疼痛知觉或称作为痛觉是由一种定名为「痛觉受体」的特殊感觉 神经元末梢作为媒介的。广泛的多种物理刺激及化学刺激诱发哺乳动 物的此种痛觉受体神经元活化，结果导致辨识可能有害刺激。但痛觉 受体不当活化或过度活化可能导致体力虚弱的急性疼痛或慢性疼痛。
神经病变性疼痛涉及于无刺激存在下的痛觉信号传输，典型地是 来自于神经系统受损。大部分情况下，疼痛是由于周边神经统及中枢 神经系统在最初周边系统损伤(例如透过直接受伤或系统性疾病而损 伤)后神经系统被敏化所致。神经病变性疼痛的强度典型为烧灼、发射、 稳定不松懈，神经病变性疼痛偶尔可能比最初诱发疼痛的伤害或疾病 过程更让人体能虚弱。
目前对神经病变性疼痛治疗大半无效。鸦片制剂例如吗啡是强力 止痛剂，但鸦片制剂的用途由于其不良副作用因而受限制，其不良副 作用例如为生理成瘾以及具有戒断性质，以及呼吸抑制、情绪改变、 减少肠道蠕动伴随便秘、恶心、呕吐，以及改变内分泌系统及自主神 经系统。此外，神经病变性疼痛经常对常规鸦片类止痛治疗无反应或 只有部分反应。采用N-甲基-D-天冬酸酯拮抗剂氯胺酮(ketamine)或α(2) 肾上腺素激性促效剂可乐定可减少急性疼痛或慢性疼痛，允许减少鸦 片类消耗量，但此等药剂由于副作用缘故耐受性不佳。
曾经使用辣椒辣素局部治疗来处理慢性疼痛及急性疼痛，包括神 经病变性疼痛。辣椒辣素是衍生自茄科植物(包括红辣椒)的辣性物质， 辣椒辣素显然是选择性作用于直径小的据信为传输疼痛的传入神经纤 维(A-Δ纤维及C纤维)。对辣椒辣素的反应特征是周边组织的痛觉神 经受体持续性活化，最后周边痛觉受体对一种刺激或多种刺激脱敏。 由动物研究，辣椒辣素经由开启钙及钠的阳离子选择性通道而促发C 纤维膜去极化。对于离体感觉神经元，辣椒辣素的反应显示与剂量有 关。
此种反应也可由辣椒辣素结构类似物激发，辣椒辣素结构类似物 享有一个共有的类香草部分。其中一种类似物为含树脂毒素(RTX)，属 于大戟属植物的天然产物。类香草受体(VR)一词是创出来描述辣椒辣 素以及相关刺激性化合物的神经元膜辨识位置。辣椒辣素的反应受到 另一种辣椒辣素类似物辣椒素受体阻断剂的竞争性抑制(因此被拮抗) 的拮抗，辣椒辣素的反应也受到非选择性阳离子通道阻断剂钌红的抑 制。此等拮抗剂结合至VR，亲和力不大于中等亲和力(典型具有Ki值 不低于140μM)。
最近，由背根神经节细胞克隆出大鼠及人类的辣椒辣素受体。此 种受体被称作为VR1，「VR1」以及「辣椒辣素受体」一词于此处互 换使用来表示此种类型的大鼠及/或人类受体以及哺乳类同系物。VR1 在痛觉中扮演的角色已经使用缺乏此种痛觉受体的小鼠获得证实，小 鼠没有香草素激发的疼痛表现，对热反应以及对发炎的反应受损。辣 椒辣素受体是一种非选择性阳离子信道，阳离子信道开启的阈值是低 于对温度升高、低pH、以及辣椒辣素受体促效剂的反应。例如信道通 常是在高于约45℃温度开启。辣椒辣素受体通道的开启通常接着为从 表达该受体的神经元以及邻近神经元释放出炎性肽，而增加疼痛反应。 由辣椒辣素初步活化后，辣椒辣素受体通过cAMP依赖性蛋白质激酶 磷酸化而进行快速脱敏。
由于VR1促效剂类香草素化合物可让周边组织的痛觉受体如此脱 敏，因此VR1促效剂类香草化合物被用作为局部麻醉剂。但促效剂用 途本身造成灼烧疼痛，因此限制其用于此项医疗用途。
如此可与VR1交互作用，但不会提引出VR1促效剂类香草化合物 的初期痛觉的化合物，为慢性疼痛及急性疼痛包括神经病变性疼痛的 治疗上所需。此种受体的拮抗剂在疼痛治疗上特别需要，以及对例如 暴露于催泪瓦斯、搔痒及尿失禁等情况特别需要。本发明可满足此项 需求且提供额外相关优点。

本发明提供辣椒辣素受体调节剂，其调节辣椒辣素受体的活化， 且优选抑制辣椒辣素受体的活化。在若干方面，此处提供化合物以下 式为特征：

                                              式I
或其医药上可接受的盐。
式I中，V及X各自分别为N或CR1，条件是V及X中的至少一 个为N；U为N或CR2，但如果V及X为N，则U为CR2。W、Y及 Z各自分别为N或CR1。R1在每次出现时独立地选自氢、卤原子、羟 基、氰基、氨基、C1-C8烷基、卤代C1-C8烷基、C1-C8烷氧基、卤代 C1-C8烷氧基及一-(C1-C8烷基)氨基及二-(C1-C8烷基)氨基。
R2为：(i)氢、卤原子、氰基或-COOH；(ii)C2-C8烷氧羰基、C1-C8 烷酰基、C2-C8烷酮、C1-C8烷酰氧基、C1-C8碳酸根或C1-C8氨基甲酸 根，其各自为未经取代或被1至9个Rb的取代基取代；或(iii)如式 -Rc-M-A-Ry的基团，其中：Rc为C0-C3烷基；M为键连接、N(Rz)、O、 S、SO2、-C(＝O)pN(Rz)、N(Rz)C(＝O)p、SO2N(Rz)或N(Rz)SO2，其中p 为0或1；A为键连接或选择性地被1至3个分别选自Rb的取代基取 代的C1-C8烷基；以及Ry及Rz分别为(a)氢、C1-C8烷基、C2-C8烯基、 C2-C8炔基、C6-C10芳基C1-C8烷基、C2-C8烷基醚、C1-C8烷氧基、4 至10单元碳环或杂环，或接合至Rc而形成4至10单元碳环或杂环， 其中各个Ry及Rz分别为未经取代或被1至9个分别选自Rb的取代基 取代；或(b)接合而形成一个4至10单元杂环，其为未经取代或被1 至9个分别选自Rb的取代基取代。
Rb在各次出现时分别是选自羟基、卤原子、氨基、氨基羰基、酰 氨基、氰基、硝基、酮基、C1-C8烷基、C1-C8烷氧基、C1-C8烷硫基、 C1-C8烷基醚、羟基C1-C8烷基、卤基C1-C8烷基、苯基、苯基(C1-C8 烷基)、一-(C1-C6烷基)氨基及二-(C1-C6烷基)氨基、(SO2)C1-C8烷基、5 元至7元杂环及(5元至7元杂环)(C1-C8烷基)。
Ar1及Ar2各自分别是选自5元至10元芳香族碳环及杂环，其各 自为未经取代，或被1至3个分别选自如式LRa的取代基取代。L于 各自出现时分别是选自键连接、-O-、-C(＝O)-、-OC(＝O)-、-C(＝O)O-、 -O-C(＝O)O-、-S(O)m-、-NRx-、-C(＝O)NHRx-、-NHRxC(＝O)-、-NRxS(O)m-、 S(O)mNRx-及-N[S(O)mRx]S(O)m-；其中m于各自出现时分别是选自0、 1及2；以及Rx在各次出现时分别是选自氢及C1-C8烷基。Ra在各次出 现时分别是选自：(i)氢、卤原子、氰基及硝基；和(ii)C1-C8烷基、C2-C8 烯基、C2-C8炔基、C2-C8烷基醚、3元至10元杂环、一-(C1-C8烷基) 氨基和二-(C1-C8烷基)氨基以及(3元至10元杂环)C1-C6烷基，其各自 任选地被1至9个分别选自Rb的取代基取代。若干如式I的化合物中， Ar2为5元至7元芳香族杂环，任选地如前述取代。
在另一方面，此处提供的化合物是以下式为特征：

                                                 式II
或其医药上可接受的盐。式II中，U、V、W、X、Y及Z如前所 述。如式II的Ar1及Ar2各自分别是选自苯基及5元和6元芳香族杂环， 其任选地被1至3个分别选自式LRa群组(定义如前)的取代基取代。如 式II的R7为C1-C8烷基、C2-C8烯基、C2-C8炔基、一-(C1-C8烷基)氨 基或二-(C1-C8烷基)氨基、或3元至10元杂环，其各自任选地被1至5 个分别选自羟基、卤原子、C1-C6烷基、C1-C8烷氧基、C2-C8烷基醚、 卤代C1-C8烷基及卤代C1-C8烷氧基的取代基取代。
在又另一方面，此处提供的化合物为如式III的经取代的2-氨基烷 基-喹唑啉基-4-基胺类似物：

                                         式III
或其医药上可接受的盐或其前体药物，其中：
V、X、W、Y及Z是如前文说明；
Ar1及Ar2分别是选自苯基及5元至7元芳香族杂环，其各自 为未经取代或被1至3个分别选自如前述式LRa的取代基取代；
R3及R4为：
(i)各自分别是选自
(a)氢；
(b)C1-C8烷基、C2-C8烯基、C2-C8炔基、C1-C8烷氧基、 C3-C8烷酮、C2-C8烷酰基、C2-C8烷基醚、C6-C10芳基C0-C8烷 基、5元至10元杂环C0-C8烷基及-(SO2)C1-C8烷基，其各自任 选地被1至9个分别选自Rb的取代基取代；以及
(c)接合至R5或R6而形成一个4元至10元杂环族基团的 基团，所述杂环族基团为未经取代或被1至6个分别选自Rb的 取代基取代；或
(ii)与其键连接至N接合而形成一个4元至10元杂环基团，其 为未经取代或被1至6个分别选自Rb、C1-C8烷酰基、4元至7元 杂环烷基C0-C4烷基、以及一-和二-(C1-C6烷基)氨基C1-C6烷基的 取代基取代。
R5及R6在各次出现时分别为：
(i)各自分别选自：
(a)氢或羟基；
(b)C1-C8烷基，其为未经取代或被1至2个分别选自 Rb的取代基取代；以及
(c)接合至R5或R6而形成一个4元至10元杂环基团 的基团，所述杂环基团为未经取代或被1至6个分别选自 Rb的取代基取代；
(ii)共同结合而形成一个酮基；或
(iii)接合而形成一个3元至7元碳环或杂环的环，其为未 经取代或被1至4个选自Rb的取代基取代；
Rb是如前文说明；以及
n为1、2或3。
在若干其它方面，此处提供的化合物为如式IV的经取代的2-羟基 烷基-喹唑啉-4-基胺类似物：

                                           式IV
或其医药上可接受的盐或其前体药物，其中：
V、X、W、Y及Z是如前文说明；
Ar1及Ar2分别是选自苯基及5元至7元芳香族杂环，其各自 为未经取代或被1至3个分别选自前述式如LRa群组的取代基取 代；
R3是选自：
(a)氢；
(b)C1-C8烷基、C2-C8烯基、C2-C8炔基、C2-C8烷基醚、 C6-C10芳基C0-C8烷基、及5元至10元杂环C0-C8烷基，其各自 任选地被1至9个分别选自Rb的取代基取代；以及
(c)接合至R5或R6而形成一个4元至10元杂环基团的基团， 所述杂环基团为未经取代或被1至6个分别选自Rb的取代基取 代；或
R5及R6在各次出现时分别为：
(i)各自分别选自：
(a)氢或羟基；
(b)C1-C8烷基，其为未经取代或被1至2个分别选自 Rb的取代基取代；以及
(c)接合至R5或R6而形成一个4元至10元杂环基团 的基团，所述杂环基团为未经取代或被1至6个分别选自 Rb的取代基取代；或
(ii)接合而形成一个3元至7元碳环或杂环的环，其为未 经取代或被1至4个选自Rb的取代基取代；
Rb是如前文说明；以及
n为1、2或3。
在若干方面，此处所述化合物在辣椒辣素受体结合检定分析中具 有Ki不大于1μM、100nM、10nM或1nM，及/或在测定辣椒辣素受 体拮抗剂活性的检定分析中具有IC50值不大于1μM、100nM、10nM 或1nM。优选的化合物通常包括有较高强度(即较低Ki或较低IC50)的 化合物。
在本发明的若干方面，此处所述化合物由可检测的标识物(例如放 射性标记或荧光素轭合)加标记。
在其它方面，本发明进一步提供包含至少一种此处所述化合物或 盐与生理可接受的载剂或赋形剂结合的医药组合物。
在本发明的进一步方面，提供减少细胞辣椒辣素受体钙传导的方 法，包含表达辣椒辣素受体的细胞(例如神经元细胞)与有效量的至少一 种此处所述的化合物或盐接触。此种接触是在活体内或在试管内试验 进行。
在其它方面，本发明进一步提供对类香草配位子结合至辣椒辣素 受体的抑制。在若干方面，抑制是在试管试验进行。此种方法包含在 一定条件下且有足够数量以可检测方式抑制类香草配位子与辣椒辣素 受体结合，让辣椒辣素受体接触至少一种如上所述化合物或盐。在此 种方面，辣椒辣素受体是在患者体内。此种方法包含使在患者体内的 表达辣椒辣素受体的细胞与至少一种此处所述化合物或盐接触，患者 其用量足够以可检测方式抑制类香草配位子与试管试验中表达克隆辣 椒辣素受体的细胞结合，由此抑制类香草配位子结合至患者体的辣椒 辣素受体。
本发明在其它方面提供对患者对辣椒辣素受体调节有反应性的疾 病的治疗方法，包含对患者给予辣椒辣素受体调节有效量的至少一种 此处所述化合物或盐，由此来缓和患者的病情。
在其它方面，提供为患者治疗疼痛的方法，包含对患有疼痛患者 给予辣椒辣素受体调节用量的至少一种此处所述化合物或盐，由此减 轻患者的疼痛。
在其它方面，进一步提供为患者治疗搔痒、尿失禁、咳嗽及/或打 嗝的方法，包含对患有前述一或多种病情的患者给予辣椒辣素受体调 节用量的至少一种此处所述化合物或盐，由此减轻患者病情。
本发明进一步提供促进肥胖患者体重减轻的方法，包含对肥胖患 者给予辣椒辣素受体调节量的至少一种如此处所述化合物或盐，由此 促进患者的体重减轻。
在其它方面，本发明提供测定样品中是否存在有辣椒辣素受体的 方法，包含下列步骤：(a)使样品与此处所述化合物在允许该化合物结 合辣椒辣素受体的条件下接触，以及(b)检测化合物结合至辣椒辣素受 体的程度。
本发明进一步提供包装医药制剂，包含：(a)在一容器中的一种如 此处所述医药组合物；以及(b)使用该组合物来治疗一或多种对辣椒辣 素受体调节有反应的疾病的指示，该等疾病例如为疼痛、搔痒、尿失 禁、咳嗽、打嗝及/或肥胖。
又另一方面，本发明提供制备此处公开的化合物的方法，包括中 间物。
本发明的此等及其它方面也参照后文详细说明以更为明确。
实施方式
如前文说明，本发明提供包含经取代的喹唑啉-4-基胺类似物的辣 椒辣素受体调节剂。此种调节剂可在体外或体内使用来调节(优选抑制) 各方面的辣椒辣素受体活性。
若干如式I的化合物包括如下化合物，其中：
V、X、W、Y及Z各自分别为N或CR1，条件是V及X中的至少一 个为N；
U为N或CR2，但若V及X为N，则U为CR2；
R1在各次出现时分别是选自氢、卤原子、羟基、氨基、C1-C8烷基、卤 代C1-C8烷基、C1-C8烷氧基、卤代C1-C8烷氧基及一-(C1-C8烷基) 氨基及二-(C1-C8烷基)氨基；
R2为：(i)氢、卤原子、氰基或-COOH；
(ii)C1-C8烷酰基、C2-C8烷酮或C1-C8氨基甲酸根，其各自为未 经取代或被1至9个分别选自Rb的取代基取代；或
(iii)如式-Rc-M-A-Ry的基团，其中：
Rc为C0-C3烷基；
M为键连接、N(Rz)、O、S、SO2、C(＝O)pN(Rz)、N(Rz)C(＝O)p、 SO2N(Rz)或N(Rz)SO2，其中p为0或1；
A为键连接或C1-C8烷基，任选地被1至3个分别选自Rb 的取代基取代；以及
Ry及Rz若存在时为：
(a)分别为氢、C1-C8烷基、C2-C8烯基、C2-C8炔基、C6-C10 芳基C1-C8烷基、C2-C8烷基醚、C1-C8烷氧基、4元 至10元碳环或杂环，或Ry及Rz接合至Rc而形成一 个4元至10元碳环或杂环，其中各个Ry及Rz分别 为未经取代或被1至9个分别选自Rb的取代基取 代；或
(b)接合而形成一个4元至10元碳环或杂环，其为未经 取代或被1至9个分别选自Rb的取代基取代。
Ar2为5元至7元芳香族杂环，任选地被1至3个分别选自式LRa的群 组的取代基取代；
Ar1为5元至10元芳香族碳环或杂环，任选地被1至3个分别选自式 LRa的群组的取代基取代；
L在各次出现时分别是选自键连接、-O-、-C(＝O)-、-OC(＝O)-、-C(＝O)O-、 -O-C(＝O)O-、-S(O)m-、-NRx-、-C(＝O)NHRx-、-NHRxC(＝O)-、 -NRxS(O)m-、S(O)mNRx-及-N[S(O)mRx]S(O)m-；其中m在各自出现时 分别是选自0、1及2；以及Rx在各次出现时分别是选自氢及C1-C8 烷基。
Ra在各次出现时分别是选自：
(i)氢、卤原子、氰基及硝基；以及
(ii)C1-C8烷基、C2-C8烯基、C2-C8炔基、C2-C8烷基醚、3 元至10元杂环、一-(C1-C8烷基)氨基及二-(C1-C8烷基)氨基及(3 元至10元杂环)C1-C6烷基，其各自为未经取代或被1至9个分 别选自Rb的取代基取代；以及
Rb在各次出现时分别是选自羟基、卤原子、氨基、氨基羰基、酰氨基、 氰基、硝基、酮基、C1-C8烷基、C1-C8烷氧基、C1-C8烷硫基、C1-C8 烷基醚、羟基C1-C8烷基、卤基C1-C8烷基、苯基、苯基(C1-C8烷基)、 一-(C1-C6烷基)氨基及二-(C1-C6烷基)氨基、(SO2)C1-C8烷基、5元至 7元杂环及(5元至7元杂环)(C1-C8烷基)。
此等化合物在此处称作为式Ib化合物。
若干式Ib化合物中，Ar2是选自吡啶基、哒嗪基、嘧啶基、嗪吡 嗪基、吡咯基、咪唑基、吡唑基、噁唑基、异噁唑基、噻唑基、异噻 唑基及噻二唑基，其各自为未经取代或被1或2个选自卤原子、氰基、 C1-C6烷基、卤代C1-C6烷基、羟基C1-C6烷基、C1-C6烷基醚、C1-C6 烷酰基、氨基、一-(C1-C6烷基)氨基及二-(C1-C6烷基)氨基的取代基取 代。若干具体实施方式中，Ar2为吡啶基、异噁唑基、噻二唑基或吡唑 基，其各自为未经取代或被卤原子、C1-C4烷基、或卤代C1-C4烷基取 代。
若干具体实施方式中，Ar1为苯基或吡啶基，任选地被卤原子、C1-C6 烷基、卤代C1-C6烷基、C1-C6烷氧基或卤代C1-C6烷氧基取代。
在若干如式Ib的化合物中，U为CR2。若干具体实施方式中，R2 为：
(i)氢或卤原子；或
(ii)C1-C6烷基、-(CH2)nNH、-(CH2)nNH(C1-C8烷基)、-(CH2)nN(C1-C8 烷基)2、-(CH2)n(5元至8元杂环烷基)、-(CH2)nOH或-(CH2)nO(C1-C8烷 基)，其各自为未经取代或被1至4个分别选自卤原子、氰基、羟基、 氨基、一-(C1-C6烷基)氨基及二-(C1-C6烷基)氨基、C1-C6烷基及卤代 C1-C6烷基的取代基取代。
在另一方面，本发明提供如式Iib的化合物，亦即式II化合物，其 中
V、X、W、Y及Z各自分别为N或CR1，条件是V及X中的至少一 个为N；
U为N或CR2，但若V及X为N，则U为CR2；
R1在各次出现时分别是选自氢、卤原子、羟基、氨基、C1-C8烷基、卤 代C1-C8烷基、C1-C8烷氧基、卤代C1-C8烷氧基及一-(C1-C8烷基) 氨基及二-(C1-C8烷基)氨基；
R2为：(i)氢、卤原子、氰基或-COOH；
(ii)C1-C8烷酰基、C2-C8烷酮或C1-C8氨基甲酸根，其各自为未 经取代或被1至9个分别选自Rb的取代基取代；或
(iii)如式-Rc-M-A-Ry的基团，其中：
Rc为C0-C3烷基；
M为键连接、N(Rz)、O、S、SO2、C(＝O)pN(Rz)、N(Rz)C(＝O)p、 SO2N(Rz)或N(Rz)SO2，其中p为0或1；
A为键连接或C1-C8烷基，任选地被1至3个分别选自 Rb的取代基取代；以及
Ry及Rz若存在时为：
(a)分别为氢、C1-C8烷基、C2-C8烯基、C2-C8炔基、 C6-C10芳基C1-C8烷基、C2-C8烷基醚、C1-C8烷氧 基、4元至10元碳环或杂环，或Ry及Rz接合至 Rc而形成一个4元至10元碳环或杂环，其中各个 Ry及Rz分别为未经取代或被1至9个分别选自Rb 的取代基取代；或
(b)接合而形成一个4元至10元碳环或杂环，其为未 经取代或被1至9个分别选自Rb的取代基取代。
Ar1及Ar2分别是选自苯基及5元及6元芳香族杂环，其任选地被1至 3个分别选自式LRa群组的取代基取代；
L在各自出现时分别是选自键连接、-O-、-C(＝O)-、-OC(＝O)-、-C(＝O)O-、 -O-C(＝O)O-、-S(O)m-、-NRx-、-C(＝O)NHRx-、-NHRxC(＝O)-、 -NRxS(O)m-、S(O)mNRx-及-N[S(O)mRx]S(O)m-；其中m在各自出现时 分别是选自0、1及2；以及Rx在各次出现时分别是选自氢及C1-C8 烷基。
Ra在各次出现时分别是选自：
(i)氢、卤原子、氰基及硝基；以及
(ii)C1-C8烷基、C2-C8烯基、C2-C8炔基、C2-C8烷基醚、3元至10 元杂环、一-(C1-C8烷基)氨基及二-(C1-C8烷基)氨基及(3元至10元 杂环)C1-C6烷基，其各自为未经取代或被1至9个分别选自Rb的取 代基取代；
Rb在各次出现时分别是选自羟基、卤原子、氨基、氨基羰基、酰氨基、 氰基、硝基、酮基、C1-C8烷基、C1-C8烷氧基、C1-C8烷硫基、C1-C8 烷基醚、羟基C1-C8烷基、卤基C1-C8烷基、苯基、苯基(C1-C8烷基)、 一-(C1-C6烷基)氨基及二-(C1-C6烷基)氨基、(SO2)C1-C8烷基、5元至 7元杂环及(5元至7元杂环)(C1-C8烷基)；以及
R7为C1-C8烷基、C2-C8烯基、C2-C8炔基、一-(C1-C8烷基)氨基或二-(C1-C8 烷基)氨基或3元至10元杂环，其各自任选地被1至5个分别选自 羟基、卤原子、C1-C6烷基、C1-C8烷氧基、C2-C8烷基醚、卤代C1-C8 烷基及卤代C1-C8烷氧基的取代基取代。
若干如式IIb的化合物中，Ar2为苯基或吡啶基，其各自任选地被 1或2个选自卤原子、氰基、C1-C6烷基及卤代C1-C6烷基的取代基取 代。若干化合物中，Ar2为苯基，任选地被卤原子、C1-C4烷基或卤代 C1-C4烷基取代。
若干如式IIb的化合物中，Ar1为苯基或吡啶基，任选地被卤原子、 C1-C6烷基、卤代C1-C6烷基、C1-C6烷氧基或卤代C1-C6烷氧基取代。 若干具体实施方式实施方式中，Ar1及Ar2各自为吡啶基，被一个分别 选自卤原子、C1-C4烷基、C1-C4卤代烷基及C1-C4烷氧基的取代基取代。
若干如式IIb的化合物中，U为CR2。若干具体实施方式中，R2 为：
(i)氢或卤原子；或
(ii)C1-C6烷基、-(CH2)nNH、-(CH2)nNH(C1-C8烷基)、-(CH2)nN(C1-C8 烷基)2、-(CH2)n(5元至8元杂环烷基)、-(CH2)nOH或-(CH2)nO(C1-C8 烷基)，其各自为未经取代或被1至4个分别选自卤原子、氰基、 羟基、氨基、一-(C1-C6烷基)氨基及二-(C1-C6烷基)氨基、C1-C6 烷基及卤代C1-C6烷基的取代基取代。若干具体实施方式中，X 及V各自为N。
若干如式IIb的化合物中，R7包含直接键连接至SO2的氮原子。 若干具体实施方式中，R7为氨基、一-(C1-C6烷基)氨基或二-(C1-C6烷基) 氨基、吗啉基、哌啶基、哌嗪基或吡咯啶基，其各自为未经取代或被1 至3个分别选自卤原子、C1-C6烷基及卤代C1-C6烷基的取代基取代。 其它式IIb化合物中，R7为C1-C6烷基、卤代C1-C6烷基、吗啉基、哌 啶基、哌嗪基或吡咯啶基，其任选地被1至5个分别选自C1-C6烷基、 C1-C6烷氧基、C1-C6烷基醚、卤代C1-C6烷基及卤代C1-C6烷氧基的取 代基取代。
在另一方面，本发明提供如式IIIb的化合物，亦即化合物其中： V、X、W、Y及Z各自分别为N或CR1，条件是V及X中的至少一 个为N；
R1在各次出现时分别是选自氢、卤原子、羟基、氰基、氨基、C1-C8 烷基、卤代C1-C8烷基、C1-C8烷氧基、卤代C1-C8烷氧基及一-(C1-C6 烷基)氨基及二-(C1-C6烷基)氨基；
Ar1及Ar2分别是选自苯基及5元至7元芳香族杂环，其各自为未经取 代或被1至3个分别选自式LRa群组的取代基取代；
L在各自出现时分别是选自键连接、-O-、-C(＝O)-、-OC(＝O)-、-C(＝O)O-、 -O-C(＝O)O-、-S(O)m-、-NRx-、-C(＝O)NHRx-、-NHRxC(＝O)-、 -NRxS(O)m-、S(O)mNRx-及-N[S(O)mRx]S(O)m-；其中m在各自出现时 分别是选自0、1及2；以及Rx在各次出现时分别是选自氢及C1-C8 烷基；
Ra在各次出现时分别是选自：
(i)氢、卤原子、氰基及硝基；以及
(ii)C1-C8烷基、C2-C8烯基、C2-C8炔基、C2-C8烷基醚、3元至10元 杂环、及(3元至10元杂环)C1-C6烷基，其各自为未经取代或被1至 9个分别选自Rb的取代基取代；
R3及R4为：
(i)各自分别是选自
(a)氢；
(b)C1-C8烷基、C2-C8烯基、C2-C8炔基、C1-C8烷氧基、C3-C8 烷酮、C2-C8烷酰基、C2-C8烷基醚、C6-C10芳基C0-C8烷基、 5元至10元杂环C0-C8烷基及-(SO2)C1-C8烷基，其各自任选 地被1至9个分别选自Rb的取代基取代；以及
(c)接合至R5或R6而形成一个4元至10元杂环族基团的基团， 所述杂环基团为未经取代或被1至6个分别选自Rb的取代基 取代；或
(ii)与键连接至其上的N接合而形成一个4元至10元杂环族环，其 为未经取代或被1至6个分别选自Rb、C1-C8烷酰基、4元至7 元杂环烷基C0-C4烷基、及一-及二-(C1-C6烷基)氨基C1-C6烷基 的取代基取代。
R5及R6在各次出现时分别为：
(i)各自分别选自：
(a)氢或羟基；
(b)C1-C8烷基，其为未经取代或被1至2个分别选自Rb的取代 基取代；以及
(c)接合至R5或R6而形成一个4元至10元杂环基团的基团，所 述杂环芳基为未经取代或被1至6个分别选自Rb的取代基取 代；
(ii)共同结合而形成一个酮基；或
(iii)接合而形成一个3元至7元碳环或杂环的环，其为未经取 代或被1至4个选自Rb的取代基取代；
Rb在各次出现时分别是选自羟基、卤原子、氨基、氨基羰基、酰氨基、 氰基、硝基、酮基、C1-C8烷基、C1-C8烷氧基、C1-C8烷硫基、C1-C8 烷基醚、羟基C1-C8烷基、卤基C1-C8烷基、苯基、苯基(C1-C8烷基)、 一-(C1-C6烷基)氨基及二-(C1-C6烷基)氨基、(SO2)C1-C8烷基、5元至 7元杂环及(5元至7元杂环)(C1-C8烷基)；以及
n为1、2或3。
若干如式IIIb的化合物中，Ar1及Ar2分别是选自苯基及6元芳香 族杂环，其各自被0、1或2个取代基取代。若干具体实施方式中，(i) Ar1为苯基或吡啶基，其各自为未经取代或被1或2个选自卤原子、羟 基、氰基、氨基、硝基、一-(C1-C6烷基)氨基及二-(C1-C6烷基)氨基、 C1-C6烷基、卤代C1-C6烷基、C1-C6烷氧基及卤代C1-C6烷氧基的取代 基取代；以及(ii)Ar2为苯基或吡啶基，其各自为未经取代或被1或2 个分别选自卤原子、羟基、氰基、氨基、一-(C1-C6烷基)氨基及二-(C1-C6 烷基)氨基、C1-C6烷基、卤代C1-C6烷基、C1-C6烷氧基、卤代C1-C6 烷氧基、C2-C6烷基醚，C1-C6烷酰基、-(SO2)R2、-NRxS(O)m-及-N(S(Om)2的取代基取代；其中m为1或2，Rx为氢或C1-C6烷基以及R2为C1-C6 烷基、卤代C1-C6烷基、氨基、一-或二-(C1-C6烷基)氨基或5元至10 元N键联杂环基，各个R2任选地被Rb取代。例如，若干具体实施方 式中，(i)Ar1为吡啶基，其为未经取代或被卤原子、C1-C4烷基或卤代 C1-C4烷基取代；以及(ii)Ar2为苯基或吡啶基，其各自为未经取代或被 卤原子、氰基、C1-C4烷基、卤代C1-C4烷基、C2-C4烷基醚、C1-C4烷 酰基或-(SO2)Ra取代，其中Ra为C1-C4烷基或卤代C1-C4烷基。若干化 合物为其中(i)Ar1为吡啶-2-基、3-甲基-吡啶-2-基、3-三氟甲基-吡啶-2- 基或3-卤-吡啶-2-基；以及(ii)Ar2为苯基、2-吡啶基或3-吡啶基，其各 自在4位置被三氟甲烷磺酰基、丙烷磺酰基、丙烷-2-磺酰基、叔丁基、 三氟甲基或2，2，2-三氟-1-甲基-乙基取代。
若干如式IIIb的化合物中，R3及R4各自分别为：(i)氢；或(ii)C1-C8 烷基、C2-C8烯基、苯基C0-C4烷基、2，3二氢化茚基C0-C4烷基、5元 至6元杂芳基C0-C4烷基、或4元至7元杂环烷基C0-C4烷基，其各自 为未经取代或被1至4个分别选自羟基、卤原子、氨基、C1-C6烷基、 卤代C1-C6烷基、C1-C6烷氧基及卤代C1-C6烷氧基的取代基取代。若 干具体实施方式中，R3及R4各自分别为(i)氢；或(ii)C1-C6烷基、C2-C6 烯基、5元至7元杂环C0-C4烷基、C2-C6烷基醚、2，3二氢化茚基、苄 基、1-苯乙基、1-苯丙基及2-苯乙基，其各自为未经取代或被1至3 个分别选自羟基、卤原子及C1-C4烷基的取代基取代。例如R3及R4的 一为吡啶基C0-C4烷基、嘧啶基C0-C4烷基、咪唑基C0-C4烷基或四唑 基C0-C4烷基，其各自被0、1或2个取代基取代。
若干如式IIIb的化合物中，R3与R4接合形成5元至10元杂环族 基，其被0至4个取代基取代。若干具体实施方式中，杂环族基被至 少一个选自羟基、卤原子、C1-C4烷基、卤代C1-C4烷基、C1-C4烷氧基、 卤代C1-C4烷氧基、C1-C4烷酰基及氨基羰基的取代基取代。若干具体 实施方式中，杂环族基包含芳香环。一个杂环族基为被0、1或2个取 代基取代的3，4-二氢-1H-异喹啉-2-基。其它具体实施方式中，杂环族 基为5元至10元杂环烷基，其被0至4个取代基取代。例如杂环烷基 为哌啶基、哌嗪基、吡咯啶基、一氮庚环基、一氮辛环基、十氢喹啉 基或1，4-二噁-8-吖-螺[4.5]癸-8-基，其各自为未经取代或被1至4个分 别选自卤原子、羟基、C1-C4烷基、C1-C4烷氧基、卤代C1-C4烷基、卤 代C1-C4烷氧基、C1-C4烷酰基及C1-C4烷氧羰基的取代基取代。此外 杂环族基包括吗啉基、硫吗啉基或1，1-二酮基-硫吗啉-4-基，其各自为 未经取代或被1至4个分别选自卤原子、羟基、C1-C4烷基、C1-C4烷 氧基、卤代C1-C4烷基、卤代C1-C4烷氧基、C1-C4烷酰基及C1-C4烷氧 羰基的取代基取代。若干化合物中，杂环族基被1至4个分别选自甲 基及乙基的取代基取代。
若干如式IIIb的化合物中，R5及R6各自分别选自氢及C1-C6烷基。 若干具体实施方式中，R5及R6为氢。
若干如式IIIb的化合物中，n为1。
若干代表性的如式IIIb的化合物为如下化合物，其中：
(i)V及X为N；
(ii)Ar1为吡啶基，其为未经取代或被卤原子、C1-C4烷基或卤代 C1-C4烷基取代；
(iii)Ar2为苯基或吡啶基，其为未经取代或被C1-C4烷基、卤代 C1-C4烷基或式-(SO2)R2基团取代，其中R2为C1-C4烷基或卤代C1-C4 烷基；
(iv)R3及R4各自分别是选自C1-C6烷基、C2-C6烯基、C2-C6烷 基醚、5元至10元杂芳基C0-C4烷基、苯基C0-C4烷基及2，3二氢化茚 基，其各自被0、1或2个分别选自羟基、卤原子、C1-C4烷基及卤代 C1-C4烷基的取代基取代；以及
(v)n为1。
又有其它如式IIIb的化合物为如下化合物，其中：
(i)V及X为N；
(ii)Ar1为吡啶基，其为未经取代或被卤原子、C1-C4烷基或卤代 C1-C4烷基取代；
(iii)Ar2为苯基或吡啶基，其为未经取代或被C1-C4烷基、卤代 C1-C4烷基或式-(SO2)R2基团取代，其中R2为C1-C4烷基或卤代C1-C4 烷基；
(iv)R3及R4接合而形成一个5元至10元杂环族基，其为未经 取代或被1至3个取代基取代；以及
(v)n为1。
在又另一方面，本发明提供如式IVb的化合物，亦即式IV化合物 中：
V、X、W、Y及Z各自分别为N或CR1，但V及X中的至少一个为 N；
R1在各次出现时分别是选自氢、卤原子、羟基、氰基、氨基、C1-C8 烷基、卤代C1-C8烷基、C1-C8烷氧基、卤代C1-C8烷氧基及一-(C1-C6 烷基)氨基及二-(C1-C6烷基)氨基；
Ar1及Ar2分别是选自苯基及5元至7元芳香族杂环，其各自为未经取 代或被1至3个分别选自式LRa群组的取代基取代；
L在各自出现时分别是选自键连接、-O-、-C(＝O)-、-OC(＝O)-、-C(＝O)O-、 -O-C(＝O)O-、-S(O)m-、-NRx-、-C(＝O)NHRx-、-NHRxC(＝O)-、 -NRxS(O)m-、S(O)mNRx-及-N[S(O)mRx]S(O)m-；其中m在各自出现时 分别是选自0、1及2；以及Rx在各次出现时分别是选自氢及C1-C8 烷基；
Ra在各次出现时分别是选自：
(i)氢、卤原子、氰基及硝基；以及
(ii)C1-C8烷基、C2-C8烯基、C2-C8炔基、C2-C8烷基醚、3元至10 元杂环、一-及二-(C1-C8烷基)氨基及(3元至10元杂环)C1-C6烷基， 其各自为未经取代或被1至9个分别选自Rb的取代基取代；
R3是选自：
(i)氢；
(ii)C1-C8烷基、C2-C8烯基、C2-C8炔基、C3-C8烷酮、C2-C8烷基醚、 C6-C10芳基C0-C8烷基及5元至10元杂环C0-C8烷基，其各自任 选地被1至9个分别选自Rb的取代基取代；以及
(iii)接合至R5或R6而形成一个4元至10元杂环基团的基团，所述 杂环基团为未经取代或被1至6个分别选自Rb的取代基取代；
R5及R6在各次出现时分别为：
(i)各自分别选自：
(a)氢或羟基；
(b)C1-C8烷基，其为未经取代或被1至2个分别选自Rb的取代基 取代；以及
(c)接合至R3而形成一个4元至10元杂环基团的基团，所述杂环 基团为未经取代或被1至6个分别选自Rb的取代基取代；或
(ii)接合而形成一个3元至7元碳环或杂环的环，其为未经取代或被 1至4个选自Rb的取代基取代；
Rb在各次出现时分别是选自羟基、卤原子、氨基、氨基羰基、酰氨基、 氰基、硝基、酮基、C1-C8烷基、C1-C8烷氧基、C1-C8烷硫基、C1-C8 烷基醚、羟基C1-C8烷基、卤基C1-C8烷基、苯基、苯基(C1-C8烷基)、 一-(C1-C6烷基)氨基及二-(C1-C6烷基)氨基、(SO2)C1-C8烷基、5元至 7元杂环及(5元至7元杂环)(C1-C8烷基)；以及
n为1、2或3。
若干如式IVb的化合物中，Ar1及Ar2分别是选自苯基及6元芳香 族杂环，其各自被0、1或2个取代基取代。若干具体实施方式中，(i) Ar1为苯基或吡啶基，其各自为未经取代或被1或2个选自卤原子、羟 基、氰基、氨基、硝基、一-(C1-C6烷基)氨基及二-(C1-C6烷基)氨基、 C1-C6烷基、卤代C1-C6烷基、C1-C6烷氧基及卤代C1-C6烷氧基的取代 基取代；以及(ii)Ar2为苯基或吡啶基，其各自为未经取代或被1或2 个选自卤原子、羟基、氰基、氨基、硝基、一-(C1-C6烷基)氨基及二-(C1-C6 烷基)氨基、C1-C6烷基、卤代C1-C6烷基、C1-C6烷氧基、卤代C1-C6 烷氧基、C2-C6烷基醚，C1-C6烷酰基、-(SO2)R2、-NRxS(O)m-及-N(S(Om)2的取代基取代；其中m为1或2，Rx为氢或C1-C6烷基以及R2为C1-C6 烷基、卤代C1-C6烷基、氨基、一-或二-(C1-C6烷基)氨基或5元至10 元N键联杂环基，各个R2任选地被Rb取代。若干具体实施方式中， (i)Ar1为吡啶基，其为未经取代或被卤原子、C1-C4烷基或卤代C1-C4 烷基取代；以及(ii)Ar2为苯基或吡啶基，其为未经取代或被C1-C4烷基、 卤代C1-C4烷基或-(SO2)R2基团(其中R2为C1-C4烷基或卤代C1-C4烷基) 取代。在若干化合物中(i)Ar1为吡啶-2-基、3-甲基-吡啶-2-基、3-三氟 甲基-吡啶-2-基或3-卤-吡啶-2-基；以及(ii)Ar2为苯基、2-吡啶基或3- 吡啶基，其各自在4位置被三氟甲烷磺酰基、丙烷磺酰基、丙烷-2-磺 酰基、叔丁基、三氟甲基或2，2，2-三氟-1-甲基-乙基取代。
若干如式IVb的化合物中，R3为：(i)氢；或(ii)C1-C8烷基、C2-C8 烯基、苯基C0-C4烷基、5元至6元杂芳基C0-C4烷基、或4元至7元 杂环烷基C0-C4烷基，其各自为未经取代或被1至4个分别选自羟基、 卤原子、氨基、C1-C6烷基、卤代C1-C6烷基、C1-C6烷氧基及卤代C1-C6 烷氧基的取代基取代。若干具体实施方式中，R3为(i)氢；或(ii)C1-C6 烷基或苄基，其各自为未经取代或被1至3个分别选自羟基、卤原子 及C1-C4烷基的取代基取代。
若干如式IVb的化合物中，R5及R6各自分别是选自氢及C1-C6烷 基。若干具体实施方式中，R5及R6为氢。
若干如式IVb的化合物中，n为1。
若干代表性的如式IVb的化合物为如下化合物，其中：
(i)V及X为N；
(ii)Ar1为吡啶基，其为未经取代或被卤原子、C1-C4烷基或卤代C1-C4 烷基取代；
(iii)Ar2为苯基或吡啶基，其为未经取代或被C1-C4烷基、卤代C1-C4 烷基或式-(SO2)R2基团取代，其中R2为C1-C4烷基或卤代C1-C4烷基；
(iv)R3是选自(a)氢；以及(b)C1-C6烷基、C2-C6烯基及苯基C0-C4烷基， 其各自被0、1或2个分别选自羟基、卤原子、C1-C4烷基及卤代C1-C4 烷基的取代基取代；以及
(v)n为1。
优选如式Ib、IIb、IIIb及IVb的化合物在辣椒辣素受体钙移动性 检定分析中具有IC50为值100nM或以下，10nM或以下或1nM或以 下。
在另一方面，本发明提供医药组合物，包含至少一种根据式Ib、 IIb、IIIb及IVb的化合物或盐，与一种生理上可接受的载剂或赋形剂 结合。
在此处所述的各种方法中，使用的VR1调节剂可满足下式的一或 多式：I、II、III、IV、Ia、IIa、IIIa、IVa、Ib、IIb、IIIb或IVb。若干 调节剂可满足式I，其中
V、X、W、Y及Z各自分别为N或CR1，条件是V及X中的至少一 个为N；
U为N或CR2，但若V及X为N，则U为CR2；
R1在各次出现时分别是选自氢、卤原子、羟基、氰基、氨基、C1-C8 烷基、卤代C1-C8烷基、C1-C8烷氧基、卤代C1-C8烷氧基及一-(C1-C8 烷基)氨基及二-(C1-C8烷基)氨基；
R2为：(i)氢、卤原子、氰基或-COOH；
(ii)C1-C8烷酰基、C2-C8烷酮或C1-C8氨基甲酸根，其各自为未 经取代或被1至9个分别选自Rb的取代基取代；或
(iii)如式-Rc-M-A-Ry的基团，其中：
Rc为C0-C3烷基；
M为键连接，N(Rz)、O、S、SO2、C(＝O)pN(Rz)、N(Rz)C(＝O)p、 SO2N(Rz)或N(Rz)SO2，其中p为0或1；
A为键连接或C1-C8烷基，任选地被1至3个分别选自Rb 的取代基取代；以及
Ry及Rz为：
(a)分别为氢、C1-C8烷基、C2-C8烯基、C2-C8炔基、C6-C10 芳基C1-C8烷基、C2-C8烷基醚、C1-C8烷氧基、4元至10 元碳环或杂环，或Ry及Rz接合至Rc而形成一个4元至 10元碳环或杂环，其中各个Ry及Rz分别为未经取代或 被1至9个分别选自Rb的取代基取代；或
(b)接合而形成一个4元至10元碳环或杂环，其为未经取代 或被1至9个分别选自Rb的取代基取代；
Ar1及Ar2分别是选自5元至10元芳香族碳环及杂环，其各自为未经 取代或被1至3个分别选自式LRa群组的取代基取代；
L在各自出现时分别是选自键连接、-O-、-C(＝O)-、-OC(＝O)-、-C(＝O)O-、 -O-C(＝O)O-、-S(O)m-、-NRx-、-C(＝O)NHRx-、-NHRxC(＝O)-、 -NRxS(O)m-、S(O)mNRx-及-N[S(O)mRx]S(O)m-；其中m在各自出现时 分别是选自0、1及2；以及Rx在各次出现时分别是选自氢及C1-C8 烷基；
Ra在各次出现时分别是选自：
(i)氢、卤原子、氰基及硝基；以及
(ii)C1-C8烷基、C2-C8烯基、C2-C8炔基、C2-C8烷基醚、3元至10 元杂环、一-(C1-C8烷基)氨基及二-(C1-C8烷基)氨基及(3元至10元 杂环)C1-C6烷基，其各自为未经取代或被1至9个分别选自Rb的 取代基取代；以及
Rb在各次出现时分别是选自羟基、卤原子、氨基、氨基羰基、酰氨基、 氰基、硝基、酮基、C1-C8烷基、C1-C8烷氧基、C1-C8烷硫基、C1-C8 烷基醚、羟基C1-C8烷基、卤基C1-C8烷基、苯基、苯基(C1-C8烷基)、 一-(C1-C6烷基)氨基及二-(C1-C6烷基)氨基、(SO2)C1-C8烷基、5元至 7元杂环及(5元至7元杂环)(C1-C8烷基)。
术语
此处所述化合物通常是使用标准命名描述。对于具有非对称中心 的化合物而言，须了解(除非另行规定)其涵盖全部的光学异构物及其混 合物。此外，具有碳-碳双键的化合物可呈Z形及E形，全部化合物异 构物形皆包含于本发明的范围(除非另行规定)。当化合物以各种互变异 构形存在时，引用的化合物非仅限于任一种特定互变异构物，而是倾 向于涵盖全部互变异构形式。若干此处以通式描述的化合物包括变量 (例如R1、n、Ar1)。除非另行规定，否则在此式中的各个变量是与其它 变量独立定义，在式中出现多于一次的任一种变量可在各次出现时分 开定义。
术语「喹唑啉-4-基胺类似物」用于此处涵盖全部可满足此处一种 或多种如式I-IV的化合物，及此等化合物的医药上可接受的盐及水合 物。此等化合物包括类似物，其中喹唑啉核心的环氮原子数目及/或位 置经过修改，以及类似物其中各个取代基(容后详述)附接在此种核心结 构。换言之，吡啶并[2，3-d]嘧啶-4-基胺类、吡啶并[3，2-d]嘧啶-4-基胺 类、异喹啉-1-基胺类及酞嗪-1-基胺类的化合物是属于喹唑啉-4-基胺类 似物的范围。
用于此处的「烷基」一词表示直链、支链或环状饱和的脂肪族烃。 烷基可透过任一个化学的适当部分而键连接至感兴趣分子内部的一个 原子。烷基包括含1至8个碳原子的烷基(C1-C8烷基)、含1至6个碳 原子(C1-C6烷基)及含1至4个碳原子(C1-C4烷基)，例如甲基、乙基、 丙基、异丙基、正丁基、仲丁基、叔丁基、戊基、2-戊基、异戊基、 新戊基、己基、2-己基、3-己基、3-甲基戊基、环丙基、环丙基甲基、 环戊基、环戊基甲基、环己基、环庚基及降冰片基。「C0-C4烷基」表 示键连接或C1-C4烷基；「C0-C8烷基」表示键连接或C1-C8烷基。
同理，「烯基」表示直链或支链烯基或环烯基。在烯基内部存在 有一或多个不饱和碳-碳双键。烯基包括C2-C8烯基、C2-C6烯基及C2-C4 烯基，其各自含2至8个碳原子、2至6个碳原子或2至4个碳原子如 乙烯基、丙烯基或异丙烯基。「炔基」表示直链或支链炔基，其含有 一或多个不饱和碳-碳键，其中至少一个不饱和键为三键。炔基包括 C2-C8炔基、C2-C6炔基及C2-C4炔基，其各自含有2至8个碳原子、2 至6个碳原子或2至4个碳原子。
「烷氧基」用于此处表示如前所述由氧桥键连接的烷基、烯基或 炔基。烷氧基包括C1-C8烷氧基、C1-C6烷氧基及C1-C4烷氧基，其分 别含有1至8个碳原子、1至6个碳原子或1至4个碳原子。烷氧基包 括例如甲氧基、乙氧基、丙氧基、异丙氧基、正丁氧基、仲丁氧基、 叔丁氧基、正戊氧基、2-戊氧基、3-戊氧基、异戊氧基、新戊氧基、己 氧基、2-己氧基、3-己氧基及3-甲基戊氧基。
「烷酰基」一词表示酰基呈线性、分支或环状排列(例如-(C＝O)- 烷基)。酰基包括C2-C8烷酰基、C2-C6烷酰基及C2-C4烷酰基，其分别 含有2至8个、2至6个或2至4个碳原子。「C1烷酰基」表示-(C＝O)-H， 涵盖在「C1-C8烷酰基」的范围。
「烷酮」为酮基，其中碳原子是呈线性、分支或环状烷基排列。 「C3-C8烷酮」、「C3-C6烷酮」及「C3-C4烷酮」表示分别含3至8、6 或4个碳原子的烷酮。例如C3烷酮具有结构式-CH2-(C＝O)-CH3。
同理，「烷基醚」表示透过碳-碳键连接至直链或分支醚取代基。 烷基醚基包括C2-C8烷基醚、C2-C6烷基醚、及C2-C4烷基醚其分别含 有2至8、6或4个碳原子。例如C2烷基醚基具有结构式-CH2-O-CH3。
「烷氧羰基」一词表示由羰基键联至烷氧基(亦即具有通式 -C(＝O)-O-烷基)的基团。烷氧羰基包括C2-C8、C2-C6及C2-C4烷氧羰基， 其分别含有2至8、6或4个碳原子。「C1烷氧羰基」表示-C(＝O)-OH， 其是涵盖在「C1-C8烷氧羰基」一词的范围内。
「烷酰氧基」用于此处表示由氧桥键联至烷酰基(亦即具有通式 -O-C(＝O)-烷基的基团)。烷酰氧基包括C2-C8、C2-C6及C2-C4烷酰氧基， 其分别含有2至8、6或4个碳原子。「C1烷酰氧基」是指O-C(＝O)-H， 其是涵盖在「C1-C8烷酰氧基」一词的范围内。
「C1-C8碳酸根」一词表示经由氧桥基键联的烷氧羰基。换言的， 碳酸根具有通式-O-C(＝O)-O-烷基。C1-C6碳酸根通常为优选，C1-C4碳 酸根为特别优选。
「C1-C8氨基甲酸根」一词用于此处表示具有通式结构式 -N-C(＝O)-O-烷基的基团。通常以C1-C6氨基甲酸根为优选，以C1-C4 氨基甲酸根为特别优选。
烷基氨基表示具有通式结构式-NH-烷基或-N(烷基)(烷基)的仲胺 或叔胺，其中各个烷基可相同或相异。此等基团包括例如一-及二 -(C1-C8烷基)氨基，其中各个烷基为相同或相异，含有1至8个碳原子 以及一-及二-(C1-C6烷基)氨基及一-及二-(C1-C4烷基)氨基。烷基氨基烷 基表示经由烷基连接的烷基氨基(亦即具有通式结构式-烷基-NH-烷基 或-烷基-N(烷基)(烷基))的基团。此种基团例如包括例如一-及二-(C1-C8 烷基)氨基C1-C8烷基、一-及二-(C1-C6烷基)氨基C1-C6烷基以及一-及 二-(C1-C4烷基)氨基C1-C4烷基，其中各个烷基可相同或相异。
「氨基羰基」一词表示酰氨基(亦即-(C＝O)NH2)。
「卤素」一词包括氟、氯、溴及碘。「卤代烷基」为分支、直链 或环状烷基被1或多个卤原子取代(例如「卤代C1-C8烷基」含1至8 个碳原子；「卤代C1-C6烷基」含有1至6个碳原子)。卤代烷基例如 包括(但非限制性)一-、二-或三-氟甲基；一-、二-或三-氯甲基；一-、 二-、三-、四-或五氟乙基；及一-、二-、三-、四-或五氯乙基。典型卤 代烷基为三氟甲基及二氟甲基。此处提供的若干化合物中存在有不多 于5个或3个卤代烷基。「卤代烷氧基」一词表示如前文定义的卤代 烷基由氧桥连接。「卤代C1-C8烷氧基」含1至8个碳原子。
非介于两个字母或符号间的短横线(「-」)用来表示取代基的连接 点。例如-CONH2是经碳原子连接。
「杂原子」一词用于此处表示氧、硫或氮。
「碳环」或「碳环基」包含至少一个完全由碳-碳键形成的环(此处 称作碳环环)，而不含杂环环。除非另行规定，否则碳环内部的各个碳 环环可为饱和、部分饱和或芳香族。碳环通常含有1至3个稠合环、 侧出环或螺环，若干具体实施方式的碳环含有一个环或两个稠合环。 典型地，各个环为3至8元环(亦即C3-C8)；若干具体实施方式中引述 C5-C7环。包含稠合环、侧出环、或螺形环的碳环典型为9至14元环。 若干代表性碳环为环烷基(亦即包含饱和环及/或部分饱和环的基团例 如环丙基、环丁基、环戊基、环己基、环庚基、环辛基、金刚烷基、 十氢-萘基、八氢-茚基及前述任一个的部分饱和变化，例如环己烯基)， 以及芳香族基团(亦即含有至少一个芳香族碳环环的基团例如苯基、苄 基、萘基、苯氧基、苄氧基、苯乙酮基、芴基、2，3二氢化茚基及1，2，3，4- 四氢-萘基)。存在在碳环环内部的碳原子例如进一步键连接至0、1或 2个氢原子及/或多种环取代基的任一个，例如羟基、卤原子、氰基、 硝基、C1-C8烷基、C2-C8烯基、C2-C8炔基、C1-C8烷氧基、C2-C8烷基 醚、C3-C8烷酮、C1-C8烷硫基、氨基、一-(C1-C8烷基)氨基或二-(C1-C8 烷基)氨基、C3-C7环烷基C0-C4烷基、卤代C1-C8烷基、卤代C1-C8烷 氧基、氨基C1-C8烷基、羟基C1-C8烷基、C1-C8烷酰基、C1-C8烷氧羰 基、-COOH、-C(＝O)NH2、一-或二-(C1-C8烷基)羧酰氨基、-S(O2)NH2及/或一-或二-(C1-C8烷基)磺酰氨基。
若干在此处引述的碳环包括C6-C10芳基C0-C8烷基(亦即其中包含 至少一个芳香环的碳环是通过直接的键或通过C1-C8烷基而键联的基 团)。此等基团包括例如苯基及2，3二氢化茚基，以及其中任一个是通 过C1-C8烷基优选透过C1-C4烷基键联的基团。苯基是通过直接键连接， 或通过可被定名为苯基C0-C8烷基(例如苄基、1-苯基-乙基、1-苯基-丙 基及2-苯基-乙基)的烷基连接。
「杂环」或「杂环基」含有1至3个稠合环、侧出环或螺环，其 中至少一个环为杂环(亦即一或多个环原子为杂原子，其余环原子为 碳)。典型地，杂环包含1-4个杂原子；在若干具体实施方式中，各个 杂环每个环含1或2个杂原子。各个杂环通常为3至8元环(若干具体 实施方式中引述了5至7元环)，包含稠合环、侧出环或螺环的杂环典 型为9至14元环。杂环可任选地在氮原子及/或碳原子以多个取代基取 代，例如前文对碳环所述的取代基。除非另行规定，否则杂环可为杂 环烷基(亦即各个环为饱和或部分饱和)或杂芳基(亦即该基团中的至少 一个环为芳香环)。杂环基通常是透过任一个环或取代基原子键联，只 要可获得稳定化合物即可。N键联杂环基是透过成分氮原子键联。「杂 环C0-C8烷基」为透过直接的键连接或C1-C8烷基键联的杂环基。(3元 至10元杂环)C1-C6烷基为3至10元的透过C1-C6烷基键联的杂环基。
杂环基例如包括吖啶基、一氮庚环基、一氮辛环基、苯并咪唑基、 苯并咪唑啉基、苯并异噻唑基、苯并异噁唑基、苯并呋喃基、苯并硫 呋喃基、苯并噻吩基、苯并噁唑基、苯并噻唑基、苯并三唑基、咔唑 基、苯并四唑基、NH-咔唑基、咔啉基、吖啶基、苯并二氢吡喃基、苯 并吡喃基、噌啉基、十氢喹啉基、二氢呋喃并[2，3-b]四氢呋喃、二氢异 喹啉基、二氢四氢呋喃基、1，4-二噁-8-吖-螺[4.5]癸-8-基、二噻嗪基、 呋喃基、呋赞基、咪唑啉基、咪唑啶基、咪唑基、吲唑基、吲哚烯基、 吲哚啉基、吲哚嗪基、吲哚基、异苯并呋喃基、异苯并二氢吡喃基、 异吲唑基、异吲哚啉基、异吲哚基、异噻唑基、异噁唑基、异喹啉基、 吗啉基、萘啶基、十氢异喹啉基、噁二唑基、噁噻唑啶基、噁唑基、 菲啶基、菲咯啉基、吩嗪基、吩噻嗪基、吩噁噻因基、吩噁嗪基、酞 嗪基、哌嗪基、哌啶基、哌啶基、哌啶酮基、蝶啶基、嘌呤基、吡喃 基、嗪吡嗪基、吡唑啶基、吡唑啉基、吡唑基、哒嗪基、吡啶并咪唑 基、吡啶并噁唑基、吡啶并噻唑基、吡啶基、嘧啶基、吡咯啶基、吡 咯啶酮基、吡咯啉基、吡咯基、喹唑啉基、喹啉基、喹噁啉基、喹核 碱基、四氢异喹啉基、四氢喹啉基、四唑基、噻二嗪基、噻二唑基、 噻蒽基、噻唑基、噻吩并噻唑基、噻吩并噁唑基、噻吩并咪唑基、噻 吩基、硫苯基、硫吗啉基及其变化例，其中硫原子经氧化、三嗪基、 氧杂蒽基及前述任一基团被1至4个前述取代基取代。
若干杂环基为3元至10元或5元至10元基团，其含有一个杂环 或两个稠合环或螺环，任选地如前述取代。(C3-C10)杂环烷基例如包括 哌啶基、哌嗪基、吡咯啶基、一氮庚环基、1，4-二噁-8-吖-螺[4.5]癸-8- 基、吗啉基、硫吗啉基、及1，1-二酮基-硫吗啉-4-基，以及其中前述各 基团被1至6个(优选1至4个)分别选自卤原子、羟基、C1-C4烷基、 C1-C4烷氧基、卤代C1-C4烷基、卤代C1-C4烷氧基、C1-C4烷基羰基及 C1-C4烷氧羰基的取代基取代的基团。若干具体实施方式中，杂环烷基 可为4元至7元杂环烷基C0-C4烷基。此等基团包含前述4元至7元杂 环烷基透过直接键或C1-C4烷基键联。
若干芳香族杂环包括5元至10元杂芳基C0-C8烷基(即其中包含至 少一个芳香环的杂环基是通过直接的键或C1-C8烷基连接的基团)。此 种基团包括例如前文引述的杂芳基，以及其中前述任一基团通过C1-C8 烷基、C1-C6烷基或C1-C4烷基连接的基团。代表性的芳香族杂环为唑 辛基、吡啶基、嘧啶基、咪唑基、四唑基、3，4-二氢-1H-异喹啉-2-基以 及其中前述各个基团是通过C1-C4烷基连接的基团。
「取代基」用于此处表示共价键连接至感兴趣分子内部的一个原 子的分子部分。例如「环取代基」可为例如此处讨论的卤原子、烷基、 卤代烷基、或其它基团部分，其是共价键连接至环成员原子(优选为碳 原子或氮原子)。「取代」一词表示以前述取代基置换分子结构的氢原 子，因此不超过指定原子的价数，由取代可获得化学性质稳定化合物 (亦即可被分离、决定特征及试验生物活性的化合物)。
「任选地经取代」的基团为未经取代或在一或多个可利用位置典 型为1、2、3、4或5个位置，由一个或多个适当的非氢基团(可为相 同或相异)取代。此种任选地取代基例如包括羟基、卤原子、氰基、硝 基、C1-C8烷基、C2-C8烯基、C2-C8炔基、C1-C8烷氧基、C2-C8烷基醚、 C3-C8烷酮、C1-C8烷硫基、氨基、一-或二-(C1-C8烷基)氨基、卤代C1-C8 烷基、卤代C1-C8烷氧基、C1-C8烷酰基、C1-C8烷酰氧基、C1-C8烷氧 羰基、-COOH、-CONH2、一-或二-(C1-C8烷基)羧酰氨基、-SO2NH2、 及/或一-或二-(C1-C8烷基)磺酰氨基以及碳环族基或杂环基。若干任选 地取代基被0至3个独立选择的取代基取代。
「VR1」、「第一型的类香草受体」及「辣椒辣素受体」等词在 此处互换使用。除非另行规定，否则此等术语涵盖大鼠VR1受体及人 VR1受体(例如GenBank存取编号AF327067、AJ277028及 NM_018727；若干人VR1 cDNAs序列提供在美国专利第6,482,611号 的SEQ ID NOs：1-3以及SEQ ID NOs：4及5所示编码氨基酸序列)，以 及其它物种所见的同是物。
「VR1调节剂」在此处也称作为「调节剂」是一种可调节VR1活 化及/或VR1-媒介信号转导的化合物。VR1调节剂可为VR1促效剂或 VR1拮抗剂，但为了达成某些此处所述目的，VR1调节剂优选对经由 类香草配位子促效剂(例如辣椒辣素或辣椒辣素类似物如欧凡尼 (olvanil)或含树脂毒素)结合至VR1导致的VR1活化进行抑制。若在 VR1的Ki是小于1μM，优选小于100nM、10nM或1nM，则调节剂 是以「高度亲和力」结合。测定在VR1的Ki的代表性检定分析在此处 实施例5提供。若检测得调节剂可抑制类香草配位子结合至VR1及/ 或VR1媒介的信号转导(例如使用实施例6提供的代表性检定分析)， 则该调节剂被视为拮抗剂；通常此种拮抗剂可抑制VR1活化，具有实 施例6提供的检定分析的IC50值小于1μM，优选小于100nM及更优 选小于10nM或1nM。VR1拮抗剂包括中性拮抗剂及反促效剂。优选 调节剂实质上不会抑制人类表皮生长因子(EGF)受体酪胺酸激酶活性 (亦即在EGF受体检定分析的IC50是大于1μM，优选大于100μM或 10μM)。更优选调节剂不会以可检测方式抑制EGF受体活性。检测对 EGF受体抑制功效的检定分析为业界众所周知，包括Carpenter等人 (1979)生物化学期刊254：4884，及美国专利第5,654,307及6,169,091 号所述检定分析。
VR1的「反促效剂」为一种可在VR1抑制类香草配位子活性的化 合物，在无添加类香草配位子存在下，可降低VR1活性至低于其基准 活性程度。VR1的反促效剂也可抑制类香草配位子与VR1的结合。化 合物抑制类香草配位子结合VR1的能力，可藉结合检定分析例如实施 例5列举的结合检定分析测定。VR1的基准活性以及VR1活性由在存 在有VR1拮抗剂而降低，可由钙移动性检定分析测定，例如实施例6 的检定分析测定。
VR1的「中性拮抗剂」为一种可抑制类香草配位子与VR1活性的 化合物，但不会显著改变受体的基本活性(亦即在实施例6所述钙移动 性检定分析，在无类香草配位子存在下，VR1活性降低不超过10％、 5％或2％；优选没有可检测的活性降低)。VR1的中性拮抗剂可抑制类 香草配位子结合至VR1。
用于此处的VR1「促效剂」为可提升受体活性高于受体基准活性 程度的化合物。
「类香草配位子」为辣椒辣素或任一种辣椒辣素类似物，其包含 一个苯基环，所述苯基环由两个氧原子结合至毗邻环碳，其结合至 VR1，具有Ki(如此处所述测定)不高于10μM。类香草配位子促效剂包 括辣椒辣素、欧凡尼、N-花生四烯酰基、多巴胺及含树脂毒素(RTX)。 类香草配位子拮抗剂包括辣椒素受体阻断剂及碘-含树脂毒素。
「前体药物」为一种无法完全满足此处提供化合物的结构要求， 但在给予患者后在活体内经修改可产生喹唑啉-4-基胺类似物。例如前 体药物可为此处提供的化合物的酰化衍生物。前体药物包括如下化合 物，其中羟基、氨基或巯基键连接至任一个基团，该基团当给予哺乳 动物个体时可被裂解而分别形成自由态羟基、氨基或巯基。前体药物 例如包括(但非限制性)此处提供化合物内部的醇官能基及氨基官能基 的乙酸、甲酸及苯甲酸衍生物。
「患者」是任一种使用此处提供的VR1调节剂处理的个体。患者 包括人类及其它动物例如伴侣动物(如犬及猫)及牲口。患者可能出现一 或多种对辣椒辣素受体调节有反应的疾病症状(例如疼痛、暴露于类香 草配位子、搔痒、尿失禁、呼吸病症、咳嗽及/或打嗝)，也可能丝毫不 含此等症状(即处理为预防性的)。
VR1调节剂
如前述，本发明提供VR1调节剂(即可调节VR1媒介的信号转导 的化合物；优选为也以可检测方式结合至VR1的化合物)。VR1调节 剂也可用于多方面调节VR1活性，包括治疗(i)疼痛(例如神经病变性疼 痛或周边神经媒介的疼痛)，(ii)暴露于辣椒辣素，(iii)暴露于酸、热、 光、催泪瓦斯、空气污染、胡椒喷雾剂或相关化学剂，(iv)呼吸疾病例 如气喘或慢性阻塞性肺疾，(v)搔痒，(vi)尿失禁，(vii)咳嗽或打嗝和/ 或(viii)肥胖。VR1调节剂也可用于多项试管试验检定分析(例如受体活 性检定分析)作为检测与定位VR1的探针，以及作为在配位子结合检定 分析及VR1媒介信号转导检定分析的标准品。
此处提供的VR1调节剂为经取代的喹唑啉-4-基胺类似物，其是以 纳摩尔浓度(即次微摩尔浓度)的浓度以可检测方式调节辣椒辣素结合 至VR1，优选在次纳摩尔浓度，更优选在低于100pM或甚至低于20pM 的浓度调节辣椒辣素结合至VR1。此种调节剂优选为非辣椒辣素类似 物(即其不含有两个氧原子键连接至毗邻环原子的苯基环)。优选调节剂 为在实施例6所述检定分析中不具有可检测的促效剂活性的VR1拮抗 剂。若干具体实施方式中，此种调节剂进一步以高度亲和力结合至 VR1，且实质上不会抑制人类EGF受体酪胺酸激酶活性。
本发明是部分基于发现具有通式I的小分子(以及医药上可接受的 盐、水合物及前体药物)可调节VR1活性。若干具体实施方式中，W、 Y及Z中的不大于2个为N。代表性的喹唑啉-4-基胺类似物包括(但非 限制性)其中U、V、W、X、Y及Z适用于表1列举的任一种具体实施 方式的化合物。
                        表I
          代表性喹唑啉-4-基胺类似物核心结构     U     V     X     W     Y     Z     CR2     N     CH     CH     CH     CH     CR2     CH     N     CH     CH     CH     CR2     N     N     CH     CH     CH     N     CH     N     CH     CH     CH     CR2     N     CH     CH     N     CH     CR2     CH     N     CH     N     CH     CR2     N     N     CH     N     CH     N     CH     N     CH     N     CH     CR2     N     CH     CH     CH     N     CR2     CH     N     CH     CH     N     CR2     N     N     CH     CH     N     N     CH     N     CH     CH     N     CR2     N     CH     N     CH     CH     CR2     CH     N     N     CH     CH     CR2     N     N     N     CH     CH     N     CH     N     N     CH     CH     CR2     N     CH     N     CH     N     CR2     CH     N     N     CH     N     CR2     N     N     N     CH     N     N     CH     N     N     CH     N     CR2     N     CH     CH     N     N     CR2     CH     N     CH     N     N     CR2     N     N     CH     N     N     N     CH     N     CH     N     N
在式I-IV中，R1优选为氢、C1-C4烷基、或卤代C1-C4烷基，以氢 为特别优选。例如V及X皆为N。若干具体实施方式中，W、Y或Z 之一为N，而其余为CH，或W、Y及Z全部皆为CH。
在若干具体实施方式中，式I及II的R2若存在时为氢、氨基、羟 基、卤原子、或任选地经取代的-(CH2)nNH2、-(CH2)nNH(C1-C8烷基)、 -(CH2)nN(C1-C8烷基)2、-(CH2)n(5-元至8-元杂环基)、-(CH2)nOH、 -(CH2)nO(C1-C8烷基)。任选地经取代的基团例如包括未经取代的基团 以及被1至4个分别选自卤原子、氰基、羟基、氨基、一-及二-(C1-C6 烷基)氨基、C1-C6烷基、及卤代C1-C6烷基的取代基取代的基团。杂环 烷基包括其中杂环烷基包含氮原子或氧原子直接连接至-(CH2)n。
若干具体实施方式中，如式I-IV化合物的Ar1及Ar2分别被选自 5-元至7-元芳香族碳环及杂环其可任选地取代。例如Ar1及Ar2可分别 选自苯基及6-元芳香族杂环，其各自被0、1或2个取代基取代。若干 具体实施方式中，Ar1为苯基或吡啶基，其各自为未经取代或被1、2 或3个如前述取代基取代；优选此等取代基(若有)可分别选自卤原子、 羟基、氰基、氨基、硝基、一-及二-(C1-C6烷基)氨基、C1-C6烷基、卤 代C1-C6烷基、C1-C6烷氧基及卤代C1-C6烷氧基。例如Ar1可含有一个 选自卤原子、C1-C6烷基、C1-C6烷氧基、卤代C1-C6烷基、及卤代C1-C6 烷氧基的取代基。若存在有一或多个Ar1取代基，则至少一个取代基优 选位于邻位(例如Ar1可为取代在2位置的苯基，或取代在3位置的2- 吡啶基)。Ar1基团包括(但非限制性)吡啶-2-基、3-甲基-吡啶-2-基、3- 三氟甲基-吡啶-2-基及3-卤-吡啶-2-基。
在若干具体实施方式中，Ar2为苯基或吡啶基，其各自为未经取代 或被1或2个如前述取代基取代。若干具体实施方式中，一个取代基 位于6元Ar2的对位位置；式II中，-SO2-R7优选位于对位，式I、III 及IV中，任选地取代基优选位于该对位位置。任选地Ar2取代基为前 述取代基，例如包括其中Ra在各次出现时分别是选自下列的基团：(i) 氢、卤原子、氰基及硝基；以及(ii)C1-C8烷基、C2-C8烯基、C2-C8炔基 及3-元至10-元杂环，其各自任选地被1至9个分别选自羟基、卤原子、 C1-C6烷基及卤代C1-C6烷基的取代基取代。优选Ra部分包括卤原子、 羟基、氰基、氨基、一-及二-(C1-C6烷基)氨基、C1-C6烷基、卤代C1-C6 烷基、C1-C6烷氧基、卤代C1-C6烷氧基、C2-C6烷基醚、C1-C6烷酰基、 -(SO2)Rn、-NRxS(O)m、及-N(S(O)m)2；其中m为1或2，Rx为氢或C1-C6 烷基、以及Ra为C1-C6烷基、卤代C1-C6烷基、或5-元至10-元N-连接 杂环基，各个Ra任选地被1至4个分别选自Ra的取代基取代。优选 Ar2取代基包括C1-C4烷基、卤代C1-C4烷基、及式-(SO2)Ra基团，其中 Ra为C1-C4烷基或卤代C1-C4烷基。Ar2基团包括苯基、吡啶基、哒嗪 基、嘧啶基、嗪吡嗪基、吡咯基、咪唑基、吡唑基、噁唑基、异噁唑 基、噻唑基、异噻唑基、及噻二唑基，其各自任选地被1或2个分别 选自卤原子、氰基、C1-C6烷基、卤代C1-C6烷基、C1-C6烷氧基、卤代 C1-C6烷氧基、-SO2-Ra及-SO2NRx-Ra的取代基取代。优选Ar2基为苯基、 吡啶基、异噁唑基、噻二唑基、及吡唑基，其任选地被卤原子、C1-C4 烷基、或卤代C1-C4烷基取代。在若干具体实施方式中，Ar2为苯基或 吡啶基，其各自任选地被1或2个分别选自卤原子、氰基、C1-C4烷基、 卤代C1-C4烷基、C2-C4烷基醚、C1-C4烷酰基、及式-(SO2)Ra基团(其中 Ra为C1-C6烷基或卤代C1-C6烷基)的取代基取代。Ar2基团包括(但非限 制性)苯基、2-吡啶基及3-吡啶基，其各自在4-位置被卤原子、氰基、 甲基、乙基、丙基、异丙基、叔丁基、三氟甲基、2，2，2-三氟乙基、2，2，2- 三氟-1-甲基-乙基、甲烷磺酰基、乙烷磺酰基、丙烷磺酰基、丙烷-2- 磺酰基、三氟甲烷磺酰基或2，2，2-三氟乙烷磺酰基取代。
在式II化合物若干具体实施方式中，Ar2为苯基或吡啶基，任选地 被1或2个分别选自卤原子、氰基、C1-C6烷基、及卤代C1-C6烷基的 取代基取代；以及Ar1为苯基或吡啶基，任选地被卤原子、C1-C6烷基、 卤代C1-C6烷基、C1-C6烷氧基或卤代C1-C6烷氧基取代。式II中，连 接至SO2的Ar2碳原子优选是与连接至N的碳原子隔开至少一个环原 子且优选两个环原子。换言的，对于其中Ar2为苯基的具体实施方式， SO2优选是位于对位(4位)。若干具体实施方式中，R7为C1-C6烷基、 卤代C1-C6烷基、氨基、一-或二-(C1-C6烷基)氨基、或非芳香族杂环(例 如吗啉基、哌啶基、哌嗪基或吡咯啶基)，任选地如前述取代。
在若干具体实施方式中，式III的R3及R4各自分别是选自(i)氢或 (ii)C1-C8烷基、C2-C8烯基、C2-C8炔基、C3-C8烷酮、C1-C8烷酰基、C2-C8 烷基醚、C6-C10芳基C0-C8烷基、5-元至10-元杂环C0-C8烷基、及 -(SO2)C1-C8烷基，其各自任选地被1至9个分别选自Rb的取代基取代。 在其它具体实施方式中，R3及R4各自分别是选自(i)氢以及(ii)C1-C8烷 基、C2-C8烯基、苯基C0-C4烷基、2，3二氢化茚基C0-C4烷基、5-元至 6-元杂芳基C0-C4烷基及4-元至7-元杂环烷基C0-C4烷基，其各自任选 地被1至4个分别选自羟基、卤原子、氨基、C1-C6烷基、卤代C1-C6 烷基、C1-C6烷氧基、及卤代C1-C6烷氧基的取代基取代。代表性的R3 及R4基团包括C1-C6烷基、C2-C6烯基、5-元至7-元杂环C0-C4烷基、 C2-C6烷基醚、2，3二氢化茚基、苄基、1-苯基-乙基、1-苯基-丙基、及 2-苯基-乙基，其各自为5取代或被1至3个分别选自羟基、卤原子及 C1-C4烷基的取代基取代。例如R3及R4中的至少一个为吡啶基C0-C4 烷基、嘧啶基C0-C4烷基、咪唑基C0-C4烷基、或四唑基C0-C4烷基， 其各自被0、1或2个取代基取代。另外，R3及/或R4可接合至R5或 R6基团(连同R3及R4是键连接的N，以及介于N与R5或R6间的任何 碳原子)来形成任选地取代的杂环，例如5-元至7-元单环基或双环基。
在其它具体实施方式中，式III的R3及/或R4可形成任选地取代的 杂环。例如R3及R4可与其键连接的N结合形成一个任选地取代的杂 环；或R3或R4可接合至R5或R6部分来形成任选地取代的杂环。任一 种情况下，结果所得的杂环例如为4-元或5-元至10-元单环基团或双环 基团，该单环基团或双环基团任选地被0至4个取代基取代(例如1至 4个取代基或0、1或2个取代基取代)。在若干具体实施方式中，各个 取代基分别是选自羟基、卤原子、C1-C4烷基、卤代C1-C4烷基、C1-C4 烷氧基、卤代C1-C4烷氧基、C1-C4烷酰基、C1-C4烷氧羰基、氨基羰基、 杂环C0-C8烷基、及杂环C1-C8烷氧羰基。若干具体实施方式中，此等 取代基为低碳烷基如甲基及/或乙基。
包含R3及/或R4的杂环基可为杂芳基，其包含芳香环(例如任选地 取代的吖啶基、苯并咪唑啉基、苯并咪唑基、苯并三唑基、咔唑基、 噌啉基、吲唑基、吲哚啉基、吲哚基、异喹啉基、喹噁啉基、萘啶基、 菲啶基、吩嗪基、吩噻嗪基、吩噁嗪基、酞嗪基、蝶啶基、嘌呤基、 喹啉基、喹噁啉基、喹唑啉基、四氢异喹啉基、或四氢喹啉基)。其中 一个杂芳基为3，4-二氢-1H-异喹啉-2-基。另外，杂环可为任选地取代 的杂环烷基例如一氮庚环基、唑辛基、十氢喹啉基、1，4-二噁-8-吖-螺 [4.5]癸-8-基、咪唑啶基、咪唑啉基、吗啉基、哌啶基、哌嗪基、哒嗪 基、吡唑啶基、吡唑啉基、吡咯啶基、吡咯啉基、硫吗啉基、或1，1- 二酮基-硫吗啉-4-基。可由R3与R4形成的代表性杂环包括(但非限制性) 任选地经取代的一氮庚环、一氮辛环、二氢异喹啉、咪唑、吗啉、八 氢喹啉、哌嗪、哌啶、及吡咯啶。可由R3或R4组合R5或R6形成的杂 环包括(但非限制性)任选地经取代的哌啶及吡咯啶。
式III的R5及R6在若干具体实施方式中分别为(在各次出现时分别 为)氢或任选地取代的C1-C6烷基；此外或另外，任一个R5或R6可与 任何另一个R5或R6接合形成一个任选地取代的5-元至7-元环烷基， 或(如前文讨论)与R3或R4接合形成任选地取代的杂环。
在式IV中，(在若干具体实施方式中)R3为(i)氢或(ii)C1-C8烷基、 C2-C8烯基、C2-C8炔基、C3-C8烷酮、C2-C8烷基醚、C6-C10芳基C0-C8 烷基或5-元至10-元杂环C0-C8烷基，其各自任选地被1至9个分别选 自Rb的取代基取代。在其它具体实施方式中，式IV的R3为(i)氢或 (ii)C1-C6烷基、C2-C6烷基醚、苯基C0-C4烷基、5-元至6-元杂芳基C0-C4 烷基、或4-元至7-元杂环烷基C0-C4烷基，其各自任选地被1至4个 分别选自羟基、卤原子、氨基、C1-C6烷基、卤代C1-C6烷基、C1-C6 烷氧基、及卤代C1-C6烷氧基的取代基取代。代表性的R3基包括氢、 C1-C4烷基、C1-C4烷基醚及苄基，其各自为未经取代或被1至3个分 别选自羟基、卤原子及C1-C4烷基的取代基取代。另外，R3可接合至 R5或R6基团(连同R3所键连接的O，以及任一个介于O与R5或R6间 的碳原子)而形成一个任选地取代的杂环，例如5-元至10-元单环基或 双环基。结果所得杂环可以为例如被0至4(例如0、1或2)个分别选自 羟基、卤原子、C1-C4烷基、卤代C1-C4烷基、C1-C4烷氧基、卤代C1-C4 烷氧基、C1-C4烷酰基、C1-C4烷氧羰基、氨基羰基、杂环C0-C8烷基、 及杂环C1-C8烷氧羰基的取代基取代。
在若干式IV具体实施方式中，R5及R6在各次出现时可分别为氢 或任选地取代的C1-C6烷基；此外或另外，任一个R5或R6可接合至任 何另一个R5或R6而形成一个任选地取代的5-元至7-元环烷基，或(如 前文讨论)与R3接合而形成一个任选地取代的杂环。在若干具体实施方 式中，各个R5及R6为氢。n为1、2或3，在若干具体实施方式中以1 为佳。
若干优选的化合物满足式Ia、IIa、IIIa或IVa中的至少一个，其 中的变量分别是如前文对I、II、III及IV定义：

式Ia                                          式IIa

式IIIa                                        式IVa
代表性式的如I-IV的化合物包括，但不限制于，实施例1-3特别 说明的化合物。显然例中引述的特定化合物只作为代表性化合物，而 非意图限定本发明的范围。此外如前所述，全部本发明化合物可呈水 合物、自由态碱或其医药上可接受的酸加成盐形式存在。
此处提供的经取代的喹唑啉-4-基胺类似物以可检测的方式变更 (调节)类香草配位子诱发的VR1活性，如使用标准试管试验VR1配位 子结合检定分析及/或功能检定分析测定，功能检定分析例如为钙移动 性检定分析、背根神经节检定分析或活体试验疼痛缓解检定分析。此 处所述「VR1配位子结合检定分析」表示标准试管试验受体结合检定 分析，例如由实施例5提供的，而「钙移动性检定分析」(也称作为「信 号转导检定分析」)可使用实施例6的方法进行。简言之，为了评比 VR1的结合，可进行竞争检定分析，其中VR1制剂是与经标记(例如 125I)VR1促效剂及未经标记的试验化合物共同培养。在此处提供的检定 分析，使用的VR1优选为哺乳类VR1，更优选为人类或大鼠VR1。受 体可以重组方式表现或以自然方式表现。VR1制剂例如为可以重组方 式表现人类VR1的得自HEK293细胞或CHO细胞的膜制剂(例如美国 专利第6,482,611号提供的VR1序列)。
与以可检测方式调节类香草配位子结合至VR1的化合物共同培 养，将导致结合至VR1制剂的标记量，相对于在无该化合物存在下结 合的标记量的增减。优选此种化合物在实施例5所述VR1配位子结合 检定分析中具有Ki在VR1小于1μM，更优选小于500nM、100nM、 20nM、10nM、或1nM。通常优选在此种检定分析中减少标记结合至 VR1制剂量的化合物。
如前所述，VR1拮抗剂化合物在若干具体实施方式中是优选的。 此等化合物在实施例6提供的标准试管试验VR1媒介的钙移动检定分 析中，具有IC50值为1μM或以下，优选约100nM或以下，10nM或 以下或1nM或以下。简言之，表达辣椒辣素受体的细胞与感兴趣化合 物和胞内钙浓度指示剂[例如膜可透性钙敏感度染料，例如Fluo-3或 Fura-2(二者皆得自例如分子探针公司，俄勒冈州犹金市，其当结合至 Ca++时各自产生荧光)]接触。此种接触优选是经由细胞在包含化合物及 指示剂中的任一个或二者在溶液的缓冲液或培养基进行。接触维持一 段足够允许染料进入细胞的时间(例如1-2小时)。细胞经洗涤或过滤来 去除过量染料，然后接触类香草受体促效剂(例如辣椒辣素、RTX或欧 凡尼)，优选在等于IC50浓度的浓度接触，以及测定荧光反应。当细胞 接触VR1拮抗剂化合物，以及当细胞接触类香草受体促效剂时，比较 在无试验化合物存在下接触促效剂的细胞，荧光反应通常降低至少 20％，优选至少50％及更优选至少80％。另外或此外，化合物可使用 如实施例9提供的培养背根神经节检定分析、及/或实施例10提供的活 体试验疼痛缓解检定分析来评比化合物活性。此处提供化合物优选在 一或多项此种功能检定分析对VR1活性具有统计上显著的特异性效 果。
在若干具体实施方式中，此处提供的调节剂实质上不会调节配位 子结合至其它细胞表面受体，例如EGF受体酪胺酸激酶或烟碱酸乙酰 胆碱受体。换言之，此等调节剂实质上不会抑制细胞表面受体活性， 例如人表皮生长因子(EGF)受体酪胺酸激酶活性或烟碱酸乙酰胆碱受 体活性(在此种受体的IC50或IC40优选大于1μM，且最优选大于10μM)。 优选调节剂在0.5μM、1μM或更优选10μM浓度不会以可检测方式来 抑制EGF受体活性或烟碱酸乙酰胆碱受体活性。测定EGF受体抑制的 检定分析为业界众所周知，包括Carpenter等人(1979)生物化学期刊， 254：4884及美国专利第5,654,307及6,169,091号及WO 95/19774所述。 测定烟碱酸乙酰胆碱受体抑制的检定分析(例如IC40)也为业界众所周 知，包括Liu及Simon(1997)神经科学函件228：29所述。
优选本发明化合物不具有镇定性。换言的，在测定疼痛缓解的动 物研究模式(例如此处实施例10提供的模式)中为足够产生止痛作用的 最低剂量两倍的化合物剂量，在镇定动物研究模式检定分析(使用 Fitzgerald等人(1989)毒理学49(2-3)：433-9所述方法)只造成短暂镇定 (即持续不超过疼痛缓解持续时间的1/2)，或优选并无统计的显著镇定 作用。优选足够产生镇定的最低剂量的5倍剂量不会产生统计上显著 的镇定作用。更优选此处提供化合物在低于25毫克(优选低于10毫克 /千克)的静脉剂量、或在低于140毫克/千克(优选低于50毫克/千克， 更优选低于30毫克/千克)的口服剂量不会产生镇定。
若有所需，此处提供的化合物可评估若干药理性质包括，但不限 于，口服生物利用率(优选化合物为口服可被生物利用至允许在口服剂 量低于140毫克/千克，优选低于50毫克/千克更优选低于30毫克/千 克又更优选低于10毫克/千克，又更优选低于1毫克/千克及最优选低 于0.1毫克/千克的口服剂量，允许达成化合物的治疗有效浓度)、毒性 (优选化合物为当辣椒辣素受体调节用量给予个体时为无毒)、副作用 (优选化合物当在以治疗有效量给予个体时产生的副作用可媲美安慰 剂)、血清蛋白结合、以及活体内及试管内半衰期(优选化合物具有试管 内半衰期等于活体内半衰期，允许每日4次给药，优选每日3次给药， 更优选每日2次给药及最优选每日一次给药)。此外，血脑屏障的不同 穿透性为化合物经由调节CNS VR1活性治疗疼痛时所需，因此前述总 每日口服剂量可提供此种调节至治疗有效程度，同时使用低的脑部化 合物浓度用来治疗周边神经传导的疼痛是优选的(即此种剂量不会提 供足够显著调节VR1活性的化合物脑部浓度(例如CSF浓度))。业界众 所周知的例行检定分析可用来评比此等性质，识别用于特定用途的优 异化合物。例如用于预测生物利用性的检定分析包括跨人肠细胞单层 包括Caco-2细胞单层转运。化合物在人体对血脑屏障中的穿透性可由 化合物在给予该化合物(例如静脉注射)的实验室动物的脑部浓度预测。 血清蛋白质结合可由白蛋白结合检定分析预测。化合物半衰期是与化 合物给药频率成反比。化合物的试管试验半衰期可如此处实施例7所 述由微粒体半衰期检定分析预测。
毒性及副作用可使用任一种标准方法评比。通常「无毒」一词用 于此处应理解是表示相对意义，意图表示任一种物质已经由美国食品 药物管理局(「FDA」)给予哺乳类(优选为人类)，或符合既定标准，可 由FDA核准用于哺乳类(优选人类)。毒性可使用实施例8提供的对细 胞ATP制造的影响检定分析评估。其它可用的检定分析包括细菌反突 变检定分析例如阿米斯试验(Ames test)，以及标准畸胎发生检定分析及 肿瘤发生检定分析。优选以某种剂量(即可获得治疗有效活体内浓度剂 量，或优选0.01、0.05、0.1、0.5、1、5、10、40或50毫克/千克注射 给药或口服给药剂量)给予此处所述化合物不会导致心脏QT间隔的延 长(即藉天竺鼠、迷你猪或犬的心电图测定)。当每日给药连续5日或优 选10日时，此种剂量也不会造成肝脏肿大，结果导致肝脏对体重的比 例比实验室啮齿类(例如小鼠或大鼠)的匹配对照组的肝脏对体重的比 例增加超过100％，优选不超过75％及更优选不超过50％。此种剂量也 优选不会导致肝肿大，结果与犬或其它非啮齿类哺乳类的匹配而未经 处理的对照组相比，肝对体重比增加50％，优选不超过25％且更优选 不超过10％。
优选化合物也不会促成活体内由肝细胞实质地释放出肝脏酵素 (例如ALT、LDH或AST)。优选前述剂量与实验室啮齿类的匹配未经 处理的对照组的活体试验相比，不会升高酵素血清浓度超过100％，优 选不超过75％及更优选不超过50％。同理，等于最低活体内治疗浓度 的2倍、优选5倍及最优选10倍浓度(在培养基或其它在试管试验接 触细胞或与细胞共同培养的溶液)不会造成在试管试验中，任一种肝脏 酵素由肝细胞以可检测方式释放至培养基，高于得自未经处理细胞的 培养基的基准线浓度。
此外优选化合物不具有作为钠离子通道阻断剂的显著活性，当以 4μM或以下的浓度存在时，具有钠离子特异性配位子(例如箭毒蛙碱、 河豚毒素或非蛋白质强毒素)结合抑制作用低于15％，且更优选抑制低 于10％。钠通道特异性配位子结合检定分析为业界众所周知。此外， 优选化合物不具有显著雄性素拮抗剂活性(例如活体试验采用 Hershberger检定分析，或试管试验采用例如Nellemann等人(2001)毒理 学163(1)：29-38所述检定分析)。优选化合物当以4μM或以下的浓度存 在时，在试管试验检定分析对雄性素受体的活化抑制作用低于15％， 更优选低于10％抑制作用，及最优选低于5％抑制作用。显著活性一词 表示当使用具有统计意义的标准参数检定分析例如学生T试验测定 时，结果与对照组的改变是在p＜0.1的程度，或更优选在p＜0.05的程 度。
供检测目的，如后文详细讨论，此处提供化合物可加同位素标记 或加放射性标记。如此式I引述的化合物可有一个或多个原子是由相 同元素原子所替代，所述原子具有与自然界常见的原子量或质量数不 同的原子量或质量数。可存在在此处化合物的同位素例如包括氢、碳、 氮、氧、磷、氟及氯同位素例如2H、3H、11C、13C、14C、15N、18O、 17O、31P、32P、35S、18F及36Cl。此外，以重同位素取代例如氘(即2H) 可提供代谢稳定度较高的治疗优点，例如活体内半衰期增加、或剂量 需求减低，因此在某些情况下为优选。
VR1调节剂的制备
经取代的喹唑啉-4-基胺类似物通常可使用标准合成方法制备。通 常起始物料可得自供货商例如西革玛亚利叙(Sigma-Aldrich)公司(蒙大 拿州圣路易)，或起始物料可由商业可得前驱物使用既定方案合成。举 例言的，可使用类似反应图1-23的任一图所示的合成途径，连同有机 合成化学界已知的合成方法，或如熟悉技艺人士了解的变化方法。如 下反应图中的「R」表示任一个符合此处所述化合物说明的基团。
下列反应图中「催化剂」一词表示适当的过渡金属催化剂例如， 但非限制于，四(三苯基膦)钯(O)或乙酸钯(II)。此外，催化系统包括配 位子例如，但非限制于，2-(二环己基膦基)联苯及二-叔丁基苯，也包 括碱例如磷酸、碳酸钠或叔丁氧化钠或叔丁氧化钾。过渡金属催化反 应可在周围温度或升高温度使用多种惰性溶剂进行，惰性溶剂包括， 但非限制性于，甲苯、二氧己环、DMF、N-甲基吡咯啶酮、乙二醇二 甲醚、二乙二醇二甲醚及乙腈。当结合适当的金属-芳基反应剂使用时， 过渡金属催化的(杂)芳基-芳基耦合反应可用来制备通式结构式1C、2A 及2F、3C、5A及5H、14C、15A、16D、18D、19C、20C及22C涵 盖的化合物。常用的成对反应剂/催化剂包括芳基二羟基硼酸/钯(O)(铃 木反应；Miyaura及Suzuki(1995)化学综论95：2459)及芳基三烷基锡烷/ 钯(O)(Stille反应；T.N.Mitchell，合成(1992)803)，芳基锌/钯(O)及芳基 革立亚/镍(II)。
「还原」一词表示将硝基官能团还原成为氨基官能团的过程。此 种转形可以采用有机合成业界众所周知的多种方式进行，包括，但非 限制于，催化氢化、使用二氯化锡还原及使用三氯化钛还原。有关还 原方法的综论参考：Hudlicky，M.(1996)有机化学还原ACS单章188。
「活化」一词表示合成转换，其中酰胺部分的羰基被转成适当的 离去基团(L)。此种转换例如可用于制备如通式结构式1F、2E、2G、 5F、11A、14I、15G、16L、17H、19I、20I、21C及23H的化合物。 适合用于进行此种转换的反应剂为有机合成业界人士众所周知，包括， 但非限制于，SOCl2、POCl3及三氟甲烷磺酐。
「氧化」一词表示合成转换，其中甲基被转成羧酸官能团。此种 转换例如可用于制备化合物如10E、11-C、14E、19E及22D。有机合 成业界人士熟知的多种化学剂可用来进行此种转换，包括，但非限制 于，在碱性介质(如氢氧化钠溶液或水性吡啶)中的KMnO4及在酸性介 质(如硫酸)中的K2Cr2O7。
「环化」一词表示合成转换，其中邻-氨基-苯甲酸、邻-氨基-苯甲 酸酯及邻-氨基-苯甲腈被转换成对应3H-喹唑啉-4-酮。执行邻-氨基-苯 甲腈环化的方法包括，但非限制于，与含乙酸钠的回流甲酸进行反应。 执行邻-氨基-苯甲酸环化的方法包括，但不限制于，与甲酰胺在升温下 反应，或与甲脒乙酸盐在惰性溶剂反应，该反应也是在高温下进行。 执行邻-氨基-苯甲酸酯环化的方法包括，但不限制于，与甲脒乙酸盐在 高温下在惰性溶剂中反应。
在反应图8中，「H2N-Prot」表示经保护的氨基官能团如4-甲氧 基苄基胺，以及「脱保护」表示由该方法可去除此种保护基的化学方 法。有关有机合成业界人士使用的保护方法及脱保护方法的综论可参 考：Greene，T.及Wuts，P.有机合成保护基，第3版，约翰威力父子公司， 1999年。
中反应图9中，「亲核基团」一词表示伯胺或仲级胺或烷氧化物。
在反应图19中，「脱保护」一词表示使用有机合成业界人士熟悉 的各种方法裂解苄醚的C-O键来获得「脱保护」醇的方法。此种方法 举例说明于反应图19，其中通式如19I的化合物可被转化成如通式19J 的脱保护醇。执行此种转换的方法包括，但不限制于，使用氢气及适 当催化剂系统如钯/碳或阮尼镍进行氢解反应。有关有机合成业界人士 使用的保护方法及脱保护方法的综论可参考：Greene，T.及Wuts，P.有机 合成保护基，第3版，约翰威力父子公司，1999年。
「去甲基」一词表示裂解甲基醚官能团的Me-O键，如16D转换 成16E。此种转换可以有机合成业界人士熟知的多种方法进行，该等 方法包括，但不限制于，使用氢溴酸处理，使用路易斯酸/亲核基团组 合处理，三甲基硅烷基碘等。
                                           反应图1

                                           反应图2

                                           反应图3

                                           反应图4

                                           反应图5

                                           反应图6

                                           反应图8

                                           反应图9

                                           反应图10

                                           反应图11

                                           反应图12

                                           反应图13

                                           反应图14

                                           反应图15

                                           反应图16

                                           反应图17

                                           反应图18

                                           反应图19

                                           反应图20

                                           反应图21

                                           反应图22

                                           反应图23

若干具体实施方式中，VR1调节剂含有一或多个非对称碳原子， 因此化合物可呈不同立体异构形式存在。此等形式例如可为外消旋形 式或旋光形式。如前述，全部立体异构体皆由本发明所涵盖。虽言如 此，希望获得单一对映异构物(即旋光形式)。制备单一对映异构物的标 准方法包括非对称合成方法以及外消旋混合物的光学分割方法。外消 旋混合物的光学分割例如可由常规方法达成，例如在光学分割剂存在 下结晶，或使用例如对手性HPLC管柱进行层析术。
如前所述，本发明涵盖此处所述化合物的医药上可接受的盐。用 于此处的「医药上可接受的盐」为酸式盐或碱式盐，其被业界通常视 为适合接触人体组织或动物体组织，而无过高毒性、刺激性、过敏反 应或其它问题或并发症。此等盐包括碱性残基如胺类及/或碱金属或碱 土金属的无机酸式盐及有机酸式盐；或酸性残基如羧酸的有机盐。特 定医药盐包括，但不限制于，与下列酸所生成的盐，例如氢氯酸、磷 酸、氢溴酸、苹果酸、乙醇酸、反丁烯二酸、硫酸、氨基磺酸、苯氨 基磺酸、甲酸、甲苯磺酸、甲烷磺酸、苯磺酸、乙烷二磺酸、2-羟基 乙基磺酸、硝酸、苯甲酸、2-乙酰氧基苯甲酸、柠檬酸、酒石酸、乳 酸、硬脂酸、水杨酸、谷氨酸、抗坏血酸、双羟萘酸、丁二酸、反丁 烯二酸、顺丁烯二酸、丙酸、羟基顺丁烯二酸、氢碘酸、苯乙酸、烷 基酸如乙酸、HOOC-(CH2)n-COOH此处n＝0-4等。同理，医药上可接 受的阳离子包括，但不限制于，钠、钾、钙、铝、锂、及铵。本领域 技术人员应一步认识到此处所述化合物的其它医药上可接受的盐，包 括列举在雷明顿制药科学第17版默克出版公司宾州伊士顿1418页 (1985年)。因此，本公开须解译为包括特别引述的化合物的所有医药 上可接受的盐。
广泛的多种合成程序可用于制备医药上可接受的盐。通常，医药 上可接受的盐可由含碱性部分或酸性部分的亲代化合物藉任一种常规 化学方法合成。简言之，此种盐可经由此等化合物的自由态酸性或碱 性形式与化学计算量的适当碱或酸在水或在有机溶剂中，或在二者的 混合物中反应制备；通常以非水性介质如醚、乙酸乙酯、乙醇、异丙 醇或乙腈是优选的。
此处提供化合物的前体药物可经由对化合物中存在的官能团进行 改性，因此改性部分被裂解成为母体化合物而制备。前体药物包括如 下化合物，其中羟基、氨基或巯基键连接至任一个基团，该化合物当 给予哺乳动物体时，被裂解而分别生成自由态羟基、氨基或巯基。前 体药物例如包括，但不限制于，在此处提供的化合物的醇官能团及胺 官能团的乙酸盐、甲酸盐及苯甲酸盐衍生物。优选前体药物包括酰化 衍生物。本领域技术人员应了解可采用多种方法来制备此处提供的化 合物的前体药物。
化合物可经由使用包含至少一个放射性同位素原子的前体来进行 合成而加上放射标记。各个放射性同位素优选为碳(如14C)、氢(例如 3H)、硫(例如35S)、或碘(例如125I)。氚标记化合物也可通过在氚化乙酸 经过铂催化的交换、在氚化三氟乙酸藉酸催化交换、或使用化合物作 为基质让某些化合物接受氚气而制备。此外，若干前体可视需要使用 氚气进行氚-卤素交换，氚气还原不饱和键，或使用硼氚化钠还原。放 射性标记化合物的制备可方便地由放射性标记探针化合物的订制合成 的规定而由放射性同位素供货商进行合成。
医药组合物
本发明也提供包含一或多种VR1调节剂，连同至少一种生理可接 受的载剂或赋形剂的医药组合物。医药组合物例如包含水、缓冲液(例 如中性缓冲食盐水或磷酸盐缓冲食盐水)、乙醇、矿物油、植物油、二 甲亚砜、碳水化合物(例如葡萄糖、甘露糖、蔗糖或葡聚糖)、甘露糖醇、 蛋白质、辅剂、多肽或氨基酸如甘胺酸、抗氧化剂、螯合剂如EDTA 或谷胱甘肽及/或保藏剂中的一种或多种。如前述，其它活性成分可以 (但非必要)含括于此处提供的医药组合物。
医药组合物可调配用于任一种适当的给药方式，包括例如局部给 药、口服给药、经鼻给药、经直肠给药、或经肠道外给药。肠道外一 词用于此处，包括皮下注射、皮内注射、血管内注射(例如静脉注射)、 肌肉注射、椎骨注射、颅内注射、鞘内注射、及腹内注射，以及任一 种类似的注射或输注技术。若干具体实施方式中，以呈适合口服的组 合物为优选。此等剂型例如包括片剂、口含片、糖锭、水性或油性悬 浮液剂、可分散散剂或粒剂、乳液剂、硬胶囊剂或软胶囊剂、或糖浆 剂或酏剂。在又另一具体实施方式中，本发明组合物可调配成冻干制 剂。局部给药用调配剂用于某些疾病为优选(例如治疗皮肤病，如烧烫 伤或搔痒)。
口服给药用组合物进一步包含一或多种成分例如甜味剂、调味剂、 着色剂及/或保藏剂，以提供诱人且可口的制剂。片剂含有活性成分并 混合有生理可接受的适合用于制造片剂的赋形剂。此种赋形剂例如包 括惰性稀释剂(如碳酸钙、碳酸钠、乳糖、磷酸钙或磷酸钠)、造粒剂及 崩解剂(如玉米淀粉或褐藻酸)、粘合剂(如淀粉、明胶或阿拉伯胶)及润 滑剂(如硬脂酸镁、硬脂酸或滑石)。片剂可未包衣，或片剂可由已知技 术包衣，来延迟在胃肠道的崩解及吸收，由此提供长时间持续作用。 例如可使用时间延迟材料如一硬脂酸甘油酯或二硬脂酸甘油酯。
口服用调配剂也可呈硬明胶胶囊剂剂型，其中活性成分混合有惰 性固体稀释剂(如碳酸钙、磷酸钙或高岭土)或呈软明胶胶囊剂，其中活 性成分混合了水介质或油介质(例如花生油、液体石蜡或橄榄油)。
水性悬浮液剂含有活性成分并混合了适合用于制造水性悬浮液剂 的赋形剂。此种赋形剂包括悬浮剂(如羧甲基纤维素钠、甲基纤维素、 羟基丙基纤维素、褐藻酸钠、聚乙烯基吡咯啶酮、西黄蓍胶及阿拉伯 胶)；以及分散剂或湿润剂(例如天然磷脂如卵磷脂、环氧烷与脂肪酸的 缩合产物如聚氧伸乙基硬脂酸酯、环氧乙烷与长链脂肪醇的缩合产物 如十七烷乙基氧基鲸蜡醇、环氧乙烷与衍生自脂肪酸及己糖醇的部分 酯的缩合产物，如聚氧伸乙基山梨糖醇一油酸酯、或环氧乙烷与衍生 自脂肪酸与己糖醇酐部分酯的缩合产物，例如聚伸乙基聚山梨糖醇一 油酸酯)。水性悬浮液剂也包含一或多种保藏剂，例如对羟基苯甲酸乙 酯或对羟基苯甲酸正丙酯、一或多种着色剂、一或多种调味剂，及一 或多种甜味剂例如蔗糖或糖精。
油性悬浮液剂可经由将活性成分悬浮于植物油(如花生油、橄榄 油、芝麻油、或椰子油)或悬浮于矿物油如液体石蜡而调配。油性悬浮 液剂含有增稠剂如蜂蜡、硬石蜡、或鲸蜡醇。可添加例如前述甜味剂 及/或调味剂来提供可口的口服制剂。此种悬浮液剂可由加入抗氧化剂 如抗坏血酸保藏。
适合由加水制备水性悬浮液剂的可分散散剂及粒剂包含活性成分 混合分散剂或湿润剂、悬浮剂以及一或多种保藏剂。适当的分散剂或 湿润剂及悬浮剂是如前述举例说明。也可存在有其它成分如甜味剂、 调味剂、及着色剂。
医药组合物也可呈水包油型乳液剂。油相可为植物油(如橄榄油或 花生油、矿物油如液体石蜡或其混合物)。适当的乳化剂包括天然塑料 (如阿拉伯胶或西黄蓍胶)、天然磷脂(如大豆、卵磷脂，及衍生自脂肪 酸及己糖醇的酯或部分酯)、酸酐(如聚山梨糖醇一油酸酯)、及衍生自 脂肪酸及己糖醇的部分酯与环氧乙烷的缩合产物(如聚氧伸乙基聚山 梨糖醇一油酸酯)。乳液也包含一或多种甜味剂及/或调味剂。
糖浆剂及酏剂可使用甜味剂调配，甜味剂例如为甘油、丙二醇、 山梨糖醇、或蔗糖。此等调配剂也包含一或多种缓和剂、保藏剂、调 味剂及/或着色剂。
局部给药所用的调配剂典型地包含局部用媒剂组合活性成分，含 或不含额外任选地成分。适当的局部用媒剂及其它成分为业界众所周 知，显然媒剂的选择将依据特定物理形式及输送模式决定。局部媒剂 包括水；有机溶剂如醇(如乙醇或异丙醇或甘油)；二醇(如丁二醇、异 戊二醇或丙二醇)；脂肪醇(如羊毛脂)；水与有机溶剂的混合物，以及 有机溶剂混合物如醇与甘油混合物；以脂质为主的材料如脂肪酸、酰 基甘油(包括油如矿物油及天然来源或合成来源的脂肪)、磷酸甘油酯 类、鞘磷脂、及蜡；以蛋白质为主的材料如胶原及明胶；以聚硅氧为 主的材料(包括非挥发性及挥发性)；以及以烃为主的材料如微海绵及聚 合物基体。组合物进一步包括一或多种适合改良施用调配剂的安定性 或功效的成分，例如安定剂、悬浮剂、乳化剂、粘度调整剂、胶凝剂、 保藏剂、抗氧化剂、皮肤渗透促进剂、湿润剂、及持续释放材料。此 等成分例如述在Martindale--额外药典(制药出版社伦敦1993年)及 Martin(编辑)雷明顿制药科学。调配物可包含微胶囊如羟基甲基纤维素 或明胶微胶囊、微脂粒、白蛋白微球、微乳液、纳米粒子、或纳米胶 囊。
局部调配物可制备成多种物理形式例如包括固体制剂、糊膏剂、 乳膏剂、发泡剂、洗剂、凝胶剂、散剂、水性液剂、及乳液剂。这些 剂型的实体外观及粘度是由调配物中是否存在有乳化剂及粘度调整剂 及其存在量决定。固体制剂通常是坚实且不可倾倒的，通常是调配成 杆状或棒状或调配成颗粒剂型；固体制剂可为不透明或透明，任选地 含有溶剂、乳化剂、湿润剂、润滑剂、香料、染料/着色剂、保藏剂， 及其它可增高或提升终产物功效的活性成分。乳膏剂及洗剂经常彼此 类似，主要只有粘度差异；洗剂及乳膏剂可为不透明、半透明或透明， 经常含有乳化剂溶剂及粘度调整剂以及湿润剂、润滑剂、香料、染料/ 着色剂、保藏剂，及其它可提高或加强终产物功效的活性成分。凝胶 剂可制备成宽广粘度范围，由稠厚或高粘度至稀薄或低粘度。此等调 配物类似洗剂及乳膏剂也含有溶剂、乳化剂、湿润剂、润滑剂、香料、 染料/着色剂、保藏剂，及其它可提高或加强终产物功效的活性成分。 液剂比乳膏剂、洗剂或凝胶剂更稀薄，经常不含乳化剂。液体局部制 剂经常含有溶剂、乳化剂、湿润剂、润滑剂、香料、染料/着色剂、保 藏剂，及其它可提高或加强终产物功效的活性成分。
供局部调配物使用的适当的乳化剂包括，但不限制于，离子性乳 化剂、鲸蜡醇、非离子性乳化剂如聚氧伸乙基油基醚、PEG-40硬脂酸、 鲸蜡硬脂醇聚醚-12、鲸蜡硬脂醇聚醚-20、鲸蜡硬脂醇聚醚-30、鲸蜡 硬脂醇聚醚醇、PEG-100硬脂酸及硬脂酸甘油酯。适当的粘度调整剂 包括，但不限制于，保护胶体或非离子性树胶如羟乙基纤维素、黄胶、 铝硅酸镁、硅氧、微晶蜡、蜂蜡、石蜡、及棕榈酸鲸蜡酯。凝胶组合 物可由添加胶凝剂而生成，胶凝剂例如甲壳聚糖、甲基纤维素、乙基 纤维素、聚乙烯醇、polyquaterniums、羟基乙基纤维素、羟基丙基纤维 素、羟基丙基甲基纤维素、卡波姆(carbomer)或氨化甘草酸盐。适当界 面活性剂包括(但非限在)非离子性界面活性剂、两性离子性界面活性 剂、离子性界面活性剂、及阴离子性界面活性剂。例如局部用调配物 可使用一或多种二甲聚硅氧烷共聚多元醇、聚山梨醇酯20、聚山梨醇 酯40、聚山梨醇酯60、聚山梨醇酯80、月桂酰胺DEA、可可酰胺DEA 及可可酰胺MEA、油基菜碱、可可酰胺丙基磷脂基PG-dimonium氯化 物、及硫酸月桂酯铵。适当保藏剂包括，但非限于，抗微生物剂如对 羟基苯甲酸甲酯、对羟基苯甲酸丙酯、山梨酸、苯甲酸、及甲醛，以 及物理安定剂及抗氧化剂如微生素E、抗坏血酸钠/抗坏血酸及没食子 酸丙酯。适当湿润剂包括(但非限于)乳酸及其它羟基酸及其盐类、甘油、 丙二醇、及丁二醇。适当润滑剂包括羊毛脂醇、羊毛脂、羊毛脂衍生 物、胆固醇、软石蜡、新戊酸异硬脂酯、及矿物油。适当香料及色料 包括(但非限于)FD&C红色40号及FD&C黄色5号。局部调配物可含 括的其它适当成分包括(但非限于)磨蚀剂、吸收剂、防结块剂、消泡剂、 抗静电剂、收敛剂(例如金缕梅、酒精及生药萃取物如甘菊萃取物)、粘 粘合剂/赋形剂、缓冲剂、螯合剂、薄膜生成剂、调理剂、推进剂、不 透明剂、pH调节剂、及保护剂。
调配凝胶剂用的适当局部媒剂例如为：羟基丙基纤维素(2.1％)； 70/30异丙醇/水(90.9％)；丙二醇(5.1％)；及聚山梨醇酯80(1.9％)。发 泡剂调配物用的适当局部用媒剂例如为鲸蜡醇(1.1％)；硬脂醇(0.5％)； Quaternium52(1.0％)；丙二醇(2.0％)；乙醇95 PGF3(61.05％)；去离子 水(30.05％)；P75烃推进剂(4.30％)。全部百分比均为以重量计。
典型的局部组合物的输送模式包括使用手指施用；使用物理施用 器施用，物理施用器例如为布、面纸、拭子、棒或刷；喷雾(包括雾、 气溶胶或发泡喷雾)；滴剂施用；溅洒施用；浸泡以及清洗。也可使用 控制释放媒剂。
医药组合物可制备成无菌注射水性悬浮液或油性悬浮液。依据使 用的媒剂及浓度而定，调节剂可悬浮于或溶解于媒剂。此种组合物可 根据已知技术使用适当分散剂、湿润剂、及/或悬浮剂例如前述所调配。 有用的可接受的媒剂及溶剂包括水、1，3-丁二醇、林格氏溶液及等渗氯 化钠溶液。此外，可使用无菌固定油作为溶剂或悬浮介质。为达成此 项目的，可采用任何品牌的固定油，包括合成一酸甘油酯及合成二酸 甘油酯。此外如油酸等脂肪酸可用于制备注射用组合物，如局部麻醉 剂等辅剂、保藏剂及/或缓冲剂可溶解在媒剂。
调节剂也可制备成栓剂剂型(例如供直肠给药用)。此种组合物的制 法可经由药物与适当的非刺激性赋形剂混合而制备，该赋形剂在常温 为固体，但在肛温为液体，因此在直肠熔解而释放出药物。适当赋形 剂例如包括可可脂及聚乙二醇。
医药组合物可调配成持续释放调配物(即胶囊剂等调配物其在给 药后缓慢释放出调节剂)。此种调配物可使用众所周知的技术制备，例 如口服、经直肠或皮下植入给予或植入预定目标位置。此种调配物使 用的载剂为生物可兼容的也可为生物可分解的；优选调配物可提供相 当稳定的调节剂释放水平。持续释放调配物中的调节剂含量是依据植 入部位、预计释放速率及释放时间、以及欲治疗或欲预防的疾病性质 决定。
额外、或连同前述给药模式，调节剂可方便地加入食物或饮水[例 如给予非人动物包括伴侣动物(如犬及猫)及牲口]。动物饲料及饮水组 合物可调配成动物可连同饮食而服用适量组合物。也可方便地将组合 物提供为预拌剂供添加至饲料或饮水。
调节剂通常是以辣椒辣素受体调节量给药[即可在体液(如血液、血 浆、血清、CSF、滑液、淋巴、细胞间质液、泪液、或尿液)达成足够 抑制类香草配位子在试管试验中结合至VR1所需浓度的用量]。当所用 剂量可获得可分辨的患者效果例如如此处所述的疼痛缓解时，该剂量 被视为治疗有效量。优选系统用药剂量不高于每日每千克体重50毫克 (例如在约0.001毫克至约50毫克/千克体重/日的范围)，口服剂量通常 比静脉剂量高约5-20倍(例如在0.01至40毫克/千克/体重的范围)。
可与载剂材料结合来制造单一剂型的活性成分用量将依据例如接 受治疗的患者及特定给药模式而改变。单位剂型通常含有约10微克至 约500毫克活性成分。最优选剂量可使用例行测试确定，例行测试程 序为业界众所周知。
医药组合物可包装用来治疗对VR1调节有反应的疾病(例如治疗 暴露于类香草配位子、疼痛、搔痒、肥胖、或尿失禁)。经包装的医药 组合物可包括用容器盛装治疗有效量的至少一种如此处所述VR1调节 剂，以及用指令(例如卷标)来指示所含组合物将用来治疗患者的对VR1 调节有反应性的疾病。
使用方法
此处提供的VR1调节剂可用作为辣椒辣素受体在多方面包括试管 试验及活体试验的促效剂或(优选)拮抗剂。在某些方面，VR1拮抗剂 可用来在试管或活体内抑制类香草配位子促效剂(例如辣椒辣素及/或 RTX)结合至辣椒辣素受体。通常此种方法包含在类香草配位子存在 下，在水溶液中且在适合配位子结合辣椒辣素受体的条件下，辣椒辣 素受体接触足量的一种或多种喹唑啉-4-基胺类似物的步骤。辣椒辣素 受体可存在于溶液或悬浮液(例如在离体细胞膜或细胞制剂中)或存在 于培养细胞或离体细胞。在若干具体实施方式中，辣椒辣素受体是由 患者的神经元细胞表现，水溶液为体液。通常，与受体接触的喹唑啉 -4-基胺类似物的数量将获得在水溶液足够在试管内抑制类香草配位子 结合VR1的浓度，例如使用实施例5所述结合检定分析及/或实施例6 所述钙移动检定分析测定。优选一或多种喹唑啉-4-基胺类似物是以类 似物在动物的至少一种体液以治疗有效浓度即100nM或以下，优选 50nM或以下，20nM或以下，或10nM或以下的数量给予动物。例 如化合物可以低于20毫克/千克体重，优选低于5毫克/千克及某些情 况下低于1毫克/千克的剂量给药。
此处也提供调节优选为抑制辣椒辣素受体的信号转导活性的方 法。此种调节可经由辣椒辣素受体(在试管内或在活体内)在适合调节剂 结合受体的条件下，接触有效量的一种或多种此处提供的VR1调节剂 来达成调节。受体可存在于溶液或悬浮液中，存在于培养细胞制剂或 离体细胞制剂中，或存在于患者体内。信号转导活性调节可由检测对 钙离子传导(也称作为钙移动性或钙通量)的功效来进行评比。通常，有 效量VR1调节剂是足够获得在试管试验中如实施例6所述的钙移动检 定分析，获得足够调节VR1信号转导活性的浓度(在与受体接触的水溶 液中)。此处提供的VR1调节剂优选是口服或经局部给予患者(例如人 类)，且存在于动物体的至少一种体液内部，同时调节VR1信号转导活 性。优选用于此种方法的VR1调节剂可以1nM或以下，优选100pM 或以下，更优选20pM或以下在试管内调节VR1信号的转导活性；以 及在体液如血液内以100nM或以下浓度在活体内调节VR1信号的转 导活性。
本发明进一步提供治疗对VR1调节有反应性的疾病的方法。在本 发明的内容中，「处理」一词涵盖疾病改性处理及症状处理，两种处 理皆可为预防性(即在症状开始前处理，以预防、延迟或降低症状的严 重程度)、或治疗性(即在症状开始后处理，以降低症状严重程度及/或 症状持续时间)。一种疾病若其特征为辣椒辣素受体活性不正常，而与 局部存在的类香草配位子数量无关，及/或调节辣椒辣素受体活性可获 得病情或症状的减轻，则该种疾病「对VR1调节有反应性」。此等疾 病包括例如暴露在VR1活化刺激导致的症状、疼痛、呼吸症状例如气 喘及慢性阻塞性肺疾、搔痒、尿失禁、咳嗽、打嗝、及肥胖，容后详 述。此等疾病可使用业界既定标准来诊断及监视。患者包括人类、家 庭伴侣动物及牲畜，而其剂量是如前文说明。
治疗的用法用量是依据使用化合物以及欲治疗的特定病情而改 变。但用于治疗大部分病症，以每日给药4次或4次以下为优选。通 常以每日两次的用法用量为更优选，以每日一次给药为最优选。为了 治疗急性疼痛，希望单剂用药可快速达到有效浓度。但须了解特定患 者的特定剂量及特定治疗计划将依据多项因素，包括采用的特定化合 物活性、年龄、体重、一般健康情况、性别、饮食、给药时间、给药 途径及排泄速率、药物组合以及接受治疗的特定疾病严重程度决定。 通常以使用足够提供有效治疗的最小剂量为优选。患者优选使用适合 用于接受治疗的病情或接受预防病情的医疗标准或兽医标准来监视疗 效。
由于暴露于辣椒辣素受体活化的刺激而出现症状的患者包括因 热、光、催泪瓦斯或酸而引起烧烫伤的患者，以及粘膜(例如通过吞食、 吸入、或眼部接触)暴露于辣椒辣素(例如来自辣椒的辣椒辣素或胡椒喷 雾剂的辣椒辣素)或相关刺激剂例如酸、催泪瓦斯及空气污染的个体。 造成的症状(可使用此处提供化合物治疗的症状)包括例如疼痛、支气管 缩窄、及发炎。
可使用此处提供化合物治疗的疼痛可为慢性或急性疼痛，包括但 非限制于周边神经媒介的疾病(特别为神经病变性疼痛)。此处提供的化 合物可用于治疗例如乳房切除术后疼痛综合征、残肢痛、假性肢痛、 口腔神经病变疼痛、牙痛(牙痛)、假牙痛、疱疹后神经痛、糖尿病性神 经病变、反射交感神经营养失调、三叉神经痛、骨关节炎、类风湿性 关节炎、纤维肌痛、归-伯二氏综合征、感觉异常性股痛、灼烧-口腔综 合征及/或两侧周边神经病变。其它神经病变性疼痛包括灼痛(反射交感 神经营养失调-RSD、继发于周边神经受伤之后)、神经炎(包括例如坐 骨神经炎、周边神经炎、多发性神经炎、视神经炎、发烧后神经炎、 迁移性神经炎、分段性神经炎、及贡博氏神经炎)、神经细胞炎、神经 痛(例如前述神经痛、颈臂神经痛、颅骨神经痛、膝神经痛、舌与喉神 经痛、偏头痛性神经痛、特发性神经痛、肋间神经痛、乳房神经痛、 颚关节神经痛、莫通氏神经痛、鼻睫状神经痛、枕骨神经痛、红斑性 肢痛病、斯路德氏神经痛、脾颚神经痛、眼窝上神经痛及维杜斯氏神 经痛)、手术相关疼痛、肌肉骨骼疼痛、艾滋病相关神经病变、MS-相 关神经病变，及脊柱受伤相关疼痛。头痛包括牵涉周边神经活性的疼 痛例如窦、簇(例如偏头痛性神经痛)，以及若干紧张压力及疼痛和偏头 痛也可如此处所述治疗。例如一旦患者感觉有偏头痛前兆，即刻给予 此处提供的化合物来预防偏头痛。其它可如此处所述治疗的疼痛病情 包括「灼烧口腔综合征」、分娩痛、夏科氏疼痛、肠胀气痛、经痛、 急慢性背痛、痔疮痛、消化不良痛、心绞痛、神经根痛、同位置痛、 及不同位置痛，包括癌症引发的疼痛(例如骨癌患者的疼痛)、蛇毒(例 如毒蛇咬伤、蜘蛛咬伤或昆虫咬伤)引发的疼痛(与发炎)，以及创伤引 发的疼痛(例如术后疼痛、割伤、瘀伤、及骨折引发的疼痛及烧烫伤疼 痛)。其它可如此处所述治疗的疼痛病情包括发炎性肠病、刺激性肠综 合征及/或发炎性肠病。
在若干方面，VR1拮抗剂包括(但非限于)此处特别引述的VR1拮 抗剂可用于治疗机械性疼痛。用于此处「机械性疼痛」一词表示头痛 以外的疼痛，该疼痛并非神经病变或由于暴露于热、冷或外部化学刺 激所导致的结果。机械性疼痛包括物理创伤(热烧烫伤或化学品烧伤或 其它刺激性暴露及/或疼痛性暴露于有害化学品除外)例如术后疼痛及 割伤、瘀血及骨折疼痛；牙痛、假牙痛；神经根痛；骨关节炎、类风 湿性关节炎、纤维肌痛、感觉异常性骨痛、背痛、癌症引发疼痛、心 绞痛、腕管综合征及因骨折、分娩、痔疮、肠胀气、消化不良、以及 月经导致的疼痛。任一种可以Ki小于100μM结合VR1的VR1拮抗剂， 及/或可以EC50小于或等于100μM(如此处所述测定)抑制VR1活性的 VR1拮抗剂皆可使用。优选使用的VR1拮抗剂并非辣椒辣素类似物； 特别优选的VR1拮抗剂为此处提供的拮抗剂。
可治疗的搔痒病情包括干癣性搔痒、洗肾造成的搔痒、疟原性搔 痒，以及阴户炎、接触性皮肤炎、昆虫咬伤及皮肤过敏引发的搔痒。 尿失禁一词用于此处包括脊椎来源的迫肌反射亢进及膀胱过敏，二者 皆可如此处所述治疗。此处提供的化合物也可用作为止咳剂(来预防、 缓解或压制咳嗽)以及用于治疗打嗝，以及促进肥胖患者的减重。此等 方法的治疗有效量通常足够提供所治疗疾病的可检测的缓解。
在其它方面，此处提供的VR1拮抗剂可在组合治疗中用来治疗涉 及发炎成分的疾病。此等疾病包括例如自体免疫病以及已知含发炎成 分的病理性自体免疫病，包括，但不限制于，关节炎(特别是类风湿性 关节炎)、牛皮癣、克罗恩氏病、红斑性狼疮、激躁性肠综合征、组织 移植物排斥以及移植器官的超急性排斥。其它病症包括创伤(例如头部 受伤或脊柱受伤)、心血管病及脑血管病及若干发炎疾病。
对于组合治疗，VR1拮抗剂是连同抗炎剂一起给予患者。VR1拮 抗剂及抗炎剂可存在于同一个医药组合物中，或可以任一种顺序分开 给药。抗炎剂包括例如非类固醇抗炎药(NSAIDs)、非特异性-及环氧合 酶-2(COX-2)特异性-环氧合酶抑制剂、金化合物、皮质类固醇、甲氨蝶 呤、肿瘤坏死因子(TNF)受体拮抗剂、抗-TNFα抗体、抗-C5抗体及介 白质-1(IL-1)受体拮抗剂。NSAIDs例如包括但非限于布洛芬、(例如 ADVILTM、MOTRINTM)、氟比洛芬(ANSAIDTM)、萘普生或萘普生钠(例 如NAPROSYN、ANAPROX、ALEVETM)、双氯芬酸(例如 CATAFLAMTM、VOLTARENTM)、双氯芬酸钠与米索普司妥(misoprostol) 的组合(例如ARTHROTECTM)、舒林苏(CLINORILTM)、欧萨普辛 (oxaprozin)(DAYPROTM)、二氟苯水杨酸(DOLOBIDTM)、吡氧噻嗪 (FELDENETM)、消炎痛(INDOCINTM)、乙哚乙酸(LODINETM)、菲诺洛 芬钙、(NALFONTM)、酮洛芬(例如ORUDISTM、ORUVAILTM)、钠那布 美通(nabumetone)(RELAFENTM)、水杨酸偶氮磺胺吡啶 (AZULFIDINETM)、托美丁钠(TOLECTINTM)以及羟基氯喹(普拉奎诺 (PLAQUENILTM)。特定一类NSAIDs包括可抑制环氧合酶(COX)的化 合物例如赛勒考西(celecoxib)(CELEBREXTM)及罗菲考西 (rofecoxib)(VIOXXTM)。NSAIDs进一步包括水杨酸盐例如乙酰基水杨 酸或阿司匹林、水杨酸钠、水杨酸胆碱及水杨酸镁(TRILISATETM)及双 水杨酯(DISALCIDTM)以及皮质类固醇例如可的松(CORTONETM乙酸 盐)、地塞米松(例如DECADRONTM)、甲基泼尼松龙(MEDROLTM)、泼 尼松龙(PRELONETM)、泼尼松龙钠磷酸盐(PEDIAPREDTM)、以及泼尼 松(例如PREDNICEN-MTM、DELTASONETM、STERAPREDTM)。
此种组合治疗中，VR1拮抗剂的适当剂量通常说明如前。抗炎剂 的剂量及给药方法例如可参考医师桌面手册的制造商指示。在若干具 体实施方式中，VR1拮抗剂与抗炎剂的组合给药可获得产生疗效所需 抗炎剂剂量的降低。如此优选在本发明组合或本发明组合治疗方法的 抗炎剂剂量是低于制造商推荐的未组合给予VR1拮抗剂时，抗炎剂给 药的推荐最高剂量。更优选此种剂量与制造商推荐未与VR1拮抗剂组 合给药时抗炎剂的给药最高剂量相比，是低于该最高剂量的3/4，甚至 更优选低于1/2且高度优选低于1/4，最优选该剂量是低于10％。显然 达成预定效果所需组合中VR1拮抗剂成分的剂量同样是受到组合中的 抗炎剂成分的剂量及抗炎剂强度的影响。
若干优选具体实施方式中，VR1拮抗剂与抗炎剂组合给药可通过 将一或多种VR1拮抗剂以及一或多种抗炎剂包装于同一个包装，或包 装于包装内的独立容器，或优选呈一或多种VR1拮抗剂与一或多种抗 炎剂的混合物给药。优选混合物是调配供口服给药(例如呈丸剂、胶囊 剂、片剂等)。优选包装内有标签指示一种或多种VR1拮抗剂及一或多 种抗炎剂共同给药用来治疗发炎疼痛病症。高度优选组合为其中抗炎 剂包括至少一种COX-2特异性环氧合酶抑制剂例如凡得考西 (valdecoxib)(BEXTRA_)、鲁米拉考西(lumiracoxib)(PREXIGETM)、伊 妥瑞考西(etoricoxib)(ARCOXIA_)、赛勒考西(CELEBREXTM)和/或罗菲 考西(VIOXX_)。
前述方法通常采用VR1拮抗剂调节剂；但此处也提供采用VR1 促效剂的调节剂的方法。此等调节剂例如可用于控制群众运动(作为催 泪瓦斯替代品)或用于人身保护(用于喷雾剂)或作为通过辣椒辣素受体 脱敏治疗疼痛、搔痒或尿失禁的药剂。通常用于群众运动控制或人身 保护的化合物是根据常规催泪瓦斯或胡椒喷雾技术调配与使用。
在不同方面，本发明提供多种非药物的试管使用或活体使用用于 此处提供的化合物。例如此等化合物可加标记或用于检测辣椒辣素受 体及辣椒辣素受体定位(在检体例如细胞制剂或组织切片、制剂或其部 分)。化合物也可用于受体阳性检定分析作为阳性对照，作为测定结合 辣椒辣素受体候选剂能力的标准品，或作为正子发射断层摄影术(PET) 成像的放射追踪剂，或作为单一正子发射计算机断层摄影术(SPECT) 的放射性追踪剂。此种方法可用来决定活体的辣椒辣素受体特性。例 如VR1调节剂可使用业界众所周知的多项技术标记(例如使用此处所 述放射性核种如氚作放射性标记)，且与检体培养一段适当培养时间(例 如首先检定分析一段结合时间测定)。培养后，去除(例如藉洗涤去除) 未结合的化合物，使用适合该标记的任一种方法检测结合化合物(例如 自动放射性摄影术或闪烁计数用于放射性标记化合物；分光光谱术方 法用于检测发光基团及荧光基团)。至于对照，含有经标记化合物以及 更大量(例如10倍大量)未经标记化合物的匹配检体可以相同方式处 理。比对照组有更大量可检测标记留在试验检体，表示检体中存在有 辣椒辣素受体。检测检定分析包括辣椒辣素受体在培养细胞或组织试 样的受体自动放射性摄影(受体映射)可如Kuhar在药理学流行方案 (1998年)约翰威力父子公司，纽约，8.1.1节至8.1.9节所述进行。
此处提供的调节剂也可用于广泛的多种众所周知的细胞分离方 法。例如调节剂可连结至组织培养板或其它撑体内表面，调节剂可用 作为在试管内制动辣椒辣素受体因而分离辣椒辣素受体(例如分离表 达受体的细胞)作为亲和配位子。在一个优选具体实施方式中，连结至 荧光标记如荧光素的调节剂接触细胞，然后藉荧光素活化细胞筛检 (FACS)分析(或分离)。
下列实施例是供举例说明而非限制性的。除非另行规定，否则全 部反应物及溶剂属于标准商业等级，未经进一步纯化即供使用。
实施例1
代表性化合物的制备
本实施例举例说明代表性的经取代的喹唑啉-4-基胺类似物的制 备。本例及随后各例所示质谱数据为电喷洒MS，是在正离子模式下使 用15伏特锥电压，使用微量(Micromass)飞行时间LCT，装配有瓦特氏 (Waters)600泵、瓦特氏996光电二极管数组检测器、吉尔森(Gilson)215 自动取样机以及吉尔森841微注入器获得电喷洒MS。MassLynx(先进 化学发展公司，加拿大多伦多)3.5版软件用于数据的收集与分析。1微 升容积样品注入50×4.6毫米Chromolith SpeedROD C18管柱，以6毫 升/分钟流速使用二相线性梯度洗提。样品使用全吸光比技术在220-340 纳米紫外光范围检测。洗脱条件为流动相A-95/5/0.1水/甲醇/三氟乙酸； 流动相B-5/95/0.05水/甲醇/三氟乙酸。
梯度                时间                    ％B
                    0                       10
                    0.5                     100
                    1.2                     100
                    1.21                    10
总操作运行时间为注入至注入为2分钟。
A.(4-三氟甲基-苯基)-[7-(2-三氟甲基-苯基)-喹唑啉-4-基]-胺(化合物1)
1. 3-硝基-2’-三氟甲基-联苯-4-羧酸甲酯

在2-(三氟甲基)-苯基二羟基硼酸(4.4克，0.0232摩尔)，2-(二环己 基膦基)联苯(111毫克，0.318毫摩尔)及磷酸钾(6.52克，0.031毫摩尔) 在甲苯中的溶液内加入乙酸钯(II)(36毫克，0.160毫摩尔)。反应混合物 以干氮气吹扫10分钟，然后加入4-氯-2-硝基苯甲酸甲酯。反应混合物 在80℃下加热搅拌隔夜，冷却混合物，使用乙酸乙酯经C矿(celite)过 滤。在减压下浓缩，在新鲜乙酸乙酯中摄取，溶液以碳酸氢钠(饱和水 性)洗涤。溶液(硫酸钠)经脱水，在减压下浓缩，然后使用乙酸乙酯作 为洗脱剂经硅胶过滤。在减压下去除溶剂获得纯3-硝基-2’-三氟甲基- 联苯-4-羧酸甲酯，呈油。
2. 3-氨基-2’-三氟甲基-联苯-4-羧酸甲酯

在帕尔氏装置内使用四(三苯基膦)钯(O)(300毫克)在55psi氢气下 氢化3-硝基-2’-三氟甲基-联苯-4-羧酸甲酯(5.54克，0.0169摩尔)的乙醇 溶液。18小时后，混合物经C矿过滤，在减压下浓缩，获得3-氨基-2’- 三氟甲基-联苯-4-羧酸甲酯，呈固体。
3. 7-(2-三氟甲基-苯基)-3H-喹唑啉-4-酮

3-氨基-2’-三氟甲基-联苯-4-羧酸甲酯(5.0克，0.0169摩尔)及甲脒 乙酸酯(2.8克，0.0203摩尔)在2-甲氧基乙醇的溶液回流加热8小时。 冷却混合物，减压下浓缩，获得深色油。残余物溶解在10％氢氧化钠 中，以醚洗涤(3次)。水层使用12N盐酸调整为pH约为4而获得乳状 溶液。溶液使用乙酸乙酯萃取，乙酸乙酯以食盐水洗涤，脱水(硫酸钠) 及在减压下浓缩获得7-(2-三氟甲基-苯基)-3H-喹唑啉-4-酮，呈淡棕色 固体。
4. 4-氯-7-(2-三氟甲基-苯基)-喹唑啉

7-(2-三氟甲基-苯基)-3H-喹唑啉-4-酮(1.12克，0.0039摩尔)在 POCl3的溶液中回流16小时。冷却混合物及在减压下浓缩。残余物分 溶在饱和水性碳酸氢钠及乙酸乙酯。乙酸乙酯层又以碳酸氢钠洗一次， 脱水(硫酸钠)及在减压下浓缩获得粗产物，呈固体。残余物经2英寸硅 胶衬垫(50％乙酸乙酯/己烷类)过滤，在减压下浓缩，获得4-氯-7-(2-三 氟甲基-苯基)-喹唑啉，呈灰黄褐色固体。
5.(4-三氟甲基-苯基)-[7-(2-三氟甲基-苯基)-喹唑啉-4-基]-胺

4-氯-7-(2-三氟甲基-苯基)-喹唑啉(258毫克，0.836毫摩尔)及4-(三 氟甲基)-苯胺(269毫克，1.67毫摩尔)在异丙醇溶液中回流8小时。冷 却溶液，经过滤收集沉淀，以无水醚洗涤(3次)，获得纯质(4-三氟甲基 -苯基)-[7-(2-三氟甲基-苯基)-喹唑啉-4-基]-胺，为单-盐酸盐。质谱 433.1。
B.(4-叔丁基-苯基)-[7-(2-三氟甲基-苯基)-喹唑啉-4-基]-胺(化合物2)
1.7-(2-三氟甲基-苯基)-喹啉-4-酚

组合7-氯喹啉-4-酚(1000毫克，5.55亳摩尔)、2-(三氟甲基)苯基二 羟基硼酸(1583毫克，8.33毫摩尔)及甲苯(50毫升)，氮气通气入溶液 内10分钟。加入乙酸钯(25毫克，0.11毫摩尔)、2-(二环己基膦基)联 苯(78毫克，0.22毫摩尔)及磷酸钾(2353毫克，11.1毫摩尔)及在90℃ 加热16小时。让其冷却，加水(25毫升)及乙酸乙酯(50毫升)，由过滤 去除任何不溶性物质。分离乙酸乙酯层，水层以乙酸乙酯(各25毫升) 萃取两次。组合乙酸乙酯萃取物，脱水(硫酸钠)及蒸发。由硅胶层析术 纯化(94％二氯甲烷/5％甲醇/1％氢氧化铵)，获得110毫克7-(2-三氟甲 基-苯基)-喹啉-4-酚，呈白色固体。
2. 4-氯-7-(2-三氟甲基-苯基)-喹啉

7-(2-三氟甲基-苯基)-喹啉-4-酚(50毫克，0.17毫摩尔)在磷酰氯(10 毫升)的混合物中在90℃下加热16小时。蒸发去除磷酰氯，加冰(100 克)接着小心加入饱和碳酸氢钠。以乙酸乙酯萃取，脱水(硫酸钠)及蒸 发，获得4-氯-7-(2-三氟甲基-苯基)-喹啉，呈黄褐色固体。
3.(4-叔丁基-苯基)-[7-(2-三氟甲基-苯基)-喹啉-4-基]-胺

4-氯-7-(2-三氟甲基-苯基)-喹啉(42毫克，0.14毫摩尔)及4-(叔丁基) 苯胺(41毫克，0.29毫摩尔)在2-丙醇(10毫升)的混合物回流加热3小 时。蒸发混合物，加入1M氢氧化钠(10毫升)，使用乙酸乙酯(各10毫 升)萃取两次，脱水(硫酸钠)及蒸发获得粗产物。由硅胶层析术纯化， 使用75％己烷-乙酸乙酯洗脱获得(4-叔丁基-苯基)-[7-(2-三氟甲基-苯 基)-喹啉-4-基]-胺，呈白色固体。质谱420.2。
C.(4-叔丁基-苯基)-[7-(2-三氟甲基-苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶-4-基]-胺 (化合物3)
1. 5-溴-3-硝基吡啶-2-甲腈

2，5-二溴-3-硝基吡啶(1.77克，6.3毫摩尔；Malinowski(1988)Bull. Soc.Chim.Belg.97：51；也参考US 5,801,183)及氰化亚铜(0.60克，6.69 毫摩尔)在N，N-二甲基乙酰胺(25毫升)的溶液在100℃加热72小时。冷 却后，混合物以水(25毫升)稀释，以乙酸乙酯(各25毫升)萃取两次， 然后以水(各25毫升)洗涤两次。组合乙酸乙酯萃取物经脱水(硫酸钠)， 蒸发，及由急速层析术纯化(50％乙酸乙酯-己烷)，获得5-溴-3-硝基吡 啶-2-甲腈，呈灰色固体。
2. 3-氨基-5-溴吡啶-2-甲腈

5-溴-3-硝基吡啶-2-甲腈(1.5克，5.3毫摩尔)及氯化锡二水合物(5.00 克，26.3毫摩尔)在浓盐酸中混合，让其在室温搅拌隔夜。由加冰后序 处理，小心加入10M氢氧化钠至变成碱性。以乙醚(200毫升)萃取， 脱水(硫酸钠)及蒸发。由硅胶层析术(75％己烷-乙酸乙酯)纯化获得3- 氨基-5-溴吡啶-2-甲腈，呈灰色固体。
3. 7-溴吡啶并[3，2-d]嘧啶-4-酚

3-氨基-5-溴吡啶-2-甲腈(504毫克，2.00毫摩尔)及乙酸钠(312毫 克，3.81毫摩尔)在甲酸(20毫升)的混合物回流16小时。通过蒸发至白 色固体后序处理，加入3N氢氧化钠(50毫升)。过滤去除任何未溶解的 材料，然后由加入浓盐酸至达到pH3再度生成自由态嘧啶酚。收集7- 溴吡啶并[3，2-d]嘧啶-4-酚让其干燥隔夜。
4.溴-4-氯吡啶并[3，2-d]嘧啶

7-溴吡啶并[3，2-d]嘧啶-4-酚(35毫克，0.15毫摩尔)及磷酰氯(10毫 升)的混合物在90℃下加热16小时。蒸发去除磷酰氯，加冰(100克) 接着小心加入饱和碳酸氢钠。以乙酸乙酯萃取两次，脱水(硫酸钠)及蒸 发获得溴-4-氯吡啶并[3，2-d]嘧啶，呈白色固体。
5.(7-溴-吡啶并[3，2-d]嘧啶-4-基)-4-叔丁基-苯基)-胺

溴-4-氯吡啶并[3，2-d]嘧啶(35毫克，0.14毫摩尔)及4-(叔丁基)胺(43 毫克，0.29毫摩尔)在2-丙醇(10毫升)的混合物回流加热3小时。蒸发 混合物，加入1M氢氧化钠(10毫升)，以乙酸乙酯(各10毫升)萃取两 次，脱水(硫酸钠)，及蒸发获得粗产物。由硅胶层析术纯化，以75％ 己烷-乙酸乙酯洗脱，获得(7-溴-吡啶并[3，2-d]嘧啶-4-基)-4-叔丁基-苯 基)-胺，呈白色固体。
6.(4-叔丁基-苯基)-[7-(2-三氟甲基-苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶-4-基]- 胺

(7-溴-吡啶并[3，2-d]嘧啶-4-基)-4-叔丁基-苯基)-胺(36毫克，0.1毫 摩尔)，2-(三氟甲基)苯基-二羟基硼酸(29毫克，0.15毫摩尔)在1，2-二 甲氧基乙烷(10毫升)中组合，氮气通入混合物10分钟。添加四(三苯基 膦)钯(O)(12毫克，0.01毫摩尔)及2M碳酸钠(1毫升)，在80℃下加热 48小时。让混合物冷却至室温，以水(10毫升)稀释，以乙酸乙酯(各10 毫升)萃取。脱水(硫酸钠)，蒸发，在制备性硅胶板(2000微米)使用75％ 己烷-乙酸乙酯洗脱纯化，获得(4-叔丁基-苯基)-[7-(2-三氟甲基-苯基)- 吡啶并[3，2-d]嘧啶-4-基]-胺，呈淡黄色固体。质谱422.2。
D.(4-叔丁基-苯基)-[6-(2-三氟甲基-苯基)-酞嗪-1-基]-胺(化合物4)
1. 4-溴-2-二溴甲基-苄腈

4-溴-2-甲基-苄腈(19.6克，0.1摩尔)及溴(39.0克，0.22摩尔)在四 氯化碳(500毫升)的混合物中使用500瓦太阳灯16小时。让其冷却至 室温及过滤去除丁二酰亚胺。完全蒸发产物，获得4-溴-2-二溴甲基- 苄腈，呈黄色粉末。
2. 5-溴-3-羟基-2，3-二氢-异吲哚-1-酮

4-溴-2-二溴甲基-苄腈(7.0克，19.8毫摩尔)与乙腈(150毫升)组合。 逐滴加入硝酸银(7.0克，41.2毫摩尔)在水(40毫升)的混合物，所得半 透明黄色液体回流72小时。蒸发去除混合物，加入1M氢氧化钠(100 毫升)。以乙酸乙酯(各100毫升)萃取两次。溶液经脱水(硫酸钠)，蒸发 及由硅胶层析术(80％己烷-乙酸乙酯)纯化，获得600毫克4-溴-2-甲酰 基-苄腈及1250毫克5-溴-3-羟基-2，3-二氢-异吲哚-1-酮，呈白色固体。
3. 6-溴-酞嗪-1-酚

5-溴-3-羟基-2，3-二氢-异吲哚-1-酮(1.0克，4.39毫摩尔)与肼水合物 (10毫升)组合，让悬浮液在室温下搅拌16小时。收集6-溴-酞嗪-1- 酚，呈白色固体。
4. 6-溴-1-氯-酞嗪

6-溴-酞嗪-1-酚(300毫克，1.33毫摩尔)在磷酰氯(10毫升)的混合物 在90℃加热2小时。蒸发去除磷酰氯，加冰(100克)，接着小心加入饱 和碳酸氢钠。以乙酸乙酯萃取，脱水(硫酸钠)及蒸发获得4-氯-7-(2-三 氟甲基-苯基)-喹啉，呈白色固体。
5.(6-溴-酞嗪-1-基)-(4-叔丁基-苯基)-胺

6-溴-1-氯-酞嗪(500毫克，2.05毫摩尔)及4-(叔丁基)苯胺(611毫克， 4.10毫摩尔)在2-丙醇(10毫升)的混合物回流加热3小时。蒸发去除混 合物，加入1M氢氧化钠(10毫升)，以乙酸乙酯(各10毫升)萃取两次， 脱水(硫酸钠)及蒸发获得粗产物。由硅胶层析术纯化，以二氯甲烷洗脱， 接着以95％二氯甲烷-甲醇洗脱，获得(6-溴-酞嗪-1-基)-(4-叔丁基-苯 基)-胺，呈白色固体。
6.(4-叔丁基-苯基)-[6-(2-三氟甲基-苯基)-酞嗪-1-基]-胺

(6-溴-酞嗪-1-基)-(4-叔丁基-苯基)-胺(60毫克，0.19毫摩尔)，2-(三 氟甲基)苯基-二羟基硼酸(50毫克，0.26毫摩尔)在1，2-二甲氧基乙烷(10 毫升)组合，氮气通气入混合物10分钟。加入四(三苯基膦)钯(O)(12毫 克，0.01毫摩尔)及2M碳酸钠(1毫升)，在80℃加热48小时。让混合 物冷却至室温，以水10毫升稀释，以乙酸乙酯(各10毫升)萃取两次。 脱水(硫酸钠)，蒸发及在制备性硅胶板(2000微米)使用75％己烷-乙酸 乙酯洗脱纯化，获得(4-叔丁基-苯基)-[6-(2-三氟甲基-苯基)-酞嗪-1-基]- 胺，呈枯草色固体。质谱421.2。
F.(4-叔丁基-苯基)-[7-(2-三氟甲基-苯基)-吡啶并[2，3-d]嘧啶-4-基]-胺 (化合物5及6)
1.酮基-3-苯基丙醛

甲苯及乙氧化钠(40毫升21％乙醇溶液)的混合物加热至50℃。加 入2-三氟甲基苯乙酮(20.0克，0.11摩尔)及甲酸乙酯(11.8克，0.16摩 尔)，让其在65℃搅拌12小时。混合物冷却至室温，加入300毫升乙 醚。收集沉淀获得3-酮基-3-苯基丙醛的钠盐。
2. 7-(2-三氟甲基-苯基)-1H-吡啶并[2，3-d]嘧啶-2，4-二酮

精细分割3-酮基-3-苯基丙醛的钠盐(10.0克，0.043摩尔)，加入50 毫升90％磷酸。搅拌至完全溶解。另外以类似方式溶解6-氨基-1H-嘧 啶-2，4-二酮(5.7克，0.043摩尔)在50毫升90％磷酸。将两种溶液组合， 让其在100℃搅拌12小时。让溶液冷却至室温，加入300毫升水，收 集产物呈沾粘性固体。使用醚研磨，获得7-(2-三氟甲基-苯基)-1H-吡 啶并[2，3-d]嘧啶-2，4-二酮，呈白色固体。
3. 2，4-二氯-7-(2-三氟甲基-苯基)-吡啶并[2，3-d]嘧啶

7-(2-三氟甲基-苯基)-1H-吡啶并[2，3-d]嘧啶-2，4-二酮(5.0克，0.016 摩尔)及磷酰氯(100毫升)的混合物在90℃加热36小时。蒸发去除磷酰 氯，加冰(400克)，接着小心加入饱和碳酸氢钠。以乙酸乙酯萃取两次， 脱水(硫酸钠)及蒸发获得2，4-二氯-7-(2-三氟甲基-苯基)-吡啶并[2，3-d] 嘧啶。
4.(4-叔丁基-苯基)-[2-氯-7-(2-三氟甲基-苯基)-吡啶并[2，3-d]嘧啶 -4-基]-胺(化合物5)

在二异丙基乙基胺(260毫克，2.0毫摩尔)在乙腈(5毫)的混合物内 加入叔丁基苯胺(124毫克，1.0毫摩尔)，接着加入(4-叔丁基-苯基)-[2- 氯-7-(2-三氟甲基-苯基)-吡啶并[2，3-d]嘧啶-4-基]-胺(310毫克，1.0毫摩 尔)。混合物加热至80℃6小时。蒸发去除溶剂，分溶在1M氢氧化钠 及乙酸乙酯。溶剂经脱水(硫酸钠)及蒸发。由硅胶层析术(1∶1己烷/乙 酸乙酯)纯化获得一苯胺(4-叔丁基-苯基)-[2-氯-7-(2-三氟甲基-苯基)-吡 啶并[2，3-d]嘧啶-4-基]-胺，呈黄色固体。
5.(4-叔丁基-苯基)-[7-(2-三氟甲基-苯基)-吡啶并[2，3-d]嘧啶-4-基]- 胺(化合物6)

(4-叔丁基-苯基)-[2-氯-7-(2-三氟甲基-苯基)-吡啶并[2，3-d]嘧啶-4- 基]-胺的2-氯取代基可使用有机合成业界人士已知的多种还原条件去 除，例如使用氢解或以氢化铝还原剂去除(例如参考Hudlicky，M.有机 化学还原，ACS单章188：1996)。
F.[7-(3-氟-吡啶-2-基)-喹唑啉-4-基]-(5-三氟甲基-吡啶-2-基)-胺(化合物 7)
1. 7-溴-4-氯-喹唑啉

7-溴-3H-喹唑啉-4-酮(1.24克，0.0055摩尔)在磷酰氯的溶液回流 3.5小时。在减压下去除过量磷酰氯，残余物分溶在乙酸乙酯及饱和水 性碳酸氢钠。乙酸乙酯层经脱水，在减压下去除溶剂，获得7-溴-4-氯- 喹唑啉，呈黄色固体。
2.(7-溴-喹唑啉-4-基)-(5-三氟甲基-吡啶-2-基)-胺

7-溴-4-氯-喹唑啉(200毫克，0.821毫摩尔)及2-氨基-5-三氟甲基- 吡啶(239毫克，1.48毫摩尔)的混合物在230℃加热2分钟。将固体残 余物冷却且分溶在乙酸乙酯及10％氢氧化钠。乙酸乙酯层经脱水(硫酸 钠)，在减压下去除溶剂，经急速层析术纯化，获得(7-溴-喹唑啉-4- 基)-(5-三氟甲基-吡啶-2-基)-胺，呈黄色固体。
3. 3-氟-2-三丁基锡烷基-吡啶

2-溴-3-氟-吡啶(542毫克，3.08毫摩尔)在无水THF的溶液使用干 冰-丙酮浴冷却至-78℃。经注射器以20分钟时间逐滴添加正丁基锂 (1.6M在THF，2.0毫升)至反应混合物。在-78℃搅拌1.5小时后，经注 射器缓慢加入三丁基氯化锡，去除冷却浴。2小时后，反应混合物分溶 在乙酸乙酯及食盐水，乙酸乙酯层经脱水(硫酸钠)及在减压下去除溶 剂。急速层析术(醚/己烷)获得3-氟-2-三丁基锡烷基-吡啶，呈无色油。
4.[7-(3-氟-吡啶-2-基)-喹唑啉4-基]-(5-三氟甲基-吡啶-2-基)-胺

使用类似前文说明的程序，经由耦合(7-溴-喹唑啉-4-基)-(5-三氟甲 基-吡啶-2-基)-胺至3-氟-2-三丁基锡烷基-吡啶而制备[7-(3-氟-吡啶-2- 基)-喹唑啉-4-基]-(5-三氟甲基-吡啶-2-基)-胺。质谱385.1。
G.(4-叔丁基-苯基)-(7-吡啶-2-基-喹唑啉-4-基)-胺(化合物8)
1. 4-溴-2-硝基苄腈

1，4-二溴-2-硝基-苯(3.56毫摩尔)及氰化亚铜(3.74毫摩尔)在 DMA(4毫升)的混合物在100℃搅拌5小时。冷却至室温，以乙酸乙酯 稀释，经C矿过滤，有机层以食盐水洗涤，以硫酸钠脱水及真空浓缩。 残余物由急速层析术(4∶1己烷/乙酸乙酯)纯化，获得4-溴-2-硝基苄腈。
2. 2-氨基-4-溴-苄腈

4-溴-2-硝基苄腈(2.60克，0.0115摩尔)在12N盐酸的悬浮液内在0 ℃分成数份加入SnCl2-2H2O。反应激烈搅拌时生成白色沉淀。1小时 后加冰至反应容器，接着加入10N氢氧化钠至溶液为碱性。水性混合 物以醚萃取(2次)及以乙酸乙酯萃取(1次)，组合有机层以食盐水洗涤。 溶液经脱水(硫酸钠)及在减压下去除溶剂，获得2-氨基-4-溴-苄腈，呈 淡棕色固体。
3. 7-溴-3H-喹唑啉-4-酮

在2-氨基-4-溴-苄腈(550毫克，2.79毫摩尔)在甲酸的溶液内，一 次加入乙酸钠(435毫克，5.30毫摩尔)。反应混合物回流16小时，然 后在减压下去除甲酸获得固体。加入20％水性氢氧化钠及搅拌1小时， 经过滤去除未溶解固体，滤液以12N盐酸酸化而制造白色固体。固体 经过滤收集，以水洗涤(5次)及以醚洗涤(1次)，获得7-溴-3H-喹唑啉-4- 酮，呈灰白色固体。
4. 7-吡啶-2-基-3H-喹唑啉-4-酮

在7-溴-3H-喹唑啉-4-酮(100毫克，0.444毫摩尔)在甲苯/二氧己烷 (3∶1)的混合物中，加入2-三丁基锡烷基吡啶(162毫克，0.444毫摩尔)， 接着加入四-(三苯基膦)钯(O)(26毫克，0.022毫摩尔)。氮气通过溶液 10分钟，然后在氮气气氛下加热搅拌中的溶液至115℃。数分钟后， 反应混合物变均质。16小时后，冷却反应容器，沉淀经过滤收集。固 体以25％乙酸乙酯/己烷洗涤，接着以己烷洗涤，获得7-吡啶-2-基-3H- 喹唑啉-4-酮，呈淡棕色固体。
5.(4-叔丁基-苯基)-(7-吡啶-2-基-喹唑啉-4-基)-胺

使用类似前述程序，由4-氯-7-吡啶-2-基-喹唑啉及4-叔丁基胺制 备(4-叔丁基-苯基)-(7-吡啶-2-基-喹唑啉-4-基)-胺。质谱354.2。
H.(4-叔丁基-苯基)-[7-(3-三氟甲基-吡啶-2-基)-喹唑啉-4-基]-胺盐酸盐 (化合物9)
1. 2-(4-溴-苯基)-3-(三氟甲基)-吡啶

在2-溴-3-(三氟甲基)-吡啶(2.26毫摩尔)，4-溴-苯基二羟基硼酸 (2.49毫摩尔)及在DME(10毫升)的2M碳酸钠(5.65毫摩尔)的经过除气 的混合物内，在氮气气氛下加入Pd(PPh3)4(0.09毫摩尔)。混合物在80 ℃搅拌隔夜，浓缩，使用乙酸乙酯萃取。以硫酸钠脱水，真空浓缩， 由急速层析术(4∶1己烷/乙酸乙酯)纯化，获得2-(4-溴-苯基)-3-(三氟甲 基)-吡啶。
2. 2-(4-溴-3-硝基-苯基)-3-(三氟甲基)-吡啶

在2-(4-溴-苯基)-3-(三氟甲基)-吡啶(0.93毫摩尔)在硫酸(4毫升)的 溶液内小心加入发烟硝酸(2毫升)。混合物在室温下搅拌30分钟。混 合物倒至冰水(20毫升)，收集沉淀。沉淀在乙酸乙酯中溶解，使用饱 和碳酸氢钠中和，以硫酸钠脱水，真空浓缩，获得2-(4-溴-3-硝基-苯 基)-3-(三氟甲基)-吡啶。
3. 2-硝基-4-(3-三氟甲基-吡啶-2-基)-苄腈

向2-(4-溴-3-硝基-苯基)-3-(三氟甲基)-吡啶(0.55毫摩尔)在DMA(4 毫升)的溶液加入CuCN(0.60毫摩尔)。混合物在110℃下搅拌4小时。 冷却至室温，以20毫升乙酸乙酯稀释，经C矿衬垫过滤。滤液以食盐 水洗涤，以硫酸钠脱水，真空浓缩及由急速层析术(1∶1己烷/乙酸乙酯) 纯化，获得2-硝基-4-(3-三氟甲基-吡啶-2-基)-苄腈。
4. 2-氨基-4-(3-三氟甲基-吡啶-2-基)-苄腈

向2-硝基-4-(3-三氟甲基-吡啶-2-基)-苄腈(0.44毫摩尔)在浓盐酸(6 毫升)的以冰水冷却溶液内加入SnCl2(1.457毫摩尔)。混合物在室温下 搅拌2小时。使用氢氧化钠中和，以乙酸乙酯萃取，以硫酸钠脱水， 及真空浓缩。残余物由急速层析术(4∶1己烷/乙酸乙酯)纯化，获得2- 氨基-4-(3-三氟甲基-吡啶-2-基)-苄腈。
5. 7-(3-三氟甲基-吡啶-2-基)-喹唑啉-4-酚

2-氨基-4-(3-三氟甲基-吡啶-2-基)-苄腈(0.41毫摩尔)与乙酸钠(1.23 毫摩尔)在甲酸(10毫升)中回流16小时。真空蒸发去除溶剂，残余物悬 浮在20毫升20％氢氧化钠，在室温下搅拌30分钟。过滤，以乙酸乙 酯萃取，以硫酸钠脱水及真空浓缩，获得7-(3-三氟甲基-吡啶-2-基)-喹 唑啉-4-酚。
6. 4-氯-7-(3-三氟甲基-吡啶-2-基)-喹唑啉

7-(3-三氟甲基-吡啶-2-基)-喹唑啉-4-酚(0.38毫摩尔)在POCl3(5毫 升)回流18小时。真空蒸发去除溶剂，然后以碳酸氢钠小心中和及以 乙酸乙酯萃取。以硫酸钠脱水，真空浓缩获得4-氯-7-(3-三氟甲基-吡啶 -2-基)-喹唑啉。
7.(4-叔丁基-苯基)-[7-(3-三氟甲基-吡啶-2-基)-喹唑啉-4-基]-胺盐 酸盐

4-氯-7-(3-三氟甲基-吡啶-2-基)-喹唑啉(0.16毫摩尔)及4-叔丁基-苯 胺(0.32毫摩尔)在IPA(4毫升)在80℃搅拌6小时。冷却混合物，收集 沉淀，获得(4-叔丁基-苯基)-[7-(3-三氟甲基-吡啶-2-基)-喹唑啉-4-基]- 胺盐酸盐。质谱422.2。
I.(4-叔丁基-苯基)-[2-甲基-7-(3-三氟甲基-吡啶-2-基)-喹唑啉-4-基]-胺 盐酸盐(化合物10)
1. 2-氨基-4-(3-三氟甲基-吡啶-2-基)-苄酰胺

2-氨基-4-(3-三氟甲基-吡啶-2-基)-苄腈(0.50毫摩尔)在70％硫酸(10 毫升)的混合物在110℃下搅拌1小时。冷却至室温，以碳酸氢钠中和， 以乙酸乙酯萃取，以硫酸钠脱水及真空浓缩。残余物由急速层析术(3∶2 己烷类/乙酸乙酯)纯化，获得2-氨基-4-(3-三氟甲基-吡啶-2-基)-苄酰胺。
2. 2-乙酰氨基-4-(3-三氟甲基-吡啶-2-基)-苄酰胺

向2-氨基-4-(3-三氟甲基-吡啶-2-基)-苄酰胺(0.5毫摩尔)及吡啶 (0.55毫摩尔)在THF(5毫升)的溶液内加入乙酰氯(0.55毫摩尔)。混合 物在室温搅拌10分钟。经真空浓缩，以乙酸乙酯萃取，以食盐水洗涤， 以硫酸钠脱水及真空浓缩。使用醚研磨获得2-乙酰氨基-4-(3-三氟甲基 -吡啶-2-基)-苄酰胺。
3. 2-甲基-7-(3-三氟甲基-吡啶-2-基)-喹唑啉-4-酚

将2-乙酰氨基-4-(3-三氟甲基-吡啶-2-基)-苄酰胺悬浮在20毫升 20％氢氧化钠，在室温搅拌30分钟。过滤，酸化至pH＝6，以乙酸乙 酯萃取，真空浓缩获得2-甲基-7-(3-三氟甲基-吡啶-2-基)-喹唑啉-4-酚。
4. 4-氯-2-甲基-7-(3-三氟甲基-吡啶-2-基)-喹唑啉

使用类似前述程序，由2-甲基-7-(3-三氟甲基-吡啶-2-基)-喹唑啉-4- 酚制备4-氯-2-甲基-7-(3-三氟甲基-吡啶-2-基)-喹唑啉。
5.(4-叔丁基-苯基)-[2-甲基-7-(3-三氟甲基-吡啶-2-基)-喹唑啉-4- 基]-胺

使用类似前述程序，经由缩合4-氯-2-甲基-7-(3-三氟甲基-吡啶-2- 基)-喹唑啉与4-叔丁基苯胺，制备(4-叔丁基-苯基)-[2-甲基-7-(3-三氟甲 基-吡啶-2-基)-喹唑啉-4-基]-胺。质谱436.2。
J.[7-(3-甲基-吡啶-2-基)-喹唑啉-4-基]-(4-三氟甲基-苯基)-胺(化合物11)
1. 7[B(OH)2]-3H-喹唑啉-4-酮

根据Torssell等人(1957)Arkiv Kemi10：497制备的3-氨基-4-乙酯基 -苯基二羟基硼酸(1.46克，0.007摩尔)与甲脒乙酸酯(1.17克，0.008摩 尔)在甲氧基乙醇的混合物回流7小时。加入额外当量甲脒乙酸酯及持 续回流16小时。冷却深色溶液，在减压下去除溶剂。加入约100毫升 水，搅拌10分钟，在烧结玻璃漏斗收集浅灰色固体。固体以水洗涤(3 次)，脱水，由甲醇再结晶获得7[B(OH)2]-3H-喹唑啉-4-酮，呈白色固 体。
2. 7-(3-甲基-吡啶-2-基)-3H-喹唑啉-4-酮

7[B(OH)2]-3H-喹唑啉-4-酮(115毫克，0.605毫摩尔)，2-溴-3-甲基- 吡啶(103毫克，0.605毫摩尔)，碳酸钠(0.757毫升，1.51毫摩尔，2M 水溶液)及DMF(4毫升)的溶液以氮气扫除10分钟。加入催化量的四 -(三苯基膦)钯(O)(35毫克，0.03毫摩尔)，在95℃加热16小时。冷却 反应混合物，以水稀释及以乙酸乙酯萃取。组合有机层经脱水(硫酸钠)， 在减压下浓缩，粗产物使用硅胶层析术(甲醇/二氯甲烷)纯化获得7-(3- 甲基-吡啶-2-基)-3H-喹唑啉-4-酮。
3.[7-(3-甲基-吡啶-2-基)-喹唑啉-4-基]-(4-三氟甲基-苯基)-胺

使用类似前述程序(例如参考反应图1及2)，由7-(3-甲基-吡啶-2- 基)-3H-喹唑啉-4-酮分成二步骤制备[7-(3-甲基-吡啶-2-基)-喹唑啉-4- 基]-(4-三氟甲基-苯基)-胺。质谱380.1。
K.(4-叔丁基-苯基)-[7-(3-三氟甲基-吡啶-2-基)-喹唑啉-4-基]-胺盐酸盐 (化合物9)
1. 2-对甲苯基-3-三氟甲基-吡啶

在2-氯-3-(三氟甲基)-吡啶(70.1毫摩尔)，对甲苯基二羟基硼酸(70.6 毫摩尔)及2M碳酸钠(175.0毫摩尔)在DME(200毫升)的经过除气的混 合物内在氮下加入Pd(PPh3)4(2.8毫摩尔)。混合物在80℃搅拌隔夜，浓 缩，以乙酸乙酯萃取。以硫酸钠脱水，真空浓缩，通过硅胶衬垫，获 得2-对甲苯基-3-三氟甲基-吡啶。
2. 2-(4-甲基-3-硝基-苯基)-3-(三氟甲基)-吡啶

在2-对甲苯基-3-三氟甲基-吡啶(8.4毫摩尔)在硫酸(6毫升)的溶液 内小心加入发烟硝酸(2毫升)。混合物在室温搅拌60分钟。混合物倒 入冰水(30毫升)，以乙酸乙酯萃取，以1N氢氧化钠中和，以硫酸钠脱 水及真空浓缩，获得2-(4-甲基-3-硝基-苯基)-3-(三氟甲基)-吡啶。
3. 2-硝基-4-(3-三氟甲基-吡啶-2-基)-苯甲酸

在2-(4-甲基-3-硝基-苯基)-3-(三氟甲基)-吡啶(7.1毫摩尔)在吡啶 (10毫升)及水(5毫升)的混合物的溶液内分成数份加入KMnO4(25.3毫 摩尔)。混合物在110℃搅拌4小时然后又加入25.3毫摩尔KMnO4及 10毫升水。混合物在110℃搅拌隔夜。冷却至室温，经C矿衬垫过滤。 滤液经真空浓缩，以水稀释，以乙酸乙酯洗涤水溶液。以2N硫酸中和 水溶液及收集沉淀获得2-硝基-4-(3-三氟甲基-吡啶-2-基)-苯甲酸。
4. 2-氨基-4-(3-三氟甲基-吡啶-2-基)-苯甲酸

2-硝基-4-(3-三氟甲基-吡啶-2-基)-苯甲酸(3.84毫摩尔)在95％乙醇 (100毫升)的溶液中使用10％-Pd-C(150毫克)氢化并隔夜。经C矿衬垫 过滤，滤液经浓缩，获得2-氨基-4-(3-三氟甲基-吡啶-2-基)-苯甲酸。
5. 7-(3-三氟甲基-吡啶-2-基)-喹唑啉-4-酚

2-氨基-4-(3-三氟甲基-吡啶-2-基)-苯甲酸(1.95毫摩尔)在甲酰胺(10 毫升)的混合物在145℃搅拌4小时。冷却至室温，以20毫升水稀释及 收集沉淀获得7-(3-三氟甲基-吡啶-2-基)-喹唑啉-4-酚。
6.(4-叔丁基-苯基)-[7-(3-三氟甲基-吡啶-2-基)-喹唑啉-4-基]-胺盐 酸盐

使用类似程序(例如参考反应图1及2)，由7-(3-三氟甲基-吡啶-2- 基)-喹唑啉-4-酚分成二步骤制备(4-叔丁基-苯基)-[7-(3-三氟甲基-吡啶 -2-基)-喹唑啉-4-基]-胺盐酸盐。质谱422.2。
L.[6-(丙烷-2-磺酰基)-吡啶-3-基]-[7-(3-三氟甲基-吡啶-2-基)-喹唑啉 -4-基]-胺盐酸盐(化合物12)
1. 2-异丙基硫烷基-5-硝基-吡啶

2-巯基-5-硝基吡啶(10.0毫摩尔)及氢化钠(14.0毫摩尔)在DMA(10 毫升)的混合物在室温搅拌30分钟。加入2-碘丙烷(11.0毫摩尔)及在室 温搅拌隔夜。以水稀释，以乙酸乙酯萃取，以食盐水洗涤，以硫酸钠 脱水及真空浓缩。残余物由急速层析术(9∶1己烷/乙酸乙酯)纯化获得2- 异丙基硫烷基-5-硝基-吡啶。
2. 5-硝基-2-(丙烷-2-磺酰基)-吡啶

2-异丙基硫烷基-5-硝基-吡啶(3.5毫摩尔)及KMnO4(14.1毫摩尔) 在乙酸(15毫升)的混合物在110℃加热隔夜。过滤，滤液经浓缩及以碳 酸氢钠中和。使用乙酸乙酯萃取，以食盐水洗涤，以硫酸钠脱水及真 空浓缩，获得2-(丙烷-2-磺酰基)-5-硝基-吡啶。
3. 6-(丙烷-2-磺酰基)-吡啶-3-基胺

2-(丙烷-2-磺酰基)-5-硝基-吡啶(0.44毫摩尔)悬浮在10毫升浓盐 酸，加入氯化锡二水合物(1.43毫摩尔)及在室温搅拌2小时。使用碳酸 氢钠中和。以乙酸乙酯萃取，以食盐水洗涤，以硫酸钠脱水及真空浓 缩获得6-(丙烷-2-磺酰基)-吡啶-3-基胺。
4.[6-(丙烷-2-磺酰基)-吡啶-3-基]-[7-(3-三氟甲基-吡啶-2-基)-喹唑 啉-4-基]-胺盐酸盐

使用实施例1H.7所述方法获得的[6-(丙烷-2-磺酰基)-吡啶-3- 基]-[7-(3-三氟甲基-吡啶-2-基)-喹唑啉-4-基]-胺盐酸盐。质谱473.1。
M.其它代表性经取代的喹唑啉-4-基胺类似物
使用常规修改，变更起始物料并采用额外步骤来制备本发明涵盖 的其它化合物。表II列举的化合物是使用前述方法制备带有显然易见 的修改。
                                           表II
                                    代表性经取代的喹唑啉-4-基胺类似物




















其它制备的化合物列举于表III。使用的缩写为：Ph＝苯基；Py＝ 吡啶；Me＝甲基；Et＝乙基；tBu＝叔-丁基；thia＝(1，3，4)噻二唑；pyraz＝1H- 吡唑；isopr＝异丙基；MeO＝甲氧基；EtO＝乙氧基；PrO＝丙氧基；MeA＝ 甲基氨基；EtA＝乙基氨基；PrA＝丙基氨基；BuA＝丁基氨基；DMA＝ 二甲基氨基；DEA＝二乙基氨基。表III指示的可变位置是如如下结构 式所示：
                                   
                                        表III 化合物 Ar1 Ar2 R2   MS 143. 2-CF3-Ph 4-环己基-Ph H   447.2 144. 2-CF3-Ph 4-CF3-Ph isopr   475.1 145. 2-CF3-Ph 4-tBu-Ph CF3   489.2 146. 2-Cl-Ph 4-(CF(CF3)2)-Ph H   499.1 147. 2-F-Ph 4-(CF(CF3)2)-Ph H   483.1 148. 2-MeO-Ph 4-(CF(CF3)2)-Ph H   495.1 149. 2-CF3-Ph 5-tBu-isox-3yl H   412.1 150. 2-CF3-Ph 5-tBu-thia-2yl H   429.1 151. 2-CF3-Ph 5-tBu-pyraz-3yl H 152. 3-CF3-Py-2yl 6-CF3-Py-3yl -NH-(6-CF3-Py-3yl)   595.1 153. 3-CF3-Py-2yl 6-Me-Py-3yl H   381.1 154. 3-CF3-Py-2yl 5-Cl-Py-2yl H 155. Py-2yl 4-CF3-Ph H   366.1 156. 3-F-Py-2yl 4-tBu-Ph H   372.2 157. 3-F-Py-2yl 4-CF3-Ph H   384.1 158. 3-Cl-Py-2yl 4-tBu-Ph H   388.1 159. 3-Cl-Py-2yl 4-CF3-Ph H   400.1 160. 3-CF3-Py-2yl 4-CF3-Ph H   434.1 161. 3-CF3-Py-2yl 4-F-Ph H   384.1 162. 3-CF3-Py-2yl 4-Cl-Ph H   400.1 163. 3-CF3-Py-2yl 4-乙酰基-Ph H   408.1 164. 3-CF3-Py-2yl 4-氰基-Ph H   391.1
化合物 Ar1 Ar2 R2   MS 165. 3-CF3-Py-2yl 4-(CF(CF3)2)-Ph H   534.1 166. 3-CF3-Py-2yl 4-CF3-Ph Me   448.1 167. 3-CF3-Py-2yl 4-CF3-Ph Cl 168. 3-CF3-Py-2yl 4-CF3-Ph -O-CH2CH2OH   494.1 169. 3-CF3-Py-2yl 4-CF3-Ph -O-CH2CH2-DMA   521.2 170. 3-CF3-Py-2yl 4-CF3-Ph -O-(CH2)3-DMA   535.2 171. 3-CF3-Py-2yl 4-CF3-Ph MeA   463.1 172. 3-CF3-Py-2yl 4-CF3-Ph DMA   477.1 173. 3-CF3-Py-2yl 4-isopr-Ph H   408.2 174. 3-CF3-Py-2yl 6-MeO-Py-3yl H   397.1 175. 3-CF3-Py-2yl 3-Me-4-isopr-Ph H   422.2 176. 3-MeO-Py-2yl 4-CF3-Ph H   396.1 177. 3-Pro-Py-2yl 4-CF3-Ph H   424.2 178. 3-Pro-Py-2yl 4-isopr-Ph H   398.2 179. 2-Cl-Ph 4-CF3-Ph H   399.1 180. 2，4-diCl-Ph 4-CF3-Ph H   433.0 181. 2-Cl-Ph 4-tBu-Ph H   387.2 182. 2，4-diCl-Ph 4-tBu-Ph H   421.1 183. 3-CF3-Py-2yl 4-CF3-Ph MeO 184. 3-Cl-Py-2yl 6-CF3-Py-3yl H   401.1 185. 2-CF3-Ph 4-CF3-Ph 吗啉-4基   519.1 186. 3-CF3-Py-2yl 3-MeO-Ph H   396.1 187. 3-CF3-Py-2yl 6-tBu-Py-3yl H   423.2 188. 3-Cl-Py-2yl 6-tBu-Py-3yl H   389.1 189. 3-Pro-Py-2yl 6-tBu-Py-3yl H   413.2 190. 3-CF3-Py-2yl 4-(isopr-SO2)-Ph H   472.1 191. 3-CF3-Py-2yl 5-CF3-Py-2yl Me   449.1 192. 3-CF3-Py-2yl 6-tBu-Py-3yl Me   437.2 193. 3-CF3-Py-2yl 6-CF3-Py-3yl CF3   503.1 194. 3-CF3-Py-2yl 6-CF3-Py-3yl n-Pr   477.1
化合物 Ar1 Ar2 R2   MS 195. 3-CF3-Py-2yl 6-tBu-Py-3yl n-Pr   465.2 196. 3-CF3-Py-2yl 5-CF3-Py-2yl n-Pr   477.1 197. 3-CF3-Py-2yl 6-CF3-Py-3yl Et   463.1 198. 3-CF3-Py-2yl 6-tBu-Py-3yl Et 199. 3-CF3-Py-2yl 6-tBu-Py-3yl CF3   491.2 200. 3-CF3-Py-2yl 4-(tBu-NH-SO2)-Ph Me   515.2 201. 3-CF3-Py-2yl 6-isopr-Py-3yl H   409.2 202. 3-CF3-Py-2yl 6-isopr-Py-3yl n-Pr   451.2 203. 3-CF3-Py-2yl 6-isopr-Py-3yl Me   423.2 204. 3-CF3-Py-2yl 6-tBu-Py-3yl -O-(CH2)CH2OH   483.2 205. 3-CF3-Py-2yl 6-CF3-Py-3yl Cl   469.1 206. 3-CF3-Py-2yl 6-CF3-Py-3yl -N-(CH2)CH2(CH3)2   520.2 207. 3-CF3-Py-2yl 4-CF3-Ph CN   325.0 208. 3-CF3-Py-2yl 4-CF3-Ph Ph   510.1 209. 3-CF3-Py-2yl 5-CF3-Py-2yl 氯甲基   483.1 210. 3-CF3-Py-2yl 4-CF3-Ph 氯甲基 211. 3-NO2-Py-2yl 6-CF3-Py-3yl H   412.1 212. 3-CF3-Py-2yl 4-CF3-Ph -CH2SO2CH3   526.1 213. 3-CF3-Py-2yl 6-CF3-Py-3yl -CH2SO2CH3   527.1 214. 3-Cl-Py-2yl 6-CF3-Py-3yl Me   415.1 215. 3-CF3-Py-2yl 4-(CH3SO2)-Ph H   445.1 216. 2-(CH3SO2)-Ph 4-CF3-Ph H 217. 2-(CH3SO2)-Ph 6-CF3-Py-3yl H 218. 3-(DMA-SO2)-Py-2yl 4-CF3-Ph H 219. 2-(CH3SO2)-Ph 4-CF3-Ph Me 220. 2-(CH3SO2)-Ph 6-CF3-Py-3yl Me 221. 3-(DMA-SO2)-Py-2yl 4-CF3-Ph Me 222. 3-CF3-Py-2yl 4-CF3-Ph -(CH2)2-S-Me 223. 3-CF3-Py-2yl 6-CF3-Py-3yl -(CH2)2-S-Me
化合物 Ar1 Ar2 R2   MS 224. 3-CF3-Py-2yl 4-CF3-Ph -(CH2)2-SO2-Me 225. 3-氰基-Py-2yl 4-CF3-Ph Me 226. 3-Cl-Py-2yl 4-(CF3SO2)-Ph H   464.0 227. 3-CF3-Py-2yl 4-CF3-Ph -CH2-CN   473.1 228. 3-CH3-Py-2yl 4-tBu-Ph H   368.2 229. 3-CH3-Py-2yl 6-CF3-Py-3yl H   381.1 230. 3-CH3-Py-2yl 4-isopr-Ph H   354.2 231. 3-CH3-Py-2yl 4-Et-Ph H   340.2
其它制备的化合物列举于表IV。使用的缩写如前文对表III所述。 可变位置显示在如下结构式：
                                        
                                                  表IV 化合物 Ar1 Ar2 R2 MS 232. 2-CF3-Ph 4-CF3-Ph -NH-(4-CF3-Ph) 593.1 233. 2-CF3-Ph 4-(CF3-SO2)-Ph Cl 532.2 234. 2-CF3-Ph 4-(吗啉-4yl-SO2)-Ph Cl 549.1 235. 2-CF3-Ph 4-tBu-Ph -N-CH2CH(CH3)2 493.2 236. 2-CF3-Ph 4-(吗啉-4yl-SO2)-Ph -N-CH2CH(CH3)2 586.2 237. 2-CF3-Ph 4-(吗啉-4yl-SO2)-Ph -N-isopr 572.2 238. 2-CF3-Ph 4-(吗啉-4yl-SO2)-Ph -N-(CH2)2CH(CH3)2 600.2 239. 2-CF3-Ph 4-(吗啉-4yl-SO2)-Ph N-(CH2)6CH(CH3)2 240. 2-CF3-Ph 6-CF3-Py-3yl H 435.1 241. 2-CF3-Ph 5-CF3-Py-2yl Cl 469.1 242. 3-Cl-Py-2yl 4-tBu-Ph H 389.1
化合物 Ar1 Ar2 R2   MS 243. 3-Cl-Py-2yl 4-CF3-Ph H   401.1 244. 3-Cl-Py-2yl 4-[C(CH3)2CN]-Ph H   400.1 245. 3-Cl-Py-2yl 4-[C(CH3)2CH2OMe]-Ph H   419.2 246. 3-Cl-Py-2yl 4-isopr-Ph H   375.1 247. 3-Cl-Py-2yl 4-(2-丁基)-Ph H   389.1 248. 3-Cl-Py-2yl 4-Cl-Ph H   367.0 249. 3-Cl-Py-2yl 3-Me，4-CF3-Ph H   415.1 250. 3-Cl-Py-2yl 4-[CH(CH3)(CF3)]-Ph H   429.1 251. 3-Cl-Py-2yl 4-环戊基-Ph H   401.1 252. 3-Cl-Py-2yl 4-环己基-Ph H   415.2 253. Py-2yl 4-CF3-Ph H   367.1 254. Py-2yl 4-tBu-Ph H   355.2 255. Py-2yl 4-isopr-Ph H   341.2 256. Py-2yl 4-(2-丁基)-Ph H   355.2 257. Py-2yl 4-环戊基-Ph H   367.2 258. Py-2yl 4-环己基-Ph H   381.2 259. 3-Cl-Py-2yl 6-CF3-Py-3yl H   402.1 260. 3-Cl-Py-2yl 4-tBu-Ph Me   403.2 261. 3-Cl-Py-2yl 4-isopr-Ph Me   389.1 262. 3-Cl-Py-2yl 4-CF3-Ph Me   415.1 263. 2-Cl-Ph 4-tBu-Ph H   388.1 264. 2-Cl-Ph 4-isopr-Ph H   374.1 265. 2-Cl-Ph 4-(2-丁基)-Ph H   388.1 266. 3-CH3-Py-2yl 4-CF3-Ph H   400.1 267. 3-CH3-Py-2yl 4-tBu-Ph Me   383.2 268. 3-CH3-Py-2yl 4-isopr-Ph Me   369.2 269. 3-CH3-Py-2yl 4-CF3-Ph Me 270. 3-CH3-Py-2yl 4-(2-丁基)-Ph Me 271. 3-CH3-Py-2yl 4-环戊基-Ph Me 272. 3-CF3-Py-2yl 4-tBu-Ph Me
化合物 Ar1 Ar2 R2  MS 273. 3-CF3-Py-2yl     4-isopr-Ph     Me 274. 3-CF3-Py-2yl     4-CF3-Ph     Me 275. 3-CH3-Py-2yl     4-(CH3-SO2)-Ph     Me 276. 3-CH3-Py-2yl     4-(CF3-SO2)-Ph     Me 277. 3-CH3-Py-2yl     6-CF3-Py-3yl     Me 278. 3-CF3-Py-2yl     4-tBu-Ph     H 279. 3-CF3-Py-2yl     4-isopr-Ph     H 280. 3-CF3-Py-2yl     4-CF3-Ph     H 281. 3-CF3-Py-2yl     4-环戊基-Ph     H 282. 3-CF3-Py-2yl     4-(吗啉-4yl-SO2)-Ph     H 283. 3-CH3-Py-2yl     4-(吗啉-4yl-SO2)-Ph     Me 284. 3-CH3-Py-2yl     4-tBu-Ph     环丁基  423.2 285. 3-CH3-Py-2yl     4-isopr-Ph     环丁基  409.2 286. 3-CH3-Py-2yl     4-CF3-Ph     环丁基  435.2 287. 3-CH3-Py-2yl     4-(CF3-SO2)-Ph     环丁基  499.1 288. 3-CH3-Py-2yl     5-CF3-Py-2yl     环丁基  436.2 289. 3-CH3-Py-2yl     6-CF3-Py-3yl     环丁基
制备的额外化合物列举于表V。使用的缩写如前文表III所述。可 变位置显示于如下结构式：
                                                    
                                                         表V 化合物 Ar1 Ar2 R2   MS 290. 3-CF3-Py-2yl 4-tBu-Ph H   423.2 291. 3-CF3-Py-2yl 4-(tBu-NH-SO2)-Ph H   502.1 292. 3-CF3-Py-2yl 6-tBu-Py-3yl H   424.2 293. 3-CF3-Py-2yl 4-CF3-Ph Me   449.1 294. 3-CF3-Py-2yl 6-CF3-Py-3yl Me 295. 3-CF3-Py-2yl 5-CF3-Py-2yl Me   450.1 296. 3-Me-Py-2yl 4-CF3-Ph H   381.1 297. 3-Me-Py-2yl 6-CF3-Py-3yl H   382.1 298. 3-Me-Py-2yl 4-tBu-Ph H   369.2 299. 3-Cl-Py-2yl 4-CF3-Ph Me   415.1 300. 3-Cl-Py-2yl 6-CF3-Py-3yl Me   416.1 301. 3-Cl-Py-2yl 4-(CF3SO2)-Ph Me   479.0 302. 3-Cl-Py-2yl 4-CF3-Ph H   401.1 303. 3-Cl-Py-2yl 6-CF3-Py-3yl H   402.1 304. 3-Cl-Py-2yl 4-(CF3SO2)-Ph H   465.0 305. 3-Cl-Py-2yl 6-tBu-Py-3yl Me   404.2 306. 3-Cl-Py-2yl 4-tBu-Ph Me   403.2 307. 3-CF3-Py-2yl 4-isopr-Ph H   409.2
Ar1-基体、Het-基体、及Ar2-基体表列举可由类似前述方法制备 的多种额外代表性化合物。化合物可经由组合来自Het-基体的任何成 元与来自Ar1-基体及Ar2-基体的任何成元形成。例如得自Ar1-基体成 元111与得自Het-基体成元202的组合获得部分111202。然后此部分 与得自Ar2-基体的成元312组合而形成111202312，其为(7-吡啶-2-基- 喹唑啉-4-基)-(4-三氟甲基-苯基)-胺。

                                           Ar1-基体

                                           Het-基体

                                           Ar2-基体

实施例2
代表性化合物的制备
本实施例举例说明代表性的经取代的2-氨基烷基-喹唑啉-4-基胺 类似物的制备。
A.[2-吡咯啶-1-基甲基-7-(3-三氟甲基-吡啶-2-基)-喹唑啉-4-基]-(4-三氟 甲基-苯基)-胺(化合物308)
1. 2-对-甲苯基-3-三氟甲基-吡啶

向2-氯-3-(三氟甲基)-吡啶(70.1毫摩尔)、对-甲苯基二羟基硼酸 (70.6毫摩尔)、及2M碳酸钠(175.0毫摩尔)在二甲基醚(DME；200毫 升)的经过除气的混合物内，在氮下加入Pd(PPh3)4(2.8毫摩尔)。混合物 在80℃搅拌隔夜，浓缩，以乙酸乙酯萃取。以硫酸钠脱水，经真空浓 缩，通过硅胶衬垫获得2-对-甲苯基-3-三氟甲基-吡啶。
2. 2-(4-甲基-3-硝基-苯基)-3-(三氟甲基)-吡啶

向2-对-甲苯基-3-三氟甲基-吡啶(8.4毫摩尔)在硫酸(6毫升)的 溶液内小心加入发烟硝酸(2毫升)。混合物在室温搅拌60分钟。混合 物倒至冰水(30毫升)上，以乙酸乙酯萃取，以1N氢氧化钠中和，以 硫酸钠脱水，及真空浓缩获得2-(4-甲基-3-硝基-苯基)-3-(三氟甲基)-吡 啶。
3. 2-硝基-4-(3-三氟甲基-吡啶-2-基)-苯甲酸

向2-(4-甲基-3-硝基-苯基)-3-(三氟甲基)-吡啶(7.1毫摩尔)在吡 啶(10毫升)及水(5毫升)的混合物的溶液内，分成数份添加KMnO4(25.3 毫摩尔)。混合物在110℃搅拌4小时，然后又以10毫升水加入25.3 毫摩尔KMnO4。混合物在110℃搅拌隔夜。冷却至室温，通过C矿(celite) 衬垫过滤。滤液经真空浓缩，以水稀释及以乙酸乙酯水溶液洗涤。水 溶液以2N盐酸中和及收集沉淀获得2-硝基-4-(3-三氟甲基-吡啶-2-基)- 苯甲酸。
4. 2-硝基-4-(3-三氟甲基-吡啶-2-基)-苄酰胺

2-氨基-4-(3-三氟甲基-吡啶-2-基)-苯甲酸(25克)与SOCl2(50毫升) 的混合物回流4小时及浓缩。残余物溶解在二氯甲烷(DCM)，以冰水 浴冷却，NH3气体通过溶液30分钟，在室温搅拌15分钟。浓缩及以 水洗涤获得2-硝基-4-(3-三氟甲基-吡啶-2-基)-苄酰胺。
5. 2-氨基-4-(3-三氟甲基-吡啶-2-基)-苄酰胺

使用50psi氢气及100毫克10％Pd/C在乙醇氢化2-硝基-4-(3-三 氟甲基-吡啶-2-基)-苄酰胺(1.0克，0.0032摩尔)。16小时后，混合物经 C矿过滤，在减压下浓缩获得2-氨基-4-(3-三氟甲基-吡啶-2-基)-苄酰胺， 呈固体。
6. 2-氯甲基-7-(3-三氟甲基-吡啶-2-基)-3H-喹唑啉-4-酮

2-氨基-4-(3-三氟甲基-吡啶-2-基)-苄酰胺(100毫克，0.356毫摩尔) 在2-氯-1，1，1-三甲氧基乙烷(bp 138℃)的溶液在130℃加热4小时。混 合物在减压下浓缩获得2-氯甲基-7-(3-三氟甲基-吡啶-2-基)-3H-喹唑啉 -4-酮，呈油，在放置时结晶。
7. 4-氯-2-氯甲基-7-(3-三氟甲基-吡啶-2-基)-喹唑啉

2-氯甲基-7-(3-三氟甲基-吡啶-2-基)-3H-喹唑啉-4-酮(得自前述反 应)及POCl3的混合物回流16小时。冷却混合物并在减压下浓缩。残余 物分溶在乙酸乙酯及饱和碳酸氢钠溶液。乙酸乙酯部分以额外碳酸氢 钠洗涤，然后脱水(硫酸钠)并在减压下浓缩。褐色残余物经两英寸硅胶 (1∶1乙酸乙酯/己烷类洗脱剂)过滤，在减压下浓缩获得4-氯-2-氯甲基 -7-(3-三氟甲基-吡啶-2-基)-喹唑啉。
8.[2-氯甲基-7-(3-三氟甲基-吡啶-2-基)-喹唑啉-4-基]-(4-三氟甲基- 苯基)-胺

4-氯-2-氯甲基-7-(3-三氟甲基-吡啶-2-基)-喹唑啉(42毫克，0.117毫 摩尔)及4-三氟甲基-苯胺(19毫克，0.117毫摩尔)在异丙醇(1毫升)的混 合物在75℃加热4小时。冷却混合物，沉淀以异丙醇洗涤，接着以醚 洗涤获得[2-氯甲基-7-(3-三氟甲基-吡啶-2-基)-喹唑啉-4-基]-(4-三氟甲 基-苯基)-胺，呈一盐酸盐。
9.[2-吡咯啶-1-基甲基-7-(3-三氟甲基-吡啶-2-基)-喹唑啉-4-基]-(4- 三氟甲基-苯基)-胺

[2-氯甲基-7-(3-三氟甲基-吡啶-2-基)-喹唑啉-4-基]-(4-三氟甲基-苯 基)-胺HCl(30毫克，0.058毫摩尔)在吡咯啶(1毫升)的溶液在100℃加 热1小时。在减压下去除过量吡咯啶，残余物分溶在乙酸乙酯与10％ 碳酸氢钠溶液。乙酸乙酯层经脱水(硫酸钠)及在减压下浓缩，获得[2- 吡咯啶-1-基甲基-7-(3-三氟甲基-吡啶-2-基)-喹唑啉-4-基]-(4-三氟甲基- 苯基)-胺，呈泡沫体。质谱517.2。
B.[2-(2，6-二甲基-吗啉-4-基甲基)-7-(2-三氟甲基-苯基)-吡啶并[4，3-d]嘧 啶-4-基]-(4-三氟甲基-苯基)-胺(顺)(化合物309)
1. 4-羟基-6-(2-三氟甲基-苯基)-烟碱酸乙酯

将溶解双(三甲基硅烷基)酰胺锂(LiHMDS)(34克，0.20摩尔)于无 水THF(150毫升)，在氮气气氛下冷却至-70℃。加入4-二甲基氨基-3- 乙氧基-丁-3-烯-2-酮(15克，0.081摩尔；参考杂环化学期刊 (1987)24：1669)及2-(三氟甲基)苯甲酰氯(20.0克，0.097摩尔)在THF(50 毫升)至溶液经历10分钟时间。移开冷却浴及搅拌10分钟。添加乙酸 铵(10克)及乙酸(200毫升)至反应混合物，在减压下蒸馏去除THF。混 合物在60-65℃加热18小时，冷却，及加水(250毫升)及二氯甲烷(250 毫升)。分离二氯甲烷层，水层以二氯甲烷(2×各250毫升)萃取两次。 组合二氯甲烷萃取物，脱水(硫酸镁)及蒸发。由硅胶层析术纯化，获得 4-羟基-6-(2-三氟甲基-苯基)-烟碱酸乙酯呈黄色固体。
2. 4-氯-6-(2-三氟甲基-苯基)-烟碱酸乙酯

4-羟基-6-(2-三氟甲基-苯基)-烟碱酸乙酯(9.0克，0.029摩尔)在磷 酰氯(22克)的混合物在110℃加热2小时。蒸发去除磷酰氯，加冰(100 克)，接着小心加入饱和碳酸氢钠。以乙酸乙酯萃取，脱水(硫酸镁)， 及蒸发获得4-氯-6-(2-三氟甲基-苯基)-烟碱酸乙酯，呈褐色油。
3. 4-氨基-6-(2-三氟甲基-苯基)-烟碱酰胺

4-氯-6-(2-三氟甲基-苯基)-烟碱酸乙酯(5.2克)及28％水性氢氧化铵 (100毫升)的混合物在350毫升可再密封加压容器内加热60小时。冷 却，以乙酸乙酯(3×各100毫升)萃取，脱水(硫酸镁)，及蒸发获得粗产 物。由硅胶层析术纯化，获得4-氨基-6-(2-三氟甲基-苯基)-烟碱酰胺， 呈固体。
4. 2-(2，6-二甲基-吗啉-4-基甲基)-7-(2-三氟甲基-苯基)-吡啶并 [4，3-d]嘧啶-4-醇

4-氨基-6-(2-三氟甲基-苯基)-烟碱酰胺(1克，3.5毫摩尔)，(2，6-二 甲基-吗啉-4-基)-乙酸乙酯(2.85克，14毫摩尔)，乙酸钠(5.0当量)在乙 醇(10毫升)的溶液加热20小时。冷却后，反应混合物在减压下浓缩， 混合物以水(25毫升)稀释，以乙酸乙酯(3×各25毫升)萃取，然后以水 (各25毫升)洗两次，以硫酸镁脱水。蒸发，由急速层析术纯化获得 2-(2，6-二甲基-吗啉-4-基甲基)-7-(2-三氟甲基-苯基)-吡啶并[4，3-d]嘧啶 -4-醇。
5. 4-氯-2-(2，6-二甲基-吗啉-4-基甲基)-7-(2-三氟甲基-苯基)-吡啶并 [4，3-d]嘧啶

2-(2，6-二甲基-吗啉-4-基甲基)-7-(2-三氟甲基-苯基)-吡啶并[4，3-d] 嘧啶-4-醇(0.6克)，2，6-二甲基吡啶(0.62克)及磷酰氯(1.1克)在氯仿(15 毫升)的混合物中回流20小时。冷却混合物，在减压下浓缩。残余物 分溶在乙酸乙酯及饱和碳酸氢钠溶液。以额外碳酸氢钠洗涤乙酸乙酯， 然后经脱水(硫酸钠)及在减压下浓缩。褐色残余物通过两英寸硅胶(1∶1 乙酸乙酯/己烷类洗脱剂)过滤，在减压下浓缩，获得4-氯-2-(2，6-二甲 基-吗啉-4-基甲基)-7-(2-三氟甲基-苯基)-吡啶并[4，3-d]嘧啶。
6.[2-(2，6-二甲基-吗啉-4-基甲基)-7-(2-三氟甲基-苯基)-吡啶并 [4，3-d]嘧啶-4-基]-(4-三氟甲基-苯基)-胺(顺)

4-氯-2-(2，6-二甲基-吗啉-4-基甲基)-7-(2-三氟甲基-苯基)-吡啶并 [4，3-d]嘧啶(43.7毫克，0.1毫摩尔)及4-三氟甲基-苯胺(16.1毫克，0.1 毫摩尔)在乙腈(1毫升)的混合物在80℃加热24小时。混合物经冷却， 沉淀以醚洗涤，获得4-氯-2-(2，6-二甲基-吗啉-4-基甲基)-7-(2-三氟甲基 -苯基)-吡啶并[4，3-d]嘧啶，呈一盐酸盐。质谱561.2。
C.[2-吗啉-4-基甲基-7-(3-三氟甲基-吡啶-2-基)-吡啶并[3，2-a]嘧啶-4- 基]-(4-三氟甲基-苯基)-胺(化合物310)
1. 6’-甲氧基-3-三氟甲基-[2，3’]联吡啶

将2-氯-3-三氟甲基吡啶(37克，0.2摩尔)、2-甲氧基吡啶-5-二羟基 硼酸(32克，0.21摩尔)、四(三苯基膦)钯(O)(9克，7毫摩尔)及2M碳 酸钾(150毫升)在甲苯(500毫升)的混合物在氮气气氛下在90℃加热8 小时。冷却反应混合物及分离成各层。水层以乙酸乙酯(2×250毫升)萃 取，组合有机层以4M氢氧化钠(250毫升)、水(250毫升)及食盐水(250 毫升)洗涤。脱水(硫酸镁)及在减压下浓缩。油在硅胶(50％醚/50％己烷) 由急速层析术纯化，获得标题化合物(48.2克，95％)，呈无色油。
2. 3-三氟甲基-1’H-[2，3’]联吡啶-6’-酮

6’-甲氧基-3-三氟甲基-[2，3’]联吡啶(41克，0.16摩尔)在30％溴化 氢/乙酸(100毫升)回流加热1小时。冷却混合物及过滤，沉淀以醚(100 毫升)洗涤。沉淀移转至10M氢氧化钠(500毫升)及搅拌1小时，溶液 以盐酸处理至溶液为pH7。由过滤收集白色固体及风干获得标题化合 物(36克，93％)，呈白色固体。
3. 5’-硝基-3-三氟甲基-1’H-[2，3’]联吡啶-6’-酮

向3-三氟甲基-1’H-[2，3’]联吡啶-6’-酮(25克，0.1摩尔)在浓硫酸 (100毫升)的溶液内，在0℃逐滴加入发烟硝酸(35毫升)及浓硫酸10毫 升的溶液。反应混合物加热至70℃ 1小时，冷却并倾倒至冰(500毫升) 上。混合物经过滤及滤液以10M氢氧化钠处理至溶液在pH4-5。由过 滤收集沉淀及风干，获得标题化合物(26.2克，92％)，呈白色固体。
4. 6’-氯-5’-硝基-3-三氟甲基-[2，3’]联吡啶

将5’-硝基-3-三氟甲基-1’H-[2，3’]联吡啶-6’-酮(25克，0.088摩尔)、 亚磺酰氯(300毫升)及DMF(3毫升)的混合物回流加热4小时。由旋转 蒸发去除挥发物，残余物分溶在乙酸乙酯(350毫升)与饱和碳酸氢钠溶 液(250毫升)。水层再用乙酸乙酯(250毫升)萃取，组合有机层以食盐 水(250毫升)洗涤。脱水(硫酸镁)及在减压下浓缩，获得标题化合物(25 克，93％)，呈黄色油。
5. 6’-氯-3-三氟甲基-[2，3’]联吡啶-5’-基胺

向6’-氯-5’-硝基-3-三氟甲基-[2，3’]联吡啶(25克，0.082摩尔)及氯 化钙(11克，0.1摩尔)在乙醇(300毫升)及水(50毫升)的溶液内加入铁粉 (45克，0.82摩尔)。溶液回流加热1.5小时，冷却，经C矿过滤。混 合物在减压下浓缩，再度溶解在乙酸乙酯(300毫升)及以食盐水(200毫 升)洗涤。溶液在减压下浓缩，在硅胶(50％醚/50％己烷)由快速层析术 纯化，获得标题化合物(19克，85％)，呈灰黄色固体。
6. 3-氨基-5-[3-(三氟甲基)(2-吡啶基)]吡啶-2-羧酰胺

将6’-氯-3-三氟甲基-[2，3’]联吡啶-5’-基胺(25克，0.091摩尔)、氰 化锌(6.75克，0.058摩尔)、三(二亚苄基丙酮)二-钯(也称作为 「pd2(dba)3」；2.63克，2.86毫摩尔)、1，1’-双(二苯基膦基)铁茂(也称 作为「DPPF」；3.16克，5.72毫摩尔)在DMF(250毫升)及水(2.5毫升) 的溶液在氮气气氛下在120℃加热1小时。加水(30毫升)，溶液又在 120℃加热4小时而完成水解。溶液冷却至0℃，加入饱和氯化铵(200 毫升)、水(200毫升)及浓氢氧化铵(50毫升)溶液。在0℃搅拌1小时后， 过滤去除黄色沉淀，以水(200毫升)及醚-己烷1∶1混合物(200毫升) 洗涤。固体在空气脱水然后真空烘箱脱水，获得(23克，90％)标题化合 物。
7. 2-(氯甲基)-7-[3-(三氟甲基)(2-吡啶基)]-3-氢吡啶并[3，2-d]嘧啶 -4-酮

3-氨基-5-[3-(三氟甲基)(2-吡啶基)]吡啶-2-羧酰胺(23克，81.5毫摩 尔)及2-氯-1，1，1-三甲氧基乙烷(250毫升)的溶液在130℃加热1小时。 由蒸发去除挥发物，研磨固体(50％醚/50％己烷)，获得标题化合物，呈 浅褐色固体(21克，76％)。
8. 2-(吗啉-4-基甲基)-7-[3-(三氟甲基)(2-吡啶基)]-3-氢吡啶并[3，2-d] 嘧啶-4-酮

将2-(氯甲基)-7-[3-(三氟甲基)(2-吡啶基)]-3-氢吡啶并[3，2-d]嘧啶 -4-酮(20克，0.058摩尔)、吗啉(15.66克，0.18摩尔)在乙腈(500毫升) 的溶液在80℃加热12小时。蒸发去除溶液，残余物分溶在乙酸乙酯(500 毫升)及饱和碳酸钠溶液(500毫升)。水层又以乙酸乙酯(250毫升)萃取， 组合有机层以食盐水(500毫升)洗涤。脱水(硫酸镁)，在减压下浓缩， 获得标题化合物(18.8克，83％)呈褐色固体。
9. 4-({-氯-7-[3-(三氟甲基)(2-吡啶基)]吡啶并[3，2-d]嘧啶-2-基}甲 基)-甲基吗啉

2-(吗啉-4-基甲基)-7-[3-(三氟甲基)(2-吡啶基)]-3-氢吡啶并[3，2-d] 嘧啶-4-酮(11.73克，0.03摩尔)，磷酰氯(13.8克，0.09摩尔)及2，6-二 甲基吡啶(9.63克，0.09摩尔)在氯仿(500毫升)的溶液在60℃加热12 小时。蒸发去除溶剂，残余物分溶在乙酸乙酯(500毫升)及饱和碳酸钠 溶液(500毫升)。水层又以乙酸乙酯(250毫升)萃取，以食盐水(500毫 升)洗涤组合有机层。脱水(硫酸镁)及在减压下浓缩，获得标题化合物 (11.5克，94％)，呈褐色固体。
10.[2-吗啉-4-基甲基-7-(3-三氟甲基-吡啶-2-基)-吡啶并[3，2-a]嘧啶 -4-基]-(4-三氟甲基-苯基)-胺

4-({-氯-7-[3-(三氟甲基)(2-吡啶基)]吡啶并[3，2-d]嘧啶-2-基}甲基)- 甲基吗啉(12.2克，0.03摩尔)，4-(三氟甲基)苯胺(4.8克，0.03摩尔)在 乙腈(500毫升)的溶液在80℃加热12小时。蒸发去除溶液，残余物分 溶在乙酸乙酯(500毫升)与饱和碳酸钠溶液(500毫升)。水层又以乙酸 乙酯(2×250毫升)萃取，组合有机层以食盐水(500毫升)洗涤。脱水(硫 酸镁)及在减压下浓缩。残余物在硅胶(90％醚/10％己烷然后100％醚) 纯化，获得标题化合物(12.5克，78％)。质谱534.2。
D.[2-(2-吡咯啶-1-基-乙基)-7-(3-三氟甲基-吡啶-2-基)-喹唑啉-4-基]-(4- 三氟甲基-苯基)-胺(化合物311)
1. 3-苄氧基-丙酸

分成小份将氢化钠(2.22克，60％在矿物油分散液，55.4毫摩尔) 加至苄醇(4.0克，37毫摩尔)在甲苯(100毫升)的冷(0℃)溶液。将3-溴 丙酸乙酯(8.0克，44毫摩尔)逐滴添加至混合物，所得溶液温热至室温 及搅拌1小时。反应由加水骤冷直至全部起泡停止为止。混合物以乙 酸乙酯(100毫升)稀释，以水(100毫升)及食盐水(100毫升)萃取。有机 萃取物以硫酸钠脱水，在减压下去除溶剂，获得粗产物酯，呈澄清油。 油溶解在甲醇(20毫升)及6N氢氧化钠(20毫升)，搅拌1小时。混合 物(约20毫升)经浓缩，以水(20毫升)稀释。水性混合物以二氯甲烷(40 毫升)洗一次。水相以浓盐酸酸化，及以乙酸乙酯(3×50毫升)萃取，组 合乙酸乙酯萃取物以硫酸钠脱水。在减压下去除溶剂，获得标题化合 物，呈澄清油(2.28克，34.0％)，在放置时固化。
2. 2-(2-苄氧基-乙基)-7-(3-三氟甲基-吡啶-2-基)-3H-喹唑啉-4-酮

3-苄氧基-丙酸(1.66克，9.19毫摩尔)在己烷类(40毫升)的溶液冷却 至0℃，逐滴加入草酰氯(3.50克，27.6毫摩尔)。添加完成后，加入 DMF(2滴)，所得混合物搅拌1小时。在减压下去除溶剂，粗产物酰氯 溶解在无水THF(20毫升)。在分开瓶内，溶解2-氨基-4-(3-三氟甲基- 吡啶-2-基)-苄酰胺(2.35克，8.37毫摩尔)在无水THF(40毫升)及吡啶 (0.727克，9.19毫摩尔)，及冷却至0℃。含粗产物酰氯溶液逐滴添加 至第二溶液。让混合物温热至室温及搅拌1小时。10％氢氧化钠(水性 溶液)(20毫升)添加至混合物，溶液搅拌1小时。浓缩混合物(约20毫 升)，以水(20毫升)稀释，以浓盐酸酸化。所得溶液以乙酸乙酯(3×50 毫升)萃取。组合有机萃取物以食盐水洗涤及以硫酸钠脱水。在减压下 去除溶剂，获得标题化合物，呈白色固体(3.24克，82.9％)。
3. 2-(苄氧基-乙基)-4-氯-7-(3-三氟甲基-吡啶-2-基)-喹唑啉

2-(2-苄氧基-乙基)-7-(3-三氟甲基-吡啶-2-基)-3H-喹唑啉-4-酮(3.24 克，7.62毫摩尔)溶解在氯仿(40毫升)及2，6-二甲基吡啶(2.45克，22.9 毫摩尔)。逐滴加入磷酰氯(1.77毫升，19.0毫摩尔)，所得溶液回流加 热18小时。冷却溶液，在减压下去除溶剂。粗产物残余物分溶在乙酸 乙酯(200毫升)及饱和碳酸氢钠(水溶液)(200毫升)。去除有机相，水相 以乙酸乙酯(200毫升)萃取。组合两种萃取物，以食盐水(200毫升)洗 涤，以硫酸钠脱水。去除溶剂，获得标题化合物，呈浅褐色固体(2.47 克，73.1％)。
4.[2-(2-苄氧基-乙基)-7-(3-三氟甲基-吡啶-2-基)-喹唑啉-4-基]-(4- 三氟甲基-苯基)-胺

2-(苄氧基-乙基)-4-氯-7-(3-三氟甲基-吡啶-2-基)-喹唑啉(2.47克， 5.57毫摩尔)溶解在乙腈(50毫升)及4-三氟甲基-苯胺(0.986克，6.12毫 摩尔)的溶液。混合物加热至80℃ 2小时形成白色沉淀。溶液在冰浴冷 却及加入乙醚(25毫升)。过滤去除白色沉淀，真空脱水获得标题化合 物，呈一盐酸盐(2.96克，87.8％)。
5. 2-[4-(4-三氟甲基-苯基氨基)-7-(3-三氟甲基-吡啶-2-基)-喹唑啉 -2-基]-乙醇

[2-(2-苄氧基-乙基)-7-(3-三氟甲基-吡啶-2-基)-喹唑啉-4-基]-(4-三 氟甲基-苯基)-胺盐酸盐(2.96克，4.89毫摩尔)溶解在甲醇(1 50毫升)， 及加入10％ Pd/C(200毫克)。混合物在60℃在50p.s.i.氢化8小时。混 合物经C矿快速过滤，C矿滤饼以热甲醇(200毫升)洗涤。在减压下去 除溶剂，获得标题化合物一盐酸盐，呈白色固体(1.75克，69.5％)。
6.[2-(2-氯-乙基)-7-(3-三氟甲基-吡啶-2-基)-喹唑啉-4-基]-(4-三氟 甲基-苯基)-胺

2-[4-(4-三氟甲基-苯基氨基)-7-(3-三氟甲基-吡啶-2-基)-喹唑啉-2- 基]-乙醇盐酸盐(1.54克，2.99毫摩尔)溶解在亚磺酰氯(20毫升)，加热 至60℃ 1小时。在减压下去除过量亚磺酰氯，残余物使用乙醚研磨， 获得标题化合物一盐酸盐，呈浅褐色固体(1.48克，92.8％)。
7.[2-(2-吡咯啶-1-基-乙基)-7-(3-三氟甲基-吡啶-2-基)-喹唑啉-4- 基]-(4-三氟甲基-苯基)-胺

将[2-(2-氯-乙基)-7-(3-三氟甲基-吡啶-2-基)-喹唑啉-4-基]-(4-三氟 甲基-苯基)-胺盐酸盐(20毫克，0.0375毫摩尔)溶解于乙腈/10％二异丙 基乙基胺(0.187毫升)，加入0.2N吡咯啶在乙腈溶液(0.281毫升)。混 合物在70℃加热18小时。在减压下去除溶剂，粗反应混合物分溶在乙 酸乙酯(1毫升)及1N氢氧化钠。去除有机萃取物，水相再度以乙酸乙 酯(1毫升)萃取。组合有机萃取物经小块硅胶衬垫过滤，以丙酮洗涤， 获得标题化合物，呈浅褐色固体(18毫克，90％)。
E.[2-(3-吗啉-4-基-丙基)-7-(3-三氟甲基-吡啶-2-基)-喹唑啉-4-基]-(4-三 氟甲基-苯基)-胺盐酸盐(化合物313)
1. 3-[4-羟基-7-(3-三氟甲基-吡啶-2-基)-喹唑啉-2-基]-丙酸乙酯

向2-氨基-4-(3-三氟甲基-吡啶-2-基)-苄酰胺(0.5毫摩尔)及吡啶 (0.55毫摩尔)在THF(5毫升)的溶液内，加入3-氯羰基-丙酸乙酯氯化物 (0.55毫摩尔)。混合物在室温搅拌20分钟，加入20毫升21％乙酸钠在 乙醇，在50℃搅拌30分钟。浓缩，加水，过滤，酸化至pH6，收集 沉淀，获得3-[4-羟基-7-(3-三氟甲基-吡啶-2-基)-喹唑啉-2-基]-丙酸乙 酯。
2. 3-[4-氯-7-(3-三氟甲基-吡啶-2-基)-喹唑啉-2-基]-丙酸乙酯

使用类似前述程序，由3-[4-羟基-7-(3-三氟甲基-吡啶-2-基)-喹唑啉 -2-基]-丙酸乙酯制备3-[4-氯-7-(3-三氟甲基-吡啶-2-基)-喹唑啉-2-基]- 丙酸乙酯。
3. 3-[4-(4-三氟甲基-苯基氨基)-7-(3-三氟甲基-吡啶-2-基)-喹唑啉 -2-基]-丙酸乙酯

使用类似前述程序，由3-[4-氯-7-(3-三氟甲基-吡啶-2-基)-喹唑啉 -2-基]-丙酸乙酯制备3-[4-(4-三氟甲基-苯基氨基)-7-(3-三氟甲基-吡啶 -2-基)-喹唑啉-2-基]-丙酸乙酯。
4. 3-[4-(4-三氟甲基-苯基氨基)-7-(3-三氟甲基-吡啶-2-基)-喹唑啉 -2-基]-丙酸

向3-[4-(4-三氟甲基-苯基氨基)-7-(3-三氟甲基-吡啶-2-基)-喹唑啉 -2-基]-丙酸乙酯(0.5毫摩尔)在THF(20毫升)及水(20毫升)的混合物内， 加入氢氧化锂(1.5毫摩尔)。混合物在60℃搅拌2小时。浓缩，加水， 以醚萃取，水层酸化至pH4-5，以乙酸乙酯萃取及浓缩，获得3-[4-(4- 三氟甲基-苯基氨基)-7-(3-三氟甲基-吡啶-2-基)-喹唑啉-2-基]-丙酸。
5. 1-吗啉-4-基-3-[4-(4-三氟甲基-苯基氨基)-7-(3-三氟甲基-吡啶-2- 基)-喹唑啉-2-基]-丙-1-酮(化合物312)

向3-[4-(4-三氟甲基-苯基氨基)-7-(3-三氟甲基-吡啶-2-基)-喹唑啉 -2-基]-丙酸(0.5毫摩尔)及三乙基胺(0.5毫摩尔)在DMF(10毫升)的溶液 内，加入苯并三唑-1-基-氧基-三(二甲基氨基)六氟磷酸鏻(BOP；0.5毫 摩尔)。混合物在室温搅下拌18小时，以水稀释，以乙酸乙酯萃取， 以食盐水洗涤。浓缩获得1-吗啉-4-基-3-[4-(4-三氟甲基-苯基氨基)-7-(3- 三氟甲基-吡啶-2-基)-喹唑啉-2-基]-丙-1-酮。质谱575.2。
6.[2-(3-吗啉-4-基-丙基)-7-(3-三氟甲基-吡啶-2-基)-喹唑啉-4- 基]-(4-三氟甲基-苯基)-胺盐酸盐(化合物313)

向1-吗啉-4-基-3-[4-(4-三氟甲基-苯基氨基)-7-(3-三氟甲基-吡啶-2- 基)-喹唑啉-2-基]-丙-1-酮(0.14毫摩尔)在THF(20毫升)的溶液内加入 LAH(0.67毫摩尔)。混合物在室温下搅拌6小时，以10％氢氧化钠骤 冷，以乙酸乙酯萃取，以硫酸钠脱水及加入盐酸-乙酸乙酯。收集沉淀， 获得[2-(3-吗啉-4-基-丙基)-7-(3-三氟甲基-吡啶-2-基)-喹唑啉-4-基]-(4- 三氟甲基-苯基)-胺盐酸盐。质谱561.2。
F.4-三氟甲基苯基-[2-(2 6-二甲基吗啉-4-基甲基)-7-(2-三氟甲基苯基)- 喹唑啉-4-基]-胺(化合物314)
1. 7-溴-2-氯甲基-3H-喹唑啉-4-酮

将2-氨基-4-溴苄酰胺(27克，0.13摩尔；参考Joshi及 Chaudhari(1987)印度化学期刊，B章节，26B(6)：602-4)在2-氯-1，1，1-三 甲氧基乙烷(50毫升)中的溶液回流30分钟，在该段时间出现大沉淀。 完全蒸发去除混合物，使用醚研磨，收集28克7-溴-2-氯甲基-3H-喹唑 啉-4-酮，呈白色固体。
2. 7-溴-4-氯-2-氯甲基喹唑啉

将7-溴-2-氯甲基-3H-喹唑啉-4-酮(5克，18.2毫摩尔)，2，6-二甲基 吡啶(5克)及磷酰氯(5毫升)在1，2-二甲氧基乙烷(500毫升)的混合物在 80℃加热16小时。混合物冷却至室温，完全蒸发去除混合物，然后以 醚稀释及以水洗涤。溶剂经脱水(硫酸钠)及蒸发醚，获得7-溴-4-氯-2- 氯甲基喹唑啉(3.5克)呈黄色固体。
3. 7-溴-2-(氯甲基喹唑啉-4-基)-(4-三氟甲基苯基)-胺

7-溴-4-氯-2-氯甲基喹唑啉(1168毫克，4.0毫摩尔)及4-(三氟甲基) 苯胺(644毫克，4.0毫摩尔)在氯仿(50毫升)的混合物在60℃加热16小 时。冷却及收集沉淀产物7-溴-2-(氯甲基喹唑啉-4-基)-(4-三氟甲基苯 基)-胺(1021毫克)，呈盐酸盐。
4.[7-溴-2-(顺-2，6-二甲基吗啉-4-基甲基)-喹唑啉-4-基]-4-(三氟甲 基苯基)-胺

7-溴-2-(氯甲基喹唑啉-4-基)-(4-三氟甲基苯基)-胺(416毫克，1.0毫 摩尔)，顺-2，6-二甲基吗啉(150毫克，1.3毫摩尔)及三乙基胺(202毫克， 2.0毫摩尔)在N，N-二甲基乙酰胺(7毫升)的混合物加热1小时。冷却至 室温，以乙酸乙酯(50毫升)稀释，以水洗4次(各25毫升)。脱水(硫酸 钠)及蒸发。使用醚研磨获得[7-溴-2-(顺-2，6-二甲基吗啉-4-基甲基)-喹唑 啉-4-基]-4-(三氟甲基苯基)-胺(430毫克，呈黄色固体)。
5.[2-(顺-2，6-二甲基吗啉-4-基氧基甲基)-7-(2-三氟甲基苯基)-喹唑 啉-4-基]-(4-三氟甲基苯基)-胺

在氮下，[7-溴-2-(顺-2，6-二甲基吗啉-4-基甲基)-喹唑啉-4- 基]-4-(三氟甲基苯基)-胺(75毫克，0.15毫摩尔)，2-(三氟甲基苯基)二 羟基硼酸(45毫克，0.23毫摩尔)，四(三苯基膦)钯(O)(21毫克，0.018 毫摩尔)，2M碳酸钠在水(1毫升)，及1，2-二甲氧基乙烷(5毫升)的混 合物在60℃加热16小时。混合物冷却至室温，以乙酸乙酯稀释及以水 洗两次(各10毫升)。有机层经脱水(硫酸钠)及蒸发。由制备性TLC(9∶ 1二氯甲烷∶甲醇)纯化获得[2-(顺-2，6-二甲基吗啉-4-基氧基甲基)-7-(2- 三氟甲基苯基)-喹唑啉-4-基]-(4-三氟甲基苯基)-胺(112毫克)，呈黄色固 体。质谱560.2。
G.[7-(3-甲基-吡啶-2-基)-2-吡咯啶-1-基甲基-吡啶并[3，2-d]嘧啶-4- 基]-(4-三氟甲基-苯基)-胺(化合物315)
1. 5-溴-3-硝基吡啶-2-甲腈

2-氨基-5-溴-3-硝基吡啶(2.18克，10毫摩尔)，氰化亚铜(1.33 克，15毫摩尔)及亚硝酸叔-丁酯(2.0毫升，15毫摩尔)在乙腈(50毫升) 的溶液加热至60℃2小时。溶液经冷却，分溶在乙酸乙酯(100毫升)及 饱和碳酸氢钠水溶液(100毫升)。水溶液以乙酸乙酯(2×50毫升)萃取， 以水(100毫升)洗涤，以食盐水(100毫升)洗涤，脱水(硫酸镁)及蒸发。 固体在硅胶(25％醚/75％己烷)由快速层析术纯化，获得标题化合物，呈 灰黄色固体(934毫克，41％)。
2. 5-(3-甲基(2-吡啶基)-3-硝基吡啶-2-甲腈

5-溴-3-硝基吡啶-2-甲腈(228毫克，1.0毫摩尔)，四(三苯基膦) 钯(O)(15毫克)，3-甲基-2-吡啶基溴化锌(0.5M在THF，3毫升，1.5毫 摩尔)在THF(5毫升)的溶液加热至60℃ 2小时。溶液经冷却，及分溶 在乙酸乙酯(10毫升)及饱和水性碳酸氢钠(10毫升)。水溶液以乙酸乙 酯(2×15毫升)萃取，以水(10毫升)、食盐水(10毫升)洗涤，脱水(硫酸 镁)及蒸发，获得标题化合物，呈灰黄色固体(211毫克，88％)。
3. 3-氨基-5-(3-甲基(2-吡啶基))吡啶-2-羧酰胺

5-(3-甲基(2-吡啶基)-3-硝基吡啶-2-甲腈(1克，4.1毫摩尔)，铁 (2.3克，40毫摩尔)及氯化钙(560毫克，5毫摩尔)在乙醇(15毫升)及水 (4毫升)的溶液回流加热1小时。混合物经冷却，经C矿过滤且以乙酸 乙酯洗涤。滤液经蒸发，残余物再度溶解在乙酸乙酯，以水然后以食 盐水洗涤，脱水(硫酸镁)及蒸发，获得标题化合物，呈灰黄色固体(880 毫克，94％)。
4.[7-(3-甲基-吡啶-2-基)-2-吡咯啶-1-基甲基-吡啶并[3，2-d]嘧啶-4- 基]-(4-三氟甲基-苯基)-胺

标题化合物是以类似用于制备[2-吡咯啶-1-基甲基-7-(3-三氟甲 基-吡啶-2-基)-喹唑啉-4-基]-(4-三氟甲基-苯基)-胺(实施例2.A，步骤6 至9)使用的方式，由3-氨基-5-(3-甲基(2-吡啶基))吡啶-2-羧酰胺制备的。
H.其它代表性的经取代的2-氨基烷基-喹唑啉-4-基胺类似物
本领域技术人员应该了解可改变起始物料，以及采用额外步骤， 来制造本发明涵盖的其它化合物。表VI列举的化合物是使用前述方法 制备，但有显而易见的修改。
                                               表VI
                         代表性的经取代的2-氨基烷基-喹唑啉-4-基胺类似物































































实施例3
代表性化合物的制备
本实施例举例说明代表性的经取代的2-羟基烷基-喹唑啉-4-基胺 类似物的制备。
A.[2-异丙氧基甲基-7-(3-三氟甲基-吡啶-2-基)-喹唑啉-4-基]-(4-三氟甲 基-苯基)-胺酯(化合物701)
1. 2-对甲苯基-3-三氟甲基吡啶

向2-氯-3-(三氟甲基)-吡啶(70.1毫摩尔)，对甲苯基二羟基硼酸(70.6 毫摩尔)及2M碳酸氢钠(175.0毫摩尔)在二甲基醚(DME；200毫升)的 经除气的混合物内，在氮气气氛下加入Pd(PPh3)4(2.8毫摩尔)。混合物 在80℃搅拌隔夜，浓缩，以乙酸乙酯萃取。以硫酸钠脱水，真空浓缩 及通过硅胶衬垫过滤，获得2-对甲苯基-3-三氟甲基吡啶。
2. 2-(4-甲基-3-硝基-苯基)-3-(三氟甲基)-吡啶

向2-对甲苯基-3-三氟甲基吡啶(8.4毫摩尔)在硫酸(6毫升)的溶液 内小心加入发烟硝酸(2毫升)。混合物在室温搅拌60分钟。混合物倒 至冰水(30毫升)上，以乙酸乙酯萃取，以1N氢氧化钠中和，以硫酸 钠脱水及在真空浓缩，获得2-(4-甲基-3-硝基-苯基)-3-(三氟甲基)-吡啶。
3. 2-硝基-4-(3-三氟甲基-吡啶-2-基)-苯甲酸

向2-硝基-4-(3-三氟甲基-吡啶-2-基)-苯甲酸(7.1毫摩尔)在吡啶(10 毫升)及水(5毫升)的混合物的溶液内分成数分加入KMnO4(25.3毫摩 尔)。混合物在110℃搅拌4小时，然后又以10毫升水加入25.3毫摩 尔KMnO4。混合物在110℃搅拌隔夜。冷却至室温，经C矿衬垫过滤。 滤液经真空浓缩，以水稀释，以乙酸乙酯水溶液洗涤。水溶液以2N 盐酸中和，及收集沉淀，获得2-硝基-4-(3-三氟甲基-吡啶-2-基)-苯甲酸。
4. 2-硝基-4-(3-三氟甲基-吡啶-2-基)-苄酰胺

2-氨基-4-(3-三氟甲基-吡啶-2-基)-苯甲酸(25克)与亚磺酰氯(50毫 升)的混合物回流4小时并浓缩。残余物溶解于二氯甲烷(DCM)，以冰 水浴冷却，氨气通过溶液30分钟，在室温搅拌15分钟。浓缩及以水 洗涤获得2-硝基-4-(3-三氟甲基-吡啶-2-基)-苄酰胺。
5. 2-氨基-4-(3-三氟甲基-吡啶-2-基)-苄酰胺

2-硝基-4-(3-三氟甲基-吡啶-2-基)-苄酰胺(1.0克，0.0032摩尔)使用 50psi氢气及100毫克10％ Pd/C在乙醇氢化。16小时后，混合物经C矿过滤，在减压下浓缩，获得2-氨基-4-(3-三氟甲基-吡啶-2-基)-苄酰胺 呈固体。
6. 2-氯甲基-7-(3-三氟甲基-吡啶-2-基)-3H-喹唑啉-4-酮

2-氨基-4-(3-三氟甲基-吡啶-2-基)-苄酰胺(100毫克，0.356毫摩尔) 在2-氯-1，1，1-三甲氧基乙烷(bp 138℃)的溶液在130℃加热4小时。混 合物在减压下浓缩，获得2-氯甲基-7-(3-三氟甲基-吡啶-2-基)-3H-喹唑 啉-4-酮呈油，油在放置时结晶。
7. 4-氯-2-氯甲基-7-(3-三氟甲基-吡啶-2-基)-喹唑啉

2-氯甲基-7-(3-三氟甲基-吡啶-2-基)-3H-喹唑啉-4-酮(得自前述反 应)及POCl3的混合物回流16小时。混合物经冷却及在减压下浓缩。残 余物分溶在乙酸乙酯与饱和碳酸氢钠溶液。乙酸乙酯部分又以碳酸氢 钠洗涤，然后脱水(硫酸钠)及在减压下浓缩。褐色固体经2英寸硅胶(1∶1 乙酸乙酯/己烷类洗脱剂)过滤及在减压下浓缩获得4-氯-2-氯甲基-7-(3- 三氟甲基-吡啶-2-基)-喹唑啉。
8.[2-氯甲基-7-(3-三氟甲基-吡啶-2-基)-喹唑啉-4-基]-(4-三氟甲基- 苯基)-胺

4-氯-2-氯甲基-7-(3-三氟甲基-吡啶-2-基)-喹唑啉(42毫克，0.117毫 摩尔)及4-三氟甲基-苯胺(19毫克，0.117毫摩尔)在异丙醇(1毫升)的混 合物在75℃加热4小时。混合物经冷却及沉淀以异丙醇洗涤，接着以 醚洗涤，获得[2-氯甲基-7-(3-三氟甲基-吡啶-2-基)-喹唑啉-4-基]-(4-三氟 甲基-苯基)-胺呈一盐酸盐。
9.[2-异丙氧基甲基-7-(3-三氟甲基-吡啶-2-基)-喹唑啉-4-基]-(4-三 氟甲基-苯基)-胺

向[2-氯甲基-7-(3-三氟甲基-吡啶-2-基)-喹唑啉-4-基]-(4-三氟甲基- 苯基)-胺盐酸盐(1.9克，0.0037摩尔)在无水异丙醇(100毫升)的悬浮液 内，加入20当量的NaO-i-Pr(由钠及异丙醇制备)。灰黄色混合物在60 ℃搅拌5小时，冷却及在减压下蒸发去除溶剂。残余物分溶在乙酸乙 酯与水，有机层以水洗涤(1次)。有机层经脱水(硫酸钠)及浓缩获得[2- 异丙氧基甲基-7-(3-三氟甲基-吡啶-2-基)-喹唑啉-4-基]-(4-三氟甲基-苯 基)-胺，呈泡沫体。
B.2-[4-(4-三氟甲基-苯基氨基)-7-(3-三氟甲基-吡啶-2-基)-喹唑啉-2- 基]-乙醇(化合物702)
1. 3-苄氧基丙酸

氢化钠(2.22克，60％在矿物油的分散液，55.4毫摩尔)分成小份添 加至苄醇(4.0克，37毫摩尔)在甲苯(100毫升)的冷(0℃)溶液。逐滴添 加3-溴丙酸乙酯(8.0克，44毫摩尔)至混合物后，让所得溶液温热至室 温并搅拌1小时。反应由加水骤冷直到全部起泡停止为止。混合物以 乙酸乙酯(100毫升)稀释并以水(100毫升)及食盐水(100毫升)萃取。有 机萃取物以硫酸钠脱水及在减压下去除溶剂，获得粗产物酯呈澄清油。 油溶解于甲醇(20毫升)及6N氢氧化钠(20毫升)，搅拌1小时，浓缩 混合物(约20毫升)及以水(20毫升)稀释。水性混合物以二氯甲烷(40 毫升)萃取一次。水相以浓盐酸酸化，以乙酸乙酯(3×50毫升)萃取，组 合乙酸乙酯萃取物以硫酸钠脱水。在减压下去除溶剂，获得标题化合 物呈澄清油(2.28克，34.0％)，其在放置时固化。
2. 2-(2-苄氧基-乙基)-7-(3-三氟甲基-吡啶-2-基)-3H-喹唑啉-4-酮

3-苄氧基丙酸(1.66克，9.19毫摩尔)在己烷类(40毫升)的溶液冷却 至0℃，逐滴加入草酰氯(3.50克，27.6毫摩尔)。添加完成后，加入 DMF(2滴)，所得混合物搅拌1小时。在减压下去除溶剂，粗产物酰 氯溶解于无水THF(20毫升)。在分开的烧瓶内，将2-氨基-4-(3-三氟甲 基-吡啶-2-基)-苄酰胺(2.35克，8.37毫摩尔)溶解于无水THF(40毫升) 及吡啶(0.727克，9.19毫摩尔)，冷却至0℃。含粗产物酰氯的溶液逐 滴添加至第二溶液。让混合物温热至室温及搅拌1小时。将10％碳酸 氢钠(水性)溶液(20毫升)添加至混合物，溶液搅拌1小时。混合物经浓缩 (约20毫升)，以水(20毫升)稀释及以浓盐酸酸化。所得溶液以乙酸乙 酯萃取(3×50毫升)。组合有机萃取物以食盐水洗涤及以硫酸钠脱水。 溶剂在减压下去除，获得标题化合物，呈白色固体(3.24克，82.9％)。
3. 2-(2-苄氧基-乙基)-4-氯-7-(3-三氟甲基-吡啶基-2-基)-喹唑

2-(2-苄氧基-乙基)-7-(3-三氟甲基-吡啶-2-基)-3H-喹唑啉-4-酮(3.24 克，7.26毫摩尔)溶解于氯仿(44毫升)及2，6-二甲基吡啶(2.45克，22.9 毫摩尔)。逐滴加入磷酰氯(1.77毫升，19.0毫摩尔)，所得溶液回流加 热18小时。溶液经冷却，在减压下去除溶剂。粗产物残余物分溶于乙 酸乙酯(200毫升)及饱和碳酸氢钠(水性)(200毫升)。去除有机相，水相以 乙酸乙酯(200毫升)萃取。组合两种有机萃取物，以盐水(200毫升)洗 涤及以硫酸钠脱水。去除溶剂，获得标题化合物呈浅褐色固体(2.47克， 73.1％)。
4.[2-(2-苄氧基-乙基)-7-(3-三氟甲基-吡啶-2-基)-喹唑啉-4-基]-(4- 三氟甲基-苯基)-胺

2-(2-苄氧基-乙基)-4-氯-7-(3-三氟甲基-吡啶基-2-基)-喹唑啉(2.47 克，5.57毫摩尔)溶解于乙腈(50毫升)及4-三氟甲基-苯胺(0.986克，6.12 毫摩尔)的溶液。混合物加热至80℃ 2小时。生成白色沉淀。溶液在 冰浴冷却，加入乙醚(25毫升)。蒸发去除白色沉淀，在真空烘箱脱水 获得标题化合物，呈一盐酸盐(2.96克，87.8％)。
5. 2-[4-(4-三氟甲基-苯基氨基)-7-(3-三氟甲基-吡啶-2-基)-喹唑啉 -2-基]-乙醇

[2-(2-苄氧基-乙基)-7-(3-三氟甲基-吡啶-2-基)-喹唑啉-4-基]-(4-三 氟甲基-苯基)-胺盐酸盐(2.96克，4.89毫摩尔)溶解在甲醇(150毫升)及 加入10％ Pd/C(200毫克)。混合物在60℃在50p.s.i.氢化8小时。混合 物快速通过C矿过滤，C矿滤饼用热甲醇(200毫升)洗涤。在减压下去 除溶剂，获得标题化合物一盐酸盐，呈白色固体(1.75克，69.5％)。质 谱478.1。
C.[2-(2-甲氧基-乙基)-7-(3-三氟甲基-吡啶-2-基)-喹唑啉-4-基]-(4-三氟 甲基-苯基)-胺(化合物703)
1、2-(2-甲氧基-乙基)-7-(3-三氟甲基-吡啶-2-基)-喹唑啉-4-酚

向2-氨基-4-(3-三氟甲基-吡啶-2-基)-苄酰胺(3.56毫摩尔)及吡 啶(3.91毫摩尔)在THF(20毫升)的溶液内，加入4-甲氧基-丁酰氯(3.91 毫摩尔)。混合物在室温下搅拌20分钟，加入20毫升20％氢氧化钠， 在50℃下搅拌60分钟。浓缩，加水、过滤酸化至pH＝6，收集沉淀获 得2-(3-苄氧基-丙基)-7-(3-三氟甲基-吡啶-2-基)-喹唑啉-4-酚。
2. 2-(2-甲氧基-乙基)-4-氯-7-(3-三氟甲基-吡啶-2-基)-喹唑啉

使用类似前文说明的程序，由2-(2-甲氧基-乙基)-7-(3-三氟甲基- 吡啶-2-基)-喹唑啉-4-酚制备2-(2-甲氧基-乙基)-4-氯-7-(3-三氟甲基-吡 啶-2-基)-喹唑啉。
3.[2-(2-甲氧基-乙基)-7-(3-三氟甲基-吡啶-2-基)-喹唑啉-4-基]-(4- 三氟甲基-苯基)-胺

使用类似前述程序，由2-(2-甲氧基-乙基)-4-氯-7-(3-三氟甲基-吡啶 -2-基)-喹唑啉制备[2-(2-甲氧基-乙基)-7-(3-三氟甲基-吡啶-2-基)-喹唑 啉-4-基]-(4-三氟甲基-苯基)-胺。质谱492.1。
D.3-[4-(4-三氟甲基-苯基氨基)-7-(3-三氟甲基-吡啶-2-基)-喹唑啉-2- 基]-丙-1-醇(化合物704)
1. 2-(3-苄氧基-丙基)-7-(3-三氟甲基-吡啶-2-基)-喹唑啉-2-酚

向2-氨基-4-(3-三氟甲基-吡啶-2-基)-苄酰胺(3.56毫摩尔)及吡 啶(3.91毫摩尔)在THF(20毫升)的溶液内，加入4-甲氧基-丁酰氯(3.91 毫摩尔)。混合物在室温下搅拌20分钟，加入20毫升20％氢氧化钠， 在50℃下搅拌60分钟。浓缩，加水、过滤酸化至pH＝6，收集沉淀获 得2-(3-苄氧基-丙基)-7-(3-三氟甲基-吡啶-2-基)-喹唑啉-4-酚。
2. 2-(3-苄氧基-丙基)-4-氯-7-(3-三氟甲基-吡啶-2-基)-喹唑啉

使用类似前述程序，由2-(3-苄氧基-丙基)-7-(3-三氟甲基-吡啶-2- 基)-喹唑啉-2-酚制备2-(3-苄氧基-丙基)-4-氯-7-(3-三氟甲基-吡啶-2- 基)-喹唑啉。
3. 2-(3-苄氧基-丙基)-7-(3-三氟甲基-吡啶-2-基)-喹唑啉-4-基]-(4-三 氟甲基-苯基)-胺

使用类似前述程序，由2-(3-苄氧基-丙基)-4-氯-7-(3-三氟甲基-吡啶 -2-基)-喹唑啉制备2-(3-苄氧基-丙基)-7-(3-三氟甲基-吡啶-2-基)-喹唑啉 -4-基]-(4-三氟甲基-苯基)-胺。
4. 3-[4-(4-三氟甲基-苯基氨基)-7-(3-三氟甲基-吡啶-2-基)-喹唑啉 -2-基]-丙-1-醇

2-(3-苄氧基-丙基)-4-氯-7-(3-三氟甲基-吡啶-2-基)-喹唑啉(0.5毫摩 尔)及10％ Pd-C在乙醇(100毫升)的混合物在50psi下氢化30小时。 过滤、浓缩及层析，获得3-[4-(4-三氟甲基-苯基氨基)-7-(3-三氟甲基- 吡啶-2-基)-喹唑啉-2-基]-丙-1-醇。质谱492.1。
E.7-(3-三氟甲基-吡啶-2-基)-2-甲氧基甲基-吡啶并[3，2-d]嘧啶-4-基]-(4- 三氟甲基-苯基)-胺(化合物705)
1. 6’-甲氧基-3-三氟甲基-[2，3’]联吡啶

2-氯-3-三氟甲基吡啶(37克，0.2摩尔)，2-甲氧基吡啶-5-二羟基硼 酸(32克，0.21摩尔)，四(三苯基膦)钯(O)(9克，7毫摩尔)及2M碳酸 钾(150毫升)在甲苯(500毫升)的混合物在氮气气氛下在90℃加热8小 时。反应混合物经冷却及分离各层。水层以乙酸乙酯(2×250毫升)萃 取，组合有机层以4M氢氧化钠(250毫升)、水(250毫升)及食盐水(250 毫升)洗涤。脱水(硫酸镁)及在减压下浓缩。所得油在硅胶(50％醚/50％ 己烷)由快速层析术纯化，获得标题化合物(48.2克，95％)，呈无色油。
2. 3-三氟甲基-1’H-[2，3’]联吡啶-6’-酮

6’-甲氧基-3-三氟甲基-[2，3’]联吡啶(41克，0.16摩尔)在30％氢溴 酸/乙酸(100毫升)回流加热1小时。混合物经冷却，过滤，沉淀以醚(100 毫升)洗涤。沉淀移至10M氢氧化钠(500毫升)，搅拌1小时。溶液以 盐酸洗涤至溶液为pH7。过滤收集白色固体，风干，获得标题化合物 (36克，93％)，呈白色固体。
3. 5’-硝基-3-三氟甲基-1’H-[2，3’]联吡啶-6’-酮

向3-三氟甲基-1’H-[2，3’]联吡啶-6’-酮(25克，0.1摩尔)在浓流酸 (100毫升)在0℃的溶液内，逐滴加入发烟硝酸(35毫升)及浓硫酸(10 毫升)的溶液。反应混合物加热至70℃ 1小时，冷却，倒至冰(500毫 升)上。混合物经过滤，滤液以10M氢氧化钠处理至溶液的pH为4-5。 过滤收集沉淀，风干，获得标题化合物(26.2克，92％)，呈白色固体。
4. 6’-氯-5’-硝基-3-三氟甲基-[2，3’]联吡啶

5’-硝基-3-三氟甲基-1’H-[2，3’]联吡啶-6’-酮(25克，0.088摩尔)，亚 磺酰氯(300毫升)及DMF(3毫升)的溶液加热至回流4小时。由旋转蒸 发去除挥发物，残余物分溶在乙酸乙酯(350毫升)及饱和碳酸氢钠溶液 (250毫升)。水层又以乙酸乙酯(250毫升)萃取，组合有机层以食盐水 (250毫升)洗涤。脱水(硫酸镁)及在减压下浓缩，获得标题化合物(25 克，93％)，呈黄色油。
5. 6’-氯-3-三氟甲基-[2，3’]联吡啶-5’-基胺

向6’-氯-5’-硝基-3-三氟甲基-[2，3’]联吡啶(25克，0.082摩尔) 及氯化钙(11克，0.1摩尔)在乙醇(300毫升)及水(50毫升)的溶液内加入 铁粉(45克，0.82摩尔)。溶液回流加热1.5小时，冷却及经C矿过滤。 混合物在减压下浓缩，再度溶解在乙酸乙酯(300毫升)及以食盐水(200 毫升)洗涤。溶液在减压下浓缩，在硅胶(50％醚/50％己烷)由急速层析 术纯化，获得标题化合物(19克，85％)，呈灰黄色固体。
6. 3-氨基-5-[3-(三氟甲基)(2-吡啶基)]吡啶-2-羧酰胺

6’-氯-3-三氟甲基-[2，3’]联吡啶-5’-基胺(25克，0.091摩尔)，氰 化锌(6.75克，0.058摩尔)，三[二亚苄基丙酮]二-钯(pd2(dba)3；2.63克， 2.86毫摩尔)及1，1’-双(二苯基膦基)铁茂(DPPF；3.16克，5.72毫摩尔) 在DMF(250毫升)及水(2.5毫升)的溶液在氮气气氛下在120℃加热1 小时。加水(30毫升)，溶液又在120℃加热4小时而完成水解。反应冷 却至0℃，加入饱和氯化铵溶液(200毫升)，水(200毫升)及浓氢氧化铵 (50毫升)。在0℃搅拌1小时后，黄色沉淀经过滤，以水(200毫升)及 以1∶1醚-己烷混合物(200毫升)洗涤。固体经风干，然后在真空烘箱脱 水获得(23克，90％)标题化合物。
7. 2-(氯甲基)-7-[3-(三氟甲基)(2-吡啶基)]-3-氢吡啶并[3，2-d]嘧啶 -4-酮

3-氨基-5-[3-(三氟甲基)(2-吡啶基)]吡啶-2-羧酰胺(23克，81.5毫摩 尔)及2-氯-1，1，1-三甲氧基乙烷(250毫升)的溶液在130℃加热1小时。 由蒸发去除挥发物，研磨固体(50％醚/50％己烷)，获得标题化合物，呈 浅褐色固体(21克，76％)。
8. 4-氯-2-氯甲基-7-(3-氯-吡啶-2-基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶

2-(氯甲基)-7-[3-(三氟甲基)(2-吡啶基)]-3-氢吡啶并[3，2-d]嘧啶-4- 酮(2.49克，7.31毫摩尔)，磷酰氯(10毫升)，2，6-二甲基吡啶(2.13毫升， 18.3毫摩尔)及甲苯溶液回流加热8小时。去除溶剂，粗产物残余物分 溶在乙酸乙酯(150毫升)及水(150毫升)。去除有机相，水相以乙酸乙 酯(150毫升)萃取。组合有机萃取物，以饱和碳酸氢钠(水性)(150毫升) 及食盐水(150毫升)洗涤，以硫酸钠水。去除溶剂获得标题化合物，呈 浅褐色固体(230克，87.6％)。
9.[2-(2-氯甲基)-7-(3-三氟甲基-吡啶-2-基)-喹唑啉-4-基]-(4-三氟 甲基-苯基)-胺

4-氯-2-氯甲基-7-(3-氯-吡啶-2-基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶(2.30克，6.40 毫摩尔)溶解在乙腈(20毫升)及4-三氟甲基苯胺(1.13克，7.04毫摩尔)。 混合物在80℃加热18小时。混合物冷却至0℃，以乙醚(20毫升)稀释。 标题化合物的一盐酸盐形成浅褐色沉淀(2.85克，85.6％)，其由过滤去 除及在真空烘箱脱水。
10. 7-(3-三氟甲基-吡啶-2-基)-2-甲氧基甲基-吡啶并[3.2-d]嘧 啶-4-基]-(4-三氟甲基-苯基)-胺

[2-(2-氯甲基)-7-(3-三氟甲基-吡啶-2-基)-喹唑啉-4-基]-(4-三氟甲基 -苯基)-胺使用甲氧化钠如前实施例1.A-9所述处理。如此获得7-(3-三 氟甲基-吡啶-2-基)-2-甲氧基甲基-吡啶并[3.2-d]嘧啶-4-基]-(4-三氟甲基 -苯基)-氨基，呈固体。质谱479.1。
F.7-(3-甲基-吡啶-2-基)-2-甲氧基甲基-吡啶并[3，2-d]嘧啶-4-基]-(4-三氟 甲基-苯基)-胺(化合物706)
1. 5-溴-3-硝基吡啶-2-甲腈

2-氨基-5-溴-硝基吡啶(2.18克，10毫摩尔)，氰化亚铜(1.33克，15 毫摩尔)及亚硝酸第三丁酯(2.0毫升，15毫摩尔)在乙腈(50毫升)的溶液 在60℃加热2小时。溶液经冷却，分溶在乙酸乙酯(100毫升)及饱和水 性碳酸氢钠(100毫升)。水层以乙酸乙酯(2×50毫升)萃取，以水(100 毫升)及食盐水(100毫升)洗涤，脱水(硫酸镁)及蒸发。固体在硅胶(25％ 醚/75％己烷)由急速层析术纯化，获得标题化合物，呈灰黄色固体(934 毫克，41％)。
2. 5-(3-甲基(2-吡啶基))-3-硝基吡啶-2-甲腈

5-溴-3-硝基吡啶-2-甲腈(228毫克，1.0毫摩尔)，四(三苯基膦)钯 (O)(15毫克)，3-甲基-2-吡啶基溴化锌(0.5M在THF，3毫升，1.5毫摩 尔)于THF(5毫升)的溶液在60℃下加热2小时。冷却溶液，分溶在乙 酸乙酯(10毫升)及饱和水性碳酸氢钠(10毫升)。水层以乙酸乙酯(2×15 毫升)萃取，以水(10毫升)及食盐水(10毫升)洗涤，脱水(硫酸镁)及蒸 发。获得标题化合物，呈灰黄色固体(211毫克，88％)。
3. 3-氨基-5-(3-甲基(2-吡啶基))吡啶-2-羧酰胺

5-(3-甲基(2-吡啶基))-3-硝基吡啶-2-甲腈(1克，4.1毫摩尔)，铁(2.3 克，40毫摩尔)及氯化钙(560毫克，5毫摩尔)在乙醇(15毫升)及水(4 毫升)的溶液回流加热1小时。混合物经冷却，经C矿过滤，以乙酸乙 酯洗涤。滤液经蒸发，残余物再溶解于乙酸乙酯。以水及食盐水洗涤， 脱水(硫酸镁)及蒸发，获得标题化合物，呈灰黄色固体(880毫克，94％)。
4. 7-(3-甲基-吡啶-2-基)-2-甲氧基甲基-吡啶并[3，2-d]嘧啶-4-基]-(4- 三氟甲基-苯基)-胺

标题化合物是使用类似实施例A、B、D、E、G及H所述程序， 由5’-氨基-3-甲基-[2，3’]联吡啶-6’-羧酸酰胺。
G.7-(3-三氟甲基-吡啶-2-基)-2-甲氧基甲基-吡啶并[3，2-d]嘧啶-4- 基]-(4-三氟甲基-苯基)-胺(化合物707)
1. 7-(3-三氟甲基-吡啶-2-基)-2-甲氧基甲基-3H-吡啶并[3，2-d]嘧啶 -4-酮

3-氨基-5-[3-(氯-吡啶-2-基)]吡啶-2-羧酰胺(340毫克，1.21毫摩 尔)在THF(5毫升)及吡啶(0.11毫升)的溶液中使用甲氧基-乙酰氯(0.11 毫升，144毫克，1.33毫摩尔)处理。混合物在室温下搅拌3小时。然 后加入5N氢氧化钠(10毫升)，溶液又搅拌18小时。溶液经浓缩(约5 毫升)，使用浓盐酸酸化。水性混合物以乙酸乙酯(3×25毫升)萃取。组 合有机萃取物以硫酸钠脱水。在减压下去除溶剂，获得标题化合物呈 白色固体。
2. 4-氯-7-(3-三氟甲基-吡啶-2-基)-2-甲氧基甲基-吡啶并[3，2-d]嘧啶

7-(3-三氟甲基-吡啶-2-基)-2-甲氧基甲基-3H-吡啶并[3，2-d]嘧啶-4- 酮(276毫克，0.822毫摩尔)溶解于氯仿(25毫升)及2，6-二甲基吡啶(294 毫克，2.74毫摩尔)。逐滴加入磷酰氯(0.255毫升，2.74毫摩尔)，所得 溶液回流加热24小时。溶液经冷却，在减压下去除溶剂。粗产物残余 物分溶在乙酸乙酯(50毫升)及饱和碳酸氢钠(水性)(50毫升)。去除有机相， 水相又以乙酸乙酯(50毫升)萃取。组合两种有机萃取物，以食盐水(100 毫升)洗涤，及以硫酸钠脱水。去除溶剂获得标题化合物，呈浅褐色固 体。
3. 7-(3-三氟甲基-吡啶-2-基)-2-甲氧基甲基-吡啶并[3，2-d]嘧啶-4- 基]-(4-三氟甲基-苯基)-胺

4-氯-7-(3-三氟甲基-吡啶-2-基)-2-甲氧基甲基-吡啶并[3，2-d]嘧啶 (30毫克，0.0934毫摩尔)溶解于乙腈(3毫升)及4-三氟甲基-苯胺(18.0 毫克，0.112毫摩尔)的溶液。混合物加热至80℃ 16小时。反应混合 物在冰浴中冷却，并加入乙醚(3毫升)过滤去除灰白色沉淀，在真空烘 箱中脱水，获得标题化合物，呈一盐酸盐。质谱479.1。
H.7-(3-氯-吡啶-2-基)-2-甲氧基甲基-吡啶并[3，2-d]嘧啶-4-基]-(4-三氟 甲基-苯基)-胺(化合物708)
1. 2-乙酰基-3-氯吡啶

3-氯-2-氰基吡啶(10.0克，0.072摩尔，化学制药公报(1985) 33：565-571)在氮气气氛下溶解在无水THF(200毫升)，在冰浴冷却。逐 滴添加在乙醚(48毫升，0.14摩尔)中的3.0M甲基碘化镁至反应混合 物，在冰浴中搅拌2小时。反应混合物倒至冰冷水上，混合物以2.0N 水性盐酸酸化至pH2至3。反应混合物以乙酸乙酯(3×100毫升)萃取， 以无水硫酸镁脱水。过滤，真空浓缩，然后经硅胶衬垫过滤，使用20％ 乙酸乙酯/己烷作洗脱剂。在减压下去除溶剂，获得纯2-乙酰基-3-氯吡 啶，呈油。
2. 1-(3-氯-吡啶-2-基)-3-二甲基氨基丙烯酮

2-乙酰基-3-氯吡啶(0.77克，5.0毫摩尔)与N，N-二甲基甲酰胺二甲 缩醛(3.0克)在105℃加热20小时。在减压下浓缩，获得1-(3-氯-吡啶 -2-基)-3-二甲基氨基丙烯酮，呈油。
3. 2-氨基-4-(3-氯-吡啶-2-基)-苄腈

1-(3-氯-吡啶-2-基)-3-二甲基氨基丙烯酮(1.05克，5毫摩尔)，3-氨 基-3-甲氧基-丙烯腈盐酸盐(1.35克，10毫摩尔)及乙酸铵(2.2克，15.0 毫摩尔)在乙醇(25毫升)的溶液回流加热20小时。混合物经冷却，在减 压下浓缩成为深色油。残余物溶解在乙酸乙酯/水(100毫升)。水溶液以 乙酸乙酯萃取，乙酸乙酯以食盐水洗涤，脱水(硫酸镁)及真空浓缩获得 2-氨基-4-(3-氯-吡啶-2-基)-苄腈，呈褐色固体。
4. 6-氨基-3’-氯-[2，2’]-联吡啶基-5-羧酸酰胺

浓硫酸(10毫升)在冰浴中在氮气气氛下冷却。以15分钟时间分成 数份加入2-氨基-4-(3-氯-吡啶-2-基)-苄腈(1.0克，4.3毫摩尔)。在室温 下搅拌隔夜。反应混合物倒至冰上，使用10N水性氢氧化钠调整pH 至10，过滤出固体，固体以水洗涤及真空脱水，获得6-氨基-3’-氯-[2，2’]- 联吡啶基-5-羧酸酰胺，呈黄色固体。
5. 7-(3-氯-吡啶-2-基)-2-甲氧基甲基-3H-吡啶并[2，3-d]嘧啶-4-酮

6-氨基-3’-氯-[2，2’]-联吡啶基-5-羧酸酰胺(0.5克，2.02毫摩尔)在氮 气气氛下溶解于无水THF(10毫升)。逐滴添加吡啶(0.36克，4.04毫摩 尔)及甲氧基乙酰氯(0.48克，4.04毫摩尔)的反应混合物，在室温下搅 拌隔夜。加入10％水性碳酸氢钠(10毫升)及回流4小时。真空浓缩， 使用乙酸调整pH至6.0，由过滤收集固体，真空脱水，获得7-(3-氯- 吡啶-2-基)-2-甲氧基甲基-3H-吡啶并[2，3-d]嘧啶-4-酮，呈白色固体。
6. 4-氯-7-(3-氯-吡啶-2-基)-2-甲氧基甲基-吡啶并[2，3-d]嘧啶

7-(3-氯-吡啶-2-基)-2-甲氧基甲基-3H-吡啶并[2，3-d]嘧啶-4-酮(0.25 克)，2，6-二甲基吡啶(0.44克)及在氯仿(5毫升)中磷酰氯(0.51克)的混合 物回流20小时。混合物经冷却并在减压下浓缩。残余物分溶在乙酸乙 酯及饱和碳酸氢钠溶液。乙酸乙酯部分以额外碳酸氢钠洗涤然后脱水 (硫酸钠)，在减压下浓缩。褐色残余物经2英寸硅胶(1∶1乙酸乙酯/己 烷类洗脱剂)过滤，及在减压下浓缩，获得4-氯-7-(3-氯-吡啶-2-基)-2- 甲氧基甲基-吡啶并[2，3-d]嘧啶。
7. 7-(3-氯-吡啶-2-基)-2-甲氧基甲基-吡啶并[3，2-d]嘧啶-4-基]-(4- 三氟甲基-苯基)-胺

4-氯-7-(3-氯-吡啶-2-基)-2-甲氧基甲基-吡啶并[2，3-d]嘧啶(0.1毫摩 尔)及4-三氟甲基-苯胺(16.1毫克，0.1毫摩尔)在乙腈(1毫升)的混合物 在80℃下加热24小时。混合物经冷却，沉淀用醚洗涤，获得7-(3-氯- 吡啶-2-基)-2-甲氧基甲基-吡啶并[3，2-d]嘧啶-4-基]-(4-三氟甲基-苯基)- 胺，呈一盐酸盐。质谱445.1。
I.[2-甲氧基甲基-7-(3-甲基吡啶-2-基)-喹唑啉-4-基]-(4-三氟甲基-苯基)- 胺(化合物709)
1. 7-溴-2-(甲氧基甲基喹唑啉-4-基)-(4-三氟甲基-苯基)-胺

7-溴-2-(氯甲基喹唑啉-4-基)-(4-三氟甲基-苯基)-胺(得自实施例C， 200毫克，0.48毫摩尔)，4.4M甲氧化钠在甲醇(2.4毫升)及甲醇(1毫升) 的混合物加热至60℃ 4小时。冷却至室温，蒸发去除混合物。以乙酸 乙酯(10毫升)稀释，以水(各10毫升)洗两次。有机层(硫酸钠)经脱水及 蒸发。由制备性TLC(3∶1己烷类∶乙酸乙酯)纯化，获得2-甲氧基甲基 -7-(吡啶-4-基-喹唑啉-4-基)-(4-三氟甲基苯基)-胺(225毫克)，呈黄色固 体。
2.[2-甲氧基甲基-7-(3-甲基吡啶-2-基)-喹唑啉-4-基]-(4-三氟甲基- 苯基)-胺

2-甲氧基甲基-7-(吡啶-4-基-喹唑啉-4-基)-(4-三氟甲基苯基)-胺 (100毫克，0.243毫摩尔)，3-甲基-2-吡啶基溴化锌(1毫升0.5M THF 溶液)、在1，2-二甲氧基甲烷(5毫升)中四(三苯基膦)钯(O)(50毫克，0.043 毫摩尔)的混合物在80℃在氮下加热3小时。冷却至室温及以乙酸乙酯 (10毫升)稀释。以水(2×10毫升)洗涤，有机层经脱水(硫酸钠)及蒸发。 由制备性TLC纯化获得[2-甲氧基甲基-7-(3-甲基吡啶-2-基)-喹唑啉-4- 基]-(4-三氟甲基-苯基)-胺(38毫克)，呈灰白色固体。
J.其它代表性的经取代的2-羟基烷基-喹唑啉-4-基胺类似物
表VII列举的化合物是使用前述方法制备，但有显而易见的修改。
                                               表VII
                                 代表性的经取代的2-羟基烷基-喹唑啉-4-基胺类似物
































实施例4
经VR1转移感染的细胞及膜制剂
本实施例说明经VR1转移感染的细胞及制备含VR1的膜以用于辣 椒辣素结合检定分析(实施例5)。
cDNA编码整个长度的人类辣椒辣素受体(美国专利第6,482,611 号的SEQ ID NO：1、2或3)次克隆于质体pBK-CMV(史塔基因 (Stratagene)，加州拉荷拉)用于哺乳类细胞的重组表现。
人胚胎的肾(HEK293)细胞使用标准方法以编码整个长度的人类辣 椒辣素受体的pBK-CMV表现构成体转移感染。转移感染后的细胞在 含G418(400微克/毫升)的培养基中选择二周，来获得经过稳定转移感 染细胞汇集物。由此汇集物由限制稀释分离出独立纯株，获得克隆稳 定的细胞以用于随后实验。
用于放射性配位子结合试验，细胞接种于不含抗生素培养基的 T175细胞培养瓶，生长至约90％融合。然后细胞培养瓶以PBS洗涤， 在含5mM EDTA的PBS收获。细胞由温和离心造粒，在-80℃储存至 检定分析。
先前经冷冻的细胞借助于组织均化器破坏在冰冷HEPES中均化缓 冲液(5mM KCl 5，5.8mM NaCl，0.75mM CaCl2，2mM MgCl2，320mM 蔗糖及10mM HEPES pH7.4)。细胞均化物首先在1000xg(4℃)离心 10分钟，来去除核部分及碎屑，然后得自第一次离心的清液进一步在 35,000xg(4℃)离心30分钟来获得部分纯化的膜部分。检定分析前， 膜再度悬浮于HEPES均化缓冲液。整份膜均化物用来由Bradford方法 (拜雷(BIO-RAD))蛋白质检定分析套件组#500-0001，拜雷公司加州赫 克立斯)测定蛋白质浓度。
实施例5
辣椒辣素受体结合检定分析
本实施例说明可用于测定化合物对辣椒辣素(VR1)受体的结合亲 和力的代表性辣椒辣素受体的结合检定分析。
与[3H]含树脂毒素(RTX)结合的检定分析大致上是如Szallasi及 Blumberg(1992)药理试验治疗期刊262：883-888所述进行。在此方案中， 在结合反应结束后，由加入牛α1酸糖蛋白质(100微克/管)减少非特异 性RTX结合。
[3H]RTX(37居礼/毫摩尔)是由化学合成与分析实验室，国家癌症 研究院-费德烈克癌症研究发展中心，马里兰州费德烈克合成与获得。 [3H]RTX也是得自商业供货商(例如阿莫山(Amersham)法马西亚 (Pharmacia)生技公司，纽泽西州匹兹卡威)。
实施例4的膜均化物如前离心，在均化缓冲液中再悬浮至333微 克/毫升蛋白质浓度。结合检定分析混合物置于冰上，含有[3H]RTX(比 活性2200毫居礼/毫升)，2微升非放射性试验化合物，0.25毫克/毫升 牛血清白蛋白(柯恩(Cohn)部分V)及5×104-1×105经CR1转移感染细 胞。最终容积使用前述冰冷HEPES均化缓冲液(pH7.4)调整至500微 升(用于竞争结合检定分析)或1000微升(用于饱和结合检定分析)。非 特异性结合定义为在1μM非放射性RTX(艾立希司(Alexis)公司；加州 圣地亚哥)存在下出现的结合。为了达成饱和结合，使用1至2次稀释 以7-1000pM的浓度范围添加[3H]RTX。典型地，每条饱和结合曲线收 集11个浓度点。
竞争结合检定分析是在60pM[3H]RTX存在下以及不等浓度试验 化合物存在下进行。结合反应是由将检定分析混合物移转入37℃水浴 开始，而在经60分钟培养期后由试管在冰上冷却结束。与膜结合的 RTX是与自由RTX分离，以及与任何α1酸糖蛋白结合的RTX分离， 分离方式是在使用前事先以1.0％ PEI(聚伸乙基亚胺)浸泡2小时的瓦 勒克(WALLAC)玻璃纤维过滤膜(博金埃玛(PERKIN-ELMER)公司，马 里兰州盖塞堡)过滤。让过滤膜干燥隔夜，然后加入瓦勒克BETA SCINT 闪烁流体在瓦勒克1205BETA板中计数。
借助于计算机程序FIT P(生物软件(Biosoft)公司，蒙大拿州范古 松)，如Szallasi等人(1993)药理实验治疗期刊266：678-683所述，将变 构希尔(Hill)方程式配合测量值测定出平衡结合参数。此处提供的化合 物通常具有辣椒辣素受体Ki值小于4μM，在本检定分析中优选小于1 μM、100nM、50nM、25nM、10nM或1nM。
实施例6
钙移动性检定分析
本实施例举例说明代表性钙移动性检定分析，用于监视表达辣椒 辣素受体细胞对辣椒辣素以及其它辣椒辣素受体的类香草配位子的反 应，以及评比试验化合物的促效剂活性及拮抗剂活性。
细胞被表达质体(如实施例4所述)转移感染，由此表达人类辣椒辣 素受体，该细胞在费康(FALCON)黑壁透明底96孔孔板(#3904，贝克 敦迪克森(BECTON-DICKINSON)纽泽西州，法兰克林湖)上接种且生 长至70％-90％融合。培养基由96孔孔板中排空，添加FLUO-3 AM钙 敏感染料(分子探针公司，厄勒冈州犹金市)至各孔[染料溶液：1毫克 FLUO-3 AM，440微升DMSO及440微升20％普龙尼克酸(pluronic acid) 在DMSO，在克雷白林格(Krebs-Ringer)HEPES(KRH)缓冲液(25mM HEPES，5mM KCl，0.96mM NaH2PO4，1mM MgSO2，2mM CaCl2， 5mM葡萄糖，1mM羧苯磺胺(probenecid)，pH7.4)稀释1∶250，每孔 50微升稀溶液]。板由铝箔覆盖，在含5％二氧化碳的环境中在37℃下 培养1-2小时。培养后，由孔板排空染料，细胞以KRH缓冲液洗一次， 再悬浮于KRH缓冲液。
促效剂(例如欧法尼尔(olvanil)，辣椒辣素或RTX)诱发的钙移动是 使用FLUOROSKAN ASCENT(实验系统公司麻省法兰克林)或 FLIPR(荧光成像孔板读取器系统，分子装置，加州桑尼维尔)仪器监视 的。不等浓度的拮抗剂钌红或辣椒素受体阻断剂(RBI；麻省纳提克)与 促效剂(例如25-50nM辣椒辣素)共同添加至细胞。对促效剂诱发的钙 反应，在促效剂的施用后30秒至60秒所得数据用来产生IC50值。 KALEIDAGRAPH软件(协同软件公司，宾州瑞丁)用来将资料代入方程 式：
                y＝a*(1/(1+(b/x)C))
测定反应的IC50。本方程式中，y为最大荧光信号，x为促效剂或拮抗 剂浓度，a为Emax，b对应在IC50值，及c为希尔系数。
为了量测试验化合物拮抗(抑制)表达辣椒辣素受体细胞对辣椒辣 素或其它类香草促效剂的反应，首先测定辣椒辣素IC50。又添加20微 升KRH缓冲液及1微升DMSO至各个细胞孔，各细胞孔是如前述制 备。100微升辣椒辣素在KRH缓冲液中由FLIPR仪器自动转移至各孔。 使用8点浓度反应曲线来测定辣椒辣素IC50，最终的辣椒辣素浓度为1 nM至3μM。
试验化合物溶解于DMSO，在20微升KRH缓冲液中稀释，在检 定分析孔内试验化合物终浓度为1μM至5μM，添加至如前述制备的 细胞。含有制备好的细胞及试验化合物的96孔孔板在暗处在室温下培 养0.5小时至6小时。重要的是培养不可连续超过6小时。正好在测定 荧光反应之前，100微升辣椒辣素在KRH缓冲液中具有由浓度反应曲 线测得IC50浓度两倍，由FLIPR仪器自动添加至96孔孔板的各孔，获 得最终样品容积为200微升，终辣椒辣素浓度等于EC50。检定分析孔 内试验化合物终浓度为1μM至5μM。暴露于辣椒辣素IC50的典型细 胞具有荧光反应约10,000相对荧光单位。与匹配的对照组比较，辣椒 辣素受体拮抗剂可降低此反应至少约20％，优选至少约50％，及最优 选至少80％。提供50％降低的所需拮抗剂浓度为拮抗剂的IC50，优选 低于1μM、100nM、10nM或1nM。
化合物用作辣椒辣素受体促效剂的能力是经由在无辣椒辣素、 RTX或其它已知辣椒辣素受体促效剂存在下，使用前述方法，测量表 达辣椒辣素受体的细胞的荧光反应测定。造成细胞具有高于背景的荧 光的化合物为辣椒辣素受体促效剂。若干优选的本发明化合物为拮抗 剂，拮抗剂大致上不含促效剂活性，如在此种检定分析中在化合物浓 度低于4nM，更优选浓度低于10μM，及最优选浓度低于或等于100 μM时，不存在有可检测的促效剂活性证实。
实施例7
微粒体试管试验半衰期
本实施例显示使用代表性的肝脏微粒体半衰期检定分析来评比化 合物的半衰期值(t1/2值)。
汇集的人肝微粒体是得自XenoTech LLC，堪萨斯州66103堪萨斯 城剑桥路3800号(型号H0610)。此种肝微粒体也可得自试管技术公司 (马里兰州巴尔帝摩)或组织转型技术(新泽西州爱迪生)。准备6个试验 反应，每个含有25微升微粒体，5微升10μM的试验化合物溶液，及 399微升0.1M的磷酸盐缓冲液(19毫升0.1M NaH2PO4，81毫升0.1M Na2HPO4，使用磷酸调整至pH7.4)。第七反应制备作为阳性对照组， 含有25微升微粒体，399微升0.1M磷酸盐缓冲液及5微升100μM具 有已知代谢性质的化合物溶液(例如戴西潘(DIAZEPAM)或可罗在平 (CLOZAPINE))。反应在39℃下预培养10分钟。
辅因子混合物是经由将16.2毫克NADP及45.4毫克葡萄糖6-磷 酸稀释于4毫升100mM氯化镁制备的。葡萄糖6-磷酸去氢酶溶液是 经由将214.3微升葡萄糖6-磷酸去氢酶悬浮液(百灵嘉曼汉 (Boehringer-Manheim)型号0737224，罗氏分子生化公司分销，印地安 那州印地安那波里)稀释于1285.7微升蒸馏水制备。71微升起始反应 混合物(3毫升辅因子混合物；1.2毫升葡萄糖6-磷酸去氢酶溶液)添加 至6个试验反应中的5个，以及添加至阳性对照。71微升100mM氯 化镁添加至第六试验反应，第六试验反应用作为阴性对照。在每个时 间点(0、1、3、5及10分钟)，各75微升反应混合物滴量入96孔深孔 板的孔，孔内含有75微升冰冷乙腈。将样品反转混合，以3500rpm(索 法(Sorval)T 6000D离心机，H1000B转子)离心10分钟。75微升得自 各反应的清液转移至96孔孔板的孔，每孔含有150微升0.5μM化合 物溶液，具有已知LCMS侧绘(内部标准)。各样品进行LCMS分析， 未经代谢的试验化合物测量作为AUC，化合物浓度相对于时间作图， 试验化合物的t1/2值经过外推法测定。
优选的本发明化合物在人体肝脏微粒体具有试管试验t1/2值大于 10分钟而小于4小时，且优选为30分钟至1小时。
实施例8
MDCK毒性检定分析
本实施例说明使用马丁卡比(Madin Darby)犬肾(MDCK)细胞胞毒 性检定分析来评比化合物的毒性。
1微升试验化合物添加至透明底96孔孔板(帕克(PACKARD)，康 奈提格州马里兰)的各孔，获得的化合物经检定分析终浓度为10μM、 100μM或200μM。不含试验化合物的溶剂添加至对照孔。
MDCK细胞，ATCC编号CCL-34(美国种型培养收集会，维吉尼 亚州马纳萨)按照ATCC生产信息表的指示保持在无菌条件下。融合 MDCK细胞经过胰蛋白酶消化、收获、使用温暖(37℃)培养基 (VITACELL最低必须培养基鹰氏，ATCC型录编号30-2003)稀释至浓 度0.1×106细胞/毫升。100微升稀细胞添加至各孔，但五个标准曲线 对照孔除外，标准曲线对照孔含100微升温热培养基但不含细胞。然 后孔板在37℃下在95％氧、5％二氧化碳中以恒常搅拌培养2小时。培 养后，每孔加入50微升哺乳类细胞分解溶液，各孔盖上帕克顶封贴纸， 孔板在适当振摇器上以约700rpm振摇2分钟。
引发毒性的化合物将相对于未经处理细胞减少ATP的产量。帕克 (康奈提格州马里兰)ATP-LITE-M发光ATP检测套件组，产品编号 6016941，通常根据制造商指示用来量测在经处理MDCK细胞以及未 经处理MDCK细胞的ATP产量。让帕克ATP LITE-M反应剂平衡至 室温。一旦平衡后，冻干酶基质溶液在5.5毫升酶基质缓冲液(得自套 件组)重新调制。冻干ATP标准溶液在去离子水重新调制获得10mM 备用缓冲液。至于5个对照孔，10微升经过一是列稀释的帕克标准溶 液添加至标准曲线对照孔的各孔，来在接续各孔获得终浓度200nM、 100nM、50nM、25nM、及12.5nM。帕克酶基质溶液(50微升)添加 至各孔，然后加盖，孔板在适当振摇器在约700rpm振摇2分钟。白 帕克贴纸贴至各孔底部，样品包裹于金属箔内放置于暗处10分钟调整 适应暗处。然后在22℃下使用发光计数器(例如帕克顶计数微板闪烁及 发光计数器或提肯SPECTRAFLUOR PLUS)测定发光，由标准曲线算 出ATP浓度。使用试验化合物处理的细胞的ATP浓度比较未经处理细 胞测定的ATP浓度。使用10μM优选试验化合物处理的细胞具有ATP 浓度至少占未经处理细胞的80％，优选至少90％。当使用100μM试 验化合物浓度时，使用优选试验化合物处理的细胞具有ATP浓度占在 未经处理细胞检测得的ATP浓度的至少50％，且优选至少80％。
实施例9
背根神经节细胞检定分析
本例说明评比化合物的VR1拮抗剂活性的代表性背根神经节细胞 检定分析。
由新生大鼠切下DRG，分离，使用标准方法培养(Aguayo及 White(1992)脑研究570：61-67)。培养48小时后，细胞洗一次，与钙敏 感染料Fluo 4 AM(2.5-10微克毫升；铁氟实验室(TefLabs)，德州奥斯 汀)培养30-60分钟。然后细胞洗1次，添加不等浓度化合物至细胞。 添加辣椒辣素至细胞，结果导致CR1依赖性胞内钙浓度增高，是使用 荧光剂由Fluo-4荧光变化检测。数据收集60-180秒时间来测定最大荧 光信号。然后荧光信号呈化合物浓度的函数作图来识别达成50％辣椒 辣素活化抑制所需浓度，或IC50。辣椒辣素受体拮抗剂优选具有IC50 低于1μM、100nM、10nM或1nM。
实施例10
疼痛缓解测定的动物实验模式
本例说明评比由化合物所提供疼痛缓解程度的代表性方法。
A.疼痛缓解试验
下列方法可用来评比疼痛的缓解。
机械性痛觉异常
机械性痛觉异常(对有害刺激的异常反应)大致上是如Chaplan等人 (1994)神经科学方法期刊53：55-63及Tal及Eliav(1998)疼痛 64(3)：511-518所述评比。一系列具有不等刚性的冯弗雷(von Frey)灯丝 (典型有一系列8-14根灯丝)施用至后脚底面，施加的压力恰好足够弯 曲灯丝。灯丝被维持在此位置不超过3秒，或维持至大鼠表现出阳性 痛觉异常反应为止。阳性痛觉异常反应包括举高该脚掌，接着立刻舔 舐或振摇该脚掌。使用迪克森(Dixon)上下方法测定个别灯丝的施用顺 序及施用频率。试验是以该系列的中央开始，随后以连续顺序，连续 上升或连续下降施用灯丝，依据最初灯丝所得的反应为阴性反应或阳 性反应决定。
如果大鼠使用化合物处理，需要使用具有较高刚硬强度的冯弗雷 灯丝刺激才会诱发比较未经处理大鼠或媒剂处理大鼠对照组的阳性痛 觉异常反应，则该化合物可有效逆转或预防机械性痛觉异常类似症状。 另外或此外，测试慢性疼痛化合物可在化合物给药前及给药后进行。 此种检定分析中，有效化合物可获得，与处理前诱发反应的灯丝硬度 比较、或与也患有慢性疼痛动物但未经处理或使用媒剂处理动物比较， 诱发反应需要的灯丝硬度在接受处理后硬度增高。试验化合物是在疼 痛开始前或开始后给予。当试验化合物是在疼痛开始后给予时，试验 是在给药后进行10分钟至3小时。
机械性痛觉过敏
机械性痛觉过敏(对疼痛刺激的反应夸大)大致上是如Koch等人 (1996)止痛2(3)：157-164所述试验。大鼠放置在有温热打孔金属底板的 笼的各个室内。在温和针刺大鼠任一后脚的脚底，测量针刺后的后脚 回缩持续时间(即动物维持脚掌向上而将脚掌置回地板之前的时间)。
若脚掌回缩时间由统计上显著缩短，则动物产生机械性痛觉过敏 减少。试验化合物可在疼痛开始前或开始后给予。对疼痛开始后给予 的化合物，试验是在给药后10分钟至3小时进行。
热知觉过敏
热知觉过敏(对有害热刺激的夸大反应)大致上是如Hargreaves等 人(1988)疼痛32(1)：77-88所述测定。简言之对动物后脚脚底持续性施 加恒定辐射热源。后脚回缩时间(即在动物移动脚掌之前施热的时间) 也定义为热阈值或热潜伏期，可测定动物后脚对热的敏感度。
若后脚回缩时间显著缩短(即热对反应的阈值增加或热潜伏期增 加)，则化合物产生热知觉过敏的降低。试验化合物是在疼痛开始前或 疼痛开始后给予。疼痛开始后给予的化合物试验是在给药后10分钟至 3小时进行。
B.疼痛模式
疼痛可使用下列任一种方法诱发，来允许试验化合物的止痛功效。 通常此处提供的化合物导致在统计上显著的疼痛减少，使用雄SD大鼠 以及至少下列一种模式，由前述至少一种方法测定。
急性发炎疼痛模式
急性发炎疼痛是使用角叉菜胶模式诱发，大致上如Field等人(1997) 英国药理期刊121(8)：1513-1522所述。100-200微升1％-2％角叉菜胶溶 液注射入大鼠后脚掌。注射后3至4小时，使用前述方法试验动物对 热刺激及机械刺激的敏感度。试验化合物(0.01至50毫克/千克)是在试 验前或在角叉菜胶注射前给予动物。化合物可口服或经任一种注射途 径给予，或局部施用于脚掌。在此种模式可缓解疼痛的化合物可获得 机械性痛觉异常及/或热知觉过敏在统计上显著下降。
慢性发炎疼痛模式
慢性发炎疼痛是使用下列方案之一诱发：
1.大致如Bertorelli等人(1999)英国药理期刊128(6)：1252-1258及 Stein等人(1998)药理生化行为31(2)：455-51所述，200微升完全福朗氏 (Freund’s)辅剂(0.1毫克加热杀死及干燥的结合杆菌)注射入大鼠后脚 掌：100微升注入脚背面以及100微升注入脚底面。
2.大致如Abbadie等人(1994)神经科学期刊14(10)：5865-5871所述， 大鼠在胫骨-跗骨关节注射150微升CFA(1.5毫克)。
在任一种方案注射CFA之前，对各实验动物获得动物后脚掌对机 械刺激及热刺激的个别基准线敏感度。
注射CFA后，大鼠如前述测试热知觉过敏、机械性痛觉异常及机 械性痛觉过敏。为了证实症状的发展，在CFA注射后第5、6及7日 对大鼠进行试验。在第7日，动物使用试验化合物即吗啡或媒剂处理。 1-5毫克/千克口服剂量吗啡适合用作为阳性对照组。典型使用0.01-50 毫克/千克试验化合物剂量。在试验前或在试验前每日一次、或每日二 次或每日三次连续数日以单一大剂量给予化合物。药物是口服给予或 经任一种肠道外途径给予，或局部施用于动物。
结果以最大可能效率百分比(MPE)表示。0％MPE定义为媒剂的止 痛效果，100％MPE定义为动物返回CFA前期基准线敏感度。本模式 可缓解疼痛至化合物获得MPE至少为30％。
慢性神经病变性疼痛模式
慢性神经病变性疼痛是使用对大鼠坐骨神经长期束紧伤害(CCI) 诱发，大致上如Bennett及Xie(1988)疼痛33：87-107所述。大鼠经麻醉 (例如使用腹内注射剂量50-65毫克/千克戊基巴比妥，若有所需可额外 注射麻醉)。各后肢外侧经剃毛与消毒。使用无菌技术，在后肢外侧在 中间臀高度作切开。股骨二头肌直接切除，暴露出坐骨神经。在动物 的一后肢，环绕坐骨神经宽松地绑四条系带，间隔约1-2毫米。在另 一侧的后肢，坐骨神经未结扎也未经处理。肌肉以连续模式封闭，皮 肤使用伤口夹或缝线封闭。如前文说明评比大鼠的机械性痛觉异常、 机械性痛觉过敏及热知觉过敏。
在本模式中可缓解疼痛的化合物在接近实验前以单一大剂量给药 或连续数日给药：在试验前每日一次或二次或三次给药(0.01-50毫克/千 克，口服，注射或局部给药)的化合物导致机械性痛觉异常、机械性痛 觉过敏和/或热知觉过敏在统计上显著降低。