蛋白激酶(PKs)为一组调节不同的、重要的生物学过程包括细胞 生长、存活和分化、器官形成和形态发生、新血管形成、组织修复和 再生等的酶。蛋白激酶通过催化蛋白(或底物)的磷酸化而发挥其生理 学功能，由此调节各种生物学过程细胞活动。除了正常组织/器官的功 能外，许多蛋白激酶在人类宿主的疾病包括癌症中也起着更特殊的作 用。蛋白激酶的一个亚组(也称为致癌蛋白激酶)在失调时，可引起肿 瘤形成和生长，并进一步导致肿瘤转移和发展(Blume-JensenP等， Nature 2001，411(6835)：355-365)。迄今为止，致癌蛋白激酶代表用于 癌症干预和药物开发的最大的和最吸引人的蛋白靶标之一。
蛋白激酶可分类为受体型和非-受体型。受体酪氨酸激酶(RTKs) 具有细胞外部分，跨膜结构域，及细胞内部分，而非-受体酪氨酸激酶 为完全细胞内。RTK介导的信号转导通常是通过与特殊的生长因子(配 体)的相互细胞外作用来启动的，一般接着为受体的二聚作用，固有的 蛋白酪氨酸激酶活性的刺激，以及受体的转磷酸作用。因而建立用于 细胞内信号转导分子的结合位点，并导致形成具有细胞质信号转导分 子光谱的复合物，该分子促进适宜的细胞应答，如细胞分裂、分化、 代谢作用以及在细胞外环境中的改变。
目前，已经鉴定至少十九(19)种不同的RTK亚家族。一种RTK 亚家族(称为HER亚家族)包括EGFR、HER2、HER3和HER4，且结 合这样的配位如表皮生长因子(EGF)、TGF-α、双调蛋白、HB-EGF、 β细胞素和调蛋白。RTKs的第二个家族(称为胰岛素亚家族，包括 INS-R、IGF-1R和IR-R。第三个家族，即＂PDGF＂亚家族，包括PDGFα 和β受体、CSFIR、c-kit和FLK-II。RTKs的另一个亚家族(称为FLK 亚家族)包括激酶插入结构域-受体胎儿激酶-1(KDR/FLK-1)。胎儿肝 激酶4(FLK-4)和fms-样酪氨酸激酶1(flt-1)。RTKs的两个其它的亚 家族也被鉴定为FGF受体家族(FGFR1、FGFR2、FGFR3和FGFR4) 和Met亚家族(c-Met、Ron和Sea)。对于蛋白激酶的详细讨论，参见 例如，Blume-Jensen，P.等，Nature.2001，411(6835)：355-365，及Manning， G.等，Science.2002，298(5600)：1912-1934。
非-受体型酪氨酸激酶也包括许多亚家族，包括Src、Btk、Abl、 Fak和Jak。这些亚家族中的每一个可被进一步细分为多个成员，所述 成员频繁地与癌症发生有关。Src家族，例如，为最大的家族并包括 Src、Fyn、Lck和Fgr等。对于这些激酶的详细讨论，参见Bolen JB.非 受体酪氨酸蛋白激酶。癌基因(Oncogene).1993，8(8)：2025-31。
酪氨酸激酶的重要成员(受体和非受体)与癌症有关(参见 Madhusudan S，Ganesan TS.癌症治疗最大酪氨酸激酶抑制剂。Clin Biochem.2004，37(7)：618-35.)。临床研究提示，酪氨酸激酶的过度表 达或失调也可具有预测价值。例如，RTKs的HER家族成员与卵腺癌、 直肠结肠癌、头颈部癌和肺癌的不良预后有关。c-Kit酪氨酸激酶的突 变与胃肠道基质瘤有关。在急性骨髓性白血病、Flt-3突变预示较短的 无疾病存活(shorter disease free survival)。VEGFR表达(其对肿瘤的血 管形成是重要的)与肺癌的低存活率相关。Tie-1激酶表达与胃癌的存 活存在负相关。BCR-Abl表达是慢性骨髓性白血病应答的重要预报因 子，而Src酪氨酸激酶各期直肠结肠癌的不良预后的指标。
免疫系统对损害和来自病原体的威胁作出反应。细胞因子为低分 子量的多肽或糖蛋白，其实质上刺激各种细胞类型的生物学反应。例 如，细胞因子调节宿主对脓毒症有关的的许多免疫应答途径。细胞因 子影响细胞分化、增殖和激活，因而它们能调节促炎和抗炎反应，以 使宿主对病原体产生合适的反应。
细胞因子与其细胞表面受体的结合启动细胞内信号传导级联反 应，其将细胞外信号转导到核，最终导致基因表达的改变。涉及蛋白 酪氨酸激酶(JAKs)的两面神激酶家族和信号转导和转录的激活 (STATs)的途径参与宽范围的细胞因子的信号传导。一般来说，细胞 因子受体不具有固有的酪氨酸激酶活性，因此需要与受体相关的激酶 以扩展磷酸化级联(cascade)。JAKs实现这种功能。与其受体结合的细 胞因子，引起受体二聚化，这样能促使JAKs彼此以及细胞因子受体 内特异性酪氨酸基序的磷酸化。识别这些磷酸化基序的STATs被募集 到受体上，因而本身被JAK-依赖性酪氨酸磷酸化事件所激活。一旦激 活，STATs从受体上分离、二聚并移位到核上，以结合到特异性DNA 位点并改变转录(Scott，M.J.，C.J.Godshall，等.(2002).＂Jaks，STATs， 细胞因子(Cytokines)和脓毒症.＂Clin Diagn Lab Immunol 9(6)：1153-9)。
JAK家族在涉及免疫应答的细胞增殖和功能的细胞因子-依赖性 调节中起作用。目前，有四种已知的哺乳动物JAK家族成员：JAK1 (也称为两面神激酶-1)、JAK2(也称为两面神激酶-2)、JAK3(也称为 两面神激酶，白细胞；JAKL；L-JAK和两面神激酶-3)和TYK2(也称 为蛋白-酪氨酸激酶2)。JAK蛋白的大小范围在120-140kDa并包含7 个保守的JAK同源性(JH)结构域；其中之一为功能性催化激酶结构 域，而另一个为假性激酶(pseudokinase)结构域，其有效地发挥调节功 能和/或作为STATs的停靠位点起作用(docking site)(Scott，Godshall等. 2002，supra)。
虽然JAK1、JAK2和TYK2为遍在表达的，但JAK3被报道优先 在天然杀伤(NK)细胞中表达而不在其它的T细胞中表达，提示在淋 巴样激活转导作用(Kawamura，M.，D.W.McVicar，等.(1994).＂L-JAK 的分子克隆，在天然杀伤细胞的激活的白细胞中表达的两面神家族蛋 白-酪氨酸激酶.＂Proc Natl Acad Sci USA 91(14)：6374-8)。
细胞因子-刺激的免疫和炎性应答不仅引起正常宿主防御，它们 也在以下疾病的发病机理中起作用：因免疫系统活动不足和受到抑制 引起的严重结合的免疫缺陷(SCID)发病机理，以及过强或不适当的免 疫/炎性应答引起的自身免疫疾病如类风湿性和银屑病关节炎、哮喘 和系统性红斑狼疮、炎性肠道疾病、多发性硬化、I型糖尿病、重症 肌无力、甲状腺炎、免疫球蛋白性肾病、心肌炎以及疾病如硬皮病 和骨关节炎的发病机理(Ortmann，R.A.，T.Cheng，等.(2000).＂两面神 激酶和信号转导和转录的激活：它们在细胞因子信号转导，促使和免 疫调节中的作用.＂Arthritis Res 2(1)：16-32)。此外，伴有自身免疫和免 疫缺陷疾病的混合型表现的综合征是相当普遍的(Candotti，F.，L Notarangelo，等.(2002).＂原发性免疫缺陷的分子方面：来自细胞因子及 其信号传导途径的解释.＂J Clin Invest 109(10)：1261-9)。因此，治疗剂 通常相应地以免疫和炎性途径的增强或抑制为靶标。
JAK家族成员表达的缺乏与疾病状态有关。Jak1-/-小鼠在出生时 是发育不全的，未得到护理，因而死于围产期(Rodig，S.J.，M.A.Meraz， 等.(1998).＂Jak1基因的破裂证明Jaks在细胞因子-诱导的生物学应答 的专性和非多余的作用.＂细胞93(3)：373-83)。Jak2-/-小鼠胚胎是贫血 的并因缺乏发育完全的红细胞生成而死于交配后约12.5天。JAK2-缺 乏的成纤维细胞对IFNγ无响应，尽管对IFNα/β和IL-6的响应不受影 响。JAK2在发育完全的红细胞生成所需的一组特殊细胞因子受体的 信号传导方面起作用(Neubauer，H.，A.Cumano，等.(1998).细胞93(3)： 397-409；Parganas，E.，D.Wang，等.(1998).细胞93(3)：385-95.).JAK3 似乎在B和T淋巴细胞的正常发育和功能方面起作用。据报道JAK3 的突变引起常染色体接受的严重合并的人免疫缺陷(SCID)(Candotti， F.，S.A.Oakes，等.(1997)。＂JAK3-缺乏的严重合并的免疫缺陷的结构 和功能基础(Structural and functional basis for JAK3-deficient severe combined immunodeficiency).＂Blood 90(10)：3996-4003)。
JAK/STAT途径，且特别是JAK家族的全部四个成员，被认为在 哮喘反应、慢性阻塞性肺病、支气管炎及其它相关的下呼吸道炎性疾 病的发病机理中起作用。例如，不适当的免疫对由CD4+T辅助细胞 亚群(称为T辅助2(Th2)细胞)引起的特征性哮喘作出应答。通过细胞 因子受体IL-4的信号传导刺激JAK1和JAK3激活STAT6，而通过 IL-12的信号传导刺激JAK2和TYK2的激活，随后为STAT4的磷酸 化。STAT4和STAT6控制CD4+T辅助细胞分化的各个方面(Pernis，A. B和P.B.Rothman(2002).＂哮喘中的JAK-STAT的信号传导.＂J Clin Invest 109(10)：1279-83)。此外，发现TYK2-缺乏小鼠具有增强的Th2 细胞-介导的过敏性气道炎症(Seto，Y.，H.Nakajima，等.(2003).＂在 Tyk2-缺乏小鼠中增强的Th2细胞介导的过敏性炎症.＂J Immunol 170(2)：1077-83)。而且，通过JAK激酶传导信号的多种细胞因子与炎 性疾病或上呼吸道疾病如侵袭鼻子和鼻窦的那些疾病(如鼻炎、鼻窦炎) 有关，不论是否为过敏性反应。
也提示JAK/STAT途径在炎性疾病/眼病包括，但不限于，虹膜 炎、葡萄膜炎、巩膜炎、结膜炎以及慢性过敏性应答中起作用。因此， JAK激酶的抑制在这些疾病的治疗中可具有有益作用。
JAK/STAT途径，且特别是JAK3，在免疫系统的癌症中也具有 作用。在成人T细胞白血病/淋巴瘤(ATLL)，人CD4+T细胞获得转化 的表型，一种与获得JAKs和STATs的组成型磷酸化相关的事件。此 外，JAK3和STAT-1，STAT-3和STAT-5激活与细胞-周期发展之间 的关系被碘化丙锭染色和溴脱氧尿苷结合到四个待治疗的ATLL患者 的细胞中所证实。这些结构提示JAK/STAT激活与白血病细胞的复制 有关并且提示针对JAK/STAT抑制的治疗途径可被认为能阻止瘤的生 长(Takemoto，S.，J.C.Mulloy，等.(1997).＂成人T细胞白血病/淋巴瘤细 胞的增殖与JAK/STAT蛋白的组成型激活有关.＂Proc Natl Acad Sci U S A 94(25)：13897-902)。
在JAK激酶水平阻断信号传导有望开发对人癌症的治疗。白介 素6(IL-6)家族的细胞因子(激活信号转导gp130)人多发性骨髓瘤(MM) 细胞的主要的存活和生长因子。gp130的信号传导被认为涉及JAK1、 JAK2和Tyk2和下游效应器STAT3和促细胞分裂剂-激活蛋白激酶 (MAPK)途径。在用JAK2抑制剂酪氨酸磷酸化抑制剂AG490处理的 IL-6-依赖性MM细胞系中，JAK2激酶活性及ERK2和STAT3磷酸 化被抑制。此外，抑制了细胞增殖和诱导了细胞凋亡(De Vos，J.，M. Jourdan，等.(2000)。＂JAK2酪氨酸激酶抑制剂酪氨酸磷酸化抑制剂 AG490下调促有丝分裂剂-激活蛋白激酶(MAPK)和信号转导以及转录 (STAT)途径的激活并诱导骨髓瘤细胞的细胞凋亡。＂Br J Haematol 109(4)：823-8)。然而，在某些情况下，AG490可诱导肿瘤细胞的休 眠，由此保护它们避免死亡。
癌症中JAK/STAT的激活可通过多种机制发生，包括细胞因子 刺激(如IL-6或GM-CSF)或通过减少JAK信号传导如SOCS的内源性 抑制剂(抑制剂或细胞因子信号传导)或PIAS(激活STAT的蛋白抑制 剂)(Boudny，V.，and Kovarik，J.，Neoplasm.49：349-355，2002)。重要的 是，STAT信号传导以及JAKs(如Akt)下游的其它途径的激活，与许 多癌症型的不良预后有关(Bowman，T.，等.Oncogene 19：2474-2488， 2000)。然而，通过JAK/STAT的信号的循环细胞因子的升高水平可不 利地影响患者健康，因为它们被认为在恶病质和/或慢性疲劳中起着病 因的作用。因此，JAK因其强的潜在抗-肿瘤活性，其抑制对于治疗癌 症患者可能是有治疗作用的。基于对饱满感因子廋素(leptin)通过JAKs 进行信号传导的认识，恶病质指证可以获得机理上的支持。
两面神激酶3(JAK3)的药理学靶标被成功用于控制同种异体移 植物的排斥和移植物抗宿主疾病(GVHD)。除了其参与细胞因子受体 的信号传导之外，JAK3还参与外周血单核细胞CD40的信号传导途 径。在CD40-介导的骨髓树突细胞(DCs)的突变期间，JAK3活性降低， 而共刺激(costimulatory)分子表达增加，IL-12产生增加，并观察到有 效的同种异体刺激能力。一种合理设计的在不成熟水平阻止DCs的 JAK3抑制剂WHI-P-154防止这些结果，提示靶向酪氨酸激酶JAK3 的免疫抑制疗法也可影响骨髓细胞(Saemann，M.D.，C.Diakos，等. (2003)的功能。＂两面神激酶3靶向的CD40-触发的树突细胞成熟的预 防和T-细胞低反应性的诱导.＂Am J Transplant 3(11)：1341-9)。在小鼠 模型系统中，也显示JAK3为治疗自身免疫胰岛素-依赖性(1型)糖尿 病的一种重要分子靶标。合理设计的JAK3抑制剂JANEX-1抑制有效 的免疫调节活性并延迟NOD小鼠的自身免疫型1型糖尿病模型阻断 糖尿病发生(Cetkovic-Cvrlje，M.，A.L.Dragt，等.(2003)。＂用JANEX-1 靶向JAK3预防NOD mice的自身免疫性1型糖尿病.＂Clin Immunol 106(3)：213-25)。
已提示抑制JAK2酪氨酸激酶可能对脊髓增生性疾病患者有益 (Levin等，癌症细胞，vol.7，2005：387-397)。脊髓增生性疾病(MPD) 包括脾大性红细胞增多(PV)、原发性血小板减少症(ET)、伴有脊髓纤 维变性的脊髓组织变性(MMM)、慢性骨髓性白血病(CML)、慢性脊髓 单核细胞性白血病(CMML)、嗜酸性白细胞增多综合征(HES)和系统性 巨细胞疾病(SMCD)。虽然脊髓增生性疾病(如PV，ET和MMM)被认 为由造血原始细胞的获得性体突变引起，这些疾病的遗传基础尚不清 楚。然而，已报道得自大多数PV患者和数量可观的ET和MMM患 者的造血细胞在JAK2酪氨酸激酶中具有复发的体激活突变。还有报 道用小分子抑制剂抑制JAK2V617F激酶导致造血细胞增殖的抑制， 提示JAK2酪氨酸激酶为患有PV、ET和MMM的患者中药理学抑制 的有效靶标。
也已设想抑制JAK激酶对患有皮肤免疫疾病如牛皮癣和皮肤过 敏的患者有治疗益处。在寻常牛皮癣(最常见的牛皮癣形式)中，已普 遍接受这一事实，激活T淋巴细胞对维持所述疾病是重要的且其与牛 皮癣蚀斑有关(Gottlieb，A.B.等，Nat Rev Drug Disc.，4：19-34)。牛皮癣蚀 斑含有明显的免疫浸润，包括白细胞和单核细胞，以及伴有增加的角 化细胞增殖的多层表皮层。虽然牛皮癣中免疫细胞的最初激活通过不 明确的机理发生，但认为维持是依赖于许多炎性细胞因子，也包括各 种趋化因子和生长因子(JCI，113：1664-1675)。许多这些因子，包括白 介素-2、-4、-6、-7、-12、-15、-18和-23以及GM-CSF和IFNg，通 过两面神(JAK)激酶传导信号(Adv Pharmacol.2000；47：113-74)。因此， 阻断JAK激酶水平的信号传可在患有牛皮癣或其它免疫性皮肤疾病 的患者中带来治疗益处。
已知某些治疗剂可在某些患者中引起免疫反应如皮疹或腹泻。例 如，给予某些新的靶向抗癌药如易瑞沙、爱必妥和特罗凯在某些患者 中引起痤疮样皮疹。另一个实例是某些治疗剂在局部使用时引起皮肤 刺激、皮疹、接触性皮炎或过敏性接触性致敏。对于某些患者，这些 免疫反应可能是令人烦恼的，但对于其它患者，免疫反应如皮疹或腹 泻可导致持续性治疗无效。虽然在目前隐藏在这些免疫反应后面的驱 动力尚未完阐明，这些免疫反应很可能与免疫浸润有关。
已广泛寻找两面神激酶或相关激酶的抑制剂，有几篇出版物已报 道有效的几类化合物。例如，某些抑制剂在WO 99/65909，US 2004/0198737；WO 2004/099204；WO 2004/099205；and WO 01/42246中有报道。杂芳基取代的吡咯和其它的化合物在WO 2004/72063和WO 99/62908中有报道。
因此，长期需要抑制激酶如两面神激酶的新的或改进的药物，所 述药物用作免疫抑制剂(用于器官移植)，以及这些药物用于预防和治 疗自身免疫性疾病(如，多发性硬化、类风湿性关节炎、哮喘、I型糖 尿病，炎性肠道疾病、克罗恩氏病、自身免疫性甲状腺疾病、阿尔 茨海默氏病)、涉及活动过度的炎性反应的疾病(如，湿疹)、变态反应、 癌症(如，前列腺癌、白血病，多发性骨髓瘤)，以及由其它治疗剂引 起的某些免疫反应(如，皮疹或接触性皮炎或腹泻)等等。本文描述的 化合物，组合物和方法旨在针对这些需求和其它的目的。
发明概述
本发明提供式I化合物：

或其药学上可接受的盐形式，其中各组成成员如本文所定义。
本发明还提供组合物，其包含式I化合物或其药学上可接受的 盐，及药学上可接受的载体。
本发明还提供调节JAK活性的方法，该方法包括使JAK与式I 化合物或其药学上可接受的盐接触。
本发明还提供治疗患者疾病的方法，其中所述疾病与JAK活性 有关，该方法包括给予所述患者治疗有效量的式I化合物，或其药学 上可接受的盐。
本发明还提供用于治疗的式I化合物。
本发明还提供制备药物的式I化合物，所述药物用于治疗。
发明详述
本发明提供特别是调节一种或多种JAKs的活性，因而用于例 如，治疗与JAK表达或活性相关疾病的化合物。本发明的化合物具有 式I：

包括其药学上可接受的盐形式或前药，其中：
A1和A2独立地选自C和N；
T、U和V独立地选自O、S、N、CR5和NR6；
其中A1、A2、U、T和V形成的5-元环为芳环；
X为N或CR4；
Y为C1-8亚烷基、C2-8亚烯基、C2-8亚炔基、(CR11R12)p-(C3-10亚环 烷基)-(CR11R12)q、(CR11R12)p-(亚芳基)-(CR11R12)q、(CR11R12)p-(C1-10亚 杂环烷基)-(CR11R12)q、(CR11R12)p-(亚杂芳基)-(CR11R12)q、 (CR11R12)pO(CR11R12)q、(CR11R12)pS(CR11R12)q、 (CR11R12)pC(O)(CR11R12)q、(CR11R12)pC(O)NRc(CR11R12)q、 (CR11R12)pC(O)O(CR11R12)q、(CR11R12)pOC(O)(CR11R12)q、 (CR11R12)pOC(O)NRc(CR11R12)q、(CR11R12)pNRc(CR11R12)q、 (CR11R12)pNRcC(O)NRd(CR11R12)q、(CR11R12)pS(O)(CR11R12)q、 (CR11R12)pS(O)NRc(CR11R12)q、(CR11R12)pS(O)2(CR11R12)q或 (CR11R12)pS(O)2NRc(CR11R12)q，其中所述C1-8亚烷基、C2-8亚烯基、C2-8 亚炔基、亚环烷基、亚芳基、亚杂环烷基或亚杂芳基任选被独立选自 -D1-D2-D3-D4的1、2或3个取代基取代；
Z为H、卤代、C1-4烷基、C2-4烯基、C2-4炔基、C1-4卤代烷基、 卤代硫烷基、C1-4羟基烷基、C1-4氰基烷基、＝C-Ri、＝N-Ri、Cy1、CN、 NO2、ORa、SRa、C(O)Rb、C(O)NRcRd、C(O)ORa、OC(O)Rb、OC(O)NRcRd、 NRcRd、NRcC(O)Rb、NRcC(O)NRcRd、NRcC(O)ORa、C(＝NRi)NRcRd、 NRcC(＝NRi)NRcRd、S(O)Rb、S(O)NRcRd、S(O)2Rb、NRcS(O)2Rb、 C(＝NOH)Rb、C(＝NO(C1-6烷基)Rb和S(O)2NRcRd，其中所述C1-8烷基、 C2-8烯基或C2-8炔基任选由1、2、3、4、5或6个独立选自以下的取 代基取代：卤代、C1-4烷基、C2-4烯基、C2-4炔基、C1-4卤代烷基、卤 代硫烷基、C1-4羟基烷基、C1-4氰基烷基、Cy1、CN、NO2、ORa、SRa、 C(O)Rb、C(O)NRcRd、C(O)ORa、OC(O)Rb、OC(O)NRcRd、NRcRd、 NRcC(O)Rb、NRcC(O)NRcRd、NRcC(O)ORa、C(＝NRi)NRcRd、 NRcC(＝NRi)NRcRd、S(O)Rb、S(O)NRcRd、S(O)2Rb、NRcS(O)2Rb、 C(＝NOH)Rb、C(＝NO(C1-6烷基))Rb和S(O)2NRcRd；
其中当Z为H时，n为1；
或者-(Y)n-Z部分与i)与所述部分连接的A2，ii)T或V的R5或 R6，以及iii)T或V的R5或R6连接的C或N原子结合在一起，形成 与由A1、A2、U、T和V形成的5-元环稠合的4-至20-元芳基、环烷 基、杂芳基或杂环烷基环，其中所述4-至20-元芳基、环烷基、杂芳 基或杂环烷基环任选被1、2、3、4或5个独立选自-(W)m-Q的取代基 取代；
W为C1-8亚烷基、C2-8亚烯基、C2-8亚炔基、O、S、C(O)、C(O)NRc’、 C(O)O、OC(O)、OC(O)NRc’、NRc’、NRc’C(O)NRd’、S(O)、S(O)NRc’、 S(O)2或S(O)2NRc’；
Q为H、卤代、CN、NO2、C1-8烷基、C2-8烯基、C2-8炔基、C1-8 卤代烷基、卤代硫烷基、芳基、环烷基、杂芳基或杂环烷基，其中 所述C1-8烷基、C2-8烯基、C2-8炔基、C1-8卤代烷基、芳基、环烷基、 杂芳基或杂环烷基任选由1、2、3或4个独立选自以下的取代基取 代：卤代、C1-4烷基、C2-4烯基、C2-4炔基、C1-4卤代烷基、卤代硫烷 基、C1-4羟基烷基、C1-4氰基烷基、Cy2、CN、NO2、ORa’、SRa’、 C(O)Rb’、C(O)NRc’Rd’、C(O)ORa’、OC(O)Rb’、OC(O)NRc’Rd’、 NRc’Rd’、NRc’C(O)Rb’、NRc’C(O)NRc’Rd’、NRc’C(O)ORa’、S(O)Rb’、 S(O)NRc’Rd’、S(O)2Rb’、NRc’S(O)2Rb’和S(O)2NRc’Rd’；
Cy1和Cy2独立地选自芳基、杂芳基、环烷基和杂环烷基，各自 任选由1、2、3、4或5个独立选自以下的取代基取代：卤代、C1-4烷 基、C2-4烯基、C2-4炔基、C1-4卤代烷基、卤代硫烷基、C1-4羟基烷 基、C1-4氰基烷基、CN、NO2、ORa”、SRa”、C(O)Rb”、 C(O)NRc”Rd”、C(O)ORa”、OC(O)Rb”、OC(O)NRc”Rd”、NRc”Rd”、 NRc”C(O)Rb”、NRc”C(O)ORa”、NRc”S(O)Rb”、NRc”S(O)2Rb”、 S(O)Rb”、S(O)NRc”Rd”、S(O)2Rb”和S(O)2NRc”Rd”；
R1、R2、R3和R4独立地选自H、卤代、C1-4烷基、C2-4烯基、C2-4 炔基、C1-4卤代烷基、卤代硫烷基、芳基、环烷基、杂芳基、杂环烷 基、CN、NO2、OR7、SR7、C(O)R8、C(O)NR9R10、C(O)OR7 OC(O)R8、OC(O)NR9R10、NR9R10、NR9C(O)R8、NRcC(O)OR7、 S(O)R8、S(O)NR9R10、S(O)2R8、NR9S(O)2R8和S(O)2NR9R10；
R5为H、卤代、C1-4烷基、C2-4烯基、C2-4炔基、C1-4卤代烷基、 卤代硫烷基、CN、NO2、OR7、SR7、C(O)R8、C(O)NR9R10、 C(O)OR7、OC(O)R8、OC(O)NR9R10、NR9R10、NR9C(O)R8、 NR9C(O)OR7、S(O)R8、S(O)NR9R10、S(O)2R8、NR9S(O)2R8或 S(O)2NR9R10；
R6为H、C1-4烷基、C2-4烯基、C2-4炔基、C1-4卤代烷基、OR7、 C(O)R8、C(O)NR9R10、C(O)OR7、S(O)R8、S(O)NR9R10、S(O)2R8或 S(O)2NR9R10；
R7为H、C1-6烷基、C1-6卤代烷基、C2-6烯基、C2-6炔基、芳基、 环烷基、杂芳基、杂环烷基、芳基烷基、杂芳基烷基、环烷基烷基或 杂环烷基烷基；
R8为H、C1-6烷基、C1-6卤代烷基、C2-6烯基、C2-6炔基、芳基、 环烷基、杂芳基、杂环烷基、芳基烷基、杂芳基烷基、环烷基烷基或 杂环烷基烷基；
R9和R10独立地选自H、C1-10烷基、C1-6卤代烷基、C2-6烯基、 C2-6炔基、C1-6烷基羰基、芳基羰基、C1-6烷基磺酰基、芳基磺酰基、 芳基、杂芳基、环烷基、杂环烷基、芳基烷基、杂芳基烷基、环烷基 烷基和杂环烷基烷基；
或R9和R10与它们连接的N原子一起形成4-、5-、6-或7-元杂环 烷基；
R11和R12独立地选自H和-E1-E2-E3-E4；
D1和E1独立地不存在或独立地选自C1-6亚烷基、C2-6亚烯基、 C2-6亚炔基、亚芳基、亚环烷基、亚杂芳基和亚杂环烷基，其中各个 C1-6亚烷基、C2-6亚烯基、C2-6亚炔基、亚芳基、亚环烷基、亚杂芳基 和亚杂环烷基任选由1、2或3个独立选自以下的取代基取代：卤代、 CN、NO2、N3、SCN、OH、C1-6烷基、C1-6卤代烷基、C2-8烷氧基烷 基、C1-6烷氧基、C1-6卤代烷氧基、氨基、C1-6烷基氨基和C2-8二烷基 氨基；
D2和E2独立地不存在或独立地选自C1-6亚烷基、C2-6亚烯基、 C2-6亚炔基、(C1-6亚烷基)r-O-(C1-6亚烷基)s、(C1-6亚烷基)r-S-(C1-6亚烷 基)s、(C1-6亚烷基)r-NRe-(C1-6亚烷基)s、(C1-6亚烷基)r-CO-(C1-6亚烷基)s、 (C1-6亚烷基)r-COO-(C1-6亚烷基)s、(C1-6亚烷基)r-CONRe-(C1-6亚烷基)s、 (C1-6亚烷基)r-SO-(C1-6亚烷基)s、(C1-6亚烷基)r-SO2-(C1-6亚烷基)s、(C1-6 亚烷基)r-SONRe-(C1-6亚烷基)s和(C1-6亚烷基)r-NReCONRf-(C1-6亚烷 基)s，其中各个C1-6亚烷基、C2-6亚烯基和C2-6亚炔基任选由1、2或3 个独立选自以下的取代基取代：卤代、CN、NO2、N3、SCN、OH、 C1-6烷基、C1-6卤代烷基、C2-8烷氧基烷基、C1-6烷氧基、C1-6卤代烷 氧基、氨基、C1-6烷基氨基和C2-8二烷基氨基；
D3和E3独立地不存在或独立地选自C1-6亚烷基、C2-6亚烯基、 C2-6亚炔基、亚芳基、亚环烷基、亚杂芳基和亚杂环烷基，其中各个 C1-6亚烷基、C2-6亚烯基、C2-6亚炔基、亚芳基、亚环烷基、亚杂芳基 和亚杂环烷基任选由1、2或3个独立选自以下的取代基取代：卤代、 CN、NO2、N3、SCN、OH、C1-6烷基、C1-6卤代烷基、C2-8烷氧基烷 基、C1-6烷氧基、C1-6卤代烷氧基、氨基、C1-6烷基氨基和C2-8二烷基 氨基；
D4和E4独立地选自H、卤代、C1-4烷基、C2-4烯基、C2-4炔基、 C1-4卤代烷基、卤代硫烷基、C1-4羟基烷基、C1-4氰基烷基、Cy1、CN、 NO2、ORa、SRa、C(O)Rb、C(O)NRcRd、C(O)ORa、OC(O)Rb、OC(O)NRcRd、 NRcRd、NRcC(O)Rb、NRcC(O)NRcRd、NRcC(O)ORa、C(＝NRi)NRcRd、 NRcC(＝NRi)NRcRd、S(O)Rb、S(O)NRcRd、S(O)2Rb、NRcS(O)2Rb、 C(＝NOH)Rb、C(＝NO(C1-6烷基)Rb和S(O)2NRcRd，其中所述C1-8烷基、 C2-8烯基或C2-8炔基任选由1、2、3、4、5或6个独立选自以下的取 代基取代：卤代、C1-4烷基、C2-4烯基、C2-4炔基、C1-4卤代烷基、卤 代硫烷基、C1-4羟基烷基、C1-4氰基烷基、Cy1、CN、NO2、ORa、SRa、 C(O)Rb、C(O)NRcRd、C(O)ORa、OC(O)Rb、OC(O)NRcRd、NRcRd、 NRcC(O)Rb、NRcC(O)NRcRd、NRcC(O)ORa、C(＝NRi)NRcRd、 NRcC(＝NRi)NRcRd、S(O)Rb、S(O)NRcRd、S(O)2Rb、NRcS(O)2Rb、 C(＝NOH)Rb、C(＝NO(C1-6烷基))Rb和S(O)2NRcRd；
Ra为H、Cy1、-(C1-6烷基)-Cy1、C1-6烷基、C1-6卤代烷基、C2-6 烯基、C2-6炔基，其中所述C1-6烷基、C1-6卤代烷基、C2-6烯基或C2-6 炔基任选由1、2或3个独立选自以下的取代基取代：OH、CN、氨基、 卤代、C1-6烷基、C1-6卤代烷基、卤代硫烷基、芳基、芳基烷基、杂 芳基、杂芳基烷基、环烷基和杂环烷基；
Rb为H、Cy1、-(C1-6烷基)-Cy1、C1-6烷基、C1-6卤代烷基、C2-6 烯基、C2-6炔基，其中所述C1-6烷基、C1-6卤代烷基、C2-6烯基或C2-6 炔基任选由1、2或3个独立选自以下的取代基取代：OH、CN、氨基、 卤代、C1-6烷基、C1-6卤代烷基、C1-6卤代烷基、卤代硫烷基、芳基、 芳基烷基、杂芳基、杂芳基烷基、环烷基和杂环烷基；
Ra’和Ra”独立地选自H、C1-6烷基、C1-6卤代烷基、C2-6烯基、C2-6 炔基、芳基、环烷基、杂芳基、杂环烷基、芳基烷基、杂芳基烷基、 环烷基烷基和杂环烷基烷基，其中所述C1-6烷基、C1-6卤代烷基、C2-6 烯基、C2-6炔基、芳基、环烷基、杂芳基、杂环烷基、芳基烷基、杂 芳基烷基、环烷基烷基或杂环烷基烷基任选由1、2或3个独立选自 以下的取代基取代：OH、CN、氨基、卤代、C1-6烷基、C1-6卤代烷基、 卤代硫烷基、芳基、芳基烷基、杂芳基、杂芳基烷基、环烷基和杂环 烷基；
Rb’和Rb”独立地选自H、C1-6烷基、C1-6卤代烷基、C2-6烯基、C2-6 炔基、芳基、环烷基、杂芳基、杂环烷基、芳基烷基、杂芳基烷基、 环烷基烷基和杂环烷基烷基，其中所述C1-6烷基、C1-6卤代烷基、C2-6 烯基、C2-6炔基、芳基、环烷基、杂芳基、杂环烷基、芳基烷基、杂 芳基烷基、环烷基烷基或杂环烷基烷基任选由1、2或3个独立选自 以下的取代基取代：OH、CN、氨基、卤代、C1-6烷基、C1-6卤代烷基、 C1-6卤代烷基、卤代硫烷基、芳基、芳基烷基、杂芳基、杂芳基烷基、 环烷基和杂环烷基；
Rc和Rd独立地选自H、Cy1、-(C1-6烷基)-Cy1、C1-10烷基、C1-6 卤代烷基、C2-6烯基、C2-6炔基，其中所述C1-10烷基、C1-6卤代烷基、 C2-6烯基或C2-6炔基任选由1、2或3个独立选自以下的取代基取代： Cy1、-(C1-6烷基)-Cy1、OH、CN、氨基、卤代、C1-6烷基、C1-6卤代 烷基、C1-6卤代烷基和卤代硫烷基；
或Rc和Rd与它们连接的N原子一起形成任选由1、2或3个独 立选自以下的取代基取代的4-、5-、6-或7-元杂环烷基：Cy1、-(C1-6烷 基)-Cy1、OH、CN、氨基、卤代、C1-6烷基、C1-6卤代烷基、C1-6卤代 烷基和卤代硫烷基；
Rc’和Rd’独立地选自H、C1-10烷基、C1-6卤代烷基、C2-6烯基、C2-6 炔基、芳基、杂芳基、环烷基、杂环烷基、芳基烷基、杂芳基烷基、 环烷基烷基和杂环烷基烷基，其中所述C1-10烷基、C1-6卤代烷基、C2-6 烯基、C2-6炔基、芳基、杂芳基、环烷基、杂环烷基、芳基烷基、杂 芳基烷基、环烷基烷基或杂环烷基烷基任选由1、2或3个独立选自 以下的取代基取代：OH、CN、氨基、卤代、C1-6烷基、C1-6卤代烷基、 C1-6卤代烷基、卤代硫烷基、芳基、芳基烷基、杂芳基、杂芳基烷基、 环烷基和杂环烷基；
或Rc’和Rd’与它们连接的N原子一起形成任选由1、2或3个独 立选自以下的取代基取代的4-，5-，6-或7-元杂环烷基：OH、CN、氨 基、卤代、C1-6烷基、C1-6卤代烷基、C1-6卤代烷基、卤代硫烷基、芳 基、芳基烷基、杂芳基、杂芳基烷基、环烷基和杂环烷基；
Rc”和Rd”独立地选自H、C1-10烷基、C1-6卤代烷基、C2-6烯基、 C2-6炔基、芳基、杂芳基、环烷基、杂环烷基、芳基烷基、杂芳基烷 基、环烷基烷基和杂环烷基烷基，其中所述C1-10烷基、C1-6卤代烷基、 C2-6烯基、C2-6炔基、芳基、杂芳基、环烷基、杂环烷基、芳基烷基、 杂芳基烷基、环烷基烷基或杂环烷基烷基任选由1、2或3个独立选 自以下的取代基取代：OH、CN、氨基、卤代、C1-6烷基、C1-6卤代烷 基、卤代硫烷基、C1-6卤代烷基、芳基、芳基烷基、杂芳基、杂芳基 烷基、环烷基和杂环烷基；
或Rc”和Rd”与它们连接的N原子一起形成任选由1、2或3个独 立选自以下的取代基取代的4-、5-、6-或7-元杂环烷基：OH、CN、 氨基、卤代、C1-6烷基、C1-6卤代烷基、C1-6卤代烷基、卤代硫烷基、 芳基、芳基烷基、杂芳基、杂芳基烷基、环烷基和杂环烷基；
Ri为H、CN、NO2或C1-6烷基；
Re和Rf独立地选自H和C1-6烷基；
Ri为H、CN或NO2；
m为0或1；
n为0或1；
p为0、1、2、3、4、5或6；
q为0、1、2、3、4、5或6；
r为0或1；和
s为0或1。
在一些实施方案中，当X为N，n为1，且由A1、A2、U、T、V 和-(Y)n-Z形成的部分具有下式时：

则Y不是(CR11R12)pC(O)NRc(CR11R12)q。
在一些实施方案中，当X为N时，由A1、A2、U、T和V形成 的5-元环不是吡咯基。
在一些实施方案中，当X为CH，n为1，且由A1、A2、U、T、 V和-(Y)n-Z形成的部分具有下式时：

则-(Y)n-Z不是COOH。
在一些实施方案中，当X为CH或C-卤代，R1、R2和R3各自为 H，n为1，且由A1、A2、U、T、V和-(Y)n-Z形成的部分具有下式时：
或
则Y不是(CR11R12)pC(O)NRc(CR11R12)q或(CR11R12)pC(O)(CR11R12)q。
在一些实施方案中，当X为CH或C-卤代，R1、R2和R3各自为 H，n为0，且由A1、A2、U、T、V和-(Y)n-Z形成的部分具有下式时：
或
则Z不是CN、卤代或C1-4烷基。
在一些实施方案中，当X为CH或C-卤代，R1、R2和R3各自为 H，n为1，且由A1、A2、U、T、V和-(Y)n-Z形成的部分具有下式时：
或
则Y不是(CR11R12)pC(O)NRc(CR11R12)q或(CR11R12)pC(O)(CR11R12)q。
在一些实施方案中，当X为CH或C-卤代，R1、R2和R3各自为 H，n为1，且由A1、A2、U、T、V和-(Y)n-Z形成的部分具有下式时：

则Y不是(CR11R12)pNRc(CR11R12)q。
在一些实施方案中，当X为CH或C-卤代及R1、R2和R3各自为 H，则由A1、A2、U、T、V和-(Y)n-Z形成的部分不具有以下结构式：
或
在一些实施方案中：
Z为H、卤代、CN、NO2、C1-8烷基、C2-8烯基、C2-8炔基、C1-8 卤代烷基、芳基、环烷基、杂芳基或杂环烷基，其中所述C1-8烷基、 C2-8烯基、C2-8炔基、C1-8卤代烷基、芳基、环烷基、杂芳基或杂环烷 基任选由1、2、3、4、5或6个独立选自以下的取代基取代：卤代、 C1-4烷基、C2-4烯基、C2-4炔基、C1-4卤代烷基、C1-4羟基烷基、C1-4氰 基烷基、Cy1、CN、NO2、ORa、SRa、C(O)Rb、C(O)NRcRd、C(O)ORa、 OC(O)Rb、OC(O)NRcRd、NRcRd、NRcC(O)Rb、NRcC(O)NRcRd、 NRcC(O)ORa、C(＝NRi)NRcRd、NRcC(＝NRi)NRcRd、S(O)Rb、S(O)NRcRd、 S(O)2Rb、NRcS(O)2Rb和S(O)2NRcRd；
Q为H、卤代、CN，NO2、C1-8烷基、C2-8烯基、C2-8炔基、C1-8 卤代烷基、芳基、环烷基、杂芳基或杂环烷基，其中所述C1-8烷基、 C2-8烯基、C2-8炔基、C1-8卤代烷基、芳基、环烷基、杂芳基或杂环烷 基任选由1、2、3或4个独立选自以下的取代基取代：卤代、C1-4烷 基、C2-4烯基、C2-4炔基、C1-4卤代烷基、C1-4羟基烷基、C1-4氰基烷 基、Cy2、CN、NO2、ORa’、SRa’、C(O)Rb’、C(O)NRc’Rd’、 C(O)ORa’、OC(O)Rb’、OC(O)NRc’Rd’、NRc’Rd’、NRc’C(O)Rb’、 NRc’C(O)NRc’Rd’、NRc’C(O)ORa’、S(O)Rb’、S(O)NRc’Rd’、S(O)2Rb’、 NRc’S(O)2Rb’和S(O)2NRc’Rd’；
Cy1和Cy2独立地选自芳基、杂芳基、环烷基和杂环烷基，各自 任选由1、2、3、4或5个独立选自以下的取代基取代：卤代、C1-4烷 基、C2-4烯基、C2-4炔基、C1-4卤代烷基、C1-4羟基烷基、C1-4氰基烷 基、CN、NO2、ORa”、SRa”、C(O)Rb”、C(O)NRc”Rd”、C(O)ORa”、 OC(O)Rb”、OC(O)NRc”Rd”、NRc”Rd”、NRc”C(O)Rb”、 NRc”C(O)ORa”、NRc”S(O)Rb”、NRc”S(O)2Rb”、S(O)Rb”、 S(O)NRc”Rd”、S(O)2Rb”和S(O)2NRc”Rd”；
R1、R2、R3和R4独立地选自H、卤代、C1-4烷基、C2-4烯基、C2-4 炔基、C1-4卤代烷基、芳基、环烷基、杂芳基、杂环烷基、CN、 NO2、OR7、SR7、C(O)R8、C(O)NR9R10、C(O)OR7OC(O)R8、 OC(O)NR9R10、NR9R10、NR9C(O)R8、NRcC(O)OR7、S(O)R8、 S(O)NR9R10、S(O)2R8、NR9S(O)2R8和S(O)2NR9R10；
R5为H、卤代、C1-4烷基、C2-4烯基、C2-4炔基、C1-4卤代烷基、 CN、NO2、OR7、SR7、C(O)R8、C(O)NR9R10、C(O)OR7、 OC(O)R8、OC(O)NR9R10、NR9R10、NR9C(O)R8、NR9C(O)OR7、 S(O)R8、S(O)NR9R10、S(O)2R8、NR9S(O)2R8或S(O)2NR9R10；
R6为H、C1-4烷基、C2-4烯基、C2-4炔基、C1-4卤代烷基、OR7、 C(O)R8、C(O)NR9R10、C(O)OR7、S(O)R8、S(O)NR9R10、S(O)2R8或 S(O)2NR9R10；
R7为H、C1-6烷基、C1-6卤代烷基、C2-6烯基、C2-6炔基、芳基、 环烷基、杂芳基、杂环烷基、芳基烷基、杂芳基烷基、环烷基烷基或 杂环烷基烷基；
R8为H、C1-6烷基、C1-6卤代烷基、C2-6烯基、C2-6炔基、芳基、 环烷基、杂芳基、杂环烷基、芳基烷基、杂芳基烷基、环烷基烷基或 杂环烷基烷基；
R9和R10独立地选自H、C1-10烷基、C1-6卤代烷基、C2-6烯基、 C2-6炔基、C1-6烷基羰基、芳基羰基、C1-6烷基磺酰基、芳基磺酰基、 芳基、杂芳基、环烷基、杂环烷基、芳基烷基、杂芳基烷基、环烷基 烷基和杂环烷基烷基；
或R9和R10与它们连接的N原子一起形成4-、5-、6-或7-元杂环 烷基；
R11和R12独立地选自H、卤代、OH、CN、C1-4烷基、C1-4卤代 烷基、C2-4烯基、C2-4炔基、C1-4羟基烷基、C1-4氰基烷基、芳基、杂 芳基、环烷基和杂环烷基；
Ra、Ra’和Ra”独立地选自H、C1-6烷基、C1-6卤代烷基、C2-6烯基、 C2-6炔基、芳基、环烷基、杂芳基、杂环烷基、芳基烷基、杂芳基烷 基、环烷基烷基和杂环烷基烷基，其中所述C1-6烷基、C1-6卤代烷基、 C2-6烯基、C2-6炔基、芳基、环烷基、杂芳基、杂环烷基、芳基烷基、 杂芳基烷基、环烷基烷基或杂环烷基烷基任选由1、2或3个独立选 自以下的取代基取代：OH、CN、氨基、卤代、C1-6烷基、C1-6卤代烷 基、芳基、芳基烷基、杂芳基、杂芳基烷基、环烷基和杂环烷基；
Rb、Rb’和Rb”独立地选自H、C1-6烷基、C1-6卤代烷基、C2-6烯基、 C2-6炔基、芳基、环烷基、杂芳基、杂环烷基、芳基烷基、杂芳基烷 基、环烷基烷基和杂环烷基烷基，其中所述C1-6烷基、C1-6卤代烷基、 C2-6烯基、C2-6炔基、芳基、环烷基、杂芳基、杂环烷基、芳基烷基、 杂芳基烷基、环烷基烷基或杂环烷基烷基任选由1、2或3个独立选 自以下的取代基取代：OH、CN、氨基、卤代、C1-6烷基、C1-6卤代烷 基、C1-6卤代烷基、芳基、芳基烷基、杂芳基、杂芳基烷基、环烷基 和杂环烷基；
Rc和Rd独立地选自H、C1-10烷基、C1-6卤代烷基、C2-6烯基、C2-6 炔基、芳基、杂芳基、环烷基、杂环烷基、芳基烷基、杂芳基烷基、 环烷基烷基和杂环烷基烷基，其中所述C1-10烷基、C1-6卤代烷基、C2-6 烯基、C2-6炔基、芳基、杂芳基、环烷基、杂环烷基、芳基烷基、杂 芳基烷基、环烷基烷基或杂环烷基烷基任选由1、2或3个独立选自 以下的取代基取代：OH、CN、氨基、卤代、C1-6烷基、C1-6卤代烷基、 C1-6卤代烷基、芳基、芳基烷基、杂芳基、杂芳基烷基、环烷基或杂 环烷基；
或Rc和Rd与它们连接的N原子一起形成任选由1、2或3个独 立选自以下的取代基取代的4-、5-、6-或7-元杂环烷基：OH、CN、 氨基、卤代、C1-6烷基、C1-6卤代烷基、C1-6卤代烷基、芳基、芳基烷 基、杂芳基、杂芳基烷基、环烷基和杂环烷基；
Rc’和Rd’独立地选自H、C1-10烷基、C1-6卤代烷基、C2-6烯基、C2-6 炔基、芳基、杂芳基、环烷基、杂环烷基、芳基烷基、杂芳基烷基、 环烷基烷基和杂环烷基烷基，其中所述C1-10烷基、C1-6卤代烷基、C2-6 烯基、C2-6炔基、芳基、杂芳基、环烷基、杂环烷基、芳基烷基、杂 芳基烷基、环烷基烷基或杂环烷基烷基任选由1、2或3个独立选自 以下的取代基取代：OH、CN、氨基、卤代、C1-6烷基、C1-6卤代烷基、 C1-6卤代烷基、芳基、芳基烷基、杂芳基、杂芳基烷基、环烷基和杂 环烷基；
或Rc’和Rd’与它们连接的N原子一起形成任选由1、2或3个独 立选自以下的取代基取代的4-、5-、6-或7-元杂环烷基：OH、CN、 氨基、卤代、C1-6烷基、C1-6卤代烷基、C1-6卤代烷基、芳基、芳基烷 基、杂芳基、杂芳基烷基、环烷基和杂环烷基；
Rc”和Rd”独立地选自H、C1-10烷基、C1-6卤代烷基、C2-6烯基、 C2-6炔基、芳基、杂芳基、环烷基、杂环烷基、芳基烷基、杂芳基烷 基、环烷基烷基和杂环烷基烷基，其中所述C1-10烷基、C1-6卤代烷基、 C2-6烯基、C2-6炔基、芳基、杂芳基、环烷基、杂环烷基、芳基烷基、 杂芳基烷基、环烷基烷基或杂环烷基烷基任选由1、2或3个独立选 自以下的取代基取代：OH、CN、氨基、卤代、C1-6烷基、C1-6卤代烷 基、C1-6卤代烷基、芳基、芳基烷基、杂芳基、杂芳基烷基、环烷基 和杂环烷基；和
或Rc”和Rd”与它们连接的N原子一起形成任选由1、2或3个独 立选自以下的取代基取代的4-、5-、6-或7-元杂环烷基：OH、CN、 氨基、卤代、C1-6烷基、C1-6卤代烷基、C1-6卤代烷基、芳基、芳基烷 基、杂芳基、杂芳基烷基、环烷基和杂环烷基。
在一些实施方案中，X为N。
在一些实施方案中，X为CR4。
在一些实施方案中，A1为C。
在一些实施方案中，A1为N。
在一些实施方案中，A2为C。
在一些实施方案中，A2为N。
在一些实施方案中，A1、A2、U、T和V中的至少一个为N。
在一些实施方案中，由A1、A2、U、T和V形成的5-元环为吡咯 基、吡唑基、咪唑基、噁唑基、噻唑基或噁二唑基。
在一些实施方案中，由A1、A2、U、T和V形成的5-元环选自：


和
其中：
a 指定部分-(Y)n-Z的连接位置；
b 指定连接于以下核心部分的位置：
和
c和c’指定稠合的4-至20-元芳基、环烷基、杂芳基或杂环烷基环 的两个连接位置。
在一些实施方案中，由A1、A2、U、T和V形成的5-元环选自：

和
其中：
a 指定部分-(Y)n-Z的连接位置；
b 指定连接于以下核心部分的位置：
和
C和c’指定稠合的4-至20-元芳基、环烷基、杂芳基或杂环烷基 环的两个连接位置。
在一些实施方案中，由A1、A2、U、T和V形成的5-元环选自：

和
其中：
a 指定部分-(Y)n-Z的连接位置；
b 指定连接于以下核心部分的位置：
和
c和c’指定稠合的4-至20-元芳基、环烷基、杂芳基或杂环烷基环 的两个连接位置。
在一些实施方案中，由A1、A2、U、T和V形成的5-元环选自：

和
其中：
a 指定部分-(Y)n-Z的连接位置；
b 指定连接于以下核心部分的位置：

在一些实施方案中，由A1、A2、U、T和V形成的5-元环选自：
和
其中：
a 指定部分-(Y)n-Z的连接位置；
b 指定连接于以下核心部分的位置：

在一些实施方案中，由A1、A2、U、T和V形成的5-元环选自：

其中：
a 指定部分-(Y)n-Z的连接位置；
b 指定连接于以下核心部分的位置：

在一些实施方案中，n为0。
在一些实施方案中，n为1。
在一些实施方案中，n为1和Y为C1-8亚烷基、C2-8亚烯基、 (CR11R12)pC(O)(CR11R12)q、(CR11R12)pC(O)NRc(CR11R12)q、 (CR11R12)pC(O)O(CR11R12)q、(CR11R12)pOC(O)(CR11R12)q，其中所述 C1-8亚烷基或C2-8亚烯基任选由1、2或3个选自以下的取代基取代： 卤代、OH，CN，氨基、C1-4烷基氨基或C2-8二烷基氨基。
在一些实施方案中，n为1和Y为C1-8亚烷基、 (CR11R12)pC(O)(CR11R12)q、(CR11R12)pC(O)NRc(CR11R12)q、 (CR11R12)pC(O)O(CR11R12)q，其中所述C1-8亚烷基任选由1、2或3个 选自以下的取代基取代：卤代、OH、CN、氨基、C1-4烷基氨基或C2-8 二烷基氨基。
在一些实施方案中，n为1和Y为任选由1、2或3个选自以下 的取代基取代的C1-8亚烷基：卤代、OH、CN、氨基、C1-4烷基氨基 或C2-8二烷基氨基。
在一些实施方案中，n为1和Y为任选由1、2或3个选自以下 的取代基取代的亚乙基：卤代、OH，CN，氨基、C1-4烷基氨基或C2-8 二烷基氨基。
在一些实施方案中，n为1和Y为(CR11R12)pC(O)(CP11R12)q (CR11R12)pC(O)NRc(CR11R12)q或(CR11R12)pC(O)O(CR11R12)q。
在一些实施方案中，Y为C1-8亚烷基、C2-8亚烯基、C2-8亚炔基、 (CR11R12)p-(C3-10亚环烷基)-(CR11R12)q、(CR11R12)p-(亚芳 基)-(CR11R12)q、(CR11R12)p-(C1-10亚杂环烷基)-(CR11R12)q、 (CR11R12)p-(亚杂芳基)-(CR11R12)q、(CR11R12)pO(CR11R12)q或 (CR11R12)pS(CR11R12)q，其中所述C1-8亚烷基、C2-8亚烯基、C2-8亚炔 基、亚环烷基、亚芳基、亚杂环烷基或亚杂芳基任选由1、2或3个 独立选自-D1-D2-D3-D4的取代基取代。
在一些实施方案中，Y为C1-8亚烷基、C2-8亚烯基、C2-8亚炔基、 (CR11R12)p-(C3-10亚环烷基)-(CR11R12)q、(CR11R12)p-(亚芳 基)-(CR11R12)q、(CR11R12)p-(C1-10亚杂环烷基)-(CR11R12)q、 (CR11R12)p-(亚杂芳基)-(CR11R12)q、(CR11R12)pO(CR11R12)q或 (CR11R12)pS(CR11R12)q，其中所述C1-8亚烷基、C2-8亚烯基、C2-8亚炔 基、亚环烷基、亚芳基、亚杂环烷基或亚杂芳基任选由1、2或3个 独立选自D4的取代基取代.
在一些实施方案中，Y为C1-8亚烷基、C2-8亚烯基、C2-8亚炔基或 (CR11R12)p-(C3-10亚环烷基)-(CR11R12)q，其中所述C1-8亚烷基、C2-8亚 烯基、C2-8亚炔基或亚环烷基任选由1、2或3个独立选自-D1-D2-D3-D4 的取代基取代：
在一些实施方案中，Y为C1-8亚烷基、C2-8亚烯基、C2-8亚炔基或 (CR11R12)p-(C3-10亚环烷基)-(CR11R12)q，其中所述C1-8亚烷基、C2-8亚 烯基、C2-8亚炔基或亚环烷基任选由1、2或3个独立选自D4的取代 基取代。
在一些实施方案中，Y为C1-8亚烷基、C2-8亚烯基或C2-8亚炔基， 各自任选由1、2或3个独立选自-D1-D2-D3-D4的取代基取代。
在一些实施方案中，Y为任选由1、2或3个独立选自 -D1-D2-D3-D4的取代基取代的C1-8亚烷基。
在一些实施方案中，Y为任选由1、2或3个独立选自D4的取代 基取代的C1-8亚烷基。
在一些实施方案中，Y为C1-8亚烷基、C2-8亚烯基、C2-8亚炔基、 (CR11R12)pO(CP11R12)q、(CR11R12)pS(CR11R12)q、 (CR11R12)pC(O)(CR11R12)q、(CR11R12)pC(O)NRc(CR11R12)q、 (CR11R12)pC(O)O(CR11R12)q、(CR11R12)pOC(O)(CR11R12)q、 (CR11R12)pOC(O)NRc(CR11R12)q、(CR11R12)pNRc(CR11R12)q、 (CR11R12)pNRcC(O)NRd(CR11R12)q、(CR11R12)pS(O)(CR11R12)q、 (CR11R12)pS(O)NRc(CR11R12)q、(CR11R12)pS(O)2(CR11R12)q或 (CR11R12)pS(O)2NRc(CR11R12)q，其中所述C1-8亚烷基、C2-8亚烯基、C2-8 亚炔基任选由1、2或3个独立选自以下的取代基取代：卤代、OH、 CN、氨基、C1-4烷基氨基和C2-8二烷基氨基。
在一些实施方案中，Y为C1-8亚烷基、C2-8亚烯基、C2-8亚炔基、 (CR11R12)p-(C3-10亚环烷基)-(CR11R12)q、(CR11R12)p-(亚芳 基)-(CR11R12)q、(CR11R12)p-(C1-10亚杂环烷基)-(CR11R12)q、 (CR11R12)p-(亚杂芳基)-(CR11R12)q、(CR11R12)pO(CR11R12)q、 (CR11R12)pS(CR11R12)q、(CR11R12)pC(O)(CR11R12)q、 (CR11R12)pC(O)NRc(CR11R12)q、(CR11R12)pC(O)O(CR11R12)q、 (CR11R12)pOC(O)(CR11R12)q、(CR11R12)pOC(O)NRc(CR11R12)q、 (CR11R12)pNRc(CR11R12)q、(CR11R12)pNRcC(O)NRd(CR11R12)q、 (CR11R12)pS(O)(CR11R12)q、(CR11R12)pS(O)NRc(CR11R12)q、 (CR11R12)pS(O)2(CR11R12)q或(CR11R12)pS(O)2NRc(CR11R12)q，其中所述 C1-8亚烷基、C2-8亚烯基、C2-8亚炔基、亚环烷基，、亚芳基、亚杂环烷 基或亚杂芳基任选由1、2或3个独立选自以下的取代基取代：卤 代、OH、CN、氨基、C1-4烷基氨基和C2-8二烷基氨基。
在一些实施方案中，p为0。
在一些实施方案中，p为1。
在一些实施方案中，p为2。
在一些实施方案中，q为0。
在一些实施方案中，q为1。
在一些实施方案中，q为2。
在一些实施方案中，p和q之一为0，而p和q的另一个为1、2 或3。
在一些实施方案中，Z为H、卤代、C1-4烷基、C2-4烯基、C2-4炔 基、C1-4卤代烷基、卤代硫烷基、C1-4羟基烷基、C1-4氰基烷基、 Cy1、CN、NO2、ORa、SRa、C(O)Rb、C(O)NRcRd、C(O)ORa、 OC(O)Rb、OC(O)NRcRd、NRcRd、NRcC(O)Rb、NRcC(O)NRcRd、 NRcC(O)ORa、C(＝NRi)NRcRd、NRcC(＝NRi)NRcRd、S(O)Rb、 S(O)NRcRd、S(O)2Rb、NRcS(O)2Rb、C(＝NOH)Rb、C(＝NO(C1-6烷 基)Rb和S(O)2NRcRd，其中所述C1-8烷基、C2-8烯基或C2-8炔基任选由 1、2、3、4、5或6个独立选自以下的取代基取代：卤代、C1-4烷 基、C2-4烯基、C2-4炔基、C1-4卤代烷基、卤代硫烷基、C1-4羟基烷 基、C1-4氰基烷基、Cy1、CN、NO2、ORa、SRa、C(O)Rb、 C(O)NRcRd、C(O)ORa、OC(O)Rb、OC(O)NRcRd、NRcRd、 NRcC(O)Rb、NRcC(O)NRcRd、NRcC(O)ORa、C(＝NRi)NRcRd、 NRcC(＝NRi)NRcRd、S(O)Rb、S(O)NRcRd、S(O)2Rb、NRcS(O)2Rb、 C(＝NOH)Rb、C(＝NO(C1-6烷基))Rb和S(O)2NRcRd。
在一些实施方案中，Z为芳基、环烷基、杂芳基或杂环烷基，各 自任选由1、2、3、4、5或6个选自以下的取代基取代：卤代、C1-4 烷基、C2-4烯基、C2-4炔基、C1-4卤代烷基、卤代硫烷基、C1-4羟基烷 基、C1-4氰基烷基、Cy1、CN、NO2、ORa、SRa、C(O)Rb、 C(O)NRcRd、C(O)ORa、OC(O)Rb、OC(O)NRcRd、NRcRd、 NRcC(O)Rb、NRcC(O)NRcRd、NRcC(O)ORa、C(＝NRi)NRcRd、 NRcC(＝NRi)NRcRd、S(O)Rb、S(O)NRcRd、S(O)2Rb、NRcS(O)2Rb和 S(O)2NRcRd。
在一些实施方案中，Z为芳基、环烷基、杂芳基或杂环烷基，各 自任选由1、2、3、4、5或6个选自以下的取代基取代：卤代、C1-4 烷基、C2-4烯基、C2-4炔基、C1-4卤代烷基、C1-4羟基烷基、C1-4氰基 烷基、Cy1、CN、NO2、ORa、SRa、C(O)Rb、C(O)NRcRd、 C(O)ORa、OC(O)Rb、OC(O)NRcRd、NRcRd、NRcC(O)Rb、 NRcC(O)NRcRd、NRcC(O)ORa、C(＝NRi)NRcRd、NRcC(＝NRi)NRcRd、 S(O)Rb、S(O)NRcRd、S(O)2Rb、NRcS(O)2Rb和S(O)2NRcRd。
在一些实施方案中，Z为芳基或杂芳基，各自任选由1、2、3、 4、5或6个选自以下的取代基取代：卤代、C1-4烷基、C2-4烯基、C2-4 炔基、C1-4卤代烷基、卤代硫烷基、C1-4羟基烷基、C1-4氰基烷基、 Cy1、CN、NO2、ORa、SRa、C(O)Rb、C(O)NRcRd、C(O)ORa、 OC(O)Rb、OC(O)NRcRd、NRcRd、NRcC(O)Rb、NRcC(O)NRcRd、 NRcC(O)ORa、C(＝NRi)NRcRd、NRcC(＝NRi)NRcRd、S(O)Rb、 S(O)NRcRd、S(O)2Rb、NRcS(O)2Rb和S(O)2NRcRd。
在一些实施方案中，Z为芳基或杂芳基，各自任选由1、2、3、 4、5或6个选自以下的取代基取代：卤代、C1-4烷基、C2-4烯基、C2-4 炔基、C1-4卤代烷基、C1-4羟基烷基、C1-4氰基烷基、Cy1、CN、NO2、 ORa、SRa、C(O)Rb、C(O)NRcRd、C(O)ORa、OC(O)Rb、 OC(O)NRcRd、NRcRd、NRcC(O)Rb、NRcC(O)NRcRd、NRcC(O)ORa、 C(＝NRi)NRcRd、NRcC(＝NRi)NRcRd、S(O)Rb、S(O)NRcRd、S(O)2Rb、 NRcS(O)2Rb和S(O)2NRcRd。
在一些实施方案中，Z为苯基或5-或6-元杂芳基，各自任选由 1、2、3、4、5或6个选自以下的取代基取代：卤代、C1-4烷基、C2-4 烯基、C2-4炔基、C1-4卤代烷基、卤代硫烷基、C1-4羟基烷基、C1-4氰 基烷基、Cy1、CN、NO2、ORa、SRa、C(O)Rb、C(O)NRcRd、 C(O)ORa、OC(O)Rb、OC(O)NRcRd、NRcRd、NRcC(O)Rb、 NRcC(O)NRcRd、NRcC(O)ORa、C(＝NRi)NRcRd、NRcC(＝NRi)NRcRd、 S(O)Rb、S(O)NRcRd、S(O)2Rb、NRcS(O)2Rb和S(O)2NRcRd。
在一些实施方案中，Z为苯基或5-或6-元杂芳基，各自任选由 1、2、3、4、5或6个选自以下的取代基取代：卤代、C1-4烷基、C2-4 烯基、C2-4炔基、C1-4卤代烷基、C1-4羟基烷基、C1-4氰基烷基、Cy1、 CN、NO2、ORa、SRa、C(O)Rb、C(O)NRcRd、C(O)ORa、OC(O)Rb、 OC(O)NRcRd、NRcRd、NRcC(O)Rb、NRcC(O)NRcRd、NRcC(O)ORa、 C(＝NRi)NRcRd、NRcC(＝NRi)NRcRd、S(O)Rb、S(O)NRcRd、S(O)2Rb、 NRcS(O)2Rb和S(O)2NRcRd。
在一些实施方案中，Z任选由1、2、3、4、5或6个选自以下的 取代基取代的苯基：卤代、C1-4烷基、C2-4烯基、C2-4炔基、C1-4卤代 烷基、卤代硫烷基、C1-4羟基烷基、C1-4氰基烷基、Cy1、CN、NO2、 ORa、SRa、C(O)Rb、C(O)NRcRd、C(O)ORa、OC(O)Rb、 OC(O)NRcRd、NRcRd、NRcC(O)Rb、NRcC(O)NRcRd、NRcC(O)ORa、 C(＝NRi)NRcRd、NRcC(＝NRi)NRcRd、S(O)Rb、S(O)NRcRd、S(O)2Rb、 NRcS(O)2Rb和S(O)2NRcRd。
在一些实施方案中，Z任选由1、2、3、4、5或6个选自以下的 取代基取代的苯基：卤代、C1-4烷基、C2-4烯基、C2-4炔基、C1-4卤代 烷基、C1-4羟基烷基、C1-4氰基烷基、Cy1、CN、NO2、ORa、SRa、 C(O)Rb、C(O)NRcRd、C(O)ORa、OC(O)Rb、OC(O)NRcRd、NRcRd、 NRcC(O)Rb、NRcC(O)NRcRd、NRcC(O)ORa、C(＝NRi)NRcRd、 NRcC(＝NRi)NRcRd、S(O)Rb、S(O)NRcRd、S(O)2Rb、NRcS(O)2Rb和 S(O)2NRcRd。
在一些实施方案中，Z为环烷基或杂环烷基，各自任选由1、 2、3、4、5或6个选自以下的取代基取代：卤代、C1-4烷基、C2-4烯 基、C2-4炔基、C1-4卤代烷基、卤代硫烷基、C1-4羟基烷基、C1-4氰基 烷基、Cy1、CN、NO2、ORa、SRa、C(O)Rb、C(O)NRcRd、 C(O)ORa、OC(O)Rb、OC(O)NRcRd、NRcRd、NRcC(O)Rb、 NRcC(O)NRcRd、NRcC(O)ORa、C(＝NRi)NRcRd、NRcC(＝NRi)NRcRd、 S(O)Rb、S(O)NRcRd、S(O)2Rb、NRcS(O)2Rb和S(O)2NRcRd。
在一些实施方案中，Z为环烷基或杂环烷基，各自任选由1、 2、3、4、5或6个选自以下的取代基取代：卤代、C1-4烷基、C2-4烯 基、C2-4炔基、C1-4卤代烷基、C1-4羟基烷基、C1-4氰基烷基、Cy1、 CN、NO2、ORa、SRa、C(O)Rb、C(O)NRcRd、C(O)ORa、OC(O)Rb、 OC(O)NRcRd、NRcRd、NRcC(O)Rb、NRcC(O)NRcRd、NRcC(O)ORa、 C(＝NRi)NRcRd、NRcC(＝NRi)NRcRd、S(O)Rb、S(O)NRcRd、S(O)2Rb、 NRcS(O)2Rb和S(O)2NRcRd。
在一些实施方案中，Z为环丙基、环丁基、环戊基、环己基或环 庚基，各自任选由1、2、3、4、5或6个选自以下的取代基取代：卤 代、C1-4烷基、C2-4烯基、C2-4炔基、C1-4卤代烷基、卤代硫烷基、C1-4 羟基烷基、C1-4氰基烷基、Cy1、CN、NO2、ORa、SRa、C(O)Rb、 C(O)NRcRd、C(O)ORa、OC(O)Rb、OC(O)NRcRd、NRcRd、 NRcC(O)Rb、NRcC(O)NRcRd、NRcC(O)ORa、C(＝NRi)NRcRd、 NRcC(＝NRi)NRcRd、S(O)Rb、S(O)NRcRd、S(O)2Rb、NRcS(O)2Rb和 S(O)2NRcRd。
在一些实施方案中，Z为C1-8烷基、C2-8烯基或C2-8炔基，各自 任选由1、2、3、4、5或6个选自以下的取代基取代：卤代、C1-4烷 基、C2-4烯基、C2-4炔基、C1-4卤代烷基、卤代硫烷基、C1-4羟基烷 基、C1-4氰基烷基、Cy1、CN、NO2、ORa、SRa、C(O)Rb、 C(O)NRcRd、C(O)ORa、OC(O)Rb、OC(O)NRcRd、NRcRd、 NRcC(O)Rb、NRcC(O)NRcRd、NRcC(O)ORa、C(＝NRi)NRcRd、 NRcC(＝NRi)NRcRd、S(O)Rb、S(O)NRcRd、S(O)2Rb、NRcS(O)2Rb和 S(O)2NRcRd。
在一些实施方案中，Z为C1-8烷基、C2-8烯基或C2-8炔基，各自 任选由1、2、3、4、5或6个选自以下的取代基取代：卤代、C1-4烷 基、C2-4烯基、C2-4炔基、C1-4卤代烷基、C1-4羟基烷基、C1-4氰基烷 基、Cy1、CN、NO2、ORa、SRa、C(O)Rb、C(O)NRcRd、C(O)ORa、 OC(O)Rb、OC(O)NRcRd、NRcRd、NRcC(O)Rb、NRcC(O)NRcRd、 NRcC(O)ORa、C(＝NRi)NRcRd、NRcC(＝NRi)NRcRd、S(O)Rb、 S(O)NRcRd、S(O)2Rb、NRcS(O)2Rb和S(O)2NRcRd。
在一些实施方案中，Z为芳基、环烷基、杂芳基或杂环烷基，各 自任选由1、2、3、4、5或6个独立选自以下的取代基取代：卤代、 C1-4烷基、C2-4烯基、C2-4炔基、C1-4卤代烷基、卤代硫烷基、C1-4羟 基烷基、C1-4氰基烷基、Cy1、CN、NO2、ORa、SRa、C(O)Rb、 C(O)NRcRd、C(O)ORa、OC(O)Rb、OC(O)NRcRd、NRcRd、 NRcC(O)Rb、NRcC(O)NRcRd、NRcC(O)ORa、S(O)Rb、S(O)NRcRd、 S(O)2Rb、NRcS(O)2Rb和S(O)2NRcRd。
在一些实施方案中，Z为芳基、环烷基、杂芳基或杂环烷基，各 自任选由1、2、3、4、5或6个独立选自以下的取代基取代：卤代、 C1-4烷基、C2-4烯基、C2-4炔基、C1-4卤代烷基、C1-4羟基烷基、C1-4氰 基烷基、Cy1、CN、NO2、ORa、SRa、C(O)Rb、C(O)NRcRd、 C(O)ORa、OC(O)Rb、OC(O)NRcRd、NRcRd、NRcC(O)Rb、 NRcC(O)NRcRd、NRcC(O)ORa、S(O)Rb、S(O)NRcRd、S(O)2Rb、 NRcS(O)2Rb和S(O)2NRcRd。
在一些实施方案中，Z为芳基或杂芳基，各自任选由1、2、3、 4、5或6个独立选自以下的取代基取代：卤代、C1-4烷基、C2-4烯 基、C2-4炔基、C1-4卤代烷基、卤代硫烷基、C1-4羟基烷基、C1-4氰基 烷基、Cy1、CN、NO2、ORa、SRa、C(O)Rb、C(O)NRcRd、 C(O)ORa、OC(O)Rb、OC(O)NRcRd、NRcRd、NRcC(O)Rb、 NRcC(O)NRcRd、NRcC(O)ORa、S(O)Rb、S(O)NRcRd、S(O)2Rb、 NRcS(O)2Rb和S(O)2NRcRd。
在一些实施方案中，Z为芳基或杂芳基，各自任选由1、2、3、 4、5或6个独立选自以下的取代基取代：卤代、C1-4烷基、C2-4烯 基、C2-4炔基、C1-4卤代烷基、C1-4羟基烷基、C1-4氰基烷基、Cy1、 CN、NO2、ORa、SRa、C(O)Rb、C(O)NRcRd、C(O)ORa、OC(O)Rb、 OC(O)NRcRd、NRcRd、NRcC(O)Rb、NRcC(O)NRcRd、NRcC(O)ORa、 S(O)Rb、S(O)NRcRd、S(O)2Rb、NRcS(O)2Rb和S(O)2NRcRd。
在一些实施方案中，Z为苯基或5-或6-元杂芳基，各自任选由 1、2、3、4、5或6个独立选自以下的取代基取代：卤代、C1-4烷 基、C2-4烯基、C2-4炔基、C1-4卤代烷基、卤代硫烷基、C1-4羟基烷 基、C1-4氰基烷基、Cy1、CN、NO2、ORa、SRa、C(O)Rb、 C(O)NRcRd、C(O)ORa、OC(O)Rb、OC(O)NRcRd、NRcRd、 NRcC(O)Rb、NRcC(O)NRcRd、NRcC(O)ORa、S(O)Rb、S(O)NRcRd、 S(O)2Rb、NRcS(O)2Rb和S(O)2NRcRd。
在一些实施方案中，Z为苯基或5-或6-元杂芳基，各自任选由 1、2、3、4、5或6个独立选自以下的取代基取代：卤代、C1-4烷 基、C2-4烯基、C2-4炔基、C1-4卤代烷基、C1-4羟基烷基、C1-4氰基烷 基、Cy1、CN、NO2、ORa、SRa、C(O)Rb、C(O)NRcRd、C(O)ORa、 OC(O)Rb、OC(O)NRcRd、NRcRd、NRcC(O)Rb、NRcC(O)NRcRd、 NRcC(O)ORa、S(O)Rb、S(O)NRcRd、S(O)2Rb、NRcS(O)2Rb和 S(O)2NRcRd。
在一些实施方案中，Z任选由1、2、3、4、5或6个独立选自以 下的取代基取代的苯基：卤代、C1-4烷基、C2-4烯基、C2-4炔基、C1-4 卤代烷基、卤代硫烷基、C1-4羟基烷基、C1-4氰基烷基、Cy1、CN、 NO2、ORa、SRa、C(O)Rb、C(O)NRcRd、C(O)ORa、OC(O)Rb、 OC(O)NRcRd、NRcRd、NRcC(O)Rb、NRcC(O)NRcRd、NRcC(O)ORa、 S(O)Rb、S(O)NRcRd、S(O)2Rb、NRcS(O)2Rb和S(O)2NRcRd。
在一些实施方案中，Z任选由1、2、3、4、5或6个独立选自以 下的取代基取代的苯基：卤代、C1-4烷基、C2-4烯基、C2-4炔基、C1-4 卤代烷基、C1-4羟基烷基、C1-4氰基烷基、Cy1、CN、NO2、ORa、 SRa、C(O)Rb、C(O)NRcRd、C(O)ORa、OC(O)Rb、OC(O)NRcRd、 NRcRd、NRcC(O)Rb、NRcC(O)NRcRd、NRcC(O)ORa、S(O)Rb、 S(O)NRcRd、S(O)2Rb、NRcS(O)2Rb和S(O)2NRcRd。
在一些实施方案中，Z为环烷基或杂环烷基，各自任选由1、 2、3、4、5或6个独立选自以下的取代基取代：卤代、C1-4烷基、 C2-4烯基、C2-4炔基、C1-4卤代烷基、卤代硫烷基、C1-4羟基烷基、C1-4 氰基烷基、Cy1、CN、NO2、ORa、SRa、C(O)Rb、C(O)NRcRd、 C(O)ORa、OC(O)Rb、OC(O)NRcRd、NRcRd、NRcC(O)Rb、 NRcC(O)NRcRd、NRcC(O)ORa、S(O)Rb、S(O)NRcRd、S(O)2Rb、 NRcS(O)2Rb和S(O)2NRcRd。
在一些实施方案中，Z为环烷基或杂环烷基，各自任选由1、 2、3、4、5或6个独立选自以下的取代基取代：卤代、C1-4烷基、 C2-4烯基、C2-4炔基、C1-4卤代烷基、C1-4羟基烷基、C1-4氰基烷基、 Cy1、CN、NO2、ORa、SRa、C(O)Rb、C(O)NRcRd、C(O)ORa、 OC(O)Rb、OC(O)NRcRd、NRcRd、NRcC(O)Rb、NRcC(O)NRcRd、 NRcC(O)ORa、S(O)Rb、S(O)NRcRd、S(O)2Rb、NRcS(O)2Rb和 S(O)2NRcRd。
在一些实施方案中，Z为C1-8烷基、C2-8烯基或C2-8炔基，各自 任选由1、2、3、4、5或6个独立选自以下的取代基取代：卤代、 C1-4烷基、C2-4烯基、C2-4炔基、C1-4卤代烷基、卤代硫烷基、C1-4羟 基烷基、C1-4氰基烷基、Cy1、CN、NO2、ORa、SRa、C(O)Rb、 C(O)NRcRd、C(O)ORa、OC(O)Rb、OC(O)NRcRd、NRcRd、 NRcC(O)Rb、NRcC(O)NRcRd、NRcC(O)ORa、S(O)Rb、S(O)NRcRd、 S(O)2Rb、NRcS(O)2Rb和S(O)2NRcRd。
在一些实施方案中，Z为C1-8烷基、C2-8烯基或C2-8炔基，各自 任选由1、2、3、4、5或6个独立选自以下的取代基取代：卤代、 C1-4烷基、C2-4烯基、C2-4炔基、C1-4卤代烷基、C1-4羟基烷基、C1-4氰 基烷基、Cy1、CN、NO2、ORa、SRa、C(O)Rb、C(O)NRcRd、 C(O)ORa、OC(O)Rb、OC(O)NRcRd、NRcRd、NRcC(O)Rb、 NRcC(O)NRcRd、NRcC(O)ORa、S(O)Rb、S(O)NRcRd、S(O)2Rb、 NRcS(O)2Rb和S(O)2NRcRd。
在一些实施方案中，Z为C1-8烷基、C2-8烯基、C2-8炔基、芳基、 环烷基、杂芳基或杂环烷基，各自任选由1、2、3、4、5或6个独立 选自以下的取代基取代：卤代、C1-4烷基、C1-4卤代烷基、卤代硫烷 基、C1-4羟基烷基、C1-4氰基烷基、Cy1、CN、NO2、ORa、 C(O)NRcRd、C(O)ORa、NRcRd、NRcC(O)Rb和S(O)2Rb。
在一些实施方案中，Z为C1-8烷基、C2-8烯基、C2-8炔基、芳基、 环烷基、杂芳基或杂环烷基，各自任选由1、2、3、4、5或6个独立 选自以下的取代基取代：卤代、C1-4烷基、C1-4卤代烷基、C1-4羟基烷 基、C1-4氰基烷基、Cy1、CN、NO2、ORa、C(O)NRcRd、C(O)ORa、 NRcRd、NRcC(O)Rb和S(O)2Rb。
在一些实施方案中，Z为C1-8烷基、C2-8烯基、C2-8炔基、芳基、 环烷基、杂芳基或杂环烷基，各自任选由1、2或3个独立选自以下 的取代基取代：卤代、C1-4烷基、C1-4卤代烷基、卤代硫烷基、C1-4羟 基烷基、C1-4氰基烷基、Cy1、CN、NO2、ORa、C(O)NRcRd、 C(O)ORa、NRcRd、NRcC(O)Rb和S(O)2Rb。
在一些实施方案中，Z为C1-8烷基、C2-8烯基、C2-8炔基、芳基、 环烷基、杂芳基或杂环烷基，各自任选由1、2或3个独立选自以下 的取代基取代：卤代、C1-4烷基、C1-4卤代烷基、C1-4羟基烷基、C1-4 氰基烷基、Cy1、CN、NO2、ORa、C(O)NRcRd、C(O)ORa、NRcRd、 NRcC(O)Rb和S(O)2Rb。
在一些实施方案中，Z被包含至少一个CN基团的至少一个取代 基取代。
在一些实施方案中，Z为C1-8烷基、C2-8烯基、C2-8炔基、芳基、 环烷基、杂芳基或杂环烷基，各自被至少一个CN或C1-4氰基烷基取 代和任选被1、2、3、4或5个另外的选自以下取代基取代：卤代、 C1-4烷基、C2-4烯基、C2-4炔基、C1-4卤代烷基、卤代硫烷基、C1-4羟 基烷基、C1-4氰基烷基、Cy1、CN、NO2、ORa、SRa、C(O)Rb、 C(O)NRcRd、C(O)ORa、OC(O)Rb、OC(O)NRcRd、NRcRd、 NRcC(O)Rb、NRcC(O)NRcRd、NRcC(O)ORa、S(O)Rb、S(O)NRcRd、 S(O)2Rb、NRcS(O)2Rb和S(O)2NRcRd。
在一些实施方案中，Z为C1-8烷基、C2-8烯基、C2-8炔基、芳基、 环烷基、杂芳基或杂环烷基，各自被至少一个CN或C1-4氰基烷基取 代和任选被1、2、3、4或5个另外的选自以下取代基取代：卤代、 C1-4烷基、C2-4烯基、C2-4炔基、C1-4卤代烷基、C1-4羟基烷基、C1-4氰 基烷基、Cy1、CN、NO2、ORa、SRa、C(O)Rb、C(O)NRcRd、 C(O)ORa、OC(O)Rb、OC(O)NRcRd、NRcRd、NRcC(O)Rb、 NRcC(O)NRcRd、NRcC(O)ORa、S(O)Rb、S(O)NRcRd、S(O)2Rb、 NRcS(O)2Rb和S(O)2NRcRd。
在一些实施方案中，其中-(Y)n-Z部分与i)所述部分连接的A2，ii) T或V的R5或R6，以及iii)所述T或V的R5或R6连接的C或N 原子，结合在一起形成与由A1、A2、U、T和V形成的5-元环稠合的 4-至20-元芳基、环烷基、杂芳基或杂环烷基环，其中所述4-至20-元 芳基、环烷基、杂芳基或杂环烷基环任选被1、2、3、4或5个独立 选自-(W)m-Q的取代基取代。
在一些实施方案中，其中-(Y)n-Z部分与i)所述部分连接的A2， ii)T或V的R5或R6，以及iii)所述T或V的R5或R6连接的C或N 原子，结合在一起形成与由A1、A2、U、T和V形成的5-元环稠合的 4-至8-元芳基、环烷基、杂芳基或杂环烷基环，其中所述4-至8-元芳 基、环烷基、杂芳基或杂环烷基环任选被1、2、3、4或5个独立选 自-(W)m-Q的取代基取代。
在一些实施方案中，-(Y)n-Z部分与i)所述部分连接的A2，ii)T 或V的R5或R6，以及iii)所述T或V的R5或R6连接的C或N原 子，结合在一起形成与由A1、A2、U、T和V形成的5-元环稠合的 6-元芳基、环烷基、杂芳基或杂环烷基环，其中所述6-元芳基、环烷 基、杂芳基或杂环烷基环任选被1、2或3个独立选自以下的取代基 取代：卤代、CN、NO2、C1-8烷基、C2-8烯基、C2-8炔基、C1-8卤代烷 基、芳基、环烷基、杂芳基或杂环烷基，其中所述C1-8烷基、C2-8烯 基、C2-8炔基、C1-8卤代烷基、芳基、环烷基、杂芳基或杂环烷基任 选被1、2或3个CN取代。
在一些实施方案中，Cy1和Cy2独立地选自芳基、杂芳基、环烷 基和杂环烷基，各自任选由1、2、3、4或5个独立选自以下的取代 基取代：卤代、C1-4烷基、C2-4烯基、C2-4炔基、C1-4卤代烷基、C1-4 羟基烷基、C1-4氰基烷基、CN、NO2、ORa”、SRa”、C(O)Rb”、 C(O)NRc”Rd”、C(O)ORa”、OC(O)Rb”、OC(O)NRc”Rd”、NRc”Rd”、 NRc”C(O)Rb”、NRc”C(O)ORa”、S(O)Rb”、S(O)NRc”Rd”、S(O)2Rb”和 S(O)2NRc”Rd”。
在一些实施方案中，Cy1和Cy2独立地选自芳基、杂芳基、环烷 基和杂环烷基，各自任选由1、2、3、4或5个独立选自以下的取代 基取代：卤代、C1-4烷基、C2-4烯基、C2-4炔基、C1-4卤代烷基、CN、 NO2、ORa”、SRa”、C(O)Rb”、C(O)NRc”Rd”、C(O)ORa”、 OC(O)Rb”、OC(O)NRc”Rd”、NRc”Rd”、NRc”C(O)Rb”、 NRc”C(O)ORa”、S(O)Rb”、S(O)NRc”Rd”、S(O)2Rb”和S(O)2NRc”Rd”。
在一些实施方案中，Cy1和Cy2独立地选自环烷基和杂环烷基， 各自任选由1、2、3、4或5个独立选自以下的取代基取代：卤代、 C1-4烷基、C2-4烯基、C2-4炔基、C1-4卤代烷基、CN、NO2、ORa”、 SRa”、C(O)Rb”、C(O)NRc”Rd”、C(O)ORa”、OC(O)Rb”、 OC(O)NRc”Rd”、NRc”Rd”、NRc”C(O)Rb”、NRc”C(O)ORa”、 S(O)Rb”、S(O)NRc”Rd”、S(O)2Rb”和S(O)2NRc”Rd”。
在一些实施方案中，Cy1和Cy2独立地选自任选被1、2、3、4或 5个独立选自以下的取代基取代的环烷基：卤代、C1-4烷基、C2-4烯 基、C2-4炔基、C1-4卤代烷基、CN、NO2、ORa”、SRa”、C(O)Rb”、 C(O)NRc”Rd”、C(O)ORa”、OC(O)Rb”、OC(O)NRc”Rd”、NRc”Rd”、 NRc”C(O)Rb”、NRc”C(O)ORa”、S(O)Rb”、S(O)NRc”Rd”、S(O)2Rb”和 S(O)2NRc”Rd”。
在一些实施方案中，R1、R2、R3和R4独立地选自H、卤代、C1-4 烷基、C2-4烯基、C2-4炔基、C1-4卤代烷基、芳基、环烷基、杂芳基、 杂环烷基、CN、NO2、OR7、SR7、C(O)R8、C(O)NR9R10、C(O)OR7 OC(O)R8、OC(O)NR9R10、NR9R10、NR9C(O)R8、NRcC(O)OR7、 S(O)R8、S(O)NR9R10、S(O)2R8、NR9S(O)2R8和S(O)2NR9R10。
在一些实施方案中，R1、R2、R3和R4独立地选自H、卤代和C1-4 烷基。
在一些实施方案中，R1、R2、R3和R4各自为H。
在一些实施方案中，R1为H、卤代或C1-4烷基。
在一些实施方案中，R5为H、卤代、C1-4烷基、C2-4烯基、C2-4 炔基、C1-4卤代烷基、CN、NO2、OR7、SR7、C(O)R8、 C(O)NR9R10、C(O)OR7、OC(O)R8、OC(O)NR9R10、NR9R10、 NR9C(O)R8、NR9C(O)OR7、S(O)R8、S(O)NR9R10、S(O)2R8、 NR9S(O)2R8或S(O)2NR9R10。
在一些实施方案中，R5为H、卤代、C1-4烷基、C1-4卤代烷基、 卤代硫烷基、CN或NR9R10。
在一些实施方案中，R5为H、卤代、C1-4烷基、C1-4卤代烷基、 CN或NR9R10。
在一些实施方案中，R5为H。
在一些实施方案中，R6为H或C1-4烷基。
在一些实施方案中，R6为H。
在一些实施方案中，R11和R12独立地选自H、卤代、C1-4烷基、 C2-4烯基、C2-4炔基、C1-4卤代烷基、卤代硫烷基、C1-4羟基烷基、C1-4 氰基烷基、Cy1、CN、NO2、ORa、SRa、C(O)Rb、C(O)NRcRd、 C(O)ORa、OC(O)Rb、OC(O)NRcRd、NRcRd、NRcC(O)Rb、 NRcC(O)NRcRd、NRcC(O)ORa、C(＝NRi)NRcRd、NRcC(＝NRi)NRcRd、 S(O)Rb、S(O)NRcRd、S(O)2Rb、NRcS(O)2Rb、C(＝NOH)Rb、 C(＝NO(C1-6烷基)Rb和S(O)2NRcRd，其中所述C1-8烷基、C2-8烯基或 C2-8炔基任选由1、2、3、4、5或6个独立选自以下的取代基取代： 卤代、C1-4烷基、C2-4烯基、C2-4炔基、C1-4卤代烷基、卤代硫烷基、 C1-4羟基烷基、C1-4氰基烷基、Cy1、CN、NO2、ORa、SRa、 C(O)Rb、C(O)NRcRd、C(O)ORa、OC(O)Rb、OC(O)NRcRd、NRcRd、 NRcC(O)Rb、NRcC(O)NRcRd、NRcC(O)ORa、C(＝NRi)NRcRd、 NRcC(＝NRi)NRcRd、S(O)Rb、S(O)NRcRd、S(O)2Rb、NRcS(O)2Rb、 C(＝NOH)Rb、C(＝NO(C1-6烷基))Rb和S(O)2NRcRd。
在一些实施方案中，R11和R12独立地选自H、卤代、OH、CN、 C1-4烷基、C1-4卤代烷基、卤代硫烷基、SCN、C2-4烯基、C2-4炔基、 C1-4羟基烷基、C1-4氰基烷基、芳基、杂芳基、环烷基和杂环烷基。
在一些实施方案中，R11和R12独立地选自H、卤代、OH、CN、 C1-4烷基、C1-4卤代烷基、C2-4烯基、C2-4炔基、C1-4羟基烷基、C1-4氰 基烷基、芳基、杂芳基、环烷基和杂环烷基。
在一些实施方案中，所述化合物具有式Ia或Ib：

在一些实施方案中，所述化合物具有式II：

在一些实施方案中，所述化合物具有式IIIa或IIIb：

在一些实施方案中，所述化合物具有式IV：

在一些实施方案中，所述化合物具有式Va：

在一些实施方案中，所述化合物具有式Vb：

在一些实施方案中，所述化合物具有式VIa：

在一些实施方案中，所述化合物具有式VIb：

在本说明书的各部分，本发明化合物的取代基以基团组或范围公 开。特别打算使本发明包括这样的基团组和范围的成员的各个和每一 个独立的亚组合。例如，术语“C1-6烷基”特别指独立公开的甲基、乙 基、C3烷基、C4烷基、C5烷基和C6烷基。
还应该意识到，本发明的某些特征(在各实施方案中的上下文中 清楚描述的特征)也可以在组合中以单一的实施方案的提供。相反地， 本发明的各种特征(在单一实施方案中的上下文中简约描述的特征)也 可以分开或以任何合适的亚组合提供。
在本说明书的各部分，描述了连接取代基。特别指出各连接取代 基包括连接取代基的前面和后面的形式(forward and backward forms) 两者。例如，-NR(CR’R”)n-包括NR(CR’R”)n和-(CR’R”)nNR-。在该 结构清楚地需要连接基团时，列于该基团的马库什变量(Markush variables)应被理解为连接基团。例如，如果该结构需要连接基团和马 库什(Markush)基团对变量表“烷基”或“芳基”的定义，则应该理解“烷 基”或“芳基”分别表示连接键亚烷基或亚芳基。
术语“n-元”，其中n为整数，通常描述在一个部分中的成环原子 的数量，其中成环原子的数量为n。例如，哌啶基是6-元杂环烷基环 的实例，而1，2，3，4-四氢-萘是10-元环烷基的实例。
如在本文中所用的，术语“烷基”意指饱和的烃基，其为直链或支 链的。烷基的例子包括甲基(Me)、乙基(Et)、丙基(如，n-丙基和异丙 基)、丁基(如，正-丁基、异丁基、叔-丁基)、戊基(如，正-戊基、异戊 基、新戊基)等。烷基可含有1至约20，2至约20，1至约10，1至约 8，1至约6，1至约4或1至约3个碳原子。连接烷基在此被称为“亚 烷基”。
如在本文中所用的，“烯基”指具有一个或多个碳-碳双键的烷基。 烯基的实例包括乙烯基、丙烯基、环己烯基等。连接烯基在此被称为 “亚烯基”。
如在本文中所用的，“炔基”指具有一个或多个碳-碳三键的烷基。 炔基的实例包括乙炔基、丙炔基等。连接炔基在此被称为“亚炔基”。
如在本文中所用的，“卤代烷基”指具有一个或多个卤素取代基 的烷基。卤代烷基的实例包括CF3、C2F5、CHF2、CCl3、CHCl2、 C2Cl5等。
如在本文中所用的，“卤代硫烷基”指具有一个或多个卤素取代 基的硫基。卤代硫烷基的实例包括五卤代硫烷基如SF5。
如在本文中所用的，“芳基”指单环或多环(如，具有2、3或4个 稠合环)的芳烃例如，苯基、萘基、蒽基、菲基、茚满基、茚基等。在 一些实施方案中，芳基具有6至约20碳原子。连接芳基在此被称为 “亚芳基”。
如在本文中所用的，“环烷基”指非-芳族环状烃，包括环状烷基、 烯基和炔基。环烷基可包括单环或多环(如，具有2、3或4个稠合环) 的基团和螺环。环烷基的成环碳原子可任选被氧代或硫代(sulfido)取 代。环烷基也包括亚环烷基。环烷基的实例包括环丙基、环丁基、环 戊基、环己基、环庚基、环戊二烯基、环己烯基、环己二烯基、还 庚三烯基、降冰片烯基、norpinyl、降蒈烷基(norcarnyl)、金刚烷烯基 (adamantyl)等。环烷基的定义中也包括具有稠合于环烷基环的一个或 多个芳环(即，具有与环烷基环的共同键)的部分，例如，戊烷，戊烯， 己烷等的苯并或噻吩基衍生物。包含稠合芳环的环烷基可通过任何 成环原子包括稠合的芳环的成环原子连接。连接环烷基在此被称为“环 亚烷基”。
如在本文中所用的，“杂芳基”指具有至少一个杂原子环成员如 硫，氧或氮的芳族杂环。杂芳基包括单环或多环(如，具有2、3或4 个稠合环)系统。杂芳基的实例包括(但不限于)吡啶基、嘧啶基、吡嗪 基、哒嗪基、三嗪基、呋喃基、喹啉基、异喹啉基、噻吩基、咪唑基、 噻唑基、吲哚基、吡咯基(pyrryl)、噁唑基、苯并呋喃基、苯并噻吩、 苯并噻唑基、异噁唑基、吡唑基、三唑基、四唑基、吲唑基、1，2，4- 噻二唑基、异噻唑基、苯并噻吩基、嘌呤基、咔唑基、苯并咪唑基、 二氢吲哚基等。在一些实施方案中，杂芳基具有1至约20碳原子， 而在进一步的实施方案中含有约3至约20碳原子。在一些实施方案 中，杂芳基含有3至约14，4至约14，3至约7或5至6成环原子。 在一些实施方案中，杂芳基含有1至约4，1至约3或1至2杂原子。 连接杂芳基在此被称为“亚杂芳基”。
如在本文中所用的，“杂环烷基”指包括环状烷基、烯基和炔基 的非-芳族杂环，其中一个或多个成环碳原子被杂原子如O、N或S原 子替代。杂环烷基包括单环或多环(如，具有2、3或4个稠合环)系统 以及螺环。“杂环烷基”的实例包括吗啉代、硫代吗啉代、哌嗪基、四 氢呋喃基、四氢噻吩基、2，3-二氢苯并呋喃基、1，3-苯并间二氧杂环戊 烯、苯并-1，4-二氧六环、哌啶基、吡咯烷基、异噁唑烷基、异噻唑烷 基、吡唑烷基、噁唑烷基、噻唑烷基、咪唑烷基等。成环碳原子和 杂环烷基的杂原子可任选被氧代或硫代取代。杂环烷基的定义中还 包括具有稠合于非芳族杂环的一个或多个芳环(即，具有与非芳族杂 环的共同键)的部分，例如苯邻二甲酰亚胺基(phthalimidyl)、萘二甲酰 亚氨基(naphthalimidyl)和杂环的苯并衍生物。杂环烷基通过成环碳原 子或成环杂原子连接。杂环烷基包含可通过任何成环原子包括稠合的 芳环的成环原子连接的稠合芳环。在一些实施方案中，杂环烷基具有 1至约20碳原子，而在进一步的实施方案中具有约3至约20碳原 子。在一些实施方案中，杂环烷基含有3至约14，4至约14，3至约 7或5至6成环原子。在一些实施方案中，杂环烷基含有1至约4，1 至约3或1至2杂原子。在一些实施方案中，杂环烷基含有0-3个双 键或三键。在一些实施方案中，杂环烷基含有0-2双键或三键。连接 杂环烷基在此被称为“亚杂环烷基”。
如在本文中所用的，“卤代”或“卤素”包括氟代、氯代、溴代和碘 代。
如在本文中所用的，“芳基烷基”指由芳基取代的烷基和“环烷基 烷基”指被环烷基取代的烷基。芳基烷基的实例为苄基。
如在本文中所用的，“杂芳基烷基”指杂芳基取代的烷基，而“杂 环烷基烷基”指杂环烷基取代的烷基。
如在本文中所用的，“氨基”指NH2。
如在本文中所用的，“烷基氨基”指被烷基取代的氨基。
如在本文中所用的，“二烷基氨基”指被两个烷基取代的氨基。
如在本文中所用的，“羟基烷基”指被羟基取代的烷基。
如在本文中所用的，“氰基烷基”指被氰基取代的烷基。如果在术 语之前对碳计数，则通常不计算氰基的碳原子。例如，氰基甲基在此 被认为是C1氰基烷基。
本文描述的化合物可以是不对称的(如，具有一个或多个立构中 心(stereocenters))。所有的立体异构体，如对映体和非对映体，都包括 在内，除非另外指明。含有不对称取代的碳原子的本发明化合物可以 以旋光性形式或外消旋形式被分离。本领域中已知如何由旋光性原料 制备旋光性形式的方法，例如通过拆分外消旋混合物或通过立体有 择合成。烯烃的多种几何异构体、C＝N双键等也可存在于本文所述的 化合物中，所有此类稳定的异构体均应包括在本发明中。对本发明 化合物的顺和反式几何异构体进行了论述，它们可分离为异构体的 混合物或单独异构体形式。
化合物的外消旋混合物的拆分可通过本领域已知的多种方法的 任何一种进行。方法的实例包括使用旋光性的手性拆分酸，成盐的有 机酸进行分级结晶。用于分级结晶方法的合适的拆分剂为例如，旋光 性酸，如酒石酸的D和L形式、二乙酰基酒石酸、二苯甲酰基酒石酸、 扁桃酸、苹果酸、乳酸或者各种旋光性樟脑磺酸如β-樟脑磺酸。适用 于分级结晶方法的其它的拆分剂包括立体异构体纯形式的α-甲基苄 基胺(如，S和R形式，或立体异构体纯形式)、2-苯基甘氨醇 (glycinol)、降麻黄碱、麻黄碱、N-甲基麻黄碱、环己基乙基胺、1，2- 二氨基环己烷等。
外消旋混合物的拆分也可通过洗脱用旋光性拆分剂填充的柱 (如，二硝基苯甲酰基苯基甘氨酸)来进行。合适的洗脱溶剂组分可由 本领域技术人员确定。
本发明化合物也包括外消旋形式。外消旋形式产生于用相邻的双 键替换单键，同时伴有质子的移动。外消旋形式包括质子转移互变异 构体，其为具有相同的经验公式和总电荷的异构质子化状态。质子转 移互变异构体的实例包括酮-烯醇对、酰胺-亚氨基酸对、内酰胺-内酰 亚胺对、酰胺-亚氨基酸对、烯胺-亚胺对，以及环状形式，其中质子 可占据杂环系统的两个或更多个位置，例如，1H-和3H-咪唑、1H-、 2H-和4H-1，2，4-三唑、1H-和2H-异吲哚和1H-和2H-吡唑。外消旋形 式可以是平衡的或通过适当的取代经空间位阻锁定为一种形式。
本发明化合物还包括水合物和溶剂合物，以及无水形式和非-溶 剂合物形式。
本发明化合物还可包括出现在中间体或终化合物的原子的所有 同位素。同位素包括具有相同原子数但不同质量数的那些原子。例如， 氢的同位素包括氚和氘。
在一些实施方案中，本发明的化合物及其盐可被基本分离。术语 “基本分离”意指化合物由其形成或发现的环境中至少被部分地或基本 地分离。部分地分离可包括例如富含本发明的化合物的组成。基本地 分离可包括含至少约50％，至少约60％，至少约70％，至少约80％，至 少约90％，至少约95％，至少约97％或至少约99％重量本发明的化合 物或其盐的组成。用于分离化合物及其盐的方法为本领域的常规方 法。
如在此所用的短语，“环境温度”和“室温，”为本领域所理解，且通 常指温度，例如反应温度，即指反应进行的大致室内温度，例如约20 ℃至约30℃的温度。
本文中使用的短语“药学上可接受的”是指在合理的医学判断范 围内，适用于与人和动物组织接触，无过度毒性、刺激、过敏反应或 其它问题或并发症，与合理的利益/风险比相称的那些化合物、物质、 组合物和/或剂型。
本发明还包括本文中所述化合物的药学上可接受的盐。本文中 使用的“药学上可接受的盐”是指公开化合物的衍生物，其中通过 将存在的酸或碱部分转化为其盐形式用于修饰母体化合物。药学上 可接受的盐的实例包括但不限于碱基例如胺的无机或有机酸盐；酸 基例如羧酸的碱或有机盐等。本发明药学上可接受的盐包括例如由 无毒的无机或有机酸形成的母体化合物的常规无毒盐或季铵盐。可 通过常规化学方法，由含碱性或酸性部分的母体化合物合成本发明 药学上可接受的盐。通常，可在水或在有机溶剂或在两种溶剂的混 合物中，通过使这些化合物的游离酸或碱形式与化学计量量的适当 的碱或酸反应，制备此类盐；通常优选非水溶媒如乙醚、乙酸乙 酯、乙醇、异丙醇或乙腈(MeCN)适宜的盐的目录可在Remington’s 药物科学(Remington’s Pharmaceutical Sciences)，第17版，Mack出版 社(Mack Publishing Company)，Easton，Pa.，1985，p.1418和药物科学 (Journal of Pharmaceutical Science)，66，2(1977)中找到，各自通过引 用全文结合到本文中。
本发明还包括本文中所述化合物的前药。本文中使用的“前药” 是指当给予哺乳动物患者时释放活性母体药物的任何共价结合的载 体。可通过常规操作或在体内，按可分解为母体化合物的修饰方式， 修饰存在于化合物中的官能团，制备前药。前药包括当给予哺乳动物 患者时，其中羟基、氨基、巯基或羧基与任何基团连接的分解后分别 形成游离羟基、氨基、巯基或羧基的化合物。前药的实例包括但不限 于本发明化合物中醇和胺官能团的乙酸酯、甲酸酯和苯甲酸酯衍生 物。T.Higuchi和V.Stella，“作为新传递系统的前药(Pro-drugs as Novel Delivery Systems)，”A.C.S的第14卷.论文集系列(Symposium Series) 和药物设计中的生物可逆性载体(Bioreversible Carriers in Drug Design)，Edward B.Roche编辑，美国药学会和Pergamon出版社 (American Pharmaceutical Association and Pergamon Press)，1987对前 药的制备和使用方法进行了论述，两者通过引用全文结合到本文中。
合成
本发明化合物，包括其盐，可使用已知的有机合成技术制备并可 依据许多可能的合成途径中的任何一种合成。
可在合适的溶剂中进行用于制备本发明化合物的反应，有机合成 领域的技术人员可容易地选择合适的溶剂。在反应进行的温度即可 在溶剂的凝固温度至溶剂的沸点温度范围内，适宜的溶剂可基本上 不与原料(反应物)、中间体或产物反应。可在一种溶剂或一种以上 的溶剂的混合物中进行特定的反应。根据具体的反应步骤，技术人 员可选择用于具体反应步骤的适宜溶剂。
制备化合物的方法涉及将各种化学基团保护和脱保护。本领域 技术人员可容易地确定保护和脱保护的需要以及选择适宜的保护基 团。保护基团化学可在例如T.W.Greene和P.G.M.Wats等，有机合成 的保护基团(Protective Groups in Organic Synthesis)，第三版，Wiley & Sons，1991中找到，其通过引用全文结合到本文中。
可按照本领域中已知的任何合适的方法，监测本文中所述反应。 例如，可通过广谱方法例如核磁共振波谱(例如1H或13C)、红外光谱、 分光光度测定(例如UV-可见)或质谱，或通过色谱例如高效液相色谱 (HPLC)或薄层层析监测产物形成。
本发明化合物可依据文献中已知的许多制备途径制备。制备本发 明化合物的合成方法的实例在以下流程中提供。
如流程1中所示，含吡唑的核心1-9和1-6可用吡咯并[2，3-b]吡 啶或吡咯并[2，3-b]嘧啶1-1作为起始原料来合成。通过使用氧化剂如 m-CPBA，可将化合物1-1转化为活性物质如N-氧化物类似物(1-2)。 N-氧化物1-2可用卤化剂如四甲基溴化铵和甲磺酸酐的组合进行卤 化，形成4-卤代化合物1-3如4-溴代化合物，而同时N-氧化物被还原。 化合物1-3的胺基可被合适的胺保护基团保护，得到保护的化合物 1-7，其随后与硼酸1-8经历Suzuki偶合，得到含吡唑的核心1-9a， 其可进一步与试剂L-(Y)n-Z(其中L为离去基团)反应，得到本发明化 合物1-9b。或者，N-氧化物1-2可用卤化剂如MeSO2Cl卤化，形成 4-卤代化合物1-4如4-氯代化合物，而同时N-氧化物被还原。4-卤代 化合物1-4可与溴代-取代的吡唑化合物1-5在合适的条件下如加热下 进行偶合，得到含吡唑的核心1-6，其可含有一些适合于进一步的化 学修饰发官能团如溴代或氰基。
类似地，咪唑核1-11可通过4-卤代化合物1-4与咪唑衍生物1-10 在合适的条件下如加热下偶合而合成，得到含吡唑的核心1-11，其可 含有一些官能团如溴代或氰基适合于进一步的化学修饰。
流程1

如流程2中所示，含吡唑的核心2-3、2-5和2-6可用溴代-取代 的吡唑衍生物2-1(流程1中的化合物1-6，其中一个R5为Br)作为起 始原料合成。采用Suzuki偶合，可使溴代-取代的吡唑衍生物2-1与含 硼的芳族物质如芳族硼酸2-2偶合，其中Ar为芳基或杂芳基，其中的 每一个可任选被一个或多个取代基如烷基、芳基、CN、硝基、烷氧基 等取代。或者，含烯烃-或炔烃的-化合物如含烯烃的2-5可通过溴代- 取代的吡唑衍生物2-1与不饱和的化合物如烯烃2-4在金属催化剂如 双(三苯膦)氯化钯(II)存在下偶合而获得。其中t可以是0、1、2等； 和R可以是取代基如烷基、芳基、CN、硝基、烷氧基等。化合物2-5 的烯烃基可以通过氢化作用被还原，得到相应的化合物2-6。
流程2

如流程3中所示，含咪唑的核心3-7可以用N-保护的4-溴代-吡 咯并[2，3-b]吡啶或N-保护的4-溴代-吡咯并[2，3-b]嘧啶3-1(其中P为合 适的胺保护基团如{[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基}(SEM))作为起 始原料来合成。化合物3-1可以与Grignard试剂如异丙基氯化镁反应， 通过离子交换生成芳族阴离子。随后将含氯代乙酰基的化合物如2-氯 -N-甲氧基-N-甲基乙酰胺3-2加入到该阴离子上，将通常得到氯代乙 酰基衍生物3-3。该衍生物3-3可以与有机酸盐如铯盐R5CO2Cs反应， 得到化合物3-4。在合适的氨源如乙酸铵的存在下，化合物3-4可以与 氨在合适的条件下如高温下反应，形成化合物3-5的咪唑环，咪唑衍 生物3-5的游离胺氮可经历进一步的修饰如与化合物X-(Y)n-Z反应， 其中X为离去基团如氯代、溴代或碘代等，得到化合物3-6。化合物 3-6的保护基团可以依据保护基团的性质，通过适当的方法除去，得 到化合物3-7。应该注意到，如果在R、R5和-(Y)n-Z基团中存在官能 团，可以进行进一步的修饰。例如，CN基团可以被水解，得到酰胺基 团；羧酸可被转化为酯，其依次可被进一步还原为醇，其依次可以 被进一步修饰。本领域技术人员应认识到适当的进一步的修饰。
流程3

如在流程4中所示，含噻唑的核心4-3可以用N-保护的氯代乙酰 基衍生物4-1作为起始原料来合成，其中P为合适的胺保护基团如 SEM。化合物4-1可以与硫代酰胺4-2反应，形成噻唑环，接着通过 除去P基团，使吡咯环的胺氮脱保护，得到化合物4-3。用于制备噻 唑化合物4-3的各种硫脲4-5(相当于化合物4-2，其中-(Y)n-Z为 NR’R”；及R’和R”为H、烷基、芳基等；或R’和R”与它们连接的 N原子一起形成杂环烷基)可以由仲胺4-4制得。仲胺4-4可以与1，1’- 硫代羰基二咪唑反应；和生成的中间体可以与氨进一步反应，得到硫 脲4-5。
流程4

如在流程5中所示，含噻唑的核心5-5可以用噻唑化合物5-1作 为起始原料来合成。化合物5-1可以与金属烷基如正丁基锂通过离子 交换反应，原位生成芳族阴离子。随后加入硼酸三甲基酯，接着水 解，通常得到硼酸5-2。硼酸5-2可与N-保护的4-溴代-吡咯并[2，3-b] 吡啶或N-保护的4-溴代-吡咯并[2，3-b]嘧啶5-3经历Suzuki偶合，其 中P为合适的胺保护基团如SEM。偶合产物5-4的保护基团P可以依 据保护基团的性质，通过适当的方法除去，得到本发明的化合物5-5。
流程5

如在流程6中所示，通过用适当的试剂在吡唑NH基团上取代， 可进一步修饰含吡唑化合物6-1。例如，其中P为合适的胺保护基团 如SEM的化合物6-1可以与L-(Y)n-Z在碱性条件下反应，其中L表 示离去基团如卤代、三氟甲磺酸根等，得到化合物6-2。如果在Y和/ 或Z基团中存在一些官能团，可以进行进一步的修饰。例如，CN基 团可以被水解，得到酰胺基团；羧酸可被转化为酯，其依次可被进 一步还原为醇。本领域技术人员应认识到，如果需要可进行进一步的 修饰。
此外，化合物6-1可以与烯烃6-3(其中R’和R”可以是H、烷基、 环烷基等反应；和Z’可以是吸电子基团如酯或CN)，得到化合物 6-4。此外，取代可以在烯烃6-3的α位(相对于Z’的α位)上进行，生 成产物的取代的衍生物，6-4(见，如，实施例68)。
化合物6-2和6-4可以依据所用保护基团的性质，通过适当的方 法脱保护，得到它们的相应的脱保护的对应物。
流程6

如在流程7中所示，含溴代吡唑化合物7-1可通过用试剂如丁基 锂金属化并与亲电试剂如醛反应而被进一步修饰，得到含醇化合物 7-2，其可以被脱保护，得到具有式7-3的本发明化合物。本领域技术 人员应认识到，需要时可进行进一步的修饰。
流程7

如在流程8中所示，含吡唑化合物8-4和8-5可通过N-保护的溴 代化合物8-1与肼在合适的溶剂如N，N-二甲基甲酰胺(DMF)中的反应 而制备，得到肼中间体8-2。肼基中间体8-2与适当取代的1，3二醛如 8-3反应，得到含吡唑化合物8-4。如果Y和/或Z基团中存在一些官 能团，可以进行进一步的修饰。例如，CN基团可以被水解，得到酰 胺基团；羧酸可被转化为酯，其依次可被进一步还原为醇。本领域技 术人员应该知道其它有效的修饰。
流程8

如在流程9中所示，1，2，4-噁二唑化合物9-6可通过在催化剂如双 (三丁基)钯的存在下，在DMF中用氰化锌处理，由N-保护的溴代化 合物9-1制备，得到N-保护的氰基化合物9-2。N-羟基甲脒(carbox- imidamide)化合物9-3可以通过在合适的溶剂如乙醇中和在碱如碳酸 钾的存在下，在溶剂的熔点以下的温度加热N-保护的氰基化合物9-2 与羟基胺盐酸盐制备。N-保护的1，2，4-噁二唑化合物可以通过在溶剂 如吡啶中，在足以完成环闭合的温度下，用适当取代的酰氯化合物9-4 处理N-羟基甲脒化合物9-3制备。如果在Y和/或Z基团中存在一些 官能团，可以进行进一步的修饰。例如，CN基团可以被水解，得到 酰胺基团；羧酸可被转化为酯，其依次可被进一步还原为醇。本领域 技术人员应认识到，需要时可进行进一步的修饰。

如在流程10中所示，3-和4-芳基吡唑并化合物10-9可以通过3- 芳基吡唑并化合物10-4或4-芳基吡唑并化合物10-7分别与如前所述 的适当取代的溴代化合物10-8反应来制备。3-芳基吡唑并化合物10-4 可以通过使含卤素如溴代或三氟甲磺酸酯的适当取代的芳基与N-保 护的硼酸或硼酸酯吡唑化合物10-2在文献中已知的Suzuki-样条件下 反应来制备。10-3的N-保护基团可以在前述条件下和文献中已知的用 除去基团如SEM的条件下除去。
4-芳基吡唑并化合物10-7可以通过使适当取代的苯乙酮化合物 10-5与DMF缩醛(acetal)在DMF中，在升高的温度下反应来制备，得 到二甲基氨基化合物10-6。4-芳基吡唑并化合物10-7可以通过用肼在 溶剂如乙醇中处理二甲基氨基化合物10-6制备。
流程10

如在流程11中所示，取代的吡唑化合物11-5可以通过多种方 法，如通过在前述条件下，从化合物11-4中除去保护基团如，SEM。 例如取代的吡唑N-保护的化合物11-4可以通过使中间体吡唑N-保护 的化合物11-3与适当取代的烷基卤化物、苄基卤化物、烷基磺酸酯， 如，甲磺酸酯或甲苯磺酸酯，或其它合适的离去基团L，在合适的溶 剂如MeCN、DMF或四氢呋喃(THF)中，在碱如氢化钠或碳酸铯的存 在下反应来制备。N-芳基吡唑11-4(其中Y是芳族的)可通过使中间体 吡唑11-3与适当取代的芳基硼酸在溶剂如含有乙酸铜和吡啶的二氯 甲烷(DCM)中反应来制备。或者N-芳基吡唑11-4(其中Y是芳族的) 可通过使中间体吡唑11-3与适当取代的芳基-氟化物在溶剂如DMF 中，在升高的温度下反应来制备。或者，取代的吡唑化合物11-4(其 中Z为基团如腈或酯和Y为至少两个碳)可通过使中间体吡唑11-3与 适当取代的丙烯酸酯，丙烯腈或其它Michael-样受体在溶剂如DMF 中，在碱如1，8-二氮杂双环[5.4.0]十一碳-7-烯(DBU)或三乙胺(TEA)的 存在下和在低于溶剂的沸点的温度下反应来制备。如果在Y和/或Z 基团中存在一些官能团，可以进行进一步的修饰。例如，CN基团可 以被水解，得到酰胺基团；羧酸可被转化为酯，其依次可被进一步 还原为醇。本领域技术人员应认识到，如果需要可进行进一步的修饰。
流程11

如在流程12中所示，其中P为合适的胺保护基团如SEM的吡唑 12-1可以与含炔烃的-共轭物受体如12-2(其中Z为吸电子基团(例 如，-CN))任选在碱(DBU或K2CO3等)的存在下，在溶剂如DMF或 MeCN(用于在可变化的时间长度提供含烯烃的加合物12-3)中反应。 由式12-3代表的化合物可以依据所用保护基团的性质，通过适当的方 法脱保护，得到本发明化合物12-4。
流程12

如在流程13中所示，含噁唑-或噻唑-化合物13-6可以用N-保护 的4-氯-吡咯并[2，3-b]嘧啶13-1(其中P为合适的胺保护基团如SEM) 作为起始原料制备。式13-2的含噁唑-或噻唑-产物可以通过钯-催化的 13-1与噁唑或噻唑的偶合来制备。化合物13-2可以与金属烷基如正丁 基锂反应，原位生成芳族阴离子，可以在低温(优选-78℃至0℃)下， 在其它添加剂如氯化锌和碘化亚铜(I)的存在下(当X1＝O时)，在合适 的溶剂如THF中，向其中加入羧酸13-3(其中当X1＝S时，W＝ N(Me)(OMe)；和当X1＝O时，W＝Cl)衍生物，生成各种酮13-4。酮 13-4可以与各种试剂如二乙基(氰基甲基)膦酸酯或膦酰基乙酸三乙基 酯在碱如叔丁醇钾的存在下反应，接着还原(包括氢化或氢化铜催化 的共轭物还原)，或与试剂如甲苯磺酰基甲基异腈反应，提供式13-5 的产物，其中Z为吸电子基团如酯或-CN。如果在R基团中存在官能 团或Z基团包含官能团时，可进行进一步的修饰，而这样的适当的进 一步修饰将为本领域技术人员所知晓。化合物13-5可以依据所用保 护基团的性质，通过适当的方法脱保护，得到它们的相应的脱保护的 对应物13-6。

如在流程14中所示，含氨基噻唑的核心14-5可以用含噻唑的核 心14-1(其中P为合适的胺保护基团如SEM)作为起始原料合成。化合 物14-1可以用金属烷基如正丁基锂处理，原位生成芳族阴离子，向其 中可以加入合适的亲电试剂卤素源如四溴化碳，得到卤化衍生物 14-2。14-2的保护基团P可以依据保护基团的性质，通过适当的方法 除去，得到产物14-3。化合物14-3可以与胺14-4在升高的温度下， 在合适的溶剂如DMF中反应，得到本发明的化合物，14-5。
流程14

如在流程15中所示，含吡咯的核心15-4可以用N-保护的4-氯- 吡咯并[2，3-b]嘧啶15-1(其中P为合适的胺保护基团如DEM(二乙氧 基甲基))作为起始原料合成。化合物15-1可以与1-(三异丙基甲硅烷基) 吡咯-3-硼酸在SuZuki偶合条件下反应，同时得到吡咯-脱保护的核心 15-2。含吡咯化合物15-2可以与含吸电子基团Z(如-CN)的烯烃15-3 在适当的碱(如DBU)存在下，在各种温度(如，室温-40℃)下反应，接 着原位脱保护或在适用于选择保护基团的独立脱保护步骤脱保护， 得到本发明化合物15-4。
流程15

如在流程16中所示，在16-6中的含砜或亚砜官能团的取代的吡唑化 合物可通过多种方法制备，如用适当取代的溴代硫代苯基醚16-2作为 起始原料。硫醚16-2可通过用烷基卤化物、甲磺酸酯等，使用碱如 DBU、碳酸钾或氢化钠，使苯硫酚16-1烷基化而容易地制备。肉桂酰 基腈16-3可通过Heck化学等，使用乙酸钯和三苯膦，在DMF中，在 合适的温度下，用丙烯腈制备。SEM保护的中间体16-4可通过前述 用于进行如将吡唑核心经Michael样加成到适当取代的α-β不饱和腈 如16-3中的方法制备。亚砜16-5(其中n＝1)和砜16-5(其中n＝2)可通 过文献中熟知的用于氧化硫醚16-4如间-氯代过苯甲酸(MCPBA)的方 法在DCM中制备。最终化合物16-6，其中n＝0、1或2，可通过前述 用于除去SEM保护基团的方法制备。或者，硫氧化作用可在化合物 16-2 or 16-3上进行，这取决于在合成流程中取代的相容性。
流程16

也如在流程17中所示，取代的吡唑化合物包含磺酰胺官能团， 如17-6可以通过多种方法制备。例如，一种方法是可用适当取代的溴 代苯基磺酰胺17-2(其中Rc和Rd为合适的取代基)作为起始原料。化 合物17-2可通过溴代苯基磺酰氯17-1和适当取代的胺如苯胺，或伯 胺或仲胺在合适的溶剂如DCM、THF或吡啶中反应而很容易地制备。 肉桂酰基腈17-3可通过Heck化学等，使用在DMF中的乙酸钯和三苯 膦，在合适的温度下用丙烯腈制备。最终化合物17-6(其中Rc和Rd 为磺酰胺官能团的一部分)可通过类似于在流程16中描述的那些方 法，用肉桂酰基腈17-3作为起始原料制备。
流程17

也如在流程18中所示，含α-烯丙基环戊基亚甲基官能团的取代 的吡唑化合物，如18-8，可以通过例如使吡唑18-3(其中P为合适的 胺保护基团如SEM和X为N或C)与环戊基丙烯酸酯18-4反应来制 备，形成酯18-5。然后，酯18-5可被还原为相应的醛，18-6，例如， 通过还原为醇的两步骤方法，并将中间体醇选择性地氧化为醛，如通 过Swern氧化作用。然后，例如通过与Wittig试剂的反应可将醛，18-6 转化为相应的烯烃18-7。再如全文所述，可将烯烃18-7脱保护，得到 式18-7化合物。中间体，18-4可例如如在流程18中所示，用环戊基醛 作为起始原料制备。
流程18

也如在流程19中所示，氰基胍衍生物19-6可以用取代的吡唑化 合物如吡唑18-3(其中P为合适的保护基团如SEM和X为N或C)作 为起始原料制备。化合物18-3可以例如与烯烃19-1(通过相应的Boc- 保护的哌啶酮的Horner-Wadsworth Emmons反应制备)在合适的碱性 催化剂的存在下，在合适的溶剂中反应，形成19-2。采用合适的脱保 护反应，使中间体19-2脱保护，提供胺化合物19-3，然后其选择性地 与氰基亚氨基碳酸酯试剂如19-4，在极性溶剂中，在合适的温度，例 如约20℃反应，得到氰基亚氨基氨基甲酸酯如19-5，然后其可与各 种胺的任何一种在升高的温度下反应，得到产物19-6。
流程19

中间体化合物20-5和20-6可通过文献中的多种方法，例如，如 在流程20中概述的方法制备。中间体化合物20-3可通过醛化合物20-1 与适当取代的Wittig试剂或Horner Emmons试剂的反应来制备。得到 α-β未取代的酯20-3。或者，20-3可通过与适当取代的芳基溴化物20-2 和丙烯酸酯在钯试剂的存在下，在升高的温度下进行Heck-like反应来 制备。化合物20-4可通过前述用于适当取代的吡咯18-3加成到α-β 不饱和的酯化合物20-3的Michael-样加成方法制备。醛化合物20-5 可通过用试剂如二异丁基氢化铝在低温如约-78℃，在合适的溶剂中 还原酯化合物20-4制备。用试剂如在甲醇中的硼氢化钠，可将醛化合 物20-5进一步还原为相应的醇化合物20-6。或者醇化合物20-6可通 过在适当的溶剂中和在适宜的温度下，用试剂如氢化锂铝还原酯20-4 来制备。
流程20

化合物21-2和21-3可通过使用文献中的各种方法，例如在流程 21中概述的方法制备。烯烃化合物21-1可通过醛化合物20-5与适当 取代的Wittig试剂或Horner Emmons试剂的反应，使用碱如氢化钠或 叔丁醇钾，在合适的溶剂并在适宜的温度下进行制备。例如，使用文 献中熟知的氢化条件，如在披钯碳的存在下，在溶剂如甲醇中使用氢， 可将烯烃化合物21-1还原为饱和的化合物21-2。炔属化合物21-3可 通过前述方法，或通过如在文献中所述的醛20-5与Bestmann-Ohira试 剂的反应制备(E.Quesada等，Tetrahedron，62(2006)6673-6680)。或者 在流程20中的醇化合物20-6可用文献中熟知的方法，如Swern氧化 条件氧化为醛20-5，接着与Bestmann-Ohira试剂反应，其中该反应的 顺序可以作为一釜法的两步骤反应顺序，或以两个分开的反应步骤进 行。
流程21

化合物22-1和22-3可通过使用文献中的各种方法，例如通过在 流程22中概述的方法制备。氧-取代的化合物22-1可例如，通过适当 取代的醇20-6(在流程20中)，其中X为N或C和P为保护基团，与 碱如氢化钠和适当的试剂如烷基碘化物、碳酸酯或异氰酸酯，在合适 的溶剂中和在合适的温度下进行反应来制备。或者，化合物20-6上的 醇基团可转化为离去基团LG，如在化合物22-2中一样，其中离去基 团可以是例如，溴化物或甲磺酸酯。化合物22-2用作随后与亲核试剂 例如，乙醇钠(Nuc＝乙氧基)反应的底物。
流程22

应该注意到，在本文描述的所有流程中，如果在取代基基团如Y、 Z、R、R1、R2、R5等上存在官能团时，在适当时和需要时，可进行进 一步的修饰。例如，CN基团可以被水解，得到酰胺基团；羧酸可被 转化为酯，其依次可以被还原为醇，其依次可以被进一步修饰。在 另一个实例中，OH基团可以被转化为较好的离去基团如甲磺酸酯， 其依次适合于例如通过CN进行亲核取代。本领域技术人员应认识到 这样的进一步的修饰。
方法
本发明化合物可调节一种或多种两面神激酶(JAKs)的活性。术语 “调节”意指增加或降低JAK家族激酶的一个或多个成员的活性的能 力。因此，本发明化合物可以用于通过使JAK与任何一个或多个在此 所述的化合物或组合物接触而调节JAK的方法中。在一些实施方案 中，本发明的化合物可用作一种或多种JAKs的抑制剂。在一些实施 方案中，本发明的化合物可用于刺激一种或多种JAKs的活性。在其 它的实施方案，本发明的化合物可以用于在需要调节该受体的个体 中，通过给予调节量的式Ia、Ib或Ic化合物调节JAK的活性。
本发明化合物结合和/或调节的JAKs包括JAK家族的任何成员。 在一些实施方案中，JAK为JAK1、JAK2、JAK3或TYK2。在一些实 施方案中，JAK为JAK1或JAK2。在一些实施方案中，JAK为JAK2。 在一些实施方案中，JAK为JAK3。
本发明的化合物可以是选择性的。所谓“选择性的”意指与至少一 种其它JAK比较，化合物分别以更大的亲和力或效力结合或抑制一种 JAK。在一些实施方案中，本发明的化合物为对JAK1或JAK2超过 对JAK3和/或TYK2的选择性抑制剂。在一些实施方案中，本发明的 化合物为JAK2的选择性抑制剂(如，超过对JAK1、JAK3和TYK2 的选择性)。不希望受到理论的束缚，由于JAK3的抑制剂可导致免疫 抑制作用，对JAK2的选择性超过对JAK3且治疗癌症(如多发性骨髓 瘤)有用的化合物可提供具有较少免疫抑制副作用的额外优点。选择性 可以是至少约5-倍、10-倍、至少约20-倍、至少约50-倍、至少约100- 倍、至少约200-倍、至少约500-倍或至少约1000-倍。选择性可以通 过本领域的常规方法测定。在一些实施方案中，选择性可以在每种酶 的Km水平进行测定。在一些实施方案中，本发明化合物对JAK2的 选择性超过JAK3可以通过细胞ATP浓度来确定。
本发明的另一个方面属于在个体(如患者)中治疗JAK-相关疾病 或紊乱的方法，即通过给予需要这种治疗的个体治疗有效量或剂量的 本发明的化合物或其药用组合物。JAK-相关疾病可包括任何与JAK 的表达或活性直接或间接相关的疾病、紊乱或病症，包括过度表达和 /或异常的活性水平。JAK-相关疾病也可包括可通过调节JAK活性得 到预防、缓解或治愈的任何疾病、紊乱或病症。
JAK-相关疾病的实例包括涉及免疫系统的疾病，包括例如，器官 移植排斥(如同种异体移植排斥和移植物抗宿主疾病)。
JAK-相关疾病的进一步的实例包括自身免疫性疾病如多发性硬 化、类风湿性关节炎、青少年关节炎、I型糖尿病、狼疮、牛皮癣、 炎性肠道疾病、溃疡性结肠炎、克罗恩氏病、重症肌无力、免疫球蛋 白性肾病、自身免疫性甲状腺疾病等。在一些实施方案中，自身免疫 性疾病自身免疫性大疱皮肤病如寻常型天疱疮(PV)或大疱性]类天疱 疮(BP)。
JAK-相关疾病的进一步的实例包括过敏性病症如哮喘，食物变 态反应、特应性皮炎和鼻炎。JAK-相关疾病的其它实例包括病毒性疾 病如厄泼斯坦-巴尔(Epstein Barr)病毒(EBV)，乙型肝炎、丙型肝炎、 HIV、HTLV 1、水痘-带状疱疹病毒(VZV)和人乳头状瘤病毒(HPV)。
JAK-相关疾病或病症的进一步的实例包括皮肤病如牛皮癣(例 如，寻常牛皮癣)、特应性皮炎、皮疹、皮肤刺激、皮肤过敏(如，接 触性皮炎或过敏性接触性皮炎)。例如，某些物质包括一些药物在局 部施用时可引起皮肤过敏。在一些实施方案中，本发明的至少一种JAK 抑制剂与引起不需要的过敏的药物一起同时给予或顺序给予可有益 于治疗这样的不需要的过敏或皮炎。在一些实施方案中，通过局部给 予本发明的至少一种JAK抑制剂治疗皮肤病。
在其它的实施方案，JAK-相关疾病为癌症包括以实体瘤(如，前 列腺癌、肾癌、肝癌、胰腺癌、胃癌、乳腺癌、肺癌、头颈部癌、 甲状腺癌、成胶质细胞瘤、卡波济氏肉瘤、巨大淋巴结增生、黑素瘤 等)、血液癌(如淋巴瘤、白血病如急性成淋巴细胞白血病，或多发性 骨髓瘤)，和皮肤癌症如皮肤T-细胞淋巴瘤(CTCL)和皮肤B-细胞淋巴 瘤为特征的那些癌症。皮肤T-细胞淋巴瘤的实例包括塞扎里综合征和 蕈状真菌病。
JAK-相关疾病还可包括表达突变体JAK2如具有至少一个突变在 假性-激酶结构域具有至少一个突变的那些突变体(如，JAK2V617F) 为特征的那些的疾病。
JAK-相关疾病还可包括脊髓增生性疾病(MPDs)如脾大性红细胞 增多(PV)、原发性血小板减少症(ET)、伴有脊髓纤维变性的脊髓组织 变性(MMM)、慢性骨髓性白血病(CML)、慢性脊髓单核细胞性白血病 (CMML)、嗜酸性白细胞增多综合征(HES)、系统性巨细胞疾病(SMCD) 等。
其它的JAK-相关疾病包括炎症和炎性疾病。炎性疾病的实例包 括眼睛的炎性疾病(如、虹膜炎、葡萄膜炎、巩膜炎、结膜炎，或相 关的疾病)、呼吸道的炎性疾病(如上呼吸道包括包括鼻和鼻窦如鼻炎 或鼻窦炎或者下呼吸道包括气管炎、慢性阻塞性肺病等)、炎性肌病 如心肌炎及其它炎性疾病。
在此描述的JAK抑制剂还可用于治疗缺血性再灌注损伤或与炎 性缺血性事故如中风或心脏停搏相关的疾病或病症。在此描述的JAK 抑制剂还可用于治疗厌食症、恶病质，或疲劳如由癌症引起的或与 癌症相关的疾病。在此描述的JAK抑制剂还可用于治疗再狭窄、硬皮 病，或纤维变性。在此描述的JAK抑制剂还可用于治疗与氧过少或星 状神经胶质瘤病(astrogliosis)相关的病症，例如，糖尿病性视网膜病、 癌症，或神经变性。见，如，Dudley，A.C.等.Biochem.J.2005，390(Pt 2)：427-36和Sriram，K.等.J.Biol.Chem.2004，279(19)：19936-47.Epub 2004 Mar 2。
本文中使用的术语“接触”是指将指定部分与体外系统或体内系 统联系在一起。例如，使JAK与本发明化合物“接触”包括给予具有 JAK的个体或患者例如人本发明化合物，和例如将本发明化合物引入 含有含JAK的细胞或纯化制剂的样品中。
在本文中可互换使用的术语“个体”或“患者”是指包括哺乳动 物在内的任何动物，优选小鼠、大鼠、其它啮齿类动物、兔、狗、猫、 猪、牛、羊、马或灵长类动物，最优选人。
本文中使用的短语“治疗有效量”是指研究人员、兽医、医师或 其它临床医师正在组织、系统、动物、个体或人中寻找的引起生物学 或医学反应的活性化合物或药物的量，它包括以下一项或多项：
(1)预防疾病；例如在易感染疾病、紊乱或病症但尚未经历或出 现疾病病理或症状的个体中预防疾病、紊乱或病症。
(2)抑制疾病；例如在正经历或出现疾病、紊乱或病症的病理或 症状的个体中抑制疾病、紊乱或病症(即阻止病理和/或症状的进一步 发展)；和
(3)缓解疾病；例如在正经历或出现疾病、紊乱或病症的病理或 症状的个体中缓解疾病、紊乱或病症(即逆转病理和/或症状)。
联合疗法
一种或多种其它药物，例如，化学治疗剂，抗炎药，类固醇，免疫 抑制剂，以及Bcr-Abl、Flt-3、RAF和FAK激酶抑制剂，例如，在 WO 2006/056399中描述的那些药物，或其它可与本发明化合物联合使 用，以治疗与JAK有关的疾病或病症。一种或多种其它药物可以同时 或顺序给予所述患者。
化学治疗剂的实例包括蛋白体抑制剂(如，硼替佐米)、沙立度胺、 米那杜胺，和DNA-损伤剂如美法仑、多柔比星、环磷酰胺、长春新 碱、依托泊苷、亚硝基氮芥等。
类固醇的实例包括可的松类固醇如地塞米松或脱氢可的松。
Bcr-Abl抑制剂的实例包括在U.S.Pat.No.5,521,184、WO 04/005281、EP2005/009967、EP2005/010408和U.S.Ser.No.60/578,491 中公开的化合物的属和种类，及其药学上可接受的盐。
合适的Flt-3抑制剂的实例包括在WO 03/037347、WO 03/099771 和WO 04/046120中公开的化合物，及其药学上可接受的盐。
合适的RAF抑制剂的实例包括如在WO 00/09495和WO 05/028444中公开的化合物，及其药学上可接受的盐。
实施例合适的FAK抑制剂包括如在WO 04/080980、WO 04/056786、WO 03/024967、WO 01/064655、WO 00/053595和WO 01/014402中公开的化合物，及其药学上可接受的盐。
在一些实施方案中，本发明的一种或多种JAK抑制剂可以用于 与化学治疗剂联合治疗癌症，如多发性骨髓瘤，并可改善治疗响应(与 对单一化学治疗剂的响应比较)，而无加重的毒性作用。用于治疗多发 性骨髓瘤的其它药物的实例，例如，可包括(但不限于)美法仑、美法仑 加脱氢可的松[MP]、多柔比星、地塞米松和Velcade(硼替佐米)。用 于治疗多发性骨髓瘤的其它药物包括Bcr-Abl、Flt-3、RAF和FAK激 酶抑制剂。增效或协同作用是本发明的JAK抑制剂与其它药物联合的 需要的结果。此外，在用本发明的JAK抑制剂治疗时，多发性骨髓瘤 细胞对药物如地塞米松的耐药性可能是可逆性的。所述药物可以与本 发明化合物合并在单一或连续的剂型中，或者药物可以作为分开的剂 型，同时或序贯给予。
在一些实施方案中，皮质类固醇如地塞米松与至少一种JAK抑 制剂联合给予患者，其中地塞米松可与连续给药相反，以间断方式给 药。
在一些其它实施方案中，一种或多种本发明的JAK抑制剂与其 它治疗剂的组合可以在骨髓移植或干细胞移植之前、期间和/或之后给 予患者。
药物制剂和剂型
当用作药物时，可按药物组合物的形式给予本发明化合物。可按 药剂领域中熟知的方式制备这些组合物，可通过多种途径给予它们， 这取决于是否需要局部或全身治疗和所治疗的区域。可局部(包括透 皮、皮肤、眼和粘膜包括鼻内、阴道和直肠递药)、肺(例如通过吸入 或吹入粉末或气雾剂，包括通过喷雾器；气管内、鼻内)、口服或肠胃 外给药。肠胃外给药包括静脉内、动脉内、皮下、腹膜内或肌内注射 或输注；或颅内例如鞘内或脑室内给药。可按单次大剂量形式肠胃外 给药，或可通过例如连续灌注泵给药。局部给予的药用组合物和制剂 可包括透皮贴剂、软膏、洗剂、霜剂、凝胶剂、滴剂、栓剂、喷雾剂、 液体剂和散剂。常规药物载体、水、粉末或油性基质、增稠剂等可能 是必须的或需要的。包衣避孕套(Coated condoms)、手套等也可以是有 用的。
本发明还包括含与一种或多种药学上可接受的载体组合的以一 种或多种以上本发明化合物为活性成分的药用组合物。在制备本发明 的组合物时，通常将活性成分与赋形剂混合，通过赋形剂稀释或装入 例如胶囊、小药囊、纸或其它容器形式的这种载体内。当赋形剂用作 稀释剂时，它可以是固体、半固体或液体物质，用作溶媒、载体或活 性成分的介质。因此，组合物可以是以下形式：片剂、丸剂、散剂、 锭剂、小药囊、扁囊剂、酏剂、混悬剂、乳剂、溶液剂、糖浆剂、气 雾剂(固体或溶于液体溶媒)；含例如高达10％重量活性化合物的软膏 剂、软和硬明胶胶囊、栓剂、无菌注射溶液和无菌包装粉末。
在制备制剂时，可将活性化合物粉碎，得到适宜粒度，然后与其 它成分混合。如果活性化合物基本上不溶，可将其粉碎成小于200目 粒度的颗粒。如果活性化合物基本上溶于水，可通过粉碎调整粒度， 得到基本上均匀分布在制剂中的粒度例如约40目。
适宜的赋形剂的某些实例包括乳糖、葡萄糖、蔗糖、山梨醇、甘 露醇、淀粉、阿拉伯胶、磷酸钙、藻酸盐、黄蓍胶、明胶、硅酸钙、 微晶纤维素、聚乙烯吡咯烷酮、纤维素、水、糖浆和甲基纤维素。制 剂还可含有：润滑剂例如滑石粉、硬脂酸镁和矿物油；湿润剂；乳化 剂和悬浮剂；防腐剂例如苯甲酸甲酯和苯甲酸羟基丙酯；甜味剂和矫 味剂。可通过使用本领域中已知的方法配制本发明组合物，以便在给 予患者后提供速释、缓释或延迟释放活性成分的作用。
可按单位剂型配制组合物，每一剂量含约5-约1000mg(1g)，更 通常约100-约500mg活性成分。术语“单位剂型”是指物理上分离 的适宜作为用于人患者和其它哺乳动物的单一剂量单位，各单位含有 与适宜的药物赋形剂混合的经计算可产生所需疗效的预定量的活性 物质。
活性化合物的有效剂量的范围可很大，通常按药用有效量给药。 但是，可以理解实际给予的化合物的量通常由医师根据相关情况决 定，它们包括所治疗的病症、所选择的给药途径、所给予的实际化合 物；患者个体的年龄、重量和反应；患者症状的严重程度等。
对于制备固体组合物例如片剂，将主要的活性成分与药物赋形剂 混合，形成含本发明化合物的均匀混合物的固体预制剂组合物。当称 这些预制剂组合物为均匀时，是指活性成分通常均匀地分布在整个组 合物中，致使该组合物可容易地划分为同等有效的单位剂型例如片 剂、丸剂和胶囊剂。然后将该固体预制剂划分为上述类型的含例如0.1- 约1000mg本发明活性成分的单位剂型。
可将本发明片剂或丸剂包衣或复合，得到提供长效作用优点的剂 型。例如，片剂或丸剂含内剂量和外剂量组分，后者是前者的被膜形 式。可通过肠溶层将两种组分隔离，肠溶层用于在胃中阻止崩解，以 使内组分完整通过十二指肠或延迟释放。多种物质可用于此类肠溶层 或包衣剂，此类物质包括多种高分子酸和高分子酸与此类物质如虫 胶、鲸蜡醇和醋酸纤维素的混合物。
其中可掺入本发明化合物和组合物，用于口服或注射给药的液体 形式包括水溶液、适当矫味的糖浆剂、水或油混悬液；和用食用油例 如棉子油、芝麻油、椰子油或花生油矫味的乳剂；以及酏剂和类似的 药用溶媒。
用于吸入或吹入的组合物包括溶于药学上可接受的水或有机溶 剂或其混合物的溶液剂和混悬液、散剂。液体或固体组合物可含有如 上所述适宜的药学上可接受的赋形剂。在某些实施方案中，通过口服 或鼻呼吸途径给予组合物，实现局部或全身作用。可通过使用惰性气 体，使组合物成雾化。可直接由雾化装置吸入雾化溶液，或雾化装置 可与面罩帷或间歇正压呼吸机连接。可通过口服或由按适当方式递送 制剂的装置通过鼻给予溶液、混悬液或粉末组合物。
给予患者的化合物或组合物的量不固定，取决于给予的药物、给 药的目的例如预防或治疗；患者的状态、给药的方式等。在治疗应用 时，可给予已患疾病的患者足够治愈或至少部分抑制疾病及其并发症 症状的量的组合物。有效剂量应取决于所治疗的疾病状态和主治临床 医师的判断，该判断取决于例如疾病的严重程度、患者的年龄、体重 和一般状况等因素。
给予患者的组合物可以是上述药用组合物形式。可通过常规灭菌 技术或可过滤灭菌，将这些组合物灭菌。可将水溶液包装原样使用， 或冻干，给药前，将冻干制剂与无菌水性载体混合。化合物制剂的pH 通常为3-11，更优选5-9，最优选7-8。可以理解，使用某些前述赋形 剂、载体或稳定剂会导致形成药物盐。
本发明化合物的治疗剂量可根据例如以下而定：治疗的具体用 途、给予化合物的方式、患者的健康和状态，以及签处方医师的判断。 本发明化合物在药用组合物中的比例或浓度可不固定，取决于多种因 素，它们包括剂量、化学特性(例如疏水性)和给药途径。例如可通过 含约0.1-约10％w/v该化合物的生理缓冲水溶液提供本发明化合物， 用于肠胃外给药。某些典型剂量范围为约1μg/kg-约1g/kg体重/日。 在某些实施方案中，剂量范围为约0.01mg/kg-约100mg/kg体重/日。 剂量很可能取决于此类变量，如疾病或病症的种类和发展程度、具体 患者的一般健康状态、所选择的化合物的相对生物学效力、赋形剂制 剂及其给药途径。可通过由体外或动物模型试验系统导出的剂量-反应 曲线外推，得到有效剂量。
本发明的组合物也可与包括一种或多种其它药物，例如化学治疗 剂，类固醇，抗炎化合物，或免疫抑制剂，其实例以在上文列出。
标记化合物和测定方法
本发明的另一方面涉及本发明的标记化合物(放射性标记的、荧 光标记的等)，它们不仅可用于成像而且可用于体内外测定；用于定位 和定量组织标本包括人中的JAK；以及通过抑制标记化合物的结合， 用于鉴定JAK配体。因此，本发明包括含有此类标记化合物的JAK 测定剂。
本发明还包括同位素标记的本发明化合物。“同位素”或“放射 性标记”化合物是具有以下特征的本发明化合物：其中一个或多个原 子被具有不同于通常在自然界中发现的(即天然存在的)原子质量或质 量数的原子质量或质量数的原子置换或取代。可掺入本发明化合物中 的适宜的放射性核包括但不限于2H(又写为D，代表氘)、3H(又写为 T，代表氚)、11C、13C、14C、13N、15N、15O、17O、18O、18F、35S、36Cl、 82Br、75Br、76Br、77Br、123I、124I、125I和131I。掺入本发明放射性标记 化合物的放射性核须取决于该放射性标记化合物的专门用途。例如， 对于体内金属蛋白酶标记和竞争测定，掺入3H、14C、82Br、125I、131I、 35S的化合物通常应最有效。对于放射性成像应用，11C、18F、125I、123I、 124I、131I、75Br、76Br或77Br应最有效。
可以理解，“放射性标记”或“标记化合物”是掺入至少一种放 射性核的化合物。在某些实施方案中，放射性核选自3H、14C、125I、 35S和82Br。
本发明还可包括用于将放射性同位素掺入本发明化合物的合成 方法。将放射性同位素掺入有机化合物的合成方法是本领域中众所周 知的，且本领域的普通技术人员将容易地认识适用于本发明化合物的 方法。
本发明的标记化合物可用于筛选测定，以鉴定/评价化合物。例如， 通过监测其与JAK接触时的浓度变化，通过标记的示踪，可以评价标 记的新合成的或鉴定的化合物(即，试验化合物)结合JAK的能力。例 如，可以评价试验化合物(标记的)减少另一个已知结合于JAK的化合 物(即，标准化合物)的结合的能力。因此，试验化合物与标准化合物竞 争与JAK结合的能力直接与其结合亲和力相关。相反地，在一些其它 筛选测定中，标准化合物被标记，而试验化合物为未标记的。因此，监 测标记的标准化合物的浓度，以评价标准化合物和试验化合物之间的 竞争，由此确定试验化合物的相对结合亲和力。
药剂盒
本发明还包括用于例如治疗或预防与JAK有关的疾病或病症，例 如癌症的药剂盒，这种药剂盒包括一个或多个含药用组合物的容器， 所述药用组合物含有治疗有效量的本发明化合物。此类药剂盒还酌情 包括一个或多个各种常规药剂盒组件，例如含有一种或多种药学上可 接受的载体的容器、本领域技术人员显而易见的其它容器等。也可将 用作插页或标签的指明给予成分的量、用药指南和/或将成分混合的指 南的说明书包括在药剂盒中。
通过具体的实施例更详细地说明本发明。为说明目的提供以下实 施例，它们不应以任何方式限制本发明。本领域技术人员应容易认识 到，可改变或修改多种非关键性参数，得到基本上相同的结果。按照 一种或多种本文中所述的测定，发现以下实施例化合物是JAK抑制 剂。
实施例
实施例1：3-[3-甲基-1-(1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-4-基)-1H-吡唑-4-基]苄 腈

步骤1. 1H-吡咯并[2，3-b]吡啶7-氧化物
于0℃，向1H-吡咯并[2，3-b]吡啶(4.90g，0.0415mol)的乙酸乙酯 (41mL，0.42mol)溶液中加入间-氯代过苯甲酸(MCPBA；9.3g，0.054 mol)的乙酸乙酯(27mL，0.28mol)溶液。当加入～20mL MCPBA溶液 时，反应混合物固化。加入另外的～10mL乙酸乙酯，以便生成溶液。 使反应混合物温热至室温(rt)并搅拌过夜，然后于0℃冷却，过滤并 用乙酸乙酯洗涤3次，得到10.94g湿固体。然后使湿固体(8.45g)悬浮 于水(35mL)中，并向该悬浮液中滴加入13mL饱和Na2CO3，并将生成 的混合物于室温下搅拌过夜。然后于0℃冷却该混合物，过滤并用水 洗涤(x4)，得到3.55g淡紫色固体，将其于40℃干燥过夜，得到所需产 物(2.47g，44.4％得率)。
1H NMR(400MHz，CD3OD)：δ 8.2(1H，d)；7.95(1H，d)；7.5(1H，d)； 7.2(1H，m)；6.65(1H，d)。MS(M+H)+：136.
步骤2. 4-氯-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶
于50℃，向1H-吡咯并[2，3-b]吡啶7-氧化物(2.47g，0.0184mol)的 二甲基甲酰胺(DMF)(13.3mL，0.172mol)粉红色溶液中加入甲磺酰氯 (4.0mL，0.052mol)，而粉红色改变为橙色。反应混合物于73℃加热2 小时，然后冷却至40℃。加入水(35mL)，将生成的悬浮液于0℃冷却。 加入NaOH，以调节混合物的pH至约7。过滤该混合物并用水洗涤(x3)， 得到3.8g湿的浅橙色固体，将其于40℃搅拌过夜，得到产物(2.35g， 82.2％得率)。
1H NMR(400MHz，CDCl3)：δ 10.8(1H，br)；8.21(1H，d)；7.41(1H，d)； 7.18(1H，d)；6.61(1H，d)。MS(M+H)+：153.
步骤3. 4-(4-溴代-3-甲基-1H-吡唑-1-基)-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶

将4-氯-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶(0.050g，0.00033mol)和4-溴代-3-甲 基-1H-吡唑(0.10g，0.00066mol)的混合物于130℃加热过夜。然后使反 应混合物经历柱层析(用5％ MeOH/DCM、0.5％ NH4OH在硅胶上洗 脱)，得到80mg浅黄色固体，将其用MeOH(1.5mL)研磨，得到为浅黄 色固体的产物(44mg，44％得率)。
1H NMR(400MHz，CD3OD)：δ 8.32(1H，s)；8.25(1H，d)；7.6(1H，s)； 7.45(1H，d)；7.37(1H，d)；6.96(1H，d)；2.4(3H，s)。MS(M+H)+：276.
步骤4. 3-[3-甲基-1-(1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-4-基)-1H-吡唑-4-基]苄腈
将4-(4-溴代-3-甲基-1H-吡唑-1-基)-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶(0.032g， 0.00012mol)，(3-氰基苯基)硼酸(0.027g，0.00018mol)、碳酸钠(0.032g， 0.00030mol)和四(三苯膦)钯(0)(7.0mg，0.0000060mol)在1，2-二甲氧 基乙烷(0.3mL，0.003mol)和水(0.3mL，0.02mol)中的混合物于130℃ (生成液体，但分成两层)加热4小时。然后使反应混合物冷却至室温(rt)， 过滤并用水(x2)和二甲基醚(DME)(x2)洗涤，得到产物，为浅橙色固 体(15mg，44％得率)。
1H NMR(400MHz，CD3OD)：(1H，s)；8.31(1H，d)；7.8(2H， m)；7.75(2H，m)；7.55(1H，s)；7.45(2H，m)；7.01(1H，d)；2.6(3H， s)。MS(M+H)+：299.
实施例2：(2E)-3-[3-甲基-1-(1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-4-基)-1H-吡唑-4- 基]丙烯腈三氟乙酸盐

步骤1. 4-溴代-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶
于0℃，向1H-吡咯并[2，3-b]吡啶7-氧化物(8.0g，0.060mol)(通过 在实施例1，步骤1中概述的方法制备)的DMF(100mL，1mol)溶液中 加入甲磺酸酐(20.8g，0.119mol，分4份)。于0℃将该混合物再搅拌20 分钟，接着加入四甲基溴化铵(23.0g，0.149mol)。将得到的混合物搅 拌过夜。加入水(0.1L)，并观察到轻微的放热。加入氢氧化钠水溶液 (12.5M，12mL)，以调节该混合物的pH至约8，接着加入～0.25L水。 将得到的混合物再搅拌2小时，然后过滤。得到的固体用水洗涤x3， 得到6.72g微红色固体，将其于50℃干燥过周末，得到产物(5.75g， 49％得率)。
1H NMR(400MHz，CDCl3)：δ 10.8(1H，br)；8.2(1H，d)；7.41(1H，d)； 7.19(1H，d)；6.61(1H，d)。MS(M+H)+：196.
步骤2. 4-溴代-1-[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基-1H-吡咯并[2，3-b] 吡啶
于0°，向4-溴代-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶(6.2g，0.031mol)和[β-(三 甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基氯(6.7mL，0.038mol)的DMF(62mL，0.80 mol)溶液中加入氢化钠(1.5g，0.038mol)C，生成的溶液变得不透明。 将该混合物再搅拌4小时，然后用甲基叔-丁基醚(MTBE)稀释。分离有 机层，用水(x2)和盐水溶液顺序洗涤。干燥有机相并真空浓缩，得到 14.1g产物，为浅橙色油状物。油状物经柱层析纯化，用5-20％乙酸乙 酯/己烷洗脱，得到纯化的产物，为无色油状物(9.66g，94％得率)。
1H NMR(400MHz，CDCl3)：(1H，d)；7.49(1H，d)；7.19(1H，d)； 6.62(1H，d)；5.78(2H，s)；3.6(2H，t)；0.98(2H，t)；0.0(9H，s)。 MS(M+H)+：326.
步骤3. (2E)-3-[3-甲基-1-(1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-4-基)-1H-吡唑-4-基] 丙烯腈
将2-丙烯腈(0.043mL，0.00065mol)、双(三苯膦)氯化钯(II)(0.0091 g，0.000013mol)、4-(4-溴代-3-甲基-1H-吡唑-1-基)-1H-吡咯并[2，3-b]吡 啶(0.036g，0.00013mol)和四乙基胺(TEA)(0.15mL，0.0011mol)的 DMF(0.15mL，0.0019mol)溶液经120℃微波加热2小时。然后用乙酸 乙酯稀释该溶液，用水(x2)和盐水顺序洗涤。干燥有机相并真空浓缩， 得到62mg产物，为橙色固体。该橙色固体经prep-LCMS纯化，得到12 mg灰白色固体，为三氟乙酸(TFA)盐，将其用MTBE(1mL)研磨，提 供纯化的产物，为浅绿色固体。(于60℃4小时，9mg，28％得率)。
1H NMR(400MHz，CD3OD)：2:1反式：顺式异构体，对于反式：δ8.95 (NH，1H，s)；7.75(烯烃1H，d)；6.1(烯烃1H，d)；2.45(Me，3H，s)。MS (M+H)+：249.
实施例3：3-[3-甲基-1-(1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-4-基)-1H-吡唑-4-基]丙 腈，三氟乙酸盐

将(2E)-3-[3-甲基-1-(1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-4-基)-1H-吡唑-4-基]丙 烯腈，TFA盐，(0.0050g，0.000020mol，依据实施例2制备)和钯(5.8 mg，0.0000054mol)在甲醇(1mL，0.02mol)和1，2-二氯代乙烷(1mL， 0.01mol)中的混合物脱气，然后在氢气氛下搅拌3小时。然后过滤反应 混合物，真空浓缩滤液，得到8mg产物，为灰白色固体。粗制物质经 prep-LCMS纯化，得到5.1mg白色固体，为TFA盐，将其用MTB(1mL) 研磨，得到产物，为白色固体(1.7mg，34％得率)。
1H NMR(400MHz，CD3OD)：(1H，s)；8.35(1H，d)；7.72(1H，d)； 7.6(1H，s)；7.38(1H，d)；6.96(1H，d)；2.7-2.9(4H，m)；2.4(3H，s)。 MS(M+H)+：251.
实施例13：4-(4-苯基-1H-咪唑-1-基)-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶

将4-氯-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶(0.050g，0.00033mol)在4-苯基-1H- 咪唑(0.24g，0.0016mol)中的熔融物(melt)于200℃加热过夜。使反应 物分配于乙酸乙酯和饱和的NaHCO3之间，分离并用盐水洗涤有机相。 然后干燥有机层并浓缩，得到250mg橙色油状物。该油状物使用7％ MeOH/DCM、0.7％ NH4OH，在溶剂系统中的样品进行层析。收集74mg 产物，为橙色玻璃状物。该玻璃状物用热DCE(1.5mL)研磨，得到51mg 棕色固体，将其于60℃干燥4小时，得到所需产物(50mg，59得率)。
1H NMR(400MHz，二甲亚砜(DMSO))：(1H，s)；8.5(1H，s)；8.4 (1H，s)；8.38(1H，d)；7.8(2H，m)；7.62(1H，d)；7.4(3H，m)；7.3(1H， m)；6.81(1H，d)。MS(M+H)+：260
实施例14：[3-甲基-1-(1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-4-基)-1H-吡唑-4-基]-哌 啶-1-基-甲酮

步骤1. 3-甲基-1-(1-[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基-1H-吡咯并[2，3-b] 吡啶-4-基)-1H-吡唑-4-羧酸
向4-(4-溴代-3-甲基-1H-吡唑-1-基)-1-[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧 基]甲基-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶(0.107g，0.000263mol)在THF(1mL， 0.01mol)中的-70℃溶液中，加入在己烷(0.23mL，1.6M)中的正丁基 锂，0.5g CO2固体。15分钟后，用NH4Cl猝灭反应。加入乙酸乙酯和水。 有机相用盐水洗涤，并蒸发，得到84mg灰白色玻璃状物/固体。固体 用50％乙酸乙酯/己烷，0.5％ AcOH，在硅胶中的样品进行层析，得到 40mg纯化的产物，为白色固体(37％得率)。
1H NMR(400MHz，CDCl3)：δ 8.5(1H，d)；7.45(1H，d)；7.25(1H，d)； 7.02(1H，s)；6.6(1H，d)；5.75(2H，s)；3.6(2H，t)；2.48(3H，s)；0.98 (3H，t)；0.0(9H，s)。MS(M+H)+：372.
步骤2. 4-[3-甲基-4-(哌啶-1-基羰基)-1H-吡唑-1-基]-1-[2-(三甲基甲硅 烷基)乙氧基]甲基-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶
将3-甲基-1-(1-[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基-1H-吡咯并[2，3-b] 吡啶-4-基)-1H-吡唑-4-羧酸(0.040g，0.00011mol)(1:1 of AcOH)和N，N- 羰基二咪唑(0.035g，0.00021mol)的THF(1mL，0.01mol)溶液搅拌1.2 小时，此后加入哌啶(32μL，0.00032mol)。再过2小时后，加入另一份 哌啶(15μL)，将得到的混合物搅拌过夜。然后使反应混合物分配于乙 酸乙酯和水之间，用饱和NaHCO3和盐水顺序洗涤。干燥有机相并浓 缩，得到49mg粗制产物，为橙色油状物/玻璃状物。粗产物用75-100％ 乙酸乙酯/己烷进行层析(在DCM中的样品)。收集25mg纯化的产物， 为无色玻璃状物/油状物(50％得率)。
1H NMR(400MHz，CDCl3)：δ 8.45(1H，d)；8.23(1H，s)；7.5(1H，d)； 7.4(1H，d)；7.05(1H，d)；5.8(2H，s)；3.7(4H，br)；3.6(2H，t)；2.55 (3H，s)；1.7(6H，br)；1.0(3H，t)；0.0(9H，s)。MS(M+H)+：439.
步骤3.3-甲基-1-(1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-4-基)-1H-吡唑-4-基]-哌啶-1- 基-甲酮
将4-[3-甲基-4-(哌啶-1-基羰基)-1H-吡唑-1-基]-1-[2-(三甲基甲硅 烷基)乙氧基]甲基-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶(0.025g，0.000057mol)的TFA (1mL，0.01mol)溶液搅拌1.5小时。然后浓缩反应混合物，使其分配于 DCM和饱和NaHCO3 x2，和盐水之间。然后干燥有机层并浓缩，得到 28mg产物，为白色泡沫物。使该泡沫物溶于甲醇(1mL，0.02mol)，用 氢氧化铵在水(8.0M，1mL)中处理1.5小时。使用旋转蒸发器浓缩反应 物，得到24mg浅黄色玻璃状物。该玻璃状物用甲基叔-丁基醚(MTBE) 研磨，得到13mg白色固体，将其于室温下干燥过周末。干燥后获得 总共8mg产物(45％得率)。
1H NMR(400MHz，CDCl3)：δ 9.7(1H，s)；8.4(1H，d)；8.2(1H，s)；7.42 (1H，d)；7.4(1H，d)；6.99(1H，d)；3.4-3.8(4H，br)；2.47(3H，s)；1.5-1.8 (6H，br)。MS(M+H)+：309.
实施例15：[3-甲基-1-(1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-4-基)-1H-吡唑-4-基甲基]- 苯基-胺

步骤1. 3-甲基-1-(1-[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基-1H-吡咯并[2，3-b] 吡啶-4-基)-1H-吡唑-4-甲醛
向4-(4-溴代-3-甲基-1H-吡唑-1-基)-1-[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧 基]甲基-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶(0.25g，0.00061mol)在THF(2mL，0.03 mol)中的-70℃溶液，加入在己烷中的1.6M正丁基锂(0.54mL)。10 分钟后，加入DMF(120μL，0.0015mol)。使该反应物温热至室温并搅 拌过夜。然后用NH4Cl猝灭反应物。加入乙酸乙酯/水。分离有机相并 用盐水洗涤，然后干燥并浓缩，得到180mg橙色油状物。粗产物用25％ 乙酸乙酯/己烷进行层析(在DCM中的样品)。收集40mg浅黄色油状物 (18％得率)。
1H NMR(400MHz，CDCl3)：δ 10.15(1H，s)；8.7(1H，s)；8.47(1H，d)； 7.58(1H，d)；7.5(1H，d)；7.05(1H，d)；5.8(2H，s)；3.63(2H，t)；2.7 (3H，s)；0.98(3H，t)；0.0(9H，s)。MS(M+H)+：356.
步骤2. N-[3-甲基-1-(1-[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基-1H-吡咯并 [2，3-b]吡啶-4-基)-1H-吡唑-4-基]甲基苯胺
将3-甲基-1-(1-[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基-1H-吡咯并[2，3-b] 吡啶-4-基)-1H-吡唑-4-甲醛(0.025g，0.000070mol)和苯胺(1M在DCM 中，0.070mL)在DCM(1mL，0.02mol)中的溶液搅拌1分钟。加入乙酸 (20μL，0.0004mol)，苯胺(1M在DCM中，140μL)和三乙酰氧基硼氢化 钠(0.022g，0.00010mol)。将该反应物搅拌过夜并分配于DCM和饱和 NaHCO3之间，用盐水洗涤。干燥有机相并浓缩，得到21mg产物，为 浅橙色玻璃状物(70％得率)。
1H NMR(400MHz，CDCl3)：δ 8.4(1H，d)；8.15(1H，s)；7.65(1H，d)； 7.35(3H，m)；7.09(1H，d)；6.82(1H，m)；6.89(2H，m)；5.8(2H，s)； 4.35(2H，s)；3.6(2H，t)；2.5(3H，s)；0.99(3H，t)；0.0(9H，s)。MS(M+H)+： 433.
步骤3. [3-甲基-1-(1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-4-基)-1H-吡唑-4-基甲基]-苯 基-胺
依据实施例14，步骤3的方法，使N-[3-甲基-1-(1-[2-(三甲基甲硅烷 基)乙氧基]甲基-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-4-基)-1H-吡唑-4-基]甲基苯胺 脱保护，得到所需产物(58％得率)。
1H NMR(400MHz，CDCl3)：δ 9.9(1H，s)；8.38(1H，d)；8.1(1H，s)； 7.4(1H，d)；7.35(1H，d)；7.3(2H，m)；7.0(1H，d)；6.79(1H，m)；6.77 (2H，m)；4.25(2H，s)；3.81(1H，s)；2.41(3H，s)。MS(M+H)+：303.
实施例25：3-[3-甲基-1-(1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-4-基)-1H-吡唑-4-基]- 环己醇

步骤1. 3-乙氧基-1-[3-甲基-1-(1-[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基-1H- 吡咯并[2，3-b]吡啶-4-基)-1H-吡唑-4-基]环己-2-烯-1-醇

向4-(4-溴代-3-甲基-1H-吡唑-1-基)-1-[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧 基]甲基-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶(0.11g，0.00027mol)在THF(1.5mL， 0.018mol)中的-75℃溶液中加入在乙烷中的1.6M正丁基锂(0.22 mL)。该反应混合物转变为深橙色。～10分钟后，加入1.0M二溴化镁 的乙醚(0.35mL)溶液。再过50分钟后，加入3-乙氧基-2-环己烯-1-酮 (41.5μL，0.000308mol)的THF(～0.3mL)溶液。用1小时使得到的混合 物温热至-40℃，用NH4Cl猝灭。然后加入乙酸乙酯/水。有机相用盐 水洗涤并浓缩，得到145mg橙色油状物。粗产物用0-50％乙酸乙酯/己 烷梯度液(在DCM中的样品)进行层析。收集35mg产物，为油状物(30％ 得率)。
1H NMR(400MHz，CDCl3)：δ 8.49(1H，d)；8.38(1H，s)；7.55(1H，d)； 7.4(1H，d)；7.1(1H，d)；6.0(2H，s)；3.6(2H，t)；2.81(2H，m)；2.62 (3H，s)；2.58(2H，m)；2.27(2H，m)；1.0(3H，t)；0.0(9H，s)。MS(M+H)+： 422.
步骤2. 3-[3-甲基-1-(1-[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基-1H-吡咯并 [2，3-b]吡啶-4-基)-1H-吡唑-4-基]环己醇
将3-[3-甲基-1-(1-[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基-1H-吡咯并 [2，3-b]吡啶-4-基)-1H-吡唑-4-基]环己-2-烯-1-酮(0.019g，0.000045mol) 和披钯碳(Pd/C)(0.018g，0.000017mol)在甲醇(2mL，0.05mol)中的混 合物脱气并在氢气氛下搅拌过夜。加入另外48mg 10％ Pd/C并在氢气 氛下搅拌8小时。滤除钯，滤液用四氢硼酸钠(0.032g，0.00084mol)研 磨5小时。反应经prep-HPLC纯化，得到5mg所需产物。MS(M+H)+：426.
步骤3. 3-[3-甲基-1-(1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-4-基)-1H-吡唑-4-基]-环己 醇
依据实施例14，步骤3的方法，使3-[3-甲基-1-(1-[2-(三甲基甲硅烷 基)乙氧基]甲基-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-4-基)-1H-吡唑-4-基]环己醇脱 保护，得到所需产物(40％得率)。
1H NMR(400MHz，CDCl3)：(1H，s)；8.35(1H，d)；7.95(1H，s)； 7.41(1H，d)；7.35(1H，d)；7.02(1H，d)；3.78(1H，m)；2.6(1H，m)； 2.4(3H，s)；1.2-2.4(8H，m)。MS(M+H)+：296.
实施例40：4-[1-(3-甲氧基-1-甲基-丙基)-1H-吡唑-4-基]-1H-吡咯并 [2，3-b]吡啶

步骤1. 4-[1-(3-甲氧基-1-甲基丙基)-1H-吡唑-4-基]-1-[2-(三甲基甲硅 烷基)乙氧基]-甲基-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶
向3-[4-(1-[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基-1H-吡咯并[2，3-b]吡 啶-4-基)-1H-吡唑-1-基]丁-1-醇(该醇通过DIBAL还原实施例58的酯而 制得)(0.056g，0.00014mol))在DMF(1mL，0.01mol)中的0℃溶液中 加入氢化钠(0.0107g，0.000268mol)。5分钟后，加入甲基碘(18μL， 0.00029mol)，将得到的混合物搅拌过周末。然后使该混合物分配于乙 酸乙酯和水之间，分离并用盐水洗涤有机相。浓缩有机相，得到浅橙色 油状物。
1H NMR(400MHz，CDCl3)：δ 8.4(1H，d)；8.3(1H，s)；8.0(1H，s)；7.65 (1H，d)；7.27(1H，d)；6.8(1H，d)；5.8(2H，s)；4.7(1H，m)；3.63(2H， t)；3.2-3.4(2H，m)；3.38(3H，s)；2.1-2.3(2H，m)；1.7(3H，d)；1.0(2H， t)；0.0(9H，s)。MS(M+H)+：400.
步骤2. 4-[1-(3-甲氧基-1-甲基-丙基)-1H-吡唑-4-基]-1H-吡咯并[2，3-b] 吡啶
依据实施例14，步骤3的方法，使4-[1-(3-甲氧基-1-甲基丙基)-1H- 吡唑-4-基]-1-[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]-甲基-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶 脱保护，得到所需产物(25％得率)。
1H NMR(400MHz，CDCl3)：δ 10.0(1H，s)；8.35(1H，d)；8.18(1H，s)； 7.95(1H，s)；7.41(1H，d)；7.21(1H，d)；6.75(1H，d)；4.63(1H，m)； 3.15-3.4(2H，m)；3.35(3H，s)；2.21-2.05(2H，m)；1.6(3H，d)。MS (M+H)+：270.
实施例42：4-[1-(1-甲基-3-吡唑-1-基-丙基)-1H-吡唑-4-基]-1H-吡咯并 [2，3-b]吡啶

步骤1. 4-1-[1-甲基-3-(1H-吡唑-1-基)丙基]-1H-吡唑-4-基-1-[2-(三甲基 甲硅烷基)乙氧基]甲基-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶
向甲磺酸3-[4-(1-[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基-1H-吡咯并 [2，3-b]吡啶-4-基)-1H-吡唑-1-基]丁基酯(通过如同实施例59，步骤1，使 醇甲磺酰化制备)(0.055g，0.00012mol)和1H-吡唑(0.025g，0.00036 mol)在DMF(1mL，0.01mol)中的0℃溶液中加入氢化钠(0.014g， 0.00036mol)。将生成的溶液搅拌过夜，然后分配于乙酸乙酯和0.1N HCl、水之间。分离有机相并用盐水洗涤。然后浓缩有机层，得到49mg 浅橙色玻璃状物(87％得率)。
1H NMR(400MHz，CDCl3)：δ 8.4(1H，d)；8.18(1H，s)；7.99(1H，s)； 7.6(1H，t)；7.5(1H，d)；7.4(1H，t)；7.27(1H，d)；6.8(1H，d)；6.3(1H， m)；5.8(2H，s)；4.2(1H，m)；4.0-4.2(2H，m)；3.61(2H，t)；2.58(2H， m)；1.65(3H，d)；1.0(2H，t)；0.0(9H，s)。MS(M+H)+：436.
步骤2. 4-[1-(1-甲基-3-吡唑-1-基-丙基)-1H-吡唑-4-基]-1H-吡咯并 [2，3-b]吡啶
依据实施例14，步骤3的方法，使4-1-[1-甲基-3-(1H-吡唑-1-基)丙 基]-1H-吡唑-4-基-1-[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基-1H-吡咯并 [2，3-b]吡啶脱保护，得到所需产物(38％得率)。
1H NMR(400MHz，CDCl3)：δ 9.7(1H，s)；8.38(1H，d)；8.1(1H，s)； 7.7(1H，s)；7.59(1H，t)；7.4(1H，d)；7.35(1H，t)；7.21(1H，d)；6.75(1H， d)；6.25(1H，m)；4.4(1H，m)；3.9-4.15(2H，m)；2.55(2H，m)；1.63 (3H，d)。MS(M+H)+：306.
通过类似于如上所述程序的方法。制备表1中的以下化合物。“纯 化A”表示在以下条件下，通过制备型-HPLC纯化以下的脱保护产物： 用MeCN/含0.15％ NH4OH的H2O的梯度液洗脱C18。
表1








实施例46：4-(2-叔-丁基-1-甲基-1H-咪唑-4-基)-1H-吡咯并[2，3-b]吡 啶三氟-乙酸盐

步骤1. 4-(2-叔-丁基-1H-咪唑-5-基)-1-[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲 基-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶
向三甲基乙酸(0.169mL，0.00147mol)的乙醇(6mL，0.1mol)溶液 中加入碳酸铯(0.24g，0.00073mol)，将得到的混合物搅拌2小时。真空 除去溶剂，得到新戊酸铯。
向2-氯-1-(1-[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基-1H-吡咯并[2，3-b] 吡啶-4-基)乙酮(如在实施例50，步骤1中制备)(0.054g，0.00017mol) 的DMF(1.8mL，0.023mol)溶液中加入新戊酸铯(0.0389g，0.000166 mol)，将该反应物于室温下搅拌16小时。加入乙酸铵(0.45g，0.0058 mol)，将反应物在微波炉中加热至170℃ 5分钟。加入水，产物用MTBE 提取。合并的有机提取物经硫酸钠干燥，然后过滤并浓缩。粗残留物 经快速柱层析纯化(2.5％ MeOH/DCM)，得到4-(2-叔-丁基-1H-咪唑-5- 基)-1-[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶(32mg， 52％)。1H NMR(400MHz，CDCl3)：(d，1H)，7.50(s，1H)，7.40(d， 1H)，7.37(d，1H)，6.94(d，1H)，5.69(s，2H)，3.52(dd，2H)，1.46(s，9H)， 0.90(dd，2H)，-0.08(s，9H)；MS(ES)：371(M+1)。
步骤2. 4-(2-叔-丁基-1-甲基-1H-咪唑-4-基)-1-[2-(三甲基甲硅烷基)乙 氧基]甲基-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶
用48小时，分两份向4-(2-叔-丁基-1H-咪唑-5-基)-1-[2-(三甲基甲 硅烷基)乙氧基]甲基-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶(0.019g，0.000051mol)和 碳酸钾(0.15g，0.0011mol)在DMF(3mL，0.04mol)中的混合物中加入 甲基碘(0.01mL，0.00015mol)。然后加入水，产物用MTBE提取。合并 的提取物经硫酸钠干燥，过滤，并真空浓缩，然后经硅胶层析纯化(20％ 乙酸乙酯/己烷)，得到4-(2-叔-丁基-1-甲基-1H-咪唑-4-基)-1-[2-(三甲基 甲硅烷基)乙氧基]甲基-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶(10mg，51％)。
1H NMR(400MHz，CDCl3)：(d，1H)，7.54(d，1H)，7.44-7.22(m， 2H)，7.19(d，1H)，5.78(s，2H)，3.93(s，3H)，3.60(dd，2H)，1.61(s，9H)， 0.98(dd，2H)，0.00(s，9H)；MS(ES)：385(M+1)。
步骤3.
将4-(2-叔-丁基-1-甲基-1H-咪唑-4-基)-1-[2-(三甲基甲硅烷基)-乙 氧基]-甲基-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶(0.010g，0.000026mol)的TFA(3mL， 0.04mol)溶液搅拌2小时。然后蒸发过量的TFA，将残留物在甲醇(3mL， 0.07mol)和NH4OH(1mL)中搅拌16小时。除去溶剂，产物通过制备型 -HPLC纯化(C18，用ACN/含0.1％ TFA的H2O洗脱)，得到4-(2-叔-丁基 -1-甲基-1H-咪唑-4-基)-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶，三氟乙酸盐(9mg，90％)。
1H NMR(400MHz，d6-DMSO)： 12.24(s，1H)，8.38(br s，1H)，8.24(s， 1H)，7.70-7.63(m，2H)，7.08(br s，1H)，2.55(s，3H)，1.51(s，9H)； MS(ES)：255(M+1)。
采用与实施例46中描述的那些程序类似的程序，用不同的起始原 料如在步骤1中的备选羧酸，制备如表2中所示的其它类似物。当所述 类似物作为游离碱获得时，所述产物经制备型-HPLC获得(用ACN/含 0.15％ NH4OH的H2O的梯度液洗脱C18)。依据以下结构，结果概述于 表2中：

表2

实施例50：4-(2-苯基-1，3-噻唑-4-基)-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶三氟乙酸 盐

步骤1. 2-氯-1-(1-[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基-1H-吡咯并 [2，3-b]吡啶-4-基)乙酮
于0℃，向4-溴代-1-[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基-1H-吡咯并 [2，3-b]吡啶(2.05g，0.00626mol)的THF(10mL，0.123mol)溶液中滴加 入异丙基氯化镁的乙醚(2.0M，9.4mL)溶液。使该混合物温热至室温并 搅拌4小时。然后将该混合物通过导管转移到2-氯-N-甲氧基-N-甲基乙 酰胺(2.84g，0.0207mol)的THF(10ml)溶液中。经30分钟反应时间后， 该溶液通过加入饱和的氯化铵水溶液猝灭。产物用乙酸乙酯提取，合 并的有机提取物用盐水洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并浓缩。粗残留物 经快速柱层析纯化(0-20％乙酸乙酯/己烷)，得到2-氯-1-(1-[2-(三甲基甲 硅烷基)乙氧基]甲基-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-4-基)乙酮(711mg，35％)。
1H NMR(400MHz，CDCl3)：(d，1H)，7.66(d，1H)，7.60(d，1H)， 7.23(d，1H)，5.80(s，2H)，4.91(s，2H)，3.60(dd，2H)，0.98(dd，2H)，0.01 (s，9H)；MS(ES)：325(M+1)。
步骤2. 4-(2-苯基-1，3-噻唑-4-基)-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶三氟乙酸盐
将2-氯-1-(1-[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基-1H-吡咯并[2，3-b] 吡啶-4-基)乙酮(0.050g，0.00015mol)和苯硫代甲酰胺(carbothioamide) (0.031g，0.00022mol)在乙醇(2mL，0.03mol)中的溶液加热至回流1小 时。真空除去溶剂。加入乙酸乙酯，通过过滤分离生成的固体。将粗 制固体与TFA一起搅拌1小时，然后真空除去过量的TFA。然后将粗残 留物与NH4OH水溶液和MeOH一起搅拌16小时。除去溶剂，产物通过 制备型-HPLC纯化(C18，用ACN/含0.1％ TFA的H2O的梯度液洗脱)， 得到4-(2-苯基-1，3-噻唑-4-基)-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶，为三氟乙酸盐(11 mg，18％)。1H NMR(400MHz，d6-DMSO)：(s，1H)，8.58(s，1H)， 8.39(br s，1H)，8.13-8.07(m，2H)，7.81(d，1H)，7.67-7.64(m，1H)， 7.62-7.52(m，3H)，7.22(d，1H)；MS(ES)：278(M+1)。
实施例51：N-甲基-N-丙基-4-(1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-4-基)-1，3-噻唑-2- 胺，三氟乙酸盐

步骤1. N-甲基-N-丙基硫脲
将N-甲基-N-丙基胺(0.501mL，0.00488mol)加入到1，1′-硫代羰基- 二咪唑(0.957g，0.00537mol)的THF(9mL，0.1mol)溶液中，并将生成 的溶液搅拌16小时。通过硅胶层析(5％ MeOH在DCM中)从反应混合物 中分离中间体，将该中间体与氨(7M的MeOH溶液)(6mL)一起搅拌48 小时。真空除去溶剂。快速柱层析后获得N-甲基-N-丙基硫脲(4％ MeOH在DCM中)。
步骤2.
将2-氯-1-(1-[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基-1H-吡咯并[2，3-b] 吡啶-4-基)乙酮(0.050g，0.00015mol)和N-甲基-N-丙基硫脲(0.030g， 0.00022mol)的乙醇(2mL，0.03mol)溶液加热至回流2小时。然后，真 空除去乙醇，使残留物溶于2mL TFA中并搅拌40分钟。真空除去过量 的TFA，使残留物溶于3mL MeOH。向其中加入0.5mL NH4OH和100 μL乙二胺，将生成的溶液搅拌16小时。除去溶剂，然后加入水，得到 白色沉淀物，将其通过制备型-HPLC纯化(C18，用ACN/含0.1％ TFA 的H2O的梯度液洗脱)，得到N-甲基-N-丙基-4-(1H-吡咯并[2，3-b]吡啶 -4-基)-1，3-噻唑-2-胺，为三氟乙酸盐(39mg，67％)。1H NMR(300MHz， CD3OD)：(br s，1H)，7.92(br s，1H)，7.72(s，1H)，7.63(d，1H)， 7.45(br s，1H)，3.56(t，2H)，3.20(s，3H)，1.78(dq，2H)，1.00(t，3H)； MS(ES)：273(M+1)。
通过与在实施例51中描述的那些方法类似的方法，使用不同的起 始原料如在步骤2中的备选硫脲，制备其它的氨基噻唑类似物。在实 施例52和53中，过滤分离通过实施例51的方法获得的白色沉淀物， 用水洗涤并在高真空下干燥，得到为游离胺的类似物。依据以下结构， 结果概述于表3：

表3

实施例54：4-(2-苯基-1，3-噻唑-5-基)-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶三氟乙酸 盐

步骤1. (2-苯基-1，3-噻唑-5-基)硼酸
于-78℃，向在乙醚(20mL)中的正丁基锂的己烷(1.6M，2.1mL) 溶液中滴加入2-苯基-1，3-噻唑(449mg，0.00278mol)的乙醚(5mL)溶 液。于-78℃，将该混合物搅拌1小时，接着加入硼酸三甲基酯(0.949mL， 0.00835mol)。于-78℃，将该混合物搅拌15分钟，然后使温热至室温 并搅拌另外40分钟。加入饱和的NH4Cl水溶液，接着加入1.0N HCl水 溶液。将酸化的混合物搅拌15分钟，所需产物用四份含15％异丙醇的 DCM提取。合并的有机提取物经硫酸钠干燥并浓缩，得到566mg作为 与2-苯基-1，3-噻唑的混合物的含所需(2-苯基-1，3-噻唑-5-基)硼酸的白 色固体。该混合物无须进一步纯化而用于步骤2。MS(ES)：206(M+1)。
步骤2.
向(2-苯基-1，3-噻唑-5-基)硼酸(75.0mg，0.000366mol)和4-溴代 -1-[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶(80mg， 0.000244mol)在DMF(4mL，0.0516mol)中的混合物中加入碳酸钾 (101mg，0.000732mol)的水溶液(1mL，0.0555mol)。将该混合物用稳 定的氮气流吹洗15分钟。
加入四(三苯膦)钯(0)(20mg，0.000018mol)，将得到的混合物加 热至125℃ 30分钟。产物通过制备型-HPLC纯化(C18，用ACN/含0.1％ TFA的H2O的梯度液洗脱)，得到12mg黄色固体的含作为主要成分的 所需产物。将该混合物在TFA(1mL)中搅拌1小时。然后真空除去过量 的TFA，将得到的残留物与2mL MeOH、0.5mL NH4OH和100μL乙二 胺一起搅拌16小时。产物经制备型-HPLC分离(C18，用ACN/含0.1％ TFA的H2O的梯度液洗脱)，得到4-(2-苯基-1，3-噻唑-5-基)-1H-吡咯并 [2，3-b]吡啶三氟乙酸盐(5mg，5％)。1H NMR(400MHz，CD3OD)： (s，1H)，8.34(d，1H)，8.10-8.04(m，2H)，7.73(d，1H)，7.71(d，1H)， 7.56-7.51(m，3H)，7.14(d，1H)；MS(ES)：278(M+1)。
实施例55：2-甲基-2-[4-(1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-4-基)-1H-吡唑-1-基]丙 酸乙基酯三氟乙酸盐(55a)
和
2-甲基-2-[4-(1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-4-基)-1H-吡唑-1-基]丙酸(55b)

使4-(1H-吡唑-4-基)-1-[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基-1H-吡咯 并[2，3-b]吡啶(60mg，0.00019mol)溶于DMF(1.5mL)，用冷浴使该溶 液冷却至0℃。加入氢化钠(15mg，0.00038mol)。搅拌10分钟后，加 入2-溴代-2-甲基-丙酸乙基酯(42μL，0.00028mol)。然后移去冷浴，用 1小时使反应混合物温热至室温。反应混合物用饱和的氯化铵溶液猝 灭。加入更多的水，产物用MTBE提取。合并的提取物经硫酸钠干燥， 过滤并浓缩。使残留物溶于2mL TFA并搅拌1小时。然后真空除去过 量的TFA，将得到的残留物在2mL EtOH(含0.6mL NH4OH)溶液中搅 拌16小时。除去挥发物，该混合物的纯化通过制备型-HPLC(C18，用 ACN/含0.1％ TFA的H2O的梯度液洗脱)进行，得到2-甲基-2-[4-(1H-吡 咯并[2，3-b]吡啶-4-基)-1H-吡唑-1-基]丙酸乙基酯三氟乙酸盐(13mg， 17％)：1H NMR(300MHz，d6-DMSO)：(s，1H)，8.67(s，1H)， 8.31-8.19(m，2H)，7.59(t，1H)，7.48(d，1H)，6.98(br s，1H)，4.10(q，2H)， 1.84(s，6H)，1.12(t，3H)；MS(ES)：299(M+1)和2-甲基-2-[4-(1H-吡咯并 [2，3-b]吡啶-4-基)-1H-吡唑-1-基]丙酸(27mg，53％)：1H NMR(300 MHz，d6-DMSO)： 12.04(s，1H)，8.64(s，1H)，8.26(s，2H)，7.59(br s， 1H)，7.48(d，1H)，6.99(br s，1H)，1.83(s，6H)；MS(ES)：271(M+H)。
实施例56：2-甲基-2-[4-(1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-4-基)-1H-吡唑-1-基] 丙酰胺

将2-甲基-2-[4-(1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-4-基)-1H-吡唑-1-基]丙酸 (23mg，0.000085mol)和N，N-羰基二咪唑(CDI)(21mg，0.00013mol)在 2mL DMF中的混合物搅拌3小时。将过量的固体NH4Cl和TEA加入到 该混合物中并搅拌3小时。真空除去大部分溶剂，粗残留物通过制备 型-HPLC纯化(C18，用ACN/含0.1％ TFA的H2O的梯度液洗脱)，接着 经制备型-HPLC(C18，用ACN/含0.15％ NH4OH的H2O的梯度液洗脱) 再次纯化，得到2-甲基-2-[4-(1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-4-基)-1H-吡唑-1- 基]丙酰胺(6mg，26％)。1H NMR(400MHz，d6-DMSO)：(s，1H)， 8.44(s，1H)，8.16(s，1H)，8.14(s，1H)，7.47(t，1H)，7.29(d，1H)，7.21(s， 1H)，6.93(s，1H)，6.80(dd，1H)，1.77(s，6H)；MS(ES)：270(M+1)。
实施例57：3-甲基-3-[4-(1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-4-基)-1H-吡唑-1-基]丁 酸乙基酯三氟乙酸盐

步骤1. 3-甲基-3-[4-(1-[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基-1H-吡咯并 [2，3-b]吡啶-4-基)-1H-吡唑-1-基]丁酸乙基酯
使4-(1H-吡唑-4-基)-1-[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基-1H-吡咯 并[2，3-b]吡啶(220mg，0.0006996mol)和3-甲基-2-丁酸乙基酯(292μL， 0.00210mol)溶于DMF(10mL)。加入碳酸铯(912mg，0.00280mol)，将 得到的混合物于室温下搅拌3小时。反应混合物用水稀释，产物用 MTBE提取数次。合并的提取物经硫酸钠干燥并浓缩。粗残留物经快 速柱层析纯化(0-60％ EtOAc/己烷)，得到3-甲基-3-[4-(1-[2-(三甲基甲硅 烷基)乙氧基]甲基-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-4-基)-1H-吡唑-1-基]丁酸乙 基酯(244mg，79％)。1H NMR(300MHz，CDCl3)：(d，1H)，8.11(s， 1H)，8.09(s，1H)，7.45(d，1H)，7.24(d，1H)，6.79(d，1H)，5.77(s，2H)， 4.10(q，2H)，3.62(dd，2H)，3.04(s，2H)，1.88(s，6H)，1.20(t，3H)，0.98 (dd，2H)，0.00(s，9H)；MS(ES)：443(M+1)。
步骤2.
将3-甲基-3-[4-(1-[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基-1H-吡咯并 [2，3-b]吡啶-4-基)-1H-吡唑-1-基]丁酸乙基酯(20mg，0.0000452mol)在1 mL TFA中搅拌1小时.然后真空除去过量的TFA。将残留物在含0.5 mL NH4OH的2mL MeOH中搅拌16小时。蒸发挥发物，接着经制备型 -HPLC(C18，用ACN/含0.1％ TFA的H2O的梯度液洗脱)纯化，得到3- 甲基-3-[4-(1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-4-基)-1H-吡唑-1-基]丁酸乙基酯，三 氟乙酸盐(5mg，26％)。1H NMR(400MHz，d6-DMSO)：(s，1H)， 8.61(br s，1H)，8.34-8.22(br m，2H)，7.62(br s，1H)，7.51(br d，1H)，7.02 (br s，1H)，3.91(q，2H)，2.96(s，2H)，1.70(s，6H)，1.02(t，3H)； MS(ES)：313(M+1)。
实施例58：3-甲基-3-[4-(1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-4-基)-1H-吡唑-1-基] 丁-1-醇三氟乙酸盐

于-78℃，向3-甲基-3-[4-(1-[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基-1H- 吡咯并[2，3-b]吡啶-4-基)-1H-吡唑-1-基]丁酸乙基酯(213mg，0.000481 mol)的THF(5mL，0.0616mol)溶液中滴加入二异丁基氢化铝的DCM (1.00M，1.1mL)溶液。将该反应混合物搅拌3小时，此时使反应混合物 缓慢升温至-10℃。于-10℃，向该混合物中小心加入酒石酸K/Na四水 合物的水溶液。将该混合物搅拌2小时，然后用三份乙酸乙酯提取。 合并的有机提取物用2份水和1份盐水洗涤，然后经硫酸钠干燥，过滤 并浓缩，得到3-甲基-3-[4-(1-[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基-1H-吡咯 并[2，3-b]吡啶-4-基)-1H-吡唑-1-基]丁-1-醇(185mg，96％)，其无须进一 步纯化而使用。将如此获得的1份醇(15mg，0.000037mol)在TFA(1mL) 中搅拌2小时。真空除去TFA，将残留物与含0.5mL NH4OH的2mL MeOH一起搅拌16小时。除去挥发物，产物通过制备型-HPLC纯化 (C18，用ACN/含0.1％ TFA的H2O的梯度液洗脱)，得到3-甲基-3-[4-(1H- 吡咯并[2，3-b]吡啶-4-基)-1H-吡唑-1-基]丁-1-醇，为三氟乙酸盐(8.0mg， 57％)。1H NMR(300MHz，d6-DMSO)：(s，1H)，8.58(br s，1H)， 8.32-8.22(br m，2H)，7.62(br s，1H)，7.53(br d，1H)，7.03(br s，1H)，3.25 (t，2H)，2.07(t，2H)，1.62(s，6H)；MS(ES)：271(M+1)。
实施例59：4-甲基-4-[4-(1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-4-基)-1H-吡唑-1-基] 戊烷腈三氟乙酸盐

步骤1. 4-甲基-4-[4-(1-[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基-1H-吡咯并 [2，3-b]吡啶-4-基)-1H-吡唑-1-基]戊烷腈
于0℃，将TEA(38.0μL，0.000273mol)和甲烷磺酰氯(21.1μL， 0.000273mol)依次加入到3-甲基-3-[4-(1-[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基] 甲基-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-4-基)-1H-吡唑-1-基]丁-1-醇(如在实施例 58中制备)(81mg，0.00020mol)的DCM(4mL，0.05mol)溶液中。将该 反应混合物在此温度下保持1.5小时，然后通过加入水猝灭。反应混合 物用DCM提取4次。合并的提取物经硫酸钠干燥，过滤并浓缩，得到 粗制甲磺酸3-甲基-3-[4-(1-[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基-1H-吡咯 并[2，3-b]吡啶-4-基)-1H-吡唑-1-基]丁基酯(87mg)。MS(ES)：479(M+1)。
将甲磺酸3-甲基-3-[4-(1-[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基-1H-吡 咯并[2，3-b]吡啶-4-基)-1H-吡唑-1-基]丁基酯(42mg，0.000088mol)和氰 化钾(46mg，0.000702mol)在DMF(1mL)中的混合物于125℃的微波 反应器中加热30分钟，加入后于135℃加热30分钟。然后将该混合物 用水稀释，产物用3份MTBE提取。合并的提取物经硫酸钠干燥，过滤 并浓缩，得到61mg粗制4-甲基-4-[4-(1-[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲 基-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-4-基)-1H-吡唑-1-基]戊烷腈，其无须进一步 纯化而使用。MS(ES)：410(M+1)。
步骤2.
将4-甲基-4-[4-(1-[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基-1H-吡咯并 [2，3-b]吡啶-4-基)-1H-吡唑-1-基]戊烷腈(57mg，0.00014mol)在DCM(4 ml)和TFA(1mL)中搅拌2小时。真空除去溶剂，将残留物在含0.2mL 乙二胺的2mL MeOH中搅拌16小时。蒸发挥发物，通过制备型-HPLC (C18，用ACN/含0.1％ TFA的H2O的梯度液洗脱)从反应混合物中分离 产物，得到4-甲基-4-[4-(1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-4-基)-1H-吡唑-1-基]戊 烷腈，为三氟乙酸盐(10mg，18％)。1H NMR(400MHz，d6-DMSO)：δ .12.09(s，1H)，8.58(s，1H)，8.29(s，1H)，8.25(d，1H)，7.60(t，1H)，7.48(d， 1H)，7.00(br s，1H)，2.33-2.21(m，4H)，1.61(s，6H)；MS(ES)：280(M+1)。
实施例60：4-甲基-4-[4-(1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-4-基)-1H-吡唑-1-基] 戊酰胺三氟乙酸盐

将粗制4-甲基-4-[4-(1-[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基-1H-吡咯 并[2，3-b]吡啶-4-基)-1H-吡唑-1-基]戊烷腈(36mg，0.000088mol，见实 施例59中的制备)在TFA(2mL)中搅拌1小时。浓缩该混合物以除去过 量的TFA，将得到的残留物在含0.5mL NH4OH 2mL甲醇中搅拌16小 时。产物通过制备型-HPLC纯化(C18，用ACN/含0.1％ TFA的H2O的梯 度液洗脱)，得到4-甲基-4-[4-(1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-4-基)-1H-吡唑-1- 基]戊酰胺，为三氟乙酸盐(21mg，58％)。1H NMR(400MHz， d6-DMSO)：(s，1H)，8.60(s，1H)，8.33-8.21(m，2H)，7.62(br s， 1H)，7.53(d，1H)，7.22(br s，1H)，7.04(br s，1H)，6.71(br s，1H)， 2.14-2.07(m，2H)，1.86-1.79(m，2H)，1.58(s，6H)；MS(ES)：298(M+1)。
实施例61：(3S)-3-[4-(1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-4-基)-1H-吡唑-1-基]丁 腈三氟乙酸盐，
和
(3R)-3-[4-(1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-4-基)-1H-吡唑-1-基]丁腈三氟乙酸盐
和
向4-(1H-吡唑-4-基)-1-[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基-1H-吡咯 并[2，3-b]吡啶(0.050g，0.00016mol)的ACN溶液中加入2-丁烯腈(0.014 mL，0.00017mol)和DBU(0.029mL，0.00020mol)。将得到的混合物搅 拌16小时。然后蒸发挥发物，使残留物溶于乙酸乙酯。生成的溶液用 1.0N HCl、水和盐水顺序洗涤，然后经硫酸钠干燥，过滤并浓缩。得 到基本纯形式的对映体，采用方法A(参见下文)。
使粗残留物溶于TFA(7mL，0.09mol)并将溶液搅拌1小时。然后 蒸发过量的TFA，然后将残留物与乙二胺(0.1mL，0.001mol)一起在甲 醇(4mL，0.09mol)中搅拌16小时。浓缩该混合物，产物通过制备型 -HPLC纯化(C18，用ACN/含0.1％ TFA的H2O的梯度液洗脱)，得到 3-[4-(1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-4-基)-1H-吡唑-1-基]丁腈三氟乙酸盐(35 mg，61％)。1H NMR(300MHz，d6-DMSO)：(s，1H)，8.73(s，1H)， 8.32(s，1H)，8.28(d，1H)，7.65-7.61(m，1H)，7.48(d，1H)，6.99(d，1H)， 4.86(q，1H)，3.17(d，2H)，1.57(d，3H)；MS(ES)：252(M+1)。
通过与实施例61中描述的那些方法类似的方法。使用不同的起始 原料用于吡唑环烷基化，制备其它的类似物。例如，α，β-不饱和的腈 通过类似于下文对(2E)-和(2Z)-己烯腈举例说明的方法制备：于0℃， 向1.00M叔丁醇钾的THF(24.2mL)溶液中滴加入氰基甲基膦酸二乙 基酯(4.10mL，0.025mol)的THF(30mL)溶液。移去水浴使该溶液温热 至室温。达到室温后，使溶液再次冷却至0℃，滴加入丁醛(2.00mL， 0.023mol)的THF(7mL)溶液。使反应混合物温热至室温并搅拌过夜。 混合物用乙酸乙酯和水稀释。分离各层，含水层用3份乙酸乙酯提取。 合并的有机提取物用盐水洗涤，经硫酸钠干燥，过滤并浓缩。得到1.6 g含(2E)-和(2Z)-己烯腈的粗制混合物，其无须进一步纯化而用于随后 的烷基化步骤中。1H NMR(400MHz，CDCl3)：(dt，1H反式烯烃)， 6.48(dt，1H顺式烯烃)，5.34(dt，1H反式烯烃)，5.31-5.30(m，1H顺式烯 烃)。
其中理想的是获得基本纯形式的对映体，通过以下方法之一进行 手性分离：
A)硅胶层析(乙酸乙酯/己烷)后，通过制备型手性HPLC(OD-H 柱，用15％乙醇的己烷溶液洗脱)，对SEM-保护的中间体进行分离；
B)通过制备型手性HPLC(OD-H柱，用15％乙醇的己烷溶液洗 脱)，对脱保护的游离碱进行分离；
C)硅胶层析(乙酸乙酯/己烷)后，通过制备型手性HPLC(AD-H 柱，用10％乙醇的己烷溶液洗脱)，对SEM-保护的中间体进行分离；
D)硅胶层析(乙酸乙酯/己烷)后，通过制备型手性HPLC(AD-H 柱，用15％乙醇的己烷溶液洗脱)，对SEM-保护的中间体进行分离；
E)硅胶层析(乙酸乙酯/己烷)后，通过制备型手性HPLC(OD-H 柱，用20％乙醇的己烷溶液洗脱)，对SEM-保护的中间体进行分离； 或
F)硅胶层析(乙酸乙酯/己烷)后，通过制备型手性HPLC(OD-H 柱，用30％乙醇的己烷溶液洗脱)，对SEM-保护的中间体进行分离。 OD-H柱指购自手性技术公司(Chiral Technologies，Inc)的Chiralcel OD-H(3x25cm，5μm)。AD-H柱指购自手性技术公司(Chiral Technologies，Inc)的ChiralPak AD-H(2x25cm，5μm)。化合物的结果概 述于下表4中。

表4

实施例65：(3R)-3-[4-(7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基)-1H-吡唑-1-基]己 烷腈三氟乙酸盐
和
(3S)-3-[4-(7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基)-1H-吡唑-1-基]己烷腈三氟乙酸 盐
和
步骤1. 4-氯-7-[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧 啶
于0℃，向4-氯代吡咯并[2，3-d]嘧啶(0.86g，0.0056mol)的DMF (20mL，0.2mol)溶液中分次加入氢化钠(0.27g，0.0067mol)。将该反应 混合物搅拌另外45分钟，接着滴加入β-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基 氯(1.2mL，0.0067mol)。将生成的反应混合物于0℃搅拌45分钟，然后 用水猝灭，用乙酸乙酯提取。有机提取物用水、盐水洗涤，经硫酸钠 干燥，过滤并浓缩，得到油状物。粗残留物经快速柱层析纯化(0-15％ 乙酸乙酯/己烷)，得到4-氯-7-[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基-7H-吡 咯并[2，3-d]嘧啶(1.40g，88％)。
1H NMR(400MHz，CDCl3)：(s，1H)，7.46(d，1H)，6.72(d，1H)， 5.71(s，2H)，3.59(dd，2H)，0.97(dd，2H)，0.00(s，9H)； MS(ES)：284(M+1)。
步骤2. 4-(1H-吡唑-4-基)-7-[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基-7H-吡 咯并[2，3-d]嘧啶
向4-氯-7-[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶 (1.4g，0.0049mol)和4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼杂戊环-2- 基)-1H-吡唑(1.4g，0.0074mol)在DMF(40mL，0.5mol)中的混合物中 加入在15mL水中的碳酸钾(2.0g，0.015mol)。将该混合物用稳定的氮 气流中吹洗15分钟。加入四(三苯膦)钯(0)(0.41g，0.00036mol)，将该 反应物加热至125℃ 30分钟。使该混合物冷却，然后用乙酸乙酯稀释。 将经稀释的反应混合物用水、盐水洗涤，经Na2SO4干燥并浓缩，得到 少量DMF(约2-3mL)的溶液。加入水，使该物质在烧瓶壁上形成胶状 物。然后轻轻倒掉水，使该固体溶于乙酸乙酯。溶液经Na2SO4干燥并 真空浓缩，得到黄色固体。产物用乙醚研磨，得到4-(1H-吡唑-4- 基)-7-[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶，为白色 粉末，将其在真空下干燥(1g，60％)。1H NMR(300MHz，CDCl3)： (br s，1H)，8.93(s，1H)，8.46(s，2H)，7.46(d，1H)，6.88(d，1H)，5.73(s， 2H)，3.61(dd，2H)，0.98(dd，2H)，0.00(s，9H)；MS(ES)：316(M+1)。
步骤3.
向4-(1H-吡唑-4-基)-7-[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基-7H-吡咯 并[2，3-d]嘧啶(0.050g，0.00016mol)的ACN(1mL，0.02mol)溶液中加 入己-2-烯腈(0.100g，0.00105mol)(为顺式和反式异构体的混合物)，接 着加入DBU(60μL，0.0004mol)。将得到的混合物于室温下搅拌16小 时。真空除去ACN。使粗残留物溶于乙酸乙酯，用1.0N HCl、盐水洗 涤，经Na2SO4干燥并浓缩。粗残留物经快速柱层析纯化(0-70％ EtOAc/ 己烷)，得到56mg产物，将其与1:1 TFA/DCM一起搅拌1小时，蒸发溶 剂。将生成的产物与含乙二胺(0.1mL，0.001mol)的甲醇(4mL，0.1mol) 一起搅拌过夜。蒸发溶剂，产物通过制备型-HPLC纯化(C18，用ACN/ 含0.1％ TFA的H2O的梯度液洗脱)，得到3-[4-(7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4- 基)-1H-吡唑-1-基]己烷腈，为三氟乙酸盐。需要时，通过以上实施例 61描述的方法，分离基本纯形式的对映体。1H NMR(300MHz， CD3OD)：(s，1H)，8.88(s，1H)，8.52(s，1H)，7.85(d，1H)，7.28(d， 1H)，4.87-4.77(m，1H)，3.26-3.05(m，2H)，2.20-2.05(m，1H)，2.00-1.86 (m，1H)，1.40-1.10(m，2H)，0.95(t，3H)；MS(ES)：281(M+1)。
实施例67：(3R)-和(3S)-3-环戊基-3-[4-(7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4- 基)-1H-吡唑-1-基]丙腈
和
步骤1. (2E)-和(2Z)-3-环戊基丙烯腈
于0℃，向1.0M叔丁醇钾的THF(235mL)溶液中滴加入氰基甲 基膦酸二乙基酯(39.9mL，0.246mol)的THF(300mL)溶液。移去冷浴， 使反应物温热至室温，接着再冷却至0℃，此时滴加入环戊烷甲醛(22.0 g，0.224mol)的THF(60mL)溶液。移去水浴，使反应物温热至环境温 度并搅拌64小时。使混合物分配于乙醚和水之间，水层用3份乙醚提 取，接着用两份乙酸乙酯提取。合并的提取物用盐水洗涤，然后经硫 酸钠干燥，过滤并真空浓缩，得到含24.4g烯烃异构体的混合物，其无 须进一步纯化而使用(89％)。
1H NMR(400MHz，CDCl3)：δ 6.69(dd，1H，反式烯烃)，6.37(t，1H，顺 式烯烃)，5.29(dd，1H，反式烯烃)，5.20(d，1H，顺式烯烃)，3.07-2.95(m， 1H，顺式产物)，2.64-2.52(m，1H，反式产物)，1.98-1.26(m，16H)。
步骤2. (3R]-和(3S)-3-环戊基-3-[4-(7-[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基 -7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基)-1H-吡唑-1-基]丙腈
向4-(1H-吡唑-4-基)-7-[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基-7H-吡咯 并[2，3-d]嘧啶(15.0g，0.0476mol)的ACN(300mL)溶液中加入3-环戊 基丙烯腈(15g，0.12mol)(为顺式和反式异构体的混合物)，接着加入 DBU(15mL，0.10mol)。将生成的混合物于室温下搅拌过夜。蒸发 ACN。混合物用乙酸乙酯稀释，溶液用1.0N HCl洗涤。有机层用3份 乙酸乙酯回提。合并的有机提取物用盐水洗涤，经硫酸钠干燥，过滤 并浓缩。粗产物通过硅胶层析(乙酸乙酯/己烷的梯度液)纯化，得到粘 稠的透明浆状物，使其溶于乙醇并浓缩数次以除去乙酸乙酯，得到19.4 g外消旋加合物(93％)。对映体通过制备型-HPLC分离，(OD-H，15％乙 醇/己烷)并分别用于下一步骤，生成它们的相应的最终产物。源于各 个分离的对映体的最终产物(见步骤3)被发现为活性的JAK抑制剂；然 而，从制备型-HPLC洗脱的源于第二个峰的最终产物比其对映体更有 活性。
1H NMR(300MHz，CDCl3)：δ 8.85(s，1H)，8.32(s，2H)，7.39(d，1H)， 6.80(d，1H)，5.68(s，2H)，4.26(dt，1H)，3.54(t，2H)，3.14(dd，1H)，2.95 (dd，1H)，2.67-2.50(m，1H)，2.03-1.88(m，1H)，1.80-1.15(m，7H)，0.92(t， 2H)，-0.06(s，9H)；MS(ES)：437(M+1)。
步骤3.
向3-环戊基-3-[4-(7-[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基-7H-吡咯并 [2，3-d]嘧啶-4-基)-1H-吡唑-1-基]丙腈(6.5g，0.015mol，如上分离的R或 S对映体)的DCM(40mL)溶液中加入TFA(16mL)，将其搅拌6小时。 真空除去溶剂和TFA。使残留物溶于DCM并使用旋转蒸发器再浓缩两 次，以尽可能除去TFA。此后，使残留物与乙二胺(4mL，0.06mol)一 起在甲醇(30mL)中搅拌过夜。真空除去溶剂，加入水，将产物提取到3 份乙酸乙酯中。合并的提取物用盐水洗涤，经硫酸钠干燥，倾析并浓 缩，得到粗产物，将其经快速柱层析纯化(用甲醇/DCM的梯度液洗脱)。 将得到的混合物通过制备型-HPLC/MS(C18，用ACN/含0.15％NH4OH 的H2O的梯度液洗脱)进一步纯化，得到产物(2.68g，58％)。
1H NMR(400MHz，D6-dmso)：δ 12.11(br s，1H)，8.80(s，1H)，8.67(s， 1H)，8.37(s，1H)，7.60(d，1H)，6.98(d，1H)，4.53(dt，1H)，3.27(dd，1H)， 3.19(dd，1H)，2.48-2.36(m，1H)，1.86-1.76(m，1H)，1.68-1.13(m，7H)； MS(ES)：307(M+1)。
在以下表中提供的其它的类似物通过在例如实施例61和65中描 述的那些方法类似的方法，在步骤3中使用不同的起始原料如不同的 α，β-不饱和的腈制备。通过以上(A-F)前表4所述的指定手性分离方法， 分离基本纯形式的对映体。当产物作为游离胺分离时，脱保护的产物 通过制备型-HPLC纯化(C18，用ACN/含0.15％ NH4OH的H2O的梯度液 洗脱)，而不是通过制备型-HPLC(C18，用ACN/含0.1％ TFA的H2O的 梯度液洗脱)。这被称为“改进G”。依据以下结构，结果概述于表5：

表5


实施例69：4-{1-[(1S)-1-甲基丁基]-1H-吡唑-4-基}-7H-吡咯并[2，3-d] 嘧啶三氟乙酸盐
和
4-{1-[(1R)-1-甲基丁基]-1H-吡唑-4-基}-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶三氟乙 酸盐
和
将4-(1H-吡唑-4-基)-7-[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基-7H-吡咯 并[2，3-d]嘧啶(0.050g，0.00016mol)的DMF(2mL，0.02mol)溶液在冰 浴中冷却，向其中加入氢化钠(0.013g，0.00032mol)。将得到的混合物 搅拌10分钟，接着加入2-溴代戊烷(0.030mL，0.00024mol)。然后移去 冷浴，将该反应物于室温下搅拌3小时，此时加入另一份2-溴代戊烷 (0.015mL，0.00012mol)。45分钟后，加入水，反应混合物用3份乙酸 乙酯提取。合并的提取物用盐水洗涤，经硫酸钠干燥，过滤并浓缩。 残留物与TFA(3mL，0.04mol)和DCM(3mL，0.05mol)一起搅拌3.5小 时，然后真空除去溶剂。然后将残留物与NH4OH(1.5mL)一起在MeOH (4mL)中搅拌16小时。蒸发溶剂和产物通过制备型-HPLC纯化(C18， 用ACN/含0.1％ TFA的H2O的梯度液洗脱)，得到4-[1-(1-甲基丁基)-1H- 吡唑-4-基]-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶，为三氟乙酸盐(25mg，44％)。1H NMR(300MHz，CD3OD)：(s，1H)，8.75(s，1H)，8.43(s，1H)，7.77 (d，1H)，7.24(d，1H)，4.63-4.50(m，1H)，2.07-1.91(m，1H)，1.88-1.74(m， 1H)，1.58(d，3H)，1.38-1.09(m，2H)，0.93(t，3H)；MS(ES)：256(M+1)。
通过分离外消旋游离碱(脱保护后，通过快速柱层析分离，用 MeOH/DCM梯度液洗脱)，使用HPLC(OD-H，用5％异丙醇/己烷洗脱) 分离基本纯形式的对映体。
实施例69a：4-甲基-4-[4-(7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基)-1H-吡唑-1-基]戊 烷腈

步骤1. 3-甲基-3-[4-(7-[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基-7H-吡咯并 [2，3-d]嘧啶-4-基)-1H-吡唑-1-基]丁酸乙基酯
将4-(1H-吡唑-4-基)-7-[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基-7H-吡咯 并[2，3-d]嘧啶(12.1g，0.0384mol)、2-丁酸，3-甲基-，乙基酯(16.0mL， 0.115mol)和DBU(14.3mL，0.0959mol)在ACN(100mL)中的溶液在 回流下加热3.5小时。真空除去溶剂。残留物用水稀释，用乙酸乙酯提 取，合并的有机提取物用饱和氯化铵洗涤，经硫酸钠干燥并浓缩。粗 残留物经快速柱层析纯化(乙酸乙酯/己烷)，得到所需产物(15.5g， 91％)。
1H NMR(400MHz，CDCl3)：(s，1H)，8.36(s，1H)，8.27(s，1H)， 7.37(d，1H)，6.80(d，1H)，5.66(s，2H)，4.03(q，2H)，3.54(dd，2H)，2.98 (s，2H)，1.80(s，6H)，1.13(t，3H)，0.91(dd，2H)，-0.07(s，9H)； MS(ES)：444(M+1)。
步骤2. 3-甲基-3-[4-(7-[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基-7H-吡咯并 [2，3-d]嘧啶-4-基)-1H-吡唑-1-基]丁-1-醇
于-78℃，向3-甲基-3-[4-(7-[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基-7H- 吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基)-1H-吡唑-1-基]丁酸乙基酯(15.4g，0.0347mol) 的THF(151mL)溶液中滴加入在DCM(84.5mL)中的1.00M二异丁基 氢化铝。将该反应物搅拌2小时，同时缓慢温热至-10℃。混合物用水 猝灭，然后用酒石酸钠钾四水合物和水处理。将该混合物搅拌1小时， 然后用乙酸乙酯提取。提取物用水和盐水洗涤，然后用硫酸钠干燥， 过滤并真空浓缩。粗残留物经快速柱层析纯化，得到所需产物(13.8g， 99％)。
1H NMR(300MHz，CDCl3)：δ 8.83(s，1H)，8.38(s，1H)，8.26(s，1H)， 7.38(d，1H)，6.80(d，1H)，5.67(s，2H)，3.65(dd，2H)，3.54(dd，2H)，2.21 (t，2H)，1.72(s，6H)，0.91(dd，2H)，-0.07(s，9H)；MS(ES)：402(M+1)。
步骤3. 3-甲基-3-[4-(7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基)-1H-吡唑-1-基]丁-1- 醇
将3-甲基-3-[4-(7-[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基-7H-吡咯并 [2，3-d]嘧啶-4-基)-1H-吡唑-1-基]丁-1-醇(13.8g，0.0344mol)的TFA(20 mL)溶液搅拌1小时。然后真空浓缩混合物，将残留物在甲醇(30mL)、 氢氧化铵(30mL)和乙二胺(8mL)的混合物中搅拌2小时。然后浓缩混 合物，残留物用水稀释并用15％ IPA/CH2Cl2提取数次。合并的提取物 经硫酸钠干燥并真空浓缩，得到20g白色固体。固体用乙醚研磨，产 物经过滤分离，得到产物，为白色固体(7.75g，83％)。
1H NMR(400MHz，CDCl3)：(s，1H)，8.83(s，1H)，8.39(s，1H)， 8.28(s，1H)，7.38(dd，1H)，6.80(dd，1H)，3.66(t，2H)，2.72(br s，1H)， 2.22(t，2H)，1.74(s，6H)；MS(ES)：272(M+1)。
步骤4. 甲烷磺酸3-甲基-3-[4-(7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基)-1H-吡唑-1- 基]丁基酯
于0℃，将3-甲基-3-[4-(7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基)-1H-吡唑-1- 基]丁-1-醇(6.61g，0.0244mol)的DCM(300mL)溶液用TEA(3.74mL， 0.0268mol)处理，接着用甲磺酰氯(2.07mL，0.0268mol)处理。将该反 应物搅拌1小时，然后真空浓缩。粗残留物经快速柱层析纯化，得到 所需产物(4.9g，57％)。
1H NMR(400MHz，d6-dmso)：(s，1H)，9.50(s，1H)，9.35(s，1H)， 8.83(s，1H)，7.79(dd，1H)，7.11(dd，1H)，4.75(t，1H)，3.30(s，3H)，2.85 (t，1H)，1.75(s，6H)；MS(ES)：254(M-CH3SO3H+1)。
步骤5. 4-甲基-4-[4-(7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基)-1H-吡唑-1-基]戊烷腈
将甲磺酸3-甲基-3-[4-(7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基)-1H-吡唑-1-基] 丁基酯(2.97g，8.50mmol)、DMF(120mL)和氰化钠(6.21g，0.127mol) 均匀分布在6个20mL微波反应器，其中的每一个在微波反应器中， 于125℃加热4000秒钟。合并小瓶中的内容物并用400mL水稀释，用5 份150mL的乙酸乙酯提取。合并的提取物经硫酸钠干燥并真空除去溶 剂。粗残留物经快速柱层析纯化，得到所需产物(1.40g，59％)。
1H NMR(400MHz，CDCl3)：(br s，1H)，8.83(s，1H)，8.34(s，1H)， 8.29(s，1H)，7.39(dd，1H)，6.81(dd，1H)，2.38(dd，2H)，2.16(dd，2H)， 1.73(s，6H)；MS(ES)：281(M+1)。
表5a中的所述类似物依据上文对实施例69a所述的方法制备。对 实施例69b，使用共轭受体并如在Perkin Trans.1，2000，(17)，2968-2976 中所述制备，并在步骤3之前实施步骤4和5。
表5a


实施例69d：3-甲基-3-[4-(7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基)-1H-吡唑-1-基] 丁腈

步骤1. 异戊烯腈(Senecionitrile)
于0℃，向1.0M叔丁醇钾的THF(2.0mL)溶液中滴加入氰基甲基 膦酸二乙基酯(0.33mL，2.06mmol)的THF(4mL)溶液。移去冷浴，使 反应物温热至室温。然后将反应物再冷却至于0℃并滴加入丙酮(0.20 mL，2.81mmol)。然后移去冷浴，使反应物温热至室温并搅拌过夜。 反应用水稀释，分离各层，用乙酸乙酯提取水层。用盐水洗涤提取物， 经硫酸钠干燥，过滤并浓缩。产物无须进一步纯化而使用(339mg， 67％)。
1H NMR(300MHz，CDCl3)：(br s，1H)，2.05(s，3H)，1.92(s，3H)。
步骤2. 3-甲基-3-[4-(7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基)-1H-吡唑-1-基]丁腈
向4-(1H-吡唑-4-基)-7-[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基-7H-吡咯 并[2，3-d]嘧啶(0.216g，0.684mmol)的ACN(4mL，0.08mol)溶液中加 入粗制异戊烯腈(0.111g，1.37mmol)，接着加入DBU(200μL，0.002 mol)并将得到的混合物加热至60℃ 23小时。使该混合物冷却至室温并 蒸发ACN。混合物用乙酸乙酯稀释和用稀HCl和盐水洗涤。有机溶液 经硫酸钠干燥，过滤并浓缩。通过硅胶层析(乙酸乙酯/己烷)纯化，得 到所需产物。
1H NMR(300MHz，d6-dmso)：(s，1H)，8.38(s，1H)，8.28(s，1H)， 7.39(d，1H)，6.80(d，1H)，5.66(s，2H)，3.54(dd，2H)，3.08(s，2H)，1.84(s， 6H)，0.91(dd，2H)，-0.07(s，9H)；MS(ES)：397(M+1)。
于0℃，向该产物的DCM溶液中加入足以包含20％的总体积的 TFA。于该温度下搅拌溶液30分钟，然后于环境温度搅拌2小时又15 分钟。真空除去溶剂，将该残留物与甲醇(10mL)和乙二胺(0.4mL， 0.006mol)一起搅拌过夜。蒸发溶剂，产物经制备型-HPLC/MS纯化 (C18柱，用ACN/含0.15％ NH4OH的H2O的梯度液洗脱)，得到产物(25 mg，14％)。
1H NMR(300MHz，d6-dmso)：(s，1H)，8.68(s，2H)，8.39(s，1H)， 7.59(d，1H)，7.05(d，1H)，3.32(s，2H)，1.73(s，6H)；MS(ES)：267(M+1)。
通过以上实施例69d所述方法类似的方法，用依据公布的文献方 法，或通过步骤1中的方法制备的不饱和的腈，制备表5b中的实施 例69e和69f。
表5b


通过在实施例69中描述的那些方法类似的方法，使用不同的起始 原料如用于亲核取代步骤的溴化物或甲磺酸酯化合物，制备其它的类 似物。其中获得为产物的游离胺，产物在脱保护后，经硅胶层析(用在 DCM中的5％甲醇洗脱)或通过制备型-HPLC(C18，用ACN/含0.15％ NH4OH的H2O的梯度液洗脱)纯化。表6概述所列化合物的结果。

表6


实施例74：(2Z)-3-环戊基-3-[4-(7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基)-1H-吡唑 -1-基]丙烯腈

步骤1. 3-环戊基丙-2-炔腈(prop-2-ynenitrile)
于-78℃，向环戊基乙炔(0.50g，5.3mmol)的THF(5mL)溶液中加 入2.5M正丁基锂的己烷(2.23mL)溶液。将该混合物搅拌15分钟，接 着滴加入在THF(3mL)中的氰酸苯基酯(0.70g，5.8mmol)。使反应物温 热至室温。将6N NaOH倾入反应混合物中，搅拌该混合物5分钟。用 乙醚提取产物。提取物用6N NaOH和盐水洗涤，然后经硫酸钠干燥， 倾析和真空除去溶剂，得到产物(600mg，95％)。1H NMR(300MHz， CDCl3)： 2.81-2.68(m，1H)，2.07-1.54(m，8H)。
步骤2. (2Z)-3-环戊基-3-[4-(7-[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基-7H-吡 咯并[2，3-d]嘧啶-4-基)-1H-吡唑-1-基]丙烯腈
向4-(1H-吡唑-4-基)-7-[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基-7H-吡咯 并[2，3-d]嘧啶(0.40g，1.2mmol)和3-环戊基丙-2-炔腈(0.30g，2.5mmol) 在DMF(8mL)的混合物中加入碳酸钾(0.09g，0.6mmol)。将该混合物 搅拌35分钟。反应物用乙酸乙酯和盐水稀释，用3体积的乙酸乙酯提 取含水部分。合并的有机提取物再用盐水洗涤，然后经硫酸钠干燥，倾 析并真空浓缩。粗残留物经快速柱层析纯化(乙酸乙酯/己烷)，得到所 需产物(290mg，53％)。
1H NMR(400MHz，CDCl3)：(s，1H)，8.87(s，1H)，8.46(s，1H)， 7.42(d，1H)，6.84(d，1H)，5.67(s，2H)，5.21(s，1H)，3.64-3.55(m，1H)， 3.53(t，2H)，2.13-2.01(m，2H)，1.83-1.66(m，4H)，1.57-1.46(m，2H)， 0.91(t，2H)，-0.07(s，9H)；MS(ES)：435(M+1)。
步骤3. (2Z)-3-环戊基-3-[4-(7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基)-1H-吡唑-1-基] 丙烯腈
将(2Z)-3-环戊基-3-[4-(7-[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基-7H-吡 咯并[2，3-d]嘧啶-4-基)-1H-吡唑-1-基]丙烯腈(0.030g，0.069mol)在 DCM(3mL)和TFA(2mL)中的溶液搅拌1小时。真空除去溶剂，将该 产物与THF(1.5mL)、氢氧化钠、50％水溶液(0.75mL)和水(0.75mL) 一起搅拌2小时。反应混合物通过滴加入浓HCl中和。产物用乙酸乙酯 提取。合并的有机物经硫酸钠干燥，过滤并真空浓缩。粗残留物经制 备型-HPLC/MS纯化(C18柱，用ACN/含0.15％ NH4OH的H2O的梯度液 洗脱)，得到所需产物(16mg，76％)。
1H NMR(400MHz，d6-dmso)：δ 9.08(s，1H)，8.74(s，1H)，8.63(s，1H)， 7.66(d，1H)，7.05(d，1H)，5.82(d，1H)，3.62-3.54(m，1H)，2.00-1.90(m， 2H)，1.76-1.48(m，6H)；MS(ES)：305(M+1)。
实施例75：3-亚环戊基-3-[4-(7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基)-1H-吡唑 -1-基]丙腈

步骤1. 3-亚环戊基-3-[4-(7-[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基-7H-吡咯 并[2，3-d]嘧啶-4-基)-1H-吡唑-1-基]丙腈
向3-环戊基丙-2-炔腈(0.4g，0.003mol)的ACN(10mL)悬浮液中 加入4-(1H-吡唑-4-基)-7-[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基-7H-吡咯并 [2，3-d]嘧啶(0.53g，1.7mmol)和DBU(0.33mL，2.2mmol)。将该混合物 于室温下搅拌50分钟。使反应混合物分配于乙酸乙酯和稀HCl之间。 分离含水部分，用乙酸乙酯提取。合并的有机提取物用稀HCl和盐水 洗涤，经硫酸钠干燥，过滤并真空浓缩。粗残留物经快速柱层析纯化 (乙酸乙酯/己烷)，得到所需产物(540mg，74％)。
1H NMR(300MHz，CDCl3)：(s，1H)，8.36(s，1H)，8.35(s，1H)， 7.40(d，1H)，6.78(d，1H)，5.67(s，2H)，3.70(s，2H)，3.54(dd，2H)，2.55(t， 2H)，2.45(t，2h)，1.85(dddd，2H)，1.73(dddd，2H)，0.91(dd，2H)，-0.06(s， 9H)；MS(ES)：435(M+1)。
步骤2. 3-亚环戊基-3-[4-(7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基)-1H-吡唑-1-基]丙 腈
将3-亚环戊基-3-[4-(7-[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基-7H-吡咯 并[2，3-d]嘧啶-4-基)-1H-吡唑-1-基]丙腈(0.030g，0.069mmol)在DCM (3mL)和TFA(2mL)中的溶液搅拌1小时。真空浓缩溶剂，将该产物与 氢氧化钠、50％水溶液(0.75mL)和水(0.75mL)和THF(1.5mL)一起搅 拌2小时。反应混合物通过滴加入浓HCl中和。产物用乙酸乙酯提取。 合并的有机提取物经硫酸钠干燥，过滤并真空浓缩。粗残留物经制备 型-HPLC/MS纯化(C18柱，用ACN/含0.15％ NH4OH的H2O的梯度液洗 脱)，得到所需产物(7mg，33％)。
1H NMR(400MHz，d6-dmso)：(br s，1H)，8.78(s，1H)，8.69 (s，1H)，8.46(s，1H)，7.60(d，1H)，7.04(d，1H)，3.95(s，2H)，2.53(t，2H)， 2.42(t，2H)，1.76(dddd，2H)，1.65(dddd，2H)；MS(ES)：305(M+1)。
实施例76：3-甲基[5-(7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基)-1，3-噻唑-2-基]氨基 丙腈三氟乙酸盐

步骤1. 4-(1，3-噻唑-5-基)-7-[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基-7H-吡咯 并[2，3-d]嘧啶
使4-氯-7-[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶 (3.00g，0.0106mol)和1，3-噻唑(7.50mL，0.106mol)溶于N，N-二甲基乙 酰胺(40.0mL)。将该溶液等份分配于4个20mL的微波反应器中。然后 向每个反应容器中加入乙酸钾(0.777g，7.93mmol)，接着加入四(三苯 膦)钯(0)(0.60g，2.1mmol)。将每个反应容器在微波反应器中于200℃ 加热30分钟。合并反应物，真空除去大部分溶剂。残留物用DCM稀释， 过滤并浓缩。纯化通过快速柱层析(乙酸乙酯/己烷)，得到所需产物 (2.25g，64％)。
1H NMR(300MHz，CDCl3)：δ 8.99(s，1H)，8.90(s，1H)，8.72(s，1H)， 7.49(d，1H)，6.91(d，1H)，5.70(s，2H)，3.56(dd，2H)，0.93(dd，2H)，-0.05 (s，9H)；MS(ES)：333(M+1)。
步骤2. 4-(2-溴代-1，3-噻唑-5-基)-7-[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基 -7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶
将2.5M正丁基锂的己烷(0.860mL)溶液滴加到4-(1，3-噻唑-5- 基)-7-[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶(550mg， 0.0016mol)在THF(20mL)中的-78℃溶液中。于-78℃将该混合物搅 拌30分钟，接着缓慢加入四溴化碳(658mg，0.00198mol)的THF(10mL) 溶液。30分钟后，将该混合物用少量饱和的氯化铵猝灭，用乙醚稀释， 并经硫酸钠干燥。过滤和浓缩获得的残留物经快速柱层析纯化(乙酸乙 酯/己烷)，得到所需产物(387mg，57％)。
1H NMR(300MHz，CDCl3)：δ 8.85(s，1H)，8.33(s，1H)，7.49(d，1H)， 6.83(d，1H)，5.69(s，2H)，3.55(dd，2H)，0.92(dd，2H)，-0.05(s，9H)； MS(ES)：411，413(M+1)。
步骤3.4-(2-溴代-1，3-噻唑-5-基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶
将4-(2-溴代-1，3-噻唑-5-基)-7-[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基 -7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶(370mg，0.90mmol)在DCM(5.0mL)和TFA (1.0mL)中的溶液于室温下搅拌7小时。然后浓缩混合物，再次溶解于 甲醇(2mL)中，加入乙二胺(0.5mL)。将该混合物于室温下搅拌6小时。 混合物用DCM稀释(10mL)，沉淀物经过滤分离，用少量DCM洗涤， 得到所需产物(182mg，72％)。
1H NMR(300MHz，d6-dmso)：(s，1H)，8.70(s，1H)，7.76(d，1H)， 7.15(d，1H)；MS(ES)：281，283(M+1)。
步骤4. 3-甲基[5-(7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基)-1，3-噻唑-2-基]氨基丙腈
将4-(2-溴代-1，3-噻唑-5-基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶(31mg，0.11 mmol)和3-(甲基氨基)丙腈(103μL，0.00110mol)的DMF(1.0mL，0.013 mol)溶液于90℃搅拌2小时。粗制反应混合物经制备型-HPLC/MS (C18柱，用ACN/含0.15％ NH4OH的H2O的梯度液洗脱)并再次经制备 型-HPLC/MS(C18柱，用ACN/含0.1％ TFA的H2O的梯度液洗脱)纯化， 得到所需产物，为三氟乙酸盐(30mg，68％)。
1H NMR(300MHz，d6-DMSO)：(s，1H)，8.60(s，1H)，8.31(s，1H)， 7.60(dd，1H)，7.00(dd，1H)，3.89(t，2H)，3.20(s，3H)，2.94(t，2H)； MS(ES)：285(M+1)。
实施例77：(3S)-和(3R)-3-[5-(7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基)-1，3-噻唑-2- 基]己烷腈
和
步骤1. N-甲氧基-N-甲基丁酰胺
向丁酸(1.01g，0.0115mol)和N，O-二甲基羟基胺盐酸盐(1.12g， 0.0115mol)在DCM(50mL)中的混合物中加入苯并三唑-1-基氧基三 (二甲基氨基)膦鎓六氟磷酸盐(5.6g，0.013mol)和TEA(3.2mL，0.023 mol)。将该混合物于室温下搅拌过夜。然后用水和盐水洗涤该溶液，经 硫酸钠干燥，并真空浓缩。粗产物通过快速柱层析(乙醚/己烷)纯化。除 去溶剂(235mbar/40℃)，得到产物(1.33g，88％)。1H NMR(300MHz， CDCl3)： 3.68(s，3H)，3.18(s，3H)，2.40(t，2H)，1.74-1.59(m，2H)，0.96 (t，3H)。
步骤2. 1-[5-(7-[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧 啶-4-基)-1，3-噻唑-2-基]丁-1-酮
将2.5M正丁基锂的己烷(878μL)溶液缓慢滴加到4-(1，3-噻唑-5- 基)-7-[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶(501mg， 1.37mmol)在THF(20mL)中的-78℃溶液。45分钟后，加入N-甲氧基 -N-甲基丁酰胺(0.360g，2.74mmol)。将反应物于-78℃继续搅拌30分 钟，然后使之达到室温。反应用饱和氯化铵猝灭，用乙酸乙酯提取。 提取物用水和盐水洗涤，经硫酸钠干燥并真空浓缩。快速柱层析(乙酸 乙酯/己烷)，得到产物(235mg，42％)。
1H NMR(300MHz，CDCl3)：(s，1H)，8.76(s，1H)，7.52(d，1H)， 6.92(d，1H)，5.71(s，2H)，3.56(dd，2H)，3.19(t，2H)，1.92-1.77(m，2H)， 1.05(t，3H)，0.93(dd，2H)，-0.05(s，9H)；MS(ES)：403(M+1)。
步骤3. (2E)-和(2Z)-3-[5-(7-[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基-7H-吡咯 并[2，3-d]嘧啶-4-基)-1，3-噻唑-2-基]己-2-烯腈
于0℃，向1.0M叔丁醇钾的THF(0.605mL)在THF(4.0mL)中的 溶液中滴加入氰基甲基膦酸二乙基酯(0.102mL，0.634mmol)。移去冷 浴，使反应物温热至室温。30分钟后，滴加入1-[5-(7-[2-(三甲基甲硅 烷基)乙氧基]甲基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基)-1，3-噻唑-2-基]丁-1-酮 (232mg，0.576mmol)的THF(3.0mL)溶液。将该反应物搅拌2小时，然 后将粗制混合物吸收到硅胶中，经快速柱层析纯化(乙酸乙酯/己烷)， 得到产物，为烯烃异构体的混合物(225mg，92％)。
1H NMR(300MHz，CDCl3)，主要异构体：(s，1H)，8.65(s，1H)， 7.52(d，1H)，6.89(d，1H)，6.35(s，1H)，5.70(s，2H)，3.56(dd，2H)，2.96(t， 2H)，1.88-1.72(m，2H)，1.08(t，3H)，0.93(dd，2H)，-0.07(s，9H)； MS(ES)：426(M+1)。
步骤4. (3S)-和(3R)-3-[5-(7-[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基-7H-吡咯 并[2，3-d]嘧啶-4-基)-1，3-噻唑-2-基]己烷腈
将乙酸铜一水合物(0.7mg，0.004mmol)和(氧基二-2，1-亚苯基)双 (二苯基膦)(2mg，0.004mol)在甲苯(0.24mL)中混合。加入PMHS(30 μL)。将该混合物于室温下搅拌25分钟，接着加入在甲苯(0.24mL)中 的(2E)-3-[5-(7-[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧 啶-4-基)-1，3-噻唑-2-基]己-2-烯腈(51mg，0.12mol)，最后加入叔-丁基 醇(0.043mL)。将得到的混合物搅拌过夜。将粗制混合物直接经快速 柱层析(乙酸乙酯/己烷)纯化，得到所需产物(39mg，76％)。
1H NMR(300MHz，CDCl3)：(s，1H)，8.52(s，1H)，7.48(d，1H)， 6.87(d，1H)，5.69(s，2H)，3.60-3.46(m，3H)，2.99-2.82(m，2H)， 2.05-1.89(m，2H)，1.50-1.34(m，2H)，0.97(t，3H)，0.92(t，2H)，-0.06(s， 9H)；MS(ES)：428(M+1)。
步骤5. (3S)-和(3R)-3-[5-(7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基)-1，3-噻唑-2-基]己 烷腈
将TFA(1.0mL)加入到3-[5-(7-[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基 -7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基)-1，3-噻唑-2-基]己烷腈(36mg，0.084mmol) 的DCM(4.0mL)溶液中，将该混合物于室温下搅拌3小时。浓缩该混 合物，使再次溶于甲醇(3mL)中，向其中加入乙二胺(0.1mL)。经2小 时反应时间后，浓缩该混合物，直接经制备型-HPLC/MS(C18柱，用 ACN/含0.15％ NH4OH的H2O的梯度液洗脱)纯化，得到所需产物(10mg， 40％)。1H NMR(300MHz，CDCl3)：(br s，1H)，8.87(s，1H)，8.54(s， 1H)，7.51-7.45(m，1H)，6.90-6.86(m，1H)，3.59-3.44(m，1H)，3.01-2.82 (m，2H)，2.06-1.87(m，2H)，1.51-1.34(m，2H)，0.98(t，3H)； MS(ES)：298(M+1)。
实施例78：(3R)-和(3S)-3-环戊基-3-[5-(7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4- 基)-1，3-噻唑-2-基]丙腈
和
向(2E)-和(2Z)-3-环戊基-3-[5-(7-[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基 -7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基)-1，3-噻唑-2-基]丙烯腈(199mg，0.440 mmol)(例如，按照实施例77，步骤1-3制备)在乙醇(10mL)和乙酸乙酯 (10mL)的溶液中加入催化量的10％披钯碳。将该混合物于室温、1个 氢气压下搅拌过夜。然后使其经历50PSI H2，直至反应完成。过滤并 除去溶剂，得到油状物，使其溶于DCM(4mL)和TFA(1mL)。搅拌该 溶液直至起始原料消耗，然后浓缩该混合物并再次溶于甲醇(3mL)， 向其中加入乙二胺(0.4mL)。将该溶液于室温下搅拌1小时，真空浓缩。 粗制混合物经制备型-HPLC/MS纯化(C18柱，用ACN/含0.15％ NH4OH 的H2O的梯度液洗脱)，得到所需产物(36mg，25％)。
1H NMR(400MHz，CDCl3)：(br s，1H)，8.89(s，1H)，8.56(s，1H)， 7.50(dd，1H)，6.89(dd，1H)，3.34(dt，1H)，2.98(dd，1H)，2.89(dd，1H)， 2.44-2.31(m，1H)，2.07-1.96(m，1H)，1.80-1.52(m，5H)，1.40-1.24(m， 2H)；MS(ES)：324(M+1)。
如实施例77、78或86中所述(如下表中所示)，通过使用不同的 Weinreb酰胺(如在实施例77，步骤1中制备)，制备表5c中的以下化合物 (为外消旋混合物)：

表5c


实施例84：(2S)-和(2R)-2-[5-(7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基)-1，3-噻唑-2- 基]戊烷腈
和
步骤1. (2S)-和(2R)-2-[5-(7-[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基-7H-吡咯 并[2，3-d]嘧啶-4-基)-1，3-噻唑-2-基]戊烷腈
向1-[5-(7-[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧 啶-4-基)-1，3-噻唑-2-基]丁-1-酮(如在实施例77中制备)(101mg，0.251 mmol)和对甲苯磺酰基甲基异腈(147mg，0.753mmol)在DMSO(5.0 mL)和乙醇(61μL)的混合液中的混合物中加入1.0M叔丁醇钾的THF (753μL)溶液。然后将该混合物加热至45℃ 2小时。一旦冷却至室温， 通过加入饱和的氯化铵猝灭该混合物，接着加入水。产物用乙醚提取， 提取物用水和盐水洗涤，经硫酸钠干燥，过滤并真空浓缩。快速柱层 析(乙酸乙酯/己烷)，得到产物(39mg，25％)。
1H NMR(400MHz，CDCl3)：δ 8.88(s，1H)，8.52(s，1H)，7.50(d，1H)， 6.87(d，1H)，5.70(s，2H)，4.32(dd，1H)，3.55(dd，2H)，2.20-2.11(m，2H)， 1.71-1.57(m，2H)，1.03(t，3H)，0.93(dd，2H)；MS(ES)：414(M+1)。
步骤2. (2S)-和(2R)-2-[5-(7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基)-1，3-噻唑-2-基]戊 烷腈
将2-[5-(7-[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧 啶-4-基)-1，3-噻唑-2-基]戊烷腈(59mg，0.093mmol)在DCM(3mL)和 TFA(0.5mL)中的溶液于室温下搅拌4小时。然后浓缩该混合物，然后 使残留物溶于甲醇(3mL)，然后向其中加入乙二胺(0.3mL)。将该溶液 于室温下搅拌40分钟。真空除去溶剂，粗制混合物经制备型-HPLC/MS 纯化(C18柱，用ACN/含0.15％ NH4OH的H2O的梯度液洗脱)，得到所 需产物(20mg，76％)。
1H NMR(400MHz，CDCl3)：(br s，1H)，8.88(s，1H)，8.54(s，1H)， 7.49(dd，1H)，6.88(dd，1H)，4.33(dd，1H)，2.23-2.12(m，2H)，1.75-1.60 (m，2H)，1.04(t，3H)；MS(ES)：284(M+1)。
实施例85：(4S)-和(4R)-4-[5-(7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基)-1，3-噻唑-2- 基]庚烷-腈
和
于0℃，向膦酰基乙酸三乙基酯(188mg，0.838mmol)的THF(6.0 mL)溶液中加入1.0M叔丁醇钾的THF(840μL)。然后使该混合物温热 至室温，接着再冷却至0℃，此时加入在THF(4.0mL)中的 1-[5-(7-[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4- 基)-1，3-噻唑-2-基]丁-1-酮(如在实施例77中制备)(225mg，0.559 mmol)。将该混合物于室温下搅拌1.5小时，此时将其用水猝灭，用乙 酸乙酯提取。合并的提取物用水和盐水洗涤，经硫酸钠干燥并真空浓 缩。快速柱层析得到产物，为烯烃异构体的混合物(222mg，84％)。 MS(ES)：473(M+1)。
使3-[5-(7-[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧 啶-4-基)-1，3-噻唑-2-基]己-2-烯酸乙基酯(为(2E)-和(2Z)-异构体的混合 物)(222mg，0.470mmol)溶于乙醇(10mL)，加入催化量的10％Pd-C。 在通过气球提供的氢气氛下搅拌该混合物16小时。过滤并真空浓缩， 得到所需产物(201mg，90％)。MS(ES)：475(M+1)。
于-78℃，向3-[5-(7-[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基-7H-吡咯并 [2，3-d]嘧啶-4-基)-1，3-噻唑-2-基]己酸乙基酯(201mg，0.423mmol)的 THF(5.0mL)溶液中加入1.00M二异丁基氢化铝的DCM(1.06mL)溶 液。用1.5小时使该混合物缓慢温热至-10℃，接着加入酒石酸钠钾四 水合物、水和乙醚。将该混合物搅拌1小时，然后分离各层，含水层用 乙酸乙酯进一步提取。有机提取物用水和盐水洗涤，经硫酸钠干燥并 真空浓缩，得到所需产物(176mg，96％)。MS(ES)：433(M+1)。
将3-[5-(7-[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧 啶-4-基)-1，3-噻唑-2-基]己-1-醇(88mg，0.20mmol)的TFA(2mL)溶液 搅拌30分钟。然后蒸发TFA，将该残留物在含乙二胺(0.2mL)和水滴的 甲醇(2mL)中搅拌30分钟。经制备型-HPLC/MS(C18，用ACN/含0.15％ NH4OH的H2O的梯度液洗脱)纯化，得到所需产物(36mg，58％)。 MS(ES)：303(M+1)。
于0℃，向3-[5-(7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基)-1，3-噻唑-2-基]己-1- 醇(36mg，0.12mmol)和TEA(19.9μL，0.143mmol)在DCM(5mL)中的 混合物中加入甲磺酰氯(11.0μL，0.143mmol)。搅拌10分钟后，浓缩该 溶液，并溶于DMSO(1.6mL)中，加入氰化钠(23mg，0.48mmol)。然 后将该混合物在微波中于125℃加热30分钟。然后使用制备型 -HPLC/MS直接纯化该混合物(C18，用ACN/含0.15％ NH4OH的H2O的 梯度液洗脱)，得到所需产物(10mg，27％)。
1H NMR(400MHz，CDCl3)：(br s，1H)，8.86(s，1H)，8.52(s，1H)， 7.46(dd，1H)，6.88(dd，1H)，3.34-3.25(m，1H)，2.47-2.30(m，2H)， 2.22-2.12(m，2H)，1.95-1.71(m，2H)，1.44-1.31(m，2H)，0.94(t，3H)； MS(ES)：312(M+1)。
实施例86：3-[5-(7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基)-1，3-噻唑-2-基]戊烷二腈

步骤1. N-甲氧基-2-[(4-甲氧基苄基)氧基]-N-甲基乙酰胺
向[(4-甲氧基苄基)氧基]乙酸(生物有机和医用化学信件 (Bioorganic and Medicinal Chemistry Letters，2001，pp.2837-2841)(6.86 g，0.0350mol)和N，O-二甲基羟基胺盐酸盐(3.41g，0.0350mol)在DCM (100mL)中的混合物中加入苯并三唑-1-基氧基三(二甲基氨基)膦鎓六 氟磷酸盐(17g，0.038mol)，接着加入TEA(9.7mL，0.070mol)。将得到 的混合物于室温下搅拌过夜。然后用水、0.5M HCl、饱和的NaHCO3 和盐水洗涤该溶液，然后经硫酸钠干燥，过滤并真空浓缩。快速柱层 析(乙醚/己烷)，得到所需产物(5.75g，69％)。
步骤2. 2-[(4-甲氧基苄基)氧基]-1-[5-(7-[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲 基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基)-1，3-噻唑-2-基]乙酮
于-78℃，向4-(1，3-噻唑-5-基)-7-[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基 -7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶(2.12g，6.38mmol)的THF(70mL)溶液中缓慢 滴加入2.5M正丁基锂的己烷(3.06mL)溶液。搅拌30分钟后，加入N- 甲氧基-2-[(4-甲氧基苄基)氧基]-N-甲基乙酰胺(2.29g，9.56mmol)。于 -78℃加入后继续该反应30分钟，然后移去冷浴，反应用饱和氯化铵 猝灭，用乙醚提取。提取物经硫酸钠干燥并真空浓缩。粗制混合物通 过快速柱层析(乙酸乙酯/己烷)纯化，得到所需产物(2.16g，66％)。
1H NMR(300MHz，CDCl3)：(s，1H)，8.72(s，1H)，7.53(d，1H)， 7.37(d，2H)，6.91(d，2H)，6.89(d，1H)，5.70(s，2H)，5.00(s，2H)，4.70(s， 2H)，3.81(s，3H)，3.56(dd，2h)，0.93(dd，2H)，-0.05(s，9H)； MS(ES)：511(M+1)。
步骤3. (2E)-和(2Z)-4-[(4-甲氧基苄基)氧基]-3-[5-(7-[2-(三甲基甲硅烷 基)乙氧基]甲基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基)-1，3-噻唑-2-基]丁-2-烯腈
于0℃，向1M叔丁醇钾的THF(4.44mL)在THF(30mL)中的溶 液中滴加入氰基甲基膦酸二乙基酯(820mg，0.0046mol)。移去水浴， 使反应物温热至室温。30分钟后，滴加入2-[(4-甲氧基苄基)氧 基]-1-[5-(7-[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4- 基)-1，3-噻唑-2-基]乙酮(2.16g，0.00423mol)的THF(20mL)溶液。将该 反应搅拌1小时，然后用少量饱和的氯化铵猝灭，用乙醚稀释，经硫酸 钠干燥并真空浓缩.纯化通过快速柱层析，用0-35％乙酸乙酯/己烷的梯 度液洗脱，得到所需产物，为烯烃异构体的几乎等量的混合物(1.76g， 78％)。
1H NMR(400MHz，CDCl3)：δ 8.90(s，1H)，8.88(s，1H)，8.71(s，1H)， 8.67(s，1H)，7.50(d，2H)，7.35(dd，2H)，7.31(dd，2H)，6.92(dd，2H)， 6.90(dd，2H)，6.86(d，2H)，6.62(s，1H)，6.10(t，1H)，5.70(s，4H)，4.75(s， 2H)，4.72(d，2H)，4.64(s，4H)，3.82(s，3H)，3.81(s，3H)，3.56(dd，2H)， 3.55(dd，2H)，0.96-0.90(m，4H)，-0.05(s，9H)，-0.054(s，9H)； MS(ES)：534(M+1)。
步骤4. 4-[(4-甲氧基苄基)氧基]-3-[5-(7-[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲 基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基)-1，3-噻唑-2-基]丁腈
使(2E)-和(2Z)-4-[(4-甲氧基苄基)氧基]-3-[5-(7-[2-(三甲基甲硅烷 基)乙氧基]甲基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基)-1，3-噻唑-2-基]丁-2-烯腈 (880mg，1.6mmol)溶于乙醇(20mL)和乙酸乙酯(20mL)的混合液中。 加入催化量的10％ Pd-C。在50PSI氢气下震摇该混合物。过滤该混合 物并真空浓缩，得到所需产物(0.85g，99％)。MS(ES)：536(M+1)。
步骤5. 3-[5-(7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基)-1，3-噻唑-2-基]戊烷二腈
用二氯二氰基醌(DDQ)(434mg，1.87mmol)处理在DCM(10mL) 中的4-[(4-甲氧基苄基)氧基]-3-[5-(7-[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基 -7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基)-1，3-噻唑-2-基]丁腈(251mg，0.468 mmol)，接着加入水(376μL)。1.5小时，加入饱和的饱和碳酸氢钠和 水，反应物用乙酸乙酯提取3次。提取物用水、盐水洗涤，经硫酸钠干 燥，过滤并真空浓缩，得到粗产物，其无须进一步纯化而使用。
于0℃，将以上制备的4-羟基-3-[5-(7-[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基] 甲基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基)-1，3-噻唑-2-基]丁腈的DCM(12mL) 溶液用TEA(130μL，0.94mmol)和甲烷磺酰氯(73μL，0.94mmol)依次 处理。1小时反应时间后，混合物用水稀释，用乙酸乙酯提取3次。提 取物用水和盐水洗涤，经硫酸钠干燥，过滤并真空浓缩。然后使残留 物溶于DMSO(5mL)，加入氰化钠(110mg，2.3mmol)。30分钟后，混 合物用水稀释，用乙醚提取，用水、盐水洗涤，经硫酸钠干燥。浓缩并 通过快速柱层析纯化(乙酸乙酯/己烷)，得到所需产物(14mg，7％)。 MS(ES)：425(M+1)。
将3-[5-(7-[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧 啶-4-基)-1，3-噻唑-2-基]戊烷二腈(14mg，0.033mmol)在含TFA(0.6 mL)的DCM(3mL)中搅拌4小时。然后浓缩该混合物，使残留物再次 溶于甲醇(2mL)，然后向其中加入乙二胺(0.4mL)。1小时反应时间后， 产物经制备型-HPLC/MS纯化(C18，用ACN/含0.15％ NH4OH的H2O的 梯度液洗脱)，得到所需产物(6mg，62％)。
1H NMR(400MHz，d6-dmso)：(br s，1H)，8.84(s，1H)，8.76(s， 1H)，7.75(d，1H)，7.14(d，1H)，4.14(m，1H)，3.17(d，4H)； MS(ES)：295(M+1)。
实施例87：(3R)-3-环戊基-3-[5-(7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基)-1，3-噁唑 -2-基]丙腈，
和
(3S)-3-环戊基-3-[5-(7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基)-1，3-噁唑-2-基]丙腈
和
步骤1. 4-(1，3-噁唑-5-基)-7-[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基-7H-吡咯 并[2，3-d]嘧啶
在微波反应器中，将4-氯-7-[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基-7H- 吡咯并[2，3-d]嘧啶(0.440g，1.55mmol)、1，3-噁唑(0.306mL，4.65 mmol)、乙酸钾(0.456g，4.65mmol)和四(三苯膦)钯(0)(0.179g，0.155 mmol)在N，N-二甲基乙酰胺(8.0mL)中的混合物加热至200℃ 30分钟。 真空除去大部分溶剂。得到的残留物用DCM稀释，过滤并浓缩。快速 柱层析(乙酸乙酯/己烷)，得到产物(330mg，67％)。
1H NMR(400MHz，CDCl3)：δ 8.96(s，1H)，8.21(s，1H)，8.08(s，1H)， 7.54(d，1H)，7.08(d，1H)，5.76(s，2H)，3.60(t，2H)，0.98(t，2H)，0.00(s， 9H)；MS(ES)：317(M+1)。
步骤2. 环戊基[5-(7-[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基-7H-吡咯并 [2，3-d]嘧啶-4-基)-1，3-噁唑-2-基]甲酮
将在己烷(1.6M，0.30mL)中的正丁基锂缓慢滴加到4-(1，3-噁唑 -5-基)-7-[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶 (140.0mg，0.44mmol)在THF(10.0mL)中的-78℃溶液。20分钟后，加 入1.0M二氯化锌的乙醚(0.53mL)溶液。然后于0℃将该反应混合物搅 拌60分钟。此后，加入碘化亚铜(I)(84mg，0.44mmol，将该合物搅拌 10分钟。然后加入环戊烷碳酰氯(108μL，0.885mmol)。将该反应物于0 ℃再搅拌1小时，此时使其温热至室温。加入饱和的NH4Cl溶液猝灭反 应，用乙酸乙酯提取。提取物用水和盐水洗涤，经硫酸钠干燥，过滤 并真空浓缩。快速柱层析(乙酸乙酯/己烷)，得到产物(97mg，53％)。
1H NMR(400MHz，CDCl3)：δ 8.96(s，1H)，8.21(s，1H)，7.56(d，1H)， 7.22(d，1H)，5.76(s，2H)，3.60(t，2H)，3.56(t，1H)，2.23-1.56(m，8H)， 0.98(t，2H)，0.00(s，9H)；MS(ES)：413(M+1)。
步骤3. (3R)-和(3S)-3-环戊基-3-[5-(7-[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基 -7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基)-1，3-噁唑-2-基]丙腈
于0℃，向1.0M叔丁醇钾的THF(0.355mL)溶液和THF(3mL) 中滴加入氰基甲基膦酸二乙基酯(66mg，0.37mmol)。移去冷浴，使反 应物温热至室温。30分钟后，滴加入环戊基[5-(7-[2-(三甲基甲硅烷基) 乙氧基]甲基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基)-1，3-噁唑-2-基]甲酮(1.40E2 mg，0.338mmol)的THF(2.0mL)溶液。3小时反应时间后，使该混合物 吸收到硅胶上，经快速柱层析(乙酸乙酯/己烷)，得到所需产物，为烯 烃异构体的混合物(89mg，60％)。MS(ES)：436(M+1)。
向乙酸铜一水合物(4.0mg，0.020mmol)和(氧基二-2，1-亚苯基)双 (二苯基膦)(11mg，0.020mmol)在甲苯(0.40mL，0.0038mol)中的混合 物中加入PMHS(50μL)。将得到的混合物于室温下搅拌25分钟，接着 加入在甲苯(0.40mL)中的(2E)-和(2Z)-3-环戊基-3-[5-(7-[2-(三甲基甲 硅烷基)乙氧基]甲基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基)-1，3-噁唑-2-基]丙烯 腈(88mg，0.20mmol)，然后加入叔-丁基醇(0.072mL)。经过16小时不 能达到室温后，加入乙酸铜一水合物和(氧基二-2，1-亚苯基)双(二苯基 膦)(每份0.10mol当量)，将该反应混合物于60℃加热16小时。粗制混 合物经历快速柱层析(乙酸乙酯/己烷)，得到所需产物(21mg，23％)。
1H NMR(400MHz，CDCl3)：δ 8.96(s，1H)，8.02(s，1H)，7.56(d，1H)， 7.10(d，1H)，5.76(s，2H)，3.60(t，2H)，3.38-3.30(m，1H)，3.03(dd，1H)， 2.95(dd，1H)，2.60-2.40(m，1H)，2.10-2.00(m，1H)，1.85-1.15(m，7H)， 0.98(t，2H)，0.00(s，9H)；MS(ES)：438(M+1)。
步骤4. (3R)-和(3S)-3-环戊基-3-[5-(7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基)-1，3-噁 唑-2-基]丙腈
将3-环戊基-3-[5-(7-[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基-7H-吡咯并 [2，3-d]嘧啶-4-基)-1，3-噁唑-2-基]丙腈(20.0mg，0.0457mmol)与TFA (0.1mL)在DCM(0.2mL)中的溶液搅拌6小时。除去溶剂，将得到的残 留物与乙二胺(0.1mL)一起在甲醇(0.2mL)中搅拌过夜。真空除去溶 剂。经制备型-HPLC/MS(C18柱，用ACN/含0.15％ NH4OH的H2O的梯 度液洗脱)获得所需产物(5.3mg，38％)。
1H NMR(400MHz，CDCl3)：δ 10.25(br s，1H)，8.90(s，1H)，8.00(s，1H)， 7.50(d，1H)，7.06(d，1H)，3.36-3.28(m，1H)，2.98(dd，1H)，2.90(dd，1H)， 2.51-2.38(m，1H)，2.08-1.96(m，1H)，1.80-1.51(m，5H)，1.44-1.30(m， 2H)；MS(ES)：308(M+1)。
依据上文实施例87的方法，也可制备表5d的以下化合物，为外消 旋混合物。
表5d

实施例90：5-(甲硫基)-3-[4-(7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基)-1H-吡唑-1- 基]戊烷腈

步骤1. (2E)-5-(甲硫基)丙-2-烯腈
向[氯代(三苯基)正膦基]ACN(2.5g，0.0073mol)在THF(10mL， 0.1mol)中的0℃混合物中加入TEA(2.0mL，0.014mol)，将得到的混 合物搅拌30分钟。移去冰浴30分钟，然后使混合物再次冷却到0℃， 加入3-(甲硫基)-丙醇(0.68mL，0.0072mol)的THF(1mL，0.02mol)溶 液，将该混合物搅拌过夜.加入水，过滤该混合物。用水 x 3和盐水洗涤 滤液。干燥有机相并通过旋转蒸发除去溶剂，得到2.1g灰白色固体。 固体用MTBE研磨并过滤。用1N HCl、水、饱和NaHCO3和盐水洗涤 滤液。干燥有机相，使用旋转蒸发器浓缩，得到0.62g橙色油状物(44％ 得率，反式：顺式～2∶1)。
1H NMR对于反式(400MHz，CDCl3)：δ 6.68(1H，m)；5.14(1H，d)；2.6 (2H，m)；2.55(2H，t)；2.1(3H，s)。
步骤2. 5-(甲硫基)-3-[4-(7-[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基-7H-吡咯 并[2，3-d]嘧啶-4-基)-1H-吡唑-1-基]戊烷腈
将4-(1H-吡唑-4-基)-7-[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基-7H-吡咯 并[2，3-d]嘧啶(0.30g，0.00095mol)、(2E)-5-(甲硫基)丙-2-烯腈(0.28g， 0.0016mol)和DBU(45μL，0.00030mol)在ACN(3mL，0.06mol)中的 混合物于室温下搅拌5天。通过旋转蒸发除去溶剂，得到橙色油状物。 粗制油状物用30-70乙酸乙酯/己烷层析，得到0.35g无色油状物(83％得 率)。
1H NMR(400MHz，CDCl3)：δ 8.95(1H，s)；8.41(1H，s)；8.4(1H，s)； 7.48(1H，d)；6.84(1H，d)；5.75(2H，s)；4.95(1H，br)；3.6(2H，t)； 3.1(2H，m)；2.58(2H，m)；2.28(2H，m)；2.1(3H，s)；1.99(2H，t)； 0.0(9H，s)。MS(M+H)：443.
步骤3. 5-(甲硫基)-3-[4-(7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基)-1H-吡唑-1-基]戊 烷腈
将5-(甲硫基)-3-[4-(7-[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基-7H-吡咯 并[2，3-d]嘧啶-4-基)-1H-吡唑-1-基]戊烷腈(0.35g，0.00079mol)的THF (4mL，0.05mol)溶液和3.0M HCl(HCl)在水(4mL)中加热至回流过 夜。通过旋转蒸发除去溶剂，得到浅橙色油状物。将在乙醇(3mL，0.05 mol)中的该油状物和8.0M氢氧化铵在水(1mL)中搅拌过夜。浓缩反应 物并经prep LCMS(C18柱，用ACN/含0.15％ NH4OH的H2O的梯度液洗 脱)纯化，得到125mg白色泡沫物。白色泡沫物用MTBE研磨(～1.5 mL)。过滤生成的固体，洗涤并干燥，得到80mg产物(32％得率)。
1H NMR(400MHz，CDCl3)：δ 10.38(1H，s)；8.88(1H，s)；8.39(1H，s)； 8.38(1H，s)；7.44(1H，d)；6.8(1H，d)；5.75(2H，s)；4.9(1H，br)；3.05 (2H，m)；2.5(2H，m)；2.23(2H，d)；2.1(3H，s)。MS(M+H)：313.
实施例91：5-(甲基亚磺酰基)-3-[4-(7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基)-1H-吡 唑-1-基]戊烷腈

将5-(甲硫基)-3-[4-(7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基)-1H-吡唑-1-基]戊 烷腈(0.065g，0.00021mol)和过氧化氢(0.022mL，0.00023mol)的ACN (1mL，0.02mol)溶液搅拌过夜。浓缩反应物并经HPLC纯化，得到21mg 固体。固体用MTBE研磨(1mL)/DCM(10drops)。过滤该固体并洗涤， 得到13mg白色固体(20％得率)，将其在室温至50℃干燥2小时。
1H NMR(400MHz，CDCl3)：δ 9.95(1H，s)；8.85(1H，s)；8.4(2H，m)； 7.4(1H，d)；6.8(1H，s)；4.9(1H，br)；3.15(2H，m)；3.0(2H，m)；2.8-2.5 (2H，m)；2.6(3H，s)。MS(M+H)：329.
实施例92：5-(甲基磺酰基)-3-[4-(7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基)-1H-吡唑 -1-基]戊烷腈

将5-(甲硫基)-3-[4-(7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基)-1H-吡唑-1-基]戊 烷腈(0.040g，0.00013mol)和过氧化氢(0.5mL，0.005mol)的ACN(1 mL，0.02mol)溶液回流过夜。反应物经HPLC纯化，得到16mg白色玻 璃状物/固体，将其用EtOH(～0.8mL)研磨，得到13mg白色固体(30％ 得率)。
1H NMR(400MHz，CDCl3)：δ 8.75(1H，s)；8.48(1H，d)；8.4(1H，d)； 7.43(1H，d)；6.8(1H，s)；5.0(1H，br)；3.4(2H，m)；3.2-3.0(2H，m)； 2.8-2.5(2H，m)；2.95(3H，s)。MS(M+H)：345.
实施例93：4，4，4-三氟-3-[4-(7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基)-吡唑-1-基]- 丁腈

步骤1. 4，4，4-三氟-3-[4-(7-[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基-7H-吡咯 并[2，3-d]嘧啶-4-基)-1H-吡唑-1-基]丁腈
将4-(1H-吡唑-4-基)-7-[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基-7H-吡咯 并[2，3-d]嘧啶(6.9g，0.022mol)、(2E)-4，4，4-三氟丁-2-烯腈(2.8g，0.023 mol)和DBU(0.18mL，0.0012mol)在ACN(70mL，1mol)中的混合物搅 拌20分钟。过滤反应物，通过旋转蒸发除去滤液，得到橙色油状物。 粗制油状物用20-50％乙酸乙酯/己烷层析，得到9.1g固体/油状物(96％ 得率)。单一对映体(峰2)经手性柱层析(OD-H柱，30％EtOH/hex)分离， 为浅绿色固体/玻璃状物(3.3g，32％得率)。
1H NMR(400MHz，CDCl3)：δ 8.93(1H，s)；8.46(1H，s)；8.45(1H，s)； 7.5(1H，d)；6.85(1H，d)；5.75(2H，s)；5.2(1H，m)；3.6(2H，t)；3.7-3.3 (2H，m)；1.99(2H，t)；0.0(9H，s)。MS(M+H)：438.
步骤2. 4，4，4-三氟-3-[4-(7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基)-吡唑-1-基]-丁腈
将得自步骤1的4，4，4-三氟-3-[4-(7-[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲 基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基)-1H-吡唑-1-基]丁腈(3.1g，0.0071mol) 的THF(35mL，0.43mol)溶液和3.0M HCl在水(35mL)中加热至回流 过夜。通过旋转蒸发除去溶剂，得到浅绿色橙色油状物/玻璃状物。将 油状物与乙酸乙酯和饱和NaHCO3(50mL)一起搅拌。水相用乙酸乙酯 提取。有机层用盐水洗涤，通过旋转蒸发浓缩，得到油状物/玻璃状物 残留物。将在乙醇(20mL，0.3mol)中的该残留物和8.0M氢氧化铵在水 (10mL)中一起搅拌过周末。通过旋转蒸发除去溶剂，得到浅橙色泡沫 物/固体。粗制物用0-7％ MeOH/DCM、0-0.7％ NH4OH层析，得到3g 浅橙色糊状物/固体。使固体在EtOH中重结晶，得到1.6g灰白色晶体 (74％得率)。
1H NMR(400MHz，DMSO)：δ 12.2(1H，s)；8.95(1H，s)；8.7(1H，s)； 8.5(1H，s)；7.63(1H，d)；6.96(1H，d)；6.01(1H，m)；3.7(2H，m)。 MS(M+H)：306.
按照标记“制备实施例号”的栏中所述，制备表5e的以下化合物。
表5e


实施例97：3-(2-氰基-1-[4-(7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基)-1H-吡唑-1-基] 乙基)-环戊烷-甲腈三氟乙酸盐

步骤1：3-(二甲氧基甲基)环戊烷甲醛.
在3-颈圆底烧瓶中，使2-降冰片烯(5.500g，0.05841mol)溶于 DCM(198.0mL，)和甲醇(38.5mL)中并冷却至-78℃。使臭氧通过反应 物直至其转化为蓝色并于-78℃搅拌30分钟.然后使氮气通过20分 钟，加入对甲苯磺酸(0.95g，0.0055mol)。使反应物温热至20℃并搅 拌90分钟。向该反应物中加入饱和碳酸氢钠(1.67g，0.0199mol)，将 得到的混合物于20℃搅拌30分钟，加入二甲硫(9.4mL，0.13mol)。 将该反应物搅拌16小时，通过旋转蒸发浓缩至～50mL。反应物用DCM 提取，有机提取物用水和盐水洗涤，干燥(MgSO4)及真空汽提。于135 ℃(浴温)、高真空泵下蒸发反应物，得到产物(7.5g)，为非对映体的 ～2:1混合物。1H NMR(300MHz，CDCl3)：9.64 & 9.62(d，1H)，4.15 & 4.12(s，1H)，3.35 & 3.34(s，6H)，2.77m，1H)，2.34(m，1H)，1.35-2.00(m， 6H)。
步骤2. (2E，Z)-3-[3-(二甲氧基甲基)环戊基]丙烯腈
向含t-BuOK的THF(1.0M，6，10mL)0℃溶液的烧瓶中加入氰 基甲基膦酸二乙基酯(1.1g，6.4mmol)的THF(8mL)溶液。移去冷浴， 使反应物温热至环境温度，然后滴加入3-(二甲氧基甲基)环戊烷甲醛 (1.00g，5.81mmol)的THF(2mL)溶液。加入完成后不久，橙色胶-样 颗粒开始发泡，约1小时后，反应物呈凝胶状。将反应物在环境温度 搅拌16小时，此时tlc指示反应完成。使反应物分配于水和EtOAc之 间，水相用另外的EtOAc洗涤。合并的有机相用水洗涤，然后用饱和 NaCl洗涤，然后经MgSO4干燥并真空浓缩，得到的残留物经柱层析 纯化，用6:1己烷：EtOAc+1％ TEA洗脱，得到产物，为E/Z异构体 的1:1混合物(760mg，61％)。1H NMR(400MHz，CDCl3)：δ 乙烯的质 子在6.69(m，0.5H)，6.37(m，0.5H)，5.32(m，0.5H)，5.23(m，0.5H)，醛缩 亚甲醇(acetal methane)质子在4.14(m，1H)，甲基质子在3.34(s，6H)。
步骤3. 3-[3-(二甲氧基甲基)环戊基]-3-[4-(7-[2-(三甲基甲硅烷基)乙 氧基]甲基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基)-1H-吡唑-1-基]丙腈.
向4-(1H-吡唑-4-基)-7-[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基-7H-吡咯 并[2，3-d]嘧啶(230mg，0.74mmol)的ACN(5mL)溶液中加入 (2E，Z)-3-[3-(二甲氧基甲基)环戊基]丙烯腈(289mg，1.48mmol)，接着 DBU(300μL，2.0mmol)。将该混合物在环境温度下搅拌16小时，此 时LCMS和TLC指示反应完成。将反应物真空浓缩至干，残留物经 柱层析纯化，获得产物，为非对映体的混合物(293mg，77％)。1H NMR (400MHz，CDCl3)：δ 8.85(s，1H)，8.31(s，2H)，7.40(d，1H)，6.80(d，1H)， 5.68(s，2H)，4.28(m，1H)，4.11(m，1H)，3.54(t，2H)，3.36(s，1.5H)，3.34 (s，1.5H)，3.30(s，1.5H)，3.26(s，1.5H)，3.12(m，1H)，2.94(m，1H)，2.65 (m，1H)，2.34(m，1H)，2.0-1.0(m，6H)，0.92(t，2H)，-0.56(s，9H)。MS(EI) m/z＝511.3(M+H)。
步骤4. 3-(3-甲酰基环戊基)-3-[4-(7-[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基 -7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基)-1H-吡唑-1-基]丙腈
向3-[3-(二甲氧基甲基)环戊基]-3-[4-(7-[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧 基]-甲基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基)-1H-吡唑-1-基]丙腈(293mg， 0.574mmol)的THF(4.5mL)溶液中加入HCl水溶液(1.0M，1.5mL)。 将反应物于环境温度保持2.5小时，此时TLC和LCMS指示完成脱保 护，得到相应的醛。使反应物分配于水和EtOAc之间，水相用另外的 EtOAc提取。合并的有机相用水洗涤，然后用饱和NaHCO3洗涤，然 后用饱和NaCl洗涤，再经MgSO4干燥，过滤并汽提至干，留下粗产 物，为非对映体的混合物。1H NMR(400MHz，CDCl3)：δ 9.69(d，0.5H)， 9.64(d，0.5H)，8.85(s，0.5H)，8.84(s，0.5H)，8.35(s，0.5H)，8.34(s，0.5H)， 8.32(s，0.5H)，8.30(s，0.5H)，7.41(d，0.5H)，7.40(d，0.5H)，6.80(d，0.5H)， 6.79(d，0.5H)，5.68(s，1H)，5.67(s，1H)，4.32(m，1H)，3.54(m，2H)， 3.14(m，1H)，2.96(m，2H)，2.76(m，1H)，2.1-1.1(m，6H)，0.92(m，2H)， -0.058(s，9H)。MS(EI)m/z＝465.1(M+H)。
步骤5. 3-3-[(E，Z)-(羟基亚氨基)甲基]环戊基-3-[4-(7-[2-(三甲基甲硅烷 基)乙氧基]甲基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基)-1H-吡唑-1-基]丙腈
向3-(3-甲酰基环戊基)-3-[4-(7-[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基 -7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基)-1H-吡唑-1-基]丙腈(336mg，0.000723mol) 的CH3OH(5.0mL，0.12mol)溶液中加入羟基胺盐酸盐(60mg，0.00087 mol)和KHCO3(110mg，0.0011mol)，将反应于环境温度保持16小时， 此时LCMS指示反应完成。将反应物真空浓缩至干，残留物分配于水 和EtOAc之间，水相用另外的EtOAc提取。合并的有机相用水洗涤，然 后用饱和NaCl洗涤，然后经MgSO4干燥并浓缩，留下粗产物，其无 须纯化而直接进行随后的反应。NMR指示醛式质子消失。MS(EI)m/z ＝480.2(M+H)。
步骤6. 3-(2-氰基-1-[4-(7-[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基-7H-吡咯并 [2，3-d]嘧啶-4-基)-1H-吡唑-1-基]乙基)环戊烷甲腈.
向3-3-[(E，Z)-(羟基亚氨基)甲基]环戊基-3-[4-(7-[2-(三甲基甲硅烷 基)-乙氧基]-甲基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基)-1H-吡唑-1-基]丙腈(324 mg，0.67mmol)的吡啶(1.2mL)溶液中滴加入甲磺酰氯(210μL，2.7 mmol)。将反应物加热至60℃2.5小时，此时LCMS指示反应完成。 使反应物分配于水和EtOAc之间，水相用另外的EtOAc提取。合并 的有机相用水洗涤，然后用0.1N HCl洗涤，然后用饱和NaCl洗涤， 然后经MgSO4干燥。粗产物经柱层析纯化，获得产物，为非对映体的 混合物(164mg，52％)。然后通过手性HPLC分离非对映体，提供四个 不同的非对映体，其直接用于脱保护步骤。MS(EI)m/z＝462.1(M+H)。
步骤7. 3-(2-氰基-1-[4-(7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基)-1H-吡唑-1-基]乙 基)-环戊烷甲腈三氟乙酸盐.
然后，四个非对映体以代表性方式分开脱保护。向溶于CH2Cl2 (2.0mL)的3-2-氰基-1-[4-(7-[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基-7H-吡咯 并[2，3-d]嘧啶-4-基)-1H-吡唑-1-基]乙基环戊烷甲腈(35mg，0.076mmol) 中加入TFA(1.0mL)，将反应物于环境温度搅拌2小时，此时LCMS 指示完成裂解，得到N-羟基甲基中间体。除去溶剂并向残留物中加入 甲醇(1.0mL)，接着加入乙二胺(40μL，0.61mmol)，将该反应物搅拌 16小时，此时LCMS指示反应完成。除去溶剂，残留物通过制备型 LCMS纯化，提供为TFA盐的产物。NOE实验证实所有的异构体在 环戊基环上具有顺式几何异构体。异构体1和2：1H NMR(400MHz， CD3OD)：δ 8.95(s，1H)，8.89(s，1H)，8.54(s，1H)，7.86(d，1H)，7.29(d， 1H)，4.72(m，1H)，3.27(m，1H)，3.19(m，1H)，2.95(m，1H)，2.72(m，1H)， 2.2-1.9(m，4H)，1.67(m，2H)。异构体3和4：1H NMR(400MHz， CD3OD)：δ 8.95(s，1H)，8.88(s，1H)，8.52(s，1H)，7.85(d，1H)，7.28(d， 1H)，4.72(m，1H)，3.27(m，1H)，3.19(m，1H)，3.05(m，1H)，2.71(m，1H)， 2.44(m，1H)，2.05(m，1H)，1.92(m，1H)，1.72(m，1H)，1.58(m，2H)。MS (EI)m/z＝332.2(M+H)。
实施例98：3-[3-(羟基甲基)环戊基]-3-[4-(7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4- 基)-1H-吡唑-1-基]丙腈

步骤1：3-[3-(羟基甲基)环戊基]-3-[4-(7-[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基] 甲基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基)-1H-吡唑-1-基]丙腈
将3-(3-甲酰基环戊基)-3-[4-(7-[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基 -7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基)-1H-吡唑-1-基]丙腈(50.0mg，0.108mmol) 的甲醇(280μL)溶液冷却至0℃，然后加入四氢硼酸钠(14mg，0.37 mmol)。将反应物于0℃保持10分钟，此时LCMS和TLC指示反应完成。 通过小心加入1N HCl(3滴)和甲醇(1mL)猝灭反应，接着加入NaHCO3 水溶液和CHCl3。分离各相，水相用另外的CHCl3洗涤。合并的有机相 用饱和NaCl洗涤，经MgSO4干燥并浓缩至干。残留物经柱层析纯化， 获得产物，为非对映体的混合物(37.4mg，74％)。1H NMR(400MHz， CDCl3)：(s，1H)，8.31(s，2H)，7.40(d，1H)，6.80(d，1H)，5.67(s， 2H)，4.29(m，1H)，3.53(m，1H)，3.53(t，2H)，3.14(m，1H)，2.95(m，1H)， 2.68(m，1H)，2.2-1.0(m，9H)，0.92(t，2H)，-0.059(s，9H)。MS(EI)m/z＝ 467.2(M+H)。
步骤2. 3-[3-(羟基甲基)环戊基]-3-[4-(7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基)-1H- 吡唑-1-基]丙腈
向溶于CH2Cl2(2.0mL)的3-[3-(羟基甲基)环戊基]-3-[4-(7-[2-(三 甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基)-1H-吡唑-1-基] 丙腈(60.4mg，0.129mmol)中加入TFA(1.0mL)，将反应物搅拌1小时， 此时LCMS指示完成裂解，得到N-羟基甲基中间体(m/z＝367)。也观 察到环戊基环的羟基甲基的三氟乙酸酯(m/z＝463)。除去溶剂，向残 留物中加入甲醇(1.0mL)，接着加入乙二胺(80μL，1.19mmol)。将得 到的混合物搅拌16小时，此时LCMS指示反应完成，得到所需产物。 除去溶剂，残留物经手性HPLC纯化，提供四个不同的非对映体(四个 异构体总重20.2mg，46％)。NOE实验提示所有的异构体环戊基环上 具有顺式几何异构体。异构体1和2：1H NMR(400MHz，CD3OD)： δ 8.65(s，1H)，8.62(s，1H)，8.38(s，1H)，7.50(d，1H)，6.95(d，1H)，4.51 (m，1H)，3.40(m，2H)，3.22(m，1H)，3.11(m，1H)，2.61(m，1H)，2.10(m， 1H)，1.94(m，1H)，1.82(m，1H)，1.6-1.4(m，3H)，1.03(m，1H)。异构体3 和4：1H NMR(400MHz，CD3OD)：δ 8.66(s，1H)，8.62(s，1H)，8.37(s， 1H)，7.50(d，1H)，6.95(d，1H)，4.51(m，1H)，3.46(m，2H)，3.21(m，1H)， 3.11(m，1H)，2.61(m，1H)，2.22(m，1H)，2.09(m，1H)，1.71(m，1H)， 1.55-1.25(m，3H)，1.04(m，1H)。MS(EI)m/z＝337.1(M+H)。
实施例100：1-(1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-4-基)-1H-吲唑(100a)和2-(1H-吡 咯并[2，3-b]吡啶-4-基)-2H-吲唑(100b)

搅拌下，将4-溴代-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶(0.078g，0.00040mol)和 1H-吲唑(0.283g，0.00240mol)在密封管中，于200℃(油浴)加热过夜。 使反应物冷却至室温，粗产物经prep LC-MS在C-18柱上纯化，用水 /含0.2％ TFA的ACN梯度液洗脱，得到标题化合物(0.015gm，15％)， 为无定形白色固体，LC/MS(M+H)+235，1H NMR(DMSO-d6)δ 12.01 (bs，1H)，9.17(s，1H)，8.31(s，1H)，7.73(d，1H，J＝9.0)，7.67(m，2H)，7.58(m， 1H)，7.28(m，1H)，7.07(m，2H)。
实施例106：3-[3-(1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-4-基)-1，2，4-噁二唑-5-基]苄 腈

步骤1. 1-[2-T三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-4- 甲腈

使4-溴代-1-[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基-1H-吡咯并[2，3-b]吡 啶(0.300g，0.000917mol)溶于DMF(6.5mL，0.084mol)，然后加热氰化 锌(0.30g，0.0026mol)。该溶液用氮气脱气，然后加热二(三-叔-丁基膦) 钯(0.1g，0.0002mol)。封闭反应物并在微波中加热至100℃ 30分钟。 使反应物冷却至室温，溶于乙酸乙酯，用水、盐水洗涤饱和的碳酸钠， 经硫酸镁干燥并浓缩，得到油状物。粗产物通过快速柱层析(FCC)在 硅胶上纯化，用己烷:乙酸乙酯梯度液洗脱，得到产物(0.25gm)，为无 色油状物。LC/M S(M+H)+274，1H NMR(CDCl3)δ 8.22(d，1H)， 7.53(d，1H)，7.40(d，1H)，6.73(d，1H)，5.65(s，2H)，3.50(m，2H)，0.90(m， 2H)，0.0(s，9H)。
步骤2. N-羟基-1-[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基-1H-吡咯并[2，3-b] 吡啶-4-甲脒(carboximidamide)

使1-[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-4-甲 腈(0.05g，0.0002mol)溶于乙醇(2.0mL，0.034mol)，然后加入羟基胺盐 酸盐(0.023g，0.00033mol)和碳酸钾(0.10g，0.00073mol)。将反应物加 热至回流5小时，然后使反应物冷却至室温，过滤除去固体。浓缩滤 液，得到产物0.06g为黄色油状的残留物，LC/MS(M+H)+307.
步骤3. 3-[3-(1-[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基-1H-吡咯并[2，3-b]吡 啶-4-基)-1，2，4-噁二唑-5-基]苄腈

使粗产物N-羟基-1-[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基-1H-吡咯并 [2，3-b]吡啶-4-甲脒(0.06gm，0.0002mol)溶于吡啶(1.0mL，0.012mol)， 然后于室温下加入3-氰基苯甲酰氯(0.040g，0.00024mol)。将该混合物 搅拌1小时并在油浴中加热至80℃。加热18小时后，使反应物冷却至 室温，然后用CAN稀释并真空浓缩，得到3-[3-(1-[2-(三甲基甲硅烷基) 乙氧基]甲基-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-4-基)-1，2，4-噁二唑-5-基]苄腈0.08 gm，为灰白色残留物，LC/M S(M+H)+418.
步骤4. 3-[3-(1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-4-基)-1，2，4-噁二唑-5-基]苄腈
在氮气下，使粗制3-[3-(1-[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基-1H- 吡咯并[2，3-b]吡啶-4-基)-1，2，4-噁二唑-5-基]苄腈(0.08g，0.0002mol)溶 于TFA(3.0mL，0.039mol)，然后加热至60℃。加热2小时后，使反应 物冷却至室温并真空浓缩。使得到的残留物溶于甲醇并浓缩，以尽可 能除去更多的TFA。使残留物溶于甲醇(2.0mL，0.049mol)和氢氧化铵 (1mL)。将该混合物于室温下搅拌2小时后反应完成。真空浓缩反应 物，得到粗产物，将其通过prep HPLC在C-18柱上纯化，用0.2％ TFA的 ACN:水梯度液洗脱，得到标题化合物(0.025gm，43％)(M+H)+288.1H NMR(DMSO-d6)δ 12.1(bs，1H)，8.65(s，1H)，8.48(d，1H，J＝6.4)，8.39(d， 1H，J＝4.8)，8.16(d，1H，J＝6.4)，7.84(t，1H，J＝6.4)，7.75(d，1H，J＝4.8)， 7.68(m，1H)，6.99(m，1H)。
实施例107：4-(1-苯并噻吩-2-基)-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶

步骤1. 4-(1-苯并噻吩-2-基)-]-[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基-1H- 吡咯并[2，3-b]吡啶

将1-苯并噻吩-2-基硼酸(0.05g，0.0003mol)和4-溴代-1-[2-(三甲基 甲硅烷基)乙氧基]甲基-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶(0.10g，0.00031mol)在 甲苯(3.0mL，0.028mol)和乙醇(1.0mL，0.017mol)中合并。然后加入溶 于水(1.0mL)中的碳酸钾(0.085g，0.00062mol)，用氮气使反应物脱气。 然后加入四(三苯膦)钯(0)(0.05g，0.00004mol)，在密封管中，将该反 应物用微波加热至120℃60分钟。使其冷却至室温，溶于乙酸乙酯并 用水2X、盐水洗涤，经硫酸镁干燥并浓缩，得到4-(1-苯并噻吩-2- 基)-1-[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶(0.10 gm)，为油状物，LC/MS(M+H)+381.
步骤2. 4-(1-苯并噻吩-2-基)-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶
使用类似于实施例106，步骤4的程序，但是使用4-(1-苯并噻吩-2- 基)-1-[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶，制备标 题化合物，为黄色粉末(0.015g，18％)，LC/MS(M+H)+：251，1H NMR (DMSO-d6)δ 11.95(bs，1H)，8.28(d，1H，J＝5.4)，8.15(s，1H)，8.03(m，1H)， 7.96(m，1H)，7.64(m，1H)，7.42(m，2H)，7.39(d，1H，J＝5.4)，6.95(m，1H)。
实施例120：4-氟-2-[1-(1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-基]苯 酚

将4-溴代-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶(0.050g，0.00025mol)和4-氟 -2-(1H-吡唑-3-基)苯酚(0.150g，0.000842mol)加热至160℃ 5小时。使 反应物冷却至室温，残留物经prep LC-MS在C-18柱上纯化，用水/含 0.2％ TFA的ACN梯度液洗脱，得到标题化合物(0.052g，20％，为无定 形白色固体，LC/MS(M+H)+295，1H NMR(DMSO-d6)δ 12.01(bs， 1H)，10.25(bs，1H)，8.81(s，1H)，8.35(d，1H，J＝5.5)，7.77(d，1H，J＝9.5)， 7.64(m，1H)，7.59(d，1H，J＝5.5)，7.32(s，1H)，7.09(m，1H)，7.05(m，1H)， 7.01(m，1H)。
实施例127：4-3-[3-(三氟甲基)苯基]-1H-吡唑-1-基-1H-吡咯并[2，3-b] 吡啶

步骤1.(2E)-3-(二甲基氨基)-1-[3-(三氟甲基)苯基]丙-2-烯-1-酮

将1-[5-(三氟甲基)苯基]乙酮(0.20mL，0.0013mol)和1，1-二甲氧 基-N，N-二甲基甲胺(0.17mL，0.0013mol)在密封管中合并并在微波中 加热至120℃ 15分钟，使反应物冷却并浓缩，以除去剩余的DMF缩 醛，得到(2E)-3-(二甲基氨基)-1-[3-(三氟甲基)苯基]丙-2-烯-1-酮0.32 gm，为红色油状物，LC/MS(M+H)+：244.
步骤2： 3-[3-(三氟甲基)苯基]-1H-吡唑

在氮气下，使(2E)-3-(二甲基氨基)-1-[3-(三氟甲基)苯基]丙-2-烯-1- 酮(0.32g，0.0013mol)溶于乙醇(10.0mL，0.171mol)和肼(0.24mL， 0.0078mol)并加热至回流。通过HPLC监测反应，反应几乎立即完成。 使该混合物冷却至室温并浓缩，得到为油状物的粗产物。产物经FCC 在硅胶上纯化，用己烷:乙酸乙酯梯度液洗脱，得到3-[3-(三氟甲基)苯 基]-1H-吡唑，为油状物(0.25g，89％)，LC/MS(M+H)+：213，1H NMR (CDCl3)δ 8.06(s，1H)，7.99(d，1H，J＝7.5)，7.66(d，1H，J＝2.4)，7.57(m， 1H)，7.55(d，1H，J＝7.5)，6.69(d，1H，J＝2.4)。
步骤3. 4-3-[3-(三氟甲基)苯基]-1H-吡唑-1-基-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶
将4-溴代-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶(0.028g，0.00014mol)和3-[3-(三 氟甲基)苯基]-1H-吡唑(0.03g，0.0001mol)合并。将在密封管中的反应 物在油浴中加热至175℃20-得到为黑色粘稠胶状物的粗产物。粗产物 经HPLC在C-18柱上纯化，用水：含0.2％ TFA的ACN梯度液洗脱，得到 标题产物(0.025gm，50％)，为白色无定形固体，LC/MS(M+H)+：329， 1H NMR(DMSO-d6)δ 11.95(bs，1H)，8.83(d，1H，J＝2.7)，8.31(m，3H)， 7.75(m，2H)，7.60(m，2H)，7.35(d，1H，J＝2.7)，7.14(m，1H)。
实施例128：3-[1-(1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-基]苄腈

步骤1. 3-[(2E)-3-(二甲基氨基)丙-2-烯酰基]苄腈
将3-乙酰基苄腈(0.435g，0.00300mol)和1，1-二甲氧基-N，N-二甲 基甲胺(0.400mL，0.00301mol)合并的并在密封管中，用微波加热至 120℃15分钟。然后使反应物冷却至室温，得到3-[(2E)-3-(二甲基氨 基)丙-2-烯酰基]苄腈，为红色-橙色结晶物质，LC/MS(M+H)+：201.
步骤2. 3-(1H-吡唑-3-基)苄腈
使3-[(2E)-3-(二甲基氨基)丙-2-烯酰基]苄腈(0.600g，0.00300mol) 溶于乙醇(20.0mL，0.342mol)和肼(0.56mL，0.018mol)，在氮气氛下、 于室温搅拌1.5小时。真空浓缩反应物，得到黑色产物，其经FCC在硅 胶上纯化，用乙酸乙酯-己烷1:1洗脱，得到3-(1H-吡唑-3-基)苄腈，为 油状物(0.430g，84％)，LC/MS(M+H)+：170.
步骤3. 3-[1-(1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-基]苄腈
将4-溴代-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶(0.075g，0.00038mol)和3-(1H-吡 唑-3-基)苄腈(0.161g，0.000952mol)在密封管中加热至160℃18小时。 生成为黑色粘稠胶状物的产物，经HPLC在C-18柱上纯化，用水：含0.2％ TFA的ACN梯度液洗脱，得到标题产物(0.030g，27％)，为白色无定 形固体，LC/MS(M+H)+：286，1H NMR(DMSO-d6)δ 11.95(bs，1H)， 8.76(s，1H)，8.36(s，1H)，8.29(d，1H，J＝7.5)，8.25(d，1H，J＝5.0)，7.79(d， 1H，J＝7.5)，7.62(t，1H，J＝7.5)，7.53(m，2H)，7.25(s，1H)，7.11(m，1H)。
实施例153：3-[1-(1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-4-基)-1H-吡唑-4-基]苄腈

步骤1. 4-[4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼杂戊环-2-基)-1-[2-(三甲基甲 硅烷基)乙氧基]甲基-1H-吡唑
将4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼杂戊环-2-基)-1H-吡唑(2.0g， 0.010mol)和DMF(30.0mL，0.387mol)的溶液冷却至0℃。加入氢化钠 (320mg，0.013mol)(60％在油中)并搅拌该混合物10分钟。加入[β-(三 甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基氯(2.4mL，0.013mol)，将得到的混合物于 0℃搅拌20分钟和于室温下搅拌2小时。反应物分配于水和乙酸乙酯之 间。有机层用盐水洗涤，经MgSO4干燥并浓缩，得到4-(4，4，5，5-四甲基 -1，3，2-二氧杂硼杂戊环-2-基)-1-[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基-1H- 吡唑，为粗制物质。LC/MS(M+H)+：325，1H NMR(CDCl3)δ 7.85(s，1H)， 7.80(s，1H)，5.45(s，2H)，3.55(t，2H)，1.35(s，12H)，0.95(t，2H)，0.0(s，9H)。
步骤2.3-(1-[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基-1H-吡唑-4-基)苄腈
将4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼杂戊环-2-基)-1-[2-(三甲基甲 硅烷基)乙氧基]甲基-1H-吡唑(150.0mg，0.0004625mol)和3-溴代苄腈 (0.10g，0.00056mol)在甲苯(2.0mL，0.019mol)和乙醇(0.3mL，0.005 mol)中的混合物用碳酸钠(98mg，0.00092mol)在水(0.5mL，0.03mol) 中进行处理。通过鼓泡通入氮气使该混合物脱气。加入四(三苯膦)钯 (0)(53mg，0.000046mol)并鼓泡通入氮气3分钟。将反应物在微波中于 80℃加热30分钟，然后冷却至室温，使溶于水和乙酸乙酯。有机层经 MgSO4干燥，过滤并浓缩，得到粗制产物，其经FCC在硅胶上纯化， 用EtOAc/己烷(1:5)洗脱，得到3-(1-[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基 -1H-吡唑-4-基)苄腈，为油状物，LC/MS(M+H)+：300.
步骤3.3-(1H-吡唑-4-基)苄腈三氟乙酸盐

使3-(1-[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基-1H-吡唑-4-基)苄腈 (110.0mg，0.0003673mol)溶液吸收于TFA(3.0mL，0.039mol)中，将混 合物在微波中加热至120℃3分钟。使反应混合物冷却至室温，然后 浓缩，得到粗残留物。产物经HPLC在C-18柱上纯化，用水/含0.2％ TFA 的ACN梯度液洗脱，得到3-(1H-吡唑-4-基)苄腈三氟乙酸盐，为无定形 白色固体，LC/MS(M+H)+：170.
步骤4. 3-[1-(1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-4-基)-1H-吡唑-4-基]苄腈
将4-溴代-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶(25.0mg，0.000127mol)和3-(1H- 吡唑-4-基)苄腈三氟乙酸盐(23.6mg，0.0000833mol)的混合物于180℃ 加热过夜。粗残留物经HPLC在C-18柱上纯化，用水：含0.2％ TFA的 ACN梯度液洗脱，得到标题化合物，为无定形白色固体，LC/MS (M+H)+：286，1H NMR(DMSO-d6)δ 11.85(bs，1H)，9.18(s，1H)，8.42(s， 1H)，8.28(s，1H)，8.25(d，1H，J＝5.0)，8.07(d，1H，J＝7.0)，7.64(d，1H， J＝7.0)，7.56(t，1H，J＝7.0)，7.51(m，1H)，7.47(d，1H，J＝5.0)，7.03(m，1H)。
实施例170：2-[1-(1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-4-基)-1H-吡唑-4-基]-1，3-苯 并噁唑

步骤1. 4-肼基-1-[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基-1H-吡咯并[2，3-b] 吡啶

向4-溴代-1-[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基-1H-吡咯并[2，3-b]吡 啶(1.98g，0.00605mol)加入肼(11.0mL，0.350mol)，接着加入甲醇(1.0 mL，0.025mol)(以改善溶解性)。将该反应混合物在密封管中，于97℃ (油浴)中加热18小时。使反应混合物冷却至室温并形成灰白色固体沉 淀。滤去固体，用冷水洗涤并干燥，得到4-肼基-1-[2-(三甲基甲硅烷 基)乙氧基]甲基-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶(1.55gm)，为淡黄色固体， LC/MS(M+H)+：279，1H NMR(DMSO-d6)δ 7.98(d，1H)，7.91(s，1H)， 7.28(d，1H)，6.69(s，1H)，6.61(d，1H)，5.58(s，2H)，4.37(s，2H)，3.56(t，2H)， 0.90(t，2H)，0.0(s，9H)。
步骤2. 2-[1-(1-[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基-1H-吡咯并[2，3-b] 吡啶-4-基)-1H-吡唑-4-基]-1，3-苯并噁唑

向在甲苯(1.5mL，0.014mol)中的4-肼基-1-[2-(三甲基甲硅烷基) 乙氧基]甲基-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶(0.083g，0.00030mol)3782-117-1 和1，3-苯并噁唑-2-基丙醛(malonaldehyde)(0.056g，0.00030mol)加入分 子筛。搅拌下，将混合物在密封管中，于70℃(油浴)加热2小时。真 空除去溶剂和粗产物经FCC在硅胶上纯化，使用乙酸乙酯:己烷3:7，得 到2-[1-(1-[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-4- 基)-1H-吡唑-4-基]-1，3-苯并噁唑(0.090gm)，为油状物，LC/MS(M+H)+： 432.
步骤3.
使用类似于实施例106，步骤4的程序，但是使用2-[1-(1-[2-(三甲 基甲硅烷基)乙氧基]甲基-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-4-基)-1H-吡唑-4- 基]-1，3-苯并噁唑，制备标题化合物，为白色无定形粉末(0.015gm， 18％)，LC/MS(M+H)+：302，1H NMR(DMSO-d6)δ 11.85(bs，1H)， 9.45(s，1H)，8.53(s，1H)，8.36(bs，1H)，7.7-7.6(m，2H)，7.65(d，1H)， 7.56(bs，1H)，7.38-7.34(m，2H)，7.01(d，1H)。
实施例172：环己基[1-(1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-4-基)-1H-吡唑-4-基]甲 醇

步骤1. 4-(4-溴代-1H-吡唑-1-基)-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶

将4-溴代-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶(1.10g，0.00558mol)和4-溴代 -1H-吡唑(1.2g，0.0084mol)加热至150℃ 2小时。加入DMF以溶解粗残 留物。使残留物溶于EtOAc并用1N NaOH洗涤。有机层用盐水洗涤，经 MgSO4干燥，过滤并浓缩，得到粗制4-(4-溴代-1H-吡唑-1-基)-1H-吡咯 并[2，3-b]吡啶残留物，LC/MS(M+H)+：263，265.
步骤2. 4-(4-溴代-1H-吡唑-1-基)-1-[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基 -1H-吡咯并[2，3-b]吡啶

加入4-(4-溴代-1H-吡唑-1-基]-1-[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲 基氯(1.4mL，0.0079mol)溶液并于0℃搅拌20分钟。使反应物分配于在 乙酸乙酯和水之间。有机层用盐水洗涤，经MgSO4干燥并浓缩，得到 粗制物质。产物经FCC在硅胶上纯化(EtOAc/己烷，1/10)，得到4-(4-溴 代-1H-吡唑-1-基)-1-[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基-1H-吡咯并 [2，3-b]吡啶，为固体产物，LC/MS(M+H)+：393，394，1HNMR(CDCl3) δ 8.47(d，1H，J＝7.0)，8.27(s，1H)，7.88(s，1H)，7.52(d，1H，J＝4.5)，7.39(d， 1H，J＝7.0)，7.069(d，1H，J＝4.5)，5.80(s，2H)，3.6(t，2H)，1.95(t，2H)，0.0(s， 9H)。
步骤3. 环己基[1-(1-[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基-1H-吡咯并 [2，3-b]吡啶-4-基)-1H-吡唑-4-基1甲醇

在氮气氛下，将4-(4-溴代-1H-吡唑-1-基)-1-[2-(三甲基甲硅烷基) 乙氧基]甲基-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶(50.0mg，0.000127mol)在THF(2.0 mL，0.025mol)中的混合物冷却至-78℃，加入1.6M正丁基锂的水 (1.00mL，0.0555mol)溶液。将该混合物搅拌3分钟。使反应物分配于 水和EtOAc之间。有机层经MgSO4干燥，过滤并浓缩，得到环己基 [1-(1:5)，得到4-基)-1H-吡唑-4-基]甲醇，为粗残留物，LC/MS(M+H)+： 417.
步骤4. 环己基[1-苯基乙烯基)-1H-吡唑-4-基]甲醇
使用类似于实施例106，步骤4的程序，但是使用环己基 [1-(1-[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶，制备标 题化合物，为白色无定形粉末(0.015gm，18％)，LC/MS(M+H)+：297. 1H NMR(DMSO-d6)δ 11.85(bs，1H)，8.44(s，1H)，7.74(s，1H)，7.50(m， 1H)，7.44(d，1H，J＝6.5.70(s，1H)，5.37(s，1H)。
实施例173：4-[4-(1-苯基乙烯基)-1H-吡唑-1-基]-1H-吡咯并[2，3-b]吡 啶

步骤1. 4-[4-(1-苯基乙烯基)-1H-吡唑-1-基]-1-[2-(三甲基甲硅烷基)乙 氧基]-甲基-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶

将(1-苯基乙烯基)硼酸(24.0mg，0.000162mol)和4-(4-溴代-1H-吡 唑-1-基)-1-[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶 (50.0mg，0.000127mol)在甲苯(2.00mL，0.0188mol)和乙醇(0.50mL， 0.0086mol)中的混合物用碳酸钾(35mg，0.00025mol)在水(1.00mL， 0.0555mol)处理。通过鼓泡通入氮气使该混合物脱气。加入四(三苯膦) 钯(0)(10mg，0.00001mol)并鼓泡通入氮气3分钟。将反应物在密封管 中，于100℃微波加热30分钟。使反应物冷却至室温并分配于乙酸乙 酯和水之间。合并的有机层经MgSO4干燥，过滤并浓缩，得到粗制物 质，粗产物经FCC在硅胶上纯化，用EtOAc/己烷(1:5)洗脱，得到4-[4-(1- 苯基乙烯基)-1H-吡唑-1-基]-1-[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基-1H-吡 咯并[2，3-b]吡啶，为固体残留物，LC/MS(M+H)+：417.
步骤2.
使用类似于实施例106，步骤4的程序，但是使用4-[4-(1-苯基乙烯 基)-1H-吡唑-1-基]-1-[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基-1H-吡咯并 [2，3-b]吡啶，制备标题化合物，为白色无定形粉末(0.015gm，31％)，LC /MS(M+H)+：287，1H NMR(DMSO-d6)δ 11.85(bs，1H)，8.63(s，1H)， 7.99(s，1H)，7.55(bs，1H)，7.48(m，2H)，7.43-7.37(m，5H)，7.01(m，1H)， 5.70(s，1H)，5.37(s，1H)。
实施例200：4-(1-苄基-1H-吡唑-4-基)-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶

步骤1. 4-(1-苄基-1H-吡唑-4-基)-1-[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基 -1H-吡咯并[2，3-b]吡啶

使4-溴代-1-[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基-1H-吡咯并[2，3-b]吡 啶(0.100g，0.000306mol)与1-苄基-4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼杂 戊环-2-基)-1H-吡唑(0.113g，0.000398mol)在甲苯(3.0mL，0.028mol) 和乙醇(0.5mL，0.008mol)中合并。加入溶于水(1.0mL，0.056mol)的碳 酸钾(0.084g，0.00061mol)，用氮气使反应混合物脱气。加入四(三苯 膦)钯(0)(0.080g，0.000069mol)，用氮气使该混合物再脱气5分钟。将 该反应物在密封管中，于100℃在微波中加热30分钟。使反应物分配 于在乙酸乙酯和水之间。有机层用水、盐水洗涤，经硫酸镁干燥并浓 缩，得到粗残留物。产物经FCC在硅胶上纯化，使用乙酸乙酯:己烷3:7， 得到4-(1-苄基-1H-吡唑-4-基)-1-[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基-1H- 吡咯并[2，3-b]吡啶0.092g，为半固体残留物，LC/MS(M+H)+：405.
步骤2. 4-(1-苄基-1H-吡唑-4-基)-1H-吡咯并[2，3-b1吡啶
使用类似于实施例106，步骤4的程序，但是使用4-(1-苄基-1H-吡 唑-4-基)-1-[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶，制 备标题化合物，为白色无定形粉末(0.054gm)，LC/MS(M+H)+：275，1H NMR(DMSO-d6)δ 12.21(bs，1H)，8.80(s，1H)，8.25(vbs，1H)，8.23(s， 1H)，7.63(s，1H)，7.49(bs，1H)，7.4-7.2(m，5H)，6.99(s，1H)，5.42(s，2H)。
实施例201：4-[1-(2-萘基甲基)-1H-吡唑-4-基]-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶

步骤1. 1-(2-萘基甲基)-4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼杂戊环-2- 基)-1H-吡唑
于室温、氮气下，将4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼杂戊环-2- 基)-1H-吡唑(0.10g，0.00052mol)与萘，2-(溴代甲基)-(0.12g，0.00057 mol)在ACN(3.0mL，0.057mol)中合并。然后加入碳酸铯(0.50g，0.0015 mol)，搅拌1小时后，反应完成。使其分配于乙酸乙酯和盐水之间。有 机层用盐水洗涤，经硫酸镁干燥并浓缩，得到1-(2-萘基甲 基)-4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼杂戊环-2-基)-1H-吡唑0.17gm，为 油状物，LC/MS(M+H)+：335，1H NMR(CDCl3)δ 7.89(s，1H)， 7.79-7.84(m，3H)，7.69(bs，2H)，7.49-7.4(m，2H)，7.46-7.33(m，1H)， 5.47(s，2H)，1.31(s，12H)。
步骤2. 4-[1-(2-萘基甲基)-1H-吡唑-4-基]-1-[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧 基1甲基-1H-吡咯并[2，3-b1吡啶

将4-溴代-1-[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基-1H-吡咯并[2，3-b]吡 啶(0.06g，0.0002mol)和1-(2-萘基甲基)-4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂 硼杂戊环-2-基)-1H-吡唑(0.074g，0.00022mol)在甲苯(2.0mL，0.019 mol)和乙醇(1.0mL，0.017mol)中合并，然后加入碳酸钾(0.063g， 0.00046mol，在1mL水中)。反应混合物用氮气脱气，然后加入四(三苯 膦)钯(0)(0.02g，0.00002mol)，将其密封于管中并在微波中加热至120 ℃30分钟。使其冷却，然后分配于乙酸乙酯和盐水之间。有机层经硫 酸镁干燥并浓缩，得到4-[1-(2-萘基甲基)-1H-吡唑-4-基]-1-[2-(三甲基 甲硅烷基)乙氧基]甲基-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶0.08g，为油状残留物， LC/MS(M+H)+：455.
步骤3
使用类似于实施例106，步骤4的程序，但是使用4-[1-(2-萘基甲 基)-1H-吡唑-4-基]-1-[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基-1H-吡咯并 [2，3-b]吡啶，制备标题化合物，为白色无定形粉末(0.053g，88％)，LC /MS(M+H)+：325，1H NMR(DMSO-d6)δ 12.0(bs，1H)，8.79(s，1H)， 8.24(s，1H)，8.19(d，1H，J＝5.7)，7.82(m，4H)，7.56(m，1H)，7.43(m，4H)， 6.92(m，1H)，5.54(s，2H)。
实施例219：4-(1-苯基-1H-吡唑-4-基)-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶

步骤1. 1-苯基-4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼杂戊环-2-基)-1H-吡唑
将4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼杂戊环-2-基)-1H-吡唑(0.07g， 0.0003mol)和苯基硼酸(0.083g，0.00068mol)在DMF(1.50mL，0.0194 mol)中合并。然后加入二乙酸铜(II)(0.010g，0.000055mol)和吡啶 (0.069mL，0.00085mol)。将反应物在开放管中加热至80℃ 40分钟。 经HPLC监测反应完成，使冷却至室温，溶于乙酸乙酯并用碳酸钠饱 和的水洗涤。有机层用盐水洗涤，经硫酸镁干燥并浓缩，得到1-苯基 -4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼杂戊环-2-基)-1H-吡唑，0.09gm，为油 状残留物，LC/MS(M+H)+：271.
步骤2. 4-(1-苯基-1H-吡唑-4-基)-1-[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基 -1H-吡咯并[2，3-b]吡啶
使用类似于实施例201，步骤B和C的程序，但是使用1-苯基 -4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼杂戊环-2-基)-1H-吡唑，制备标题化 合物，为白色无定形粉末(0.015gm，18％)，LC/MS(M+H)+：261，1H NMR(DMSO-d6)δ 12.05(bs，1H)，9.23(s，1H)，8.53(s，1H)，8.31(m，1H)， 8.01(m，2H)，7.63(m，1H)，7.57-7.52(m，3H)，7.36(m，1H)，7.13(m，1H)。
实施例231：3-[4-(1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-4-基)-1H-吡唑-1-基]苄腈

步骤1. 4-(1H-吡唑-4-基)-1-[2-(三甲基甲硅烷基]乙氧基]甲基-1H-吡咯 并[2，3-b]吡啶

将4-溴代-1-[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基-1H-吡咯并[2，3-b]吡 啶(0.20g，0.00061mol)和4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼杂戊环-2- 基)-1H-吡唑(0.15g，0.00079mol)在DMF(5.0mL，0.064mol)中合并， 然后加入在1mL水中的碳酸钾(0.25g，0.0018mol)。用氮气使反应物脱 气，然后加入四(三苯膦)钯(0)(0.08g，0.00007mol)，在密封管中将反 应物在油浴中加热至120℃。将反应物加热30分钟，使冷却，然后溶 于乙酸乙酯。反应混合物用盐水洗涤，经硫酸镁干燥并浓缩，得到油 状物。产物经FCC在硅胶上纯化，用己烷:乙酸乙酯梯度液洗脱，得到 4-(1H-吡唑-4-基)-1-[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基-1H-吡咯并[2，3-b] 吡啶(0.13gm，70％)，为晶体白色粉末，LC/MS(M+H)+：315，1H NMR (DMSO-d6)δ 13.35(bs，1H)，8.59(bs，1H)，8.32(d，1H，J＝8.5)，8.26(bs， 1H)，7.76(d，1H，J＝6.0)，7.45(d，1H，J＝8.5)，7.01(d，1H，J＝6.0)，5.73(s， 2H)，3.61(t，2H)，0.92(t，2H)，0.0(s，9H)。
步骤2. 3-[4-(1-[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基-1H-吡咯并[2，3-b]吡 啶-4-基)-1H-吡唑-1-基]苄腈

将4-(1H-吡唑-4-基)-1-[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基-1H-吡咯 并[2，3-b]吡啶(0.025g，0.000080mol)和(3-氰基苯基)硼酸(0.023g， 0.00016mol)在DMF(1.50mL，0.0194mol)中合并。然后加入二乙酸铜 (II)(0.002g，0.00001mol)和吡啶(0.019mL，0.00024mol)。将反应物在 开放管中加热至125℃ 40分钟，使冷却至室温，溶于乙酸乙酯并用碳 酸钠饱和的水洗涤。有机层用盐水洗涤，经硫酸镁干燥并浓缩，得到 3-[4-(1-[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-4- 基)-1H-吡唑-1-基]苄腈(0.025gm，92％)，为油状残留物，LC/MS (M+H)+：316.
步骤3
使用类似于实施例106，步骤4的程序，但是使用3-[4-(1-[2-(三甲 基甲硅烷基)乙氧基]甲基-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-4-基)-1H-吡唑-1-基] 苄腈，制备标题化合物，为白色晶体粉末(0.012gm，60％)，LC/MS (M+H)+：286，1H NMR(DMSO-d6)δ 12.05(bs，1H)，9.32(s，1H)， 8.59(m，1H)，8.55(m，1H)，8.36(m，1H)，8.30(d，1H，J＝5.2)，7.83(m，1H)， 7.75(m，1H)，7.63(m，1H)，7.51(d，1H，J＝5.2)，7.12(m，1H)。
实施例250：4-{1-[(1R)-1-甲基丁基]-1H-吡唑-4-基}-1H-吡咯并[2，3-b] 吡啶(250a)和
4-{1-[(1S)-1-甲基丁基]-1H-吡唑-4-基}-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶(250b)
和
步骤1. 4-[1-(1-甲基丁基)-1H-吡唑-4-基]-1-[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧 基]-甲基-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶
使4-(1H-吡唑-4-基)-1-[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基-1H-吡 咯并[2，3-b]吡啶(50mg，0.0002mol)(见，实施例231，步骤1)溶于DMF (2mL，0.02mol)并于0℃冷却。用氢化钠(7.0mg，0.00029mol)(60％在 油中)处理该溶液并搅拌15分钟。然后用2-溴代戊烷(40mg，0.0002mol) 处理该混合物并搅拌5小时。使反应物分配于在乙酸乙酯和水之间。 有机层用盐水洗涤，经MgSO4干燥，过滤并浓缩，得到粗产物4-[1-(1- 甲基丁基)-1H-吡唑-4-基]-1-[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基-1H-吡咯 并[2，3-b]吡啶，为油状物，LC/MS(M+H)+：286.
步骤2. 4-[1-(1-甲基丁基)-1H-吡唑-4-基]-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶
使用类似于实施例106，步骤4的程序，但是使用4-[1-(1-甲基丁 基)-1H-吡唑-4-基]-1-[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基-1H-吡咯并 [2，3-b]吡啶，制备标题化合物，为白色无定形粉末(0.025gm，60％)，LC /MS(M+H)+：255，1H NMR(DMSO-d6)δ 12.21(bs，1H)，8.66(s，1H)， 8.27(bs，1H)，8.25(s，1H)，7.62(m，1H)，7.49(m，1H)，7.02(m，1H)，4.46(m， 1H)，1.9-1.8(m，1H)，1.7-1.6(m，1H)，1.47(d，3H)，1.2-1.0(m，2H)，0.83(t， 3H)。
步骤3. 对映体的分离
得自步骤2的4-[1-(1-甲基丁基)-1H-吡唑-4-基]-1H-吡咯并[2，3-b]- 吡啶的对映体的分离通过手性柱制备型HPLC分离法进行，使用OD-H 柱，用异丙醇:己烷梯度液洗脱，得到标题化合物，为无定形白色残留 物，LC/MS(M+H)+：255，1H NMR(DMSO-d6)δ 12.21(bs，1H)，8.66(s， 1H)，8.27(bs，1H)，8.25(s，1H)，7.62(m，1H)，7.49(m，1H)，7.02(m，1H)， 4.46(m，1H)，1.9-1.8(m，1H)，1.7-1.6(m，1H)，1.47(d，3H)，1.2-1.0(m，2H)， 0.83(t，3H)。
实施例286：4-甲基-3-[4-(1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-4-基)-1H-吡唑-1-基] 苄腈

步骤1. 4-甲基-3-[4-(1-[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基-1H-吡咯并 [2，3-b]吡啶-4-基)-1H-吡唑-1-基]苄腈

向4-(1H-吡唑-4-基)-1-[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基-1H-吡咯 并[2，3-b]吡啶(0.050g，0.00016mol)(见，实施例231，步骤1)和碳酸铯 (0.10g，0.00032mol)在无水DMF(1.0mL，0.013mol)中的混合物中加 入3-氟-4-甲基苄腈(0.043g，0.00032mol)。将该反应混合物在密封管 中，于120℃加热5.5小时。使反应物冷却并分配于乙酸乙酯和水之间。 有机层用水、盐水洗涤，经硫酸镁干燥，过滤并浓缩，得到4-甲基 -3-[4-(1-[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-4- 基)-1H-吡唑-1-基]苄腈，为粗制产物，LC/MS(M+H)+：430.
步骤2. 4-甲基-3-[4-(1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-4-基)-1H-吡唑-1-基]苄腈
使用类似于实施例106，步骤4的程序，但是使用4-甲基 -3-[4-(1-[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-4- 基)-1H-吡唑-1-基]苄腈，制备标题化合物，为白色无定形粉末(0.037gm， 88％)，LC/MS(M+H)+：300，1H NMR(DMSO-d6)δ 12.19(bs，1H)， 8.98(s，1H)，8.57(s，1H)，8.31(d，1H，J＝7.0)，8.08(s，1H)，7.89(d，1H， J＝10)，7.66(d，1H，J＝10)，7.63(m，1H)，7.55(d，1H)，7.07(m，1H)，2.4(s， 3H)。
本发明的其它实施例化合物在下表7、8、9、10和11中提供。列 于表7、8、9、10和11中的化合物为外消旋的，除非分别指明对映体。
表7



表8



表9




表10













表11




















实施例407：3-[4-(7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基)-1H-吡唑-1-基]戊烷二 腈

步骤1：3-[4-(7-{[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基}-7H-吡咯并[2，3-d] 嘧啶-4-基)-1H-吡唑-1-基]戊烷二酸二甲基酯
使4-(1H-吡唑-4-基)-7-[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基-7H-吡咯 并[2，3-d]嘧啶(31.0g，0.0983mol)悬浮于ACN(620mL，12mol)中，在 氮气下加入DBU(9.3mL，0.062mol)。将反应物加热至65℃，用2小 时，以每份5mL分次加入(2E)-丙-2-烯二酸二甲基酯(16mL，0.12 mol)。搅拌过夜后反应完成。使反应物冷却至室温并真空浓缩，得到 黑色油状物。使该油状物分配于在乙酸乙酯和水之间。有机层用1.0 N HCl、盐水洗涤，经硫酸镁干燥，然后浓缩，得到黑色油状物。粘稠 油状物用乙醚3 X 500mL研磨，得到黑色沉淀物。使油状物溶于乙酸 乙酯，形成固体。收集固体，用乙醚洗涤并干燥，得到3-[4-(7-{[2-(三 甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基}-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基)-1H-吡唑-1- 基]戊烷二酸二甲基酯，为白色粉末(29.5gm，64％)，LC/MS(M+H)+： 474，1H NMR(DMSO-d6)δ 9.1(s，1H)，9.02(s，1H)，8.65(s，1H)，8.11(d， 1H)，7.42(d，1H)，5.78(s，2H)，5.27(m，1H)，3.65(m，8H)，3.15(m，4H)， 0.95(t，2H)，0.1(s，9H)。
步骤2：3-[4-(7-[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧 啶-4-基)-1H-吡唑-1-基]戊烷二酸
使3-[4-(7-{[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基}-7H-吡咯并[2，3-d] 嘧啶-4-基)-1H-吡唑-1-基]戊烷二酸二甲基酯(43.0g，0.0908mol)溶于 甲醇(271.2mL，6.695mol)，加入溶于水(125mL)的氢氧化锂一水合物 (15g，0.36mol)。将该反应物于室温下搅拌2小时。真空除去甲醇， 生成的水层在冰浴中冷却。用1N HCl使该溶液呈酸性pH～4，得到白 色沉淀物。收集固体沉淀物，用水洗涤、干燥，得到3-[4-(7-[2-(三甲基 甲硅烷基)乙氧基]甲基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基)-1H-吡唑-1-基]戊 烷二酸，为白色晶体粉末(31.8gm，80％)，LC/MS(M+H)+：446，1H NMR(DMSO-d6) 8.85(s，..1H)，8.75(s，1H)，8.42(s，1H)，7.85(d，1H)， 7.17(d，1H)，5.71(s，2H)，5.18(m，1H)，3.65(t，2H)，3.05(m，4H)，0.92(t，2H)， 0.1(s，9H)。
步骤3：3-[4-(7-[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧 啶-4-基)-1H-吡唑-1-基]戊烷二酰胺
在氮气下，在冰浴中，使3-[4-(7-[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲 基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基)-1H-吡唑-1-基]戊烷二酸(31.80g， 0.07137mol)溶于DMF(636mL，8.21mol)，加入CDI(34.7g，0.214 mol)。将该混合物搅拌30分钟，然后使温热至室温。搅拌2小时后，向 该溶液中鼓泡通入氨(12.2g，0.714mol)30分钟，得到混浊悬浮液。浓 缩该反应混合物，以除去一些DMF(～200mL)，然后缓慢加入水，得 到白色沉淀物。在冰浴中冷却该混合物，收集固体沉淀物，用水洗涤和 真空干燥，得到3-[4-(7-[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基-7H-吡咯并 [2，3-d]嘧啶-4-基)-1H-吡唑-1-基]戊烷二酰胺，为白色粉末(29.0gm， 91％)，LC/MS(M+H)+：444，1H NMR(DMSO-d6)δ 8.85(s，1H)，8.59(s， 1H)，8.40(s，1H)，7.87(d，1H)，7.75(s，2H)，7.15(d，1H)，6.95(s，2H)，5.73(s， 2H)，5.29(m，1H)，3.63(t，2H)，2.82(m，2H)，2.73(m，2H)，0.90(t，2H)，0.1(s， 9H)。
步骤4：3-[4-(7-[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧 啶-4-基)-1H-吡唑-1-基]戊烷二腈
使3-[4-(7-[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧 啶-4-基)-1H-吡唑-1-基]戊烷二酰胺(29.0g，0.0654mol)部分溶于DMF (200mL，2mol)、DCM(200mL，3mol)和TEA(36mL，0.26mol)，在 氮气氛下，在冰浴中冷却。滴加入三氯乙酰氯(15mL，0.14mol)，反应 物变成深色溶液。于0℃搅拌1/2小时。然后浓缩反应物，以除去 DCM，生成的DMF溶液用水稀释以沉淀产物。收集固体沉淀物，用 水洗涤，得到黑色固体。然后使固体溶于DCM并用盐水洗涤，经硫 酸镁干燥并浓缩，得到深黑色油状残留物。使残留物溶于DCM，加 入己烷直至溶液变得稍稍混浊。于室温下搅拌以沉淀3-[4-(7-[2-(三甲 基甲硅烷基)乙氧基]甲基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基)-1H-吡唑-1-基] 戊烷二腈，为白色针状晶体(22.7gm，85％)，LC/MS(M+H)+：408，1H NMR(DMSO-d6)δ 9.07(s，1H)，8.87(s，1H)，8.59(s，1H)，7.88(d，1H)， 7.19(d，1H)，5.75(s，2H)，5.30(m，1H)，3.62(t，2H)，3.40(m，4H)，0.91(t， 2H)，0.10(s，9H)。
步骤5：3-[4-(7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基)-1H-吡唑-1-基]戊烷二腈
于室温下，使3-[4-(7-[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基-7H-吡咯并 [2，3-d]嘧啶-4-基)-1H-吡唑-1-基]戊烷二腈(10.0g，0.0245mo1)溶于ACN (200mL，3.83mo1)和水(20g，1.1mol)。向其中加入四氟硼酸锂(23.0g， 0.245mol)得到混浊溶液。将反应物加热至回流，通过HPLC监测。加 热24小时后，使反应物冷却至室温，然后在冰浴中冷却。向其中缓慢 加入氢氧化铵(23mL，0.59mol)。使反应物温热至室温。搅拌18小时后， 反应用水稀释并真空浓缩，以除去ACN，得到沉淀物。收集固体，用水 洗涤并干燥，得到标题化合物，为灰白色固体(6.2gm，91％)，LC/MS (M+H)+：278，1H NMR(DMSO-d6)δ 8.9(s，1H)，8.72(s，1H)，8.43(s，1H)， 7.59(d，1H)，6.92(d，1H)，5.21(m，1H)，3.25(m，4H)。
实施例421：5-{2-氰基-1-[4-(7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基)-1H-吡唑-1- 基]乙基}-吡啶-2-甲腈三氟乙酸盐

步骤1：3-(6-氯代吡啶-3-基)-3-[4-(7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基)-1H-吡 唑-1-基]丙腈
将3-(6-氯代吡啶-3-基)-3-[4-(7-[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基 -7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基)-1H-吡唑-1-基]丙腈(通过实施例61中描述 的方法类似的方法制备)(0.070g，0.00014mol)在TFA(3.0mL，0.039 mol)和DCM(3.0mL，0.047mol)中于室温下搅拌1小时。真空除去溶 剂，使残留物溶于甲醇(4.0mL，0.099mol)和乙二胺(0.07mL，0.001 mol)。将该反应混合物于室温下搅拌过夜。真空除去溶剂，粗产物经 制备型HPLC纯化，用CAN:水梯度液洗脱，用氢氧化铵缓冲至pH＝10， 得到3-(6-氯代吡啶-3-基)-3-[4-(7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基)-1H-吡唑 -1-基]丙腈，为白色粉末(35mg，69％)，LCMS(M+1)+：350，1H NMR (DMSO-d6)δ 12.21(b，1H)，9.00(s，1H)，8.78(s，1H)，8.62(s，1H)，8.58 (s，1H)，8.00(m，1H)，7.70(m，2H)，7.00(s，1H)，6.22(m，1H)，3.90(m，1H)， 3.78(m，1H)
步骤2：5-2-氰基-1-[4-(7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基)-1H-吡唑-1-基]乙基 吡啶-2-甲腈三氟乙酸盐
将3-(6-氯代吡啶-3-基)-3-[4-(7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基)-1H-吡 唑-1-基]丙腈(0.025g，0.000071mol)和氰化锌(0.08g，0.0007mol)在 DMF(1.0mL，0.013mol)中的混合物用氮气脱气。向该混合物中加入 四(三苯膦)钯(0)(0.04g，0.00004mol)，得到的混合物用分子氮再次脱 气。将该反应混合物在密封管中，在微波(Personal Chemistry)中于170 ℃加热15分钟。冷却至室温后，过滤固体，用DMF洗涤，真空浓缩合 并的溶剂。残留物用己烷(3x)研磨，弃取己烷洗液。粗产物经制备型 HPLC纯化，用含0.2％ TFA的CAN:水梯度液洗脱，得到标题化合物， 为白色粉末(16mg，49.27％)，LCMS(M+1)+：341，1H NMR(DMSO-d6) δ 12.50(b，1H)，9.05(s，1H)，8，89(s，1H)，8，80(s，1H)，8.58(s，1H)，8.18(m，2H)， 7.78(s，1H)，7.05(s，1H)，6.20(m，1H)，3.90(m，1H)，3.77(m，1H)。
实施例428：4-[4-(7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基)-1H-吡唑-1-基]庚烷二 腈

步骤1：3-[4-(7-[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧 啶-4-基)-1H-吡唑-1-基]戊烷-1，5-二醇
将3-[4-(7-[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧 啶-4-基)-1H-吡唑-1-基]戊烷二酸二乙基酯(基本如实施例407中所述制 备)(0.80g，0.0016mol)溶于THF(40mL，0.49mol)并在氮气氛下，在冰 浴中冷却。向该混合物中缓慢加入1.0M四氢铝酸锂的THF(3.2mL)溶 液。将反应物搅拌1小时，用冰猝灭并分配于乙酸乙酯和1N HCl之间。 有机层用盐水洗涤，经硫酸镁干燥并浓缩，得到琥珀色油状物。产物 经FCC在硅胶上纯化，用乙酸乙酯:甲醇梯度液洗脱，得到3-[4-(7-[2-(三 甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基)-1H-吡唑-1-基] 戊烷-1，5-二醇，为澄清粘稠油状物(0.51gm，76％)，LC/MS(M+H)+：418， 1H NMR(DMSO-d6)δ，8.85(s，1H)，8.41(s，1H)，8.37(s，1H)，7.45(d，1H)， 6.83(d，1H)，5.73(s，2H)，4.91(m，1H)，3.75(m，2H)，3.59(m，2H)， 3.45(m，2H)，2.18(m，4H)，0.95(m，2H)，0.1(s，9H)。
步骤2：二甲烷磺酸3-[4-(7-[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基-7H-吡咯 并[2，3-d]嘧啶-4-基)-1H-吡唑-1-基]戊烷-1，5-二基酯
将3-[4-(7-[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧 啶-4-基)-1H-吡唑-1-基]戊烷-1，5-二醇(50mg，0.0001mol)在DCM(2 mL，0.03mol)中的混合物冷却至0℃。向该混合物中加入TEA(50μL， 0.0004mol)。将反应物搅拌15分钟。加入甲磺酰氯(23μL，0.00030 mol)，搅拌得到的混合物1小时。加入水，产物用乙酸乙酯提取。合并 的提取物用饱和的氯化钠洗涤，经硫酸镁干燥，过滤并浓缩，得到二 甲磺酸3-[4-(7-[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶 -4-基)-1H-吡唑-1-基]戊烷-1，5-二基酯(57mg，80％)，为油状物。MS(ES)： 574(M+1)。
步骤3：4-[4-(7-[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧 啶-4-基)-1H-吡唑-1-基]庚烷二腈
向二甲磺酸3-[4-(7-[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基-7H-吡咯并 [2，3-d]嘧啶-4-基)-1H-吡唑-1-基]戊烷-1，5-二基酯(57mg，0.000099mol) 在DMSO(1mL，0.01mol)中的混合物中加入氰化钠(10mg，0.0003 mol)，搅拌该混合物2小时。于60℃将该混合物加热1小时.加入水， 产物用乙酸乙酯提取。合并的提取物用饱和的氯化钠洗涤，经硫酸镁 干燥，过滤并浓缩，得到4-[4-(7-[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基-7H- 吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基)-1H-吡唑-1-基]庚烷二腈(40mg，90％)，为油状 物。MS(ES)：436(M+1)。
步骤4：4-[4-(7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基)-1H-吡唑-1-基]庚烷二腈
使用类似于实施例61用于除去SEM保护基团的方法，制备标题化 合物，为白色无定形固体(17mg，60％)1H NMR(400MHz，DMSO)：  8.75(s，1H)，8.65(s，1H)，8.4(s，1H)，7.6(d，1H)，7.0(d，1H)，4.5(m， 1H)，2.35(m，4H)，2.2(m，4H)。MS(ES)：306(M+1)。
实施例429：3-(5-溴代吡啶-3-基)-3-[4-(7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4- 基)-1H-吡唑-1-基]丙腈

步骤1：(2Z&E)-3-(5-溴代吡啶-3-基)丙烯腈

于0℃(水-冰浴，在氮气氛下)，向1.0M叔丁醇钾在THF(2.7mL) 中的混合物中滴加入在THF(4.0mL，0.049mol)中的氰基甲基膦酸二 乙基酯(0.48mL，0.0030mol)。使反应混合物升温至室温，然后冷却至 0℃，接着滴加入5-溴代烟醛(nicotinaldehyde)(0.5g，0.003mol)的THF (1.0mL，0.012mol)溶液。于室温下搅拌20小时后，反应混合物用水猝 灭，用乙酸乙酯提取。有机层用盐水洗涤，经无水硫酸镁干燥，过滤 并浓缩，得到粗产物，为深色油状物。粗产物经硅胶快速层析纯化， 使用乙酸乙酯-己烷3:7作为洗脱液，得到顺式和反式异构体(2)-3-(5-溴 代吡啶-3-基)丙烯腈的混合物，为灰白色固体(268mg，47.69％)。LCMS (M+1)+：209，211，1H NMR(400MHz，CDCl3)：δ .8.75(s，1H)，8.62(s，1H)， 7.90(s，1H)，7.40(d，1H)，6.00(d，1H)。
步骤2：3-(5-溴代吡啶-3-基)-3-[4-(7-[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基 -7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基)-1H-吡唑-1-基]丙腈
向在1.0mL无水CAN中的4-(1H-吡唑-4-基)-7-[2-(三甲基甲硅烷 基)乙氧基]甲基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶(0.200g，0.000634mol)中加入 DBU(0.10mL，0.00067mol)，接着加入在1.0mL ACN中的 (2Z&E)-3-(5-溴代吡啶-3-基)丙烯腈(0.234g，0.00112mol)。将该反应混 合物于67℃搅拌4小时。一旦冷却，使混合物分配于稀盐酸和乙酸乙 酯之间。有机层用饱和的氯化钠洗涤，经无水硫酸钠干燥并浓缩。粗 产物经硅胶快速层析纯化，使用乙酸乙酯:己烷(7:3)，得到3-(5-溴代吡 啶-3-基)-3-[4-(7-[2-(三甲基甲硅烷基)-乙氧基]-甲基-7H-吡咯并[2，3-d] 嘧啶-4-基)-1H-吡唑-1-基]丙腈，为灰白色固体(225mg，67.66％)。LCMS (M+1)+：524，526：1H NMR(400MHz，CDCl3)： 8.90(s，1H)，8.80(s， 1H)，8.70(s，1H)，8.42(s，1H)，8.40(s，1H)，8.00(s，1H)，7.50(d，1H)， 6.82(d，1H)，5.81(m，1H)，5.75(s，2H)，3.70(m，1H)，3.60(m，2H)，3.42(m， 1H)，1.00(m，2H)，0.08(s，9H)。
步骤3：3-(5-溴代吡啶-3-基)-3-[4-(7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基)-1H-吡 唑-1-基]丙腈
将3-(5-溴代吡啶-3-基)-3-[4-(7-[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基 -7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基)-1H-吡唑-1-基]丙腈(0.220g，0.000419mol) 在DCM(9.0mL，0.14mol)和TFA(9.0mL，0.12mol)中于室温下搅拌1 小时。浓缩反应物，得到残留物。使粗制中间体溶于甲醇(12mL，0.30 mol)和乙二胺(0.2mL，0.003mol)并于室温下搅拌过夜。真空浓缩反应 物，得到粗产物其经制备型HPLC纯化，用水:ACN梯度液(氢氧化铵 (pH＝10))洗脱，得到3-(5-溴代吡啶-3-基)-3-[4-(7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4- 基)-1H-吡唑-1-基]丙腈，为无定形白色粉末(118mg，71.36％)。LCMS (M+1)+：394，396，1H NMR(400MHz，DMSO-d6)：(bs，1H)，8.98(s， 1H)，7.0(s，1H)，6.50(m，2H)，8.50(s，1H)，8.10(s，1H)，7.80(s，1H)，6.98(s， 1H)，6.21(m，1H)，3.90(m，1H)，3.70(m，1H)。
实施例430：3-[4-(7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基)-1H-吡唑-1-基]戊烷-1，5- 二醇

使用类似于实施例61用于除去SEM保护基团的方法，但是使用 得自实施例428的3-[4-(7-[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基-7H-吡咯并 [2，3-d]嘧啶-4-基)-1H-吡唑-1-基]戊烷-1，5-二醇，制备标题化合物，为 白色无定形固体(25mg，70％)1H NMR(400MHz，DMSO)：δ.8.65(s， 1H)，8.6(s，1H)，8.25(s，1H)，7.6(d，1H)，6.0(d，1H)，4.6(m，1H)，3.3(m， 2H)，3.2(m，2H)，2.1(m，2H)，1.9_(m，2H)。MS(ES)：288(M+1)。
实施例431：5-(2-氰基-1-[4-(7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基)-1H-吡唑-1- 基]乙基)烟腈双(三氟乙酸盐)

将浆状物3-(5-溴代吡啶-3-基)-3-[4-(7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4- 基)-1H-吡唑-1-基]丙腈(0.050g，0.00013mol)(得自实施例429)、DMF (2.0mL，0.026mol)和氰化锌(0.1g，0.001mol)通过用氮气吹洗脱气。然 后加入四(三苯膦)钯(0)(0.07g，0.00006mol)，生成的浆状物再次用氮 气脱气。封闭反应，在微波(Personal Chemistry)中于170℃加热15分钟。 使反应物冷却，滤除固体。合并的DMF部分经真空浓缩。残留物用乙 酸乙酯-己烷2:8研磨，然后用乙醚研磨，以除去副产物。粗产物经制备 型HPLC纯化，用水：含0.2％ TFA的乙腈梯度液洗脱，得到外消旋标 题化合物(43mg，59.65％)。LCMS(M+1)+：341，1H NMR(400MHz， DMSO-d6)：(bs，1H)，9.10(s，1H)，8.90(s，1H)，8.80(s，1H)，8.50(s， 1H)，8.42(s，1H)，7.78(s，1H)，7.10(s，1H)，6.30(m，1H)，3.90(m，1H)， 3.70(m，1H)。
实施例431R和实施例431S
对映体R-5-(2-氰基-1-[4-(7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基)-1H-吡唑-1- 基]-乙基)烟腈和S-5-(2-氰基-1-[4-(7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基)-1H-吡 唑-1-基]-乙基)烟腈经手性柱HPLC分离。
实施例467：3-(3-氨基苯基)-3-[4-(7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基)-1H-吡 唑-1-基]丙腈双(三氟乙酸盐)

步骤1：3-(3-硝基苯基)-3-[4-(7-[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基-7H- 吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基)-1H-吡唑-1-基]丙腈
向在8.0mL无水CAN中的4-(1H-吡唑-4-基)-7-[2-(三甲基甲硅烷 基)乙氧基]甲基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶(0.500g，0.00158mol)加入DBU (0.24mL，0.0016mol)，接着加入在2.0mL ACN中的(2Z)-3-(3-硝基苯 基)丙烯腈(0.36g，0.0021mol)。将该反应混合物于67℃加热18小时。 使其冷却至室温，使混合物分配于稀盐酸和乙酸乙酯之间。有机层用 饱和的氯化钠洗涤，经无水硫酸镁干燥并浓缩。粗产物经硅胶快速层 析纯化，使用乙酸乙酯-己烷6:4洗脱，得到3-(3-硝基苯基)-3-[4-(7-[2-(三 甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基)-1H-吡唑-1-基] 丙腈，为深橙色油状物(688mg，88.65％)。LCMS(M+1)+：490
步骤2.3-(3-氨基苯基)-3-(4-7-[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]-7H-吡咯并 [2，3-d]嘧啶-4-基-1H-吡唑-1-基)丙腈
使3-(3-硝基苯基)-3-[4-(7-[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基-7H- 吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基)-1H-吡唑-1-基]丙腈(0.630g，0.00129mol)溶于 乙醇(65mL，1.1mol)，用氮气脱气，然后加入钯(0.55g，0.0052mol) (10％载于碳上)。用氮气使反应混合物脱气，然后在Parr瓶中，于50psi 氢气下震摇60分钟。过滤反应混合物并浓缩，得到3-(3-氨基苯 基)-3-(4-7-[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基 -1H-吡唑-1-基)丙腈，为无色油状物(550mg，95.92％)，LCMS (M+1)+＝460，
步骤3.3-(3-氨基苯基)-3-[4-(7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基)-1H-吡唑-1- 基]丙腈双(三氟乙酸盐)
使用类似于实施例61用于除去SEM保护基团的方法，制备标题化 合物，为白色无定形固体(18mg，38％)，LCMS(M+1)+＝329：1H NMR (DMSO-d6)δ 12.61(b，1H)，9.00(s，1H)，8.80(s，1H)，8.50(s，1H)，7.78 (m，1H)，7.25(m，1H)，7.18(m，1H)，6.85(m，2H)，6.02(m.1H)，3.78(m，1H)， 3.60(m，1H)。
实施例468：N-(3-(2-氰基-1-[4-(7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基)-1H-吡唑 -1-基]乙基)苯基)乙酰胺三氟乙酸盐

步骤1-(3-2-氰基-1-[4-(7-[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基-7H-吡咯 并[2，3-d]嘧啶-4-基)-1H-吡唑-1-基]乙基苯基)乙酰胺
向在无水DCM(1.0mL，0.016mol)中的3-(3-氨基苯 基)-3-[4-(7-[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4- 基)-1H-吡唑-1-基]丙腈(0.070g，0.00015mol)(得自实施例467)加入 TEA(0.042mL，0.00030mol)。将反应物在冰浴中冷却，加入乙酰氯 (0.016mL，0.00023mol)。将该反应混合物搅拌30分钟，用水稀释并用 乙酸乙酯(2x)提取。合并的有机层用饱和的氯化钠洗涤，经无水硫酸镁 干燥，过滤并真空浓缩，得到N-(3-2-氰基-1-[4-(7-[2-(三甲基甲硅烷基) 乙氧基]甲基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基)-1H-吡唑-1-基]乙基苯基)乙 酰胺，为无色油状物，(65mg，85.08％)，LCMS(M+1)+＝502.
步骤2 N-(3-2-氰基-1-[4-(7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基)-1H-吡唑-1-基]乙 基苯基)乙酰胺三氟乙酸盐
使用类似于实施例61用于除去SEM保护基团的方法，制备标题化 合物，为白色无定形固体(40mg，68.9％)，LCMS(M+1)+＝372，1H NMR (DMSO-d6)δ 12.61(b，1H)，9.05(s，1H)，8.79(s，1H)，8.44(s，1H)，7.85 (s，1H)，7.55(s，1H)，7.48(d，1H)，7.24(m，1H)，7.10(m，2H))，6.05(m，1H)， 3.70(m，1H)，3.48(m，1H)，1.98(s，3H)。
实施例470：4-(2-氰基-1-[4-(7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基)-1H-吡唑-1- 基]乙基)噻吩-2-甲腈三氟乙酸盐

步骤1 4-溴代-2-(二乙氧基甲基)噻吩
将4-溴代噻吩-2-甲醛(1.2g，0.0063mol)在乙醇(10mL，0.2mol)中 的混合物用氯化铵(0.42g，0.0078mol)和原甲酸乙酯(1.2g，0.0078mol) 处理。将该混合物于60℃搅拌2小时。反应用水猝灭，用乙酸乙酯提 取。合并的有机层用饱和的氯化钠洗涤，经硫酸镁干燥，过滤并浓缩， 得到4-溴代-2-(二乙氧基甲基)噻吩，为油状物(1.3g，81％)。1H NMR (400MHz，CDCl3)： 7.22(s，1H)，6.99(s，1H)，5.68(s，1H)，3.63(q， 4H)1.24(t，6H)。
步骤2 5-(二乙氧基甲基)基吩-3-甲醛
将4-溴代-2-(二乙氧基甲基)噻吩(500mg，0.002mol)的乙醚(5 mL，0.05mol)溶液于-78℃冷却。向该溶液中滴加入2.5M正丁基锂的 己烷(0.83mL)溶液。将该反应物于-78℃搅拌1小时。于-78℃向该反 应物中加入DMF(0.4g，0.006mol)，搅拌该混合物30分钟。反应用水 猝灭，用乙酸乙酯提取。合并的有机层用饱和的氯化钠洗涤，经硫酸 镁干燥，过滤并浓缩。粗残留物经快速柱层析纯化，得到5-(二乙氧基 甲基)噻吩-3-甲醛，为油状物(170mg，42.0％)。经1H NMR鉴定，形成 两种不同的区域异构体的醛且并未分离；(注意：NMR位移仅为主要异 构体的)1H NMR(400MHz，CDCl3)：(s，1H)，8.05，7.7(s，1H)， 7.45，7.15(s，1H)，5.7(s，1H)，3.65(m，2H)，1.25(m，2H)。
步骤3(2E)-3-[5-(二乙氧基甲基)-3-噻吩基]丙烯腈
向氰基甲基膦酸二乙基酯(100mg，0.0008mol)的THF(2mL，0.02 mol)的冷却至0℃的溶液中滴加入1.0M叔丁醇钾的THF(0.8mL)溶 液。移去水浴，使反应物温热至室温30分钟。使反应物冷却至0℃， 滴加入5-(二乙氧基甲基)噻吩-3-甲醛(170mg，0.00079mol)的THF(2 mL，0.02mol)溶液。将该反应物于室温下搅拌过夜。使反应物分配于 水和乙酸乙酯之间。合并的提取物用饱和的氯化钠洗涤，经硫酸镁干 燥，过滤并浓缩。粗残留物经快速硅胶柱层析纯化，用(乙酸乙酯:己 烷，1:5)洗脱，得到(2E)-3-[5-(二乙氧基甲基)-3-噻吩基]丙烯腈，为油状 物(160mg，84.9％)。1H NMR(300MHz，CDCl3)：(m，3H)，5.65 (m1H)，4.2(m，1H)，3.65(m，4H)，1.25(m，6H)。
步骤4 3-[5-(二乙氧基甲基)-3-噻吩基]-3-[4-(7-[2-(三甲基甲硅烷基)乙 氧基]甲基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基)-1H-吡唑-1-基]丙腈
向4-(1H-吡唑-4-基)-7-[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基-7H-吡咯 并[2，3-d]嘧啶(200mg，0.0007mol)的ACN(2mL，0.04mol)溶液和 (2E)-3-[5-(二乙氧基甲基)-3-噻吩基]丙烯腈(160mg，0.00067mol)(区 域异构体的混合物)中加入DBU(80μL，0.0005mol)。将该反应物搅拌 过夜，然后加入水，产物用乙酸乙酯提取。合并的提取物用饱和的氯 化钠洗涤，经硫酸镁干燥，过滤并浓缩。粗残留物经快速硅胶柱层析 纯化，用(50％ EtOAc/己烷)洗脱，得到3-[5-(二乙氧基甲基)-3-噻吩 基]-3-[4-(7-[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4- 基)-1H-吡唑-1-基]丙腈(160mg，43％)。1H NMR(400MHz，CDCl3)：δ .8.92(s，1H)，8.41(s，1H)，8.29(b，1H)，7.45(d，1H)，7.41(d，1H)，7.15(s， 1H)，7.05(d，1H)，6.82(m，1H)，5.74(d，2H)，3.74(m，2H)，3.71(m，8H)， 3.59(m，1H)，1.32(m，4H)，0.95(m，2H)，-0.08(s，9H)；MS(ES)：553 (M+1)。
骤5 3-(5-甲酰基-3-噻吩基)-3-[4-(7-[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲 基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基)-1H-吡唑-1-基]丙腈
将3-[5-(二乙氧基甲基)-3-噻吩基]-3-[4-(7-[2-(三甲基甲硅烷基)乙 氧基]甲基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基)-1H-吡唑-1-基]丙腈(70mg， 0.0001mol)的THF(1mL，0.01mol)溶液用1M HCl在水(400μL)中进 行处理。将该反应物于室温下搅拌。加入水，产物用乙酸乙酯提取。 合并的提取物用饱和的氯化钠洗涤，经硫酸镁干燥，过滤并浓缩，得 到3-(5-甲酰基-3-噻吩基)-3-[4-(7-[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基 -7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基)-1H-吡唑-1-基]丙腈，为半固体残留物(60 mg，98％)。1H NMR(400MHz，CDCl3)：(s，1H)，8.89(s，1H)，8.44 (m，2H)，7.46(1H)，5.73(s，2H)，4.15(m，1H)，3.73-3.43(m，3H)，1.35(m， 1H)，1.01(m，2H)，0.03(s，9H)；MS(ES)：479(M+1)。
步骤6：5-[(E)-(羟基亚氨基)甲基]-3-噻吩基-3-[4-(7-[2-(三甲基甲硅 烷基)乙氧基]甲基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基)-1H-吡唑-1-基]丙腈
将3-(5-甲酰基-3-噻吩基)-3-[4-(7-[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲 基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基)-1H-吡唑-1-基]丙腈(65mg，0.00014mol) 的甲醇(2mL，0.05mol)溶液用羟基胺盐酸盐(11mg，0.00016mol)和碳 酸氢钾(23mg，0.00023mol)处理。将该反应物于室温下搅拌4小时。加 入水和产物用乙酸乙酯提取。合并的提取物用饱和的氯化钠洗涤，经 硫酸镁干燥，过滤并浓缩，得到3-5-[(E)-(羟基亚氨基)甲基]-3-噻吩基 -3-[4-(7-[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4- 基)-1H-吡唑-1-基]丙腈，为半固体油状物(60mg，89.5％)。(粗产物包含 肟的两种异构体以及噻吩的两种区域异构体)。MS(ES)：494(M+1)。
步骤7：4-(2-氰基-1-[4-(7-[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基-7H-吡咯并 [2，3-d]嘧啶-4-基)-1H-吡唑-1-基]乙基)噻吩-2-甲腈
向3-5-[(E)-(羟基亚氨基)甲基]-3-噻吩基-3-[4-(7-[2-(三甲基甲硅烷 基)乙氧基]甲基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基)-1H-吡唑-1-基]丙腈(70 mg，0.0001mol)在吡啶(1mL，0.01mol)中的混合物中加入甲磺酰氯 (100μL，0.001mol)。将该混合物于60℃搅拌2小时。加入水，产物用 乙酸乙酯提取。合并的提取物用0.1N HCl、盐水洗涤，经硫酸镁干燥， 过滤并浓缩，得到4-(2-氰基-1-[4-(7-[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基 -7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基)-1H-吡唑-1-基]乙基)噻吩-2-甲腈，为粗产 物(30mg，44％)。MS(ES)：476(M+1)。
步骤8：4-(2-氰基-1-[4-(7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基)-1H-吡唑-1-基]乙 基)噻吩-2-甲腈三氟乙酸盐
将4-(2-氰基-1-[4-(7-[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基-7H-吡咯并 [2，3-d]嘧啶-4-基)-1H-吡唑-1-基]乙基)噻吩-2-甲腈(50mg，0.0001mol) 在DCM(2mL，0.03mol)和TFA(1mL，0.01mol)中的混合物搅拌1小 时。起始原料被消耗，形成所需甲基羟基化合物。真空浓缩混合物， 以除去TFA。使粗制中间体溶于甲醇(3mL，0.07mol)并用乙二胺(1 mL，0.01mol)处理。将该混合物搅拌过夜并真空浓缩。产物通过制备 型HPLC纯化，用ACN：含0.2％ TFA的水洗脱，得到两种区域异构体， 标题化合物为无定形白色固体(30mg，60％)。
1H NMR(500MHz，DMSO)：(s，1H)，8.76(s，1H)，8.48(s，1H)， 8.06(s，1H)，8.04(s，1H)，7.70(d，1H)，7.05(d，1H)，6.25(m，1H)， 3.80-3.60(m，2H)；MS(ES)：346(M+1)。
实施例471：5-(2-氰基-1-[4-(7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基)-1H-吡唑-1- 基]乙基)噻吩-2-甲腈三氟乙酸盐

从实施例470化合物分离第二种区域异构体，分离标题化合物， 为无定形白色固体(4mg，8％)。1H NMR(500MHz，DMSO)：(s， 1H0，8.75(s，1H)，8.50(s，1H)，7.95(s，1H)，7.65(s，1H)，7.45(s，1H)，7.0 (d，1H)，6.45(m，1H)，3.8(dd，2H)；MS(ES)：346(M+1)。
实施例472：3-[3-(吗啉-4-基羰基)苯基]-3-[4-(7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶 -4-基)-1H-吡唑-1-基]丙腈三氟乙酸盐

步骤1：3-(2-氰基-1-[4-(7-[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基-7H-吡咯并 [2，3-d]嘧啶-4-基)-1H-吡唑-1-基]乙基)苯甲酸
向3-2-氰基-1-[4-(7-[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基-7H-吡咯并 [2，3-d]嘧啶-4-基)-1H-吡唑-1-基]乙基苯甲酸甲基酯(50mg，0.0001mol) (如在实施例61中制备)的甲醇(2mL，0.05mol)溶液中缓慢加入在水(1 mL，0.06mol)中的氢氧化锂(1mg，0.0001mol)。加入水，也加入一些 1N HCl，直至溶液稍呈酸性。水层用乙酸乙酯提取。合并的提取物经 硫酸镁干燥，过滤并浓缩，得到3-(2-氰基-1-[4-(7-[2-(三甲基甲硅烷基)- 乙氧基]甲基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基)-1H-吡唑-1-基]乙基)苯甲酸， 为粗残留物(35mg，72.0％)。MS(ES)：489(M+1)。
步骤2：3-[3-(吗啉-1-基羰基)苯基]-3-[4-(7-{[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧 基]甲基}-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基)-1H-吡唑-1-基]丙腈
向3-(2-氰基-1-[4-(7-[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基-7H-吡咯并 [2，3-d]嘧啶-4-基)-1H-吡唑-1-基]乙基)苯甲酸(40mg，0.00008mol)的 DMF(1mL，0.01mol)溶液中加入N，N，N′，N′-四甲基-O-(7-氮杂苯并三 唑-1-基)脲鎓六氟磷酸盐(36mg，0.000095mol)和DIPEA(30μL，0.0002 mol)。将反应物搅拌10分钟，然后加入吗啉(10mg，0.00012mol)，将 得到的混合物搅拌3小时。加入水，产物用乙酸乙酯提取。合并的有 机提取物用1N HCl、盐水洗涤，经硫酸镁干燥，过滤并浓缩，得到 3-[3-(吗啉-1-基羰基)苯基]-3-[4-(7-{[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲 基}-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基)-1H-吡唑-1-基]丙腈，为粗制(40mg， 88％)产物。MS(ES)：558(M+1)。
步骤3：3-[3-(吗啉-4-基羰基)苯基]-3-[4-(7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4- 基)-1H-吡唑-1-基]丙腈三氟乙酸盐
使用类似于实施例61用于除去SEM保护基团的方法，分离标题化 合物，为无定形白色固体(18mg，50％)。1H NMR(400MHz，DMSO)： (s，1H)，8.75(s，1H)，8.44(s，1H)，7.85(b，1H)，7.665(s，1H)， 7.55-7.35(m，3H)，7.15(s，1H)，6.15(m，1H)，3.85(m，1H)，3.65-3.4(m， 6H)，3.25(m，2H)，3.05(m，1H)；MS(ES)：428(M+1)。
实施例482：3-(5-苯基吡啶-3-基)-3-[4-(7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4- 基)-1H-吡唑-1-基]丙腈三氟乙酸盐

步骤1：3-(5-苯基吡啶-3-基)-3-[4-(7-[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基 -7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基)-1H-吡唑-1-基]丙腈
向3-(5-溴代吡啶-3-基)-3-[4-(7-[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基 -7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基)-1H-吡唑-1-基]丙腈(得自实施例429)(60 mg，0.0001mol)的1，4-二氧六环(2mL，0.02mol)溶液中加入苯基硼酸 (15mg，0.00012mol)和饱和碳酸氢钠(30mg，0.0003mol)的水(0.5mL， 0.03mol)溶液。用氮气使生成的混合物脱气。加入四(三苯膦)钯(0)(10 mg，0.00001mol)，再次向反应物中鼓泡通入氮气。将反应物于80℃ 油浴中加热1小时。加入水，产物用乙酸乙酯提取。合并的提取物用 饱和的氯化钠洗涤，经硫酸镁干燥，过滤并浓缩，得到3-(5-苯基吡啶 -3-基)-3-[4-(7-[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶 -4-基)-1H-吡唑-1-基]丙腈(50mg，80％)，为粗制产物。MS(ES)：522 (M+1)。
步骤2：3-(5-苯基吡啶-3-基)-3-[4-(7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基)-1H-吡 唑-1-基]丙腈三氟乙酸盐
使用类似于实施例61用于除去SEM保护基团的方法，分离标题化 合物，为无定形白色固体(20mg，40％)。1HNMR(400MHz，DMSO)： (s，1H)，8.85(s，1H)，8.80(s，1H)，8.65(s，1H)，8.45(s，1H)，8.22 (s，1H)，7.85(b，1H)，7.67(m，2H)，7.45(m2H)，7.43(m，1H)，7.15(s，1H)， 6.25(m1H)，3.95(dd，1H)，3.80(dd，1H)，3.0(m，1H)；MS(ES)：392.1 (M+1)
实施例486：3-(5-乙炔基吡啶-3-基)-3-[4-(7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4- 基)-1H-吡唑-1-基]丙腈三氟乙酸盐

步骤1：3-[4-(7-[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧 啶-4-基)-1H-吡唑-1-基]-3-5-[(三甲基甲硅烷基)乙烷基]吡啶-3-基丙腈
将3-(5-溴代吡啶-3-基)-3-[4-(7-[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基 -7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基)-1H-吡唑-1-基]丙腈(得自实施例429) (0.080g，0.00015mol)的TEA(0.300mL，0.00215mol)溶液用氮气脱 气，然后加入碘化亚铜(I)(0.005g，0.00003mol)、(三甲基甲硅烷基) 乙炔和双(三苯膦)二氯化钯(II)。将反应混合物密封于管中并于室温 下搅拌过夜。使生成的黑色溶液分配于水(10mL)和乙醚之间。有机层 用饱和的氯化钠洗涤，经硫酸镁干燥并真空浓缩，得到3-[4-(7-[2-(三甲 基甲硅烷基)乙氧基]甲基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基)-1H-吡唑-1- 基]-3-5-[(三甲基甲硅烷基)乙炔基]吡啶-3-基丙腈，为黄色油状物(60 mg，72.6)，LCMS(M+1)+：542)。
步骤2：3-(5-乙炔基吡啶-3-基)-3-[4-(7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基)-1H- 吡唑-1-基]丙腈三氟乙酸盐
使3-[4-(7-[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧 啶-4-基)-1H-吡唑-1-基]-3-5-[(三甲基甲硅烷基)乙炔基]吡啶-3-基丙腈 (0.050g，0.000092mol)溶于DCM(5.0mL，0.078mol)和TFA(2.0mL， 0.026mol)。将该反应混合物于室温下搅拌90分钟并真空浓缩。使干燥 的残留物溶于甲醇，在冰浴中冷却，加入氢氧化钾(0.482g，0.00859mol) 的甲醇(10mL，0.2mol)溶液。将反应溶液搅拌30分钟，浓缩，粗产物 经制备型HPLC纯化，用水：含0.2％ TFA的ACN梯度液洗脱，得到标 题化合物，为白色无定形固体(15mg，35.85％)。LCMS(M+1)+：340，1H NMR(400MHz，DMSO-d6)：(bs，1H)，9.02(s，1H)，8.80(s，1H)， 8.70(m，2H)，8.48(s，1H)，8.00(s，1H)，7.80(d，1H)，7.15(d，1H)，6.20(m， 1H)，4.82(s，1H)，3.90(m，1H)，3.70(m，1H)。
实施例488：3-[5-(苯硫基)吡啶-3-基]-3-[4-(7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4- 基)-1H-吡唑-1-基]丙腈三氟乙酸盐

步骤1：3-[5-(苯硫基)吡啶-3-基]-3-[4-(7-[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基] 甲基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基)-1H-吡唑-1-基]丙腈
向得自实施例429步骤2的3-(5-溴代吡啶-3-基)-3-[4-(7-[2-(三甲基 甲硅烷基)乙氧基]甲基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基)-1H-吡唑-1-基]丙 腈(0.130g，0.000248mol)在无水1，4-二氧六环(1.60mL，0.0205mol)的 溶液中加入DIPEA(0.085mL，0.00049mol)。溶液用氮气脱气，接着加 入(9，9-二甲基-9H-氧杂蒽-4，5-二基)双(二苯基膦)(0.007g，0.00001 mol)、双(二亚苄基丙酮)钯(0)(0.0036g，0.0000062mol)和苯硫酚(0.025 mL，0.00025mol)。将该溶液再次用氮气脱气。反应混合物在密封管中 加热至回流3小时。反应混合物用乙酸乙酯稀释，用水(2X)、盐水(1X) 洗涤，经硫酸镁干燥，过滤和真空蒸发溶剂。粗产物用己烷-乙酸乙酯 9:1研磨，得到3-[5-(苯硫基)吡啶-3-基]-3-[4-(7-[2-(三甲基甲硅烷基)乙 氧基]甲基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基)-1H-吡唑-1-基]丙腈(110mg， 80％)。LC/MS(M+H)+：m/z＝554.2.
步骤2：3-[5-(苯硫基)吡啶-3-基]-3-[4-(7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基)-1H- 吡唑-1-基]丙腈三氟乙酸盐
使3-[5-(苯硫基)吡啶-3-基]-3-[4-(7-[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基] 甲基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基)-1H-吡唑-1-基]丙腈(0.110g， 0.000199mol)溶于DCM(5.0mL，0.078mol)和TFA(2.0mL，0.026 mol)，将该混合物于室温下搅拌1小时。真空除去溶剂，使得到的残留 物溶于甲醇(5.0mL，0.12mol)，加入乙二胺(0.1mL，0.002mol)。将该 反应混合物于室温下搅拌过夜。真空浓缩该混合物，粗产物经LCMS 纯化(pH＝2)，得到标题化合物，为无定形固体(62mg，58.07％)。1H NMR (400MHz，DMSO)：δ.12.80(s)，9.10(s)8.87(d)，8.60(s)，8.50(s)，8.43 (s)，7.82(s)，7.78(m)，7.39(m)，7.25(m)，7.18(d)，6.20(m)，3.84(m)， 3.70(m)。LC/MS(M+H)+：m/z＝424.15
实施例491：3-(5-吗啉-4-基吡啶-3-基)-3-[4-(7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4- 基)-1H-吡唑-1-基]丙腈

步骤1：4-(5-溴代吡啶-3-基)吗啉
向[3，5-二溴代吡啶(1000mg，0.004mol)的1，4-二氧六环(8mL，0.1 mol)溶液中加入吗啉(400mg，0.004mol)和叔丁醇钠(400mg，0.004 mol)。反应用氮气脱气。加入四(三苯膦)钯(0)(200mg，0.0002mol)， 鼓泡通入氮气数分钟。将该混合物于80℃加热过夜。使反应物冷却至 室温，然后分配于水和乙酸乙酯之间。有机层用饱和的氯化钠洗涤， 经硫酸镁干燥，过滤并浓缩，得到粗残留物。粗产物经FCC在硅胶上 纯化，用1:1，EtOAC:己烷洗脱，得到4-(5-溴代吡啶-3-基)吗啉，为粘 稠油状物(400mg，40％)。1H NMR(400MHz，CDCl3)：δ .8.2(s，1H)， 8.1(s，1H)，7.2(s，1H)，3.8(m，4H)，3.2(m，4H)。
步骤2：5-吗啉-4-基烟醛(nicotinaldehyde)
将冷却至-78℃的4-(5-溴代吡啶-3-基)吗啉(100mg，0.0004mol) 的乙醚(2mL，0.02mol)溶液用2.5M正丁基锂在己烷(0.2mL)中进行 处理并搅拌1小时。向其中混合物滴加入DMF(0.5mL，0.006mol)。反 应用水猝灭，用乙酸乙酯提取。合并的有机层用饱和的氯化钠洗涤， 经硫酸镁干燥，过滤并浓缩，得到5-吗啉-4-基烟醛(70mg，90％)，为 粗制产物。1H MR(400MHz，CDCl3)： 10.1(s，1H)，8.0(s，2H)，7.6 (s，1H)，3.8(m，4H)，3.2(m，4H)。
步骤3：(2E)-3-(5-吗啉-4-基吡啶-3-基)丙烯腈
向冷却至0℃的氰基甲基膦酸二乙基酯(70mg，0.0004mol)的 THF(2mL，0.02mol)溶液中滴加入1.0M叔丁醇钾的THF(0.50mL) 溶液。移去冷浴，用30分钟使反应物温热至室温。使反应物冷却至0℃， 滴加入5-吗啉-4-基烟醛(70mg，0.0004mol)的THF(2mL，0.02mol)溶 液。将该反应物于室温下搅拌4小时，用水猝灭，用乙酸乙酯提取。 合并的有机层用饱和的氯化钠洗涤，经硫酸镁干燥，过滤并浓缩，得 到(2E)-3-(5-吗啉-4-基吡啶-3-基)丙烯腈(75mg，100％)，为异构体的混 合物；LC/MS：216(M+1)。
步骤4：3-(5-吗啉-4-基吡啶-3-基)-3-[4-(7-[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基] 甲基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基)-1H-吡唑-1-基]丙腈
向4-(1H-吡唑-4-基)-7-[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基-7H-吡咯 并[2，3-d]嘧啶(120mg，0.00038mol)的ACN(10mL，0.2mol)溶液和 (2E)-3-(5-吗啉-4-基吡啶-3-基)丙烯腈(70mg，0.0003mol)(异构体的混 合物)中加入DBU(50μL，0.0003mol)，将得到的混合物搅拌过夜。使 混合物分配于水和乙酸乙酯之间。合并的有机层用饱和的氯化钠洗 涤，经硫酸镁干燥，过滤并浓缩，得到3-(5-吗啉-4-基吡啶-3- 基)-3-[4-(7-[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基-7H-吡吡咯并[2，3-d]嘧啶-4- 基)-1H-吡唑-1-基]丙腈(200mg，100％)，为粗制产物；L/MS＝531 (M+1)。
步骤5：3-(5-吗啉-4-基吡啶-3-基)-3-[4-(7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4- 基)-1H-吡唑-1-基]丙腈
使用类似于实施例61用于除去SEM保护基团的方法，分离标题化 合物，为无定形白色固体(18mg，50％)。1HNMR(400MHz，DMSO)： (s，1H)，8.6(s，1H)，8.4(s，1H)，8.2(s，1H)，8.0(s，1H)，7.6(d， 1H)，7.4(m，1H)，6.9(d，1H)，6(m，1H)，3.8(dd，1H)，3.7(m，4H)，3.6(dd， 1H)，3.1(m，4H)；LC/MS：401(M+1)。
实施例496：3-[5-(苯基亚磺酰基)吡啶-3-基]-3-[4-(7H-吡咯并[2，3-d] 嘧啶-4-基)-1H-吡唑-1-基]丙腈，
和
实施例497：3-[5-(苯基磺酰基)吡啶-3-基]-3-[4-(7H-吡咯并[2，3-d]嘧 啶-4-基)-1H-吡唑-1-基]丙腈

向得自实施例488，步骤2的3-[5-(苯硫基)吡啶-3-基]-3-[4-(7H-吡 咯并[2，3-d]嘧啶-4-基)-1H-吡唑-1-基]丙腈三氟乙酸盐(0.050g， 0.000093mol)的THF(1.0mL，0.012mol)溶液中加入在冰浴中的 MCPBA(0.022g，0.00013mol)(0.031g，77％在水中)。将该反应混合 物于室温下搅拌1小时。粗产物经LCMS纯化(pH＝10)。收集两个峰：
# 1-得到3-[5-(苯基亚磺酰基)吡啶-3-基]-3-[4-(7H-吡咯并[2，3-d] 嘧啶-4-基)-1H-吡唑-1-基]丙腈(8mg，19.57％)。1H NMR(400MHz， DMSO)：δ .12.1(s)，8.89(d)，8.80(d)，8.70(s)，8.62(s)，8.40(s)，8.19 (s)，7.70(m)，7.58(s)，7.42(m)，6.90(s)，6.20(m)，3.82(m)，3.65(m)。 LC/MS(M+H)+：m/z＝440.0
# 2-得到3-[5-(苯基磺酰基)吡啶-3-基]-3-[4-(7H-吡咯并[2，3-d]嘧 啶-4-基)-1H-吡唑-1-基]丙腈(21mg，50％)。1H NMR(400MHz， DMSO)：δ .12.1(s)，9.10(s)，8.86(m)，8.61(s)，8.40(m)，7.98(m)，7.62 (m)，7.58(m)，6.90(s)，6.20(m)，3.82(m)，3.65(m)。LC/MS(M+H)+：m/z ＝456.0
实施例498：3-[4-(7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基)-1H-吡唑-1-基]戊-1-醇

步骤1：3-[4-(7-[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧 啶-4-基)-1H-吡唑-1-基]戊醛
向4-(1H-吡唑-4-基)-7-[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基-7H-吡咯 并[2，3-d]嘧啶(100mg，0.0003mol)的ACN(2mL，0.04mol)和DBU(50 μL，0.0003mol)溶液中滴加入在1ml ACN中的(2E)-戊-2-烯醛 (pent-2-enal)(4.0E1mg，0.00048mol)。将反应物搅拌1小时，然后加入 水，生成的混合物用乙酸乙酯提取。合并的有机层用饱和的氯化钠洗 涤，经硫酸镁干燥，过滤并浓缩，得到粗制物，为水合产物形式。LC/MS (M+H)+：m/z＝400.
步骤2：3-[4-(7-[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧 啶-4-基)-1H-吡唑-1-基]戊-1-醇
将[3-[4-(7-[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧 啶-4-基)-1H-吡唑-1-基]戊醛(50mg，0.0001mol)在甲醇(2mL，0.05mol) 中的混合物用四氢硼酸钠(8mg，0.0002mol)处理。将该混合物于室温 下搅拌1小时，然后加入水，产物用乙酸乙酯提取。合并的有机层用 饱和氯化钠洗涤，经硫酸镁干燥，过滤并浓缩，得到所需产物，为油 状物。LC/MS(M+H)+：m/z＝402.
步骤3：
使用类似于实施例61用于除去SEM保护基团的方法，分离标题化 合物，为无定形白色固体(6mg，20％)。1HNMR(400MHz，DMSO)：δ .8.65(d，1H)，8.60(d，1H)，7.55(s，1H)，6.95(s，1H)，4.50(b，1H)，4.4 (m，1H)，3.4(m，1H)，3.2(m，1H)，2.1(m，1H)，1.8-2.0(m，3H)，0.7(t， 3H)；LC/MS(M+H)+：m/z＝272.
实施例499：3-[4-(7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基)-1H-吡唑-1-基]戊基碳酸 甲基酯

步骤1：3-[4-(7-[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧 啶-4-基)-1H-吡唑-1-基]戊基碳酸甲基酯
向得自实施例498步骤2的[3-[4-(7-[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基] 甲基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基)-1H-吡唑-1-基]戊-1-醇(50mg，0.0001 mol)的吡啶(1mL，0.01mol)溶液中加入氯代甲酸甲酯(30μL，0.0003 mol)。将反应物搅拌3小时，加入水，产物用乙酸乙酯提取。合并的有 机层用1N HCl、盐水洗涤，经硫酸镁干燥，过滤并浓缩，得到 3-[4-(7-[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4- 基)-1H-吡唑-1-基]戊基碳酸甲基酯，为半固体残留物(30mg，50％)。 LC/MS(M+H)+：m/z＝460.
步骤2：
使用类似于实施例61用于除去SEM保护基团的方法，分离标题化 合物，为无定形白色固体(8mg，20％)。1HNMR(400MHz，DMSO)：δ .12.0(b，1H)，8.65(d，1H)，8.35(s，1H)，7.65(b，1H)，7.600(s，1H)，7.0(s， 1H)，4.4(m，1H)，4.0(m，1H)，3.8(m，1H)，3.6(s，3H)，2.1(m，1H)，2.2 (m，1H)，1.95(m，2H)，0.75(t，3H)；LC/MS(M+H)+：m/z＝330.
实施例500(a)：(1E)-3-[4-(7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基)-1H-吡唑-1-基] 戊醛肟

步骤1：(1E)-3-[4-(7-[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基-7H-吡咯并 [2，3-d]嘧啶-4-基)-1H-吡唑-1-基]戊醛肟
向得自实施例498，步骤2的3-[4-(7-[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基] 甲基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基)-1H-吡唑-1-基]戊醛(60mg，0.0002 mol)的甲醇(2mL，0.05mol)溶液中加入羟基胺盐酸盐(16mg，0.00022 mol)和碳酸氢钾(22mg，0.00022mol)。将该反应物于室温下搅拌2小 时，加入水，产物用乙酸乙酯提取。合并的提取物用饱和的氯化钠洗 涤，经硫酸镁干燥，过滤并浓缩，得到(1E)-3-[4-(7-[2-(三甲基甲硅烷 基)乙氧基]甲基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基)-1H-吡唑-1-基]戊醛肟，为 半固体残留物(50mg，80％)。LC/MS(M+H)+：m/z＝415.
骤2：
使用类似于实施例61用于除去SEM保护基团的方法，分离标题化 合物，为无定形白色固体.1H NMR(400MHz，DMSO)： 12.0(b， 1H)，8.6(m，2H)，8.2(m，1H)，7.5(d，1H)，7.1 and 6.5(t，1H)，4.6(m，1H)， 4.4(m，1H)，2.6-2.8(m，2H)，1.8(m，2H)，0.65(t，3H)；LC/MS(M+H)+： m/z＝285.
实施例501(a)：(1E)-3-[4-(7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基)-1H-吡唑-1-基] 戊醛O-甲基肟，
和
实施例502(a)：(1Z)-3-[4-(7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基)-1H-吡唑-1-基] 戊醛O-甲基肟

步骤1：(1E)-3-[4-(7-[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基-7H-吡咯并 [2，3-d]嘧啶-4-基)-1H-吡唑-1-基]戊醛O-甲基肟
和
(1Z)-3-[4-(7-[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶 -4-基)-1H-吡唑-1-基]戊醛O-甲基肟
向3-[4-(7-[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧 啶-4-基)-1H-吡唑-1-基]戊醛(70mg，0.0002mol)的甲醇(2mL，0.05mol) 溶液中加入甲氧基胺盐酸盐(19mg，0.00022mol)和碳酸氢钾(22mg， 0.00022mol)。将该反应物于室温下搅拌2小时，加入水，产物用乙酸 乙酯提取。合并的提取物用饱和的氯化钠洗涤，经硫酸镁干燥，过滤 并浓缩，得到3-[4-(7-[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基-7H-吡咯并 [2，3-d]嘧啶-4-基)-1H-吡唑-1-基]戊醛O-甲基肟，为异构体的混合物(70 mg，90％)粗制产物。LC/MS(M+H)+：m/z＝429.
骤2：
使用类似于实施例61用于除去SEM保护基团的方法，分离标题化 合物，为无定形白色固体(4mg，25％)。异构体1，1H NMR(400MHz， DMSO)：(s，2H)，8.3(s，1H)，7.6(s，1H)，7.3(t，1H)，7.0(s，1H)， 4.6(m，1H)，3.3(s，3H)，2.8(m，2H)，1.9(m，2H)，0.8(t，3H)；LC/S (M+H)+：m/z＝299。异构体2(3mg，22％)，1H NMR(400MHz， DMSO)：  8.7(s，2H)，8.3(s，1H)，7.6(s，1H)，7.0(s，1H)，6.7(t，1H)， 4.5(m，1H)，3.3(s，3H)，2.8-3.0(m，2H)，1.9(m，2H)，0.8(t，3H)；LC/MS (M+H)+：m/z＝299.
实施例503：4-[1-(4，4-二溴代-1-乙基丁-3-烯-1-基)-1H-吡唑-4- 基]-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶三氟乙酸盐

步骤1：4-[1-(4，4-二溴代-1-乙基丁-3-烯-1-基)-1H-吡唑-4-基]-7-[2-(三 甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶
向冷却至0℃的3-[4-(7-[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基-7H-吡 咯并[2，3-d]嘧啶-4-基)-1H-吡唑-1-基]戊醛(300mg，0.0008mol)的DCM (4mL，0.06mol)溶液中加入三苯膦(800mg，0.003mol)和四溴化碳(500 mg，0.002mol)。将该反应物于0℃搅拌10分钟，加入水，用乙酸乙酯 提取。合并的有机提取物用饱和的氯化钠洗涤，经硫酸镁干燥，过滤 并浓缩。粗产物经prep LC-MS纯化(ACN，水，NH4OH)，得到4-[1-(4，4- 二溴代-1-乙基丁-3-烯-1-基)-1H-吡唑-4-基]-7-[2-(三甲基甲硅烷基)乙 氧基]甲基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶，为无定形固体(50mg，10％)。1H NMR(400MHz，CDCl3)：δ .8.9(s，2H)，8.4(s，1H)，8.3(s，1H)，7.4(m， 1H)，7.3(s，1H)，6.9(m，1H)，6.4(m，1H)，5.7(s，2H)，4.2(m，1H)，3.6(m， 2H)，2.8(m，2H)，2.1(m，1H)，2.0(m，1H)，1.0(m，5H)，LC/MS(M+H)+： m/z＝556
步骤2：
使用类似于实施例61用于除去SEM保护基团的方法，分离标题化 合物，为无定形白色固体(8mg，40％)。1HNMR(400MHz，DMSO)：δ .8.8(s，2H)，8.4(s，1H)，7.7(b，1H)，7.2(b，1H)，6.5(t，1H)，4.4(m，1H)， 2.6(m，2H)，1.8(m，2H)，0.8(t，3H)；LC/MS(M+H)+：m/z＝：426.
实施例506：4-[1-(1-乙基丁-3-炔-1-基)-1H-吡唑-4-基]-7H-吡咯并 [2，3-d]嘧啶三氟乙酸盐

步骤1：4-[1-(1-乙基丁-3-炔-1-基)-1H-吡唑-4-基]-7-[2-(三甲基甲硅烷 基)乙氧基]甲基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶
于-78℃，将4-[1-(4，4-二溴代-1-乙基丁-3-烯-1-基)-1H-吡唑-4- 基]-7-[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶(20mg， 0.00004mol)(得自实施例503步骤1)的THF(1mL，0.01mol)用2.5M 正丁基锂在己烷(0.032mL)中处理。于-78℃搅拌该混合物1小时，然 后于室温下搅拌1小时。反应用水(1mL，0.06mol)和1N HCl猝灭。使 反应物分配于水和乙酸乙酯之间。有机提取物用饱和的氯化钠洗涤， 经硫酸镁干燥，过滤并浓缩，得到4-[1-(1-乙基丁-3-炔-1-基)-1H-吡唑 -4-基]-7-[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶，为半 固体(12mg，80％)。LC/MS(M+H)+：m/z＝396.
步骤2：
使用类似于实施例61用于除去SEM保护基团的方法，分离标题化 合物，为无定形白色固体(4mg，30％)。1HNMR(400MHz，DMSO)：δ .12.2(b，1H)，8.8(s，2H)，8.4(s，1H)，7.6(s，1H)，7.1(s，1H)，4.4(m， 1H)，2.8(m，3H)，1.9(m，2H)，0.8(t，3H)；LC/MS(M+H)+：m/z＝266.
实施例516：(R)-3-[3-(乙基磺酰基)苯基]-3-[4-(7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶 -4-基)-1H-吡唑-1-基]丙腈，
和
(S)-3-[3-(乙基磺酰基)苯基]-3-[4-(7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基)-1H-吡 唑-1-基]丙腈

步骤1：1-溴代-3-(乙硫基)苯
将碘代乙烷(0.46mL，0.0058mol)加入到3-溴代苯硫酚(0.50mL， 0.0048mol)、ACN(7.11mL，0.136mol)和碳酸钾(2.0g，0.014mol)的悬 浮液中。将反应物于室温下搅拌2小时，用乙酸乙酯稀释并过滤，以 除去固体。真空浓缩反应物，得到1-溴代-3-(乙硫基)苯，为无色油状 物1.0gm，100％
步骤2：1-溴代-3-(乙基磺酰基)苯
将MCPBA(2.37g，10.6mmol)加入到1-溴代-3-(乙硫基)苯(1.00g， 4.80mmol)的DCM(10ml，156mmol)的冷却至0℃的溶液中。将反应 物搅拌1小时，然后用水稀释并用乙酸乙酯提取3次。合并的有机层经 硫酸镁干燥，过滤并真空浓缩。生成的粗残留物经快速柱层析纯化， 用己烷：乙酸乙酯梯度液洗脱，得到为无色油状物的1-溴代-3-(乙基磺 酰基)苯1.1gm 92％，1H NMR(300MHz，CDCl3)：8.09(m，1H)， 7.85(d，1H)，7.78(d，1H)7.45(t，1H)，3.14(q，2H)，1.25(t，3H)。
步骤3：(2E & Z)-3-[3-(乙基磺酰基)苯基]丙烯腈
使1-溴代-3-(乙基磺酰基)苯(1.3g，0.0052mol)溶于DMF(15.0 mL，0.194mol)和2-丙烯腈(0.68mL，0.010mol)中，加入TEA(1.4mL， 0.010mol)和三苯膦(0.23g，0.00089mol)。生成的溶液用氮气脱气，加 入乙酸钯(0.07g，0.0003mol)。再次用氮气使反应物脱气，然后在密封 管中加热至110℃ 8小时。经HPLC监测反应完成，然后冷却至室温， 然后分配于乙酸乙酯和水之间。有机层用盐水洗涤，经硫酸镁干燥并 浓缩。产物经FCC在硅胶上纯化，用己烷:乙酸乙酯梯度液洗脱，得到 (2E&Z)-3-[3-(乙基磺酰基)苯基]丙烯腈，为琥珀色油状物(1.1gm，92％) LC/MS(M+H)+：m/z＝222.
步骤4：3-[3-(乙基磺酰基)苯基]-3-[4-(7-[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基] 甲基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基)-1H-吡唑-1-基]丙腈
于室温、氮气下，将(2E&Z)-3-[3-(乙基磺酰基)苯基]丙烯腈(1.0g， 0.0045mol)与4-(1H-吡唑-4-基)-7-[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基 -7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶(1.3g，0.0041mol)和DBU(0.61mL，0.0041mol) 在ACN(10.0mL，0.191mol)中合并。将该反应物于室温下搅拌24小 时。使其分配于在乙酸乙酯和水之间，加入0.1N HCl以调节pH至7。 合并的有机提取物用盐水洗涤，经硫酸镁干燥并浓缩，得到粗制油状 物。产物经FCC在硅胶上纯化，用己烷:乙酸乙酯梯度液洗脱，得到 3-[3-(乙基磺酰基)苯基]-3-[4-(7-[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基-7H- 吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基)-1H-吡唑-1-基]丙腈，为油状物(1.5gm，68％)。 LC/MS(M+H)+：m/z＝537。该油状物为外消旋体，其经手性柱层析 (Chiracel OD-H，用乙醇:甲醇:己烷30:30:40洗脱，Rt 13.2和17.1分钟)分 离，得到两种对映体，每种为玻璃状物(0.51gm)LC/MS(M+H)+：m/z＝ 537，1H NMR(300MHz，CDCl3)：δ 8.89(s，1H)，8.45(s，1H)，8.35(s，1H)， 8.09(s，1h)，8.05(d，1H)，7.75(d，1H)，7.71(t，1H)，7.45(d，1H)，6.83(d，1H)， 5.85(t，1H)，5.75(s，2H)，3.78-3.42(m，4H)，3.18(m，2H)，1.35(t，3H)， 0.97(t，2H)，0.05(s，9H)。
步骤5：
使用类似于实施例61用于除去SEM保护基团的方法，制备标题化 合物，得到异构体#1，为无定形白色固体(300mg，80％)。1H NMR(400 MHz，DMSO)： 9.1(s，1H)，8.8(s，1H)，8.5(s，1H)，8.0(s，1H)，7.6-7.9 (m，4H)，7.1(s，1H)，6.3(m，1H)，3.9(m，1H)，3.7(m，1H)3.2(q，2H)，1.0 (t，3H)；MS(ES)(M+H)+：m/z＝407.
使用类似于实施例61用于除去SEM保护基团的方法，制备标题化 合物，得到异构体#2，为无定形白色固体(300mg，80％)。1H NMR(400 MHz，DMSO)：δ.9.1(s，1H)，8.8(s，1H)，8.5(s，1H)，8.0(s，1H)，7.6-7.9 (m，4H)，7.1(s，1H)，6.3(m，1H)，3.9(m，1H)，3.7(m，1H)3.2(q，2H)，1.0 (t，3H)；MS(ES)(M+H)+：m/z＝407.
实施例526：4-[1-(1-乙基丁-3-烯-1-基)-1H-吡唑-4-基]-7H-吡咯并 [2，3-d]嘧啶

步骤1：4-[1-(1-乙基丁-3-烯-1-基)-1H-吡唑-4-基]-7-[2-(三甲基甲硅烷 基)乙氧基]甲基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶
向甲基三苯基膦鎓溴化物(100mg，0.0004mol)在THF(2mL，0.02 mol)中的冰冷却溶液中加入0.5M双(三甲基甲硅烷基)氨化钾的甲苯 (0.8mL)溶液。将该混合物于0℃冰浴中搅拌1小时，然后冷却至-78℃ 并用3-[4-(7-[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶 -4-基)-1H-吡唑-1-基]戊醛(80mg，0.0002mol)(得自实施例498)处理。 将该反应物于-78℃搅拌并逐渐升温至室温过夜。使反应物分配于水 和乙酸乙酯之间。有机层用饱和的氯化钠洗涤，经硫酸镁干燥，过滤 并浓缩，得到4-[1-(1-乙基丁-3-烯-1-基)-1H-吡唑-4-基]-7-[2-(三甲基甲 硅烷基)乙氧基]甲基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶150mg，为粗制产物。 LC/MS＝398(M+1)。
步骤2：4-[1-(1-乙基丁-3-烯-1-基)-1H-吡唑-4-基]-7H-吡咯并[2，3-d]嘧 啶
使用类似于实施例61用于除去SEM保护基团的方法，分离标题化 合物，为无定形白色固体(25mg，1％)。1H NMR(400MHz，DMSO)：δ .8.6(s，2H)，8.2(s，1H)，7.4(s，1H)，6.9(s，1H)，5.8(m，1H)，5.0(dd，2H)， 4.2(m，1H)，2.4-2.6(m，2H)，1.7-1.9(m，2H)，0.6(t，3H)；LC/MS：268 (M+1)。
实施例500：(3R)-和(3S)-4，4，4-三氟-3-[3-(7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4- 基)-1H-吡咯-1-基]丁腈
和
步骤1.4-氯-7-(二乙氧基甲基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶
将4-氯代吡咯并[2，3-d]嘧啶(2.00g，0.0130mol)和原甲酸乙酯(25 mL，0.15mol)的混合物加热至回流2小时。蒸发溶剂，残留物经快速柱 层析纯化(用乙酸乙酯/己烷洗脱)，得到所需产物(1.13g，34％)。
1H NMR(400MHz，CDCl3)：δ 8.63(s，1H)，7.58(d，1H)，6.71(s，1H)， 6.65(d，1H)，3.77-3.67(m，2H)，3.58-3.49(m，2H)，1.23(t，3H)，1.23(t， 3H)。
步骤2. 7-(二乙氧基甲基)-4-(1H-吡咯-3-基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶
向4-氯-7-(二乙氧基甲基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶(1.13g，0.00442 mol)和1-(三异丙基甲硅烷基)-3-硼酸(1.00g，0.00374mol)和碳酸钠 (0.396g，0.00374mol)在1，2-二甲氧基乙烷(15mL)和水(3mL)中的脱气 溶液中加入四(三苯膦)钯(0)(0.22g，0.00019mol)。将该混合物于环境 温度下搅拌2小时，然后加热至回流4小时。然后冷却该混合物，浓缩， 经快速柱层析纯化(用乙酸乙酯/己烷洗脱)，得到残留物，为油状物。 将ACN加入到残留物中，滤除沉淀的产物，用少量ACN(165mg，13％) 洗涤。
1H NMR(400MHz，D6-dmso)：(br s，1H)，8.66(s，1H)，7.80-7.78 (m，1H)，7.58(d，1H)，7.03(d，1H)，6.94(dd，1H)，6.90(dd，1H)，6.75(s， 1H)，3.74-3.65(m，2H)，3.59-3.50(m，2H)，1.15(t，6H)；MS(ES)：M+H＝ 287.
步骤3.
向7-(二乙氧基甲基)-4-(1H-吡咯-3-基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶 (0.125g，0.436mmol)和4，4，4-三氟丁-2-烯腈(0.0476mL，0.480mmol)的 ACN(1mL)溶液中加入DBU(0.0653mL，0.436mmol)。加入TFA(0.5 mL)并搅拌该混合物1小时。真空除去TFA和溶剂。残留物经制备型 -HPLC/MS纯化(C-18，用H2O/含0.15％ NH4OH的ACN梯度液洗脱)， 得到产物(102mg，76％)。需要时，通过手性HPLC(AD-H，20％ EtOH/ 己烷)分离基本纯形式的对映体。
1H NMR(300MHz，D6-dmso)：δ 12.05(br s，1H)，8.65(s，1H)，8.04(s， 1H)，7.56(dd，1H)，7.21(t，1H)，7.02(dd，1H)，6.93(dd，1H)，5.89-5.74 (m，1H)，3.95(dd，1H)，3.66(dd，1H)；MS(ES)：M+H＝306.
依据相同的方法制备表12中的类似物，使用不同的共轭受体，但 步骤3中的共轭加成除，反应于40℃进行3天。
表12

  实施 例号 命名 R MS(ES) (M+1) 制备和手性分 离方法 501 3-[3-(7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4- 基)-1H-吡咯-1-基]丁腈 CH3 252 实施例500， 对映体不分离
按照标记“制备方法”栏中所述，制备表13中的以下化合物，且某 些示例性合成方法的细节在表13中提供。
表13





















实施例649：3-[3-(吗啉-4-基磺酰基)苯基]-3-[4-(7H-吡咯并[2，3-d]嘧 啶-4-基)-1H-吡唑-1-基]丙腈

步骤1：4-[(3-溴代苯基)磺酰基]吗啉
将在1.0ml THF中的吗啉(0.19mL，0.0022mol)滴加到3-溴代苯磺 酰氯(0.3mL，0.002mol)和TEA(0.30mL，0.0022mol)在无水4.0mL HF 中的在冰浴中冷却的溶液中。将该反应混合物于室温下搅拌过夜，然 后分配于0.05N HCl和乙酸乙酯之间。有机层用水(2X)和盐水(1X)洗 涤，然后经无水硫酸镁干燥，过滤，然后真空浓缩，得到4-[(3-溴代苯 基)磺酰基]吗啉，为白色晶体产物(470mg，78％)。LCMS(M+H)+：m/z ＝306，308.
步骤2：(2E&Z)-3-[3-(吗啉-4-基磺酰基)苯基]丙烯腈
使4-[(3-溴代苯基)磺酰基]吗啉(0.250g，0.000816mol)溶于无水 DMF(2.5mL，0.032mol)，用氮气流使混合物脱气。向其中混合物加 入TEA(0.23mL，0.0016mol)、2-丙烯腈(0.11mL，0.0016mol)、乙酸钯 (0.011g，0.000049mol)和三苯膦(0.0364g，0.000139mol)，再次用氮气 生混合物脱气。将该反应混合物在密封管中，于110℃加热16小时。 冷却至室温后，使反应混合物分配于0.05N HCl和乙酸乙酯之间。有机 层用水(2X)和盐水(1X)洗涤，经无水硫酸镁干燥，过滤并真空浓缩，得 到(2E&Z)-3-[3-(吗啉-4-基磺酰基)苯基]丙烯腈，为油状物(0.240gm， 85％)，其为顺式和反式异构体的混合物。LCMS(M+H)+：m/z＝279.
步骤3：3-[3-(吗啉-4-基磺酰基)苯基]-3-[4-(7-[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧 基]甲基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基)-1H-吡唑-1-基]丙腈
向4-(1H-吡唑-4-基)-7-[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基-7H-吡咯 并[2，3-d]嘧啶(0.100g，0.000317mol)和(2E&Z)-3-[3-(吗啉-4-基磺酰基) 苯基]丙烯腈(0.097g，0.00035mol)在无水ACN(2.0mL，0.038mol)中 的混合物中加入DBU(0.095mL，0.00063mol)，将得到的混合物于室 温下搅拌过夜。然后用水稀释反应混合物，用乙酸乙酯提取。合并的 有机相用水(2X)和盐水(1X)洗涤，经硫酸镁干燥，过滤并然后真空浓 缩，得到粗制产物。粗产物经硅胶快速柱层析纯化，使用乙酸乙酯- 己烷(6：4)作为洗脱液，得到3-[3-(吗啉-4-基磺酰基)苯基]-3-[4-(7-[2-(三 甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基)-1H-吡唑-1-基] 丙腈，为粘稠油状物(62mg，32.94％)。LCMS(M+H)+：m/z＝594
步骤4：
使用类似于实施例61用于除去SEM保护基团的方法，分离标题化 合物，为无定形白色固体(30mg，63.84％.LCMS(M+H)+：m/z＝464. 1H NMR(400MHz，DMSO-d6)：(s)，8.62(s)，8.1(s)，7.78(m)， 7.70(m)，7.58(m)，6.95(m)，6.20(m)，3.84(m)，3.70(m)，3.45(m)，2.78(m)。
实施例679：顺式-4-[4-(7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基)-1H-吡唑-1-基]环 己基乙腈

步骤1：4-(羟基甲基)环己醇.
使4-氧代环己烷羧酸乙基酯(2.0g，0.012mol)溶于乙醚(20.0mL)， 然后于0℃冷却。向该混合物中加入在乙醚(20mL)中的1M四氢铝酸 锂，将得到的混合物于0℃搅拌2小时。反应用水(2mL)和1N NaOH(2 mL)猝灭，加入乙醚(100mL)。滤除沉淀的固体，残留物用于下一步 反应。1H NMR(CDCl3)：δ 4.02 and 3.75(m，1H)，3.45-3.61(m，2H)，2.02 (m，2H)，1.84(m，1H)，1.52-1.80(m，2H)，1.44(m，1H)，1，32(m，2H)， 1.03(m，1H)。
骤2：4-[(三苯甲游基氧基)甲基]环己醇.
使4-(羟基甲基)环己醇(2.0g，0.015mol)溶于吡啶(15.0mL)，将该 混合物冷却至0℃。向该反应物中加入三苯基甲基氯(4.7g，0.017 mol)，将得到的混合物于0℃搅拌2小时并于25℃搅拌16小时。然后 使用旋转蒸发器浓缩反应物，用乙酸乙酯提取浓缩液。有机提取物用 水、饱和的NaCl洗涤，干燥(MgSO4)，然后真空浓缩。反应在硅胶上 层析，使用30％ EtOAc/己烷，得到顺式异构体(0.74g)1H NMR(CDCl3)：δ 7.52(m，6H)，7.27(m，9H)，3.98(m，1H)，2.93(m，2H)， 1.21-1.68(m，9H)；和反式异构体(2.72g)1H NMR(CDCl3)：δ 7.44(m， 6H)，7.20-7.31(m，9H)，3.54(m，1H)，2.88(m，2H)，1.98(m，2H)，1.88 (m，2H)，1.60(m，1H)，0.99-1.37(m，4H)。
步骤3：反式-4-[(三苯甲游基氧基)甲基]环己基甲烷磺酸酯.
使反式-4-[(三苯甲游基氧基)甲基]环己醇(2.72g，0.00730mol)溶 于氯仿(30.0mL)，将该混合物于0℃冷却。向该反应物中加入TEA(1.4 mL，0.010mol)和甲烷磺酰氯(0.68mL，0.0088mol)，将得到的混合物于 0℃搅2小时。然后用乙酸乙酯提取反应物，有机提取物用水、饱和的 NaCl洗涤，干燥(MgSO4)和真空浓缩。1H NMR(CDCl3)：δ 7.43(m，6H)， 7.20-7.31(m，9H)，4.57(m，1H)，3.00(m，3H)，2.90(m，2H)，2.16(m，2H)， 1.93(m，2H)，1.09-1.60(m，5H)。
步骤4：7-[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基-4-(1-顺式-4-[(三苯甲游基 氧基)甲基]环己基-1H-吡唑-4-基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶.
将4-(1H-吡唑-4-基)-7-[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基-7H-吡吡咯 并[2，3-d]嘧啶(1.5g，0.0048mol)与氢化钠(0.34g，0.0086mol)和反式 -4-[(三苯甲游基氧基)甲基]环己基甲磺酸酯(3.00g，0.00666mol)混合， 使该混合物冷却至-78℃。向该反应物中加入DMF(8.3mL)，使该混 合物温热至25℃并搅拌20分钟。于55℃搅拌温热的混合物48小时。 反应物用乙酸乙酯提取，有机提取物用水、饱和的NaCl洗涤，干燥 (MgSO4)和然后真空浓缩。在硅胶上层析浓缩液，使用40％ EtOAc/己 烷洗脱，得到产物。LC/MS(M+H)+：670，1H NMR(CDCl3)：δ 8.89(s，1H)， 8.27(s，1H)，8.24(s，1H)，6.84-7.51(m，10H)，6.87(d，1H)，5.73(s，2H)， 4.39(m，1H)，3.60(m，2H)，3.12(m，2H)，1.76-2.11(m，9H)，0.96(m，2H)， 0.00(s，9H)。
步骤5：顺式-4-[4-(7-[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基-7H-吡咯并 [2，3-d]嘧啶-4-基)-1H-吡唑-1-基]环己基甲醇.
使7-[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基-4-(1-顺式-4-[(三苯甲游基 氧基)甲基]环己基-1H-吡唑-4-基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶(0.3g，0.0004 mol)溶于甲醇(7.0mL)和THF(2.0mL，0.025mol)，加入4.0M HCl的 1，4--二氧六环(0.5mL)溶液。然后将反应物于25℃搅拌2小时。TLC分 析显示无起始原料存在且LCMS分析显示产物存在。将反应无加入到 饱和的NaHCO3溶液中，用乙酸乙酯提取。有机提取物用水、饱和的 NaCl洗涤，干燥(MgSO4)和真空浓缩。在硅胶上层析浓缩液，使用 EtOAc作为洗脱液，得到产物。LC/MS(M+H)+：428
1H NMR(CDCl3)：δ 8.89(s，1H)，8.37(s，1H)，8.31(s，1H)，7.44(d，1H)， 6.87(d，1H)，5.73(d，2H)，4.41(m，1H)，3.51-3.71(m，4H)，2.31(m，2H)， 2.08(m，3H)，1.70-1.93(m，4H)，0.98(m，2H)，0.00(s，9H)。
步骤6：顺式-4-[4-(7-[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基-7H-吡咯并 [2，3-d]嘧啶-4-基)-1H-吡唑-1-基]环己基甲基甲磺酸酯.
使顺式-4-[4-(7-[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基-7H-吡咯并 [2，3-d]嘧啶-4-基)-1H-吡唑-1-基]环己基甲醇溶于氯仿(3.00mL)并冷却 至0℃，向该反应物中加入TEA(0.10mL，0.00072mol)和甲烷磺酰氯 (0.05mL，0.0006mol)，将该混合物于0℃搅拌2小时，此时LCMS分析 显示在该混合物中主要存在产物。反应物用乙酸乙酯提取，有机提取 物用水、饱和的NaCl洗涤，干燥(MgSO4)和真空浓缩。LC/MS(M+H)+： 506
步骤7：顺式-4-[4-(7-[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基-7H-吡咯并 [2，3-d]嘧啶-4-基)-1H-吡唑-1-基]环己基乙腈
将顺式-4-[4-(7-[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基-7H-吡咯并- [2，3-d]嘧啶-4-基)-1H-吡唑-1-基]环己基甲基甲磺酸酯(0.10g，0.00020 mol)和氰化钠(0.050g，0.0010mol)和DMSO(1.0mL)混合。将该混合物 于60℃搅拌24小时，此时LCMS分析显示大部分起始原料已经消耗。 反应物用乙酸乙酯提取和有机提取物用水、饱和的NaCl洗涤，干燥 (MgSO4)和真空浓缩。在硅胶上层析浓缩液，使用EtOAc作为洗脱液， 得到产物。LC/MS(M+H)+：437，1H NMR(CDCl3).：δ 8.90(s，1H)，8.36(s， 1H)，8.31(s，1H)，7.45(d，1H)，6.87(d，1H)，5.73(S，2H)，4.43(m，1H)， 3.60(m，2H)，2.45(d，2H，J＝7.6Hz)，2.37(m，2H)，2.10(m，4H)， 1.70-1.93(m，3H)，0.98(m，2H)，0.00(s，9H)。
步骤8：顺式-4-[4-(7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基)-1H-吡唑-1-基]环己基 乙腈.
将顺式-4-[4-(7-[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基-7H-吡咯并- [2，3-d]嘧啶-4-基)-1H-吡唑-1-基]环己基乙腈(0.080g，0.00018mol)和 TFA(0.50mL，0.0065mol)加入到DCM(3.00mL，0.0468mol)，将该混 合物于25℃搅拌16小时。通过旋转蒸发器浓缩反应物，使浓缩液溶于 甲醇(3.0mL，0.074mol)，加入氢氧化铵(0.5mL，0.01mol)。将该反应 物于25℃搅拌6小时，此时LCMS分析显示无起始原料存在。反应在 硅胶上层析，使用5％ MeOH/EtOAc，得到产物。
LC/MS(M+H)+：307，1H NMR(CD3OD).：δ 8.64(s，1H)，8.55(s，1H)，8.31 (s，1H)，7.50(d，1H)，6.96(d，1H)，4.42(m，1H)，2.61(d，2H，J＝8.0Hz)， 2.27(m，2H)，1.70-2.15(m，7H)。
实施例680：顺式-4-[4-(7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基)-1H-吡唑-1-基]环 己基甲基硫氰酸酯

步骤1：顺式-4-[4-(7-[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基-7H-吡咯并 [2，3-d]嘧啶-4-基)-1H-吡唑-1-基]环己基甲基硫氰酸酯
使顺式-4-[4-(7-[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基-7H-吡咯并- [2，3-d]嘧啶-4-基)-1H-吡唑-1-基]环己基甲基甲磺酸酯(0.10g，0.00020 mol)与硫氰酸钾(0.082g，0.00084mol)溶于DMSO(1.00mL)。将该反应 物于68℃加热4天，此时LCMS分析显示～4:1的产物/起始原料比例。 反应物用乙酸乙酯提取和有机提取物用水、饱和的NaCl洗涤，干燥 (MgSO4)和真空浓缩。在硅胶上层析浓缩液，使用1:1 EtOAc/己烷，得 到产物。LC/MS(M+H)+：469，1H NMR(CDCl3).：δ 8.89(s，1H)，8.36(s， 1H)，8.31(s，1H)，7.45(d，1H)，6.87(d，1H)，5.73(S，2H)，4.45(m，1H)， 3.60(m，2H)，3.05(m，2H)，2.37(m，2H)，2.10(m，4H)，1.70-1.93(m，3H)， 0.98(m，2H)，0.00(s，9H)。
步骤2：顺式-4-[4-(7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基)-1H-吡唑-1-基]环己基 甲基硫氰酸酯)。
使顺式-4-[4-(7-[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基-7H-吡咯并- [2，3-d]嘧啶-4-基)-1H-吡唑-1-基]环己基甲基硫氰酸酯溶于甲醇(2.0mL， 0.049mol)和DCM(2.0mL，0.031mol)，加入TFA(0.5mL，0.006mol)。 将得到的混合物于25℃搅拌16小时。TLC分析显示无起始原料存在且 LCMS分析显示出产物。使用旋转蒸发器浓缩反应物和在硅胶上层析 浓缩液，使用2％ MeOH/EtOAc，得到产物。LC/MS(M+H)+：339，1H NMR(CD3OD)δ 8.65(s，1H)，8.55(s，1H)，8.31(s，1H)，7.50(d，1H)， 6.96(d，1H)，4.43(m，1H)，3.20(d，2H，J＝7.6Hz)，2.24(m，2H)， 1.80-2.17(m，7H)。
实施例681：N-5-[(顺式-4-[4-(7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基)-1H-吡唑 -1-基]环己基甲基)硫基]-4H-1，2，4-三唑-3-基嘧啶-2-胺三氟乙酸盐

步骤1：5-[(顺式-4-[4-(7-[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基-7H-吡咯并 [2，3-d]嘧啶-4-基)-1H-吡唑-1-基]环己基甲基)硫基]-4H-1，2，4-三唑-3-胺
使顺式-4-[4-(7-[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基-7H-吡咯并 [2，3-d]嘧啶-4-基)-1H-吡唑-1-基]环己基甲基甲磺酸酯(124.56mg， 0.00024mol)和5-氨基-4H-1，2，4-三唑-3-硫醇(43.00mg，0.0003702mol) 溶于DMF(1.20mL)，加入碳酸钾(0.122g，0.000887mol)。将该反应物 于50℃搅拌18小时，此时LCMS显示反应几乎完成且产物存在。反 应物用乙酸乙酯提取和有机提取物用水、饱和的NaCl洗涤，干燥 (MgSO4)和真空浓缩。在硅胶上层析浓缩液，使用EtOAc作为洗脱液， 得到产物。LC/MS(M+H)+：526，1H NMR(CDCl3).：δ 8.90(s，1H)，8.40(s， 1H)，8.30(s，1H)，7.45(d，1H)，6.87(d，1H)，5.73(S，2H)，4.45(brs，2H)， 4.41(m，1H)，3.60(m，2H)，3.22(d，2H，J＝7.2Hz)，2.29(m，2H)， 1.70-2.10(m，7H)，0.98(m，2H)，0.00(s，9H)。
步骤2：5-[(顺式-4-[4-(7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基)-1H-吡唑-1-基]环己 基甲基)硫基]-4H-1，2，4-三唑-3-胺
使5-[(顺式-4-[4-(7-[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基-7H-吡咯并 [2，3-d]嘧啶-4-基)-1H-吡唑-1-基]环己基甲基)硫基]-4H-1，2，4-三唑-3-胺 (9a)溶于TFA(1mL)并搅拌2小时。使用旋转蒸发器浓缩溶液，以除去 TFA。使残留物溶于甲醇(1mL)，加入氢氧化铵(1mL)。将该溶液搅 拌过夜。LCMS显示完成脱保护。溶液使用旋转蒸发器浓缩。产物经 prep LCMS分离，使用30mm x 100mm C18柱；11％ CH3CN-H2O (0.1％ TFA)，1.5分钟，至33％ 6分钟；60mL/分钟；检测装置设置在m/z 396；保留时间，5.5min(2runs)。冻干洗脱液。得到21mg(二-TFA盐)。 LC/MS(M+H)+：396，1H NMR(d6-DMSO)δ 12.9(br s，1H，NH)；8.9(2 个单峰，2H)；8.5(s，1H)；7.9(m，1H)；7.3(m，1H)；4.4(m，1H，NCH)； 3.1(d，2H)；2.2(m，2H)；1.9(m，3H)；1.7(m，2H)；1.6(m，2H)。MS(ES) 396(M+1)。
实施例682：N-5-[(顺式-4-[4-(7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基)-1H-吡唑-1- 基]环己基甲基)硫基]-4H-1，2，4-三唑-3-基嘧啶-2-胺三氟乙酸盐

步骤1：N-5-[(顺式-4-[4-(7-[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基-7H-吡咯 并[2，3-d]嘧啶-4-基)-1H-吡唑-1-基]环己基甲基)硫基]-4H-1，2，4-三唑-3- 基嘧啶-2-胺
在一个小瓶中[A]将5-[(顺式-4-[4-(7-[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基] 甲基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基)-1H-吡唑-1-基]环己基甲基)硫 基]-4H-1，2，4-三唑-3-胺(0.047g，0.000089mol)与2-氯代嘧啶(0.011g， 0.000096mol)一起在1，4-二氧六环(1.00mL，0.0128mol)中，于150℃ 在微波反应器中加热40分钟。LCMS分析显示无反应发生。向反应物 中加入含碳酸铯(0.033g，0.00010mol)和碘化亚铜(I)(4.00mg， 0.0000210mol)的2-氯代嘧啶(0.020g，0.00017mol)，将该混合物于115 ℃加热3小时，此时LCMS分析显示无起始原料存在且主要产物存在。 反应物在硅胶上层析，使用2％ MeOH/EtOAc洗脱，得到产物。LC/MS (M+1)+：604，1NMR(CDCl3)：8.89(s，1H)，8.82m，2H)，8.43(s，1H)，8.30 (s，1H)，7.44(d，1H)，7.23(m，1H)，7.03(br s，2H)，6.88(d，1H)，5.73(s， 2H)，4.40(m，1H)，3.60(m，2H)，3.35(d，2H)，2.34(m，2H)，1.80-2.15(m， 7H)，0.98(m，2H)，0.00(s，9H)。
步骤2：N-5-[(顺式-4-[4-(7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基)-1H-吡唑-1-基]环 己基甲基)硫基]-4H-1，2，4-三唑-3-基嘧啶-2-胺.
使N-5-[(顺式-4-[4-(7-[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基-7H-吡咯 并[2，3-d]嘧啶-4-基)-1H-吡唑-1-基]环己基甲基)硫基]-4H-1，2，4-三唑-3- 基嘧啶-2-胺(0.024g，0.000040mol)溶于DCM(4.00mL)，加入TFA (0.50mL，0.0065mol)。将该反应物于25℃搅拌16小时，真空浓缩。使 残留物溶于甲醇(3.00mL)，加入浓氢氧化铵(0.50mL)。将该反应物于 25℃搅拌2小时，此时LCMS分析显示为主要产物。使用旋转蒸发器 浓缩反应物，经prep LC纯化浓缩液，得到产物，为三氟乙酸盐。LC/MS (M+H)+：474，1H NMR(CD3OD)δ 8.87(s，1H)，8.85(s，1H)，8.81(s，1H)， 8.79(s，1H)，8.45(s，1H)，7.85(d，1H)，7.34(m，2H)，4.43(m，1H)，3.20 (d，2H，J＝7.6Hz)，2.24(m，2H)，1.80-2.17(m，7H)。
实施例683：3-顺式-4-[4-(7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基)-1H-吡唑-1-基]环 己基丙腈三氟乙酸盐

步骤1：2-(1，4-二氧杂螺[4.5]癸-8-基)乙醇.
使依据Itagaki，Noriaki；Kimura，Mari；Sugahara，Tsutomu； Iwabuchi，Yoshiharu.(Organic Letters 2005；7(19)；4181-4183.)的方 法制备的1，4-二氧杂螺[4.5]癸-8-基乙酸乙基酯(3.40g，0.0149mol)溶于 乙醚(30.00mL)，使该混合物冷却至0℃，向反应物中加入1.00M四氢 铝酸锂的乙醚(15.0mL)溶液，将得到的混合物于0℃搅拌60分钟并于 25℃搅拌2小时。冷却反应物，加入水(0.40mL，0.022mol)，接着加入 1.00M氢氧化钠(0.40mL)。然后向反应物中加入乙醚(100.00mL)， 滤除沉淀物的固体。使用旋转蒸发器浓缩滤液，得到产物。1H NMR(CDCl3)：3.94(s，4H)，3.67(t，2H)，1.20-1.80(m，11H)。
步骤2：4-(2-羟基乙基)环己酮.
使2-(1，4-二氧杂螺[4.5]癸-8-基)乙醇(2.70g，0.0145mol)溶于丙酮 (10.00mL)，加入THF(10.00mL)和6.00M HCl(6.00mL)。将该反应物 于25℃搅拌16小时，用NaHCO3溶液中和，然后用乙酸乙酯提取。有 机提取物用水和饱和的NaCl洗涤，然后干燥(MgSO4)和真空浓缩。粗 产物用于下一步反应，而无须进一步纯化。1H NMR(CDCl3)：3.75(m， 2H)，2.36(m，4H)，1.20-2.13(m，7H)。
步骤3：4-(2-羟基乙基)环己醇.
使4-(2-羟基乙基)环己酮(2.00g，0.0141mol)溶于乙醚(30.00mL) 并于0℃冷却。向反应物中加入1.0M锂四氢aluminate的乙醚(14.1 mL)，将得到的混合物于0℃搅拌2小时并于25℃搅拌16小时。向反应 物中加入THF(20.00mL)，将该混合物于0℃冷却，然后加入水(0.40 mL，0.022mol)，接着加入1.00M氢氧化钠(0.40mL)。然后向反应物 中加入乙醚(100.00mL)，搅拌得到的混合物10分钟，然后过滤，滤液 使用旋转蒸发器浓缩，提供粗产物。粗产物用于下一步反应，而无须 进一步纯化。
1H NMR(CDCl3)：3.96和3.57(m，1H)次要和主要CHOH(～1:5比例) 3.70(m，2H)，0.94-2.02(m，11H)。
步骤4：4-[2-(三苯甲游基氧基)乙基]环己醇.
使4-(2-羟基乙基)环己醇(得自前述反应的粗制物)(1.88g，0.0130 mol)溶于吡啶(20.00mL)并于0℃冷却。向反应物中加入三苯基甲基 氯(4.0g，0.014mol)，将该混合物于0℃搅拌2小时并于25℃搅拌16小 时。使用旋转蒸发器浓缩反应物，用乙酸乙酯提取浓缩液。有机提取 物用水和饱和的NaCl洗涤，然后干燥(MgSO4)和真空浓缩。在硅胶上 层析(30％ EtOAc/己烷)浓缩液，得到反式异构体(1.98g)
1H NMR(CDCl3)：7.42-7.45(m，6H)，7.20-7.30(m，9H)，3.50(m，1H)， 3.07(m，2H)，1.93(m，2H)，1.66(m，2H)，1.17-1.60(m，5H)，0.89(m， 2H)。
步骤5：反式-4-[2-(三苯甲游基氧基)乙基]环己基甲烷磺酸酯.
使反式-4-[2-(三苯甲游基氧基)乙基]环己醇(1.95g，0.00504mol) 溶于氯仿(40.00mL)，将该混合物冷却至0℃。向反应物中加入TEA (0.98mL，0.0071mol)和甲烷磺酰氯(0.47mL，0.0060mol)，将该混合物 于0℃搅拌2小时。然后用乙酸乙酯提取反应物，有机提取物用水和饱 和的NaCl洗涤，然后干燥(MgSO4)和真空浓缩。
1H NMR(CDCl3)：7.41-7.45(m，6H)，7.20-7.32(m，9H)，4.55(m，1H)， 3.07(m，2H)，2.10(m，2H)，1.70(m，2H)，1.20-1.60(m，5H)，0.95(m， 2H)。
步骤6：7-[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基-4-(1-顺式-4-[2-(三苯甲游 基氧基)乙基]环己基-1H-吡唑-4-基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶.
将4-(1H-吡唑-4-基)-7-[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基-7H-吡咯 并[2，3-d]嘧啶(1.0g，0.0032mol)与氢化钠(0.23g，0.0058mol)和反式 -4-[2-(三苯甲游基氧基)乙基]环己基甲磺酸酯(2.10g，0.00452mol)混 合，将该混合物冷却至-78℃。向反应物中加入DMF(6.00mL)，使该 混合物温热至25℃，然后搅拌20分钟。将该反应物于55℃搅拌48小 时，此时LCMS分析显示大多数为产物。反应物用乙酸乙酯提取，有 机提取物用水和饱和的NaCl洗涤，然后干燥(MgSO4)和真空浓缩。在 硅胶上层析浓缩液，使用40％ EtOAc/己烷洗脱，得到产物。LC/MS (M+H)+：684，1H NMR(CDCl3)：8.89(s，1H)，8.35(br s，1H)，8.30(s，1H)， 7.50(m，6H)，7.44(d，1H)，7.27-7.32(m，9H)，6.87(d，1H)，5.73(s，2H)， 4.33(m，1H)，3.60(m，2H)，3.17(t，2H)，1.50-2.25(m，11H)。0.98(m，2H)， 0.00(s，9H)。
步骤7：2-顺式-4-[4-(7-[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基-7H-吡咯并 [2，3-d]嘧啶-4-基)-1H-吡唑-1-基]环己基乙醇(7b)。
使7-[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基-4-(1-顺式-4-[2-(三苯甲游 基氧基)乙基]环己基-1H-吡唑-4-基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶(1.45g， 0.00212mol)溶于甲醇(30.00mL)的THF(10.00mL)，加入4.0M HCl的 1，4-二氧六环(2.00mL)溶液。将该混合物于25℃搅拌2小时，此时TLC 分析显示无起始原料存在且LCMS分析显示产物存在。就将反应物加 入饱和的NaHCO3溶液中，然后用乙酸乙酯提取。有机提取物用水和 饱和的NaCl洗涤，然后干燥(MgSO4)和真空浓缩。在硅胶上层析浓缩 液，使用EtOAc作为洗脱液，得到产物。LC/MS(M+H)+：442
步骤8：2-顺式-4-[4-(7-[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基-7H-吡咯并 [2，3-d]嘧啶-4-基)-1H-吡唑-1-基]环己基乙基甲磺酸酯(8b)。
使2-顺式-4-[4-(7-[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基-7H-吡咯并- [2，3-d]嘧啶-4-基)-1H-吡唑-1-基]环己基乙醇(0.89g，0.0020mol)溶于 DCM(12.00mL，0.1872mol)并于0℃冷却。向反应物中加入TEA(0.43 mL，0.0031mol)和甲烷磺酰氯(0.19mL，0.0024mol)，将该混合物于0 ℃搅拌2小时，此时LCMS分析显示主要产物存在。反应物用乙酸乙酯 提取，有机提取物用水和饱和的NaCl洗涤，然后干燥(MgSO4)和真空 浓缩。LC/MS(M+H)+：520，1H NMR(CDCl3)：8.90(s，1H)，8.38(br s，1H)， 8.31(s，1H)，7.45(d，1H)，6.88(d，1H)，5.73(s，2H)，4.40(m，1H)，4.27(t， 2H)，3.60(m，2H)，3.07(s，3H)，1.60-2.40(m，11H)。0.98(m，2H)，0.00(s， 9H)
步骤9：3-顺式-4-[4-(7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基)-1H-吡唑-1-基]环己 基丙腈三氟乙酸盐(9b)。
使甲磺酸2-顺式-4-[4-(7-[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基-7H-吡 咯并[2，3-d]嘧啶-4-基)-1H-吡唑-1-基]环己基乙基酯(0.075g，0.00014 mol)溶于DMSO(1.50mL)，加入氰化钠(0.035g，0.00072mol)。将该反 应物于40℃搅拌16小时，此时LCMS分析显示无起始原料存在。然后 用乙酸乙酯提取反应物，有机提取物用水和饱和的NaCl洗涤，然后干 燥(MgSO4)和真空浓缩。使残留物溶于DCM(3.00mL)，加入TFA(0.50 mL，0.0065mol)。将该混合物于25℃搅拌16小时，此时LCMS分析显 示主要为羟基甲基中间体。混合物使用旋转蒸发器浓缩，使浓缩液溶 于甲醇(3.00mL)，加入浓氢氧化铵(0.50mL)。将该反应物于25℃搅拌 3小时，此时LCMS分析显示无起始原料存在。然后使用旋转蒸发器浓 缩反应物，经prep LC纯化浓缩液，得到为TFA盐的产物(47.8mg)。 LC/MS(M+H)+：321，1H NMR(CD3OD)：8.86(s，1H)，8.81(s，1H)，8.44(s， 1H)，7.84(d，1H)，7.31(d，1H)，4.48(m，1H)，2.51(m，2H)，2.28(m，2H)， 2.00(m，2H)，1.80(m，5H)，1.67(m，2H)。
实施例684：5-[(2-顺式-4-[4-(7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基)-1H-吡唑-1- 基]环己基乙基)硫基]-4H-1，2，4-三唑-3-胺三氟乙酸盐

使甲磺酸2-顺式-4-[4-(7-[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基-7H-吡 咯并[2，3-d]嘧啶-4-基)-1H-吡唑-1-基]环己基乙基酯(0.060g，0.00012 mol)溶于含5-氨基-4H-1，2，4-三唑-3-硫醇(0.020g，0.00017mol)和碳酸 钾(0.024g，0.00017mol)的DMF(1.31mL)。将该混合物于40℃加热18 小时，此时LCMS分析显示无起始原料存在。反应物用EtOAc稀释，过 滤，然后使用旋转蒸发器浓缩。使残留物溶于DCM(3.60mL)，加入 TFA(0.60mL，0.0078mol)。将该混合物于25℃搅拌5小时，然后使用 旋转蒸发器浓缩。使残留物溶于甲醇(3.60mL)，加入浓氢氧化铵(0.60 mL)，将该混合物于25℃加热2小时。使用旋转蒸发器浓缩反应物， 经prep.LC纯化浓缩液，得到产物。LC/MS(M+H)+：410，1H NMR(CD3OD)：8.85(s，1H)，8.80(s，1H)，8.44(s，1H)，7.83(d，1H)，7.30 (d，1H)，4.46(m，1H)，3.17(m，2H)，2.27(m，2H)，2.00(m，2H)，1.62-1.90 (m，7H)。
实施例685：4-[4-(7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基)-1H-吡唑-1-基]亚环己基 乙腈三氟乙酸盐

步骤1：1，4-二氧杂螺[4.5]癸烷-8-醇
使1，4-二氧杂-螺[4.5]癸烷-8-酮(2.00g，0.0128mol)溶于乙醚(50 mL)，使该混合物冷却至0℃。向反应物中加入1M四氢铝酸锂的乙醚 (7.0mL)溶液，将该混合物于0℃搅拌2小时，此时TLC分析显示无起 始原料存在。然后用水和1N NaOH(各0.5mL)猝灭反应物，然后过滤。 用乙醚洗涤过滤的固体，合并的醚滤液使用旋转蒸发器浓缩，得到产 物。NMR(CDCl3)：3.94(m，4H)，3.81(m，1H)，1.79-1.92(m，4H)， 1.54-1.70(m，4H)。
步骤2：甲烷磺酸1，4-二氧杂螺[4.5]癸-8-基酯.
使1，4-二氧杂螺[4.5]癸烷-8-醇(0.40g，0.0025mol)溶于氯仿(10.0 mL)，将得到的混合物于0℃冷却。向混合物中加入TEA(0.49mL， 0.0035mol)和甲烷磺酰氯(0.23mL，0.0030mol)，将该混合物于0℃搅 拌2小时。反应物用乙酸乙酯提取，有机提取物用水和饱和的NaCl洗 涤，然后干燥(MgSO4)和真空浓缩。粗产物用于下一步反应，而无须进 一步纯化。
1H NMR(CDCl3)：4.85(m，1H)，3.95(m，4H)，3.02(s，3H)，1.98-2.05(m， 4H)，1.82-1.89(m，2H)，1.61-1.70(m，2H)。
步骤3：4-[1-(1，4-二氧杂螺[4.5]癸-8-基)-1H-吡唑-4-基]-7-[2-(三甲基甲 硅烷基)乙氧基]甲基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶.
将甲磺酸1，4-二氧杂螺[4.5]癸-8-基酯(0.50g，0.0015mol)与4-(1H- 吡唑-4-基)-7-[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶 (0.36g，0.0011mol)和氢化钠(0.082g，0.0020mol)的混合物于-78℃冷 却，加入DMF(2.0mL)。使反应物温热至25℃，然后搅拌20分钟，然 后加热至55℃ 24小时。然后用乙酸乙酯提取反应物。有机提取物用 水和饱和的NaCl洗涤，然后干燥(MgSO4)和真空浓缩。在硅胶上层析 浓缩液，使用1:1 EtOAc/己烷洗脱，得到产物。LC/MS(M+H)+：456，1H NMR(CDCl3)：8.89(s，1H)，8.35(s，1H)，8.30(s，1H)，7.44(d，1H)，6.87 (d，1H)，5.73(s，2H)，4.38(m，1H)，4.06(s，4H)，3.60(m，2H)，2.22-2.31 (m，4H)，2.00(m，2H)，1.86(m，2H)，0.98(m，2H)，0.00(s，9H)
步骤4：4-[4-(7-[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧 啶-4-基)-1H-吡唑-1-基]环己酮
向4-[1-(1，4-二oxa螺[4.5]癸-8-基)-1H-吡唑-4-基]-7-[2-(三甲基甲 硅烷基)乙氧基]甲基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶(2.13g，0.00467mol)中加 入丙酮(85mL)，接着加入在水(4.0mL)中的12M HCl。将该反应物于 室温下搅拌。1小时后，LCMS分析显示反应完成66％。4小时后，HPLC 显示反应完成80％。20小时后，HPLC显示无变化(且SEM未减少)。 将该反应混合物在过量的饱和NaHCO3猝灭。丙酮经旋转蒸发除去。 然后用EtOAc提取生成的碳酸氢盐水溶液和白色固体的混合物。将合 并的有机提取物饱和NaCl一起震摇，经Na2SO4干燥，然后浓缩至干， 留下2.0g粗产物。TLC(5％ iPrOH-40％ EtOAc-己烷)：产物Rf 0.12(缩 酮0.22)。粗产物经自动快速硅胶层析层析纯化，使用40g柱；流速40 mL/分钟；[A＝2％ iPrOH-己烷][B＝6％ iPrOH-50％ EtOAc/己烷]；A，2 分钟；梯度液-B25分钟，然后B10分钟。使用旋转蒸发器浓缩洗脱液， 得到1.3g白色固体。HPLC方法：Zorbax SB C18，5μm，15cm，35℃， 流速1.2mL/分钟，10％ CH3CN-H2O(0.05％ TFA)，至100％ CH3CN 9.0 分钟；停止时间12.3分钟；检测器268nm；起始原料保留时间，7.4分 钟；产物，6.9min(UV max 220，268，300，322nm)。1H NMR(CDCl3)δ 8.8(s，1H)；8.3(m，2H)；7.4(d，1H)；7.3(s，1H)；6.8(d，1H)；5.7(s，2H)； 4.7(m，1H，NCH)；3.6(t，2H)；2.3-2.5(m，8H)；0.9(t，2H)；-0.1(s，9H)。 MS(ES)412(M+1)。
步骤5：4-[4-(7-[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧 啶-4-基)-1H-吡唑-1-基]亚环己基乙腈
于0℃，向1.0M叔丁醇钾的THF(1.90mL)溶液中滴加入氰基甲 基膦酸二乙基酯(321μL，0.00198mol)的THF(4mL)溶液。将反应物维 持10分钟，然后于0℃。氮气氛下，边搅拌边将其加入到4-[4-(7-[2-(三 甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基)-1H-吡唑-1-基] 环己酮(743mg，0.00180mol)的THF(5mL)溶液中。将该反应物于室温 下搅拌1.5小时。LCMS分析显示全部转化为所需产物。然后向反应混 合物加入水和EtOAc。分离各相，水相用EtOAc提取。合并的有机提 取物用水洗涤，然后用饱和NaCl洗涤，然后经Na2SO4干燥并浓缩至 干，得到0.76g白色晶体固体(TLC(EtOAc)Rf 0.33)。产物经自动快速 硅胶层析层析纯化。使用40g柱；流速40mL/分钟；[A＝己烷][B＝ EtOAc]；A，2分钟；梯度液-B20分钟。旋转蒸发得到0.70g白色晶体 固体(89％得率)。1H NMR(CDCl3)δ 8.9(s，1H)；8.3(s，2H)；7.4(d，1H)； 7.3(s，1H)；6.9(d，1H)；5.7(s，2H)；5.3(s，1H，烯烃)；4.5(m，1H， NCH)；3.6(m，2H)；3.2(m，1H)；2.7(m，1H)；2.5(m，4H)；2.1(m，2H)； 1.0(m，2H)；-0.1(s，9H)。MS(ES)435(M+1)。
步骤6：4-[4-(7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基)-1H-吡唑-1-基]亚环己基乙 腈
将TFA(0.5mL，0.006mol)和4-[4-(7-[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基] 甲基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基)-1H-吡唑-1-基]亚环己基乙腈(22.7 mg，0.0000522mol)溶液搅拌1.5小时。然后使用旋转蒸发器浓缩该溶 液，以除去TFA。LCMS分析显示转化为羟基甲基中间体，M+H 335。 加入甲醇；使用旋转蒸发器再次浓缩甲醇混合物。使得到的残留物溶 于甲醇(1mL)并加入氢氧化铵(0.25mL，0.0064mol)。将生成的溶液搅 拌16小时。LCMS分析显示完成脱保护。然后使用旋转蒸发器浓缩溶 液。产物经prep HPLC分离，使用30mm x 100mm C18柱；18％ CH3CN-H2O(0.1％ TFA)，1分钟，至35％ 6分钟；60mL/分钟；检测器设 置在254nm；保留时间，4.4min。冻干洗脱液。得率7.6mg白色固体 (TFA盐；外消旋；34.6％)。1H NMR(d6-DMSO)δ 12.9(br s，1H，NH)； 8.9(s，2H)；8.5(s，1H)；7.8(m，1H)；7.3(m，1H)；5.6(s，1H，烯烃)； 4.6(m，1H，NCH)；2.8(m，1H)；2.6(m，1H)；2.5(m，2H)；2.3(m，2H)2.0 (m，2H)。MS(ES)305(M+1)。
实施例686：顺式-4-[4-(7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基)-1H-吡唑-1-基]环 己烷甲腈三氟乙酸盐

步骤1：顺式-4-[4-(7-[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基-7H-吡咯并 [2，3-d]嘧啶-4-基)-1H-吡唑-1-基]环己烷甲醛肟
于-10℃，将三氧化硫-吡啶复合物(53.4mg，0.000336mol)的 DMSO(0.3mL，0.004mol)溶液加入到顺式-4-[4-(7-[2-(三甲基甲硅烷 基)乙氧基]甲基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基)-1H-吡唑-1-基]环己基甲 醇(57.4mg，0.000134mol)和TEA(56.1μL，0.000403mol)的DCM(0.3 mL，0.004mol)溶液中于。将该混合物于10-20℃剧烈搅拌1小时. LCMS分析显示转化为醛。然后将该混合物倾入冰-水中，并用DCM提 取。提取物用10％柠檬酸、水、饱和碳酸氢钠水溶液、水和盐水洗涤， 然后经硫酸钠干燥。浓缩得到57mg残留物。
向得到的残留物中加入羟基胺-HCl(50mg)、1mL 20％ K2CO3和3 mL MeOH，于室温下搅拌该混合物，直至LCMS显示转化为相应的 肟，M+H441。产物经prep HPLCMS分离，使用30mm x 10，0mm，C18 柱；30％ CH3CN-H2O(0.1％ TFA)，1分钟，至60％ 6分钟；60mL/分钟； 检测器设置在m/z 441；保留时间，6.0分钟。冻干得到17.4mg白色固 体。
步骤2：顺式-4-[4-(7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基)-1H-吡唑-1-基]环己烷 甲腈
[A]使顺式-4-[4-(7-[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基-7H-吡咯并 [2，3-d]嘧啶-4-基)-1H-吡唑-1-基]环己烷甲醛肟(11.0mg，0.0000250mol) 溶于吡啶(0.25mL，0.0031mol)，加入苯磺酰氯(10.0μL，0.0000784 mol)，将得到的混合物于室温下搅拌。搅拌15小时后，LCMS分析显 示产物形成，M+H423。产物经prep HPLCMS分离，使用19mm x 100 mm C18柱；45％ CH3CN-H2O(0.1％ NH4OH)，1分钟，至75％ 6分钟； 30mL/分钟；检测器设置在m/z 423；保留时间，4.8分钟。使用旋转蒸 发器浓缩洗脱液，得到8mg所需产物。
使产物溶于TFA(0.25mL)。搅拌2小时。使用旋转蒸发器浓缩该 溶液，以除去TFA。加入甲醇，再次浓缩混合物。LCMS显示完全转 化为羟基甲基中间体(M+H323)。使残留物溶于甲醇(1mL)并加入氢氧 化铵(0.25mL)。将该溶液搅拌0.5小时，此时，LCMS显示完成脱保 护为所需产物M+H293。然后经旋转蒸发浓缩该混合物，产物经prep HPLCMS分离，使用19mm x 100mm C18柱；15％ CH3CN-H2O(0.1％ TFA)，1.5分钟，至30％ 6分钟；30mL/分钟；检测器设置在m/z 293； 保留时间，5.2分钟。冻干洗脱液，得到5.5mg产物，为TFA盐。1H NMR (d6-DMSO)δ 12.82(br s，1H，NH)；8.87(s，1H)；8.85(s，1H)；8.48(s， 1H)；7.82(m，1H)；7.24(m，1H)；4.40(m，1H，NCH)；3.22(m，1H)； 2.05(m，6H)；1.79(m，2H)。MS(ES)293(M+1)。
实施例687：2-[(顺式-4-[4-(7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基)-1H-吡唑-1-基] 环己基甲基)亚磺酰基]苄腈三氟乙酸盐

步骤1：4-[1-(顺式-4-[(2-溴代苯基)硫代]甲基环己基)-1H-吡唑-4- 基]-7-[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶
如同实施例686[A]，由甲磺酸(顺式-4-[4-(7-[2-(三甲基甲硅烷基) 乙氧基]甲基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基)-1H-吡唑-1-基]环己基甲基 酯，制备该化合物。得率73％。产物使用以下HPLC方法纯化：Zorbax SB C18，5μm，15cm，35C，流速1.2mL/min，10％ CH3CN-H2O(0.05％ TFA)，至100％ CH3CN 9.0分钟；停止时间12.3分钟；检测器254nm； 起始原料甲磺酸酯保留时间，7.5分钟；产物，9.9min(UV max 215，258， 300，& 326nm)。TLC：Rf 0.3，使用35％ EtOAc/5％ iPrOH/己烷。产物 经自动硅胶快速层析纯化，使用30％ EtOAc/5％ iPrOH/己烷。1H NMR (CDCl3)δ 8.84(s，1H)；8.31(s，1H)；8.26(s，1H)；7.55(m，1H)；7.39(d， 1H)；7.27(m，2H)；7.03(m，1H)；6.82(d，1H)；5.67(s，2H)；4.34(m， 1H，NCH)；3.55(m，2H)；2.98(d，2H)；2.28(m，2H)；2.02(m，3H)； 1.83(m，4H)；0.92(m，2H)；-0.06(s，9H)。MS(ES)598/600 1:1(M+1)。
步骤2：2-[(顺式-4-[4-(7-[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基-7H-吡咯并 [2，3-d]嘧啶-4-基)-1H-吡唑-1-基]环己基甲基)硫代]苄腈
将4-[1-(顺式-4-[(2-溴代苯基)硫代]甲基环己基)-1H-吡唑-4- 基]-7-[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶(62.7mg， 0.000105mol)、氰化锌(123mg，0.00105mol)和四(三苯膦)钯(0)(30.2 mg，0.0000262mol)在DMF(3mL)中搅拌，溶液用氮气吹洗。然后将该 溶液微波反应器加热至100℃ 25分钟。LCMS和HPLC分析显示>90％ 反应。产物经prepHPLCMS分离，使用30mm x 100mm C18柱； 52％ CH3CN-H2O(0.1％ TFA)，1.5分钟，至75％ 6分钟；60mL/分钟；检 测器设置在545nm。使用旋转蒸发器浓缩洗脱液，得到37mg 2-氰基 苯基硫TFA盐。HPLC方法：Zorbax SB C18，5μm，15cm，35C，流速1.2 mL/min，10％ CH3CN-H2O(0.05％ TFA)，至100％ CH3CN 9.0分钟；停 止时间12.3分钟；检测器265nm；起始原料保留时间，9.9分钟；产物，8.9 分钟。MS(ES)545(M+1)。
步骤3：2-[(顺式-4-[4-(7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基)-1H-吡唑-1-基]环己 基甲基)亚磺酰基]苄腈
将2-[(顺式-4-[4-(7-[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基-7H-吡咯并 [2，3-d]嘧啶-4-基)-1H-吡唑-1-基]环己基甲基)硫代]苄腈(30.6mg， 0.0000562mol)的TFA(1mL)溶液搅拌2小时。使用旋转蒸发器浓缩该 溶液，以除去TFA。加入甲醇加入。再次浓缩该混合物。使得到的残 留物溶于甲醇(1mL)并加入氢氧化铵(1mL)。将生成的溶液搅拌过夜， 此时HPLC显示完成脱保护。产物经prep HPLCMS分离，使用19mm x 100mm C18柱；30％ CH3CN-H2O(0.1％ TFA)，1.5分钟，至59％ 6分钟； 30mL/分钟；检测器设置在m/z 415nm；保留时间，4.7分钟。使用旋转 蒸发器浓缩洗脱液，得到36mg硫化物TFA盐，一种无色玻璃状物质。 NMR(d6-DMSO)δ 12.82(br s，1H，NH)；8.84(2单峰，2H)；8.45(s， 1H)；7.8(m，2H)；7.64(m，2H)；7.34(td，1H)；7.24(s，1H)；4.39(m，1H， NCH)；3.23(d，2H)；2.19(m，2H)；1.89(m，3H)；1.72(m，4H)。MS(ES) 415(M+1)。然后使该物质溶于CH2Cl2和冷却至0℃。向冷却的混合物 中加入MCPBA(12.9mg，0.0000562mol)，将得到的混合物搅拌1小时。 LCMS显示转化为产物且没有剩余的硫化物。经旋转蒸发浓缩该反应 混合物，产物经prep HPLCMS分离，使用19mm x 100mm C18柱；18％ CH3CN-H2O(0.1％ TFA)，1.0分钟，至35％ 6分钟；30mL/分钟；检测 器设置在m/z 431nm；保留时间，5.6分钟。通过冻干，由洗脱液中分 离产物。得量为27.6mg TFA盐。HPLC方法为：Zorbax SB C18，5μm， 15cm，35℃，流速1.2mL/min，10％ CH3CN-H20(0.05％ TFA)，至100％ CH3CN 9.0分钟；停止时间12.3分钟；检测器268nm；起始原料的保留 时间，5.6分钟；亚砜，4.8分钟；砜，5.2分钟；MCPBA，6.0分钟。1H NMR (CDCl3)δ 12.1(br s，1H，NH)；9.0(s，1H)；8.9(s，1H)；8.3(s，1H)；8.1 (m，1H)；7.9(m，1H)；7.8(m，1H)；7.6(m，2H)；7.0(m，1H)；4.4(m，1H， NCH)；3.1(dd，1H)；2.9(dd，1H)；2.5(m，1H)；2.3(m，1H)；2.3-1.7(m， 7H)。MS(ES)431(M+1)。
实施例688：2-[(顺式-4-[4-(7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基)-1H-吡唑-1-基] 环己基甲基)磺酰基]苄腈三氟乙酸盐

使2-[(顺式-4-[4-(7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基)-1H-吡唑-1-基]环己 基甲基)亚磺酰基]苄腈(17.2mg，0.0000400mol)(21mg TFA盐)溶于 DCM(10mL)并冷却至0℃。向混合物中加入MCPBA(18mg， 0.0000800mol)。将得到的混合物于0℃搅拌1小时，然后于室温下搅 拌16小时。HPLC和LCMS显示80％面积的产物和3％面积的亚砜。除 去MCPBA，使用饱和NaHCO3洗涤，通过旋转蒸发浓缩得到的洗涤混 合物。产物经prep HPLCMS分离，使用19mm x 100mm C18柱； 23％ CH3CN-H2O(0.1％ TFA)，1.0分钟，至43％ 6分钟；30mL/分钟；检 测器设置在m/z 447nm；保留时间，5.1分钟。通过冻干，由洗脱液中 分离产物。得量为5mg TFA盐。1HNMR(d6-DMSO)δ 12.70(br s，1H， NH)；8.83(s，1H)；8.82(s，1H)；8.41(s，1H)；8.21(dd，1H)；8.16(dd， 1H)；8.01(td，1H)；7.95(td，1H)；7.78(s，1H)；7.19(s，1H)；4.34(m，1H， NCH)；3.62(d，2H)；2.28(m，1H)；2.10(m，2H)；1.90(m，2H)；1.72(m， 4H)。MS(ES)447(M+1)。
实施例689：3-[4-(7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基)-1H-吡唑-1-基]环己基乙 腈三氟乙酸盐

步骤1：3-[4-(7-[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧 啶-4-基)-1H-吡唑-1-基]环己酮
向4-(1H-吡唑-4-基)-7-[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基-7H-吡咯 并[2，3-d]嘧啶(309mg，0.980mmol)的ACN(6mL)溶液中加入2-环己烯 -1-酮(190μL，01.96mmol)，接着加入DBU(40μL，0.3mmol)。将得到 的混合物搅拌1小时此时LCMS指示加入完成。真空浓缩混合物，粗 产物经柱层析纯化，获得产物(397mg，98％)。1H NMR(400MHz， CDCl3)：δ 8.84(s，1H)，8.27(s，1H)，8.25(s，1H)，7.45(d，1H)，6.79(d， 1H)，5.67(s，2H)，4.61(m，1H)，3.55(m，2H)，3.05-2.90(m，2H)， 2.45-2.30(m，4H)，2.05(m，1H)，1.90(m，1H)，0.92(m，2H)，-0.06(s， 9H)。MS(EI)m/z＝412.2(M+H)。
步骤2：(2E，Z)-3-[4-(7-[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基-7H-吡咯并 [2，3-d]嘧啶-4-基)-1H-吡唑-1-基]亚环己基乙腈
于0℃，向t-BuOK的THF(1.0M，0.255mL，0.255mmol)溶液中滴 加入氰基甲基膦酸二乙基酯(43μL，0.27mmol)的THF(0.6mL)溶液。 反应维持10分钟，然后滴加入3-[4-(7-[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲 基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基)-1H-吡唑-1-基]环己酮(100.0mg，0.2430 mmol)的THF(0.34mL)溶液。加入完成后，移去冷浴和反应于环境温 度保持16小时，此时LCMS指示加入完成，得到所需产物，为E和Z异 构体的混合物(87.9mg，83％)。1H NMR(400MHz，CDCl3)：δ 8.84(s， 0.5H)，8.83(s，0.5H)，8.27(d，1H)，8.25(s，1H)，7.40(s，0.5H)，7.39(s， 0.5H)，6.81(d，0.5H)，6.79(d，0.5H)，5.67(s，2H)，5.28(s，0.5H)，5.24(s， 0.5H)，4.4(m，1H)，3.55(m，2H)，3.1-2.8(m，2H)，2.5-2.1(m，6H)，0.92 (m，2H)，-0.06(s，9H)。MS(EI)m/z＝435.2(M+H)。
步骤3：3-[4-(7-[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧 啶-4-基)-1H-吡唑-1-基]环己基乙腈
向(2E，Z)-3-[4-(7-[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基-7H-吡咯并 [2，3-d]嘧啶-4-基)-1H-吡唑-1-基]亚环己基乙腈(42.0mg，0.0966mmol) 中加入THF(0.5mL)。使生成的溶液冷却至-78℃，然后滴加入1.0M L-Selectride的THF(120μL，0.12mmol)溶液。反应于-78℃维持1小 时，此时LCMS指示完成还原。于-78℃通过加入饱和的NH4Cl水溶液 和EtOAc猝灭反应，然后使温热至环境温度。分离各相，水相用另外 的EtOAc提取。合并的有机相用水洗涤，然后用饱和的NaCl洗涤，然 后经MgSO4干燥。粗产物经柱层析纯化，获得产物(26.5mg，63％)。1H NMR(400MHz，CDCl3)：δ 8.84(s，1H)，8.32(s，1H)，8.25(s，1H)，7.39 (d，1H)，6.81(d，1H)，5.67(s，2H)，4.53(m，1H)，3.52(m，2H)，2.6-1.4(m， 11H)，0.92(m，2H)，-0.06(s，9H)。MS(EI)m/z＝437.2(M+H)。
步骤4：3-[4-(7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基)-1H-吡唑-1-基]环己基乙腈三 氟乙酸盐
向3-[4-(7-[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧 啶-4-基)-1H-吡唑-1-基]环己基乙腈(30.1mg，0.0689mmol)中加入DCM (1.0mL)和TFA(1.0mL)。将得到的混合物于环境温度搅拌1小时，此 时LCMS指示裂解为N-羟基甲基中间体的反应完成。除去溶剂，向残 留物中加入甲醇(1.0mL)，接着加入乙二胺(37μL，0.55mmol)，此时 将反应物搅拌5小时，此时LCMS指示反应完成。除去溶剂，残留物通 过制备型LCMS纯化，提供产物，为TFA盐(24mg，83％)。1H NMR(400 MHz，CD3OD)：δ 8.91(s，1H)，8.82(s，1H)，8.45(s，1H)，7.84(s，1H)， 7.31(s，1H)，4.69(s，1H)，2.58(d，2H)，2.5-1.5(m，9H)。MS(EI)m/z＝ 307.10(M+H)。
实施例690：5-({顺式-4-[4-(7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基)-1H-吡唑-1-基] 环己基}硫基)-1H-1，2，4-三唑-3-胺双(三氟乙酸盐)

步骤1：反式-4-[4-(7-[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基-7H-吡咯并 [2，3-d]嘧啶-4-基)-1H-吡唑-1-基]环己醇
将4-[4-(7-[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧 啶-4-基)-1H-吡唑-1-基]环己酮(662mg，1.61mmol)的THF(5mL)溶液 冷却至0℃，缓慢加入四氢铝酸锂(2M在THF中，0.804mL，1.61 mmol)。使该混合物缓慢温热至环境温度，直至LCMS指示完成还原。 使反应物冷却至0℃，滴加入水(0.5mL)进行猝灭。加入DCM，将该 混合物于环境温度搅拌该混合物1小时，此时沉淀的固体经过滤除去。 真空浓缩滤液，留下白色固体(0.63g，99％)。该固体的HPLC显示反式 与顺式产物的比例为约4:1。Tlc(6:3:1 EtOAc：己烷：异丙醇)得到顺式产 物的Rf为0.25，而反式产物为0.18。产物经硅胶快速层析纯化，收获 230mg纯反式醇和25mg纯顺式醇和350mg混合的异构体。
1H NMR(400MHz，CDCl3)：δ 8.83(s，1H)，8.27(s，1H)，8.24(s，1H)， 7.39(d，1H)，6.81(d，1H)，5.67(s，2H)，4.24(m，1H)，3.79(m，1H)，3.54 (m，2H)，2.28(m，2H)，2.17(m，2H)，1.94(m，2H)，1.53(m，2H)，0.92(m， 2H)，-0.06(s，9H)。MS(EI)m/z＝414(M+H)。
步骤2：反式-4-[4-(7-[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基-7H-吡咯并 [2，3-d]嘧啶-4-基)-1H-吡唑-1-基]环己基甲烷磺酸酯
向反式-4-[4-(7-[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基-7H-吡咯并 [2，3-d]嘧啶-4-基)-1H-吡唑-1-基]环己醇(154mg，0.372mmol)中加入 DCM(1.0mL)和TEA(73μL，0.52mmol)。然后使生成的溶液冷却至0 ℃并加入甲磺酰氯(34μL，0.45mmol)。反应维持2小时，此时tlc和 LCMS指示反应完成。使反应物分配于水和DCM之间，分离各相，水 相经加入溶剂提取。合并的有机相用水洗涤，然后用饱和的NaCl洗涤， 然后经MgSO4干燥并真空浓缩，得到粗产物，其无须进一步纯化而 使用(173mg，95％)。1H NMR(400MHz，CDCl3)：δ 8.83(s，1H)，8.24(s， 2H)，8.24(s，1H)，7.39(d，1H)，6.80(d，1H)，5.67(s，2H)，4.77(m，1H)， 4.27(m，1H)，3.54(m，2H)，3.06(s，3H)，2.36(m，4H)，2.03(m，2H)，1.82 (m，2H)，1.53(m，2H)，0.92(m，2H)，-0.06(s，9H)。MS(EI)m/z＝492.1 (M+H)。
步骤3：5-({顺式-4-[4-(7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基)-1H-吡唑-1-基]环己 基}硫基)-1H-1，2，4-三唑-3-胺双(三氟乙酸盐)
向反式-4-[4-(7-[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基-7H-吡咯并 [2，3-d]嘧啶-4-基)-1H-吡唑-1-基]环己基甲磺酸酯(42mg，0.085mmol) 的DMF(800μL)溶液中加入3-氨基-1H-1，2，4-三唑-5-硫醇(30mg，0.26 mmol)和K2CO3(36mg，0.26mmol)。密封反应物并于100℃维持2小时， 此时LCMS指示转化为所需产物。反应用水稀释并用乙醚、乙酸乙酯 和3:1氯仿:异丙基醇顺序洗涤。合并的有机相用水洗涤，然后饱和的 NaCl，经MgSO4干燥并真空浓缩，粗产物经柱层析纯化，得到5-({顺 式-4-[4-(7-{[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基}-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶 -4-基)-1H-吡唑-1-基]环己基}硫基)-1H-1，2，4-三唑-3-胺(27.3mg，63％)。 向该产物中加入DCM(0.5mL)和TFA(0.5mL)，将反应物于环境温度 搅拌1小时，此时LCMS指示裂解为N-羟基甲基中间体的反应完成。除 去溶剂，向残留物中加入甲醇(1.0mL)，接着加入NH4OH(0.3mL)， 将反应物搅拌16小时，此时LCMS指示完成脱保护。除去溶剂，残留 物通过制备型LCMS纯化，提供产物，为双-TFA盐(15.1mg，29％)。1H NMR(400MHz，CD3OD)：δ 8.77(s，1H)，8.72(s，1H)，8.37(s，1H)，7.74 (d，1H)，7.21(d，1H)，4.40(m，1H)，3.97(m，1H)，2.25(m，2H)，2.04(m， 6H)。MS(EI)m/z＝382.2(M+H)。
实施例691：N-{5-[({顺式-4-[4-(7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基)-1H-吡唑 -1-基]环己基}甲基)硫基]-4H-1，2，4-三唑-3-基}甲烷磺酰胺三氟乙酸盐

步骤1. N-5-[(顺式-4-[4-(7-[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基-7H-吡咯 并[2，3-d]嘧啶-4-基)-1H-吡唑-1-基]环己基甲基)硫基]-4H-1，2，4-三唑-3- 基甲烷磺酰胺
使5-[(顺式-4-[4-(7-[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基-7H-吡咯并- [2，3-d]嘧啶-4-基)-1H-吡唑-1-基]环己基甲基)硫基]-4H-1，2，4-三唑-3-胺 (30.00mg，5.706E-5mol)溶于含TEA(0.024mL，0.00017mol)的DCM (2.00mL，0.0312mol)并于0℃冷却。向反应物中加入甲磺酰氯(0.0066 mL，0.000086mol)，将得到的混合物于0℃搅拌60分钟，此时LCMS 分析显示大部分为产物。反应在硅胶上层析，使用EtOAc作为洗脱液， 得到产物。LC/MS(M+1)+：604
步骤2. N-5-[(顺式-4-[4-(7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基)-1H-吡唑-1-基]环 己基甲基)硫基]-4H-1，2，4-三唑-3-基甲烷磺酰胺
向1-颈吡咯并圆底烧瓶[A]中的N-5-[(顺式-4-[4-(7-[2-(三甲基甲 硅烷基)乙氧基]甲基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基)-1H-吡唑-1-基]环己 基甲基)硫基]-4H-1，2，4-三唑-3-基甲烷磺酰胺(0.025g，0.000041mol)的 DCM(3.00mL，0.0468mol)溶液中加入TFA(mL，0.006mol)。将该反应 物于25℃搅拌16小时，此时LCMS分析显示无起始原料存在。使用旋 转蒸发器浓缩反应物并溶于甲醇(2.00mL，0.0494mol)，加入16M氨 水(0.2mL)。将该反应物于25℃搅拌3小时，此时LCMS分析显示无起 始原料存在。使用旋转蒸发器浓缩反应物并经prep LC纯化，得到产物， 为三氟乙酸盐。LC/MS(M+1)+：474，1H NMR(CD3OD)：8.87(s，1H)， 8.82(s，1H)，8.45(s，1H)，7.85(d，1H)，7.33(d，1H)，4.48(m，1H)，3.36(s， 3H)，3.23(d，2H)，2.30(m，2H)，2.04(m，3H)，1.85(m，4H)。
实施例692：[顺式-4-[4-(7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基)-1H-吡唑-1- 基]-1-(1H-1，2，4-三唑-1-基)环己基]乙腈

将1H-1，2，4-三唑(91.0mg，0.00132mol)，DBU(174μL，0.00070 mol)，[A]4-[4-(7-[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基-7H-吡咯并[2，3-d] 嘧啶-4-基)-1H-吡唑-1-基]亚环己基乙腈(86.4mg，0.000199mol)和 ACN(2.0mL)于室温下搅拌。4天后，LCMS显示约58％面积的产物 (两个峰，M+H 504，比例1:1)。用TFA中和反应物中的DBU。经prep HPLC分离产物，使用30mm x 100mm C18柱；32％ CH3CN-H2O (0.1％ TFA)，1分钟，至47％ 6分钟；60mL/分钟；检测器设置在254nm； 保留时间，5.1(A)& 5.4(B)分钟。使用旋转蒸发器浓缩洗脱液，得到22 mg(A)& 36mg(B)。
脱保护：使各产物分别溶于TFA(0.5mL)和搅拌1小时。LCMS显 示转化为羟基甲基衍生物(M+H 404)。使用旋转蒸发器浓缩该溶液， 以除去TFA。加入甲醇，再次浓缩得到的混合物。得到的残留物溶于 甲醇(1mL)，加入氢氧化铵(0.25mL)。将该溶液搅拌0.5小时。LCMS显 示完成脱保护(M+H 374)，然后通过旋转蒸发浓缩该混合物。各异构 体经prep HPLCMS分离，使用19mm x 100mm C18柱；15％ CH3CN-H2O(0.1％ TFA)，1.5分钟，至32％ 6分钟；30mL/分钟；检测 器设置在m/z 374；保留时间，4.5min(A)& 4.7min(B)。冻干洗脱液。 得到13mg异构体A和24mg异构体B(TFA盐，白色固体)。NMR分析 (包括NOE & COSY)与期望的结构一致，A＝顺式和B＝反式。NMR (d6-DMSO)δ 顺式：12.94(br s，1H，NH)；8.95(s，1H)；8.87(s，1H)；8.81 (s，1H)；8.42(s，1H)；8.14(s，1H)；7.85(m，1H)；7.22(m，1H)；4.48(m， 1H，NCH)；3.12(s，2H)；2.84(m，2H)；2.07(m，4H)；1.69(m，2H)。 MS(ES)374(M+1)。反式：12.85(br s，1H，NH)；8.94(s，1H)；8.89(s， 1H)；8.84(s，1H)；8.47(s，1H)；8.11(s，1H)；7.84(m，1H)；7.26(m，1H)； 4.50(m，1H，NCH)；3.48(s，2H)；2.42-2.10(m，8H)。MS(ES)374(M+1)。
实施例705：3-1-[4-(7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基)-1H-吡唑-1-基]丁-3- 炔-1-基-苄腈三氟乙酸盐

步骤1：3-{1-[4-(7-{[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基}-7H-吡咯并 [2，3-d]嘧啶-4-基)-1H-吡唑-1-基]丁-3-炔-1-基}苄腈

将在己烷(0.31mL)中的1M二异丁基氢化铝滴加到3-(3-氰基苯 基)-3-[4-(7-[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4- 基)-1H-吡唑-1-基]丙酸甲基酯(100mg，0.0002mol)(通过采用类似于 实施例712，步骤1的方法制备)的DCM(3mL，0.05mol)溶液中，使 混合物冷却至-78℃。于-78℃将该反应混合物搅拌4小时，此后用 冷甲醇(3mL，0.07mol)猝灭。使反应物温热至0℃并加入碳酸钾(60 mg，0.0004mol)和Bestmann-Ohira试剂(1.5eq，57mg)(E.Quesada等， Tetrahedron，62(2006)6673-6680)。将该反应物于室温下搅拌过夜，然 后分配于乙酸乙酯和水之间。有机层用饱和的NaCl洗涤，经MgSO4 干燥，过滤并浓缩，得到粗制产物。粗产物使用硅胶(EtOAC/己烷1:3 to 1:1)纯化，得到所需产物，3-{1-[4-(7-{[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲 基}-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基)-1H-吡唑-1-基]丁-3-炔-1-基}苄腈(40 mg混合物)。m/z＝469(M+1)。
骤2：3-1-[4-(7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基)-1H-吡唑-1-基]丁-3-炔-1- 基苄腈三氟乙酸盐
使用类似于实施例712，步骤4的方法，制备标题化合物(4.5mg， 46％)，为无定形白色固体.1H NMR(500MHz，DMSO)：(b，1H)， 9(s，1H)，8.8(s，1H)，8.4(s，1H)，8(s，1H)，7.8(m2H)，7.7(s，1H)，7.6(m， 1H)，7(m，1H)，5.9(m，1H)，3.4(dd，1H)，3.2(dd，1H)，2.9(s，1H)。m/z＝ 339(M+1)。
实施例706：3-{1-[4-(7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基)-1H-吡唑-1-基]丁-3- 炔-1-基}苯甲醛三氟乙酸盐

用实施例705的方法，制备标题化合物，为次级(secondary)产物 (4.5mg，46％)，为无定形白色固体.1H NMR(400MHz，CDCl3)： 10 (s，1H)，9(s，1H)，8.8(s，1H)，8.4(s，1H)，8(s，1H)，7.9(m1H)，7.8(m， 1H)，7.7s，1H)，7.6(m，1H)，7.1(s，1H)，5.9(m，1H)，3.4(dd，1H)，3.2(dd， 1H)，2.9(s，1H)。m/z＝342.
实施例712：4-[1-(3-甲氧基-1-苯基丙基)-1H-吡唑-4-基]-7H-吡咯并 [2，3-d]嘧啶三氟乙酸盐

步骤1：3-苯基-3-[4-(7-[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基-7H-吡咯并 [2，3-d]嘧啶-4-基)-1H-吡唑-1-基]丙酸甲基酯

将(2E)-3-苯基丙烯酸甲基酯(500mg，0.003mol)的ACN(2mL， 0.04mol)溶液缓慢加入到4-(1H-吡唑-4-基)-7-[2-(三甲基甲硅烷基)乙 氧基]甲基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶(0.5g，0.002mol)的ACN(2mL，0.04 mol)和DBU(500μL，0.003mol)溶液中。将该反应物于室温下搅拌过周 末。使反应物分配于水和EtOAc之间。有机层用饱和的氯化钠洗涤，经 MgSO4干燥，过滤并浓缩，得到油状物。产物经FCC在硅胶上纯化， 使用EtOAc/己烷(1:2-1:1)得到3-苯基-3-[4-(7-[2-(三甲基甲硅烷基)乙 氧基]甲基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基)-1H-吡唑-1-基]丙酸甲基酯(500 mg，70％)，为半固体残留物.
1H NMR(400MHz，CDCl3)：(s，1H)，8.4(s，2H)，7.4(m，5H)，6.8(d， 1H)，6(m，1H)，5.7(s，2H)，3.7-3.8(m，3H)，3.6(m，2H)，2.2(m，1H)，1.4 (m，2H)，1.1(m，2H)，0.02(s，9H)，m/z＝478(M+1)。
步骤2：3-苯基-3-[4-(7-[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基-7H-吡咯并 [2，3-d]嘧啶-4-基)-1H-吡唑-1-基]丙-1-醇

将在己烷(1M，0.69mL)中的二异丁基氢化铝加入到3-苯基 -3-[4-(7-[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4- 基)-1H-吡唑-1-基]丙酸甲基酯(150mg，0.00031mol)的DCM(3mL， 0.05mol)溶液中，在氮气氛下将该混合物冷却至-78℃。将反应物于-78 ℃搅拌1小时，使温热至室温4小时。用甲醇(100μL)和饱和的氯化铵 (100μL)猝灭反应，然后溶于乙酸乙酯，经MgSO4干燥和过滤。浓缩 滤液，得到3-苯基-3-[4-(7-[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基-7H-吡咯并 [2，3-d]嘧啶-4-基)-1H-吡唑-1-基]丙-1-醇(130mg，92％)，为油状物。m/z ＝450(M+1)。
步骤3：4-[1-(3-甲氧基-1-苯基丙基)-1H-吡唑-4-基]-7-[2-(三甲基甲硅 烷基)乙氧基]甲基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶

将氢化钠(9.6mg，0.00040mol)加入到3-苯基-3-[4-(7-[2-(三甲基 甲硅烷基)乙氧基]甲基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基)-1H-吡唑-1-基]丙 -1-醇(120mg，0.00027mol)的DMF(3mL，0.04mol)溶液中，将该混合 物冷却至0℃。将反应物搅拌20分钟，加入甲基碘(22μL，0.00035 mol)。使反应物温热至室温并搅拌过夜。使反应物分配于水和EtOAc 之间。有机层用饱和的NaCl洗涤，经MgSO4干燥，过滤并浓缩，得到 4-[1-(3-甲氧基-1-苯基丙基)-1H-吡唑-4-基]-7-[2-(三甲基甲硅烷基)乙 氧基]甲基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶(100mg，88％)，为半固体.m/z＝464 (M+1)。
步骤4：4-[1-(3-甲氧基-1-苯基丙基)-1H-吡唑-4-基]-7H-吡咯并[2，3-d] 嘧啶三氟乙酸盐
于室温下，将三氟乙酸(2mL，0.02mol)加入到4-[1-(3-甲氧基-1- 苯基丙基)-1H-吡唑-4-基]-7-[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基-7H-吡咯 并[2，3-d]嘧啶(80mg，0.0002mol)在DCM(3mL，0.05mol)中的混合物 中。搅拌2小时后起始原料被消耗和浓缩反应溶液，以除去TFA。粗制 反应用甲醇(3mL，0.07mol)稀释，用乙二胺(0.3mL，0.004mol)于室温 下处理。将该反应混合物搅拌18小时并浓缩，使用HPLC在C-18柱上 纯化，用ACN：含0.2％ TFA的水梯度液洗脱，得到标题化合物(43mg， 60％)，为白色无定形固体.1H NMR(400MHz，CDCl3)：(s，1H)， 8.8(s，1H)，8.4(s，1H)，7.8(s，1H)，7.4(m，1H)，7.3(m，5H)，7.2(b，1H)， 5.7(m，1H)，3.3(m，1H)，3.2(s，3H)，2.7(m，1H)，2.4(m，1H)。m/z＝334 (M+1)。
实施例715：3-1-[4-(7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基)-1H-吡唑-1-基]丁-3- 烯-1-基苄腈三氟乙酸盐

将[4-1-[1-(3-溴代苯基)丁-3-烯-1-基]-1H-吡唑-4-基-7H-吡咯并 [2，3-d]嘧啶(20mg，0.00005mol)在DMF(2mL，0.02mol)和氰化锌(60 mg，0.0005mol)中的混合物用氮气流脱气。然后用四(三苯膦)钯(0)(40 mg，0.00003mol)处理该混合物，再次用氮气脱气，然后于微波反应器 中加热至170℃15分钟。使反应物冷却，过滤并经HPLC C-18柱纯化， 用ACN/水/TFA梯度液洗脱，得到标题化合物(10mg，40％)，为白色无 定形固体。
1H NMR(400MHz，DMSO)：(s，1H)，8.8(s，1H)，8.4(s，1H)，7.9(s， 1H)，7.8(m，3H)，7.6(m，1H)，7.1(b，1H)，5.6-5.8(m，2H)，5.1(d，1H)，5 (d，1H)，3.3(m，1H)，3(m，1H)。m/z＝341(M+1)。
实施例716：4-1-[1-(3-溴代苯基)丁-3-烯-1-基]-1H-吡唑-4-基-7H-吡咯 并[2，3-d]嘧啶

步骤1：3-(3-溴代苯基)-3-[4-(7-[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基-7H- 吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基)-1H-吡唑-1-基]丙醛

将在己烷(1M，4mL)中的二异丁基氢化铝加入到3-(3-溴代苯 基)-3-[4-(7-[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4- 基)-1H-吡唑-1-基]丙酸乙基酯(600mg，0.001mol)在DCM(6mL，0.09 mol)中的-78℃溶液中。搅拌4小时后，用冷甲醇(300μL)猝灭反应， 然后饱和的氯化铵(500μL)加入和生成的溶液搅拌1小时。使反应物 分配于水和EtOAc之间。有机层用盐水洗涤，经MgSO4干燥，过滤并浓 缩。产物通过快速硅胶层析纯化，用己烷：EtOAc，(2:1-1:2)洗脱，得到 3-(3-溴代苯基)-3-[4-(7-[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基-7H-吡咯并 [2，3-d]嘧啶-4-基)-1H-吡唑-1-基]丙醛(400mg，70％)，为油状物。1H NMR(400MHz，CDCl3)：(s，1H)，8.9(s，1H)，8.4(s，2H)，7.6(d， 1H)，7.5(d，1H)，7.4(d，1H)，7.3-7.4(m，2H)，6.8(d，1H)，6.1(m，1H)，5.7 (s，2H)，4(m，1H)，3.6(m，2H)，3.3(dd，1H)，1.0(m，2H)，0.01(s，9H)。m/z ＝526，528(M+1)。
步骤2：4-1-[1-(3-溴代苯基)丁-3-烯-1-基]-1H-吡唑-4-基-7-[2-(三甲基甲 硅烷基)乙氧基]甲基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶

于0℃，将在THF(！M，200μL)中的叔丁醇钾加入到甲基三苯基膦 鎓碘化物(80mg，0.0002mol)的THF(2mL，0.02mol)溶液中。将该反应 物于室温下搅拌1小时，然后冷却至-78℃。滴加入3-(3-溴代苯 基)-3-[4-(7-[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4- 基)-1H-吡唑-1-基]丙醛(90mg，0.0002mol)的THF(2mL，0.02mol)溶 液。使反应物逐渐温热至室温。使反应物分配于水和EtOAc之间。有 机层用饱和的NaCl洗涤，经MgSO4干燥，过滤并浓缩，得到油状物。 产物经FCC在硅胶上纯化，用EtOAc:己烷(1:1)洗脱，得到4-1-[1-(3-溴 代苯基)丁-3-烯-1-基]-1H-吡唑-4-基-7-[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲 基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶(35mg，40％)，为油状物。m/z＝524，526 (M+1)。
步骤3：4-1-[1-(3-溴代苯基)丁-3-烯-1-基]-1H-吡唑-4-基-7H-吡咯并 [2，3-d]嘧啶
使用类似于实施例712，步骤4的方法，但是使用4-1-[1-(3-溴代苯 基)丁-3-烯-1-基]-1H-吡唑-4-基-7-[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基 -7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶，制备标题化合物(10mg，30％)，为白色无定形 固体，1H NMR(400MHz，DMSO)：(s，1H)，8.8(s，1H)，8.4(s，1H)， 7.8(s，1H)，7.7(s，1H)，7.5(m，2H)，7.3(m，1H)，7.1(s，1H)，5.7(m，2H)， 5.2(d，1H)，5.0(d，1H)，3.2(m，1H)，3.0(m，1H)。m/z＝394，396(M+1)。
实施例717：3-(4，4-二氟)-1-[4-(7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基)-1H-吡唑 -1-基]丁-3-烯-1-基苄腈

步骤1：4-{1-[1-(3-溴代苯基)-4，4-二氟代丁-3-烯-1-基]-1H-吡唑-4- 基}-7-{[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基}-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶

向3-(3-溴代苯基)-3-[4-(7-[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基-7H- 吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基)-1H-吡唑-1-基]丙醛(0.05g，0.00009mol)的 N，N-二甲基乙酰胺(2mL，0.02mol)溶液中加入三苯膦(0.1g，0.0006 mol)、二溴二氟代甲烷(50uL，0.0006mol)和在THF(0.7mL)中的0.76 M锌。将该反应物于室温下搅拌18小时。使反应物分配于水和EtOAc 之间。有机层用饱和的NaCl洗涤，经MgSO4干燥，过滤并浓缩，得 到油状物。产物经FCC在硅胶上纯化，用EtOAc，己烷(1:2)洗脱，得 到4-{1-[1-(3-溴代苯基)-4，4-二氟代丁-3-烯-1-基]-1H-吡唑-4- 基}-7-{[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基}-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶(20 mg，40％)，为澄清油状物。m/z＝560，562(M+1)。
步骤2：4-1-[1-(3-溴代苯基)-4，4-二氟代丁-3-烯-1-基]-1H-吡唑-4-基 -7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶

使用类似于实施例712，步骤4的方法，但是使用4-{1-[1-(3-溴代 苯基)-4，4-二氟代丁-3-烯-1-基]-1H-吡唑-4-基}-7-{[2-(三甲基甲硅烷基) 乙氧基]甲基}-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶，制备化合物4-1-[1-(3-溴代苯 基)-4，4-二氟代丁-3-烯-1-基]-1H-吡唑-4-基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶(30 mg，99％)，为油状物。m/z＝430，432(M+1)。
步骤3：3-4，4-二氟-1-[4-(7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基)-1H-吡唑-1-基] 丁-3-烯-1-基苄腈

将4-1-[1-(3-溴代苯基)-4，4-二氟代丁-3-烯-1-基]-1H-吡唑-4-基 -7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶(30mg，0.00007mol)在DMF(2mL，0.02mol) 和氰化锌(80mg，0.0007mol)中的混合物用氮气脱气。然后用四(三苯 膦)钯(0)(50mg，0.00004mol)处理该混合物并用氮气脱气，然后在微 波中加热至170℃ 15分钟。然后使反应物冷却，过滤并经HPLC在C-18 柱上纯化，用ACN/水/TFA梯度液洗脱，得到标题化合物(10mg，30％)， 为白色无定形固体.1H NMR(400MHz，DMSO)：(s，1H)，8.7(s， 1H)，8.4(s，1H)，7.9(s，1H)，7.7-7.8(m，3H)，7.5(m，1H)，7.1(m，1H)，5.7 (m，1H)，4.3-4.4(m，1H)，3.1(m，1H)，2.9(m，1H)。m/z＝377(M+1)。
按照标记“制备实施例号”的列中所述制备表14中的以下化合物， 而某些示例性合成方法的详细描述在下表14中提供。
表14





*实施例731的步骤1如下修饰：于0℃将Ph3P和CF2Br2在DMAC中 合并，然后使温热至室温直至经LCMS测定，内鎓盐形成完成。然后 将内鎓盐溶液再冷却至0℃，将醛和锌加入到内鎓盐溶液中，将该反 应物缓慢温热至室温。
实施例727：4-[1-(1-环戊基丁-3-烯-1-基)-1H-吡唑-4-基]-7H-吡咯并 [2，3-d]嘧啶三氟乙酸盐

步骤1：(2E)-3-环戊基丙烯酸
向丙二酸(1.06g，10.2mol)的吡啶(1.25mL)溶液中加入哌啶(0.15 mL)和环戊烷甲醛(1.00g，10.2mmol)。将该混合物加热至40℃ 2小时， 接着于室温下搅拌16小时。然后将该混合物在冰浴中冷却，加入2N HCl至酸化。产物用乙醚提取。醚提取物用HCl水溶液和盐水洗涤，经 硫酸钠干燥，过滤和真空除去溶剂，得到产物(1.30g，77％)，其无须进 一步纯化而使用。
1H NMR(300MHz，CDCl3)：(dd，1H)，5.80(dd，1H)，2.70-2.54(m， 1H)，1.93-1.32(m，8H)；MS(ES)：141(M+H)。
步骤2. (2E)-3-环戊基丙烯酸甲基酯
于0℃，向(2E)-3-环戊基丙烯酸(1.3g，9.3mmol)的DCM(65mL) 溶液中滴加入草酰氯(3.1mL，37mmol)。于0℃将生成的溶液搅拌40 分钟，然后于室温下搅拌2小时。蒸发挥发物，得到(2E)-3-环戊基丙烯 酰氯，为无色液体。使一份该(2E)-3-环戊基丙烯酰氯(0.75g，4.7mol) 溶于甲醇(10mL)，将生成的溶液搅拌2小时。蒸发溶剂，得到产物(700 mg，96％)。
1H NMR(300MHz，CDCl3)：(dd，1H)，5.79(dd，1H)，3.71(s，3H)， 2.66-2.50(m，1H)，1.92-1.27(m，8H)。
步骤3. 3-环戊基-3-[4-(7-[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基-7H-吡咯并 [2，3-d]嘧啶-4-基)-1H-吡唑-1-基]丙酸甲基酯
向4-(1H-吡唑-4-基)-7-[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基-7H-吡咯 并[2，3-d]嘧啶(2.9g，9.2mmol)和(2E)-3-环戊基丙烯酸甲基酯(1.70g， 11.0mmol)的ACN(100mL)溶液中加入DBU(2.7mL，18mmol)。将得 到的混合物搅拌96小时。真空除去CAN，使得到的残留物溶于乙酸乙 酯。用1.0N HCl洗涤该溶液，接着用盐水洗涤，然后经硫酸钠干燥， 真空除去溶剂。快速柱层析(用0-70％ 乙酸乙酯在己烷中的洗脱液洗 脱)，得到产物(2.73g，63％)。
1H NMR(300MHz，CDCl3)：(s，1H)，8.28(s，2H)，7.39(d，1H)， 6.81(d，1H)，5.67(s，2H)，4.46(dt，1H)，3.60(s，3H)，3.54(t，2H)，3.18 (dd，1H)，2.89(dd，1H)，2.59-2.42(m，1H)，1.95-1.80(m，1H)，1.75-1.10 (m，7H)，0.92(t，2H)，-0.06(s，9H)；MS(ES)：470(M+H)。
步骤4. 3-环戊基-3-[4-(7-[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基-7H-吡咯并 [2，3-d]嘧啶-4-基)-1H-吡唑-1-基]丙醛
于-78℃，向3-环戊基-3-[4-(7-[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基 -7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基)-1H-吡唑-1-基]丙酸甲基酯(0.501g，1.07 mmol)的THF(5.0mL)溶液中滴加入在DCM(2.35mL)中的1.00M二 异丁基氢化铝。用2小时边搅拌边将该反应物缓慢温热至-10℃。在该 温度下，加入另一份在DCM(1.50mL)中的1.0M二异丁基氢化铝。当 通过LCMS测定该反应完成时，加入K/Na的酒石酸盐的饱和溶液，接 着加入乙醚。于室温下，搅拌得到的混合物2小时。分离有机层并用 水和盐水洗涤，然后经硫酸钠干燥和真空除去溶剂，得到粘稠的油状 物，其无须进一步纯化而使用。
MS(ES)：442(M+H)。
于-78℃，向草酰氯(0.108mL，1.28mmol)的DCM(10.0mL)溶液 中加入DMSO(151μL，2.13mmol)。搅拌5分钟后，加入在DCM(3.00 mL)中的3-环戊基-3-[4-(7-[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基-7H-吡咯 并[2，3-d]嘧啶-4-基)-1H-吡唑-1-基]丙-1-醇(471mg，1.07mmol)。于-78 ℃搅拌该混合物30分钟。然后加入TEA(594μL，4.26mmol)。然后用 30分钟使得到的混合物温热至室温。加入水并分离各层。有机层用0.1 N HCl、水、饱和的饱和碳酸氢钠溶液和盐水顺序洗涤，然后经硫酸 钠干燥和真空除去溶剂。快速柱层析(用0-60％乙酸乙酯在己烷中的洗 脱液洗脱)，得到产物(384mg，82％)。
1H NMR(300MHz，CDCl3)：(s，1H)，8.87(s，1H)，8.71(br s，1H)， 8.30(s，1H)，7.47(br s，1H)，6.88(br s，1H)，5.69(s，2H)，4.66-4.49(m， 1H)，3.54(t，2H)，3.40(ddd，1H)，2.95(ddd，1H)，2.55-2.44(m，1H)， 2.01-1.21(m，8H)，0.98(t，2H)，0.00(s，9H)；MS(ES)：440(M+H)。
步骤5. 4-[1-(1-环戊基丁-3-烯-1-基)-1H-吡唑-4-基]-7-[2-(三甲基甲硅 烷基)乙氧基]甲基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶
于0℃，向1.0M叔丁醇钾在THF(0.207mL)中的THF(2.0mL) 溶液中加入三苯基甲基膦鎓溴化物(77.8mg，0.218mmol)。使得到的混 合物温热至室温并搅拌30分钟。加入3-环戊基-3-[4-(7-[2-(三甲基甲硅 烷基)乙氧基]甲基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基)-1H-吡唑-1-基]丙醛 (0.100g，0.228mmol)的THF(2.0mL)溶液。30分钟后，通过加入饱和 的氯化铵溶液猝灭该混合物，然后用乙醚提取产物。醚提取物经硫酸 钠干燥和真空除去溶剂。快速柱层析(用0-40％乙酸乙酯在己烷中的洗 脱液洗脱)，得到产物(40mg，44％)。
1H NMR(400MHz，CDCl3)：(s，1H)，8.26(s，1H)，8.19(br s，1H)， 7.40(s，1H)，6.83(br s，1H)，5.67(s，2H)，5.60(ddt，1H)，5.01(dq，1H)， 4.97-4.93(m，1H)，3.99(dt，1H)，3.54(t，2H)，2.79-2.60(m，2H)， 2.60-2.40(m，1H)，1.99-1.89(m，1H)，1.75-1.41(m，5H)，1.37-1.12(m， 2H)，0.92(t，2H)，-0.06(s，9H)；MS(ES)：438(M+H)。
步骤6. 4-[1-(1-环戊基丁-3-烯-1-基)-1H-吡唑-4-基]-7H-吡咯并[2，3-d] 嘧啶三氟乙酸盐
使4-[1-(1-环戊基丁-3-烯-1-基)-1H-吡唑-4-基]-7-[2-(三甲基甲硅 烷基)乙氧基]甲基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶(13mg，0.030mmol)溶于 DCM(3mL)，加入TFA(0.5mL)。生将成的溶液于室温下搅拌3小时。 真空除去溶剂。使残留物溶于THF(2mL)，加入6N NaOH(1mL)。将 该混合物于室温下搅拌1小时，然后分配于水和乙酸乙酯之间。有机 层经硫酸钠干燥和真空除去溶剂。通过制备型-HPLC/MS纯化(C18， 用H2O和含0.1％TFA的ACN的洗脱液洗脱)，得到产物(10mg，80％)。 1H NMR(400MHz，d6-DMSO)：(s，1H)，8.88(s，2H)，8.43(s，1H)， 7.79(t，1H)，7.19(dd，1H)，5.60(ddt，1H)，5.00-4.93(m，1H)，4.91-4.87 (m，1H)，4.23(dt，1H)，2.76-2.59(m，2H)，2.47-2.34(m，1H)，1.92-1.82 (m，1H)，1.68-1.22(m，6H)，1.21-1.09(m，1H)；MS(ES)：308(M+H)。
实施例729：4-[1-(1-环戊基-2-环丙基乙基)-1H-吡唑-4-基]-7H-吡咯并 [2，3-d]嘧啶三氟乙酸盐

步骤1. 4-[1-(1-环戊基-2-环丙基乙基)-1H-吡唑-4-基]-7-[2-(三甲基甲硅 烷基)乙氧基]甲基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶三氟乙酸盐
将4-[1-(1-环戊基丁-3-烯-1-基)-1H-吡唑-4-基]-7-[2-(三甲基甲硅 烷基)乙氧基]甲基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶(在实施例727，步骤5中制备) (54.0mg，0.123mmol)的DCM(1mL)溶液加入到新鲜制备的保持于0 ℃的过量的CH2N2的醚制溶液中。加入乙酸钯(10.0mg，0.044mol)。静 置2小时后，通过加入乙酸猝灭过量的CH2N2。然后用更多的DCM稀 释该溶液，用饱和的饱和碳酸氢钠溶液、水和盐水顺序洗涤，经硫酸 钠干燥和真空除去溶剂。经制备型-HPLC/MS纯化(C18，用H2O和含 0.1％ TFA的ACN的洗脱液洗脱)，得到产物(13mg，18％)。
1H NMR(300MHz，CDCl3)：(s，1H)，8.81(d，1H)，8.35(s，1H)， 7.59(t，1H)，7.03(t，1H)，5.76(s，2H)，4.10(t，1H)，3.59(t，2H)，2.57-2.36 (m，1H)，2.15-2.00(m，1H)，2.00-1.83(m，1H)，1.79-1.40(m，6H)， 1.37-1.09(m，2H)，0.97(t，2H)，0.55-0.26(m，3H)，0.07--0.15(m，11H)； MS(ES)：452(M+H)。
步骤2. 4-[1-(1-环戊基-2-环丙基乙基)-1H-吡唑-4-基]-7H-吡咯并[2，3-d] 嘧啶三氟乙酸盐
于室温下，将4-[1-(1-环戊基-2-环丙基乙基)-1H-吡唑-4- 基]-7-[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶三氟乙 酸盐(13mg，0.023mol)在含TFA(1.5mL)的DCM(2mL)溶液中搅拌2 小时。真空除去溶剂。使得到的残留物再溶于THF(3mL)，加入6N NaOH(2mL)。搅拌1小时后，使混合物分配于水和乙酸乙酯之间。有 机层经硫酸钠干燥和真空除去溶剂。经制备型-HPLC/MS纯化(C18， 用H2O和含0.1％TFA的ACN的洗脱液洗脱)，得到产物(9mg，90％)。 1H NMR(400MHz，d6-DMSO)：(s，1H)，8.90(s，1H)，8.84(s， 1H)，8.47(s，1H)，7.81(s，1H)，7.22(s，1H)，4.19(dt，1H)，2.43-2.29(m， 1H)，2.03-1.92(m，1H)，1.88-1.76(m，1H)，1.68-1.37(m，5H)，1.35-1.08 (m，3H)，0.43-0.26(m，2H)，0.24-0.13(m，1H)，0.07--0.03(m，1H)， -0.14--0.24(m，1H)；MS(ES)：322(M+H)。
实施例730：4-[1-(1-环戊基丁-3-炔-1-基)-1H-吡唑-4-基]-7H-吡咯并 [2，3-d]嘧啶三氟乙酸盐

步骤1. 4-[1-(1-环戊基丁-3-炔-1-基)-1H-吡唑-4-基]-7-[2-(三甲基甲硅 烷基)乙氧基]甲基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶
于0℃，向碳酸钾(38.4mg，0.278mmol)在甲醇(2.0mL)中的混合 物中加入3-环戊基-3-[4-(7-[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基-7H-吡咯 并[2，3-d]嘧啶-4-基)-1H-吡唑-1-基]丙醛(如在实施例727，步骤4中所述 制备)(61.0mg，0.139mmol)的甲醇(1.0mL)溶液，接着加入(1-二氮杂 -2-氧代丙基)膦酸二甲基酯(40.0mg，0.208mmol)的甲醇(1.0mL)溶液。 使该混合物缓慢温热至环境温度并搅拌16小时。然后用水稀释该混合 物，用乙酸乙酯提取。合并的提取物用水、饱和的氯化铵洗涤，然后 经硫酸钠干燥和真空除去溶剂，得到产物，其无须进一步纯化而使用 (52mg，86％)。
1H NMR(300MHz，CDCl3)：(s，1H)，8.47(s，1H)，8.29(s，1H)， 7.41(d，1H)，6.84(d，1H)，5.67(s，2H)，4.14(ddd，1H)，3.53(t，2H)，2.90 (ddd，1H)，2.79(ddd，1H)，2.66-2.49(m，1H)，1.98(t，1H)，2.00-1.88(m， 1H)，1.78-1.44(m，5H)，1.39-1.11(m，2H)，0.92(t，2H)，-0.06(s，9H)； MS(ES)：436(M+H)。
步骤2. 4-[1-(1-环戊基丁-3-炔-1-基)-1H-吡唑-4-基]-7H-吡咯并[2，3-d] 嘧啶三氟乙酸盐
将4-[1-(1-环戊基丁-3-炔-1-基)-1H-吡唑-4-基]-7-[2-(三甲基甲硅 烷基)乙氧基]甲基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶(52mg，0.12mmol)的DCM(3 mL)和TFA(1mL)溶液搅拌2小时。真空除去溶剂。使得到的残留物溶 于THF(3mL)，加入6N NaOH(2mL)。搅拌1小时后，使该混合物分 配于水和乙酸乙酯之间。有机层经硫酸钠干燥和真空除去溶剂。经制 备型-HPLC/MS纯化(C18，用H2O和含0.1％ TFA的ACN的洗脱液洗 脱)，得到产物(30mg，60％)。
1H NMR(300MHz，d6-DMSO)：(s，1H)，8.91(s，1H)，8.84(s，1H)， 8.47(s，1H)，7.80(s，1H)，7.19(s，1H)，4.34(dt，1H)，2.97-2.69(m，3H)， 2.50-2.32(m，1H)，1.93-1.77(m，1H)，1.70-1.09(m，7H)； MS(ES)：306(M+H)。
实施例731：4-[1-(1-环戊基丁基)-1H-吡唑-4-基]-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶 三氟乙酸盐

使4-[1-(1-环戊基丁-3-炔-1-基)-1H-吡唑-4-基]-7H-吡咯并[2，3-d] 嘧啶三氟乙酸盐(在实施例729中制备)(20mg，0.048mmol)溶于甲醇(2 mL)，加入催化量的5％ Pd-C。借助于氢气囊，将该混合物在1个氢气 压下搅拌。2小时后，过滤该混合物并经制备型-HPLC/MS纯化(C18， 用H2O和含0.1％ TFA的ACN的洗脱液洗脱)，得到产物(14mg，69％)。 1H NMR(400MHz，d6-DMSO)：(s，1H)，8.86(s，1H)，8.83(s， 1H)，8.45(s，1H)，7.79(t，1H)，7.20(d，1H)，4.11(dt，1H)，2.43-2.26(m， 1H)，2.02-1.70(m，3H)，1.68-1.35(m，4H)，1.33-0.89(m，5H)，0.83(t， 3H)；MS(ES)：310(M+H)。
实施例732：4-[1-(1-环戊基-4，4-二氟代丁-3-烯-1-基)-1H-吡唑-4- 基]-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶三氟乙酸盐

步骤1. 4-[1-(1-环戊基-4，4-二氟代丁-3-烯-1-基)-1H-吡唑-4-基]-7-[2-(三 甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶
向3-环戊基-3-[4-(7-[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基-7H-吡咯并 [2，3-d]嘧啶-4-基)-1H-吡唑-1-基]丙醛(如同在实施例727，步骤4中制备) (181mg，0.41mmol)的N，N-二甲基乙酰胺(3.6mL)溶液中加入三苯膦 (294mg，1.12mmol)，接着加入二溴二氟甲烷(235mg，1.12mmol)。然 后按一份加入RiekeZinc(1.8mL 2.5g在50ml THF中的悬浮液)。将 生成的混合物于室温下搅拌4.5小时。通过硅藻土过滤该混合物。使滤 液分配于乙醚和水之间。醚层用水和盐水洗涤，然后经硫酸钠干燥和 真空除去溶剂。快速柱层析(用0-30％乙酸乙酯的己烷梯度液洗脱)，得 到产物(104mg，53％)。
1H NMR(400MHz，CDCl3)：(s，1H)，8.51(br s，1H)，8.34(s，1H)， 7.51(d，1H)，6.93(d，1H)，5.74(s，2H)，4.05(ddd，1H)，4.04-3.96(m，1H)， 3.60(t，2H)，2.78-2.62(m，2H)，2.58-2.45(m，1H)，2.07-0.87(m，10H)， 0.00(s，9H)；MS(ES)：474(M+H)。
步骤2. 4-[1-(1-环戊基-4，4-二氟代丁-3-烯-1-基)-1H-吡唑-4-基]-7H-吡 咯并[2，3-d]嘧啶三氟乙酸盐
于室温下，将4-[1-(1-环戊基-4，4-二氟代丁-3-烯-1-基)-1H-吡唑-4- 基]-7-[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶(41mg， 0.086mmol)的DCM(3mL)和TFA(1.5mL)溶液搅拌2小时。然后真空 浓缩该溶液。使得到的残留物再溶于THF(3mL)中，加入6N NaOH(2 mL。搅拌1小时后，使该混合物分配于水和乙酸乙酯之间。有机层经 硫酸钠干燥和真空除去溶剂。经制备型-HPLC/MS纯化(C18，用H2O 和含0.1％ TFA的ACN的洗脱液洗脱)，得到所需产物(39mg，98％)。
1H NMR(400MHz，d6-DMSO)：(s，1H)，8.84(s，1H)，8.83(s， 1H)，8.45(s，1H)，7.80(t，1H)，7.18(d，1H)，4.32(ddt1H)，4.20(dt，1H)， 2.72-2.37(m，3H)，1.95-1.81(m，1H)，1.69-1.06(m，7H)； MS(ES)：344(M+H)。
其中共轭受体。例如用于实施例737，步骤3的共轭受体不能从市 售获得，这样的化合物依据下文对(2E)-3-(四氢呋喃-3-基)丙烯酸乙基 酯(对于制备实施例733)提供的方法制备。
制备(2E)-3-(四氢呋喃-3-基)丙烯酸乙基酯：

步骤A：四氢呋喃-3-甲醛
向Dess-Martin过碘烷(periodinane)(3.37g，7.95mmol)的DCM(20 mL)溶液中加入四氢呋喃-3-基甲醇(0.701mL，7.23mmol)。将该反应物 于环境温度搅拌2小时，然后真空除去溶剂。快速柱层析(使用DCM作 为洗脱液)，得到产物，为澄清油状物，其无须进一步纯化而使用。
1H NMR(400MHz，CDCl3)：(d，1H)，4.12-4.07(m，1H)，3.92-3.85 (m，2H)，3.80-3.73(m，1H)，3.10-3.02(m，1H)，2.26-2.10(m，2H)。
步骤B：(2E)-3-(四氢呋喃-3-基)丙烯酸乙基酯
向氢化钠(60％在矿物油中)(382mg，9.40mmol)在DMF(15.0mL) (THF也可使用)的0℃混合物中滴加入膦酰基乙酸三乙基酯(1.72mL， 8.68mmol)。使得到的混合物温热至室温并搅拌30分钟，然后再冷却至 0℃，此时滴加入四氢呋喃-3-甲醛(724mg，7.23mmol)的DMF(4.0mL) 溶液。将生成的混合物学该温度下搅拌1.5小时，此时混合物用水稀释 和产物用乙醚提取。合并的提取物用水和盐水洗涤，经硫酸钠干燥并 真空除去溶剂。快速柱层析(用0-40％乙酸乙酯的己烷的梯度液洗脱)， 得到产物(640mg，52％)。
1H NMR(400MHz，CDCl3)：(dd，1H)，5.86(dd，1H)，3.96-3.88(m， 2H)，3.81(dd，1H)，3.53(dd，1H)，3.04-2.93(m，1H)，2.20-2.10(m，1H)， 2.03(s，3H)，1.79(dq，1H)。
实施例736：4-[1-(1-环戊基-4，4-二氟代丁基)-1H-吡唑-4-基]-7H-吡咯 并[2，3-d]嘧啶三氟乙酸盐

使4-[1-(1-环戊基-4，4-二氟代丁-3-烯-1-基)-1H-吡唑-4-基]-7H-吡 咯并[2，3-d]嘧啶三氟乙酸盐(如同在实施例731中制备)(20.0mg，0.041 mmol)溶于甲醇(3mL)，加入催化量的载于碳上的5％ Pd。借助于氢气 囊，将该混合物于室温、在1个氢气压下搅拌2小时。过滤该混合物并 经制备型-HPLC/MS纯化(C18，用H2O和含0.1％ TFA的ACN的洗脱液 洗脱)，得到产物(4mg，21％)。
1H NMR(400MHz，d6-DMSO)(s，1H)，8.88(s，1H)，8.85(s， 1H)，8.48(s，1H)，7.80(t，1H)，7.20(dd，1H)，6.05(tt，1H)，4.17(dt，1H)， 2.47-2.34(m，1H)，2.14-1.08(m，12H)；MS(ES)：346(M+H)。
实施例737：3-(1-甲基环戊基)-3-[4-(7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基)-1H- 吡唑-1-基]丙腈三氟乙酸盐

步骤1. 1-甲基环戊烷甲醛
于0℃，按一份向环戊烷甲醛(1.00mL，9.36mmol)的DCM(47mL) 溶液中加入固体叔丁醇钾(1.44g，12.2mmol)，接着按一份加入甲基碘 (1.7mL，28mmol)。于0℃ 30分钟后，使反应混合物温热至室温并于此 温度下搅拌16小时。将该混合物倾入盐水中，分离各层。有机层经硫 酸钠干燥、倾析并浓缩，无须进一步纯化而用于步骤2。
步骤2：(2Z)-和(2E)-3-(1-甲基环戊基)丙烯腈
于0℃，向1.0M叔丁醇钾的THF(9.36mL)溶液中滴加入氰基甲 基膦酸二乙基酯(1.59mL，9.81mmol)的THF(10mL)溶液。移去冷浴， 使反应物温热至室温，接着再冷却至0℃，此时滴加入1-甲基环戊烷 甲醛(1.0g，在步骤1中生成)的THF(2mL)溶液。移去水浴和将该反应 物于环境温度下搅拌3小时。向该混合物加入水和乙醚。水层用乙醚 进一步提取。合并的提取物用盐水洗涤，经硫酸钠干燥，过滤并真空 吸收到硅胶中。快速柱层析(用0-10％乙酸乙酯在己烷中的梯度液洗 脱)，得到产物，为与己烷的混合物，产物无须进一步纯化而用于步骤 3。
步骤3：3-(1-甲基环戊基)-3-[4-(7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基)-1H-吡唑 -1-基]丙腈三氟乙酸盐
向4-(1H-吡唑-4-基)-7-[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基-7H-吡咯 并[2，3-d]嘧啶(0.134g，0.426mmol)在ACN(3mL)中的混合物中加入 (2Z)-和(2E)-3-(1-甲基环戊基)丙烯腈(0.12g，0.9mmol)的混合物，接着 加入DBU(0.13mL，0.90mmol)。将该反应物加热至60℃ 6小时。真空 除去CAN。加入乙酸乙酯，接着加入0.1N HCl。水层用3份乙酸乙酯 提取。合并的有机提取物用盐水洗涤，经硫酸钠干燥，过滤和蒸发溶 剂。粗制物质通过与TFA(2mL)一起在DCM(8mL)中搅拌2小时以脱 去保护。真空除去溶剂和TFA。使用THF(8mL)溶解残留物，加入6.0 M氢氧化钠的水(8mL)溶液。将该反应物在该碱性混合物中搅拌2小 时。用乙酸乙酯提取产物。干燥(Na2SO4)合并的提取物和真空除去溶 剂。经制备型-HPLC/MS纯化(C18，用H2O和含0.1％ TFA的ACN的洗 脱液洗脱)，得到产物(44mg，24％)。
1H NMR(400MHz，d6-DMSO)：δ 12.71(s，1H)，9.00(s，1H)，8.85(s， 1H)，8.51(s，1H)，7.81(s，1H)，7.18(s，1H)，4.72(dd，1H)，3.47(dd，1H)， 3.21(dd，1H)，1.74-1.51(m，6H)，1.44-1.32(m，1H)，1.09-1.00(m，1H)， 0.97(s，3H)；MS(ES)：321(M+H)。
实施例739：1-2-氰基-1-[4-(7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基)-1H-吡唑-1- 基]乙基环丙烷甲腈三氟乙酸盐

步骤1：1-(羟基甲基)环丙烷甲腈
用四氢硼酸锂(251mg，11.5mmol)处理在THF(12.0mL)中的1-氰 基环丙烷羧酸乙基酯(801mg，5.76mmol)。将该溶液加热至回流1.5小 时。一旦冷却至室温，用水猝灭反应，用乙酸乙酯提取。合并的提取 物经MgSO4干燥、过滤并浓缩，得到澄清油状物，其无须进一步纯化 而用于以下步骤(482mg，86％)。
1H NMR(400MHz，CDCl3)：(s，2H)，1.27(dd，2H)，0.98(dd， 2H)。
步骤2：1-甲酰基环丙烷甲腈
使Dess-Martin过碘烷(periodinane)(1.11g，2.62mmol)溶于DCM (12mL)，加入1-(羟基甲基)环丙烷甲腈(231mg，2.38mmol)。将该反应 物于环境温度搅拌1小时。然后通过快速柱层析该混合物(用0-80％乙 酸乙酯在己烷中的梯度液洗脱)，得到产物(106mg，46％)。
1H NMR(400MHz，CDCl3)：(s，1H)，1.79-1.74(m，4H)。
步骤3：1-[(E)-2-氰基乙烯基]环丙烷甲腈
于0℃，向1.0M叔丁醇钾的THF(1.12mL)溶液中缓慢加入到氰基 甲基膦酸二乙基酯(210mg，1.2mmol)的THF(2mL)溶液。移去冷浴， 使反应物温热至环境温度。然后使该溶液再冷却至0℃，滴加入1-甲 酰基环丙烷甲腈(101mg，1.06mmol)的THF(1.0mL)溶液。移去冷浴和 将反应物于环境温度搅拌3小时。然后用乙醚和水稀释该混合物，分 离乙醚溶液，用盐水洗涤，经硫酸钠干燥、过滤和真空除去溶剂。快 速柱层析(用0-60％乙醚在己烷中的梯度液洗脱)，得到产物(24mg， 19％)。
1H NMR(400MHz，CDCl3)：(d，1H)，5.82(d，1H)，1.80(dd，2H)， 1.39(dd，2H)。
步骤4：1-2-氰基-1-[4-(7-[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基-7H-吡咯 并[2，3-d]嘧啶-4-基)-1H-吡唑-1-基]乙基环丙烷甲腈
向4-(1H-吡唑-4-基)-7-[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基-7H-吡咯 并[2，3-d]嘧啶(61.4mg，0.195mmol)和1-[(E)-2-氰基乙烯基]环丙烷甲 腈(23mg，0.19mmol)的ACN(2mL)溶液中加入DBU(58uL，0.39 mmol)，将得到的混合物搅拌16小时。蒸发ACN，使残留物溶于乙酸 乙酯。用1.0N HCl、水和盐水洗涤该溶液，经硫酸钠干燥并真空除去 溶剂。快速柱层析(用0-80％乙酸乙酯在己烷中的梯度液洗脱)，得到产 物(49mg，58％)。
1H NMR(400MHz，CDCl3)：(s，1H)，8.43(s，1H)，8.34(s，1H)， 7.43(d，1H)，6.80(d，1H)，5.68(s，2H)，3.54(dd，1H)，3.51(dd，1H)，3.36 (dd，1H)，1.62(ddd，1H)，1.45(ddd，1H)，1.34(ddd，1H)，1.25(ddd，1H)， 0.92(t，2H)，-0.06(s，9H)；MS(ES)：434(M+H)。
步骤5：1-2-氰基-1-[4-(7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基)-1H-吡唑-1-基]乙 基环丙烷甲腈三氟乙酸盐
将1-2-氰基-1-[4-(7-[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基-7H-吡咯并 [2，3-d]嘧啶-4-基)-1H-吡唑-1-基]乙基环丙烷甲腈(48mg，0.11mmol)在 DCM(3mL)和TFA(2mL)的混合物中搅拌3小时。真空除去溶剂，使 残留物再次溶于THF(3mL)。加入6N NaOH(2mL)，将得到的混合物 于环境温度下搅拌3小时。使粗制反应混合物分配于乙酸乙酯和水之 间。分离各层和有机层经硫酸钠干燥和真空除去溶剂。经制备型 -HPLC/MS纯化(C18，用H2O和含0.1％ TFA的ACN的洗脱液洗脱)，得 到产物(20mg，43％)。
1H NMR(400MHz，d6-DMSO)：(s，1H)，8.99(s，1H)，8.88(s，1H)， 8.60(s，1H)，7.83(t，1H)，7.17(dd，1H)，4.55(dd，1H)，3.66(dd，1H)，3.54 (dd，1H)，1.55-1.30(m，4H)；MS(ES)：304(M+H)。
实施例740：N-[(1-2-氰基-1-[4-(7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基)-1H-吡唑 -1-基]乙基环戊基)甲基]苯甲酰胺

步骤1：1-氰基环戊烷羧酸甲基酯
向乙酸，氰基-，甲基酯(2.66mL，30.3mmol)和1，4-二溴丁烷(3.62 mL，30.3mmol)的丙酮(50mL)溶液中加入碳酸钾(8.37g，60.6mmol)。 将该反应物于环境温度下搅拌16小时。通过硅藻土过滤反应物并浓 缩。使得到的残留物分配乙醚和饱和的NH4Cl溶液之间，含水层用另 外两份乙醚提取。合并的醚提取液用盐水洗涤，经硫酸钠干燥，然后 过滤和真空除去溶剂。快速柱层析(用0-30％乙酸乙酯在己烷中的梯度 液洗脱)，得到产物(2.92g，63％)。
1H NMR(300MHz，CDCl3)：(s，3H)，2.30-2.21(m，4H)，1.93-1.82 (m，4H)。
步骤2：1-[(叔-丁氧基羰基)氨基]甲基环戊烷羧酸甲基酯
向1-氰基环戊烷羧酸甲基酯(1.26g，8.22mmol)的甲醇(100mL)溶 液中加入二氯化钴(2.1g，16.0mmol)。在冰-水浴中冷却紫色的混合物。 小心分批加入四氢硼酸钠(3.11g，82.2mmol)(放热反应)，得到黑色混 合物。加入完成后，停止冷却，将反应物在氮气下搅拌40分钟，通过 小心加入1N HCl(700ml)猝灭反应。真空除去甲醇，然后通过加入浓 NH4OH(aq)使该溶液呈碱性(pH～9)。混合物用DCM提取(6次)，合并 的DCM提取物经硫酸钠干燥并浓缩，得到粗产物，为淡黄色油状物。 向粗制胺的DCM(50ml)中加入二碳酸二叔丁基酯(1.31g，6.01 mmol)，将该反应物于25℃搅拌30分钟。反应用水稀释并用乙酸乙酯 提取3次。合并的提取物经硫酸钠干燥、过滤并真空除去溶剂。粗残 留物经快速柱层析纯化，得到所需产物(1.5g，71％)。
1H NMR(300MHz，CDCl3)：(s，1H)，3.69(s，3H)，3.26(d，2H)， 2.02-1.33(m，17H)。
步骤3：[1-(羟基甲基)环戊基]甲基氨基甲酸叔-丁基酯
于-78℃，向1-[(叔-丁氧基羰基)氨基]甲基环戊烷羧酸甲基酯(1.50 g，5.83mmol)的THF(25.0mL)滴加入1.0M二异丁基氢化铝的DCM (17.5mL)溶液。将反应物搅拌2小时，同时缓慢温热至-10℃。加入饱 和的K/Na的酒石酸盐溶液，接着加入乙醚。将该混合物于环境温度搅 拌30分钟，分离有机层，用水和盐水洗涤。然后经硫酸钠干燥有机层， 真空除去溶剂，得到产物(1.03g，77％)。1H NMR(300MHz，CDCl3)：δ .4.90(br s，1H)，3.27(s，2H)，3.06(d，2H)，1.5-1.17(m，8H)，1.44(s，9H)。
步骤4：[(1-甲酰基环戊基)甲基]氨基甲酸叔-丁基酯
于-78℃，向草酰氯(456μL，5.38mmol)的DCM(30.0mL)溶液中 加入DMSO(637μL，8.97mmol)，将得到的混合物搅拌5分钟。加入在 DCM(10.0mL)中的[1-(羟基甲基)环戊基]甲基氨基甲酸叔-丁基酯 (1.03g，4.48mmol)，于-78℃将得到的混合物搅拌30分钟。加入TEA (2.50mL，17.9mmol)，用30分钟使得到的混合物温热至环境温。加入 水。有机相用0.1N HCl、水、饱和碳酸氢钠溶液和盐水顺序洗涤，然 后经硫酸钠干燥和真空除去溶剂，得到产物(957mg，94％)。1HNMR (300MHz，CDCl3)：(s，1H)，4.94(br s，1H)，3.25(d，2H)， 1.89-1.46(m，8H)，1.41(s，9H)。
步骤5：(1-[(E)-2-氰基乙烯基]环戊基甲基)氨基甲酸叔-丁基酯和 (1-[(Z)-2-氰基乙烯基]环戊基甲基)氨基甲酸叔-丁基酯
于0℃，向1.0M叔丁醇钾的THF(4.4mL)溶液中滴加入氰基甲 基膦酸二乙基酯(820mg，4.6mmol)的THF(6.0mL)。移去冷浴，使反 应物温热至环境温度。然后使该混合物再冷却至0℃，滴加入[(1-甲酰 基环戊基)甲基]氨基甲酸叔-丁基酯(952mg，4.19mmol)的THF(4.0mL) 溶液。使反应物温热至环境温度，将温热的混合物搅拌16小时。然后 用乙醚和水稀释反应混合物。分离有机层和洗涤，用水和盐水顺序洗 涤，然后经硫酸钠干燥，然后过滤和真空除去溶剂，得到产物(1.05g， 99％)，为(E)和(Z)异构体的混合物。
1H NMR(300MHz，CDCl3)：(d，1H，E)，6.46(d，1H，Z)，5.36(d， 1H，Z)，5.36(d，1H，E)，4.70(br s，1H，Z)，4.51(br s，1H，E)，3.25(d，2H， Z)，3.18(d，2H，E)，1.88-1.48(m，8H(E)和8H(Z))，1.43(s，9H(E)和9H (Z))；MS(ES)：151(M+H-Boc)。
步骤6：[(1-2-氰基-1-[4-(7-[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基-7H-吡咯 并[2，3-d]嘧啶-4-基)-1H-吡唑-1-基]乙基环戊基)甲基]氨基甲酸叔-丁基 酯
向4-(1H-吡唑-4-基)-7-[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基-7H-吡咯 并[2，3-d]嘧啶(355mg，1.12mmol)和(1-[(E)-2-氰基乙烯基]环戊基甲 基)氨基甲酸叔-丁基酯和(1-[(Z)-2-氰基乙烯基]环戊基甲基)氨基甲酸 叔-丁基酯(作为异构体的混合物)(329mg，1.31mmol)在ACN(10mL) 中的溶液中加入DBU(0.168mL，1.12mmol)。将得到的混合物于环境 温度下搅拌3小时，接着加热至60℃ 2.5小时。真空除去CAN，得到的 残留物经快速柱层析纯化(用0-55％乙酸乙酯在己烷中洗脱)，得到产物 (350mg，55％)。
1H NMR(300MHz，CDCl3)：(s，1H)，8.37(br s，1H)，8.34(s，1H)， 7.41(d，1H)，6.82(d，1H)，5.68(s，2H)，5.37(br s，1H)，4.52(dd，1H)， 3.54(t，2H)，3.40(dd，1H)，3.23(dd，1H)，3.08(d，1H)，2.90(dd，1H)， 1.84-1.47(m，8H)，1.45(s，9H)，0.92(t，2H)，-0.06(s，9H)； MS(ES)：566(M+H)。
步骤7：N-[(1-2-氰基-1-[4-(7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基)-1H-吡唑-1-基] 乙基环戊基)甲基]苯甲酰胺
将[(1-2-氰基-1-[4-(7-[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基-7H-吡咯 并[2，3-d]嘧啶-4-基)-1H-吡唑-1-基]乙基环戊基)甲基]氨基甲酸叔-丁基 酯(175mg，0.309mmol)在DCM(5mL)和TFA(5mL)中的溶液搅拌3小 时，然后真空除去溶剂。将得到的残留物在THF(3mL)和6N NaOH(3 mL)的混合液中搅拌3小时。真空除去THF，加入水(10mL)。混合物用 几份含15％异丙醇的DCM提取。合并的提取物经硫酸钠干燥和真空除 去溶剂，得到产物，其无须进一步纯化而使用。MS(ES)：336(M+H)。
向3-[1-(氨基甲基)环戊基]-3-[4-(7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基)-1H- 吡唑-1-基]丙腈(31mg，0.060mmol)和苯甲酰氯(7.0μL，0.060mol)的 DCM(1.0mL)溶液中加入TEA(17μL，0.12mmol)。15分钟后，真空除 去溶剂，混合物经制备型-HPLC/MS纯化(C18，先用H2O和含0.1％ TFA 的ACN的梯度液洗脱，接着层析纯化，用H2O和含0.15％ NH4OH的梯 度液洗脱)，得到产物(7mg，27％)。
1H NMR(400MHz，d6-DMSO)：(s，1H)，8.95(s，1H)，8.68(s，1H)， 8.55(s，1H)，8.41(s，1H)，7.92-7.87(m，2H)，7.60(d，1H)，7.59-7.48(m， 3H)，7.02(d，1H)，4.83(dd，1H)，3.52-3.45(m，2H)，3.42(dd，1H)，3.27 (dd，1H)，2.06-1.95(m，1H)，1.68-1.12(m，7H)；MS(ES)：440(M+H)。
实施例741：3-1-[(苄氧基)甲基]环戊基-3-[4-(7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶 -4-基)-1H-吡唑-1-基]丙腈三氟乙酸盐

步骤1：1-(羟基甲基)环戊烷甲腈
将1-氰基环戊烷羧酸甲基酯(在实施例740，步骤1制备)(500mg， 3.0mmol)在THF(7mL)中的混合物用四氢硼酸锂(100mg，6.0mmol) 处理。将生成的溶液加热至回流3小时，然后于环境温度搅拌16小时。 混合物通过加入水猝灭，用乙酸乙酯提取。合并的有机提取物经 Na2SO4干燥，然后过滤和真空除去溶剂，得到产物(387mg，95％)。1H NMR(300MHz，CDCl3)：(s，2H)，2.39-1.60(m，8H)。
步骤2：1-[(苄氧基)甲基]环戊烷甲腈
向1-(羟基甲基)环戊烷甲腈(0.30g，2.0mmol)的DMF(4mL)溶液 中加入氢化钠(60％分散于矿物油中，0.101g，2.52mol)。将得到的混合 物搅拌20分钟，接着加入苄基溴(0.28mL，2.4mmol)。将该反应物于环 境温度下搅拌64小时。加入另外的氢化钠(60％分散于矿物油中，0.060 g，1.5mmol)和苄基溴(0.18mL，1.5mmol)，将反应物搅拌另外30分钟。 然后将水加入到该混合物中，接着加入盐水，含水层用乙酸乙酯提取。 合并提取物，经硫酸钠干燥，然后真空除去溶剂。向得到的残留物中 加入水。通过用乙醚提取分离该产物。乙醚提取物经硫酸钠干燥并蒸 发溶剂。快速柱层析(用0-30％乙酸乙酯在己烷中的梯度液洗脱)，得到 产物(330mg，64％)。
1H NMR(300MHz，CDCl3)：(m，5H)，4.62(s，2H)，3.44(s， 2H)，2.18-2.03(m，2H)，1.90-1.62(m，6H)。
步骤3：1-[(苄氧基)甲基]环戊烷甲醛
于0℃，向含1-[(苄氧基)甲基]环戊烷甲腈(0.16g，0.75mmol)的在 甲苯(5mL)中的混合物中加入在己烷(0.8mL)中的1.0M二异丁基氢化 铝。将该反应物于0℃搅拌1.5小时，此时起始原料腈被消耗。将该反 应物冷却至-78℃，通过加入甲醇猝灭。使混合物升温至环境温度， 加入3N HCl。搅拌45分钟后，加入固体NaCl，混合物用3份乙酸乙酯 提取。干燥(Na2SO4)合并的提取物并过滤，真空除去溶剂。快速柱层 析得到的残留物(用0-30％乙酸乙酯在己烷中的梯度液洗脱)，得到产物 (20mg，12％)。
1H NMR(300MHz，CDCl3)：(s，1H)，7.38-7.26(m，5H)，4.52(s， 2H)，3.54(s，2H)，2.00-1.89(m，2H)，1.66-1.46(m，6H)。
步骤4：(2E)-和(2Z)-3-1-[(苄氧基)甲基]环戊基丙烯腈
向氰基甲基膦酸二乙基酯(18μL，0.11mmol)在THF(1mL)中的 搅拌溶液中加入1.0M叔丁醇钾的THF(0.10mL)溶液。将得到的混合 物搅拌30分钟，此时加入1-[(苄氧基)甲基]环戊烷甲醛(0.020g，0.092 mmol)的THF(1mL)溶液。将得到的混合物搅拌16小时。然后将水加 入到反应物中，得到的混合物用3份乙醚提取。合并的提取物用盐水 洗涤，然后经硫酸钠干燥，学硫酸钠中倾析，真空除去溶剂，得到产 物，其无须进一步纯化而用于随后的共轭加成步骤。
1H NMR(400MHz，CDCl3)：(m，5H)，6.80(d，1H(E))，6.59 (d，1H(Z))，5.34(d，1H(E))，5.33(d，1H(Z))，4.53(s，2H(Z))，4.50(s， 2H(E))，3.45(s，2H(Z))，3.31(s，2H(E))，1.80-1.55(m，8H)； MS(ES)＝242(M+H)。
步骤5：3-1-[(苄氧基)甲基]环戊基-3-[4-(7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4- 基)-1H-吡唑-1-基]丙腈三氟乙酸盐
向(2E)-和(2Z)-3-1-[(苄氧基)甲基]环戊基丙烯腈(在步骤4中生成 的)和4-(1H-吡唑-4-基)-7-[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基-7H-吡咯并 [2，3-d]嘧啶(0.037g，0.12mmol)在ACN(1.5mL)的混合物中加入DBU (18μL，0.12mmol)。将得到的混合物于环境温度下搅拌3小时，然后加 热至60℃28小时。反应混合物用乙醚和0.1N HCl稀释。分离各层， 含水层用乙酸乙酯提取。乙酸乙酯提取物用盐水洗涤，经硫酸钠干燥， 倾析和真空除去溶剂。使得到的残留物溶于DCM(3mL)和TFA(0.75 mL)，将该溶液搅拌3小时。真空除去溶剂，使得到的残留物溶于THF (5mL)和6.0M氢氧化钠的水(3mL)溶液中并搅拌2小时。反应混合物 用3份乙酸乙酯提取。合并的提取物用盐水洗涤，经硫酸钠干燥，倾析 和真空除去溶剂。粗制混合物经制备型-HPLC/MS纯化(C18，用H2O 和含0.1％ TFA的ACN的洗脱液洗脱)并冻干，得到所需产物(10mg， 20％经两步骤)。
1H NMR(400MHz，d6-DMSO)：(br s，1H)，8.99(s，1H)，8.86(s， 1H)，8.52(s，1H)，7.80(s，1H)，7.38-7.23(m，5H)，7.19-7.16(m，1H)，4.92 (dd，1H)，4.50(d，1H)，4.44(d，1H)，3.49(dd，1H)，3.35(d，1H)，3.23(dd， 1H)，3.05(d，1H)，1.92-1.82(m，1H)，1.66-1.27(m，7H)； MS(ES)：427(M+H)。
实施例742：3-[1-(甲基磺酰基)吡咯烷-3-基]-3-[4-(7H-吡咯并[2，3-d] 嘧啶-4-基)-1H-吡唑-1-基]丙腈三氟乙酸盐

步骤1：3-(羟基甲基吡咯烷-1-羧酸苄基酯
于0℃，向1-[(苄氧基)羰基]吡咯烷-3-羧酸(1.0g，4.0mmol)的THF (37mL)溶液中滴加入1.0M硼烷的THF(16.4mL)溶液。使反应物温热 至室温并搅拌16小时。使该混合物冷却至0℃，加入10％ HCl(50mL。 加入后，混合物用DCM提取，用饱和的NaHCO3溶液和盐水顺序洗涤 提取物，然后经硫酸钠干燥，过滤和真空除去溶剂。产物无须进一步 纯化而用于随后的氧化步骤。
1H NMR(300MHz，CDCl3)：7.39-7.26(m，5H)，5.11(s，2H)， 3.61-3.31(m，5H)，3.18(dt，1H)，2.75(br s，0.45H)，2.59(br s，0.45H)， 2.49-2.31(m，1H)，2.19(br s，0.1H)，2.05-1.89(m，1H)，1.77-1.58(m， 1H)；MS(ES)：236(M+H)。
步骤2：3-甲酰基吡咯烷-1-羧酸苄基酯
于-78℃，将DMSO(597μL，8.42mmol)加入到草酰氯(427μL， 5.05mmol)的DCM(25mL)溶液中。5分钟后，加入3-(羟基甲基)吡咯 烷-1-羧酸苄基酯(在步骤1中生成的)。于-78℃继续反应30分钟。然后 加入TEA(2.3mL，17mmol)。然后用30分钟使得到的混合物温热至室 温。然后加入水。分离各层，有机相用0.1N HCl、水、饱和的NaHCO3 和盐水顺序洗涤。然后有机相经硫酸钠干燥和真空除去溶剂，得到产 物(0.82g，88％经两步骤)。
1H NMR(300MHz，CDCl3)：(d，1H)，7.38-7.28(m，5H)，5.13(s， 2H)，3.79(dd，1H)，3.65-3.35(m，3H)，3.11-2.99(m，1H)，2.32-2.04(m， 2H)。
步骤3：3-[(E)-2-氰基乙烯基]吡咯烷-1-羧酸苄基酯和3-[(Z)-2-氰基乙烯 基]吡咯烷-1-羧酸苄基酯
于0℃，向1.0M叔丁醇钾的THF(4.40mL)溶液中滴加入氰基甲 基膦酸二乙基酯(820mg，4.6mmol)的THF(6.0mL)溶液。移去冷浴， 使反应物温热至室温并搅拌15分钟。使该混合物冷却至0℃，滴加入 3-甲酰基吡咯烷-1-羧酸苄基酯(0.82g，2.3mmol)的THF(4.00mL)溶 液。继续冷却并将反应物于环境温度搅拌16小时。混合物用乙醚和水 稀释，分离各层，有机层用水洗涤，接着用盐水洗涤，然后经硫酸钠 干燥，过滤和真空除去溶剂。得到的残留物经快速柱层析纯化(用 0-35％乙酸乙酯在己烷中的梯度液洗脱)，得到产物，为E和Z异构体的 混合物(246mg，42％)。
1H NMR(300MHz，CDCl3)：δ 7.41-7.27(m，5H)，6.70-6.58(m，0.3H(E))， 6.38(dt，0.7H(Z))，5.50-5.30(m，1H)，5.14(s，2H)，3.79-3.11(m，5H)， 2.27-2.06(m，1H)，1.90-1.70(m，1H)；MS(ES)：279(M+Na)。
步骤4：3-2-氰基-1-[4-(7-[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基-7H-吡咯并 [2，3-d]嘧啶-4-基)-1H-吡唑-1-基]乙基吡咯烷-1-羧酸苄基酯
向3-[(E)-2-氰基乙烯基]吡咯烷-1-羧酸苄基酯和3-[(Z)-2-氰基乙烯 基]吡咯烷-1-羧酸苄基酯(241mg，0.940mmol)和DBU(234μL，1.57 mmol)在ACN(13mL)的混合物中加入4-(1H-吡唑-4-基)-7-[2-(三甲基 甲硅烷基)乙氧基]甲基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶(250mg，0.78mmol)。将 该混合物于环境温度下搅拌3小时。真空除去溶剂。使得到的残留物 溶于乙酸乙酯，有机层用1N HCl、水、饱和的NaHCO3和盐水顺序洗 涤。洗涤的溶液经硫酸钠干燥和真空除去溶剂。经快速柱层析纯化(用 0-100％[5％ MeOH/DCM]在己烷中的梯度液洗脱)，得到产物，为非 对映体的混合物(400mg，89％)。
1H NMR(400MHz，CDCl3非对映体的混合物)：(s，1H)，8.35-8.28 (m，2H)，7.42-7.25(m，6H)，6.80-6.76(m，1H)，5.69-5.66(m，2H)， 5.15-5.04(m，2H)，4.46-4.32(m，1H)，3.84-3.84(m，6H)，3.54(t，2H)， 2.26-2.13(m，1H)，1.84-1.54(m，2H)，0.95-0.89(m，2H)，-0.06(s，9H)； MS(ES)：572(M+H)。
步骤5.3-吡咯烷-3-基-3-[4-(7-[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基-7H-吡 咯并[2，3-d]嘧啶-4-基)-1H-吡唑-1-基]丙腈
使3-2-氰基-1-[4-(7-[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基-7H-吡咯并 [2，3-d]嘧啶-4-基)-1H-吡唑-1-基]乙基吡咯烷-1-羧酸苄基酯(161mg， 0.282mmol)溶于甲醇(5mL)，加入催化量的5％ Pd-C。将该悬浮液于 环境温度下，在用氢气囊提供的1个氢气压下搅拌1小时。然后加入催 化量的10％ Pd-C，将该反应物在用氢气囊提供的1个氢气压下搅拌2小 时。然后过滤该混合物，经制备型-HPLC/MS纯化(C18，用H2O和含 0.15％ NH4OH的CAN的梯度液洗脱)，得到产物，为非对映体的混合 物(57mg，46％)。
1H NMR(400MHz，CDCl3，a非对映体的混合物)：δ 8.84(s，1H)， 8.34-8.32(m，2H)，7.40(d，1H)，6.81-6.78(m，1H)，5.67(s，2H)，4.38(dt， 1H)，3.54(t，2H)，3.30-1.38(m，9H)，0.92(t，2H)，-0.06(s，9H)； MS(ES)：438(M+H)。
步骤6：3-[1-(甲基磺酰基)吡咯烷-3-基]-3-[4-(7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4- 基)-1H-吡唑-1-基]丙腈三氟乙酸盐
于0℃，向3-吡咯烷-3-基-3-[4-(7-{[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲 基}-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶基)1H-吡唑-1-基]丙腈(25mg，0.057mmol) 和TEA(10μL，0.074mmol)的DCM(1.0mL)溶液中加入甲磺酰氯(6 μL，0.074mmol)。使反应物达到环境温度并搅拌16小时。真空除去一 半溶剂并将TFA(1mL)加入到小瓶中。于室温下搅拌1小时后，真空除 去溶剂，使得到的残留物在THF(0.5mL)中重新构成。向其中加入6N NaOH(1mL)，将该溶液搅拌2小时。反应混合物用5份乙酸乙酯提取。 干燥(Na2SO4)合并的提取物，倾析并浓缩。使用制备型-HPLC/MS (C18，用H2O和含0.1％ TFA的ACN的洗脱液洗脱)，得到产物(16mg， 57％)。
1H NMR(400MHz，d6-DMSO，非对映体的混合物)：δ 12.69(s，1H)， 8.98(s，0.5H)，8.95(s，0.5H)，8.84(s，1H)，8.53-8.51(m，1H)，7.80-7.77 (m，1H)，7.16-7.13(m，1H)，4.86-4.75(m，1H)，3.55-3.48(m，1H)， 3.42-3.08(m，4H)，2.99-2.91(m，1H)，2.90(s，1.5H)，2.85(s，1.5H)， 2.16-2.07(m，1H)，1.82-1.70(m，1H)，1.64-1.48(m，1H)； MS(ES)：386(M+H)。
实施例743：N′-氰基-4-(氰基甲基)-4-[4-(7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4- 基)-1H-吡唑-1-基]哌啶-1-甲脒

步骤1：4-(氰基亚甲基)哌啶-1-羧酸叔-丁基酯
于0℃，向1.0M叔丁醇钾的THF(10.1mL)溶液中滴加入氰基甲 基膦酸二乙基酯(1.66mL，0.0102mol)的THF(20mL)。使反应维持10 分钟，然后加入到于0℃、氮气氛下搅拌的4-氧代-1-哌啶羧酸叔-丁基 酯(2.00g，0.0100mol)的THF(30mL)溶液中。加入完成后，移去冷浴 并于20℃将该反应物搅拌1.0小时。LCMS分析显示得到所需产物且无 起始原料。HPLC显示产物UVmax在200 & 230nm处。将水和EtOAc 加入到反应混合物中。分离各相，水相用EtOAc提取。合并的有机相 用水洗涤，然后用饱和的NaCl洗涤，然后经Na2SO4干燥并浓缩至干， 提供2.5g产物，为黄色油状物。TLC(25％ EtOAc/己烷)Rf 0.22。产物 经自动快速硅胶层析纯化。使用40g柱；流速40mL/分钟；[A＝己烷][B＝ EtOAc]。A，4分钟；至20％B的梯度液30分钟。收集44mL部分。产物 在21-27分钟内洗脱。浓缩各流分，得到0.67g白色固体。1H NMR (CDCl3)δ 5.19(s，1H)；3.51(m，4H)；2.56(t，2H)；2.33(t，2H)；1.50(s， 9H)。MS(ES)245(M+Na，弱；碱峰M+H-56＝167)。
步骤2：4-(氰基甲基)-4-[4-(7-[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基-7H-吡 咯并[2，3-d]嘧啶-4-基)-1H-吡唑-1-基]哌啶-1-羧酸叔-丁基酯
将4-(1H-吡唑-4-基)-7-[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基-7H-吡咯 并[2，3-d]嘧啶(0.840g，2.66mmol)在ACN(20mL)和DBU(398μL，2.66 mmol)的混合物中搅拌，加入4-(氰基亚甲基)哌啶-1-羧酸叔-丁基酯 (0.651g，2.93mmol)。吡唑于20℃不溶解，但当混合物被加热至40℃1 小时时，形成溶液。LCMS和HPLC分析显示约20％转化为产物。于40-45 ℃将该混合物搅拌过夜。HPLC显示60％面积的产物。于20℃经旋转 蒸发器除去CAN。向得到的残留物中加入饱和的NaHCO3和EtOAc。 将有机层与更多的饱和的NaHCO3水溶液一起震摇。然后干燥(Na2SO4) 和旋转蒸发，得到1.6g棕色油状物残留物。TLC(60％ EtOAc/己烷)： 产物Rf＝0.25。产物经自动快速硅胶层析纯化，使用40g柱，流速40mL/ 分钟；[A＝己烷][B＝EtOAc]。A，3分钟；至100％ B的梯度液50分钟。 收集44mL流分。产物在24-29分钟内洗脱；吡唑在39-46分钟洗脱；和 烯烃在13-15分钟洗脱。对合适的流分真空除去溶剂，得到0.27g烯烃； 0.30g吡唑；和得到0.67g产物，全部分离为白色固体。1H NMR(CDCl3) δ 8.84(s，1H)；8.42(s，1H)；8.33(s，1H)；7.40(d，1H)；6.79(d，1H)； 5.67(s，2H)；3.94(m，2H)；3.54(m，2H)；3.07(m，2H)；2.90(s，2H)； 2.72(m，2H)；2.08(m，2H)；1.45(s，9H)；0.91(m，2H)；-0.06(s，9H)。 MS(ES)538(M+H)。
步骤3：4-[4-(7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基)-1H-吡唑-1-基]哌啶-4-基乙 腈
使4-(氰基甲基)-4-[4-(7-[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基-7H-吡 咯并[2，3-d]嘧啶-4-基)-1H-吡唑-1-基]哌啶-1-羧酸叔-丁基酯(0.670g， 1.24mmol)溶于TFA(5.0mL，65mmol)并搅拌1.3小时。LCMS显示转 化为羟基甲基中间体，M+H 338。浓缩溶液，以除去TFA。将甲醇加入 到得到的残留物中，浓缩生成的混合物。使得到的残留物溶于甲醇(10 mL)，加入15.0M氢氧化铵的水(1.66mL)溶液。将生成的溶液搅拌2小 时。LCMS和HPLC分析显示完成脱保护。浓缩该混合物。将甲苯加入 到得到的残留物中并浓缩得到的混合物，提供白色半固体。大多数这 种中间体产物可用于下一步骤。其余的经prep HPLC纯化，使用30mm x 100mm C18柱；8％ ACN-H2O(0.1％ NH4OH)，1.0分钟，至27％ 6分 钟；60mL/分钟；检测器设置在m/z 308；保留时间，5.4分钟。合并含 纯产物的管子并冻干，得到13.6mg产物。
1H NMR(d6-DMSO)δ 12.07(s，1H)；8.68(s，1H)；8.62(s，1H)；8.36(s， 1H)；7.54(d，1H)；7.00(d，1H)；3.16(s，2H)；2.87(m，2H)；2.55(m，4H)； 1.94(m，2H)。MS(ES)308(M+H)。
步骤4：N-氰基-4-(氰基甲基)-4-[4-(7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基)-1H-吡 唑-1-基]哌啶-1-硫代甲亚氨酸甲基酯(carbimidothioate)
于20℃，使4-[4-(7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基)-1H-吡唑-1-基]哌啶 -4-基乙腈(361mg，1.17mmol)和二硫代亚氨基碳酸N-氰基-S，S′-二甲基 酯(344mg，2.35mmol)溶于异丙基醇(2.5mL)和DMSO(2.5mL)。16小 时反应时间后，LCMS分析显示存在一些产物，M+H 406；试剂，M+H 147；和哌啶，M+H 308。HPLC分析显示约2％反应。HPLC方法是： Zorbax SB C18，5μm，15cm，35℃，流速1.2mL/min，5％ ACN-H2O (0.05％ TFA)，1.5分钟，至100％ ACN 15.0分钟；检测器设置在324、225 和265nm。起始原料的保留时间4.9min(UV max 224，262，292，& 325nm)；产物，6.5min(UV max 226，262，290，& 324nm)；和试剂， 7.7min(UV max 265nm)。向该产物中加入TEA(327μL，2.35mmol)， 将得到的混合物于室温下搅拌。搅拌3小时后，HPLC和LCMS分析显 示60％反应。经prep HPLC分离产物和未反应的哌啶，使用30mm x 100 mm C18柱；5％ ACN-H2O(0.1％ TFA)，1.0分钟，至35％ 6分钟；60mL/ 分钟；检测器设置在326nm。产物的保留时间为5.9分钟；和起始原料 哌啶为3.5-4.3分钟。产物经冷冻干燥，得到301mg白色固体TFA盐。 1H NMR(d6-DMSO)δ 12.85(s，1H)；9.01(s，1H)；8.90(s，1H)；8.59(s， 1H)；7.85(m，1H)；7.30(m，1H)；4.23(m，2H)；3.35(m，2H)；3.30(s， 2H)；2.78(m，2H)；2.68(s，3H)；2.16(m，2H)。MS(ES)406(M+H)。
步骤5：N′-氰基-4-(氰基甲基)-4-[4-(7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基)-1H-吡 唑-1-基]哌啶-1-甲脒
使N-氰基-4-(氰基甲基)-4-[4-(7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基)-1H-吡 唑-1-基]哌啶-1-硫代甲亚氨酸甲基酯(41.3mg，0.102mmol)(53mg TFA盐)溶于2.0M氨的异丙基醇(4.00mL)溶液。将得到的混合物在微 波反应器中加热至100℃ 1小时。经HPLC和LCMS分析显示60％反应， 得到期望的M+H 375(50％面积)。向该混合物中加入2mL 7N NH3/MeOH。将得到的混合物于120℃加热1小时。HPLC和LCMS分析 显示无剩余的起始原料。旋转蒸发器上浓缩反应混合物。产物经prep HPLCMS分离，使用30mm x 100mm C18柱，用溶剂梯度液洗脱；10％ ACN-H2O(0.1％ TFA)，1.5分钟，至30％ 6分钟；60mL/分钟；检测器设 置在m/z 375；保留时间，4.7分钟。冷冻-干燥洗脱液，得到11.7mg产 物TFA盐，为白色固体。1H NMR(d6-DMSO)δ 12.69(s，1H，NH)；8.92 (s，1H)；8.81(s，1H)；8.51(s，1H)；7.75(m，1H)；7.22(m，1H)；7.18(s， 2H，NH2)；3.84(m，2H)；3.23(s，2H)；2.99(m，2H)；2.60(m，2H)； 1.97(m，2H)。MS(ES)375(M+H)。
实施例744：4-1-[2，2，2-三氟-1-(1H-咪唑-2-基甲基)乙基]-1H-吡唑-4-基 -7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶

步骤1：(3R)-4，4，4-三氟-3-[4-(7-[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基-7H- 吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基)-1H-吡唑-1-基]丁醛

向(3R)-4，4，4-三氟-3-[4-(7-[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基-7H- 吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基)-1H-吡唑-1-基]丁腈(1.06g，0.00243mol)(见， 实施例93，步骤1)的DCM(10mL，0.2mol)的-70℃溶液中加入1.0M 二异丁基氢化铝的DCM(4.8mL)溶液。将得到的混合物搅拌3小时， 在此时间间隔使温度由-70温热至-25℃，此后将反应无冷却回到-70 ℃。加入甲醇(1.5mL，0.037mol)，接着加入2.0M HCl的水(15mL)溶 液。然后从反应混合物中过量不溶性物质。有机滤液用2.0M HCl的水 溶液、水和饱和的NaCl水溶液顺序洗涤。洗涤的有机相经硫酸钠干燥 并使用旋转蒸发器浓缩，得到0.58g粗产物，为浅黄色泡沫物/固体。 粗产物用0-80％乙酸乙酯/己烷层析，得到纯化的产物(0.9g)，为浅橙 色油状物(47％得率)。
1H NMR(400MHz，CDCl3)：δ 9.85(1H，s)；8.95(1H，s)；8.5(1H，s)； 8.4(1H，s)；7.5(1H，d)；6.85(1H，d)；5.75(2H，s)；5.5(1H，m)；4.0(1H， dd)；3.6(2H，t)；3.3(1H，dd)；1.99(2H，t)；0.0(9H，s)。MS(M+H)： 440.
步骤2：4-1-[2，2，2-三氟-1-(1H-咪唑-2-基甲基)乙基]-1H-吡唑-4-基 -7-[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶

将4，4，4-三氟-3-[4-(7-[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基-7H-吡咯 并[2，3-d]嘧啶-4-基)-1H-吡唑-1-基]丁醛(0.138g，0.000314mol)、在甲醇 (1mL)中的7.0M氨。乙二醛(ethanedial)(0.5mL，0.004mol)和乙酸(20 uL，0.0004mol)的甲醇(2mL，0.05mol)溶液在100瓦微波下，于80℃加 热60分钟。微波反应后，加入乙酸乙酯/水。分离有机相并用饱和的 NaHCO3和饱和的NaCl洗涤。干燥洗涤的有机相并浓缩(旋转蒸发器)， 得到196mg粗产物，为橙色玻璃状物。粗产物经层析纯化，用0-100％ 乙酸乙酯/己烷洗脱，得到57mg纯化的产物，为灰白色固体(38％得率)。
1H NMR(400MHz，CDCl3)：δ 8.91(1H，s)；8.4(1H，s)；8.2(1H，s)； 7.5(1H，d)；7.0(2H，s)；6.83(1H，d)；5.75(2H，s)；5.62(1H，m)； 4.15(1H，dd)；3.8(1H，dd)；3.6(2H，t)；1.99(2H，t)；0.0(9H，s)。 MS(M+H)：478.
步骤3：4-1-[2，2，2-三氟-1-(1H-咪唑-2-基甲基)乙基]-1H-吡唑-4-基 -7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶
将4-1-[2，2，2-三氟-1-(1H-咪唑-2-基甲基)乙基]-1H-吡唑-4-基 -7-[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶(0.055g， 0.12mmol)在1，2-二氯代乙烷(1mL，10mmol)和TFA(0.5mL，6mmol) 中的溶液搅拌过夜。浓缩反应物，提供橙色油状物。将该油状物在甲 醇(1mL，20mmol)和8.0M氢氧化铵的水(1mL)溶液中搅拌4小时。然 后浓缩该混合物，提供粗产物，为橙色玻璃状物/固体。粗产物经Prep HPLC(pH10)纯化，得到28mg纯化的产物，为无色玻璃状物，将其用 2-甲氧基-2-甲基丙烷(1mL，8mmol)研磨，然后过滤并洗涤，提供15mg 产物，为白色固体(38％得率)，然后于室温-50℃干燥3小时。
1H NMR(400MHz，DMSO)：δ 12.13(1H，s)；11.89(1H，s)；8.65(1H，s)； 8.37(1H，s)；7.6(1H，d)；6.95(1H，d)；6.92(1H，d)；5.91(1H，m)；3.78 (1H，dd)；3.47(H，dd)。MS(M+H)：348.
实施例745：4-(1-(1R)-2，2，2-三氟-1-[(4-甲基-1，3-噻唑-2-基)甲基]乙基 -1H-吡唑-4-基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶

步骤1：(3R)-4，4，4-三氟-3-[4-(7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基)-1H-吡唑-1- 基]丁烷硫代酰胺

将五硫化磷(0.46g，1.0mmol)在乙醇(0.5mL，8mmol)中的悬浮液 搅拌1小时。加入(3R)-4，4，4-三氟-3-[4-(7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基)-1H- 吡唑-1-基]丁腈(0.15g，0.50mmol)(见，实施例93)，将得到的混合物于 80℃密封管中加热0.5小时，在反应期间，混合物变为黄色溶液。将 该反应物加热过夜。然后使反应物冷却至室温。将水(1g，60mmol)和 乙酸乙酯加入到该混合物中。分离有机相和用饱和的NaHCO3和饱和 的NaCl水溶液洗涤。然后干燥洗涤过的有机相并浓缩，得到387mg粗 产物，为白色玻璃状物/油状物。粗产物用0-10％ MeOH/DCM，0-1％ NH4OH层析，得到0.13g纯化的产物，为白色固体(76％得率)。
1H NMR(400MHz，CDCl3)：δ 8.7(1H，s)；8.5(1H，s)；8.3(1H，s)；7.4 (1H，d)；7.06.75(1H，d)；5.82(1H，m)；3.75(1H，dd)；3.2(1H，dd)。 MS(M+H)：341.
将(3R)-4，4，4-三氟-3-[4-(7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基)-1H-吡唑-1- 基]丁烷硫代酰胺(0.038g，0.00011mol)、氯代丙酮(15uL，0.00019mol) 在乙醇(1mL，0.02mol)和1，2-二氯代乙烷(1mL，0.01mol)中的悬浮液 加热至回流过夜。此后，过滤该反应混合物，以除去不溶性物质。使 滤液溶于MeOH(1mL)和DMF(1mL)并经prep HPLC(pH10)纯化-得 到6mg纯化的产物，为无色玻璃状物/油状物，然后将其用MTBE/己烷 研磨，于40℃干燥过夜，得到5.2mg纯化的产物，为灰白色固体(13％ 得率)。
1H NMR(400MHz，CDCl3)：δ 10.11(1H，s)；8.88(1H，s)；8.42(1H，s)； 8.38(1H，s)；7.45(1H，d)；6.79(1H，s)；6.65(1H，d)；5.41(1H，m)； 4.15(1H，dd)；3.75(H，dd)；2.18(3H，s)。MS(M+H)：379.
实施例A：体外JAK激酶测定
依据以下Park等，Analytical Biochemistry 1999，269，94-104描述 的体外测定法，测定本文化合物抑制JAK靶的活性。人JAK1(a.a. 837-1142)、Jak2(a.a.828-1132)和Jak3(a.a.781-1124)的带有N-末端 His标记的催化结构域用昆虫细胞中的杆状病毒表达并纯化。JAK1、 JAK2或JAK3的催化活性通过测定生物素化肽的磷酸化来测定。磷 酸化肽通过匀相时间分辨荧光(HTRF)检测。化合物对各种激酶的IC50 在反应物中测定，所述反应物含有在含100mM NaCl、5mM DTT和 0.1mg/mL(0.01％)BSA的50mM Tris(pH 7.8)缓冲液中的所述酶、 ATP和500nM肽。反应物中的ATP浓度对于Jak1为90μM，对于 Jak2为30μM和对于Jak3为3μM。反应于室温下进行1小时，然后 用在测定缓冲液中的20μL 45mM EDTA、300nM SA-APC、6nM Eu-Py20停止(Perkin Elmer，Boston，MA)。与铕标记的抗体的结合进行 40分钟，然后在Fusion读板仪(Perkin Elmer，Boston，MA)上测定HTRF 信号。具有10μM或小于10μM的IC50的化合物被认为对于任何上 述JAK靶具有活性。
实施例B：细胞测定
依据至少一种下述细胞测定法，测定本发明的一个或多个化合物 抑制JAK靶的活性。
依赖于细胞因子，因而依赖于用于生长的JAK/STAT信号传导 癌症细胞系以每孔6000个细胞(96孔格式板)接种在RPMI 1640、10％ FBS和1nG/mL适当的细胞因子中。将化合物加入到在DMSO/培养 基(最终浓度0.2％ DMSO)中的细胞中并于37℃、5％ CO2中培养72 小时。化合物对细胞成活力的作用使用细胞滴度-Glo荧光细胞成活力 测定(Promega)评价，接着进行TopCount(Perkin Elmer，Boston，MA) 定量。化合物的潜在脱靶作用使用非-JAK驱动的细胞系平行测定，用 相同的测定读出。具有10μM或小于10μM的IC50的化合物(具有对 JAK驱动的增殖的选择性)被认为是有活性的。所有的实验按一式两份 进行。
上述细胞系也可用于检测化合物对磷酸化of JAK激酶或有效的 下游底物如STAT蛋白、Akt、Shp2或Erk的磷酸化作用。这些实验 可以按照过夜细胞因子饥饿试验进行，接着与化合物进行短暂预培养 (2小时或以下)并刺激细胞因子约1小时或以下。然后从细胞提取蛋白 质并通过本领域学术界熟知的技术分析，包括蛋白质印迹法或 ELISAs，使用能区分磷酸化蛋白和总蛋白的抗体。这些实验可使用正 常的或癌症细胞以研究化合物对肿瘤细胞存活的生物学或对炎性疾 病的介质的活性。例如，对于后者，细胞因子如IL-6、IL-12、IL-23 或IFN可以用于刺激JAK激活，导致STAT蛋白的磷酸化和转录模 式的有效性(通过测定或qPCR技术评价)或蛋白如IL-17产生和/或分 泌。化合物抑制这些细胞因子介导的作用的能力可以用本领域学术界 常用的技术测定。
本发明化合物也可在设计用于评价它们的效力和对抗突变体 JAKs(例如，在脊髓增生性疾病中发现的JAK2V617F突变)的活性的 细胞模型中进行试验。这些实验常常使用野生型或突变体JAK激酶在 其中异位表达的血液学谱系的细胞因子依赖性细胞(如BaF/3)(James， C.，等.Nature 434：1144-1148；Staerk，J.，等.JBC 280：41893-41899)。终 点包括化合物对细胞存活、增殖和磷酸化的JAK、STAT、Akt或Erk 蛋白的作用。
已对或可对本发明的某些化合物抑制T-细胞增殖的活性进行评 价。如测定可以考虑第二种细胞因子(即JAK)驱动的增殖测定，也可 考虑免疫激活的免疫压制或抑制的简单化测定。下面为这样的实验可 如何进行的简短概述。外周血单核细胞(PBMCs)由人全血样品，使用 Ficoll Hypaque分离方法制备，而T-细胞(流分2000)可通过洗提得自 PBMCs。新鲜分离的人T-细胞可以以2 x 106细胞/ml的密度，于37℃ 维持在培养基(RPMI 1640中，该培养基补充有10％胎牛血清、100U/ml 青霉素、100μg/ml链霉素)最多达2天。对于IL-2刺激的细胞增殖分 析，T-细胞先用植物血凝集素(PHA)以10μg/mL的最终浓度处理72 小时。用PBS洗涤1次后，按6000细胞/孔接种于96-孔板中并在100 U/mL人IL-2(ProSpec-Tany TechnoGene；Rehovot，Israel)的存在下， 用不同的浓度的化合物在培养基处理。将板于37℃培养72小时，增 殖指数用细胞Titer-Glo荧光试剂，按照生产厂商(Promega；Madison， WI)建议的方案进行评价。
实施例C：体内抗-肿瘤效果
本发明化合物在免疫受损小鼠的人肿瘤异种移植模型中进行评 价。例如，INA-6浆细胞瘤细胞系的致瘤变体可以用于皮下接种SCID 小鼠(Burger，R等.Hematol J.2：42-53，2001)。然后可将携带肿瘤的动 物随机分配到药物或溶媒处理组，通过任何通常的途径包括口服，或 使用可植入的泵连续输注，可给予不同剂量的化合物。使用卡尺，测 定肿瘤随时间的生长。此外，肿瘤样品可以治疗开始的任何时间收获， 用于如上所述的分析(实施例B)，以评价化合物对JAK活性和下游信 号传导途径的作用。此外，化合物的选择性可以使用由其它已知激酶 (如Bcr-Abl)驱动的异种移植肿瘤模型如K562肿瘤模型进行评价。
实施例D：鼠皮肤接触性迟发型超敏反应应答试验
本发明化合物也可测试它们在T-细胞驱动的鼠迟发型超敏反应 试验模型中(抑制JAK靶)的效果。鼠皮肤接触性迟发型超敏反应(DTH) 应答被认为是临床接触性皮炎及其它T-淋巴细胞介导的皮肤免疫疾 病，如牛皮癣的真确模型(Immunol Today.1998 Jan；19(1)：37-44)。鼠 DTH与牛皮癣共有多种特征，包括免疫浸润，伴有炎性细胞因子的增 加和角化细胞的过度增殖。此外，在临床上有效治疗牛皮癣的许多类 药物也是小鼠中的DHT的有效抑制剂(Agents Actions.1993 Jan； 38(1-2)：116-21)。
在0天和第1天，通过在小鼠剃过毛的腹部局部给予抗原2，4，二 硝基-氟代苯(DNFB)使Balb/c小鼠致敏。在第5天，使用工程测微计 测量耳朵的厚度。记录该测量并用作基线。然后通过局部给予动物的 两只耳朵总共20μL DNFB(10μL给予内耳廓和10μL给予外耳廓)进 行攻击，浓度为0.2％。攻击后24-72小时，再次测量耳朵。在整个过 敏期和攻击期(-1天至第7天)或攻击前或整个攻击期(通常为第4天的 下午至第7天)用试验化合物治疗。系统或局部给予(局部治疗施用于 耳朵)试验化合物(不同的浓度)进行治疗。试验化合物的效果通过与未 经处理的情况比较，耳朵肿胀的减少来表示。化合物引起20％或以 上的减少被认为是有效的。在一些实验中，对小鼠进行攻击，但未致 敏(阴性对照)。
试验化合物的抑制效果(抑制JAK-STAT途径的激活)可以通过免 疫组织化学分析证实。激活JAK-STAT途径(s)导致功能性转录因子的 形成和易位。此外，免疫细胞的流入和角化细胞增殖的增加也将提供 耳朵的独特表达模式的改变，这种改变可以是研究的和定量的。对 福尔马林固定和石蜡埋置的耳切片(在DTH模型的攻击期后收获)进 行免疫组织化学分析，使用与磷酸化的STAT3(克隆58E12，Cell Signaling Technologies(细胞信号传导技术公司))特异性相互作用的抗 体。小鼠耳朵用试验化合物、溶媒或或地塞米松(临床上有效用于治疗 牛皮癣)治疗，或在DTH模型中无任何治疗以用作比较。试验化合物 和地塞米松可在定性和定量两方面产生类似的转录改变，试验化合物 和地塞米松两者可减少浸润细胞的数量。系统地和局部给予试验化合 物均可产生抑制作用，即减少浸润细胞的数量并抑制转录的改变。
实施例E：体内抗炎活性
设计复制单纯或复杂炎症反应的啮齿动物或非-啮齿动物模型可 以评价或已经评价本发明化合物。例如，啮齿动物的关节炎模型可以 用于评价给予的化合物在预防和治疗学上的治疗效果。这些模型包括 但不限于小鼠或大鼠胶原诱导的关节炎、大鼠佐剂诱导的关节炎和胶 原抗体诱导的关节炎。自身免疫性疾病包括，但不限于，多发性硬化、 I型糖尿病、葡萄膜视网膜炎(uveoretinitis)、甲状腺炎(thyroditis)、重 症肌无力、免疫球蛋白性肾病、心肌炎、气道过敏(哮喘)、狼疮或结 肠炎也可以用于评价本发明化合物的治疗效力。这些模型已被研究单 位完善地建立并为本领域学术界所熟知(免疫学的新方案(Current Protocols in Immunology)，Vol 3.，Coligan，J.E.等，Wiley Press.；分子生 物学方法(Methods in Molecular Biology)：Vol.225，炎症方案 (Inflammatin Protocols.)，Winyard，P.G.和Willoughby，D.A.，Humana Press，2003.)。
从上文所述可知，本发明的各种修饰，除了本文描述的那些外， 对本领域技术人员而言将是显而易见的。这样的修饰也意欲落入所附 权利要求书的范围内。本申请引用的参考文献通过引用全文结合到本 文中。