一种磺胺类定量检测套件和试剂盒
阅读：226发布：2023-02-25
专利汇可以提供一种磺胺类定量检测套件和试剂盒专利检索，专利查询，专利分析的服务。并且本实用新型公开了一种磺胺类定量检测套件和 试剂 盒 ，涉及试剂盒领域。本实用新型公开的磺胺类定量检测套件将时间分辨 荧光 微球置于由密封膜、管体的且位于环形凸缘下方的内壁以及管体的底壁构成的容纳室内，可以防止在运输的过程中由于颠簸振动导致的粉末状时间分辨荧光微球分散到管体开口或黏附到管体内壁上，有助于避免材料的浪费。，下面是一种磺胺类定量检测套件和试剂盒专利的具体信息内容。
1.一种磺胺类定量检测套件，其特征在于，其包括一个八联管和八个检测卡；
所述八联管具有相互连接的八个管体和与所述管体的开口配合的管帽，每个所述管体的内部存放有冻干的呈粉末状的时间分辨荧光微球，所述时间分辨荧光微球包括检测微球和质控微球，所述检测微球为磺胺类抗体标记的荧光微球，所述质控微球为生物素标记的荧光微球；
所述检测卡包括底板、设置在底板上的硝酸纤维素膜以及分别搭接在所述硝酸纤维素膜两端的吸水垫和样品垫，所述硝酸纤维素膜上设置有包被亲和素的质控线和包被磺胺类抗体的检测线；
所述管体的内壁沿所述管体的圆周方向延伸且向所述管体的圆心方向突出的环形凸缘，所述环形凸缘上设置有密封膜，所述密封膜的周缘沿所述管体的圆周方向与所述环形凸缘连接，所述密封膜、所述管体的且位于所述环形凸缘下方的内壁以及所述管体的底壁构成用于容纳时间分辨荧光微球的容纳室，所述时间分辨荧光微球置于所述容纳室中。
2.根据权利要求1所述的磺胺类定量检测套件，其特征在于，所述密封膜靠近所述管体的开口的表面上设置有易撕拉条，所述易撕拉条的一端与所述密封膜固定连接，所述易撕拉条的另一端向所述管体的开口方向延伸。
3.根据权利要求2所述的磺胺类定量检测套件，其特征在于，所述密封膜与所述环形凸缘的上表面通过粘黏剂连接，所述易撕拉条与所述密封膜对应于所述环形凸缘的靠近所述管体的内壁的位置固定连接。
4.根据权利要求1-3任一项所述的磺胺类定量检测套件，其特征在于，所述管帽上设置有伸入所述管体内部的密封塞，所述密封塞呈半球形。
5.根据权利要求1-3任一项所述的磺胺类定量检测套件，其特征在于，所述底板为塑料底板。
6.根据权利要求1-3任一项所述的磺胺类定量检测套件，其特征在于，所述检测微球为磺胺嘧啶钠抗体标记的荧光微球、磺胺二甲嘧啶钠抗体标记的荧光微球、磺胺甲基异恶唑抗体标记的荧光微球以及磺胺喹恶啉钠抗体标记的荧光微球的混合物。
7.根据权利要求1-3任一项所述的磺胺类定量检测套件，其特征在于，所述检测线上包被的磺胺类抗体包括有磺胺嘧啶钠抗体、磺胺二甲嘧啶钠抗体、磺胺甲基异恶唑抗体以及磺胺喹恶啉钠抗体。
8.根据权利要求1-3任一项所述的磺胺类定量检测套件，其特征在于，所述套件还包括带有瓶盖的瓶体，八个所述检测卡和一个所述八联管容置于所述瓶体内。
9.一种磺胺类定量检测试剂盒，其特征在于，其包括多个权利要求1-8任一所述的磺胺类定量检测套件。
10.根据权利要求9所述的磺胺类定量检测试剂盒，其特征在于，所述磺胺类定量检测试剂盒还包括包装盒体，多个所述磺胺类定量检测套件容置在所述包装盒体内。
一种磺胺类定量检测套件和试剂盒
技术领域
[0001] 本实用新型涉及试剂盒领域，具体而言，涉及一种磺胺类定量检测套件和试剂盒。
背景技术
[0002] 磺胺类药物为人工合成的抗菌药，用于临床已近50年，它具有抗菌谱较广、性质稳定、使用简便、生产时不耗用粮食等优点。特别是1969年抗菌增效剂—甲氧苄氨嘧啶(TMP)发现以后，与磺胺类联合应用可使其抗菌作用增强、治疗范围扩大，因此，虽然有大量抗生素问世，但磺胺类药仍是重要的化学治疗药物。
[0003] 磺酰胺基上的氢，可被不同杂环取代，形成不同种类的磺胺药。它们与母体磺胺相比，具有效价高、毒性小、抗菌谱广、口服易吸收等优点。对位上的游离氨基是抗菌活性部分，若被取代，则失去抗菌作用。必须在体内分解后重新释出氨基，才能恢复活性。
[0004] 磺胺类药对许多革兰氏阳性菌和一些革兰氏阴性菌、诺卡氏菌属、衣原体属和某些原虫(如疟原虫和阿米巴原虫)均有抑制作用。在阳性菌中高度敏感者有链球菌和肺炎球菌；中度敏感者有葡萄球菌和产气荚膜杆菌。阴性菌中敏感者有脑膜炎球菌、大肠杆菌、变形杆菌、痢疾杆菌、肺炎杆菌、鼠疫杆菌。对病毒、螺旋体、锥虫无效。对立克次氏体不但无效，反能促进其繁殖。普遍认为不同的磺胺类药物，其抗菌力的差别是在量的方面，而不在质的方面。对某一种类型细菌效价最高的化合物，对其他类型的菌效价也高。
[0005] 常见的磺胺类药有：磺胺嘧啶钠、磺胺二甲嘧啶钠、二甲氧苄氨嘧啶(地菌净)、三甲氧苄氨嘧啶(磺胺增效剂)、磺胺甲基异恶唑(新诺明)以及磺胺喹恶啉钠。
[0006] 免疫层析(lateral flow immunoassay，LFIA)快速检测试纸条多以胶体金、彩色乳胶微粒或者荧光素作为标记物。基于胶体金标记技术开发的快速检测产品，存在灵敏度低，只能定性或者半定量，批间差异较大等问题；彩色乳胶微粒虽然批间差有所改进，但灵敏度依然较低，也只能定性或半定量；基于荧光素标记技术的免疫层析灵敏度有了较大提高，也能进行定量检测，但是由于样本中含有较高的荧光本底信号，且stock位移较小，会对检测产生较大的影响。
[0007] 时间分辨荧光(Time-resolved Fluorescence，TRF)是一种非同位素荧光标记物，与普通荧光相比，具有stock位移大，荧光寿命长等特点，可以有效的避免样品中的本底荧光，以及激发光等杂散光的影响。它用镧系元素标记抗原或抗体，根据镧系元素螯合物的发光特点，用时间分辨技术测量荧光，同时检测波长和时间两个参数进行信号分辨，可有效地排除非特异荧光的干扰，相比普通荧光具有更高的灵敏度和抗干扰能力。由于其高灵敏度，在临床上得到了广泛的应用，逐渐代替了放射免疫分析。
[0008] 目前存在采用时间分辨荧光检测技术和免疫层析技术结合的检测方法，其主要是将抗原或抗体与时间分辨荧光微球分开包被在试纸条的不同位置上，检测时将待测样品加到试纸条上，让待测样品中的目标物质与抗原或抗体在试纸条上反应，在层析的过程中，时间分辨荧光微球才结合到抗原或抗体上，这样的检测方式不利于针对多种物质的同时检测，且待测物与抗原或抗体在试纸条上反应存在反应不充分的问题。实用新型内容
[0009] 本实用新型的目的在于提供一种磺胺类定量检测套件，该磺胺类定量检测套件中含有已提前将不同磺胺类抗体标记到时间分辨荧光微球的检测微球，检测微球容置在管体内，没有包被在试纸条上，以使在检测时，易于与待测样品反应，保证反应更充分。
[0010] 本实用新型的目的在于提供一种磺胺类定量检测试剂盒，其包括上述的磺胺类定量检测套件。
[0011] 本实用新型是这样实现的：
[0012] 一种磺胺类定量检测套件，其包括一个八联管和八个检测卡；
[0013] 八联管具有相互连接的八个管体和与管体的开口配合的管帽，每个管体的内部存放有冻干的呈粉末状的时间分辨荧光微球，时间分辨荧光微球包括检测微球和质控微球，检测微球为磺胺类抗体标记的荧光微球，质控微球为生物素标记的荧光微球；
[0015] 管体的内壁沿管体的圆周方向延伸且向管体的圆心方向突出的环形凸缘，环形凸缘上设置有密封膜，密封膜的周缘沿管体的圆周方向与环形凸缘连接，密封膜、管体的且位于环形凸缘下方的内壁以及管体的底壁构成用于容纳时间分辨荧光微球的容纳室，时间分辨荧光微球置于容纳室中。
[0016] 进一步地，在本实用新型较佳的实施例中，密封膜靠近管体的开口的表面上设置有易撕拉条，易撕拉条的一端与密封膜固定连接，易撕拉条的另一端向管体的开口方向延伸。
[0017] 进一步地，在本实用新型较佳的实施例中，密封膜与环形凸缘的上表面通过粘黏剂连接，易撕拉条与密封膜对应于环形凸缘的靠近管体的内壁的位置固定连接。
[0018] 进一步地，在本实用新型较佳的实施例中，易撕拉条的长度L大于环形凸缘与开口边缘的高度H。
[0019] 进一步地，在本实用新型较佳的实施例中，管帽上设置有伸入管体内部的密封塞，密封塞呈半球形。
[0020] 进一步地，在本实用新型较佳的实施例中，底板为塑料底板。
[0021] 进一步地，在本实用新型较佳的实施例中，检测微球为磺胺嘧啶钠抗体标记的荧光微球、磺胺二甲嘧啶钠抗体标记的荧光微球、磺胺甲基异恶唑抗体标记的荧光微球以及磺胺喹恶啉钠抗体标记的荧光微球的混合物。
[0022] 进一步地，在本实用新型较佳的实施例中，检测线上包被的磺胺类抗体包括有磺胺嘧啶钠抗体、磺胺二甲嘧啶钠抗体、磺胺甲基异恶唑抗体以及磺胺喹恶啉钠抗体。
[0023] 进一步地，在本实用新型较佳的实施例中，套件还包括带有瓶盖的瓶体，八个检测卡和一个八联管容置于瓶体内。
[0024] 一种磺胺类定量检测试剂盒，其包括多个上述的磺胺类定量检测套件。
[0025] 进一步地，在本实用新型较佳的实施例中，磺胺类定量检测试剂盒还包括包装盒体，多个磺胺类定量检测套件容置在包装盒体内。
[0026] 本实用新型的有益效果有：
[0027] 本实用新型提供的磺胺类定量检测套件，其包括八联管和检测卡，且将冻干的检测微球即磺胺类抗体标记的荧光微球和质控微球置于八联管的管体内，检测时，先将待测样品与时间分辨荧光微球在管体内反应，然后将反应液加到检测卡的样品垫进行层析，由仪器读取检测线和质控线的信号，再根据标准曲线浓度，即可得到待测样品中磺胺类物质的浓度，由于待测样品与时间分辨荧光微球在管体内反应，而不是在试纸条上进行，这样使得待测样品中的磺胺类物质可以与磺胺类抗体标记的荧光微球充分接触反应，最大程度地让磺胺类物质与磺胺类抗体标记的荧光微球结合，进而被检测卡上的检测线中的包被的磺胺类抗体捕获被检出，有助于提高检测结果的准确性；
[0028] 此外，将时间分辨荧光微球置于由密封膜、管体的且位于所述环形凸缘下方的内壁以及管体的底壁构成的容纳室内，可以防止在运输的过程中由于颠簸振动导致的粉末状时间分辨荧光微球分散到管体开口或黏附到管体内壁上，有助于避免材料的浪费，提高使用者的使用体验效果。附图说明
[0029] 为了更清楚地说明本实用新型实施例的技术方案，下面将对实施例中所需要使用的附图作简单地介绍，应当理解，以下附图仅示出了本实用新型的某些实施例，因此不应被看作是对范围的限定，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他相关的附图。
[0030] 图1为实施例1提供的八联管的结构示意图；
[0031] 图2为实施例1提供的单个管体的剖面结构示意图；
[0032] 图3为图2中单个管体的俯视图；
[0033] 图4为实施例1提供的检测卡的第一视角的结构示意图；
[0034] 图5为图4中检测卡的剖面结构示意图。
[0035] 图标：100-八联管；110-管体；111-开口；112-环形凸缘；113-密封膜；114-容纳室；115-易撕拉条；120-管帽；121-密封塞；200-检测卡；210-底板；220-硝酸纤维素膜；221-质控线；222-检测线；230-吸水垫；240-样品垫。
具体实施方式
[0036] 为使本实用新型实施例的目的、技术方案和优点更加清楚，下面将结合本实用新型实施例中的附图，对本实用新型实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例是本实用新型一部分实施例，而不是全部的实施例。通常在此处附图中描述和示出的本实用新型实施例的组件可以以各种不同的配置来布置和设计。
[0037] 因此，以下对在附图中提供的本实用新型的实施例的详细描述并非旨在限制要求保护的本实用新型的范围，而是仅仅表示本实用新型的选定实施例。基于本实用新型中的实施例，本领域普通技术人员在没有作出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本实用新型保护的范围。
[0038] 应注意到：相似的标号和字母在下面的附图中表示类似项，因此，一旦某一项在一个附图中被定义，则在随后的附图中不需要对其进行进一步定义和解释。
[0039] 在本实用新型的描述中，需要说明的是，术语“中心”、“上”、“下”、“左”、“右”、“竖直”、“水平”、“内”、“外”、“顺时针”、“逆时针”等指示的方位或位置关系为基于附图所示的方位或位置关系，或者是该实用新型产品使用时惯常摆放的方位或位置关系，仅是为了便于描述本实用新型和简化描述，而不是指示或暗示所指的装置或元件必须具有特定的方位、以特定的方位构造和操作，因此不能理解为对本实用新型的限制。
[0040] 此外，术语“水平”、“竖直”、“悬垂”等术语并不表示要求部件绝对水平或悬垂，而是可以稍微倾斜。如“水平”仅仅是指其方向相对“竖直”而言更加水平，并不是表示该结构一定要完全水平，而是可以稍微倾斜。
[0041] 在本实用新型的描述中，还需要说明的是，除非另有明确的规定和限定，术语“设置”、“安装”、“相连”、“连接”应做广义理解，例如，可以是固定连接，也可以是可拆卸连接，或一体地连接；可以是机械连接，也可以是电连接；可以是直接相连，也可以通过中间媒介间接相连，可以是两个元件内部的连通。对于本领域的普通技术人员而言，可以具体情况理解上述术语在本实用新型中的具体含义。
[0042] 实施例1
[0043] 参考图1-图4，本实施例提供的一种磺胺类定量检测套件，其包括：一个八联管100、八个检测卡200以及一个用于容放该联管和八个检测卡200的瓶体。
[0044] 在本实施例中，如图1和图2所示，八联管100具有相互连接的八个管体110和与管体110的开口111配合的管帽120。每个管体110的内部存放有冻干的呈粉末状的时间分辨荧光微球。时间分辨荧光微球包括检测微球和质控微球。检测微球为磺胺类抗体标记的荧光微球，质控微球为生物素标记的荧光微球。
[0045] 具体地，检测微球为磺胺嘧啶钠抗体标记的荧光微球、磺胺二甲嘧啶钠抗体标记的荧光微球、磺胺甲基异恶唑抗体标记的荧光微球以及磺胺喹恶啉钠抗体标记的荧光微球的混合物。
[0046] 各种荧光微球的比例可根据使用需求进行设定。优选地，磺胺嘧啶钠抗体标记的荧光微球、磺胺二甲嘧啶钠抗体标记的荧光微球、磺胺甲基异恶唑抗体标记的荧光微球以及磺胺喹恶啉钠抗体标记的荧光微球的比例为1:1:1:1。
[0047] 本实施例中，将检测微球的制备方法可参考如下步骤：
[0049] (2)取1ml时间分辨荧光微球加入9ml纯化水，加入10mg NHS,加入5mg EDC，常温反应1个小时。
[0050] (3)将步骤1.2得到的反应物离心，10000rpm、离心30分钟，弃上清，加入1ml纯化水，混匀。
[0051] (4)加入磺胺类抗体(例如磺胺嘧啶钠抗体)0.1mg，常温反应2小时，加入1％BSA0.1ml，进行封闭2小时。
[0052] (5)将步骤1.4得到的反应物离心，10000rpm、离心30分钟，弃上清，加入1ml保存液，混匀，得到磺胺嘧啶钠抗体标记的时间分辨荧光微球溶液。其中，保存液由0.01M PBS中加入0.5％BSA和0.1％Proclin300(即液体生物防腐剂)配制而成。
[0053] (6)磺胺二甲嘧啶钠抗体标记的荧光微球、磺胺甲基异恶唑抗体标记的荧光微球以及磺胺喹恶啉钠抗体标记的荧光微球即可按上述方法进行制备。
[0054] (7)按等体积比例，分别取磺胺嘧啶钠抗体标记的时间分辨荧光微球溶液、磺胺二甲嘧啶钠抗体标记的荧光微球溶液、磺胺甲基异恶唑抗体标记的荧光微球溶液以及磺胺喹恶啉钠抗体标记的荧光微球溶液，混合均匀，放入冻干机冻干后，即得到用于检测磺胺类的检测微球，将其与冻干的质控微球一起混合，装入至八联管100的管体110内即可。
[0055] 另外，本实施例中，如图4和图5所示，检测卡200包括底板210、设置在底板210上的硝酸纤维素膜220以及分别搭接在硝酸纤维素膜220两端的吸水垫230和样品垫240，硝酸纤维素膜220上设置有包括有亲和素的质控线221即C线和包被有磺胺类抗体的检测线222即T线。在本实施例中，底板210为塑料底板210。
[0056] 其中，检测线222上包被的磺胺类抗体包括有磺胺嘧啶钠抗体、磺胺二甲嘧啶钠抗体、磺胺甲基异恶唑抗体以及磺胺喹恶啉钠抗体。
[0057] 检测时，将待检测样品(如果是液体型)直接或通过一定方法提取后得到的提取液(待测样品是固体型的情况下，可按此方法处理待测样品)加入管体110内(检测样品体积加入量可根据具体情况确定，以加入后的总体积为管体110的体积的3/5-4/5为宜)进行反应一段时间(例如5分钟)，再取反应后的液体加到检测卡200的样品垫240进行层析，一段时间后，由仪器读取检测卡200上的检测线222和质控线221的荧光信号，再根据标准曲线浓度，即可得到待测样品中磺胺类物质的浓度。该反应过程为现有技术，本实用新型对此不再做详细描述。
[0058] 相较于现有技术中的在试纸条上进行抗原抗体反应，本实用新型由于待测样品与时间分辨荧光微球在管体110内反应且是分散在液体中进行，这样使得待测样品中的磺胺类抗原物质(如果存在磺胺唑酮、磺胺它酮、磺胺妥因、磺胺西林等物质)可以与磺胺类抗体标记的荧光微球充分接触反应，最大程度地让磺胺类物质(例如磺胺唑酮、磺胺它酮、磺胺妥因、磺胺西林)与磺胺类抗体标记的荧光微球(即磺胺嘧啶钠抗体标记的时间分辨荧光微球溶液、磺胺二甲嘧啶钠抗体标记的荧光微球溶液、磺胺甲基异恶唑抗体标记的荧光微球溶液以及磺胺喹恶啉钠抗体标记的荧光微球)结合，进而被检测卡200上的检测线222中的磺胺类抗体捕获被检出，有助于提高检测结果的准确性。
[0059] 另外，为了避免在运输的过程中由于颠簸振动导致的粉末状时间分辨荧光微球分散到管体110开口111或黏附到管体110内壁上，进而导致的材料浪费，在本实施例中，管体110的内壁沿管体110的圆周方向延伸且向管体110的圆心方向突出的环形凸缘112(如图1、图2以及图3所示)。
[0060] 环形凸缘112上设置有密封膜113，密封膜113的周缘沿管体110的圆周方向与环形凸缘112连接。密封膜113、管体110的且位于环形凸缘112下方的内壁以及管体110的底壁构成用于容纳时间分辨荧光微球的容纳室114。上述的冻干的呈粉末状的时间分辨荧光微球置于该容纳室114中。密封膜113由聚乙烯制成，具有柔软易撕特性。
[0061] 密封膜113可以有效地阻止在运输的过程中由于颠簸振动导致的粉末状时间分辨荧光微球分散到管体110开口111或黏附到管体110内壁上，有助于避免材料的浪费，提高使用者的使用体验效果。
[0062] 此外，由密封膜113、管体110的且位于环形凸缘112下方的内壁以及管体110的底壁构成的容纳室114可以很好地将时间分辨荧光微球限制集中在管体110靠底壁的位置，防止时间分辨荧光微球粉末黏附到管体110较高位置的内壁上，有利于其后期与待测样品的混合和接触，提高时间分辨荧光微球粉末的利用率。
[0063] 为了方便在使用时撕除密封膜113，在本实施例中，密封膜113靠近管体110的开口111的表面上设置有易撕拉条115，易撕拉条115的一端与密封膜113固定连接，易撕拉条115的另一端向管体110的开口111方向延伸。
[0064] 使用时，通过拉扯易撕拉条115，进而将密封膜113撕除，露出时间分辨荧光微球，然后加入待测样品，进行反应即可。通过易撕拉条115的设置可以方便使用者去除密封膜113。
[0065] 在本实施例中，密封膜113与环形凸缘112的上表面通过粘黏剂连接，易撕拉条115与密封膜113对应于环形凸缘112的靠近管体110的内壁的位置固定连接。
[0066] 将易撕拉条115与密封膜113的连接点设计在环形凸缘112的靠近管体110的内壁的位置，可以使得在撕扯密封膜113时能够将密封膜113整个去除，避免残留的密封膜113碎片影响时间分辨荧光微球与待测样品的反应。
[0067] 在本实施例中，易撕拉条115的长度L大于环形凸缘112与开口111边缘的高度H。该设计结构使得易撕拉条115的一端即远离密封膜113的一端(或称自由端)，可以伸出到管体110外，便于使用者直接夹持该自由端，拉扯易撕拉条115，进而方便快速地去除密封膜113，有效地避免了使用者用手或用夹子伸入到管体110内夹取易撕拉条115带来的不便捷问题。
至于具体的易撕拉条115的长度L可以根据实际使用需求确定，只要大于环形凸缘112与开口111边缘的高度H即可。
至于具体的易撕拉条115的长度L可以根据实际使用需求确定，只要大于环形凸缘112与开口111边缘的高度H即可。
[0068] 当然，密封膜113和易撕拉条115均可采用柔性材料制成可以一体成型，例如采用聚乙烯膜制成，方便撕扯。另外，在本实施例中，八联管100整体采用透明塑料制成，便于观察管体110内的反应。
[0069] 在本实施例中，管帽120上设置有伸入管体110内部的密封塞121，密封塞121呈半球形。当密封塞121伸入到管体110内时，易撕拉条115的自由端以弯曲状态呈现。当然，每个管帽120上设置的密封塞121数量与管体110数量一一对应。在密封膜113偶然破裂的情况下，通过密封塞121的设置，可以进一步防止管体110内的时间分辨荧光微球分散到管体110的开口111处或黏附到管体110内壁上导致的浪费现象，提高时间分辨荧光微球的利用率。
[0070] 实施例2
[0071] 本实施例提供一种磺胺类定量检测试剂盒，其包括包装盒体，以及多个实施例1提供的磺胺类定量检测套件，定量检测套件中的八个检测卡和八联管容置在瓶体中，多个磺胺类定量检测套件又容置在包装盒体内。
[0072] 以上仅为本实用新型的优选实施例而已，并不用于限制本实用新型，对于本领域的技术人员来说，本实用新型可以有各种更改和变化。凡在本实用新型的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本实用新型的保护范围之内。
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