作为细胞坏死阻碍剂的吲哚酰胺化合物
阅读：47发布：2022-01-31
专利汇可以提供作为细胞坏死阻碍剂的吲哚酰胺化合物专利检索，专利查询，专利分析的服务。并且本 发明 涉及化学式(1)的吲哚酰胺化合物、或者其药学容许的盐或异构体，及以含有此作为活性成分作为特征的用于 预防 或 治疗 细胞 坏死 及其关联 疾病 的组合物及组合物的制造方法。，下面是作为细胞坏死阻碍剂的吲哚酰胺化合物专利的具体信息内容。
1.化学式(1)的吲哚酰胺化合物、或者其药学容许的盐：
[化学式1]
在所述式中，
R1表示氢，C1-C6-烷基或-(CH2)n-C3-C8-环烷基，n是0～2的数，
R2表示-X-(CH2)n-A-R6，且其中
X表示直接键，
A表示直接键，或表示C3-C8-环烷基或C6-C10-芳基，或表示包含选自N及O的1或2个杂原子的4～8元杂环基，
R6表示氢或C1-C6-烷基，
前提是R2不是氢，
R3表示卤素或C1-C6-烷基，
R4表示-(CHR7)n-B-(Z-R8)(Z’-R9)，且其中
R7表示氢或C1-C6-烷基，
B表示直接键，或表示C6-C10-芳基，
Z及Z’各自独立地表示直接键，-(CH2)m-，-O-或-N-，
m是0～3的数，
R8及R9各自独立地表示氢，氨基，C1-C6-烷基，-CO2R7，C6-C10-芳基，C6-C10-芳基-C1-C6-烷基或C6-C10-芳基-C1-C6-烷基氨基，或表示包含选自N，O及S的1～3个杂原子的4～8元杂环基，
前提是当B是直接键时，(Z’-R9)不存在，
R5表示-(CH2)m-R10，且其中R10表示氢，C1-C6-烷基或C6-C10-芳基，Z’及R5可与附接于这些的原子一起结合而形成 结构，前提是，当Z’表示-O-时，R9不存在，
在上述中，烷基和芳基可被任选取代，取代基是选自卤素，氨基，二(C1-C6烷基)氨基，C1-C6烷基及氧代的一种以上。
2.权利要求1的化合物，其中
R1表示氢，C1-C6-烷基或-(CH2)n-C3-C8-环烷基，n是0～2的数，
R2表示-X-(CH2)n-A-R6，且其中
X表示直接键，
A表示直接键，或表示C4-C8-环烷基或C6-C10-芳基，或表示包含选自N及O的1或2个杂原子的4～8元杂环基，
R6表示氢或C1-C6-烷基，
前提是R2不是氢，
R3表示卤素或C1-C6-烷基，
R4表示-(CHR7)n-B-(Z-R8)(Z’-R9)，且其中
R7表示氢或C1-C6-烷基，
B表示直接键，或表示苯基，
Z及Z’各自独立地表示直接键，-(CH2)m-，-O-或-N-，
m是0～3的数，
R8及R9各自独立地表示氢，氨基，任选被卤素取代的C1-C6-烷基，-CO2R7，任选被卤素或C1-C6-烷基取代的C6-C10-芳基，C6-C10-芳基-C1-C6-烷基，或者任选被卤素或二(C1-C6-烷基)氨基取代的C6-C10-芳基-C1-C6-烷基氨基，或表示包含选自N，O及S的1～3个杂原子的4～8元杂环基，
前提是，当B是直接键时，(Z’-R9)不存在，
R5表示-(CH2)m-R10，且其中R10表示氢，任选被氨基取代的C1-C6-烷基或任选被卤素取代的C6-C10-芳基，
Z’及R5可与附接于这些的原子一起结合而形成 结构，前提是当Z’表示-O-
时，R9不存在。
3.权利要求1的化合物，其为下示化学式(1a)或(1b)的化合物：
[化学式(1a)]
[化学式(1b)]
在上述式中，R1，R2，R3，R5，R8，R9，R10，Z，Z’，B及n如在权利要求1中定义。
4.权利要求1的化合物，其中R1表示氢，异戊基或环戊基甲基。
5.权利要求1的化合物，其中R2表示-X-(CH2)n-A-R6，且其中n是0～2的数，
X表示直接键，
A表示直接键，或表示C3-C6-环烷基或苯基，或表示包含选自N及O的1或2个杂原子的4～
6元杂环基，
R6表示氢或C1-C6-烷基，前提是R2不是氢。
6.权利要求5的化合物，其中R2表示环戊基，哌啶，异戊基，环戊基甲基，苯乙基，戊基，环丙基甲基，哌啶-3-基，四氢吡喃或环己基。
7.权利要求1的化合物，其中R3表示卤素或C1-C3-烷基。
8.权利要求7的化合物，其中R3表示氯，溴或甲基。
9.权利要求1的化合物，其中R4的B表示直接键，或表示苯基。
10.权利要求1的化合物，其中R4的Z及Z’各自独立地表示-(CH2)m-，-O-或-N-。
11.权利要求1的化合物，其中R4的R8表示氢，氨基，任选被卤素取代的C1-C6-烷基，-CO2R7，任选被卤素或C1-C3-烷基取代的苯基，苯基-C1-C3-烷基，任选被卤素或二(C1-C3-烷基)氨基取代的苄基氨基，或者表示包含选自N，O及S的1～2个杂原子的5～6元杂环基，其中所述-CO2R7中的R7表示氢或C1-C3-烷基。
12.权利要求11的化合物，其中R8表示氨基，异戊基，3,5-二甲基-苯基，三氟甲基，苯基，苄基，异丙基，3-二甲基氨基-苄基氨基，3,5-二氟苄基氨基，羧基，哌啶，甲氧基羰基或吡咯烷。
13.权利要求1的化合物，其中R4的R9表示氢或苄基。
14.权利要求1的化合物，其中R5的R10表示氢，2,4-二氟苯基，4-氟苯基或氨基甲基。
15.吲哚化合物，其为选自下列的化合物，或者其药学容许的盐：
5-氯-7-环戊基氨基-1H-吲哚-2-羧酸(4-苯氧基-苯基)-酰胺；
5-氯-7-(吡咯烷-3-基氨基)-1H-吲哚-2-羧酸(4-苯氧基-苯基)-酰胺；
5-氯-7-(哌啶-4-基氨基)-1H-吲哚-2-羧酸[4-(3,4-二氟-苯氧基)-苯基]-酰胺；
5-氯-7-(哌啶-4-基氨基)-1H-吲哚-2-羧酸(3-苯氧基-苯基)-酰胺；
5-氯-7-[(吡咯烷-2-基甲基)-氨基]-1H-吲哚-2-羧酸苄基酰胺；
5-氯-7-(哌啶-3-基氨基)-1H-吲哚-2-羧酸(4-苯氧基-苯基)-酰胺；
5-氯-7-(哌啶-4-基氨基)-1H-吲哚-2-羧酸(4-苯氧基-苯基)-酰胺；
5-氯-7-[(吡咯烷-2-基甲基)-氨基]-1H-吲哚-2-羧酸(3-苯氧基-苯基)-酰胺；
5-氯-7-[(吡咯烷-2-基甲基)-氨基]-1H-吲哚-2-羧酸(3-环戊基氧基-5-苯氧基-苯基)-酰胺；
5-氯-7-[(吡咯烷-2-基甲基)-氨基]-1H-吲哚-2-羧酸(4-苯氧基-苯基)-酰胺；
7-[(2-氨基-吡啶-3-基甲基)-氨基]-5-氯-1H-吲哚-2-羧酸[4-(3,4-二氟-苯氧基)-苯基]-酰胺；
5-氯-7-(哌啶-4-基氨基)-1H-吲哚-2-羧酸(3-环戊基氧基-苯基)-酰胺；
5-氯-7-(哌啶-4-基氨基)-1H-吲哚-2-羧酸(3-吗啉-4-基甲基-苯基)-酰胺；
5-氯-7-(哌啶-4-基氨基)-1H-吲哚-2-羧酸联苯-3-基酰胺；
5-氯-7-(哌啶-4-基氨基)-1H-吲哚-2-羧酸(3-苄基氧基-苯基)-酰胺；
5-氯-7-(哌啶-4-基氨基)-1H-吲哚-2-羧酸(4-三氟甲氧基-苯基)-酰胺；
5-氯-7-(哌啶-4-基氨基)-1H-吲哚-2-羧酸[4-(3,5-二甲基-苯氧基)-苯基]-酰胺；
5-氯-7-(哌啶-4-基氨基)-1H-吲哚-2-羧酸[2-(3-氟-苯基)-乙基]-酰胺；
5-氯-7-[(噻唑-2-基甲基)-氨基]-1H-吲哚-2-羧酸(3-苯氧基-苯基)-酰胺；
5-氯-7-(哌啶-4-基氨基)-1H-吲哚-2-羧酸(4-异戊基氧基-苯基)-酰胺；
5-氯-7-[(吡咯烷-2-基甲基)-氨基]-1H-吲哚-2-羧酸[4-(3,4-二甲基-苯氧基)-苯基]-酰胺；
(5-氯-7-环戊基氨基-1H-吲哚-2-基)-吡咯烷-1-基-甲酮；
(R)-1-(5-氯-7-环戊基氨基-1H-吲哚-2-羰基)-吡咯烷-3-羧酸甲基酯；
(S)-1-(5-氯-7-环戊基甲基氨基-1H-吲哚-2-羰基)-吡咯烷-3-羧酸甲基酯；
(R)-1-[5-氯-7-(四氢-吡喃-4-基氨基)-1H-吲哚-2-羰基]-吡咯烷-3-羧酸甲基酯；
(S)-1-[5-甲基-7-(四氢-吡喃-4-基氨基)-1H-吲哚-2-羰基]-吡咯烷-3-羧酸甲基酯；
(5-溴-7-环己基氨基-1H-吲哚-2-基)-吗啉-4-基-甲酮；
(7-环戊基氨基-5-甲基-1H-吲哚-2-基)-吗啉-4-基-甲酮；
(7-环戊基氨基-5-甲基-1H-吲哚-2-基)-哌嗪-4-基-甲酮；
5-氯-7-环戊基氨基-1H-吲哚-2-羧酸(1-苄基-吡咯烷-3-基甲基)-酰胺；
7-环戊基氨基-5-甲基-1H-吲哚-2-羧酸(2-二甲基氨基-乙基)-酰胺；
7-环戊基氨基-5-甲基-1H-吲哚-2-羧酸(2-吗啉-4-基-乙基)-酰胺；
(4-苄基-哌嗪-1-基)-[5-氯-7-(哌啶-4-基氨基)-1H-吲哚-2-基]-甲酮；
[5-氯-7-(哌啶-4-基氨基)-1H-吲哚-2-基]-[(R)-3-(3,4-二氟-苯氧基甲基)-吡咯烷-1-基]-甲酮；
[5-氯-7-(哌啶-4-基氨基)-1H-吲哚-2-基]-[(R)-3-苯氧基甲基-吡咯烷-1-基]-甲酮；
(R)-1-[5-氯-7-(四氢-吡喃-4-基氨基)-1H-吲哚-2-羰基]-吡咯烷-3-羧酸；
[5-氯-7-(四氢吡喃-4-基氨基)-1H-吲哚-2-基]-((R)-3-羟甲基-吡咯烷-1-基)-甲酮；
(S)-1-[5-甲基-7-(四氢吡喃-4-基氨基)-1H-吲哚-2-羰基]-吡咯烷-3-羧酸；
7-(2-氨基-乙酰氨基)-5-氯-1H-吲哚-2-羧酸(4-苯氧基-苯基)-酰胺；
(3-氨基甲基-吡咯烷-1-基)-(5-氯-7-环戊基氨基-1H-吲哚-2-基)-甲酮；
(5-氯-7-环戊基氨基-1H-吲哚-2-基)-(3-哌啶-1-基甲基-吡咯烷-1-基)-甲酮；
[5-氯-7-(四氢-吡喃-4-基氨基)-1H-吲哚-2-基]-(3-哌啶-1-基甲基-吡咯烷-1-基)-甲酮；
(3-氨基甲基-吡咯烷-1-基)-[5-氯-7-(四氢-吡喃-4-基氨基)-1H-吲哚-2-基]-甲酮；
((R)-3-氨基-吡咯烷-1-基)-(5-氯-7-环戊基氨基-1H-吲哚-2-基)-甲酮；
(5-氯-7-环戊基氨基-1H-吲哚-2-基)-{3-[(3-二甲基氨基-苄基氨基)-甲基]-吡咯烷-1-基}-甲酮；
(3-氨基甲基-吡咯烷-1-基)-[5-氯-7-(3-甲基-丁基氨基)-1H-吲哚-2-基]-甲酮；
(3-氨基甲基-吡咯烷-1-基)-[5-氯-7-(环戊基甲基-氨基)-1H-吲哚-2-基]-甲酮；
(3-氨基甲基-吡咯烷-1-基)-(5-氯-7-哌啶-1-基-1H-吲哚-2-基]-甲酮；
(3-氨基甲基-吡咯烷-1-基)-(5-氯-7-苯乙基氨基-1H-吲哚-2-基]-甲酮；
(3-氨基甲基-吡咯烷-1-基)-(5-氯-7-戊基氨基-1H-吲哚-2-基]-甲酮；
(3-氨基甲基-吡咯烷-1-基-(5-氯-7-环己基氨基-1H-吲哚-2-基]-甲酮；
(3-氨基甲基-哌啶-1-基)-(5-氯-7-环戊基氨基-1H-吲哚-2-基)-甲酮；
(3-氨基甲基-吡咯烷-1-基)-[7-(双-环丙基甲基-氨基)-5-氯-1H-吲哚-2-基]-甲酮；
(3-氨基甲基-吡咯烷-1-基)-{7-[双-(3-甲基-丁基)-氨基]-5-氯-1H-吲哚-2-基}-甲酮；
((S)-3-氨基-吡咯烷-1-基)-(5-氯-7-环戊基氨基-1H-吲哚-2-基)-甲酮；
{7-[双-(3-甲基-丁基)-氨基]-5-氯-1H-吲哚-2-基}-[3-(4-氟-苄基氨基甲基)-吡咯烷-1-基]-甲酮；
{7-[双-(3-甲基-丁基)-氨基]-5-氯-1H-吲哚-2-基}-[3-(3,4-二氟-苄基氨基甲基)-吡咯烷-1-基]-甲酮；
(3-氨基甲基-吡咯烷-1-基)-(5-溴-7-环戊基氨基-1H-吲哚-2-基)-甲酮；
7-环戊基氨基-5-甲基-1H-吲哚-2-羧酸(吡咯烷-3-基甲基)-酰胺；
{7-[双-(3-甲基-丁基)-氨基]-5-氯-1H-吲哚-2-基}-[(3R,4R)-3-(2,4-二氟-苯基)-
4-吡咯烷-1-基甲基-吡咯烷-1-基]-甲酮；
{7-[双-(3-甲基-丁基)-氨基]-5-氯-1H-吲哚-2-基}-[(3R,4R)-3-(4-氯-苯基)-4-吡咯烷-1-基甲基-吡咯烷-1-基]-甲酮；
(5-氯-7-环戊基氨基-1H-吲哚-2-基)-[(3R,4R)-3-(2,4-二氟-苯基)-4-吡咯烷-1-基甲基-吡咯烷-1-基]-甲酮；
(5-氯-7-(四氢吡喃-4-基氨基)-1H-吲哚-2-基)-[(3R,4R)-3-(2,4-二氟-苯基)-4-吡咯烷-1-基甲基-吡咯烷-1-基]-甲酮；
(5-氯-7-(哌啶-4-基氨基)-1H-吲哚-2-基)-[(3R,4R)-3-(2,4-二氟-苯基)-4-吡咯烷-1-基甲基-吡咯烷-1-基]-甲酮；
(5-氯-7-环戊基氨基)-1H-吲哚-2-羧酸((R)-2-苯基-1-吡咯烷-1-基甲基-乙基)-酰胺；
[5-甲基-2-(吡咯烷-1-羰基)-1H-吲哚-7-基氨基]-乙酸；及
[7-环戊基氨基-5-(1,1-二氧代-硫代吗啉-4-基甲基)-1H-吲哚-2-基]-吡咯烷-1-基-甲酮。
16.用于预防或治疗细胞坏死及其关联疾病的组合物，其特征在于，与药学容许的载体或稀释剂一起含有治疗学有效量的根据权利要求1的化学式(1)的化合物、或者其药学容许的盐作为活性成分。
17.根据权利要求1的化学式(1)的化合物或者其药学容许的盐用于制备预防或治疗细胞坏死及其关联疾病的组合物的用途。
18.权利要求17的用途，其中细胞坏死及其关联疾病选自急性/慢性肝疾病，神经退行性疾病，缺血性疾病，糖尿病，胰腺炎，细菌性/病毒性败血症，坏死性原结肠炎，囊泡性纤维症，类风湿性关节炎，退行性关节炎，肾病，细菌感染，病毒感染，多发性硬化症，白血病，淋巴瘤，新生儿呼吸窘迫综合征，窒息，子宫内膜症，血管无力症，银屑病，冻疮，甾类处理并发症，坏疽病，压痛，血红蛋白尿症，烧伤，高热症，克罗恩氏病，乳糜泻病，间隔综合征，脊髓损伤，肾小球肾炎，肌营养不良症，代谢性遗传疾病，支原体疾病，安德森病，先天性线粒体病，苯丙酮尿症，胎盘梗塞及无菌性坏死。
19.权利要求18的用途，其中所述细菌感染是结核，炭疽病或梅毒。
20.权利要求17的用途，其中细胞坏死及其关联疾病是由药物及毒性物质导致的疾病，且选自与酒精中毒及暴露于可卡因，药物，化学毒素，毒气，农药，重金属或这些的施用或自身施用关联的细胞坏死，由暴露于放射能/UV导致的损伤及与此关联的细胞坏死。
21.权利要求20的用途，其中所述药物是抗生素，抗癌剂或NSAID。
22.权利要求17的用途，其用于肝保护，肝功能改善及预防或治疗肝疾病。
23.权利要求22的用途，其中肝疾病选自肝移植，酒精性或非酒精性脂肪肝，肝纤维症，肝硬变，病毒或药物引发的肝炎。
24.权利要求22的用途，其中肝疾病是酒精性急性/慢性肝疾病。
25.权利要求22的用途，其中肝疾病是源于脂肪酸的脂肪肝或源于脂肪肝的急性/慢性肝疾病。
26.权利要求22的用途，其特征在于，肝疾病由活性氧介导。
27.权利要求22的用途，其特征在于，肝疾病由重金属介导。
28.权利要求17的用途，其中所述组合物与药物-诱导性细胞坏死及其关联疾病的预防或治疗剂联用施用。
29.权利要求28的用途，其中药物-诱导性细胞坏死及其关联疾病的预防或治疗剂选自抗生素，抗癌剂，抗病毒剂，抗感染剂，抗炎症剂，抗凝血剂，脂质改善剂，细胞死亡抑制剂，抗高血压剂，糖尿病/肥胖治疗剂，心血管疾病治疗剂，神经退行性疾病治疗剂，抗老化剂，及代谢性疾病治疗剂。
30.权利要求22的用途，其中所述组合物与选自肝细胞再生促进剂，肝功能佐剂，抗病毒剂，免疫抑制剂，及纤维化抑制剂的药剂联用施用。
31.权利要求18的用途，其中神经退行性疾病是痴呆，帕金森病或亨廷顿病。
32.权利要求18的用途，其中缺血性疾病是心脏疾病，再灌流损伤，缺血性中风或缺血性损伤。
33.权利要求18的用途，其中糖尿病是胰腺细胞破坏物质所致的糖尿病，糖尿病性并发症或糖尿病性血管疾病。
34.权利要求33的用途，其特征在于，糖尿病由病毒，高血糖，脂肪酸，饮食，毒素或链脲霉素介导。
35.细胞坏死及其关联疾病的预防或治疗剂组合物的制造方法，其特征在于，包括将根据权利要求1的化学式(1)的化合物、或者其药学容许的盐作为活性成分与药学容许的载体一起混合的步骤。
作为细胞坏死阻碍剂的吲哚酰胺化合物
【技术领域】
[0002] 与细胞死亡关联的大多数的研究集中在被称为程序性细胞死亡(PCD)的细胞的凋亡(apoptosis)，随着发现被称为胱天蛋白酶(caspase)的酶，在过去的10年由多家制药公司进行了利用胱天蛋白酶抑制剂的药物开发。但实情是，至现在为止还几乎无被FDA的承认的药物。这是由于，细胞的凋亡是在生理状况发生的细胞死亡，由维持体内的稳态(homeostasis)的防御机理所致的可能性大。与此形成对比，，细胞坏死(necrosis)主要是在病态的状况发生的细胞死亡，在绝大多数的情况下有伴随炎症(inflammation)反应的特征。细胞坏死在长期研究期间被认为是非调节性(uncontrolled)是细胞死亡，但最近的研究结果(Proskurykakov SY et al。2002，根据Biochemistry)由细胞坏死诱发的疾病以缺血性(ischemic，例如心肌梗塞，中风，肾梗塞)，神经退行性(neurodegenerative)，而且炎症性(inflammatory)疾病为代表。细胞坏死是在病态的状况的非调节性意外死亡，由于其作用机理，分子靶向及信号递送体系等几乎未被研究，为治疗细胞坏死成为原因的缺血性，神经退行性，而且炎症性疾病，及解明细胞坏死的生物学，病理性原因，发现并开发这样的细胞坏死抑制物质是非常紧急的事务。
[0003] 根据本发明的吲哚酰胺衍生物是医药上非常有用的结构，对于这些结构有多篇发表的研究结果，其中以报告了对于葡萄糖激酶有活性的专利WO2006/112549，报告了作为抗肿瘤及心血管生成阻碍剂有用的专利WO95/07276，及报告了可作为抗生素使用的专利WO2004/018428等为代表。【发明内容】
[0004] 【发明要解决的技术课题】
[0005] 由此，本发明人在上述说明的技术性背景下，为了开发不仅显示对于细胞坏死及其关联疾病的预防或治疗及改善效果，还尤其是对于肝疾病的预防或治疗有用的化合物，施行集中并广泛的研究，其结果发现，如下说明的化学式(1)的取代的吲哚酰胺衍生物在细胞坏死及其关联疾病的预防和治疗中显现卓越的效果，从而完成本发明。
[0006] 从而，本发明旨在提供化学式(1)的新颖的吲哚酰胺化合物。
[0007] 本发明另外旨在提供用于肝保护，肝功能改善及预防或治疗细胞坏死及其关联疾病，尤其是急性/慢性肝疾病的组合物，其特征在于，与药学容许的载体或稀释剂一起含有化学式(1)的化合物、或者其药学容许的盐或异构体作为活性成分。
[0008] 本发明另外旨在提供使用所述组合物来用于肝保护，肝功能改善及预防或治疗细胞坏死及其关联疾病，尤其是急性/慢性肝疾病的方法。
[0009] 【解决课题的技术方案】
[0010] 为达成这样的目的，本发明提供下示化学式(1)所表示的吲哚酰胺化合物、或者其药学容许的盐或异构体：
[0011] [化学式1]
[0012]
[0013] 在所述式中，
[0014] R1表示氢，C1-C6-烷基或-(CH2)n-C3-C8-环烷基，
[0015] n是0～2的数，
[0016] R2表示-X-(CH2)n-A-R6，且其中X表示直接键或-C(O)-，A表示直接键，或表示C3-C8-环烷基或C6-C10-芳基，或表示各自包含选自N，O及S的1～3个杂原子的4～8元杂环基或杂芳基，R6表示氢，C1-C6-烷基，卤素，羟基，氨基，腈，硝基或-CO2-R7，R7表示氢，C1-C6-烷基，C6-C10-芳基或C6-C10-芳基-C1-C6-烷基，或表示各自任选包含氧代、且包含选自N，O及S的1～3个杂原子的5～6元杂环基或杂芳基，或
[0017] R1及R2一起结合而表示-(CH2)r-，且其中r是4～6的数，
[0018] R3表示氢，卤素，羟基，-O-R7，-NH-R7或-(CH2)m-R7，且其中m是0～3的数，[0019] R4表示-(CHR7)n-B-(Z-R8)(Z’-R9)，且其中B表示直接键，或表示C6-C10-芳基，或表示各自包含选自N，O及S的1～3个杂原子的4～9元杂环基或杂芳基，Z及Z’各自独立地表示直接键，-(CH2)m-，-O-或-N-，R8及R9各自独立地表示氢，卤素，羟基，氨基，二(C1-C6-烷基)氨基，C1-C6-烷基，-CO2R7，C3-C8-环烷基，C6-C10-芳基，C6-C10-芳基氧基，C6-C10-芳基-C1-C6-烷基或C6-C10-芳基-C1-C6-烷基氨基，或表示包含选自N，O及S的1～3个杂原子的4～8元杂环基，
[0020] R5表示-(CH2)m-R10，且其中R10表示氢，C1-C6-烷基或C6-C10-芳基，或
[0021] Z’及R5与附接了这些的原子一起结合而可形成 结构，其中当Z’表示-O-时，R9不存在，
[0022] 在上述中，烷基，烷氧基，芳基，环烷基，杂环及杂芳基可被任选取代，取代基是选自羟基，卤素，腈，氨基，烷基氨基，二烷基氨基，羧基，烷基，烷氧基，芳基烷氧基及氧代的一种以上。
[0023] 在根据本发明的化学式(1)对于化合物的取代基的定义中，术语‘烷基’是指脂肪族烃基。烷基可为不包含烯基或炔基部位的“饱和烷基(saturated alkyl)”，或可为包含至少一个烯基或炔基部位的“不饱和烷基(unsaturated alkyl)”。“烯基(alkenyl)”是指包含至少一个碳-碳双键的基团，“炔基(alkynyl)”是指包含至少一个碳-碳三键的基团。烷基在单独或与烷氧基组合使用时，可各自为分支型或直链型。
[0024] 烷基基团，如不特别定义，可具有1～20个碳原子。烷基基团可为具有1～10个碳原子的中等大小的烷基。烷基基团也可为具有1～6个碳原子的低级烷基。典型的烷基基团中包含甲基，乙基，丙基，异丙基，n-丁基，异丁基，t-丁基，戊基，己基，乙烯基，丙烯基，丁烯基等，但不仅限于这些。例如，C1-C4-烷基在烷基链具有1～4个碳原子，且选自甲基，乙基，丙基，异-丙基，n-丁基，异-丁基，sec-丁基及t-丁基。
[0025] 术语‘烷氧基’，如不特别定义，是指具有1～10个碳原子的烷基氧基。
[0026] 术语‘环烷基’，如不特别定义，是指的饱和脂肪族3～10元环。典型的环烷基基团中包含环丙基，环丁基，环戊基，环己基等，但不仅限于这些。
[0027] 术语‘芳基(aryl)’包含至少一个具有共价π电子系的环，例如包含单环或稠环多环(即，分享碳原子的邻接的对的环)基团。即，在本说明书中，芳基，如不特别定义，是指包含苯基，萘基等的4～10元，优选6～10元芳族单环或多环。
[0028] 术语'杂芳基'，如不特别定义，是指包含选自N，O及S原子的1～3个杂原子，且可与苯并或C3-C8环烷基稠合的芳族3～10元，优选4～8元，更优选5～6元环。作为单环杂芳基的例，可举出噻唑，噁唑，噻吩，呋喃，吡咯，咪唑，异噁唑，异噻唑，吡唑，三唑，三嗪，噻二唑，四唑，噁二唑，吡啶，哒嗪，嘧啶，吡嗪及与此类似的基团，但不限于这些。作为双环杂芳基的例，可举出吲哚，吲哚啉，苯并噻吩，苯并呋喃，苯并咪唑，苯并噁唑，苯并异噁唑，苯并噻唑，苯并噻二唑，苯并三唑，喹啉，异喹啉，嘌呤，嘌呤吡啶及与此类似的基团，但不限于这些。
[0029] 术语'杂环'，如不特别定义，是指包含选自N，O及S原子的1～3个杂原子，且可与苯并或C3-C8-环烷基稠合，饱和，或包含1或2个的双键的3～10元，优选4～8元，更优选5～6元环。作为杂环的例，可举出吡咯啉，吡咯烷，咪唑啉，咪唑烷，吡唑啉，吡唑烷，吡喃，哌啶，吗啉，硫代吗啉，哌嗪，氢呋喃等，但不仅限于这些。
[0030] 其他在本说明书中使用的术语和缩略语，如不特别定义，可解释为本发明所属的技术领域的本领于技术人员常规地理解的含义。
[0031] 在根据本发明的化学式(1)的化合物中也优选的化合物是
[0032] R1表示氢，C1-C6-烷基或-(CH2)n-C3-C8-环烷基，
[0033] n是0～2的数，
[0034] R2表示-X-(CH2)n-A-R6，且其中X表示直接键或-C(O)-，A表示直接键，或表示C4-C8-环烷基或C6-C10-芳基，或表示各自包含选自N，O及S的1～3个杂原子的4～8元杂环基或杂芳基，R6表示氢，C1-C6-烷基，卤素，氨基，腈或-CO2-R7，R7表示氢，C1-C6-烷基，C6-C10-芳基或C6-C10-芳基-C1-C6-烷基，或表示各自任选包含氧代、且包含选自N，O及S的1～3个杂原子的5～6元杂环基或杂芳基，或
[0035] R1及R2一起结合而表示-(CH2)r-，且其中r是4～6的数，
[0036] R3表示氢，卤素或C1-C6-烷基，
[0037] R4表示-(CHR7)n-B-(Z-R8)(Z'-R9)，且其中B表示直接键，或表示苯基，或表示各自包含选自N，O及S的1～3个杂原子的4～9元杂环基或杂芳基，Z及Z'各自独立地表示直接键，-(CH2)m-，-O-或-N-，m是0～3的数，R8及R9各自独立地表示氢，卤素，羟基，氨基，二(C1-C6-烷基)氨基，任选被卤素取代的C1-C6-烷基，-CO2R7，C4-C6-环烷基，任选被卤素或C1-C6-烷基取代的C6-C10-芳基，任选被卤素取代的C6-C10-芳基氧基，C6-C10-芳基-C1-C6-烷基，或者任选被卤素或二(C1-C6-烷基)氨基取代的C6-C10-芳基-C1-C6-烷基氨基，或表示包含选自N，O及S的1～3个杂原子的4～8元杂环基，
[0038] R5表示-(CH2)m-R10，且其中R10表示氢，任选被氨基取代的C1-C6-烷基或任选被卤素取代的C6-C10-芳基，或
[0039] Z'及R5与附接了这些的原子一起结合而可形成 结构，其中当Z’表示-O-时，R9不存在。
[0040] 在根据本发明的化学式(1)的化合物中，R5及Z'相互结合而形成环或不形成的情况中，化合物的结构可分别由如下示化学式(1a)或(1b)表示。
[0041] [化学式(1a)]
[0042]
[0043] [化学式(1b)]
[0044]
[0045] 在上述式中，R1，R2，R3，R5，R8，R9，R10，Z，Z'。B及n如之前定义。
[0046] 取代基R1更优选表示氢，异戊基，环戊基甲基。
[0047] 取代基R2更优选表示-X-(CH2)n-A-R6，且其中n是0～2的数，X表示直接键或-C(O)-，A表示直接键，或表示C3-C6-环烷基或苯基，或表示各自包含选自N，O及S的1～3个杂原子的4～6元杂环基或杂芳基，R6表示氢，C1-C6-烷基，氨基或-CO2H。R2最优选表示环戊基，哌啶，异戊基，环戊基甲基，苯乙基，戊基，环丙基甲基，2-氨基吡啶-3-基甲基，噻唑甲基，吡咯烷，吡咯烷-2-基甲基，哌啶-3-基，氨基甲基羰基，乙酸，四氢吡喃或环己基。
[0048] 取代基R1及R2一起结合而更优选表示-(CH2)5-。
[0049] 取代基R3更优选表示氢，卤素或C1-C3-烷基，最优选表示氯，溴或甲基。
[0050] 在取代基R4中，B更优选表示直接键，或表示苯基，吡咯烷，吗啉，噻唑或吲唑。
[0051] 在取代基R4中，Z及Z'各自独立地更优选表示-(CH2)m-，-O-或-N-。
[0052] 在取代基R4中，R8更优选表示氢，卤素，羟基，氨基，二(C1-C3-烷基)氨基，任选被卤素取代的C1-C6-烷基，-CO2R7(R7表示氢或C1-C3-烷基)，C4-C6-环烷基，任选被卤素或C1-C3-烷基取代的苯基，任选被卤素取代的苯氧基，苯基-C1-C3-烷基，任选被卤素或二(C1-C3-烷基)氨基取代的苄基氨基，或者表示包含选自N，O及S的1～2个杂原子的5～6元杂环基。R8最优选表示二甲基氨基，氨基，异戊基，氟，3,5-二甲基-苯基，三氟甲基，苯基，苄基，异丙基，环戊基，苯氧基，3,4-二氟苯氧基，3-二甲基氨基-苄基氨基，3,5-二氟苄基氨基，羟基，羧基，哌啶，甲氧基羰基或吡咯烷。
[0053] 在取代基R4中，R9更优选表示氢，苯氧基或苄基。
[0054] 在取代基R5中，R10更优选表示氢，2,4-二氟苯基，4-氟苯基或氨基甲基。
[0055] 根据本发明的化学式(1)的代表性的化合物中包含如下化合物：
[0056] 5-氯-7-环戊基氨基-1H-吲哚-2-羧酸(4-苯氧基-苯基)-酰胺；
[0057] 5-氯-7-(吡咯烷-3-基氨基)-1H-吲哚-2-羧酸(4-苯氧基-苯基)-酰胺；
[0058] 5-氯-7-(哌啶-4-基氨基)-1H-吲哚-2-羧酸[4-(3,4-二氟-苯氧基)-苯基]-酰胺；
[0059] 5-氯-7-(哌啶-4-基氨基)-1H-吲哚-2-羧酸(3-苯氧基-苯基)-酰胺；
[0060] 5-氯-7-[(吡咯烷-2-基甲基)-氨基]-1H-吲哚-2-羧酸苄基酰胺；
[0061] 5-氯-7-(哌啶-3-基氨基)-1H-吲哚-2-羧酸(4-苯氧基-苯基)-酰胺；
[0062] 5-氯-7-(哌啶-4-基氨基)-1H-吲哚-2-羧酸(4-苯氧基-苯基)-酰胺；
[0063] 5-氯-7-[(吡咯烷-2-基甲基)-氨基]-1H-吲哚-2-羧酸(3-苯氧基-苯基)-酰胺；
[0064] 5-氯-7-[(吡咯烷-2-基甲基)-氨基]-1H-吲哚-2-羧酸(3-环戊基氧基-5-苯氧基-苯基)-酰胺；
[0065] 5-氯-7-[(吡咯烷-2-基甲基)-氨基]-1H-吲哚-2-羧酸(4-苯氧基-苯基)-酰胺；
[0066] 7-[(2-氨基-吡啶-3-基甲基)-氨基]-5-氯-1H-吲哚-2-羧酸[4-(3,4-二氟-苯氧基)-苯基]-酰胺；
[0067] 5-氯-7-(哌啶-4-基氨基)-1H-吲哚-2-羧酸(3-环戊基氧基-苯基)-酰胺；
[0068] 5-氯-7-(哌啶-4-基氨基)-1H-吲哚-2-羧酸(3-吗啉-4-基甲基-苯基)-酰胺；
[0069] 5-氯-7-(哌啶-4-基氨基)-1H-吲哚-2-羧酸联苯-3-基酰胺；
[0070] 5-氯-7-(哌啶-4-基氨基)-1H-吲哚-2-羧酸(3-苄基氧基-苯基)-酰胺；
[0071] 5-氯-7-(哌啶-4-基氨基)-1H-吲哚-2-羧酸(4-三氟甲氧基-苯基)-酰胺；
[0072] 5-氯-7-(哌啶-4-基氨基)-1H-吲哚-2-羧酸[4-(3,5-二甲基-苯氧基)-苯基]-酰胺；
[0073] 5-氯-7-(哌啶-4-基氨基)-1H-吲哚-2-羧酸[2-(3-氟-苯基)-乙基]-酰胺；
[0074] 5-氯-7-[(噻唑-2-基甲基)-氨基]-1H-吲哚-2-羧酸(3-苯氧基-苯基)-酰胺；
[0075] 5-氯-7-(哌啶-4-基氨基)-1H-吲哚-2-羧酸(4-异戊基氧基-苯基)-酰胺；
[0076] 5-氯-7-[(吡咯烷-2-基甲基)-氨基]-1H-吲哚-2-羧酸[4-(3,4-二甲基-苯氧基)-苯基]-酰胺；
[0077] (5-氯-7-环戊基氨基-1H-吲哚-2-基)-吡咯烷-1-基-甲酮；
[0078] (R)-1-(5-氯-7-环戊基氨基-1H-吲哚-2-羰基)-吡咯烷-3-羧酸甲基酯；
[0079] (S)-1-(5-氯-7-环戊基甲基氨基-1H-吲哚-2-羰基)-吡咯烷-3-羧酸甲基酯；
[0080] (R)-1-[5-氯-7-(四氢-吡喃-4-基氨基)-1H-吲哚-2-羰基]-吡咯烷-3-羧酸甲基酯；
[0081] (S)-1-[5-甲基-7-(四氢-吡喃-4-基氨基)-1H-吲哚-2-羰基]-吡咯烷-3-羧酸甲基酯；
[0082] (5-溴-7-环己基氨基-1H-吲哚-2-基)-吗啉-4-基-甲酮；
[0083] (7-环戊基氨基-5-甲基-1H-吲哚-2-基)-吗啉-4-基-甲酮；
[0084] (7-环戊基氨基-5-甲基-1H-吲哚-2-基)-哌嗪-4-基-甲酮；
[0085] 5-氯-7-环戊基氨基-1H-吲哚-2-羧酸(1-苄基-吡咯烷-3-基甲基)-酰胺；
[0086] 7-环戊基氨基-5-甲基-1H-吲哚-2-羧酸(2-二甲基氨基-乙基)-酰胺；
[0087] 7-环戊基氨基-5-甲基-1H-吲哚-2-羧酸(2-吗啉-4-基-乙基)-酰胺；
[0088] (4-苄基-哌嗪-1-基)-[5-氯-7-(哌啶-4-基氨基)-1H-吲哚-2-基]-甲酮；
[0089] [5-氯-7-(哌啶-4-基氨基)-1H-吲哚-2-基]-[(R)-3-(3,4-二氟-苯氧基甲基)-吡咯烷-1-基]-甲酮；
[0090] [5-氯-7-(哌啶-4-基氨基)-1H-吲哚-2-基]-[(R)-3-苯氧基甲基-吡咯烷-1-基]-甲酮；
[0091] (R)-1-[5-氯-7-(四氢-吡喃-4-基氨基)-1H-吲哚-2-羰基]-吡咯烷-3-羧酸；
[0092] [5-氯-7-(四氢吡喃-4-基氨基)-1H-吲哚-2-基]-((R)-3-羟甲基-吡咯烷-1-基)-甲酮；
[0093] (S)-1-[5-甲基-7-(四氢吡喃-4-基氨基)-1H-吲哚-2-羰基]-吡咯烷-3-羧酸；
[0094] 7-(2-氨基-乙酰氨基)-5-氯-1H-吲哚-2-羧酸(4-苯氧基-苯基)-酰胺；
[0095] (3-氨基甲基-吡咯烷-1-基)-(5-氯-7-环戊基氨基-1H-吲哚-2-基)-甲酮；
[0096] (5-氯-7-环戊基氨基-1H-吲哚-2-基)-(3-哌啶-1-基甲基-吡咯烷-1-基)-甲酮；
[0097] [5-氯-7-(四氢-吡喃-4-基氨基)-1H-吲哚-2-基]-(3-哌啶-1-基甲基-吡咯烷-1-基)-甲酮；
[0098] (3-氨基甲基-吡咯烷-1-基)-[5-氯-7-(四氢-吡喃-4-基氨基)-1H-吲哚-2-基]-甲酮；
[0099] ((R)-3-氨基-吡咯烷-1-基)-(5-氯-7-环戊基氨基-1H-吲哚-2-基)-甲酮；
[0100] (5-氯-7-环戊基氨基-1H-吲哚-2-基)-{3-[(3-二甲基氨基-苄基氨基)-甲基]-吡咯烷-1-基}-甲酮；
[0101] (3-氨基甲基-吡咯烷-1-基)-[5-氯-7-(3-甲基-丁基氨基)-1H-吲哚-2-基]-甲酮；
[0102] (3-氨基甲基-吡咯烷-1-基)-[5-氯-7-(环戊基甲基-氨基)-1H-吲哚-2-基]-甲酮；
[0103] (3-氨基甲基-吡咯烷-1-基)-(5-氯-7-哌啶-1-基-1H-吲哚-2-基]-甲酮；
[0104] (3-氨基甲基-吡咯烷-1-基)-(5-氯-7-苯乙基氨基-1H-吲哚-2-基]-甲酮；
[0105] (3-氨基甲基-吡咯烷-1-基)-(5-氯-7-戊基氨基-1H-吲哚-2-基]-甲酮；
[0106] (3-氨基甲基-吡咯烷-1-基-(5-氯-7-环己基氨基-1H-吲哚-2-基]-甲酮；
[0107] (3-氨基甲基-哌啶-1-基)-(5-氯-7-环戊基氨基-1H-吲哚-2-基)-甲酮；
[0108] (3-氨基甲基-吡咯烷-1-基)-[7-(双-环丙基甲基-氨基)-5-氯-1H-吲哚-2-基]-甲酮；
[0109] (3-氨基甲基-吡咯烷-1-基)-{7-[双-(3-甲基-丁基)-氨基]-5-氯-1H-吲哚-2-基}-甲酮；
[0110] ((S)-3-氨基-吡咯烷-1-基)-(5-氯-7-环戊基氨基-1H-吲哚-2-基)-甲酮；
[0111] {7-[双-(3-甲基-丁基)-氨基]-5-氯-1H-吲哚-2-基}-[3-(4-氟-苄基氨基甲基)-吡咯烷-1-基]-甲酮；
[0112] {7-[双-(3-甲基-丁基)-氨基]-5-氯-1H-吲哚-2-基}-[3-(3,4-二氟-苄基氨基甲基)-吡咯烷-1-基]-甲酮；
[0113] (3-氨基甲基-吡咯烷-1-基)-(5-溴-7-环戊基氨基-1H-吲哚-2-基)-甲酮；
[0114] 7-环戊基氨基-5-甲基-1H-吲哚-2-羧酸(吡咯烷-3-基甲基)-酰胺；
[0115] {7-[双-(3-甲基-丁基)-氨基]-5-氯-1H-吲哚-2-基}-[(3R,4R)-3-(2,4-二氟-苯基)-4-吡咯烷-1-基甲基-吡咯烷-1-基]-甲酮；
[0116] {7-[双-(3-甲基-丁基)-氨基]-5-氯-1H-吲哚-2-基}-[(3R,4R)-3-(4-氯-苯基)-4-吡咯烷-1-基甲基-吡咯烷-1-基]-甲酮；
[0117] (5-氯-7-环戊基氨基-1H-吲哚-2-基)-[(3R,4R)-3-(2,4-二氟-苯基)-4-吡咯烷-1-基甲基-吡咯烷-1-基]-甲酮；
[0118] (5-氯-7-(四氢吡喃-4-基氨基)-1H-吲哚-2-基)-[(3R,4R)-3-(2,4-二氟-苯基)-4-吡咯烷-1-基甲基-吡咯烷-1-基]-甲酮；
[0119] (5-氯-7-(哌啶-4-基氨基)-1H-吲哚-2-基)-[(3R,4R)-3-(2,4-二氟-苯基)-4-吡咯烷-1-基甲基-吡咯烷-1-基]-甲酮；
[0120] (5-氯-7-环戊基氨基)-1H-吲哚-2-羧酸((R)-2-苯基-1-吡咯烷-1-基甲基-乙基)-酰胺；
[0121] [5-甲基-2-(吡咯烷-1-羰基)-1H-吲哚-7-基氨基]-乙酸；及
[0122] [7-环戊基氨基-5-(1,1-二氧代-硫代吗啉-4-基甲基)-1H-吲哚-2-基]-吡咯烷-1-基-甲酮。
[0123] 根据本发明的化学式(1)的化合物另外可形成药学容许的盐。这样的'药学容许的盐'中包含由形成含有药学容许的阴离子的无毒性酸加成盐的酸，例如如盐酸，硫酸，硝酸，磷酸，氢溴酸，氢碘酸等的无机酸；如酒石酸，甲酸，柠檬酸，乙酸，三氯乙酸，三氟乙酸，葡萄糖酸，苯甲酸，乳酸，富马酸，马来酸，水杨酸等的有机羧酸；如甲磺酸，乙磺酸，苯磺酸，p-甲苯磺酸，萘磺酸等的磺酸等形成的酸加成盐。另外、药学容许的碱加成盐，例如，包含由锂，钠，钾，钙，镁等形成的碱金属或碱土金属盐；赖氨酸，精氨酸，胍等的氨基酸盐；如二环己基胺，N-甲基-D-葡聚糖胺，三(羟甲基)甲基胺，二乙醇胺，胆碱，三乙基胺等的有机盐等。根据本发明的化学式(1)的化合物可由常规性的方法转换为其盐，盐的制造即使无另外的说明，也可由本领于技术人员以所述化学式(1)的结构为基础容易施行。
[0124] 另一方面，根据本发明的化合物由于可具有非对称碳中心，可作为R或S异构体，外消旋化合物，非对映异构体混合物及个体的非对映异构体存在，这些全部异构体包含在本发明的范围内。
[0125] 本发明另外提供制造化学式(1)的化合物的方法。在下文中，为帮助对于本发明的理解，将化学式(1)化合物的制造方法以例示性的反应式为基础进行说明，但本发明属的领域的普通技术人员可以化学式(1)的结构为基础，由多样的方法制造化学式(1)的化合物，应解释为这样的方法全部包含在本发明的范围内。即，可将本说明书中记载或先行技术中公开的诸合成法任选组合而制造化学式(1)的化合物，这被理解为属于本发明的范围内，化学式(1)化合物的制造方法不限于如下说明。
[0126] 首先，化学式(1)的化合物可根据下示反应式(1)的方法使化合物(2)的硝基还原而制造胺化合物(3)后，对于形成的胺，与化合物(4)一起施行还原性氨基化反应而合成。
[0127] [反应式1]
[0128]
[0129] 在所述反应式(1)中
[0130] R2，R3，R4及R5如之前定义。
[0131] 化合物(3)可使化合物(2)还原而制造。还原反应可使用酸催化剂和金属，或在氢气存在下使用金属催化剂进行。
[0132] 在利用酸催化剂和金属的还原反应中可使用的酸，例如，是如盐酸，硫酸，硝酸，磷酸等的无机酸，如乙酸，三氟乙酸等的有机羧酸，如氯化铵的胺酸盐，优选盐酸，乙酸或氯化铵等。酸的使用量是相对于化合物(2)1当量，常规是0.01～10当量，优选是0.1～5当量。可使用的金属，例如，是铁，锌，锂，钠，锡(常规地，氯化锡)等，尤其优选是铁，锌，氯化锡等。金属的使用量是相对于化合物(2)1当量，常规是1～20当量，优选是1～10当量。酸催化剂存在下的金属反应可在惰性溶剂中进行。作为惰性溶剂，例如，是甲醇，乙醇等的烷基醇，四氢呋喃，二乙基醚等的醚，如乙酸乙酯的烷基酯等，优选是甲醇，乙醇，四氢呋喃，乙酸乙酯等。反应温度常规是-10～200℃，优选是25～120℃，且反应时间常规是10分钟～60小时，优选是10分钟～12小时。
[0133] 在氢气存在下利用金属催化剂的还原反应中可使用的金属催化剂是钯，镍，铂(platinum)，钌(ruthenium)，铑(rhodium)等，尤其优选是钯，镍是等。金属催化剂的使用量是相对于化合物(2)1当量，常规是0.001～2当量，优选是0.01～1当量。氢气的压力常规是1～10气压，优选是1～3气压。反应可在惰性溶剂，例如，甲醇，乙醇等的烷基醇，四氢呋喃，二乙基醚等的醚，乙酸甲酯，乙酸乙酯等的乙酸烷酯等，优选甲醇，乙醇，乙酸乙酯等中进行。利用金属催化剂的反应的温度常规是-10～200℃，优选是25～50℃，且反应时间常规是10分钟～60小时，优选是10分钟～12小时。
[0134] 化合物(4)可通过对化合物(3)的胺基的还原性氨基化[RA：reductive amination]反应制造。
[0135] 还原性氨基化反应可使用还原剂，通过与醛或酮的反应施行，根据需要，可使用酸催化剂。醛或酮的量相对于化合物(3)1当量而常规是1～10当量，优选是1～3当量。可使用的还原剂是硼氢化钠，氰基硼氢化钠(NaBH3CN)，三乙酰氧基-硼氢化钠(NaBH(OAc)3)等。还原剂使用量相对于化合物(3)1当量而常规是1～10当量，优选是1～3当量。可使用的酸催化剂是，例如，如盐酸，硫酸，硝酸，磷酸等的无机酸，如乙酸，三氟乙酸等的有机羧酸，如氯化铵的胺酸盐等，尤其优选是盐酸，乙酸是等。酸的使用量相对于化合物(3)1当量而常规是0.1～10当量，优选是1～5当量。反应可在惰性溶剂，例如，四氢呋喃，二乙基醚等的醚，如二氯甲烷，氯仿，二氯乙烷等的氯烷，优选二氯乙烷，氯仿等中进行。反应温度常规是10～100℃，优选是-10～50℃，且反应时间常规是10分钟～60小时，优选是10分钟～12小时。
[0136] 化合物(2)如下示反应式(2)一样，可使化合物(5)及化合物(6)酰胺化反应而得到。
[0137] [反应式2]
[0138]
[0139] 在所述反应式(2)中
[0140] R3，R4及R5如之前定义。
[0141] 作为可在酰胺连接反应中使用的公知粘合剂，以将二环己基碳二亚胺(DCC)，1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺(EDC)，1,1’-二羰基二咪唑(CDI)等的碳亚胺类与1-羟基-苯并三唑(HOBT)或1-羟基-7-氮杂苯并三唑(HOAT)混合的状态使用，或可使用双-(2-氧代-3-噁唑烷基)-次膦酰氯(BOP-Cl)，二苯基磷酰叠氮化物(DPPA)，N-[二甲基氨基-1H-1,2,3-三唑[4,5-b]-吡啶-1-基亚甲基]-N-甲基甲烷氮鎓(HATU)等，但不限于这些。粘合剂的使用量是相对于化合物(5)1当量而常规是1～10当量，优选是1～3当量。使用的HOBT或HOAT的使用量是相对于化合物(5)1当量而常规是1～10当量，优选是1～3当量。当将胺的盐酸盐用于结合反应时应利用碱除去酸。此时使用的碱是如三乙基胺，二异丙基乙基胺的有机碱。碱的使用量是相对于化合物(5)1当量而常规是1～10当量，优选是1～3当量。结合反应可作为惰性溶剂在四氢呋喃，二乙基醚，N,N-二甲基甲酰胺等中进行。反应温度常规是-
10～200℃，优选是25～120℃，且反应时间常规是10分钟～60小时，优选是10分钟～12小时。
10～200℃，优选是25～120℃，且反应时间常规是10分钟～60小时，优选是10分钟～12小时。
[0142] 7-硝基吲哚化合物(6)可商业购买或可根据下示反应式(3)的方法合成。
[0143] [反应式3]
[0144]
[0145] 在所述反应式(3)中，R3如之前定义。
[0146] 硝基-苯胺化合物(7)可商业购买或用文献[Heterocycles，68(11)，2285～99，2006，或者Bioorganic&Medicinal Chemistry Letters，14(19)，4903～4906，2004]公知的方法制造。
[0147] 肼化合物(8)亦可商业购买或可使用文献[Journal of the American Chemical Society，198(48)，15374～75，2006]公知的方法，将化合物(7)的胺基转化为肼而得到。
[0148] 腙化合物(10)可通过使酮化合物(9)和肼化合物(8)结合反应而得到。如果肼化合物(8)是中性形态，则不使用碱，如果是酸性盐形态，则为造中性形态而应使用碱。作为碱，例如，可使用氢氧化钠，氢氧化锂等的金属氢氧化物，碳酸氢钠，碳酸钾等的金属碳酸盐，乙酸钠等的金属乙酸盐，三乙基胺，吡啶等的有机碱等，优选使用乙酸钠，碳酸氢钠等。
[0149] 另一方面，腙化合物(10)也可使用文献[Organic Process Research&Development，2，1988，214～220]中记载的Japp-Klingemann重排方法，在碱存在下，使重氮鎓盐与酮化合物(11)反应而制造。
[0150] 化合物(10)的环化反应可根据文献[Journal of Organic Chemistry，68(24)，2003，9506～9509和Tetrahedron，55(34)，1999，10271～10282等]中记载的方法施行。此时可使用的酸是聚磷酸，盐酸，p-甲苯磺酸，硫酸，乙酸等，在聚磷酸的情况中，可仅使用自身，或与苯，甲苯等的芳族烃混合而使用。
[0151] 本说明书中未特别说明制造方法的化合物是本身公知的化合物，或是可从公知化合物由公知的合成法或与此类似的方法合成的化合物。
[0152] 在根据本发明的制造方法中，一般性的混合物及最终化合物的分离及纯化可通过使用柱层析或使用重结晶，或正常或反向状态的HPLC(Waters，Delta Pack，300×50mmI.D.，C185μm，100A)分离。在通过重结晶或HPLC纯化的情况中，可将化合物以三氟乙酸盐的形态得到，在要得到盐酸盐的情况中，可利用离子交换树脂。
[0153] 如上说明，根据本发明的化合物，用于其制造的出发物质，中间体等可由多样的方法合成，这样的方法与化学式(1)化合物的制造关联而应解释为包含在本发明的范围内。
[0154] 本发明另外提供用于预防或治疗细胞坏死及其关联疾病的组合物，其特征在于，与药学容许的载体或稀释剂一起含有治疗学有效量的化学式(1)的化合物、或者其药学容许的盐或异构体作为活性成分。
[0155] 本发明另外提供用于使用所述组合物预防或治疗细胞坏死及其关联疾病的方法。
[0156] 可根据本发明治疗和/或预防的细胞坏死及其关联疾病可举出急性/慢性肝疾病(例如肝炎，肝纤维化，肝硬变)，神经退行性疾病(例如痴呆，帕金森病，亨廷顿病)，缺血性心脏疾病，再灌流损伤，缺血性中风或缺血性损伤，胰腺炎，细菌性/病毒性败血症，糖尿病或糖尿病性并发征，糖尿病性血管疾病[这些糖尿病特别由胰腺细胞破坏物质所致，由病毒，高血糖，脂肪酸，饮食，毒素，链脲霉素(streptozotocin)等介导]，坏死性原结肠炎(necrotizing procolitis)，囊泡性纤维症，类风湿性关节炎，退行性关节炎，肾病，细菌感染，病毒感染(例如HIV)，多发性硬化症，白血病，淋巴瘤，新生儿呼吸窘迫综合征，窒息，结核，子宫内膜症，血管无力症，银屑病，冻疮，甾类处理并发征，坏疽病，压痛，血红蛋白尿症，烧伤，高热症，克罗恩氏病，乳糜泻病，间隔综合征，脊髓损伤，肾小球肾炎，肌营养不良症，代谢性遗传疾病，支原体疾病，炭疽病，安德森病，先天性线粒体病，苯丙酮尿症，胎盘梗塞，梅毒，无菌性坏死等。另外，作为由药物及毒性物质导致的细胞坏死及其关联疾病，选自与酒精中毒及暴露于可卡因，药物(例如,对乙酰胺基酚(paracetamol))，抗生素，抗癌剂，阿霉素(adriamycin)，嘌罗霉素(puromycin)，博来霉素(bleomycin)，NSAID，环孢菌素(cyclosporine)，化学毒素(例如四氯化碳，氰化物，甲醇，乙二醇)，毒气，农药，重金属(例如铅，汞，镉)和/或这些的施用和/或自身施用关联的坏死，由暴露于放射能/UV导致的损伤及与此关联的细胞坏死。
[0157] 尤其是，根据本发明的组合物不仅显示肝保护及肝功能改善效果，还显示如脂肪肝，肝纤维化及肝硬变等的慢性肝疾病，病毒或药物引发的肝炎等的急性/慢性肝疾病的预防或治疗效果。另外，其结果可预防或治疗门静脉高血压(portal hypertention)等的肝疾病并发征，但不限于此。更加特别，根据本发明的医药组合物另外，对于选自肝移植，酒精性或非酒精性脂肪肝，肝纤维症，肝硬变，病毒或药物引发的肝炎的肝疾病的治疗或预防有效果，对于酒精性急性/慢性肝疾病有效果。
[0158] 另外，根据本发明的组合物对于源于脂肪酸的脂肪肝或源于脂肪肝的急性/慢性肝疾病的治疗或预防有效果。
[0159] 在本说明书中，"治疗"是指在呈现发病症状的个体中使用时使疾病的进行中断或延迟，"预防"是指在未呈现发病症状、但那样的危险性高的个体中使用时使发病征兆中断或延迟。
[0160] 所述“药物组合物(pharmaceutical composition)”与本发明的化合物一起，根据需要、可包含药学容许的载体，稀释剂，赋形剂，或者这些的组合。药物组合物使向生物体内施用化合物变得容易。存在多样的施用化合物的技术，其中包含经口，注射，气雾剂，非经口及局部施用等，但不仅限于这些。
[0161] 在本说明书中，“载体(carrier)”是指容易向细胞或组织内附加化合物的物质。例如，二甲基亚砜(DMSO)是容易向生物体的细胞或组织内投入多种有机化合物中常规使用的载体。
[0162] 在本说明书中，“稀释剂(diluent)”被定义为不仅使对象化合物的生物学活性形态稳定化，还在使化合物溶解的水中被稀释的物质。溶解于缓冲溶液的盐在本领域作为稀释剂使用。常规使用的缓冲溶液是模仿人溶液的盐形态的磷酸盐缓冲盐水。缓冲液盐由于可以低的浓度控制溶液的pH，罕有缓冲液稀释剂使化合物的生物学活性改变的情况。
[0163] 在本说明书中，“药学容许的(pharmaceutically acceptable)”是指不使化合物的生物学活性和性质损伤的性质。
[0164] 本发明的化合物，根据目的，可以多样的药剂学施用形态剂型化。在制造根据本发明的药物组合物中，将活性成分，具体地，化学式(1)的化合物，其药学容许的盐或异构体，根据要制造的剂型，与可选择的多样的药学容许的载体一起混合。例如，根据本发明的药物组合物，根据目的，可以注射用制剂，经口用制剂等剂型化。
[0165] 本发明的化合物可以利用公知的制药用载体和赋形剂的公知的方法制剂化而加入单位容量形态或多容量容器中。制剂的形态可为油或水性介质中的溶液，悬浮液或乳液形态，可含有常规的分散剂，悬浮剂或稳定化剂。另外，例如，也可为使用前溶于无菌、除去放热物质的水中使用的干燥粉末的形态。本发明的化合物，另外，也可利用如可可脂或其他甘油酯的常规的栓剂基剂制剂化为栓剂型。经口施用用固体施用形态可为胶囊剂，片剂，丸剂，散剂及粒剂，尤其是胶囊剂和片剂有用。片剂及丸剂优选制造为肠衣剂。固体施用形态可通过将本发明的化合物与如蔗糖，乳糖，淀粉等的一种以上的惰性稀释剂及如硬脂酸镁的润滑剂，如崩解剂，粘合剂等的载体混合而制造。
[0166] 必要时，根据本发明的化合物或含有此的药物组合物可与其他活性药剂，例如，别的种类的具有多样的作用机理的细胞保护剂，尤其是肝保护，肝功能改善及肝疾病的预防或治疗中利用的以往药剂-肝细胞再生促进剂，肝功能佐剂，抗病毒剂，免疫抑制剂，而且纤维化抑制剂等组合施用。
[0167] 根据本发明的化合物或含有此的药物组合物可与全部药物-诱导性细胞坏死及其关联疾病的预防或治疗剂联用施用。这样的药物包含抗生素，抗癌剂，抗病毒剂，抗感染剂，抗炎症剂，抗凝血剂，脂质改善剂，细胞死亡抑制剂，抗高血压剂，糖尿病/肥胖治疗剂，心血管疾病治疗剂，神经退行性疾病治疗剂，抗老化剂，及代谢性疾病治疗剂等全部疾病组的药物。
[0168] 根据本发明的化合物或含有此的药物组合物可在预防由毒素(toxin)等的诸多样的原因诱导的细胞损伤及伴随此的细胞坏死及其关联疾病中使用，这样的原因包含活性氧(ROS；reactive oxygen species)，重金属，醇，饮食(food)，补充剂(supplement)，放射能(radiation)，饮食(diet)等。
[0169] 化学式(1)化合物的施用量根据如患者的体重，性别，年龄，健康状态，膳食，疾病的特殊的性质，药剂的施用时间，施用方法，药剂混合及疾病的严重度等如的因素而依照医生的处方。但是，对于成人治疗必要的施用量根据施用的频度和强度而一般是1天约1.0mg～2,000mg范围。向成人肌肉内或静脉内施用时分为1次施用量而一般是1天约1.0mg～300mg的全体施用量就充分，但部分患者的情况中可优选更高的1天施用量。
[0170] 本发明另外提供细胞坏死及其关联疾病的预防或治疗剂组合物的制造方法，其包括将化学式(1)的化合物、或者其药学容许的盐或异构体作为活性成分与药学容许的载体或稀释剂一起混合的步骤。
[0171] 根据本发明的药剂组合物可用于肝保护和肝功能改善，预防或治疗急性/慢性肝疾病及伴随此的门静脉高血压(portal hypertention)等的肝疾病并发征，但不限于此。
[0172] 【发明效果】
[0173] 根据本发明的新颖化合物可不仅显示肝保护及肝功能改善效果，还可在因如脂肪肝，肝纤维化，肝硬变等慢性肝疾病，病毒或药物诱导的肝炎等的急性/慢性肝疾病的预防或治疗中有用地使用。本发明的化合物另外在胰腺，肾脏，脑，软骨，心脏细胞中显示细胞坏死阻碍功效。
[0174] 从而本发明的化合物可在细胞坏死及其关联疾病的预防或治疗中有用地使用。
[0175] 【实施方式】
[0176] 本发明由以下制造例及实施例更具体地说明，但本发明的范围不限于这些。在以下制造例及实施例中M是指摩尔浓度，N是指标准浓度。
[0177] 在以下制造例及实施例中使用的缩略语如下。
[0178] Ac：乙酰
[0179] BOC：t-丁氧基羰基
[0180] Bu：丁基
[0181] Bn：苄基
[0182] c-Pen：环戊基
[0183] c-Hex：环己基
[0184] DCM：二氯甲烷
[0185] DIPEA：二异丙基乙基胺
[0186] DMAP：4-二甲基氨基吡啶
[0187] DMF：N,N-二甲基甲酰胺
[0188] EDC：1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺，盐酸盐
[0189] Hex：正己烷
[0190] HOBT：羟基苯并三唑
[0191] HBTU：2-(1H-苯并三唑-1-基)-1,1,3,3-四甲基脲鎓六氟磷酸盐
[0192] i-Pr：异丙基
[0193] i-Pen：异戊基
[0195] Me：甲基
[0196] Ph：苯基
[0197] PMB：对甲氧基苄基
[0198] TEA：三乙基胺
[0199] TFA：三氟乙酸
[0200] THF：四氢呋喃
[0201] THP：四氢吡喃
[0202] TMS：三甲基甲硅烷基
[0203] 【制造例1：5-氯-7-硝基-1H-吲哚-2-羧酸】
[0204] 【阶段A：(4-氯-2-硝基-苯基)氯化肼氢】
[0205] 将可商业购买的4-氯-2-硝基苯胺(40g，0.23mol)溶于12N盐酸(100mL)，于0℃缓慢地滴加溶于水(50mL)的亚硝酸钠(16g，0.23mol)后，于0℃～室温搅拌30分钟。将反应物的温度降低到0℃而缓慢地滴加溶于12N盐酸(100mL)的氯化锡(II)(132g，0.70mol)后，于0℃～室温搅拌3小时。将生成的黄色固体形态的反应物过滤，用少量的6N HCl洗涤后干燥而收获标题化合物(30g，收率63％)。
[0206] 1H-NMR(400HMz，DMSO-d6)；δ9.21(s，1H)，7.98(d，J＝2.4Hz，1H)，7.66(d，J＝9.6Hz，1H)，7.55(dd，J＝2.4，9.6Hz，1H)，4.74(brs，2H)
[0207] 【阶段B：2-[(4-氯-2-硝基-苯基)亚肼基]丙酸甲基酯】
[0208] 将在阶段A收获的(4-氯-2-硝基-苯基)氯化肼氢(30g，0.14mol)和丙酮酸甲酯(14.4mL，0.16mol)溶于甲醇(300mL)，加入乙酸钠(14.2g，0.17mol)。将反应溶液于常温搅拌8小时，过滤生成的黄色固体，用水和甲醇洗涤，干燥而收获标题化合物(30g，收率82％)。
[0209] 1H-NMR(400HMz,CDCl3)；δ10.88(s,1H),8.21(d,J＝2.4Hz,1H),8.01(d,J＝9.2Hz,1H),7.56(dd,J＝2.4,9.2Hz,1H),3.90(s,3H),2.23(s,3H)。
[0210] 【阶段C：5-氯-7-硝基-1H-吲哚-2-羧酸甲基酯】
[0211] 向在阶段B收获的2-[(4-氯-2-硝基-苯基)亚肼基]丙酸甲基酯(13g，46mmol)加入聚磷酸(100mL)，于100℃加热4小时。反应终止后，于0℃向反应物加入水，搅拌2小时后过滤而集合固体，用水洗涤后干燥而收获标题化合物(6.0g，收率49％)。
[0212] 1H-NMR(400HMz,CDCl3)；δ10.32(br s,1H),8.29(d,1H),8.03(d,J＝2.4Hz,1H),7.31(d,J＝2.0Hz,1H),4.01(s,3H)
[0213] 【阶段D：5-氯-7-硝基-1H-吲哚-2-羧酸】
[0214] 将在阶段C收获的5-氯-7-硝基-1H-吲哚-2-羧酸甲基酯(1.0g，3.93mmol)溶于THF(10mL)，MeOH(10mL)和水(10mL)混合溶液，添加氢氧化锂(330mg，7.87mmol)后18小时于常温搅拌。反应终止则添加0.5N HCl(20mL)和水(100mL)结晶化后过滤而收获标题化合物(870mg，收率92％)。
[0215] MS[M+1]＝241(M+1)
[0216] 【制造例2：5-甲基-7-硝基-1H-吲哚-2-羧酸】
[0217] 将可商业购买的4-甲基-2-硝基-苯胺用如制造例1的方法反应而收获标题化合物。
[0218] MS[M+1]＝221(M+1)
[0219] 【制造例3：5-溴-7-硝基-1H-吲哚-2-羧酸】
[0220] 将可商业购买的4-溴-2-硝基-苯胺用如制造例1的方法反应而收获标题化合物。
[0221] MS[M+1]＝286(M+1)
[0222] 【实施例1：5-氯-7-环戊基氨基-1H-吲哚-2-羧酸(4-苯氧基-苯基)-酰胺】[0223] 5-氯-7-环戊基氨基-1H-吲哚-2-羧酸(4-苯氧基-苯基)-酰胺
[0224] 【阶段A：5-氯-7-硝基-1H-吲哚-2-羧酸(4-苯氧基-苯基)-酰胺】
[0225] 将在制造例1收获的化合物5-氯-7-硝基-1H-吲哚-2-羧酸(1.0g，4.16mmol)溶于DMF(30mL)，添加三乙基胺(841mg，8.31mmol)，HBTU(2.36g，6.22mmol)及4-苯氧基苯基胺(0.92g，5.05mmol)，于室温搅拌18小时。反应结束后，在减压下除去溶剂，加碳酸氢钠溶液(100mL)。将有机物用乙酸乙酯萃取，用无水硫酸镁干燥。将滤器的残液在减压下除去溶剂，将残留物用柱层析分离而收获标题化合物(1.6g，收率94％)。
[0226] MS[M+1]＝408(M+1)
[0227] 【阶段B：7-氨基-5-氯-1H-吲哚-2-羧酸(4-苯氧基-苯基)-酰胺】
[0228] 将在阶段A收获的5-氯-7-硝基-1H-吲哚-2-羧酸(4-苯氧基-苯基)-酰胺(1.6g，2.92mmol)溶于THF(15mL)，甲醇(15mL)及水(15mL)，加入氯化铵(2.62g，49.0mmol)和铁粉(1.34g，24.0mmol)，于70℃搅拌1小时。反应结束后，在Cellite上过滤，用四氢呋喃(100mL)清洗后，在减压下除去溶剂。使用乙酸乙酯(150mL)稀释，加入水(80mL)后将有机物用乙酸乙酯萃取，用无水硫酸镁干燥，并在减压下除去溶剂。利用二氯甲烷和己烷将残留物重结晶而收获标题化合物(1.4g，收率94％)。
[0229] MS[M+1]＝378(M+1)
[0230] 【阶段C：5-氯-7-环戊基氨基-1H-吲哚-2-羧酸(4-苯氧基-苯基)-酰胺】
[0231] 将在阶段B收获的7-氨基-5-氯-1H-吲哚-2-羧酸(4-苯氧基-苯基)-酰胺(50mg，0.13mmol)溶于二氯乙烷(10mL)，滴加乙酸(16mg，0.27mmol)，环戊酮(0.30mg，0.40mmol)及三乙酰氧基-硼氢化钠(84mg，0.40mmol)，于常温搅拌18小时。反应结束后，将反应物用水稀释，将有机物用二氯甲烷萃取，用饱和氯化钠溶液清洗后，用无水硫酸镁干燥，过滤。在减压下除去溶剂，将残留物用柱层析分离而收获标题化合物(40mg，收率68％)。
[0232] MS[M+1]＝446(M+1)
[0233] 【实施例2：5-氯-7-(吡咯烷-3-基氨基)-1H-吲哚-2-羧酸(4-苯氧基-苯基)-酰胺】[0234] 5-氯-7-(吡咯烷-3-基氨基)-1H-吲哚-2-羧酸(4-苯氧基-苯基)-酰胺
[0235] 【阶段A：3-[5-氯-2-(4-苯氧基-苯基氨甲酰)-1H-吲哚-7-基氨基]-吡咯烷-1-羧酸t-丁基酯】
[0236] 将在实施例1的阶段B收获的7-氨基-5-氯-1H-吲哚-2-羧酸(4-苯氧基-苯基)-酰胺和N-BOC-吡咯烷-3-酮用如实施例1的阶段C的方法反应而收获标题化合物。
[0237] MS[M+1]＝547(M+1)
[0238] 【阶段B：5-氯-7-(吡咯烷-3-基氨基)-1H-吲哚-2-羧酸(4-苯氧基-苯基)-酰胺】[0239] 将在阶段A收获的3-[5-氯-2-(4-苯氧基-苯基氨甲酰)-1H-吲哚-7-基氨基]-吡咯烷-1-羧酸t-丁基酯(45mg，0.082mmol)溶于二氯甲烷(3mL)，加入三氟乙酸(3mL)，于常温搅拌1小时。反应结束后，在减压下除去溶剂。将残留物用柱层析分离而收获标题化合物(18mg，收率49％)。
[0240] MS[M+1]＝447(M+1)
[0241] 【实施例3～35】
[0242] 将在制造例1～3收获的吲哚化合物和可商业购买的胺化合物用如实施例1或2的方法反应而收获下表的实施例化合物。
[0243]
[0244]实施例 R R2 R3 质量
3 4-(3,4-二氟苯基氧基)苯基-氨基 哌啶-4-基 Cl 497
4 3-苯氧基-苯基-氨基 哌啶-4-基 Cl 461
5 苄基氨基 吡咯烷-2-基甲基 Cl 383
6 4-苯氧基-苯基-氨基 哌啶-3-基 Cl 461
7 4-苯氧基-苯基-氨基 哌啶-4-基 Cl 461
8 3-苯氧基-苯基-氨基 吡咯烷-2-基甲基 Cl 461
9 3-环戊基氧基-5-苯氧基-苯基-氨基 吡咯烷-2-基甲基 Cl 545
10 4-苯氧基-苯基-氨基 吡咯烷-2-基甲基 Cl 461
11 4-(3,4-二氟苯基氧基)苯基-氨基 2-氨基-吡啶-3-基甲基 Cl 520
12 3-环戊基氧基-苯基氨基 哌啶-4-基 Cl 453
13 3-(吗啉-4-基)甲基-苯基氨基 哌啶-4-基 Cl 468
14 3-苯基-苯基氨基 哌啶-4-基 Cl 445
15 3-苄基氧基-苯基-氨基 哌啶-4-基 Cl 475
16 4-三氟甲基氧基-苯基氨基 哌啶-4-基 Cl 453
17 4-(3,5-二甲基-苯基氧基)-苯基氨基 哌啶-4-基 Cl 489
18 3-氟苯基-乙基氨基 哌啶-4-基 Cl 415
19 3-苯氧基-苯基氨基 噻唑-2-基甲基 Cl 474
20 4-异戊基氧基-苯基氨基 哌啶-4-基 Cl 455
21 4-(3,4-二甲基-苯基氧基)-苯基氨基 吡咯烷-2-基甲基 Cl 489
22 吡咯烷-1-基 环戊基 Cl 332
23 (R)-3-甲氧基羰基-吡咯烷-1-基 环戊基 Cl 390
24 (R)-3-甲氧基羰基-吡咯烷-1-基 环戊基甲基 Cl 404
25 (R)-3-甲氧基羰基-吡咯烷-1-基 四氢吡喃-4-基 Cl 406
26 (S)-3-甲氧基羰基-吡咯烷-1-基 四氢吡喃-4-基 Me 386
27 吗啉 环己基 Br 406
28 吗啉 环戊基 Me 328
29 哌嗪 环戊基 Me 327
30 1-苄基-吡咯烷-3-基甲基氨基 环戊基 Cl 451
31 2-二甲基氨基-乙基氨基 环戊基 Me 329
32 2-吗啉-4-基-乙基氨基 环戊基 Me 371
33 4-苄基-哌嗪-1-基 哌啶-4-基 Cl 452
34 (R)-3-(3,4-二氟苯氧基-甲基)吡咯烷-1-基 哌啶-4-基 Cl 489
35 (R)-3-(苯氧基甲基)吡咯烷-1-基 哌啶-4-基 Cl 453
3 4-(3,4-二氟苯基氧基)苯基-氨基 哌啶-4-基 Cl 497
4 3-苯氧基-苯基-氨基 哌啶-4-基 Cl 461
5 苄基氨基 吡咯烷-2-基甲基 Cl 383
6 4-苯氧基-苯基-氨基 哌啶-3-基 Cl 461
7 4-苯氧基-苯基-氨基 哌啶-4-基 Cl 461
8 3-苯氧基-苯基-氨基 吡咯烷-2-基甲基 Cl 461
9 3-环戊基氧基-5-苯氧基-苯基-氨基 吡咯烷-2-基甲基 Cl 545
10 4-苯氧基-苯基-氨基 吡咯烷-2-基甲基 Cl 461
11 4-(3,4-二氟苯基氧基)苯基-氨基 2-氨基-吡啶-3-基甲基 Cl 520
12 3-环戊基氧基-苯基氨基 哌啶-4-基 Cl 453
13 3-(吗啉-4-基)甲基-苯基氨基 哌啶-4-基 Cl 468
14 3-苯基-苯基氨基 哌啶-4-基 Cl 445
15 3-苄基氧基-苯基-氨基 哌啶-4-基 Cl 475
16 4-三氟甲基氧基-苯基氨基 哌啶-4-基 Cl 453
17 4-(3,5-二甲基-苯基氧基)-苯基氨基 哌啶-4-基 Cl 489
18 3-氟苯基-乙基氨基 哌啶-4-基 Cl 415
19 3-苯氧基-苯基氨基 噻唑-2-基甲基 Cl 474
20 4-异戊基氧基-苯基氨基 哌啶-4-基 Cl 455
21 4-(3,4-二甲基-苯基氧基)-苯基氨基 吡咯烷-2-基甲基 Cl 489
22 吡咯烷-1-基 环戊基 Cl 332
23 (R)-3-甲氧基羰基-吡咯烷-1-基 环戊基 Cl 390
24 (R)-3-甲氧基羰基-吡咯烷-1-基 环戊基甲基 Cl 404
25 (R)-3-甲氧基羰基-吡咯烷-1-基 四氢吡喃-4-基 Cl 406
26 (S)-3-甲氧基羰基-吡咯烷-1-基 四氢吡喃-4-基 Me 386
27 吗啉 环己基 Br 406
28 吗啉 环戊基 Me 328
29 哌嗪 环戊基 Me 327
30 1-苄基-吡咯烷-3-基甲基氨基 环戊基 Cl 451
31 2-二甲基氨基-乙基氨基 环戊基 Me 329
32 2-吗啉-4-基-乙基氨基 环戊基 Me 371
33 4-苄基-哌嗪-1-基 哌啶-4-基 Cl 452
34 (R)-3-(3,4-二氟苯氧基-甲基)吡咯烷-1-基 哌啶-4-基 Cl 489
35 (R)-3-(苯氧基甲基)吡咯烷-1-基 哌啶-4-基 Cl 453
[0245] 【实施例36：(R)-1-[5-氯-7-(四氢-吡喃-4-基氨基)-1H-吲哚-2-羰基]-吡咯烷-3-羧酸】
[0246] (R)-1-[5-氯-7-(四氢-吡喃-4-基氨基)-1H-吲哚-2-羰基]-吡咯烷-3-羧酸
[0247] 将在实施例25收获的(R)-1-[5-氯-7-(四氢-吡喃-4-基氨基)-1H-吲哚-2-羰基]-吡咯烷-3-羧酸甲基酯用如制造例1的阶段D的方法反应而收获标题化合物。
[0248] MS[M+1]＝392(M+1)
[0249] 【实施例37：[5-氯-7-(四氢吡喃-4-基氨基)-1H-吲哚-2-基]-((R)-3-羟甲基-吡咯烷-1-基)-甲酮】
[0250] [5-氯-7-(四氢吡喃-4-基氨基)-1H-吲哚-2-基]-((R)-3-羟甲基-吡咯烷-1-基)-甲酮
[0251] 将在实施例25收获的(R)-1-[5-氯-7-(四氢吡喃-4-基氨基)-1H-吲哚-2-羰基]-吡咯烷-3-羧酸甲基酯(44mg，0.11mmol)溶于THF(15mL)，将2.0M硼氢化锂(0.11mL)于0℃添加后搅拌6小时。反应终止则缓慢地添加甲醇(2mL)和1N-盐酸溶液(20mL)后，将有机物用乙酸乙酯萃取，用无水硫酸镁干燥。将滤器的残液在减压下除去溶剂，将残留物用柱层析分离而收获标题化合物(30mg，收率73％)。
[0252] MS[M+1]＝378(M+1)
[0253] 【实施例38：(S)-1-[5-甲基-7-(四氢吡喃-4-基氨基)-1H-吲哚-2-羰基]-吡咯烷-3-羧酸】
[0254] (S)-1-[5-甲基-7-(四氢吡喃-4-基氨基)-1H-吲哚-2-羰基]-吡咯烷-3-羧酸
[0255] 将在实施例26收获的(S)-1-[5-甲基-7-(四氢-吡喃-4-基氨基)-1H-吲哚-2-羰基]-吡咯烷-3-羧酸甲基酯用如实施例36的方法反应而收获标题化合物。
[0256] MS[M+1]＝372(M+1)
[0257] 【实施例39：7-(2-氨基-乙酰氨基)-5-氯-1H-吲哚-2-羧酸(4-苯氧基-苯基)-酰胺】
[0258] 7-(2-氨基-乙酰氨基)-5-氯-1H-吲哚-2-羧酸(4-苯氧基-苯基)-酰胺
[0259] 【阶段A：{[5-氯-2-(4-苯氧基-苯基氨甲酰)-1H-吲哚-7-基氨甲酰]-甲基}-氨基甲酸t-丁基酯】
[0260] 将在实施例1的阶段B收获的化合物和N-BOC-甘氨酸用如实施例1的阶段A的方法反应而收获标题化合物。
[0261] MS[M+1]＝535(M+1)
[0262] 【阶段B：7-(2-氨基-乙酰氨基)-5-氯-1H-吲哚-2-羧酸(4-苯氧基-苯基)-酰胺】[0263] 将在阶段A收获的{[5-氯-2-(4-苯氧基-苯基氨甲酰)-1H-吲哚-7-基氨甲酰]-甲基}-氨基甲酸t-丁基酯用如实施例2的阶段B的方法反应而收获标题化合物。
[0264] MS[M+1]＝435(M+1)
[0265] 【实施例40：(3-氨基甲基-吡咯烷-1-基)-(5-氯-7-环戊基氨基-1H-吲哚-2-基)-甲酮】
[0266] (3-氨基甲基-吡咯烷-1-基)-(5-氯-7-环戊基氨基-1H-吲哚-2-基)-甲酮
[0267] 【阶段A：[1-(5-氯-7-环戊基氨基-1H-吲哚-2-羰基)-吡咯烷-3-基甲基]-氨基甲酸t-丁基酯】
[0268] 将在制造例1收获的5-氯-7-硝基-1H-吲哚-2-羧酸和吡咯烷-3-基甲基-氨基甲酸t-丁基酯用如实施例1的方法反应而收获标题化合物。
[0269] MS[M+1]＝461(M+1)
[0270] 【阶段B：(3-氨基甲基-吡咯烷-1-基)-(5-氯-7-环戊基氨基-1H-吲哚-2-基)-甲酮】
[0271] 将在阶段A收获的[1-(5-氯-7-环戊基氨基-1H-吲哚-2-羰基)-吡咯烷-3-基甲基]-氨基甲酸t-丁基酯用如实施例2的阶段B的方法反应而收获标题化合物。
[0272] MS[M+1]＝361(M+1)
[0273] 【实施例41：(5-氯-7-环戊基氨基-1H-吲哚-2-基)-(3-哌啶-1-基甲基-吡咯烷-1-基)-甲酮】
[0274] (5-氯-7-环戊基氨基-1H-吲哚-2-基)-(3-哌啶-1-基甲基-吡咯烷-1-基)-甲酮
[0275] 将在实施例40收获的(3-氨基甲基-吡咯烷-1-基)-(5-氯-7-环戊基氨基-1H-吲哚-2-基)-甲酮和戊二醛用如实施例1的阶段C的方法反应而收获标题化合物。
[0276] MS[M+1]＝429(M+1)
[0277] 【实施例42～57】
[0278]
[0279]
[0280] 【实施例58：(3-氨基甲基-吡咯烷-1-基)-(5-溴-7-环戊基氨基-1H-吲哚-2-基)-甲酮】
[0281] (3-氨基甲基-吡咯烷-1-基)-(5-溴-7-环戊基氨基-1H-吲哚-2-基)-甲酮
[0282] 将在制造例3收获的5-溴-7-硝基-1H-吲哚-2-羧酸用如实施例40的方法反应而收获标题化合物。
[0283] MS[M+1]＝406(M+1)
[0284] 【实施例59：7-环戊基氨基-5-甲基-1H-吲哚-2-羧酸(吡咯烷-3-基甲基)-酰胺】[0285] 7-环戊基氨基-5-甲基-1H-吲哚-2-羧酸(吡咯烷-3-基甲基)-酰胺
[0286] 将在制造例2收获的5-甲基-7-硝基-1H-吲哚-2-羧酸和3-氨基甲基-吡咯烷-1-氨基甲酸t-丁基酯用如实施例40的方法反应而收获标题化合物。
[0287] MS[M+1]＝341(M+1)
[0288] 【制造例4：(3R,4S)-3-(2,4-二氟-苯基)-4-吡咯烷-1-基甲基-吡咯烷】
[0289] (3R,4S)-3-(2,4-二氟-苯基)-4-吡咯烷-1-基甲基-吡咯烷
[0290] 【阶段A：(4R)-4-(2,4-二氟苯基)吡咯烷-3-碳腈】
[0291] 将用专利WO 2004/09126中记载的方法制造的(4R)-1-t-丁基-4-(2,4-二氟苯基)吡咯烷-3-碳腈(4g，15.15mmol)溶于DCE(10mL)后，在0℃滴加1-氯乙基氯甲酸酯(2.45mL，22.68mmol)。将反应温度提高到70℃后维持该温度，将1,8-双(二甲基氨基)萘(4.87g，
22.72mmol)溶于DCE(10mL)而滴加2小时。反应终止后加入MeOH(10mL)而维持该温度而进一步搅拌1小时后减压浓缩而无需另外的纯化地进行后续反应。
22.72mmol)溶于DCE(10mL)而滴加2小时。反应终止后加入MeOH(10mL)而维持该温度而进一步搅拌1小时后减压浓缩而无需另外的纯化地进行后续反应。
[0292] MS[M+1]＝209(M+1)
[0293] 【阶段B：(4R)-1-BOC-4-(2,4-二氟苯基)吡咯烷-3-碳腈】
[0294] 将在阶段A收获的(4R)-4-(2,4-二氟苯基)吡咯烷-3-碳腈，DMAP(1.8g，15.15mmol)及TEA(5.56mL，15.15mmol)溶于DCM(10mL)后，在0℃滴加二-t-丁基二碳酸酯(4.9g，22.7mmol)。将反应物于常温搅拌8小时后减压浓缩而用EtOAc萃取。萃取的有机溶液用1N HCl和盐水洗出，用MgSO4干燥后减压浓缩，用柱层析(洗脱液：EtOAc/Hex＝1/6)纯化而收获标题化合物(3.3g，阶段A及B的和：72％)。
[0295] MS[M+H]＝309(M+1)
[0296] 【阶段C：(3S,4R)-1-Boc-4-(2,4-二氟苯基)吡咯烷-3-羧酸】
[0297] 将在阶段B收获的(4R)-1-BOC-4-(2,4-二氟苯基)吡咯烷-3-碳腈(3.3g，10.6mmol)溶于乙醇(10mL)，加入6N NaOH溶液(5mL)于70℃搅拌4小时。反应终止则除去溶剂，用醚稀释后，将有机溶液用6N盐酸充分酸化而洗出。将此有机溶液用盐水洗涤后用MgSO4干燥，并减压浓缩而收获标题化合物(3.43g，收率99.0％)。
[0298] MS[M+1]＝328(M+1)
[0299] 【阶段D：(3S,4R)-1-Boc-4-(2,4-二氟苯基)吡咯烷-3-甲基醇】
[0300] 将在阶段C收获的(3S,4R)-1-Boc-4-(2,4-二氟苯基)吡咯烷-3-羧酸(400mg，1.22mmol)溶于THF(15mL)，将N-甲基吗啉(140mg，1.35mmol)和异丁基氯甲酸酯(183mg，
1.34mmol)于-15℃添加后搅拌15分钟。反应终止则添加硼氢化钠(59.5mg，1.57mmol)，缓慢地添加甲醇(5mL)后搅拌1小时。反应终止则加入1N-盐酸溶液，将有机物用乙酸乙酯萃取，用无水硫酸镁干燥。将滤器的残液在减压下除去溶剂，将残留物用柱层析分离而收获标题化合物(300mg，收率79％)。
1.34mmol)于-15℃添加后搅拌15分钟。反应终止则添加硼氢化钠(59.5mg，1.57mmol)，缓慢地添加甲醇(5mL)后搅拌1小时。反应终止则加入1N-盐酸溶液，将有机物用乙酸乙酯萃取，用无水硫酸镁干燥。将滤器的残液在减压下除去溶剂，将残留物用柱层析分离而收获标题化合物(300mg，收率79％)。
[0301] MS[M+1]＝314(M+1)
[0302] 【阶段E：(3S,4R)-1-Boc-4-(2,4-二氟苯基)吡咯烷-3-羧基醛】
[0303] 将在阶段D收获的(3S,4R)-1-Boc-4-(2,4-二氟苯基)吡咯烷-3-甲基醇(296mg，0.95mmol)溶于二氯甲烷(40mL)和甲基亚砜(10mL)，加三乙基胺(337mg，3.33mmol)和三氧化硫吡啶(230mg，1.42mmol)后，于室温搅拌2小时。反应结束后，加入水，用乙酸乙酯萃取有机物，用饱和氯化钠水溶液清洗后，用无水硫酸镁干燥并过滤。在减压下除去溶剂，将残留物用柱层析分离而收获标题化合物(246mg，收率83％)。
[0304] MS[M+1]＝312(M+1)
[0305] 【阶段F：(3R,4S)-3-(2,4-二氟-苯基)-4-吡咯烷-1-基甲基-吡咯烷】
[0306] 将在阶段E收获的(3S,4R)-1-Boc-4-(2,4-二氟苯基)吡咯烷-3-羧基醛和吡咯烷根据实施例1的阶段C和实施例2的阶段B依次反应而收获标题化合物。
[0307] MS[M+1]＝267(M+1)
[0308] 【制造例5：(3R,4S)-3-(4-氯-苯基)-4-吡咯烷-1-基甲基-吡咯烷】
[0309] 将3-(4-氯苯基)吡咯烷-4-碳腈用如制造例4的方法反应而收获标题化合物。
[0310] MS[M+1]＝265(M+1)
[0311] 【实施例60：{7-[双-(3-甲基-丁基)-氨基]-5-氯-1H-吲哚-2-基}-[(3R,4R)-3-(2,4-二氟-苯基)-4-吡咯烷-1-基甲基-吡咯烷-1-基]-甲酮】
[0312] {7-[双-(3-甲基-丁基)-氨基]-5-氯-1H-吲哚-2-基}-[(3R,4R)-3-(2,4-二氟-苯基)-4-吡咯烷-1-基甲基-吡咯烷-1-基]-甲酮
[0313] 将在制造例1收获的5-氯-7-硝基-1H-吲哚-2-羧酸，在制造例4收获的(3R,4S)-3-(2,4-二氟-苯基)-4-吡咯烷-1-基甲基-吡咯烷及异丁基醛用如实施例1的方法反应而收获标题化合物。
[0314] MS[M+1]＝599(M+1)
[0315] 【实施例61：{7-[双-(3-甲基-丁基)-氨基]-5-氯-1H-吲哚-2-基}-[(3R,4R)-3-(4-氯-苯基)-4-吡咯烷-1-基甲基-吡咯烷-1-基]-甲酮】
[0316] {7-[双-(3-甲基-丁基)-氨基]-5-氯-1H-吲哚-2-基}-[(3R,4R)-3-(4-氯-苯基)-4-吡咯烷-1-基甲基-吡咯烷-1-基]-甲酮
[0317] 将在制造例1收获的5-氯-7-硝基-1H-吲哚-2-羧酸，在制造例5收获的(3R,4S)-3-(4-氯-苯基)-4-吡咯烷-1-基甲基-吡咯烷及异丁基醛用如实施例1的方法反应而收获标题化合物。
[0318] MS[M+1]＝597(M+1)
[0319] 【实施例62：(5-氯-7-环戊基氨基-1H-吲哚-2-基)-[(3R,4R)-3-(2,4-二氟-苯基)-4-吡咯烷-1-基甲基-吡咯烷-1-基]-甲酮】
[0320] (5-氯-7-环戊基氨基-1H-吲哚-2-基)-[(3R,4R)-3-(2,4-二氟-苯基)-4-吡咯烷-1-基甲基-吡咯烷-1-基]-甲酮
[0321] 将在制造例1收获的5-氯-7-硝基-1H-吲哚-2-羧酸，在制造例4收获的(3R,4S)-3-(2,4-二氟-苯基)-4-吡咯烷-1-基甲基-吡咯烷及环戊酮用如实施例1的方法反应而收获标题化合物。
[0322] MS[M+1]＝527(M+1)
[0323] 【实施例63：(5-氯-7-(四氢吡喃-4-基氨基)-1H-吲哚-2-基)-[(3R,4R)-3-(2,4-二氟-苯基)-4-吡咯烷-1-基甲基-吡咯烷-1-基]-甲酮】
[0324] (5-氯-7-(四氢吡喃-4-基氨基)-1H-吲哚-2-基)-[(3R,4R)-3-(2,4-二氟-苯基)-4-吡咯烷-1-基甲基-吡咯烷-1-基]-甲酮
[0325] 将在制造例1收获的5-氯-7-硝基-1H-吲哚-2-羧酸，在制造例4收获的(3R,4S)-3-(2,4-二氟-苯基)-4-吡咯烷-1-基甲基-吡咯烷及四氢吡喃-4-酮用如实施例1的方法反应而收获标题化合物。
[0326] MS[M+1]＝543(M+1)
[0327] 【实施例64：(5-氯-7-(哌啶-4-基氨基)-1H-吲哚-2-基)-[(3R,4R)-3-(2,4-二氟-苯基)-4-吡咯烷-1-基甲基-吡咯烷-1-基]-甲酮】
[0328] (5-氯-7-(哌啶-4-基氨基)-1H-吲哚-2-基)-[(3R,4R)-3-(2,4-二氟-苯基)-4-吡咯烷-1-基甲基-吡咯烷-1-基]-甲酮
[0329] 将在制造例1收获的5-氯-7-硝基-1H-吲哚-2-羧酸，在制造例4收获的(3R,4S)-3-(2,4-二氟-苯基)-4-吡咯烷-1-基甲基-吡咯烷及1-BOC-哌啶-4-酮用如实施例1及实施例2的阶段B的方法反应而收获标题化合物。
[0330] MS[M+1]＝542(M+1)
[0331] 【制造例6：((R)-2-苯基-1-吡咯烷-1-基甲基-乙基胺】
[0332] 可商业购买的((R)-1-羟甲基-2-苯基-乙基)-氨基甲酸t-丁基酯根据制造例4的阶段E和F依次反应而收获标题化合物。
[0333] MS[M+1]＝205(M+1)
[0334] 【实施例65：(5-氯-7-环戊基氨基)-1H-吲哚-2-羧酸((R)-2-苯基-1-吡咯烷-1-基甲基-乙基)-酰胺】
[0335] (5-氯-7-环戊基氨基)-1H-吲哚-2-羧酸((R)-2-苯基-1-吡咯烷-1-基甲基-乙基)-酰胺
[0336] 将在制造例1收获的5-氯-7-硝基-1H-吲哚-2-羧酸，在制造例6收获的((R)-2-苯基-1-吡咯烷-1-基甲基)-乙基胺及环戊酮用如实施例1的方法反应而收获标题化合物。
[0337] MS[M+1]＝465(M+1)
[0338] 【实施例66：[5-甲基-2-(吡咯烷-1-羰基)-1H-吲哚-7-基氨基]-乙酸】
[0339] [5-甲基-2-(吡咯烷-1-羰基)-1H-吲哚-7-基氨基]-乙酸
[0340] 【阶段A：(7-氨基-5-甲基-1H-吲哚-2-基)-吡咯烷-1-基-甲酮】
[0341] 将在制造例2收获的5-甲基-7-硝基-1H-吲哚-2-羧酸及吡咯烷根据实施例1的阶段A和B依次反应而收获标题化合物。
[0342] MS[M+1]＝244(M+1)
[0343] 【阶段B：5-甲基-2-(吡咯烷-1-羰基)-1H-吲哚-7-基氨基]-乙酸甲基酯】[0344] 将在阶段A收获的(7-氨基-5-甲基-1H-吲哚-2-基)-吡咯烷-1-基-甲酮(100mg，0.41mmol)溶于THF，加三乙基胺(46mg，0.45mmol)和溴乙酸甲基酯(70mg，0.45mmol)后，于
80℃搅拌4小时。反应结束后，加入水，用乙酸乙酯萃取有机物，用饱和氯化钠水溶液清洗后，用无水硫酸镁干燥并过滤。在减压下除去溶剂，将残留物用柱层析分离而收获标题化合物(80mg，收率62％)。
80℃搅拌4小时。反应结束后，加入水，用乙酸乙酯萃取有机物，用饱和氯化钠水溶液清洗后，用无水硫酸镁干燥并过滤。在减压下除去溶剂，将残留物用柱层析分离而收获标题化合物(80mg，收率62％)。
[0345] MS[M+1]＝316(M+1)
[0346] 【阶段C：[5-甲基-2-(吡咯烷-1-羰基)-1H-吲哚-7-基氨基]-乙酸】
[0347] 将在阶段B收获的5-甲基-2-(吡咯烷-1-羰基)-1H-吲哚-7-基氨基]-乙酸甲基酯根据制造例1的阶段D反应而收获标题化合物】
[0348] MS[M+1]＝302(M+1)
[0349] 【制造例7：5-溴甲基-7-硝基-吲哚-2-羧酸甲基酯】
[0350] 【阶段A：1-BOC-5-甲基-7-硝基-吲哚-2-羧酸甲基酯】
[0351] 将合成制造例2的化合物的途中生成的5-甲基-7-硝基-1H-吲哚-2-羧酸甲基酯(24.0g，100mmol)溶于二氯甲烷(500mL)后，加入三乙基胺(84mL，601mmol)和4-(二甲基氨基)吡啶(600mg，5mmol)。将(BOC)2O(43.7g，200mmol)溶于二氯甲烷(100mL)而滴加，于室温搅拌8小时。反应结束后，加入水，用乙酸乙酯萃取有机物，用饱和氯化钠水溶液清洗后，用无水硫酸镁干燥，并减压浓缩而收获标题化合物(34.0g，收率100％)。
[0352] 1H-NMR(500HMz，CDCl3)；δ7.80(s，1H)，7.67(s，1H)，7.15(s，1H)，3.93(s，3H)，2.51(s，3H)，1.62(s，9H)
[0353] 【阶段B：1-BOC-5-溴甲基-7-硝基-吲哚-2-羧酸甲基酯】
[0354] 将在阶段A收获的1-BOC-5-甲基-7-硝基-吲哚-2-羧酸甲基酯(34g，101.7mmol)溶于四氯化碳(100mL)，加入N-溴琥珀酰亚胺(27.2g，152.6mmol)和AIBN(1.7g，10.2mmol)后，于80℃搅拌5小时。反应终止后减压蒸馏，用柱层析纯化而收获标题化合物(48.0g，收率100％)。
[0355] 1H-NMR(500HMz，CDCl3)；δ8.01(s，1H)，7.90(s，1H)，7.21(s，1H)，4.60(s，2H)，3.93(s，3H)，1.62(s，9H)
[0356] 【阶段C：5-溴甲基-7-硝基-吲哚-2-羧酸甲基酯】
[0357] 将在阶段B收获的1-BOC-5-溴甲基-7-硝基-吲哚-2-羧酸甲基酯用如实施例2的阶段B的方法反应而收获标题化合物。
[0358] 质量[M+H]＝314(M+1)
[0359] 【制造例8：5-(1,1-二氧代-硫代吗啉-4-基甲基)-7-硝基-1H-吲哚-2-羧酸】[0360] 【阶段A：5-(1,1-二氧代-硫代吗啉-4-基甲基)-7-硝基-1H-吲哚-2-羧酸甲基酯】[0361] 将在制造例7收获的5-溴甲基-7-硝基-吲哚-2-羧酸甲基酯(2.4g，7.67mmol)溶于乙腈，加入硫代吗啉1,1-二氧化物(1.04mg，15.3mmol)，于80℃搅拌6小时。反应结束后，在减压下除去溶剂，加入水(100mL)，将有机物用乙酸乙酯萃取后，用无水硫酸镁干燥。在减压下除去溶剂，将残留物用柱层析分离而收获标题化合物(2.1g，收率75％)。
[0362] MS[M+1]＝368(M+1)
[0363] 【阶段B：5-(1,1-二氧代-硫代吗啉-4-基甲基)-7-硝基-1H-吲哚-2-羧酸】[0364] 将在阶段A收获的5-(1,1-二氧代-硫代吗啉-4-基甲基)-7-硝基-1H-吲哚-2-羧酸甲基酯用如制造例1的阶段D的方法反应而收获标题化合物。
[0365] MS[M+1]＝354(M+1)
[0366] 【实施例67：[7-环戊基氨基-5-(1,1-二氧代-硫代吗啉-4-基甲基)-1H-吲哚-2-基]-吡咯烷-1-基-甲酮】
[0367] [7-环戊基氨基-5-(1,1-二氧代-硫代吗啉-4-基甲基)-1H-吲哚-2-基]-吡咯烷-1-基-甲酮
[0368] 将在制造例8收获的5-(1,1-二氧代-硫代吗啉-4-基甲基)-7-硝基-1H-吲哚-2-羧酸，吡咯烷及环戊酮用如实施例1的方法反应而收获标题化合物。
[0369] MS[M+1]＝445(M+1)
[0370] 【实验例1：对于肝细胞毒性诱导物质的实施例化合物的肝细胞保护效果测定及分析】
[0371] 细胞从内/外部受多样的攻击，则大地以凋亡(apoptosis)或坏死(necrosis)的2种形态运行细胞死亡机理。本实验例利用这样的细胞死亡机理，将从大鼠分离的原代肝细胞(primary hepatocyte)用已知在临床上显示严重的肝毒性的副作用的药物或诱导细胞死亡(cell death)的诸化学物质处理，在24～48小时后测定在实施例合成的化合物的肝细胞保护效果。作为肝细胞死亡诱导物质，使用CCl4，ActD，H2O2，多柔比星(doxorubicin)，抗-Fas抗体/放线菌素D(anti-Fas Ab/Actinomycin D)，醋氨酚(acetoaminophen)，EtOH，CdCl2，棕榈酸盐(palmitate)，硬脂酸盐(stearate)，环磷酰胺(cyclophosphamide)，特非那定(terfenadine)，双氯芬酸(diclofenac)，辛伐他汀(simvastatin)，阿德福韦(adefovir)。原代肝细胞的分离利用Seglen PO(Experimental Cell Research74(1972)pp450-454)的方法。简言之，将肝细胞(hepatocyte)根据2阶段胶原酶灌流方法(two-step collagenase perfusion method)分离后，使用Percoll梯度(percoll gradient；Kreamer BL etc，In Vitro Cellular&Developmental Biology 22(1986)pp201-211)低速(500rpm)离心10分钟而除去死细胞。此时细胞的活力(viability)维持在90％或其以上。悬浮于HepatoZYME media(Gibco BRL)而计算细胞的数。将1.5×104个的细胞100μl加入包被胶原(collagen)的96孔板(BD biocoat)，使细胞附着于底壁3～4小时。
[0372] 为确认肝细胞保护效果，将所述附着的细胞用实施例化合物预处理30分钟。此时实施例化合物的浓度根据实验，从30μM，10μM或1μM以2倍或3倍经5阶段连续稀释而使用，使最终DMSO浓度成0.2％。用化合物处理后30分钟后，将肝细胞死亡诱导物质或肝毒性药物用表1中表示的浓度处理，在24小时或48小时后测定细胞的活力而评价肝细胞保护效果。用WST-1(MK-400，Takeda)方法，由440nm处的吸光度测定细胞的活力。实施例化合物的肝细胞保护效果自测定值计算而以“EC50”表示。此时“EC50”是指在实验中见到的显示最大保护效果的50％的化合物的浓度。对于代表性的实施例化合物的多柔比星的EC50值示于表1。
[0373] [表1]
[0374]实施例 EC50(μM) 实施例 EC50(μM) 实施例 EC50(μM)
13 0.15 29 0.2 38 0.33
46 0.29 49 0.33 50 0.175
51 0.33 52 0.21 53 0.71
55 0.43 60 0.25
13 0.15 29 0.2 38 0.33
46 0.29 49 0.33 50 0.175
51 0.33 52 0.21 53 0.71
55 0.43 60 0.25
[0375] 【实验例2：在肝细胞及其他多样的组织来源细胞中处理tBHP(叔丁基羟基过氧化物；t-BuOOH)时的保护效果】
[0376] 【(1)对于肝细胞(primary hepatocyte)处理tBHP的情况的保护效果】
[0377] 肝细胞分离如实验例1中记载相同地施行，用DMEM(Gibco+10％FBS+1×抗生素)培养基悬浮而向板分注肝细胞。在接种肝细胞后24小时后将化合物各连续稀释3倍至最终浓度成30，10，3，1，0.3，0.1μM而预处理30分钟。将tBHP以最终浓度300μM处理1小时后测定保护效果。如在实验例1中一样用WST-1(Takeda，10μL)处理1小时30分钟后使用SpectraMax(Molecular Device)测定440nm处的吸光度而计算EC50值。
[0378] 【(2)对于胰腺细胞(Linm5F)处理tBHP的情况的保护效果】
[0379] 为测定对于胰腺细胞的保护效果，首先将作为β细胞中的一种的Linm5F细胞以各2×104分注于96孔板而培养24小时。将实施例化合物各稀释3倍而至最终浓度成30，10，3，1，0.3，0.1μM而对各孔处理1小时。用tBHP处理至最终浓度成400μM而再培养5小时。保护效果使用对细胞的总蛋白量进行染色的SRB(Sulforhodamine B Protein)方法进行测定。简言之，将细胞培养5小时后，向各孔添加各50μL的4％甲醛溶液而固定，并于常温保存30分钟左右。弃去培养基，用蒸馏水将各孔洗涤2～3次后，将板在50℃炉中干燥。向各孔加入各50μL的SRB溶液后，于常温放置30分钟左右。除去SRB溶液后，用1％乙酸溶液洗涤板2～3次。将板在50℃炉中干燥后，加入10mM Tris 100μL而使对细胞内蛋白进行染色的SRB溶出。使用SpectrMax而在590nm和650nm处测定吸光度后，从590nm的吸光度减去650nm的吸光度值而计算EC50值。
[0380] 【(3)对于心脏细胞(H9C2，白色小鼠心肌细胞)处理tBHP的情况的保护效果】[0381] 为确认对于心脏细胞的保护效果，将H9C2细胞以各1.5×104个分注而培养24小时。将实施例化合物连续稀释各3倍至最终浓度成30，10，3，1，0.3，0.1μM而对各孔进行处理而培养45分钟。用tBHP处理至最终浓度成400μM，并培养2小时。用与所述(2)号的Linm5F相同的SRB方法测定各化合物的保护效果。
[0382] 【(4)对于肾脏细胞(LLC-PK1)处理tBHP的情况的保护效果】
[0383] 为测定对于肾脏细胞的保护效果，将4×104个的细胞分注于各孔而培养24小时。将实施例化合物处理至最终浓度成30，10，3，1，0.3，0.1μM而培养30分钟。处理400μM的tBHP而进一步培养6小时。用与所述(2)号的Linm5F相同的SRB方法测定各化合物的保护效果。
[0384] 【(5)对于软骨细胞(chondrocyte)处理tBHP的情况的保护效果】
[0385] 为测定对于软骨细胞的保护效果，首先从16周龄的SD大鼠(体重：450-460g)的2个后腿分离软骨细胞。分离方法如下。在白色小鼠后腿的膝部位分离软骨而移到装有PBS(+1×抗生素)的100π板。将PBS加入冰槽而维持4℃。更换为新的PBS后以1000rpm离心。除去PBS，添加37℃的1×胰蛋白酶(trypsin，Gibco)3mL而处理15分钟。离心后弃去上清液，再次用PBS洗涤。离心后弃去上清液。向其中加入0.2％胶原酶(collagenase，Worthington，type II)而使旋转，在37℃培养箱中过夜培养而分离细胞。对过滤的细胞溶液进行离心，并弃去上清液。用PBS洗涤后悬浮于10mL DMEM/F-12(Gibco，10％FBS)，并将2×104个的细胞分注于各孔而培养24小时。将实施例化合物各稀释3倍至最终浓度成30，10，3，1，0.3，0.1μM而处理1小时，用tBHP处理至最终浓度成500μM而培养3小时。用与在所述(2)的Linm5F相同的SRB染色方法测定各化合物的保护效果。
[0386] 【(6)对于脑细胞(SK-N-MC)处理tBHP的情况的保护效果】
[0387] 为确认对于化合物的脑细胞的保护效果，将脑细胞2×104个使用DMEM培养基(Gibco，10％的FBS)分注于96孔而培养24小时。将实施例化合物各连续稀释3倍至最终浓度成30，10，3，1，0.3，0.1μM而处理1小时。用tBHP处理至最终浓度成400μM而培养6小时。在各孔各取50μL培养基而进行LDH测定(Promega)。在LDH测定(Promega)中向培养基50μL混合测定溶液50μL后于常温反应30分钟，利用SpectraMax(Molecular Device)在490nm处测定吸光度。
[0388] 【工业实用性】
[0389] 如从上述结果可知，根据本发明的新颖化合物可不仅显示肝保护及肝功能改善效果，还可在因如脂肪肝，肝纤维化，肝硬变等慢性肝疾病，病毒或药物诱导的肝炎等的急性/慢性肝疾病的预防或治疗中有用地使用。本发明的化合物另外在胰腺，肾脏，脑，软骨，心脏细胞中显示细胞坏死阻碍功效。
[0390] 从而本发明的化合物可在细胞坏死及其关联疾病的预防或治疗中有用地使用。
[0391] 本发明属的领域普通技术人员能以上述内容为基础，在本发明的范畴内，施行多样的应用及变形。
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