AKT活性抑制剂

本发明涉及取代的萘啶化合物，所述化合物为一种或多种Akt丝氨 酸/苏氨酸激酶(还称为PKB，在下文中称为“Akt”)同工酶的活性的抑制 剂。本发明还涉及含有所述化合物的药物组合物以及使用本发明化合物 治疗癌症的方法。

细胞凋亡(程序性细胞死亡)在胚胎发育，以及在例如变性性神经元 疾病、心血管疾病和癌症等多种疾病的发病机理中扮演重要角色。近期 的研究导致了对参与程序性细胞死亡的调节或执行的各种促凋亡基因 产物和抗凋亡基因产物的确认。抗凋亡基因例如Bcl2或Bcl-xL的表达， 抑制被各种刺激诱导的凋亡性细胞死亡。另一方面，促凋亡基因例如 Bax或Bad的表达会导致程序性细胞死亡(Adams等，Science，281： 1322-1326(1998))。程序性细胞死亡的执行是由与胱天蛋白酶-1相关的 蛋白酶介导的，包括胱天蛋白酶-3、胱天蛋白酶-7、胱天蛋白酶-8和胱 天蛋白酶-9等(Thornberry等，Science，281：1312-1316(1998))。

磷脂酰肌醇3’-OH激酶(PI3K)/Akt途径对调节细胞存活/细胞死亡显 得很重要(Kulik等，Mol.Cell.Biol.17：1595-1606(1997)；Franke等， Cell，88：435-437(1997)；Kauffmann-Zeh等，Nature 385：544-548(1997)； Hemmings，Science，275：628-630(1997)；Dudek等，Science，275：661-665 (1997))。存活因子，例如血小板衍生生长因子(PDGF)、神经生长因子 (NGF)和胰岛素样生长因子-1(IGF-1)，通过诱导PI3K的活性，促进各种 条件下细胞的存活(Kulik等，1997，Hemmings 1997)。活化的PI3K导致 磷脂酰肌醇(3，4，5)-三磷酸(PtdIns(3，4，5)-P3)产生，磷脂酰肌醇(3，4，5)-三磷 酸继而与含有血小板白细胞C激酶底物(pleckstrin)同系(PH)结构域的丝 氨酸/苏氨酸激酶Akt结合，并促进其活化(Franke等，Cell，81：727-736 (1995)；Hemmings Science，277：534(1997)；Downward，Curr.Opin.Cell Biol.10：262-267(1998)；Alessi等，EMBO J.15：6541-6551(1996))。 PI3K特异性抑制剂或显性失活Akt突变体破坏了这些生长因子或细胞 因子促进存活的活性。早已披露PI3K抑制剂(LY294002或渥曼青霉素) 通过上游激酶阻断Akt的活化。另外，在细胞正常经历凋亡性细胞死亡 的条件下，组成型活性PI3K或Akt突变体的导入可促进细胞存活(Kulik 等，1997，Dudek等，1997)。

已鉴别出第二信使调节的丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶Akt亚家族的3个 成员，并分别称之为Akt1/PKBα、Akt2/PKBβ和Akt3/PKBγ(在下文称为 “Akt1”、“Akt2”和“Akt3”)。所述同工酶是同源的，特别是在编码催化结 构域的区域。Akt被在响应PI3K信号时发生的磷酸化作用激活。PI3K 使膜肌醇磷脂磷酸化，产生第二信使磷脂酰-肌醇3，4，5-三磷酸和磷脂酰 肌醇3，4-二磷酸，磷脂酰-肌醇3，4，5-三磷酸和磷脂酰肌醇3，4-二磷酸结 合到Akt的PH结构域上。Akt激活的最新模型提示，通过3’-磷酸化磷 酸肌醇将酶募集到膜上，并在膜上通过上游激酶，产生Akt调节位点的 磷酸化作用(B.A.Hemmings，Science 275：628-630(1997)；B.A. Hemmings，Science 276：534(1997)；J.Downward，Science 279：673-674 (1998))。

Akt1磷酸化发生在两个调节位点，即催化结构域活化环上的Thr308 和靠近羧基端的Ser473(D.R.Alessi等，EMBO J.15：6541-6551(1996) 和R.Meier等，J.Biol.Chem.272：30491-30497(1997))。同等的调节磷 酸化位点也发生在Akt2和Akt3上。在活化环位点使Akt磷酸化的上游 激酶被克隆，被称为3’-磷酸肌醇依赖性蛋白激酶1(PDK1)。PDK1不仅 使Akt磷酸化，而且可使p70核糖体S6激酶、p90RSK、血清及糖皮质 激素调节的激酶(SGK)和蛋白激酶C磷酸化。上游激酶对近羧基端的Akt 调节位点的磷酸化尚未得到证实，但近期的报告提示该酶对于整联蛋白 连接的激酶(ILK-1)、丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶或自身磷酸化的作用。

对人类肿瘤中Akt水平的分析表明，在为数众多的卵巢癌(J.Q. Cheng等，Proc.Natl.Acad.Sci.U.S.A.89：9267-9271(1992))和胰腺癌(J. Q.Cheng等，Proc.Natl.Acad.Sci.U.S.A.93：3636-3641(1996))中，Akt2 过量表达。同样还发现在乳腺癌细胞系和前列腺癌细胞系中，Akt3过量 表达(Nakatani等，J.Biol.Chem.274：21528-21532(1999))。

肿瘤抑制剂PTEN，一种特异性去除PtdIns(3，4，5)-P3中3’磷酸的蛋 白质和脂质磷酸酶，是PI3K/Akt途径的负调节者(Li等，Science 275： 1943-1947(1997)，Stambolic等，Cell 95：29-39(1998)，Sun等，Proc.Natl. Acad.Sci.U.S.A.96：6199-6204(1999))。PTEN的种系突变是造成人类 癌症综合征的原因，例如Cowden病(Liaw等，Nature Genetics 16：64- 67(1997))。很大比例的人类肿瘤中PTEN缺失，无功能性PTEN的肿瘤 细胞系显示活化Akt的水平升高(Li等，出处同上，Guldberg等，Cancer Research 57：3660-3663(1997)，Risinger等，Cancer Research 57： 4736-4738(1997))。

这些观察结果表明，在肿瘤发生中，PI3K/Akt途径在调节细胞存活 或细胞凋亡中扮演重要角色。

通过使用例如LY294002和渥曼青霉素等抑制剂抑制PI3K，可获得 对Akt活化和Akt活性的抑制。但是，PI3K抑制可能不加区别地影响不 仅所有3个Akt同工酶，而且影响依赖于PdtIns(3，4，5)-P3的含有其它PH 结构域的信号分子，例如酪氨酸激酶的Tec家族。另外，曾有报道披露 Akt可被与PI3K无关的生长信号激活。

或者，可通过阻断上游激酶PDK1的活性抑制Akt活性。尚无特异 性PDK1抑制剂的报道。再者，抑制PDK1可能导致抑制多个其活性依 赖于PDK1的蛋白激酶，例如，非典型PKC同工酶、SGK和S6激酶 (Williams等，Curr.Biol.10：439-448(2000))。

本发明的一个目的是提供新的化合物，该化合物为Akt抑制剂。

本发明的另一个目的是提供药物组合物，该组合物包含作为Akt抑 制剂的新化合物。

本发明的又一个目的是提供治疗癌症的方法，该方法包括给予这样 的Akt活性抑制剂。

发明概述

本发明提供了抑制Akt活性的取代的萘啶化合物。具体地讲，所公 开的化合物选择性地抑制一种或两种Akt同工酶。本发明也提供含有所 述抑制性化合物的组合物，以及通过给予需要治疗癌症的患者所述化合 物以抑制Akt活性的方法。

发明详述

本发明的化合物可用于抑制丝氨酸/苏氨酸激酶Akt的活性。在本发 明的第一个实施方案中，Akt活性的抑制剂是由下式A表示的化合物或 其可药用盐或立体异构体：

其中：

E、F、G、H、I、J、K、L和M独立地选自：C或N，其中E、F、 G、H、I、J、K、L和M各自任选被R1取代；

a为0或1；b为0或1；m为0、1或2；p独立地为0、1、2、3、 4或5；

环Z选自：(C3-C8)环烷基、芳基、杂芳基和杂环基；

R1选自：氧代、(C＝O)aOb(C1-C10)烷基、(C＝O)aOb-芳基、 (C＝O)aOb(C2-C10)烯基、(C＝O)aOb(C2-C10)炔基、CO2H、卤基、OH、Ob(C1-C6) 全氟烷基、(C＝O)aNR7R8、CN、(C＝O)aOb(C3-C8)环烷基、S(O)mNR7R8、 SH、S(O)m-(C1-C10)烷基和(C＝O)aOb-杂环基，所述烷基、芳基、烯基、 炔基、环烷基和杂环基任选被一个或多个选自R6的取代基取代；

R2独立地选自：氧代、(C＝O)aOb(C1-C10)烷基、(C＝O)aOb-芳基、 (C＝O)aOb(C2-C10)烯基、(C＝O)aOb(C2-C10)炔基、CO2H、卤基、OH、Ob(C1-C6) 全氟烷基、(C＝O)aNR7R8、CN、(C＝O)aOb(C3-C8)环烷基、SH、S(O)mNR7R8、 S(O)m-(C1-C10)烷基和(C＝O)aOb-杂环基，所述烷基、芳基、烯基、炔基、 环烷基和杂环基任选被一个或多个选自R6的取代基取代；

R3独立地选自：氧代、(C＝O)aOb(C1-C10)烷基、(C＝O)aOb-芳基、 (C＝O)aOb(C2-C10)烯基、(C＝O)aOb(C2-C10)炔基、CO2H、卤基、OH、Ob(C1-C6) 全氟烷基、(C＝O)aNR7R8、CN、(C＝O)aOb(C3-C8)环烷基、S(O)mNR7R8、 SH、S(O)m-(C1-C10)烷基、(C1-C6)烷基-杂环基和(C＝O)aOb-杂环基，所述 烷基、芳基、烯基、炔基、环烷基和杂环基任选被一个或多个选自R6 的取代基取代；

R6为：(C＝O)aObC1-C10烷基、(C＝O)aOb芳基、C2-C10烯基、C2-C10 炔基、(C＝O)aOb杂环基、CO2H、卤基、CN、OH、ObC1-C6全氟烷基、 Oa(C＝O)bNR7R8、氧代、CHO、(N＝O)R7R8、S(O)mNR7R8、SH、S(O)m(C1-C10) 烷基或(C＝O)aObC3-C8环烷基，所述烷基、芳基、烯基、炔基、杂环基 和环烷基任选被一个或多个选自R6a的取代基取代；

R6a选自：(C＝O)aOb(C1-C10)烷基、Oa(C1-C3)全氟烷基、(C0-C6)亚烷 基-S(O)mRa、SH、氧代、OH、卤基、CN、(C2-C10)烯基、(C2-C10)炔基、 (C3-C6)环烷基、(C0-C6)亚烷基-芳基、(C0-C6)亚烷基-杂环基、(C0-C6)亚 烷基-N(Rb)2、C(O)Ra、(C0-C6)亚烷基-CO2Ra、C(O)H和(C0-C6)亚烷基- CO2H，所述烷基、烯基、炔基、环烷基、芳基和杂环基任选被最多三 个选自Rb、OH、(C1-C6)烷氧基、卤素、CO2H、CN、Oa(C＝O)b(C1-C6) 烷基、氧代和N(Rb)2的取代基取代；

R7和R8独立地选自：H、(C＝O)aOb(C1-C10)烷基、(C＝O)aOb(C3-C8) 环烷基、(C＝O)aOb-芳基、(C＝O)aOb-杂环基、(C2-C10)烯基、(C2-C10)炔基、 SH、SO2Ra和(C＝O)aNRb2，所述烷基、环烷基、芳基、杂环基、烯基和 炔基任选被一个或多个选自R6a的取代基取代，或者R7和R8可与其所 连接的氮一起形成每个环为3-7元环且除了含有所述氮之外任选含有一 个或两个另外的选自N、O和S的杂原子的单环或双环杂环，所述单环 或双环杂环任选被一个或多个选自R6a的取代基取代；

Ra为(C1-C6)烷基、(C3-C6)环烷基、芳基或杂环基；和

Rb独立地为：H、(C1-C6)烷基、芳基、杂环基、(C3-C6)环烷基、 (C＝O)aOb(C1-C6)烷基或S(O)mRa。

在本发明的第二个实施方案中，Akt活性的抑制剂是由下式B表示 的化合物或其可药用盐或立体异构体：

其中

选自：

R1选自：H、氧代、(C＝O)aOb(C1-C10)烷基、(C＝O)aOb-芳基、 (C＝O)aOb(C2-C10)烯基、(C＝O)aOb(C2-C10)炔基、CO2H、卤基、OH、Ob(C1-C6) 全氟烷基、(C＝O)aNR7R8、CN、(C＝O)aOb(C3-C8)环烷基、S(O)mNR7R8、 SH、S(O)m-(C1-C10)烷基和(C＝O)aOb-杂环基，所述烷基、芳基、烯基、 炔基、环烷基和杂环基任选被一个或多个选自R6的取代基取代；

所有其它取代基和变量如第一个实施方案中所定义。

在本发明的第三个实施方案中，Akt活性的抑制剂是由下式C表示 的化合物或其可药用盐或立体异构体：

其中：

q为0、1、2、3或4；r为0、1、2、3、4或5；t为2、3、4、5 或6；

Q独立地选自：氧代、(C＝O)aOb(C1-C10)烷基、(C＝O)aOb-芳基、 (C＝O)aOb(C2-C10)烯基、(C＝O)aOb(C2-C10)炔基、CO2H、卤基、OH、Ob(C1-C6) 全氟烷基、(C＝O)aNR7R8、CN、(C＝O)aOb(C3-C8)环烷基、S(O)mNR7R8、 SH、S(O)m-(C1-C10)烷基和(C＝O)aOb-杂环基，所述烷基、芳基、烯基、 炔基、环烷基和杂环基任选被一个或多个选自R6a的取代基取代；

R4和R5独立地选自：H、(C1-C6)烷基和(C1-C6)全氟烷基，或者R4 和R5连接形成-(CH2)t-，其中碳原子之一任选被选自O、S(O)m、- N(Rb)C(O)-和-N(CORa)-的部分代替；

所有其它取代基和变量如第二个实施方案中所定义。

在本发明的第四个实施方案中，本发明的抑制剂是由下式D表示的 化合物或其可药用盐或立体异构体：

其中：

所有其它取代基和变量如第三个实施方案中所定义。

在本发明的第五个实施方案中，本发明的抑制剂是由下式E表示的 化合物或其可药用盐或立体异构体：

其中：

a为0或1；b为0或1；m为0、1或2；

R1选自：H、氧代、(C＝O)aOb(C1-C10)烷基、(C＝O)aOb-芳基、 (C＝O)aOb(C2-C10)烯基、(C＝O)aOb(C2-C10)炔基、CO2H、卤基、OH、Ob(C1-C6) 全氟烷基、(C＝O)aNR7R8、CN、(C＝O)aOb(C3-C8)环烷基、S(O)mNR7R8、 SH、S(O)m-(C1-C10)烷基和(C＝O)aOb-杂环基，所述烷基、芳基、烯基、 炔基、环烷基和杂环基任选被一个或多个选自R6的取代基取代；

R3选自：H、氧代、(C＝O)aOb(C1-C10)烷基、(C＝O)aOb-芳基、 (C＝O)aOb(C2-C10)烯基、(C＝O)aOb(C2-C10)炔基、CO2H、卤基、OH、Ob(C1-C6) 全氟烷基、(C＝O)aNR7R8、CN、(C＝O)aOb(C3-C8)环烷基、S(O)mNR7R8、 SH、S(O)m-(C1-C10)烷基、(C1-C6)烷基-杂环基和(C＝O)aOb-杂环基，所述 烷基、芳基、烯基、炔基、环烷基和杂环基任选被一个或多个选自R6 的取代基取代；

R6为：(C＝O)aObC1-C10烷基、(C＝O)aOb芳基、C2-C10烯基、C2-C10 炔基、(C＝O)aOb杂环基、CO2H、卤基、CN、OH、ObC1-C6全氟烷基、 Oa(C＝O)bNR7R8、氧代、CHO、(N＝O)R7R8、S(O)mNR7R8、SH、S(O)m- (C1-C10)烷基或(C＝O)aObC3-C8环烷基，所述烷基、芳基、烯基、炔基、 杂环基和环烷基任选被一个或多个选自R6a的取代基取代；

R6a选自：(C＝O)aOb(C1-C10)烷基、Oa(C1-C3)全氟烷基、(C0-C6)亚烷 基-S(O)mRa、SH、氧代、OH、卤基、CN、(C2-C10)烯基、(C2-C10)炔基、 (C3-C6)环烷基、(C0-C6)亚烷基-芳基、(C0-C6)亚烷基-杂环基、(C0-C6)亚 烷基-N(Rb)2、C(O)Ra、(C0-C6)亚烷基-CO2Ra、C(O)H和(C0-C6)亚烷基- CO2H，所述烷基、烯基、炔基、环烷基、芳基和杂环基任选被最多三 个选自Rb、OH、(C1-C6)烷氧基、卤素、CO2H、CN、Oa(C＝O)b(C1-C6) 烷基、氧代和N(Rb)2的取代基取代；

R7和R8独立地选自：H、(C＝O)aOb(C1-C10)烷基、(C＝O)aOb(C3-C8) 环烷基、(C＝O)aOb-芳基、(C＝O)aOb-杂环基、(C2-C10)烯基、(C2-C10)炔基、 SH、SO2Ra和(C＝O)aNRb2，所述烷基、环烷基、芳基、杂环基、烯基和 炔基任选被一个或多个选自R6a的取代基取代，或者R7和R8可与其所 连接的氮一起形成每个环为3-7元环且除了含有所述氮之外任选含有一 个或两个另外的选自N、O和S的杂原子的单环或双环杂环，所述单环 或双环杂环任选被一个或多个选自R6a的取代基取代；

Ra为(C1-C6)烷基、(C3-C6)环烷基、芳基或杂环基；和

Rb独立地为：H、(C1-C6)烷基、芳基、杂环基、(C3-C6)环烷基、 (C＝O)aOb(C1-C6)烷基或S(O)mRa。

在本发明的第六个实施方案中，本发明的抑制剂是由下式F表示的 化合物或其可药用盐或立体异构体：

其中：

R4和R5独立地为：H和(C1-C6)烷基，其中所述烷基任选被最多三 个选自OH和卤基的取代基取代；并且其中R4和R5可连接形成(C3-C7) 环烷基；

所有其它取代基和变量如第五个实施方案中所定义。

在本发明的第七个实施方案中，本发明的抑制剂是由式F表示的化 合物或其可药用盐或立体异构体：

其中：

R1选自：H、NH2、OH和(C1-C6)烷基；

R4和R5独立地为：H和(C1-C6)烷基。

在本发明的第八个实施方案中，本发明的抑制剂是由下式G表示的 化合物或其可药用盐或立体异构体：

其中：

a为0或1；b为0或1；m为0、1或2；

Q选自：杂环基，其任选被一个或多个选自R6a的取代基取代；

R1选自：H、氧代、(C＝O)aOb(C1-C10)烷基、(C＝O)aOb-芳基、 (C＝O)aOb(C2-C10)烯基、(C＝O)aOb(C2-C10)炔基、CO2H、卤基、OH、Ob(C1-C6) 全氟烷基、(C＝O)aNR7R8、CN、(C＝O)aOb(C3-C8)环烷基、S(O)mNR7R8、 SH、S(O)m-(C1-C10)烷基和(C＝O)aOb-杂环基，所述烷基、芳基、烯基、 炔基、环烷基和杂环基任选被一个或多个选自R6的取代基取代；

R4和R5独立地为：H、(C1-C6)烷基、(C1-C6)烯基、(C1-C6)炔基，其 中所述烷基任选被最多三个选自OH和卤基的取代基取代，并且其中R4 和R5可连接形成(C3-C7)环烷基，其中所述环烷基任选被最多三个选自 R6的取代基取代；

R6为：(C＝O)aObC1-C10烷基、(C＝O)aOb芳基、C2-C10烯基、C2-C10 炔基、(C＝O)aOb杂环基、CO2H、卤基、CN、OH、ObC1-C6全氟烷基、 Oa(C＝O)bNR7R8、氧代、CHO、(N＝O)R7R8、S(O)mNR7R8、SH、S(O)m- (C1-C10)烷基或(C＝O)aObC3-C8环烷基，所述烷基、芳基、烯基、炔基、 杂环基和环烷基任选被一个或多个选自R6a的取代基取代；

R6a选自：(C＝O)aOb(C1-C10)烷基、Oa(C1-C3)全氟烷基、(C0-C6)亚烷 基-S(O)mRa、SH、氧代、OH、卤基、CN、(C2-C10)烯基、(C2-C10)炔基、 (C3-C6)环烷基、(C0-C6)亚烷基-芳基、(C0-C6)亚烷基-杂环基、(C0-C6)亚 烷基-N(Rb)2、C(O)Ra、(C0-C6)亚烷基-CO2Ra、C(O)H和(C0-C6)亚烷基- CO2H，所述烷基、烯基、炔基、环烷基、芳基和杂环基任选被最多三 个选自Rb、OH、(C1-C6)烷氧基、卤素、CO2H、CN、Oa(C＝O)b(C1-C6) 烷基、氧代和N(Rb)2的取代基取代；

R7和R8独立地选自：H、(C＝O)aOb(C1-C10)烷基、(C＝O)aOb(C3-C8) 环烷基、(C＝O)aOb-芳基、(C＝O)aOb-杂环基、(C2-C10)烯基、(C2-C10)炔基、 SH、SO2Ra和(C＝O)aNRb2，所述烷基、环烷基、芳基、杂环基，烯基和炔 基任选被一个或多个选自R6a的取代基取代，或者R7和R8可与其所连 接的氮一起形成每个环为3-7元环且除了含有所述氮之外任选含有一个 或两个另外的选自N、O和S的杂原子的单环或双环杂环，所述单环或 双环杂环任选被一个或多个选自R6a的取代基取代；

Ra为(C1-C6)烷基、(C3-C6)环烷基、芳基或杂环基；和

Rb独立地为：H、(C1-C6)烷基、芳基、杂环基、(C3-C6)环烷基、 (C＝O)aOb(C1-C6)烷基或S(O)mRa。

在本发明的第九个实施方案中，本发明的抑制剂是由下式H表示的 化合物或其可药用盐或立体异构体：

其中：

R1为杂环基，所述杂环基任选被1-3个选自(C1-C6)烷基、OH、卤 基和NH2的取代基取代；

R6a选自：和

在本发明的第十个实施方案中，本发明的抑制剂是由下式H表示的 化合物或其可药用盐或立体异构体：

其中：

R1选自

所有其它取代基和变量如第九个实施方案中所定义。

在本发明的第十一个实施方案中，本发明的抑制剂是由下式J表示 的化合物或其可药用盐或立体异构体：

其中：

a为0或1；b为0或1；m为0、1或2；

R1选自：CF3、H、氧代、(C＝O)aOb(C1-C10)烷基、(C＝O)aOb-芳基、 (C＝O)aOb(C2-C10)烯基、(C＝O)aOb(C2-C10)炔基、CO2H、卤基、OH、Ob(C1-C6) 全氟烷基、(C＝O)aNR7R8、CN、(C＝O)aOb(C3-C8)环烷基、S(O)mNR7R8、 SH、S(O)m-(C1-C10)烷基和(C＝O)aOb-杂环基，所述烷基、芳基、烯基、 炔基、环烷基和杂环基任选被1-6个选自R6的取代基取代；

R3′和R3＂独立地选自：CF3、H、氧代、(C＝O)aOb(C1-C10)烷基、 (C＝O)aOb-芳基、(C＝O)aOb(C2-C10)烯基、(C＝O)aOb(C2-C10)炔基、CO2H、 卤基、OH、Ob(C1-C6)全氟烷基、(C＝O)aNR7R8、CN、(C＝O)aOb(C3-C8) 环烷基、S(O)mNR7R8、SH、S(O)m-(C1-C10)烷基、(C1-C6)烷基-杂环基和 (C＝O)aOb-杂环基，所述烷基、芳基、烯基、炔基、环烷基和杂环基任选 被1-5个选自R6的取代基取代；或者R3′和R3＂可与其所连接的氮一起形 成哌啶或吡咯烷，哌啶或吡咯烷可任选被1-5个选自R6的取代基取代；

R4和R5独立地为：H、(C1-C6)烷基、(C1-C6)烯基、(C1-C6)炔基，其 中所述烷基任选被最多三个选自OH和卤基的取代基取代，并且其中R4 和R5可连接形成(C3-C7)环烷基，其中所述环烷基任选被最多三个选自 R6的取代基取代；

R6为：CF3、(C＝O)aObC1-C10烷基、(C＝O)aOb芳基、C2-C10烯基、 C2-C10炔基、(C＝O)aOb杂环基、CO2H、卤基、CN、OH、ObC1-C6全氟 烷基、Oa(C＝O)bNR7R8、氧代、CHO、(N＝O)R7R8、S(O)mNR7R8、SH、 S(O)m-(C1-C10)烷基或(C＝O)aObC3-C8环烷基，所述烷基、芳基、烯基、 炔基、杂环基和环烷基任选被1-5个选自R6a的取代基取代；

R6a选自：CF3、(C＝O)aOb(C1-C10)烷基、Oa(C1-C3)全氟烷基、(C0-C6) 亚烷基-S(O)mRa、SH、氧代、OH、卤基、CN、(C2-C10)烯基、(C2-C10) 炔基、(C3-C6)环烷基、(C0-C6)亚烷基-芳基、(C0-C6)亚烷基-杂环基、(C0-C6) 亚烷基-N(Rb)2、(C＝O)aNRb2、C(O)Ra、(C0-C6)亚烷基-CO2Ra、C(O)H和 (C0-C6)亚烷基-CO2H，所述烷基、烯基、炔基、环烷基、芳基和杂环基 任选被最多三个选自Rb、OH、(C1-C6)烷氧基、卤素、CO2H、CN、 Oa(C＝O)b(C1-C6)烷基、氧代和N(Rb)2的取代基取代；

R7和R8独立地选自：CF3、H、(C＝O)aOb(C1-C10)烷基、(C＝O)aOb(C3-C8) 环烷基、(C＝O)aOb-芳基、(C＝O)aOb-杂环基、(C2-C10)烯基、(C2-C10)炔基、 SH、SO2Ra和(C＝O)aNRb2，所述烷基、环烷基、芳基、杂环基、烯基和 炔基任选被1-5个选自R6a的取代基取代；或者R7和R8可与其所连接的 氮一起形成每个环为3-7元环且除了含有所述氮之外任选含有一个或两 个另外的选自N、O和S的杂原子的单环或双环杂环，所述单环或双环 杂环任选被1-6个选自R6a的取代基取代；

Ra为(C1-C6)烷基、NRb2、(C3-C6)环烷基、芳基或杂环基；和

Rb独立地为：H、(C1-C6)烷基、NH2、芳基、杂环基、(C3-C6)环烷 基、(C＝O)aOb(C1-C6)烷基或S(O)mRa。

本发明的具体化合物包括：

9-苯基-8-(4-{[4-(5-吡啶-2-基-1H-1，2，4-三唑-3-基)哌啶-1-基]甲基}苯 基)[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶-3-胺(1-4)；

9-苯基-8-(4-{[4-(5-吡啶-2-基-1H-1，2，4-三唑-3-基)哌啶-1-基]甲基}苯 基)[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶-3-醇(1-5)；

9-苯基-8-(4-{[4-(4-吡啶-2-基-1H-咪唑-1-基)哌啶-1-基]甲基}苯 基)[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶-3-胺(1-6)；

9-苯基-8-(4-{[4-(5-吡啶-2-基-1H-1，2，4-三唑-3-基)哌啶-1-基]甲基}苯 基)[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶-3-硫醇(1-7)；

3-甲基-9-苯基-8-(4-{[4-(5-吡啶-2-基-1H-1，2，4-三唑-3-基)哌啶-1-基] 甲基}苯基)[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶(2-2)；

9-苯基-8-(4-{[4-(5-吡啶-2-基-1H-1，2，4-三唑-3-基)哌啶-1-基]甲基}苯 基)[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶(2-3)；

3-(氯甲基)-9-苯基-8-(4-{[4-(4-吡啶-2-基-1H-咪唑-1-基)哌啶-1-基]甲 基}苯基)[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶(2-4)；

3-[(4-甲基哌嗪-1-基)甲基]-9-苯基-8-(4-{[4-(5-吡啶-2-基-1H-1，2，4-三 唑-3-基)哌啶-1-基]甲基}苯基)[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶(2-5)；和

2-({[9-苯基-8-(4-{[4-(5-吡啶-2-基-1H-1，2，4-三唑-3-基)哌啶-1-基]甲 基}苯基)[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶-3-基]甲基}氨基)乙醇(2-6)；

或其可药用盐和立体异构体。

本发明的化合物的例子包括以下化合物的TFA盐：

9-苯基-8-(4-{[4-(5-吡啶-2-基-1H-1，2，4-三唑-3-基)哌啶-1-基]甲基}苯 基)[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶-3-胺(1-4)；

9-苯基-8-(4-{[4-(5-吡啶-2-基-1H-1，2，4-三唑-3-基)哌啶-1-基]甲基}苯 基)[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶-3-醇(1-5)；

9-苯基-8-(4-{[4-(4-吡啶-2-基-1H-咪唑-1-基)哌啶-1-基]甲基}苯 基)[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶-3-胺(1-6)；

9-苯基-8-(4-{[4-(5-吡啶-2-基-1H-1，2，4-三唑-3-基)哌啶-1-基]甲基}苯 基)[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶-3-硫醇(1-7)；

3-甲基-9-苯基-8-(4-{[4-(5-吡啶-2-基-1H-1，2，4-三唑-3-基)哌啶-1-基] 甲基}苯基)[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶(2-2)；

9-苯基-8-(4-{[4-(5-吡啶-2-基-1H-1，2，4-三唑-3-基)哌啶-1-基]甲基}苯 基)[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶(2-3)；

3-(氯甲基)-9-苯基-8-(4-{[4-(4-吡啶-2-基-1H-咪唑-1-基)哌啶-1-基]甲 基}苯基)[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶(2-4)；

3-[(4-甲基哌嗪-1-基)甲基]-9-苯基-8-(4-{[4-(5-吡啶-2-基-1H-1，2，4-三 唑-3-基)哌啶-1-基]甲基}苯基)[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶(2-5)；

2-({[9-苯基-8-(4-{[4-(5-吡啶-2-基-1H-1，2，4-三唑-3-基)哌啶-1-基]甲 基}苯基)[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶-3-基]甲基}氨基)乙醇(2-6)；

3-(3-甲基-1H-1，2，4-三唑-5-基)-9-苯基-8-(4-{[4-(5-吡啶-2-基-4H- 1，2，4-三唑-3-基)哌啶-1-基]甲基}苯基)[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶(9- 9)；

3-咪唑并[2，1-b][1，3]噻唑-6-基-9-苯基-8-(4-{[4-(5-吡啶-2-基-4H- 1，2，4-三唑-3-基)哌啶-1-基]甲基}苯基)[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶(9- 10)；

9-苯基-8-(4-{[4-(5-吡啶-2-基-4H-1，2，4-三唑-3-基)哌啶-1-基]甲基}苯 基)-3-[1，2，4]三唑并[1，5-a]嘧啶-2-基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶(9- 11)；

3-咪唑并[1，2-a]吡啶-2-基-9-苯基-8-(4-{[4-(5-吡啶-2-基-4H-1，2，4-三 唑-3-基)哌啶-1-基]甲基}苯基)[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶(9-12)；

3-(1-甲基-1H-咪唑-4-基)-9-苯基-8-(4-{[4-(5-吡啶-2-基-4H-1，2，4-三唑 -3-基)哌啶-1-基]甲基}苯基)[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶(13-3)；

5-[({4-[3-(1-甲基-1H-咪唑-4-基)-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶 -8-基]苄基}氨基)甲基]吡啶-2-醇(13-8)；

N1，N1，2，2-四甲基-N3-{4-[3-(1-甲基-1H-咪唑-4-基)-9-苯基[1，2，4]三唑 并[3，4-f]-1，6-萘啶-8-基]苄基}丙烷-1，3-二胺(13-9)；

N3-{4-[3-(羟基甲基)-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶-8-基]苄 基}-N1-(4-羟基苯基)-β-氨基丙酰胺(14-6)；

1-[4-(9-苯基-3-吡啶-2-基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶-8-基)苯基]甲 胺(16-13)；

4-[3-(1-甲基-5-苯基-1H-吡唑-4-基)-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘 啶-8-基]苄基胺(16-41)；

1-{4-[9-苯基-3-(4，5，6，7-四氢-1-苯并噻吩-3-基)[1，2，4]三唑并[3，4-f]- 1，6-萘啶-8-基]苯基}甲胺(16-42)；

1-{4-[3-(1-异丙基-1H-吡唑-4-基)-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘 啶-8-基]苯基}甲胺(16-43)；

1-{4-[9-苯基-3-(1，4，5，6-四氢环戊烷并[c]吡唑-3-基)[1，2，4]三唑并 [3，4-f]-1，6-萘啶-8-基]苯基}甲胺(16-44)；

1-[4-(3-环丙基-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶-8-基)苯基]甲胺 (16-48)；

1-{4-[9-苯基-3-(三氟甲基)[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶-8-基]苯基} 甲胺(16-49)；

1-{4-[3-(5-甲基-1H-吡唑-3-基)-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶- 8-基]苯基}甲胺(16-50)；

1-{4-[3-(1，5-二甲基-1H-吡唑-3-基)-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘 啶-8-基]苯基}甲胺(16-51)；

4-[3-(1H-吲哚-2-基)-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶-8-基]苄基 胺(16-52)；

1-{4-[3-(1-甲基-1H-咪唑-2-基)-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶- 8-基]苯基}甲胺(16-53)；

1-{4-[3-(3-甲基-2H-3λ5-咪唑-4-基)-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘 啶-8-基]苯基}甲胺(16-54)；

4-[3-(6-氯咪唑并[1，2-a]吡啶-2-基)-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘 啶-8-基]苄基胺(16-55)；

1-{4-[3-(1H-苯并咪唑-2-基)-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶-8- 基]苯基}甲胺(16-56)；

4-[3-(5-环丙基-4H-吡唑-3-基)-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶-8- 基]苄基胺(16-57)；

1-{4-[9-苯基-3-(4，5，6，7-四氢-1H-吲唑-3-基)[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6- 萘啶-8-基]苯基}甲胺(16-58)；

4-[9-苯基-3-(3-苯基-1H-吡唑-5-基)[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶-8-基] 苄基胺(16-59)；

1-(4-{9-苯基-3-[3-(三氟甲基)-1H-吡唑-5-基][1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6- 萘啶-8-基}苯基)甲胺(16-60)；

1-[4-(9-苯基-3-吡唑并[1，5-a]嘧啶-2-基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶- 8-基)苯基]甲胺(16-61)；

1-{4-[3-(1-苄基-1H-吡唑-4-基)-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶- 8-基]苯基}甲胺(16-62)；

1-[4-(9-苯基-3-[1，2，4]三唑并[1，5-a]嘧啶-2-基[1，2，4]三唑并[3，4-f]- 1，6-萘啶-8-基)苯基]甲胺(16-63)；

4-[9-苯基-3-(1-苯基-1H-吡唑-4-基)[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶-8-基] 苄基胺(16-64)；

1-{4-[9-苯基-3-(4，5，6，7-四氢-2-苯并噻吩-1-基)[1，2，4]三唑并[3，4-f]- 1，6-萘啶-8-基]苯基}甲胺(16-65)；

1-{8-[4-(氨基甲基)苯基]-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶-3-基} 乙烷-1，2-二醇(16-68)；

4-{8-[4-(氨基甲基)苯基]-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶-3-基} 咪唑烷-2-酮(16-69)；

(2R)-2-氨基-2-{8-[4-(氨基甲基)苯基]-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6- 萘啶-3-基}乙醇(16-70)；

(2R)-2-{8-[4-(氨基甲基)苯基]-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶-3- 基}-2-(甲基氨基)乙醇(16-71)；

1-[4-(3-乙基-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶-8-基)苯基]甲胺 (17-6)；

1-[4-(9-苯基-3-丙基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶-8-基)苯基]甲胺 (17-7)；

1-[4-(3-甲基-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶-8-基)苯基]环丙胺 (33-5)；

1-{4-[3-(1-甲基-1H-咪唑-4-基)-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶- 8-基]苯基}环丙胺(33-6)；

1-[4-(9-苯基-3-[1，2，4]三唑并[1，5-a]嘧啶-2-基[1，2，4]三唑并[3，4-f]- 1，6-萘啶-8-基)苯基]环丙胺(33-7)；

N-[4-(3-甲基-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶-8-基)苄基]-5-吡啶 -4-基-2-糠酰胺(39-2)；

(3-甲基-9-苯基-8-(4-{1-[(吡啶-3-基乙酰基)氨基]环丙基}苯基)[1，2，4] 三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶(39-43)；

3-甲基-9-苯基-8-(4-{1-[(喹啉-3-基羰基)氨基]环丙基}苯基)[1，2，4]三 唑并[3，4-f]-1，6-萘啶(39-44)；

3-(1-甲基-1H-咪唑-4-基)-9-苯基-8-(4-{1-[(吡啶-3-基乙酰基)氨基]环 丙基}苯基)[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶(39-46)；

1-[4-(9-乙基-2-苯基[1，2，4]三唑并[4′，3′：1，6]吡啶并[2，3-b]吡嗪-3-基) 苯基]环丙胺(42-6)；和

1-[4-(9-乙基-3-苯基[1，2，4]三唑并[4′，3′：1，6]吡啶并[2，3-b]吡嗪-2-基) 苯基]环丙胺(42-7)；

或其立体异构体。

本发明的化合物的例子包括以下化合物的甲酸盐：

9-苯基-8-(4-{[4-(5-吡啶-2-基-1H-1，2，4-三唑-3-基)哌啶-1-基]甲基}苯 基)[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶-3-胺(1-4)；和

9-苯基-8-(4-{[4-(5-吡啶-2-基-1H-1，2，4-三唑-3-基)哌啶-1-基]甲基}苯 基)[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶-3-醇(1-5)；

或其立体异构体。

本发明的具体化合物包括：

9-苯基-8-(4-{[4-(5-吡啶-2-基-1H-1，2，4-三唑-3-基)哌啶-1-基]甲基}苯 基)[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶-3-胺(1-4)；

9-苯基-8-(4-{[4-(5-吡啶-2-基-1H-1，2，4-三唑-3-基)哌啶-1-基]甲基}苯 基)[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶-3-醇(1-5)；

9-苯基-8-(4-{[4-(4-吡啶-2-基-1H-咪唑-1-基)哌啶-1-基]甲基}苯 基)[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶-3-胺(1-6)；

9-苯基-8-(4-{[4-(5-吡啶-2-基-1H-1，2，4-三唑-3-基)哌啶-1-基]甲基}苯 基)[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶-3-硫醇(1-7)；

3-甲基-9-苯基-8-(4-{[4-(5-吡啶-2-基-1H-1，2，4-三唑-3-基)哌啶-1-基] 甲基}苯基)[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶(2-2)；

9-苯基-8-(4-{[4-(5-吡啶-2-基-1H-1，2，4-三唑-3-基)哌啶-1-基]甲基}苯 基)[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶(2-3)；

3-(氯甲基)-9-苯基-8-(4-{[4-(4-吡啶-2-基-1H-咪唑-1-基)哌啶-1-基]甲 基}苯基)[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶(2-4)；

3-[(4-甲基哌嗪-1-基)甲基]-9-苯基-8-(4-{[4-(5-吡啶-2-基-1H-1，2，4-三 唑-3-基)哌啶-1-基]甲基}苯基)[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶(2-5)；

2-({[9-苯基-8-(4-{[4-(5-吡啶-2-基-1H-1，2，4-三唑-3-基)哌啶-1-基]甲 基}苯基)[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶-3-基]甲基}氨基)乙醇(2-6)；

8-(4-氨基甲基-苯基)-9-苯基-[1，2，4]三唑并[3，4-f][1，6]萘啶-3-醇(3- 8)；

1-[4-(9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶-8-基)苯基]甲胺(4-3)；

4-(3-甲基-9-苯基-[1，2，4]三唑并[3，4-f][1，6]萘啶-8-基)-苄基胺(5- 3)；

8-[4-(氨基甲基)苯基]-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶-3-胺(6- 2)；

1-[4-(9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶-8-基)苯基]乙胺(7-4)；和

9-苯基-8-{4-[4-(5-吡啶-2-基-4H-[1，2，4]三唑-3-基)-哌啶-1-基甲基]- 苯基}-[1，2，4]三唑并[3，4-f][1，6]萘啶(8-10)；

或其可药用盐或立体异构体。

本发明的化合物的例子包括以下化合物的HCl盐：

8-(4-氨基甲基-苯基)-9-苯基-[1，2，4]三唑并[3，4-f][1，6]萘啶-3-醇(3- 8)；

1-[4-(9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶-8-基)苯基]甲胺(4-3)；

4-(3-甲基-9-苯基-[1，2，4]三唑并[3，4-f][1，6]萘啶-8-基)-苄基胺(5- 3)；

8-[4-(氨基甲基)苯基]-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶-3-胺(6- 2)；和

1-[4-(9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶-8-基)苯基]乙胺(7-4)；

3-(1H-咪唑-4-基)-9-苯基-8-(4-{[4-(5-吡啶-2-基-4H-1，2，4-三唑-3-基) 哌啶-1-基]甲基}苯基)[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶(9-5)；

[9-苯基-8-(4-{[4-(5-吡啶-2-基-4H-1，2，4-三唑-3-基)哌啶-1-基]甲基} 苯基)[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶-3-基]甲基氨基甲酸叔丁基酯(9-6)；

[9-苯基-8-(4-{[4-(5-吡啶-2-基-4H-1，2，4-三唑-3-基)哌啶-1-基]甲基} 苯基)[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶-3-基]甲醇(9-7)；

5-[9-苯基-8-(4-{[4-(5-吡啶-2-基-4H-1，2，4-三唑-3-基)哌啶-1-基]甲基} 苯基)[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶-3-基]-2，4-二氢-3H-1，2，4-三唑-3-酮(9- 8)；

9-苯基-8-(4-{[4-(5-吡啶-2-基-4H-1，2，4-三唑-3-基)哌啶-1-基]甲基}苯 基)-3-(1H-1，2，4-三唑-5-基)[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶(9-13)；

3-(1H-苯并咪唑-6-基)-9-苯基-8-(4-{[4-(5-吡啶-2-基-4H-1，2，4-三唑- 3-基)哌啶-1-基]甲基}苯基)[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶(9-14)；

3-(1，5-二甲基-1H-吡唑-3-基)-9-苯基-8-(4-{[4-(5-吡啶-2-基-4H-1，2，4- 三唑-3-基)哌啶-1-基]甲基}苯基)[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶(9-15)；

3-咪唑并[1，2-a]嘧啶-2-基-9-苯基-8-(4-{[4-(5-吡啶-2-基-4H-1，2，4-三 唑-3-基)哌啶-1-基]甲基}苯基)[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶(9-16)；

5-[9-苯基-8-(4-{[4-(5-吡啶-2-基-4H-1，2，4-三唑-3-基)哌啶-1-基]甲基} 苯基)[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶-3-基]吡啶-2-胺(9-17)；

9-苯基-3-吡唑并[1，5-a]嘧啶-3-基-8-(4-{[4-(5-吡啶-2-基-4H-1，2，4-三 唑-3-基)哌啶-1-基]甲基}苯基)[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶(9-18)；

3-(5-甲基-1H-吡唑-3-基)-9-苯基-8-(4-{[4-(5-吡啶-2-基-4H-1，2，4-三唑 -3-基)哌啶-1-基]甲基}苯基)[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶(9-19)；

3-[9-苯基-8-(4-{[4-(5-吡啶-2-基-4H-1，2，4-三唑-3-基)哌啶-1-基]甲基} 苯基)[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶-3-基]吡啶-2-胺(9-20)；

4-[9-苯基-8-(4-{[4-(5-吡啶-2-基-4H-1，2，4-三唑-3-基)哌啶-1-基]甲基} 苯基)[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶-3-基]苯酚(9-21)；

3-[9-苯基-8-(4-{[4-(5-吡啶-2-基-4H-1，2，4-三唑-3-基)哌啶-1-基]甲基} 苯基)[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶-3-基]苯酚(9-22)；

2-[9-苯基-8-(4-{[4-(5-吡啶-2-基-4H-1，2，4-三唑-3-基)哌啶-1-基]甲基} 苯基)[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶-3-基]苯酚(9-23)；

1-{4-[3-(5-氧代-4，5-二氢-1H-1，2，4-三唑-3-基)-9-苯基[1，2，4]三唑并 [3，4-f]-1，6-萘啶-8-基]苄基}哌啶-4-甲酰胺(9-24)；

1-[4-(3-咪唑并[1，2-a]吡啶-2-基-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶- 8-基)苄基]哌啶-4-甲酰胺(9-25)；

3-(1-甲基-1H-咪唑-4-基)-9-苯基-8-(4-{[4-(5-吡啶-2-基-4H-1，2，4-三唑 -3-基)哌啶-1-基]甲基}苯基)[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶(13-3)；

3-(1-甲基-1H-咪唑-4-基)-9-苯基-8-(4-{[4-(5-吡嗪-2-基-4H-1，2，4-三唑 -3-基)哌啶-1-基]甲基}苯基)[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶(13-4)；

N-[2-(4-甲基-1H-咪唑-2-基)乙基]-N-{4-[3-(1-甲基-1H-咪唑-4-基)-9- 苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶-8-基]苄基}胺(13-5)；

N1-(2-羟基苯基)-N3-{4-[3-(1-甲基-1H-咪唑-4-基)-9-苯基[1，2，4]三唑 并[3，4-f]-1，6-萘啶-8-基]苄基}-β-氨基丙酰胺(13-6)；

1-{4-[3-(1-甲基-1H-咪唑-4-基)-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶- 8-基]苄基}哌啶-4-甲酰胺(13-7)；

3-羟基-2，2-二甲基-N-[4-(3-甲基-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶 -8-基)苄基]丙-1-胺(13-10)；

2-氟-3-羟基-N-[4-(3-甲基-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶-8-基) 苄基]丙-1-胺(13-11)；

2，2-二氟-3-羟基-N-[4-(3-甲基-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶-8- 基)苄基]丙-1-胺(13-12)；

2，3-二羟基-N-[4-(3-甲基-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶-8-基) 苄基]丙-1-胺(13-13)；

4-羟基-N-[4-(3-甲基-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶-8-基)苄基] 环己胺(13-14)；

4-羟基-N-[4-(3-甲基-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶-8-基)苄基] 环己胺(13-15)；

3-羟基-2，2-二甲基-N-{4-[3-(1-甲基-1H-咪唑-4-基)-9-苯基[1，2，4]三唑 并[3，4-f]-1，6-萘啶-8-基]苄基}丙-1-胺(13-16)；

3-羟基-2，2-二甲基-N-[4-(9-苯基-3-[1，2，4]三唑并[1，5-a]嘧啶-2-基 [1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶-8-基)苄基]丙-1-胺(13-17)；

3-羟基-2，2-二甲基-N-[4-(9-苯基-3-吡唑并[1，5-a]嘧啶-2-基[1，2，4]三 唑并[3，4-f]-1，6-萘啶-8-基)苄基]丙-1-胺(13-18)；

3-羟基-2，2-二甲基-N-{4-[9-苯基-3-(1H-1，2，3-三唑-4-基)[1，2，4]三唑 并[3，4-f]-1，6-萘啶-8-基]苄基}丙-1-胺(13-19)；

N-{4-[3-(氨基(ammonio)甲基)-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶- 8-基]苄基}-3-羟基-2，2-二甲基丙-1-胺(13-21)；

N3-{4-[3-(羟基甲基)-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶-8-基]苄 基}-N1-(2-羟基苯基)-β-氨基丙酰胺(14-4)；

(8-{4-[(环己基氨基)甲基]苯基}-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶- 3-基)甲醇(14-5)；

[9-苯基-8-(4-{[4-(5-吡啶-3-基-4H-1，2，4-三唑-3-基)哌啶-1-基]甲基} 苯基)[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶-3-基]甲醇(14-7)；

1-{4-[3-(羟基甲基)-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶-8-基]苄基} 哌啶-4-甲酰胺(14-8)；

1-{4-[3-(1-氧化吡啶-3-基)-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶-8-基] 苯基}甲胺(16-4)；

1-[4-(3，9-二苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶-8-基)苯基]甲胺(16- 5)；

1-{4-[3-(4-氟苯基)-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶-8-基]苯基} 甲胺(16-6)；

4-{8-[4-(氨基甲基)苯基]-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶-3-基} 苄腈(16-7)；

4-(9-苯基-3-嘧啶-4-基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶-8-基)苄基胺 (16-8)；

1-{4-[3-(1-氧化吡啶-2-基)-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶-8-基] 苯基}甲胺(16-9)；

5-{8-[4-(氨基甲基)苯基]-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶-3-基} 吡啶-2-醇(16-10)；

1-[4-(9-苯基-3-吡啶-3-基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶-8-基)苯基]甲 胺(16-11)；

4-(9-苯基-3-嘧啶-2-基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶-8-基)苄基胺 (16-12)；

1-[4-(9-苯基-3-吡嗪-2-基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶-8-基)苯基]甲 胺(16-14)；

1-{4-[9-苯基-3-(1H-1，2，4-三唑-3-基)[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶-8- 基]苯基}甲胺(16-15)；

1-{4-[9-苯基-3-(1，3-噻唑-4-基)[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶-8-基]苯 基}甲胺(16-16)；

1-{4-[9-苯基-3-(1H-吡唑-4-基)[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶-8-基]苯 基}甲胺(16-17)；

1-{4-[3-(3-甲基-1H-吡唑-4-基)-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶- 8-基]苯基}甲胺(16-18)；

1-{4-[3-(3-甲基-1H-1，2，4-三唑-5-基)-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6- 萘啶-8-基]苯基}甲胺(16-19)；

1-{4-[3-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶- 8-基]苯基}甲胺(16-20)；

1-{4-[9-苯基-3-(1，2，5-噻二唑-3-基)[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶-8-基] 苯基}甲胺(16-21)；

1-{4-[9-苯基-3-(1，2，3-噻二唑-4-基)[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶-8-基] 苯基}甲胺(16-22)；

1-[4-(9-苯基-3-吡唑并[1，5-a]嘧啶-3-基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶- 8-基)苯基]甲胺(16-23)；

{8-[4-(氨基甲基)苯基]-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶-3-基}甲 胺(16-24)；

{8-[4-(氨基甲基)苯基]-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶-3-基}甲 醇(16-25)；

1-{4-[9-苯基-3-(2，2，2-三氟乙基)[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶-8-基] 苯基}甲胺(16-26)；

1-{4-[9-苯基-3-(1H-四唑-1-基甲基)[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶-8- 基]苯基}甲胺(16-27)；

8-[4-(氨基甲基)苯基]-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶-3-甲酰胺 (16-28)；

1-{4-[3-(1H-咪唑-1-基甲基)-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶-8- 基]苯基}甲胺(16-29)；

1-(4-{3-[(甲基磺酰基)甲基]-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶-8- 基}苯基)甲胺(16-30)；

{8-[4-(氨基甲基)苯基]-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶-3-基}乙 腈(16-31)；

2-{8-[4-(氨基甲基)苯基]-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶-3-基} 乙醇(16-32)；

N-({8-[4-(氨基甲基)苯基]-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶-3-基} 甲基)乙酰胺(16-33)；

1-[4-(3-咪唑并[1，2-a]吡啶-2-基-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶- 8-基)苯基]甲胺(16-36)；

1-[4-(3-咪唑并[2，1-b][1，3]噻唑-6-基-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6- 萘啶-8-基)苯基]甲胺(16-38)；

1-{4-[3-(1-甲基-1H-咪唑-4-基)-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶- 8-基]苯基}甲胺(16-40)；

1-(4-{9-苯基-3-[(2R)-吡咯烷-2-基][1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶-8-基} 苯基)甲胺(16-44)；

1-(4-{9-苯基-3-[(2S)-吡咯烷-2-基][1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶-8-基} 苯基)甲胺(16-45)；

4-[3-(1-氨基乙基)-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶-8-基]苄基胺 (16-46)；

1-{4-[3-(1H-咪唑-2-基)-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶-8-基]苯 基}甲胺(16-47)；

1-{4-[9-苯基-3-(5，6，7，8-四氢咪唑并[1，2-a]吡啶-2-基)[1，2，4]三唑并 [3，4-f]-1，6-萘啶-8-基]苯基}甲胺(16-66)；

2-{8-[4-(氨基甲基)苯基]-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶-3-基} 丙-2-胺(16-67)；

1-{4-[3-(5-乙基异噁唑-3-基)-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶-8- 基]苯基}甲胺(16-72)；

5-{8-[4-(氨基甲基)苯基]-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶-3-基}- 2，4-二氢-3H-1，2，4-三唑-3-酮(16-73)；

6-{8-[4-(氨基甲基)苯基]-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶-3-基}- 4，5-二氢哒嗪-3(2H)-酮(16-74)；

6-{8-[4-(氨基甲基)苯基]-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶-3-基} 哒嗪-3(2H)-酮(16-75)；

N-(4-{8-[4-(氨基甲基)苯基]-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶-3- 基}苯基)乙酰胺(16-76)；

1-{4-[3-(4-苯氧基苯基)-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶-8-基]苯 基}甲胺(16-77)；

1-{4-[3-(1H-苯并咪唑-5-基)-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶-8- 基]苯基}甲胺(16-78)；

(4-{8-[4-(氨基甲基)苯基]-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶-3-基} 苯基)甲醇(16-79)；

4-[3-(4-环己基苯基)-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶-8-基]苄基 胺(16-80)；

4-{8-[4-(氨基甲基)苯基]-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶-3-基}- 1，3-二氢-2H-咪唑-2-酮(16-81)；

1-{4-[3-(4-甲基-1H-咪唑-5-基)-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶- 8-基]苯基}甲胺(16-82)；

4-[9-苯基-3-(1-丙基-1H-咪唑-4-基)[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶-8-基] 苄基胺(16-83)；

1-{4-[3-(1-异丙基-1H-咪唑-4-基)-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘 啶-8-基]苯基}甲胺(16-84)；

1-{4-[3-(1-丁基-1H-咪唑-4-基)-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶- 8-基]苯基}甲胺(16-85)；

1-[4-(3-咪唑并[1，2-a]嘧啶-2-基-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶- 8-基)苯基]甲胺(16-86)；

1-(6-甲氧基吡啶-3-基)-N-[4-(3-甲基-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6- 萘啶-8-基)苄基]甲胺(17-4)；

N-[(2-甲氧基嘧啶-5-基)甲基]-N-[4-(3-甲基-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4- f]-1，6-萘啶-8-基)苄基]胺(17-5)；

9-苯基-3-(1H-1，2，3-三唑-4-基)-8-(4-{[4-(4H-1，2，4-三唑-3-基)哌啶-1- 基]甲基}苯基)[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶(21-4)；

1-{4-[9-苯基-3-(3H-1λ4，3-噻唑-5-基)[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶-8- 基]苯基}甲胺(22-4)；

1-{4-[9-苯基-3-(1H-吡唑-3-基)-2H-4λ5-[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶- 8-基]苯基}甲胺(22-5)；

1-{4-[9-苯基-3-(1，3-噻唑-4-基)[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶-8-基]苯 基}甲胺(22-6)；

1-{4-[3-(氮杂环丁烷-1-基甲基)-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶- 8-基]苯基}甲胺(26-3)；

1-({8-[4-(氨基甲基)苯基]-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶-3-基} 甲基)哌啶-4-甲酰胺(26-4)；

1-{4-[3-(吗啉-4-基甲基)-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶-8-基]苯 基}甲胺(26-5)；

2-[({8-[4-(氨基甲基)苯基]-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶-3-基} 甲基)氨基]乙醇(26-6)；

1-(4-{3-[(4-甲基哌嗪-1-基)甲基]-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶 -8-基}苯基)甲胺(26-7)；

4-[9-苯基-3-(哌嗪-1-基甲基)[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶-8-基]苄基 胺(26-8)；

N-({8-[4-(氨基甲基)苯基]-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶-3-基} 甲基)-N-甲基胺(26-9)；

N-({8-[4-(氨基甲基)苯基]-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶-3-基} 甲基)-N，N-二甲基胺(26-10)；

3-甲基-9-苯基-8-(4-{[4-(4H-1，2，4-三唑-3-基)哌啶-1-基]甲基}苯 基)[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶(31-1)；

1-{4-[9-苯基-3-(5，6，7，8-四氢咪唑并[1，2-a]吡啶-2-基)[1，2，4]三唑并 [3，4-f]-1，6-萘啶-8-基]苯基}环丙胺(33-8)；

1-[4-(9-苯基-3-嘧啶-2-基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶-8-基)苯基]环 丙胺(33-9)；

1-{4-[3-(1，5-二甲基-1H-吡唑-3-基)-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘 啶-8-基]苯基}环丙胺(33-10)；

(1R)-1-[4-(3-甲基-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶-8-基)苯基]乙 胺(34-5)；

(1R)-1-[4-(9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶-8-基)苯基]乙胺(34- 6)；

(1R)-1-{4-[9-苯基-3-(5-吡啶-2-基-1H-吡唑-3-基)[1，2，4]三唑并[3，4-f]- 1，6-萘啶-8-基]苯基}乙胺(35-1)；

(1R)-1-{4-[3-(羟基甲基)-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶-8-基]苯 基}乙胺(35-2)；

(1R)-1-{4-[3-(1-甲基-1H-咪唑-4-基)-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6- 萘啶-8-基]苯基}乙胺(35-3)；

(1R)-1-[4-(9-苯基-3-[1，2，4]三唑并[1，5-a]嘧啶-2-基[1，2，4]三唑并[3，4- f]-1，6-萘啶-8-基)苯基]乙胺(35-4)；

(1R)-1-[4-(3-咪唑并[2，1-b][1，3]噻唑-6-基-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]- 1，6-萘啶-8-基)苯基]乙胺(35-5)；

(1R)-1-[4-(9-苯基-3-嘧啶-2-基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶-8-基)苯 基]乙胺(35-6)；

(1R)-1-[4-(9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶-8-基)苯基]丙-1-胺 (36-1)；

2-[4-(3-甲基-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶-8-基)苯基]丙-2-胺 (37-4)；

2-[4-(9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶-8-基)苯基]丙-2-胺(38- 1)；

3-(2-{[4-(3-甲基-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶-8-基)苄基]氨 基}-2-氧代乙基)吡啶(39-1)；

N-[4-(3-甲基-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶-8-基)苄基]-5-吡啶 -3-基-2-糠酰胺(39-3)；

N-[4-(3-甲基-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶-8-基)苄基]-5-吡啶 -3-基-1H-吡咯-3-甲酰胺(39-4)；

4-(2-{[4-(3-甲基-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶-8-基)苄基]氨 基}-2-氧代乙基)吗啉(39-7)；

2-{[4-(3-甲基-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶-8-基)苄基]氨基}- 2-氧代乙胺(39-8)；

4-(2-{[4-(3-甲基-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶-8-基)苄基]氨 基}-2-氧代乙基)吡啶(39-9)；

2，4-二羟基-6-(2-{[4-(3-甲基-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶-8- 基)苄基]氨基}-2-氧代乙基)嘧啶(39-10)；

2-(2-{[4-(3-甲基-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶-8-基)苄基]氨 基}-2-氧代乙基)吡啶(39-11)；

3-(2-{[4-(3-甲基-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶-8-基)苄基]氨 基}-2-氧代乙基)吡啶(39-12)；

3-甲基-9-苯基-8-[4-({[(吡啶-3-基氨基)羰基]氨基}甲基)苯基][1，2，4] 三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶(39-14)；

3-甲基-9-苯基-8-(4-{[(吡啶-3-基羰基)氨基]甲基}苯基)[1，2，4]三唑并 [3，4-f]-1，6-萘啶(39-20)；

3-甲基-9-苯基-8-(4-{[(喹啉-3-基羰基)氨基]甲基}苯基)[1，2，4]三唑并 [3，4-f]-1，6-萘啶(39-26)；

8-(4-{[(1H-苯并咪唑-1-基乙酰基)氨基]甲基}苯基)-3-甲基-9-苯基 [1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶(39-29)；

8-(4-{[(1H-苯并咪唑-2-基乙酰基)氨基]甲基}苯基)-3-甲基-9-苯基 [1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶(39-30)；

3-甲基-8-[4-({[(6-吗啉-4-基吡啶-3-基)羰基]氨基}甲基)苯基]-9-苯基 [1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶(39-34)；

3-甲基-9-苯基-8-(4-{[(3-吡啶-3-基丙酰基)氨基]甲基}苯基)[1，2，4]三 唑并[3，4-f]-1，6-萘啶(39-37)；

3-(1-甲基-1H-咪唑-4-基)-9-苯基-8-(4-{[(吡啶-3-基乙酰基)氨基]甲基} 苯基)[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶(39-38)；

9-苯基-3-吡唑并[1，5-a]嘧啶-3-基-8-(4-{[(吡啶-3-基乙酰基)氨基]甲 基}苯基)[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶(39-39)；

N-{(1R)-1-[4-(3-甲基-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶-8-基)苯基] 乙基}-2-吡啶-3-基乙酰胺(39-47)；和

N-((1R)-1-{4-[3-(羟基甲基)-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶-8-基] 苯基}乙基)-2-吡啶-3-基乙酰胺(39-49)；

或其立体异构体。

本发明的进一步具体的化合物包括：

9-苯基-8-(4-{[4-(5-吡啶-2-基-1H-1，2，4-三唑-3-基)哌啶-1-基]甲基}苯 基)[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶-3-胺(1-4)；

9-苯基-8-(4-{[4-(5-吡啶-2-基-1H-1，2，4-三唑-3-基)哌啶-1-基]甲基}苯 基)[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶-3-醇(1-5)；

9-苯基-8-(4-{[4-(4-吡啶-2-基-1H-咪唑-1-基)哌啶-1-基]甲基}苯 基)[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶-3-胺(1-6)；

9-苯基-8-(4-{[4-(5-吡啶-2-基-1H-1，2，4-三唑-3-基)哌啶-1-基]甲基}苯 基)[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶-3-硫醇(1-7)；

3-甲基-9-苯基-8-(4-{[4-(5-吡啶-2-基-1H-1，2，4-三唑-3-基)哌啶-1-基] 甲基}苯基)[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶(2-2)；

9-苯基-8-(4-{[4-(5-吡啶-2-基-1H-1，2，4-三唑-3-基)哌啶-1-基]甲基}苯 基)[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶(2-3)；

3-(氯甲基)-9-苯基-8-(4-{[4-(4-吡啶-2-基-1H-咪唑-1-基)哌啶-1-基]甲 基}苯基)[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶(2-4)；

3-[(4-甲基哌嗪-1-基)甲基]-9-苯基-8-(4-{[4-(5-吡啶-2-基-1H-1，2，4-三 唑-3-基)哌啶-1-基]甲基}苯基)[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶(2-5)；

2-({[9-苯基-8-(4-{[4-(5-吡啶-2-基-1H-1，2，4-三唑-3-基)哌啶-1-基]甲 基}苯基)[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶-3-基]甲基}氨基)乙醇(2-6)；

8-(4-氨基甲基-苯基)-9-苯基-[1，2，4]三唑并[3，4-f][1，6]萘啶-3-醇(3- 8)；

1-[4-(9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶-8-基)苯基]甲胺(4-3)；

4-(3-甲基-9-苯基-[1，2，4]三唑并[3，4-f][1，6]萘啶-8-基)-苄基胺(5- 3)；

8-[4-(氨基甲基)苯基]-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶-3-胺(6- 2)；

1-[4-(9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶-8-基)苯基]乙胺(7-4)；

9-苯基-8-{4-[4-(5-吡啶-2-基-4H-[1，2，4]三唑-3-基)-哌啶-1-基甲基]- 苯基}-[1，2，4]三唑并[3，4-f][1，6]萘啶(8-10)；

9-苯基-8-(4-{[4-(5-吡啶-2-基-4H-1，2，4-三唑-3-基)哌啶-1-基]甲基}苯 基)-3-(1H-1，2，3-三唑-4-基)[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶(9-4)；

3-(1H-咪唑-4-基)-9-苯基-8-(4-{[4-(5-吡啶-2-基-4H-1，2，4-三唑-3-基) 哌啶-1-基]甲基}苯基)[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶(9-5)；

[9-苯基-8-(4-{[4-(5-吡啶-2-基-4H-1，2，4-三唑-3-基)哌啶-1-基]甲基} 苯基)[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶-3-基]甲基氨基甲酸叔丁基酯(9-6)；

[9-苯基-8-(4-{[4-(5-吡啶-2-基-4H-1，2，4-三唑-3-基)哌啶-1-基]甲基} 苯基)[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶-3-基]甲醇(9-7)；

5-[9-苯基-8-(4-{[4-(5-吡啶-2-基-4H-1，2，4-三唑-3-基)哌啶-1-基]甲基} 苯基)[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶-3-基]-2，4-二氢-3H-1，2，4-三唑-3-酮(9- 8)；

3-(3-甲基-1H-1，2，4-三唑-5-基)-9-苯基-8-(4-{[4-(5-吡啶-2-基-4H- 1，2，4-三唑-3-基)哌啶-1-基]甲基}苯基)[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶(9- 9)；

3-咪唑并[2，1-b][1，3]噻唑-6-基-9-苯基-8-(4-{[4-(5-吡啶-2-基-4H- 1，2，4-三唑-3-基)哌啶-1-基]甲基}苯基)[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶(9- 10)；

9-苯基-8-(4-{[4-(5-吡啶-2-基-4H-1，2，4-三唑-3-基)哌啶-1-基]甲基}苯 基)-3-[1，2，4]三唑并[1，5-a]嘧啶-2-基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶(9- 11)；

3-咪唑并[1，2-a]吡啶-2-基-9-苯基-8-(4-{[4-(5-吡啶-2-基-4H-1，2，4-三 唑-3-基)哌啶-1-基]甲基}苯基)[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶(9-12)；

9-苯基-8-(4-{[4-(5-吡啶-2-基-4H-1，2，4-三唑-3-基)哌啶-1-基]甲基}苯 基)-3-(1H-1，2，4-三唑-5-基)[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶(9-13)；

3-(1H-苯并咪唑-6-基)-9-苯基-8-(4-{[4-(5-吡啶-2-基-4H-1，2，4-三唑- 3-基)哌啶-1-基]甲基}苯基)[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶(9-14)；

3-(1，5-二甲基-1H-吡唑-3-基)-9-苯基-8-(4-{[4-(5-吡啶-2-基-4H-1，2，4- 三唑-3-基)哌啶-1-基]甲基}苯基)[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶(9-15)；

3-咪唑并[1，2-a]嘧啶-2-基-9-苯基-8-(4-{[4-(5-吡啶-2-基-4H-1，2，4-三 唑-3-基)哌啶-1-基]甲基}苯基)[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶(9-16)；

5-[9-苯基-8-(4-{[4-(5-吡啶-2-基-4H-1，2，4-三唑-3-基)哌啶-1-基]甲基} 苯基)[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶-3-基]吡啶-2-胺(9-17)；

9-苯基-3-吡唑并[1，5-a]嘧啶-3-基-8-(4-{[4-(5-吡啶-2-基-4H-1，2，4-三 唑-3-基)哌啶-1-基]甲基}苯基)[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶(9-18)；

3-(5-甲基-1H-吡唑-3-基)-9-苯基-8-(4-{[4-(5-吡啶-2-基-4H-1，2，4-三唑 -3-基)哌啶-1-基]甲基}苯基)[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶(9-19)；

3-[9-苯基-8-(4-{[4-(5-吡啶-2-基-4H-1，2，4-三唑-3-基)哌啶-1-基]甲基} 苯基)[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶-3-基]吡啶-2-胺(9-20)；

4-[9-苯基-8-(4-{[4-(5-吡啶-2-基-4H-1，2，4-三唑-3-基)哌啶-1-基]甲基} 苯基)[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶-3-基]苯酚(9-21)；

3-[9-苯基-8-(4-{[4-(5-吡啶-2-基-4H-1，2，4-三唑-3-基)哌啶-1-基]甲基} 苯基)[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶-3-基]苯酚(9-22)；

2-[9-苯基-8-(4-{[4-(5-吡啶-2-基-4H-1，2，4-三唑-3-基)哌啶-1-基]甲基} 苯基)[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶-3-基]苯酚(9-23)；

1-{4-[3-(5-氧代-4，5-二氢-1H-1，2，4-三唑-3-基)-9-苯基[1，2，4]三唑并 [3，4-f]-1，6-萘啶-8-基]苄基}哌啶-4-甲酰胺(9-24)；

1-[4-(3-咪唑并[1，2-a]吡啶-2-基-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶- 8-基)苄基]哌啶-4-甲酰胺(9-25)；

9-苯基-8-(4-{[4-(5-吡嗪-2-基-4H-1，2，4-三唑-3-基)哌啶-1-基]甲基}苯 基)[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶(10-4)；

9-苯基-8-(4-{[4-(5-嘧啶-2-基-4H-1，2，4-三唑-3-基)哌啶-1-基]甲基}苯 基)-3-(1H-1，2，3-三唑-4-基)[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶(11-4)；

3-(1-甲基-1H-咪唑-4-基)-9-苯基-8-(4-{[4-(5-嘧啶-2-基-4H-1，2，4-三唑 -3-基)哌啶-1-基]甲基}苯基)[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶(12-1)；

3-(1-甲基-1H-咪唑-4-基)-9-苯基-8-(4-{[4-(5-吡啶-2-基-4H-1，2，4-三唑 -3-基)哌啶-1-基]甲基}苯基)[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶(13-3)；

3-(1-甲基-1H-咪唑-4-基)-9-苯基-8-(4-{[4-(5-吡嗪-2-基-4H-1，2，4-三唑 -3-基)哌啶-1-基]甲基}苯基)[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶(13-4)；

N-[2-(4-甲基-1H-咪唑-2-基)乙基]-N-{4-[3-(1-甲基-1H-咪唑-4-基)-9- 苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶-8-基]苄基}胺(13-5)；

N1-(2-羟基苯基)-N3-{4-[3-(1-甲基-1H-咪唑-4-基)-9-苯基[1，2，4]三唑 并[3，4-f]-1，6-萘啶-8-基]苄基}-β-氨基丙酰胺(13-6)；

1-{4-[3-(1-甲基-1H-咪唑-4-基)-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶- 8-基]苄基}哌啶-4-甲酰胺(13-7)；

5-[({4-[3-(1-甲基-1H-咪唑-4-基)-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶 -8-基]苄基}氨基)甲基]吡啶-2-醇(13-8)；

N1，N1，2，2-四甲基-N3-{4-[3-(1-甲基-1H-咪唑-4-基)-9-苯基[1，2，4]三唑 并[3，4-f]-1，6-萘啶-8-基]苄基}丙烷-1，3-二胺(13-9)；

3-羟基-2，2-二甲基-N-[4-(3-甲基-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶 -8-基)苄基]丙-1-胺(13-10)；

2-氟-3-羟基-N-[4-(3-甲基-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶-8-基) 苄基]丙-1-胺(13-11)；

2，2-二氟-3-羟基-N-[4-(3-甲基-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶-8- 基)苄基]丙-1-胺(13-12)；

2，3-二羟基-N-[4-(3-甲基-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶-8-基) 苄基]丙-1-胺(13-13)；

4-羟基-N-[4-(3-甲基-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶-8-基)苄基] 环己胺(13-14)；

4-羟基-N-[4-(3-甲基-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶-8-基)苄基] 环己胺(13-15)；

3-羟基-2，2-二甲基-N-{4-[3-(1-甲基-1H-咪唑-4-基)-9-苯基[1，2，4]三唑 并[3，4-f]-1，6-萘啶-8-基]苄基}丙-1-胺(13-16)；

3-羟基-2，2-二甲基-N-[4-(9-苯基-3-[1，2，4]三唑并[1，5-a]嘧啶-2-基 [1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶-8-基)苄基]丙-1-胺(13-17)；

3-羟基-2，2-二甲基-N-[4-(9-苯基-3-吡唑并[1，5-a]嘧啶-2-基[1，2，4]三 唑并[3，4-f]-1，6-萘啶-8-基)苄基]丙-1-胺(13-18)；

3-羟基-2，2-二甲基-N-{4-[9-苯基-3-(1H-1，2，3-三唑-4-基)[1，2，4]三唑 并[3，4-f]-1，6-萘啶-8-基]苄基}丙-1-胺(13-19)；

{[8-(4-{[(3-羟基-2，2-二甲基丙基)氨基]甲基}苯基)-9-苯基[1，2，4]三 唑并[3，4-f]-1，6-萘啶-3-基]甲基}氨基甲酸叔丁基酯(13-20)；

N-{4-[3-(氨基(ammonio)甲基)-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶- 8-基]苄基}-3-羟基-2，2-二甲基丙-1-胺(13-21)；

[9-苯基-8-(4-{[4-(5-吡嗪-2-基-4H-1，2，4-三唑-3-基)哌啶-1-基]甲基} 苯基)[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶-3-基]甲醇(14-3)；

N3-{4-[3-(羟基甲基)-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶-8-基]苄 基}-N1-(2-羟基苯基)-β-氨基丙酰胺(14-4)；

(8-{4-[(环己基氨基)甲基]苯基}-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶- 3-基)甲醇(14-5)；

N3-{4-[3-(羟基甲基)-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶-8-基]苄 基}-N1-(4-羟基苯基)-β-氨基丙酰胺(14-6)；

[9-苯基-8-(4-{[4-(5-吡啶-3-基-4H-1，2，4-三唑-3-基)哌啶-1-基]甲基} 苯基)[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶-3-基]甲醇(14-7)；

1-{4-[3-(羟基甲基)-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶-8-基]苄基} 哌啶-4-甲酰胺(14-8)；

{8-[4-(1-氨基环丙基)苯基]-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶-3-基} 甲醇(15-2)；

1-[4-(9-苯基-3-吡啶-4-基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶-8-基)苯基]甲 胺(16-3)；

1-{4-[3-(1-氧化吡啶-3-基)-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶-8-基] 苯基}甲胺(16-4)；

1-[4-(3，9-二苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶-8-基)苯基]甲胺(16- 5)；

1-{4-[3-(4-氟苯基)-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶-8-基]苯基} 甲胺(16-6)；

4-{8-[4-(氨基甲基)苯基]-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶-3-基} 苄腈(16-7)；

4-(9-苯基-3-嘧啶-4-基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶-8-基)苄基胺 (16-8)；

1-{4-[3-(1-氧化吡啶-2-基)-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶-8-基] 苯基}甲胺(16-9)；

5-{8-[4-(氨基甲基)苯基]-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶-3-基} 吡啶-2-醇(16-10)；

1-[4-(9-苯基-3-吡啶-3-基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶-8-基)苯基]甲 胺(16-11)；

4-(9-苯基-3-嘧啶-2-基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶-8-基)苄基胺 (16-12)；

1-[4-(9-苯基-3-吡啶-2-基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶-8-基)苯基]甲 胺(16-13)；

1-[4-(9-苯基-3-吡嗪-2-基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶-8-基)苯基]甲 胺(16-14)；

1-{4-[9-苯基-3-(1H-1，2，4-三唑-3-基)[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶-8- 基]苯基}甲胺(16-15)；

1-{4-[9-苯基-3-(1，3-噻唑-4-基)[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶-8-基]苯 基}甲胺(16-16)；

1-{4-[9-苯基-3-(1H-吡唑-4-基)[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶-8-基]苯 基}甲胺(16-17)；

1-{4-[3-(3-甲基-1H-吡唑-4-基)-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶- 8-基]苯基}甲胺(16-18)；

1-{4-[3-(3-甲基-1H-1，2，4-三唑-5-基)-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6- 萘啶-8-基]苯基}甲胺(16-19)；

1-{4-[3-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶- 8-基]苯基}甲胺(16-20)；

1-{4-[9-苯基-3-(1，2，5-噻二唑-3-基)[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶-8-基] 苯基}甲胺(16-21)；

1-{4-[9-苯基-3-(1，2，3-噻二唑-4-基)[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶-8-基] 苯基}甲胺(16-22)；

1-[4-(9-苯基-3-吡唑并[1，5-a]嘧啶-3-基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶- 8-基)苯基]甲胺(16-23)；

{8-[4-(氨基甲基)苯基]-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶-3-基}甲 胺(16-24)；

{8-[4-(氨基甲基)苯基]-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶-3-基}甲 醇(16-25)

1-{4-[9-苯基-3-(2，2，2-三氟乙基)[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶-8-基] 苯基}甲胺(16-26)；

1-{4-[9-苯基-3-(1H-四唑-1-基甲基)[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶-8- 基]苯基}甲胺(16-27)；

8-[4-(氨基甲基)苯基]-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶-3-甲酰胺 (16-28)；

1-{4-[3-(1H-咪唑-1-基甲基)-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶-8- 基]苯基}甲胺(16-29)；

1-(4-{3-[(甲基磺酰基)甲基]-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶-8- 基}苯基)甲胺(16-30)；

{8-[4-(氨基甲基)苯基]-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶-3-基}乙 腈(16-31)；

2-{8-[4-(氨基甲基)苯基]-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶-3-基} 乙醇(16-32)；

N-({8-[4-(氨基甲基)苯基]-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶-3-基} 甲基)乙酰胺(16-33)；

4-[3-(2-甲基咪唑并[1，2-a]吡啶-3-基)-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6- 萘啶-8-基]苄基胺(16-34)；

1-[4-(9-苯基-3-吡唑并[1，5-a]吡啶-3-基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶- 8-基)苯基]甲胺(16-35)；

1-[4-(3-咪唑并[1，2-a]吡啶-2-基-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶- 8-基)苯基]甲胺(16-36)；

1-{4-[9-苯基-3-(4，5，6，7-四氢-1，2-苯并异噁唑-3-基)[1，2，4]三唑并[3，4- f]-1，6-萘啶-8-基]苯基}甲胺(16-37)；

1-[4-(3-咪唑并[2，1-b][1，3]噻唑-6-基-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6- 萘啶-8-基)苯基]甲胺(16-38)；

1-{4-[3-(1-甲基-1H-咪唑-5-基)-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶- 8-基]苯基}甲胺(16-39)；

1-{4-[3-(1-甲基-1H-咪唑-4-基)-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶- 8-基]苯基}甲胺(16-40)；

4-[3-(1-甲基-5-苯基-1H-吡唑-4-基)-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘 啶-8-基]苄基胺(16-41)；

1-{4-[9-苯基-3-(4，5，6，7-四氢-1-苯并噻吩-3-基)[1，2，4]三唑并[3，4-f]- 1，6-萘啶-8-基]苯基}甲胺(16-42)；

1-{4-[3-(1-异丙基-1H-吡唑-4-基)-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘 啶-8-基]苯基}甲胺(16-43)；

1-{4-[9-苯基-3-(1，4，5，6-四氢环戊烷并[c]吡唑-3-基)[1，2，4]三唑并 [3，4-f]-1，6-萘啶-8-基]苯基}甲胺(16-44)；

1-(4-{9-苯基-3-[(2S)-吡咯烷-2-基][1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶-8-基} 苯基)甲胺(16-45)；

4-[3-(1-氨基乙基)-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶-8-基]苄基胺 (16-46)；

1-{4-[3-(1H-咪唑-2-基)-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶-8-基]苯 基}甲胺(16-47)；

1-[4-(3-环丙基-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶-8-基)苯基]甲胺 (16-48)；

1-{4-[9-苯基-3-(三氟甲基)[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶-8-基]苯基} 甲胺(16-49)；

1-{4-[3-(5-甲基-1H-吡唑-3-基)-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶- 8-基]苯基}甲胺(16-50)；

1-{4-[3-(1，5-二甲基-1H-吡唑-3-基)-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘 啶-8-基]苯基}甲胺(16-51)；

4-[3-(1H-吲哚-2-基)-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶-8-基]苄基 胺(16-52)；

1-{4-[3-(1-甲基-1H-咪唑-2-基)-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶- 8-基]苯基}甲胺(16-53)；

1-{4-[3-(3-甲基-2H-3λ5-咪唑-4-基)-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘 啶-8-基]苯基}甲胺(16-54)；

4-[3-(6-氯咪唑并[1，2-a]吡啶-2-基)-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘 啶-8-基]苄基胺(16-55)；

1-{4-[3-(1H-苯并咪唑-2-基)-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶-8- 基]苯基}甲胺(16-56)；

4-[3-(5-环丙基-4H-吡唑-3-基)-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶-8- 基]苄基胺(16-57)；

1-{4-[9-苯基-3-(4，5，6，7-四氢-1H-吲唑-3-基)[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6- 萘啶-8-基]苯基}甲胺(16-58)；

4-[9-苯基-3-(3-苯基-1H-吡唑-5-基)[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶-8-基] 苄基胺(16-59)；

1-(4-{9-苯基-3-[3-(三氟甲基)-1H-吡唑-5-基][1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6- 萘啶-8-基}苯基)甲胺(16-60)；

1-[4-(9-苯基-3-吡唑并[1，5-a]嘧啶-2-基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶- 8-基)苯基]甲胺(16-61)；

1-{4-[3-(1-苄基-1H-吡唑-4-基)-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶- 8-基]苯基}甲胺(16-62)；

1-[4-(9-苯基-3-[1，2，4]三唑并[1，5-a]嘧啶-2-基[1，2，4]三唑并[3，4-f]- 1，6-萘啶-8-基)苯基]甲胺(16-63)；

4-[9-苯基-3-(1-苯基-1H-吡唑-4-基)[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶-8-基] 苄基胺(16-64)；

1-{4-[9-苯基-3-(4，5，6，7-四氢-2-苯并噻吩-1-基)[1，2，4]三唑并[3，4-f]- 1，6-萘啶-8-基]苯基}甲胺(16-65)；

1-{4-[9-苯基-3-(5，6，7，8-四氢咪唑并[1，2-a]吡啶-2-基)[1，2，4]三唑并 [3，4-f]-1，6-萘啶-8-基]苯基}甲胺(16-66)；

2-{8-[4-(氨基甲基)苯基]-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶-3-基} 丙-2-胺(16-67)；

1-{8-[4-(氨基甲基)苯基]-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶-3-基} 乙烷-1，2-二醇(16-68)；

4-{8-[4-(氨基甲基)苯基]-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶-3-基} 咪唑烷-2-酮(16-69)；

(2R)-2-氨基-2-{8-[4-(氨基甲基)苯基]-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6- 萘啶-3-基}乙醇(16-70)；

(2R)-2-{8-[4-(氨基甲基)苯基]-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶-3- 基}-2-(甲基氨基)乙醇(16-71)；

1-{4-[3-(5-乙基异噁唑-3-基)-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶-8- 基]苯基}甲胺(16-72)；

5-{8-[4-(氨基甲基)苯基]-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶-3-基}- 2，4-二氢-3H-1，2，4-三唑-3-酮(16-73)；

6-{8-[4-(氨基甲基)苯基]-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶-3-基}- 4，5-二氢哒嗪-3(2H)-酮(16-74)；

6-{8-[4-(氨基甲基)苯基]-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶-3-基} 哒嗪-3(2H)-酮(16-75)；

N-(4-{8-[4-(氨基甲基)苯基]-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶-3- 基}苯基)乙酰胺(16-76)；

1-{4-[3-(4-苯氧基苯基)-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶-8-基]苯 基}甲胺(16-77)；

1-{4-[3-(1H-苯并咪唑-5-基)-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶-8- 基]苯基}甲胺(16-78)；

(4-{8-[4-(氨基甲基)苯基]-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶-3-基} 苯基)甲醇(16-79)；

4-[3-(4-环己基苯基)-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶-8-基]苄基 胺(16-80)；

4-{8-[4-(氨基甲基)苯基]-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶-3-基}- 1，3-二氢-2H-咪唑-2-酮(16-81)；

1-{4-[3-(4-甲基-1H-咪唑-5-基)-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶- 8-基]苯基}甲胺(16-82)；

4-[9-苯基-3-(1-丙基-1H-咪唑-4-基)[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶-8-基] 苄基胺(16-83)；

1-{4-[3-(1-异丙基-1H-咪唑-4-基)-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘 啶-8-基]苯基}甲胺(16-84)；

1-{4-[3-(1-丁基-1H-咪唑-4-基)-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶- 8-基]苯基}甲胺(16-85)；

1-[4-(3-咪唑并[1，2-a]嘧啶-2-基-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶- 8-基)苯基]甲胺(16-86)；

5-({[4-(3-甲基-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶-8-基)苄基]氨基} 甲基)吡啶-2-醇(17-3)；

1-(6-甲氧基吡啶-3-基)-N-[4-(3-甲基-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6- 萘啶-8-基)苄基]甲胺(17-4)；

N-[(2-甲氧基嘧啶-5-基)甲基]-N-[4-(3-甲基-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4- f]-1，6-萘啶-8-基)苄基]胺(17-5)；

1-[4-(3-乙基-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶-8-基)苯基]甲胺 (17-6)；

1-[4-(9-苯基-3-丙基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶-8-基)苯基]甲胺 (17-7)；

N-[4-(9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶-8-基)苄基]乙酰胺(18- 1)；

4-({[4-(9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶-8-基)苄基]氨基}甲基)苯 酚(19-1)；

1-[9-苯基-8-(4-{[4-(5-吡啶-2-基-4H-1，2，4-三唑-3-基)哌啶-1-基]甲基} 苯基)[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶-3-基]甲胺(20-1)；

9-苯基-3-(1H-1，2，3-三唑-4-基)-8-(4-{[4-(4H-1，2，4-三唑-3-基)哌啶-1- 基]甲基}苯基)[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶(21-4)；

1-{4-[3-(1H-咪唑-4-基)-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶-8-基]苯 基}甲胺(22-3)；

1-{4-[9-苯基-3-(3H-1λ4，3-噻唑-5-基)[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶-8- 基]苯基}甲胺(22-4)；

1-{4-[9-苯基-3-(1H-吡唑-3-基)-2H-4λ5-[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶- 8-基]苯基}甲胺(22-5)；

1-{4-[9-苯基-3-(1，3-噻唑-4-基)[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶-8-基]苯 基}甲胺(22-6)；

4-[9-苯基-3-(吡咯烷-1-基甲基)[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶-8-基]苄 基胺(26-2)；

1-{4-[3-(氮杂环丁烷-1-基甲基)-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶- 8-基]苯基}甲胺(26-3)；

1-({8-[4-(氨基甲基)苯基]-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶-3-基} 甲基)哌啶-4-甲酰胺(26-4)；

1-{4-[3-(吗啉-4-基甲基)-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶-8-基]苯 基}甲胺(26-5)；

2-[({8-[4-(氨基甲基)苯基]-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶-3-基} 甲基)氨基]乙醇(26-6)；

1-(4-{3-[(4-甲基哌嗪-1-基)甲基]-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶 -8-基}苯基)甲胺(26-7)；

4-[9-苯基-3-(哌嗪-1-基甲基)[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶-8-基]苄基 胺(26-8)；

N-({8-[4-(氨基甲基)苯基]-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶-3-基} 甲基)-N-甲基胺(26-9)；

N-({8-[4-(氨基甲基)苯基]-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶-3-基} 甲基)-N，N-二甲基胺(26-10)；

[4-(3-甲基-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶-8-基)苯基]甲醇(28- 1)；

{4-[3-(1-甲基-1H-咪唑-4-基)-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶-8- 基]苯基}甲醇(28-2)；

1-[4-(9-苯基-3-[1，2，4]三唑并[1，5-a]嘧啶-2-基[1，2，4]三唑并[3，4-f]- 1，6-萘啶-8-基)苯基]乙醇(29-2)；

9-苯基-8-(4-{[4-(4H-1，2，4-三唑-3-基)哌啶-1-基]甲基}苯基)[1，2，4]三 唑并[3，4-f]-1，6-萘啶(30-1)；

3-甲基-9-苯基-8-(4-{[4-(4H-1，2，4-三唑-3-基)哌啶-1-基]甲基}苯 基)[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶(31-1)；

9-苯基-8-(4-{[4-(4H-1，2，4-三唑-3-基)哌啶-1-基]甲基}苯基)[1，2，4]三 唑并[3，4-f]-1，6-萘啶-3-醇(32-1)；

1-[4-(3-甲基-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶-8-基)苯基]环丙胺 (33-5)；

1-{4-[3-(1-甲基-1H-咪唑-4-基)-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶- 8-基]苯基}环丙胺(33-6)；

1-[4-(9-苯基-3-[1，2，4]三唑并[1，5-a]嘧啶-2-基[1，2，4]三唑并[3，4-f]- 1，6-萘啶-8-基)苯基]环丙胺(33-7)；

1-{4-[9-苯基-3-(5，6，7，8-四氢咪唑并[1，2-a]吡啶-2-基)[1，2，4]三唑并 [3，4-f]-1，6-萘啶-8-基]苯基}环丙胺(33-8)；

1-[4-(9-苯基-3-嘧啶-2-基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶-8-基)苯基]环 丙胺(33-9)；

1-{4-[3-(1，5-二甲基-1H-吡唑-3-基)-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘 啶-8-基]苯基}环丙胺(33-10)；

(1R)-1-[4-(3-甲基-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶-8-基)苯基]乙 胺(34-5)；

(1R)-1-[4-(9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶-8-基)苯基]乙胺(34- 6)；

(1R)-1-{4-[9-苯基-3-(5-吡啶-2-基-1H-吡唑-3-基)[1，2，4]三唑并[3，4-f]- 1，6-萘啶-8-基]苯基}乙胺(35-1)；

(1R)-1-{4-[3-(羟基甲基)-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶-8-基]苯 基}乙胺(35-2)；

(1R)-1-{4-[3-(1-甲基-1H-咪唑-4-基)-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6- 萘啶-8-基]苯基}乙胺(35-3)；

(1R)-1-[4-(9-苯基-3-[1，2，4]三唑并[1，5-a]嘧啶-2-基[1，2，4]三唑并[3，4- f]-1，6-萘啶-8-基)苯基]乙胺(35-4)；

(1R)-1-[4-(3-咪唑并[2，1-b][1，3]噻唑-6-基-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]- 1，6-萘啶-8-基)苯基]乙胺(35-5)；

(1R)-1-[4-(9-苯基-3-嘧啶-2-基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶-8-基)苯 基]乙胺(35-6)；

(1R)-1-[4-(9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶-8-基)苯基]丙-1-胺 (36-1)；

2-[4-(3-甲基-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶-8-基)苯基]丙-2-胺 (37-4)

2-[4-(9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶-8-基)苯基]丙-2-胺(38- 1)；

3-(2-{[4-(3-甲基-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶-8-基)苄基]氨 基}-2-氧代乙基)吡啶(39-1)；

N-[4-(3-甲基-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶-8-基)苄基]-5-吡啶 -4-基-2-糠酰胺(39-2)；

N-[4-(3-甲基-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶-8-基)苄基]-5-吡啶 -3-基-2-糠酰胺(39-3)；

N-[4-(3-甲基-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶-8-基)苄基]-5-吡啶 -3-基-1H-吡咯-3-甲酰胺(39-4)；

2-羟基-N-[4-(3-甲基-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶-8-基)苄基] 乙酰胺(39-5)；

(2-{[4-(3-甲基-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶-8-基)苄基]氨基}- 2-氧代乙基)氨基甲酸叔丁基酯(39-6)；

4-(2-{[4-(3-甲基-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶-8-基)苄基]氨 基}-2-氧代乙基)吗啉(39-7)；

2-{[4-(3-甲基-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶-8-基)苄基]氨基}- 2-氧代乙胺(39-8)；

4-(2-{[4-(3-甲基-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶-8-基)苄基]氨 基}-2-氧代乙基)吡啶(39-9)；

2，4-二羟基-6-(2-{[4-(3-甲基-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶-8- 基)苄基]氨基}-2-氧代乙基)嘧啶(39-10)；

2-(2-{[4-(3-甲基-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶-8-基)苄基]氨 基}-2-氧代乙基)吡啶(39-11)；

3-(2-{[4-(3-甲基-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶-8-基)苄基]氨 基}-2-氧代乙基)吡啶(39-12)；

N-[4-(3-甲基-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶-8-基)苄基]-2-吡嗪 -2-基乙酰胺(39-13)；

3-甲基-9-苯基-8-[4-({[(吡啶-3-基氨基)羰基]氨基}甲基)苯基][1，2，4] 三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶(39-14)；

2-(2-羟基苯基)-N-[4-(3-甲基-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶-8- 基)苄基]乙酰胺(39-15)；

2-(3-羟基苯基)-N-[4-(3-甲基-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶-8- 基)苄基]乙酰胺(39-16)；

2-(4-羟基苯基)-N-[4-(3-甲基-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶-8- 基)苄基]乙酰胺(39-17)；

2-(3，4-二羟基苯基)-N-[4-(3-甲基-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘 啶-8-基)苄基]乙酰胺(39-18)；

N-[4-(3-甲基-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶-8-基)苄基]-2-苯基 乙酰胺(39-19)；

3-甲基-9-苯基-8-(4-{[(吡啶-3-基羰基)氨基]甲基}苯基)[1，2，4]三唑并 [3，4-f]-1，6-萘啶(39-20)；

2-羟基-N-[4-(3-甲基-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶-8-基)苄基] 苯甲酰胺(39-21)；

2-(4-羟基苯基)-2-甲基-N-[4-(3-甲基-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6- 萘啶-8-基)苄基]丙酰胺(39-22)；

4-{[4-(3-甲基-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶-8-基)苄基]氨基}- 4-氧代丁酸甲酯(39-23)；

2-羟基-N-(2-{[4-(3-甲基-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶-8-基)苄 基]氨基}-2-氧代乙基)苯甲酰胺(39-24)；

N-[4-(3-甲基-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶-8-基)苄基]-2-(5-苯 基-4H-1，2，4-三唑-3-基)乙酰胺(39-25)；

3-甲基-9-苯基-8-(4-{[(喹啉-3-基羰基)氨基]甲基}苯基)[1，2，4]三唑并 [3，4-f]-1，6-萘啶(39-26)；

N-[4-(3-甲基-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶-8-基)苄基]-2-(4-氧 代喹唑啉-3(4H)-基)乙酰胺(39-27)；

N-[4-(3-甲基-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶-8-基)苄基]-2-(2-氧 代-1，3-苯并噁唑-3(2H)-基)乙酰胺(39-28)；

8-(4-{[(1H-苯并咪唑-1-基乙酰基)氨基]甲基}苯基)-3-甲基-9-苯基 [1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶(39-29)；

8-(4-{[(1H-苯并咪唑-2-基乙酰基)氨基]甲基}苯基)-3-甲基-9-苯基 [1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶(39-30)；

2-(4-甲基-1，2，5-噁二唑-3-基)-N-[4-(3-甲基-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4- f]-1，6-萘啶-8-基)苄基]乙酰胺(39-31)；

2-(1H-吲唑-1-基)-N-[4-(3-甲基-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶- 8-基)苄基]乙酰胺(39-32)；

2-(5，6-二甲基-4-氧代噻吩并[2，3-d]嘧啶-3(4H)-基)-N-[4-(3-甲基-9-苯 基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶-8-基)苄基]乙酰胺(39-33)；

3-甲基-8-[4-({[(6-吗啉-4-基吡啶-3-基)羰基]氨基}甲基)苯基]-9-苯基 [1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶(39-34)；

2-(6-氯吡啶-3-基)-N-[4-(3-甲基-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶- 8-基)苄基]乙酰胺(39-35)；

3-氰基-N-[4-(3-甲基-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶-8-基)苄基] 丙酰胺(39-36)；

3-甲基-9-苯基-8-(4-{[(3-吡啶-3-基丙酰基)氨基]甲基}苯基)[1，2，4]三 唑并[3，4-f]-1，6-萘啶(39-37)；

3-(1-甲基-1H-咪唑-4-基)-9-苯基-8-(4-{[(吡啶-3-基乙酰基)氨基]甲基} 苯基)[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶(39-38)；

9-苯基-3-吡唑并[1，5-a]嘧啶-3-基-8-(4-{[(吡啶-3-基乙酰基)氨基]甲 基}苯基)[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶(39-39)；

N-(3-羟基-2，2-二甲基丙基)-N-[4-(3-甲基-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]- 1，6-萘啶-8-基)苄基]乙酰胺(39-40)；

N-(3-羟基-2，2-二甲基丙基)-N-{4-[3-(1-甲基-1H-咪唑-4-基)-9-苯基 [1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶-8-基]苄基}-2-(4-氧代喹唑啉-3(4H)-基)乙酰 胺(39-41)；

{2-[[4-(3-{[(叔丁氧羰基)氨基]甲基}-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6- 萘啶-8-基)苄基](3-羟基-2，2-二甲基丙基)氨基]-2-氧代乙基}氨基甲酸叔 丁基酯(39-42)；

3-甲基-9-苯基-8-(4-{1-[(吡啶-3-基乙酰基)氨基]环丙基}苯基)[1，2，4] 三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶(39-43)；

3-甲基-9-苯基-8-(4-{1-[(喹啉-3-基羰基)氨基]环丙基}苯基)[1，2，4]三 唑并[3，4-f]-1，6-萘啶(39-44)；

N-{1-[4-(3-甲基-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶-8-基)苯基]环丙 基}-2-(4-氧代喹唑啉-3(4H)-基)乙酰胺(39-45)；

3-(1-甲基-1H-咪唑-4-基)-9-苯基-8-(4-{1-[(吡啶-3-基乙酰基)氨基]环 丙基}苯基)[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶(39-46)；

N-{(1R)-1-[4-(3-甲基-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶-8-基)苯基] 乙基}-2-吡啶-3-基乙酰胺(39-47)；

N-{(1R)-1-[4-(3-甲基-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶-8-基)苯基] 乙基}乙酰胺(39-48)；

N-((1R)-1-{4-[3-(羟基甲基)-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶-8-基] 苯基}乙基)-2-吡啶-3-基乙酰胺(39-49)；

N-{1-甲基-1-[4-(9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶-8-基)苯基]乙基} 乙酰胺(39-50)；和

N-{1-甲基-1-[4-(3-甲基-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶-8-基)苯 基]乙基}乙酰胺(39-51)；

或其可药用盐或立体异构体。

本发明化合物可以有不对称中心、手性轴和手性面(参见E.L.Eliel 和S.H.Wilen，Stereochemistry of Carbon Compounds，John Wiley & Sons， New York，1994，第1119-1190页)，以外消旋体、外消旋混合物以及以 单一非对映异构体的形式存在，连同所有可能的异构体及其混合物，包 括旋光异构体在内，所有这些立体异构体都包括在本发明中。

另外，本文所公开的化合物可以互变异构体的形式存在，虽然只描 述了一种互变结构，但互变异构体的两种形式都包括在本发明的范围 内。例如，以下形式处在本发明的范围内：

四唑以1H/2H互变异构体混合物的形式存在。四唑部分的互变形式也在 本发明的范围内。

任何变量(例如R2等)在任何组成中出现的次数超过一次时，其每次 出现时的定义都独立于其它各次出现时的定义。还允许取代基与变量的 组合，只要这种组合可以产生稳定的化合物。由取代基画进环系内的线 条表示，所表示的键可与任何可取代的环原子相连接。如果环系是双环 的，则指该键与双环中任何环上的任何合适的原子相连接。

不用说本领域技术人员可将一个或多个硅(Si)原子引入到本发明的 化合物中代替一个或多个碳原子，以提供化学上稳定的化合物，而且通 过本领域已知的技术，可由容易得到的原材料容易地合成该化合物。当 比较类似的C-元素和Si-元素键时碳和硅的共价半径不同导致键长和空 间立体排列不同，这些差别导致当与碳比较时含硅化合物的大小和形状 的细微改变。本领域技术人员将理解大小和形状的差别可以导致在效 力、溶解性、偏离目标活性的缺少、包装性质等方面的细微的或显著的 改变(Diass，J.O.等，Organometallics(2006)5：1188-1198；Showell，G.A. 等，Bioorganic & Medicinal Chemistry Letters(2006)16：2555-2558)。

不用说本领域技术人员可选择本发明化合物的取代基及取代方 式，以提供化学上稳定的化合物，而且通过本领域已知的技术以及下述 方法，可由容易得到的原材料方便地合成该化合物。如果取代基自身被 不止一个基团取代，则认为只要产生稳定结构，这些多个基团可在相同 或不同的碳上。短语“任选被一个或多个取代基取代”应理解为等价于 “任选被至少一个取代基取代”，并且在优选的实施方案中具有0-4 个取代基，在更优选的实施方案中具有0-3个取代基。

本文所用的“烷基”是指包括支链和直链的含有规定碳原子数的饱 和脂族烃基团。例如，“C1-C10烷基”中的C1-C10是指包括以直链或支链 排列含有1、2、3、4、5、6、7、8、9或10个碳原子的基团。例如， “C1-C10烷基”具体包括甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、叔丁基、 异丁基、戊基、己基、庚基、辛基、壬基、癸基等。

术语“环烷基”是指含有规定碳原子数的单环饱和脂族烃基团。例 如，“环烷基”包括环丙基、甲基-环丙基、2，2-二甲基-环丁基、2-乙基- 环戊基、环己基等。

“烷氧基”表示通过氧桥连接的标明碳原子数的环状烷基或非环状 烷基。因此，“烷氧基”包括上述烷基和环烷基的定义。

如果没有说明碳原子的数目，术语“烯基”则指含有2-10个碳原子 和至少1个碳碳双键的直链、支链或环状的非芳香烃基。优选地存在1 个碳碳双键，且可能存在至多4个非芳族碳碳双键。因此，“C2-C10烯 基”是指含有2-10个碳原子的烯基。烯基包括乙烯基、丙烯基、丁烯 基、2-甲基丁烯基和环己烯基。烯基的直链、支链或环状部分可包含双 键，且如果说明是取代烯基则可被取代。

术语“炔基”是指含有2-10个碳原子和至少1个碳碳参键的直链、 支链或环状的烃基。可能存在至多三个碳碳参键。因此，“C2-C10炔基” 是指含有2-10个碳原子的炔基。炔基包括乙炔基、丙炔基、丁炔基、 3-甲基丁炔基等。炔基的直链、支链或环状部分可包含碳碳参键，且如 果说明是取代炔基则可被取代。

在某些情况下，可用包括零在内的碳的范围定义取代基，例如(C0- C6)亚烷基-芳基。如果芳基是指苯基，则该定义可包括苯基本身以及- CH2Ph、-CH2CH2Ph、CH(CH3)CH2CH(CH3)Ph等。

本文所用的“芳基”是指其各环中有至多7个原子的任何稳定的单环 碳环或双环碳环，其中至少一个环为芳环。此类芳基的实例包括苯基、 萘基、四氢-萘基、茚满基和联苯基。在芳基取代基为双环且一个环为非 芳环的情况下，一般认为是通过芳环连接的。

本文所用术语杂芳基代表稳定的单环或二环，每个环中具有最多7 个原子，其中至少一个环是芳环并且含有1-4个选自O、N和S的杂 原子。在该定义范围内的杂芳基包括但不限于：吖啶基、咔唑基、噌啉 基、喹喔啉基、吡唑基、吲哚基、苯并三唑基、呋喃基、噻吩基、苯并 噻吩基、苯并呋喃基、喹啉基、异喹啉基、噁唑基、异噁唑基、吲哚基、 吡嗪基、哒嗪基、吡啶基、嘧啶基、吡咯基、四氢喹啉。如下面的杂环 的定义，还应当理解，“杂芳基”包括含有氮的任何杂芳基的N-氧化物 衍生物。当杂芳基取代基是二环的，并且一个环是非芳族的或者不含杂 原子时，应当理解，连接分别是经由芳环或含有杂原子的环。对于取代 基Q，这样的杂芳基部分包括但不限于：2-苯并咪唑基、2-喹啉基、3- 喹啉基、4-喹啉基、1-异喹啉基、3-异喹啉基和4-异喹啉基。

本文所用的术语“杂环”或“杂环基”是指含有1-4个选自O、N和S 的杂原子的3-10元芳族杂环或非芳族杂环，还包括双环基团。因此， “杂环基”包括上述的杂芳基，以及其二氢类似物和四氢类似物。“杂环基” 的其它实例包括但不限于下述基团：苯并咪唑基、苯并咪唑酮基、苯并 呋喃基、苯并呋咱基、苯并吡唑基、苯并三唑基、苯并噻吩基、苯并噁 唑基、咔唑基、咔啉基、噌啉基、呋喃基、咪唑基、二氢吲哚基、吲哚 基、吲嗪基(indolazinyl)、吲唑基、异苯并呋喃基、异吲哚基、异喹啉基、 异噻唑基、异噁唑基、萘吡啶基(naphthpyridinyl)、噁二唑基、噁唑基、 噁唑啉、异噁唑啉、氧杂环丁烷基、吡喃基、吡嗪基、吡唑基、哒嗪基、 吡啶并吡啶基、哒嗪基、吡啶基、嘧啶基、吡咯基、喹唑啉基、喹啉基、 喹喔啉基、四氢吡喃基、四唑基、四唑并吡啶基、噻二唑基、噻唑基、 噻吩基、三唑基、氮杂环丁烷基、1，4-二氧杂环己烷基、六氢氮杂基、 哌嗪基、哌啶基、吡啶-2-酮基、吡咯烷基、吗啉基、硫代吗啉基、二氢 苯并咪唑基、二氢苯并呋喃基、二氢苯并噻吩基、二氢苯并噁唑基、二 氢呋喃基、二氢咪唑基、二氢吲哚基、二氢异噁唑基、二氢异噻唑基、 二氢噁二唑基、二氢噁唑基、二氢吡嗪基、二氢吡唑基、二氢吡啶基、 二氢嘧啶基、二氢吡咯基、二氢喹啉基、二氢四唑基、二氢噻二唑基、 二氢噻唑基、二氢噻吩基、二氢三唑基、二氢氮杂环丁烷基、亚甲二氧 基苯甲酰基、四氢呋喃基和四氢噻吩基，以及它们的N-氧化物。杂环基 取代基可通过碳原子或杂原子连接。

正如本领域技术人中所知，本文所用的“卤基”或“卤素”包括氯 (Cl)、氟(F)、溴(Br)和碘(I)。

在式A、B、C或D的实施方案中，由下式说明的部分：

包括以下结构，这些结构仅是示例性而非限制性的：

在式A、B、C或D的另一个实施方案中，由下式说明的部分：

为：

在一个实施方案中，环Z选自：苯基和杂环基。

在另一个实施方案中，环Z选自：

在另一个实施方案中，环Z为苯基。

在一个实施方案中，p独立地为0、1、2或3。

在另一个实施方案中，p独立地为0、1或2。

在另一个实施方案中，p独立地为1。

在一个实施方案中，r为0、1、2或3。

在另一个实施方案中，r为0、1或2。

在另一个实施方案中，r为1。

在一个实施方案中，Q选自：苯并咪唑基、苯并咪唑酮基、苯并呋 喃基、苯并呋咱基、苯并吡唑基、苯并三唑基、苯并噻吩基、苯并噁唑 基、咔唑基、咔啉基、噌啉基、呋喃基、咪唑基、二氢吲哚基、吲哚基、 吲嗪基、吲唑基、异苯并呋喃基、异吲哚基、异喹啉基、异噻唑基、异 噁唑基、萘吡啶基、噁二唑基、噁唑基、噁唑啉、异噁唑啉、氧杂环丁烷 基、吡喃基、吡嗪基、吡唑基、哒嗪基、吡啶并吡啶基、哒嗪基、吡啶 基、嘧啶基、吡咯基、喹唑啉基、喹啉基、喹喔啉基、四氢吡喃基、四 唑基、四唑并吡啶基、噻二唑基、噻唑基、噻吩基、三唑基、氮杂环丁 烷基、1，4-二氧杂环己烷基、六氢氮杂基、哌嗪基、哌啶基、吡啶-2- 酮基、吡咯烷基、吗啉基、硫代吗啉基、二氢苯并咪唑基、二氢苯并呋 喃基、二氢苯并噻吩基、二氢苯并噁唑基、二氢呋喃基、二氢咪唑基、 二氢吲哚基、二氢异噁唑基、二氢异噻唑基、二氢噁二唑基、二氢噁唑 基、二氢吡嗪基、二氢吡唑基、二氢吡啶基、二氢嘧啶基、二氢吡咯基、 二氢喹啉基、二氢四唑基、二氢噻二唑基、二氢噻唑基、二氢噻吩基、 二氢三唑基、二氢氮杂环丁烷基、亚甲二氧基苯甲酰基、四氢呋喃基和 四氢噻吩基，以及它们的N-氧化物，任选被1-3个选自R6a的取代基取 代。杂环基取代基可通过碳原子或杂原子连接。

在另一个实施方案中，Q选自2-氮杂酮、苯并咪唑基、苯并咪唑 酮基、2-二氮杂酮、咪唑基、2-咪唑烷酮、吲哚基、异喹啉基、吗啉 基、哌啶基、哌嗪基、吡啶基、吡咯烷基、2-哌啶酮、2-嘧啶酮、2-吡 咯烷酮、喹啉基、四唑基、四氢呋喃基、四氢异喹啉基和噻吩基，任选 被1-3个选自R6a的取代基取代。杂环基取代基可通过碳原子或杂原子 连接。

在另一个实施方案中，当Q为杂环基时，Q选自：

，其任选被1-3 个选自R6a的取代基取代。

在另一个实施方案中，当Q为杂环基时，Q选自：

和其任选被一个选自R6a的取代基取代。

在一个实施方案中，R1选自：氧代、(C＝O)aOb(C1-C10)烷基、(C＝O)aOb- 芳基、(C＝O)aOb(C2-C10)烯基、(C＝O)aOb(C2-C10)炔基、CO2H、卤基、OH、 Ob(C1-C6)全氟烷基、(C＝O)aNR7R8、CN、(C＝O)aOb(C3-C8)环烷基、 S(O)2NR7R8、SH、S(O)2-(C1-C10)烷基和(C＝O)aOb-杂环基，所述烷基、 芳基、烯基、炔基、环烷基和杂环基任选被R6a取代。

在另一个实施方案中，R1选自：氧代、(C＝O)aOb(C1-C10)烷基、CO2H、 卤基、OH、CN、(C1-C6)烷氧基、S(O)2NR7R8、SH、S(O)2-(C1-C10)烷基、 O(C＝O)(C1-C6)烷基和N(Rb)2，所述烷基任选被R6a取代。

在另一个实施方案中，R1选自：氧代、NH2、OH、SH、Oa(C1-C6) 烷基，所述烷基任选被R6a取代。

在一个实施方案中，R1选自：H、氧代、(C＝O)aOb(C1-C10)烷基、 (C＝O)aOb-芳基、(C＝O)aOb(C2-C10)烯基、(C＝O)aOb(C2-C10)炔基、CO2H、 卤基、OH、Ob(C1-C6)全氟烷基、(C＝O)aNR7R8、CN、(C＝O)aOb(C3-C8) 环烷基、S(O)2NR7R8、SH、S(O)2-(C1-C10)烷基和(C＝O)aOb-杂环基，所 述烷基、芳基、烯基、炔基、环烷基和杂环基任选被R6a取代。

在另一个实施方案中，R1选自：H、氧代、(C＝O)aOb(C1-C10)烷基、 CO2H、卤基、OH、CN、(C1-C6)烷氧基、S(O)2NR7R8、SH、S(O)2-(C1- C10)烷基、O(C＝O)(C1-C6)烷基和N(Rb)2，所述烷基任选被R6a取代。

在另一个实施方案中，R1选自：H、氧代、NH2、OH、SH、Oa(C1-C6) 烷基，所述烷基任选被R6a取代。

在一个实施方案中，R2选自：氧代、(C＝O)aOb(C1-C10)烷基、(C＝O)aOb- 芳基、(C＝O)aOb(C2-C10)烯基、(C＝O)aOb(C2-C10)炔基、CO2H、卤基、OH、 Ob(C1-C6)全氟烷基、(C＝O)aNR7R8、CN、(C＝O)aOb(C3-C8)环烷基、 S(O)2NR7R8、S(O)2-(C1-C10)烷基和(C＝O)aOb-杂环基，所述烷基、芳基、 烯基、炔基、环烷基和杂环基任选被Rb、OH、(C1-C6)烷氧基、卤素、 CO2H、CN、O(C＝O)(C1-C6)烷基、氧代和N(Rb)2取代。

在另一个实施方案中，R2选自：氧代、(C＝O)aOb(C1-C10)烷基、CO2H、 卤基、OH、CN、(C1-C6)烷氧基、O(C＝O)(C1-C6)烷基、(C2-C10)烯基和 N(Rb)2，所述烷基任选被Rb、OH、(C1-C6)烷氧基、卤素、CO2H、CN、 O(C＝O)(C1-C6)烷基、氧代和N(Rb)2取代。

在一个实施方案中，R3选自：H、氧代、Ob(C1-C10)烷基、Ob-芳基、 Ob(C2-C10)烯基、Ob(C2-C10)炔基、卤基、OH、Ob(C1-C6)全氟烷基、 (C＝O)aNR7R8、CN、(C＝O)aOb(C3-C8)环烷基、S(O)mNR7R8、SH、 S(O)m-(C1-C10)烷基、(C1-C6)烷基-杂环基和(C＝O)aOb-杂环基，所述烷基、 芳基、烯基、炔基、环烷基和杂环基任选被一个或多个选自R6的取代 基取代。

在另一个实施方案中，R3选自：(C1-C10)烷基、芳基、(C2-C10)烯基、 (C2-C10)炔基、卤基、NR7R8、CN、(C3-C8)环烷基、S(O)mNR7R8、SH、 S(O)m-(C1-C10)烷基、(C1-C6)烷基-杂环基和(C＝O)aOb-杂环基，所述烷基、 芳基、烯基、炔基、环烷基和杂环基任选被一个或多个选自R6的取代 基取代。

在另一个实施方案中，R3选自：(C1-C10)烷基，所述烷基任选被1- 3个选自NH2、OH、氧代和卤基的取代基取代。

在另一个实施方案中，R4和R5为H。

在一个实施方案中，当Q被R6a取代时，所述R6a是杂环基，该杂 环基任选被最多三个选自Rb、OH、(C1-C6)烷氧基、卤素、CO2H、CN、 Oa(C＝O)b(C1-C6)烷基、氧代和N(Rb)2的取代基取代。

在另一个实施方案中，当Q被R6a取代时，所述R6a选自： 和其任选被1-3个选自氧代、OH、N(Rb)2、卤素和 Oa(C1-C6)烷基的取代基取代。

在一个实施方案中，Rb独立地选自H和(C1-C6)烷基。

在式J的实施方案中，R4和R5独立地为：H和CH3，或者R4和R5 可连接形成环丙基。

式A化合物的游离形式以及其可药用盐和立体异构体包含在本发 明中。本文所列举的一些分离的具体化合物为胺化合物的质子化盐。术 语“游离形式”是指非盐形式的胺化合物。所包含的可药用盐不仅包括用 于举例说明本文描述的具体化合物的经分离出的盐，而且包括式A化合 物游离形式的所有典型的可药用盐。可用本领域已知的技术分离所述具 体盐化合物的游离形式。例如，用合适的稀碱水溶液，例如稀NaOH、 碳酸钾、氨和碳酸氢钠水溶液，处理盐使所述游离形式再生。游离形式 可与它们各自的盐形式在某些物理性质上略有不同，例如在极性溶剂中 的溶解度，但对于本发明，酸盐和碱盐与它们各自的游离形式在药学上 是等同的。

可以通过常规的化学方法，由含有碱性部分或酸性部分的本发明化 合物，合成本发明化合物的可药用盐。通常，或者通过离子交换色谱法 制备，或者在合适的溶剂或各种混合溶剂中，使游离碱与化学计量的或 过量的所需成盐无机酸或有机酸反应，制备碱性化合物的盐。同样，通 过与合适的无机碱或有机碱反应，形成酸性化合物的盐。

因此，本发明化合物的可药用盐包括本发明化合物常规的无毒盐， 该盐通过将碱性本发明化合物与无机酸或有机酸反应而制备，例如，常 规无毒盐包括衍生自无机酸的盐，所述无机酸例如盐酸、氢溴酸、硫酸、 氨基磺酸、磷酸、硝酸等，以及通过有机酸制备的盐，所述有机酸例如 乙酸、丙酸、琥珀酸、乙醇酸、硬脂酸、乳酸、苹果酸、酒石酸、柠檬 酸、抗坏血酸、双羟萘酸、马来酸、羟基马来酸、苯乙酸、谷氨酸、苯 甲酸、水杨酸、磺胺酸、2-乙酰氧基-苯甲酸、富马酸、甲苯磺酸、甲磺 酸、乙二磺酸、草酸、羟乙磺酸、三氟乙酸(TFA)等。

当本发明化合物呈酸性时，适当的“可药用盐”是指从可药用无毒碱 (包括无机碱和有机碱)制备的盐。衍生自无机碱的盐包括铝盐、铵盐、 钙盐、铜盐、铁盐、亚铁盐、锂盐、镁盐、亚锰盐、锰盐、钾盐、钠盐、 锌盐等。特别优选的为铵盐、钙盐、镁盐、钾盐和钠盐。衍生自可药用 有机无毒碱的盐包括如下物质的盐：伯胺、仲胺和叔胺；取代胺，包括 天然存在的取代胺、环胺和碱性离子交换树脂，例如精氨酸、甜菜碱、 咖啡因、胆碱、N，N1-二苄基乙二胺、二乙胺、2-二乙氨基乙醇、2-二甲 氨基乙醇、乙醇胺、乙二胺、N-乙基吗啉、N-乙基哌啶、葡糖胺 (glucamine)、氨基葡萄糖(glucosamine)、组氨酸、海巴胺(hydrabamine)、 异丙胺、赖氨酸、甲基葡糖胺、吗啉、哌嗪、哌啶、聚胺树脂、普鲁卡 因、嘌呤类、可可碱、三乙胺、三甲胺、三丙胺、氨丁三醇等。

上述可药用盐和其它典型的可药用盐的制备在Berg等， “Pharmaceutical Salts，”J.Pharm.Sci.，1977：66：1-19中有更详尽的描述。

还要注意的是，本发明化合物可能为内盐或两性离子，因为在生理 条件下，化合物中例如羧基的去质子化酸性部分可以为阴离子，这种电 子电荷继而可被质子化碱性部分或烷基化碱性部分例如季氮原子的阳 离子电荷在内部平衡掉。

用途

本发明化合物是Akt活性的抑制剂，因此用于治疗癌症，特别是治 疗与Akt活性紊乱及Akt下游细胞靶有关的癌症。这些癌症包括但不限 于卵巢癌、胰腺癌、乳癌和前列腺癌，以及在其中肿瘤抑制剂PTEN发 生突变的癌症(包括恶性胶质瘤)(Cheng等，Proc.Natl.Acad.Sci.(1992) 89：9267-9271；Cheng等，Proc.Natl.Acad.Sci.(1996)93：3636-3641； Bellacosa等，Int.J.Cancer(1995)64：280-285；Nakatani等，J.Biol.Chem. (1999)274：21528-21532；Graff，Expert.Opin.Ther.Targets(2002)6(1)： 103-113；及Yamada和Araki，J.Cell Science.(2001)114：2375-2382； Mischel和Cloughesy，Brain Pathol.(2003)13(1)：52-61)。

本文所提供的化合物、组合物和方法，被视为特别用于治疗癌症。 可以通过本发明化合物、组合物和方法治疗的癌症包括但不限于：心 脏：肉瘤(血管肉瘤、纤维肉瘤、横纹肌肉瘤、脂肪肉瘤)，粘液瘤，横 纹肌瘤，纤维瘤，脂肪瘤和畸胎瘤；肺：支气管癌(鳞状上皮细胞癌、未 分化小细胞癌、未分化大细胞癌、腺癌)，肺泡(细支气管)癌，支气管腺 瘤，肉瘤，淋巴瘤，软骨错构瘤，间皮瘤；胃肠：食管(鳞状细胞癌、腺 癌、平滑肌肉瘤、淋巴瘤)，胃(癌、淋巴瘤、平滑肌肉瘤)，胰腺(导管腺 癌、胰岛素瘤、胰升糖素瘤、胃泌素瘤、类癌瘤、血管活性肠多肽瘤)， 小肠(腺癌、淋巴瘤、类癌瘤、卡波西氏肉瘤、平滑肌瘤、血管瘤、脂肪 瘤、神经纤维瘤、纤维瘤)，大肠(腺癌、管状腺瘤、绒毛状腺瘤、错构 瘤、平滑肌瘤)，结肠，结肠直肠，直肠；泌尿生殖道：肾(腺癌、维尔 姆斯瘤[肾胚胎瘤]、淋巴瘤、白血病)，膀胱和尿道(鳞状细胞癌、移行细 胞癌、腺癌)，前列腺(腺癌、肉瘤)，睾丸(精原细胞瘤、畸胎瘤、胚胎性 癌、畸胎癌、绒毛膜癌、肉瘤、间质细胞癌、纤维瘤、纤维腺瘤、腺瘤 样瘤、脂肪瘤)；肝脏：肝细胞瘤(肝细胞癌)，胆管癌，肝母细胞瘤，血 管肉瘤，肝细胞性腺瘤，血管瘤；骨：骨原性肉瘤(骨肉瘤)，纤维肉瘤， 恶性纤维组织细胞瘤，软骨肉瘤，尤因氏肉瘤，恶性淋巴瘤(网状细胞肉 瘤)，多发性骨髓瘤，恶性巨细胞瘤脊索瘤，骨软骨瘤(骨软骨性外生骨 疣)，良性软骨瘤，成软骨细胞瘤，软骨粘液纤维瘤，骨样骨瘤和巨细胞 瘤；神经系统：头颅(骨瘤、血管瘤、肉芽瘤、黄瘤、畸形性骨炎)，脑 脊膜(脑膜瘤、脑膜肉瘤、神经胶质瘤病)，脑(星形细胞瘤、成神经管细 胞瘤、神经胶质瘤、室管膜瘤、生殖细胞瘤[松果体瘤]、多形性恶性胶 质瘤、少突胶质细胞瘤、神经鞘瘤、成视网膜细胞瘤、先天性肿瘤)，脊 髓神经纤维瘤，脑膜瘤，神经胶质瘤，肉瘤)；妇科：子宫(子宫内膜癌)， 子宫颈(宫颈癌、肿瘤前子宫颈发育异常)，卵巢(卵巢癌[浆液性囊腺癌、 粘液性囊腺癌、未分类癌]，粒膜细胞瘤，塞-莱细胞瘤，无性细胞瘤， 恶性畸胎瘤)，阴门(鳞状细胞癌、上皮内癌、腺癌、纤维肉瘤、黑素瘤)， 阴道(透明细胞癌、鳞状细胞癌、葡萄簇样肉瘤(胚胎横纹肌肉瘤)、输卵 管(癌)；血液学：血液(髓性白血病[急性和慢性的]，急性淋巴细胞白血 病，慢性淋巴细胞白血病，骨髓增生性疾病，多发性骨髓瘤，脊髓发育 不良综合征)，霍奇金病，非霍奇金氏淋巴瘤[恶性淋巴瘤]；皮肤：恶性 黑素瘤、基底细胞癌、鳞状细胞癌、卡波西氏肉瘤、胎块发育不良痣、 脂肪瘤、血管瘤、皮肤纤维瘤、瘢痕瘤、牛皮癣；和肾上腺：成神经细 胞瘤。因此，本文所述术语“癌细胞”包括受到上述所认定的病况中任 一种折磨的细胞。

可以通过本发明化合物、组合物和方法进行治疗的癌症包括但不限 于：乳腺癌、前列腺癌、结肠癌、结肠直肠癌、肺癌、脑癌、睾丸癌、 胃癌、胰腺癌、皮肤癌、小肠癌、大肠癌、喉癌、头颈癌、口腔癌、骨 癌、肝癌、膀胱癌、肾癌、甲状腺癌和血癌。

可以通过本发明化合物、组合物和方法进行治疗的癌症包括但不限 于：乳腺癌、前列腺癌、结肠癌、卵巢癌、结肠直肠癌和肺癌。

可以通过本发明化合物、组合物和方法进行治疗的癌症包括但不限 于：乳腺癌、结肠癌、(结肠直肠癌)和肺癌。

可以通过本发明化合物、组合物和方法进行治疗的癌症包括但不限 于：淋巴瘤和白血病。

Akt信号调节血管生成中的多个关键步骤(Shiojima和Walsh，Circ. Res.(2002)90：1243-1250)。血管生成抑制剂在治疗癌症中的应用在文献 资料已有记载，参见例如J.Rak等，Cancer Research，55：4575-4580， 1995和Dredge等，Expert Opin.Biol.Ther.(2002)2(8)：953-966。血管生 成在癌症中的作用已在下述多种癌症和组织类型中得到了表明：乳癌(G. Gasparini和A.L.Harris，J.Clin.Oncol.，1995，13：765-782；M.Toi 等，Japan.J.Cancer Res.，1994，85：1045-1049)；膀胱癌(A.J.Dickinson 等，Br.J.Urol.，1994，74：762-766)；结肠癌(L.M.Ellis等，Surgery， 1996，120(5)：871-878)及口腔肿瘤(J.K.Williams等，Am.J.Surg.，1994， 168：373-380)。其它癌症包括晚期肿瘤、毛细胞白血病、黑素瘤、晚期 头颈癌、转移性肾细胞癌、非霍奇金氏淋巴瘤、转移性乳癌、乳腺癌， 晚期黑素瘤、胰腺癌、胃癌、恶性胶质瘤、肺癌、卵巢癌、非小细胞肺 癌、前列腺癌、小细胞肺癌、肾细胞癌、各种实体瘤、多发性骨髓瘤、 转移性前列腺癌、恶性神经胶质瘤、肾癌、淋巴瘤、顽固性转移性疾病、 顽固性多发性骨髓瘤、宫颈癌、卡波西氏肉瘤、复发性间变神经胶质瘤 和转移性结肠癌(Dredge等，Expert Opin.Biol.Ther.(2002)2(8)：953- 966)。由此，本申请所公开的Akt抑制剂也可以用于治疗这些血管生成 相关的癌症。

已经历新血管形成的肿瘤显示升高的转移可能性。事实上，血管生 成对肿瘤生长和转移是至关重要的(S.P.Cunningham等，Can. Research，61：3206-3211(2001))。因此，在本申请中公开的Akt抑制剂 也可以用于预防或降低肿瘤细胞的转移。

还包含在本发明范围的是治疗或预防涉及血管生成的疾病的方 法，该方法包括向需要所述治疗的哺乳动物给药治疗有效量的本发明化 合物。眼部新血管形成病是其中大部分组织损害可以归咎于眼内血管的 异常浸润的症状的一个实例(参见WO 00/30651，2000年6月2日公布)。 不期望的浸润可以由局部缺血性视网膜病(比如由糖尿病性视网膜病、早 熟性视网膜病、视网膜静脉闭塞等)或变性疾病(比如在年龄相关黄斑变 性中观察到的脉胳膜新血管形成)引起。因此，通过给予本发明化合物对 血管生长的抑制作用可以预防血管浸润，和可以预防或治疗涉及血管生 成的疾病，例如视网膜血管化、糖尿病性视网膜病、年龄相关黄斑变性 等。

还包含在本发明范围内的是治疗或预防涉及血管生成的非恶性疾 病的方法，所述疾病包括但不限于：眼疾(例如视网膜血管化、糖尿病性 视网膜病和年龄相关黄斑变性)、动脉粥样硬化、关节炎、牛皮癣、肥胖 症和阿尔茨海默病(Dredge等，Expert Opin.Biol.Ther.(2002)2(8)：953- 966)。在另一个实施方案中，治疗或预防涉及血管生成的疾病的方法包 括：眼疾(例如视网膜血管化、糖尿病性视网膜病和年龄相关黄斑变性)、 动脉粥样硬化、关节炎和牛皮癣。

还包含在本发明范围内的是治疗过度增殖性病症的方法，例如再狭 窄、炎症、自身免疫病和变态反应/哮喘。

还包括在本发明范围内的是本发明化合物用于涂覆支架的用途，以 及由此本发明化合物在被涂覆支架上用于治疗和/或预防再狭窄的用途 (WO 03/032809)。

还包括在本发明范围内的是本发明化合物用于治疗和/或预防骨关 节炎的用途(WO 03/035048)。

还包含在本发明范围内的是治疗高胰岛素血症的方法。

本发明化合物还可以用于制备用于治疗上述疾病(特别是癌症)的药 物。

在本发明的一种实施方案中，本发明化合物为选择性抑制剂，其抑 制效力取决于PH结构域。在该实施方案中，所述化合物对缺乏PH结 构域的截短Akt蛋白表现为体外抑制活性降低或无体外抑制活性。

在另一个实施方案中，本发明化合物选自Akt1的选择性抑制剂、 Akt2的选择性抑制剂及Akt1和Akt2的选择性抑制剂。

在另一个实施方案中，本发明化合物选自Akt1的选择性抑制剂、 Akt2的选择性抑制剂、Akt3的选择性抑制剂及上述三种Akt同工酶中 两种Akt的选择性抑制剂。

在另一个实施方案中，本发明化合物为所有三种Akt同种型的选择 性抑制剂，但不是经过缺失PH结构域、缺失铰链区或既缺失PH结构 域又缺失铰链区两者修饰后的1种、2种或所有这些Akt同种型的抑制 剂。

本发明还涉及抑制Akt活性的方法，该方法包括给予有需要的哺乳 动物药学有效量的本发明化合物。

本发明化合物还可根据标准药物实践，向包括人在内的哺乳动物给 药，或单独给药，或以药物组合物的形式，其中加有可药用载体、赋形 剂或稀释剂。该化合物可以口服给药或胃肠外给药，包括静脉内、肌内、 腹膜内、皮下、直肠内和局部等给药途径。

含有活性成分的药物组合物可为适于口服的形式，例如，片剂、糖 锭剂、锭剂、水性混悬剂或油性混悬剂、分散粉剂或颗粒剂、乳剂、硬 质胶囊剂或软质胶囊剂、糖浆剂或酏剂。用于口服的组合物可以根据本 领域已知的任何制备药物组合物的方法制备，这些组合物可以包含一种 或多种选自甜味剂、矫味剂、着色剂和防腐剂的成分组成，以提供美观 适口的药物制剂。片剂包含与无毒的可药用赋形剂混合的活性成分，该 赋形剂适于片剂的制备。这些赋形剂可以是例如惰性稀释剂，例如碳酸 钙、碳酸钠、乳糖、磷酸钙或磷酸钠；制粒剂和崩解剂，例如微晶纤维 素、交联羧甲基纤维素钠、玉米淀粉或藻酸；粘合剂，例如淀粉、明胶、 聚乙烯吡咯烷酮或阿拉伯树胶；以及润滑剂，例如硬脂酸镁、硬脂酸或 滑石粉。片剂可以不包衣，或者可用已知技术包衣以掩盖药物的不适味 道，或延迟在胃肠道中的崩解和吸收，从而在较长时间内提供持续作 用。例如，可以使用水溶性味道掩饰材料，例如羟丙基甲基纤维素或羟 丙基纤维素，或者，可以使用延时材料例如乙基纤维素、醋酸丁酸纤维 素。

口服制剂还可为硬明胶胶囊剂，其中活性成分与碳酸钙、磷酸钙或 高岭土等惰性固体稀释剂混合；或者为软明胶胶囊剂，其中活性成分与 聚乙二醇等水可溶性载体混合，或与花生油、液体石蜡或橄榄油等油性 介质混合。

水性混悬剂含有与适于制备水性混悬剂的赋形剂混合的活性材 料。所述赋形剂为悬浮剂、分散剂或湿润剂，悬浮剂例如羧甲基纤维素 纳、甲基纤维素、羟丙基甲基纤维素、藻酸钠、聚乙烯吡咯烷酮、黄芪 树胶和阿拉伯树胶；分散剂或湿润剂可为天然磷脂，例如卵磷脂，或烯 化氧与脂肪酸的缩合产物，例如聚氧乙烯硬脂酸酯，或环氧乙烷与长链 脂肪醇的缩合产物，例如十七亚乙基氧基十六醇，或环氧乙烷与脂肪酸 和己糖醇衍生的偏酯的缩合产物，例如聚氧乙烯山梨糖醇单油酸酯，或 环氧乙烷与脂肪酸和己糖醇酐衍生的偏酯的缩合产物，例如聚氧乙烯脱 水山梨醇单油酸酯。水性混悬剂还可以包含一种或多种防腐剂(例如对羟 基苯甲酸乙酯或对羟基苯甲酸正丙酯)、一种或多种着色剂、一种或多种 矫味剂及一种或多种甜味剂(例如蔗糖、糖精或天冬甜素)。

油性混悬剂可以通过将活性成分悬浮在植物油(例如花生油、橄榄 油、芝麻油或椰子油)或矿物油(例如液体石蜡)中制备。所述油性混悬剂 可包含增稠剂，例如蜂蜡、固体石蜡或鲸蜡醇。还可以向其中加入比如 如上所述的甜味剂和矫味剂以提供适口的口服制剂。这些组合物可通过 加入抗氧化剂(例如丁羟茴醚或α-生育酚)予以保存。

通过向适于制备水性混悬剂的分散粉剂和颗粒剂中加入水，以提供 活性成分与分散剂或湿润剂、悬浮剂和一种或多种防腐剂的混合物。适 宜的分散剂或湿润剂和悬浮剂如上述例证说明。其中还可存在另外的赋 形剂，例如甜味剂、矫味剂和着色剂。这些组合物可通过加入抗氧化剂 (例如抗坏血酸)予以保存。

本发明的药物组合物还可以是水包油乳剂的形式。所述油相可以为 植物油(例如橄榄油或花生油)、矿物油(例如液体石蜡)或其混合物。合适 的乳化剂可为天然存在的磷脂，例如大豆卵磷脂，也可为从脂肪酸和己 糖醇酐衍生的酯或偏酯，例如脱水山梨糖醇单油酸酯，和所述偏酯与环 氧乙烷的缩合产物，例如聚氧乙烯脱水山梨醇单油酸酯。所述乳剂还可 包含甜味剂、矫味剂、防腐剂和抗氧化剂。

糖浆剂和酏剂可以利用甜味剂进行制备，例如甘油、丙二醇、山梨 醇或蔗糖。所述制剂还可包含缓和剂、防腐剂、矫味剂和着色剂，以及 抗氧化剂。

所述药物组合物可以是无菌注射水溶液剂的形式。可以使用的可接 受的载体和溶剂包括水、林格氏溶液和等渗氯化钠溶液。

所述无菌注射制剂还可以是无菌注射水包油微乳液，其中活性成分 溶解在油相中。例如，可以首先将活性成分溶于大豆油和卵磷脂的混合 物中。然后，将油性溶液掺入水和甘油的混合物中，从而制备形成微乳 液。

所述注射液或注射微乳液可以通过局部快速浓注引入到患者血管 中。另外，还可以有利地以保持本发明化合物处于恒定的循环浓度的方 式给药所述溶液或微乳液。为了保持这种恒定浓度，可以使用恒定静脉 递药装置。所述装置的实例为Deltec CADD-PLUSTM 5400型静脉泵。

所述药物组合物可以是用于肌内和皮下给药的无菌注射水性混悬 剂或油性混悬剂。所述混悬剂可以根据本领域已知技术，使用上述适宜 的分散剂或湿润剂及悬浮剂进行配制。所述无菌注射制剂还可以是无菌 注射溶液剂或混悬剂，其中含有无毒胃肠外可接受的稀释剂或溶剂，例 如1，3-丁二醇的溶液剂。另外，通常将无菌固定油用作溶剂或悬浮介质。 为此目的，可使用任何品牌的固定油，包括合成甘油单酯或合成甘油二 酯。另外，在注射剂制备中还可以使用脂肪酸(比如油酸)。

式A化合物还可以用于直肠内给药的栓剂形式进行给药。这些组合 物可以通过将药物与合适的无刺激赋形剂混合得到制备，其中所述赋形 剂在常温下为固体，但在直肠温度下为液体，因此可在直肠中熔化释放 药物。这类材料包括可可脂、甘油化明胶、氢化植物油、各种分子量的 聚乙二醇混合物和聚乙二醇脂肪酸酯。

对于局部使用，可以使用含有式A化合物的乳膏剂、软膏剂、凝胶 剂、溶液剂或混悬剂等(对于本申请，局部使用应当包括漱口水和含漱 剂)。

本发明化合物可以通过局部应用合适的鼻内载体和递药装置以鼻 内形式给药，或可以通过应用本领域普通技术人员熟知的经皮皮肤贴剂 形式经皮途径进行给药。在以经皮递药系统的形式给药时，剂量给药在 整个给药方案中当然将是连续的而不是间歇性的。本发明化合物还可以 栓剂给药，所述栓剂使用比如可可脂、甘油化明胶、氢化植物油、各种 分子量的聚乙二醇的混合物和聚乙二醇脂肪酸酯的基料。

当将本发明的组合物给药至人类对象时，其日剂量通常将由处方医 师进行确定，并且所述剂量通常将随着年龄、体重和个体患者的反应以 及患者症状的严重程度而变化。

利用本发明的化合物的给药方案可以根据各种因素进行选择，所述 各种因素包括类型、物种、年龄、重量、性别和被治疗癌症的类型；待 治疗癌症的严重程度(即阶段)；给药途径；患者的肾功和肝功；以及使 用的特定化合物或其盐。一般有经验的医生或兽医可以容易地确定和开 出有效量的药物的处方，用于治疗，例如，用于预防、抑制(完全或部分 地)或阻止疾病的发展。

例如，本发明的化合物可以最高达10,000mg的总日剂量给药。本 发明的化合物可以一天给药一次(QD)，或分成每日多次用药，如每天两 次(BID)，和每天三次(TID)。本发明的化合物可以最高达10,000mg，例 如，2,000mg，3,000mg，4,000mg，6,000mg，8,000mg或10,000mg 的总日剂量给药，所述剂量如上所述可以每天一次或可以被分成每日多 次用药。

例如，本发明的化合物可以最高达1,000mg的总日剂量给药。本发 明的化合物一天给药一次(QD)，或分成每日多次用药，如每天两次 (BID)，和每天三次(TID)。本发明的化合物可以最高达1,000mg，例如， 200mg，300mg，400mg，600mg，800mg或1,000mg的总日剂量给 药，所述剂量如上所述可以每天一次或可以被分成每日多次用药。

另外，给药可以是连续的(即每天给药)或间歇的。本文使用的术语 “间歇的”或“间歇地”是指以规则或不规则间隔停止和开始。例如， 本发明化合物的间歇给药可以是每周给药1-6天，或者其可以是指周期 性给药(例如每天给药，连续2-8周，然后是最多1周的不给药的休息期) 或者其是指隔天给药。

另外，本发明的化合物可根据上面描述的任何方案持续给药几周， 然后是休息期。例如，本发明的化合物可根据上面描述的任一方案持续 给药2-8周，然后是1周的休息期，或者以100-500mg剂量每天给药两 次，1周3-5天。在另外的特定实施方案中，本发明的化合物可以每天 给药三次，持续2周，然后是1周的休息期。

本发明化合物的任何一种或多种特定剂量和剂量给药方案还可适 用于要在联合治疗中使用的任何一种或多种治疗剂(下文称为“第二治疗 剂”)。

另外，该第二治疗剂的特定剂量的和剂量给药方案可以进一步改 变，并且最适剂量、剂量给药方案和给药途径将根据所用的特定的第二 治疗剂为基础进行确定。

理所当然的是，本发明化合物的给药途径与第二治疗剂的给药途径 无关。在一个实施方案中，本发明化合物的给药是口服给药。在另一个 实施方案中，本发明化合物的给药是静脉内给药。因此，根据这些实施 方案，本发明化合物的给药是口服或静脉内给药，第二治疗剂的给药可 以是口服、肠胃外、腹膜内、静脉内、动脉内、透皮、舌下、肌肉内、 直肠、经口颊、鼻内、脂质体方式、通过吸入方式、阴道、眼内、通过 导管或支架局部递送、皮下、脂肪内、关节内、鞘内或缓慢释放剂型给 药途径。

另外，本发明的化合物和第二治疗剂可以通过相同的给药形式给 药，即，两种药物通过例如口服或IV给药。然而，还处在本发明范围 内的是通过一种给药方式如口服途径给药本发明的化合物，通过另一种 给药方式如IV或在上文描述的任何其它的给药方式给药第二治疗剂。

第一治疗过程(本发明化合物的给药)可以在第二治疗过程(即第二 治疗剂的给药)之前进行，在使用第二治疗剂的治疗之后进行，与第二治 疗剂同时进行治疗，或者它们的组合。例如，可以确定本发明化合物的 总的疗程。第二治疗剂可在开始用本发明的化合物治疗之前给药，或者 在使用本发明的化合物治疗后给药。另外，抗癌治疗可以在本发明化合 物的给药期间进行，但是无需在本发明化合物的整个治疗期间内进行。

本发明的化合物还可用于与治疗剂、化疗剂和抗癌剂联合。本发明 公开的化合物与治疗剂、化疗剂和抗癌剂的联合在本发明的范围内。这 些药物可以在V.T.Devita和S.Hellman(编辑)的Cancer Principles and Practice of Oncology，第六版(February 15，2001)，Lippincott Williams & Wilkins Publishers中找到。本领域技术人员能够根据所涉及的药物的特 性和癌症辨别哪种药物联合将是有用的。这些药物包括以下：雌激素受 体调节剂、雄激素受体调节剂、类视黄醇受体调节剂、细胞毒剂/细胞抑 制剂、抗增殖药、异戊烯基-蛋白转移酶抑制剂、HMG-CoA还原酶抑制 剂和其他血管生成抑制剂、HIV蛋白酶抑制剂、逆转录酶抑制剂、细胞 增殖和存活信号转导抑制剂、双膦酸盐类、芳香酶抑制剂、siRNA治疗 剂、γ-分泌酶抑制剂、干扰受体酪氨酸激酶(RTKs)的药物和干扰细胞周 期关卡的药物。本发明的化合物当与放射治疗共同给予时特别有用。

“雌激素受体调节剂”是指不论通过何种机制干扰或抑制雌激素与 受体结合的化合物。雌激素受体调节剂的实例包括但不限于，他莫昔 芬、雷洛昔芬、艾多昔芬、LY353381、LY117081、托瑞米芬、氟维司 群、4-[7-(2，2-二甲基-1-氧代丙氧基-4-甲基-2-[4-[2-(1-哌啶基)乙氧基]苯 基]-2H-1-苯并吡喃-3-基)]-苯基2，2-二甲基丙酸酯、4，4’-二羟基二苯甲酮 -2，4-二硝基苯腙和SH646。

“雄激素受体调节剂”是指不论通过何种机制干扰或抑制雄激素与 受体结合的化合物。雄激素受体调节剂的实例包括非那雄胺和其它5α- 还原酶抑制剂、尼鲁米特、氟他胺、比卡鲁胺、利阿唑和醋酸阿比特龙。

“类视黄醇受体调节剂”是指不论通过何种机制干扰或抑制类视黄 醇与受体结合的化合物。这些类视黄醇受体调节剂的实例包括贝沙罗 汀、维A酸、13-顺-视黄酸、9-顺-视黄酸、α-二氟甲基鸟氨酸、ILX23- 7553、反-N-(4’-羟基苯基)视黄酰胺和N-4-羧基苯基视黄酰胺。

“细胞毒剂/细胞抑制剂”是指主要通过直接干扰细胞功能引起细胞 死亡或抑制细胞增殖、或者抑制或干扰细胞减数分裂的化合物，包括烷 化剂、肿瘤坏死因子、嵌入剂、低氧可激活化合物、微管抑制剂/微管稳 定剂、有丝分裂驱动蛋白抑制剂、组蛋白脱乙酰基酶抑制剂、参与有丝 分裂进程的激酶抑制剂、参与生长因子和细胞因子信号转导途径的激酶 抑制剂、抗代谢药、生物反应调节剂、激素/抗激素治疗药物、造血生长 因子、单克隆抗体靶向治疗剂、拓扑异构酶抑制剂、蛋白体抑制剂、遍 在蛋白连接酶抑制剂和aurora激酶抑制剂。

细胞毒剂/细胞抑制剂的实例包括但不限于sertenef、恶液质素 (cachectin)、异环磷酰胺、他索纳明、氯尼达明、卡铂、六甲蜜胺、泼 尼莫司汀、二溴卫矛醇、雷莫司汀、福莫司汀、奈达铂、奥沙利铂、替 莫唑胺、庚铂、雌莫司汀、托西酸英丙舒凡、曲磷胺、尼莫司汀、二溴 螺氯铵、嘌嘧替派、洛铂、沙铂、泊非霉素(profiromycin)、顺铂、依罗 夫文、右异环磷酰胺、顺-胺二氯(2-甲基-吡啶)合铂、苄基鸟嘌呤、葡磷 酰胺、GPX100、四氯化(反式，反式，反式)-双-μ-(己烷-1，6-二胺)-μ-[二胺- 铂(II)]双[二胺(氯)铂(II)]、二吖丙啶基精胺、三氧化二砷、1-(11-十二烷 基氨基-10-羟基十一烷基)-3，7-二甲基黄嘌呤、佐柔比星、伊达比星、柔 红霉素、比生群、米托蒽醌、吡柔比星、吡萘非特、戊柔比星、氨柔比 星、抗瘤酮、3’-脱氨基-3’-吗啉代-13-脱氧代-10-羟基洋红霉素、脂质体 蒽环霉素(annamycin)、加柔比星、依利奈法德、MEN10755、4-脱甲氧 基-3-脱氨基-3-吖丙啶基-4-甲基磺酰基-柔红霉素(参见WO 00/50032)、 Raf激酶抑制剂(例如Bay43-9006)和mTOR抑制剂(例如Wyeth公司的 CCI-779)。

低氧可激活化合物的一个实例为替拉扎明。

蛋白体抑制剂的实例包括但不限于乳胞素和MLN-341(Velcade)。

微管抑制剂/微管稳定剂的实例包括紫杉醇、硫酸长春地辛、3’，4’- 二脱氢-4’-脱氧-8’-去甲长春碱、多西他赛、根霉素、多拉司他汀、依西 酸米伏布林、奥利他汀(auristatin)、西马多丁、RPR109881、BMS184476、 长春氟宁、缩酚酸肽类抗肿瘤药(cryptophycin)、2，3，4，5，6-五氟-N-(3-氟- 4-甲氧基苯基)苯磺酰胺、脱水长春碱、N，N-二甲基-L-缬氨酰-L-缬氨酰 -N-甲基-L-缬氨酰-L-脯氨酰-L-脯氨酸-叔丁酰胺、TDX258、埃博霉素(参 见例如美国专利6,284,781和6,288,237)和BMS188797。在一个实施方 案中，微管抑制剂/微管稳定剂不包括大环内酯类抗肿瘤药。

拓扑异构酶抑制剂的一些实例为托泊替康、hycaptamine、伊立替 康、卢比替康、6-乙氧基丙酰基-3’，4’-O-外-亚苄基-教酒菌素、9-甲氧基 -N，N-二甲基-5-硝基吡唑并[3，4，5-kl]吖啶-2-(6H)丙酰胺、1-氨基-9-乙基- 5-氟-2，3-二氢-9-羟基-4-甲基-1H，12H-苯并[de]呋喃并[3’，4’：b，7]-中氮茚 并[1，2b]喹啉-10，13(9H，15H)二酮、勒托替康、7-[2-(N-异丙氨基)乙基]- (20S)喜树碱、BNP1350、BNPI1100、BN80915、BN80942、磷酸依托泊 苷、替尼泊苷、索布佐生、2’-二甲氨基-2’-脱氧-依托泊苷、GL331、N- [2-(二甲氨基)乙基]-9-羟基-5，6-二甲基-6H-吡啶并[4，3-b]咔唑-1-甲酰 胺、asulacrine、(5a，5aB，8aa，9b)-9-[2-[N-[2-(二甲氨基)乙基]-N-甲氨基] 乙基]-5-[4-羟基-3，5-二甲氧基苯基]-5，5a，6，8，8a，9-六氢呋喃并(3’，4’：6，7) 萘并(2，3-d)-1，3-二氧杂环戊烯-6-酮、2，3-(亚甲基二氧基)-5-甲基-7-羟基- 8-甲氧基苯并[c]-菲啶鎓、6，9-双[(2-氨基乙基)氨基]苯并[g]异喹啉-5，10- 二酮、5-(3-氨基丙氨基)-7，10-二羟基-2-(2-羟乙基氨基甲基)-6H-吡唑并 [4，5，1-de]吖啶-6-酮、N-[1-[2(二乙基氨基)乙基氨基]-7-甲氧基-9-氧代-9H- 噻吨-4-基甲基]甲酰胺、N-(2-(二甲氨基)乙基)吖啶-4-甲酰胺、6-[[2-(二 甲基氨基)乙基]氨基]-3-羟基-7H-茚并[2，1-c]喹啉-7-酮和地美司钠。

有丝分裂驱动蛋白抑制剂的实例，特别是人类有丝分裂驱动蛋白 KSP的实例描述于以下PCT公布文本中：WO03/039460、WO03/050064、 WO03/050122、WO03/049527、WO03/049679、WO03/049678、 WO04/039774、WO03/079973、WO03/099211、WO03/105855、 WO03/106417、WO04/037171、WO04/058148、WO04/058700、 WO04/126699、WO05/018638、WO05/019206、WO05/019205、 WO05/018547、WO05/017190、US2005/0176776。在一个实施方案中， 有丝分裂驱动蛋白的抑制剂包括但不限于KSP抑制剂、MKLP1抑制剂、 CENP-E抑制剂、MCAK抑制剂和Rab6-KIFL抑制剂。

“组蛋白脱乙酰基酶抑制剂”的实例包括但不限于SAHA、TSA、 oxamflatin、PXD101、MG98和scriptaid。进一步涉及的其它组蛋白脱 乙酰基酶抑制剂可以发现于以下文献中：Miller，T.A.等J.Med.Chem. 46(24)：5097-5116(2003)。

“参与有丝分裂进程的激酶抑制剂”包括但不限于aurora激酶抑制 剂、Polo样激酶抑制剂(PLK；特别是PLK-1抑制剂)、bub-1抑制剂和 bub-R1抑制剂。“aurora激酶抑制剂”的例子为VX-680。

“抗增殖药”包括反义RNA寡核苷酸和反义DNA寡核苷酸，比如 G3139、ODN698、RVASKRAS、GEM231和INX3001，还包括抗代谢 药，比如依诺他滨、卡莫氟、替加氟、喷司他丁、去氧氟尿苷、三甲曲 沙、氟达拉滨、卡培他滨、加洛他滨、阿糖胞苷十八烷基磷酸钠、氨磷 汀(fosteabine)钠水合物、雷替曲塞、paltitrexid、乙嘧替氟、噻唑呋啉、 地西他滨、诺拉曲塞、培美曲塞、内扎拉滨(nelzarabine)、2’-脱氧-2’-亚 甲基胞苷、2’-氟亚甲基-2’-脱氧胞苷、N-[5-(2，3-二氢-苯并呋喃基)磺酰 基]-N’-(3，4-二氯苯基)脲、N6-[4-脱氧-4-[N2-[2(E)，4(E)-十四烷二烯酰]甘 氨酰氨基]-L-甘油基-B-L-甘露糖基-吡喃庚糖基]腺嘌呤、阿吡利丁 (aplidine)、海鞘素(ecteinascidin)、曲沙他滨、4-[2-氨基-4-氧代-4，6，7，8- 四氢-3H-嘧啶并[5，4-b][1，4]噻嗪-6-基-(S)-乙基]-2，5-噻吩甲酰基-L-谷氨 酸、氨蝶呤、5-氟尿嘧啶、阿拉诺新、乙酸11-乙酰基-8-(氨甲酰基氧基 甲基)-4-甲酰基-6-甲氧基-14-氧杂-1，11-二氮杂四环(7.4.1.0.0)-十四碳- 2，4，6-三烯-9-基酯、八氢吲嗪三醇(swainsonine)、洛美曲索、右雷佐生、 甲硫氨酸酶、2’-氰基-2’-脱氧-N4-棕榈酰-1-B-D-阿糖呋喃糖基胞嘧啶、 3-氨基吡啶-2-甲醛缩氨基硫脲和曲妥单抗。

单克隆抗体靶向治疗药物的实例包括那些具有连接癌细胞特异性 单克隆抗体或靶细胞特异性单克隆抗体的细胞毒剂或放射性同位素的 治疗剂。其实例包括Bexxar。

“HMG-CoA还原酶抑制剂”是指3-羟基-3-甲基戊二酸单酰辅酶A 还原酶抑制剂。可以使用的HMG-CoA还原酶抑制剂的实例包括但不限 于洛伐他汀参见美国专利4,231,938、4,294,926和 4,319,039)、辛伐他汀(参见美国专利4,444,784、4,820,850和 4,916,239)、普伐他汀(参见美国专利4,346,227、 4,537,859、4,410,629、5,030,447和5,180,589)、氟伐他汀 参见美国专利5,354,772、4,911,165、4,929,437、5,189,164、5,118,853、 5,290,946和5,356,896)、阿托伐他汀参见美国专利 5,273,995、4,681,893、5,489,691和5,342,952)以及西立伐他汀(亦称雷伐 它汀和参见美国专利5,177,080)。M.Yalpani，“Cholesterol Lowering Drugs”，Chemistry & Industry，第85-89页(1996年2月5日) 中的第87页，以及美国专利4,782,084和4,885,314中描述了这些 HMG-CoA还原酶抑制剂和其它可用于本发明使用方法的HMG-CoA还 原酶抑制剂的结构式。本文所用的术语HMG-CoA还原酶抑制剂包括所 有可药用内酯和开链酸(即其内酯环打开形成游离酸)的形式，还包括具 有HMG-CoA还原酶抑制活性的化合物的盐和酯的形式，因而此类盐、 酯、开链酸和内酯形式的用途都包括在本发明的范围内。

“异戊烯基-蛋白转移酶抑制剂”是指抑制异戊烯基-蛋白转移酶中 任何一种或任何组合的化合物，包括法尼基蛋白转移酶(FPTase)、香叶 基香叶基蛋白转移酶I型(GGPTase-I)和香叶基香叶基蛋白转移酶II型 (GGPTase-II，亦称Rab GGPTase)。

异戊烯基-蛋白转移酶抑制剂的实例可发现于以下公开文本和专利 中：WO 96/30343、WO 97/18813、WO 97/21701、WO 97/23478、WO 97/38665、WO 98/28980、WO 98/29119、WO 95/32987、美国专利 5,420,245、美国专利5,523,430、美国专利5,532,359、美国专利 5,510,510、美国专利5,589,485、美国专利5,602,098、欧洲专利公布号0 618 221、欧洲专利公布号0 675 112、欧洲专利公布号0 604 181、欧洲 专利公布号0 696 593、WO 94/19357、WO 95/08542、WO 95/11917、 WO 95/12612、WO 95/12572、WO 95/10514、美国专利5,661,152、WO 95/10515、WO 95/10516、WO 95/24612、WO 95/34535、WO 95/25086、 WO 96/05529、WO 96/06138、WO 96/06193、WO 96/16443、WO 96/21701、WO 96/21456、WO 96/22278、WO 96/24611、WO 96/24612、 WO 96/05168、WO 96/05169、WO 96/00736、美国专利5,571,792、WO 96/17861、WO 96/33159、WO 96/34850、WO 96/34851、WO 96/30017、 WO 96/30018、WO 96/30362、WO 96/30363、WO 96/31111、WO 96/31477、WO 96/31478、WO 96/31501、WO 97/00252、WO 97/03047、 WO 97/03050、WO 97/04785、WO 97/02920、WO 97/17070、WO 97/23478、WO 97/26246、WO 97/30053、WO 97/44350、WO 98/02436 和美国专利5,532,359。异戊烯基-蛋白转移酶抑制剂对血管生成的作用 的实例参见European J.of Caner，第35卷，第9期，第1394-1401页(1999 年)。

“血管生成抑制剂”是指不论通过何种机制抑制新血管形成的化合 物。血管生成抑制剂的实例包括但不限于：酪氨酸激酶抑制剂(例如酪氨 酸激酶受体Flt-1(VEGFR1)和Flk-1/KDR(VEGFR2)抑制剂)、表皮衍生生 长因子抑制剂、成纤维细胞衍生生长因子抑制剂或血小板衍生生长因子 抑制剂、MMP(基质金属蛋白酶)抑制剂、整联蛋白阻断剂、干扰素-α、 白介素-12、聚硫酸戊聚糖、环加氧酶抑制剂(包括非甾族抗炎剂 (NSAIDs)，比如阿斯匹林和布洛芬，以及选择性环氧加酶-2抑制剂，比 如西利考昔和罗非考昔)(PNAS，第89卷，第7384页(1992年)；JNCI， 第69卷，第475页(1982年)；Arch.Opthalmol.，第108卷，第573页(1990 年)；Anat.Rec.，第238卷，第68页(1994年)；FEBS Letters，第372 卷，第83页(1995年)；Clin，Orthop.第313卷，第76页(1995年)；J.Mol. Endocrinol.，第16卷，第107页(1996年)；Jpn.J.Pharmacol.，第75卷， 第105页(1997年)；Cancer Res.，第57卷，第1625页(1997年)；Cell， 第93卷，第705页(1998年)；Intl.J.Mol.Med.，第2卷，第715页(1998 页)；J.Biol..Chem.，第274，第9116页(1999年))、甾族抗炎药(例如皮 质甾类、盐皮质甾类固醇、地塞米松、泼尼松、泼尼松龙、甲泼尼龙、 培他米松)、羧基酰胺基三唑、考布他汀A-4、角鲨胺、6-O-氯乙酰-羰基 -烟曲霉醇、沙利度胺、血管生长抑素、肌原蛋白-1、血管紧张素II拮抗 剂(参见Fernandez等，J.Lab.Clin.Med.105：141-145(1985))和抗VEGF 抗体(参见Nature Biotechnology，第17卷，第963-968页(1999年10月)； Kim等，Nature，362，841-844(1993)；WO 00/44777和WO 00/61186)。

其它调节或抑制血管生成且也可以与本发明化合物联合使用的治 疗剂，包括调节或抑制凝固系统和纤维蛋白溶解系统的试剂(参见Clin. Chem.La.Med.38：679-692(2000)中的综述)。所述调节或抑制凝固途径 和纤维蛋白溶解途径的试剂的实例包括但不限于：肝素(参见Thromb. Haemost.80：10-23(1998))、低分子量肝素和羧肽酶U抑制剂(亦称活性 凝血酶激活的纤维蛋白溶解抑制剂[TAFIa]抑制剂)(参见Thrombosis Res. 101：329-354(2001))。TAFIa抑制剂已经在美国序列号60/310,927(2001 年8月8日提交)和60/349,925(2002年1月18日提交)中进行了描述。

“干扰细胞周期关卡的药物”是指抑制转导细胞周期关卡信号的蛋 白激酶，因而使癌细胞对DNA损伤剂敏感。所述试剂包括ATR抑制剂、 ATM抑制剂、CHK11和CHK12激酶抑制剂、及cdk和cdc激酶抑制剂， 其中的具体实例为7-羟基星孢素、黄酮类抗肿瘤药(flavopiridol)、 CYC202(Cyclacel)和BMS-387032。

“干涉受体酪氨酸激酶(RTKs)的药物”是指抑制RTKs并因此抑制 参与肿瘤生成和肿块进展的机构的化合物。此类药物包括c-Kit、Eph、 PDGF、Flt3和c-Met的抑制剂。进一步的药物包括如Bume-Jensen和 Hunter，Nature，411：355-365，2001所述的RTK抑制剂。

“细胞增殖和存活信号转导途径抑制剂”是指抑制细胞表面受体信 号转导级联系统下游的化合物。此类抑制剂包括丝氨酸/苏氨酸激酶抑制 剂(包括但不限于例如在WO 02/083064、WO 02/083139、WO 02/083140、US 2004-0116432、WO 02/083138、US 2004-0102360、WO 03/086404、WO 03/086279、WO 03/086394、WO 03/084473、WO 03/086403、WO 2004/041162、WO 2004/096131、WO 2004/096129、WO 2004/096135、WO 2004/096130、WO 2005/100356、WO 2005/100344、 US 2005/029941、US 2005/44294、US 2005/43361、60/734188、60/652737 和60/670469中描述的Akt抑制剂)、Raf激酶抑制剂(例如BAY-43- 9006)、MEK抑制剂(例如CI-1040和PD-098059)、mTOR抑制剂(例如 Wyeth CCI-779)和PI3K抑制剂(例如LY294002)。

如上所述，与NSAID的联合涉及作为有效的COX-2抑制剂的 NSAID的应用。对于本说明书，如果通过细胞或微粒体测定测得一 NSAID对COX-2抑制的IC50为1μM或更低，则其是有效的。

本发明还包括与作为选择性的COX-2抑制剂的NSAID的联合。对 于本说明书，当NSAID具有抑制COX-2比抑制COX-1超过至少100倍 的特异性时，该NSAID被定义为选择性的COX-2抑制剂，该特异性可 通过细胞或微粒体测定，测出COX-2的IC50与COX-1的IC50之比来评 价。此类化合物包括但不限于以下文献所公开的化合物：美国专利 5,474,995、美国专利5,861,419、美国专利6,001,843、美国专利 6,020,343、美国专利5,409,944、美国专利5,436,265、美国专利 5,536,752、美国专利5,550,142、美国专利5,604,260、美国专利 5,698,584、美国专利5,710,140、WO 94/15932、美国专利5,344,991、美 国专利5,134,142、美国专利5,380,738、美国专利5,393,790、美国专利 5,466,823、美国专利5,633,272和美国专利5,932,598，它们都在此引入 作为参考。

特别可用于本发明治疗方法中的COX-2抑制剂为：3-苯基-4-(4-(甲 磺酰基)苯基)-2-(5H)-呋喃酮；和5-氯-3-(4-甲磺酰基)苯基-2-(2-甲基-5- 吡啶基)吡啶；或者其可药用盐。

被描述为特异性COX-2抑制剂并因而用于本发明中的化合物包括 但不限于：帕瑞考昔、和或者其可药用盐。

血管生成抑制剂的其它实例包括但不限于：内皮生长抑素 (endostatin)、ukrain、豹蛙酶、IM862、(氯乙酰基)氨基甲酸5-甲氧基-4-[2- 甲基-3-(3-甲基-2-丁烯基)环氧乙烷基]-1-氧杂螺[2，5]辛-6-基酯、乙酰 dinanaline、5-氨基-1-[[3，5-二氯-4-(4-氯苯甲酰基)苯基]甲基]-1H-1，2，3-三 唑-4-甲酰胺、CM 101、角鲨胺、考布他汀、RPI4610、NX31838、硫酸 化磷酸甘露戊糖、7，7-(羰基-二[亚氨基-N-甲基-4，2-吡咯并羰基亚氨基[N- 甲基-4，2-吡咯]-羰基亚氨基]-双-(1，3-萘二磺酸酯)和3-[(2，4-二甲基吡咯- 5-基)亚甲基]-2-二氢吲哚酮(SU5416)。

以上所应用的“整联蛋白抑制剂”是指选择性地拮抗、抑制或对抗 生理配体与αvβ3整联蛋白结合的化合物；选择性地拮抗、抑制或对抗生 理配体与αvβ5整联蛋白结合的化合物；拮抗、抑制或对抗生理配体与 αvβ3整联蛋白和αvβ5整联蛋白两者结合的化合物；以及拮抗、抑制或对 抗毛细血管内皮细胞表达的特殊整联蛋白活性的化合物。该术语还指 αvβ6、αvβ8、α1β1、α2β1、α5β1、α6β1和α6β4整联蛋白的拮抗剂。该术 语还指αvβ3、αvβ5、αvβ6、αvβ8、α1β1、α2β1、α5β1、α6β1和α6β4整联蛋 白中任何组合的拮抗剂。

酪氨酸激酶抑制剂的一些具体实例包括：N-(三氟甲基苯基)-5-甲基 异噁唑-4-甲酰胺、3-[(2，4-二甲基吡咯-5-基)亚甲基(methylidenyl)]二氢吲 哚-2-酮、17-(烯丙基氨基)-17-去甲氧格尔德霉素、4-(3-氯-4-氟苯氨基)- 7-甲氧-6-[3-(4-吗啉基)丙氧基]喹唑啉、N-(3-乙炔基苯基)-6，7-双(2-甲氧 基乙氧基)-4-喹唑啉胺、BIBX1382、2，3，9，10，11，12-六氢-10-(羟甲基)-10- 羟基-9-甲基-9，12-环氧-1H-二吲哚并[1，2，3-fg：3’，2’，1’-kl]吡咯并[3，4- i][1，6]苯并二吖辛因-1-酮、SH268、金雀异黄素、STI571、CEP2563、4-(3- 氯苯基氨基)-5，6-二甲基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶甲烷磺酸酯、4-(3-溴-4-羟 苯基)氨基-6，7-二甲氧基喹唑啉、4-(4’-羟苯基)氨基-6，7-二甲氧基喹唑 啉、SU6668、STI571A、N-4-氯苯基-4-(4-吡啶基甲基)-1-酞嗪胺和 EMD121974。

与除抗癌化合物外的其它化合物的联合也包括在本发明的方法 内。例如，本申请要求保护的化合物与PPAR-γ激动剂和PPAR-δ激动剂 的联合可用于治疗某些恶性疾病。PPAR-γ和PPAR-δ是核过氧化物酶体 增殖物激活受体γ和核过氧化物酶体增殖物激活受体δ。PPAR-γ在内皮细 胞上的表达及其参与血管生成已经在文献中得到了报道(参见J. Cardiovasc.Pharmacol.1998；31：909-913；J.Biol.Chem.1999；274： 9116-9121；Invest.Ophthalmol Vis.Sci.2000；41：2309-2317)。最近， 有报告说明PPAR-γ激动剂在体外抑制对VEGF的血管生成反应；在小 鼠中，马来酸曲格列酮和马来酸罗格列酮两者都抑制视网膜新血管形成 的发育(Arch.Ophthamol.2001；119：709-717)。PPAR-γ激动剂和 PPAR-γ/α激动剂的实例包括但不限于噻唑烷二酮类(例如DRF2725、 CS-011、曲格列酮、罗格列酮和吡格列酮)、非诺贝特、吉非贝齐、氯贝 丁酯、GW2570、SB219994、AR-H039242、JTT-501、MCC-555、GW2331、 GW409544、NN2344、KRP297、NP0110、DRF4158、NN622、GI262570、 PNU182716、DRF552926、2-[(5，7-二丙基-3-三氟甲基-1，2-苯基异噁唑-6- 基)氧基]-2-甲基丙酸(公开于USSN 09/782,856中)和2(R)-7-(3-(2-氯-4-(4- 氟苯氧基)苯氧基)丙氧基)-2-乙基苯并二氢吡喃-2-甲酸(公开于USSN 60/235,708和60/244,697中)。

本发明的另一个实施方案为现公开的化合物与用于治疗癌症的基 因治疗的联合应用。有关治疗癌症的基因策略的概况参见Hall等(Am.J. Hum.Genet.61：785-789，1997)和Kufe等(Cancer Medicine，第五版， 第876-889页，BC Decker，Hamilton 2000)。基因治疗可用于传递任何 肿瘤抑制基因。此类基因的实例包括但不限于p53，p53可通过重组病 毒介导的基因转移进行传递(参见，例如美国专利6,069,134)、uPA/uPAR 拮抗剂(“Adenovirus-Mediated Delivery of a uPA/uPAR Antagonist Suppresses Angiogenesis-Dependent Tumor Growth and Dissemination in Mice”，Gene Therapy，1998年8月，5(8)：1105-13)和干扰素γ(J.Immunol. 2000；164：217-222)。

本发明化合物还可以与固有多药耐药性(MDR)抑制剂，特别是与转 运蛋白高水平表达有关的MDR抑制剂联合用药。此类MDR抑制剂包 括p-糖蛋白(P-gp)的抑制剂，例如LY335979、XR9576、OC144-093、 R101922、VX853和PSC833(伐司朴达)。

本发明化合物可与止吐药联合使用从而治疗恶心或呕吐，包括急性 呕吐、延迟呕吐、晚期呕吐和先期呕吐，所述恶心或者呕吐可能是因单 独使用本发明化合物或与放疗一起使用而引起。为了预防或治疗呕吐， 本发明化合物可与其它止吐药联合使用，特别是与下述止吐药联合使 用：神经激肽-1受体拮抗剂；5HT3受体拮抗剂，例如昂丹司琼、格拉 司琼、托烷司琼和扎托司琼；GABAB受体激动剂，例如巴氯芬；皮质 甾类，例如Decadron(地塞米松)、Kenalog、Aristocort、Nasalide、Preferid、 Benecorten或其它公开于美国专利2,789,118、2,990,401、3,048,581、 3,126,375、3,929,768、3,996,359、3,928,326和3,749,712中的皮质甾类， 例如吩噻嗪类(如丙氯拉嗪、氟奋乃静、硫利达嗪和美索达嗪)、甲氧氯 普胺或屈大麻酚等抗多巴胺能药。在另一个实施方案中，与选自神经激 肽-1受体拮抗剂、5HT3受体拮抗剂和皮质甾类等止吐药的联合疗法得 到了公开，其用于治疗或预防由于给予本发明化合物而引起的呕吐。

与本发明化合物联用的神经激肽-1受体拮抗剂在以下专利中得到 了全面公开，例如，U.S.专利Nos.5,162,339，5,232,929，5,242,930， 5,373,003，5,387,595，5,459,270，5,494,926，5,496,833，5,637,699， 5,719,147；欧洲专利公开Nos.EP 0 360 390，0 394 989，0 428 434，0 429 366，0 430 771，0 436 334，0 443 132，0 482 539，0 498 069，0 499 313，0 512 901，0 512 902，0 514 273，0 514 274，0 514 275，0 514 276，0 515 681， 0 517 589，0 520 555，0 522 808，0 528 495，0 532 456，0 533 280，0 536 817，0 545 478，0 558 156，0 577 394，0 585 913，0 590 152，0 599 538，0 610 793，0 634 402，0 686 629，0 693 489，0 694 535，0 699 655，0 699 674， 0 707 006，0 708 101，0 709 375，0 709 376，0 714 891，0 723 959， 0 733 632 and 0 776 893；PCT国际专利公开Nos.WO 90/05525， 90/05729，91/09844，91/18899，92/01688，92/06079，92/12151，92/15585， 92/17449，92/20661，92/20676，92/21677，92/22569，93/00330，93/00331， 93/01159，93/01165，93/01169，93/01170，93/06099，93/09116，93/10073， 93/14084，93/14113，93/18023，93/19064，93/21155，93/21181，93/23380， 93/24465，94/00440，94/01402，94/02461，94/02595，94/03429，94/03445， 94/04494，94/04496，94/05625，94/07843，94/08997，94/10165，94/10167， 94/10168，94/10170，94/11368，94/13639，94/13663，94/14767，94/15903， 94/19320，94/19323，94/20500，94/26735，94/26740，94/29309，95/02595， 95/04040，95/04042，95/06645，95/07886，95/07908，95/08549，95/11880， 95/14017，95/15311，95/16679，95/17382，95/18124，95/18129，95/19344， 95/20575，95/21819，95/22525，95/23798，95/26338，95/28418，95/30674， 95/30687，95/33744，96/05181，96/05193，96/05203，96/06094，96/07649， 96/10562，96/16939，96/18643，96/20197，96/21661，96/29304，96/29317， 96/29326，96/29328，96/31214，96/32385，96/37489，97/01553，97/01554， 97/03066，97/08144，97/14671，97/17362，97/18206，97/19084，97/19942和 97/21702；以及英国专利公开Nos.2 266 529，2 268 931，2 269 170，2 269 590，2 271 774，2 292 144，2 293 168，2 293 169，和2 302 689。所述化合 物的制备完全公开在上述专利和公布说明书中，它们都在此引入作为参 考。

在一种实施方案中，用于与本发明化合物联用的神经激肽-1受体拮 抗剂选自：2-(R)-(1-(R)-(3，5-双(三氟甲基)苯基)乙氧基)-3-(S)-(4-氟苯 基)-4-(3-(5-氧代-1H，4H-1，2，4-三唑并)甲基)吗啉，或者其可药用盐，有关 内容描述于美国专利5,719,147中。

本发明化合物也可与用于治疗贫血的治疗剂一起给药。所述贫血治 疗剂为，例如，连续红血球生成受体激活剂(例如阿法依泊汀)。

本发明化合物还可与用于治疗中性粒细胞减少症的治疗剂一起给 药。所述中性粒细胞减少症的治疗剂为，例如，调节嗜中性粒细胞的形 成和功能的造血生长因子(比如，人类粒细胞集落刺激因子(G-CSF))。 G-CSF的实例包括非格司亭。

本发明化合物还可与例如左旋咪唑、异丙肌苷和日达仙(Zadaxin)的 免疫增强药一起给药。

化合物本发明的化合物还可用于与P450抑制剂联合治疗或预防癌 症，所述P450抑制剂包括：异型生物质药物(xenobiotics)、奎尼丁、酪 胺、酮康唑、睾酮、奎宁、甲吡酮(methyrapone)、咖啡因、苯乙肼、多 柔比星、醋竹桃霉素、环苯扎林、红霉素、可卡因、呋拉茶碱(furafyline)、 西眯替丁、右美沙芬、利托那韦、茚地那韦、安普那韦、地尔硫、特 非那定、维拉帕米、氢化可的松、伊曲康唑、米贝拉地尔、奈法唑酮和 奈非那韦。

本发明的化合物还可用于与Pgp和/或BCRP抑制剂联合治疗或预防 癌症，Pgp和/或BCRP抑制剂包括：环孢菌素A、PSC833、GF120918、 克列莫佛EL(cremophorEL)、烟曲霉毒素C、Ko132、Ko134、易瑞沙、 甲磺酸伊马替尼、EKI-785、C11033、新生霉素、己烯雌酚、他莫昔芬、 利血平(resperpine)、VX-710、色丙他汀(tryprostatin)A、类黄酮、利托 那韦、沙奎那韦、奈非那韦、奥美拉唑、奎尼丁、维拉帕米、特非那定、 酮康唑、硝苯地平、FK506、胺碘酮、XR9576、茚地那韦、安普那韦、 氢化可的松、睾酮、LY335979、OC144-093、红霉素、长春新碱、地高 辛和他林洛尔。

本发明的化合物还可以与双膦酸盐类(理解为包括双膦酸盐类、二膦 酸盐、双膦酸和二膦酸)联合用于治疗或预防癌症，包括骨癌。双膦酸盐 的实例包括但不限于：依替膦酸盐(Didronel)、帕米膦酸盐(Aredia)、阿 仑膦酸盐(Fosamax)、利塞膦酸盐(Actonel)、唑来膦酸盐(Zometa)、伊班 膦酸盐(ibandronate)(Boniva)、伊卡膦酸盐(incadronate)或西马膦酸盐 (cimadronate)、氯膦酸盐、EB-1053、米诺膦酸盐(minodronate)、奈立膦 酸盐(neridronate)、吡膦酸盐(piridronate)及替鲁膦酸盐(tiludronate)，包 括其任何及所有药学上可接受的盐、衍生物、水合物及它们的混合物。

本发明的化合物还可用于与芳香酶抑制剂联合治疗或预防乳腺 癌。芳香酶抑制剂的例子包括但不限于：阿那曲唑、来曲唑和依西美坦。

本发明的化合物还可用于与siRNA治疗剂联合治疗或预防癌症。

本发明的化合物还可与γ-分泌酶抑制剂和/或NOTCH信号转导抑制 剂联合给药。这些抑制剂包括在WO 01/90084，WO 02/30912，WO 01/70677，WO 03/013506，WO 02/36555，WO 03/093252，WO 03/093264， WO 03/093251，WO 03/093253，WO 2004/039800，WO 2004/039370，WO 2005/030731，WO 2005/014553，USSN 10/957,251，WO 2004/089911， WO 02/081435，WO 02/081433，WO 03/018543，WO 2004/031137，WO 2004/031139，WO 2004/031138，WO 2004/101538，WO 2004/101539和 WO 02/47671中所述的化合物(包括LY-450139)。

如WO 02/083064，WO 02/083139，WO 02/083140，US 2004-0116432， WO 02/083138，US 2004-0102360，WO 03/086404，WO 03/086279，WO 03/086394，WO 03/084473，WO 03/086403，WO 2004/041162，WO 2004/096131，WO 2004/096129，WO 2004/096135，WO 2004/096130，WO 2005/100356，WO 2005/100344，US 2005/029941，US 2005/44294，US 2005/43361，60/734188，60/652737，60/670469中公开的Akt抑制剂，包括 本发明化合物在内，还可用于与钾盐、镁盐、β-阻断剂(诸如阿替洛尔) 和内皮肽-a(ETa)拮抗剂联合使用，目的是保持心血管的动态平衡。

如WO 02/083064、WO 02/083139、WO 02/083140、US 2004- 0116432、WO 02/083138、US 2004-0102360、WO 03/086404、WO 03/086279、WO 03/086394、WO 03/084473、WO 03/086403、WO 2004/041162、WO 2004/096131、WO 2004/096129、WO 2004/096135、 WO 2004/096130、WO 2005/100356、WO 2005/100344、US 2005/029941、 US 2005/44294、US 2005/43361、60/734188、60/652737、60/670469中 公开的Akt抑制剂，包括本发明化合物在内，还可与胰岛素、胰岛素促 泌剂、PPAR-γ激动剂、二甲双胍、生长抑素受体激动剂诸如奥曲肽、 DPP4抑制剂、磺酰脲和α-葡糖苷酶抑制剂联合使用，目的是保持葡萄 糖动态平衡。

本发明的化合物还可用于与PARP抑制剂联合治疗或预防癌症。

本发明的化合物还可用于与以下的药物联合治疗癌症：abarelix (Plenaxis阿地白介素Aldesleukin Alemtuzumabbalitretinoin别嘌醇 六甲蜜胺氨磷汀阿那曲唑 三氧化二砷门冬酰胺酶阿扎胞 bevacuzimab蓓萨罗丁胶囊蓓 萨罗丁凝胶剂博来霉素bortezomib 白消安静脉内制剂白消安口服剂 卡普睾酮卡培他滨卡铂卡 莫司汀卡莫司汀卡莫司汀+聚苯丙生 20植入物(Gliadel 塞来昔布西妥昔单抗 苯丁酸氮芥顺铂克拉屈滨 氯法拉宾(clofarabine)环磷酰胺 环磷酰胺(Cytoxan环磷酰胺(Cytoxan 阿糖胞苷阿糖胞苷脂质体达卡巴嗪 D-放线菌素，放线菌素Dα-Darbepoetin 红霉素脂质体柔红霉素、柔毛霉素 柔红霉素、柔毛霉素地尼白介素-毒素 连接物(Denileukin diftitox)右雷佐生多西他赛 多柔比星(Adriamycin 多柔比星 多柔比星(Adriamycin PFS多柔比星脂质体 酸屈他雄酮丙酸屈他雄酮(masterone Elliott′s B溶液(Elliott′s B表柔比星阿法依伯汀 erlotinib雌莫司汀磷酸依托泊苷 依托泊苷、VP-16依西美坦 非格司亭氮尿苷(动脉内)氟达拉滨 氟尿嘧啶、5-FU氟维司群吉非替 尼(gefitinib)吉西他滨吉姆单抗奥佐米星 醋酸性瑞林(Zoladex醋酸性瑞林 醋酸组氨瑞林(Histrelin羟基脲Ibritumomab Xiuxetan伊达比星异环磷酰胺甲 磺酸伊马替尼(imatinib)干扰素α-2a(Roferon 干扰素 α-2b伊立替康lenalidomide来 曲唑亚叶酸醋酸利普安醋酸 亮内瑞林左旋咪唑洛莫司汀、CCNU 甲氯乙胺(meclorethamine)、氮芥醋酸甲地孕 酮美法仑、L-PAM巯嘌呤、6-MP 美司钠美司钠(Mesnex 甲氨蝶呤 甲氧沙林丝裂霉素C米托坦 米托蒽醌苯丙酸诺龙(nandrolone phenpropionate) 奈拉滨Nofetumomab Oprelvekin奥沙利铂紫杉醇紫 杉醇紫杉醇蛋白质结合粒子帕立夫明 (palifermin)帕米膦酸盐培加酶(Adagen(牛 培门冬酶Pegfilgrastim培美曲塞 二钠喷司他丁哌泊溴烷普卡霉素、 米拉霉素卟吩姆钠丙卡巴肼 米帕林拉布立酶利妥西单抗沙格 司亭沙格司亭sorafenib链佐星 马来酸苏尼替尼(sunitinib)滑石他 莫昔芬替莫唑胺替尼泊苷、VM-26 睾内酮硫鸟嘌呤、6-TG塞替派 拓扑替康托瑞米芬托西奠单 抗托西奠单抗/I-131托西奠单抗曲妥珠单抗 维甲酸、ATRA乌拉莫司汀(Uracil Mustard 伐如比星(valrubicin)长春碱长春新碱 长春瑞滨和唑来膦酸盐

因此，本发明的范围包括本发明要求保护的化合物与选自以下的第 二化合物的联合应用：雌激素受体调节剂、雄激素受体调节剂、类视黄 醇受体调节剂、细胞毒剂/细胞抑制剂、抗增殖药、异戊烯基-蛋白转移 酶抑制剂、HMG-CoA还原酶抑制剂、HTV蛋白酶抑制剂、逆转录酶抑 制剂、血管生成抑制剂、PPAR-γ激动剂、PPAR-δ激动剂、固有多药耐 药性抑制剂、止吐药、用于治疗贫血的药物、用于治疗嗜中性白细胞减 少症的药物、免疫增强药、细胞增殖和存活信号转导抑制剂、双膦酸盐 类、芳香酶抑制剂、siRNA治疗剂、γ-分泌酶抑制剂、干扰受体酪氨酸 激酶(RTKs)的药物、干扰细胞周期关卡的药物，以及上列的任何治疗 剂。

关于本发明化合物的术语“给药”及其变形(例如“给予”化合物) 是指将化合物或化合物前药引入到需要治疗的动物系统中。当将本发明 化合物或其前药与一种或多种其它活性剂(例如细胞毒剂等)联合提供 时，“给药”及其变形可以各自理解为包括同时和顺序引入化合物或其 前药及其它试剂。

在此使用的术语“组合物”是指含有规定量的规定成分的产品，以 及任何通过组合规定量的规定成分而直接或间接得到的产品。

本文所用的术语“治疗有效量”是指由研究人员、兽医、医疗医生 或其它临床医师所确定的在组织、系统、动物或人类中引发生物学或者 医学反应的活性化合物或药物的量。

术语“治疗癌症”或“癌症的治疗”是指对患有癌性病况的哺乳动 物进行给药，并涉及通过杀死癌细胞以减轻癌性病况的效果，也涉及使 癌的生长和/或转移受到抑制的效果。

在一种实施方案中，作为第二化合物使用的血管生成抑制剂选自酪 氨酸激酶抑制剂、表皮衍生生长因子抑制剂、成纤维细胞衍生生长因子 抑制剂、血小板衍生生长因子抑制剂、MMP(基质金属蛋白酶)抑制剂、 整联蛋白阻断剂、干扰素-α、白介素-12、聚硫酸戊聚糖、环加氧酶抑制 剂、羧基酰胺基三唑、考布他汀A-4、角鲨胺、6-O-氯乙酰基-羰基)-烟 曲霉醇、沙利度胺、血管生长抑素、肌原蛋白-1或抗VEGF抗体。在一 个实施方案中，雌激素受体调节剂为他莫昔芬或雷洛昔芬。

要求保护的范围还包括治疗癌症的方法，该方法包括与放射治疗和 /或第二化合物联合给予治疗有效量的本发明化合物，所述第二化合物选 自：雌激素受体调节剂、雄激素受体调节剂、类视黄醇受体调节剂、细 胞毒剂/细胞抑制剂、抗增殖药、异戊烯基-蛋白转移酶抑制剂、HMG-CoA 还原酶抑制剂、HIV蛋白酶抑制剂、逆转录酶抑制剂、血管生成抑制剂、 PPAR-γ激动剂、PPAR-δ激动剂、固有多药耐药性抑制剂、止吐药、用 于治疗贫血的药物、用于治疗中性粒细胞减少症的药物、免疫增强药、 细胞增殖和存活信号转导抑制剂、双膦酸盐类、和芳香酶抑制剂、siRNA 治疗剂、γ-分泌酶抑制剂、干扰受体酪氨酸激酶(RTKs)的药物、干扰细 胞周期关卡的药物，以及上列的任何治疗剂。

本发明的另一个实施方案是治疗癌症的方法，包括与紫杉醇或曲妥 珠单抗联合给药治疗有效量的本发明的化合物。

本发明进一步包括治疗或预防癌症的方法，包括给药治疗有效量的 本发明的化合物和COX-2抑制剂。

本发明还包括可用于治疗或预防癌症的药物组合物，该药物组合物 包括治疗有效量的本发明的化合物和选自以下的第二化合物：雌激素受 体调节剂、雄激素受体调节剂、类视黄醇受体调节剂、细胞毒剂/细胞抑 制剂、抗增殖药、异戊烯基-蛋白转移酶抑制剂、HMG-CoA还原酶抑制 剂、HIV蛋白酶抑制剂、逆转录酶抑制剂、血管生成抑制剂、PPAR-γ激 动剂、PPAR-δ激动剂、细胞增殖和存活信号转导抑制剂、双膦酸盐类、 芳香酶抑制剂、siRNA治疗剂、γ-分泌酶抑制剂、干扰受体酪氨酸激酶 (RTKs)的药物、干扰细胞周期关卡的药物，以及上列的任何治疗剂。

所有的专利、公开和再审专利申请并入本文作为参考。

化学图解和实施例说明中使用的缩写如下：AEBSF(对氨基乙基苯 磺酰基氟)；BSA(牛血清清蛋白)；BuLi(正丁基锂)；CDCl3(氯仿-d)； CuI(碘化铜)；CuSO4(硫酸铜)；DCE(二氯乙烷)；DCM(二氯乙烷)； DEAD(偶氮二羧酸二乙酯)；DMF(N，N-二甲基甲酰胺)；DMSO(二甲基 亚砜)；DTT(二硫苏糖醇)；EDTA(乙二胺-四乙酸)；EGTA(乙二醇-四 乙酸)；EtOAc(乙酸乙酯)；EtOH(乙醇)；HOAc(乙酸)；HPLC(高效液 相色谱法)；HRMS(高分辨率质谱)；LCMS(液相色谱-质谱仪)；LHMDS (双(三甲基甲硅烷基)氨基锂)；LRMS(低分辨率质谱)；MeOH(甲醇)； MP-B(CN)H3(大孔氰基硼氢化物)；NaHCO3(碳酸氢钠)；Na2SO4(硫酸 钠)；Na(OAc)3BH(三乙酰氧基硼氢化钠)；NH4OAC(醋酸铵)；NBS(N- 溴代琥珀酰胺)；NMR(核磁共振)；PBS(磷酸盐缓冲盐水)；PCR(聚合 酶链式反应)；Pd(dppf)([1，1′-双(二苯膦基)二茂铁]钯)；Pd(Ph3)4(钯(0) 四-三苯基膦)；POCl3(三氯氧化磷)；PS-DIEA(聚苯乙烯二异丙基乙基 胺)；PS-PPh3(聚苯乙烯-三苯基膦)；TBAF(四丁基氟化铵)；THF(四氢 呋喃)；TFA(三氟乙酸)；TMSCH2N2(三甲基甲硅烷基重氮甲烷)和Ac(乙 酰基)；BOC(叔丁氧羰基)；Bu(丁基)；Cal(计算值)；Calc′d(计算值)； DIEA(二异丙基乙基胺)；DMAP(4-二甲基氨基吡啶)；EDC(N-乙基- N′-(3-二甲基氨基丙基)碳二亚胺)；Eq(当量)；Et(乙基)；HOBT(羟基苯 并三唑)；IPA(异丙醇)；LC/MS(液相色谱-质谱仪)；Me(甲基)；MeCN (乙腈)；NMP(N-甲基吡咯烷酮)；Pr(丙基)；Pyr(吡啶)；Sat(饱和的) 和Tosic(对甲苯磺酸)。

除了在文献中已知的或在实验方法中举例说明的其它标准操作之 外，本发明的化合物可通过采用以下反应图解中所述的反应制备。因 此，以下的说明性反应图解不受列举的化合物或用于说明性目的使用的 任何具体的取代基的限制。反应图解中所示的取代基编号不必须与权利 要求中使用的那些相关，通常为了简便，在上述式A的定义下允许的多 个取代基表示为与该化合物连接的单独取代基。

本发明化合物的最初合成如反应图解I-IX所示。可用于制备本发明 化合物的最终反应如反应图解X-XIV所示。

反应图解概要

以下的反应图解，即反应图解I-IX，提供了制备本发明化合物的双 环部分的有用细节。

必需中间体在某些情况下可在市场上买到，或者可根据文献过程制 得。如反应图解I所示，适当取代的苯基乙炔化物可与碘化铜反应形成 相应的乙炔化铜I-1(例如参见Sonogashira，K.；Toda，Y.；Hagihara，N. Tetrahedron Lett.1975，4467)。然后中间体I-1可与适当取代的亲电子部 分反应，提供不对称取代的I-2。I-2与NBS反应然后水解，得到I-3(例 如参见Yusybov，M.S.；Filimonov，V.D.；Synthesis 1991，2，131)。许多取 代的和未被取代的芳基和杂环基化合物还可作为商品获得。

反应图解II说明了从适当取代的II-1开始制备化合物。该中间体可 以与适当取代的胺反应提供中间体II-2，II-2可以与适当的芳基或杂芳 基二胺反应提供本发明化合物的区域异构体混合物，其通常通过色谱法 分离。

反应图解III说明了另一种双环杂环基的合成。

反应图解IV说明了从适当取代的4-氨基-3-硝基苄腈IV-I制备化合 物。然后该中间体可经历微波促进的[3+2]环加成反应得到四唑IV-II。 该酸性四唑与亲电子试剂诸如碘甲烷的烷基化得到烷基化四唑的2-甲 基(IV-III)/1-甲基(IV-IV)混合物，该混合物可通过柱色谱法分离。IV-III 的Ra-镍氢化得到二胺IV-V。进一步的合成如上述反应图解中所述。

反应图解V说明了化合物的合成。适当取代的芳基或杂芳基氨基甲 醛与适当取代的酮的弗瑞德兰德环缩合得到式V-1的中间体。羧酸官能 度向醛官能度的转化得到中间体V-2，并且通过本领域技术人员公知的 方法完成。与适当取代的胺的还原烷基化得到式V-3的化合物。

反应图解VI说明了中间体V-2的另一种合成方案。

反应图解VII说明了从酮VII-1开始合成化合物，酮VII-1根据文献 制备(Renault，O.；Dallemagne，P.；和Rault，S.Org.Prep.Proced.Int.， 1999，31，324)。VII-1与N，N-二甲基甲酰胺缩二甲醇缩合得到酮-烯胺 VII-2，酮-烯胺VII-2与2-氰基乙酰胺环化得到吡啶酮VII-3。用三氯氧 化磷处理VII-3得到氯代吡啶VII-4。基团溴化，然后用适当取代的胺置 换得到胺VII-5。随后的氯代烟腈VII-5与各种双亲核试剂的反应得到环 化结构VII-6。

反应图解VIII说明了1，6-萘啶-6(5H)-酮化合物的制备。从市售的羧 酸(VIII-1)开始合成，将VIII-1转化成Weinreb酰胺(VIII-2)。所述酰胺与 芳基锂试剂(通过芳基溴化物与正丁基锂的锂-卤素交换反应获得)反 应，得到酮(VIII-3)。该取代的酮与4-氨基烟醛(nicotinaldehyde)在碱例如 氢氧化钠或甲醇钠的存在下缩合，得到1，6-萘啶(VIII-4)。苯基上的R取 代基可以是如(甲硅烷基)保护的羟基甲基、掩蔽醛(即缩醛)、或羧酸的官 能团。将该物质转化为必需的醛VIII-4。当R基团是羟基甲基时，用诸 如活化二氧化锰的试剂氧化得到醛VIII-4。当R是缩醛时，弱酸水解得 到醛。用硼氢化物还原混合酐进行的羧酸基团还原也得到醛VIII-4。然 后该醛与不同系列的胺例如4-取代的哌啶以及硼氢化物进行还原胺化 得到1，6-萘啶-5(H)-酮(VIII-5)。在150℃下用盐酸吡啶处理(VIII-5)得到 最终产物(VIII-6)。

反应图解IX说明了在C3位置引入杂环的另一种可供选择的策略。 该反应从市售的二氯苯并吡嗪开始，其与芳基硼酸在钯催化剂的存在下 偶合(Suzuki反应)。然后，在相同的反应条件下与另外的杂环硼酸重复 该反应得到最终产物。

                 反应图解I

                 反应图解II

                 反应图解III

                 反应图解IV

                 反应图解V

                 反应图解VI

                 反应图解VII

                 反应图解VIII

                 反应图解IX

                 反应图解的最终概要

以下的反应图解，即反应图解X-XIV，提供了制备本发明化合物的 三环部分的有用细节。

必需中间体在某些情况下可在市场上买到，或者可根据文献过程制 得。用POCl3处理适当取代的芳基或杂芳基中间体X-1得到式X-2的中 间体。氯官能度向酰肼官能度的转化得到中间体X-3，并通过本领域技 术人员公知的方法完成。与适当的二咪唑前体环化提供式X-4的化合 物。

反应图解XI说明了合成式X-4的化合物的另一种可供选择的策 略。

反应图解XII说明了式XII-2化合物的合成。X-3与适当的三甲氧基 氯乙酸酯缩合得到氯甲基中间体XII-1，其通过亲核置换，得到结构 XII-2。

反应图解XIII说明了三唑并萘啶化合物的制备。合成从文献/专利 已知的萘啶酮(XIII-1)开始，在回流条件下用POCl3处理后将其转化为萘 啶氯化物(XIII-2)。XIII-2与纯净肼在回流条件下反应得到酰肼(XIII-3)， 其用作合成三唑并萘啶化合物的关键中间体。在所示条件下将该酰肼 (XIII-4)转化为必需的三唑并萘啶化合物，从而完成预计的合成。三唑并 部分上的R取代基可以是如氨基、氧代基或硫羟的官能团。

反应图解XIV说明了在分子的左手部分引入三唑并部分的可供选 择的策略。从先前合成的中间体酰肼(XIII-3)开始合成，其可用三甲氧基 原乙酸酯处理得到所需的最终产物三唑并萘啶化合物(XIV-1).三唑并 部分上的R取代基可以是如质子、简单烷基、氯甲基或官能化烷基的官 能团。

反应图解XV说明了使用三种不同的还原胺化方法在苄基位置引入 伯胺来合成式XV-1的化合物。所述方法还适用于其他醛，诸如式XVII-1 的化合物。

反应图解XVI说明了使用如反应图解VIII所示的环缩合条件的变 体合成式XVI-2的化合物。使用非质子溶剂和碱得到结构XVI-2的氯代 萘啶。

反应图解XVII说明了式XVII-4的化合物的合成。在这一情况下， 经由磺酰胺XVII-2在苄基位置引入甲基取代基。其他的取代基可以使用 有机金属试剂诸如格氏试剂引入。使用酸诸如HCl可以将叔丁基亚磺酰 胺裂解除去得到胺。

反应图解XVIII说明了式XVIII-2化合物的合成，其是反应图解XI 中所述的三唑合成的变体。在这种情况下，在酸催化条件下肼XVIII-1 与羧酸偶合，中间体酰基肼环化得到稠合的三唑。

反应图解XIX说明了式XIX-2的化合物的合成，其中从腈XIX-1 合成环丙基胺。

反应图解XX说明了在标准的还原胺化条件下从式XX-1的胺合成 式XX-2的化合物。

                 反应图解X

                 反应图解XI

                 反应图解XII

                 反应图解XIII

                 反应图解XIV

                 反应图解XV

                 反应图解XVI

                 反应图解XVII

                 反应图解XVIII

                 反应图解XIX

                 反应图解XX

实施例

提供实施例和图解的目的是为了帮助进一步了解本发明。使用的具 体材料、物质和条件是为了进一步说明本发明而不是对本发明的合理范 围构成限制。

                 反应图解1

9-苯基-8-(4-{[4-(5-吡啶-2-基-1H-1，2，4-三唑-3-基)哌啶-1-基]甲基}苯 基)[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶-3-胺(1-4)

5-氯-3-苯基-2-(4-{[4-(5-吡啶-2-基-1H-1，2，4-三唑-3-基)哌啶-1-基]甲 基}苯基)-1，6-萘啶(1-2)

向配备搅拌棒的25mL RB烧瓶中加入3-苯基-2-(4-{[4-(5-吡啶-2- 基-1H-1，2，4-三唑-3-基)哌啶-1-基]甲基}苯基)-1，6-萘啶-5(6H)-酮(0.86g， 1.6mmol)，然后加入无水POCl3(8mL)。混合物加热到120℃并搅拌回 流4小时。将反应冷却到室温后，将反应混合物小心地加入到冷的饱和 NaHCO3水溶液(20mL)和EtOAc(20mL)的混合物中。在整个猝灭过程 中保持水层的PH为约PH 8-9。水溶液进一步用EtOAc(15mL)提取两 次，残余物用MeOH(20mL)洗涤，合并有机相并真空浓缩，得到5-氯 -3-苯基-2-(4-{[4-(5-吡啶-2-基-1H-1，2，4-三唑-3-基)哌啶-1-基]甲基}苯基)- 1，6-萘啶(1-2)(900mg)。粗品直接用在后面步骤中无需进一步纯化。

5-肼基-3-苯基-2-(4-{[4-(5-吡啶-2-基-1H-1，2，4-三唑-3-基)哌啶-1-基] 甲基}苯基)-1，6-萘啶(1-3)

向配备搅拌棒的25mL RB烧瓶中加入5-氯-3-苯基-2-(4-{[4-(5-吡 啶-2-基-1H-1，2，4-三唑-3-基)哌啶-1-基]甲基}苯基)-1，6-萘啶(1-2)(900mg， 1.6mmol)，然后加入无水NH2NH2(8mL)。将悬浮液加热到110℃并搅 拌回流5小时，将反应冷却到室温后，将反应混合物真空浓缩得到微黄 色粉末(900mg)。粗产物直接用于后面步骤无需进一步纯化。

9-苯基-8-(4-{[4-(5-吡啶-2-基-1H-1，2，4-三唑-3-基)哌啶-1-基]甲基}苯 基)[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶-3-胺(1-4)

向在DMF(1.5mL)中的5-肼基-3-苯基-2-(4-{[4-(5-吡啶-2-基-1H- 1，2，4-三唑-3-基)哌啶-1-基]甲基}苯基)-1，6-萘啶(1-3)(70mg，0.126mmol) 中添加文献已知的1，1-二-1H-咪唑-1-基甲基亚胺(102mg，0.633 mmol)。反应混合物在85℃搅拌4小时，真空浓缩，色谱分离得到所需 的9-苯基-8-(4-{[4-(5-吡啶-2-基-1H-1，2，4-三唑-3-基)哌啶-1-基]甲基}苯 基)[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶-3-胺(1-4)(46mg)，为三氟乙酸盐。1H NMR：(500MHz，CDCl3)δ 8.76(s，1H)，8.74(d，J＝4.3Hz，1H)，8.29-8.27(m， 2H)，8.19(m，1H)，7.67(m，1H)，7.54-7.53(m，2H)，7.48-7.46(m，2H)，7.47 (d，J＝7.7Hz，1H)，7.34-7.26(m，5H)，4.43(s，2H)，3.65(br d，J＝10.9Hz， 2H)，3.46(br s，1H)，3.27-3.19(m，2H)，2.50-2.42(m，2H)，2.10-2.06(m， 2H)。

以下表1中的化合物以图解1和反应图解一节所示的类似方式制 备。

表1

                 反应图解2

3-甲基-9-苯基-8-(4-{[4-(5-吡啶-2-基-1H-1，2，4-三唑-3-基)哌啶-1-基] 甲基}苯基)[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶(2-2)

向在DMF(1.0mL)中的5-肼基-3-苯基-2-(4-{[4-(5-吡啶-2-基-1H- 1，2，4-三唑-3-基)哌啶-1-基]甲基}苯基)-1，6-萘啶(2-1)(55mg，0.101mmol) 中添加原乙酸三甲酯(0.63mL，5.04mmol)。反应混合物在100℃搅拌3 小时，然后真空浓缩，并色谱分离，得到所需的3-甲基-9-苯基-8-(4- {[4-(5-吡啶-2-基-1H-1，2，4-三唑-3-基)哌啶-1-基]甲基}苯基)[1，2，4]三唑并 [3，4-f]-1，6-萘啶(2-2)(28mg)，为三氟乙酸盐。1H NMR：(500MHz， CDCl3)δ 8.87(s，1H)，8.65(d，J＝6.4Hz，1H)，8.33(d，J＝7.5Hz，1H)，8.11(d， J＝7.8Hz，1H)，7.92(t，J＝7.8Hz，1H)，7.49-7.41(m，3H)，7.36-7.30(m，8H)， 3.61(s，2H)，3.02-3.00(m，2H)，3.00-2.84(m，1H)，2.25-2.21(m，2H)， 2.10-1.83(m，4H)，1.97(s，3H)。

以下表2中的化合物以图解2和反应图解一节所示的类似方式制 备。

表2

                 反应图解3

8-(4-氨基甲基-苯基)-9-苯基-[1，2，4]三唑并[3，4-f][1，6]萘啶-3-醇(3- 8)

步骤A：(2-氯-3-甲酰基吡啶-4-基)氨基甲酸叔丁基酯(3-1)

4-氨基-2-氯吡啶(1.28gm，10mmol)和二碳酸二叔丁基酯(2.21gm， 10.1mmol)在THF(20mL)中的溶液冷却到0℃，在保持温度低于0℃的 同时缓慢添加1M双(三甲基甲硅烷基)氨基锂在THF(20mL，20mmol) 中的溶液，在1小时内使反应回温到室温，然后通过添加1.5N的氯化 铵水溶液(15mL)猝灭反应，搅拌几小时后，将反应物提取到乙酸乙酯 中，用盐水洗涤，有机层经过干燥(Na2SO4)，过滤和蒸发。残余物与乙 醚研磨，得到纯的(2-氯吡啶-4-基)氨基甲酸叔丁基酯。母液通过硅胶色 谱分离，用25-45％乙酸乙酯/己烷洗脱，得到更多产物。

在惰性气氛下将(2-氯吡啶-4-基)氨基甲酸叔丁基酯(1.14gm，5 mmol)在无水THF(20mL)中的溶液冷却到-70℃，并缓慢添加1.7M叔 丁基锂/戊烷(8mL，13.5mmol)。反应搅拌2小时，然后添加无水 DMF(1.2mL，15.5mmol)，在3小时内使反应缓慢回温到室温，反应混 合物用3N HCl(12mL)猝灭，并用乙醚稀释，醚层用NaHCO3水溶液洗 涤，干燥(Na2SO4)，过滤并蒸发，残余物与冷乙醚研磨，得到纯的(2- 氯-3-甲酰基吡啶-4-基)氨基甲酸叔丁基酯。母液通过硅胶色谱分离，用 15-20％乙酸乙酯/己烷洗脱，得到更多产物。1H-NMR(500MHz， CDCl3)：δ11.0(1H，br s)，10.52(1H，s)，8.38(1H，d，J＝6Hz)，8.31(1H，d， J＝6Hz)，1.54(9H，s)；m/e(m+1)：257.2。

步骤B：1-[4-(1，3-二氧杂环戊烷-2-基)苯基]-2-苯基乙酮(3-2)

向4-氰基苯甲醛(20.0g，152.5mmol)和乙二醇(25.5mL，457.5 mmol)在甲苯(250mL)中的溶液中添加对甲苯磺酸(300mg)。烧瓶配备 迪安-斯达克榻分水器，并将混合物加热至回流。在5小时后将混合物浓 缩，将残余物溶于乙酸乙酯中，用饱和NaHCO3、水(2x)和盐水洗涤， 有机层经过干燥(Na2SO4)，过滤和浓缩，得到4-(1，3-二氧杂环戊烷-2- 基)苄腈为透明油状物，其在真空下固化：1H-NMR(500MHz，CDCl3)： δ7.67(2H，d，J＝8.06Hz)，7.59(2H，d，J＝8.30Hz)，5.85(1H，s)，4.13-4.05 (4H，m)。

在0℃向4-(1，3-二氧杂环戊烷-2-基)苄腈(5.0g，28.54mmol)在无水 THF(100mL)中的溶液中缓慢添加苄基氯化镁(36mL，20％wt的THF溶 液，43mmol)。1小时后将混合物回温到室温，4小时后将混合物冷却到 0℃并用饱和NH4Cl猝灭。将混合物回温到室温并用乙酸乙酯提取(3x)， 合并的有机层经过干燥(MgSO4)，过滤和浓缩，闪柱色谱分离(10％乙酸 乙酯/己烷)，得到1-[4-(1，3-二氧杂环戊烷-2-基)苯基]-2-苯基乙酮，为淡 黄色固体：1H-NMR(500MHz，CDCl3)：δ8.02(2H，d，J＝8.30Hz，)，7.57(2 H，d，J＝8.30Hz，)，7.38-7.24(％H，m)，5.86(1H，s)，4.29(2H，s)，4.28-4.09 (4H，m)。

步骤C：5-氯-2-(4-[1，3]二氧杂环戊烷-2-基-苯基)-3-苯基-[1，6]萘啶 (3-3)

在室温下向(2-氯-3-甲酰基吡啶-4-基)氨基甲酸叔丁基酯(3-1，30.5 g，118.9mmol)和1-[4-(1，3-二氧杂环戊烷-2-基)苯基]-2-苯基乙酮(3-2， 29.0g，108.1mmol)在无水THF(300mL)中的溶液中连续添加LHMDS (1M，在THF中，248mL)。反应混合物在室温下搅拌过夜，然后回流24 小时，将其冷却并浓缩成浆状物，并用NaHCO3(饱和，50mL)和水(300 mL)处理，得到固体，过滤收集固体，将固体干燥，用醚洗涤，进一步 与甲苯共沸干燥，得到标题化合物。LRMS m/z(M+1)计算值：389.1，实 测值：389.1。

步骤D：[2-(4-[1，3]二氧杂环戊烷-2-基-苯基)-3-苯基-[1，6]萘啶-5-基]- 肼(3-4)

5-氯-2-(4-[1，3]二氧杂环戊烷-2-基-苯基)-3-苯基-[1，6]萘啶(3-3，5.2 g，13.4mmol)和无水肼(5mL)在无水1，4-二氧杂环己烷(15mL)中的悬 浮液在微波反应器中在100℃加热5分钟，冷却反应混合物，浓缩并与 甲苯共沸干燥，得到标题化合物，为固体。LRMS m/z(M+1)计算值： 385.2，实测值：385.3。

步骤E：8-(4-[1，3]二氧杂环戊烷-2-基-苯基)-9-苯基-[1，2，4]三唑并 [3，4-f][1，6]萘啶-3-醇(3-5)

在0℃向[2-(4-[1，3]二氧杂环戊烷-2-基-苯基)-3-苯基-[1，6]萘啶-5- 基]-肼(3-4，5.3g，13.8mmol)在CH2Cl2(无水，40mL)中的溶液中添加三 乙胺(9.7mL，68.9mmol)，然后迅速添加在甲苯中的光气(2M，7.6 mL)。在室温搅拌10分钟，浓缩混合物并添加水(30mL)，收集固体并 与甲苯共沸干燥，得到标题化合物，其用于后面步骤无需进一步纯化。 LRMS m/z(M+1)计算值：411.1，实测值：411.2。

步骤F：4-(3-羟基-9-苯基-[1，2，4]三唑并[3，4-f][1，6]萘啶-8-基)-苯甲醛 (3-6)

8-(4-[1，3]二氧杂环戊烷-2-基-苯基)-9-苯基-[1，2，4]三唑并[3，4-f][1，6] 萘啶-3-醇(3-5，2.7g，6.6mmol)在二氧杂环己烷(20mL)和2N HCl(20 mL)中的悬浮液在室温搅拌20分钟。将其在25℃浓缩以除去大部分二 氧杂环己烷，将残余物倾入用冰冷却的水中，得到褐色固体，过滤收集 固体，与甲苯共沸干燥，得到标题化合物。LRMS m/z(M+1)计算值：367.1， 实测值：367.1。

步骤G：8-(4-氨基甲基-苯基)-9-苯基-[1，2，4]三唑并[3，4-f][1，6]萘啶- 3-醇(3-8)

4-(3-羟基-9-苯基-[1，2，4]三唑并[3，4-f][1，6]萘啶-8-基)-苯甲醛(3-6，2.4 g，6.6mmol)和2-氨基-2，4-二甲基戊酸(3-7，1.9g，13.1mmol)在DMF(25 mL)中的悬浮液在150℃加热20分钟，将反应混合物冷却，用二氧杂环 己烷(50mL)和2N HCl(50mL)稀释，然后在100℃加热30分钟，将混 合物冷却并通过反相HPLC(0-60％乙腈/水)纯化，蒸发溶剂后得到标题 化合物，为黄色固体。HRMS m/z(M+1)计算值：368.1506，实测值： 368.1504。

1H-NMR(CD3OD)δ 8.72(s，1H)，7.98(d，1H)，7.52(d，2H)，7.46(d，2 H)，7.24-7.38(m，5H)，7.12(d，1H)，4.14(s，2H)。

                          反应图解4

1-[4-(9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶-8-基)苯基]甲胺(4-3)

步骤A：8-[4-(1，3-二氧杂环戊烷-2-基)苯基]-9-苯基[1，2，4]三唑并 [3，4-f]-1，6-萘啶(4-1)

向[2-(4-[1，3]二氧杂环戊烷-2-基-苯基)-3-苯基-[1，6]萘啶-5-基]-肼(3- 4，1.6g，4.2mmol)和甲苯磺酸一水合物(79mg，0.4mmol)在3:1的甲 苯:MeOH(16mL)中的溶液中添加原甲酸三甲酯(0.58mL，12.5 mmol)。混合物在微波反应器中加热到100℃持续1小时，然后将反应 混合物真空浓缩，收集固体并与甲苯共沸干燥，得到标题化合物，其用 于后面步骤无需进一步纯化。LRMS m/z(M+1)计算值：395.1，实测值： 395.2。

步骤B：4-(9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶-8-基)苯甲醛(4-2)

8-[4-(1，3-二氧杂环戊烷-2-基)苯基]-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6- 萘啶(4-1，0.80g，2.0mmol)在二氧杂环己烷(10mL)和3N HCl(10mL) 中的悬浮液在室温下搅拌15分钟，混合物在25℃浓缩以除去大部分的 二氧杂环己烷。将残余物倾入用冰冷却的水中得到褐色固体，通过过滤 收集固体，并与甲苯共沸干燥(x2)，得到标题化合物。LRMS m/z(M+1) 计算值：351.1，实测值：351.2。

步骤C：1-[4-(9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶-8-基)苯基]甲胺 (4-3)

4-(9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶-8-基)苯甲醛(4-2，0.80g，2.3 mmol)和2-氨基-2，4-二甲基戊酸(3-7，0.340g，2.3mmol)在DMF(10mL) 中的悬浮液在150℃加热30分钟，将反应混合物冷却，真空除去溶剂。 将粗残余物溶于3N HCl(8mL)中并在100℃加热30分钟。将混合物冷 却，通过反相HPLC纯化(5-65％乙腈/水，在15分钟内)，蒸发溶剂得到 标题化合物，为黄色固体。

1H-NMR(CD3OD)δ 9.60(s，1H)，8.98(s，1H)，8.73(d，1H)，7.75(d，1 H)，7.60(d，2H)，7.46(d，2H)，7.39-7.36(m，5H)，4.15(s，2H)。

                 反应图解5

4-(3-甲基-9-苯基-[1，2，4]三唑并[3，4-f][1，6]萘啶-8-基)-苄基胺(5-3)

步骤A：8-[4-(1，3-二氧杂环戊烷-2-基)苯基]-3-甲基-9-苯基[1，2，4]三 唑并[3，4-f]-1，6-萘啶(5-1)

向[2-(4-[1，3]二氧杂环戊烷-2-基-苯基)-3-苯基-[1，6]萘啶-5-基]-肼(3- 4，0.35g，0.91mmol)和甲苯磺酸一水合物(17mg，0.09mmol)在3:1的 甲苯:MeOH(4mL)中的溶液中添加原乙酸三甲酯(0.157mL，1.23 mmol)。混合物在微波反应器中加热到100℃持续75分钟，然后将反应 混合物真空浓缩，收集固体并与甲苯共沸干燥，得到标题化合物，其用 于后面步骤无需进一步纯化。LRMS m/z(M+1)计算值：409.2，实测值： 409.2。

步骤B：4-(3-甲基-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶-8-基)苯甲醛 (5-2)

8-[4-(1，3-二氧杂环戊烷-2-基)苯基]-3-甲基-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4- f]-1，6-萘啶(5-1，0.30g，0.73mmol)在二氧杂环己烷(5mL)和3N HCl(5 mL)中的悬浮液在室温下搅拌15分钟，混合物在25℃浓缩以除去大部 分的二氧杂环己烷。将残余物倾入用冰冷却的水中得到褐色固体，通过 过滤收集固体，并与甲苯共沸干燥(x2)，得到标题化合物。LRMS m/z (M+1)计算值：365.1，实测值：365.2。

步骤C：4-(3-甲基-9-苯基-[1，2，4]三唑并[3，4-f][1，6]萘啶-8-基)-苄基 胺(5-3)

4-(3-甲基-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶-8-基)苯甲醛(13，0.25 g，0.69mmol)和2-氨基-2，4-二甲基戊酸(3-7，0.101g，0.69mmol)在DMF (3mL)中的悬浮液在150℃加热30分钟，将反应混合物冷却，真空除去 溶剂。将粗残余物溶于3N HCl(2.5mL)中并在100℃加热30分钟。将混 合物冷却，通过反相HPLC纯化(5-65％乙腈/水，在15分钟内)，蒸发溶 剂得到标题化合物，为黄色固体。HRMS m/z(M+1)计算值：366.1713，实 测值：366.1715。

                 反应图解5(可供选择的合成方案)

4-(3-甲基-9-苯基-[1，2，4]三唑并[3，4-f][1，6]萘啶-8-基)-苄基胺(5-3)

步骤A：4-(5-氯-3-苯基-[1，6]萘啶-2-基)-苯甲醛(A)

在0℃向3-3(5.0g，12.9mmol)在1，4-二氧杂环己烷(30mL)中的溶液 中添加8.5mL的3N HCl(25.7mmol)。使混合物回温到室温并搅拌1.3小 时。反应用NaHCO3(饱和)猝灭直到pH＝7-8。混合物用EtOAc(x3)提取。 合并的有机层用盐水洗涤，用MgSO4干燥，并浓缩，得到黄色固体，为 所需的产物A。LC/MS实测值：M+1＝345.1。

步骤B：[4-(5-氯-3-苯基-[1，6]萘啶-2-基)-苄基]-氨基甲酸叔丁基酯 (C)

向A(2.8g，8.1mmol)和B(1.1g，8.9mmol)在15mL无水MeCN中的 溶液中添加三乙基硅烷(8.5g，73mmol)，然后添加三氟乙酸(3.7g， 32.5mmol)。混合物在室温下搅拌3小时，然后将混合物倾入碳酸氢钠 水溶液(30mL)中并用EtOAc提取(x3)。合并的有机层用盐水洗涤，用 MgSO4干燥，在除去溶剂时，残余物通过闪柱色谱纯化，得到所需的产 物C。LC/MS实测值：M+1＝446.1。

步骤C：[4-(5-肼基-3-苯基-[1，6]萘啶-2-基)-苄基]-氨基甲酸叔丁基酯 (D)

向C(3.7g，8.3mmol)在22mL1，4-二氧杂环己烷中的溶液中滴加肼 (6.1g，189.1mmol)。混合物在微波反应器中在100℃加热5分钟。除去溶 剂后，将残余物溶在EtOAc中并用饱和NaHCO3溶液洗涤。有机层用盐 水洗涤，用MgSO4干燥并浓缩，得到所需产物D，其用于后面的步骤无 需进一步纯化。LC/MS实测值：M+1＝442.2。

步骤D：[4-(3-甲基-9-苯基-[1，2，4]三唑并[3，4-f][1，6]萘啶-8-基)-苄基]- 氨基甲酸叔丁基酯(E)

向D(3.8g，8.6mmol)和对甲苯磺酸一水合物(0.08g，0.4mmol)在 20mL甲苯/甲醇(3:1)中的溶液中添加原乙酸三甲酯(1.4g， 11.6mmol)。溶液在微波反应器中在100℃加热35分钟。反应用NaHCO3 (0.5g)固体猝灭。有机层经过浓缩，并在闪柱色谱上纯化(100％EtOAc到 10％MeOH/90％EtOAc，在35分钟内)，得到所需产物E。LC/MS实测 值：M+1＝466.2。

步骤E：4-(3-甲基-9-苯基-[1，2，4]三唑并[3，4-f[1，6]萘啶-8-基)-苄基胺 (5-3)

向E(4.1g，8.7mmol)在80mL CH2Cl2中的溶液中滴加40mL TFA。混 合物在室温下搅拌15分钟，除去溶剂，残余物用NaHCO3(饱和)处理直 到pH＝9。混合物用EtOAc提取(x6)，合并的有机层经过浓缩，用MgSO4 干燥，除去溶剂后，获得所需产物5-6，为黄色固体。LC/MS实测值： M+1＝366.1。1H-NMR(CD3OD)δ 8.95(s，1H)，8.66(d，1H)，7.82(d，1H)， 7.60(d，2H)，7.45(d，2H)，7.42-7.34(m，5H)，4.15(s，2H)，3.00(s，3H)。

                 反应图解6

8-[4-(氨基甲基)苯基]-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶-3-胺(6- 2)

步骤A：8-[4-(1，3-二氧杂环戊烷-2-基)苯基]-9-苯基[1，2，4]三唑并 [3，4-f]-1，6-萘啶-3-胺(6-1)

向无水EtOH(1mL)中添加溴化氰(0.104mL，0.52mmol，5M在 MeCN中)，然后添加碳酸钠(96mg，0.91mmol)。添加[2-(4-[1，3]二氧杂 环戊烷-2-基-苯基)-3-苯基-[1，6]萘啶-5-基]-肼(3-4，100mg，0.26mmol)， 混合物搅拌3小时，反应混合物真空浓缩，得到的固体直接使用无需进 一步纯化。LRMS m/z(M+1)计算值：410.2，实测值：410.1。

步骤B：8-[4-(氨基甲基)苯基]-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶- 3-胺(6-2)

使用图解5中所述过程(5-1到5-3)，从8-[4-(1，3-二氧杂环戊烷-2- 基)苯基]-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶-3-胺(6-1)制备标题化合 物。LRMS m/z(M+1)计算值：367.2，实测值：367.1。

                 反应图解7

1-[4-(9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶-8-基)苯基]乙胺(7-4)

步骤A：2-甲基-N-{(1E)-[4-(9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶-8- 基)苯基]甲叉基}丙烷-2-亚磺酰胺(7-2)

外消旋的2-甲基-2-丙烷-亚磺酰胺(7-1，647mg，5.3mmol)、硫酸铜 (1.70g，7.30mmol)和醛4-2(511mg，1.45mmol)在二氯甲烷(10mL)中在 50℃搅拌5天，冷却到室温后，混合物通过硅藻土过滤，浓缩至最小体 积，并通过自动硅胶色谱纯化(0-10％MeOH，在CH2Cl2中，在30分钟 内)，得到标题化合物，为褐色泡沫。LRMS m/z(M+1)计算值：454.2，实 测值：454.2。

步骤B：2-甲基-N-{1-[4-(9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶-8-基) 苯基]乙基}丙烷-2-亚磺酰胺(7-3)

在-78℃将甲基溴化镁溶液(13.5mL，1.4M的在3:1甲苯/THF中 的溶液，19mmol)添加到搅拌的2-甲基-N-{(1E)-[4-(9-苯基[1，2，4]三唑并 [3，4-f]-1，6-萘啶-8-基)苯基]甲叉基}丙烷-2-亚磺酰胺(7-2，298mg，0.66 mmol)在二氯甲烷(5mL)中的溶液中，溶液回温到室温，18小时后，反 应用饱和氯化铵溶液猝灭，用乙酸乙酯提取，用盐水洗涤，用硫酸镁干 燥，过滤并浓缩，得到琥珀色泡沫，其通过硅胶色谱分离(0-10％甲醇 /CH2Cl2，在30分钟内)，得到标题化合物，为黄色泡沫。LRMS m/z(M+1) 计算值：470.2，实测值：470.3。

步骤C：1-[4-(9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶-8-基)苯基]乙胺 (7-4)

向搅拌的2-甲基-N-{1-[4-(9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶-8-基) 苯基]乙基}丙烷-2-亚磺酰胺(7-3，180mg，0.38mmol)在甲醇(6mL)中 的溶液中添加浓HCl(1.5mL)。1小时后，添加水，混合物用二氯甲烷 洗涤。水相用饱和碳酸钠溶液碱化，并用二氯甲烷提取。向有机层中添 加2N HCl(5mL)，混合物浓缩至最小体积。粗产物使用反相制备HPLC 纯化，得到标题化合物，为淡黄色固体。LRMS m/z(M+1)计算值：366.2， 实测值：366.3。

                 反应图解8

9-苯基-8-{4-[4-(5-吡啶-2-基-4H-[1，2，4]三唑-3-基)-哌啶-1-基甲基]- 苯基}-[1，2，4]三唑并[3，4-f][1，6]萘啶(8-10)

(2-氯-3-甲酰基吡啶-4-基)氨基甲酸叔丁基酯(8-1)

将4-氨基-2-氯吡啶(1.28g，10mmol)和二碳酸二叔丁基酯(2.21g， 10.1mmol)在THF(20mL)中的溶液冷却到0℃，并在保持温度低于0℃ 的同时缓慢添加1M的在THF中的双(三甲基甲硅烷基)氨基锂(20mL， 20mmol)。在1小时内使混合物回温到室温，然后通过添加1.5N的氯 化铵水溶液(15mL)猝灭反应，将混合物提取到乙酸乙酯中，用盐水洗 涤，有机层经过干燥(Na2SO4)，过滤和蒸发。残余物与乙醚研磨，得到 纯的(2-氯吡啶-4-基)氨基甲酸叔丁基酯。母液通过硅胶色谱分离，用 25-45％乙酸乙酯/己烷洗脱，得到更多产物。

在惰性气氛下将(2-氯吡啶-4-基)氨基甲酸叔丁基酯(1.14g，5mmol) 在无水THF(20mL)中的溶液冷却到-70℃，缓慢添加1.7M叔丁基锂/ 戊烷(8mL，13.5mmol)。反应搅拌2小时，然后添加无水DMF(1.2mL， 15.5mmol)，在3小时内使反应缓慢回温到室温，反应混合物用3N HCl (12mL)猝灭，用乙醚稀释。醚层用NaHCO3水溶液洗涤，干燥(Na2SO4)， 过滤并蒸发。残余物与冷乙醚研磨得到纯的(2-氯-3-甲酰基吡啶-4-基) 氨基甲酸叔丁基酯。母液通过硅胶色谱分离，用15-20％乙酸乙酯/己烷 洗脱，得到更多产物。1H-NMR(500MHz，CDCl3)：δ 11.0(1H，br s)，10.52 (1H，s)，8.38(1H，d，J＝6Hz)，8.31(1H，d，J＝6Hz)，1.54(9H，s)；m/e (m+1)：257.2。

1-[4-(1，3-二氧杂环戊烷-2-基)苯基]-2-苯基乙酮(8-2)

向4-氰基苯甲醛(20.0g，152.5mmol)和乙二醇(25.5mL，457.5 mmol)在甲苯(250mL)中的溶液中添加对甲苯磺酸(300mg)。烧瓶配备 迪安-斯达克榻分水器，并将混合物加热至回流。在5小时后将混合物浓 缩，将残余物溶于乙酸乙酯中，用饱和NaHCO3、水(2x)和盐水洗涤， 有机层经过干燥(MgSO4)，过滤和浓缩，得到4-(1，3-二氧杂环戊烷-2-基) 苄腈，为无色油状物，其在真空下固化：1H-NMR(500MHz，CDCl3)：δ 7.67(2H，d，J＝8.06Hz)，7.59(2H，d，J＝8.30Hz)，5.85(1H，s)，4.13-4.05 (4H，m)。

在0℃向4-(1，3-二氧杂环戊烷-2-基)苄腈(5.0g，28.54mmol)在无水 THF(100mL)中的溶液中缓慢添加苄基氯化镁(36mL，20％wt的THF溶 液，43mmol)。在1小时后将混合物回温到室温，在4小时后，将混合 物冷却到0℃并用饱和NH4Cl猝灭。将混合物回温到室温并用乙酸乙酯 提取(3x)，合并的有机层经过干燥(MgSO4)，过滤和浓缩，闪柱色谱分离 (10％乙酸乙酯/己烷)，得到1-[4-(1，3-二氧杂环戊烷-2-基)苯基]-2-苯基乙 酮，为淡黄色固体：1H-NMR(500MHz，CDCl3)：δ 8.02(2H，d，J＝8.30 Hz，)，7.57(2H，d，J＝8.30Hz，)，7.38-7.24(5H，m)，5.86(1H，s)，4.29(2H， s)，4.28-4.09(4H，m)。

2-[4-(1，3-二氧杂环戊烷-2-基)苯基]-5-甲氧基-3-苯基-1，6-萘啶(8-3)

向1-[4-(1，3-二氧杂环戊烷-2-基)苯基]-2-苯基乙酮(997mg，3.72 mmol)和(2-氯-3-甲酰基吡啶-4-基)氨基甲酸叔丁基酯(924mg，3.6mmol) 在无水甲醇(14mL)中的部分溶液中添加25wt％甲醇钠/甲醇(2.5mL， 11.4mmol)。反应混合物在65℃加热4小时，冷却的反应物料经过浓缩 以除去甲醇，残余物在水和乙酸乙酯之间分配。有机层经过干燥 (Na2SO4)，过滤和蒸发，残余物与冷乙醚研磨，得到纯的2-[4-(1，3-二氧 杂环戊烷-2-基)苯基]-5-甲氧基-3-苯基-1，6-萘啶。母液通过硅胶色谱分离 纯化，用20-40％乙酸乙酯/己烷洗脱，得到更多产物。1H-NMR(500MHz， CDCl3)：δ 8.54(1H，s)，8.23(1H，d，J＝5.9Hz)，7.55(1H，d，J＝5.9Hz)，7.48 (2H，d，J＝8Hz)，7.40(2H，d，J＝8Hz)，7.29-7.30(3H，m)，7.22-7.25(2H，m)， 4.16(3H，s)，4.02-411(4H，2m).m/e(m+1)：385.1。

4-(5-甲氧基-3-苯基-1，6-萘啶-2-基)苯甲醛(8-4)

向2-[4-(1，3-二氧杂环戊烷-2-基)苯基]-5-甲氧基-3-苯基-1，6-萘啶 (760mg，1.98mmol)在THF(8mL)中的溶液中添加1N HCl(6mL)，溶液 搅拌3小时。添加乙酸乙酯，混合物用Na2CO3水溶液碱化。有机层经 过干燥(Na2SO4)，过滤并蒸发溶剂。残余物与乙醚研磨，得到纯的产物。 母液通过硅胶柱色谱纯化，用10-30％乙酸乙酯/己烷洗脱，得到更多产 物。1H-NMR(500MHz，CDCl3)：δ 10.10(1H，s)，8.60(1H，s)，8.26(1H，d， J＝6Hz)，7.81(2H，d，J＝8.3Hz)，7.62(2H，d，J＝8.3Hz)，7.56(1H，d，J＝6.1Hz)， 7.30-7.32(3H，m)，7.21-7.23(2H，m)，4.17(3H，s).m/e(m+1)：341.1。

2-(3-哌啶-4-基-1H-1，2，4-三唑-5-基)吡啶二盐酸盐(8-5)

将羰基二咪唑(3.57g，22mmol)添加到1-(叔丁氧羰基)-哌啶-4-羧酸 (4.59g，20mmol)在二氯甲烷(50mL)中的溶液中并搅拌2小时直到停止 气体放出。然后向反应中添加肼(0.8mL，～26mmol)，反应在室温下搅 拌另外2小时，反应用更多的二氯甲烷稀释，用饱和NaHCO3水溶液洗 涤。有机层用无水Na2SO4干燥，过滤并蒸发溶剂，得到粘稠的残余物， 其与乙醚研磨，得到4-(肼基羰基)-哌啶-1-羧酸叔丁基酯，为灰白色固 体。1H NMR(500MHz，CDCl3)： 6.77(1H，br s)，4.15(2H，br s)，3.90 (2H，v br s)，2.75(2H，b s)，2.22(1H，m)，1.78(2H，br d，J＝11.9Hz)，1.66 (2H，br q，J＝12.2Hz，J＝27.5Hz)，1.47(9H，s)。

将该物质(2.43g，10mmol)溶于无水2-乙氧基乙醇(20mL)中并向溶 液中添加2-氰基吡啶(1.14g，11mmol)。添加25wt％甲醇钠/甲醇(1.1 mL，～5mmol)，混合物加热到130℃持续16小时，冷却的反应物料用乙 酸中和并在乙酸乙酯和NaHCO3水溶液之间分配，有机层经过Na2SO4 干燥，过滤除去盐，真空蒸发溶剂，残余物与乙醚研磨，得到4-(5-吡啶 -2-基-1H-1，2，4-三唑-3-基)哌啶-1-羧酸叔丁基酯，为白色固体。1H NMR(500MHz，CDCl3)：δ 8.70(1H，d，J＝3.9Hz)，8.19(1H，d，J＝7.9Hz)， 7.87(1H，d t，J＝1.7Hz，J＝8Hz)，7.40(1H，m)，4.20(2H，br s)，3.03(1H，m)， 2.95(2H，br s)，2.09(2H，br d，J＝12Hz)，1.86(2H，br q，J＝4.2Hz)，1.49(9H， s)；m/e(m+1)：330.2。

将该物质(2.68g，8.14mmol)悬浮在4N HCl/二氧杂环己烷中，反应 混合物在室温下搅拌16小时，然后用乙醚稀释，过滤分离固体，将吸 湿性固体消解在乙腈中。过滤分离固体，将其部分地溶于热甲醇中，冷 却后，添加一些乙醚到溶液中，2-(3-哌啶-4-基-1H-1，2，4-三唑-5-基)吡啶 缓慢地以二盐酸盐的形式沉淀出来。1H NMR(500MHz，DMSO-d6)：  9.10(1H，br s)，8.92(1H，br s)，8.73(1H，d，J＝4.9Hz)，8.10-8.20(2H，m)， 7.64(1H，t，J＝5.7Hz)，3.33(2H，br d，J＝12.7Hz)，3.16(1H，m)，3.05(2H，br q，J＝11.9Hz，J＝21.8Hz)，2.18(2H，br d，J＝11.5Hz)，1.99(2H，br q，j＝11.0 Hz，J＝22.2Hz)：m/e(m+1)：230.3。

5-甲氧基-3-苯基-2-(4-{[4-(5-吡啶-2-基-1H-1，2，4-三唑-3-基)哌啶-1- 基]甲基}苯基-1，6-萘啶(8-6)

向2-(3-哌啶-4-基-1H-1，2，4-三唑-5-基)吡啶二盐酸盐(542mg，1.80 mmol)和4-(5-甲氧基-3-苯基-1，6-萘啶-2-基)苯甲醛(560mg，1.65mmol)在 无水DMF(6mL)中的溶液中添加三乙胺(0.83mL，6mmol)。在搅拌10 分钟后，添加乙酸(1.03mL，18mmol)，混合物在室温下搅拌过夜，然后 一次性添加三乙酰氧基硼氢化钠(367mg，1.73mmol)，并搅拌6小时， 在用LC/MS监控后，确定反应未完成，在后面几小时内添加另外份数 的三乙酰氧基硼氢化钠(2 x 90mg)，此时反应完成。混合物用乙酸乙酯 稀释，添加Na2CO3水溶液。分离有机层并用水洗涤两次，干燥(Na2SO4)， 并蒸发溶剂。将残余物消解在乙腈中，当冷却时过滤分离出固体产物。 将该固体悬浮在热乙酸乙酯中并缓慢添加甲醇，直到完全溶解。然后使 溶剂沸腾使其体积减小，并冷却直到纯的产物结晶析出。母液硅胶柱色 谱纯化，用1-7％甲醇/乙酸乙酯洗脱，得到更多产物。1H NMR(500MHz， CDCl3)： 8.66(1H，d，J＝4.7Hz)，8.54(1H，s)，8.23(1H，d，J＝6Hz)，8.16 (1H，d，J＝7.8Hz)，7.83(1H，dt，J＝1.7Hz，J＝7.8Hz)，7.56(1H，d，J＝6Hz)， 7.40(2H，d，J＝8Hz)，7.36(1H，dd)，7.28-7.30(3H，m)，7.23-7.25(2H，m)， 4.16(3H，s)，3.54(2H，s)，2.96(2H，br d，J＝11.5Hz)，2.85(1H，t，J＝3.7Hz)， 2.06-2.17(4H，m)，1.92-2.01(2H，m).m/e(m+1)：554.3，277.9[(m+2)/2]。

3-苯基-2-(4-{[4-(5-吡啶-2-基-1H-1，2，4-三唑-3-基)哌啶-1-基]甲基}苯 基)-1，6-萘啶-5(6H)-酮(8-7)

5-甲氧基-3-苯基-2-(4-{[4-(5-吡啶-2-基-1H-1，2，4-三唑-3-基)哌啶-1- 基]甲基}苯基)-1，6-萘啶(725mg，1.31mmol)和盐酸吡啶(6.9gm，～60 mmol)的混合物在150℃加热1分钟，将冷却的残余物溶于最小量的水 中，用NaHCO3水溶液中和。过滤收集沉淀出的固体，并通过硅胶柱色 谱纯化，用1-14％乙腈/乙酸乙酯(饱和NH4OH)洗脱，分离的产物消解在 甲醇/乙腈中，得到纯产物。1H NMR(500MHz，DMSO-d6)： 11.58(1H， d，J＝4.8Hz)，8.68(1H，br s)，8.39(1H，s)，8.03(1H，d，J＝7.3Hz)，7.50(2H，t， J＝6.5Hz)，7.31-7-33(5H，m)，7.24-7.25(4H，m)，6.79(2H，d，J＝7.3Hz)，3.50 (2H，s)，2.84(2H，br d，J＝10.5Hz)，2.72(1H，m)，2.08(2H，br t，J＝11Hz)， 1.95(2H，br d，J＝11.6Hz)，1.77(2H，m).m/e(m+1)：540.3， 270.9[(m+2)/2]。

5-氯-3-苯基-2-{4-[4-(5-吡啶-2-基-4H-[1，2，4]三唑-3-基)-哌啶-1-基甲 基]-苯基}-[1，6]萘啶(8-8)

8-7(5.5g，10.2mmol)和POCl3(50.0g，326.1mmol)和DMF(0.3g， 4.1mmol)在130℃加热回流3小时，将反应混合物冷却并浓缩以除去 POCl3。添加40mL甲苯并浓缩，得到固体，向固体中添加50mL的H2O 和40mL的NaHCO3(饱和)和20mL的1N NaOH，直到pH＝9。混合物经 过搅拌以沉淀出固体，过滤收集该固体，为所需产物8-8。其用水和 CH3CN洗涤，并真空干燥。LC/MS：M+1＝559.09。

(3-苯基-2-{4-[4-(5-吡啶-2-基-4H-[1，2，4]三唑-3-基)-哌啶-1-基甲基]- 苯基}-[1，6]萘啶-5-基)-肼(8-9)

8-8(4.3g，7.7mmol)在30mL1，4-二氧杂环己烷和肼(7.4g， 231.1mmol)中的悬浮液在微波反应器中在100℃加热5分钟，将混合物 冷却并浓缩以除去溶剂。添加甲苯40mL(x3)，并真空除去残留的肼。 获得所需产物8-9，为固体。LC/MS：M+1＝554.4。

9-苯基-8-{4-[4-(5-吡啶-2-基-4H-[1，2，4]三唑-3-基)-哌啶-1-基甲基]- 苯基}-[1，2，4]三唑并[3，4-f][1，6]萘啶(8-10)

向8-9(4.5g，8.1mmol)在20mL甲醇和60mL甲苯中的溶液中添加 原甲酸三甲酯(3.5g，32.5mmol)和甲苯磺酸(0.1g，0.8mmol)。混合物回流 10小时，除去溶剂后，残余物通过闪柱色谱分离(100％ CHCl3到 50％ CHCl3和50％甲醇)，得到所需产物8-10。

HRMS：M+1(计算值)＝564.2619；实测值＝564.2589。

1H NMR(500MHz，CD3OD)： 9.35(1H，s)，8.96(1H，s)，8.72(1H， d)，8.59(1H，d)，8.28-8.10(2H，m)，7.68-7.48(6H，m)，7.40-7.30(5H，m)， 4.40(2H，s)，3.68-3.20(5H，m)，2.50-2.10(4H，m)。

                 反应图解9

9-苯基-8-(4-{[4-(5-吡啶-2-基-4H-1，2，4-三唑-3-基)哌啶-1-基]甲基}苯 基)-3-(1H-1，2，3-三唑-4-基)[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶(9-4)

4-(5-氯-3-苯基-1，6-萘啶-2-基)苯甲醛(9-1)

在0℃向搅拌的3-3(16g，41.1mMol)在无水1，4-二氧杂环己烷 (75mL)中的溶液中添加3N HCl(27mL)。然后使反应回温到室温并继续 搅拌约3小时，反应完成后，反应用饱和NaHCO3溶液猝灭直到pH>7。 产物被提取到乙酸乙酯中(3 x 150mL)，合并的有机层用盐水洗涤，用 Na2SO4和MgSO4干燥，过滤并真空浓缩，得到4-(5-氯-3-苯基-1，6-萘啶 -2-基)苯甲醛9-1，为棕褐色固体。LC/MS(M+1)计算值：345.8；实测值： 345.0。

5-氯-3-苯基-2-(4-{[4-(5-吡啶-2-基-4H-1，2，4-三唑-3-基)哌啶-1-基]甲 基}苯基)-1，6-萘啶(9-2)

向搅拌的9-1(4.9g，14.2mMol)和8-5(4.2g，15.6mMol)在NMP(50mL) 中的溶液中添加三乙胺(6mL，42.6mMol)，然后添加乙酸(1.6mL， 28.4mMol)，在环境温度搅拌过夜后，分份添加三乙酰氧基硼氢化钠 (3.6g，17mMol)。完成后，反应用乙酸乙酯稀释，并用饱和NaHCO3洗涤， 然后用水和盐水洗涤。有机层用Na2SO4和MgSO4干燥，过滤并真空浓 缩。粗残余物使用硅胶急骤色谱纯化(梯度洗脱：0％到10％甲醇，在 CHCl3中，在25分钟内)，得到9-2，为橙色固体。LC/MS(M+1)计算 值：559.1；实测值：559.2。

5-肼基-3-苯基-2-(4-{[4-(5-吡啶-2-基-4H-1，2，4-三唑-3-基)哌啶-1-基] 甲基}苯基)-1，6-萘啶(9-3)

向搅拌的9-2(5g，8.9mMol)在无水1，4-二氧杂环己烷(20mL)中的溶 液中添加肼(5.9mL，188.1mMol)。溶液在微波反应器中加热到100℃持 续5分钟，真空除去溶剂，并与甲苯共沸干燥3次。粗制固体与饱和 NaHCO3溶液研磨20分钟。悬浮液经过过滤并用足量的水洗涤，固体与 甲苯共沸干燥三次，得到9-3，为棕褐色固体。LC/MS(M+1)计算值： 554.6；实测值：554.2。

9-苯基-8-(4-{[4-(5-吡啶-2-基-4H-1，2，4-三唑-3-基)哌啶-1-基]甲基}苯 基)-3-(1H-1，2，3-三唑-4-基)[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶(9-4)

向搅拌的9-3(2.0g，3.6mMol)、HOBT(0.5g，3.9mMol)和1H-1，2，3- 三唑-4-羧酸(0.4g，3.9mMol)在无水DMF(20mL)中的溶液中添加DIEA (1.2mL，7.2mMol)，然后添加EDC(0.76g，3.9mMol)，溶液在环境温度下 搅拌过夜，溶液用2mL的乙酸处理并加热到80℃持续3小时，冷却到 室温后，溶液通过针筒式滤器过滤并在C18反相HPLC上纯化，得到 9-4，为固体。(M+1)计算值：631.2789实测值：631.2778。

下表(表3)含有的化合物使用图解9中过程制得，用适当的胺代替 8-9，用适当的羧酸代替1H-1，2，3-三唑-4-羧酸。化合物9-5至9-8和9-13 至9-25以HCl盐分离。化合物9-9至9-12以TFA盐分离。

表3

                 反应图解10

9-苯基-8-(4-{[4-(5-吡嗪-2-基-4H-1，2，4-三唑-3-基)哌啶-1-基]甲基)苯 基}[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶(10-4)

2-(3-哌啶-4-基-1H-1，2，4-三唑-5-基)吡嗪(10-1)

在室温下向1-(叔丁氧羰基)哌啶-4-羧酸(120g，520mmol)在DCM (250mL)中的溶液中分份添加羰基二咪唑(96g，590mmol)。30分钟 后，将反应混合物添加到新制备的肼(27g，840mmol)在DCM(100mL) 中的溶液中。30分钟后，反应用碳酸钠饱和溶液、盐水洗涤，硫酸钠干 燥，过滤并浓缩。得到的固体悬浮在乙醚中并过滤，得到4-(肼基羰基) 哌啶-1-羧酸叔丁基酯，为白色固体。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)：δ 9.00(s，1H)，4.15-4.10(s，2H)，3.95-3.90(m，2H)，2.80-2.60(m，2H)，2.25- 2.20(m，1H)，1.62-1.55(m，2H)，1.40(s，9H)。

在室温下，吡嗪甲腈(2.0g，19mmol)在甲醇(20mL)中的溶液用在 甲醇中的甲醇钠(25wt％，1.3mL，5.7mmol)处理，30分钟后，添加4-(肼 基羰基)哌啶-1-羧酸叔丁基酯(4.6g，19mmol)在甲醇(20mL)中的溶 液，反应加热回流19小时，反应混合物经过浓缩，溶于乙氧基乙醇(50mL) 中并加热回流22小时。将反应冷却到室温，用乙酸(0.38mL，6.6mmol) 猝灭并浓缩，将残余物悬浮在乙醚中并过滤，得到4-(5-吡嗪-2-基-1H- 1，2，4-三唑-3-基)哌啶-1-羧酸叔丁基酯，为固体。HRMS(M+H+)：实测值 ＝331.1876，计算值＝331.1877；1H NMR(400MHz，CD3OD)：δ 9.29(d， J＝1.6Hz，1H)，8.70(dd，J＝2.4，1.6Hz，1H)，8.64(d，J＝2.4Hz，2H)， 4.19-4.15(m，2H)，3.15-3.09(m，1H)，2.97(m，2H)，2.07-2.03(m，2H)， 1.84-1.75(m，2H)，1.48(s，9H)。

4-(5-吡嗪-2-基-1H-1，2，4-三唑-3-基)哌啶-1-羧酸叔丁基酯(6.0g，18 mmol)在三氟乙酸(25mL)中的溶液在室温搅拌，1小时后，反应经过浓 缩，得到的固体悬浮在乙酸乙酯和甲醇中，过滤，得到10-1，为TFA 盐，将该盐溶于1:1乙腈：水中，装载到SCX离子交换树脂上，用乙 腈漂洗，用10％NH3-乙醇洗脱，得到10-1，为固体。1H NMR(400MHz， CDCl3)：δ 9.28-9.26(m，1H)，8.70-8.68(m，1H)，8.60-8.58(m，1H)，3.35- 3.22(m，2H)，3.15-3.05(m，1H)，2.90-2.85(m，2H)，2.15-2.08(m，2H)， 1.95-1.90(m，2H)。

5-氯-3-苯基-2-(4-{[4-(5-吡嗪-2-基-4H-1，2，4-三唑-3-基)哌啶-1-基]甲 基}苯基)-1，6-萘啶(10-2)

向搅拌的9-1(1g，2.9mMol)和10-1(1.09g，3.2mMol)在NMP(10mL) 中的溶液中添加三乙胺(0.8mL，5.8mMol)，随后添加乙酸(0.3mL， 5.8mMol)。在环境温度搅拌过夜后，分份添加三乙酰氧基硼氢化钠(0.6g， 2.9mMol)，完成后，反应用乙酸乙酯稀释，用饱和NaHCO3洗涤，然后 用水、盐水洗涤。有机层用Na2SO4和MgSO4干燥，过滤和真空浓缩， 粗残余物使用硅胶闪色谱纯化(梯度：0％-10％MeOH在CHCl3中，在 25分钟内)，得到10-2，为固体。LC/MS(M+1)计算值：560.1；实测值： 560.2。

5-肼基-3-苯基-2-(4-{[4-(5-吡嗪-2-基-4H-1，2，4-三唑-3-基)哌啶-1-基] 甲基}苯基)-1，6-萘啶(10-3)

向搅拌的10-2(0.5g，0.9mMol)在无水1，4-二氧杂环己烷(5mL)中的 溶液中添加肼(0.56mL，17.8mMol)。溶液在微波反应器中加热到100℃ 持续5分钟，真空除去溶剂，并与甲苯共沸干燥3次。粗制固体与饱和 NaHCO3溶液研磨20分钟。悬浮液经过过滤并用足量的水洗涤，固体与 甲苯共沸干燥三次，得到10-3，为褐色固体。LC/MS(M+1)计算值：555.6； 实测值：555.2。

9-苯基-8-(4-{[4-(5-吡嗪-2-基-4H-1，2，4-三唑-3-基)哌啶-1-基]甲基}苯 基)[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶(10-4)

向搅拌的10-3(0.5g，0.9mMol)在16mL的3:1甲苯:甲醇中的溶 液中添加原甲酸三甲酯(0.3g，2.7mMol)和对甲苯磺酸一水合物(0.017g， 0.09mMol)。反应在微波反应器中加热到100℃持续1小时，冷却到室温 后，减压除去溶剂，产物在C18反相HPLC上纯化，得到10-4，为固体。 质量(M+1)计算值：565.2571实测值：565.2523。

                 反应图解11

9-苯基-8-(4-{[4-(5-嘧啶-2-基-4H-1，2，4-三唑-3-基)哌啶-1-基]甲基}苯 基)-3-(1H-1，2，3-三唑-4-基)[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶(11-4)

2-(3-哌啶-4-基-1H-1，2，4-三唑-5-基)嘧啶(11-1)

4-(肼基羰基)哌啶-1-羧酸叔丁基酯(10.1g，41.5mmol)和2-氰基嘧 啶(4.36g，41.5mmol)在1-丁醇(20mL)中的混合物加热回流48小时， 混合物经过浓缩，悬浮在乙醚中，过滤，得到4-(5-嘧啶-2-基-1H-1，2，4- 三唑-3-基)哌啶-1-羧酸叔丁基酯，为固体。MS(M+H+)：实测值＝331.2； 1H-NMR(400MHz，CD3OD)：δ 8.92(d，J＝4.0Hz，2H)，7.52(t，J＝4.0Hz，1H)， 4.18-4.15(m，2H)，3.14-3.08(m，1H)，2.98(br.s，2H)，2.07-2.01(m，2H)， 1.85-1.77(m，2H)，1.48(s，9H)。

向4-(5-嘧啶-2-基-1H-1，2，4-三唑-3-基)哌啶-1-羧酸叔丁基酯(13.6g， 41.1mmol)在甲醇(30mL)和DCM(15mL)中的溶液中添加无水HCl在 乙酸乙酯(60mL)中的饱和溶液。2小时后，反应经过浓缩，得到的固体 悬浮在乙酸乙酯和甲醇中，并过滤，得到11-1，为HCl盐。将该盐溶于 1:1乙腈:水中，装载到SCX离子交换树脂上，用乙腈漂洗，用10％ NH3 -乙醇洗脱，得到11-1，为固体。MS(M+H)：231.2。

5-氯-3-苯基-2-(4-{[4-(5-嘧啶-2-基-4H-1，2，4-三唑-3-基)哌啶-1-基]甲 基}苯基)-1，6-萘啶(11-2)

向搅拌的9-1(0.25g，0.73mMol)和11-1(0.23g，0.87mMol)在NMP (5mL)中的溶液中添加三乙胺(0.3mL，2.2mMol)，然后添加乙酸 (0.082mL，1.5mMol)。在环境温度搅拌过夜后，添加三乙酰氧基硼氢化 钠(0.18g，0.87mMol)。完成后，反应用乙酸乙酯稀释，用饱和NaHCO3 洗涤，然后用水、盐水洗涤。有机层用Na2SO4和MgSO4干燥，过滤并 真空浓缩，得到11-2。LC/MS计算值：559.1；实测值：559.3。

5-肼基-3-苯基-2-(4-{[4-(5-嘧啶-2-基-4H-1，2，4-三唑-3-基)哌啶-1-基] 甲基}苯基)-1，6-萘啶(11-3)

向搅拌的11-2(0.4g，0.7mMol)在无水1，4-二氧杂环己烷(3mL)中的 溶液中添加肼(0.45mL，14.5mMol)。溶液在微波反应器中加热到100℃ 持续5分钟，真空除去溶剂并与甲苯共沸干燥三次，得到11-3。LC/MS (M+1)计算值：555.6；实测值：555.4。

9-苯基-8-(4-{[4-(5-嘧啶-2-基-4H-1，2，4-三唑-3-基)哌啶-1-基]甲基}苯 基)-3-(1H-1，2，3-三唑-4-基)[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶(11-4)

向搅拌的11-3(0.2g，0.36mMol)、HOBT(0.05g，0.4mMol)和1H-1，2，3- 三唑-4-羧酸(0.05g，0.4mMol)在无水DMF(2mL)中的溶液中添加DIEA (0.18mL，1.1mMol)，然后添加EDC(0.08g，0.4mMol)。溶液在微波反应 器中在80℃加热30分钟，然后溶液用0.5mL的乙酸处理并在微波反应 器中加热到80℃持续10分钟。冷却到室温后，溶液通过针筒式滤器并 在C18反相HPLC上纯化，得到11-4，为固体。质量(M+1)计算值： 632.2742实测值：632.274。

                 反应图解12

3-(1-甲基-1H-咪唑-4-基)-9-苯基-8-(4-{[4-(5-嘧啶-2-基-4H-1，2，4-三 唑-3-基)哌啶-1-基]甲基}苯基)[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶(12-1)

向搅拌的11-3(0.23g，0.4mMol)、HOBT(0.06g，0.45mMol)和1-甲基 -1H-咪唑-4-羧酸(0.06g，0.45mMol)在无水DMF(2mL)中的溶液中添加 DIEA(0.13mL，0.8mMol)，然后添加EDC(0.09g，0.5mMol)。溶液在微波 反应器中在80℃加热15分钟，然后溶液用0.2mL的乙酸处理并在微波 反应器中加热到80℃持续20分钟。冷却到室温后，溶液通过针筒式滤 器并在C18反相HPLC上纯化，得到12-1，为固体。质量(M+1)计算值： 632.2742实测值：632.274。

                 反应图解13

3-(1-甲基-1H-咪唑-4-基)-9-苯基-8-(4-{[4-(5-吡啶-2-基-4H-1，2，4-三 唑-3-基)哌啶-1-基]甲基}苯基)[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶(13-3)

8-[4-(1，3-二氧杂环戊烷-2-基)苯基]-3-(1-甲基-1H-咪唑-4-基)-9-苯基 [1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶(13-1)

向搅拌的3-4(5g，13mMol)、HOBT(1.9g，14.3mMol)和1-甲基-1H- 咪唑-4-羧酸(2g，15.6mMol)在无水DMF(100mL)中的溶液中添加EDC (2.7g，14.3mMol)。溶液在环境温度搅拌过夜，然后溶液用24mL的乙酸 处理，然后在油浴中加热到80℃持续5小时。冷却到室温后，添加等量 的水，得到的悬浮液经过过滤，用足量的水洗涤，收集的固体与甲苯共 沸三次，得到13-1，为棕褐色固体。质量(M+1)计算值：475.1877实测 值：475.1871。

4-[3-(1-甲基-1H-咪唑-4-基)-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶-8- 基]苯甲醛(13-2)

向搅拌的13-1(2g，4.2mMol)在THF(32mL)中的溶液中添加1N HCl (32mL)。随着反应在室温下搅拌1小时出现悬浮液，然后反应用100mL 的饱和NaHCO3溶液猝灭。悬浮液经过过滤并用水洗涤，收集的固体与 甲苯共沸干燥三次，得到13-2，为棕褐色固体。质量(M+1)计算值： 431.1615实测值：431.1616。

3-(1-甲基-1H-咪唑-4-基)-9-苯基-8-(4-{[4-(5-吡啶-2-基-4H-1，2，4-三 唑-3-基)哌啶-1-基]甲基}苯基)[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶(13-3)

向搅拌的13-2(0.5g，1.2mMol)和8-5(0.34g，1.3mMol)在NMP(10mL) 中的溶液中添加三乙胺(0.33mL，2.3mMol)，然后添加乙酸(0.13mL， 2.3mMol)。在室温搅拌过夜后，分份添加三乙酰氧基硼氢化钠(0.3g， 1.3mMol)。搅拌6小时后，溶液通过针筒式滤器过滤并在C18反相HPLC 上纯化，得到13-3，为固体。质量(M+1)计算值：644.2993实测值： 644.2988。

下表(表4)含有的化合物使用图解13的过程制得，用适当的胺代替 8-5。化合物13-4-13-7、13-10-13-19和13-21以HCl盐的形式分离。 化合物13-8和13-9以TFA盐的形式分离。

表4

                化合物13-4

3-(1-甲基-1H-咪唑-4-基)-9-苯基-8-(4-{[4-(5-吡嗪-2-基-4H-1，2，4-三 唑-3-基)哌啶-1-基]甲基}苯基)[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶(13-4)

向搅拌的13-2(1.5g，3.5mMol)和10-1(1.4g，4.0mMol)在NMP(30mL) 中的溶液中添加三乙胺(1mL，7mMol)，然后添加乙酸(0.4mL， 7mMol)，室温搅拌过夜后，分份添加三乙酰氧基硼氢化钠(0.9g， 4.2mMol)。搅拌6小时后，添加饱和NaHCO3溶液直到pH大于7。得 到的悬浮液经过过滤并用水洗涤。固体与甲苯共沸干燥3次并使用正相 急骤色谱纯化(梯度：100％CHCl3到10％MeOH在CHCl3中，在40分钟 内)，得到13-4，为白色固体。质量(M+1)计算值：645.2946实测值： 645.2946。

                 反应图解14

[9-苯基-8-(4-{[4-(5-吡嗪-2-基-4H-1，2，4-三唑-3-基)哌啶-1-基]甲基} 苯基)[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶-3-基]甲醇(14-3)

{8-[4-(1，3-二氧杂环戊烷-2-基)苯基]-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6- 萘啶-3-基}甲醇(14-1)

向搅拌的3-4(5g，13mMol)、HOBT(1.9g，14.3mMol)和羟基乙酸 (1.2g，15.6mMol)在无水DMF(100mL)中的溶液中添加EDC(2.7g， 14.3mMol)。溶液在环境温度搅拌过夜，然后溶液用5mL的冰醋酸处理 并在油浴中加热到80℃持续2小时。冷却到室温后，反应用乙酸乙酯稀 释，用NaHCO3(水溶液)、水和盐水洗涤。有机层用MgSO4干燥，过滤 并真空浓缩，得到14-1，为红色固体。LC/MS(M+1)计算值：425.5；实 测值：425.6。

4-[3-(羟基甲基)-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶-8-基]苯甲醛 (14-2)

向14-1(2.1g，4.9mMol)在THF(50mL)中的悬浮液添加1N HCl (50mL)。在室温下搅拌30分钟后，反应用乙酸乙酯稀释并用水洗涤两 次，然后用盐水洗涤。有机层用MgSO4和Na2SO4干燥，过滤并真空浓 缩，得到14-2，为红色固体。质量(M+1)计算值：381.1346实测值： 381.1346。

[9-苯基-8-(4-{[4-(5-吡嗪-2-基-4H-1，2，4-三唑-3-基)哌啶-1-基]甲基} 苯基)[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶-3-基]甲醇(14-3)

向搅拌的14-2(0.05g，0.1mMol)和10-1(0.05g，0.15mMol)在 NMP(1mL)中添加三乙胺(0.04mL，0.26mMol)，然后添加乙酸(0.01mL， 0.26mMol)。在室温搅拌过夜后，添加三乙酰氧基硼氢化钠(0.03g， 0.2mMol)。搅拌6小时后，溶液通过针筒式滤器过滤并通过C18反相 HPLC纯化，得到14-3，为固体。质量(M+1)计算值：595.2677实测值： 595.2679。

下表(表5)含有的化合物使用图解14的过程制得，用适当的胺代替 10-1。化合物14-4、14-5、14-7和14-8以HCl盐的形式分离。化合物 14-6以TFA盐的形式分离。

表5

                 反应图解15

{8-[4-(1-氨基环丙基)苯基]-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶-3-基} 甲醇(15-2)

4-[3-(羟基甲基)-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶-8-基]苄腈(15- 1)

向搅拌的14-2(0.4g，1.1mMol)在无水THF(15mL)中的悬浮液中添 加3mL的浓NH4OH。然后溶液用碘(0.4g，1.6mMol)处理，在室温搅拌过 夜，然后用饱和硫代硫酸钠溶液(20mL)猝灭，产物提取进入乙酸乙酯中 三次。合并的有机层用盐水洗涤，用Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩， 得到15-1，为棕褐色固体。质量(M+1)计算值：378.135实测值： 378.1345。

{8-[4-(1-氨基环丙基)苯基]-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶-3-基} 甲醇(15-2)

在-70℃将在乙醚(0.4mL，1.2mMol，3M)中的乙基溴化镁添加到15- 1(0.1g，0.3mmol)和异丙醇钛(IV)(0.17g，0.6mMol)在无水THF(7mL)中的 溶液中，10分钟后，除去冷却浴，反应回温到室温，搅拌1小时后，添 加更多的在乙醚中的乙基溴化镁(0.18mL，0.5mMol，3M)，然后反应在冰 浴中冷却到0℃并用三氟化硼乙醚络合物(0.18g，1.2mMol)处理，反应在 0℃搅拌30分钟，然后回温到室温持续1小时，然后反应用1N HCl猝 灭，然后搅拌3小时，溶液用1M NaOH碱化，用氯仿提取，用Na2SO4 干燥，过滤并真空浓缩，粗残余物溶在甲醇中，使用C18反相HPLC纯 化，得到15-2，为固体。LC/MS(M+1)计算值：408.4；实测值：408.0。

                 反应图解16

1-[4-(9-苯基-3-吡啶-4-基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶-8-基)苯基]甲 胺(16-3)

4-(5-氯-3-苯基-1，6-萘啶-2-基)苄基氨基甲酸叔丁基酯(16-1)

向搅拌的9-1(7g，20.2mMol)和氨基甲酸叔丁基酯(2.6g，22.3mMol) 在无水乙腈(35mL)中的溶液中添加三乙基硅烷(29.1mL，182mMol)，然 后添加三氟乙酸(6mL，81mMol)。搅拌3小时后，将溶液倾入NaHCO3 水溶液中，并提取进入乙酸乙酯中3次。合并的有机层用水和盐水洗涤， 然后有机层用Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩，使用硅胶急骤色谱纯化。 LC/MS(M+1)计算值：446.9；实测值：446.1。

4-(5-肼基-3-苯基-1，6-萘啶-2-基)苄基氨基甲酸叔丁基酯(16-2)

向搅拌的16-1(6.8g，15.2mMol)在无水1，4-二氧杂环己烷(20mL)中 的溶液中添加肼(10.8mL，343mMol)，溶液在微波反应器中加热到100 ℃持续5分钟，真空除去溶剂，粗残余物溶在乙酸乙酯中并用NaHCO3 水溶液和盐水洗涤。有机层用MgSO4干燥，过滤并真空浓缩，得到16-2， 作为橙色固体。LC/MS(M+1)计算值：442.5；实测值：442.2。

1-[4-(9-苯基-3-吡啶-4-基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶-8-基)苯基]甲 胺(16-3)

向搅拌的16-2(0.08g，0.2mMol)、HOBT(0.03g，0.2mMol)和异烟酸 (0.02g，0.2mMol)在无水DMF(1mL)中的溶液中添加DIEA(0.08mL， 0.5mMol)，然后添加EDC(0.04g，0.2mMol)。溶液在微波反应器中在80 ℃加热12分钟，然后溶液用0.5mL的乙酸处理并在微波反应器中加热 到80℃持续30分钟。冷却到室温后，挥发物在真空中蒸发，溶液通过 针筒式滤器过滤并在C18反相HPLC上纯化，得到16-3，为固体。质量 (M+1)计算值：429.1822实测值：429.1811。

下表(表6)含有的化合物使用图解16的过程制得，用适当的羧酸代 替异烟酸：

表6

                 反应图解17

5-({[4-(3-甲基-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶-8-基)苄基]氨基} 甲基)吡啶-2-醇(17-3)

4-(3-甲基-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶-8-基)苄基氨基甲酸叔 丁基酯(17-1)

向搅拌的16-2(5g，11.3mMol)在20mL的3:1的甲苯:甲醇中的溶 液中添加原乙酸三甲酯(1.8g，15.3mMol)和对甲苯磺酸一水合物(0.1g， 0.6mMol)。反应在微波反应器中加热到100℃持续35分钟，冷却到室温 后，减压除去溶剂，残余物使用正相急骤色谱纯化，得到17-1，为固体。 LC/MS(M+1)计算值：466.6实测值：466.2

1-[4-(3-甲基-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶-8-基)苯基]甲胺 (5-3)

HCl(气)鼓泡通过甲醇(75mL)持续5分钟，向该溶液中添加17-1 (7.5g，16mmMol)，溶液在室温下搅拌6小时，真空除去溶剂后，得到的 固体与10:1的乙酸乙酯和甲醇溶液研磨30分钟，悬浮液经过过滤并 干燥，得到5-3，为HCl盐。质量(M+1)计算值：366.1713实测值：366.1694

6-羟基烟醛(17-2)

搅拌的6-甲氧基-3-吡啶甲醛(0.45g，3.3mMol)在3N HCl(10mL)中的 溶液加热到100℃持续30分钟，冷却后，出现针状结晶，过滤收集结晶， 得到17-2。1H-NMR(CD3OD) 9.64(s，1H)，δ8.17-8.16(m，1H)，δ7.96- 7.94(m，1H)，δ 6.58(d，1H)。

5-({[4-(3-甲基-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶-8-基)苄基]氨基} 甲基)吡啶-2-醇(17-3)

向搅拌的5-3(0.1g，0.3mMol)和三乙胺(0.08mL，0.5mMol)在NMR (1mL)中的溶液中添加17-2(0.03g，0.3mMol)和乙酸(0.03mL， 0.5mMol)，然后添加三乙酰氧基硼氢化钠(0.12g，0.5mMol)。在室温下 搅拌过夜后，反应通过针筒式滤器过滤并在C18反相HPLC上纯化，得 到17-3，为HCl盐。质量(M+1)计算值：473.2085实测值：473.2092。

下表(表7)含有的化合物使用图解17的过程制得，用适当的醛代替 17-2。化合物17-4和17-5以HCl盐的形式分离。化合物17-6和17-7 以TFA盐的形式分离。

表7

                 反应图解18

N-[4-(9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶-8-基)苄基]乙酰胺(18-1)

向4-3(0.02g，0.06mMol)和三乙胺(0.02mL，0.2mMol)在绝对乙醇 (0.5mL)中的溶液中添加乙酸酐(0.02mL，0.2mMol)。反应在10分钟后完 成，并直接在C18反相HPLC上纯化，得到18-1，为固体。LC/MS(M+1) 计算值：394.5；实测值：394.2。

                 反应图解19

4-({[4-(9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶-8-基)苄基]氨基}甲基)苯 酚(19-1)

向搅拌的4-2(0.05g，0.14mMol)和4-(氨基甲基)苯酚(0.04， 0.35mMol)在DMF(0.5mL)中的溶液中添加乙酸(0.04mL，0.7mMol)。在 室温下搅拌2小时后，添加三乙酰氧基硼氢化钠(0.06g，0.3mMol)，搅拌 过夜后，反应通过针筒式滤器过滤并在C18反相HPLC上纯化，得到 19-1，为固体。LC/MS(M+1)计算值：458.5；实测值：458.3。

                 反应图解20

1-[9-苯基-8-(4-{[4-(5-吡啶-2-基-4H-1，2，4-三唑-3-基)哌啶-1-基]甲基} 苯基)[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶-3-基]甲胺(20-1)

9-6(0.03g，0.04mMol)在30％TFA-二氯甲烷(1mL，30体积％)中的 溶液在室温下搅拌30分钟，真空除去溶剂，粗残余物溶在甲醇中并在 C18反相HPLC上纯化，得到20-1，为固体。质量(M+1)计算值：593.2884； 实测值：593.2867。

                 反应图解21

9-苯基-3-(1H-1，2，3-三唑-4-基)-8-(4-{[4-(4H-1，2，4-三唑-3-基)哌啶-1- 基]甲基}苯基)[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶(21-4)

4-(1H-1，2，4-三唑-3-基)哌啶(21-1)

在室温下，向4-氰基哌啶-1-羧酸苄基酯(20g，82mmol)在甲醇 (150mL)中的溶液中添加在甲醇中的甲醇钠(25wt％，5.6mL，25 mmol)，30分钟后，添加甲酰肼(4.9g，82mmol)在甲醇(20mL)中的溶液， 反应加热回流24小时，此时添加在甲醇中的甲醇钠(25wt％，5.6mL，25 mmol)和甲酰肼(4.9g，82mmol)。在72小时后，反应冷却到室温，用乙 酸(3.0mL，49mmol)猝灭并浓缩，得到的残余物溶于乙酸乙酯中，用水、 饱和碳酸氢钠、盐水洗涤，硫酸钠干燥，过滤并浓缩，残余物通过柱色 谱纯化，用1-35％IPA/DCM洗脱，合并适当的级分并真空除去溶剂，得 到4-(1H-1，2，4-三唑-3-基)哌啶-1-羧酸苄基酯，为固体。MS(M+H+)：287.2； 1H-NMR(400MHz，CDCl3)：δ 11.13(s，1H)，8.06(s，1H)，7.36-7.31(m， 5H)，5.15(s，2H)，4.24(br.s，2H)，3.06-2.98(m，3H)，2.07-2.04(m，2H)， 1.84-1.78(m，2H)。

向4-(1H-1，2，4-三唑-3-基)哌啶-1-羧酸苄基酯(7.3g，25mmol)在乙醇 (100mL)中的溶液中添加10％的碳载钯(500mg)，反应容器用氢气吹扫 并在氢气氛下搅拌3小时，反应经过过滤和浓缩，得到21-1，为固体。 MS(M+H+)：153.2；1H-NMR(400MHz，DMSO-d6)：δ 7.99(s，1H)，2.98- 2.94(m，2H)，2.82-2.74(m，1H)，2.57-2.50(m，2H)，1.82-1.78(m，2H)， 1.60-1.50(m，2H)。

5-氯-3-苯基-2-(4-{[4-(4H-1，2，4-三唑-3-基)哌啶-1-基]甲基}苯基)-1，6- 萘啶(21-2)

向搅拌的9-1(0.25g，0.73mMol)和21-1(0.13g，0.87mMol)在NMP (5mL)中的溶液中添加三乙胺(0.3mL，2.2mMol)，然后添加乙酸 (0.082mL，1.5mMol)，在环境温度下搅拌过夜后，添加三乙酰氧基硼氢 化钠(0.18g，0.87mMol)。完成后，反应用乙酸乙酯稀释，用饱和NaHCO3 洗涤，然后用水、盐水洗涤。有机层用Na2SO4和MgSO4干燥，过滤并 真空浓缩，得到21-2。LC/MS(M+1)计算值：482.0；实测值：482.2。

5-肼基-3-苯基-2-(4-{[4-(4H-1，2，4-三唑-3-基)哌啶-1-基]甲基}苯基)- 1，6-萘啶(21-3)

向搅拌的21-2(0.4g，0.8mMol)在无水1，4-二氧杂环己烷(3mL)中的 溶液中添加肼(0.45mL，14.5mMol)。溶液在微波反应器中加热到100℃ 持续5分钟，真空除去溶剂并与甲苯共沸干燥三次，得到21-3。LC/MS (M+1)计算值：477.6；实测值：477.3。

9-苯基-3-(1H-1，2，3-三唑-4-基)-8-(4-{[4-(4H-1，2，4-三唑-3-基)哌啶-1- 基]甲基}苯基)[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶(21-4)

向搅拌的21-3(0.2g，0.36mMol)、HOBT(0.05g，0.4mMol)和1H-1，2，3- 三唑-4-羧酸(0.05g，0.4mMol)在无水DMF(2mL)中的溶液中添加DIEA (0.18mL，1.1mMol)，然后添加EDC(0.08g，0.4mMol)。溶液在微波反应 器中在80℃加热12分钟，然后溶液用0.5mL的乙酸处理并在微波反应 器中加热到80℃持续另外10分钟。冷却到室温后，溶液通过针筒式滤 器并在C18反相HPLC上纯化，得到21-4，为HCl盐。质量(M+1)计算 值：实测值：LC/MS(M+1)计算值：554.6；实测值：554.3。

                 反应图解22

1-{4-[3-(1H-咪唑-4-基)-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶-8-基]苯 基}甲胺(22-3)

8-[4-(1，3-二氧杂环戊烷-2-基)苯基]-3-(1H-咪唑-4-基)-9-苯基[1，2，4] 三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶(22-1)

向3-4(0.2g，0.5mmol)、1H-咪唑-4-羧酸(0.06g，0.5mmol)、HOBT (0.06g，0.5mmol)和DIEA(0.2ml，1.4mmol)在DMF(2ml)中的溶液中添加 EDC(0.1g，0.6mmol)。溶液在室温下搅拌45分钟然后在微波反应器中在 80℃加热15分钟，真空除去溶剂，将残余物溶在DMF(0.5ml)中并用冰 醋酸(2.0ml)处理，反应混合物在80℃加热45分钟，然后反应用水(10ml) 猝灭并提取进入EtOAc(3x20ml)。合并的有机层真空浓缩，得到22-1， 为褐色残余物。MS M+H计算值：461.5，实测值：461.2。

4-[3-(1H-咪唑-4-基)-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶-8-基]苯甲 醛肟(22-2)

向22-1(0.8g，1.7mmol)在1，4-二氧杂环己烷(3ml)中的溶液中滴加 3N HCl(1.1ml，3.4mmol)搅拌10分钟后，溶液用在水(0.5ml)中的盐酸羟 胺(0.5g，6.9mmol)处理。混合物搅拌1小时，然后用NaHCO3(固体)猝灭 直到pH＝8。除去溶剂后，将残余物溶在水中，过滤并与甲苯共沸干燥， 得到22-2，为固体。MS M+H计算值：432.5，实测值：432.2。

1-{4-[3-(1H-咪唑-4-基)-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶-8-基]苯 基}甲胺(22-3)

22-2(0.06，0.1mmol)和Zn(固体)(0.02g，0.3mmol)在无水冰醋酸中的 溶液在室温搅拌30分钟，向该溶液中添加另外4当量的Zn(固体)(0.04g， 0.6mmol)。反应混合物搅拌另外的1小时，过滤和除去溶剂后，将残余 物溶在MeOH中并用氢氧化铵处理，除去溶剂后，将残余物用反相HPLC 纯化，得到22-3，为固体。MS M+H计算值：418.5，实测值：401.1 (M-NH2)。

下表(表8)含有的化合物使用图解22的过程制得，用适当的酸代替 咪唑-4-羧酸。表8中的化合物以HCl盐的形式被分离。

表8

                 反应图解23

5，6，7，8-四氢咪唑并[1，2-a]吡啶-2-羧酸(23-2)

向在干燥烧瓶中的在EtOH(15ml)中的23-1(0.1g，0.7mmol)中添加 Pt2O(0.1g，0.4mmol)。反应混合物置于氮气氛下并随后放气。重复该过 程三次，并将反应混合物置于氢气氛下。3小时后，反应混合物通过硅 藻土过滤，除去溶剂后，获得所需产物23-2，为灰白色固体。MS M+H 计算值：167.2，实测值：167.1。

                 反应图解24

4-甲基-1H-咪唑-5-羧酸(24-2)

向24-1(0.5g，2.4mmol)在EtOH(2ml)中的溶液中添加3N LiOH (2.2ml，6.5mmol)。反应混合物在80℃加热1小时，将温度降低到40℃， 混合物搅拌过夜。然后混合物在80℃加热另外1.5小时。反应用12N HCl 中和并真空浓缩，残余物与甲苯共沸干燥，得到所需产物24-2，为固体。 MS M+H计算值：127.1，实测值：127.1

                 反应图解25

1-丙基-1H-咪唑-4-羧酸甲酯(25-2)

向在干燥烧瓶中的25-1(0.5g，4.0mmol)在无水THF(15ml)中的溶液 中分份添加NaH(0.1g，4.8mmol)。当气泡现象平息后，添加碘丙烷(0.8ml， 8.0mmol)，并在室温搅拌过夜。向反应混合物中添加另外的0.5eq的NaH 以及3eq的碘丙烷。搅拌50小时后，添加另外的0.5eq的NaH以及2eq 的碘丙烷。反应混合物搅拌另外20小时，然后用乙醇(5ml)猝灭，除去 溶剂，得到所需产物25-2，为固体。MS M+H计算值：169.2，实测值： 155.1(M-CH2)。

1-丙基-1H-咪唑-4-羧酸(25-3)

向25-2(0.6g，3.6mmol)在无水MeOH(2ml)中的溶液中添加3N LiOH(2.6ml，7.9mmol)。反应混合物在80℃加热1小时，将温度降低到 40℃，混合物搅拌过夜。然后混合物用12N HCl中和并随后真空浓缩， 残余物与甲苯共沸干燥，得到所需产物25-3，为固体。MS M+H计算 值：155.2，实测值：155.1。

下表(表9)含有的化合物使用图解25的过程制得，代替了适当的烷 基卤。

表9

                 反应图解26

4-[9-苯基-3-(吡咯烷-1-基甲基)[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶-8-基]苄 基胺(26-2)

4-[3-(氯甲基)-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶-8-基]苄基氨基甲 酸叔丁基酯(26-1)

向16-2(1.2g，2.7mmol)在CH2Cl2(10ml)中的悬浮液中添加DMAP (0.03g，0.03mmol)和吡啶(0.4ml，5.4mmol)，然后添加氯乙酸酐(0.5g， 3.0mmol)。反应混合物在室温下搅拌2小时，然后添加另外的氯乙酸酐 (0.2g，0.9mmol)，在搅拌另外10分钟后，真空除去溶剂，残余物在饱和 NaHCO3水溶液和EtOAc之间分配(3x30ml)。合并的有机层用水、盐水 洗涤，干燥(Na2SO4/MgSO4)，除去溶剂得到所需产物26-1，为红色粉末。 MS计算值：500.2，实测值：500.1

4-[9-苯基-3-(吡咯烷-1-基甲基)[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶-8-基]苄 基胺(26-2)

向26-1(0.05g，0.1mmol)在DMSO(1ml)中的溶液中添加吡咯烷。溶 液在150℃加热30分钟。反应混合物用反相HPLC纯化，将残余物溶在 MeOH(0.5ml)中并用1N HCl(0.4ml)处理。反应混合物在35℃搅拌1天。 除去溶剂得到所需产物26-2，为固体。MS计算值：535.7，435.5。

下表(表10)含有的化合物使用图解26的过程制得，用适当的胺代 替吡咯烷。表10中的化合物以HCl盐的形式被分离。

表10

                 反应图解28

[4-(3-甲基-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶-8-基)苯基]甲醇(28- 1)

在0℃向4-(3-甲基-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶-8-基)苯甲醛 (5-2，0.317g，0.870mmol)在甲醇(5mL)中的溶液中添加硼氢化钠(0.033 g，0.870mmol)。10分钟后，将反应混合物倾入乙酸乙酯中，有机层用 碳酸氢钠饱和溶液、水和盐水洗涤，硫酸钠干燥，过滤并减压浓缩至干， 通过反相色谱纯化(Waters Sunfire MSC18，1％乙腈/0.1％三氟乙酸/水→ 95％乙腈/0.1％三氟乙酸/水)，得到标题化合物，为固体。HRMS(M+H+)： 计算值＝367.1554，实测值＝367.1547。

{4-[3-(1-甲基-1H-咪唑-4-基)-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶-8- 基]苯基}甲醇(28-2)

根据图解28的过程从13-2制备标题化合物；HRMS(M+H+)：计算 值＝433.1772，实测值＝433.1761。

                 反应图解29

1-[4-(9-苯基-3-[1，2，4]三唑并[1，5-a]嘧啶-2-基[1，2，4]三唑并[3，4-f]- 1，6-萘啶-8-基)苯基]乙醇(29-2)

1-[4-(5-氯-3-苯基-1，6-萘啶-2-基)苯基]乙醇(29-1)

在0℃向4-(5-氯-3-苯基-1，6-萘啶-2-基)苯甲醛(9-1，0.500g，1.450 mmol)在无水二氯甲烷(10mL)中的溶液中添加甲基溴化镁(2.072mL， 2.9mmol，1.4M，在甲苯/四氢呋喃(75：25)中)。15分钟后，将反应混 合物倾入乙酸乙酯中，有机层用碳酸氢钠饱和溶液、水和盐水洗涤，硫 酸钠干燥，过滤并减压浓缩至干，得到标题化合物。MS(M+H+)：计算 值＝361.85，实测值＝361.1。

1-[4-(9-苯基-3-[1，2，4]三唑并[1，5-a]嘧啶-2-基][1，2，4]三唑并[3，4-f]- 1，6-萘啶-8-基)苯基]乙醇(29-2)

根据图解9的过程制备标题化合物；HRMS(M+H+)：计算值＝ 485.1833，实测值＝485.1812。

以下表11中的化合物根据图解13的过程，从哌啶21-1和所指明的 醛制得。

表11

                 反应图解33

三氟乙酸1-[4-(3-甲基-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶-8-基)苯 基]环丙铵(33-5)

4-(2-苄基-1，3-二氧杂环戊烷-2-基)苄腈(33-1)

1-(4-溴苯基)-2-苯基乙酮(5.0g，18mmol)、乙二醇(3.0mL，54mmol) 和对甲苯磺酸(0.04g，0.2mmol)在甲苯(30mL)中的溶液使用迪安-斯 达克榻分水器加热回流15小时，将反应冷却到室温，用乙酸乙酯稀释， 用饱和碳酸氢钠、盐水洗涤，硫酸钠干燥，过滤并浓缩，得到粗2-苄基 -2-(4-溴苯基)-1，3-二氧杂环戊烷，为白色固体。向粗品中添加氰化锌(2.3 g，20mmol)、四(三苯基膦)钯(3.3g，2.8mmol)、DMF(20mL)和二氧杂 环己烷(20mL)，得到的悬浮液用氮气吹扫15分钟，然后加热100℃持 续15小时。将反应冷却到室温，倾入乙醚中并过滤。有机滤液用水、 饱和碳酸氢盐、盐水洗涤，硫酸钠干燥，过滤并浓缩，通过硅胶色谱纯 化(1％乙酸乙酯/己烷→50％乙酸乙酯/己烷)，得到标题化合物，为固 体。MS(M+H+)：计算值＝265.31，实测值＝266.1。

{1-[4-(苯基乙酰基)苯基]环丙基}氨基甲酸叔丁基酯(33-2)

在-78℃向4-(2-苄基-1，3-二氧杂环戊烷-2-基)苄腈(33-1，1.5g，5.6 mmol)在乙醚(25mL)中的溶液中添加异丙醇钛(1.8mL，6.2mmol)，然后 添加乙基溴化镁(4.2mL，12mmol，3M，在乙醚中)。在10分钟后，将反 应回温到室温持续60分钟，将反应冷却到0℃并添加三氟化硼乙醚络合 物(1.4mL，11mmol)。在0℃反应30分钟后，将反应回温到室温持续1 小时，此时将反应用1M HCl猝灭并酸化。将悬浮液在室温下搅拌另外 3小时，此时，将混合物用1M的NaOH碱化并用氯仿提取。合并的有 机层用硫酸钠干燥，过滤并浓缩。在室温下立刻向粗品中添加乙腈(15 mL)和二碳酸二叔丁基酯(1.2g，5.6mmol)，12小时后，将反应浓缩至干， 并通过硅胶色谱纯化(1％乙酸乙酯/己烷→60％乙酸乙酯/己烷)，得到 标题化合物，为白色固体。MS(M+H+)：计算值＝351.44，实测值＝ 352.1。

{1-[4-(5-氯-3-苯基-1，6-萘啶-2-基)苯基]环丙基}氨基甲酸叔丁基酯 (33-3)

33-2(0.64g，2.5mmol)、3-1(0.88g，2.5mmol)和碳酸钾(2.1g，15 mmol)在DMF(14mL)中的溶液加热到120℃持续4.5小时，将反应冷却 到室温，用乙酸乙酯稀释，用水、盐水洗涤，硫酸钠干燥，过滤并浓缩， 通过硅胶色谱纯化(1％乙酸乙酯/己烷→70％乙酸乙酯/己烷)，得到标 题化合物，为泡沫。MS(M+H+)：计算值＝471.98，实测值＝472.1。

{1-[4-(3-甲基-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶-8-基)苯基]环丙基} 氨基甲酸叔丁基酯(33-4)

根据图解27的过程从33-3制备标题化合物；MS(M+H+)：计算值 ＝491.58，实测值＝492.1.

三氟乙酸1-[4-(3-甲基-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶-8-基)苯 基]环丙铵(33-5)

根据图解27的过程制备标题化合物；HRMS(M+H+)：计算值＝ 392.1870，实测值＝392.1893。

以下表12中的化合物根据图解33的过程制得。化合物33-8-33-10 以HCl盐形式被分离。化合物33-6以TFA盐的形式被分离。

表12

                 反应图解34

氯化(1R)-1-[4-(3-甲基-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶-8-基)苯 基]乙铵(34-5)

N-{(1E)-[4-(5-氯-3-苯基-1，6-萘啶-2-基)苯基]亚甲基}-2-甲基丙烷-2- 亚磺酰胺(34-1)

4-(5-氯-3-苯基-1，6-萘啶-2-基)苯甲醛(9-1，4.24g，12.3mmol)、S-(-)- 2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(3.43mL，28.3mmol)和硫酸铜(4.49g，28.1 mmol)在二氯甲烷(20mL)中的溶液在氮气氛下加热回流。18小时后， 将反应用饱和碳酸氢钠、盐水洗涤，硫酸镁干燥，过滤并浓缩，通过硅 胶色谱纯化(0％乙酸乙酯/己烷→45％乙酸乙酯/己烷)，得到标题化合 物，为橙色泡沫。MS(M+H+)：计算值＝447.99，实测值＝448.2。

N-{(1R)-1-[4-(5-氯-3-苯基-1，6-萘啶-2-基)苯基]乙基}-2-甲基丙烷-2- 亚磺酰胺(34-2)

在-10℃向N-{(1E)-[4-(5-氯-3-苯基-1，6-萘啶-2-基)苯基]亚甲基}-2- 甲基丙烷-2-亚磺酰胺(34-1，4.53g，10.1mmol)在二氯甲烷(100mL)中 的溶液中添加甲基溴化镁(30mL，42.0mmol，1.4M，在75:25甲苯: THF中)。30分钟后，反应通过添加饱和氯化铵溶液猝灭(同时保持温度 低于0℃)，并用二氯甲烷提取。合并的有机层用水、盐水洗涤，硫酸镁 干燥，过滤并浓缩，得到标题化合物，为浅黄色固体。MS(M+H+)：计 算值＝464.03，实测值＝464.2。

叔丁基({(1R)-1-[4-(5-肼基-3-苯基-1，6-萘啶-2-基)苯基]乙基}氨基)氧 锍化物(sulfoniumolate)(34-3)

向N-{(1R)-1-[4-(5-氯-3-苯基-1，6-萘啶-2-基)苯基]乙基}-2-甲基丙烷 -2-亚磺酰胺(34-2，0.707g，1.52mmol)和无水肼(15ml)中的溶液在115 ℃加热1小时。将反应混合物倾入乙酸乙酯中，有机层用碳酸氢钠饱和 溶液、水和盐水洗涤，硫酸镁干燥，过滤并减压浓缩至干，得到粗肼加 合物，为橙色固体。MS(M+H+)：计算值＝459.62，实测值＝460.4。

叔丁基({(1R)-1-[4-(3-甲基-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶-8-基) 苯基]乙基}氨基)氧锍化物(34-4)

向粗的叔丁基({(1R)-1-[4-(5-肼基-3-苯基-1，6-萘啶-2-基)苯基]乙基} 氨基)氧锍化物(34-3，1.06g，2.31mmol)、对甲苯磺酸(63mg，0.36mmol) 和原乙酸三甲酯(1.0mL，7.7mmol)中添加无水甲苯(10mL)并加热到 110℃持续48小时，反应混合物在压力下还原并通过硅胶色谱纯化(0- 10％甲醇/二氯甲烷)，得到橙色泡沫。MS(M+H+)：计算值＝483.64，实 测值＝484.2。

氯化(1R)-1-[4-(3-甲基-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶-8-基)苯 基]乙铵(34-5)

叔丁基({(1R)-1-[4-(3-甲基-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶-8-基) 苯基]乙基}氨基)氧锍化物(34-4)在二氧杂环己烷中在室温下用4N HCl 处理15分钟。反应混合物在压力下还原并通过反相色谱纯化(Waters Sunfire MSC 18，1％乙腈/0.1％三氟乙酸/水→95％乙腈10.1％三氟乙酸 /水)并转化为HCl盐(添加HCl在乙酸乙酯中的饱和溶液(～4N)并浓缩)， 得到标题化合物，为固体。MS(M+H+)：计算值＝379.47，实测值＝ 380.2。

(1R)-1-[4-(9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶-8-基)苯基]乙胺(34- 6)

根据图解34的过程制备标题化合物；MS(M+H+)：计算值＝ 365.43，实测值＝366.2。化合物34-6以HCl盐的形式被分离。

                 图解35

(1R)-1-{4-[9-苯基-3-(5-吡啶-2-基-1H-吡唑-3-基)[1，2，4]三唑并[3，4-f]- 1，6-萘啶-8-基]苯基}乙胺二盐酸盐(35-1)

向叔丁基({(1R)-1-[4-(5-肼基-3-苯基-1，6-萘啶-2-基)苯基]乙基}氨基) 氧锍化物(34-3，0.20g，0.43mmol)、EDC(0.11g，0.57mmol)、无水HOBT (0.06g，0.39mmol)、DIPEA(0.17mL，0.96mmol)和5-吡啶-2-基-1H-吡唑 -3-羧酸(0.08g，0.43mmol)中添加无水DMF(2mL)，并在室温下搅拌过 夜，添加HCl/乙醚(1mL，2N)，反应混合物在室温下搅拌20分钟，然后 在100℃微波处理30分钟。真空除去溶剂，通过反相色谱纯化(Waters Sunfire MSC 18，1％乙腈/0.1％三氟乙酸/水→95％乙腈/0.1％三氟乙酸/ 水)并转化为HCl盐(添加HCl在乙酸乙酯中的饱和溶液(～4N)并浓缩)， 得到标题化合物，为固体。MS(M+H+)：计算值＝508.58，实测值＝ 509.1。

以下表13中的化合物根据图解35中的过程制得。表13中的化合 物以HCl盐的形式被分离。

表13

(1R)-1-[4-(9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶-8-基)苯基]丙-1-胺 (36-1)

根据图解34的过程制备标题化合物。MS(M+H+)：计算值＝379.47， 实测值＝380.2。化合物36-1以HCl盐的形式被分离。

                 反应图解37

2-[4-(3-甲基-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶-8-基)苯基]丙-2-胺 (37-4)

N-{1-甲基-1-[4-(苯基乙酰基)苯基]乙基}乙酰胺(37-1)

N-(1-甲基-1-苯基乙基)乙酰胺(21.3g，121mmol)、苯基乙酰氯(19.5 g，126mmol)和三氯化铝(19g，142mmol)在二氯甲烷(140mL)中的溶液 在氮气氛下在室温下搅拌过夜，将反应倾入到冰上冰搅拌直到冰熔融， 然后分离各层，有机层用饱和碳酸氢钠、盐水洗涤，硫酸镁干燥，过滤 并浓缩。通过硅胶色谱纯化，得到标题化合物。MS(M+H+)：计算值＝ 295.38，实测值＝296.1。

N-{1-[4-(5-氯-3-苯基-1，6-萘啶-2-基)苯基]-1-甲基乙基}乙酰胺(37- 2)

根据图解3的过程从37-1制备标题化合物；MS(M+H+)：计算值＝ 415.91，实测值＝416.1。

{1-[4-(5-氯-3-苯基-1，6-萘啶-2-基)苯基]-1-甲基乙基}氨基甲酸叔丁 基酯(37-3)

在40℃向N-{1-[4-(5-氯-3-苯基-1，6-萘啶-2-基)苯基]-1-甲基乙基}乙 酰胺(37-2，4.73g，11.4mmol)在无水THF(120mL)中的溶液中添加二苯 基硅烷(10.5ml，56.9mmol)和异丙醇钛(16.6mL，56.9mmol)持续1小 时。将反应混合物从热源移开，并通过添加饱和碳酸氢盐溶液猝灭，添 加二氯甲烷并通过硅藻土垫和硫酸镁过滤，向溶液中添加二碳酸二叔丁 基酯(3.08g，14.1mmol)，然后旋转蒸发到最小体积。添加无水二氯甲烷 (140mL)、二碳酸二叔丁基酯(4.1g，18.8mmol)和TEA(4.0mL，28.7mmol) 并在室温搅拌过夜。反应混合物用碳酸氢钠、盐水洗涤，硫酸镁干燥， 过滤并浓缩，通过硅胶色谱纯化(0-40％ EtOAc/己烷，在30分钟内)，得 到标题化合物，为白色泡沫。MS(M+H+)：计算值＝473.99，实测值＝474.1

2-[4-(3-甲基-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶-8-基)苯基]丙-2-胺 盐酸盐(37-4)

根据图解5的过程从37-3制备标题化合物；MS(M+H+)：计算值 ＝393.48，实测值＝394.1。

2-[4-(9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶-8-基)苯基]丙-2-胺(38-1)

根据图解37的过程制备标题化合物；MS(M+H+)：计算值＝421.51， 实测值＝422.3。化合物38-1以HCl盐的形式被分离。

                 反应图解39

氯化3-(2-{[4-(3-甲基-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶-8-基)苄基] 氨基}-2-氧代乙基)吡啶鎓(39-1)

向1-[4-(3-甲基-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶-8-基)苯基]甲胺 盐酸盐(5-3，20mg，0.050mmol)、EDC(12mg，0.065mmol)、HOBT(10mg， 0.0650mmol)、DIPEA(0.033ml，0.199mmol)和吡啶-3-基乙酸盐酸盐(11 mg，0.0650mmol)中添加0.6mL无水二甲基甲酰胺。然后反应混合物在 微波照射下在100℃加热5分钟，粗反应混合物通过反相色谱纯化 (Waters Sunfire MSCl 8，1％乙腈/0.1％三氟乙酸/水→95％乙腈/0.1％三氟 乙酸/水)并转化成HCl盐(添加HCl在乙酸乙酯中的饱和溶液(～4N)并浓 缩)，得到标题化合物，为黄色固体。HRMS(M+H+)：计算值＝243.1079， 实测值＝243.1083。

以下表14中的化合物从所示的胺根据图解39的过程制备(参见化合 物一栏的括号)。

表14

2-[{4-[3-(氨基(ammonio)甲基)-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-萘啶- 8-基]苄基}(3-羟基-2，2-二甲基丙基)氨基]-2-氧代乙胺(39-52)

根据图解27的过程从39-42制备标题化合物；MS(M+H+)：计算值： 524.2769，实测值：524.2777。化合物39-52以HCl盐的形式被分离。

实施例1

人Akt同工型和ΔPH-Akt1的克隆

pS2neo载体(于2001年4月3日保藏于ATCC，保藏号为ATCC PTA-3253)按下述方法制备：用BglII切割pRmHA3载体(按照Nucl.Acid Res.16：1043-1061(1988)中介绍的方法制备)，分离出2734bp片段。也 用BglII切割pUChsneo载体(按照EMBO J.4：167-171(1985)中介绍的 方法制备)，分离出4029bp片段。将所分离出的这两个片段连接起来产 生载体，被称为pS2neo-1。该质粒在金属硫蛋白启动子和醇脱氢酶聚腺 苷酸添加位点间含有多接头。它还有一个热休克启动子驱动的neo抗性 基因。用Psp5II和BsiWI切割pS2neo-1载体。合成两个互补寡核苷酸， 然后退火(CTGCGGCCGC(SEQ.ID.NO.：1)和GTACGCGGCCGCAG (SEQ.ID.NO.：2))。将经切割的pS2neo-1与经退火的寡核苷酸连接起来 产生第二个载体，即pS2neo。这一基因转变加入了NotI位点，有助于 在转染到S2细胞前线性化。

用以下引物将人脾cDNA(Clontech)通过PCR(Clontech)扩增人 Akt1基因：5’引物：

5’CGCGAATTCAGATCTACCATGAGCGACGTGGCTATTGTG 3’(SEQ.ID.NO.：3)

和3’引物：

5’CGCTCTAGAGGATCCTCAGGCCGTGCTGCTGGC 3’(SEQ.ID.NO.：4).

5’引物包括EcoRI和BglII位点。3’引物包括用于克隆目的的XbaI和 BamHI位点。所得的PCR产物作为EcoRI/Xba I片段亚克隆到pGEM3Z (Promega)中。为了表达/纯化目的，用PCR引物：

5’GTACGATGCTGAACGATATCTTCG 3’(SEQ.ID.NO.：5).

在全长Akt1基因的5’末端加上中间T标记。所得的PCR产物包含5’ KpnI位点和3’BamHI位点，用于与含有生物素标记的昆虫细胞表达载 体pS2neo一起符合读框地亚克隆所述片段。

为了表达Akt1的血小板白细胞C激酶底物同系结构域(PH)缺失模 型(Δaa4-129，其中包括Akt1铰链区一部分的缺失)，用pS2neo载体中 的全长Akt1基因作为模板，进行PCR缺失诱变。分两步进行PCR，使 用重叠内部引物

(5’GAATACATGCCGATGGAAAGCGACGGGGCTGAAGAGATGGAGGTG 3’(SEQ.ID.NO.：6)，

和

5’CCCCTCCATCTCTTCAGCCCCGTCGCTTTCCATCGGCATG TATTC 3’(SEQ.ID.NO.：7))，

该重叠内部引物包含缺失；以及5’和3’侧翼引物，该5’和3’侧翼引物在 5’端具有KpnI位点和中间T标记。最终的PCR产物用KpnI和SmaI消 化，并连接成为pS2neo全长Akt1 KpnI/SmaI切割载体，用缺失形式有 效地替换克隆的5’端。

用氨基端寡聚引物：

5’GAATTCAGATCTACCATGAGCGATGTTACCATTGTG 3’(SEQ.ID.NO.：8)；

和羧基端寡聚引物：

5’TCTAGATCTTATTCTCGTCCACTTGCAGAG 3’(SEQ.ID.NO.：9).

通过成年脑cDNA(Clontech)的PCR，扩增人Akt3基因。这些引物包括 用于克隆目的的5’EcoRI/BglII位点和3’XbaI/BglII位点。将所得的PCR 产物克隆到pGEM4Z(Promega)的EcoRI和XbaI位点。为了表达/纯化目 的，用PCR引物将中间T标记加到全长Akt3克隆的5’端，该PCR引物 为：

5’GGTACCATGGAATACATGCCGATGGAAAGCGATGTTACCATTGTGAAG 3’(SEQ.ID.NO.： 10).

所得的PCR产物包含5’KpnI位点，允许用含有生物素标记的昆虫细胞 表达载体pS2neo进行符合读框地克隆。

用以下引物，通过从人胸腺cDNA(Clontech)的PCR扩增人Akt2基 因：氨基端寡聚引物

5’AAGCTTAGATCTACCATGAATGAGGTGTCTGTC 3’(SEQ.ID.NO.：11)；

和羧基端寡聚引物：

5’GAATTCGGATCCTCACTCGCGGATGCTGGC 3’(SEQ.ID.NO.：12).

这些引物包括用于克隆目的的5’HindIII/BglII位点和3’EcoRI/BamHI位 点。所得的PCR产物可亚克隆到pGem3Z(Promega)的HindIII/EcoRI位 点。为了表达/纯化目的，用PCR引物

5’GGTACCATGGAATACATGCCGATGGAAAATGAGGTGTCTGTCATCAAAG 3’ (SEQ.ID.NO.：13).

将中间T标记加到全长Akt2的5’端。所得的PCR产物亚克隆到如上所 述的pS2neo载体内。

实施例2

人Akt同工型和ΔPH-Akt1的表达

用磷酸钙方法，将pS2neo表达载体中含有经克隆的Akt1、Akt2、 Akt3和ΔPH-Akt1基因的DNA纯化，并转染果蝇(Drosophila)S2细胞 (ATCC)。选出抗生素(G418，500μg/ml)抗性细胞集合体。将细胞扩展至 1.0L体积(约7.0×106/ml)，加入生物素和CuSO4，使之终浓度分别为 50μM和50mM。细胞在27℃下生长72小时，通过离心收获。细胞沉淀 物(paste)置于-70℃冷藏待用。

实施例3

人Akt同工型和ΔPH-Akt1的纯化

将实施例2中描述的由1L S2细胞中得到的细胞沉淀物，在50ml 含1％CHAPS的缓冲液A(50mM Tris pH 7.4、1mM EDTA、1mM EGTA、 0.2mM AEBSF、10μg/ml苯甲脒、各5μg/ml的亮抑酶肽、抑蛋白酶肽和 抑胃酶肽、10％甘油和1mM DTT)中，用超声处理进行裂解。可溶性部 分用装有9mg/ml抗中间T单克隆抗体的G蛋白琼脂糖凝胶(Sepharose) 快流(Pharmacia)柱纯化，用75μM EYMPME(SEQ.ID.NO.：14)肽于含 25％甘油的缓冲液A中的溶液洗脱。合并含有Akt/PKB的级分，通过 SDS-PAGE对蛋白质纯度进行评价。使用标准Bradford方案定量测定纯 化蛋白质。用液氮快速冷冻纯化蛋白质，并贮藏于-70℃。

需要激活从S2细胞中纯化的Akt和Akt血小板白细胞C激酶底物 同系结构域缺失。Akt和Akt血小板白细胞C激酶底物同系结构域缺失 在含有下述成分的反应物中被激活(Alessi等，Current Biology 7：261- 269)：10nM PDK1(Upstate Biotechnology，Inc.)、脂囊泡(10μM磷脂酰 肌醇-3，4，5-三磷酸(Metreya，Inc.)、100μM磷脂酰胆碱和100μM磷脂酰丝 氨酸(Avanti Polar lipids，Inc.))以及激活缓冲液(50mM Tris pH7.4、1.0mM DTT、0.1mM EGTA、1.0μM微囊藻素—LR、0.1mM ATP、10mM MgCl2、 333μg/ml BSA和0.1mM EDTA)。反应物在22℃下孵育4小时。将等分 试样在液氮中快速冷冻。

实施例4

Akt激酶测定

用GSK衍生生物素化肽底物，对活化的Akt同种型和血小板白细 胞C激酶底物同系结构域缺失构建体进行测定。可使用对磷酸肽特异性 的镧螯合物(Lance)偶联的单克隆抗体，以及将会在肽上与生物素部分结 合的与链霉抗生物素蛋白连接的别藻蓝蛋白(allophycocyanin)(SA-APC) 荧光团，通过均相时间分辨荧光(HTRF)测定肽磷酸化的程度。当镧螯合 物和APC接近时(即与同一磷酸肽分子结合)，从镧螯合物到APC产生 非辐射能量转移，随后在665nm从APC发出发射光。

测定所需的材料：

A.  活化的Akt同工酶或血小板白细胞C激酶底物同系结构域

    缺失构建体；

B.  Akt肽底物：GSK3α(S21)肽#3928生物素-

    GGRARTSSFAEPG(SEQ.ID.NO.：15)，Macromolecular

    Resources；

C.  Lance标记的抗磷酸GSK3α单克隆抗体(Cell Signaling

    Technology，克隆#27)；

D.  SA-APC(Prozyme目录号PJ25S批号896067)；

E.   U形底微量滴定板(Dynex Technologies，目

    录号7205)；

F.   HTRF微型板分析仪，Packard Instrument

    Company；

G.  100×蛋白酶抑制剂混合物(Protease Inhibitor Cocktail)

    (PIC)：1mg/ml苯甲脒，0.5mg/ml抑胃酶肽，0.5mg/ml亮

    抑酶肽，0.5mg/ml抑蛋白酶肽；

H.  10X测定缓冲液：500mM HEPES，pH 7.5，1％ PEG，mM

    EDTA，1mM EGTA，1％ BSA，20mM -甘油磷酸酯；

I.  猝灭缓冲液：50mM HEPES pH 7.3，16.6mM EDTA，0.1％

    BSA，0.1％ Triton X-100，0.17nM Lance标记的单克隆抗

    体克隆#27，0.0067mg/ml SA-APC；

J.  ATP/MgCl2使用液：1X测定缓冲液，1mM DTT，1X PIC，

    125mM KCl，5％甘油，25mM MgCl2，375 TM ATP；

K.  酶使用液：1X测定缓冲液，1mM DTT，1X PIC，5％甘油，

    活性Akt。选择最终的酶浓度，使得测定在线性反应范围

    内；

L.  肽使用液：1X测定缓冲液，1mM DTT，1X PIC，5％甘油，

    2TM GSK3生物素化肽#3928。

在96孔微量滴定板适当的孔中加入16TL ATP/MgCl2使用液，以便 组建反应。加入抑制剂或媒介物(1.0Tl)，随后加入10Tl肽使用液。加 入13Tl酶使用液并混合，反应即开始。反应进行50分钟，然后加入60 Tl HTRF猝灭缓冲液停止反应。在室温下，孵育停止反应的反应物至少 30分钟，然后在Discovery仪器上读数。

用于抗生物素蛋白链菌素快速板测定的方法：

步骤1：

将1μl测试化合物的100％ DMSO溶液加入到20μl 2X底物溶液(20 uM GSK3肽，300μM ATP，20mM MgCl2，20μCi/ml[γ33P]ATP，IX 测定缓冲液，5％甘油，1mM DTT，IX PIC，0.1％ BSA和100mM KCl) 中。通过加入19μl 2X酶溶液(6.4nM活性Akt/PKB，1X测定缓冲液， 5％甘油，1mM DTT，1X PIC和0.1％ BSA)，来引发磷酸化反应。然后， 在室温下将上述反应孵化45分钟。

步骤2：

通过加入170μl 125mM EDTA，使反应终止。将200μl终止的反 应转移入抗生物素蛋白链菌素 PLUS(NEN Life Sciences，目 录号SMP103)中。在平板振荡器上，在室温下将上述反应孵化≥10分 钟。将孔中物质从各孔中吸出，并且用200μl TBS/孔清洗各孔两次。然 后，用200μl TBS/孔将各孔洗涤5分钟，洗涤三次，在洗涤步骤的同时， 在平台振荡器上在室温下对板进行孵化。

用密封带盖上板并且利用具有适当设置的Packard TopCount对 Flashplates中的[33P]进行计数。

用于抗生物素蛋白链菌素滤板测定的方法：

步骤1：

如以上用于抗生物素蛋白链菌素快速板分析的步骤1中所述的方式 进行酶促反应。

步骤2：

通过加入20μl 7.5M的盐酸胍终止反应。将50μl终止的反应物转 移入抗生物素蛋白链菌素滤板(SAM2TM Biotin Capture Plate，Promega， 目录号V7542)中，并且在施加真空之前，在过滤器上将反应孵化1～2 分钟。

然后，如下所述利用真空歧管对板进行洗涤：1)4×200μl/孔的2M NaCl；2)6×200μl/孔的2M NaCl与1％ H3PO4；3)2×200μl/孔的双蒸 水；和4)2×100μl/孔的95％乙醇。然后，在加入闪烁剂之前，使得膜 得到完全风干。

用白色基带将板的底部密封，将30μl/孔的Microscint 20(Packard Instruments，目录号6013621)加入其中。用透明密封带密封板的顶部， 然后利用具有[33P]的适当设置和液体闪烁剂的Packard TopCount对板进 行计数。

磷酸纤维素滤板测定的方法：

步骤1：

如上述抗生物素蛋白链菌素快速板分析的步骤1中所述的方式进行 酶促反应，使用KKGGRARTSSFAEPG(SEQ.ID.NO.：16)作为底物代替 生物素-GGRARTSSFAEPG。

步骤2：

通过加入20μl 0.75％ H3PO4终止反应。将50μl终止的反应物转移 入滤板(UNIFILTERTM，Whatman P81强阳离子交换剂，白色聚苯乙烯96 孔板，Polyfiltronics，目录号7700-3312)中，并且在施加真空之前，在 过滤器上将反应孵化1～2分钟。

然后，如下所述利用真空歧管对板进行洗涤：1)9×200μl/孔的 0.75％ H3PO4；2)2×200μl/孔的双蒸水。用白色基带将板的底部密封， 将30μl/孔的Microscint 20加入其中。用透明密封带密封板的顶部，然 后利用具有[33P]的适当设置和液体闪烁剂的Packard TopCount对板进行 计数。

PKA测定：

每个单独的PKA测定由下列成分组成：

A.      5X PKA测定缓冲液(200mM Tris pH7.5，100mM MgCl2，

        5mM -巯基乙醇，0.5mM EDTA)；

B.      50μM用水稀释的肯普肽(Kemptide)(Sigma)贮液；

C.      通过将1.0μl 33P-ATP[10mCi/ml]稀释成200 Tl 50μM未标

        记ATP贮液制备的33P-ATP；

D.      10μl稀释至0.5mg/ml BSA的70nM PKA催化亚基(UBI目录

        # 14-114)贮液；

E.      PKA/肯普肽使用液：等体积的5X PKA测定缓冲液，肯普

        肽溶液和PKA催化亚基。

在96深孔测定板中进行反应。向10 Tl 33P-ATP溶液中加入抑制剂 或媒介物(10Tl)。向各孔中加入30Tl PKA/肯普肽使用液，反应即开始。 反应物经混合，在室温下孵育20分钟。加入50 Tl 100mM EDTA和 100mM焦磷酸钠，混合，反应停止。

用p81磷酸纤维素96孔滤板(Millipore)收集酶反应产物(磷酸化肯普 肽)。向p81滤板各孔中加入75mM磷酸以制板。通过板底抽真空，经 过滤，排空各孔。向各孔中加入磷酸(75mM，170μl)。在含磷酸滤板的 相应孔中，加入30μl等分的各已停止反应的PKA反应物。抽真空后， 肽被截留在滤板上，用75mM磷酸洗涤滤板5次。最后一次洗涤后，将 滤板风干。向各孔中加入闪烁液(30μl)，在TopCount(Packard)上对滤板 进行计数。

PKC测定：

每个PKC测定都由下列成分组成：

A.     10X PKC辅激活缓冲液：2.5mM EGTA、4mM CaCl2；

B.     5X PKC激活缓冲液：1.6mg/ml磷脂酰丝氨酸，0.16mg/ml

       二酰甘油，100mM Tris pH 7.5，50mM MgCl2，5mM -巯

       基乙醇；

C.     在将1.0μl 33P-ATP[10mCi/ml]稀释成100μl 100μM未标

       记的ATP贮液制备的33P-ATP；

D.     用水稀释的髓鞘碱性蛋白(350μg/ml，UBI)；

E.     稀释至0.5mg/ml BSA的PKC(50ng/ml，UBI目录#14-

       115)；

F.     PKC/髓鞘碱性蛋白使用液：将PKC辅激活缓冲液和髓鞘

       碱性蛋白各5倍体积与PKC激活缓冲液和PKC各10倍体

       积混合而制得。

在96深孔测定板中进行测定。在5.0μl 33P-ATP中加入抑制剂或媒 介物(10Tl)。加入PKC/髓鞘碱性蛋白使用液，混合，反应即开始。反应 物在30℃下孵育20分钟。加入50 Tl 100mM EDTA和100mM焦磷酸 钠，混合后，停止反应。在96孔滤板的PVDF膜上收集磷酸化髓鞘碱 性蛋白，用闪烁计数进行定量测定。

用上述测定法，对本发明的具体化合物进行测定，发现所述化合物 对Akt1、Akt2和Akt3中的一种或多种具有≤50μM的IC50。

实施例5

基干细胞的测定以便确定Akt/PKB的抑制

将细胞(例如具活化Akt/PKB的LnCaP或PTEN(-/-)肿瘤细胞系)接种 到100mM培养皿中。当细胞生长至约70-80％汇合时，再补加5ml新培 养基和试验化合物溶液。对照包括未处理细胞、经媒介物处理的细胞和 分别用以20μM或者200nM存在的LY294002(Sigma)或渥曼青霉素 (Sigma)处理的细胞。细胞孵育2、4或6小时，弃培养基。细胞用PBS 洗涤，刮出，并转移到离心管中。使细胞成团粒，再次用PBS洗涤。最 后，将细胞团粒重悬于裂解缓冲液(20mM Tris pH8、140mM NaCl、2mM EDTA、1％ Triton、1mM焦磷酸钠、10mM -甘油磷酸酯、10mM NaF、 0.5mM NaVO4、1μM Microsystine和1x蛋白酶抑制剂混合物)中，在冰 上放置15分钟，温和涡旋使细胞裂解。将裂解液放入Beckman台式超 速离心机中，在4℃以100,000×g离心20分钟。通过标准Bradford方 案(BioRad)对上清液中的蛋白质进行定量分析，贮藏于-70℃待用。

按下述方法，对澄清裂解液中的蛋白质进行免疫沉淀(IP)：对于 Akt1/PKBI，将裂解液与NETN(100mM NaCl、20mM Tris pH 8.0、1mM EDTA、0.5％ NP-40)中的Santa Cruz sc-7126(D-17)混合，加入A/G蛋白 琼脂糖凝胶(Santa Cruz sc-2003)。对于Akt2/PKB，将裂解液与NETN 中的抗Akt-2琼脂糖(Upstate Biotechnology #16-174)混合，至于kt3，将 裂解液与NETN中的抗Akt3琼脂糖(Upstate Biotechnology #16-175)混 合。免疫沉淀物(IP)在4℃下孵育过夜，洗涤，用SDS-PAGE进行分离。

使用蛋白质印迹分析总Akt，pThr308 Akt1，pSer473 Akt1，以及 Akt2和Akt3上相应的磷酸化位点，和Akt下游目标，其中利用特异性 抗体(Cell Signaling Technology)进行：抗总Akt(目录号9272)、抗磷酸 Akt丝氨酸473(目录号9271)和抗磷酸Akt苏氨酸308(目录号9275)。 在4℃下，与用PBS+0.5％脱脂奶粉(NFDM)稀释的合适第一抗体孵育过 夜后，洗涤印迹，在室温下与PBS+0.5％ NFDM中的辣根过氧化物酶 (HRP)标记的第二抗体孵育1小时。用ECL试剂(Amersham/Pharmacia Biotech RPN2134)检测蛋白质。

实施例6

调蛋白刺激的Akt活化

将MCF7细胞(为PTEN+/+的一种人乳癌系)以1x106细胞/100mM板 接种到培养板中。当细胞为70-80％汇合时，再补加5ml无血清培养基 并孵育过夜。次日上午，加入化合物，孵育细胞1-2小时，然后加入调 蛋白(诱导Akt的活化)30分钟，用上述方法对细胞进行分析。

实施例7

肿瘤生长的抑制

癌细胞生长抑制剂的体内功效，可通过几种本领域众所周知的方案 加以确定。

第0天，在6-10周龄的雌性无胸腺小鼠(雄性小鼠[10-14周龄]还用 于前列腺肿瘤异种移植[LnCaP和PC3])(Harlan)左胁处，皮下注射人肿 瘤细胞系，该细胞系具有PI3K途径(例如LnCaP、PC3、C33a、OVCAR-3、 MDA-MB-468、A2780等)失调。随机将小鼠分为媒介物组、化合物组或 联合治疗组。从第一天起，每天经皮下给药，并在实验过程中连续给药。 或者，可选用连续输注泵，给予抑制剂试验化合物。化合物、化合物组 合或媒介物以总体积为0.2ml给药。通常在注射细胞后4-5.5周，当所有 媒介物治疗的动物的损害直径为0.5-1.0cm时，切除肿瘤并称重。计算 每一治疗组每一细胞系肿瘤的平均重量。

实施例8

斑点多路测定(Spot Multiplex Assay)

该方法描述了用于检测在96孔格式板中相同的孔内多个磷酸化蛋 白质的三明治免疫测定(sandwich immunoassay)。在96孔板中培养细胞 裂解液，在该96孔板上，不同的捕捉抗体在空间上布置在相同孔内的 不同斑点上。添加磷酸化-特异性兔多克隆抗体，通过用电化学荧光标记 物做标记的抗兔抗体检测复合物。

96孔LNCaP板+/-化合物：

在Beckman J6中以1200rpm离心10分钟，吸出介质。添加50μl/ 孔：TBS(Pierce #28376-20mM Tris pH 7.5，150mM NaCl)+1％ Triton X- 100+蛋白酶和磷酸酶抑制剂。包在塑料包装内，在完全冷冻前放置在 -70℃冷冻器内。用3％封阻剂A在1X的Tris洗涤缓冲液中封阻多路 (Multiplex)板(Meso Scale Discovery，Gaithersburg，MD)，150μl/孔。用板 密封带覆盖，在Micromix振荡器上在室温下培养2小时(最少2小时)。 用1X RCM 51(TTBS)洗涤。在冰上解冻细胞裂解液板，向被封阻的板 内添加40μl的裂解液/孔。用板密封带覆盖，在Micromix振荡器上在4 ℃O/N培养，用1X RCM 51洗涤。在1％封阻剂A在1X Tris洗涤缓 冲液中稀释二级抗体：抗磷酸AKT(T308)，抗磷酸马铃薯球蛋白 (Tuberin)(T1462)，单独或组合。添加25μl/孔，用板密封带覆盖，在 Micromix振荡器上在室温下培养3小时，用1X RCM 51洗涤。在1％封 阻剂A在1X Tris洗涤缓冲液中稀释Ru-GAR。添加25μl/孔，用板密封 带覆盖，在Micromix振荡器上在室温下培养1小时，用1X RCM 51洗 涤。用水将4X读数缓冲液T稀释到1X，添加每孔200μl经稀释的读数 缓冲液。

在Sector 6000成像器上读数。

蛋白酶和磷酸酶抑制剂：

微囊藻素-LR，Calbiochem# 475815到1μM的最终浓度(贮液 ＝500μM)

Calbiochem # 524624，100X Set I

Calbiochem # 524625，100X Set H

Calbiochem # 539134，100X Set III

抗磷酸AKT(T308)：

Cell Signalling Technologies # 9275

抗磷酸马铃薯球蛋白(T1462)：

Covance Affinity Purified(兔MS 2731/2732)

Ru-GAR＝钌化(Ruthenylated)山羊抗兔抗体

10X Tris洗涤缓冲液、封阻剂A和4X读数缓冲液T

10X RCM51(10X TTBS，RCM 51)

1X＝20mM Tris pH 7.5，140mM NaCl，0.1％吐温-20

实施例9

细胞基(体内)试验

该方法描述了用于Akt丝氨酸/苏氨酸激酶的细胞基(体内)活性试 验。活化的内源性Akt能够使生物素酰化的特异性Akt底物(GSK3β)肽 磷酸化。通过均相时间分辨荧光(HTRF)使用与铕Kryptate[Eu(K)]结合的 磷肽特异性抗体和与链霉抗生物素蛋白连接的XL665荧光团(其将与肽 上的生物素部分结合)进行检测。当[Eu(K)]和XL665接近时(即与同一磷 肽分子结合时)，从Eu(K)向XL665发生非辐射能量转移，然后在665nm 从XL665发射光。

如果各自都存在特异性抗体的话，该试验可用于检测来自各种不同 物种的所有三种Akt同功酶(Akt1、Akt2和Akt3)的抑制剂。

材料和试剂

A.       Cell Culture Microtiter Flat Bottom 96孔板，Corning

         Costar，目录编号3598

B.       Reacti-Bind蛋白A覆层96孔板，Pierce，目录编号

         15130

C.      Reacti-Bind蛋白G覆层96孔板，Pierce，目录编号

        15131

D.      Micromix 5振荡器

E.           U形底微量滴定板，Dynex

        Technologies，目录编号7205

F.      96孔板洗涤器，Bio-Tek Instruments，目录编号EL

        404

G.       HTRF微量滴定板分析器，Packard

        Instrument Company

缓冲液

A.      IP激酶细胞裂解缓冲液：1X TBS；0.2％吐温20；1X

        蛋白酶抑制剂混合物III(贮液为100X，Calbiochem，

        539134)；1X磷酸酶抑制剂混合物I(贮液为100X，

        Calbiochem，524624)；和1X磷酸酶抑制剂混合物II

        (贮液为100X，Calbiochem，524625)。

B.      10X测定缓冲液：500mM Hepes pH 7.5；1％PEG；1

        mM EDTA；1mM EGTA；和20mM β-甘油磷酸

        酯。

C.      IP激酶测定缓冲液：1X测定缓冲液；50mM KCl；

        150μM ATP；10mM MgCl2；5％甘油；1mM DTT；

        每50ml测定缓冲液1片蛋白酶抑制剂混合物；和

        0.1％BSA。

D.      GSK3β底物溶液：IP激酶测定缓冲液；和500nM

        生物素酰化GSK3β肽。

E.      Lance缓冲液：50mM Hepes pH 7.5；0.1％BSA；和

        0.1％Triton X-100。

F.      Lance终止缓冲液：Lance缓冲液；和33.3mM

        EDTA。

G.      Lance检测缓冲液：Lance缓冲液；13.3μg/ml SA-

        APC；和0.665nM EuK Ab a-磷酸(Ser-21)GSK3β。

多步骤免疫沉淀Akt激酶测定

第一天

A.接种C33a细胞步骤：板60,000 C33a细胞/孔，在96孔微量滴 定板。

B.在37℃培养细胞过夜。

第二天

D.化合物添加步骤：将在新鲜培养基(α-MEM/10％ FBS，室温)中的 化合物添加到上述的96孔板并在组织培养保温箱中培养5小时。

E.细胞裂解步骤：吸出培养基并添加100μl的IP激酶细胞裂解缓 冲液。

F.在-70℃冷冻96孔微量滴定板(注解：该步骤可进行至少1小时 或过夜。)

第三天

G.涂覆蛋白质A/G 96孔板步骤：向以下孔中添加在100μl PBS中 的适当浓度的α-Akt抗体(Akt1、Akt2或Akt3)：

α-Akt1(20ng/孔/100μl)  B2>>>>>>B10/行B-G/Akt1板

α-Akt2(50ng/孔/100μl)  B2>>>>>>B10/行B-G/Akt2板

兔-IgG(150ng/孔在每个板上的B11-G11(Akt1和Akt2) /100μl)：

H.在Micromix 5上在冷房间(+4℃)培养4小时(形式(Form)20；姿 态(Attitude)2)(注解：姿态根据Micromix 5机器而定)。

I.吸出α-Akt抗体溶液并向每个孔中添加100μl的PBS。

J.Akt免疫沉淀步骤：向得自步骤(I)的100μl的PBS中添加5μl解 冻的细胞裂解液用于Akt1板和添加10μl解冻的细胞裂解液用于Akt2 板。注解：在冰上解冻细胞裂解液。在转移到抗体板之前通过移液管上 下吸取10次混合解冻的裂解液。在冰上保存细胞裂解液。在将细胞裂 解液转移到抗体板之后在-70℃重新冷冻细胞裂解液的板。

K.在Micromix 5振荡器(形式20，姿态3)上在冷的房间(+4℃)培养 过夜。

第4天

L.免疫沉淀板洗涤步骤：使用96孔板洗涤器用TTBS(RCM 51， 1X＝2个循环)洗涤96孔板1X。用TTBS填充各孔并培养10分钟。用 TTBS洗涤96孔板2X。(注解：使用前准备好板洗涤器：1.检查缓冲液 容器，确保它们装满，和2.腾空废液容器。

M.手动板洗涤步骤：添加180μl的IP激酶测定缓冲液。

N.开始Akt酶反应：吸出上清液。添加60μl的GSK3β底物溶液。

O.在Micromix 5振荡器上在室温培养2.5小时。注解：应当调整 培养时间，使得柱10/柱11的比不大于10。

P.将30μl的Lance检测缓冲液与30μl的Lance终止缓冲液合并 (60μl总体积/孔)，并添加到Microfluor U形底96孔黑色板中。

Q.停止Akt酶反应：将得自步骤(O)的蛋白质A/G96孔板由来的 40μl的Akt酶反应混合物转移到得自步骤(P)的Microfluor U形底96孔 黑色板中。

U.在Micromix 5振荡器(形式20，姿态3)上在室温下培养1-2小 时，然后使用Akt程序用Discovery HTRF微板分析器读数。

IP激酶细胞裂解缓冲液

100μl/孔

  8ml      (1个板) 45ml     (6个板) 1X TBS                   吐温20                  1X蛋白酶抑制剂混合物III 1X蛋白酶抑制剂混合物I   1X蛋白酶抑制剂混合物II  微囊藻素LR(500X)                                7744μl 20μl   80μl          80μl          80μl   NA    NA    NA    450μl 450μl 450μl       90μl 

IP激酶测定缓冲液

100μl/孔

  8ml      (1个板) 50ml     (3个板) 10X测定缓冲液      1M KCl               250mM ATP           1M MgCl2             甘油               1M DTT              蛋白酶抑制剂混合物 10％ BSA           di dH2O              800μl    400μl    4.8μl    80μl     400μl    8μl      1片/50ml  80μl     6227.2μl 5ml    2.5ml  30μl  500μl 2.5ml  50μl  1     500μl 38.9ml

GSK3β底物溶液

60μl/孔

  5ml      (1个板) 7ml IP激酶测定缓冲液 1mM GSK3β肽      5ml    2.5μl -      3.5μl

Lance终止缓冲液

30μl/孔

  3ml      (1个板) 5ml 5ml 1X Lance缓冲液 EDTA 0.5M     2800.2μl 199.8μl 

Lance检测缓冲液

30μl/孔

  3ml      (1个板) 5ml SA-APC(1mg/ml在ddH2O        中，在Lance缓冲液中稀释   1/75.2)                   EuK Ab a-磷酸(Ser 21)GSK3β (680nM，在Lance缓冲液中   稀释1/1133)               40μl              2.7μl       66.7μl               4.5μl        

发明背景