磷脂酰肌醇(下文缩写为“PI”)是在细胞膜中发现的多种磷脂之一。近年来，已 经弄清楚PI在细胞内信号传导中起着重要作用。经由3’-磷酸化的磷酸肌醇的细胞信 号传导已牵涉到许多细胞过程，例如恶性转化、生长因子信号传导、炎症和免疫 (Rameh等人(1999)，J.Biol Chem，274：8347-8350)。负责产生这些磷酸化信号传导产 物的酶，即磷脂酰肌醇3-激酶(也称为PI 3-激酶或PI3K)，最初被确定为具有与病 毒癌基因蛋白和生长因子受体酪氨酸激酶相关的活性，所述激酶将磷脂酰肌醇(PI) 及其磷酸化衍生物的肌醇环的3’-羟基磷酸化(Panayotou等人(1992)Trends Cell Biol 2：358-60)。
磷酸肌醇3-激酶(PI3K)是将脂质的肌醇环的3-羟基残基磷酸化的脂质激酶 (Whitman等人(1988)Nature，332：664)。由PI-3激酶产生的3-磷酸化磷脂(PIP3s) 用作具有脂质结合域(包括plekstrin同源(PH)区)的第二信使募集激酶，例如Akt 和磷酸肌醇依赖性激酶-1(PDK1)。Akt与膜PIP3s的结合导致Akt移位到胞质膜上， 使Akt与PDK1接触，这造成Akt的激活。肿瘤抑制磷酸酶PTEN将PIP3去磷酸化， 因此起着Akt激活的负调节剂的作用。PI3-激酶Akt和PDK1对包括细胞周期调节、 增殖、存活、凋亡和运动性的许多细胞过程的调节非常重要，是诸如癌症、糖尿病和 免疫炎症的疾病的分子机制的重要组成部分(Vivanco等人(2002)，Nature Rev.Cancer
2：489；Phillips等人(1998)Cancer 83：41)。
PI3激酶家族包括由结构同源性细分的至少15种不同的酶，根据序列同源性和由 酶催化形成的产物分为三类。I类PI3激酶由2个亚单位(subunit)组成：110kd催 化亚单位和85kd调节亚单位。该调节亚单位含有SH2结构域，结合于具有酪氨酸激 酶活性的生长因子受体或癌基因产物所磷酸化的酪氨酸残基，从而诱导p110催化亚 单位的PI3K活性，将它的脂质底物磷酸化。I类PI3激酶涉及细胞因子、整合素、生 长因子和免疫受体的重要的信号传导过程下游，这表明该途径的控制可导致重要的治 疗效果如调节细胞增殖和癌变。I类PI3Ks能够将磷脂酰肌醇(PI)、磷脂酰肌醇-4- 磷酸酯和磷脂酰肌醇-4，5-二磷酸酯(PIP2)磷酸化，分别产生磷脂酰肌醇-3-磷酸酯 (PIP)、磷脂酰肌醇-3，4-二磷酸酯和磷脂酰肌醇-3，4，5-三磷酸酯。II类PI3Ks将PI 和磷脂酰肌醇-4-磷酸酯磷酸化。III类PI3Ks仅能将PI磷酸化。
癌症中的主要PI3-激酶同工型是I类PI3-激酶，p110α(US5824492；US5846824； US6274327)。其它同工型牵涉到心血管和免疫炎症性疾病(Workman P(2004)＂抑制 磷酸肌醇3-激酶途径用于治疗癌症(Inhibiting the phosphoinositide 3-kinase pathway for cancer treatment)＂Biochem Soc Trans 32：393-396；Patel等人，(2004)＂鉴定有效 的PI3K选择性抑制剂作为候选抗癌药(Identification of potent selective inhibitors of PI3K as candidate anticancer drugs)＂Proceedings of the American Association of Cancer Research(Abstract LB-247)95th Annual Meeting，March 27-31，Orlando， Florida，USA；Ahmadi K and Waterfield MD(2004)＂磷酸肌醇3-激酶：作用和机制 (Phosphoinositide 3-Kinase：Function and Mechanisms)＂Encyclopedia of Biological Chemistry(Lennarz W J，Lane M D eds)Elsevier/Academic Press)。
PI3-激酶/AKt/PTEN途径的几种组分牵涉到癌变。除了生长因子受体酪氨酸激酶 以外，整合素依赖的细胞粘附和G蛋白偶联受体直接和间接通过接合体分子激活PI3- 激酶。在许多恶性肿瘤中已经确定PTEN(p53之后的癌症中最常见的突变抑癌基因) 的功能丧失、PI3激酶的癌基因突变(Samuels等人(2004)Science 304：554)、PI3-激 酶的扩增和Akt的过表达。另外，通过刺激胰岛素样生长因子受体由PI3-激酶/Akt 途径的持续信号传导是抗表皮生长因子受体抑制剂如AG1478和曲妥单抗的机制。已 经发现p110α的癌基因突变在结肠、乳腺、大脑、肝、卵巢、胃、肺以及头颈实体肿 瘤中出现频率很高。在胶质母细胞瘤、黑色素瘤、前列腺癌、子宫内膜癌、卵巢癌、 乳腺癌、肺癌、头颈癌、肝细胞癌和甲状腺癌中发现了PTEN异常。
在用各种激动剂处理细胞时，磷脂酰肌醇-3，4，5-三磷酸酯(PIP3)，PI3-激酶活化 的主要产物的水平提高。因此，PI3-激酶活化被认为牵涉众多细胞应答，包括细胞生 长、分化和凋亡(Parker等人，(1995)Current Biology，5：577-99；Yao等人，(1995) Science，267：2003-05)。虽然还未充分表征在PI3激酶活化后产生的磷酸化脂质的下游 靶的，但新出现的证据表明，当与各种磷脂酰肌醇脂质结合时，含有pleckstrin同源 区和FYVE指状区的蛋白被激活(Sternmark等人，(1999)J Cell Sci，112：4175-83； Lemmon等人(1997)Trends Cell Biol，7：237-42)。在体外，蛋白激酶C(PKC)的一 些同工型直接由PIP3激活，而PKC相关性蛋白激酶，PKB，已显示由PI3激酶活化 (Burgering等人，(1995)Nature，376：599-602)。
PI3激酶的初始纯化和分子克隆揭示，它是由p85和p110亚单位组成的杂二聚体 (Otsu等人，(1991)Cell 65：91-104；Hiles等人，(1992)Cell 70：419-29)。自那时起，已 经鉴定了四种不同的I类PI3Ks，表示为PI3Kα，β，δ和ω，各自由不同的110kDa 催化亚单位和调节亚单位组成。更具体地说，三个催化亚单位，即p110α、p110β和 p110δ，各自与相同的调节亚单位p85相互作用；而p110γ与不同的调节亚单位p101 相互作用。如下所述，这些PI3Ks各自在人细胞和组织中的表达模式也是不同的。
PI3激酶的各种同工型的细胞功能没有完全被阐明。牛p110α在克隆后被描述为 与酿酒酵母蛋白相关：Vps34p，一种牵涉到液泡蛋白加工的蛋白。重组p110α产物还 显示与p85α相关，在转染COS-1细胞中提供了PI3K活性(Hiles等人，(1992)，Cell， 70：419-29)。第二种人p110同工型被克隆，表示为p110β(Hu等人(1993)Mol Cell Biol 13：7677-88)。该同工型据说与细胞中的p85相关，并且到处表达，因为p110β mRNA 已经在许多人和小鼠组织以及人脐静脉内皮细胞、Jurkat人白血病T细胞、293人胚 肾细胞、小鼠3T3成纤维细胞、HeLa细胞和NBT2大鼠膀胱癌细胞中发现。PI3激 酶的p110δ同工型的鉴定在Chantry等人，J Biol Chem，272：19236-41(1997)中有描述。 发现人p110δ同工型以组织限制方式表达。它在淋巴细胞和淋巴组织中高水平表达， 表明该蛋白可能在免疫系统的PI3激酶介导的信号传导中具有重要作用(US 5858753； US 5822910；US 5985589；WO 97/46688；以及Vanhaesebroeck等人，(1997)Proc Natl Acad Sci USA，94：4330-5)。
在各个PI3Kα、β和δ亚型中，p85亚单位通过它的SH2区与目标蛋白的磷酸化 酪氨酸残基(存在于适当的序列范围内)的相互作用而将PI3激酶定位于胞质膜上 (Rameh等人，(1995)Cell，83：821-30)。p85的两种同工型已经被鉴定，其中p85α广 泛表达，而p85β主要在脑和淋巴组织中发现(Volinia等人，(1992)Oncogene， 7：789-93)。p85亚单位与PI3激酶p110α、β或δ催化亚单位的结合似乎是这些酶的催 化活性和稳定性所必需的。另外，Ras蛋白的结合还上调PI3激酶活性。p110γ的克 隆进一步揭示了PI3K酶家族内的复杂性(Stoyanov等人，(1995)Science，269：690-93)。 该p110γ同工型与p110α和p110β密切相关(催化区45-48％同一性)，但不利用 p85作为目标亚单位。反而，PI3K在其氨基端附近含有命名为“pleckstrin同源区”的 另一区域。该区允许p110γ与杂三聚G蛋白的β和γ亚单位相互作用，该相互作用似 乎调节其活性。PI3K γ的p101调节亚单位最初在猪中被克隆，随后人同源物鉴定 (Krugmann等人，(1999)J Biol Chem，274：17152-8)。
因此，PI3激酶能够通过它们的氨基酸同一性或它们的活性来定义。该增长的基 因家族的其它成员包括相关性更远的脂质和蛋白激酶，包括酿酒酵母的Vps34 TOR1 和TOR2(和它们的哺乳动物同系物，例如FRAP和mTOR)，运动失调性毛细血管 扩张症基因产物(ATR)和DNA依赖性蛋白激酶的催化亚单位(DNA-PK)。一般 参阅Hunter(1995)Cell，83：1-4。
PI3激酶似乎还涉及白细胞活化。p85相关性PI3激酶活性已显示与CD 28的胞 浆区物理结合，CD28是一种在抗原应答中激活T细胞的重要共同刺激分子(Pages等 人，(1994)Nature，369：327-29；Rudd，(1996)Immunity 4：527-34)。T细胞通过CD28 活化，降低了抗原活化的阈值，提高了增殖应答的程度和持续时间。这些效应相联系， 从而增加包括白介素-2(IL2)(一种重要的T细胞生长因子)的许多基因的转录(Fraser 等人，(1991)Science.251：313-16)。CD28的突变使得它不能再与PI3激酶相互作用， 导致不能诱发IL-2产生，提示了PI3激酶在T细胞活化中的关键作用。
I类PI3激酶的抑制诱发了凋亡，阻断体内肿瘤诱发的血管生成以及提高了某些 肿瘤的放射敏感性。至少两种化合物，即LY294002和渥曼青霉素，已经广泛用作PI3 激酶抑制剂。然而，这些化合物是非特异性PI3K抑制剂，因为它们在I类PI3激酶 的四种成员中不区分。例如，渥曼青霉素抗每一种I类PI3激酶的IC50值(US6703414) 是在1-10纳摩尔(nM)的范围内。LY294002(2-(4-吗啉基)-8-苯基-4H-1-苯并吡喃 -4-酮)是公知的I类PI3激酶特异性抑制剂，具有抗癌性能(Chiosis等人，(2001) Bioorganic & Med.Chem.Lett.11：909-913；Vlahos等人，(1994)J.Biol.Chem. 269(7)：5241-5248；Walker等人，(2000)Mol.Cell 6：909-919；Fruman等人，(1998)Ann Rev Biochem，67：481-507)。然而，LY294002的抗癌应用受其水溶性缺乏和低劣药代 动力学的严重影响。而且，LY294002没有组织特异性，已经证明在动物体内快速代 谢。因为这些因素，LY294002需要以频繁的间隔给药，因此还具有抑制正常细胞内 的PI3激酶的潜力，从而导致不希望有的副作用。
对具有改进药代动力学和药效学性能的I类PI3激酶抑制剂继续存在着需求。PI3 激酶/Akt/PTEN途径因此是癌症药物开发的有吸引力的靶的，因为这些药剂预计抑制 增殖，逆转凋亡的阻遏和克服癌细胞内的抗细胞毒素剂作用。PI3激酶抑制剂已有报 道(Yaguchi等人，(2006)Jour，of the Nat.Cancer Inst.98(8)：545-556；US 6608056；US 6608053；US 6838457；US 6770641；US 6653320；US 6403588；WO 2004017950；US 2004092561；WO 2004007491；WO 2004006916；WO 2003037886；US 2003149074； WO 2003035618；WO 2003034997；US 2003158212；EP 1417976；US 2004053946；JP 2001247477；JP 08175990；JP 08176070)。渥曼青霉素类似物在哺乳动物中具有PI3激 酶活性(US 6703414；WO 97/15658)。
发明概述
本发明一般涉及具有抗癌活性，更具体具有PI3激酶抑制活性的稠合双环噻吩并 嘧啶和呋喃并嘧啶化合物。某些过度增殖性疾病表征为对PI3激酶功能的调节，例如 通过突变或蛋白的过表达来调节。因此，本发明的化合物可用于治疗过度增殖性疾病， 如癌症。所述化合物可以抑制哺乳动物的肿瘤生长，可用于治疗癌症病人。
本发明还涉及使用该化合物用于对哺乳动物细胞、有机体或相关病理状况进行体 外、原位和体内诊断或治疗的方法。
更具体地说，本发明的一个方面提供了式Ia和Ib的4-吗啉代噻吩并嘧啶和呋喃 并嘧啶化合物以及它们的立体异构体、几何异构体、互变异构体、溶剂合物、代谢物 和药学上可接受的盐：

其中X是O或S。基团R1、R2和R3如本文所定义。
本发明的另一个方面提供了药物组合物，其包含式Ia或Ib的噻吩并嘧啶或呋喃 并嘧啶化合物和药学上可接受的载体。该药物组合物可以进一步包含一种或多种选自 以下的附加治疗剂：抗增殖剂、抗炎药、免疫调节剂、神经营养因子、治疗心血管疾 病的药剂、治疗肝病的药剂、抗病毒药、治疗血液病的药剂、治疗糖尿病的药剂或治 疗免疫缺陷疾病的药剂。
本发明的再一个方面提供了抑制PI3激酶活性的方法，其包括使PI3激酶与有效 抑制量的式Ia或Ib的化合物或其立体异构体、几何异构体、互变异构体、溶剂合物、 代谢物或药学上可接受的盐或前药接触。
本发明的又一个方面提供了预防或治疗由PI3激酶调节的疾病的方法，其包括给 予需要这种治疗的哺乳动物有效量的式Ia或Ib的化合物或其立体异构体、几何异构 体、互变异构体、溶剂合物、代谢物或药学上可接受的盐或前药。此类疾病的实例包 括但不限于过度增殖性(hyperproliferative)疾病(例如癌症，包括黑色素瘤和其它皮肤 癌症)，神经变性、心脏肥大、疼痛、偏头痛、神经外伤疾病、中风、糖尿病、肝肿大、 心血管疾病、阿尔茨海默氏症、囊性纤维化、病毒病、自身免疫性疾病、动脉粥样硬 化、再狭窄、银屑病、过敏性疾病、炎症、神经病、激素相关疾病、与器官移植有关 的病症、免疫缺陷疾病、破坏性骨病、增殖性疾病、传染病、与细胞死亡有关的病症、 凝血酶诱导的血小板聚集、慢性粒细胞性白血病(CML)、肝脏疾病、涉及T细胞活 化的病理性免疫疾病(pathologic immune conditions)和中枢神经系统(CNS)疾病。
本发明的还一个方面提供了预防或治疗过度增殖性疾病的方法，包括对需要这种 治疗的哺乳动物单独施用有效量的式Ia或Ib的化合物或其立体异构体、几何异构体、 互变异构体、溶剂合物、代谢物或药学上可接受的盐或前药，或联合施用其与一种或 多种具有抗过度增殖性能的另外化合物。
在又一个方面，本发明提供了使用本发明的化合物治疗哺乳动物中由PI3激酶调 节的疾病或病症的方法。
本发明的另一个方面是本发明的化合物在制备治疗或预防哺乳动物中由PI3激酶 调节的疾病或病症的药物中的用途。
本发明的再一个方面包括试剂盒，其包含式Ia或Ib的化合物或其立体异构体、 几何异构体、互变异构体、溶剂合物、代谢物或药学上可接受的盐或前药；容器以及 任选的指导治疗的包装说明书(package insert)或标签。
本发明的还一个方面包括式Ia和Ib的化合物的制备方法、分离方法和纯化方法。
本发明的其它优点和新颖特征的一部分将在下文中阐述，剩余部分在阅读了以下 说明书之后对于本领域技术人员来说显而易见或者可以通过实施本发明得知。通过在 所附权利要求中具体指出的手段、结合、组合物和方法来实现本发明的优点。
示例性实施方式详述
现在详细提到本发明的某些实施方案，结合结构及式子说明其实例。虽然结合所 列举的实施方案描述了本发明，但应该理解的是，本发明意图涵盖落入权利要求所定 义的发明范围内的所有替代、改造和等同物。本领域技术人员会认识到许多类似或等 同于本文描述的那些的方法和材料，它们可以用于实施本发明。本发明决不受限于所 述的方法和材料。如果一篇或多篇引用文献、专利和类似资料不同于本申请或与本申 请冲突，包括但不限于定义的术语、术语用法、所述技术等，那么以本申请为准。
定义
本文所使用的术语“烷基”是指1-12个碳原子的饱和直链或支链单价烃基，其中 烷基可以任选被一个或多个下述取代基独立取代。烷基的实例包括但不限于甲基(Me， -CH3)、乙基(Et，-CH2CH3)、1-丙基(n-Pr，正丙基，-CH2CH2CH3)、2-丙基(i-Pr， 异丙基，-CH(CH3)2)、1-丁基(n-Bu，正丁基，-CH2CH2CH2CH3)、2-甲基-1-丙基(i-Bu， 异丁基，-CH2CH(CH3)2)、2-丁基(s-Bu，仲丁基，-CH(CH3)CH2CH3)、2-甲基-2-丙基 (t-Bu，叔丁基，-C(CH3)3)、1-戊基(正戊基，-CH2CH2CH2CH2CH3)、2-戊基 (-CH(CH3)CH2CH2CH3)、3-戊基(-CH(CH2CH3)2)、2-甲基-2-丁基(-C(CH3)2CH2CH3)、 3-甲基-2-丁基(-CH(CH3)CH(CH3)2)、3-甲基-1-丁基(-CH2CH2CH(CH3)2)、2-甲基-1- 丁基(-CH2CH(CH3)CH2CH3)、1-己基(-CH2CH2CH2CH2CH2CH3)、2-己基 (-CH(CH3)CH2CH2CH2CH3)、3-己基(-CH(CH2CH3)(CH2CH2CH3))、2-甲基-2-戊基 (-C(CH3)2CH2CH2CH3)、3-甲基-2-戊基(-CH(CH3)CH(CH3)CH2CH3)、4-甲基-2-戊基(- CH(CH3)CH2CH(CH3)2)、3-甲基-3-戊基(-C(CH3)(CH2CH3)2)、2-甲基-3-戊基 (-CH(CH2CH3)CH(CH3)2)、2，3-二甲基-2-丁基(-C(CH3)2CH(CH3)2)、3，3-二甲基-2-丁基 (-CH(CH3)C(CH3)3、1-庚基、1-辛基等。
术语“烯基”是指具有至少一个不饱和位点，即碳-碳sp2双键的2-12个碳原子的 直链或支链单价烃基，其中该烯基可以任选被一个或多个本文所述的取代基独立取 代，并包括具有“顺式”和“反式”取向或者“E”和“Z”取向的基团。实例包括但不限于乙 烯基(-CH＝CH2)、烯丙基(-CH2CH＝CH2)等。
术语“炔基”是指具有至少一个不饱和位点，即碳-碳sp三键的2-12个碳原子的 直链或支化单价烃基，其中该炔基可以任选地被一个或多个本文所述的取代基独立取 代。实例包括但不限于乙炔基(-C≡CH)、丙炔基(炔丙基，-CH2C≡CH)等。
术语“碳环”、“碳环基”和“环烷基(cycloalkyl)”是指作为单环具有3-12个碳原 子或作为双环具有7-12个碳原子的单价非芳族、饱和或部分不饱和的环。具有7- 12个原子的双环碳环例如可以排列为双环[4，5]、[5，5]、[5，6]或[6，6]系统，并且具有9 或10个环原子的双环碳环可以排列为双环[5，6]或[6，6]系统，或者排列为桥连系统，如 双环[2.2.1]庚烷、双环[2.2.2]辛烷和双环[3.2.2]壬烷。单环碳环的实例包括但不限于环 丙基、环丁基、环戊基、1-环戊-1-烯基、1-环戊-2-烯基、1-环戊-3-烯基、环己基、1- 环己-1-烯基、1-环己-2-烯基、1-环己-3-烯基、环己二烯基、环庚基、环辛基、环壬基、 环癸基、环十一烷基、环十二烷基等。
“芳基”是指从芳族母环系统的单个碳原子上除去一个氢原子所获得的6-20个碳 原子的单价芳族烃基。一些芳基在示例性结构中表示为“Ar”。芳基包括芳环与饱和环、 部分不饱和环或芳族碳环或杂环稠合的双环基团。典型的芳基包括但不限于由苯(苯 基)、取代苯、萘、蒽、联苯基、茚基、茚满基、1，2-二氢萘、1，2，3，4-四氢萘基等衍生 的基团。芳基任选被一个或多个本文所述的取代基独立取代。
术语“杂环”和“杂环基”在本文可以互换地使用，是指3-20个环原子的饱和或部 分饱和(即，在环内具有一个或多个双键和/或三键)的碳环基团，其中至少一个环原 子是选自氮、氧和硫的杂原子，其余环原子是C，其中一个或多个环原子任选地被一 个或多个下文所述的取代基独立取代。杂环可以是具有3-7个环原子(2-6个碳原 子和1-4个选自N、O、P和S的杂原子)的单环或具有7-10个环原子(4-9个碳 原子和1-6个选自N、O、P和S的杂原子)的双环，例如双环[4，5]、[5，5]、[5，6]或[6，6] 系统。杂环描述于下列文献中：Paquette，Leo A.；＂Principles of Modern Heterocyclic Chemistry＂(W.A.Benjamin，New York，1968)，尤其第1、3、4、6、7和9章；＂The Chemistry of Heterocyclic Compounds，A series of Monographs＂(John Wiley & Sons， New York，1950至今)，尤其第13、14、16、19和28卷；以及J.Am.Chem.Soc.(1960) 82：5566。杂环基可以是碳基或杂原子基团。术语“杂环”包括杂环烷氧基。“杂环基”还 包括其中杂环基与饱和环、部分不饱和环或芳族碳环或杂环稠合的基团。杂环的实例 包括但不限于吡咯烷基、四氢呋喃基、二氢呋喃基、四氢噻吩基、四氢吡喃基、二氢 吡喃基、四氢噻喃基、哌啶子基、吗啉代、硫代吗啉基、噻噁烷基、哌嗪基、高哌嗪 基(homopiperazinyl)、氮杂环丁烷基、氧杂环丁烷基(oxetanyl)、硫杂环丁烷基 (thietanyl)、高哌啶基、氧杂环庚烷基、硫杂环庚烷基(thiepanyl)、氧氮杂基、 二氮杂基(diazepinyl)、硫氮杂革基(thiazepinyl)、2-吡咯啉基、3-吡咯啉基、 二氢吲哚基、2H-吡喃基、4H-吡喃基、二噁烷基、1，3-二氧戊环基、吡唑啉基、二噻 烷基、二硫杂环戊烷基、二氢吡喃基、二氢噻吩基、二氢呋喃基、吡唑烷基咪唑啉基、 咪唑烷基、3-氮杂双环[3.1.0]己烷基、3-氮杂双环[4.1.0]庚烷基、氮杂双环[2.2.2]己 烷基、3H-吲哚基喹嗪基和N-吡啶基脲。螺环结构部分也包括在该定义的范围内。其 中2个环碳原子被氧代(＝O)部分取代的杂环基团的实例是嘧啶酮基和1，1-二氧代-硫代 吗啉基。本文的杂环基团任选被一个或多个本文所述的取代基独立取代。
术语“杂芳基”是指含有一个或多个独立地选自氮、氧和硫的杂原子的5、6或7 元环的单价芳族基团，包括5-20个原子的稠环系统(至少一个是芳族的)。杂芳基 的实例是吡啶基(例如包括2-羟基吡啶基)、咪唑基、咪唑并吡啶基、嘧啶基(例如包 括4-羟基嘧啶基)、吡唑基、三唑基、吡嗪基、四唑基、呋喃基、噻吩基、异噁唑基、 噻唑基、噁唑基、异噻唑基、吡咯基、喹啉基、异喹啉基、吲哚基、苯并咪唑基、苯 并呋喃基、噌啉基、吲唑基、中氮茚基、2，3-二氮杂萘基、哒嗪基、三嗪基、异吲哚 基、喋啶基、嘌呤基、噁二唑基、三唑基、噻二唑基、噻二唑基、呋咱基、苯并呋咱 基、苯并噻吩基、苯并噻唑基、苯并噁唑基、喹唑啉基、喹喔啉基、萘啶基和呋喃并 哌啶基。杂芳基任选地被一个或多个本文所述的取代基独立取代。
杂环或杂芳基在可能进行此类连接之处可以是碳连接的、氮连接的或氧连接的。 作为非限制性实例，碳连接的杂环或杂芳基连接于以下位置：吡啶的2、3、4、5或6 位；哒嗪的3、4、5或6位；嘧啶的2、4、5或6位；吡嗪的2、3、5或6位；呋喃、 四氢呋喃、硫代呋喃、噻吩、吡咯或四氢吡咯的2、3、4或5位；噁唑、咪唑或噻唑 的2、4或5位；异噁唑、吡唑或异噻唑的3、4或5位；氮丙啶的2或3位；氮杂环 丁烷的2、3或4位；喹啉的2、3、4、5、6、7或8位或者异喹啉的1、3、4、5、6、 7或8位。
作为非限制性实例，氮连接的杂环或杂芳基连接于氮丙啶、氮杂环丁烷、吡咯、 吡咯烷、2-吡咯啉、3-吡咯啉、咪唑、咪唑烷、2-咪唑啉、3-咪唑啉、吡唑、吡唑啉、 2-吡唑啉、3-吡唑啉、哌啶、哌嗪、吲哚、二氢吲哚、1H-吲唑的1位，异吲哚或异吲 哚啉的2位，吗啉的4位以及咔唑或β-咔啉的9位。
含有一个或多个独立地选自氮、氧和硫的杂原子的“稠合双环C4-C20杂环基”和 “稠合双环C1-C20杂芳基”的区别仅在于它们的芳香性，并且都具有稠合在一起的两个 环，即，具有共同键。稠合双环杂环基和杂芳基可以在稠合双环C4-C20杂环基或稠合 双环C1-C20杂芳基R3基团的任何碳(碳连接的)原子或氮(氮连接的)原子处连接 于根据式Ia和Ib的嘧啶环的C-2位置。稠合双环杂环基和杂芳基包括但不限于：1H- 吲唑、1H-吲哚、二氢吲哚-2-酮、1-(二氢吲哚-1-基)乙酮、1H-苯并[d][1，2，3]三唑、1H- 吡唑并[3，4-b]吡啶、1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶、1H-苯并[d]咪唑、1H-苯并[d]咪唑-2(3H)- 酮、1H-吡唑并[3，4-c]吡啶、1H-吡咯并[2，3-c]吡啶、3H-咪唑并[4，5-c]吡啶、7H-吡咯 并[2，3-d]嘧啶、7H-嘌呤、1H-吡唑并[4，3-d]嘧啶、5H-吡咯并[3，2-d]嘧啶、2-氨基-1H- 嘌呤-6(9H)-酮、喹啉、喹唑啉、喹喔啉、异喹啉、异喹啉-1(2H)-酮、3，4-二氢异喹啉 -1(2H)-酮、3，4-二氢喹啉-2(1H)-酮、喹唑啉-2(1H)-酮、喹喔啉-2(1H)-酮、1，8-萘啶、 吡啶并[3，4-d]嘧啶和吡啶并[3，2-b]吡嗪。稠环双环杂环和稠合双环杂芳基任选地被本 文所述的一个或多个取代基独立取代。
烷基、烯基、炔基、碳环基、杂环基、芳基、杂芳基、稠合双环C4-C20杂环基和 稠合双环C1-C20杂芳基任选被取代基取代，所述取代基包括F、Cl、Br、I、CN、CF3、 -NO2、氧代、R10、-C(＝Y)R10、-C(＝Y)OR10、-C(＝Y)NR10R11、-(CR14R15)nNR10R11、 -(CR14R15)nOR10、-NR10R11、-NR12C(＝Y)R10、-NR12C(＝Y)OR11，-NR12C(＝Y)NR10R11、 -NR12SO2R10、＝NR12、OR10、-OC(＝Y)R10、-OC(＝Y)OR10、-OC(＝Y)NR10R11、 -OS(O)2(OR10)、-OP(＝Y)(OR10)(OR11)、-OP(OR10)(OR11)、SR10、-S(O)R10、-S(O)2R10、 -S(O)2NR10R11、-S(O)(OR10)、-S(O)2(OR10)、-SC(＝Y)R10、-SC(＝Y)OR10、 -SC(＝Y)NR10R11、任选取代的C1-C12烷基、任选取代的C2-C8烯基、任选取代的C2-C8 炔基、任选取代的C3-C12碳环基、任选取代的C2-C20杂环基、任选取代的C6-C20芳 基、任选取代的C1-C20杂芳基、-(CR14R15)t-NR12C(＝O)(CR14R15)NR10R11以及 (CR4R5)t-NR10R11。
术语“治疗”是指治疗性治疗和预防性措施，其中目的是预防或减慢(减轻)不希 望有的生理变化或障碍，例如癌症的发生或扩散。对于本发明的目的来说，有益或所 需的临床结果包括但不限于减轻症状、减轻疾病程度、稳定疾病状态(即没有恶化)、 延迟或减慢疾病进程、改善或缓和以及缓解疾病状态(不论是部分还是全部)，不论 是可检测到还是不能检测到。“治疗”还可以表示与如果没有接受治疗的期望存活期相 比，延长存活期。需要治疗的人包括已患有该疾病或病症的人以及易患该疾病或的人 或要预防该疾病或病症的人。
短语“治疗有效量”是指(i)治疗或预防特定疾病、病症或障碍；(ii)减轻、改善或消 除特定疾病、病症或障碍的一种或多种症状，或者(iii)预防或延迟本文所述的特定疾 病、病症或障碍的一个或多个症状开始出现的本发明化合物的量。在癌症的情况下， 药物的治疗有效量可以减少癌细胞的数目；减小肿瘤尺寸；抑制(即一定程度减慢， 且优选阻止)癌细胞浸润到周围器官；抑制(即一定程度减慢，且优选阻止)肿瘤转 移；一定程度抑制肿瘤生长；和/或一定程度减轻与癌症相关的一种或多种症状。该药 物可以一定程度防止癌细胞生长和/或杀死存在的癌细胞，它可以抑制细胞生长和/或 溶解细胞。对于癌症治疗，例如可以通过评定疾病进展时间(TTP)和/或测定反应率 (RR)来测定效力。
术语“癌症”是指或描述哺乳动物中的生理状况，其通常以不受调节的细胞生长为 特征。“肿瘤”包括一种或多种癌细胞。癌症的实例包括但不限于癌、淋巴瘤、母细胞 瘤、肉瘤以及白血病或淋巴恶性肿瘤。这类癌症的更具体的实例包括鳞状细胞癌(例如 鳞状上皮细胞癌)；肺癌，包括小细胞肺癌和非小细胞肺癌(“NSCLC”)、肺腺癌和肺鳞 状细胞癌；腹膜癌；肝细胞癌；包括肠或胃癌在内的胃肠癌症；胰腺癌；胶质母细胞 瘤；子宫颈癌；卵巢癌；肝癌；膀胱癌；肝细胞瘤；乳腺癌；结肠癌；直肠癌；结肠 直肠癌症；子宫内膜癌或子宫癌；唾液腺癌；肾癌；前列腺癌；外阴癌；甲状腺癌； 肝癌；肛门癌；阴茎癌和头颈癌。
“化疗剂”是用于治疗癌症的化合物。化疗剂的实例包括埃罗替尼 Genentech/OSI Pharm.)、保特佐米(Millennium Pharm.)、氟维司群 AstraZeneca)、舒尼替尼(SU11248，Pfizer)、来曲唑 Novartis)、甲磺酸伊马替尼(Novartis)、PTK787/ZK222584(Novartis)、 奥沙利铂(，Sanofi)、5-FU(5-氟尿嘧啶)、甲酰四氢叶酸、雷帕霉素 (Sirolimus，，Wyeth)、拉帕替尼(，GSK572016，Glaxo Smith Kline)、洛那法尼(Lonafarnib)(SCH 66336)、索拉非尼(BAY43-9006，Bayer Labs) 和吉非替尼(，AstraZeneca)、AG 1478、AG 1571(SU 5271；Sugen)、烷化 剂，如硫替派和环磷酰胺；烷基磺酸酯，例如白消安、英丙舒凡和哌泊 舒凡；氮杂环丙烷，例如苯佐替派(benzodopa)、卡巴醌、美妥替哌(meturedopa) 和乌瑞替哌(uredopa)；乙撑亚胺和甲基蜜胺类(methylamelamines)，包括六甲 蜜胺、曲他胺、三亚乙基磷酰胺、三乙撑硫代磷酰胺和三羟甲蜜胺 (trimethylomelamine)；多聚乙酰类(acetogenins)(尤其布拉它辛(bullatacin)和布 拉它辛酮(bullatacinone))；喜树碱(包括合成类似物拓扑替康)；草苔虫内酯 (bryostatin)；卡来斯他汀(callystatin)；CC-1065(包括它的阿多来新、卡折来新 和比折来新合成类似物)；自念珠藻环肽(cryptophycins)(尤其自念珠藻环肽1和 自念珠藻环肽8)；海兔毒肽(dolastatin)；多卡米星(duocarmycin，包括合成类似 物KW-2189和CB1-TM1)；艾榴塞洛素；水鬼蕉碱(pancratistatin)；沙可迪汀 (sarcodictyin)；海绵抑制素(spongistatin)；氮芥类，例如苯丁酸氮芥、双氯乙基 -β-萘胺、氯磷酰胺(chlorophosphamide)、雌氮芥、异环磷酰胺、二氯甲二乙胺、 二氯甲二乙胺氧化物盐酸盐、苯丙氨酸氮芥、新恩比兴、胆甾醇对苯乙酸氮芥、松龙 苯芥、氯乙环磷酰胺、尿嘧啶氮芥；亚硝基脲类，例如亚硝脲氮芥、吡葡亚硝脲、福 泰氮芥、环己亚硝脲、嘧啶亚硝脲和雷莫司汀(ranimnustine)；抗生素，例如烯二 炔类抗生素(例如卡奇霉素，尤其卡奇霉素γ1I和卡奇霉素ΩI1(Angew Chem.Intl.Ed. Engl.(1994)33：183-186)；蒽环类抗生素，包括Dynemicin A；二膦酸盐，比如氯膦酸 盐；埃斯波霉素(esperamicin)；新制癌菌素发色团和相关色蛋白烯二炔抗生素发色 团)、阿克拉霉素、放线菌素、奥斯拉米星(authramycin)、偶氮丝氨酸、博来霉素、 放线菌素C、卡柔比星、洋红霉素、嗜癌菌素、色霉素(chromomycinis)、放线菌 素、道诺红菌素、地托比星、6-重氮-5-氧代-L-正亮氨酸、(阿霉素)、 吗啉代多柔比星、氰基吗啉代多柔比星、2-二氢吡咯并-多柔比星和去氧多柔比星)、 表柔比星、依索比星、依达比星、麻西罗霉素、丝裂霉素比如丝裂霉素C、霉酚酸、 诺加霉素、橄榄霉素、培洛霉素、紫菜霉素、嘌呤霉素、三铁阿霉素、罗多比星、链 黑菌素、链脲霉素、杀结核菌素、乌苯美司、净司他丁、佐柔比星；抗代谢物比如氨 甲喋呤和5-氟尿嘧啶(5-FU)；叶酸类似物，比如4-氨基二甲叶酸(denopterin)、氨 甲喋呤、蝶罗呤、三甲曲沙；嘌呤类似物，比如氟达拉滨、6-巯基嘌呤、硫咪嘌呤 (thiamiprine)、2-氨基嘌呤-6-硫醇；嘧啶类似物，比如环胞苷、阿扎胞苷、6-氮尿 苷、卡莫氟、阿糖胞苷、双脱氧尿苷、去氧氟尿苷、依诺他滨、氟尿苷(floxuridine)； 雄性激素，比如二甲睾酮、屈他雄酮丙酸酯、环硫雄醇、美雄烷、睾丸内脂；抗肾上 腺药物，比如氨鲁米特、米托坦、曲洛司坦；叶酸补充剂比如frolinic acid；醋葡醛 内酯；醛磷酰胺苷(aldophosphamide glycoside)；氨基乙酰丙酸；恩尿嘧啶(eniluracil)； 安吖啶；贝斯特拉布希(bestrabucil)；比生群(bisantrene)；依达曲沙(edatraxate)； 地磷胺(defofamine)；脱羰秋水仙碱；地吖醌；依氟鸟氨酸(elfornithine)；依利 醋铵；埃坡霉素；乙环氧啶；硝酸镓；羟基脲；蘑菇多糖；氯尼达明(lonidainine)； 美登类化合物比如美登素和安丝菌素(ansamitocins)；丙脒腙；米托蒽醌；莫哌达 醇(mopidanmol)；尼曲吖啶(nitraerine)；喷司他丁；蛋氨氮芥(phenamet)； 吡柔比星；洛索蒽醌；鬼臼酸(podophyllinic acid)；2-乙基酰肼(2-ethylhydrazide)； 普鲁苄肼；多糖复合物(JHS Natural Products，Eugene，OR)；丙亚胺；根瘤菌 素；西佐喃；锗螺胺；细交链格孢菌酮酸；三乙撑亚胺苯醌；2，2′，2＂-三氯三乙胺； 单端孢霉烯族毒素类(trichothecenes)(尤其T-2毒素，verracurin A，杆孢菌素A和 蛇形菌毒素(anguidine))；尿烷；去乙酰长春酰胺；氮烯唑胺；甘露醇氮芥；二溴甘露 醇；二溴卫矛醇；双溴丙基哌嗪；加西托新(gacytosine)；阿拉伯糖苷(“Ara-C”)； 环磷酰胺；硫替派；紫杉类药物(taxoids)，例如(紫杉醇；Bristol-Myers Squibb Oncology.Princeton，N.J.)、ABRAXANETM(不含聚氧乙烯蓖麻油)、紫杉醇的 白蛋白工程纳米颗粒制剂(American Pharmaceutical Partners，伊利诺州 Schaumberg)、(多西他赛；法国Antony的-Poulenc Rorer)； 苯丁酸氮芥(chloranmbucil)；(吉西他滨)；6-硫代鸟嘌呤；巯基嘌呤； 氨甲喋呤；铂类似物比如顺铂和碳铂；长春花碱；表鬼臼毒素吡喃葡糖苷(VP-16)；异 环磷酰胺；米托蒽醌；长春新碱；(长春瑞滨)；诺消灵；表鬼臼毒噻 吩糖苷；依达曲沙；柔毛霉素；氨基蝶呤；卡培他滨；伊班膦酸钠；CPT-11； 拓扑异构酶抑制剂RFS 2000；二氟甲基鸟氨酸(DMFO)；类视色素比如视黄酸；以及 任何上述化合物的药学上可接受的盐、酸和衍生物。
在“化疗剂”的定义内还包括：(i)用于调节或抑制激素对肿瘤的作用的抗激素药， 例如抗雌激素剂和选择性雌激素受体调节剂(SERMs)，例如包括它莫昔芬(包括 它莫昔芬柠檬酸盐)、雷洛西芬、屈洛昔芬、4-羟基它莫昔芬、曲沃 昔芬、雷洛昔芬盐酸盐(keoxifene)、LY117018、奥那司酮和(托瑞米 芬柠檬酸盐)；(ii)调节肾上腺中雌激素产生的抑制芳香酶的芳香酶抑制剂，例如4(5)- 咪唑类、氨鲁米特、(乙酸甲地孕酮)、(依西美坦；Pfizer)、 福美坦(formestanie)、法倔唑、(伏氯唑)、(来曲唑；Novartis) 和(阿那曲唑；AstraZeneca)；(iii)抗雄激素，例如氟他胺、尼鲁米特、比 卡鲁胺、亮丙瑞林、戈舍瑞林；以及曲沙他滨(1，3-二氧戊环核苷胞嘧啶类似物)；(iv) 蛋白激酶抑制剂；(v)脂类激酶抑制剂；(vi)反义寡核苷酸，尤其抑制在牵涉异常细胞 增殖的信号传导途径中的基因的表达的那些，例如PKC-α、Ralf和H-Ras；(vii)核 糖酶，例如VEGF表达抑制剂(例如)和HER2表达抑制剂；(viii)疫 苗，例如基因治疗疫苗，例如 和 rIL-2；拓扑异构酶1抑制剂例如 rmRH；(ix)抗血管新生药，例如贝伐单抗(Genentech)；以及(x)以 上任何化合物的药学上可接受的盐、酸和衍生物。
本申请中所使用的术语“前药”是指本发明化合物的前体或衍生物形式，与母体化 合物或药物相比，其对细胞的细胞毒作用小，能够经酶促或水解活化或者转化为活性 更高的母体形式。例如参阅Wilman，＂Prodrugs in Cancer Chemotherapy＂ Biochemical Society Transactions，14，第375-382页，615th Meeting Belfast(1986)和 Stella等人，＂Prodrugs：A Chemical Approach to Targeted Drug Delivery，＂Directed Drug Delivery，Borchardt等人编辑，第247-267页，Humana Press(1985)。本发明的 前药包括但不限于含磷酸酯的前药、含硫代磷酸酯的前药、含硫酸酯的前药、含肽的 前药、D-氨基酸修饰的前药、糖基化的前药、含β-内酰胺的前药、含任选取代的苯氧 基乙酰胺的前药、含任选取代的苯基乙酰胺的前药、5-氟胞嘧啶和其它5-氟尿苷前药， 它们可以转化为活性更高的无细胞毒性(cytotoxic free)的药物。可以衍生为用于本 发明的前药形式的细胞毒性药物的实例包括但不限于本发明化合物以及诸如上面所 述的化疗剂。
“代谢物”是特定化合物或其盐通过在体内代谢产生的产物。化合物的代谢物可以 使用本领域已知的常规技术来鉴定，使用诸如本文所述的那些试验来测定它们的活 性。此类产物例如可以由被施用的化合物的氧化、还原、水解、酰胺化、脱酰胺、酯 化、脱酯、酶促裂解等产生。因此，本发明包括本发明化合物的代谢物，包括通过使 本发明化合物与哺乳动物接触足以获得其代谢产物的时间的方法所产生的化合物。
“脂质体”是由各种类型的脂质、磷脂和/或表面活性剂组成的小泡，可用于将药物 (如本文公开的PI3激酶抑制剂和任选的化疗剂)传递到哺乳动物。脂质体的组分通 常按双层结构排列，类似于生物膜的脂质排列。
术语“包装说明书”是指通常在治疗产品的商品包装中含有的说明书，其含有关于 使用这种治疗产品的指示、用法、剂量、给药、禁忌症和/或告诫的信息。
术语“手性”是指具有镜像配对(partner)的不重叠性的分子，而术语“非手性” 是指可重叠于其镜像配对上的分子。
术语“立体异构体”是指具有相同的化学构成，但原子或基团在空间的排列不同的 化合物。
“非对映异构体”是指具有两个或多个手性中心的立体异构体，其分子彼此之间不 互为镜像。非对映异构体具有不同物理性能，如熔点、沸点、光谱性能和反应性。可 以通过高分辨率分析程序如电泳和色谱法来分离非对映异构体的混合物。
“对映异构体”是指一种化合物的两种立体异构体，它们互为不可重叠的镜像。
本文所使用的立体化学定义和规定一般遵照S.P.Parker，Ed.，McGraw-Hill Dictionary of Chemical Terms(1984)McGraw-Hill Book Company，New York；以及 Eliel，E.和Wilen，S.，＂Stereochemistry of Organic Compounds＂，John Wiley & Sons， Inc.，New York，1994。本发明化合物可以含有不对称或手性中心，因此存在不同的立 体异构形式。有意将本发明化合物的所有立体异构形式，包括但不限于非对映异构体、 对映异构体和阻转异构体，以及它们的混合物如外消旋混合物形成本发明的一部分。 许多有机化合物以旋光形式存在，即，它们具有旋转平面偏振光的平面的能力。在描 述旋光化合物时，前缀D和L，或R和S，用于表示分子的手性中心的绝对构型。前 缀d和l或者(+)和(-)用于表示该化合物旋转平面偏振光的符号，其中(-)或l表示该化 合物是左旋的。前缀(+)或d的化合物是右旋的。对于给定化学结构，这些立体异构体 是相同的，除了它们为彼此的镜像。一种具体的立体异构体还可以称为对映异构体， 此类异构体的混合物通常称为对映异构体混合物。对映异构体的50:50混合物称为外 消旋混合物或外消旋物，它们可以在非立体选择或立体特异性的化学反应或过程中出 现。术语“外消旋混合物”和“外消旋物”是指两种对映异构体物质(species)的等摩尔 混合物，无旋光性。
术语“互变异构体”或“互变异构形式”是指可通过低能垒相互转换的不同能量的 结构异构体。例如，质子互变异构体(也称为质子移变互变异构体)包括经由质子迁 移相互转化，例如酮-烯醇和亚胺-烯胺异构化。化合价互变异构体包括通过改组一些 成键电子的相互转化。
本文所使用的短语“药学上可接受的盐”是指本发明化合物的药学上可接受的有 机或无机盐。盐的实例包括但不限于硫酸盐、柠檬酸盐、乙酸盐、草酸盐、氯化物、 溴化物、碘化物、硝酸盐、硫酸氢盐、磷酸盐、酸式磷酸盐、异烟酸盐，乳酸盐，水 杨酸盐，酸式柠檬酸盐、酒石酸盐、油酸盐、丹宁酸盐、泛酸盐、酒石酸氢盐、抗坏 血酸盐、琥珀酸盐、马来酸盐、龙胆酸盐、富马酸盐、葡糖酸盐、葡糖醛酸、蔗糖盐、 甲酸盐、苯甲酸盐、谷氨酸盐、甲磺酸盐、乙磺酸盐、苯磺酸盐、对-甲苯磺酸盐和双 羟萘酸盐(pamoate)(即，1，1’-亚甲基-双-(2-羟基-3-萘甲酸盐))。药学上可接受的盐 可以包括其它分子例如乙酸根离子、琥珀酸根离子或其它抗衡离子。抗衡离子可以是 稳定母体化合物上的电荷的任何有机或无机部分。此外，药学上可接受的盐可以在其 结构中具有多于一个的带电荷原子。在多个带电荷的原子为药学上可接受的盐的一部 分时，可以具有多个抗衡离子。因此，药学上可接受的盐可以具有一个或多个带电荷 原子和/或一个或多个抗衡离子。
如果本发明的化合物为碱，所需的药学上可接受的盐可以通过本领域可获得的任 何适当方法来制备，例如用诸如盐酸、氢溴酸、硫酸、硝酸、甲磺酸、磷酸等无机酸 或用诸如乙酸、马来酸、丁二酸、扁桃酸、富马酸、丙二酸、丙酮酸、草酸、乙醇酸、 水杨酸、吡喃糖苷酸(如葡糖醛酸或半乳糖醛酸)、α羟基酸(如柠檬酸或酒石酸)、 氨基酸(如天冬氨酸或谷氨酸)、芳香酸(如苯甲酸或肉桂酸)、磺酸(如对甲苯磺 酸或乙磺酸)等有机酸处理游离碱。
如果本发明的化合物是酸，所需的药学上可接受的盐可以通过任何适合的方法来 制备，例如用无机或有机碱如胺(伯、仲或叔)、碱金属氢氧化物或碱土金属氢氧化 物等处理游离酸。适合的盐的实例包括但不限于由氨基酸(如甘氨酸和精氨酸)、氨、 伯、仲和叔胺和环胺(如哌啶、吗啉和哌嗪)衍生的有机盐，以及由钠、钙、钾、镁、 锰、铁、铜、锌、铝和锂衍生的无机盐。
短语“药学上可接受的”是指该物质或组合物必须与配制剂包含的其它成分和/或 用其治疗的哺乳动物在化学和/或毒理学上相容。
“溶剂合物”是指一种或多种溶剂分子和本发明化合物的缔合物或复合物。形成溶 剂合物的溶剂的实例包括但不限于水、异丙醇、乙醇、甲醇、DMSO、乙酸乙酯、乙 酸和乙醇胺。术语“水合物”是指其中溶剂分子是水的复合物。
术语“保护基”是指通常用于封闭或保护特定官能团而使化合物上的其它官能团 反应的取代基。例如，“氨基保护基”是指封闭或保护化合物中的氨基官能团的连接于 氨基的取代基。适合的氨基保护基包括乙酰基、三氟乙酰基、叔丁氧羰基(BOC)、 苄氧基羰基(CBZ)和9-芴甲氧羰基(Fmoc)。类似地，“羟基保护基”是指封闭或 保护羟基官能团的羟基的取代基。适合的保护基包括乙酰基和甲硅烷基。“羧基保护 基”是指封闭或保护羧基官能团的羧基的取代基。常用的羧基保护基包括苯基磺酰基 乙基、氰基乙基、2-(三甲基甲硅烷基)乙基、2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基甲基、2-(对甲 苯磺酰基)乙基、2-(对硝基苯基亚磺酰基)乙基、2-(二苯基磷基)-乙基、硝基乙基等。 关于保护基和它们的用途的一般说明，参阅T.W.Greene，Protective Groups in Organic Synthesis，John Wiley & Sons，New York，1991。
术语“本发明化合物”、“本发明的化合物”和“式Ia和Ib的化合物”包括式Ia和Ib 的化合物以及它们的立体异构体、几何异构体、互变异构体、溶剂合物、代谢物和药 学上可接受的盐和前药。
术语“哺乳动物”包括但不限于人、小鼠、大鼠、豚鼠、猴、狗、猫、马、牛、猪 和羊以及禽类。
PI3激酶抑制剂化合物
本发明提供了潜在有用于治疗由PI3激酶调节的疾病、病症和/或障碍的4-吗啉代 噻吩并嘧啶和呋喃并嘧啶化合物以及它们的药物制剂。所述化合物可以作为泛抑制剂 抑制p110同工型，包括α、β、γ和δ型。所述化合物可以是选择性抑制p110同工型 之一的p110同工型选择性抑制剂。
更具体地说，本发明提供了式Ia和Ib的化合物及其立体异构体、几何异构体、 互变异构体、溶剂合物、代谢物和药学上可接受的盐：

其中：
X是O或S；
R1选自H、F、Cl、Br、I、CN、-CR14R15-NR16R17、-CR14R15-NHR10、 -(CR14R15)tNR10R11、-C(R14R15)nNR12C(＝Y)R10、-(CR14R15)nNR12S(O)2R10、 -(CR14R15)mOR10、-(CR14R15)nS(O)2R10、-(CR14R15)nS(O)2NR10R11、-C(OR10)R11R14、 -C(R14)＝CR18R19、-C(＝Y)R10、-C(＝Y)OR10、-C(＝Y)NR10R11、-C(＝Y)NR12OR10、 -C(＝O)NR12S(O)2R10、-C(＝O)NR12(CR14R15)mNR10R11、-NO2、-NHR12、 -NR12C(＝Y)R11、-NR12C(＝Y)OR11、-NR12C(＝Y)NR10R11、-NR12S(O)2R10、 -NR12SO2NR10R11、-S(O)2R10、-S(O)2NR10R11、-SC(＝Y)R10、-SC(＝Y)OR10、C2-C12 烷基、C2-C8烯基、C2-C8炔基、C3-C12碳环基、C2-C20杂环基、C6-C20芳基或C1-C20 杂芳基；
R2选自H、F、Cl、Br、I、CN、CF3、-NO2、-C(＝Y)R10、-C(＝Y)OR10、-C(＝Y)NR10R11、 -(CR14R15)mNR10R11、-(CR14R15)nOR10、-(CR14R15)t-NR12C(＝O)(CR14R15)NR10R11、 -NR12C(＝Y)R10、-NR12C(＝Y)OR10、-NR12C(＝Y)NR10R11、-NR12SO2R10、OR10、 -OC(＝Y)R10、-OC(＝Y)OR10、-OC(＝Y)NR10R11、-OS(O)2(OR10)、 -OP(＝Y)(OR10)(OR11)、-OP(OR10)(OR11)、SR10、-S(O)R10、-S(O)2R10、-S(O)2NR10R11、 -S(O)(OR10)、-S(O)2(OR10)、-SC(＝Y)R10、-SC(＝Y)OR10、-SC(＝Y)NR10R11、C1-C12 烷基、C2-C8烯基、C2-C8炔基、C3-C12碳环基、C2-C20杂环基、C6-C20芳基和C1-C20 杂芳基；
R3是稠合双环C4-C20杂环基或稠合双环C1-C20杂芳基；
R10、R11和R12独立地是H、C1-C12烷基、C2-C8烯基、C2-C8炔基、C3-C12碳环 基、C2-C20杂环基、C6-C20芳基或C1-C20杂芳基，
或者R10和R11与它们所连接的氮一起任选地形成饱和、部分不饱和或完全不饱 和的任选含有一个或多个选自N、O或S的另外环原子的C3-C20杂环，其中所述杂环 任选被一个或多个独立地选自以下的基团取代：氧代、(CH2)mOR10、NR10R11、CF3、 F、Cl、Br、I、SO2R10、C(＝O)R10、NR12C(＝Y)R11、NR12S(O)2R11、C(＝Y)NR10R11、 C1-C12烷基、C2-C8烯基、C2-C8炔基、C3-C12碳环基、C2-C20杂环基、C6-C20芳基和 C1-C20杂芳基；
R14和R15独立地选自H、C1-C12烷基或-(CH2)n-芳基，
或者R14和R15与它们所连接的原子一起形成饱和或部分不饱和的C3-C12碳环，
R16和R17独立地是H、C1-C12烷基、C2-C8烯基、C2-C8炔基、C3-C12碳环基或 C6-C20芳基，
R18和R19与它们所连接的碳一起形成C3-C20杂环，
其中所述烷基、烯基、炔基、碳环基、杂环基、芳基、杂芳基、稠合双环C4-C20 杂环基和稠合双环C1-C20杂芳基任选地被一个或多个独立地选自以下的基团取代：F、 Cl、Br、I、CN、CF3、-NO2、氧代、R10、-C(＝Y)R10、-C(＝Y)OR10、-C(＝Y)NR10R11、 -(CR14R15)nNR10R11、-(CR14R15)nOR10、-NR10R11、-NR12C(＝Y)R10、-NR12C(＝Y)OR11、 -NR12C(＝Y)NR10R11、-NR12SO2R10、＝NR12、OR10、-OC(＝Y)R10、-OC(＝Y)OR10、 -OC(＝Y)NR10R11、-OS(O)2(OR10)、-OP(＝Y)(OR10)(OR11)、-OP(OR10)(OR11)、SR10、 -S(O)R10、-S(O)2R10、-S(O)2NR10R11、-S(O)(OR10)、-S(O)2(OR10)、-SC(＝Y)R10、 -SC(＝Y)OR10、-SC(＝Y)NR10R11、任选取代的C1-C12烷基、任选取代的C2-C8烯基、 任选取代的C2-C8炔基、任选取代的C3-C12碳环基、任选取代的C2-C20杂环基、任选 取代的C6-C20芳基、任选取代的C1-C20杂芳基、 -(CR14R15)t-NR12C(＝O)(CR14R15)NR10R11以及(CR4R5)t-NR10R11；
Y是O、S或NR12；
m是0、1、2、3、4、5或6；
n是1、2、3、4、5或6；和
t是2、3、4、5或6。
在另一个实施方案中，本发明提供了式Ia和Ib的化合物，其中：
X是O或S；
R1选自H、-CR14R15-NR10R11、-(CR14R15)tNR10R11、-C(R14R15)nNR12C(＝Y)R10、 -(CR14R15)nNR12S(O)2R10、-(CR14R15)nOR10、-(CR14R15)nS(O)2R10、 -(CR14R15)nS(O)2NR10R11、-C(＝Y)R10、-C(＝Y)OR10、-C(＝Y)NR10R11、 -C(＝Y)NR12OR10、-C(＝O)NR12S(O)2R10、-C(＝O)NR12(CR14R15)mNR10R11、-NO2、 -NHR12、-NR12C(＝Y)R11、-NR12C(＝Y)OR11、-NR12C(＝Y)NR10R11、-NR12S(O)2R10、 -NR12SO2NR10R11、-S(O)2R10、-S(O)2NR10R11、-SC(＝Y)R10、-SC(＝Y)OR10、C2-C12 烷基、C2-C8烯基、C2-C8炔基、C3-C12碳环基、C2-C20杂环基、C6-C20芳基或C1-C20 杂芳基；
R2选自H、F、Cl、Br、I、CN、CF3、-NO2、-C(＝Y)R10、-C(＝Y)OR10、-C(＝Y)NR10R11、 -(CR14R15)mNR10R11、-(CR14R15)nOR10、-(CR14R15)t-NR12C(＝O)(CR14R15)NR10R11、 -NR12C(＝Y)R10、-NR12C(＝Y)OR10，-NR12C(＝Y)NR10R11、-NR12SO2R10、OR10、 -OC(＝Y)R10、-OC(＝Y)OR10、-OC(＝Y)NR10R11、-OS(O)2(OR10)、-OP(＝Y)(OR10)(OR11)、 -OP(OR10)(OR11)、SR10、-S(O)R10、-S(O)2R10、-S(O)2NR10R11、-S(O)(OR10)、 -S(O)2(OR10)、-SC(＝Y)R10、-SC(＝Y)OR10、-SC(＝Y)NR10R11、C2-C12烷基、C2-C8烯 基、C2-C8炔基、C3-C12碳环基、C2-C20杂环基、C6-C20芳基和C1-C20杂芳基；
R3是稠合双环C2-C20杂环基或稠合双环C1-C20杂芳基；
R10、R11和R12独立地是H、C1-C12烷基、C2-C8烯基、C2-C8炔基、C3-C12碳环 基、C2-C20杂环基、C6-C20芳基或C1-C20杂芳基，
或者R10和R11与它们所连接的氮一起任选地形成饱和、部分不饱和或完全不饱 和的任选含有一个或多个选自N、O或S的另外环原子的C3-C20杂环，其中所述杂环 任选被一个或多个独立地选自以下的基团取代：氧代、(CH2)nOR10、NR10R11、CF3、 F、Cl、Br、I、SO2R10、C(＝O)R10、NR12C(＝Y)R11、C(＝Y)NR10R11、C1-C12烷基、 C2-C8烯基、C2-C8炔基、C3-C12碳环基、C2-C20杂环基、C6-C20芳基和C1-C20杂芳基；
R14和R15独立地选自H、C1-C12烷基或-(CH2)n-芳基，
或者R14和R15与它们所连接的原子一起形成饱和或部分不饱和的C3-C12碳环，
其中所述烷基、烯基、炔基、碳环基、杂环基、芳基和杂芳基任选被一个或多个 独立地选自以下的基团取代：F、Cl、Br、I、CN、CF3、-NO2、氧代、-C(＝Y)R10、 -C(＝Y)OR10、-C(＝Y)NR10R11、-(CR14R15)nNR10R11、-(CR14R15)nOR10、-NR10R11、 -NR12C(＝Y)R10、-NR12C(＝Y)OR11、-NR12C(＝Y)NR10R11、-NR12SO2R10、＝NR12、OR10、 -OC(＝Y)R10、-OC(＝Y)OR10、-OC(＝Y)NR10R11、-OS(O)2(OR10)、-OP(＝Y)(OR10)(OR11)、 -OP(OR10)(OR11)、SR10、-S(O)R10、-S(O)2R10、-S(O)2NR10R11、-S(O)(OR10)、 -S(O)2(OR10)、-SC(＝Y)R10、-SC(＝Y)OR10、-SC(＝Y)NR10R11、C1-C12烷基、C2-C8烯 基、C2-C8炔基、C3-C12碳环基、C2-C20杂环基、C6-C20芳基、C1-C20杂芳基、 -(CR14R15)t-NR12C(＝O)(CR14R15)NR10R11以及(CR4R5)t-NR10R11；
Y是O、S或NR12；
m是0、1、2、3、4、5或6；
n是1、2、3、4、5或6；和
t是2、3、4、5或6。
式Ia和Ib化合物是区域异构体，即在噻吩并嘧啶(X＝硫)或呋喃并嘧啶(X＝ 氧)环体系中的原子X的位置不同。式Ia和Ib化合物的母体分子是：

噻吩并[3，2d]嘧啶       噻吩并[2，3-d]嘧啶

呋喃并[3，2-d]嘧啶       呋喃并[2，3-d]嘧啶
因此，本发明化合物包括4-吗啉代噻吩并嘧啶和4-吗啉代呋喃并嘧啶化合物各自 的两种区域异构体，以及如以下由R1、R2和R3所述的取代形式：

在某些实施方案中，R1是-(CR14R15)tNR10R11，其中t是2或3，R10和R11与它们 所连接的氮一起形成C3-C20杂环。
在某些实施方案中，R1是-(CR14R15)nNR12S(O)2R10，其中n是1或2；R12、R14 和R15独立地选自H和C1-C12烷基；R10是C1-C12烷基或C6-C20芳基。
在某些实施方案中，R1是-(CR14R15)nOR10，其中n是1或2，R10、R14和R15独 立地选自H和C1-C12烷基。
在某些实施方案中，R1是-(CR14R15)nS(O)2R10，其中n是1或2，R14和R15是H。 R10可以是C1-C12烷基或C6-C20芳基。
在某些实施方案中，R1是-(CR14R15)nS(O)2NR10R11，其中n是1或2，R14和R15 是H。
在某些实施方案中，R1是-C(＝Y)NR10R11，其中Y是O，R10和R11与它们所连接 的氮一起形成C2-C20杂环。R10和R11与它们所连接的氮一起可以形成选自吗啉基、 哌啶基、哌嗪基和吡咯烷基的C2-C20杂环。
在某些实施方案中，R1是-C(＝Y)NR10R11，其中Y是O，R10和R11独立地选自H 和C1-C12烷基。
在某些实施方案中，R1是-C(＝Y)NR10R11，其中Y是O，R10和R11独立地选自H、 C3-C12碳环基、C2-C20杂环基、C6-C20芳基和C1-C20杂芳基。
在某些实施方案中，R1是-NHR12，其中R12是C3-C12碳环基、C2-C20杂环基、 C6-C20芳基或C1-C20杂芳基。R12可以是苯基或4-吡啶基。
在某些实施方案中，R1是-NR12C(＝Y)R11，其中Y是O，R12是H或C1-C12烷基， R11是C1-C12烷基、C3-C12碳环基、C2-C20杂环基、C6-C20芳基或C1-C20杂芳基。R11 包括但不限于甲基、乙基、丙基、异丙基、异丁基、2，2-二甲基丙基和叔丁基。R11还 包括但不限于环丙基、环丁基、环戊基和环己基。
在某些实施方案中，R1是-NR12S(O)2R10，其中R12是H或C1-C12烷基，R10是 C1-C12烷基、C3-C12碳环基、C2-C20杂环基、C6-C20芳基或C1-C20杂芳基。
在某些实施方案中，R1是S(O)2NR10R11，其中R10和R11与它们所连接的氮一起 形成选自吗啉基、哌啶基、哌嗪基和吡咯烷基的C2-C20杂环。
在某些实施方案中，R1是S(O)2NR10R11，其中R10和R11独立地选自H和C1-C12 烷基。R10和R11可以独立地选自H、取代的乙基和取代的丙基。
在某些实施方案中，R1是C2-C12烷基。
在某些实施方案中，R1是C2-C8烯基。
在某些实施方案中，R1是C2-C8炔基。C2-C8炔基可以被C2-C20杂环基取代，所 述C2-C20杂环基包括但不限于吗啉基、哌啶基、哌嗪基和吡咯烷基。
在某些实施方案中，R1选自以下基团：

和
在某些实施方案中，R1是C6-C20芳基，例如苯基。
在某些实施方案中，R1是C3-C12碳环基。
在某些实施方案中，R1是C2-C20杂环基。
在某些实施方案中，R1是C1-C20杂环基，例如2-吡啶基、3-吡啶基、4-吡啶基或 5-嘧啶基。
在某些实施方案中，R2是H。
在某些实施方案中，R2是甲基(CH3)。
R3的示例性实施方案包括但不限于：1H-吲唑、1H-吲哚、二氢吲哚-2-酮、1-(二 氢吲哚-1-基)乙酮、1H-苯并[d][1，2，3]三唑、1H-吡唑并[3，4-b]吡啶、1H-吡唑并[3，4-d] 嘧啶、1H-苯并[d]咪唑、1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮、1H-吡唑并[3，4-c]吡啶、1H-吡咯 并[2，3-c]吡啶、3H-咪唑并[4，5-c]吡啶、7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶、7H-嘌呤、1H-吡唑并 [4，3-d]嘧啶、5H-吡咯并[3，2-d]嘧啶、2-氨基-1H-嘌呤-6(9H)-酮、喹啉、喹唑啉、喹喔 啉、异喹啉、异喹啉-1(2H)-酮、3，4-二氢异喹啉-1(2H)-酮、3，4-二氢喹啉-2(1H)-酮、 喹唑啉-2(1H)-酮、喹喔啉-2(1H)-酮、1，8-萘啶、吡啶并[3，4-d]嘧啶和吡啶并[3，2-b]吡嗪。
R3基团与根据式Ia和Ib的嘧啶环的C-位置的连接部位(site)可以在稠合双环 C4-C20杂环基或稠合双环C1-C20杂芳基R3基团的任何碳(碳连接)、氮(氮连接) 或氧(氧连接)原子处。
R3的示例性实施方案包括下列基团，其中波浪线表示连接至嘧啶环的部位：



其中波浪线表示连接部位。
R3的示例性实施方案包括稠合双环C4-C20杂环基和稠合双环C1-C20杂芳基(包 括以上举例说明的那些)，其被一个或多个独立地选自以下的基团取代：F、Cl、Br、 I、CN、CF3、-NO2、氧代、-C(＝Y)R10、-C(＝Y)OR10、-C(＝Y)NR10R11、-(CR14R15)nNR10R11、 -(CR14R15)nOR10、-NR10R11、-NR12C(＝Y)R10、-NR12C(＝Y)OR11、-NR12C(＝Y)NR10R11、 -NR12SO2R10、＝NR12、OR10、-OC(＝Y)R10、-OC(＝Y)OR10、-OC(＝Y)NR10R11、 -OS(O)2(OR10)、-OP(＝Y)(OR10)(OR11)、-OP(OR10)(OR11)、SR10、-S(O)R10、-S(O)2R10、 -S(O)2NR10R11、-S(O)(OR10)、-S(O)2(OR10)、-SC(＝Y)R10、-SC(＝Y)OR10、 -SC(＝Y)NR10R11、C1-C12烷基、C2-C8烯基、C2-C8炔基、C3-C12碳环基、C2-C20杂环 基、C6-C20芳基、C1-C20杂芳基、-(CR14R15)t-NR12C(＝O)(CR14R15)NR10R11以及 (CR4R5)t-NR10R11。
本发明的式Ia和Ib化合物可以含有不对称或手性中心，因此以不同的立体异构形 式存在。有意将本发明化合物的所有立体异构形式，包括但不限于非对映异构体、对 映异构体和阻转异构体以及它们的混合物(例如外消旋混合物)构成本发明的一部分。
另外，本发明包括所有的几何和位置异构体。例如，如果式Ia和Ib的化合物包 含双键或稠环，则它们的顺式、反式以及顺式和反式混合物均在本发明范围内。单一 的位置异构体和位置异构体的混合物也在本发明的范围内。
在本文所示结构式中，如果任何特定手性原子的立体化学没有被指明，那么考虑 所有的立体异构体，并将之包括为本发明化合物。如果用表示特定构型的实心楔或短 划线规定了立体化学，那么该立体异构体被这样规定和定义。
本发明的化合物可以非溶剂化形式和含有药学上可接受的溶剂(如水、乙醇等) 的溶剂化形式存在，本发明有意包括溶剂化和非溶剂化形式。
本发明的化合物还可以不同互变异构形式存在，所有这些形式均包括在本发明范 围内。术语“互变异构体”或“互变异构形式”是指经由低能垒相互转化的不同能量的结 构异构体，例如，质子互变异构体(也称为质子移变互变异构体)包括经由质子迁移 相互转化，例如酮-烯醇和亚胺-烯胺异构化。化合价互变异构体包括通过改组一些成 键电子的相互转化。
本发明还包括同位素标记的本发明化合物，它们与本文所述那些相同，但实际上 一个或多个原子被原子量或质量数与天然存在的原子量或质量数不同的原子替代。任 何特定原子或元素的所有同位素被考虑在本发明化合物和它们的用途的范围内。可以 并入本发明化合物的同位素实例包括氢、碳、氮、氧、磷、硫、氟、氯和碘的同位素， 例如2H、3H、11C、13C、14C、13N、15N、15O、17O、18O、32P、33P、35S、18F、36Cl、 123I和125I。本发明的某些同位素标记的化合物(例如用3H和14C标记的那些)有用 于化合物和/或底物组织分布检测。氚化(3H)和碳-14(14C)同位素因其制备简单和可 检测性而有用。此外，用诸如氘(即2H)的更重的同位素进行取代可以提供由更高的 代谢稳定性而获得的某些治疗优点(例如增加体内半衰期或减小剂量要求)，因此在 某些情况下可能是优选的。正电子发射同位素(例如15O、13N、11C和18F)有用于正 电子发射断层摄影术(PET)研究来检验底物受体占用率。同位素标记的本发明化合 物一般可以按照类似于以下反应路线和/或实施例中所公开的那些的操作程序通过用 同位素标记的试剂替代非同位素标记的试剂来制备。
式Ia和Ib化合物的制备
式Ia和Ib的噻吩并嘧啶和呋喃并嘧啶化合物可以通过包括类似于化学领域众所 周知的那些方法的合成路线，尤其根据本文的说明来合成。起始原料一般可以从商业 来源(例如Aldrich Chemicals(Milwaukee，WI))来获得，或者容易地使用本领域技 术人员熟知的方法来制备(例如通过Louis F.Fieser和Mary Fieser，Reagents for Organic Synthesis，v.1-19，Wiley，N.Y.(1967-1999 ed.)或者Beilsteins Handbuch der organischen Chemie，4，Aufl.ed.Springer-Verlag，Berlin，包括补充材料(也可以从 Beilstein在线数据库获得)中一般描述的方法来制备)。
在某些实施方案中，式Ia或Ib的化合物可以容易地使用众所周知用于制备噻吩 类、呋喃类、嘧啶类(US 6608053；US 6492383；US 6232320；US 6187777；US 3763156； US 3661908；US 3475429；US 5075305；US 2003/220365；GB 1393161；WO 93/13664；) 和其它杂环(描述于Comprehensive Heterocyclic Chemistry，Katritzky和Rees编辑， Pergamon Press，1984)的操作程序来制备。
式Ia和Ib的化合物可以单独制备或作为包含至少2种(例如5-1,000种或10 -100种)化合物的化合物库来制备。可以利用本领域技术人员已知的操作程序通过 “分割和混合(‘split and mix’)”组合方法或者通过使用溶液相或固相化学的多个平行合 成来制备式Ia或Ib的化合物库。因此，本发明的另一个方面提供了包含至少2种化 合物或其药学上可接受的盐的化合物库。
为了说明的目的，方案1-7示出了制备本发明化合物和关键中间产物的一般方 法。关于各个反应步骤的详细说明，参见以下实施例部分。本领域技术人员将理解， 可以使用其它合成路线来合成本发明化合物。虽然在以下方案中描述并且讨论了具体 的起始原料和试剂，但可以容易地换用其它起始原料和试剂以提供各种衍生物和/或反 应条件。另外，用下述方法制备的许多化合物可以根据本公开内容，使用本领域技术 人员熟知的普通化学方法加以进一步改造。
在式Ia和Ib化合物的制备中，中间体的远端官能团(remote functionality)(例 如伯胺或仲胺)的保护可能是必需的。对此类保护的需要将取决于远端官能团的性质 和制备方法的条件。适合的氨基保护基包括乙酰基、三氟乙酰基、叔丁氧羰基(BOC)、 苄氧基羰基(CBz)和9-芴甲氧羰基(Fmoc)。本领域技术人员容易地确定对此类保 护的需要。关于保护基及其用途的一般说明，参见T.W.Greene，Protective Groups in Organic Synthesis，John Wiley & Sons，New York，1991。

方案1
方案1示出了从2-羧酸酯，3-氨基噻吩(X＝S)和呋喃(X＝O)、以及2-氨基，3-羧 酸酯噻吩(X＝S)和呋喃(X＝O)试剂(分别为51和52)制备噻吩并嘧啶和呋喃并 嘧啶中间体55和56的一般方法，其中X是O或S；Hal是Cl、Br或I；R1、R2和 R10如以上对于式Ia和Ib化合物或其前体或前药所定义。

方案2
方案2示出了在有机溶剂中于碱性条件下分别用吗啉从双卤代噻吩并嘧啶和4-吗 啉代呋喃并嘧啶中间体57和58中选择性置换4-卤素以制备2-卤代，4-吗啉代噻吩并 嘧啶和4-吗啉代呋喃并嘧啶化合物59和60的一般方法，其中X是O或S；Hal是 Cl、Br或I；R1和R2如以上对于式Ia和Ib化合物或其前体或前药所定义。

方案3
方案3示出了对其中R1是H的2-卤代，4-吗啉代，6-氢噻吩并嘧啶和4-吗啉代 呋喃并嘧啶化合物61和62的6位进行衍生的一般方法。用锂化试剂处理61或62以 脱除6位质子，随后加入酰化试剂R10C(O)Z(其中Z是离去基团，例如卤基(halide)、 NHS酯、羧酸酯或二烷基氨基)，得到2-卤代，4-吗啉代，6-酰基噻吩并嘧啶和4- 吗啉代呋喃并嘧啶化合物63和64，其中X是O或S；Hal是Cl、Br或I；R2和R10 如对于式Ia和Ib化合物或其前体或前药所定义。制备6-甲酰基化合物的R10C(O)Z 实例(R10＝H)是N，N’-二甲基甲酰胺(DMF)。

方案4
方案4示出了使2-卤代嘧啶中间体(65和66)与稠合双环杂环或杂芳基硼酸(R15 ＝H)或酯(R15＝烷基)试剂67进行铃木型偶联，以制备式Ia和Ib的2-稠合双环 杂环或杂芳基(FBHy)，4-吗啉代噻吩并嘧啶和4-吗啉代呋喃并嘧啶化合物(68和 69)，其中X是O或S；Hal是Cl、Br或I；R1和R2如以上对于式Ia和Ib化合物 或其前体或前药所定义。关于铃木反应的综述，参见Miyaura等人，(1995)Chem.Rev. 95：2457-2483；Suzuki，A.(1999)J.Organomet.Chem.576：147-168；Suzuki，A.，in Metal-Catalyzed Cross-Coupling Reactions，Diederich，F.，Stang，P.J.，编辑，VCH， Weinheim，DE(1998)，第49-97页。钯催化剂可以是通常用于铃木类型的交叉偶联的 任何催化剂，例如PdCl2(PPh3)2、Pd(PPh3)4、Pd(OAc)2、PdCl2(dppf)-DCM、 Pd2(dba)3/Pt-Bu)3(Owens等人，(2003)Bioorganic & Med.Chem.Letters 13：4143-4145； Molander等人，(2002)Organic Letters 4(11)：1867-1870；US6448433)。

方案5
方案5示出了合成炔71的一般方法，该方法能够用于制备化合物72和73的炔 基化衍生物。可以通过在适当的碱(Cs2CO3等)的存在下，使炔丙基溴70与式 R10R11NH的胺(其中R10和R11独立地选自H、烷基、芳基和杂芳基，或者R10和R11 与它们连接的氮原子一起形成杂环)反应来制备炔丙基胺71。关于炔基胺以及相关合 成的综述，参见Booker-Milburn，K.I.，Comprehensive Organic Functional Group Transformations(1995)，2：1039-1074；以及Viehe，H.G.，(1967)Angew.Chem.，Int.Ed. Eng.，6(9)：767-778。炔71可以随后与中间体72(X2＝溴或碘)或73(通过Sonogashira 偶联)反应，以分别提供化合物74和75，其中X是O或S，R2和R3如以上对于式 Ia和Ib化合物或其前体或前药所定义。

方案6
方案6示出了合成炔类77的一般方法，该方法能够用于制备化合物72和73的 炔基化衍生物可以使用Zaragoza，F.等人，(2004)J.Med.Chem.，47：2833所述的方法 来制备偕二烷基炔丙基胺77。根据方案10，可使偕二烷基氯76(R14和R15独立地是 甲基、乙基或其它烷基)与式R10R11NH的胺(其中R10和R11独立地选自H、烷基、 芳基和杂芳基，或者R10和R11与它们连接的氮原子一起形成杂环)在CuCl和适当的 碱(例如TEA等)的存在下反应，以提供炔烃77。炔烃77可以分别与中间体72或 73(通过Sonogashira偶联)反应，以获得化合物78和79，其中X是S或O，R2和 R3如以上对于式Ia和Ib化合物或其前体或前药所定义。

方案7
方案7示出了合成炔烃81的一般方案，该方案能够用于制备化合物72和73的 炔基化衍生物。可以使用Olomucki M.等人(1960)Ann.Chim.5：845所述的操作程序， 通过炔烃80(LG＝甲苯磺酸根或其它离去基团)与式R10R11NH的胺(其中R10和 R11独立地选自H、烷基、芳基和杂芳基，或者R10和R11与它们连接的氮原子一起形 成杂环)的反应来制备丁-3-炔-1-胺81(其中R14和R15独立地是H、烷基、芳基、杂 芳基，或者R14和R15与它们连接的碳原子一起形成碳环或杂环)。炔烃81随后可以 与中间体72或73(通过Sonogashira偶联)按照方案5和7所提供的说明进行反应， 分别提供化合物82和83，其中X是O或S，R2和R3如以上对于式Ia和Ib化合物 或其前体或前药所定义。
分离方法
在制备本发明化合物的方法中，可以有利地将反应产物相互分离和/或与起始原料 分离。通过本领域的常用技术将每一步骤或每一系列步骤的所需产物分离和/或纯化 (下文称为“分离”)至所需的均质程度。通常，此类分离包括多相萃取、从溶剂或溶 剂混合物中结晶、蒸馏、升华或色谱分离。色谱法可以包括许多方法，例如包括反相 和正相色谱；尺寸排阻色谱；离子交换色谱；高、中和低压液相色谱方法和装置；小 规模分析；模拟移动床(SMB)和制备性薄或厚层色谱法以及小规模薄层和快速(flash) 色谱技术。
另一类分离方法包括用试剂处理混合物，所述试剂选择为与所需产物、未反应的 起始原料、反应副产物等结合或者在其它情况下可分离(otherwise separable)。此 类试剂包括吸附剂或吸收剂，例如活性炭、分子筛、离子交换介质等。或者，该试剂 在碱性材料的情况下可以是酸，在酸性材料的情况下可以是碱，还可以是结合试剂， 例如抗体、结合蛋白、选择性螯合剂例(如冠醚)、液/液离子萃取试剂(LIX)等。
适当的分离方法的选择取决于所涉及的材料的性质。例如，蒸馏和升华时的沸点 和分子量，色谱法中的极性官能团的存在与否，多相萃取中的酸性和碱性介质中材料 的稳定性等等。本领域技术人员会应用最可能实现所需分离的技术。
可以通过本领域技术人员熟知的方法(例如通过色谱和/或分级结晶)根据它们的 物理化学差别将非对映异构体混合物分离为它们的单种的非对映异构体。可以通过以 下方法分离对映异构体：通过与适当的旋光化合物(例如手性助剂，如手性醇或 Mosher’酰氯)反应将对映异构体混合物转化为非对映异构体混合物，分离非对映异 构体并将单种非对映异构体转化(例如水解)为相应的纯对映异构体。另外，一些本 发明化合物可以是阻转异构体(例如取代的双芳基)，并且被认为是本发明的一部分。 还可以使用手性HPLC柱来分离对映异构体。
单一立体异构体(例如基本上不含其立体异构体的对映异构体)可以通过使用诸 如用旋光拆分剂形成非对映异构体的方法拆分外消旋混合物来获得(Eliel，E.和Wilen， S.＂Stereochemistry of Organic Compounds，＂John Wiley & Sons，Inc.，New York， 1994；Lochmuller，C.H.，(1975)J.Chromatogr.，113(3)：283-302)。本发明的手性化合物 的外消旋混合物可以通过任何适当的方法分离，包括：(1)与手性化合物形成离子 的非对映异构体盐，并通过分级结晶或其它方法分离；(2)与手性衍生化试剂形成 非对映异构体化合物，分离所述非对映异构体，并转化为纯的立体异构体；以及(3) 直接在手性条件下分离基本纯的或富集的立体异构体。参见：“Drug Stereochemistry， Analytical Methods and Pharmacology”，Irving W.Wainer，Ed.，Marcel Dekker，Inc.， New York(1993)。
在方法(1)中，可通过对映体纯(enantiomerically pure)的手性碱(例如马钱 子碱、奎宁、麻黄素、士的宁、α-甲基-β-苯基乙基胺(苯异丙胺)等)与带有酸性 官能团的不对称化合物(如羧酸和磺酸)反应而形成非对映异构体盐。非对映异构体 盐可通过分级结晶或离子色谱法分离。为了分离氨基化合物的光学异构体，加入手性 羧酸或磺酸(如樟脑磺酸、酒石酸、扁桃酸或乳酸)，可形成非对映异构体盐。
或者通过方法(2)，待拆分的底物与一种对映异构体手性化合物反应以形成非 对映异构体对(E.and Wilen，S.“Stereochemistry of Organic Compounds”，John Wiley & Sons，Inc.，1994，第322页)。可以通过使不对称化合物与对映体纯的手性衍生化试 剂(如薄荷基衍生物)反应来形成非对映异构体化合物，随后分离非对映异构体并水 解，获得纯的或富集的对映异构体。测定光学纯度的一种方法包括制备外消旋混合物 的手性酯，例如薄荷酯(例如在碱的存在下的(-)氯甲酸薄荷酯)或Mosher酯、乙酸 α-甲氧基-α-(三氟甲基)苯酯(Jacob III.J.Org.Chem.，(1982)47：4165)，并对关于两种 阻转对映异构体或非对映异构体的存在的1H NMR波谱进行分析。阻转异构体化合物 的稳定的非对映异构体可以按照分离阻转萘基-异喹啉的方法(WO96/15111)通过正 相和反相色谱来分离。通过方法(3)，两种对映异构体的外消旋混合物可以通过使 用手性固定相的色谱来分离(＂Chiral Liquid Chromatography＂(1989)W.J.Lough， Ed.，Chapman and Hall，New York；Okamoto，J.Chromatogr.，(1990)513：375-378)。 富集的或纯化的对映异构体可以通过用于区分具有不对称碳原子的其它手性分子的 方法来区分，例如旋光度和圆二色性。
生物学评价
有可能用许多直接和间接的检测法来测定式Ia或Ib化合物对PI3激酶活性的活 性。对本文所述的某些示例性化合物进行制备、表征，并且分析了它们的PI3K结合 活性(实施例364和365)和体外抗肿瘤细胞活性(实施例366)。PI3K结合活性的 范围为小于1nM(纳摩尔)到大约10μM(微摩尔)。本发明的某些示例性化合物具 有小于10nM的PI3K结合活性IC50值。本发明的某些化合物具有小于100nM的基于 肿瘤细胞的活性IC50值。
式Ia和Ib化合物可以作为泛抑制剂抑制p110催化亚单位同工型，包括α、β、γ 和δ型。某些式Ia和Ib化合物可以是选择性抑制p110同工型α、β、γ或δ型之一的 p110同工型选择性抑制剂。本发明的一个实施方案是p110α选择性抑制剂的式Ia或 Ib化合物。P110选择性抑制剂可以减轻由与抑制其它p110同工型相关的潜在毒性造 成的毒性风险。某些式Ia和Ib化合物可以是与两种或多种p110同工型明显结合的 p110同工型泛抑制剂。本发明的一个实施方案是PI3K泛抑制剂的式Ia或Ib化合物。
通过闪烁亲近测定法(SPA)测量表1a和1b中的式Ia和Ib化合物与p110同工 型α、β、δ和γ的纯化制剂的结合，以测定结合活性(IC50μMol)以及β、δ和γ同工 型相对于α同工型的结合选择性(实施例365)。这些值在表2中示出。
式Ia和Ib示例性化合物的细胞毒或细胞静止(cytostatic)活性通过以下方法来 测定：在细胞培养基中建立正在增殖的哺乳动物肿瘤细胞系，加入式Ia或Ib化合物， 将细胞培养大约6小时到大约5天的时间；测定细胞活力(实施例366)。使用基于 细胞的体外分析来测定活力，即，增殖(IC50)、细胞毒性(EC50)和凋亡的诱导(胱 冬酶活化)。
式Ia和Ib示例性化合物的体外效力通过细胞增殖分析(购自Promega Corp.， Madison，WI的荧光细胞活力分析(Luminescent Cell Viability Assay))来测定(实施例366)。该均匀分析方法基于鞘翅目(Coleoptera)荧光素 酶的重组表达(US 5583024；US 5674713；US 5700670)，并基于所存在的ATP(代谢活 性细胞的指示物)的定量来测定培养基中的存活细胞数(Crouch等人，(1993)J. Immunol.Meth.160：81-88；US 6602677)。分析在96或384孔格式中 进行，使得可以进行自动化高通量筛选(HTS)(Cree等人，(1995)Anticancer Drugs 6：398-404)。均匀性分析操作包括将单一试剂(试剂)直接加入到补充 血清的培养基中培养的细胞中。不需要细胞洗涤、培养基去除和多个移液步骤。384 孔格式中，该体系可以在添加试剂和混合之后10分钟内检测到少达15细胞/孔。
均质的“加入-混合-测量(add-mix-measure)”形式导致细胞裂解以及产生与ATP 存在量成比例的发光信号。ATP的量与培养基中存在的细胞数成正比。 分析产生了“辉光型”发光信号，通过荧光素酶反应形成，它具有通常大于5小时的半 衰期，这取决于细胞类型和所使用的培养基。存活细胞反映在相对发光单位(RLU) 上。底物、甲虫荧光素通过重组萤火虫荧光素酶进行氧化脱羧，伴随着ATP转化为 AMP并产生光子。延长的半衰期不需要使用试剂注射器并提供多板连续或间歇模式 处理的灵活性。该细胞增殖分析可以按各种多孔格式，例如96或384孔格式使用。 可以用光度计或CCD照相机成像装置来记录数据。发光输出表示为随时间测定的相 对光单位(RLU)。
式Ia和Ib示例性化合物的抗增殖效应通过抗几种肿瘤细胞系(包括PC3、Detroit 562和MDAMB361.1)的分析来测定(实施例366)。建立试验化合 物的EC50值。体外细胞效力活性的范围是大约100nM到大约10μM。
通过包括下列的分析方法测定某些示例性化合物的某些ADME性能：Caco-2渗 透性(实施例367)、肝细胞清除(实施例368)、细胞色素P450抑制(实施例369)、 细胞色素P450诱导(实施例370)、血浆蛋白结合(实施例371)和hERG通道阻断 (实施例372)。
根据本发明的方法制备的示例性式Ia和Ib化合物No.101-466包括表1a和1b中 的以下结构和其相应名称(ChemDraw Ultra，CambridgeSoft Corp.，Cambridge MA)。
表1a







































表1b

































式Ia和Ib的化合物的给予
可以通过任何适于所治疗的疾病的途径给予本发明化合物。适合的途径包括口 服、胃肠外(包括皮下、肌内、静脉内、动脉内、皮内、鞘内和硬膜外)、透皮、直 肠、经鼻、局部(包括经颊和舌下)、阴道、腹膜内、肺内和鼻内。对于局部免疫抑 制治疗，可通过损害内施用给予所述化合物，包括灌注或者使移植物与抑制剂在移植 之前接触。应该理解，优选的途径可以随着例如接受者的状态而改变。在口服给予化 合物时，该化合物可以与药学上可接受的载体或赋型剂配制为丸剂、胶囊、片剂等。 在化合物胃肠外给予化合物时，该化合物可以与药学上可接受的胃肠外载体配制为单 位剂量注射形式(unit dosage injectable form)，如下所述。
治疗病人的剂量可以是大约10mg到大约1000mg的式Ia或Ib化合物。典型剂 量可以是大约100mg到大约300mg的化合物。可以一天一次(QID)、每天两次(BID) 或者更频繁的方式给予某一剂量，这取决于特定化合物的药代动力学和药效性能，包 括吸收、分布、代谢和排泄。另外，毒性因素可能影响剂量和给药方案。当口服给药 时，可可以在规定的时期内每日或以更低频率摄取丸剂、胶囊或片剂。该方案可以重 复多个治疗周期。
用式Ia和Ib化合物治疗的方法
本发明化合物可用于治疗疾病、病症和/或障碍(包括但不限于以过表达脂质激酶 (例如PI3激酶)为特征的那些)。因此，本发明的另一个方面包括治疗或预防疾病 或病症的方法，所述疾病或病症可以通过抑制包括PI3的脂质激酶来治疗或预防。在 一个实施方案中，该方法包括给予需要其的哺乳动物治疗有效量的式Ia或Ib的化合 物或其立体异构体、几何异构体、互变异构体、溶剂合物、代谢物或药学上可接受的 盐或前药。
可根据本发明方法治疗的疾病和病症包括但不限于癌症、中风、糖尿病、肝肿大、 心血管疾病、阿尔茨海默氏症、囊性纤维化、病毒病、自身免疫性疾病、动脉粥样硬 化、再狭窄、银屑病、过敏性疾病、炎症、神经病(neurological disorders)、激素相 关疾病、与器官移植有关的病症、免疫缺陷疾病、破坏性骨病、增殖性疾病、传染病、 与细胞死亡有关的病症、凝血酶诱导的血小板聚集、慢性粒细胞性白血病(CML)、 肝脏疾病、涉及T细胞活化的病理性免疫疾病和中枢神经系统疾病。在一个实施方案 中，病人用式Ia或Ib的化合物和药学上可接受的载体、佐剂或或赋形剂治疗，其中 式Ia或Ib的化合物以可检测到抑制PI3激酶活性的量存在。
可以根据本发明的方法治疗的癌症包括但不限于乳腺癌、卵巢癌、宫颈癌、前列 腺癌、睾丸癌、生殖泌尿道癌、食管癌、喉癌、成胶质细胞瘤、神经母细胞瘤、胃癌、 皮肤癌、角化棘皮瘤、肺癌、表皮样癌、大细胞癌、非小细胞肺癌(NSCLC)、小细胞 癌、肺腺癌、骨癌、结肠癌、腺瘤、胰腺癌、腺癌、甲状腺癌、滤泡状癌、未分化癌、 乳头状癌、精原细胞瘤、黑色素瘤、肉瘤、膀胱癌、肝癌和胆道癌、肾癌、骨髓异常 (myeloid disorders)、淋巴疾病、毛细胞癌、口腔和咽(口)癌、唇癌、舌癌、口癌、 咽癌、小肠癌、结肠-直肠癌、大肠癌、直肠癌、脑和中枢神经系统癌症、霍奇金病和 白血病。
可以根据本发明的方法治疗的心血管疾病包括但不限于再狭窄、心脏肥大、动脉 粥样硬化、心肌梗死和充血性心力衰竭。
可以根据本发明的方法治疗的神经变性疾病包括但不限于阿尔茨海默氏病、帕金 森氏病、肌萎缩侧索硬化症、亨廷顿氏病、脑缺血以及由外伤、谷氨酸神经中毒和缺 氧引起的神经变性疾病。
可以根据本发明的方法治疗的炎性疾病包括但不限于类风湿性关节炎、银屑病、 接触性皮炎和迟发性超敏反应。
本发明的另一个方面提供了用于治疗遭受上述疾病或病症的哺乳动物(例如人) 的本发明化合物。还提供了本发明化合物在制备治疗诸如哺乳动物(例如人)的温血 动物的本文所述疾病和病症的药药中的用途。
药物制剂
为了使用本发明化合物治疗性治疗(包括预防性治疗)包括人在内的哺乳动物， 通常按照标准制药实践将其配制为药物组合物。根据本发明的该方面，提供了包含本 发明化合物以及药学上可接受的稀释剂或载体的药物组合物。
通过将本发明化合物与载体、稀释剂或赋型剂混合来制备典型的制剂。适合的载 体、稀释剂和赋型剂是本领域技术人员所公知的，包括诸如碳水化合物、蜡、水溶性 和/或水溶胀性聚合物、亲水性或疏水性材料、明胶、油、溶剂、水等材料。所使用的 特定载体、稀释剂或赋型剂取决于施用本发明化合物的方法和目的。一般基于本领域 技术人员公认对哺乳动物施用安全(GRAS)的溶剂来选择溶剂。通常，安全的溶剂 是无毒的含水溶剂，例如水和其它在水中可溶或混溶的无毒溶剂。适合的含水溶剂包 括水、乙醇、丙二醇、聚乙二醇(例如PEG400、PEG300)等和它们的混合物。所述 制剂还可以包括一种或多种缓冲剂、稳定剂、表面活性剂、润湿剂、润滑剂、乳化剂、 悬浮剂、防腐剂、抗氧化剂、不透明剂、助流剂、加工助剂、着色剂、甜味剂、香味 剂、矫味剂和其它已知的添加剂，以提供优美表观的药物(即，本发明的化合物或其 药物组合物)或者有助于制造药品(即药物)。
可以使用常规的溶解和混合工艺来制备制剂。例如，将松散的(bulk)药物物质 (即本发明化合物或稳定形式的该化合物(例如与环糊精衍生物或其它已知复合剂的 复合物)在一种或多种上述赋型剂的存在下溶于适合的溶刑中。本发明化合物通常配 制成药物剂型，以提供容易控制的药物剂量，且能够使患者依从处方方案。
可以用根据药物给药的方法的许多方式包装药物组合物(或制剂)。通常，分销 的制品包括容器，药物制剂以适当的形式存放在容器内。适合的容器是本领域技术人 员所公知的，包括诸如瓶子(塑料和玻璃)、小袋、安瓿、塑料袋、金属圆筒等材料。 该容器还可以包括防干扰组装，以避免不慎接触包装的内容物。另外，该容器上设有 说明容器内容物的标签。该标签还可以包括适当的警告。
可以制备本发明化合物的药物制剂以用于各种给药途径和类型。例如，具有所需 纯度的式Ia或Ib的化合物可以任选与药学上可接受的稀释剂、载体、赋形剂或稳定 剂(Remington′s Pharmaceutical Sciences(1980)第16版，Osol，A.编辑)混合为冻干制 剂、碾碎粉末或水溶液的形式。配制可以通过在环境温度和适当的pH下以所需的纯 度与生理学上可接受的载体(即，在所用剂量和浓度下对接受者无毒的载体)混合而 进行。制剂的pH主要取决于特定用途和化合物的浓度，但可以在大约3到大约8的 范围内。在pH5的乙酸盐缓冲剂中配制是适宜的实施方式。
本文使用的本发明化合物优选是灭菌的。尤其，用于体内给予的制剂必需是灭菌 的。这种通过无菌过滤膜过滤容易地实现此类灭菌。
所述化合物通常可以作为固体组合物、冻干制剂或水溶液保存。
本发明药物组合物以数量、浓度、时间表、过程、赋形剂和给药途径与良好的医 疗实践一致的方式配制、计量和给予。在这方面的考虑因素包括所要治疗的特定疾病、 治疗的特定哺乳动物、个体患者的临床状况、疾病的起因、药剂传递的部位、给药方 法、给药时间表和医生已知的其它因素。给予的化合物的“治疗有效量”由这些考虑 因素来规定，是预防、缓解或治疗凝血因子介导的疾病所需的最小量。这种量优选低 于对宿主有毒或者使宿主明显更容易出血的量。
作为一般性建议，胃肠外给予的每一剂量抑制剂的初始药学有效量是在大约 0.01-100mg/kg的范围内，即大约0.1-20mg/kg患者体重/天，化合物的典型初始用量 范围是0.3-15mg/kg/天。
可接受的稀释剂、载体、赋型剂和稳定剂在所用剂量和浓度下对接受者无毒，其 包括缓冲剂，如磷酸盐、柠檬酸盐和其它有机酸；抗氧化剂，包括抗坏血酸和甲硫氨 酸；防腐剂(例如十八烷基二甲基苄基氯化铵；六甲氯铵；苯扎氯铵；苄索氯铵；苯 酚、丁基或苄基醇；对羟基苯甲酸烷基酯，例如对羟基苯甲酸甲酯或丙酯；儿茶酚； 间苯二酚；环己醇；3-戊醇；和间甲酚)；低分子量(少于约10个残基)多肽；蛋白 质，例如血清白蛋白、明胶或免疫球蛋白；亲水性聚合物，例如聚乙烯吡咯烷酮；氨 基酸，如甘氨酸、谷氨酰胺、天冬氨酸、组氨酸、精氨酸或赖氨酸；单糖、二糖和其 它碳水化合物，包括葡萄糖、甘露糖或糊精；螯合剂，如EDTA；糖类如蔗糖、甘露 醇、海藻糖或山梨醇；成盐抗衡离子，例如钠；金属络合物(例如Zn蛋白络合物)； 和/或非离子表面活性剂，例如TWEENTM、PLURONICSTM或聚乙二醇(PEG)。活 性药物成分还可以装入到微胶囊中(所述微胶囊例如分别通过凝聚技术或通过界面聚 合制备，如羟甲基纤维素或明胶微胶囊和聚(甲基丙烯酸甲酯)微胶囊制备)、胶体 药物传递系统中(例如脂质体、白蛋白微球、微乳液、纳米颗粒和纳米胶囊)或粗乳 状液中。此类技术公开于Remington′s Pharmaceutical Sciences，第16版，Osol，A.编 辑(1980)中。
可以制备式Ia和Ib化合物的缓释制剂。缓释制剂的适合实例包括含有式Ia或Ib 化合物的固体疏水性聚合物的半渗透性基质，该基质为成型制品的形式，例如薄膜或 微胶囊。缓释基质的实例包括聚酯、水凝胶(例如聚(2-羟乙基-甲基丙烯酸酯)或聚乙 烯醇)、聚丙交酯(US专利No.3,773,919)、L-谷氨酸和γ-乙基-L-谷氨酸酯的共聚物、 不可降解的乙烯-乙酸乙烯酯、可降解的乳酸-乙醇酸共聚物(例如LUPRON DEPOTTM (由乳酸-乙醇酸共聚物和乙酸亮丙瑞林组成的可注射微球))和聚-D-(-)-3-羟基丁酸。
制剂包括适于本文详述的给药途径的那些。这些制剂可以适宜地以单位剂型提 供，可以通过制药领域公知的任何方法来制备。技术和配制一般可在Remington′s Pharmaceutical Sciences(Mack Publishing Co.，Easton，PA)中找到。此类方法包括将 活性成分与包括一种或多种辅助成分的载体混合(association)的步骤。一般地，通 过将活性成分与液体载体或细分的固体载体或二者均匀而密切混合，然后，如果需要 的话，将产品成型来制备制剂。
可将适于口服给予的式Ia或Ib的化合物的制剂制备成分立(discrete)的单位， 例如丸剂、胶囊、扁囊剂或片剂，其各自含有预定量的式Ia或Ib的化合物。
压制片剂可以通过在适合的机器中压缩任选与粘结剂、润滑剂、惰性稀释剂、防 腐剂、表面活性剂或分散剂混合的自由流动形式(如粉末或颗粒)的活性成分来制备。 模制片剂可以通过在适合的机器中模压用惰性液体稀释剂润湿的粉状活性成分的混 合物来制备。片剂可任选经包衣或划痕，任选进行配制，以致提供从中缓释或控释活 性成分。
可以制备片剂、锭剂、糖锭、水性或油性混悬剂、分散性粉末或颗粒、乳剂、硬 或软胶囊(例如明胶胶囊)、糖浆或酏剂用于口服。用于口服的式Ia或Ib的化合物 的制剂可以根据本领域已知用于制备药物组合物的任何方法来制备，此类组合物可以 含有一种或多种试剂，包括甜味剂、调味剂、着色剂和防腐剂，以便提供适口的制剂。 含有与适于制造片剂的无毒药学上可接受的赋型剂混合的活性成分的片剂是可接受 的。这些赋型剂例如可以是惰性稀释剂，例如碳酸钙或碳酸钠、乳糖、磷酸钙或磷酸 钠；造粒剂和崩解剂，例如玉米淀粉或海藻酸；粘结剂，例如淀粉、明胶或阿拉伯树 胶；以及润滑剂，如硬脂酸镁、硬脂酸或滑石。片剂可以是未包衣的或者可以用已知 的技术(包括微胶囊包封)包衣，以延缓在胃肠道中的崩解和吸收，从而提供长时期 的持续作用。例如，可以使用延时材料，例如单独使用的单硬脂酸甘油酯或二硬脂酸 甘油酯或其与蜡一起使用。
为了治疗眼睛或其它外部组织(例如口和皮肤)，所述制剂优选以含有其量例如 为0.075-20％w/w的活性成分的局部用软膏或乳膏施用。当在软膏中配制时，活性 成分可以与石蜡基或水混溶性软膏基质一起使用。或者，活性成分可以用水包油乳膏 基质在乳膏中配制。
如果需要，乳膏基质的水相可以包括多元醇，即具有两个或多个羟基的醇，例如 丙二醇、1，3-丁二醇、甘露醇、山梨醇、甘油和聚乙二醇(包括PEG400)和它们的混 合物。局部制剂可以理想地包含增强活性成分通过皮肤或其它受影响区域的吸收或渗 透的化合物。此类皮肤渗透增强剂的实例包括二甲亚砜和相关类似物。
本发明的乳剂的油相可由已知成分以已知方式组成。虽然该相可以只包含乳化 剂，但它理想地包含至少一种乳化剂与脂肪或油或脂肪和油二者的混合物。优选地， 亲水性乳化剂与用作稳定剂的亲脂性乳化剂一起被包含。还优选包含油和脂肪两者。 乳化剂与或不与稳定剂一起组成所谓的乳化蜡，而该蜡与油和脂肪一起组成所谓的乳 化软膏基质，这形成了乳膏制剂的含油分散相。适用于本发明制剂的乳化剂和乳液稳 定剂包括 60、 80、鲸蜡硬脂醇、苄醇、肉豆蔻醇、甘油单硬脂酸酯和 月桂基硫酸钠。
式Ia或Ib化合物的水性混悬液含有与适用于制备水性混悬液的赋型剂混合的活 性物质。此类赋型剂包括悬浮剂，例如羧甲基纤维素钠、交联羧甲基纤维素、聚维酮、 甲基纤维素、羟丙基甲基纤维素、海藻酸钠、聚乙烯吡咯烷酮、黄芪胶和阿拉伯树胶； 以及分散剂或润湿剂，例如天然存在的磷脂(例如卵磷脂)、环氧烷与脂肪酸的缩合 产物(例如聚氧化乙烯硬脂酸酯)、环氧乙烷与长链脂族醇的缩合产物(例如十七氧 化乙烯鲸蜡醇)、环氧乙烷与由脂肪酸和己糖醇酐衍生的偏酯(partial ester)的缩合 产物(例如聚氧化乙烯脱水山梨醇单油酸酯)。水性混悬液还可以含有一种或多种防 腐剂，例如对羟基苯甲酸乙酯或正丙酯；一种或多种着色剂；一种或多种香料和一种 或多种甜味剂，例如蔗糖或糖精。
式Ia或Ib化合物的药物组合物可以是无菌注射制剂的形式，例如无菌注射水性 或油性混悬液。可以根据现有技术使用以上提到的那些适合的分散剂或润湿剂和悬浮 剂来配制该混悬液。无菌注射制剂还可以是在无毒的胃肠外可接受的稀释剂或溶剂中 的无菌可注射溶液或混悬液(例如1，3-丁二醇中的溶液)，或者制备为冻干粉。能够 使用的可接受赋形剂和溶剂包括水、林格氏液和等渗氯化钠溶液。另外，无菌固定油 可以常规用作溶剂或悬浮介质。为此目的，可以使用任何温和的固定油，包括合成的 单甘油酯或二甘油酯。另外，脂肪酸(例如油酸)可以同样在注射制剂中使用。
可以与载体材料混合以产生单次剂型的活性成分的量将根据所治疗的主体和具 体的给药模式而变化。例如，用于对人口服给予的缓释制剂可以含有大约1-1000mg 活性化合物与适当且便利的量的载体物质，所述载体物质的量可以在组合物总量的约 5％到约95％(重量:重量)之间变化。可制备该药物组合物，以提供容易测定的给药 量。例如，用于静脉内输注的水溶液可以含有约3到500μg的活性成分/毫升溶液，以 便能够以大约30mL/hr的速率输注适当量。
适用于胃肠外给予的制剂包括水性和非水性无菌注射溶液，其可以含有抗氧化 剂、缓冲剂、抑菌剂和使配制剂与目的接受者的血液等渗的溶质；以及可以包括悬浮 剂和增稠剂的水性和非水性无菌混悬液。
适用于对眼局部施用的制剂还包括滴眼剂，其中活性成分溶于或悬浮于适合的载 体，尤其活性成分的含水溶剂中。活性成分优选以约0.5-20％w/w，例如约0.5- 10％w/w(例如约1.5％w/w)的浓度存在于此类制剂中。
适于口内局部给予的制剂包括在增香基质(通常为蔗糖和阿拉伯树胶或黄蓍胶) 中含有活性成分的锭剂；在惰性基质(例如明胶和甘油，或者蔗糖和阿拉伯树胶)中 含有活性成分的软锭剂；以及在适合的液体载体中含有活性成分的漱口剂。
用于直肠给药的制剂可以为具有适合基质的栓剂，所述基质例如包括可可脂或水 杨酸酯/盐。
适于肺内给予或经鼻给予的制剂具有例如0.1-500微米的粒度(包括在0.1-500 微米范围内的以例如0.5、1、30微米、35微米等增量的粒度)，它通过鼻道快速吸 入或者通过口吸入来给药，以便到达肺泡囊。适合的制剂包括活性成分的水溶液或油 溶液。适于气雾剂或干粉给予的制剂可以根据常规方法制备，且可以与其它治疗剂例 (如前文用于治疗或预防如下所述疾病的化合物)一起传递。
适于阴道给予的制剂可以为阴道栓剂、棉塞、乳膏剂、凝胶剂、糊剂、泡沫或喷 雾制剂，除了活性成分，其含有本领域已知的适宜载体。
制剂可包装于单位剂量或多剂量容器(例如密封安瓿和管形瓶)内，并且可在冷 冻干燥(冻干)条件下储存，在使用之前仅需要添加无菌液体载体(例如水)，立即 用于注射。由前述类型的无菌粉末、颗粒和片剂制备即用注射溶液和混悬液。优选的 单位剂量制剂是含有如上所述的日剂量或单位每日亚剂量(unit daily sub-dose)或者 其适当部分的活性成分的那些制剂。
因此本发明进一步提供包含至少一种如上所定义的活性成分与兽药载体的兽药 组合物。兽药载体是用于给予组合物目的的材料，可以是固体、液体或气体材料，其 另外是惰性的或者在兽药领域可接受的，并且与活性成分相容的。这些兽药组合物可 以胃肠外、口服或其它希望的途径给药。
联合治疗
式Ia和Ib的化合物可以单独使用或与用于治疗本文所述的疾病或病症(如过度 增殖性疾病(例如癌症))的其它治疗剂联合使用。在某些实施方案中，式Ia或Ib 的化合物在药物联合制剂或者作为联合治疗的剂量方案中与具有抗过度增殖性能或 者可用于治疗过度增殖性疾病(例如癌症)的第二化合物联合。药物联合制剂或者剂 量方案的第二化合物优选具有对式Ia或Ib的化合物的互补活性，使得它们不会相互 产生不利影响。此类化合物适合以有效用于预期目的的量联合存在。在一个实施方案 中，本发明的组合物包含式Ia或Ib的化合物或其立体异构体、几何异构体、互变异 构体、溶剂合物、代谢物或药学上可接受的盐或前药以及如本文所述的化疗剂。
联合治疗可以同时或顺序方案施用。当顺序给药时，该联合治疗剂可以按两次或 多次给予。联合给药包括使用独立的制剂或者单一药物制剂的同时给药以及接任意顺 序的连续给药，其中优选具有其中两种(或全部)活性剂同时发挥其生物活性的时段。
以上任何同时给予的药剂的适宜剂量是目前使用的剂量，并且可以由于新确定的 药剂和其它化疗剂或治疗的联合作用(协同)而降低。
联合治疗可以提供“协同作用”，证明具有“协同性”，即，当活性成分一起使 用时所获得的效果大于单独使用化合物所获得的效果的总和。当活性成分处于以下情 况时可以获得协同效应：(1)在联合单位剂量制剂中共配制并同时给予或传递；(2)以 单独制剂形式交替或平行递送；或者(3)通过某些其它方案。在交替治疗中递送时，当 按序给予或递送(例如通过用分开的注射器进行不同注射)化合物时，可以获得协同 效应。一般地，在交替治疗过程中，按顺序(即，连续)给予每一种活性成分的有效 剂量，而在联合治疗中，一起给予有效剂量的两种或多种活性成分。
在抗癌治疗的具体实施方案中，式Ia或Ib的化合物或其立体异构体、几何异构 体、互变异构体、溶剂合物、代谢物或药学上可接受的盐或前药可以与诸如本文所述 那些的其它化疗剂、激素或抗体药剂联合以及与手术治疗和放疗联合。根据本发明的 联合治疗因此包括给予至少一种式Ia或Ib的化合物或其立体异构体、几何异构体、 互变异构体、溶剂合物、代谢物或药学上可接受的盐或前药以及使用至少一种其它癌 症治疗方法。对式Ia或Ib化合物和其它药学活性化疗剂的量以及相对给药时机 (relative timings of administration)进行选择，以便获得所需的联合治疗效果。
式Ia和Ib化合物的代谢物
本文所述的式Ia和Ib的体内代谢产物也落入本发明的范范内。此类产物例如可 以由被施用的化合物的氧化、还原、水解、酰胺化、脱酰胺基、酯化、脱酯、酶促裂 解等获得。因此，本发明包括式Ia和Ib化合物的代谢物，包括通过包括使本发明化 合物与哺乳动物接触足够长的时间以获得其代谢产物的方法所产生的化合物。
代谢产物一般通过下列方式鉴定：制备本发明化合物的放射性标记(例如14C或 3H)同位素，以可检测的剂量(例如高于约0.5mg/kg)胃肠外将其给予诸如大鼠、小 鼠、豚鼠、猴或人的动物，允许足够时间发生代谢(通常大约30秒至30小时)，从 尿、血液或其它生物样本中分离出其转化产物。这些产物容易分离，因为它们被标记 (其它通过使用能够与代谢物中存留的抗原决定部位结合的抗体来分离)。用常规方 式(例如通过MS、LC/MS或NMR分析)来确定代谢物结构。一般地，代谢物的分 析以与本领域技术人员熟知的常规药物代谢研究相同的方式进行。只要代谢产物不另 外(otherwise)在体内被发现，就有用于对本发明化合物的治疗剂量的诊断分析。
式Ia和Ib化合物的前药
除了式Ia和Ib化合物以外，本发明还包括此类化合物的药学上可接受的前药。 前药包括其中氨基酸残基或两个或多个(例如两个、三个或四个)氨基酸残基的多肽 链通过酰胺键或酯键共价连接至本发明化合物的游离氨基、羟基或羧酸基团的化合 物。氨基酸残基包括但不限于通常用三个字母符号表示的20种天然存在的氨基酸， 还包括磷酸丝氨酸、磷酸苏氨酸、磷酸酪氨酸、4-羟脯氨酸、羟赖氨酸、demosine、 isodemosine、γ-羧基谷氨酸、马尿酸、八氢吲哚-2-羧酸、抑胃酶氨酸(statine)、 1，2，3，4-四氢异喹啉-3-羧酸、青霉胺、鸟氨酸、3-甲基组氨酸、正缬氨酸、β-丙氨酸、 γ-氨基丁酸、瓜氨酸、高半胱氨酸、高丝氨酸、甲基-丙氨酸、对-苯甲酰基苯基丙氨 酸、苯基甘氨酸、炔丙基甘氨酸、肌氨酸、蛋氨酸砜和叔丁基甘氨酸。
还包括其它类型的前药。例如，式Ia或Ib化合物的游离羧基可以衍生为酰胺或 烷基酯。作为另一个例子，包含游离羟基的本发明化合物可以通过将羟基转化为其它 基团来衍生为前药，所述其它基团例如但不限于如在Advanced Drug Delivery Reviews，(1996)19：115中所列出的磷酸酯、半琥珀酸酯、二甲基氨基乙酸酯或者磷酰 氧基甲氧基羰基。还包括羟基和氨基的氨基甲酸酯前药以及羟基的碳酸酯、磺酸酯和 硫酸酯前药。也包括羟基衍生为(酰氧基)甲基醚和(酰氧基)乙基醚，其中酰基可 以是任选被包括但不限于醚、胺和羧酸官能团的基团取代的烷基酯，或者其中酰基是 如上所述的氨基酸酯。这类前药描述于J.Med.Chem.，(1996)，39：10中。更具体的实 例包括醇基的氢原子被诸如以下的基团置换：(C1-C6)烷酰氧基甲基、1-((C1-C6)烷酰氧 基)乙基、1-甲基-1-((C1-C6)烷酰氧基)乙基、(C1-C6)烷氧基羰氧基甲基、N-(C1-C6)烷氧 基羰基氨基甲基、琥珀酰基、(C1-C6)烷酰基、α-氨基(C1-C4)烷酰基、芳酰基和α-氨基 酰基或α-氨基酰基-α-氨基酰基，其中各α-氨基酰基独立地选自天然存在的L-氨基酸、 P(O)(OH)2、-P(O)(O(C1-C6)烷基)2或糖基(该基团由除去半缩醛形式的碳水化合物的 羟基获得)。
式Ia和Ib的化合物的游离胺基还可以衍生为酰胺、磺酰胺或者膦酰胺。所有这些 部分可合并包括但不限于以下的基团：醚、胺和羧酸官能团。例如，可以通过用基团 置换胺基中的氢原子来形成前药，所述基团例如是R-羰基、RO-羰基、NRR’-羰基，其 中R和R’各自独立地是(C1-C10)烷基、(C3-C7)环烷基或苄基，或者R-羰基是天然α-氨 基酰基或天然α-氨基酰基-天然α-氨基酰基；-C(OH)C(O)OY，其中Y是H、(C1-C6)烷 基或苄基；-C(OY0)Y1，其中Y0是(C1-C4)烷基，Y1是(C1-C6)烷基、羧基(C1-C6)烷基、 氨基(C1-C4)烷基或单-N-或二-N，N-(C1-C6)烷基氨基烷基；或者-C(Y2)Y3，其中Y2是H 或甲基，Y3是单-N-或者二-N，N-(C1-C6)烷基氨基；吗啉代、哌啶-1-基或吡咯烷-1-基。
关于前药衍生物的其它实例，例如参见a)Design of Prodrugs，由H.Bundgaard 编辑，(Elsevier，1985)和Methods in Enzymology，第42卷，第309-396页，由K.Widder 等人编辑(Academic Press，1985)；b)A Textbook of Drug Design and Development，由 Krogsgaard-Larsen和H.Bundgaard编辑，第5章＂Design and Application of Prodrugs＂(H.Bundgaard编写)，第113-191页(1991)；c)H.Bundgaard，Advanced Drug Delivery Reviews，8：1-38(1992)；d)H.Bundgaard等人，Journal of Pharmaceutical Sciences，77：285(1988)；以及e)N.Kakeya等人，Chem.Pharm.Bull.， 32：692(1984)，这些文献各自具体引入本文供参考。
制品
在本发明的另一个实施方案中，提供了含有用于治疗上述疾病或病症的物质的制 品或“试剂盒”。在一个实施方案中，所述试剂盒包含容纳式Ia或Ib化合物或其立 体异构体、几何异构体、互变异构体、溶剂合物、代谢物或药学上可接受的盐或前药 的容器。该试剂盒可进一步包含在容器上或与容器相伴的标签或包装说明书。术语“包 装说明书”用于表示通常在治疗产品的商业包装中包含的说明书，其含有关于使用此 类治疗产品的的指示、用法、剂量、给药、禁忌症和/或告诫的信息。适合的容器例如 包括瓶、管形瓶、注射器、泡罩包装(blister pack)等。该容器可以由各种材料(例 如玻璃或塑料)制成。该容器可装有有效治疗疾病的式Ia或Ib的化合物或其制剂， 可以具有无菌进入口(例如，该容器可以是具有可被皮下注射针刺穿的塞子的静脉溶 液袋或管形瓶)。组合物中的至少一种活性剂是式Ia或Ib的化合物。标签或包装说 明书指出，该组合物用于治疗所选择的疾病，例如癌症。另外，标签或包装说明书可 以指出，所治疗的患者是过度增殖性疾病、神经变性、心脏肥大、疼痛、偏头痛或神 经外伤疾病的患者。在一个实施方案中，标签或包装说明书指出，含有式Ia或Ib化 合物的组合物可以用于治疗由异常细胞生长所导致的疾病。标签或包装说明书还可以 指出，该组合物可以用于治疗其它疾病。作为替代，或者另外，该制品可进一步包含 容纳药学上可接受的缓冲剂的第二容器，所述缓冲剂例如是抑菌注射用水(BWFI)、 磷酸盐缓冲盐水、林格氏液和葡萄糖溶液。它可以进一步包含从商业和用户角度上希 望的其它物料，包括其它缓冲剂、稀释剂、过滤器、针头和注射器。
该试剂盒可以进一步包含式Ia或Ib化合物以及第二药物制剂(如果存在)的给 药说明书。例如，如果该试剂盒包含含有式Ia或Ib化合物的第一组合物以及第二药 物制剂，则该试剂盒可进一步包含将第一和第二药物组合物同时、按序或单独给予需 要其的患者的说明书。
在另一个实施方案中，所述试剂盒适于传递固体口服形式的式Ia或Ib化合物， 例如片剂或胶囊。此类试剂盒优选包括若干单位剂量。此类试剂盒可包含记载有按其 预定使用顺序排列的剂量的卡片。此类试剂盒的实例是“泡罩包装”。泡罩包装在包 装工业中是众所周知的，广泛用于包装药物单位剂型。如果需要，可以提供记忆辅助 手段，例如以数字、字母或其它标记的形式，或使用日历插页，其指明可以给予剂量 的治疗时间表中的日子。
根据一个实施方案，试剂盒可包含(a)其中盛有式Ia或Ib化合物的第一容器； 和任选的(b)其中盛有第二药物制剂的第二容器，其中第二药物制剂包含具有抗过度 增殖活性的第二化合物。作为替代或另外，该试剂盒可进一步包含容纳药学上可接受 的缓冲剂(如抑菌注射用水(BWFI)、磷酸盐缓冲盐水、林格氏液和葡萄糖溶液) 的第三容器。它可以进一步包含从商业和用户角度上希望的其它物料，包括其它缓冲 剂、稀释剂、过滤器、针头和注射器。
在其中试剂盒包含式Ia或Ib化合物与第二治疗剂的组合物的某些其它实施方案 中，该试剂盒可以包含用于容纳单独组合物的容器，例如分开的瓶子或分开的箔包装， 然而，各单独组合物还可以容纳在单一的未分开的容器内。通常，该试剂盒包含关于 各单独组分的施用的说明书。当各单独组分优选以不同的剂型给予(例如口服和胃肠 外)，以不同的给药间隔给予时，或者当该联合使用的各单独组分需要处方医生滴定 时，该试剂盒形式尤为有利。
一般制备程序
一般程序A       铃木(Suzuki)偶联：

铃木型(Suzuki-type)偶联反应可用于将稠合双环杂环或稠合双环杂芳基连接于 嘧啶环的2位上(参见方案4)。一般地，取代的2-氯-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶5或 2-氯-4-吗啉代噻吩并[2，3-d]嘧啶6可以与1.5当量4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂环戊 硼烷(dioxaborolan)-2-基)-1H-吲唑7结合，并溶于3当量的1M碳酸钠水溶液和等 体积的乙腈中。加入催化量或更多量的低价钯试剂，例如二氯化双(三苯基膦)钯(II)。 可以使用各种硼酸或硼酸酯代替所述吲唑硼酸酯。或者，可对吲唑的氮进行保护，例 如用四氢吡喃基进行保护；参见化合物40。在某些情况下，使用乙酸钾代替碳酸钠来 调节水层的pH。然后在压力下在Biotage Optimizer微波反应器(Biotage，Inc.)内将 反应液加热到大约140-150℃，保持10-30分钟。内容物用乙酸乙酯或另一有机溶 剂萃取。在蒸发有机层之后，可在二氧化硅上或通过反相HPLC纯化产物8或9。
一般程序B       酰胺偶联：

用1.5当量HATU、3当量烷基胺和3当量DIPEA在DMF中处理2-(1H-吲唑-4- 基)-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-甲酸13或2-(1H-吲唑-4-基)-4-吗啉代噻吩并[2，3-d] 嘧啶-6-甲酸14至大约0.1M浓度。搅拌反应液直至反应完成，在乙酸乙酯中用饱和碳 酸氢钠溶液萃取一次。将有机层干燥，过滤和浓缩，获得粗中间体。该中间体通过反 相HPLC纯化，获得产物15或16。
一般程序C     磺酰胺的形成：

将2-氯-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-磺酰氯17悬浮于1mL DCM中，然后加入 2当量胺和3当量DIPEA。通过LCMS监控反应直至完成。粗反应混合物用乙酸乙 酯稀释，用饱和氯化铵萃取，并用乙酸乙酯反萃取一次。将有机层合并，浓缩至干。 在后续铃木偶联中直接使用粗磺酰胺中间体18。
一般程序D     醇合成

将2-氯-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶4以0.2摩尔浓度悬浮于THF中，在干冰/乙 腈浴中冷却至-50℃，然后加入2当量的2.5M nBuLi己烷溶液。在15分钟后，将3.0 摩尔当量的环酮或无环酮加入到该溶液中。在-50℃下继续搅拌反应液1小时，然后在 大多数情况下使之回到0℃。当通过TLC或质谱显示反应完成时，将反应液猝灭入饱 和氯化铵溶液中，用EtOAc萃取两次。将有机层浓缩，用作粗混合物，经二氧化硅 纯化，或者将产物12溶解在最少量的乙腈中，过滤除去剩余的起始原料4。
一般程序F     在一釜中(one pot)进行的铃木偶联反应

在密封微波反应器中，将2-氯-6-碘-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶19(1当量)、苯 基硼酸或杂环硼酸(R1-B(OH)2，1.1当量)和二氯化双(三苯基膦)钯(II)(0.1当量) 在1M Na2CO3水溶液(3当量)和乙腈(3当量)中加热至100℃，保持10-40分钟， 获得20。一经反应完毕，在同一釜内加入4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂环戊硼烷-2- 基)-1H-吲唑7(1.3当量)和二氯化双(三苯基膦)钯(II)(0.1当量)。在密封微波反应 器中将反应混合物加热到150℃，保持10-15分钟。该混合物用乙酸乙酯(3×5mL) 萃取。将合并的有机层浓缩，获得粗品21。
一般程序G    酰胺偶联反应

将2-氯-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-胺22(1当量)、酰氯(1.5-2当量)和三 乙胺(2当量)在二氯甲烷中搅拌。通过LC/MS监控反应直至完成。将混合物蒸发， 获得粗酰胺23，其未经纯化直接用于下一步反应。
一般程序H    乙酰胺、苯甲脒和磺酰胺的制备

在冷却到0℃的1-(2-氯-4-吗啉代噻吩并[2，3-d]嘧啶-6-基)-N-甲基甲胺在DCM中 的0.25-0.40M溶液中加入1.5当量TEA，随后滴加稀释于DCM中的1.0-1.5当量烷 基酰氯或芳基酰氯或磺酰氯。在环境温度下搅拌该反应液，通过LCMS监控反应完成。 在反应完成后，用DCM增加反应体积，将稀碳酸氢钠水溶液添加到该溶液中。分离 有机层和水层。最后，有机层用盐水洗涤并干燥(MgSO4)。干燥的有机溶液在真空 中浓缩，如果需要通过二氧化硅(silica)色谱纯化。
一般程序I     苯胺的酰胺偶联反应

将DMF中的3-(2-氯-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基)苯胺24(1当量)、羧酸 (RCO2H，1.5当量)、1-羟基-7-氮杂苯并三唑(0.2当量)、O-(7-氮杂苯并三唑-1- 基)-(N，N，N’，N’-四甲基脲六氟磷酸盐(HATU，1.5当量)和N，N-二异丙基乙胺(2.5 当量)于室温下搅拌。通过LC/MS监控反应直至完成。反应混合物用乙酸乙酯稀释， 用饱和碳酸氢钠和盐水洗涤。有机层经MgSO4干燥、过滤并蒸发，获得酰胺产物25。
一般程序J     6-碘代置换和2-铃木偶联

在2-氯-6-碘-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶19(0.05g，0.13mmol)的DMF(1.00ml) 溶液中加入适当的苯胺(200mol％)、Cs2CO3(50mol％)、Pd2(dba)3(5mol％)和 XANTPHOS(10mol％)。在Biotage optimizer微波反应器中将该反应物在压力下加 热到110℃，保持30分钟。在遵循一般程序A之后，真空浓缩所得溶液，获得26。
一般程序K     6-氨基烷基酰化和2-铃木偶联

在(2-氯-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基)甲胺27(50mg，0.2mmol)的CH2Cl2 (4mL)溶液中加入Et3N(84μl，0.6mmol)和适当的酰氯或其HCl盐(0.3mmol)。 在用水猝灭之前，将反应液在室温下搅拌18-48小时。水层用EtOAc萃取。合并的 有机层经Na2SO4干燥，并在真空中浓缩。按照一般程序A使粗2-氯代产物与硼酸酯 试剂7和钯催化剂偶联，获得28，其通过反相HPLC纯化技术纯化。
或者，往(2-氯-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基)甲胺27(111mg，0.39mmol)的 DMF(5mL)溶液中加入2，6-二甲基吡啶(48.2μl，0.41mmol)和适当的酰氯或其HCl 盐(0.39mmol)。在用水猝灭之前，将该反应液在室温下搅拌18-72小时。水层用 EtOAc萃取。合并的有机层经MgSO4干燥，并在真空中浓缩。按照一般程序A使粗 2-氯代产物与硼酸酯试剂7和钯催化剂偶联，获得20mg的28，其通过反相HPLC纯 化技术纯化。
一般程序L    氟吡啶上的胺取代

将2-氯-6-(6-氟吡啶-3-基)-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶或者2-氯-6-(6-氟吡啶-3- 基)-4-吗啉代噻吩并[2，3-d]嘧啶化合物、大约4当量的伯胺或仲胺(R＝H、C1-C12烷基、 C2-C8烯基、C2-C8炔基、C3-C12碳环基、C2-C20杂环基、C6-C20芳基或C1-C20杂芳基) 和大约2当量的二异丙基乙胺在N-甲基吡咯烷(约0.1M)中的混合物在密封微波反 应器内加热到约130-140℃，保持10-40分钟，随后在高真空下去除挥发物。通过快 速色谱纯化粗混合物，获得中间体2-氯-6-(6-氨基吡啶-3-基)-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧 啶或2-氯-6-(6-氨基吡啶-3-基)-4-吗啉代噻吩并[2，3-d]嘧啶化合物，其可以与稠合双环 杂环或杂芳基硼酸酯试剂按照一般程序A进行铃木偶联。
实施例
提供以下实施例用于说明本发明。然而，应该理解的是，这些实施例并不限制本 发明，仅意味着提出实施本发明的一种方法。本领域技术人员会认识到，可以容易地 使所描述的化学反应适合制备本发明的许多其它PI3K抑制剂，制备本发明化合物的 另选方法被认为落入本发明范围内。例如，可以通过对本领域技术人员而言显而易见 的更改而成功实施未例示的本发明化合物的合成，例如通过适当保护干扰基团，通过 利用除了所描述的那些以外的本领域已知的其它适合试剂，和/或通过反应条件的常规 改变来实施。或者，本文公开的或本领域已知的其它反应将被公认适于制备本发明的 其它化合物。
在下述实施例中，除非另有指明，所有温度按摄氏度计。试剂购自商业供应商(例 如Aldrich Chemical Company、Lancaster、TCI或Maybridge)，且除非另有指明， 不用进一步纯化而使用。
下述反应一般在正氮气压或正氩气压下或者于干燥管(除非另有规定)在无水溶 剂中进行。反应烧瓶一般配备橡胶隔片，用于经由注射器引入底物和试剂。玻璃器皿 经过烘箱干燥和/或热干燥。
在带有硅胶柱或二氧化硅SEP 柱(Waters)的Biotage系统(制造商： Dyax Corporation)上实施柱色谱。在400MHz下操作的Varian仪器上记录1H NMR 波谱。使用氯仿作为参比标准物(7.25ppm)，在含氘CDCl3、d6-DMSO、CH3OD或 d6-丙酮溶液(按ppm报告)中获得1H NMR波谱。当报告峰多重性时，使用下列缩 写：s(单峰)，d(双重峰)，t(三重峰)，m(多重峰)，br(增宽峰)，dd(双重峰 的双重峰)，dt(三重峰的双重峰)。所给出的偶合常数按赫兹(Hz)报告。 实施例12，4-二氯-噻吩并[3，2-d]嘧啶 3

将3-氨基-2-噻吩甲酸甲酯1(13.48g，85.85mmol)和脲(29.75g，5eq)的混合物 在190℃下加热2小时。将该热反应混合物倒入氢氧化钠溶液中，通过过滤除去任何 不溶性物质。然后将该混合物酸化(HCl，2N)，获得白色沉淀1H-噻吩并[3，2-d]嘧啶 -2，4-二酮2，通过过滤收集并风干(9.49g，66％)。1H NMR 400MHz，d6-DMSO)6.90 (1H，d，J＝5.2Hz)，8.10(1H，d，J＝5.2Hz)，11.60-11.10(2H，br s)。
将1H-噻吩并[3，2-d]嘧啶-2，4-二酮2(9.49g，56.49mmol)和氯氧化磷(150mL) 的混合物在回流下加热6小时。然后，将该反应混合物冷却，在剧烈搅拌下倾至冰/ 水上，获得沉淀物。然后将该混合物过滤，获得白色固体2，4-二氯-噻吩并[3，2-d]嘧啶 3(8.68g，75％)。1H NMR(400MHz，CDCl3)7.56(1H，d，J＝5.5Hz)，8.13(1H，d， J＝5.5Hz)。
实施例2 2-氯-4-吗啉-4-基-噻吩并[3，2-d]嘧啶 4

将2，4-二氯-噻吩并[3，2-d]嘧啶3(8.68g，42.34mmol)、吗啉(8.11mL，2.2eq)和 MeOH(150mL)的混合物在室温下搅拌1小时。然后将反应混合物过滤，用水和 MeOH洗涤，获得白色固体2-氯-4-吗啉-4-基-噻吩并[3，2-d]嘧啶4(11.04g，100％)。 1H NMR(400MHz，d6-DMSO)3.74(4H，t，J＝4.9Hz)，3.90(4H，t，J＝4.9Hz)，7.40(1H，d， J＝5.6Hz)，8.30(1H，d，J＝5.6Hz)。
实施例3 2-氯-4-吗啉-4-基-噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-甲醛(carbaldehyde) 10

在-78℃下，往2-氯-4-吗啉-4-基-噻吩并[3，2-d]嘧啶4(1.75g，6.85mmol)的无水 THF(40mL)悬浮液中加入正丁基锂(nBuLi)在己烷(3.3mL，1.2eq)中的2.5M溶 液。在搅拌1小时之后，加入无水DMF(796μL，1.5eq)。将该反应混合物在-78℃下 搅拌1小时，然后缓慢升温到室温。在室温下进一步保持2小时后，将反应混合物倾 倒于冰/水上，获得黄色沉淀物。该沉淀物通过过滤收集并风干，获得2-氯-4-吗啉-4- 基-噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-甲醛10(1.50g，77％)。1H NMR 400MHz，d6-DMSO)3.76(4H， t，J＝4.9)，3.95(4H，t，J＝4.9)，8.28(1H，s)，10.20(1H，s)。

并且，在-78℃下，往4-(2-氯噻吩并[2，3-d]嘧啶-4-基)吗啉(1.75g，6.85mmol)的 无水THF悬浮液中加入正丁基锂(nBuLi)在己烷(3.3mL，1.2eq)中的2.5M溶液。 在搅拌1小时之后，加入无水DMF(796μL，1.5eq)。将该反应混合物在-78℃下搅拌 1小时，然后缓慢升温到室温。在室温下进一步保持2小时后，将反应混合物倾倒于 冰/水上，获得黄色沉淀。通过过滤收集该沉淀并风干，获得2-氯-4-吗啉代噻吩并[2，3-d] 嘧啶-6-甲醛(1.5g，77％收率)MS(Q1)284(M)+。
实施例4 4-(4，4，5，5-四甲基-[1，3，2]二氧杂环戊硼烷-2-基)-1H-吲唑7—路线1

往3-溴-2-甲基苯胺(5.0g，26.9mmol)的氯仿(50mL)溶液中加入乙酸钾(1.05eq， 28.2mmol，2.77g)。在冰水中冷却的同时加入乙酸酐(2.0eq，53.7mmol，5.07mL)。然 后将该混合物在室温下搅拌10分钟，此时后，形成白色凝胶状固体。然后加入18-冠 醚-6(0.2eq，5.37mmol，1.42g)，再加入亚硝酸异戊酯(2.2eq，59.1mmol，7.94mL)，将 该混合物在回流下加热18小时。将该反应混合物冷却，在氯仿(3×100mL)和饱和 碳酸氢钠水溶液(100mL)之间分配(partitioned)。合并的有机萃取物用盐水(100mL) 洗涤、分离并干燥(MgSO4)。
将粗产物蒸发至二氧化硅上，在20％→40％EtOAc-汽油(petrol)的洗脱下，经色 谱纯化，获得橙色固体状1-(4-溴-吲唑-1-基)-乙酮A(3.14g，49％)和浅橙色固体状的 4-溴-1H-吲唑B(2.13g，40％)。
A：1H NMR(400MHz，CDCl3)2.80(3H，s)，7.41(1H，t，J＝7.8Hz)，7.50(1H，d， J＝7.8Hz)，8.15(1H，s)，8.40(1H，d，J＝7.8Hz)。
B：1H NMR(400MHz，CDCl3)7.25(1H，t，J＝7.3Hz)，7.33(1H，d，J＝7.3Hz)，7.46 (1H，d，J＝7.3Hz)，8.11(1H，s)，10.20(1H，br s)。
往1-(4-溴-吲唑-1-基)-乙酮A(3.09g，12.9mmol)的MeOH(50mL)溶液中加入 6N HCl水溶液(30mL)，将该混合物在室温下搅拌7小时。将MeOH蒸发，该混合 物在EtOAc(2×50mL)和水(50mL)之间分配。合并的有机层用盐水(50mL)洗 涤、分离并干燥(MgSO4)。通过在减压下蒸发除去溶剂，获得4-溴-1H-吲唑B(2.36g， 93％)。
往4-溴-1H-吲唑B(500mg，2.54mmol)和联硼酸频那醇酯(bis(pinacolato)diboron) (1.5eq，3.81mmol)在DMSO(20mL)中的溶液中加入乙酸钾(3.0eq，7.61mmol，747mg 用干燥枪干燥)和PdCl2(dppf)2(3mol％，0.076mmol，62mg)。用氩气对该混合物脱气， 在80℃下加热40小时。将反应混合物冷却，在水(50mL)和醚(3×50mL)之间分 配。合并的有机层用盐水(50mL)洗涤，经分离并干燥(MgSO4)。粗物质经色谱(用 30％→40％EtOAc-汽油洗脱)纯化，获得不可分离的4-(4，4，5，5-四甲基-[1，3，2]二氧杂 环戊硼烷(dioxaborolan)-2-基)-1H-吲唑7(369mg，60％)和吲唑(60mg，20％)的 3:1混合物，以黄色胶离析，其在静置时固化，提供为灰白色固体。1H NMR(400MHz， d6-DMSO)1.41(12H，s)，7.40(1H，dd，J＝8.4Hz，6.9Hz)，7.59(1H，d，J＝8.4Hz)，7.67(1H， d，J＝6.9Hz)，10.00(1H，br s)，8.45(1H，s)，and indazole：7.40(1H，t)，7.18(1H，t， J＝7.9Hz)，7.50(1H，d，J＝9.1Hz)，7.77(1H，d，J＝7.9Hz)，8.09(1H，s)。杂质在1.25。
实施例5 4-(4，4，5，5-四甲基-[1，3，2]二氧杂环戊硼烷-2-基)-1H-吲唑7—路线2

往2-甲基-3-硝基苯胺(2.27g，14.91mmol)的乙酸(60mL)溶液中加入亚硝酸钠 (1.13g，1.1eq)的水(5mL)溶液。在2小时后，将该深红色溶液倾倒于冰/水上，通 过过滤收集所得沉淀，获得4-硝基-1H-吲唑C(1.98g，81％)。
将4-硝基-1H-吲唑C(760mg，4.68mmol)、钯/碳(10％，催化剂)和乙醇(30mL) 的混合物在氢气氛围下搅拌4小时。然后使反应混合物过滤通过硅藻土，在真空中除 去溶剂，获得1H-吲唑-4-基胺D(631mg，100％)。
在低于0℃下，将亚硝酸钠(337mg，4.89mmol)的水(2mL)溶液滴加到1H- 吲唑-4-基胺D(631mg，4.74mmol)在6M盐酸(7.2mL)中的悬浮液中。在搅拌30 分钟后，将四氟硼酸钠(724mg)加入到反应混合物中。获得粘性溶液，将其过滤， 用水短暂洗涤，获得深红色固体状的四氟硼酸1H-吲唑-4-重氮盐E(69)(218mg， 20％)。
用氩气吹扫无水甲醇(4mL)5分钟，然后在其中加入四氟硼酸1H-吲唑-4-重氮 盐(218mg，0.94mmol)、联硼酸频那醇酯(239mg，1.0eq)和氯化[1，1’-双(二苯基膦基) 二茂铁]钯(II)(20mg)。将该反应混合物搅拌5小时，然后使之过滤通过硅藻土。 残留物使用快速色谱(flash chromatography)纯化，获得4-(4，4，5，5-四甲基-[1，3，2]二 氧杂环戊硼烷-2-基)-1H-吲唑7(117mg)。
实施例6 6-氟吲唑-4-硼酸酯7a

往4-氟-2-硝基甲苯(3.44g)的三氟乙酸(13mL)溶液中加入浓硫酸(4mL)， 随后加入N-溴代琥珀酰亚胺(5.92g)。将该反应混合物搅拌16小时，然后用盐水猝 灭，萃取到乙酸乙酯中，经干燥(MgSO4)。在真空中除去溶剂，得到粗品1-溴-5-氟 -2-甲基-3-硝基-苯(5.96g)。
往粗品1-溴-5-氟-2-甲基-3-硝基-苯(5.96g)的MeOH(90mL)溶液中加入浓盐 酸(11.7mL)和铁(6.1g)，将该反应混合物加热到回流。在16小时后，将该混合物 冷却，用DCM稀释，用碳酸钠溶液洗涤，干燥(MgSO4)，在真空中除去溶剂。残 留物用快速色谱纯化，获得3-溴-5-氟-2-甲基-苯胺(1.46g)。
往3-溴-5-氟-2-甲基-苯胺(470mg)的二噁烷(6mL)溶液中加入三乙胺(1.28mL)、 乙酸钯(25mg)、2-二环己基膦联苯(161mg)和频那醇硼烷(1.001ml)，将该混合物 加热至80℃保持4小时。将反应混合物冷却，用氯仿稀释，用盐水洗涤，经干燥 (MgSO4)并真空脱除溶剂。用快速色谱纯化残留物，获得化合物7a(466mg)。
实施例6a 6-(三丁基甲锡烷基)-1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-1H-咪唑并[4，5-b] 吡啶 50
在N2下，往3.07g5-溴-2，3-二氨基吡啶中加入20mL甲酸，将反应液加热至回流 保持4小时，使之冷却到室温。将反应液在室温下搅拌过夜，通过LCMS证实反应完 成。将该溶液在真空中浓缩，通过快速色谱(DCM/MeOH)纯化，获得1.64g化合物 47(收率51％)。在-78℃下，在氮气下将在40mL THF中的化合物47(1.64g)加入 到10mL THF中的0.22g(1.1eq)NaH中。将反应液在-78℃下搅拌30分钟，随后加 入1.45g SEM-Cl(1.05eq)，使之升温到室温。将该反应液在室温下搅拌过夜，通过 LCMS证实反应完全。用水猝灭反应，随后加入NaCl(不饱和)，用EtOAc萃取两 种产物，真空浓缩。通过快速色谱(EtOAc/己烷)分离该两种区域异构体，获得1.68g 化合物48和0.5g化合物49(总收率80％)。将化合物49(0.5g)溶于50mL二噁烷 中，随后加入1.76g(2.0eq)双(三丁基锡)、88mg(0.05eq)Pd(PPh3)4和0.19g(3.0eq) LiCl。将该反应混合物在氮气下加热到回流，保持1.5小时，通过LCMS证实反应完 全。将该混合物冷却到室温，经过硅藻土过滤(用EtOAc洗涤硅藻土)，经旋转蒸发， 通过快速色谱(EtOAc/己烷)纯化，获得501mg6-(三丁基甲锡烷基)-1-((2-(三甲基甲 硅烷基)乙氧基)甲基)-1H-咪唑并[4，5-b]吡啶50(收率60％)。MS(Q1)539.2(M)+。

实施例6b 2-甲基-6-(4，4，5，5-四甲基-1，3-二氧戊环-2-基)-3-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧 基)甲基)-3H-咪唑并[4，5-b]吡啶 54
在N2下在5.06g5-溴-2，3-二氨基吡啶中加入50mL乙酸，将反应液加热到回流过 夜。通过LCMS证实完全反应。将该溶液真空浓缩，通过快速色谱(DCM/MeOH) 纯化，获得4.68g化合物51(收率82％)。在氮气下于-78℃将在150mL THF中的化 合物51(4.68g)加入到10mL THF中的0.63g(1.1eq)NaH中。将该反应液在-78℃ 下搅拌30分钟，随后加入3.86g SEM-Cl(1.05eq)，使之升温到室温。将该反应液在 室温下搅拌4.5小时，通过LCMS证实完全反应。用水猝灭反应，随后加入NaCl(不 饱和)，用EtOAc萃取两种产物，进行真空浓缩。通过快速色谱(EtOAc/己烷)分离 该两种区域异构体，获得2.84g化合物52和1.94g化合物53(总收率63％)。将化合 物52(2.08g)溶于50mL甲苯中，随后加入2.32g(1.5eq)联硼酸频那醇酯、0.24g (0.05eq)PdCl2(dppf)和1.79g(3.0eq)KOAc。在氮气下将该反应混合物加热到95 ℃，搅拌过夜。通过LCMS证实完全反应。将该混合物冷却到室温，旋转蒸发，通过 快速色谱(EtOAc/己烷)纯化，获得1.83g的2-甲基-6-(4，4，5，5-四甲基-1，3-二氧戊环-2- 基)-3-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-3H-咪唑并[4，5-b]吡啶54(收率77％)。MS(Q1 390.2(M)+。

实施例7 2-(1H-吲唑-4-基)-4-吗啉-4-基-噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-甲醛 11

将2-氯-4-吗啉-4-基-噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-甲醛10(100mg，0.35mmol)、4-(4，4，5，5- 四甲基-[1，3，2]二氧杂环戊硼烷-2-基)-1H-吲唑(70)(95mg，0.39mmol)和碳酸钠(112mg) 的混合物悬浮于甲苯(2.5mL)、乙醇(1.5mL)和水(0.7mL)中。在其中加入氯化双(三 苯基膦)钯(II)(13.5mg)，反应容器用氩气冲洗。将该反应混合物在120℃下微波处理 1小时，然后在DCM和水之间分配，用盐水洗涤有机层，经硫酸镁干燥，过滤以及 真空浓缩。使用快速色谱纯化所得残留物，获得2-(1H-吲唑-4-基)-4-吗啉-4-基-噻吩并 [3，2-d]嘧啶-6-甲醛11(97mg)。
实施例8 (2-氯-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基)甲醇 29

在0℃下，用NaBH4(0.1g，3.5mmol)处理2-氯-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6- 甲醛10(1.0g，3.5mmol)的MeOH(30mL)溶液。使该溶液升温到室温，搅拌15 分钟。该反应混合物用饱和碳酸氢钠溶液和水的混合物(1:1，v/v)猝灭。水溶液用 EtOAc萃取。合并的有机层用Na2SO4干燥，真空浓缩。粗物质29不需要进一步纯化 (0.9g，90％)。MS(Q1)286(M)+。
实施例9 6-(溴甲基)-2-氯-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶 30

在0℃下，往(2-氯-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基)甲醇29(100mg，0.4mmol) 的苯(3.0mL)溶液中加入PBr3(30μL，0.4mmol)。将反应液在回流下加热1小时。 在冷却到室温后，通过加入水猝灭反应液。含水层用EtOAc萃取。合并的有机层用 Na2SO4干燥，真空浓缩。粗产物30不需要进一步纯化(115mg，94％)。MS(Q1) 350(M)+。
实施例10 2-((2-氯-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基)甲基)异吲哚啉-1，3-二酮31

往6-(溴甲基)-2-氯-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶30(0.3g，0.9mmol)的DMF(10mL) 溶液中加入K2CO3(0.2g，1.3mmol)和邻苯二甲酰亚胺(0.1g，0.9mmol)。将所得溶 液在室温下搅拌20小时。将该反应液真空浓缩，用水(10mL)稀释。过滤该多相混合 物，获得2-((2-氯-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基)甲基)异吲哚啉-1，3-二酮31(0.3g， 75％)。MS(Q1)415(M)+。
实施例11 (2-氯-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基)甲胺 27

往2-((2-氯-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基)甲基)异吲哚啉-1，3-二酮31(100mg， 0.24mmol)的MeOH(7mL)溶液中加入H2NNH2 ·H2O(24μL，0.48mmol)。将该反应 液在回流下加热1小时。在冷却到室温之后，用水(10mL)猝灭该反应液，用EtOAc 萃取。合并的有机层用Na2SO4干燥，真空浓缩，获得(2-氯-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧 啶-6-基)甲胺27(0.05g，73％)。MS(Q1)285(M)+。
实施例11a  1-(2-氯-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基)-N-甲基甲胺 55

往3.0g2-氯-4-吗啉-4-基-噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-甲醛10在50mL甲苯和50mL THF 中的溶液中加入30mL NH2ME(40％水溶液)，将该混合物在氮气下搅拌2天。真空 浓缩混合物，并使之溶于50mL THF和50mL MeOH中，随后分批加入1.6g(4.0eq) NaBH4，在室温下搅拌反应混合物过夜。通过LCMS证实完全反应，将该混合物真空 浓缩，通过快速色谱(95/5％EtOAc/EtOH 20分钟，随后梯度至100％EtOH，另外 30分钟)纯化，获得2.45g 1-(2-氯-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基)-N-甲基甲胺55(收 率77.5％)。MS(Q1)300(M)+。

同样，往2-氯-4-吗啉-4-基-噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-甲醛(2.0g)的THF(50mL)溶 液中加入20mL40％甲胺水溶液。氮气下，在室温下搅拌反应混合物24小时。真空 脱除溶剂，将残留物溶于50mL MeOH和50mLTHF中，分批加入NaBH4。氮气下， 在室温下搅拌反应混合物24小时，通过LCMS证实完全反应。真空脱除溶剂，通过 快速色谱(EtOAc/EtOH)纯化粗产物，获得1.12g的1-(2-氯-4-吗啉代噻吩并[2，3-d] 嘧啶-6-基)-N-甲基甲胺(收率53％)。MS(Q1)300(M)+。
实施例11b 1-(2-氯-7-甲基-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基)-N-甲基甲胺56
在20mL甲苯和20mL THF中加入3.46g 2-氯-7-甲基-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶 -6-甲醛，随后加入15mL的NH2ME(40％水溶液)，将该混合物在氮气下搅拌过夜。 将该混合物真空浓缩，使之溶于30mL MeOH和20mL THF中，随后分批加入1.76g (4.0eq)NaBH4，将该反应混合物在室温下搅拌4天。通过LCMS证实完全反应，将混 合物在真空中浓缩，通过快速色谱(97/3％EtOAc/EtOH 20分钟，随后另经30分钟 梯度至100％EtOH)纯化，获得2.53g 1-(2-氯-7-甲基-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6- 基)-N-甲基甲胺56(收率70％)。MS(Q1)313.8(M)+。
实施例12 2-氯-6-碘-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶 19

按照US6492383中的操作程序，在-78℃下，将2.5M正丁基锂(9.4mL，22.48mmol) 己烷溶液加入到2-氯-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶4(3.0g，11.74mmol)在60mL THF 中的混合物中。将该反应混合物升温到-40℃，搅拌30分钟。滴加碘(6.0g，23.48mmol) 的THF(10mL)溶液。在加完后，将该反应混合物升高到室温，搅拌2小时。通过 用二氯甲烷稀释和用H2O(2×100mL)萃取来猝灭混合物。有机层用Na2S2O3(2× 100mL)、H2O(2×100mL)洗涤，用MgSO4干燥，经过滤、蒸发，获得2-氯-6-碘 -4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶19(3.4g，75％)。

同样，在-78℃下，往2-氯-7-甲基-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶(3.0g，11.1mmol； 按照合成2-氯-4-吗啉-4-基-噻吩并[3，2-d]嘧啶的操作程序制备，但由3-氨基-4-甲基- 噻吩-2-羧酸乙酯开始)的THF(60mL)溶液中加入n-BuLi(8.9mL，2.5M Et2O溶液)。 将所得淤浆升温到-40℃，搅拌50分钟。然后将该反应混合物冷却到-78℃，加入在I2 (5.6g，22.2mmol)的THF(30mL)溶液。将该溶液升温到室温，搅拌5小时。通过 加水来猝灭反应。分离有机层，水层用CH2Cl2萃取。合并的有机层用饱和Na2S2O3 水溶液洗涤，经Na2SO4干燥、过滤、真空浓缩，获得2-氯-6-碘-7-甲基-4-吗啉代噻吩 并[3，2-d]嘧啶(3.8g，收率84％)。
实施例13 呋喃-3-基氨基甲酸叔丁酯 32

将3-呋喃甲酸(5.60g，1.0eq)溶于叔丁醇(200mL)中，用三乙胺(10ml，1.4eq) 和叠氮化磷酸二苯酯(diphenyl phosphoryl azide)(12ml，1.1eq)处理。将该混合物 在回流下加热18小时。将反应混合物冷却到室温，然后浓缩至50ml，倾入饱和NaHCO3 水溶液中。将混合物在0℃下搅拌2小时。通过过滤收集固体，在高度真空下干燥。通 过快速色谱纯化粗反应混合物，获得呋喃-3-基氨基甲酸叔丁酯32(6.95g，76％)：1H NMR(CDCl3，400MHz)δ 7.71(bs，1H)，7.27(m，1H)，6.27(bs，1H)，6.20(bs，1H)，1.50(s， 9H)；MS(Q1)184(M)+。
实施例14 2-(甲氧基羰基)呋喃-3-基氨基甲酸叔丁酯 33

在-30℃下，往呋喃-3-基氨基甲酸叔丁酯32(1.7g，1.0eq)的THF(50ml)溶液 中加入TMEDA(1.75ml，1.3eq)，随后加入正丁基锂的1.6M溶液(8.4ml，2.25eq，1.6M 己烷溶液)。将反应混合物升温到0℃，搅拌1小时，然后冷却回到-30℃。快速加入 碳酸二甲酯(2.4ml，3.0eq)，然后将反应混合物升温到室温，保持1小时。反应混合 物用2M HCl猝灭，随后加入饱和NaCl水溶液。用乙酸乙酯萃取混合物。合并的有 机萃取物经Na2SO4干燥并浓缩。通过快速色谱纯化粗反应混合物，获得2-(甲氧基羰 基)呋喃-3-基氨基甲酸叔丁酯33(1.14g，51％)：MS(Q1)242(M)+。
实施例15 3-氨基呋喃-2-甲酸甲酯34

将2-(甲氧基羰基)呋喃-3-基氨基甲酸叔丁酯33(1.14g，1.0eq)溶于二氯甲烷(8ml) 中，用三氟乙酸(5ml)处理。将反应混合物在室温下搅拌3小时，然后浓缩。使残 留物溶于二氯甲烷中，用饱和碳酸氢钠水溶液洗涤。将有机层干燥(Na2SO4)并浓缩。 混合物用乙酸乙酯萃取。合并的有机萃取物经Na2SO4干燥、浓缩。通过快速色谱纯 化粗反应混合物，获得3-氨基呋喃-2-甲酸甲酯34(574mg，86％)：MS(Q1)142(M)+。
实施例16 3-脲基呋喃-2-甲酸乙酯 35

在-78℃下，往3-氨基呋喃-2-甲酸甲酯34(100mg，1.0eq)的二氯甲烷(3ml)溶 液中滴加氯磺酰异氰酸酯(0.09ml，1.4eq)。将该反应液缓慢升温到室温，搅拌40分 钟。浓缩反应液。在残留物中加入6N HCl(3.5ml)，将该混合物在100℃下加热20 分钟。将反应混合物冷却到室温，用饱和碳酸氢钠水溶液中和。通过过滤收集固体， 获得米黄色固体状的3-脲基呋喃-2-甲酸乙酯35(120mg，92％)，其未经进一步纯化而 在下一反应中使用。
实施例17 呋喃并[3，2-d]嘧啶-2，4-二醇 36

将3-脲基呋喃-2-甲酸乙酯35(120mg，1.0eq)悬浮于甲醇(6ml)中，用1.5M NaOH (1.5ml)处理。将反应混合物加热到回流，保持90分钟。将反应混合物冷却到室温， 用6N HCl酸化至pH 3。将混合物浓缩。在残留物中加入甲醇，过滤固体，在高真空 度和95℃下干燥24小时，获得呋喃并[3，2-d]嘧啶-2，4-二醇36(90mg，91％)，其未经 进一步纯化而在下一反应中使用。
实施例18 2，4-二氯呋喃并[3，2-d]嘧啶 37

将呋喃并[3，2-d]嘧啶-2，4-二醇36(39mg，1.0eq)溶于POCl3(1.8ml)中。将该混 合物冷却到-40℃，缓慢加入N，N-二异丙基乙胺(0.45ml)。然后将反应混合物加热到回 流，保持48小时，然后冷却到室温。将反应混合物倾倒入冰/水中。用乙酸乙酯萃取混 合物。合并的有机层用饱和碳酸氢钠水溶液洗涤，经干燥(Na2SO4)并浓缩，获得2，4- 二氯呋喃并[3，2-d]嘧啶37(23mg，48％)，其未经进一步纯化而在下一反应中使用。
实施例19 2-氯-4-吗啉代呋喃并[3，2-d]嘧啶 38

将2，4-二氯呋喃并[3，2-d]嘧啶37(23mg，1.0eq)悬浮于甲醇(1.7ml)中，用吗啉 (0.09ml，4.0eq)处理。将反应混合物在室温下搅拌2小时，然后用饱和碳酸氢钠水 溶液猝灭。混合物用二氯甲烷萃取。将合并的有机层干燥(Na2SO4)和浓缩，获得 2-氯-4-吗啉代呋喃并[3，2-d]嘧啶38(14mg，48％)，其未经进一步纯化而在下一反应中 使用。
实施例20 2-氯-4-吗啉代呋喃并[3，2-d]嘧啶-6-甲醛 39

在-78℃下，往溶有2-氯-4-吗啉代呋喃并[3，2-d]嘧啶38(40mg，1.0eq)的THF (1.7ml)溶液中加入1.6M正丁基锂溶液(0.14ml，1.3eq，1.6M己烷溶液)。在-78℃下 搅拌反应混合物30分钟。加入DMF(0.05ml，4.0eq)，将反应混合物缓慢升温到室温， 搅拌90分钟。反应混合物用水猝灭，用二氯甲烷萃取。将合并的有机层干燥(Na2SO4) 并浓缩。用快速色谱纯化粗反应混合物，获得2-氯-4-吗啉代呋喃并[3，2-d]嘧啶-6-甲醛 39(22mg，50％)：1H NMR(CDCl3，400MHz)δ 9.92(s，1H)，7.48(s，1H)，4.12(m，4H)， 3.86(dd，4H)；MS(Q1)268(M)+。
实施例21 1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂环戊硼烷-2-基)-1H- 吲唑40(路线A)

步骤A：4-氯-1H-吲唑的制备：在具有搅拌棒的250ml烧瓶内加入2-甲基-3-氯苯 胺(8.4ml，9.95g，70.6mmol)、乙酸钾(8.3g，84.7mmol)和氯仿(120ml)。在搅拌下 将该混合物冷却到0℃。在冷却的混合物中经2分钟滴加乙酸酐(20.0ml，212mmol)。 将该反应混合物升温到25℃，搅拌1小时。在此时间点，将反应液加热到60℃。加 入亚硝酸异戊酯(18.9ml，141mmol)，将反应液在60℃下搅拌过夜。一旦完成，加入 水(75ml)和THF(150ml)，将反应液冷却到0℃。加入LiOH(20.7g，494mmol)， 将反应液在0℃下搅拌3小时。加入水(200ml)，产物用EtOAc(300ml，100ml)萃 取。将有机层合并，用MgSO4干燥，真空浓缩，获得11.07g(100％)橙色固体。1H NMR (400MHz，CDCl3)δ 8.18(d，J＝1Hz，1H)，7.33(d，J＝8Hz1H)，7.31(t，J＝7Hz，1H)， 7.17(dd，J＝7Hz，1Hz1H)。LCMS(ESI pos)m/e 153(M+1)。
步骤B：4-氯-1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吲唑的制备：在具有机械搅拌器的1L烧 瓶内加入4-氯-1H-吲唑(75.0g，0.492mol)、对甲苯磺酸吡啶鎓(1.24g，4.92mmol)、 CH2Cl2(500ml)和3，4-二氢-2H-吡喃(98.6ml，1.08mol)。在搅拌的同时，将该混合 物加热至45℃并保持16小时。反应混合物的分析显示形成产物的两种异构体。将反 应液冷却到25℃，加入CH2Cl2(200ml)。用水(300ml)和饱和碳酸氢钠(250ml) 洗涤该溶液。有机物用MgSO4干燥并浓缩至干。通过将粗产物溶于EtOAc/己烷(4:6， 1L)和加入SiO2(1.2L)来纯化粗产物。将该混合物过滤，滤饼用EtOAc/己烷(4:6， 2L)洗涤。将有机物真空浓缩，获得110.2g(95％)的橙色固体。异构体1：1H NMR(400 MHz，CDCl3)δ 8.10(d，J＝1Hz，1H)，7.50(dd，J＝9Hz，1Hz 1H)，7.29(dd，J＝9Hz， 8Hz 1H)，7.15(dd，J＝8Hz，1Hz 1H)5.71(dd，J＝9Hz，3Hz 1H)4.02(m，1H)3.55 (m，1H)2.51(m，1H)2.02(m，2H)1.55(m，3H).LCMS(ESI pos)m/e237(M+1)；异 构体2：1H NMR(400MHz，CDCl3)δ 8.25(d，J＝1Hz，1H)，7.62(dd，J＝9Hz，1Hz 1H)，7.20(dd，J＝9Hz，8Hz 1H)，7.06(dd，J＝8Hz，1Hz 1H)5.69(dd，J＝9Hz，3Hz 1H)4.15(m，1H)3.80(m，1H)2.22(m，2H)2.05(m，1H)1.75(m，3H)。LCMS(ESI pos) m/e 237(M+1)。
步骤C：1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂环戊硼烷-2-基)-1H- 吲唑的制备：在带有搅拌棒的500ml烧瓶内加入4-氯-1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吲唑 (10.0g，42.2mmol)、DMSO(176ml)、PdCl2(PPh3)2(6.2g，8.86mmol)、三环己基膦 (0.47g，1.69mmol)、联硼酸频那醇酯(16.1g，63.4mmol)和乙酸钾(12.4g，0.127mol)。 在搅拌的同时，将该混合物加热至130℃，保持16小时。将该反应液冷却到25℃，加 入EtOAc(600ml)，用水(2×250ml)洗涤。有机物用MgSO4干燥，真空浓缩至干。 粗产物通过SiO2塞(120g)纯化，用10％EtOAc/己烷(1L)和30％EtOAc/己烷(1L) 洗脱。将滤液在真空中浓缩，获得13.9g(100％)产物40，为乙酸乙酯中的20％(wt/wt) 溶液。1H NMR显示存在约20％(wt/wt)联硼酸频那醇酯。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ 8.37(s，1H)，7.62(dd，J＝14Hz，2Hz 1H)，7.60(dd，J＝7Hz，1Hz 1H)，7.31(dd，J＝8 Hz，7Hz 1H)5.65(dd，J＝9Hz，3Hz 1H)4.05(m，1H)3.75(m，1H)2.59(m，1H)2.15 (m，1H)2.05(m，1H)1.75(m，3H)1.34(s，12H)。LCMS(ESI pos)m/e 245(M+1)。
实施例22 1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂环戊硼烷-2-基)-1H- 吲唑40(路线B)

步骤A：4-硝基-1H-吲唑的制备：将2-甲基-3-硝基苯胺(200g，1.315mol)和乙酸 (8000ml)的混合物冷却到15-20℃，经30分钟缓慢加入亚硝酸钠(90.6g，1.315mol) 在水(200ml)中的溶液。在加入之后，将反应温度升高到25-30℃，将该反应在该 温度下搅拌2-3小时。通过TLC监视反应进程，在反应结束后，将产物过滤，残留 物用乙酸(1000ml)洗涤。在真空(550mm Hg)和80℃以下蒸馏掉乙酸，加入水 (8000ml)，冷却到25-30℃，搅拌30分钟。将淤浆过滤，用水洗(1000ml)。粗产 物在70-80℃下加热2小时来进行干燥，然后溶解在5％乙酸乙酯/正己烷 (100:2000ml)溶液中，在环境温度下搅拌1-1.5小时。将该悬浮液过滤，用5％乙 酸乙酯/正己烷混合物(25:475ml)洗涤。所得产物在真空和80℃以下干燥10-12小 时，获得棕色固体(150g，70％)：熔点：200-203℃；1H NMR(200MHz，CDCl3)δ 13.4(br， 1H)，8.6(s，1H)，8.2-7.95(dd，2H)，7.4(m，1H)。ESMS m/z 164(M+1)。纯度：95％ (HPLC)。
步骤B：4-氨基-1H-吲唑的制备：将4-硝基-1H-吲唑(200g，1.22mol)和10％钯/ 碳(20.0g)在EtOH(3000ml)中的混合物在环境温度下氢化(反应是放热的，温度 升高到50℃)。在反应结束后，通过过滤除去催化剂。溶剂在真空和80℃以下蒸发， 冷却到室温，将正己烷(1000ml)加入到残留物中，再搅拌30分钟。过滤分离固体， 并用正己烷(200mL)洗涤。产物在真空和70-80℃下干燥10-12小时，获得棕色固 体(114g，70％)，熔点：136-143℃。1H NMR(200MHz，CDCl3)δ 12(br，1H)，8.0(s，1H)， 7.1-7.0(dd，2H)，6.5(d.1H)，3.9(m，2H).ESMS m/z 134(M+1)。纯度：90-95％ (HPLC)。
步骤C：4-碘-1H-吲唑的制备：将在水(100ml)中的4-氨基-1H-吲唑(50.0g， 0.375mol)和浓盐酸(182ml)的混合物冷却到-10℃，在-10℃下在大约30-60分钟 内在其中滴加亚硝酸钠(51.7g，0.75mol)在水(75ml)中的溶液(在加入过程中发现 起泡)。在另一烧瓶内，在室温下制备碘化钾(311g，1.87mol)在水(3000ml)中的混 合物，在大约30-40分钟内在30-40℃下在其中加入以上冷却的重氮盐。反应在30 ℃下保持1小时，在反应结束后，加入乙酸乙酯(500ml)，通过塞力特硅藻土过滤反 应混合物。分离各层，含水层用乙酸乙酯(2×500ml)萃取。合并的有机层用5％大 苏打溶液(2×500ml)、盐水(500ml)洗涤，干燥(Na2SO4)，再浓缩。粗产物通过 色谱法(硅胶，己烷，15-20％乙酸乙酯/己烷)纯化，获得橙色固体状产物(23.0g， 25％)。熔点：151-177℃，1H NMR(200MHz，CDCl3)δ 12.4(br，1H)，8.0(s，1H)，7.6(dd， 2H)，7.1(d，1H)。ESMS m/z 245(M+1)。纯度：95-98％(HPLC)。
步骤D：4-碘-1-(2-四氢吡喃基)吲唑的制备：将4-氨基-1H-吲唑(250.0g，1.024mol)、 3，4-二氢-2H-吡喃(126.0g，1.5mol)和PPTS(2.57g，0.01mol)在CH2Cl2(1250ml) 中的混合物在50℃下加热2小时。将反应冷却到室温，倾倒于水(625ml)中，分离 各层，含水层用CH2Cl2(250ml)萃取。合并的有机层用水(625ml)洗涤，干燥(Na2SO4)， 再浓缩。粗残留物通过色谱法纯化(硅胶，己烷，5-10％乙酸乙酯/己烷)，获得油状 产物(807.0g，60％)。1H NMR(200MHz，CDCl3)δ8.5(s，1H)，7.8(m，1H)，7.6(d，1H)， 7.25(m，1H)，5.7(dd，1H)，4.2-3.8(dd，1H)，2.2-2.0(m，4H)2.0-1.8(m，4H)。ESMS m/z 329(M+1)。
步骤E：1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂环戊硼烷-2-基)-1H- 吲唑的制备：将4-碘-1-(2-四氢吡喃基)吲唑(100g，0.304mol)、双硼酸频那醇酯(96.4g， 0.381mol)、PdCl2(dppf)(8.91g，0.012mol)和乙酸钾(85.97g，0.905mol)在DMSO (500ml)中的混合物加热到80℃，保持2-3小时。在反应结束后，将反应冷却到室 温，加入水(1500ml)。反应物质萃取到乙酸乙酯(3×200ml)中，将合并的有机层 蒸发，干燥(Na2SO4)，浓缩。粗产物通过柱色谱法(硅胶，己烷，5-10％乙酸乙酯 己烷)纯化，获得粘性棕色油状产物40(70.0g，70％)。5：1H NMR(CDCl3)δ 8.5(s，1H) 7.8(m，1H)，7.6(d，1H)，7.25(m，1H)，5.7(dd，1H)，4.2-3.8(dd，1H)，2.2-2.0(m，4H) 2.0-1.8(m，4H)，1.4-1.2(s，12H)。ESMS m/z 329(M+1)。
实施例23 5-苯基-3-脲基呋喃-2-甲酸乙酯41

在-78℃下，往3-氨基-5-苯基-呋喃-2-甲酸酯(116mg，1.0eq)在二氯甲烷(3ml) 中的溶液中滴加氯磺酰异氰酸酯(0.06ml，1.3eq)(Redman，A.M.；Dumas，J.；Scott，W. J.Org.Lett.(2000)2：2061-2063)。将该反应液缓慢升温到室温，再搅拌40分钟。将 反应液浓缩。在残留物中加入6N HCl(2.5ml)，将混合物加热到100℃，保持20分 钟。将反应混合物冷却到室温，用饱和碳酸氢钠水溶液中和。通过过滤收集固体，获 得米黄色固体状的5-苯基-3-脲基呋喃-2-甲酸酯41(130mg，95％)，不用进一步纯化 在下一反应中使用。
实施例24 6-苯基呋喃并[3，2-d]嘧啶-2，4-二醇 42

将5-苯基-3-脲基呋喃-2-甲酸酯41(125mg，1.0eq)悬浮于甲醇(5ml)中，用1.5M NaOH(1ml)处理。将反应混合物加热到回流，保持90分钟。将反应混合物冷却到 室温，用6N HCl酸化至pH3。将固体过滤，在95℃和高真空度下干燥24小时，获 得米黄色固体状的6-苯基呋喃并[3，2-d]嘧啶-2，4-二醇(79mg，76％)，不用进一步纯化在 下一反应中使用。
实施例25 2，4-二氯-6-苯基呋喃并[3，2-d]嘧啶 43

将6-苯基呋喃并[3，2-d]嘧啶-2，4-二醇42(80mg，1.0eq)溶于POCl3(2.4ml)中。 将混合物冷却到-40℃，缓慢加入N，N-二异丙基乙胺(0.6ml)。然后将反应混合物加 热到回流，保持48小时，然后冷却到室温。将该反应混合物倒入冰/水中。混合物用 乙酸乙酯萃取。合并的有机层用饱和碳酸氢钠水溶液洗涤，干燥(Na2SO4)，再浓缩， 获得2，4-二氯-6-苯基呋喃并[3，2-d]嘧啶43(76mg，82％)，该化合物不用进一步纯化在 下一反应中使用。
实施例26 2-氯-4-吗啉代-6-苯基呋喃并[3，2-d]嘧啶 44

将2，4-二氯-6-苯基呋喃并[3，2-d]嘧啶43(165mg，1.0eq)悬浮于甲醇(4.2ml)中， 用吗啉(0.22ml，4.0eq)处理。将反应混合物在室温下搅拌4小时。将固体过滤，获 得米黄色固体状的纯2-氯-4-吗啉代-6-苯基呋喃并[3，2-d]嘧啶44(163mg，83％收率)： 1H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.80(m，2H)，7.51(m，3H)，6.99(m，1H)，4.10(m，4H)， 3.89(m，1H)；MS(Q1)316(M)+。
实施例27 2-氯-6-碘-4-吗啉代呋喃并[3，2-d]嘧啶 45

在-78℃下，往溶于THF(2.1ml)的2-氯-4-吗啉代呋喃并[3，2-d]嘧啶38(50mg， 1.0eq)的溶液中加入正丁基锂的1.6M溶液(0.17ml，1.3eq，1.6M己烷溶液)。将该反 应混合物在-78℃下搅拌30分钟。加入碘(159mg，3.0eq)在THF(0.6ml)中的溶液， 将反应混合物缓慢升温到室温，搅拌45分钟。该反应混合物用饱和Na2S2O3水溶液 猝灭，再用二氯甲烷萃取。将合并的有机层干燥(Na2SO4)，浓缩。粗反应混合物通 过快速色谱纯化，获得2-氯-6-碘-4-吗啉代呋喃并[3，2-d]嘧啶45(63mg，83％)：MS(Q1) 366(M)+。
实施例28 2-(2-氯-4-吗啉代呋喃并[3，2-d]嘧啶-6-基)丙-2-醇 46

在-78℃下，往溶于THF(2.5ml)的2-氯-4-吗啉代呋喃并[3，2-d]嘧啶38(60mg， 1.0eq)的溶液中加入正丁基锂的1.6M溶液(0.20ml，1.3eq，1.6M己烷溶液)。将该反 应混合物在-78℃下搅拌30分钟。加入丙酮(0.07ml，4.0eq)，将反应混合物升温直至 -40℃并搅拌1小时。将粗反应混合物浓缩，通过反相HPLC纯化，获得2-(2-氯-4-吗 啉代呋喃并[3，2-d]嘧啶-6-基)丙-2-醇46。MS(Q1)298(M)+。
实施例29 3-(2-(1H-吲唑-4-基)-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基)-N-甲基苯甲酰胺 101
在密封微波反应器内，将在0.6mL1M Na2CO3水溶液和0.6mL乙腈中的120mg 2- 氯-6-碘-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶19、62mg 3-(N-甲基氨基羰基苯基)硼酸和22mg 二氯化双(三苯基膦)钯(II)加热到100℃，保持15分钟。该混合物用H2O稀释， 然后用乙酸乙酯萃取(3×20mL)萃取。将合并的有机层浓缩。通过反相HPLC纯化 粗产物，获得75mg 3-(2-氯-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基)-N-甲基苯甲酰胺。
经由一般程序A，使3-(2-氯-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基)-N-甲基苯甲酰胺 (50mg)与4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂环戊硼烷-2-基)-1H-吲唑7偶联。通过反相 HPLC纯化产物，获得13.3mg的101。MS(Q1)471(M)+。
实施例30 2-(1H-吲唑-4-基)-4-吗啉代-6-(3-异丙基磺酰基氨基苯基)噻吩并[3，2-d]嘧 啶 102

将120mg2-氯-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基)苯胺和43μL异丙基磺酰氯在 1mL吡啶中于室温下搅拌过夜。将反应混合物蒸发。粗产物通过反相HPLC纯化， 获得47mg的氯代中间体。
使氯代中间体(21mg)经由一般程序A与4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂环戊硼烷 -2-基)-1H-吲唑7偶联。通过反相HPLC纯化产物，获得10mg的102。MS(Q1)535(M)+。
实施例31 (S)-1-(2-(1H-吲唑-4-基)-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基)乙醇103和 (R)-1-(2-(1H-吲唑-4-基)-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基)乙醇 104
经由一般程序D在100mg的2-氯-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶4中加入乙醛。粗 产物氯化物经历程序A，获得可分离的化合物103和化合物104的混合物。MS(Q1) 382.2(M)+。
实施例32 2-(1H-吲唑-4-基)-4-吗啉代-6-(丙基磺酰基)噻吩并[2，3-d]嘧啶 105
将500mg的2-氯-4-吗啉代噻吩并[2，3-d]嘧啶在50mL THF中冷却到-78℃，然后 加入1.3eq的nBuLi在己烷中的2.5M溶液。将反应在-78℃下搅拌30分钟，然后升 温至-40℃，保持几分钟，以便完全形成锂阴离子。然后将反应再冷却到-78℃，通过 套管在反应溶液中鼓泡二氧化硫气体2分钟。将反应冷却到0℃，用水猝灭。含水层 用乙酸乙酯萃取，以除去任何2-氯-4-吗啉代噻吩并[2，3-d]嘧啶。含水层然后冻干，通 过反相HPLC纯化，获得180mg的纯2-氯-4-吗啉代噻吩并[2，3-d]嘧啶-6-亚磺酸。
往在1.5mL DMF中的90mg的2-氯-4-吗啉代噻吩并[2，3-d]嘧啶-6-亚磺酸中加入 1.05eq的NaH(60％油分散体)。将该反应在室温下搅拌30分钟，然后加入1.05eq 的碘代丙烷，再将温度升高到50℃，反应在30分钟内完成。将反应冷却到室温，然 后用饱和碳酸氢钠溶液萃取到乙酸乙酯中两次。有机层用MgSO4干燥，过滤，再浓 缩至干燥。粗氯化物进行程序A的操作，获得27.6mg的化合物105。MS(Q1)444.1 (M)+。
实施例33 2-(2-(1H-吲唑-4-基)-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基)-1-甲氧基丙-2-醇 106
按照一般程序D，将200mg的2-氯-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶4与甲氧基丙酮一 起使用，获得相应的叔醇。按照一般程序A在钯催化的交叉偶联反应中使用60mg的 原料，在反相HPLC纯化之后，获得23mg的化合物106。MS(Q1)426(M)+。
实施例34 2-(2-(1H-吲唑-4-基)-4-吗啉代呋喃并[3，2-d]嘧啶-6-基)丙-2-醇 107
将2-(2-氯-4-吗啉代呋喃并[3，2-d]嘧啶-6-基)丙-2-醇(60mg，1.0eq)溶于乙腈 (2.0ml)中，用4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂环戊硼烷-2-基)-1H-吲唑7(123mg， 2.5eq)、PdCl2(PPh3)2(14.1mg，0.10eq)和1M乙酸钾(0.6ml)处理。将管形瓶密封， 在微波反应器内在搅拌的同时加热至140℃，保持30分钟。将粗反应混合物浓缩，通 过反相HPLC纯化，获得2-(2-(1H-吲唑-4-基)-4-吗啉代呋喃并[3，2-d]嘧啶-6-基)丙-2- 醇107。MS(Q1)380(M)+。
2-(2-(1H-吲唑-4-基)-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基)-1，3-二甲氧基丙-2-醇108
按照一般程序D，将200mg的2-氯-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶4与1，3-二甲氧基 丙酮一起使用，获得相应的叔醇。按照一般程序A在钯催化的交叉偶联反应中使用 60mg的原料，在反相HPLC纯化之后，获得15mg的化合物108。MS(Q1)456(M)+。
实施例35 2-(2-(1H-吲唑-4-基)-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基)-1-(二乙基氨基)丙 -2-醇 109
按照一般程序D，将200mg的2-氯-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶4与(N，N-二乙基 氨基)丙酮一起使用，获得相应的叔醇。按照一般程序A在钯催化的交叉偶联反应中 使用60mg的原料，在反相HPLC纯化之后，获得12mg的化合物109。MS(Q1)467 (M)+。
实施例36 1-(4-(2-(1H-吲唑-4-基)-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基)-4-羟基哌啶-1-基) 乙酮 110
按照一般程序D，将200mg的2-氯-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶4与1-乙酰基-4- 哌啶酮一起使用，获得相应的叔醇。粗反应混合物用乙腈研制，按照一般程序A在钯 催化的交叉偶联反应中使用60mg的叔醇，在反相HPLC纯化之后，获得25mg的化 合物110。MS(Q1)479(M)+。
实施例37 2-(1H-吲唑-4-基)-6-(3-(甲基磺酰基)苯基)-4-吗啉代呋喃并[3，2-d]嘧啶 111
将2-氯-6-碘-4-吗啉代呋喃并[3，2-d]嘧啶(40mg，1.0eq)溶于乙腈(0.4ml)中， 用3-(甲基磺酰基)苯基硼酸(23mg，1.05eq)、PdCl2(PPh3)2(7.7mg，0.10eq)和1M Na2CO3(0.33ml)处理。将管形瓶密封，在微波反应器内在搅拌的同时加热至100℃， 保持30分钟。反应混合物用饱和碳酸氢钠水溶液猝灭，用二氯甲烷萃取。将合并的 有机层干燥(Na2SO4)，再浓缩。将残留物溶于乙腈(0.4ml)，用4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2- 二氧杂环戊硼烷-2-基)-1H-吲唑7(53mg，2.0eq)、PdCl2(PPh3)2(7.7mg，0.10eq)和1M Na2CO3(0.33ml)处理。将管形瓶密封，在微波反应器内在搅拌的同时加热至150℃， 保持15分钟。将粗反应混合物浓缩，通过反相HPLC纯化，获得2-(1H-吲唑-4- 基)-6-(3-(甲基磺酰基)苯基)-4-吗啉代呋喃并[3，2-d]嘧啶111。MS(Q1)476(M)+。
实施例38 N-(3-(2-(1H-吲唑-4-基)-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基)苯基)-2-羟基-2- 甲基丙酰胺 112
在密封微波反应器内，将在0.6mL的1M Na2CO3水溶液和0.6mL的乙腈中的2- 氯-6-碘-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶19(300mg)、3-氨基苯基硼酸(134mg)和二氯化 双(三苯基膦)钯(II)(55mg)加热到100℃，保持15分钟。该反应混合物用乙酸 乙酯(80mL)稀释，用水(50mL)洗涤。有机层用MgSO4干燥，过滤，蒸发，获 得270mg的3-(2-氯-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基)苯胺。
通过一般程序I，将3-(2-氯-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基)苯胺(50mg)与2- 羟基异丁酸反应，获得N-(3-(2-氯-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基)苯基)-2-羟基-2-甲 基丙胺。通过一般程序A，将62mg的粗品N-(3-(2-氯-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6- 基)苯基)-2-羟基-2-甲基丙胺偶联于4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂环戊硼烷-2-基)-1H- 吲唑7。产物通过反相HPLC纯化，获得16.2mg的化合物112。MS(Q1)515(M)+。
实施例39 (2S)-N-(3-(2-(1H-吲唑-4-基)-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基)苯基)-2-羟基 丙酰胺 113
通过一般程序I，将3-(2-氯-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基)苯胺(50mg)与L- 乳酸反应，获得(2S)-N-(3-(2-氯-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基)苯基)-2-羟基丙酰胺。 通过一般程序A，将60mg的粗品(2S)-N-(3-(2-氯-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基)苯 基)-2-羟基丙酰胺偶联于4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂环戊硼烷-2-基)-1H-吲唑7。产 物通过反相HPLC纯化，获得3mg的化合物113。MS(Q1)501(M)+。
实施例40 (2-(1H-吲唑-4-基)-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基)甲醇 114
该化合物使用一般程序A由(2-氯-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基)甲醇制备，在 反相HPLC纯化之后，获得化合物114(54％)。MS(Q1)368(M)+。
实施例41 (2-(1H-吲唑-4-基)-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基)甲胺 115
该化合物使用一般程序A由实施例11的(2-氯-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基) 甲胺27制备，在反相HPLC纯化之后，获得化合物115(35％)。MS(Q1)367(M)+。
实施例42 (2-(1H-吲唑-4-基)-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基)甲烷(甲基磺酰基)胺116
往(2-氯-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基)甲胺(50mg，0.2mmol)在CH2Cl2(4mL) 中的溶液中加入Et3N(84μL，0.6mmol)和MeSO2Cl(26μL，0.3mmol)。在用水(2mL) 猝灭之前，将该反应在室温下搅拌18小时。含水层用EtOAc萃取。合并的有机层用 Na2SO4干燥，真空浓缩。粗磺酰胺根据一般程序A使用，在反相HPLC纯化之后， 获得化合物116(13％，2个步骤)。MS(Q1)445(M)+。
实施例43 2-(1H-吲唑-4-基)-4-吗啉代-N-(吡啶-3-基)噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-胺 117
根据一般程序J制备，获得化合物117(6％，2个步骤)。MS(Q1)430(M)+。
实施例44 2-(4-(2-(2-(1H-吲唑-4-基)-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基)乙基)哌嗪-1- 基)-N，N-二甲基乙酰胺 118
按照实施例67制备化合物144的操作程序，使用N，N-二甲基-2-哌嗪-1-基-乙酰胺， 制备化合物118。NMR：CDCl3：2.49-2.62(8H，m，CH2)，2.68-2.84(2H，m，CH2)，2.91(3 H，s，Me)，3.02(3H，s，Me)，3.08(2H，t，J7.22，CH2)，3.13(2H，s，CH2)，3.79-3.84(4H， m，CH2)，3.98-4.02(4H，m，CH2)，7.20(1H，s，Ar)，7.44(1H，t，J8.0，Ar)，7.52(1H，d， J8.15，Ar)，8.22(1H，d，J7.35，Ar)and8.95(1H，s，Ar)。MS：(ESI+)：MH+535.36。
实施例45 N-(2-(1H-吲唑-4-基)-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基)-2-甲氧基乙酰胺 119
通过一般程序G让55mg的2-氯-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-胺与26mg的甲氧 基乙酰氯反应，获得N-(2-氯-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基)-2-甲氧基乙酰胺。
通过一般程序A将70mg的粗品N-(2-氯-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基)-2-甲氧 基乙酰胺与4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂环戊硼烷-2-基)-1H-吲唑7偶联。产物通过 反相HPLC纯化，获得28.1mg的化合物119。MS(Q1)425(M)+。
实施例46 N-(3-(2-(1H-吲唑-4-基)-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基)苯基)-2-甲氧基 乙酰胺 120
将3-(2-氯-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基)苯胺(60mg)、甲氧基乙酰氯(23mg) 和36μL的三乙胺在二氯甲烷中搅拌1小时。将该反应混合物蒸发，获得N-(3-(2-氯-4- 吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基)苯基)-2-甲氧基乙酰胺。通过一般程序A将70mg的粗 品N-(3-(2-氯-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基)苯基)-2-甲氧基乙酰胺与4-(4，4，5，5-四甲 基-1，3，2-二氧杂环戊硼烷-2-基)-1H-吲唑7偶联。产物通过反相HPLC纯化，获得 17.3mg的化合物120。MS(Q1)501(M)+。
实施例47 2-(1H-吲唑-4-基)-4-吗啉代-N-(吡啶-2-基)噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-胺 121
根据一般程序J制备，获得化合物121(12％，2个步骤)。MS(Q1)430(M)+。
实施例48 (2-(1H-吲唑-4-基)-4-吗啉代噻吩并[2，3-d]嘧啶-6-基)(4-甲基哌嗪-1-基)甲 酮 122
通过一般程序B将45mg的2-(1H-吲唑-4-基)-4-吗啉代噻吩并[2，3-d]嘧啶-6-甲酸 14与1-甲基哌嗪偶联。产物通过反相HPLC纯化，获得34.5mg的化合物122。MS (Q1)464.2(M)+。
实施例49 (2-(1H-吲唑-4-基)-4-吗啉代噻吩并[2，3-d]嘧啶-6-基)(4-羟基哌啶-1-基)甲 酮 123
通过一般程序B将45mg的2-(1H-吲唑-4-基)-4-吗啉代噻吩并[2，3-d]嘧啶-6-甲酸 14与哌啶-4-醇偶联。产物通过反相HPLC纯化，获得46.6mg的化合物123。MS (Q1)465.1(M)+。
实施例50 (2-(1H-吲唑-4-基)-4-吗啉代噻吩并[2，3-d]嘧啶-6-基)(4-乙酰基哌嗪-1-基) 甲酮 124
通过一般程序B将45mg的2-(1H-吲唑-4-基)-4-吗啉代噻吩并[2，3-d]嘧啶-6-甲酸 14与1-乙酰基哌嗪偶联。产物通过反相HPLC纯化，获得52.5mg的化合物124。MS (Q1)492.2(M)+。
实施例51 (2-(1H-吲唑-4-基)-4-吗啉代噻吩并[2，3-d]嘧啶-6-基)(4-甲基磺酰基哌嗪 -1-基)甲酮 125
通过一般程序B将45mg的2-(1H-吲唑-4-基)-4-吗啉代噻吩并[2，3-d]嘧啶-6-甲酸 14与1-甲烷磺酰基哌嗪偶联。产物通过反相HPLC纯化，获得55mg的化合物125。 MS(Q1)528.1(M)+。
实施例52 2-(1H-吲唑-4-基)-N-异丙基-4-吗啉代噻吩并[2，3-d]嘧啶-6-甲酰胺 126
通过一般程序B将45mg的2-(1H-吲唑-4-基)-4-吗啉代噻吩并[2，3-d]嘧啶-6-甲酸 14与丙-2-胺偶联。产物通过反相HPLC纯化，获得28.1mg的化合物126。MS(Q1)423.2 (M)+。
实施例53 N-(2，2，2-三氟乙基)-2-(1H-吲唑-4-基)-4-吗啉代噻吩并[2，3-d]嘧啶-6-甲酰胺 127
通过一般程序B将45mg的2-(1H-吲唑-4-基)-4-吗啉代噻吩并[2，3-d]嘧啶-6-甲酸 14与2，2，2-三氟乙胺偶联。产物通过反相HPLC纯化，获得15mg的化合物127。MS (Q1)463.1(M)+。
实施例54 N-(2-羟乙基)-2-(1H-吲唑-4-基)-4-吗啉代噻吩并[2，3-d]嘧啶-6-甲酰胺 128
通过一般程序B将45mg的2-(1H-吲唑-4-基)-4-吗啉代噻吩并[2，3-d]嘧啶-6-甲酸 14与乙醇胺偶联。产物通过反相HPLC纯化，获得10.2mg的化合物128。MS(Q1)425.1 (M)+。
实施例55 N-乙基-2-(1H-吲唑-4-基)-4-吗啉代噻吩并[2，3-d]嘧啶-6-甲酰胺 129
通过一般程序B将45mg的2-(1H-吲唑-4-基)-4-吗啉代噻吩并[2，3-d]嘧啶-6-甲酸 14与乙胺HCl偶联。产物通过反相HPLC纯化，获得31.8mg的化合物129。MS (Q1)409.2(M)+。
实施例56 2-(1H-吲唑-4-基)-N，N-二甲基-4-吗啉代噻吩并[2，3-d]嘧啶-6-甲酰胺 130
通过一般程序B将45mg的2-(1H-吲唑-4-基)-4-吗啉代噻吩并[2，3-d]嘧啶-6-甲酸 14与二甲胺HCl偶联。产物通过反相HPLC纯化，获得33mg的化合物130。MS (Q1)409.2(M)+。
实施例57 2-(1H-吲唑-4-基)-N-甲基-4-吗啉代噻吩并[2，3-d]嘧啶-6-甲酰胺 131
通过一般程序B将45mg的2-(1H-吲唑-4-基)-4-吗啉代噻吩并[2，3-d]嘧啶-6-甲酸 14与甲胺HCl偶联。产物通过反相HPLC纯化，获得36.4mg的化合物131。MS (Q1)395.2(M)+。
实施例58 4-(2-(1H-吲唑-4-基)-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基)-四氢-2H-噻喃-4-醇 132
根据一般程序D，将250mg的2-氯-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶4与四氢噻喃-4- 酮一起使用，获得相应的叔醇。粗反应混合物用乙腈研制，分离出60mg的叔醇，按 照一般程序A在钯催化的交叉偶联反应中使用，在反相HPLC纯化之后，获得35mg 的化合物132。MS(Q1)454(M)+。
实施例59 1-(2-(1H-吲唑-4-基)-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基)环丁醇 133
根据一般程序D，将250mg的2-氯-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶4与环丁酮一起使 用，获得相应的叔醇。按照一般程序A在钯催化的交叉偶联反应中使用100mg的粗 物质，在反相HPLC纯化之后，获得35mg的化合物133。MS(Q1)408(M)+。
实施例60 6-氯-2-(1H-吲唑-4-基)-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶 134

在-78℃下，将正丁基锂(1.6mL，3.914mmol)的2.5M己烷溶液加入到2-氯-4- 吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶4(500mg，1.957mmol)在10mL的THF中的混合物。将该 反应混合物升温到-40℃，并搅拌40分钟。滴加N-氯丁二酰亚胺(523mg，3.914mmol) 在8mL THF中的溶液。在加入完后，将该反应混合物升温到室温，并搅拌2小时。 通过LC/MS监视反应。该混合物用醚稀释，用1N HCl(2×60mL)萃取。然后将含 水层碱化，用乙酸乙酯(2×100mL)萃取。有机层用H2O(60mL)洗涤，用MgSO4 干燥，过滤，再蒸发。粗产物通过ISCO Combiflash(5～50％乙酸乙酯/己烷)纯化， 获得2，6-二氯-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶(284mg，50％)。
通过一般程序A，将40mg的2，6-二氯-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶与4-(4，4，5，5-四 甲基-1，3，2-二氧杂环戊硼烷-2-基)-1H-吲唑7偶联。产物通过反相HPLC纯化，获得 4.4mg的化合物134。MS(Q1)372(M)+。
实施例61 (R)-1-(3-(2-(1H-吲唑-4-基)-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基)苯基磺酰基) 丙-2-醇 135
在室温下，将607μL的R-(+)-环氧丙烷加入到2g的3-巯基苯基硼酸和氧化铝(～ 30eq，中性，活化，～150目)在二乙醚中的混合物中。反应通过LC/MS监视至结束。 将该混合物蒸发，然后加入1N HCl。所得混合物用乙酸乙酯(3×150mL)萃取。合 并的有机层用MgSO4干燥，过滤，蒸发，获得3-((R)-2-羟丙基硫基)苯基硼酸(1.3， 70％)。粗产物不用纯化直接用于下一步反应。
通过一般程序I，将100mg的2-氯-6-碘-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶19与3-((R)-2- 羟丙基硫基)苯基硼酸偶联，获得(R)-1-(3-(2-(1H-吲唑-4-基)-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧 啶-6-基)苯硫基)丙-2-醇。
将322mg的过硫酸氢钾制剂在4mL H2O中的溶液加入到132mg的 (R)-1-(3-(2-(1H-吲唑-4-基)-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基)苯硫基)丙-2-醇在8mL甲 醇中的混合物中。将该反应混合物搅拌2小时。将该混合物过滤，将滤液蒸发。产物 通过反相HPLC纯化，获得3.8mg的化合物135。MS(Q1)536(M)+。
实施例62 N-(3-(2-(1H-吲唑-4-基)-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基)苯基)-2-氨基-2- 甲基丙酰胺 136
通过一般程序I，将3-(2-氯-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基)苯胺(50mg)与Boc-2- 氨基异丁酸反应，获得(3-(2-氯-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基)苯基氨基甲酰基)丙-2- 基氨基甲酸叔丁酯。通过一般程序A，将75mg的粗品(3-(2-氯-4-吗啉代噻吩并[3，2-d] 嘧啶-6-基)苯基氨基甲酰基)丙-2-基氨基甲酸叔丁酯与4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂 环戊硼烷-2-基)-1H-吲唑7偶联，获得(3-(2-(1H-吲唑-4-基)-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶 -6-基)苯基氨基甲酰基)丙-2-基氨基甲酸叔丁酯。
(3-(2-(1H-吲唑-4-基)-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基)苯基氨基甲酰基)丙-2-基氨 基甲酸叔丁酯(86mg)用2mL三氟乙酸/二氯甲烷(1:1)处理。在结束后，将反应混 合物蒸发。产物通过反相HPLC纯化，获得18.8mg的化合物136。MS(Q1)514(M)+。
实施例63 N-(3-(2-(1H-吲唑-4-基)-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基)苯基)-2-氨基乙酰 胺 137
通过一般程序I，将3-(2-氯-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基)苯胺(50mg)与Boc- 甘氨酸反应，获得(3-(2-氯-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基)苯基氨基甲酰基)甲基氨基 甲酸叔丁酯。通过一般程序A，将70mg的粗品(3-(2-氯-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶·6, 基)苯基氨基甲酰基)甲基氨基甲酸叔丁酯与4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂环戊硼烷-2, 基)-1H-吲唑7偶联，获得(3-(2-(1H-吲唑-4-基)-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基)苯基 氨基甲酰基)甲基氨基甲酸叔丁酯。
(3-(2-(1H-吲唑-4-基)-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基)苯基氨基甲酰基)甲基氨基 甲酸叔丁酯(82mg)用2mL三氟乙酸/二氯甲烷(1:1)处理。在结束后，将反应混合 物蒸发。产物通过反相HPLC纯化，获得13.9mg的化合物137。MS(Q1)486(M)+。
实施例64 (S)-1-(3-(2-(1H-吲唑-4-基)-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基)苯基磺酰基 丙-2-醇 138
在室温下，将S-(-)-环氧丙烷(152μL)加入到500mg的3-巯基苯基硼酸和氧化 铝(～30eq，中性，活化，～150目)在二乙醚中的混合物中。反应通过LC/MS监视 至结束。将该反应混合物蒸发，然后加入1N HCl。所得混合物用乙酸乙酯(3×50mL) 萃取。合并的有机层用MgSO4干燥，过滤，蒸发，获得3-((S)-2-羟丙基硫基)苯基硼 酸(414mg，90％)。粗产物不用纯化直接用于下一步反应。
通过一般程序I，将50mg的2-氯-6-碘-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶19与3-((S)-2- 羟丙基硫基)苯基硼酸偶联，获得(S)-1-(3-(2-(1H-吲唑-4-基)-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶 -6-基)苯硫基)丙-2-醇。
将161mg的过硫酸氢钾制剂在2mL H2O中的溶液加入到66mg的(S)-1-(3-(2-(1H- 吲唑-4-基)-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基)苯硫基)丙-2-醇在4mL甲醇中的混合物 中。将该反应混合物搅拌1小时。将该混合物过滤，将滤液蒸发。产物通过反相HPLC 纯化，获得3mg的化合物138。MS(Q1)536(M)+。
实施例65 N-(3-(2-(1H-吲唑-4-基)-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基)苯基)-2-羟基乙酰 胺 139
通过一般程序I，将3-(2-氯-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基)苯胺(40mg)与乙 醇酸反应，获得N-(3-(2-氯-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基)苯基)-2-羟基乙酰胺。通 过一般程序A，将47mg的粗品N-(3-(2-氯-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基)苯基)-2- 羟基乙酰胺与4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂环戊硼烷-2-基)-1H-吲唑7偶联。产物通 过反相HPLC纯化，获得3mg的化合物139。MS(Q1)487(M)+。
实施例66 2-(2-(1H-吲唑-4-基)-4-吗啉代噻吩并[2，3-d]嘧啶-6-基)丙-2-醇 140
将在2mL THF中的100mg的2-氯-4-吗啉代噻吩并[2，3-d]嘧啶冷却到-78℃，然后 加入1.3eq的nBuLi的2.5M己烷溶液。将该溶液在-78℃下搅拌30分钟，然后升温 至-40℃，加入10eq的丙酮。将该反应在-40℃下搅拌30分钟，然后缓慢升温至0℃， 然后用水猝灭。将THF蒸发，水用乙酸乙酯萃取。有机层用MgSO4干燥，过滤，再 蒸发。粗氯化物进行一般程序A，获得76mg的化合物140。MS(Q1)396.2(M)+。
实施例67 2-(1H-吲唑-4-基)-4-吗啉代噻吩并[2，3-d]嘧啶-6-甲酸141(14)
将2-氯-4-吗啉代噻吩并[2，3-d]嘧啶(500mg)在50mL THF中冷却到-78℃，然后 加入1.3eq的nBuLi的2.5M己烷溶液。将该反应在-78℃下搅拌30分钟，然后升温 至-40℃，保持几分钟，以便完全形成锂阴离子。然后将反应再冷却至-78℃，通过套 管将从干冰中放出的二氧化碳气体鼓泡到反应溶液中达1小时。然后经30分钟将该 反应缓慢升温至0℃。通过旋转蒸发浓缩THF。然后该反应用水猝灭，用乙酸乙酯萃 取，除去任何2-氯-4-吗啉代噻吩并[2，3-d]嘧啶。然后通过加入浓HCl将含水层的pH 变为2-3。然后通过Buchner漏斗收集从含水层中沉淀出的固体，用水冲洗，在真空 下干燥过夜，获得494mg的2-氯-4-吗啉代噻吩并[2，3-d]嘧啶-6-甲酸。
通过一般程序A，让2-氯-4-吗啉代噻吩并[2，3-d]嘧啶-6-甲酸(444mg)与化合物 7反应。在萃取到乙酸乙酯中时，产物保持在含水层中，用20eq的Amberlite IR-120 离子交换树脂处理2小时，或者直到溶液变混浊为止。该溶液首先粗滤器烧瓶过滤， 以除去树脂，然后用Buchner漏斗过滤，以收集476mg的浅棕色固体状的2-(1H-吲 唑-4-基)-4-吗啉代噻吩并[2，3-d]嘧啶-6-甲酸。然后通过反相HPLC纯化25mg的该产 物，以获得12.8mg的化合物141(14)。MS(Q1)382.1(M)+。
实施例68 2-(1H-吲唑-4-基)-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-甲酰胺 142
通过一般程序B将2-氯-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-甲酸(100mg)与氯化铵偶 联。将该反应混合物溶于乙酸乙酯中，用饱和氯化铵溶液萃取。将有机层浓缩至干燥， 进行程序A，获得16mg的化合物142。MS(Q1)381.1(M)+。
实施例69 6-((3-甲氧基丙基磺酰基)甲基)-2-(1H-吲唑-4-基)-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧 啶 143
在0℃下，往(2-氯-4-吗啉-4-基-噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基)-甲醇(500mg)和三乙胺 (0.5mL)在二氯甲烷(20mL)中的混合物中加入甲磺酰氯(0.27mL)。将该反应混 合物在室温下搅拌16小时，然后用水(20mL)猝灭，萃取到二氯甲烷(2×20mL) 中。合并的有机层用盐水溶液(2×20mL)洗涤，干燥(MgSO4)，浓缩，获得黄色 固体状的甲磺酸2-甲基-4-吗啉-4-基-噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-甲基酯(523mg)。
往甲磺酸2-甲基-4-吗啉-4-基-噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-甲基酯(300mg)在DMF(8mL) 中的溶液中加入硫代乙酸钾(113mg)。将该反应在60℃下搅拌16小时，然后冷却到 室温。该反应混合物然后用水(20mL)猝灭，萃取到乙酸乙酯(2×20mL)中。合 并的有机层用盐水溶液(3×20mL)洗涤，干燥(MgSO4)，浓缩，使用柱色谱法纯 化，获得灰白色固体状的硫代乙酸S-(2-甲基-4-吗啉-4-基-噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基甲基) 酯(210mg)。
在0℃下，往硫代乙酸S-(2-甲基-4-吗啉-4-基-噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基甲基)酯 (200mg)在甲醇(10mL)中的溶液中加入甲醇钠(35mg)在甲醇(2mL)中的溶 液。将该反应混合物在0℃下搅拌30分钟，然后滴加甲苯-4-磺酸3-甲氧基-丙酯 (156mg)在甲醇(3mL)中的溶液。将该反应混合物在室温下搅拌16小时，然后用 水(20mL)猝灭，萃取到乙酸乙酯(2×20mL)中。合并的有机层用盐水溶液(2× 20mL)洗涤，干燥(MgSO4)，浓缩，使用柱色谱法纯化，获得白色固体状的6-(3- 甲氧基-丙基硫烷基甲基)-2-甲基-4-吗啉-4-基-噻吩并[3，2-d]嘧啶(170mg)。
在0℃下，往6-(3-甲氧基-丙基硫烷基甲基)-2-甲基-4-吗啉-4-基-噻吩并[3，2-d]嘧啶 (170mg)在二氯甲烷(10mL)中的溶液中分批加入间-氯过氧苯甲酸(224mg)。将 该反应混合物在室温下搅拌16小时，然后用硫代硫酸钠水溶液(20mL)猝灭，萃取 到二氯甲烷(2×20mL)中。合并的有机层用饱和碳酸氢钠水溶液(2×20mL)和盐 水溶液(2×20mL)洗涤，干燥(MgSO4)，浓缩，获得白色固体状的6-(3-甲氧基- 丙烷-1-磺酰基甲基)-2-甲基-4-吗啉-4-基-噻吩并[3，2-d]嘧啶(190mg)。
使用标准方法用6-(3-甲氧基-丙烷-1-磺酰基甲基)-2-甲基-4-吗啉-4-基-噻吩并 [3，2-d]嘧啶(190mg)进行铃木偶联。使用柱色谱法纯化，获得白色固体状化合物143 (54mg)。NMR：DMSO：1.92-2.00(2H，m，CH2)，2.18-2.24(2H，m，CH2)，3.22(3H，s， Me)，3.42(2H，t，J7.22，CH2)，3.79-3.84(4H，m，CH2)，3.98-4.02(4H，m，CH2)，5.05(2 H，s，CH2)，7.44(1H，t，J8.0，Ar)，7.60(1H，s，Ar)，7.62(1H，d，J8.15，Ar)，8.21(1H， d，J7.35，Ar)，8.85(1H，s，Ar)，13.15(1H，s，NH)。MS：(ESI+)：MH+488.14。
实施例70 2-(1H-吲唑-4-基)-4-吗啉代-6-(2-(4-甲基磺酰基哌嗪-1-基)乙基)噻吩并 [3，2-d]嘧啶 144
在0℃下，往甲氧基甲基三苯基氯化鏻(7.24g)在THF(100mL)中的悬浮液中 加入正丁基锂(6.76mL的2M己烷溶液)。将该反应混合物在0℃下搅拌1小时，然 后滴加2-氯-4-吗啉-4-基-噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-甲醛10(2g)在THF(30mL)中的悬 浮液。将反应混合物在室温下搅拌16小时，然后用水(80mL)猝灭，用乙酸乙酯(2 ×80mL)萃取。合并的有机层用盐水溶液(2×80mL)洗涤，干燥(MgSO4)，浓缩， 使用柱色谱法纯化，获得黄色固体状的2-氯-6-(2-甲氧基-乙烯基)-4-吗啉-4-基-噻吩并 [3，2-d]嘧啶(顺式/反式异构体的混合物)(2.24g)。
往2-氯-6-(2-甲氧基-乙烯基)-4-吗啉-4-基-噻吩并[3，2-d]嘧啶(1.05g)在THF (30mL)中的溶液中加入4N盐酸水溶液(15mL)。将该反应混合物在50℃下搅拌 16小时，然后冷却到室温。该反应混合物用水(30mL)稀释，萃取到乙酸乙酯(3 ×30mL)中。将合并的有机层干燥(MgSO4)，浓缩，获得含有(2-氯-4-吗啉-4-基-噻 吩并[3，2-d]嘧啶-6-基)-乙醛的粗混合物。
在室温下，往粗品(2-氯-4-吗啉-4-基-噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基)-乙醛(300mg)和 1-甲烷磺酰基-哌嗪(243mg)在1，2-二氯乙烷(10mL)中的溶液中加入原甲酸三甲酯 (0.33mL)。将该反应混合物在室温下搅拌1小时，然后加入三乙酰氧基硼氢化钠 (534mg)。将该反应混合物在室温下搅拌16小时，然后用饱和碳酸钠水溶液(20mL) 猝灭，萃取到二氯甲烷(2×20mL)中。合并的有机层用盐水溶液(2×20mL)洗涤， 干燥(MgSO4)，浓缩，使用柱色谱法纯化，获得白色固体状的2-氯-6-[2-(4-甲烷磺酰 基-哌嗪-1-基)-乙基]-4-吗啉-4-基-噻吩并[3，2-d]嘧啶(100mg)。
使用标准方法用2-氯-6-[2-(4-甲烷磺酰基-哌嗪-1-基)-乙基]-4-吗啉-4-基-噻吩并 [3，2-d]嘧啶(100mg)进行铃木偶联。使用柱色谱法纯化，获得白色固体状的化合物 144(24mg)。NMR：CDCl3：2.54-2.62(4H，m，CH2)，2.71(3H，s，Me)，2.72-2.80(2H，m， CH2)，3.02-3.11(2H，m，CH2)，3.20-3.28(4H，m，CH2)，3.79-3.84(4H，m，CH2)， 3.98-4.02(4H，m，CH2)，7.40(1H，s，Ar)，7.44(1H，t，J8.0，Ar)，7.62(1H，d，J 8.15， Ar)，8.21(1H，d，J7.35，Ar)，8.90(1H，s，Ar)。MS：(ESI+)：MH+528.24。
实施例71 3-(2-(1H-吲唑-4-基)-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基)-N-甲基丙酰胺 145
按照实施例67b的操作程序，使用甲胺，制备化合物145。NMR：DMSO：2.52-2.60 (2H，m，CH2)，2.61(3H，s，Me)，3.18(2H，t，J7.22，CH2)，3.79-3.84(4H，m，CH2)， 3.98-4.02(4H，m，CH2)，7.30(1H，s，Ar)，7.41(1H，t，J8.0，Ar)，7.62(1H，d，J 8.15，Ar)， 7.81-7.84(1H，m，NH)，8.21(1H，d，J7.35，Ar)，8.85(1H，s，Ar)，13.15(1H，s，NH)。MS： (ESI+)：MH+423.18。
实施例72 2-(1H-吲唑-4-基)-6-((甲基磺酰基)甲基)-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶146
按照实施例67aa的操作程序，使用甲基碘，制备化合物146。NMR：DMSO：3.06 (3H，s，Me)，3.79-3.84(4H，m，CH2)，3.98-4.02(4H，m，CH2)，5.02(2H，s，Me)，7.40 (1H，s，Ar)，7.44(1H，t，J 8.0，Ar)，7.62(1H，d，J 8.15，Ar)，8.21(1H，d，J 7.35，Ar)，8.85 (1H，s，Ar)，13.15(1H，s，NH)。MS：(ESI+)：MH+430.10。
实施例73 3-(2-(1H-吲唑-4-基)-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基)丙酰胺147
按照实施例67b的操作程序，使用乙酸铵，制备化合物147。NMR：DMSO：2.54 (2H，t，J 7.27，CH2)，3.16(2H，t，J 7.22，CH2)，3.79-3.84(4H，m，CH2)，3.98-4.02(4H， m，CH2)，7.40(1H，s，Ar)，7.44(1H，1，J 8.0，Ar)，7.62(1H，d，J 8.15，Ar)，8.21(1H，d，J 7.35，Ar)，8.85(1H，s，Ar)，13.15(1H，s，NH)。MS：(ESI+)：MH+409.15。
实施例74 3-(2-(1H-吲唑-4-基)-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基)-N，N-二甲基丙酰胺 148
在0℃下，往磷酰基乙酸三乙酯(2.1mL)在THF(50mL)中的溶液中加入氢化 钠(254mg)。将该混合物在0℃下搅拌1小时，然后加入2-氯-4-吗啉-4-基-噻吩并[3，2-d] 嘧啶-6-甲醛10(1.5g)。将反应混合物在50℃下搅拌16小时，然后冷却到室温。通过 加入水(50mL)猝灭反应，然后过滤，获得黄色固体状的3-(2-氯-4-吗啉-4-基-噻吩并 [3，2-d]嘧啶-6-基)-丙烯酸乙酯(1.64g)。
往3-(2-氯-4-吗啉-4-基-噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基)-丙烯酸乙酯(2g)在乙酸乙酯 (100mL)中的溶液中加入Pd/C(200mg)在乙醇(10mL)中的悬浮液。该烧瓶用 氮气吹洗，然后接上氢气球。将反应混合物在室温下搅拌16小时。然后用塞力特硅 藻土过滤该混合物，将滤液浓缩，获得黄色固体状的3-(2-氯-4-吗啉-4-基-噻吩并[3，2-d] 嘧啶-6-基)丙酸乙酯(1.83g)。
往3-(2-氯-4-吗啉-4-基-噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基)丙酸乙酯(1g)在甲醇(30mL) 中的混合物中加入1N氢氧化钠水溶液(10mL)。将该反应混合物在室温下搅拌1小 时，然后用2M盐酸水溶液酸化至pH6。该产物然后过滤，用水洗涤，获得黄绿色固 体状的3-(2-氯-4-吗啉-4-基-噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基)丙酸(612mg)。
让3-(2-氯-4-吗啉-4-基-噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基)丙酸(200mg)、4-(4，4，5，5-四甲基 -1，3，2-二氧杂环戊硼烷-2-基)-1H-吲唑(209mg)、1M碳酸钠水溶液(1.83mL)和 PdCl2(PPh3)2(22mg)在乙腈(3mL)中的混合物在微波反应器中在140℃下反应15 分钟。然后将该反应混合物倾倒于乙酸乙酯(20mL)和水(20mL)的混合物中。收 集含水层，使用2M盐酸水溶液小心酸化至pH6。然后将产物过滤，用水洗，获得灰 色固体状的3-[2-(1H-吲唑-4-基)-4-吗啉-4-基-噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基]-丙酸(145mg)。
在室温下，往3-[2-(1H-吲唑-4-基)-4-吗啉-4-基-噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基]-丙酸 (145mg)在DMF(5mL)中的溶液中加入羰基咪唑(115mg)。然后将该反应混合 物在室温下搅拌1小时。然后，加入三乙胺(0.15mL)和二甲胺盐酸盐(58mg)，将 该溶液在室温下搅拌16小时。然后该反应用水(20mL)猝灭，萃取到乙酸乙酯(2 ×20mL)中。合并的有机层用盐水溶液(3×20mL)洗涤，干燥(MgSO4)，浓缩， 使用柱色谱法纯化，获得白色固体状的化合物148(96mg)。NMR：DMSO：2.68-2.84(2 H，m，CH2)，2.86(3H，s，Me)，3.02(3H，s，Me)，3.18(2H，t，J 7.22，CH2)，3.79-3.84(4 H，m，CH2)，3.98-4.02(4H，m，CH2)，7.40(1H，s，Ar)，7.44(1H，t，J 8.0，Ar)，7.62(1H，d； J 8.15，Ar)，8.21(1H，d，J 7.35，Ar)，8.85(1H，s，Ar)，13.15(1H，s，NH)。MS：(ESI+)： MH+437.22。
实施例75 3-(2-(1H-吲唑-4-基)-4-吗啉代噻吩并[2，3-d]嘧啶-6-基)-1-(4-甲基磺酰基哌 嗪-1-基)丙酮 149
按照实施例67b的操作程序，使用1-甲烷磺酰基-哌嗪，制备化合物149。NMR： DMSO：2.86(3H，s，Me)，2.88-2.92(2H，m，CH2)，3.05-3.15(4H，m，CH2)，3.20(2H，t， J7.22，CH2)，3.58-3.63(4H，m，CH2)，3.79-3.84(4H，m，CH2)，3.98-4.02(4H，m，CH2)， 7.40(1H，s，Ar)，7.44(1H，t，J 8.0，Ar)，7.62(1H，d，J 8.15，Ar)，8.21(1H，d，J 7.35，Ar)， 8.85(1H，s，Ar)，13.15(1H，s，NH)。MS：(ESI+)：MH+556.26。
实施例76 2-(1H-吲唑-4-基)-4-吗啉代-N-苯基噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-胺 150
根据一般程序J制备，获得化合物150(10％，2个步骤)。MS(Q1)429(M)+。
实施例77 3-(2-(1H-吲唑-4-基)-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基)苯基甲基磺酰胺 151
经由一般程序I将50mg的2-氯-6-碘-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶19与3-甲基磺 酰基氨基苯基硼酸偶联。产物通过反相HPLC纯化，获得37.4mg的化合物151。 MS(Q1)507(M)+。
实施例78 N-(3-(2-(1H-吲唑-4-基)-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基)苯基)-2-(二甲基 氨基)乙酰胺 152
通过一般程序I，将55mg的3-(2-氯-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基)苯胺与N，N- 二甲基甘氨酸反应，获得N-(3-(2-氯-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基)苯基)-2-(二甲基 氨基)乙酰胺。通过一般程序A，将70mg的粗品N-(3-(2-氯-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧 啶-6-基)苯基)-2-(二甲基氨基)乙酰胺与4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂环戊硼烷-2- 基)-1H-吲唑7偶联。产物通过反相HPLC纯化，获得3mg的化合物152。MS (Q1)514(M)+。
实施例79 2-(1H-吲唑-4-基)-6-(3-甲氧基吡啶-4-基)-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶 153
经由一般程序I将50mg的2-氯-6-碘-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶19与2-甲氧基 吡啶-3-硼酸偶联。产物通过反相HPLC纯化，获得7.2mg的化合物153。MS(Q1)445 (M)+。
实施例80 3-(2-(1H-吲唑-4-基)-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基)戊-3-醇 154
按照一般程序D，一起使用225mg的2-氯-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶4与3-丙酮， 获得相应的叔醇。按照一般程序A在钯催化的交叉偶联反应中使用100mg的粗物质， 在反相HPLC纯化之后，获得45mg的化合物154。MS(Q1)424(M)+。
实施例81 6-(6-氟吡啶-3-基)-2-(1H-吲唑-4-基)-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶 155
经由一般程序I将50mg的2-氯-6-碘-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶19与2-氟吡啶-5- 硼酸偶联。产物通过反相HPLC纯化，获得4.7mg的化合物155。MS(Q1)433(M)+。
实施例82 6-(2-氟吡啶-3-基)-2-(1H-吲唑-4-基)-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶 156
经由一般程序I将50mg的2-氯-6-碘-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶19与2-氟吡啶-3- 硼酸偶联。产物通过反相HPLC纯化，获得7.3mg的化合物156。MS(Q1)433(M)+。
实施例83 2-(1H-吲唑-4-基)-6-(4-甲氧基吡啶-3-基)-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶 157
经由一般程序I将50mg的2-氯-6-碘-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶19与4-甲氧基 吡啶-3-硼酸偶联。产物通过反相HPLC纯化，获得19.1mg的化合物157。MS(Q1)445 (M)+。
实施例84 3-(2-(1H-吲唑-4-基)-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基)苯胺 158
经由一般程序I将2-氯-6-碘-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶19(50mg)与3-氨基苯 基硼酸偶联。产物通过反相HPLC纯化，获得14.9mg的化合物158。MS(Q1)429(M)+。
实施例85 2-(2-(1H-吲唑-4-基)-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基)苯甲酰胺159
经由一般程序I将2-氯-6-碘-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶19(50mg)与2-(氨基羰 基苯基)硼酸偶联。产物通过反相HPLC纯化，获得9.2mg的化合物159。MS(Q1)457 (M)+。
实施例86 N-(2-(2-(1H-吲唑-4-基)-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基)苯基)乙酰胺 160
经由一般程序I将2-氯-6-碘-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶19(50mg)与2-(乙酰基 氨基苯基)硼酸偶联。产物通过反相HPLC纯化，获得22.9mg的化合物160。MS(Q1)471 (M)+。
实施例87 3-(2-(1H-吲唑-4-基)-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基)苯甲酰胺 161
经由一般程序I将2-氯-6-碘-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶19(50mg)与3-氨基羰 基苯基硼酸偶联。产物通过反相HPLC纯化，获得3.9mg的化合物161。MS(Q1)457 (M)+。
实施例88 N-(2-(1H-吲唑-4-基)-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基)丙酰胺 162
将2-氯-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基氨基甲酸叔丁酯(800mg)用5mL三氟 乙酸/二氯甲烷(1:1)处理。将该反应混合物在室温下搅拌，直至反应完全。将反应 混合物蒸发。残留物用乙酸乙酯(100mL)稀释，用饱和碳酸氢钠(50mL)和盐水 (50mL)洗涤。含水层用乙酸乙酯(2×60mL)反萃取，然后用饱和碳酸氢钠和盐 水洗涤。合并的有机层用MgSO4干燥。过滤，蒸发，获得580mg的2-氯-4-吗啉代噻 吩并[3，2-d]嘧啶-6-胺。
通过一般程序G，让2-氯-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-胺(35mg)与23μL丙酰 氯反应，获得N-(2-氯-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基)丙酰胺。
通过一般程序A将粗品N-(2-氯-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基)丙酰胺(42mg) 与4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂环戊硼烷-2-基)-1H-吲唑7偶联。产物通过反相HPLC 纯化，获得19.8mg的化合物162。MS(Q1)409(M)+。
实施例89 N-(2-(1H-吲唑-4-基)-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基)乙酰胺 163
通过一般程序G让2-氯-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-胺(40mg)与21μL乙酰 氯反应，获得N-(2-氯-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基)乙酰胺。
通过一般程序A将粗品N-(2-氯-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基)乙酰胺(46mg) 与4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂环戊硼烷-2-基)-1H-吲唑7偶联。产物通过反相HPLC 纯化，获得24.2mg的化合物163。MS(Q1)395(M)+。
实施例90 N-(2-(1H-吲唑-4-基)-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基)异丁酰胺 164
通过一般程序G让2-氯-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-胺(35mg)与27μL异丁 酰氯反应，获得N-(2-氯-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基)异丁酰胺。
通过一般程序A将粗品N-(2-氯-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基)异丁酰胺 (45mg)与4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂环戊硼烷-2-基)-1H-吲唑7偶联。产物通过 反相HPLC纯化，获得1.9mg的化合物164。MS(Q1)423(M)+。
实施例91 N-(2-(1H-吲唑-4-基)-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基)苯甲酰胺 165
通过一般程序G让2-氯-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-胺(35mg)与30μL苯甲 酰氯反应，获得N-(2-氯-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基)苯甲酰胺。
通过一般程序A将粗品N-(2-氯-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基)苯甲酰胺 (49mg)与4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂环戊硼烷-2-基)-1H-吲唑7偶联。产物通过 反相HPLC纯化，获得8.2mg的化合物165。MS(Q1)457(M)+。
实施例92 3-(1H-吲唑-4-基)-4-吗啉代-6-(2-(4-甲基磺酰基哌嗪-1-基)丙基)噻吩并[3，2-d] 嘧啶 166
在氢气氛围下将2-(1H-吲唑-4-基)-6-[3-(4-甲烷磺酰基-哌嗪-1-基)-丙-1-炔基]-4-吗 啉-4-基-噻吩并[3，2-d]嘧啶和10％Pd/C的混合物在甲醇和二氯甲烷中搅拌过夜。使用 快速色谱纯化，获得化合物166。(CDCl3)：2.78-2.82(4H，m)，2.82(3H，s)，3.34-3.39(4H， m)，-3.70(2H，s)，3.92-3.96(4H，m)，4.07-4.11(4H，m)，7.52(1H，dd)，7.61-7.65(2H，m)， 8.30(1H，d，J＝7.2)，9.02(1H，s)，10.10(1H，br)。ESI+：MH+538。
实施例93 (2-(1H-吲唑-4-基)-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基)(4-(甲基乙酰胺基)哌啶 -1-基)甲酮 167
通过一般程序B将2-(1H-吲唑-4-基)-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-甲酸13(45mg) 与N-甲基哌啶-4-甲酸偶联。产物通过反相HPLC纯化，获得26.3mg的化合物167。 MS(Q1)506.2(M)+。
实施例94 (2-(1H-吲唑-4-基)-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基)(3-(甲基磺酰基)吡咯烷 -1-基)甲酮 168
通过一般程序B将2-(1H-吲唑-4-基)-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-甲酸13(45mg) 与3-(甲基磺酰基)吡咯烷偶联。产物通过反相HPLC纯化，获得26.1mg的化合物 168。 MS(Q1)513.1(M)+。
实施例95 2-(1H-吲唑-4-基)-N-(2-(甲基磺酰基)乙基)-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-甲 酰胺169
通过一般程序B将2-(1H-吲唑-4-基)-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-甲酸13(45mg) 与2-(甲基磺酰基)乙胺偶联。产物通过反相HPLC纯化，获得26.8mg的化合物169。 MS(Q1)487.1(M)+。
实施例96 N-乙基-2-(1H-吲唑-4-基)-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-甲酰胺 170
通过一般程序B将2-(1H-吲唑-4-基)-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-甲酸13(45mg) 与乙胺HCl偶联。产物通过反相HPLC纯化，获得10.6mg的化合物170。MS (Q1)409.2(M)+。
实施例97 2-(1H-吲唑-4-基)-N-甲基-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-甲酰胺 171
通过一般程序B将2-(1H-吲唑-4-基)-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-甲酸13(75mg) 与甲胺HCl偶联。产物通过反相HPLC纯化，获得38.8mg的化合物171。MS (Q1)395.1(M)+。
实施例98 N-(2-(1H-吲唑-4-基)-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基)环丙烷甲酰胺 172
通过一般程序G让2-氯-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-胺(40mg)与27μL环丙 烷碳酰氯反应，获得N-(2-氯-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基)环丙烷甲酰胺。
通过一般程序A将粗品N-(2-氯-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基)环丙烷甲酰胺 (50mg)与4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂环戊硼烷-2-基)-1H-吲唑7偶联。产物通过 反相HPLC纯化，获得12.1mg的化合物172。MS(Q1)421(M)+。
实施例99 N-(2-(1H-吲唑-4-基)-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基)-3，3-二甲基丁酰胺 173
通过一般程序G让2-氯-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-胺(40mg)与41μL叔丁 基乙酰氯反应，获得N-(2-氯-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基)-3，3-二甲基丁酰胺。
通过一般程序A将粗品N-(2-氯-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基)-3，3-二甲基丁酰 胺(55mg)与4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂环戊硼烷-2-基)-1H-吲唑7偶联。产物通 过反相HPLC纯化，获得16.9mg的化合物173。MS(Q1)451(M)+。
实施例100 2-(2-甲基-1H-苯并[d]咪唑-1-基)-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶 174
将2-氯-4-吗啉-4-基-噻吩并[3，2-d]嘧啶4(155mg)和2-甲基苯并咪唑(161mg) 的混合物一起在135℃下加热过夜。然后将该混合物冷却，用水稀释，用乙酸乙酯萃 取。将合并的萃取物干燥(Na2SO4)，过滤，再浓缩。先后进行快速色谱和研制，获 得化合物174(28％)。NMR：(CDCl3)：2.95(s，3H，CH3)，3.89-3.91(m，4H，2 x CH2)， 4.07-4.09(m，4H，2 x CH2)，7.25-7.28(m，2H，2 x ArH)，7.50(d，H，ArH，J＝5.47Hz)， 7.71(m，H，ArH)，7.85(d，H，ArH，J＝5.48Hz)，8.09(m，H，ArH)。MS：(ESI+)：MH+＝ 352.13。
实施例101 2-(1H-吲唑-4-基)-6-(3-(4-甲基哌嗪-1-基)丙-1-炔基)-4-吗啉代噻吩并 [3，2-d]嘧啶 175
在氮气下将根据实施例12制备的2-氯-6-碘-4-吗啉-4-基-噻吩并[3，2-d]嘧啶19 (1.57g)、炔丙醇(288μL)、碘化酮(39mg)、氯化双(三苯基膦)钯(II)(146mg)、 三乙胺(25ml)和四氢呋喃(30mL)的混合物搅拌10天。然后将该反应混合物在氯 仿和盐水之间分配，然后将合并的有机层干燥(MgSO4)。真空脱除溶剂。然后使用 快速色谱纯化粗产物，获得3-(2-氯-4-吗啉-4-基-噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基)-丙-2-炔-1-醇 (1.2g)。
往氯仿(10ml)中的3-(2-氯-4-吗啉-4-基-噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基)-丙-2-炔-1-醇 (142mg)中加入三乙胺(77μL)和甲磺酰氯(49μL)。在室温下搅拌2小时，然后 在氯仿和盐水之间分配，将合并的有机层干燥(MgSO4)。真空脱除溶剂，获得甲磺 酸3-(2-氯-4-吗啉-4-基-噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基)-丙-2-炔基酯(150mg)。
将甲磺酸3-(2-氯-4-吗啉-4-基-噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基)-丙-2-炔基酯(150mg)、碳 酸钾(64mg)、N-甲基哌嗪(45μL)和乙腈(5ml)的混合物在50℃下搅拌3小时。 然后将反应混合物冷却，用二氯甲烷稀释，用盐水洗涤，干燥(MgSO4)，在真空中 除去溶剂，获得2-氯-6-[3-(4-甲基-哌嗪-1-基)-丙-1-炔基]-4-吗啉-4-基-噻吩并[3，2-d]嘧 啶(101mg)。
使用标准条件用2-氯-6-[3-(4-甲基-哌嗪-1-基)-丙-1-炔基]-4-吗啉-4-基-噻吩并 [3，2-d]嘧啶和吲唑4-硼酸酯进行铃木偶联，获得化合物175，用快速色谱纯化。 NMR(DMSO)：2.18(3H，s)，2.30-2.42(4H，br)，2.50-2.63(4H，br)，3.68(2H，s)， 3.83-3.88(4H，m)，4.00-4.05(4H，m)，7.46-7.51(1H，m)，7.70(1H，d，J＝8.3)，7.78(1H，s)， 8.22(1H，d，J＝5.2)，8.88(1H，s)，13.18(1H，br)。ESI+：MH+474(14％)。
实施例102 2-(1H-吲唑-4-基)-4-吗啉代-6-(3-(吡咯烷-1-基)丙-1-炔基)噻吩并[3，2-d]嘧 啶 176
使用吡咯烷通过实施例93的程序制备2-(1H-吲唑-4-基)-4-吗啉-4-基-6-(3-(吡咯烷 -1-基-丙-1-炔基)噻吩并[3，2-d]嘧啶176。NMR：(CDCl)：1.88-1.96(4H，m)，2.72-2.83 (4H，m)，3.70(2H，s)，3.92-3.96(4H，m)，4.07-4.11(4H，m)，7.52(1H，dd)，7.61-7.65(2H， m)，8.30(1H，d，J＝7.2)，9.02(1H，s)，10.10(1H，br)。ESI+：MH+445。
实施例103 2-(1H-吲唑-4-基)-4-吗啉代-6-(3-吗啉丙-1-炔基)噻吩并[3，2-d]嘧啶 177
使用吗啉通过实施例93的程序制备2-(1H-吲唑-4-基)-4-吗啉-4-基-6-(3-吗啉-4-基- 丙-1-炔基)噻吩并[3，2-d]嘧啶177。NMR：(CDCl3)：2.65-2.72(4H，m)，3.62(2H，s)， 3.78-3.82(4H，m)，3.92-3.96(4H，m)，4.07-4.11(4H，m)，7.52(1H，dd)，7.61-7.65(2H，m)， 8.30(1H，d，J＝7.2)，9.02(1H，s)，10.10(1H，br)。ESI+)：MH+461。
实施例104 2-(1H-吲唑-4-基)-4-吗啉代-6-(3-(4-甲基磺酰基哌嗪-1-基)噻吩并[3，2-d]嘧 啶 178
使用1-甲烷磺酰基-哌嗪通过实施例93的程序制备2-(1H-吲唑-4-基)-6-[3-(4-甲基 磺酰基-哌嗪-1-基)-丙-1-炔基]-4-吗啉-4-基-噻吩并[3，2-d]嘧啶178。(CDCl3)：2.78-2.82 (4H，m)，2.82(3H，s)，3.34-3.39(4H，m)，3.70(2H，s)，3.92-3.96(4H，m)，4.07-4.11(4H， m)，7.52(1H，dd)，7.61-7.65(2H，m)，8.30(1H，d，J＝7.2)，9.02(1H，s)，10.10(1H，br)。
实施例105 (2-(1H-吲哚-4-基)-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基)甲醇 179
将实验106的2-(1H-吲哚-4-基)-4-吗啉-4-基-噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-甲醛还原，获得 化合物179。NMR：(400MHz，CDCl3)：8.26(1H，b，s)，8.18(1H，d，J 7.36)，7.54(1H，m)， 7.50(1H，d，J 5.02)，7.40(2H，m)，7.30(1H，d，J 7.82)，4.99(2H，d，J 4.75)，4.09(4H，t，J 4.83)，3.91(4H，t，J 4.82)，2.16(1H，b，t)。MS：(M+H)+367.11。
实施例106 2-(1H-吲唑-4-基)-6-((1-甲基哌啶-4-基)甲基)-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶 180
在甲醇-二氯甲烷和氢气中用Pd/C还原化合物181，获得化合物180。NMR： d4-MeOH：1.69(2H，m)；2.2(3H，m)；2.87(3H，s)；3.00(2H，t)；3.12(2H，d，J＝6.7Hz)；3.50 (2H，brd)；4.00(4H，t，J＝4.8Hz)；4.20(4H，t，J＝4.8Hz)；7.42(1H，s)；7.60(1H，t，J＝7.7Hz)； 7.77(1H，d，J＝7.4Hz)；8.92(1H，s)。MS：(ESI+)：MH+449。
实施例107 2-(1H-吲唑-4-基)-6-((1-甲基哌啶-4-亚基)甲基)-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧 啶181
将实施例9获得的6-溴甲基-2-氯-4-吗啉-4-基-噻吩并[3，2-d]嘧啶30(1.0g)和磷 酸三甲酯(5mL)的混合物在回流下加热3小时。在冷却到室温之后，加入水(20mL)， 将产物过滤，用水洗涤，真空干燥，获得黄色固体状的(2-氯-4-吗啉-4-基-噻吩并[3，2-d] 嘧啶-6-基甲基)-磷酸二甲酯(0.54g)。
在-78℃下往(2-氯-4-吗啉-4-基-噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基甲基)-磷酸二甲酯(0.80gm) 在THF(10mL)中的悬浮液中滴加二异丙基氨基化锂(1.17mL的THF/庚烷/乙基苯 的2.0M溶液)。将该混合物升温至室温，通过套管加入4-氧代-哌啶-1-甲酸叔丁酯 (0.48g)在THF(10mL)中的溶液。然后将该混合物在室温下搅拌2小时，用盐水 (20mL)猝灭，萃取到二氯甲烷(2×20mL)中。将合并的有机层干燥(MgSO4)， 真空浓缩，通过柱色谱法纯化，获得黄色油状的4-(2-氯-4-吗啉-4-基-噻吩并[3，2-d]嘧 啶-6-基亚甲基)-哌啶-1-甲酸叔丁酯(0.862g)。
在室温下，往4-(2-氯-4-吗啉-4-基-噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基亚甲基)-哌啶-1-甲酸叔 丁酯(0.85g)在二氯甲烷(10mL)中的悬浮液中加入氯化氢(2mL的2.0M二乙醚 溶液)。将该反应混合物在室温下搅拌16小时，然后真空浓缩。将残留物再溶于二氯 甲烷(10mL)，用饱和碳酸钠溶液(2×10mL)和盐水(10mL)洗涤，干燥(MgSO4)， 真空浓缩，获得2-氯-4-吗啉-4-基-6-亚哌啶-4-基甲基-噻吩并[3，2-d]嘧啶(0.53g)。
在室温下，往2-氯-4-吗啉-4-基-6-亚哌啶-4-基甲基-噻吩并[3，2-d]嘧啶(500mg) 和甲酸(2.5mL)的混合物中加入甲醛(0.5mL的37wt％水溶液)。将该反应混合物 在60℃下搅拌16小时。该混合物然后用二氯甲烷(2mL)稀释，用2M氢氧化钠水 溶液(20mL)和盐水(20mL)洗涤，干燥(MgSO4)，真空浓缩，通过柱色谱法纯 化，获得黄色固体状的2-氯-6-(1-甲基-亚哌啶-4-基甲基)-4-吗啉-4-基-噻吩并[3，2-d]嘧 啶(0.15g)。
按照一般程序A让2-氯-6-(1-甲基-亚哌啶-4-基甲基)-4-吗啉-4-基-噻吩并[3，2-d]嘧 啶与4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂环戊硼烷-2-基)-1H-吲唑反应。用硅胶纯化，获得 化合物181。NMR：(CDCl3)2.37(3H，s)；2.55(6H，m)；2.82(2H，t，J＝5.5Hz)；3.93 (4H，t，J＝4.8Hz)；4.10(4H，t，J＝4.8Hz)；6.44(1H，s)；7.33(1H，s)；7.51(1H，s)；7.60 (1H，d，J＝8.2Hz)；8.28(1H，d，J＝7.1Hz)；9.03(1H，s)；10.25(brs)。M+H(447)。
实施例108 2-(1H-吲唑-4-基)-6-(4-甲氧基-1-甲基哌啶-4-基)-4-吗琳代噻吩并[3，2-d]嘧 啶182
在0℃下，往4-(2-氯-4-吗啉-4-基-噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基)-4-羟基-哌啶-1-甲酸叔 丁酯(335mg)在DMF(3ml)中的溶液中加入氢化钠(60％w/w矿物油悬浮液，41mg)。 在30分钟后，加入碘甲烷(56μl)，将该反应混合物缓慢升温到室温过夜。乙酸乙酯/ 盐水萃取，硅胶纯化，获得4-(2-氯-4-吗啉-4-基-噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基)-4-甲氧基-哌 啶-1-甲酸叔丁酯(219mg)。
然后使用HCl醚溶液按照标准程序脱除BOC基团，获得2-氯-6-(4-甲氧基-哌啶 -4-基)-4-吗啉-4-基-噻吩并[3，2-d]嘧啶。
往甲醇(3ml)中的2-氯-6-(4-甲氧基-哌啶-4-基)-4-吗啉-4-基-噻吩并[3，2-d]嘧啶 (175mg)中加入甲醛(37％水溶液，0.11ml)和硼氢化钠(54mg)。将该反应混合 物在室温下搅拌过夜。氯仿/盐水萃取，硅胶纯化，获得2-氯-4-基)-6-(4-甲氧基-1-甲基 -哌啶-4-基)-4-吗啉-4-基-噻吩并[3，2-d]嘧啶。
使用标准条件用2-氯-4-基)-6-(4-甲氧基-1-甲基-哌啶-4-基)-4-吗啉-4-基-噻吩并 [3，2-d]嘧啶和吲唑硼酸酯进行铃木偶联，获得标题化合物。NMR：(CDCl3/MeOD)： 2.20-2.38(4H，m)，2.46(3H，s)，2.55-2.69(2H，m)，2.80-2.92(2H，m)，3.22(3H，s)， 3.95-4.02(4H，m)，4.12-4.20(4H，m)，7.44(1H，s)，7.56(1H，m)，7.68(1H，d)，8.20(1H， d)，8.90(1H，s)。MS：(ESI+)：MH+465(10％)。
实施例109 4-(2-(1H-吲唑-4-基)-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基)-1-甲基哌啶-4-醇 183
在-78℃下搅拌的同时，往2-氯-4-吗啉-4-基-噻吩并[3，2-d]嘧啶4(288mg)在无水四 氢呋喃(10ml)中的溶液中加入2.5M正丁基锂己烷溶液(541μL)。用1小时将该反 应混合物逐渐升温至-40℃，然后冷却到-78℃。然后加入1-甲基-4-哌啶酮(138μL)。 将该反应混合物逐渐升温至室温，然后搅拌3天。然后该反应混合物用水猝灭，过滤 所形成的沉淀。该粗产物然后用快速色谱纯化，获得1-(2-氯-4-吗啉-4-基-噻吩并[3，2-d] 嘧啶-6-基)-甲基-哌啶-4-醇(135mg)。
使用标准条件用1-(2-氯-4-吗啉-4-基-噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基)-甲基哌啶-4-醇 (135mg)和吲唑硼酸酯进行铃木偶联，获得化合物183。NMR(MeOD)9.00(1H，s)， 8.25(2H，d)，7.72(1H.d)，7.60(1H，t)，7.51(1H，S)74.22-4.18(4H，m)，4.01-3.99(4H，m)， 3.27-3.05(4H，m)，2.82(3H，s)，2.55-2.48(2H，m)，2.28-2.20(2H，m)。MH+451。
实施例110 (2-(1H-吲唑-4-基)-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基)-N-磺酰基甲基-N-(2- 吗啉代乙基)甲胺 184
在0℃下，往4-(2-氨基乙基)吗啉(0.5g)在二氯甲烷(5ml)中的溶液中加入甲 烷磺酰氯(0.33ml)和三乙胺(0.59ml)。将该反应混合物升温至室温，并搅拌2小时。 该反应混合物用二氯甲烷稀释，合并的有机层用盐水洗涤，干燥(MgSO4)，真空脱 除溶剂，获得粗残留物，通过快速色谱纯化，获得N-(2-吗啉-4-基-乙基)-甲烷磺酰胺 (596mg)。
在氮气氛围下，往N-(2-吗啉-4-基-乙基)-甲烷磺酰胺在四氢呋喃中的溶液中加入 氢化钠(60％矿物油分散体，16mg)。将该混合物在室温下搅拌40分钟。加入6-溴代 甲基-2-氯-4-吗啉-4-基-噻吩并[3，2-d]嘧啶(125mg)在四氢呋喃(5ml)中的溶液。将 该反应混合物在室温下搅拌3.5小时，然后在50℃下搅拌3.5小时。真空脱除溶剂， 获得粗产物，通过快速色谱纯化，获得N-(2-氯-4-吗啉-4-基-噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基甲 基)-N-(2-吗啉-4-基-乙基)-甲烷磺酰胺(138mg)。
按照一般程序A让N-(2-氯-4-吗啉-4-基-噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基甲基)-N-(2-吗啉 -4-基-乙基)-甲烷磺酰胺与4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂环戊硼烷-2-基)-1H-吲唑反 应。用硅胶快速色谱纯化，获得化合物184。NMR：400MHz；CDCl3：2.49(4H，m)； 2.60(2H，t，J＝5.9Hz)；3.09(3H，s)；3.48(2H，m)；3.70(4H，m)；3.92(4H，m)；4.08(4H，m)； 4.82(2H，s)；7.47(1H，s)；7.52(1H，t，J＝7.7Hz)；7.60(1H，d，J＝8.1Hz)；8.28(1H，d，J＝7.1Hz)； 9.00(1H，S)；10.15(1H，brs)。MS：(ESI+)：558。
实施例111 (2-(1H-吲唑-4-基)-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基)-N-甲基磺酰基 -N-(2-N，N-二甲基氨基乙基)甲胺 185
在0℃下，往N，N-二甲基乙二胺(0.5g)在二氯甲烷(10ml)中的溶液中加入三 乙胺(0.87ml)和甲烷磺酰氯。将该反应混合物升温至室温，并搅拌1小时。将该反 应混合物在二氯甲烷和饱和碳酸氢钠水溶液之间分配，将合并的有机层干燥 (MgSO4)，真空脱除溶剂，获得粗产物。该粗产物通过快速色谱纯化，获得N-(2-二 甲基氨基-乙基)-甲烷磺酰胺(0.46g)。
在氮气氛围下往N-(2-二甲基氨基-乙基)-甲烷磺酰胺(50mg)在四氢呋喃中的溶 液中加入氢化钠(60％矿物油分散体，13mg)。将该反应混合物在室温下搅拌30分钟， 滴加四氢呋喃(5ml)中的6-溴甲基-2-氯-4-吗啉-4-基-噻吩并[3，2-d]嘧啶。将该反应混 合物搅拌5天，真空脱除溶剂，获得粗产物，通过快速色谱纯化，获得N-(2-氯-4-吗 啉-4-基-噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基甲基)-N-(2-二甲基氨基-乙基)-甲烷磺酰胺(35mg)。
根据一般程序A让N-(2-氯-4-吗啉-4-基-噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基甲基)-N-(2-二甲基 氨基-乙基)-甲烷磺酰胺与4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂环戊硼烷-2-基)-1H-吲唑反 应。用硅胶快速色谱纯化，获得化合物185。NMR：400MHz；CDCl3：2.30(6H，s)； 2.55(2H，m)；3.05(3H，s)；3.45(2H，m)；3.94(4H，t，J＝4.8Hz)；4.10(4H，t，J＝4.8Hz)； 4.82(2H，s)；7.48(1H，s)；7.52(1H，t，J＝7.8Hz)；7.60(1H，d，J＝8.3Hz)；8.28(1H，d，J＝7.3Hz)； 9.02(1H，s)；10.15(1H，brs)。MS：(ESI+)：516。
实施例112 (2-(1H-吲唑-4-基)-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基)-N-甲基，N-(3-吗啉代 丙基磺酰基)甲胺 186
按照一般程序A，让3-氯-丙烷-1-磺酸(2-氯4-吗啉-4-基-噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基甲 基)-甲基酰胺与4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂环戊硼烷-2-基)-1H-吲唑反应。硅胶纯 化，获得3-氯-丙烷-1-磺酸[2-(1H-吲唑-4-基)-4-吗啉-4-基-噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基甲基)- 甲基酰胺。
往3-氯-丙烷-1-磺酸[2-(1H-吲唑-4-基)-4-吗啉-4-基-噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基甲基]- 甲基酰胺(45mg)在乙腈(2mL)中的溶液中加入吗啉(38μL)、碳酸钾(18mg)和 碘化钾(2mg)。将该反应混合物在80℃下加热72小时，然后冷却到室温，再用水 (30mL)猝灭，萃取到二氯甲烷(2×30mL)中。合并的有机层用盐水(30mL)洗 涤，干燥(MgSO4)，真空浓缩，通过柱色谱法纯化，获得灰白色固体状的化合物186 (27mg)。NMR：CDCl3：1.97(m，2H)，2.36-2.43(m，6H)，2.87(s，3H)，3.07(m，2H)， 3.63(t，J＝4.6，4H)，3.84(t，J＝4.8，4H)，4.01(t，J＝4.8，4H)，4.61(s，2H)，7.39(s，1H)，7.43 (t，J＝8.2，1H)，7.51(d，J＝8.3，1H)，8.20(d，J＝6.8，1H)，8.94(s，1H)，10.30(brs，1H)。MS： ESI+：MH+572.09。
实施例113 (2-(1H-吲哚-4-基)-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基)-N-甲基，N-(3-吗啉代 丙基磺酰基)甲胺187
按照一般程序A，让3-氯-丙烷-1-磺酸(2-氯-4-吗啉-4-基-噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基甲 基)-甲基酰胺与吲哚硼酸反应。硅胶纯化，获得3-氯-丙烷-1-磺酸[2-(1H-吲哚-4-基)-4- 吗啉-4-基-噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基甲基)-甲基酰胺。
在室温下，往3-氯-丙烷-1-磺酸[2-(1H-吲哚-4-基)-4-吗啉-4-基-噻吩并[3，2-d]嘧啶 -6-基甲基]-甲基酰胺(18mg)在乙腈(1mL)中的溶液中加入吗啉(15μL)、碳酸钾 (7mg)和碘化钾(2mg)。将该反应混合物在80℃下搅拌72小时，然后冷却到室温， 再用水(30mL)猝灭，萃取到二氯甲烷(2×30mL)中。合并的有机层用盐水(30mL) 洗涤，干燥(MgSO4)，真空浓缩，通过柱色谱法纯化，获得灰白色固体状的标题化 合物(7mg)。NMR：CDCl3：1.96(m，2H)，2.43-2.37(m，6H)，2.87(s，3H)，3.05(m，2H)， 3.84(t，J＝4.8，4H)，4.01(t，J＝4.8，4H)，4.60(s，2H)，7.21-7.27(m，2H)，7.39(s，1H)， 7.42-7.47(m，2H)，8.11(d，J＝7.2，1H)，8.25(s，1H)。MS：(ESI+)：MH+571。
实施例114 2-(1H-吲唑-4-基)-N-(2-甲氧基乙基)-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-甲酰胺 188
通过一般程序B，将45mg的2-(1H-吲唑-4-基)-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-甲酸 13与2-甲氧基乙胺偶联。产物通过反相HPLC纯化，获得18.8mg的化合物188。MS(Q1) 439.1(M)+。
实施例115 2-(1H-吲哚-4-基)-N-(2-甲氧基乙基)-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-甲酰胺 189
往二氯甲烷(2ml)中的2-氯-4-吗啉-4-基-噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-甲醛10中加入草 酰氯在二氯甲烷(0.75ml)中的2M溶液，随后加入2小滴的二甲基甲酰胺。将该反 应混合物在室温下搅拌过夜。真空脱除溶剂，获得粗产物。该粗产物在二氯甲烷(5ml) 中搅拌，在其中加入2-甲氧基乙胺(34.8μL)和三乙胺(61.5μL)。将该反应混合物 在室温下搅拌过夜。然后在二氯甲烷和饱和碳酸氢钠溶液之间分配，将合并的有机层 干燥(MgSO4)，真空脱除溶剂，获得粗残留物。粗残留物通过快速色谱纯化，获得 2-甲基-4-吗啉-4-基-噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-甲酸(2-甲氧基-乙基)-酰胺(30mg)。
按照一般程序A，让2-甲基-4-吗啉-4-基-噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-甲酸(2-甲氧基-乙 基)-酰胺与吲哚硼酸反应，硅胶纯化，获得化合物189。NMR：400MHz；CDCl3 3.44(3H， s)；3.60(2H，m)；3.70(2H，m)；3.92(4H，t，J＝4.8Hz)；4.15(4H，t，J＝4.8Hz)；6.74(1H，br t)；7.30(1H，d，J＝7.8Hz)；7.35(1H，m)；7.52(1H，d，J＝8.0Hz)；7.57(1H，s)；7.82(1H，s)； 8.20(1H，d，J＝7.4Hz)；8.30(1H，br s)。MS：(ESI+)M+H(438)。
实施例116 (2-(1H-吲哚-4-基)-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基)-N-甲基-N-(2-N，N-二 甲基氨基磺酰基)-甲胺 190
在室温下，往(2-氯-4-吗啉-4-基-噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基甲基)-甲胺(220mg)在二 氯甲烷(7mL)中的溶液中加入三乙胺(0.174mL)，然后加入3-氯丙烷磺酰氯 (0.134mL)。将该反应混合物在室温下搅拌30分钟，然后用水(25mL)猝灭，萃取 到二氯甲烷(3×25mL)中。将合并的有机层用盐水(30mL)洗涤，干燥(MgSO4)， 真空浓缩，通过柱色谱法纯化，获得3-氯-丙烷-1-磺酸(2-氯-4-吗啉-4-基-噻吩并[3，2-d] 嘧啶-6-基甲基)-甲基-酰胺(301mg)。
按照一般程序A，让3-氯-丙烷-1-磺酸(2-氯-4-吗啉-4-基-噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基甲 基)-甲基-酰胺与吲哚硼酸反应。硅胶纯化，获得3-氯-丙烷-1-磺酸[2-(1H-吲哚-4-基)-4- 吗啉-4-基-噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基甲基)-甲基-酰胺。
往3-氯-丙烷-1-磺酸[2-(1H-吲哚-4-基)-4-吗啉-4-基-噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基甲基)- 甲基-酰胺(59mg)在乙腈(1.0mL)和DMF(1mL)中的溶液中加入碳酸钾(19mg)、 碘化钾(19mg)和甲胺(26mg)在乙腈(0.5mL)中的溶液。将该反应混合物在60℃下 加热12小时，然后冷却到室温。然后用硅胶纯化反应混合物，获得灰白色固体状的 标题化合物(45mg)。NMR：DMSOd6：11.2(1H，s)；8.11(1H，d，J＝7.2Hz)；7.51(2H， m)；7.43(2H，m)；7.19(1H，t，J＝7.7Hz)；4.69(2H，s)；3.99(4H，m)；3.82(4H，m)； 3.19(2H，m)2.85(3H，s)；2.32(2H，m)；2.13(6H，s)；1.86(2H，m)。MS：(ESI+)： MH+529.2。
实施例117 2-(1H-吲哚-4-基)-6-(2-(甲基磺酰基)乙基)-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶 191
在微波反应器内，将在甲苯(1.5ml)、乙醇(0.75ml)和水(0.4ml)中的2-氯-4- 吗啉-4-基-噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-甲醛10(200mg)、4-吲哚-硼酸(125mg)、碳酸氢钠 (178mg)和PdCl2(PPh3)2(4mg)在120℃下加热45分钟。氯仿/水萃取，硅胶纯化， 获得2-(1H-吲哚-4-基)-4-吗啉-4-基-噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-甲醛(257mg)。
往2-(1H-吲哚-4-基)-4-吗啉-4-基-噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-甲醛(54mg)在无水甲醇 (8ml)中的悬浮液中加入磷砜(Phosphorus sulphone，34mg)，随后加入甲醇钠 (148μl)。将该反应混合物在室温下搅拌4.5小时，然后蒸发，上硅胶通过快速色谱 纯化，获得2-(1H-吲哚-4-基)-6-((E)-2-甲烷磺酰基-乙烯基)-4-吗啉-4-基-噻吩并[3，2-d] 嘧啶(30mg)。
在大气压下使用在MeOH中的10％钯/碳和氢气球将2-(1H-吲哚-4-基)-6-((E)-2- 甲烷磺酰基-乙烯基)-4-吗啉-4-基-噻吩并[3，2-d]嘧啶(25mg)氢化。上硅胶纯化，获 得化合物191。NMR：400MHz CDC138.27(1H，s)：8.19(1H，d，J＝7.4)；7.52(2H，m)； 7.33(3H，m)；4.08(4H，m)；3.91(4H，m)；3.49(4H，m)；2.94(3H，s)。MS：MH+＝ 443.02。
实施例118 N-((2-(1H-吲唑-4-基)-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基)甲基)-N-甲基乙酰 胺 192
根据制备化合物193的实施例106的操作程序，根据一般程序A，让N-[2-(1H- 吲唑-4-基)-4-吗啉-4-基-噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基甲基]-N-甲基-乙酰胺与4-(4，4，5，5-四甲 基-1，3，2-二氧杂环戊硼烷-2-基)-1H-吲唑反应。用硅胶纯化，获得化合物192。NMR： 400MHz；CDCl3 2.20，2.27(3H，s，2旋转异构体)；3.07(3H，s)；3.90(4H，m)；4.05(4H，m)； 4.82，4.86(2H，s，2旋转异构体)；7.40(1H，s)；7.50(1H，t，J＝7.8Hz)；7.60(1H，d，J＝8.2Hz)； 8.28(1H，d，J＝7.2Hz)；9.00(1H，s)；10.15(1H，br s)。MS：(ESI+)：M+H(423)。
实施例119 N-((2-(1H-吲哚-4-基)-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基)甲基)-N-甲基乙酰 胺 193
在氮气氛围下，往溶于甲醇的2-氯-4-吗啉-4-基-噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-甲醛10 (1.0g)加入甲胺溶液(11.79g甲胺，溶于50ml甲醇中)(1.39ml)。将该反应混合物 在室温下搅拌过夜。然后真空脱除溶剂，获得[1-(2-氯-4-吗啉-4-基-噻吩并[3，2-d]嘧啶 -6-基)-(E)-亚甲基]-甲胺。
在氮气氛围下，往溶于甲醇(25ml)和四氢呋喃(10ml)中的[1-(2-氯-4-吗啉-4- 基-噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基)-(E)-亚甲基]-甲胺(0.9g)中加入硼氢化钠(0.17g)和分子 筛。将该反应混合物在室温下搅拌过夜。真空脱除溶剂，用盐水猝灭，用二氯甲烷萃 取，干燥(MgSO4)，真空脱除溶剂，获得粗产物，该粗产物使用快速色谱纯化，获 得(2-氯-4-吗啉-4-基-噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基甲基]-甲胺(342mg)。
往(2-氯-4-吗啉-4-基-噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基甲基]-甲胺(120mg)在二氯甲烷(2ml) 中的溶液中加入乙酰氯(31.4μL)和三乙胺(61.6μL)。将该反应混合物在室温下搅 拌3.5小时，然后用二氯甲烷稀释，用盐水洗涤，干燥(MgSO4)，真空脱除溶剂，获 得粗残留物。该残留物通过快速色谱纯化，获得N-(2-氯-4-吗啉-4-基-噻吩并[3，2-d]嘧 啶-6-基甲基)-N-甲基乙酰胺(110mg)。
按照一般程序A让N-(2-氯-4-吗啉-4-基-噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基甲基)-N-甲基乙酰 胺与吲哚硼酸反应。用硅胶纯化，获得化合物193。NMR：400MHz；CDCl3 2.10，2.18 (3H，s，2旋转异构体)；3.00(3H，s)；3.84(4H，m)；4.00(4H，m)；4.73，4.77(2H，s，2旋转异构 体)；7.26(2H，m)；7.33(1H，s)；7.42(1H，m)；7.48(1H，S)；8.13(1H，m)；8.21(1H，br s)。 MS：(ESI+)：M+H(422)。
实施例120 N-((2-(1H-吲哚-4-基)-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基)甲基)-N-(甲基)甲 磺酰胺 194
往[1-(2-氯-4-吗啉-4-基-噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基)-(E)-亚甲基]-甲胺(0.76mmol)在 甲醇(4ml)和二氯甲烷(4ml)中的溶液中加入硼氢化钠(114mg)。将该反应混合 物在室温下搅拌过夜。在二氯甲烷和水之间分配。合并的有机层用盐水洗涤，干燥 (MgSO4)，真空脱除溶剂，获得粗残留物，该残留物使用快速色谱纯化，获得N-(2- 氯-4-吗啉-4-基-噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基甲基)-N-甲基-甲烷磺酰胺(85mg)。
按照一般程序A让N-(2-氯-4-吗啉-4-基-噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基甲基)-N-甲基-甲 烷磺酰胺与吲哚硼酸反应。用硅胶纯化，获得化合物194。NMR：(400MHz，DMSO) 2.83(s，3H)，3.02(s，3H)，3.85(t，J＝4.7，4H)，3.99(t，J＝4.7，4H)，4.64(s，2H)，7.19(t， J＝7.7，1H)，7.43(m，2H)，7.51(m，2H)，8.12(d，J＝7.3，1H)，11.20(s br，1H)。MS： (ESI+)：[M+H]+458.01。
实施例121 N-((2-(1H-吲唑-4-基)-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基)甲基)-N-甲基磺酰 基-1-甲基吡咯烷-3-胺195
往(+/-)-3-氨基-1N-BOC-吡咯烷(0.5g)在MeCN(10mL)中的溶液中加入三乙 胺(0.41mL)，然后加入甲磺酰氯(0.22mL)。将该混合物搅拌2.5小时。含水后处理， 随后用硅胶纯化，获得3-甲磺酰氨基-吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(0.49g)。
往3-甲磺酰氨基-吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(0.47g)在DMF(5mL)中的溶液中加入 NaH(63mg)。将该混合物搅拌40分钟，然后经套管加入6-溴甲基-2-氯-4-吗啉-4-基- 噻吩并[3，2-d]嘧啶(0.52g)在DMF(5mL)中的溶液。所得混合物在室温下搅拌5 小时。水后处理，随后用硅胶纯化，获得3-[(2-氯-4-吗啉-4-基-噻吩并[3，2-d]嘧啶-6- 基甲基)-甲烷磺酰基-氨基]-吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(384mg)。
溶于CH2Cl2(10mL)中的3-[(2-氯-4-吗啉-4-基-噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基甲基)-甲 烷磺酰基-氨基]-吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(380mg)用2M HCl醚溶液(2mL)处理。在 18小时之后，将该混合物浓缩，获得HCl盐，用饱和碳酸氢钠溶液稀释，然后用CH2Cl2 萃取。将合并的提取物干燥(MgSO4)，过滤，浓缩，获得游离碱(204mg)。
将N-(2-氯-4-吗啉-4-基-噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基甲基)-N-吡咯烷-3-基-甲烷磺酰胺 (200mg)、甲酸(2.5mL)和甲醛(37％溶液，0.37mL)的混合物在60℃下加热过 夜。该混合物用2M NaOH稀释，然后用CH2Cl2萃取。将合并的提取物干燥(MgSO4)， 过滤，浓缩。用硅胶纯化，获得N-(2-氯-4-吗啉-4-基-噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基甲基)-N-(1- 甲基-吡咯烷-3-基)-甲烷磺酰胺(38mg)。
根据一般程序A，让N-(2-氯-4-吗啉-4-基-噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基甲基)-N-(1-甲基- 吡咯烷-3-基)-甲烷磺酰胺与4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂环戊硼烷-2-基)-1H-吲唑反 应，获得化合物195。NMR：(CDCl3)：1.96(1H，m)；2.19(2H，m)；2.33(4H，m)；2.48 (1H，m)；2.90(5H，m)；3.94(4H，m)；4.10(4H，m)；4.57(1H，m)；4.90(2H.s)；7.50(1H，s)； 7.53(1H，d，J＝7.4Hz)；7.10(1H，d，J＝8.2Hz)；8.30(1H，d，J＝7.1Hz)；9.03(1H，s)；10.14(1H， br s)。MS：(ESI+)：MH+＝528。
实施例122 2-(1H-吲唑-4-基)-6-(3-((4-甲基磺酰基哌嗪-1-基)甲基)苯基)-4-吗啉代噻 吩并[3，2-d]嘧啶 196
在微波反应器内，将在0.6mL的1M Na2CO3水溶液和0.6mL的乙腈中的2-氯-6- 碘-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶19(300mg)、130mg的3-甲酰基苯硼酸和55mg的二 氯化双(三苯基膦)钯(II)加热到100℃，保持15分钟。该反应混合物用乙酸乙酯 (60mL)稀释，然后用水(40mL)洗涤。有机层用MgSO4干燥，过滤，蒸发。残 留物通过ISCO CombiFlash(0-40％乙酸乙酯/己烷)纯化，获得99mg的3-(2-氯-4- 吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基)苯甲醛。
将40mg的3-(2-氯-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基)苯甲醛、25mg的1-甲磺酰基 哌嗪、35mg的三乙酰氧基硼氢化钠在1，2-二氯乙烷(1mL)和乙酸(10μL)中在室 温下搅拌过夜。该反应混合物用二氯甲烷(20mL)稀释，然后用饱和碳酸氢钠(10mL) 和盐水(10mL)洗涤。有机层用MgSO4干燥，过滤，再蒸发，获得2-氯-6-(3-((4-甲 基磺酰基哌嗪-1-基)甲基)苯基)-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶。
通过一般程序A，将2-氯-6-(3-((4-甲基磺酰基哌嗪-1-基)甲基)苯基)-4-吗啉代噻吩 并[3，2-d]嘧啶偶联于4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂环戊硼烷-2-基)-1H-吲唑7。产物通 过反相HPLC纯化，获得14.2mg的化合物196。MS(Q1)519(M)+。
实施例123 2-(1H-吲唑-4-基)-6-(3-((4-甲基哌嗪-1-基)甲基)苯基)-4-吗啉代噻吩并 [3，2-d]嘧啶 197
将40mg的3-(2-氯-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基)苯甲醛、12mg的1-甲基哌嗪、 28mg的三乙酰氧基硼氢化钠在1，2-二氯乙烷(1mL)和乙酸(10μL)中在室温下搅 拌过夜。该反应混合物用二氯甲烷(20mL)稀释，然后用饱和碳酸氢钠(10mL)和 盐水(10mL)洗涤。有机层用MgSO4干燥，过滤，再蒸发，获得2-氯-6-(3-((4-甲基 哌嗪-1-基)甲基)苯基)-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶。
通过一般程序A，将2-氯-6-(3-((4-甲基哌嗪-1-基)甲基)苯基)-4-吗啉代噻吩并[3，2-d] 嘧啶与4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂环戊硼烷-2-基)-1H-吲唑7偶联。产物通过反相 HPLC纯化，获得8.5mg的化合物197。MS(Q1)526(M)+。
实施例124 4-(4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-2-基)二氢吲哚-2-酮 198
往2-(1H-吲哚-4-基)-4-吗啉-4-基-噻吩并[3，2-d]嘧啶199(90mg)在乙酸(2ml) 和水(1ml)中的溶液中加入作为乙酸溶液(4ml)的溴化吡啶鎓过溴化物(103mg)， 将该反应混合物在80℃下加热4小时。然后将该混合物碱化，萃取到二氯甲烷中，将 有机层干燥(MgSO4)，过滤，真空脱除挥发物。用硅胶纯化，获得化合物198(23mg)。 NMR：(CDCl3)：3.39-3.43(4H，m)，4.03-4.08(4H，m)，4.10(2H，s)，6.95(1H，d，J＝7.4)， 7.36(1H，t，J＝7.9)，7.49(2H，m)，7.79(1H，d，J＝5.6)，8.10(1H，d，J＝7.9)。MS：(ESI+)： MH+353(100％)。
实施例125 2-(1H-吲哚-4-基)-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶 199
在微波反应器内将溶于DME(3ml)和水(1ml)中的2-氯-4-吗啉-4-基-噻吩并[3，2-d] 嘧啶4(120mg)、4-吲哚-硼酸(110mg)、碳酸氢钠(120mg)和PdCl2(PPh3)2(30mg) 在130℃下加热90分钟。二氯甲烷/水萃取，用硅胶纯化，获得化合物199(40mg)。 NMR：(400MHz，CDCl3)：3.95(4H，t，J＝4.5)，4.13(4H，t，J＝4.5)，7.30-7.38(2H，m)， 7.52(1H，d，J＝8.1)，7.55-7.59(2H，m)，7.75(1H，d5J＝5.5)，8.22(1H，d，J＝7.4)，8.30(1H， br)。MS：(ESI+)：MH+337。
实施例126 2-(1H-吲唑-4-基)-4-吗啉代-6-(嘧啶-5-基)噻吩并[3，2-d]嘧啶 200
通过一般程序I，将2-氯-6-碘-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶19(50mg)与嘧啶-5- 硼酸偶联。该产物通过反相HPLC纯化，获得19.2mg的化合物200。MS(Q1)416(M)+。
实施例127 2-(1H-吲唑-4-基)-4-吗啉代-6-苯基呋喃[3，2-d]嘧啶 201
将2-氯-4-吗啉代-6-苯基呋喃并[3，2-d]嘧啶44(50mg，1.0eq)溶于甲苯/乙醇/水 (4:2:1，2.8ml)，用4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂环戊硼烷-2-基)-1H-吲唑7(97mg， 2.5eq)、PdCl2(PPh3)2(13.3mg，0.12eq)和碳酸钠(59mg，3.5eq)处理。将管形瓶密 封，在微波反应器中在搅拌的同时加热到150℃，保持25分钟。将粗反应混合物浓缩， 通过反相HPLC纯化，获得化合物201。MS(Q1)398(M)+。
实施例128 N-(环丙基甲氧基)-2-(1H-吲唑-4-基)-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-甲酰 胺 202
在0℃下，往50mg的2-氯-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-甲酸中加入溶于THF中 的1当量环丙基甲氧基胺和4.5当量的N-甲基吗啉。在0℃下滴加1.2当量的二苯基 膦之后10分钟将反应升温到室温。将反应搅拌几小时，直到反应完全。将水加入到 反应混合物中，然后用乙酸乙酯萃取。将有机层浓缩至干燥，进行程序A，获得22.4mg 的化合物202。MS(Q1)451.2(M)+。
实施例129 2-(1H-吲唑-4-基)-4-吗啉代-6-(1H-吡唑-4-基)噻吩并[3，2-d]嘧啶 203
通过一般程序I，将2-氯-6-碘-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶19(50mg)与4，4，5，5- 四甲基-2-(1H-吡唑-4-基)-1，3，2-二氧杂环戊硼烷偶联。产物通过反相HPLC纯化，获 得18.1mg的化合物203。MS(Q1)404(M)+。
实施例130 2-(1H-吲唑-4-基)-4-吗啉代-6-苯基噻吩并[3，2-d]嘧啶204
通过一般程序I，使2-氯-6-碘-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶19(50mg)与苯基硼酸 偶联。该产物通过反相HPLC纯化，获得17.3mg的化合物204。MS(Q1)414(M)+。
实施例131 (S)-1-((2-(1H-吲唑-4-基)-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基)甲基氨基)丙-2- 醇205

将2-氯-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-甲醛10(50mg)溶于1mL二氯乙烷中。在 该溶液中加入2.0当量(s)-1-氨基-2-丙醇、0.2mL原甲酸三甲酯和10μL乙酸。在加入 1.5当量的三乙酰氧基硼氢化钠之前将该混合物搅拌6小时。在搅拌16小时之后，将 反应物倒入饱和碳酸氢钠溶液，用乙酸乙酯萃取几次。该中间体直接在一般程序A中 使用，获得化合物205。MS(Q1)425(M)+。
实施例132 2-(1H-吲唑-4-基)-N-(甲基磺酰基)-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-甲酰胺 206
在溶于1mL DMF的50mg 2-氯-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-甲酸中加入2当量 的羰基二咪唑。将该反应液在室温下搅拌1小时，然后加入1mL含有2.5当量DBU 和2当量甲磺酰胺DMF溶液。将该反应在环境温度下搅拌过夜，并浓缩至干燥。使 粗氯化物经历程序A，获得13.8mg的化合物206。MS(Q1)459.1(M)+。
实施例133 6-(异丁基氨基磺酰基)-2-(1H-吲唑-4-基)-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶 207
按照一般程序C，在40mg的2-氯-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-磺酰氯17中加 入2-甲基丙-1-胺。通过反相HPLC纯化产物，获得14mg的207。MS(Q1)473.1(M)+。
实施例134 6-(3-羟苯基氨基磺酰基)-2-(1H-吲唑-4-基)-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶 208
经由一般程序C，在40mg 2-氯-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-磺酰氯17中加入 3-羟基苯胺。产物通过反相HPLC纯化，获得10.7mg的208。MS(Q1)509.1(M+。
实施例135 6-((4-哌嗪-2-酮)磺酰基)-2-(1H-吲唑-4-基)-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶209
经由一般程序C，在40mg 2-氯-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-磺酰氯17中加入哌 嗪-2-酮。产物通过反相HPLC纯化，获得4.3mg的209。MS(Q1)500.1(M)+。
实施例136 6-(4-甲基哌嗪磺酰基)-2-(1H-吲唑-4-基)-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶 210
经由一般程序C，在40mg 2-氯-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-磺酰氯17中加入 1-甲基哌嗪。产物通过反相HPLC纯化，获得6.5mg的210。MS(Q1)500.1(M)+。
实施例137 6-(2-羟甲基哌啶磺酰基)-2-(1H-吲唑-4-基)-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶 211
经由一般程序C，在40mg 2-氯-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-磺酰氯17中加入(哌 啶-2-基)甲醇。产物通过反相HPLC纯化，获得4.4mg的211。MS(Q1)515.1(M)+。
实施例138 6-(3-羟甲基哌啶磺酰基)-2-(1H-吲唑-4-基)-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶 212
经由一般程序C，在40mg 2-氯-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-磺酰氯17中加入(哌 啶-3-基)甲醇。产物通过反相HPLC纯化，获得12.1mg的212。MS(Q1)515.1(M)+。
实施例139 6-(4-羟甲基哌啶磺酰基)-2-(1H-吲唑-4-基)-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶 213
经由一般程序C，在40mg 2-氯-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-磺酰氯17中加入(哌 啶-4-基)甲醇。产物通过反相HPLC纯化，获得7.1mg的213。MS(Q1)515.1(M)+。
实施例1406-(4-(2-羟乙基)哌啶磺酰基)-2-(1H-吲唑-4-基)-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧 啶 214
经由一般程序C，在40mg 2-氯-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-磺酰氯17中加入 2-(哌嗪-1-基)乙醇。产物通过反相HPLC纯化，获得12.2mg的214。MS(Q1)529.1(M)+。
实施例141 6-(4-(2-羟乙基)哌嗪磺酰基)-2-(1H-吲唑-4-基)-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧 啶 215
通过一般程序C，在40mg 2-氯-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-磺酰氯17中加入 2-(哌嗪-1-基)乙醇。产物通过反相HPLC纯化，获得215。MS(Q1)530.2(M)+。
实施例142 6-(4-羟基哌啶磺酰基)-2-(1H-吲唑-4-基)-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶216
通过一般程序C，在40mg 2-氯-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-磺酰氯17中加入哌 啶-4-醇。产物通过反相HPLC纯化，获得6.4mg的216。MS(Q1)501.1(M)+。
实施例143 6-(3-羟基吡咯烷磺酰基)-2-(1H-吲唑-4-基)-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶 217
通过一般程序C，在40mg 2-氯-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-磺酰氯17中加入吡 咯烷-3-醇。产物通过反相HPLC纯化，获得3.3mg的217。MS(Q1)487.1(M)+。
实施例144 6-(2-哌啶基乙基氨基磺酰基)-2-(1H-吲唑-4-基)-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧 啶 218
通过一般程序C，在40mg 2-氯-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-磺酰氯17中加入 2-(哌啶-1-基)乙胺。产物通过反相HPLC纯化，获得13.6mg的218。MS(Q1)528.2(M)+。
实施例145 6-(2-N-吗啉代乙基氨基磺酰基)-2-(1H-吲唑-4-基)-4-吗啉代噻吩并[3，2-d] 嘧啶 219
通过一般程序C，在40mg的2-氯-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-磺酰氯17中加 入2-吗啉代乙胺。产物通过反相HPLC纯化，获得7.4mg的219。MS(Q1)530.1(M)+。
实施例146 6-(3-甲氧基丙基氨基磺酰基)-2-(1H-吲唑-4-基)-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧 啶 220
通过一般程序C，在40mg的2-氯-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-磺酰氯17中加 入3-甲氧基丙-1-胺。产物通过反相HPLC纯化，获得8.5mg的220。MS(Q1)489.1(M)+。
实施例147 6-(N，N-双-2-羟乙基氨基磺酰基)-2-(1H-吲唑-4-基)-4-吗啉代噻吩并[3，2-d] 嘧啶 221
通过一般程序C，在40mg的2-氯-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-磺酰氯17中加 入二乙醇胺。产物通过反相HPLC纯化，获得6.9mg的221。MS(Q1)505.1(M)+。
实施例148 6-(2-羟乙基氨基磺酰基)-2-(1H-吲唑-4-基)-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶 222
按照一般程序C，在40mg 2-氯-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-磺酰氯17中加入乙 醇胺。产物通过反相HPLC纯化，获得3.6mg的222。MS(Q1)461.1(M)+。
实施例149 6-(二甲基氨基磺酰基)-2-(1H-吲唑-4-基)-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶 223
按照一般程序C，在40mg2-氯-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-磺酰氯17中加入 N，N-二甲基胺HCl。产物通过反相HPLC纯化，获得4.9mg的223。MS(Q1)445.1(M)+。
实施例150 6-(甲基氨基磺酰基)-2-(1H-吲唑-4-基)-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶224
按照一般程序C，在40mg 2-氯-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-磺酰氯17中加入甲 胺HCl。产物通过反相HPLC纯化，获得9.6mg的224。MS(Q1)431.1(M)+。
实施例151 2-(1H-吲唑-4-基)-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-胺 225

将2-氯-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-甲酸(1g)、791μL的叠氮化磷酸二苯酯和 511μL的三苯胺在t-BuOH中回流4小时。在反应完成时，将反应混合物蒸发，将残 留物溶于乙酸乙酯(150mL)，然后用饱和碳酸氢钠(50mL)、5％柠檬酸(50mL) 和盐水(60mL)洗涤。有机层用MgSO4干燥，过滤，蒸发。残留物通过ISCO CombiFlash (0-50％乙酸乙酯/己烷)纯化，获得2-氯-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基氨基甲酸叔 丁酯(890mg，72％)。
通过一般程序A，将2-氯-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基氨基甲酸叔丁酯(50mg) 与4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂环戊硼烷-2-基)-1H-吲唑7偶联。产物通过反相HPLC 纯化，获得8.8mg的225。MS(Q1)353(M)+。
实施例152 2-(2-(1H-吲唑-4-基)-4-吗啉代噻吩并[32-d]嘧啶-6-基氨基)乙醇 226
将2-氯-6-碘-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶19(150mg)、2-噁唑烷酮(103mg)、磷 酸三钾(250mg)、碘化酮(7mg)、在1，4-二噁烷2mL中的4μL的N，N-二甲基乙二胺 加热到100℃，保持15小时。将该反应混合物蒸发，残留物用乙酸乙酯(50mL)稀 释，用盐水洗涤，用MgSO4干燥，经过滤并蒸发。粗产物通过反相HPLC纯化，获 得2-(2-氯-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基氨基)乙醇副产物。
通过一般程序A，将2-(2-氯-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基氨基)乙醇(28mg) 与4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂环戊硼烷-2-基)-1H-吲唑7偶联。产物通过反相HPLC 纯化，获得21mg的226。MS(Q1)397(M)+。
实施例153 (2-(1H-吲唑-4-基)-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基)-N-磺酰基甲基-N-(2- 甲氧基乙基)甲胺 227
往搅拌的2-甲氧基乙胺(0.58ml)的二氯甲烷(10ml)溶液中加入三乙胺(1.0ml) 和甲磺酰氯(0.51ml)。将该混合物在室温下搅拌过夜。真空脱除溶剂，获得粗产物， 粗产物通过快速色谱纯化，获得N-(2-甲氧基-乙基)-甲磺酰胺(0.74g)。
在氮气下，往N-(2-甲氧基-乙基)-甲磺酰胺(61mg)的四氢呋喃(1.5ml)溶液中 加入氢化钠(60％矿物油分散体，18mg)。将该反应混合物在室温下搅拌30分钟，加 入6-溴甲基-2-氯-4-吗啉-4-基-噻吩并[3，2-d]嘧啶(140mg)。将该反应混合物在室温下 搅拌2小时，然后在50℃下搅拌5小时。真空脱除溶剂，获得粗产物。该粗产物通过 快速色谱纯化，获得N-(2-氯-4-吗啉-4-基-噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基甲基)-N-(2-甲氧基- 乙基)-甲磺酰胺(124mg)。
按照一般程序A，使N-(2-氯-4-吗啉-4-基-噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基甲基)-N-(2-甲氧 基-乙基)-甲磺酰胺与4-(4，4，5，5-四甲基-[1，3，2]二氧杂环戊硼烷-2-基)-1H-吲唑反应。通 过硅胶快速色谱纯化，获得227。NMR：400MHz；CDCl3：3.00(3H，s)；3.40(3H，s)； 3.56(2H，m)；3.60(2H，m)；3.93(4H，t，J＝4.8Hz)；3.98(4H，t，J＝4.82Hs)；7.50(1H，s)； 7.54(1H，d，J＝4.2Hz)；7.51(1H，d，J＝8.2Hz)；9.3(1H，s)；10.15(1H，s)。MS：(ESI+)：503。
实施例154 1-(4-(4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-2-基)二氢吲哚-1-基)乙酮228
往2-(1H-吲哚-4-基)-4-吗啉-4-基-噻吩并[3，2-d]嘧啶199(100mg)的乙酸(2ml) 溶液中加入氰基硼氢化钠(76mg)，将该反应混合物在60℃下加热过夜。然后将该混 合物碱化，萃取到二氯甲烷中，将有机层干燥(MgSO4)，过滤，真空脱除挥发物。 经快速色谱纯化，从热的二氯甲烷/己烷中重结晶，获得228(11mg)。NMR：(DMSOd6)： 2.21(3H，s)，3.70(2H，t，J＝8.6)，3.80-3.86(4H，m)，3.98-4.04(4H，m)，4.17(2H，t，J＝8.5)， 7.30(1H，t，J＝7.9)，7.55(1H，d，3＝5.6)，8.00(1H，d，J＝8.4)，8.25(1H，d，J＝7.8)，8.30(1H， d，J＝5.6)。MS：(ESI+)：MH+381。
实施例155 2-(1H-吲唑-6-基)-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶 229
将2-氯-4-吗啉-4-基-噻吩并[3，2-d]嘧啶4(772mg)、3-氨基-4-甲基苯硼酸(502mg)、 DME(10mL)、水(5mL)、碳酸钠(640mg)和PdCl2(PPh3)2(100mg)的混合物在 加热至回流，保持16小时。然后将反应混合物冷却，用乙酸乙酯稀释，真空浓缩。 残留物使用快速色谱纯化，获得2-甲基-5-(4-吗啉-4-基-噻吩并[3，2-d]嘧啶-2-基)-苯胺 (930mg)。
往2-甲基-5-(4-吗啉-4-基-噻吩并[3，2-d]嘧啶-2-基)-苯胺(99mg)在氯仿(10mL) 和乙酸(2mL)中的溶液中加入亚硝酸异戊酯(44μL)。将反应混合物在室温下搅拌 2天，然后该混合物用碳酸氢钠溶液猝灭，萃取到氯仿中，在真空中浓缩。残留物使 用快速色谱纯化，获得229。MS：ESI MH+338。
实施例156 4-(2-(1H-吲唑-4-基)-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基)-1-((噻唑-2-基)甲 基)哌啶-4-醇230
将4-(2-氯-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基)哌啶-4-醇二盐酸盐(250mg)和2-噻 唑-甲醛(0.08ml)在1，2-二氯乙烷(3ml)和三乙胺(0.18ml)中与三乙酰氧基硼氢 化钠(187mg)一起在室温下搅拌过夜。用二氯甲烷/盐水萃取并在二氧化硅上纯化， 获得4-(2-氯-4-吗啉-4-基-噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基)-1-噻唑-2-基甲基-哌啶-4-醇 (119mg)。
使用标准条件，用4-(2-氯-4-吗啉-4-基-噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基)-1-噻唑-2-基甲基- 哌啶-4-醇和吲唑硼酸酯进行铃木偶联，获得230。NMR：(DMSO)：1.86-1.94(2H，m)， 2.10-2.18(2H，m)，2.60-2.68(2H，m)，2.75-2.82(2H，m)，3.84-3.87(4H，m)，3.90(2H，s)， 4.03-4.06(4H，m)，7.44-7.46(1H，m)，7.62-7.69(2H，m)，7.73(1H，d)，8.23(1H，d)，8.90 (1H，s)，13.15(1H，br)。MS：(ESI+)：MH+534(44％)。
实施例157 4-(2-(1H-吲唑-4-基)-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基)-1-(甲基磺酰基)哌 啶-4-醇 231
在-78℃下，往2-氯-4-吗啉-4-基-噻吩并[3，2-d]嘧啶4(1.22g)的无水四氢呋喃 (20ml)溶液中加入2.5M正丁基锂己烷溶液(2.3mL)。经1小时将该反应混合物逐 渐升温至-40℃，冷却到-78℃，加入1-BOC-4-哌啶酮(950mg)。将该反应混合物逐渐 升温至室温，然后搅拌2小时，倒入冰/水中，萃取到乙酸乙酯中。进行常规干燥和蒸 发溶剂之后，残留物通过快速色谱纯化，获得4-(2-氯-4-吗啉-4-基-噻吩并[3，2-d]嘧啶 -6-基)-4-羟基-哌啶-1-甲酸叔丁酯。
然后根据标准程序使用HCl醚溶液脱除BOC基团，获得4-(2-氯-4-吗啉-4-基-噻 吩并[3，2-d]嘧啶-4-醇二盐酸盐。该盐与甲磺酸苯并三唑-1-基酯在DMF和三乙胺中反 应，获得4-(2-氯-4-吗啉-4-基-噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基)-1-甲磺酰基-哌啶-4-醇。使用 Tetrahedron Letters，40(1)，第117-120页，1999中所述的条件制备甲磺酸苯并三唑-1- 基酯。
使用标准条件用4-(2-氯-4-吗啉-4-基-噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基)-1-甲磺酰基-哌啶-4- 醇和吲唑硼酸酯进行铃木偶联，获得231。NMR：(CDCl3/MeOD)：1.95-2.02(2H，m)， 2.08-2.16(2H，m)，2.73(3H，s)，3.08-3.14(2H，m)，3.55-3.60(2H，m)，3.75-3.78(4H，m)， 3.98-4.02(4H，m)，7.28(1H，s)，7.33-7.38(1H，m)，7.49-7.52(1H，d)，7.97-8.02(1H，d)， 8.68(1H，s)。MS：(ESI+)：MH+515(100％)。
实施例158 4-(2-(1H-吲唑-4-基)-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基)-1-((吡啶-2-基)甲 基)哌啶-4-醇232
使4-(2-氯-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基)哌啶-4-醇二盐酸盐(250mg)和2-吡 啶基甲醛(0.084ml)在1，2-二氯乙烷(3ml)和三乙胺(0.18ml)中与三乙酰氧基硼 氢化钠(187mg)一起在室温下搅拌过夜。用二氯甲烷/盐水萃取，并在二氧化硅上纯 化，获得4-(2-氯-4-吗啉-4-基-噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基)-1-吡啶-2-基甲基-哌啶-4-醇 (204mg)。
使用标准条件使4-(2-氯-4-吗啉-4-基-噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基)-1-吡啶基-哌啶-4-醇 和吲唑硼酸酯进行铃木偶联，获得232。NMR：(CDCl3)：2.05-2.11(2H，m)，2.29-2.38 (2H，m)，2.70-2.78(2H，m)，2.84-2.89(2H，m)，3.80(2H，s)，3.95-4.02(4H，m)，4.15-4.19 (4H，m)，7.29-7.32(1H，m)，7.42(1H，s)，7.53-7.58(1H，m)，7.60(1H，d)，7.68(1H，d)， 7.82(1H，t)，8.20(1H，d)，8.53(1H，d)，8.90(1H，s)。MS：(ESI+)：MH+528(18％)。
实施例159 2-(1H-吲唑-4-基)-4-吗啉代-6-苯基呋喃并[3，2-d]嘧啶 233
将2-氯-4-吗啉代-6-苯基呋喃并[3，2-d]嘧啶(50mg，1.0eq)溶于甲苯/乙醇/水(4:2:1， 2.8ml)中，用4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂环戊硼烷-2-基)-1H-吲唑7(97mg，2.5eq)、 PdCl2(PPh3)2(13.3mg，0.12eq)和碳酸钠(59mg，3.5eq)处理。将管形瓶密封，在微 波反应器中边搅拌边加热到150℃，保持25分钟。将粗反应混合物浓缩，通过反相 HPLC纯化，获得233。MS(Q1)398(M)+。
实施例160 2-(1H-吲唑-4-基)-6-(甲基磺酰基)-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶234
将2-氯-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶4(2gm)在50mL THF中冷却到-78℃，然后 加入1.3当量的nBuLi在己烷中的2.5M溶液。将反应在-78℃下搅拌30分钟，然后 升温至-40℃，保持几分钟，以便完全形成锂阴离子。然后将反应再冷却到-78℃，通 过套管在反应溶液中鼓泡二氧化硫气体2分钟。通过注射器取5mL的反应混合物， 在饱和氯化铵溶液中猝灭。该中间体水溶性极高，必须通过反相HPLC纯化，获得 130mg的纯2-氯-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-亚磺酸。
往1.5mL DMF中的40mg的2-氯-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-亚磺酸中加入 1.05当量的NaH(60％油分散体)。将该反应液在室温下搅拌30分钟，然后加入1.05 当量的碘甲烷，再将温度升高到70℃，反应在30分钟内完成。将反应液冷却到室温， 然后用饱和碳酸氢钠溶液萃取到乙酸乙酯中，用乙酸乙酯反萃取一次。将有机层合并， 用MgSO4干燥，过滤，浓缩至干。使粗氯化物经历程序A的操作，获得22mg的234。 MS(Q1)416.1(M)+。
实施例161 2-(2-(1H-吲唑-4-基)-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基)丙-2-醇235
按照一般程序D，使2-氯-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶4(200mg)与丙酮反应， 获得相应的叔醇。按照一般程序A在钯催化的交叉偶联反应中使用120mg的该粗原 料，在反相HPLC纯化之后，获得68mg的235。MS(Q1)396(M)+。
实施例162 2-(1H-吲唑-4-基)-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-(N-苯基磺酰基)甲酰胺 236
在溶于1mLTHF的50mg2-氯-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-甲酸中加入1.1当量 的羰基二咪唑。将该反应液在室温下搅拌15分钟，然后加入1mL含有2当量DBU 和2当量苯磺酰胺的THF溶液。将该反应液在环境温度下搅拌过夜，萃取到0.1N HCl 和DCM中。将有机层浓缩，进行程序A，获得11.6mg的236。MS(Q1)520.7(M)+。
实施例163 (3-(2-(1H-吲唑-4-基)-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基)苯基)甲醇 237
经由一般程序I将2-氯-6-碘-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶19(50mg)与3-羟甲基 苯基硼酸偶联。产物通过反相HPLC纯化，获得14.3mg的237。MS(Q1)444(M)+。
实施例164 N-(3-(2-(1H-吲唑-4-基)-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基)苯基)乙酰胺 238
经由一般程序I将2-氯-6-碘-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶19(50mg)与3-乙酰胺 基苯基硼酸偶联。产物通过反相HPLC纯化，获得24.1mg的238。MS(Q1)471(M)+。
实施例165 2-(1H-吲唑-4-基)-4-吗啉代-6-(吡啶-4-基)噻吩并[3，2-d]嘧啶 239
经由一般程序I将2-氯-6-碘-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶19(50mg)与4-吡啶硼 酸偶联。产物通过反相HPLC纯化，获得8.6mg的239。MS(Q1)415(M)+。
实施例166 2-(1H-吲唑-4-基)-4-吗啉代-6-(吡啶-3-基)噻吩并[3，2-d]嘧啶 240
经由一般程序I将2-氯-6-碘-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶19(50mg)与3-吡啶硼 酸偶联。产物通过反相HPLC纯化，获得19.7mg的240。MS(Q1)415(M)+。
实施例167 2-(1H-吲唑-4-基)-6-(3，4-二甲氧基苯基)-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶 241
经由一般程序I将2-氯-6-碘-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶19(50mg)与3，4-二甲 氧基苯基硼酸偶联。产物通过反相HPLC纯化，获得35.3mg的241。MS(Q1)474(M)+。
实施例168 2-(1H-吲唑-4-基)-4-吗啉代-6-(4-乙酰基-哌嗪子基磺酰基)噻吩并[3，2-d]嘧啶 242
按照一般程序C，在40mg的2-氯-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-磺酰氯17中加 入1-乙酰基哌嗪。通过反相HPLC纯化产物，获得32.9mg的242。MS(Q1)527.7(M)+。
实施例169 2-(1H-吲唑-4-基)-4-吗啉代-6-(4-甲基磺酰基-哌嗪子基磺酰基)噻吩并 [3，2-d]嘧啶 243
将2-氯-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶4(2gm)在50mL THF中冷却到-78℃，然后 加入1.3当量的nBuLi在己烷中的2.5M溶液。将反应在-78℃下搅拌30分钟，然后 升温至-40℃，保持几分钟，以便完全形成锂阴离子。然后将反应再冷却到-78℃，通 过套管在反应溶液中鼓泡二氧化硫气体2分钟。将反应缓慢升温至0℃，加入5当量 的N-氯丁二酰亚胺，在室温下搅拌至反应完全。通过旋转蒸发来蒸发掉THF，然后 用水猝灭反应。然后通过Buchner漏斗收集从含水层中沉淀的固体，用水冲洗，在真 空下干燥过夜，获得2.4g的棕色固体状2-氯-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-磺酰氯17。
根据一般程序C，在40mg的2-氯-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-磺酰氯17中加 入1-甲烷磺酰基哌嗪。产物通过反相HPLC纯化，获得10.7mg的化合物243。MS(Q1) 563.6(M)+。
实施例170 (2-(1H-吲唑-4-基)-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基)(4-(2-羟乙基)哌嗪-1- 基)甲酮 244
通过一般程序B将2-(1H-吲唑-4-基)-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-甲酸13(30mg) 与2-(哌嗪-1-基)乙醇偶联。产物通过反相HPLC纯化，获得20.7mg的化合物244。 MS(Q1)493.8(M)+。
实施例171 N-苄基-2-(1H-吲唑-4-基)-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-甲酰胺 245
通过一般程序B将2-(1H-吲唑-4-基)-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-甲酸13(30mg) 与苄胺偶联。产物通过反相HPLC纯化，获得8.9mg的化合物245。MS(Q1)470.8(M)+。
实施例172 N-(3-羟苯基)-2-(1H-吲唑-4-基)-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-甲酰胺 246
通过一般程序B将2-(1H-吲唑-4-基)-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-甲酸13(30mg) 与3-羟基苯胺偶联。产物通过反相HPLC纯化，获得7.7mg的化合物246。MS(Q1) 472.7(M)+。
实施例173 2-(1H-吲唑-4-基)-4-吗啉代-N-苯基噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-甲酰胺 247
通过一般程序B将2-(1H-吲唑-4-基)-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-甲酸13(30mg) 与苯胺偶联。产物通过反相HPLC纯化，获得6.4mg的化合物247。MS(Q1)456.8(M)+。
实施例174 N-((二甲基氨基甲酰基)甲基)-2-(1H-吲唑-4-基)-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧 啶-6-甲酰胺 248
将N-Cbz甘氨酸(9.6mmol)溶于DMF(30mL)。随后将二异丙基乙胺(40mmol)、 EDC HCl(10mmol)、HOAt(10mmol)和二甲胺盐酸盐(10mmol)加入到该溶液 中。将该反应搅拌过夜。将乙酸乙酯(100mL)加入到该溶液中，有机层用1N HCl 洗涤，随后用饱和碳酸氢钠水溶液洗涤。用硫酸镁干燥有机层，浓缩，获得1.02g的 2-(苄基氨基)-N，N-二甲基乙酰胺。将2-(苄基氨基)-N，N-二甲基乙酰胺(4.3mmol)溶 于甲醇(20mL)，与5％负载Pd/C(0.21mmol)结合。将该溶液在填充氢气的气球下 搅拌4小时，然后用塞力特硅藻土过滤，浓缩，获得402mg的黄色油状2-氨基-N，N- 二甲基乙酰胺。
通过一般程序B将30mg的2-(1H-吲唑-4-基)-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-甲酸 13与2-氨基-N，N-二甲基乙酰胺偶联。产物通过反相HPLC纯化，获得6.5mg的化合 物248。MS(Q1)465.8(M)+。
实施例175 (2-(1H-吲唑-4-基)-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基)(4-(吡咯烷-1-基)哌啶 -1-基)甲酮 249
通过一般程序B将2-(1H-吲唑-4-基)-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-甲酸13(30mg) 与4-(吡咯烷-1-基)哌啶偶联。产物通过反相HPLC纯化，获得13.2mg的化合物249。 MS(Q1)517.8(M)+。
实施例176 (2-(1H-吲唑-4-基)-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基)(哌嗪-2-酮)甲酮 250
通过一般程序B将2-(1H-吲唑-4-基)-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-甲酸13(30mg) 与哌嗪-2-酮偶联。产物通过反相HPLC纯化，获得16.4mg的化合物250。MS(Q1) 463.7(M)+。
实施例177 (2-(1H-吲唑-4-基)-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基)(4-羟基哌啶-1-基)甲 酮 251
通过一般程序B将2-(1H-吲唑-4-基)-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-甲酸13(30mg) 与哌啶-4-醇偶联。产物通过反相HPLC纯化，获得12.9mg的化合物251。MS(Q1) 464.8(M)+。
实施例178 (2-(1H-吲唑-4-基)-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基)(吗啉代)甲酮252
通过一般程序B将2-(1H-吲唑-4-基)-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-甲酸13(30mg) 与吗啉偶联。产物通过反相HPLC纯化，获得8.7mg的化合物252。MS(Q1)450.8(M)+。
实施例179 (2-(1H-吲唑-4-基)-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基)(3-(甲基氨基)吡咯烷 -1-基)甲酮 253
通过一般程序B将2-(1H-吲唑-4-基)-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-甲酸13(30mg) 与N-甲基吡咯烷-3-胺偶联。产物通过反相HPLC纯化，获得16.7mg的化合物253。 MS(Q1)463.8(M)+。
实施例180 N-(2，2，2-三氟乙基)-2-(1H-吲唑-4-基)-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-甲酰 胺 254
通过一般程序B将2-(1H-吲唑-4-基)-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-甲酸13(30mg) 与2，2，2-三氟乙胺偶联。产物通过反相HPLC纯化，获得10.4mg的化合物254。MS(Q1) 462.7(M)+。
实施例181 2-(1H-吲唑-4-基)-4-吗啉代-N-(2-吗啉代乙基)噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-甲酰胺 255
通过一般程序B将2-(1H-吲唑-4-基)-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-甲酸13(30mg) 与2-吗啉基乙胺偶联。产物通过反相HPLC纯化，获得22mg的化合物255。MS(Q1) 493.8(M)+。
实施例182 2-(1H-吲唑-4-基)-N-异丁基-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-甲酰胺256
通过一般程序B将2-(1H-吲唑-4-基)-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-甲酸13(30mg) 与2-甲基丙-1-胺偶联。产物通过反相HPLC纯化，获得13.2mg的化合物256。MS(Q1) 436.8(M)+。
实施例183 2-(1H-吲唑-4-基)-4-吗啉代-N-(2-(哌啶-1-基)乙基)噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-甲 酰胺 257
通过一般程序B将2-(1H-吲唑-4-基)-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-甲酸13(30mg) 与2-(哌啶-1-基)乙胺偶联。产物通过反相HPLC纯化，获得20.4mg的化合物257。 MS(Q1)491.8(M)+。
实施例184 N，N-双(2-羟乙基)-2-(1H-吲唑-4-基)-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-甲酰胺 258
通过一般程序B将2-(1H-吲唑-4-基)-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-甲酸13(30mg) 与二乙醇胺偶联。产物通过反相HPLC纯化，获得15.8mg的化合物258。MS(Q1) 468.8(M)+。
实施例185 2-(2-(1H-吲唑-4-基)-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基)乙醇 259

将2-氯-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶4(1gm)溶于15mL THF中，在干冰丙酮浴 中冷却到-78℃，然后加入2.0mL的2.5M nBuLi。将该反应搅拌30分钟，然后升温 至-40℃。将环氧乙烷鼓泡到该溶液中持续大约10分钟，将该反应在-40℃下搅拌2小 时。然后将它倾倒于饱和氯化铵中，用乙酸乙酯萃取。在蒸发有机层之后，粗反应物 上40g硅胶层析，使用0-100％乙酸乙酯/己烷梯度，获得333mg的醇。将45mg的 该中间体与36mg的硼酸酯、0.5mL乙腈、0.5mL的1.0M碳酸钠和5-10mg PdCl2(PPh3)2合并，在微波反应器中在140℃下加热10分钟，然后在145℃下加热另 外20分钟。反应物用乙酸乙酯萃取，产物通过反相HPLC纯化，获得18mg的化合 物259。MS(Q1)382(M)+。
实施例186 N-(1-羟基丙-2-基)-2-(1H-吲唑-4-基)-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-甲酰 胺 260
通过一般程序B将2-(1H-吲唑-4-基)-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-甲酸13(30mg) 与2-氨基丙-1-醇偶联。产物通过反相HPLC纯化，获得22.3mg的化合物260。MS(Q1) 438.8(M)+。
实施例187 (2-(1H-吲唑-4-基)-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基)(4-甲基哌嗪-1-基)甲 酮 261
通过一般程序B将2-(1H-吲唑-4-基)-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-甲酸13(30mg) 与1-甲基哌嗪偶联。产物通过反相HPLC纯化，获得17.6mg的化合物261。MS(Q1) 561.8(M)+。
实施例188 (2-(1H-吲唑-4-基)-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基)(4-甲基磺酰基哌嗪 -1-基)甲酮 262
通过一般程序B将2-(1H-吲唑-4-基)-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-甲酸13(30mg) 与1-甲烷磺酰基哌嗪偶联。产物通过反相HPLC纯化，获得19.2mg的化合物262。 MS(Q1)527.7(M)+。
实施例189 2-(1H-吲唑-4-基)-N，N-二甲基-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-甲酰胺 263
通过一般程序B将2-(1H-吲唑-4-基)-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-甲酸13(30mg) 与N，N-二甲基胺HCl偶联。产物通过反相HPLC纯化，获得19.7mg的化合物263。 MS(Q1)408.8(M)+。
实施例190 2-(1H-吲唑-4-基)-6-(4-(甲基磺酰基)苯基)-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶 264
通过一般程序I将2-氯-6-碘-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶19(50mg)与4-甲基磺 酰基苯基硼酸偶联。产物通过反相HPLC纯化，获得10.1mg的化合物264。MS(Q1) 492(M)+。
实施例191 2-(1H-吲唑-4-基)-6-(3-(甲基磺酰基)苯基)-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶 265
通过一般程序I将2-氯-6-碘-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶19(50mg)与3-甲基磺 酰基苯基硼酸偶联。产物通过反相HPLC纯化，获得26.5mg的化合物265。MS(Q1) 492(M)+。
实施例192 N-(2-羟乙基)-2-(1H-吲唑-4-基)-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-甲酰胺266
通过一般程序B将2-(1H-吲唑-4-基)-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-甲酸13(30mg) 与乙醇胺HCl偶联。产物通过反相HPLC纯化，获得6.3mg的化合物266。MS(Q1) 424.8(M)+。
实施例193 (2-(1H-吲唑-4-基)-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基)(4-乙酰基哌嗪-1-基) 甲酮267
将2-氯-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶4(2.5g)在50mL THF中冷却到-78℃，然后 加入1.3当量的nBuLi的2.5M己烷溶液。将该反应在-78℃下搅拌30分钟，然后升 温至-40℃，保持几分钟，以便完全形成锂阴离子。然后将反应再冷却至-78℃，通过 套管将从干冰中放出的二氧化碳气体鼓泡到反应溶液中达1小时。然后经30分钟将 该反应缓慢升温至0℃。通过旋转蒸发浓缩THF。然后该反应用水猝灭，用乙酸乙酯 萃取，以除去任何2-氯-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶。然后通过加入浓HCl将含水层的 pH变为2-3。然后通过Buchner漏斗收集从含水层中沉淀出的固体，用水冲洗，在 真空下干燥过夜，获得2.65g的2-氯-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-甲酸。然后让500mg 的该中间体进行程序A。在萃取到乙酸乙酯中时，产物保持在含水层中，用20当量 的Amberlite IR-120离子交换树脂处理2小时，或者直到溶液变混浊为止。该溶液首 先通过粗滤器烧瓶过滤，以除去树脂，然后用Buchner漏斗过滤，以收集637mg的 浅棕色固体状的2-(1H-吲唑-4-基)-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-甲酸13。
通过一般程序B，将30mg2-(1H-吲唑-4-基)-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-甲酸13 与1-乙酰基哌嗪偶联。产物通过反相HPLC纯化，获得16.8mg的化合物267。MS(Q1) 491.8(M)+。
实施例194 (4-(2-(1H-吲唑-4-基)-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基)苯基)甲醇 268
经由一般程序I将50mg的2-氯-6-碘-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶19与4-羟甲基 苯基硼酸偶联。产物通过反相HPLC纯化，获得20.7mg的化合物268。MS(Q1) 444(M)+。
实施例195 1-(2-(1H-吲唑-4-基)-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基)-2-甲基丙-2-醇 269

将2-氯-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶4(200mg)溶于3mL THF中，在干冰丙酮浴 中冷却到-78℃，然后加入0.33mL的2.5M nBuLi。将该反应搅拌30分钟，然后升温 至-40℃，保持20分钟，然后再冷却至-78℃。将0.08mL的1，2-环氧基-2-甲基丙烷加 入到该溶液中，经1小时缓慢升温至0℃，在此时，反应变为淡褐色。然后将它倒入 饱和氯化铵中，用乙酸乙酯萃取。在蒸发有机层之后，粗反应物上硅胶层析，使用0 -100％乙酸乙酯/己烷梯度，获得35mg的醇。将该中间体与40mg的硼酸酯、0.5mL 乙腈、0.5mL的1.0M碳酸钠和5-10mg PdCl2(PPh3)2合并，在微波反应器中在140 ℃下加热10分钟。反应物用乙酸乙酯萃取，产物通过反相HPLC纯化，获得27mg 的化合物269。MS(Q1)410(M)+。
实施例196 2-(1H-吲唑-4-基)-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶 270
往3-溴-2-甲基苯胺(1.00g)在二噁烷(15mL)中的溶液中加入三乙胺(3.0mL)、 Pd(OAc)2(60mg)、2-二环己基膦基联苯(377mg)和频那醇硼烷(2.34mL)，然后将 该反应混合物在80℃下加热1小时。然后将该反应混合物冷却，用乙酸乙酯稀释，真 空浓缩。残留物使用快速色谱纯化，获得2-甲基-3-(4，4，5，5-四甲基-[1，3，2]二氧杂环戊 硼烷-2-基)-苯胺(1.07g)。
在铃木条件下让2-甲基-3-(4，4，5，5-四甲基-[1，3，2]二氧杂环戊硼烷-2-基)-苯胺与2- 氯-4-吗啉-4-基-噻吩并[3，2-d]嘧啶反应，获得2-甲基-3-(4-吗啉-4-基-噻吩并[3，2-d]嘧啶 -2-基)-苯胺。往2-甲基-3-(4-吗啉-4-基-噻吩并[3，2-d]嘧啶-2-基)-苯胺(80mg)在氯仿 (8mL)和乙酸(4mL)中的溶液中加入亚硝酸异戊酯(36μL)。将该反应混合物在 室温下搅拌1天。该混合物然后用碳酸氢钠溶液猝灭，萃取到氯仿中，真空浓缩。残 留物使用快速色谱纯化，获得化合物270。MS：ESI MH+338。
实施例197 2-(1H-吲哚-5-基)-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶 271
按照一般程序A，让2-氯-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶4与5-吲哚硼酸以23.5mmol 的水平反应，在RP-HPLC纯化之后，获得25.7mg的化合物271。MS(Q1)337.1(M)+。
实施例198 2-(1H-吲哚-6-基)-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶 272
按照一般程序A，让2-氯-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶4与6-吲哚硼酸以23.5mmol 的水平反应，在RP-HPLC纯化之后，获得30mg的化合物272。MS(Q1)337.1(M)+。
实施例199 N-((2-(1H-吲唑-4-基)-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基)甲基)-N-(甲基)甲 基磺酰胺 273
按照一般程序A，让N-(2-氯-4-吗啉-4-基-噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基甲基)-N-甲基- 甲烷磺酰胺与4-(4，4，5，5-四甲基-[1，3，2]二氧杂环戊硼烷-2-基)-1H-吲唑反应。用硅胶纯 化，获得化合物273。NMR：(400MHz，CDCl3)10.20(br s，1H)，9.02(br s，1H)，8.28(d， J＝7.4，1H)，7.60(d，J＝8.3，1H)，7.51(t，J＝7.7，1H)，7.47(s，1H)，4.67(s，2H)，4.09(t，J ＝4.8，4H)，3.92(t，J＝4.8，4H)，2.95(s，3H)，2.93(s，3H)。MS：(ESI+)：[M+H]+459.06。
实施例200 N-[2-(1H-吲唑-4-基)-4-吗啉-4-基-噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基甲基]-乙酰胺 274
根据一般程序K制备，获得化合物274。MS(Q1)409(M)+。
实施例201 N-[2-(1H-吲唑-4-基)-4-吗啉-4-基-噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基甲基]-苯甲酰胺 275
根据一般程序K制备，获得化合物275。MS(Q1)471(M)+。
实施例202 吡啶-2-甲酸[2-(1H-吲唑-4-基)-4-吗啉-4-基-噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基甲基]- 酰胺 276
根据一般程序K制备，获得化合物276。MS(Q1)472(M)+。
实施例203 N-[2-(1H-吲唑-4-基)-4-吗啉-4-基-噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基甲基]-烟酰胺 277
根据一般程序K制备，获得化合物277。MS(Q1)472(M)+。
实施例204 N-[2-(1H-吲唑-4-基)-4-吗啉-4-基-噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基甲基]-异烟酰胺 278
根据一般程序K制备，获得化合物278。MS(Q1)472(M)+。
实施例205 3-(2-(1H-吲唑-4-基)-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基)-1-(4-甲基哌嗪-1- 基)丙-1-酮 279
按照制备化合物148的操作程序，使用N-甲基哌嗪，制备化合物279。NMR： DMSO：2.16(3H，s，Me)，2.20-2.28(4H，m，CH2)，2.80-2.86(2H，m，CH2)，3.19(2H，t， J7.24，CH2)，3.48-3.50(4H，m，CH2)，3.79-3.84(4H，m，CH2)，3.98-4.02(4H，m，CH2)， 7.40(1H，s，Ar)，7.44(1H，t，J 8.0，Ar)，7.62(1H，d，J 8.15，Ar)，8.21(1H，d，J 7.35，Ar)， 8.85(1H，s，Ar)，13.15(1H，s，NH)。MS：(ESI+)：MH+492.21。
实施例206 2-(1H-吲唑-4-基)-6-(甲氧基甲基)-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶 280
在0℃下，往2-氯-4-吗啉-4-基-噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-甲醛(500mg)在甲醇(20mL) 中的悬浮液加入硼氢化钠(66mg)。将该反应搅拌2小时，然后用1:1饱和碳酸氢钠 水溶液-水(20mL)猝灭。将该混合物搅拌10分钟，然后过滤，用水洗涤，风干，获 得白色固体状的(2-氯-4-吗啉-4-基-噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基)甲醇(489mg)。
在0℃下，往(2-氯-4-吗啉-4-基-噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基)甲醇(300mg)在DMF (10mL)中的溶液中加入氢化钠(46mg)。将该混合物在0℃下搅拌1小时，然后加 入甲基碘(0.07mL)。将该反应混合物在室温下搅拌16小时，然后用水(20mL)猝 灭，萃取到乙酸乙酯(2×20mL)中。合并的有机层用盐水溶液(2×20mL)洗涤， 干燥(MgSO4)，浓缩，获得黄色固体状2-氯-6-甲氧基甲基-4-吗啉-4-基-噻吩并[3，2-d] 嘧啶(92mg)。
使用标准方法，用2-氯-6-甲氧基甲基-4-吗啉-4-基-噻吩并[3，2-d]嘧啶(85mg)进 行铃木偶联。使用柱色谱法纯化，获得白色固体状的化合物280(24mg)。NMR：CDCl3： 3.41(3H，s，Me)，3.81-3.89(4H，m，CH2)，4.01-4.08(4H，m，CH2)，4.70(2H，s，CH2)， 7.31(1H，s，Ar)，7.42(1H，t，J 8.25，Ar)，7.50(1H，d，J 8.24，Ar)，8.21(1H，d，J 7.21，Ar)， 8.96(1H，s，Ar)，10.03(1H，s，NH)。MS：(ESI+)：MH+382.17。
实施例207 6-((苄氧基)甲基)-2-(1H-吲唑-4-基)-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶 281
按照制备化合物280的程序，使用苄基溴，制备化合物281。NMR：CDCl3： 3.88-3.94(4H，m，CH2)，4.09-4.14(4H，m，CH2)，4.69(2H，s，CH2)，4.86(2H，s，CH2)， 7.31-7.46(6H，m，Ar)，7.53(1H，t，J 8.22，Ar)，7.56(1H，t，J 8.24，Ar)，8.30(1H，d，J 6.94，Ar)，9.03(1H，s，Ar)，10.11(1H，s，NH)。MS：(ESI+)：MH+458.16。
实施例208 6-(((吡啶-2-基)甲氧基)甲基)-2-(1H-吲唑-4-基)-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧 啶 282
按照制备化合物280的程序，使用2-吡啶甲基氯，制备化合物282。NMR：CDCl3： 3.80-3.90(4H，m，CH2)，4.01-4.08(4H，m，CH2)，4.72(2H，s，CH2)，4.88(2H，s，CH2)， 7.10-7.14(1H，m，Ar)，7.38(1H，s，Ar)，7.40-7.48(2H，m，Ar)，7.51(1H，d，J 8.23，Ar)， 7.65(1H，t，J 8.22，Ar)，8.18(1H，d，J 7.20，Ar)，8.52(1H，d，J 4.60，Ar)，8.96(1H，s，Ar)， 10.06(1H，s，NH)。MS：(ESI+)：MH+459.17。
实施例209　6-(((吡啶-3-基)甲氧基)甲基)-2-(1H-吲唑-4-基)-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧 啶 283
按照制备化合物280的程序，使用3-吡啶甲基氯，制备化合物283。NMR：CDCl3： 3.90-3.94(4H，m，CH2)，4.08-4.13(4H，m，CH2)，4.68(2H，s，CH2)，4.88(2H，s，CH2)， 7.30(1H，dd，J 7.79和4.87，Ar)，7.44(1H，S，Ar)，7.51(1H，t，J 8.14，Ar)，7.57(1H，d，J 8.20，Ar)，7.71(1H，d，J 7.79，Ar)，8.28(1H，d，J 7.35，Ar)，8.58(1H，dd，J 4.80和1.47， Ar)，8.63(1H，d，J 1.86，Ar)，9.02(1H，s，Ar)。MS：(ESI+)：MH+459.16。
实施例210 6-(((吡啶-4-基)甲氧基)甲基)-2-(1H-吲唑-4-基)-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧 啶 284
按照制备化合物280的程序，使用4-吡啶甲基氯，制备化合物284。NMR：CDCl3： 3.90-3.94(4H，m，CH2)，4.08-4.13(4H，m，CH2)，4.68(2H，s，CH2)，4.92(2H，s，CH2)， 7.30(2H，d，J 5.81，Ar)，7.46(1H，s，Ar)，7.51(1H，t，J 8.14，Ar)，7.60(1H，d，J 8.20， Ar)，8.28(1H，d，J 7.32，Ar)，8.61(2H，d，J 5.27，Ar)，9.01(1H，s，Ar)，10.14(1H，s， NH)。MS：(ESI+)：MH+459.17。
实施例211　2-(1H-吲唑-4-基)-4-吗啉代-6-(苯氧基甲基)噻吩并[3，2-d]嘧啶 285
在0℃下，往苯酚(142mg)在DMF(8mL)中的溶液分批加入氢化钠(64mg)。 将该反应混合物在0℃下搅拌1小时，然后加入6-溴甲基-2-氯-4-吗啉-4-基-噻吩并 [3，2-d]嘧啶(240mg)。将该反应混合物在室温下搅拌16小时，然后用水(20mL)猝 灭，萃取到乙酸乙酯(2×20mL)中。合并的有机层用2M氢氧化钠水溶液(2×20mL) 和盐水溶液(2×20mL)洗涤，干燥(MgSO4)，浓缩，获得白色固体状2-氯-4-吗啉 -4-基-6-苯氧基甲基-噻吩并[3，2-d]嘧啶(123mg)。
使用标准方法，用2-氯-4-吗啉-4-基-6-苯氧基甲基-噻吩并[3，2-d]嘧啶(112mg) 进行铃木偶联。使用柱色谱法纯化，获得白色固体状的化合物285(34mg)。NMR： CDCl3：3.90-3.98(4H，m，CH2)，4.08-4.13(4H，m，CH2)，5.41(2H，S，CH2)，6.98-7.06 (3H，m，Ar)，7.40-7.46(2H，m，Ar)，7.49-7.55(2H，m.Ar)，7.60(1H，d，J 8.22，Ar)， 8.30(1H，d，J 7.24，Ar)，9.01(1H，S，Ar)，10.14(1H，s，NH)。MS：(ESI+)：MH+444.17。
实施例212 N-((2-(1H-吲唑-4-基)-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基)甲基)苯甲酰胺 286
按照一般程序K，(2-氯-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基)甲胺27用苯甲酰氯酰化， 然后按照一般程序A与4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂环戊硼烷-2-基)-1H-吲唑7 (34mg)反应，获得化合物286。MS(Q1)471(M)+。
实施例213 N-((2-(1H-吲唑-4-基)-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基)甲基)吡啶酰胺 287
按照一般程序K，(2-氯-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基)甲胺27用吡啶甲酰氯酰 化，然后按照一般程序A与4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂环戊硼烷-2-基)-1H-吲唑7 (34mg)反应，获得化合物287。MS(Q1)472(M)+。
实施例214 N-((2-(1H-吲唑-4-基)-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基)甲基)烟酰胺 288
按照一般程序K，(2-氯-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基)甲胺27用烟酰氯酰化， 然后按照一般程序A与4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂环戊硼烷-2-基)-1H-吲唑7 (34mg)反应，获得化合物288。MS(Q1)472(M)+。
实施例215 N-((2-(1H-吲唑-4-基)-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基)甲基)乙酰胺 289
按照一般程序K，(2-氯-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基)甲胺27用乙酰氯酰化， 然后按照一般程序A与4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂环戊硼烷-2-基)-1H-吲唑7 (34mg)反应，获得化合物289。MS(Q1)409(M)+。
实施例216 N-((2-(1H-吲唑-4-基)-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基)甲基)异烟酰胺 290
按照一般程序K，(2-氯-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基)甲胺27用异烟酰氯酰化， 然后按照一般程序A与4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂环戊硼烷-2-基)-1H-吲唑7 (34mg)反应，获得化合物290。MS(Q1)472(M)+。
实施例217 2-(1H-吲唑-4-基)-4-吗啉代呋喃并[3，2-d]嘧啶-6-甲酰胺 291
按照一般程序A，让2-氯-4-吗啉代呋喃并[3，2-d]嘧啶-6-甲酰胺与4-(4，4，5，5-四甲 基-1，3，2-二氧杂环戊硼烷-2-基)-1H-吲唑7反应，在通过反相HPLC纯化后，获得化合 物291。MS(Q1)365(M)+。
实施例218 (2-(1H-吲唑-4-基)-4-吗啉代呋喃并[3，2-d]嘧啶-6-基)(4-N-甲磺酰基哌嗪 -1-基)甲酮 292
将2-氯-4-吗啉代呋喃并[3，2-d]嘧啶-6-甲酸(1.0eq)、HATU(1.5eq)、1-甲烷磺酰 基哌嗪的盐酸盐(1.5eq)、二异丙基乙胺(3.0eq)在DMF中的溶液搅拌30分钟。将 从反应中沉淀出的固体过滤，获得2-氯-4-吗啉代呋喃并[3，2-d]嘧啶-6-基(4-甲磺酰基哌 嗪-1-基)甲酮。MS(Q1)430(M)+。
按照一般程序A，让2-氯-4-吗啉代呋喃并[3，2-d]嘧啶-6-基(4-甲磺酰基哌嗪-1-基) 甲酮与4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂环戊硼烷-2-基)-1H-吲唑7反应，在通过反相 HPLC纯化后，获得化合物292。MS(Q1)352(M)+。
实施例219 2-(1H-吲唑-4-基)-N-甲基-4-吗啉代呋喃并[3，2-d]嘧啶-6-甲酰胺 293
在-78℃下，在溶于THF中的实施例27的2-氯-4-吗啉代呋喃并[3，2-d]嘧啶45 (1.0eq)的溶液中加入正丁基锂在己烷中的1.6M溶液(1.3eq)。将反应混合物在-78 ℃下搅拌30分钟，然后在-78℃下，在反应烧瓶内鼓泡送入缓和的CO2气流1小时， 然后在0℃下鼓泡送入缓和CO2气流40分钟。将反应混合物浓缩，然后用水猝灭。 混合物用乙酸乙酯萃取，以除去剩余的任何起始原料。然后，含水层用HCl 6M酸化 至pH3。将所得固体过滤，获得2-氯-4-吗啉代呋喃并[3，2-d]嘧啶-6-甲酸。MS(Q1)284 (M)+。
将2-氯-4-吗啉代呋喃并[3，2-d]嘧啶-6-甲酸(1.0eq)、HATU(1.5eq)、甲胺盐酸 盐(1.5eq)、二异丙基乙胺(3.0eq)在DMF中的溶液搅拌30分钟。反应混合物用饱 和碳酸氢钠水溶液猝灭，用乙酸乙酯萃取。将合并的有机层干燥(Na2SO4)，浓缩。 该粗反应混合物通过快速色谱纯化，获得2-氯-N-甲基-4-吗啉代呋喃并[3，2-d]嘧啶-6- 甲酰胺。MS(Q1)297(M)+。
按照一般程序A，让2-氯-N-甲基-4-吗啉代呋喃并[3，2-d]嘧啶-6-甲酰胺与 4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂环戊硼烷-2-基)-1H-吲唑7反应，在通过反相HPLC纯 化后，获得化合物293。MS(Q1)379(M)+。
实施例220 (2-(1H-吲唑-4-基)-4-吗啉代呋喃并[3，2-d]嘧啶-6-基)甲醇 296
将2-氯-4-吗啉代呋喃并[3，2-d]嘧啶-6-甲醛(1.0eq)溶于1，2-二氯乙烷中，用1- 甲烷磺酰基哌嗪的盐酸盐(1.4eq)、乙酸钠(1.4eq)和原甲酸三甲酯(10eq)处理。 将反应混合物在室温下搅拌12小时。加入三乙酰氧基硼氢化钠(1.2eq)，将该反应混 合物在室温下搅拌8小时。反应混合物用饱和碳酸氢钠溶液猝灭，用二氯甲烷萃取。 将合并的有机层干燥(Na2SO4)和浓缩。粗反应混合物通过快速色谱纯化，获得2- 氯-4-吗啉代呋喃并[3，2-d]嘧啶-6-基)甲醇：MS(Q1)270(M)+。
按照一般程序A，让2-氯-4-吗啉代呋喃并[3，2-d]嘧啶-6-基)甲醇与4-(4，4，5，5-四甲 基-1，3，2-二氧杂环戊硼烷-2-基)-1H-吲唑7反应，在通过反相HPLC纯化后，获得化合 物296。MS(Q1)352(M)+。
实施例221 2-(1H-吲唑-4-基)-6-(4-甲氧基吡啶-3-基)-4-吗啉代呋喃并[3，2-d]嘧啶 297
通过一般程序A，由实施例27获得的2-氯-6-碘-4-吗啉代呋喃并[3，2-d]嘧啶45与 4-甲氧基吡啶-3-基-3-硼酸反应，得到相应的中间体，经快速色谱纯化后，其与 4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂环戊硼烷-2-基)-1H-吲唑7反应，在通过反相HPLC纯 化后，获得化合物297。MS(Q1)429(M)+。
实施例222 2-(1H-吲唑-4-基)-4-吗啉代噻吩并[2，3-d]嘧啶-6-甲酰胺 298
通过一般程序B，实施例67的2-氯-4-吗啉代噻吩并[2，3-d]嘧啶-6-甲酸(100mg) 用90mg的氯化铵处理，获得2-氯-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-甲酰胺。然后通过一 般程序A，让该粗中间体2-氯-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-甲酰胺与4-(4，4，5，5-四甲 基-1，3，2-二氧杂环戊硼烷-2-基)-1H-吲唑7反应，在通过反相HPLC纯化后，获得 17.4mg的化合物298。MS(Q1)381.1(M)+。
实施例223 2-(1H-吲唑-4-基)-4-吗啉代-6-(3-(吗啉代甲基)苯基)噻吩并[3，2-d]嘧啶 299
将2-氯-6-碘-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶19(50mg)与4-[3-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2- 二氧杂环戊硼烷-2-基)]苄基吗啉偶联，然后通过一般程序F与4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2- 二氧杂环戊硼烷-2-基)-1H-吲唑7反应。产物通过反相HPLC纯化，获得2.6mg的化 合物299。MS(Q1)513.2(M)+。
实施例224 3-(2-(1H-吲唑-4-基)-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基)-5-氨基苯甲酸甲酯 300
通过一般程序F，将2-氯-6-碘-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶19(50mg)与3-氨基 -5-甲氧基羰基苯基硼酸偶联，然后与4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂环戊硼烷-2- 基)-1H-吲唑反应。产物通过反相HPLC纯化，获得5.2mg的化合物300。MS(Q1) 487.1(M)+。
实施例225 N-(3-((2-(1H-吲唑-4-基)-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基)甲基氨基)苯基) 乙酰胺 301
往实施例9的6-(溴甲基)-2-氯-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶30(90mg，0.3mmol) 在DMF(3mL)中的溶液中加入3-氨基-N-乙酰苯胺(39mg，0.3mmol)和K2CO3(50mg， 0.4mmol)。将所得溶液在室温下搅拌过夜，然后真空浓缩。残留物用水稀释，再过滤。 按照一般程序A，在铃木偶联中使用该粗产物与4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂环戊硼 烷-2-基)-1H-吲唑7，在反相HPLC纯化后，获得化合物301(39mg)。MS(Q1)500(M)+。
实施例226 N-((2-(1H-吲唑-4-基)-4-吗啉代噻吩并嘧啶-6-基)甲基)苯胺 302
往实施例9的6-(溴甲基)-2-氯-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶30(90mg，0.3mmol) 在DMF(3mL)中的溶液加入苯胺(24μL，0.3mmol)和K2CO3(50mg，0.4mmol)。 将所得溶液在室温下搅拌过夜，然后真空浓缩。残留物用水稀释，再过滤。按照一般 程序A，在铃木偶联中使用该粗产物与4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂环戊硼烷-2- 基)-1H-吲唑7，在反相HPLC纯化后，获得化合物302(49mg)。MS(Q1)443(M)+。
实施例227 3-((2-(1H-吲唑-4-基)-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基)甲基氨基)苯甲酰 胺 303
往实施例9的6-(溴甲基)-2-氯-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶30(90mg，0.3mmol) 在DMF(3mL)中的溶液加入3-氨基-苯甲酰胺(35mg，0.3mmol)和K2CO3(50mg， 0.4mmol)。将所得溶液在室温下搅拌过夜，然后真空浓缩。残留物用水稀释，再过滤。 按照一般程序A，在铃木偶联中使用该粗产物与4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂环戊硼 烷-2-基)-1H-吲唑7，在反相HPLC纯化后，获得化合物303(28mg)。MS(Q1)486(M)+。
实施例228 (2-(1H-吲唑-4-基)-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基)-N，N-二甲基甲胺 304
往实施例9的6-(溴甲基)-2-氯-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶30(90mg，0.3mmol) 在DMF(3mL)中的溶液加入二甲胺盐酸盐(21mg，0.3mmol)和K2CO3(90mg， 0.6mmol)。将所得溶液在室温下搅拌过夜，然后真空浓缩。残留物用水稀释，再过滤。 按照一般程序A，在铃木偶联中使用该粗产物与4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂环戊硼 烷-2-基)-1H-吲唑7，在反相HPLC纯化后，获得化合物304(34mg)。MS(Q1)395(M)+。
实施例229 N-((2-(1H-吲唑-4-基)-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基)甲基)吗啉-4-甲酰 胺 305
往实施例11的(2-氯-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基)甲胺27(50mg，0.2mmol) 在CH2Cl2(4mL)中的溶液加入Et3N(84μL，0.6mmol)和4-吗啉基碳酰氯(40μL， 0.3mmol)。将该反应在室温下搅拌18小时，然后用水猝灭。含水层用EtOAc萃取。 合并的有机层用Na2SO4干燥，真空浓缩。按照一般程序A，该粗产物与4-(4，4，5，5-四 甲基-1，3，2-二氧杂环戊硼烷-2-基)-1H-吲唑7在铃木偶联中使用，在反相HPLC纯化后， 获得化合物305(24mg)。MS(Q1)480(M)+。
实施例230 (2-(1H-吲唑-4-基)-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基)-N-苯基磺酰基甲胺 306
往实施例11的(2-氯-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基)甲胺27(50mg，0.2mmol) 在CH2Cl2(4mL)中的溶液加入Et3N(84μL，0.6mmol)和苯磺酰氯(44μL，0.3mmol)。 将该反应在室温下搅拌18小时，然后用水猝灭。含水层用EtOAc萃取。合并的有机 层用Na2SO4干燥，真空浓缩。按照一般程序A，该粗产物与4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2- 二氧杂环戊硼烷-2-基)-1H-吲唑7在铃木偶联中使用，在反相HPLC纯化后，获得化 合物306(3mg)。MS(Q1)507(M)+。
实施例231 3-((2-(1H-吲唑-4-基)-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基)甲基)-1，1-二甲基 脲 307
往实施例11的(2-氯-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基)甲胺27(50mg，0.2mmol) 在CH2Cl2(4mL)中的溶液加入Et3N(84μL，0.6mmol)和二甲基氨基甲酰氯 (0.3mmol)。将该反应在室温下搅拌18小时，然后用水猝灭。含水层用EtOAc萃取。 合并的有机层用Na2SO4干燥，真空浓缩。按照一般程序A，该粗产物与4-(4，4，5，5-四 甲基-1，3，2-二氧杂环戊硼烷-2-基)-1H-吲唑7在铃木偶联中使用，在反相HPLC纯化后， 获得化合物307(12mg)。MS(Q1)438(M)+。
实施例232 1-(2-(1H-吲唑-4-基)-4-吗啉代噻吩并[2，3-d]嘧啶-6-基)乙醇 308
按照一般程序D，让2-氯-4-吗啉代噻吩并[2，3-d]嘧啶(300mg)与乙醛反应，获 得1-(2-氯-4-吗啉代噻吩并[2，3-d]嘧啶-6-基)乙醇。该粗中间体与4-(4，4，5，5-四甲基 -1，3，2-二氧杂环戊硼烷-2-基)-1H-吲唑7按照一般程序A反应，在反相HPLC纯化后， 获得100.2mg的化合物308。MS(Q1)382.1(M)+。
实施例233 2-(1H-吲唑-4-基)-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基)磺酰胺 309
按照一般程序C，让2-氯-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-磺酰氯17与氯化铵反应。 该中间体粗品然后与4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂环戊硼烷-2-基)-1H-吲唑7按照一 般程序A反应，在反相HPLC纯化后，获得36.3mg的化合物309。MS(Q1)417.1(M)+。
实施例234 2-(2-(1H-吲唑-4-基)-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基)丙-2-胺 310
在-10℃下，将氯化锆(IV)(320mg)加入到410mg的2-(1H-吲唑-4-基)-4-吗啉 代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-甲酰胺在THF中的混合物中。将该反应混合物在-10℃下搅拌 30分钟。加入溴化甲基镁(2.7mL，3.0M二乙醚溶液)。将该反应混合物升温至室温， 搅拌过夜。加入饱和氯化铵水溶液，然后用乙酸乙酯萃取。将有机层干燥(MgSO4)， 蒸发，获得2-(2-氯-6-碘-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基)丙-2-胺(380mg)。
按照一般程序A将2-(2-氯-6-碘-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基)丙-2-胺(30mg) 与4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂环戊硼烷-2-基)-1H-吲唑7按照一般程序A反应，获 得11.5mg的化合物310。MS(Q1)395.0(M)+。
实施例235 3-((2-(1H-吲唑-4-基)-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基)甲基)噁唑烷-2-酮 311
在0℃下，往2-噁唑烷酮(50mg，0.6mmol)在DMF(2mL)中的溶液加入NaH (60％，溶于矿物油中；0.7mmol)。在15分钟后，加入实施例9的6-(溴甲基)-2-氯-4- 吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶30(200mg，0.6mmol)在DMF(0.5mL)中的溶液。将该反 应搅拌15分钟。反应通过加入饱和氯化铵水溶液来猝灭。含水层用EtOAc萃取。合 并的有机层用Na2SO4干燥，过滤，再真空浓缩。按照一般程序A，在铃木偶联中使 用该粗产物与4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂环戊硼烷-2-基)-1H-吲唑7，在反相HPLC 纯化后，获得化合物311(6mg)。MS(Q1)437(M)+。
实施例236 6-((1H-咪唑-1-基)甲基)-2-(1H-吲唑-4-基)-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶 312
往实施例9的6-(溴甲基)-2-氯-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶30(90mg，0.3mmol) 在DMF(3mL)中的溶液加入咪唑(18mg，0.3mmol)和K2CO3(50mg，0.4mmol)。 将所得溶液在室温下搅拌过夜，然后真空浓缩。残留物用水稀释，再过滤。按照一般 程序A，该粗产物与4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂环戊硼烷-2-基)-1H-吲唑7在铃木 偶联中使用，在反相HPLC纯化后，获得化合物312(32mg)。MS(Q1)418(M)+。
实施例237 6-((1H-1，2，4-三唑-1-基)甲基)-2-(1H-吲唑-4-基)-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧 啶 313
往实施例9的6-(溴甲基)-2-氯-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶30(90mg，0.3mmol) 在DMF(3mL)中的溶液加入1，2，4-三唑(18mg，0.3mmol)和K2CO3(50mg，0.4mmol)。 将所得溶液在室温下搅拌过夜，然后真空浓缩。残留物用水稀释，再过滤。按照一般 程序A，该粗产物与4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂环戊硼烷-2-基)-1H-吲唑7在铃木 偶联中使用，在反相HPLC纯化后，获得化合物313(16mg)。MS(Q1)419(M)+。
实施例238 2-(1H-吲唑-4-基)-6-(甲氧基甲基)-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶 314
在0℃下，往实施例3的2-氯-4-吗啉-4-基-噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-甲醛10(500mg) 在甲醇(20mL)中的悬浮液加入硼氢化钠(66mg)。将该反应搅拌2小时，然后用 1:1饱和碳酸氢钠水溶液：水(20mL)猝灭。将该混合物搅拌10分钟，然后过滤，获 得白色固体状的(2-氯-4-吗啉-4-基-噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基)-甲醇(489mg)。
在0℃下，往(2-氯-4-吗啉-4-基-噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基)-甲醇(300mg)在DMF (10mL)中的溶液加入氢化钠(46mg)。将该混合物在0℃下搅拌1小时，然后加入 甲基碘(0.07mL)。将该反应混合物在室温下搅拌16小时，然后用水(20mL)猝灭， 萃取到乙酸乙酯(2×20mL)中。合并的有机层用盐水溶液(2×20mL)洗涤，干燥 (MgSO4)，浓缩，获得黄色固体状的2-氯-6-甲氧基甲基-4-吗啉-4-基-噻吩并[3，2-d] 嘧啶(92mg)。通过一般程序A用2-氯-6-甲氧基甲基-4-吗啉-4-基-噻吩并[3，2-d]嘧啶 (85mg)进行铃木偶联，使用柱色谱法纯化，获得白色固体状的化合物314(24mg)。 NMR：CDCl3：3.41(3H，s，Me)，3.81-3.89(4H，m，CH2)，4.01-4.08(4H，m，CH2)，4.70 (2H，s，CH2)，7.31(1H，s，Ar)，7.42(1H，1，J 8.25，Ar)，7.50(1H，d，J 8.24，Ar)，8.21(1H， d，J 7.21，Ar)，8.96(1H，S，Ar)，10.03(1H，s，NH)。MS：(ESI+)：MH+382.17。
实施例239 6-((苄氧基)甲基)-2-(1H-吲唑-4-基)-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶315
按照制备化合物314的程序，在DMF和氢化钠中的(2-氯-4-吗啉-4-基-噻吩并 [3，2-d]嘧啶-6-基)-甲醇用苄基溴烷基化，获得2-氯-6-苄氧基甲基-4-吗啉-4-基-噻吩并 [3，2-d]嘧啶。通过一般程序A进行2-氯-6-苄氧基甲基-4-吗啉-4-基-噻吩并[3，2-d]嘧啶 和化合物7的铃木偶联。使用柱色谱法纯化，获得化合物315。NMR：CDCl3：3.88-3.94 (4H，m，CH2)，4.09-4.14(4H，m，CH2)，4.69(2H，s，CH2)，4.86(2H，s，CH2)，7.31-7.46 (6H，m，Ar)，7.53(1H，t，J 8.22，Ar)，7.56(1H，t，J 8.24，Ar)，8.30(1H.d，J 6.94，Ar)， 9.03(1H，s，Ar)，10.11(1H，s，NH)。MS：(ESI+)：MH+458.16。
实施例240 2-(1H-吲唑-4-基)-4-吗啉代-6-(苯氧基甲基)噻吩并[3，2-d]嘧啶 316
在0℃下，往苯酚(142mg)在DMF(8mL)中的溶液分批加入氢化钠(64mg)。 将该反应混合物在0℃下搅拌1小时，然后加入6-溴甲基-2-氯-4-吗啉-4-基-噻吩并 [3，2-d]嘧啶(240mg)。将该反应混合物在室温下搅拌16小时，然后用水(20mL)猝 灭，萃取到乙酸乙酯(2×20mL)中。合并的有机层用2M氢氧化钠水溶液(2×20mL) 和盐水溶液(2×20mL)洗涤，干燥(MgSO4)，浓缩，获得白色固体状的2-氯-4-吗 啉-4-基-6-苯氧基甲基-噻吩并[3，2-d]嘧啶(123mg)。
使用标准方法进行2-氯-4-吗啉-4-基-6-苯氧基甲基-噻吩并[3，2-d]嘧啶(112mg) 与化合物7的铃木偶联。使用柱色谱法纯化，获得白色固体状的化合物316(34mg)。 NMR：CDCl3：3.90-3.98(4H，m，CH2)，4.08-4.13(4H，m，CH2)，5.41(2H，s，CH2)， 6.98-7.06(3H，m，Ar)，7.40-7.46(2H，m，Ar)，7.49-7.55(2H，m，Ar)，7.60(1H，d，J.8.22， Ar)，8.30(1H，d，J7.24，Ar)，9.01(1H，s，Ar)，10.14(1H，s，NH)。MS：(ESI+)：MH+ 444.17。
实施例241 6-(((吡啶-2-基)甲氧基)甲基)-2-(1H-吲唑-4-基)-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧 啶 317
按照制备化合物314的程序，在DMF和氢化钠中的(2-氯-4-吗啉-4-基-噻吩并 [3，2-d]嘧啶-6-基)-甲醇用2-吡啶甲基氯烷基化，获得4-(2-氯-6-((吡啶-2-基甲氧基)甲基) 噻吩并[3，2-d]嘧啶-4-基)吗啉。通过一般程序A进行4-(2-氯-6-((吡啶-2-基甲氧基)甲基) 噻吩并[3，2-d]嘧啶-4-基)吗啉和化合物7的铃木偶联。使用柱色谱法纯化，获得化合物 317。NMR：CDCl3：3.80-3.90(4H，m，CH2)，4.01-4.08(4H，m，CH2)，4.72(2H，s，CH2)， 4.88(2H，s，CH2)，7.10-7.14(1H，m，Ar)，7.38(1H，s，Ar)，7.40-7.48(2H，m，Ar)，7.51 (1H，d，J 8.23，Ar)，7.65(1H，t，J 8.22，Ar)，8.18(1H，d，J 7.20，Ar)，8.52(1H，d，J 4.60， Ar)，8.96(1H，s，Ar)，10.06(1H，s，NH)。MS：(ESI+)：MH+459.17。
实施例242 4-吗啉代-2-(1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-5-基)-7-(噻唑-5-基)噻吩并[3，2-d]嘧 啶 318
让2-氯-4-吗啉-4-基-7-噻唑-5-基-噻吩并[3，2-d]嘧啶和5-(4，4，5，5-四甲基-[1，3，2]二 氧杂环戊硼烷-2-基)-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶根据一般程序A反应，获得化合物318。 NMR(DMSO，400MHz)，3.86(4H，t，J＝4.4)，4.09(4H，t，J＝5.2)，6.61-6.63(1H，m)， 7.54-7.57(1H，m)，8.78(2H，s)，9.03(1H，s)，9.20(1H，s)，9.44-9.46(1H，m)，11.88(1H， s)。MS：(ESI+)：MH+＝421。
实施例243 6-(((吡啶-3-基)甲氧基)甲基)-2-(1H-吲唑-4-基)-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧 啶 319
按照制备化合物314的程序，在DMF和氢化钠中的(2-氯-4-吗啉-4-基-噻吩并 [3，2-d]嘧啶-6-基)-甲醇用3-吡啶甲基氯烷基化，获得4-(2-氯-6-((吡啶-3-基甲氧基)甲基) 噻吩并[3，2-d]嘧啶-4-基)吗啉。通过一般程序A进行4-(2-氯-6-((吡啶-3-基甲氧基)甲基) 噻吩并[3，2-d]嘧啶-4-基)吗啉和化合物7的铃木偶联。使用柱色谱法纯化，获得化合物 319。NMR：CDCl3：3.90-3.94(4H，m，CH2)，4.08-4.13(4H，m，CH2)，4.68(2H，s，CH2)， 4.88(2H，s，CH2)，7.30(1H，dd，J 7.79和4.87，Ar)，7.44(1H，s，Ar)，7.51(1H，t，J 8.14， Ar)，7.57(1H，d，J 8.20，Ar)，7.71(1H，d，J 7.79，Ar)，8.28(1H，d，J 7.35，Ar)，8.58(1H， dd，J 4.80和1.47，Ar)，8.63(1H，d，J 1.86，Ar)，9.02(1H，s，Ar)。MS：(ESI+)：MH+ 459.16。
实施例244 6-(((吡啶-4-基)甲氧基)甲基)-2-(1H-吲唑-4-基)-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧 啶 320
按照制备化合物314的程序，在DMF和氢化钠中的(2-氯-4-吗啉-4-基-噻吩并 [3，2-d]嘧啶-6-基)-甲醇用4-吡啶甲基氯烷基化，获得4-(2-氯-6-((吡啶-4-基甲氧基)甲基) 噻吩并[3，2-d]嘧啶-4-基)吗啉。通过一般程序A进行4-(2-氯-6-((吡啶-4-基甲氧基)甲基) 噻吩并[3，2-d]嘧啶-4-基)吗啉和化合物7的铃木偶联。使用柱色谱法纯化，获得化合物 320。NMR：CDCl3：3.90-3.94(4H，m，CH2)，4.08-4.13(4H，m，CH2)，4.68(2H，s，CH2)， 4.92(2H，s，CH2)，7.30(2H，d，J 5.81，Ar)，7.46(1H，s，Ar)，7.51(1H，t，J 8.14，Ar)，7.60 (1H，d，J 8.20，Ar)，8.28(1H，d，J 7.32，Ar)，8.61(2H，d，J 5.27，Ar)，9.01(1H，s，Ar)， 10.14(1H，s，NH)。MS：(ESI+)：MH+459.17。
实施例245 N-((2-(1H-吲唑-4-基)-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基)甲基)-2-羟基-2-甲 基丙酰胺 321
按照一般程序D，让2-氯-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶4(4g)与丙酮反应，获得 相应的叔醇。按照一般程序A，在钯催化的交叉偶联反应中使用75mg的该粗原料， 在反相HPLC纯化之后，获得69mg的化合物321。MS(Q1)395(M)+。
实施例246 2-(2-(1H-吲哚-4-基)-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基)丙-2-醇 322
往实施例11的(2-氯-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基)甲胺27(50mg，0.2mmol) 在DMF(1.5mL)中的溶液依次加入O-(7-氮杂苯并三唑-1-基)-N，N，N’，N’-四甲基脲六 氟磷酸盐(134mg，0.4mmol)、N，N-二异丙基乙胺(190μL，1.1mmol)、2-羟基异丁酸 (53mg，0.5mmol)。将所得溶液在室温下搅拌30分钟。然后加入过量的羟胺盐酸盐， 然后用饱和碳酸氢钠水溶液猝灭反应。含水层用EtOAc萃取。合并的有机层用Na2SO4 干燥，过滤，真空浓缩。按照一般程序A，该粗产物与4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂 环戊硼烷-2-基)-1H-吲唑7在铃木偶联中使用，在反相HPLC纯化后，获得化合物322 (2mg)。MS(Q1)453(M)+。
实施例247 N-((2-(1H-吲唑-4-基)-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基)甲基)-2-羟基乙酰 胺323
往实施例11的(2-氯-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基)甲胺27(50mg，0.2mmol) 在DMF(1.5mL)中的溶液依次加入O-(7-氮杂苯并三唑-1-基)-N，N，N’，N’-四甲基脲六 氟磷酸盐(134mg，0.4mmol)、N，N-二异丙基乙胺(190μL，1.1mmol)、乙醇酸(38mg， 0.5mmol)。将所得溶液在室温下搅拌30分钟。然后加入过量的羟胺盐酸盐，然后用 饱和碳酸氢钠水溶液猝灭反应。含水层用EtOAc萃取。合并的有机层用Na2SO4干燥， 过滤，真空浓缩。按照一般程序A，该粗产物与4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂环戊硼 烷-2-基)-1H-吲唑7在铃木偶联中使用，在反相HPLC纯化后，获得化合物323(26mg)。 MS(Q1)425(M)+。
实施例248 2-(2-(1H-吲哚-4-基)-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基)丙-2-醇 324
往实施例11的(2-氯-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基)甲胺27(50mg，0.2mmol) 在DMF(1.5mL)中的溶液依次加入O-(7-氮杂苯并三唑-1-基)-N，N，N’，N’-四甲基脲六 氟磷酸盐(134mg，0.4mmol)、N，N-二异丙基乙胺(190μL，1.1mmol)、3-(甲基磺酰 基)苯甲酸(102mg，0.5mmol)。将所得溶液在室温下搅拌30分钟。然后加入过量的羟 胺盐酸盐，然后用饱和碳酸氢钠水溶液猝灭反应。含水层用EtOAc萃取。合并的有 机层用Na2SO4干燥，过滤，真空浓缩。按照一般程序A，该粗产物与4-(4，4，5，5-四甲 基-1，3，2-二氧杂环戊硼烷-2-基)-1H-吲唑7在铃木偶联中使用，在反相HPLC纯化后， 获得化合物324(28mg)。MS(Q1)549(M)+。
实施例249 6-((1H-吡唑-1-基)甲基)-2-(1H-吲唑-4-基)-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶 325
往实施例9的6-(溴甲基)-2-氯-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶30(90mg，0.3mmol) 在DMF(3mL)中的溶液加入吡唑(18mg，0.3mmol)和K2CO3(50mg，0.4mmol)。 将所得溶液在室温下搅拌过夜，然后真空浓缩。残留物用水稀释，再过滤。按照一般 程序A，该粗产物与4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂环戊硼烷-2-基)-1H-吲唑7在铃木 偶联中使用，在反相HPLC纯化后，获得化合物325(13mg)。MS(Q1)418(M)+。
实施例250 1-((2-(1H-吲唑-4-基)-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基)甲基)-1H-苯并[d] 咪唑-2(3H)-酮 326
往实施例9的6-(溴甲基)-2-氯-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶30(90mg，0.3mmol) 在DMF(3mL)中的溶液加入2-羟基苯并咪唑(35mg，0.3mmol)和K2CO3(50mg， 0.4mmol)。将所得溶液在室温下搅拌过夜，然后真空浓缩。残留物用水稀释，再过滤。 按照一般程序A，该粗产物与4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂环戊硼烷-2-基)-1H-吲唑7 在铃木偶联中使用，在反相HPLC纯化后，获得化合物326(3mg)。MS(Q1)484(M)+。
实施例251 3-(2-(1H-吲唑-4-基)-4-吗啉代呋喃并[3，2-d]嘧啶-6-基)-N-甲基磺酰基苯胺 327
通过一般程序A，让实施例27的2-氯-6-碘-4-吗啉代呋喃并[3，2-d]嘧啶45与3-(甲 基磺酰基氨基)苯基硼酸反应，获得相应的中间体，在通过快速色谱纯化后，然后与 4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂环戊硼烷-2-基)-1H-吲唑7反应，在通过反相HPLC纯 化后，获得化合物327。MS(Q1)491(M)+。
实施例252 2-(1H-吲唑-4-基)-6-(异噁唑-4-基)-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶 328
在密封微波反应器中，将2-氯-6-碘-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶19(150mg)、84mg 的4-异噁唑硼酸频那醇酯和14mg的二氯化双(三苯基膦)钯(II)在0.7mL的1M Na2CO3水溶液和0.7mL乙腈中加热至100℃，保持10分钟。将该反应混合物蒸发。 粗产物通过快速色谱纯化，用0～20％MeOH/DCM洗脱，获得2-氯-6-(异噁唑-4-基)-4- 吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶(85mg，67％)。
根据一般程序A，将2-氯-6-(异噁唑-4-基)-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶(85mg)与 4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂环戊硼烷-2-基)-1H-吲唑7偶联，获得4.3mg的化合物 328。MS(Q1)405.1(M)+。
实施例253 3-(2-(1H-吲唑-4-基)-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基)-N-乙基苯甲酰胺 329
通过一般程序B，让3-(2-氯-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基)苯甲酸(55mg)与 乙胺反应，获得3-(2-氯-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基)-N-乙基苯甲酰胺。通过一般 程序A，将粗品3-(2-氯-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基)-N-乙基苯甲酰胺(59mg)与 4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂环戊硼烷-2-基)-1H-吲唑7反应，获得14.5mg的化合物 329。MS(Q1)485.1(M)+
实施例254 N-((2-(1H-吲唑-4-基)-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基)甲基)-2-(N-甲基磺 酰基氨基)乙酰胺 330
往实施例11的(2-氯-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基)甲胺27(150mg，0.5mmol) 在DMF(4.5mL)中的溶液依次加入O-(7-氮杂苯并三唑-1-基)-N，N，N’，N’-四甲基脲六 氟磷酸盐(400mg，1mmol)、N，N-二异丙基乙胺(550μL，3.2mmol)、N-Boc甘氨酸 (270mg，1.5mmol)。将所得溶液在室温下搅拌30分钟。加入过量的羟胺盐酸盐，然 后用饱和碳酸氢钠水溶液猝灭反应。含水层用EtOAc萃取。合并的有机层用Na2SO4 干燥，过滤，真空浓缩。粗产物的一部分(0.5mmol)溶于CH2Cl2(15mL)中，然 后加入MeOH(15mL)、Et2O(6mL)和4M HCl的二噁烷溶液(6mL)。将所得混 合物在室温下搅拌过夜。将该反应混合物真空浓缩。将一部分的粗品材料(0.3mmol) 溶于CH2Cl2(8mL)中，加入Et3N(4mL)和甲磺酰氯(450μL，6mmol)。反应混 合物在室温下搅拌过夜。通过加入水猝灭反应，然后用EtOAc萃取。合并的有机层 用Na2SO4干燥，过滤，真空浓缩。按照一般程序A，该粗品材料与4-(4，4，5，5-四甲基 -1，3，2-二氧杂环戊硼烷-2-基)-1H-吲唑7在铃木偶联中使用，在反相HPLC纯化后，获 得化合物330(36mg)。MS(Q1)502(M)+。
实施例255 N-((2-(1H-吲唑-4-基)-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基)甲基)-2-氨基乙酰 胺 331
往实施例11的(2-氯-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基)甲胺27(150mg，0.5mmol) 在DMF(4.5mL)中的溶液依次加入O-(7-氮杂苯并三唑-1-基)-N，N，N’，N’-四甲基脲六 氟磷酸盐(400mg，1mmol)、N，N-二异丙基乙胺(550μL，3.2mmol)、N-Boc甘氨酸 (270mg，1.5mmol)。将所得溶液在室温下搅拌30分钟。加入过量的羟胺盐酸盐，然 后用饱和碳酸氢钠水溶液猝灭反应。含水层用EtOAc萃取。合并的有机层用Na2SO4 干燥，过滤，真空浓缩。粗产物的一部分(0.5mmol)溶于CH2Cl2(15mL)中，然 后加入MeOH(15mL)、Et2O(6mL)和4M HCl的二噁烷溶液(6mL)。将所得混 合物在室温下搅拌过夜。将该反应混合物真空浓缩。按照一般程序A，一部分粗品材 料(0.2mmol)与4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂环戊硼烷-2-基)-1H-吲唑7在铃木偶联 中使用，在反相HPLC纯化后，获得化合物331(2mg)。MS(Q1)424(M)+。
实施例256 2-(1H-吲唑-4-基)-4-吗啉代-6-(1-(4-N-甲基磺酰基哌嗪-1-基)乙基)噻吩并 [3，2-d]嘧啶 332
在-78℃下，往2-氯-4-吗啉-4-基-噻吩并[3，2-d]嘧啶(500mg)在THF(20mL) 中的溶液加入正丁基锂(0.94mL的2.5M己烷溶液)，将该反应在-78℃下搅拌1小时。 然后，加入乙醛(0.33mL)，经16小时将反应升温至室温。该反应用水(20mL)猝 灭，萃取到二氯甲烷(2×20mL)中。将合并的有机层干燥(MgSO4)，真空浓缩， 获得奶油状固体1-(2-氯-4-吗啉-4-基-噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基)-乙醇。
在0℃下，往1-(2-氯-4-吗啉-4-基-噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基)-乙醇(500mg)在二氯 甲烷(20mL)中的溶液加入三乙胺(0.28mL)，然后加入甲磺酰氯(0.14mL)，将该 反应在室温下搅拌16小时。用水(20mL)猝灭反应，萃取到二氯甲烷(2×20mL) 中。合并的有机层用盐水溶液(2×20mL)洗涤，干燥(MgSO4)，真空浓缩，获得 黄色固体状的甲磺酸1-(2-氯-4-吗啉-4-基-噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基)-乙酯。
往甲磺酸1-(2-氯-4-吗啉-4-基-噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基)-乙酯(300mg)在乙腈 (20mL)中的溶液加入N-磺酰基哌嗪酰胺(239mg)和碳酸钾(548mg)，再将反应 在回流下加热16小时。在冷却至室温后，将溶剂在真空中浓缩，将残留物再溶于二 氯甲烷(20mL)，用饱和碳酸氢钠水溶液(2×20mL)、盐水溶液(2×20mL)洗涤， 干燥(MgSO4)，真空浓缩，通过柱色谱法纯化，获得灰白色固体状的2-氯-6-[1-(4- 甲基磺酰基-哌嗪-1-基)乙基]-4-吗啉-4-基-噻吩并[3，2-d]嘧啶。
根据一般程序A，让2-氯-6-[1-(4-甲基磺酰基-哌嗪-1-基)乙基]-4-吗啉-4-基-噻吩并 [3，2-d]嘧啶与4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂环戊硼烷-2-基)-1H-吲唑反应。通过柱色谱 法纯化，获得化合物332。NMR：CDCl3：1.56(3H，d，J7.1，Me)，2.62-2.80(4H，m.CH2)， 2.81(3H，s，Me)，3.26-3.31(4H，m，CH2)，3.95-3.99(4H，m，CH2)，4.02-4.11(5H，m)， 7.45(1H，s，Ar)，7.50(1H，明显三重峰，J8.2，Ar)，7.61(1H，d，J8.2，Ar)，8.28(1H，d，J 7.5，Ar)，9.03(1H，s，Ar)。MS：(ESI+)：MH+528.31。
实施例257 2-((2-(1H-吲唑-4-基)-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基)甲氧基)-N，N-二甲 基乙酰胺 333
在0℃下，往2-氯-4-吗啉-4-基-噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-甲醛(500mg)在甲醇(20mL) 中的悬浮液加入硼氢化钠(66mg)。将该反应搅拌2小时，然后用1:1饱和碳酸氢钠 水溶液-水(20mL)猝灭。将该混合物搅拌10分钟，然后过滤，用水洗，风干，获得 白色固体状的(2-氯-4-吗啉-4-基-噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基)-甲醇(489mg)。
往(2-氯-4-吗啉-4-基-噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基)-甲醇(180mg)在THF(20mL)中 的溶液加入氢化钠(2eq，50mg)，将该混合物在室温下搅拌1小时。然后，加入2- 氯-N，N-二甲基乙酰胺(2eq，0.13ml)，并将该反应在回流下搅拌16小时。在冷却至室 温后，用水(20mL)猝灭反应，萃取到乙酸乙酯(2×20mL)中。合并的有机层用 盐水溶液(2×20mL)洗涤，干燥(MgSO4)，真空浓缩，通过柱色谱法纯化，获得 黄色固体状的2-(2-氯-4-吗啉-4-基-噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基甲氧基)-N，N-二甲基乙酰胺。
根据一般程序A，让2-(2-氯-4-吗啉-4-基-噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基甲氧基)-N，N-二 甲基乙酰胺与4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂环戊硼烷-2-基)-1H-吲唑反应。通过柱色 谱法纯化，获得化合物333。NMR：CDCl3：3.02(6H，s，Me)，3.96-3.99(4H，m，CH2)， 4.09-4.13(4H，m，CH2)，4.31(2H，s，CH2)，4.95(2H，s，CH2)，7.45(1H，s，Ar)，7.50(1H， 明显三重峰，J 8.2，Ar)，7.61(1H，d，J 8.2，Ar)，8.28(1H，d，J 7.5，Ar)，9.03(1H，s，Ar)， 10.30(1H，s，NH)。MS：(ESI+)：MH+453.20。
实施例258 2-(1H-吲唑-4-基)-6-((E)-3-甲氧基丙-1-烯基)-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶 334
在密封微波反应器内，将在1mL的1M Na2CO3水溶液和1mL的乙腈中的2-氯-6- 碘-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶19(150mg)、85mg的(E)-2-(3-甲氧基-1-丙烯-1- 基)-4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂环戊硼烷和14mg的二氯化双(三苯基膦)钯(II)加 热到100℃，保持10分钟。将该反应混合物蒸发。粗产物通过快速色谱纯化，用5～ 50％EtOAc/己烷洗脱，获得2-氯-6-((E)-3-甲氧基丙-1-烯基)-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧 啶(87mg，68％)。通过一般程序A将2-氯-6-((E)-3-甲氧基丙-1-烯基)-4-吗啉代噻吩 并[3，2-d]嘧啶(40mg)与4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂环戊硼烷-2-基)-1H-吲唑7偶 联，获得29.1mg的化合物334。MS(Q1)408.1(M)+。
实施例259 2-(1H-吲唑-4-基)-6-(3-甲氧基苯基)-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶 335
在密封微波反应器内，将在1mL的1M Na2CO3水溶液和1mL的乙腈中的2-氯-6- 碘-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶19(150mg)、66mg的3-甲氧基苯基硼酸和14mg的二 氯化双(三苯基膦)钯(II)加热到100℃，保持20分钟。将该反应混合物蒸发。粗 产物通过快速色谱纯化，用0～50％EtOAc/己烷洗脱，获得2-氯-6-(3-甲氧基苯基)-4- 吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶(94mg，66％)。
通过一般程序A将2-氯-6-(3-甲氧基苯基)-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶(94mg)与 4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂环戊硼烷-2-基)-1H-吲唑7偶联，获得8.1mg的化合物 335。MS(Q1)444.2(M)+。
实施例260 3-(2-(1H-吲唑-4-基)-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基)-N-((S)-2-羟丙基)苯 甲酰胺 336
通过一般程序B，让3-(2-氯-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基)苯甲酸(49mg)与 (S)-(+)-1-氨基-2-丙醇反应，获得3-(2-氯-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基)-N-((S)-2-羟 丙基)苯甲酰胺。然后通过一般程序A，让该3-(2-氯-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6- 基)-N-((S)-2-羟丙基)苯甲酰胺(56mg)与4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂环戊硼烷-2- 基)-1H-吲唑7偶联，获得24.8mg的化合物336。MS(Q1)515.2(M)+。
实施例261 (3-(2-(1H-吲唑-4-基)-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基)苯基)(吗啉代)甲酮 337
通过一般程序B，让3-(2-氯-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基)苯甲酸(49mg)与 吗啉反应，获得3-(2-氯-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基)苯基(吗啉代)甲酮。通过一般 程序A，让3-(2-氯-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基)苯基(吗啉代)甲酮粗品(58mg) 与4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂环戊硼烷-2-基)-1H-吲唑7偶联，获得23.7mg的化合 物337。MS(Q1)527.2(M)+。
实施例262 3-(2-(1H-吲唑-4-基)-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基)苯甲酸 338
通过一般程序A，让该3-(2-氯-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基)苯甲酸与 4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂环戊硼烷-2-基)-1H-吲唑7(100mg)偶联，获得7.6mg 的化合物338。MS(Q1)458.1(M)+。
实施例263 (3-(2-(1H-吲唑-4-基)-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基)苯基)(4-甲基哌嗪 -1-基)甲酮339
通过一般程序B，让3-(2-氯-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基)苯甲酸(60mg)与 1-甲基哌嗪反应，获得3-(2-氯-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基)苯基(4-甲基哌嗪-1-基) 甲酮。通过一般程序A，让粗品3-(2-氯-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基)苯基(4-甲基 哌嗪-1-基)甲酮(71mg)与4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂环戊硼烷-2-基)-1H-吲唑7 偶联，获得22.4mg的化合物339。MS(Q1)540.1(M)+。
实施例264 3-(2-(1H-吲唑-4-基)-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基)-N-(2-(二甲基氨基) 乙基)苯甲酰胺 340
通过一般程序B，让3-(2-氯-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基)苯甲酸(60mg)与 N，N-二甲基乙二胺反应，获得3-(2-氯-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基)-N-(2-二甲基氨 基)乙基)苯甲酰胺。通过一般程序A，让粗品3-(2-氯-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6- 基)-N-(2-二甲基氨基)乙基)苯甲酰胺(73mg)与4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂环戊硼 烷-2-基)-1H-吲唑7偶联，获得16mg的化合物340。MS(Q1)528.0(M)+。
实施例265 N-(3-(2-(1H-吲唑-4-基)-4-吗啉代呋喃并[3，2-d]嘧啶-6-基)苯基)乙酰胺 341
根据一般程序A，将实施例27的2-氯-6-碘-4-吗啉代呋喃并[3，2-d]嘧啶45与3- 乙酰胺基苯基硼酸反应，获得相应的中间体，在用快速色谱纯化后，然后与4-(4，4，5，5- 四甲基-1，3，2-二氧杂环戊硼烷-2-基)-1H-吲唑7反应，通过反相HPLC纯化后，获得化 合物341。MS(Q1)455(M)+。
实施例266 5-(2-(1H-吲唑-4-基)-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基)-N-((S)-2-羟丙基)吡 啶-3-甲酰胺 342
通过一般程序B，让5-(2-氯-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基)吡啶-3-甲酸(40mg) 与(S)-(+)-1-氨基-2-丙醇反应，获得5-(2-氯-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基)-N-((S)-2- 羟丙基)吡啶-3-甲酰胺。通过一般程序A，让粗品5-(2-氯-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶 -6-基)-N-((S)-2-羟丙基)吡啶-3-甲酰胺(46mg)与4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂环戊 硼烷-2-基)-1H-吲唑7偶联，获得7.6mg的化合物342。MS(Q1)516.5(M)+。
实施例267 5-(2-(1H-吲唑-4-基)-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基)-N-(2-(二甲基氨基) 乙基)吡啶-3-甲酰胺 343
通过一般程序B，让5-(2-氯-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基)吡啶-3-甲酸(40mg) 与N，N-二甲基乙二胺反应，获得5-(2-氯-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基)-N-(2-(二甲 基氨基)乙基)吡啶-3-甲酰胺。通过一般程序A，让粗品5-(2-氯-4-吗啉代噻吩并[3，2-d] 嘧啶-6-基)-N-(2-(二甲基氨基)乙基)吡啶-3-甲酰胺(46mg)与4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2- 二氧杂环戊硼烷-2-基)-1H-吲唑7偶联，获得22.3mg的化合物343。MS(Q1)529.0(M)+。
实施例268 5-(2-(1H-吲唑-4-基)-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基)-N-甲基吡啶-3-甲 酰胺 344
通过一般程序B，让5-(2-氯-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基)吡啶-3-甲酸(40mg) 与甲胺盐酸盐反应，获得5-(2-氯-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基)-N-甲基吡啶-3-甲酰 胺。通过一般程序A，让粗品5-(2-氯-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基)-N-甲基吡啶-3- 甲酰胺(41mg)与4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂环戊硼烷-2-基)-1H-吲唑7偶联，获 得10.6mg的化合物344。MS(Q1)472.0(M)+。
实施例269 2-(2-(1H-吲哚-6-基)-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基)丙-2-醇 345
按照一般程序D，让2-氯-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶4(4g)与丙酮反应，获得 相应的叔醇。按照一般程序A，在钯催化的交叉偶联反应中使用75mg的该粗原料， 在反相HPLC纯化之后，获得18mg的化合物345。MS(Q1)395(M)+。
实施例270 2-(4-吗啉代-2-(喹啉-3-基)噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基)丙-2-醇 346
按照一般程序D，2-氯-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶4(2g)与丙酮一起使用，获 得相应的叔醇。按照一般程序A，在钯催化的交叉偶联反应中使用75mg的该粗原料， 在反相HPLC纯化之后，获得8mg的化合物346。MS(Q1)407(M)+。
实施例271 (5-(2-(1H-吲唑-4-基)-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基)吡啶-3-基)(吗啉代) 甲酮 347
通过一般程序B，让5-(2-氯-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基)吡啶-3-甲酸(40mg) 与吗啉反应，获得5-(2-氯-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基)-吡啶-3-基)(吗啉)甲酮。通 过一般程序A，让粗品5-(2-氯-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基)-吡啶-3-基)(吗啉)甲酮 (47mg)与4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂环戊硼烷-2-基)-1H-吲唑7偶联，获得10.6mg 的化合物347。MS(Q1)528.1(M)+。
实施例272 (5-(2-(1H-吲唑-4-基)-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基)吡啶-3-基)(4-甲基 哌嗪-1-基)甲酮 348
通过一般程序B，让5-(2-氯-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基)吡啶-3-甲酸(40mg) 与1-甲基哌嗪反应，获得5-(2-氯-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基)吡啶-3-基)(4-甲基 哌嗪-1-基)甲酮。通过一般程序A，让粗品5-(2-氯-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基) 吡啶-3-基)(4-甲基哌嗪-1-基)甲酮(48mg)与4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂环戊硼烷 -2-基)-1H-吲唑7偶联，获得14.6mg的化合物348。MS(Q1)541.1(M)+。
实施例273 5-(2-(1H-吲唑-4-基)-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基)吡啶-3-甲酸 349
在密封微波反应器内，将在1.5mL的1M Na2CO3水溶液和1.5mL的乙腈中的2- 氯-6-碘-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶19、200mg的3-乙氧基羰基吡啶-5-硼酸频那醇酯 (250mg)和23mg的二氯化双(三苯基膦)钯(II)加热到100℃，保持10分钟。 将该反应混合物蒸发。粗产物通过快速色谱纯化，用10％～100％EtOAc/己烷洗脱， 获得5-(2-氯-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基)吡啶-3-甲酸乙酯(240mg，75％)。
将5-(2-氯-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基)吡啶-3-甲酸乙酯(240mg)和27mg 的氢氧化锂一水合物溶于4mL的THF和4mL的H2O中。将反应在室温下搅拌2小 时。将混合物蒸发，然后加入水。该混合物用1N HCl酸化至pH＝2-3。将所得固体过 滤，用水洗涤，获得5-(2-氯-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基)吡啶-3-甲酸(250mg)。
根据一般程序A，将5-(2-氯-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基)吡啶-3-甲酸(40mg) 与4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂环戊硼烷-2-基)-1H-吲唑7偶联，获得5mg的化合物 349。MS(Q1)459.1(M)+。
实施例274 N-((2-(1H-吲唑-4-基)-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基)甲基)-2-(二甲基氨 基)乙酰胺350
往实施例11的(2-氯-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基)甲胺27(50mg，0.2mmol) 在CH2Cl2(4mL)中的溶液加入Et3N(84μL，0.6mmol)和二甲基甘氨酸乙醚 (0.3mmol)。将该反应在室温下搅拌18-48小时，然后用水猝灭。含水层用EtOAc 萃取。合并的有机层用Na2SO4干燥，真空浓缩，获得N-((2-氯-4-吗啉代噻吩并[3，2-d] 嘧啶-6-基)甲基)-2-(二甲基氨基)乙酰胺，按照一般程序A在铃木偶联中使用。粗物质 通过反相HPLC纯化，获得化合物350(10mg)。MS(Q1)452(M)+。
实施例275 2-(4-吗啉代-2-(1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-5-基)噻吩并[2，3-d]嘧啶-6-基)丙 -2-醇351
让2-(2-氯-4-吗啉代噻吩并[2，3-d]嘧啶-6-基)丙-2-醇(100mg)和5-(4，4，5，5-四甲基 -1，3，2-二氧杂环戊硼烷-2-基)-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶根据一般程序A反应，在反相 HPLC纯化之后，获得120mg的化合物351。MS(Q1)396.2(M)+。
实施例276 N-(3-(2-(1H-吲唑-4-基)-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基)苯基)-N-甲基乙 酰胺 352
在密封微波反应器内，将在1.5mL的1M Na2CO3水溶液和1.5mL的乙腈中的2- 氯-6-碘-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶19、129mg的3-乙酰胺基苯基硼酸(250mg)和 23mg的二氯化双(三苯基膦)钯(II)加热到100℃，保持15分钟。在反应结束后， 将该反应混合物蒸发。粗产物通过快速色谱纯化，用20％～100％EtOAc/己烷洗脱， 获得N-(3-(2-氯-6-碘-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基)苯基)乙酰胺(530mg，53％)。
往60mg的N-(3-(2-氯-6-碘-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基)苯基)乙酰胺和78mg 的碳酸铯在DMF中的溶液加入12μL的碘甲烷。将该反应混合物在室温下搅拌2小 时。该混合物用乙酸乙酯稀释，用水洗涤。将有机层干燥(MgSO4)，蒸发，获得N-(3-(2- 氯-6-碘-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基)苯基)-N-甲基乙酰胺。
根据一般程序A，将N-(3-(2-氯-6-碘-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基)苯基)-N-甲 基乙酰胺(62mg)与4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂环戊硼烷-2-基)-1H-吲唑7偶联， 获得化合物352。MS(Q1)485.2(M)+。
实施例277 (2-(1H-吲唑-4-基)-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基)(4-N-甲基磺酰基哌啶 -4-基)甲醇 353
将溶于20mL二氯甲烷中的4-(羟甲基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(1g)与2g的戴斯马丁 氧化剂结合，搅拌2小时，用塞力特硅藻土过滤，用饱和碳酸氢钠溶液萃取，再蒸发。 将粗产物置于柱子中，分离出325mg的醛，4-甲酰基哌啶-1-甲酸叔丁酯。按照一般程 序D，让260mg 2-氯-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶4与325mg4-甲酰基哌啶-1-甲酸叔丁 酯反应，获得100mg的4-((2-氯-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基)(羟基)甲基)哌啶-1- 甲酸叔丁酯。在含有0.5mL甲醇的10mLDCM中使用0.125mL的4.0M HCl的二噁烷 溶液从100mg的所述醇中脱除Boc基团。几小时后，蒸发DCM、甲醇和HCl。粗品 胺，(2-氯-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基)(哌啶-4-基)甲醇在3mL DCM和0.04mL三 乙胺中用0.03甲磺酰氯进行甲磺酸化。然后，按照一般程序A将4-N-甲基磺酰基哌 啶基化合物与4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂环戊硼烷-2-基)-1H-吲唑7偶联，在反相 HPLC纯化之后，获得70mg的化合物353。MS(Q1)530(M)+。
实施例278 1-(2-(1H-吲唑-4-基)-4-吗啉代呋喃并[3，2-d]嘧啶-6-基)乙醇354；和对映 体：(S)-1-(2-(1H-吲唑-4-基)-4-吗啉代呋喃并[3，2-d]嘧啶-6-基)乙醇294和(R)-1-(2-(1H- 吲唑-4-基)-4-吗啉代呋喃并[3，2-d]嘧啶-6-基)乙醇295
在-78℃下，往实施例19的2-氯-4-吗啉代呋喃并[3，2-d]嘧啶38(0.3mmol)溶于 THF(3ml)中的溶液加入1.6M正丁基锂溶液(0.39mmol)。反应混合物搅拌30分 钟，此时，加入乙醛(1.2mmol)。将反应搅拌1小时，用冰猝灭，再升温至室温。含 水层用二氯甲烷萃取，有机层用硫酸钠过滤。将有机相浓缩，获得1-(2-氯-4-吗啉代呋 喃并[3，2-d]嘧啶-6-基)乙醇(72mg)。
将1-(2-氯-4-吗啉代呋喃并[3，2-d]嘧啶-6-基)乙醇(0.25mmol)溶于乙腈(1.5mL) 中，用4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂环戊硼烷-2-基)-1H-吲唑(0.62mmol)、 PdCl2(PPh3)2(0.025mmol)和1M乙酸钾水溶液(0.75mmol)处理。将管形瓶密封， 在微波反应器内在搅拌的同时加热至150℃，保持14分钟。将粗反应混合物过滤和浓 缩。外消旋产物通过反相色谱法纯化，获得外消旋产物354。外消旋产物354的手性 色谱法分离出两种对映体294和295。
实施例279 2-(1H-吲唑-4-基)-4-吗啉代-6-((吡啶-3-基氧基)甲基)噻吩并[3，2-d]嘧啶 355
在40℃下，往2-氯-4-吗啉-4-基-噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-甲醛(900mg)在甲苯(20mL) 中的悬浮液加入三溴化磷(0.10mL)，将该反应混合物在100℃下加热16小时。在冷 却到室温之后，该反应物用二氯甲烷(40mL)稀释，用饱和碳酸氢钠水溶液(2×40mL) 洗涤。将有机层干燥(MgSO4)，真空浓缩，获得黄色固体状的6-溴甲基-2-氯-4-吗啉 -4-基-噻吩并[3，2-d]嘧啶。
往3-羟基吡啶(102mg)在THF(10mL)中的溶液加入氢化钠(43mg)，将反 应在室温下搅拌1小时。然后，加入6-溴甲基-2-氯-4-吗啉-4-基-噻吩并[3，2-d]嘧啶 (150mg)，将反应在室温下搅拌16小时。用水(20mL)猝灭反应，萃取到乙酸乙酯 (2×20mL)中。合并的有机层用盐水溶液(2×20mL)洗涤，干燥(MgSO4)，真 空浓缩，通过柱色谱法纯化，获得白色固体状的2-氯-4-吗啉-4-基-6-苯氧基甲基-噻吩 并[3，2-d]嘧啶。
按照一般程序A，让2-氯-4-吗啉-4-基-6-苯氧基甲基-噻吩并[3，2-d]嘧啶与 4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂环戊硼烷-2-基)-1H-吲唑反应。通过柱色谱法纯化，获得 化合物355。NMR：CDCl3：3.81-3.84(4H，m，CH2)，4.02-4.05(4H，m，CH2)，5.41(2H， s，CH2)，7.12-7.15(1H，m，Ar)，7.21-7.23(1H，m，Ar)，7.42-7.43(1H，m，Ar)，7.45(1H，s， Ar)，7.50(1H，d，J8.2，Ar)，8.28(1H，d，J7.5，Ar)，8.40-8.42(1H，m，Ar)，9.03(1H，s， Ar)。MS：(ESI+)：MH+445.18。
实施例280 -7-甲基-6-(5-(甲基磺酰基)吡啶-3-基)-4-吗啉代-2-(1H-吡咯并[2，3-b]吡啶 -5-基)噻吩并[3，2-d]嘧啶 356
通过一般程序F，将2-氯-6-碘-7-甲基-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶(150mg)与3- 甲磺酰基氨基甲基苯硼酸偶联，然后与7-氮杂吲哚-5-硼酸频那醇酯反应。产物通过反 相HPLC纯化，获得79mg的化合物356。MS(Q1)507.1(M)+。
实施例281 6-((六氢-2-甲基磺酰基吡咯并[3，4-c]吡咯-5(1H)-基)甲基)-2-(1H-吲唑-4- 基)-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶 357
往溶于1，2-二氯乙烷(2mL)的实施例3的中间体2-氯-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧 啶-6-甲醛10(100mg，0.35mmol)中依次加入乙酸(20μL，0.35mmol)、2-BOC-六氢 -吡咯并[3，4-c]吡咯(98mg，0.5mmol)和Na(OAc)3BH(90mg，0.42mmol)。将该反应 在室温下搅拌过夜。用水猝灭反应，用DCM萃取。合并的有机层用Na2SO4干燥，过 滤，再真空浓缩。粗产物溶于CH2Cl2(10mL)中，然后加入MeOH(15mL)、Et2O (2mL)和4M HCl的二噁烷溶液(7mL)。将所得混合物在室温下搅拌过夜。将反应 混合物在真空中浓缩。将粗物质溶于CH2Cl2(5mL)中，加入Et3N(4mL)和甲磺 酰氯(54μL，0.7mmol)。将反应混合物在室温下搅拌过夜。反应通过加入水来猝灭， 然后用EtOAc萃取。合并的有机层用Na2SO4干燥，过滤，再真空浓缩。根据一般程 序A，在铃木偶联反应中使用该粗物质与4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂环戊硼烷-2- 基)-1H-吲唑7，在反相HPLC纯化之后，获得化合物357(21mg)。MS(Q1)540(M)+。
实施例282 3-(2-(1H-吲唑-4-基)-7-甲基-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基)-N-甲基苯 甲酰胺 358
在密封微波反应器内，将在1M Na2CO3水溶液(0.5mL)和乙腈(0.5mL)中的 实施例12的2-氯-6-碘-7-甲基-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶(0.1g，0.3mmol)、3-(N-甲 基氨基羰基)苯硼酸(50mg，0.3mmol)和二氯化双(三苯基膦)钯(II)(9mg，13μmol) 加热到100℃，保持10分钟。在反应完成后，将4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂环戊硼 烷-2-基)-1H-吲唑7(122mg，0.5mmol)、二氯化双(三苯基膦)钯(II)(9mg，13μmol)、 1M Na2CO3水溶液(1mL)和乙腈(1mL)加入到同一罐中。在密封微波反应器中， 将该反应混合物加热到150℃，保持20分钟。该混合物用EtOAc和CH2Cl2萃取。将 合并的有机层浓缩，在反相HPLC纯化后，获得化合物358(2mg)。MS(Q1)485(M)+。
实施例283 N-(3-(2-(1H-吲唑-4-基)-7-甲基-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基)苯基)乙 酰胺 359
在密封微波反应器内，将在1M Na2CO3水溶液(0.5mL)和乙腈(0.5mL)中的 实施例12的2-氯-6-碘-7-甲基-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶(0.1g，0.3mmol)、3-乙酰胺 基苯硼酸(50mg，0.3mmol)和二氯化双(三苯基膦)钯(II)(9mg，13μmol)加热 到100℃，保持10分钟。在反应完成后，将4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂环戊硼烷-2- 基)-1H-吲唑7(122mg，0.5mmol)、二氯化双(三苯基膦)钯(II)(9mg，13μmol)、 1M Na2CO3水溶液(1mL)和乙腈(1mL)加入到同一罐中。在密封微波反应器中， 将该反应混合物加热到150℃，保持20分钟。该混合物用EtOAc和CH2Cl2萃取。将 合并的有机层浓缩，在反相HPLC纯化后，获得化合物359(10mg)。MS(Q1)485(M)+。
实施例284 2-(1H-吲唑-4-基)-7-甲基-6-(3-(甲基磺酰基)苯基)-4-吗啉代噻吩并[3，2-d] 嘧啶 360
在密封微波反应器内，将在1M Na2CO3水溶液(3mL)和乙腈(3mL)中的实 施例12的2-氯-6-碘-7-甲基-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶(0.6g，1.5mmol)、3-(甲磺酰 基)苯基硼酸(0.3g，1.5mmol)和二氯化双(三苯基膦)钯(II)(53mg，80μmol) 加热到100℃，保持10分钟。在反应完成后，分离有机层，含水层用EtOAc萃取。 合并的有机层在真空中浓缩。将一部分残留物(0.38mmol)溶于1M Na2CO3(1.5mL) 和CH3CN(1.5mL)中，以及将4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂环戊硼烷-2-基)-1H-吲 唑7(0.2g，0.8mmol)和二氯化双(三苯基膦)钯(II)(13mg，20μmol)加入到同 一罐内。在密封微波反应器内将该反应混合物加热到150℃，保持30分钟。该混合物 用EtOAc和CH2Cl2萃取。将合并的有机层浓缩，在反相HPLC纯化后，获得化合物 360(90mg)。MS(Q1)506(M)+。
实施例285 2-(1H-吲唑-4-基)-6-(4-甲氧基吡啶-3-基)-7-甲基-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧 啶361
在密封微波反应器内，将在1M Na2CO3水溶液(0.5mL)和乙腈(0.5mL)中的 实施例12的2-氯-6-碘-7-甲基-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶(0.1g，0.3mmol)、4-甲氧基 -3-吡啶硼酸(42mg，0.3mmol)和二氯化双(三苯基膦)钯(II)(9mg，13μmol) 加热到100℃，保持10分钟。在反应完成后，将4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂环戊硼 烷-2-基)-1H-吲唑7(122mg，0.5mmol)、二氯化双(三苯基膦)钯(II)(9mg，13μmol)、 1M Na2CO3水溶液(1mL)和乙腈(1mL)加入到同一罐中。在密封微波反应器中， 将该反应混合物加热到150℃，保持20分钟。该混合物用EtOAc和CH2Cl2萃取。将 合并的有机层浓缩，在反相HPLC纯化后，获得化合物361(28mg)。MS(Q1)459(M)+。
实施例286 N-((2-(1H-吲唑-4-基)-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基)甲基)-3-甲氧基苯 甲酰胺 362
将实施例11的(2-氯-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基)甲胺27(50.0mg，0.17mM) 溶于1.5mL DMF中。在该溶液中加入77.6mg(3.0eq)的对茴香酸、129.3mg(2.0eq) 的HATU和0.18μL(6.0eq)DIPEA，将该反应在40℃下加热18小时。通过HPLC 确认完全反应，将2.0当量的NH2OH·H2O加入到该冷却的反应物中，并且将反应物 搅拌10分钟。该反应物用饱和碳酸氢钠溶液稀释，用EtOAc萃取，用盐水洗涤，用 MgSO4干燥，在真空中浓缩。该中间体通过快速色谱(EtOAc/己烷)纯化，随后按 照一般程序A与4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂环戊硼烷-2-基)-1H-吲唑7进行铃木偶 联。通过LCMS证实完全反应，反应进行真空浓缩，在RP-HPLC纯化后，获得18.9mg 的最终产物(38％收率)。MS(Q1)501.3(M)+。
实施例287 N-((2-(1H-吲唑-4-基)-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基)甲基)-4-甲氧基苯 甲酰胺 363
将实施例11的(2-氯-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基)甲胺27(50.0mg，0.17mM) 溶于1.5mL DMF中。在该溶液中加入77.6mg(3.0eq)的对茴香酸、129.3mg(2.0eq) 的HATU和0.18μL(6.0eq)DIPEA，将该反应在40℃下加热18小时。通过HPLC 确认完全反应，将2.0当量的NH2OH·H2O加入到该冷却的反应物中，并且将反应物 搅拌10分钟。该反应物用饱和碳酸氢钠溶液稀释，用EtOAc萃取，用盐水洗涤，用 MgSO4干燥，在真空中浓缩。该中间体通过快速色谱(EtOAc/己烷)纯化，随后按 照一般程序A与4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂环戊硼烷-2-基)-1H-吲唑7进行铃木偶 联。通过LCMS证实完全反应，反应进行真空浓缩，在RP-HPLC纯化后，获得18.9mg 的化合物363(38％收率)。MS(Q1)501.3(M)+。
实施例288 N-((2-(1H-吲唑-4-基)-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基)甲基)-4-甲氧基苯 胺 364
往含有溶于3mL DMF中的实施例9的6-(溴甲基)-2-氯-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧 啶30(54.8mg，0.16mM)的20mL管形瓶内加入19.7mg(1.0eq)对茴香胺和30.4mg (1.4eq)K2CO3。将该管形瓶封盖，将反应在室温下搅拌过夜。通过LCMS证实完全 反应，所得中间体通过快速色谱纯化，获得42.6mg的产物(收率68％)。按照一般程 序A，该中间体与4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂环戊硼烷-2-基)-1H-吲唑7反应。通 过LCMS证实完全反应，将反应在真空中浓缩，在RP-HPLC纯化后，获得24.7mg 的化合物364(47％收率)。MS(Q1)473.3(M)+。
实施例289 2-(1H-吲唑-4-基)-6-((2-甲基-1H-咪唑-1-基)甲基)-4-吗啉代噻吩并[3，2-d] 嘧啶 365
往含有溶于3mL DMF中的实施例9的6-(溴甲基)-2-氯-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧 啶30(54.8mg，0.16mM)的20mL管形瓶内加入13.14mg(1.0eq)2-甲基咪唑和30.4mg (1.4eq)K2CO3。将该管形瓶封盖，将反应在室温下搅拌过夜。通过LCMS证实完全 反应，所得中间体通过快速色谱纯化，获得40mg的产物(收率71％)。按照一般程 序A，该中间体与4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂环戊硼烷-2-基)-1H-吲唑7反应。通 过LCMS证实完全反应，将反应在真空中浓缩，在RP-HPLC纯化后，获得24.3mg 的化合物365(51％收率)。MS(Q1)432.2(M)+。
实施例290 N-((2-(1H-吲唑-4-基)-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基)甲基)-2-甲氧基苯 胺 366
往含有溶于3mL DMF中的实施例9的6-(溴甲基)-2-氯-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧 啶30(54.8mg，0.16mM)的20mL管形瓶内加入19.7mg(1.0eq)邻茴香胺和30.4mg (1.4eq)K2CO3。将该管形瓶封盖，将反应在室温下搅拌过夜。通过LCMS证实完全 反应，所得中间体通过快速色谱纯化，获得40mg的产物(收率64％)。按照一般程 序A，该中间体与4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂环戊硼烷-2-基)-1H-吲唑7反应。通 过LCMS证实完全反应，将反应在真空中浓缩，在RP-HPLC纯化后，获得23.0mg 的化合物366(49％收率)。MS(Q1)473.3(M)+。
实施例291 3-((2-(1H-吲唑-4-基)-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基)甲基氨基)-N-甲基 苯甲酰胺 367
往含有溶于3mL DMF中的实施例9的6-(溴甲基)-2-氯-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧 啶30(54.8mg，0.16mM)的20mL管形瓶内加入24.0mg(1.0eq)3-氨基苯甲酰基甲基 酰胺和30.4mg(1.4eq)K2CO3。将该管形瓶封盖，将反应在室温下搅拌过夜。通过 LCMS证实完全反应，所得中间体通过快速色谱纯化，获得50.1mg的产物(收率 75％)。按照一般程序A，该中间体与4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂环戊硼烷-2-基)-1H- 吲唑7反应。通过LCMS证实完全反应，将反应在真空中浓缩，在RP-HPLC纯化后， 获得33.3mg的化合物367(56％收率)。MS(Q1)500.3(M)+。
实施例292 N-((2-(1H-吲唑-4-基)-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基)甲基)-6-甲氧基吡 啶-3-胺 368
往含有溶于3mL DMF中的实施例9的6-(溴甲基)-2-氯-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧 啶30(54.8mg，0.16mM)的20mL管形瓶内加入19.9mg(1.0eq)5-氨基-2-甲氧基吡啶 和30.4mg(1.4eq)K2CO3。将该管形瓶封盖，将反应在室温下搅拌过夜。通过LCMS 证实完全反应，所得中间体通过快速色谱纯化，获得56.0mg的产物(收率89％)。按 照一般程序A，该中间体与4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂环戊硼烷-2-基)-1H-吲唑7 反应。通过LCMS证实完全反应，将反应在真空中浓缩，在RP-HPLC纯化后，获得 8.8mg的化合物368(12％收率)。MS(Q1)474.2(M)+。
实施例293 N-((2-(1H-吲唑-4-基)-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基)甲基)吡啶-3-胺 369
往含有溶于3mL DMF中的实施例9的6-(溴甲基)-2-氯-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧 啶30(54.8mg，0.16mM)的20mL管形瓶内加入15.06mg(1.0eq)3-氨基吡啶和30.4mg (1.4eq)K2CO3。将该管形瓶封盖，将反应在室温下搅拌过夜。通过LCMS证实完全 反应，所得中间体通过快速色谱纯化，获得55.0mg的产物(收率95％)。按照一般程 序A，该中间体与4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂环戊硼烷-2-基)-1H-吲唑7反应。通 过LCMS证实完全反应，将反应在真空中浓缩，在RP-HPLC纯化后，获得1.5mg 的化合物369(2％收率)。MS(Q1)444.2(M)+。
实施例294 N-((2-(1H-吲唑-4-基)-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基)甲基)-4-吗啉代苯 胺 370
往含有溶于3mL DMF中的实施例9的6-(溴甲基)-2-氯-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧 啶30(54.8mg，0.16mM)的20mL管形瓶内加入28.5mg(1.0eq)4-吗啉代苯胺和30.4mg (1.4eq)K2CO3。将该管形瓶封盖，将反应在室温下搅拌过夜。通过LCMS证实完全 反应，所得中间体通过快速色谱纯化，获得60.0mg的产物(收率84％)。按照一般程 序A，该中间体与4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂环戊硼烷-2-基)-1H-吲唑7反应。通 过LCMS证实完全反应，将反应在真空中浓缩，在RP-HPLC纯化后，获得11.2mg 的化合物370(16％收率)。MS(Q1)528.3(M)+。
实施例295 N-((2-(1H-吲唑-4-基)-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基)甲基)-1H-吡唑-5- 胺 371
往含有溶于3mL DMF中的实施例9的6-(溴甲基)-2-氯-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧 啶30(54.8mg，0.16mM)的20mL管形瓶内加入13.3mg(1.0eq)3-氨基吡唑和30.4mg (1.4eq)K2CO3。将该管形瓶封盖，将反应在室温下搅拌过夜。通过LCMS证实完全 反应，所得中间体通过快速色谱纯化，获得46mg的产物(收率82％)。按照一般程 序A，该中间体与4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂环戊硼烷-2-基)-1H-吲唑7反应。通 过LCMS证实完全反应，将反应在真空中浓缩，在RP-HPLC纯化后，获得15.3mg 的化合物371(27％收率)。MS(Q1)433.2(M)+。
实施例296 N-((2-(1H-吲唑-4-基)-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基)甲基)-1，3-二氢苯 并[c]噻吩-1，1-二氧化物-5-胺 372
往含有溶于3mL DMF中的实施例9的6-(溴甲基)-2-氯-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧 啶30(54.8mg，0.16mM)的20mL管形瓶内加入29.3mg(1.0eq)5-氨基-2，3-二氢 -1H-2-λ-6-苯并[c]噻吩-2，2-二酮和30.4mg(1.4eq)K2CO3。将该管形瓶封盖，将反应在 室温下搅拌过夜。通过LCMS证实完全反应，所得中间体通过快速色谱纯化，获得 57.5mg的产物(收率80％)。按照一般程序A，该中间体与4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2- 二氧杂环戊硼烷-2-基)-1H-吲唑7反应。通过LCMS证实完全反应，将反应在真空中 浓缩，在RP-HPLC纯化后，获得17.4mg的化合物372(25％收率)。MS(Q1)533.2(M)+。
实施例297 N-((2-(1H-吲唑-4-基)-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基)甲基)-6-吗啉代吡 啶-3-胺 373
往含有溶于3mL DMF中的实施例9的6-(溴甲基)-2-氯-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧 啶30(54.8mg，0.16mM)的20mL管形瓶内加入28.7mg(1.0eq)3-氨基-6-吗啉代-吡啶 和30.4mg(1.4eq)K2CO3。将该管形瓶封盖，将反应在室温下搅拌过夜。通过LCMS 证实完全反应，所得中间体通过快速色谱纯化，获得58.0mg的产物(收率81％)。按 照一般程序A，该中间体与4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂环戊硼烷-2-基)-1H-吲唑7 反应。通过LCMS证实完全反应，将反应在真空中浓缩，在RP-HPLC纯化后，获得 34.8mg的化合物373(51％收率)。MS(Q1)529.3(M)+。
实施例298 N1-((2-(1H-吲唑-4-基)-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基)甲基)-3-甲基磺 酰基氨基苯-1-胺 374
往含有溶于3mL DMF中的实施例9的6-(溴甲基)-2-氯-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧 啶30(54.8mg，0.16mM)的20mL管形瓶内加入29.8mg(1.0eq)N-(3-氨基苯基)甲烷磺 酰胺和30.4mg(1.4eq)K2CO3。将该管形瓶封盖，将反应在室温下搅拌过夜。通过 LCMS证实完全反应，所得中间体通过快速色谱纯化，获得20.0mg的产物(收率 28％)。按照一般程序A，该中间体与4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂环戊硼烷-2-基)-1H- 吲唑7反应。通过LCMS证实完全反应，将反应在真空中浓缩，在RP-HPLC纯化后， 获得14.3mg的化合物374(53％收率)。MS(Q1)536.2(M)+。
实施例299 N-((2-(1H-吲唑-4-基)-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基)甲基)-3-(甲基磺酰 基)苯胺 375
往含有溶于3mL DMF中的实施例9的6-(溴甲基)-2-氯-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧 啶30(54.8mg，0.16mM)的20mL管形瓶内加入24.5mg(1.0eq)3-(甲基磺酰基)苯胺和 30.4mg(1.4eq)K2CO3。将该管形瓶封盖，将反应在室温下搅拌过夜。通过LCMS证 实完全反应，所得中间体通过快速色谱纯化，获得25.6mg的产物(收率36％)。按照 一般程序A，该中间体与4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂环戊硼烷-2-基)-1H-吲唑7反 应。通过LCMS证实完全反应，将反应在真空中浓缩，在RP-HPLC纯化后，获得 11.8mg的化合物375(38％收率)。MS(Q1)521.2(M)+。
实施例300 (2-(1H-吲唑-4-基)-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基)-N-环丙基磺酰基甲 胺 376
按照一般程序K，让由实施例11得到的(2-氯-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基)甲 胺27(53.2mg，0.19mM)与环丙烷磺酰氯(2.2eq)反应，随后与4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2- 二氧杂环戊硼烷-2-基)-1H-吲唑7进行铃木偶联。通过LCMS证实完全反应，将反应 在真空中浓缩，在RP-HPLC纯化之后，获得16.7mg的化合物376(收率40％)。 MS(Q1)471.3(M)+。
实施例301 N-((2-(1H-吲唑-4-基)-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基)甲基)-2-(3-甲氧基 苯基)乙酰胺 377
按照一般程序K，让由实施例11得到的(2-氯-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基)甲 胺27(53.2mg，0.19mM)与3-甲氧基苯基乙酰氯(2.2eq)反应，随后与4-(4，4，5，5- 四甲基-1，3，2-二氧杂环戊硼烷-2-基)-1H-吲唑7进行铃木偶联。通过LCMS证实完全 反应，将反应在真空中浓缩，在RP-HPLC纯化之后，获得16.0mg的化合物377(收 率33％)。MS(Q1)515.3(M)+。
实施例302 N-((2-(1H-吲唑-4-基)-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基)甲基)-2-(4-甲氧基 苯基)乙酰胺 378
按照一般程序K，让由实施例11得到的(2-氯-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基)甲 胺27(53.2mg，0.19mM)与4-甲氧基苯基乙酰氯(2.2eq)反应，随后与4-(4，4，5，5- 四甲基-1，3，2-二氧杂环戊硼烷-2-基)-1H-吲唑7进行铃木偶联。通过LCMS证实完全 反应，将反应在真空中浓缩，在RP-HPLC纯化之后，获得18.8mg的化合物378(收 率42％)。MS(Q1)515.3(M)+。
实施例303 (2-(1H-吲唑-4-基)-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基)-N-甲基磺酰基甲胺 379
按照一般程序K，让由实施例11得到的(2-氯-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基)甲 胺27(53.2mg，0.19mM)与异丙基磺酰氯(2.2eq)反应，随后与4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2- 二氧杂环戊硼烷-2-基)-1H-吲唑7进行铃木偶联。通过LCMS证实完全反应，将反应 在真空中浓缩，在RP-HPLC纯化之后，获得2.8mg的化合物379(收率17％)。MS (Q1)473.2(M)+。
实施例304 2-(N-((2-(1H-吲唑-4-基)-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基)甲基)-N，N-双 -(N-环丙基乙酰胺)-甲胺 380
按照一般程序K，往由实施例11得到的(2-氯-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基)甲 胺27(110mg，0.39mM)在5mL DMF中的溶液加入48.2μL(1.06eq)2，6--二甲基吡啶 和N1-环丙基-2-氯乙酰胺(1.2eq)，随后与4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂环戊硼烷-2- 基)-1H-吲唑7进行铃木偶联。通过LCMS证实完全反应，将反应在真空中浓缩，在 RP-HPLC纯化之后，获得10.0mg的化合物380(收率22％)。MS(Q1)561.3(M)+。
实施例305 1-((2-(1H-吲唑-4-基)-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基)甲基)-N-甲基磺酰 基氮杂环丁烷-3-胺 381
往实施例3的2-氯-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-甲醛10(100mg，0.35mmol)在 1，2-二氯乙烷(2mL)中的溶液依次添加醋酸(20μL，0.35mmol)，3-N-BOC-氨基氮杂 环丁烷(78mg，0.5mmol)和Na(OAc)3BH(90mg，0.42mmol)。将反应在室温下搅拌 过夜，然后用水猝灭，用DCM萃取。合并的有机层用Na2SO4干燥，过滤，真空浓 缩。将粗产物溶于CH2Cl2(10mL)，添加MeOH(10mL)和4M HCl二噁烷溶液(10mL)。 将所得混合物在室温下搅拌1小时，然后真空浓缩。将粗物质溶于CH2Cl2(5mL)， 添加Et3N(4mL)和甲磺酰氯(110μL，1.4mmol)。将该反应混合物在室温下搅拌过 夜，然后通过添加水来猝灭，用EtOAc萃取。用Na2SO4将合并的有机层干燥，过滤， 真空浓缩，获得N-(1-((2-氯-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基)甲基)氮杂环丁烷-3-基) 甲烷磺酰胺，按照一般程序A，它与4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂环戊硼烷-2-基)-1H- 吲唑7进行铃木偶联反应，在反相HPLC纯化后，获得化合物381(2mg)。MS(Q1) 500(M)+。
实施例306 2-((2-(1H-吲唑-4-基)-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基)甲基氨基)-N-环丙 基乙酰胺 382
按照一般程序K，往由实施例11得到的(2-氯-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基)甲 胺27(110mg，0.39mM)在5mL DMF中的溶液添加48.2μL(1.06eq)2，6-二甲基吡啶 和N1-环丙基-2-氯乙酰胺(1.2eq)，随后与4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂环戊硼烷-2- 基)-1H-吲唑7进行铃木偶联。通过LCMS证实完全反应，将反应在真空中浓缩，在 RP-HPLC纯化之后，获得6.5mg的化合物382(收率40％)。MS(Q1)464.3(M)+。
实施例307 N-((2-(1H-吲唑-4-基)-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基)甲基)-2-(甲基磺 酰基)乙胺 383
往N-(2-溴乙基)邻苯二甲酰亚胺(500mg)在DMSO(8mL)中的混合物添加硫 代甲醇钠(152mg)，将反应在室温下搅拌16小时。然后添加水(2mL)，将该混合物 在室温下搅拌10分钟。反应用水(20mL)稀释，萃取到乙酸乙酯(2×20mL)中。 合并的有机层用盐水溶液(2×20mL)洗涤，干燥(MgSO4)，真空浓缩，获得白色固 体状的2-(2-甲基硫烷基-乙基)-异吲哚-1，3-二酮。
往2-(2-甲基硫烷基-乙基)-异吲哚-1，3-二酮(400mg)在甲醇(10mL)中的溶液 添加过硫酸氢钾制剂(1.67g)在水(10mL)中的溶液，将反应在室温下搅拌16小时。 该反应然后用水(20mL)稀释，萃取到二氯甲烷(2×20mL)中。合并的有机层用盐 水溶液(2×20mL)洗涤，干燥(MgSO4)，真空浓缩，获得白色固体状的2-(2-甲基磺 酰基-乙基)-异吲哚-1，3-二酮。
往2-(2-甲基磺酰基-乙基)-异吲哚-1，3-二酮(387mg)在乙醇(10mL)中的溶液 添加肼一水合物(0.60mL)，将该反应在回流下加热3小时。在冷却到室温后，将该 混合物过滤，将滤液真空浓缩，获得白色固体状的2-甲烷磺酰基-乙胺。
往2-氯-4-吗啉-4-基-噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-甲醛(277mg)在甲醇(10mL)中的溶 液添加2-甲磺酰基-乙胺(234mg)，并且将该反应在室温下搅拌16小时。在真空中除 去溶剂，将残留物再溶于乙醇(50mL)中，添加钯/碳(20mg)，将该反应在室温和 氢气球下搅拌48小时。然后用塞力特硅藻土过滤反应物，真空浓缩滤液，获得白色 固体状的(2-氯-4-吗啉-4-基-噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基甲基)-(2-甲基磺酰基-乙基)-胺。
让(2-氯-4-吗啉-4-基-噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基甲基)-(2-甲基磺酰基-乙基)-胺与 4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂环戊硼烷-2-基)-1H-吲唑按照一般程序A反应。柱色谱 法纯化，获得化合物383。NMR：CDCl3：2.95(3H，s，Me)，3.18-3.21(4H，m，CH2)， 3.82-3.85(4H，m，CH2)，4.01-4.04(4H，m，CH2)，4.12(2H，s，CH2)，7.45(1H，s，Ar)， 7.50(1H，明显三重峰，J 8.2，Ar)，7.61(1H，d，J 8.2，Ar)，8.28(1H，d，J 7.55Ar)，9.03 (1H，s，Ar)。MS：(ESI+)：MH+473.22。
实施例308 N-((2-(1H-吲唑-4-基)-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基)甲基)-3-(甲基磺 酰基)丙-1-胺 384
往N-(3-溴丙基)邻苯二甲酰亚胺(500mg)在DMSO(8mL)中的混合物添加硫 代甲醇钠(144mg)，将反应在室温下搅拌16小时。然后添加水(2mL)，将该混合物 在室温下搅拌10分钟。反应用水(20mL)稀释，萃取到乙酸乙酯(2×20mL)中。 合并的有机层用盐水溶液(2×20mL)洗涤，干燥(MgSO4)，真空浓缩，获得白色固 体状的2-(3-甲基硫烷基-丙基)-异吲哚-1，3-二酮。
往2-(3-甲基硫烷基-丙基)-异吲哚-1，3-二酮(440mg)在甲醇(10mL)中的溶液 添加过硫酸氢钾制剂(1.73g)在水(10mL)中的溶液，将反应在室温下搅拌16小时。 该反应然后用水(20mL)稀释，萃取到二氯甲烷(2×20mL)中。合并的有机层用盐 水溶液(2×20mL)洗涤，干燥(MgSO4)，真空浓缩，获得白色固体状的2-(3-甲基磺 酰基-丙基)-异吲哚-1，3-二酮。
往2-(3-甲基磺酰基-丙基)-异吲哚-1，3-二酮(407mg)在乙醇(10mL)中的溶液 添加肼一水合物(0.80mL)，将该反应在回流下加热3小时。在冷却到室温后，将该 混合物过滤，将滤液真空浓缩，获得白色固体状的3-甲烷磺酰基-丙胺。
往6-溴甲基-2-氯-4-吗啉-4-基-噻吩并[3，2-d]嘧啶(200mg)在乙腈(10mL)中的 溶液添加3-甲磺酰基-丙胺(86mg)和碳酸钾(317mg)，并且将该反应在80℃下搅拌 16小时。在冷却至室温后，真空除去溶剂，将残留物再溶于二氯甲烷(20mL)中。 该溶液用饱和碳酸氢钠水溶液(20mL)、盐水溶液(2×20mL)洗涤，干燥(MgSO4)， 真空浓缩，通过柱色谱法纯化，获得黄色固体状的(2-氯-4-吗啉-4-基-噻吩并[3，2-d]嘧 啶-6-基甲基)-(3-甲基磺酰基-丙基)胺。
让(2-氯-4-吗啉-4-基-噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基甲基)-(3-甲基磺酰基-丙基)胺与 4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂环戊硼烷-2-基)-1H-吲唑按照一般程序A反应。柱色谱 法纯化，获得化合物384。NMR：CDCl3：1.99-2.05(2H，m，CH2)，2.80(2H，t，J 7.2， CH2)，2.81(3H，s，Me)，3.10-3.13(2H，m，CH2)，3.85-3.88(4H，m，CH2)，4.01-4.06(6H， m)，7.45(1H，s，Ar)，7.50(1H，明显三重峰，J 8.2，Ar)，7.61(1H，d，J 8.2，Ar)，8.28(1H， d，J 7.5，Ar)，9.03(1H，s，Ar)。MS：(ESI+)：MH+487.20。
实施例309 N-((2-(1H-吲唑-4-基)-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基)甲基)-3-(二甲基 氨基磺酰基)丙-1-胺 385
往二甲胺盐酸盐(1.38g)在二氯甲烷(20mL)中的悬浮液添加三乙胺(20mL)， 然后添加3-氯丙烷磺酰氯(0.69mL)，将反应在室温下搅拌16小时。该反应用水 (20mL)猝灭，萃取到二氯甲烷(2×30mL)中。合并的有机层依次用1M盐酸水溶 液(40mL)和饱和碳酸氢钠水溶液洗涤，干燥(MgSO4)，真空浓缩，获得黄色固体 状的3-氯-丙烷-1-磺酸二甲基酰胺。
将3-氯-丙烷-1-磺酸二甲基酰胺(1.06g)和碘化钠(2.57g)在2-丁酮(20mL) 中的混合物在80℃下加热16小时。冷却至室温后，真空脱除溶剂。该残留物在乙酸 乙酯(20mL)和水(20mL)之间分配，将有机层干燥(MgSO4)，真空浓缩，获得 黄色固体状的3-碘-丙烷-1-磺酸二甲基酰胺。
往3-碘-丙烷-1-磺酸二甲基酰胺(600mg)在DMF(10mL)中的溶液添加邻苯二 甲酰亚胺钾(590mg)，将反应加热到100℃，保持16小时。在冷却到室温后，将反 应物在二氯甲烷(30mL)和水(30mL)之间分配。有机层用盐水溶液(3×30mL) 洗涤，干燥(MgSO4)，真空浓缩，获得白色固体状的3-(1，3-二氧代-1，3-二氢-异吲哚 -2-基)-丙烷-1-磺酸二甲基酰胺。
往3-(1，3-二氧代-1，3-二氢-异吲哚-2-基)-丙烷-1-磺酸二甲基酰胺(530mg)在乙醇 (10mL)中的溶液添加肼一水合物(0.80mL)，将该反应在回流下加热3小时。在冷 却到室温后，将该混合物过滤，将滤液真空浓缩，获得白色固体状的3-氨基-丙烷-1- 磺酸二甲基酰胺。
往2-氯-4-吗啉-4-基-噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-甲醛(280mg)在甲醇(10mL)中的溶 液添加3-氨基-丙烷-1-磺酸二甲基酰胺(284mg)，并且将该反应在室温下搅拌16小时。 在真空中除去溶剂，将残留物再溶于乙醇(50mL)中，添加钯/碳(20mg)，将该反 应在室温和氢气球下搅拌48小时。然后用塞力特硅藻土过滤反应物，真空浓缩滤液， 获得黄色固体状的3-[(2-氯-4-吗啉-4-基-噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基甲基)-氨基]-丙烷-1-磺 酸二甲基酰胺。
让3-[(2-氯-4-吗啉-4-基-噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基甲基)-氨基]-丙烷-1-磺酸二甲基酰 胺与4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂环戊硼烷-2-基)-1H-吲唑按照一般程序A反应。柱 色谱法纯化，获得化合物385。NMR：CDCl3：1.99-2.01(2H，m，CH2)，2.78-2.81(2H，m， CH2)，2.82(6H，s，Me)，2.98-3.01(2H，m，CH2)，3.84-3.88(4H，m，CH2)，4.02-4.05(4H， m，CH2)，4.07(2H，s，CH2)，7.45(1H，s，Ar)，7.50(1H，明显三重峰，J 8.2，Ar)，7.61(1H， d，J 8.2，Ar)，8.28(1H，d，J 7.5，Ar)，9.03(1H，s，Ar)。MS：(ESI+)：MH+516.34。
实施例310 N-((2-(1H-吲唑-4-基)-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基)甲基)-N-甲基(苯 基)甲胺 386
将实施例3 的2-氯-4-吗啉-4-基-噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-甲醛10(101mg)溶于 1，2-DCE和1eq AcOH中，添加—小勺分子筛(4A)，再添加57mg(1.3eq)的N-苄基 甲胺。将反应搅拌25分钟，添加0.5mL MeOH。搅拌另外5分钟，然后添加91.1mg 的Na(OAc)3BH，再于室温下搅拌48小时。通过LCMS证实完全反应。将反应物过 滤，真空浓缩，通过快速色谱纯化，获得58.6mg的中间体(42％收率)，随后按照一 般程序A与4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂环戊硼烷-2-基)-1H-吲唑7进行铃木偶联。 通过LCMS证实完全反应，将反应真空浓缩，在RP-HPLC纯化之后获得12.9mg的 化合物386(收率18％)。MS(Q1)471.3(M)+。
实施例311 N-((2-(1H-吲唑-4-基)-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基)甲基)(3-甲氧基苯 基)-N-甲基甲胺 387
将实施例3的2-氯-4-吗啉-4-基-噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-甲醛10(101mg)溶于 1，2-DCE和1eq AcOH中，添加一小勺分子筛(4A)，再添加71.1mg(1.3eq)的3-甲氧 基-N-甲基苄胺。将反应搅拌25分钟，添加0.5mL MeOH。搅拌另外5分钟，然后添 加91.1mg的Na(OAc)3BH，再于室温下搅拌48小时。通过LCMS证实完全反应。将 反应物过滤，真空浓缩，通过快速色谱纯化，获得54.6mg的中间体(36％收率)，随 后按照一般程序A与4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂环戊硼烷-2-基)-1H-吲唑7进行铃 木偶联。通过LCMS证实完全反应，将反应真空浓缩，在RP-HPLC纯化之后获得 31.5mg的化合物387(收率42％)。MS(Q1)501.3(M)+。
实施例312 N-(2-(2-(1H-吲唑-4-基)-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基)丙-2-基)苯甲酰 胺 388

往4-吗啉代-2-(吡啶-3-基)噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-甲酸(610mg，2.04mmol)、1-羟基 -7-氮杂苯并三唑(56mg，0.4mmol)、O-(7-氮杂苯并三唑-1-基)-(N，N，N’，N’-四甲基脲六氟 磷酸盐(HATU，1.2g，3.1mmol)和N，N-二异丙基乙胺(1.4mL，8.1mmol)在DMF(3mL) 中的混合物添加氯化铵(330mg，6.1mmol)。将该反应混合物在室温下搅拌。该混合 物用EtOAc稀释，用饱和碳酸氢钠水溶液和盐水洗涤。含水层用EtOAc萃取。合并 的有机层用饱和碳酸氢钠和盐水洗涤，然后用MgSO4干燥，过滤，再真空浓缩。残 留物通过硅胶色谱法纯化(0-20％MeOH/CH2Cl2)，获得2-氯-4-吗啉代噻吩并[3，2-d] 嘧啶-6-甲酰胺(490mg，81％收率)。
在-10℃下，将氯化锆(IV)(780mg，3.3mmol)加入到2-氯-4-吗啉代噻吩并[3，2-d] 嘧啶-6-甲酰胺(400mg，1.3mmol)在THF(8mL)中的混合物中。将该反应混合物在-10℃ 下搅拌1小时。滴加溴化甲基镁的溶液(2.7mL，3M Et2O溶液)。将所得混合物升温 至室温，搅拌过夜。反应通过添加水来猝灭。分离有机层，含水层用EtOAc萃取。 该水溶液然后用饱和碳酸氢钠碱化，再次用EtOAc萃取。合并的有机层用MgSO4干 燥，过滤，再真空浓缩。粗混合物通过硅胶色谱法纯化(0-15％MeOH/CH2Cl2)，获 得2-(2-氯-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基)丙-2-胺(220mg，收率53％)。
往2-(2-氯-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基)丙-2-胺(1.1g，3.5mmol)在CH2Cl2 (50mL)中的溶液添加Et3N(0.6mL，4.9mmol)和苯甲酰氯(0.6mL，4.2mmol)。将 所得混合物在室温下搅拌过夜。该反应物用1M HCl稀释，然后用DCM萃取，用 MgSO4干燥，再真空浓缩。粗物质通过硅胶色谱法(0-50％EtOAc/己烷)纯化。按 照一般程序A，一部分(0.65mmol)的粗物质与4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂环戊硼 烷-2-基)-1H-吲唑7进行铃木偶联反应，在反相HPLC纯化之后，获得化合物388 (133mg)。MS(Q1)499(M)+。
实施例313 (2-(1H-吲唑-4-基)-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基)-N-甲基甲胺 389
根据一般程序A让实施例11a的1-(2-氯-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基)-N-甲基 甲胺55与0.18g(1.3eq)的4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂环戊硼烷-2-基)-1H-吲唑7反 应，在RP-HPLC纯化之后，获得18mg的化合物389(28％收率)。MS(Q1)381.2(M)+。
实施例314 N-((2-(1H-吲唑-4-基)-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基)甲基)-N-甲基苯甲 酰胺 390
根据一般程序K，让实施例11a的1-(2-氯-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基)-N-甲 基甲胺55与苯甲酰氯(1.2eq)反应，随后与4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂环戊硼烷 -2-基)-1H-吲唑7进行铃木偶联，通过LCMS证实完全反应，将反应真空浓缩，在 RP-HPLC纯化之后，获得59.5mg的化合物390(72％收率)。MS(Q1)485.3(M)+。
实施例315 N-((2-(1H-吲唑-4-基)-7-甲基-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基)甲基)-N-甲 基磺酰基-甲胺 391
根据一般程序K，让实施例11b的1-(2-氯-7-甲基-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6- 基)-N-甲基甲胺56与甲磺酰氯(1.2eq)反应，随后与4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂 环戊硼烷-2-基)-1H-吲唑7进行铃木偶联，通过LCMS证实完全反应，将反应真空浓 缩，在RP-HPLC纯化之后，获得31.0mg的化合物391(29％收率)。MS(Q1)473.2(M)+。
实施例316 N-((2-(1H-吲哚-5-基)-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基)甲基)-N-甲基乙酰 胺 392
根据一般程序K，让实施例11a的1-(2-氯-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基)-N-甲 基甲胺55与乙酰氯(1.2eq)反应，随后与吲哚-5-硼酸进行铃木偶联，通过LCMS证 实完全反应，将反应真空浓缩，在RP-HPLC纯化之后，获得33.1mg的化合物392 (44％收率)。MS(Q1)422.2(M)+。
实施例317 N-(3-(2-(1H-吲唑-4-基)-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基)苯基)乙酰胺 393
按照一般程序C，将2-氯-6-碘-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶19与3-乙酰胺基苯基 硼酸反应，获得相应中间体，在通过快速色谱纯化后，然后再次通过一般程序A与 4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂环戊硼烷-2-基)-1H-吲唑7反应，通过反相HPLC纯化 后获得化合物393。MS(Q1)471(M)+。
实施例318 2-(1H-吲唑-4-基)-6-(3-(甲基磺酰基)苯基)-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶 394
按照一般程序A，将2-氯-6-碘-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶19与3-甲基磺酰基苯 基硼酸反应，获得相应中间体，在通过快速色谱纯化后，然后再次通过一般程序A与 4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂环戊硼烷-2-基)-1H-吲唑7反应，通过反相HPLC纯化 后获得化合物394。MS(Q1)507(M)+。
实施例319 7-甲基-6-(3-(甲基磺酰基)苯基)-4-吗啉代-2-(1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-5-基) 噻吩并[3，2-d]嘧啶 395
在密封微波反应器内，将在1M Na2CO3水溶液(1.5mL)和乙腈(1.5mL)中的 实施例12的2-氯-6-碘-7-甲基-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶(0.3g，0.8mmol)、3-(甲基 磺酰基)苯基硼酸(0.3g，1.5mmol)和二氯化双(三苯基膦)钯(II)(30mg，40μmol) 加热到100℃，保持10分钟。在反应完成后，将5-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂环戊硼 烷-2-基)-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶(0.4g，1.7mmol)和二氯化双(三苯基膦)钯(II)(30mg， 40μmol)加入到同一罐中。在密封微波反应器中，将该反应混合物加热到150℃，保 持20分钟。该混合物用EtOAc和CH2Cl2萃取。将合并的有机层浓缩，在反相HPLC 纯化后，获得化合物395(82mg)。MS(Q1)506(M)+。
实施例320 2-(1H-吲唑-4-基)-6-(4-甲氧基吡啶-3-基)-4-吗啉代噻吩并[2，3-d]嘧啶 396
按照一般程序C，将2-氯-6-碘-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶19与4-甲氧基吡啶-3- 基-3-硼酸反应，获得相应中间体，在通过快速色谱纯化后，然后再次通过一般程序A 与4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂环戊硼烷-2-基)-1H-吲唑7反应，通过反相HPLC纯 化后获得化合物396。MS(Q1)445(M)+。
实施例321 2-(1H-吲唑-4-基)-6-(1H-吲哚-4-基)-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶 397
按照一般程序A，将2-氯-6-碘-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶19与4-(4，4，5，5-四甲 基-1，3，2-二氧杂环戊硼烷-2-基)-1H-吲哚反应，获得相应中间体，在通过快速色谱纯化 后，然后再次通过一般程序A与4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂环戊硼烷-2-基)-1H-吲 唑7反应，通过反相HPLC纯化后获得化合物397。MS(Q1)453(M)+。
实施例322 2-(2-(1H-吲唑-4-基)-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基)-N-甲基磺酰基丙 -2-胺 398
往2-(2-氯-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基)丙-2-胺(400mg，1.3mmol)在CH2Cl2 (20mL)中的溶液添加Et3N(630μL，4.5mmol)和甲磺酰氯(200μL，2.6mmol)。将 所得混合物在室温下搅拌过夜。该反应通过添加饱和碳酸氢钠水溶液来猝灭。分离有 机层，含水层用EtOAc萃取。合并的有机层用Na2SO4干燥，过滤，再真空浓缩。粗 物质通过硅胶色谱法(0-100％EtOAc/己烷)纯化。按照一般程序A，一部分(0.1mmol) 的所得纯产物与4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂环戊硼烷-2-基)-1H-吲唑7进行铃木偶 联反应，在反相HPLC纯化之后，获得化合物398(8mg)。MS(Q1)473(M)+。
实施例323 N-(2-(2-(1H-吲唑-4-基)-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基)丙-2-基)乙酰胺 399
往2-(2-氯-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基)丙-2-胺(400mg，1.3mmol)在CH2Cl2 (20mL)中的溶液添加Et3N(630μL，4.5mmol)和乙酰氯(180μL，2.6mmol)。将所 得混合物在室温下搅拌过夜。该反应通过添加饱和碳酸氢钠水溶液来猝灭。分离有机 层，含水层用EtOAc萃取。合并的有机层用Na2SO4干燥，过滤，再真空浓缩。粗物 质通过硅胶色谱法(0-100％EtOAc/己烷)纯化。按照一般程序A，一部分(0.2mmol) 的所得纯产物与4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂环戊硼烷-2-基)-1H-吲唑7进行铃木偶 联反应，在反相HPLC纯化之后，获得化合物399(36mg)。MS(Q1)437(M)+。
实施例324 2-(1H-吲唑-4-基)-4-吗啉代-6-(6-吗啉代吡啶-3-基)噻吩并[3，2-d]嘧啶 400
按照一般程序A，将2-氯-6-碘-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶19与4-(5-(4，4，5，5-四 甲基-1，3，2-二氧杂环戊硼烷-2-基)吡啶-2-基)吗啉反应，获得相应中间体，在通过快速 色谱纯化后，然后再次通过一般程序A与4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂环戊硼烷-2- 基)-1H-吲唑7反应，通过反相HPLC纯化后获得化合物400。MS(Q1)500(M)+。
实施例325 2-(1H-吲唑-4-基)-6-(2-(4-N-甲基磺酰基哌嗪-1-基)丙-2-基)-4-吗啉代噻吩 并[3，2-d]嘧啶 401
在-78℃下，往2-氯-4-吗啉-4-基-噻吩并[3，2-d]嘧啶(6g)在THF(300mL)中的 溶液添加正丁基锂(11.3mL的2.5M己烷溶液)，并且将该反应在-78℃下搅拌1小时。 然后用几分钟将二氧化碳气体缓慢鼓泡到反应混合物中。将该反应混合物缓慢升温至 室温。真空脱除THF，将残留物溶于碳酸氢钠溶液，用乙酸乙酯洗涤，然后将碱性相 小心酸化至pH3，获得苍白色沉淀，通过过滤收集。风干后获得2-氯-4-吗啉-4-基-噻 吩并[3，2-d]嘧啶-6-甲酸(5.5g)。
往2-氯-4-吗啉-4-基-噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-甲酸(2.0g)在DMF(50mL)中的溶 液添加1，1-羰基二咪唑(2.16g)。在1小时后，添加三乙胺(2.8ml)和1-甲磺酰基- 哌嗪盐酸盐(2.7g)。在搅拌过夜后，添加水，(2-氯-4-吗啉-4-基-噻吩并[3，2-d]嘧啶-6- 基)-(4-甲磺酰基哌嗪-1-基)甲酮通过过滤作为白色固体收集。
在-10℃下，将(2-氯-4-吗啉-4-基-噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基)-(4-甲磺酰基哌嗪-1-基) 甲酮(1.8g)溶于THF(40mL)，添加氯化锆(4.7g)。在搅拌1小时后，滴加溴化甲 基镁(3M醚溶液，8.1mL)。在24小时后，反应混合物用水猝灭，用EtOAc萃取， 干燥(MgSO4)，真空脱除溶剂。残留物用快速色谱纯化，获得2-氯-6-[1-(4-甲磺酰基 -哌嗪-1-基)-1-甲基-乙基]-4-吗啉-4-基-噻吩并[3，2-d]嘧啶(100mg)。
按照一般程序A，让2-氯-6-[1-(4-甲磺酰基-哌嗪-1-基)-1-甲基-乙基]-4-吗啉-4-基- 噻吩并[3，2-d]嘧啶与4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂环戊硼烷-2-基)-1H-吲唑反应。通过 柱色谱法纯化，获得化合物401。(400MHz CDCl3)：1.48(6H，s，CH3)， 2.66-2.68(4H，m，CH2)，2.75(3H，s，CH3)，3.21(4H，m.CH2)，3.86-3.88(4H，m，CH2)， 4.01-4.04(4H，m，CH2)，7.29(1H，s，ar)，7.42-7.46(1H，m，ar)，7.53(1h，d(J＝8.33)，ar)， 8.21(1h，d(J＝7.09)，ar)，8.95(1H，s，ar)，10.04(1H，b，NH)。MH+＝542.46。
实施例326 2-(1H-吲唑-4-基)-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-腈 402
将实施例12的2-氯-6-碘-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶19(0.2g，0.5mmol)和CuCN (50mg，0.6mmol)在吡啶(1mL)中的溶液在115℃下加热2小时，然后冷却到室温， 再搅拌18小时。将该反应倒入1M HCl和冰中，含水层用CH2Cl2萃取。产物通过硅 胶色谱法(0-75％EtOAc/己烷)纯化，获得2-氯-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-腈 (35mg)。
根据一般程序A的铃木偶联，让2-氯-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-腈(35mg) 与4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂环戊硼烷-2-基)-1H-吲唑7(6mg)反应，获得化合物 402。MS(Q1)363(M)+。
实施例327 N-((2-(1H-吲唑-4-基)-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基)甲基)-2-甲氧基-N- 甲基乙酰胺 403
根据一般程序K，让实施例11a的1-(2-氯-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基)-N-甲 基甲胺55(0.22g)与甲氧基乙酰氯(1.2eq)反应，随后与4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二 氧杂环戊硼烷-2-基)-1H-吲唑7进行铃木偶联。通过LCMS证实完全反应，将反应真 空浓缩，在RP-HPLC纯化之后，获得52.7mg的化合物403(52％收率)。MS(Q1) 453.2(M)+。
实施例328 (2-(1H-吲唑-4-基)-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基)(4-(甲硫基)苯基)甲醇 404
在-78℃下，往2-氯-4-吗啉-4-基-噻吩并[3，2-d]嘧啶(2.74g)在THF(40mL)中 的溶液添加正丁基锂(5.15mL的2.5M己烷溶液)，并且将该反应在-78℃下搅拌1小 时。然后添加4-甲基巯基苯甲醛(1.43mL)，将该反应混合物缓慢升温至室温。添加 水，通过过滤收集所得沉淀。从EtOAc/己烷中重结晶，获得(2-氯-4-吗啉-4-基-噻吩并 [3，2-d]嘧啶-6-基)-(4-甲硫基-苯基)-甲醇(2.53g)。
按照一般程序A，让(2-氯-4-吗啉-4-基-噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基)-(4-甲硫基-苯基)- 甲醇与4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂环戊硼烷-2-基)-1H-吲唑反应。通过柱色谱法纯 化，获得化合物404。(400MHz，CDCl3)：2.52(3H，s，CH3)，2.60(1H，m，CH)，3.91-3.93 (4H，m，CH2)，4.09-4.11(4H，m，CH2)，6.15(1H，b，OH)，7.30(1H，m，ar)，7.33(1H，m， ar)，7.35(1H，m，ar)，7.43(1H，m，ar)，7.46(1H，m，ar)，7.51(1H，m，ar)，7.59(1H，m， ar)，8.38(1H，d，ar)，9.02(1H，s，ar)，10.10(1H，b，NH)。(M+H)+490.27。
实施例329 (2-(1H-吲唑-4-基)-4-吗啉代噻吩并[2，3-d]嘧啶-6-基)-N-甲基磺酰基，N-甲 基甲胺 405
按照一般程序A，让按照一般程序H制备的(2-氯-4-吗啉代噻吩并[2，3-d]嘧啶-6- 基)-n-甲基-N-(甲基磺酰基)甲胺(56％收率；MS(Q1)377(M)+)与1H-吡咯并[2，3-b] 吡啶硼酸频那醇酯反应，以3.6％的收率获得化合物405，MS(Q1)459.1(M)+。
实施例330 N-((2-(1H-吲唑-4-基)-4-吗啉代噻吩并[2，3-d]嘧啶-6-基)甲基)-N-甲基乙酰 胺 406
按照一般程序A，让按照一般程序H制备的N-((2-氯-4-吗啉代噻吩并[2，3-d]嘧啶 -6-基)-N-甲基乙酰胺(68％收率；MS(Q1)341.1(M)+)与1H-吡咯并[2，3-b]吡啶硼酸频 那醇酯反应，以35.5％的收率获得化合物406，MS(Q1)384.5(M)+。
实施例331 N-((2-(1H-吲唑-4-基)-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基)甲基)-2-羟基-N，2- 二甲基丙酰胺 407
根据一般程序K，让实施例11a的1-(2-氯-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基)-N-甲 基甲胺55(0.22g)与2-乙酰氧基异丁酰氯(1.2eq)反应，随后与4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2- 二氧杂环戊硼烷-2-基)-1H-吲唑7进行铃木偶联。将所得化合物溶于2mL THF和2mL MeOH中，随后添加2mL 1M LiOH，并将所得溶液搅拌2.5小时。通过LCMS证实 完全反应，将反应真空浓缩，在RP-HPLC纯化之后，获得80.2mg的化合物407(52％ 收率)。MS(Q1)467.2(M)+。
实施例332 N-((2-(1H-吲唑-4-基)-7-甲基-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基)甲基)-N-甲 基乙酰胺 408
根据一般程序K，让实施例11b的1-(2-氯-7-甲基-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6- 基)-N-甲基甲胺56与乙酰氯(1.2eq)反应，随后与4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂环 戊硼烷-2-基)-1H-吲唑7进行铃木偶联，通过LCMS证实完全反应，将反应真空浓缩， 在RP-HPLC纯化之后，获得101.9mg的化合物408(40％收率)。MS(Q1)437.2(M)+。
实施例333 N-((2-(1H-吲唑-4-基)-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基)甲基)-2-羟基-N-甲 基乙酰胺 409
根据一般程序K，让实施例11a的1-(2-氯-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基)-N-甲 基甲胺55(0.22g)与乙酰氧基乙酰氯(1.2eq)反应，随后与4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2- 二氧杂环戊硼烷-2-基)-1H-吲唑7进行铃木偶联。将所得化合物溶于2mL THF和2mL MeOH中，随后添加2mL1M LiOH，并将所得溶液搅拌2.5小时。通过LCMS证实 完全反应，将反应真空浓缩，在RP-HPLC纯化之后，获得31.1mg的化合物409(24％ 收率)。MS(Q1)439.2(M)+。
实施例334 N-(2-(2-(1H-吲唑-4-基)-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基)丙-2-基)烟酰胺 410
往2-(2-氯-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基)丙-2-胺(150mg，0.5mmol)在CH2Cl2 (10mL)中的溶液添加Et3N(450μL，3.2mmol)和烟酰氯盐酸(160mg，0.9mmol)。 将所得混合物在室温下搅拌过夜。该反应通过添加饱和碳酸氢钠水溶液来猝灭。分离 有机层，含水层用EtOAc萃取。合并的有机层用Na2SO4干燥，过滤，再真空浓缩。 按照一般程序A，一部分(0.2mmol)的所得粗产品与4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂 环戊硼烷-2-基)-1H-吲唑7进行铃木偶联反应，在反相HPLC纯化之后，获得化合物 410(22mg)。MS(Q1)500(M)+。
实施例335 N-(2-(2-(1H-吲唑-4-基)-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基)丙-2-基)-3-甲氧 基苯甲酰胺 411
往2-(2-氯-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基)丙-2-胺(150mg，0.5mmol)在CH2Cl2 (10mL)中的溶液添加Et3N(230μL，1.6mmol)和间茴香酰氯(160mg，0.9mmol)。 将所得混合物在室温下搅拌过夜。该反应通过添加饱和碳酸氢钠水溶液来猝灭。分离 有机层，含水层用EtOAc萃取。合并的有机层用Na2SO4干燥，过滤，再真空浓缩。 按照一般程序A，一部分(0.2mmol)的所得粗产品与4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂 环戊硼烷-2-基)-1H-吲唑7进行铃木偶联反应，在反相HPLC纯化之后，获得化合物 411(13mg)。MS(Q1)529(M)+。
实施例336 N-(2-(2-(1H-吲唑-4-基)-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基)丙-2-基)-4-甲氧 基苯甲酰胺 412
往2-(2-氯-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基)丙-2-胺(150mg，0.5mmol)在CH2Cl2 (10mL)中的溶液添加Et3N(230μL，1.6mmol)和对茴香酰氯的HCl盐(160mg， 0.9mmol)。将所得混合物在室温下搅拌过夜。该反应通过添加饱和碳酸氢钠水溶液来 猝灭。分离有机层，含水层用EtOAc萃取。合并的有机层用Na2SO4干燥，过滤，再 真空浓缩。按照一般程序A，一部分(0.2mmol)的所得粗物质与4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2- 二氧杂环戊硼烷-2-基)-1H-吲唑7进行铃木偶联反应，在反相HPLC纯化之后，获得 化合物412(30mg)。MS(Q1)529(M)+。
实施例337 (2-(1H-吲唑-4-基)-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基)(4-(甲基磺酰基)苯基) 甲醇 413
在0℃下，往(2-氯-4-吗啉-4-基-噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基)(4-甲硫基-苯基)甲醇 (712mg)在DCM(50mL)中的溶液中添加间-氯过苯甲酸(820mg)。在4小时后， 将反应混合物用硫代硫酸钠溶液猝灭，用DCM萃取，干燥(MgSO4)，真空脱除溶 剂。残留物用快速色谱纯化，获得(2-氯-4-吗啉-4-基-噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基)(4-甲基磺 酰基-苯基)甲醇。
按照一般程序A，让(2-氯-4-吗啉-4-基-噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基)(4-甲基磺酰基-苯 基)甲醇与4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂环戊硼烷-2-基)-1H-吲唑反应。通过柱色谱法 纯化，获得化合物413。(400MHz，CDCl3)：3.00(3H，s，CH3)，3.82-3.84(4H，m，CH2)， 3.99-4.01(4H，m，CH2)，6.21(1H，b，NH)，7.29(1H，d(J＝0.80)，ar)，7.43(1H，t(J＝7.80)， ar)，7.53(1H，d(J＝8.30)，ar)，7.66(2H，d(J＝8.26)，ar)，7.91(2H，d(J＝8.46)，ar)，8.18 (1H，d(J＝6.56)，ar)，8.91(1H，s，ar)。(M+H)+522.21。
实施例338 2-(2-(2-甲基-3H-咪唑并[4，5-b]吡啶-6-基)-4-吗啉代噻吩并 基)丙-2-醇 414
根据实施例6b和一般程序A，让2-(2-氯-4-吗啉代噻吩并[2，3-d]嘧啶-6-基)丙-2- 醇(100mg)与161mg的3-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-2-甲基-6-(4，4，5，5-四甲 基-1，3，2-二氧杂环戊硼烷-2-基)-3H-咪唑并[4，5-b]吡啶54反应。然后将粗品 2-(2-(1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-2-甲基-1H-苯并[d]咪唑-6-基)-4-吗啉代噻 吩并[2，3-d]嘧啶-6-基)丙-2-醇与2当量的四丁基氟化铵在THF中回流过夜，以便除去 SEM保护基。粗物质然后用水和乙酸乙酯萃取。将有机层浓缩至干燥，然后通过反相 HPLC纯化，获得5.1mg的化合物414。MS(Q1)411.2(M)+。
实施例339 (S)-1-(3-(7-甲基-4-吗啉代-2-(1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-5-基)噻吩并[3，2-d] 嘧啶-6-基)苯基磺酰基)丙-2-醇 415
通过一般程序A，将(S)-1-(3-(2-氯-7-甲基-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基)苯基磺 酰基)丙-2-醇(10mg)与7-氮杂吲哚-5-硼酸频那醇酯偶联。产物通过反相HPLC纯化， 获得38mg的化合物415。MS(Q1)550.0(M)+。
实施例340 7-甲基-6-(3-(N-吗啉代)磺酰基)苯基)-4-吗啉代-2-(1H-吡咯并[2，3-b]吡啶 -5-基)噻吩并[3，2-d]嘧啶416
按照一般程序F，将2-氯-6-碘-7-甲基-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶(70mg)与N- 吗啉基-3-硼苯磺酰胺偶联，然后与7-氮杂吲哚-5-硼酸频那醇酯反应。产物通过反相 HPLC纯化，获得39mg的化合物416。MS(Q1)577.0(M)+。
实施例341 N-甲基，N-甲基磺酰基(4-吗啉代-2-(1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-5-基)噻吩并 [2，3-d]嘧啶-6-基)甲胺 417
按照一般程序A，将(2-氯-4-吗啉代噻吩并[2，3-d]嘧啶-6-基-n-甲基-N-(甲基磺酰基) 甲胺与1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-5-基-5-硼酸反应，以6.0％的收率获得化合物417。 MS(Q1)459.2(M)+。
实施例342 6-(3-(甲基磺酰基)苯基)-4-吗啉代-2-(1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-5-基)噻吩并 [3，2-d]嘧啶 418
在密封微波反应器内，将在1M Na2CO3水溶液(1mL)和乙腈(1mL)中的实 施例12的2-氯-6-碘-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶19(0.2g，0.6mmol)、3-(甲基磺酰基) 苯基硼酸(120mg，0.6mmol)和二氯化双(三苯基膦)钯(II)(20mg，30μmol)加 热到100℃，保持10分钟。在反应完成后，添加5-(4，4，5，5-四甲基-[1，3，2]二氧杂环戊 硼烷-2-基)-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶(210mg，0.87mmol)和二氯化双(三苯基膦)钯(II) (20mg，30μmol)，在密封微波反应器中将该反应混合物加热到150℃，保持20分钟。 该混合物用EtOAc和CH2Cl2萃取。将合并的有机层浓缩，在反相HPLC纯化后，获 得化合物418(40mg)。MS(Q1)492(M)+。
实施例343 4-吗啉代-6-苯基-2-(1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-5-基)噻吩并[3，2-d]嘧啶 419
在密封微波反应器内，将在1M Na2CO3水溶液(1mL)和乙腈(1mL)中的实 施例12的2-氯-6-碘-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶19(0.2g，0.6mmol)、苯基硼酸(70mg， 0.6mmol)和二氯化双(三苯基膦)钯(II)(20mg，30μmol)加热到100℃，保持 10分钟。在反应完成后，添加5-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂环戊硼烷-2-基)-1H-吡咯 并[2，3-b]吡啶(210mg，0.87mmol)和二氯化双(三苯基膦)钯(II)(20mg，30μmol)， 在密封微波反应器中将该反应混合物加热到150℃，保持20分钟。该混合物用EtOAc 和CH2Cl2萃取。将合并的有机层浓缩，在反相HPLC纯化后，获得化合物419(45mg)。 MS(Q1)414(M)+。
实施例344 7-甲基-4-吗啉代-6-苯基-2-(1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-5-基)噻吩并[3，2-d]嘧 啶 420
在密封微波反应器内，将在1M Na2CO3水溶液(1mL)和乙腈(1mL)中的实 施例12的2-氯-6-碘-7-甲基-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶(0.2g，0.5mmol)、苯基硼酸 (60mg，0.5mmol)和二氯化双(三苯基膦)钯(II)(18mg，25μmol)加热到100℃， 保持10分钟。在反应完成后，添加5-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂环戊硼烷-2-基)-1H- 吡咯并[2，3-b]吡啶(180mg，0.75mmol)和二氯化双(三苯基膦)钯(II)(13mg，20μmol)， 在密封微波反应器中将该反应混合物加热到150℃，保持20分钟。该混合物用EtOAc 和CH2Cl2萃取。将合并的有机层浓缩，在反相HPLC纯化后，获得化合物420(57mg)。 MS(Q1)428(M)+。
实施例345 (2S)-2-羟基-N-((3-(7-甲基-4-吗啉代-2-(1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-5-基)噻吩 并[3，2-d]嘧啶-6-基)苯基)甲基)丙酰胺421
通过一般程序A，将粗(2S)-N-(3-(2-氯-7-甲基-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基)苯 基)甲基-2-羟基丙酰胺(65mg)与7-氮杂吲哚-5-硼酸频那醇酯偶联。产物通过反相 HPLC纯化，获得48.4mg的化合物421。MS(Q1)529.2(M)+。
实施例346 2-(4-吗啉代-2-(1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-5-基)噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基)丙 -2-醇 422
按照一般程序A，往209mg的化合物12在2mL 1M KOAc和2mL乙腈中的溶液 中添加195.2mg(1.2eq)的7-氮杂吲哚-5-硼酸频那醇酯和77.4mg(0.1eq)的Pd(PPh3)4， 在RP-HPLC纯化之后，获得99.2mg的化合物422(收率75％)。MS(Q1)396.2(M)+。
实施例347 7-甲基-6-(3-(2-羟乙基氨基磺酰基)苯基)-4-吗啉代-2-(1H-吡咯并[2，3-b]吡 啶-5-基)噻吩并[3，2-d]嘧啶 423
按照一般程序F，将2-氯-6-碘-7-甲基-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶(50mg)与N-(2- 羟乙基)-3-硼苯磺酰胺偶联，然后与7-氮杂吲哚-5-硼酸频那醇酯反应。产物通过反相 HPLC纯化，获得17.7mg的化合物423。MS(Q1)551.1(M)+。
实施例348 N-甲基磺酰基(3-(7-甲基--4-吗啉代-2-(1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-5-基)噻吩并 [3，2-d]嘧啶-6-基)苯基)甲胺 424
按照一般程序F，将2-氯-6-碘-7-甲基-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶(50mg)与3- 甲磺酰基氨基甲基苯硼酸偶联，然后与7-氮杂吲哚-5-硼酸频那醇酯反应。产物通过反 相HPLC纯化，获得34.5mg的化合物424。MS(Q1)535.2(M)+。
实施例349 (4-羟基哌啶-1-基)(3-(7-甲基-4-吗啉代-2-(1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-5-基)噻 吩并[3，2-d]嘧啶-6-基)苯基)甲酮 425
按照一般程序B，让3-(2-氯-7-甲基-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基)苯甲酸 (60mg)与4-羟基哌啶反应，获得3-(2-氯-7-甲基-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基) 苯基(4-羟基哌啶-1-基)甲酮。通过一般程序A，将粗3-(2-氯-7-甲基-4-吗啉代噻吩并 [3，2-d]嘧啶-6-基)苯基(4-羟基哌啶-1-基)甲酮(72mg)与7-氮杂吲哚-5-硼酸频那醇酯 偶联。产物通过反相HPLC纯化，获得29.5mg的化合物425。MS(Q1)555.2(M)+。
实施例350 N-(2-羟乙基)-3-(7-甲基-4-吗啉代-2-(1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-5-基)噻吩并 [3，2-d]嘧啶-6-基)苯甲酰胺 426
按照一般程序B，让3-(2-氯-7-甲基-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基)苯甲酸 (60mg)与乙醇胺反应，获得3-(2-氯-7-甲基-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基)-N-(2- 羟乙基)苯甲酰胺。通过一般程序A，将粗3-(2-氯-7-甲基-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶 -6-基)-N-(2-羟乙基)苯甲酰胺(74mg)与7-氮杂吲哚-5-硼酸频那醇酯偶联。产物通过 反相HPLC纯化，获得2.6mg的化合物426。MS(Q1)515.2(M)+。
实施例351 (3-(7-甲基-4-吗啉代-2-(1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-5-基)噻吩并[3，2-d]嘧啶 -6-基)苯基)(4-甲基哌嗪-1-基)甲酮427
按照一般程序B，让3-(2-氯-7-甲基-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基)苯甲酸 (60mg)与1-甲基哌嗪反应，获得3-(2-氯-7-甲基-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基) 苯基(4-甲基哌嗪-1-基)甲酮。通过一般程序A，将粗3-(2-氯-7-甲基-4-吗啉代噻吩并 [3，2-d]嘧啶-6-基)苯基(4-甲基哌嗪-1-基)甲酮(67mg)与7-氮杂吲哚-5-硼酸频那醇酯 偶联。产物通过反相HPLC纯化，获得19.8mg的化合物427。MS(Q1)554.0(M)+。
实施例352 4-吗啉代-6-(6-吗啉代吡啶-3-基)-2-(1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-5-基)噻吩并 [3，2-d]嘧啶 428
通过一般程序A，让2-氯-6-碘-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶19与4-(5-(4，4，5，5-四甲 基-1，3，2-二氧杂环戊硼烷-2-基)吡啶-2-基)吗啉反应，获得相应中间体，在通过快速色 谱纯化后，然后通过一般程序A与5-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂环戊硼烷-2-基)-1H- 吡咯并[2，3-b]吡啶反应，在通过反相HPLC纯化后，再次获得22mg的化合物428。 MS(Q1)500(M)+。
实施例353 4-(4-吗啉代-2-(1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-5-基)噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基)噻唑 -2-胺 429

按照一般程序D，在-78℃下，往实施例2的2-氯-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶4 (1.0eq)在THF中的溶液(0.1M)添加正丁基锂溶液(1.3eq，1.6M己烷溶液)。将 该反应混合物在-40℃下搅拌30分钟。添加N，N-二甲基乙酰胺(4.0eq)，将反应混合 物缓慢升温至0℃，并且搅拌2小时。将反应混合物倒入0.25M HCl的冷溶液中，用 二氯甲烷萃取。将合并的有机层干燥(Na2SO4)，再浓缩。粗反应混合物通过快速色 谱纯化，获得1-(2-氯-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基)乙酮。

在0℃下，往1-(2-氯-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基)乙酮(1.0eq)溶于CHCl3、 33wt％HBr和醋酸的混合物(1:1:1)中的溶液中添加Br2在CHCl3中的溶液(1.05eq)。 将反应混合物在0℃下搅拌至反应完全，然后在二氯甲烷中用饱和碳酸氢钠溶液萃取 一次。将有机层干燥，过滤，再浓缩，获得粗中间体。该中间体通过快速色谱纯化， 获得2-溴-1-(2-氯-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基)乙酮。

往2-溴-1-(2-氯-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基)乙酮(1.0eq)溶于EtOH的溶液 添加硫脲。将反应混合物在70℃下加热至反应完全，然后在二氯甲烷中用饱和碳酸氢 钠溶液萃取一次。将有机层干燥，过滤，再浓缩，获得粗中间体。该中间体通过快速 色谱纯化，获得4-(2-氯-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基)噻唑-2-胺。MS(Q1)413(M)+。
按照一般程序B，让4-(2-氯-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基)噻唑-2-胺与 5-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂环戊硼烷-2-基)-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶反应，在通过反相 HPLC纯化后，获得41mg的化合物429。MS(Q1)436(M)+。
实施例354 6-(7-甲基-6-(3-(甲基磺酰基)苯基)-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-2-基)-3H- 咪唑[4，5-b]吡啶 430
往微波管形瓶内的215mg4-(2-氯-7-甲基-6-(3-(甲基磺酰基)苯基)噻吩并[3，2-d]嘧 啶-4-基)吗啉在5mL DMF中的溶液添加0.41g(1.5eq)的化合物50和36mg(0.1eq)的 Pd(PPh3)2Cl2，将该管形瓶在Biotage微波反应器内在150℃下放置30分钟。通过LCMS 证实完全反应。该反应混合物用EtOAc稀释，用1M HCl分配，EtOAc层用MgSO4 干燥，真空浓缩。粗固体通过快速色谱(EtOAc/己烷)纯化，获得0.22g(69％收率) 的保护产物，将该保护产物溶于20mL THF和0.55g TBAF(6.0eq)，加热到80℃， 保持72小时，以脱除保护基。通过LCMS证实完全脱保护，该反应混合物用水稀释， 用EtOAc萃取，再真空浓缩，在RP-HPLC纯化之后，获得38.5mg(22％收率)的 化合物430。MS(Q1)507.1(M)+。
实施例355 2-(2-(1H-咪唑并[4，5-b]吡啶-6-基)-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基)丙-2- 醇 431
往微波管形瓶内的100mg化合物12在5mL DMF中的溶液添加0.26g(1.5eq)的化 合物50和22mg(0.1eq)的Pd(PPh3)2Cl2，将该管形瓶在Biotage微波反应器内在150℃ 下放置20分钟。反应是不完全的，在该混合物中另外添加0.1eq Pd(PPh3)2Cl2，在微 波反应器内在150℃下再次放置30分钟。通过LCMS证实完全反应。该反应混合物 用水和盐水稀释，产物用EtOAc萃取，真空浓缩。粗固体通过RP-HPLC纯化，获得 化合物431。MS(Q1)397.2(M)+。
实施例356 2-甲基-6-(7-甲基-6-(3-(甲基磺酰基)苯基)-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-2- 基)-3H-咪唑并[4，5-b]吡啶 432
按照一般程序A，往2mL 1M KOAc和2mL乙腈中的120mg4-(2-氯-7-甲基 -6-(3-(甲基磺酰基)苯基)噻吩并[3，2-d]嘧啶-4-基)吗啉中添加0.16g(1.5eq)化合物54和 32mg(0.1eq)的Pd(PPh3)4，在快速色谱(EtOAc/己烷)之后，获得180mg(99％收率) 的保护产物。MS(Q1)652(M)+。将该化合物溶于10mL THF，添加0.45g TBAF(6.0eq)， 将反应加热至90℃过夜，以除去SEM保护基。通过LCMS证实完全脱保护，该反应 混合物用水稀释，用EtOAc萃取，用MgSO4干燥，真空浓缩，在RP-HPLC纯化后， 获得44.8mg的化合物432(46％收率)。MS(Q1)521(M)+。
实施例357 2-(2-(2-甲基-3H-咪唑并[4，5-b]吡啶-6-基)-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6- 基)丙-2-醇 433
按照一般程序A，往2mL 1M KOAc和2mL乙腈中的236mg化合物12中加入 0.44g(1.5eq)化合物54和87mg(0.1eq)的Pd(PPh3)4，在RP-HPLC纯化之后，获得 330mg(81％收率)的SEM加合物。MS(Q1)396.2(M)+。将该化合物溶于10mL THF， 添加0.96g TBAF，将反应加热至90℃过夜，以除去SEM保护基。通过LCMS证实 完全脱保护，该反应混合物用水稀释，用EtOAc和少量MeOH萃取，用盐水洗涤， 真空浓缩，在RP-HPLC纯化后，获得113.8mg的化合物433(46％收率)。MS(Q1) 411.2(M)+。
实施例358 5-(7-甲基-4-吗啉代-2-(1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-5-基)噻吩并[3，2-d]嘧啶-6- 基)-N-(2-吗啉代乙基)吡啶-2-胺434
在密封微波反应器内，将在1M Na2CO3水溶液(3eq)和等体积乙腈中的2-氯-6- 碘-7-甲基-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶(1eq)、2-氟-5-吡啶硼酸(1.1eq)和二氯化双(三 苯基膦)钯(II)(0.1eq)加热到100℃，保持30分钟。将反应混合物浓缩，然后通 过快速色谱纯化粗产物，获得4-(2-氯-6-(6-氟吡啶-3-基)-7-甲基噻吩并[3，2-d]嘧啶-4- 基)吗啉。MS(Q1)365(M+)。
经由一般程序L，使4-(2-氯-6-(6-氟吡啶-3-基)-7-甲基噻吩并[3，2-d]嘧啶-4-基)吗啉 与2-吗啉代乙胺反应，通过快速色谱纯化后获得相应的中间体，然后经由一般程序A 使之与5-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂环戊硼烷-2-基)-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶反应，通过 反相HPLC纯化后获得40mg的434。MS(Q1)557(M+)。
实施例359 3-(5-(7-甲基-4-吗啉代-2-(1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-5-基)噻吩并[3，2-d]嘧啶 -6-基)吡啶-2-基氨基)丙-1，2-二醇435
经由一般程序L，使4-(2-氯-6-(6-氟吡啶-3-基)-7-甲基噻吩并[3，2-d]嘧啶-4-基)吗啉 与3-氨基-1，2-丙二醇反应，经快速色谱纯化后，获得相应的中间体，然后经由一般程 序A使之与5-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂环戊硼烷-2-基)-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶反应， 通过反相HPLC纯化后，获得50mg的435。MS(Q1)518(M+)。
实施例360 2-(2-(5-(7-甲基-4-吗啉代-2-(1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-5-基)噻吩并[3，2-d]嘧 啶-6-基)吡啶-2-基氨基)乙氧基)乙醇 436
经由一般程序L，使4-(2-氯-6-(6-氟吡啶-3-基)-7-甲基噻吩并[3，2-d]嘧啶-4-基)吗啉 与2-(2-氨基乙氧基)乙醇反应，经快速色谱纯化后获得相应中间体，然后经由一般程 序A使其与5-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂环戊硼烷-2-基)-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶反应， 经反相HPLC纯化后获得52mg的436。MS(Q1)532(M+)。
实施例361 N-甲基(4-吗啉代-2-(1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-5-基)噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基) 甲胺437
按照一般程序A，使(2-氯-4-吗啉-4-基-噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基甲基)-甲胺与 5-(4，4，5，5-四甲基-[1，3，2]二氧杂环戊硼烷-2-基)-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶反应，获得437。 NMR(DMSO，400MHz)，2.35(3H，s)，3.78-3.82(4H，m)，3.99-4.06(6H，m)，6.54(1H，s) 7.36(1H，s)，7.48-7.51(1H，m)，8.97(1H，s)，9.28(1H，s).MS：(ESI+)：MH+＝381。
实施例362 1-(2-(1H-吲唑-4-基)-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基)吡咯烷-2-酮 438
将在2mL 1，4-二噁烷中的2-氯-6-碘-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶(150mg)、90μL 2- 吡咯烷酮、磷酸三钾(250mg)、碘化酮(7mg)、4μL N，N-二甲基乙二胺加热到100℃， 保持16小时。将该反应混合物蒸发，残留物用乙酸乙酯(60mL)稀释，用盐水(30mL) 洗涤，用MgSO4干燥，经过滤并蒸发。在反相HPLC上纯化粗产物，获得53mg1-(2- 氯-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基)吡咯烷-2-酮。
经由一般程序A，将1-(2-氯-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基)吡咯烷-2-酮(35mg) 与4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂环戊硼烷-2-基)-1H-吲唑偶联。通过反相HPLC纯化 产物，获得19.5mg的438。MS(Q1)421(M)+。
实施例363 3-(2-(1H-吲唑-4-基)-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基)噁唑烷-2-酮 439
在-78℃下，将正丁基锂(9.4mL，22.48mmol，2.5M己烷溶液)加入到2-氯-4-吗 啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶(3.0g，11.74mmol)在60mL THF中的混合物中。将该反应混 合物升温至-40℃，并搅拌30分钟。滴加碘(6.0g，23.48mmol)的THF(10mL)溶 液。加完后，将反应混合物升温至室温，并搅拌2小时。通过用二氯甲烷(300mL) 稀释和用H2O(2×100mL)萃取来猝灭该混合物。有机层用Na2S2O3(2×100mL)、 H2O(2×100mL)洗涤，经MgSO4干燥、过滤、蒸发，获得2-氯-6-碘-4-吗啉代噻吩 并[3，2-d]嘧啶(3.4g，75％)。
将在2mL 1，4-二噁烷中的2-氯-6-碘-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶(150mg)、2-噁唑 烷酮(103mg)、磷酸三钾(250mg)、碘化酮(7mg)和4μLN，N-二甲基乙二胺加热 到100℃，保持15小时。将该反应混合物蒸发，残留物用乙酸乙酯(50mL)稀释， 用盐水(30mL)洗涤，经MgSO4干燥，过滤并蒸发。通过反相HPLC纯化粗产物， 获得46mg 3-(2-氯-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基)噁唑烷-2-酮。
经由程序A，将3-(2-氯-4-吗啉代噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-基)噁唑烷-2-酮(46mg)与 4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂环戊硼烷-2-基)-1H-吲唑偶联。通过反相HPLC纯化产 物，获得8.6mg 439。MS(Q1)423(M)+。
实施例364 p110α PI3K结合分析
结合分析：在Analyst HT 96-384(Molecular Devices Corp，Sunnyvale，CA.)上进 行初始偏振实验。通过在终浓度10mM的PIP2(Echelon-Inc，Salt Lake City，UT.)中加 入以20μg/mL的终浓度起始的p110α PI3K(Upstate Cell Signaling Solutions， Charlottesville，VA)在偏振缓冲液(10mM Tris pH7.5，50mM NaCl，4mM MgCl2， 0.05％Chaps和1mM DTT)中的1:3连续稀释物来制备荧光偏振亲合(fluorescence polarization affinity)测定用样品。在室温下孵育30分钟后，通过添加终浓度分别为 100nM和5nM的GRP-1和PIP3-TAMRA探针(Echelon-Inc，Salt Lake City，UT.)使反 应停止。在384孔黑色低容积浅孔板(Proxiplates)(PerkinElmer，Wellesley，MA.) 中用对于若丹明荧光团的标准截止滤光片(cut-offfilters)(λex＝530nm；λem＝590nm) 读数。绘制作为蛋白浓度的函数的荧光偏振值，通过使用KaleidaGraph软件(Synergy software，Reading，PA)将该数据与4-参数方程式拟合来获得EC50值。该实验还确立在 随后的抑制剂竞争实验中使用的恰当蛋白浓度。
通过以下方法测定抑制剂的IC50值：在孔中加入与PIP2(100mM终浓度)混合 的0.04mg/mL p110α PI3K(终浓度)，所述孔含有在偏振缓冲液中的终浓度为25mM 的ATP(CellSignaling Technology，Inc.，Danvers，MA)中的拮抗剂1:3连续稀释物。在 室温下孵育30分钟后，通过分别添加100nM和5nM终浓度的GRP-1和PIP3-TAMRA 探针(Echelon-Inc，Salt Lake City，UT.)来停止反应。在384孔黑色低容积浅孔板 (Proxiplates)(PerkinElmer，Wellesley，MA.)中用对于若丹明荧光团的标准截止滤 光片(λex＝530nm；λem＝590nm)读数。绘制作为拮抗剂浓度的函数的荧光偏振值， 通过使用Assay Explorer软件(MDL，San Ramon，CA.)将该数据与4-参数方程式拟合 来获得IC50值。
或者，在使用纯化的重组酶和浓度为1μM的ATP的放射分析中测定PI3K的抑制。 在100％DMSO中连续稀释该化合物。将该激酶反应物在室温下孵育1小时，通过加 入PBS来终止反应。随后使用S形剂量-反应曲线拟合(可变斜率)来测定IC50值。
实施例365 p110同工型选择性闪烁亲近结合分析
通过放射闪烁亲近分析(SPA，GE Healthcare，Amersham Biosciences)来测定表1a 和1b中的式Ia和Ib化合物抑制人PI3K同工型α、β、δ和γ的纯化制剂的脂质激酶 活性的能力。测定所有四种同工型(α)的50％浓度依赖性抑制(Concentration dependent inhibition at50％)(IC50μMol)，计算α同工型与β、δ和γ同工型相比的效 力倍数，用于表2中化合物的选择。每一种化合物具有<1μMol的p110αIC50。
表2
化合物            α/β               α/δ            α/γ
101               >10              <10             >10
133               <10              <10             >10
137               >10              <10             <10
170               <10              <10             <10
202               <10              <10             >10
203               <10              <10             >10
205               <10              <10             >10
208               >10              <10             >10
218               >10              <10             >10
226               <10              <10             >10
233               >10              <10             <10
235               >10              <10             >10
237               >10              <10             >10
238               >10              <10             >10
257               <10              <10             >10
263               <10              <10             >10
265               >10              <10             >10
304               10               <10             >10
305               <10              <10             >10
312               <10              <10             >10
321               >10              <10             >10
324               >10              <10             >10
334               >10              <10             >10
336               >10              <10             >10
338               >10              <10             >10
353               <10              <10             >10
360               >10              >10             >10
368               <10              <10             >10
388               >10              <10             >10
390               <10              <10             <10
395          >10          >10          >10
417          >10          >10          >10
418          >10          10           >10
422          >10          <10          >10
428          >10          >10          >10
429          >10          >10          >10
实施例366 体外细胞增殖分析
通过使用下列操作程序的细胞增殖分析测定式Ia和Ib的化合物的效力(Promega Corp.Technical Bulletin TB288；Mendoza等人(2002)Cancer Res.62：5485-5488)：
1.将培养基中含有大约104细胞(PC3、Detroit562或MDAMB361.1)的100μl 细胞培养物等份试样沉积在384孔不透明壁板的每一孔内。
2.制备含有培养基但无细胞的对照孔。
3.将该化合物加入到实验孔内，孵育3-5天。
4.将板平衡至室温，保持大约30分钟。
5.添加其体积等于每孔内所存在的细胞培养基体积的CellTiter-Glo试剂。
6.在定轨振荡器上将内容物混合2分钟，以诱发细胞裂解。
7.将板在室温下孵育10分钟，以稳定发光信号。
8.记录发光，并在图中报告为RLU＝相对发光单位。
或者，将细胞以最佳密度接种于96孔板上，在试验化合物的存在下孵育4天。 随后将Alamar BlueTM加入到试验培养基中，将细胞孵育6小时，然后在544nm激发、 590nm发射下jinx读数。使用S形剂量-反应曲线拟合来计算EC50值。
实施例367 Caco-2渗透性
以1×105细胞/cm2的密度将Caco-2细胞接种到Millipore Multiscreen板上，培养 20天。随后进行化合物渗透性评价。将化合物施加于细胞单层的顶面(A)上，对进 入基底外侧(B)区室的化合物渗透进行测定。这以反向(B-A)进行，以研究主动运 输。计算每一种化合物的渗透系数值Papp(化合物跨膜渗透率的度量)。基于与具有已 确立的人体吸附的对照化合物的比较，将化合物分组为低(Papp/＝1.0×106cm/s)吸附电位。
为了评价化合物进行主动外排的能力，测定相比于A对B的基底外侧(B)与顶 面(A)运输的比率。B-A/A-B>/＝1.0的值表示发生了主动的细胞外排。具有 >/＝1.0×106cm/s的Papp值。
实施例368 肝细胞清除率
使用冷藏的人肝细胞的悬浮液。在1mM或3μM的化合物浓度和0.5×106存活细 胞/mL的细胞密度下孵育。孵育中的最终DMSO浓度为0.25％。还在不存在细胞的 条件下进行对照孵育，以揭露任何的非酶促降解。在0、5、10、20、40和60分钟时 (对照样品仅在60分钟时)从孵育混合物中取双份样品(50μL)，并加入到含甲醇的 内标(100μL)中-以终止反应。使用甲苯磺丁脲、7-羟基香豆素和睾酮作为对照化 合物。将样品离心，将每一时间点的上清汇集，通过LC-MSMS分析。从ln峰面积 比(母体化合物峰面积/内标峰面积)对时间的图线(plot)，计算内在清除率(CLint) 如下：CLint(μl/min/百万细胞)＝V x k，其中k是消除速度常数，由ln浓度对时间的图 线的梯度获得；V是源自孵育体积的体积术语，表示为μL106细胞-1。
基于低(CL/＝4.6；/＝25.2μl/min/106细胞)肝细胞清除率来表征表1a和1b的化合物。
实施例369 细胞色素P450的抑制
通过抗五种CYP450靶标(1A2、2C9、2C19、2D6、3A4)筛选本发明的某些化 合物，所述靶标采用一式两份10个浓度，最高浓度使用100μM。使用标准抑制剂(呋 拉茶碱、磺胺苯吡唑、反苯环丙胺、奎尼丁、酮康唑)作为对照。使用的BMG LabTechnologies PolarStar以荧光模式进行读板。
实施例370 细胞色素P450的诱导
将新鲜分离自单个供体的人肝细胞培养48小时，然后添加三种浓度的试验化合 物并孵育72小时。在孵育结束前30分钟和1小时，添加CYP3A4和CYP1A2的探 针底物。在72小时，移出细胞和培养基，通过LC-MS/MS定量每一种探针底物的代 谢程度。通过使用一式三份的在某一浓度下孵育的各P450s的诱导剂控制实验，以测 定细胞色素P450酶的诱导程度。
实施例371 血浆蛋白的结合
在缓冲液和10％血浆(v/v，缓冲液中)中制备试验化合物溶液(5μm，0.5％最 终DMSO浓度)。组装96孔HT透析板，从而通过半渗透纤维素膜将每一孔分成两 部分。在膜的一侧加入缓冲溶液，在另一侧加入血浆溶液；然后在37℃下按一式三份 孵育2小时。接着倒空小室(cells)，将每一批化合物的溶液合并为两组(无血浆和含 血浆)，然后使用用于无血浆溶液(6个点)和含血浆溶液(7个点)的两套校准标准 品通过LC-MSMS进行分析。表1a和1b的化合物的未结合分数值计算为：高蛋白结 合化合物(>/＝90％结合)具有实施例372 hERG通道阻断
使用已确立的外向通量方法，评价表1a和1b的化合物对自稳定表达hERG钾通 道的HEK-294细胞的铷流出量的调节。在含有RbCl的培养基中制备细胞，将其平板 接种到96孔板内，使之生长过夜，以形成单层细胞。通过在室温下抽吸该培养基并 用3×100μL的预孵育缓冲液(含有低[K+])洗涤每一个孔来启动外向通量实验。在最 终的抽吸之后，将50μL工作储存(working stock)(2×)化合物加入到每一孔内，在 室温下孵育10分钟。然后将50μL刺激缓冲液(含有高[K+])加入到每一孔内，获得 最终的试验化合物浓度。然后将细胞板在室温下孵育另外10分钟。随后将来自各个 孔的80μL上清液转移到96孔板的对等孔内，通过原子发射光谱法进行分析。根据 10pt重复IC50曲线(n＝2)从最高浓度100μM筛选化合物。
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