本发明涉及使用法尼基转移酶(FTase)抑制剂与羟甲基glutaryl 辅酶A(HMG CoA)还原酶抑制剂结合治疗哺乳动物中的癌症。

致癌基因是一种基因，它在活化时，按照信号转导变异途径编码 蛋白组分导致对细胞生长和有丝分裂的异常刺激。致癌基因在培养细 胞中的表达导致细胞转化，其特征在于细胞能在软琼脂中的生长且细 胞生长因缺乏非转化细胞中显示的接触抑制而密集地聚集。

一些致癌基因的突变和/或过度表达经常与人类的癌症和其它涉 及异常(即，非调控)细胞生长的病症有关。例如，活化的Ras致癌基因 的表达或其它经过致癌突变的基因对Ras蛋白的活化可引起良性和恶 性肿瘤的生长。发生在其它增殖性疾病中良性和恶性细胞的异常细胞 生长可由异常的Ras活化引起。Ras的变异致癌基因型在很多人类癌 症中都可见到，特别是在结肠癌和胰腺癌中特别显著，多于50％(Kohl 等.，Science，Vol.260，1834-1837，1993)。Ras致癌基因在约40 ％的固体恶性肿瘤中表达，其对常规的化疗是反应迟钝的。K-Ras同 种型在约90％的胰腺癌和约40％的结肠癌和肺癌中表达。H-Ras同种 型在约40％的头部和颈部癌中表达。N-Ras同种型在大多数甲状腺癌 和约25％的急性骨髓性白血病中表达。为了获得正常细胞向癌细胞或 显示异常生长的良性细胞转化的能力，如下所述，Ras致癌蛋白的前 体必须进行位于羧基末端四肽的半胱氨酸残基的法尼化基 (farnesylation)。因此催化此修饰的酶，即法尼基转移酶的抑制剂 可用作由Ras导致的转化形成的肿瘤的抗肿瘤剂。

K-Ras同种型在完整细胞中既可被法尼基化又可被香叶基-香叶 基化。法尼基酶(FTase)的有效抑制剂对于FTase具有高度选择性， 相反，香叶基香叶基转移酶I(GGTaseI)不能阻断突变K-Fas的异戊二 烯化，因此对于K-Ras表达的肿瘤细胞生长抑制是无效的。

本发明的发明者发现使用低剂量的HMG CoA还原酶抑制剂和有效 的选择性FTase抑制剂结合给药可阻断K-Ras异戊二烯化和K-Ras功 能，也可阻断H-Ras异戊二烯化及其功能。蛋白异戊二烯转移酶FTase 和GGTase I的活性分别依赖于类异戊二烯底物，法尼基和香叶基香 叶基焦磷酸(geranylgeranyl-pyrophosphates)的浓度。甲羟戊酸是 类异戊二烯途径中的第一个定型中间物，且其合成依赖于HMG CoA还 原酶的活性。化合物如洛伐他汀和康巴新(compactin)，它们是HMG CoA还原酶的紧密结合抑制剂，可阻断甲羟戊酸的形成并因此阻断类 异戊二烯途径。因此，它们可抑制FTase和GGTase I。

上述两类药物(FTase抑制剂和HMG CoA还原酶抑制剂)中化合物 的治疗效果可认为是有协同作用的。本发明发现使用FTase抑制剂和 HMG CoA还原酶抑制剂结合给药可克服使用它们分别给药的缺陷。预 期它们的结合给药对于单独给药无效的情况是有效的。

日本专利申请JP7316076A，公开于1995年12月5日，涉及一种 抗癌药物组合物，其含有柠檬烯，它虽然不是FTase抑制剂，但是显 示可减少包括起源于甲羟戊酸的异戊二烯化合物向Ras和Ras相关蛋 白的转化，而普伐他汀是一种HMG CoA还原酶抑制剂。

本发明涉及用于治疗包括人在内的哺乳动物中癌症或良性增殖性 疾病的药物组合物，包括FTase抑制剂，HMG CoA还原酶抑制剂和药 学上可接受的载体，其中活性组分在该组合物(即，FTase抑制剂和HMG CoA还原酶抑制剂)中的存在量应使组合物在治疗癌症或良性增殖性 疾病中是有效的。

本发明还涉及治疗包括人在内的哺乳动物中癌症或良性增殖性疾 病的方法，包括对所述哺乳动物使用含有FTase抑制剂，HMG CoA还 原酶抑制剂和药学上可接受的载体的抗癌或抗增殖有效量的药物组合 物给药。

本发明还涉及治疗包括人在内的哺乳动物中癌症或良性增殖性疾 病的方法，包括对所述哺乳动物使用FTase抑制剂和HMG CoA还原酶 抑制剂以这两种活性试剂混合对于治疗癌症或良性增殖性疾病有效的 量给药。

本发明还涉及用于抑制包括人在内的哺乳动物中异常细胞生长的 药物组合物，包括FTase抑制剂，HMG CoA还原酶抑制剂和药学上可 接受的载体，其中活性组分在该组合物(即，FTase抑制剂和HMG CoA 还原酶抑制剂)中的存在量应使组合物在抑制异常细胞生长中是有效 的。

本发明还涉及抑制包括人在内的哺乳动物中异常细胞生长的方 法，包括对所述哺乳动物使用FTase抑制剂和HMG CoA还原酶抑制剂 以这两种活性组分混合对于抑制异常细胞生长有效的量给药。

这里使用的术语“治疗”，是指预防，延迟或抑制疾病的进展。

这里使用的术语“异常细胞生长”，是指细胞生长不按照正常规 则机理(例如，缺乏接触抑制)。这包括异常生长：(1)肿瘤细胞(肿瘤) 表达活化的Ras致癌基因；(2)在其它基因中致癌突变的结果导致肿瘤 细胞中Ras蛋白被活化；和(3)其它增殖性疾病中良性和恶性细胞发生 了异常Ras活化。

这类良性增殖性疾病的例子包括牛皮癣，良性前列腺肥大和再狭 窄。

可按照本发明方法使用FTase抑制剂和HMG CoA还原酶抑制剂结 合治疗或使用本发明的药物组合物治疗的患者包括，例如被诊断患有 肺癌，骨癌，胰腺癌，皮肤癌，头部和颈部癌症，皮肤上或眼内黑瘤， 子宫癌，卵巢癌，直肠癌，肛门区癌症，胃癌，结肠癌，乳房癌，妇 科肿瘤(例如，子宫肉瘤，输卵管癌，子宫内膜癌，宫颈癌，阴道癌 或外阴癌)，禾杰金氏病，食道癌，小肠癌，内分泌系统癌(例如， 甲状腺癌，甲状旁腺癌或肾上腺癌)，软组织肉瘤，尿道癌，阴茎癌， 前列腺癌，慢性或急性白血病，儿童期实体瘤(solid tumor)，淋巴 细胞淋巴瘤，膀胱癌，肾癌或输尿管癌(例如，肾脏细胞癌，肾盂癌)， 或中枢神经系统瘤(例如，原发CNS淋巴瘤，脊椎轴肿瘤，脑干神经 胶质瘤或脑垂体腺瘤)。

可按照本发明方法使用FTase抑制剂和HMG CoA还原酶抑制剂结 合治疗或使用本发明的药物组合物治疗的患者还包括患如上定义的异 常细胞生长的患者。

本发明涉及上述药物组合物和治疗方法的更具体情况是，其中 FTase选自： (a)下式化合物

其中R1和R2分别选自-(CH2)p(5-10员杂环)，-(CH2)p(C6-C10芳 基)，烯丙基，炔丙基和C1-C6烷基，其中p是0-3，所述烷基和所 述R1和R2基团的烷基部分可被1-3个R9取代基任意取代，且所述R1 和R2基团的芳基和杂环基部分可被1-3个分别选自卤素和R9的取代 基取代；

R3是-(CH2)m(1-或2-金刚烷基)，-(CH2)m(C3-C10环烷基)，- (CH2)m(C6-C10芳基)，C1-C10烷基， 或

其中m是0-6，且所述环烷基和烷基可选择性含有1或2个双键 或三键；

X1，X2和X3分别是选择性含有1或2个双键或三键的C1-C7不饱 和烷基，X4是一个键或选择性含有1或2个双键或三键的C1-C7不饱 和烷基，且在通式(B)中，X4部分可连接在X1部分上任何可能的碳原子 上；

R4是C6-C10芳基，5-10员杂环基或C1-C6烷基，其中所述每个 R4基团可被1-3个R5取代基选择性取代；

每个R5分别选自卤素，硝基，氰基，苯基，-C(O)OR6，-SO2NR6R7， -NR6R8，-C(O)R6，-OR6，-C(O)NR6R8，-OC(O)NR6R8，-NR8C(O)NR8R6， -NR8C(O)R6，-NR8C(O)O(C1-C4烷基)，-C(NR8)NR8R6，-C(NCN)NR8R6， -C(NCN)S(C1-C4烷基)，-NR8C(NCN)S(C1-C4烷基)，-NR8C(NCN)NR8R6， -NR8SO2(C1-C4烷基)，-S(O)n(C1-C4烷基)其中n是0-2， -NR8C(O)C(O)NR8R6，-NR6C(O)C(O)R8，噻唑基，咪唑基，噁唑基，吡唑 基，三唑基，四唑基，和选择性被1-3个氟取代基取代的C1-C4烷基；

每个R6和R7分别是氢或C1-C4烷基；

每个R8分别是R6或-OR6；且

每个R9分别选自氰基，R6，-OR6，-OC(O)R6，-C(O)OR6，-C(O)NR6R7， -NR6R7，-NR6R8，-SO2NR6R7，和被羟基取代的C1-C4烷基；和

(b)下式化合物，及其药用盐 或

其中R1是氢，卤素(例如，氯，氟，溴或碘)，氰基，羟基，硝 基，三氟甲基，-NHR5，-NR5R5，R5，-OR5或-S(O)m-R5；

R2是-(CH2)n-Y或-OCOR5；

R3是4-，3-，或2-吡啶基，嘧啶基，吡嗪基，2-氟-4-吡啶 基或3-氟-4-吡啶基；

R4是1-金刚烷基或2-金刚烷基；

Y是氢，羟基，氨基，氰基，-NHR5，-NR5R5，-NHCOR5，-NHCOR5， -NHCO2R5，卤素，OR5，-S(O)mR5，-CO2H，-CO2R5，-CO2R5，-CONR5R5， -CONHR5，-CONH2，-COR5，-CH＝CHCO2R5，-OCOR5，苯基，被W取代的 苯基，-C≡CCO2R5，-CH＝CHR5或-C≡CR5；

每个R5分别是(C1-C4)直链或支链烷基，苯基或苄基，其中所述苯 基和所述苄基的苯基部分可被卤素，羟基，硝基，氰基，氨基，(C1- C4)直链或支链烷基，(C1-C4)直链或支链烷氧基，，苯基，苄基，(C1-C4) 烷基氨基，二[(C1-C4)烷基]氨基，或-S(O)m-(C1-C4)直链或支链烷基 选择性取代；

每个W分别是卤素，R5，羟基，-OR5，硝基，氨基，-NHR5，-NR5R5， 氰基或-S(O)m-R5；

m是0，1或2；

n是1-7；

p是0或1；

E1和E2分别选自氢，卤素，(C1-C3)烷基，羟基，(C1-C3)烷氧基， 硝基，三氟甲基，氰基，氨基，(C1-C3)烷基氨基和二[(C1-C3)烷基]氨 基；

Het’和Het”分别选自含有1-4个氮原子的6员杂环，其可任意 被选自(C1-C3)烷基，卤素，羟基，(C1-C3)烷氧基，氨基，(C1-C3)烷基 氨基和二[(C1-C3)烷基]氨基的取代基任意取代；和 (c)下式化合物

其中虚线代表任意的双键；

当它是通过双键连接到A环时，Z是氧或硫，且当Z通过单键连 接到A环时，Z是羟基，(C1-C10)烷基-S-，(C1-C10)烷基-SO-，(C1-C10) 烷基-SO2-，金刚烷-2-基-S-，萘基-S-，苄基-S-，苯基-C(＝O)CH2- S-，(C1-C6)烷基-O-C(＝O)-CH2-S-或(H，H)(即，Z代表两个氢原子， 每个都通过单键与A环连接)，且其中所述萘基和苯基以及所述苄基的 苯基部分可被1-3个分别选自任意被1-3个选自氟原子的取代基取 代的(C1-C6)烷基，任意被1-3个选自氟原子的取代基取代的(C1-C6) 烷氧基，卤素(例如，氯，氟，溴或碘)，氨基，(C1-C6)烷基氨基，[二 -(C1-C6)烷基]氨基，氰基，硝基，(C1-C6)烷基-SOn-，其中n是0，1 或2，-COOH，-COO(C1-C6)烷基和-C(O)NH(C1-C6)烷基的取代基任意取 代；

X是NR1或CHR1；

当A环是饱和环时(即当A环不含双键时)R1是氢，(C1-C6)烷基或 (C1-C6)烷基苯基，且当A环含有双键时R1不存在；

R2选自萘基，苯基，(C1-C6)烷基苯基，1-金刚烷基，2-金刚烷基， (C1-C8)直链或支链烷基，(C3-C10)环烷基和(C8-C30)双环或三环烷基； 其中所述(C3-C10)环烷基和所述(C8-C30)双环或三环烷基可任意被羟基 取代；且其中所述金刚烷基可被1-3个分别选自(C1-C6)烷基，卤素 和羟基的取代基任意取代；和

R3和R4分别选自苄基，其中所述苄基的苯基部分可被氨基或硝基 任意取代；氢，苯基，(N≡C)-(C1-C6)烷基，(C1-C6)烷基-O-C(＝O)-(C1-C6) 烷基和Het-CH2，其中Het选自2-，3-，或4-吡啶基，呋喃基，四氢 呋喃基，嘧啶基，吡嗪基，吡唑基，异恶唑基，噻吩基和三唑基；

条件是(a)在任何一个化合物中存在的两个虚线中不多于一个代 表双键，(b)当Z是(H，H)时，X是CH2，(c)当Z是氧或(H，H)且X是 CHR1，时，R1必须是H，(d)当Z是硫且X是NR1，R1必须是氢，和(e)R3 和R4之一必须是Het-CH2，且 (d)下式化合物 及其药学用盐。

涉及任何上述药物组合物和治疗方法的本发明的其他具体方案 是，其中FTase抑制剂选自其中R1和R2都是-(CH2)p(5-10员杂环)， 其中p是1或2的上述定义的通式I化合物。

涉及任何上述药物组合物和治疗方法的本发明的其他具体方案 是，其中FTase抑制剂选自其中R3是-(CH2)m(蒎烷)，其中m是0，1 或2，更优选其中R3是蒎烷甲基的上述定义的通式I化合物。

涉及任何上述药物组合物和治疗方法的本发明的其他具体方案 是，其中FTase抑制剂选自其中R3是 或 其中X1，X2，X3和X4定义如上的通式I化合物。

涉及任何上述药物组合物和治疗方法的本发明的其他具体方案 是，其中FTase抑制剂选自其中R4是被1-3个R5取代基任意取代的 苯基的的上述定义的通式I化合物。

涉及任何上述药物组合物和治疗方法的本发明的其他具体方案 是，其中Ftase抑制剂选自下列化合物：

2-[2-(4-溴苯基)-2-氧-亚乙基]-5，5-双吡啶-4-基甲基-3- (2，6，6，-三甲基-双环[3.1.1]庚-3-基甲基)-咪唑烷-4-酮；

4-{[5-氧-4，4-双吡啶-4-基甲基-1-(2，6，6-三甲基-双环 [3.1.1]庚-3-基甲基)-咪唑烷-2-亚基]-乙酰基}-苯甲腈；

2-[2-(4-氯苯基)-2-氧-亚乙基]-5，5-双吡啶-4-基甲基-3- (2，6，6，-三甲基-双环[3.1.1]庚-3-基甲基)-咪唑烷-4-酮；

2-[2-(3，4-二氯苯基)-2-氧-亚乙基]-5，5-双吡啶-4-基甲基-3- (2，6，6，-三甲基-双环[3.1.1]庚-3-基甲基)-咪唑烷-4-酮；

2-[2-(3-硝基苯基)-2-氧-亚乙基]-5，5-双吡啶-4-基甲基-3- (2，6，6，-三甲基-双环[3.1.1]庚-3-基甲基)-咪唑烷-4-酮；

2-[2-(4-甲氧苯基)-2-氧-亚乙基]-5，5-双吡啶-4-基甲基-3- (2，6，6，-三甲基-双环[3.1.1]庚-3-基甲基)-咪唑烷-4-酮；

2-[2-(3-甲氧苯基)-2-氧-亚乙基]-5，5-双吡啶-4-基甲基-3- (2，6，6，-三甲基-双环[3.1.1]庚-3-基甲基)-咪唑烷-4-酮；

2-[2-(2-甲氧苯基)-2-氧-亚乙基]-5，5-双吡啶-4-基甲基-3- (2，6，6，-三甲基-双环[3.1.1]庚-3-基甲基)-咪唑烷-4-酮；

2-(2-联苯-4-基-2-氧-亚乙基)-5，5-双吡啶-4-基甲基-3- (2，6，6，-三甲基-双环[3.1.1]庚-3-基甲基)-咪唑烷-4-酮；

2-(2-萘-2-基-2-氧-亚乙基)-5，5-双吡啶-4-基甲基-3- (2，6，6，-三甲基-双环[3.1.1]庚-3-基甲基)-咪唑烷-4-酮；

2-[2-(4-氟苯基)-2-氧-亚乙基]-5，5-双吡啶-4-基甲基-3- (2，6，6，-三甲基-双环[3.1.1]庚-3-基甲基)-咪唑烷-4-酮；

2-[2-(2，4-二氟苯基)-2-氧-亚乙基]-5，5-双吡啶-4-基甲基-3- (2，6，6，-三甲基-双环[3.1.1]庚-3-基甲基)-咪唑烷-4-酮；

4-{[5-氧-4，4-双吡啶-4-基甲基-1-(2，6，6-三甲基-双环 [3.1.1]庚-3-基)-咪唑烷-2-亚基]-乙酰基}-苯甲腈；

2-[2-(4-硝基苯基)-2-氧-亚乙基]-5，5-双吡啶-4-基甲基-3- (2，6，6，-三甲基-双环[3.1.1]庚-3-基甲基)-咪唑烷-4-酮；

2-[2-氧-2-苯基-亚乙基]-5，5-双吡啶-4-基甲基-3-(2，6，6，-三 甲基-双环[3.1.1]庚-3-基甲基)-咪唑烷-4-酮；

2-{2-氧-2-[4-(2H-四唑-5-基)苯基]-亚乙基]-5，5-双吡啶-4- 基甲基-3-(2，6，6，-三甲基-双环[3.1.1]庚-3-基甲基)-咪唑烷-4- 酮；

3-{[5-氧-4，4-双吡啶-4-基甲基-1-(2，6，6-三甲基-双环 [3.1.1]庚-3-基甲基)-咪唑烷-2-亚基]-乙酰基}-苯甲腈；

4-{[5-氧-4，4-双吡啶-4-基甲基-1-(2，6，6-三甲基-双环 [3.1.1]庚-3-基甲基)-咪唑烷-2-亚基]-乙酰基}-苯甲酸乙酯；

2-[2-氧-2-(4-三氟甲基苯基)-亚乙基]-5，5-双吡啶-4-基甲基- 3-(2，6，6，-三甲基-双环[3.1.1]庚-3-基甲基)-咪唑烷-4-酮；

2-[2-(4-甲磺酰基苯基)-2-氧-亚乙基]-5，5-双吡啶-4-基甲基- 3-(2，6，6，-三甲基-双环[3.1.1]庚-3-基甲基)-咪唑烷-4-酮；

4-{[1-(6，6-二甲基-双环[3.1.1]庚-2-基甲基)-5-氧-4，4-双 吡啶-4-基甲基-咪唑烷-2-亚基]-乙酰基}-苯甲腈；

4-[(1-双环[2.2.2]辛-1-基甲基-5-氧-4，4-双吡啶-4-基甲基咪 唑烷-2-亚基]-乙酰基}-苯甲腈；

4-{[1-(2-乙基-6，6-二甲基-双环[3.1.1]庚-3-基甲基)-5-氧- 4，4-双吡啶-4-基甲基-咪唑烷-2-亚基]-乙酰基}-苯甲腈；

4-{[1-(2-苄基-6，6-二甲基-双环[3.1.1]庚-3-基甲基)-5-氧- 4，4-双吡啶-4-基甲基-咪唑烷-2-亚基]-乙酰基}-苯甲腈；

4-{[1-(2-异丙烯基-6，6-二甲基-双环[3.1.1]庚-3-基甲基)-5- 氧-4，4-双吡啶-4-基甲基-咪唑烷-2-亚基]-乙酰基}-苯甲腈；

4-{[1-(2-异丙基-6，6-二甲基-双环[3.1.1]庚-3-基甲基)-5-氧 -4，4-双吡啶-4-基甲基-咪唑烷-2-亚基]-乙酰基}-苯甲腈；

4-({1-[2-(1-甲氧亚氨基-乙基)-6，6-二甲基-双环[3.1.1]庚- 3-基甲基)-5-氧-4，4-双吡啶-4-基甲基-咪唑烷-2-亚基]-乙酰基}- 苯甲腈；

4-{[1-(6，6-二甲基-2-亚甲基-双环[3.1.1]庚-3-基甲基)-5-氧 -4，4-双吡啶-4-基甲基-咪唑烷-2-亚基]-乙酰基}-苯甲腈；

4-{[1-(2-羟基-2-羟甲基-6，6-二甲基-双环[3.1.1]庚-3-基甲 基)-5-氧-4，4-双吡啶-4-基甲基-咪唑烷-2-亚基]-乙酰基}-苯甲 腈；

4-{[1-(6，6-二甲基-2-氧-双环[3.1.1]庚-3-基甲基)-5-氧- 4，4-双吡啶-4-基甲基-咪唑烷-2-亚基]-乙酰基}-苯甲腈；

3-叔丁基-2-(2-氧-2-苯基-亚乙基)-5，5-双吡啶-4-基甲基-咪 唑烷-4-酮；

4-{[1-(2，2-二甲基丙基)-5-氧-4，4-双吡啶-4-基甲基-咪唑烷- 2-亚基]-乙酰基}-苯甲腈；

4-{[1-(2-金刚烷-1-基乙基)-5-氧-4，4-双吡啶-4-基甲基-咪唑 烷-2-亚基]-乙酰基}-苯甲腈；

3-环己基-2-(2-氧-2-苯基-亚乙基]-5，5-双吡啶-4-基甲基-咪 唑烷-4-酮；

4-[(1-金刚烷-1-基甲基)-5-氧-4，4-双吡啶-4-基甲基-咪唑烷- 2-亚基)-乙酰基]-苯甲腈；

4-[(1-环己基甲基-5-氧-4，4-双吡啶-4-基甲基-咪唑烷-2-亚 基)-乙酰基]-苯甲腈；

3-己基-2-(2-氧-2-苯基-亚乙基]-5，5-双吡啶-4-基甲基-咪唑 烷-4-酮；

3-萘-1-基-2-(2-氧-2-苯基-亚乙基]-5，5-双吡啶-4-基甲基-咪 唑烷-4-酮；

3-金刚烷-1-基-2-(2-氧-2-苯基-亚乙基)-5，5-双吡啶-4-基甲 基-咪唑烷-4-酮；

3-金刚烷-1-基-2-[2-(4-硝基-苯基)-2-氧-亚乙基]-5，5-双吡 啶-4-基甲基-咪唑烷-4-酮；

4-[(1-苄基-5-氧-4，4-双吡啶-4-基甲基-咪唑烷-2-亚基)-乙酰 基]-苯甲腈；

4-[(1-烯丙基-5-氧-4，4-双吡啶-4-基甲基-咪唑烷-2-亚基)-乙 酰基]-苯甲腈；

4-[(1-甲基-5-氧-4，4-双吡啶-4-基甲基-咪唑烷-2-亚基)-乙酰 基]-苯甲腈；

4-{[1-(2，2-二乙氧-乙基)-5-氧-4，4-双吡啶-4-基甲基-咪唑烷 -2-亚基)-乙酰基]-苯甲腈；

4-[(1-金刚烷-2-基甲基)-5-氧-4，4-双吡啶-4-基甲基-咪唑烷- 2-亚基)-乙酰基]-苯甲腈；

4-[(1-金刚烷-2-基-5-氧-4，4-双吡啶-4-基甲基-咪唑烷-2-亚 基)-乙酰基]-苯甲腈；

4-[(-5-氧-1-苯基-4，4-双吡啶-4-基甲基-咪唑烷-2-亚基)-乙 酰基]-苯甲腈；和

4-{[4-叔丁基-苯基-5-氧-4，4-双吡啶-4-基甲基-咪唑烷-2-亚 基)-乙酰基]-苯甲腈，

以及这些化合物的药学上可接受的盐。

涉及任何上述药物组合物和治疗方法的本发明的其他具体方案 是，包含在这些组合物和用在这些方法中的HMG CoA还原酶抑制剂选 自阿特他汀(atorvastatin)，普伐他汀(pravastatin)，烟酸 (niacin)，二甲苯氧庚酸(gemfibrozil)，氯贝特(clofibrate)，洛 伐他汀(lovastatin)，氟伐他汀(fluvatatin)，西伐他汀 (simvastati)和康巴新，以及前述化合物的药学上可接受的盐。

涉及任何上述药物组合物和治疗方法的本发明的其他具体方案 是，其中包含在这些组合物和用在这些方法中的HMG CoA还原酶抑制 剂选自阿特他汀。

涉及任何上述药物组合物和治疗方法的本发明的其他具体方案 是，其中包含在这些组合物和用在这些方法中的HMG CoA还原酶抑制 剂选自洛伐他汀(lovastatin)。

涉及任何上述药物组合物和治疗方法的本发明的其他具体方案 是，其中包含在这些组合物和用在这些方法中的FTase抑制剂选自：

(a)定义如上的通式IIA化合物，其中R3是4-吡啶基，4-嘧啶基 或2-氟-4-吡啶基；

(b)定义如上的通式IIA化合物，其中R2是-(CH2)nY；

(c)定义如上的通式IIA化合物，其中R2是-(CH2)nY，n是1-5 的整数；

(d)定义如上的通式IIA化合物，其中每个R1，E1，E2和R4，如果 存在，是氢；和

(e)定义如上的通式IIA化合物，其中R2是-(CH2)nY，R1是4-吡 啶基，4-嘧啶基或2-氟-4-吡啶基，R5是(C1-C2)烷基且Y是-CO2R5，氰 基，-CONHR4，CH＝CHCO2R5或-OCOR5；且n是1-5的整数；

涉及任何上述药物组合物和治疗方法的本发明的其他具体方案 是，其中包含在这些组合物和用在这些方法中的Ftase还原酶抑制剂 不是柠檬烯或d-柠檬烯。

这里使用的术语“烷基”，除非另有说明，包括具有直链，支链 或环部分或其结合的饱和单价烃残基。

这里使用的术语“卤素”，除非另有说明，是指氯，氟，溴或碘。

上述通式I，IIA，IIB，III和IV化合物可含有一或多个手性中 心，并因此存在2个或多个对映异构体和非对映异构体形式。具有上 述通式I，IA，IIB，III和IV的化合物的定义包括所有对映异构体， 非对映异构体和这些化合物的其他立体异构体，以及它们的混合物。

下列文献涉及在本发明药物组合物和方法中与HMG CoA还原酶抑 制剂结合使用的且显示FTase抑制剂活性的化合物，以及其制备方 法：国际专利申请PCT/US92/11292，指定美国，公开于1993年7月 22日的专利WO 93/14085；颁布于1989年10月24日的美国专利 4,876,259；颁布于1994年8月2日的美国专利H1345；颁布于1993 年11月9日的美国专利5,260,332；颁布于1993年11月16日的美 国专利5,262,435；颁布于1994年11月29日的美国专利5,369,125； 公开于1993年12月9日的世界专利申请WO 93/24633；公开于1994 年2月17日的世界专利申请WO 94/03597；公开于1994年6月21 日的世界专利申请WO 94/16069；G.L.Bulton et al.，209th American Chem.Soc.Nat’I Meeting，Anaheim，Ca，April 2-6， 1995，Division of Med.Chem.，Abs.No.032，公开于1995年1 月5日的世界专利申请WO 95/00497；公开于1993年11月9日的美 国专利5,260,479；世界专利申请WO 95/10514；世界专利申请WO 95/10515；世界专利申请WO 95/10516；公开于1995年5月11日的 世界专利申请WO 95/12572；公开于1995年5月4日的世界专利申请 WO 95/11917；公开于1994年11月24日的世界专利申请WO 94/26723；公开于1995年9月21日的世界专利申请WO 95/25086； Kanda et al，AFMC.International Medicinal Chemistry Symposium AIMECS 95，Tokyo Japan，Poster，P7M1563，1995年9 月4日；公开于1996年4月4日的世界专利申请WO 96/10037；公开 于1996年4月4日的世界专利申请WO 96/10035；公开于1996年4 月4日的世界专利申请WO 96/10034；公开于1996年4月6日的世界 专利申请WO 96/10011；公开于1996年4月4日的世界专利申请WO 96/09821；公开于1996年4月4日的世界专利申请WO 96/09820； Quin et al，211th American Chemical Society National Meeting， New Orleans，La.，1996年3月24-28日，Lecture，COMP 012，1996 年3月24日；公开于1996年3月7日的世界专利申请WO 96/06609 和WO 96/06604；公开于1996年2月14日的欧洲专利申请EP 696，593；Hartman G.D.，14th International Symposium on Medicinal Chemistry，Maastricht，Netherlands，1996年9月8 -12日，Lecture，SL-08.3，1996年9月10日；公开于1996年10 月3日的世界专利申请WO 96/30363；公开于1996年10月3日的世 界专利申请WO 96/30343，世界专利申请WO 97/03050；公开于1994 年11月24日的世界专利申请WO 94/26723；，指定美国并于1995 年3月20日申请的国际专利申请PCT/IB95/00189；申请于1994年4 月29日的美国专利申请08/236,743；R.A.Volkmann和J.P. lyssikatos申请于1996年5月28日的题目为“金刚烷基取代的羟吲 哚作为药剂”的美国临时专利申请；颁布于1994年9月27日的美国 专利申请5,350,867；颁布于1994年10月4日的美国专利申请 5,352,705；颁布于1996年10月15日的美国专利申请5,565,489； 颁布于1994年9月27日的美国专利申请5,350,867；公开于1997 年2月2日的欧洲专利申请EP750,609；公开于1991年12月18日 的欧洲专利申请461,869；公开于1996年2月14日的欧洲专利申请 EP 696,593；和公开于1996年7月18日的世界专利申请96/21456。

下面文献涉及显示作为HMG CoA还原酶抑制剂活性且在本发明药 物组合物和方法中与FTase抑制剂联合的化合物及其制备方法： 颁布于1987年7月21日的美国专利4,681,893；颁布于1993年12 月28日的美国专利5,273,995；颁布于1995年1月31日的美国专利 5,385,929；颁布于1990年9月18日的美国专利4,957,971；颁布 于1992年4月7日的美国专利5,102,893；颁布于1990年9月18 日的美国专利4,957,940；颁布于1990年8月21日的美国专利 4,950,675；颁布于1990年5月29日的美国专利4,929,620；颁布 于1990年5月8日的美国专利4,923,861；颁布于1990年3月6日 的美国专利4,906,657；颁布于1989年9月19日的美国专利 4,868,185；颁布于1992年6月23日的美国专利5,124,482；颁布 于1991年3月26日的美国专利5,003,080；颁布于1992年3月17 日的美国专利5,097,405；颁布于1992年9月22日的美国专利 5,149,837；颁布于1990年3月6日的美国专利4,906,624；颁布于 1988年8月2日的美国专利4,761,419；颁布于1988年4月5日的 美国专利4,735,950；颁布于1988年2月28日的美国专利 4,808,621；颁布于1987年1月3日的美国专利4,647,576；颁布于 1992年6月2日的美国专利5,118,882；颁布于1993年5月25日的 美国专利5,214,197；颁布于1994年6月14日的美国专利 5，321,046；颁布于1993年11月9日的美国专利5,260,440；颁布 于1993年5月4日的美国专利5,208,258；颁布于1994年11月29 日的美国专利5,369,125；颁布于1994年8月2日的美国专利H1345； 颁布于1993年11月16日的美国专利5,262,435；和颁布于1993年 11月9日的美国专利5,260,332。公开于1981年2月25日的英国专 利申请GB2,055,100；颁布于1987年2月24日的美国专利 4,499,289；颁布于1986年9月23日的美国专利4,613,610；颁布 于1987年5月26日的美国专利4,668,699；颁布于1989年7月25 日的美国专利4,851,436；颁布于1987年7月7日的美国专利 4，678,806；颁布于1988年9月20日的美国专利4,772,626；颁布 于1989年8月8日的美国专利4,855,321；公开于1987年11月4 日的欧洲专利申请EP244364；颁布于1988年8月23日的美国专利 4,766,145；颁布于1989年10月24日的美国专利4,876,279；颁布 于1989年7月11日的美国专利4,847,306；颁布于1991年9月17 日的美国专利5,049,696；公开于1987年11月19日的欧洲专利申请 EP245,990；公开于1988年1月7日的欧洲专利申请EP251,625；颁 布于1988年1月12日的美国专利4,719,229；公开于1988年1月 21日的日本专利申请63014722；颁布于1988年4月5日的美国专利 4,736,064；颁布于1988年4月19日的美国专利4,738,982；颁布 于1989年7月4日的美国专利4,845,237；授权于1992年3月18 日的欧洲专利EP306,263；颁布于1991年6月25日的美国专利 5,026,708；颁布于1989年9月5日的美国专利4,863,957；颁布于 1990年8月7日的美国专利4,946,841；授权于1994年7月13日的 欧洲专利339358；颁布于1998年6月26日的美国专利4,937,264； 颁布于1989年10月24日的美国专利4,876,366；颁布于1990年5 月1日的美国专利4,921,974；颁布于1990年10月16日的美国专利 4,963,538；颁布于1992年7月14日的美国专利5,130,306；颁布 于1990年2月13日的美国专利4,900,754；颁布于1991年7月25 日的美国专利5,026,698；颁布于1990年12月11日的美国专利 4,977,161；颁布于1990年51228日的美国专利4,927,851；公开于 1990年6月20日的欧洲专利申请EP373,507；颁布于1990年7月 3日的美国专利4,939,143；颁布于1990年7月3日的美国专利 4,939,159；颁布于1993年7月10日的美国专利4,940,727；颁布 于1992年5月26日的美国专利5,116,870；授权于1993年3月25 日的澳大利亚专利AU635,545；颁布于1992年3月24日的美国专 利5,098,391；颁布于1994年3月15日的美国专利5,294,724；颁 布于1991年3月19日的美国专利5,001,255；颁布于1992年9月 22日的美国专利5,149,834；颁布于1993年11月28日的美国专利； 颁布于1992年2月18日的美国专利5,089,523；公开于1992年1 月8日的欧洲专利申请EP465,265；颁布于1995年11月19日的美 国专利5,476,846；颁布于1994年6月14日的美国专利5,321,046； 颁布于1992年4月21日的美国专利5,106,992；颁布于1994年9 月13日的美国专利5,347,039；公开于1992年7月13日的日本专利 申请4193836；公开于1992年9月23日的英国申请专利2253787； 颁布于1995年5月2日的美国专利5,411,969；公开于1992年12 月10日的日本专利申请4356435；颁布于1993年11月30日的美国 专利5,266,707；颁布于1995年10月3日的美国专利5,455,247； 颁布于1995年12月12日的美国专利5,475,029；颁布于1997年1 月7日的美国专利5,591,772；颁布于1994年2月15日的美国专利 5,286,746；公开于1995年4月4日的日本专利申请JP 7089898； 公开于1995年10月18日的欧洲专利申请EP 677,039和公开于1996 年3月21日的世界专利申请96/08248。

本发明涉及治疗癌症的方法，其中使用FTase抑制剂和HMG CA 还原酶抑制剂一起给药，还涉及同样的药物组合物，以及其中使用两 种活性组分按照设计的可获得结合给药的有益效果的合适剂量方案分 别给药的方法。合适的剂量方案，每个组分的给药量，和每种活性组 分的剂量具体时间间隔依赖于被治疗的患者，癌症或异常细胞生长的 种类以及病情的严重程度。在使用本发明的方法时，FTase的给药量 应按照文献中公开的量给药，或者按照确信其在作为单独的活性组分 用于治疗癌症或抑制异常细胞生长中是有效的量给药，且HMG CoA还 原酶抑制剂的给药量可使用文献中公开的给药量的四分之一至二分之 一给药，或者按照确信其在作为单独的活性组分用于治疗血胆甾醇过 多中是有效的量给药。例如，在使用本发明的方法时，通式I，IIA， IIB和III的FTase抑制剂的给药量一般是对于平均70kg的成人给药 量范围在每天约0.005-约0.6mg/公斤所治疗病人的体重，可一次或 分次给药，且HMG CoA还原酶抑制剂阿特他汀的给药量一般是每天约 0.07-约3.6mg/公斤体重，一次或分次给药。虽然如此，但给药可根 据要治疗的动物种类，及其个体对所述药物的应答，以及药物制剂的 类型选择和时间周期以及间隔进行变化。在某些情况下，剂量水平低 于上述范围的低限可能更合适，而在其他情况下，可使用剂量水平高 于上述日剂量的高限而不引起任何有害的副反应，条件是这样大剂量 的药物要在一天多次小剂量给药。

在本发明药物组合物和方法中使用的FTase抑制剂和HMG CoA还 原酶抑制剂在下面也称作“治疗剂”。治疗剂可经口服或非肠道途径 给药。含有FTase抑制剂和HMG CoA还原酶抑制剂的组合物可每天口 服或经非肠道途径给药，每天一次或分多次给药，以使每种活性组分 的给药总量落在上述建议的给药量范围内。

治疗剂可单独给药或与药学上可接受的载体或稀释剂结合按照前 述任何途径给药，且给药可以是单剂量或多剂量形式的。更具体地说， 本发明的新的治疗剂可在较大的剂量范围内变化，即，它可结合药学 上可接受的惰性载体以片剂，胶囊，锭剂，糖锭，硬糖，栓剂，含水悬 浮液，可注射溶液，酏剂，糖浆等形式给药。这些载体包括固体稀释 剂或填充剂，无菌含水介质和各种无毒有机溶剂等。另外，口服药物 组合物可被适当地制成甜味和/或校正口味。通常，本发明的治疗化合 物，当分开给药时(即，不在同一药物组合物中)，在这些剂量形式中 的存在量为约5.0％至约70％重量百分比的浓度水平。

用于口服给药，片剂含有各种赋形剂如微晶纤维素，柠檬酸钠， 碳酸钙，磷酸氢二钙和甘氨酸可与各种崩解剂如淀粉(且优选玉米， 马铃薯，或木著淀粉)，海藻酸和特定的硅酸盐配合物，以及颗粒粘 合剂如聚乙烯吡咯烷酮，蔗糖，明胶和阿拉伯胶一起使用。另外，润 滑剂如硬脂酸镁，月桂基硫酸钠和滑石也经常用于制片剂。相似类型 的固体组合物还可以在明胶胶囊中使用填充剂；在这种结合中优选的 材料还包括乳糖或奶糖以及高分子量聚乙二醇。当希望以含水悬浮液 和/或酏剂形式口服给药时，活性化合物可与各种甜味剂或矫味剂，着 色剂或染料，以及，如果需要，乳化和/或悬浮剂，以及稀释剂如水， 乙醇，丙二醇，甘油和各种它们的组合结合使用。

用于胃肠外给药，可使用治疗剂在芝麻或花生油或含水丙二醇中 的溶液。如果需要可将含水溶液适当缓冲并将液体稀释剂先进行等渗 处理。这些含水溶液适用于静脉内注射。油溶液适用于关节内，肌肉 内和皮下注射。所有这些制剂可按照本领域技术人员熟知的标准药学 技术在无菌条件下容易地制备。

作为FTase抑制剂的治疗化合物的活性可通过在体外相对于对照 组其抑制Ftase的能力来测定。

用包括匀化的脑组织的胞质部分的FTase的粗品制备在96孔分析 板上筛选化合物。通过匀化在100ml蔗糖/MgCl2/EDTA缓冲液中的约 40g新鲜组织(使用Dounce匀化器；10-15冲程)，然后在1000grams 于4G将匀化物离心10分钟，将上层清液再在17,000grams于4G离 心15分钟，然后收集上清液，制备cytosolic部分。将此上清液稀 释，达到最终浓度含有50mM Tris Hcl(pH7.5)，5mN DTT，0.2M Kcl， 20mM ZnCl2，1mM PMSF并在178,000grams于4G再离心90分钟。将 上清液定义为“粗品FTase”用于分析蛋白浓度，等分试样，并在-70 ℃贮存。

用于测定体外抑制人FTase的分析方法是Amersham LifeScience 描述的改进方法，使用它们的法尼基转移酶(3H)Scintilation Proximity Assay(SPA)成套分析盒(TRKQ 7010)。在100ml含有50mM N-(2-羟基乙基)哌嗪-N-(2-乙烷磺酸)(HEPES)，pH7.5，30mM MgCl2， 20μM Kcl，5mM Na2HPO4，5mM二硫苏糖醇(DTT)，0.01％三硝基甲苯 X-100，5％二甲基亚砜(DMSO)，20mg粗品FTase，0.12mM[3H]- 法尼基焦磷酸盐([3H]-FPP；36000dpr/pmol，Amersham LifeScience)，和0.2mM生物素基化的Ras肽KTKCVIS(Bt-KTKCVIS) 中，它是在N-末端的α氨基上生物素化的，并在实验室合成并用HPLC 纯化的，测定FTase酶活性。加入酶起始反应，在37℃保温45分钟 后加入EDTA(在分析盒TRKQ 7010中作为终止试剂)终止反应。每孔中 加入10mlsteptavidin-包衣的SPA珠(TRKQ 7010)并在室温保温30 分钟获得异戊烯基化和非异戊烯基化的Bt-KTKCVIS。使用MicroBeta 1450板式计数器测定结合在SPA珠上的放射活性量。在这样的分析条 件下，酶活性与异戊烯基受体，Bt-KTKCVIS和粗品FTase的浓度成线 性关系，但是被异戊烯基供体，FPP饱和。该分析的反应时间也是线 性范围。

将试验化合物常规溶于100％DMSO。通过计算存在试验化合物时 氚代法尼基掺入和对照孔(无抑制剂)掺入的百分比测定法尼基转移酶 的抑制活性。IC50值，即产生半数法尼基化Bt-KTKCVIS所需的浓度， 可从剂量应答测定。

描述于UK专利申请GB2,267,966(1993年12月22日公开)的用 于FTase活性的荧光分析可用于筛选FTase抑制剂。

可按照描述于Dugan等的，Achiv.Biochem.Biophys.， (1972)，152，21-27的方法测定作为HMG CoA还原酶抑制剂的特定治 疗剂的活性。在该方法中，可通过对标准实验室大鼠使用含有5％的 考来烯胺饮食喂养四天，增加标准实验室鼠中HMG-CoA酶的活性，之 后将鼠杀死。匀化鼠的肝脏，并向非可皂化液体(nonsaponifiable lipid)掺入胆固醇-14C-乙酸酯测定鼠肝脏匀化物。测定经过1小时50 ％抑制甾醇合成所需的化合物的微摩尔浓度，并用IC50值表示。

第二种方法(定义为COR筛选)描述于T.Kita等，J.Kita等.J. Clin.Invest，(1980)，66：1094-1100。在该方法中，测定在纯化 的HMG-CoA还原酶酶制剂存在下14C-HMG-CoA转化为14C-甲羟戊酸的 量。测定50％抑制甾醇合成所需的化合物的微摩尔浓度，并用IC50值 表示。

本发明的不同的方法可部分用作治疗，包括使用一种或多种其他 抗肿瘤物质给药，例如，那些选自核分裂抑制剂，例如，长春碱；烷 基化试剂，例如，顺铂，卡铂和环磷酰胺；抗代谢药物，例如，5-氟 尿嘧啶，胞嘧啶阿拉伯糖甙和羟基脲，或例如，公开于欧洲专利申请 No.239362中的一种优选的抗代谢药物，如N-{5-[N-(3，4-二氢-2- 甲基-4-氧喹唑啉-6-基甲基)-N-甲基氨基]-2-噻吩甲酰基}-L-谷氨 酸；插入抗生素，例如，阿霉素和博莱霉素；酶，例如，天门冬酰胺酶； 拓扑异构酶抑制剂，例如，依托泊甙；生物应答改性剂，例如，干扰 素；和抗激素，例如，抗雌激素剂如“NOLVADEX”(他莫昔芬)或抗雄 激素剂如“CASODEX”(4’-氰基-3-(4-氟苯基磺酰基)-2-羟基-2-甲基 -3’-(三氟甲基)-N-丙酰苯胺。这些治疗剂各组分可以同时，顺序或 分开的剂量给药进行治疗。按照本发明的此方案，提供了一种药物组 合物，含有如上所述的药学上可接受的载体，HMG CoA还原酶抑制剂 和FTase抑制剂中的一种或两种，和如上所述的另外的抗肿瘤剂。

如下述表1所显示，本发明有效的化合物1，且结构如下 其效果可被最小有效量的洛伐他汀增强。 表1

在Intact细胞中洛伐他汀和化合物1对处理异戊烯基化K-ras 4B 的协同作用 抑制K-Ras 4B异戊烯基化的％* 化合物1[μm] 对照 +5μM洛伐他汀 0 0 23 0.1 0 56 1.0 0 83 10 0 96

*半融合的单层NIH-3T3转染的过度表达突变体K-Ras 4B用增 长浓度的CP-390，392在有和无5μM水解的洛伐他汀存在下在37 ℃处理18小时。将细胞溶解于RIPA溶解细胞缓冲液(50mM三[羟甲基] 氨基-甲烷，0.15M氯化钠，1％脱氧胆酸钠，1％三硝基甲苯X-100， 0.1％SDS，0.25叠氮化钠；pH8.5)，该溶液含有1mM DTT(二硫苏糖 醇；Boehringer Mannheim，Indianapolis，1N)和蛋白酶抑制剂(抑 肽酶，亮抑酶肽，Anitpain，Pefabioc，它们的最终浓度分别是 10μg/ml，2μg/ml，2μg/ml和50μM；Boehringer Mannheim， Indianapolis，1N)并煮沸3分钟。通过SDS-PAGE在12.5％凝胶上 将等量的蛋白(100μg/道)再溶解并转移至生物固定(immobilon)- P膜上(Intergrated Separation Systems，Natick，MA.)。将膜 用5μg/mld抗-Pan-ras(Ab-3)单克隆抗体(Calbiochem，La Jolla， CA)做免疫印迹。将印迹与连接有第二个抗体的过氧化物酶一起保温， 用增强的化学萤光(Amersham Life Products，Arlinton Heights，IL) 测定免疫印迹的Ras蛋白。使用MasterScan 3.0(Scanalytics， Billerica，Massachusettes)进行密度扫描测定异戊烯基化的Ras 的百分比。