利用微生物发酵制备鼠李糖脂的方法
专利汇可以提供利用微生物发酵制备鼠李糖脂的方法专利检索，专利查询，专利分析的服务。并且本 发明 涉及一种采用 发酵 合成所需的化合物的方法，特别是指一种利用 微 生物 发酵制备鼠李糖脂的方法。它以 铜 绿假单胞菌作为原始菌种，采用葵子油及废糖蜜作为二级扩大培养及发酵的主要 碳 源，通过斜面 种子 的制备，将斜面种子经扩大培养制备成种子液，将种子液接种到 发酵罐 中经通 风 培养、补料控制最终制备成含生物 表面活性剂 鼠李糖脂的发酵液。本发明解决了 现有技术 存在的生产成本高、产品得率低的问题，具有生产工艺合理且易于实现，生产成本低、产品得率高的优点。，下面是利用微生物发酵制备鼠李糖脂的方法专利的具体信息内容。
1、利用微生物发酵制备鼠李糖脂的方法，其特征在于包括下列工艺步骤： A、将原始菌种制成斜面菌种； B、将步骤A中的斜面菌种经扩大培养制成种子液； C、将步骤B中制备的种子液按种子液∶发酵培养基为8％-10％的接种量接入发酵培养基接入发酵培养基进行发酵，制成含鼠李糖脂的发酵液，其中发酵培养基包括下列质量份数的组分： 葵子油1.0-2.0 废糖蜜1.0-2.0 硫酸铵0.2-0.3 尿素0.2-0.3 磷酸氢二钠0.2-0.3 磷酸二氢钾0.1-0.2 发酵培养基的初始pH为7.0-7.2，发酵条件为温度32℃-36℃，发酵周期为60-75小时，通风量0.2-0.6vvm，在发酵进行到6-50小时补入葵子油、尿素并调整通风量； 原始菌种选用铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa)。
2、 根据权利要求l所述的利用微生物发酵制备鼠李糖脂的方法，其特征 在于所述的步骤A中斜面菌种的制备过程中的培养基含有如下质量份数的组 分：葡萄糖1-2 蛋白胨0.2-0. 4酵母膏0. 2-0. 3 琼脂2-2. 5 培养基的pH7. 0-7. 2。
3、 根据权利要求l所述的利用微生物发酵制备鼠李糖脂的方法，其特征 在于所述的步骤B中的扩大培养包括摇瓶种子制备、 一级种子制备和二级种 子制备，将斜面菌种接入摇瓶扩大培养基经发酵制成摇瓶摇瓶种子，将摇瓶 种子接入一级扩大培养的培养基经发酵制成一级种子，将一级种子接入二级 扩大培养基经发酵制成二级种子；摇瓶扩大培养基含有如下质量份数的组分:葡萄糖l-2 硝酸钠0.4-0. 7 酵母膏O. 1-0. 3 蛋白胨O. 15-0. 3 摇瓶扩大培养基的pH7. 0-7. 3,接种量为斜面菌种：培养基=1 : 200,培 养温度32°C-36°C,转速200-250转/分钟，发酵周期20-25小时。
4、 根据权利要求3所述的利用微生物发酵制备鼠李糖脂的方法，其特征 在于所述的一级扩大培养中的培养基包括下列质量份数的组分：液体石蜡l. 0-2. 0 葡萄糖1.0-2.0 硝酸钠O. 7-0. 9 硫酸铵0. 1-0. 2 尿素0. 1-0. 3 酵母膏0. 01-0. 02一级扩大培养的培养基pH为7.0-7.2，接种量为摇瓶种子： 一级扩大培 养的培养基为=1 : 100，培养条件为温度32°C-36°C，培养周期为24-26小时, 通风量为0. 2-0. 35vvm， OD值为2. 2-2. 6时移种。
5、 根据权利要求3所述的利用微生物发酵制备鼠李糖脂的方法，其特征在于所述的二级扩大培养中的培养基包括下列质量份数的组分： 葵子油1.0-2.0 废糖蜜l. 0-2. 0 硝酸钠O. 6-0. 8 硫酸铵0. 2-0. 3 尿素 2-0. 4 酵母膏0. 01-0. 02 二级扩大培养的培养基pH为7.0-7.2，接种量为一级种子：二级扩大培养的培养基为=8-10 : 100,培养条件为温度32°C-36°C，培养周期为10-15小时，通风量为0. 4-0. 6vvm， OD值为2. 8-3. 2时移种。
6、 根据权利要求l所述的利用微生物发酵制备鼠李糖脂的方法，其特征 在于所述的在发酵进行到6-50小时补入葵子油、尿素并调整通风量具体包括 如下工艺步骤：酵6-14小时补葵子油0. 5-1. 0%、尿素0. 1-0. 2%，通风量0. 4-0. 6穆; 发酵14-28小时补入葵子油0. 5-1. 0%、尿素O. 1-0. 2%，通风量0. 3-0. 4vvm; 周期28-36小时补入葵子油2. 0-3.0%,通风量0. 2-0. 3vvm;发酵36-50小时 补入葵子油0. 5-1. 0%;通风量0. 4-0. 6vvm;发酵50-75小时之间的通风量为 0.4-0.6vvm;以上补入葵子油、尿素的百分含量为质量百分含量。
利用微生物发酵制备鼠李糖脂的方法
技术领域
鼠李糖脂作为生物表面活性剂，其制备主要包括斜面菌种的制备、摇瓶 种子液的制备、将种子液接入发酵培养基进行发酵等工艺步骤，上述现有技
术由于采用成本较高的原料作为发酵培养基的主要碳源，生产成本较高；同
时由于工艺设计的不合理，存在着产品得率低（鼠李糖脂的浓度为30 g /L)
的缺点。 发明内容
本发明的目的在于提供一种利用微生物发酵制备鼠李糖脂的方法，利用 以葵子油和废糖蜜作为二级扩大培养培养基和发酵培养基的碳源，并优化了 生产工艺，使生产成本大大降低，产品得率高。
本发明的整体生产工艺是：
利用微生物发酵制备鼠李糖脂的方法，包括下列工艺步骤：
A、 将原始菌种制成斜面菌种；
B、 将步骤A中的斜面菌种经扩大培养制成种子液；
C、 将步骤B中制备的种子液按种子液：发酵培养基为8%-10%的接种量接 入发酵培养基接入发酵培养基进行发酵，其中发酵培养基包括下列质量份数 的组分：
葵子油1. 0-2. 0 废糖蜜1. 0-2. 0 硫酸铵0. 2-0. 3 尿素0. 2-0. 3 磷酸氢二钠0. 2-0. 3 磷酸二氢钾0. 1-0. 2
发酵培养基的初始PH为7.0-7.2,发酵条件为温度32°C-36°C，发酵周 期为60-75小时，通风量0. 2-0. 6vvm，在发酵进行到6-50小时补入葵子油、
尿素并调整通风量；
原始菌种铜绿假单胞菌（Pseudomonas aeruginosa )。 本发明的具体工艺条件和工艺配比是：
步骤A中斜面菌种的制备过程中的培养基含有如下质量份数的组分：葡萄糖l-2 蛋白胨O. 2-0.4
酵母膏0. 2-0. 3 琼脂2-2. 5 培养基的pH7. 0-7. 2。
步骤B中的扩大培养包括摇瓶种子制备、 一级种子制备和二级种子制备， 将斜面菌种接入摇瓶扩大培养基经发酵制成摇瓶摇瓶种子，将摇瓶种子接入 一级扩大培养的培养基经发酵制成一级种子，将一级种子接入二级扩大培养 基经发酵制成二级种子；摇瓶扩大培养基含有如下质量份数的组分：
葡萄糖l-2 硝酸钠O. 4-0. 7 酵母膏O. 1-0. 3 蛋白胨O. 15-0. 3 摇瓶扩大培养基的PH7. 0-7. 3,接种量为斜面菌种：培养基=1 : 200,培 养温度32°C-36°C,转速200-250转/分钟，发酵周期20-25小时。
所述的一级扩大培养中的培养基包括下列质量份数的组分： 液体石蜡1.0-2.0 葡萄糖l. 0-2. 0 硝酸钠O. 7-0. 9 硫酸铵0.1-0. 2 尿素0.1-0. 3 酵母膏0. 01-0. 02 一级扩大培养的培养基pH为7.0-7.2,接种量为摇瓶种子： 一级扩大培
养的培养基为=1 : 100，培养条件为温度32°C-36X:，培养周期为24-26小时，
通风量为0. 2-0. 35vvm, OD值为2. 2-2. 6时移种。
所述的二级扩大培养中的培养基包括下列质量份数的组分： 葵子油l. 0-2. 0 废糖蜜1.0-2. 0 硝酸钠O. 6-0. 8 硫酸铵0. 2-0. 3 尿素0. 2-0. 4 酵母奮0. 01-0. 02 二级扩大培养的培养基pH为7.0-7.2,接种量为一级种子：二级扩大培
养的培养基为=8-10 : 100，培养条件为温度32°C-36°C，培养周期为10-15小
时，通风量为0.4-0. 6vvm, OD值为2. 8-3. 2时移种。
所述的在发酵进行到6-50小时补入葵子油、尿素并调整通风量具体包括
如下工艺步骤：
发酵6-14小时补葵子油0. 5-1. 0%、尿素0. 1-0. 2%,通风量0. 4-0. 6vvm; 发酵14-28小时补入葵子油0. 5-1. 0%、尿素0. 1-0. 2°/»,通风量0. 3-0. 4vvm; 周期28-36小时补入葵子油2. 0-3. 0%,通风量0. 2-0. 3vvm;发酵36-50小时 补入葵子油0. 5-1. 0%;通风量0. 4-0. 6vvm;发酵50-75小时之间的通风量为 0.4-0. 6vvm;以上补入葵子油、尿素的百分含量为质量百分含量。本发明所取得的实质性特点和显著的技术进步：
本发明的工艺设计合理，易于实现，同时生产过程也是一个环境净化、 变废为宝的过程。由于采用葵子油和废糖蜜作为二级扩大培养的培养基和发 酵培养基的碳源，生产成本大大降低，通过优化和改进生产工艺，产品得率
高，经检测，发酵终了时鼠李糖脂的浓度为46-55 g /L。 具体实施方式
以下结合实施例对本发明做进一步描述： 本实施例的整体工艺步骤如下：
利用微生物发酵制备鼠李糖脂的方法，包括下列工艺步骤：
A、 将原始菌种制成斜面菌种；
B、 将步骤A中的斜面菌种经扩大培养制成种子液；
C、 将步骤B中制备的种子液按种子液：发酵培养基为8%-10%的接种量接 入发酵培养基接入发酵培养基进行发酵，其中发酵培养基包括下列质量份数 的组分：
葵子油1..5 废糖蜜1.8硫酸铵0.26 尿素0.24 磷酸氢二钠0. 23 磷酸二氢钾0. 14
发酵培养基的初始PH为7. 0-7. 2,发酵条件为温度35°C，发酵周期为66 小时，通风量0. 2-0. 6vvm，在发酵进行到6-50小时补入葵子油、尿素并调整 通风量；
原始菌种铜绿假单胞菌（Pseudomonas aeruginosa )。 本实施例的具体工艺条件和工艺配比是：
步骤A中斜面菌种的制备过程中的培养基含有如下质量份数的组分： 葡萄糖1.5 蛋白胨0.26 酵母膏0.23 琼脂2.2
培养基的pH7. 0-7. 2。
步骤B中的扩大培养包括摇瓶种子制备、 一级种子制备和二级种子制备， 将斜面菌种接入摇瓶扩大培养基经发酵制成摇瓶摇瓶种子，将摇瓶种子接入 一级扩大培养的培养基经发酵制成一级种子，将一级种子接入二级扩大培养 基经发酵制成二级种子；摇瓶扩大培养基含有如下质量份数的组分：葡萄糖l. 7 硝酸钠O. 5 酵母膏0.2 蛋白胨O. 2
摇瓶扩大培养基的pH7. 0-7. 3,接种量为斜面菌种：培养基=1 : 200，培
养温度33'C,转速200-250转/分钟，发酵周期23小时。
所述的一级扩大培养中的培养基包括下列质量份数的组分： 液体石蜡l. 7 葡萄糖l. 3 硝酸钠O. 76 硫酸铵O. 12 尿素O. 18 酵母膏0.015
一级扩大培养的培养基pH为7.0-7.2，接种量为摇瓶种子： 一级扩大培 养的培养基为=1 : 100，培养条件为温度32。C，培养周期为24-26小时，通风 量为0. 3vvm， OD值为2. 2-2. 6时移种。
所述的二级扩大培养中的培养基包括下列质量份数的组分： 葵子油1.2 废糖蜜1.2 硝酸钠0.66 硫酸铵O. 23 尿素0，24 酵母膏0.017
二级扩大培养的培养基pH为7.0-7.2,接种量为一级种子：二级扩大培 养的培养基为=8 : 100，培养条件为温度35匸，培养周期为13小时，通风量 为0. 4-0. 6vvm， OD值为2. 8-3. 2时移种。
所述的在发酵进行到6-50小时补入葵子油、尿素并调整通风量具体包括 如下工艺步骤：
发酵6-14小时补葵子油0.8%、尿素0.15%,通风量0. 4-0.6vvm;发酵 14-28小时补入葵子油0.7%、尿素0.18%,通风量0.3-0. 4vvm;周期28-36 小时补入葵子油2. 8%,通风量0. 26vvm;发酵36-50小时补入葵子油0. 58%; 通风量O. 46vvm;发酵50-75小时之间的通风量为0. 4-0. 6vvm;以上补入葵 子油、尿素的百分含量为质量百分含量。
| 标题 | 发布/更新时间 | 阅读量 |
|---|---|---|
| 微生物增生器废水处理方法 | 2021-06-17 | 3 |
| 利用微生物发酵制备鼠李糖脂的方法 | 2021-06-27 | 2 |
| 一种复合微生物菌肥及其制备方法 | 2022-04-10 | 1 |
| 利用微生物提取黄芪甲苷的方法 | 2022-05-15 | 1 |
| 包含益生微生物的婴儿喂养配方 | 2022-08-09 | 4 |
| 一种微生物样本转运箱 | 2020-08-24 | 5 |
| 表面上微生物生长的光动力学控制 | 2021-10-26 | 2 |
| 一种芽孢杆菌属固体微生物菌剂的制备及应用 | 2020-05-18 | 3 |
| 一种微生物转化法制备胆固醇的方法 | 2021-06-02 | 2 |
| 控制乙醇发酵方法中的微生物污染 | 2022-08-28 | 2 |
高效检索全球专利专利汇是专利免费检索,专利查询,专利分析-国家发明专利查询检索分析平台，是提供专利分析，专利查询，专利检索等数据服务功能的知识产权数据服务商。
我们的产品包含105个国家的1.26亿组数据，免费查、免费专利分析。
专利汇分析报告产品可以对行业情报数据进行梳理分析，涉及维度包括行业专利基本状况分析、地域分析、技术分析、发明人分析、申请人分析、专利权人分析、失效分析、核心专利分析、法律分析、研发重点分析、企业专利处境分析、技术处境分析、专利寿命分析、企业定位分析、引证分析等超过60个分析角度，系统通过AI智能系统对图表进行解读，只需1分钟，一键生成行业专利分析报告。
