技术领域
[0001] 本
发明涉及杏鲍菇种植领域，尤其涉及一种液态发酵生产富硒杏鲍菇菌种的方法。
背景技术
[0002] 杏鲍菇是一种生长于欧洲地中海区域、中东和北非，但也在亚洲部分地区生长的食用性菇类，又叫刺芹侧
耳，属于
真菌门、担子菌亚门、真担子菌纲、层菌亚纲、伞菌目、侧耳科、侧耳属。杏鲍菇菌肉肥厚，营养丰富，具有杏仁
香味和
鲍鱼味，故称杏仁鲍鱼菇，其子实体色泽
雪白，质地脆嫩，也称“雪茸”，又有“平菇王”、“干贝菇”、“草原上的美味
牛肝菌”之美誉。野生杏鲍菇主要分布于南欧、北非、中亚等地区，在我国主要分布在新疆、青海、四川北部。我国自20世纪90年代开始引种栽培杏鲍菇，经过多年的人工驯化栽培技术研究，目前我国的许多地区已经开始产业化生产。
[0003] 硒是迄今为止发现的最重要的抗衰老元素。广西巴
马县是世界著名四大长寿地区之一，中国科学院专家对巴马的研究表明：巴马
土壤、谷物中的硒含量高于全国平均
水平10倍以上，百岁老人血液中的硒含量高出正常人的3-6倍。后来在安徽省石台县又发现一个长寿村，80岁以上老人占全村人口的12％，更为奇特的是50年来未发现一例癌症患者、心脑血管、糖尿病患者和肥胖患者，经对该村土壤中硒含量分析测定表明：硒含量高出一般地方10倍。原来，硒元素是抗
氧化剂谷胱甘肽过氧化物酶的活性成分，人体补充了充足的硒元素，就能有效清除自由基，抗氧化、延缓衰老，硒如果配合维生素E、β—胡萝卜素进行适量补充，效果会更加出色。
[0004] 传统的杏鲍菇培养并未考虑硒元素的添加，已经不能完全满足消费者获取营养的消费心理，从而降低了购买和食用杏鲍菇的能
力。
发明内容
[0005] 为解决上述
现有技术所中存在的技术问题，本发明提出了一种液态发酵生产富硒杏鲍菇菌种的方法，旨在通过添加Na2SeO3溶液，配合发酵作用，得到富硒的杏鲍菇菌种。
[0006] 为解决上述问题，本发明采用如下技术方案：
[0007] 一种液态发酵生产富硒杏鲍菇菌种的方法，包括如下步骤：
[0008] S1.菌种活化：将杏鲍菇菌种转接到无菌斜面培养基上，并置于25℃恒温
培养箱中，培养10d，得到斜面菌种；
[0009] S2.制备
种子液：将种子液分装于250mL锥形瓶中，每瓶装液量为100mL，使用
棉塞封口，并在121℃条件下灭菌处理30min；
[0010] S3.待种子液冷却至常温后，在无菌条件下，每瓶种子液中接种0.2cm3-0.4cm3大小的斜面菌种3
块，将接种后的种子液置于摇床中，在28℃条件下，用180r/min培养5d；
[0011] S4.制备富硒发酵液：将富硒发酵液分装至250mL的锥形瓶中，每瓶装液量为100mL，使用棉塞封口，并在121℃条件下灭菌30min；
[0012] S5、待富硒发酵液冷却至常温后，在无菌条件下将发酵好的种子液接种至富硒发酵液中，其接种量为10％，将接种后的富硒发酵液置于摇床中，在30℃条件下，用120r/min培养7d，即得到富硒杏鲍菇菌种。
[0013] 优选的，在步骤S1中，所述斜面培养基中各组份按照重量配比包括：马铃薯200-250g、
葡萄糖20-40g、蛋白胨4-6g、
磷酸二氢
钾2-4g、
硫酸镁1-2g、VB1 0.00l-0.002g、
酵母浸汁50-70g、琼脂18-20g，加水至1L，并调pH至7.5。
[0014] 优选的，在步骤S2中，所述种子液中各组份按照重量配比包括：葡萄糖30-40g、磷酸二氢钾5-6g、
硫酸镁4-5g、琼脂2-3g、VB1 0.00l-0.002g、蛋白胨5-6g、酵母
浸出汁50-60g、杏鲍菇菌渣10-30g，加水至1L，并调pH至5。
[0015] 优选的，在步骤S4中，所述富硒发酵液中各组份按照重量配比包括：麦麸皮40-50g、黄豆饼粉20-30g、杏鲍菇菌渣20-30g、葡萄糖30-40g、磷酸二氢钾5-6g、硫酸镁2-4g、VB1 0.00l-0.002g、蛋白胨3-4g、Na2SeO3溶液0.02-0.04g，加水至1L，并调pH至6。
[0016] 与已有技术相比，本发明的有益效果体现在：
[0017] 本发明中提供的一种液态发酵生产富硒杏鲍菇菌种的方法，通过添加Na2SeO3溶液，配合发酵作用，加快硒元素进入杏鲍菇菌体的细胞内，细胞内的物质代谢可以将硒元素结合到大分子活性物质上，转化为多糖硒和蛋白硒等有机形态的硒，从而得到富硒的杏鲍菇菌种，方法步骤简单、容易操作，且富硒效果明显。
具体实施方式
[0018] 为使本发明的目的、技术方案和优点更加清楚明了，下面结合具体实施方式，对本发明进一步详细说明。应该理解，这些描述只是示例性的，而并非要限制本发明的范围。此外，在以下说明中，省略了对公知结构和技术的描述，以避免不必要地混淆本发明的概念。
[0020] 一种液态发酵生产富硒杏鲍菇菌种的方法，包括如下步骤：
[0021] S1.菌种活化：将杏鲍菇菌种转接到无菌斜面培养基上，并置于25℃恒温培养箱中，培养10d，得到斜面菌种；
[0022] 斜面培养基中各组份按照重量配比包括：马铃薯200g、葡萄糖20g、蛋白胨4g、磷酸二氢钾2g、硫酸镁1g、VB1 0.00l g、酵母浸汁50g、琼脂18g，加水至1L，并调pH至7.5。
[0023] S2.制备种子液：将种子液分装于250mL锥形瓶中，每瓶装液量为100mL，使用棉塞封口，并在121℃条件下灭菌处理30min；
[0024] 种子液中各组份按照重量配比包括：葡萄糖30g、磷酸二氢钾5g、硫酸镁4g、琼脂2g、VB1 0.00l g、蛋白胨5g、酵母浸出汁50g、杏鲍菇菌渣10g，加水至1L，并调pH至5。
[0025] S3.待种子液冷却至常温后，在无菌条件下，每瓶种子液中接种0.2cm3-0.4cm3大小的斜面菌种3块，将接种后的种子液置于摇床中，在28℃条件下，用180r/min培养5d。
[0026] S4.制备富硒发酵液：将富硒发酵液分装至250mL的锥形瓶中，每瓶装液量为100mL，使用棉塞封口，并在121℃条件下灭菌30min；
[0027] 富硒发酵液中各组份按照重量配比包括：麦麸皮40g、黄豆饼粉20g、杏鲍菇菌渣20g、葡萄糖30g、磷酸二氢钾5g、硫酸镁2g、VB1 0.00l g、蛋白胨3g、Na2SeO3溶液0.02g，加水至1L，并调pH至6。
[0028] S5.待富硒发酵液冷却至常温后，在无菌条件下将发酵好的种子液接种至富硒发酵液中，其接种量为10％，将接种后的富硒发酵液置于摇床中，在30℃条件下，用120r/min培养7d，即得到富硒杏鲍菇菌种。
[0029] 实施例2
[0030] 一种液态发酵生产富硒杏鲍菇菌种的方法，包括如下步骤：
[0031] S1.菌种活化：将杏鲍菇菌种转接到无菌斜面培养基上，并置于25℃恒温培养箱中，培养10d，得到斜面菌种；
[0032] 斜面培养基中各组份按照重量配比包括：马铃薯220g、葡萄糖25g、蛋白胨4g、磷酸二氢钾4g、硫酸镁1.5g、VB1 0.00l g、酵母浸汁55g、琼脂20g，加水至1L，并调pH至7.5。
[0033] S2.制备种子液：将种子液分装于250mL锥形瓶中，每瓶装液量为100mL，使用棉塞封口，并在121℃条件下灭菌处理30min；
[0034] 种子液中各组份按照重量配比包括：葡萄糖35g、磷酸二氢钾5g、硫酸镁5g、琼脂2.5g、VB1 0.00l g、蛋白胨5.5g、酵母浸出汁60g、杏鲍菇菌渣15g，加水至1L，并调pH至5。
[0035] S3.待种子液冷却至常温后，在无菌条件下，每瓶种子液中接种0.2cm3-0.4cm3大小的斜面菌种3块，将接种后的种子液置于摇床中，在28℃条件下，用180r/min培养5d。
[0036] S4.制备富硒发酵液：将富硒发酵液分装至250mL的锥形瓶中，每瓶装液量为100mL，使用棉塞封口，并在121℃条件下灭菌30min；
[0037] 富硒发酵液中各组份按照重量配比包括：麦麸皮45g、黄豆饼粉20g、杏鲍菇菌渣25g、葡萄糖40g、磷酸二氢钾5g、硫酸镁2g、VB1 0.00l g、蛋白胨3.5g、Na2SeO3溶液0.025g，加水至1L，并调pH至6。
[0038] S5.待富硒发酵液冷却至常温后，在无菌条件下将发酵好的种子液接种至富硒发酵液中，其接种量为10％，将接种后的富硒发酵液置于摇床中，在30℃条件下，用120r/min培养7d，即得到富硒杏鲍菇菌种。
[0039] 实施例3
[0040] 一种液态发酵生产富硒杏鲍菇菌种的方法，包括如下步骤：
[0041] S1.菌种活化：将杏鲍菇菌种转接到无菌斜面培养基上，并置于25℃恒温培养箱中，培养10d，得到斜面菌种；
[0042] 斜面培养基中各组份按照重量配比包括：马铃薯225g、葡萄糖30g、蛋白胨5g、磷酸二氢钾3g、硫酸镁1.5g、VB1 0.00l5g、酵母浸汁60g、琼脂19g，加水至1L，并调pH至7.5。
[0043] S2.制备种子液：将种子液分装于250mL锥形瓶中，每瓶装液量为100mL，使用棉塞封口，并在121℃条件下灭菌处理30min；
[0044] 种子液中各组份按照重量配比包括：葡萄糖35g、磷酸二氢钾5.5g、硫酸镁4.5g、琼脂2.5g、VB1 0.00l5g、蛋白胨5.5g、酵母浸出汁55g、杏鲍菇菌渣20g，加水至1L，并调pH至5。
[0045] S3.待种子液冷却至常温后，在无菌条件下，每瓶种子液中接种0.2cm3-0.4cm3大小的斜面菌种3块，将接种后的种子液置于摇床中，在28℃条件下，用180r/min培养5d。
[0046] S4.制备富硒发酵液：将富硒发酵液分装至250mL的锥形瓶中，每瓶装液量为100mL，使用棉塞封口，并在121℃条件下灭菌30min；
[0047] 富硒发酵液中各组份按照重量配比包括：麦麸皮45g、黄豆饼粉25g、杏鲍菇菌渣25g、葡萄糖35g、磷酸二氢钾5.5g、硫酸镁3g、VB1 0.00l5g、蛋白胨3.5g、Na2SeO3溶液0.03g，加水至1L，并调pH至6。
[0048] S5.待富硒发酵液冷却至常温后，在无菌条件下将发酵好的种子液接种至富硒发酵液中，其接种量为10％，将接种后的富硒发酵液置于摇床中，在30℃条件下，用120r/min培养7d，即得到富硒杏鲍菇菌种。
[0049] 实施例4
[0050] 一种液态发酵生产富硒杏鲍菇菌种的方法，包括如下步骤：
[0051] S1.菌种活化：将杏鲍菇菌种转接到无菌斜面培养基上，并置于25℃恒温培养箱中，培养10d，得到斜面菌种；
[0052] 斜面培养基中各组份按照重量配比包括：马铃薯250g、葡萄糖40g、蛋白胨6g、磷酸二氢钾4g、硫酸镁2g、VB1 0.002g、酵母浸汁70g、琼脂20g，加水至1L，并调pH至7.5。
[0053] S2.制备种子液：将种子液分装于250mL锥形瓶中，每瓶装液量为100mL，使用棉塞封口，并在121℃条件下灭菌处理30min；
[0054] 种子液中各组份按照重量配比包括：葡萄糖40g、磷酸二氢钾6g、硫酸镁5g、琼脂3g、VB1 0.002g、蛋白胨6g、酵母浸出汁60g、杏鲍菇菌渣30g，加水至1L，并调pH至5。
[0055] S3.待种子液冷却至常温后，在无菌条件下，每瓶种子液中接种0.2cm3-0.4cm3大小的斜面菌种3块，将接种后的种子液置于摇床中，在28℃条件下，用180r/min培养5d。
[0056] S4.制备富硒发酵液：将富硒发酵液分装至250mL的锥形瓶中，每瓶装液量为100mL，使用棉塞封口，并在121℃条件下灭菌30min；
[0057] 富硒发酵液中各组份按照重量配比包括：麦麸皮50g、黄豆饼粉30g、杏鲍菇菌渣30g、葡萄糖40g、磷酸二氢钾6g、硫酸镁4g、VB1 0.002g、蛋白胨4g、Na2SeO3溶液0.04g，加水至1L，并调pH至6。
[0058] S5.待富硒发酵液冷却至常温后，在无菌条件下将发酵好的种子液接种至富硒发酵液中，其接种量为10％，将接种后的富硒发酵液置于摇床中，在30℃条件下，用120r/min培养7d，即得到富硒杏鲍菇菌种。
[0059] 将上述实施例中的菌种所培育出的杏鲍菇分为四组，每组取20份，采用氢化物
原子荧光光谱法对四组杏鲍菇中硒的含量的进行检测，依次经过试样制备、试样消解和测定，检测结果如下：四组杏鲍菇中硒的含量为0.4mg/kg-0.5mg/kg。由检测结果可知，通过本发明中提供的一种液态发酵生产富硒杏鲍菇菌种的方法，培育出的杏鲍菇硒的含量丰富，具有极高的营养价值。
[0060] 应当理解的是，本发明的上述具体实施方式仅仅用于示例性说明或解释本发明的原理，而不构成对本发明的限制。因此，在不偏离本发明的精神和范围的情况下所做的任何
修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。此外，本发明所附
权利要求旨在涵盖落入所附权利要求范围和边界、或者这种范围和边界的等同形式内的全部变化和修改例。
