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一种EGCG在改善绝经期后焦虑与肠道菌群方面的应用

阅读：929发布：2020-05-26

专利汇可以提供一种EGCG在改善绝经期后焦虑与肠道菌群方面的应用专利检索，专利查询，专利分析的服务。并且本发明公开了一种EGCG在改善绝经期后焦虑与肠道菌群方面的应用，首先制备去卵巢大鼠模型；对大鼠模型进行药物治疗；对大鼠模型的焦虑行为进行测定；通过旷场实验和高架十字迷宫检测大鼠焦虑行为；对大鼠肠道菌群进行检测；采取大鼠粪便进行16S rRNA基因高通量测序。本发明应用对于去卵巢大鼠(模拟绝经期妇女的动物模型) 焦虑症状的作用及肠道菌群的分布情况具有良好的改善效果。，下面是一种EGCG在改善绝经期后焦虑与肠道菌群方面的应用专利的具体信息内容。

权利要求

1.一种EGCG在改善绝经期后焦虑与肠道菌群方面的应用，其特征在于，所述应用方法包括如下步骤：
S1，制备去卵巢大鼠模型：
10％水合氯醛按0.3mL/100g腹腔注射麻醉；待大鼠麻醉完全后取俯卧位，在大鼠最末肋骨下，距脊柱外侧约1cm处，剪去鼠毛，碘伏消毒，正中切口，切口为1cm，钝性分离至肌肉层，切开腹膜，组织镊探入切口，夹出小网膜脂肪，分离并切除双侧卵巢，压迫止血后，将脂肪放入腹腔，分层缝合肌肉筋膜，缝合皮肤，碘伏消毒切口；
假手术:剪除一小块脂肪——脂肪体积同OVX组，其他步骤与OVX手术相同；8周后，测定所有大鼠血清雌激素含量；
S2，药物治疗：
灌胃给予EGCG组去卵巢大鼠EGCG-10mg/kg共8周，假手术组和去卵巢大鼠给予相同体积生理盐水；
S3，焦虑行为测定：
通过旷场实验和高架十字迷宫检测大鼠焦虑行为；
旷场实验：
S3-1-1，实验箱底部平均划为25格，中央9格为中央区域，其余16格为外周区域；
S3-1-2，在安静且昏暗的房间，捏住大鼠距根部1/3处的尾巴轻放入实验箱中央，观察其在5min内总活动路程和中央区域停留时间，红外照明，摄像头记录过程；
S3-1-3，1次OFT后清理箱内粪便等残留物，喷洒酒精并用纱布拭擦干净，以除去上一只大鼠的气味，避免影响下一只大鼠实验结果；
S3-2，高架十字迷宫：
每只大鼠置于EPM的中央平台处，使其头部正对其中一个开放臂，释放后即开始记录
5min内下述指标：进入开放臂次数、进入开放臂时间；
S4，大鼠肠道菌群的检测：
采取大鼠粪便进行16S rRNA基因高通量测序。

说明书全文

一种EGCG在改善绝经期后焦虑与肠道菌群方面的应用

技术领域

[0001] 本发明涉及药物应用领域，尤其涉及一种表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)在改善绝经期后焦虑与肠道菌群方面的应用。

背景技术

[0002] 女性生殖衰老会出现一系列绝经症状，同时会出现如抑郁、焦虑等情绪改变，但患者习惯于因躯体不适而就诊，情绪障碍尚未引起医患双方的足够重视，严重影响家庭社会及身体健康，也导致大量卫生资源的浪费。近年来，从天然植物中寻找有效的抗抑郁成分成为精神类药物研发领域的新思潮。茶叶中含有大量茶多酚，具有较强的抗氧化能力，一直作为天然的食品抗氧化添加剂儿茶素类以表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)含量最高，占50％～60％，具有抗癌、抗突变、预防和治疗心脑血管系统疾病以及调理内分泌、免疫系统等生物活性。而绝经期后女性由于雌激素缺乏会引起肠道菌群的失调从而诱发各种疾病,因此，EGCG可能作为一种新型药物通过调节肠道菌群的分布而在绝经期焦虑中发挥作用。

发明内容

[0003] 本发明目的在于提供一种EGCG在改善绝经期后焦虑与肠道菌群方面的应用，研究EGCG对于去卵巢大鼠(模拟绝经期妇女的动物模型)焦虑症状的作用及肠道菌群的分布情况。

[0004] 为实现上述目的，采用了以下技术方案：本发明所述应用方法包括如下步骤：

[0005] S1，制备去卵巢大鼠模型：

[0006] 10％水合氯醛按0.3mL/100g腹腔注射麻醉；待大鼠麻醉完全后取俯卧位，在大鼠最末肋骨下，距脊柱外侧约1cm处，剪去鼠毛，碘伏消毒，正中切口，切口为1cm，钝性分离至肌肉层，切开腹膜，组织镊探入切口，夹出小网膜脂肪，分离并切除双侧卵巢，压迫止血后，将脂肪放入腹腔，分层缝合肌肉筋膜，缝合皮肤，碘伏消毒切口；

[0007] 假手术:剪除一小块脂肪——脂肪体积同OVX组，其他步骤与OVX手术相同；8周后，测定所有大鼠血清雌激素含量；

[0008] S2，药物治疗：

[0009] 灌胃给予EGCG组去卵巢大鼠EGCG-10mg/kg共8周，假手术组和去卵巢大鼠给予相同体积生理盐水；

[0010] S3，焦虑行为测定：

[0011] 通过旷场实验和高架十字迷宫检测大鼠焦虑行为；

[0012] 旷场实验：

[0013] S3-1-1，实验箱底部平均划为25格，中央9格为中央区域，其余16格为外周区域；

[0014] S3-1-2，在安静且昏暗的房间，捏住大鼠距根部1/3处的尾巴轻放入实验箱中央，观察其在5min内总活动路程和中央区域停留时间，红外照明，摄像头记录过程；

[0015] S3-1-3，1次OFT后清理箱内粪便等残留物，喷洒酒精并用纱布拭擦干净，以除去上一只大鼠的气味，避免影响下一只大鼠实验结果；

[0016] S3-2，高架十字迷宫：

[0017] 每只大鼠置于EPM的中央平台处，使其头部正对其中一个开放臂，释放后即开始记录5min内下述指标：进入开放臂次数、进入开放臂时间；

[0018] S4，大鼠肠道菌群的检测：

[0019] 采取大鼠粪便进行16S rRNA基因高通量测序。

[0020] 与现有技术相比，本发明具有如下优点：利用目前模拟绝经期的最佳动物模型(去卵巢大鼠模型)，灌胃给予EGCG，发现EGCG可以提高去卵巢大鼠肠道菌门丰度，EGCG组的生物多样性水平和均匀性均高于去卵巢大鼠组。同时通过行为学研究发现EGCG可以改善去卵巢大鼠焦虑状态。EGCG可以显著调节动物的肠道菌群，进而通过肠道菌群的作用而改善去卵巢大鼠焦虑症状。本发明首次发现了EGCG可作为一种改善绝经期后焦虑症状的新型药物。而且，EGCG是一种天然茶叶提取物，应用于人体副作用小。附图说明

[0021] 图1、2是本发明应用中大鼠粪便进行16S rRNA基因高通量测序图。

[0022] 图3是本发明应用中大鼠进入开放臂次数结果图。

[0023] 图4是本发明应用中大鼠进入开放臂时间结果图。

具体实施方式

[0024] 下面结合附图对本发明做进一步说明：

[0025] 本发明所述应用方法包括如下步骤：

[0026] S1，制备去卵巢大鼠模型：

[0027] 10％水合氯醛按0.3mL/100g腹腔注射麻醉；待大鼠麻醉完全后取俯卧位，在大鼠最末肋骨下，距脊柱外侧约1cm处，剪去鼠毛，碘伏消毒，正中切口，切口为1cm，钝性分离至肌肉层，切开腹膜，组织镊探入切口，夹出小网膜脂肪，分离并切除双侧卵巢，压迫止血后，将脂肪放入腹腔，分层缝合肌肉筋膜，缝合皮肤，碘伏消毒切口；

[0028] 假手术:剪除一小块脂肪——脂肪体积同OVX组，其他步骤与OVX手术相同；8周后，测定所有大鼠血清雌激素含量；

[0029] S2，药物治疗：

[0030] 灌胃给予EGCG组去卵巢大鼠EGCG-10mg/kg共8周，假手术组和去卵巢大鼠给予相同体积生理盐水；

[0031] S3，焦虑行为测定：

[0032] 通过旷场实验和高架十字迷宫检测大鼠焦虑行为；

[0033] 旷场实验：

[0034] S3-1-1，实验箱底部平均划为25格，中央9格为中央区域，其余16格为外周区域；

[0035] S3-1-2，在安静且昏暗的房间，捏住大鼠距根部1/3处的尾巴轻放入实验箱中央，观察其在5min内总活动路程和中央区域停留时间，红外照明，摄像头记录过程；

[0036] S3-1-3，1次OFT后清理箱内粪便等残留物，喷洒酒精并用纱布拭擦干净，以除去上一只大鼠的气味，避免影响下一只大鼠实验结果；

[0037] S3-2，高架十字迷宫：

[0038] 每只大鼠置于EPM的中央平台处，使其头部正对其中一个开放臂，释放后即开始记录5min内下述指标：进入开放臂次数、进入开放臂时间；结果见图3、图4。

[0039] S4，大鼠肠道菌群的检测：

[0040] 采取大鼠粪便进行16S rRNA基因高通量测序。结果见图1、图2。

[0041] 以上所述的实施例仅仅是对本发明的优选实施方式进行描述，并非对本发明的范围进行限定，在不脱离本发明设计精神的前提下，本领域普通技术人员对本发明的技术方案做出的各种变形和改进，均应落入本发明权利要求书确定的保护范围内。

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