促生长素抑制素-多巴胺嵌合类似物 |
|||||||
| 申请号 | CN201380057080.8 | 申请日 | 2013-10-31 | 公开(公告)号 | CN104768570A | 公开(公告)日 | 2015-07-08 |
| 申请人 | 益普生制药股份有限公司; | 发明人 | Z·X·董; Y·舍恩; S·H·金; | ||||
| 摘要 | 本 发明 涉及新的促生长素抑制素-多巴胺嵌合类似物及其在抑制、 预防 和/或 治疗 瘤形成、神经内分泌 肿瘤 、库欣病/综合征和其它病症的 治疗用途 。 | ||||||
| 权利要求 | 1.化合物，包含： |
||||||
| 说明书全文 | 促生长素抑制素-多巴胺嵌合类似物发明领域 [0002] 发明背景 [0003] 天然存在的促生长素抑制素(SSTs)也称作促生长素释放抑制因子(SRIFs)，它们在贯穿于体内的许多细胞和器官中具有不同生物作用。它们由正常内分泌、胃肠道、免疫和神经细胞和由一些肿瘤产生(Patel,Y.C.,Frontiers in Neuroendocrinology,20(3)：157-198(1999)；Froidevaux等人,Biopolymers,66(3)：161-83(2002))。促生长素抑制素的作用对激素分泌和细胞增殖和存活具有广泛抑制作用。它们抑制内分泌(例如生长激素、胰岛素、胰高血糖素、胃泌素、胆囊收缩素、血管活性肠肽和分泌素)和外分泌(例如胃酸、肠液和胰酶)(Patel,Y.C.,(1999)同上)。促生长素抑制素还抑制正常和肿瘤细胞的增殖(Bousquet等人,Chemotherapy,47(2)：30-39(2001))。 [0004] 这些实际上均为抑制性的促生长素抑制素的生物作用通过一系列G-蛋白偶联受体引起，已经表征了其中的5种不同亚型(SSTR1-5)(Reubi等人,Cancer Res，47：551-558(1987)；Reisine 等 人 ,Endocrine Review,16：427-442(1995)；Patel,Y.C.,(1999)同上)。SSTR1-5对内源性促生长素抑制素配体具有类似的亲和力，但在不同组织中具有不同的分布。 [0005] 最初研发促生长素抑制素类似物是为了控制与神经内分泌肿瘤(NETs)相关的激素综合征。近年来，累积的数据已经支持了它们作为抗增殖剂的作用，它们能够稳定具有转移性神经内分泌恶性肿瘤的患者中的肿瘤生长，包括类癌和胰腺内分泌肿瘤(Strosberg等人,World J Gastroenterol,26(24)：2963-2970(2010))。 [0006] 促生长素抑制素类似物的实例公开在如下文献中：例如PCT公开号WO 02/10215；WO 2007/144492；WO 2010/037930；WO 99/22735；和WO 03/014158。 [0007] 多巴胺是一种与帕金森病和精神分裂症的发病机制有关的儿茶酚胺神经递质(Graybiel 等 人 ,Adv.Neurol.,53：17-29(1990)；Goldstein等 人 ,FASEB Journal,6：2413-2421(1992)；Olanow等人,Annu.Rev.Neurosci.、22,123-144(1999))。多巴胺及相关分子在小鼠中显示出可以抑制几种类型的恶性肿瘤的生长，且这种活性被不同地归因于对肿瘤细胞增生的抑制，对肿瘤免疫的刺激或在恶性黑素瘤中的黑色素代谢的结果。(Wick,M.M.,J.Invest.Dermatol.,71：163-164(1978)；Wick,M.M.,J.Natl.Cancer Inst.,63：1465-1467(1979)；Wick,M.M.,Cancer Treat Rep.,63：991-997(1979)；Basu等人,Endocrine,12：237-241(2000)；Basu等人,J.Neuroimmunol.,102：113-124(2000))。 [0008] 已经证实多巴胺受体亚型DRD2和促生长素抑制素受体亚型SSTR2以及其它促生长素抑制素受体亚型和多巴胺和阿片样受体家族的成员通过杂-寡聚化发生物理相互作用，从而生成具有增强功能活性的新受体(Rocheville等人,Science、288(5463)：154-157(2000)；Baragli 等 人 ,Hetero-oligomerization of dopamine(D2R)and SST th receptors(SSTR2)in CHO-K1 cells and cortical cultured neurons,Proc.85 Endo.Soc.Meeting,Philadelphia,PA,USA(2003)(Abstract P2-669)；Pfeiffer等人,J.Biol.Chem.,277：19762-19772(2002))。 [0009] 涉及促生长素抑制素和多巴胺受体的相互作用的基础研究观察结果和组合的促生长素抑制素和多巴胺类似物治疗在抑制生长激素分泌过多中增强效能的临床报告，共同导致了创建合并两种化合物类型的结构特征的嵌合分子的概念。促生长素抑制素-多巴胺嵌合分子的实例公开在美国专利申请公开号US 2004/0209798和PCT公开号WO2004/091490、WO 2002/100888和WO 2009/139855中。 [0010] 本领域中教导了示例性促生长素抑制素-多巴胺嵌合分子，与各SST或DA受体激动剂相比，它们保持了与两种家族的受体发生相互作用的能力并且展示出显著增强的功效和效能。使用来自肢端肥大患者的垂体腺瘤细胞体外研究已经证实，嵌合分子在抑制来自肢端肥大患者的垂体腺瘤细胞的生长激素和催乳素分泌方面具有令人意 外 的 活性 (Saveanu等 人,J Clin Endocrinol Metab,87(12)：5545-5552(2002)；Jaquet等人,European Journal of Endocrinology,153：135–141(2005))。类似地，已经观察到了有效地抑制ACTH从导致库欣病的促皮质激素细胞瘤中分泌且抑制非功能性垂体腺瘤增殖(Florio等人,Endocrine-Related Cancer,15：583-596(2008))。当在非人灵长类中测试时，促生长素抑制素-多巴胺嵌合化合物在抑制体内生长激素和IGF1方面也是非常有效力和有效的，而对胰岛素分泌或血糖控制无效(Culler等人,The somatostatin-dopamine chimeric molecule,BIM-23A760,does not induce the insulin/glycemic effects observed with individual somatostatin or dopamine agonists in cynomolgus monkeys(Macaca fascicularis),欧洲神经内分泌协会第12次会议，Athens,Greece(2006))。 [0011] 检查紧急、皮下施用选择促生长素抑制素-多巴胺嵌合化合物的初步临床研究揭示延长的循环半衰期和延长的生物学作用期限(Culler,M.,Horm Metab Res、43(12)：854-857(2011))。然而，由于长期施用，则发现选择促生长素抑制素-多巴胺嵌合化合物产生了具有多巴胺能活性的代谢物，其逐步蓄积并且干扰母体化合物的活性(Culler,M.,(2011)同上)。 [0012] 显然，对具有特别用于抑制、预防和/或治疗神经内分泌肿瘤和/或疾病的改善活性的另外的促生长素抑制素-多巴胺嵌合类似物仍然存在需求。 [0013] 发明概述 [0014] 本发明基于改进的促生长素抑制素-多巴胺嵌合类似物的发现，即既保持促生长素抑制素活性又保持多巴胺活性的嵌合化合物。本发明优选的促生长素抑制素-多巴胺嵌合类似物与一些预先报道的促生长素抑制素-多巴胺化合物相比显示的活性水平，使得有希望将它们添加到促生长素抑制素-多巴胺类似物的研发家族中。 [0015] 本发明改进的促生长素抑制素-多巴胺嵌合类似物被视为可用作例如体外用作研究工具、诊断试验等，或体内用作诊断剂或治疗剂。本发明优选的促生长素抑制素-多巴胺嵌合类似物与单独或组合的天然促生长素抑制素和多巴胺相比展示出活性增强，且特别地与预先报道的促生长素抑制素-多巴胺嵌合类似物相比展示出增强活性。 [0016] 本发明提供新的一系列促生长素抑制素-多巴胺嵌合化合物及其药学上可接受的盐，所述新的一系列促生长素抑制素-多巴胺嵌合化合物具有至少一个结合一种或多种多巴胺受体亚型的部分和式I(SEQ ID NO：58)的促生长素抑制素类似物部分： [0017] A1-环(DLys-Arg-Phe-A5-DTrp-Lys-Thr-A9) [0018] (I) [0019] 其中： [0020] A1是DTyr、Tyr、DLys、Lys或不存在； [0021] A5是Phe、2Pal、3Pal或4Pal；且 [0022] A9是Phe、2FPhe、3FPhe、4FPhe、3,4FPhe、3,5FPhe、2,3,4,5,6FPhe或Tyr； [0023] 其中所述结合一种或多种多巴胺受体亚型的至少一个部分每次出现时独立地连接至所述式I的促生长素抑制素类似物部分的N-末端胺基或内部胺或羟基。 [0024] 另外，本发明提供新的一系列促生长素抑制素-多巴胺嵌合化合物及其药学上可接受的盐，所述新的一系列促生长素抑制素-多巴胺嵌合化合物具有至少一个结合一种或多种多巴胺受体亚型的部分和式II(SEQ ID NO：59)的促生长素抑制素类似物部分： [0025] A1-B-环(DLys-Arg-Phe-A5-DTrp-Lys-Thr-A9) [0026] (II) [0027] 其中： [0028] A1是DTyr、Tyr、DLys、Lys或不存在； [0029] B是假肽键； [0030] A5是Phe、2Pal、3Pal或4Pal；且 [0031] A9是Phe、2FPhe、3FPhe、4FPhe、3,4FPhe、3,5FPhe、2,3,4,5,6FPhe或Tyr； [0032] 其中所述结合一种或多种多巴胺受体亚型的至少一个部分每次出现时独立地连接至所述式II的促生长素抑制素类似物部分的N-末端胺基或内部胺或羟基。 [0033] 根据本发明的一个优选的实施方案，所述式II的假肽键是如本文所定义的psi(CH2NR)，其中R是H、(C1-10)烷基、取代的(C1-10)烷基、(C1-10)杂烷基、取代的(C1-10)杂烷基、(C2-10)链烯基、取代的(C2-10)链烯基、(C2-10)炔基、取代的(C2-10)炔基、芳基、烷基芳基、取代的烷基芳基、芳基烷基、取代的芳基烷基、(C2-10)酰基、取代的(C2-10)酰基或结合如本文所定义的一种或多种多巴胺受体亚型的部分例如Dop1、Dop1(SO)或Dop1(SO2)，或其羰基可以被修饰成CH2的任意这些部分。 [0034] 在本发明的一个具体的实施方案中，所述促生长素抑制素-多巴胺嵌合化合物是式III及其药学上可接受的盐： [0035] [0036] 其中： [0037] Z是所述式I或式II的促生长素抑制素类似物部分； [0038] Y是-O-、-C(O)-、-S-、-O-(CH2)n-C(O)-、-S-(CH2)n-C(O)-、-S(O)-、-S(O)2-、-S-C(5 5 6 O)-、-O-C(O)-、-N(R)-C(O)-、-N(R)S(O)2-或-N(R)-； [0039] L是-(CH2)n-C(O)-或-(CH2)n-； [0040] i是1或2； [0041] n是1-10； [0042] R1是(C1-3)烷基；且 [0043] R5和R6每次出现时各自独立地是H、(C1-10)烷基、取代的(C1-10)烷基、(C1-10)杂烷基、取代的(C1-10)杂烷基、(C2-10)链烯基、取代的(C2-10)链烯基、(C2-10)炔基、取代的(C2-10)炔基、芳基、烷基芳基、取代的烷基芳基、芳基烷基、取代的芳基烷基、(C2-10)酰基或取代的(C2-10)酰基； [0044] 其中括号之间描述的每个部分每次出现时独立地连接至Z的N-末端胺基或内部胺或羟基。 [0045] 在本发明的另一个具体的实施方案中，所述促生长素抑制素-多巴胺嵌合化合物是式IIIa及其药学上可接受的盐： [0046] [0047] 其中： [0048] Z是所述式I或式II的促生长素抑制素类似物部分； [0049] Y是-O-、-C(O)-、-S-、-O-(CH2)n-C(O)-、-S-(CH2)n-C(O)-、-S(O)-、-S(O)2-、-S-C(O)-、-O-C(O)-、-N(R5)-C(O)-、-N(R5)S(O)2-、-N(R6)-或不存在； [0050] L是-(CH2)n-C(O)-或-(CH2)n-； [0051] i是1或2； [0052] n是1-10； [0053] R1是(C1-3)烷基；且 [0054] R5和R6每次出现时各自独立地是H、(C1-10)烷基、取代的(C1-10)烷基、(C1-10)杂烷基、取代的(C1-10)杂烷基、(C2-10)链烯基、取代的(C2-10)链烯基、(C2-10)炔基、取代的(C2-10)炔基、芳基、烷基芳基、取代的烷基芳基、芳基烷基、取代的芳基烷基、(C2-10)酰基或取代的(C2-10)酰基； [0055] 其中括号之间描述的每个部分每次出现时独立地连接至Z的N-末端胺基或内部胺或羟基。 [0056] 本发明还提供药物组合物，其包含本发明的促生长素抑制素-多巴胺嵌合化合物。 [0059] 图1是显示化合物4(参见下文表I，其化学名及其相应的结构表示)对具有巨腺瘤(macroadenoma)的肢端肥大患者的垂体瘤细胞的生长激素抑制活性的示意图。将不同浓度的化合物4加入到培养基中并且将细胞温育18小时，然后使用AlphaLISA生长激素免疫测定研究试剂盒(PerkinElmer)对培养基中的生长激素水平进行测定。 [0060] 图2是显示化合物5、6和7(参见下文表I，其化学名及其相应的结构表示)对具有巨腺瘤的肢端肥大患者的垂体瘤细胞的生长激素抑制活性的示意图。将不同浓度的化合物5、6和7加入到培养基中并且将细胞温育18小时，然后使用AlphaLISA生长激素免疫测定研究试剂盒(PerkinElmer)对培养基中的生长激素水平进行测定。 [0061] 图3是显示化合物4、6、7、8和9(参见下文表I，其化学名及其相应的结构表示)对具有巨腺瘤的肢端肥大患者的垂体瘤细胞的生长激素抑制活性的示意图。将不同浓度的化合物4、6、7、8和9加入到培养基中并且将细胞温育18小时，然后使用AlphaLISA生长激素免疫测定研究试剂盒(PerkinElmer)对培养基中的生长激素水平进行测定。 [0062] 图4是显示化合物4、7、8和9(参见下文表I，其化学名及其相应的结构表示)对具有巨腺瘤的肢端肥大患者的垂体瘤细胞的生长激素抑制活性的示意图。将不同浓度的化合物4、7、8和9加入到培养基中并且将细胞温育18小时，然后使用AlphaLISA生长激素免疫测定研究试剂盒(PerkinElmer)对培养基中的生长激素水平进行测定。 [0063] 图5是显示化合物4和5(参见下文表I，其化学名及其相应的结构表示)与母体促生长素抑制素类似物(即化合物4和5的促生长素抑制素部分)相比对具有巨腺瘤的肢端肥大患者的垂体瘤细胞的生长激素抑制活性的示意图。将不同浓度的化合物4和5加入到培养基中并且将细胞温育18小时，然后使用AlphaLISA生长激素免疫测定研究试剂盒(PerkinElmer)对培养基中的生长激素水平进行测定。 [0064] 详细描述 [0065] 定义 [0066] 用于定义肽类的命名法是典型地本领域中使用的，其中N-末端上的氨基显示在左侧，而C-末端上的羧基显示在右侧。除非另有明确指示，否则如果氨基酸具有异构体形式，则它是表示的氨基酸的L型，例如“DLys”是指D-赖氨酸。 [0067] 除非另有定义，否则氨基酸残基之间的线表示氨基酸残基之间的肽键。本文命名为“psi”的希腊字母ψ在本文中用于表示肽键(即酰胺键)已经被假肽键(例如还原的酰胺键)替代。本文所用的psi术语的格式是X-psi(CH2NR)-X'，其中X是氨基酰基或酰基，例如如本文所定义的Dop1、Dop1(SO)或Dop1(SO2)，其羰基被修饰成CH2，且其中X'是氨基酰基，其α-氨基被修饰成NR，其中R是例如H、(C1-10)烷基、(C2-10)酰基或与一种或多种多巴胺受体亚型结合的部分，例如如本文所定义的Dop1、Dop1(SO)或Dop1(SO2)，或其羰基被修饰成CH2的任意这些部分。例如，如果X是Dop1，其羰基被修饰成CH2，且如果R是乙酰基，则X-psi(CH2NR)-X'被作为“Dop1-psi(CH2NAc)-X'”提供。对于另一个实例，如果X和R均为Dop1，其羰基被修饰成CH2，则X-psi(CH2NR)-X'被作为“双[Dop1-psi(CH2N)]-X'”提供，其中假肽键被命名为Dop1-psi(CH2N)，其中Dop1相当于式X-psi(CH2NR)-X'中的R。假肽键在双[Dop1-psi(CH2N)]-X'实例中的性质应通过参照作为下文提供的术语“双[Dop1-psi(CH2N)]-X'”的图形表示变得更清楚。 [0068] 本文所用的术语“Dop1”是指具有化学名(D-6-甲基-8β-麦角灵基甲基)硫代乙酰基并且具有如下结构的化合物： [0069] [0070] 本文所用的术语“Dop1-psi(CH2NH)-X'”是指具有如下结构的化合物： [0071] [0072] 其中术语“X'”是式 的氨基酰基，其中R1和R2每次出现时各自独立地是氢或氨基酸侧链(例如R1＝CH3，且R2＝H，对于丙氨酸)。 [0073] 本文所用的术语“双[Dop1-psi(CH2N)]-X'”是指具有如下结构的化合物： [0074] [0075] 其中术语“X'”是式 的氨基酰基，其中R1和R2每次出现时各自独立地是氢或氨基酸侧链。 [0076] 本文所用的术语“Dop1(SO2)”是指具有如下结构的化合物： [0077] [0078] 本文所用的术语“Dop1(SO2)-psi(CH2NH)-X'”是指具有如下结构的化合物： [0079] [0080] 其中术语“X'”是式 的氨基酰基，其中R1和R2每次出现时各自独立地是氢或氨基酸侧链。 [0081] 本文所用的术语“Dop1(SO)”是指具有如下结构的化合物： [0082] [0083] 其中，除非指定硫原子上的立体化学，否则由该术语表示的化合物是Dop1[(R)SO]，即 或Dop1[(S)SO]，即 或包含Dop1[(R)SO]和Dop1[(S)SO]的非对映异构体混合物。 [0084] 本文所用的术语“Dop1(SO)-psi(CH2NH)-X'”是指具有如下结构的化合物： [0085] [0086] 其中术语“X'”是式 的氨基酰基，其中R1和R2每次出现时各自独立地是氢或氨基酸侧链，且其中，除非指定硫原子上的立体化学，否则由该术语 表 示 的 化 合 物 是Dop1[(R)SO]-psi(CH2NH)-X'，即 或Dop1[(S)SO]-psi(CH2NH)-X'，即 或 包 含 Dop1[(R) SO]-psi(CH2NH)-X'和Dop1[(S)SO]-psi(CH2NH)-X'的非对映异构体混合物。 [0087] 本发明的一些化合物具有至少一个不对称中心。另外的不对称中心可以存在于分子上，视分子的不同取代基的性质而定。每个这样的不对称中心产生两种光学异构体，且预期所有这样的光学异构体，作为单独的纯或部分纯化的光学异构体、其外消旋混合物或其非对映异构体混合物，均包括在本发明范围内。 [0088] 所谓“促生长素抑制素受体激动剂”是指对促生长素抑制素受体(例如如如下所示受体结合测定所定义)、例如任意不同亚型例如SSTR1、SSTR2、SSTR3、SSTR4和SSTR5具有高结合亲和力(例如小于100nM或优选小于10nM或更优选小于1nM的Ki)并且引起促生长素抑制素-样作用的化合物；例如，在抑制cAMP胞内产生的测定中。 [0089] 所谓“促生长素抑制素选择性激动剂”是指对一种促生长素抑制素受体亚型具有高于对任意其它促生长素抑制素受体亚型的结合亲和力(例如较低Ki)和/或效能(例如低EC50)的促生长素抑制素受体激动剂，例如，促生长素抑制素SSTR2选择性激动剂。 [0090] 所谓“多巴胺受体激动剂”是指对多巴胺受体(例如如如下所示受体结合测定所定义)例如任意不同亚型例如D1、D2、D3、D4和D5受体具有高结合亲和力(例如小于100nM或优选小于10nM或更优选小于1nM的Ki)并且引起多巴胺-样作用的化合物；例如，在抑制cAMP胞内产生的测定中。 [0092] 所谓“多巴胺受体激动剂作用”是指结合多巴胺受体后，配体活化多巴胺受体-介导的信号传导途经。 [0094] 所谓“取代的烷基”、例如取代的(C1-10)烷基是指烷基，其中烃基的一个或多个氢原子被一个或多个取代基替代，所述取代基选自卤素(即氟、氯、溴和碘)、-OH、-CN、-SH、-NH2、-NHCH3、-NO2、被1－5个卤素取代的-(C1-2)烷基、-CF3、-OCH3、-OCF3和-(CH2)0-4-COOH。在不同的实施方案中，存在1、2、3或4个取代基。存在-(CH2)0-4-COOH导致产生烷基酸。包含-(CH2)0-4-COOH或由其组成的烷基酸的实例包括2-降冰片烷乙酸、叔丁酸和3-环戊基丙酸。 [0095] 所谓“杂烷基“、例如(C1-10)杂烷基是指烷基，其中烃基上的碳原子的一个或多个被如下基团的一个或多个替代：氨基、酰氨基、-O-或羰基。在不同的实施方案中，存在1或2个杂原子。 [0096] 所谓“取代的杂烷基“、例如取代的(C1-10)杂烷基是指杂烷基，其中烃基的一个或多个氢原子被一个或多个取代基替代，所述取代基选自卤素(即氟、氯、溴和碘)、-OH、-CN、-SH、-NH2、-NHCH3、-NO2、被1－5个卤素取代的-(C1-2)烷基、-CF3、OCH3、-OCF3和-(CH2)0-4-COOH。在不同的实施方案中，存在1、2、3或4个取代基。 [0097] 所谓“链烯基”、例如(C2-10)链烯基是指由2个或多个碳构成的烃基，其中存在一个或多个碳-碳双键。链烯基烃基可以是直链的或包含一个或多个支链或环状基团。 [0098] 所谓“取代的链烯基”、例如取代的(C2-10)链烯基是指链烯基，其中烃基的一个或多个氢原子被一个或多个取代基替代，所述取代基选自卤素(即氟、氯、溴和碘)、-OH、-CN、-SH、-NH2、-NHCH3、-NO2、被1－5个卤素取代的-(C1-2)烷基、-CF3、OCH3、-OCF3和-(CH2)0-4-COOH。在不同的实施方案中，存在1、2、3或4个取代基。 [0099] 所谓“炔基”、例如(C2-10)炔基是指由2个或多个碳构成的烃基，其中存在一个或多个碳-碳三键。炔基烃基可以是直链的或包含一个或多个支链或环状基团。 [0100] 所谓“取代的炔基”、例如取代的(C2-10)炔基是指炔基，其中烃基的一个或多个氢原子被一个或多个取代基替代，所述取代基选自卤素(即氟、氯、溴和碘)、-OH、-CN、-SH、-NH2、-NHCH3、-NO2、被1－5个卤素取代的-(C1-2)烷基、-CF3、OCH3、-OCF3和-(CH2)0-4-COOH。在不同的实施方案中，存在1、2、3或4个取代基。 [0101] 所谓“芳基”是指任选取代的芳族基团，其具有至少一个具有共轭pi-电子系统的环，包含至多2个共轭或稠合环系。芳基包括碳环芳基、杂环芳基和联芳基。优选地，芳基是5或6元环。杂芳基的优选原子是一个或多个硫、氧和/或氮。芳基的实例包括苯基、1-萘基、2-萘基、吲哚和喹啉、2-咪唑和9-蒽。芳基取代基选自-C1-4烷基、-C1-4烷氧基、卤素(即氟、氯、溴和碘)、-OH、-CN、-SH、-NH2、-NO2、被1－5个卤素取代的-(C1-2)烷基、-CF3、-OCF3和-(CH2)0-4-COOH。在不同的实施方案中，芳基包含0、1、2、3或4个取代基。 [0102] 所谓“酰基”、例如(C2-10)酰基是指X’-R”-C(O)-，其中R”是烷基、取代的烷基、杂烷基、取代的杂烷基、链烯基、取代的链烯基、炔基、取代的炔基、芳基、烷基芳基或取代的烷基芳基，且X’是H或不存在。 [0103] 所谓“芳基烷基”或“烷基芳基”是指连接至“芳基”的“烷基”。 [0104] 本文描述为“包含”一个或多个命名的要素或步骤的组合物或方法是开放式的，即命名的要素或步骤是必需的，但在所述组合物或方法范围内可以添加其它要素或步骤。为了避免繁琐，还应理解描述为“包含”(或“包含”)一个或多个要素或步骤的任意组合物或方法还描述相应的更具有限制性的“主要由”(或“基本上由”)相同要素或步骤组成的组合物或方法，即该组合物或方法包括命名的必需要素或步骤且还可以包括实质上不影响所述组合物或方法基本和新特征的另外的要素或步骤。还应理解，本文描述为“包含”一个或多个命名的要素或步骤或“主要由其组成”的任意组合物或方法还描述相应的更具有限制性的且是封闭式的组合物或方法，其“由”(或“由”)命名的要素或步骤组成，排除任意其它未命名的要素或步骤。在本文公开的任意组合物或方法中，任意命名的必需要素或步骤的已知或公开的等效体可以用于取代所述要素或步骤。还应理解，“选自”的要素或步骤是指如下清单中的要素或步骤，包括所列出的要素或步骤的任意2个或多个的组合。 [0105] 在本文所述的上下文中促生长素抑制素类似物化合物的治疗用途中，术语“治疗”是指化合物准备或预以校正或减轻患者疾病病情例如阻止或抑制神经内分泌肿瘤生长或增殖和/或缓解神经内分泌病和其它病症症状的任意用途。因此，对个体的治疗可以在任意显示可能存在神经内分泌肿瘤或神经内分泌病的诊断之后进行。 [0106] 包括有机化学、药理学和生理学的本领域的熟练技术人员可以从上下文中理解其它术语的含义。 [0107] 缩写 [0108] 在式I和II和如表I中列出的化学名中，使用如下氨基酸缩写：“Lys”是赖氨酸；“Arg”是精氨酸；“Phe”是苯丙氨酸；“Trp”是色氨酸；“Thr”是苏氨酸；“2Pal”是β-(2-吡啶基)丙氨酸；“3Pal”是β-(3-吡啶基)丙氨酸；“4Pal”是β-(4-吡啶基)丙氨酸；“Tyr”是酪氨酸；“2FPhe、3FPhe、4FPhe、3,4FPhe、3,5FPhe或2,3,4,5,6FPhe”是在苯环的指定位置上各自被氟化的苯丙氨酸；且“Orn”是鸟氨酸。 [0109] 本文所用的一些缩写如下所定义： [0110] 所谓“Boc”是指叔丁氧基羰基。 [0112] 所谓“Bzl”是指苄基。 [0113] 所谓“DCM”是指二氯甲烷。 [0114] 所谓“DIC”是指N,N-二异丙基碳二亚胺。 [0115] 所谓“DIEA”是指二异丙基乙胺。 [0116] 所谓“Dmab”是指4-{N-[1-(4,4-二甲基-2,6-二氧代亚环己基)-3-甲基丁基]-氨基}苄基。 [0117] 所谓“DMAP”是指4-(二甲基氨基)吡啶。 [0118] 所谓“DMF”是指二甲基甲酰胺。 [0119] 所谓“DNP”是指2,4-二硝基苯基。 [0120] 所谓“DTT”是指二硫苏糖醇。 [0121] 所谓“ESI-MS”是指电喷雾离子化质谱。 [0122] 所谓“FBS”是指胎牛血清。 [0123] 所谓“Fmoc”是指芴基甲氧基羰基。 [0124] 所谓“HBTU”是指2-(1-H-苯并三唑-1-基)-1,1,3,3-四甲基脲鎓六氟磷酸盐。 [0125] 所谓“HOBt”是指1-羟基-苯并三唑。 [0127] 所谓“NMP”是指N-甲基吡咯烷酮。 [0128] 所谓“Pbf”是指2,2,4,6,7-五甲基二氢苯并呋喃-5-磺酰基。 [0129] 所谓“PBS”是指磷酸盐缓冲盐水。 [0130] 所谓“PyAOP”是指(7-氮杂苯并三唑-1-基氧基三吡咯烷子基磷鎓六氟磷酸盐)。 [0131] 所谓“PyBOP”是指苯并三唑-1-基-氧基三吡咯烷子基磷鎓六氟磷酸盐。 [0132] 所谓“tBu”是指叔丁基。 [0134] 所谓“Trt”是指三苯甲基。 [0135] 所谓“TFA”是指三氟乙酸。 [0136] 本发明的实施方案 [0137] 在式I、II、III和IIIa的化合物中，A1是Dtyr、Tyr、Dlys、Lys或不存在。在一1 1 些实施方案中，A是Tyr、Lys或不存在。在一些实施方案中，A 是Tyr或Lys。在一些实施 1 1 方案中，A是Tyr或不存在。在一些实施方案中，A 是Lys或不存在。在一些具体的实施 1 1 方案中，A是不存在。在一些其它具体的实施方案中，A 是Tyr。 [0138] 在式I、II、III和IIIa的化合物中，A5是Phe、2Pal、3Pal或4Pal。在一些实施方5 5 案中，A是Phe或4Pal。在一些具体的实施方案中，A 是4Pal。 [0139] 在式I、II、III和IIIa的化合物中，A9是Phe、2FPhe、3FPhe、4FPhe、3,4FPhe、9 3,5FPhe、2,3,4,5,6FPhe或Tyr。在一些实施方案中，A是Phe、4FPhe或Tyr。在一些具体 9 的实施方案中，A是Tyr。 [0140] 在式II、III和IIIa的化合物中，B是假肽键。在一些实施方案中，B是-psi(CH2NH)-或-psi(CH2NR)-，其中R是(C1-10)烷基、取代的(C1-10)烷基、(C2-10)杂烷基、取代的(C1-10)杂烷基、(C2-10)链烯基、取代的(C2-10)链烯基、(C2-10)炔基、取代的(C2-10)炔基、芳基、烷基芳基、取代的烷基芳基、芳基烷基、取代的芳基烷基、(C2-10)酰基、取代的(C2-10)酰基或结合一种或多种多巴胺受体亚型的部分。在一些实施方案中，R是(C1-3)烷基、(C2-4)酰基或Dop1，其羰基被修饰成CH2。在一些实施方案中，B是psi(CH2NH)、psi(CH2NAc)或Dop1-psi(CH2N)。在一些实施方案中，B是-psi(CH2NH)-或-psi(CH2NAc)-。在一些具体的实施方案中，B是-psi(CH2NH)-。在一些具体的实施方案中，B是-psi(CH2NR)-，其中R是Dop1，其羰基被修饰成CH2。 [0141] 在式III和IIIa的化合物中，R1是(C1-3)烷基。在一些具体的实施方案中，R1是-CH3。 [0142] 在式III和IIIa的化合物中，Y是-O-、-C(O)-、-S-、-O-(CH2)n-C(O)-、-S-(CH2)n5 5 6 -C(O)-、-S(O)-、-S(O)2-、-S-C(O)-、-O-C(O)-、-N(R)-C(O)-、-N(R)S(O)2-、-N(R)-或不存 5 6 在。在一些实施方案中，Y是-S-、-S(O)-、-S(O)2-、-N(R)-C(O)-或-N(R)-。在一些实施 5 6 方案中，Y是-S-、-S(O)-或-S(O)2-。在另一些实施方案中，Y是-N(R)-C(O)-或-N(R)-。 在一些实施方案中，Y是-S-或-S(O)-。在一些具体的实施方案中，Y是-S-。 [0143] 在式III和IIIa的化合物中，R5和R6每次出现时各自独立地是H、(C1-10)烷基、取代的(C1-10)烷基、(C1-10)杂烷基、取代的(C1-10)杂烷基、(C2-10)链烯基、取代的(C2-10)链烯基、(C2-10)炔基、取代的(C2-10)炔基、芳基、烷基芳基、取代的烷基芳基、芳基烷基、取代的芳5 基烷基、(C2-10)酰基或取代的(C2-10)酰基。在一些实施方案中，R每次出现时独立地是H、(C1-4)烷基、取代的(C1-4)烷基、(C2-4)杂烷基、取代的(C2-4)杂烷基、(C2-4)链烯基、取代的 5 (C2-4)链烯基、(C2-4)炔基、取代的(C2-4)炔基、芳基或芳基烷基。在一些实施方案中，R每次 6 出现时独立地是H或–CH3。在一些实施方案中，R每次出现时独立地是H、(C1-4)烷基、取代的(C1-4)烷基、(C2-4)杂烷基、取代的(C2-4)杂烷基、(C2-4)链烯基、取代的(C2-4)链烯基、 6 (C2-4)炔基、取代的(C2-4)炔基、芳基、芳基烷基或(C2-4)酰基。在一些实施方案中，R每次出现时独立地是H、-CH3或Ac。 [0144] 在式III和IIIa的化合物中，L是-(CH2)n-C(O)-或-(CH2)n-，其中n是1-10。在一些实施方案中，n是1-5。在一些实施方案中，n是1-2。在一些实施方案中，L是-(CH2)-C(O)-、-(CH2)-或-(CH2)2-。在一些具体的实施方案中，L是-(CH2)-。 [0145] 根据本发明的一个优选的实施方案，所述式I、II和III的促生长素抑制素-多巴胺嵌合化合物的特征在于： [0146] R1是-CH3； [0147] Y是-S-、-S(O)-、-S(O)2-或-N(R5)-S(O)2-； [0148] L是-CH2-C(O)-或-(CH2)2-； [0149] A1是Tyr,Lys或不存在； [0150] B是psi(CH2NH)； [0151] A5是Phe或4Pal；且 [0152] A9是Phe、4FPhe或Tyr。 [0153] 根据本发明的一个特别优选的实施方案，所述式I、II和III的促生长素抑制素-多巴胺嵌合化合物的特征在于： [0154] R1是-CH3； [0155] Y是-S-、-S(O)-、-S(O)2-或-N(R5)-S(O)2-； [0156] L是-CH2-C(O)-或-(CH2)2-； [0157] A1是Tyr或Lys； [0158] B是psi(CH2NH)； [0159] A5是4Pal；且 [0160] A9是Phe。 [0161] 根据本发明的另一个特别优选的实施方案，所述式I、II和III的促生长素抑制素-多巴胺嵌合化合物的特征在于： [0162] R1是-CH3； [0163] Y是-S-、-S(O)-、-S(O)2-或-N(R5)-S(O)2-； [0164] L是-CH2-C(O)-或-(CH2)2-； [0165] A1是Tyr或不存在； [0166] B是psi(CH2NH)； [0167] A5是Phe；且 [0168] A9是4Fphe。 [0169] 根据本发明的另一个特别优选的实施方案，所述式I、II和III的促生长素抑制素-多巴胺嵌合化合物的特征在于： [0170] R1是-CH3； [0171] Y是-S-、-S(O)-、-S(O)2-或-N(R5)-S(O)2-； [0172] L是-CH2-C(O)-或-(CH2)2-； [0173] A1是Lys或不存在； [0174] B是psi(CH2NH)； [0175] A5是4Pal；且 [0176] A9是Tyr。 [0177] 根据本发明的另一个优选的实施方案，所述式I、II和III的促生长素抑制素-多巴胺嵌合化合物的特征在于： [0178] R1是-CH3； [0179] Y是-S-、-S(O)-、-S(O)2-、-N(R5)S(O)2-或-N(R6)-； [0180] L是-(CH2)-C(O)-或-(CH2)2-；且 [0181] A1是Tyr、Lys或不存在。 [0182] 根据本发明的另一个优选的实施方案，所述式I、II和III的促生长素抑制素-多巴胺嵌合化合物的特征在于： [0183] R1是-CH3； [0184] Y是-S-、-S(O)-、-S(O)2-、-N(R5)S(O)2-或-N(R6)-； [0185] L是-(CH2)-C(O)-或-(CH2)2-；且 [0186] A1是Tyr或Lys。 [0187] 根据本发明的另一个优选的实施方案，所述式I、II和III的促生长素抑制素-多巴胺嵌合化合物的特征在于： [0188] R1是-CH3； [0189] Y是-S-、-S(O)-、-S(O)2-、-N(R5)S(O)2-或-N(R6)-； [0190] L是-(CH2)-C(O)-或-(CH2)2-；且 [0191] A1是Tyr或不存在。 [0192] 根据本发明的另一个优选的实施方案，所述式I、II和III的促生长素抑制素-多巴胺嵌合化合物的特征在于： [0193] R1是-CH3； [0194] Y是-S-、-S(O)-、-S(O)2-、-N(R5)S(O)2-或-N(R6)-； [0195] L是-(CH2)-C(O)-或-(CH2)2-；且 [0196] A1是Lys或不存在。 [0197] 根据本发明的另一个优选的实施方案，所述式I、II和III的促生长素抑制素-多巴胺嵌合化合物的特征在于： [0198] R1是-CH3； [0199] Y是-S-、-S(O)-、-S(O)2-、-N(R5)S(O)2-或-N(R6)-； [0200] L是-(CH2)-C(O)-或-(CH2)2-；且 [0201] A1是不存在。 [0202] 根据本发明的一个优选的实施方案，所述式I、II和III的促生长素抑制素-多巴胺嵌合化合物的特征在于： [0203] R1是-CH3； [0204] Y是-S-、-S(O)-或-S(O)2-； [0205] L是-(CH2)-C(O)-或-(CH2)2-；且 [0206] A1是Tyr、Lys或不存在。 [0207] 根据本发明的另一个优选的实施方案，所述式I、II和III的促生长素抑制素-多巴胺嵌合化合物的特征在于： [0208] R1是-CH3； [0209] Y是-S-、-S(O)-或-S(O)2-； [0210] L是-(CH2)-C(O)-或-(CH2)2-；且 [0211] A1是Tyr或Lys。 [0212] 根据本发明的另一个优选的实施方案，所述式I、II和III的促生长素抑制素-多巴胺嵌合化合物的特征在于： [0213] R1是-CH3； [0214] Y是-S-、-S(O)-或-S(O)2-； [0215] L是-(CH2)-C(O)-或-(CH2)2-；且 [0216] A1是Tyr或不存在。 [0217] 根据本发明的另一个优选的实施方案，所述式I、II和III的促生长素抑制素-多巴胺嵌合化合物的特征在于： [0218] R1是-CH3； [0219] Y是-S-、-S(O)-或-S(O)2-； [0220] L是-(CH2)-C(O)-或-(CH2)2-；且 [0221] A1是Lys或不存在。 [0222] 根据本发明的另一个优选的实施方案，所述式I、II和III的促生长素抑制素-多巴胺嵌合化合物的特征在于： [0223] R1是-CH3； [0224] Y是-S-、-S(O)-或-S(O)2-； [0225] L是-(CH2)-C(O)-或-(CH2)2-；且 [0226] A1是不存在。 [0227] 根据本发明的一个优选的实施方案，所述式I、II和III的促生长素抑制素-多巴胺嵌合化合物的特征在于： [0228] R1是-CH3； [0229] Y是-S-或-S(O)-； [0230] L是-(CH2)-C(O)-或-(CH2)2-；且 [0231] A1是Tyr、Lys或不存在。 [0232] 根据本发明的另一个优选的实施方案，所述式I、II和III的促生长素抑制素-多巴胺嵌合化合物的特征在于： [0233] R1是-CH3； [0234] Y是-S-或-S(O)-； [0235] L是-(CH2)-C(O)-或-(CH2)2-；且 [0236] A1是Tyr或Lys。 [0237] 根据本发明的另一个优选的实施方案，所述式I、II和III的促生长素抑制素-多巴胺嵌合化合物的特征在于： [0238] R1是-CH3； [0239] Y是-S-或-S(O)-； [0240] L是-(CH2)-C(O)-或-(CH2)2-；且 [0241] A1是Tyr或不存在。 [0242] 根据本发明的另一个优选的实施方案，所述式I、II和III的促生长素抑制素-多巴胺嵌合化合物的特征在于： [0243] R1是-CH3； [0244] Y是-S-或-S(O)-； [0245] L是-(CH2)-C(O)-或-(CH2)2-；且 [0246] A1是Lys或不存在。 [0247] 根据本发明的另一个优选的实施方案，所述式I、II和III的促生长素抑制素-多巴胺嵌合化合物的特征在于： [0248] R1是-CH3； [0249] Y是-S-或-S(O)-； [0250] L是-(CH2)-C(O)-或-(CH2)2-；且 [0251] A1是不存在。 [0252] 根据本发明的一个优选的实施方案，所述式I、II和III的促生长素抑制素-多巴胺嵌合化合物的特征在于： [0253] R1是-CH3； [0254] Y是-S-； [0255] L是-(CH2)-C(O)-或-(CH2)2-；且 [0256] A1是Tyr、Lys或不存在。 [0257] 根据本发明的另一个优选的实施方案，所述式I、II和III的促生长素抑制素-多巴胺嵌合化合物的特征在于： [0258] R1是-CH3； [0259] Y是-S-； [0260] L是-(CH2)-C(O)-或-(CH2)2-；且 [0261] A1是Tyr或Lys。 [0262] 根据本发明的另一个优选的实施方案，所述式I、II和III的促生长素抑制素-多巴胺嵌合化合物的特征在于： [0263] R1是-CH3； [0264] Y是-S-； [0265] L是-(CH2)-C(O)-或-(CH2)2-；且 [0266] A1是Tyr或不存在。 [0267] 根据本发明的另一个优选的实施方案，所述式I、II和III的促生长素抑制素-多巴胺嵌合化合物的特征在于： [0268] R1是-CH3； [0269] Y是-S-； [0270] L是-(CH2)-C(O)-或-(CH2)2-；且 [0271] A1是Lys或不存在。 [0272] 根据本发明的另一个优选的实施方案，所述式I、II和III的促生长素抑制素-多巴胺嵌合化合物的特征在于： [0273] R1是-CH3； [0274] Y是-S-； [0275] L是-(CH2)-C(O)-或-(CH2)2-；且 [0276] A1是不存在。 [0277] 根据本发明的另一个优选的实施方案，所述式I、II和III的促生长素抑制素-多巴胺嵌合化合物的特征在于： [0278] R1是-CH3； [0279] Y是-S-； [0280] L是-(CH2)2-；且 [0281] A1是不存在。 [0282] 根据本发明的另一个优选的实施方案，所述式I、II和IIIa的促生长素抑制素-多巴胺嵌合化合物的特征在于： [0283] R1是-CH3； [0284] Y是不存在；且 [0285] L是-(CH2)n-。 [0286] 根据本发明的另一个优选的实施方案，所述式I、II和IIIa的促生长素抑制素-多巴胺嵌合化合物的特征在于： [0287] R1是-CH3； [0288] Y是不存在；且 [0289] L是-(CH2)2-、-(CH2)3-或-(CH2)4-；且 [0290] A1是Tyr、Lys或不存在。 [0291] 根据本发明的另一个优选的实施方案，所述式I、II和IIIa的促生长素抑制素-多巴胺嵌合化合物的特征在于： [0292] R1是-CH3； [0293] Y是不存在；且 [0294] L是-(CH2)2-、-(CH2)3-或-(CH2)4-；且 [0295] A1是Tyr或Lys。 [0296] 根据本发明的另一个优选的实施方案，所述式I、II和IIIa的促生长素抑制素-多巴胺嵌合化合物的特征在于： [0297] R1是-CH3； [0298] Y是不存在；且 [0299] L是-(CH2)2-、-(CH2)3-或-(CH2)4-；且 [0300] A1是Tyr或不存在。 [0301] 根据本发明的另一个优选的实施方案，所述式I、II和IIIa的促生长素抑制素-多巴胺嵌合化合物的特征在于： [0302] R1是-CH3； [0303] Y是不存在；且 [0304] L是-(CH2)2-、-(CH2)3-或-(CH2)4-；且 [0305] A1是Lys或不存在。 [0306] 根据本发明的另一个优选的实施方案，所述式I、II和IIIa的促生长素抑制素-多巴胺嵌合化合物的特征在于： [0307] R1是-CH3； [0308] Y是不存在；且 [0309] L是-(CH2)2-、-(CH2)3-或-(CH2)4-；且 [0310] A1是不存在。 [0311] 上述举出的本发明的优选实施方案预以示例本发明的范围，但绝不预以将本发明的范围限于上文具体举出的那些实施方案。本领域技术人员易于认可存在许多其它不同的属于本文所定义的式I、II、III和IIIa的范围的组合。例如，根据上述举出的本发明优选5 9 实施方案的任意一种，A优选可以是Phe或4Pal，且A 优选可以是Phe、4FPhe或Tyr。 [0312] 将选择的本发明化合物提供在表I中。 [0313] 表I [0314] [0315] [0316] [0317] [0318] [0319] [0320] [0321] [0322] [0323] [0324] [0325] [0326] [0327] [0328] [0329] [0330] [0331] [0332] 在本发明的另一个实施方案中，所述促生长素抑制素-多巴胺嵌合类似物包含表I中所列的化合物的任一种。 [0333] 在本发明的一个优选的实施方案中，所述促生长素抑制素-多巴胺嵌合类似物包含选自如下清单的化合物： [0334] Dop1-Tyr-psi(CH2NH)-环(DLys-Arg-Phe-4Pal-DTrp-Lys-Thr-Phe)(SEQ ID NO：4)； [0335] Dop1-Tyr-psi(CH2NH)- 环 (DLys-Arg-Phe-Phe-DTrp-Lys-Thr-4FPhe)(SEQ ID NO：5)； [0336] Dop1-psi(CH2NH)-环(DLys-Arg-Phe-Phe-DTrp-Lys-Thr-4FPhe)(SEQ ID NO：6)； [0337] Dop1-psi(CH2NH)-环(DLys-Arg-Phe-4Pal-DTrp-Lys-Thr-Tyr)(SEQ ID NO：12)； [0338] Dop1-Lys(Dop1)-psi(CH2NH)- 环 (DLys-Arg-Phe-4Pal-DTrp-Lys-Thr-Tyr)(SEQ ID NO：13)； [0339] Dop1-Lys(Dop1)-psi(CH2NH)- 环 (DLys-Arg-Phe-4Pal-DTrp-Lys-Thr-Phe)(SEQ ID NO：14)； [0340] Dop1-psi(CH2NH)-环(DLys-Arg-Phe-4Pal-DTrp-Lys-Thr-Phe)(SEQ ID NO：28)； [0341] Dop1-环(DLys-Arg-Phe-4Pal-DTrp-Lys-Thr-Phe)(SEQ ID NO：29)； [0342] Dop1-环(DLys-Arg-Phe-4Pal-DTrp-Lys-Thr-Tyr)(SEQ ID NO：30)； [0343] 双[Dop1-psi(CH2N)]-环(DLys-Arg-Phe-4Pal-DTrp-Lys-Thr-Phe)(SEQ ID NO：35)； [0344] Dop1-Tyr-psi(CH2NH)-环(DLys-Arg-Phe-Phe-DTrp-Lys-Thr-Phe)(SEQ ID NO：39)； [0345] Dop1-Tyr-psi(CH2NH)-环(DLys-Arg-Phe-Phe-DTrp-Lys-Thr-Tyr)(SEQ ID NO：40)；和 [0346] Dop1(SO)-psi(CH2NH)-环(DLys-Arg-Phe-4Pal-DTrp-Lys-Thr-Tyr)(SEQ ID NO：18)。 [0347] 在本发明的另一个优选的实施方案中，所述促生长素抑制素-多巴胺嵌合类似物包含选自如下清单的化合物： [0348] Dop1-psi(CH2NH)-环(DLys-Arg-Phe-Phe-DTrp-Lys-Thr-4FPhe)(SEQ ID NO：6)； [0349] Dop1-psi(CH2NH)-环(DLys-Arg-Phe-4Pal-DTrp-Lys-Thr-Tyr)(SEQ ID NO：12)； [0350] Dop1-psi(CH2NH)-环(DLys-Arg-Phe-4Pal-DTrp-Lys-Thr-Phe)(SEQ ID NO：28)； [0351] Dop1-环(DLys-Arg-Phe-4Pal-DTrp-Lys-Thr-Phe)(SEQ ID NO：29)； [0352] Dop1-环(DLys-Arg-Phe-4Pal-DTrp-Lys-Thr-Tyr)(SEQ ID NO：30)； [0353] 双[Dop1-psi(CH2N)]-环(DLys-Arg-Phe-4Pal-DTrp-Lys-Thr-Phe)(SEQ ID NO：35)； [0354] 双[Dop1-psi(CH2N)]-环(DLys-Arg-Phe-Phe-DTrp-Lys-Thr-4FPhe)(SEQ ID NO：45)；和 [0355] Dop1-环(DLys-Arg-Phe-Phe-DTrp-Lys-Thr-Phe)(SEQ ID NO：50)。 [0356] 在本发明的另一个优选的实施方案中，所述促生长素抑制素-多巴胺嵌合类似物包含选自如下清单的化合物： [0357] Dop1-Tyr-psi(CH2NH)-环(DLys-Arg-Phe-4Pal-DTrp-Lys-Thr-Phe)(SEQ ID NO：4)； [0358] Dop1-Tyr-psi(CH2NH)- 环 (DLys-Arg-Phe-Phe-DTrp-Lys-Thr-4FPhe)(SEQ ID NO：5)； [0359] Dop1-Tyr-psi(CH2NH)-环(DLys-Arg-Phe-Phe-DTrp-Lys-Thr-Phe)(SEQ ID NO：39)；和 [0360] Dop1-Tyr-psi(CH2NH)-环(DLys-Arg-Phe-Phe-DTrp-Lys-Thr-Tyr)(SEQ ID NO：40)。 [0361] 在本发明的另一个优选的实施方案中，所述促生长素抑制素-多巴胺嵌合类似物包含选自如下清单的化合物： [0362] Dop1-Lys(Dop1)-psi(CH2NH)- 环 (DLys-Arg-Phe-4Pal-DTrp-Lys-Thr-Tyr)(SEQ ID NO：13)； [0363] Dop1-Lys(Dop1)-psi(CH2NH)- 环 (DLys-Arg-Phe-4Pal-DTrp-Lys-Thr-Phe)(SEQ ID NO：14)；和 [0364] Dop1-Lys(Dop1)-psi(CH2NH)-环(DLys-Arg-Phe-Phe-DTrp-Lys-Thr-4FPhe)(SEQ ID NO：52)。 [0365] 另外，本发明提供治疗对象的疾病或病症的方法，该方法包括给所述对象施用治疗有效量的本文所述的促生长素抑制素-多巴胺嵌合类似物或其药学上可接受的盐，其中所述疾病或障碍选自：神经内分泌肿瘤；血管疾病；结缔组织病；免疫疾病；胃肠道、胰腺、肾或肝疾患；代谢病；恶病质；肺、乳腺、前列腺、肝、甲状腺或血液癌症或肿瘤；肌骨障碍；惊恐障碍；和阿片样物质服药过量；且其中所述治疗有效量是有效治疗所述对象的所述疾病或障碍的量。 [0366] 在一些实施方案中，神经内分泌肿瘤是垂体神经内分泌肿瘤。在第一个优选的实施方案中，垂体神经内分泌肿瘤是产生ACTH的肿瘤。优选地，产生ACTH的肿瘤是库欣病。在第二个优选的实施方案中，垂体神经内分泌肿瘤是产生生长激素的肿瘤。优选地，产生生长激素的肿瘤是肢端肥大症。在第三个优选的实施方案中，垂体神经内分泌肿瘤是产生催乳素的肿瘤。优选地，产生催乳素的肿瘤是催乳素瘤。在第四个优选的实施方案中，垂体神经内分泌肿瘤是高催乳素血症或催乳素血症(prolactinemia)。在第五个优选的实施方案中，垂体神经内分泌肿瘤是促甲状腺激素(TSH)分泌型肿瘤。在第六个优选的实施方案中，垂体神经内分泌肿瘤是“非功能性”垂体腺瘤。在第七个优选的实施方案中，垂体神经内分泌肿瘤是促性腺素瘤(gonadotropinoma)。 [0367] 在一些实施方案中，神经内分泌肿瘤是类癌瘤。在一个优选的实施方案中，类癌瘤导致类癌综合征。在一些实施方案中，神经内分泌肿瘤是胰高血糖素瘤(glucagonoma)。在一些实施方案中，神经内分泌肿瘤是小细胞肺癌。在一些实施方案中，神经内分泌肿瘤是甲状腺髓样癌(medullary carcinoma)。在一些实施方案中，神经内分泌肿瘤是血管活性肠肽瘤(VIPoma)。在一些实施方案中，神经内分泌肿瘤是胰岛素瘤(insulinoma)。在一些实施方案中，神经内分泌肿瘤是功能性或非功能性胃肠胰神经内分泌肿瘤(GEP-NET)。在一些实施方案中，所述血管疾病的障碍是不适当的血管发生。在一些实施方案中，所述血管疾病的障碍是再狭窄。在一些实施方案中，所述血管疾病的障碍是视网膜病变。在一个优选的实施方案中，视网膜病变是糖尿病视网膜病变或增殖性视网膜病。在另一个优选的实施方案中，视网膜病变是黄斑变性，优选是年龄相关黄斑变性。 [0368] 在一些实施方案中，结缔组织病是硬皮病。在一些实施方案中，免疫疾病是类风湿性关节炎。在一些实施方案中，免疫疾病是炎症。在一些实施方案中，免疫疾病是纤维化。在一些实施方案中，免疫疾病是格雷夫斯眼病变。在一些实施方案中，免疫疾病是同种异体移植排斥。在一些实施方案中，胃肠道障碍包含胃酸分泌、消化性溃疡、炎性肠病(IBD)或腹泻。在一个优选的实施方案中，IBD是肠易激综合征或局限性回肠炎。在另一个优选的实施方案中，腹泻是AIDS相关或化疗相关或水泻综合征。在另一个优选的实施方案中，胃肠道障碍是小肠综合征、小肠梗阻、胃食管反流、十二指肠胃反流、幽门螺杆菌(H.pylori)增殖或胃肠出血。 [0369] 在一些实施方案中，代谢病包含高脂血症、胰岛素抗性、X综合征、肥胖、糖尿病或糖尿病相关疾病。在一个优选的实施方案中，糖尿病相关疾病包含糖尿病肾病、糖尿病神经病变、糖尿病视网膜病变或胃肌轻瘫。 [0370] 在一些实施方案中，恶病质是心原性恶病质、癌性恶病质或老年病恶病质。 [0371] 在一些实施方案中，所述疾病或障碍包含神经胶质瘤、厌食症、甲状腺功能减退、格雷夫斯病、醛固酮过多症(hyperaldeosteronism)、系统性硬化病、胰腺炎、外部和内部胰腺假囊肿和腹水、胰管皮瘘(pancreaticocutaneous fistula)、胰岛细胞增生症(nesidoblastosis)、高胰岛素症、胃泌素瘤(gastrinoma)、卓林格-艾丽逊综合征、胃肠道激素分泌型肿瘤、晨晓现象(dawn phenomenon)、倾倒综合征(dumping synfrome)、甲状旁腺功能亢进、佩吉特病、多囊卵巢病、多囊卵巢病、直立性低血压、餐后低血压、门静脉高压、血管病或移植血管出血。 [0372] 还考虑本发明的促生长素抑制素-多巴胺嵌合化合物通常与其它活性成分和/或治疗剂联用，例如抗癌剂、生长激素拮抗剂、放疗剂、化疗剂、抗生素、抗体、抗病毒药、止痛药(例如非甾类抗炎药(NSAID)、对乙酰氨基酚、阿片样物质、COX-2抑制剂)、免疫刺激剂(例如细胞因子或合成免疫刺激有机分子)、激素(天然、合成或半合成的)、中枢神经系统(CNS)刺激剂、止吐药、抗组织胺药、红细胞生成素、活化补体的活性剂、镇静药、肌肉松弛药、麻醉药、抗惊厥药、抗抑郁药、抗精神病药及其组合。 [0373] 一般地可以将本发明的化合物制成其药学上可接受的酸加成盐形式，例如使用无机酸和有机酸衍生的盐。这样的酸的实例是盐酸、硝酸、硫酸、磷酸、甲酸、乙酸、三氟乙酸、丙酸、马来酸、琥珀酸、D-酒石酸、L-酒石酸、丙二酸、甲磺酸等。此外，包含酸性官能团例如羧基的一些化合物可以以其无机盐的形式分离，其中抗衡离子可以选自钠、钾、锂、钙、镁等；并且可以从有机碱中分离。 [0374] 可以通过取约1当量的本发明化合物并且使其接触约1当量或以上的适合的相应期望的盐的酸形成药学上可接受的盐。后处理和分离得到的盐对于本领域技术人员而言是众所周知的。 [0375] 可以通过口服、胃肠外(例如肌内、腹膜内、静脉内或皮下注射或植入物)、鼻部、阴道、直肠、舌下或局部施用途径来施用本发明的化合物，且可以使用药学上可接受的载体配制它们，得到适合于每种施用途径的剂型。因此，本发明的特征在于药物组合物，其包含至少一种本发明的化合物作为活性成分与药学上可接受的载体。 [0376] 用于口服施用的固体剂型包括胶囊、片剂、丸剂、粉末和颗粒。在这样的固体剂型中，将活性化合物与至少一种惰性药学上可接受的载体例如蔗糖、乳糖或淀粉混合。作为正常实践，这样的剂型还可以包含另外非这类惰性稀释剂的物质，例如润滑剂，例如硬脂酸镁。在胶囊、片剂和丸剂的情况中，剂型还可以包含缓冲剂。片剂和丸剂还可以使用肠溶衣制备。 [0377] 用于口服施用的液体剂型包括药学上可接受的乳剂、溶液、混悬液、糖浆剂、酏剂，它们包含本领域常用的惰性稀释剂，例如水。除这样的惰性稀释剂外，组合物还可以包括佐剂，例如湿润剂、乳化剂和助悬剂和甜味剂、矫味剂和芳香剂。 [0378] 用于胃肠外施用的本发明制剂包括无菌水或非水溶液、混悬液或乳剂。非水溶剂或媒介物的实例是丙二醇、聚乙二醇、植物油例如橄榄油和玉米油、明胶和可注射有机酯类例如油酸乙酯。这样的剂型还可以包含佐剂，例如防腐剂、湿润剂、乳化剂和分散剂。例如，可以通过截留细菌的滤膜过滤、通过将灭菌剂掺入组合物、通过照射组合物或通过加热组合物给它们灭菌。它们还可以制备为无菌固体组合物的形式，在使用前即刻用无菌水或一些另外的可注射介质溶解。 [0379] 用于直肠或阴道施用的组合物优选是栓剂，其除包含活性物质外还可以包含例如可可脂或栓剂蜡这样的赋形剂。 [0380] 还使用本领域众所周知的标准赋形剂制备用于鼻或舌下施用的组合物。 [0381] 一般而言，本发明组合物中的活性成分的有效剂量可以改变；然而，必需的情况是，活性成分的用量使得能够得到适合的剂型。所选择的剂量取决于期望的治疗效果、施用途径和治疗期限，它们全部属于本领域技术人员的知识范围。通常，将0.0001-100mg/kg体重的每日剂量水平施用于人和其它动物，例如哺乳动物。 [0382] 优选的剂量范围在0.01-10.0mg/kg体重。例如，可以将这样的剂量作为单剂量每日施用或分成多个剂量每日施用。 [0383] 促生长素抑制素激动剂的合成 [0384] 合成肽促生长素抑制素激动剂的方法是得到充分记载的且属于本领域技术人员的能力范围。例如，可以用Rink酰胺MBHA树脂(4-(2’4’-二甲氧基苯基-Fmoc-氨基甲基)-苯氧基乙酰氨基-正亮氨酰基-MBHA树脂)、应用Fmoc化学的标准固相方案合成肽类。然后用包含多巴胺部分的相应化合物处理在N-末端上带有游离氨基官能团的肽-树脂。用TFA水/TIS混合物从树脂上裂解终产物。 [0385] 例如，通过如下PCT公开号WO 94/04752中举出的方案合成带有取代的N-末端的促生长素抑制素激动剂。带有内酰胺桥的促生长素抑制素激动剂的合成描述在PCT公开号WO 03/014158中。 [0386] 多巴胺激动剂的合成 [0387] 合成许多多巴胺激动剂的方法是得到充分记载且属于本领域技术人员的能力范围。用于本文公开的促生长素抑制素-多巴胺嵌合化合物的多巴胺激动剂的合成方案可以在PCT公开号WO 2004/091490和WO 2002/100888中找到。在如下反应方案和实施例中提供了另外的合成方法。实施例 [0388] 促生长素抑制素-多巴胺嵌合体的合成 [0389] 可以根据如下反应方案和实施例合成促生长素抑制素-多巴胺嵌合体。用于这样的化合物的原料和中间体是商购的或使用标准方法制备(例如参见Pharmazie 39：537(1984)和美国专利US5,097,031)。提供下列实施例用于示例本发明。它们绝不以任何方式限定本发明。 [0390] D-6-甲基-8β-甲磺酰氧基甲基-麦角灵的制备 [0391] 向二氢麦角醇(240mg)在10mL吡啶中的溶液中加入250μL甲磺酰氯。在室温搅拌2小时后，将该反应混合物倾入100mL水，用氯仿(2x20mL)萃取。用水洗涤有机层，用MgSO4干燥，真空浓缩，得到140mg浅棕色固体。在用NaHCO3碱化后从水层中进一步萃取，又得到100mg产物。ESI-MS分析得到334.5的分子量。 [0392] D-6-甲基-8β-麦角灵基甲基硫代乙酰基酸的制备 [0393] 向上述D-6-甲基-8β-甲磺酰氧基甲基-麦角灵(140ng)在3mL二甲基甲酰胺中的溶液中加入粉状K2CO3(150mg)，随后加入150μL 2-巯基乙酸乙基酯，将该混合物在40℃在氮气气氛中加热2小时。真空除去溶剂至干，使残余物分配在氯仿与水之间。然后干燥(MgSO4)有机层，蒸发溶剂后，使残余物进行制备型硅胶薄层色谱，使用氯仿/甲醇(9：1)作为展开溶剂。分离适合的部分，用氯仿-甲醇萃取，真空除去溶剂至干，得到100mg浅棕色固体。ESI-MS分析得到359.2的分子量。用1N LiOH水解该酯，通过HPLC监测。水解完成后，用稀HCl将其酸化至pH 3，生成D-6-甲基-8β-麦角灵基甲基硫代乙酰酸。ESI-MS分析得到331.5的分子量，与330.5的理论量一致。 [0394] D-6-甲基-8β-麦角灵基甲基硫代乙醛的制备 [0395] 根据如下所示的合成方案制备如下另外的多巴胺部分： [0396] [0397] 步骤1：D-6-甲基-8β-甲磺酰氧基甲基-麦角灵(ii)的制备 [0398] 向D-6-甲基-8β-羟基甲基-麦角灵(2.8g)在50mL吡啶中的冰冷混悬液中滴加2.5mL甲磺酰氯(2.5eq.)，将该混合物温至室温，搅拌过夜。将该混合物倾入冰-NaHCO3混合物，用氯仿将碱水混合物萃取几次(3x50mL)。真空蒸发挥发性物质至干，再通过与甲苯共蒸发除去痕量的吡啶。ESI-MS分析得到335.4的分子量。 [0399] 步骤2：(D-6-甲基-8β-麦角灵基甲基)硫代乙醇(iii)的制备 [0400] 向D-6-甲基-8β-甲磺酰氧基甲基-麦角灵(5g)、粉状K2CO3(7.7g)在60mL DMF中的混合物中加入3.5mL 2-巯基乙醇，将该混合物在50℃-60℃在氮气气氛中加热(浴)过夜。用氯仿(100mL)稀释该混合物，过滤，用氯仿-甲醇洗涤滤饼。真空蒸发滤液至干，使其分配在氯仿/甲醇与水之间。然后用MgSO4干燥有机层，蒸发溶剂后，将残余物与甲醇一起研磨。通过过滤采集淡黄色固体(1.9g)。真空蒸发母液至干。对残余物进行硅胶(30g)色谱，使用氯仿/甲醇(19：1)作为洗脱液。采集适合的级分，真空除去溶剂至干，得到1.0g浅棕色固体。ESI-MS分析得到317.3的分子量。 [0401] 步骤3：D-6-甲基-8β-麦角灵基甲基硫代乙醛(iv)的制备 [0402] 在搅拌的同时向冰冷的用5mL THF稀释的D-6-甲基-8β-麦角灵基甲基硫代乙醇(480mg)在DMSO/三乙胺(2：1，4.5mL)中的混合物中加入三氧化硫-三乙胺复合物(770mg，2.8eq.)在5mL DMSO中的溶液。将该反应混合物在0-5℃搅拌30分钟，在室温搅拌1小时。 加入30mL 10％乙酸水溶液，将该混合物搅拌1小时。缓慢地加入5N-NaOH以便将pH调整至8-9。通过过滤收集浅粉红色固体，用水洗涤，然后干燥。ESI-MS分析得到315.5、629.4、 943.1和472.6的分子量。 [0403] Dop1-Tyr-psi(CH2NH)-环(DLys-Arg-Phe-4Pal-DTrp-Lys-Thr-Phe)(化合物4；SEQ ID NO：4)的合成方法 [0404] 基于Fmoc化学、用Applied Biosystems(Foster City,California,USA)433A型肽合成仪自动合成化合物4的肽部分。使用具有0.58mmol/g取代的预先载入的Fmoc-Phe-2ClTrt树脂，以0.2mmol等级进行合成。Fmoc氨基酸柱得自AnaSpec(San Jose,California,USA)。带有 侧链保护 的Fmoc氨基酸 如下：Fmoc-Thr(tBu)-OH、Fmoc-Lys(Boc)-OH、Fmoc-DTrp(Boc)-OH、Fmoc-Arg(Pbf)-OH、Fmoc-DLys(Mtt)-OH 和Fmoc-4Pal(Chem-Impex Inc.；Wood Dale,Illinois,USA)。以0.25mmol等级进行合成。ABI 433A肽合成仪设定程序进行如下反应循环：用NMP洗涤；用20％哌啶的NMP溶液除去Fmoc保护基10分钟；用NMP洗涤；和与预活化的氨基酸偶合1小时。根据顺序依次对树脂进行双重偶合，直到肽链组装完成。在洗涤和除去Fmoc的循环过程中，首先用2mL 0.45M HBTU/HOBt的DMF溶液预活化Fmoc氨基酸(4eq.,1mmol)。将这种活化的氨基酸酯、1mL 2M DIEA和2.5mL NMP加入到树脂中。在氨基烷基化前，用25％哌啶的DMF溶液处理树脂40分钟，用DMF、MeOH和DCM洗涤。 [0405] 使5mmol Fmoc-Tyr(tBu)-OH的DCM溶液与5.1mmol N,O-二甲基羟基胺盐酸盐、PyBOP和DIEA反应，转化成Weinreb酰胺。然后将1mmol该酰胺溶于10mL无水THF，用盐-冰浴冷却(-5℃)15分钟，在20分钟内向其中缓慢地滴加1mmol LAH(1mL)。将该反应体系在冷冰浴(0℃)中保持冷却，再搅拌1小时。通过添加10mL 10％ KHSO4淬灭反应，用50mL DCM稀释。再用DCM(50mL、30mL和20mL)萃取该水溶液。用10％ KHSO4(20mLx3)和盐水(20mLx3)洗涤所有有机层。用Na2SO4干燥后，将其蒸发至干。HPLC显示宽峰。将该粗醛(Fmoc-Tyr(tBu)-CHO)溶于2.5mL DMF，与不含N-末端的树脂的10mL DMF和125μL AcOH溶液混合，分5部分以半小时递增的方式向其中加入2.1mmol(136.8mg)NaBH3CN。将该反应体系振摇过夜。裂解树脂的等分试样，证实反应完成。 [0406] 洗涤后，用MeOH将树脂处理2小时，然后与25％哌啶/DMF混合过夜，依次用DMF、MeOH和DCM洗涤树脂，然后与D-6-甲基-8β-麦角灵基甲基硫代乙酰酸(3eq.)、PyAOP(5eq.)和DIEA(10eq.)偶合过夜。裂解等分试样显示偶合完成。 [0407] 用DCM洗涤后，用32mL包含TFA/DCM(1：99)的溶液将树脂处理(对于0.159mmol等级的树脂)30分钟。然后过滤入0.583mL TEA，蒸发至干。重复该过程3次以上。将粗直链产物溶于77.5mL DCM，向其中加入2eq.PyAOP、2.5eq.HOBt和16eq.DIEA。通过HPLC监测内酰胺形成。 [0408] 用TFA/TIS/H2O/DTT溶液(20mL,1.26mL,1.34mL,1.25g)将环化的被保护的粗产物处理6小时。用150mL冷乙醚过滤。离心后，将沉淀准备用于纯化。 [0409] 将粗产物溶于50％ AcOH水溶液，用10倍0.1％ TFA水溶液稀释。滴加乙腈以制成澄清溶液。用反相制备型 HPLC/MS、使用来自Phenomenex的Luna C18柱(100x21.2mm, 5μm)进行纯化。用30-60％ B梯度在35分钟内从柱上洗脱肽，其中ATM 是0.1％ TFA水溶液，B是0.1％ TFA的乙腈溶液。用ACQUITY UPLC (Waters Corporation； Milford,Massachusetts,USA)检查级分，合并包含纯产物的级分，冷冻至干。 [0410] Dop1-Tyr-psi(CH2NH)-环(DLys-Arg-Phe-Phe-DTrp-Lys-Thr-4FPhe)(化合物5；SEQ ID NO：5)的合成方法 [0411] 基本上根据化合物4的合成方法合成化合物5，除外使用Fmoc-4FPhe-2ClTrt树脂和在肽序列中用4Pal替代Phe。 [0412] Dop1-psi(CH2NH)-环(DLys-Arg-Phe-Phe-DTrp-Lys-Thr-4FPhe)(化合物6；SEQ ID NO：6)的合成方法 [0413] 基本上根据化合物5的合成方法合成化合物6，除外使用Dop1-CHO而不是Fmoc-Tyr(tBu)-CHO。 [0414] Dop1-psi(CH2NH)-环(DLys-Arg-Phe-4Pal-DTrp-Lys-Thr-Tyr)(化合物7；SEQ ID NO：12)的合成方法 [0415] 基本上根据化合物6的合成方法合成化合物7，除外在肽序列中用4Pal替代Phe且C-末端是Tyr而不是4FPhe。 [0416] Dop1-psi(CH2NH)-环(DLys-Arg-Phe-4Pal-DTrp-Lys-Thr-Tyr)(化合物7；SEQ ID NO：12)的可选合成方法 [0417] 将Fmoc-Tyr(tBu)-OH(12mmole,5.51g)溶于40mL DCM和20mL DMF的溶液。向该溶液中加入具有1.5mmol/g取代的2-氯三苯甲基树脂(12.135mmole,8.09g)和二异丙基乙胺(36mmol,6.27mL)。3小时后，过滤树脂，用DMF、然后用DCM洗涤3次。然后用10％ DIEA的MeOH溶液将树脂处理1.5小时。依次用DMF、DCM和MeOH洗涤树脂，干燥过夜。根据M.Gude等人,Lett.Pep.Sci.9、203.(2003)中的1,8-二氮杂双环[5.4.0]十一-7-烯方法将树脂的取代度测定为0.58mmoles/g。 [0418] 使用 合 成 仪 (Protein Technologies,Inc.,Tuscon,Arizona,USA)、基 于Fmoc化 学 制 备 标 题 肽。 使 用 具 有0.58mmol/g 取 代 度的0.345g 预 先 载 入 的Fmoc-Tyr(tBu)-2-ClTrt 树 脂，以0.2mmol 等 级 进 行 合成。使用侧链保护的Fmoc氨基酸如下：Fmoc-Thr(tBu)-OH、Fmoc-Lys(ivDde)-OH、Fmoc-DTrp(Boc)-OH、Fmoc-Phe-OH,Fmoc-4Pal-OH 和 Fmoc-Arg(Pbf)-OH(CBL Biopharma,Boulder,Colorado,USA)和Fmoc-DLys(Mtt)-OH(Chem-Impex Int’l Inc.,Wood Dale,Illinois,USA)。合成仪设定程序进行如下反应循环：用NMP洗涤；对于前3种氨基酸，用20％哌啶的NMP溶液除去Fmoc保护基15分钟，对于Fmoc-DTrp(Boc)-OH至肽末端，需要30分钟；用NMP洗涤；与0.9eq.HCTU偶合。根据顺序依次对树脂进行双重偶合，直到肽链组装完成。合成按照程序进行最终脱保护以除去Fmoc。将树脂与12eq.过量的(Boc)2O和6eq.DIEA在4mL DMF中混合2小时，重复一次。完全裂解的等分试样显示MS为1383，与1382.6的分子量理论值一致。UPLC(5％-80％ B，5min，其中A是0.1％ TFA的水溶液，B是0.1％ TFA的乙腈溶液)显示产物的Rt＝2.82。 [0419] 用25mL冷TFA/TIS/DCM(1/5/94)将上述Boc-DLys(Mtt)-Arg(Pbf)-Phe-4Pal-DTrp(Boc)-Lys(ivDde)-Thr(tBu)-Tyr(tBu)-2-ClTrt树脂处理30分钟，以便提供选择性裂解。通过同时在冰浴中添加0.47mL TEA中和过滤DCM裂解溶液。将该过程重复2次，然后合并3次中和的滤液，即刻使用5eq.PyBOP、8eq.DIEA和催化量的DMF进行环化过夜。UPLC分析显示保留时间从2.83移动至3.946(梯度为50％-100％缓冲液B，5分钟)。MS显示1929(直链是1947)。将该混合物蒸发至干，溶于20mL水，研磨，得到油状沉淀。将残余物与包含0.8mL TIS、0.8mL水和0.65g DTT的12mL TFA溶液混合4hr。将该混合物倾入80mL乙醚，离心，得到沉淀。将粗的环化肽溶于5mL 50％ AcOH水溶液，用0.1％ TFA水溶液稀释10倍。如果需要，加入少量ACN以使溶液澄清。将其装载至来自Phenomenex的反相制备型Luna C18柱(100x21.2mm, 5μm)。用20-50％ B梯度在50分钟内洗脱肽，其 中A是0.1％ TFA水溶液，B是0.1％ TFA的乙腈溶液。用Acquity UPLC(Waters)检查级分，合并包含纯产物的级分，冷冻至干。ESI-MS分析显示具有1365.2的正确产物，与1365的分子量理论值一致。得到96mg，具有95％纯度。基于起始树脂的平均收率为29.8％。 [0420] 在0-10℃向D-6-甲基-8β-麦角灵基甲基硫代乙醇(1.5g、4.7mmol)在TEA/DMSO/THF(6mL/12mL/30mL)中的溶液中滴加三氧化硫-三乙胺复合物(3.44g,19mmol)在DMSO(10mL)中的溶液。添加后，将该混合物在室温搅拌2小时。HPLC显示反应完成。用低于10℃的5％ HCl将pH调整至2-3。将该溶液在室温搅拌1小时，然后用5M NaOH将pH调整至8-9，用EtOAc萃取该混合物，用盐水洗涤合并的有机层，用Na2SO4干燥，浓缩，得到Dop1-CHO D-6-甲基-8β-麦角灵基甲基硫代乙醛(1.5g,平均纯度为80-90％)。ESI-MS分析得到315.28的分子量(与314.15的分子量理论值一致)。将其不经进一步纯化用于下一步反应。 [0421] 将新鲜制备的Dop1-CHO溶于MeOH，制成的储备溶液浓度为0.0527mmol。制备30mg/ml MeOH(0.477mmol/mL) 的 NaBH3CN 储 备 溶 液。 将 215.6mg NH2-[DLys-Arg-Phe-4Pal-DTrp-Lys(ivDde)-Thr-Tyr](0.158mmol) 溶 于 20mL MeOH。 向 其 中 加入1.4eq.Dop1-CHO(0.22mmol,4.2mL储备溶液)，随后分3部分在1小时期限内加入NaBH3CN(1.5eq.,0.237mmol)(3x0.55mL)。反应后进行UPLC和infusion MS。2.5小时后，起始肽耗尽，真空浓缩该反应体系，得到粗产物。 [0422] 向 粗 肽 Dop1-psi(CH2NH)-cyclo[DLys-Arg-Phe-4Pal-DTrp-Lys(ivDde)-Thr-Tyr]中加入5％肼的DMF溶液(12mL)。将得到的混合物在室温搅拌1小时。通过HPLC和ESI监测反应混合物，显示原料耗尽。使用TFA将该反应混合物酸化至pH 4，真空浓缩。通过HPLC纯化粗产物。使用来自Phenomenex的反相制备型Luna C18柱(250x21.2mm,5μm)。用10-30％ B梯度在40分钟内洗脱肽，其中A是0.1％ TFA水溶液，B是0.1％ TFA的乙腈溶液。得到94mg终产物，纯度为94％。得到基于肽的收率41％；基于Dop1-OH的收率为29％。ESI-MS分析得到1456.8的分子量，与1456.8的理论值一致。 [0423] Dop1-Lys(Dop1)-psi(CH2NH)-环(DLys-Arg-Phe-4Pal-DTrp-Lys-Thr-Tyr)(化合物8；SEQ ID NO：13)的合成方法 [0424] 基本上根据化合物7的合成方法合成化合物8，除外将Fmoc-Lys(Fmoc)-CHO用于氨基烷基化。然后用25％哌啶/DMF处理树脂以除去Lys上的Fmoc保护基，使游离氨基与D-6-甲基-8β-麦角灵基甲基硫代乙醛偶合。 [0425] Dop1-Lys(Dop1)-psi(CH2NH)-环(DLys-Arg-Phe-4Pal-DTrp-Lys-Thr-Phe)(化合物9；SEQ ID NO：14)的合成方法 [0426] 基本上根据化合物8的合成方法合成化合物9，除外C-末端氨基酸是Phe而不是Tyr。 [0427] Dop1(SO2)-psi(CH2NH)-环(DLys-Arg-Phe-4Pal-DTrp-Lys-Thr-Tyr)(化合物20；SEQ ID NO：25),Dop1[(R)SO]-psi(CH2NH)- 环 (DLys-Arg-Phe-4Pal-DTrp-Lys-Thr-Tyr)(化合物11；SEQ ID NO：16)和Dop1[(S)SO]-psi(CH2NH)-环(DLys-Arg-Phe-4Pal-DTrp-Lys-Thr-Tyr)(化合物12；SEQ ID NO：17)的合成方法 [0428] 化合物20、11和12得自化合物7的氧化。将纯化的化合物7粉末溶于水，制成3.433mM溶液。将1.1倍的高碘酸钠溶于Dulbecco’s PBS(20mM PBS,137mM NaCl)，制成 3.84mM浓度。混合溶液，在室温搅拌。0.5小时后，ESI-MS分析得到氧化产物的分子量为 1472.1(M+16)和1486(M+32)。UPLC显示3个主峰。50倍过量的乙二醇用于淬灭反应。通过HPLC用VyDac 218TP10510纯化，使用如下梯度：0-10％ B，5分钟；10-35％ B，55分钟，在UV 285nm监测(A：含有0.1％ TFA的100％水；B：含有0.1％ TFA的100％乙腈)。基于Infusion MS和HPLC抽取全部级分。那些具有MS 1486.5和99.6％纯度的级分是化合物20。那些具有MS 1472.7的级分显示它们在HPLC中是混合物，通过与上述那些相同的梯度对其进行进一步纯化。化合物11的特征为保留时间21.032，化合物12的特征为在20.7的保留时间，在较缓慢梯度条件下(0-20％ B，10分钟，然后达到35％，30分钟)。 [0429] 将本发明选择的化合物的物理数据概括在表II中。 [0430] 表II [0431] [0432] [0433] [0434] 促生长素抑制素受体放射性配体结合试验 [0435] 通过放射性配体结合试验、在用每种人促生长素抑制素受体亚型hSSTR1-5稳定转染的CHO-K1细胞中测定测试化合物对人促生长素抑制素受体的亲和力。将hSSTR1(GenBank 登 记 号 NM_001049.1)、hSSTR2(GenBank 登 记 号 XM_012697.1)、hSSTR3(GenBank 登 记 号 XM_009963.1)、hSSTR4(GenBank 登 记 号 NM_001052.1) 和hSSTR5(GenBank登记号XM_012565.1)的cDNA编码序列亚克隆入哺乳动物表达载体 pcDNA3.1(Life Technologies)。通过转染入CHO-K1细胞(ATCC)得到稳定表达每种促生长素抑制素受体的克隆细胞系，随后用包含0.8mg/mL G418(Life Technologies)的培养基筛选。 [0436] 通过如下 方法得到 用于体外受 体结合试 验的膜。使 用PolytronPT10-35GT(Kinematica)以18,000rpm将表达促生长素抑制素受体之一的CHO-K1细胞在含10mM Tris-HCl、5mM EDTA、3mM EGTA、1mM苯甲基磺酰氟的冰冷缓冲液pH 7.6一起匀化 30秒，以500xg离心10分钟。将包含质膜的上清液以100,000xg离心30分钟，将沉淀重新混悬于包含20mM甘氨酸-甘氨酸、1mM MgCl2、250mM蔗糖的pH 7.2的缓冲液，用于贮存在-80℃。 [0437] 对于SSTR1、2和5试验，将膜和不同浓度的测试化合物在25℃在96-孔培125 11 养 板 中 与 0.05nM[ I-Tyr ]-SRIF-14( 对 于 hSSTR1；PerkinElmer Life Science)、 125 0.05nM[ I-Tyr]- 司 格 列 肽 ( 对 于 hSSTR2；PerkinElmer Life Science) 或 125 0.05nM[ I-Tyr]-[DPhe- 环 (Cys-Tyr-DTrp-Lys-Val-Cys)-Thr-NH2]( 对 于 hSSTR5； PerkinElmer Life Science)在50mM HEPES、0.2％ BSA、0.1mM MgCl2,pH 7.5中的溶液一起温育60分钟。 [0438] 对于hSSTR3和4试验，将膜和不同浓度的测试化合物在25℃在96-孔培养板中与125 11 0.05nM[ I-Tyr ]-SRIF-14(PerkinElmer Life Science)在50mM HEPES、0.2％ BSA、5mM MgCl2、200KIU/mL抑肽酶、0.02mg/mL杆菌肽和0.02mg/mL苯甲基磺酰氟pH 7.5中的溶液一起温育60分钟。 [0439] 通过经GF/C玻璃微纤维滤板(用0.3％聚乙烯亚胺和0.1％ BSA预湿润)快速过滤、使用96-孔细胞采集器(Brandel)终止温育。用包含50mM Tris缓冲液pH 7.7的1mL/孔等分的冰冷缓冲液将培养板洗涤6次。将特异性结合定义为结合的总放射性配体减去在1000nM SRIF-14存在下的结合。 [0440] 将如上文所述的促生长素抑制素受体放射性配体结合试验的结果提供在表III中，用于筛选本发明的化合物。 [0441] 表III [0442] [0443] [0444] [0445] 多巴胺受体放射性配体结合试验 [0446] 如下通过放射性配体结合试验、在用hDRD2受体稳定转染的CHO-K1细胞中测定测试化合物对人多巴胺受体的亲和力。将hDRD2(GenBank登记号X51362)的cDNA编码序列亚克隆入哺乳动物表达载体pcDNA3.1/GS(Life Technologies)。通过转染入CHO-K1细胞得到稳定表达hDRD2的克隆细胞系，随后用包含0.3mg/mL博莱霉素(zeocin)(Life Technologies)的培养基筛选。 [0447] 通过如下 方法得到 用于体外受 体结合试 验的膜。使 用PolytronPT10-35GT(Kinematica)以18,000rpm将表达hDRD2的CHO-K1细胞在含10mM Tris-HCl、 5mM EDTA、3mM EGTA、1mM苯甲基磺酰氟的冰冷缓冲液pH 7.6中一起匀化30秒，以500xg离心10分钟。将包含质膜的上清液以100,000xg离心30分钟，将沉淀重新混悬于包含20mM甘氨酸-甘氨酸、1mM MgCl2、250mM蔗糖的pH 7.2的缓冲液，用于贮存在-80℃。 [0448] 为了进行试验，将膜和不同浓度的测试化合物在25℃在96-孔培养板中与0.25nM[3H]-螺哌隆(PerkinElmer Life Science)在50mM Tris HCI、120mM NaCI、5mM KCl、 2mM CaCl2和1mM MgC12中的溶液一起温育60分钟。通过经GF/C玻璃微纤维滤板(用0.3％聚乙烯亚胺和0.1％ BSA预湿润)快速过滤、使用96-孔细胞采集器(Brandel)终止温育。 用包含50mM Tris缓冲液pH 7.7的1mL/孔等分的冰冷缓冲液将培养板洗涤6次。将特异性结合定义为结合的总放射性配体减去在1000nM(+)布他拉莫(butaclamol)存在下的结合。 [0449] 将如上文所述的多巴胺受体放射性配体结合试验的结果提供在表III中，用于筛选本发明的化合物。 [0450] 胞内钙动员试验 [0451] 通过胞内钙动员试验、使用FLIPR Calcium 4测定试剂盒(Molecular Devices)测定本发明的筛选化合物活化hSSTR2和hDRD2的能力。 [0452] 将表达hSSTR2或hDRD2的细胞在384-孔微量培养板中的组织培养基中铺板，在37℃在具有5％ CO2的加湿气氛中温育16-24小时。用包含Hank缓冲盐水、20mM HEPES、 2.5mM丙磺舒和Calcium 4染料的加样缓冲液替代培养基，将培养板在37℃温育60分钟。将不同浓度的测试化合物在使用Flexstation III微量培养板读出器(Molecular Devices)、在485nm激发和在525nm发射的荧光测定过程中施用于细胞。 [0453] 通 过 使 用 GraphPad Prism 5.03 版 (GraphPad Software,SanDiego,California,USA)使数据拟合S形剂量响应曲线，计算半数最大有效浓度(EC50)。％Emax值代表测试化合物的最大效应，以SRIF-14最大效应的百分比计。 [0454] 将如上文所述的胞内钙动员试验的结果提供在表IV中，用于筛选本发明的化合物。 [0455] 表IV [0456] [0457] [0458] [0459] 合成参比化合物编号A、B和C(其化学名及其相应的结构提供在表V中)，并且通过相同的胞内钙动员试验、使用FLIPR Calcium 4测定试剂盒(Molecular Devices)和在与如上文所述相同的测试化合物的实验条件下测定其活化hSSTR2和hDRD2的能力，且将其结果提供在表VI中。 [0460] 表V [0461] [0462] [0463] 表VI [0464] [0465] 在表V中所列的化学名中，术语“Dab”是氨基酸残基2,4-二氨基丁酸的缩写。 [0466] 参照表IV和VI，令人惊奇地是，化合物24、25、6、7、23和29显示在EC50方面以具有统计学显著性的改善超过参比化合物A，其中p值(斯氏t-检验，单尾)为<0.05。例如，化合物24在结构上不同于参比化合物A的方面仅在于在环肽部分的第一个氨基酸残基位置上存在DLys而不是DDab，并且在环肽部分的第四个氨基酸残基位置上存在4Pal而不是Phe，且基于本申请表IV和V中提供的数据，这对于本发明所属技术领域的普通技术人员而言无法预期和令人惊奇的是，化合物24的EC50值低于参比化合物A约9-倍。 [0467] 同样，参照表IV和V，令人惊奇地是，化合物4、5、32和33显示在EC50和/或％Emax方面以具有统计学显著性的改善超过参比化合物B。 [0468] 同样，参照表IV和V，令人惊奇地是，化合物8、9和47显示在％Emax方面以具有统计学显著性的改善超过参比化合物C。 [0469] 人垂体腺瘤细胞生长激素释放试验 [0470] 具有巨腺瘤的肢端肥大患者进行经蝶骨手术，且通过酶和机械方法分离手术时得到的每种肿瘤的部分。将细胞在补充10％ FBS和抗生素的DMEM培养基中培养3天。然后4 将细胞以3-5x10细胞/孔的密度在补充了10％ FBS和抗生素的DMEM中、在多-孔组织培养皿中铺板，所述多-孔组织培养皿上包被有来自牛内皮角膜细胞的胞外基质。培养2-3天后，将培养基改变成补充1％ FBS、抗生素和1％ ITS(胰岛素、转铁蛋白和硒)的DMEM。 [0471] 正如图1-4中所示，本发明的促生长素抑制素-多巴胺嵌合类似物以剂量响应方式对具有巨腺瘤的肢端肥大患者的垂体瘤细胞具有显著性的生长激素抑制活性；且如图5中所示，本发明促生长素抑制素-多巴胺嵌合类似物的该生长激素抑制活性明显优于其母体促生长素抑制素类似物。 [0473] 对本发明所公开的化合物和可选实施方案的显而易见的改变在本领域技术人员考虑到上述公开内容的情况下显而易见。所有这样显而易见的变化和可选替代均被视为属于如本文所述的本发明的范围。 |
||||||
