좌측 및 우측 경계 요소 및 표적 유전자에 작동가능하게 연결된, 프로모터, 및 그의 하류의 종결인자를 포함하는 적어도 1개의 발현 카세트를 포함하는, 식물에서 표적 유전자의 발현을 위한 T-DNA이며, 여기서 좌측에서 우측 경계 요소까지 측정되고 표적 유전자를 포함한 T-DNA의 길이는 적어도 30000 bp의 길이를 갖는 것인 T-DNA.

실시예에 주어진 표의 임의의 단일 유전자의 코딩 서열을 포함하고, 바람직하게는 실시예에 주어진 표의 임의의 단일의 코딩 서열 및 프로모터, 보다 바람직하게는 실시예에 주어진 표의 임의의 단일의 코딩 서열 및 프로모터 및 종결인자, 가장 바람직하게는 실시예의 표의 임의의 단일의 발현 카세트를 포함하는 T-DNA이며, 특히 실시예의 표 11의 데새투라제 및 엘롱가제의 코딩 서열을 포함하는 T-DNA.

게놈 내에 통합된, 본 발명의 이종 T-DNA를 포함하는 식물 또는 종자 또는 그의 부분.

1개 이상의 d5Des, 1개 이상의 d6Elo, 1개 이상의 d6Des, 1개 이상의 o3Des, 1개 이상의 d5Elo 및 1개 이상의 D4Des를 코딩하는 1개 이상의 발현 카세트를 포함하는 1개 이상의 T-DNA를 포함하는 식물.

i) 제1항 또는 제2항의 T-DNA 및/또는 이러한 T-DNA의 부분을 포함하는 브라시카세아에( Brassicaceae ) 과, 바람직하게는 브라시카( Brassica ) 속, 가장 바람직하게는 브라시카 나푸스( Brassica napus ), 브라시카 올레라세아( Brassica oleracea ), 브라시카 니그라( Brassica nigra ) 또는 브라시카 카리나타( Brassica carinata ) 속의 식물을, 상기 T-DNA 및/또는 그의 부분을 포함하지 않는 브라시카세아에 과, 바람직하게는 브라시카 속, 가장 바람직하게는 브라시카 나푸스, 브라시카 올레라세아, 브라시카 니그라 또는 브라시카 카리나타 속의 식물과 교배하여 F1 잡종을 수득하는 단계,
ii) 적어도 1 세대 동안 F1 잡종을 자가수분하는 단계, 및
iii) 18:1n-9의 하류의 모든 VLC-PUFA의 함량이 40% (w/w)의 오일 함량에서 총 종자 지방산 함량 중 적어도 40% (w/w)이거나, 또는 바람직하게는 40% (w/w)의 오일 함량에서 총 종자 지방산 함량 중 EPA의 함량이 적어도 6%, 바람직하게는 적어도 7.5% (w/w) 및/또는 DHA의 함량이 적어도 0.8% (w/w), 바람직하게는 1.2%이도록 VLC-PUFA를 포함하는 종자를 생산할 수 있는 본 발명의 T-DNA를 포함하는 단계 (ii)의 자손을 확인하는 단계
를 포함하는 방법에 의해 제조되는 자손 계통으로부터 수득가능하거나 수득되는, 종자 오일 VLC-PUFA 함량의 유전가능한 표현형을 부여하는 유전자형을 갖는, 브라시카세아에 과, 바람직하게는 브라시카 속의 식물 또는 그의 종자.

제11항의 방법에 의해 수득가능하거나 수득되는 다중불포화 지방산을 포함하는 식물 오일.

i) 데새투라제에, 지방산 모이어티 및 머리기를 포함하는 검출가능하게 표지된 분자를 제공하는 단계,
ii) 데새투라제가 표지된 분자에 대해 반응하도록 하는 단계, 및
iii) 탈포화 생성물을 검출하는 단계
를 포함하는 데새투라제 반응 특이성을 분석하는 방법.

i) 엘롱가제에, 검출가능하게 표지된 신장 기질 및 신장될 분자를 제공하는 단계,
ii) 엘롱가제가 표지된 신장 기질을 사용하여 신장될 분자를 신장되도록 하는 단계, 및
iii) 신장 생성물을 검출하는 단계
를 포함하는 엘롱가제 반응 특이성을 분석하는 방법.

i) 대사 경로의 효소 및 경로의 제1 효소 또는 효소들에 의해 사용될 1개 이상의 기질을 제공하는 단계,
ii) 효소와 기질을 반응시켜 생성물을 생산하고, 이를 차례로 잠재적 기질로서 경로의 효소에 또한 노출시키는 단계, 및
iii) 생성물의 축적을 결정하는 단계
를 포함하는 대사 경로의 최적화 방법.

i) 엘롱가제를 제공하여 표적 데새투라제를 위한 기질을 생산하고, 표적 데새투라제의 전환 효율을 결정하는 단계, 및
ii) 비-CoA 의존성 데새투라제를 제공하여 표적 데새투라제를 위한 기질을 생산하고, 표적 데새투라제의 전환 효율을 결정하는 단계, 및
iii) 단계 i) 및 ii)의 표적 데새투라제 전환 효율을 비교하는 단계
를 포함하는 표적 데새투라제의 CoA-의존성을 결정하는 방법.

i) 엘롱가제를 제공하여 표적 데새투라제의 생성물을 신장시키고, 엘롱가제의 전환 효율을 결정하는 단계,
ii) 엘롱가제를 제공하여 비-CoA 의존성인 것으로 공지된 비교 데새투라제의 생성물을 신장시키고, 엘롱가제의 전환 효율을 결정하는 단계,
iii) 단계 i) 및 ii)의 엘롱가제 전환 효율을 비교하는 단계
를 포함하는 표적 데새투라제의 CoA-의존성을 결정하는 방법.

식물에서, 델타-6-데새투라제를 코딩하는 적어도 1개의 폴리뉴클레오티드, 델타-6-엘롱가제를 코딩하는 적어도 1개의 폴리뉴클레오티드, 및 델타-5-데새투라제를 코딩하는 적어도 1개의 폴리뉴클레오티드를 발현하는 것을 포함하는, 대조군 식물에 비해 식물에서 미드산 (20:3n-9)의 함량을 증가시키는 방법.