复方抗疟组合物
阅读：206发布：2020-09-02
专利汇可以提供复方抗疟组合物专利检索，专利查询，专利分析的服务。并且本 发明 涉及一种复方抗疟组合物。具体而言，本发明涉及含有青蒿琥酯和常山乙素的复方抗疟组合物，特别涉及含有青蒿琥酯醇质体和常山乙素醇质体的复方抗疟醇质体组合物以及复方抗疟醇质体凝胶膏剂，及其制备方法和用途。所述复方抗疟醇质体凝胶膏剂由凝胶膏基质、青蒿琥酯醇质体、常山乙素醇质体、背衬和防粘层组成。本发明利用醇质体的载体促渗特性，提高了抗疟药物的经皮渗透性能、增强了药物的抗疟效果；另外，本发明醇质体凝胶膏剂的制备工艺简单，制备过程中无需高温加热，且避免了有害 有机 溶剂 的使用。，下面是复方抗疟组合物专利的具体信息内容。
1.一种复方抗疟组合物，其特征在于包含青蒿琥酯和常山乙素以及药学上可接受的载体。
2.根据权利要求1所述的复方抗疟组合物，其中所述青蒿琥酯的含量占组合物总重量的0.38-3.22％，所述常山乙素的含量占组合物总重量的0.01-1.67‰。
3.一种复方抗疟醇质体组合物，其特征在于，包含青蒿琥酯醇质体和常山乙素醇质体，以及药学上可接受的载体。
4.根据权利要求3所述的复方抗疟醇质体组合物，其中所述青蒿琥酯醇质体和/或常山乙素醇质体的粒径在20-300nm之间，优选20-30nm之间。
5.一种复方抗疟醇质体凝胶膏剂，其特征在于，含有背衬层、亲水凝胶层、防粘层；所述亲水凝胶层含有青蒿琥酯醇质体、常山乙素醇质体、和凝胶膏基质。
6.根据权利要求5所述的凝胶膏剂，其中，所述青蒿琥酯醇质体、常山乙素醇质体与凝胶膏基质之间的重量比为：(青蒿琥酯醇质体+常山乙素醇质体)：凝胶膏基质＝1:9-1:2；
其中，优选所述青蒿琥酯醇质体与常山乙素醇质体的重量比为：3:1-29:1。
7.根据权利要求3或4所述的醇质体组合物或根据权利要求5或6所述的凝胶膏剂，其中以所述青蒿琥酯醇质体总重量为100％计，所述青蒿琥酯醇质体组成为：5-10％的青蒿琥酯、10-20％的磷脂、3-10％的表面活性剂、30-50％的低分子醇、0.1-2％的胆固醇、
0.1-1％的抗氧剂、和30-50％的纯净水；其中，所述磷脂优选为大豆卵磷脂、蛋黄卵磷脂、氢化大豆卵磷脂、氢化蛋黄卵磷脂的一种；所述表面活性剂优选为吐温80、吐温60、吐温
20、司盘80、司盘60、聚氧乙烯氢化蓖麻油、熊去氧胆酸钠、泊洛沙姆188的一种或几种的混合物；所述低分子醇优选为乙醇、丙二醇、1,3-丁二醇的一种或几种的混合物；所述抗氧剂优选为维生素C、维生素E、2,6-二叔丁基-4-甲基苯酚、依地酸二钠的一种或几种的混合物。
8.根据权利要求3或4所述的醇质体组合物或根据权利要求5或6所述的凝胶膏剂，其中以所述常山乙素醇质体总重量为100％计，所述常山乙素醇质体组成为：0.3-2％的常山乙素、5-20％的磷脂、5-10％的表面活性剂、30-50％的低分子醇、0.1-2％的胆固醇、
0.05-1％的抗氧剂、和30-50％的纯净水；其中，所述磷脂优选为大豆卵磷脂、蛋黄卵磷脂、氢化大豆卵磷脂、氢化蛋黄卵磷脂的一种；所述表面活性剂优选为吐温80、吐温60、吐温
20、司盘80、司盘60、聚氧乙烯氢化蓖麻油、熊去氧胆酸钠、泊洛沙姆188的一种或几种的混合物；所述低分子醇优选为乙醇、丙二醇、1,3-丁二醇的一种或几种的混合物；所述抗氧剂优选为维生素C、维生素E、2,6-二叔丁基-4-甲基苯酚、依地酸二钠的一种或几种的混合物。
9.根据权利要求5～8任一项所述的凝胶膏剂，其中以凝胶膏基质的总重量为100％计，凝胶膏基质的组成为：2-20％的聚丙烯酸钠、5-20％的聚乙烯吡咯烷酮、2-10％的羧甲基纤维素钠、1-10％的聚乙烯醇、2-15％的卡波姆、5-15％的明胶、交联剂0.0-2％，交联调节剂0.0-1％，保湿剂10％-40％，防腐剂0.0-0.3％，纯水20-40％；其中，所述交联剂优选为明矾、氢氧化铝、甘羟铝、三氯化铝、氯化钙、氯化镁的一种或几种的混合物；所述交联调节剂优选为柠檬酸、酒石酸、琥珀酸、乳酸、乙二胺四乙酸二钠的一种或几种的混合物；所述保湿剂优选为甘油、丙二醇、山梨醇的一种或几种的混合物；所述防腐剂优选为羟苯乙酯、山梨酸钾、对羟基苯甲酸丙酯、苯甲醇的一种或几种的混合物。
10.根据权利要求5所述的凝胶膏剂，其中所述背衬为：无纺布、弹力布、法兰绒、复合铝箔中的一种；所述防粘层为：聚乙烯膜、防粘纸、聚丙烯膜中的一种。
11.一种根据权利要求5～10任一项所述的复方抗疟醇质体凝胶膏剂的制备方法，其包含以下步骤：
1)制备青蒿琥酯醇质体：
按处方量称取各辅料，先将青蒿琥酯和胆固醇用低分子醇溶解，并依次加入抗氧剂和表面活性剂，混合均匀后再加入磷脂，待磷脂完全溶解后将纯净水缓慢注入上述辅料的低分子醇溶液中，25-40℃下搅拌3-15分钟，搅拌速度800-1500转/分钟，将制备的醇质体通过微孔滤膜过滤，得到粒径均匀的青蒿琥酯醇质体；
2)制备常山乙素醇质体：
按处方量称取各辅料，先将常山乙素和胆固醇用低分子醇溶解，并依次加入抗氧剂和表面活性剂，混合均匀后再加入磷脂，待磷脂完全溶解后将纯净水缓慢注入上述辅料的低分子醇溶液中，25-35℃下搅拌3-15分钟，搅拌速度800-1500转/分钟，将制备的醇质体通过微孔滤膜过滤，得到粒径均匀的常山乙素醇质体；
3)制备醇质体凝胶膏：
按处方量称取各辅料，将卡波姆、PVP-K30分别加入适量甘油、水，放置20-120分钟使其充分溶胀；按处方量称取明胶、羧甲基纤维素钠、聚乙烯醇加水溶解并搅拌30-60分钟混合均匀；称取处方量聚丙烯酸钠加入适量甘油分散；称取羟苯乙酯、甘羟铝、柠檬酸加入适量水溶解；将各部分辅料按顺序混合均匀，50℃下搅拌40-120分钟，停止加热后待凝胶膏基质温度降至20-40℃，将处方量青蒿琥酯醇质体和常山乙素醇质体一并加入到凝胶膏基质中混合均匀，制得青蒿琥酯醇质体/常山乙素醇质体凝胶膏体；取5-15g上述含药醇质体凝胶膏体，经涂布、压膜、裁剪成常规凝胶膏剂规格，得到青蒿琥酯醇质体/常山乙素醇质体凝胶膏剂成品。
12.根据权利要求1～10任一项所述的复方抗疟组合物、复方抗疟醇质体组合物或复方抗疟醇质体凝胶膏剂在制备用于治疗疟疾的药物中的用途。
复方抗疟组合物
技术领域
[0001] 本发明属于药物制剂技术领域，具体涉及含有青蒿琥酯和常山乙素的复方抗疟组合物，特别涉及含有青蒿琥酯醇质体和常山乙素醇质体的复方抗疟醇质体组合物和复方抗疟醇质体凝胶膏剂，及其制备方法和用途。
背景技术
[0002] 疟疾是一种通过蚊虫叮咬进行传播的虫媒传染病。资料显示2010年全球约有[1]2.19亿人感染疟疾，死亡人数达到66万 。疟疾目前仍然是世界范围内，尤其是热带欠发达地区，威胁人类健康的重大疾病之一。上个世纪70年代，我国药学工作者从菊科植物黄花蒿(Artemisia annua L.)中分离得到了一种具有强大的疟原虫杀灭作用的倍半萜内酯[2]
类化合物——青蒿素 。随着研究的深入，人们在青蒿素的基础上又合成了一系列的青蒿素类衍射物，包括：青蒿琥酯、双氢青蒿素和蒿甲醚等。
类化合物——青蒿素 。随着研究的深入，人们在青蒿素的基础上又合成了一系列的青蒿素类衍射物，包括：青蒿琥酯、双氢青蒿素和蒿甲醚等。
[0003] 目前，青蒿素类抗疟药的常规剂型主要有片剂、注射剂、胶囊剂和栓剂等。然而，常规青蒿素类制剂在使用中出现药物体内代谢速度快、生物利用度低、首过效应明显等问题，[3,4]需要连续多次的给药来保持有效血药浓度 ，不但患者的顺应性低，而且影响了药物的抗疟效果。另外，经过多年的临床使用，单方青蒿素类药物出现了明显的疟原虫耐药现象，近年来随着耐药性问题愈加严峻，世界卫生组织(WHO)进一步提出了全面采用复方抗疟药同时禁止单方抗疟药的要求。结合世界上抗疟药物的发展趋势和WHO对复方抗疟药物的要求，构建新型复方抗疟制剂是非常必要的。
发明内容
[0004] 与黄花蒿相同，中药常山(Dichroa febrifuga Lour)在中国民间也用于疟疾的治[5]疗。《神农本草经》中记载“常山具有引吐、杀虫、抗疟疾、解热等功效” 。现代研究发现常[6]
山乙素(febrifugine)为中药常山抗疟的主要活性成分之一 ，药理研究表明常山乙素的[7]
抗疟作用是奎宁的50倍左右 。
山乙素(febrifugine)为中药常山抗疟的主要活性成分之一 ，药理研究表明常山乙素的[7]
抗疟作用是奎宁的50倍左右 。
[0005] 结合青蒿素类抗疟药面临的问题和WHO对复方抗疟药物的要求，本发明将青蒿琥酯与常山乙素配伍，并构建了复方抗疟组合物。
[0006] 因此，本发明的第一个目的是提供一种复方抗疟组合物，其特征在于包含青蒿琥酯和常山乙素以及药学上可接受的载体；其中所述青蒿琥酯的含量占组合物总重量的0.38-3.22％，所述常山乙素的含量占组合物总重量的0.01-1.67‰。
[0007] 本发明进一步涉及一种复方抗疟醇质体组合物，所述醇质体组合物包含青蒿琥酯醇质体和常山乙素醇质体，以及药学上可接受的载体。
[0008] 本发明的另一目的在于提供一种复方抗疟醇质体凝胶膏剂，其特征在于，含有背衬层、亲水凝胶层、防粘层；所述亲水凝胶层含有青蒿琥酯醇质体、常山乙素醇质体、和凝胶膏基质。所述青蒿琥酯醇质体、常山乙素醇质体与凝胶膏基质之间的重量比优选为：(青蒿琥酯醇质体+常山乙素醇质体)：凝胶膏基质＝1:9-2:3；并且，所述青蒿琥酯醇质体与常山乙素醇质体的重量比优选为：3:1-29:1。本发明的复方醇质体凝胶膏剂利用新型透皮载体-醇质体，来提高复方药物的透皮速率，增强复方药物经皮制剂的抗疟效果。
[0009] 本发明所述的青蒿琥酯醇质体以总重量为100％计，所述青蒿琥酯醇质体组成为：5-10％的青蒿琥酯、10-20％的磷脂、3-10％的表面活性剂、30-50％的低分子醇、0.1-2％的胆固醇、0.1-1％的抗氧剂、和30-50％的纯净水。
[0010] 本发明所述的常山乙素醇质体以总重量为100％计，所述常山乙素醇质体组成为：0.3-2％的常山乙素、5-20％的磷脂、5-10％的表面活性剂、30-50％的低分子醇、0.1-2％的胆固醇、0.05-1％的抗氧剂、和30-50％的纯净水。
[0011] 本发明所述的青蒿琥酯醇质体的粒径在20-300nm之间，优选20-30nm之间。
[0012] 本发明所述的常山乙素醇质体的粒径在20-300nm之间，优选20-30nm之间。
[0013] 本发明所述的凝胶膏基质以总重量为100％计，凝胶膏基质的组成为：2-20％的聚丙烯酸钠(粘性剂1)、5-20％的聚乙烯吡咯烷酮(粘性剂2)、2-10％的羧甲基纤维素钠(粘性剂3)、1-10％的聚乙烯醇(粘性剂4)、2-15％的卡波姆(粘性剂5)、5-15％的明胶(粘性剂6)、交联剂0.0-2％，交联调节剂0.0-1％，保湿剂10％-40％，防腐剂0.0-0.3％，纯水20-40％。
[0014] 本发明所述的磷脂包括但不限于大豆卵磷脂、蛋黄卵磷脂、氢化大豆卵磷脂、氢化蛋黄卵磷脂的一种或几种的混合物。
[0016] 本发明所述的低分子醇包括但不限于乙醇、丙二醇、1,3-丁二醇的一种或几种的混合物。
[0017] 本发明所述的抗氧剂包括但不限于维生素C、维生素E、2,6-二叔丁基-4-甲基苯酚、依地酸二钠的一种或几种的混合物。
[0020] 本发明所述的保湿剂包括但不限于甘油、丙二醇、山梨醇的一种或几种的混 合物。
[0023] 本发明进一步提供一种本发明所述复方抗疟醇质体凝胶膏剂的制备方法，其包含以下步骤：
[0024] 1)制备青蒿琥酯醇质体：
[0025] 按处方量称取各辅料，先将青蒿琥酯和胆固醇用低分子醇溶解，并依次加入抗氧剂和表面活性剂，混合均匀后再加入磷脂，待磷脂完全溶解后将纯净水缓慢注入上述低分子醇溶液中，于25-40℃下搅拌3-15分钟，搅拌速度800-1500转/分钟，将制备的醇质体通过微孔滤膜过滤，得到粒径均匀的青蒿琥酯醇质体；
[0026] 2)制备常山乙素醇质体：
[0027] 按处方量称取各辅料，先将常山乙素和胆固醇用低分子醇溶解，并依次加入抗氧剂和表面活性剂，混合均匀后再加入磷脂，待磷脂完全溶解后将纯净水缓慢注入上述低分子醇溶液中，于25-35℃下搅拌3-15分钟，搅拌速度800-1500转/分钟，将制备的醇质体通过微孔滤膜过滤，得到粒径均匀的常山乙素醇质体。
[0028] 3)制备醇质体凝胶膏：按处方量称取各辅料，将卡波姆、PVP-K30置于烧杯中分别加入适量甘油和水，放置20-120分钟使其充分溶胀，制得组分A；按处方量称取明胶、羧甲基纤维素钠、聚乙烯醇置于50-100ml烧杯中加入适量水溶解并搅拌30-60分钟混合均匀，制得组分B；称取处方量聚丙烯酸钠置于烧杯中并加入适量甘油分散，制得组分C；将羟苯乙酯、甘羟铝、柠檬酸置于10ml西林瓶中并加入适量水溶解，制得组分D；将A组分与B组分混合并搅拌均匀，随后加入D组分搅拌均匀，再加入C组分，50℃下搅拌40-120分钟，停止加热后待凝胶膏基质温度降至20-40℃，将处方量青蒿琥酯醇质体和常山乙素醇质体一并加入到凝胶膏基质中混合均匀，制得青蒿琥酯醇质体/常山乙素醇质体凝胶膏体；取5-15g上述含药醇质体凝胶膏体，经涂布、压膜、裁剪成常规凝胶膏剂规格(长10cm×宽6cm或长11cm×宽7cm或长12cm×宽8cm)，得到青蒿琥酯醇质体/常山乙素醇质体凝胶膏剂成品。
[0029] 本发明进一步提供本发明的复方抗疟组合物、复方抗疟醇质体组合物或本发明的复方抗疟醇质体凝胶膏剂在制备用于治疗疟疾的药物中的用途。
[0030] 本文所述的“药学上可接受的”是其有用于制备通常是安全、既无生物学上的毒性又无其它不需要的毒性的，并且对于兽医使用和人类药物使用是可接受的药物组合物。
[0031] 本文所述的“载体”是指与化合物一起施用的稀释剂、佐剂、或赋形剂。药学上可接受的载体可以是液体，例如水和油，包括石油、动物、植物或合成来源 的油，例如花生油、大豆油、矿物油、菜籽油等。药学上可接受的载体也可以是生理盐水、阿拉伯树胶、明胶、淀粉糊、滑石粉、角蛋白、硅胶、尿素等。另外，还可以使用辅助剂、稳定剂、增稠剂、润滑剂和着色剂等。
[0032] 本发明所述的复方抗疟醇质体凝胶膏剂是一种经皮给药系统。经皮给药系统或经皮吸收制剂指经皮肤贴敷方式用药，药物通过皮肤吸收进入全身血液循环并达到有效血药浓度，实现疾病治疗或预防的一类制剂。药物经皮给药具有避免肝脏及胃肠道首过效应，降[8]低药物毒副作用，药物缓释输送，减少给药次数，患者用药顺应性好等特点 。因此，常山乙素/青蒿琥酯复方经皮给药系统的构建，有助于稳定血药浓度，减少给药次数，提高抗疟效果，降低药物的毒性。
[0033] 在克服皮肤对药物的屏障作用方面，本发明采用新型药物经皮输送载体-醇质体。
[0034] 醇质体是一种含有高浓度醇，具有脂质双分子层的囊泡结构的新型柔性脂质体[9]，醇质体具有药物输送和经皮促渗方面的优势；与普通脂质体相比醇质体具有如下特点[10-13]
：①粒径小、粒径分布范围窄；②膜流动相强，变形性好，角质层通透能力强，可以经皮入血；③包封率高、稳定性好；④皮肤刺激性低，醇质体虽然含有较大量的醇，但其刺激性明显小于相同浓度的醇溶液；⑤醇质体的细胞内传递能力强。
：①粒径小、粒径分布范围窄；②膜流动相强，变形性好，角质层通透能力强，可以经皮入血；③包封率高、稳定性好；④皮肤刺激性低，醇质体虽然含有较大量的醇，但其刺激性明显小于相同浓度的醇溶液；⑤醇质体的细胞内传递能力强。
[0035] 凝胶膏剂又称巴布剂，是一种由高分子聚合物为主要基质材料组成的外用贴膏剂[14]。凝胶膏剂的主要优点包括：1)载药量高。对组成复杂的中药粉或提取物，载药量可达
20％以上；2)膏体含水量高，可达50％以上。高含水量是其贴敷舒适、无皮肤无刺激性和过敏性、以及水化皮肤角质层促进活性成分经皮通透的关键因素；3)如采用交联基质，可确保适宜的膏体强度(揭下时皮肤无残留、吸收汗液不发粘)，适用于南方高温、高湿的气候环境中使用。4)制备工艺可常温涂布-室温交联成型，制备过程中不须高温加热，有效避免活性成分及水分损失。
20％以上；2)膏体含水量高，可达50％以上。高含水量是其贴敷舒适、无皮肤无刺激性和过敏性、以及水化皮肤角质层促进活性成分经皮通透的关键因素；3)如采用交联基质，可确保适宜的膏体强度(揭下时皮肤无残留、吸收汗液不发粘)，适用于南方高温、高湿的气候环境中使用。4)制备工艺可常温涂布-室温交联成型，制备过程中不须高温加热，有效避免活性成分及水分损失。
[0036] 本发明的特点主要是：
[0037] (1)将青蒿琥酯/常山乙素制备成经皮给药制剂，可以达到药物缓释输送，稳定血药浓度，减少给药次数，降低药物毒性，增强复方药物抗疟效果和提高患者顺应性的目的。
[0038] (2)与普通凝胶膏剂相比，醇质体凝胶膏剂利用醇质体的载体促渗特性，明显提高了药物透皮速率，增强了药物的抗疟疗效。
[0039] (3)在醇质体处方中加入特定的表面活性剂，可以大幅减小醇质体的粒径，有助于提高载药醇质体的透皮速度。
[0040] (4)本发明的复方醇质体凝胶膏剂制备工艺简单，工艺中多采用传统的机械搅拌，加热温度低，能耗低，设备要求不高；辅料选择方面，本发明所用的辅料均为药物制剂中的常规辅料，在成本节约和用药安全性上都具有明显优势。附图说明
[0041] 图1显示凝胶膏剂8青蒿琥酯醇质体的粒径测试图。
[0042] 图2显示凝胶膏剂8常山乙素醇质体的粒径测试图。
[0043] 图3显示凝胶膏剂8青蒿琥酯醇质体的Zeta电位测试图。
[0044] 图4显示凝胶膏剂8常山乙素醇质体的Zeta电位测试图。
[0045] 图5显示青蒿琥酯醇质体/常山乙素醇质体凝胶膏剂8与普通青蒿琥酯/常山乙素凝胶膏剂中青蒿琥酯的Q-t透皮曲线对比图。
[0046] 图6显示青蒿琥酯醇质体/常山乙素醇质体凝胶膏剂8与普通青蒿琥酯/常山乙素凝胶膏剂中常山乙素的Q-t透皮曲线对比图。
[0047] 图7-A～L显示青蒿琥酯醇质体/常山乙素醇质体凝胶膏剂8与普通青蒿琥酯/常山乙素凝胶膏剂的经皮抗疟效果(各给药组停药5天后，具有代表性的小鼠血液涂片)；其中：
[0048] 图7-A显示复方凝胶膏剂组C-A的小鼠血液涂片；
[0049] 图7-B显示复方醇质体凝胶膏剂组X-A的小鼠血液涂片；
[0050] 图7-C显示复方凝胶膏剂组C-B的小鼠血液涂片；
[0051] 图7-D显示复方醇质体凝胶膏剂组X-B的小鼠血液涂片；
[0052] 图7-E显示复方凝胶膏剂组C-C的小鼠血液涂片；
[0053] 图7-F显示复方醇质体凝胶膏剂组X-C的小鼠血液涂片；
[0054] 图7-G显示复方凝胶膏剂组C-D的小鼠血液涂片；
[0055] 图7-H显示复方醇质体凝胶膏剂组X-D的小鼠血液涂片；
[0056] 图7-I显示复方凝胶膏剂组C-E的小鼠血液涂片；
[0057] 图7-J显示复方醇质体凝胶膏剂组X-E的小鼠血液涂片；
[0058] 图7-K显示空白对照组的小鼠血液涂片；
[0059] 图7-L显示空白醇质体凝胶膏剂组的小鼠血液涂片。
具体实施方式
[0060] 引用以下具体实施例和随附的附图详细说明本发明，但本领域技术人员应理解以下实施例仅是示例性的描述，其并不以任何形式限制本发明的范围。
[0061] 实施例1：本发明复方抗疟醇质体凝胶膏剂的制备
[0062]
[0063]
[0064]
[0065]
[0066] 青蒿琥酯醇质体/常山乙素醇质体凝胶膏剂的制备：
[0067] (1)青蒿琥酯醇质体的制备：
[0068] 设备及材料
[0069] 磁力搅拌器：C-MAG HS4型磁力搅拌器(德国IKA公司)；分析天平：BSA224S CW型电子分析天平(德国赛多利斯公司)；过滤器：一次性针筒式过滤器(Ф13，0.22μm，聚四氟乙烯)(天津市津腾实验设备有限公司)。
[0070] 称取各处方量的各组分，首先将青蒿琥酯和胆固醇加入到25ml具筛子三角瓶中，并向三角瓶中加入全部处方量低分子醇，采用磁力搅拌器搅拌(搅拌条件：25-40℃，200-800转/分钟)，待青蒿琥酯和胆固醇溶解后，向低分子醇溶液中加入抗氧剂，并于相同的搅拌条件下搅拌使抗氧剂完全分散(或溶解)；再向此低分子醇溶液中加入磷脂，搅拌使其完全溶解；待磷脂溶解后向低分子醇溶液中继续加入表面活性剂，并于上述相同的搅拌条件下，使表面活性剂完全分散(或溶解)；最后在搅拌温度不变的情况下，将搅拌速度加快至800-1500转/分钟，向该低分子醇溶液中缓慢注入纯水(注入速度：1.0-3.0ml/min)，待纯水全部加入后，保持上述搅拌条件继续搅拌3-15分钟，得到醇质体，将制备的醇质体经过一次性针筒式过滤器(Ф13，0.22μm，聚四氟乙烯)过滤，得到粒径均匀的青蒿琥酯醇质体。
[0071] (2)常山乙素醇质体的制备：
[0072] 设备及材料
[0073] 同(1)青蒿琥酯醇质体的制备。
[0074] 称取各处方量的各组分，首先将常山乙素和胆固醇加入到10ml具筛子西林瓶中，并向西林瓶中加入全部处方量低分子醇，采用磁力搅拌器搅拌(搅拌条件：25-35℃，200-800转/分钟)，待常山乙素和胆固醇溶解后，向低分子醇溶液中加入抗氧剂，并于相同的搅拌条件下搅拌使抗氧剂完全分散(或溶解)；再向此低分子醇溶液中加入磷脂，搅拌使其完全溶解；待磷脂溶解后向低分子醇溶液中继续加入表面活性剂，并于上述相同的搅拌条件下，使表面活性剂完全分散(或溶解)；最后在搅拌温度不变的情况下，将搅拌速度加快至800-1500转/分钟，向该低分子醇溶液中缓慢注入纯水(注入速度：1.0-3.0ml/min)，待纯水全部加入后，保持上述搅拌条件继续搅拌3-15分钟，得到醇质体，将制备的醇质体经过一次性针筒式过滤器(Ф13，0.22μm，聚四氟乙烯)过滤，得到粒径均匀的常山乙素醇质体。
[0075] (3)醇质体凝胶膏的制备：
[0076] 设备及材料
[0077] 搅拌器：Z92-BD多功能搅拌器(天津利华仪器厂)；分析天平：BSA224S CW型电子分析天平(德国赛多利斯公司)。
[0078] 制备方法：按处方量称取各辅料，将卡波姆、PVP-K30置于50-200ml烧杯中分别加入1-6g甘油、2-6ml水，放置20-120分钟使其充分溶胀，制得组分A；按处方量称取明胶、羧甲基纤维素钠、聚乙烯醇置于50-100ml烧杯中加2-5ml水溶 解并搅拌30-60分钟混合均匀，制得组分B；称取处方量聚丙烯酸钠置于25-50ml烧杯中并加入1-6g甘油分散，制得组分C；将羟苯乙酯、甘羟铝、柠檬酸置于10ml西林瓶中并加入2-6ml水溶解，制得组分D；将A组分与B组分混合并搅拌均匀，随后加入D组分搅拌均匀，再加入C组分，50℃下搅拌
40-120分钟，停止加热后待凝胶膏基质温度降至20-40℃，将处方量青蒿琥酯醇质体和常山乙素醇质体一并加入到凝胶膏基质中混合均匀，制得青蒿琥酯醇质体/常山乙素醇质体凝胶膏体；取5-15g上述含药醇质体凝胶膏体，经涂布、压膜、裁剪成常规凝胶膏剂规格(长
10cm×宽6cm或长11cm×宽7cm或长12cm×宽8cm)，得到青蒿琥酯醇质体/常山乙素醇质体凝胶膏剂成品。
40-120分钟，停止加热后待凝胶膏基质温度降至20-40℃，将处方量青蒿琥酯醇质体和常山乙素醇质体一并加入到凝胶膏基质中混合均匀，制得青蒿琥酯醇质体/常山乙素醇质体凝胶膏体；取5-15g上述含药醇质体凝胶膏体，经涂布、压膜、裁剪成常规凝胶膏剂规格(长
10cm×宽6cm或长11cm×宽7cm或长12cm×宽8cm)，得到青蒿琥酯醇质体/常山乙素醇质体凝胶膏剂成品。
[0079] 实施例2：青蒿琥酯醇质体和常山乙素醇质体的表征
[0080] (1)青蒿琥酯醇质体和常山乙素醇质体粒径的测试
[0081] 测试设备
[0083] 测试对象
[0084] 实施例1中，用于制备凝胶膏剂8的青蒿琥酯醇质体和常山乙素醇质体。
[0085] 测试方法
[0086] 分别将1ml青蒿琥酯醇质体和常山乙素醇质体原液加入到DTS0012样品池，并将样品池放置于Zetasizer Nano ZS纳米粒度仪内测试二者的粒径。
[0087] 测试结果
[0088] 实施例1中，用于制备凝胶膏剂8的青蒿琥酯醇质体和常山乙素醇质体的粒径分别为：26.48±0.12nm和28.58±0.24nm(见图1和图2)。
[0089] 采用上述相同的方法，测试了其它凝胶膏剂1～7和9～10的青蒿琥酯醇质体和常山乙素醇质体的粒径，其结果均在20～30nm的范围内。
[0090] (2)青蒿琥酯醇质体和常山乙素醇质体Zeta电位的测试
[0091] 测试设备
[0092] Zetasizer Nano ZS纳米粒度仪(英国马尔文公司)；DTS1060样品池。
[0093] 测试对象
[0094] 实施例1中，用于制备凝胶膏剂8的青蒿琥酯醇质体和常山乙素醇质体。
[0095] 测试方法
[0096] 取待测青蒿琥酯醇质体和常山乙素醇质体原液各0.2ml，用纯水将二者稀释适当倍数，稀释液分别加入到DTS1060样品池内，将样品池放置于Zetasizer Nano ZS纳米粒度仪内测试二者的Zeta电位。
[0097] 测试结果
[0098] 实施例1中，用于制备凝胶膏剂8的青蒿琥酯醇质体和常山乙素醇质体的Zeta电位分别为：-28.0±1.6mv和-28.8±1.68mv(见图3和图4)。
[0099] 采用上述相同的方法，测试了其它凝胶膏剂1～7和9～10的青蒿琥酯醇质体和常山乙素醇质体的Zeta电位，其结果均在-25～-35mv的范围内。
[0100] 实施例3：本发明复方抗疟醇质体凝胶膏剂的透皮性能研究
[0101] 相同载药量下，青蒿琥酯醇质体/常山乙素醇质体凝胶膏剂与青蒿琥酯/常山乙素凝胶膏剂的药物透皮性能对比研究。
[0102] 样品的制备
[0103] (1)青蒿琥酯/常山乙素凝胶膏剂的制备
[0104] 按照实施例1中凝胶膏剂8的凝胶膏剂基质制备方法制备凝胶膏基质；按照凝胶膏剂8中青蒿琥酯醇质体处方和常山乙素醇质体处方称取各辅料及药物，但不进行醇质体的制备过程，仅将各辅料(包括药物)与凝胶膏基质混合，从而制得普通青蒿琥酯/常山乙素凝胶膏剂。
[0105] (2)青蒿琥酯醇质体/常山乙素醇质体凝胶膏剂的制备
[0106] 按照实施例1中凝胶膏剂8的处方和制备方法制备青蒿琥酯醇质体/常山乙素醇质体凝胶膏剂。
[0107] 设备及材料
[0108] 高效液相色谱仪(2487型双波长紫外检测器，1515型高压输液泵，717型自动进样器，美国Waters公司)；色谱柱Diamonsil C18(2)(4.6mmX250mm,5μm)(北京迪马科TM技有限公司)；Fisher色谱纯乙腈(赛默飞世尔科技公司)；脱毛膏Nair Lotion with Aloe&Lanolin(CHURCH&DWIGHT CO.,INC)；一次性针筒式过滤器(Ф13，0.22μm，聚四氟乙烯)(天津市津腾实验设备有限公司)。
[0109] 动物皮肤的处理
[0110] 雄性昆明种小白鼠(20-25g)(购自北京军事医学科学院实验动物中心，动物许可证号：SCXK-(军)-2012-004)，小鼠断颈处死后，用脱毛膏脱毛，剥离腹部皮肤，去除脂肪层，生理盐水冲洗后备用。
[0111] 体外透皮研究
[0112] 试验采用垂式Franz扩散池(体积：18.0ml，扩散面积：2.92cm2)；温度：2
32.5±0.5℃；转速：350转/分钟；将(面积：2.92cm，含青蒿琥酯3mg，常山乙素0.02mg)复方醇质体凝胶膏剂或复方凝胶膏剂紧密贴于小鼠皮肤角质层一侧，固定于装置上，在接收室中注满接收液(30％乙醇-70％水)。分别于1、2、4、8、12、24小时，将接收室中的接收液全部倒出(补加同体积新鲜接收液)，样品经一次性针筒式过滤器过滤，进高效液相色谱仪，按照相应的液相条件(其中测定青蒿琥酯的液相条件为：流动相：乙腈-0.1％磷酸(42:68)，流速1.0ml/min，柱温30℃，检测波长210nm；测定常山乙素的液相条件为：流动相：乙腈-0.1％磷酸(9:91)，流速1.0ml/min，柱温30℃，检测波长225nm)，分别测定各接收液中样品中青蒿琥酯和常山乙素的含量。
32.5±0.5℃；转速：350转/分钟；将(面积：2.92cm，含青蒿琥酯3mg，常山乙素0.02mg)复方醇质体凝胶膏剂或复方凝胶膏剂紧密贴于小鼠皮肤角质层一侧，固定于装置上，在接收室中注满接收液(30％乙醇-70％水)。分别于1、2、4、8、12、24小时，将接收室中的接收液全部倒出(补加同体积新鲜接收液)，样品经一次性针筒式过滤器过滤，进高效液相色谱仪，按照相应的液相条件(其中测定青蒿琥酯的液相条件为：流动相：乙腈-0.1％磷酸(42:68)，流速1.0ml/min，柱温30℃，检测波长210nm；测定常山乙素的液相条件为：流动相：乙腈-0.1％磷酸(9:91)，流速1.0ml/min，柱温30℃，检测波长225nm)，分别测定各接收液中样品中青蒿琥酯和常山乙素的含量。
[0113] 分别以青蒿琥酯和常山乙素的单位面积的累积透皮量Q对时间t1/2作图，结果如1/2
图5和6所示；以单位面积的累积透皮量Q对t 进行方程拟合，其结果见表3；24小时药物的累计透皮率见表4。
图5和6所示；以单位面积的累积透皮量Q对t 进行方程拟合，其结果见表3；24小时药物的累计透皮率见表4。
[0114] 表3：复方凝胶膏剂与本发明的复方醇质体凝胶膏剂的透皮零级方程拟合结果[0115]
[0116] 表4：复方凝胶膏剂与本发明的复方醇质体凝胶膏剂24小时累计透过率[0117]
[0118] 结果：
[0119] 如图5、图6和表3、表4所示，本发明的青蒿琥酯醇质体/常山乙素醇质体凝胶膏剂与普通青蒿琥酯/常山乙素凝胶膏剂相比，药物具有更快的透皮速率，单位时间内醇质体凝胶膏剂的药物透皮量有明显提高。
[0120] 另外，采用上述方法测试了其它凝胶膏剂1～7和9～10的透皮性能，其结果显示单位时间内均较相应的普通凝胶膏剂的药物透皮量有明显的提高。
[0121] 实施例4：本发明复方抗疟醇质体凝胶膏剂的药效学研究
[0122] 青蒿琥酯醇质体/常山乙素醇质体凝胶膏剂与普通青蒿琥酯/常山乙素凝胶膏剂的经皮抗疟活性和抗复燃情况对比(青蒿琥酯和常山乙素纯度>98％)。
[0123] 样品的制备
[0124] (1)复方凝胶膏剂的制备
[0125] 根据各给药剂量组的剂量要求，按照实施例1中凝胶膏剂8的凝胶膏剂基质制备方法制备凝胶膏基质，并按照凝胶膏剂8中青蒿琥酯醇质体处方和常山乙素醇质体处方称取各辅料(青蒿琥酯和常山乙素的用量根据不同给药剂量组的用量称取)，但不进行醇质体的制备过程，仅将各辅料(包括药物)与凝胶膏基质混合，从而制得复方凝胶膏剂。
[0126] (2)复方醇质体凝胶膏剂的制备
[0127] 根据各给药剂量组的剂量要求，按照实施例1中凝胶膏剂8的凝胶膏剂基质制备方法制备凝胶膏基质；按照凝胶膏剂8中青蒿琥酯醇质体处方和常山乙素醇质体处方称取各辅料(青蒿琥酯和常山乙素的用量根据不同给药剂量组的用量称取)，并按照本发明青蒿琥酯醇质体和常山乙素醇质体制备方法制备醇质体；最后 按照醇质体凝胶膏剂的制备方法制备复方醇质体凝胶膏剂。
[0128] (3)空白醇质体凝胶膏剂
[0129] 按照实施例1中凝胶膏剂8的凝胶膏剂基质制备方法制备凝胶膏基质；按照凝胶膏剂8中青蒿琥酯醇质体处方和常山乙素醇质体处方仅称取各辅料，而不称取相应的药物，按照实施例1中青蒿琥酯醇质体和常山乙素醇质体的制备方法，分别制备两种空白醇质体，并将两种空白醇质体与凝胶膏基质混合，从而制得空白凝胶膏剂。
[0130] 试验方法：
[0131] 设备及动物
[0132] 显微镜：OLYMPUS-BX51。
[0133] 试验动物：120只雄性昆明种小白鼠(18-22g)(购自北京维通利华实验动物技术有限公司，许可证编号：SCXK(京)2012－0001)；动物周龄：选用7周龄动物，适应性饲养1天后开始给予受试物；动物要求：无特殊病原菌。
[0135] 组别：复方凝胶膏剂组，复方醇质体凝胶膏剂组，空白醇质体凝胶膏剂组，空白对照组(即小鼠接种疟原虫后不进行任何处理的组别)。
[0136] 按照化学药品技术指导原则进行药效学试验。每只小鼠腹腔内定量接种含有1000万个感染鼠疟原虫的红细胞，接种量0.2ml。接种当日，120只小鼠按空白对照组、空白醇质体凝胶膏剂组、复方凝胶膏剂组和本发明的复方醇质体凝胶膏剂组，将小鼠随机分为12组(动物分组和给药剂量见表5)，每组10只，按照组别每天透皮给药一次，连续给药4天，给2
药面积约为2×3cm，停药后第5天尾部取血、涂片、吉姆萨染色法染色、显微镜下观察每个剂量组疟原虫转阴率以及复燃情况。抗复燃实验涂片时间1个月。试验结果见表6和图7。
药面积约为2×3cm，停药后第5天尾部取血、涂片、吉姆萨染色法染色、显微镜下观察每个剂量组疟原虫转阴率以及复燃情况。抗复燃实验涂片时间1个月。试验结果见表6和图7。
[0137] 表5：药效学试验动物分组和给药剂量情况
[0138]
[0139]
[0140] 表6：青蒿琥酯/常山乙素醇质体凝胶膏与普通青蒿琥酯/常山乙素凝胶膏剂的经皮抗疟结果(n＝10)
[0141]
[0142] 结果：
[0143] 如表6和图7所示，青蒿琥酯/常山乙素醇质体凝胶膏剂与青蒿琥酯/常山乙素凝胶膏剂相比，抗疟效果得到了增强。
[0144] 本发明采用醇质体传递技术，并且综合利用复方抗疟和经皮抗疟的优势，构建出高效抗疟的复方醇质体抗疟凝胶膏剂。在药效对比研究中，复方抗疟凝胶膏剂可以使疟原虫感染动物快速转阴，且停药后只有复方凝胶膏剂组中的较低给药剂量组少量动物发生复燃(见表4)；将复方药物分别采用醇质体技术进行包合，再制成醇质体凝胶膏剂，可以将复燃率进一步降低，甚至达到停药后零复燃的治疗效果(见表4)。制剂学评价显示：复方凝胶膏剂和醇质体凝胶膏剂的体外释放和透皮动力学参数特征与上述药效学结果相一致，即：抗疟药物醇质体凝胶膏剂与凝胶膏剂相比，具有更快的透皮速率，具体结果见表1-2、4和图3、4。通过试验可知，复方抗疟凝胶膏剂对疟疾模型鼠的抗疟治疗效果显著，复燃率低，毒副作用小。
[0145] 上述研究验证了复方抗疟醇质体凝胶膏剂的抗疟高效性，显示了醇质体技术在提高药物抗疟效果中的突出作用；同时，在醇质体技术的支持之下，使经皮制剂在抗疟应用中的前景更为广阔。
[0146] 参考文献：
[0147] [1]王 英 新,杨 恒 林. 疟 疾 化 学 治 疗 的 研 究 现 状 [J].医 学 综述,2013,19(22):4151-4153.
[0148] [2]卢义钦.青蒿素的发现与研究进展[J].生命科学研究，2012,16(3):260-265.[0149] [3]李超.青蒿素类抗疟药动物体内药动学及体外代谢研究[D].山西医科大学,导师：张淑秋，2011.
[0150] [4]陈芝喜，林炳流，李国桥，李志强，陈津岩.青蒿琥酯片剂在狗体内的药代动力学研究[J].放射免疫学杂志，1996,9(2):77-79.
[0151] [5]李燕，刘明川，金林红，胡德禹，杨松.常山化学成分及生物活性研究进展[J].广州化工，2011,39(9):7-9.
[0152] [6]Chou,T.Q.,Fu,F.Y.,Kao,Y.S.Antimalarial constituents ofChinese drug,ch'ang shan,Dichroa febrifuga Lour.[J].J.Amer.Chem.
Soc.,1948,70(5):1765-1767.
Soc.,1948,70(5):1765-1767.
[0153] [7]张昌邵，黄琪章，常山碱的药理[J].生理学报，1956，20(1):30-36.[0154] [8]华晓东，仁变文.经皮给药系统的研究进展[J].现代药物与临床，2009,24(5):282-285.
[0156] [10]安珂瑶，孙勇.醇质体的研究进展[J].中国药房，2011,22(5):463-465.[0157] [11]祝伟伟，翟光喜，赵军.醇质体的研究进展[J].食品与药 品，2007,9(1):46-49.
[0158] [12]Godin B,Touitou E.Mechanism of bacitracin permeation enhancement through the skin and cellular membranes from an ethosomal carrier[J].Journal of Controlled Release,2004,94(2-3):365-379.
[0159] [13]Touitou E.,Godin B.Dermal drug delivery with ethosomes:therapeutic potential[J].Therapy,2007,4(4):465-472.
[0160] [14]日本公定书协会.第十二改正日本药局方解说书[M].东京:广川书店,1991.A136-141。
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