术语“蛋白激酶”定义了一类具有酶活性的蛋白，其中可分为受体型激 酶和非受体型激酶以及酪氨酸和丝氨酸/苏氨酸激酶。就其所处的位置而 言，可分为核、细胞质和膜相关激酶。许多膜相关酪氨酸激酶同时也是生 长因子的受体。
就其催化活性而言，蛋白激酶(PK)是催化细胞内蛋白特定的丝氨酸、 苏氨酸或酪氨酸残基的磷酸化的酶。这种底物蛋白的翻译后修饰通常以分 子开关的形式进行，其代表了一种调节细胞增殖、活化和/或分化的步骤。 已经在一些疾病状态中观察到了异常或过度或更一般地为不恰当的PK活 性，所述疾病状态包括良性和恶性增殖病症。在许多情况中，可通过利用 PK抑制剂来对疾病如增殖疾病进行体内和体外治疗。
过去数年来，已经了解了Eph受体酪氨酸激酶及其配体--Ephrins的 基本作用。已经根据其对配体的亲和力对一些不同的Eph受体进行了编目 并将其分组成EphA或EphB亚类。已经鉴定了至少8种是膜蛋白的Ephrins， 其为甘油磷脂酰肌醇(GPI)-连接型(ephrinA)或跨膜(ephrinB)型。Eph受体 及其配体之间的信号转导似乎局限于细胞-细胞直接接触的部位。接触的结 果是诱导了细胞间一些相互的双向事件。认为Ephrins及其受体在某些部位 的表达对空间十分受限的细胞位置的组织模式化(patterning)和组构有影 响。其中的一些具体影响包括改变细胞迁移、粘附和体节形成。
EphB4(也被称为HTK)及其配体ephrinB2(HTKL)在血管网络的建立 和确定中起着重要作用。EphB4在静脉上皮上特异性表达，而在血管形成 早期，ephrinB2在动脉内皮细胞上特异性和相反地表达。机能障碍的基因 导致了小鼠胚胎的致死性，在ephrinB2或EphB4有缺陷的情况中，胚胎在 形成毛细血管连接方面表现出相同的缺陷。在胚胎发生期间，二者都在血 细胞生成和血管建立的第一部位上进行表达。已经确定了其对于适当造血、 内皮、成血管细胞和原始中胚层发育有重要作用。EphB4缺乏使得胚胎干 细胞中胚层分化结果被改变。EphB4在乳房组织中的异位表达使得乳房结 构体系混乱、组织功能异常和有恶性化倾向(参见例如N.Munarini等人，J. Cell.Sci.115，25-37(2002))。由这些数据和其它数据，推断在恶性肿瘤形成 中可能涉及不恰当的EphB4表达，因此，预期抑制EphB4是对抗恶性肿瘤 例如癌症等的一种手段。
在患有慢性髓细胞性白血病(CML)的患者中观察到abl原癌基因转化 成癌基因。染色体易位将染色体22上的bcr基因连接到得自染色体9的abl基 因上，从而产生了一种费城染色体。所得的融合蛋白具有与Abl酪氨酸蛋白 激酶的羧基末端相连的Bcr蛋白的氨基末端。结果，Abl激酶结构域被不适 当地活化，驱动了骨髓中造血细胞克隆的过度增殖。已经表明用活性成分 GleevecTM或(Novartis的商标，这种融合蛋白的抑制剂)抑制这种酪 氨酸激酶是十分有效的CML疗法。因此，可验证Abl酪氨酸激酶的不充分 表达可治疗恶性肿瘤，尤其是白血病的一般观念。
在细胞中发现的酪氨酸激酶c-Src的组成型表达的病毒形式c-Src(得自 Rous Sarcoma病毒，一种逆转录病毒)是Src蛋白酪氨酸激酶的不恰当表达 如何导致基于转化的细胞的恶性肿瘤的一个实例。抑制Src蛋白酪氨酸激酶 使得可抑制例如结缔组织肿瘤中的转化的肿瘤细胞的失控生长。因此，预 期抑制c-Src或其修饰或突变形式对增殖性疾病的治疗具有有益影响。
已知VEGFR(血管内皮生长因子受体)参与了血管生成初起的控制。 因为实体瘤尤其依赖于良好的血液供应，因此，在该类肿瘤的治疗中，正 在对抑制VEGFR并由此抑制血管生成进行临床研究，并且表现出了一些 有希望的结果。VEGF在白血病和淋巴瘤中也是主要的参与者，其在许多 恶性实体瘤中高度表达，与恶性疾病的进程联系紧密。表达VEGFR-2 (KDR)的肿瘤的实例有肺癌、乳癌、非何杰金氏淋巴瘤、卵巢癌、胰腺癌、 恶性胸膜间皮瘤和黑素瘤。除其血管生成活性外，VEGFR的配 体--VEGF还可通过对肿瘤细胞的直接促存活(pro-survival)作用促进肿 瘤生长。还有许多疾病与失控的血管生成有关，例如下述疾病。
因此，本发明所要解决的问题是：由于有大量的蛋白激酶抑制剂和多 种增殖性疾病及其它与蛋白激酶相关的疾病以及由于对某些疗法形成耐受 性，因此一直需要提供可用作蛋白激酶抑制剂并因此可用于治疗这些与蛋 白酪氨酸激酶如丝氨酸/苏氨酸和/或优选的PTK(蛋白酪氨酸激酶)相关的 疾病的新化合物类型。所需的是药学上有利的抑制蛋白激酶，尤其是PTK 的新化合物，其尤其是具有有利的性质如对有限组或甚至单一的蛋白激酶 具有高亲和力和/或选择性、在已经对不同类型化合物耐受的情况中有效、 对特定组的激酶具有有用的亲和性。
已经描述了某些酰基-或酰基氨基-取代的芳基氨基-吡唑并嘧啶类物质 可用作p38-抑制剂，见WO 03/099280。但是，其中详细描述的化合物在 结构上与本发明的化合物不同。
本发明的一般性描述
现在已经令人吃惊地发现，本发明的吡唑并[3，4-d]嘧啶化合物可用于 抑制许多可能参与由营养因子介导的信号传递和涉及蛋白激酶活性的疾病 表现(例如增殖性(例如肿瘤)生长)的蛋白激酶，蛋白酪氨酸激酶的典型实例 尤其是选自下面的激酶族：abl激酶，尤其是v-abl或c-abl激酶、得自src 激酶族的激酶，尤其是c-src激酶、RET-受体激酶或Ephrin受体激酶，例 如EphB2激酶、EphB4激酶或相关激酶、和/或b-raf(V599E)，以及EGF 受体激酶或EGF族的其它激酶，例如HER-1或c-erbB2激酶(HER-2)和/ 或VEGF-受体激酶(例如KDR和Flt-1)，此外，还有Flt-3、Ick、fyn、c-erbB3 激酶、c-erbB4激酶；PDGF-受体酪氨酸蛋白激酶族的成员，例如PDGF- 受体激酶、CSF-1受体激酶、Kit-受体激酶(c-Kit)、FGF-受体激酶，例如 FGF-R1、FGF-R2、FGF-R3、FGF-R4、c-Raf、酪蛋白激酶(CK-1、CK-2、 G-CK)、Pak、ALK、ZAP70、Jak1、Jak2、Axl、Cdk1、cdk4、cdk5、 Met、FAK、Pyk2、Syk、Tie-2、胰岛素受体激酶(Ins-R)、胰岛素样生长 因子的受体激酶(IGF-1激酶)和/或丝氨酸/苏氨酸激酶，例如蛋白激酶C (PK-C)、PK-B、EK-B或cdc激酶，如CDK1、以及任何一种或多种这些 激酶的突变(例如组成活化)形式(例如Bcr-Abl、RET/MEN2A、 RET/MEN2B、RET/PTC1-9或b-raf(V599E))。所有这些和其它蛋白激酶 都在包括人细胞在内的哺乳动物细胞的生长调节和转化中起一定的作用。
由于这些活性，本发明的化合物可用于治疗对蛋白激酶调节有响应的 疾病，如尤其是与该类激酶的活性异常(例如不可调、失控或组成活化)或 过度有关的疾病，尤其是所提到的那些疾病。
本发明的详细描述
在第一个实施方案中，本发明涉及式(I)的吡唑并[3，4-d]嘧啶化合物或 其盐(优选可药用的盐)

其中
R1是氢、未被取代或被取代的烷基或未被取代或被取代的芳基，
R2是氢、卤素、未被取代或被取代的芳基、未被取代或被取代的环烷基、 未被取代或被取代的烷基、被取代的羰基或未被取代或被取代的杂环基，
R3是氢、卤素、C1-C4-烷基、C1-C4-烷氧基或氰基，
各R4独立于任何其它存在基团地是卤素，尤其是氟、甲基、甲氧基或C1-4 烷基哌嗪C1-4烷基；
A是C(＝O)-N(R5)或N(R5)-C(＝O)，其中
R5是氢或未被取代或被取代的烷基；
R6是氢或未被取代或被取代的烷基，
X是CH或N，且
n是0至2。
在另一个实施方案中，本发明涉及如下的式I的吡唑并[3，4-d]嘧啶化 合物或其盐(优选可药用的盐)，其中
R1是氢、未被取代或被取代的烷基或未被取代或被取代的芳基，
R2是氢、卤素、未被取代或被取代的烷基、被取代的羰基或未被取代或被 取代的杂环基，
R3是氢、卤素、C1-4-烷基、C1-4-烷氧基或氰基，
各R4独立于任何其它存在基团地是卤素，尤其是氟、甲基、甲氧基或C1-4 烷基哌嗪-C1-4烷基；
A是C(＝O)-N(R5)或N(R5)-C(＝O)，其中
R5是氢或未被取代或被取代的烷基；
R6是氢或未被取代或被取代的烷基，
X是CH或N，且
n是0至2。
在另一个实施方案中，本发明涉及如下的式I的吡唑并[3，4-d]嘧啶化 合物或其盐(优选可药用的盐)，其中
R1是氢、未被取代或被取代的烷基或未被取代或被取代的芳基，
R2是氢、卤素、被取代的羰基或未被取代或被取代的杂环基，
R3是氢、卤素或C1-4-烷基；
各R4独立于任何其它存在基团地是卤素，尤其是氟、甲基或C1-4烷基哌 嗪-C1-4烷基；
A是C(＝O)-NH或NH-C(＝O)；
R6是氢；
X是CH或N，且
n是0或1。
在另一个实施方案中，本发明涉及如下的式I的吡唑并[3，4-d]嘧啶化 合物或其盐(优选可药用的盐)，其中
R1是氢、未被取代或被取代的C1-4烷基或未被取代或被取代的苯基，
R2是氢、卤素、被取代的羰基或未被取代或被取代的具有5至7个环原子 的单环杂环基，例如吡啶基、哌啶基、吡嗪基，这些基团各自未被取代或 被C1-4烷基所取代；
R3是氢、卤素或C1-4-烷基；
各R4独立于任何其它存在基团地是卤素，尤其是氟、甲基或C1-4烷基哌 嗪-C1-4烷基；
A是C(＝O)-NH或NH-C(＝O)；
R6是氢；
X是CH或N，并且
n是0或1。
本发明涉及式I的化合物或其可药用的盐用于治疗对蛋白激酶调节有 响应的疾病的应用，所述疾病尤其是动物或优选人的疾病，尤其是对一种 或多种“本发明的一般描述”下所述的蛋白酪氨酸激酶(PTK)的抑制有响应 的疾病，所述激酶更尤其是一种或多种选自下面的PTK：abl激酶，尤其 是v-abl或c-abl激酶、得自src激酶族的激酶，尤其是c-src激酶、b-raf (V599E)和/或尤其是RET-受体激酶或Ephrin受体激酶，例如EphB2激酶、 EphB4激酶或相关激酶、或其突变(例如组成活化或部分或完全失控的)形 式--与EGF受体激酶或EGF族的其它激酶，例如HER-1或c-erbB2 激酶(HER-2)和/或VEGF-受体激酶(例如KDR和Flt-1)相比，发现这里的 激酶常常具有良好的抑制价值，但是，通常也可以用一种或多种式I的化 合物抑制这些PTK。
本发明还涉及式I的化合物或其盐(优选可药用的盐)在制备用于治疗 所述疾病的药物制剂中的应用；包含式I的化合物或其可药用的盐和至少 一种可药用载体的药物制剂，尤其是用于治疗所述疾病的药物制剂；用于 治疗动物或人体，尤其是用于治疗前面段落所述疾病的式I的化合物或其 可药用的盐；治疗动物或人体的方法，其包括给动物或人，尤其是需要该 类治疗的动物或人施用治疗所述疾病有效量的式I的化合物或其可药用的 盐；以及制备式I的化合物或其盐(优选可药用的盐)的方法。
在式I中，独立、集合或者以其任何组合或亚组合形式优选下面的含 义：
在本文中，除非特别说明，否则上下文中所用的一般术语或符号优选 地具有下面的含义：
术语“低级”或“C1-C7-”定义了一种具有高至并包括最多7个，尤其是 高至并包括最多4个碳原子的部分，所述部分是支链(分支一次或多次)或 直链的。低级或C1-C7-烷基例如是正-戊基、正-己基或正-庚基或优选地是 C1-C4-烷基，尤其是甲基、乙基、正-丙基、仲-丙基、正-丁基、异丁基、 仲-丁基、叔-丁基。在低级链烯基或低级炔基的情况中，低级优选地指 “C2-C7”-，或者更优选地指“C2-C4-”。
卤代或卤素优选地是氟、氯、溴或碘，最优选地是氟、氯或溴，更优 选地是氟或氯。
未被取代或被取代的烷基优选地是C1-C20-烷基，更优选地是低级烷 基，例如甲基、乙基或丙基，其可以是直链的或者可以分支一次或多次(前 提是碳原子数允许)并且未被取代或被一个或多个，优选最多三个独立地选 自下面基团的取代基所取代：未被取代或如下所述那样被取代的杂环基， 尤其是吡咯烷-1-基、哌啶-1-基、被氨基或N-单-或N，N-二-[低级烷基、苯 基和/或苯基-低级烷基)-氨基取代的哌啶-1-基、通过环碳原子结合的未被取 代或N-低级烷基取代的哌啶基，如1-异丙基-哌啶-4-基、哌嗪-1-基、低级 烷基哌嗪-1-基，如4-(甲基、乙基或异丙基)-哌嗪-1-基、吗啉-4-基或硫代吗 啉-4-基；未被取代或如下面所定义那样被取代的环烷基、未被取代或如下 面所定义那样被取代的芳基，尤其是苯基或萘基；低级链烯基、低级炔基、 卤素、羟基、低级烷氧基、低级-烷氧基-低级烷氧基、(低级-烷氧基)-低级 烷氧基-低级烷氧基、苯氧基、萘氧基、苯基-或萘基-低级烷氧基，如苄氧 基；氨基-低级烷氧基、低级-烷酰氧基、苯甲酰氧基、萘甲酰氧基、硝基、 氰基、羧基、低级烷氧基羰基，例如甲氧基羰基、正-丙氧基羰基、异-丙 氧基羰基或叔-丁氧基羰基；苯基-或萘基-低级烷氧基羰基，如苄氧基羰基； 低级烷酰基，如乙酰基、苯甲酰基、萘甲酰基、氨基甲酰基、N-单-或N，N- 二取代的氨基甲酰基，如N-单-或N，N-二取代的氨基甲酰基，其中所述取 代基选自低级烷基和羟基-低级烷基；脒基、胍基、脲基、巯基、低级烷硫 基、苯硫基或萘硫基、苯基-或萘基-低级烷硫基、低级烷基-苯硫基、低级 烷基-萘硫基、卤素-低级烷基巯基、低级烷基亚磺酰基、苯基-或萘基-亚磺 酰基、苯基-或萘基-低级烷基亚磺酰基、低级烷基-苯基亚磺酰基、低级烷 基-萘基亚磺酰基、磺基、低级链烷烃磺酰基、苯基-或萘基-磺酰基、苯基- 或萘基-低级烷基磺酰基、烷基苯基磺酰基、卤素-低级烷基磺酰基，如三 氟甲磺酰基；磺酰氨基、苯磺酰氨基、氨基、N-单-或N，N-二-[低级烷基、 苯基和/或苯基-低级烷基)-氨基，如N，N-二甲基氨基、N，N-二乙基氨基、 3-[N-(N，N-二甲基氨基)-丙基氨基、2-[N-(N，N-二甲基氨基)-乙基氨基或 N-(N，N-二甲基氨基)-甲基氨基；其中作为取代基或被取代烷基的取代基的 一部分的上述各苯基或萘基(也包括位于苯氧基或萘氧基中的苯基或萘基) 本身未被取代或被一个或多个，例如最多3个，优选1或2个独立地选自 下面部分的取代基所取代：卤素，尤其是氟、氯、溴或碘、卤代-低级烷基， 如三氟甲基、羟基、低级烷氧基、氨基、N-单-或N，N-二-(低级烷基、苯基、 萘基、苯基-低级烷基和/或萘基-低级烷基)-氨基、硝基、羧基、低级-烷氧 基羰基氨基甲酰基、氰基和/或氨磺酰基。式I中的R1和/或R2尤其优选 地是低级烷基、羟基-C1-4烷基、氨基-低级烷基，如3-氨基丙基、2-氨基乙 基或2-氨基甲基、N-单-或N，N-二-(低级烷基、苯基和/或苯基-低级烷基)- 氨基-低级烷基，如3-(N，N-二甲基氨基)-丙基、3-(N，N-二乙基氨基)-丙基、 2-(N，N-二甲基氨基)-乙基、2-(N，N-二乙基氨基)-乙基、N，N-二甲基氨基甲 基或N，N-二乙基氨基甲基、吡咯烷-1-基-低级烷基、哌啶-1-基-低级烷基、 1-低级烷基哌啶-4-基-低级烷基、4-[N-单-或N，N-二-(低级烷基、苯基和/或 苯基-低级烷基)-氨基]-哌啶-1-基、哌嗪-1-基-低级烷基，如哌嗪-1-基-甲基、 4-低级烷基哌嗪-1-基-低级烷基，如4-(甲基、乙基或异丙基)-哌嗪-1-基-甲 基或(吗啉-4-基或硫代吗啉-4-基)-低级烷基。就未被取代或被取代的烷基 R5和/或R6而言，尤其优选地是低级烷基或苯基-或萘基-低级烷基，更优 选地是甲基。
未被取代或被取代的芳基优选地是不高于20个碳原子，尤其是不高于 16个碳原子的不饱和碳环系统，其优选地是单-、二-或三环，其未被取代， 或者，在被取代的芳基的情况中，其优选地被一个或多个，优选最多三个， 例如一个或两个独立地选自下面基团的取代基所取代：低级烷基，例如甲 基、苯基、萘基、苯基-或萘基-低级烷基，如苄基；羟基-低级烷基，如羟 基甲基；低级-烷氧基-低级烷基、(低级-烷氧基)-低级烷氧基-低级烷基、低 级烷酰基-低级烷基、卤代-低级烷基，如三氟甲基；苯氧基-或萘氧基-低级 烷基、苯基-或萘基-低级烷氧基-低级烷基，如苄氧基-低级烷基；低级烷氧 基-羰氧基-低级烷基，如叔-丁氧基羰氧基-低级烷基；苯基-或萘基-低级烷 氧基羰氧基-低级烷基，如苄氧基羰氧基-低级烷基；氰基-低级烷基、低级 链烯基、低级炔基、低级烷酰基，如乙酰基；卤素、羟基、低级烷氧基， 如甲氧基、低级-烷氧基-低级烷氧基、(低级-烷氧基)-低级烷氧基-低级烷氧 基、苯氧基、萘氧基、苯基-或萘基-低级烷氧基，如苄氧基；氨基-低级烷 氧基、低级-烷酰氧基、苯甲酰氧基、萘甲酰氧基、硝基、氨基、单-、二- 或三-取代的(在后一种情况中被季铵化且荷正电)氨基，其中所述氨基取代 基独立地选自低级烷基、低级烷酰基、苯基、萘基、苯基-和萘基-低级烷 基；氰基、羧基、低级烷氧基羰基，例如甲氧基羰基、正-丙氧基羰基、异 -丙氧基羰基或叔-丁氧基羰基；苯基-或萘基-低级烷氧基羰基，如苄氧基羰 基；苯甲酰基、萘甲酰基、氨基甲酰基、N-单-或N，N-二取代的氨基甲酰 基，如N-单-或N，N-二取代的氨基甲酰基，其中所述取代基选自低级烷基 和羟基-低级烷基；脒基、胍基、脲基、巯基、低级烷硫基、苯硫基或萘硫 基、苯基-或萘基-低级烷硫基、低级烷基-苯硫基、低级烷基-萘硫基、卤素 -低级烷基巯基、低级烷基亚磺酰基、苯基-或萘基-亚磺酰基、苯基-或萘基 -低级烷基亚磺酰基、低级烷基-苯基亚磺酰基、低级烷基-萘基亚磺酰基、 磺基、低级链烷烃磺酰基、苯基-或萘基-磺酰基、苯基-或萘基-低级烷基磺 酰基、烷基苯基磺酰基、卤素-低级烷基磺酰基，如三氟甲磺酰基；磺酰氨 基、苯磺酰氨基、吡咯烷-1-基、哌啶-1-基、被氨基或N-单-或N，N-二-[低 级烷基、苯基和/或苯基-低级烷基)-氨基取代的哌啶-1-基、通过环碳原子结 合的未被取代或N-低级烷基取代的哌啶基，如1-异丙基-哌啶-4-基、哌嗪 -1-基、低级烷基哌嗪-1-基，如4-(甲基、乙基或异丙基)-哌嗪-1-基、吗啉-4- 基或硫代吗啉-4-基；其中作为取代基或被取代芳基取代基的一部分的上述 各苯基或萘基(也包括位于苯氧基或萘氧基中的苯基或萘基)本身未被取代 或被一个或多个，例如最多3个，优选1或2个选自下面部分的取代基所 取代：卤素，尤其是氟、氯、溴或碘、卤代-低级烷基，如三氟甲基、羟基、 低级烷氧基、氨基、N-单-或N，N-二-(低级烷基、苯基、萘基、苯基-低级 烷基和/或萘基-低级烷基)氨基、硝基、羧基、低级-烷氧基羰基氨基甲酰基、 氰基和/或氨磺酰基。未被取代或被取代的芳基，尤其是就式I中的R1和/ 或R2而言，优选地是苯基，其未被取代或被卤素、羟基所取代，更优选 地被低级烷氧基、硝基、氨基、N-单-、N，N-二-或N，N，N-三-(低级烷基、 苯基和/或苯基-低级烷基)-氨基(后一种情况相当于四元氨基＝季铵)、吡咯 烷-1-基、哌啶-1-基、被氨基或N-单-或N，N-二-[低级烷基、苯基和/或苯基 -低级烷基)-氨基取代的哌啶-1-基、通过环碳原子结合的未被取代或N-低级 烷基取代的哌啶基，如1-异丙基-哌啶-4-基、哌嗪-1-基、低级烷基哌嗪-1- 基，如4-(甲基、乙基或异丙基)-哌嗪-1-基、吗啉-4-基或硫代吗啉-4-基。
未被取代或被取代的杂环基优选地是不饱和、饱和或部分饱和的杂环 基团，并且其是单环或者在本发明的广义上而言，是二环或三环；其具有 3至24个环原子，更优选地具有4至16个环原子，最优选地具有4至10 个环原子；其中一个或多个，优选一至四个，尤其是一个或两个碳环原子 被选自氮、氧和硫的杂原子所代替，结合环优选地具有4至12，尤其是5 至7个环原子；该杂环基团(杂环基)未被取代或被一个或多个，尤其是1 至3个独立地选自上面“被取代的芳基”下所定义取代基的取代基所取代； 并且该杂环基尤其是选自下面基团的杂环基：环氧乙烷基、氮杂环丙烯基、 氮杂环丙烷基、1，2-氧硫杂环戊基、噻吩基、呋喃基、四氢呋喃基、吡喃基、 噻喃基、噻蒽基、异苯并呋喃基、苯并呋喃基、色烯基、2H-吡咯基、吡 咯基、吡咯啉基、吡咯烷基、咪唑基、咪唑烷基、苯并咪唑基、吡唑基、 吡嗪基、吡唑烷基、噻唑基、异噻唑基、二噻唑基、噁唑基、异噁唑基、 吡啶基、吡嗪基、嘧啶基、哌啶基、哌嗪基、哒嗪基、吗啉基、硫代吗啉 基、(S-氧代或S，S-二氧代)-硫代吗啉基、吲嗪基、异吲哚基、3H-吲哚基、 吲哚基、苯并咪唑基、cumaryl、吲唑基、三唑基、四唑基、嘌呤基、4H- 喹嗪基、异喹啉基、喹啉基、四氢喹啉基、四氢异喹啉基、十氢喹啉基、 八氢异喹啉基、苯并呋喃基、二苯并呋喃基、苯并噻吩基、二苯并噻吩基、 酞嗪基、萘啶基、喹喔啉基、喹唑啉基、喹唑啉基、噌啉基、蝶啶基、咔 唑基、β-咔啉基、菲啶基、吖啶基、萘嵌间二氮杂苯基、菲咯啉基、呋咱 基、吩嗪基、吩噻嗪基、吩噁嗪基、色烯基、异色满基和色满基，这些基 团各自未被取代或被一至两个选自低级烷基，尤其是甲基或叔-丁基、低级 烷氧基，尤其是甲氧基，和卤素，尤其是溴或氯的基团所取代。在式I的 R2的情况中，未被取代或被取代的杂环基优选地是吡啶基，尤其是3-吡啶 基，例如C1-4烷氧基-3-吡啶基或N-低级烷基-哌啶基，尤其是N-低级烷基 -哌啶-4-基或吡嗪基(pyrazyl)。
在未被取代或被取代的环烷基中，环烷基优选地是具有3至16，优选 3至9个环碳原子的饱和单-或二环烃基，例如环丙基、环丁基、环戊基、 环己基、环庚基或环辛基，并且被一个或多个，优选一至三个独立地选自 被取代的芳基所述的这些取代基的所取代或者未被取代(是优选的)。
被取代的羰基是指羰基被连接到嘧啶环上并且优选地被氨基、C1-4烷 氧基羰基、C1-4烷基氨基羰基、N，N-二-C1-4烷基氨基C1-4烷基氨基羰基、 吡咯烷-1-基-C1-4烷基氨基羰基、未被取代或被取代的杂环基，例如具有5 至7个环原子的杂环基，例如具有5至7个环原子的饱和杂环基所取代，例 如C1-4烷基哌嗪-1-基羰基，如4-甲基哌嗪-1-基羰基或吗啉-4-基羰基。
在A是C(＝O)-N(R5)的情况中，其是指羰基与携带式I中的R3的环 相连，同时N(R5)与携带CF3和(如果存在的话)R4的环相连；另一方面， 在A是N(R5)-C(＝O)的情况中，就刚刚关于C(＝O)-N(R5)定义的取向而言， 羰基和N(R5)的取向相反。R5优选地是氢。
盐尤其是式I化合物可药用的盐。在存在成盐基团，如碱性或酸性基团 的情况中，可以形成这些盐，所述盐可以以至少部分解离的形式存在，例 如在pH为4至10的含水性环境中，或者尤其是可以以固体形式被分离出来， 或者，在存在荷电基团(例如季铵)的情况中-在后一种情况中，与有机酸 或无机酸(如下段中所定义)的阴离子形成酰化盐。
该类盐例如可以被形成为酸加成盐形式，优选由具有碱性氮原子的式I 的化合物与有机酸或无机酸形成的盐，尤其是可药用的盐。适宜的无机酸 有例如氢卤酸，如盐酸、硫酸或磷酸。适宜的有机酸有例如羧酸、膦酸、 磺酸或氨基磺酸，例如乙酸、丙酸、乳酸、富马酸、琥珀酸、柠檬酸、氨 基酸，如谷氨酸或天冬氨酸、马来酸、羟基马来酸、甲基马来酸、苯甲酸、 甲磺酸或乙磺酸、乙烷-1，2-二磺酸、苯磺酸、2-萘磺酸、1，5-萘-二磺酸、 N-环己基氨基磺酸、N-甲基-、N-乙基-或N-丙基-氨基磺酸，或其它有机质 子酸，如抗坏血酸。
在存在荷负电基团如羧基或磺基的情况中，还可以是与碱形成的盐， 如金属或铵盐，如碱金属或碱土金属盐，例如钠、钾、镁或钙盐，或者是 与氨或适宜的有机胺如一元叔胺，例如三乙胺或三(2-羟基乙基)胺，或杂环 碱，例如N-乙基-哌啶或N，N’-二甲基哌嗪形成的铵盐。
当在同一分子中同时存在碱性基团和酸性基团时，式I的化合物还可以 形成内盐。
对于分离或纯化而言，还可以使用不可药用的盐，例如苦味酸盐或高 氯酸盐。对于治疗应用而言，仅使用可药用的盐或游离化合物(在适用的情 况中被包括在药物制剂中)，并且因此优选这些盐。
由于化合物的游离形式和其盐形式(包括那些可用作中间体，例如用于 所述化合物或其盐的纯化或鉴定的中间体的盐)之间的紧密关系，在上下文 中，在任何时候涉及“化合物”(也包括起始材料和“中间体”)，尤其是式I的 化合物时，在适宜和方便的情况中并且如果没有另外的明确描述，则其应 当被理解为还涉及其一种或多种盐或游离化合物与其一种或多种盐的混合 物，其各自也包括式I化合物的任何溶剂化物、代谢前体如酯或酰胺，或者 任何一种或多种这些物质的盐。还可以获得不同的晶形和溶剂化物，并且 本发明也包括这些晶形和溶剂化物。
在化合物、盐、药物制剂、疾病、病症等使用复数的情况中，也意味 着涉及单数化合物、盐、药物制剂、疾病等，在使用“一种”的情况中，其 指不定冠词或者优选指“一”。
在一些情况中，本发明的化合物可包含一个或多个位于取代基中的手 性中心或者表现出其它不对称性(导致产生对映异构体)或者还可以以一种 以上立体异构体的形式存在，例如由于存在一个以上手性中心或一个以上 不对称中心或者由于存在使得出现Z/E(或顺式-反式)异构现象(非对映异构 体)的环或双键而以一种以上立体异构体的形式存在。本发明包括两种或多 种该类异构体的混合物，如对映异构体的混合物，尤其是外消旋物，并且 优选纯化的异构体，尤其是纯化的对映异构体或对映异构体富集的混合物。
式I的化合物具有有价值的药理学性质并且可用于治疗对蛋白激酶， 尤其是蛋白酪氨酸激酶(尤其是一种或多种上面“本发明的一般描述”下所 定义的一种或多种蛋白激酶，尤其是abl激酶，尤其是v-abl或c-abl激酶、 得自src激酶族的激酶，尤其是c-src激酶、RET-受体激酶或Ephrin受体 激酶，例如EphB2激酶、EphB4激酶或相关激酶和/或b-raf(V599E)以及 任何一种或多种这些激酶的突变形式(例如组成活化形式))调节有响应的疾 病，其中调节优选地是指抑制并且响应是指疾病的进程和/或其症状被减 缓、终止或甚至反转并且包括完全或至少暂时治愈。术语“治疗”尤其是包 括预防(包括预防性治疗)，例如在发现了表明其易于或可能易于形成疾病 的突变或变化的患者中，或者优选地指所述疾病的治疗性处理(非限制性地 包括治标、治愈、缓解症状、减少症状、抑制疾病或症状、延迟进程、激 酶调节和/或激酶抑制)，所述疾病尤其是任何一种或多种下面所述疾病。
本文中所用的术语“治愈”优选地是指在治疗涉及受体酪氨酸激酶(尤 其是失调的)活性的正在发作的事件中的功效。术语“预防”优选地是指预防 涉及受体酪氨酸激酶活性失调的疾病的发作或复发。
本文中所用的术语“进程的延迟”尤其是指给处于所治疗疾病前期或早 期的患者施用所述活性化合物，其中所述患者例如被诊断为处于相应疾病 的前期形式或者所述患者正在进行医学治疗或者处于由意外事故造成的可 能将形成相应疾病的情况中，或者认为例如在不进行治疗的情况下会发生 转移。
动物优选地是温血动物，更优选地是哺乳动物。人(其通常也落入到通 用术语“动物”中)尤其是有患上下文所定义疾病风险的患者或人(例如由于 一些突变或其它特性而有患病风险)。
在上下文提及术语“应用”(作为动词或名词)(涉及式I的化合物或其可 药用盐的应用)时，在适宜和方便时，如果没有相反说明的的话，(如果在 上下文中没有给出不同的指示或教导)则其分别包括任何一种或多种本发 明下面的实施方案(如果没有相反说明的话)：在治疗对蛋白(尤其是酪氨 酸)激酶调节(尤其是抑制)有响应的疾病中的应用、用于制备治疗对蛋白激 酶调节(尤其是抑制)有响应的疾病的药物组合物的应用、在对蛋白激酶调 节(尤其是抑制)有响应的疾病和/或增殖性疾病中使用一种或多种式I化合 物的方法、用于治疗所述对蛋白激酶调节(尤其是抑制)有响应的疾病的包 含一种或多种式I的化合物的药物制剂、和用于治疗所述对蛋白激酶调节 (尤其是抑制)有响应的疾病的一种或多种式I的化合物。所治疗的并且因此 对于式I化合物的“应用”是优选的疾病选自下面所述的对蛋白(尤其是酪氨 酸)激酶调节(尤其是抑制)有响应的(不仅指“依赖”，也指“支持的”，还包括 其中疾病对蛋白激酶的调节(尤其是抑制)有响应的疾病(即蛋白激酶的活性 支持或甚至造成疾病表现))，尤其是下述的增殖性疾病。
在提及蛋白激酶的情况中，其是指任何类型的蛋白激酶，尤其是上面 “本发明的一般描述”下所定义这些激酶之一，更尤其是丝氨酸/苏氨酸和/ 或优选的蛋白酪氨酸激酶，最优选一种或多种酪氨酸蛋白激酶，尤其是选 自v-abl或c-abl激酶、得自src激酶族的激酶，尤其是c-src激酶、b-raf(V599E) 和/或优选RET-受体激酶或Ephrin受体激酶，例如EphB2激酶、EphB4激 酶或相关激酶激酶，包括任何一种或多种这些激酶的一种或多种改变或突 变或等位形式(例如使各原癌基因转化成癌基因的这些形式，如组成活化的 突变型，例如Bcr-Abl)。尤其是包括异常高表达的、组成活化的或正常但 是在患者其它调节机理的给定情况中相对活动过度、和/或突变的形式。
本发明化合物在蛋白激酶调节中的用途(尤其是作为抑制剂的用途)例 如尤其是可以用下面的用于上面优选提及的蛋白激酶的试验系统来证明。
在下面典型实验性测试系统的描述中，下面的缩写具有下面的含义： DMSO＝二甲基亚砜；DTT＝二硫苏糖醇；EDTA＝乙二胺四乙酸盐； GST＝谷胱甘肽-S-转移酶；MOI＝感染复数；PBS＝磷酸盐缓冲的盐水； PMSF＝对-甲苯磺酰氟；Tris＝三(羟基甲基)氨基甲烷。如果没有提及， 则“抑制剂”是式I的测试化合物。
可以如下那样证明式I化合物作为抑制剂或Ephrin B4受体(EphB4)激 酶的功效：
Bac-to-BacTM(Invitrogen Life Technologies，Basel，瑞士)GST-融合表 达载体的产生：由得自人胎盘或脑的cDNA库通过PCR分别将EphB-类的 整个细胞质(cytoplasmatic)编码区扩增。产生表达人EphB4受体的第 566-987位氨基酸区域的重组杆状病毒(SwissProt Database，登记号 P54760)。将GST序列克隆到载体(Invitrogen Life Technologies，Basel，瑞士)中并将其PCR扩增。将编码EphB4-受体结构域 的cDNA分别在GST序列的3’prime框中克隆到这种修改的FastBac1载 体中以产生pBac-to-BacTM供体载体。对得自该转化的单个菌落进行培养， 从而获得过夜培养物，用其来进行小规模质粒制备。质粒DNA的限制酶 分析表明一些克隆包含预期尺度的插入物。通过自动测序，证实在两股中 都插入了大约50bp的侧翼(flanking)载体序列。
病毒的制备：如果没有特别说明，则根据GIBCO提供的方案制备各激 酶的病毒。简单地说，将包含所述激酶结构域的转移载体转染到DH10Bac 细胞系(GIBCO)中并将其涂到选择性琼脂板上。不含有插入到病毒基因组 (由该细菌所携带)中的融合序列的菌落为蓝色。挑选出单个的白色菌落并 用标准质粒纯化操作从细菌中分离出病毒DNA(杆粒)。然后，根据该方案， 用Cellfectin试剂将Sf9细胞或Sf21细胞在25cm2的烧瓶中用病毒DNA 转染。
GST-标记激酶的纯化：将已离心的细胞溶胞产物负载到一根2mL的 谷胱甘肽-琼脂糖柱(Pharmacia)上，用10mL 25mM Tris-HCl，pH 7.5、 2mM EDTA、1mM DTT、200mM NaCl洗涤三次。然后，通过应用10 次(每次1mL)25mM Tris-HCl，pH 7.5、10mM还原的谷胱甘肽、100mM NaCl、1mM DTT、10％甘油来洗脱GST-标记的蛋白并将其储存在-70℃ 下。
蛋白激酶试验：通过测量由[γ33P]ATP混入到作为底物的谷氨酸和酪 氨酸的聚合物(聚(Glu，Tyr))中的33P来对存在或不存在抑制剂情况下的蛋 白激酶活性进行分析。使该使用纯化GST-EphB(30ng)的激酶试验在环境 温度下以30μl的终体积进行15-30分钟，在所述体积中包含20mM Tris·HCl，pH 7.5、10mM MgCl2、3-50mM MnCl2、0.01mM Na3VO4、 1％DMSO、1mM DTT、3μg/mL聚(Glu，Tyr)4：1(Sigma；St.Louis，Mo.， USA)和2.0-3.0μM ATP(γ-[33P]-ATP 0.1μCi)。通过加入20μL 125mM EDTA来结束该试验。随后，将40μl反应混合物转移到之前用甲醇浸泡 了5分钟的Immobilon-PVDF膜(微孔，Bedford，MA，USA)上，用水清洗， 然后用0.5％H3PO4浸泡5分钟，将其安放在具有断开的真空源的多头抽真 空装置上。在安放好所有的样品后，连接真空并将各孔用200μl 0.5％H3PO4 进行洗涤。取下这些膜并将其在摇动器上用1.0％H3PO4洗涤4次，用乙醇 洗涤1次。在将其在环境温度下干燥、安放在Packard TopCount96-孔框 架上、加入10μL/孔的MicroscintTM(Packard)后，对这些膜进行计数。通 过对一式两份、4个浓度(通常为0.01、0.1、1和10μM)的各试验化合物的 抑制百分比进行线性回归分析来计算IC50值。一个蛋白激酶活性单位被定 义为在37℃下，每分钟每mg蛋白从[γ33P]ATP向底物蛋白转移1nmol 33P ATP。式I的化合物表现出低至1nM的EphB4抑制，其IC50值优选地为 0.001-20.0μM，更优选地为0.001至10μM。
或者，可以如下那样测量EphB4受体自磷酸化作用：
用一种体外试验，用细胞如转染的A375人黑素瘤细胞(ATCC 号：CRL-1619)证实对EphB4受体自磷酸化作用的抑制，所述细胞永久表达 人EphB4(SwissProt AccNo P54760)，将其接种到位于6-孔细胞培养板中的 完全培养基(具有10％胎牛血清＝FCS)中并将其在37℃下在5％CO2下培养 至表现出约90％的融合率。然后，将受试化合物用培养基(不含FCS，具有 0.1％牛血清白蛋白)稀释并加入到所述细胞中。(对照包含不含测试化合物 的培养基)。通过加入1μg/ml可溶性EphrinB2-Fc(s-EphrinB2-Fc：R&D Biosystems，CatNr 496-EB)和0.1μM原钒酸盐来诱导配体诱导的自磷酸化 作用。在将其在37℃下再培养20分钟后，将细胞用冰冷的PBS(磷酸盐缓冲 的盐水)洗涤两次并将其立即以每孔200μl溶解缓冲液的数量溶解。然后， 将该溶胞产物离心以除去细胞核，用商业蛋白试验(PIERCE)测定上清液中 的蛋白浓度。然后，立即使用该溶胞产物或者如果需要的话，将其储存在 -20℃下
进行夹心酶联免疫分析以测量EphB4磷酸化作用：为了捕获磷酸化的 EphB4蛋白，以100ng/孔的数量将EphrinB2-Fc(s-EphrinB2-Fc：R&D Biosystems，CatNr 496-EB)固定在MaxiSorb(Nunc)ELISA板上。然后，将 该板洗涤并用3％位于具有吐温(聚氧化乙烯(20)脱水山梨醇单月桂酸 酯，ICI/Uniquema)的磷酸盐缓冲的生理盐水(PBST)中的(Juro， Cat.#TB232010)饱和剩余的游离蛋白结合部位。然后，将细胞溶胞产物(每 孔100μg蛋白)在这些板中在室温下培养1小时。在用PBS将这些孔洗涤3 次后，加入与碱性磷酸酯酶偶合的抗磷酸酪氨酸抗体(PY 20 Alkaline Phosphate结合的：ZYMED，Cat Nr03-7722)并将其再培养1小时。再次对这 些板进行洗涤，然后用10mM D-硝基苯基磷酸酯作为底物证明和定量抗磷 酸酪氨酸抗体与被捕获磷酸化受体的结合，并且在0.5小时-1小时后，在405 nm下测量其OD。
阳性对照(用钒酸盐和s-EphrinB2-Fc刺激)信号和阴性对照(未进行刺 激)信号间的差异相当于最大EphB4磷酸化作用(＝100％)。以最大EphB4 磷酸化抑制百分比的形式计算受试物质的活性，其中诱导一半最大抑制的 物质浓度被定义为IC50(50％抑制的抑制剂量)。可以发现式I化合物的IC50 值为0.0005至50μM，优选地为0.0005至20μM。
可以如下那样证明本发明化合物作为c-Abl蛋白-酪氨酸激酶活性抑制 剂的功效。
如Geissler等人在Cancer Res.1992；52：4492-4498中所述的滤器结合试 验那样在96-孔板中进行体外酶试验，对Geissler等人所述的试验进行了下 面的修改。如Bhat等人在J.Biol.Chem.1997；272：16170-16175中所述的那样 克隆c-Abl的His-标记激酶结构域并将其表达到杆状病毒/Sf9系统中。用一 种两步操作在钴金属螯合柱上对37kD的蛋白(c-Abl激酶)进行纯化，然后用 阴离子交换柱对其进行纯化，Sf9细胞的收率为1-2mg/L(Bhat等人，引用 的参考资料)。在考马斯蓝染色后，SDS-PAGE鉴定该c-Abl激酶的纯度 ＞90％。该试验包含(30μL的总体积)：c-Abl激酶(50ng)、20mM Tris·HCl， pH 7.5、10mM MgCl2、10μM Na3VO4、1mM DTT和0.06μCi/试验的[γ33 P]-ATP(5μM ATP)，使用30μg/mL聚-Ala，Glu，Lys，Tyr-6:2:5:1 (Poly-AEKY，Sigma P1152)，并且存在1％DMSO。通过加入10μL 250mM EDTA来结束反应并将30μL该反应混合物转移到之前用甲醇浸泡了5分钟 的Immobilon-PVDF膜(微孔，Bedford，MA，USA)上，用水清洗，然后用 0.5％H3PO4浸泡5分钟，将其安放在具有断开的真空源的多头抽真空装置 上。在安放好所有的样品后，连接真空并将各孔用200μl0.5％H3PO4进行 洗涤。取下这些膜并将其在摇动器上用0.5％H3PO4洗涤(4次)，用乙醇洗涤 1次。在将其在环境温度下干燥、安放在Packard TopCount96-孔框架上、 加入10μL/孔的MicroscintTM(Packard)后，对这些膜进行计数。使用这种 系统，式I化合物对c-Abl抑制表现出例如0.002至100μM的IC50值，其IC50 值通常为0.002至5μM。
式I的化合物还可抑制其它酪氨酸蛋白激酶，尤其是例如c-Src激酶， 其在动物，尤其是包括人细胞在内的哺乳动物细胞的生长调节和转化中起 作用。Andrejauskas-Buchdunger等人，Cancer Res.52，5353-8(1992)描述了 一种适用的试验。使用这种试验系统，式I的化合物表现出的抑制c-Src的 IC50值为例如0.01至100μM，通常为0.05至10μM。
另外，还可用式I的化合物抑制b-raf(V599E)。在存在或不存在抑制剂 的情况下，通过测量由[γ33P]ATP混入到(His)-IκB中的33P来对B-Raf-V599E 活性进行分析。将试验化合物溶解于DMSO(10mM)中并将其储存在-20℃ 下。在DMSO中新制备系列稀释物并用纯水进一步对其进行稀释，从而获 得位于3％DMSO中的3倍浓度试验溶液。该试验的终体积(30μl)包含10μl 试验溶液(1％DMSO)、10μl试验混合物(20mM Tris-HCl，pH 7.5、3mM MnCl2、3mM MgCl2、1nM DTT、3μg/ml(His)-IκB、1％DMSO和3.5μM ATP[γ33P]-ATP 0.1μCi)和10μl酶稀释物(600ng GST-B-Raf-V599E)。对 移液步骤进行编程以在MultiPROBE Iix，MultiPROBE IILx或 HamiltonSTAR自动机械上以96-孔形式进行该步骤。该试验是如文献中所 述那样来进行的(见C.Garcia-Echeverria等人，Cancer Cel..5， 231-9(2004))，通过加入20μl 125mM EDTA来结束试验。如下那样通过滤 器结合法来进行磷酸化肽的捕获：将40μl反应混合物转移到预先用甲醇浸 泡了5分钟的Immobilon-PVDF膜上，用水清洗，然后将其用0.5％H3PO4 浸泡5分钟并将其安放在具有断开的真空源的多头抽真空装置上。在安放好 所有的样品后，连接真空并将各孔用200μl 0.5％H3PO4进行洗涤。取下游 离膜并将其在摇动器上用1.0％H3PO4洗涤4次，用乙醇洗涤1次。在将其在 环境温度下干燥、安放在Packard TopCount96-孔框架上、加入10μL/孔的 MicroscintTM后，对这些膜进行计数。最后，将这些板密封并在微量培养 板闪烁计数器(TopCount NXT，TopCount NXT HTS)中对其进行计数。在 闪板法的情况中，首先在聚苯乙烯塑料板上进行激酶反应，然后在60分钟， 通过加入20μl 125mM EDTA来终止反应。为了捕获(60分钟，RT)，将已生 物素化的底物转移到涂有镍的闪板上。将试验板用PBS洗涤三次并将其在 室温下干燥。其后，将这些板密封并在微量培养板闪烁计数器(TopCount NXT，TopCount NXT HTS)中对其进行计数。通过对四个浓度(通常为0.01、 0.1、1和10μM)下一式两份或者以从10μM开始然后1∶3稀释的8个单个点 形式的化合物的抑制百分比进行线性回归分析来计算IC50值。式I化合物表 现出的b-raf抑制的IC50值为0.05至50μM
另一方面，式I的化合物表现出抑制各种其它蛋白酪氨酸或丝氨酸/苏 氨酸激酶的作用，在一些情况中，其具有比上述试验系统更高的IC50值， 然后，在降低不希望的不利药物反应风险的情况下表现出有用的选择性， 在其它一些情况中具有相当的IC50-值。
例如，可如下那样证明本发明化合物作为KDR蛋白-酪氨酸激酶活性 抑制剂的活性：用细胞如转染的CHO细胞来证实对VEGF-诱导的受体自磷 酸化作用的抑制，所述细胞永久表达人VEGF-R2受体(KDR)，将其接种到 位于6-孔细胞培养板中的完全培养基(具有10％胎牛血清＝FCS)中并将其 在37℃下在5％CO2下培养至其表现出约80％的融合率。然后，将受试化合 物用培养基(不含FCS，具有0.1％牛血清白蛋白)稀释并加入到所述细胞中。 对照包含不含测试化合物的培养基。在将其在37℃下培养2小时后，加入重 组VEGF；VEGF的终浓度为20ng/ml。在将其在37℃下再培养5分钟后， 将细胞用冰冷的PBS(磷酸盐缓冲的盐水)洗涤两次并将其立即以每孔100μl 溶解缓冲液的数量溶解。然后，将该溶胞产物离心以除去细胞核，用商业 蛋白试验(BIORAD)测定上清液中的蛋白浓度。然后，立即使用该溶胞产 物或者如果需要的话，将其储存在-20℃下。使用这种方案，发现式I的选 择性化合物表现出的KDR抑制的IC50值优选地比对c-Abl酪氨酸激酶的 IC50值高至少1.5倍，更优选地比对EphB4酪氨酸激酶的IC50值高2倍。发现 式I的化合物在这种试验系统中的IC50值通常为0.05至20μM，更优选地为 0.1至20μM。
结果表明，一些优选的式I的化合物具有有利的选择性，在这种情况中， 选择性不必指仅将一种激酶抑制至有利的程度，而是指与其它激酶相比， 选择性地对两种或多种激酶产生更强的抑制作用。
还有一些用于证明式I化合物抗肿瘤活性的体内试验。例如，为了分 析式I的化合物(例如下面给出的实施例1的化合物)是否能抑制体内血管生 成，用小鼠生长因子植入模型对其对血管生成因子如VEGF、bFGF、S-1P、 PDGF或IGF-1诱导的血管生成响应的影响进行分析：将多孔的聚四氟乙 烯小室(体积为0.5mL)用0.8％w/v包含肝素(20个单位/ml)、包含或不包含 生长因子(2μg/ml人VEGF)的琼脂填充，将其皮下植入到C57/C6小鼠的 背侧胁腹中。在植入所述小室的当天，用测试化合物(例如5、10、25、50 或100mg/kg，p.o.，每天一次)或基质对小鼠进行处理并且其后继续处理4 天。在处理结束时，将小鼠杀死并取出所述小室。小心取下在该小室周围 生长的血管组织并对其进行称重，通过测量该组织的血红蛋白含量来对血 含量进行评估(Drabkins法；Sigma，Deisenhofen，德国)。用特异性ELISA 测定作为内皮标记物度量的Tie-2蛋白水平以定量血管生成响应。之前已 经表明这些生长因子以剂量依赖性的方式诱导了小室周围生长的这种组织 (组织学特征为包含成纤维细胞和小血管)的重量、血含量和Tie-2蛋白水平 的增加，并且通过中和抗体(例如特定中和VEGF)可阻断这种响应(见Wood JM等人，Cancer Res.60(8)，2178-2189，(2000)；和Schlaeppi等人，J.Cancer Res.Clin.Oncol.125，336-342，(1999))。用这种模型，式I的化合物在上面 给出的浓度下表现出了抑制作用。
在本发明优选的意义上，对蛋白激酶调节有响应的疾病是一种受治疗 个体对蛋白(优选酪氨酸)激酶、尤其是上面优选的激酶活性的调节(尤其是 抑制)以有益方式发生响应的病症，在所述治疗中使用式I的化合物，所述 疾病是一种或多种增殖性疾病(是指一种依赖于蛋白激酶活性(尤其是不适 当的活性)的疾病酶)，包括过度增殖情况，如一种或多种下面的情况：白 血病、超常增生、纤维化(尤其是肺纤维化，但是也可以是其它类型的纤维 化，如肾纤维化)、血管生成、银屑病、动脉粥样硬化和血管中的平滑肌增 生，如狭窄或血管成形术后的再狭窄。此外，式I的化合物还可用于治疗 血栓形成和/或硬皮病。
优选式I的化合物在治疗(包括预防)增殖性疾病(尤其是对蛋白(优选酪 氨酸)激酶、尤其是这里优选提及的激酶活性的调节(尤其是抑制)有响应的 疾病)中的应用，所述疾病选自肿瘤或癌性疾病，尤其是优选地为良性或尤 其是恶性肿瘤或癌性疾病，更优选地为实体瘤，例如脑癌、肾癌、肝癌、 肾上腺癌、膀胱癌、乳癌、胃癌(尤其是胃的肿瘤)、卵巢癌、结肠癌、直 肠癌、前列腺癌、胰腺癌、肺癌(例如小细胞或大细胞肺癌)、阴道癌、甲 状腺癌、肉瘤、成胶质细胞瘤、多发性骨髓瘤或胃肠癌，尤其是结肠癌或 结肠直肠腺瘤、或头和颈的肿瘤，例如头和颈的鳞状细胞癌，包括瘤形成， 尤其是上皮特征的瘤形成，例如在乳癌的情况中；表皮过度增生(不是癌)， 尤其是银屑病；前列腺超常增生；或白血病。
式I的化合物或其应用使得可造成肿瘤消退和/或预防肿瘤转移瘤的形 成和转移瘤(也包括微小转移灶)的生长。
还可以用式I的化合物治疗涉及一些或者尤其是单个的蛋白(优选酪氨 酸)激酶，尤其是优选提及的这些蛋白激酶的免疫系统疾病。此外，式I的 化合物还可用于治疗其中涉及至少一种蛋白(优选酪氨酸)激酶、尤其是优 选提及的这些蛋白酪氨酸激酶进行的信号传递的中枢或外周神经系统疾 病。
在慢性髓细胞性白血病(CML)中，造血干细胞(HSC)中交互平衡的染 色体易位产生了BCR-ABL杂合基因。后者编码致癌的Bcr-Abl融合蛋白。 尽管ABL编码严密受控的蛋白酪氨酸激酶(其在细胞增殖、粘附和凋亡的 调节中起基本作用)，但是BCR-ABL融合基因编码组成活化的激酶(该激 酶转化HSC从而产生一种表现出失控的克隆样增生、向骨髓间质的粘附能 力降低和对诱变刺激的凋亡响应降低的表型)，从而使得逐渐蓄积了更多恶 性变形。所得粒细胞不能形成成熟的淋巴细胞并且被释放到循环中，从而 导致了成熟细胞不足和易感性增加。已经描述了Bcr-Abl(或相当的突变形 式)的ATP竞争抑制剂抑制激酶(例如P-3激酶和STAT5)，使其不能活化 有丝分裂和抗-细胞凋亡途径，从而导致BCR-ABL表型细胞死亡并因此提 供了有效治疗CML的方法。因此，本发明用作Bcr-Abl抑制剂的式I的 化合物尤其适用于治疗与其过表达有关的疾病，尤其是白血病，如白血病， 例如CML或ALL。
血管生成被看成是生长至最大直径超过约1-2mm的这些肿瘤的先决 条件；生长至高至这种限度时，必需通过扩散向肿瘤细胞提供氧和营养物。 因此，不管其起源以及起因如何，在达到一定的大小后，每一种肿瘤的生 长都依赖于血管生成。在血管生成抑制剂的肿瘤治疗活性中起重要作用的 机理主要有三种：1)抑制血管、尤其是毛细血管向无血管的休眠肿瘤生长， 结果，由于细胞凋亡和增殖间达到平衡，没有肿瘤净生长；2)由于没有血 液流入和流出肿瘤，从而阻止了肿瘤细胞的迁移；和3)抑制内皮细胞增殖， 从而避免了通常位于血管内层的内皮细胞对周围组织发挥的旁分泌生长刺 激作用。
鉴于其具有抑制KDR和Ephrin受体激酶例如EphB4激酶以及可能 的其它蛋白激酶的能力并因此具有调节血管生成的能力，因此式I的化合 物尤其适用于治疗与相应受体(优选酪氨酸)激酶不适当的活性，尤其是过 表达有关的疾病或病症。在这些疾病中，尤其重要的是(例如局部缺血性) 视网膜病、(例如与年龄有关的)黄斑变性、银屑病、肥胖、成血管细胞瘤、 血管瘤、炎性疾病如类风湿性或风湿性炎性疾病，尤其是关节炎如类风湿 性关节炎、或其它慢性炎性病症如慢性哮喘、动脉或移植术后动脉粥样硬 化、子宫内膜异位，并且尤其是瘤形成疾病，例如所谓的实体瘤(尤其是胃 肠道、胰腺、乳房、胃、宫颈、膀胱、肾、前列腺、卵巢、子宫内膜、肺、 脑的癌症、黑素瘤、卡波济肉瘤、头和颈的鳞状细胞癌、恶性胸膜间质瘤、 淋巴瘤或多发性骨髓瘤)和进一步的液体肿瘤(例如白血病)。
式I的化合物尤其是可用于治疗或预防由持续血管生成触发的疾病， 如再狭窄，例如，支架诱导的再狭窄；克罗恩病；何杰金病；眼部疾病， 如糖尿病性视网膜病和新生血管性青光眼；肾疾病，如肾小球性肾炎；糖 尿病肾病；炎性肠病；恶性肾硬化；栓塞性微血管病综合征；(例如慢性)移 植排斥和肾小球病；纤维变性疾病，如肝硬化；肾小球膜细胞-增殖性疾病； 神经组织损伤；和用于抑制气囊式导管处理后血管的再闭合、用于血管修 复学或在插入用于保持血管开放的机械装置如支架后应用、用作免疫抑制 剂、用于帮助无疤痕伤口愈合和用于治疗老年斑和接触性皮炎。
本发明优选地涉及式I的化合物或其可药用的盐在治疗本文所述实体 瘤和/或本文所述液体肿瘤例如白血病中的应用。
由于其调节蛋白激酶如Eph受体激酶的性质，式I的化合物还可用于 刺激或促进神经再生(神经元再生；神经再生)如轴索再生，或者抑制或逆 转神经变性(神经元变性；神经变性)。这些应用代表了本发明的另一些方 面。
因此，式I的化合物还可用于治疗对蛋白激酶如Eph受体激酶调节有 响应的情况、疾病或病症，在这些疾病中，希望刺激或促进神经再生(神经 元再生；神经再生)如轴索再生或者抑制或逆转神经变性(神经元变性；神 经变性)，例如其可用于治疗脊髓损伤、低氧情况、外伤性脑损伤、梗死、 中风、多发性硬化或其它神经变性情况、疾病或病症。这些应用和治疗方 法代表了本发明的另一些方面。
制备方法
式I的化合物是与现有技术中原则上已知的制备其它化合物的方法类 似地来进行制备的，对于式I的新型化合物而言，该方法作为类似方法也 是新的，其制备方法优选地为
将其中Ra是式I化合物定义的R1或一种保护基团，Hal是卤素，尤其是 溴或氯且R2如式I的化合物所定义的式II的化合物

与其中A、R3、R4、R6和n如式I的化合物所定义的式III的化合物进行 反应

除去任何存在的保护基团，
并且如果需要的话，将式I的化合物转化成另一种式I的化合物、将获得 的式I化合物的盐转化成游离化合物或另一种盐、将获得的游离的式I的 化合物转化成其盐、和/或将获得的式I化合物的异构体混合物分离成单个 的异构体。
该反应优选地在溶剂或溶剂混合物例如醇如叔-丁醇中在升高的温度 例如30℃至回流温度或50℃至150℃的温度下进行，例如在微波炉中进行。
在下面“一般操作条件”下提及的标准参考著作中对保护基团(如果存 在的话)的性质、引入、类型和除去进行了描述。
任选的反应和转化
可以将式I的化合物转化成另一种式I的化合物。
例如，在其中R1是卤代-芳基，如溴代-芳基，例如溴苯基的式I的化合 物中，卤素可以被通过氮原子结合的取代基代替，例如被吗啉-4-基代替，其 可通过与相应的伯胺或仲胺如吗啉在存在强碱如碱金属醇化物例如叔-丁醇 钾和适宜的偶合催化剂例如氯化2-(二甲基-氨基-)-2-联苯基-钯(II)二降冰片 基膦复合体的情况下在适宜的溶剂或溶剂混合物例如醚如四氢呋喃中进行反 应来进行。
作为另一个实例，可以通过与其中Alk是未被取代或被取代的烷基且 Hal是卤素，尤其是溴的式IV的化合物
Alk-Hal    (IV)
在存在适宜碱例如碱土金属碳酸盐，如碳酸铯的情况下在适宜溶剂或溶剂 混合物例如N，N-二-(低级烷基)-低级烷酰基酰胺，如N，N-二甲基甲酰胺中 进行反应，优选地在升高的温度例如50至160℃下，例如在微波炉中进行 反应来将其中R1是氢的式I的化合物转化成其中R1是未被取代或被取代 的烷基的式I的化合物。
式I化合物转化的另一个实例是在被取代的芳基R1上存在硝基取代 基的情况中，该硝基取代基可以被还原成相应的氨基取代基，例如用催化 氢化，例如在存在阮内镍的情况下，在适宜的溶剂或溶剂混合物如醇例如 甲醇或乙醇中进行还原，反应温度为例如0至50℃。
可以通过与相应的烷基卤例如碘甲烷反应将式I化合物中的氨基取代 基(尤其是作为式I中芳基R1的取代基的氨基)转化成二-或三-烷基化的氨 基(在后一种情况中为季铵)取代基，该反应优选地在存在叔氮碱如三乙胺 的情况下在适宜的溶剂或溶剂混合物例如N，N-二-(低级烷基)-低级烷酰基 酰胺，如N，N-二甲基甲酰胺中进行，反应温度优选地为20至80℃。
具有至少一个成盐基团的式I化合物的盐可以以本身已知的方式来进 行制备。例如，可以通过用金属化合物如适宜有机羧酸的碱金属盐例如2- 乙基己酸的钠盐、用有机碱金属或碱土金属化合物，如相应的氢氧化物、 碳酸盐或碳酸氢盐，如氢氧化钠或氢氧化钾、碳酸钠或碳酸钾、相应的钙 化合物或氨或适宜的有机胺处理具有酸性基团的式I化合物来形成具有酸 性基团式I化合物的盐，优选地使用化学计量量或仅少量过量的成盐试剂。 可以用常规方式获得式I化合物的酸加成盐，例如可以通过用酸或适宜的 阴离子交换试剂处理式I的化合物来获得。可以形成包含酸性和碱性成盐 基团例如游离羧基和游离氨基的式I化合物的内盐，例如可以通过用弱酸 将盐如酸加成盐中和至等电点或者通过用离子交换剂处理来形成内盐。
可以用常规方式将式I化合物的盐转化成游离化合物；例如可以通过 用适宜的酸处理来对金属或铵盐进行转化，并且可以通过用适宜的碱性试 剂进行处理来对酸加成盐进行转化。在这两种情况中，都可以使用适宜的 离子交换剂。
可以以本身已知的方式，通过适宜的分离方法将立体异构混合物，例 如非对映异构体的混合物分离成其相应的异构体。例如可以通过分级结晶、 色谱法、溶剂分配和类似操作将非对映异构体混合物分离成其各非对映异 构体。这种分离可以在起始化合物或式I化合物本身的水平上进行。可以 通过形成非对映体盐例如通过用对映异构体纯的手性酸形成盐、或者通过 用使用具有手性配体的色谱底物的色谱法例如HPLC来分离对映异构体。
可以根据标准方法对中间体和终产物进行后处理和/或纯化，例如可以 用色谱法、分配法、(重)结晶等来进行后处理和/或纯化。
起始材料
起始材料例如可优选地如下那样来进行制备：
在起始材料中使用R1、R2、R3、R4、A、R5、R6和n的情况中， 如果没有另外说明，则这些符号优选地具有式I化合物所给出的含义。
式II的卤代-吡唑并嘧啶化合物优选地是由式V的4-羟基吡唑并嘧啶 制得的，

其中R1和R2如式I的化合物所定义，其中形成嘧啶环一部分的 -C(-OH)＝N-部分可以位于与互变异构形式-C(＝O)-NH-的平衡中，或者这两 种互变异构形式中的一种可能明显占优势，
将其与甲基苯基磺酸或全氟代烷烃磺酸的酸酐，例如相应的磺酰氯或磺酰 溴，或优地与酰基卤如光气、草酰氯，更优选无机酰基卤，如亚硫酰氯、 亚硫酰溴、磺酰氯、三氯化磷、三溴化磷、五氯化磷、五溴化磷、磷酰溴 或尤其是磷酰氯(POCl3＝三氯氧磷)在不存在或存在五氯化磷的情况下进 行反应(由此获得其中Hal是Cl的式V的化合物)，优选地在排除水分的情 况下进行反应，如果需要的话，在存在(优选低于化学计量数量)叔氮碱， 如三乙胺或吡啶的情况下进行反应。该反应在惰性溶剂中进行或者优选地 (尤其是在所述酸酐或酰基卤至少在反应温度下为液体或者在室温下已经 是液体的情况中)在不存在溶剂的情况下进行。优选的反应温度为升高的温 度，例如50℃至约100℃或高至回流温度。
式V的化合物可优选地通过将其中R1如式I的化合物所定义的式VI 的吡唑酰胺化合物

与其中R2如式I的化合物所定义的式
R2-C(＝O)-NH2            (VII)，
的酰胺进行反应来获得。该反应优选地在脱水条件下进行，尤其是在不存 在(如果式VII中的R2是氢，则可能)或存在(如果式VII中的R2是未被取 代或被取代的芳基、未被取代或被取代的环烷基、未被取代或被取代的烷 基或未被取代或被取代的杂环基，则优选)聚磷酸的情况下进行，优选的反 应温度为90℃至回流温度，例如100至195℃。
或者，其中R1如式I中所定义且R2是氢的式V的化合物可以通过将其中 R1如式I中所定义的式VI的化合物与原甲酸三低级烷基酯，如原甲酸三乙 酯在存在例如冰醋酸的情况下在升高的温度例如30至80℃下进行反应来制 备。
或者，式V的化合物可以由下面所给出的式VIII的化合物通过将式 VIII化合物与其中R2如式I的化合物所定义的式
HOOC-R2           (VII＊)，
的酸在存在聚磷酸的情况下在升高的温度例如50℃至该反应混合物的回 流温度，例如80至120℃下进行反应来直接获得。
其中R1如式I的化合物所定义的式VI的化合物优选地是由其中R1 如式I的化合物所定义的式

的腈化合物，通过用强酸，优选浓(例如约96％)硫酸水解获得的，优选的 反应温度为-10℃至约25℃，例如0℃至室温。
还可以由式VIII的化合物通过将式VIII的腈与甲酸在升高的温度，优 选回流条件下进行反应来直接获得其中R1如式I的化合物所定义且R2是氢 的式V的化合物。
式VIII的化合物优选地是通过将其中R1如式I的化合物所定义的式
R1-NH-NH2           (IX)，
的化合物与低级烷氧基亚甲基丙二腈，优选乙氧基亚甲基丙二腈反应获得 的。该反应优选地在醇如乙醇或异丙醇中进行，优选地在不存在或存在(尤 其是在使用式IX化合物的盐形式，例如盐酸盐的情况中)叔氮碱，例如三低 级烷基胺，如三乙胺的情况下进行，优选的反应温度为0℃至回流温度，例 如室温至回流温度。
其中A是C(＝O)-N(R5)的式III的苯胺衍生物可优选地通过将其中R3如 式I的化合物所定义的式

的碳酸或其反应性衍生物与其中R5、R4和n如式I的化合物所定义的式

的苯胺衍生物进行反应，从而得到其中R5、R4和n如式I的化合物所定义的 式

的化合物来获得。
然后，可以获得式III的化合物，将如前面那样获得的或者用任何其它 方法获得的式XII的化合物还原成其中A是C(＝O)-N(R5)且R6是氢的相应 的式III的化合物，例如将其催化氢化还原，例如在存在阮内镍的情况下在 适宜的溶剂或溶剂混合例如醇如甲醇或乙醇中，在例如0至50℃的温度下进 行还原，然后，如果需要的话，通过用适宜的式XIII的卤化物在常规烷基 化条件下进行烷基化将其转化成未被取代或被取代的烷基R6，
R6-Hal              (XIII)，
其中R6是未被取代或被取代的烷基且Hal是卤素，尤其是溴或碘。
其中A是N(R5)-C(＝O)的式III的苯胺衍生物可优选地通过将其中R4和 n如式I的化合物所定义的式

的碳酸或其反应性衍生物与其中R3如式I的化合物所定义的式

的苯胺衍生物进行反应，从而得到其中R3、R4、R5和n如式I的化合物所 定义的式

的化合物，然后，将其还原，例如通过催化氢化进行还原，例如在存在阮 内镍的情况下在适宜的溶剂或溶剂混合物例如醇如甲醇或乙醇中在例如0 至50℃下进行反应，从而将其还原成其中A是N(R5)-C(＝O)且R6是氢的相 应的式III的化合物，然后，如果需要的话，通过用适宜的式XIII的卤化物 在常规烷基化条件下进行烷基化将其转化成未被取代或被取代的烷基R6，
R6-Hal             (XIII)，
其中R6是未被取代或被取代的烷基且Hal是卤素，尤其是溴或碘。
式X或XIV的碳酸或其各自反应性衍生物的反应优选地用就以其本身 形式使用的反应性碳酸衍生物例如对称或混合酸酐形式的反应性碳酸衍生 物、活性酯或碳酰氯，如酰基氯进行，例如在存在叔氮碱，如三-低级烷基 胺或吡啶的情况下进行反应，或者在原位形成，例如通过在存在可就地形 成反应性酯的试剂的情况下进行缩合。该反应例如可以通过将碳酸和相应 的胺溶解于适宜的试剂，例如卤化烃，如二氯甲烷、N，N-二甲基甲酰胺、 N，N-二甲基乙酰胺、N-甲基-2-吡咯烷酮、二氯甲烷、或两种或多种该类溶 剂的混合物中，和通过加入适宜的碱，例如三乙胺、二异丙基乙基胺(DIEA) 或N-甲基吗啉来进行，并且如果式II的酸的反应性衍生物就地形成，则还 存在可就地形成优选的式III的碳酸的反应性衍生物的适宜偶合剂，例如二 环己基碳二亚胺/1-羟基苯并三唑(DCC/HOBT)；二(2-氧代-3-噁唑烷基)次 膦酰氯(BOPCl)；O-(1，2-二氢-2-氧代-1-吡啶基)-N，N，N‘，N‘-四甲基脲鎓四氟 硼酸盐(TPTU)；O-苯并三唑-1-基)-N，N，N’，N’-四甲基脲鎓四氟硼酸盐 (TBTU)；(苯并三唑-1-氧基)-三吡咯烷-1-基磷鎓六氟磷酸盐(PyBOP)、盐酸 1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺/羟基苯并三唑或/1-羟基-7-氮杂苯并 三唑(EDC/HOBT或EDC/HOAt)或HOAt，或者还同时存在(1-氯-2-甲基-丙 烯基)-二甲基胺。对于其它一些可能的偶合剂的综述而言，参见例如 Klauser；Bodansky，Synthesis 1972，453-463。该反应混合物优选地在约-20 至50℃，尤其是0℃至30℃，例如室温下进行搅拌。该反应优选地在惰性气 体，例如氮气或氩气下进行。
或者，可以不使用式X或XV的硝基化合物，而是使用其中氨基被保 护的相应的氨基化合物(用氨基代替硝基)，然后，可以将被保护的氨基去 保护，从而得到式III的化合物。
式IV的化合物、式VII的化合物、式IX的化合物、式X的化合物、 式XI的化合物、式XIII的化合物、式XIV的化合物和式XV的化合物以 及其它起始材料在现有技术中是已知的、可商业获得和/或可以根据标准操 作来制备，例如可以用与实施例用所述方法相似的方法或用实施例中所述 方法来制备。
一般处理条件
下面的叙述通常适用于上下文所述的所有方法，同时优选上下文特定 提及的反应条件：
在上下文所提及的任何反应中，在适宜或需要的情况中，即使没有特 别提及，也可以用保护基团对不需要参与给定反应的官能团进行保护，并 且可以在适宜或所需的阶段将其引入和/或除去。因此，在本说明书中没有 特别提及保护和/或去保护的反应中，在需要时也包括使用保护基团的反 应。
在本文的范围中，除非特别说明，否则仅不是所需特定式I终产物的 组成部分的容易除去的基团被称为“保护基团”。在例如标准参考著作，如 J.F.W.McOmie，“有机化学中的保护基团(Protective Groups in Organic Chemistry)”，Plenum Press，伦敦和纽约1973、T.W.Greene和P.G.M. Wuts，“有机合成中的保护基团(Protective Groups in Organic Synthesis)”， 第3版，Wiley，纽约1999、“肽类(The Peptides)”；第3卷(主编：E.Gross和 J.Meienhofer)，Academic Press，伦敦和纽约1981、“Methoden der organischen Chemie”(有机化学方法)，Houben Weyl，第4版，第15/I卷， Georg Thieme Verlag，Stuttgart 1974、H.-D.Jakubke and H.Jeschkeit， “，Peptide，Proteine”(氨基酸，肽类，蛋白质)，Verlag Chemie， Weinheim，Deerfield Beach，和Basel 1982、以及Jochen Lehmann，“Chemie der Kohlenhydrate：Monosaccharide und Derivate”(碳水化合物化学：单糖 和衍生物)，Georg Thieme Verlag，Stuttgart 1974中对用保护基团对官能团 进行的保护、保护基团本身、以及适用于除去所述保护基的反应进行了描 述。保护基团的特性在于其可以容易地被除去(即不会发生不希望的继发反 应)，例如可以通过溶剂分解、还原、光解被除去或者可以在生理条件下被 除去(例如通过酶裂解被除去)。
所有上述处理步骤都可以在本身已知的反应条件下进行，优选地在上 面具体提及的条件下，在不存在或通常在存在溶剂或稀释剂，优选对所用 试剂为惰性并且可溶解所用试剂的溶剂或稀释剂的情况下，在不存在或存 在催化剂、缩合剂或中和剂例如离子交换剂如阳离子交换剂例如H+型交换 剂的情况下进行，根据所说反应和/或反应物的性质，在降低、正常或升高 的温度，例如约-100℃至约190℃，优选约-80℃至约150℃，例如-80至 -60℃、室温、-20至40℃或在回流温度下，在大气压下或在密封容器中进 行，在适宜的情况下在加压下和/或在惰性气氛，例如氩气或氮气气氛下进 行。
除非在方法的描述中特别说明，否则可以由其中选择出适用于任何特 定反应的这些溶剂的溶剂包括那些具体提及的溶剂或者，例如，水；酯类， 如低级烷基-低级链烷酸酯，例如乙酸乙酯；醚类，如脂族醚类，例如乙醚， 或环醚类，例如四氢呋喃或二恶烷；液态芳族烃类，如苯或甲苯；醇类， 如甲醇、乙醇或1-或2-丙醇；腈类，如乙腈；卤代烃类，例如二氯甲烷或 氯仿；酰胺类，如二甲基甲酰胺或二甲基乙酰胺；碱类，如杂环氮碱，例 如吡啶或N-甲基吡咯烷-2-酮；羧酸酐，如低级链烷酸酐，例如乙酸酐；环 状、直链或支链烃类，如环己烷、己烷或异戊烷、或这些溶剂的混合物， 例如水溶液。在后处理，例如通过色谱法或分配进行的后处理中也可以使 用该类溶剂混合物。
本发明还涉及其中用在所说方法中的任何阶段以中间体形式获得的化 合物作为起始材料并进行其余处理步骤、或者其中在所说反应条件下形成 起始材料或者起始材料以其衍生物形式例如被保护形式或者盐形式被使 用、或者在所说处理条件下制得用本发明方法获得的化合物并就地对其进 行进一步处理的这些形式的方法。在本发明的方法中，优选地使用产生优 选式I化合物的这些起始材料。本发明还涉及新中间体和/或起始材料。特 别优选与实施例中所述这些反应条件相同或相似的反应条件。
本发明的优选实施方案
在优选的实施方案以及在前面和下面的更一般范围的实施方案中，以 及在权利要求书中，可以用上面和下面所提供的更具体的相应定义来代替 任何一个或多个或所有的一般性表述，从而获得本发明更优选的实施方案。
本发明尤其是涉及如权利要求书，更优选从属的化合物/盐权利要求中 所定义的式I的化合物或其盐。
本发明尤其是涉及包含独立的化合物/盐权利要求或从属的化合物/盐 权利要求所述的式I化合物或其可药用的盐和至少一种可药用载体的药物 制剂。
本发明还优选地涉及用于动物或人体的诊断或治疗性处理，尤其是用 于本文所定义或权利要求书中所定义的治疗方法的独立的化合物/盐权利 要求或从属的化合物/盐权利要求所述的式I化合物或其可药用的盐。
本发明还涉及权利要求书中所述的应用和方法涉及的其它实施方案， 在权利要求书中，从属权利要求描述了优选的实施方案。
因此，所有的权利要求在这里都被引入作为参考。
本发明尤其是涉及实施例中所给出的式I的化合物或其可药用的盐、 或其本发明所述的用途以及实施例中所述的方法和新起始材料以及中间 体。
药物组合物
本发明还涉及包含式I的化合物(优选新化合物)的药物组合物、其在治 疗性处理(在本发明的广义上还包括预防性处理)中的应用或治疗依赖于不 适当的蛋白(尤其是酪氨酸)激酶活性的疾病或病症、尤其是上面所述的优 选病症或疾病的方法、用于所述应用的化合物以及药物制剂及其制备，尤 其是用于所述应用的药物制剂。在式I化合物的情况中更一般地使用药物 制剂。
本发明药理学可接受的化合物例如可存在于包含有效量作为活性成分 的式I的化合物或其可药用盐和一种或多种无机或有机、固体或液体形式 的可药用载体(载体物质)的药物组合物中，或者例如可用于制备该类药物 组合物。
本发明还涉及适于给药于温血动物，尤其是人(或者得自温血动物，尤 其是人的细胞或细胞系，例如淋巴细胞)、用来治疗(在本发明的广义的方 面还包括预防)对蛋白(尤其是酪氨酸)激酶活性的抑制有响应的疾病的药物 组合物，其包含一定量式I的化合物或其可药用的盐和至少一种可药用的 载体，其中，所说化合物的量优选对于所说抑制而言是有效的。
本发明的药物组合物是用于肠内如鼻、直肠或口服、或胃肠外如肌内 或静脉内给药于温血动物(尤其是人)的药物组合物，其仅包含有效剂量药 理学活性成分或者还包含足够量的可药用载体。所说活性成分的剂量取决 于温血动物的种类、体重、年龄和个体情况、个体的药动学数据、被治疗 的疾病和给药方式。
本发明还涉及一种治疗对依赖于蛋白(尤其是酪氨酸)激酶的不适当的 活性的疾病的抑制有响应的疾病的方法；其包括尤其是给由于所述的疾病 之一而需要该类治疗的温血动物，例如人施用预防或尤其是治疗有效量的 式I化合物或其可药用的盐。
被给药于温血动物，例如体重约70kg的人的式I化合物或其可药用 盐的剂量优选地为约3mg至约10g，更优选地为约10mg至约1.5g，最 优选地为约100mg至约1000mg/人/天，其优选地被分成1-3个单剂量， 所说的单剂量例如大小可以相同。儿童所接受的剂量通常为成人剂量的一 半。
所说的药物组合物包含约1％至约95％，优选约20％至约90％的活性 成分。本发明的药物组合物例如可以为单位剂量形式，例如可以为安瓿剂、 小瓶、栓剂、糖锭剂、片剂或胶囊的形式。
本发明的药物组合物可以用本身已知的方式来进行制备，例如可以通 过常规的溶解、冷冻干燥、混合、制粒或成型方法来进行制备。
优选地使用活性成分的溶液，并且还可以使用其混悬液，并且尤其是 等渗的水性溶液或混悬液，在例如仅包含活性成分或者包含活性成分和载 体如甘露醇的冷冻干燥组合物的情况中，可以在使用前制备该类溶液或混 悬液。所说的药物组合物可以被灭菌和/或可以包含赋形剂，例如防腐剂、 稳定剂、润湿剂和/或乳化剂、增溶剂、用于调节渗透压的盐和/或缓冲剂， 并且可以用本身已知的方式来进行制备，例如可以通过常规溶解或冷冻干 燥方法来进行制备。所说的溶液或混悬液可以包含增加粘度的物质，如羧 甲基纤维素钠、羧甲基纤维素、葡聚糖、聚乙烯吡咯烷酮或明胶。
位于油中的混悬液包含作为油性组分的常用于注射目的的植物油、合 成或半合成油类。可提及的尤其是包含具有8-22个，尤其是12-22个碳原 子的作为酸组分的长链脂肪酸，例如月桂酸、十三烷酸、肉豆蔻酸、十五 烷酸、棕榈酸、十七烷酸、硬脂酸、花生酸、二十二烷酸或相应的不饱和 酸，例如油酸、反油酸、芥酸、brasidic acid或亚油酸的液体脂肪酸酯， 如果需要的话，还可加入抗氧剂，例如维生素E、β-胡萝卜素或3，5-二-叔- 丁基-4-羟基甲苯。这些脂肪酸酯的醇组分具有最多6个碳原子并且是单- 或多-羟基例如单-、二-或三-羟基醇，例如甲醇、乙醇、丙醇、丁醇或戊醇 或其异构体，但是尤其是二醇和甘油。因此，可提及的脂肪酸酯的实例如 下：油酸乙酯、肉豆蔻酸异丙酯、棕榈酸异丙酯、“Labrafil M 2375”(聚氧 乙烯甘油三油酸酯，Gattefossé，巴黎)、“Miglyol 812”(具有C8至C12的链 长度的饱和脂肪酸的甘油三酯，Hüls AG，德国)，但是尤其是植物油，如棉 籽油、杏仁油、橄榄油、蓖麻油、芝麻油、豆油和花生油。
所说的注射或输液组合物是以常规方式在无菌条件下进行制备的；也 同样在无菌条件下将该组合物引入到安瓿或小瓶中并将该容器密封。
用于口服给药的药物组合物可以通过将活性成分与固体载体混合到一 起，如果需要的话，将所得的混合物制粒并且如果需要或必需的话，在加 入适宜的赋形剂后将该混合物加工成片剂、糖锭剂核或胶囊来获得。还可 以将其混入到可以使活性成分以所确定的量扩散或释放的塑性载体中。
适宜的载体通常有填充剂，如糖类，例如乳糖、蔗糖、甘露醇或山梨 醇、纤维素制剂和/或磷酸钙类，例如磷酸三钙或磷酸氢钙、和粘合剂，如 淀粉糊，例如使用玉米、小麦、水稻或马铃薯淀粉的淀粉糊、明胶、黄蓍 胶、甲基纤维素、羟丙甲基纤维素、羧甲基纤维素钠和/或聚乙烯吡咯烷酮、 和/或如果需要的话，崩解剂，如上述淀粉类物质、和/或羧甲基淀粉、交联 聚乙烯吡咯烷酮、琼脂、藻酸或其盐，如藻酸钠。赋形剂尤其是流动调节 剂和润滑剂，例如硅酸、滑石粉、硬脂酸或其盐，如硬脂酸镁或硬脂酸钙、 和/或聚乙二醇。为糖锭剂核提供适宜的、任选为肠溶的包衣，特别是可使 用可包含阿拉伯胶、滑石粉、聚乙烯吡咯烷酮、聚乙二醇和/或二氧化钛的 浓的糖溶液，或者位于适宜有机溶剂中的包衣溶液，或者，为了制备肠溶 包衣，可采用适宜纤维素制剂如邻苯二甲酸乙基纤维素或邻苯二甲酸羟丙 甲基纤维素的溶液。胶囊有由明胶制得的干填充的胶囊和由明胶和增塑剂 如甘油或山梨醇制得的密封的软胶囊。所说的干填充的胶囊可以包含颗粒 形式的活性成分，所说的颗粒形式例如可以具有填充剂如乳糖、粘合剂如 淀粉类物质和/或助流剂如滑石粉或硬脂酸镁，并且如果需要的话还可以具 有稳定剂。在软胶囊的情况中，优选地将所说的活性成分溶解或混悬于适 宜的油性赋形剂，如脂肪油、石蜡油或液体聚乙二醇中，还可以向其中加 入稳定剂和/或抗菌剂。可以向片剂或糖锭剂包衣或胶囊壳中加入染料或颜 料，例如为了识别目的或表明活性成分的不同剂量。
还可有利地将式I的化合物与其它生物学活性剂，优选其它抗增殖剂 联合使用。所述抗增殖剂非限制性地包括芳香酶抑制剂；抗雌激素药；拓 扑异构酶I抑制剂；拓扑异构酶II抑制剂；微管活化剂；烷化剂；组蛋白 脱乙酰基酶抑制剂；诱导细胞分化过程的化合物；环氧合酶抑制剂；MMP 抑制剂；mTOR抑制剂；抗肿瘤的抗代谢物；铂化合物；靶向/降低蛋白或 脂质激酶活性的化合物和其它抗血管生成化合物；靶向、降低或抑制蛋白或 脂质磷酸酶活性的化合物；戈那瑞林(gonadorelin)激动剂；抗雄激素药； 蛋氨酸氨基肽酶抑制剂；二膦酸盐；生物学响应调节剂；抗增殖抗体；类 肝素酶抑制剂；Ras致癌同种型的抑制剂；端粒末端转移酶抑制剂；蛋白 酶体抑制剂；血液学恶性肿瘤治疗中所用的活性剂；靶向、降低或抑制Flt-3 活性的化合物；Hsp90抑制剂；和替莫唑胺()。
这里所用的术语“芳香酶抑制剂”指的是一种抑制雌激素产生，即，分 别抑制底物雄甾烯二酮和睾酮向雌酮和雌二醇转化的化合物。该术语非限 制性地包括甾族化合物，尤其是阿他美坦、依西美坦和福美坦，并且特别 是非甾族化合物，尤其是氨基格鲁米特、罗谷亚胺(roglethimide)、吡鲁米 特、曲洛司坦、睾内酯、酮康唑(ketokonazole)、伏氯唑、法倔唑、阿那曲 唑和来曲唑。依西美坦例如可以以其市售形式，例如以商标AROMASIN 进行市售的形式进行给药。福美坦例如可以以其市售形式，例如以商标 LENTARON进行市售的形式进行给药。法倔唑例如可以以其市售形式， 例如以商标AFEMA进行市售的形式进行给药。阿那曲唑例如可以以其市 售形式，例如以商标ARIMIDEX进行市售的形式进行给药。来曲唑例如 可以以其市售形式，例如以商标FEMARA或FEMAR进行市售的形式进 行给药。氨基格鲁米特例如可以以其市售形式，例如以商标ORIMETEN 进行市售的形式进行给药。包含芳香酶抑制剂类化疗剂的本发明的组合特 别可用于治疗激素受体阳性的肿瘤，例如乳房肿瘤。
这里所用的术语“抗雌激素药”指的是在雌激素受体水平下拮抗雌激素 作用的化合物。该术语非限制性地包括他莫昔芬、氟维司群、雷洛昔芬和 盐酸雷洛昔芬。他莫昔芬例如可以以其市售形式，例如以商标NOLVADEX 进行市售的形式进行给药。盐酸雷洛昔芬例如可以以其市售形式，例如以 商标EVISTA进行市售的形式进行给药。氟维司群可以如US 4,659,516中 所公开的那样来进行配制或者其例如可以以其市售形式，例如以商标 FASLODEX进行市售的形式进行给药。包含作为抗雌激素药的化疗剂的 本发明的组合特别可用于治疗雌激素受体阳性的肿瘤，例如乳房肿瘤。
这里所用的术语“抗雄激素药”指的是能抑制雄激素的生物学作用的任 何物质并且非限制性地包括比卡鲁胺(CASODEX)，其例如可以如US 4,636,505中所公开的那样来进行配制。
这里所用的术语“戈那瑞林激动剂”非限制性地包括阿巴瑞克、戈舍瑞 林和乙酸戈舍瑞林。戈舍瑞林在US 4,100,274中进行了公开并且例如可以 以其市售形式，例如以商标ZOLADEX进行市售的形式进行给药。阿巴瑞 克例如可以如US 5,843,901中所公开的那样来进行配制。
这里所用的术语“拓扑异构酶I抑制剂”非限制性地包括托泊替康、吉 马替康(gimatecan)、依立替康、喜树碱以及其类似物、9-硝基喜树碱和大 分子喜树碱轭合物PNU-166148(WO99/17804中的化合物A1)。依立替康 例如可以以其市售形式，例如以商标CAMPTOSAR进行市售的形式进行 给药。托泊替康例如可以以其市售形式，例如以商标HYCAMTIN进行市 售的形式进行给药。
这里所用的术语“拓扑异构酶II抑制剂”非限制性地包括蒽环类抗生素 如阿霉素(包括脂质体制剂，例如CAELYX)、柔红霉素、表柔比星、伊达 比星和奈莫柔比星、蒽醌类物质米托蒽醌和洛索蒽醌、以及鬼臼毒素木脂 素类(podophillotoxines)依托泊苷和替尼泊苷。依托泊苷例如可以以其市售 形式，例如以商标ETOPOPHOS进行市售的形式进行给药。替尼泊苷例 如可以以其市售形式，例如以商标VM 26-BRISTOL进行市售的形式进行 给药。阿霉素例如可以以其市售形式，例如以商标ADRIBLASTIN或 ADRIAMYCIN进行市售的形式进行给药。表柔比星例如可以以其市售形 式，例如以商标FARMORUBICIN进行市售的形式进行给药。伊达比星 例如可以以其市售形式，例如以商标ZAVEDOS进行市售的形式进行给药。 米托蒽醌例如可以以其市售形式，例如以商标NOVANTRON进行市售的 形式进行给药。
术语“微管活化剂”指的是微管稳定剂、微管去稳定剂和微管蛋白 (microtublin)聚合抑制剂，其非限制性地包括紫杉烷类，例如紫杉醇和多 西紫杉醇、长春花属生物碱，例如长春碱，尤其是硫酸长春碱、长春新碱， 尤其是硫酸长春新碱，和长春瑞滨、海绵内酯(discodermolides)、秋水仙碱 和埃坡霉素以及其衍生物，例如埃坡霉素B或其衍生物。紫杉醇例如可以 以其市售形式，例如TAXOL进行市售的形式进行给药。多西紫杉醇例如 可以以其市售形式，例如以商标TAXOTERE进行市售的形式进行给药。 硫酸长春碱例如可以以其市售形式，例如以商标VINBLASTIN R.P.进行市 售的形式进行给药。硫酸长春新碱例如可以以其市售形式，例如以商标 FARMISTIN进行市售的形式进行给药。海绵内酯例如可以如US 5,010,099 中所公开的那样来获得。还包括在WO 98/10121、US 6,194,181、WO 98/25929、WO 98/08849、WO 99/43653、WO 98/22461和WO 00/31247 中所公开的埃坡霉素衍生物。尤其优选的是埃坡霉素A和/或B。
这里所用的术语“烷化剂”非限制性地包括环磷酰胺、异环磷酰胺、美 法仑或亚硝基脲(BCNU或Gliadel)。环磷酰胺例如可以以其市售形式，例 如以商标CYCLOSTIN进行市售的形式进行给药。异环磷酰胺例如可以以 其市售形式，例如以商标HOLOXAN进行市售的形式进行给药。
术语“组蛋白脱乙酰基酶抑制剂”或“HDAC抑制剂”指的是抑制组蛋白 脱乙酰基酶并具有抗增殖活性的化合物。其包括在WO 02/22577中所公开 的化合物，尤其是N-羟基-3-[4-[[(2-羟基乙基)[2-(1H-吲哚-3-基)乙基]-氨基] 甲基]苯基]-2E-2-丙烯酰胺、N-羟基-3-[4-[[[2-(2-甲基-1H-吲哚-3-基)-乙基]- 氨基]甲基]苯基]-2E-2-丙烯酰胺以及其可药用的盐。其尤其是还包括辛二 酰基苯胺异羟肟酸(SAHA)。
术语“抗肿瘤抗代谢物”非限制性地包括5-氟尿嘧啶(5-FU)；卡培他滨； 吉西他滨；DNA脱甲基化剂，如5-氮杂胞啶和地西他滨；甲氨蝶呤；依达 曲沙；和叶酸拮抗剂如培美曲塞。卡培他滨例如可以以其市售形式，例如 以商标XELODA进行市售的形式进行给药。吉西他滨例如可以以其市售 形式，例如以商标GEMZAR进行市售的形式进行给药。还包括单克隆抗 体曲妥单抗，其例如可以以其市售形式，例如以商标HERCEPTIN进行市 售的形式进行给药。
这里所用的术语“铂化合物”非限制性地包括卡铂、顺铂(cis-platin)、 顺铂(cisplatinum)和奥沙利铂。卡铂例如可以以其市售形式，例如以商标 CARBOPLAT进行市售的形式进行给药。奥沙利铂例如可以以其市售形 式，例如以商标ELOXATIN进行市售的形式进行给药。
这里所用的术语“靶向/降低蛋白或脂质激酶活性的化合物和其它抗血 管生成化合物”非限制性地包括：蛋白酪氨酸激酶和/或丝氨酸和/或苏氨酸 激酶抑制剂或脂质激酶抑制剂，例如：
a)靶向、降低或抑制血小板衍生生长因子-受体(PDGFR)活性的化合 物，如靶向、降低或抑制PDGFR活性的化合物，尤其是抑制PDGF受体 的化合物，例如N-苯基-2-嘧啶-胺衍生物，例如伊马替尼(imatinib)、SU101、 SU6668、和GFB-111；
b)靶向、降低或抑制成纤维细胞生长因子-受体(FGFR)活性的化合物；
c)靶向、降低或抑制胰岛素样生长因子受体I(IGF-IR)活性的化合物， 尤其是抑制IGF-1R的化合物，如在WO 02/092599中所公开的化合物；
d)靶向、降低或抑制Trk受体酪氨酸激酶族活性的化合物；
e)靶向、降低或抑制Axl受体酪氨酸激酶族活性的化合物；
f)靶向、降低或抑制c-Met受体活性的化合物；
g)靶向、降低或抑制c-Kit受体酪氨酸激酶(PDGFR族的一部分)活性 的化合物，如靶向、降低或抑制c-Kit受体酪氨酸激酶族活性的化合物， 尤其是抑制c-Kit受体的化合物，例如伊马替尼；
h)靶向、降低或抑制c-Abl族成员以及其基因融合产物(例如BCR-Abl 激酶)活性的化合物，如靶向、降低或抑制c-Abl族成员以及其基因融合产 物活性的化合物，例如N-苯基-2-嘧啶-胺衍生物，例如伊马替尼；PD180970； AG957；NSC 680410；或得自ParkeDavis的PD173955；
i)靶向、降低或抑制蛋白激酶C(PKC)成员和丝氨酸/苏氨酸激酶的Raf 族、MEK、SRC、JAK、FAK、PDK和Ras/MAPK族成员、或PI(3)激 酶族、或与PI(3)-激酶有关的激酶族、和/或细胞周期蛋白-依赖性激酶族 (CDK)成员的活性的化合物并且尤其是在US 5,093,330中所公开的星形孢 碱衍生物，例如米哚妥林；其它化合物的实例包括例如UCN-01、沙芬戈、 BAY 43-9006、苔藓抑素1、哌立福辛；依莫福新；RO 318220和RO 320432； GO 6976；Isis 3521；LY333531/LY379196；异喹啉化合物如在WO 00/09495 中所公开的那些化合物；FTIs；PD184352或QAN697(一种P13K抑制剂)；
j)靶向、降低或抑制蛋白-酪氨酸激酶活性的化合物，如甲磺酸伊马替 尼(GLIVEC/GLEEVEC)或酪氨酸磷酸化抑制剂(tyrphostin)。酪氨酸磷酸 化抑制剂优选地是一种低分子量(Mr＜1500)化合物或其可药用的盐，尤其 是选自亚苄基丙二腈类或S-芳基苯丙二腈或双底物(bisubstrate)喹啉类化 合物，更尤其是任何选自Tyrphostin A23/RG-50810；AG 99；Tyrphostin AG 213；Tyrphostin AG 1748；Tyrphostin AG 490；Tyrphostin B44； Tyrphostin B44(+)对映异构体；Tyrphostin AG 555；AG 494；Tyrphostin AG 556、AG957和adaphostin(4-{[(2，5-二羟基苯基)甲基]氨基}-苯甲酸金 刚烷酯；NSC 680410，adaphostin)的化合物；和
k)靶向、降低或抑制受体酪氨酸激酶的表皮生长因子族(均-或杂二聚体 形式的EGFR、ErbB2、ErbB3、ErbB4)活性的化合物，如靶向、降低或 抑制表皮生长因子受体族活性的化合物、尤其是抑制EGF受体酪氨酸激酶 族成员，例如EGF受体、ErbB2、ErbB3和ErbB4或者和EGF或EGF 相关配体结合的化合物、蛋白或抗体，并且特别是在WO 97/02266中一般 和具体公开的这些化合物、蛋白或单克隆抗体，例如实施例39的化合物， 或者是在EP 0 564 409、WO 99/03854、EP 0520722、EP 0 566 226、EP 0 787 722、EP 0 837 063、US 5,747,498、WO 98/10767、WO 97/30034、WO 97/49688、WO 97/38983并且尤其是在WO 96/30347(例如被称为CP 358774的化合物)、WO 96/33980(例如化合物ZD 1839)和WO 95/03283(例 如化合物ZM105180)中所公开的化合物、蛋白或单克隆抗体；例如曲妥单 抗(HerpetinR)、西妥昔单抗、Iressa、依洛替尼(erlotinib)(TarcevaTM)、 CI-1033、EKB-569、GW-2016、E1.1、E2.4、E2.5、E6.2、E6.4、E2.11、 E6.3或E7.6.3，和在WO 03/013541中公开的7H-吡咯并-[2，3-d]嘧啶衍生 物。
其他抗血管生成的化合物包括其活性具有其他机理例如与蛋白或脂质 激酶的抑制无关的机理的化合物，例如沙利度胺(THALOMID)和 TNP-470。
靶向、降低或抑制蛋白或脂质磷酸酶活性的化合物有例如磷酸酶1、 磷酸酶2A、PTEN或CDC25的抑制剂，例如冈田酸或其衍生物。
诱导细胞分化过程的化合物有例如视黄酸、α-γ-或δ-生育酚或α-γ-或δ- 生育三烯酸。
这里所用的术语“环氧合酶抑制剂”非限制性地包括例如Cox-2抑制 剂、5-烷基取代的2-芳基氨基苯基乙酸和衍生物，如塞来考昔 (CELEBREX)、罗非考昔(VIOXX)、艾托考昔、伐地考昔或5-烷基-2-芳基 氨基苯基乙酸，例如5-甲基-2-(2′-氯-6′-氟苯氨基)苯基乙酸、鲁米考昔 (lumiracoxib)。
术语“mTOR抑制剂”指的是抑制哺乳动物雷帕霉素(mTOR)靶点并具 有抗增殖活性的化合物如西罗莫司()、依维莫司(CerticanTM)、 CCI-779和ABT578。
这里所用的术语“二膦酸盐”非限制性地包括依替膦酸(etridonic)、氯膦 酸、替鲁膦酸、帕米膦酸、阿仑膦酸、伊班膦酸、利塞膦酸和唑来膦酸。“依 替膦酸”例如可以以其市售形式，例如以商标DIDRONEL进行市售的形式 进行给药。“氯膦酸”例如可以以其市售形式，例如以商标BONEFOS进行 市售的形式进行给药。“替鲁膦酸”例如可以以其市售形式，例如以商标 SKELID进行市售的形式进行给药。“帕米膦酸”例如可以以其市售形式， 例如以商标AREDIATM进行市售的形式进行给药。“阿仑膦酸”例如可以以 其市售形式，例如以商标FOSAMAX进行市售的形式进行给药。“伊班膦 酸”例如可以以其市售形式，例如以商标BONDRANAT进行市售的形式进 行给药。“利塞膦酸”例如可以以其市售形式，例如以商标ACTONEL进行 市售的形式进行给药。“唑来膦酸”例如可以以其市售形式，例如以商标 ZOMETA进行市售的形式进行给药。
这里所用的术语“类肝素酶抑制剂”指的是靶向、降低或抑制硫酸肝素 降解的化合物。该术语非限制性地包括PI-88。
这里所用的术语“生物学响应改性剂”指的是淋巴因子或干扰素类物 质，例如干扰素γ。
这里所用的术语“Ras致癌同种型的抑制剂”，例如H-Ras、K-Ras、或 N-Ras指的是靶向、降低或抑制Ras的致癌活性的化合物例如“法尼基转移 酶抑制剂”例如L-744832、DK8G557或R115777(Zarnestra)。
这里所用的术语“端粒末端转移酶抑制剂”指的是靶向、降低或抑制端 粒末端转移酶活性的化合物。靶向、降低或抑制端粒末端转移酶活性的化 合物尤其是抑制端粒末端转移酶受体的化合物，例如特洛他汀 (telomestatin)。
这里所用的术语“蛋氨酸氨基肽酶抑制剂”指的是靶向、降低或抑制蛋 氨酸氨基肽酶活性的化合物。靶向、降低或抑制蛋氨酸氨基肽酶活性的化 合物例如是苯加米德(bengamide)或其衍生物。
这里所用的术语“蛋白酶体抑制剂”指的是靶向、降低或抑制蛋白酶体 活性的化合物。靶向、降低或抑制蛋白酶体活性的化合物包括例如PS-341 和MLN 341。
这里所用的术语“基质金属蛋白酶抑制剂”或(“MMP抑制剂”)非限制 性地包括胶原拟肽(peptidomimetic)和非拟肽(nonpeptidomimetic)抑制剂、 四环素衍生物，例如异羟肟酸盐拟肽(peptidomimetic)抑制剂巴马司他以及 其可口服利用的类似物马立马司他(BB-2516)、普啉司他(AG3340)、美他司 他(metastat)(NSC 683551)BMS-279251、BAY 12-9566、TAA211、 MMI270B或AAJ996。
这里所用的术语“血液学恶性肿瘤的治疗中所用的活性剂”非限制性地 包括FMS-样酪氨酸激酶抑制剂例如靶向、降低或抑制Flt-3活性的化合物； 干扰素、1-b-D-阿糖呋喃基胞嘧啶(ara-c)和双硫凡(bisulfan)；以及ALK抑 制剂例如靶向、降低或抑制间变性淋巴瘤激酶的化合物。
术语“靶向、降低或抑制Flt-3活性的化合物”尤其是抑制Flt-3的化合 物、蛋白或抗体，例如PKC412、米哚妥林、星形孢碱衍生物、SU11248 和MLN518。
这里所用的术语“HSP90抑制剂”非限制性地包括靶向、降低或抑制 HSP90的固有ATP酶活性的化合物；通过泛素蛋白酶体途径降解、靶向、 降低或抑制HSP90客户蛋白的化合物。靶向、降低或抑制HSP90的固有 ATP酶活性的化合物尤其是抑制HSP90的ATP酶活性的化合物、蛋白或 抗体例如17-烯丙基氨基、17-脱甲氧基格尔德霉素(17AAG)、格尔德霉素 衍生物；其他与格尔德霉素有关的化合物；根赤壳菌素和HDAC抑制剂。
这里所用的术语“抗增殖抗体”非限制性地包括曲妥单抗 (HerceptinTM)、曲妥单抗-DM1、贝伐单抗(AvastinTM)、利妥昔单抗 ()、PRO64553(抗-CD40)和2C4抗体。抗体指的是例如完整的单 克隆抗体、多克隆抗体、由至少2个完整的抗体形成的多特异性抗体、和 抗体片段，只要其表现出所需的生物学活性即可。
对于急性髓性白血病(AML)的治疗而言，可以将式I的化合物与标准 的白血病疗法联合使用，尤其是与用于治疗AML的治疗联用。式I的化 合物特别是可以与例如法尼基转移酶抑制剂和/或用于治疗AML的其它药 物如柔红霉素、多柔比星、Ara-C、VP-16、替尼泊苷、米托蒽醌、伊达比 星、碳铂和PKC412联合给药。
用代码、属名或商品名确定的活性剂的结构可以得自标准纲要“默克索 引(The Merck Index)”的现行版本或数据库，例如Patents International(例 如IMS World Publications)。
可以与式I的化合物联用的上述化合物可以如现有技术如上面所列举 的文献中所述的那样来进行制备和给药。
还可以有利地将式I的化合物与已知的治疗方法联用，例如可以将式 I的化合物与激素的给药或者尤其是辐射联用。
式I的化合物特别是可被用作放射致敏剂，尤其是可用于治疗对放疗 的敏感性差的肿瘤。
“联合”指位于一种剂量单位形式中的固定组合，或者用于联合给药的 药盒，其中式I的化合物和联合伴侣可以同时被独立地给药或者在尤其是 使得所说的组合伴侣表现出合作例如协同作用的时间间隔内分别给药或其 任何组合。
用下面的实施例来对本发明进行非限制性说明。
温度是以摄氏度为单位进行测量的。除非特别说明，否则该反应是在 室温下进行的。
TLC中的Rf值表示各物质移动的距离与洗脱剂前沿移动的距离之间 的比例。TLC的Rf值是在5×10cm TLC板(硅胶F254，Merck，Darmstadt， 德国)上测量的；在实施例中标记的溶剂系统如下：
＊10％甲醇/90％二氯甲烷(CH2Cl2)
＊＊5％甲醇/95％二氯甲烷
＊＊＊2％甲醇/98％二氯甲烷
100％甲醇
66％己烷/33％乙酸乙酯
除非特别说明，否则分析HPLC条件如下：
柱：Column Engineering，Inc.，Matrix，3μm C18 150×4.6mm(Lot#205) 用UV吸收在215和254nm下进行检测。柱温为35C并且保留时 间(tR)是以分钟为单位给出的。流速：1mL/min
梯度：水(0.1％TFA)/乙腈(0.1％TFA)＝98/2，1分钟，至100％乙腈(0.1％ TFA)，10分钟。在100％下停留2分钟(运行的总时间：13分钟)
缩写：
HPLC  高效液相色谱
Isolute International Solvent Technology Ltd.，U.K.生产的 HM-N
mL     毫升
min    分钟
MS-ES  电喷射质谱
Rf     TLC中的前沿比例
RT     室温
TFA    三氟乙酸
THF    四氢呋喃
TLC    薄层色谱
tR     保留时间
UV     紫外线
起始材料
苯胺构建块(下面用N-(3-氨基-4-甲基-苯基)-3-三氟甲基-苯甲酰胺举例说明) 合成的一般操作：

上图左侧所示的化合物N-(3-氨基-4-甲基-苯基)-3-三氟甲基-苯甲酰胺 是通过在室温下在甲醇中用阮内镍对相应的硝基化合物(N-(4-甲基-3-硝基- 苯基)-3-三氟甲基-苯甲酰胺)进行氢化获得的。以高产率获得该产物。该硝 基化合物中间体(A)-N-(3-硝基-4-甲基-苯基)-3-三氟甲基-苯甲酰胺是通 过将4-甲基-3-硝基-苯基胺(B)和3-三氟甲基-苯甲酰氯(C)在二氯甲烷中在 室温下并使用三乙胺进行反应获得的。以良好收率获得中间体(A)。
用适宜的相应起始材料，类似地合成下面实施例中所用的下面的N- 氨基-苯基-苯甲酰胺类化合物：
N-(3-氨基-4-甲基-苯基)-4-甲氧基-3-三氟甲基苯甲酰胺，
N-(3-氨基-4-甲基-苯基)-4-氟-3-三氟甲基苯甲酰胺，
N-(3-氨基-4-甲基-苯基)-3-氟-3-三氟甲基苯甲酰胺，
N-(3-氨基苯基)-3-三氟甲基苯甲酰胺，
N-(3-氨基-4-氯-苯基)-3-三氟甲基苯甲酰胺，
N-(3-氨基-4-甲基-苯基)-4-(4-甲基-哌嗪-1-基甲基)-3-三氟甲基-苯甲酰 胺。
根据相同的操作，但是使用相应的可通过商业途径获得的适宜化合物 来合成相应的反向3-氨基-苯甲酰胺衍生物。类似地合成下面的起始物质：
3-氨基-4-甲基-N-(3-三氟甲基苯基)-苯甲酰胺
3-氨基-N-(4-甲氧基-3-三氟甲基苯基)-4-甲基-苯甲酰胺
3-氨基-N-(3-三氟甲基苯基)-苯甲酰胺
3-氨基-4-氯-N-(3-三氟甲基苯基)-苯甲酰胺
实施例1：N-{4-甲基-3-[1-(4-吗啉-4-基-苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-基氨 基]-苯基}-3-三氟甲基-苯甲酰胺
将N-{3-[1-(4-溴-苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-基氨基]-4-甲基-苯 基}-3-三氟甲基-苯甲酰胺(100mg，0.14mmol)，吗啉(38μl，0.44mmol)和叔 -丁醇钾(92mg，0.79mmol)在氩气气氛下加入到5mL无水THF中。加入 钯催化剂氯化2-(二甲基氨基)-2-联苯基-钯(II)降冰片基(dinorbornyl)膦 复合体(15mg；0.026mmol；Fluka No.36037)并将该反应混合物在微波炉 中加热至120℃达20分钟。减压除去溶剂并将该粗品吸收到Isolute上。 将产物用自动柱色谱进行分离并将其在高真空泵下干燥，得到米白色固体 形式的标题化合物。HPLC：tR＝9.66分钟；MS-ES：(M+H)+＝574；TLC＊： Rf＝0.70
起始材料的制备如下：
步骤1.1：N-{3-[1-(4-溴-苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-基氨基]-4-甲基-苯 基}-3-三氟甲基-苯甲酰胺
将N-(3-氨基-4-甲基-苯基)-3-三氟甲基-苯甲酰胺(0.665g，2.26mmol) 和1-(4-溴-苯基)-4-氯-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶(1.0g，2.26mmol)在微波炉中 在10ml叔-丁醇中加热至150℃达20分钟。减压除去溶剂并将其吸收到 Isolute上。将产物用自动柱色谱进行分离并将其在高真空泵下干燥，得到 白色固体形式的标题化合物。HPLC：tR＝11.61分钟；MS-ES+：(M+H)+＝ 568；TLC＊：Rf＝0.75
步骤1.2：1-(4-溴-苯基)-4-氯-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶
将1-(4-溴-苯基)-1，5-二氢-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-酮(3.3g，11.5mmol)混 悬于三氯氧磷(21.7ml，230mmol)中。将该反应混合物回流3小时。在减压 下蒸发掉过量的三氯氧磷并将获得的产物在高真空泵下干燥。得到褐色固 体形式的标题化合物。HPLC：tR＝12.86分钟；MS-ES+：(M+H)+＝310
步骤1.3：1-(4-溴-苯基)-1，5-二氢-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-酮
将5-氨基-1-(4-溴-苯基)-1H-吡唑-4-甲酰胺(4g，14mmol)与甲酰胺 (19.3ml，484mmol)一起在170℃下加热2小时。将该反应混合物冷却至室 温，产物沉淀。将产物过滤，用水洗涤并将其在高真空泵下干燥。得到褐 色固体形式的标题化合物。HPLC：tR＝9.27分钟；MS-ES+：(M+H)+＝292
步骤1.4：5-氨基-1-(4-溴-苯基)-1H-吡唑-4-甲酰胺
将5-氨基-1-(4-溴-苯基)-1H-吡唑-4-甲腈(18.3g，69.8mmol)缓慢加入 到93ml浓硫酸(1680mmol)中，将温度保持在10-15℃。在完全加入起始 材料后，将该反应混合物搅拌1小时。其后，将该混合物倾倒到冰/水上并 将其pH调至8。通过过滤分离出所形成的沉淀并将其在高真空泵下干燥， 得到标题化合物。HPLC：tR＝7.91分钟；MS-ES+：(M+H)+＝282
步骤1.5：5-氨基-1-(4-溴-苯基)-1H-吡唑-4-甲腈
向混悬于乙醇中的盐酸4-溴苯肼(20g，89.5mmol)(Aldrich)中滴加三 乙胺(13.1ml，94mmol)。因为反应放热，所以分小份向该溶液中加入乙氧 基亚甲基丙二腈(11g，89.5mmol)(Aldrich)。通过过滤分离出沉淀的产物， 用乙醚洗涤并将其在高真空泵下干燥，得到标题化合物。HPLC：tR＝9.32 分钟；MS-ES+：(M+H)+＝264
实施例2：N-(4-甲基-3-{1-[4-(4-甲基-哌嗪-1-基)-苯基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧 啶-4-基氨基}-苯基)-3-三氟甲基-苯甲酰胺
使用与实施例1中的操作相同的操作，只是用N-甲基-哌嗪(Aldrich) 代替吗啉。将产物用自动柱色谱进行分离并将其在高真空泵下干燥。获得 白色固体形式的标题化合物。HPLC：tR＝7.99分钟；MS-ES：(M+H)+＝587； TLC＊：Rf＝0.38
实施例3：N-(3-{1-[4-(4-二乙基氨基-哌啶-1-基)-苯基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧 啶-4-基氨基}-4-甲基-苯基)-3-三氟甲基-苯甲酰胺
使用与实施例1中的操作相同的操作，只是用二乙基-哌啶-4-基-胺 (Fluorochem)代替吗啉。将产物用自动柱色谱进行分离并将其在高真空泵 下干燥。获得白色固体形式的标题化合物。HPLC：tR＝8.43分钟； MS-ES：(M+H)+＝643；TLC＊：Rf＝0.16
实施例4：N-{3-[1-(4-甲氧基-苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-基氨基]-4-甲基 -苯基}-3-三氟甲基-苯甲酰胺
使用实施例1步骤1.5至1.1所述的操作，只是在步骤1.5中使用盐酸 4-甲氧基苯肼(Aldrich)。在反应后，在减压下除去溶剂并将残余物用自动 柱色谱进行纯化。获得白色固体形式的标题化合物。HPLC：tR＝10.35分钟； MS-ES+：(M+H)+＝519；TLC＊＊：Rf＝0.21
实施例5：4-甲氧基-N-{3-[1-(4-甲氧基-苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-基氨 基]-4-甲基-苯基}-3-三氟甲基-苯甲酰胺
使用实施例1步骤1.1中所述的操作，只是在叔-丁醇中使用4-氯-1-(4- 甲氧基-苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶(与实施例1.5至1.1中所述类似地进行 制备，但是用盐酸4-甲氧基苯肼(Aldrich)代替盐酸4-溴苯肼)和N-(3-氨基 -4-甲基-苯基)-4-甲氧基-3-三氟甲基-苯甲酰胺。将产物用自动柱色谱进行分 离并将其在高真空泵下干燥。获得白色固体形式的标题化合物。HPLC：tR＝ 10.25分钟；MS-ES：(M+H)+＝549；TLC＊＊：Rf＝0.33
实施例6：4-氟-N-{3-[1-(4-甲氧基-苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-基氨基]-4- 甲基-苯基}-3-三氟甲基-苯甲酰胺
使用实施例1步骤1.1中所述的操作，只是在叔-丁醇中使用4-氯-1-(4- 甲氧基-苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶和N-(3-氨基-4-甲基-苯基)-4-氟-3-三氟 甲基-苯甲酰胺。将产物用自动柱色谱进行分离并将其在高真空泵下干燥。 获得白色固体形式的标题化合物。HPLC：tR＝10.49分钟；MS-ES：(M+H)+＝ 537；TLC＊：Rf＝0.50
实施例7：3-氟-N-{3-[1-(4-甲氧基-苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-基氨基]-4- 甲基-苯基}-5-三氟甲基-苯甲酰胺
使用实施例1步骤1.1中所述的操作，只是在叔-丁醇中使用4-氯-1-(4- 甲氧基-苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶和N-(3-氨基-4-甲基-苯基)-3-氟-5-三氟 甲基-苯甲酰胺。将产物用自动柱色谱进行分离并将其在高真空泵下干燥。 获得白色固体形式的标题化合物。HPLC：tR＝10.60分钟；MS-ES：(M+H)+＝ 537；TLC＊：Rf＝0.52
实施例8：N-{3-[1-(4-甲氧基-苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-基氨基]-苯 基}-3-三氟甲基-苯甲酰胺
使用实施例1步骤1.1中所述的操作，只是在叔-丁醇中使用4-氯-1-(4- 甲氧基-苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶和N-(3-氨基-苯基)-3-三氟甲基-苯甲酰 胺。将产物用自动柱色谱进行分离并将其在高真空泵下干燥。获得白色固 体形式的标题化合物。HPLC：tR＝10.71分钟；MS-ES：(M+H)+＝505； TLC＊：Rf＝0.50
实施例9：N-{4-氯-3-[1-(4-甲氧基-苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-基氨基]- 苯基}-3-三氟甲基-苯甲酰胺
使用实施例1步骤1.1中所述的操作，只是在叔-丁醇中使用4-氯-1-(4- 甲氧基-苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶和N-(3-氨基-4-氯-苯基)-3-三氟甲基-苯 甲酰胺。将产物用自动柱色谱进行分离并将其在高真空泵下干燥。获得白 色固体形式的标题化合物。HPLC：tR＝11.13分钟；MS-ES：(M+H)+＝539； TLC＊：Rf＝0.55
实施例10：N-{4-甲基-3-[1-(4-硝基-苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-基氨基]- 苯基}-3-三氟甲基-苯甲酰胺
使用实施例1步骤1.5至1.1中所述的操作，只是在步骤1.5中使用4- 硝基苯肼(Fluka)。在反应后，除去溶剂。将产物用自动柱色谱进行分离并 将其在高真空泵下干燥。获得白色固体形式的标题化合物。HPLC：tR＝11.39 分钟；MS-ES：(M+H)+＝534；TLC＊＊：Rf＝0.64
实施例11：N-{3-[1-(4-氨基-苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-基氨基]-4-甲基- 苯基}-3-三氟甲基-苯甲酰胺
将N-{4-甲基-3-[1-(4-硝基-苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-基氨基]-苯 基}-3-三氟甲基-苯甲酰胺(实施例10)在甲醇中在室温下用阮内镍作为催化 剂进行氢化。将该反应混合物过滤并在减压下除去溶剂。将产物在高真空 泵下干燥，得到米白色固体形式的标题化合物。HPLC：tR＝8.52分钟； MS-ES：(M+H)+＝504；TLC＊＊：Rf＝0.26
实施例12：三甲基-(4-{4-[2-甲基-5-(3-三氟甲基-苯甲酰基氨基)-苯基氨基]- 吡唑并[3，4-d]嘧啶-1-基}-苯基)-铵·2TFA
将N-{3-[1-(4-氨基-苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-基氨基]-4-甲基-苯 基}-3-三氟甲基-苯甲酰胺(实施例11)用碘甲烷在N，N-二甲基甲酰胺和三乙 胺中甲基化。将该反应在40℃下搅拌2小时并将其冷却至室温。将产物用 自动的反相色谱进行纯化，分离出相应的二-三氟乙酸盐形式的产物。获得 白色固体形式的标题化合物。HPLC：tR＝8.63分钟；MS-ES：(M-2TFA)+＝ 546
实施例13：3-[1-(4-甲氧基-苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-基氨基]-4-甲基 -N-(3-三氟甲基-苯基)-苯甲酰胺
使用实施例1步骤1.1中所述的操作，只是在叔-丁醇中使用4-氯-1-(4- 甲氧基-苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶和3-氨基-4-甲基-N-(3-三氟甲基-苯基)- 苯甲酰胺。将产物用自动柱色谱进行分离并将其在高真空泵下干燥。获得 白色固体形式的标题化合物。HPLC：tR＝10.63分钟；MS-ES：(M+H)+＝519； TLC＊＊：Rf＝0.42
实施例14：3-[1-(4-甲氧基-苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-基氨基]-N-(4-甲 氧基-3-三氟甲基-苯基)-4-甲基-苯甲酰胺
使用实施例1步骤1.1中所述的操作，只是在叔-丁醇中使用4-氯-1-(4- 甲氧基-苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶和3-氨基-N-(4-甲氧基-3-三氟甲基-苯 基)-4-甲基-苯甲酰胺。将产物用自动柱色谱进行分离并将其在高真空泵下 干燥。获得白色固体形式的标题化合物。HPLC：tR＝10.36分钟； MS-ES：(M+H)+＝549；TLC＊＊：Rf＝0.33
实施例15：3-[1-(4-甲氧基-苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-基氨基]-N-(3-三 氟甲基-苯基)-苯甲酰胺
使用实施例1步骤1.1中所述的操作，只是在叔-丁醇中使用4-氯-1-(4- 甲氧基-苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶和3-氨基-N-(3-三氟甲基-苯基)-苯甲酰 胺。将产物用自动柱色谱进行分离并将其在高真空泵下干燥。获得白色固 体形式的标题化合物。HPLC：tR＝11.23分钟；MS-ES：(M+H)+＝505； TLC＊：Rf＝0.67
实施例16：4-氯-3-[1-(4-甲氧基-苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-基氨 基]-N-(3-三氟甲基-苯基)-苯甲酰胺
使用实施例1步骤1.1中所述的操作，只是在叔-丁醇中使用4-氯-1-(4- 甲氧基-苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶和3-氨基-4-氯-N-(3-三氟甲基-苯基)-苯 甲酰胺。将产物用自动柱色谱进行分离并将其在高真空泵下干燥。获得白 色固体形式的标题化合物。HPLC：tR＝11.47分钟；MS-ES：(M+H)+＝539； TLC＊：Rf＝0.78
实施例17：N-[4-甲基-3-(1-甲基-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-基氨基)-苯基]-3- 三氟甲基-苯甲酰胺
使用实施例1步骤1.5至1.1中所述的操作，只是在步骤1.5中用盐酸 甲基肼(Aldrich)代替盐酸4-溴苯肼。获得白色固体形式的标题化合物。 HPLC：tR＝8.87分钟；MS-ES+：(M+H)+＝427；TLC＊＊：Rf＝0.26
实施例18：4-甲氧基-N-[4-甲基-3-(1-甲基-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-基氨基)- 苯基]-3-三氟甲基-苯甲酰胺
使用实施例1步骤1.1中所述的操作，只是在叔-丁醇中使用4-氯-1- 甲基-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶和N-(3-氨基-4-甲基-苯基)-4-甲氧基-3-三氟甲 基-苯甲酰胺。将产物用自动柱色谱进行分离并将其在高真空泵下干燥。获 得白色固体形式的标题化合物。HPLC：tR＝8.88分钟；MS-ES：(M+H)+＝ 457；TLC＊＊：Rf＝0.24
实施例19：4-甲基-3-(1-甲基-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-基氨基)-N-(3-三氟甲 基-苯基)-苯甲酰胺
使用实施例1步骤1.1中所述的操作，只是在叔-丁醇中使用4-氯-1- 甲基-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶和3-氨基-4-甲基-N-(3-三氟甲基-苯基)-苯甲酰 胺。将产物用自动柱色谱进行分离并将其在高真空泵下干燥。获得白色固 体形式的标题化合物。HPLC：tR＝9.09分钟；MS-ES：(M+H)+＝427； TLC＊＊：Rf＝0.26
实施例20：N-(4-甲氧基-3-三氟甲基-苯基)-4-甲基-3-(1-甲基-1H-吡唑并 [3，4-d]嘧啶-4-基氨基)-苯甲酰胺
使用实施例1步骤1.1中所述的操作，只是在叔-丁醇中使用4-氯-1- 甲基-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶和3-氨基-N-(4-甲氧基-3-三氟甲基-苯基)-4-甲 基-苯甲酰胺。将产物用自动柱色谱进行分离并将其在高真空泵下干燥。获 得白色固体形式的标题化合物。HPLC：tR＝8.93分钟；MS-ES：(M+H)+＝ 457；TLC＊＊：Rf＝0.23
实施例21：N-[4-甲基-3-(1-甲基-6-吡啶-3-基-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-基氨 基)-苯基]-3-三氟甲基-苯甲酰胺
使用实施例1步骤1.5至1.1中所述的操作，只是在步骤1.5中用盐酸 甲基肼代替盐酸4-溴苯肼并在步骤1.3中用烟酸(吡啶-3-甲酸；Aldrich)代 替甲酰胺在聚磷酸(PPA)中加热至180℃达2小时，然后，将该反应用水淬 熄，将形成的沉淀洗涤并通过过滤对其进行分离。
根据实施例1步的骤1.1，在叔-丁醇中使用由此获得的4-氯-1-甲基-6- 吡啶-3-基-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶和N-(3-氨基-4-甲基-苯基)-3-三氟甲基-苯 甲酰胺。将产物用自动柱色谱进行分离并将其在高真空泵下干燥。获得白 色固体形式的标题化合物。HPLC：tR＝9.17分钟；MS-ES+：(M+H)+＝504； TLC＊＊：Rf＝0.22
实施例22：4-甲氧基-N-[4-甲基-3-(1-甲基-6-吡啶-3-基-1H-吡唑并[3，4-d]嘧 啶-4-基氨基)-苯基]-3-三氟甲基-苯甲酰胺
使用实施例1步骤1.1中所述的操作，只是在叔-丁醇中使用4-氯-1- 甲基-6-吡啶-3-基-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶和N-(3-氨基-4-甲基-苯基)-4-甲氧 基-3-三氟甲基-苯甲酰胺。将产物用自动柱色谱进行分离并将其在高真空泵 下干燥。获得白色固体形式的标题化合物。HPLC：tR＝9.18分钟； MS-ES+：(M+H)+＝534；TLC＊＊：Rf＝0.39
实施例23：4-甲基-3-(1-甲基-6-吡啶-3-基-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-基氨 基)-N-(3-三氟甲基-苯基)-苯甲酰胺
使用实施例1步骤1.1中所述的操作，只是在叔-丁醇中使用4-氯-1- 甲基-6-吡啶-3-基-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶和3-氨基-4-甲基-N-(3-三氟甲基-苯 基)-苯甲酰胺。将产物用自动柱色谱进行分离并将其在高真空泵下干燥。 获得白色固体形式的标题化合物。HPLC：tR＝9.29分钟；MS-ES+：(M+H)+ ＝504；TLC＊＊：Rf＝0.22
实施例24：N-{4-甲基-3-[1-甲基-6-(1-甲基-哌啶-4-基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧 啶-4-基氨基]-苯基}-3-三氟甲基-苯甲酰胺
使用实施例1步骤1.5至1.1中所述的操作，只是在步骤1.5中使用盐 酸甲基肼并在步骤1.3中用N-甲基哌啶-4-甲酸盐酸盐(ABCR)代替甲酰胺 在聚磷酸(PPA)中加热至180℃达2小时。将该反应用水淬熄，将所形成的 沉淀洗涤并通过过滤对其进行分离。根据实施例1的步骤1.1，在叔-丁醇 中使用获得的4-氯-1-甲基-6-(1-甲基-哌啶-4-基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶和 N-(3-氨基-4-甲基-苯基)-3-三氟甲基-苯甲酰胺。将产物用自动柱色谱进行分 离并将其在高真空泵下干燥。获得白色固体形式的标题化合物。HPLC：tR＝ 8.38分钟；MS-ES+：(M+H)+＝524；TLC＊：Rf＝0.06
实施例25：4-甲氧基-N-{4-甲基-3-[1-甲基-6-(1-甲基-哌啶-4-基)-1H-吡唑并 [3，4-d]嘧啶-4-基氨基]-苯基}-3-三氟甲基-苯甲酰胺
使用实施例1步骤1.1中所述的操作，但是在叔-丁醇中使用4-氯-1- 甲基-6-(1-甲基-哌啶-4-基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶和N-(3-氨基-4-甲基-苯 基)-4-甲氧基-3-三氟甲基-苯甲酰胺。将产物用自动柱色谱进行分离并将其 在高真空泵下干燥。获得白色固体形式的标题化合物。HPLC：tR＝8.37分 钟；MS-ES+：(M+H)+＝554；TLC＊：Rf＝0.07
实施例26：N-(4-甲氧基-3-三氟甲基-苯基)-4-甲基-3-[1-甲基-6-(1-甲基-哌啶 -4-基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-基氨基]-苯甲酰胺
使用实施例1步骤1.1中所述的操作，但是在叔-丁醇中使用4-氯-1-甲 基-6-(1-甲基-哌啶-4-基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶和3-氨基-N-(4-甲氧基-3-三 氟甲基-苯基)-4-甲基-苯甲酰胺。将产物用自动柱色谱进行分离并将其在高 真空泵下干燥。获得白色固体形式的标题化合物。HPLC：tR＝8.44分钟； MS-ES+：(M+H)+＝554；TLC＊：Rf＝0.06
实施例27：N-[4-甲基-3-(1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-基氨基)-苯基]-3-三氟甲 基-苯甲酰胺
将4-氯-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶(0.60g，3.9mmol)和N-(3-氨基-4-甲基- 苯基)-3-三氟甲基-苯甲酰胺(0.92g，3.9mmol)在叔-丁醇中在微波炉中加热 至150℃达20分钟。将该反应冷却并在减压下除去溶剂。将产物用自动柱 色谱纯化并将其在高真空泵下干燥。获得白色固体形式的标题化合物。 HPLC：tR＝8.38分钟；MS-ES+：(M+H)+＝413；TLC＊＊：Rf＝0.22
起始材料的制备如下：
步骤27.1：4-氯-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶
产物是根据已知文献的操作(Jyh-Haur Chern，Kak-Shan Shia， Tsu-An Hsu，Chia-Liang Tai，Chung-Chi Lee，Yen-Chun Lee，Chih-Shiang Chang，Sung-Nien Tseng和Shin-Ru Shih；Bioorg.and Med.Chem.Lett. 14(2004)2519和R.K.Robins；J.Am Chem.Soc.1956，78，784)由可商业获 得的别嘌呤醇合成的。
实施例28：N-{3-[1-(2-二乙基氨基-乙基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-基氨 基]-4-甲基-苯基}-3-三氟甲基-苯甲酰胺
将N-[4-甲基-3-(1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-基氨基)-苯基]-3-三氟甲基-苯 甲酰胺(100mg，0.242mmol)、(2-溴-乙基)-二乙基胺氢溴化物(Aldrich)(71 mg，0.388mol)和碳酸铯(279mg，0.848mmol)在N，N-二甲基甲酰胺中在微 波炉中加热至150℃达20分钟。将该反应冷却并用水淬熄。将产物用乙酸 乙酯萃取并用自动柱色谱进行纯化。获得白色固体形式的标题化合物。 HPLC：tR＝8.24分钟；MS-ES+：(M+H)+＝512；TLC＊：Rf＝0.38
实施例29：N-(4-甲基-3-{1-[3-(4-甲基-哌嗪-1-基)-丙基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧 啶-4-基氨基}-苯基)-3-三氟甲基-苯甲酰胺
使用实施例28中所述的操作，但是用1-(3-氯-丙基)-4-甲基-哌嗪盐酸 盐(Alfa)代替(2-溴-乙基)-二乙基胺氢溴化物。将产物用自动柱色谱进行纯 化并将其在高真空泵下干燥。获得白色固体形式的标题化合物。HPLC：tR＝ 7.53分钟；MS-ES+：(M+H)+＝553；TLC＊：Rf＝0.25
实施例30：N-(4-甲基-3-{1-[2-(4-甲基-哌嗪-1-基)-乙基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧 啶-4-基氨基}-苯基)-3-三氟甲基-苯甲酰胺
使用实施例28中所述的操作，但是用1-(2-氯-乙基)-4-甲基-哌嗪盐酸 盐(根据文献操作合成，见G.Caliendo等人，Eur.J.Med.Chem.30， 77-84(1995))代替(2-溴-乙基)-二乙基胺氢溴化物。将产物用自动柱色谱进行 纯化并将其在高真空泵下干燥。获得白色固体形式的标题化合物。HPLC：tR ＝7.74分钟；MS-ES+：(M+H)+＝539；TLC＊：Rf＝0.28.
实施例31：N-{4-甲基-3-[1-(2-哌啶-1-基-乙基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-基 氨基]-苯基}-3-三氟甲基-苯甲酰胺
使用实施例28中所述的操作，但是用1-(2-氯-乙基)-哌啶盐酸盐 (Aldrich)代替(2-溴-乙基)-二乙基胺氢溴化物。将产物用自动柱色谱进行纯 化并将其在高真空泵下干燥。获得白色固体形式的标题化合物。HPLC：tR＝ 8.32分钟；MS-ES+：(M+H)+＝524；TLC＊：Rf＝0.43
实施例32：N-{4-甲基-3-[1-(2-吡咯烷-1-基-乙基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4- 基氨基]-苯基}-3-三氟甲基-苯甲酰胺
使用实施例28中所述的操作，但是用1-(2-氯-乙基)-吡咯烷盐酸盐 (Aldrich)代替(2-溴-乙基)-二乙基胺氢溴化物。将产物用自动柱色谱进行纯 化并将其在高真空泵下干燥。获得白色固体形式的标题化合物。HPLC：tR＝ 8.10分钟；MS-ES+：(M+H)+＝510；TLC＊：Rf＝0.20
实施例33：N-{3-[1-(2-二甲基氨基-乙基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-基氨 基]-4-甲基-苯基}-3-三氟甲基-苯甲酰胺
使用实施例28中所述的操作，但是用(2-氯-乙基)-二甲基-胺盐酸盐 (Fluka)代替(2-溴-乙基)-二乙基胺氢溴化物。将产物用自动柱色谱进行纯化 并将其在高真空泵下干燥。获得白色固体形式的标题化合物。HPLC：tR＝ 7.94分钟；MS-ES+：(M+H)+＝484；TLC＊：Rf＝0.26
实施例34：4-甲基-3-(1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-基氨基)-N-(3-三氟甲基-苯 基)-苯甲酰胺
使用实施例27中所述的操作，但是用3-氨基-4-甲基-N-(3-三氟甲基- 苯基)-苯甲酰胺代替N-(3-氨基-4-甲基-苯基)-3-三氟甲基-苯甲酰胺。将产物 用自动柱色谱进行纯化并将其在高真空泵下干燥。获得白色固体形式的标 题化合物。HPLC：tR＝8.54分钟；MS-ES+：(M+H)+＝413；TLC＊＊：Rf＝0.30
实施例35：3-[1-(2-二乙基氨基-乙基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-基氨基]-4-甲 基-N-(3-三氟甲基-苯基)-苯甲酰胺
将4-甲基-3-(1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-基氨基)-N-(3-三氟甲基-苯基)-苯 甲酰胺(100mg，0.242mmol)、(2-溴-乙基)-二乙基胺氢溴化物(Aldrich)(71 mg，0.388mol)和碳酸铯(279mg，0.848mmol)在N，N-二甲基甲酰胺中在微 波炉中加热至150℃达20分钟。将该反应冷却并用水淬熄。将产物用乙酸 乙酯萃取并用自动柱色谱进行纯化。获得白色固体形式的标题化合物。 HPLC：tR＝8.57分钟；MS-ES+：(M+H)+＝512；TLC＊：Rf＝0.27
实施例36：4-甲基-3-{1-[3-(4-甲基-哌嗪-1-基)-丙基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶 -4-基氨基}-N-(3-三氟甲基-苯基)-苯甲酰胺
使用实施例35中所述的操作，但是用1-(3-氯-丙基)-4-甲基-哌嗪盐酸 盐(Alfa)代替(2-溴-乙基)-二乙基胺氢溴化物。将产物用自动柱色谱进行纯 化并将其在高真空泵下干燥。获得白色固体形式的标题化合物。HPLC：tR＝ 7.83分钟；MS-ES+：(M+H)+＝553；TLC＊：Rf＝0.06
实施例37：4-甲基-3-{1-[2-(4-甲基-哌嗪-1-基)-乙基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶 -4-基氨基}-N-(3-三氟甲基-苯基)-苯甲酰胺
使用实施例35中所述的操作，但是用1-(2-氯-乙基)-4-甲基-哌嗪盐酸 盐(根据文献操作合成，见G.Caliendo等人，Eur.J.Med.Chem.30， 77-84(1995))代替(2-溴-乙基)-二乙基胺氢溴化物。将产物用自动柱色谱进行 纯化并将其在高真空泵下干燥。获得白色固体形式的标题化合物。HPLC：tR ＝8.00分钟；MS-ES+：(M+H)+＝539；TLC＊：Rf＝0.14。
实施例38：4-甲基-3-[1-(2-吡咯烷-1-基-乙基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-基氨 基]-N-(3-三氟甲基-苯基)-苯甲酰胺
使用实施例35中所述的操作，但是用1-(2-氯-乙基)-吡咯烷盐酸盐 (Aldrich)代替(2-溴-乙基)-二乙基胺氢溴化物。将产物用自动柱色谱进行纯 化并将其在高真空泵下干燥。获得白色固体形式的标题化合物。HPLC：tR＝ 8.44分钟；MS-ES+：(M+H)+＝510；TLC＊：Rf＝0.24
实施例39：3-[1-(2-二甲基氨基-乙基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-基氨基]-4-甲 基-N-(3-三氟甲基-苯基)-苯甲酰胺
使用实施例35中所述的操作，但是用(2-氯-乙基)-二甲基-胺盐酸盐 (Fluka)代替(2-溴-乙基)-二乙基胺氢溴化物。将产物用自动柱色谱进行纯化 并将其在高真空泵下干燥。获得白色固体形式的标题化合物。HPLC：tR＝ 8.29分钟；MS-ES+：(M+H)+＝484；TLC＊：Rf＝0.17
实施例40：N-{3-[1-(4-甲氧基-苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-基氨基]-4-甲 基-苯基}-2-三氟甲基-异烟酰胺
使用实施例1步骤1.1中所述的操作，只是在叔-丁醇中使用4-氯-1-(4- 甲氧基-苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶和N-(3-氨基-4-甲基-苯基)-2-三氟甲基- 异烟酰胺。将产物用自动柱色谱进行分离并将其在高真空泵下干燥。获得 白色固体形式的标题化合物。HPLC：tR＝9.77分钟；MS-ES：(M+H)+＝520； TLC＊：Rf＝0.50
实施例41：N-[4-甲基-3-(1-甲基-6-吡啶-4-基-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-基氨 基)-苯基]-3-三氟甲基-苯甲酰胺
使用实施例1步骤1.5至1.1中所述的操作，只是在步骤1.5中用盐酸 甲基肼代替盐酸4-溴苯肼并在步骤1.3中用异烟酸(吡啶-4-甲酸；Aldrich) 代替甲酰胺在聚磷酸(PPA)中加热至180℃达2小时，然后将该反应用水淬 熄，将所形成的沉淀洗涤并通过过滤对其进行分离。
根据实施例1的步骤1.1，在叔-丁醇中使用由此获得的4-氯-1-甲基-6- 吡啶-4-基-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶和N-(3-氨基-4-甲基-苯基)-3-三氟甲基-苯 甲酰胺。将产物用自动柱色谱进行分离并将其在高真空泵下干燥。获得白 色固体形式的标题化合物。HPLC：tR＝9.27分钟；MS-ES+：(M+H)+＝504； TLC＊：Rf＝0.46
实施例42：4-甲基-3-(1-甲基-6-吡啶-4-基-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-基氨 基)-N-(3-三氟甲基-苯基)-苯甲酰胺
使用实施例1步骤1.1中所述的操作，但是在叔-丁醇中使用4-氯-1- 甲基-6-吡啶-4-基-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶和3-氨基-4-甲基-N-(3-三氟甲基-苯 基)-苯甲酰胺。将产物用自动柱色谱进行分离并将其在高真空泵下干燥。 获得白色固体形式的标题化合物。HPLC：tR＝9.18分钟；MS-ES+：(M+H)+ ＝504；TLC＊：Rf＝0.47
实施例43：N-{4-氯-3-[1-(2-二乙基氨基-乙基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-基氨 基]-苯基}-3-三氟甲基-苯甲酰胺
将N-[4-氯-3-(1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-基氨基)-苯基]-3-三氟甲基-苯甲 酰胺(80mg，0.185mmol)、(2-溴-乙基)-二乙基胺氢溴化物(Aldrich)(32mg， 0.185mol)和碳酸铯(213mg，0.65mmol)在N，N-二甲基甲酰胺中在微波炉 中加热至150℃达20分钟。将该反应冷却并用水淬熄。将产物用乙酸乙酯 萃取并用自动柱色谱进行纯化。获得白色固体形式的标题化合物。HPLC：tR ＝8.76分钟；MS-ES+：(M+H)+＝532；TLC＊：Rf＝0.27
步骤43.1：N-[4-氯-3-(1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-基氨基)-苯基]-3-三氟甲基- 苯甲酰胺
将4-氯-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶(300mg，1.94mmol)和N-(3-氨基-4-氯- 苯基)-3-三氟甲基-苯甲酰胺(458mg，1.5mmol)在叔-丁醇中在微波炉中加 热至150℃达20分钟。将该反应冷却并在减压下除去溶剂。将产物用自动 柱色谱进行纯化并将其在高真空泵下干燥。获得白色固体形式的标题化合 物。HPLC：tR＝8.65分钟；MS-ES+：(M+H)+＝433；TLC＊＊：Rf＝0.10
实施例44：4-氯-3-[1-(2-二乙基氨基-乙基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-基氨 基]-N-(3-三氟甲基-苯基)-苯甲酰胺
将4-氯-3-(1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-基氨基)-N-(3-三氟甲基-苯基)-苯甲 酰胺(80mg，0.185mmol)、(2-溴-乙基)-二乙基胺氢溴化物(Aldrich)(32mg， 0.185mol)和碳酸铯(213mg，0.65mmol)在N，N-二甲基甲酰胺中在微波炉 中加热至150℃达20分钟。将该反应冷却并用水淬熄。将产物用乙酸乙酯 萃取并用自动柱色谱进行纯化。获得白色固体形式的标题化合物。HPLC：tR ＝8.98分钟；MS-ES+：(M+H)+＝532；TLC＊：Rf＝0.28
步骤44.1：4-氯-3-(1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-基氨基)-N-(3-三氟甲基-苯基)- 苯甲酰胺
将4-氯-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶(300mg，1.94mmol)和3-氨基-4-氯-N-(3- 三氟甲基-苯基)-苯甲酰胺(458mg，1.5mmol)在叔-丁醇中在微波炉中加热 至150℃达20分钟。将该反应冷却并在减压下除去溶剂。将产物用自动柱 色谱进行纯化并将其在高真空泵下干燥。获得白色固体形式的标题化合物。 HPLC：tR＝8.84分钟；MS-ES+：(M+H)+＝433；TLC＊＊：Rf＝0.14
实施例45：N-[4-甲基-3-(1-甲基-6-吡嗪-2-基-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-基氨 基)-苯基]-3-三氟甲基-苯甲酰胺
使用实施例1步骤1.5至1.1中所述的操作，只是在步骤1.5中，用盐 酸甲基肼代替盐酸4-溴苯肼并在步骤1.3中用吡嗪-2-甲酸(Aldrich)代替甲 酰胺在聚磷酸(PPA)中加热至180℃达2小时，然后将该反应用水淬熄，将 所形成的沉淀洗涤并通过过滤对其进行分离。
根据实施例1的步骤1.1，在叔-丁醇中使用由此获得的4-氯-1-甲基-6- 吡嗪-2-基-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶和N-(3-氨基-4-甲基-苯基)-3-三氟甲基-苯 甲酰胺。将产物用自动柱色谱进行分离并将其在高真空泵下干燥。获得白 色固体形式的标题化合物。HPLC：tR＝9.68分钟；MS-ES+：(M+H)+＝505； TLC＊：Rf＝0.37
实施例46：4-甲基-3-(1-甲基-6-吡嗪-2-基-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-基氨 基)-N-(3-三氟甲基-苯基)-苯甲酰胺
使用实施例1步骤1.1中所述的操作，但是在叔-丁醇中使用4-氯-1- 甲基-6-吡嗪-2-基-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶和3-氨基-4-甲基-N-(3-三氟甲基-苯 基)-苯甲酰胺。将产物用自动柱色谱进行分离并将其在高真空泵下干燥。 获得白色固体形式的标题化合物。HPLC：tR＝9.95分钟；MS-ES+：(M+H)+ ＝505；TLC＊：Rf＝0.44
实施例47：N-{3-[1-(4-羟基-苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-基氨基]-4-甲基- 苯基}-3-三氟甲基-苯甲酰胺
将N-{3-[1-(4-甲氧基-苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-基氨基]-4-甲基- 苯基}-3-三氟甲基-苯甲酰胺(实施例4)去甲基化。将产物用自动柱色谱进行 分离并将其在高真空泵下干燥。获得白色固体形式的标题化合物。HPLC：tR ＝9.51分钟；MS-ES+：(M+H)+＝505；TLC＊＊：Rf＝0.16
实施例48：N-{3-[1-(2-羟基-乙基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-基氨基]-4-甲基- 苯基}-3-三氟甲基-苯甲酰胺
使用实施例28中所述的操作，但是用2-溴乙醇(Fluka)代替(2-溴-乙基)- 二乙基胺氢溴化物。将产物用自动柱色谱进行纯化并将其在高真空泵下干 燥。获得白色固体形式的标题化合物。HPLC：tR＝8.71分钟； MS-ES+：(M+H)+＝457；TLC＊＊：Rf＝0.18
实施例49：3-[1-(2-羟基-乙基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-基氨基]-4-甲基 -N-(3-三氟甲基-苯基)-苯甲酰胺
使用实施例35中所述的操作，但是用2-溴乙醇(Fluka)代替(2-溴-乙基)- 二乙基胺氢溴化物。将产物用自动柱色谱进行纯化并将其在高真空泵下干 燥。获得白色固体形式的标题化合物。HPLC：tR＝8.75分钟； MS-ES+：(M+H)+＝457；TLC＊＊＊：Rf＝0.29
实施例50；N-[4-甲基-3-(1-甲基-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-基氨基)-苯 基]-4-(4-甲基-哌嗪-1-基甲基)-3-三氟甲基-苯甲酰胺
使用实施例1步骤1.1中所述的操作，只是在叔-丁醇中使用4-氯-1- 甲基-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶和N-(3-氨基-4-甲基-苯基)-4-(4-甲基-哌嗪-1-基 甲基)-3-三氟甲基-苯甲酰胺。将产物用自动柱色谱进行分离并将其在高真 空泵下干燥。获得白色固体形式的标题化合物。HPLC：tR＝7.55分钟； MS-ES：(M+H)+＝539；TLC＊＊：Rf＝0.09
实施例51：1-甲基-4-[2-甲基-5-(3-三氟甲基-苯基氨基甲酰基)-苯基氨 基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-6-甲酸乙酯
使用实施例1步骤1.1中所述的操作，只是在叔-丁醇中使用4-氯-1- 甲基-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-6-甲酸乙酯和3-氨基-4-甲基-N-(3-三氟甲基-苯 基)-苯甲酰胺。将产物用自动柱色谱进行分离并将其在高真空泵下干燥。 获得白色固体形式的标题化合物。HPLC：tR＝10.52分钟；MS-ES：(M+H)+＝ 499
起始材料的制备如下：
步骤51.1：4-氯-1-甲基-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-6-甲酸乙酯
将1-甲基-4-氧代-4，5-二氢-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-6-甲酸乙酯(0.3g， 1.35mmol)混悬于三氯氧磷(3.0ml)中。将该反应混合物回流3小时。在减 压下蒸发掉过量的三氯氧磷并将获得的产物在高真空泵下干燥。将标题化 合物直接用于下一步。
步骤51.2：1-甲基-4-氧代-4，5-二氢-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-6-甲酸乙酯
将1-甲基-4-氧代-1，4-二氢-吡唑并[3，4-d][1，3]噁嗪-6-甲酸乙酯(6.52g， 29.2mmol)、醋酸铵(2.48g，32.1mmol)(Merck)和乙酸(0.88g，14.6 mmol)(Fluka)在100ml乙醇中加热至回流达小时。将该混合物倾倒到冰水 中并通过过滤分离出所形成的沉淀，将其在高真空泵下干燥，得到标题化 合物。HPLC：tR＝6.47分钟；MS-ES+：(M+H)+＝223
步骤51.3：1-甲基-4-氧代-1，4-二氢-吡唑并[3，4-d][1，3]噁嗪-6-甲酸乙酯
将5-氨基-1-甲基-1H-吡唑-4-甲酸(5.0g，35.4mmol)溶解于25ml无水 吡啶中并将其冷却至0℃。滴加乙基草酰氯(8.1ml，72.6mmol)并将该反应 在室温下搅拌1小时。将该反应用冰和水淬熄并通过过滤分离出所形成的 沉淀。将白色固体用2-丙醇重结晶。将该粗品直接用于下一步。HPLC：tR＝ 7.12分钟；MS-ES+：(M+H)+＝224
步骤51.4：5-氨基-1-甲基-1H-吡唑-4-甲酸
将5-氨基-1-甲基-1H-吡唑-4-甲酸乙酯(16.4g，97mmol)和97ml 2M NaOH水溶液(194mmol)在100ml乙醇中回流5小时。将其pH调至4-5， 通过过滤分离出所形成的沉淀并将其在高真空泵下干燥，得到标题化合物。 HPLC：tR＝4.65分钟；MS-ES+：(M+H)+＝142
步骤51.5：5-氨基-1-甲基-1H-吡唑-4-甲酸乙酯
向甲基肼(7.6ml，142mmol)(Aldrich)在乙醇中的溶液中滴加三乙胺 (20ml，142mmol)。将该溶液冷却至0℃并分小份加入乙氧基亚甲基丙二 腈乙基酯(24.0g，142mmol)(Fluka)，然后将该反应在室温下搅拌18小时。 在减压下除去乙醇，将获得的固体用乙醚洗涤并将其在高真空泵下干燥， 得到标题化合物。HPLC：tR＝6.87分钟；MS-ES+：(M+H)+＝170
实施例52：1-甲基-4-[2-甲基-5-(3-三氟甲基-苯基氨基甲酰基)-苯基氨 基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-6-甲酰胺
将1-甲基-4-[2-甲基-5-(3-三氟甲基-苯基氨基甲酰基)-苯基氨基]-1H-吡 唑并[3，4-d]嘧啶-6-甲酸乙酯(50mg，0.1mmol)(实施例51)在微波炉中与过 量NH3一起在甲醇中加热至100℃达15分钟。将产物用自动柱色谱进行分 离并将其在高真空泵下干燥。获得白色固体形式的标题化合物。HPLC：tR＝ 9.70分钟；MS-ES：(M+H)+＝470
实施例53：1-甲基-4-[2-甲基-5-(3-三氟甲基-苯基氨基甲酰基)-苯基氨 基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-6-甲酸甲基酰胺
使用实施例52中所述的操作，只是使用甲胺的水溶液(40％的溶液)。 将产物用自动柱色谱进行分离并将其在高真空泵下干燥。获得白色固体形 式的标题化合物。HPLC：tR＝10.05分钟；MS-ES：(M+H)+＝484
实施例54：4-甲基-3-[1-甲基-6-(4-甲基-哌嗪-1-羰基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶 -4-基氨基]-N-(3-三氟甲基-苯基)-苯甲酰胺
使用实施例52中所述的操作，只是使用N-甲基-哌嗪(Fluka)。将产物 用自动柱色谱进行分离并将其在高真空泵下干燥。获得白色固体形式的标 题化合物。HPLC：tR＝8.56分钟；MS-ES：(M+H)+＝553；TLC＊：Rf＝0.26
实施例55：1-甲基-4-[2-甲基-5-(3-三氟甲基-苯基氨基甲酰基)-苯基氨 基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-6-甲酸(2-二甲基氨基-乙基)-酰胺
使用实施例52中所述的操作，只是使用N，N-二甲基-乙烷-1，2-二胺 (Fluka)。将产物用自动柱色谱进行分离并将其在高真空泵下干燥。获得白 色固体形式的标题化合物。HPLC：tR＝8.74分钟；MS-ES：(M+H)+＝541； TLC＊：Rf＝0.09
实施例56：1-甲基-4-[2-甲基-5-(3-三氟甲基-苯基氨基甲酰基)-苯基氨 基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-6-甲酸(2-吡咯烷-1-基-乙基)-酰胺
使用实施例52中所述的操作，只是使用2-吡咯烷-1-基-乙基胺(Fluka)。 将产物用自动柱色谱进行分离并将其在高真空泵下干燥。获得白色固体形 式的标题化合物。HPLC：tR＝8.90分钟；MS-ES：(M+H)+＝567； TLC＊：Rf＝0.08
实施例57：4-甲基-3-[1-甲基-6-(吗啉-4-羰基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-基氨 基]-N-(3-三氟甲基-苯基)-苯甲酰胺
使用实施例52中所述的操作，只是使用吗啉(Fluka)。将产物用自动 柱色谱进行分离并将其在高真空泵下干燥。获得白色固体形式的标题化合 物。HPLC：tR＝9.68分钟；MS-ES：(M+H)+＝540；TLC＊：Rf＝0.35
实施例58：N-[4-甲基-3-(1-甲基-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-基氨基)-苯基]-2- 三氟甲基-异烟酰胺
使用实施例1步骤1.1中所述的操作，只是在叔-丁醇中使用4-氯-1- 甲基-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶和N-(3-氨基-4-甲基-苯基)-2-三氟甲基-异烟酰 胺。将产物用自动柱色谱进行分离并将其在高真空泵下干燥。获得白色固 体形式的标题化合物。HPLC：tR＝8.25分钟；MS-ES：(M+H)+＝428； TLC＊：Rf＝0.31
实施例59：3-[1-(2-二乙基氨基-乙基)-6-吡啶-3-基-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4- 基氨基]-4-甲基-N-(3-三氟甲基-苯基)-苯甲酰胺
将3-[6-氯-1-(2-二乙基氨基-乙基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-基氨基]-4- 甲基-N-(3-三氟甲基-苯基)-苯甲酰胺(65mg，0.12mmol)、吡啶硼酸(17.6mg， 0.14mmol)、1，1’-二(二苯基膦基)二茂铁-二氯钯(II)二氯甲烷(4.9mg，0.006 mmol，ABCR)、238μl 2M碳酸钠水溶液在3ml甲苯和0.3ml乙醇中在微 波炉中加热至150℃达1小时。将产物用自动柱色谱进行分离并将其在高 真空泵下干燥。获得白色固体形式的标题化合物。HPLC：tR＝8.48分钟； MS-ES：(M+H)+＝589；Rf＝0.52
起始材料的制备如下：
步骤59.1：3-[6-氯-1-(2-二乙基氨基-乙基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-基氨 基]-4-甲基-N-(3-三氟甲基-苯基)-苯甲酰胺
将3-(6-氯-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-基氨基)-4-甲基-N-(3-三氟甲基-苯 基)-苯甲酰胺(300mg，0.67mmol)、2-二乙基氨基-乙醇(165mg，1.41mmol) 和三苯基膦(264mg，1.01mmol)溶解于THF中并将其冷却至0℃。缓慢加 入(40％甲苯溶液)并使该反应加温至室温。将产物用自动柱色谱进行分离 并将其在高真空泵下干燥，得到标题化合物。HPLC：tR＝9.55分钟； MS-ES：(M+H)+＝547；Rf＝0.58
步骤59.2：3-(6-氯-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-基氨基)-4-甲基-N-(3-三氟甲基- 苯基)-苯甲酰胺
使用实施例1步骤1.1中所述的操作，但是在叔-丁醇中使用4，6-二氯 -1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶和3-氨基-4-甲基-N-(3-三氟甲基-苯基)-苯甲酰胺。将 产物用自动柱色谱进行分离并将其在高真空泵下干燥。获得白色固体形式 的标题化合物。HPLC：tR＝9.99分钟；MS-ES+：(M+H)+＝447； TLC＊：Rf＝0.41
步骤59.3：4，6-二氯-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶
将4，6-二羟基吡唑并[3，4-d]嘧啶(12.4g，81.5mmol)、N，N-二甲基苯胺 (30ml)和三氯氧磷(POCl3，80ml，Fluka)加热至回流达2小时。将该反应倾 倒到冰上并用乙醚对产物进行萃取。在减压下除去溶剂，得到标题化合物。 HPLC：tR＝8.34分钟；MS-ES：(M+H)+＝190；Rf＝0.55
实施例60：3-[1-(2-二乙基氨基-乙基)-6-(6-甲氧基-吡啶-3-基)-1H-吡唑并 [3，4-d]嘧啶-4-基氨基]-4-甲基-N-(3-三氟甲基-苯基)-苯甲酰胺
使用实施例59中所述的操作，只是使用2-甲氧基-5-吡啶硼酸。将产 物用自动柱色谱进行分离并将其在高真空泵下干燥。获得白色固体形式的 标题化合物。HPLC：tR＝10.04分钟；MS-ES：(M+H)+＝619
实施例61：4-甲基-3-[1-(2-吗啉-4-基-乙基)-6-吡啶-3-基-1H-吡唑并[3，4-d]嘧 啶-4-基氨基]-N-(3-三氟甲基-苯基)-苯甲酰胺
使用实施例59中所述的操作，只是在步骤59.1中，用4-(2-羟基乙基) 吗啉代替2-二乙基氨基-乙醇。将产物用自动柱色谱进行分离并将其在高真 空泵下干燥。获得白色固体形式的标题化合物。HPLC：tR＝8.41分钟； MS-ES：(M+H)+＝603
实施例62：4-甲基-3-{1-[2-(4-甲基-哌嗪-1-基)-乙基]-6-吡啶-3-基-1H-吡唑并 [3，4-d]嘧啶-4-基氨基}-N-(3-三氟甲基-苯基)-苯甲酰胺
使用实施例59中所述的操作，只是在步骤59.1中，用1-(2-羟基乙基)-4- 甲基-哌嗪代替2-二乙基氨基-乙醇。将产物用自动柱色谱进行分离并将其 在高真空泵下干燥。获得白色固体形式的标题化合物。HPLC：tR＝8.28分 钟；MS-ES：(M+H)+＝616
实施例63：3-[1-(2-二甲基氨基-乙基)-6-吡啶-3-基-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4- 基氨基]-4-甲基-N-(3-三氟甲基-苯基)-苯甲酰胺
使用实施例59中所述的操作，只是在步骤59.1中用2-二甲基氨基-乙 醇代替2-二乙基氨基-乙醇。将产物用自动柱色谱进行分离并将其在高真空 泵下干燥。获得白色固体形式的标题化合物。HPLC：tR＝8.35分钟； MS-ES：(M+H)+＝561
实施例64：4-甲基-3-{1-[3-(4-甲基-哌嗪-1-基)-丙基]-6-吡啶-3-基-1H-吡唑并 [3，4-d]嘧啶-4-基氨基}-N-(3-三氟甲基-苯基)-苯甲酰胺
使用实施例59中所述的操作，只是在步骤59.1中用3-(4-甲基-哌嗪-1- 基)-丙-1-醇代替2-二乙基氨基-乙醇。将产物用自动柱色谱进行分离并将其 在高真空泵下干燥。获得白色固体形式的标题化合物。HPLC：tR＝8.07分 钟；MS-ES：(M+H)+＝630
实施例65：3-[1-(2-二甲基氨基-乙基)-6-(6-甲氧基-吡啶-3-基)-1H-吡唑并 [3，4-d]嘧啶-4-基氨基]-4-甲基-N-(3-三氟甲基-苯基)-苯甲酰胺
使用实施例60中所述的操作，只是在步骤59.1中用2-二甲基氨基-乙 醇代替2-二乙基氨基-乙醇。将产物用自动柱色谱进行分离并将其在高真空 泵下干燥。获得白色固体形式的标题化合物。HPLC：tR＝9.80分钟； MS-ES：(M+H)+＝591
实施例66：3-{6-(6-甲氧基-吡啶-3-基)-1-[2-(4-甲基-哌嗪-1-基)-乙基]-1H-吡 唑并[3，4-d]嘧啶-4-基氨基}-4-甲基-N-(3-三氟甲基-苯基)-苯甲酰胺
使用实施例60中所述的操作，只是在步骤59.1中，用1-(2-羟基乙基)-4- 甲基-哌嗪代替2-二乙基氨基-乙醇。将产物用自动柱色谱进行分离并将其 在高真空泵下干燥。获得白色固体形式的标题化合物。HPLC：tR＝9.45分 钟；MS-ES：(M+H)+＝646
实施例67：4-氟-N-[4-甲基-3-(1-甲基-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-基氨基)-苯 基]-3-三氟甲基-苯甲酰胺
使用实施例1步骤1.1中所述的操作，只是在叔-丁醇中使用4-氯-1- 甲基-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶和N-(3-氨基-4-甲基-苯基)-4-氟-3-三氟甲基-苯 甲酰胺。将产物用自动柱色谱进行分离并将其在高真空泵下干燥。获得白 色固体形式的标题化合物。HPLC：tR＝9.09分钟；MS-ES：(M+H)+＝445； TLC＊：Rf＝0.37
实施例68：3-[6-氯-1-(2-羟基-乙基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-基氨基]-4-甲 基-N-(3-三氟甲基-苯基)-苯甲酰胺
将3-(6-氯-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-基氨基)-4-甲基-N-(3-三氟甲基-苯 基)-苯甲酰胺(见步骤59.2)(100mg，0.2mol)、2-溴乙醇(16.6μl，0.2mmol， Fluka)和碳酸钾(312mg，2.2mmol)加热至回流达18小时。将产物用自动柱 色谱进行分离并将其在高真空泵下干燥。获得白色固体形式的标题化合物。 HPLC：tR＝10.11分钟；MS-ES：(M+H)+＝491；TLC＊：Rf＝0.38
实施例69：3-[6-氯-1-(3-羟基-丙基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-基氨基]-4-甲 基-N-(3-三氟甲基-苯基)-苯甲酰胺
使用实施例68中所述的操作，只是用3-溴-1-丙醇代替2-溴-乙醇。将 产物用自动柱色谱进行分离并将其在高真空泵下干燥。获得白色固体形式 的标题化合物。HPLC：tR＝10.19分钟；MS-ES：(M+H)+＝505； TLC＊：Rf＝0.28
实施例70：3-[1-(2-羟基-乙基)-6-吡啶-3-基-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-基氨 基]-4-甲基-N-(3-三氟甲基-苯基)-苯甲酰胺
使用实施例59中所述的操作，只是使用3-[6-氯-1-(2-羟基-乙基)-1H- 吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-基氨基]-4-甲基-N-(3-三氟甲基-苯基)-苯甲酰胺(实施 例68)。将产物用自动柱色谱进行分离并将其在高真空泵下干燥。获得白色 固体形式的标题化合物。HPLC：tR＝8.89分钟；MS-ES：(M+H)+＝534； TLC＊：Rf＝0.27
实施例71：软胶囊
如下那样制备5000粒各自包含0.05g作为活性成分的如前面任意一个 实施例中所述的式I化合物之一的软明胶胶囊：
组成
活性成分      250g
Lauroglycol   2升
制备方法：将粉碎了的活性成分混悬于Lauroglykol＊(丙二醇月桂酸酯， GattefosséS.A.，Saint Priest，法国)中并将其在湿粉碎器中进行研磨以产生 约1至3μm的粒度。然后，用胶囊填充机将0.419g该混合物引入到软明 胶胶囊中。
实施例72：包含式I化合物的片剂
按照标准操作，制备具有下面组成的包含100mg作为活性成分的前面 任意一项实施例的任何一种式I化合物的片剂：
组成
活性成分    100mg
结晶乳糖    240mg
Avicel      80mg
PVPPXL      20mg
Aerosil     2mg
硬脂酸镁    5mg
      --------------------
            447mg
生产：将活性成分与载体材料混合到一起并用压片机(Korsch EKO， Stempeldurchmesser 10mm)对其进行压片。
是微晶纤维素(FMC，Philadelphia，USA)。PVPPXL是交联聚 乙烯吡咯烷酮(BASF，德国)。是二氧化硅(Degussa，德国)。