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细胞化还平的控制

阅读:330发布:2022-08-12

专利汇可以提供细胞化还平的控制专利检索,专利查询,专利分析的服务。并且本文公开了用于调控受试者的 氧 化还原状态和/或降低氧化性应激的组合物和方法,所述方法和组合物包含TLR激动剂,所述TLR激动剂包含细菌裂解物和/或裂解物级分。本文还公开了包含细菌裂解物和/或裂解物级分的组合物和方法,所述细菌裂解物和/或裂解物级分以与一种或多种其它 治疗 剂或药剂的结合而配制或施用。,下面是细胞化还平的控制专利的具体信息内容。

1.一种用于调控受试者的化还原状态的toll样受体(TLR)激动剂组合物,所述组合物包含:
(a)包含细菌的至少一种裂解物和/或裂解物级分的TLR激动剂,其中,所述TLR激动剂活化至少一种或多种TLR或NLR;
(b)用于增强所述组合物吸收的任选促进剂;和
(c)用于增加所述组合物体积的任选载体,
其中,向所述受试者施用有效量的所述组合物可测量地降低所述受试者中的氧化性应激平。
2.根据权利要求1所述的组合物,其中,所述激动剂活化至少两种不同的TLR和/或NLR。
3.根据权利要求1所述的组合物,其中,所述激动剂活化至少三种不同的TLR和/或NLR。
4.根据权利要求1所述的组合物,其中,所述细菌是革兰氏阳性细菌或革兰氏阴性细菌。
5.根据权利要求4所述的组合物,
其中,至少一种所述革兰氏阳性细菌选自由乳酸杆菌(Lactobacillaceae)科的细菌、链球菌(Streptococcaceae)科的细菌、双歧杆菌(Bifidobacteriaceae)科的细菌和芽孢杆菌(Bacillaceae)科的细菌组成的组;并且
其中,至少一种所述革兰氏阴性细菌选自由假单胞菌(Pseudomonas)属、克雷伯菌(Klebsiella)属、黄单胞菌(Xanthomonas)属、志贺氏菌(Shigella)属和肠杆菌(Enterobacter)属的细菌组成的组。
6.根据权利要求4所述的组合物,
其中,至少一种所述革兰氏阳性细菌选自由凝结芽孢杆菌(Bacillus coagulans)、芽孢乳酸杆菌(Lactobacillus sporogenes)、嗜热链球菌(Streptococcus thermophilus)、动物双歧杆菌(Bifidobacterium animalis)、双歧杆菌(Bifidobacterium)、动物(animalis)、亚种动物(subspecies animalis)、婴儿双歧杆菌(Bifidobacterium infantis)、长双歧杆菌(Bifidobacterium longum)、短双歧杆菌(Bifidobacterium breve)、嗜酸乳酸杆菌(Lactobacillus acidophilus)、植物乳酸杆菌(Lactobacillus plantarum)、干酪乳酸杆菌(Lactobacillus casei)、德氏乳酸杆菌(Lactobacillus delbrueckii)、德氏乳酸杆菌保加利亚亚种(Lactobacillus delbrueckii subspecies bulgaricus)、乳酸乳球菌(Lactococcus lactis)、乳酸乳球菌乳酸亚种(Lactococcus lactis subspecies lactis)、乳酸链球菌(Streptococcus lactis)、嗜热链球菌(Streptococcus thermophilus)、乳双歧杆菌(Bifidobacterium lactis)、短双歧杆菌(Bifidobacterium breve)、乳酸片球菌(Pediococcus aciditactici)和瑞士乳酸杆菌(Lactobacillus hetveticus)组成的组;并且
其中,至少一种所述革兰氏阴性细菌选自由催产克雷伯菌(Klebsiella oxytocia)、福氏志贺氏菌(Shigella flexneri)、野油菜黄单胞菌(Xanthomonas campestris)和荧光假单胞菌(Pseudomonas flourescens)组成的组。
7.根据权利要求1所述的组合物,其中,所述TLR激动剂活化TLR2、TLR3、TLR4、TLR5、TLR7、TLR8、TLR9、NOD1和NOD2中的至少一种或多种。
8.根据权利要求2所述的组合物,其中,所述TLR激动剂活化TLR2和TLR4。
9.根据权利要求1所述的组合物,其中,所述TLR激动剂活化TLR2、TLR3、TLR4、TLR5、TLR7、TLR8、TLR9、NOD1和NOD2中的两种或更多种。
10.根据权利要求1所述的组合物,其中,所述TLR激动剂活化TLR2、TLR3、TLR4、TLR5、TLR7、TLR8、TLR9、NOD1和NOD2中的三种或更多种。
11.根据权利要求1所述的组合物,其中,所述促进剂选自由基酸、氨基糖和糖组成的组。
12.根据权利要求1所述的组合物,其中,所述载体选自由粘合剂、胶基及其组合组成的组。
13.根据权利要求12所述的组合物,其中,所述胶基包含至少一种疏水性聚合物和至少一种亲水性聚合物。
14.根据权利要求12所述的组合物,其中,所述粘合剂选自由糖、糖醇及其组合组成的组。
15.根据权利要求14所述的组合物,其中,所述糖醇选自由甘露糖醇、山梨糖醇、木糖醇及其组合组成的组。
16.根据权利要求1所述的组合物,其中,所述组合物被制造成选自由锭剂、口香糖、咀嚼片、糖果和溶解片组成的组的剂型。
17.根据权利要求16所述的组合物,其中,所述剂型将所述激动剂递送至口腔粘膜。
18.根据权利要求17所述的组合物,其中,所述口腔粘膜选自由舌下粘膜、颊黏膜及其组合组成的组。
19.根据权利要求1所述的组合物,其中,将所述组合物与药剂组合施用以增强所述药剂的活性。
20.根据权利要求1所述的组合物,其中,将所述组合物与药剂组合施用以降低所述药剂的副作用
21.根据权利要求20所述的组合物,其中,所述药剂的副作用是氧化性应激。
22.一种调控受试者的氧化还原状态的方法,所述方法包括向有需要的受试者施用治疗有效量的根据权利要求1所述的组合物。
23.根据权利要求22所述的方法,其中,通过测量所述受试者中异前列烷浓度的变化来评估氧化还原状态调控。
24.根据权利要求23所述的方法,其中,所述受试者是哺乳动物
25.根据权利要求24所述的方法,其中,所述哺乳动物是人。
26.根据权利要求23所述的方法,其中,所述受试者是非哺乳动物。
27.根据权利要求26所述的方法,其中,所述受试者是鱼类、家禽、甲壳类动物和昆虫。
28.根据权利要求27所述的方法,其中,所述昆虫是果蝇。
29.根据权利要求25所述的方法,其中,所述氧化还原状态是氧化性的并且导致氧化性应激。
30.根据权利要求29所述的方法,其中,人的所述氧化性应激与创伤后应激障碍相关。
31.一种调控受试者的氧化还原状态的方法,该方法包括以下步骤:
(a)向有需要的受试者反复施用时间上分开且由组合物组成的剂量,所述组合物包含:
(i)包含细菌的至少一种裂解物和/或裂解物级分的toll样受体(TLR)激动剂,其中,所述激动剂活化至少一种或多种不同的TLR或NLR;
(ii)用于增强所述组合物吸收的任选促进剂;和
(iii)用于增加所述组合物体积的任选载体,以及
(b)测量所述受试者的体液以检测氧化性应激水平的变化。
32.根据权利要求31所述的调控受试者的氧化还原状态的方法,其中,所述激动剂活化至少两种不同的TLR和/或NLR。
33.根据权利要求32所述的调控受试者的氧化还原状态的方法,其中,所述激动剂活化至少三种不同的TLR和/或NLR。
34.根据权利要求31所述的调控受试者的氧化还原状态的方法,其中,所述细菌是革兰氏阳性细菌或革兰氏阴性细菌。
35.根据权利要求34所述的调控受试者的氧化还原状态的方法,
其中,至少一种所述革兰氏阳性细菌选自由乳酸杆菌(Lactobacillaceae)科的细菌、链球菌(Streptococcaceae)科的细菌、双歧杆菌(Bifidobacteriaceae)科的细菌和芽孢杆菌(Bacillaceae)科的细菌组成的组;并且
其中,至少一种所述革兰氏阴性细菌选自由假单胞菌(Pseudomonas)属、克雷伯菌(Klebsiella)属、黄单胞菌(Xanthomonas)属、志贺氏菌(Shigella)属和肠杆菌(Enterobacter)属的细菌组成的组。
36.根据权利要求34所述的调控受试者的氧化还原状态的方法,
其中,至少一种所述革兰氏阳性细菌选自由凝结芽孢杆菌(Bacillus coagulans)、芽孢乳酸杆菌(Lactobacillus sporogenes)、嗜热链球菌(Streptococcus thermophilus)、动物双歧杆菌(Bifidobacterium animalis)、双歧杆菌(Bifidobacterium)、动物(animalis)、亚种动物(subspecies animalis)、婴儿双歧杆菌(Bifidobacterium infantis)、长双歧杆菌(Bifidobacterium longum)、短双歧杆菌(Bifidobacterium breve)、嗜酸乳酸杆菌(Lactobacillus acidophilus)、植物乳酸杆菌(Lactobacillus plantarum)、干酪乳酸杆菌(Lactobacillus casei)、德氏乳酸杆菌(Lactobacillus delbrueckii)、德氏乳酸杆菌保加利亚亚种(Lactobacillus delbrueckii subspecies bulgaricus)、乳酸乳球菌(Lactococcus lactis)、乳酸乳球菌乳酸亚种(Lactococcus lactis subspecies lactis)、乳酸链球菌(Streptococcus lactis)、嗜热链球菌(Streptococcus thermophilus)、乳双歧杆菌(Bifidobacterium lactis)、短双歧杆菌(Bifidobacterium breve)、乳酸片球菌(Pediococcus aciditactici)和瑞士乳酸杆菌(Lactobacillus hetveticus)组成的组;并且
其中,至少一种所述革兰氏阴性细菌选自由催产克雷伯菌(Klebsiella oxytocia)、福氏志贺氏菌(Shigella flexneri)、野油菜黄单胞菌(Xanthomonas campestris)和荧光假单胞菌(Pseudomonas flourescens)组成的组。
37.根据权利要求31所述的调控受试者的氧化还原状态的方法,其中,所述TLR激动剂活化TLR2、TLR3、TLR4、TLR5、TLR7、TLR8、TLR9、NOD1和NOD2中的至少一种或多种。
38.根据权利要求31所述的调控受试者的氧化还原状态的方法,其中,所述TLR激动剂活化TLR2、TLR3、TLR4、TLR5、TLR7、TLR8、TLR9、NOD1和NOD2中的两种或更多种。
39.根据权利要求31所述的调控受试者的氧化还原状态的方法,其中,所述TLR激动剂活化TLR2、TLR3、TLR4、TLR5、TLR7、TLR8、TLR9、NOD1和NOD2中的三种或更多种。
40.根据权利要求38所述的调控受试者的氧化还原状态的方法,其中,所述TLR激动剂活化TLR2和TLR4。
41.根据权利要求31所述的调控受试者的氧化还原状态的方法,其中,所述促进剂选自由氨基酸、氨基糖和糖组成的组。
42.根据权利要求31所述的调控受试者的氧化还原状态的方法,其中,所述载体选自由粘合剂、胶基及其组合组成的组。
43.根据权利要求42所述的调控受试者的氧化还原状态的方法,其中,所述胶基包含至少一种疏水性聚合物和至少一种亲水性聚合物。
44.根据权利要求42所述的调控受试者的氧化还原状态的方法,其中,所述粘合剂选自由糖、糖醇及其组合组成的组。
45.根据权利要求44所述的调控受试者的氧化还原状态的方法,其中,所述糖醇选自由甘露糖醇、山梨糖醇、木糖醇及其组合组成的组。
46.根据权利要求31所述的调控受试者的氧化还原状态的方法,其中,所述组合物被制造成选自由锭剂、口香糖、咀嚼片、糖果和溶解片组成的组的剂型。
47.根据权利要求46所述的调控受试者的氧化还原状态的方法,其中,所述剂型将所述激动剂递送至口腔粘膜。
48.根据权利要求31所述的调控受试者的氧化还原状态的方法,其中,所述口腔粘膜选自由舌下粘膜、颊黏膜及其组合组成的组。
49.根据权利要求31所述的调控受试者的氧化还原状态的方法,其中,对体液进行测量以评估所述受试者中异前列烷浓度的变化。
50.根据权利要求31所述的调控受试者的氧化还原状态的方法,其中,所述受试者是哺乳动物。
51.根据权利要求50所述的调控受试者的氧化还原状态的方法,其中,所述哺乳动物是人。
52.根据权利要求31所述的方法,其中,所述受试者是非哺乳动物。
53.根据权利要求52所述的方法,其中,所述受试者是鱼类、家禽、甲壳类动物和昆虫。
54.根据权利要求53所述的方法,其中,所述昆虫是果蝇。
55.根据权利要求54所述的调控受试者的氧化还原状态的方法,其中,人的氧化性应激与创伤后应激障碍相关。
56.一种减少受试者的尿液或血液中异前列烷的量的方法,所述方法包括以下步骤:
(a)确定所述受试者的尿液或血液中异前列烷的水平;
(b)向所述受试者施用有效量的组合物,所述组合物包含:
(i)包含来自细菌的至少一种裂解物和/或裂解物级分的toll样受体(TLR)激动剂,其中,所述TLR激动剂活化至少一种或多种不同的TLR或NLR;和
(ii)用于增强所述组合物吸收的任选促进剂;以及
(c)继续施用所述组合物直至所述受试者的尿液或血液中异前列烷的水平减少。
57.根据权利要求56所述的方法,其中,所述细菌是革兰氏阳性细菌或革兰氏阴性细菌。
58.根据权利要求57所述的方法,其中,所述细菌是:
(a)革兰氏阳性细菌,其选自由以下组成的组:凝结芽孢杆菌(Bacillus coagulans)、芽孢乳酸杆菌(Lactobacillus sporogenes)、嗜热链球菌(Streptococcus 
thermophilus)、动物双歧杆菌(Bifidobacterium  animalis)、双歧杆菌
(Bifidobacterium)、动物(animalis)、亚种动物(subspecies animalis)、婴儿双歧杆菌(Bifidobacterium infantis)、长双歧杆菌(Bifidobacterium longum)、短双歧杆菌(Bifidobacterium breve)、嗜酸乳酸杆菌(Lactobacillus acidophilus)、植物乳酸杆菌(Lactobacillus plantarum)、干酪乳酸杆菌(Lactobacillus casei)、德氏乳酸杆菌(Lactobacillus delbrueckii)、德氏乳酸杆菌保加利亚亚种(Lactobacillus 
delbrueckii subspecies bulgaricus)、乳酸乳球菌(Lactococcus lactis)、乳酸乳球菌乳酸亚种(Lactococcus lactis subspecies lactis)、乳酸链球菌(Streptococcus lactis)、嗜热链球菌(Streptococcus thermophilus)、乳双歧杆菌(Bifidobacterium lactis)、短双歧杆菌(Bifidobacterium  breve)、乳酸片球菌(Pediococcus 
aciditactici)和瑞士乳酸杆菌(Lactobacillus hetveticus);或者
(b)革兰氏阴性细菌,其选自由以下组成的组:催产克雷伯菌(Klebsiella oxytocia)、福氏志贺氏菌(Shigella flexneri)、野油菜黄单胞菌(Xanthomonas campestris)和荧光假单胞菌(Pseudomonas flourescens)。
59.一种组合物,其包含:
(a)能够活化至少一种或多种toll样受体(TLR)或Nod样受体(NLR)的细菌裂解物和/或裂解物级分;
(b)用于增强所述组合物吸收的任选促进剂;和
(c)用于增加所述组合物体积的任选载体。
60.一种药物制剂,其包含权利要求59所述的组合物,其中,所述药物制剂被配制用于颊或舌下施用。
61.根据权利要求60所述的药物制剂,其中,所述药物制剂被配制成在施用后不少于1分钟内溶解。
62.根据权利要求59所述的组合物,其中,所述细菌裂解物和/或裂解物级分是革兰氏阴性细菌或革兰氏阳性细菌裂解物和/或裂解物级分。
63.根据权利要求62所述的组合物,其中,所述细菌裂解物和/或裂解物级分是:
革兰氏阳性细菌裂解物和/或裂解物级分,其选自由以下组成的组:乳酸杆菌
(Lactobacillaceae)细菌裂解物和/或裂解物级分、链球菌(Streptococcaceae)细菌裂解物和/或裂解物级分、双歧杆菌(Bifidobacteriaceae)细菌裂解物和/或裂解物级分、或芽孢杆菌(Bacillaceae)细菌裂解物和/或裂解物级分;或者
革兰氏阴性细菌裂解物和/或裂解物级分,其选自由以下组成的组:假单胞菌
(Pseudomonas)细菌裂解物和/或裂解物级分、克雷伯菌(Klebsiella)细菌裂解物和/或裂解物级分、黄单胞菌(Xanthomonas)细菌裂解物和/或裂解物级分、志贺氏菌(Shigella)细菌裂解物和/或裂解物级分、或肠杆菌(Enterobacter)细菌裂解物和/或裂解物级分。
64.根据权利要求62所述的组合物,其中,所述细菌裂解物和/或裂解物级分是:
(a)革兰氏阳性细菌裂解物和/或裂解物级分,其选自由以下组成的组:凝结芽孢杆菌(Bacillus coagulans)、芽孢乳酸杆菌(Lactobacillus sporogenes)、嗜热链球菌(Streptococcus thermophilus)、动物双歧杆菌(Bifidobacterium animalis)、双歧杆菌(Bifidobacterium)、动物(animalis)、亚种动物(subspecies animalis)、婴儿双歧杆菌(Bifidobacterium infantis)、长双歧杆菌(Bifidobacterium longum)、短双歧杆菌(Bifidobacterium breve)、嗜酸乳酸杆菌(Lactobacillus acidophilus)、植物乳酸杆菌(Lactobacillus plantarum)、干酪乳酸杆菌(Lactobacillus casei)、德氏乳酸杆菌(Lactobacillus delbrueckii)、德氏乳酸杆菌保加利亚亚种(Lactobacillus 
delbrueckii subspecies bulgaricus)、乳酸乳球菌(Lactococcus lactis)、乳酸乳球菌乳酸亚种(Lactococcus lactis subspecies lactis)、乳酸链球菌(Streptococcus lactis)、嗜热链球菌(Streptococcus thermophilus)、乳双歧杆菌(Bifidobacterium lactis)、短双歧杆菌(Bifidobacterium  breve)、乳酸片球菌(Pediococcus 
aciditactici)、或瑞士乳酸杆菌(Lactobacillus hetveticus)裂解物和/或裂解物级分;
或者
(b)革兰氏阴性细菌裂解物和/或裂解物级分,其选自由以下组成的组:催产克雷伯菌(Klebsiella oxytocia)、福氏志贺氏菌(Shigella flexneri)、野油菜黄单胞菌(Xanthomonas campestris)、或荧光假单胞菌(Pseudomonas flourescens)裂解物和/或裂解物级分。
65.一种生产细菌裂解物的方法,该方法包括以下步骤:
(a)将生长培养基中的细菌发酵至稳定生长期以产生发酵液;
(b)从所述发酵液中收集细菌;
(c)将收获的细菌进行巴氏杀菌;以及
(d)用溶菌酶裂解巴氏杀菌的细菌以产生细菌裂解物。
66.根据权利要求65所述的方法,其中,在对数中期、对数后期,早期稳定期、中期稳定期或后期稳定期收获所述细菌。
67.根据权利要求65所述的方法,其中,所述细菌是革兰氏阳性细菌或革兰氏阴性细菌。
68.根据权利要求67所述的方法,
其中,所述革兰氏阳性细菌选自由乳酸杆菌(Lactobacillaceae)科的细菌、链球菌(Streptococcaceae)科的细菌、双歧杆菌(Bifidobacteriaceae)科的细菌和芽孢杆菌(Bacillaceae)科的细菌组成的组;并且
其中,所述革兰氏阴性细菌选自由假单胞菌(Pseudomonas)属、克雷伯菌(Klebsiella)属、黄单胞菌(Xanthomonas)属、志贺氏菌(Shigella)属和肠杆菌(Enterobacter)属的细菌组成的组。
69.根据权利要求67所述的方法,
其中,所述革兰氏阳性细菌选自由凝结芽孢杆菌(Bacillus coagulans)、芽孢乳酸杆菌(Lactobacillus sporogenes)、嗜热链球菌(Streptococcus thermophilus)、动物双歧杆菌(Bifidobacterium animalis)、双歧杆菌(Bifidobacterium)、动物(animalis)、亚种动物(subspecies animalis)、婴儿双歧杆菌(Bifidobacterium infantis)、长双歧杆菌(Bifidobacterium longum)、短双歧杆菌(Bifidobacterium breve)、嗜酸乳酸杆菌(Lactobacillus acidophilus)、植物乳酸杆菌(Lactobacillus plantarum)、干酪乳酸杆菌(Lactobacillus casei)、德氏乳酸杆菌(Lactobacillus delbrueckii)、德氏乳酸杆菌保加利亚亚种(Lactobacillus delbrueckii subspecies bulgaricus)、乳酸乳球菌(Lactococcus lactis)、乳酸乳球菌乳酸亚种(Lactococcus lactis subspecies lactis)、乳酸链球菌(Streptococcus  lactis)、嗜热链球菌(Streptococcus thermophilus)、乳双歧杆菌(Bifidobacterium lactis)、短双歧杆菌(Bifidobacterium breve)、乳酸片球菌(Pediococcus aciditactici)和瑞士乳酸杆菌(Lactobacillus hetveticus)组成的组;并且
其中,所述革兰氏阴性细菌选自由催产克雷伯菌(Klebsiella oxytocia)、福氏志贺氏菌(Shigella flexneri)、野油菜黄单胞菌(Xanthomonas campestris)和荧光假单胞菌(Pseudomonas flourescens)组成的组。
70.一种细菌裂解物,其根据权利要求65-69中任一项所述的方法产生。
71.一种用于减轻与施用药剂相关的一种或多种氧化性应激相关副作用的方法,所述方法包括与药剂组合施用治疗有效量的裂解物组合物,所述裂解物组合物包含:
(a)细菌的裂解物和/或裂解物级分;
(b)用于增强所述组合物吸收的任选促进剂;和
(c)用于增加所述组合物体积的任选载体;
其中,同时或以任何顺序并通过相同或不同的施用途径施用所述药剂和裂解物组合物。
72.根据权利要求71所述的方法,其中,所述裂解物和/或裂解物级分活化至少一种或多种TLR或NLR。
73.根据权利要求71所述的方法,其中,所述裂解物和/或裂解物级分活化至少两种TLR和/或NLR。
74.根据权利要求71所述的方法,其中,所述裂解物和/或裂解物级分活化至少三种TLR和/或NLR。
75.根据权利要求71所述的方法,其中,所述裂解物和/或裂解物级分活化TLR2、TLR3、TLR4、TLR5、TLR7、TLR8、TLR9、NOD1和NOD2中的至少一种或多种。
76.根据权利要求71所述的方法,其中,所述裂解物和/或裂解物级分活化TLR2和TLR4。
77.根据权利要求71所述的方法,其中,所述裂解物和/或裂解物级分活化TLR2、TLR3、TLR4、TLR5、TLR7、TLR8、TLR9、NOD1和NOD2中的两种或更多种。
78.根据权利要求71所述的方法,其中,所述裂解物和/或裂解物级分活化TLR2、TLR3、TLR4、TLR5、TLR7、TLR8、TLR9、NOD1和NOD2中的三种或更多种。
79.根据权利要求71所述的方法,其中,所述细菌是革兰氏阳性细菌或革兰氏阴性细菌。
80.根据权利要求79所述的方法,
其中,所述革兰氏阳性细菌选自由乳酸杆菌(Lactobacillaceae)科的细菌、链球菌(Streptococcaceae)科的细菌、双歧杆菌(Bifidobacteriaceae)科的细菌和芽孢杆菌(Bacillaceae)科的细菌组成的组;并且
其中,革兰氏阴性细菌选自由假单胞菌(Pseudomonas)属、克雷伯菌(Klebsiella)属、黄单胞菌(Xanthomonas)属、志贺氏菌(Shigella)属和肠杆菌(Enterobacter)属的细菌组成的组。
81.根据权利要求79所述的方法,
其中,所述革兰氏阳性细菌选自由凝结芽孢杆菌(Bacillus coagulans)、芽孢乳酸杆菌(Lactobacillus sporogenes)、嗜热链球菌(Streptococcus thermophilus)、动物双歧杆菌(Bifidobacterium animalis)、双歧杆菌(Bifidobacterium)、动物(animalis)、亚种动物(subspecies animalis)、婴儿双歧杆菌(Bifidobacterium infantis)、长双歧杆菌(Bifidobacterium longum)、短双歧杆菌(Bifidobacterium breve)、嗜酸乳酸杆菌(Lactobacillus acidophilus)、植物乳酸杆菌(Lactobacillus plantarum)、干酪乳酸杆菌(Lactobacillus casei)、德氏乳酸杆菌(Lactobacillus delbrueckii)、德氏乳酸杆菌保加利亚亚种(Lactobacillus delbrueckii subspecies bulgaricus)、乳酸乳球菌(Lactococcus lactis)、乳酸乳球菌乳酸亚种(Lactococcus lactis subspecies lactis)、乳酸链球菌(Streptococcus  lactis)、嗜热链球菌(Streptococcus thermophilus)、乳双歧杆菌(Bifidobacterium lactis)、短双歧杆菌(Bifidobacterium breve)、乳酸片球菌(Pediococcus aciditactici)和瑞士乳酸杆菌(Lactobacillus hetveticus)组成的组;并且
其中,所述革兰氏阴性细菌选自由催产克雷伯菌(Klebsiella oxytocia)、福氏志贺氏菌(Shigella flexneri)、野油菜黄单胞菌(Xanthomonas campestris)和荧光假单胞菌(Pseudomonas flourescens)组成的组。
82.根据权利要求72所述的方法,其中,所述一种或多种氧化性应激相关副作用选自由以下组成的组:无蓝蛋白血症、动脉/系统性高血压、关节炎、哮喘、动脉粥样硬化、特应性皮炎、癌症、膀胱癌、白血病、子宫癌、宫颈癌、头晕、恶心、呕吐、便秘、腹泻、失眠、嗜睡、眩晕、性欲减退、暂时昏迷、颤抖、黄疸、心律失常、心率增加、心率减慢、麻疹、抑郁症、临床抑郁症、脑缺血、支气管发育不良、心血管疾病白内障、蜂窝组织炎、化疗副作用、慢性疲劳综合征、结肠炎、冠状动脉疾病、血脂异常、子痫、勃起功能障碍、共济失调、头痛、心衰竭、血液透析副作用、肝硬化、高胆固醇血症、高同型半胱氨酸血症、高脂血症、间质性肺病、肺损害、黄斑变性、男性不育症、轻度认知障碍、心肌梗塞、心肌炎、肌病、神经病、肥胖症、骨关节炎、骨质疏松症、胰腺炎、牙周病腹膜透析副作用、创伤后应激障碍、先兆子痫、皮癣、牛皮癣关节炎、肺动脉高压、放疗法副作用、反应性关节炎、呼吸窘迫综合征、横纹肌溶解症、湿性疾病、败血症、睡眠呼吸暂停、中风、自杀念头、淀粉样变性、血栓形成、tau蛋白病、不稳定型心绞痛、尿毒症或静脉功能不全。
83.一种用于治疗受试者中的氧化性应激相关疾病或病症的方法,所述方法包括向所述受试者施用治疗有效量的组合物,所述组合物包含:
(a)能够活化至少一种或多种toll样受体(TLR)或Nod样受体(NLR)的细菌裂解物和/或裂解物级分;
(b)用于增强所述组合物吸收的任选促进剂;和
(c)用于增加所述组合物体积的任选载体。
84.根据权利要求83所述的方法,其中,所述氧化性应激相关病症是无铜蓝蛋白血症、急性和慢性酒精性肝病、急性自身免疫性心肌炎、镰状细胞病急性胸部综合征、急性胰腺炎、急性呼吸窘迫综合征、酒精肝性疾病、肌萎缩侧索硬化、动脉/系统性高血压、肺、哮喘、共济失调毛细血管扩张症、动脉粥样硬化、特应性皮炎、脑缺血、支气管肺发育不良、烧伤、某些癌症、体外循环、心血管疾病、白内障、蜂窝组织炎、化疗副作用、慢性疲劳综合征、慢性丙型肝炎、慢性肾病、慢性阻塞性肺病、慢性肾衰竭、结肠炎、冠状动脉疾病、克罗伊茨费尔特-雅各布病、克罗恩氏病、皮肤利什曼病、囊性纤维化、1型糖尿病、2型糖尿病、血脂异常、唐氏综合征、子痫、晚期肾脏疾病、勃起功能障碍、弗里德赖希共济失调、头痛、心力衰竭、幽螺杆菌感染/炎症血液透析副作用、肝硬化、人类免疫缺陷病毒感染、亨廷顿病、高压病、高胆固醇血症、高同型半胱氨酸血症、高脂血症、特发性肺纤维化、间质性肺病、缺血/再灌注损害、少年慢性关节炎、肾移植失败、白血病、肺癌、肺损害、黄斑变性、男性不育症、梅尼埃尔综合征、脑膜炎、轻度认知障碍、多发性硬化症、骨髓增生异常综合征、心肌梗塞、心肌炎、新生儿支气管肺发育不良、肥胖症、骨关节炎、骨质疏松症、胰腺炎、帕金森病、牙周病、腹膜透析副作用、光老化、创伤后应激障碍、先兆子痫、原发性胆汁性肝硬化、支气管肺疾病、早衰、牛皮癣、牛皮癣关节炎、肺动脉高压、放疗法副作用、反应性关节炎、肾细胞癌、呼吸窘迫综合征、早产儿视网膜病变,后束纤维化、风湿性疾病、类风湿性关节炎、结节病、败血症、镰状细胞贫血病、睡眠呼吸暂停、球形红细胞增多症、脊髓损害、中风、突触核蛋白病、系统性淀粉样变性、系统性红斑狼疮、系统性硬化症(硬皮病)、血栓形成、tau蛋白病、创伤性应激肺结核、不稳定型心绞痛、尿毒症、静脉功能不全、沃纳综合征和脑肝肾综合征。
85.根据权利要求83所述的方法,其中,所述细菌是:
(a)革兰氏阳性细菌,其选自由以下组成的组:凝结芽孢杆菌(Bacillus coagulans)、芽孢乳酸杆菌(Lactobacillus sporogenes)、嗜热链球菌(Streptococcus 
thermophilus)、动物双歧杆菌(Bifidobacterium  animalis)、双歧杆菌
(Bifidobacterium)、动物(animalis)、亚种动物(subspecies animalis)、婴儿双歧杆菌(Bifidobacterium infantis)、长双歧杆菌(Bifidobacterium longum)、短双歧杆菌(Bifidobacterium breve)、嗜酸乳酸杆菌(Lactobacillus acidophilus)、植物乳酸杆菌(Lactobacillus plantarum)、干酪乳酸杆菌(Lactobacillus casei)、德氏乳酸杆菌(Lactobacillus delbrueckii)、德氏乳酸杆菌保加利亚亚种(Lactobacillus 
delbrueckii subspecies bulgaricus)、乳酸乳球菌(Lactococcus lactis)、乳酸乳球菌乳酸亚种(Lactococcus lactis subspecies lactis)、乳酸链球菌(Streptococcus lactis)、嗜热链球菌(Streptococcus thermophilus)、乳双歧杆菌(Bifidobacterium lactis)、短双歧杆菌(Bifidobacterium  breve)、乳酸片球菌(Pediococcus 
aciditactici)和瑞士乳酸杆菌(Lactobacillus hetveticus);或者,
(b)革兰氏阴性细菌,其选自由以下组成的组:催产克雷伯菌(Klebsiella oxytocia)、福氏志贺氏菌(Shigella flexneri)、野油菜黄单胞菌(Xanthomonas campestris)和荧光假单胞菌(Pseudomonas flourescens)。
86.一种用于降低受试者的氧化性应激的方法,所述方法包括:
(a)通过测量所述受试者的尿液或血液中异前列烷的量来确定所述受试者中的氧化性应激水平;
(b)向所述受试者施用有效量的组合物,所述组合物包含:
(i)包含来自细菌的至少一种裂解物和/或裂解物级分的toll样受体(TLR)激动剂,其中,所述TLR激动剂活化至少一种或多种TLR或NLR;和
(ii)用于增强所述组合物吸收的任选促进剂;以及
(c)继续施用所述组合物直至氧化性应激水平降低,通过所述受试者的尿液中异前列烷的减少量确定。
87.根据权利要求86所述的方法,其中,继续施用细菌裂解物直至受试者的尿液中异前列烷的量小于约3ng/mg肌酸酐,小于约2ng/mg肌酸酐,小于约1ng/mg肌酸酐或小于约
0.5ng/mg肌酸酐。
88.根据权利要求86所述的方法,其中,所述细菌是革兰氏阳性细菌或革兰氏阴性细菌。
89.根据权利要求86所述的方法,其中,所述细菌是:
(a)革兰氏阳性细菌,其选自由以下组成的组:凝结芽孢杆菌(Bacillus coagulans)、芽孢乳酸杆菌(Lactobacillus sporogenes)、嗜热链球菌(Streptococcus 
thermophilus)、动物双歧杆菌(Bifidobacterium  animalis)、双歧杆菌
(Bifidobacterium)、动物(animalis)、亚种动物(subspecies animalis)、婴儿双歧杆菌(Bifidobacterium infantis)、长双歧杆菌(Bifidobacterium longum)、短双歧杆菌(Bifidobacterium breve)、嗜酸乳酸杆菌(Lactobacillus acidophilus)、植物乳酸杆菌(Lactobacillus plantarum)、干酪乳酸杆菌(Lactobacillus casei)、德氏乳酸杆菌(Lactobacillus delbrueckii)、德氏乳酸杆菌保加利亚亚种(Lactobacillus 
delbrueckii subspecies bulgaricus)、乳酸乳球菌(Lactococcus lactis)、乳酸乳球菌乳酸亚种(Lactococcus lactis subspecies lactis)、乳酸链球菌(Streptococcus lactis)、嗜热链球菌(Streptococcus thermophilus)、乳双歧杆菌(Bifidobacterium lactis)、短双歧杆菌(Bifidobacterium  breve)、乳酸片球菌(Pediococcus 
aciditactici)和瑞士乳酸杆菌(Lactobacillus hetveticus);或者,
(b)革兰氏阴性细菌,其选自由以下组成的组:催产克雷伯菌(Klebsiella oxytocia)、福氏志贺氏菌(Shigella flexneri)、野油菜黄单胞菌(Xanthomonas campestris)和荧光假单胞菌(Pseudomonas flourescens)。
90.根据权利要求86所述的方法,其中,所述裂解物和/或裂解物级分活化至少一种或多种TLR或NLR。
91.根据权利要求86所述的方法,其中,所述裂解物和/或裂解物级分活化至少两种TLR和/或NLR。
92.根据权利要求86所述的方法,其中,所述裂解物和/或裂解物级分活化至少三种TLR和/或NLR。
93.根据权利要求86所述的方法,其中,所述裂解物和/或裂解物级分活化TLR2、TLR3、TLR4、TLR5、TLR7、TLR8、TLR9、NOD1和NOD2中的至少一种或多种。
94.根据权利要求86所述的方法,其中,所述裂解物和/或裂解物级分活化TLR2和TLR4。
95.根据权利要求86所述的方法,其中,所述裂解物和/或裂解物级分活化TLR2、TLR3、TLR4、TLR5、TLR7、TLR8、TLR9、NOD1和NOD2中的两种或更多种。
96.根据权利要求86所述的方法,其中,所述裂解物和/或裂解物级分活化TLR2、TLR3、TLR4、TLR5、TLR7、TLR8、TLR9、NOD1和NOD2中的三种或更多种。
97.一种治疗性组合,该组合包含:
(a)裂解物组合物,其包含
(i)能够活化至少一种或多种toll样受体(TLR)或Nod样受体(NLR)的细菌裂解物和/或裂解物级分;
(ii)用于增强所述组合物吸收的任选促进剂;和
(iii)用于增加所述组合物体积的任选载体;和
(b)一种或多种药剂;
其中,同时或以任何顺序施用所述裂解物组合物和所述一种或多种药剂,并且其中,经由相同或不同的施用途径施用所述裂解物组合物和所述一种或多种药剂。
98.根据权利要求97所述的治疗性组合,其中,所述裂解物组合物经舌下或口腔施用。
99.一种药物制剂,其包含以下组合:
(a)裂解物组合物,其包含
(i)能够活化至少一种或多种toll样受体(TLR)或Nod样受体(NLR)的细菌裂解物和/裂解物级分;
(ii)用于增强所述组合物吸收的任选促进剂;和
(iii)用于增加所述组合物体积的任选载体;和
(b)一种或多种药剂。
100.根据权利要求97所述的治疗性组合或权利要求99所述的药物制剂,其中所述一种或多种药剂选自由以下组成的组:
抗痉挛剂、运动兴奋剂、H2受体拮抗剂、抗毒蕈剂;螯合剂、前列腺素类似物、氨基水杨酸盐、皮质类固醇、影响免疫应答的药物、刺激性泻剂、影响胆汁组成和流动的药物、胆汁酸螯合剂、多巴胺拮抗剂、质子抑制剂、阿片类物质、阿片类物质受体拮抗剂、镇痛药、睡眠药物、强心苷、磷酸二酯酶抑制剂、噻嗪类、利尿剂、保利尿剂、拮抗剂、渗透利尿剂、心律失常药物、β肾上腺素受体阻断药物、高血压药物、影响肾素-血管紧张素系统的药物、硝酸盐、阻断剂、抗心绞痛药物、外周血管扩张剂、拟交感神经剂、抗凝剂、鱼精蛋白、抗血小板药物、纤维蛋白溶解药物、抗纤维蛋白溶解药物、调控脂质药物、ω-3脂肪酸化合物、CNS药物、抗感染药物,或选自由以下组成的组的另一种药物:苯托品、丙环啶、比哌立登、金刚烷胺、溴隐亭、培高利特、恩他卡朋、托卡朋、司来吉兰、普拉克索、布地奈德、福莫特罗、富酸喹硫平、奥氮平、匹格列酮、孟鲁司特、唑来膦酸、缬沙坦、拉坦前列素、依贝沙坦、氯吡格雷、阿托西汀、右苯丙胺、利他灵、莫达非尼、博来霉素、放线菌素、柔红霉素、伊达比星、米托霉素、米托蒽醌、阿扎胞苷、卡培他滨、克拉屈滨、氯法拉滨、阿糖胞苷、氟达拉滨、氟尿嘧啶、吉西他滨、巯嘌呤、甲氨喋呤、奈拉滨、培美曲塞、雷替曲塞、硫嘌呤、阿扑吗啡、倍他米松、可的松、地夫可特、地塞米松、氢化可的松、甲基泼尼松龙、泼尼松龙、曲安奈德、环孢霉素、西罗莫司、他克莫司、干扰素α和干扰素β。
101.根据权利要求97所述的治疗性组合或权利要求99所述的药物制剂,其中所述一种或多种药剂选自由以下组成的组:
选自由硫酸阿托品、盐酸双环维林、丁溴东莨菪碱、溴丙胺太林、枸橼酸阿尔维林和盐酸美贝维林组成的组的抗痉挛剂;
选自由胃复安和多潘立酮组成的组的运动性兴奋剂;
选自由甲氰咪胍、法莫替丁尼替丁和雷尼替丁组成的组的H2受体拮抗剂;
抗毒蕈碱剂;
选自由二柠檬酸铋酸三钾和硫糖组成的组的螯合剂;
前列腺素类似物;
选自由巴柳氮钠、美沙拉嗪、奥沙拉嗪和柳氮磺胺吡啶组成的组的氨基水杨酸盐;
选自由二丙酸倍氯米松、布地奈德、氢化可的松和泼尼松龙组成的组的皮质类固醇;选自由环孢菌素、巯嘌呤、甲氨蝶呤、阿达木单抗和英夫利昔单抗组成的组的影响免疫应答的药物;
选自由比沙可啶、二羟基蒽醌、多库酯和吡苯氧磺钠组成的组的刺激性泻药;
影响胆汁组成和流动的药物;
选自由消胆胺脂、羟苄利明、卡米罗芬、美贝维林、曲美布汀、罗西维林、双环维林、双己维林、双苯美林、二苯哌酯、苯唑酮、甲哌佐酯、哌苯偶酯、格隆溴铵、奥芬澳胺、环戊噻吩、乙胺太林、丙美卡因、奥替溴铵、三乙已苯铵、异丙胺、己环铵、泊尔定、贝弗宁、二苯马尼、替莫碘铵、吡芬溴铵、噻哌溴铵、苯哌维林、罂粟碱、屈他维林、莫沙维林、5-HT3拮抗剂、5-HT4激动剂、二苯丙哌啶、地索普明、氯苄沙明、匹维溴铵、非诺维林、依丹帕明、普罗沙唑、阿尔维林、曲匹布通、异美汀、卡罗维林、均苯三酚、酮、三甲二苯丙胺、阿托品、莨菪碱、东莨菪碱、丁基莨菪胺、甲基东莨菪碱、甲基阿托品、芬托溴铵、西托溴铵和主要多巴胺拮抗剂组成的组的胆汁酸螯合剂;
选自由奥美拉唑钠、兰索拉唑钠、泮托拉唑钠、美拉唑钠和雷贝拉唑钠组成的组的质子泵抑制剂;
阿片类物质和阿片类物质受体拮抗剂;
选自由对乙酰氨基酚、双氯芬酸、氟苯水杨酸、依托度酸、非诺洛芬、氟比洛芬、布洛芬、吲哚美辛、酮洛芬、酮咯酸、甲氯芬那酸、甲芬那酸、美洛昔康、丁美酮、萘普生、奥沙普嗪、保泰松、吡罗昔康、舒林酸、托美丁钠、塞来昔布、丁丙诺啡、布托啡诺、可待因、氢可酮、氢吗啡酮、左啡诺、哌替啶、美沙酮、吗啡、纳布啡、羟考酮、羟吗啡酮、喷他佐辛、丙氧芬和曲马多组成的组的镇痛药
选自由硝西泮、氟西泮、洛索拉明、氯甲西泮、替马西泮、扎来普隆、唑吡坦、佐匹克隆、水合氯醛、磷酸三氯乙酯、氯美噻唑、夸西泮、三唑仑、艾司唑仑、氯硝西泮、阿普唑仑、艾司佐匹克隆、雷美替胺、曲唑酮、阿米替林、多塞平、苯二氮卓类药物、褪黑激素、苯海拉明和草药治疗剂组成的组的睡眠药物;
选自由地高辛和洋地黄毒苷组成的组的强心苷;
选自由依诺昔酮和米力农组成的组的磷酸二酯酶抑制剂;
选自由苄氟噻嗪、氯噻酮、环戊噻嗪、伊那酰胺、美托拉宗和西帕胺组成的组的噻嗪类和相关利尿剂;
选自由呋塞米、布美他尼和托拉塞米组成的组的利尿剂;
选自由盐酸阿米洛利、氨苯蝶啶、依普利酮和螺内酯组成的组的保钾利尿剂和醛固酮拮抗剂;
渗透利尿剂;
选自由腺苷、盐酸胺碘酮、丙吡胺、醋酸氟卡胺、盐酸普罗帕酮和盐酸利多卡因组成的组的心律失常药物;
选自由普萘洛尔、阿替洛尔、醋丁洛尔、毕索洛尔富马酸盐、卡维地洛、塞利洛尔、艾司洛尔、伊巴洛尔、酒石酸美托洛尔、纳多洛尔、奈必洛尔、氧烯洛尔、吲哚洛尔、索他洛尔和噻吗洛尔组成的组的β肾上腺素受体阻断药物;
选自由安替康、波生坦、二氮嗪、肼苯哒嗪、伊洛前列素、米诺地尔、西地那非、西他生坦、硝普钠、可乐定、甲基多巴、莫索尼定、胍乙啶单硫酸盐、多沙唑嗪、吲哚拉明、哌唑嗪、特拉唑嗪、苯氧苯胺和甲磺酸酚妥拉明组成的组的高血压药物;
选自由卡托普利、西拉普利、依那普利马来酸盐、福辛普利、咪达普利、赖诺普利、莫昔普利、培哚普利叔丁胺盐、喹那普利、雷米普利、群多普利、坎地沙坦西酯、依普罗沙坦、依贝沙坦、氯沙坦、奥美沙坦酯、替米沙坦、缬沙坦和阿利吉仑组成的组的影响肾素-血管紧张素系统的药物;
选自由三硝酸甘油、二硝酸异山梨醇酯、单硝酸异山梨醇酯、苯磺酸氨氯地平、地尔硫卓、非洛地平、伊拉地平、拉西地平、乐卡地平、硝吡胺甲酯、利心平、尼莫地平、戊脉安、伊伐布雷定、尼可地尔和雷诺嗪组成的组的硝酸盐、钙通道阻断剂、抗心绞痛药物;
选自由西洛他唑、肌醇烟酸醇酯、莫西赛利、草酸萘呋胺和己酮可可碱组成的组的外周血管扩张和相关药物;
选自由多巴胺、多培沙明、麻黄素、间羟胺、去甲肾上腺素酒石酸盐、酒石酸去甲麻黄碱和苯麻黄碱组成的组的拟交感神经剂;
选自由肝素、贝米肝素、达肝素、依诺肝素、亭扎肝素、达那肝素、比伐卢定、来匹卢定、依前列醇、磺达肝素、华法令、醋硝香豆素、苯茚满二酮、达比加群酯、利伐沙班和鱼精蛋白硫酸盐组成的组的抗凝剂和鱼精蛋白;
选自由阿昔单抗、阿司匹林、氯吡格雷、潘生丁、依替巴肽、普拉格雷和替罗非班组成的组的抗血小板药物;
选自由阿替普酶、瑞替普酶、链激酶、替奈普酶、尿激酶、酚磺乙胺和传明酸组成的组的纤维蛋白溶解药物和抗纤维蛋白溶解药物;
选自由阿托伐他汀、氟伐他汀、普伐他汀、罗苏伐他汀、辛伐他汀、考来维仑、消胆胺脂、考来替泊、依泽替米贝、苯扎贝特、环丙贝特、非诺贝特、吉非贝齐、阿西莫司、烟酸、ω-3脂肪酸化合物、乙醇胺油酸酯和十四烷基硫酸钠组成的组的调控脂质药物;
选自由苯哌利多、氯丙嗪、氟哌噻吨、氟哌啶醇、左美丙嗪、哌氰嗪、奋乃静、哌迷清、氯吡嗪、普马嗪、舒必利、三氟拉嗪、珠氯噻醇、氨磺必利、阿立哌唑、氯氮平、奥氮平、帕潘立酮、奎硫平、利培酮、施立碟、苯噻庚乙胺、氟哌噻吨、氟奋乃静、奥氮平双羟萘酸盐、安乐嗪棕榈酸酯、利螺环酮、珠氯噻醇、卡马西平、丙戊酸钠、丙戊酸、酸锂、柠檬酸锂、阿米替林、氯米帕明、度硫平、丙咪嗪、洛非帕明、去甲替林、曲米帕明、米安色林、曲唑酮、苯乙肼、异卡波肼、反苯环丙胺、吗氯贝胺、西酞普兰、依他普仑、氟西汀、氟伏沙明、帕罗西汀、舍曲林、阿戈美拉汀、度洛西汀、氟哌噻吨、米氮平、瑞波西汀、色氨酸文拉法辛、阿托莫西汀、地塞米明、哌甲酯、莫达非尼、艾斯利卡西平、奥卡西平、乙琥胺、加巴喷丁、普加巴林、拉科酰胺、拉莫三嗪、左乙拉西坦、苯巴比妥、普利米酮、苯妥英、卢非酰胺、噻加宾、托吡酯、氨己烯酸、唑尼沙胺、罗匹尼罗、罗替戈汀、复方苯胺多巴胺、左旋多巴、复方卡尔多巴、雷沙吉兰、司来吉兰、恩他卡朋、托卡朋、金刚胺、邻甲苯海明、普环啶、苯海索、氟哌啶醇、吡拉西坦、利鲁唑、丁苯那嗪、阿坎酸、双硫仑、安非他酮、伐尼克兰、丁丙诺啡、洛非西定、多奈哌齐、加兰他敏、美金刚胺和利凡斯的明组成的组的CNS药物;
选自由青霉素、青霉素V、氟氯西林、替莫西林、阿莫西林、氨苄西林、复方阿莫西林、复方氟氯西林、哌拉西林、替卡西林、匹美西林、头孢菌素类、头孢克洛、头孢羟氨苄、头孢氨苄、头孢克肟、头孢噻肟、头孢拉定、头孢他啶、头孢呋辛、厄他培南、亚胺培南、美罗培南、氨曲南、四环素、去甲金霉素、多西环素、赖甲环素、米诺环素、土霉素、替加环素、庆大霉素、丁胺卡那霉素、新霉素、妥布霉素、红霉素、阿奇霉素、克拉霉素、泰利霉素、克林霉素、氯霉素、夫西地酸、万古霉素、替考拉宁、达托霉素、利奈唑胺、奎奴普丁、多黏菌素E、复方磺胺甲基异恶唑、磺胺嘧啶、甲氧苄啶、卷曲霉素、环丝氨酸、乙胺丁醇、异烟肼、吡嗪酰胺、利福布汀、利福平、链霉素、氨苯砜、氯法齐明、甲硝唑、替硝唑、环丙沙星、左氧氟沙星、莫西沙星、萘啶酸、诺氟拉星、诺氟沙星、呋喃妥因、乌洛托品马尿酸盐、两性霉素、阿尼芬净、卡泊芬净、氟康唑、氟胞嘧啶、灰黄霉素、依他康唑、酮康唑、米卡芬净、制霉菌素、泊沙康唑、特比萘芬、伏立康唑、阿巴卡韦、去羟肌苷、恩曲他滨、拉米夫定、司他夫定、替诺福韦酯、齐多夫定、阿扎那韦、地瑞那韦、福沙那韦、印地那韦、罗平奈尔、奈非那韦、利托那韦、沙奎那韦、替拉那韦、依法韦仑、依曲韦林、奈韦拉平、恩夫韦地、马拉维若、雷特格韦、阿昔洛韦、泛昔洛韦、异丙肌苷、缬昔洛韦、西多福韦、更昔洛韦、膦甲酸、缬更昔洛韦、阿德福韦酯、恩替卡韦、替比夫定、金刚烷胺、奥司他韦、扎那米韦、帕利珠单抗、利巴韦林、蒿甲醚、氯喹、甲氟喹、伯氨喹、氯胍、乙胺嘧啶、奎宁、强力霉素、二氯尼特糠、甲硝哒唑、替硝唑、米帕林、葡萄糖酸锑钠、阿托伐醌、依地酸戊脒、甲苯咪唑和哌嗪组成的组的抗感染药物;
选自由苯托品、丙环啶、比哌立登、金刚烷胺、溴隐亭、培高利特、恩他卡朋、托卡朋、司来吉兰、普拉克索、布地奈德、福莫特罗、富马酸喹硫平、奥氮平、匹格列酮、孟鲁司特、唑来膦酸、缬沙坦、拉坦前列素、依贝沙坦、氯吡格雷、阿托西汀、右苯丙胺、利他灵、莫达非尼、博来霉素、放线菌素、柔红霉素、伊达比星、米托霉素、米托蒽醌、阿扎胞苷、卡培他滨、克拉屈滨、氯法拉滨、阿糖胞苷、氟达拉滨、氟尿嘧啶、吉西他滨、巯嘌呤、甲氨喋呤、奈拉滨、培美曲塞、雷替曲塞、硫鸟嘌呤、阿扑吗啡、倍他米松、可的松、地夫可特、地塞米松、氢化可的松、甲基泼尼松龙、泼尼松龙、曲安奈德、环孢素、西罗莫司、他克莫司、干扰素α和干扰素β组成的组的其它药物。
102.一种制剂,其包含
(a)裂解物组合物,所述裂解物组合物包含
(i)能够活化至少一种或多种toll样受体(TLR)或Nod样受体(NLR)的细菌裂解物和/或裂解物级分;
(ii)用于增强所述组合物吸收的任选促进剂;和
(iii)用于增加所述组合物体积的任选载体;和
(b)分离的人抗TNFα抗体或其抗原结合片段或TNF抑制剂。
103.根据权利要求102所述的制剂,其中,所述人抗TNFα抗体或其抗原结合片段是阿达木单抗。
104.根据权利要求103所述的制剂在制备用于治疗受试者的类风湿性关节炎(RA)、迟发性RA或牛皮癣关节炎的药物中的用途。
105.一种用于治疗受试者的类风湿性关节炎(RA)、迟发性RA或牛皮癣关节炎的方法,所述方法包括向所述受试者施用治疗有效量的根据权利要求102所述的制剂。
106.根据权利要求105所述的方法,其中,将所述人抗TNFα抗体或其抗原结合片段以双周给药方案施用于所述受试者。
107.根据权利要求105所述的方法,其中,将所述人抗TNFα抗体或其抗原结合片段以
30mg或更高的剂量施用于所述受试者。
108.根据权利要求105所述的方法,其中,所述TNFα抑制剂是TNFα融合蛋白。
109.根据权利要求108所述的方法,其中,所述TNFα融合蛋白是依那西普。
110.根据权利要求105所述的方法,其中,所述抗TNFα抗体或其抗原结合片段是英夫利昔单抗或戈利木单抗。
111.根据权利要求105所述的方法,其中,所述抗TNFα抗体或其抗原结合片段是阿达木单抗。
112.根据权利要求105所述的方法,其中,所述抗TNFα抗体或其抗原结合片段是阿达木单抗。

说明书全文

细胞化还平的控制

[0001] 相关申请的交叉引用
[0002] 本申请要求2015年11月10日提交的美国临时申请号62/253,542的优先权。本申请还是2015年3月6日提交的美国申请号14/640,075的部分继续申请,其是2013年9月23日提交的美国申请号14/034,044的继续申请,其要求了2012年9月21日提交的美国临时申请号61/704,090的优先权。本申请还是2013年1月16日提交的美国申请号13/743,194的部分继续申请,其要求了2012年1月16日提交的美国临时申请号61/586,975的优先权。所有上述申请均通过引用整体并入本文。

背景技术

[0003] 先天性免疫应答是调控炎症的途径之一。炎症通过由受损细胞释放的化学因子来刺激,并用于建立抗感染扩散的物理屏障,并促进病原体清除后任何受损组织的愈合。急性炎症的过程由已存在于所有组织中的细胞启动,主要是常驻巨噬细胞、树突细胞、组织细胞、库普弗细胞和肥大细胞。这些细胞呈现包含在表面或细胞内的受体,称为模式识别受体(PRR),其识别由病原体广泛分享但与宿主的分子模式可区分的分子模式。这些分子模式统称为病原体相关分子模式(PAMP)。当其中一个PRR识别PAMP并且响应释放炎症中介体时,免疫细胞经历激活。
[0004] 因此,PAMP是与由先天性免疫系统细胞识别的病原体组相关联的结构。大量不同的化学类型可用作PAMP,包括聚糖和糖缀合物。这些结构也可以称为在一类生物中保守的小分子模序。它们被植物和动物中的Toll样受体(TLR)和其它PRR识别。
[0005] TLR是保守的受体,其可识别来自细菌、真菌原生动物和病毒的结构。虽然TLR受体位于质膜表面,但与受体的结合是跨膜传递的并导致细胞间信号传导应答。TLR信号最终导致诱导或抑制协调炎症应答的基因。例如,特定TLR的活化引发一系列细胞内事件,导致特征在于产生促炎细胞因子的免疫应答。TLR信号传导起源于细胞质Toll-白细胞介素1(TIR)结构域,在所有TLR中是保守的。含有TIR结构域和死亡结构域两者的衔接分子MyD88与TLR和IRAK蛋白的TIR结构域相关。IRAK的磷酸化导致与TRAF6的相关性以及随后的NF-κB的活化和促炎细胞因子的分泌。先前已证明来自痘苗病毒(vaccinia virus)的免疫调节蛋白A52R是TIR依赖性信号传导的细胞内抑制剂。当在HEK293细胞中表达时,A52R显示为响应于各种TLR(包括TLR4、TLRS,以及TLR2和TLR6以及TLR2和TLR1的组合)的刺激而抑制NF-κB活化。此外,A52R响应于一种TLR3的合成配体Poly(1:0)而抑制NF-κB活化。TLR3与抗病毒先天性免疫应答有关。
[0006] 活化的主要应答之一是改变细胞的氧化还原状态。活性氧物质(ROS)可以用于防御目的。正是ROS的存在消耗了抗氧化剂(还原剂)并导致更多氧化性氧化还原状态。ROS和氧化条件不仅可以导致细胞损伤以及基因的活化,氧化还原状态本身还可以控制基因表达。例如,当条件变得更加氧化时,易氧化的化学基团如某些蛋白上的巯基会被氧化。然后识别这些蛋白的氧化状态,导致特异性基因的活化,例如控制氧化还原状态和促进或控制炎症的基因,或产生异常或疾病促进蛋白的基因。
[0007] 炎症是身体组织对有害刺激物(如病原体、受损细胞或刺激因素)的复杂生物应答的一部分。自身免疫性障碍也可能导致炎症(当身体组织被错误地识别为外来的时)。炎症最初是作为涉及免疫细胞、血管和分子中介体的保护性应答。炎症的一个目的是消除细胞伤害的最初原因,清除原始损害和炎症过程中受损的坏死细胞和组织,并启动组织修复。在概念上区分炎症和感染是有用的,存在其中炎症不是由微生物入侵或感染驱动的许多病理情况,例如动脉粥样硬化、III型超敏反应、创伤和缺血。也存在其中微生物入侵不会导致经典炎症应答的病理情况,例如嗜酸性粒细胞增多。然而过少的炎症可能导致有害的“入侵者”(例如细菌、病毒和突变的细胞)进行性组织破坏并损害生物体的存活,过多的炎症(在慢性炎症的情况下)可能导致宿主疾病,如花粉热、牙周炎、动脉粥样硬化、类湿性关节炎甚至癌症(例如胆囊癌)。
[0008] 氧化还原变化的启动以及由此产生的对病原体的炎症应答是用于控制感染的先天性免疫应答的关键组成部分。由于炎症中介体的持续产生可能导致慢性炎症、组织损伤和疾病发展,所以炎症通常被严密调控。由PAMP/TLR相互作用启动的信号级联和高潮基因活化与许多疾病状态相关,包括败血症、自身免疫性疾病、哮喘、心脏病和癌症。例如,假设当细菌及其产物活化不受控制的宿主来源中介体(例如可能导致多器官衰竭、心血管衰竭和死亡的促炎细胞因子)的网络时发生败血症。异常的TLR信号传导应答可能导致过度的细胞活化应答,导致败血症。
[0009] 炎症(无论是慢性的还是急性的)起因于并导致从受损和/或炎症组织中产生和释放自由基和其它ROS增加,并且因此导致或引起氧化性应激。同时,当ROS损伤组织时,炎症可能由氧化应激引起。因此,炎症和与之相关的各种病症也可被视为“氧化性应激相关疾病或病症”。其它应激如心理应激也会导致氧化还原水平发生改变,导致氧化应激,甚至炎症。当氧化还原状态引起氧化应激状态时,通过这样的正反馈循环,该状态可以自我延续。氧化性氧化还原状态和氧化应激应该发生在确定位置和有限时间内。当氧化性氧化还原状态的位置不合适和/或持续太长时间时,存在病理或疾病状态。慢性或急性炎症引起的不合适的氧化还原状态或氧化应激增强了各种病理或疾病状态,反之亦然。
[0010] 氧化应激是氧化性氧化还原状态的病理形式,涉及异常增加量的ROS(包括自由基)的损伤作用。自由基是单个原子或分子,其具有至少一个被单个电子(“未配对”)而不是两个电子(“配对”)“占据”的外部电子轨道。未配对电子的存在使得自由基化合物异常活跃。它们可能会自发地反应并因此损伤大量关键的细胞分子。包括自由基的一定数量的ROS由于细胞代谢而自然产生。例如,一些激素的合成涉及自由基的产生,而多形核白细胞(polymorphonuclear leukocytes)使用自由基的产生作为“化学战”的一种形式来杀死细菌,由此保护身体免受感染。其它自由基如一氧化氮(NO)是身体稳态的基础,因为它们作为化学信使调节重要功能,包括血管紧张度、血小板聚集、细胞粘附等等。
[0011] 自由基具有潜在的危险性,因为它们自发地倾向于用第二电子填充它们未填充的外部轨道。两个电子在同一轨道的存在是最大稳定性-最小能量的条件。因此,当自由基与具有一个或多个“可用”电子的“靶标分子”如不饱和脂肪酸分子(例如花生四烯酸)碰撞时,它立即从靶标分子“提取”电子。由于这种效应-“氧化”-原始的自由基失去了其潜在的危险性,而新生成的分子被“氧化”,并且转而可能变成新的自由基,因此如果没有抗氧化剂可用于抑制它,则使反应永久化。反应可以继续到其它分子,包括水化合物、脂质、基酸、肽、蛋白、核苷酸、核酸等等(“连反应效应”)。自由基的这种作用可能导致不同程度的组织损伤,并可能导致(或相反起因于)炎症应答。ROS释放的初始或主要位点可以是对入侵微生物的适当响应,但入侵者不被破坏,或者如果氧化还原稳态在入侵者破坏后不恢复,则氧化还原状态可能扩散并且持续的第二氧化性氧化还原状态可能导致具有组织损伤的慢性、损伤性病理学。一个示例是创伤性脑伤害(TBI),其导致脑中的局部炎症和氧化性氧化还原状态。如果稳态不能重建,慢性氧化性氧化还原状态可能导致长期组织损伤和慢性创伤性脑病(CTE)。
[0012] 因此在本领域中存在对用于控制细胞氧化还原水平的组合物和方法的需要。发明内容
[0013] 本文公开的方法和组合物不限于特定的优点或功能。
[0014] 在一方面,本公开提供了用于调控受试者的氧化还原状态的toll样受体(TLR)激动剂组合物,所述组合物包含:(a)包含细菌的至少一种裂解物和/或裂解物级分的TLR激动剂,其中,所述TLR激动剂活化至少一种或多种TLR或NLR;(b)用于增强组合物吸收的任选促进剂;和(c)用于增加组合物体积的任选载体,其中,向受试者施用有效量的组合物可测量地降低受试者中的氧化性应激水平。
[0015] 在另一方面,本公开提供了调控受试者的氧化还原状态的方法,所述方法包括向有需要的受试者施用治疗有效量的根据本公开的裂解物组合物。在一些实施方式中,通过测量受试者中异前列烷浓度的变化来评估氧化还原状态调控。
[0016] 在另一方面,本公开提供了调控受试者的氧化还原状态的方法,所述方法包括以下步骤:(a)向有需要的受试者反复施用时间上分开且由组合物组成的剂量,所述组合物包含:(i)包含细菌的至少一种裂解物和/或裂解物级分的toll样受体(TLR)激动剂,其中,所述激动剂活化至少一种或多种不同的TLR或NLR;(ii)用于增强组合物吸收的任选促进剂;和(iii)用于增加组合物体积的任选载体,以及(b)测量受试者的体液以检测氧化性应激水平的变化。
[0017] 在另一方面,本公开提供了减少受试者的尿液或血液中异前列烷的量的方法,所述方法包括以下步骤:(a)确定受试者的尿液或血液中异前列烷的水平;(b)向受试者施用有效量的组合物,所述组合物包含:(i)包含来自细菌的至少一种细菌裂解物和/或裂解物级分的toll样受体(TLR)激动剂,其中,所述TLR激动剂活化至少一种或多种不同的TLR或NLR;和(ii)用于增强组合物吸收的任选促进剂;以及(c)继续施用组合物直至受试者的尿液或血液中异前列烷的水平减少。
[0018] 在另一方面,本公开提供了组合物,所述组合物包含:(a)能够活化至少一种或多种toll样受体(TLR)或Nod样受体(NLR)的细菌裂解物和/或裂解物级分;(b)用于增强组合物吸收的任选促进剂;和(c)用于增加组合物体积的任选载体。
[0019] 在另一方面,本公开提供了包含根据本公开的裂解物组合物的药物制剂,其中,所述药物制剂被配制用于颊或舌下施用。在一些实施方式中,药物制剂被配制成在施用后不少于1分钟内溶解。
[0020] 在另一方面,本公开提供了生产细菌裂解物的方法,该方法包括以下步骤:(a)将生长培养基中的细菌发酵至稳定生长期以产生发酵液;(b)从发酵液中收集细菌;(c)将收获的细菌进行巴氏杀菌;以及(d)用溶菌酶裂解巴氏杀菌的细菌以产生细菌裂解物。在一些实施方式中,在对数中期、对数后期、早期稳定期、中期稳定期或后期稳定期收获细菌。
[0021] 在另一方面,本公开提供了根据包括以下步骤的方法产生的细菌裂解物:(a)将生长培养基中的细菌发酵至稳定生长期以产生发酵液;(b)从发酵液中收集细菌;(c)将收获的细菌进行巴氏杀菌;以及(d)用溶菌酶裂解巴氏杀菌的细菌以产生细菌裂解物。在一些实施方式中,在对数中期、对数后期、早期稳定期、中期稳定期或后期稳定期收获细菌。
[0022] 在另一方面,本公开提供了用于减轻与施用药剂相关的一种或多种氧化性应激相关副作用的方法,所述方法包括与药剂组合施用治疗有效量的裂解物组合物,所述裂解物组合物包含:(a)细菌的裂解物和/或裂解物级分;(b)用于增强组合物吸收的任选促进剂;和(c)用于增加组合物体积的任选载体;其中,同时或以任何顺序并通过相同或不同的施用途径施用药剂和裂解物组合物。
[0023] 在另一方面,本公开提供了用于治疗受试者中的氧化性应激相关疾病或病症的方法,所述方法包括向所述受试者施用治疗有效量的组合物,所述组合物包含:(a)能够活化至少一种或多种toll样受体(TLR)或Nod样受体(NLR)的细菌裂解物和/或裂解物级分;(b)用于增强组合物吸收的任选促进剂;和(c)用于增加组合物体积的任选载体。
[0024] 在另一方面,本公开提供了用于降低受试者的氧化性应激的方法,所述方法包括:(a)通过测量受试者的尿液或血液中异前列烷的量来确定受试者中的氧化性应激水平;(b)向受试者施用有效量的组合物,所述组合物包含:(i)包含来自细菌的至少一种裂解物和/或裂解物级分的toll样受体(TLR)激动剂,其中,所述TLR激动剂活化至少一种或多种TLR或NLR;和(ii)用于增强组合物吸收的任选促进剂;以及(c)继续施用组合物直至氧化性应激水平降低,通过受试者的尿液中异前列烷的减少量确定。
[0025] 在另一方面,本公开提供了治疗性组合,所述组合包含:(a)裂解物组合物,其包含(i)能够活化至少一种或多种toll样受体(TLR)或Nod样受体(NLR)的细菌裂解物和/或裂解物级分;(ii)用于增强组合物吸收的任选促进剂;和(iii)用于增加组合物体积的任选载体;和(b)一种或多种药剂;其中,同时或以任何顺序施用裂解物组合物和一种或多种药剂,并且其中,经由相同或不同的施用途径施用裂解物组合物和一种或多种药剂。
[0026] 在另一方面,本公开提供了包含以下组合的药物制剂:(a)裂解物组合物,其包含(i)能够活化至少一种或多种toll样受体(TLR)或Nod样受体(NLR)的细菌裂解物和/裂解物级分;(ii)用于增强组合物吸收的任选促进剂;和(iii)用于增加组合物体积的任选载体;和(b)一种或多种药剂。在一些实施方式中,所述一种或多种药剂选自由以下组成的组:抗痉挛剂、运动兴奋剂、H2受体拮抗剂、抗毒蕈剂;螯合剂、前列腺素类似物、氨基水杨酸盐、皮质类固醇、影响免疫应答的药物、刺激性泻剂、影响胆汁组成和流动的药物、胆汁酸螯合剂、多巴胺拮抗剂、质子抑制剂、阿片类物质、阿片类物质受体拮抗剂、镇痛药、睡眠药物、强心苷、磷酸二酯酶抑制剂、噻嗪类、利尿剂、保利尿剂、拮抗剂、渗透利尿剂、心律失常药物、β肾上腺素受体阻断药物、高血压药物、影响肾素-血管紧张素系统的药物、硝酸盐、阻断剂、抗心绞痛药物、外周血管扩张剂、拟交感神经剂、抗凝剂、鱼精蛋白、抗血小板药物、纤维蛋白溶解药物、抗纤维蛋白溶解药物、调控脂质药物、ω-3脂肪酸化合物、CNS药物、抗感染药物,或选自由以下组成的组的另一种药物:苯托品、丙环啶、比哌立登、金刚烷胺、溴隐亭、培高利特、恩他卡朋、托卡朋、司来吉兰、普拉克索、布地奈德、福莫特罗、富酸喹硫平、奥氮平、匹格列酮、孟鲁司特、唑来膦酸、缬沙坦、拉坦前列素、依贝沙坦、氯吡格雷、阿托西汀、右苯丙胺、利他灵、莫达非尼、博来霉素、放线菌素、柔红霉素、伊达比星、米托霉素、米托蒽醌、阿扎胞苷、卡培他滨、克拉屈滨、氯法拉滨、阿糖胞苷、氟达拉滨、氟尿嘧啶、吉西他滨、巯嘌呤、甲氨喋呤、奈拉滨、培美曲塞、雷替曲塞、硫嘌呤、阿扑吗啡、倍他米松、可的松、地夫可特、地塞米松、氢化可的松、甲基泼尼松龙、泼尼松龙、曲安奈德、环孢霉素、西罗莫司、他克莫司、干扰素α和干扰素β。
[0027] 在另一方面,本公开提供了制剂,所述制剂包含:(a)裂解物组合物,其包含(i)能够活化至少一种或多种toll样受体(TLR)或Nod样受体(NLR)的细菌裂解物和/或裂解物级分;(ii)用于增强组合物吸收的任选促进剂;和(iii)用于增加组合物体积的任选载体;和(b)分离的人抗TNFα抗体或其抗原结合片段或TNF抑制剂。在一些实施方式中,人抗TNFα抗体或其抗原结合片段是阿达木单抗。在另一方面,本公开提供了这种制剂在制备用于治疗受试者的类风湿性关节炎(RA)、迟发性RA或皮癣关节炎的药物中的用途。在另一方面,本公开提供了用于治疗受试者的类风湿性关节炎(RA)、迟发性RA或牛皮癣关节炎的方法,所述方法包括向受试者施用治疗有效量的这种制剂。
[0028] 在本文公开的任何方法或组合物的一些实施方式中,所述细菌是革兰氏阳性或革兰氏阴性细菌。在本文公开的任何方法或组合物的一些实施方式中,革兰氏阳性细菌选自由乳酸杆菌(Lactobacillaceae)科的细菌、链球菌(Streptococcaceae)科的细菌、双歧杆菌(Bifidobacteriaceae)科的细菌和芽孢杆菌(Bacillaceae)科的细菌组成的组。在一些实施方式中,革兰氏阳性细菌选自由凝结芽孢杆菌(Bacillus coagulans)、芽孢乳酸杆菌(Lactobacillus sporogenes)、嗜热链球菌(Streptococcus thermophilus)、动物双歧杆菌(Bifidobacterium animalis)、双歧杆菌(Bifidobacterium)、动物(animalis)、亚种动物(subspecies animalis)、婴儿双歧杆菌(Bifidobacterium infantis)、长双歧杆菌(Bifidobacterium longum)、短双歧杆菌(Bifidobacterium breve)、嗜酸乳酸杆菌(Lactobacillus acidophilus)、植物乳酸杆菌(Lactobacillus plantarum)、干酪乳酸杆菌(Lactobacillus casei)、德氏乳酸杆菌(Lactobacillus delbrueckii)、德氏乳酸杆菌保加利亚亚种(Lactobacillus delbrueckii subspecies bulgaricus)、乳酸乳球菌(Lactococcus lactis)、乳酸乳球菌乳酸亚种(Lactococcus lactis subspecies lactis)、乳酸链球菌(Streptococcus  lactis)、嗜热链球菌(Streptococcus thermophilus)、乳双歧杆菌(Bifidobacterium lactis)、短双歧杆菌(Bifidobacterium breve)、乳酸片球菌(Pediococcus aciditactici)和瑞士乳酸杆菌(Lactobacillus hetveticus)组成的组。
[0029] 在本文公开的任何方法或组合物的一些实施方式中,革兰氏阴性细菌选自由假单胞菌(Pseudomonas)属、克雷伯菌(Klebsiella)属、黄单胞菌(Xanthomonas)属、志贺氏菌(Shigella)属和肠杆菌(Enterobacter)属的细菌组成的组。在一些实施方式中,革兰氏阴性细菌选自由催产克雷伯菌(Klebsiella oxytocia)、福氏志贺氏菌(Shigella flexneri)、野油菜黄单胞菌(Xanthomonas campestris)和荧光假单胞菌(Pseudomonas flourescens)组成的组。
[0030] 在本文公开的任何方法或组合物的一些实施方式中,TLR激动剂、裂解物、裂解物级分或细胞壁级分活化TLR2、TLR3、TLR4、TLR5、TLR7、TLR8、TLR9、NOD1和NOD2中的至少一种或多种。在一些实施方式中,TLR激动剂、裂解物、裂解物级分或细胞壁级分活化TLR2、TLR3、TLR4、TLR5、TLR7、TLR8、TLR9、NOD1和NOD2中的两种或更多种。在一些实施方式中,TLR激动剂、裂解物、裂解物级分或细胞壁级分活化TLR2和TLR4。在一些实施方式中,TLR激动剂、裂解物、裂解物级分或细胞壁级分活化TLR2、TLR3、TLR4、TLR5、TLR7、TLR8、TLR9、NOD1和NOD2中的三种或更多种。
[0031] 在本文公开的任何方法或组合物的一些实施方式中,促进剂选自由氨基酸、氨基糖和糖组成的组。在一些实施方式中,载体选自由粘合剂、胶基及其组合组成的组。在一些实施方式中,胶基包含至少一种疏水性聚合物和至少一种亲水性聚合物。在一些实施方式中,粘合剂选自由糖、糖醇及其组合组成的组。在一些实施方式中,糖醇选自由甘露糖醇、山梨糖醇、木糖醇及其组合组成的组。
[0032] 在一些实施方式中,组合物被制造成选自由锭剂、口香糖、咀嚼片、糖果和溶解片组成的组的剂型。在一些实施方式中,剂型将TLR激动剂递送至口腔粘膜。在一些实施方式中,口腔粘膜选自由舌下粘膜、颊黏膜及其组合组成的组。
[0033] 在本文公开的任何方法和组合物的一些实施方式中,组合物被配制用于口腔粘膜递送;在一些实施方式中,组合物被配制用于舌下或颊递送。在一些实施方式中,组合物被配制成在施用后不少于1分钟内溶解。
[0034] 对于本领域普通技术人员来说,这些以及其它方面、优点和替代方案将通过阅读以下详细描述并在适当的情况下参考附图并结合所附权利要求而变得显而易见。

附图说明

[0035] 图1显示了显示各种响应途径的toll样受体(TLR)的图示。
[0036] 图2显示了本发明组合物对选择TLR/NLR细胞系的示例性刺激效应;图中的值对应于三次筛选实验的平均值。
[0037] 图3显示了与保加利亚乳酸杆菌裂解物相比,乳酸片球菌裂解物的TLR刺激的结果。
[0038] 图4显示了具有不同收获时间的凝结芽孢杆菌裂解物的TLR刺激的结果。
[0039] 图5显示了来自嗜酸乳酸杆菌(Lactobacillus acidophilus)、瑞士乳酸杆菌(Lactobacillus helviticus)、植物乳酸杆菌(Lactobacillus plantarum)和嗜热链球菌(Streptococcus thermophilus)的革兰氏阳性细菌裂解物的TLR刺激的结果。
[0040] 图6显示了来自大肠杆菌(Escherichia coli)、催产克雷伯菌(Klebsiella oxytocia)、福氏志贺氏菌(Shigella flexneri)、野油菜黄单胞菌(Xanthomonas campestris)和荧光假单胞菌(Pseudomonas flourescens)的革兰氏阴性细菌裂解物的TLR刺激的结果。
[0041] 图7显示了与黄原胶相比,野油菜黄单胞菌裂解物的TLR刺激的结果。
[0042] 图8显示了施用本公开的组合物后PTSD诊断的作战退伍军人的尿液中尿异前列烷的水平减少。
[0043] 图9显示了施用本公开的组合物后PTSD诊断的作战退伍军人的睡眠缺陷减少。
[0044] 图10显示了施用本公开的组合物后PTSD诊断的作战退伍军人的神经病症状减少。
[0045] 图11显示了施用本公开的组合物后PTSD诊断的作战退伍军人的总体情绪改善。
[0046] 图12显示了施用本公开的组合物后PTSD诊断的作战退伍军人的总体能量水平增加。
[0047] 图13显示了施用本公开的组合物后PTSD诊断的作战退伍军人的关节健康的总体满意度增加。
[0048] 图14显示了施用本公开的组合物后PTSD诊断的作战退伍军人的消化健康满意度水平增加。
[0049] 图15显示了施用本公开的组合物后PTSD诊断的作战退伍军人的易怒水平减少。
[0050] 图16显示了施用本公开的组合物后PTSD诊断的作战退伍军人自我报告的性功能满意度的总体水平增加。
[0051] 图17显示了施用本公开的组合物后PTSD诊断的作战退伍军人白天嗜睡程度减少。
[0052] 图18显示了施用本公开的组合物后PTSD诊断的作战退伍军人自我报告的生活满意度的总体水平增加。
[0053] 图19显示了施用本公开的组合物后PTSD诊断的作战退伍军人的抑郁水平减少。
[0054] 图20显示了施用本公开的裂解物后具有震荡历史的个体中异前列烷水平减少。

具体实施方式

[0055] 出于所有目的,本文引用的所有出版物、专利和专利申请特此通过引用明确地并入。
[0056] 细胞氧化还原(氧化-还原)状态变化很大。氧化和还原反应是细胞生物能学的关键。通常当食物分子的氧化作为能量富集分子例如NADP(烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸)和ATP(三磷酸腺苷)导致电子传输和最终捕获能量时,以下游氧化/还原反应平衡的方式活化TLR。如本文所用,术语“平衡”是指稳态的平衡;也就是说,不一定是氧化量等于给定系统中的还原量的情况,而是氧化和还原处于免疫状态并因此是宿主的代谢稳态的情况。然而,存在许多细胞情况,其中氧化还原状态改变。通常,细胞装备有抗氧化分子,但是当这些分子耗尽时,细胞的氧化还原状态改变。一个可能的原因是出于防御或类似目的而有目的地产生活性氧物质(ROS),例如O2-(超氧自由基)、OH(羟基自由基)和H2O2(过氧化氢)。当氧化还原平衡改变时,氧化性应激可能随之而来。氧化性应激是ROS水平异常增加的损伤作用(身体细胞和组织上的)所触发的病理状态。氧化性应激是ROS的增加、免疫失控性的产生和/或抗氧化剂对过量ROS防御的生理活性降低的直接后果。炎症(无论是慢性还是急性)以及其它应激和感染可能导致受损和/或炎症性组织中ROS的产生和释放的增加,由此改变细胞的氧化还原平衡并因此导致氧化性应激。同时,由于ROS损伤组织,氧化性应激可能引起炎症。许多疾病和疾病状态与慢性或急性炎症引起的氧化还原状态和氧化性应激的变化相关,或者反之亦然。目前用于治疗慢性或急性炎症的疗法不具有有害的副作用。本文描述了用于改变氧化性应激和相关病症治疗中的氧化还原水平的组合物和方法。
[0057] 在详细描述所公开的方法和组合物之前,将定义多个术语。如本文所用,除非上下文另外明确指出,否则单数形式“一个”,“一种”和“该”包括复数指示物。例如,提及“核酸”是指一种或多种核酸。
[0058] 为了描述和限定本发明,注意到术语“基本上”在本文中用于表示可归因于任何定量比较、值、测量或其它表示的不确定性的固有程度。术语“基本上”在本文中也用于表示定量表示可以与所述参考不同的程度,而不导致所讨论主题的基本功能的变化。
[0059] 如上所述,病原体相关分子模式(PAMP)可以通过刺激TLR活化先天性免疫应答,所述TLR通常由保守的非自身生物化学结构活化,从而保护宿主免受感染。细菌脂多糖(LPS)在某些细菌的细菌细胞膜上被发现,被认为是典型的PAMP。先天性免疫系统的识别受体TLR4特异性识别LPS。其它PAMP包括细菌鞭毛蛋白(由TLRS识别)、脂磷壁酸、肽聚糖和通常与病毒相关的核酸变体,如由TLR3识别的双链RNA(dsRNA)或被由TLR9识别的非甲基化CpG模序。
[0060] 然而,在一些情况下,PAMP减少炎症。EPS(胞外多糖)是一种刺激免疫应答的物质,已显示能刺激TLR的负调控因子,从而导致炎症应答减少。更具体地,已经显示了EPS刺激免疫球蛋白IL-1相关受体、toll相互作用蛋白、B细胞淋巴瘤3-编码蛋白、A20、促分裂原活化蛋白激酶磷酸-1和白细胞介素相关激酶M的表达,并且已经显示了导致TLR和炎症的负调控。
[0061] 这些看似矛盾的PAMP效应至少部分可以通过先天性免疫系统与微生物组的相互作用来解释。免疫系统不存在于真空中。即使当生物体没有发生活性炎症应答时,免疫细胞也会对来自环境(尤其是来自微生物组)的PAMP的冲击做出响应。鉴于被活化的各种TLR受体正在产生处于免疫状态和代谢稳态的下游氧化还原状态,所述系统发出“全清除”信号以避免可能损伤基本微生物组组成的无意响应。因此,将PAMP与先天性免疫系统的细胞正确结合可以控制整个氧化还原系统下调或上调它来达到或在某些情况下恢复免疫状态和代谢稳态。
[0062] 图1显示了跨膜型TLR的图示。尽管分子的配体接收(刺激物)部分位于质膜表面上,但蛋白的跨膜结构域能够通过配体结合时发生的构象变化将信号传导至膜的细胞质表面。在细胞质表面,该信号(箭头)与许多不同的信号传导途径相连。显示了增殖/分化和应激响应途径。应注意的是,一个TLR类型不能同时控制这个通用图中的两条途径。而是一些TLR控制一个途径或一组途径,其它TLR控制不同的一个途径或一组途径。另外,一种类型的TLR可能根据其所在的细胞类型来控制不同的途径;因此,递送TLR激动剂的正确平衡对维持稳态非常重要。
[0063] 下游信号传导机制可以或多或少地被共享。在图1中,增殖响应主要使用ERK途径,而应激响应使用MEKK和TAK途径。在每个途径中,信号分子被磷酸化,并且可能存在磷酸化级联以放大信号。最终,磷酸化蛋白进入细胞核(通过核孔),其中,磷酸化中间体改变转录和翻译。以这种方式,TLR能够控制整基因。总之,数以千计的基因由TLR信号传导所活化,并且总体而言,TLR构成了用于基因调节的最具多效性但严密调控的入口之一。
[0064] TLR活化的主要响应之一是在必要时改变细胞的下游氧化还原状态。氧化还原变化的启动以及由此产生的对病原体的炎症应答是用于控制感染的先天性免疫应答的关键组成部分。炎症(无论是慢性还是急性)由其引起并导致从受损和/或炎症性组织中产生和释放自由基和其它ROS的增加,并且因此导致或引起氧化性应激。同时,当ROS损伤组织时,炎症可能由氧化性应激引起。因此,炎症和与之相关的各种病症也可被视为“氧化性应激相关疾病或病症”。
[0065] 作为生化条件的氧化性应激除了其诱导的特异性病理学病症之外通常不显示任何特异性的临床症状或临床体征。它通常可能保持未被发现,伴随着对患者的损伤,直到临床医师怀疑其存在并决定检测氧化性应激。
[0066] 各种常见疾病和/或病症通常与氧化性应激相关。一个示例是阿尔茨海默氏病。研究表明,慢性氧化性应激增加了tau蛋白磷酸化水平,这是阿尔茨海默氏病的一种公知生物标记物。研究还表明氧化性应激导致阿尔茨海默氏病模型中tau诱导的神经变性。
[0067] 其它公知的“氧化性应激相关疾病或病症”包括但不限于:无蓝蛋白血症、急性和慢性酒精性肝病、急性自身免疫性心肌炎、急性镰状细胞病胸部综合征、急性胰腺炎、急性呼吸窘迫综合征、酒精肝性疾病、肌萎缩侧索硬化、动脉/系统性高血压、、哮喘、共济失调毛细血管扩张症、动脉粥样硬化、特应性皮炎、脑缺血、支气管肺发育不良、烧伤、某些癌症、体外循环、心血管疾病白内障、蜂窝组织炎、化疗副作用、慢性疲劳综合征、慢性丙型肝炎、慢性肾病、慢性阻塞性肺病、慢性肾衰竭、结肠炎、冠状动脉疾病、克罗伊茨费尔特-雅各布病、克罗恩氏病、皮肤利什曼病、囊性纤维化、1型糖尿病、2型糖尿病、血脂异常、唐氏综合征、子痫、晚期肾脏疾病、勃起功能障碍、弗里德赖希共济失调、头痛、心衰竭、幽螺杆菌感染/炎症、血液透析副作用、肝硬化、人类免疫缺陷病毒感染、亨廷顿病、高压病、高胆固醇血症、高同型半胱氨酸血症、高脂血症、特发性肺纤维化、间质性肺病、缺血/再灌注损害、少年慢性关节炎、肾移植失败、白血病、肺癌、肺损害、黄斑变性、男性不育症、梅尼埃尔综合征、脑膜炎、轻度认知障碍、多发性硬化症、骨髓增生异常综合征、心肌梗塞、心肌炎、新生儿支气管肺发育不良、肥胖症、骨关节炎、骨质疏松症、胰腺炎、帕金森病牙周病腹膜透析副作用、光老化、创伤后应激障碍、先兆子痫、原发性胆汁性肝硬化、支气管肺疾病、早衰、牛皮癣、牛皮癣关节炎、肺动脉高压、放疗法副作用、反应性关节炎、肾细胞癌、呼吸窘迫综合征、早产儿视网膜病变、后束纤维化(retrolenticolar fibroplasy)、风湿性疾病、类风湿性关节炎、结节病、败血症、镰状细胞贫血病、睡眠呼吸暂停、球形红细胞增多症、脊髓损害、中风、突触核蛋白、系统性淀粉样变性、系统性红斑狼疮、系统性硬化症(硬皮病)、血栓形成、tau蛋白病、创伤性应激肺结核、不稳定型心绞痛、尿毒症、静脉功能不全、沃纳综合征和脑肝肾综合征。
[0068] 氧化性应激介导许多障碍的病理学症状和氧化还原水平的控制,并且氧化还原水平的控制以及由此的氧化性应激将防止许多组织损伤,从而允许更容易控制潜在疾病,其中,减少氧化性应激不足以实现对疾病的控制。例如,心肌梗塞是由血管阻塞引起的心脏肌肉的死亡或损伤。撇开氧化性应激在引起血管阻塞中的可能作用,一旦发生阻塞,受影响的肌肉细胞变成缺氧并最终死亡。但是,如果阻塞迅速逆转(例如通过“凝血破坏”药物),则循环恢复,理论上,受影响的肌肉细胞将被保存。然而,在许多情况下,尽管循环迅速恢复,最初的损伤会引起炎症应答,导致氧化性应激和肌肉细胞损伤。控制这种氧化性应激实际上可以消除对心脏肌肉细胞的损伤。在所有这些疾病和障碍中,氧化性应激的调控可缓解或治疗疾病或障碍的症状和/或病因。
[0069] 氧化还原状态的变化可能导致关键蛋白上巯基的氧化,但这些蛋白本身往往难以测量。然而,通过先前提到的巯基的氧化或通过导致电子转移的其它化学氧化性机理(如过氧化作用)慢性或急性氧化性应激或氧化还原变化的增加可以并且将改变许多其它细胞组成。
[0070] 异前列烷是在没有环加氧酶(COX)的直接作用下由自由基催化的必需脂肪酸(主要是花生四烯酸)过氧化形成的体内前列腺素样化合物,这是前列腺素形成的正常机制。这些化合物作为增加疼痛知觉的炎症中介体具有有效的生物活性。这些分子受至少两种不同的途径控制。一个途径由COX酶介导,COX酶将脂质转化为异前列烷以响应基因活化和信号分子。在替代途径中,将脂质直接氧化成异前列烷以响应高氧化性氧化还原状态。由于异前列烷是炎症中介体,它们形成正反馈循环的一部分,这可以维持受损的氧化性氧化还原状态。
[0071] 异前列烷(例如F2异前列烷)因此是氧化性应激的动物和人类模型中氧化性氧化还原状态的精确标记物,并且由于它们的遗传稳定性和它们在体液如尿液和血液中的易测性,测量异前列烷已经成为评估体内氧化性应激的最可靠方法之一。这种简便性和稳定性使得测量异前列烷在探索氧化性应激在人类疾病发病机理中的作用中成为重要且可靠的工具。异前列烷水平与氧化性氧化还原状态和产生的氧化性应激直接相关。即使氧化性氧化还原状态的位点受到一定程度的限制,产生的异前列烷也可以在体液(例如尿液)中测量,远离氧性化应激位点和所导致的炎症。
[0072] 其它可被氧化的生物化合物包括但不限于蛋白、金属蛋白酶、脂质、脂肪酸、碳水化合物、神经递质、DNA、维生素、多酚、抗氧化剂和辅酶。因此,诸如但不限于超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化物酶、谷胱甘肽等组分以及由于暴露于反应性物质(例如但不限于高级氧化蛋白、丙二醛、8-羟基喹啉等)的细胞组成的氧化形式是其它潜在的氧化性应激生物标记物。
[0073] 鉴于炎症在免疫应答中的重要性及其可能通过氧化性应激、氧化性应激相关疾病或病症和/或其它过程引起的有害后果,重要的是生物体保持对氧化还原状态的严密控制。此外,鉴于氧化性应激与炎症之间的交织关系,已经提出测量炎症的生物标记物作为氧化性应激的间接生物标记物。这些生物标记物(例如但不限于C-反应性蛋白、血清淀粉样蛋白A和细胞因子)在其获得炎症的低等级变化的能力方面受到限制,并因此限制其获得低等级氧化还原变化的能力。另一种方法是关注生物标记物(如异前列烷)以测量氧化还原状态,以及改变氧化还原状态的机制。
[0074] 氧化还原可以通过增加还原物质(抗氧化剂)或减少氧化剂来改变。通过添加抗氧化剂或抗氧化剂治疗来控制有害的氧化还原水平几乎没有成功(参见Ho等,Biological markers of oxidative stress:Applications to cardiovascular research and practice.2013Redox Biology)。有证据表明长期使用膳食抗氧化剂-可能作为预防剂。但是,当免疫系统不能达到或保持稳态的氧化还原水平时,添加的抗氧化剂通常无法有效纠正平衡。
[0075] 影响氧化还原状态的另一种途径是针对下游靶标;这样的策略包括使用阿司匹林和糖皮质激素以阻断NF-κB活化和特异性炎症中介体如TNF-α的靶向。鉴于它们在介导先天性免疫应答和炎症中的作用,TLR为控制先天性和炎症性响应提供另一个靶标。
[0076] 如上所述,TLR通过诱导或抑制协调炎症反应的基因来帮助介导先天性免疫应答。TLR识别并响应各种信号。这些信号与特异性TLR结合以促进或阻断可诱导或抑制介导炎症的基因的信号途径。通过用特异性试剂靶向特异性TLR,可以介导免疫应答和炎症有效性。
[0077] 通过靶向常见的信号传导成分抑制多种TLR依赖性响应或活化特异性的响应可能被证明是控制炎症应答的有效方法。因此,本文公开的组合物可以用于治疗与TLR信号传导途径(例如TLR诱导的炎症)相关的氧化性应激障碍,所述方法包括施用治疗有效量的如本文所述的组合物,其中,受影响的TLR是TLR2、TLR4、TLR5、TLR7和TLR9中的一种或多种。
[0078] 如本文所用,术语“治疗有效量”是指对受试者施用足以在受试者中引起期望效应的量。
[0079] 如本文所用,术语“药物制剂”和“药物组合物”是指其形式为允许活性成分的生物学活性有效并且不含有额外组分的制剂,所述额外组分对待施用制剂的受试者具有不可接受的毒性。术语“产物”、“补充物”和“组合物”在本文中可互换地用于提及包含本公开的细菌裂解物、裂解物级分和/或细胞壁级分的药物组合物。
[0080] 本文所述的组合物可被修饰以靶向单独的TLR或TLR组。通过靶向单独的TLR或TLR组,本文所述的组合物可以用于介导急性或慢性炎症的情况。另外,本文所述的组合物可用于抑制异常炎症的情况并恢复炎症的健康水平。
[0081] 因此,本文描述了用于调控氧化性应激的组合物和方法。如通过测量多种细胞系中的NF-κB表达所评估的,组合物能够活化各种TLR。本文所述的组合物还可以降低或下调TLR的活性,从而导致炎症水平降低或调控。当达到TLR活化的适当平衡时,细胞氧化还原状态得到优化并且氧化性应激降低。这可以通过提供含有同时结合两种或更多种不同类型的TLR的PAMP的组合物来实现。
[0082] 在一些情况下,单一类型的微生物的裂解物可以作为两种或更多种TLR的激动剂。如本文所公开的,处理微生物裂解物的确切方式可以影响由裂解物刺激的TLR。在一些实施方式中,可以通过组合来自单一类型的微生物的不同裂解物或级分或来自多种类型的微生物的裂解物或级分来完成TLR组的活化。
[0083] 存在许多不同但相似的与给定TLR类型结合的PAMP,虽然具有不同的亲和力。还有刺激完全不同的TLR类型的PAMP分子。裂解物或级分如何加工可能影响最终产物中存在的PAMP组合物。因此,不同类型的微生物呈现不同的PAMP工作调色板。如本文所公开的,提供同时刺激(用作激动剂)特定TLR类型的组合物导致氧化性应激的显著下调。
[0084] 出乎意料的是,刺激TLR并不一定会导致氧化性应激的增加。相反,微生物组不断刺激TLR是正常情况,不会导致不合适的氧化还原状态和氧化性应激。部分解释可能与给定TLR受体的位置以及TLR受体的类型相关。位于粘膜上的TLR受体的活化产生与位于身体内部组织中的相同类型的TLR受体的活化不同的结果。不受限于特定的解释或机制,本公开提供了施加或增加正常微生物组信号的方法,其通过中断给异常氧化还原状态和氧化性应激供能的正反馈循环来重新确立稳态并“重置”整个系统。
[0085] 本公开的治疗活性组合物包含非合成生物活性剂,优选一种或多种微生物的一种或多种细胞壁级分,所述微生物包括革兰氏阳性细菌,革兰氏阴性细菌或其组合,例如以裂解物的形式,连同促进剂以及任选的一种或多种其它添加剂(包括控释组分),以允许组合物被吸收到需要治疗的受试者的粘膜壁中或与需要治疗的受试者的粘膜壁相互作用。
[0086] 如本文所用,术语“剂量”应包括推注或负荷剂量,并且还包括慢性或维持剂量。根据本发明,活性治疗剂是细菌的裂解物、裂解物级分或细胞壁级分,根据具体的治疗应用充当多种TLR中两种的激动剂所需的,所述细菌例如革兰氏阳性细菌或革兰氏阴性细菌的量为约0.01mg治疗剂/千克体重至约100mg/千克体重。在一些实施方式中,本公开的活性治疗剂以约0.01mg治疗剂/千克体重至约10gm治疗剂/千克体重的剂量施用。在一些实施方式中,本公开的活性治疗剂以约0.01mg治疗剂/千克体重至约1gm治疗剂/千克体重的剂量施用。在一些实施方式中,本公开的活性治疗剂以约0.01mg治疗剂/千克体重至约50mg治疗剂/千克体重的剂量施用。在一些实施方式中,本公开的活性治疗剂以约0.05mg治疗剂/千克体重至约30mg治疗剂/千克体重的剂量施用。在一些实施方式中,本公开的活性治疗剂以约0.05mg治疗剂/千克体重至约5mg治疗剂/千克体重的剂量施用。在一些实施方式中,本文公开的活性治疗剂以约0.1mg治疗剂/千克体重、或约0.2mg治疗剂/千克体重、或约0.3mg治疗剂/千克体重、或约0.4mg治疗剂/千克体重、或约0.5mg治疗剂/千克体重、或约0.6mg治疗剂/千克体重、或约0.7mg治疗剂/千克体重、或约0.8mg治疗剂/千克体重、或约0.9mg治疗剂/千克体重、或约1mg治疗剂/千克体重、或约2mg治疗剂/千克体重、或约3mg治疗剂/千克体重、或约4mg治疗剂/千克体重、或约5mg治疗剂/千克体重、或约6mg治疗剂/千克体重、或约7mg治疗剂/千克体重、或约8mg治疗剂/千克体重、或约9mg治疗剂/千克体重、或约10mg治疗剂/千克体重的剂量施用。在一些实施方式中,上述剂量描述了每天向受试者施用的活性成分的总量,其中总量可以分成每天两次或更多次施用,或者可以是以单一日剂量施用的量。
[0087] 如本文所用,术语“治疗剂”和“活性成分”是指与组合物或制剂中的非活性成分相对的本公开的裂解物、裂解物级分和/或细胞壁级分或其组合。
[0088] 在一些实施方式中,本文公开的药物组合物以制剂形式施用,例如以口服制剂(包括片剂制剂)施用,其包含约0.01mg至约10gm活性成分/剂量、或约0.5mg至约50mg活性成分/剂量、或约3mg至约30mg活性成分/剂量、或每剂约10mg至约30mg活性成分/剂量。在一些实施方式中,将药物制剂以约0.5mg、或约1mg、或约5mg、或约10mg、或约15mg、或约20mg、或约25mg、或约30mg活性成分/剂量配制和/或施用。在一些实施方式中,将本公开的药物组合物配制成片剂,每片包含约0.5mg至约30mg活性成分/片。在一些实施方式中,每个片剂包含约0.5mg活性成分。在一些实施方式中,每个片剂包含约1mg活性成分。在一些实施方式中,每个片剂包含约5mg活性成分。在一些实施方式中,每个片剂包含约10mg活性成分。在一些实施方式中,每个片剂包含约15mg有效成分。在一些实施方式中,每个片剂包含约25mg活性成分。在一些实施方式中,每个片剂包含约40mg活性成分。在一些实施方式中,每个片剂包含约50mg活性成分。在一些实施方式中,每个片剂包含约1gm活性成分。在一些实施方式中,每个片剂包含约10gm活性成分。
[0089] 在一些实施方式中,本公开的药物制剂每天施用一次至每天施用三次。在一些实施方式中,本公开的药物制剂每天施用一次。在一些实施方式中,本公开的药物制剂每天施用两次。在一些实施方式中,本公开的药物制剂每天施用三次。
[0090] 在一些实施方式中,药物制剂以剂量水平和频率施用,使得受试者接受总共约0.01mg至约10gm活性治疗剂/天、或总共约1mg至约1gm的活性治疗剂/天、或总共约5mg至约
1gm活性治疗剂/天、或总共约5mg至约500mg活性治疗剂/天,或总共约12mg至约375mg/天。
在一些实施方式中,本公开的药物制剂以剂量水平和频率施用,使得受试者接受总共约
1mg、或约2mg、或约3mg、或约4mg、或约5mg、或约6mg、或约7mg、或约8mg、或约9mg、或约10mg、或约11mg、或约12mg、或约13mg、或约14mg或约15mg活性成分(即裂解物、裂解物级分和/或细胞壁级分或其组合)/天或更多(如果需要)。在一些实施方式中,本公开的药物制剂以剂量水平和频率施用,使得受试者接受总共约12mg、或约24mg、或约36mg、或约48mg、或约
60mg、或约72mg、或约84mg、或约96mg、或约108mg、或约120mg、或约132mg、或约144mg、或约
156mg、或约168mg、或约180mg活性成分(即裂解物、裂解物级分和/或细胞壁级分或其组合)/天或更多(如果需要)。在一些实施方式中,本公开的药物制剂以剂量水平和频率施用,使得受试者接受总共约15mg、或约30mg、或约45mg、或约60mg、或约75mg、或约90mg、或约
105mg、或约120mg、或约135mg、或约150mg、或约165mg、或约180mg、或约195mg、或约210mg、或约225mg活性成分(即裂解物、裂解物级分和/或细胞壁级分或其组合)/天或更多(如果需要)。在一些实施方式中,本公开的药物制剂以剂量水平和频率施用,使得受试者接受总共约25mg、或约50mg、或约75mg、或约100mg、或约125mg、或约150mg、或约175mg、或约200mg、或约225mg、或约250mg、或约275mg、或约300mg、或约325mg、或约350mg、或约375mg、或约400mg活性成分(即裂解物、裂解物级分和/或细胞壁级分或其组合)/天或更多(如果需要)。
[0091] 任何和所有的上述剂量和施用量均适用于本公开的活性成分的单一治疗性施用,以及其中本公开的活性成分与一种或多种其它治疗剂或药剂组合施用的实施方式。
[0092] 活性成分
[0093] 待用于本公开的组合物和方法中的活性成分包含细菌裂解物、裂解物级分或细胞壁级分。活性成分可以由任何革兰氏阳性细菌或革兰氏阴性细菌生物体制造、产生或衍生。
[0094] 如本文所用的术语“裂解物”是指由裂解细胞(如细菌细胞)制备的组合物。取决于用于产生裂解物的精确工艺条件,裂解物含有全部细胞内容物,以及在一些实施方式中含有相关表面组分如胞外多糖。
[0095] 根据本公开的生产活性成分的非限制性示例工艺如实施例1中所示,且通常涉及以下步骤:(1)在生长培养基中发酵细菌;(2)离心细菌悬浮液以从中收获细菌;(3)将收获的细菌进行洗涤并巴氏杀菌;(4)破坏细菌的细胞壁以裂解细菌;和(4)冻干所得的混合物以获得活性成分,如细菌裂解物、裂解物级分或细胞壁级分。
[0096] 存在于负责TLR活化和氧化性应激减少的本公开的裂解物、裂解物级分和/或细胞壁级分中的结构是所有细菌微生物之间共同的和保守的结构。因此,原则上,可以使用任何细菌生物体来生产本公开的活性成分(即裂解物、裂解物级分和/或细胞壁级分)。
[0097] 在一些实施方式中,用于生产本公开的活性成分的细菌生物体是革兰氏阳性细菌。在一些实施方式中,革兰氏阳性细菌选自:嗜酸乳酸杆菌(Lactobacillus acidophilus)、布氏乳酸杆菌(Lactobacillus buchneri)、干酪乳酸杆菌(Lactobacillus casei)、链状乳酸杆菌(Lactobacillus catenaforme)、纤维二糖乳酸杆菌(Lactobacillus cellobiosus)、卷曲乳酸杆菌(Lactobacillus crispatus)、弯曲乳酸杆菌(Lactobacillus curvatus)、德氏乳酸杆菌(Lactobacillus delbrueckii)、德氏乳酸杆菌保加利亚亚种(Lactobacillus delbrueckii subsp.bulgaricus)、德氏乳酸杆菌乳亚种(Lactobacillus delbruecldi subsp.lactis)、瑞士乳酸杆菌(Lactobacillus helveticus)、詹氏乳酸杆菌(Lactobacillus jensenii)、莱士曼氏乳酸杆菌(Lactobacillus leichmannii)、微小乳酸杆菌(Lactobacillus minutus)、副干酪乳酸杆菌(Lactobacillus paracasei)、植物乳酸杆菌(Lactobacillus plantarum)、鼠李糖乳酸杆菌(Lactobacillus rhamnosus)、罗氏乳酸杆菌(Lactobacillus rogosae)、唾液乳酸杆菌(Lactobacillus salivarius)、芽孢乳酸杆菌(Lactobacillus sporogenes)(也称为凝固芽胞杆菌(Bacillus coagulans))、短乳酸杆菌(Lactobacillus brevis)、加氏乳酸杆菌(Lactobacillus gasseri)、发酵乳酸杆菌(Lactobacillus fermentum)、青春双岐杆菌(Bifidobacterium adolescentis)、动物双歧杆菌(Bifidobacterium animalis)(特别是B.动物、动物亚种)、形双歧杆菌
(Bifidobacterium angulatum)、两岐双岐杆菌(Bifidobacterium bifidum)、短双歧杆菌(Bifidobacterium breve)、链双歧杆菌(Bifidobacterium catenulatum)、齿双歧杆菌(Bifidobacterium dentium)、埃氏双岐杆菌(Bifidobacterium eriksonii)、婴儿双歧杆菌(Bifidobacterium infantis)、乳双歧杆菌(Bifidobacterium lactis)(动物乳双歧杆菌亚种)、长双歧杆菌(Bifidobacterium longum)、植物双歧杆菌(Bifidobacterium plantarum)、假链双歧杆菌(Bifidobacterium pseudo-catenulatum)、假长双歧杆菌(Bifidobacterium pseudo-longum)、乳酸乳球菌(Leptococcus lactis)、乳酸链球菌(Streptococcus lactis)(也称为乳酸乳球菌乳酸亚种)、棉子糖链球菌(Streptococcus raffinolactis)、发酵氨基酸球菌(Acidaminococcus fermenta)、发酵噬纤维菌
(Cytophaga fermentans)、发酵红育菌(Rhodoferax fermentans)、发酵纤维单胞菌(Cellulomonas fermentans)、运动发酵单胞菌(Zymomonas mobilis)、乳酸片球菌(Pediococcus acidilactici)、嗜热链球菌(Streptococcus thermophilus)以及其功能等同变体。
[0098] 在一些实施方式中,用于生产本公开的活性成分的细菌生物体是革兰氏阴性细菌。在一些实施方式中,革兰氏阴性细菌选自:鲍氏不动杆菌(Acinetobacter baumannii)、放线杆菌属(Actinobacilllus)、木醋杆菌(Acetobacter xylinus)、多形拟杆菌(Bacteroides thetaiotaomicron)、脆弱拟杆菌(Bacteroides fragalis)、百日咳博德特氏菌(Bordetella pertussis)、流产布鲁氏菌(Brucella abortus)、空肠弯曲杆菌(Campylobacter jejuni)、弗劳氏枸橼酸杆菌(Citobacter freundii)、阴沟肠杆菌(Enterobacter  cloacae)、阪崎肠杆菌(Enterobacter  sakasakii)、蓝藻
(Cyanobacteria)、梨水疫病欧文氏菌(Erwinia amylovora)、大肠杆菌(Escherichia coli)、土拉热弗朗西斯氏菌(Franciscella tularensis)、幽门螺旋杆菌(Helicobacter pylori)、流感嗜血杆菌(Haemophilus influenza)、嗜肺性军团病杆菌(Legionella pneumophila)、粘膜炎莫拉菌(Moraxella catarrhalis)、淋病奈瑟氏菌(Neisseria gonorrhoeae)、奇异变形杆菌(Proteus mirabilis)、铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa)、荧光假单胞菌(Pseudomonas flourescens)、肠炎沙门氏菌(Salmonella enteritidis)、伤寒沙门氏杆菌(Salmonella  typhi)、粘质赛氏杆菌(Serratia mareescens)、福氏志贺氏菌(Shigella flexneri)、霍乱弧菌(Vibrio cholera)、海洋弧菌(Vibrio algenily)、青枯雷尔氏菌(Ralstonia solanaceaerum)、结核分枝杆菌
(Mycobacterium tuberculosis)、卡纳氏分枝杆菌(Mycobacterium kanassi)、催产克雷伯菌(Klebsiella oxytocia)和肺炎克雷伯菌(Klebsiella pneumonia)以及野油菜黄单胞菌(Xanthomonas campestris)。在一些实施方式中,革兰氏阴性细菌选自:假单胞菌(Pseudomonas)属、克雷伯菌(Klebsiella)属、黄单胞菌(Xanthomonas)属、志贺菌(Shigella)属和肠杆菌(Enterobacter)属。在一些实施方式中,革兰氏阴性细菌是大肠杆菌(Escherichia coli)、催产克雷伯菌(Klebsiella oxytocia)、福氏志贺氏菌(Shigella flexneri)、荧光假单胞菌(Pseudomonas flourescens)和野油菜黄单胞菌(Xanthomonas campestris)以及其功能等同变体中的一种或多种。
[0099] 以上所述的所有细菌都被认为生产免疫刺激性细胞成分,例如但不限于EPS(胞外多糖),其与许多细菌中发现的LPS(脂多糖)不同。其它种类的细菌也可以用于本公开的组合物和方法中,例如现有技术中所公开的那些和在ECACC(欧洲细胞培养物保藏中心)、ASTM(美国试验和材料协会)、ATCC(美国典型培养物保藏中心)和DSM(德国微生物和细胞培养物保藏中心)中通常可获得的那些。
[0100] 关于根据本公开的用于生产裂解物、裂解物级分或细胞壁级分的发酵步骤,待用于发酵的可接受的生长培养基将取决于正在生长的特定细菌。典型的生长培养基包括包含以下那些:氮源(1-4%),其可以包括以下酵母提取物、乳蛋白酪蛋白水解物、大豆和大豆水解物、肉提取物、蛋白胨或氨盐中的一种或多种;含有简单糖或产生简单糖的水解碳水化合物的简单糖或成分,例如但不限于葡萄糖或乳糖(0.5-3%);和矿物质(0.05-0.3%),其可以包括钠、锰、镁、钙和钾的盐。可以加入表面活性剂、半胱氨酸HCL和核糖核苷酸(0.001-0.75%)以支持细胞生长。将生长培养基调节至6至8之间的pH值。在一些实施方式中,取决于正在生长的特定细菌,生长培养基的pH值范围为约6.0至6.5。在一些实施方式中,生长培养基的pH值范围为约6.5至7.0。在一些实施方式中,生长培养基的pH值范围为约7.0至7.5。
[0101] 在一些实施方式中,在发酵期间接种的培养基在30-50℃之间温育。在一些实施方式中,在发酵期间接种的培养基在30-40℃之间温育。在一些实施方式中,接种的培养基在大约30℃、或大约31℃、或大约32℃、或大约33℃、或大约34℃、或大约35℃、或大约36℃、或大约37℃、或大约38℃、或大约39℃、或大约40℃、或大约45℃温育。在一些实施方式中,接种的培养基在大约30℃温育。在一些实施方式中,接种的培养基在大约33℃温育。在一些实施方式中,接种的培养基在大约35℃温育。在一些实施方式中,接种的培养基在大约37℃温育。在一些实施方式中,接种的培养基在大约40℃温育。在一些实施方式中,接种的培养基在大约45℃温育。
[0102] 在一些实施方式中,在收获细菌之前,继续发酵约6小时至约120小时。在一些实施方式中,在收获细菌之前,继续发酵约12小时至约48小时。在一些实施方式中,在收获细菌之前,继续发酵约12小时至约24小时。在一些实施方式中,继续发酵约14小时、或约15小时、或约16小时、或约17小时、或约18小时、或约19小时、或约20小时、或约22小时、或约24小时、或约48小时。在一些实施方式中,继续发酵直至细菌生长达到对数中期、对数后期、早期稳定期、中期稳定期或后期稳定期。在一些实施方式中,继续发酵直至细菌达到稳定生长期。在一些实施方式中,在下游加工之前可以使用本领域技术人员公知的技术保持发酵,例如但不限于冷却和pH值控制,在必要时长达14天或更长时间。
[0103] 发酵后,通常将发酵液冷却并通过离心收获细菌。在一些实施方式中,在发酵后将发酵液冷却至约1℃至约25℃。在一些实施方式中,将发酵液冷却至约1℃、或约2℃、或约3℃、或约4℃、或约5℃、或约6℃、或约7℃、或约8℃、或约10℃。在一些实施方式中,将发酵液冷却至约4℃至约7℃。
[0104] 冷却后,进行离心而将细胞与周围生长培养基分离。然后通过重复离心和再悬浮在新鲜培养基、去离子水、水或其它溶液中洗涤细胞,然后再悬浮在新鲜培养基或其它溶液中以为巴氏杀菌步骤做准备。
[0105] 在一些实施方式中,将洗涤的细菌巴氏杀菌。在一些实施方式中,细菌在约75℃至约85℃巴氏杀菌30分钟至60分钟。在一些实施方式中,收获的细菌在约80℃巴氏杀菌。在一些实施方式中,巴氏杀菌进行约30分钟、或约45分钟、或约60分钟。
[0106] 巴氏杀菌后,处理细胞浓缩物以破坏细胞壁并由此暴露TLR激动剂。细胞壁的破坏可以通过使用螯合剂、去污剂、表面活性剂和水解酶来完成。可以使用的水解酶的示例包括但不限于溶菌酶,例如鸡(母鸡)蛋清溶菌酶(例如或 )、溶素、内溶素和水解酶。在一些实施
方式中,将溶菌酶加入到巴氏杀菌的细菌细胞悬浮液中至0.01-4体积%的最终浓度。在一些实施方式中,将溶菌酶加入到巴氏杀菌的细菌细胞悬浮液至终浓度为约0.5体积%、或约
1体积%、或约2体积%、或约3体积%、或约4体积%。在一些实施方式中,用裂解酶继续处理巴氏杀菌的细菌悬浮液约1至约10小时、或约6至约8小时、或约5小时、或约6小时、或约7小时、或约8小时、或约9小时、或约10小时。在一些实施方式中,在约25℃至约50℃、或约30℃至约45℃、或约35℃、或约37℃,或在约40℃,或在约42℃,或在约45℃的温度下进行用裂解酶处理巴氏杀菌的细菌悬浮液。裂解后,通常将裂解物冷冻并冻干。
[0107] 在一些实施方式中,并且如下文更详细描述的,然后将冻干物质与促进剂例如N-乙酰D葡糖胺HCl(NAG)混合。任选地,视情况而定,可以加入其它制剂赋形剂以产生固体形式的丸剂或粉末。
[0108] 在一些实施方式中,可以通过改变原材料、工艺材料或工艺条件来改变由特定裂解物活化或刺激的一种或多种特定TLR。如本文所用,术语“TLR特异性”是指由包含细菌裂解物、裂解物级分和/或细胞壁级分的本公开的给定组合物活化的一种或多种特定TLR。在一些实施方式中,根据细菌细胞在发酵期间生长的密度改变TLR特异性。在一些实施方式中,生产活性成分的特定细菌种或亚种也导致TLR特异性的差异。在一些实施方式中,巴氏杀菌后用于裂解细菌细胞的特定酶导致TLR特异性的差异。
[0109] 如本文所用,当与受体或其它生物分子靶标相关使用时,术语“活化”、“刺激”、“靶向”和“激动作用”是可互换的并且是指与受体(例如toll样受体)的结合和活化,使得改变、调节或以其它方式影响受体下游的信号传导级联。
[0110] 应该理解的是,可以在裂解之前对细胞进行分级或者可以通过公知的生物化学方法(包括例如差速离心或柱层析,如凝胶渗透层析、离子交换层析、疏水性介质层析或沉淀等)对上述生产的裂解物进行分级。在一些实施方式中,裂解物分级生产具有不同TLR特异性的级分;例如,可以生产靶向比完全裂解物更少数量的TLR的级分。
[0111] 在一些实施方式中,包含胞外多糖的成分可以与本公开的裂解物、裂解物级分和/或细胞壁级分组合。胞外多糖能够活化TLR。因此,例如,源自野油菜黄单胞菌(Xanthomonas campestris)的黄原胶可以与本公开的裂解物、裂解物级分和/或细胞壁级分组合使用以增加组合物的TLR活化和/或改变组合物的TLR特异性。在一些实施方式中,黄原胶本身是裂解物级分,例如,在黄原胶衍生自野油菜黄单胞菌(Xanthomonas campestris)发酵生产的裂解物的实施方式中,例如通过对野油菜黄单胞菌(Xanthomonas campestris)裂解物进行分级。其它成分和递送形式
[0112] 本公开的治疗性组合物可以进一步和任选地包含一种或多种促进剂以辅助活性剂通过生物膜的治疗性递送。根据本公开有用的促进剂可以是氨基酸、N-烷基化肽、糖、氨基糖或氨基糖螯合物。氨基糖螯合物包含一种或多种氨基糖配体、一种或多种饱和羟基化羧酸配体和营养学上可接受的金属,其中,所述一种或多种氨基糖配体中的至少一种是葡糖胺,并且其中,所述金属选自由锰、镁、钠、钾和锌组成的组,并且其中,所述一种或多种饱和羟基化羧酸配体是葡糖酸,并且其中,所述葡糖胺配体与营养学上可接受的金属的比率是2:1,其中,营养学上金属是非的。
[0113] 根据本公开的一个方面,治疗性制剂可以包括一种或多种乙酰化或脱乙酰化的氨基糖,所述氨基糖选自由NAG、半乳糖胺、N-乙酰半乳糖胺、甘露糖胺和N-乙酰甘露糖胺的单体、低聚物和/或其聚合物形式(包括几丁质)和人葡糖胺聚糖及其衍生物组成的组。本文关于氨基糖使用的术语“其衍生物”是指在灭菌期间具有相同或基本相同的能力以形成细胞毒性降解产物的氨基糖衍生物。根据本公开选择的其它方面,所述促进剂是选自由聚-L-赖氨酸、葡糖胺、聚-L-精氨酸、半乳糖胺、N-乙酰甘露糖胺(NAM;N-Ac-Man)、N-15乙酰葡糖胺(NAG;N-Ac-Glc)、N,N'-二乙酰基葡糖胺(NAG-NAG;N,N'-二乙酰基二硫代葡萄糖)、N,N',N”,N”'-四乙酰基葡糖胺(NAG-NAG-NAG-NAG;N,N',N”,N”'-四乙酰基牛磺四糖)及其混合物组成的组的成员。
[0114] 任选地且同样可接受的是,所述促进剂可以是酰化糖氧基糖或2-12个任选酰化低聚糖氧基糖部分、a-1,2和/或a-1,6连接的糖,其中,所述糖选自由D-甘露糖、D-半乳糖、D-古洛糖(ghicose)、D-古洛糖胺(ghicosamine)、N-乙酰葡糖胺和6-脱氧-L-甘露糖组成的组,其中,低聚糖氧基糖部分可以包含相同或不同的糖。
[0115] 在另一种实施方式中,本发明的组合物为选自由锭剂、口香糖、咀嚼片和溶解片(如缓溶片、快速溶解片、或控释片剂或其它合适的控释制剂)组成的组的剂型。
[0116] 在一种实施方式中,将本公开的活性剂通过受试者的口腔粘膜递送,所述口腔粘膜选自由舌下粘膜、颊粘膜及其组合组成的组。可以舌下施用该组合物,使得活性成分通过舌下粘膜递送。
[0117] 在另一种实施方式中,载体通常为固体、半固体或液体,例如粘合剂、胶基或其组合。用于本发明组合物的合适的粘合剂包括但不限于糖醇如甘露糖醇、山梨糖醇和木糖醇;糖如乳糖、右旋糖、蔗糖、葡萄糖和糖粉;其它物质如肌醇、糖蜜、麦芽糖糊精、淀粉、纤维素、微晶纤维素、聚乙烯吡咯烷酮、阿拉伯胶、瓜尔胶、黄蓍胶、海藻酸盐、爱尔兰苔藓提取物、潘瓦尔胶、印度树胶、车前子壳黏液(欧车前)、 落叶松阿拉伯半乳聚糖、明胶、
甲基纤维素、乙基纤维素、羧甲基纤维素,羟丙基甲基纤维素、聚丙烯酸(例如聚羧乙烯)、酸钙、磷酸钙、磷酸二钙、硫酸钙、高岭土氯化钠、聚乙二醇及其组合。用于本发明组合物的合适的胶基包括例如选自本领域公知的许多不溶于水和不溶于唾液的胶基材料中的材料。
在某些情况下,胶基包含至少一种疏水性聚合物和至少一种亲水性聚合物。用于胶基的合适的疏水性和亲水性聚合物的非限制性示例包括天然和合成聚合物如弹性体、橡胶及其组合。合适的天然聚合物的示例包括但不限于植物来源的物质,例如糖胶树胶、节路顿胶、杜仲胶、冠胶及其组合。合适的合成聚合物的示例包括弹性体,例如丁二烯-苯乙烯共聚物、异丁烯和异戊二烯共聚物(例如“丁基橡胶”)、聚乙烯、聚异丁烯、聚乙烯基酯(例如聚乙酸乙烯酯和聚乙酸乙烯邻苯二甲酸酯)及其组合。在其它情况下,胶基包含丁基橡胶(即异丁烯和异戊二烯共聚物)、聚异丁烯和任选的聚乙烯乳酸酯(例如具有分子量约12000)的混合物。
[0118] 在又一种实施方式中,本发明组合物可以进一步包含甜味剂调味剂、保护剂、增塑剂、蜡、弹性体溶剂、填充材料、防腐剂或其组合。在又一种实施方式中,本发明组合物可以进一步包含润滑剂、润湿剂、乳化剂、增溶剂、悬浮剂、着色剂、崩解剂或其组合。在一种实施方式中,与约75至约100微米的典型平均药物粒度相比,本文所述组合物中药物的平均粒度为约20微米。在另一种实施方式中,本文所述组合物中药物的平均粒度小于或等于载体成分(例如胶基、粘合剂等)的平均粒度。
[0119] 在本公开的一方面,治疗性组合物可以任选地包括缓冲体系以将唾液的pH值升高至约8.0至约11的pH值,而不管待治疗的受试者的口腔中唾液的起始pH。以上描述了用于本发明的合适的治疗剂。上面还描述了用于本发明缓冲体系的合适的碳酸盐和碳酸氢盐。在某些情况下,组合物还包含非生物治疗剂,例如NSAID。
[0120] 合适的柠檬酸盐、磷酸盐酸盐包括但不限于本领域公知的柠檬酸、磷酸或硼酸的任何盐。例如,在一些实施方式中,柠檬酸盐选自由柠檬酸钠、柠檬酸钾、柠檬酸钙、柠檬酸镁和柠檬酸铵组成的组。
[0121] 在其它实施方式中,磷酸盐选自由磷酸二氢钠、磷酸氢二钠、磷酸二氢钾、磷酸氢二钾、磷酸二氢钙、磷酸氢二钙、磷酸二氢镁、磷酸氢二镁、磷酸二氢铵和磷酸氢二铵组成的组。在其它实施方式中,硼酸盐选自由硼酸钠、硼酸钾、硼酸钙、硼酸镁和硼酸铵组成的组。在某些情况下,缓冲体系包含碳酸盐、碳酸氢盐和/或柠檬酸盐。在某些其它情况下,缓冲体系包含碳酸盐、碳酸氢盐和/或磷酸盐。在其它情况下,缓冲体系包含碳酸盐、碳酸氢盐和/或硼酸盐。
[0122] 除了包含碳酸盐、碳酸氢盐和/或金属氧化物的缓冲体系之外,其它缓冲体系适用于本发明的组合物。例如,在一种替代实施方式中,三元缓冲体系包含碳酸盐、碳酸氢盐和柠檬酸盐、磷酸盐或硼酸盐。在另一种替代实施方式中,缓冲体系包含碳酸盐或碳酸氢盐以及两种或更多种选自由金属氧化物、柠檬酸盐、磷酸盐和硼酸盐组成的组的缓冲剂。在又一种替代实施方式中,缓冲体系是包含碳酸盐或碳酸氢盐和金属氧化物的二元缓冲体系。在又一种替代实施方式中,缓冲体系是包含碳酸盐或碳酸氢盐以及柠檬酸盐、磷酸盐或硼酸盐的二元缓冲体系。在另一种替代实施方式中,缓冲体系是包含金属氧化物和柠檬酸盐、磷酸盐或硼酸盐的二元缓冲体系。在又一种替代实施方式中,缓冲体系是包含碳酸盐和碳酸氢盐的二元缓冲体系。
[0123] 递送形式
[0124] 本发明的治疗性组合物可以采取固体、半固体、冻干粉末或液体剂型的形式,例如片剂(例如咀嚼片、缓慢溶解片、快速溶解片)、丸剂、胶囊、锭剂、糖果、胶、粉末、溶液、悬浮剂、乳剂、气雾剂等。剂型可以是口香糖、快速溶解片、糖果或锭剂。
[0125] 如本文所用,术语“剂型”是指适合作为人受试者、哺乳动物和其它非哺乳动物动物的单位剂量的物理离散单位,每个单位含有预定量的治疗剂以及一种或多种合适的药物赋形剂如载体,所述治疗剂经计算可产生所需的发作、耐受性和治疗性效果。制备这种剂型的方法对于本领域技术人员来说是公知或将是显而易见的。例如,在一些实施方式中,本发明的口香糖剂型可以根据工业中的程序标准制备。在其它实施方式中,本发明的片剂、锭剂或糖果剂型(例如吸盘或棒棒糖)可以根据例如Remington的“The Science and Practice of Pharmacy,20th Ed”,[Lippincott,Williams&Wilkins(2003)和“Pharmaceutical Dosage Forms,Volume 1:Tablets”,2nd Ed.,Marcel Dekker,Inc.,New York,N.Y.(1989)]中所述的程序制备。在任何情况下,待施用的剂型含有一定量的治疗有效量的活性治疗剂,用于缓解根据本发明的教导施用时正在治疗的病症。
[0126] 如本文所用,术语“载体”是指用作药物(例如治疗剂)的稀释剂或媒介物的典型惰性物质。该术语还包括赋予组合物粘着性的典型惰性物质。用于本发明组合物的合适载体包括但不限于固体、半固体或液体(例如粘合剂或胶基)。本领域普通技术人员公知粘合剂的示例。可以通过本领域公知的方法预处理粘合剂以改善其流动性和味道,例如冷冻干燥[参见例如"Fundamentals of Freeze-Drying,"Pharm.Biotechnol.,Vol.14,pp.281-360(2002);"Lyophilization  of Unit Dose Pharmaceutical Dosage  Forms,"Drug.Dev.Ind.Pharm.,Vol.29,pp.595-602(2003)];固溶体制备;以及用合适的润滑剂进行润滑剂撒粉和湿法制粒(参见例如Remington:The  Science and Practice of Pharmacy,同上)。当制剂中包括粘合剂时,本发明的组合物可以包含约15重量%至约90重量%的粘合剂以及约35重量%至约80重量%的粘合剂。然而,本领域技术人员将会认识到,本发明的组合物可以在没有任何粘合剂的情况下制备,例如以生产高度易碎的剂型。
[0127] 片剂
[0128] 当剂型是片剂如溶解片(即崩解片)或咀嚼片时,本发明组合物包含如本文所述的治疗剂,其衍生自一种或多种细菌或其药学上可接受的盐、促进剂、载体(如粘合剂)和缓冲体系(包括二元缓冲体系或三元缓冲体系)。片剂组合物可进一步包含润滑剂、润湿剂、乳化剂、悬浮剂、防腐剂、甜味剂、调味剂、着色剂和崩解剂。典型地,本发明的片剂组合物包含约0.001重量%至约10.0重量%的活性治疗剂(以任何选择的形式,按其游离碱形式测量),并且更典型地约1.0%至约5.0%。本领域技术人员应该理解的是,上述百分比根据所用活性治疗剂的具体来源、最终制剂中所需的活性治疗剂的量以及所需活性治疗剂的特定释放速率将有所不同。片剂组合物的缓冲体系提供超过至少约8.0,至少约9.5和/或约pH值9.9至约pH值11的最终唾液pH值。
[0129] 在某些实施方式中,片剂是溶解片,诸如由受试者的唾液溶解而不需要咀嚼的缓慢溶解或快速溶解片剂。例如,置于受试者舌头上的溶解片可用于治疗剂的颊递送。或者,置于受试者舌头下方的溶解片可用于治疗剂的舌下递送。这种类型的剂型对于儿科和老年患者尤其可取,因为小孩和老年人经常难以咀嚼某些物品。典型地,将溶解片配制成在施用后约1至约15分钟内,约2至约10分钟内,例如约2、3、4、5、6、7、8、9或10分钟内溶解。本领域技术人员应该理解的是,快速溶解片比缓慢溶解片溶解更快,其通常被受试者的唾液逐渐溶解而不是快速溶解。在一种实施方式中,缓慢溶解或快速溶解片在超过约1分钟的时间内将治疗剂通过舌下粘膜递送。
[0130] 在某些其它实施方式中,片剂是咀嚼片,其被受试者咀嚼并配制成快速或逐渐溶解。例如,置于受试者舌头上的咀嚼片可用于治疗剂的颊递送。在咀嚼期间,咀嚼片可以在口腔内移动,有时可以停留在牙龈和脸颊之间或舌头下方。因此,咀嚼片中所含的治疗剂的至少一部分也可以在舌下(即通过舌下粘膜)递送。典型地,将咀嚼片配制成在施用后约1至约15分钟内,约2至约10分钟内且不少于1分钟内,例如约2、3、4、5、6、7、8、9或10分钟内溶解。
[0131] 如上所述,本发明的溶解片和咀嚼片通常配制成在施用后约1至15分钟,并且在施用后不少于约1分钟内溶解。然而,虽然这些时间范围适合于使治疗剂最大限度地暴露于口腔粘膜(例如舌下和/或颊粘膜),但它们并不总是服从使用者依从性(例如,使用者可能吞咽得太频繁,因此,阻碍最大跨粘膜吸收)。因此,在某些情况下,可能需要在患者依从性和治疗剂对口腔粘膜的最大暴露时间之间取得平衡。这可以通过例如减小片剂大小(例如,从约700-800mg至约200-300mg)而不降低每单位剂量的缓冲体系或治疗剂的浓度或量来实现。另外,片剂制剂的细微变化例如将一种调味剂替换为另一种(例如荷兰薄荷的巧克力)或将一种粘合剂或甜味剂替换为另一种(例如用甘露醇或山梨糖醇的乳糖)可用于减少流涎。
[0132] 与其它药剂组合
[0133] 许多药物活性剂产生有害的副作用,这些副作用由活性剂通过生物化学和其它代谢反应进行时产生的ROS驱动。因此,本文所述的组合物是用于治疗氧化性应激和氧化性应激相关疾病和病症的有吸引力的候选者,并且可以与本领域公知的一种或多种药剂组合,例如Physician's Desk Reference中列出的任何药剂(可在http://www.pdr.net获得)。
[0134] 在一些实施方式中,本公开的活性成分与靶向氧化性应激、炎症、免疫应答和/或氧化性应激相关疾病或病症的公知药剂组合,或者它们可以与产生氧化性应激作为副作用的药剂组合。在药剂靶向某些其它疾病状态但产生氧化性应激作为副作用的情况下,与本发明组合物的组合减少了由氧化性应激引起的损伤,并且通过允许更高剂量而没有由氧化性应激引起的禁止性损伤而增强药剂的效力。应该理解的是,用特定组合的最佳结果可能需要调整裂解物以在添加药剂的存在下最佳地靶向正确的TLR。
[0135] 因此,在一方面,本公开提供了用于减少或减轻与施用药剂相关的一种或多种氧化性应激相关副作用的方法,所述方法包括施用本公开的裂解物、裂解物级分和/或细胞壁级分与药物的组合。在一些实施方式中,同时或以任何顺序并通过相同或不同的施用途径施用药剂和裂解物组合物。在一些实施方式中,药剂是具有一种或多种氧化性应激相关副作用的任何药剂,例如Physician's Desk Reference中列出的具有一种或多种氧化性应激相关副作用的任何药剂(可在http://www.pdr.net获得)。在一些实施方式中,药剂选自由抗风湿药、抗炎剂、化疗剂、放疗剂、免疫抑制剂、干扰素、基于干扰素的化疗剂和细胞毒性药组成的组。在一些实施方式中,氧化性应激相关副作用选自无铜蓝蛋白血症、动脉/系统性高血压、关节炎、哮喘、动脉粥样硬化、特应性皮炎、癌症、膀胱癌、白血病、子宫癌、宫颈癌、头晕、恶心、呕吐、便秘、腹泻、失眠、嗜睡、眩晕、性欲减退、暂时昏迷、颤抖、黄疸、心律失常、心率增加、心率减慢、麻疹、抑郁症、临床抑郁症、脑缺血、支气管肺发育不良、心血管疾病、白内障、蜂窝组织炎、化疗副作用、慢性疲劳综合征、结肠炎、冠状动脉疾病、血脂异常、子痫、勃起功能障碍、共济失调、头痛、心力衰竭、血液透析副作用、肝硬化、高胆固醇血症、高同型半胱氨酸血症、高脂血症、间质性肺病、肺损害、黄斑变性、男性不育症、轻度认知障碍、心肌梗塞、心肌炎、肌病、神经病、肥胖症、骨关节炎、骨质疏松症、胰腺炎、牙周病、腹膜透析副作用、创伤后应激障碍、先兆子痫、牛皮癣、牛皮癣关节炎、肺动脉高压、放疗法副作用、反应性关节炎、呼吸窘迫综合征、横纹肌溶解症、风湿性疾病、败血症、睡眠呼吸暂停、中风、自杀念头、淀粉样变性、血栓形成、tau蛋白病、不稳定型心绞痛、尿毒症或静脉功能不全。
[0136] 在一些实施方式中,具有一种或多种氧化性应激相关副作用的药剂选自由以下组成的组:选自由硫酸阿托品、盐酸双环维林、丁溴东莨菪碱、溴丙胺太林、枸橼酸阿尔维林和盐酸美贝维林组成的组的抗痉挛剂;选自由胃复安和多潘立酮组成的组的运动性兴奋剂;选自由甲氰咪胍、法莫替丁尼替丁和雷尼替丁组成的组的H2受体拮抗剂;抗毒蕈碱剂;选自由二柠檬酸铋酸三钾和硫糖组成的组的螯合剂;前列腺素类似物;选自由巴柳氮钠、美沙拉嗪、奥沙拉嗪和柳氮磺胺吡啶组成的组的氨基水杨酸盐;选自由二丙酸倍氯米松、布地奈德、氢化可的松和泼尼松龙组成的组的皮质类固醇;选自由环孢菌素、巯嘌呤、甲氨蝶呤、阿达木单抗和英夫利昔单抗组成的组的影响免疫应答的药物;选自由比沙可啶、二羟基蒽醌、多库酯和吡苯氧磺钠组成的组的刺激性泻药;影响胆汁组成和流动的药物;选自由消胆胺脂、羟苄利明、卡米罗芬、美贝维林、曲美布汀、罗西维林、双环维林、双己维林、双苯美林、二苯哌酯、苯唑酮、甲哌佐酯、哌苯偶酯、格隆溴铵、奥芬澳胺、环戊噻吩、乙胺太林、丙美卡因、奥替溴铵、三乙已苯铵、异丙胺、己环铵、泊尔定、贝弗宁、二苯马尼、替莫碘铵、吡芬溴铵、噻哌溴铵、苯哌维林、罂粟碱、屈他维林、莫沙维林、5-HT3拮抗剂、5-HT4激动剂、二苯丙哌啶、地索普明、氯苄沙明、匹维溴铵、非诺维林、依丹帕明、普罗沙唑、阿尔维林、曲匹布通、异美汀、卡罗维林、均苯三酚、硅酮、三甲二苯丙胺、阿托品、莨菪碱、东莨菪碱、丁基莨菪胺、甲基东莨菪碱、甲基阿托品、芬托溴铵、西托溴铵和主要多巴胺拮抗剂组成的组的胆汁酸螯合剂;选自由奥美拉唑钠、兰索拉唑钠、泮托拉唑钠、美拉唑钠和雷贝拉唑钠组成的组的质子泵抑制剂;阿片类物质和阿片类物质受体拮抗剂;选自由对乙酰氨基酚、双氯芬酸、氟苯水杨酸、依托度酸、非诺洛芬、氟比洛芬、布洛芬、吲哚美辛、酮洛芬、酮咯酸、甲氯芬那酸、甲芬那酸、美洛昔康、丁美酮、萘普生、奥沙普嗪、保泰松、吡罗昔康、舒林酸、托美丁钠、塞来昔布、丁丙诺啡、布托啡诺、可待因、氢可酮、氢吗啡酮、左啡诺、哌替啶、美沙酮、吗啡、纳布啡、羟考酮、羟吗啡酮、喷他佐辛、丙氧芬和曲马多组成的组的镇痛药;选自由硝西泮、氟西泮、洛索拉明、氯甲西泮、替马西泮、扎来普隆、唑吡坦、佐匹克隆、水合氯醛、磷酸三氯乙酯、氯美噻唑、奥沙西泮、三唑仑、艾司唑仑、氯硝西泮、阿普唑仑、艾司佐匹克隆、雷美替胺、曲唑酮、阿米替林、多塞平、苯二氮卓类药物、褪黑激素、苯海拉明和草药治疗剂组成的组的睡眠药物;选自由地高辛和洋地黄毒苷组成的组的强心苷;选自由依诺昔酮和米力农组成的组的磷酸二酯酶抑制剂;选自由苄氟噻嗪、氯噻酮、环戊噻嗪、伊那酰胺、美托拉宗和西帕胺组成的组的噻嗪类和相关利尿剂;选自由呋塞米、布美他尼和托拉塞米组成的组的利尿剂;
选自由盐酸阿米洛利、氨苯蝶啶、依普利酮和螺内酯组成的组的保钾利尿剂和醛固酮拮抗剂;渗透利尿剂;选自由腺苷、盐酸胺碘酮、丙吡胺、醋酸氟卡胺、盐酸普罗帕酮和盐酸利多卡因组成的组的心律失常药物;选自由普萘洛尔、阿替洛尔、醋丁洛尔、毕索洛尔富马酸盐、卡维地洛、塞利洛尔、艾司洛尔、伊巴洛尔、酒石酸美托洛尔、纳多洛尔、奈必洛尔、氧烯洛尔、吲哚洛尔、索他洛尔和噻吗洛尔组成的组的β肾上腺素受体阻断药物;选自由安替康、波生坦、二氮嗪、肼苯哒嗪、伊洛前列素、米诺地尔、西地那非、西他生坦、硝普钠、可乐定、甲基多巴、莫索尼定、胍乙啶单硫酸盐、多沙唑嗪、吲哚拉明、哌唑嗪、特拉唑嗪、苯氧苯胺和甲磺酸酚妥拉明组成的组的高血压药物;选自由卡托普利、西拉普利、依那普利马来酸盐、福辛普利、咪达普利、赖诺普利、莫昔普利、培哚普利叔丁胺盐、喹那普利、雷米普利、群多普利、坎地沙坦西酯、依普罗沙坦、依贝沙坦、氯沙坦、奥美沙坦酯、替米沙坦、缬沙坦和阿利吉仑组成的组的影响肾素-血管紧张素系统的药物;选自由三硝酸甘油、二硝酸异山梨醇酯、单硝酸异山梨醇酯、苯磺酸氨氯地平、地尔硫卓、非洛地平、伊拉地平、拉西地平、乐卡地平、硝吡胺甲酯、利心平、尼莫地平、戊脉安、伊伐布雷定、尼可地尔和雷诺嗪组成的组的硝酸盐、钙通道阻断剂、抗心绞痛药物;选自由西洛他唑、肌醇烟酸醇酯、莫西赛利、草酸萘呋胺和己酮可可碱组成的组的外周血管扩张和相关药物;选自由多巴胺、多培沙明、麻黄素、间羟胺、去甲肾上腺素酒石酸盐、酒石酸去甲麻黄碱和苯麻黄碱组成的组的拟交感神经剂;选自由肝素、贝米肝素、达肝素、依诺肝素、亭扎肝素、达那肝素、比伐卢定、来匹卢定、依前列醇、磺达肝素、华法令、醋硝香豆素、苯茚满二酮、达比加群酯、利伐沙班和鱼精蛋白硫酸盐组成的组的抗凝剂和鱼精蛋白;选自由阿昔单抗、阿司匹林、氯吡格雷、潘生丁、依替巴肽、普拉格雷和替罗非班组成的组的抗血小板药物;选自由阿替普酶、瑞替普酶、链激酶、替奈普酶、尿激酶、酚磺乙胺和传明酸组成的组的纤维蛋白溶解药物和抗纤维蛋白溶解药物;选自由阿托伐他汀、氟伐他汀、普伐他汀、罗苏伐他汀、辛伐他汀、考来维仑、消胆胺脂、考来替泊、依泽替米贝、苯扎贝特、环丙贝特、非诺贝特、吉非贝齐、阿西莫司、烟酸、ω-3脂肪酸化合物、乙醇胺油酸酯和十四烷基硫酸钠组成的组的调控脂质药物;选自由苯哌利多、氯丙嗪、氟哌噻吨、氟哌啶醇、左美丙嗪、哌氰嗪、奋乃静、哌迷清、氯吡嗪、普马嗪、舒必利、三氟拉嗪、珠氯噻醇、氨磺必利、阿立哌唑、氯氮平、奥氮平、帕潘立酮、奎硫平、利培酮、施立碟、苯噻庚乙胺、氟哌噻吨、氟奋乃静、奥氮平双羟萘酸盐、安乐嗪棕榈酸酯、利螺环酮、珠氯噻醇、卡马西平、丙戊酸钠、丙戊酸、碳酸锂、柠檬酸锂、阿米替林、氯米帕明、度硫平、丙咪嗪、洛非帕明、去甲替林、曲米帕明、米安色林、曲唑酮、苯乙肼、异卡波肼、反苯环丙胺、吗氯贝胺、西酞普兰、依他普仑、氟西汀、氟伏沙明、帕罗西汀、舍曲林、阿戈美拉汀、度洛西汀、氟哌噻吨、米氮平、瑞波西汀、色氨酸文拉法辛、阿托莫西汀、地塞米明、哌甲酯、莫达非尼、艾斯利卡西平、奥卡西平、乙琥胺、加巴喷丁、普加巴林、拉科酰胺、拉莫三嗪、左乙拉西坦、苯巴比妥、普利米酮、苯妥英、卢非酰胺、噻加宾、托吡酯、氨己烯酸、唑尼沙胺、罗匹尼罗、罗替戈汀、复方苯胺多巴胺、左旋多巴、复方卡尔多巴、雷沙吉兰、司来吉兰、恩他卡朋、托卡朋、金刚胺、邻甲苯海明、普环啶、苯海索、氟哌啶醇、吡拉西坦、利鲁唑、丁苯那嗪、阿坎酸、双硫仑、安非他酮、伐尼克兰、丁丙诺啡、洛非西定、多奈哌齐、加兰他敏、美金刚胺和利凡斯的明组成的组的CNS药物;选自由青霉素、青霉素V、氟氯西林、替莫西林、阿莫西林、氨苄西林、复方阿莫西林、复方氟氯西林、哌拉西林、替卡西林、匹美西林、头孢菌素类、头孢克洛、头孢羟氨苄、头孢氨苄、头孢克肟、头孢噻肟、头孢拉定、头孢他啶、头孢呋辛、厄他培南、亚胺培南、美罗培南、氨曲南、四环素、去甲金霉素、多西环素、赖甲环素、米诺环素、土霉素、替加环素、庆大霉素、丁胺卡那霉素、新霉素、妥布霉素、红霉素、阿奇霉素、克拉霉素、泰利霉素、克林霉素、氯霉素、夫西地酸、万古霉素、替考拉宁、达托霉素、利奈唑胺、奎奴普丁、多黏菌素E、复方磺胺甲基异恶唑、磺胺嘧啶、甲氧苄啶、卷曲霉素、环丝氨酸、乙胺丁醇、异烟肼、吡嗪酰胺、利福布汀、利福平、链霉素、氨苯砜、氯法齐明、甲硝唑、替硝唑、环丙沙星、左氧氟沙星、莫西沙星、萘啶酸、诺氟拉星、诺氟沙星、呋喃妥因、乌洛托品马尿酸盐、两性霉素、阿尼芬净、卡泊芬净、氟康唑、氟胞嘧啶、灰黄霉素、依他康唑、酮康唑、米卡芬净、制霉菌素、泊沙康唑、特比萘芬、伏立康唑、阿巴卡韦、去羟肌苷、恩曲他滨、拉米夫定、司他夫定、替诺福韦酯、齐多夫定、阿扎那韦、地瑞那韦、福沙那韦、印地那韦、罗平奈尔、奈非那韦、利托那韦、沙奎那韦、替拉那韦、依法韦仑、依曲韦林、奈韦拉平、恩夫韦地、马拉维若、雷特格韦、阿昔洛韦、泛昔洛韦、异丙肌苷、缬昔洛韦、西多福韦、更昔洛韦、膦甲酸、缬更昔洛韦、阿德福韦酯、恩替卡韦、替比夫定、金刚烷胺、奥司他韦、扎那米韦、帕利珠单抗、利巴韦林、蒿甲醚、氯喹、甲氟喹、伯氨喹、氯胍、乙胺嘧啶、奎宁、强力霉素、二氯尼特糠、甲硝哒唑、替硝唑、米帕林、葡萄糖酸锑钠、阿托伐醌、依地酸戊脒、甲苯咪唑和哌嗪组成的组的抗感染药物;选自由苯托品、丙环啶、比哌立登、金刚烷胺、溴隐亭、培高利特、恩他卡朋、托卡朋、司来吉兰、普拉克索、布地奈德、福莫特罗、富马酸喹硫平、奥氮平、匹格列酮、孟鲁司特、唑来膦酸、缬沙坦、拉坦前列素、依贝沙坦、氯吡格雷、阿托西汀、右苯丙胺、利他灵、莫达非尼、博来霉素、放线菌素、柔红霉素、伊达比星、米托霉素、米托蒽醌、阿扎胞苷、卡培他滨、克拉屈滨、氯法拉滨、阿糖胞苷、氟达拉滨、氟尿嘧啶、吉西他滨、巯嘌呤、甲氨喋呤、奈拉滨、培美曲塞、雷替曲塞、硫鸟嘌呤、阿扑吗啡、倍他米松、可的松、地夫可特、地塞米松、氢化可的松、甲基泼尼松龙、泼尼松龙、曲安奈德、环孢素、西罗莫司、他克莫司、干扰素α和干扰素β组成的组的其它药物。
[0137] 因此,本公开的治疗性制剂可以进一步包含一种或多种额外的治疗剂,例如下面描述的任何治疗剂。在一些实施方式中,组合物作为包括药学上可接受的载体的无菌药物组合物的一部分供应。包含额外的治疗剂的这种组合物可以呈任何合适的形式(取决于将其施用给患者的期望方法)。在一些实施方式中,共同施用本公开的活性成分与一种或多种额外的治疗剂,尽管不一定以单一制剂与一种或多种额外的治疗剂组合。在一些实施方式中,本公开的活性成分通过一种施用途径施用,而共同施用的额外治疗剂通过第二施用途径施用。例如,本公开的活性成分可以口服施用、粘膜施用、舌下施用、颊施用等,而共同施用的一种或多种额外治疗剂通过肠胃外、静脉内等施用。
[0138] 可以与本发明组合物组合的化合物的示例包括抗风湿药物、抗炎剂、化疗剂、放疗剂、免疫抑制剂、干扰素、基于干扰素的化疗剂或细胞毒性药物。
[0139] 抗风湿药物包括但不限于金诺芬、硫唑嘌呤、氯喹、D-青霉胺、硫代苹果酸金钠羟基氯喹、硫代苯酸金钠和柳氮磺胺吡啶甲氨蝶呤。
[0140] 抗炎剂包括但不限于地塞米松、颇得斯安、美沙拉嗪、阿肠克锭、磷酸可待因、苯甲酸盐、芬布芬、萘普生、双氯芬酸、依托度酸和吲哚美辛、阿司匹林和布洛芬以及其它非甾体和抗炎剂(NSAIDS)。
[0141] 化学治疗剂包括但不限于放射性分子、毒素,也称为细胞毒素或细胞毒性剂(其包括任何试剂即对细胞存活有害的)、试剂和含有化疗化合物的脂质体或其它囊泡。合适的化疗剂的示例包括但不限于1-去氢睾酮、5-氟尿嘧啶达卡巴嗪、6-巯基嘌呤、6-硫鸟嘌呤、放线菌素D、阿霉素、阿地白介素、烷化剂、别嘌呤醇钠、六甲蜜胺、氨磷汀、阿纳托唑、安曲霉素(AMC)),抗有丝分裂剂、顺式二氯二氨铂(II)(DDP)顺铂)、二氨基二氯铂、蒽环类、抗生素、抗代谢物、天冬酰胺酶、BCG活菌(膀胱内)、倍他米松磷酸钠和醋酸倍他米松、比卡鲁胺、博来霉素硫酸盐、白消安、甲酰四氢叶酸钙、卡奇霉素、卡培他滨、卡铂、洛莫司汀(CCNU)、卡莫司汀(BSNU)、苯丁酸氮芥、顺铂、克拉屈滨、秋水仙碱、缀合的雌激素、环磷酰胺、环磷酰胺、阿糖胞苷、阿糖胞苷、细胞松弛素B、环磷氮介、达卡巴嗪、更生霉素、更生霉素(以前称为放线菌素)、盐酸柔红霉素、柔毛霉素柠檬酸盐、地尼白介素、右雷佐生、二溴甘露醇、二羟基蒽二酮、多西他赛、甲磺酸多拉司琼、盐酸多柔比星、屈大麻酚、大肠杆菌L-天冬酰胺、依米丁、依泊汀-α、欧文氏菌L-门冬酰胺酶、酯化雌激素、雌二醇、雌莫司汀磷酸钠、溴化乙锭、乙炔雌二醇、依替膦酸、依托泊苷枸橼酸盐因子、磷酸依托泊苷、非格司亭、氟尿苷、氟康唑、磷酸氟达拉滨、氟尿嘧啶、氟他胺、亚叶酸、盐酸吉西他滨、糖皮质激素、醋酸戈舍瑞林、短杆菌肽D、盐酸格拉司琼、羟基脲、盐酸伊达比星、异环磷酰胺、干扰素α-2b、盐酸伊立替康、来曲唑、亚叶酸钙、醋酸亮丙瑞林、盐酸左旋咪唑、利多卡因、洛莫司汀、美登木素、盐酸氮芥、醋酸甲羟孕酮、醋酸甲地孕酮、盐酸美法仑、巯基嘌呤、美司钠、甲氨蝶呤、甲基睾酮、光神霉素、丝裂霉素C、米托坦、米托蒽醌、尼鲁米特、醋酸奥曲肽、盐酸恩丹西酮、紫杉醇、帕米膦酸二钠、喷司他汀、盐酸匹鲁卡品、普利霉素、具有卡氯芥植入物的聚苯丙生、卟吩姆钠、普鲁卡因、盐酸甲基苄肼、普萘洛尔、利妥昔单抗、沙莫司亭、链脲霉素、他莫昔芬、紫杉酚、替尼泊苷、鬼臼噻吩甙、睾酮内酯、丁卡因、噻替派、苯丁酸氮芥、硫鸟嘌呤、塞替派、盐酸托泊替康、枸橼酸托瑞米芬、曲妥珠单抗、维甲酸、戊柔比星、硫酸长春碱、硫酸长春新碱和酒石酸长春瑞滨。
[0142] 在本公开的其它方面,本公开的活性成分与TNF-α拮抗剂或抗TNF-α抗体组合施用。这种TNF-α拮抗剂的示例包括但不限于可溶性TNF-α受体;依那西普(Immunex)或其片段、衍生物或类似物;英夫利昔单抗( Centacor)或其衍生
物、类似物或抗原结合片段;已知通过干扰素-γ活化的巨噬细胞TNFR-IgG阻断TNF-α产生的阿达木单抗(Humira和Exemptia),IL-10;鼠产品TBP-1;疫苗CytoTAb(Protherics);反义分子104838(ISIS);肽RDP-58(SangStat);沙利度胺(Celgene);CDC-801(Celgene);DPC-
333(Dupont);VX-745(Vertex);AGIX-4207(AtheroGenics);ITF-2357(Italfarmaco);NPI-
13021-31(Nereus);SCIO-469(Scios);TACE靶向剂(Immunix/AHP);CLX-120500(Calyx);噻唑菌(Dynavax);金诺芬(Ridaura)(SmithKline Beecham Pharmaceuticals);奎纳克林(mepacrine dichlorohydrate);替尼达普(Enablex);黑色素(Large Scale Biological)和Uriach的抗p38MAPK剂。
[0143] 在本公开的另一方面,本公开的活性成分与雷帕霉素或类似的大环抗生素组合施用。如本文所用的,雷帕霉素包括雷帕霉素及其所有类似物、衍生物和缀合物,以及具有与雷帕霉素相同的药理学性质的其它亲免疫因子包括TOR或mTOR的抑制(哺乳动物雷帕霉素靶标)(例如,充当TOR激酶抑制剂)。可以用作一种或多种药物或治疗剂的其它免疫抑制剂包括但不限于环孢霉素、他克莫司(FK-506)、硫唑嘌呤和霉酚酸吗啉乙酯。
[0144] 可与本公开的活性成分组合的其它治疗剂包括血管生成剂,例如血管内皮生长因子(VEGF)和成纤维细胞生长因子(FGF);血管紧张素受体阻断剂;一氧化氮供体;反义寡核苷酸及其组合;细胞周期抑制剂,mTOR抑制剂和生长因子受体信号转导激酶抑制剂;类视黄醇;周期性CDK抑制剂;HMG辅酶还原酶抑制剂(例如他汀类药物)和蛋白酶抑制剂。
[0145] TNF抑制剂
[0146] 用于本发明的方法和组合物中的肿瘤坏死因子(TNF)抑制剂,特别是TNFα抑制剂包括干扰TNFα活性的任何试剂。在一种优选实施方式中,TNFα抑制剂可以中和TNFα活性,特别是与氧化性应激疾病和障碍相关的有害TNFα活性,如[参见定义],以及相关的并发症和症状。
[0147] 如本文所用,术语“人TNFα”(在本文中缩写为hTNFα,或简称为hTNF)旨在表示以17kD分泌形式和26kD膜结合形式存在的人细胞因子,其生物活性形式由非共价结合的17kD分子的三聚体组成。例如,在Pennica,D.,等(1984)Nature 312:724-729;Davis,J.M.,等(1987)Biochemistry 26:1322-1326和Jones,E.Y.,等(1989)Nature 338:225-228中进一步描述了hTNFα的结构。术语人TNFα旨在包括重组人TNFα(rhTNFα),其可通过标准重组表达方法制备或商购(例如购自R&D Systems,Minneapolis,Minn.)。本文的TNFα也被等同称为TNF。
[0148] 术语“TNFα抑制剂”是指干扰TNFα活性的试剂。该术语还包括本文所述的每种抗-TNFα人抗体和抗体部分以及美国专利号6,090,382;6,258,562;6,509,015和美国专利号7,223,394中描述的那些。在一种实施方式中,本发明中使用的TNFα抑制剂是抗TNFα抗体或其片段,包括英夫利昔单抗( Johnson和Johnson;描述于美国专利号5,656,272,
其通过引用并入本文)、CDPS71(人源化单克隆抗TNF-αIgG4抗体)、CDP870(人源化单克隆抗TNF-α抗体片段),抗TNF dAb的(Peptech)、CNTO148(戈利木单抗;Medarex和Centocor,参见WO02/12502)和阿达木单抗( Abbott实验室,人抗TNFmAb,作为“D2E7”描述于美国专利号6,090,382)。可用于本发明的额外的TNF抗体描述于美国专利号6,593,458;6,498,
237;6,451,983和6,448,380,其中的每一个通过引用并入本文。在另一种实施方式中,TNF抑制剂是TNF融合蛋白,例如,依那西酱( Amgen;描述于WO91/03553和WO09/406,
476,其通过引用并入本文)。在另一种实施方式中,TNFα抑制剂是重组TNF结合蛋白(r-TBP-
1)(Serono)。
[0149] 如本文所用,术语“抗体”旨在表示由四条多肽链,通过二硫键相互连接的两条重链(H)和两条轻链(L)组成的免疫球蛋白分子。每条重链由重链可变区(本文缩写为HCVR或VH)和重链恒定区组成。重链恒定区由三个结构域CH1、CH2和CH3组成。每条轻链由轻链可变区(本文缩写为LCVR或VL)和轻链恒定区组成。轻链恒定区由一个结构域CL组成。VH和VL区可以进一步细分成称为互补决定区(CDR)的高变区,其中散布有更保守的区域,称为框架区(FR)。每个VH和VL由三个CDR和四个FR组成,按照以下顺序从氨基末端排列到羧基末端:FR1、CDR1、FR2、CDR2、FR3、CDR3、FR4。本发明的抗体进一步详细描述于美国专利号6,090,
382;6,258,562和6,509,015,其中的每一个通过引用整体并入本文。
[0150] 如本文所用,术语“人抗体”旨在包括具有源自人种系免疫球蛋白序列的可变区和恒定区的抗体。本发明的人抗体可以包括不由人种系免疫球蛋白序列编码的氨基酸残基(例如通过体外随机或位点特异性诱变或通过体内体细胞诱变引入的突变),例如在CDR中且特别是CDR3。然而,如本文所用,术语“人抗体”并不旨在包括其中源自另一哺乳动物物种如小鼠的种系的CDR序列已被移植到人框架序列上的抗体。
[0151] 如本文所用,术语“重组人抗体”旨在包括通过重组手段制备、表达、产生或分离的所有人抗体,例如使用转染到宿主细胞中的重组表达载体表达的抗体(如下文所述),分离自重组组合人抗体文库的抗体(如下文所述),分离自对人免疫球蛋白基因转基因的动物(例如小鼠)的抗体(参见例如Taylor等(1992)Nucl.Acids Res.20:6287),或通过涉及将人免疫球蛋白基因序列剪接至其它DNA序列的任何其它手段制备、表达、产生或分离的抗体。这样的重组人抗体具有源自人种系免疫球蛋白序列的可变区和恒定区。然而,在某些实施方式中,使这样的重组人抗体进行体外诱变(或当使用人Ig序列转基因动物时,体内体细胞诱变),并且因此重组抗体的VH和VL区的氨基酸序列是源自人种系VH和VL序列并且与其相关的序列,其可能不是天然存在于体内人抗体种系库内的序列。
[0152] 在一种实施方式中,术语“TNFα抑制剂”不包括英夫利昔单抗。在另一种实施方式中,术语“TNFα抑制剂”不包括阿达木单抗和英夫利昔单抗。
[0153] 在一种实施方式中,术语“TNFα抑制剂”不包括依那西普,以及任选的阿达木单抗、英夫利昔单抗、以及阿达木单抗和英利昔单抗。
[0154] 在一种实施方式中,术语“TNFα抗体”不包括英夫利昔单抗。在一种实施方式中,术语“TNFα抗体”不包括阿达木单抗。在另一种实施方式中,术语“TNFα抗体”不包括阿达木单抗和英夫利昔单抗。
[0155] 在一种实施方式中,本发明特征在于用于治疗或者确定治疗克罗恩病的TNFα抑制剂的功效的应用和组合物,其中TNFα抗体是以高亲和性和低解离率结合人TNFα并且还具有高中和能力的分离的人抗体或其抗原结合部分。优选地,用于本发明的人抗体是重组中和人抗hTNFα抗体。本发明最优选的重组中和抗体在本文中被称为D2E7,也被称为或阿达木单抗(D2E7VL区的氨基酸序列示于SEQ ID NO:1中;D2E7VH区的氨基
酸序列示于SEQ ID NO:2中)。D2E7(阿达木单抗/ )的性质已经在本文中描述,
并且通过引用各自并入本文。本发明的方法还可以使用经历了用于治疗类风湿性关节炎的临床测试的嵌合和人源化鼠抗-hTNFα抗体(参见例如,Elliott,M.J.,等(1994)Lancet 
344:1125-1127;Elliot,M.J.,等(1994)Lancet 344:1105-1110;Rankin,E.C.,等(1995)Br.J.Rheumatol.34:334-342)。
[0156] 因此,在一方面,本公开提供了用于调控受试者的氧化还原状态的toll样受体(TLR)激动剂组合物,所述组合物包含:(a)包含细菌的至少一种或多种裂解物和/或裂解物级分的TLR激动剂,其中,TLR激动剂活化至少一种或多种TLR或NLR;(b)用于增强组合物吸收的任选促进剂;和(c)用于增加组合物体积的任选载体,其中,向受试者施用有效量的组合物可测量地降低受试者中的氧化性应激水平。在一些实施方式中,激动剂活化至少两种不同的TLR和/或NLR。在一些实施方式中,细菌是革兰氏阳性细菌或革兰氏阴性细菌。
[0157] 在一些实施方式中,组合物与药剂组合施用以增强药剂的活性。在一些实施方式中,组合物与药剂组合施用以降低药剂的副作用。在一些实施方式中,药剂的副作用是氧化性应激。
[0158] 在另一方面,本公开提供了用于调控受试者的氧化还原状态的方法,该方法包括向有需要的受试者施用治疗有效量的本文公开的任何裂解物或裂解物级分组合物。在一些实施方式中,理想地通过测量异前列烷浓度的变化或通过包括但不限于受试者中的基因表达的其它方法评估氧化还原状态调控。在一些实施方式中,受试者是哺乳动物。在一些实施方式中,哺乳动物是人。在一些实施方式中,受试者是非哺乳动物的动物,诸如鱼类、家禽、甲壳类动物和昆虫例如果蝇。在一些实施方式中,氧化还原状态是氧化性的并导致氧化性应激。在一些实施方式中,人的氧化性应激与创伤后应激障碍相关。
[0159] 在另一方面,本公开提供了调控受试者的氧化还原状态的方法,所述方法包括以下步骤:(a)向有需要的受试者反复施用时间上分开且由组合物组成的剂量,所述组合物包含:(i)包含至少一种裂解物和/或裂解物级分的toll样受体(TLR)激动剂,其中,所述激动剂活化至少一种或多种不同的TLR;(ii)用于增强组合物吸收的任选促进剂;和(iii)用于增加组合物体积的任选载体,以及(b)测量受试者的体液以检测氧化性应激水平的变化。在一些实施方式中,TLR激动剂活化至少三种不同的TLR。在一些实施方式中,TLR激动剂包含来自单个细菌物种的裂解物和/或裂解物级分和/或细胞壁级分。在一些实施方式中,TLR激动剂包含来自至少两个细菌物种或品系的裂解物和/或裂解物级分。
[0160] 在一些实施方式中,对体液进行测量以评估受试者中异前列烷浓度的变化。在一些实施方式中,通过包括但不限于受试者中的基因表达的方法间接测量异前列烷浓度的变化。在一些实施方式中,受试者是哺乳动物。在一些实施方式中,哺乳动物是人。在一些实施方式中,受试者是除哺乳动物以外的动物,例如但不限于鱼类、家禽、甲壳类动物和昆虫例如果蝇。在一些实施方式中,人的氧化性应激与创伤后应激障碍相关。
[0161] 在另一方面,本公开提供了减少受试者的尿液或血液中异前列烷的量的方法,所述方法包括以下步骤:(a)确定受试者的尿液或血液中异前列烷的水平;(b)向受试者施用有效量的组合物,所述组合物包含:(i)包含来自细菌的至少一种细菌裂解物和/或裂解物级分的toll样受体(TLR)激动剂,其中,所述TLR激动剂活化至少一种或多种TLR或NLR;和(ii)用于增强组合物吸收的任选促进剂;以及(c)继续施用组合物直至受试者的尿液或血液中的异前列烷的水平减少。
[0162] 在另一方面,本公开提供了组合物,所述组合物包含:(a)能够活化至少一种或多种toll样受体(TLR)或Nod样受体(NLR)的细菌裂解物和/或裂解物级分;(b)用于增强组合物吸收的任选促进剂;和(c)用于增加组合物体积的任选载体。
[0163] 在另一方面,本公开提供了包含本文公开的任何组合物的药物制剂。在一些实施方式中,所述药物制剂被配制用于颊或舌下施用。在一些实施方式中,药物制剂被配制成在施用后不少于1分钟内溶解。
[0164] 在另一方面,本公开提供了生产细菌裂解物的方法,该方法包括以下步骤:(a)将生长培养基中的革兰氏阳性细菌或革兰氏阴性细菌发酵至稳定生长期以产生发酵液;(b)从发酵液中收集细菌;(c)将收获的细菌进行巴氏杀菌;以及(d)用溶菌酶裂解巴氏杀菌的细菌以产生细菌裂解物。在一些实施方式中,在开始任何特定发酵之后,在生长周期的不同时间收获裂解物。在一些实施方式中,在特征确定的培养基中发酵细菌。
[0165] 在另一方面,本公开提供了根据方法产生的细菌裂解物,该方法包括以下步骤:(a)将生长培养基中的革兰氏阳性细菌或革兰氏阴性细菌发酵至稳定生长期以产生发酵液;(b)从发酵液中收集细菌;(c)将收获的细菌进行巴氏杀菌;以及(d)用溶菌酶裂解巴氏杀菌的细菌以产生细菌裂解物。在一些实施方式中,在开始任何特定发酵之后,在生长周期的不同时间收获裂解物。在一些实施方式中,在特征确定的培养基中发酵细菌。
[0166] 在另一方面,本公开提供了用于减轻与施用药剂相关的一种或多种氧化性应激相关副作用的方法,所述方法包括与药剂组合施用治疗有效量的组合物,所述组合物包含:(a)细菌的裂解物和/或裂解物级分;(b)用于增强组合物吸收的任选促进剂;和(c)用于增加组合物体积的任选载体;其中,同时或以任何顺序并通过相同或不同的施用途径施用药剂和裂解物组合物。在一些实施方式中,裂解物和/或裂解物级分活化至少一种或多种TLR或NLR。在一些实施方式中,裂解物和/或裂解物级分活化至少两种TLR和/或NLR。在一些实施方式中,裂解物和/或裂解物级分活化至少三种TLR和/或NLR。
[0167] 在一些实施方式中,一种或多种氧化性应激相关的副作用选自由以下组成的组:动脉/系统性高血压、关节炎、哮喘、动脉粥样硬化、特应性皮炎、癌症、膀胱癌、白血病、子宫癌、宫颈癌、头晕、恶心、呕吐、便秘、腹泻、失眠、嗜睡、眩晕、性欲减退、暂时昏迷、颤抖、黄疸、心律失常、心率增加、心率减慢、麻疹、抑郁症、临床抑郁症、脑缺血、支气管肺发育不良、心血管疾病、白内障、蜂窝组织炎、化疗副作用、慢性疲劳综合征、结肠炎、冠状动脉疾病、血脂异常、子痫、勃起功能障碍、共济失调、头痛、心力衰竭、血液透析副作用、肝硬化、高胆固醇血症、高同型半胱氨酸血症、高脂血症、间质性肺病、肺损害、黄斑变性、男性不育症、轻度认知障碍、心肌梗塞、心肌炎、肌病、神经病、肥胖症、骨关节炎、骨质疏松症、胰腺炎、牙周病、腹膜透析副作用、创伤后应激障碍、先兆子痫、牛皮癣、牛皮癣关节炎、肺动脉高压、放疗法副作用、反应性关节炎、呼吸窘迫综合征、横纹肌溶解症、风湿性疾病、败血症、睡眠呼吸暂停、中风、自杀念头、淀粉样变性、血栓形成、tau蛋白病、不稳定型心绞痛、尿毒症或静脉功能不全。
[0168] 在另一方面,本公开提供了用于治疗受试者中的氧化性应激相关疾病或病症的方法,所述方法包括向所述受试者施用治疗有效量的组合物,所述组合物包含:(a)能够活化至少一种或多种toll样受体(TLR)或Nod样受体(NLR)的细菌裂解物和/或裂解物级分;(b)用于增强组合物吸收的任选促进剂;和(c)用于增加组合物体积的任选载体。
[0169] 在一些实施方式中,氧化性应激相关的病症是无铜蓝蛋白血症、急性和慢性酒精性肝病、急性自身免疫性心肌炎、镰状细胞病急性胸部综合征、急性胰腺炎、急性呼吸窘迫综合征、酒精肝性疾病、肌萎缩侧索硬化、动脉/系统性高血压、石棉肺、哮喘、共济失调毛细血管扩张症、动脉粥样硬化、特应性皮炎、脑缺血、支气管肺发育不良、烧伤、某些癌症、体外循环、心血管疾病、白内障、蜂窝组织炎、化疗副作用、慢性疲劳综合征、慢性丙型肝炎、慢性肾病、慢性阻塞性肺病、慢性肾衰竭、结肠炎、冠状动脉疾病、克罗伊茨费尔特-雅各布病、克罗恩氏病、皮肤利什曼病、囊性纤维化、1型糖尿病、2型糖尿病、血脂异常、唐氏综合征、子痫、晚期肾脏疾病、勃起功能障碍、弗里德赖希共济失调、头痛、心力衰竭、幽门螺杆菌感染/炎症、血液透析副作用、肝硬化、人类免疫缺陷病毒感染、亨廷顿病、高压病、高胆固醇血症、高同型半胱氨酸血症、高脂血症、特发性肺纤维化、间质性肺病、缺血/再灌注损害、少年慢性关节炎、肾移植失败、白血病、肺癌、肺损害、黄斑变性、男性不育症、梅尼埃尔综合征、脑膜炎、轻度认知障碍、多发性硬化症、骨髓增生异常综合征、心肌梗塞、心肌炎、新生儿支气管肺发育不良、肥胖症、骨关节炎、骨质疏松症、胰腺炎、帕金森病、牙周病、腹膜透析副作用、光老化、创伤后应激障碍、先兆子痫、原发性胆汁性肝硬化、支气管肺疾病、早衰、牛皮癣、牛皮癣关节炎、肺动脉高压、放疗法副作用、反应性关节炎、肾细胞癌、呼吸窘迫综合征、早产儿视网膜病变、后束纤维化、风湿性疾病、类风湿性关节炎、结节病、败血症、镰状细胞贫血病、睡眠呼吸暂停、球形红细胞增多症、脊髓损害、中风、突触核蛋白病、系统性淀粉样变性、系统性红斑狼疮、系统性硬化症(硬皮病)、血栓形成、tau蛋白病、创伤性应激肺结核、不稳定型心绞痛、尿毒症、静脉功能不全、沃纳综合征和脑肝肾综合征。
[0170] 在另一方面,本公开提供了用于降低受试者的氧化性应激的方法,所述方法包括:(a)通过测量受试者的尿液或血液中异前列烷的量来确定受试者中的氧化性应激水平;(b)向受试者施用有效量的组合物,所述组合物包含:(i)包含来自革兰氏阴性细菌或革兰氏阳性细菌的至少一种裂解物和/或裂解物级分的toll样受体(TLR)激动剂,其中,所述TLR激动剂活化至少一种或多种不同的TLR或NLR;和(ii)用于增强组合物吸收的任选促进剂;以及(c)继续施用组合物直至氧化性应激水平降低,通过受试者尿液中异前列烷的减少量确定。
[0171] 在一些实施方式中,在任何上述方面中继续施用细菌裂解物直至受试者的尿液中异前列烷的量小于约3ng/mg肌酸酐,小于约2ng/mg肌酸酐,小于约1ng/mg肌酸酐或小于约0.5ng/mg肌酸酐。
[0172] 在另一方面,本公开提供了包含以下组合的药物制剂:(a)裂解物组合物,其包含(i)能够活化至少一种或多种toll样受体(TLR)或Nod样受体(NLR)的细菌裂解物和/裂解物级分;(ii)用于增强组合物吸收的任选促进剂;和(iii)用于增加组合物体积的任选载体;和(b)一种或多种药剂。在一些实施方式中,所述一种或多种药剂选自由以下组成的组:抗痉挛剂、运动兴奋剂、H2受体拮抗剂、抗毒蕈碱剂;螯合剂、前列腺素类似物、氨基水杨酸盐、皮质类固醇、影响免疫应答的药物、刺激性泻剂、影响胆汁组成和流动的药物、胆汁酸螯合剂、多巴胺拮抗剂、质子泵抑制剂、阿片类物质、阿片类物质受体拮抗剂、镇痛药、睡眠药物、强心苷、磷酸二酯酶抑制剂、噻嗪类、利尿剂、保钾利尿剂、醛固酮拮抗剂、渗透利尿剂、心律失常药物、β肾上腺素受体阻断药物、高血压药物、影响肾素-血管紧张素系统的药物、硝酸盐、钙阻断剂、抗心绞痛药物、外周血管扩张剂、拟交感神经剂、抗凝剂、鱼精蛋白、抗血小板药物、纤维蛋白溶解药物、抗纤维蛋白溶解药物、调控脂质药物、ω-3脂肪酸化合物、CNS药物、抗感染药物,或选自由以下组成的组的另一种药物:苯托品、丙环啶、比哌立登、金刚烷胺、溴隐亭、培高利特、恩他卡朋、托卡朋、司来吉兰、普拉克索、布地奈德、福莫特罗、富马酸喹硫平、奥氮平、匹格列酮、孟鲁司特、唑来膦酸、缬沙坦、拉坦前列素、依贝沙坦、氯吡格雷、阿托西汀、右苯丙胺、利他灵、莫达非尼、博来霉素、放线菌素、柔红霉素、伊达比星、米托霉素、米托蒽醌、阿扎胞苷、卡培他滨、克拉屈滨、氯法拉滨、阿糖胞苷、氟达拉滨、氟尿嘧啶、吉西他滨、巯嘌呤、甲氨喋呤、奈拉滨、培美曲塞、雷替曲塞、硫鸟嘌呤、阿扑吗啡、倍他米松、可的松、地夫可特、地塞米松、氢化可的松、甲基泼尼松龙、泼尼松龙、曲安奈德、环孢霉素、西罗莫司、他克莫司、干扰素α和干扰素β。
[0173] 在另一方面,本公开提供了制剂,例如药物制剂,其包含:(a)裂解物组合物,所述裂解物组合物包含(i)能够活化至少一种或多种toll样受体(TLR)或Nod样受体(NLR)的细菌裂解物和/或裂解物级分;(ii)用于增强组合物吸收的任选促进剂;和(iii)用于增加组合物体积的任选载体;和(b)分离的人抗TNFα抗体或其抗原结合片段或TNF抑制剂。在一些实施方式中,人抗TNFα抗体或其抗原结合片段是阿达木单抗。在一些实施方式中,本公开提供了该方面的组合制剂在制备用于治疗受试者的类风湿性关节炎(RA)或迟发性RA的药物中的用途。在一些实施方式中,如本文所公开,本公开提供了用于治疗受试者的类风湿性关节炎(RA)或迟发性RA的方法,所述方法包括向受试者施用治疗有效量的该方面的组合制剂。在一些实施方式中,受试者已经超过50岁。在一些实施方式中,将人抗TNFα抗体或其抗原结合片段以双周给药方案施用于受试者。在一些实施方式中,将人抗TNFα抗体或其抗原结合片段以30mg或更高的剂量施用于受试者。在一些实施方式中,TNFα抑制剂是TNFα融合蛋白。在一些实施方式中,TNFα融合蛋白是依那西普。在一些实施方式中,抗TNFα抗体或其抗原结合片段是英夫利昔单抗或戈利木单抗。在一些实施方式中,抗TNFα抗体或其抗原结合片段是阿达木单抗。
[0174] 在另一个方面,本公开提供了抑制人受试者中氧化性应激相关的疾病或障碍进展的方法,所述受试者具有与对TNFα活性有害的障碍相关的氧化性应激相关的疾病或障碍。该方法包括:向具有氧化性疾病或障碍的受试者施用本公开的裂解物、裂解物级分和/或细胞壁级分以及分离的人抗TNFα抗体或其抗原结合部分,使得受试者中的氧化性应激进展受-7
到抑制,其中,人抗TNFα抗体或其抗原结合部分在标准体外L929测定中以1×10 M或更低的IC50中和人TNFα细胞毒性。在一些实施方式中,本公开的裂解物和人抗TNFα或其抗原结合部分在不同施用方案下的不同时间施用。在一些实施方式中,人抗TNFα抗体是戈利木单抗或其抗原结合部分。在一些实施方式中,人抗TNFα抗体是阿达木单抗或其抗原结合部分。在一些实施方式中,将人抗TNFα抗体或其抗原结合部分以双周给药方案施用于受试者。在一些实施方式中,所述方法还包括向所述受试者施用额外的治疗剂。在一些实施方式中,将本公开的裂解物施用至少24周的时间。在一些实施方式中,将抗TNFα抗体或其抗原结合部分施用至少24周的时间。在一些实施方式中,本公开的裂解物、抗TNFα抗体或其抗原结合部分、或两者通过一种或多种不同机制的组合来修复或防止对受试者的氧化性损伤。
[0175] 在任何本文公开的方法或组合物的一些实施方式中,所述细菌是革兰氏阳性或革兰氏阴性细菌。在任何本文公开的方法或组合物的一些实施方式中,革兰氏阳性细菌选自由乳酸杆菌(Lactobacillaceae)科的细菌、链球菌(Streptococcaceae)科的细菌、双歧杆菌(Bifidobacteriaceae)科的细菌和芽孢杆菌(Bacillaceae)科的细菌组成的组。在一些实施方式中,革兰氏阳性细菌选自由凝结芽孢杆菌(Bacillus coagulans)、芽孢乳酸杆菌(Lactobacillus sporogenes)、嗜热链球菌(Streptococcus thermophilus)、动物双歧杆菌(Bifidobacterium animalis)、双歧杆菌(Bifidobacterium)、动物(animalis)、亚种动物(subspecies animalis)、婴儿双歧杆菌(Bifidobacterium infantis)、长双歧杆菌(Bifidobacterium longum)、短双歧杆菌(Bifidobacterium breve)、嗜酸乳酸杆菌(Lactobacillus acidophilus)、植物乳酸杆菌(Lactobacillus plantarum)、干酪乳酸杆菌(Lactobacillus casei)、德氏乳酸杆菌(Lactobacillus delbrueckii)、德氏乳酸杆菌保加利亚亚种(Lactobacillus delbrueckii subspecies bulgaricus)、乳酸乳球菌(Lactococcus lactis)、乳酸乳球菌乳酸亚种(Lactococcus lactis subspecies lactis)、乳酸链球菌(Streptococcus  lactis)、嗜热链球菌(Streptococcus thermophilus)、乳双歧杆菌(Bifidobacterium lactis)、短双歧杆菌(Bifidobacterium breve)、乳酸片球菌(Pediococcus aciditactici)和瑞士乳酸杆菌(Lactobacillus hetveticus)组成的组。
[0176] 在本文公开的任何方法或组合物的一些实施方式中,革兰氏阴性细菌选自由假单胞菌(Pseudomonas)属、克雷伯菌(Klebsiella)属、黄单胞菌(Xanthomonas)属、志贺氏菌(Shigella)属和肠杆菌(Enterobacter)属的细菌组成的组。在一些实施方式中,革兰氏阴性细菌选自由催产克雷伯菌(Klebsiella oxytocia)、福氏志贺氏菌(Shigella flexneri)、野油菜黄单胞菌(Xanthomonas campestris)和荧光假单胞菌(Pseudomonas flourescens)组成的组。
[0177] 在本文公开的任何方法或组合物(包括制剂)的一些实施方式中,TLR激动剂、裂解物、裂解物级分或细胞壁级分活化TLR2、TLR3、TLR4、TLR5、TLR7、TLR8、TLR9、NOD1和NOD2中的至少一种或多种。在一些实施方式中,TLR激动剂、裂解物、裂解物级分或细胞壁级分活化TLR2、TLR3、TLR4、TLR5、TLR7、TLR8、TLR9、NOD1和NOD2中的两种或更多种。在一些实施方式中,TLR激动剂、裂解物、裂解物级分或细胞壁级分活化TLR2和TLR4。在一些实施方式中,TLR激动剂、裂解物、裂解物级分或细胞壁级分活化TLR2、TLR3、TLR4、TLR5、TLR7、TLR8、TLR9、NOD1和NOD2中的三种或更多种。
[0178] 在本文公开的任何方法或组合物(包括制剂)的一些实施方式中,促进剂选自由氨基酸、氨基糖和糖组成的组。在一些实施方式中,载体选自由粘合剂、胶基及其组合组成的组。在一些实施方式中,胶基包含至少一种疏水性聚合物和至少一种亲水性聚合物。在一些实施方式中,粘合剂选自由糖、糖醇及其组合组成的组。在一些实施方式中,糖醇选自由甘露糖醇、山梨糖醇、木糖醇及其组合组成的组。
[0179] 在一些实施方式中,组合物被制造成选自由锭剂、口香糖、咀嚼片、糖果和溶解片组成的组的剂型。在一些实施方式中,剂型将TLR激动剂递送至口腔粘膜。在一些实施方式中,口腔粘膜选自由舌下粘膜、颊黏膜及其组合组成的组。
[0180] 在本文公开的任何方法和组合物的一些实施方式中,组合物被配制用于口腔粘膜递送;在一些实施方式中,组合物被配制用于舌下或颊递送。在一些实施方式中,组合物被配制成在施用后不少于1分钟内溶解。
[0181] 实施例
[0182] 下面的实施例说明了本发明的具体实施方式及其各种用途。它们仅仅是为了解释的目的而提出的,并不被视为限制本发明。
[0183] 实施例1:用于TLR激动剂组合物的活性成分的制备
[0184] 如何配制组合物的示例包括以下过程。
[0185] 活性成分。如下所述,活性成分源自细菌发酵和细胞分离过程。德氏乳酸杆菌保加利亚亚种(Lactobacillus delbrueckii,ssp.bulgaricus)(本文中称为L.bulgaricus)是该实施例中使用的生物体,但是该细菌生物体可以是任何革兰氏阳性或革兰氏阴性细菌或两者。
[0186] 德氏乳酸杆菌保加利亚亚种(Lactobacillus delbrueckii ssp bulgaricus)在包含1.5%酪蛋白水解产物、1%酵母提取物、3%乳糖、0.2%乙酸钠、0.02%甲酸钠、0.01%5-肌苷酸二钠、0.01%硫酸锰、0.05%硫酸镁和0.05%聚山梨醇酯80,pH值6.4的生长培养基中发酵。将接种的培养基在37℃下温育直至发酵达到稳定生长,通过代谢停止确定。将发酵液冷却至4℃并通过在约4000-4500×g下离心收获。
[0187] 使用冷冻水并再次通过离心使细胞流动来将浓缩的细胞连续洗涤两次。将洗过的细胞浓缩物在80℃巴氏杀菌45分钟。
[0188] 巴氏杀菌后,处理细胞浓缩物以破坏细胞壁,从而裂解细菌并暴露TLR激动剂。使用浓度为3重量%的鸡蛋清溶菌酶在40℃保持7小时以完成细菌细胞壁的破坏。将得到的裂解物冷冻并冻干。
[0189] 将冻干物质与促进剂(例如盐酸N-乙酰葡糖胺(NAG))混合以形成裂解的德氏乳酸杆菌保加利亚亚种(Lactobacillus delbrueckii subsp.Bulgaricus)和NAG的混合物。任选地,酌情添加其它制剂赋形剂以产生固体形式的丸剂或粉末。然后将该产品用于以下筛选测试。
[0190] 实施例2:TLR筛选测定
[0191] 通过评估表达给定TLR或Nod样受体(NLR)的HEK293细胞中的NF-κB活化来测试Toll样受体(TLR)刺激。在7种不同的人TLR(TLR2、3、4、5、7、8和9(Invivogen,San Diego,CA))以及在两种不同的人NLR(含有核苷酸结合寡聚化结构域的蛋白质1和2(NOD1和NOD2))上测试样品的活性。如下所述,在TLR或NLR细胞上以1/100储备溶液的最终浓度测试每种配体,并且与对照配体进行比较。该步骤重复进行三次。
[0192] 实施例中使用的对照配体、对照细胞系和样品如表1所示。
[0193] 表1:用于配体筛选测试的对照配体和对照细胞系信息
[0194]
[0195]
[0196] 通常程序。通过评估表达给定TLR的HEK293细胞中的NF-κB活化来测试筛选中的TLR刺激。分泌的碱性磷酸酶报告基因受转录因子NF-κB诱导的启动子控制。通过评估表达给定TLR或NLR的HEK293细胞中的NF-κB活化来测试筛选中的TLR刺激。基于NF-κB的活化,该报告基因允许通过TLR/NLR监测信号传导。在含有合适细胞(50000-75000个细胞/孔)的96孔板(200μL总体积)中,将20μL样品(裂解产物)或阳性对照配体加入孔中。添加到孔中的培养基被设计用于检测NFκB诱导的SEAP(分泌的碱性磷酸酶)表达。温育16-20小时后,在Molecular Devices Spectra Max 340PC吸光度检测器上读取650nm处的OD(光密度)并记录。
[0197] 这些实验的筛选结果如图2所示。这些结果显示,如上所述产生的典型裂解物对于至少TLR2(和较少程度的TLR4)和NOD2是强激动剂。
[0198] 实施例3:过程变量对TLR信号传导的变化的影响
[0199] 通过观察某些过程变化对TLR信号传导的影响,注意到可能改变TLR信号模式。
[0200] 图3显示了细胞形态具有革兰氏阳性生物体的TLR信号上的差异。与杆菌生物体保加利亚乳酸杆菌(L.bulgaricus)相比,来自乳酸片球菌(Pediococcus acidilactici,一种球菌生物体)的裂解物产生更高的TLR4和更低的NOD2信号,而乳酸片球菌(P.acidilactici)产生的TLR2信号仅略高于保加利亚乳酸杆菌(L.bulgaricus)产生的TLR2信号。在乳酸片球菌(P.acidilactici)中NOD2活化显著降低,这反映了在球菌中发现的较低胞壁酰肽。
[0201] 如图4所示,TLR信号模式也受到凝结芽孢杆菌(Bacillus coagulans)裂解物的培养收获时间的影响。使用含pH值为6.5的标准酵母提取物/葡萄糖培养基的摇瓶,在45℃和250rpm下温育培养凝结芽孢杆菌(Bacillus coagulans)。培养物的收获遵循实施例1的裂解物生产过程,但根据生长阶段而改变发酵后的细菌收获时间:对数中期、对数后期、早期稳定期、中期稳定期和后期稳定期由OD、底物耗尽、代谢物产生和EPS确定。一般来说,这些数据表明TLR活化特异性可以通过改变发酵后的细菌收获时间来改变。例如,从对数中期收获的培养物产生的裂解物活化除了TLR4之外的所有测试靶标,并且对于TLR2、3、5、8、9和NOD1具有较高信号。随着培养物离开对数期并进入稳定期,TLR信号强度降低,在后期稳定期完全停止TLR信号。在收获的所有阶段接种细胞培养物,并注意到细胞计数在所有时间点大于5×108CFU/ml。目视检查培养物时没有发现内生孢子。来自裂解物的TLR效应来自营养细胞。在后期稳定期培养物的侧壁上注意到大量的EPS。
[0202] 图5显示了从选定的革兰氏阳性生物体的裂解物获得的TLR信号模式。将嗜热链球菌(Streptococcus thermophilus)、瑞士乳酸杆菌(Lactobacillus helveticus)、嗜酸乳酸杆菌(Lactobacillus acidophilus)、植物乳酸杆菌(Lactobacillus plantarum)、动物双歧杆菌乳亚种(Bifidobacterium animalis subsp lactis)和枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)在含pH值为6.5的标准酵母提取乳糖/酪蛋白水解物培养基的摇瓶中在37℃和110rpm下培养。将植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)、动物双歧杆菌乳亚种(B.lactis)和枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)在含pH值为6.5的酵母提取物培养基/葡萄糖培养基的摇瓶中在37℃和110rpm下培养,而枯草芽孢杆菌(B.subtilis)在37℃和
250rpm下温育。乳酸双歧杆菌(B.lactis)还将0.05%的盐酸半胱氨酸加入到培养基中。培养物的收获遵循实施例1的裂解物生产过程。如实施例4中指出的,嗜热链球菌(S thermophilus,一种球菌生物体)产生类似于其它球菌培养物乳酸片球菌
(P.acidilactici)的TLR信号模式(较高TLR2和TLR4,以及较低NOD2)。然而,虽然乳双歧杆菌(B.lactis)与保加利亚乳杆菌(L.bulgaricus)形态不同,但具有类似的TLR模式。在瑞士乳酸杆菌(L.helviticus)、嗜酸乳酸杆菌(L.acidophilus)、植物乳酸杆菌(L.plantarum)和枯草芽孢杆菌(B.subtilis)的革兰氏阳性杆菌培养物中,TLR模式几乎没有相似性。瑞士乳酸杆菌(L.helviticus)产生类似于保加利亚乳杆菌(L.bulgaricus)的TLR模式的TLR模式。尽管嗜酸乳酸杆菌(L.acidophilus)信号强度较低,但产生的结果与球菌产生的结果相似。当收获和浓缩培养物时,嗜酸乳酸杆菌(L.acidophilus)不产生明显的EPS,而保加利亚乳杆菌(L.bulgaricus)、瑞士乳酸杆菌(L.helviticus)和乳双歧杆菌(B.lactis)都产生明显的EPS,并且都产生类似的TLR信号模式。植物乳酸杆菌(L.plantarum)裂解物具有与其它革兰氏阳性生物体非常不同的TLR信号模式,其中所有TLR信号都被沉默。信号模式的这种沉默从发酵的特征来看并不明显,但已知植物乳酸杆菌(L.plantarum)产生可代表TLR信号减少的许多代谢物。除了产生较高的TLR4活化外,枯草芽孢杆菌(B.subtilis)具有与对数期收获的凝结芽孢杆菌(B.coagulans)培养物相似的TLR模式。总体而言,革兰氏阳性生物体的TLR信号模式根据生物体的形态学、EPS产生和代谢物而变化。
[0203] 图6显示了从选定的革兰氏阴性生物体的裂解物获得的TLR信号模式。使用胰蛋白酶大豆肉汤在摇瓶中培养大肠杆菌(Escherichia coli)、催产克雷伯菌(Klebsiella oxytocia)、福氏志贺氏菌(Shigella flexneri)、荧光假单胞菌(Pseudomonas flourescens)和野油菜黄单胞菌(Xanthomonas campestris)。在37℃和250rpm下培养催产克雷伯菌(K.oxytocia)、大肠杆菌(E.coli)和福氏志贺氏菌(S.flexneri),同时在30℃和
250rpm下将荧光假单胞菌(P.flourescens)和野油菜黄单胞菌(Xanthomonas campestris)温育。使用补充有1%碳酸钙的酵母提取物/葡萄糖培养基培养野油菜黄单胞菌
(Xanthomonas campestris)。在收获之前,通过以500×g离心3分钟来除去CaCO3。从发酵液中收获培养物遵循实施例1的裂解物生产过程。令人惊奇且出乎意料的是,当以类似浓度测试时,除了TLR5和9外,来自革兰氏阴性生物体(包括大肠杆菌)的裂解物的TLR信号模式在信号强度上低于革兰氏阳性生物体的裂解物。一般来说,革兰氏阴性菌膜/细胞壁比革兰氏阳性细菌更容易破裂,这可能解释了更高的TLR9信号。观察到催产克雷伯菌(K.oxytocia)和野油菜黄单胞菌(X.campestris)在发酵过程中产生EPS,并且还产生相对高的TLR3、4和9活化,催产克雷伯菌(K.oxytocia)产生测试菌株的最高TLR2和NOD1活化。与非EPS生产菌株(S.flexneri)相比,EPS似乎改变了TLR信号模式。有趣的是,所有革兰氏阴性细菌在TLR测定中都具有显著的空细胞的NF-κB活化。将这种NF-κB活性从TLR信号中减去,并解释了荧光假单胞菌(P.flourescens)的TLR7和NOD2的轻微阴性活性。
[0204] 最后,图7显示了包含黄原胶的裂解物组合物的TLR信号传导。这些数据表明,由野油菜黄单胞菌(Xanthomonas campestris)菌株产生的裂解物以及黄原胶本身(由野油菜黄单胞菌产生的EPS)都产生TLR活化。菌株和EPS黄原胶两者对TLR5有强烈的刺激,对TLR4和9有中等活性。这些数据表明来自给定细菌菌株的裂解物以及来自该菌株的相应EPS(例如在该实施例中的黄原胶)都可以用于或混合到用于靶向TLR活性的制剂中。
[0205] 令人惊奇且出乎意料的是,这些数据表明由给定裂解物产生的TLR信号模式以及TLR信号的强度取决于制造过程以及原材料的选择,包括但不限于培养基和微生物。这些数据表明TLR活化特异性可以通过改变过程、细菌生物体、原材料和试剂参数而改变和定制。
[0206] 实施例4:创伤后应激障碍(PTSD)诊断作战退伍军人中的氧化性应激、认知和生活质量指标
[0207] PTSD是氧化性应激相关疾病或病症。该研究的目的有四个:(1)评估本发明组合物定量降低PTSD诊断的作战退伍军人氧化性应激标记物异前列烷的水平的有效性;(2)评估本发明组合物定性降低PTSD诊断的作战退伍军人一氧化氮水平的有效性;(3)评估本发明组合物在改进PTSD诊断的作战退伍军人的单词发现和单词回忆的有效性;以及(4)评估本发明组合物在改善PTSD诊断的作战退伍军人生活质量参数方面的有效性。
[0208] 新兴的循证文献支持氧化性应激与创伤后应激障碍(PTSD)之间的联系。由于循环氧化剂和抗氧化剂之间的不平衡,氧化性应激发生在体内和细胞水平。许多研究表明,这种细胞氧化性应激是由自由基对人体神经生理学的影响所致。一氧化氮被认为在防止氧化性应激方面发挥重要作用。
[0209] 在发生创伤性脑损伤的个人以及作战退伍军人中,查找单词往往受到影响。闭合性头部损伤/创伤性脑损伤(CHI/TBI)和PTSD经常伴发病症。
[0210] 受试者选择标准。
[0211] 研究参与者的预期数量最少为10人,最多为15人。
[0212] 预期的性别分布尽可能接近50%男性和50%女性。由于被诊断为PTSD的男性退伍军人人数较多,因此参与人群中男性比例可能稍高一些。
[0213] 不允许孕妇参加研究。
[0214] 唯一的年龄限制是由于征兵最低年龄为18岁,因此研究的预期年龄范围从18岁到大约80岁,上限由健康水平决定。
[0215] 没有种族或民族血统的限制。基于种族的预期百分比反映了大休斯顿地区的参与者被招募的比例。这些百分比大致为:44%西班牙裔(Hispanic)、26%白人(white)、23%非洲裔美国人(African America)、6%亚洲人(Asian)、1%其它。
[0216] 纳入和排除标准列于下表2。
[0217] 表2.实施例3的纳入和排除标准。
[0218]
[0219] 方法和程序
[0220] 在知情同意下,参与者被估计以评估细胞氧化性应激水平、一氧化氮水平、语言/单词发现能力、焦虑和抑郁水平以及当前生活质量参数。
[0221] 参与者被提供15天的组合物,据推测该组合物可降低氧化性应激,具体由尿中异前列烷水平的降低所指示。两(2)个12mg产品片剂每天舌下服用两(2)次,总共每日48mg。
[0222] 为了最小化测量波动,不使用安慰剂,受试者作为自己的测量对照。所有受试者被分配到相同的研究组并接受相同的程序。
[0223] 使用市售测定法(Oxford Biomedical Research)通过异前列烷的尿分析测量氧化性应激。使用肌酸酐测定试剂盒(Oxford Biomedical Research)对收集的样品进行肌酸酐标准化以控制尿浓度水平的差异。
[0224] 每位参与者在第1天和第15天检测他/她的尿液中的异前列烷水平最小值。在15天研究的每一天中,要求一致的个体子集提交尿样以建立数据点作为检查随时间推移可能发生的异前列烷变化的方法。保留第三方(对研究目标不知情)进行异前列烷测定。
[0225] 所有参与者在第1天和第15天在私人房间进行了三(3)次语言测试。使用的语言测试是接受性单词图片词汇测试第4版(ROWPVT-4)、表达性单词图片词汇测试第4版(EOWPVT-4)和非言语智力测验第4版(TONI-4)。
[0226] 此外,要求每位参与者在第1天和第15天完成焦虑和抑郁自我评估量表(Zung Self-Rating Scale for Anxiety and Depression)、生活满意量表(SWLS)和Eppworth嗜睡量表(the Eppworth Sleepiness Scale)。这些表格在私人房间填写,并使用标准方法编码以掩盖参与者的识别信息。
[0227] 每位参与者都填写了每天早上4点通过电子邮件发送给他/她的每日生活质量(QOL)调查。为了让每位参与者熟悉QOL调查格式并建立更强的数据基线,每个人在开始他/她使用产品之前最少四(4)天开始在QOL调查中记录他/她的分数。
[0228] 数据分析和数据监测
[0229] 在15天内收集上述参数之后,分析研究数据以确定氧化性应激和一氧化氮水平、单词发现能力、焦虑/抑郁的存在以及总体生活质量评分的趋势。所使用的统计分析方法是直接的,因为只评估了一个定量参数,即异前列烷。使用适当的多元统计测试分析数据。
[0230] 风险/收益评估。
[0231] 风险类别:此试验的风险类别为“最小”。因此,在同意书中同意伤害语言是没有必要的,因此临床试验协议(CTA)是没有必要的。最小风险类别是由于被测试的产品被认为是酸奶中发现的食品级GRAS化合物的事实。此外,由于尿液和唾液是唯一收集的体液,因此没有进行侵入性程序。
[0232] 在收集数据时,大约有35人(男性和女性)正在服用该产品。在研究时,最长的使用者在17个月前开始使用该产品,并且报告没有使用该产品产生的不良副作用。在大约共35个施用该产品的个体中,没有报告不良副作用。
[0233] 受试者确定和招募方法
[0234] 该研究使用了便利样本,招募参与者的方法主要基于调查人员的个人和专业联系。
[0235] 受试者能力
[0236] 如果这个人被认为缺乏足够的同意能力,则不允许他们参加这项研究。没有未成年人参与这项研究,也没有任何人要求提交同意书或法定代理人在场。
[0237] 受试者理解力
[0238] 为了评估已经发生了足够的理解力,参与者被要求向进行同意过程的个人解释研究,然后才允许他们参加该研究。受试者证实了他们的所有问题都得到充分的回答。
[0239] 结果
[0240] 在该研究中,通过测量/分析评估补充剂的效果:1)异前列烷水平;2)生活质量调查结果;3)心理/心理调查结果;和4)演说语言结果。
[0241] 如图8所示,用补充剂治疗引起尿中异前列烷的水平降低。异前列烷是没有通常涉及前列腺素产生的环加氧酶(COX)的直接作用时由自由基催化的过氧化必需脂肪酸(主要是花生四烯酸)体内形成的前列腺素样化合物。这些化合物是动物和人氧化性应激模型中脂质过氧化的精确标记物。在第15天,大多数受试者显示了降低的异前列烷水平。到第70天,所有受试者显示了异前列烷水平比第1天低。
[0242] 如表3A和表3B中所见,用该组合物治疗导致治疗15天后异前列烷的量显著减少,表2A显示来自该研究的原始数据,而表3B显示了计算氧化性应激标记物的百分比降低和百分比提高后的结果。在表3A和3B中,“PTSD+”是被诊断为具有PTSD的参与者。“PTSD-”是未被诊断为具有PTSD的参与者。“TX+”是在研究之前使用组合物的参与者。“XX-”是未使用过该组合物的参与者。
[0243] 如表3B所示,受试者在治疗15天后显示了异前列烷水平降低60%,随后在治疗70天后异前列烷水平额外降低3.18%。此外,受试者在治疗15天后表现出氧化性应激生物标记物水平提高469%,随后在治疗70天后氧化性应激生物标记物(异前列烷)水平额外提高53.19%。
[0244] 表3A:PTSD氧化性应激研究原始数据
[0245]
[0246] 表3B:PTSD氧化性应激研究数据
[0247]
[0248] 要求受试者以1-10的等级自我评估和评定他们的睡眠,其中,值1对应于睡眠缺陷,而值10对应于没有睡眠缺陷。如图9所示,与第1天自我评估的睡眠评定质量相比,在第70天所有受试者均显示睡眠缺陷减少。
[0249] 要求受试者以1-10的等级自我评估和评定他们的神经病症状,其中,值1对应于来自神经病症状的极大不适和疼痛,而值10对应于来自神经病症状的最小不适和疼痛。如图10所示,与第1天相比,在第15天所有受试者(除了2个以外)(P03和P04)显示出来自神经病症状的最小不适和疼痛。与第1天相比,在第70天所有患者(除了1个(P03)以外)显示出来自神经病症状的最小不适和疼痛或-在P04的情况下-在不适方面没有差异(注意到P04在研究开始时表现出来自神经病症状的最小不适和疼痛)。
[0250] 要求受试者以1-10的等级自我评估和评定他们的总体情绪,其中,值1对应于通常不愉快或不安的情绪,而值10对应于通常快乐或轻松的情绪。如图11所示,在第15天所有受试者(除了2个之外)都表现出总体情绪的改善。与第1天相比,在第70天所有患者(除了1个(P04)以外)都表现出总体情绪的改善。
[0251] 要求受试者以1-10的等级自我评估和评定他们的总体能量水平,其中,值1对应于低水平的能量,而值10对应于高水平的能量。如图12所示,与第1天相比,在第15天和第70天所有受试者(除了P03以外)都显示出能量水平的增加。
[0252] 要求受试者以1-10的等级自我评估和评定他们对其关节健康的总体满意度(通过估计包括柔韧性、僵硬和疼痛在内的多种因素确定),其中,值1对应于低水平的满意度,而值10对应于高水平的满意度。如图13所示,与第1天相比,在第15天所有受试者(除了P03和P04以外)显示出对其关节的满意度水平的改善。该趋势在第70天继续。
[0253] 要求受试者以1-10的等级自我评估和评定他们对其消化健康的总体满意度,其中,值1对应于低水平的满意度,而值10对应于高水平的满意度。如图14所示,与第1天相比,在第15天所有受试者(除P01和P04以外)显示出对其消化健康满意度水平的改善。该趋势在第70天继续。
[0254] 要求受试者以1-10的等级自我评估和评定他们的总体易怒水平,其中,值1对应于高水平的易怒性,而值10对应于最低水平的易怒性。如图15所示,与第1天相比,在第70天所有受试者显示出易怒性水平的降低。
[0255] 要求受试者以1-10的等级自我评估和评定他们对其性功能的满意度总体水平,其中,值1对应于低水平的满意度,而值10对应于高水平的满意度。如图16所示,与第1天相比,在第70天所有受试者(除了P04和P05以外)显示出对其性表现的满意度水平的增加。
[0256] 按照Epworth嗜睡量表(ESS)的指导原则,要求受试者自我评估和评定其白天嗜睡的总体水平。ESS是一个自我管理的问卷,有8个问题。它提供了一个人的白天嗜睡的一般水平或他们在日常生活中的平均睡眠倾向的度量。它已成为进行此评估的世界标准方法。ESS要求人们按照4分等级(0-3分)对他们通常会在8种不同的情况或大多数人作为日常生活的一部分参与的活动中瞌睡或入睡的机会进行评定,虽然不一定每天。它并不要求人们在每种情况下打瞌睡的频率。这很大程度上取决于他们在这些情况下发生的频率。相反,它会要求他们什么时候在每种情况下都会打瞌睡的机会。这需要精神判断,似乎大多数人能够以有意义的方式做出决定。总ESS评分是8项评分的总和,可以介于0-24之间。评分越高,该人的白天嗜睡程度越高。总ESS评分提供了每个人的一般特征的估计-他们在日常生活中的平均嗜睡水平。
[0257] 如图17所示,在第15天所有受试者显示出白天嗜睡的减少。与第1天相比,在第70天完成研究的所有受试者(除了P03以外)均显示出白天嗜睡的减少。
[0258] 要求受试者以1-40的等级自我评估和评定他们的生活满意度总体水平,其中,值1对应于低水平的满意度,而值40对应于高水平的满意度。如图18所示,与第1天相比,在第15天所有受试者的生活满意度水平都有所提高。该趋势在第70天继续。
[0259] 要求受试者按照Zung抑郁自我评估量表的指导原则自我评估和评定他们的焦虑的总体水平。Zung抑郁自我评估量表由杜克大学精神病学家William W.K.Zung MD设计以评估诊断为抑郁症患者的抑郁症的水平。
[0260] Zung抑郁自我评估量表是一个简短的自我管理调查以量化患者的抑郁状态。该量表具有20项评定与抑郁症有关的情感、心理和躯体症状的等级。有十个积极措辞和十个消极措辞问题。每个问题的评分范围为1到4(根据这些回答:“一点时间”、“一些时间”、“较多时间”、“大量时间”)。评分测试范围从20到80。评分分为四个范围,其中:20-44与正常范围相关,45-59与轻度抑郁症状态相关,60-69与中度抑郁症状态相关,70+与严重抑郁症状态相关。如图19所示,与第1天相比,在第15天所有受试者(除了P01和P05以外)均显示抑郁症水平的降低。与第1天相比,在第70天受试者P02、P03、P04、P06和P07均显示出焦虑水平的降低。
[0261] 实施例5:与氧化性应激相关的副作用的减少。
[0262] 减少头痛。在治疗之前的1.5年中经历三次脑震荡的17岁男性以45mg的剂量每日两次施用本公开的裂解物。在治疗的第14天,增加剂量至每日两次75mg活性成分。治疗前,患者报告频繁头痛。治疗前F2-异前列烷(F2IsoP)在尿液中测量为2.4ng/mg肌酸酐。图20显示了在患者尿中测得的异前列烷在85天内降低,从72-85天平均为0.82ng异前列烷/mg肌酸酐。图20中的字母A-H表示以下事件:(A)第1至3天,基线F2IsoP水平;(B)第3天,在9.99ng/mgF2IsoP峰处出现严重头痛;(C)第1至13天,使用每日两次45mg裂解物,伴有每日头痛;(D)第13天,患者开始使用每日两次75mg裂解物以解决头痛问题;(E)第18天至89天,头痛现已解决并继续得到解决;(F)第30天,新的冲击事件踢足球,头痛18小时,伴有视觉和神经紊乱;(G)第81天,情景压力事件,显示升高的F2IsoP水平,但没有导致头痛;(H)第1至89天,异前列烷趋势线在89天内显示减少98%。总体而言,这些数据表明响应裂解物施用的氧化性应激的伴随减少。此外,受试者报告施用裂解物后头痛明显减少。
[0263] 其它与氧化性应激相关的副作用的减少。将与药剂施用相关的经历一种或多种副作用的患者以每日两次45-100mg的剂量共同施用本公开的细菌裂解物。在开始共同施用裂解物之前,在血液或尿液中测量F2-异前列烷水平。裂解物的共同施用导致F2IsoP水平随着时间持续下降,在约45天内F2IsoP水平总体降低约50%,并且在约90天内F2IsoP水平降低约95%,伴随着与药物相关的氧化性应激相关副作用的减少。
[0264] 实施例6:裂解物/阿达木单抗组合对于治疗牛皮癣关节炎中的皮肤病是有效的[0265] 进行研究以评估包含阿达木单抗与本公开的细菌裂解物组合物组合的治疗性组合物的功效,将所述组合联合或分别施用以用于牛皮癣关节炎(PsA)患者的皮肤疾病(氧化性应激障碍)。
[0266] 在NSAID治疗失败的活性PsA患者(>3个肿胀和>3个压痛关节)中研究了阿达木单抗的随机III期研究。通过甲氨蝶呤(MTX)使用和牛皮癣程度(<3%或>3%体表面积[BSA])在基线进行中心分层随机化。完成第24周的患者将有资格继续进行开放标签扩展研究。
[0267] 如果患者有牛皮癣史;超过18岁;>3个肿胀和>3个压痛关节;对NSAID治疗的反应不足,则纳入患者。排除标准包括先前进行抗TNF治疗;进入研究前12周内接受阿来赛普;进入研究前6周内接受其它生物制剂;进入研究前4周内接受DMARD(除了MTX以外);进入研究前4周内进行牛皮癣全身治疗;以及进入研究前2周内进行光疗和局部治疗。
[0268] 根据甲氨蝶呤使用(是/否)和牛皮癣程度(<3%和>3%BSA参与)对患者进行分层,并口服接受20-50mg的裂解物作为每日基础,结合每隔一周40mg阿达木单抗或安慰剂至24周。
[0269] 待使用的功效测定包括:ACR响应标准(共同主要终点:第12周的ACR20响应);进入研究时有重大牛皮癣的患者的牛皮癣面积和严重指数(PASI)(>3%BSA);和牛皮癣的医生整体评估(PGA)。该研究根据牛皮癣的严重程度在基线:PASI<10与PASI≥10检查患者。
[0270] 因此,基线处影响>3%BSA的牛皮癣患者的疗效测定包括PASI、牛皮癣PGA和DLQI。ACR响应标准也被用作功效测定。对基线PASI<10与PASI>10的患者进行事后分析。PASI分析由NRI进行,并且PGA和DLQI分数计算为LOCF。
[0271] 接受共同施用的裂解物的治疗组经历了注射位点反应(例如疼痛、发红或刺激)的改善以及较少的总体氧化性应激相关副作用,这将允许增加粘附和对治疗的依从性,这转而又为改善原发疾病提供了更大的机会。
[0272] 实施例7:裂解物/他汀/ACE抑制剂组合对治疗高血压是有效的
[0273] 进行高血压治疗并接受每日一次20mg普伐他汀和每日一次20mg赖诺普利组合的人受试者正在经历皮肤红疹和失眠的氧化性应激相关副作用。
[0274] 当向患者额外施用每日两次45mg由本文公开涵盖的裂解物时,60天内解决了皮肤红疹和失眠的副作用。
[0275] 实施例8:裂解物/SSRI组合对治疗临床抑郁症是有效的
[0276] 进行抑郁症治疗并接受每日一次60mg度洛西汀 的人受试者正在经历氧化性应激相关的副作用(性高潮障碍、头晕、麻木和易怒性)。
[0277] 当向患者额外施用每日两次45mg由本文公开涵盖的裂解物时,10天内解决性高潮障碍、7天内解决头晕、10天内解决麻木并且5天内解决易怒性。
[0278] 实施例9:裂解物/激素组合对治疗甲状腺功能减退症是有效的
[0279] 进行甲状腺功能减退症治疗并接受每日一次150mg左旋甲状腺素的人受试者正在经历与氧化性应激相关的脱发副作用。
[0280] 当向患者额外施用每日两次75mg的由本文公开涵盖的裂解物时,180天内解决脱发的副作用。
[0281] 实施例10:裂解物/逆转录酶抑制剂组合对治疗HIV感染是有效的
[0282] 进行HIV(非艾滋病)治疗并接受每日一次一片依法韦仑/恩曲他滨/诺福韦酯基富马酸酯 的人受试者正在经历氧化性应激相关副作用(勃起功能障碍、神经病、失眠和脑雾化)。
[0283] 当向患者额外施用每日两次45mg由本文公开涵盖的裂解物时,10天内解决勃起功能障碍、10天内解决神经病、3天内解决失眠、3天内解决脑雾。
[0284] 实施例11:裂解物/直接作用抗病毒药物组合对治疗丙型肝炎是有效的
[0285] 进行丙型肝炎治疗并接受每日一次一片雷迪帕韦/索非布韦 的人受试者正在经历氧化性应激相关副作用(脑雾、头痛和关节炎)。
[0286] 当向患者额外施用每日两次75mg由本文公开涵盖的裂解物时,3天内解决脑雾、10天内解决头痛、14天内解决关节炎。
[0287] 实施例12:裂解物/抗癌药物组合对治疗癌症是有效的
[0288] 进行癌症治疗并接受双周剂量的拓扑异构酶I抑制剂/长春碱生物碱/烷化抗肿瘤药 的人受试者正在经历氧化性应激相关副作用(脑雾、不适、失眠和红疹)。
[0289] 当向患者额外施用每日两次75mg由本文公开涵盖的裂解物时,3天内解决脑雾、5天内解决不适、5天内解决失眠、14天内解决红疹。
[0290] 实施例13:裂解物/胰岛素类似物组合对治疗2型糖尿病是有效的
[0291] 进行2型糖尿病治疗并接受每日剂量的胰岛素类似物甘精胰岛素的人受试者正在经历氧化性应激相关副作用(红疹(注射位点),易怒性和头痛)。
[0292] 当向患者额外施用每日两次45mg由本文公开涵盖的裂解物时,5天内解决易怒性、7天内解决头痛、10天内解决红疹(注射位点)。
[0293] 实施例14:裂解物/抗生素组合对治疗类风湿性关节炎是有效的
[0294] 10个月前,被诊断患有类风湿性关节炎并用TNF抑制剂治疗的人受试者也正在用导致3级腹泻的抗生素治疗,如国家癌症研究所(NCI)标准所确定的。同时,受试者接受额外的抗生素以对抗由严重腹泻引起的艰难梭菌感染。在不改变目前的药理学疗法的情况下,向受试者每天2次额外施用45mg裂解物。腹泻在2周内开始解决,并在一个月内改善为NCI 2级标准。
[0295] 实施例15:裂解物/放射组合对治疗癌症是有效的
[0296] 对人受试者进行前列腺癌治疗并在规定治疗的40天过程中接受如下强度和/或持续时间增加的放疗:在每周的一天中,在180cGy(lcGy=1rad)的8次会话中,在9个点上,爆发两次,一次8秒钟,一次5秒;在180cGy的8次会话中,爆发12秒和9秒;在180cGy的9次会话中,在右侧2个象限中爆发14秒和10秒,然后在左侧爆发12秒和9秒;并且在200cGy的16次会话中,两个连续的全圆周穿过80秒且每隔一个会话都是两个完整连续的全圆周在相反方向上穿过。辐射剂量的变化总是在星期一,接下来的每个星期二医生都会看到患者以评估副作用。每次增加导致恶心3小时,治疗后发生约2小时,在任何治疗会话后不超过6小时完全解决。结合放疗治疗,向患者施用75mg剂量的本公开的裂解物,一天三次。没有向患者施用任何用于恶心、呕吐或出血的治疗。在1到10的生活质量量表中(“1”是最差的,“10”是最好的),患者报告了8为暴露的最终升级的开始。患者报告恶心在最大暴露情况下将不会低于7,并且在整个治疗过程中每天继续履行其工作职责。
[0297] 鉴于与本公开的裂解物组合物共同施用的上述药物的多种作用机制,并且鉴于裂解物本身的作用机制,可以合理推断本文公开的裂解物组合物以提供对大多数任何药物有益的不利作用减少的结果。例如, 是一种可注射的α-TNF,与裂解物共同施用会产生注射位点刺激的改善。按照包装说明书,该药物被确定为引起关节炎,如在直接作用抗病毒剂 中所见的。当患者将本公开的裂解物与规定的HCV药物如
一起使用时,在治疗期间副作用减少并且治疗后也不会持续。
[0298] 应该理解的是,本文所述的设置和功能仅仅是为了示例目的而呈现的,并且多种变体是可能的。例如,可以添加、省略、组合、分配、重新排序或以其它方式修饰元素。因此,以下权利要求被理解为包括以上具体示出和描述的内容、概念上等同的内容、可以明显替代的内容以及本质上结合了本发明的基本思想的内容。本领域的技术人员将认识到,在不脱离本发明的范围的情况下,可以配置刚刚描述的实施方式的各种修改和修饰。示例性实施方式是仅出于示例目的而阐述的,并且不应被视为限制本发明。因此,应该理解的是,在所附权利要求的范围内,本发明可以以不同于本文具体描述的方式来实施。
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