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一种制备燕麦活性肽的方法

阅读：63发布：2023-01-25

专利汇可以提供一种制备燕麦活性肽的方法专利检索，专利查询，专利分析的服务。并且本发明公开了一种制备燕麦活性肽的方法，该方法以燕麦麸皮为原料，加水提取，加入淀粉酶和β-葡聚糖酶酶解，碱性提取燕麦蛋白质，离心分离，离心液等电点沉淀，离心得到燕麦蛋白，复溶燕麦蛋白，定向酶解得到燕麦多肽，超滤富集燕麦多肽，冷冻干燥得到燕麦活性肽粉末。本发明得到的燕麦小分子肽分子量在1000-5000Da，纯度为80-95%。该燕麦活性肽具有抑制ACE酶的活性，保湿、促进细胞新陈代谢等功效，可以广泛应用于降压保健食品等领域。，下面是一种制备燕麦活性肽的方法专利的具体信息内容。

权利要求

1.一种制备燕麦活性肽的方法，其特征在于：以燕麦麸皮为原料，加水提取，加入淀粉酶和β-葡聚糖酶酶解，碱性提取燕麦蛋白质，离心分离，离心液等电点沉淀，离心得到燕麦蛋白，复溶燕麦蛋白，定向酶解得到燕麦多肽，超滤富集燕麦多肽，冷冻干燥得到燕麦活性肽粉末。
2.根据权利要求1所述的制备燕麦活性肽的方法，其特征在于包括以下具体步骤：
（1）将燕麦麸皮加水搅拌，升温到70-90℃，调整pH为6.0-8.0，加入0. 01-0.1%的淀粉酶反应0.5-1小时；然后调整温度为40-70℃，pH为4.0-7.0，添加0.01-0.1%的β-葡聚糖酶反应15-30分钟；再调整体系温度为50-70℃，pH为7.0-10.0，反应0.5-2小时；
（2）将提取液进行离心，离心机离心时，离心温度保持在50-70℃；
（3）使用酸调节离心液等电点，然后对液体再次离心，离心温度保持在30-50℃；
（4）将离心得到的燕麦蛋白配制为0.5-2.0%的溶液，温度保持在40-70℃，pH为
4.0-8.0，添加酶进行酶解，添加酶的量保持在2.0-20 u/ml，反应时间为0.5-2小时；
（5）将降解得到的燕麦多肽进行超滤，采用的超滤膜的截留分子量为1000-5000Da；
（6）将得到的燕麦多肽进行冷冻干燥，最终得到燕麦活性肽粉末。
3.根据权利要求2所述的制备燕麦活性肽的方法，其特征在于：步骤（1）中燕麦麸皮与水的重量体积比例为1:10-1:20。
4.根据权利要求2所述的制备燕麦活性肽的方法，其特征在于：步骤（1）中添加的淀粉酶的活力为4000 u/ml。
5.根据权利要求2所述的制备燕麦活性肽的方法，其特征在于：步骤（1）中添加的β-葡聚糖酶的活力为50000 u/ml。
6.根据权利要求2所述的制备燕麦活性肽的方法，其特征在于：步骤（2）中离心转速保持在2000-3000转/分钟。
7.根据权利要求2所述的制备燕麦活性肽的方法，其特征在于：步骤（3）中酸为盐酸、柠檬酸或醋酸。
8.根据权利要求2所述的制备燕麦活性肽的方法，其特征在于：步骤（3）中离心转速保持在3000-5000转/分钟。
9.根据权利要求2所述的制备燕麦活性肽的方法，其特征在于：步骤（4）中添加的酶为胃蛋白酶、木瓜蛋白酶、复合蛋白酶和碱性蛋白酶中的一种或几种。
10.根据权利要求9所述的制备燕麦活性肽的方法，其特征在于：所述复合蛋白酶为诺维信Protamex复合蛋白酶，碱性蛋白酶为枯草杆菌蛋白酶。

说明书全文

一种制备燕麦活性肽的方法

技术领域

[0001] 本发明属于农产品深加工技术领域，具体涉及一种制备燕麦活性肽的方法。

背景技术

[0002] 燕麦一般分为带稃型和裸粒型两大类。世界各国栽培的燕麦以带稃型的为主，常称为皮燕麦。我国栽培的燕麦以裸粒型的为主，常称裸燕麦。燕麦的医疗价值和保健作用，已被古今中外医学界所公认。据1981～1985年中国农科院与北京市心脑血管研究中心、北京市海淀医院等18家医疗单位5轮动物试验和3轮997例临床观察研究证明，裸燕麦能预防和治疗由高血脂引发的心脑血管疾病。

[0003] 燕麦蛋白质是燕麦最主要的成分之一，谷类中燕麦蛋白质含量最高，必需氨基酸组成合理，含有人体必需的8种氨基酸，赖氨酸含量高于小麦粉和稻米，有利于饮食中其他氨基酸的吸收，色氨酸含量也很丰富，具有很高的营养和保健价值。燕麦蛋白质经酶解可得到小分子的肽和氨基酸，这一类分子中都含有亲水基团，可以吸收水分或锁住皮肤角质层水分，具有非常好的保湿功效。燕麦蛋白质、多肽和氨基酸还是组织和细胞生长发育必须的营养物资，在化妆品中添加这些物质，还可以滋润肌肤、营养细胞、促进皮肤组织健康的生长发育。

[0004] 目前国内外对于燕麦蛋白以及燕麦多肽的研究也趋于热衷，基本分为两类，一类是大分子量的燕麦蛋白提取方法的研究，另一类是以降解后的小分子量的燕麦多肽提取方法进行研究。中国专利《一种提取燕麦多肽、燕麦葡聚糖的综合提取方法》中，其公开的工艺是一种综合提取燕麦成分的方法，且其对于燕麦多肽提取工艺部分是采用单一碱性蛋白酶酶解再硅藻土板框过滤的方法。中国专利《从燕麦麸皮中提取燕麦淀粉、蛋白粉、β-葡聚糖的方法》中，其公开的工艺是离心机分离出燕麦蛋白，再喷雾干燥得到燕麦蛋白。中国专利《一种燕麦多肽及其制备方法与应用》中，公开的是超声预处理，酶降解，大孔树脂吸附纯化的工艺方法。而其他公开的涉及燕麦蛋白或多肽提取的专利文献，均是单一提取燕麦蛋白，或者对燕麦蛋白进行降解后即为产品。在其他文献报道中，《燕麦麸皮浓缩蛋白提取工艺研究》与《碱提酸沉法制备燕麦麸浓缩蛋白的工艺及其改进》等文献均是单一提取燕麦蛋白质。《酶法制备燕麦麸蛋白ACE抑制肽的研究》、《燕麦多肽提取工艺及特性研究》、《燕麦多肽提取工艺及特性研究》等文献均采用酶降解燕麦多肽，但并没有对燕麦多肽进行不同分子量的富集。

发明内容

[0005] 本发明的目的是提供一种采用新型工艺制备燕麦活性肽的方法，制得的燕麦活性肽功效更显著，更利于人们应用。

[0006] 本发明提供的一种制备燕麦活性肽的方法，其特征在于：以燕麦麸皮为原料，加水提取，加入淀粉酶和β-葡聚糖酶酶解，碱性提取燕麦蛋白质，离心分离，离心液等电点沉淀，离心得到燕麦蛋白，复溶燕麦蛋白，定向酶解得到燕麦多肽，超滤富集燕麦多肽，冷冻干燥得到燕麦活性肽粉末。具体制备步骤为：（1）将燕麦麸皮加水搅拌，升温到70-90℃，调整pH为6.0-8.0，加入0. 01-0.1%的淀粉酶反应0.5-1小时；然后调整温度为40-70℃，pH为4.0-7.0，添加0.01-0.1%的β-葡聚糖酶反应15-30分钟；再调整体系温度为50-70℃，pH为7.0-10.0，反应0.5-2小时；
（2）将提取液进行离心，离心机离心时，离心温度保持在50-70℃；
（3）使用酸调节离心液等电点，然后对液体再次离心，离心温度保持在30-50℃；
（4）将离心得到的燕麦蛋白配制为0.5-2.0%的溶液，温度保持在40-70℃，pH为
4.0-8.0，添加酶进行酶解，添加酶的量保持在2.0-20 u/ml，反应时间为0.5-2小时；
（5）将降解得到的燕麦多肽进行超滤，采用的超滤膜的截留分子量为1000-5000Da；
（6）将得到的燕麦多肽进行冷冻干燥，最终得到燕麦活性肽粉末。

[0007] 上述制备步骤中：步骤（1）中燕麦麸皮与水的重量体积比例为1:10-1:20。

[0008] 步骤（1）中添加的淀粉酶的活力为4000 u/ml。

[0009] 步骤（1）中添加的β-葡聚糖酶的活力为50000 u/ml。

[0010] 步骤（2）中离心转速保持在2000-3000转/分钟。

[0011] 步骤（3）中酸为盐酸、柠檬酸或醋酸。

[0012] 步骤（3）中离心转速保持在3000-5000转/分钟。

[0013] 步骤（4）中添加的酶为胃蛋白酶、木瓜蛋白酶、复合蛋白酶和碱性蛋白酶中的一种或几种，其中复合蛋白酶为诺维信Protamex复合蛋白酶，碱性蛋白酶为枯草杆菌蛋白酶。

[0014] 本发明采用燕麦麸皮作为原料，运用多种酶定向酶解，超滤富集特定分子量的燕麦活性肽，制得的燕麦活性肽呈淡黄至白色粉末，其分子量在1000-5000Da之间，纯度为80-95%，使燕麦多肽功效更显著，更利于人们应用。

[0015] 下面结合具体实施方式对本发明做进一步的说明。

具体实施方式

[0016] 实施例1将燕麦麸皮加水10倍搅拌，升温到80℃，调整pH为6.0，加入0. 01%酶活力为4000 u/ml的淀粉酶反应0.5小时；然后调整温度为50℃，pH4.0，添加0. 03%酶活力为50000 u/ml的β-葡聚糖酶反应15分钟；再调整体系温度为50℃，pH为8.0，反应1小时。将提取液进行离心，离心机离心时，离心转速保持在2000转/分钟，离心温度保持在50℃。使用盐酸调节离心液等电点，然后对液体再次离心，离心机转速保持在4000转/分钟，离心温度保持在30℃。将离心得到的燕麦蛋白配制为1.0%的溶液，温度保持在50℃，pH为5.0，添加胃蛋白酶和木瓜蛋白酶进行酶解，添加酶的量分别为10 u/ml和8u/ml，反应时间为1小时。将降解得到的燕麦多肽进行超滤，采用的超滤膜的截留分子量为1000-5000Da。得到的燕麦多肽采用冷冻干燥得到燕麦活性肽粉末。经检验计算得出该燕麦活性肽纯度为90%。

[0017] 实施例2将燕麦麸皮加水20倍搅拌，升温到80℃，调整pH为6.5，加入0. 05%酶活力为4000 u/ml的淀粉酶反应1小时；然后调整温度为55℃，pH4.5，添加0. 02%酶活力为50000 u/ml的β-葡聚糖酶反应20分钟；再调整体系温度为60℃，pH为8.5，反应1小时。将提取液进行离心，离心机离心时，离心转速保持在2500转/分钟，离心温度保持在60℃。使用醋酸调节离心液等电点，然后对液体再次离心，离心机转速保持在4000转/分钟，离心温度保持在40℃。将离心得到的燕麦蛋白配制为0.8%的溶液，温度保持在50℃，pH为4.5，添加木瓜蛋白酶进行酶解，添加酶的量为10u/ml，反应时间为2小时。将降解得到的燕麦多肽进行超滤，采用的超滤膜的截留分子量为1000-5000Da。得到的燕麦多肽采用冷冻干燥得到燕麦活性肽粉末。经检验计算得出该燕麦活性肽纯度为92%。

[0018] 实施例3将燕麦麸皮加水15倍搅拌，升温到75℃，调整pH为6.0，加入0. 08%酶活力为4000 u/ml的淀粉酶反应0.5小时；然后调整温度为70℃，pH6.0，添加0. 07%酶活力为50000 u/ml的β-葡聚糖酶反应25分钟；再调整体系温度为60℃，pH为9.0，反应1小时。将提取液进行离心，离心机离心时，离心转速保持在2000转/分钟，离心温度保持在50℃。使用盐酸调节离心液等电点，然后对液体再次离心，离心机转速保持在3000转/分钟，离心温度保持在45℃。将离心得到的燕麦蛋白配制为1.5%的溶液，温度保持在50℃，pH为7.0，添加诺维信Protamex复合蛋白酶和枯草杆菌碱性蛋白酶进行酶解，添加酶的量分别为5u/ml和10u/ml，反应时间为30分钟。将降解得到的燕麦多肽进行超滤，采用的超滤膜的截留分子量为1000-5000Da。得到的燕麦多肽采用冷冻干燥得到燕麦活性肽粉末。经检验计算得出该燕麦活性肽纯度为88%。

[0019] 实施例4将燕麦麸皮加水18倍搅拌，升温到90℃，调整pH为6.0，加入0. 1%酶活力为4000 u/ml的淀粉酶反应40分钟；然后调整温度为60℃，pH5.5，添加0. 05%酶活力为50000 u/ml的β-葡聚糖酶反应20分钟；再调整体系温度为70℃，pH为8.0，反应1.5小时。将提取液进行离心，离心机离心时，离心转速保持在3000转/分钟，离心温度保持在50℃。使用柠檬酸调节离心液等电点，然后对液体再次离心，离心机转速保持在5000转/分钟，离心温度保持在50℃。将离心得到的燕麦蛋白配制为2.0%的溶液，温度保持在50℃，pH为6.0，添加诺维信Protamex复合蛋白酶进行酶解，添加酶的量为15u/ml，反应时间为1.5小时。将降解得到的燕麦多肽进行超滤，采用的超滤膜的截留分子量为1000-5000Da。得到的燕麦多肽采用冷冻干燥得到燕麦活性肽粉末。经检验计算得出该燕麦活性肽纯度为93%。

[0020] 实施例5将燕麦麸皮加水20倍搅拌，升温到85℃，调整pH为6.5，加入0. 01%酶活力为4000 u/ml的淀粉酶反应1小时；然后调整温度为55℃，pH5.0，添加0. 1%酶活力为50000 u/ml的β-葡聚糖酶反应20分钟；再调整体系温度为60℃，pH为9.0，反应2小时。将提取液进行离心，离心机离心时，离心转速保持在2000转/分钟，离心温度保持在50℃。使用柠檬酸调节离心液等电点，然后对液体再次离心，离心机转速保持在5000转/分钟，离心温度保持在40℃。将离心得到的燕麦蛋白配制为1.5%的溶液，温度保持在55℃，pH为8.0，添加枯草杆菌碱性蛋白酶进行酶解，添加酶的量分别为15u/ml，反应时间为2小时。将降解得到的燕麦多肽进行超滤，采用的超滤膜的截留分子量为1000-5000Da。得到的燕麦多肽采用冷冻干燥得到燕麦活性肽粉末。经检验计算得出该燕麦活性肽纯度为91%。

[0021] 以上实施例仅是本发明较有代表性的举例。本发明的技术方案并不限于上述实施例，还可以有许多变形。本领域的普通技术人员能从本发明公开的内容直接导出或联想到

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