大环生长素释放肽受体激动剂的盐、溶剂合物和药物组合物及其使用方法

申请号 CN201080054791.6 申请日 2010-09-29 公开(公告)号 CN102781441A 公开(公告)日 2012-11-14
申请人 特兰齐姆制药公司; 发明人 H·R·霍维达; M·韦兹纳; E·富尼耶; R·加农; P·贝雷尔;
摘要 本 发明 提供了与生长素释放肽(生长 激素 促分泌素)受体结合和/或为其功能性激动剂的大环化合物的新颖盐和 溶剂 合物。本发明还涉及这些盐和溶剂合物的多晶型物、含有这些盐或溶剂合物的药物组合物以及使用所述药物组合物的方法。这些药物组合物可用作用于一系列 疾病 适应症的 治疗 剂,尤其用于治疗和 预防 胃肠道病症,包括但不限于术后肠梗阻;胃轻瘫,包括糖尿病性胃轻瘫和术后胃轻瘫;阿片样物质所诱发的肠功能障碍(opioid bowel dysfunction);慢性肠假性梗阻;短肠综合征;功能性胃肠道病症和胃肠 运动障碍 ,如在危重症护理情况下或者因用药剂治疗而连同其它病状一起出现的胃肠运动障碍。另外,所述药物组合物可以应用于治疗和预防代谢和/或内分泌病症、心血管病症、中枢神经系统病症、骨病、炎性病症、过度增生病症、以细胞凋亡为特征的病症和遗传性病症。
权利要求

1.一种大环化合物的盐的溶剂合物,其具有以下结构:
其中HX选自由盐酸氢溴酸氢碘酸酸、硫酸硝酸磷酸甲酸、乙酸、丙酸、来酸、琥珀酸扁桃酸、富马酸、丙二酸柠檬酸、丙酸、草酸硬脂酸抗坏血酸乙醇酸、杨酸、吡喃糖苷酸、α-羟酸、基酸、芳族酸和磺酸组成的组。
2.根据权利要求1所述的溶剂合物,其中HX是盐酸、琥珀酸、丙二酸或乙磺酸。
3.根据权利要求1所述的溶剂合物,其中所述溶剂合物为非晶形。
4.根据权利要求1所述的溶剂合物,其中所述溶剂合物为晶形。
5.根据权利要求1所述的溶剂合物,其中所述溶剂合物是乙醇合物、水合物或一水合物。
6.根据权利要求1所述的溶剂合物,其中所述溶剂合物是单盐酸盐一水合物、单盐酸盐二水合物或单盐酸盐单乙醇合物。
7.一种根据权利要求1所述的溶剂合物的多晶型物。
8.根据权利要求7所述的多晶型物,其中HX是盐酸。
9.根据权利要求7所述的多晶型物,其中X射线粉末衍射图与图9的一致。
10.根据权利要求7所述的多晶型物,其中X射线粉末衍射图含有以2θ度数为约7.9、
9.3、15.9、17.9和23.9表示的特征峰。
11.根据权利要求7所述的多晶型物,其中X射线粉末衍射图含有以2θ度数为约
7.7、7.9、9.3、11.4、11.5、13.3、14.5、15.9、16.2、16.8、17.2、17.6、17.9、19.7、21.6、22.3、
22.6、23.2、23.9、24.8、25.3、26.2、26.6和26.9表示的特征峰。
12.一种用于制备根据权利要求7所述的多晶型物的方法,所述方法包括:
(a)将具有以下结构的大环化合物
溶于醇溶液中,形成溶液A;
(b)将酸HX加入溶液A中,形成酸化的溶液A,其中HX选自由盐酸、氢溴酸、氢碘酸、碳酸、硫酸、硝酸、磷酸、甲酸、乙酸、丙酸、马来酸、琥珀酸、扁桃酸、富马酸、丙二酸、柠檬酸、丙酮酸、草酸、硬脂酸、抗坏血酸、乙醇酸、水杨酸、吡喃糖苷酸、α-羟酸、氨基酸、芳族酸和磺酸组成的组;
(c)任选地冷却酸化的溶液A;
(d)从酸化的溶液A中分离沉淀的盐;
(e)将来自(d)的所沉淀的盐溶于醇与水的热混合物中,形成溶液B;
(f)冷却溶液B;
(g)从溶液B中分离沉淀的盐;
(h)将来自(g)的所沉淀的盐溶于酮溶剂与水的热混合物中,形成溶液C;
(i)将溶液C冷却到环境温度环境温度以下;以及
(j)从溶液C中分离沉淀的盐。
13.根据权利要求12所述的方法,其中所述醇是乙醇。
14.根据权利要求12所述的方法,其中HX是盐酸。
15.根据权利要求12所述的方法,其中所述酮溶剂是甲基乙基酮(2-丁酮)。
16.根据权利要求12所述的方法,其中所述酮溶剂与水的热混合物是甲基乙基酮与水的1∶4比例的混合物。
17.一种药物组合物,其包含:
(a)根据权利要求1所述的溶剂合物;和
(b)药学上可接受的载体、赋形剂或稀释剂。
18.根据权利要求17所述的药物组合物,其中所述药学上可接受的载体、赋形剂或稀释剂是缓冲剂。
19.根据权利要求18所述的药物组合物,其中所述缓冲剂是乙酸盐缓冲液。
20.根据权利要求17所述的药物组合物,其中所述药学上可接受的载体、赋形剂或稀释剂是张度剂。
21.根据权利要求20所述的药物组合物,其中所述张度剂是盐水、氯化钠或右旋糖。
22.根据权利要求17所述的药物组合物,其中所述药学上可接受的载体、赋形剂或稀释剂包含缓冲剂和张度剂。
23.根据权利要求22所述的药物组合物,其中所述缓冲剂是乙酸盐缓冲液且所述张度剂是盐水、氯化钠或右旋糖。
24.一种药物组合物,其包含:
(a)根据权利要求7所述的多晶型物;和
(b)药学上可接受的载体、赋形剂或稀释剂。
25.一种药物组合物,其包含:
(a)根据权利要求7所述的多晶型物;
(b)10nM乙酸盐;和
(c)水中的5%右旋糖。
26.一种大环化合物的盐,其具有以下结构:
其中HX选自由碳酸、硫酸、硝酸、磷酸、甲酸、乙酸、丙酸、马来酸、琥珀酸、扁桃酸、富马酸、丙二酸、柠檬酸、丙酮酸、草酸、硬脂酸、抗坏血酸、乙醇酸、水杨酸、吡喃糖苷酸、α-羟酸、氨基酸、芳族酸和磺酸组成的组。
27.根据权利要求26所述的盐,其中所述酸是琥珀酸、丙二酸、马来酸、富马酸、苹果酸、酒石酸、柠檬酸、乳酸、甲酸、硫酸、磷酸、甲磺酸或乙磺酸。
28.根据权利要求26所述的盐,其中所述盐为非晶形。
29.根据权利要求26所述的盐,其中所述盐为晶形。
30.一种药物组合物,其包含:
(a)根据权利要求26所述的盐;和
(b)药学上可接受的载体、赋形剂或稀释剂。
31.一种大环化合物的盐的多晶型物,其具有以下结构:
其中HX选自由盐酸、氢溴酸、氢碘酸、碳酸、硫酸、硝酸、磷酸、甲酸、乙酸、丙酸、马来酸、琥珀酸、扁桃酸、富马酸、丙二酸、丙酮酸、草酸、硬脂酸、抗坏血酸、乙醇酸、水杨酸、吡喃糖苷酸、α-羟酸、氨基酸、芳族酸和磺酸组成的组。
32.一种药物组合物,其包含:
(a)根据权利要求31所述的多晶型物;和
(b)药学上可接受的载体、赋形剂或稀释剂。
33.一种用于制备根据权利要求17所述的药物组合物的方法,其包括以下步骤:
(a)将张度剂溶于溶剂中,形成溶液D;
(b)将酸加入溶液D中,形成酸性溶液D;
(c)将具有以下结构的大环化合物
其中HX选自由盐酸、氢溴酸、氢碘酸、碳酸、硫酸、硝酸、磷酸、甲酸、乙酸、丙酸、马来酸、琥珀酸、扁桃酸、富马酸、丙二酸、丙酮酸、草酸、硬脂酸、抗坏血酸、乙醇酸、水杨酸、吡喃糖苷酸、α-羟酸、氨基酸、芳族酸和磺酸组成的组;溶于酸化的溶液D中,形成溶液E;
(d)通过添加调节溶液E的pH值,形成溶液F;以及
(e)用溶剂将溶液F稀释到有效浓度。
34.根据权利要求33所述的方法,其中所述步骤按步骤(b),然后步骤(d),然后步骤(a),然后步骤(c),然后步骤(e)的顺序进行。
35.根据权利要求33所述的方法,其中所述张度剂是右旋糖。
36.根据权利要求33所述的方法,其中所述酸是乙酸。
37.根据权利要求33所述的方法,其中所述碱是氢化钠。
38.根据权利要求33所述的方法,所述方法进一步包括通过一个或多个灭菌过滤器过滤。
39.一种通过用根据权利要求17、24、30或32所述的药物组合物治疗受试者来刺激胃肠运动的方法。
40.根据权利要求39所述的方法,其中胃肠外或静脉内施用所述药物组合物。
41.根据权利要求40所述的方法,其中所述静脉内施用经由输注进行。
42.根据权利要求39所述的方法,其中皮下施用所述药物组合物。
43.根据权利要求39所述的方法,其中口服施用所述药物组合物。
44.根据权利要求39所述的方法,其中所述受试者是人类。
45.根据权利要求39所述的方法,其中所述受试者是马。
46.一种通过对受试者施用根据权利要求17、24、306或32所述的药物组合物来治疗胃肠道病症的方法。
47.根据权利要求46所述的方法,其中所述胃肠道病症选自由术后肠梗阻、胃轻瘫、阿片样物质所诱发的肠功能障碍、慢性肠假性梗阻、急性结肠假性梗阻(奥格尔维氏综合征(Ogilvie′s syndrome))、肠运动障碍、短肠综合征、呕吐、便秘为主的肠易激综合征(IBS)、慢性便秘、功能性消化不良、癌症相关性消化不良综合征、移植物抗宿主病、胃排空延迟、连同其它病状一起出现的胃肠功能失调或胃排空延迟、在危重症护理情况下出现的胃肠运动障碍或胃排空延迟、因用药剂治疗而引起的胃肠功能失调或胃排空延迟、胃食管反流病(GERD)、胃溃疡、胃肠炎和克罗恩氏病组成的组。
48.根据权利要求46所述的方法,其中所述胃肠道病症是术后肠梗阻。
49.根据权利要求46所述的方法,其中所述胃肠道病症是胃轻瘫。
50.根据权利要求50所述的方法,其中所述胃轻瘫是糖尿病性胃轻瘫或术后胃轻瘫。
51.根据权利要求47所述的方法,其中所述胃肠功能失调或胃排空延迟出现在患有
以下疾病的患者中:帕金森氏病、强直性肌营养不良、硬皮病、危重病、饮食障碍、自主神经退化、中、多发性硬化、神经疾病、精神病、囊性纤维化、结缔组织疾病、肝硬化、肝衰竭、肾衰竭、胆囊病症、偏头痛、脑干病变、脊髓损伤、癌症、瘤形成、弛缓不能、传染病、特纳氏综合征、内分泌紊乱、代谢紊乱或电解质紊乱、创伤或疼痛
52.根据权利要求47所述的方法,其中所述胃肠功能失调或胃排空延迟因使用以下
药物进行治疗而出现:阿片样物质、抗胆碱能药、β阻断剂、通道拮抗剂、胰高血糖素样肽-1(GLP-1)受体激动剂、胰淀素受体激动剂、肽YY(PYY)受体激动剂、蛋白酶体抑制剂、三环抗抑郁药、单胺摄取阻断剂抗抑郁药、癌症化学治疗剂、肾上腺素能激动剂、多巴胺能剂、抗疟药、解痉药、大麻素激动剂、奥曲肽、左旋多巴、酒精或尼古丁。
53.根据权利要求46所述的方法,其中所述受试者是人类。
54.根据权利要求46所述的方法,其中所述受试者是马。
55.一种治疗患有以缺乏食欲、食欲抑制或引起食物摄入减少为特征的病症的受试者的方法,其包括对有需要的受试者施用根据权利要求17、24、30或32所述的药物组合物。
56.根据权利要求55所述的方法,其中所述病症是恶病质。
57.根据权利要求55所述的方法,其中所述恶病质由癌症、慢性心衰竭、获得性免疫缺乏综合症(AIDS)、肾病、肌营养不良或老化所诱发。
58.根据权利要求55所述的方法,其中所述受试者是人类。
59.一种治疗患有代谢和/或内分泌病症、心血管病症、中枢神经系统病症、骨病、炎性病症、过度增生病症、以细胞凋亡为特征的病症或遗传性病症的受试者的方法,其包括对有需要的受试者施用根据权利要求17、24、30或32所述的药物组合物。
60.一种试剂盒,其含有根据权利要求17、24、30或32所述的药物组合物。
61.根据权利要求60所述的试剂盒,其中所述药物组合物容纳于小瓶或注射器中。
62.根据权利要求17、24、30或32中任一项所述的药物组合物,其中所述药物组合物包含量处于约75%到约99.9%范围内的所述盐、溶剂合物或多晶型物。

说明书全文

大环生长素释放肽受体激动剂的盐、溶剂合物和药物组合

物及其使用方法

[0001] 方法
[0002] 相关申请的交叉引用
[0003] 本申请要求2009年9月30日提交的第61/247,362号美国临时申请的优先权,该临时申请的公开内容以引用的方式整体并入本文。发明领域
[0004] 本发明涉及与生长素释放肽(生长激素促分泌素)受体结合和/或为其功能性激动剂的大环化合物的新颖盐和溶剂合物。本发明还涉及这些盐和溶剂合物的多晶型物、含有这些盐或溶剂合物的药物组合物以及使用所述药物组合物的方法。这些药物组合物可用作用于多种疾病适应症,尤其用于治疗预防胃肠道病症的治疗剂,所述胃肠道病症包括但不限于术后肠梗阻;胃轻瘫,包括糖尿病性胃轻瘫和术后胃轻瘫;阿片样物质所诱发的肠功能障碍;慢性肠假性梗阻;短肠综合征;功能性胃肠道病症;和胃肠运动障碍,诸如在危重症护理情况下或者因用药剂治疗而连同其它病状一起出现的胃肠运动障碍。另外,所述药物组合物可以应用于治疗和预防代谢和/或内分泌病症、心血管病症、中枢神经系统病症、骨病、炎性病症、过度增生病症、特征在于细胞凋亡和遗传障碍的病症。 [0005] 发明背景
[0006] 生长素释放肽是新近表征的具有28个基酸的肽激素,其最初自大鼠的胃中分离出,随后在人类中识别出直接同源物,其特征在于Ser3上异常的正辛酰基修饰。(Kojima,M.;Hosoda,H. 等,Nature 1999,402,656-660;Kojima,M.Regul.Pept.2008,
145,2-6。)此激素存在于许多其它物种中,表明其在正常生理功能中起保守并重要的作用。已表明生长素释放肽是先前孤儿G蛋白偶联受体(GPCR)(即1型生长激素促分泌素受体(GHS-R1a))的内源性配体(Howard,A.D.;Feighner,S.D. 等,Science 1996,273,
974-977;第6,242,199号美国专利;第WO97/21730号和第WO 97/22004号国际专利申请)。GHS-R1a新近因识别出其内源性配体而被重新分类为生长素释放肽受体(GRLN)(Davenport,A.P.等,Pharmacol.Rev.2005,57,541-546)。GRLN主要存在于脑(尤其是下丘脑中的弓状核和腹内侧核、海和黑质)和垂体中,并且表达于许多其它组织和器官中(Gnanapavan,S.;Kola,B.;Bustin,S.A.等,J.Clin.Endocrinol.Metab.2002,87,
2988-2991;Cruz,C.R.;Smith,R.G.Vitam.Horm.2008,77,47-88)。
[0007] 已发现生长素释放肽具有多种内分泌和非内分泌功能(Broglio,F.;Gottero,C;Arvat,E.;Ghigo,E.Horm.Res.2003,59,109-117;Hosoda,H.;Kojima,M.;Kangawa,K.J.Pharmacol.Sci.2006,100,398-410)且此作用范围促使去寻求用于许多治疗目的的生长素释放肽受体调节剂。(Kojima,M.;Kangawa,K.Nat.Clin.Pract.Endocrinol.Metab.2006,2,80-88;Akamizu,T.;Kangawa,K.Endocr.J. 2006,53,585-591;Leite-Moreira,A.F.;Soares,J.-B.Drug Disc.7oday 2007,12,276-288;Katergari,S.A.;Milousis,A.;Pagonopoulou,O.;Asimakopoulos,B.;Nikolettos,N.K.Endocr.J. 2008,55,439-453;Constantino,L.;Barlocca,D.Fut.Med. Chem.2009,1,157-177。)例如,生长素释放肽和生长素释放肽激动剂已被表明在消耗综合征(诸如恶病质)中具有积极的作用。(Kamiji,M.M.;Inui,A.Curr.Opin.Clin.Nutr.Metab.Care 2008,
11,443-451;DeBoer,M.D.Nutrition2008,24,806-814;Ashitani,J.;Matsumoto,N.;
Nakazato,M.Peptides 2009,30,1951-1956;Cheung,W.W.;Mak,R.H.Kidney Intl.2009,
76,135-137。)已开始对这些激动剂中的某些进行临床试验,从而利用这些作用。(Garcia,J.M.;Polvino,W.J.The Oncologist 2007,12,594-600;Strasser,F.;Lutz,T.A.;
Maeder,M.T.Br.J. Cancer 2008,98,300-308;Garcia,JM.;Polvino,W.J.GrowthHorm.IGF Res.2009,19,267-273。)还将这些药剂作为老化干预剂进行了研究。(Smith,R.G.;
Sun,Y.;Jiang,H.;Albarran-Zeckler,R.; Timchenko,N.Ann.N.Y.Acad.Sci.2007,1119,
147-164。)
[0008] 作为另一实例,生长素释放肽在胃肠(GI)系统中具有促动作用,使得生长素释放肽激动剂可用于在特征为GI运动障碍的病症中达到治疗目的。(Peeters,T.L.Curr.Opin.Pharmacol.2006,6,553-558;Sanger,G.J.Drug Disc.Today 2008,13,234-239;Venkova,K.;Greenwood-Van Meerveld,B.Curr.Opin.Invest.Drugs 2008,
9,1103-1107;DeSmet,B.;Mitselos,A.;Depoortere,I.Pharmacol.Ther.2009,123,
207-223;Camilleri,M.;Papathanasopoulos,A.;Odunsi,S.T.Nat.Rev.Gastroenterol.Hepatol.2009,6,343-352;El-Salhy,M.Int.J.Mol.Med. 2009,24,727-732。) 所 述 病症包括但不限于术后肠梗阻;胃轻瘫,包括糖尿病性胃轻瘫和术后胃轻瘫;阿片样物质所诱发的肠功能障碍;慢性肠假性梗阻;短肠综合征;功能性胃肠道病症;和胃肠运动障碍,诸如在危重症护理情况下或者因用药剂治疗而连同其它病状一起出现的胃肠运动障碍。生长素释放肽激动剂还已用作治疗心血管疾病(诸如慢性心力衰竭)的治疗剂(Nagaya,N.;Kangawa,K.Drugs 2006,66,439-448;Garcia,E.A.;Karbonits,M.Curr.Opin.Pharmacol.2006,6,142-147;Isgaard,J.;Barlind,A.;Johansson,I.Cardiovasc.Hematol.Disord.Drug Targets2008,8,133-137),,这是因为生长素释放肽已显示为有效的血管扩张剂;用作治疗骨病(诸如骨质疏松症)的治疗剂(Svensson,J.;Lall,S.;Dickson,S.L. 等,Endocrine2001,14,63-66;van der Velde,M.;Delhanty,P. 等,Vitamins and Hormones 2007,77,239-258);用作过度增生病症(诸如癌症)的抗血管生成剂(Baiguera,S.;Conconi,M.T.;Guidolin,D.等,Int.J. Mol. Med.2004,14,849-854;
Conconi,M.T.;Nico,B.;Guidolin,D.等,Peptides2004,25,2179-2185);和用于预防或者改善累及CNS的病状,包括焦虑、压力、认知增强和睡眠调节。(Seoane,L.M.;Al-Massadi,O.;Lage,M.;Dieguez,C.;Casanueva,F.F.Pediatr.Endocrinol.Rev.2004,1,432-437;
McNay,E.C.Curr.Opin.Pharmacol.2007,7,628-632;Ferrini,F.;Salio,C.;Lossi,L.;
Merighi,A.Curr.Neuropharmacol.2009,7, 37-49。)生长素释放肽还显示出抗细胞凋亡特性,表现在其能够改善脊髓损伤后的恢复(Lee,J.Y.;Chung,H.;Yoo,Y.S.;Oh,Y.J.;Oh,T.H.;Park,S,Yune,T.Y.Endocrinology.2010,151,3815-3826)或辐射暴露后的恢复(诸如在辐射复合伤中)(Jacob,A.;Shah,K.G.;Wu,R.;Wang,P.Mol.Med.2010,16,137-143),展现出生长素释放肽受体激动剂的其它治疗潜能。最后,生长素释放肽显示出抗炎作用,因此,生长素释放肽激动剂可用于治疗和预防炎性病症。(Vixit,V.D.;Taub,D.D.Exp.Gerontol.2005,40,900-910;Taub,D.D.Vitamins and Hormones 2007,77,325-346。) [0009] 一系列大环肽模拟物最近已被描述为生长素释放肽受体的调节剂,并且其可用于治疗和预防多种医学病状,包括所概述的代谢和/或内分泌病症、胃肠道病症、心血管病症、肥胖和肥胖相关病症、中枢神经系统病症、遗传障碍、过度增生病症和炎性病症(第
7,452,862号、第7,476,653号和第7,491,695号美国专利;第WO 2006/009645号、第WO 2006/009674号、第WO 2006/046977号、第WO 2006/137974号和第WO 2008/130464号国际专利申请公布;第2006/025566号、第2007/021331号、第2008/051383号和第
2008/194672号美国专利申请公布)。已报道这些大环之一(即化合物298)在大鼠POI模型中的活性。(Venkova,K.;Fraser,G.;Hoveyda,H.R.;Greenwood-Van Meerveld,B.Dig.Dis.Sci.2007,52,2241-2248;Fraser,G.L.;Venkova,K.;Hoveyda,H.R.;Thomas,H.;
Greenwood-Van Meerveld,B.Eur.J.Pharmacol.2009,604,132-137。)和其它类型的生长素释放肽激动剂相比,化合物298在这些动物模型中不会刺激同时发生的GH分泌。(Fraser,G.L.;Hoveyda,H.R.;Tannenbaum,G.S.Endocrinology 2008,149,6280-6288。)然而,仍需要可用作活性药物成分并且适合于制备药物组合物的其它形式的化合物298。
[0010]
[0011] 已知有机化合物的固态特性会显著地影响其研发成医药产品的适宜性(Berge,S.M.;Bighley,L. D.;Monkhouse,D.C.J.Pharm.Sci.1977,66,1-19;Gould,P.L.Int.J.Pharm.1986,33,201-217;Byrn,S.R.;Pfeiffer,R.R.;Stephenson,G.;Grant,D.J.W.;Gleason,W.B.Chem.Mater.1994,6,1146-1158;Bighley,L. D.;Berge,S.M.;Monkhouse,D.C.Salt Forms of Drugs and Absorption.Encyclopaedia of Pharmaceutical Technology;Swarbrick,J.,Boylan,J.C.编;Marcel Dekker,Inc.:New York,1996;第13卷,第453-499页;Stahl,P.H.,Wermuth,C.G.编,Handbook of Pharmaceutical Salts:
Properties,Selection and Use;VHCA和Wiley-VCH:Zurich,Switzerland和Weinheim,Germany,2002;Clas,S.-D.Curr.Opin.Drug Disc.Develop.2003,6,555-560;Huanga,L.-F.;Tong,W.-Q.Adv.Drug Deliv.Rev.2004,56,321-334;Serajuddin,A.T.M.Adv.Drug Deliv.Rev.2007,59,603-616;Paulekuhn,G.S.;Dressman,J.B.;Saal,C.J. Med. Chem.2007,5O,6665-6672。)
[0012] 呈固态的化合物可能与一个或多个溶剂分子形成结晶结构的一部分,继而被称为溶剂合物。这些溶剂合物同样具有特定物理化学特性和其它特性,所述特性可能显著不同,取决于溶剂的性质和与晶体缔合的溶剂分子的数目。这又可能继而极大地影响物质的溶解度生物利用度以及其它医药相关参数。(Vippagunta,S.R.;Brittain,H.G.;Grant,D.J.Adv.Drug Deliv.Rev.2001,48,3-26。)
[0013] 除鉴别出最适当的盐或溶剂合物形式之外,对于固态物质还需考虑多晶型现象。多晶型物是相同化学物质的不同晶形。(Burger,A.; Ramberger,R.Mikrochim.Acta 1979,
2,259-271,273-316;Vippagunta,S.R.;Brittain,H.G.;Grant,D.J.W.Adv.Drug Deliv.Rev.2001,48,3-26;Singhal,D.;Curatolo,W.Adv.Drug Deliv.Rev.2004,56,335-347;
Llinàs,A.;Goodman,J.M.Drug Disc.Today 2008,13,198-210;Brittain,H.G. 编,Polymorphism in Pharmaceutical Solids,第2版,Informa Healthcare,London and New York,2009。)不同的多晶型物可以具有不同的物理特性,包括但不限于熔点、溶解度、流动特性、可压缩性和密度、溶解率以及稳定性
[0014] 就如化合物298的大环分子而言,对其固态性质知之甚少,这是因为此一般类别的分子很少被研发成医药产品。已报道化合物298的盐酸盐仅用作化合物298的纯化过程中的中间体(第7,476,653号;第7,491,695号美国专利;和美国专利申请12/351,395),但是没有描述特定溶剂合物或结晶多晶型物。化合物298的未指定制剂已对人类显示出适当的安全和药代动力学特性(Lasseter,K.C.;Shaughnessy,L.;Cummings,D.等,J. Clin.Pharmacol.2008,48,193-202),以 及治 疗POI(Popescu,I.;Fleshner,P.R.;Pezzullo,J.C.;Charlton,P.A.;Kosutic,G.;Senagore,A.J.Dis Colon Rectum 2010,
53,126-134)和糖尿病性胃轻瘫(Ejskjaer,N.;Vestergaard,E.T.;Hellstrom,P.M.等,Aliment Pharmacol Ther2009,29,1179-1187;Ejskjaer,N.;Dimcevski,G.;Wo,J. 等,Neurogastroenterol Motil 2010,1069-1078)的功效。
[0015] 由本发明提供的特定盐、溶剂合物和多晶型物具有优异的高度有利的特性,所述特性适于医药研发且未在现有技术中公开。此外,这些固态形式使得制备效能特征得到改良的药物组合物的制剂成为可能。
[0016] 发明概述
[0017] 本发明提供构象确定的大环化合物的溶剂合物和其多晶型物。这些溶剂合物和多晶型物可以充当生长素释放肽(生长激素促分泌素)受体(GRLN、GHS-R1a)及其亚型、同种型(isoform)和变体的激动剂。此 外,其能够容易地配制成可用作药剂的组合物。更具体而言,能够可重现地制备这些具有高稳定性、显著溶解度、缺少吸湿性、具有所需溶解率和/或良好生物利用度以及易于处理且易于制备药物组合物的溶剂合物和多晶型物。 [0018] 根据本发明的各方面,本发明涉及具有以下结构的溶剂合物:
[0019]
[0020] 其中HX选自盐酸、氢溴酸氢碘酸酸、硫酸硝酸磷酸甲酸、乙酸、丙酸、马来酸、琥珀酸扁桃酸、富马酸、丙二酸柠檬酸、丙酸、草酸硬脂酸抗坏血酸乙醇酸、杨酸、吡喃糖苷酸(pyranosidyl acid)、α-羟酸(诸如乳酸、苹果酸或酒石酸)、氨基酸、芳族酸和磺酸(诸如甲磺酸或乙磺酸)。
[0021] 本发明的特定方面提供这些溶剂合物的非晶形或晶形。其它具体方面提供溶剂合物,其是水合物或乙醇合物。
[0022] 本发明的另一特定方面提供单盐酸盐一水合物溶剂合物、单盐酸盐二水合物溶剂合物和单盐酸盐单乙醇合物溶剂合物。
[0023] 本发明的另一特定方面提供具有上文所示结构的溶剂合物的多晶型物: [0024]
[0025] 其中HX选自盐酸、氢溴酸、氢碘酸、碳酸、硫酸、硝酸、磷酸、甲酸、乙酸、丙酸、马来酸、琥珀酸、扁桃酸、富马酸、丙二酸、柠 檬酸、丙酮酸、草酸、硬脂酸、抗坏血酸、乙醇酸、水杨酸、吡喃糖苷酸、α-羟酸(诸如乳酸、苹果酸或酒石酸)、氨基酸、芳族酸和磺酸(诸如甲磺酸或乙磺酸)。
[0026] 在另一方面,提供了制备这些多晶型物的方法。对于本发明的一实施方案来说,所述方法包括:
[0027] (a)将具有以下结构的大环化合物
[0028]
[0029] 溶于醇的溶液中,形成溶液A;
[0030] (b)将酸HX加入溶液A,形成酸化的溶液A,其中HX选自盐酸、氢溴酸、氢碘酸、碳酸、硫酸、硝酸、磷酸、甲酸、乙酸、丙酸、马来酸、琥珀酸、扁桃酸、富马酸、丙二酸、柠檬酸、丙酮酸、草酸、硬脂酸、抗坏血酸、乙醇酸、水杨酸、吡喃糖苷酸、α-羟酸(诸如乳酸、苹果酸或酒石酸)、氨基酸、芳族酸和磺酸(诸如甲磺酸或乙磺酸);
[0031] (c)任选地将酸化的溶液A冷却;
[0032] (d)从酸化的溶液A中分离沉淀的盐;
[0033] (e)将来自(d)的所沉淀的盐溶于醇与水的热混合物中,形成溶液B;
[0034] (f)将溶液B冷却;
[0035] (g)从溶液B中分离沉淀的盐;
[0036] (h)将来自(g)的所沉淀的盐溶于酮溶剂与水的热混合物中,形成溶液C; [0037] (i)将溶液C冷却到环境温度环境温度以下;以及
[0038] (j)从溶液C中分离沉淀的盐。
[0039] 在某些其它实施方案中,所述方法中的醇是乙醇,酸HX是盐酸 或酮溶剂是甲基乙基酮(2-丁酮)。
[0040] 本发明其它方面提供药物组合物,其包含这些溶剂合物或多晶型物和药学上可接受的载体、赋形剂或稀释剂。在一些实施方案中,药物组合物包含(a)本文所述的多晶型物或溶剂合物、缓冲剂和张度剂。在一些实施方案中,乙酸盐缓冲液的pH值是约4.0到6.0,乙酸盐缓冲液是乙酸盐缓冲液和/或张度剂是右旋糖。在一些实施方案中,乙酸盐缓冲液的浓度是约5mM到50mM,且右旋糖以约4%到6%的浓度存在于水中。在特定实施方案中,药物组合物包含本文所述的多晶型物或溶剂合物、10mM乙酸盐和溶于水中的5%右旋糖(D5W)。
[0041] 在某些实施方案中,药物组合物中存在的溶剂合物或多晶型物的量是在组合物的约75重量%到约99.9重量%范围内。在一些实施方案中,在制备药物组合物和/或最终药物组合物期间仅存在活性物质的一种溶剂合物或多晶型物。
[0042] 在其它实施方案中,药物组合物是固体剂型。在更其它实施方案中,药物组合物是含水剂型,即提供于溶剂中。
[0043] 在一特定方面,提供了单盐酸盐一水合物的缓冲含水药物组合物。
[0044] 另一特定方面提供了制备这些药物组合物的方法。在本发明的一实施方案中,其中药学上可接受的载体、赋形剂或稀释剂是缓冲剂和张度剂,所述方法包括:
[0045] (a)将张度剂溶于溶剂中,形成溶液D;
[0046] (b)将酸加入溶液D中,形成酸性的溶液D;
[0047] (c)将具有以下结构的大环化合物
[0048]
[0049] 其中HX选自盐酸、氢溴酸、氢碘酸、碳酸、硫酸、硝酸、磷酸、甲酸、乙酸、丙酸、马来酸、琥珀酸、扁桃酸、富马酸、丙二酸、柠檬酸、丙酮酸、草酸、硬脂酸、抗坏血酸、乙醇酸、水杨酸、吡喃糖苷酸、α-羟酸(诸如乳酸、苹果酸或酒石酸)、氨基酸、芳族酸和磺酸(诸如甲磺酸或乙磺酸);溶于酸化的溶液D中,形成溶液E;
[0050] (d)通过添加调节溶液E的pH值,形成溶液F;以及
[0051] (e)用溶剂将溶液F稀释到有效浓度。
[0052] 在一实施方案中,前述方法中的步骤依序进行,而在另一实施方案中,各步骤以步骤(b),步骤(d),步骤(a),步骤(c),步骤(e)的顺序进行。
[0053] 在其它实施方案中,此方法中溶剂是注射用水,张度剂是右旋糖,酸是乙酸,碱是氢化钠,pH值被调节到4.0-5.0之间,或有效浓度是0.05mg/mL到5.0mg/mL。在此方法的具体实施方案中,pH值处于4.3-4.7之间或有效浓度是1.0±0.1mg/mL或2.0±0.2mg/mL(以游离碱当量给出)。在另一实施方案中,所述方法进一步包括通过一个或多个灭菌过滤器(诸如0.22μm过滤器)过滤。
[0054] 在本发明的另一方面,提供具有以下结构的大环化合物的盐:
[0055]
[0056] 其中HX选自碳酸、硫酸、硝酸、磷酸、甲酸、乙酸、丙酸、马来酸、琥珀酸、扁桃酸、富马酸、丙二酸、柠檬酸、丙酮酸、草酸、硬脂酸、抗坏血酸、乙醇酸、水杨酸、吡喃糖苷酸、α-羟酸(诸如乳酸、苹果酸或酒石酸)、氨基酸、芳族酸和磺酸(诸如甲磺酸或乙磺酸)。 [0057] 本发明其它方面涉及制备盐、溶剂合物和多晶型物及其药物组合物的方法。 [0058] 本发明的其它方面提供了用有效量的含有溶剂合物或多晶型物的药物组合物治疗以下疾病的方法:胃肠道病症、由食欲降低或食物摄入减少表征的病症、代谢或内分泌病症、心血管病症、炎性病症、骨病、由细胞凋亡表征的病症或过度增生病症。
[0059] 本发明的另外方面进一步提供刺激胃肠运动和/或治疗胃肠道病症的方法,所述方法包括对受试者施用有效量的这些盐、溶剂合物或多晶型物来刺激哺乳动物GRLN受体。 [0060] 本发明的各方面还涉及预防和/或治疗本文所述的病症,尤其以下病症的方法:胃肠道病症,包括术后肠梗阻、胃轻瘫(诸如糖尿病性胃轻瘫和术后胃轻瘫)、阿片样物质所诱发的肠功能障碍、慢性肠假性梗阻、短肠综合征、功能性胃肠道病症;胃肠运动障碍,诸如在危重症护理情况下或者因用药剂治疗而连同其它病状(包括感染、神经疾病、神经肌肉病状、结缔组织疾病和内分泌或代谢失调)一起出现的胃肠运动障碍;诸如由癌症化疗所引起的呕吐、诸如与肠易激综合征(IBS)的运动不足阶段有关的便秘、与消耗性病状有关的胃排空延迟、胃食管反流病(GERD)、胃溃疡、克罗恩氏病(Crohn′s disease)和其它胃肠道疾病及病症。
[0061] 在特定实施方案中,胃肠道病症是术后肠梗阻、胃轻瘫、糖尿病性胃轻瘫、术后胃轻瘫、阿片样物质所诱发的肠功能障碍、慢性肠假性梗阻、急性结肠假性梗阻(奥格尔维氏综合征(Ogilvie′s syndrome))、短肠综合征、呕吐、便秘为主的肠易激综合征(IBS)、慢性便秘、功能性消化不良、癌症相关性消化不良综合征、移植物抗宿主反应、胃食管反流病(GERD)、胃溃疡、克罗恩氏病、胃肠炎、饮食障碍(包括神经性厌食症和贪食症)患者的胃肠功能失调或胃排空延迟、帕金森氏病(Parkinson′s disease)患者的胃肠功能失调或胃排空延迟、强直性肌营养不良患者的胃肠功能失调或胃排空延迟、自主神经退化患者的胃肠功能失调或胃排空延迟、中患者的胃肠功能失调或胃排空延迟、多发性硬化患者的胃肠功能失调或胃排空延迟、神经疾病和病症(包括淀粉 样蛋白神经病、原发性自主运动不能、交感神经损伤和幽狭窄)患者的胃肠功能失调或胃排空延迟、精神病(包括抑郁症)患者的胃肠功能失调或胃排空延迟、硬皮病患者的胃肠功能失调或胃排空延迟、囊性纤维化患者的胃肠功能失调或胃排空延迟、结缔组织疾病(包括全身性硬化、皮肌炎、多发性肌炎、全身性红斑狼疮和淀粉样变性)患者的胃肠功能失调或胃排空延迟、肝硬化患者的胃肠功能失调或胃排空延迟、肝衰竭患者的胃肠功能失调或胃排空延迟、肾衰竭患者的胃肠功能失调或胃排空延迟、胆囊病症患者的胃肠功能失调或胃排空延迟、偏头痛患者的胃肠功能失调或胃排空延迟、败血症患者的胃肠功能失调或胃排空延迟、脑干病变患者的胃肠功能失调或胃排空延迟、脊髓损伤患者的胃肠功能失调或胃排空延迟、癌症(包括胃癌、胆癌、食道癌、胃癌和胰腺癌)患者的胃肠功能失调或胃排空延迟、瘤形成患者的胃肠功能失调或胃排空延迟、进行辐射治疗患者的胃肠功能失调或胃排空延迟、弛缓不能患者的胃肠功能失调或胃排空延迟、传染病(包括HIV、带状疱疹(Herpes zoster)感染和恰加斯氏病(Chagas disease))患者的胃肠功能失调或胃排空延迟、因手术而引起的胃肠功能失调或胃排空延迟、危重病患者的胃肠功能失调或胃排空延迟、需要危重症护理的患者的胃肠功能失调或胃排空延迟、移植(包括心脏或移值)后患者的胃肠功能失调或胃排空延迟、特纳氏综合征(Turner′s syndrome)患者的胃肠功能失调或胃排空延迟;因用药剂治疗而引起的胃肠功能失调或胃排空延迟,所述药剂包括阿片样物质、抗胆碱能药、β阻断剂、通道拮抗剂、胰高血糖素样肽-1(GLP-1)受体激动剂、胰淀素受体激动剂、肽YY(PYY)受体激动剂、蛋白酶体抑制剂、三环抗抑郁药、单胺摄取阻断剂抗抑郁药、癌症化学治疗剂、肾上腺素能激动剂、多巴胺能剂、抗疟药、解痉药、大麻素激动剂、奥曲肽、左旋多巴、酒精和尼古丁;因内分泌失调(包括甲状腺功能减退、甲状腺功能亢进、迪生氏病(Addison′s disease)和卟啉症)所致的胃肠功能失调或胃排空延迟、因代谢失调(包括高血糖症、低血症和低镁血症)所致的胃 肠功能失调或胃排空延迟、因麻醉所致的胃肠功能失调或胃排空延迟、因机械通气所致的胃肠功能失调或胃排空延迟、因电解质紊乱所致的胃肠功能失调或胃排空延迟、因严重创伤所致的胃肠功能失调或胃排空延迟,或因疼痛所致的胃肠功能失调或胃排空延迟。
[0062] 本发明还涉及用于制备用于预防和/或治疗本文所述病症的药物的溶剂合物或多晶型物。
[0063] 本发明的其它方面提供了试剂盒,其包含一个或多个容器,所述容器容纳包含有效量的一种或多种本发明化合物的药物剂量单位,所述药物剂量单位连同其任选的使用说明书一起封装。
[0064] 本发明的上述及其它方面更详细地阐明于下文所述的说明书中。
[0065] 附图简述
[0066] 图1显示本发明代表性溶剂合物化合物298·HCl·H2O的合成途径。
[0067] 图2显示本发明代表性溶剂合物化合物298·HCl·H2O的单晶X射线结构。
[0068] 图3显示本发明的另一代表性溶剂合物化合物298·HCl·2H2O的单晶X射线结构。
[0069] 图4显示本发明的另一代表性溶剂合物化合物298·HCl·EtOH的单晶X射线结构。
[0070] 图5显示本发明代表性溶剂合物化合物298·HCl·H2O的1H NMR谱。
[0071] 图6显示本发明代表性溶剂合物化合物298·HCl·H2O的13C NMR谱。
[0072] 图7显示本发明代表性溶剂合物化合物298·HCl·H2O的19F NMR谱。
[0073] 图8显示本发明代表性溶剂合物化合物298·HCl·H2O的FT-IR谱。
[0074] 图9显示本发明代表性多晶型物的X射线粉末衍射图(XRPD)。
[0075] 图10显示本发明代表性溶剂合物化合物298·HCl·H2O的差示扫描量热法(DSC)热谱图。
[0076] 图11显示本发明代表性溶剂合物化合物298·HCl·H2O的动态蒸汽吸附/解吸附(DVS)实验结果。
[0077] 发明详述
[0078] 现将结合本文所述的实施方案更详细地描述本发明的上述及其它方面。应了解,本发明可以不同形式体现且不应将其视作局限于本文所述的实施方案。相反,提供这些实施方案以使本发明公开内容详尽且完整,并且将本发明的范围完整地传达给本领域的技术人员。
[0079] 本发明的说明书中所用的术语仅旨在描述特定实施方案,而不意图限制本发明。除非上下文另外明确指示,否则如本发明的说明书和所附的权利要求中所用的单数形式“一个(种)”和“所述”还意图包括复数形式。另外,如本文所用的术语“和/或”包括所列相关项目中的一个或多个的任何及所有组合并且可缩写为“/”。
[0080] 除非另外定义,否则本文所用的所有技术和科学术语的含义与本发明所属领域的一般技术人员通常所了解的含义相同。
[0081] 本文引用的所有出版物、美国专利申请、美国专利和其它参考文献以引用的方式整体并入本文。
[0082] “稳定化合物”或“稳定结构”指的是足够稳固从而能够以适用的纯度分离和配制成有效治疗剂的化合物。
[0083] 术语“氨基酸”指的是为本领域技术人员所知的常见天然(基因编码的)或合成氨基酸和其常见衍生物。“标准”或“蛋白原(proteinogenic)”在应用于氨基酸时指基因编码的20种呈天然构型的氨基酸。同样,“非天然”或“不常见”在应用于氨基酸时指非天然的、稀少的或合成的氨基酸的广泛选择物,诸如以下文献中所述的氨基酸:Hunt,S.Chemistry and Biochemistry of the Amino Acids,Barrett,G.C.编著,Chapman and Hall:New York,1985;Kamphuis,J.;Meijer,E.M.;Boesten,W.H. 等,Ann.N.Y. Acad.Sci.1992,672,510-527;Kotha,S.Acc.Chem.Res.2003,36,342-351;Cardillo,G.;Gentilucci,L.;
Tolomelli,A.Mini-Rev.Med.Chem.2006,6,293-304;Fotheringham,I.;Archer,I.;Carr,R.;Speight,R.; Turner,N.J.Biochem.Soc.Trans.2006,34,287-290。
[0084] 用于氨基酸的缩写和肽命名法遵循J. Biol.Chem.1972,247,977-983中的IUPAC-IUB生物化学命名委员会(IUPAC-IUBCommission of Biochemical Nomenclature)的规则。此文献已更新:Biochem.J. 1984,219,345-373;Eur.J. Biochem.1984,138,9-37;1985,152,1;Internat.J. Pept.Prot.Res.1984,24,第 84 页 后;J. Biol.Chem.1985,
260,14-42;Pure Appl.Chem.1984,56,595-624;Amino Acids and Peptides 1985,16,
387-410;和 Biochemical Nomenclature and Related Documents,第 2版,Portland Press,1992,第39-67页。所述规则的扩充内容公布于JCBN/NC-IUB Newsletter 1985,
1986,1989中;参见Biochemical Nomenclature and Related Documents,第2版,Portland Press,1992,第68-69页。
[0085] 术语“激动剂”指使得蛋白质、受体、酶或类似物的内源性配体的至少一些效应加倍的化合物。
[0086] 术语“有效量”或“有效”意图表示引起如通过临床试验和评估、患者观测和/或类似方法所指明的疾病或病症的症状缓解的剂量和/或使得生物活性或化学活性出现可检测变化的剂量。可检测的变化可以由本领域的技术人员检测和/或进一步定量以用于相关的机制或过程。如本领域通常所了解,剂量将根据施用途径、症状和患者的体重以及所施用的化合物而变化。
[0087] “组合”施用两种或更多种化合物意指两种化合物的施用时间足够接近以使得一种化合物的存在会改变另一化合物的生物效应。两种化合物可以同时(并行)或依序施用。可以通过先混合化合物,之后施用,或通过在同一时间点但在不同解剖部位或使用不同施用途径施用化合物来进行同时施用。如本文所用的短语“并行施用”、“组合施用”、“同时施用(simultaneous administration)”或“同时施用(administered simultaneously)”意指化合物在同一时间点施用或彼此紧密相继施用。在后一种情况下,两种化合物的施用时间足够接近以使得所观测到的 结果与在同一时间点施用化合物时所达到的结果没有区别。
[0088] 术语“药学上可接受的盐”意图表示化合物的盐形式,所述盐形式允许所述化合物用作或配制成药物且保留指定化合物的生物有效性并且在生物学上或其它方面合乎需要。所述的一些盐描述于Stahl,P.H.,Wermuth,C.G.编著,Handbook of Pharmaceutical Salts:Properties,Selection and Use;VHCA 及 Wiley-VCH:Zurich,Switzerland 及Weinheim,Germany,2002中。
[0089] 术语“药学活性代谢物”意图表示通过指定化合物在体内代谢而产生的药理学活性产物。
[0090] 术语“盐”意图表示由酸与碱接触而产生的离子化合物。盐在呈固体形式时可以是非晶形的、结的晶或部分结晶的。
[0091] 术语“溶剂合物”意图表示含有溶剂分子作为一部分晶体结构的指定化合物的药学上可接受的固体形式。溶剂合物通常保留所述化合物的至少一些生物有效性。溶剂合物可具有不同的溶解度、吸湿性、稳定性和其它特性。溶剂合物的实例包括但不限于化合物与水、异丙醇、乙醇、甲醇、DMSO、乙酸乙酯、乙酸或乙醇胺的组合。溶剂合物有时称作“假多晶型物(pseudopolymorph)”。
[0092] 术语“水合物”意图表示含有水的溶剂合物。
[0093] 术语“乙醇合物”意图表示含有乙醇的溶剂合物。
[0094] 术语“多晶型物(polymorph”或“多晶型物(polymorphic form)”意图表示物质的单晶形。结晶物质可具有一种或多种多晶型物。多晶型物的化学组成相同,但是晶格结构中分子的排列或构象不同。不同多晶型物可以具有不同的物理和化学特性,包括不同的密度、熔点、溶解度和其它特性。
[0095] 1.化合物
[0096] 本文公开的化合物可具有不对称中心。本发明的化合物可以单个立体异构体、外消旋体和/或对映体和/或非对映体的混合物形式存在。所有所述的单个立体异构体、外消旋体和其混合物意图处于本发明范 围内。然而,在特定实施方案中,使用呈光学纯形式的本发明化合物。如本文所用的术语“S”构型和“R”构型如IUPAC 1974Recommendations for Section E,Fundamentals of Stereochemistry(Pure Appl.Chem.1976,45,13-30)所定义。除非另外描绘成某一特定取向,否则本发明涉及所有立体异构形式。
[0097] 如本领域技术人员通常所了解,“光学纯的”化合物是仅含有单个对映体的化合物。如本文所用的术语“具有光学活性”意图表示化合物所包含的一种对映体相比另一对映体来说至少足够过量以便混合物使平面偏振光旋转。光学活性化合物能够使平面偏振光旋转。一种对映体相比另一对映体来说过量通常表示为对映体过量(e.e.)。在描述光学活性化合物中,字首D和L或R和S用于表示所述分子关于其手性中心的绝对构型。字首“d”和“1”或(+)和(-)用于表示化合物的旋光性(即,平面偏振光由光学活性化合物旋转的方向)。“l”或(-)字首指示化合物具有左旋性(即,平面偏振光向左或逆时针方向旋转),而“d”或(+)字首意指化合物具有右旋性(即,平面偏振光向右或顺时针方向旋转)。旋光性的符号(即(-)和(+))与分子的绝对构型(R和S)无关。
[0098] 具有所需药理学特性的本发明化合物是旋光的,并且可以包含至少90%(80%e.e.)、至少95%(90%e.e.)、至少97.5%(95%e.e.)或至少99%(98%e.e.)的单个异构体。
[0099] 本发明的盐、溶剂合物和/或多晶型物相较于先前已知的化合物显示出增强的稳定性。在各种环境条件下的稳定性尤其能够确保不形成具有可能不合需要的副作用的分解产物并且药物组合物中活性物质的量不会随时间推移或在储存期间减少到有效量以下。同样,物质在制备含有这物质的药物组合物中所涉及的必要加工期间必须保持稳定。 [0100] 本发明的盐、溶剂合物和/或多晶型物显示出提高的活性物质溶解度。这在以下情况中是合乎需要的:例如在将药物组合物制备成诸如用于注射或输注的溶液期间,活性物质必须充分溶解于生理上可接受 的溶剂中并且随时间推移以及在储存期间保持可溶。同样,对于口服制剂来说,活性物质同样必须充分溶解于生理性流体中,以便在施用后溶解率允许在血浆中达到活性物质的治疗水平。本发明的盐、溶剂合物和/或多晶型物可拥有这些能力。
[0101] 为了制备用于口服施用的药物组合物,活性物质的固态特性因另外的原因而同样有益。流动性会影响在制备和加工药物组合物(通常为片剂或胶囊)期间处理物质的简易性,虽然这同样和制备如糖浆剂或酏剂的液体组合物有关。流动性不良通常需要添加赋形剂以改良流动特性,从而会增加复杂度并提高药物组合物的成本。(Aleeva,G.N.;Zhuravleva,M.V.;Khafizyanova,R.K.Pharm.Chem.J. 2009,43,230-234。)固态形式影响活性物质的可压缩性,此可压缩性同样是固体剂型的一个重要的参数。本发明的盐、溶剂合物和/或多晶型物可拥有这些能力。
[0102] 活性物质的吸湿性也是一个目标参数。药物质吸收水分,从而重量增加且因此使得活性组分的相对含量减少。所述物质通常被特殊地储存以防止其吸收水分。吸湿性也可能在制备活性物质或含有其的药物组合物期间造成困难,这是因为在制造期间吸收水分会引起加工和分离工序方面的技术问题。本发明的盐、溶剂合物和/或多晶型物显示出低吸湿性。
[0103] 2.合成方法
[0104] 用于本发明盐、溶剂合物和多晶型物的一般类型大环结构的合成方法描述于国际专利申请WO 01/25257、WO 2004/111077、WO2005/012331和WO 2005/012332中。如图1中所概述来制备化合物298和其盐酸盐(第7,476,653号和第7,491,164号美国专利;美国专利申请公布2009/0198050;和美国专利申请12/351,395)。本发明的盐、溶剂合物和多晶型物可以使用下文所述的一般方法以及实施例中所提供的一般方法来制备。
[0105] 方法2A.制备本发明代表性盐或溶剂合物的一般方法
[0106] 使用以下一般工序来制备本发明的代表性盐或溶剂合物:
[0107] (a)将1当量(1.0当量)呈其游离碱形式的大环化合物加入适当的容器中; [0108] (b)向游离碱中添加1.1当量酸水溶液;
[0109] (c)将所得混合物搅动多达72小时;
[0110] (d)将混合物加热,并添加有机溶剂(使用诸如逐滴或与水溶液体积成固定比率的技术);
[0111] (e)将热混合物缓慢冷却到室温,任选地进一步冷却到4℃;
[0112] (f)通过过滤收集所沉淀的盐并洗涤。
[0113] 方法2B.制备本发明的代表性多晶型物的一般方法
[0114] 可以使用以下工序制备本发明的代表性多晶型物:
[0115] (a)将大环化合物溶于醇溶液中,形成溶液A;
[0116] (b)将酸加入溶液A中,形成酸化的溶液A,然后可以任选地将其冷却;
[0117] (c)从酸化的溶液A中分离沉淀的盐;
[0118] (d)将来自(c)的所沉淀的盐溶于醇与水的热混合物中,形成溶液B;
[0119] (e)将溶液B冷却;
[0120] (f)从溶液B中分离沉淀的盐;
[0121] (g)将来自(f)的所沉淀的盐溶于酮溶剂与水的热混合物中,形成溶液C; [0122] (h)将溶液C冷却到环境温度或环境温度以下;以及
[0123] (i)从溶液C中分离沉淀的多晶型物。
[0124] 本发明的盐也可能通过为本领域技术人员所知的任何合适的方法来制备,包括用以下酸处理游离碱:无机酸,诸如盐酸、氢溴酸、氢碘酸、碳酸、硫酸、硝酸、磷酸及类似酸;或有机酸,包括甲酸、乙酸、丙酸、马来酸、琥珀酸、扁桃酸、富马酸、丙二酸、柠檬酸、丙酮酸、草酸、硬脂酸、抗坏血酸、乙醇酸、水杨酸;吡喃糖苷酸, 诸如葡糖酸或半乳糖醛酸;α-羟酸,诸如乳酸、苹果酸或酒石酸;氨基酸,诸如天冬氨酸或谷氨酸;芳族酸,诸如苯甲酸肉桂酸;磺酸,诸如甲苯磺酸、甲磺酸、乙磺酸、2-羟基乙磺酸、苯磺酸、环己基-氨基磺酸或类似酸。本发明代表性盐的制备法提供于实施例中。
[0125] 本发明的盐可以与其所接触的某些溶剂形成溶剂合物。这些溶剂通常是参与化合物反应或纯化的溶剂。本发明的代表性盐、溶剂合物和多晶型物按照实施例中所述来制备。 [0126] 3.药物组合物
[0127] 本发明的盐、溶剂合物和多晶型物可配制成各种剂型的药物组合物。在所述各种剂型中可包括量为约75%、80%、85%、90%、95%、99%或99.9%的本发明盐、溶剂合物和多晶型物。因此,药物组合物的一种特定剂型可能包括受控、稳定和/或所需量的呈盐形式、溶剂合物形式或多晶型物的本文所述化合物。在一些实施方案中,在剂型中包括活性物质的最具热力学稳定性的多晶型物。
[0128] 为了制备本发明的药物组合物,根据为药物配制领域的技术人员所知的技术,将一种或多种盐、溶剂合物或多晶型物作为活性成分与适当的载体、赋形剂和添加剂紧密地混合。
[0129] 用于这些药物组合物的载体和添加剂可以采用多种形式,取决于预期的施用方式。因此,用于口服施用的组合物可能是例如固体制剂,诸如片剂、糖衣片剂、硬胶囊、软胶囊、颗粒剂、粉末剂及类似制剂,其中合适的载体和添加剂是淀粉、糖、粘合剂、稀释剂、成粒剂、润滑剂、崩解剂及类似物。由于片剂和胶囊易于使用并且患者依从性较高,所以片剂和胶囊代表用于许多医学病状的最有利的口服剂型。
[0130] 类似地,液体制剂组合物包括溶液、乳液、分散液、混悬液、糖浆剂、酏剂及类似制剂,其中合适的载体和添加剂是水、醇、油、二醇、防腐剂调味剂着色剂、悬浮剂及类似物。用于胃肠外施用的典型制剂包含活性成分以及载体,诸如无菌水或胃肠外可接受的油,包括聚乙二醇、聚乙烯吡咯烷酮、卵磷脂、花生油或芝麻油,其中也 可能包括用于协助溶解或防腐的其它添加剂。在溶液的情况下,可将其冻干成粉末,然后在临用前复水(reconstituted)。对于分散液和混悬液来说,适当的载体和添加剂包括含水树胶、纤维素酸盐或油。
[0131] 根据本发明的实施方案的药物组合物包括适合于口服、直肠、局部、吸入(例如经由气溶胶)、经颊(例如舌下)、阴道、局部(即,皮肤和粘膜表面,包括气管表面)、透皮施用和胃肠外或输注(例如皮下、肌肉内、皮内、关节内、胸膜内、腹膜内、鞘内、脑内、颅内、动脉内或静脉内)的组合物,尽管在任何给定情况下最合适的途径将取决于正治疗的病状的性质和严重度以及正使用的特定活性剂的性质。
[0132] 用于注射的组合物将包括活性成分连同合适的载体,包括丙二醇-醇-水、等渗水、无菌注射用水(WFI,USP)、emulPhorTM-醇-水、cremophor-ELTM或其它为本领域技术人员所知的合适的载体。这些载体可单独使用或与其它常规的增溶剂(诸如乙醇、丙二醇或其它为本领域技术人员所知的试剂)组合使用。
[0133] 在本发明的大环化合物的溶剂合物、多晶型物和盐将以溶液或注射剂形式施用时,所述化合物可以通过溶解或悬浮于任何常规的稀释剂中来加以使用。稀释剂可能包括例如生理盐水、林格氏溶液(Ringer′ssolution)、葡萄糖水溶液、右旋糖水溶液、醇、脂肪酸酯、甘油、二醇、植物或动物源性油、石蜡及类似物。这些制剂可以根据为本领域技术人员所知的任何常规方法来制备。
[0134] 此外,在制备这些包含一种或多种活性成分与为配制组合物所需的组分的混合物的药物组合物中,可以并入其它药理上可接受的常规添加剂,例如赋形剂、稳定剂、抗菌剂、湿润剂、乳化剂、润滑剂、甜味剂、着色剂、调味剂、等渗剂、缓冲剂、抗氧化剂及类似添加剂。作为添加剂,有可能提到例如淀粉、蔗糖、果糖、右旋糖、乳糖、葡萄糖、甘露醇、山梨糖醇、沉淀碳酸钙、结晶纤维素、羧甲基纤维素、糊精、明胶、阿拉伯胶、EDTA、硬脂酸镁、滑石、羟丙基甲基纤维素、焦亚硫酸钠及类似添加剂。
[0135] 在一些实施方案中,提供了呈诸如片剂或胶囊的单位剂型的组合物。
[0136] 在其它实施方案中,本发明提供了试剂盒,所述试剂盒包括一个或多个包含药物剂量单位的容器,这些药物剂量单位包含有效量的本发明中的一种或多种盐、溶剂合物或多晶型物。
[0137] 在具体实施方案中,所述试剂盒含有包含药物剂量单位的小瓶或注射器,这些药物剂量单位包含有效量的本发明中的一种或多种盐、溶剂合物或多晶型物。
[0138] 本发明进一步说明本发明的溶剂合物、盐和多晶型物可以与用于预防和/或治疗以下疾病的治疗剂组合施用:代谢和/或内分泌病症、胃肠道病症、心血管病症、肥胖和肥胖相关病症、中枢神经系统病症、骨病、遗传障碍、过度增生病症、由细胞凋亡表征的病症和炎性病症。示例性药剂包括镇痛剂(包括阿片样物质镇痛剂)、麻醉剂、抗真菌剂、抗生素、消炎药(包括非类固醇消炎剂)、驱虫剂、止吐剂、抗组胺剂、抗高血压剂、抗精神病药、抗关节炎药、止咳药、抗病毒剂、心脏活性药物、泻药、化学治疗剂(诸如DNA相互作用剂、抗代谢物、微管蛋白相互作用剂、激素剂和诸如天冬酰胺酶或羟基脲的药剂)、类皮质激素(类固醇)、抗抑郁药、镇静剂、利尿剂、安眠药、矿物质、营养补充剂、拟副交感神经药、激素(诸如促皮质素释放激素、促肾上腺皮质激素、生长激素释放激素、生长激素、促甲状腺激素释放激素和促甲状腺激素)、安神剂、磺酰胺、刺激剂、拟交感神经药、镇定剂、血管收缩剂、血管扩张剂、维生素和黄嘌呤衍生物。
[0139] 适于根据本发明加以治疗的受试者包括但不限于类和哺乳动物受试者,并且优选是哺乳动物。本发明的哺乳动物包括但不限于犬、猫、、山羊、马、绵羊、猪、啮齿动物(例如大鼠和小鼠)、兔类动物、灵长类动物、人类及类似哺乳动物,以及处于子宫内的哺乳动物。需要根据本发明治疗的任何哺乳动物受试者是合适的。优选人类受试者。两种性别和处于任何发育阶段(即,新生儿、婴儿、少年、青年、 成年)的人类受试者能够根据本发明来治疗。
[0140] 根据本发明的说明性鸟类包括鸡、鸭、火鸡、鹅、鹌鹑、雉鸡、平胸类鸟(例如鸵鸟)和驯养鸟类(例如鹦鹉和金丝雀)以及处于卵内的鸟。
[0141] 虽然本发明主要关于人类受试者的治疗,但是本发明还可以出于兽医学目的对动物受试者进行,尤其是哺乳动物受试者,诸如小鼠、大鼠、犬、猫、家畜和马。 [0142] 在生长素释放肽受体激动剂有效的的哺乳动物(即人类或动物)的病状治疗的治疗应用中,可施用有效量的本发明的溶剂合物、盐或多晶型物或其适当的药物组合物。由于物质的活性和治疗作用程度不同,所以所施用的实际剂量将依据诸如以下的公认因素来确定:受试者的年龄、病状、递送途径和受试者的体重。剂量可为约0.1mg/kg到约100mg/kg,每天1到4次口服施用。另外,适当的药物组合物中的溶剂合物、盐或多晶型物可以通过每次给药注射约0.01mg/kg到20mg/kg来施用,每天施用1到4次。治疗可以持续几周、几个月或更久。因此,治疗可以是急性或长期的。针对特定情况确定最佳剂量在本领域技术人员的能力范围内。
[0143] 方法3A.制备本发明的代表性药物组合物的一般方法
[0144] 以下工序可用于制备含有本发明的盐、溶剂合物或多晶型物的代表性制剂。 [0145] (a)将张度剂(例如盐水溶液或溶于水中的5%右旋糖)溶于溶剂(诸如注射用水)中,形成新溶液D;
[0146] (b)添加酸(诸如乙酸),形成酸化的溶液D;
[0147] (c)将盐、溶剂合物或多晶型物溶于酸化的溶液D中,形成溶液E;
[0148] (d)通过添加碱(例如氢氧化钠)来调节溶液E的pH值,形成溶液F;以及
[0149] (e)用溶剂将溶液F稀释到有效浓度。
[0150] 本发明的某些代表性药物组合物在实施例中提供。
[0151] 4.分析方法
[0152] 本发明的溶剂合物、盐和多晶型物可利用一系列公认的分析和物理化学技术来进行鉴别和表征。在一些情况下,这些技术的特定方法已被研发用于本发明的溶剂合物、盐和多晶型物。某些标准分析方法提供于美国药典-国家处方集(United States Pharmacopeia-National Formulary,USP-NF)中,所述美国药典/国家处方集为公共药典标准书籍且含有针对医药、剂型、药物质、赋形剂、医疗器械和膳食补充剂的标准。所述方法由USP<#>指示,其中#表示USP-NF中对应的章节数。
[0153] 除了使用单晶X射线衍射法来提供关于结晶固体形式的结构信息之外,还已经研发出许多不同的分析技术来定量和区分非晶形与晶形以及晶形与多晶型物(Bugay,D.E.Adv.Drug Deliv.Rev.2001,48,43-65;Shah,B.;Kakumanu,K.;Bansal,A.K.J. Pharm.Sci.2006,95,1641-1665。)这些包括X射线粉末衍射法(XRPD)、热重分析、差示扫描量热法(DSC)、溶液微量热法、等温微量热法(IMC)、拉曼光谱法(Raman spectroscopy)、近红外光谱法(NIR)、漫反射红外(IR)光谱法、衰减反射光谱法、固态核磁共振(NMR)、动态蒸汽吸附(DVS)、太赫兹脉冲光谱法(terahertz pulsed spectroscopy,TPS)、热刺激电流光谱法(TSC)、动态力学分析(DMA)和反相气相色谱法(IGC)。
[0154] 不同多晶型物可以由其热行为来区分,且可以使用诸如熔点、热重分析(TGA)和DSC的方法来单独地表征。特定多晶型物具有独特的光谱特性,这些光谱特性可以使用诸如13
XRPD、固态 C NMR光谱法和IR光谱法的技术来检测。
[0155] 为了测定活性药物成分(API)或药物组合物的稳定性,可以遵循如人用药物注册技术要求国际协调会议(ICH)Q1A准则:新药物质和产品稳定性测试(International Conference on Harmonisation of Technical Requirements for Registration of Pharmaceuticals for Human Use(ICH)Q 1A Guideline:Stability Testing of New Drug Substances and Products)(2003年2月)中出于规范的目的所概述的方法。概括来说,这要求对在三种代表性受控条件下所储存的样品重复某些分析测试以确定是否出现任何降解或效能降低。所用的典型条件是:(1)25℃±2℃,60%±5%相对湿度(RH);(2)30℃±2℃,65%±5%RH;(3)40℃±2℃,75%±5%RH(这常称作加速稳定性)。通常还研究如人用药物注册技术要求国际协调会议(ICH)Q1B准则:稳定性测试:新药物质和产品的光稳定性测试(International Conference on Harmonisation of Technical Requirements for Registration of Pharmaceuticals for Human Use(ICH)Q1B Guideline:Stability Testing:Photostability Testing of New Drug Substances and Products)(1996年11月)中所概述的光稳定性。
[0156] 可采用以下一般方法对本发明的盐、溶剂合物或多晶型物进行表征。
[0157] 方法4A.外观
[0158] 目测检查样品并报告物理状态和颜色
[0159] 方法4B.HPLC测定-纯度、杂质和效能
[0160] 这一工序的目的在于通过反相HPLC测定本发明的代表性盐、溶剂合物和多晶型物的纯度。可以利用与HPLC相容的任何适当的检测方法,诸如单波长或双波长紫外线(UV)检测、蒸发光散射检测(ELSD)或化学发光氮检测(CLND)。对于大多数情况来说,优选UV检测。纯度可以由峰面积%来确定。使用相同测定条件来测定杂质水平和效能。此HPLC测定的参数描述于下文中。
[0161] 流动相A:10mM氢氧化铵的水溶液
[0162] 将1.8mL氢氧化铵(21%)加入2L水中并充分混合。如果为HPLC系统所需,那么可以通过适当的方法(诸如在线脱气器或He鼓泡)来使溶剂脱气。
[0163] 流动相B:10mM氢氧化铵的乙腈溶液将1.8mL氢氧化铵(21%)加入2L乙腈中并充分混合。如果为 HPLC系统所需,那么可以通过适当的方法(诸如在线脱气器或He鼓泡)来使溶剂脱气。
[0164] 稀释剂:水/乙腈(1/1,v/v)
[0165] 将500mL乙腈和500mL水加入适当的容器中并充分混合。此稀释剂通常还用于制备空白样品。
[0166] 典型色谱条件
[0167] 柱: XTerra RP18,3.5μm,4.6×100mm(或等效物)
[0168] 检测: 230nm
[0169] 柱温: 30℃
[0170] 注入体积: 10μL
[0171] 流速: 1毫升/分钟
[0172] 运行时间: 46.0分钟
[0173] 数据采集时间:37.5分钟
[0174] 流动相A: 10mM氢氧化铵的水溶液
[0175] 流动相B: 10mM氢氧化铵的乙腈溶液
[0176] 梯度
[0177]时间(分钟) %A %B 流速(mL/min)
0.00 80.0 20.0 1.0
25.00 50.0 50.0 1.0
35.00 0.0 100.0 1.0
37.50 0.0 100.0 1.0
38.00 80.0 20.0 1.0
46.00 80.0 20.0 1.0
[0178] 制备空白对照:
[0179] 使用水/乙腈(1/1)作为空白对照。
[0180] 制备样品:
[0181] 称取约25mg样品并用水/乙腈(1/1)(或适当的溶液以提供0.5mg/mL的浓度)溶解/稀释到50.0mL。
[0182] 制备标准品:
[0183] 为了确定已知化合物的种类或测定其效能,称取适量的标准样品放入50mL容量瓶中。溶于水/乙腈(1/1)(或其它适当溶剂)中,稀释到一定体积并充分混合。可以通过准确地稀释特定体积量的标准样品来制备不同浓度的样品。所述样品还可以用于确定系统适用性。
[0184] 样品分析工序
[0185] ●使色谱系统平衡。
[0186] ●注入空白对照并确定对目标峰的预期保留时间不存在显著干扰。
[0187] ●注入标准品(或根据分析的需要注入一系列标准品)。
[0188] ●注入每一样品制备物一次。
[0189] ●在分析多个样品期间插入适当的标准样品。
[0190] ●测量在样品注入中等于或高于定量限(0.05%)的所有峰的面积%响应值。 [0191] 替代色谱条件
[0192] 柱: XTerra RP18,3.5μm,4.6×100mm(或等效物)
[0193] 检测: 225nm
[0194] 柱温: 30℃
[0195] 注入体积: 20μL
[0196] 流速: 1.2毫升/分钟
[0197] 运行时间: 46.0分钟
[0198] 重平衡时间: 8.5分钟
[0199] 数据收集时间:37.5分钟
[0200] 洗针液: 50/50乙腈/水(v/v)
[0201] 流动相A: 10mM氢氧化铵的水溶液
[0202] 流动相B: 10mM氢氧化铵的乙腈溶液
[0203] 梯度
[0204]时间(分钟) %A %B
0.0 80 20
0.5 80 20
27.0 60 40
35.0 0 100
37.5 0 100
38.0 80 20
46.0 80 20
[0205]
[0206] 方法4C.通过UV-可见光谱法分析
[0207] 可以使用Ultrospec 2100Pro UV/可见光分光光度计(或类似仪器)获得本发明的盐、溶剂合物或多晶型物的适当溶液的紫外光谱。
[0208] 方法4D.通过1H NMR、13C NMR及19F NMR分析种类
[0209] 根据USP<761>,使用Varian Mercury VX-300MHz光谱仪、Bruker Avance 300MHz1 13 19
光谱仪或Bruker Avance 500MHz光谱仪(或类似仪器)记录 H NMR、C NMR和 F NMR光谱。通常针对样品与标准品的结构一致性来分析光谱。
[0210] 方法4E.通过傅里叶变换红外(Fourier-Transform Infrared,FT-IR)法进行分析
[0211] 可以使用Perkin Elmer 1600FT-IR光谱仪(或类似仪器),在适当的溶液中或以溴化钾(KBr)压片形式获得本发明的盐、溶剂合物和多晶型物的傅里叶变换红外(FT-IR)吸收光谱。
[0212] 方法4F.测定氯离子
[0213] 将样品溶于乙腈∶水(1∶1)中,然后用水和6N硝酸稀释。然后使用硝酸溶液通过电位滴定来测定氯离子的定量。
[0214] 可以使用如下替代方法,此替代方法利用氧气燃烧,之后进行电位滴定。 [0215] 方法4G.测定水分水平
[0216] 根据USP<9211a>,使用直接滴定法,通过卡尔费歇尔滴定分析法(Karl Fischer titrimetry)来测定水分水平。
[0217] 方法4H.灼烧残渣
[0218] 根据USP<281>,通过硫酸化灰分测试来测定灼烧残渣。
[0219] 方法4I.测定内毒素水平
[0220] 根据USP<85>,使用胶凝法测量内毒素水平。
[0221] 方法4J.测定生物负荷(bioburden)
[0222] 根据USP<61>,通过总细菌计数以及总酵母和霉菌计数来评估生物负荷。 [0223] 方法4K.X射线粉末衍射(XRPD)分析
[0224] 为了评估本发明的盐和溶剂合物的结晶度和多晶型物,可以在环境条件(22℃±3℃)下操作广粉末X射线衍射仪(Siemens D5005,Shimadzu型号XRD-6000或类似仪器)来进行XRPD。此通常从5°到40°2θ,以步进扫描方式并以0.05°2θ的增量来进行,并且在每一步累加计数1秒。可以将磨碎的粉末样品或其它适当制备的样品顶部填充到制样品架中,且曝露于Cu Kα辐射。
[0225] 方法4L.差示扫描量热法(DSC)表征
[0226] 可以通过使用TA Instruments型号Q1000或Mettler Toledo型号822e装置(或类似装置)来进行DSC分析。通常使用铟金属作为参照物针对熔点温度和熔化来修正DSC装置。在氮气下,使用密封的铝样品盘获得DSC谱。样品通常以“原样”形式使用而不施加任何研磨
[0227] 方法4M.吸湿性分析
[0228] 可以通过静态和动态吸湿性研究来评估本发明的盐、溶剂合物和多晶型物的吸湿性。对于后者来说,可以在SGA-100重量吸附分析器(或类似仪器)上进行动态蒸汽吸附/解吸附(DVS)实验。实验方案通常包括在0%RH下全重平衡。
[0229] 方法4N:X射线结晶学
[0230] 在典型实验中,使用玻璃纤维将一个单晶安装于测角仪上。除非另作说明,否则在Enraf-Nonius CAD-4自动衍射仪(或类似仪器)上,在293K±2K下使用ω/2θ扫描来收集数据。使用DIFRAC程序(Flack,H.D.;Blanc,E.;Schwarzenbach,D.J. Appl.Cryst,1992,25,455-459)来进行定中心、指数测定和数据收集。每100次反射测量两次标准反射,在数据收集期间观测任何可观测到的强度衰減并针对个别结构进行 记录。通过根据 扫描的经验方法来针对吸收率修正数据且用NRCVAX程序换算(Gabe,E.J.;Le Page,Y.;Charland,J.-P.;Lee,F.L.;White,P.S.J. Appl.Cryst.1989,22,384-387)。 使 用
2
SHELXL-9将其解析且用SHELXL-97通过基于F 的全矩阵最小二乘法来进行精修。(版本
97-2;Sheldrick,G.M.Acta Cryst.2008,A64,112-122。)各向异性地精修非氢原子。将氢原子放在理想化的计算几何位置上并使用骑式模型各向同性地精修。除非另作说明,否则通过反常色散效应来指定最终的绝对结构。(Flack,H.D.Acta Cryst.A1983,39,876-881。) [0231] 表1提供了如何能够使用这些方法来对本发明的代表性溶剂合物进行表征的实例。
[0232] 表1:针对化合物298·HClH2O的代表性分析测试
[0233]
[0234] 在通过调整性工艺使活性成分进展期间,常常会修改所示的目标结果,通常会达到更严格的限定。
[0235] 可以使用其它分析方法来对本发明的药物组合物进行表征。
[0236] 方法4O.药物组合物的外观
[0237] 以一张干净的白纸为背景对药物组合物进行目测检查并记录观测结果,尤其包括所见到的任何微粒物质。
[0238] 方法4P.针对种类、杂质和效能的HPLC分析
[0239] 可以使用单个HPLC方法进行所有三项测定。可以使用同一测定来确定药物组合物在各种储存条件下随时间推移的稳定性。
[0240] 工序
[0241] 按一定顺序注入色谱标准品和样品制备物以利用每四次样品制备物注入标准品交替测试法(standard bracketing)。在单次注入中注入各样品制备物。可以如下文所示计算效能(呈%游离碱形式)。同样,可以如下文所示计算所观测到的任何已知和未知的杂质/相关物质的面积%(以及任何未知杂质的相对保留时间)。
[0242] 色谱条件
[0243]柱: XTerra RP18,3.5μm,4.6×100mm
检测(UV): 225nh
柱温: 30℃
注入体积: 20μL
流速: 1.2毫升/分钟
运行时间: 46分钟
数据采集时间: 37.5分钟
流动相A: 10mM氢氧化铵的水溶液
流动相B: 10mM氢氧化铵的乙腈溶液
[0244] 梯度
[0245]时间(分钟) %A %B 流速(毫升/分钟)
初始 80 20 1.2
0.5 80 20 1.2
27 60 40 1.2
35 0 100 1.2
37.5 0 100 1.2
38 80 20 1.2
46 80 20 1.2
[0246] 制备流动相A
[0247] 对于各3L流动相来说,将2.25mL 25%氢氧化铵吸取到3000mL 高纯度水中并充分混合。
[0248] 制备流动相B
[0249] 对于各三升流动相来说,将2.25mL 25%氢氧化铵吸取到3000mL乙腈中并充分混合。
[0250] 制备稀释剂
[0251] 对于制备每一升稀释剂来说,将500mL高纯度水与500mL乙腈组合并充分混合。 [0252] 制备标准品
[0253] 准确地称取一定量固体参照标准品并转移到容量瓶中。用稀释剂稀释到一定体积并充分混合。标准品制备物在未加保护以免受光影响的情况下在5℃下或在室温下储存时通常保持稳定至少7天。
[0254] 制备样品
[0255] 用稀释剂将样品稀释到先前确定的工作浓度,诸如0.5mg/mL。因此,对于2mg/mL标示量的样品溶液来说,吸取1.0mL样品和3.0mL稀释剂放入小瓶中并充分混合。一式两份制备样品。每一样品注入一次。
[0256] 计算
[0257] 以下计算关于以2mg/mL配制的药物组合物。
[0258]
[0259] ●PF是针对药物组合物所指定的效能因子。根据参照标准品中的游离碱含量以小数形式报道其值。
[0260] ●平均标准品峰面积是在整个分析期间所有标准品的平均值。
[0261] ●DF是应用于样品的稀释因子。对于2mg/mL制剂来说,稀释因子是4,这是因为将样品1∶4稀释,从而达到最终浓度0.5mg/ml。
[0262] ●化合物%是以mg/mL报道的理论浓度(通常是游离碱的浓度)。
[0263] 杂质%(面积%)=通过色谱系统针对每一峰相对于总峰面积所计算得到的值。仅仅累计面积%≥0.05%(LOQ)的峰。
[0264] %总相关物质=未鉴别杂质的总和+已鉴别杂质的总和
[0265] 应注意,不考虑将溶剂前沿、稀释剂相关峰用于计算。
[0266] 鉴别测试:样品制备物中化合物的保留时间与参照标准品制备物中化合物的保留时间相同(容许误差±5%)。
[0267] 方法4Q.pH值测定
[0268] 可以根据USP<791>pH值测定(pH Determination)来测定样品的pH值。
[0269] 方法4R.重量渗透摩尔浓度测定
[0270] 可以根据USP<785>重量渗透摩尔浓度和容量渗透摩尔浓度(Osmolality and Osmolarity)来测定样品的重量渗透摩尔浓度。
[0271] 方法4S.微粒物质测定
[0272] 可以遵照USP<788>注射剂中的微粒物质(Particulate Matter in Injections)中所指示,使用光阻法粒子计数测试对微粒物质进行表征。
[0273] 方法4T.内毒素测定
[0274] 可以遵照USP<85>细菌内毒素测试(Bacterial Endotoxins Test)中所指示,使用胶凝法分析样品。
[0275] 方法4U.无菌性测定
[0276] 对于无菌性来说,可以遵照USP<71>无菌性测试(Sterility Tests)中所指示来测试样品。
[0277] 在实施例中提供了使用这些方法来对本发明的代表性药物组合物进行表征。 [0278] 5.生物学方法
[0279] 已知针对人类(GRLN、GHS-R1a)、猪和大鼠生长素释放肽受体的特定测定方法(第6,242,199号美国专利、第WO 97/21730号和第97/22004号国际专利申请)以及针对犬生长素释放肽受体的特定测定方法(第6,645,726号美国专利),和将这些方法用于通常鉴别这些受体的激动剂和拮抗剂。
[0280] 还已知用于测定与人类生长素释放肽受体(GRLN)相互作用的本 发明溶剂合物、盐和多晶型物的功能和体内活性的适当方法。例如,可以使用竞争性放射性配体结合测定、荧光测定或水母发光蛋白功能性测定(参见第7,452,862号;第7,476,653号;第7,491,695号美国专利;和第2008/051383号;第2008/194672号美国专利申请公布)。另外,可以使用本领域中确立的方法来测定其它对于确定作为药剂的适合性来说重要的参数,诸如药代动力学。
[0281] 本发明的盐、溶剂合物和多晶型物以及其药物组合物的药代动力学特性可以通过为本领域技术人员所熟知的方法来确定并且可用于研究静脉内、皮下和口服施用这些物质的药代动力学参数(消除半衰期、总血浆清除率等)。(Wilkinson,G.R.“Pharmacokinetics:The Dynamics of Drug Absorption,Distribution,and Elimination”,Goodman & Gilman′s The Pharmacological Basis of Therapeutics,第
10版,Hardman,J.G.;Limbird,L. E.编著,McGraw Hill,Columbus,OH,2001,第1章。)还参见第7,476,653号;第7,491,695号美国专利和美国专利申请公布2008/0194672。在实施例中提供了本发明的代表性药物组合物的这些参数的测定。
[0282] 6.使用方法
[0283] 本发明的盐、溶剂合物和多晶型物可用于预防和治疗多种医学病状,包括但不限于代谢和/或内分泌病症、胃肠道病症、心血管病症、肥胖和肥胖相关病症、中枢神经系统病症、骨病、遗传障碍、过度增生病症、由细胞凋亡表征的病症、炎性病症和其组合,其中所述病症可能是多种潜在疾病的结果。在特定实施方案中,疾病或病症是肠易激综合征(IBS)、非溃疡性消化不良、克罗恩氏病、胃食管反流病症、连同其它病状一起出现的胃肠运动障碍、便秘、溃疡性结肠炎、胰腺炎、婴儿肥厚性幽门狭窄、类癌瘤综合征、吸收不良综合征、萎缩性结肠炎、胃炎、胃潴留、胃肠倾倒综合征、胃肠造口吻合术后综合征、乳糜泻、饮食障碍或肥胖。在其它实施方案中,疾病或病症是充血性心力衰竭、缺血性心脏病或慢性心脏病。在其它实施方案中,疾病或 病症是骨质疏松症和/或骨脆性、骨折修复加速、代谢综合征、蛋白质分解代谢反应弱化、恶病质、蛋白质丧失、伤口愈合障碍或伤口愈合障碍的风险、烧伤恢复障碍或烧伤恢复障碍的风险、手术恢复障碍或手术恢复障碍的风险、肌力受损或肌力受损的风险、活动障碍或活动障碍的风险、皮肤厚度改变或皮肤厚度改变的风险、代谢稳态受损或代谢稳态受损的风险,或肾稳态受损或肾稳态受损的风险。在其它实施方案中,所述疾病或病症涉及以下方面:促成新生儿发育、刺激人体生长激素释放、维持人类的肌力和功能、逆转或预防人类的骨脆性、预防糖皮质激素的分解代谢副作用、治疗骨质疏松症、刺激和提高肌肉量和肌力、刺激免疫系统、加速伤口愈合、加速骨折修复、治疗肾衰竭或因生长迟缓所致的功能不全、治疗身材矮小症、治疗肥胖和生长迟缓、加速烧伤患者恢复和减少其住院治疗、治疗宫内生长迟缓、治疗骨骼发育不良、治疗皮质醇过多症、治疗库兴氏综合征(Cushing′s syndrome)、诱导脉动式生长激素释放、替代应激患者的生长激素、治疗骨软骨发育不良、治疗努南综合征(Noonans syndrome)、治疗精神分裂症、治疗抑郁症、治疗阿茲海默氏病、治疗呕吐、治疗记忆丧失、治疗繁殖障碍、治疗伤口愈合延迟、治疗心理社会剥夺、治疗肺功能障碍、治疗呼吸机依赖;弱化蛋白质分解代谢反应、减轻恶病质和蛋白质丧失、治疗高胰岛素血症、诱导排卵的辅佐治疗、刺激胸腺发育、预防胸腺功能下降、治疗免疫抑制患者、改善肌肉活动度、维持皮肤厚度、代谢稳态、肾稳态、刺激成骨细胞、刺激骨重建、刺激软骨生长、刺激伴侣动物的免疫系统、治疗伴侣动物的老化病症、促进家畜生长和/或刺激绵羊羊毛生长。其它实施方案提供了治疗由细胞凋亡表征的病症(诸如脊髓损伤和辐射复合伤)的方法。其它实施方案提供了治疗以下疾病的方法:炎性病症,包括溃疡性结肠炎、炎性肠病、克罗恩氏病、胰腺炎、类风湿性关节炎、骨关节炎、哮喘、血管炎、牛皮癣、过敏性鼻炎、消化性溃疡疾病、手术后腹内败血症、缺血再灌注损伤、胰腺和肝脏损伤、败血症和败血性休克、由某些药物所引起 的胃损伤、应激性胃损伤、由幽门螺旋杆菌(H.pylori)所引起的胃损伤、炎性疼痛、慢性肾病和肠炎。
[0284] 根据本发明的另一方面,提供了治疗患有以下疾病的人类或动物患者所患疾病的方法:术后肠梗阻、胃轻瘫(诸如由I型或II型糖尿病引起的胃轻瘫)、其它胃肠道病症、恶病质(消耗综合征)(诸如由癌症、AIDS、心脏病和肾病引起的恶病质)、生长激素缺乏症、骨丧失,和其它年龄相关病症,所述方法包括对所述患者施用有效量的至少一种选自以下的成员:本文公开的能够刺激生长素释放肽受体的溶剂合物、盐和多晶型物。可以由本文公开的化合物所治疗的其它疾病和病症包括短肠综合征、胃肠倾倒综合征、胃肠造口吻合术后综合征、乳糜泻和过度增生病症,诸如肿瘤、癌症和赘生性病症以及恶变前和非赘生性或非恶性过度增生病症。特定来说,能够由本发明治疗的肿瘤、癌症和赘生性组织包括但不限于恶性病症,诸如乳腺癌、骨肉瘤、血管肉瘤、纤维肉瘤和其它肉瘤、白血病、淋巴瘤、窦瘤、卵巢癌、输尿管癌、膀胱癌、前列腺癌和其它泌尿生殖器癌症、结肠癌、食道癌和胃癌及其它胃肠癌症、肺癌、骨髓瘤、胰腺癌、肝癌、肾癌、内分泌癌症、皮肤癌和脑或中枢和周围神经(CNS)系统肿瘤(恶性或良性),包括神经胶质瘤和成神经细胞瘤。
[0285] 在特定实施方案中,本发明的盐、溶剂合物和多晶型物可以用于治疗术后肠梗阻。在其它实施方案中,本发明的盐、溶剂合物和多晶型物可以用于治疗胃轻瘫。在其它实施方案中,本发明的溶剂合物、盐和多晶型物可以用于治疗糖尿病性胃轻瘫或术后胃轻瘫。在另一实施方案中,本发明的溶剂合物、盐和多晶型物可以用于治疗阿片样物质所诱发的肠功能障碍。
[0286] 在特定实施方案中,本发明的盐、溶剂合物和多晶型物可以用于治疗术后肠梗阻、胃轻瘫、糖尿病性胃轻瘫、术后胃轻瘫、阿片样物质所诱发的肠功能障碍、慢性肠假性梗阻、急性结肠假性梗阻(奥格尔维氏综合征)、短肠综合征、呕吐、便秘为主的肠易激综合征(IBS)、 慢性便秘、功能性消化不良、癌症相关性消化不良综合征、移植物抗宿主反应、胃食管反流病(GERD)、胃溃疡、克罗恩氏病、胃肠炎、饮食障碍(包括神经性厌食症和贪食症)患者的胃肠功能失调或胃排空延迟、帕金森氏病患者的胃肠功能失调或胃排空延迟、强直性肌营养不良患者的胃肠功能失调或胃排空延迟、自主神经退化患者的胃肠功能失调或胃排空延迟、中风患者的胃肠功能失调或胃排空延迟、多发性硬化患者的胃肠功能失调或胃排空延迟、神经疾病和病症(包括淀粉样蛋白神经病、原发性自主运动不能、交感神经损伤和幽门狭窄)患者的胃肠功能失调或胃排空延迟、精神病(包括抑郁症)患者的胃肠功能失调或胃排空延迟、硬皮病患者的胃肠功能失调或胃排空延迟、囊性纤维化患者的胃肠功能失调或胃排空延迟、结缔组织疾病(包括全身性硬化、皮肌炎、多发性肌炎、全身性红斑狼疮和淀粉样变性)患者的胃肠功能失调或胃排空延迟、肝硬化患者的胃肠功能失调或胃排空延迟、肝衰竭患者的胃肠功能失调或胃排空延迟、肾衰竭患者的胃肠功能失调或胃排空延迟、胆囊病症患者的胃肠功能失调或胃排空延迟、偏头痛患者的胃肠功能失调或胃排空延迟、败血症患者的胃肠功能失调或胃排空延迟、脑干病变患者的胃肠功能失调或胃排空延迟、脊髓损伤患者的胃肠功能失调或胃排空延迟、癌症(包括胃癌、胆癌、食道癌、胃癌和胰腺癌)患者的胃肠功能失调或胃排空延迟、瘤形成患者的胃肠功能失调或胃排空延迟、进行辐射治疗患者的胃肠功能失调或胃排空延迟、弛缓不能患者的胃肠功能失调或胃排空延迟、传染病(包括HIV、带状疱疹感染和恰加斯氏病)患者的胃肠功能失调或胃排空延迟、因手术而引起的胃肠功能失调或胃排空延迟、危重病患者的胃肠功能失调或胃排空延迟、需要危重症护理的患者的胃肠功能失调或胃排空延迟、移植(包括心脏或肺移值)后患者的胃肠功能失调或胃排空延迟、特纳氏综合征患者的胃肠功能失调或胃排空延迟;因用药剂治疗而引起的胃肠功能失调或胃排空延迟,所述药剂包括阿片样物质、抗胆碱能药、β阻断剂、钙通道拮抗剂、胰高血糖素样肽-1(GLP-1)受体激动 剂、胰淀素受体激动剂、肽YY(PYY)受体激动剂、蛋白酶体抑制剂、三环抗抑郁药、单胺摄取阻断剂抗抑郁药、癌症化学治疗剂、肾上腺素能激动剂、多巴胺能剂、抗疟药、解痉药、大麻素激动剂、奥曲肽、左旋多巴、酒精和尼古丁;因内分泌失调(包括甲状腺功能减退、甲状腺功能亢进、艾迪生氏病和卟啉症)所致的胃肠功能失调或胃排空延迟、因代谢失调(包括高血糖症、低钾血症和低镁血症)所致的胃肠功能失调或胃排空延迟、因麻醉所致的胃肠功能失调或胃排空延迟、因机械通气所致的胃肠功能失调或胃排空延迟、因电解质紊乱所致的胃肠功能失调或胃排空延迟、因严重创伤所致的胃肠功能失调或胃排空延迟,或因疼痛所致的胃肠功能失调或胃排空延迟。
[0287] 本发明进一步提供了治疗马或犬的胃肠道病症的方法,其包括施用治疗有效量的本发明的盐、溶剂合物或多晶型物。在一些实施方案中,胃肠道病症是肠梗阻或绞痛。 [0288] 如本文所用的“治疗”未必意图表示治愈或完全消除与其相关的病症或症状。 [0289] 本发明的盐、溶剂合物或盐可以进一步用于制备用于治疗多种医学病状的药物组合物或药物,所述医学病状包括但不限于胃肠道病症、代谢和/或内分泌病症、心血管病症、中枢神经系统病症、肥胖和肥胖相关病症、遗传障碍、骨病、过度增生病症、由细胞凋亡表征的病症和炎性病症。
[0290] 现在将参考以下实施例来描述本发明的其它实施方案。应了解,这些实施例旨在说明本发明的实施方案,而非限制本发明的范围。实施例
[0291] 实施例1
[0292] 通过结晶制备化合物298·HCl·H20
[0293] 制备例A
[0294] 将非晶形化合物298·HCl(1.0g)悬浮在逐滴添加的热H2O和甲基乙基酮(MEK)(4∶1)中直到完全溶解。然后使用油浴(90℃->25℃)将溶 液缓慢地冷却到室温,之后在4℃下放置过夜(O/N)。通过过滤收集所得化合物298·HCl·H2O的晶体并在空气中干燥过夜。产率:82%。
[0295] 制备例B
[0296] 将非晶形化合物298·HCl(3.0g)溶于40mL热H2O/MEK(3∶1)中。使用油浴(90℃->25℃)将溶液缓慢地冷却到室温,然后在4℃下放置过夜。将所得晶体过滤,然后在空气中干燥24小时。获得与制备例A中所形成的化合物298·HCl·H2O晶体的X射线结构相同的晶胞。
[0297] 通过从40mL热H2O/iPrOH(3∶1)中进行结晶获得相似结果。
[0298] 制备例C
[0299] 将化合物298·HCl·EtOH(10g,16.1mmol)在H2O/MEK(8∶2,100mL)中的混悬液在回流下搅拌并缓慢地添加MEK直到完全溶解。将混合物缓慢地冷却到室温,然后在室温下留置10小时。通过过滤收集晶体并用冷水(1×10mL)洗涤。将固体在空气中干燥过夜(16小时到18小时),得到呈大白色晶体状的化合物298·HCl·H2O(约80%产率)。
[0300] 制备例D
[0301] 在8mL玻璃小瓶中,向化合物298游离碱(100mg,0.18mmol,1.0当量)在MEK(0.5mL)中的溶液中缓慢地添加浓HCl(23μL,0.27mmol,1.5当量)。将溶液在室温下搅拌10分钟,期间出现沉淀,然后添加0.5mL水,使得沉淀物完全溶解。将溶液在氮气氛下浓缩到0.5mL并添加0.5mL水。出现沉淀。将混悬液加热到回流并逐滴地添加MEK直到完全溶解。将溶液在油浴(90℃->室温)中缓慢地冷却到室温。在冷却时出现结晶。将小瓶在约5℃下放置过夜。通过过滤收集晶体并用冷水(1×0.5mL)洗涤。将晶体在50℃下高真空干燥,得到呈白色晶体状的化合物298·HCl·H2O(70mg,70%)。
[0302] 制备例E
[0303] 向化合物298(38.0g,70.6mmol)在115mL无水EtOH中的溶液中添加1.25M HCl的EtOH溶液(113mL,141mmol,Fluka)。将混合物在室温下搅拌15分钟,然后在0℃下搅拌30分钟。将沉淀的固体 在仍冷的同时通过过滤来收集,然后用冷EtOH(2×100mL)洗涤。
将固体真空干燥过夜,得到26.1g(64%)呈白色固体状的化合物298·HCl·EtOH。将此溶于210mL EtOH/H2O(85∶15)中并加热到75℃。将溶液冷却到室温,然后在-20℃下放置过夜。收集所形成的晶体,用无水EtOH(1×100mL)洗涤,然后真空干燥,得到25.7g(99%)白色结晶固体。将此与以类似方式制备的3.3g相同物质(通过HPLC和MS鉴别)合并,并将合并的固体溶于EtOH/H2O(3∶1,125mL)中,加热到75℃,在仍热的同时进行过滤,并将滤液冷却到室温,然后在-20℃下放置过夜。收集结晶的物质,用EtOH(1×)洗涤并真空干燥,留下24.4g。向其中添加iPrOH/H2O(7∶3,180mL)并将混合物加热到85℃直到溶解。
将溶液冷却到室温,然后放置在-20℃下。将胶状固体分离,从其倾析溶剂并将残余物用丙酮处理。收集所形成的固体,用丙酮清洗并真空干燥,得到19.0g。随后将此物质溶于MEK/H2O(15∶85,147mL)中并加热到95℃。在溶解后,停止加热,将溶液冷却到室温,然后在
2℃下放置过夜。收集固体,用冷H2O(2×)洗涤并真空干燥,得到14.5g结晶物质。将大部分(13.0g)此固体悬浮在73mL H2O中并加热到95℃(油浴),然后逐滴地添加MEK直到完全溶解(16mL)。将溶液缓慢地(5℃/小时)冷却到室温,并留置过夜。收集沉淀的固体并用H2O(2×)洗涤,留下11.6g白色晶体。将此固体在95℃(油浴)下溶于MEK/H2O(1∶4,
65mL)中。将溶液缓慢地(5℃/小时)冷却到室温。收集所形成的晶体,用MEK/H2O(1∶4,
2×25mL)、H2O(1×25mL)洗涤,然后在空气中干燥过夜,得到呈白色结晶固体状的化合物
298·HCl·H2O(7.6g)。
[0304] 纯度
[0305] 使用方法4B通过HPLC和在230nm下进行UV检测来测定溶剂合物的纯度。
[0306] X射线结晶学
[0307] 使用方法4N得到的化合物298·HCl·H2O的代表性X射线晶体结 构呈现在图2中。此确定了单盐酸盐一水合物结构,并与由其它方法形成的溶剂合物的X射线结构一致。 [0308] 化合物298·HCl·H2O的晶体数据和结构精修
[0309]
[0310]
[0311] 溶解度
[0312] 在含水介质(pH 4.0-7.0)和非含水介质中测定化合物298HCl·H2O的溶解度。来自这些研究的数据总结在表2中。
[0313] 表2:化合物298·HCl·H2O的溶解度数据
[0314]
[0315]
[0316] 1溶解度描述遵循USP第28卷(2005年)第9页(凡例(General Notices)章节)中的指导。
[0317] UV分析
[0318] 使用方法4C获得0.1mg/mL化合物298·HCl·H2O溶于MeOH中的溶液的紫外光谱。在这些条件下,溶剂合物在217nm、266nm、272nm和278nm处显示出最大吸收值。 [0319] NMR分析
[0320] 使用方法4D,用Varian Mercury-VX 300MHz获得化合物298·HCl·H2O的1H NMR13 19
谱、C NMR谱和 F NMR谱。具体来说,用以300.080MHz操作并维持在25℃下的光谱仪获
1
得 H NMR(1D和2D)谱。通过将36.1mg化合物298·HCl·H2O溶于3.61mLCD3CN(99.96%
1
D,Aldrich)中来制备样品。所有 H NMR谱中的化学位移参考值由CHD2CN五重峰(δ=
1
1.94ppm)提供。代表性 H NMR谱呈现在图5中。这些光谱数据与化合物298·HCl·H2O的结构完全相符。
[0321] 1H NMR(CD3CN):δ0.48-0.70(m,3H),0.77-0.89(m,1H),1.23(d,m,重 叠,J =7.5Hz,4H),1.47(d,J = 6.1Hz,3H),1.70-1.90(m,2H),2.58-2.78(m,1H),2.96-3.12(s,m, 重 叠,4H),3.12-3.26(m,2H),3.26-3.40(m,2H),3.40-3.55(m,1H),3.72-3.88(m,
1H),4.33(d,J = 8.3Hz,1H),4.46-4.60(m,2H),4.85-4.97(m,1H),6.93-7.08(m,4H),
7.16-7.30(m,2H),7.32-7.43(m,2H),7.51-7.67(br s,br t,重叠,2H),8.38(d,J=9.3Hz,
1H),9.80-10.05(br s,1H)。
[0322] 在以75.46MHz操作并维持在25℃下的光谱仪上获得13C NMR谱。将已经制备用1 13
于 H NMR实验的同一样品用于 C NMR光谱法。化学位移参考值由CD3CN七重峰(δ=
13
1.32ppm)提供。图6显示了化合物298·HCl·H2O的代表性 C NMR谱。
[0323] 13C NMR(CD3CN):δ1.9,5.6,10.1,15.1,18.1,28.9,30.0,32.8,36.4,41.1,49.5,56.7,57.0,61.5,70.3,115.3,115.6(JC-F = 21Hz),123.0,127.9,130.8,132.0(JC-F =
8Hz),133.1,136.0(JC-F=3Hz),154.9,162.4(JC-F=242 Hz),171.4,171.8,172.4。 [0324] 最后,在以282.33MHz操作并维持在25℃下的光谱仪上获得19FNMR谱。正如对于
1
H NMR光谱法所进行来制备样品,例外为添加一滴CCl3F用作参照标准品(δ=0ppm)。如
19
图7中的代表性光谱所示,如对于结构所预期,获得-117.4ppm处的单个 F信号。 [0325] FT-IR分析
[0326] 使用方法4E以溴化钾压片形式获得化合物298·HCl·H2O的傅里叶变换红外-1(FT-IR)吸收光谱。通过求得以4cm 的分辨率所测量的16次扫描的平均值来获得光谱。
FT-IR光谱与结构相符,其中最主要的谱带如表3中所指定,且代表性光谱提供在图8中。 [0327] 表3.化合物298·HCl·H2O的主要FT-IR吸收谱带
[0328]
[0329] 1这表中使用的缩写:ν=伸缩振动模式。νs=对称振动模式。νas=反对称振动模式。δ=弯曲或形变振动模式。
[0330] XRPD分析
[0331] 根据方法4K对化合物298·HCl·H2O进行X射线粉末衍射(XRPD)分析。代表性衍射图显示在图9中。
[0332] 在以下各处获得峰(2θ):7.7、7.9、8.9、9.3、9.5、11.4、11.5、13.3、14.5、15.6、15.9、16.2、16.8、17.2、17.6、17.9、19.7、21.6、22.3、 22.6、23.2、23.9、24.8、25.3、26.2、
26.6、26.9、28.6、29.1、33.0、33.8。
[0333] DSC谱
[0334] 使用方法4L获得化合物298·HCl·H2O的DSC谱,且代表性实施例提供于图10中。
[0335] 吸湿性分析
[0336] 通过静态和动态蒸汽吸附/解吸附(DVS)实验来评估化合物298·HCl·H2O的吸湿性,所述实验在25℃下根据方法4M来进行。由此经由这些DVS研究所评估出的代表性吸湿性曲线图呈现在图11中。
[0337] 在20%到90%相对湿度范围内仅观测到1%重量变化(约0.3H2O)。经由在0%RH下平衡而失去的晶格水(2.6%重量减轻≡0.9H2O)在初始10%RH增加范围内快速收复,因此使一水合物形式复水(3重量%H2O含量)。根据这些结果,化合物298·HCl·H2O基本上不吸湿。另外,根据这一准则在整体结晶物质中不可检测到残余非晶形内含物。 [0338] 通过使化合物298·HCl·H2O在25℃下暴露于80%RH湿度3个月时间来进行静态吸湿性研究。在这一研究期间的任何时间点都没有检测到潮解。在第1周、第1个月、第2个月和第3个月时间点通过以下方法来分析样品:DSC、热重分析和卡尔费歇尔滴定分析法。这些研究还确定了化合物298·HCl·H2O基本上不吸湿。
[0339] 实施例2
[0340] 合成化合物298·HCl·H2O
[0341] 步骤2-1:制备化合物298·HCl·EtOH
[0342] 在25L反应器中,将根据图1中所示制备的化合物298(1.75kg)溶于乙醇(10.5kg)中,然后添加1.5当量氯化氢(3.5L,溶于乙醇中的1.0M),形成盐酸盐。在环境温度下搅拌混合物以使盐酸盐沉淀,然后在0℃下搅拌30分钟。将由此获得的固体过滤并用乙醇洗涤,然后在40℃下真空干燥。将物质(1.3kg,83%产率,98.5%HPLC纯度) 直接用于下一步。
[0343] 步骤2-2:使化合物298·HCl·EtOH重结晶
[0344] 在25L反应器中,将化合物298·HCl EtOH(1.3kg,2.09mol)悬浮在乙醇(8.5L)与水(1.5L)的混合物中。使混合物回流直到溶解并经由0.20μm过滤器趁热过滤。在-20℃下冷却,得到结晶化合物298·HCl·EtOH(1.1kg,84.6%产率,99.2%HPLC纯度),将其原样用于下一步。
[0345] 步骤2-3:形成化合物298·HClH2O并使其结晶
[0346] 在25L反应器中,将化合物298·HCl·EtOH(1.1kg,1.77mol)悬浮在2-丁酮(1.1L)与水(4.4L)的混合物中。使混合物回流直到出现完全溶解。然后将其冷却到室温并在这一温度下维持16小时以使得完全结晶。将产物通过过滤分离,然后用冷水洗涤,得到呈白色晶体状的化合物298·HCl·H2O(868.5g,82.7%产率,99.6%HPLC纯度)。 [0347] 表4:对化合物298·HCl·H2O的代表性制备物的分析
[0348]
[0349] 1根据表1中的测试方法和目标值。
[0350] 2未测试
[0351] 稳定性测试
[0352] 表5.化合物298·HCl·H2O的代表性制备物的稳定性(批料1)
[0353]
[0354] 1相对湿度
[0355] 2使用方法4B以重量计
[0356] 3未测试
[0357] 实施例3
[0358] 制备和纯化298·HCl·H2O
[0359] 步骤3-1:合成化合物298·HCl·EtOH
[0360] 在氮气下向100L玻璃夹套反应器中加入85.8L THF、4.2L二异丙基乙胺(DIPEA)和1.6kg DEPBT。将反应器温度设定为20℃,并经6小时添加溶于THF中的化合物298。在添加后,将溶液在这一温度下搅拌至少36小时。在完成(起始物料≤1%(HPLC面积%))后,将反应器温度调节到40℃并将THF真空浓缩直到残留约20L溶液。将1M碳酸钠(20.7L)加入反应器中,继而将29.7L EtOAc加入反应器中,然后剧烈搅动2小时。停止反应器搅动,并将底部水层从反应器中排出。将有机相依序用5.3L 1M碳酸钠在30分钟内洗涤,然后用8L饱和氯化钠水溶液洗涤。将反应器温度调节到40℃并将含有EtOAc的有机溶液真空浓缩直到残留约22L溶液。将EtOH(44L)加入反应器中 并在40℃下蒸发反应器内容物直到残留约33L溶液。添加乙醇以使最终体积达到44L。将反应器温度调节到15℃到20℃,并添加3.4L约2.5M氯化氢的乙醇溶液以使pH值达到1.76(目标范围pH 1.5到2.0)。冷却到
0℃±5℃后,出现沉淀过夜。通过过滤收集固体并在25℃下真空干燥,得到2.2kg(67.6%产率)分离的化合物298·HCl·EtOH(98.8%纯度(HPLC面积%))。
[0361] 步骤3-2:使化合物298·HCl EtOH重结晶
[0362] 向100L玻璃夹套反应器中加入19.5L乙醇水溶液(EtOH/H2O85∶15,使用注射用水)和2.2kg化合物298·HCl·EtOH。将反应器加热到75℃-85℃,并将溶液经由配备有0.2μm过滤器(Whatman,货号:6715-7502)的转移管线趁热转移。用EtOH清洁反应器,并使已过滤的溶液回到反应器中。然后将反应器温度调节到20℃并在这一温度下将内容物搅动6小时。将反应器进一步冷却到-15℃±5℃,并将所得浆料搅拌2小时。通过过滤收集固体,用乙醇(冷却到-13.9℃)洗涤并在25℃下真空干燥,得到1.843kg(84%产率)结晶化合物298·HCl·EtOH(99.7%纯度(HPLC面积%))。
[0363] 步骤3-3:使化合物298·HCl H2O结晶
[0364] 向22L玻璃夹套反应器中加入9.2L 2-丁酮水溶液(MEK/注射用水,1∶4)和1.843kg化合物298·HCl·EtOH。将反应器加热到75℃-85℃。缓慢冷却并在20℃±5℃下搅拌,之后通过过滤收集固体化合物298·HCl·H2O,用注射用水(预先冷却到4℃)洗涤并在氮气下于25℃下干燥。此得到1.483kg(84%产率)结晶化合物298·HCl·H2O(99.9%HPLC纯度)。
[0365] 13C NMR(DMSO-d6):δ1.18,4.55,9.53,14.58,17.50,27.54,28.73,31.69,35.81,48.75,54.18,55.69,59.83,69.38,112.81,114.65(JC-F 50.1Hz),120.98,126.76,129.44,
130.94(JC-F 19.8Hz),134.46(JC-F 7.2Hz),154.51,160.88(JC-F 577Hz),169.66,170.37,
171.12。
[0366] 表6:化合物298·HCl·H2O的代表性物理化学特征
[0367]
[0368] 表7:对化合物298·HCl H2O的代表性制备物的分析
[0369]
[0370] 1根据表1中的测试方法和目标值。
[0371] 2未测试
[0372] 稳定性测试
[0373] 表8.化合物298·HCl·H2O的代表性制备物的稳定性
[0374]
[0375]
[0376] 1相对湿度
[0377] 2方法4B
[0378] 3以重量计
[0379] 4未测试
[0380] 5方法4G
[0381] 呈白色粉末状的外观在6个月时间内保持不变。
[0382] 样品在两种储存条件下6个月后的XRPD分析仍与标准图一致(参见图9)。 [0383] 实施例4
[0384] 制备化合物298·HCl·2H2O
[0385] 将非晶形化合物298·HCl悬浮在使用巴斯德(Pasteur)吸管逐滴添加的热H2O和甲基乙基酮(MEK)中直到观测到完全溶解。使用油浴(90℃->25℃)将溶液缓慢地冷却到室温,之后在4℃下放置过夜。在将温度维持在203K±2K下收集这些晶体并快速获取X射线结构。此结构确定了化合物298·HCl·2H2O盐的种类并提供为图3。在室温下静置后,此溶剂合物自发地失去了一个水分子而形成化合物298·HCl·H2O。
[0386] 化合物298·HCl·2H2O的晶体数据和结构精修
[0387]
[0388]
[0389]
[0390] 实施例5
[0391] 制备化合物298·HCl·EtOH
[0392] 通过以下制备溶剂合物:将100mg非晶形化合物298·HCl溶于热H2O/EtOH(1∶1)中,然后将所得溶液缓慢地冷却到室温。将溶液在4℃下放置过夜。过滤化合物298·HCl·EtOH的晶体并在室温下真空干燥过夜(产率85%)。
[0393] 晶体的X射线结构显示为图4。最终的绝对结构由反常色散效应测定,显示了实际和反向结构的孪晶。C24′和C25′组在两个几何位点上是无序的,此组的最终精修占有率是54.5%而C24和C25的占有率是45.5%。为清晰起见,仅显示主要位点。乙醇分子在两个几何位点上也是无序的,出于同样的原因,仅显示了55.8%占有率的精修主要位点。用相等的热和键限制(EADP)对C24、C24′、C25和C25′原子进行精修,用相似的热和键限制(SIMU,DELU)对乙醇分子进行精修。
[0394] 当最初将化合物298溶于浓HCl/EtOH(1∶1)中时,形成相似的晶体。
[0395] 化合物298·HCl·EtOH的晶体数据和结构精修
[0396]
[0397]
[0398] 实施例6
[0399] 制备化合物298的盐并测定其溶解度
[0400] 向20mg(37.2μmol,1.0当量)化合物298中添加0.5mL酸水溶液(40.9μmol,1.1当量)。将所得混合物在回旋振荡器上搅动72小时。然后测量溶液的pH值并通过HPLC-CLND分析测定已溶解的盐的量。表9总结了由此所测定的14种化合物298盐的溶解度结果。
[0401] 表9.代表性化合物298盐的溶解度
[0402]酸 化合物 第72小时的pH值 盐溶解度
298盐 (mg/mL)1
马来酸 马来酸盐 2.6 12.4
富马酸 富马酸盐 3.6 19.0
琥珀酸 琥珀酸盐 4.2 36.4
丙二酸 丙二酸盐 3.4 35.8
L-苹果酸 苹果酸盐 4.2 36.0
柠檬酸 柠檬酸盐 3.6 30.4
D-酒石酸 酒石酸盐 3.5 4.4
L-乳酸 乳酸盐 4.6 37.0
甲酸 甲酸盐 3.8 35.8
甲磺酸 甲磺酸盐 2.1 14.8
乙磺酸 乙磺酸盐 1.8 36.4
硫酸 硫酸盐 2.0 6.2
盐酸 盐酸盐 4.8 17.2
磷酸 磷酸盐 3.3 35.0
[0403]1
[0404] 通过HPLC-CLND定量来测定
[0405] 实施例7
[0406] 合成化合物298·琥珀酸盐
[0407] 向溶于10mL丙酮中的500mg化合物298游离碱中添加2mL(1.1当量)琥珀酸水溶液(通过将301mg琥珀酸溶于5mL水中来制备)。将溶液搅动10分钟,然后在真空中蒸发丙酮(旋转蒸发器)。用EtOAc(3×5mL)萃取所得水溶液。将合并的有机相经MgSO4干燥,过滤并在真空中蒸发滤液。将由此获得的残余固体干燥过夜(真空)。将盐溶于最少量的EtOAc中,然后添加庚烷以使白色固体沉淀。将固体用庚烷研磨,通过过滤收集并干1 1
燥,得到455mg化合物298·琥珀酸盐。HNMR与对于此盐所预期的 H NMR一致(包括约
2.5ppm处的单峰)。
[0408] 以100mg化合物298游离碱为起始物重复上述工序,得到85mg琥珀酸盐。以3.0g化合物298为起始物重复工序,得到基本上定量产率的化合物298·琥珀酸盐。
[0409] 通过以下得到结晶化合物298·琥珀酸盐:将50mg非晶形物质溶 于5mL Et2O中,然后逐滴添加庚烷直到观测到有些混浊,但混浊消失。将混合物在室温下密封储存,在约7天后得到298·琥珀酸盐的长针状结晶。或者,将100mg非晶形物质溶于13.5mL-15mL Et2O中,加热到40℃℃(油浴),然后逐滴添加1.5mL-2.5mL庚烷。将混合物冷却到室温,然后储存在室温下。获得大正方形透明晶体。在其它的实验中,需要在-20℃下冷却或缓慢蒸发Et2O以实现结晶。
[0410] 熔点:可能在80℃-90℃下转变,在155℃-158℃下分解。
[0411] 实施例8
[0412] 合成化合物298·丙二酸盐
[0413] 向溶于2mL丙酮中的100mg化合物298游离碱中添加0.4mL(1.1当量)丙二酸水溶液(通过将269mg丙二酸溶于5mL水中来制备)。将溶液搅动10分钟,然后在真空中蒸发丙酮(旋转蒸发器)。用EtOAc(3×5mL)萃取所得水溶液。将合并的有机相经MgSO4干燥,过滤并在真空中蒸发滤液直到残留约2mL-3mL EtOAc,然后添加庚烷以使白色固体沉淀。在真空中除去溶剂,得到85mg化合物298·丙二酸盐。如果固体变色,那么将其溶于最1
少量的EtOAc中,然后添加庚烷以使盐沉淀,用庚烷研磨并通过过滤收集。H NMR与对于此
1
盐所预期的 HNMR一致(包括约3.05ppm处的单峰)。将盐干燥过夜(真空泵)。
[0414] 以3.0g化合物298为起始物重复工序,得到基本上定量产率的化合物298·丙二酸盐。
[0415] 熔点:在90℃-110℃下转变,在165℃下分解。
[0416] 实施例9
[0417] 合成化合物298·乙磺酸盐
[0418] 向溶于2mL丙酮中的100mg化合物298游离碱中添加0.4mL(1.1当量)乙磺酸水溶液(通过将0.42mL乙磺酸溶于10mL水中来制备)。将溶液搅动10分钟,然后在真空中蒸发丙酮(旋转蒸发器)。用EtOAc(3×5mL)萃取所得水溶液。将合并的有机相经MgSO4干燥, 过滤并在真空中蒸发滤液直到残留约2mL-3mL EtOAc,此时白色固体沉淀。将盐干1 1
燥过夜(真空泵),得到75mg化合物298·乙磺酸盐。 H NMR与对于此盐所预期的 H NMR一致[包括以下特征峰:1.2ppm(单峰)、2.1ppm(宽单峰)、8.2ppm(多重峰)]。
[0419] 以3.0g化合物298为起始物重复工序,得到3.60g(定量产率)化合物298·乙磺酸盐。
[0420] 熔点:在190℃-195℃下分解。
[0421] 实施例10
[0422] 测定化合物298的盐和溶剂合物的溶解度稳定性
[0423] 向溶于水中的5%右旋糖(D5W)中添加5mg和20mg各种化合物298盐和溶剂合物,并用缓冲液将pH值确定在4、5或6。将样品在室温下维持3周,其中定期观测并测定溶解度(HPLC)。结果呈现在表10中。
[0424] 表10.化合物298盐和溶剂合物的溶解度稳定性
[0425]样品 在pH 5下的溶解度(mg/mL)
化合物298·HCl·H2O 5
化合物298·HCl·EtOH 8
化合物298·HCl非晶形物 7
化合物298·琥珀酸盐 15-20
[0426] 对于所有样品来说,溶解度在三周时间内保持稳定,或甚至略有增加。没有观测到沉淀。
[0427] 实施例11
[0428] 制备298·HCl H2O的代表性药物组合物
[0429] 可以利用以下工序制备可用作药物的化合物298·HCl H2O制剂。批料量可以变化;描述用于30L批料的工序。
[0430] 1.将约25.0L无菌注射用水加入配衡的40L玻璃酸瓶中,同时混合。
[0431] 2.将1363.68g无水右旋糖加入玻璃酸瓶中并混合直到溶解。
[0432] 3.将17.04mL乙酸加入来自步骤2的溶液中并混合至少5分 钟。
[0433] 4.记录制剂的pH值。
[0434] 5.用1NNaOH(水)溶液将制剂的pH值调节到pH 4.5±0.2。
[0435] 6.在达到此pH值后,通过定期量测来监测溶液的pH值直到其稳定。
[0436] 7.在pH值稳定后,将33.72g化合物298·HCl·H2O加入玻璃酸瓶中。
[0437] 8.搅动直到观测到完全溶解(约1小时)。
[0438] 9.添加无菌注射用水以达到30.41kg的最终批料重量(密度是1.0136g/mL)。 [0439] 10.将制剂经由0.45μmDurapore Millipak预过滤器和0.22μmDurapore Millipak过滤器无菌过滤。
[0440] 11.进行制剂外观和pH值的处理中测试。
[0441] 12.用制剂无菌填充10mL玻璃小瓶,达到9.37g±0.19g的目标重量(约9.5mL)。 [0442] 13.塞住并密封小瓶,然后检查每一者。
[0443] 可以如表11中所概述来分析所得药物组合物,在所述表11中,显示了预期的结果。
[0444] 表11.化合物298·HCl·H2O药物组合物的代表性分析测试
[0445]
[0446]
[0447] 对使用实施例11所制备的化合物298·HCl·H2O的代表性药物组合物的分析列在表12中。药物组合物的稳定性呈现在表13中。
[0448] 表12.对实施例11的药物组合物的分析
[0449]
[0450] a报道超过0.1%的各单个降解物和降解物总和的结果。
[0451] b没有观测到超过临限值0.1%的降解物。仅仅观测到早已存在于活性成分中的杂质。通过HPLC-UV(λ=230nm)所指定的纯度是99.6%。
[0452] 表13.实施例11的代表性药物组合物的稳定性
[0453]
[0454]
[0455]
[0456]1
[0457] 方法4P2
[0458] 方法4Q3
[0459] 方法4Sa
[0460] 使用标准电极测量,所有其它测量值用微电极测量。b
[0461] 未测试c
[0462] 相对湿度
[0463] 所研究的所有样品呈澄清无色溶液的外观(方法4O)在整个24个月时间内保持不变。
[0464] 在第6个月、第12个月、第18个月、第24个月时的测试显示,所测试的所有样品保持无菌(方法4U)。
[0465] 条件3的测试仅仅进行6个月。
[0466] 药代动力学分析
[0467] 已经报道了在对健康人类志愿者静脉内施用单个和多个剂量的实施例11药物组合物后的药代动力学分析。(Lasseter,K.C.;Shaughnessy,L.;Cummings,D.等,J. Clin.Pharmacol.2008,48,193-202。)
[0468] 实施例12
[0469] 制备298·HCl H2O的代表性药物组合物
[0470] 可以利用以下工序制备可用作医药产品的298·HCl·H2O制剂,以下工序是实施例11工序的变体。批料量可以变化;描述用于约50L批料的工序。
[0471] 1.将约45.0L无菌注射用水(WFI)加入配衡的干净50L玻璃酸瓶中,同时混合。 [0472] 2.将2272.8g无水右旋糖加入玻璃酸瓶中并混合直到溶解。
[0473] 3.将28.40mL冰乙酸加入来自步骤2的溶液中并混合至少5分钟。
[0474] 4.记录制剂的pH值。
[0475] 5.用1N NaOH(水)溶液(需要约210mL)将制剂的pH值调节到pH4.5±0.2。
[0476] 6.在达到此pH值后,通过定期量测来监测溶液的pH值直到其稳定。
[0477] 7.在pH值稳定后,将56.20g化合物298·HCl·H2O加入玻璃酸瓶中。
[0478] 8.搅动直到观测到完全溶解(约1小时到2小时)。
[0479] 9.添加无菌WFI以达到50.68kg的最终批料重量(密度是1.0136g/mL)。
[0480] 10.将制剂经由两个0.22μm Durapore Millipak过滤器无菌过滤。
[0481] 11.进行制剂外观和pH值的处理中测试。
[0482] 12.用含有298·HCl一水合物药物产品的制剂无菌填充10mL玻璃小瓶,达到9.63g±0.19g的目标重量。
[0483] 13.塞住并密封小瓶,然后检查每一者。
[0484] 对使用实施例12所制备的化合物298·HCl·H2O的代表性药物组合物的分析列在表14中。药物组合物的两个单独制备物的稳定性呈现于表15和表16中。
[0485] 表14.对实施例12的药物组合物的代表性分析
[0486]
[0487]
[0488] a报道超过0.1%的各单个降解物和降解物总和的结果。
[0489] b没有观测到超过临限值0.1%的降解物。仅仅观测到早已存在于活性成分中的杂质。通过HPLC-UV(λ=230nm)所指定的纯度是99.5%。
[0490] 表15.实施例12的代表性药物组合物的稳定性(批料1)
[0491]
[0492]1
[0493] 方法4P2
[0494] 方法4Q3
[0495] 方法4Sa
[0496] 使用标准电极测量,所有其它测量值用微电极测量。b
[0497] 未测试c
[0498] 相对湿度
[0499] 所研究的所有样品呈澄清无色溶液的外观(方法4O)在整个24个月时间内保持不变。
[0500] 在第6个月、第12个月、第18个月、第24个月时的测试显示,所测试的所有样品保持无菌(方法4U)。仅在第3个月时进行的条件3的测试显示,样品仍无菌。
[0501] 条件3的测试仅仅进行6个月。
[0502] 表16.实施例12的代表性药物组合物的稳定性(批料2)
[0503]
[0504] 1方法4P
[0505] 2方法4Q
[0506] 3方法4S
[0507] a使用标准电极测量,所有其它测量值用微电极测量。
[0508] b未测试
[0509] c相对湿度
[0510] 所研究的所有样品呈澄清无色溶液的外观(方法4O)在整个24个月时间内保持不变。
[0511] 在第6个月、第12个月、第18个月、第24个月时的测试显示,所测试的所有样品保持无菌(方法4U)。
[0512] 实施例13
[0513] 制备化合物298·HCl·H2O的代表性药物组合物
[0514] 下文描述了适用于药物的化合物298·HCl·H2O组合物的另一制备物。在所概述的逐步操作之前,通常适当地将不锈槽和槽之间的连接管道以及槽与填充机之间的连接管道灭菌。
[0515] 1.在25℃±5℃的温度下将等于约85%的最终目标重量的注射用水(WFI)装入装备有磁性搅拌器的200L不锈钢混配槽中。启动混合器以在后续添加期间进行连续混合。 [0516] 2.向其中添加乙酸(100%)并测量pH值。
[0517] 3.然后使用1N NaOH将pH值调节到4.5±0.2。
[0518] 4.当达到这一pH值时,在连续混合下,添加所需的全部量的右旋糖(无水)。 [0519] 5.在右旋糖完全溶解后,添加化合物298·HCl·H2O并将混合物搅动1小时。必要时,将混合进行更久以确保大环完全溶解,之后继续。
[0520] 6.在完全溶解后,添加剩余量的WFI。
[0521] 7.使用氮气压力将溶液经由灭菌Pall 0.22μm筒式过滤器(例如产品号:MCY4440DFLPH4)预过滤。(请注意,在使用之前和之后,用WFI将所有溶液过滤器润湿并使用适当方法(诸如泡点测试或前进流测试)测试其完整性。)
[0522] 8.可以将溶液储存在氮气下直到准备用于填充到适当容器(诸如小瓶)中。 [0523] 9.对于填充,将已预过滤的溶液通过经由两个0.22μm Pall过滤器(例如产品号:KA3DFLP1)加压过滤来灭菌并放入填充贮器中。
[0524] 10.为用药物组合物填充小瓶,使用Bosch FLC 3080填充/加塞机(或类似机器)。例如,在10mL玻璃小瓶的情况下,准备10.5mL目标填充物体积。
[0525] 虽然已使用实施例13的工序制备了批料量为约170L的化合物298·HCl·H2O药物组合物(2mg/mL),但是同样可以用所述方法制备更小或更大的批料量。用于此批料的组分的量显示在表17中。此代表 性药物组合物(2mg/mL)的测试结果呈现在表18中,且代表性药物组合物的稳定性呈现在表19中。
[0526] 表17.用于实施例13的代表性药物组合物的制备物的组分的量
[0527]组分 量
298·HCl·H2O 340.0g
右旋糖(无水) 8.16kg
冰乙酸 0.107L
氢氧化钠(用于制备1.0N溶液) 40g
注射用水 164.36L
[0528] 表18.对实施例13的药物组合物的代表性分析
[0529]
[0530] 表19.实施例13的代表性药物组合物的稳定性
[0531]
[0532]1
[0533] 方法4P2
[0534] 方法4Q3
[0535] 方法4S4
[0536] 未测试a
[0537] 使用标准电极测量,所有其它测量值用微电极测量。b
[0538] 相对湿度
[0539] 所研究的所有样品呈澄清无色溶液的外观(方法4O)在整个12个月时间内保持不变。
[0540] 在第6个月和第12个月时的条件1测试显示,所测试的所有样品保持无菌(方法4U)。在第6个月时的条件2测试显示,样品仍无菌。
[0541] 条件2的测试仅仅进行6个月。
[0542] 实施例14
[0543] 用于皮下施用的化合物298·HCl·H2O的代表性药物组合物的制备和药代动力学(PK)
[0544] 以0.4mg/mL(以化合物298游离碱等效物计)的浓度制备化合物 298·HCl·H2O在乙酸盐缓冲液和溶于水中的5%右旋糖(D5W)中的水溶液,其最终的pH值是4.5并指定为制剂A。其通过以下来制备:用6mL D5W稀释4mL溶于10mM乙酸盐在D5W中的缓冲液中的1mg/mL(以化合物298游离碱计)实施例11的组合物。
[0545] 通过以下来制备各种浓度的化合物298·HCl·H2O的12%N-甲基吡咯烷酮(NMP)和0.25%苯甲醇的D5W溶液:将化合物298·HCl·H2O溶于NMP中并搅拌约5分钟,继而添加苯甲醇并随后添加D5W。所得制剂B-1、B-2和B-3为0.4mg/mL、1.6mg/mL和6.4mg/mL,分别对应于0.36mg/mL、1.45mg/mL和5.81mg/mL化合物298游离碱(MW=538.65g/mol)。 [0546] 以5mL/kg的给药体积对雄性斯泼累格·多雷大鼠(Sprague-Dawley rat)皮下(sc)施用制剂A、B-1、B-2和B-3。化合物施用的细节呈现在表20中。
[0547] 表20.化合物298·HCl·H2O的代表性药物组合物的施用细节
[0548]
[0549] 附注:剂量水平是以化合物298游离碱的mg/kg数计。
[0550] 采血方案
[0551] 在以下时间收集血液样本(约300μL):给药前、在皮下施用后第5分钟、第15分钟、第30分钟、第60分钟、第120分钟、第240分钟、第360分钟和第480分钟。经由JVC将血液收集到容纳乙二胺四乙酸钠(NaEDTA)的试管中并放在冰上直到离心。在将温度维持在4℃同时,将样本以13,000rpm离心5分钟。分离血浆并在分析之前冷冻储存在干冰上。通过LC-MS-MS测定每一取样时间点的大鼠血浆样本中的化合物298浓度。
[0552] 计算
[0553] 使用非隔室模型化(血管外输入模型)和WinNonlin软件(版本5.2,Pharsight)计算各动物的药代动力学(PK)参数。对于各动物和给药组来说,计算半衰期(t1/2)、时间零点到最后的可定量点(AUC0-t)和时间零点到无限的时间(AUC0-∞)的浓度-时间曲线下面积并将所观测到的Cmax和Tmax制成表格。在皮下施用2mg/kg的化合物298后,对于制剂A所观测到的平均Cmax是约1.6μg/mL(范围是1.2μg/mL-1.8μg/mL)且对于制剂B所观测到的平均Cmax是1.5μg/mL(范围是1.3μg/mL-1.7μg/mL)。在7mg/kg或29mg/kg给药后,在制剂B的较高剂量的化合物298·HCl·H2O下所观测到的平均Cmax分别是约2.6μg/mL(范围是2.1μg/mL-2.9μg/mL)和3.3μg/mL(范围是2.8μg/mL-3.7μg/mL)。在皮下施用后,Cmax的增加小于与剂量成比例的增加,或许是因为从皮下隔室的吸收具有速率限制性。然而,在施用药物后,血浆水平长时间维持在高并稳定的水平,表示在皮下施用化合物后血浆暴露较高并且持续。计算终末消除速率常数以获得外推的AUC0-∞值。在此研究中,AUC0-∞与剂量成比例地增加,指示在所测试的剂量范围内从皮下隔室的吸收为线性吸收。对于这些代表性药物组合物测定的PK参数总结在表21中。
[0554] 表21.在对大鼠皮下施用后化合物298·HCl·H2O的代表性药物组合物的药代动力学参数
[0555]
[0556]
[0557]
[0558] 1S.D.=标准偏差
[0559] 上文是对本发明的说明,而不应理解为对本发明进行限制。本发明由以下权利要求及其中包括的等效物限定。
QQ群二维码
意见反馈