本申请要求2001年12月19日提交的美国专利申请序列号 10/025,116的优先权并且为该申请的部分继续申请，本申请还要求于 2000年9月19日申请的美国申请顺序号60/233,519、于2001年4 月18日申请的美国申请顺序号60/284,730和于2001年4月18日申 请的美国申请顺序号60/284,438的优先权，所述临时申请通过引用 全部结合到本文中。本申请还要求2001年6月20日提交的美国专 利申请序列号09/885,381和2001年6月20日提交的美国专利申请 序列号09/885,827的优先权并且为这些申请的部分继续申请，这些 申请通过引用全部结合到本文中。

                        发明领域

本发明涉及稠环化合物、用这类化合物治疗核激素受体相关病 症(例如癌症)的方法以及含有这类化合物的药用组合物。

                        发明背景

核激素受体(NHR)构成一个大的配体依赖性和序列特异性转录因 子的超家族。该家族的成员或者通过与启动子靶基因特异性结合而 直接影响转录(Evans，Science 240：889-895(1988))，或者通过与其它 转录因子的蛋白-蛋白相互作用而间接影响转录(Jonat等，Cell 62： 1189-1204(1990)，Schuele等，Cell 62：1217-1226(1990)，和Yang-Yen 等，Cell 62：1205-1215(1990))。核激素受体超家族(在本领域中也称为 “类固醇/甲状腺激素受体超家族”)包括各种各样的疏水性配体包括 皮质醇、醛固酮、雌激素、孕酮、睾酮、维生素D3、甲状腺激素和 视黄酸的受体(Evans，1988，参见上文)。除这些常规核激素受体之外， 该超家族含有大量的配体未知的蛋白质，称为孤独核激素受体 (Mangelsdorf等，Cell 83：835-839(1995)，O′Malley等，Mol.Endocrinol. 10：1293(1996)，Enmark等，Mol.Endocrinol.10，1293-1307(1996)和 Giguere，Endocrin.Rev.20，689-725(1 999))。所述常规核激素受体在 有配体时一般是反式激活蛋白，而在无配体时，可以或者是活性阻 抑蛋白或者转录上为惰性的。某些孤独受体的表现如同它们在无配 体时转录上是惰性的一样。然而，其它孤独受体或者是组成型激活 蛋白或者是阻抑蛋白。这些孤独核激素受体或者处于尚未被鉴定的 遍在配体的控制之下，或者不需要结合配体来发挥其活性。

与其它转录因子一样，核激素受体具有模块结构，所述模块结 构由三个不同的结构域构成：含有转录激活功能AF-1的可变体积的 N末端结构域、高度保守的DNA结合结构域和中等保守的配体结合 结构域。所述配体结合结构域不仅负责结合特异性配体，而且还含 有称为AF-2的转录激活功能和二聚化结构域(Wurtz等，Nature Struc. Biol.3，87-94(1996)，Parker等，Nature Struc.Biol.3，113-115(1996)和 Kumar等，Steroids 64，310-319(1999))。虽然这些受体的总体蛋白质 序列可以有相当大的变化，但所有的序列在所述配体结合结构域都 享有从一个祖先原始型趋异的共同结构排列指征和基本同源性(尤其 是序列同一性)。

类固醇结合核激素受体(SB-NHR)构成一个核激素受体亚家族。 这些受体是相关的，因为与NHR超家族的其它成员相比，它们相互 之间享有较强的序列同源性，特别是在配体结合结构域(LBD)中(Evans， 1988，参见上文)，并且它们都利用基于类固醇的配体。NHR的该亚 家族的某些例子是雄激素受体(AR)、雌激素受体(ER)、孕酮受体(PR)、 糖皮质激素受体(GR)、盐皮质激素受体(MR)、醛固酮受体(ALDR)以 及类固醇和异生素受体(SXR)(Evans等，WO 99/35246)。根据LBD中 的强序列同源性，几种孤独受体也可能是SB-NHR亚家族的成员。

与每种SB-NHR在LBD中发现的高序列同源性一致，每种SB- NHR的天然配体来源于一种共同的类固醇核心。SB-NHR成员所利 用的某些基于类固醇的配体的实例包括皮质醇、醛固酮、雌激素、 孕酮、睾酮和二氢睾酮。一种SB-NHR相对于另一种SB-NHR的具 体基于类固醇配体的特异性通过在所述类固醇核心周围的不同取代 而获得。与对特定SB-NHR的高水平特异性相关联的、与该特定 SB-NHR结合的高亲和性，可以通过在类固醇核心周围仅进行较小的 结构变化而实现(例如Waller等，Toxicol.Appl.Pharmacol.137，219- 227(1996)和Mekenyan等，Environ.Sci.Technol.31，3702-3711(1997)， 与睾酮相比，孕酮对雄激素受体的结合亲和性)。

关于SB-NHR家族成员，已经描述了数目众多的合成来源的类 固醇和非类固醇激动剂和拮抗剂。许多这些激动剂配体和拮抗剂配 体在临床上用于治疗男性的各种疾病。RU486是PR合成激动剂的实 例，用作节制生育药(Vegeto等，Cell 69：703-713(1992))，而氟他胺 是AR拮抗剂的实例，用于治疗前列腺癌(Neri等，Endo.91，427-437 (1972))。他莫昔芬是ER功能的组织特异性调节剂的例子，用于治疗 乳癌(Smigel，J.Natl.Cancer Inst.90，647-648(1998))。他莫昔芬在乳 房组织中可以起ER的拮抗剂作用，而在骨中可以作为ER的激动剂 发挥作用(Grese等，Proc.Natl.Acad.Sci.USA 94，14105-14110 (1997))。因为观察到他莫昔芬的组织选择性效应，所以将这种药物 和与其类似的药物称为“部分激动剂”或“部分拮抗剂”。除合成 来源的非内源性配体之外，可以从食物来源获得NHR的非内源性配 体(Regal等，Proc.Soc.Exp.Biol.Med.223，372-378(2000)和 Hempstock等，J.Med.Food 2，267-269(1999))。黄酮类植物雌激素是 SB-NHR的非天然配体的实例，它们可以从食物来源(例如大豆)容易 地获得(Quella等，J.Clin.Oncol.18，1068-1074(2000)和Banz等，J. Med.Food 2，271-273(1999))。通过加入小分子配体调节各种NHR的 转录活性的能力，使得它们成为开发用于各种病状的药物的理想的 靶标。

如上所述，可以将非天然配体进行合成工程改造，以用作NHR 功能的调节剂。就SB-NHR而言，非天然配体的工程改造可以包括 鉴定模拟天然类固醇核心系统的核心结构。这可以通过用可得到的 各种NHR配体结合结构域的晶体结构来针对几种SB-NHR进行随机 筛选或者通过多种定向途径来达到(Bourguet等，Nature 375，377-382 (1995)，Brzozowski等，Nature 389，753-758(1997)，Shiau等，Cell 95， 927-937(1998)和Tanenbaum等，Proc.Natl.Acad.Sci.USA 95，5998- 6003(1998))。在这样一种类固醇模拟核心周围的不同取代，可以提 供对一种受体的选择性优于对另一种受体的药物。另外，这类修饰 可以用来获得对特定SB-NHR具有激动剂活性或者拮抗剂活性的药 物。在所述类固醇模拟核心周围的不同取代，可能导致形成一系列 具有特异性的高亲和性激动剂和拮抗剂，例如ER对PR对AR对GR 对MR。这样一种不同取代的途径已经在例如以下文献中有关类固醇 NHR的基于喹啉的调节剂方面有报道：J.Med.Chem.，41，623(1999)； WO 9749709；US 5696133；US 5696130；US 5696127；US 5693647；US 5693646；US 5688810；US 5688808和WO 9619458，所述文献都通过 引用结合到本文中。

本发明的化合物包含一个用作类固醇模拟物的核心，可用作类 固醇结合核激素受体功能以及下述的其它NHR功能的调节剂。

                       发明概述

本发明提供以下式I的稠环化合物及其盐，所述化合物尤其可 用作核激素受体功能的调节剂：

当用于式I和整个说明书中时，所述符号具有以下含义，除非另有说 明，并且每次出现时独立地选自：

G为芳基或杂环基(例如杂芳基)，其中所述基团为单环或多环，并且 所述基团可任选地在一个或多个位置、优选被以下基团取代：

氢、烷基或取代的烷基、链烯基或取代的链烯基、炔基或取代 的炔基、卤代、环烷基或取代的环烷基、环烯基或取代的环烯 基、芳基或取代的芳基、杂环基或取代的杂环基、芳烷基或取 代的芳烷基、杂环基烷基或取代的杂环基烷基、CN、R1OC＝O、 R1C＝O、R1C＝S、R1NHC＝O、R1R2NC＝O、HOCR3R3’、硝基、 R1OCH2、R1O、NH2、NR4R5、SR1、S＝OR1、SO2R1、SO2OR1、 SO2NR1R1’、(R1O)(R1’O)P＝O、氧代、(R1)(R1’)P＝O或 (R1’)(NHR1)P＝O；

Z1为O、S、NH或NR6；

Z2为O、S、NH或NR6；

A1为CR7或N；

A2为CR7或N；

Y为J-J’-J”，其中J为(CR7R7’)n，而n＝0-3，J’为一个键或O、S、S＝O、 SO2、NH、NR7、C＝O、OC＝O、NR1C＝O、CR7R7’、C＝CR8R8’、 R2P＝O、R2P＝S、R2OP＝O、R2NHP＝O、OP＝OOR2、OP＝ONHR2、 OP＝OR2、OSO2、C＝NR7、NHNH、NHNR6、NR6NH、N＝N、 环烷基或取代的环烷基、环烯基或取代的环烯基、杂环基或取 代的杂环基、或者芳基或取代的芳基，且J”为(CR7R7’)n，而n＝ 0-3，其中Y不是键(即，如果J′为键，则在J或J″(各自定义为 (CR7R7’)n)中至少一个之中，n不为0)；

W为CR7R7’-CR7R7’、CR8＝CR8’、CR7R7’-C＝O、C＝O-C＝O、 CR7R7’-C＝CH2、C＝CH2-C＝CH2、CR7R7’-C＝NR1、C＝NR1--C＝NR1、 NR9-CR7R7’、N＝CR8、N＝N、NR9-NR9’、S-CR7R7’、SO-CR7R7’、 SO2-CR7R7’、环烷基或取代的环烷基、环烯基或取代的环烯基、杂环 基或取代的杂环基、或者芳基或取代的芳基，其中当W不是 NR9-CR7R7’、N＝CR8、N＝N、NR9-NR9’、S-CR7R7’、SO-CR7R7’、 SO2-CR7R7’、或者杂环基或取代的杂环基时，则J’必须是O、S、 S＝O、SO2、NH、NR7、OC＝O、NR1C＝O、OP＝OOR2、OP＝ONHR2、 OSO2、NHNH、NHNR6、NR6NH或N＝N；或

当W为CR7R7’-CR7R7’时，则R7和R7’取代基每次出现时可结合在一 起形成取代或未取代的碳环或取代或未取代的杂环体系，这些 环系可由与相同碳原子连接的R7和R7’的任何组合形成；

Q1为H、烷基或取代的烷基、链烯基或取代链烯基、环烷基或取代 的环烷基、环烯基或取代的环烯基、杂环基烷基或取代的杂环 基烷基、芳烷基或取代的芳烷基、炔基或取代的炔基、芳基或 取代的芳基、杂环基(例如杂芳基)或取代的杂环基(例如取代的 杂芳基)、卤代、CN、R1OC＝O、R4C＝O、R5R6NC＝O、HOCR7R7’、 硝基、R1OCH2、R1O、NH2、C＝OSR1、SO2R1或NR4R5；

Q2为H、烷基或取代的烷基、链烯基或取代的链烯基、环烷基或取 代的环烷基、环烯基或取代的环烯基、杂环基烷基或取代的杂 环基烷基、芳烷基或取代的芳烷基、炔基或取代的炔基、芳基 或取代的芳基、杂环基(例如杂芳基)或取代的杂环基(例如取代 的杂芳基)、卤代、CN、R1OC＝O、R4C＝O、R5R6NC＝O、HOCR7R7’、 硝基、R1OCH2、R1O、NH2、C＝OSR1、SO2R1或NR4R5；

L为一个键、(CR7R7’)n、NH、NR5、NH(CR7R7’)n或NR5(CR7R7’)n， 其中n＝0-3；

R1和R1’分别独立地为H、烷基或取代的烷基、链烯基或取代的链烯 基、炔基或取代的炔基、环烷基或取代的环烷基、环烯基或取 代的环烯基、杂环基或取代的杂环基、环烷基烷基或取代的环 烷基烷基、环烯基烷基或取代的环烯基烷基、杂环基烷基或取 代的杂环基烷基、芳基或取代的芳基、芳烷基或取代的芳烷基；

R2为烷基或取代的烷基、链烯基或取代的链烯基、炔基或取代的炔 基、环烷基或取代的环烷基、环烯基或取代的环烯基、杂环基 或取代的杂环基、环烷基烷基或取代的环烷基烷基、环烯基烷 基或取代的环烯基烷基、杂环基烷基或取代的杂环基烷基、芳 基或取代的芳基、芳烷基或取代的芳烷基；

R3和R3’分别独立地为H、烷基或取代的烷基、链烯基或取代的链烯 基、炔基或取代的炔基、环烷基或取代的环烷基、环烯基或取 代的环烯基、杂环基或取代的杂环基、环烷基烷基或取代的环 烷基烷基、环烯基烷基或取代的环烯基烷基、杂环基烷基或取 代的杂环基烷基、芳基或取代的芳基、芳烷基或取代的芳烷基、 卤代、CN、羟胺、羟基酰胺、烷氧基或取代的烷氧基、氨基、 NR1R2、巯基、烷硫基或取代的烷硫基；

R4为H、烷基或取代的烷基、链烯基或取代的链烯基、炔基或取代 的炔基、环烷基或取代的环烷基、环烯基或取代的环烯基、杂 环基或取代的杂环基、环烷基烷基或取代的环烷基烷基、环烯 基烷基或取代的环烯基烷基、杂环基烷基或取代的杂环基烷基、 芳基或取代的芳基、芳烷基或取代的芳烷基、R1C＝O、R1OC＝O、 R1NHC＝O、SO2OR1、SO2R1或SO2NR1R1’；

R5为烷基或取代的烷基、链烯基或取代的链烯基、炔基或取代的炔 基、环烷基或取代的环烷基、环烯基或取代的环烯基、杂环基 或取代的杂环基、环烷基烷基或取代的环烷基烷基、环烯基烷 基或取代的环烯基烷基、杂环基烷基或取代的杂环基烷基、芳 基或取代的芳基、芳烷基或取代的芳烷基、R1C＝O、R1NHC＝O、 SO2R1、SO2OR1或SO2NR1R1；

R6为烷基或取代的烷基、链烯基或取代的链烯基、炔基或取代的炔 基、环烷基或取代的环烷基、环烯基或取代的环烯基、杂环基 或取代的杂环基、环烷基烷基或取代的环烷基烷基、环烯基烷 基或取代的环烯基烷基、杂环基烷基或取代的杂环基烷基、芳 基或取代的芳基、芳烷基或取代的芳烷基、CN、OH、OR1、 R1C＝O、R1NHC＝O、SO2R1、SO2OR1或SO2NR1R1’；

R7和R7’分别独立地为H、烷基或取代的烷基、链烯基或取代链烯基、 炔基或取代的炔基、环烷基或取代的环烷基、环烯基或取代的 环烯基、杂环基或取代的杂环基、环烷基烷基或取代的环烷基 烷基、环烯基烷基或取代的环烯基烷基、杂环基烷基或取代的 杂环基烷基、芳基或取代的芳基、芳烷基或取代的芳烷基、卤 代、CN、OR4、硝基、羟胺、羟基酰胺、氨基、NHR4、NR2R5、 NR5R5、NOR1、巯基、烷硫基或取代的烷硫基、HOC＝O、R1C＝O、 R1(C＝O)O、R1OC＝O、R1NHC＝O、NH2C＝O、SO2R1、SOR1、 PO3R1R1’、R1R1’NC＝O、C＝OSR1、SO2R1、SO2OR1或SO2NR1R1’， 或者其中A1或A2含有基团R7，而W含有基团R7，A1或A2的 所述R7基团与W一起形成一个杂环；

R8和R8分别独立地为H、烷基或取代的烷基、链烯基或取代链烯基、 炔基或取代的炔基、环烷基或取代的环烷基、环烯基或取代的 环烯基、杂环基或取代的杂环基、环烷基烷基或取代的环烷基 烷基、环烯基烷基或取代的环烯基烷基、杂环基烷基或取代的 杂环基烷基、芳基或取代的芳基、芳烷基或取代的芳烷基、硝 基、卤代、CN、OR1、氨基、NHR4、NR2R5、NOR1、烷硫基或 取代的烷硫基、C＝OSR1、R1OC＝O、R1C＝O、R1NHC＝O、 R1R1’NC＝O、SO2OR1、S＝OR1、SO2R1、PO3R1R1’或SO2NR1R1’； 且

R9和R9’分别独立地为H、烷基或取代的烷基、链烯基或取代链烯基、 炔基或取代的炔基、环烷基或取代的环烷基、环烯基或取代的 环烯基、杂环基或取代的杂环基、环烷基烷基或取代的环烷基 烷基、环烯基烷基或取代的环烯基烷基、杂环基烷基或取代的 杂环基烷基、芳基或取代的芳基、芳烷基或取代的芳烷基、CN、 OH、OR1、R1C＝O、R1OC＝O、R1NHC＝O、SO2R1、SO2OR1或 SO2NR1R1’。

式I的各化合物是新的化合物，其中一个优选的亚类是以下式Ia 的化合物：

其中G、L、Z1、Z2、A1、A2、Q1和Q2如上文所限定；

Y’为J-J’-J”，其中J为(CR7R7’)n，而n＝0-3，J’为一个键或O、S、S＝O、 SO2、NH、NR7、CR7R7’、R2P＝O、R2P＝S、R2OP＝O、R2NHP＝O、 OP＝OOR2、OP＝ONHR2、OSO2、NHNH、NHNR6、NR6NH、N＝N、 环烷基或取代的环烷基、环烯基或取代的环烯基、或者杂环基 或取代的杂环基，且J”为(CR7R7’)n，而n＝0-3，其中Y不是键； 且

W’为CR7R7’-CR7R7’、CR7R7’-C＝O、C＝O-C＝O、CR7R7’-C＝CH2、 C＝CH2-C＝CH2、CR7R7’-C＝NR1、C＝NR1-C＝NR1、NR9-CR7R7’、 N＝CR8、N＝N、NR9-NR9’、环烷基或取代的环烷基、环烯基或 取代的环烯基、杂环基或取代的杂环基、或者芳基或取代的芳 基，其中当W’不是NR9-CR7R7’、N＝CR8、N＝N、NR9-NR9’或者 杂环基或取代的杂环基时，则J’必须是O、S、S＝O、SO2、NH、 NR7、OP＝OOR2、OP＝ONHR2、OSO2、NHNH、NHNR6、NR6NH 或N＝N；或者，

当W为CR7R7’-CR7R7’时，则R7和R7’取代基每次出现时可结合在一 起形成取代或未取代的碳环或取代或未取代的杂环体系，这些 环系可由与相同碳原子连接的R7和R7’的任何组合形成；或者，

Y’为NR7-CR7R7’，且W’为CR8＝CR8’；或者，

Y’为CR7R7’-C＝O，且W’为NR9-CR7R7’；

其中R2、R6、R7、R7’、R8、R9和R9’如上文所限定，并且条件是：(1) 当Y’为-O-，Q1和Q2为氢，Z1和Z2为O，W’为-CH2-CH2-，并 且A1和A2为CH时，则G-L不是苯基、一取代的苯基或被两 个或更多个以下基团取代的苯基：甲氧基、卤代、NO2、甲基、 CH3-S-、OH、CO2H、三氟甲基、-C(O)-C6H5、NH2、4-7-环氧、 六氢-1H-异吲哚-1，3(H2)二酮或-C(O)-CH3；

(2)当Y’为-O-，Q1和Q2为氢，Z1和Z2为O，W’为CH2-CH2， 并且A1和A2中一个为CH，而另一个为CR7时，则G-L不是未 取代的苯基；

(3)当Y’为-O-，Q1和Q2为氢，Z1和Z2为O，W’为CH2-CH2， 并且A1和A2中一个为CH，而另一个为C-CH3时，则G-L不是 被氯和/或甲基取代的苯基；

(4)当Y’为-O-或-S-，Q1和Q2为氢，Z1和Z2为O，W’为CH2-CH2， 并且A1和A2中一个为CH，而另一个为CH或C-烷基时，则G-L 不是N-取代的哌嗪-烷基-或N-取代的咪唑烷-烷基-；

(5)当Y’为-O-；Q1和Q2为氢，Z1和Z2为O，W’为CH2-CH2， 并且A1和A2为CH时，则G-L不是噁唑或三唑；

(6)当Y’为-O-；Q1和Q2为氢或甲基，Z1和Z2为O，W’为 CH2-CH2，并且A1和A2为CH或C-CH3时，则G-L不是噻唑或取代 的噻唑(另外，任选地除去其中G-L为可任选取代的噻二唑或者 部分饱和的噻唑的这类化合物，条件是其中A1和A2都是CH)；

(7)当Y’含有一个选自以下的基团J’：S、S＝O、SO2、NH、NR7、 R2P＝O、R2P＝S、R2OP＝O、R2NHP＝O、OP＝OOR2、OP＝ONHR2、 OSO2、NHNH、NHR6、NR6NH或N＝N，W’为CR7R7’-CR7R7’， 并且Z1和Z2为O时，则G-L不是未取代的苯基；

(8)当Y’为NR7，W’为未取代或取代的苯基，并且Q1和Q2为氢 时，则Z1和Z2不是O；

(9)当Y’为-O-，Q1和Q2为氢，Z1和Z2为O，W’为带有一个任 选取代的苯基的二氢异噁唑，并且A1和A2为CH时，则G-L 不是未取代的苯基或二氯苯基；

(10)当Y’为O，Q1和Q2为氢，Z1和Z2为O，W’为环氧乙烷， 并且A1和A2为CH时，则G-L不是甲基苯基或氯苯基；

(11)当Y’为NR7-CR7R7’，W’为CR8＝CR8’，Q1和Q2为氢，A1和 A2为CH、C-CH3、C-CH2-C6H5或C-CH2-CH3，并且Z1和Z2为 O时，则G-L不是未取代的苯基、一取代的苯基或甲基吡啶基；

(12)当Y’为CR7R7’-C＝O，W’为NR9-CR7R7’，Q1和Q2为氢，A1 和A2为CH，并且Z1和Z2为O时，则G-L不是未取代的苯基；

(13)当Y’为CHR7’-NR7，其中R7’为未取代的苯基、甲氧基或乙 氧基，且R7为未取代的苯基、甲基或-C(O)-C6H5，W’为二甲氧 基亚苯基或未取代的亚苯基，Z1和Z2为O，Q1和Q2为氢，并 且A1和A2为CH、C-CN、C-C(O)-C6H5或-C(O)-二甲氧基苯基 时，则G-L不是未取代的苯基；

(14)式Ia化合物不是6，10-环硫-4H-噻吩并[3’，4’：5，6]环辛并 (cyclooct)[1，2-f]异吲哚-7，9(5H，8H)-二酮、8-(3，5-二氯苯基)- 6，6a，9a，10，11，12，-六氢-1，3，6，10-四甲基-2，2，13-三氧化物， (6R，6aR，9aS，10S)；

(15)当Y’为O，W’为-CH2-CH2-，Q1和Q2为甲基，Z1和Z2为O， 并且A1和A2为CH时，则G-L不是未取代的苯基、被甲氧基 取代的苯基、苯基-烷基-或吗啉-烷基，也不是通过为亚烷基的 基团L自身桥连形成双化合物的所述化合物；

(16)当Y’为-O-，Q1和Q2为氢，Z1和Z2为O，W’为CR7R7’-CR7R7’， 并且A1和A2为CH时，则G-L不是未取代的苯基；并且 (17)当Y’为-O-，Q1和Q2为氢，Z1和Z2为O，W’为环戊基、环 己基、3-苯基-2-异噁唑啉或CR7R7’-CR7R7’，其中R7和R7’分别 独立地限定为Cl、Br、H和4-丁内酯，而R7和R7’不同时都是 H，并且A1和A2为CH时，则G-L不是未取代的萘环或一取代 的苯环，其中所述取代基为甲氧基、Br、Cl、NO2、甲基、乙基、 CH2-苯基、S-苯基或O-苯基。

式I化合物优选是单体，并且不包括在其它寡聚体或多聚体内。

另一个优选的新型亚类是以下式Ib的化合物：

其中G、Z1、Z2、Q1和Q2如上文所定义；

Y’为J-J’-J”，其中J为(CR7R7’)n，而n＝0-3，J’为一个键或O、S、S＝O、 SO2、NH、NR7、CR7R7’、R2P＝O、R2P＝S、R2OP＝O、R2NHP＝O、 OP＝OOR2、OP＝ONHR2、OSO2、NHNH、NHNR6、NR6NH、N＝N、 环烷基或取代的环烷基、环烯基或取代的环烯基、或者杂环基 或取代的杂环基，并且J”为(CR7R7’)n，而n＝0-3，其中Y不是 键；且

W’为CR7R7’-CR7R7’、CR7R7’-C＝O、C＝O-C＝O、CR7R7’-C＝CH2、 C＝CH2-C＝CH2、CR7R7’-C＝NR1、C＝NR1-C＝NR1、NR9-CR7R7’、 N＝CR8、N＝N、NR9-NR9’、环烷基或取代的环烷基、环烯基或 取代的环烯基、杂环基或取代的杂环基、或者芳基或取代的芳 基，其中

当W’不是NR9-CR7R7’、N＝CR8、N＝N、NR9-NR9’或者杂环基或取代 的杂环基时，则J’必须是O、S、S＝O、SO2、NH、NR7、OP＝OOR2、 OP＝ONHR2、OSO2、NHNH、NHNR6、NR6NH或N＝N；或者，

当W为CR7R7’-CR7R7’时，则R7和R7’取代基每次出现时可结合在一 起形成取代或未取代的碳环或取代或未取代的杂环体系，这些 环系可由与相同碳原子连接的R7和R7’的任何组合形成；

Y’为CR7R7’-C＝O，且W’为NR9-CR7R7’；

L为一个键；并且

A1和A2如以上所定义，尤其是当其中A1和/或A2为烷基或任选取代 的烷基(优选这类任选的取代基是一个或多个以下限定的基团V1)，条 件是：当Y’＝O，且W’＝-CH2-CH2-时，则A1或A2中至少一个不是 CH；

此外还带有上文的(2)、(3)、(6)、(7)和(8)的条件。

式I化合物或及其盐包括一个核心，所述核心可以充当类固醇 模拟物(并且不需要存在类固醇型(例如环戊并全氢菲类似物)结构)。

                     本发明的进一步描述

以下是本说明书中所用术语的定义。本文为一个基团或术语提 供的原始定义适用于本说明书中单独的或者作为另一组术语一部分 的该基团或术语，除非另有说明。

术语“烷基(alkyl)”和“烷(alk)”是指含有1-12个碳原子、优 选1-6个碳原子的直链或支链烷(烃)基。示例性的这类基团包括但不 限于甲基、乙基、丙基、异丙基、正丁基、叔丁基、异丁基、戊基、 己基、异己基、庚基、4，4-二甲基戊基、辛基、2，2，4-三甲基戊基、壬 基、癸基、十一烷基、十二烷基等。“取代的烷基”是指在任何可 用的连接点上被一个或多个取代基、优选1-4个取代基取代的烷基。 示例性的取代基包括但不限于一个或多个以下基团：卤代(例如一个 卤代取代基或多个卤代取代基，在后一种情况下形成诸如全氟烷基， 或者带有Cl3或CF3的烷基)、烷氧基、烷硫基、羟基、羧基(即-COOH)、 烷氧基羰基、烷基羰基氧基、氨基(即-NH2)、氨甲酰基或取代的氨甲 酰基、氨基甲酸酯或者取代的氨基甲酸酯、脲或取代的脲、脒基 (amidinyl)或取代的脒基、巯基(即-SH)、芳基、杂环、环烷基、杂环 基烷基、-S-芳基、-S-杂环、-S＝O-芳基、-S＝O-杂环、芳烷基-O-、-S(O)2- 芳基、-S(O)2-杂环、-NHS(O)2-芳基、-NHS(O)2-杂环、-NHS(O)2NH- 芳基、-NHS(O)2NH-杂环、-P(O)2-芳基、-P(O)2-杂环、-NHP(O)2-芳 基、-NHP(O)2-杂环、-NHP(O)2NH-芳基、-NHP(O)2NH-杂环、-O-芳 基、-O-杂环、-NH-芳基、-NH-杂环、-NHC＝O-芳基、-NHC＝O-烷基、 -NHC＝O-杂环、-OC＝O-芳基、-OC＝O-杂环、-NHC＝ONH-芳基、- NHC＝ONH-杂环、-OC＝OO-芳基、-OC＝OO-杂环、-OC＝ONH-芳基、 -OC＝ONH-杂环、-NHC＝OO-芳基、-NHC＝OO-杂环、-NHC＝OO-烷 基、-C＝ONH-芳基、-C＝ONH-杂环、-C＝OO-芳基、-C＝OO-杂环、-N(烷 基)S(O)2-芳基、-N(烷基)S(O)2-杂环、-N(烷基)S(O)2NH-芳基、-N(烷 基)S(O)2NH-杂环、-N(烷基)P(O)2-芳基、-N(烷基)P(O)2-杂环、-N(烷 基)P(O)2NH-芳基、-N(烷基)P(O)2NH-杂环、-N(烷基)-芳基、-N(烷基) 杂环、-N(烷基)C＝O-芳基、-N(烷基)C＝O-杂环、-N(烷基)C＝ONH-芳 基、-N(烷基)C＝ONH-杂环、-OC＝ON(烷基)-芳基、-OC＝ON(烷基)-杂 环、-N(烷基)C＝OO-芳基、-N(烷基)C＝OO-杂环、-C＝ON(烷基)-芳基、 -C＝ON(烷基)-杂环、-NHS(O)2N(烷基)-芳基、-NHS(O)2N(烷基)-杂环、 -NHP(O)2N(烷基)-芳基、NHP(O)2N(烷基)-杂环、-NHC＝ON(烷基)-芳 基、-NHC＝ON(烷基)-杂环、-N(烷基)S(O)2N(烷基)-芳基、-N(烷 基)S(O)2N(烷基)-杂环、-N(烷基)P(O)2N(烷基)-芳基、-N(烷 基)P(O)2N(烷基)-杂环、-N(烷基)C＝ON(烷基)-芳基和-N(烷基)C＝ON(烷 基)-杂环。在上述示例性取代基中，在每种情况下，基团例如“烷基”、 “芳基”和“杂环”本身可以被任选取代；例如，在上述基团“NCH＝OO- 烷基”中的“烷基”可以被任选取代，因此“NHC＝OO-烷基”和 “NHC＝OO-取代的烷基”是示例性取代基。示例性烷基取代基也包 括例如“T”和“T-R12”(其定义如下)的基团，尤其是A1或A2内的 取代烷基。

术语“链烯基”是指含有2-12个碳原子和至少一个碳-碳双键的 直链或支链烃基。示例性的这类基团包括乙烯基或烯丙基。“取代 的链烯基”是指在任何可用的连接点上被一个或多个取代基、优选1-4 个取代基取代的链烯基。示例性的取代基包括但不限于烷基或取代 的烷基、以及上述同示例性烷基取代基一样的那些基团。

术语“炔基”是指含有2-12个碳原子和至少一个碳-碳叁键的直 链或支链烃基。示例性的这类基团包括乙炔基。“取代的炔基”是 指在任何可用的连接点被一个或多个取代基、优选1-4个取代基取代 的炔基。示例性的取代基包括但不限于烷基或取代的烷基、以及上 述同示例性烷基取代基一样的那些基团。

术语“环烷基”是指含有1-4个环并且每个环含有3-8个碳原子 的全饱和环烃基。示例性的这类基团包括环丙基、环丁基、环戊基、 环己基等。“取代的环烷基”是指在任何可用的连接点被一个或多 个取代基、优选1-4个取代基取代的环烷基。示例性取代基包括但不 限于硝基、氰基、烷基或取代的烷基、以及上述与示例性烷基取代 基一样的和与先前所述的G定义中的优选芳基取代基一样的那些基 团。示例性取代基也包括螺接环取代基或稠环取代基，尤其是环烯 基或取代的环烯基。

术语“环烯基”是指含有1-4个环并且每个环含有3-8个碳原子 的部分不饱和环烃基。示例性的这类基团包括环丁烯基、环戊烯基、 环己烯基等。“取代的环烯基”是指在任何可用的连接点被一个或 多个取代基、优选1-4个取代基取代的环烯基。示例性取代基包括但 不限于硝基、氰基、烷基或取代的烷基、以及上述与示例性烷基取 代基一样的和与先前所述的G定义中的优选芳基取代基一样的那些 基团。示例性取代基也包括螺接环取代基或稠环取代基，尤其是环 烷基或取代的环烷基。

术语“烷氧基”或“烷硫基”是指分别通过一个氧键(-O-)或硫 键(-S-)连接的上述烷基。术语“取代的烷氧基”或“取代的烷硫基” 是指分别通过一个氧键(-O-)或硫键(-S-)连接的上述取代的烷基。

术语“烷氧基羰基”是指通过一个羰基连接的烷氧基。

术语“烷基羰基”是指通过一个羰基连接的烷基。术语“烷基 羰基氧基”是指通过一个氧键连接的烷基羰基。

术语“芳烷基”、“取代的芳烷基”、“环烷基烷基”、“取 代的环烷基烷基”、“环烯基烷基”、“取代的环烯基烷基”、“杂 环烷基”和“取代的杂环烷基”是指在指明为“取代”的芳基、环 烷基、环烯基或杂环基和/或烷基上取代的、通过一个烷基连接的芳 基、环烷基、环烯基和杂环基。

术语“芳基”是指具有1-5个芳环、尤其是单环基或二环基的 环状芳烃基，例如苯基、联苯基或萘基。当含有两个或更多个芳环(二 环等)时，所述芳基的芳环可以在一个点连接(例如联苯基)、或者稠 合(例如萘基、菲基)。“取代的芳基”是指在任何连接点被一个或多 个取代基、优选1、2、3、4或5个取代基取代的芳基。示例性的取 代基包括但不限于硝基、环烷基或取代的环烷基、环烯基或取代的 环烯基、氰基、烷基-S(O)m-(m＝0、1或2)、烷基或取代的烷基、以 及上述与示例性烷基取代基一样的和与先前所述的G定义中的优选 芳基取代基一样的那些基团。示例性取代基也包括稠环取代基、例 如杂环基或环烯基、或者取代的杂环基或环烯基(例如从而形成芴基、 四氢萘基或二氢茚基)。

“氨甲酰基”是指基团-CONH-，其一端连接于所述分子的其余 部分，而另一端连接于氢或一个有机部分(例如烷基、取代的烷基、 芳基、取代的芳基、杂环、烷基羰基、羟基和取代的氮)。“氨基甲 酸酯”是指基团-O-CO-NH-，其一端连接于所述分子的其余部分，而 另一端连接于氢或一个有机部分(例如以上所列的部分)。“脲”是指 基团-NH-CO-NH-，其一端连接到所述分子的其余部分，而另一端连 接于氢或一个有机部分(例如以上所列的部分)。“脒基”是指 C(＝NH)(NH2)。“取代的氨甲酰基”、“取代的氨基甲酸酯”、“取 代的脲”和“取代的脒基”是指其中一个或多个氢被有机部分(例如 以上所列的)取代的上述氨甲酰基、氨基甲酸酯、脲或脒基。

术语“杂环”、“杂环基(heterocyclic)”和“杂环基(heterocyclo)” 是指在至少一个含碳原子的环中具有至少一个杂原子的全饱和或部 分不饱和或完全不饱和的包括芳族的(即“杂芳基”)环基(例如3-7元 单环、7-11元二环或者10-16元三环的环系)。含杂原子的杂环基的 每个环可以有1、2、3或4个选自氮原子、氧原子和/或硫原子的杂 原子，其中所述氮杂原子和硫杂原子可以任选地被氧化，并且所述 氮杂原子可以任选被季铵化。(术语“杂芳鎓”是指带有季铵氮原子 并因此带有正电荷的杂芳基。)杂环基可以在所述环或环系的任何杂 原子或碳原子上连接于所述分子的其余部分。应理解，当W或W′为 环烷基或取代环烷基、环烯基或取代环烯基、杂环或取代杂环或芳 基或取代芳基时，A1和A2可分别与所述基团上的不同环原子(如邻 位原子)键合。示例性的单环杂环基包括环氧乙烷、氮杂环丁烷基、 吡咯烷基、吡咯基、吡唑基、氧杂环丁烷基、吡唑啉基、咪唑基、 咪唑啉基、咪唑烷基、噁唑基、噁唑烷基、异噁唑啉基、异噁唑基、 噻唑基、噻二唑基、噻唑烷基、异噻唑基、异噻唑烷基、呋喃基、 四氢呋喃基、噻吩基、噁二唑基、哌啶基、哌嗪基、2-氧代哌嗪基、 2-氧代哌啶基、2-氧代吡咯烷基、2-氧代氮杂_基、氮杂_基、六氢 二氮杂_基、4-哌啶酮基、吡啶基、吡嗪基、嘧啶基、哒嗪基、三嗪 基、三唑基、四唑基、四氢吡喃基、吗啉基、硫代吗啉基、硫代吗 啉基亚砜、硫代吗啉基砜、1，3-二氧戊环和四氢-1，1-二氧代噻吩基等。 示例性的二环杂环基包括吲哚基、异吲哚基、苯并噻唑基、苯并间 二氧杂环戊烯基、苯并噁唑基、苯并噁二唑基、苯并噻吩基、奎宁 环基、喹啉基、四氢异喹啉基、异喹啉基、苯并咪唑基、苯并吡喃 基、中氮茚基、苯并呋喃基、苯并呋咱基、色酮基、香豆素基、苯 并吡喃基、噌啉基、喹喔啉基、吲唑基、吡咯并吡啶基、呋喃并吡 啶基(例如呋喃并[2，3-c]吡啶基、呋喃并[3，2-b]吡啶基]或呋喃并[2，3-b] 吡啶基)、二氢苯并二氧杂环己烯基、二氢二氧化苯并噻吩基 (dihydrodioxidobenzothiophenyl)、二氢异吲哚基、二氢吲哚基、二氢 喹啉基、二氢喹唑啉基(例如3，4-二氢-4-氧代-喹唑啉基)、三嗪基氮 杂_、四氢异喹啉基等。示例性的三环杂环基包括咔唑基、benzidolyl， 菲咯啉基、氧芴基、吖啶基、菲啶基、呫吨基等。

“取代的杂环”和“取代的杂环基”(例如“取代的杂芳基”)是 指在任何可用连接点上被一个或多个取代基、优选1-4个取代基取代 的杂环或杂环基。示例性的取代基包括但不限于环烷基或取代的环 烷基、环烯基或取代的环烯基、硝基、氧代(即＝O)、氰基、烷基-S(O)m- (m＝0、1或2)、烷基或取代的烷基、以及以上与示例性烷基取代基 一样的和与先前所述的G定义中的优选杂环基取代基一样的那些取 代基。

术语“季铵氮”是指四价带正电荷的氮原子，包括例如四烷基 铵基团(例如四甲基铵、N-甲基吡啶鎓)中带正电荷的氮、质子化铵种 类(例如三甲基氢化铵、N-氢化吡啶鎓)中带正电荷的氮、胺N-氧化 物(例如N-甲基-吗啉-N-氧化物、吡啶-N-氧化物)中带正电荷的氮、 以及N-氨基-铵基(例如N-氨基吡啶鎓)中带正电荷的氮。

术语“卤素”或“卤代”是指氯、溴、氟或碘。

术语“羟胺”和“羟基酰胺”分别是指基团OH-NH-和 OH-NH-CO-。

当官能团被称为“被保护的”时，这是指该基团为被修饰的形 式，所述修饰是为减轻、尤其是消除所述被保护位点不需要的副反 应。用于本文所述方法和化合物的合适保护基包括但不限于在标准 教科书例如Greene，T.W.等，Protective Groups in Organic Synthesis， Wiley，N.Y.(1991)中描述的那些保护基。

当使用诸如“(CRR)n”之类的术语时，是指在连接的两个片段 之间存在任选取代的烷基链，该链的长度由术语n所述的范围限定。 其实例为n＝0-3，是指在所述两个片段之间存在0-3个(CRR)单位， 所述两个片断连接于第一个和最后一个(CRR)单位。当术语n设定为 0(n＝0)时，则在连接于(CRR)的两个片段之间有一个键。

除非另有说明，具有不饱和化合价的任何杂原子都假定有足以 满足所述化合价的氢原子。

二价基团，例如W定义中的那些二价基团(例如NR9-CR7R7’)， 可以以任一方向连接于所述分子的其余部分(例如对于W定义中上述 基团而言为 或，

羧酸根阴离子是指带负电荷基团-COO-。

式I化合物形成盐，所述盐也在本发明的范围内。在本文中提 及式I化合物时，应该理解是包括提及的其盐，除非另有说明。本文 所用的术语“盐”是指与无机和/或有机酸和碱形成的酸式盐和/或碱 式盐。另外，当式I化合物既含有碱性部分(例如但不限于吡啶或咪 唑)和酸性部分(例如但不限于羧酸)时，可以形成两性离子(“内盐”)， 这些包括在本文所用的术语“盐”的范围内。虽然其它盐也是可用 的，例如用于在制备期间可能使用的分离或纯化步骤中，但优选药 学上可接受的(即无毒的生理上可接受的)盐。例如，通过使式I化合 物与一定量的酸或碱(例如等量的)在一种介质中反应，可以生成式I 化合物的盐，所述介质例如为所述盐在其中沉淀的介质，或者式I化 合物与酸或碱在水性介质中反应，然后冻干。

含有碱性部分(包括例如*但不限于胺或吡啶或咪唑环)的式I化 合物可以与各种各样的有机酸和无机酸形成盐。示例性的酸加成盐 包括乙酸盐(例如与乙酸或三卤代乙酸(例如三氟乙酸)生成的盐)、己 二酸盐、藻酸盐、抗坏血酸盐、天冬氨酸盐、苯甲酸盐、苯磺酸盐、 硫酸氢盐、硼酸盐、丁酸盐、柠檬酸盐、樟脑酸盐、樟脑磺酸盐、 环戊烷丙酸盐、二葡萄糖酸盐、十二烷基硫酸盐、乙磺酸盐、富马 酸盐、葡糖庚酸盐、甘油磷酸盐、半硫酸盐、庚酸盐、己酸盐、盐 酸盐、氢溴酸盐、氢碘酸、羟基乙磺酸盐(例如2-羟基乙磺酸盐)、乳 酸盐、马来酸盐、甲磺酸盐、萘磺酸盐(例如2-萘磺酸盐)、烟酸盐、 硝酸盐、草酸盐、果胶酸盐、过硫酸盐、苯基丙酸盐(例如3-苯基丙 酸盐)、磷酸盐、苦味酸盐、新戊酸盐、丙酸盐、水杨酸盐、琥珀酸 盐、硫酸盐(例如与硫酸形成的那些盐)、磺酸盐(例如本文提及的那 些盐)、酒石酸盐、硫氰酸盐、甲苯磺酸盐(toluenesulfonate)例如甲苯 磺酸盐(tosylate)、十一烷酸盐等。

含有酸性部分(包括例如但不限于羧酸)的式I化合物可以与各种 各样的有机碱和无机碱形成盐。示例性的碱式盐包括铵盐、碱金属 盐例如钠盐、锂盐和钾盐、碱土金属盐例如钙盐和镁盐、与有机碱(例 如有机胺)例如苯乍生、二环己胺、hydrabamines(与N，N-双(脱氢枞 基)乙二胺形成的)、N-甲基-D-葡糖胺、N-甲基-D-葡糖酰胺、叔丁胺 形成的盐和与氨基酸例如精氨酸、酪氨酸等形成的盐。含氮碱性基 团可以用诸如低级烷基卤(例如甲基、乙基、丙基和丁基氯、溴和碘)、 二烷基硫酸酯(例如硫酸二甲酯、二乙酯、二丁酯和二戊酯)、长链卤 化物(例如癸基、十二烷基、肉豆蔻基和硬脂基氯、溴和碘)、芳烷基 卤(例如苄基溴和苯乙基溴)和其它试剂季铵化。

本发明也考虑了本发明化合物的前体药物和溶剂合物。本文所 用的术语“前体药物”是指在给予受治疗者后通过代谢过程或化学 过程经历化学转化产生式I化合物、或其盐和/或溶剂合物的化合物。 式I化合物的溶剂合物包括例如水合物。

式I化合物或其盐可以以其互变异构体形式(例如作为酰胺或亚 氨基醚)存在。所有这类互变异构体形式在此都考虑作为本发明的一 部分。

本发明化合物的所有立体异构体(例如由于各种取代基上不对称 碳而引起的可能存在的那些立体异构体)包括对映体形式和非对映体 形式，都考虑在本发明范围内。本发明化合物的各种立体异构体可 以是例如基本上无其它异构体(例如作为纯或基本纯的具有特定活性 的旋光异构体)，或者可以混合例如作为外消旋体，或者与所有其它 立体异构体或其它选定的立体异构体混合。本发明的手性中心可以 具有IUPAC 1974 Recommendations定义的S构型或R构型。外消旋 形式可以通过物理方法例如非对映体衍生物的分级结晶、分离或结 晶、或者通过手性柱色谱分离来拆分。各种旋光异构体可以通过任 何合适的方法，包括但不限于常规方法(例如与旋光性酸形成盐然后 结晶)，从外消旋体中获得。

考虑了或者为混合物形式或者为纯的或基本纯的形式的本发明 化合物的所有构型异构体。本发明化合物的定义包括顺式(Z)和反式(E) 烯烃异构体以及环烃或杂环的顺式和反式异构体。在某些情况下， 例如对于式I中与G-L连接的稠合环系而言，可能优选外型或内型 构型。例如，对于其中Y为O或NR7的雄激素受体拮抗剂(或选择性 雄激素受体调节剂)而言，可能优选外型构型，而对于Y的大多数其 它定义而言，可能优选内型构型。正如人们可以认识到的，所述优 选的构型可能随特定化合物及其优选活性而变。构型异构体的分离 可以通过任何合适的方法(例如柱色谱)来完成。

在整个说明书中，可以选择基团及其取代基以提供稳定的部分 和化合物。

本文中所示的作为实例性的或优选的实施方案是用来说明之用 的，而非限制之间的。

                         制备方法

本发明的化合物可以通过诸如在以下流程I-XI中所示的那些方 法来制备。本领域技术人员可以容易地选择溶剂、温度、压力和其 它反应条件。原料可由市售获得，或者由本领域技术人员容易地来 制备。在制备化合物时，可以使用组合的技术，例如在中间体具有 适合于这些技术的基团的情况下。参见以下文献，以下文献描述可 以用来制备本发明化合物的其它方法：Li等，Eur.J.Org.Chem.9， 1841-1850(1998)；Li，Y-Q，Synlett.5，461-464(1996)；Thiemann等，Bull. Chem.Soc.Jpn.67，1886-1893(1994)；Tsuge等，Heterocycles 14，423- 428(1980)；Ward等，Can J.Chem.75，681-693(1997)；Ward等，Can J. Chem.69，1487-1497(1991)；Ward等，Tetrahedron Lett.31，845-848 (1990)；Fleming等，J.Org.Chem.44，2280-2282(1979)；Jankowski等，J. Organomet.Chem.595，109-113(2000)；Keglevich等，J.Organomet. Chem.579，182-189(1999)；Keglevich等，J.Organomet.Chem.570，49- 539(1998)；Jankowski等，Hetroat.Chem.7，369-374(1996)；Jankowski 等，J.Am.Chem.Soc.113，7011-7017(1991)；Quin等，Tetrahedron Lett. 31，6473-6476(1990)；Quin等，J.Org.Chem.59，120-129(1994)；Quin 等，J.Org.Chem.58，6212-6216(1993)；Quin等，Phosphorous，Sulfur Silicon Relat.Elem.63，349-362(1991)；Quin等，Hetroat.Chem.2，359- 367(1991)；Hussong等，Phosphorus Sulfur.25，201-212(1985)；Quin等， J.Org.Chem.51，3341-3347(1986)；Myers等，J.Am.Chem.Soc.114， 5684-5692(1992)；Myers等，J.Am.Chem.Soc.113，6682-6683(1991)； Shen等，美国专利第5817679号；Cordone等，J.Am.Chem.Soc.111， 5969-5970(1989)；Jung等，J.Chem.Soc.Commun.630-632(1984)；Lay 等，J.Am.Chem.Soc.104，7658-7659(1982)；Gonzalez等，J.Am.Chem. Soc.117，3405-3421(1995)；Kreher等，Chem Ber.125，183-189(1992)； Simig等，Synlett.7，425-426(1990)；Sha等，J.Org.Chem.55，2446-2450 (1990)；Drew等，J.Chem.Soc.，Perkin Trans.17，1277-1284(1985)； Kreher等，Anorg.Chem.，Org.Chem.31B，599-604(1976)；Avalos等， Tetrahedron Lett.39，9301-9304(1998)；Gousse等，Macromolecules 31， 314-321(1998)；Mikhailyuchenko等，Khim.Geterotsikl.Soedin.6，751- 758(1993)；Lubowitz等，美国专利第4476184号；Padwa等，J.Org. Chem.61，3706-3714(1996)；Schlessinger等，J.Org.Chem.59，3246- 3247(1994)；Buchmeiser等，WO公布号9827423；Tanabe等，日本专 利文件JP 07144477；Mochizucki等，日本专利文件JP 63170383； Hosoda等，日本专利文件JP 62053963；Onaka等，日本专利文件JP 62053964；Kato等，日本专利文件JP 53086035；Kato等，日本专利文 件JP 51088631；Tottori等，日本专利文件JP 49124225；Augustin等，德 国专利文件DD101271；Title等，法国专利文件FR 2031538；Gousse 等，Polym.Int.48，723-731(1999)；Padwa等，J.Org.Chem.62，4088- 4096(1997)；Theurillat-Moritz等，Tetrahedron：Asymmetry 7，3163-3168 (1996)；Mathews等，J.Carbohydr.Chem.14，287-97(1995)；Srivastava 等，Natl.Acad.Sci.Lett.(India)15，41-44(1992)；Mayorga等，Rev. Cubana Quim.4，1-6(1988)；Kondoli等，J.Chem.Res.，Synop.3，76 (1987)；Primelles等，Cent.Azucar 7-14(1985)；Solov’eva等，Khim. Geterotsikl.Soedin.5，613-15(1984)；Liu等，Yaoxue Xuebao 18，752-759 (1983)；Joshi等，Indian J.Chem，Sect.B.22B，131-135(1983)；Amos等， WO公布号9829495；Odagiri等，美国专利第4670536号；Gallucci等， 欧洲专利文件EP 355435；Redmore，D.美国专利第3821232号； Nakano等，Heterocycles 35，37-40(1993)；Tomisawa等，Chem.Pharm. Bull.36，1692-1697(1988)；Krow等，J.Heterocycl.Chem.22，131-135 (1985)；Krow等，J.Org.Chem.47，1989-1993(1982)；Liu等，Yaoxue Xuebao18，752-759(1983)；Nishikawa等，Yaoxue Xuebao JP 01061457； 和/或Rice等，J.Med.Chem.11，183-185(1968)。

在本说明书中引用的所有文献，例如在“制备方法”中以及在 本文的其它小节中引用的那些文献，都通过引用全部结合到本文中。 在本文中提及任何参考文献，不构成对这一文献是现有技术的认可。

                            流程I

如流程I中所示，可以在本领域技术人员容易选择的条件下((例 如加上加热(“Δ”))，使式II的二烯烃与式III的亲双烯体反应，获得 式IV化合物，这是一种式I化合物。式II的中间体二烯烃可以从商 业来源获得，或者可以由本领域技术人员例如按照以下文献以及其 中引用的参考文献容易地制备：Hofman等，J.Agric.Food Chem.45， 898-906(1997)；Baciocchi等，J.Chem.Soc.，Perkin Trans.28，821-824 (1975)；Wu等，J.Heterocycles 38，1507-1518(1994)；Yin等， Tetrahedron Lett.38，5953-5954(1997)；Mic′ovic′等，Tetrahedron 20， 2279-2287(1964)；Gorbunova等，J.Org.Chem.，35，1557-1566(1999)； Rassu等，Chem.Soc.Rev.29，109-118(2000)；Kaberdin等，Russ.Chem. Rev..68，765-779(1999)；Barluenga等，Aldrichimica Acta 32，4-15 (1999)；Bogdanowicz-Szwed等，Pol.Wiad.Chem.52，821-842(1998)； Casiraghi等，Adv.Asymmetric Synth.3，113-189(1998)；和/或Baeckvall 等，Chem.Rev.98，2291-2312(1998)。一种式III的中间体亲双烯体可 以从商业来源获得，或者由本领域技术人员例如按照以下文献以及 其中引用的参考文献容易地制得：Deshpande等，Heterocycles 51， 2159-2162(1999)；Seijas等，J.Chem.Res.，Synop.7，420-421(1999)； Langer等，Eur.J.Org.Chem.7，1467-1470(1998)；Kita等，日本专利文 件JP 09194458；Lopez-Alvarado等，J.Org.Chem.61，5865-5870(1996)； Condon等，美国专利第5523277号；Sasakihara等，日本专利文件JP 04290868；Igarashi等，日本专利文件JP 04149173；Aoyama等，日本 专利文件JP 04134063；Aoyama等，日本专利文件JP 04134062；Pastor 等，J.Org.Chem.53，5776-5779(1988)；和/或Takahashi等，Chem.Lett. 6，1229-1232(1987)。

                       流程II

如流程II所示，通过例如在溶剂例如乙酸中在加热或不加热的 情况下，使式V的伯胺与式VI的取代的酸酐样中间体反应，得到式 IV化合物(它是一种式I化合物)，可以获得式I化合物。式V的伯 胺可以从商业来源获得，或者可以由本领域技术人员容易地合成。 式VI的酸酐样试剂可以从商业来源获得，或者可以由本领域技术人 员容易地合成。以下所列的文献描述了用于合成式VI中间体的示例 性途径以及可能适用于合成式IV化合物的合成途径(所有文献都通过 引用全部结合到本文中)：Kohler，E.P.；Tishler，M.；Potter，H.； Thompson，H.T.J.Am.Chem.Soc.1939，1057-1061；Yur′ev，Y.K.， Zefirov，N.S.J.Gen.Chem.U.S.S.R.(Engl.Transl.)1961，31，772-5； Norman G.Gaylord美国专利第3,995,099号；Schueler，P.E.；Rhodes， Y.E.J.Org.Chem.1974，39，2063-9；Ishitobi，H.；Tanida，H；Tsuji，T. Bull.Chem.Soc.Japan 1971，44，2993-3000；Stájer，G.；Virág，M.；Szabó， A.E.；Bernáth，G.；Sohár，P.；Sillanp__，R.Acta.Chem.Scand. 1996，50， 922-30；Hart，H.；Ghosh，T.Tetrahedron Lett.1988，29，881-884；Kato， M.；Yamamoto，S.；Yoshihara，T.；Furuichi，K；Miwa，T.Chem.Lett.1987， 1823-1826；Kottwitz，J.；Vorbrüggen，H.Synthesis 1995，636-637；Creary， X.J.Org.Chem.1975，40，3326-3331；Alder，K.；Ache，H.-J.；Flock，F.H. Chem.Ber.1960，93，1888-1895；Toder，B.H.；Branca，S.J.；Dieter，R.K.； Smith，A.B.III Synth.Commun.1975，5，435-439；Sprague，P.W.； Heikes，J.E.；Gougoutas，J.Z.；Malley，M.F.；Harris，D.N.；和/或 Greenberg，R.J.Med.Chem.1985，28，1580-1590。

上述途径可以以组合方式应用，例如通过用在以下文献中所述 的多孔反应板的方式(multi-well reaction block)：Waldemar Ruediger， Wen-Jeng Li，John W.，Allen Jr.和Harold N.Weller III，美国专利第 5,961,925号，Apparatus for Synthesis of Multiple Organic Compounds With Pinch Valve Block(通过引用全部结合到本文中)。通过利用上述 的多孔反应板，人们可以例如一次进行多个96个反应。然后可以从 反应管中除去溶剂，而无需从反应板中除去溶剂，可以用碱例如碳 酸氢钠沉淀粗产物。可以通过将反应板内容物过滤，收集沉淀，然 后可以将所需产物直接转移到96孔板中以供筛选。以这种方式，可 以合成大量的一系列式I化合物，并且可以根据需要通过自动化方法 进行测试。

                          流程III

流程III描述了一种制备式VI的中间体化合物的方法，式VI 化合物可以用来合成式I化合物，如流程II中所述。如流程III中所 述，可以使式II的二烯烃与式VII的亲双烯体反应，得到式VI的中 间体。用来达到这种转化的方法与流程I中所述的方法类似。

                          流程IV

流程IV描述了一种制备式VI的中间体化合物的方法，式VI 化合物可以用来合成式I化合物，如流程II中所述。如流程IV中所 述，可以使式II的二烯烃与式VIII的亲双烯体反应，得到式IX的 中间体。可以使式IX的中间体脱水，成为式VI的酸酐样中间体。

式IX的双酸中间体的脱水可以通过各种各样的方法来完成，例如本 领域技术人员已知的方法以及在以下文献和其中引用的参考文献中 描述的方法：Sprague等，J.Med.Chem.28，1580-1590(1985)；和/或 Retemi等，J.Org.Chem.61，6296-6301(1996)。

流程I-IV描述了用于合成式I化合物及其中间体的通用方法， 其中在所述环系周围的取代直接在例如中间体二烯烃、亲双烯体、 酸酐样中间体和胺基团水平上加入。除这些途径之外，可以在已经 制备的式I化合物上，通过各种各样的途径引入其它的取代，以制备 其它的式I化合物。用于进一步取代的示例性方法描述于流程V-XI 中。

                          流程V

流程V描述了一种这样的将额外的取代引入式I结构的方法。 如流程V中所示，式X化合物是一种式I化合物，其中A1和A2为 CR7，W为NH-CHR7，而Y为CHR7-CHR7，例如通过本领域技术人 员已知的方法，通过使式X化合物与多种亲电试剂(例如酰基卤或烷 基卤)在碱存在下反应，在基团W的游离胺上，将式X化合物官能 化。在流程V中，X是离去基团，式XI化合物是其中A1和A2为CR7、 W为NR7-CHR7而Y为CHR7-CHR7的式I化合物。

                           流程VI

流程VI描述了一种用于在式I化合物上进一步引入取代的途 径。如流程VI所示，式XII化合物是一种式I化合物，其中A1和 A2为CR7，W为S-CHR7，而Y为CHR7-CHR7，可以用氧化剂(例如 mCPBA)或诸如本领域技术人员已知的其它试剂，将式XII化合物部 分氧化，得到式XIII的亚砜类似物，式XIII的亚砜类似物是其中A1 和A2为CR7，W为SO-CHR7，而Y为CHR7-CHR7的式I化合物。 用氧化剂(例如mCPBA)或者例如本领域技术人员已知的其它试剂进 一步处理式XIII化合物，可以得到式XIV的砜类似物，式XIV的 砜类似物是其中A1和A2为CR7、W为SO2-CHR7、而Y为CHR7-CHR7的式I化合物。或者，通过用氧化剂(例如mCPBA)或用例如本领域 技术人员已知的其它试剂延长时间处理，可以将式XII化合物直接 转化为式XIV化合物。

                            流程VII

流程VII描述了用于在式I化合物上进一步引入取代的另一种 途径。如流程VII所示，可以使式IIa的二烯烃与式III的亲双烯体 (如流程I中所述)进行反应，得到式IVa化合物，式IVa化合物是一 种式I化合物，其中Y为O，A2为CR7，而A1为C-(CH2)q-T。可以 使式IVa化合物与式R12-T’的试剂反应，获得式IVb或IVc的化合物， 式IVb或IVc的化合物是其中Y为O、A2为CR7、而A1分别为 C-(CH2)q-T’-R12或C-(CH2)q-T-R12的式I化合物。试剂R12-T’可以得自 商业来源，或者可以由本领域技术人员容易地制备。

在上述流程中，R12具有与先前定义的R7一样的定义，q为0或 者0-8的整数，而T定义为或者(1)能够经历与离去基团T’的亲核取 代反应的亲核中心，例如但不限于含氮、氧或硫的基团，或者(2)能 够经历与亲核基团T’的亲核取代反应的离去基团(例如但不限于含 氮、氧或硫的亲核基团)。T’的定义与T相同。在本发明的情况下， 例如，当攻击试剂(亲核试剂)给底物带来一个电子对时，用这对电子 形成新键，然后离去基团(离核体)离开该电子对，留下阴离子中间体， 发生亲核取代反应。有关脂族亲核取代机制的详细论述和具体脂族 亲核取代反应的综述，参见Advanced Organic Chemistry，Reactions， Mechanisms，and Structure，4th Addition.Jerry March(编著)，John Wiley &Sons，New York(1992)293-500及其其中的参考文献。当然，式IVa、 IVb或IVc化合物可以用于本文所述的方法中(尤其是用于治疗核激 素受体相关病症)，而无需经历T或T’的进一步反应。

                       流程VIII

式IVa、IVb和IVc化合物的一种替代途径描述于流程VIII中。 关于这种途径，可以用例如流程II、III和IV中描述的技术来制备 式VIa的中间体，其中T和q如流程VII中所限定。可以使式VIa 的中间体与式V的取代胺(如流程II中所述)进行反应，得到式IVa 化合物，式IVa化合物是一种式I化合物，其中Y为O，A2为CR7， 而A1为C-(CH2)q-T。可以以流程VII中所述的方式处理式IVa化合 物，获得式IVb或IVc化合物，式IVb或IVc化合物是其中Y为O、 A2为CR7、而A1分别为C-(CH2)q-T’-R12或C-(CH2)q-T-R12的式I化合 物。

                           流程IX

流程IX描述了在式I化合物上进一步引入取代的另一种途径。 如流程IX所示(其中X是离去基团)，可以使式IIb的二烯烃与式III 的亲双烯体(如流程I中所述)进行反应，得到式IVe化合物，式IVe 化合物是一种式I化合物，其中Y为NH，A1和A2为CR7。例如通 过用本领域技术人员已知的方法以及在流程V中所述的方法，使式 IVe化合物与各种各样的亲电子试剂(例如酰基氯或烷基卤)在碱存在 下反应，可以在游离胺上将式IVe化合物官能化，得到式IVf化合 物，式IVf化合物是一种其中Y为NR7、A1和A2为CR7的式I化合 物。

                           流程X

在流程X中描述式IVe和IVf化合物的一种替代途径。关于该 途径，可以应用流程II、III和IV中所述的技术来制备式VIb的中 间体。可以使式VIb的中间体与式V的取代胺(如流程II中所述)进 行反应，得到式IVe化合物，式IVe化合物是一种式I化合物，其 中Y为NH，A1和A2为CR7。可以以流程V中所述的方式处理后一 种中间体，获得式IVf化合物，式IVf化合物是一种其中Y为NR7、 A1和A2为CR7的式I化合物。

                              流程XI

流程XI描述了在式I化合物上引入其它取代的另一种途径。如 流程XI中所示，可以使式IIc的二烯烃与式III的亲双烯体(如流程 I中所述)进行反应，得到式IVg化合物，式IVg化合物是一种式I 化合物，其中Y为SO，而A1和A2为CR7。可以用氧化剂(例如mCPBA) 如流程VI中所述处理式IVg化合物，得到式IVh化合物，式IVh 化合物是一种式I化合物，其中Y为SO2，而A1和A2为CR7。

                              流程XII

流程XII描述了在式I化合物上引入其它取代的另一种途径。 如流程XII中所示，可以将式XV化合物(该化合物可以按照上述流 程制备)在合适的酶或微生物存在下温育，形成式XVI的羟基化类似 物。这种方法可以用来由特定微生物或一系列不同的微生物在式XV 分子中区域特异性地以及对映体特异性地引入羟基。这类微生物在 性质上可以例如是细菌、酵母或真菌，并且可以从分销商 (distributors)(例如ATCC)处获得，或者例如用本领域技术人员已知的 方法经鉴定用于本方法中。化合物XVI是一种式I化合物，其中Y 如上所述，而A1和A2优选为CR7。

                            流程XIII

流程III描述了在式I化合物上引入其它取代的另一种途径。如 流程XIII中所示，可以将式XVII化合物(该化合物可以按照上述流 程制备)在合适的酶或微生物存在下温育，形成式XVIII的二醇类似 物。这种方法可以用来由特定微生物或一系列不同的微生物将式XVII 化合物区域特异性地以及对映体特异性地转化为式XVIII的1-2二 醇。这类微生物在性质上可以例如是细菌、酵母或真菌，并且可以 从分销商(例如ATCC)处获得，或者例如用本领域技术人员已知的方 法经鉴定而用于本方法中。化合物XVIII是一种式I化合物，其中 Y如上所述，而A1和A2优选为CR7。

本发明也提供流程XII和XIII的方法。

因此，在一个实施方案中，本发明提供一种制备下式XVI化合 物或其盐的方法：

其中所述符号如本文所定义，

所述方法包括使下式XV的化合物或其盐：

其中所述符号如上所限定；

与能够催化所述化合物XV羟基化生成所述化合物XVI的酶或微生 物接触，从而实现所述羟基化的步骤。

在另一个优选实施方案中，本发明提供一种制备以下式XVIII 的化合物或其盐的方法：

其中所述符号如上所限定；

所述方法包括使以下式XVII的化合物或其盐：

其中所述符号如上所限定；

与能够催化化合物XVII的环氧环开环形成所述化合物XVIII的二醇 的酶或微生物接触，从而实现所述开环和形成二醇的步骤。

在本发明的所述方法中，考虑了或者单独的(即基本上无其它立 体异构体)或者与其它立体异构体形式混合的式XV、XVI、XVII和 XVIII化合物的未指定手性中心的所有立体构型。当接触异构体混合 物时选择性地使一种异构体转化(例如与内型异构体的羟基化相比， 优先将外型异构体羟基化)，是本发明的一个优选实施方案。选择性 地转化为一种异构体(例如与内面(exo face)“内型异构体”的羟基化 相比，优先在外面(exo face)“外型异构体”上羟基化，或者使环氧 化物区域选择性地开环，仅形成反式二醇的两种可能区域异构体中 的一种)，是本发明的一个优选实施方案。将非手性中间体羟基化而 形成所述羟基化产物的单一旋光异构体，也是本发明的一个优选实 施方案。通过选择性羟基化、或者环氧化物开环和二醇形成来拆分 中间体的外消旋混合物，从而产生两种可能的旋光异构体中的一种， 也是本发明的一个优选实施方案。本文所用的术语“拆分”是指部 分拆分以及优选完全拆分。

本文所用的术语“酶促过程”或“酶促方法”是指利用酶或微 生物的本发明的过程或方法。本文所用的术语“羟基化”是指将羟 基如上所述加入到亚甲基上。羟基化可以例如按照本发明的方法通 过与分子氧接触而完成。二醇形成可以例如按照本发明的方法通过 与水接触而完成。本发明方法中“酶或微生物”的应用包括应用两 种或更多种以及一种酶或微生物。

在本发明中所用的酶或微生物可以是能够催化本文所述的酶促 转化的任何酶或微生物。所述酶或微生物材料无论其何种来源或纯 度，都可以以游离状态使用，或者例如通过物理吸附或捕获固定于 支持体上。适用于本发明的微生物或酶可以通过筛选所要求的活性 来选择，例如通过使候选微生物或酶与起始化合物XV或XVII或其 盐接触，然后观察转化为相应的化合物XVI或XVIII或其盐。所述 酶可以例如为动物或植物酶或其混合物、微生物细胞、压碎细胞、 细胞提取物的形式，或者是合成来源的形式。

示例性微生物包括以下属内的微生物：链霉菌属(Streptomyces) 或拟无枝酸菌属(Amycolatopsis)。特别优选的微生物是以下种内的微 生物：灰色链霉菌(Streptomyces griseus)尤其是灰色链霉菌ATCC 10137和东方拟无枝酸菌(Amycolatopsis orientalis)例如ATCC 14930、 ATCC 21425、ATCC 35 165、ATCC 39444、ATCC 43333、ATCC 43490、ATCC 53550、ATCC 53630，尤其是ATCC 43491。本文所 用的术语“ATCC”是指美国典型培养物保藏中心(American Type Culture Collection)10801 University Blvd.，Manassas Virginia 20110- 2209所提及生物体的保藏号。应该理解，本发明也考虑了这些生物 体的突变体在本文所述的方法中的应用，例如利用化学、物理(例如 X射线)或生物方法(例如采用分子生物学技术)修饰的那些突变体。

优选的酶包括来源于微生物(特别是上述那些微生物)的酶。可以 例如通过提取和纯化方法，例如用本领域技术人员已知的方法来分 离酶。酶可以例如以其游离状态或者以其固定化形式使用。本发明 的一个实施方案是其中酶被吸附到合适的载体上，例如硅藻土(多孔 Celite Hyflo Supercel)、微孔聚丙烯(Enka Accurel_聚丙烯粉末)或非离 子聚合吸附剂例如Amberlite_；XAD-2(聚苯乙烯)或XAD-7(聚丙烯 酸酯)(得自Rohm and Haas Co.)。当用于使酶固定化时，载体可以控 制酶的粒径并防止在有机溶剂中使用时酶颗粒聚集。例如通过用冷 丙酮在Celite Hyflo Supercel存在下沉淀所述酶的水溶液、然后真空 干燥，或者在非离子聚合吸附剂的情况下，将酶溶液与吸附剂在振 摇器上温育，除去过量的溶液，然后真空下干燥酶-吸附剂树脂，可 以完成固定化。虽然理想的是尽可能使用最少量的酶，但所需的酶 量将根据所用酶的具体活性而变。

如上所述的羟基化可以在体内发生。例如，肝脏酶可以相对于 内型异构体，选择性地将本发明化合物的外型异构体羟基化。在体 外实施本发明方法时，可以使用肝微粒体羟化酶作为催化的酶。

也可以采用含有有能力催化所述转化的酶的微生物细胞来进行 这些方法。当用微生物进行所述转化时，通过加入所述细胞和原料 至所需的反应介质中，常规性地实施这些程序。

当使用微生物时，所述细胞可以以完整的湿细胞或干燥细胞(例 如冻干、喷雾干燥或热干燥)的细胞形式、或者以经处理的细胞材料(例 如已破碎细胞或细胞提取物)的形式使用。也可以使用固定化于先前 描述的Celite_或Accurel_聚丙烯上的细胞提取物。本发明也考虑了 应用遗传工程生物体。宿主细胞可以是经修饰从而含有表达一种或 多种如上所述能够催化的酶的一个或多个基因的任何细胞，例如大 肠杆菌(Escherichia coli)。

当使用一个或多个微生物时，本发明的酶法可以在微生物发酵 之后进行(两级发酵转化)，或者与发酵同时进行，也就是说，在后一 种情况下，通过原位发酵和转化进行(单级发酵转化)。

本领域技术人员可以利用合适的培养基达到使微生物生长。用 于使微生物生长的合适培养基包括那些为微生物细胞的生长提供必 需营养素的培养基。供生长用的典型培养基包括必需的碳源、氮源 和元素(例如微量的)。也可以加入诱导物。本文所用的术语“诱导物” 包括增强微生物细胞内所需酶活性形成的任何化合物。

碳源可以包括：糖，例如麦芽糖、乳糖、葡萄糖、果糖、甘油、 山梨醇、蔗糖、淀粉、甘露醇、丙二醇等；有机酸，例如乙酸钠、 柠檬酸钠等；和醇类，例如乙醇、丙醇等。

氮源可以包括N-Z胺A、玉米浆、大豆粉、牛肉膏、酵母膏、 糖蜜、面包酵母、胰蛋白胨、大豆营养素、蛋白胨、酵母胺、氨基 酸(例如谷氨酸钠等)、硝酸钠、硫酸铵等。

微量元素可以包括镁盐、锰盐、钙盐、钴盐、镍盐、铁盐、钠 盐和钾盐。磷酸盐也可以以微量加入，优选以大于微量的量加入。

采用的培养基可以包括不止一种碳源或氮源或其它营养素。

供生长用的优选培养基包括培养液。

当在微生物生长期间例如在摇瓶培养器或发酵罐中进行时，反 应混合物的搅动和通气影响转化过程中可用的氧量。

反应介质的温育最好在约4℃和约60℃之间的温度下进行。反 应时间可以根据所用的酶量以及酶的比活适当地改变。通过提高反 应温度和/或增加加入至反应溶液中的酶量，可以减少反应时间。

也优选使用水性液体作为反应介质，虽然也可以使用有机液体 或混溶性或不混溶性(两相)有机/水性液体混合物。选择使用相对于原 料的酶或微生物用量，以催化本发明的酶促转化。

两相溶剂体系的有机相溶剂可以是在水中不混溶的任何有机溶 剂，例如甲苯、环己烷、二甲苯、三氯三氟乙烷等。水相一般为水， 优选去离子水，或者为合适的水性缓冲液，尤其是磷酸盐缓冲液。 双相溶剂体系优选包含约10-90％体积的有机相和约90-10％体积的水 相，最优选含有20％或约20％体积的有机相和80％或约80％积的 水相。

这类方法的一个示例性实施方案以制备待用的酶或微生物的水 溶液开始。例如，可以将优选的酶或微生物加入至适量的水性溶剂(例 如磷酸盐缓冲液等)中。优选将这种混合物调节并维持在所需的pH。

用本发明方法制备的化合物XVI和XVIII可以通过例如萃取、 蒸馏、结晶和柱色谱的方法进行分离和纯化。

                      优选化合物

本发明化合物的一个优选亚类包括式I化合物或其盐，其中一 个或多个、优选所有以下取代基按如下定义：

G为芳基或杂环基(例如杂芳基)，其中所述基团为单环或多环，并且 所述基团可任选地在一个或多个位置、优选被以下基团取代：

氢、烷基或取代的烷基、链烯基或取代的链烯基、炔基或取代 的炔基、卤代、环烷基或取代的环烷基、环烯基或取代的环烯 基、芳基或取代的芳基、杂环基或取代的杂环基、芳烷基或取 代的芳烷基、杂环基烷基或取代的杂环基烷基、CN、R1OC＝O、 R1C＝O、R1HNC＝O、R1R2NC＝O、HOCR3R3’、硝基、R1OCH2、 R1O、NH2、NR4R5、S＝OR1、SO2R1、SO2NR1R1’、(R1)(R1’)P＝O或(R1’)(NHR1)P＝O；

Z1为O、S、NH或NR6；

Z2为O、S、NH或NR6；

A1为CR7或N；

A2为CR7或N；

Y为J-J’-J”，其中J为(CR7R7’)n，而n＝0-3，J’为一个键或O、S、S＝O、 SO2、NH、OC＝O、C＝O、NR7、CR7R7’、R2P＝O、R2P＝S、R2OP＝O、 R2NHP＝O、OP＝OOR2、OP＝ONHR2、OP＝OR2、OSO2、NHNH、 NHNR6、NR6NH、N＝N、环烷基或取代的环烷基、环烯基或取 代的环烯基或者杂环基或取代的杂环基，且J”为(CR7R7’)n，而n＝ 0-3，其中Y不是键；

W为CR7R7’-CR7R7’、CR7R7’-C＝O、NR9-CR7R7’、N＝CR8、N＝N、 NR9-NR9’、环烷基或取代的环烷基、环烯基或取代的环烯基、 杂环基或取代的杂环基、或者芳基或取代的芳基，其中当W不 是NR9-CR7R7’、N＝CR8、N＝N、NR9-NR9’或者杂环基或取代的 杂环基时，则J’必须是O、S、S＝O、SO2、NH、NR7、OP＝OOR2、 OP＝ONHR2、OSO2、NHNH、NHNR6、NR6NH或N＝N；

Q1为H、烷基或取代的烷基、链烯基或取代链烯基、环烷基或取代 的环烷基、环烯基或取代的环烯基、杂环基烷基或取代的杂环 基烷基、芳烷基或取代的芳烷基、炔基或取代炔基、芳基或取 代的芳基、杂环基(例如杂芳基)或取代的杂环基(例如取代的杂 芳基)、卤代、CN、R1OC＝O、R4C＝O、R5R6NC＝O、HOCR7R7’、 硝基、R1OCH2、R1O、NH2或NR4R5；

Q2为H、烷基或取代的烷基、链烯基或取代链烯基、环烷基或取代 的环烷基、环烯基或取代的环烯基、杂环基烷基或取代的杂环 基烷基、芳烷基或取代的芳烷基、炔基或取代炔基、芳基或取 代的芳基、杂环基(例如杂芳基)或取代的杂环基(例如取代的杂 芳基)、卤代、CN、R1OC＝O、R4C＝O、R5R6NC＝O、HOCR7R7’、 硝基、R1OCH2、R1O、NH2或NR4E5；

L为一个键、(CR7R7’)n、NH、NR5或NR5(CR7R7’)n，其中n＝0-3； R1和R1’分别独立地为H、烷基或取代的烷基、链烯基或取代的链烯 基、炔基或取代的炔基、环烷基或取代的环烷基、环烯基或取 代的环烯基、杂环基或取代的杂环基、环烷基烷基或取代的环 烷基烷基、环烯基烷基或取代的环烯基烷基、杂环基烷基或取 代的杂环基烷基、芳基或取代的芳基、芳烷基或取代的芳烷基；

R2为烷基或取代的烷基、链烯基或取代的链烯基、炔基或取代的炔 基、环烷基或取代的环烷基、环烯基或取代的环烯基、杂环基 或取代的杂环基、环烷基烷基或取代的环烷基烷基、环烯基烷 基或取代的环烯基烷基、杂环基烷基或取代的杂环基烷基、芳 基或取代的芳基、芳烷基或取代的芳烷基；

R3和R3’分别独立地为H、烷基或取代的烷基、链烯基或取代的链烯 基、炔基或取代的炔基、环烷基或取代的环烷基、环烯基或取 代的环烯基、杂环基或取代的杂环基、环烷基烷基或取代的环 烷基烷基、环烯基烷基或取代的环烯基烷基、杂环基烷基或取 代的杂环基烷基、芳基或取代的芳基、芳烷基或取代的芳烷基、 卤代、CN、羟胺、羟基酰胺、烷氧基或取代的烷氧基、氨基、 NR1R2、巯基、烷硫基或取代的烷硫基；

R4为H、烷基或取代的烷基、链烯基或取代的链烯基、炔基或取代 的炔基、环烷基或取代的环烷基、环烯基或取代的环烯基、杂 环基或取代的杂环基、环烷基烷基或取代的环烷基烷基、环烯 基烷基或取代的环烯基烷基、杂环基烷基或取代的杂环基烷基、 芳基或取代的芳基、芳烷基或取代的芳烷基、R1C＝O、R1NHC＝O或SO2NR1R1’；

R5为烷基或取代的烷基、链烯基或取代的链烯基、炔基或取代的炔 基、环烷基或取代的环烷基、环烯基或取代的环烯基、杂环基 或取代的杂环基、环烷基烷基或取代的环烷基烷基、环烯基烷 基或取代的环烯基烷基、杂环基烷基或取代的杂环基烷基、芳 基或取代的芳基、芳烷基或取代的芳烷基、R1C＝O、R1NHC＝O、 SO2R1或SO2NR1R1’；

R6为烷基或取代的烷基、链烯基或取代的链烯基、炔基或取代的炔 基、环烷基或取代的环烷基、环烯基或取代的环烯基、杂环基 或取代的杂环基、环烷基烷基或取代的环烷基烷基、环烯基烷 基或取代的环烯基烷基、杂环基烷基或取代的杂环基烷基、芳 基或取代的芳基、芳烷基或取代的芳烷基、CN、OH、OR1、 R1C＝O、R1NHC＝O、SO2R1或SO2NR1R1’；

R7和R7’分别独立地为H、烷基或取代的烷基、链烯基或取代的链烯 基、炔基或取代的炔基、环烷基或取代的环烷基、环烯基或取 代的环烯基、杂环基或取代的杂环基、环烷基烷基或取代的环 烷基烷基、环烯基烷基或取代的环烯基烷基、杂环烷基或取代 的杂环烷基、芳基或取代的芳基、芳烷基或取代的芳烷基、卤 代、CN、OR4、硝基、羟胺、羟基酰胺、氨基、NHR4、NR2R5、 NOR1、巯基、烷硫基或取代的烷硫基、R1C＝O、R1(C＝O)O、 R1OC＝O、R1NHC＝O、SOR1、PO3R1R1’、R1R1’NC＝O、C＝OSR1、 SO2R1或SO2NR1R1’；

R8和R8’分别独立地为H、烷基或取代的烷基、链烯基或取代链烯基、 炔基或取代的炔基、环烷基或取代的环烷基、环烯基或取代的 环烯基、杂环基或取代的杂环基、环烷基烷基或取代的环烷基 烷基、环烯基烷基或取代的环烯基烷基、杂环烷基或取代的杂 环烷基、芳基或取代的芳基、芳烷基或取代的芳烷基、硝基、 卤代、CN、OR1、氨基、NHR4、NR2R5、NOR1、烷硫基或取代 的烷硫基、C＝OSR1、R1OC＝O、R1C＝O、R1NHC＝O、R1R1’NC＝O、 S＝OR1、SO2R1、PO3R1R1’或SO2NR1R1’；

R9和R9’分别独立地为H、烷基或取代的烷基、链烯基或取代链烯基、 炔基或取代的炔基、环烷基或取代的环烷基、环烯基或取代的 环烯基、杂环基或取代的杂环基、环烷基烷基或取代的环烷基 烷基、环烯基烷基或取代的环烯基烷基、杂环烷基或取代的杂 环烷基、芳基或取代的芳基、芳烷基或取代的芳烷基、CN、OH、 OR1、R1C＝O、R1OC＝O、R1NHC＝O或SO2NR1R1’；

尤其是其中该优选亚类的基团W和Y也在式Ia的W’和Y’的定义内， 在适合于该亚类时以所述式Ia的(1)-(14)为条件，并且最优选其 中(i)当Y’为-O-，并且W’为CR7R7’-CR7R7’时，A1和A2不同时 为CH；以及(ii)当L为一个键时，G不是未取代的苯基。

本发明化合物的另一个更优选亚类包括式I化合物或其盐，其 中一个或多个、优选所有以下取代基按以下定义：

G为芳基或杂环基(例如杂芳基)，其中所述基团为单环或多环，并且 所述基团可任选地在一个或多个位置、优选被以下基团取代： 氢、烷基或取代的烷基、链烯基或取代的链烯基、炔基或取代 的炔基、卤代、环烷基或取代的环烷基、环烯基或取代的环烯 基、芳基或取代的芳基、杂环基或取代的杂环基、芳烷基或取 代的芳烷基、杂环烷基或取代的杂环烷基、CN、R1C＝O、 R1HNC＝O、R1R2NC＝O、HOCR3R3’、硝基、R1OCH2、R1O、NH2、 NR4R5、SO2R1或SO2NR1R1’；

Z1为O；

Z2为O；

A1为CR7；

A2为CR7；

Y为J-J’-J’’，其中J为(CR7R7’)n，而n＝0-3，J’为一个键或O、S、S＝O、 SO2、NH、NR7、CR7R7’、R2P＝O、R2P＝S、R2OP＝O、R2NHP＝O、 OP＝OOR2、OP＝ONHR2、OP＝OR2、OSO2、NHNH、NHNR6、 NR6NH、N＝N、环烷基或取代的环烷基、环烯基或取代的环烯 基或者杂环基或取代的杂环基，且J”为(CR7R7’)n，而n＝0-3， 其中Y不是键；

W为CR7R7’-CR7R7’、CR7R7’-C＝O、NR9-CR7R7’、N＝CR8、N＝N、 NR9-NR9’、环烷基或取代的环烷基、环烯基或取代的环烯基、 杂环基或取代的杂环基、或者芳基或取代的芳基，其中当W不 是NR9-CR7R7’、N＝CR8、N＝N、NR9-NR9’、或者杂环基或取代 的杂环基时，则J’必须是O、S、S＝O、SO2、NH、NR7、OP＝OOR2、 OP＝ONHR2、OSO2、NHNH、NHNR6、NR6NH或N＝N；

Q1为H、烷基或取代的烷基、链烯基或取代链烯基、环烷基或取代 的环烷基、环烯基或取代的环烯基、杂环烷基或取代的杂环烷 基、芳烷基或取代的芳烷基、炔基或取代炔基、芳基或取代的 芳基、杂环基(例如杂芳基)或取代的杂环基(例如取代的杂芳 基)、卤代、CN、R4C＝O、R5R6NC＝O、HOCR7R7’、硝基、R1OCH2、 R1O、NH2或NR4R5；

Q2为H、烷基或取代的烷基、链烯基或取代链烯基、环烷基或取代 的环烷基、环烯基或取代的环烯基、杂环烷基或取代的杂环烷 基、芳烷基或取代的芳烷基、炔基或取代炔基、芳基或取代的 芳基、杂环基(例如杂芳基)或取代的杂环基(例如取代的杂芳 基)、卤代、CN、R4C＝O、R5R6NC＝O、HOCR7R7’、硝基、R1OCH2、 R1O、NH2或NR4R5；

L为一个键；

R1和R1’分别独立地为H、烷基或取代的烷基、链烯基或取代链烯基、 炔基或取代的炔基、环烷基或取代的环烷基、环烯基或取代的 环烯基、杂环基或取代的杂环基、环烷基烷基或取代的环烷基 烷基、环烯基烷基或取代的环烯基烷基、杂环烷基或取代的杂 环烷基、芳基或取代的芳基、芳烷基或取代的芳烷基；

R2为烷基或取代的烷基、链烯基或取代链烯基、炔基或取代的炔基、 环烷基或取代的环烷基、环烯基或取代的环烯基、杂环基或取 代的杂环基、环烷基烷基或取代的环烷基烷基、环烯基烷基或 取代的环烯基烷基、杂环基烷基或取代的杂环基烷基、芳基或 取代的芳基、芳烷基或取代的芳烷基；

R3和R3’分别独立地为H、烷基或取代的烷基、链烯基或取代链烯基、 炔基或取代的炔基、环烷基或取代的环烷基、环烯基或取代的 环烯基、杂环基或取代的杂环基、环烷基烷基或取代的环烷基 烷基、环烯基烷基或取代的环烯基烷基、杂环基烷基或取代的 杂环基烷基、芳基或取代的芳基、芳烷基或取代的芳烷基、卤 代、CN、烷氧基或取代的烷氧基、氨基、NR1R2、烷硫基或取 代的烷硫基；

R4为H、烷基或取代的烷基、链烯基或取代链烯基、炔基或取代的 炔基、环烷基或取代的环烷基、环烯基或取代的环烯基、杂环 基或取代的杂环基、环烷基烷基或取代的环烷基烷基、环烯基 烷基或取代的环烯基烷基、杂环烷基或取代的杂环烷基、芳基 或取代的芳基、芳烷基或取代的芳烷基、R1C＝O、R1NHC＝O或 SO2NR1R1’；

R5为烷基或取代的烷基、链烯基或取代链烯基、炔基或取代的炔基、 环烷基或取代的环烷基、环烯基或取代的环烯基、杂环基或取 代的杂环基、环烷基烷基或取代的环烷基烷基、环烯基烷基或 取代的环烯基烷基、杂环烷基或取代的杂环烷基、芳基或取代 的芳基、芳烷基或取代的芳烷基、R1C＝O、R1NHC＝O、SO2R1或SO2NR1R1’；

R6为烷基或取代的烷基、链烯基或取代链烯基、炔基或取代的炔基、 环烷基或取代的环烷基、环烯基或取代的环烯基、杂环基或取 代的杂环基、环烷基烷基或取代的环烷基烷基、环烯基烷基或 取代的环烯基烷基、杂环烷基或取代的杂环烷基、芳基或取代 的芳基、芳烷基或取代的芳烷基、CN、OH、OR1、R1C＝O、 R1NHC＝O、SO2R1或SO2NR1R1’；

R7和R7’分别独立地为H、烷基或取代的烷基、链烯基或取代链烯基、 炔基或取代的炔基、环烷基或取代的环烷基、环烯基或取代的 环烯基、杂环基或取代的杂环基、环烷基烷基或取代的环烷基 烷基、环烯基烷基或取代的环烯基烷基、杂环烷基或取代的杂 环烷基、芳基或取代的芳基、芳烷基或取代的芳烷基、卤代、CN、 OR4、硝基、氨基、NHR4、NR2R5、烷硫基或取代的烷硫基、R1C＝O、 R1(C＝O)O、R1NHC＝O、SO2R1、R1R1’NC＝O或SO2NR1R1’；

R8和R8’分别独立地为H、烷基或取代的烷基、链烯基或取代链烯基、 炔基或取代的炔基、环烷基或取代的环烷基、环烯基或取代的 环烯基、杂环基或取代的杂环基、环烷基烷基或取代的环烷基 烷基、环烯基烷基或取代的环烯基烷基、杂环烷基或取代的杂 环烷基、芳基或取代的芳基、芳烷基或取代的芳烷基、硝基、 卤代、CN、OR1、氨基、NHR4、NR2R5、烷硫基或取代的烷硫 基、R1C＝O、R1NHC＝O、R1R-1’NC＝O、SO2R1或SO2NR1R1’；且

R9和R9’分别独立地为H、烷基或取代的烷基、链烯基或取代链烯基、 炔基或取代的炔基、环烷基或取代的环烷基、环烯基或取代的 环烯基、杂环基或取代的杂环基、环烷基烷基或取代的环烷基 烷基、环烯基烷基或取代的环烯基烷基、杂环烷基或取代的杂 环烷基、芳基或取代的芳基、芳烷基或取代的芳烷基、CN、OH、 OR1、R1C＝O、R1NHC＝O或SO2NR1R1’；

尤其是其中该优选亚类的基团W和Y也在式Ia的W’和Y’的定义内， 在适合于该亚类时以所述式Ia的(1)-(14)为条件，并且最优选其 中(i)当Y’为-O-，并且W’为CR7R7’-CR7R7’时，A1和A2不同时 为CH；以及(ii)当L为一个键时，G不是未取代的苯基。

本发明化合物的一个特别优选的亚类包括式I化合物或其盐， 其中一个或多个、优选所有以下取代基按以下定义：

G为芳基(尤其是苯基或萘基)或杂环基(尤其是本文实施例化合物的 那些杂环基G)，其中所述基团为单环或多环，并且所述基团可 任选地在一个或多个位置、优选被任何本文实施例化合物中例 举的取代基取代；

L为一个键、(CR7R7’)n(其中n为1，而R7和R7’分别独立地为H、烷 基或取代的烷基)或-CH2-NH-；

A1和A2分别独立地为CR7，其中R7(i)为氢、烷基或取代的烷基、芳 烷基或取代的芳烷基、链烯基或取代的链烯基(例如被芳基(尤其 是苯基或萘基)或取代的芳基取代的链烯基、或者被杂环基或取 代的杂环基取代的链烯基)、芳基或取代的芳基、杂环基或取代 的杂环基、杂环烷基或取代的杂环烷基，其中对于每种所述基 团而言，优选的取代基是一个或多个选自V1的基团(尤其是式CR7的A1和A2基团，其中A1和/或A2中每个的R7独立选自未取代 的C1-4烷基或其中烷基被一个或多个基团V1取代的C1-4烷基)， 或者(ii)与基团W(尤其是当W为CR7R7’-CR7R7’时)的R7形成一 个杂环；

V1为OH、CN、卤代、-O-芳基、-O-取代的芳基、-O-杂环基(如-O-(任 选取代的吡啶基)或-O-(任选取代的嘧啶基))、-O-取代的杂环基、 -O-CO-烷基、-O-CO-取代的烷基、-O-(烷基甲硅烷基)、-O-芳基 烷基、-O-取代的芳基烷基、-O-CO-烷基、-O-CO-取代的烷基、 -O-CO-芳基烷基、-O-CO-取代的芳基烷基、-O-CO-芳基、-O-CO- 取代的芳基、-O-CO-杂环基、-O-CO-取代的杂环基、-S-(任选取 代的芳基)-NH-CO-(任选取代的烷基)、-SO-(任选取代的芳基)- NH-CO-(任选取代的烷基)、-SO2-(任选取代的芳基)-NH-CO-(任 选取代的烷基)、-NH-SO2-芳基、-NH-SO2-取代的芳基、-NH- CO-O-(任选取代的芳基烷基)、-NH-CO-O-烷基、-NH-CO-O-取 代的烷基、-NH-CO-烷基、-NH-CO-取代的烷基、-NH-CO-芳基、 -NH-CO-取代的芳基、-NH-CO-(任选取代的芳基烷基)、-NH- CO-(任选取代的烷基)-O-(任选取代的芳基)、-N(任选取代的烷 基)(任选取代的芳基)、-N(任选取代的烷基)(任选取代的芳基烷 基)、-COH、-COOH、-CO-O-烷基、-CO-O-取代的烷基、-CO- O-任选取代的芳基烷基、-CO-芳基、-CO-取代的芳基、-O-CO- NH-芳基、-O-CO-NH-取代的芳基、-CO-NH-芳基、-CO-NH-取 代的芳基、-CO-NH-芳基烷基、-CO-NH-取代的芳基烷基、-O-(任 选取代的芳基)-NH-CO-(任选取代的烷基)；

Y为-O-、-SO-、-N(V2)-、-CH2-N(V2)-、-CO-N(烷基)-、-CH2-S-、 -CH2-SO2-；

V2为氢、烷基、芳基烷基、-CO-烷基、-CO-O-芳基、-CO-O-芳基烷 基；

W为CR7R7’-CR7R7’(其中R7和R7’分别独立选自：H、OH、烷基或取 代的烷基(例如羟基烷基)，或者其中R7与A1或A2的R7一起形 成一个杂环)、CR8＝CR8’(其中R8和R8’分别独立选自：H、烷基 或取代的烷基(例如羟基烷基))、CR7R7’-C＝O(R7和R7’分别为氢， 或者其中R7与A1或A2的R7一起形成一个杂环)、N＝CR8(其中 R8为烷基)、环烷基或取代的环烷基、或者杂环基或取代的杂环 基；

Z1和Z2为O；且

Q1和Q2为H。

优选的G-L基团是任选取代的苯基、任选取代的萘基或任选取 代的稠合二环杂环基，例如任选取代的苯并稠合杂环基(例如通过所 述苯部分连接于所述分子的其余部分)，尤其是其中连接于苯的杂环 具有5元环的那些基团，实例为苯并噁唑、苯并噻唑、苯并噻二唑、 苯并噁二唑或苯并噻吩，例如：

其中

X为卤代(尤其是F)、OH、CN、NO2或

或

X′为卤代(尤其是Cl、F或I)、CH3、CF3、CN或OCH3；

U为O或S(其中S可以任选地被氧化，例如氧化为SO)；

U1为CH3或CF3；

每个U2独立地为N、CH或CF；

U3为N、O或S；

U4和U5与它们所连接的原子一起形成一个任选取代的5元杂环，所 述杂环可以部分不饱和或是芳环，并且含有1-3个环杂原子；

每个U6独立地为CH或N；和

表示由U3、U4和U5形成的环内的任选双键。

一个尤其优选的亚类包括具有以下结构的式I化合物或其盐：

其中G为任选取代的苯基、萘基或苯并稠合二环杂环基，R7为CH3

或被V’取代的C1-4烷基，而其中一个R7’为H或羟基，另一个为H。

优选的本发明化合物包括：

1)[3aS-(3aα，4β，6β，7β，7aα)]-4-(八氢-6-羟基-4-甲基-1，3-二氧代- 4，7-环氧-2H-异吲哚-2-基)-2-(三氟甲基)苄腈；

2)[3aR-(3aα，4β，6β，7β，7aα)]-4-(八氢-6-羟基-4-甲基-1，3-二氧代- 4，7-环氧-2H-异吲哚-2-基)-2-(三氟甲基)苄腈；

3)[3aS-(3aα，4β，5β，6α，7β，7aα)]-4-(八氢-5，6-二羟基-4，7-二甲基- 1，3-二氧代-4，7-环氧-2H-异吲哚-2-基)-2-(三氟甲基)苄腈；

 4)[3aS-(3aα，4β，5β，7β，7aα)]-5-(八氢-5-羟基-4，7-二甲基-1，3-二氧 代-4，7-环氧-2H-异吲哚-2-基)-3甲基-2-吡啶甲腈；

5)[3aS-(3aα，4β，5β，7β，7aα)]-2-(2，1，3-苯并噁二唑-5-基)-六氢-5-羟 基-4，7-二甲基-4，7-环氧-1H-异吲哚-1，3(2H)-二酮；

6)[3aS-(3aα，4β，5β，7β，7aα)]-5-(八氢-5-羟基-4，7-二甲基-1，3-二氧 代-4，7-环氧-2H-异吲哚-2-基)-3，4-二甲基-2-吡啶甲腈；

7)[3aR-(3aα，4β，5β，7β，7aα)]-5-(八氢-5-羟基-4，7-二甲基-1，3-二氧 代-4，7-环氧-2H-异吲哚-2-基)-3，4-二甲基-2-吡啶甲腈；

8)[3aS-(3aα，4β，5β，7β，7aα)]-2-(6-苯并噻唑基)-六氢-5-羟基-4，7-二 甲基-4，7-环氧-1H-异吲哚-1，3(2H)-二酮；

9)[3aR-(3aα，4β，5β，7β，7aα)]-2-(7-氯-2，1，3-苯并噁二唑-4-基)-六氢 -5-羟基-4，7-二甲基-4，7-环氧-1H-异吲哚-1，3(2H)-二酮；

10)[3aR-(3aα，4β，5α，7β，7aα)]-5-(八氢-5-羟基-4，7-二甲基-1，3-二氧 代-4，7-环氧-2H-异吲哚-2-基)-3-(三氟甲基)-2-吡啶甲腈；

11)[3aR-(3aα，4β，5α，7β，7aα)]-4-(八氢-5-羟基-4，7-二甲基-1，3-二氧 代-4，7-环氧-2H-异吲哚-2-基)-2-碘代苄腈；

12)(3aα，4β，5α，6β，7β，7aα)-2-(4-氰基-3-(三氟甲基)苯基)-六氢-6-氰  基-4，7-二甲基-1，3-二氧代-4，7-环氧-1H-异吲哚-5-甲酸甲酯；

13)(3aα，4β，7β，7aα)-4-(八氢-4，7，8-三甲基-1，3-二氧代-4，7-亚氨基- 2H-异吲哚-2-基)-2-(三氟甲基)苄腈；

14)[3aR-(3aα，4β，5β，6α，7β，7aα)]-4-(八氢-5，6-二氯-4，7-二甲基-1，3- 二氧代-4，7-环氧-2H-异吲哚-2-基)-2-(三氟甲基)苄腈；

15)[3aS-(3aα，4β，5β，6α，7β，7aα)]-4-(八氢-5，6-二氯-4，7-二甲基-1，3- 二氧代-4，7-环氧-2H-异吲哚-2-基)-2-(三氟甲基)苄腈；

16)(3aα，4β，7β，7aα)-4-(八氢-4，7-二甲基-1，3，5-三氧代-4，7-环氧-2H- 异吲哚-2-基)-2-碘代苄腈；

17)(3aα，4β，5α，7β，7aα)-4-(八氢-5-[[[二氟甲基]氧基]甲基-4，7-二甲 基-1，3-二氧代-4，7-环氧-2H-异吲哚-2-基)-2-(三氟甲基)苄腈；

18)(3aα，4β，5α，7β，7aα)-4-(八氢-5-[[苯基甲氧基羰基]氨基]-4，7-二 甲基-1，3-二氧代-4，7-环氧-2H-异吲哚-2-基)-2-(三氟甲基)苄 腈；

19)(3aα，4β，5α，7β，7aα)-4-(八氢-5-[[丙氧基羰基]氨基]-4，7-二甲基- 1，3-二氧代-4，7-环氧-2H-异吲哚-2-基)-2-(三氟甲基)苄腈；

20)(3aα，4β，5α，7β，7aα)-4-(八氢-5-[[[环丙基甲氧基]羰基]氨基]-4，7- 二甲基-1，3-二氧代-4，7-环氧-2H-异吲哚-2-基)-2-(三氟甲基)苄 腈；

21)(3aα，4β，5α，7β，7aα)-4-(八氢-5-[[甲氧基羰基]氨基]-4，7-二甲基- 1，3-二氧代-4，7-环氧-2H-异吲哚-2-基)-2-(三氟甲基)苄腈；

22)[3aR-(3aα，4β，5β，7β，7aα)]-4-(八氢-5-羟基-4，7-二甲基-1，3-二氧 代-4，7-环氧-2H-异吲哚-2-基)-2，3-二氯苄腈；

23)[3aR-(3aα，4β，4aα，5aα，6β，7aα)]-4-(八氢-4a-羟基-4，6-二甲基- 1，3-二氧代-4，6-环氧环丙烷并(cycloprop)[f]异吲哚-2(1H)-基)- 2-(三氟甲基)苄腈；

24)(3aα，4β，5α，7β，7aα)-2-(4-氰基-3-(三氟甲基)苯基)-六氢-5-羟基- 4，7-二甲基-1，3-二氧代-4，7-环氧-N，N-二甲基-1H-异吲哚-5-甲 酰胺；

25)[3aR-(3aα，4β，4β，5β，6β，7β，7aα)]-4-(八氢-5-氯-6-羟基-4，7-二甲 基-1，3-二氧代-4，7-环氧-2H-异吲哚-2-基)-2-(三氟甲基)苄腈；

26)[3aS-(3aα，4β，5β，6β，7β，7aα)]-4-(八氢-5-氯-6-羟基-4，7-二甲基- 1，3-二氧代-4，7-环氧-2H-异吲哚-2-基)-2-(三氟甲基)苄腈；

27)(3aα，4β，5α，7β，7aα)-4-(八氢-5-[[[6-(三氟甲基)-4-嘧啶基]氧基] 甲基]-4，7-二甲基-1，3-二氧代-4，7-环氧-2H-异吲哚-2-基)-2-(三 氟甲基)苄腈；

28)(3aα，4β，5α，7β，7aα)-4-(八氢-5-[[[5-氯-2-吡啶基]氧基]甲基]-4，7- 二甲基-1，3-二氧代-4，7-环氧-2H-异吲哚-2-基)-2-(三氟甲基)苄 腈；

29)[3aR-(3aα，4β，5α，7β，7aα)]-4-(八氢-5-[[[苯基氨基]羰基]氨基]- 4，7-二甲基-1，3-二氧代-4，7-环氧-2H-异吲哚-2-基)-2-(三氟甲基) 苄腈；

30)[3aR-(3aα，4β，5α，7β，7aα)]-4-(八氢-5-[[(1-甲基乙基氧基)羰基] 氨基]-4，7-二甲基-1，3-二氧代-4，7-环氧-2H-异吲哚-2-基)-2-(三 氟甲基)苄腈；

31)(3aα，4β，5α，7β，7aα)-4-(八氢-5-[[[5-氟-4-嘧啶基]氧基]甲基]-4，7- 二甲基-1，3-二氧代-4，7-环氧-2H-异吲哚-2-基)-2-(三氟甲基)苄 腈；

32)[3aR-(3aα，4β，5α，7β，7aα)]-4-(八氢-5-[[乙氧基羰基]氨基]-4，7-二 甲基-1，3-二氧代-4，7-环氧-2H-异吲哚-2-基)-2-(三氟甲基)苄 腈；

33)[3aR-(3aα，4β，5α，7β，7aα)]-2-(4-氰基-3-(三氟甲基)苯基)-六氢- 4，7-二甲基-1，3-二氧代-4，7-环氧-1H-异吲哚-5-甲酸4-吡啶基 甲基酯；

34)[3aR-(3aα，4β，5α，7β，7aα)]-4-(八氢-5-[[4-吡啶基甲氧基羰基]氨 基]-4，7-二甲基-1，3-二氧代-4，7-环氧-2H-异吲哚-2-基)-2-(三氟 甲基)苄腈；

35)(3aα，4β，5β，7β，7aα)-4-(八氢-5-[[[2-甲基-5-(三氟甲基)-2H-吡唑- 3-基]氧基]甲基]-5-羟基-4，7-二甲基-1，3-二氧代-4，7-环氧-2H- 异吲哚-2-基)-2-(三氟甲基)苄腈；

36)(3aα，4β，5α，7β，7aα)-2-(4-氰基-3-(三氟甲基)苯基)-六氢-4，7-二 甲基-1，3-二氧代-4，7-环氧-1H-异吲哚-5-甲酸甲酯；

37)[3aR-(3aα，4β，5β，7β，7aα)]-4-(八氢-5-环丙基甲氧基-4，7-二甲基- 1，3-二氧代-4，7-环氧-2H-异吲哚-2-基)-2-(三氟甲基)苄腈；

38)(3aα，4β，5α，7β，7aα)-4-(八氢-5-[[((苯基甲基)氨基)羰基]氧基]- 4，7-二甲基-1，3-二氧代-4，7-环氧-2H-异吲哚-2-基)-2-(三氟甲基) 苄腈；和

39)[3aR-(3aα，4β，5β，7β，7aα)]-4-(八氢-5-环丙氧基-4，7-二甲基-1，3- 二氧代-4，7-环氧-2H-异吲哚-2-基)-2-(三氟甲基)苄腈；

或其药学上可接受的盐、溶剂合物、前药或立体异构体。

更优选的本发明化合物包括：

(1)[3aR-(3aα，4β，5β，7β，7aα)]-5-(八氢-5-羟基-4，7-二甲基-1，3-二氧 代-4，7-环氧-2H-异吲哚-2-基)-3-(三氟甲基)-2-吡啶甲腈；

(2)[3aS-(3aα，4β，5β，7β，7aα)]-5-(八氢-5-羟基-4，7-二甲基-1，3-二氧 代-4，7-环氧-2H-异吲哚-2-基)-3-(三氟甲基)-2-吡啶甲腈；

(3)[3aR-(3aα，4β，5β，7β，7aα)]-2-(4-氯-3-碘代苯基)-六氢-5-羟基- 4，7-二甲基-4，7-环氧-1H-异吲哚-1，3(2H)-二酮；

(4)[3aS-(3aα，4β，5β，6α，7β，7aα)]-4-(八氢-5，6-二羟基-4，7-二甲基- 1，3-二氧代-4，7-环氧-2H-异吲哚-2-基)-2-(三氟甲基)苄腈；

(5)[3aR-(3aα，4β，7β，7aα)]-4-(八氢-4，7-二甲基-1，3，5-三氧代-4，7-环 氧-2H-异吲哚-2-基)-2-(三氟甲基)苄腈；

(6)[3aR(3aα，4β，5α，7β，7aα)]-4-(八氢-5-羟基-4，7-二甲基-1，3-二氧 代-4，7-环氧-2H-异吲哚-2-基)-2-(三氟甲基)苄腈；

(7)[3aS-(3aα，4β，5α，7β，7aα)]-4-(八氢-5-羟基-4，7-二甲基-1，3-二氧 代-4，7-环氧-2H-异吲哚-2-基)-2-(三氟甲基)苄腈；

(8)[3aS-(3aα，4β，6β，7β，7aα)]-4-(八氢-6-羟基-4-甲基-1，3-二氧代- 4，7-环氧-2H-异吲哚-2-基)-2-(三氟甲基)苄腈；

(9)[3aR-(3aα，4β，5β，7β，7aα)]-2-(4-氯-3-(三氟甲基)苯基)-六氢-5- 羟基-4，7-二甲基-4，7-环氧-1H-异吲哚-1，3(2H)-二酮；

(10)[3aS-(3aα，4β，5β，7β，7aα)]-4-(八氢-5-羟基-4，7-二甲基-1，3-二 氧代-4，7-环氧-2H-异吲哚-2-基)-2-碘代苄腈；

(11)[3aR-(3aα，4β，5β，7β，7aα)]-4-(八氢-5-羟基-4，7-二甲基-1，3-二 氧代-4，7-环氧-2H-异吲哚-2-基)-2-碘代苄腈；

(12)[3aS-(3aα，4β，5β，7β，7aα)]-2-(4-氯-3-(三氟甲基)吡啶基)-六氢- 5-羟基-4，7-二甲基-4，7-环氧-1H-异吲哚-1，3(2H)-二酮；

(13)[3aR-(3aα，4β，5β，7β，7aα)]-4-(八氢-5-羟基-4，7-二甲基-1，3-二 氧代-4，7-环氧-2H-异吲哚-2-基)-3-甲基-2-(三氟甲基)苄腈；

(14)[3aR-(3aα，4β，5β，7β，7aα)]-4-(八氢-5-甲氧基-4，7-二甲基-1，3- 二氧代-4，7-环氧-2H-异吲哚-2-基)-2-(三氟甲基)苄腈；

(15)[3aR-(3aα，4β，5α，7β，7aα)]-5-(八氢-5-羟基-4，7-二甲基-1，3-二 氧代-4，7-环氧-2H-异吲哚-2-基)-3-(三氟甲基)-2-吡啶甲腈；

(16)[3aS-(3aα，4β，5β，7β，7aα)]-4-(八氢-5-甲氧基-4，7-二甲基-1，3- 二氧代-4，7-环氧-2H-异吲哚-2-基)-2-(三氟甲基)苄腈；

(17)[3aS-(3aα，4β，6β，7β，7aα)]-4-(八氢-6-氟-5，5-二羟基-4，7-二甲 基-1，3-二氧代-4，7-环氧-2H-异吲哚-2-基)-2-(三氟甲基)苄腈；

(18)[3aR-(3aα，4β，7β，7aα)]-5-(八氢-4，7-二甲基-1，3，5-三氧代-4，7- 环氧-2H-异吲哚-2-基)-3-(三氟甲基)-2-吡啶甲腈；

(19)[3aS-(3aα，4β，5β，7β，7aα)]-2-(4-氯-2-甲基-3-(三氟甲基)苯基)- 六氢-5-羟基-4，7-二甲基-4，7-环氧-1H-异吲哚-1，3(2H)-二酮；

(20)[3aR-(3aα，4β，5β，7β，7aα)]-2-(4-氯-2-甲基-3-(三氟甲基)苯基)- 六氢-5-羟基-4，7-二甲基-4，7-环氧-1H-异吲哚-1，3(2H)-二酮；

(21)(3aα，4β，6β，7β，7aα)-4-(八氢-6-氟-5，5-二羟基-4，7-二甲基-1，3- 二氧代-4，7-环氧-2H-异吲哚-2-基)-2-碘代苄腈；

(22)(3aα，4β，5α，7β，7aα)-2-(4-氰基-3-(三氟甲基)苯基)-六氢-5-羟 基-4，7-二甲基-1，3-二氧代-4，7-环氧-1H-异吲哚-5-甲酸甲酯；

(23)[3aS-(3aα，4β，6β，7β，7aα)-4-(八氢-6-氟-5，5-二羟基-4，7-二甲 基-1，3-二氧代-4，7-环氧-2H-异吲哚-2-基)-2-碘代苄腈；

(24)(3aα，4β，5α，7β，7aα)-4-(八氢-5-乙基磺酰氨基-4，7-二甲基-1，3- 二氧代-4，7-环氧-2H-异吲哚-2-基)-2-(三氟甲基)苄腈；

(25)[3aR-(3aα，4β，5α，7β，7aα)]-4-(八氢-5-[[(4-氟代苯基氨基)羰基] 氧基]-4，7-二甲基-1，3-二氧代-4，7-环氧-2H-异吲哚-2-基)-2-(三 氟甲基)苄腈；

(26)[3aR-(3aα，4β，5α，7β，7aα)]-4-(八氢-5-[[(1-甲基乙基氨基)羰基] 氧基]-4，7-二甲基-1，3-二氧代-4，7-环氧-2H-异吲哚-2-基)-2-(三 氟甲基)苄腈；

(27)[3aS-(3aα，4β，5α，7β，7aα)]-4-(八氢-5-[[(1-甲基乙氧基)羰基]氨 基]-4，7-二甲基-1，3-二氧代-4，7-环氧-2H-异吲哚-2-基)-2-(三氟 甲基)苄腈；

(28)[3aR-(3aα，4β，6β，7β，7aα)]-4-(八氢-6-氟-5，5-二羟基-4，7-二甲 基-1，3-二氧代-4，7-环氧-2H-异吲哚-2-基)-2-碘代苄腈；

(29)[3aR-(3aα，4β，5α，7β，7aα)]-2-(4-氰基-3-(三氟甲基)苯基)-六氢 -4，7-二甲基-1，3-二氧代-4，7-环氧-N-甲基-N-苯基-1H-异吲哚- 5-甲酰胺；

(30)[3aR-(3aα，4β，5β，7β，7aα)]-4-(八氢-5-羟基-4，7-二甲基-1，3-二 氧代-4，7-环氧-2H-异吲哚-2-基)-2-氯-3-甲基苄腈；

(31)[3aR-(3aα，4β，5α，7β，7aα)]-4-(八氢-5-[[乙氧基羰基]氨基]-4，7- 二甲基-1，3-二氧代-4，7-环氧-2H-异吲哚-2-基)-2-(三氟甲基)苄 腈；

(32)(3aα，4β，5α，7β，7aα)-4-(八氢-5-[[[2-甲基-5-(三氟甲基)-2H-吡 唑-3-基]氧基]甲基]-4，7-二甲基-1，3-二氧代-4，7-环氧-2H-异吲 哚-2-基)-2-(三氟甲基)苄腈；

(33)[3aS-(3aα，4β，5α，6β，7β，7aα)]-2-(4-氰基-3-(三氟甲基)苯基)-六 氢-6-羟基-4，7-二甲基-1，3-二氧代-4，7-环氧-1 H-异吲哚-5-甲酸 甲酯；

(34)(3aα，4β，5α，7β，7aα)-4-(八氢-5-[[[6-(三氟甲基)-4-嘧啶基]氧基] 甲基]-4，7-二甲基-1，3-二氧代-4，7-环氧-2H-异吲哚-2-基)-2-(三 氟甲基)苄腈；

(35)[3aR-(3aα，4β，5α，7β，7aα)]-4-(八氢-5-甲氧基-4，7-二甲基-1，3- 二氧代-4，7-环氧-2H-异吲哚-2-基)-2-(三氟甲基)苄腈；

(36)(3aα，4β，5α，7β，7aα)-2-(4-氰基-3-(三氟甲基)苯基)-六氢-4，7- 二甲基-1，3-二氧代-4，7-环氧-1H-异吲哚-5-甲腈；

(37)[3aR-(3aα，4β，5β，6α，7β，7aα)]-4-(八氢-5，6-二羟基-4，7-二甲基- 1，3-二氧代-4，7-环氧-2H-异吲哚-2-基)-3-甲基-2-(三氟甲基)苄 腈；

(38)[3aR-(3aα，4β，5α，7β，7aα)]-4-(八氢-5-[[[(环丙基甲基)氨基]羰 基]氨基]-4，7-二甲基-1，3-二氧代-4，7-环氧-2H-异吲哚-2-基)-2- (三氟甲基)苄腈；

(39)[3aR-(3aα，4β，5α，7β，7aα)]-4-(八氢-5-[[(二甲氨基)磺酰基]氨 基]-4，7-二甲基-1，3-二氧代-4，7-环氧-2H-异吲哚-2-基)-2-(三氟 甲基)苄腈；

(40)(3aα，4β，5α，7β，7aα)-4-(八氢-5-苯磺酰氨基-4，7-二甲基-1，3-二 氧代-4，7-环氧-2H-异吲哚-2-基)-2-(三氟甲基)苄腈；

(41)[3aR-(3aα，4β，6β，7β，7aα)]-4-(八氢-6-氟-5，5-二羟基-4，7-二甲 基-1，3-二氧代-4，7-环氧-2H-异吲哚-2-基)-2-(三氟甲基)苄腈；

(42)[3aR-(3aα，4β，5α，6β，7β，7aα)]-2-(4-氰基-3-(三氟甲基)苯基)- 六氢-6-羟基-4，7-二甲基-1，3-二氧代-4，7-环氧-1H-异吲哚-5-甲 酸甲酯；和

(43)[3aR-(3aα，4β，5α，7β，7aα)]-4-(八氢-5-[[(二甲氨基)磺酰基]氨 基]-4，7-二甲基-1，3-二氧代-4，7-环氧-2H-异吲哚-2-基)-2-(三氟 甲基)苄腈；

或其药学上可接受的盐、溶剂合物、前药或立体异构体。

相对于其中R7’为H的相应化合物而言，其中R7’为羟基的化合 物除具有良好的通透性和高系统血液水平外，还可以增强水溶性和 代谢稳定性。这些含羟基的化合物可以通过R7’为H的相应化合物的 体内代谢以及通过本文所述的制备方法来获得。

                             应用和实用性

本发明的化合物调节核激素受体(NHR)的功能，本发明的化合物 包括例如作为雄激素受体(AR)、雌激素受体(ER)、孕酮受体(PR)、糖 皮质激素受体(GR)、盐皮质激素受体(MR)、类固醇和异生素受体 (SXR)、其它类固醇结合NHR、孤独受体或其它NHR的激动剂、部 分激动剂、拮抗剂或部分拮抗剂的化合物。优选相对于NHR家族内 其它NHR对一种这样的NHR具有选择性调节的化合物。“调节” 包括例如活化(例如激动剂活性，诸如选择性雄激素受体激动剂活性) 或抑制(例如拮抗剂活性)。

因此，本发明的化合物可用于治疗NHR相关病症。“NHR相 关病症”在本文中使用时是指可以通过调节受治疗者体内NHR的功 能而治疗的病症或疾病，其中治疗包括所述病症或疾病的预防(例如 预防性治疗)、部分缓解或治愈。调节可以在局部发生，例如在所述 受治疗者的某些组织内发生，或者在正治疗这种疾病病症的受治疗 者体内更为广泛地发生。

本发明的化合物可用于治疗各种各样的病症和疾病，包括但不 限于以下所述的病症和疾病：

式I化合物可以在涉及雌激素受体途径调节的各种各样的病症 中用作雌激素受体的激动剂、部分激动剂、拮抗剂或部分拮抗剂， 优选对该受体具有选择性。所述化合物的应用包括但不限于：骨质 疏松，热潮红、阴道干燥、前列腺癌、乳癌、子宫内膜癌、表达雌激 素受体的癌症(例如上述癌症和其它癌症)、避孕、终止妊娠、绝经、 闭经和痛经。

式I化合物可以在涉及孕酮受体途径调节的各种各样的病症中 用作孕酮受体的激动剂、部分激动剂、拮抗剂或部分拮抗剂，优选 对该受体具有选择性。所述化合物的应用包括但不限于：乳癌、带 有孕酮受体的其它癌症、子宫内膜异位、恶病质、避孕、绝经、周 期同步症、脑脊膜瘤、痛经、纤维瘤、终止妊娠、引产和骨质疏松。

式I化合物可以在涉及糖皮质激素受体途径调节的各种各样的 病症中用作糖皮质激素受体的激动剂、部分激动剂、拮抗剂或部分 拮抗剂，优选对该受体具有选择性。所述化合物的应用包括但不限 于：炎性疾病、自身免疫病、前列腺癌、乳癌、早老性痴呆、精神 病、药瘾、非胰岛素依赖性糖尿病以及作为多巴胺受体阻滞药或者 作为用于治疗多巴胺受体介导疾病的药物。

式I化合物可以在涉及盐皮质激素受体途径调节的各种各样的 病症中用作盐皮质激素受体的激动剂、部分激动剂、拮抗剂或部分 拮抗剂，优选对该受体具有选择性。所述化合物的应用包括但不限 于：停药综合征和炎性疾病。

式I化合物可以在涉及醛固酮受体途径调节的各种各样的病症 中用作醛固酮受体的激动剂、部分激动剂、拮抗剂或部分拮抗剂， 优选对该受体具有选择性。所述化合物的一个应用包括但不限于充 血性心力衰竭。

式I化合物可以在涉及雄激素受体途径调节的各种各样的病症 中用作雄激素受体的激动剂、部分激动剂、拮抗剂或部分拮抗剂， 优选对该受体具有选择性。所述化合物的应用包括但不限于：多毛 症、痤疮、皮脂溢、早老性痴呆、雄激素性脱发(androgenic alopecia)、 性腺机能减退、超多毛症(hyperpilosity)、良性前列腺肥大、前列腺腺 瘤和肿瘤(例如晚期转移性前列腺癌)、带有雄激素受体的良性或恶性 肿瘤细胞的治疗(例如乳房、脑、皮肤、卵巢、膀胱、淋巴、肝脏和 肾脏癌症的情况)、VCAM表达的胰腺癌调节和其中用于治疗心脏病、 炎症和免疫调节的应用、VEGF表达的调节以及其中用作抗血管生成 药的应用、骨质疏松、抑制精子发生、性欲、恶病质、子宫内膜异 位、多囊卵巢综合征、厌食、雄性中由于年龄相关的睾酮水平下降 的雄激素补充、雄性更年期(male menopause)、雄性激素替代、雄性 和雌性性机能障碍以及在能走动的患者中抑制肌肉萎缩。例如，考 虑了泛AR(pan AR)调节，尤其优选前列腺选择性AR调节 (“SARM”)，例如用于治疗早期前列腺癌。

式I化合物可以用作例如在许多肿瘤系中发现的突变型雄激素 受体的(优选选择性的)拮抗剂。这类突变体的实例是在诸如以下的代 表性前列腺肿瘤细胞系中发现的那些突变体：LNCap(T877A突变， Biophys.Acta，187，1052(1990))、PCa2b(L701H和T877A突变，J.Urol.， 162，2192(1999))和CWR22(H874Y突变，Mol.Endo.，11，450 (1997))。所述化合物的应用包括但不限于前列腺腺瘤和肿瘤、乳癌 和子宫内膜癌。

式I化合物可以在涉及类固醇异生素受体途径调节的各种各样 的病症中用作类固醇异生素受体的激动剂、部分激动剂、拮抗剂或 部分拮抗剂，优选对该受体具有选择性。所述化合物的应用包括但 不限于：治疗胆固醇内稳态调节异常、通过共同给予调节SXR的P450 调节剂效应的药物(本发明化合物)减弱药物的代谢。

除上述NHR之外，还有许多可能未鉴定的活化配体或失活配体 的NHR。这些蛋白由于与其它NHR有强序列同源性，被分类为NHR， 并且被称为孤独受体。因为所述孤独受体表现出与其它NHR的强序 列同源性，所以式I化合物包括用作孤独NHR功能调节剂的那些化 合物。受NHR调节剂(例如式I范围内的化合物)调节的孤独受体例 如但不限于表1中所列的那些受体。所述孤独受体的调节剂的示例 性治疗应用也在表1中列出，但不限于其中的实例。

表1.示例性的孤独核激素受体、形式(M＝单体，D＝异二聚体，H＝ 同二聚体)、组织表达和目标治疗应用。(CNS＝中枢神经系统)

受体         形式     组织表达              目标治疗应用

NURR1         M/D       多巴胺能神经元         帕金森病

RZRβ                    M         脑(脑垂体)，肌肉       睡眠障碍

RORα                    M         小脑，浦肯野细胞       关节炎，小脑性共济

                                               失调

NOR-1         M         脑，肌肉，心脏，肾     CNS疾病，癌症

                        上腺，胸腺

NGFI-Bβ              M/D       脑                     CNS疾病

COUP-Tfα            H         脑                     CNS疾病

COUP-TFβ            H         脑                     CNS疾病

COUP-TFγχ          H         脑                     CNS疾病

Nur77         H         脑，胸腺，肾上腺       CNS疾病

Rev-ErbAα          H         肌肉，脑(遍在的)       肥胖

HNF4α                  H         肝，肾，肠             糖尿病

SF-1          M         性腺，脑垂体           代谢性疾病

LXRα，β            D         肾(遍在的)             代谢性疾病

GCNF          M/H       睾丸，卵巢             不育症

ERRα，β            M         胎盘，骨               不育症，骨质疏松

FXR           D         肝，肾                 代谢性疾病

CARα                    H         肝，肾                 代谢性疾病

PXR           H         肝，肠                 代谢性疾病

COUP-TF2      D         睾丸                   肿瘤/血管生成

(ARP1)

RORbeta       M         CNS，视网膜，松果      代谢性疾病

                        体

因此，本发明提供用于治疗NHR相关病症的方法，所述方法包 括给予需要所述治疗的受治疗者有效量的至少一种式I化合物的步 骤。其它治疗药(例如下述的那些治疗药)可以与本发明化合物一起用 于本发明方法中(例如分开应用，或作为固定剂量配制在一起)。在本 发明的方法中，这类其它治疗药可以在给予本发明化合物之前、同 时或之后给予。

本发明也提供药用组合物，所述药用组合物包含有效量的至少 一种能够治疗NHR相关病症的式I化合物和药学上可接受的载体(介 质或稀释剂)。本发明的组合物可以含有下述的其它治疗药，并且可 以例如按照例如药用制剂领域熟知的技术，通过用常规固体或液体 载体或稀释剂以及适合于所需给药方式的类型的药用添加剂(例如赋 形剂、粘合剂、防腐剂、稳定剂、矫味剂等)来配制。

应该注意到，本发明化合物在其作用机制方面并无限制，可用 于治疗本文所列或所述的任何病症或疾病，例如炎性疾病或癌症或 其它增生性疾病，还可用于治疗这类病症或疾病的组合物中。这类 病症和疾病包括但不限于任何先前所述的以及诸如以下所述的病症 或疾病：维持肌肉强度和功能(例如在老年动物中)；逆转或预防老年 动物虚弱或年龄相关性机能减退(“ARFD”)(例如sarcopenia)；治疗糖 皮质激素分解代谢副作用；预防和/或治疗骨量、密度或生长减少(例 如骨质疏松和骨质稀少)；治疗慢性疲劳综合征(CFS)；慢性舞蹈病； 治疗急性疲劳综合征和选择性手术后的肌肉损失(例如术后康复)；加 速伤口愈合；加速骨折修复(例如加速髋部骨折患者恢复)；加速复合 性骨折(例如内脱位性骨生成)的愈合；用于关节置换；预防术后粘连 形成；加速牙齿修复或生长；维持感觉功能(例如听觉、视觉、嗅觉 和味觉)；治疗牙周病；治疗骨折继发的消瘦和与慢性阻塞性肺病 (COPD)、慢性肝病、AIDS、失重、癌性恶病质、烧伤和外伤恢复、 慢性分解代谢状态(例如昏迷)、进食障碍(例如厌食)和化学治疗相关 的消瘦；治疗心肌病；治疗血小板减少；治疗与节段性回肠炎相关 的生长迟缓；治疗短肠综合征；治疗过敏性大肠综合征；治疗炎性 肠病；治疗节段性回肠炎和溃疡性结肠炎；治疗与移植相关的并发 症；治疗生理性身材矮小(包括生长激素缺乏儿童)和与慢性病相关的 身材矮小；治疗肥胖和与肥胖相关的身材矮小；治疗厌食(例如与恶 病质或衰老相关的)；治疗皮质醇过多症和Cushing综合征；Paget病； 治疗骨关节炎；诱导脉冲式生长激素释放；治疗骨软骨发育不良； 治疗抑郁、神经过敏、易怒和紧张；治疗精神动力减低和自卑(例如 动机/过分自信)；改善认知功能(例如治疗痴呆，包括早老性痴呆和短 期记忆力丧失)；治疗与肺机能障碍和呼吸器依赖有关的分解代谢； 治疗心机能障碍(例如与心脏瓣膜疾病、心肌梗塞、心脏肥大或充血 性心力衰竭相关的)；降压；预防心室机能障碍或预防再灌注事件； 治疗长期透析的成年人；逆转或减慢衰老的分解代谢状态；减弱或 逆转外伤后的蛋白质分解代谢反应(例如逆转与手术、充血性心力衰 竭、心肌病、烧伤、癌症、COPD等相关的分解代谢状态)；减轻恶 病质和由于诸如癌症或AIDS之类的慢性病所致的蛋白质损失；治疗 血胰岛素增多，包括胰岛细胞增殖症；治疗免疫抑制患者；治疗与 多发性硬化或其它神经变性性疾病相关的消瘦；促进髓磷脂修复； 维持皮肤厚度；治疗代谢内稳态和肾内稳态(例如在虚弱的老年动物 中)；刺激成骨细胞、骨重建和软骨生长；调节食物摄取量；治疗哺 乳动物(例如人类)的胰岛素抗性，包括NIDDM；治疗心脏中的胰岛 素抵抗；改善睡眠质量和校正由于REM睡眠高度增加和REN潜伏 期减少所致的衰老的相对生长激素过少症；治疗低体温；治疗充血 性心力衰竭；治疗脂肪营养不良(例如在进行HIV或AIDS治疗(例如 蛋白酶抑制剂)的患者中)；治疗肌萎缩(例如由于身体不活动、卧床 或承重减轻的条件所致)；治疗肌骨骼损伤(例如在老年动物中)；改 善总体肺功能；治疗睡眠障碍；和治疗长时间危重疾病的分解代谢 状态；治疗多毛症、痤疮、皮脂溢、雄激素性脱发、贫血、超多毛 症、良性前列腺肥大、前列腺腺瘤和肿瘤(例如晚期转移性前列腺癌) 和带有雄激素受体的恶性肿瘤细胞，例如在乳房、脑部、皮肤、卵 巢、膀胱、淋巴、肝脏和肾脏癌症的情况下；皮肤癌、胰腺癌、子 宫内膜癌、肺癌和结肠癌；骨肉瘤；恶性肿瘤的高钙血；转移性骨 病；治疗精子生成、子宫内膜异位和多囊卵巢综合征；抵抗妊娠的 先兆子痫、子痫和早产；治疗经前综合征；治疗阴道干燥；雄性中 年龄相关的睾酮水平降低、雄性更年期、性腺机能减退、雄性激素 替代、雄性和雌性性机能障碍(例如勃起机能障碍、性冲动减少、性 冷淡(sexual well-being)、性欲减低)、雄性和雌性避孕、脱发、Reaven 综合征以及增强骨和肌肉性能/强度；以及统称为“综合征X(Syndrome X)”或在Johannsson J.Clin.Endocrinol.Metab.，82，727-34(1997)中详 述的“代谢综合征”的病症、疾病和病患。

本发明化合物在调节免疫细胞活化/增殖方面有治疗效用，例如 作为涉及CAM(细胞粘着分子)和白细胞整联蛋白(Leukointegrin)的胞 间配体/受体结合反应的竞争性抑制剂。例如，本发明的化合物调节 LFA-ICAM 1，尤其可用作LFA-ICAM 1拮抗剂，因而用于治疗与 LFA-ICAM 1相关的所有病症，例如免疫性疾病。本发明化合物的优 选应用包括但不限于炎性疾病，例如由哺乳动物体内非特异性免疫 系统的应答引起的那些病症(例如成人呼吸窘迫综合征、休克、氧中 毒、败血病继发的多器官损伤综合征、外伤继发的多器官损伤综合 征、由于心肺旁路、心肌梗塞或应用血栓溶解药引起的组织再灌注 损伤、急性肾小球性肾炎、脉管炎、反应性关节炎、带有急性炎性 组分的皮肤病、中风、热损伤、血液透析、白细胞提取、溃疡性结 肠炎、坏死性小肠结肠炎和粒细胞输注相关综合征)和由于哺乳动物 体内特异性免疫系统应答引起的病症(例如牛皮癣、器官/组织移植排 斥、移植物抗宿主反应和自身免疫病，包括Raynaud综合征、自身 免疫性甲状腺炎、皮炎、多发性硬化、类风湿性关节炎、胰岛素依 赖性糖尿病、眼色素层炎、炎性肠病(包括节段性回肠炎和溃疡性结 肠炎)和系统性红斑狼疮)。本发明化合物可以用于治疗哮喘或作为辅 助药以将癌症治疗中细胞因子治疗的毒性降至最低。本发明化合物 可以用来治疗目前通过类固醇疗法可治疗的所有疾病。本发明化合 物可以单独或者与其它免疫抑制药或消炎药一起用于治疗这些疾病 和其它疾病。按照本发明，式I化合物可以在炎症开始之前给予(以 便抑制提前出现的炎症)或在炎症开始之后给予。当预防性给予时， 所述免疫抑制化合物优选在任何炎症反应或症状之前(例如在器官或 组织移植之前、移植时或之后不久，但在任何症状或器官排斥之前) 给予。式I化合物的预防性给予，能预防或减弱任何的后续炎症反应 (例如移植器官或组织的排斥等)。给予式I化合物可减弱任何实际的 炎症(例如移植器官或组织的排斥)。

可以通过任何合适的方式给予式I化合物，用于本文所述的任 何用途，诸如可经口给予，例如以片剂、胶囊、颗粒剂或散剂的形 式；经舌下给予；口腔含化给予；胃肠外给予，例如通过皮下、静 脉内、肌内或胸骨内注射或输注技术(例如作为无菌注射用水性或非 水溶液或混悬剂)；经鼻给予，包括给予鼻粘膜，例如通过吸入喷雾； 局部给予，例如为乳油或软膏形式；或经直肠给予，例如为栓剂形 式；以含有无毒药学上可接受的溶媒或稀释剂的剂量单位制剂。本 发明化合物可以例如以适合于立即释放或延长释放的形式给予。立 即释放或延长释放可以通过以下方法达到：应用包含本发明化合物 的合适的药用组合物，或者特别是在延长释放的情况下，应用诸如 皮下植入物或渗透泵的装置。本发明化合物也可以通过脂质体给予。

用于口服给药的示例性组合物包括：混悬剂，所述混悬剂可以 含有例如用于增加体积的微晶纤维素、作为悬浮剂的藻酸或藻酸钠、 作为粘度增强剂的甲基纤维素以及例如本领域已知的那些甜味剂或 矫味剂；和立即释放片剂，所述片剂可以含有例如微晶纤维素、磷 酸二钙、淀粉、硬脂酸镁和/或乳糖和/或例如本领域已知的那些其它 赋形剂、粘合剂、增容剂、崩解剂、稀释剂和润滑剂。式I化合物也 可以通过舌下和/或口腔含化而经口腔给予。模制片、压制片或冻干 片是可以使用的示例性形式。示例性组合物包括用快速溶解性稀释 剂例如甘露醇、乳糖、蔗糖和/或环糊精配制本发明化合物的那些组 合物。在这类制剂中也可以包括高分子量赋形剂，例如纤维素(avicel) 或聚乙二醇(PEG)。这类制剂也可以含有有助于粘膜粘附的赋形剂， 例如羟丙基纤维素(HPC)、羟丙基甲基纤维素(HPMC)、羧甲基纤维 素钠(SCMC)、马来酸酐共聚物(例如Gantrez)以及控制释放的药剂， 例如聚丙烯酸酯共聚物(例如Carbopol 934)。为便于制造和应用，也 可以加入润滑剂、助流剂、矫味剂、着色剂和稳定剂。

用于鼻用气雾剂或吸入给药的示例性组合物包括盐水中的溶 液，所述溶液可以含有例如苯甲醇或其它合适的防腐剂、用于增强 生物利用度的吸收促进剂和/或其它例如本领域已知的那些增溶剂或 分散剂。

用于胃肠外给药的示例性组合物包括注射用溶液或混悬剂，所 述溶液或混悬剂可以含有例如合适的无毒胃肠外可接受的稀释剂或 溶剂，例如甘露醇、1，3-丁二醇、水、Ringer氏溶液、等渗氯化钠溶 液或其它合适的分散剂或润湿剂和悬浮剂，包括合成的甘油一酯或 甘油二酯、以及脂肪酸，包括油酸或Cremaphor。

用于直肠给药的示例性组合物包括栓剂，所述栓剂可以含有例 如合适的无刺激性赋形剂，例如可可脂、合成甘油酯或聚乙二醇， 所述栓剂在常温下为固体，但在直肠腔中液化和/或溶解以释放药物。

用于局部给药的示例性组合物包括局部载体，例如Plastibase(用 聚乙烯胶凝的矿物油)。

本发明化合物的有效量可以由本领域技术人员确定，包括用于 成人的约1-100(例如15或以下，尤其是1至3或以下)mg/kg体重/ 天的活性化合物的示例性剂量，所述剂量可以以一次剂量或单个各 分次剂量形式给予，例如每日1-4次。人们会理解，用于任何特定受 治疗者的具体剂量水平和给药频率可以改变，并且取决于各种各样 的因素，包括所用具体化合物的活性、该化合物的代谢稳定性和作 用时间、受治疗者的物种、年龄、体重、一般健康状况、性别和饮 食、给药方式和给药时间、排泄速率、药物组合和具体病症的严重 程度。优选受治疗者包括经受NHR相关病症的动物，最优选哺乳动 物，例如人类和驯养动物(例如狗、猫等)。

如上所述，本发明的化合物可以单独使用，或者可以相互联用 和/或与其它合适的可用于治疗NHR相关病症的治疗药联用，例如抗 生素或其它药用活性物质。

例如，本发明化合物可以与例如但不限于以下的生长促进药联 用：TRH、二乙基己烯雌酚、茶碱、脑啡肽、E系列前列腺素、美国 专利第3,239,345号中公开的化合物(例如折仑诺)和在美国专利第 4,036,979号公开的化合物(例如舒贝诺司)或在美国专利第4,411,890 号中公开的肽。

本发明化合物也可以与生长激素促分泌剂联用，所述促分泌剂 例如GHRP-6、GHRP-1(如在美国专利第4,411,890号和公开的WO 89/07110和WO 89/07111中公开的)、GHRP-2(如在WO 93/04081中 公开的)、NN703(Novo Nordisk)、LY444711(Lilly)、MK-677(Merck)、 CP424391(Pfizer)和B-HT920，或者与生长激素释放因子及其类似物 或生长激素及其类似物或生长调节素(包括IGF-I和IGF-2)联用，或 者与α-肾上腺素能激动剂(例如可乐定)、或5-羟色胺5-HTD激动剂(例 如舒马普坦)、或抑制促生长素抑制素或其释放的药物(例如毒扁豆 碱和吡斯的明)联用。本发明所公开化合物的再一用法是与甲状旁腺 激素PTH(1-34)或二膦酸酯例如MK-217(阿仑膦酸)联用。

本发明化合物的再一种用法是与以下药物联用：雌激素、睾酮、 选择性雌激素受体调节剂(例如他莫昔芬或雷洛昔芬)或者其它雄激素 受体调节剂，例如在Edwards，J.P.等，Bio.Med.Chem.Let.，9，1003- 1008(1999)和Hamann，L.G.等，J Med.Chem.，42，210-212(1999)中公 开的药物。

本发明化合物的再一用法是与孕酮受体激动剂(“PRA”)(例如左 炔诺孕酮、醋酸甲羟孕酮(MPA))联用。

本发明的化合物可以单独使用或者相互联用，和/或与包括以下 的其它核激素受体调节剂或可用于治疗上述疾病的其它合适的治疗 药联用：抗糖尿病药；抗骨质疏松药；抗肥胖药；消炎药；抗焦虑 药；抗抑郁药；降压药；抗血小板药；抗血栓形成药和血栓溶解药； 强心苷；降胆固醇药/降脂药；盐皮质激素受体拮抗剂；磷酸二酯酶 抑制剂；蛋白质酪氨酸激酶抑制剂；甲状腺模拟物(thyroid mimetics) (包括甲状腺受体激动剂)；同化激素类药；HIV或AIDS治疗；可用 于治疗早老性痴呆和其它认知障碍的疗法；可用于治疗睡眠障碍的 疗法；抗增殖药；和抗肿瘤药。

与本发明化合物联用的合适抗糖尿病药的实例包括双胍类(例如 二甲双胍)、糖苷酶抑制剂(例如阿卡波糖)、胰岛素(包括胰岛素促分 泌剂或胰岛素致敏剂)、氯茴苯酸(例如瑞格列奈)、磺酰脲类(例如格列 美脲、格列本脲和格列吡嗪)、双胍/格列本脲组合(例如Glucovance_)、 噻唑烷二酮(例如曲格列酮、rosiglitazone和吡格列酮)、PPAR-α激动剂、 PPAR-γ激动剂、PPARα/γ双重激动剂、SGLT2抑制剂、糖原磷酸化 酶抑制剂、脂肪酸结合蛋白(aP2)的抑制剂例如在2000年3月6日申 请的美国专利顺序号09/519,079中公开的那些、胰高血糖素样肽-1 (GLP-1)和二肽基肽酶IV(DP4)抑制剂。

与本发明化合物联用的合适抗骨质疏松药的实例包括阿仑膦 酸、利塞膦酸、PTH、PTH片段、雷洛昔芬、降钙素、类固醇或非类 固醇孕酮受体激动剂、RANK配体拮抗剂、钙传感受体拮抗剂、TRAP 抑制剂、选择性雌激素受体调节剂(SERM)、雌激素和AP-1抑制剂。

与本发明化合物联用的合适抗肥胖药的实例包括aP2抑制剂， 例如在2000年3月6日申请的美国顺序号09/519,079中公开的抑制 剂；PPARγ拮抗剂、PPARδ激动剂、β3肾上腺素能激动剂，例如AJ9677 (Takeda/Dainippon)、L750355(Merck)或CP331648(Pfizer)或其它已 知的β3激动剂如在美国专利第5,541,204、5,770,615、5,491,134、 5,776,983和5,488,064号中公开的激动剂；脂酶抑制剂，例如奥利司 他或ATL-962(Alizyme)、5-羟色胺(和多巴胺)再吸收抑制剂，例如西 布曲明、托吡酯(Johnson&Johnson)或axokine(Regeneron)；甲状腺受 体β药，例如WO 97/21993(U.Cal SF)、WO 99/00353(KaroBio)和 GB98/284425(KaroBio)中公开的甲状腺受体配体；和/或食欲抑制药， 例如右苯丙胺、芬特明、苯丙醇胺或马吲哚。

与本发明化合物联用的合适消炎药的实例包括泼尼松、地塞米 松、Enbrel_、环加氧酶抑制剂(即COX-1和/或COX-2抑制剂，例 如NSAID、阿司匹林、吲哚美辛、布洛芬、吡罗昔康、Naproxen_、 Celebrex_、Vioxx_)、CTLA4-Ig激动剂/拮抗剂、CD40配体拮抗剂、 IMPDH抑制剂例如麦考酚酸(CellCept_)整联蛋白拮抗剂、α-4 β-7整 联蛋白拮抗剂、细胞粘着抑制剂、干扰素γ拮抗剂、ICAM-1、肿瘤坏 死因子(TNF)拮抗剂(例如infliximab，OR1384)、前列腺素合成抑制剂、 布地奈德、氯法齐明、CNI-1493、CD4拮抗剂(例如priliximab)、p38促 细胞分裂剂活化蛋白激酶抑制剂、蛋白质酪氨酸激酶(PTK)抑制剂、 IKK抑制剂和用于治疗刺激性大肠综合征的疗法(例如Zelmac_和 Maxi-K_openers，例如美国专利第6,184,231 B1号中公开的那些)。

与本发明化合物联用的合适抗焦虑药的实例包括地西泮、劳拉 西泮、丁螺环酮、奥沙西泮和双羟萘酸羟嗪。

与本发明化合物联用的合适抗抑郁药包括西酞普兰、氟西汀、奈法 唑酮、舍曲林和帕罗西汀。

与本发明化合物联用的合适降压药包括β肾上腺素能阻滞药、钙 通道阻滞药(L-型和T-型；例如地尔硫_、维拉帕米、硝苯地平、氨氯地 平和mybefradil)、利尿药(例如氯噻嗪、氢氯噻嗪、氟甲噻嗪、氢氟 噻嗪、苄氟噻嗪、甲氯噻嗪、三氯噻嗪、泊利噻嗪、苄噻嗪、依他尼酸 tricrynafen、氯噻酮、呋塞米、musolimine、布美他尼、氨苯蝶啶、阿 米洛利、螺内酯)、肾素抑制剂、ACE抑制剂(例如卡托普利、佐芬普 利、福辛普利、依那普利、西多普利、西拉普利、地拉普利、喷托普利、喹那 普利、雷米普利、赖诺普利)、AT-1受体拮抗剂(例如氯沙坦、irbesartan、 缬沙坦)、ET受体拮抗剂(例如sitaxsentan、atrsentan和在美国专利第 5,612,359和6,043,265号中公开的化合物)、双ET/AII拮抗剂(例如在 WO 00/01389中公开的化合物)、中性内肽酶(NEP)抑制剂、 vasopepsidase抑制剂(双NEP-ACE抑制剂)(例如奥马曲拉和 gemopatrilat)和硝酸盐。

与本发明化合物联用的合适抗血小板药的实例包括GPIIb/IIIa阻 滞药(例如阿昔单抗、依替巴肽、替罗非班)、P2Y12拮抗剂(例如氯 吡格雷、噻氯匹定、CS-747)、血栓烷受体拮抗剂(例如依非曲班)、 阿司匹林和带有或不带有阿司匹林的PDE-III抑制剂(例如双嘧达 莫)。

与本发明化合物联用的合适强心苷的实例包括洋地黄和毒毛花 苷G。

与本发明化合物联用的合适降胆固醇药/降脂药的实例包括 HMG-CoA还原酶抑制剂(例如普伐他汀、洛伐他汀、阿托伐他汀、 辛伐他汀、NK-104(a.k.a.依伐他汀或nisvastatin或nisbastatin)和ZD- 4522(a.k.a.罗苏伐他汀或atavastatin或visastatin))、角鲨烯合成酶抑 制剂、fibrates、胆汁酸螯合剂、ACAT抑制剂、MTP抑制剂、脂加 氧酶(lipooxygenase)抑制剂、胆固醇吸收抑制剂和胆固醇酯转运蛋白 抑制剂(例如CP-529414)。

与本发明化合物联用的合适盐皮质激素受体拮抗剂的实例包括 螺内酯和依普利酮(eplerinone)。

与本发明化合物联用的合适磷酸二酯酶抑制剂的实例包括 PDEIII抑制剂(例如西洛他唑)和PDE V抑制剂(例如sildenafil)。

与本发明化合物联用的合适甲状腺模拟物的实例包括促甲状腺 素、polythyroid、KB-130015和决奈达隆。

与本发明化合物联用的合适同化激素类药的实例包括睾酮、TRH 己烯雌酚、雌激素、β-激动剂、茶碱、促蛋白合成类固醇、脱氢表雄 甾酮、脑啡肽、E-系列前列腺素、视黄酸和美国专利第3,239,345号 中公开的化合物(例如Zeranol_(折仑诺))、美国专利第4,036,979中公 开的化合物(例如舒贝诺司)或美国专利第4,411,890号中公开的肽。

与本发明化合物联用的合适HIV或AIDS治疗药的实例包括硫 酸茚地那韦、沙奎那韦、甲磺酸沙奎那韦、利托那韦、拉米夫定、 齐多夫定、拉米夫定/齐多夫定组合、扎西他滨、去羟肌苷、司他夫 定和醋酸甲地孕酮。

与本发明化合物联用的治疗早老性痴呆和认知障碍的合适治疗 药的实例包括多奈哌齐、他克林、revastigmine、5HT6、γ分泌酶抑制 剂、β分泌酶抑制剂、SK通道阻滞药、Maxi-K阻滞药和KCNQ阻滞 药。

与本发明化合物联用的治疗睡眠障碍的合适治疗药的实例包括 褪黑激素类似物、褪黑激素受体拮抗剂、ML1B激动剂和 GABA/NMDA受体拮抗剂。

与本发明化合物联用的合适抗增殖药的实例包括环孢菌素A、 紫杉醇、FK 506和柔红霉素。

与本发明化合物联用的合适抗肿瘤药的实例包括紫杉醇、柔红 霉素、epothilones、顺铂和卡铂。

本发明的化合物还可以与诸如U.S.5,179,080中描述的营养增补 剂联用，尤其是与乳清蛋白或酪蛋白、氨基酸(例如亮氨酸、支链氨 基酸和丁酸羟甲酯)、甘油三酯、维生素(例如A、B6、B12、叶酸、 C、D和E)、矿物质(例如硒、镁、锌、铬、钙和钾)、肉毒硷、硫辛 酸、肌酸和辅酶Q-10联用。

另外，本发明化合物可以与以下药物联合使用：用于治疗性功 能障碍的治疗药。包括但不限于PDE5抑制剂，例如西地那非或IC- 351；抗吸收药、激素替代治疗药、维生素D类似物、降钙素、元素 钙和钙增补剂、组织蛋白酶K抑制剂、MM抑制剂、玻连蛋白受体 拮抗剂、Src SH2拮抗剂、vacular-H+-ATP酶抑制剂、孕酮受体激动 剂、依普黄酮、氟化物、RANK拮抗剂、PTH及其类似物和片段、 替勃龙、HMG-CoA还原酶抑制剂、SERM’s、p38抑制剂、prostanoids、 17-β羟基类固醇脱氢酶抑制剂和Src激酶抑制剂。

本发明化合物可以与以下药物联用：雄性避孕药例如壬苯醇醚9 或用于治疗脱发的治疗药(例如米诺地尔和非那雄胺)或化疗药(例如 LHRH激动剂)。

对于优选的抗癌应用或抗血管生成应用，本发明的化合物可以 单独给予，或者与其它抗癌药和细胞毒性药以及用于治疗癌症或其 它增生性疾病的治疗联合给予，例如当所述第二种药物的作用机制 与本发明式I化合物相同或不同时。可与本发明化合物联用的抗癌药 和细胞毒性药类的实例包括但不限于：烷化剂，例如氮芥、烷基磺 酸酯类、亚硝基脲类、乙烯亚胺类和三氮烯类；EGFR抑制剂，如小 分子EGFR抑制剂，EGFR抗体(如C225(Erbitux))；抗代谢药，例如 叶酸拮抗剂、嘌呤类似物和嘧啶类似物；抗生素，例如蒽环类抗生 素、博来霉素、丝裂霉素、放线菌素和普卡霉素；酶类，例如L-天 冬酰胺酶；法尼基-蛋白质转移酶抑制剂；5α还原酶抑制剂；3型或1 型的17β-羟基类固醇脱氢酶抑制剂；激素类药，例如糖皮质激素、 雌激素/抗雌激素、雄激素/抗雄激素、孕激素和黄体素释放激素拮抗 剂、乙酸奥曲肽；微管破坏药，例如海鞘素或其类似物和衍生物； 微管稳定药，例如taxanes，例如紫杉醇(Taxolt_)、多西他赛(Taxotere_) 以及它们的类似物、和epothilones，例如epothilones A-F及其类似 物；植物源制品，例如长春花生物碱、表鬼臼毒素、taxanes；和拓 扑异构酶抑制剂；异戊二烯基-蛋白质转移酶抑制剂；和其它药物 (miscellaneous agents)，例如羟基脲、丙卡巴肼、米托坦、六甲蜜胺、 铂配位络合物(例如顺铂和卡铂)；和用作抗癌药和细胞毒性药的其它 药物，例如生物响应改进剂、生长因子；免疫调节药和单克隆抗体。 本发明的化合物也可以与放射治疗结合使用。

这些类别的抗癌药和细胞毒性药的代表性实例包括但不限于盐 酸氮芥、环磷酰胺、苯丁酸氮芥、美法仑、异环磷酰胺、白消安、 卡莫司汀、洛莫司汀、司莫司汀、链佐星、赛替派、达卡巴嗪、甲 氨蝶呤、硫鸟嘌呤、巯基嘌呤、氟达拉滨、pentastatin、克拉屈滨、 阿糖胞苷、氟尿嘧啶、盐酸多柔比星、柔红霉素、伊达比星、硫酸 博来霉素、丝裂霉素C、放线菌素D、safracins、saframycins、 quinocarcins、discodermolides、长春新碱、长春花碱、酒石酸长春瑞 滨、依托泊苷、磷酸依托泊苷、替尼泊苷、紫杉醇、他莫昔芬、雌 莫司汀、磷酸雌莫司汀钠盐、氟他胺、布舍瑞林、亮丙立德、蝶啶、 diyneses、左旋咪唑、aflacon、干扰素、白介素、阿地白介素、非格 司亭、沙格司亭、利妥昔单抗、BCG、维A酸、盐酸伊立替康、倍 他米松、盐酸吉西他滨、六甲蜜胺和托泊替康和它们的类似物或衍 生物。

这些类别的优选成员包括但不限于：紫杉醇、顺铂、卡铂、多 柔比星、洋红霉素、柔红霉素、氨基蝶呤、甲氨蝶呤、甲基蝶呤、 丝裂霉素C、海鞘素743或泊非霉素、5-氟尿嘧啶、6-巯基嘌呤、吉 西他滨、阿糖胞苷、鬼臼毒素或鬼臼毒素衍生物例如依托泊苷、磷 酸依托泊苷或替尼泊苷、美法仑、长春花碱、长春新碱、异长春碱、 长春地辛和环氧长春碱。

抗癌药和其它细胞毒性药的实例包括以下：在德国专利第 4138042.8号；WO 97/19086、WO 98/22461、WO 98/25929、WO 98/38192、WO 99/01124、WO 99/02224、WO 99/02514、WO 99/03848、 WO 99/07692、WO 99/27890、WO 99/28324、WO 99/43653、WO 99/54330、WO 99/54318、WO 99/54319、WO 99/65913、WO 99/67252、 WO 99/67253和WO 00/00485中发现的epothilone衍生物；在WO 99/24416中(也可参见美国专利第6,040,321号)中发现的细胞周期蛋 白依赖性激酶抑制剂；在WO 97/30992和WO 98/54966中发现的异 戊二烯基-蛋白质转移酶抑制剂；和在美国专利第6,011,029号中通法 描述和具体描述的那些药物(所述美国专利的化合物可以与任何NHR 调节剂(包括但不限于本发明的那些化合物)例如AR调节剂、ER调 节剂和LHRH调节剂、或者与手术去生殖腺(尤其是在治疗癌症时)一 起使用)。

也可以配制本发明的组合物，或者将本发明的组合物与在给予 与上述病症相关的治疗时根据特定用途选择的其它治疗药共同给 予。例如，可将本发明的化合物与预防恶心、过敏和胃刺激的药物(例 如止吐剂)以及H1和H2抗组胺药一起配制制成制剂。

当涉及癌症治疗时，本发明的化合物最优选单独使用，或者与 抗癌疗法(例如放射治疗)和/或与细胞抑制药和/或细胞毒性药(例如但 不限于以下的药物)联合使用：DNA相互作用药，例如顺铂或多柔比 星；法尼基蛋白质转移酶抑制剂，例如美国专利第6,011,029号中描 述的那些；拓扑异构酶II抑制剂，例如依托泊苷；拓扑异构酶I抑 制剂，例如CPT-11或托泊替康；微管蛋白稳定药，例如紫杉醇、多 西他赛、其它taxanes或epothilones；激素类药，例如他莫昔芬；胸 苷酸合酶抑制剂，例如5-氟尿嘧啶；抗代谢药，例如甲氨蝶呤；抗 血管生成药，例如制管张素、ZD6474、ZD6126和comberstatin A2； 激酶抑制剂，例如her2特异性抗体、Iressa和CDK抑制剂；组蛋白 脱乙酰酶抑制剂，例如CI-994和MS-27-275。这类化合物也可以与 抑制循环睾酮产生的药物(例如LHRH激动剂或拮抗剂)或者与手术去 生殖腺联合使用。与本发明化合物一起使用的示例性联合药物(如用 于治疗前列腺癌的药物)包括LHRH调节剂或泼尼松。

本发明还包括用于如治疗前列腺癌的试剂盒，所述试剂盒包括： 第一容器(如管瓶)，该容器中装有含本发明化合物的药物制剂，其中 所述化合物任选在药学上可接受的载体中；第二容器(如管瓶)，该容 器中装有含一种或多种与所述本发明化合物联合使用的试剂(如 LHRH调节剂)，所述试剂任选在药学上可接受的载体中。

例如，晚期转移性前列腺癌的已知疗法包括“全雄激素切除疗 法(complete androgen ablation therapy)”，其中通过化学去生殖腺(去 生殖腺用于抑制循环睾酮(T)和二氢睾酮(DHT)的产生)，然后给予雄 激素受体(AR)拮抗剂(所述拮抗剂可以抑制来自前列腺组织将循环雄 激素前体转化为T/DHT的T/DHT功能)，从而控制将雄激素供应给 前列腺组织，来抑制肿瘤生长。本发明的化合物在全切除疗法中可 作为AR拮抗剂单独使用，或者与其它AR拮抗剂例如氟他胺、卡索 地司(Casodex)、尼鲁米特或醋酸环丙孕酮联用。

本发明提供了可用于治疗患有对除本发明式I化合物(或其盐)外 的雄激素受体拮抗剂(如，比卡鲁胺(bicalutimide))具有对抗性的前列 腺癌的患者的化合物。本发明还包括一种治疗对除式I的那些化合物 或其盐外的雄激素受体拮抗剂具有对抗性的前列腺癌的方法，所述 方法包括给予有需要的患者有效量的能够降低所述癌症的肿瘤物质 的生长速率的化合物。术语“降低所述肿瘤物质的生长速率”是指 相对于采用除式I的那些化合物或其盐外的其它雄激素受体拮抗剂进 行治疗时肿瘤的生长速率而言，在治疗时所述肿瘤物质的生长速率 的降低程度(当然包括稳定性或体积变小)。在本发明式I的化合物及 其药学上可接受的盐是优选的这类化合物。

本发明还包括将抗雌激素药和/或芳香酶抑制药与本发明化合物 联合使用，以例如有助于减轻伴随抗雄激素疗法所产生副作用，如 形成男子女性型乳房。示例性的抗雌激素药和/或芳香酶抑制药包括 阿那曲唑(Arimidex)、枸橼酸他莫昔芬(Nolvadex)、依西美坦 (Aromasin)、枸橼酸托瑞米芬(Fareston)、来曲唑(Femara)、盐酸雷洛 昔芬(Evista)、Faslodex或923(Wyeth Ayerst)。

本发明的化合物可以作为手术的辅助治疗剂。

本发明化合物的另一应用是与抗体疗法(例如但不限于抗PSCA 的抗体疗法)联用。另外一种应用是与用于治疗癌症的疫苗/免疫调节 剂协调使用。

本发明的化合物可以按照Mark E.Salvati等的2001年4月18日 申请的题为“Selective Androgen Receptor Modulators and Methods for Their Identification，Design and Use”的美国临时专利申请顺序号 60/284,438(案卷号为LD0250(PSP))(所述临时专利申请通过引用全 部结合到本文中(包括但不限于引用本发明式I范围内的所有具体化 合物))和Mark E.Salvati等的2001年6月20日申请的题为“Selective Androgen Receptor Modulators and Methods for Their Identification， Design and Use”的美国专利申请顺序号09/885,827(案卷号为 LD0250(NP))(所述专利申请通过引用全部结合到本文中(包括但不限 于引用本发明式I范围内的所有具体化合物))中描述的方法使用。

对于本发明化合物的外消旋物，一种对映体可以例如是全AR 拮抗剂，而另一种对映体在肿瘤组织中可以为AR拮抗剂，而在带有 雄激素受体的非肿瘤组织中没有活性或有激动剂活性。

以上其它治疗药当与本发明化合物联用时，可以例如按 Physicians’Desk Reference(PDR)中指定的量或者按本领域技术人员 确定的量来使用。

以下测定可以用来确定化合物作为NHR调节剂的活性。在这些 测定的任一项测定中，优选结合活性或反式激活活性高于20μM的 那些化合物。利用如下所述的反式激活测定方法和标准AR结合测定 方法，确定本发明的各种化合物具有AR调节活性。

反式激活测定：

AR特异性测定：

在转染的报道构建体的反式激活测定中，用宿主细胞的内源性 雄激素受体，测试本发明的化合物。反式激活测定提供一种鉴定模 拟天然激素(在这种情况下为二氢睾酮(DHT)效应的功能性激动剂和 部分激动剂或者抑制天然激素效应的拮抗剂的方法。这种测定可以 用来预测在两个系列数据有良好相关性时体内的活性。参见例如T. Berger等，J.Steroid Biochem.Molec.Biol.773(1992)，该文献的公开 内容通过引用结合到本文中。

对于反式激活测定，是将报道质粒通过转染(一种诱导细胞摄取 外源基因的方法)导入到相应的细胞中。这种报道质粒包含受含雄激 素效应元件(ARE)的前列腺特异性抗原(PSA)上游序列控制的报道蛋 白(例如分泌型碱性磷酸酶(SEAP))的cDNA。这种报道质粒作为AR 的转录调节活性的报道分子起作用。因此，所述报道分子作为在AR 及其天然激素控制下的基因正常表达的产物(mRNA，然后是蛋白质) 的替代物起作用。为了检测拮抗剂，反式激活测定在恒定浓度的诱 导特定报道信号的已知天然AR激素(DHT)存在下进行。增加怀疑拮 抗剂的浓度将降低所述报道信号(例如SEAP产生)。另一方面，将转 染细胞暴露于增加浓度的怀疑激动剂中，将增加所述报道信号的产 生。

在该测定中，LNCaP和MDA 453细胞得自美国典型培养物保 藏中心(American Type Culture Collection(Rockville，MD))，并且分别 保持在补充10％胎牛血清(FBS；Gibco)的RPMI 1640或DMEM培养 基中。按照Heiser，130 Methods Mol.Biol.，117(2000)所述的优化方 法，用pSEAP2/PSA540/增强子报道质粒，通过电穿孔瞬时转染相应 的细胞。所述报道质粒如下构建：用市售的人胎盘基因组DNA通过 聚合酶循环反应(RCR)，产生含有BglII位点(位置5284)和于人前列 腺特异性抗原启动子((登记号U37672)，Schuur，等，J.Biol.Chem.，271 (12)：7043-51(1996))的5831位上Hind III位点的片段。将该片段亚 克隆到预先用BglII和HindIII消化的pSEAP2/basic(Clontech)中，产 生pSEAP2/PSA540构建体。然后，通过PCR，从人胎盘基因组DNA 中扩增一个带有人PSA中位置-5322至-3873之间的上游序列的片段 的片段。用引物引入XhoI位点和BglII位点。将所得的片段亚克隆 到分别用XhoI和BglII消化的pSEAP2/PSA540中，产生 pSEAP2/PSA540/增强子构建体。将LNCaP和MDA 453细胞收集到 含有10％经活性炭脱色的FBS的培养基中。将每种细胞悬浮液分配 到两个Gene Pulser Cuvetts(Bio-Rad)中，然后接受8μg所述报道构 建体，随后用Bio-Rad Gene Pulser以210伏和960微法拉第电穿孔。 在转染后洗涤细胞后，用含有活性炭吸附的胎牛血清的培养基在无(空 白)或有(对照)1nM二氢睾酮(DHT；Sigma Chemical)的存在下和在 有或无10-10至10-5M(样品)浓度范围的标准抗雄激素比卡鲁胺或 本发明化合物存在下孵育。每种样品使用双份测定。化合物的稀释 在Biomek 2000实验室工作站上进行。48小时后，用Phospha-Light Chemiluminescent Reporter Gene Assay System(磷光化学发光报道基 因分析系统)(Tropix，Inc)，分析一部分上清液的SEAP活性。用 CellTiter 96 Aqueous Non-Radioactive Cell Proliferation Assay(96孔细 胞固定；水溶性非放射性细胞增殖测定仪)(MTS Assay，Promega)， 测定剩余细胞的活力。简言之，将四唑鎓化合物(3-(4，5-二甲基噻唑-2- 基)-5-(3-羧基甲氧基苯基)-2-(4-磺基苯基)-2H-四唑鎓内盐；MTS)和 电子偶合试剂(吩嗪硫酸甲酯；PMS)的混合物加入到细胞中。MTS (Owen试剂)被细胞生物还原为可溶于组织培养基中的甲_，因此无 需其它加工，可以直接从96孔测定板直接测量490nm的吸光度。根 据490nm吸光度的量测量的甲_产物的量与培养物中的活细胞数成 正比。对于每个重复测定，根据得自MTS测定的吸光度490值，将 SEAP读出值标准化。对于拮抗剂模式，如下计算抑制百分比： ％抑制＝100×(1-[对照平均值-空白平均值/样品平均值-空白平均 值])

将数据作图，将抑制50％标准化SEAP的化合物浓度(IC50)定量。

对于激动剂模式，％对照是指与用天然激素(在这种情况下为 DHT)观测到的最大效应相比，试验化合物的效应，如下计算： ％对照＝100×样品平均值-空白平均值/对照平均值-空白平均值

将数据作图，将激活至50％标准化SEAP水平的化合物浓度(EC50) 定量。

GR特异性测定：

所用的报道质粒由AR特异性反式激活测定所述的SEAP报道 蛋白的cDNA构成。SEAP报道蛋白的表达由小鼠乳腺瘤病毒长末端 重复(MMTV LTR)序列控制，所述序列含有三个可以用GR和PR调 节的激素效应元件(HRE)，参见例如G.Chalepakis等，Cell，53(3)，371 (1988)。将该质粒转染到表达内源GR的A549细胞中，获得GR特 异性反式激活测定。A549细胞得自美国典型培养物保藏中心 (Rockville，MD)，并且保持在补充10％胎牛血清(FBS；Gibco)的RPMI 1640中。本发明化合物的GR特异性拮抗剂活性的测定方法与AR 特异性反式激活测定所述的测定方法相同，只是DHT被5nM地塞 米松(Sigma Chemicals)取代，地塞米松是一种GR特异性的激动剂。 本发明化合物的GR特异性激动剂活性的测定按照AR反式激活测定 中所述方法进行，其中通过在无已知的GR特异性激动剂配体的存在 下，加入试验化合物，测量所述GR特异性报道系统的激活。

PR特异性测定：

所用的报道质粒由AR特异性反式激活测定所述的SEAP报道 蛋白的cDNA构成。SEAP报道蛋白的表达由小鼠乳腺瘤病毒长末端 重复(MMTV LTR)序列控制，所述序列含有三个可以用GR和PR调 节的激素效应元件(HRE)。将该质粒转染到表达内源PR的T47D中， 获得PR特异性反式激活测定。T47D细胞得自美国典型培养物保藏 中心(Rockville，MD)，并且保持在补充10％胎牛血清(FBS；Gibco)的 DMEM培养基中。本发明化合物的PR特异性拮抗剂活性的测定方 法与AR特异性反式激活测定所述的测定方法相同，只是DHT被1nM Promegastone(NEN)取代，Promegastone是一种PR特异性的激动剂。 本发明化合物的PR特异性激动剂活性的测定按照AR反式激活测定 中所述方法进行，其中通过在无已知的PR特异性激动剂配体的存在 下，加入试验化合物，测量所述PR特异性报道系统的激活。

AR结合测定：

全细胞结合测定，是将分别含有10％经活性炭脱色的CA-FBS (Cocaleco Biologicals)的RPMI 1640或DMEM的96孔微量滴定板中 的人LNCaP细胞(T877A突变型AR)或MDA 453(野生型AR)于37 ℃孵育，以除去可能与细胞中所述受体复合的任何内源配体。48小 时后，或者进行饱和分析以测定氚化的二氢睾酮[3H]-DHT的Kd，或 者进行竞争性结合测定以评价试验化合物与[3H]-DHT竞争的能力。 饱和分析，是将在无(总结合)或有(非特异性结合)500倍摩尔浓度过 量的未标记DHT存在下的含有[3H]-DHT(浓度范围为0.1nM-16nM) 培养基(RPMI 1640或DMEM-0.2％CA-FBS)加入到细胞中。于37℃4 小时后，取出一等份的每种[3H]-DHT浓度的总结合培养基，以测定 游离[3H]-DHT的量。取出剩余的培养基，用PBS洗涤细胞3次，将 细胞收集到UniFilter GF/B板(Packard)上，加入Microscint(Packard)， 然后在Top-Counter(Packard)中对平板计数，以评估结合[3H]-DHT的 量。

对于饱和分析，将总结合和非特异性结合之差定义为特异性结 合。特异性结合通过Scatchard分析评估，以测定[3H]-DHT的Kd。 参见例如D.Rodbard，Mathematics and statistics of ligand assays：an illustrated guide：载于：J.Langon和J.J.Clapp编著，Ligand Assay， Masson Publishing U.S.A.，Inc.，New York，第45-99页(1981)，所述文 献的公开内容通过引用结合到本文中。

对于竞争研究，将含有1nM[3H]-DHT和浓度范围为10-10-10-5M 的本发明化合物(“试验化合物”)的培养基加入到细胞中。每种样品 进行两次重复测定。于37℃4小时后，如上所述洗涤细胞、收获细 胞并对其计数。将数据以剩余的[3H]-DHT的量(在无试验化合物时占 对照的百分比)对给定化合物的剂量反应曲线范围作图。在log-logit 转换后，将在无竞争配体存在时，抑制[3H]-DHT的结合量的50％的 试验化合物的浓度(IC50)定量。通过将Cheng Prusoff方程应用于IC50 值，测定KI值，其中：

对非特异性结合进行校正后，测定IC50值。IC50定义为将特异性结合 降低50％所需的竞争配体的浓度。[3H]-DHT对于MDA 453和LNCaP 的Kd分别为0.7nM和0.2nM。

人前列腺细胞增殖测定：

在人前列腺癌细胞系增殖方面，测试本发明化合物(“试验化合 物”)。为此，将来源于未去生殖腺的患者的转移瘤的细胞系MDA PCa2b细胞(Navone等，Clin.Cancer Res.，3，2493-500(1997))在有或无 试验化合物的情况下孵育72小时，定量测定掺入到DNA中的[3H]- 胸苷的量，作为评价细胞数和因此评价增殖的一种方式。将MDA PCa2b细胞系保持在补充10％FBS的BRFF-HPC1培养基(Biological Research Faculty&Facility Inc.，MD)中。为进行该测定，将细胞接种 到Biocoated 96孔微量滴定平板中，于37℃在10％FBS(经活性炭脱 色的)/BRFF-BMZERO(无雄激素)中孵育。24小时后，将细胞在无(空 白)或有1nM DHT(对照)或者加入浓度范围为10-10-10-5M的本发明 试验化合物(样品)的情况下处理。每种样品进行双份测定。化合物的 稀释在Biomek 2000实验室工作站上进行。72小时后，每孔加入0.44 uCi.[3H]-胸苷(Amersham)，再孵育24小时，然后用胰蛋白酶处理， 将细胞收获到GF/B滤器上。加入Micro-scint PS至滤器上，然后在 Beckman TopCount上计数。

抑制百分比如下计算：

％抑制＝100×(1-[平均值对照-平均值空白/平均值样品-平均值空白])。 将数据作图，定量测定抑制50％所述[3H]-胸苷掺入的化合物浓度( IC50)。

C2C12小鼠成肌细胞反式激活测定：

开发两种功能性反式激活测定法，以便用荧光素酶报道分子评 价雄激素激动剂在肌细胞背景中的功效。第一种测定法(ARTA Stable 1)使用一种细胞系-Stable 1(克隆#72)，所述细胞系稳定表达全长大 鼠雄激素受体，但需要增强子/报道分子的瞬时转染。这种细胞系来 源于C2C12小鼠成肌细胞。第二种测定法(ARTA Stable 2)使用一种 细胞系-Stable 2(克隆#133)，该细胞系来源于稳定表达rAR和增强 子/荧光素酶报道分子两者的Stable 1。

在该系统中使用的增强子/报道分子构建体是pGL3/2XDR-1/荧 光素酶。据报道2XDR-1是CV-1细胞中的AR特异性效应元件，Brown 等The Journal of Biological Chemisty 272，8227-8235，(1997)。该构建 体根据AR/GR共有增强子序列的随机诱变而开发得到。

ARTA Stable 1：

1.将Stable 1细胞以6,000细胞/孔接种到96孔板内的含有10％ 经活性炭和葡聚糖处理的FBS(HyClone Cat.No.：SH30068.02)、50 mM HEPES缓冲液(Gibco BRL，Cat.No.：15630-080)、1×MEM丙酮 酸钠(Gibco BRL，Cat.No.：11360-070)、0.5×抗生素-抗真菌药和800 μg/ml遗传霉素(Gibco BRL，Cat.No.：10131-035)的高葡萄糖无酚红 DMEM(Gibco BRL，Cat.No.：21063-029)中。

2.48小时后，采用LipofectAMINE PlusTM试剂(Gibco BRL，Cat. No.：10964-013)，将细胞用pGL3/2XDR-1/荧光素酶转染。具体地说， 将5ng/孔pGL3/2XDR-1/荧光素酶DNA和50ng/孔鲑精DNA(作为 载体)用5μl/孔Opti-MEMem培养基(Gibco BRL，Cat.No.：31985-070) 稀释。向其中加入0.5μl/孔Plus试剂。将该混合物于室温孵育15分 钟。在一个单独的容器中，将0.385μl/孔LipofectAMINE试剂用5μl/ 孔Opti-MEM稀释，然后，将该DNA混合物与LipofectAMINE混合 物混合，于室温再孵育15分钟。在此期间，除去细胞中的培养基， 更换为60μl/孔的Opti-MEM。向其中加入10μl/孔的 DNA/LipofectAMINE转染混合物。将细胞孵育4小时。

3.从细胞中除去转染混合物，用90μl以上#1中的培养基取代。

4.在每孔中加入10μl/孔的合适药物稀释液。

5.24小时后，用Steady-GloTM Luciferase Assay System(荧光素 酶测定系统)，按照生产商的说明(Promega，Cat.No.：E2520)测定活 性。

ARTA stable 2

1.将Stable 2细胞以6,000细胞/孔接种到96孔板内的含有10％ 经活性炭和葡聚糖处理的FBS(HyClone Cat.No.：SH30068.02)、50 mM HEPES缓冲液(Gibco BRL，Cat.No.：15630-080)、1×MEM丙酮 酸钠(Gibco BRL，Cat.No.：11360-070)、0.5×抗生素-抗真菌药、800 μg/ml遗传霉素(Gibco BRL，Cat.No.：10131-035)和800μg/ml潮霉素β (Gibco BRL，Cat.No.：10687-010)的高葡萄糖无酚红DMEM(Gibco BRL，Cat.No.：21063-029)中。

2.48小时后，除去所述细胞中的培养基，更换为90μl新鲜培 养基。在每孔中加入10μl/孔的合适药物稀释液。

3.24小时后，用Steady-GloTM Luciferase Assay System(荧光素 酶测定系统)，按照生产商的说明(Promega，Cat.No.：E2520)测定活 性。

参见Jacek Ostrowski等于2001年6月20日申请的题为“Cell Lines and Cell-BasedAssays for Identification of Androgen Receptor Modulators”的美国专利顺序号09/885,831(档案号为D0177)，该专 利申请通过引用全部结合到本文中。

增殖测定

鼠类乳腺细胞增殖测定：

通过在增殖测定中，用来源于Shionogi肿瘤的雄激素反应性小 鼠乳腺细胞系(Hiraoka等，Cancer Res.，47，6560-6564(1987))测试本发 明化合物，未测定本发明化合物(“试验化合物”)调节AR功能的能 力。通过按照最初在Tetuo等，Cancer Research 25，1168-1175(1965) 中描述的通用方法，将肿瘤碎片传代，建立了亲代Shionogi系的稳 定AR依赖性克隆。通过上述程序，分离出一个稳定系-SC114，对 其定性并用于测试实施例化合物。将SC114细胞在有或无所述试验 化合物的情况下孵育72小时，然后如Suzuki等在J.Steroid Biochem. Mol.Biol.37，559-567(1990)中所述方法，定量测定作为替代物终点 的DNA中的[3H]-胸苷掺入量，以评价细胞数，从而评价增殖率。将 SC114细胞系保持在含有10-8M睾酮和2％DCC处理的FCS的MEM 中。为进行该测定，将细胞接种于96孔微量培养板内的维持培养基 中，并于37℃孵育。第二天，将培养基更换为含有(拮抗剂模式)或不 含(激动剂模式)10-8M睾酮和含有浓度范围为10-10-10-5M的本发 明试验化合物的无血清培养基[含有0.1％BSA的Ham’s F-12：MEM (1∶1，v/v)]中。每种样品进行双份测定。化合物的稀释在Biomek 2000 实验室工作站上进行。72小时后，每孔加入0.44uCi [3H]-胸苷 (Amersham)，再孵育2小时，然后用胰蛋白酶处理，将细胞收获到 GF/B滤器上。将Micro-scint PS加入至滤器上，然后在Beckman TopCount上计数。

对于拮抗剂模式，抑制百分比如下计算：

％抑制＝100×(1-[平均值样品-平均值空白/平均值对照-平均值空白])

将数据作图，定量测定抑制50％所述[3H]-胸苷掺入的化合物浓度( IC50)。

对于激动剂模式，％对照是指与用天然激素(在这种情况下为 DHT)观测到的最大效应相比的试验化合物的效应，并且如下计算：

％对照＝100×(平均值样品-平均值空白)/(平均值对照-平均值空白)

将数据作图，并且定量测定抑制50％所述[3H]-胸苷掺入的化合 物浓度(EC50)。

测量GR诱导的AP-1反式阻抑的体外测定法：

所述AP-1测定是基于细胞的荧光素酶报道分子测定。使含有内 源糖皮质激素受体的A549细胞用与荧光素酶基因连接的AP-1 DNA 结合部位稳定地转染。然后使细胞在RPMI+10％胎牛血清(活性炭处 理的)+青霉素/链霉素与0.5mg/ml遗传霉素中生长。在所述测定前 一天，以大约40000细胞/孔接种细胞。在测定当天，通过吸取，取 出培养基，每孔加入20μl测定缓冲液(无酚红RPMI+10％FCS(活 性炭处理的)+青霉素/链霉素)。此时，向每孔中加入20μl测定缓冲 液(对照实验)、本发明化合物(“试验化合物”)(溶于DMS中，并且 以不同浓度加入)或地塞米松(100nM，溶于DMSO中，阳性对照)。 然后将平板于37℃预孵育15分钟，然后用10ng/ml PMA刺激细胞。 然后，将平板于37℃孵育7小时，随后向每孔中加入40μl荧光素酶 底物试剂。通过在发光计中通过分析测定活性，与用缓冲液或地塞 米松处理的对照实验结果对比。将活性以与用单独的10ng/ml PMA 的缓冲液对照相比的报道系统的抑制百分比表示。≤10μM浓度的地 塞米松-对照，抑制活性通常达65％。在试验化合物≤10μM浓度下， 表现出抑制PMA达50％或更高的诱导的试验化合物被认为具有活 性。

前列腺湿重测定法-AR拮抗剂测定：

用一种公认的给定化合物的标准抗雄激素活性试验中-未成熟 雄性大鼠模型，研究了本发明化合物作为AR拮抗剂的活性，如L.G. Hershberger等，Proc.Soc.Expt.Biol.Med.，83，175(1953)；P.C.Walsh 和R.F.Gittes，“Inhibition of extratesticular stimuli to prostate growth in the castrated rat by antiandrogens”，Endocrinology，86，624(1970)；和B.J. Furr等，“ICI 176,334：A novel non-steroid，peripherally selective antiandrogen”，J.Endocrinol.，113，R7-9(1987)(所述文献的公开内容通 过引用结合到本文中)中所述。

该测定法的根据在于：雄性副性器官(例如前列腺和精囊)在生殖 功能方面起重要作用这一事实。通过持续存在血清睾酮(T)，这些腺 体被刺激生长并且维持其体积和分泌功能，睾酮是睾丸中莱迪希氏 细胞在垂体黄体生成素(LH)和促卵泡激素(FSH)控制下产生的主要血 清雄激素(＞95％)。睾酮在前列腺中被5α-还原酶转化为更具活性的 形式-二氢睾酮(DHT)。与肾上腺雄激素在65岁男性中贡献总DHT 的40％相比，肾上腺雄激素在大鼠前列腺中也贡献总DHT的大约 20％。F.Labrie等Clin.Invest.Med.，16，475-492(1993)。然而，这并 不是主要的途径，因为在动物和人类中，在不伴随肾上腺切除术的 情况下，阉割都可导致前列腺和精囊的几乎完全退化。因此，在正 常条件下，肾上腺并不支持前列腺组织的显著生长，M.C.Luke和D. S.Coffey，″The Physiology of Reproduction″.E.Knobil和J.D.Neill编 著，1，1435-1487(1994)。由于雄性性器官是对雄激素活性调节反应最 强的组织，所以用这一模型来测定未成熟阉割大鼠中副性器官的雄 激素依赖性生长。

在metofane麻醉下，将雄性未成熟大鼠(19-20日龄Sprague- Dawley，Harlan Sprague-Dawely)阉割。手术后5天，对这些阉割大鼠 (60-70g，23-25日龄)给药3天。皮下(s.c.)给予动物花生油溶媒中的1 mg/kg丙酸睾酮(TP)，通过管饲法(p.o.)口服给予溶于/混悬于80％PEG 400和20％Tween 80(PEGTW)中的抗雄激素试验化合物(本发明的化 合物)。以0.5ml溶媒/100g体重的剂量(v/w)给服动物。实验组如下：

1.对照溶媒

2.丙酸睾酮(TP)(3mg/大鼠/天，皮下)

3.TP加Casodex(卡索地司)(p.o.给药，在PEGTW中，QD)，一 种公认的抗雄激素，作为参比化合物。

4.为了证明拮抗剂活性，以一系列剂量给予(p.o.，在PEGTW中， QD)本发明的化合物(“试验化合物”)与TP(s.c.，在第2组中 给予)。

5.为了证明激动剂活性，以一系列剂量给予(p.o.，在PEGTW中， QD)单独的本发明化合物(“试验化合物”)。

在3天治疗结束时，处死动物，将腹侧前列腺称重。为了比较 得自不同实验的数据，首先将性器官重量以mg/100g体重标准化， 将TP所诱导的器官重量的增加量认定为最大增加值(100％)。顺次导 用ANOVA和单尾Student或Fischer正合检验(exact test)进行统计分 析。

性器官的增重和减重反映出随血清雄激素浓度而变的细胞数 (DNA含量)和细胞质量(蛋白质含量)的变化。参见Y.Okuda等，J.Urol.， 145，188-191(1991)，该文献的公开内容通过引用结合到本文中。因 此，器官湿重的测量结果足以表明雄激素和雄激素拮抗剂的生物活 性。在未成熟阉割大鼠中，外源性雄激素的替代以剂量依赖性方式 增强了精囊(SV)和腹侧前列腺(VP)。

当给予3mg/大鼠/天的睾酮(T)或1mg/大鼠/天的丙酸睾酮(TP)达 3天时，器官重量的最大增加量为4-5倍。T和TP的EC50分别约为 1mg和0.03mg。VP和SV的重量增加也与血清T和DHT浓度的增 加相关。虽然给予T显示出皮下注射后2小时的T和DHT的血清浓 度高于TP5倍，但此后，这些高水平下降非常快。相反，在TP治疗 的动物中T和DHT的血清浓度在24小时期间相当一致，因此，TP 显示出高于游离T约10-30倍的效力。

在该未成熟阉割大鼠模型中，也将已知的AR拮抗剂(卡索地司) 与0.1mg TP(ED80)同时给予，以剂量依赖性方式抑制睾酮介导的VP 和SV的重量增加。当口服给药或皮下给药时，拮抗剂效应相似。本 发明的化合物也通过抑制睾酮介导的VP和SV的重量增加而显示出 AR拮抗剂活性。

肛门提肌和前列腺湿重测定-AR激动剂测定：

在未成熟雄性大鼠模型中，研究了本发明化合物作为AR激动 剂的活性，这是给定化合物在肌肉中合成代谢作用和在性器官中维 持作用(sustaining effect)的一种公认的试验，如L.G.Hershberger等， Proc.Soc.Expt.Biol.Med.，83，175(1953)；B.L.Beyler等，″Methods for evaluating anabolic and catabolic agents in laboratory animals″，J.Amer. Med.Women’s Ass.，23，708(1968)；H.Fukuda等，″Investigations of the levator ani muscle as an anabolic steroid assay″，Nago Dai.Yak.Ken.Nem. 14，84(1966)中所述，所述文献的公开内容通过引用结合到本文中。

该测定法的基础在于已充分确定的雄激素类药对动物和男性中 肌肉组织和副性器官的维持和生长的作用。已经充分地表征了雄激 素类固醇(例如睾酮(T))维持肌肉质量的能力。阉割后将动物或人类用 外源性T治疗，可导致肌萎缩的逆转。在大鼠肛门提肌中T对肌萎 缩的作用已被很好地表征。M.Masuoka等，″Constant Cell population in normal，testosterone  deprived and testosterone stimulated levator ani muscles″Am.J.Anat.119，263(1966)；Z.Gori等，″Testosterone hypertrophy of levator ani muscle of castrated rats.I.Quantitative data″ Boll.-Soc.Ital.Biol.Sper.42，1596(1966)；Z.Gori等，″Testosterone hypertrophy of levator ani muscle of castrated rats.II.Electron microscopic observations″Boll.-Soc.Ital.Biol.Sper.42，1600(1966)；A. Boris等，Steroids 15，61(1970)。如上所述，已对雄激素对雄性副性器 官(例如前列腺和精囊)维持的作用进行了充分的描述。阉割导致前列 腺和精囊的快速退化和萎缩。这种效应可以通过外源性加入雄激素 而被逆转。由于肛门提肌和雄性性器官都是对雄激素类药作用最具 反应性的组织，所以用这一模型来测定未成熟阉割大鼠中肛门提肌 和副性器官中萎缩的雄激素依赖性逆转。从销售商(Taconic)处获得阉 割的性成熟大鼠(200-250g，6-8周龄，Sprague-Dawley，Harlan)。将大 鼠分为多组，用以下药物之一每日治疗达7-14天：

1.对照溶媒

2.丙酸睾酮(TP)(3mg/大鼠/天，皮下)

3.TP加卡索地司(p.o.给药，在PEGTW中，QD)，一种公认的抗 雄激素，作为参比化合物。

4.为了证明拮抗剂活性，以一系列剂量给予(p.o.，在PEGTW中， QD)本发明的化合物(“试验化合物”)与TP(s.c.，在第2组中 给予)。

5.为了证明激动剂活性，以一系列剂量给予(p.o.，在PEGTW中， QD)单独的本发明化合物(“试验化合物”)。

在所述7-14天的治疗结束时，用二氧化碳处死动物，将肛门提 肌、精囊和腹侧前列腺称重。为了比较得自不同实验的数据，首先 将肛门提肌和性器官重量以mg/100g体重标准化，将TP所诱导的器 官重量的增加值认定是最大增加值(100％)。用Super-anova(单因素) 进行统计分析。

性器官的增重和减重反映出随血清雄激素浓度而变的细胞数 (DNA含量)和细胞质量(蛋白质含量)的变化。参见Y.Okuda等，J.Urol.， 145，188-191(1991)，该文献的公开内容通过引用结合到本文中。因 此，器官湿重的测量结果足以表明雄激素和雄激素拮抗剂的生物活 性。在未成熟阉割大鼠中，外源性雄激素的替代以剂量依赖性方式 增强了肛门提肌、精囊(SV)和前列腺。

当给予3mg/大鼠/天的睾酮(T)或1mg/大鼠/天的丙酸睾酮(TP)达 3天时，器官重量的最大增加为4-5倍。T和TP的EC50分别约为1mg 和0.03mg。VP和SV的重量增加量也与血清T和DHT浓度的增加 相关。虽然给予T显示出皮下注射后2小时的T和DHT的血清浓度 高于TP5倍，但此后，这些高水平非常快地下降。相反，在TP治疗 的动物中T和DHT的血清浓度在24小时期间相当一致，因此，TP 显示出高于游离T约10-30倍的效力。

MDA PCa2b人前列腺Zenograft测定：

体内抗肿瘤试验：在Balb/c nu/nu裸鼠体内维持MDA-PCa-2b人 前列腺肿瘤。用从供体小鼠获得的肿瘤碎片，使肿瘤在成年雄性裸 鼠(4-6周龄)中作为皮下移植物繁殖。每5-6周进行肿瘤传代。

为进行抗肿瘤功效试验，在试验开始时，将需要测定有意义反 应的所需数目的动物集中，用13号套针给每只动物皮下植入肿瘤碎 片(约50mg)。使肿瘤生长至大约100-200mg(排除超出该范围的肿 瘤)，将动物平均分配到不同的治疗组和对照组中。每只动物的治疗 基于个体的体重。每日检查受治疗动物的治疗相关毒性/死亡率。在 治疗开始前，给每组动物称重(Wt1)，然后在最后一剂治疗之后再次 称重(Wt2)。体重之差(Wt2-Wt1)提供了对治疗相关毒性的度量。

每周两次通过用卡尺测量肿瘤，来测定肿瘤反应，直至肿瘤达 到0.5gm的预定“目标”大小。根据公式：肿瘤重量＝(长度×宽度 2)÷2，估计肿瘤重量(mg)。

肿瘤反应的终点以肿瘤生长抑制(％T/C)(定义为经治疗肿瘤的平 均肿瘤重量(T)与对照组平均肿瘤重量(C)之比)来表示。

为了评估肿瘤细胞的杀伤力，首先用以下公式计算肿瘤体积加 倍的时间：

TVDT＝对照肿瘤达到目标大小的平均时间(天数)-对照肿瘤达 到一半目标大小的平均时间(天数)，以及

log细胞杀伤＝(T-C)÷(3.32×TVDT)

用Gehan广义Wilcoxon检验进行数据的统计学评估。

Dunning前列腺肿瘤：

Dunning R3327H前列腺肿瘤是前列腺的一种自发衍生的充分分 化的雄激素反应性腺癌(Smolev JK，Heston WD，Scott WW和Coffey DS，Cancer Treat Rep.61，273-287(1977))。根据其高度雄激素依赖性 和在完整雄性大鼠中的可再现性生长，选择R3327H亚系的生长物。 因此，这一模型和这种肿瘤的其它亚系被广泛用来评估抗雄激素(例 如氟他胺和比卡鲁胺/卡索地司)的体内抗肿瘤活性(Maucher A.和von Angerer，J.Cancer Res.Clin.Oncol.，119，669-674(1993)，Furr B.J.A. Euro.URL.18(suppl.3)，2-9(1990)，Shain S.A.和Huot Ri.J.Steriod Biochem.31，711-718(1988))。

在研究开始时，将Dunning肿瘤碎片(约4×4mm)皮下移植至成 熟雄性Copenhagen大鼠(6-7周龄，Harlan-Sprague Dawley，Indianapolis， MD)的胁腹。移植后约6周，将带有可测量体积(约80-120mm2)肿瘤 的动物随机分为多个治疗组(8-10只大鼠/组)，然后开始治疗。将一 组大鼠阉割，用作肿瘤生长的阴性对照。将动物每日用本发明化合 物、标准抗雄激素(例如比卡鲁胺)或溶媒(对照)治疗平均10-14周。 将试验化合物溶于含10％聚乙二醇和0.05％Tween 80的1％羧甲基 纤维素-PEG/CMC(Sigma，St Louis，MO)溶媒(2.5ml/kg体重)中。典 型的治疗性试验将包括每种标准品或试验化合物的三个逐步上升剂 量(范围300-3mg/kg)的三个组。

溶媒(对照)组中的肿瘤达到1500-2500mm3，而阉割动物组在14 周的观测期间通常显示出肿瘤停滞。与对照组动物相比，用20mg/kg 比卡鲁胺或氟他胺口服治疗的动物肿瘤体积预期在14周治疗后将显 示出减小40％。每周用游标卡尺(Froboz，Switzerland)，采用长度和宽 度的垂直测量法，测量肿瘤的大小。肿瘤体积用以下公式：长度× 宽度×高度＝体积，以mm3测量。用多重ANOVA分析，然后通过 单尾非参数Studentt检验评估治疗组和对照组之间的统计学差异。

成熟大鼠前列腺重量分析：

用一种成熟雄性大鼠模型研究本发明化合物的活性，该模型是 上文所述肛门提肌和前列腺湿重测定法的一种变体。上述体内测定 法是公认用于测定给定化合物对肌肉的合成代谢作用和对性器官的 维持作用的测定方法，如以下文献中所述：L.G.Hershberger等，83 Proc.Soc.Expt.Biol.Med.，175(1953)；B.L.Beyler等，″Methods for evaluating anabolic and catabolic agents in laboratory animals″，23 J. Amer.Med.Women’s Ass.，708(1968)；H.Fukuda等，″Investigations of the levator ani muscle as an anabolic steroid assay″，14 Nago Dai.Yak. Ken.Nem.84(1966)，所述文献的公开内容通过引用结合到本文中。 该测定法的基础在于已充分确定的雄激素类药对动物和男性中肌肉 组织和副性器官的维持和生长的作用。

雄性副性器官(例如前列腺和精囊)在生殖功能方面起重要作用。 通过持续存在的血清睾酮(T)，刺激这些腺体的生长并且维持其体积 和分泌功能，睾酮是睾丸中莱迪希氏细胞在垂体黄体生成素(LH)和 促卵泡激素(FSH)控制下产生的主要血清雄激素(＞95％)。睾酮在前列 腺中被5α-还原酶转化为更具活性的形式-二氢睾酮(DHT)。与肾上 腺雄激素在65岁男性中贡献总DHT的40％相比，肾上腺雄激素在 大鼠前列腺中也贡献总DHT的大约20％。F.Labrie等16 Clin.Invest. Med.，475-492(1993)。然而，这并不是主要的途径，因为在动物和人 类中，在不伴随肾上腺切除术的情况下，阉割都可导致前列腺和精 囊的几乎完全退化。因此，在正常条件下，肾上腺并不支持前列腺 组织的显著生长，M.C.Luke和D.S.Coffey，″The Physiology of Reproduction″.E.Knobil和J.D.Neill编著，1，1435-1487(1994)。由 于雄性性器官和肛门提肌是对雄激素活性调节反应最强的组织，所 以用这一模型来测定成熟大鼠中调节雄激素受体途径的化合物的活 性。

除其对组织(例如前列腺、精囊和肌肉)的促有丝分裂活性外，睾 酮也充当其自身生物合成的负调节剂。睾丸莱迪希氏细胞中睾酮的 产生受从垂体中释放的循环LH水平的控制。LH水平本身受在下丘 脑中产生的LHRH水平的控制。血液中的睾酮水平用来抑制LHRH 的分泌，因此降低LH水平，最终降低循环睾酮水平。通过测量受本 发明化合物(“试验化合物”)作用时的LH血液水平，有可能测定所 述化合物在这种内分泌循环的下丘脑轴中的激动剂活性水平或拮抗 剂活性水平。

通过管饲法(p.o.)给对应组的Harlan Sprague Dawely大鼠(40-42 日龄，180-220g)口服给予溶于/悬浮于80％PEG 400和20％Tween 80 (PEGTW)中的所述试验化合物14天。两个对照组，一个为完整对照 组，一个为阉割对照组，仅给这两个对照组口服给予所述PEGTW溶 媒。以0.5ml溶媒/100g体重的剂量给动物服用(v/w)。实验组如下：

1.完整溶媒(p.o.PEGTW，QD)

2.对照溶媒(p.o.PEGTW，QD)

3.比卡鲁胺(Casodex(卡索地司)，一种公认的抗雄激素，作为 参比化合物)或一种本发明化合物，p.o.，在PEGTW中，QD， (按一系列剂量)。

在14天的治疗结束时，处死动物，手术取出腹侧前列腺、精囊 和肛门提肌，称重。为了比较得自不同实验的数据，首先将器官重 量以mg/100g体重标准化，然后以完整组中相应器官的所述数值的 百分比来表示。

用Biotrak[125I]试剂盒(Amersham Pharmacia Biotek)，按照生产 商的说明书，定量测定大鼠黄体生成素(rLH)。该测定法基于血清中 存在的LH与Amerlex-M微珠/抗体悬浮液竞争结合[125I]rLH。将与 所述血清温育并且随后洗涤后剩余的放射性推测出标准曲线，得到 一个读数(ng/ml)。

性器官和肛门提肌的增重和减重反映出随血清雄激素浓度而变 的细胞数(DNA含量)和细胞质量(蛋白质含量)的变化。参见Y.Okuda 等，J.Urol.，145，188-191(1991)，该文献的公开内容通过引用结合到 本文中。因此，器官湿重的测量结果足以表明雄激素和雄激素拮抗 剂的生物活性。在成熟大鼠测定中，活性激动剂对一种或多种雄激 素效应器官(肛门提肌、前列腺、精囊)的重量没有作用，或者将增加 一种或多种雄激素效应器官(肛门提肌、前列腺、精囊)的重量，并且 对LH分泌没有作用或者有抑制作用。具有拮抗剂活性的化合物将增 加一种或多种雄激素效应器官(肛门提肌、前列腺、精囊)的重量，并 且对LH分泌没有作用或者有降低的抑制作用。

CWR22人前列腺Zenograft测定：

体内抗肿瘤试验：在Balb/c nu/nu裸鼠体内维持CWR22人前列 腺肿瘤。用从供体小鼠获得的肿瘤碎片，在成年雄性裸鼠(4-6周龄) 中，使肿瘤作为皮下移植物繁殖。每5-6周进行肿瘤传代。

为进行抗肿瘤功效试验，在试验开始时，将需要测定有意义反 应的所需数目的动物集中，用13号套针给每只动物皮下植入肿瘤碎 片(约50mg)。让肿瘤生长至大约100-200mg(排除超出该范围的肿 瘤)，然后将动物平均分配到不同的治疗组和对照组中。每只动物的 治疗基于个体的体重。每日检查受治疗动物的治疗相关毒性/死亡率。 在治疗开始前，给每组动物称重(Wt1)，然后在最后一剂治疗之后再 次称重(Wt2)。体重之差(Wt2-Wt1)提供了对治疗相关毒性的度量。

通过每周两次用卡尺测量肿瘤来测量肿瘤反应，直至肿瘤达到 0.5gm的预定“目标”大小。根据公式：肿瘤重量＝(长度×宽度2)÷ 2，估计肿瘤重量(mg)。

肿瘤反应的终点以肿瘤生长抑制(％T/C)来表示，定义为经治疗 肿瘤的平均肿瘤重量(T)与对照组平均肿瘤重量(C)之比。

为了评估肿瘤细胞的杀伤力，首先用以下公式计算肿瘤体积加 倍的时间：

TVDT＝对照组肿瘤达到目标大小的平均时间(天数)-对照肿瘤 达到一半目标大小的平均时间(天数)，以及

log细胞杀伤＝(T-C)÷(3.32×TVDT)

用Gehan广义Wilcoxon检验进行数据的统计学评估。

以下实施例说明本发明的实施方案，但并不是限制本发明的范 围。在某些实施例中，首先制备某种式I的化合物，随后将该化合物 用于进一步制备一种或多种其它式I化合物或其盐。在本文中描述的 用于制备某种式I化合物或其盐的方法在适当的情况下可用于制备本 发明的其它化合物。

缩写

在本文中使用以下缩写：

DBU＝1，8-二氮杂二环[5.4.0]十一碳-7-烯

4-DMAP＝4-二甲氨基吡啶

ee＝对映体过量

DMF＝二甲基甲酰胺

EtOAc＝乙酸乙酯

LDA＝二异丙基氨基化锂

Hünig碱＝N，N-二异丙基乙胺

Me＝甲基

RT＝保留时间

TFA＝三氟乙酸

THF＝四氢呋喃

TLC＝薄层色谱

TMS＝三甲基甲硅烷基

pTSA＝对甲苯磺酸

Δ＝加热

t-Bu＝叔丁基

PhCH3＝甲苯

Pd/C＝披钯碳

TsCI＝甲苯磺酰氯

TBSOTf＝三氟甲磺酸叔丁基二甲基甲硅烷基酯

TBS＝叔丁基二甲基甲硅烷

MeI＝甲基碘

(BOC)2O＝重碳酸二叔丁酯

TEA＝三乙胺

n-BuLi＝正丁基锂

rt＝室温

LC＝液相色谱

Ts＝甲苯磺酰基

Ph＝苯基

EtOH＝乙醇

DCE＝二氯乙烷

DMSO＝二甲基亚砜

Ra-Ni＝阮内镍

MS＝分子筛

MS(ES)＝电离喷雾质谱

mCPBA＝间氯过氧苯甲酸

sat＝饱和的

AcOH＝乙酸

MeOH＝甲醇

Et2O＝乙醚

Ac＝乙酰基

DEAD＝偶氮二甲酸二乙酯

h＝小时

Et＝乙基

WSDCC＝水溶性二羰基二酰亚胺，盐酸1-(3-二甲氨基丙基)-3- 乙基碳二亚胺

TBAF＝氟化四丁基铵

DBAD＝偶氮二甲酸二叔丁酯

DCC＝二环己基碳二亚胺

Wilkinson催化剂＝RhCl(PPh3)3

ADDP＝1，1-[偶氮二羰基]联哌啶

DMA＝二甲基乙酰胺

DME＝1，2-二甲氧基乙烷

BOP＝六氟合磷酸苯并三唑-1-基氧基三(二甲氨基)-鏻

HRMS＝高分辨质谱

TBME＝MTBE＝甲基·叔丁基醚(即2-甲氧基-2-甲基-丙烷)

TiCl2Cp2＝二氯化双(环戊二烯基)合钛

DPPA＝二苯基磷酰叠氮化物

HMPA＝六甲基磷酰胺

V％＝％体积

BH3·DMS＝硼烷·硫酸二甲酯

vvm＝气体体积/液体体积/分钟

                            实施例1

(3aα，4α，7α，7aα)-2-(4-溴-3-甲基苯基)四氢-4，7-桥亚乙基噻喃并[3，4-c] 吡咯-1，3，8(2H，4H)-三酮(1C)

A.4-(叔丁基二甲基甲硅烷氧基)-2H-噻喃(1A)

将2，3-二氢-4H-噻喃-4-酮(1.50g，13.14mol，按Richards等，J.Org. Chem.46，4836-4842(1981)中所述方法合成)溶于CH2Cl2(130mL) 中，加入三乙胺(5.47mL，39.4mmol)。然后加入三氟甲磺酸叔丁基二 甲基甲硅烷基酯(3.62mL，15.8mmol)。10分钟后，于25℃下真空除 去挥发物。使所得的黄色油状物通过SiO2短柱，用3％TEA的己烷 溶液洗脱，得到1.82g(7.97mmol，61％)作为橙色油状物的化合物1A。

B.1-[4-溴-3-甲基苯基]-1H-吡咯-2，5-二酮(1B)

将4-溴-3-甲基苯胺(1.55g，8.33mmol)和马来酸酐(0.898g，9.16 mmol)溶于乙酸(10mL)中，于115℃加热12小时。然后将反应物冷 却至25℃，真空除去乙酸。将所得的残余物悬浮于5％K2CO3(100mL) 中，搅拌25分钟，然后过滤并用水漂洗。然后将所述物质真空干燥， 得到1.65g(6.20mmol，74％)作为浅褐色固体的化合物1B。HPLC：100％， 2.96min(保留时间)(YMC S5 ODS柱，4.6×50mm，用含有0.1％TFA 的10-90％甲醇水溶液在4分钟内洗脱，4mL/min，于220nm检测)。

C.(3aα，4α，7α，7aα)-2-(4-溴-3-甲基苯基)四氢-4，7-桥亚乙基噻喃并[3，4- c]吡咯-1，3，8(2H，4H)-三酮(1C)

将化合物1A(0.313g，1.41mmol)和化合物1B(0.250g，0.94mmol) 溶于甲苯中，加热至回流5小时。然后将氩气流通入反应瓶而除去 甲苯。之后将残余物通过SiO2快速色谱纯化，用20％己烷的氯仿溶 液洗脱。得到0.168g作为黄色固体的烯醇醚中间体。将所述烯醇醚 中间体溶于二氯乙烷(2.0mL)中，加入TFA(0.25mL)。0.5小时后， 将反应用饱和碳酸氢钠水溶液猝灭，用CH2Cl2(2×30mL)萃取。将有 机物经无水硫酸钠干燥并蒸发，得到作为白色固体的0.079 g(0.21mmol，22％)的化合物1C。HPLC：99％，3.010min(保留时 间)(YMC S5 ODS柱，4.6×50mm，用含有0.1％TFA的10-90％甲醇 水溶液在4分钟内洗脱，4mL/min，于220nm检测)，MS(ES)：m/z 396.9[M+NH4]+。

                                    实施例2

(3aα，4α，7α，7aα)-2-(4-溴-3-甲基苯基)四氢-4，7-桥亚乙基噻喃并[3，4-c] 吡咯-1，3，8(2H，4H)-三酮5，5-二氧化物(2)

将化合物1C(0.040g，0.11mmol)溶于CH2Cl2(4.0mL)中，冷却 至0℃。加入m-CPBA(60％纯度，0.061g，0.210mmol)，然后将反应 物温热至25℃。1小时后，在剧烈搅拌下加入饱和碳酸氢钠和饱和 亚硫酸钠的1∶1混合物(20mL)。15分钟后，将混合物用CH2Cl2(2×30 mL)萃取，有机物经无水硫酸钠干燥，得到作为白色固体的0.031 g(0.075mmol，71％)的化合物2。不必进行纯化。HPLC：78％，2.290min (保留时间)(YMC S5 ODS柱，4.6×50mm，用含有0.1％TFA的10-90％ 甲醇水溶液在4分钟内洗脱，4mL/min，于220nm检测)，MS(ES)：m/z 429.8[M+NH4]+。

                                实施例3

(3aα，4β，7β，7aα)-2-(3-氯苯基)六氢-4-甲基-4，7-环氧-1H-异吲哚- 1，3(2H)-二酮(3)

将3-氯苯胺(0.100g，0.787mmol)和3，6-桥氧-3-甲基六氢邻苯二 甲酸酐(0.172g，0.945mmol)溶于AcOH(2.0mL)中，并且加热至110 ℃11小时。然后将反应物冷却至25℃，倾至冷饱和碳酸钾水溶液中， 并且剧烈搅拌10分钟。然后将该溶液过滤并用水漂洗。将所得的滤 液真空干燥，得到作为白色固体的0.118g(0.404mmol，51％)的化合物 3。不必进行进一步纯化。HPLC：99％，2.510min(保留时间)(YMC S5 ODS柱，4.6×50mm，用含有0.1％TEA的10-90％甲醇水溶液在4分 钟内洗脱，4mL/min，于220nm检测)，MS(ES)：m/z292.32[M+H]+。

                               实施例4

(3aα，4α，7α，7aα)-和(3aα，4β，7β，7aα)-4-[(乙酰氧基)甲基]-3a，4，7，7a-四 氢-2-[3-(三氟甲基)苯基]-4，7-环氧-1H-异吲哚-1，3(2H)-二酮 (分别为4i和4ii)

于25℃将2-乙酰氧基甲基呋喃(0.599mL，4.78mmol)和1-[3-(三 氟甲基)-苯基]-1H-吡咯-2，5-二酮(0.500g，2.39mmol，按照实施例1B 描述的方法制备)溶于二氯甲烷(3.0mL)中。22小时后，真空除去挥 发物，所得的残余物经SiO2快速色谱纯化，用0-15％丙酮的二氯甲 烷溶液洗脱，得到0.438g(1.15mmol，48％)黄色油状物，为未被分离 的化合物4i和化合物4ii的2∶1混合物。HPLC：100％，3.093min(保 留时间)(YMC S5 ODS柱，4.6×50mm，用含有0.1％TFA的10-90％ 甲醇水溶液在4分钟内洗脱，4mL/min，于220nm检测)，MS(ES)：m/z 398.9[M+NH4]+。

                                    实施例5

(3aα，4α，7α，7aα)-和(3aα，4β，7β，7aα)-4-[(乙酰氧基)甲基]-六氢2-[3-(三 氟甲基)苯基]-4，7-环氧-1H-异吲哚-1，3(2H)-二酮(分别为5i和5ii)

将所述化合物4i和4ii的2∶1混合物(0.361g，0.948mmol)溶于乙 酸乙酯(25mL)中，加入Pd/C(10％Pd，0.2g)。通过气囊引入氢气， 将反应物于25℃搅拌4小时；然后通过硅藻土过滤并用乙酸乙酯漂 洗。真空浓缩，得到0.348g(0.908mmol，96％)黄色油状物，测定所述 油状物为未被分离的化合物5i和化合物5ii的2∶1混合物(未分离)。 HPLC：100％，2.900min(保留时间)(YMC S5 ODS柱，4.6×50mm，用 含有0.1％TFA的10-90％甲醇水溶液在4分钟内洗脱，4mL/min，于 220nm检测)，MS(ES)：m/z401.0[M+NH4]+。

                                 实施例6

(3aα，4α，7α，7aα)-和(3aα，4β，7β，7aα)-3a，4，7，7a-四氢-5-(羟基甲基)-2-[3- (三氟甲基)苯基]-4，7-环氧-1H-异吲哚-1，3(2H)-二酮(分别为6i和6ii)

将1-[3-(三氟甲基)苯基]-1H-吡咯-2，5-二酮(0.500g，2.39mmol， 按照实施例1B描述的方法制备)和3-呋喃甲醇(0.412mL，4.78mmol) 溶于二氯甲烷(3.0mL)中，于25℃搅拌20小时。然后真空除去挥发 物，将所得的物质通过SiO2快速色谱纯化，用氯仿/丙酮洗脱，得到 0.379g(1.12mmol，47％)的化合物6i和0.220g的化合物6ii，这两种 化合物都为白色固体。化合物6i：HPLC：100％，2.197min(保留时 间)(YMC S5 ODS柱，4.6×50mm，用含有0.1％TFA的10-90％甲醇水 溶液在4分钟内洗脱，4mL/min，于220nm检测)，MS(ES)：m/z338.0 [M-H]-。化合物6ii：HPLC：100％，2.477min(保留时间)(YMC S5 ODS 柱，4.6×50mm，用含有0.1％TFA的10-90％甲醇水溶液在4分钟内 洗脱，4mL/min，于220nm检测)，MS(ES)：m/z338.0[M-H]-。

                            实施例7

(3aα，4α，7α，7aα)-3a，4，7，7a-四氢-5-(羟基甲基)-4-甲基-2-[3-(三氟甲基) 苯基]-4，7-环氧-1H-异吲哚-1，3(2H)-二酮(7)

将2-甲基-3-呋喃甲醇(0.537g，4.78mmol)和1-[3-(三氟甲基)-苯 基]-1H-吡咯-2，5-二酮(0.500g，2.39mmol，按照实施例1B描述的方 法制备)溶于二氯乙烷(2.0mL)中，于25℃搅拌20小时。然后真空浓 缩反应物，所得的物质通过SiO2快速色谱纯化，用乙酸乙酯/二氯甲 烷洗脱，得到0.317g(0.897mmol，37.5％)的化合物7，为白色固体。 在色谱后没有分离到其它可能的异构体。HPLC：100％，2.197min(保 留时间)(YMC S5 ODS柱，4.6×50mm，用含有0.1％TFA的10-90％甲 醇水溶液在4分钟内洗脱，4mL/min，于220nm检测)，MS(ES)：m/z 351.9[M-H]-。

                                制实施例8

(3aα，4β，7β，7aα)-2-[3，5-双(三氟甲基)苯基]六氢-4，7-环氧-1H-异吲哚- 1，3(2H)-二酮(8)

将3，5-双(三氟甲基)-苯胺(0.017g，0.075mmol)溶于乙酸(0.300 mL)中，然后转移到带有密封盖(septa cap)的1.5mL锥形小瓶中。如 上所述制备另外95种胺的储备液。向每个上述小瓶中加入0.40mL (0.12mmol)外-7-氧杂二环[2.2.1]庚烷-2，3-二甲酸酐的乙酸储备液。然 后密封小瓶，于110℃加热11小时。冷却至25℃时，从小瓶取下帽， 真空除去乙酸。向每个小瓶中加入1mL丙酮/二氯甲烷的2∶1混合物， 然后将小瓶于40℃加热1小时。当所有产物都在溶液中时，将其通 过机器人转移到带有用0.2mL水预先润湿的粗玻璃料的过滤管中。 使氮气吹过每个管，直至除去挥发性有机物。然后向各管中加入1.5 mL 10％碳酸钾水溶液，然后于25℃剧烈振摇15分钟。将管抽空， 再密封，向各管中加入1.0mL水，然后振摇。再次将管抽空，并用 水第二次洗涤。然后将各管中的所得残余物真空干燥48小时。干燥 后，向各管中加入1.0mL 20％TFA的二氯甲烷溶液，将管架振摇30 分钟。然后将管排空到有预先配衡的(pre-tared)定制微量管的96孔板 中。分析各管中产物的纯度(分析型LC)和特性(LC-MS)。将管中物真 空浓缩，然后称重以得到产量。含有3，5-双三氟甲基苯胺和外-7-氧 杂二环[2.2.1]庚烷-2，3-二甲酸酐的反应物的管，得到0.022 g(0.058mmol，77％)的化合物8，为白色固体。HPLC：94％，4.03min(保 留时间)(YMC S5 ODS柱，4.6×50mm，用含有0.1％TFA的10-90％甲 醇水溶液在4分钟内洗脱，4mL/min，于220nm检测)，MS(ES)：m/z 434.2[M+Na+MeOH]+。在其余95种的另外反应中，得到纯度＞70％ 且产量＞5mg的总共80种最终的化合物。几种样品需要进一步纯化， 所述纯化通过SiO2短柱进行，用二氯甲烷/丙酮洗脱。参见以下表2。

                                实施例9

(3aα，4α，7α，7aα)-2-(4-苯基)八氢-1，3-二氧代4，7-桥亚乙烯基-5H-吡 咯并[3，4-c]吡啶-5-甲酸苯酯(9)

将1-[4-溴苯基]-1H-吡咯-2，5-二酮(0.250g，0.992mmol，如实施例 1B中所述方法制备)和1(2H)-吡啶甲酸苯基甲酯(0.299g，1.49mmol， 如Richard等，J.Org.Chem.46，4836-4842(1981)中所述方法合成)溶 于甲苯中，并于85℃加热1小时。冷却至25℃时后，真空除去甲苯。 将所得的残余物溶于最少量的氯仿中，通过加入己烷沉淀所述产物。 于25℃1小时后，将产物过滤，用冷20％己烷的氯仿溶液漂洗，得 到0.243g(0.536mmol，54％)白色固体状的化合物9(单一异构体)。 HPLC：100％，3.393min(保留时间)(YMC S5 ODS柱，4.6×50mm，用 含有0.1％TFA的10-90％甲醇水溶液在4分钟内洗脱，4mL/min，于 220nm检测)，MS(ES)：m/z454.98[M+H]+。

                                  实施例10

(3aα，4α，7α，7aα)-2-(4-溴苯基)八氢-1，3-二氧代-4，7-桥亚乙烯基-5H-吡 咯并[3，4-c]吡啶-5-甲酸苯基甲酯(10)

将1-[3-(三氟甲基)苯基]-1H-吡咯-2，5-二酮(3.78g，15.7mmol，按 照实施例1B的方法制备)和1(2H)-吡啶甲酸苯基甲酯(4.00g，18.8 mmol，按Richard等，J.Org.Chem.46，4836-4842(1981)中所述方法合 成)溶于甲苯中，并于80℃加热3小时。冷却至25℃后，真空除去甲 苯，所得的残余物通过SiO2快速色谱纯化，用甲醇/二氯甲烷洗脱， 得到3.20g(7.01mmol，45％)的化合物10，为黄色油状物。HPLC：95％， 3.510min(保留时间)(YMC S5 ODS柱，4.6×50mm，用含有0.1％TFA 的10-90％甲醇水溶液在4分钟内洗脱，4mL/min，于220nm检测)，MS (ES)：m/z457.2[M+H]+。

                                 实施例11

(3aα，4α，7α，7aα)-六氢-2-[3-(三氟甲基)苯基]-4，7-桥亚乙基-1H-吡咯并 [3，4-c]吡啶-1，3(2H)-二酮三氟乙酸盐(11)

将化合物10(3.20g，7.01mmol)溶于100ml MeOH中，加入10％ Pd/C DeGussa催化剂(2.00g，催化剂)。然后通过气囊引入氢气。1小 时后，将反应物通过硅藻土过滤，用MeOH漂洗。真空除去挥发物， 所得的粗制物质通过反相制备型HPLC纯化，得到2.50g(5.70mmol， 81％)作为TFA盐(白色固体)的化合物11。HPLC：99％，1.843min(保 留时间)(YMC S5 ODS柱，4.6×50mm，用含有0.1％TFA的10-90％甲 醇水溶液在4分钟内洗脱，4mL/min，于220nm检测)，MS(ES)：m/z 325.12[M+H]+。

                                实施例12

(3aα，4α，7α，7aα)-5-乙酰基六氢-2-[3-(三氟甲基)苯基]-4，7-桥亚乙基- 1H-吡咯并[3，4-c]吡啶-1，3(2H)-二酮(12)

将化合物11(0.10g，0.23mmol)悬浮于THF(5.0mL)中，加入TEA (0.097mL，0.46mmol)，产生均相溶液。然后加入乙酰氯(0.033mL， 0.46mmol)。2小时后，将反应物用饱和碳酸氢钠水溶液猝灭，然后 用二氯甲烷(3×15mL)萃取。粗制物质通过制备型TLC纯化，用氯仿 /丙酮洗脱，得到0.067g(0.18mmol，79％)的化合物12，为无色油状 物。HPLC：99％，2.66min(保留时间)(YMC S5 ODS柱，4.6×50mm，用 含有0.1％TFA的10-90％甲醇水溶液在4分钟内洗脱，4mL/min，于 220nm检测)，MS(ES)：m/z 367.0[M+H]+。

                                   实施例13

(3aα，4α，7α，7aα)-5-苯甲酰基六氢-2-[3-(三氟甲基)苯基]-4，7-桥亚乙基- 1H-吡咯并[3，4-c]吡啶-1，3(2H)-二酮(13)

将化合物11(0.10g，0.23mmol)悬浮于THF(5.0mL)中，加入TEA (0.097mL，0.46mmol)，产生均相溶液。然后加入苯甲酰氯(0.053mL， 0.46mmol)。2小时后，将反应物用饱和碳酸氢钠水溶液猝灭，然后 用二氯甲烷(3×15mL)萃取。粗制物质经反相制备型HPLC纯化，得 到0.020g(0.047mmol，20％)的化合物13，为白色泡沫状物。HPLC：99％， 3.183min(保留时间)(YMC S5 ODS柱，4.6×50mm，用含有0.1％TFA 的10-90％甲醇水溶液在4分钟内洗脱，4mL/min，于220nm检测)，MS (ES)：m/z429.1[M+H]+。

                               实施例14

(3aα，4α，7α，7aα)-六氢-5-甲基-2-[3-(三氟甲基)苯基]-4，7-桥亚乙基-1H- 吡咯并[3，4-c]吡啶-1，3(2H)-二酮(14)

将化合物11(0.10g，0.23mmol)悬浮于THF(5.0mL)，加入TEA (0.097mL，0.46mmol)，产生均相溶液。加入硫酸二甲酯(0.043mL，0.46 mmol)，将反应物于25℃搅拌。14小时后，将反应物真空浓缩，粗 制物质通过制备型TLC纯化，用10％MeOH的二氯甲烷溶液洗脱， 得到0.030g(0.088mmol，39％)的化合物14，为白色固体。HPLC：100％， 1.797min(保留时间)(YMC S5 ODS柱，4.6×50mm，用含有0.1％TFA 的10-90％甲醇水溶液在4分钟内洗脱，4mL/min，于220nm检测)，MS (ES)：m/z339.21[M+H]+。

                                   实施例15

(3aα，4α，7α，7aα)-六氢-5-(苯基甲基)-2-[3-(三氟甲基)苯基]-4，7-桥亚乙 基-1H-吡咯并[3，4-c]吡啶-1，3(2H)-二酮三氟乙酸盐(15)

将化合物11(0.10g，0.23mmol)溶于DMF(5.0mL)中，加入K2CO3(0.063g，0.46mmol)。然后加入苄基溴(0.041mL，0.35mmol)。将反应 物于25℃搅拌1小时，然后过滤并浓缩。粗制物质通过反相制备型 HPLC纯化，得到0.055g(0.10mmol，43％)的化合物15，为白色固体。 HPLC：100％，2.31min(保留时间)(YMC S5 QDS柱，4.6×50mm，用含 有0.1％TFA的10-90％甲醇水溶液在4分钟内洗脱，4mL/min，于220 nm检测)，MS(ES)：m/z415.36[M+H]+。

                              实施例16

(3aα，4α，7α，7aα)-六氢-5-丙基-2-[3-(三氟甲基)苯基]-4，7-桥亚乙基-1H- 吡咯并[3，4-c]吡啶-1，3(2H)-二酮三氟乙酸盐(16)

将化合物11(0.10g，0.23mmol)溶于DMF(5.0mL)中，加入K2CO3(0.079g，0.57mmol)，然后加入1-溴丙烷(0.031mL，0.34mmol)。将 反应物于25℃搅拌6小时，然后过滤并真空浓缩。粗制物质经反相 制备型HPLC纯化，得到0.070g(0.15mmol，63％)的化合物16，为 白色固体。HPLC：100％，1.907min(保留时间)(YMC S5 ODS柱， 4.6×50mm，用含有0.1％TFA的10-90％甲醇水溶液在4分钟内洗脱，4 mL/min，于220nm检测)，MS(ES)：m/z340.22[M+H]+。

                                实施例17

(3aα，4α，4aβ，5aβ，6α，6aα)-2-[4-氰基-3-(三氟甲基)苯基]十氢-1，3-二氧 代-4，6-(亚氨基亚甲基)环丙[f]异吲哚-7-甲酸苯基甲酯(17)

将1-甲基-3-硝基-1-亚硝基胍(2.5g，17mmol)分次加入到于0℃ 的40％KOH/H2O(15mL)和Et2O(25mL)的溶液中。当加入完成后， 乙醚层变为黄色。于0℃30分钟后，于0℃将乙醚层倾至 (3aα，4α，7α，7aα)-2-[4-氰基-3-(三氟甲基)苯基]八氢-1，3-二氧代-4，7-桥 亚乙烯基-5H-吡咯并[3，4-c]吡啶-5-甲酸苯基甲酯(0.500g，1.09mmol， 按实施例10中所述方法制备)和Pd(OAc)2(0.010g)的THF(10mL)溶 液中。然后将反应物缓慢温热至25℃，搅拌24小时，然后通过硅藻 土过滤，用THF漂洗。然后粗制物质通过SiO2快速色谱纯化，用 MeOH/CH2Cl2洗脱，得到0.34g(0.69mmol，63％)的化合物17，为白 色固体，并且是单一的异构体。HPLC：100％，3.61min(保留时 间)(YMC S5 ODS柱，4.6×50mm，用含有0.1％TFA的10-90％甲醇水 溶液在4分钟内洗脱，4mL/min，于220nm检测)，MS(ES)：m/z 496.25 [M+H]+。

                                实施例18

(3aα，4α，4aβ，5aβ，6α，6aα)-4-[十氢-1，3-二氧代-4，6-(亚氨基亚甲基)环丙 [f]异吲哚-2-基]-2-(三氟甲基)苄腈(18)

将化合物17(0.200g，0.404mmol)溶于MeOH(20mL)中，加入 5％Pd/C(0.200g)。然后通过气囊引入氢气。3小时后，将反应物通 过硅藻土过滤，用MeOH漂洗，真空除去挥发物，得到0.130 g(0.360mmol，89％)化合物18，为白色固体。HPLC：100％，1.80min(保 留时间)(YMC S5 ODS柱，4.6×50mm，用含有0.1％TFA的10-90％甲 醇水溶液在4分钟内洗脱，4mL/min，于220nm检测)，MS(ES)：m/z 362.09[M+H]+。

                                    实施例19

(3aα，4α，4aβ，5aβ，6α，6aα)-4-[十氢-7-甲基-1，3-二氧代-4，6-(亚氨基亚甲 基)环丙[f]异吲哚-2-基]-2-(三氟甲基)苄腈(19)

将化合物18(0.100g，0.277mmol)溶于CH3CN(2.0mL)中。然后 加入TEA(0.19mL，1.4mmol)和MeI(0.052mL，0.83mmol)，将反应 物于25℃搅拌14小时。将反应物减压浓缩，使粗制物质在二氯甲烷 /水间分配，用CH2Cl2(3×15mL)萃取水层。将合并的有机物经无水 硫酸钠干燥。粗制物质经快速色谱纯化，用3％MeOH/CH2Cl2洗脱， 得到0.030g(0.080mmol，29％)的化合物19，为浅黄色固体。HPLC： 100％，1.720min(保留时间)(YMC S5 ODS柱，4.6×50mm，用含有 0.1％TFA的10-90％甲醇水溶液在4分钟内洗脱，4mL/min，于220nm 检测)，MS(ES)：m/z 376.11[M+H]+。

                               实施例20

(3aα，4β，7β，7aα)-4-(八氢-4，7-二甲基-1，3-二氧代-4，7-环氧-2H-异吲哚- 2-基)-2-(三氟甲基)苄腈(20B)

A.(3aα，4β，7β，7aα)-六氢-4，7-环氧异苯并呋喃-1，3-二酮(20A)

将新蒸馏的二甲基呋喃(1.60mL，15.3mmol)溶于CH2Cl2(2.0mL) 中，加入马来酸酐(1.0g，10.2mmol)中。将反应物于25℃搅拌16小 时，然后真空浓缩，得到黄色固体。将该固体溶于乙酸乙酯(30 mL) 中，加入10％Pd/C(0.200g，催化剂)。通过气囊引入氢气，将反应 物搅拌24小时。将反应混合物通过硅藻土过滤，用EtOAc漂洗，然 后真空浓缩，得到1.69g(8.61mmol，84％)化合物20A，为白色固体。 二维NOE实验证实所述结构指定为化合物20A的结构。

B.(3aα，4β，7β，7aα)-4-(八氢-4，7-二甲基-1，3-二氧代-4，7-环氧-2H-异吲 哚-2-基)-2-(三氟甲基)苄腈(20B)

将化合物20A(603mg，3.21mmol)、5-氨基-2-氰基三氟甲苯 (benzotrifluoride)(640mg，3.44mmol)和TsOH(10mg，催化量)的甲苯 (5mL)溶液在密封管中加热2天。将反应混合物冷却至室温，然后减 压浓缩。经硅胶快速色谱纯化，用50％EtOAc/己烷洗脱，得到400mg (1.10mmol，34％)的化合物20B，为白色固体。HPLC：99％，3.04min(保 留时间)(YMC S5 ODS柱，4.6×50mm，在4分钟内用含有0.2％磷酸的 10-90％甲醇水溶液洗脱，4mL/min，于220nm检测)，MS(ESI)：m/z 382.2[M+NH4]+。

                                 实施例21

(3aα，4β，7β，7aα)-N-[4-[[2-[2-[4-氰基-3-(三氟甲基)苯基]八氢-7-甲基- 1.3-二氧代-4，7-环氧-4H-异吲哚-4-基]乙基]硫基]苯基]乙酰胺(21E)

A.5-甲基-2-呋喃乙醇(21A)

于0℃、惰性环境下，将n-BuLi(83.0mL，133mmol，1.6M己烷 液)溶液加入至2-甲基呋喃(10.0mL，111mmol)的THF(85mL)搅拌溶 液中。将反应混合物于室温搅拌4小时，然后冷却至0℃。滴加环氧 乙烷(8.30mL，166mmol)，然后使反应混合物温热至室温过夜。用饱 和氯化铵水溶液猝灭后，分离所得的各层，将水层用乙醚(2×250mL) 萃取。将合并的有机层经硫酸钠干燥，减压浓缩。常压蒸馏(170-185 ℃)，得到10.1g(80.3mmol，72％)的化合物21A，为浅黄色油状物。

B.2-(2-溴乙基)-5-甲基呋喃(21B)

将Ph3Br2(3.68g，8.72mmol)加入到化合物21A(1.00g，7.93mmol) 的DMF(8mL)溶液中，将反应混合物于室温搅拌1小时。将反应混 合物加入至水中，用EtOAc(3X)萃取。将合并的有机层用水(2×)洗 涤，经硫酸钠干燥并减压浓缩。经硅胶快速色谱纯化，用10％EtOAc/ 己烷洗脱，得到0.507g(2.68mmol，34％)的化合物21B。

C.N-[4-[[2-(5-甲基-2-呋喃基)乙基]硫基]苯基]乙酰胺(21C)

于0℃、惰性环境下，向4-乙酰氨基苯硫酚(442mg，2.64mmol) 的THF(1mL)溶液中加入n-BuLi(2mL，3.17mmol，1.6M己烷溶液) 的THF(1mL)溶液。将反应溶液于室温搅拌10分钟，加入化合物21B (500mg，2.64mmol)的THF(3mL)溶液。在通过TLC测定所有原料 耗尽后，用水猝灭反应物，将混合物用EtOAc(2X)萃取，经硫酸钠 干燥，减压浓缩。经硅胶快速色谱纯化，用50％EtOAc/己烷洗脱， 得到0.644g(2.34mmol，88％)的化合物21C。MS(ESI)：m/z 276.09 [M+H]+。

D.(3aα，4β，7β，7aα)-N-[4-[[2-[2-[4氰基-3-(三氟甲基)苯基]- 1，2，3，3a，7，7a-六氢-7-甲基-1，3-二氧代-4，7-环氧-4H-异吲哚-4-基]乙基] 硫基]苯基]乙酰胺(21D)

将化合物21C(195mg，0.708mmol)和4-(2，5-二氢2，5-二氧代-1H- 吡咯-1-基)-2-三氟甲基苄腈(377mg，1.416mmol，按实施例1B中所述 方法制备)的CH2Cl2(1.5mL)溶液于室温搅拌2天。将反应混合物减 压浓缩，通过NMR分析测定得到化合物21D。化合物21D不经纯 化而直接用于下一步。

E.(3aα，4β，7β，7aα)-N-[4-[[2-[2-[4-氰基-3-(三氟甲基)苯基]八氢-7-甲基 -1，3-二氧代-4，7-环氧-4H-异吲哚-4-基]乙基]硫基]苯基]乙酰胺(21E)

将粗制化合物21D(0.708mmol)和10％Pd/C(200mg)的MeOH (20mL)溶液在氢气环境下搅拌过夜。经反相HPLC纯化[34.4min(保 留时间)(YMC S5 ODS柱，20×250mm，在30分钟内用含有0.1％TFA 的0-100％甲醇水溶液洗脱，10mL/min，于220nm检测)]，然后经硅 胶快速色谱纯化，用1％MeOH/CH2Cl2洗脱，得到29mg(0.053mmol， 7.5％)的化合物21E，为黄色粉末。HPLC：99％，3.44min(保留时 间)(YMC S5 ODS柱，4.6×50mm，在4分钟内用含有0.2％磷酸的10- 90％甲醇水溶液洗脱，4mL/min，于220nm检测)，MS(ESI)：m/z 544.01[M+H]+。

                             实施例22

(3aα，4β，7β，7aα)-N-[4-[[2-[2-[4-氰基-3-(三氟甲基)苯基]八氢-7-甲基- 1，3-二氧代-4，7-环氧-4H-异吲哚-4-基]乙基]亚硫酰基]苯基]乙酰胺(22)

将mCPBA(12mg，0.050mmol)分次加入至粗制化合物21E(65 mg，0.12mmol)的CH2Cl2(6mL)溶液中，直至原料耗尽。经反相HPLC 纯化[30.5min(保留时间)(YMC S5 ODS柱，30×250mm，在30分钟内 用含有0.1％TFA的0-100％甲醇水溶液洗脱，25mL/min，于220nm 检测)]，得到27.5mg(0.0491mmol，41％)的化合物22，为黄褐色固 体(非对映体的约1∶1混合物)。HPLC：96％，2.88min(保留时间)(YMC S5 ODS柱，4.6×50mm，在4分钟在内用含有0.1％TFA的10-90％甲 醇水溶液洗脱，4mL/min，于220nm检测)，MS(ESI)：m/z 559.97 [M+H]+。

                            实施例23

(3aα，4β，7β，7aα)-N-[4-[[2-[2-[4-氰基-3-(三氟甲基)苯基]八氢-7-甲基- 1，3-二氧代-4，7-环氧-4H-异吲哚-4-基]乙基]磺酰基]苯基]乙酰胺(23)

将mCPBA(26mg，0.11mmol)加入至化合物21E(19mg，0.035 mmol)的CH2Cl2(6mL)溶液中，将反应物于室温搅拌，直至通过TLC 显示，原料和中间体亚砜(化合物22)耗尽。经反相制备型色谱纯化 [HPLC，53.3min(保留时间)(YMC S5 ODS柱，30×250mm，在45分钟 内用含有0.1％TFA的0-70％甲醇水溶液洗脱，25mL/min，于220nm 检测)]，得到8.0mg(0.014mmol，40％)的化合物23，为白色固体。HPLC： 99％，2.94min(保留时间)(YMC S5 ODS柱，4.6×50mm，在4分钟内 用含有0.2％磷酸的10-90％甲醇水溶液洗脱，4mL/min，于220nm检 测)，MS(ESI)：m/z575.95[M+H]+。

                              实施例24

(3aα，4β，7β，7aα)-和(3aα，4α，7α，7aα)-N-[2-[2-[4-氰基-3-(三氟甲基)苯基] 八氢-7-甲基-1，3-二氧代-4，7-环氧-4H-异吲哚-4-基]乙基]苯磺酰胺 (分别为24Ci和24Cii)

A.5-甲基-2-呋喃乙醇4-甲基苯磺酸酯(24A)

将4-甲基苯磺酰氯(907mg，4.76mmol)加入至化合物21A(500 mg，3.96mmol)的6ml无水吡啶溶液中。将反应物于室温搅拌4小时， 然后用冰猝灭。将反应混合物用二氯甲烷萃取，将合并的有机层用 饱和碳酸氢钠水溶液和水洗涤，减压浓缩，得到900mg(81％)的化 合物24A，为黄色油状物。

B.N-[2-(5-甲基-2-呋喃基)乙基]苯磺酰胺(24B)

将苯磺酰胺(157mg，1.00mmol)加入至10％氢氧化钠水溶液(0.4 ml，1mmol)中。然后加入化合物24A(280mg，1.00mmol)的丙酮(1mL) 溶液。将反应混合物于90℃加热8小时，然后冷却至室温。加入冰， 将混合物用二氯甲烷萃取。将合并的有机层用水洗涤、干燥并减压 浓缩。经硅胶快速色谱纯化，用二氯甲烷洗脱，得到60mg(0.23mmol， 23％)的化合物24B，为黄色油状物。

C.(3aα，4β，7β，7aα)-和(3aα，4α，7α，7aα)-N-[2-[2-[4-氰基-3-(三氟甲基) 苯基]八氢-7-甲基-1，3-二氧代-4，7-环氧-4H-异吲哚-4-基]乙基]苯磺酰 胺(分别为24Ci和24Cii)

将4-(2，5-二氢-2，5-二氧代-1H-吡咯-1-基)-2-三氟甲基苄腈(129mg， 0.485mmol，按实施例1B中所述方法制备)加入至化合物24B(60mg， 0.23mmol)的CH2Cl2(2mL)溶液中。将反应混合物于室温搅拌2天， 减压浓缩并经硅胶快速色谱纯化，用70％EtOAc/己烷洗脱，得到20mg (0.038mmol，16％)的不饱和Diels-Alder产物。立即将所述不饱和产 物(20mg)溶于乙醇(2ml)中，加入10％Pd/C(10mg催化剂)。将溶液 于室温、氢气环境下搅拌过夜。过滤混合物，将滤液减压浓缩。经 制备型反相HPLC纯化，得到7.0mg(0.013mmol，34％)的化合物24Ci 和2.0mg(0.0037mmol，10％)的化合物24Cii。化合物24Ci：HPLC：96％， 3.17min(保留时间)(YMC ODSA S5 C18 4.6×50mm，4分钟内用含有 0.1％TFA的10％-90％甲醇水溶液梯度洗脱，于220nm检测)，MS(ES)： m/z：533.99[M+H]+。化合物24Cii：HPLC：99％，38.95min(保留时 间)(YMC ODS S5 20×250mm，40分钟内用含有0.1％TFA的10％- 90％甲醇水溶液梯度洗脱，于220nm检测)，MS(ES)：m/z 533.99 [M+H]+。

                                  实施例25

(3aα，4β，7β，7aα)-4-[八氢-4-(2-羟乙基)-7-甲基-1，3-二氧代-4，7-环氧-2H- 异吲哚-2-基]-2-(三氟甲基)苄腈(25B)

A.(3aα，4β，7β，7aα)-和(3aα，4α，7α，7aα)-4-[1，3，3a，4，7，7a-六氢-4-(2-羟乙 基)-7-甲基-1，3-二氧代-4，7-环氧-2H-异吲哚-2-基]-2-(三氟甲基)苄腈(分 别为25Ai和25Aii)

将化合物21A(252mg，2mmol)和4-(2，5-二氢-2，5-二氧代-1H-吡 咯-1-基)-2-三氟甲基苄腈(798mg，3.00mmol)的CH2Cl2(10mL)溶液于 室温搅拌2天。将反应混合物减压浓缩。经硅胶快速色谱纯化，用65％ EtOAc/己烷洗脱，得到217mg的纯化合物25Ai、73mg的纯化合物 25Aii以及310mg化合物25Ai和25Aii的混合物。所有三个部分都 作为白色固体分离，总分离产量为600mg(1.53mmol，76.5％)。化合 物25Ai：HPLC 90％，2.56min(保留时间)(YMC S5 ODS柱，4.6×50mm， 在4分钟内用含有0.2％磷酸的10-90％甲醇水溶液洗脱，4mL/min，于 220nm监测)。化合物25Aii：HPLC 90％，2.56min(保留时间)(YMC S5 ODS柱，4.6×50mm，在4分钟内用含有0.2％磷酸的10-90％甲醇水溶 液洗脱，4mL/min，于220nm检测)。

B.(3aα，4β，7β，7aα)-4-[八氢-4-(2-羟乙基)-7-甲基-1，3-二氧代-4，7-环氧- 2H-异吲哚-2-基]-2-(三氟甲基)苄腈(25B)

将化合物25Ai(0.2g，0.51mmol)和10％Pd/C(43mg，催化量)的 EtOH(12mL)溶液在氢气环境下室温搅拌2小时。将反应混合物通过 硅藻土过滤并减压浓缩，得到0.20g(0.51mmol，100％)的化合物 25B，为白色固体。HPLC：95％，2.59min(保留时间)(YMC S5 ODS 柱，4.6×50mm，用含有0.1％TFA的10-90％甲醇水溶液在4分钟内 洗脱，4mL/min，于220nm检测)，MS(ESI)：m/z 394.97[M+H]+。

                           实施例26

(3aα，4β，7β，7aα)-和(3aα，4α，7α，7aα)-N-[4-[2-[2-[4-氰基-3-(三氟甲基)苯 基]八氢-7-甲基-1，3-二氧代-4，7-环氧-4H-异吲哚-4-基]乙氧基]苯基]乙 酰胺(分别为26Ci和26Cii)

A.2-[4-[2-(5-甲基-2-呋喃基)乙氧基]苯基]乙酰胺(26A)

将三苯膦(681mg，2.60mmol)加入至化合物21A(252mg，2.00 mmol)和4-乙酰氨基苯酚(302mg，2.00mmol)的CH2Cl2(4mL)溶液 中。加入THF(5mL)，使反应混合物成为均相，然后将混合物冷却 至0℃。滴加DEAD(0.41mL，2.6mmol)，将反应混合物于室温搅拌 过夜，然后减压浓缩。经硅胶快速色谱纯化，用60％EtOAe/己烷洗 脱，然后经制备型反相HPLC纯化，得到270mg(1.04mmol，52％)的 化合物26A，为浅褐色固体。MS(ESI)：m/z 260.09[M+H]+。

B.(3aα，4β，7β，7aα)-和(3aα，4α，7α，7aα)-N-[4-[2-[2-[4-氰基-3-(三氟甲基) 苯基]-1，2，3，3a，7，7a-六氢-7-甲基-1，3-二氧代-4，7-环氧-4H-异吲哚-4-基] 乙氧基]苯基]乙酰胺(分别为26Bi和26Bii)

将化合物26A(40mg，0.15mmol)和4-(2，5-二氢-2，5-二氧代-1H- 吡咯-1-基)-2-三氟甲基苄腈(88mg，0.31mmol)的二氯甲烷(2mL)溶液 于室温搅拌2天。将反应混合物减压浓缩。经硅胶快速色谱纯化， 用75％EtOAc/己烷洗脱，得到55mg(0.105mmol，68％)化合物26Bi 和26Bii的5∶1混合物，为白色固体，所述混合物直接用于下一步。 HPLC 90％，3.28min(保留时间)(YMC S5 ODS柱，4.6×50mm，在4分 钟内用含有0.2％磷酸的10-90％甲醇水溶液洗脱，4mL/min，于220nm 检测)。

C.(3aα，4β，7β，7aα)-和(3aα，4α，7α，7aα)-N-[4-[2-[2-[4-氰基-3-(三氟甲基) 苯基]八氢-7-甲基-1，3-二氧代-4，7-环氧-4H-异吲哚-4-基]乙氧基]苯基] 乙酰胺(分别为26Ci和26Cii)

将化合物26Bi和26Bii(55mg，0.105mmol)和10％Pd/C(12mg， 催化量)的EtOH(3mL)溶液在氢气环境下于室温搅拌过夜。将反应 混合物通过硅藻土过滤，然后减压浓缩，得到50mg粗产物。经硅 胶快速色谱纯化，用70％EtOAc/己烷洗脱，分别得到18mg(0.034 mmol，32％)的化合物26Ci[HPLC：96％，3.33min(保留时间)(YMC S5 ODS柱，4.6×50mm，在4分钟内用含有0.2％磷酸的10-90％甲醇水溶 液洗脱，4mL/min，于220nm检测)。MS(ES)：m/z 528.01[M+H]+]； 和2.3mg(0.0044mmols，4％)的85∶15的26Cii和26Ci的混合物(通过 1H NMR鉴定)[HPLC：90％，3.35min(保留时间)(YMC S5 ODS柱， 4.6×50mm，4分钟内用含有0.2％磷酸的10-90％甲醇水溶液洗脱，4 mL/min，于220nm检测)，MS(ESI)：m/z 528.12[M+H]+]。

                               实施例27

(3aα，4α，7α，7aα)-六氢-2-(2-萘基)-4，7-环氧-1H-异吲哚-1，3(2H)-二酮 (27D)

A.(内，内)-7-氧杂二环[2.2.1]庚-5-烯-2，3-二甲酸(27A)

按照Sprague等，J.Med.Chem.28，1580-1590(1985)中所述的方 法，合成化合物27A、27B和27C。将呋喃(100mL，1.38mol)和马 来酸(160g，1.38mol)的水(340mL)混合物于室温搅拌5天。将混合物 置于分液漏斗中，将水层与含有未反应呋喃的层分开。将水层用活 性炭处理，通过硅藻土过滤，然后置于冰箱中。将接晶种时从溶液 中结晶的所需产物过滤，用冷水洗涤并经五氧化二磷干燥，得到70g (0.38mol，28％)的化合物27A，为白色固体。

B.(内，内)-7-氧杂二环[2.2.1]庚烷-2，3-二甲酸(27B)

向化合物27A(69.0g，0.375mol)的EtOH(700mL)溶液中加入 10％Pd/C(4.5g，催化量)，然后将混合物于55psi氢气环境下振摇， 直至停止吸收气体。将混合物通过硅藻土过滤并真空浓缩，得到66.0 g(0.355mol，95％)的化合物27B，为白色固体。

C.(3aα，4α，7α，7aα)-六氢-4，7-环氧异苯并呋喃-1，3-二酮(27C)

将化合物27B(66.0g，355mol)的乙酰氯(300mL)溶液回流1小 时。真空浓缩反应溶液，将所得的残余物从苯中再结晶，得到49.2g (0.292mol，82％)的化合物27C，为白色固体(＞99％内型，通过1HNMR 分析)。

D.(3aα，4α，7α，7aα)-六氢-2-(2-萘基)-4，7-环氧-1H-异吲哚-1，3(2H)-二酮 (27D)

将化合物27C(45mg，0.30mmol)与2-萘胺(47mg，0.33mmol)在 乙酸(1mL)中混合，然后于115℃加热过夜。在反应物冷却至室温后， 加入一滴水，滤出所得的沉淀。将该物质用甲醇洗涤并干燥，得到65.7 mg(0.224mmol，74.7％)的化合物27D，为白色晶体。HPLC：99％，2.68 min(保留时间)(YMC S5 ODS柱，4.6×50mm，4分钟内用含有0.2％磷 酸的10-90％甲醇水溶液洗脱，4mL/min，于220nm检测)，MS(ESI)： m/z294.0[M+H]+。

                                     实施例28

(1aα，2β，2aα，5aα，6β，6aα)-六氢-4-(2-萘基)-2，6-环氧-3H-环氧乙烯并[f] 异吲哚-3，5(4H)-二酮(28B)

A.(1aα，2β，2aα，5aα，6β，6aα)-四氢-2，6-环氧基环氧乙烯并[f]异苯并呋 喃-3，5(2aH，5aH)-二酮(28A)

按Yur’ev，等，J.Gen.Chem.U.S.S.R.(Engl.Transl.)31，772-775 (1961)中所述，于室温搅拌外-7-氧杂二环[2.2.1]庚烷-2，3-二甲酸酐 (5.00g，30.1mmol)、甲酸(10mL)和过氧化氢(6mL)的溶液。30分钟 后，将反应物置于冰浴中(反应放热，同时逸出气体)，让其缓慢温热 至室温。搅拌过夜后，经过滤收集所得的沉淀，用冰乙酸洗涤干燥， 得到3.02g白色粉末。将粗制固体在乙酰氯(100ml)中煮沸10小时， 将混合物减压浓缩至约20ml。滤出所得的沉淀，用二噁烷洗涤并干 燥，得到2.37g(13.0mmol，43％)的化合物28A，为白色粉末。

B.(1aα，2β，2aα，5aα，6β，6aα)-六氢-4-(2-萘基)-2，6-环氧-3H-环氧乙烯并 [f]异吲哚-3，5(4H)-二酮(28B)

将化合物28A(100mg，0.520mmol)与2-萘胺(62.1mg，0.434mmol) 在乙酸(2mL)中混合，并于115℃加热过夜。使反应物冷却至室温后， 加入水，滤出所得的沉淀。将所述物质用碳酸钾水溶液和水顺次洗 涤，然后在真空炉中干燥，得到113.7mg(0.371mmol，85.5％)的化 合物28B，为灰白色晶体。HPLC：99％，1.76min(保留时间)(YMC S5 ODS柱，4.6×50mm，在4分钟内用含有0.2％磷酸的10-90％甲醇水溶 液洗脱，4mL/min，于220nm检测)，MS(ESI)：m/z308.0[M+H]+。

                            实施例29

(3aα，4α，7α，7aα)-2-[4-溴-3-(三氟甲基)苯基]-3a，4，7，7a-四氢-4，7-二甲基 -4，7-环硫-1H-异吲哚-1，3(2H)-二酮8-氧化物(29)

将2，5-二甲基噻吩(0.048mL，0.42mmol)和4-(2，5-二氢-2，5-二氧 代-1H-吡咯-1-基)-2-三氟甲基苄腈(0.290g，0.625mmol，按照实施例 1B的方法制备)溶于二氯甲烷(8.0mL)中，冷却至-20℃。缓慢加入 BF3·Et2O(0.412mL，3.36mmol)，然后加入mCPBA(～50％，0.29g，0.84 mmol)。于20℃2小时后，将反应混合物倾至饱和碳酸氢钠水溶液中， 用二氯甲烷(3×20mL)萃取，将有机物经无水硫酸钠干燥。粗产物通 过SiO2快速色谱纯化，用5％-10％-20％EtOAc的二氯甲烷溶液洗脱， 得到0.119g(0.265mmol，63％)的化合物29，为白色固体。HPLC：91％， 3.303min(保留时间)(YMC S5 ODS柱，4.6×50mm，在4分钟内用含 有0.2％磷酸的10-90％甲醇水溶液洗脱，4mL/min，于220nm检测)。 MS(ESI)：m/z 480.2[M+H]+。

                             实施例30

(3aα，4α，7α，7aα)-2-[4-溴-3-(三氟甲基)苯基]-3a，4，7，7a-四氢-4，7-环硫- 1H-异吲哚-1，3(2H)-二酮8-氧化物(30)

将噻吩(0.375mL，4.69mmol)和4-(2，5-二氢-2，5-二氧代-1H-吡咯- 1-基)-2-三氟甲基苄腈(0.100g，0.313mmol，按照实施例1B的方法制 备)溶于二氯甲烷(50mL)中，加入mCPBA(-50％，1.62g，4.69mmol)， 然后于25℃下搅拌所得混合物3小时。然后加入三苯膦(2.0g)。15 分钟后，真空除去挥发物，将所得的残余物溶于二氯甲烷(200mL)中， 用饱和碳酸氢钠水溶液洗涤(3×50mL)，经硫酸钠干燥。然后将粗制 物质通过SiO2快速色谱纯化，用1％-3％-5％甲醇的二氯甲烷溶液洗 脱，得到0.059g(0.14mmol，45％)作为白色粉末的化合物30。NMR 和LC分析表明为单一的非对映体。HPLC：100％，3.437min(保留时 间)(YMC S5 ODS柱，4.6×50mm，在4分钟内用含有0.2％磷酸的10- 90％甲醇水溶液洗脱，4mL/min，于220nm检测)，MS(ESI)：m/z443.2 [M+H]+。

                                   实施例31

(3aα，4α，7α，7aα)-六氢-2-[3-(三氟甲基)苯基]-4，7-亚氨基-1H-异吲哚- 1，3(2H)-二酮(31D)

A.7-氮杂二环[2.2.1]庚-2，5-二烯-2，3，7-三甲酸2，3-二甲基酯7-(1，1-二 甲基乙基)酯(31A)

将新蒸馏的乙炔二甲酸二甲酯(6.7mL，54mmol)和N-(叔丁氧羰 基)-1H-吡咯(9.0mL，54mmol)混合，并于120℃加热3小时。经SiO2快速色谱纯化，用EtOAc/CH2Cl2洗脱，得到8.3g(27mmol，50％)的 化合物31A，为黄色固体。

B.(外，内)-7-氮杂二环[2.2.1]庚-2，5-二烯-2，3，7-三甲酸7-(1，1-二甲基乙 基)酯(31B)

将化合物31A(1.0g，3.5mmol)溶于MeOH(2.0mL)中，加入KOH 水溶液(1g，在5mL水中)。将反应物加热至50℃1小时。然后将反 应物冷却至25℃，加入10％Pd/C(0.5g，催化剂)，然后将混合物置 于Parr装置中于25℃14小时。然后将反应物通过硅藻土过滤，用水 漂洗。通过加入1N HCl将水溶液酸化至pH＝2，然后用EtOAc(2×100 mL)萃取。将有机物浓缩，得到化合物31B，为浅黄色固体。

C.(3aα，4α，7α，7aα)-六氢-1，3-二氧代-4，7-亚氨基异苯并呋喃-8-甲酸 1，1-二甲基乙酯(31C)

在升华室中，将粗制化合物31B真空下加热至120℃，产生0.051 g(0.19mmol，5.4％)作为白色固体的化合物31C的升华，直接收集化 合物31C，不经进一步纯化用于下一步中。

D.(3aα，4α，7α，7aα)-六氢-2-[3-(三氟甲基)苯基]-4，7-亚氨基-1H-异吲哚 -1，3(2H)-二酮(31D)

将化合物31C(0.050g，0.19mmol)和1-氨基-3-(三氟甲基)苯 (0.030g，0.19mmol)溶于AcOH(2.5mL)中，加热至115℃4.5小时。 通过加入饱和碳酸氢钠水溶液猝灭反应，将反应物用二氯甲烷(3×15 mL)萃取。粗制物质经反相制备HPLC纯化，得到0.030g(0.097mmol， 51％)的化合物31D，为白色固体。HPLC：99％，2.33min(保留时 间)(YMC S5 ODS柱，4.6×50mm，在4分钟内用含有0.2％磷酸的10- 90％甲醇水溶液洗脱，4mL/min，于220nm检测)，MS(ESI)：m/z 311.15[M+H]+。

                                  实施例32

(3aα，4β，7β，7aα)-和(3aα，4α，7α，7aα)-3a，4，7，7a-四氢-4，7-二甲基-2-[3- (三氟甲基)苯基]-4，7-环氧-1H-异吲哚-1，3(2H)-二酮(分别为32i和32ii)

将新蒸馏的2，5-二甲基呋喃(0.32mL，2.6mmol)溶于二氯甲烷(2.0 mL)中，加入1-[3-(三氟甲基)苯基]-1H-吡咯-2，5-二酮(0.5g，2.5mmol， 按照实施例1B的方法制备)。将反应物于25℃搅拌16小时，然后减 压浓缩。经硅胶快速色谱纯化，用0.5％MeOH/CH2Cl2洗脱，得到250 mg(0.741mmol，30％)的化合物32i和50mg(0.15mmol，6％)的化合 物32ii，为白色固体。化合物32i：HPLC：98％，3.080min(保留时 间)(YMC S5 ODS柱，4.6×50mm，在4分钟内用含有0.2％磷酸的10- 90％甲醇水溶液洗脱，4mL/min，于220nm检测)，MS(ES)：m/z： 338.30[M+H]+；化合物32ii：HPLC：92％，3.047min(保留时间)(YMC S5 ODS柱，4.6×50mm，在4分钟内用含有0.2％磷酸的10-90％甲醇 水溶液检测，4mL/min，于220nm检测)，MS(ES)：m/z338.15 [M+H]+。

                                 实施例33

(3aα，4β，7β，7aα)-六氢-4，7-二甲基-2-[3-(三氟甲基)苯基]-4，7-环氧-1H- 异吲哚-1，3(2H)-二酮(33)

将化合物32i(0.080g，0.24mmol)溶于EtOAc(2mL)中，加入 EtOH(1ml)和10％Pd/C(0.050g，催化剂)。然后通过气囊引入氢气， 将反应物搅拌24小时。将混合物通过硅藻土过滤，用EtOAc漂洗并 真空浓缩，得到0.075g(0.22mmol，93％)化合物33，为白色固体。无 需进一步纯化。HPLC：90％，3.233min(保留时间)(YMC S5 ODS柱， 4.6×50mm，在4分钟内用含有0.2％磷酸的10-90％甲醇水溶液洗脱，4 mL/min，于220nm检测)，MS(ES)：m/z340.40[M+H]+。

                              实施例34

(3aα，4β，7β，7aα)-四氢-5-甲基-2-(4-硝基-1-萘基)-4，7-桥亚乙烯基-1H- 吡咯并[3，4-c]吡啶-1，3，6(2H，5H)-三酮(34B)

A.4，5，7，7a-四氢-5-甲基-4，7-桥亚乙烯基呋喃并[3，4-c]吡啶-1，3，6(3aH)- 三酮(34A)

采用Tomisawa等，Heterocycles 6，1765-1766(1977)和Tetrahedron Lett.29，2465-2468(1969)中所述方法的改进方法，合成化合物34A。 将马来酸酐(2.00g，20.4mmol)和1-甲基-2-吡啶酮(2.22g，20.4mmol) 悬浮于30ml无水甲苯中。反应容器配有一个迪安-斯达克榻分水器， 将反应物回流48小时。使该深色溶液冷却至室温，然后真空除去挥 发物。将所得的褐色糊状物(4g)溶于10ml沸腾的甲苯中，在氮气流 下过滤热溶液，以除去颗粒。于25℃静置时，所需产物从溶液中沉 淀出来。经过滤分离固体，用冷却甲苯洗涤，得到1.0g(4.8mmol，24％) 化合物34A，该化合物无需进一步纯化而使用。

B.(3aα，4α，7α，7aα)-四氢-5-甲基-2-(4-硝基-1-萘基)-4，7-桥亚乙烯基- 1H-吡咯并[3，4-c]吡啶-1，3，6(2H，5H)-三酮(34B)

将1-氨基-4-硝基萘(0.094g，0.5mmol)和化合物34A(0.130g， 0.627mmol)溶于AcOH(2.0mL)中，加热至110℃11小时。然后将反 应物冷却至25℃，倾至冷饱和碳酸钾水溶液中，剧烈搅拌10分钟。 将该溶液过滤并用水漂洗。将所得的滤液真空干燥，经硅胶快速色 谱纯化，使用4∶6 EtOAc/己烷溶剂体系洗脱，得到0.172g(0.456mmol， 91％)的化合物34B，为白色固体。HPLC：92％，2.472min(保留时 间)(YMC S5 ODS柱，4.6×50mm，用含有0.1％TFA的10-90％甲醇水 溶液在4分钟内洗脱，4mL/min，于220nm检测)，MS(ES)：m/z378.29 [M+H]+。

                                  实施例35

(3aα，4β，7β，7aα)-4-[4-[2-(4-氟苯氧基)乙基]八氢-7-甲基-1，3-二氧代- 4，7-环氧-2H-异吲哚-2-基]-2-(三氟甲基)苄腈(35)

于室温、惰性环境下，将DEAD(0.06mL，0.38mmol)加入至三 苯膦(100mg，0.380mmol)的THF(1.3mL)溶液中。搅拌10分钟后， 一次性加入4-氟苯酚(43mg，0.380mmol)。将反应混合物搅拌5分钟， 加入化合物25B(100mg，0.254mmol)，然后继续搅拌3.5小时。经硅 胶快速色谱纯化，用50％EtOAc/己烷洗脱，然后经反相制备型HPLC 纯化[11.93min(保留时间)(YMC S5 ODS柱，20×100mm，10分钟内用 含有0.1％TFA的0-100％甲醇水溶液洗脱，20mL/min，于220nm检 测)]，得到72mg(58％)的化合物35，为固体。HPLC：99％，3.74min(保 留时间)(YMC S5 ODS柱，4.6×50mm，在4分钟内用含有0.2％磷酸的 10-90％甲醇水溶液洗脱，4mL/min，于220nm检测)，MS(ESI)：m/z 487.1[M-H]-。

                               实施例36

（3aα，4β，7β，7aα)-4-[4-(2-溴乙基]八氢-7-甲基-1，3-二氧代-4，7-环氧-2H- 异吲哚-2-基]-2-(三氟甲基)苄腈(36)

于0℃，将化合物25B(495mg，1.26mmol)和吡啶(100μl，1.26 mmol)的二氯甲烷(2ml)溶液加入至Ph3PBr2(636mg，1.51mmol)的二氯 甲烷(2ml)溶液中。将反应混合物于室温搅拌3小时，然后减压除去 溶剂。所得的残余物用10ml的EtOAc-己烷(6∶4)洗涤2次，将合并 洗涤液经硅胶快速色谱纯化，用60％EtOAc/己烷洗脱，得到390mg (0.853mmol，67.7％)的化合物36，为白色固体。HPLC：99％，3.51min (保留时间)(YMC S5 ODS柱，4.6×50mm，在4分钟内用含有0.2％磷 酸的10-90％甲醇水溶液洗脱，4mL/min，于220nm检测)。MS(ESI)： m/z456.7[M-H]-。

                                   实施例37

(3aα，4β，7β，7aα)-六氢-4，7-二甲基-2-(3-甲基-4-硝基苯基)-4，7-环氧-1H- 异吲哚-1，3(2H)-二酮(37)

将4-硝基-3-甲基苯胺(0.050g，0.33mmol)、化合物20A(0.083g， 0.43mmol)、TEA(0.2mL)、MgSO4(0.075g)和甲苯(0.8mL)的组合物 在密封管中混合，将混合物加热至120℃14小时。冷却至25℃后， 将反应物过滤，用二氯甲烷漂洗，减后浓缩。粗产物经制备型SiO2TLC 纯化，用二氯甲烷洗脱，得到0.075g(0.23mmol，69％)的化合物37， 为浅黄色固体。HPLC：100％，2.733min(保留时间)(YMC S5 ODS柱， 4.6×50mm；10-90％MeOH/H2O梯度+0.1％TFA；4mL/min，于220 nm检测)，MS(ES)：m/z348.2[M+NH4]+。

                        实施例38-121

采用与上述方法类似的方法，制备本发明的其它化合物。实施 例38-121的化合物具有以下结构(L为一个键)：

其中G、化合物名称、保留时间、分子量和所用的方法在表2中叙 述。用来测定表2化合物保留时间的色谱技术如下：LCMS＝YMC S5 ODS柱，4.6×50mm，用含有0.1％TFA的10-90％MeOH/H2O在4 分钟内洗脱；4mL/min，于220nm检测。表2中所列化合物的分子 量(如果提供)通过MS(ES)以公式m/z测定。

                               表2

                            实施例122-164

本发明的另外一些化合物通过与上述方法类似的方法制备。表3 提供了化合物名称和结构、保留时间以及表3中关于实施例122-164 化合物制备所基于方法的实施例编号。用来测定表3化合物保留时 间的色谱技术如下：

LCMS＝YMC S5 ODS柱，4.6×50mm，用含有0.1％TFA的10-90％ MeOH/H2O在4分钟内洗脱；4mL/min，于220nm检测。

LC＝YMC S5 ODS柱，4.6×50mm，用含有0.2％磷酸的10-90％ MeOH/H2O在4分钟内洗脱，4mL/min，于220nm检测。

                                表3

                             实施例165-203

制备本发明的其它化合物，并在以下表4中进一步描述。表4 叙述了化合物名称和结构以及表4中关于实施例165-203化合物制备 所基于方法的实施例编号。

                             表4

                                 实施例204

(3aα，4β，7β，7aα)-4-[八氢-4-(2-羟乙基)-7-甲基-1，3-二氧代-4，7-环氧-2H- 异吲哚-2-基]-2-(三氟甲基)苄腈(204D/25B)

A.2-[2-[[(1，1-二甲基乙基)二甲基甲硅烷基]氧基]乙基]-5-甲基呋喃 (204A)

向化合物21A(2.00g，15.9mmol)的DMF(50mL)溶液中加入咪 唑(1.62g，23.9mmol)，然后加入叔丁基二甲基甲硅烷基氯(2.63g，17.5 mmol)。于25℃2小时后，将反应物倾至乙醚(300mL)中，用水(1×100 mL)、1N HCl(1×100mL)、水(1×100mL)、盐水(1×50mL)洗涤，经 无水硫酸镁干燥。粗制化合物204A经LCMS和NMR分析，测定其 纯度足以直接进行下一个步骤。HPLC：100％，4.347min(保留时 间)(YMC S5 ODS柱，4.6×50mm，用含有0.1％TFA的10-90％甲醇水 溶液在4分钟内洗脱，4mL/min，于220nm检测)。

B.(3aα，4β，7β，7aα)-4-[2-[[(1，1-二甲基乙基)二甲基硅烷基]-氧基]乙基] 六氢-7-甲基-4，7-环氧-1H-异苯并呋喃-1，3(2H)-二酮(204B)

将化合物204A(4.0g，18.9mmol)和马来酸酐(1.42g，14.5mmol) 溶于二氯乙烷(10mL)中，于25℃搅拌60小时。然后真空除去挥发 物，将所得的橙色油状物溶于无水乙醇(50mL)中，加入10％Pd/C(1.00 g，催化剂)。然后通过气囊引入氢气。3小时后，将反应物通过硅藻 土过滤，用EtOAc漂洗，真空浓缩。粗制酸酐经SiO2快速色谱纯化， 用丙酮/氯仿(0-2-4％丙酮)洗脱，除得到3.00g(12.5mmol，66％)起始 化合物204A之外，还得到1.30g(3.82mmol，20％)的化合物204B， 为透明油状物。经质子NMR光谱学表征，表明仅有外型异构体。1H NMR(400MHz，CDCl3)，δ＝3.83(2H，t，J＝6.0Hz)，3.22(1H，d，J＝ 8.2Hz)，3.06(1H，d，J＝8.2Hz)，1.70-2.25(6H，m)，1.55(3H，s)，0.82(9 H，s)，0.00(6H，s)。

C.(3aα，4β，7β，7aα)-4-[4-[2-[[(1，1-二甲基乙基)二甲基甲硅烷基]-氧基] 乙基]八氢-7-甲基-1，3-二氧代-4，7-环氧-2H-异吲哚-2-基]-2-(三氟甲基) 苄腈(204C)

在密封管内，将化合物204B(0.250g，0.734mmol)和4-氨基-2- 三氟甲基-苄腈(0.124g，0.668mmol)悬浮于无水甲苯(2.0mL)中。然后 加入MgSO4(0.200g)和三乙胺(0.5mL)，将管密封并置于125℃油浴 中。40小时后，将反应物冷却至25℃，过滤并真空浓缩。将粗制物 质通过SiO2快速色谱纯化，用CH2Cl2洗脱，得到0.111g(0.281mmol， 30％)的化合物204C，为黄色固体。HPLC：92％，4.203min(保留时 间)(YMC S5 ODS柱，4.6×50mm，用含有0.1％TFA的10-90％甲醇水 溶液在4分钟内洗脱，4mL/min，于220nm检测)。MS(ESI)：m/z531.1 [M+Na]+。

D.(3aα，4β，7β，7aα)-4-[八氢-4-(2-羟乙基)-7-甲基-1，3-二氧代4，7-环氧- 2H-异吲哚-2-基]-2-(三氟甲基)苄腈(204D)

将化合物204C(0.031g，0.061mmol)溶于THF(0.5mL)中，转移 至聚丙烯容器中，然后冷却至0℃。随后加入HF·吡啶(～47％HF，0.1 mL)。15分钟后，经LC测定反应完成，将反应物倾至冷的饱和碳酸 氢钠水溶液中。将混合物用CH2Cl2(3×10mL)萃取。将合并的有机层 用1N HCl(1×20mL)洗涤，经无水硫酸钠干燥。化合物204D以黄 色油状物分离出来，并与在实施例25中制备的物质比较。无需纯化。

                               实施例205

(3aα，4β，7β，7aα)-和(3aα，4α，7α，7aα)-4-[八氢-4-甲基-1，3-二氧代-7-(苯 基甲基)-4，7-环氧-2H-异吲哚-2-基]-2-(三氟甲基)苄腈

(分别为205Ci和205Cii)

A.2-甲基-5-(苯基甲基)-呋喃(205A)

于-25℃，将n-BuLi(1.8ml，4.51mmol，2.5M己烷溶液)加入至2- 甲基-呋喃(0.37ml，4.10mmol)的无水THF(3mL)溶液中。将所得溶 液于室温搅拌3小时，然后冷却至-15℃。加入已通过了氧化铝柱的 苄基溴(0.59ml，4.92mmol)，将溶液温热至室温，并搅拌过夜。加入 饱和氯化铵溶液(5mL)，搅拌混合物1小时。然后将反应混合物用乙 醚(2×5)萃取，将合并的有机萃取液干燥并减压浓缩。经硅胶快速色 谱纯化，用己烷洗脱，得到323mg(1.88mmol，46％)的化合物205A， 为无色油状物。HPLC：95％，3.72min(保留时间)(YMC S5 ODS柱， 4.6×50mm，在4分钟内用含有0.2％磷酸的10-90％甲醇水溶液洗脱， 4mL/min，于220nm检测)，和约400mg产物与苄基溴的混合物 (～2∶1，通过HPLC分析)。

B.(3aα，4β，7β，7aα)-和(3aα，4α，7α，7aα)-4-[八氢-4-甲基-1，3-二氧代-7- (苯基甲基)-4，7-环氧-2H-异吲哚-2-基]-2-(三氟甲基)苄腈(分别为205Bi 和205Bii)

于室温下搅拌化合物205A(124mg，0.72mmol)和4-(2，5-二氢- 2，5-二氧代-1H-吡咯-1-基)-2-三氟甲基苄腈(290mg，1.09mmol)的二氯 甲烷(2mL)溶液。4天后，将反应混合物减压浓缩。经硅胶快速色谱 纯化，用CH2Cl2洗脱，得到62mg(0.14mmol，20％)化合物205Bi与 205Bii的混合物，为白色固体，该混合物直接用于下一步。HPLC：93％， 3.69min(保留时间)(YMC S5 QDS柱，4.6×50mm，在4分钟内用含有 0.2％磷酸的10-90％甲醇水溶液洗脱，4mL/min，于220nm检测)。

C.(3aα，4β，7β，7aα)-和(3aα，4α，7α，7aα)-4-[八氢-4-甲基-1，3-二氧代-7- (苯基甲基)-4，7-环氧-2H-异吲哚-2-基]-2-(三氟甲基)苄腈(分别为205Ci 和205Cii)

于室温、氢气环境下，将化合物205Bi与205Bii(62mg，0.14mmol) 的混合物和10％Pd/C(12mg，催化量)在EtOH(3.5mL)中的溶液搅拌 2小时。将反应混合物通过硅藻土过滤，减压浓缩。经硅胶快速色谱 纯化，用35％EtOAc/己烷洗脱，得到22mg(0.05mmol，35％)的化合 物205Ci和12mg(0.027mmols，19％)的化合物205Cii。化合物205Ci： HPLC：98％，3.75min(保留时间)(YMC S5 ODS柱，4.6×50mm，在4 分钟内用含有0.2％磷酸的10-90％甲醇水溶液洗脱，4mL/min，于220 nm检测)，MS(ESI)：m/z458.2[M+NH4]+。化合物205Cii：HPLC：97％， 3.78min(YMC S5 ODS柱，4.6×50mm，4分钟内用含有0.2磷酸的10- 90％甲醇水溶液洗脱，4mL/min，于220nm监测)，MS(ESI)：m/z 473.45[M+CH3OH]+。

                                   实施例206

(3aα，4β，7β，7aα)-2-[4-氰基-3-(三氟甲基)苯基]八氢-7-甲基-1，3-二氧代- 4，7-环氧-4H-异吲哚-4-丙腈(206)

将化合物36(34mg，0.074mmol)和NaCN(24mg，0.49mmol)的 DMSO(1mL)溶液于100℃加热0.5小时。冷却后，将反应混合物倾 至水(5mL)中，将水层用EtOAc(2×5mL)萃取。将合并的有机层用 水(2×5mL)洗涤，经硫酸钠干燥并减压浓缩。经SiO2快速色谱纯化， 用50％EtOAc/己烷洗脱，然后经反相制备型HPLC纯化[30.41min(保 留时间)(YMC S5 ODS 30×250mm，在30分钟内用含有0.1％TFA 的10-90％甲醇水溶液洗脱，25mL/min，于220nm检测)]，得到6.6mg (0.016mmol，22％)的化合物206，为白色固体。HPLC：99％，2.89min(保 留时间)(YMC S5 ODS柱，4.6×50mm，用含有0.2％磷酸的10-90％甲 醇水溶液在4分钟内洗脱，4mL/min，于220nm检测)，MS(ES)：m/z 402.1[M-H]-。

                                     实施例207

(3aα，4β，7β，7aα)-4-[八氢-4-甲基-7-[2-(4-吗啉基)乙基]-1，3-二氧代-4，7- 环氧-2H-异吲哚-2-基]-2-(三氟甲基)苄腈三氟乙酸盐(1∶1)(207)

将化合物36(15.6mg，0.0341mmol)和吗啉(6.0μL，0.068mmol) 的甲苯(1mL)溶液于100℃加热过夜。冷却后，减压浓缩反应混合物。 经SiO2快速色谱纯化，用10％MeOH/二氯甲烷洗脱，然后经反相制 备型HPLC纯化[23.96min(保留时间)(YMC S5 ODS 30×250mm，在 30分钟内用含有0.1％TFA的10-90％甲醇水溶液洗脱，25mL/min，于 220nm检测)，得到8.7mg(0.015mmol，44％)的化合物207(TFA盐)， 为白色固体。HPLC：99％，2.02min(保留时间)(YMC S5 ODS柱， 4.6×50mm，用含有0.2％磷酸的10-90％甲醇水溶液在4分钟内洗脱，4 mL/min，于220nm检测)，MS(ES)：m/z464.3[M+H]+。

                         实施例208

(3aα，4β，7β，7aα)-2-(5-氟-1-萘基)六氢-4，7-二甲基-4，7-环氧-1H-异吲哚- 1，3(2H)-二酮(208C)

A.1-氟-5-硝基萘(208A)

如J.Chem.Soc.1187(1949)中所述，向6N HCl(12mL)溶液中 加入1.47g(7.83mmol)细粉状5-硝基-1-萘胺。将混合物冷却至0℃， 缓慢加入冷的NaNO2(547mg，7.93mmol)的2mL水溶液，使得温度 保持在0℃左右。加入完成后，将反应混合物搅拌30分钟并过滤。 将滤液冷却至0℃，然后用冷4.5M NaBF4溶液(5ml)处理，得到氟硼 酸重氮盐完全沉淀。将混合物保持0℃30分钟，然后将其过滤，将 沉淀用冷4.5M NaBF4溶液(5mL)、冰冷的乙醇(10mL)和Et2O(20mL) 洗涤。将所得的固体风干，得到1.74g(77％)相应的重氮盐。

向1.70g(5.92mmol)上述氟硼酸重氮盐中加入5g沙子，将所述 组分充分混合。将反应混合物小心地在减压下加热，直至发生分解。 反应结束时，将烧瓶进一步加热30分钟至130℃，以确保完全转化。 冷却后，将反应混合物溶于丙酮中，使内容物预先吸附至硅胶上。 经快速色谱达到纯化(硅胶，0-10％EtOAc的己烷溶液洗脱)，得到449 mg(2.35mmol，40％)的化合物208A，为白色固体。

B.1-氨基-5-氟萘(208B)

将化合物208A(62mg，0.32mmol)的含0.1mL 12N HCl的1mL EtOH溶液加热至回流。以多个小份加入铁粉(62mg，1.11mmol)，继 续加热2小时。将混合物冷却，用1N NaOH溶液中和，将水层用二 氯甲烷萃取。合并的有机相经硫酸镁干燥，真空浓缩，留下残余物， 残余物经硅胶快速色谱纯化，以40-80％EtOAc的己烷溶液为洗脱液， 得到42mg(0.26mmol，80％)的化合物208B，为黄色固体。

C.(3aα，4β，7β，7aα)-2-(5-氟-1-萘基)六氢-4，7-二甲基-4，7-环氧-1H-异吲 哚-1，3(2H)-二酮(208C)

将化合物208B(42mg，0.26mmol)、化合物20A(54mg，0.27 mmol)、MgSO4(69mg，0.58mmol)和三乙胺(191μL，1.37mmol)溶于 2ml甲苯中，置于密封管中。将密封管加热至135℃14小时。将冷 却的反应混合物通过硅藻土短柱过滤，用二氯甲烷洗脱，减压除去 溶剂。残余物经制备型反相HPLC纯化(YMC S5 ODS 20×100mm，用 含有0.1％TFA的30-100％甲醇水溶液在10分钟内洗脱，20mL/min)， 得到15mg(0.044mmol，17％)的化合物208C，为浅黄色固体。HPLC： 16％，2.96min和77％，3.06min(阻转异构体，保留时间)(YMC S5 ODS 柱，4.6×50mm，用含有0.2％磷酸的10-90％甲醇水溶液在4分钟内 洗脱，4mL/min，于220nm检测)，MS(ES)：m/z340.2[M+H]+。

                             实施例209

(3aα，4β，7β，7aα)-2-(5-氟-4-硝基-1-萘基)六氢-4，7-二甲基-4，7-环氧-1H- 异吲哚-1，3(2H)-二酮(209C)

A.N-(5-氟-1-萘基)乙酰胺(209A)

将141mg(0.74mmol)的化合物208A的2mL AcOH溶液加热至 回流，然后用各小份的铁粉(118mg，2.11mmol)处理。将混合物回流 下保持15分钟，然后加入73μL(0.78mmol)Ac2O。回流下再过15 分钟后，将混合物冷却并过滤，用二氯甲烷洗脱。然后将滤液减后 浓缩，残余物经硅胶快速色谱纯化，以20-50％EtOAc的己烷溶液为 洗脱液，得到145mg(0.71mmol，97％)化合物209A，为白色固体。

B.1-氨基-5-氟-4-硝基萘(209B)

将化合物209A(133mg，0.645mmol)溶于1mL AcOH中，将所 得溶液冷却至10℃。在该温度下，加入80.0μl(2.00mmol)红色发烟 硝酸，继续搅拌15分钟，然后加入碎冰猝灭反应物。将水层用二氯 甲烷萃取，合并的有机相经硫酸镁干燥，真空浓缩。将所得的残余 物溶于3mL EtOH中，加热至回流，用0.5mL 40％NaOH水溶液处 理。继续搅拌15分钟，然后将反应物冷却并用水稀释。将水层用二 氯甲烷萃取，合并的有机相经硫酸镁干燥，真空浓缩。所得的残余 物经硅胶快速色谱纯化，以40-70％EtOAc的己烷溶液洗脱，得到36 mg(0.17mmol，27％)的化合物209B，为黄色固体。

C.(3aα，4β，7β，7aα)-2-(5-氟-4-硝基-1-萘基)六氢-4，7-二甲基-4，7-环氧- 1H-异吲哚-1，3(2H)-二酮(209C)

按照以上实施例208C中所述的方法，在密封管中，使化合物209B (36mg，0.18mmol)与化合物20A(38mg，0.19mmol)、MgSO4(46mg， 0.39mmol)和Et3N(128μL，0.92mmol)在250μL甲苯溶液中反应， 在通过制备型反相HPLC纯化(YMC S5 ODS 20×100mm，用含有 0.1％TFA的30-100％甲醇水溶液在10分钟内洗脱，20mL/min)后， 得到27mg(0.070mmol，39％)的化合物209C，为黄色固体。HPLC：8％， 2.88min和84％，3.06min(阻转异构体，保留时间)(YMC S5 ODS柱， 4.6×50mm，用含有0.2％磷酸的10-90％甲醇水溶液在4分钟内洗脱，4 mL/min，于220nm检测)，MS(ES)：m/z402.0[M+H]+。

                          实施例210

(3aα，4β，7β，7aα)-2-(1，1-二氧化苯并[b]噻吩-3-基)六氢-4，7-二甲基-4，7- 环氧-1H-异吲哚-1，3(2H)-二酮(210)

于室温下，将mCPBA(160mg，0.641mmol，70％纯度)加入至化 合物134(70.0mg，0.214mmol)的二氯甲烷(2mL)溶液中。在原料耗 尽后，将反应物用饱和碳酸氢钠猝灭，用二氯甲烷萃取。将有机层 用1N NaOH洗涤，经硫酸钠干燥并减压浓缩，得到63.9mg (0.178mmol，83％)的化合物210，为白色固体。HPLC：99％，3.81min(保 留时间)(YMC S5 ODS柱，4.6×50mm，用含有0.2％磷酸的10-90％甲 醇水溶液在4分钟内洗脱，4mL/min，于220nm检测)，MS(ES)：m/z 360.0[M+H]+。

                       实施例211

4-(1，3，3a，4，7，7a-六氢-4，6，7-三甲基-1，3-二氧代-4，7-环氧-2H-吡咯并 [3，4-c]吡啶-2-基)-2-(三氟甲基)苄腈(211)

将2，4，5-三甲基噁唑(0.48mL，4.14mmol)溶于甲苯(2.0mL)中， 加入4-(2，5-二氢-2，5-二氧代-1H-吡咯-1-基)-2-三氟甲基苄腈(1.00g 3.76mmol)。将反应混合物在氮气下于75℃搅拌2.5小时。将溶液冷 却至室温，滤出所得的沉淀，用甲苯漂洗，得到0.51g(35％)的化合 物211，为浅灰色固体。NMR分析表明，化合物211为一种异构体(外 型/内型)，然而该异构体的身份不能通过NMR分析来确定。HPLC： 100％，2.85min(保留时间)(YMC S5 ODS柱，4.6×50mm，用含有0.1％ TFA的10-90％甲醇水溶液在4分钟内洗脱，4mL/min，于220nm检 测)，MS(ES)：m/z378.42[M+H]+。

                                  实施例212

(3aα，4β，7β，7aα)-四氢-4，7-二甲基-2-[3-(三氟甲基)苯基]-4，7-环氧-1H- 异吲哚-1，3，5(2H，4H)-三酮和(3aα，4α，7α，7aα)-四氢-4，7-二甲基-2-[3- (三氟甲基)苯基]-4，7-环氧-1H-异吲哚-1，3，5(2H，4H)-三酮 (分别为212i和212ii)

在密封管内，将2，2-二甲基-3(H)-呋喃酮(0.500g，4.46mmol)和 1-[3-(三氟甲基)苯基]-1H-吡咯-2，5-二酮(1.07g，4.46mmol，根据实施 例1B所述制备)悬浮于甲苯(20mL)中。将混合物于110℃加热4小 时，然后冷却至25℃，随后真空浓缩。将所得的残余物通过SiO2快 速色谱纯化，用二氯甲烷洗脱，得到0.411g(26％)作为白色固体的化 合物212i和0.193g(12％)作为白色固体的化合物212ii。所述结构指 定通过1-D NOE质子NMR实验得到证实。化合物212i：HPLC：100％， 2.817min(保留时间)(YMC S5 ODS柱，4.6×50mm，用含有0.1％TFA 的10-90％甲醇水溶液在4分钟内洗脱，4mL/min，于220nm检测)，MS (ES)：m/z376.0[M+Na]+。化合物212ii：HPLC：100％，3.013min(保留 时间)(YMC S5 ODS柱，4.6×50mm，用含有0.2％磷酸的10-90％甲醇 水溶液在4分钟内洗脱，4mL/min，于220nm监测)，MS(ES)：m/z 354.02[M+H]+。

                                    实施例213

(3aα，4β，7β，7aα)-2-(5-氯-1-萘基)六氢-4，7-二甲基-4，7-环氧-1H-异吲哚- 1，3(2H)-二酮(213B)

A.1-氨基-5-氯萘(213A)

向1.74g(6.06mmol)氟硼酸重氮盐(如实施例208A中描述的)的 丙酮(7mL)溶液中以多个小份加入693mg(7.00mmol)CuCl。在停止 氮气放出后，减压除去丙酮，将残余物溶于二氯甲烷(30ml)中。将 有机相用水(30mL)洗涤，经硫酸镁干燥、真空浓缩，最后经快速色 谱纯化(硅胶，EtOAc的己烷溶液，，0-15％)，得到754mg(70％)1-氯- 5-硝基萘。

将以上合成的1-氯-5-硝基萘(540mg，2.6mmol)溶于10mL AcOH中，然后用415mg(7.43mmol)铁粉处理，随后按照实施例209A中 所述方法用Ac2O(0.26mL，2.73mmol)酰基化，得到543mg(95％)1- 乙酰氨基-5-氯萘。

将以上合成的1-乙酰氨基-5-氯萘(52mg，0.24mmol)的3mL EtOH溶液加热至回流，然后用0.5mL 40％NaOH水溶液处理。将混 合物回流直至不再能检测到原料，将其冷却并减压浓缩。将残余物 溶于二氯甲烷(50mL)中，用水(25ml)洗涤。有机层经硫酸镁干燥， 真空浓缩，留下41mg(98％)的化合物213A，为白色固体。

B.(3aα，4β，7β，7aα)-2-(5-氯-1-萘基)六氢-4，7-二甲基-4，7-环氧-1H-异吲 哚-1，3(2H)-二酮(213B)

按照实施例208C中描述的方法，在密封管内，使化合物213A(24 mg，0.14mmol)与化合物20A(29mg，0.15mmol)、MgSO4(36mg，0.30 mmol)和Et3N(100μL，0.710mmol)在250μL甲苯中反应，在经制备 型反相HPLC纯化(YMC S5 ODS 20×100mm，用含有0.1％TFA的 30-100％甲醇水溶液在10分钟内洗脱，20mL/min)后，得到27mg(40％) 的化合物213B，为白色固体。HPLC：98％，1.82min(保留时间)(YMC S5 TurboPack Pro柱，4.6×33mm，用含有0.2％磷酸的10-90％甲醇水 溶液在2分钟内洗脱，4mL/min，于220nm检测)，MS(ES)：m/z356.4 [M+H]+。

                          实施例214

(3aα，4β，7β，7aα)-2-(5-氯-4-硝基-1-萘基)六氢-4，7-二甲基-4，7-环氧-1H- 异吲哚-1，3(2H)-二酮(214B)

A.1-氨基-5-氯-4-硝基萘(214A)

按照实施例209A中所述的方法，将1-乙酰氨基-5-氯萘(150mg， 0.68mmol，如实施例213A中所述方法制备)溶于1mL AcOH中，用 82μL红色发烟硝酸处理，随后用1mL 40％NaOH水溶液在3mL EtOH 中去酰化，得到49mg(32％)的化合物214A，为黄色固体。

B.(3aα，4β，7β，7aα)-2-(5-氯-4-硝基-1-萘基)六氢-4，7-二甲基-4，7-环氧- 1H-异吲哚-1，3(2H)-二酮(214B)

按照实施例208C中所述的方法，在密封管内，使化合物214A(27 mg，0.12mmol)与化合物20A(26mg，0.13mmol)、MgSO4(32mg，0.27 mmol)和Et3N(88μL，0.63mmol)在250μl甲苯中反应，在经制备型 反相HPLC纯化(YMC S5 ODS 20×100mm，用含有0.1％TFA的30- 100％甲醇水溶液在10分钟内洗脱，20mL/min)后，得到22mg(45％) 的化合物214B，为黄色固体。HPLC：24％，3.06min和76％，3.25min (阻转异构体，保留时间)(YMC S5 ODS柱，4.6×50mm，用含有0.2％ 磷酸的10-90％甲醇水溶液在4分钟内洗脱，4mL/min，于220nm检 测)，MS(ES)：m/z418.0[M+NH4]+。

                           实施例215

(3aα，4β，7β，7aα)-4-乙基六氢-7-甲基-2-(4-硝基-1-萘基)-4，7-环氧-1H-异 吲哚-1，3(2H)-二酮(215B)

A.(3aα，4β，7β，7aα)-4-乙基六氢-7-甲基-4，7-环氧异苯并呋喃-1，3-二酮 (215A)

将2-乙基-5-甲基呋喃(1.89mL，15.3mmol)溶于二氯甲烷(10mL) 中，加入马来酸酐(1.00g，10.2mmol)。将反应物于25℃搅拌18小时， 然后真空浓缩。将所得的粗制二环溶于EtOAc(50 mL)中，加入10％ Pd/C(0.40g)。通过气囊引入氢气。4小时后，通过硅藻土过滤反应 物，用EtAOc漂洗。真空浓缩，得到粗制化合物215A(1.93g)，为 白色固体。该物质不经纯化直接用于下一步反应。

B.(3aα，4β，7β，7aα)-4-乙基六氢-7-甲基-2-(4-硝基-1-萘基)-4，7-环氧- 1H-异吲哚-1，3(2H)-二酮(215B)

将化合物215A(0.168g，0.798mmol)和1-氨基-4-硝基萘(0.10g， 0.53mmol)悬浮于甲苯(0.8mL)中，加入TEA(0.2mL)和硫酸镁(0.1 g)。将混合物在密封管中于135℃加热18小时。然后将反应物冷却 至室温并过滤，用氯仿漂洗。浓缩，得到粗产物，将其经制备型SiO□2TLC纯化，用二氯甲烷洗脱。得到0.077g(0.20mmol，38％)化合物 215B，为黄色固体。HPLC：100％，3.260min(保留时间)(YMC S5 ODS 柱，4.6×50mm，用含有0.2％磷酸的10-90％甲醇水溶液在4分钟内洗 脱，4mL/min，于220nm检测)，MS(ES)：m/z381.05[M+H]+。

                            实施例216

(3aα，4β，7β，7aα)-2-(4-氰基-1-萘基)-N-(4-氟苯基)八氢-7-甲基-1，3-二氧 代-4，7-环氧-4H-异吲哚-4-乙酰胺(216B)

A.N-(4-氟苯基)-5-甲基-2-呋喃乙酰胺(216A)

将5-甲基-2-呋喃乙酸(1.00g，7.14mmol，按照WO 9507893，实 施例19中所述方法合成)溶于CH3CN/DMF(4∶1，25mL)中，然后加入 1-[3-(二甲氨基)丙基]-3-乙基碳二亚胺(1.37g，7.14mmol)和1-羟基-7- 氮杂苯并三唑(0.972g，7.14mmol)，接着加入4-氟苯胺(0.676mL，7.14 mmol)。3小时后，将反应物用EtOAc(150mL)稀释，用1N HCl(1×30 mL)、饱和碳酸氢钠水溶液(1×30mL)、盐水(1×40mL)洗涤，经硫酸 钠干燥。真空浓缩后，化合物216A(1.58g，95％)作为黄色泡沫状物 分离出来。无需进一步纯化。HPLC：78％，2.647min(保留时间)(YMC S5 ODS柱，4.6×50mm，用含有0.2％磷酸的10-90％甲醇水溶液在4 分钟内洗脱，4mL/min，于220nm检测)。

B.(3aα，4β，7β，7aα)-2-(4-氰基-1-萘基)-N-(4-氟苯基)八氢-7-甲基-1，3-二 氧代-4，7-环氧-4H-异吲哚-4-乙酰胺(216B)

将化合物216A(0.200g，0.858mmol)和4-(2，5-二氢-2，5-二氧代- 1H-吡咯-1-基)-2-三氟甲基苄腈(0.164g，0.66mmol)溶于苯中，于60 ℃加热14小时。然后将反应物冷却并真空浓缩。将所得的橙色油状 物溶于EtOAc(15mL)中，加入10％Pd/C(0.050g)。通过气囊引入氢 气。3小时后，将反应物通过硅藻土过滤，用EtOAc漂洗，真空浓 缩。所得的粗制物质经制备型硅胶TLC纯化，用5％丙酮的二氯甲 烷溶液洗脱，得到0.166g(54％)的化合物216B，为白色固体。NMR 光谱学表明仅有一种异构体，该异构体通过NOE实验测定为外型。 HPLC：95％，3.200min(保留时间)(YMC S5 ODS柱，4.6×50mm，用含 有0.2％磷酸的10-90％甲醇水溶液在4分钟内洗脱，4mL/min，于220 nm检测)，MS(ES)：m/z484.0[M+H]+。

                                 实施例217

(3aα，4β，7β，7aα)-六氢-4-甲基-2-(2-萘基)-4，7-环氧-1H-异吲哚-1，3(2H)- 二酮(快洗脱出的对映体)和(3aα，4β，7β，7aα)-六氢-4-甲基-2-(2-萘基)- 4，7-环氧-1H-异吲哚-1，3(2H)-二酮(慢洗脱出的对映体)(分别为217i和 217ii)

通过手性反相液相色谱，将外消旋化合物137分离为其单一对 映体。用Chiralpak AD-R柱(4.6×250mm)，用70％乙腈/30％水以1 mL/min洗脱。使用220nm的UV检测。通过分析性手性反相色谱分 析，发现快洗脱出的异构体-化合物217i(保留时间＝15.66min)为 99.9％ee，而慢洗脱出的异构体-化合物217ii(保留时间＝15.66min) 为99.6％ee。

                            实施例218

(3aα，4β，7β，7aα)-4-[4-[2-[[(4-氟苯基)甲基]甲基氨基]乙基]八氢-7-甲基- 1，3-二氧代-4，7-环氧-2H-异吲哚-2-基]-2-(三氟甲基)苄腈(218B)

A.(4-氟苄基)甲胺和双(4-氟苄基)甲胺(218A和218A’)

按照Singer等，J.Med.Chem.29；40-44(1986)中所述的方法， 制备化合物218A和218A’。将4-氟苄基溴(189mg，1.00mmol)在乙 醇(1.5mL)和甲胺(5mL，2M MeOH溶液)中回流3小时。加入另外一 份甲胺(2mL)，将混合物再回流1小时。将该溶液冷却并真空浓缩， 将残余物溶于2N HCl(3mL)和乙醚(1.5mL)的混合物中。分离各层， 将水层用另外一份乙醚萃取。将水溶液冷却至0℃，用NaOH滴定至 pH11，然后用二氯甲烷萃取。萃取液经硫酸镁干燥，真空浓缩，分 别得到120mg化合物218A与化合物218A’的2.5∶1混合物。粗制混 合物不经进一步纯化而进行到下一步。

B.(3aα，4β，7β，7aα)-4-[4-[2-[[(4-氟苯基)甲基]甲基氨基]乙基]八氢-7-甲 基-1，3-二氧代-4，7-环氧-2H-异吲哚-2-基]-2-(三氟甲基)苄腈(218B)

将化合物36(34.3mg，0.075mmol)和化合物218A与218A’(21 mg，～0.088mmol(218A))的甲苯(0.4mL)溶液于100℃加热过夜。将反 应混合物冷却至室温，然后减压浓缩。经硅胶快速色谱纯化，用25％ 丙酮/75％二氯甲烷洗脱，得到30mg(0.058mmol，78％)的218B，为 黄色固体。HPLC：99％，2.46min(保留时间)(YMC S5 ODS 4.6×50mm， 4分钟内用含有0.2磷酸的10-90％甲醇水溶液洗脱，于220nm检测)， MS(ES)：m/z516.26[M+H]+。

                               实施例219

(3aα，4β，5β，6β，7β，7aα)-4-(八氢-4，5，6，7-四甲基-1，3-二氧代-4，7-环氧- 2H-异吲哚-2-基)-2-(三氟甲基)苄腈(219D)

A.2，3，4，5-四甲基呋喃(219A)

按照Hancock等，J.Org.Chem.42，1850-1856(1977)和Amarnath， 等，J.Org.Chem.，60，301-307(1995)中所述的方法，制备化合物 219A。将2-丙酮(100mL，1.1mol)在PbO2(26.7g，0.112mol)上回流28 小时。冷却至室温后，将反应混合物过滤，将残余物用丙酮洗涤。 将滤液减压浓缩以除去丙酮，然后于20 Torr蒸馏。收集在100-120 ℃之间馏出的部分，得到6.75g(42.5％)3，4-二甲基己-2，5-二酮，为 浅黄色油状物。

将3，4-二甲基己-2，5-二酮(3.00g，21.1mmol)和对甲苯磺酸(401 mg，2.11mmol)的苯(30mL)溶液在迪安-斯达克榻分水器中加热至回 流过夜。常压下蒸馏反应混合物，以除去过量的苯。将残余的混合 物转移至较小的烧瓶中，于常压下蒸馏。收集在80-100℃之间馏出 的部分，得到509mg(19％)的化合物219A，为浅黄色油状物。

B.(3aα，4β，7β，7aα)-4-乙基-3a，4，7，7a-四氢-4，5，6，7-四甲基-4，7-环氧异苯 并呋喃-1，3-二酮(219B)

将化合物219A(400mg，3.22mmol)和马来酸酐(442mg，4.51 mmol)的Et2O(1.5mL)溶液于室温搅拌过夜。然后将反应混合物置于 冰箱中5天，此后收集产生的晶体并干燥，得到0.26g(37％)的化合 物219B，为黄褐色晶体。粗制化合物219B不经进一步纯化而进行 到下一步中。

C.(3aα，4β，5α，6α，7β，7aα)-4-乙基六氢-4，5，6，7-四甲基-4，7-环氧异苯并 呋喃-1，3-二酮(219C)

于室温、在氢气囊通气下，将化合物219B(120mg，0.545mmol) 和10％Pd/C(24mg，催化量)的EtOAc(2mL)溶液搅拌过夜。将反应 混合物通过硅藻土过滤并减压浓缩，得到100mg(0.446mmol，82％) 的化合物219C，为白色固体，所述化合物不经进一步纯化而进行到 下一步。

D.(3aα，4β，5β，6β，7β，7aα)-4-(八氢-4，5，6，7-四甲基-1，3-二氧代-4，7-环氧- 2H-异吲哚-2-基)-2-(三氟甲基)苄腈(219D)

将化合物219C(44.4mg，0.2mmol)、5-氨基-2-氰基三氟甲苯(45 mg，0.24mmol)、TEA(0.04mL)和硫酸镁(20mg)的甲苯(0.2mL)溶液 于135℃加热过夜。将反应混合物冷却至室温，过滤，然后减压浓缩。 经硅胶快速色谱纯化，用40％EtOAc/己烷洗脱，然后用MeOH洗涤 所得的固体，得到17mg(0.043mmol，22％)的化合物219D，为白色 固体。HPLC：90％，3.11min(保留时间)(YMC S5 ODS 4.6×50mm，4 分钟内含有0.2％磷酸的10-90％甲醇水溶液，于220nm检测)，MS(ES)： m/z391.2[M-H]-。

                             实施例220

(3aα，4β，7β，7aα)-4-[八氢-4-甲基-1，3-二氧代-7-[2-[4-(三氟甲基)苯氧基] 乙基]-4，7-环氧-2H-异吲哚-2-基]-2-(三氟甲基)苄腈(快洗脱对映体)和 (3aα，4β，7β，7aα)-4-[八氢-4-甲基-1，3-二氧代-7-[2-[4-(三氟甲基)苯氧基] 乙基]-4，7-环氧-2H-异吲哚-2-基]-2-(三氟甲基)苄腈(慢洗脱对映体)(分 别为220i和220ii)

用手性正相液相色谱，将外消旋化合物35分离为其单一的对映 体。用Chiralpak AD柱(50×500mm)，用85％己烷/7.5％甲醇/7.5％乙 醇以50mL/min洗脱。使用220nm UV检测。通过分析性手性正相色 谱分析，发现快洗脱异构体-化合物220i(保留时间＝55.86min)具 有95.8％ee([α]D25＝-53.02°，C＝3.134mg/cc，在二氯甲烷中)，而慢 洗脱异构体-化合物220ii(保留时间＝62.86min)为86％ee([α]D25＝ +48.74°，C＝2.242mg/cc，在二氯甲烷中)。

                              实施例221

(3aα，4β，5β，7β，7aα)-4-(八氢-5-羟基-4，7-二甲基-1，3-二氧代-4，7-环氧- 2H-异吲哚-2-基)-2-(三氟甲基)苄腈(221B)

A.(3aα，4β，7β，7aα)-4-(六氢-4，7-二甲基-1，3-二氧代-4，7-环氧-2H-异吲 哚-2-基)-2-(三氟甲基)苄腈(221Ai)和(3aα，4α，7α，7aα)-4-(六氢-4，7-二甲 基-1，3-二氧代-4，7-环氧-2H-异吲哚-2-基)-2-(三氟甲基)苄腈(221Aii)

将2，5-二甲基呋喃(0.800mL，7.51mmol)和4-(2，5-二氢-2，5-二氧 代-1H-吡咯-1-基)-2-三氟甲基苄腈(按照实施例1B中所述方法，使用 4-氰基-3-三氟甲基苯铵代替4-溴-3-甲基苯铵合成)(1.00g，3.75mmol) 的苯(4mL)溶液于60℃加热过夜。将反应混合物减压浓缩，然后置 于高真空泵上，直至油状物固化，得到化合物221Ai和221Aii的3∶1 混合物(通过LC和NMR测定)，为褐色固体，所述混合物不经进一 步纯化直接用于下一步。

B.(3aα，4β，5β，7β，7aα)-4-(八氢-5-羟基-4，7-二甲基-1，3-二氧代-4，7-环氧 -2H-异吲哚-2-基)-2-(三氟甲基)苄腈(221B)

于0℃，将BH3·THF(3.75mL，3.75mmol，1M的THF溶液)加入 粗制化合物221Ai和221Aii(3.75mmol)的THF(12.5mL)溶液中。在 原料耗尽后，将反应混合物减压浓缩。然后将所得的残余物溶于甲 苯(12.5mL)中，加入Me3NO(845mg，11.25mmol)，将混合物加热至 回流过夜。然后将反应混合物冷却至室温，加入到水中，用EtOAc(3X) 萃取。将合并的有机层经硫酸镁干燥，减压浓缩。经SiO2快速色谱 纯化，用75％EtOAc/己烷洗脱，得到0.354g(25％)的化合物221B， 为黄褐色粉末。HPLC：90％，2.45min(保留时间)(YMC S5 ODS柱， 4.6×50mm，用含有0.2％磷酸的10-90％甲醇水溶液在4分钟内洗脱，4 mL/min，于220nm检测)，MS(ES)：m/z381.11[M+H]+。

                                实施例222

(3aα，4β，5α，7β，7aβ)-4-(八氢-5-羟基-4，7-二甲基-1，3-二氧代-4，7-环氧- 2H-异吲哚-2-基)-2-(三氟甲基)苄腈(222D)

A.3-[[(1，1-二甲基乙基)二甲基甲硅烷基]氧基]-2，5-二甲基呋喃(222A)

将2，5-二甲基-3(3H)-呋喃酮(2.00g，17.8mmol)溶于二氯甲烷(180 mL)中。于25℃加入TEA(7.43mL，53.5mmol)，然后加入TBSOTf (4.92mL，21.4mmol)。1小时后，将反应物真空浓缩，所得的浆状液 经用3％TEA的己烷溶液平衡的硅胶柱分离。将产物用3％TEA/己 烷洗脱，得到3.6g(89％)的化合物222A，为橙色油状物，该化合物 直接用于后续反应中。

B.(3aα，4β，7β，7aα)-4-[5-[[(1，1-二甲基乙基)二甲基甲硅烷基]氧基]- 1，3，3a，4，7，7a-六氢-4，7-二甲基-1，3-二氧代-4，7-环氧-2H-异吲哚-2-基]-2- (三氟甲基)苄腈(222B)

将4-(2，5-二氢-2，5-二氧代-1H-吡咯-1-基)-2-三氟甲基苄腈(1.00g， 3.85mmol)溶于苯(5.0mL)中，加入化合物222A(1.30g，5.77mmol)。 将反应混合物温热至60℃2小时，然后冷却至25℃。然后真空浓缩 所述溶液，得到化合物222B，为黄色油状物，所述油状物不经纯化 而用于下一个反应中。HPLC：60％，4.013min(保留时间)(YMC S5 ODS柱，4.6×50mm，用含有0.2％磷酸的10-90％甲醇水溶液在4分钟 内洗脱，4mL/min，于220nm检测)。

C.(3aα，4β，5α，7β，7aβ)-4-[5-[[(1，1-二甲基乙基)二甲基甲硅烷基]氧基] 八氢-4，7-二甲基-1，3-二氧代-4，7-环氧-2H-异吲哚-2-基]-2-(三氟甲基) 苄腈(222C)

将粗制化合物222B(3.85mmol)溶于乙酸乙酯(75mL)中，加入 10％Pd/C(1.20g)。然后通过气囊引入氢气。24小时后，将反应物通 过硅藻土过滤，用乙酸乙酯漂洗，真空浓缩，得到黄色油状物。粗 产物经硅胶快速色谱纯化，用二氯甲烷/丙酮(0％-1％-2％丙酮)洗脱， 得到0.710g(35％)作为黄色固体的化合物222C。HPLC：100％，4.160 min(保留时间)(YMC S5 ODS柱，4.6×50mm，用含有0.2％磷酸的10- 90％甲醇水溶液在4分钟内洗脱，4mL/min，于220nm检测)，MS(ES)： m/z517.6[M+Na]+。

D.(3aα，4β，5α，7β，7aβ)-4-(八氢-5-羟基-4，7-二甲基-1，3-二氧代-4，7-环氧 -2H-异吲哚-2-基)-2-(三氟甲基)苄腈(222D)

将化合物222C(0.040g，0.081mmol)溶于THF(1.0mL)中，加入 HF-吡啶(0.5mL)。2小时后，小心地将反应物倾至冷的饱和碳酸氢钠 水溶液中。然后将混合物用二氯甲烷(3×10mL)萃取。将合并的有机 物用1N HCl(1×10mL)洗涤，经无水硫酸钠干燥。真空浓缩，得到 0.031g(10％)作为黄色固体的化合物222D。NOE实验证实为所指定 的异构体。HPLC：98％，2.777min(保留时间)(YMC S5 ODS柱，4.6×50 mm，用含有0.2％磷酸的10-90％甲醇水溶液在4分钟内洗脱，4 mL/min，于220nm检测)，MS(ES)：m/z403.06[M+Na]+。

                                   实施例223

(αR)-α-甲氧基苯乙酸2-[(3aα，4β，7β，7aα)-2-(4-氰基-1-萘基)八氢-7-甲 基-1，3-二氧代-4，7-环氧-4H-异吲哚-4-基]乙酯(223C)

A.(3aα，4β，7β，7aα)-4-[4-[2-[[(1，1-二甲基乙基)二甲基甲硅烷基]氧基] 乙基]八氢-7-甲基-1，3-二氧代-4，7-环氧-2H-异吲哚-2-基]-1-萘甲腈 (223A)

将4-氨基-1-萘甲腈(19.2g，114mmol)和马来酸酐(14.0g，113 mmol)的AcOH(230mL)溶液于115℃加热12小时。冷却至室温后， 将反应混合物减压浓缩，然后用二氯甲烷(2.5L)稀释。将有机层用水 (3L)洗涤3次，用饱和碳酸钠水溶液(1L)洗涤1次，用盐水(1L)洗 涤1次，经硫酸镁干燥，减压浓缩至约200ml。经阳离子交换树脂(60 g，CUBX13M6，United Chemical Technologies)快速色谱纯化，用二氯 甲烷洗脱，得到25.0g(88％)4-(2，5-二氢-2，5-二氧代-1H-1-基)-1-萘甲 腈，为黄色固体。HPLC 96％，2.48min(Phenomenex-prime S5-C18柱， 4.6×50mm，在4分钟内用含有0.2％磷酸的10-90％甲醇水溶液洗脱，4 mL/min，于220nm检测)，MS(ES)：m/z249.25[M+H]+。

在密封管内，将4-(2，5-二氢-2，5-二氧代-1H-1-基)-1-萘甲腈(1.00g， 4.03mmol)悬浮于苯(6.0mL)中，加入化合物204A(1.11g，5.24 mmol)。将反应物于60℃加热16小时，然后冷却至25℃。真空除去 苯，得到黄色固体。将该固体溶于乙酸乙酯(40mL)中，加入Pd/C(10％ Pd，0.300g)。然后通过气囊引入氢气。4小时后，将反应物通过硅藻 土过滤，用乙酸乙酯漂洗。真空浓缩，得到浅黄色固体，所述固体 经硅胶快速色谱纯化，用丙酮/氯仿(0％-1.5％-3％丙酮)洗脱，得到1.53 g(77％)化合物223A，为黄色泡沫状物。HPLC：86％，4.173min(保 留时间)(YMC S5 ODS柱，4.6×50mm，用含有0.2％磷酸的10-90％甲 醇水溶液在4分钟内洗脱，4mL/min，于220nm检测)。

B.(3aα，4β，7β，7aα)-4-[八氢-4-(2-羟乙基)-7-甲基-1，3-二氧代-4，7-环氧- 2H-异吲哚-2-基]-1-萘甲腈(223B)

将化合物223A(1.37g，2.97mmol)溶于THF(8.0mL)中，然后转 移至聚丙烯瓶中，冷却至0℃。然后加入HF·吡啶(2.0mL)。20分钟 后，小心地将反应物倾至冷饱和碳酸氢钠水溶液中，用二氯甲烷(3×30 mL)萃取。然后将有机物用1N HCl洗涤，经无水硫酸钠干燥。真空 浓缩，得到0.99g(89％)化合物223B，为黄色泡沫状物，该泡沫状 物不经进一步纯化。HPLC：96％，2.443和2.597min(阻转异构体)(保 留时间)(YMC S5 ODS柱，4.6×50mm，用含有0.2％磷酸的10-90％甲 醇水溶液在4分钟内洗脱，4mL/min，于220nm检测)，MS(ES)：m/z 399.02[M+Na]+。

C.(αR)-α-甲氧基苯乙酸2-[(3aα，4β，7β，7aα)-2-(4-氰基-1-萘基)八氢-7- 甲基-1，3-二氧代-4，7-环氧-4H-异吲哚-4-基]乙酯(223C)

将化合物223B(0.200g，0.575mmol)加入至WSDCC(0.138g， 0.719mmol)和(R)-杏仁酸(0.096g，0.575mmol)的二氯甲烷(6.0mL)溶 液中。然后加入4-DMAP(0.005g)，将反应物于25℃搅拌4小时。 然后将混合物用二氯甲烷稀释，用1N HCl(2×10mL)洗涤，用碳酸 氢钠(10mL)洗涤1次，经无水硫酸钠干燥。真空浓缩，得到0.220g(71％) 化合物223C，为黄色固体，该固体不经进一步纯化。HPLC：100％， 3.283min(保留时间)(YMC S5 ODS柱，4.6×50mm，用含有0.2％磷酸 的10-90％甲醇水溶液在4分钟内洗脱，4mL/min，于220nm检测)，MS (ES)：m/z547.26[M+Na]+。

                                  实施例224

(3aα，4β，7β，7aα)-2-(甲硫基)-4-(八氢-4，7-二甲基-1，3-二氧代-4，7-环氧- 2H-异吲哚-2-基)苄腈(224)

按照实施例208C中所述的方法，在密封管内，使4-氨基-2-(甲 硫基)苄腈(100mg，0.609mmol，按照EP 40931 A1中所述方法合成) 与化合物20A(131mg，0.668mmol)、硫酸镁(161mg，1.34mmol)和 Et3N(0.44mL，3.17mmol)在0.50mL甲苯中反应，经制备型反相HPLC 纯化(YMC S5 ODS 20×100mm，用含有0.1％TFA的30-100％甲醇水 溶液在10分钟内洗脱，20mL/min)后，得到137mg(0.400mmol，66％) 的化合物224，为白色固体。HPLC：100％，2.73min(保留时间)(YMC S5 ODS柱，4.6×50mm，用含有0.2％磷酸的10-90％甲醇水溶液在4分钟 内洗脱，4mL/min，于220nm检测)，MS(ES)：m/z401.0[M-H+OAc]-。

                                   实施例225

(3aα，4β，7β，7aα)-2-(甲基亚硫酰基)-4-(八氢-4，7-二甲基-1，3-二氧代-4，7- 环氧-2H-异吲哚-2-基)苄腈(225)

向冰冷的化合物224(30mg，0.088mmol)在2mL 水/MeOH(1∶1) 中的悬浮液中，一次性加入固体过硫酸氢钾制剂(80mg，0.26mmol)。 将所得混合物于0℃搅拌4小时，然后用水(10mL)稀释，用二氯甲 烷(2×20mL)萃取。将合并的有机层干燥，真空浓缩，留下残余物， 通过硅胶短柱过滤该物质，用二氯甲烷洗脱而纯化，得到32mg(0.088 mmol，100％)的化合物225，为无色油状物。HPLC：99％，2.01min(保 留时间)(YMC S5 ODS柱，4.6×50mm，用含有0.2％磷酸的10-90％甲 醇水溶液在4分钟内洗脱，4mL/min，于220nm检测)，MS(ES)：m/z 376.0[M+NH4]+。

                                实施例226

(3aα，4β，7β，7aα)-2-(甲基磺酰基)-4-(八氢-4，7-二甲基-1，3-二氧代-4，7-环 氧-2H-异吲哚-2-基)苄腈(226)

向化合物225(48mg，0.14mmol)的二氯甲烷(2mL)溶液中，一 次性加入固体mCPBA(145mg，50％混合物，0.42mmol)。使所得的混 合物温热至室温，搅拌60小时，此时通过HPLC不再检测到原料。 通过加入饱和碳酸氢钠溶液(5mL)猝灭反应物，分离各层，将水层用 二氯甲烷(20mL)萃取。合并的有机相经硫酸镁干燥，真空浓缩。残 留的残余物经反相制备型HPLC纯化(YMC S5 ODS 20×100mm，用 含有0.1％TFA的30-100％甲醇水溶液在10分钟内洗脱，20mL/min)， 得到48mg(0.13mmol，92％)的化合物226，为白色固体。HPLC：100％， 2.07min(保留时间)(YMC S5 ODS柱，4.6×50mm，用含有0.2％磷酸 的10-90％甲醇水溶液在4分钟内洗脱，4mL/min，于220nm检测)，MS (ES)：m/z392.0[M+NH4]+。

                               实施例227

(3aα，4β，5β，7β，7aα)-7-[2-[[(1，1-二甲基乙基)二甲基甲硅烷基]氧基]乙 基]六氢-5-羟基-4-甲基-2-(4-硝基-1-萘基)-4，7-环氧-1H-异吲哚- 1，3(2H)-二酮(227B)

A.(3aα，4β，7β，7aα)-4-[2-[[(1，1-二甲基乙基)二甲基甲硅烷基]氧基]乙 基]-3a，4，7，7a-四氢-7-甲基-2-(4-硝基-1-萘基)-4，7-环氧-1H-异吲哚- 1，3(2H)-二酮(227A)

将化合物204A(455mg，1.89mmol)和1-[4-硝基萘]-1H-吡咯-2，5- 二酮(254mg，0.947mmol，按照实施例223A中关于4-(2，5-二氢-2，5- 二氧代-1H-1-基)-1-萘甲腈所述的方法制备)的苯(2mL)溶液于60℃加 热过夜。将反应混合物减压浓缩，得到粗制化合物227A，为褐色固 体，该固体不经进一步纯化直接用于下一步中。

B.(3aα，4β，5β，7β，7aα)-7-[2-[[(1，1-二甲基乙基)二甲基甲硅烷基]氧基] 乙基]六氢-5-羟基-4-甲基-2-(4-硝基-1-萘基)-4，7-环氧-1H-异吲哚- 1，3(2H)-二酮(227B)

于0℃，将BH3·THF(0.95mL，0.95mmol，1M的THF溶液)加入 至粗制化合物227A(0.48g，0.95mmol)的THF(2mL)溶液中。在通过 HPLC表明化合物227A耗尽后，减压浓缩反应混合物。然后将所得 的残余物溶于甲苯(2mL)中，加入Me3NO(71mg，2.84mmol)，将混 合物加热至回流过夜。然后将反应混合物冷却至室温，加入至水中， 用EtOAc(3X)萃取。合并的有机层经硫酸镁干燥，减压浓缩。经SiO2快速色谱纯化，用75％EtOAc/己烷洗脱，得到130mg(26％)的化合 物227B，为褐色固体。HPLC：94％，3.92min(保留时间)(YMC S5 ODS 柱，4.6×50mm，用含有0.2％磷酸的10-90％甲醇水溶液在4分钟内洗 脱，4mL/min，于220nm检测)，MS(ES)：m/z527.5[M+H]+。

                       实施例228

(3aα，4β，5β，7β，7aα)-六氢-5-羟基-7-(2-羟乙基)-4-甲基-2-(4-硝基-1-萘 基)-4，7-环氧-1H-异吲哚-1，3(2H)-二酮(228)

于0℃，将TBAF(0.3mL，0.3mmol，1M的THF溶液)和HF(0.3 mL，50％水溶液)在CH3CN(6mL)中的混合物加入至227B(104mg， 0.197mmol)的THF(2mL)溶液中。将反应混合物于室温搅拌过夜。 在经TLC表明原料耗尽后，加入水和EtOAc，然后分离各层。将水 层用EtOAc(1X)萃取，将合并的有机层用水(1X)和盐水(1X)洗涤，经 硫酸钠干燥并减压浓缩。经SiO2快速色谱纯化，用5％MeOH/二氯 甲烷洗脱，得到61mg(75％)的化合物228，为黄色固体。HPLC：99％， 2.47min(保留时间)(YMC S5 ODS柱，4.6×50mm，用含有0.2％磷酸 的10-90％甲醇水溶液在4分钟内洗脱，4mL/min，于220nm检测)，MS (ES)：m/z 411.2[M-H]-。

                                实施例229

(3aα，4β，5β，7β，7aα)-7-[2-(4-氟苯氧基)乙基]六氢-5-羟基-4-甲基-2-(4-硝 基-1-萘基)-4，7-环氧-1H-异吲哚-1，3(2H)-二酮(229)

加入DBAD(37.7mg，0.164mmol)至PPh3(43mg，0.164mmol)的 THF(1mL)溶液中。搅拌10分钟后，加入4-氟苯酚(18.3mg，0.164 mmol)，再搅拌反应混合物5分钟。加入化合物228(45mg，0.109mmol) 的THF(1mL)溶液，将混合物于室温搅拌过夜。HPLC显示，所述 粗制反应混合物含有大多数原料二醇(化合物228)，因此，于室温下 将该混合物加入至先前预先形成的PPh3(86mg)、DBAD(75.4mg)和 苯酚(36.6mg)在THF(4mL)中的混合物中。继续搅拌，直至所有化 合物228耗尽。然后减压浓缩反应物。经反相制备型HPLC纯化[15.2 min(保留时间)(YMC S5 ODS A柱，20×100mm，在15分钟内用含 有0.1％TFA的10-90％甲醇水溶液洗脱，20mL/min，于220nm检 测)]，得到25.0mg(45％)的化合物229，为浅黄色固体。HPLC：99％， 3.53min(保留时间)(YMC S5 ODS柱，4.6×50mm，用含有0.2％磷酸 的10-90％甲醇水溶液在4分钟内洗脱，4mL/min，于220nm检测)，MS (ES)：m/z505.2[M-H]-。

                                    实施例230

(3aα，4β，5β，6β，7β，7aα)-4-(八氢-5，6-二羟基-4，7-二甲基-1，3-二氧代-4，7- 环氧-2H-异吲哚-2-基)-2-(三氟甲基)苄腈和(3aα，4β，5α，6α，7β，7aα)-4- (八氢-5，6-二羟基-4，7-二甲基-1，3-二氧代-4，7-环氧-2H-异吲哚-2-基)-2- (三氟甲基)苄腈(分别为230Bi和230Bii)

A.(3aα，4β，7β，7aα)-4-(1，3，3a，4，7，7a-六氢-4，7-二甲基-1，3-二氧代-4，7-环 氧-2H-异吲哚-2-基)-2-(三氟甲基)苄腈(230A)

将2，5-二甲基呋喃(1.23mL，11.5mmol)和4-(2，5-二氢-2，5-二氧代 -1H-吡咯-1-基)-2-三氟甲基苄腈(2.00g，7.69mmol)溶于苯(10mL)中， 于60℃加热18小时。然后真空除去挥发性有机物。所得的粗制化合 物230A不经纯化而用于下一步。HPLC：71％，3.007min(保留时 间)(YMC S5 ODS柱，4.6×50mm，用含有0.2％磷酸的10-90％甲醇水 溶液在4分钟内洗脱，4mL/min，于220nm检测)。

B.(3aα，4β，5β，6β，7β，7aα)-4-(八氢-5，6-二羟基-4，7-二甲基-1，3-二氧代- 4，7-环氧-2H-异吲哚-2-基)-2-(三氟甲基)苄腈和(3aα，4β，5α，6α，7β，7aα)- 4-(八氢-5，6-二羟基-4，7-二甲基-1，3-二氧代-4，7-环氧-2H-异吲哚-2-基)- 2-(三氟甲基)苄腈(230Bi和230Bii)

将化合物230A(0.100g，0.281mmol)溶于丙酮中，加入N-甲基 吗啉-N-氧化物(50％水溶液，0.10mL，0.42mmol)。然后加入OsO4(4％ 水溶液，0.014mmol)。于25℃3小时后，反应完成，在剧烈搅拌下加 入亚硫酸钠(0.250g)。15分钟后，加入盐水(10mL)，将该溶液用EtOAc (3×15mL)萃取。有机物经无水硫酸钠干燥，然后真空浓缩。将得到 的粗制二醇混合物经制备型TLC纯化，用18％丙酮的氯仿溶液洗脱， 得到0.038g(34％)的化合物230Bi(β面型)和0.012g(11％)的化合物 230Bii(α面型)，为浅黄色固体。化合物230Bi：HPLC：100％，2.567min (保留时间)(YMC S5 ODS柱，4.6×50mm，用含有0.2％磷酸的10-90％ 甲醇水溶液在4分钟内洗脱，4mL/min，于220nm检测)，MS(ES)：m/z 397.08[M+H]+。化合物230Bii：HPLC：100％，2.417min(保留时 间)(YMC S5 ODS柱，4.6×50mm，用含有0.2％磷酸的10-90％甲醇水 溶液在4分钟内洗脱，4mL/min，于220nm检测)，MS(ES)：m/z397.08 [M+H]+。

                                实施例231

(3aα，4β，5β，6β，7β，7aα)-4-[八氢-5，6-二羟基-4-(羟乙基)-7-甲基-1，3-二氧 代-4，7-环氧-2H-异吲哚-2-基]-1-萘甲腈(231C)

A.(3aα，4β，7β，7aα)-4-[4-[2-[[(1，1-二甲基乙基)二甲基甲硅烷基]氧基] 乙基]-1，3，3a，4，7，7a-六氢-7-甲基-1，3-二氧代-4，7-环氧-2H-异吲哚-2- 基]-1-萘甲腈(231A)

将化合物204A(29.0g，120mmol)和4-(2，5-二氢-2，5-二氧代-1H- 1-基)-1-萘甲腈(20.0g，80.6mmol)悬浮于苯(80mL)中，加热至60℃达 14小时。然后于40℃真空浓缩混合物40分钟。将所得的浆状液冷 却至25℃，然后悬浮于MeOH(200mL)中，于室温搅拌30分钟。然 后将该溶液冷却至0℃30分钟，然后过滤，用冷MeOH漂洗。将所 得的固体真空干燥，得到26.1g粗制化合物231A，为白色固体。将 甲醇溶液真空浓缩，再悬浮于MeOH(50mL)中，然后冷却至-20℃4 小时。随后过滤所述溶液，用冷MeOH漂洗。将所得的固体真空干 燥，得到3.8g(10％)的化合物231A，为白色固体。HPLC：95％，4.227min (保留时间)(YMC S5 ODS柱，4.6×50mm，用含有0.2％磷酸的10-90％ 甲醇水溶液在4分钟内洗脱，4mL/min，于220nm监测)。

B.(3aα，4β，5β，6β，7β，7aα)-4-[4-[2-[[(1，1-二甲基乙基)二甲基甲硅烷基] 氧基]乙基]八氢-5，6-二羟基-7-甲基-1，3-二氧代-4，7-环氧-2H-异吲哚-2- 基]-1-萘甲腈(231B)

将化合物231A(0.400g，0.851mmol)溶于丙酮(9.0mL)中，加入 N-甲基吗啉-N-氧化物(50％水溶液，0.150mL，1.28mmol)。然后加入 OsO4(4％水溶液，0.043mmol)。于25℃3小时后，反应完成，在剧烈 搅拌下加入亚硫酸钠(1.0g)。15分钟后，加入盐水(30mL)，将该溶 液用EtOAc(3×50mL)萃取。有机物经无水硫酸钠干燥，然后真空浓 缩。将所得的粗制二醇经二氧化硅快速色谱纯化，用5-25％丙酮的氯 仿溶液洗脱，得到0.355g(80％)的化合物231B，为黄色固体。HPLC： 93％，3.903min(保留时间)(YMC S5 ODS柱，4.6×50mm，用含有0.2％ 磷酸的10-90％甲醇水溶液在4分钟内洗脱，4mL/min，于220nm检 测)，MS(ES)：m/z522.00[M+H]+。

C.(3aα，4β，5β，6β，7β，7aα)-4-[八氢-5，6-二羟基-4-(羟乙基)-7-甲基-1，3-二 氧代-4，7-环氧-2H-异吲哚-2-基]-1-萘甲腈(231C)

将化合物231B(0.400g，0.766mmol)溶于THF(5.0mL)中，将 其转移至聚丙烯瓶中，然后冷却至0℃。随后加入HF·吡啶(1.0mL)。 20分钟后，小心地将反应物倾至冷饱和碳酸氢钠水溶液中，用二氯 甲烷(3×30mL)萃取。然后，将有机物用1N HCl洗涤1次，经无水 硫酸钠干燥。真空浓缩，得到0.290g(93％)化合物231C，为黄色泡 沫状物，该物质不经进一步纯化。HPLC：92％，2.273和2.423min(阻 转异构体)(保留时间)(YMC S5 ODS柱，4.6×50mm，用含有0.2％磷酸 的10-90％甲醇水溶液在4分钟内洗脱，4mL/min，于220nm检测)，MS (ES)：m/z409.10[M+H]+。

                               实施例232

(3aα，4β，5β，6β，7β，7aα)-4-[八氢-5，6-二羟基-4-甲基-1，3-二氧代-7-[2-[4- (三氟甲基)苯氧基]乙基]-4，7-环氧-2H-异吲哚-2-基]-2-(三氟甲基)苄腈 (232C)

A.2-甲基-5-[2-[4-(三氟甲基)苯氧基]乙基]呋喃(232A)

向三苯膦(1.56g，5.95mmol)的THF(40mL)溶液中加入DBAD (1.37g，5.95mmol)。10分钟后，加入4-三氟甲基苯酚(0.964g，5.95 mmol)。再过10分钟后，加入化合物21A(0.500g，3.97mmol)。于25 ℃14小时后，将反应物真空浓缩，经二氧化硅快速色谱纯化，用氯 仿洗脱，得到0.713g(44％)的化合物232A，为透明油状物。

B.(3aα，4β，7β，7aα)-4-[1，3，3a，4，7，7a-六氢-4-甲基-1，3-二氧代-7-[2-[4-(三 氟甲基)苯氧基]乙基]-4，7-环氧-2H-异吲哚-2-基]-2-(三氟甲基)苄腈 (232B)

将化合物232A(0.301g，1.15mmol)和4-(2，5-二氢-2，5-二氧代1H- 吡咯-1-基)-2-三氟甲基苄腈(0.220g，0.846mmol)悬浮于苯(1.5mL) 中，然后加热至60℃14小时。随后于40℃真空浓缩混合物40分钟。 粗产物经二氧化硅快速色谱纯化，用10-0％己烷的二氯甲烷溶液洗 脱，得到0.199g(44％)的化合物232B，为黄色固体。通过NOE实验， 表征化合物232B为外型非对映体。HPLC：94％，3.993min(保留时 间)(YMC S5 ODS柱，4.6×50mm，用含有0.2％磷酸的10-90％甲醇水 溶液在4分钟内洗脱，4mL/min，于220nm检测)。

C.(3aα，4β，5β，6β，7β，7aα)-4-[八氢-5，6-二羟基-4-甲基-1，3-二氧代-7-[2- [4-(三氟甲基)苯氧基]乙基]-4，7-环氧-2H-异吲哚-2-基]-2-(三氟甲基)苄 腈(232C)

将化合物232B(0.075g，0.140mmol)溶于丙酮(2.0mL)中，加入 N-甲基吗啉-N-氧化物(50％水溶液，0.025mL，0.21mmol)。然后加入 OsO4(4％水溶液，0.007mmol)。于25℃3小时后，反应完成，在剧烈 搅拌下加入亚硫酸钠(0.25g)。15分钟后，加入盐水(5mL)，将该溶 液用EtOAc(3×10mL)萃取。有机物经无水硫酸钠干燥，然后真空浓 缩。将得到的粗制二醇经制备型硅胶TLC纯化，用10％丙酮的氯仿 溶液洗脱，得到0.038g(48％)的化合物232C，为黄色固体。HPLC：98％， 3.747min(保留时间)(YMC S5 ODS柱，4.6×50mm，用含有0.2％磷酸 的10-90％甲醇水溶液在4分钟内洗脱，4mL/min，于220nm检测)，MS (ES)：m/z593.08[M+Na]+。

                                实施例233

(3aα，4β，5β，5aβ，8aβ，8bα)-4-(十氢-5-羟基-4-甲基-1，3-二氧代-4，8a-环氧- 2H-呋喃并[3，2-e]异吲哚-2-基)-1-萘甲腈(233)

向三苯膦(0.072g，0.28mmol)的THF(3.0mL)溶液中加入DBAD (0.063g，0.28mmol)。10分钟后，加入4-氰基苯酚(0.033g，0.28 mmol)。再经10分钟后，加入化合物231C(0.075g，0.18mmol)。于 25℃3小时后，将反应物真空浓缩，经制备型硅胶TLC纯化，用15％ 丙酮的氯仿溶液洗脱，得到0.068g(95％)的化合物233，为白色固体。 HPLC：95％，2.430和2.560min(阻转异构体，保留时间)(YMC S5 ODS 柱，4.6×50mm，在4分钟内用含有0.2％磷酸的10-90％甲醇水溶液洗 脱，4mL/min，于220nm检测)，MS(ES)：m/z391.09[M+H]+。

                            实施例234

(3aα，4β，7β，7aα)-2-(4-氰基-1-萘基)八氢-7-甲基-1，3-二氧代-4，7-环氧- 4H-异吲哚-4-乙酸(234B)

A.(3aα，4β，7β，7aα)-2-(4-氰基-1-萘基)-1，2，3，3a，7，7a-六氢-7-甲基-1，3-二 氧代-4，7-环氧-4H-异吲哚4-乙酸(234A)

将5-甲基-2-呋喃乙酸(0.500g，3.57mmol)和4-(2，5-二氢-2，5-二氧 代-1H-1-基)-1-萘甲腈(0.899g，3.57mmol)溶于苯(3.0mL)中，于60℃ 加热2小时，然后冷却至25℃。12小时后，从溶液中沉淀白色固体， 将其滤出，收集并用乙醚漂洗，得到1.20g(87％)的化合物234A，为 浅黄色固体。NMR表明仅有一种非对映体。HPLC：86％，2.767min(保 留时间)(YMC S5 ODS柱，4.6×50mm，在4分钟内用含有0.2％磷酸的 10-90％甲醇水溶液洗脱，4mL/min，于220nm检测)，MS(ES)：m/z 389.45[M+H]+。

B.(3aα，4β，7β，7aα)-2-(4-氰基-1-萘基)八氢-7-甲基-1，3-二氧代-4，7-环氧 -4H-异吲哚-4-乙酸(234B)

将化合物234A(1.10g，2.82mmol)溶于EtOH/EtOAc(1∶1，50mL) 中，加入10％Pd/C(0.4g，催化剂)，然后通过气囊加入氢气。于25 ℃5小时后，将反应物通过硅藻土过滤，用EtOAc漂洗，真空浓缩， 得到1.00g(91％)的化合物234B，为黄色固体。HPLC：80％，2.84min (保留时间)(YMC S5 ODS柱，4.6×50mm，在4分钟内用含有0.2％磷 酸的10-90％甲醇水溶液洗脱，4mL/min，于220nm检测)，MS(ES)： m/z391.1[M+H]+。

                                  实施例235

(3aα，4β，7β，7aα)-2-(4-氰基-1-萘基)八氢-7-甲基-1，3-二氧代-4，7-环氧- 4H-异吲哚-4-乙酸甲酯(235)

将化合物234B(0.050g，0.13mmol)溶于乙腈(2.0mL)中，然后加 入DCC(0.025g，0.13mmol)，接着加入HOAc(0.018g，0.13mmol)。 加入4-氟苄醇(0.014mL，0.13mmol)，将反应物搅拌3小时。然后真 空浓缩反应混合物，经反相制备型HPLC纯化(YMC S5 ODS 20×100 mm，在15分钟内用含有0.1％TFA的10-90％甲醇水溶液洗脱，20 mL/min，于220nm检测)。纯化得到0.040g作为白色固体的化合物 235，而不是预期的苄酯。通过NMR或LC-MS没有观测到预期的苄 酯。HPLC：100％，3.033min(保留时间)(YMC S5 ODS柱，4.6×50mm，4 分钟内用含有0.2％磷酸的10-90％甲醇水溶液洗脱，4mL/min，于220 nm检测)，MS(ES)：m/z405.51[M+H]+。

                                 实施例236

(3aα，4β，7β，7aα)-2-(4-氰基-1-萘基)-N-[(4-氟苯基)甲基]八氢-7-甲基- 1，3-二氧代-4，7-环氧-4H-异吲哚-4-乙酰胺(236)

将化合物234B(0.10g，0.27mmol)溶于乙腈(4.0mL)中。然后加 入HOAc(0.035g，0.27mmol)和DCC(0.049g，0.27mmol)，接着加入 4-氟苄胺(0.030mL，0.27mmol)。于25℃4小时后，将反应物真空浓 缩，经反相制备型HPLC纯化(YMC S5 ODS 20×100mm，在15分钟 内用含有0.1％TFA的10-90％甲醇水溶液洗脱，20mL/min，于220nm 检测)，得到0.085g(67％)的化合物236，为白色固体。HPLC：100％， 3.277min(保留时间)(YMC S5 ODS柱，4.6×50mm，在4分钟内用含 有0.2％磷酸的10-90％甲醇水溶液洗脱，4mL/min，于220nm检测)， MS(ES)：m/z498.43[M+H]+。

                              实施例237

(3aα，4β，7β，7aα)-N-[2-[2-(4-氰基-1-萘基)八氢-7-甲基-1，3-二氧代-4，7- 环氧-4H-异吲哚-4-基]乙基]-4-氟苯甲酰胺(237B)

A.4-氟-N-[2-(5-甲基-2-呋喃基)乙基]苯甲酰胺(237A)

于室温下，将4-氟苯乙酰基氯(0.29mL，2.44mmol)滴加至β-(5- 甲基-2-呋喃基)乙胺(300mg，2.44mmol，按照Yur’ev.等J.Gen.Chem. USSR(Engl.Transl.)33，3444-8(1963)的方法制备)的THF(2.5mL)溶 液中，然后滴加Et3N(0.34mL，2.44mmol)。当通过HPLC表明原料 耗尽后，立即将反应物用水猝灭，用二氯甲烷萃取。将合并的有机 层经硫酸镁干燥，减压浓缩。通过硅胶快速色谱纯化，用0％-50％ EtOAc/己烷梯度洗脱，得到523mg(95％)的化合物237A，为白色固 体。HPLC：99％，2.84min(保留时间)(Phenomenex-prime S5-C18柱， 4.6×50mm，用含有0.2％磷酸的10-90％甲醇水溶液在4分钟内洗脱，4 mL/min，于220nm检测)，MS(ES)：m/z248.15[M+H]+。

B.(3aα，4β，7β，7aα)-N-[2-[2-(4-氰基-1-萘基)八氢-7-甲基-1，3-二氧代- 4，7-环氧-4H-异吲哚-4-基]乙基]-4-氟苯甲酰胺(237B)

将化合物237A(221.5mg，0.896mmol)和4-(2，5-二氢-2，5-二氧代- 1H-1-基)-1-萘甲腈(222.4mg，0.896mmol)的苯(4mL)溶液于60℃加热 过夜。将反应混合物减压浓缩，然后溶于EtOAc(30mL)中。加入10％ Pd/C(50mg)，在用氢气气囊通气下将混合物搅拌过夜。将反应混合 物通过硅藻土柱过滤，减压浓缩。经快速色谱纯化，用25％-75％EtOAc/ 己烷梯度洗脱，得到160mg(36％)的化合物237B，为灰白色固体。 HPLC：97％，3.13和3.23min(保留时间)(Phenomenex-prime S5-C18柱， 4.6×50mm，用含有0.2％磷酸的10-90％甲醇水溶液在4分钟内洗脱，4 mL/min，于220nm检测)，MS(ES)：m/z498.11[M+H]+。

                                   实施例238

[3aR-(3aα，4β，7β，7aα)]-4-[八氢-4-(2-羟乙基)-7-甲基-1，3-二氧代-4，7-环 氧-2H-异吲哚-2-基]-1-萘甲腈和[3aS-(3aα，4β，7β，7aα)]-4-[八氢-4-(2-羟 乙基)-7-甲基-1，3-二氧代-4，7-环氧-2H-异吲哚-2-基]-1-萘甲腈(238i和

用正相制备型手性HPLC(CHIRALPAK AD 5×50cm柱；用20％ MeOH/EtOH(1∶1)的庚烷溶液(等度)洗脱，以50mL/min，于220nm 检测)，将外消旋化合物223B分离为其对映体，得到快洗脱出的化 合物238i(Chiral HPLC：13.54min；CHIRALPAK AD 4.6×250mm柱； 用20％MeOH/EtOH(1∶1)的庚烷溶液，以1mL/min洗脱)和慢洗脱出 的化合物238ii(Chiral HPLC：14.99min；CHIRALPAK AD 4.6×250mm 柱；用20％MeOH/EtOH(1∶1)的庚烷溶液，以1mL/min洗脱)。未确 定化合物238i和238ii的绝对构象。为了使命名简化，在本文中将化 合物238i指定为具有“R”构型，而化合物238ii指定为具有“S” 构型。在本文中从化合物238i衍生的对映体纯产物被指定为具有“R” 构型，而从化合物238ii衍生的对映体纯产物被指定为具有“S”构 型。

                                   实施例239

[3aR-(3aα，4β，7β，7aα)]-4-[4-[2-(3-氟苯氧基)乙基]八氢-7-甲基-1，3-二氧 代-4，7-环氧-2H-异吲哚-2-基]-1-萘甲腈和[3aS-((3aα，4β，7β，7aα)]-4-[4- [2-(3-氟苯氧基)乙基]八氢-7-甲基-1，3-二氧代-4，7-环氧-2H-异吲哚-2- 基]-1-萘甲腈(239i和239ii)

向三苯膦(0.052g，0.20mmol)的HF(2.0mL)溶液中加入DBAD (0.046g，0.2mmol)。10分钟后，加入3-氟苯酚(0.018mL，0.2mmol)。 再过10分钟后，加入化合物238i(0.050g，0.13mmol)。于25℃3小 时后，将反应物真空浓缩，经制备型HPLC纯化(YMC S5 ODS 20×100 mm，在15分钟内用含有0.2％TFA的10-90％甲醇水溶液洗脱，20 mL/min，于220nm检测)，得到0.031g(33％)的化合物239i，为白色 固体。用化合物238ii重复该程序，得到化合物239ii。化合物239i： HPLC：100％，3.80min(保留时间)(YMC S5 ODS柱，4.6×50mm，在4 分钟内用含有0.2％磷酸的10-90％甲醇水溶液洗脱，4mL/min，于220 nm检测)，MS(ES)：m/z471.65[M+H]+，[α]D25＝-47.371(c＝4.412 mg/cc，二氯甲烷)。化合物239ii：HPLC：100％，3.80min(保留时 间)(YMC S5 ODS柱，4.6×50mm，在4分钟内用含有0.2％磷酸的10- 90％甲醇水溶液洗脱，4mL/min，于220nm检测)，MS(ES)：m/z471.65 [M+H]+，[α]D25＝+24.3(c＝4.165mg/cc，CH2Cl2)。

                                  实施例240

(4-氟苯基)氨基甲酸2-[(3aα，4β，7β，7aα)-2-(4-氰基-1-萘基)八氢-7-甲基 -1，3-二氧代-4，7-环氧-4H-异吲哚-4-基]乙酯(240)

将化合物223B(0.100g，0.279mmol)溶于二氯乙烷(3.0mL)中， 加入异氰酸4-氟苯酯(0.048mL，0.42mmol)，然后于60℃加热。2小 时后，将反应物冷却至25℃，用二氯甲烷稀释。将混合物用饱和碳 酸氢钠水溶液(20mL)洗涤1次，然后将有机相经无水硫酸钠干燥。 粗制物质经硅胶快速色谱纯化，用15％丙酮的氯仿溶液洗脱，得到 0.098g(68％)的化合物240，为黄色泡沫状物。HPLC：98％，3.320和 3.457min(阻转异构体，保留时间)(YMC S5 ODS柱，4.6×50mm，在 4分钟内含有0.2％磷酸的10-90％甲醇水溶液洗脱，4mL/min，于220 nm检测)，MS(ES)：m/z514.13[M+H]+。

                                  实施例241

(3aα，4β，7β，7aα)-4-[八氢-4-(2-羟乙基)-1，3-二氧代-4，7-环氧-2H-异吲哚 -2-基]-1-萘甲腈(241D)

A.2-[2-[[(1，1-二甲基乙基)二甲基甲硅烷基]氧基]乙基]呋喃(241A)

于25℃将2-(2-羟乙基)呋喃(1.00g，8.93mmol，实施例255A)溶 于DMF中，加入咪唑(0.790g，11.6mmol)。然后在5分钟内分多次 加入TBSCl(1.35g，8.93mmol)。2小时后，将反应物倾至乙醚(300mL) 中，顺次用水(1×100mL)、1N HCl(1×100mL)和盐水(1×100mL)洗 涤。然后将合并的有机相经硫酸镁干燥，真空浓缩。化合物241A作 为透明油状物分离出来(1.77g)，该物质不经纯化而用于下一步中。 HPLC：100％，4.233min(保留时间)(YMC S5 ODS柱，4.6×50mm，在4 分钟内含有0.2％磷酸的10-90％甲醇水溶液洗脱，4mL/min，于220nm 检测)。

B.(3aα，4β，7β，7aα)-4-[4-[2-[[(1，1-二甲基乙基)二甲基甲硅烷基]氧基] 乙基]-1，3，3a，4，7，7a-六氢-1，3-二氧代-4，7-环氧-2H-异吲哚-2-基]-1-萘甲 腈(241B)

在密封管内，将4-(2，5-二氢-2，5-二氧代-1H-1-基)-1-萘甲腈(0.721 g，3.40mmol)悬浮于苯(5.0mL)中，然后加入化合物241A(1.00g，4.42 mmol)。将反应物于60℃加热16小时，然后冷却至25℃。真空除去 苯，得到黄色固体。该粗制物质经硅胶快速色谱纯化，用1-5％丙酮 的氯仿溶液洗脱，得到1.37g(85％)的化合物241B，为黄色固体。NMR 实验证实了外向异构体的指定。HPLC：100％，4.030和4.110min(阻 转异构体)(保留时间)(YMC S5 ODS柱，4.6×50mm，在4分钟内用含 有0.2％磷酸的10-90％甲醇水溶液洗脱，4mL/min，于220nm检测)。

C.(3aα，4β，7β，7aα)-4-[4-[2-[[(1，1-二甲基乙基)二甲基甲硅烷基]氧基] 乙基]八氢-1，3-二氧代-4，7-环氧-2H-异吲哚-2-基]-1-萘甲腈(241C)

将化合物241B(0.500g，1.14mmol)溶于乙酸乙酯(40mL)中，加 入10％Pd/C(0.200g)。然后通过气囊引入氢气。4小时后，将反应 物通过硅藻土过滤，用乙酸乙酯漂洗，真空浓缩，得到浅黄色固体， 该固体经硅胶快速色谱纯化，用丙酮/氯仿(0％-1.5％-3％丙酮)洗脱， 得到0.450g(83％)化合物241C，为黄色泡沫状物。

D.(3aα，4β，7β，7aα)-4-[八氢-4-(2-羟乙基)-1，3-.二氧代-4，7-环氧-2H-异吲 哚-2-基]-1-萘甲腈(241D)

将化合物241C(0.283g，0.594mmol)溶于2％浓HCl的无水乙 醇(10mL)溶液中。1小时后，将反应物用饱和碳酸氢钠水溶液猝灭， 用二氯甲烷(4×20mL)萃取。将合并的有机物经硫酸钠干燥，真空浓 缩，得到0.211g(98％)的化合物241D，为白色固体。HPLC：100％，2.14 min(保留时间)(YMC S5 ODS柱，4.6×50mm，在4分钟内用含有0.2％ 磷酸的10-90％甲醇水溶液洗脱，4mL/min，于220nm检测)，MS(ES)： m/z363.45[M+H]+。

                                  实施例242

(3aα，4β，6β，7β，7aα)-4-[4-[2-(4-氰基苯氧基)乙基]八氢-6-羟基-1，3-二氧 代-4，7-环氧-2H-异吲哚-2-基)-1-萘甲腈(242C)

A.(3aα，4β，6β，7β，7aα)-4-[4-[2-[[(1，1-二甲基乙基)二甲基甲硅烷基]氧 基]乙基]八氢-6-羟基-1，3-二氧代-4，7-环氧-2H-异吲哚-2-基]-1-萘甲腈 (242A)

将化合物241B(1.00g，2.28mmol)和Wilkinson催化剂(0.105g， 0.114mmol)在25℃、真空下快速搅拌1小时，然后用氮气吹扫。然 后加入THF(30mL)，接着在烯烃完全溶解后加入儿茶酚硼烷(0.487 mL，4.57mmol)。1小时后，将反应物冷却至0℃，加入pH7.2磷酸 盐缓冲液(33mL)，然后加入EtOH(13mL)和H2O2(30％水溶液，3.0 g)。于0℃3小时后，通过LC分析，反应完成，将混合物用二氯甲 烷(3×50mL)萃取。将合并的有机物用10％亚硫酸钠/1N NaOH的1∶1 混合物(50mL)洗涤，然后用盐水(50mL)洗涤1次。合并所有的水相， 用二氯甲烷(50mL)萃取，将有机相与先前的萃取液混合。然后将所 有的有机物经无水硫酸钠干燥，真空浓缩。粗制物质经硅胶快速色 谱纯化，用10-20％丙酮的氯仿溶液洗脱，得到0.634g的化合物242A， 为白色泡沫状物。HPLC：96％，3.797min(保留时间)(YMC S5 ODS柱， 4.6×50mm，在4分钟内含有0.2％磷酸的10-90％甲醇水溶液洗脱，4 mL/min，于220nm检测)，MS(ES)：m/z493.13[M+H]+。

B.(3aα，4β，6β，7β，7aα)-4-[八氢-6-羟基-4-(2-羟乙基)-1，3-二氧代-4，7-环 氧-2H-异吲哚-2-基]-1-萘甲腈(242B)

将化合物242A(0.400g，0.813mmol)溶于2％12N HCl的无水乙 醇(10mL)溶液中。1小时后，将反应物用饱和碳酸氢钠水溶液猝灭， 用EtOAc(4×20mL)萃取。将合并的有机物经硫酸钠干燥，真空浓缩， 得到0.305g的化合物242B，为白色固体。HPLC：90％，2.043min(保 留时间)(YMC S5 ODS柱，4.6×50mm，在4分钟内含有0.2％磷酸的 10-90％甲醇水溶液洗脱，4mL/min，于220nm检测)，MS(ES)：m/z 379.09[M+H]+。

C.(3aα，4β，6β，7β，7aα)-4-[4-[2-(4-氰基苯氧基)乙基]八氢-6-羟基-1，3-二 氧代-4，7-环氧-2H-异吲哚-2-基)-1-萘甲腈(242C)

向三苯膦(0.054g，0.207mmol)的THF(2.0mL)溶液中加入DBAD (0.048g，0.207mmol)。10分钟后，加入4-氰基苯酚(0.025g，0.207 mmol)。再经10分钟后，加入化合物242B(0.050g，0.138mmol)。于 25℃3小时后，将反应物真空浓缩，经制备型二氧化硅TLC纯化， 用25％丙酮/氯仿洗脱，得到0.056g的化合物242C，为白色固体。 HPLC：90％，2.987min(保留时间)(YMC S5 ODS柱，4.6×50mm，在4 分钟内含有0.2％磷酸的10-90％甲醇水溶液洗脱，4mL/min，于220nm 检测)，MS(ES)：m/z480.10[M+H]+。

                                实施例243

[3aS-(3aα，4β，5β，7β，7aα)]-4-[八氢-5-羟基-7-(2-羟乙基)-4-甲基-1，3-二 氧代-4，7-环氧-2H-异吲哚-2-基)-1-萘甲腈和[3aR-(3aα，4β，5β，7β，7aα)]- 4-[八氢-5-羟基-7-(2-羟乙基)-4-甲基-1，3-二氧代-4，7-环氧-2H-异吲哚- 2-基)-1-萘甲腈(243Di和243Dii)

A.(3aα，4β，7β，7aα)-4-[4-[2-[[(1，1-二甲基乙基)二甲基甲硅烷基]氧基] 乙基]-1，3，3a，4，7，7a-六氢-1，3-二氧代-4，7-环氧-2H-异吲哚-2-基]-1-萘甲 腈(243A)

加入4-(2，5-二氢-2，5-二氧代-1H-1-基)-1-萘甲腈(18.3g，68.7mmol) 至化合物204A(26.6g，110.6mmol)的苯(75mL)溶液中，于60℃加热 过夜。冷却至室温后，减压浓缩反应混合物。在0℃搅拌下，将残余 物用MeOH(250mL)处理10分钟。滤出所得的固体，用冷MeOH(2X 10mL)洗涤，干燥，得到26.7g(79.5％)的化合物243A，为黄色固体。 上述固体的HPLC分析表明它为95％的纯度(HPLC条件：95％，2.48 min(保留时间)(Phenomenex-prime S5-C18柱，4.6×50mm，用含有0.2％ 磷酸的10％-90％甲醇水溶液的4分钟梯度洗脱，于220nm检测))。 然后减压浓缩滤液，所得的固体经色谱纯化，用3％丙酮/CHCl3纯化， 得到另外4.36g的化合物243A(13％)，最终总收率为92.5％。

B.(3aα，4β，5β，7β，7aα)-4-[7-[2-[[(1，1-二甲基乙基)二甲基甲硅烷基]氧 基]乙基]八氢-5-羟基-4-甲基-1，3-二氧代-4，7-环氧-2H-异吲哚-2-基]-1- 萘甲腈(243B)

将243A(10g，20.46mmol)和RhCl(PPh3)3(0.947mg，1.02mmol) 的混合物排空，并充满氩气(3X)。加入THF(200mL)，当所有颗粒 溶解后，立即缓慢滴加儿茶酚硼烷(4.4mL，40.93mmol)。当通过HPLC 测定产物生成停止后，将反应混合物冷却至0℃，用磷酸盐缓冲液(330 mL，pH7.2)猝灭，然后加入EtOH(130mL)和过氧化氢(300mL，30％ 水溶液)。当硼酸盐耗尽后，立即将混合物用二氯甲烷(3X)萃取，将 合并的有机层用1N NaOH、10％亚硫酸氢钠水溶液(1∶1，1X)和盐水(1X) 洗涤。将合并的洗涤液用二氯甲烷(1X)萃取，合并的有机层经硫酸钠 干燥。经硅胶快速色谱纯化，用10％-30％丙酮/氯仿梯度在25分钟 内洗脱，得到7.1g(68％)243B，为浅黄色固体。HPLC条件：98％，3.82 min(保留时间)(Phenomenex-prime S5-C18柱，4.6×50mm，用含有 0.2％磷酸的10％-90％甲醇水溶液在4分钟内梯度洗脱，于220nm检 测)。

C.[3aR-(3aα，4β，5β，7β，7aα)]-4-[7-[2-[[(1，1-二甲基乙基)二甲基甲硅烷 基]氧基]乙基]八氢-5-羟基-4-甲基-1，3-二氧代-4，7-环氧-2H-异吲哚-2- 基]-1-萘甲腈和[3aS-(3aα，4β，5β，7β，7aα)]-4-[7-[2-[[(1，1-二甲基乙基)二 甲基甲硅烷基]氧基]乙基]八氢-5-羟基-4-甲基-1，3-二氧代-4，7-环氧- 2H-异吲哚-2-基]-1-萘甲腈(243Ci和243Cii)

通过手性正相液相色谱，将外消旋化合物243B分离为其各个对 映体。使用Chiralpak OD柱(50×500mm)，用13％EtOH/己烷在99 分钟内以50mL/min洗脱，于220nm检测。快洗脱出的异构体化合 物243Ci的保留时间＝45min，而慢洗脱出的异构体化合物243Cii 的保留时间＝66min。

D.[3aS-(3aα，4β，5β，7β，7aα)]-4-[八氢-5-羟基-7-(2-羟乙基)-4-甲基-1，3- 二氧代-4，7-环氧-2H-异吲哚-2-基)-1-萘甲腈和[3aR- (3aα，4β，5β，7β，7aα)]-4-[八氢-5-羟基-7-(2-羟乙基)-4-甲基-1，3-二氧代- 4，7-环氧-2H-异吲哚-2-基]-1-萘甲腈(243Di和243Dii)

将化合物243Ci(0.84g，2.14mmol)溶于2％12N HCl/EtOH(20 mL)中，搅拌5分钟，然后减压浓缩。经硅胶快速色谱纯化，用5-10％ MeOH/二氯甲烷洗脱，得到0.57g(88％)的243Di。通过分析性手性 正相色谱，发现从快洗脱异构体(243Ci)馏出的化合物243Di为99.7％ ee。HPLC条件：99.7％，2.17min(保留时间)(Chiralcel OJ 44.6×250 mm，10微米，40℃，等度80％庚烷/20％EtOH/MeOH(1∶1)，1.0mL/min.， 于288nm检测)。

将化合物243Cii(0.86g，2.19mmol)溶于2％12N HCl/EtOH(20 mL)中，搅拌5分钟，减压浓缩。经硅胶快速色谱纯化，用5-10％MeOH/ 二氯甲烷洗脱，得到0.60g(90％)的243Dii。通过分析性手性正相色 谱，发现从慢洗脱异构体(243Cii)馏出的化合物243Dii具有87.1％ee。 HPLC条件：87.1％，18.4min(Chiralcel OJ 44.6×250mm，10微米，40 ℃，等度80％庚烷/20％EtOH/MeOH(1∶1)，1.0mL/min.，于288nm检 测)。

未确定化合物243Di和243Dii的绝对构象。为了使命名简化， 在本文中将化合物243Di指定为具有“S”构型，而化合物243Dii指 定为具有“R”构型。在本文中从化合物243Di衍生的对映体纯产物 被指定为具有“S”构型，而从化合物243Dii衍生的对映体纯产物被 指定为具有“R”构型。

                            实施例244

[3aS-(3aα，4β，5β，7β，7aα)]-4-[7-[2-(4-氰基苯氧基)乙基]八氢-5-羟基-4- 甲基-1，3-二氧代-4，7-环氧-2H-异吲哚-2-基]-1-萘甲腈和[3aR- (3aα，4β，5β，7β，7aα)]-4-[7-[2-(4-氰基苯氧基)乙基]八氢-5-羟基-4-甲基- 1，3-二氧代-4，7-环氧-2H-异吲哚-2-基]-1-萘甲腈(244i和244ii)

加入DBAD(26mg，0.115mmol)至PPh3(30mg，0.115mmol)的 THF(0.65mL)溶液中。搅拌10分钟后，加入4-氰基苯酚(13.6mg，0.115 mmol)，再将反应混合物搅拌5分钟。加入化合物243Di(30mg，0.076 mmol)，于室温搅拌混合物1小时。减压浓缩反应物。经硅胶快速色 谱纯化，用30％丙酮/70％CHCl3洗脱，得到23.1mg(0.047mmol，61.7％) 的化合物244i。HPLC条件：95％，3.06min(保留时间)(YMC S5 ODS 4.6×50mm，用含有0.2％磷酸的10％-90％甲醇水溶液在4分钟内梯度 洗脱，于220nm检测)。MS(ES)：m/z494.09[M+H]+。[α]D＝53.30°，C ＝4.5mg/cc的THF溶液，于589nm)。

加入DBAD(26mg，0.115mmol)至PPh3(30mg，0.115mmol)的 THF(0.65mL)溶液中。搅拌10分钟后，加入4-氰基苯酚(13.6mg，0.115 mmol)，再将反应混合物搅拌5分钟。加入化合物243Dii(30mg，0.076 mmol)，于室温搅拌混合物1小时。减压浓缩反应物。经硅胶快速色 谱纯化，用30％丙酮/70％CHCl3洗脱，得到20.3mg(0.041mmol，54.2％) 的化合物244ii。HPLC条件：90％，3.07min(保留时间)(YMC S5 ODS 4.6×50mm，用含有0.2％磷酸的10％-90％甲醇水溶液在4分钟内梯度 洗脱，于220nm检测)。MS(ES)：m/z494.09[M+H]+。[α]D＝-42.87°，C ＝6.6mg/cc的THF溶液，于589nm)。

                                   实施例245

(3aα，4β，7β，7aα)-4-[4-[2-(4-氰基苯氧基)乙基]-7-乙基八氢-1，3-二氧代- 4，7-环氧-2H-异吲哚-2-基)-1-萘甲腈(245D)

A.2-乙基-5-(2-羟乙基)呋喃(245A)

于-25℃加入n-BuLi(2.5M己烷溶液，4.4mL，11mmol)至2-乙基 呋喃(1.05mL，10mmol)的THF(10mL)溶液中。将溶液温热至室温， 搅拌3小时。于-78℃加入环氧乙烷(0.75mL)。于-15℃搅拌反应物达 0.5小时，然后于室温搅拌过夜。加入饱和氯化铵水溶液，将混合物 用乙醚(3×)萃取。将合并的萃取液用水(1×)和盐水(1×)洗涤，经硫 酸钠干燥。经硅胶快速色谱纯化，用30％EtOAc/70％己烷洗脱，得 到1.12g(8.02mmol，80.2％)的化合物245A，为黄色油状物。

B.(3aα，4β，7β，7aα)-4-[4-乙基-1，3，3a，4，7，7a-六氢-7-(2-羟乙基)-1，3-二氧 代-4，7-环氧-2H-异吲哚-2-基]-1-萘甲腈(245B)

将化合物245A(280mg，2.00mmol)和4-(2，5-二氢-2，5-二氧代- 1H-1-基)-1-萘甲腈(496mg，2.00mmol)的苯(2mL)溶液于60℃搅拌2 小时。减压浓缩反应混合物。将黄色固体-化合物245B直接用于下 一步。

C.(3aα，4β，7β，7aα)-4-[4-乙基八氢-7-(2-羟乙基)-1，3-二氧代-4，7-环氧- 2H-异吲哚-2-基]-1-萘甲腈(245C)

将化合物245B(764mg，1.97mmol)和10％Pd/C(115mg，催化 量)在EtOAc(36mL)中的混合物于室温、氢气环境下搅拌2小时。将 反应混合物通过硅藻土过滤，减压浓缩，得到779mg粗制化合物 245C。该粗产物经硅胶快速色谱纯化，用70％EtOAc/30％己烷洗脱， 得到235mg(0.6mmol，30.1％)的化合物245C。HPLC条件：99％，2.84 min(保留时间)(YMC S5 ODS 4.6×50mm，用含有0.2％磷酸的10％- 90％甲醇水溶液在4分钟内梯度洗脱，于220nm检测)。MS(ES)：m/z 391.12[M+H]+。

D.(3aα，4β，7β，7aα)-4-[4-[2-(4-氰基苯氧基)乙基]-7-乙基八氢-1，3-二氧 代-4，7-环氧-2H-异吲哚-2-基]-1-萘甲腈(245D)

加入DBAD(44.2mg，0.192mmol)至PPh3(50.4mg，0.192mmol) 的THF(1mL)溶液中。搅拌10分钟后，加入4-氰基苯酚(23mg，0.192 mmol)，再搅拌反应混合物5分钟。加入化合物245C(50mg，0.128 mmol)，于室温下搅拌混合物2小时。减压浓缩反应物。经硅胶快速 色谱纯化，用40％EtOAc/60％己烷洗脱，得到43mg(0.087mmol， 68.4％)的化合物245D，为白色固体。HPLC条件：99％，3.65min(保留 时间)(YMC S5 ODS 4.6×50mm，用含有0.2％磷酸的10％-90％甲醇水 溶液在4分钟内梯度洗脱，于220nm检测)。MS(ES)：m/z492.16 [M+H]+。

                                实施例246

(3aα，4β，7β，7aα)-4-[2-(乙酰氧基)乙基]-2-(4-氰基-1-萘基)六氢-7-甲基- 4，7-环氧-1H-异吲哚-1，3(2H)-二酮(246)

于25℃下，将化合物223B(0.100g，0.279mmol)溶于二氯甲烷(3.0 mL)中，加入吡啶(0.071mL，0.837mmol)和4-DMAP(1.0mg)。然后 加入乙酸酐(0.053mL，0.559mmol)，将反应物于25℃搅拌20小时。 20小时后，加入饱和碳酸氢钠水溶液，将反应物搅拌30分钟。然后， 混合物用二氯甲烷(2×20mL)萃取。随后，将有机物用1N HCl(10mL) 洗涤1次，然后经无水硫酸钠干燥。真空浓缩后，粗制物质经制备 型二氧化硅TLC纯化，用12％丙酮的氯仿溶液洗脱，得到0.073g 的化合物246，为黄色泡沫状物。HPLC：95％，2.837和3.027min(阻 转异构体，保留时间)(YMC S5 ODS柱，4.6×50mm，在4分钟内含有 0.2％磷酸的10-90％甲醇水溶液洗脱，4mL/min，于220nm检测)，MS (ES)：m/z441.10[M+Na]+。

                                实施例247

(3aα，4β，7β，7aα)-4-[八氢-4-甲基-1，3-二氧代-7-(2-氧代乙基)-4，7-环氧 2H-异吲哚-2-基]-1-萘甲腈(247)

加入草酰氯(2.0M溶液，1.73mL，3.5mmol)至干燥二氯甲烷(10 mL)中，冷却至-78℃。然后滴加DMSO(0.283mL，3.99mmol)，放出 气体。15分钟后，加入化合物223B(1.00g，2.66mmol)的二氯甲烷(10 mL)溶液。15分钟后，加入TEA(1.10mL，7.98mmol)，将反应物缓 慢温热至25℃。然后加入水(30mL)，将混合物用二氯甲烷(100mL) 稀释。然后将有机物用1N HCl(30mL)洗涤1次，用水(30mL)洗涤 1次，用盐水(30mL)洗涤1次，然后经无水硫酸钠干燥。粗产物通 过真空浓缩分离，得到化合物247，为橙色泡沫状物。粗制化合物247 直接用到下一个反应中。HPLC：100％，2.70min(保留时间)(YMC S5 ODS柱，4.6×50mm，在4分钟内含有0.2％磷酸的10-90％甲醇水溶液 洗脱，4mL/min，于220nm检测)。  MS(ES)：m/z483.65[M+H]+。

                                  实施例248

[3aα，4β(E)，7β，7aα]-4-[4-[3-(4-氰基苯基)-2-丙烯基]八氢-7-甲基-1，3-二 氧代-4，7-环氧-2H-异吲哚-2-基]-1-萘甲腈和[3aα，4β(Z)，7β，7aα]-4-[4- [3-(4-氰基苯基)-2-丙烯基]八氢-7-甲基-1，3-二氧代-4，7-环氧-2H-异吲 哚-2-基]-1-萘甲腈(248i和248ii)

将氯化(4-氰基苄基)-三苯基鏻(0.072g，0.174mmol)悬浮于THF (2.0mL)中，并冷却至0℃。然后滴加n-BuLi(1.6M溶液，0.092mL， 0.147mmol)，产生均相溶液。将该溶液温热至25℃达15分钟，然后 冷却至0℃。然后加入化合物247(0.050g，0.134mmol)的THF溶液。 1小时后，将反应物用饱和氯化铵水溶液猝灭，然后用二氯甲烷(3×20 mL)萃取。将合并的有机物经无水硫酸钠干燥，然后真空浓缩。粗制 物质经制备型TLC纯化，用5％丙酮的氯仿溶液洗脱，得到0.010g化 合物248i与248ii的混合物，为白色固体。通过NMR光谱学表征为 E和Z烯烃异构体的1∶1混合物。HPLC：100％，3.517min(保留时 间)(YMC S5 ODS柱，4.6×50mm，在4分钟内含有0.2％磷酸的10-90％ 甲醇水溶液，4mL/min，于220nm检测)，MS(ES)：m/z474.2[M+H]+。

                                  实施例249

(3aα，4β，7β，7aα]-4-[4-[3-(4-氰基苯基)丙基]八氢-7-甲基-1，3-二氧代- 4，7-环氧-2H-异吲哚-2-基]-1-萘甲腈(249)

将所述化合物248i和248ii的混合物(0.008g，0.017mmol)溶于 EtOH(3.0mL)中，加入Pd/C(10％Pd，0.008g)。然后通过气囊引入氢 气。18小时后，将反应物通过硅藻土过滤，用EtOAc洗脱，然后真 空浓缩。化合物249作为白色固体被分离出来(0.007g)。HPLC：90％， 3.520min(保留时间)(YMC S5 ODS柱，4.6×50mm，在4分钟内含有 0.2％磷酸的10-90％甲醇水溶液，4mL/min，于220nm检测)，MS(ES)： m/z476.13[M+H]+。

                                实施例250

(3aα，4β，7β，7aα)-4-[4-[2-[(6-氯-1，2-苯并异噁唑-3-基)氧基]乙基]八氢- 7-甲基-1，3-二氧代-4，7-环氧-2H-异吲哚-2-基]-1-萘甲腈(250)

向PPh3(52mg，0.20mmol)的0.5mL THF溶液中一次性加入固 体DBAD(46mg，0.20mmol)。将所得的混合物搅拌10分钟，然后加 入6-氯-3-羟基-1，2-苯并异噁唑(34mg，0.20mmol)。继续搅拌10分钟， 然后通过插管导入化合物223B(50mg，0.13mmol)的0.5mL THF溶 液。将所得的混合物于环境温度下搅拌24小时，真空浓缩，然后经 反相制备型HPLC纯化(YMC S5 ODS 20×100mm柱；用含有0.1％ TFA的30-100％甲醇水溶液在10分钟内以20mL/min洗脱)，得到白 色固体。将所获得的固体溶于二氯甲烷中，用饱和碳酸氢钠溶液洗 涤，经硫酸钠干燥，真空浓缩，得到50mg(71％)的化合物250，为 无色油状物。HPLC：3.89min和4.02min(阻转异构体，保留时 间)(YMC S5 ODS柱，4.6×50mm Ballistic，在4分钟内含有0.2％磷酸 的10-90％甲醇水溶液洗脱，4mL/min，于220nm检测)，MS(ES)：m/z 528.4[M+H]+。

                                实施例251

(3aα，4β，7β，7aα)-4-[八氢-4-甲基-7-[2-[(6-硝基-1H-吲唑-3-基)氧基]乙 基]-1，3-二氧代-4，7-环氧-2H-异吲哚-2-基]-1-萘甲腈(251)

向化合物223B(50mg，0.13mmol)的甲苯(1mL)溶液中加入 ADDP(50mg，0.20mmol)、6-硝基-3-吲唑啉酮(indazolinone)(36mg， 0.20mmol)和n-Bu3P(50μL，0.2mmol)。将所得的混合物加热至80℃ 达24小时，真空浓缩，然后经反相制备型HPLC(YMC S5 ODS 20×100 mm柱；用含有0.1％TFA的30-100％甲醇水溶液在10分钟内以20 mL/min洗脱)和快速色谱(硅胶，25％丙酮的氯仿溶液)组合纯化，得到 17mg(25％)的化合物251，为黄色固体。HPLC：3.60min以及3.74min (阻转异构体，保留时间)(YMC S5 ODS柱，4.6×50mm Ballistic，在4 分钟内用含有0.2％磷酸的10-90％甲醇水溶液洗脱，4mL/min，于220 nm检测)，MS(ES)：m/z 537.6[M+H]+。

                                  实施例252

[3aS-(3aα，4β，5β，7β，7aα)]-4-[7-[2-(1，2-苯并异噁唑-3-基氧基)乙基]八氢 -5-羟基-4-甲基-1，3-二氧代-4，7-环氧-2H-异吲哚-2-基]-1-萘甲腈(252)

按照关于化合物250所给出的方法，使PPh3(47mg，0.18mmol)、 DBAD(41mg，0.18mmol)、3-羟基-1，2-苯并异噁唑(24mg，0.18mmol) 和化合物243Di(35mg，0.09mmol)反应。通过反相HPLC(YMC S5 ODS 20×100mm柱；用含有0.1％TFA的30-100％甲醇水溶液在10 分钟内以20mL/min洗脱)完成纯化，得到白色固体。将所得的固体 溶于二氯甲烷中，用饱和碳酸氢钠溶液洗涤，经硫酸钠干燥，减压 浓缩，得到29mg(64％)的化合物252，为无色油状物。HPLC：96％，3.29 min(阻转异构体，保留时间)(YMC S5 ODS柱，4.6×50mm Ballistic，在 4分钟内用含有0.2％磷酸的0-100％甲醇水溶液洗脱，4mL/min，于 220nm检测)，MS(ES)：m/z510.2[M+H]+。

                                 实施例253

[3aR-(3aα，4β，5β，7β，7aα)]-4-[7-[2-(1，2-苯并异噁唑-3-基氧基)乙基]八 氢-5-羟基-4-甲基-1，3-二氧代-4，7-环氧-2H-异吲哚-2-基]-1-萘甲腈(253)

按照关于化合物250所给出的方法，使PPh3(47mg，0.18mmol)， DBAD(41mg，0.18mmol)、3-羟基-1，2-苯并异噁唑(24mg，0.18mmol) 和化合物243Dii(35mg，0.09mmol)反应。通过反相HPLC(YMC S5 ODS 20×100mm柱；用含有0.1％TFA的30-100％甲醇水溶液在10 分钟内以20mL/min洗脱)完成纯化，得到白色固体。将所得的固体 溶于二氯甲烷中，用饱和碳酸氢钠溶液洗涤，经硫酸钠干燥，减压 浓缩，得到23mg(51％)的化合物253，为无色油状物。HPLC：95％，3.29 min(阻转异构体，保留时间)(YMC S5 ODS柱，4.6×50mm Ballistic，在 4分钟内用含有0.2％磷酸的0-100％甲醇水溶液洗脱，4mL/min，于 220nm检测)，MS(ES)：m/z510.4[M+H]+。

                          实施例254

[3aR-(3aα，4β，5β，7β，7aα)]-4-(八氢-5-羟基-4，7-二甲基-1，3-二氧代-4，7- 环氧-2H-异吲哚-2-基)-2-(三氟甲基)苄腈和[3aS-(3aα，4β，5β，7β，7aα)]- 4-(八氢-5-羟基-4，7-二甲基-1，3-二氧代-4，7-环氧-2H-异吲哚-2-基)-2- (三氟甲基)苄腈(254i和254ii)

通过正相制备型手性HPLC(CHIRALPAK AD 5×50cm柱；用 20％MeOH/EtOH(1∶1)的庚烷溶液(等度)以50mL/min洗脱)，将外消 旋化合物221B分离为其对映体，得到快洗脱出的化合物254i(Chiral HPLC：10.02min；CHIRALPAK AD 4.6×250mm柱；用20％ MeOH/EtOH(1∶1)的庚烷溶液以1mL/min洗脱)和慢洗脱出的化合物 254ii(Chiral HPLC：14.74min；CHIRALPAK AD 4.6×250mm柱；用 20％MeOH/EtOH(1∶1)的庚烷溶液以1mL/min洗脱)。(题述化合物基 于所测定的绝对立体化学构型命名)。

                                   实施例255

(3aα，4β，7β，7aα)-2-(4-氰基-1-萘基)八氢-1，3-二氧代-7-[2-(苯基甲氧基) 乙基]-4，7-环氧-4H-异吲哚-4-丙腈和(3aα，4α，7α，7aα)-2-(4-氰基-1-萘基) 八氧-1，3-二氧代-7-[2-(苯基甲氧基)乙基]-4，7-环氧-4H-异吲哚-4-丙腈

                      (255Hi和255Hii)

A.2-(2-羟乙基)呋喃(255A)

按照以下参考文献制备2-(2-羟乙基)呋喃：Harmata，M，等J.Org. Chem.60，5077-5092(1995)。于-78℃加入n-BuLi(2.5M己烷溶液，44 mL，110mmol)至呋喃(8mL，110mmol)的100mL THF溶液中。将溶 液于0℃搅拌4小时，然后于-78℃加入环氧乙烷(7.5mL)。将反应混 合物于-15℃搅拌1小时，然后于室温搅拌过夜。将反应物用饱和氯 化铵猝灭，用乙醚(3×)萃取。将合并的萃取液用水(1×)和盐水(1×) 洗涤。该乙醚溶液经硫酸钠干燥，减压浓缩。经硅胶快速色谱纯化， 用40％EtOAc/60％己烷洗脱，得到5.4g(48.2mmol，43.8％)的化合物 255A，为浅褐色油状物。

B.2-[2-[[(1，1-二甲基乙基)二甲基甲硅烷基]氧基]乙基]呋喃(255B)

将咪唑(3.65g，53.6mmol)和TBSC1(6.47g，42.9mmol)加入至化 合物255A(4.00g，35.7mmol)的50mL DMF溶液中。将混合物于室 温搅拌2小时，然后将反应混合物倾至乙醚中。将该乙醚溶液用水 (1×)、1N HCl(1×)、水(1×)和盐水(1×)洗涤。有机层经硫酸钠干燥 并减压浓缩。经硅胶快速色谱纯化，用30％CH2Cl2/70％己烷洗脱， 得到7.4g(32.7mmol，91.7％)的255B，为无色油状物。

C.2-[2-[[(1，1-二甲基乙基)二甲基甲硅烷基]氧基]乙基]-5-(2-羟乙基)呋 喃(255C)

于-78℃滴加t-BuLi(1.2M戊烷溶液，10mL，16.99mmol)至255B (3.49g，15.44mmol)在13mL THF中的搅拌溶液中。将混合物于0℃ 再搅拌4小时。于-78℃将环氧乙烷(1.05mL)加入至反应溶液中。将 混合物温热至室温，搅拌过夜。加入饱和氯化铵水溶液，减压除去 大多数THF。将混合物用乙醚(3×)萃取，将合并的有机层用水(1×) 和盐水(1×)洗涤，并经硫酸钠干燥。经硅胶快速色谱纯化，用5％ EtOAc/95％二氯甲烷洗脱，得到2.8g(10.4mmol，67％)的化合物 255C，为黄色油状物。

D.2-[2-[[(1，1-二甲基乙基)二甲基甲硅烷基]氧基]乙基]-5-[2-(苯基甲氧 基)乙基]呋喃(255D)

将醇255C(1.00g，3.7mmol)的12mL THF溶液用60％NaH(177.8mg，4.44mmol)、苄基溴(0.53mL，4.44mmol)和碘化四丁基铵 (50mg，5％)于室温处理3小时。加入水，将混合物用EtOAc(3×)萃 取。将合并的萃取液用水(1×)和盐水(1×)洗涤，经硫酸钠干燥。经 硅胶快速色谱纯化，用20％己烷/80％CH2Cl2洗脱，得到1.10g(3.05 mmol，82.6％)的化合物255D，为黄色油状物。

E.2-(2-羟乙基)-5-[2-(苯基甲氧基)乙基]呋喃(255E)

于0℃，加入氟化四丁基铵(1.0M的THF溶液，3.06mL，3.06mmol) 至化合物255D(1.1g，3.06mmol)的10mL THF溶液中。将反应混合 物于室温搅拌10分钟，用饱和氯化铵猝灭，然后用乙醚(3×)萃取。 合并的萃取液经硫酸钠干燥。经硅胶快速色谱纯化，用10％ EtOAc/90％CH2Cl2洗脱，得到750mg(3.05mmol，99.6％)的化合物 255E，为浅黄色油状物。

F.5-[2-(苯基甲氧基)乙基]呋喃-2-丙腈(255F)

于0℃，将DEAD(1.285mL，8.17mmol)加入至Ph3P(2.14g，8.17 mmol)的12mL干燥THF搅拌溶液中。将该溶液于室温搅拌30分钟， 加入化合物255E(670mg，2.72mmol)。将反应物搅拌15分钟，于-15 ℃加入丙酮合氰化氢(0.745mL，8.17mmol)。将反应物于-15℃搅拌30 分钟，然后于室温搅拌过夜。然后减压浓缩混合物。经硅胶快速色 谱纯化，用100％CH2Cl2洗脱，得到180mg(0.705mmol，26％)的化 合物255F，为无色油状物。

G.(3aα，4β，7β，7aα)-2-(4-氰基-1-萘基)-1，2，3，3a，7，7a-六氢-1，3-二氧代-7- [2-(苯基甲氧基)乙基]-4，7-环氧-4H-异吲哚-4-丙腈(255G)

将化合物255F(180mg，0.706mmol)和4-(2，5-二氢-2，5-二氧代- 1H-1-基)-1-萘甲腈(263mg，1.06mmol)的二氯甲烷(3mL)溶液于室温 搅拌3天。减压浓缩反应混合物。经硅胶快速色谱纯化，用5％EtOAc/ 二氯甲烷洗脱，得到318mg(0.63mmol，89.6％)的化合物255G，为 浅灰色固体，该固体直接用于下一步。

H.(3aα，4β，7β，7aα)-2-(4-氰基-1-萘基)八氢-1，3-二氧代-7-[2-(苯基甲氧 基)乙基]-4，7-环氧-4H-异吲哚-4-丙腈和(3aα，4α，7α，7aα)-2-(4-氰基-1- 萘基)八氢-1，3-二氧代-7-[2-(苯基甲氧基)乙基]-4，7-环氧-4H-异吲哚-4- 丙腈(255Hi和255Hii)

将化合物255G(318mg，0.63mmol)和10％Pd/C(64mg)在EtOH (10mL)和EtOAc(5mL)中的混合物于室温、氢气环境下搅拌过夜。 将反应混合物通过硅藻土过滤，减压浓缩，得到320mg粗制化合物 255Hi和255Hii。通过硅胶快速色谱纯化25mg这种粗产物，用55％ EtOAc/己烷洗脱，得到6.5mg(0.013mmol，26％(基于25mg))的化合 物255Hi和8.1mg(0.016mmol，32.4％(基于25mg))的化合物255Hii。 化合物255Hi：HPLC条件：98％，3.57min(保留时间)(YMC S5 ODS 4.6×50mm，在4分钟内含有0.2％磷酸的10％-90％甲醇水溶液洗脱， 于220nm检测，MS(ES)：m/z 506.15[M+H]+。化合物255Hii：HPLC 条件：98％，3.51min(保留时间)(YMC S5 ODS 4.6×50mm，含有0.2％ 磷酸的10％-90％甲醇水溶液的4分钟梯度洗脱，于220nm检测)，MS (ES)：m/z 506.15[M+H]+。

                                   实施例256

(3aα，4β，7β，7aα)-2-(4-氰基-1-萘基)八氢-7-(2-羟乙基)-1，3-二氧代-4，7- 环氧-4H-异吲哚-4-丙腈和(3aα，4α，7α，7aα)-2-(4-氰基-1-萘基)八氢-7- (2-羟乙基)-1，3-二氧代-4，7-环氧-4H-异吲哚-4-丙腈(256i和256ii)

将化合物255Hi与255Hii(200mg，0.396mmol)和PdCl2(8.4mg， 催化量)在EtOH(1mL)和EtOAc(3mL)中的混合物于室温、氢气环 境(30psi)下搅拌过夜。将反应混合物通过硅藻土过滤，减压浓缩。 通过硅胶快速色谱纯化，用5％MeOH/二氯甲烷洗脱，然后用第二根 色谱柱纯化，用100％EtOAc洗脱，得到28.9mg(0.0696mmol，17.6％) 的化合物256ii和26.5mg(0.0639mmol，16.1％)的化合物256i。化合 物256ii：HPLC条件：90％，2.44min(保留时间)(YMC S5 ODS 4.6×50 mm，用含有0.2％磷酸的10％-90％甲醇水溶液的4分钟梯度洗脱，于 220nm检测)，MS(ES)：m/z 416.11[M+H]+。化合物256i：HPLC条件： 99％，2.47min(保留时间)(YMC S5 ODS 4.6×50mm，用含有0.2％磷酸 的10％-90％甲醇水溶液的4分钟梯度洗脱，于220nm检测)，MS(ES)： m/z 416.11[M+H]+。

                                    实施例257

(3aα，4β，7β，7aα)-2-(4-氰基-1-萘基)-7-[2-(4-氟苯氧基)乙基]八氢-1，3-二

                     氧代-4，7-环氧-4H-异吲哚-4-丙腈(257)

加入DBAD(15mg，0.065mmol)至PPh3(17mg，0.065mmol)的 THF(0.3mL)溶液中。搅拌10分钟后，加入4-氟苯酚(7.33mg，0.065 mmol)，再搅拌反应混合物5分钟。加入化合物256i(18.1mg，0.044 mmol)，于室温搅拌混合物3小时。减压浓缩反应物。经硅胶快速色 谱纯化，用60％EtOAc/30％己烷洗脱，得到5.9mg(0.0116mmol， 26.34％)的化合物257。HPLC条件：98％，3.59min(保留时间)(YMC S5 ODS 4.6×50mm，用含有0.2％磷酸的10％-90％甲醇水溶液的4分钟 梯度洗脱，于220nm检测)。MS(ES)：m/z 510.14[M+H]+。

                                      实施例258

(3aα，4β，7β，7aα)-2-(7-氯-2，1，3-苯并噁二唑-4-基)六氢-4，7-二甲基-4，7-

                      环氧-1H-异吲哚-1，3(2H)-二酮(258)

A.4-氨基-7-氯-2，1，3-苯并噁二唑(258A)

将1.0g(5.02mmol)4-氯-7-硝基苯并呋喃在20mL AcOH、10mL EtOAc和2mL水中的溶液加热至50℃，用铁粉(1.4g，251mmol)处 理。将混合物于80℃加热30分钟，然后让其冷却至室温。将混合物 通过硅藻土过滤，用EtOAc洗脱。将滤液用饱和碳酸氢钠水溶液洗 涤，经硫酸镁干燥，减后浓缩，得到化合物258A(0.80g，94％)，为 红色固体。

B.(3aα，4β，7β，7aα)-2-(7-氯-2，1，3-苯并噁二唑-4-基)六氢-4，7-二甲基- 4，7-环氧-1H-异吲哚-1，3(2H)-二酮(258B)

按照以上实施例208C中所述的方法，使化合物258A(42mg，0.25 mmol)在密封管内与化合物20A(73.5mg，0.375mmol)、MgSO4(75mg， 0.625mmol)和Et3N(170μl，1.25mmol)在250μL甲苯中反应，在经 反相制备型HPLC纯化(YMC S5 ODS 20×100mm，用含有0.1％TFA 的30-100％甲醇水溶液在12min内洗脱，20mL/min)后，得到23mg (26％)的化合物258B，为黄色固体。HPLC：97.6％，2.87min(保留时 间)(YMC S5 ODS柱，4.6×50mm，用含有0.2％磷酸的10-90％甲醇水 溶液在4分钟内洗脱，4mL/min，于220nm检测)，MS(DCI)：m/z 347.9 [M]+。

                                    实施例259

(3aα，4β，7β，7aα)-2-(7-氯-2-甲基-4-苯并呋喃基)六氢-4，7-二甲基-4，7-环

                         氧-1H-异吲哚-1，3(2H)-二酮(259)

按照实施例208C中所述的方法，使7-氯-2-甲基-4-苯并呋喃胺(38 mg，0.25mmol，按照Enomoto和Takemura在EP 0476697 A1中所述 的方法制备)在密封管内与化合物20A(73.5mg，0.375mmol)、硫酸镁 (75mg，0.625mmol)和Et3N(170μL，1.25mmol)在250μL甲苯中反 应，在经反相制备型HPLC纯化(YMC S5 ODS 20×100mm，用含有 0.1％TFA的30-100甲醇水溶液在12min内洗脱，20mL/min)后，得 到42mg(47％)的化合物259，为白色固体。HPLC：98％，3.45min(保 留时间)(YMC S5 ODS柱，4.6×50mm，用含有0.2％磷酸的10-90％甲 醇水溶液在4分钟内洗脱，4mL/min，于220nm检测)，MS(DCI)：m/z 359.9[M]+。

                                    实施例260

(3aα，4β，7β，7aα)-2-(7-氯-2-甲基苯并[b]噻吩-4-基)六氢-4，7-二甲基-4，7-

                         环氧-1H-异吲哚-1，3(2H)-二酮(260)

A.1-氯-2-(2-氯-烯丙基硫烷基)-4-硝基-苯(260A)

将2-氯-5-硝基-苯硫醇(1.0g，5.27mmol，按照Still等，Synth. Comm.13，1181(1983)中所述方法制备)的15mL DMF溶液用2，3-二 氯丙烯(693μl，7.52mmol)和K2CO3(433mg，3.13mmol)处理。将混合 物于80℃加热2小时，然后让其冷却至室温。加入EtOAc(200mL) 和水(100mL)。将有机相用水(2×250mL)、饱和氯化钠水溶液(100mL) 洗涤，经硫酸镁干燥，真空浓缩。粗制物质经硅胶快速柱色谱纯化， 用20％EtOAc的己烷溶液洗脱，得到化合物260A(1.09g，89％)，为 橙色油状物。

B.4-氨基-7-氯-2-甲基苯并[b]噻吩(260B)

将1.09g(4.67mmol)的化合物260A在20mL AcOH和10mL EtOAc和2mL水中的溶液加热至80℃，然后用铁粉(1.3g，23.4mmol) 处理。将混合物于80℃加热40分钟，然后让其冷却至室温。将混合 物通过硅藻土过滤，用EtOAc洗脱。将滤液用饱和碳酸氢钠水溶液 洗涤，经硫酸镁干燥，真空浓缩。加入N，N-二乙基苯胺(10mL)，将 反应物于215℃加热6小时。冷却至室温后，加入1N HCl水溶液(20 mL)，将反应物于室温搅拌2小时。将混合物用EtOAc(3×30mL)萃 取。有机相用饱和碳酸氢钠水溶液洗涤，经硫酸镁干燥并真空浓缩。 粗制物质经硅胶快速柱色谱纯化，用25％EtOAc的己烷溶液洗脱， 得到化合物260B(320mg，35％)，为淡棕色固体。

C.(3aα，4β，7β，7aα)-2-(7-氯-2-甲基苯并[b]噻吩-4-基)六氢-4，7-二甲基- 4，7-环氧-1H-异吲哚-1，3(2H)-二酮(260C)

按照实施例208C中所述的方法，在密封管内，使化合物260B(49 mg，0.25mmol)与化合物20A(73.5mg，0.38mmol)、硫酸镁(75mg，0.63 mmol)和Et3N(170μL，1.25mmol)在250μl甲苯中反应，在经反相制 备型HPLC纯化(YMC S5 ODS 20×100mm，用含有0.1％TFA的30- 100％甲醇水溶液在12min内洗脱，20mL/min)后，得到28mg(30％) 的化合物260C，为浅黄色固体。HPLC：96％，3.18min(保留时间)(YMC S5 ODS柱，4.6×50mm，用含有0.2％磷酸的10-90％甲醇水溶液在4 分钟内洗脱，4mL/min，于220nm检测)。MS(DCI)：m/z 376.0[M]+。

                                    实施例261

[3aα，4β(E)，7β，7aα]-4-[2-(4-氰基-1-萘基)八氢-7-甲基-1，3-二氧代-4，7-

              环氧-4H-异吲哚-4-基]-2-丁烯酸苯基甲酯(261)

将化合物247(0.500g，0.134mmol)溶于THF(20mL)中，加入苄 基(三苯基亚正膦基)(0.55g，0.134mmol)。于67℃搅拌反应混合物2 小时，然后减压浓缩。经SiO2快速色谱纯化，用5％丙酮/95％氯仿 洗脱，得到0.65g的化合物261，为黄色固体。HPLC：99％，3.717min (保留时间)(YMC S5 ODS柱，4.6×50mm，用含有0.2％磷酸的10-90％ 甲醇水溶液在4分钟内洗脱，4mL/min，于220nm检测)。MS(ES)：m/z 507.1[M+H]+。

                                  实施例262

(3aα，4β，7β，7aα)-2-(4-氰基-1-萘基)八氢-7-甲基-1，3-二氧代-4，7-环氧-

                             4H-异吲哚-4-丁酸(262)

将化合物261(0.60g，1.19mmol)溶于EtOH/EtOAc(5mL/5mL) 中，加入10％Pd/C(0.30g)。然后通过气囊导入氢气。8小时后，将 反应物通过硅藻土过滤，然后减压浓缩，得到化合物262(0.47g)， 为白色固体。HPLC：98％，2.81min(保留时间)(YMC S5 ODS柱， 4.6×50mm，用含有0.2％磷酸的10-90％甲醇水溶液在4分钟内洗脱，4 mL/min，于220nm检测)。MS(ES)：m/z 419.1[M+H]+。

                                    实施例263

(3aα，4β，7β，7aα)-2-(4-氰基-1-萘基)-N-(4-氟苯基)八氢-7-甲基-1，3-二氧

          代-4，7-环氧-4H-异吲哚-4-丁酰胺(263)

将化合物262(0.030g，0.072mmol)溶于CH3CN(1mL)中。然后 加入DCC(0.014g，0.072mmol)和HOAc(0.0098g，0.072mmol)，接 着加入4-氟苯胺(0.007mL，0.072mmol)。将反应混合物在氩气下搅 拌14小时，将粗制物质溶于MeOH中，经反相制备型HPLC纯化(YMC VP-ODS柱，20×100mm，在15分钟内用20％B至100％B，然后于 100％B保持10分钟洗脱)。化合物263(0.020g)作为白色固体分离 出来。HPLC：100％，3.217min(保留时间)(YMC S5 ODS柱，4.6×50mm， 用含有0.2％磷酸的10-90％甲醇水溶液在4分钟内洗脱，4mL/min，于 220nm检测)，MS(ES)：m/z 512.1[M+H]+。

                                     实施例264

[3aS-(3aα，4β，5β，7β，7aα)]-4-[7-[2-(乙酰氧基)乙基]八氢-5-羟基-4-甲基-

        1，3-二氧代-4，7-环氧-2H-异吲哚-2-基]-1-萘甲腈和[3aR-

(3aα，4β，5β，7β，7aα)]-4-[八氢-5-羟基-7-(2-羟乙基)-4-甲基-1，3-二氧代-

         4，7-环氧-2H-异吲哚-2-基]-1-萘甲腈(264和243Dii)

在2L烧瓶中，将化合物243Di和243Dii的外消旋混合物(1.90 克)溶于100mL无水THF中。在搅拌下，将无水叔丁基·甲基醚(900mL) 和乙酸乙烯酯(40mL)转移至烧瓶中，加入脂酶(20g，II型，粗品，得 自猪胰；Sigma，Cat# L3126)。于室温搅拌反应混合物21小时，此时 加入另外5克所述脂酶和20mL乙酸乙烯酯。再于室温下搅拌反应 物19小时，将其贮存于4℃且不搅拌达36小时，然后于室温下再搅 拌22小时(直至通过手性HPLC分析显示所需％ee)。为了监测所述 反应，取出200μl所述混合物，将其离心。将上清液(100μl)在氮气 下干燥，将所得的残余物溶于100μl EtOH中，并进行HPLC分析：

1)反相HPLC：色谱柱，YMC-ODS AQ 150×4.6；流速，1.2 mL/min；进样体积，10μl

溶剂A，：1mM HCl水溶液；溶剂B，MeCN；于300nm检测

梯度：

时间(min)  0   8   8.5  9.5  10   12

B％        30  60  85   85   30   30

2)Chiral-HPLC：色谱柱，CHIRALCEL OJ 4.6×250mm

流动相，己烷/MeOH/EtOH(8∶1∶1)

流速，1mL/min；进样体积，20μl

于220nm和300nm检测

于25℃和40℃进行。

(用于测定反应混合物的ee％)

经过滤除去酶，减压浓缩滤液。将得到的混合物溶于氯仿中， 然后吸附至硅胶(63-200微米)上。将这些固体上样至装有5cm柱床 高度硅胶(25-40微米)的VLC漏斗(3cm I.D.，VLC是一种真空液相色 谱，使用在底部有24/40接合点的玻璃漏斗)中，然后进行分步梯度 洗脱。所述梯度在前3个流分中为100％氯仿、接着为CHCl3-1％MeOH (3个流分)、CHCl3-2％MeOH(3个流分)、CHCl3-3％MeOH(3个流 分)、CHCl3-4％MeOH(3个流分)、最后为CHCl3-5％MeOH(3个流 分)。所述流分的体积为100mL，直至达到CHCl3-3％MeOH，此后 流分的体积为200mL。化合物264在100％CHCl3的最后2个流分 中洗脱，直至CHCl3-2％MeOH的第一个流分。化合物243Dii从 CHCl3-2％MeOH的第二个流分开始洗脱，持续至CHCl3-5％MeOH 的第一个流分。粗制化合物243Dii含有少量有色杂质，通过Sephadex 柱[LH-20，在CHCl3-MeOH(2∶1)中溶胀，柱(2.5cm I.D.和90cm长)] 除去所述杂质，得到632mg的化合物243Dii。化合物264：HPLC 条件：98％，7.2min(保留时间)(方法1)，手性HPLC条件：29.0min，于 25℃(方法2)。化合物243Dii：HPLC条件：98％，4.6min(保留时间)(方 法1)，手性HPLC条件：96％ee，于25.7min(保留时间)(于25℃)和 19.8min(保留时间)(于40℃)(方法2)。

                                  实施例265

(3aα，4β，7β，7aα(E)]-4-[八氢-4-甲基-1，3-二氧代-7-(4-氧代-4-苯基-2-丁

                  烯基)-4，7-环氧-2H-异吲哚-2-基]-1-萘甲腈(265)

将化合物247(0.050g，0.134mmol)溶于THF(1.5mL)中，加入(苯 甲酰亚甲基)三苯基正膦(0.051g，0.134mmol)。将反应混合物于67℃ 搅拌24小时，然后冷却至23℃，真空浓缩。然后将粗制物质经反相 制备型HPLC纯化(YMC VP-ODS柱，20×100mm，在15分钟内用20％ B至100％B，然后于100％B保持10分钟洗脱)，得到化合物265(0.040 g)，为白色固体。HPLC：100％，3.503min(保留时间)(YMC S5 ODS 柱，4.6×50mm，用含有0.2％磷酸的10-90％甲醇水溶液在4分钟内洗 脱，4mL/min，于220nm检测)。MS(ES)：m/z 477.1[M+H]+。

                                  实施例266

(3aα，4β，7β，7aα(E))-4-[八氢-4-甲基-1，3-二氧代-7-(4-羟基-4-苯基-2-丁

                   基)-4，7-环氧-2H-异吲哚-2-基]-1-萘甲腈(266)

将化合物265(0.010g，0.021mmol)溶于EtOH(2.0mL)中，加入 Pd/C(10％Pd，0.005g)。然后通过气囊导入氢气，将反应物于25℃搅 拌3小时。然后将反应物通过硅藻土过滤，用EtOAc冲洗，真空浓 缩，得到作为黄褐色固体的化合物266(0.009g)。无需进行纯化。HPLC： 100％，3.38min(保留时间)(YMC S5 ODS柱，4.6×50mm，用含有0.2％ 磷酸的10-90％甲醇水溶液在4分钟内洗脱，4mL/min，于220nm检 测)，MS(ES)：m/z 503.2[M+Na]+。(若该反应进行1小时，则所得产 物为化合物455)。

                    实施例267-378

采用与上述方法类似的方法，制备本发明另外的化合物。实施 例267-378的化合物具有以下结构(L为一个键)：

其中G、R7、化合物名称、保留时间、分子量和所用的方法在表5中 叙述。以下化合物的绝对构型未确定。为了使命名简化，化合物238i 在本文中被指定为具有“R”构型，而化合物238ii被指定为具有“S” 构型。在本文中从化合物238i衍生的对映体纯产物被指定为具有“R” 构型，而从化合物238ii衍生的对映体纯产物被指定为具有“S”构 型。

用来测定表5化合物保留时间的色谱技术如下：LCMS＝YMC S5 ODS柱，4.6×50mm，用含有0.1％TFA的10-90％MeOH/H2O在4 分钟内洗脱；4mL/min，于220nm检测。LCMS*＝YMC S5 ODS柱， 4.6×50mm，用含有0.1％TFA的10-90％MeOH/H2O在2分钟内洗 脱；4mL/min，于220nm检测。LC＝YMC S5 ODS柱，4.6×50mm， 用含有0.2％磷酸的10-90％MeOH/H2O在4分钟内洗脱，4mL/min，于 220nm检测。表5中所列化合物的分子量通过MS(ES)按公式m/z 测定。

                            表5

                   实施例379-381

采用与上述方法类似的方法，制备本发明另外的化合物。实施 例379-381的化合物具有以下结构(L为一个键)：

其中G、R7、化合物名称、保留时间、分子量和所用的方法在表6中 叙述。用来测定表6化合物保留时间的色谱技术如下：LCMS＝YMC S5 ODS柱，4.6×50mm，用含有0.1％TFA的10-90％MeOH/H2O在4分钟内洗脱；4mL/min，于220nm检测。LCMS*＝YMC S5 ODS 柱，4.6×50mm，用含有0.1％TFA的10-90％MeOH/H2O在2分钟 内洗脱；4mL/min，于220nm检测。LC＝YMC S5 ODS柱，4.6×50 mm，用含有0.2％磷酸的10-90％MeOH/H2O在4分钟内洗脱，4mL/min， 于220nm检测。

表6中所列化合物的分子量通过MS(ES)按公式m/z测定。

                            表6

                    实施例382-383

采用与上述方法类似的方法，制备本发明另外的化合物。实施 例382-383的化合物具有以下表7中所示的结构、化合物名称、保留 时间、分子量，并且用表7中所用的方法制备。用来测定表7化合 物保留时间的色谱技术如下：LCMS＝YMC S5 ODS柱，4.6×50 mm，用含有0.1％TFA的10-90％MeOH/H2O在4分钟内洗脱；4 mL/min，于220nm检测。LCMS*＝YMC S5 ODS柱，4.6×50mm， 用含有0.1％TFA的10-90％MeOH/H2O在2分钟内洗脱；4mL/min，于 220nm检测。LC＝YMC S5 ODS柱，4.6×50mm，用含有0.2％磷 酸的10-90％MeOH/H2O在4分钟内洗脱，4mL/min，于220nm检测。 表7中所列化合物的分子量通过MS(ES)按公式m/z测定。

                            表7

                   实施例384-418

采用与上述方法类似的方法，制备本发明另外的化合物。实施 例384-418的化合物具有以下结构(L为一个键)：

其中G、R7、化合物名称、保留时间、分子量和所用的方法在表8中 叙述。以下化合物的绝对构型并未确定。为了使命名简化，化合物 243Di在本文中被指定为具有“S”构型，而化合物243Dii在本文中 被指定为具有“R”构型。由化合物243Di衍生的对映体纯产物在本 文中被指定为具有“S”构型，由化合物243Dii衍生的对映体纯产物 在本文中被指定为具有“R”构型。

用来测定表8化合物保留时间的色谱技术如下：LCMS＝YMC S5 ODS柱，4.6×50mm，用含有0.1％TFA的10-90％MeOH/H2O在4 分钟内洗脱；4mL/min，于220nm检测。LCMS*＝YMC S5 ODS柱， 4.6×50mm，用含有0.1％TFA的10-90％MeOH/H2O在2分钟内洗 脱；4mL/min，于220nm检测。LC＝YMC S5 ODS柱，4.6×50mm， 用含有0.2％磷酸的10-90％MeOH/H2O在4分钟内洗脱，4mL/min，于 220nm检测。表8中所列化合物的分子量通过MS(ES)按公式m/z 测定。

                            表8

                                      实施例422

(3aα，4β，7β，7aα)-2-(7-溴-2，1，3-苯并噁二唑-4-基)六氢-4，7-二甲基-4，7-

                       环氧-1H-异吲哚-1，3(2H)-二酮(422C)

A.4-溴-7-硝基苯并呋咱(422A)

向2，6-二溴苯胺(1.0g，4.0mmol)的CHCl3(8mL)溶液中加入 mCPBA(70％，HPLC，1.4g，8.0mmol)在CHCl3(8mL)中的悬浮液， 于室温下搅拌所得混合物24小时。将反应混合物用氯仿稀释，顺次 用2％Na2S2O3溶液、5％Na2CO3溶液和盐水洗涤。有机层经硫酸钠 干燥，减压浓缩，留下一种固体，将该固体悬浮于DMSO(15mL)中。 于室温向该悬浮液中加入NaN3(272mg，4.19mmol)的DMSO(15mL) 溶液。于室温下搅拌所得混合物，直至大部分氮气被放出，然后快 速加热至120℃达3分钟。将反应混合物冷却，然后倾至碎冰(100g) 中。静置1小时后，滤出沉淀，真空干燥，将其再溶解于浓硫酸(5mL) 中。向该溶液中加入含NaNO3(400mg，4.7mmol)的50％H2SO4(1.6 mL)溶液，使温度维持在60℃。在加入完成后，将混合物加热至85 ℃达30分钟，冷却至室温，然后倾至碎冰(40g)中。加入EtOAc，分 离各层，将水层用EtOAc萃取。合并的有机层经硫酸钠干燥，减后 浓缩，留下固体，固体经快速色谱纯化(硅胶，EtOAc的(20％)己烷溶 液)，得到化合物422A(785mg，81％)，为黄褐色固体。

B.4-溴-7-氨基苯并呋咱(422B)

将化合物422A(563mg，2.31mmol)的AcOH(5mL)溶液加热至 70℃，一次性加入铁粉(258mg，4.62mmol)。将所得的深色反应混合 物搅拌15分钟，冷却至室温并减压浓缩。将残余物溶于EtOAc中， 将所得溶液用饱和碳酸钠溶液洗涤。有机层经硫酸钠干燥、真空浓 缩，经硅胶快速色谱纯化，以10-60％EtOAc的己烷溶液洗脱，得到 470mg(95％)化合物422B，为红色固体。

C.(3aα，4β，7β，7aα)-2-(7-溴-2，1，3-苯并噁二唑-4-基)六氢-4，7-二甲基- 4，7-环氧-1H-异吲哚-1，3(2H)-二酮(422C)

将化合物422B(43mg，0.20mmol)、化合物20A(45mg，0.23 mmol)、硫酸镁(60mg，0.50mmol)、Et3N(139μL，1.0mmol)和1，2-二 甲氧基乙烷(300μL)的混合物置于密封管中，加热至135℃达14小 时。冷却至室温后，将混合物通过硅藻土过滤，用MeOH洗脱，得 到深色固体，所述固体经硅胶快速色谱纯化，经5-40％EtOAc的己 烷溶液洗脱，得到42mg(54％)化合物422C，为黄色固体。HPLC：99％， 2.96min(保留时间)(YMC S5 ODS柱，4.6×50mm Ballistic，在4分钟 内含有0.2％磷酸的10-90％甲醇水溶液洗脱，4mL/min，于220nm检 测)。1H NMR(丙酮-d6，400MHz)：δ＝8.00(d，J＝7.5Hz，1H)，7.45(d，J ＝7.5Hz，1H)，3.31(s，2H)，1.98-1.93(m，2H)，1.74-1.69(m，2H)，1.57(s， 6H)。

                                     实施例423

(3aα，4β，7β，7aα)-7-[八氢-4，7-二甲基-1，3-二氧代-4，7-环氧-2H-异吲哚-

                       2-基]-2，1，3-苯并噁二唑-4-甲腈(423)

向化合物422C(42mg，0.11mmol)的DMA(1mL)溶液中加入 CuCN(20mg，0.22mmol)，将所得混合物加热至150℃达5小时。使 混合物冷却至室温，在EtOAc和NaCN水溶液(5g/50mL)之间分配。 分离各层，将水层用EtOAc萃取一次。合并的有机相经硫酸钠干燥， 真空浓缩，经硅胶快速色谱纯化，以20-70％EtOAc的己烷溶液为洗 脱液，得到13mg(35％)化合物423，为黄色油状物。HPLC：99％，2.66 min(保留时间)(YMC S5 ODS柱，4.6×50mm Ballistic，在4分钟内含 有0.2％磷酸的10-90％甲醇水溶液洗脱，4mL/min，于220nm检测)， MS(ES)：m/z 396.9[M-H+OAc]-。

                                    实施例424

(3aα，4β，7β，7aα)-7-[八氢-4，7-二甲基-1，3-二氧代-4，7-环氧-2H-异吲哚-

              2-基]-2，1，3-苯并噻二唑-4-甲腈(424B)

A.4-氰基-7-氨基-苯并噻二唑(424A)

将2-氰基-5-硝基苯二胺(78mg，0.44mmol，按照WO 0076501中 所述方法制备)的SOCl2(2mL)溶液加热至回流达3小时。让所得的 混合物冷却至室温，然后倾至冰/水中。加入二氯甲烷，分离各层， 水层用二氯甲烷萃取2次。合并的有机相经硫酸镁干燥、真空浓缩， 经硅胶快速色谱纯化，以50％EtOAc的己烷溶液为洗脱液，得到4- 氰基-7-硝基苯并噻二唑。将该物质溶于含有EtOAc(1mL)和水(0.2mL) 的AcOH(2mL)中，加热至70℃。在该温度下一次性加入固体铁粉(78 mg，1.41mmol)，将该深色混合物搅拌20分钟，然后冷却至室温。将 反应混合物通过硅藻土过滤，用EtOAc洗脱，用饱和碳酸钠溶液洗 涤，经硫酸镁干燥并真空浓缩。通过硅胶快速色谱进行纯化，以20- 70％EtOAc的己烷溶液为洗脱液，得到47mg(61％)化合物424A，为 褐色固体。

B.(3aα，4β，7β，7aα)-7-[八氢-4，7-二甲基-1，3-二氧代-4，7-环氧-2H-异吲 哚-2-基]-2，1，3-苯并噻二唑-4-甲腈(424B)

将化合物424A(35mg，0.20mmol)、化合物20A(45mg，0.23 mmol)、硫酸镁(60mg，0.50mmol)、Et3N(139μL，1.0mmol)和DME (200μL)的混合物置于密封管中，加热至135℃达14小时。冷却至室 温后，将混合物通过硅藻土过滤，用MeOH洗脱，得到深色固体， 将所述固体通过硅胶快速色谱(以10-50％EtOAc的己烷溶液为洗脱 液)和反相制备型HPLC(YMC S5 ODS 20×100mm，用含有0.1％TFA 的27-100％甲醇水溶液在10分钟内洗脱，20mL/min)的组合纯化，得 到36mg(51％)化合物424B，为黄色固体。HPLC：98％，2.45min(保 留时间)(YMC S5 ODS柱，4.6×50mm Ballistic，在4分钟内用含有 0.2％磷酸的10-90％甲醇水溶液洗脱，4mL/min，于220nm脱测)，MS (DCI)：m/z 355.0[M+H]+。

                                    实施例425

(3aα，4β，7β，7aα)-N-[2-[2-(4-氰基-1-萘基)八氢-7-甲基-1，3-二氧代-4，7-

         环氧-4H-异吲哚-4-基]乙基]-4-氟-N-甲基苯甲酰胺(425B)

A.4-氟-N-甲基-N-[2-(5-甲基-呋喃-2-基)-乙基]-苯甲酰胺(425A)

将NaH(60％油中的分散体，65mg，1.63mmol)分次加入至4-氟- N-[2-(5-甲基-2-呋喃基)乙基]苯甲酰胺(269mg，1.09mmol，237A)的 THF(5mL)溶液中。在气体放出停止后，滴加碘甲烷(0.14mL，2.18 mmol)。当HPLC分析表明反应完成50％后，立即减压浓缩混合物， 然后再经受上述条件处理。在所有原料耗尽后，加入水，将所得混 合物用EtOAc(2×5mL)萃取。合并的有机层经硫酸钠干燥，然后减 压浓缩。经硅胶快速色谱纯化，用20％丙酮/氯仿洗脱，得到238mg (84％)的化合物425A。HPLC：98％，2.94min(保留时间)(Phenomenex- prime S5-C18柱，4.6×50mm，用含有0.2％磷酸的10-90％甲醇水溶液 在4分钟内洗脱，4mL/min，于220nm检测)，MS(ES)：m/z[M+H]＝ 262.38。

B.(3aα，4β，7β，7aα)-N-[2-[2-(4-氰基-1-萘基)八氢-7-甲基-1，3-二氧代- 4，7-环氧-4H-异吲哚-4-基]乙基]-4-氟-N-甲基苯甲酰胺(425B)

将化合物425A(183mg，0.75mmol)和4-(2，5-二氢-2，5-二氧代- 1H-1-基)-1-萘甲腈(174mg，0.75mmol)的苯(1mL)溶液于60℃加热15 小时。减压浓缩反应混合物，得到357mg粗制中间体。将粗制中间 体(156mg)溶于EtOAc(6mL)中，加入10％Pd/C(16mg)，在氢气囊 通气下将混合物搅拌过夜。将反应混合物通过硅藻土垫过滤，然后 减压浓缩。经反相制备型色谱纯化(YMC S5 ODS 20×100mm，在15 分钟内用含有0.1％TFA的20-100％甲醇水溶液洗脱，20mL/min，于 220nm检测)，得到160.3mg(72％)的化合物425B，为灰白色固体。 HPLC：99％，3.23min(保留时间)(Phenomenex-prime S5-C18柱，4.6×50 mm，在4分钟内用含有0.2％磷酸的10-90％甲醇水溶液洗脱，4 mL/min，于220nm检测)。MS(ES)：m/z[M+H]＝512.19。

                                   实施例426

(3aα，4β，7β，7aα)-六氢-4，7-二甲基-2-[4-(2，2，2-三氟-1-羟乙基)苯基]-4，7-

                        环氧-1H-异吲哚-1，3(2H)-二酮(426B)

A.1-(4-氨基-苯基)-2，2，2-三氟-乙醇(426A)

按照Stewart，R.等，Can.J.Chem.58，2491-2496(1980)中所述方 法，制备化合物426A。于室温下，加入NaBH4(47mg，1.235mmol) 加入到对氨基三氟苯乙酮(155.7mg，0.823mmol，按照Klabunde，K.J. 等，J.Org.Chem.35，1711-1712(1970)中所述方法合成)的异丙醇(3mL) 溶液中。30分钟后，将反应物用磷酸盐缓冲液(pH7.2)猝灭，用水稀 释，然后用EtOAc(2×10mL)萃取。将合并的有机层经硫酸钠干燥， 减压浓缩，得到154mg(98％)的化合物426A，为黄褐色固体。该物 质不经纯化而直接用于下一步中。HPLC：99％，0.42min(保留时 间)(YMC S5 ODS柱，4.6×50mm，用含有0.2％磷酸的10-90％甲醇水 溶液在4分钟内洗脱，4mL/min，于220nm检测)。察院MS(ES)：m/z [M+H]＝192.13。

B.(3aα，4β，7β，7aα)-六氢-4，7-二甲基-2-[4-(2，2，2-三氟-1-羟乙基)苯基]- 4，7-环氧-1H-异吲哚-1，3(2H)-二酮(426B)

将化合物426A(75.3mg，0.394)、化合物20A(51.5mg，0.262 mmol)、三乙胺(0.15mL)和硫酸镁(50mg)的甲苯(1mL)的混合物在密 封管中加热至135℃达15小时。将混合物过滤，然后减压浓缩。经 反相制备型HPLC纯化(YMC S5 ODS 20×100mm，在15分钟内用 含有0.1％TFA的20-100％甲醇水溶液洗脱，20mL/min，于220nm检 测)，得到63.1mg(65％)的化合物426B，为白色固体。HPLC：98％，2.49 min(保留时间)(Phenomenex-prime S5-C18柱，4.6×50mm，用含有 0.2％磷酸的10-90％甲醇水溶液在4分钟内洗脱，4mL/min，于220nm 检测)。MS(ES)：m/z[M+H]＝370.16。

                     实施例427

(3aα，4β，7β，7aα)-4-[4-[2-[[(1，1-二甲基乙基)二甲基甲硅烷基]氧基]乙 基]-1，3，3a，4，7，7a-六氢-7-甲基-1，3-二氧代-4，7-环氧-2H-异吲哚-2-基)-2- (三氟甲基)苄腈和(3aα，4α，7α，7aα)-4-[4-[2-[[(1，1-二甲基乙基)二甲基 甲硅烷基]氧基]乙基]-1，3，3a，4，7，7a-六氢-7-甲基-1，3-二氧代-4，7-环氧-

     2H-异吲哚-2-基)-2-(三氟甲基)苄腈(427i和427ii)

将化合物204A(2.00g，8.50mmol)和4-(2，5-二氢-2，5-二氧代-1H- 吡咯-1-基)-2-三氟甲基苄腈(1.50g，5.60mmol)在苯(5.0mL)中混合， 然后于60℃加热14小时，随后冷却至25℃。在40℃真空下，用1 小时除去溶剂，得到粗制物质，该粗制物质经二氧化硅快速色谱纯 化，用0.5％EtOAc/CH2Cl2洗脱，得到2.0g的化合物427i和1.3g 的化合物427ii，均为浅褐色固体。化合物427i：HPLC：95％，4.200min (保留时间)(YMC S5 ODS柱，4.6×50mm，用含有0.2％磷酸的10-90％ 甲醇水溶液在4分钟内洗脱，4mL/min，于220nm检测)。MS(ES)：m/z 507.1[M+H]+。化合物427ii：HPLC：95％，4.20min(保留时间)(YMC S5 ODS柱，4.6×50mm，用含有0.2％磷酸的10-90％甲醇水溶液在4分钟 内洗脱，4mL/min，于220nm检测)。MS(ES)：m/z 507.1[M+H]+。

                                     实施例428

[3aR-(3aα，4β，5β，7β，7aα)]-4-7-[2-[[(1，1-二甲基乙基)二甲基甲硅烷基] 氧基]乙基]八氢-5-羟基-4-甲基-1，3-二氧代-4，7-环氧-2H-异吲哚-2-基]- 2-(三氟甲基)苄腈和[3aS-(3aα，4β，5β，7β，7aα)]-4-7-[2-[[(1，1-二甲基乙基) 二甲基甲硅烷基]氧基]乙基]八氢-5-羟基-4-甲基-1，3-二氧代-4，7-环氧-

     2H-异吲哚-2-基]-2-(三氟甲基)苄腈(428i和428ii)

将化合物427i(1.40g，2.77mmol)和RhCl(PPh3)3(0.128g，0.14 mmol)在烧瓶中混合。然后将烧瓶抽空并充入氩气3次，然后用注射 器加入THF(3.0mL)。当所有颗粒溶解，立即滴加儿茶酚硼烷(0.59mL， 5.54mmol)。在氩气下，于25℃搅拌反应混合物30分钟，然后冷却 至0℃。加入磷酸盐缓冲液(pH＝7，20mL)，接着加入EtOH(10mL)、 30％H2O2/H2O(2mL)。于0℃搅拌反应混合物3小时，然后用二氯甲 烷(3×25mL)萃取。将合并的有机层用1N NaOH(25mL)、10％Na2SO3(25mL)和盐水(25mL)洗涤。然后，将粗制物质经真空浓缩，然后经 二氧化硅快速色谱纯化，用2％EtOAc/二氯甲烷至10％EtOAc/二氯 甲烷洗脱，得到0.63g化合物428i和428ii的外消旋混合物，为浅黄 色固体。HPLC：99％，3.867min(保留时间)(YMC S5 ODS柱，4.6×50 mm，用含有0.2％磷酸的10-90％甲醇水溶液在4分钟内洗脱，4 mL/min，于220nm检测)，MS(ES)：m/z 525.1[M+H]

通过正相制备型手性HPLC，用Chiracel OD柱(5cm×50cm)， 使用含13％溶剂B(EtOH)的溶剂A(己烷)溶液洗脱，流速为50 mL/min，分离化合物428i和428ii的外消旋混合物。化合物428i在 34min至38min洗脱出来，而化合物428ii在44min至49min洗脱 出来。通过手性HPLC测定对映体过量。化合物428i：＞99％ee(12.576 min(保留时间)(Chiralcel OJ柱，4.6×250mm，用等度85％庚烷/15％ MeOH/乙醇(1∶1)洗脱，1mL/min，于220nm检测，40℃)。化合物428ii： 99％ee(18.133min(保留时间)(Chiralcel OJ柱，4.6×250mm，用等度 85％庚烷/15％MeOH/乙醇(1∶1)洗脱，1mL/min，于220nm检测，40 ℃)。

化合物428i和428ii的绝对构型未确定。为了使命名简化，在 本文中将化合物428i指定为具有“R”构型，而化合物428ii指定为 具有“S”构型。在本文中从化合物428i衍生的对映体纯产物被指定 为具有“R”构型，而从化合物428ii衍生的对映体纯产物被指定为 具有“S”构型。

                                     实施例429

[3aR-(3aα，4β，5β，7β，7aα)]-4-[八氢-5-羟基-7-(2-羟乙基)-4-甲基-1，3-二

      氧代-4，7-环氧-2H-异吲哚-2-基]-2-(三氟甲基)苄腈和[3aS-

(3aα，4β，5β，7β，7aα)]-4-[八氢-5-羟基-7-(2-羟乙基)-4-甲基-1，3-二氧代-

        4，7-环氧-2H-异吲哚-2-基]-2-(三氟甲基)苄腈(429i和429ii)

将化合物428i(180mg，0.34mmol)溶于2％HCl/EtOH(5.0mL) 中。30分钟后，加入饱和碳酸氢钠，将水层用二氯甲烷(20mL×3)萃 取，用盐水洗涤，经硫酸钠干燥，得到135mg的化合物429i，为白 色固体。HPLC：99％，2.257min(保留时间)(YMC S5 ODS柱，4.6×50 mm，用含有0.2％磷酸的10-90％甲醇水溶液在4分钟内洗脱，4 mL/min，于220nm检测)，MS(ES)：m/z 411.1[M+H]+。

用化合物428ii重复上述程序，以相似的收率得到所需二醇化合 物429ii。

                                    实施例430

[3aR-(3aα，4β，5β，7β，7aα)]-4-[7-[2-[(5-氯-2-吡啶基)氧基]乙基]八氢-5- 羟基-4-甲基-1，3-二氧代-4，7-环氧-2H-异吲哚-2-基]-2-(三氟甲基)苄腈

                            (430)

将三苯膦(0.026g，0.098mmol)和DBAD(0.023g，0.098mmol)在 THF(0.5mL)中混合。使先前的混合物反应15分钟后，加入2-羟基- 6-氯吡啶(0.016g，0.100mmol)，将混合物搅拌10分钟，加入化合物 429i(0.020g，0.049mmol)。于25℃搅拌反应混合物2小时，然后将 粗制物质经制备型TLC纯化，用10％丙酮/氯仿洗脱，得到0.014g 的化合物430，为浅褐色固体。HPLC：100％，3.370min(保留时 间)(YMC S5 ODS柱，4.6×50mm，用含有0.1％TFA的10-90％甲醇水 溶液在4分钟内洗脱，4mL/min，于220nm检测)，MS(ES)：m/z 522.08 [M+H]+。

                                    实施例431

[3aS-(3aα，4β，5β，7β，7aα)]-4-[7-[2-[(5-氯-2-吡啶基)氧基]乙基]八氢-5- 羟基-4-甲基-1，3-二氧代-4，7-环氧-2H-异吲哚-2-基]-2-(三氟甲基)苄腈

                             (431)

将三苯膦(0.026g，0.098mmol)和DBAD(0.023g，0.098mmol)在 THF(0.5mL)中混合。使先前的混合物反应15分钟后，加入2-羟基- 6-氯吡啶(0.016g，0.100mmol)，将混合物搅拌10分钟，加入化合物 429ii(0.020g，0.049mmol)。于25℃搅拌反应混合物2小时，然后将 粗制物质经制备型TLC纯化，用10％丙酮/氯仿洗脱，得到0.015g 的化合物431，为浅褐色固体。HPLC：100％，3.370min(保留时 间)(YMC S5 ODS柱，4.6×50mm，用含有0.1％TFA的10-90％甲醇水 溶液在4分钟内洗脱，4mL/min，于220nm检测)，MS(ES)：m/z 522.08 [M+H]+。

                                    实施例432

(3aα，4β，7β，7aα)-2-(4-氰基-1-萘基)八氢-N-(2-羟基苯基)-7-甲基-1，3-二

                      氧代-4，7-环氧-4H-异吲哚-4-丁酰胺(432)

将化合物262(0.100g，0.239mmol)溶于DMF(无水，1.5mL)中， 加入BOP(0.211g，0.478mmol)，然后加入2-氨基苯酚(0.052g，0.478 mmol)和N-甲基吗啉(0.052mL，0.478mmol)。在氩气下，于25℃搅 拌反应混合物3小时，然后将粗制物质经反相制备型HPLC纯化(YMC S5 ODS 20×100mm，在15分钟内含有0.1％TFA的20-100％甲醇水 溶液洗脱，20mL/min，于220nm检测)，得到0.060g的化合物432， 为浅褐色固体。HPLC：100％，3.037min(保留时间)(YMC S5 ODS柱， 4.6×50mm，用含有0.1％TFA的10-90％甲醇水溶液在4分钟内洗脱，4 mL/min，于220nm检测)，MS(ES)：m/z 510.34[M+H]+。

                                   实施例433

(3aα，4β，7β，7aα)-4-[4-[3-(2-苯并噁唑基)丙基]八氢-7-甲基-1，3-二氧代-

                     4，7-环氧-2H-异吲哚-2-基]-1-萘甲腈(433)

将三苯膦(0.031g，0.118mmol)和DBAD(0.027g，0.118mmol)在 THF(0.5mL)中混合。使上述混合物反应15分钟后，加入化合物432 (0.030g，0.059mmol)。于25℃搅拌反应混合物2小时，然后将粗制 物质经反相制备型HPLC纯化(YMC S5-ODS 20×100mm，在15分 钟内含有0.1％TFA的20-100％甲醇水溶液洗脱，20mL/min，于220 nm检测)，得到0.018g的化合物433，为浅褐色固体。HPLC：100％， 3.357min(保留时间)(YMC S5 ODS柱，4.6×50mm，用含有0.1％TFA 的10-90％甲醇水溶液在4分钟内洗脱，4mL/min，于220nm检测)，MS (ES)：m/z 492.37[M+H]+。

                                   实施例434

(3aα，4β，5β，7β，7aα)-4-[4-乙基八氢-5-羟基-7-(2-羟乙基)-1，3-二氧代-

                   4，7-环氧-2H-异吲哚-2-基]-1-萘甲腈(434C)

A.叔丁基-[2-(5-乙基-呋喃-2-基)-乙氧基]-二甲基-硅烷(434A)

将咪唑(255mg，3.75mmol)和TBSC1(414mg，2.75mmol)加入至 245A(350mg，2.5mmol)的DMF(4mL)溶液中。于室温搅拌混合物15 小时，然后加入另外100mg(0.66mmol)TBSC1，以使反应完成。再 搅拌1小时后，将反应混合物用乙醚(100mL)稀释，用水(20mL)、1N HCl(20mL)、水(20mL)和盐水(20mL)洗涤。有机层经硫酸钠干燥， 减压浓缩得到509mg的化合物434A(80.3％)，为黄色油状物。

B.(3aα，4β，7β，7aα)-4-[4-[2-[[(1，1-二甲基乙基)-二甲基甲硅烷基]氧基] 乙基]-4-乙基-1，3，3a，4，7，7a-六氢-1，3-二氧代-4，7-环氧-2H-异吲哚-2- 基]-1-萘甲腈(434B)

将化合物434A(509mg，2.00mmol)和4-(2，5-二氢2，5-二氧代- 1H-1-基)-1-萘甲腈(498mg，2.00mmol)的苯(2mL)溶液于60℃加热18 小时。减压浓缩反应混合物，得到992mg(99％)粗制化合物434B， 该化合物不经进一步纯化而直接用于下一步中。

C.(3aα，4β，5β，7β，7aα)-4-[7-[2-[[(1，1-二甲基乙基)-二甲基甲硅烷基]氧 基]乙基]-4-乙基八氢-5-羟基-1，3-二氧代-4，7-环氧-2H-异吲哚-2-基]-1- 萘甲腈(434C)

将化合物434B(992mg，1.98mmol)和RhCl2(PPh3)3(183mg， 0.198mmol)的混合物抽空，充入氩气(3×)。加入THF(20mL)，当 所有颗粒溶解后，立即缓慢滴加儿茶酚硼烷(0.42mL，3.96mmol)。当 通过HPLC测定产物生成停止后，将反应混合物冷却至0℃，用磷酸 盐缓冲液(34mL，pH7.2)猝灭，然后加入EtOH(19mL)和30％过氧化 氢(2.9mL)。2小时后，再加入磷酸盐缓冲液(6.8mL，pH7.2)、EtOH(3.8 mL)和过氧化氢(0.6mL)。于室温下搅拌反应混合物3小时。当硼酸 盐中间体耗尽后，立即将混合物用二氯甲烷(300mL)萃取，将合并的 有机层用1N NaOH、10％亚硫酸氢钠水溶液和盐水洗涤，随后经硫 酸钠干燥。经硅胶快速色谱纯化，用10％MeOH/二氯甲烷洗脱，得 到75mg(9.3％)的化合物434C，为灰色固体。HPLC条件：97％，2.43 min(保留时间)(Phenomenex-prime S5-C18柱，4.6×50mm，含有0.2％ 磷酸的10％-90％甲醇水溶液的进行4分钟梯度洗脱，于220nm检 测)。MS(ES)：m/z 407.18[M+H]+。

D.(3aα，4β，5β，7β，7aα)-4-[4-乙基八氢-5-羟基-7-(2-羟乙基)-1，3-二氧代- 4，7-环氧-2H-异吲哚-2-基]-1-萘甲腈(434D)

将化合物434C(24mg，0.046mmol)溶解在2％浓盐酸/乙醇(0.8mL) 中，在室温下将所述混合物搅拌20分钟。往混合物中加入冷的饱和 碳酸氢钠溶液，直至溶液呈碱性(pH8)。将反应物用乙酸乙酯萃取(3 ×2mL)，将合并的有机层用盐水洗涤(2×5mL)，经无水硫酸钠干燥。 真空浓缩得到14mg(75％)化合物434D，为白色固体。HPLC：95％，2.40 min(保留时间)(YMC S5 ODS柱，4.6×50mm，用含有0.2％H3PO4的 10-90％甲醇水溶液在4分钟内洗脱，于220nm检测)。

                                      实施例435

(3aα，4β，5β，7β，7aα)-4-[7-[2-(4-氰基苯氧基)乙基]-4-乙基八氢-5-羟基-

           1，3-二氧代-4，7-环氧-2H-异吲哚-2-基]-1-萘甲腈(435)

将DBAD(39.6mg，0.172mmol)加入至PPh3(45.1mg，0.172mmol) 的THF(0.8mL)溶液中。搅拌10分钟后，加入4-氰基苯酚(20.5mg， 0.172mmol)，再将反应混合物搅拌5分钟。加入化合物434C(25.0mg， 0.062mmol)，于室温下搅拌混合物2小时。减压浓缩反应物。经制 备型TLC纯化，用10％丙酮/氯仿洗脱，得到18.1mg(0.036mmol， 57.6％)的化合物435。HPLC条件：96％，3.15min(保留时间)(YMC S5 ODS 4.6×50mm，含有0.2％磷酸的10％-90％甲醇水溶液在4分钟内 梯度洗脱，于220nm检测)。MS(ES)：m/z 508.14[M+H]+。

                                   实施例436

(3aα，4β，7β，7aα)-2-(4-氰基-1-萘基)八氢-N-(2-羟基苯基)-7-甲基-1，3-二

                     氧代-4，7-环氧-4H-异吲哚-4-乙酰胺(436)

将化合物234B(0.100g，0.256mmol)溶于DMF(无水，1.5mL) 中，加入BOP(0.225g，0.51mmol)，然后加入2-氨基苯酚(0.056g，0.51 mmol)和N-甲基吗啉(0.056mL，0.51mmol)。在氩气下，于25℃搅拌 反应混合物3小时，然后将粗制物质经反相制备型HPLC纯化(YMC S5 ODS 20×100mm，在15分钟内含有0.1％TFA的20-100％甲醇 水溶液洗脱，20mL/min，于220nm检测)，得到0.078g的化合物436， 为浅褐色固体。HPLC：100％，3.037min(保留时间)(YMC S5 ODS柱， 4.6×50mm，用含有0.1％TFA的10-90％甲醇水溶液在4分钟内洗脱，4 mL/min，于220nm检测)。MS(ES)：m/z 482.34[M+H]+。

                                    实施例437

(3aα，4β，7β，7aα)-4-[4-(2-苯并噁唑基甲基)八氢-7-甲基-1，3-二氧代-4，7-

                       环氧-异吲哚-2-基]-1-萘甲腈(437)

将三苯膦(0.082g，0.312mmol)和DBAD(0.072g，0.312mmol)在 THF(0.5mL)中混合。使上述混合物反应15分钟后，加入化合物436 (0.075g，0.156mmol)。于25℃搅拌反应混合物2小时，然后将粗制 物质经反相制备型HPLC纯化(YMC S5 ODS 20×100mm，在15分 钟内含有0.1％TFA的20-100％甲醇水溶液洗脱，20mL/min，于220 nm检测)，得到0.052g的化合物437，为浅褐色固体。HPLC：100％， 3.443min(保留时间)(YMC S5 ODS柱，4.6×50mm，用含有0.1％TFA 的10-90％甲醇水溶液在4分钟内洗脱，4mL/min，于220nm检测)。 MS(ES)：m/z 464.18[M+H]+。

                                   实施例438

(3aα，4β，7β，7aα)-六氢-4，7-二甲基-2-[4-[2，2，2-三氟-1-羟基-1-(三氟甲基)

               乙基]苯基]-4，7-环氧-1H-异吲哚-1，3(2H)-二酮(438)

在密封管内，将2-(4’-氨基苯基)-1，1，1，3，3，3-六氟-2-丙醇(95.7mg， 0.369)、化合物20A(48.3mg，0.246mmol)、三乙胺(0.15mL)和硫酸 镁(50mg)在甲苯(1mL)中的混合物加热至135℃过夜。将混合物过滤 并减压浓缩。经反相制备型HPLC纯化(YMC S5 ODS 20×100mm， 在15分钟内含有0.1％TFA的20-100％甲醇水溶液洗脱，20mL/min， 于220nm检测)，得到44.0mg(41％)的化合物438，为白色固体。HPLC： 99％，3.10min(保留时间)(Phenomenex-prime S5-C18柱，4.6×50mm， 用含有0.2％磷酸的10-90％甲醇水溶液在4分钟内洗脱，4mL/min，于 220nm检测)。MS(ES)：m/z[M+H]＝438.14。

                   实施例439-454

采用与上述方法类似的方法，制备本发明另外的化合物。实施 例439-454的化合物具有以下结构(L为一个键)：

其中G、R7、化合物名称、保留时间、分子量和所用的方法在表9中 叙述。以下化合物的绝对构型并未确定。为了使命名简化，化合物 243Di在本文中被指定为具有“S”构型，而化合物243Dii在本文中 被指定为具有“R”构型。由化合物243Di衍生的对映体纯产物在本 文中被指定为具有“S”构型，由化合物243Dii衍生的对映体纯产物 在本文中被指定为具有“R”构型。同样地，化合物428i在本文中被 指定为具有“S”构型，而化合物428ii在本文中被指定为具有“R” 构型。由化合物428i衍生的对映体纯产物在本文中被指定为具有“S” 构型，由化合物428ii衍生的对映体纯产物在本文中被指定为具有 “R”构型。

用来测定表9化合物保留时间的色谱技术如下：LCMS＝YMC S5 ODS柱，4.6×50mm，用含有0.1％TFA的10-90％MeOH/H2O在4 分钟内洗脱；4mL/min，于220nm检测。LCMS*＝YMC S5 ODS柱， 4.6×50mm，用含有0.1％TFA的10-90％MeOH/H2O在2分钟内洗 脱；4mL/min，于220nm检测。LC＝YMC S5 ODS柱，4.6×50mm， 用含有0.2％磷酸的10-90％MeOH/H2O在4分钟内洗脱，4mL/min，于 220nm检测。表9中所列化合物的分子量通过MS(ES)按公式m/z 测定。

                            表9

                   实施例455-457

采用与上述方法类似的方法，制备本发明另外的化合物。实施 例455-457的化合物具有以下结构(L为一个键)：

其中G、R7、化合物名称、保留时间、分子量和所用的方法在表10 中叙述。以下化合物的绝对构型并未确定。为了使命名简化，化合 物238i在本文中被指定为具有“R”构型，而化合物238ii在本文中 被指定为具有“S”构型。由化合物238i衍生的对映体纯产物在本文 中被指定为具有“R”构型，由化合物238ii衍生的对映体纯产物在 本文中被指定为具有“S”构型。

用来测定表10化合物保留时间的色谱技术如下：LCMS＝YMC S5 ODS柱，4.6×50mm，用含有0.1％TFA的10-90％MeOH/H2O在4分钟内洗脱；4mL/min，于220nm检测。LCMS*＝YMC S5 ODS 柱，4.6×50mm，用含有0.1％TFA的10-90％MeOH/H2O在2分钟 内洗脱；4mL/min，于220nm检测。LC＝YMC S5 ODS柱，4.6×50 mm，用含有0.2％磷酸的10-90％MeOH/H2O在4分钟内洗脱，4mL/min， 于220nm检测。表10中所列化合物的分子量通过MS(ES)按公式m/z 测定。

                            表10

                                     实施例458

(3aα，4β，5β，7β，7aα)-4-(八氢-5-羟基-4，7-二甲基-1，3-二氧代-4，7-环氧- 2H-异吲哚-2-基)-2-(三氟甲基)苄腈和(3aα，4β，5α，7β，7aα)-4-(八氢-5-羟 基-4，7-二甲基-1，3-二氧代-4，7-环氧-2H-异吲哚-2-基)-2-(三氟甲基)苄

                       腈(221B和222D)

通过生物转化，将化合物20B转化为化合物221B和222D(也 作为化合物221B和222D合成)。

用东方拟无枝酸菌(Amycolatopsis orientalis)(ATCC 43491)将化 合物20B羟基化。用来自冷冻小瓶的1ml培养物接种500mL锥形 瓶中的100ml培养基，将烧瓶于28℃、200rpm下培养3天。用10mL 一份的这种培养物接种500mL锥形瓶中的100ml培养基，将烧瓶于 28℃、200rpm下培养1天。将10mL的所述1天培养物分配到3个 50ml烧瓶的每个烧瓶中。向每种培养物中加入化合物20B(3mg的 0.1mL甲醇溶液)，继续培养3天。将每个烧瓶中的培养液用20mL 乙酸乙酯萃取，将合并的乙酸乙酯萃取液于40℃氮气流下蒸发至干。 将残余物溶于1.2mL甲醇中，通过HPLC、LC/MS和LC/NMR分析。 该溶液含有2.5mg剩余的化合物20B、1.6mg的化合物221B和1.3mg 的化合物222D。MS和NMR分析结果与以上所示结构一致。

培养基：0.5％烘烤过的大豆培养基，2％葡萄糖，0.5％酵母膏， 0.5％K2HPO4，0.5％NaCl，用HCl调至pH7(R.V.Smith和J.P. Rosazza，Arch.Biochem.Biophys.，161，551-558(1974)

HPLC分析

色谱柱：Phenomenex Luna C18，150×2mm，5μ

流动相：溶剂A：95％20mM乙酸铵pH5.1，5％乙腈

溶剂B：95％乙腈，5％20mM乙酸铵pH5.1

线性梯度为25分钟内从100％溶剂A至5％溶剂A，然后以100％溶 剂A平衡8分钟。

温度：40℃

检测：250nm

注射体积：1μl

保留时间：化合物20B，20.8min；化合物221B，16.5min；化合物222D， 17.8min

HPLC条件

用手性HPLC条件来分离对映体，用非手性HPLC条件来分离 化合物20B的羟基化类似物的非对映体(即化合物221B和222D以及 化合物254i和254ii)。

在手性HPLC条件下使用两种方法，用反相(RP)进行生物样品 中生物转化产物的手性分析，用正相(NP)进行非生物样品的分析。

手性RP-HPLC条件

色谱柱：           CHIRALPAK AD-R

                   4.6×250mm，10μ

温度：             40℃

注射体积：         5μL或20μL

流动相：           A：MeCN

                   B：H2O

                   等度，30％A，18min

流速：             1mL/min

UV检测：           242nm

手性NP-HPLC条件

色谱柱：           CHIRALPAK AD

                   4.6×250mm，10μ

温度：             25℃

注射体积：         5μL或20μL

流动相：           A：庚烷

                   B：MeOH/乙醇(1∶1)

                   等度，80％A，20min

流速：             1mL/min

UV检测：           242nm

在这些条件下，化合物254i和254ii的保留时间分别为8.5分钟和9.85 分钟。

用反相HPLC来分离非对映体化合物221B和222D：

流动相：

溶剂A：95％20mM乙酸铵pH5.1，5％乙腈

溶剂B：95％乙腈，5％20mM乙酸铵pH5.1

梯度：

线性梯度在25分钟内从100％溶剂A至5％溶剂A，然后以100％ 溶剂A平衡8分钟。总洗脱时间为36分钟。

流速：

0.2ml/min

柱子：

Phenomenex Luna 5微米C18 150×2.0mm id

检测：

于242nm下进行UV检测

在这些条件下，化合物221B和222D的保留时间分别为18.983 min和20.362min。

                                     实施例459

(3aα，4β，5β，7β，7aα)-4-[八氢-5-羟基-7-[2-(羟乙基)-4-甲基-1，3-二氧代-

                     4，7-环氧-2H-异吲哚-2-基]-1-萘甲腈(459)

通过生物转化，将化合物223A和331转化为化合物459。

化合物223A的微生物羟基化

1.反应

向装有100ml转化培养基的500mL烧瓶中，加入一个冷冻小 瓶(约2ml)的灰色链霉菌(Streptomyces griseus)ATCC 10137。转化培 养基如下制备：向2L塑料烧杯中加入20g葡萄糖、5.0g酵母膏、5.0 g大豆粉、5.0g氯化钠、5.0g磷酸氢二钾和1L去离子水，将混合 物于室温搅拌3-30分钟。然后用1N HCl或1N NaOH将混合物的pH 调至7.0。将所得的混合物分装到500ml烧瓶(每个烧瓶100ml)中。 用Bio/Wrap覆盖烧瓶，于121℃高压灭菌15分钟，在使用之前冷却 至室温。

将培养物于28℃、250rpm下温育24小时。将10mL所得培养 物转移至50mL烧瓶中，向其中加入含1mg化合物223A的0.2ml 乙醇溶液。将烧瓶于28℃、250rpm下温育24小时，用EtOAc(10ml) 萃取反应培养物。将EtOAc萃取液在氮气下干燥，将残余物溶于1ml MeOH中(反应萃取液)。

2.产物分析

HPLC：

将10μL反应萃取液注射到HPLC柱(YMC ODS-AQ C-18柱， 150×6.0mm i.d.)中。将该柱用1mM HCl的水溶液/CH3CN溶液以1.2 mL/min的流速洗脱：8分钟内30-60％CH3CN，0.5分钟内60-85％ CH3CN，85％CH3CN 1分钟，0.5分钟内85-30％CH3CN。于300nm 监测流出液。观测到面积比约为1∶1的两个主峰，它们分别具有与化 合物459和331相同的UV谱，保留时间分别为4.55min和7.23min， 与化合物459(4.53min)和化合物331(7.2min)的真实样品的保留时间 匹配。

LC/MS

反应萃取液：两个UV主峰。

峰1，Tr 4.68min：391[M+H]+，343，319，303，289

峰2，Tr 5.35min：375[M+H]+，345

                        真实样品

化合物459，Tr 4.82min：391[M+H]+，343，319，289

化合物331，Tr 5.48min：375[M+H]+，345

化合物331的微生物羟基化

向装有100ml转化培养基的500mL烧瓶中，加入一个冷冻小 瓶(约2ml)的灰色链霉菌(Streptomyces griseus)ATCC 10137。转化培 养基如下制备：向2L塑料烧杯中加入20g葡萄糖、5.0g酵母膏、5.0 g大豆粉、5.0g氯化钠、5.0g磷酸氢二钾和1L去离子水，将混合 物于室温搅拌3-30分钟。然后用1N HCl或1N NaOH将混合物的pH 调至7.0。将所得的混合物分装到500ml烧瓶(每个烧瓶100ml)中。 用Bio/Wrap覆盖烧瓶，于121℃高压灭菌15分钟，在使用之前冷却 至室温。

将培养物于28℃、250rpm下培养3天。将1mL所得培养物加 入至装有100ml转化培养基的500mL烧瓶中，将烧瓶于28℃、250rpm 温育24小时。将10mL所得培养物转移至50mL烧瓶中，向其中加 入含1mg化合物331的0.2ml乙醇溶液。将烧瓶于28℃、250rpm 下温育23小时。HPLC分析表明，反应培养物中化合物459与化合 物331的峰面积比约为1.1/1。

                                        实施例460

(1aα，2β，2aα，5aα，6βb，6aα)-4-[2-[2-[[(1，1-二甲基乙基)二甲基甲硅烷基] 氧基]乙基]八氢-6-甲基-3，5-二氧代-2，6-环氧-4H-环氧乙烯并[f]异吲哚-

                    4-基]-1-萘甲腈(460)

将化合物231A(2.00g，4.10mmol)溶于二氯甲烷(40ml)中，然后 冷却至0℃。加入mCPBA(2.36g，8.20mmol)。然后将反应混合物温 热至室温，在氩气下搅拌18小时，随后加入10％Na2SO3(25ml)和 饱和碳酸氢钠(25ml)。搅拌20分钟后，分离有机层，将水层用二氯 甲烷(3×50ml)萃取。将合并的有机层用盐水洗涤，经硫酸钠干燥并 减压浓缩，得到2.0g化合物460，为浅黄色固体。HPLC：99％，4.00 min(保留时间)(Phenomenex-prime S5-C 18柱，4.6×50mm，用含有 0.2％磷酸的10-90％甲醇水溶液在4分钟内洗脱，4mL/min，于220nm 监测)，MS(ES)：m/z[M+H]＝505.19

                                   实施例461

[3aR-(3aα，4β，7β，7aα)]-4-[4-乙基八氢-7-(2-羟乙基)-1，3-二氧代-4，7-环 氧-2H-异吲哚-2-基]-1-萘甲腈和[3aS-(3aα，4β，7β，7aα)]-4-[4-乙基八氢- 7-(2-羟乙基)-1，3-二氧代-4，7-环氧-2H-异吲哚-2-基]-1-萘甲腈(461i和

                             461ii)

通过正相制备型手性HPLC，用Chiracel AD柱(5cm×50cm)，用 含20％溶剂B(50％MeOH/EtOH)的溶剂A(庚烷)，以50mL/min的 流速洗脱，分离化合物245C的外消旋混合物。化合物461i在80min 至100min洗脱，化合物461ii在125min至150min洗脱。

化合物461i和461ii的绝对构型未确定。为了使命名简化，在 本文中将化合物461i指定为具有“R”构型，而将化合物461ii指定 为具有“S”构型。在本文中从化合物461i衍生的对映体纯产物被指 定为具有“R”构型，而从化合物461ii衍生的对映体纯产物被指定 为具有“S”构型。

                                    实施例462

[3aR-(3aα，4β，7β，7aα)]-4-[4-[2-(4-氰基苯氧基)乙基]-7-乙基八氢-1，3-二

              氧代-4，7-环氧-2H-异吲哚-2-基]-1-萘甲腈(462)

将DBAD(29.5mg，0.128mmol)加入至PPh3(33.6mg，0.128mmol) 的THF(0.5mL)溶液中。搅拌10分钟后，加入4-氰基苯酚(15.2mg， 0.128mmol)，将反应混合物再搅拌5分钟。加入化合物461i(18.3mg， 0.047mmol)，将混合物于室温搅拌2小时。减压浓缩反应物。经硅 胶快速色谱纯化，用40％EtOAc/己烷洗脱，得到16.9mg(0.034mmol， 73.2％)的化合物462。HPLC条件：98％，3.64min(YMC S5 ODS 4.6 ×50mm，在4分钟内用含有0.2％磷酸的10％-90％甲醇水溶液梯度 洗脱，于220nm检测)。MS(ES)：m/z 492.23[M+H]+。

                                    实施例463

[3aS-(3aα，4β，7β，7aα)]-4-[4-[2-(4-氰基苯氧基)乙基]-7-乙基八氢-1，3-二

              氧代-4，7-环氧-2H-异吲哚-2-基]-1-萘甲腈(463)

将DBAD(29.5mg，0.128mmol)加入至PPh3(33.6mg，0.128mmol)的 THF(0.5mL)溶液中。搅拌10分钟后，加入4-氰基苯酚(15.2mg，0.128 mmol)，将反应混合物再搅拌5分钟。加入化合物461ii(18.3mg，0.047 mmol)，将混合物于室温搅拌2小时。减压浓缩反应物。经硅胶快速 色谱纯化，用40％EtOAc/己烷洗脱，得到18.1mg(0.037mmol，78.4％) 的化合物463。HPLC条件：97％，3.63min(YMC S5 ODS 4.6×50mm， 4分钟内用含有0.2％磷酸的10％-90％甲醇水溶液梯度洗脱，于220nm 检测)。MS(ES)：m/z 492.17[M+H]+。

                                   实施例464

(1aα，2β，2aα，5aα，6β，6aα)-5-[2-[2-[(5-氯-2-吡啶基)氧基]乙基]八氢-6-甲 基-3，5-二氧代-2，6-环氧-4H-环氧乙烯并[f]异吲哚-4-基]-8-喹啉甲腈 (464H)

A.8-溴-5-硝基-喹啉(464A)

在室温下，将8-溴喹啉(25.00g，120.2mmol)溶解在硫酸(82.5mL) 中，随后冷却至0℃。接着在10分钟内缓慢加入硝酸(发烟硝酸，32.5 mL)。将反应物温热至室温，接着升温至65℃。在65℃下48小时后， 将反应物冷却至室温，然后倒入500g冰中。将该溶液用二氯甲烷(5× 200mL)萃取。将有机层用盐水洗涤一次，经无水硫酸钠干燥。浓缩 得到粗制的化合物464A，为浅黄色固体(28.6g，94％)。HPLC：98％， 于2.717min(保留时间)(YMC S5 ODS柱，4.6×50mm，在4分钟内用 含0.2％磷酸的10-90％甲醇水溶液洗脱，4mL/min，于220nm检测)。

B.5-硝基-喹啉-8-甲腈(464B)

将化合物464A(15.0g，59.3mmol)溶解在DMF(120mL)中，加入 氰化锌(4.20g，35.9mmol)。接着加入双(二苯基膦)二茂铁(3.00g，5.40 mmol)和三(亚苄基丙酮)合二钯(3.00g，3.30mmol)，将反应物加热至 100℃下1.5h。将反应物冷却至22℃，随后倒入浓氢氧化铵(900mL) 中，得到橙色沉淀物，将所得沉淀物过滤，用冷水(1L)漂洗。将所 得的沉淀物溶于二氯甲烷中，用盐水(1×300mL)洗涤，随后经无水硫 酸钠干燥。真空浓缩得到粗制的物质，为橙色固体，该固体经硅胶 快速色谱纯化，用二氯甲烷洗脱，得到6.01g(51％)化合物464B，为 黄色固体。HPLC：99％，于1.900min(保留时间)(YMC S5 ODS柱，4.6 ×50mm，在4分钟内用含0.2％磷酸的10-90％甲醇水溶液洗脱，4 mL/min，于220nm检测)。

C.5-氨基-喹啉-8-甲腈(464C)

在机械搅拌下，将化合物464B(6.00g，30.1mmol)溶解在回流的 THF(150mL)中。随后依次加入EtOH(150mL)和氯化铵水溶液(2.4 g/225mL水)。在70℃下加热混合物，随后在剧烈机械搅拌下加入铁 粉(325目，6.75g，120mmol)。1小时后，将反应物冷却至22℃，经 硅藻土过滤，用二氯甲烷清洗。随后将滤液浓缩至-250mL，通过添 加1N NaOH将pH调节至10。然后将所得溶液用乙酸乙酯(5×150mL) 萃取。将合并的有机层用盐水(250mL)洗涤一次，经无水硫酸镁干燥。 真空浓缩得到5.09g(100％)化合物464C，为黄色固体。HPLC：99％， 于1.143min(保留时间)(YMC S5 ODS柱，4.6×50mm，在4分钟内用 含0.2％磷酸的10-90％甲醇水溶液洗脱，于220nm检测)。MS(ES)：m/z 170.16[M+H]+。

D.5-(2，5-二氧代-2，5-二氢-吡咯-1-基)-喹啉-8-甲腈(464D)

将化合物464C(7.00g，41.4mmol)和马来酸酐(6.00g，62.1mmol) 在密封试管中混合，然后加入THF(10mL)。将所得反应混合物加热 至115℃15分钟，随后冷却至室温，沉淀出中间体酰胺。将该固体 物过滤，用冷THF清洗，得到11.0g酸，为黄色固体。向装在密封 试管的上述酰胺中加入Ac2O(25mL)，将混合物在100℃下加热15 min，随后冷却至室温。将所得的固体过滤，用冷乙醚清洗，得到8.30 g(80％)化合物464D，为黄色固体。HPLC：97％，于1.783min(保留 时间)(YMC S5 ODS柱，4.6×50mm，在4分钟内用含0.2％磷酸的 10-90％甲醇水溶液洗脱，4mL/min，于220nm检测)。

E.(3aα，4β，7β，7aα)-5-[4-[2-[[(1，1-二甲基乙基)二甲基甲硅烷基]氧基]乙 基]-1，3，3a，4，7，7a-六氢-7-甲基-1，3-二氧代-4，7-环氧-2H-异吲哚-2-基]-8- 喹啉甲腈(464E)

将化合物464D(6.00g，24.1mmol)溶解在苯(80mL)和丙酮(20mL) 的混合物中，接着加入化合物204A(14.46g，60.15mmol)。将混合物 在80℃下加热14h，随后冷却至22℃。在40℃下真空浓缩，接着加 入丙酮(40mL)，然后再次在40℃下浓缩。将所得的黄色油状物经硅 胶快速柱色谱纯化，用0-10％丙酮的氯仿溶液洗脱，得到9.98g(85％) 化合物464E，为黄色油状物。经NMR波谱测定，化合物464E为单 一的异构体。HPLC：97％，于3.853min(保留时间)(YMC S5 ODS柱，4.6 ×50mm，在4分钟内用含0.2％磷酸的10-90％甲醇水溶液洗脱， 4mL/min，于220nm检测)。MS(ES)：m/z 490.35[M+H]+。

F.(1aα，2β，2aα，5aα，6β，6aα)-5-[2-[2-[[(1，1-二甲基乙基)二甲基甲硅烷基] 氧基]乙基]八氢-6-甲基-3，5-二氧代-2，6-环氧-4H-环氧乙烯并[f]异吲哚 -4-基]-8-喹啉甲腈(464F)

往化合物464E(0.050g，0.10mmol)的二氯甲烷溶液(2mL)中加入 mCPBA(60％混合物，0.063g，0.22mmol)。将反应混合物在室温下搅 拌16h，随后加入二氯甲烷(20mL)、饱和碳酸氢钠(10mL)和10％亚 硫酸钠(10mL)。将混合物剧烈搅拌40min，分离有机层，用盐水洗涤 一次，经硫酸钠干燥。真空浓缩得到48mg(96％)化合物464F，为浅 黄色固体。HPLC：98％，于3.783min(保留时间)(YMC S5 ODS柱，4.6 ×50mm，在4分钟内用含0.2％磷酸的10-90％甲醇水溶液洗脱， 4mL/min，于220nm检测)。MS(ES)：m/z 506.25[M+H]+。

G.(1aα，2β，2aα，5aα，6β，6aα)-5-[八氢-2-(2-羟乙基)-6-甲基-3，5-二氧代- 2，6-环氧-4H-环氧乙烯并[f]异吲哚-4-基]-8-喹啉甲腈(464G)

将化合物464F(1.30g，2.57mmol)溶于2％浓盐酸/乙醇(50mL) 中。将反应混合物在室温下搅拌1h，随后加入饱和碳酸氢钠(50mL) 和二氯甲烷(100mL)。分离出有机层，用盐水洗涤一次，经硫酸钠干 燥。真空浓缩得到930mg(93％)化合物464G，为黄色固体。HPLC： 98％，于1.863(保留时间)(YMC S5 ODS柱，4.6×50mm，在4分钟内 用含0.2％磷酸的10-90％甲醇水溶液洗脱，4mL/min，于220nm检测)。 MS(ES)：m/z 392.20[M+H]+。

H.(1aα，2β，2aα，5aα，6β，6aα)-5-[2-[2-[(5-氯-2-吡啶基)氧基]乙基]八氢-6- 甲基-3，5-二氧代-2，6-二氧代-2，6-环氧-4H-环氧乙烯并[f]异吲哚-4-基]- 8-喹啉甲腈(464H)

在氩气气氛中，将三苯基膦(25mg，0.096mmol)和DBAD(22mg， 0.096mmol)在THF(0.5mL)中混合。5min后，加入5-氯-2-吡啶酚(13mg， 0.096mmol)。将反应混合物在22℃下再搅拌10min，接着加入化合 物464G(25mg，0.064mmol)。在氩气气氛中，将反应混合物在22℃ 下搅拌3h，随后真空浓缩。所得的粗制物质经硅胶制备型TLC纯化， 用10％丙酮的氯仿溶液洗脱，得到11mg(23％)化合物464H，为白 色固体。HPLC：100％，于3.177(保留时间)(YMC S5 ODS柱，4.6× 50mm，在4分钟内用含0.2％磷酸的10-90％甲醇水溶液洗脱，4mL/min， 于220nm检测)。MS(ES)：m/z 503.14[M+H]+。

                                 实施例465

(3aα，4β，7β，7aα)-5-[4-[2-[[(1，1-二甲基乙基)二甲基甲硅烷基]氧基] 乙基]八氢-7-甲基-L3-二氧代-4，7-环氧-2H-异吲哚-2-基]-8-喹啉甲腈 (465)

将化合物464E(2.40g，4.91mmol)溶解在乙酸乙酯中，加入 Pd/C(10％Pd，0.50g)。通过气囊引入氢气。3h后，将反应物用氮气 吹扫，经硅藻土过滤，用乙酸乙酯清洗，真空浓缩得到2.39g(99％) 化合物465，为黄色油状物。HPLC：95％，于4.013min(保留时间)(YMC S5 ODS柱，4.6×50mm，在4分钟内用含0.2％磷酸的10-90％甲醇水 溶液洗脱，4mL/min，于220nm检测)。MS(ES)：m/z 492.22[M+H]+。

                                    实施例466

(3aα，4β，7β，7aα)-5-[八氢-4-(2-羟乙基)-7-甲基-1，3-二氧代-4，7-环氧-2H- 异吲哚-2-基]-8-喹啉甲腈(466)

将化合物465(1.40g，2.85mmol)溶解在2％浓盐酸/MeOH(20mL) 中，在22℃下搅拌3h。随后将反应物浓缩至～5mL体积，用少量 的饱和碳酸氢钠水溶液猝灭。接着将溶液用二氯甲烷(3×30mL)萃 取，将合并的有机层经无水硫酸钠干燥。真空浓缩得到0.893g(93％) 化合物466，为黄色固体。该物质未经进一步纯化直接使用。HPLC： 98％，于2.140min(保留时间)(YMC S5 ODS柱，4.6×50mm，在4分 钟内用含0.2％磷酸的10-90％甲醇水溶液洗脱，4mL/min，于220nm 检测)。MS(ES)：m/z 378.25[M+H]+。

                                    实施例467

[3aR-(3aα，4β，7β，7aα)]-5-[八氢-4-(2-羟乙基)-7-甲基-1，3-二氧代-4，7-环 氧-2H-异吲哚-2-基]-8-喹啉甲腈(467Bi)，和

[3aS-(3aα，4β，7β，7aα)]-5-[八氢-4-(2-羟乙基)-7-甲基-1，3-二氧代-4，7-环 氧-2H-异吲哚-2-基]-8-喹啉甲腈(467Bii)

A.[3aR-(3aα，4β，7β，7aα)]-5-[4-[2-[[(1，1-二甲基乙基)二甲基甲硅烷基] 氧基]乙基]八氢-7-甲基-1，3-二氧代-4，7-环氧-2H-异吲哚-2-基]-8-喹啉 甲腈(467Ai)和[3aS-(3aα，4β，7β，7aα)]-5-[4-[2-[[(1，1-二甲基乙基)二甲基 甲硅烷基]氧基]乙基]八氢-7-甲基-1，3-二氧代-4，7-环氧-2H-异吲哚-2- 基]-8-喹啉甲腈(467Aii)

通过正相制备型手性HPLC，将化合物465分离为其单一的对映 体。使用Chiralcel OD柱(50×500nm)，流速50mL/min(16％乙醇/己 烷)，于220nm处检测。较快洗脱出的对映体化合物467Ai的保留时 间为40.85min(＞99％ee)和较慢洗脱出的对映体化合物467Aii的保留 时间为62.81min(＞99％ee)。分离后，两种对映体均为白色固体。 没有确定化合物467Ai和467Aii的绝对构型。为便于命名起见，在 本文中将化合物467Ai标记为″R″构型而将化合物467Aii标记为″S″ 构型。在本文中将衍生自化合物467Ai的对映异构体纯产物标记为 “R”构型，衍生自化合物467Aii的对映异构体纯产物标记为“S” 构型。

B.[3aR-(3aα，4β，7β，7aα)]-5-[八氢-4-(2-羟乙基)-7-甲基-1，3-二氧代-4，7- 环氧-2H-异吲哚-2-基]-8-喹啉甲腈(467Bi)和[3aS-(3aα，4β，7β，7aα)]-5- [八氢-4-(2-羟乙基)-7-甲基-1，3-二氧代-4，7-环氧-2H-异吲哚-2-基]-8-喹 啉甲腈(467Bii)

按实施例464G描述的方法，将两种对映体进行脱保护，得到相 应的醇化合物467Bi和467Bii，为白色固体：

化合物467Bi：HPLC：98％，于2.110min(保留时间)(YMC S5 ODS 柱，4.6×50mm，在4分钟内用含0.2％磷酸的10-90％甲醇水溶液洗脱， 4mL/min，于220nm检测)。MS(ES)：m/z 378.21[M+H]+。

化合物467Bii：HPLC：98％，于2.117min(保留时间)(YMC S5 ODS柱，4.6×50mm，在4分钟内用含0.2％磷酸的10-90％甲醇水溶 液洗脱，4mL/min，于220nm检测)。MS(ES)：m/z 378.20[M+H]+。

                                     实施例468

(3aα，4β，7β，7aα)-8-[八氢-4，7-二甲基-1，3-二氧代-4，7-环氧-2H-异吲哚-2- 基]-5-喹喔啉甲腈(468C)

A.8-硝基-喹喔啉-5-甲腈(468A)

2，3-二氨基-4-硝基-苄腈(0.050g，0.28mmol，按照WO-98/32439 中描述的方法制备)加入至乙二醛(40％水溶液，0.032mL，0.28mmol) 的乙酸(0.75mL)溶液中，在22℃下搅拌3h。将反应物冷却至0℃， 加入水(2.0mL)，通过添加氢氧化铵将pH调节至9.0，从而沉淀出产 物。随后将混合物过滤，用冷水漂洗。真空干燥，得到0.039g(70％) 化合物468A，为橙色固体物。HPLC：100％，于2.037min(保留时 间)(YMC S5 ODS柱，4.6×50mm，在4分钟内用含0.2％磷酸的10- 90％甲醇水溶液洗脱，4mL/min，于220nm检测)。

B.8-氨基-喹喔啉-5-甲腈(468B)

将化合物468A(0.200g，1.00mmol)悬浮于乙酸(5.0mL)中，加入 铁粉(325目，0.112g，2.00mmol)。随后将反应物在70℃下加热20 min，接着冷却至22℃。反应物经Celite过滤，用乙酸乙酯清洗。收 集乙酸乙酯清洗液，用饱和碳酸钾水溶液洗涤。将水层用乙酸乙酯(3× 20mL)萃取，将合并的有机层经无水硫酸镁干燥。真空浓缩得到0.170 g(100％)化合物468B，为黄色固体。HPLC：88％，于1.677min(保留 时间)(YMC S5 ODS柱，4.6×50mm，在4分钟内用含0.2％磷酸的 10-90％甲醇水溶液洗脱，4mL/min，于220nm检测)。MS(ES)：m/z 171.29[M+H]+。

C.(3aα，4β，7β，7aα)-8-[八氢-4，7-二甲基-1，3-二氧代-4，7-环氧-2H-异吲哚 -2-基]-5-喹喔啉甲腈(468C)

将化合物468B(0.060g，0.35mmol)及硫酸镁(0.060g)和化合物 20A(0.104g，0.529mmol)悬浮于甲苯(1.0mL)中。随后加入 TEA(0.2mL)，在密封试管中，将混合物加热至145℃。16h后，将 反应物冷却至22℃，经硅藻土过滤，用丙酮清洗。将混合物真空浓 缩，随后经硅胶制备型TLC纯化，用7％乙酸乙酯/二氯甲烷洗脱。 得到0.018g(15％)化合物468C，为黄色固体。HPLC：100％，于2.040 和2.133min(阻转异构体，保留时间)(YMC S5 ODS柱，4.6×50mm，在 4分钟内用含0.2％磷酸的10-90％甲醇水溶液洗脱，4mL/min，于 220nm检测)。MS(ES)：m/z 349.33[M+H]+。

                                       实施例469

(3aα，4β，7β，7aα)-1，2，3，4-四氢-8-(八氢-4，7-二甲基-1，3-二氧代-4，7-环氧- 2H-异吲哚-2-基)-5-喹喔啉甲腈(469B)

A.8-氨基-1，2，3，4-四氢-喹喔啉-5-甲腈(469A)

将化合物468A(0.037g，0.18mmol)溶解在乙酸乙酯(1.0mL)/乙醇 (1.0mL)的混合物中，加入10％Pd/C(0.050g)。随后通过气囊引入氢 气。2h后，将反应物用氮气吹扫，经硅藻土过滤，用乙酸乙酯清洗。 真空浓缩得到0.029g(90％)化合物469A，为红色油状物，该产物未 经进一步纯化直接使用。HPLC：97％，于3.217min(保留时间)(YMC S5 ODS柱，4.6×50mm，在4分钟内用含0.2％磷酸的10-90％甲醇水溶 液洗脱，4mL/min，于220nm检测)。

B.(3aα，4β，7β，7aα)-1，2，3，4-四氢-8-(八氢-4，7-二甲基-1，3-二氧代-4，7-环 氧-2H-异吲哚-2-基)-5-喹喔啉甲腈(469B)

将化合物469A(0.029g，0.17mmol)及硫酸镁(0.030g)和化合物 20A(0.050g，0.256mmol)悬浮于甲苯(1.0mL)中。随后加入TEA(0.2mL) 在密封试管中，将混合物在145℃下加热。48h后，将反应物冷却至 22℃，经硅藻土过滤，用丙酮清洗。将混合物真空浓缩，随后经制 备型TLC纯化，用20％丙酮的氯仿溶液洗脱。得到0.014g(24％)化 合物469B，为黄色固体。HPLC：85％，于2.267min(保留时间)(YMC S5 ODS柱，4.6×50mm，在4分钟内用含0.2％磷酸的10-90％甲醇水溶 液洗脱，4mL/min，于220nm检测)。MS(ES)：m/z 353.19[M+H]+。

                                     实施例470

(3aα，4β，7β，7aα)-4-(八氢-4，7-二甲基-1，3-二氧代-4，7-环氧-2H-异吲哚-2- 基)-1-异喹啉甲腈(470E)

A.4-溴-异喹啉-2-氧化物(470A)

室温下，在1小时内，将4-溴异喹啉(4.16g，18.6mmol)在100mL 氯仿中的溶液滴加至70％mCPBA(12.4g，50.3mmol)在100mL氯仿 中的溶液内。搅拌18h后，将反应混合物用1N NaOH(2×150mL)洗 涤，经硫酸镁干燥，真空浓缩得到4.23g(94％)化合物470A，为灰白 色固体。1H NMR-400MHz(CDCl3)：δ8.71(s，1H)，8.43(s，1H)，8.09(d， 1H，J＝8Hz)，7.70(m，3H)。

B.4-溴-异喹啉-1-甲腈(470B)

将1，8-二氮杂双环[5.4.0]十一碳-7-烯(1.67mL，11.2mmol)加入至 化合物470A(1.12g，5.00mmol)和氰基三甲基硅烷(0.75mL，5.5mmol) 在35mL THF中的混合物内。将所得的均相混合物回流20min。真 空浓缩后，剩余物经5×15cm硅胶柱快速色谱纯化，用3∶1己烷∶ 乙酸乙酯洗脱，得到0.95g(82％)化合物470B，为白色粉末。1H NMR(400MHz，CDCl3)：δ8.85(s，1H)，8.36(d，1H，J＝8.5Hz)，8.28(d，1H， J＝8.5Hz)，7.96(t，1H，J＝8.5Hz)，7.89(t，1H，J＝8.5Hz)。

C.4-(2，4-二甲氧基-苄基氨基)-异喹啉-1-甲腈(470C)

将化合物470B(699mg，3.00mmol)和2，4-二甲氧基苄基胺(4.8 ml，30mmol)在15mL乙腈中的混合物回流16h。真空浓缩后，剩余 物经5×15cm硅胶柱纯化，用3∶2己烷∶乙酸乙酯洗脱，得到290 mg(30％)470C，为浅黄色固体。HPLC：1.76min(保留时间)(Phenomenex C-18，5微米柱，4.6×30mm，在2分钟内用含0.1％TFA的10-90％甲 醇水溶液洗脱，4mL/min，于254nm检测)。

D.4-氨基-异喹啉-1-甲腈(470D)

将化合物470C(50mg，0.16mmol)用三氟乙酸(0.5mL)处理1h。 使深色的混合物在乙酸乙酯(30mL)和1N NaOH(30mL)间分配。用盐 水(15mL)洗涤后，有机层经硫酸镁干燥，真空浓缩得到24mg(92％) 化合物470D，为黄色固体。HPLC：99％，于1.09min(保留时 间)(Phenomenex C-18，5微米柱，4.6×30mm，在2分钟内用含 0.1％TFA的10-90％甲醇水溶液洗脱，4mL/min，于254nm检测)。 MS(ES+)：m/z 170.2[M+H]+。

合成化合物470D的另一种途径如下所述。将化合物470B(1.17g， 5.02mmol)，二苯甲酮亚胺(1.05mL，6.26mmol)，乙酸钯(25mg，0.11 mmol)，外消旋-2，2′-双(二苯基膦)-1，1′-联萘(100mg，0.161mmol)和碳 酸铯(2.30g，7.06mmol)在20mL甲苯中的混合物在100℃下加热20 h。将反应混合物用乙醚(200mL)稀释，经Celite过滤。将滤液浓缩后， 将剩余物溶解在120mL THF中，用40mL 1N HCl处理。在室温静 置2h后，使混合物在乙酸乙酯(150mL)和0.25N NaOH(160mL)间分 配。用盐水洗涤后(100mL)，有机层经硫酸镁干燥。将有机层过滤， 往滤液中加入～50g Celite。真空浓缩后，将粉末状剩余物经5×15cm 硅胶柱快速色谱纯化，分别用1L 1∶1乙酸乙酯∶己烷、6∶4乙酸乙酯∶ 己烷和8∶2乙酸乙酯∶己烷洗脱，得到450mg(53％)470D，为黄色粉 末。

E.(3aα，4β，7β，7aα)-4-(八氢-4，7-二甲基-1，3-二氧代-4，7-环氧-2H-异吲哚 -2-基)-1-异喹啉甲腈(470E)

使用微波加热装置，将在密封容器中的化合物470D(24mg，0.14 mmol)、化合物20A(55mg，0.28mmol)、三乙胺(0.1mL)、硫酸镁(100 mg)、2-甲氧基乙醚(0.5mL)和DMF(0.1mL)的混合物在250℃下总共 加热2.5h。使反应混合物在乙酸乙酯(25mL)和水(25mL)间分配后， 有机层经硫酸镁干燥，真空浓缩。将大约一般的剩余物经反相制备 型HPLC纯化(YMC S5 ODS 20×50mm，在10分钟内用含0.1％TFA 的10-100％甲醇水溶液洗脱，20mL/min)。将纯品部分洗脱液浓缩， 得到6mg(12％)化合物470E，为白色粉末。HPLC：99％，于1.42min(保 留时间)(Phenomenex C-18，5微米柱，4.6×30mm，在2分钟内用含 0.1％TFA的10-90％甲醇水溶液洗脱，4mL/min，于254nm检测)。 MS(ES+)：m/z 348.23[M]+。

                                      实施例471

[3aR-(3aα，4β，5β，7β，7aα)]-4-(八氢-5-羟基-4，7-二甲基-1，3-二氧代-4，7-环 氧-2H-异吲哚-2-基)-2-(三氟甲基)苄腈(471Di)和

[3aS-(3aα，4β，5β，7β，7aα)]-4-(八氢-5-羟基-4，7-二甲基-1，3-二氧代-4，7-环 氧-2H-异吲哚-2-基)-2-(三氟甲基)苄腈(471Dii)

A.4-(2，5-二氧代-2，5-二氢-吡咯-1-基)-2-三氟甲基-苄腈(471A)

将3-三氟甲基-4-氰基-苯胺(24.0g，129mmol)和马来酸酐(14.0g， 143mmol)在50mL乙酸中的混合物在115℃下加热过夜。在加热过 程中得到沉淀物。在室温下，再将反应物静置过夜。过滤除去固体， 将滤饼用乙醚洗涤并干燥，得到21g(79mmol，61％)化合物471A，为 浅白色固体。HPLC：100％，于2.11min(保留时间)(YMC S5 ODS柱，4.6 ×50mm，在4分钟内用含0.2％磷酸的10-90％甲醇水溶液洗脱， 4mL/min，于220nm检测)。

B.(3aα，4β，7β，7aα)-4-(1，3，3a，4，7，7a-六氢-4，7-二甲基-1，3-二氧代-4，7-环 氧-2H-异吲哚-2-基)-2-(三氟甲基)苄腈(471B)

将化合物471A(13.0g，48.8mmol)和2，5-二甲基呋喃(10.5mL，98.6 mmol)在50mL甲苯中的悬浮液在氩气气氛、60℃下加热。在开始加 热时便得到溶液，在大约1h后观察到形成沉淀物。继续加热过夜。 冷至室温后，将悬浮液在4℃下静置过夜。将所得的固体过滤，将滤 饼用冷甲苯洗涤，接着空气干燥，得到13.2g纯化合物471B，为白 色固体。真空将滤液体积减少到一半，将所得溶液如上进行处理， 又得到2.8g纯化合物471B(总共16.0g，90％)。HPLC：90％，于3.65 min(保留时间)(YMC S5 ODS柱，4.6×50mm，在4分钟内用含0.2％ 磷酸的10-90％甲醇水溶液洗脱，4mL/min，于220nm检测)。

C.(3aα，4β，5β，7β，7aα)-4-(八氢-5-羟基-4，7-二甲基-1，3-二氧代-4，7-环氧- 2H-异吲哚-2-基)-2-(三氟甲基)苄腈(471C)

在氮气气氛中，将装于干燥烧瓶中的化合物471B(25g，69mmol) 在125mL THF中的溶液用冰浴冷却至10℃。在10min内，往该溶 液中滴加入纯的硼烷-二甲硫醚络合物(13.0mL，138mmol)，同时保持 反应温度＜15℃。将反应混合物在室温下搅拌30min，随后在冰浴 中冷却至10℃。往所述冷却的溶液中缓慢加入480mL pH为7的磷 酸盐缓冲液，发生了强烈的放热反应并剧烈释放出气体。在加入过 程中，通过冰浴保持溶液温度＜21℃。往所得溶液中加入240mL乙 醇，然后用冰浴将所得的混合物冷却至5℃。往冷却的溶液中加入50 mL 30％过氧化氢，将所得的混合物在10-20℃下搅拌1.5h。将混合 物用乙酸乙酯(2×1L)萃取，将合并的有机层用10％亚硫酸钠(1× 500mL)和盐水(2×300mL)洗涤，经硫酸镁干燥。真空浓缩得到29g 粗制的产物，为白色固体。该物质经1.2L硅胶柱(用100％二氯甲烷 平衡)快速色谱纯化。将该物质在100mL EtOAc(温热)和400mL二氯 甲烷中的溶液装入所述柱中。起始时用二氯甲烷(3L)，接着用 25％EtOAc/75％二氯甲烷(3L)和最后用50％EtOAc/50％二氯甲烷(6L) 洗脱，得到11.8g(45％)化合物471C，为外消旋混合物。

或者，化合物471C可通过以下方法制备：用真空/氩气循环， 将装有化合物471B(8.90g，24.6mmol)和Wilkinson催化剂(0.57mg， 0.62mmol)的干燥烧瓶脱气4次。往烧瓶中加入THF(40mL)，搅拌混 合物直到得到透明棕色的溶液。随后在20分钟内滴加儿茶酚硼烷(49 mL，49mmol，1M THF溶液)，观察到稍微的放热。继续搅拌45min， 接着用冰浴冷却反应混合物。缓慢加入pH为7的磷酸盐缓冲液(175 mL)，接着依次加入乙醇(87mL)和30％过氧化氢(18mL)。在冷却下 继续搅拌，反应过程经HPLC监测4h。将反应物用二氯甲烷(3×250 mL)萃取。将合并的萃取液用1∶1 1N NaOH：15％亚硫酸钠(300mL)和 盐水洗涤，经硫酸镁干燥，真空除去溶剂得到8.5g黄褐色固体。粗 制产物经500cm3硅胶柱快速色谱纯化，用25-50％EtOAc/二氯甲烷 为梯度洗脱液，得到6.00g化合物471C(15.8mmol，64％)，为白色固 体。HPLC：90％，于2.45min(保留时间)(YMC S5 ODS柱，4.6×50mm， 在4分钟内用含0.2％磷酸的10-90％甲醇水溶液洗脱，4mL/min，于 220nm检测)。MS(ES)：m/z 381.11[M+H]+。

D.[3aR-(3aα，4β，5β，7β，7aα)]-4-(八氢-5-羟基-4，7-二甲基-1，3-二氧代- 4，7-环氧-2H-异吲哚-2-基)-2-(三氟甲基)苄腈(471Di)和

[3aS-(3aα，4β，5β，7β，7aα)]-4-(八氢-5-羟基-4，7-二甲基-1，3-二氧代-4，7-环 氧-2H-异吲哚-2-基)-2-(三氟甲基)苄腈(471Dii)

通过正相制备型手性HPLC(CHIRALPAK AD，5×50cm柱)，分 离化合物471C的单一对映体。将2.5g的一部分471C溶于25mL温 热的丙酮中，然后注入己烷稀释至50-75mL。用20％MeOH/乙醇(1∶1) 的庚烷溶液以50mL/min的速率等度洗脱，得到较快洗脱出的化合 物471Di(手性HPLC：10.02min；CHIRALPAK AD 4.6×250mm柱； 用20％MeOH/乙醇(1∶1)的庚烷溶液以1mL/min的流速等度洗脱)和 较慢洗脱出的化合物471Dii(手性HPLC：14.74min；CHIRALPAK AD 4.6×250mm柱；用20％MeOH/乙醇(1∶1)的庚烷溶液以1mL/min的 流速等度洗脱)。化合物471Di和471Dii：HPLC：90％，于2.45min(保 留时间)(YMC S5 ODS柱，4.6×50mm，在4分钟内用含0.2％磷酸的 10-90％甲醇水溶液洗脱，4mL/min，于220nm检测)。MS(ES)：m/z 381.11[M+H]+。经单晶X-射线衍射测试测定化合物471Di和471Dii 的绝对立体化学，并通过指定的命名法进行描述。

通过以下描述的任一种方法进行结晶，将所得的化合物471Di 和471Dii的HPLC纯化洗脱部份作进一步纯化。

1)在乙酸乙酯中结晶

室温下，将700mg的一部分化合物471Di(经上述手性色谱纯化 后得到)溶解在乙酸乙酯(10mL)中。将所得溶液用小部分己烷(20mL) 稀释，直到观察到出现浑浊。在室温下，将该溶液静置过夜。将所 得的白色固体过滤，空气干燥得到430mg化合物471Di，为白色粉 末。将该样品进一步在60℃(3h，0.5托)和70℃(12h，0.5托)下干燥。

2)在丙酮中结晶

将500mg的一部分化合物471Di(经上述手性色谱纯化后得到) 溶解在少量的丙酮(3mL)中，缓慢用己烷(1mL)稀释。将所述透明无 色的溶液在室温下静置过夜。将所得的白色固体过滤，空气干燥得 到440mg化合物471Di，为白色粉末。将该样品进一步在60℃(3h，0.5 托)和70℃(12h，0.5托)下干燥。

3)在甲醇中结晶

将500mg的一部分化合物471Di(经上述手性色谱纯化后得到) 溶解在5mL热(蒸气浴)甲醇中。将所述透明无色的溶液在室温下静 置2小时，随后在4℃下静置过夜。过滤出所得的固体，用少量冷甲 醇洗涤，然后空气干燥，得到360mg化合物471Di，为白色粉末。 将该样品进一步在70℃(12h，0.5托)下干燥。

4)在二氯甲烷中结晶

室温下，将7.00g的一部分化合物471Di(经上述手性色谱纯化 后得到)溶解在75mL二氯甲烷中。将所述透明和无色的溶液缓慢用 己烷(48mL)稀释直至观察到发生结晶现象。将所述透明无色的溶液 在室温下静置1小时，随后在4℃下静置过夜。将所得的结晶物质过 滤，随后用少量的冷2∶1二氯甲烷∶己烷洗涤。将所得的大晶体研磨 成细碎的粉末，在50℃(12h，0.5托)下干燥，得到5.96g化合物 471Di，为白色粉末。

                                实施例472

(3aα，4β，7β，7aα)-4-(八氢-4，7-二甲基-1，3-二氧代-4，7-环氧-2H-异吲 哚-2-基)-2-(三氟甲基)苄腈(472)

在室温下，将化合物471B(500mg，1.38mmol)在乙酸乙酯(10mL) 中的溶液(含有10％Pd/C(25mg，催化剂))在氢气气氛(通过气囊引入) 中搅拌。2小时后，将反应物通过Celite过滤，将滤饼用EtOAc洗涤。 将透明无色的滤液真空浓缩，得到501mg(1.38mmol，100％)化合物 472，为白色固体。不要求进一步纯化。HPLC：99％，于3.04min(保 留时间)(YMC S5 ODS柱，4.6×50mm，在4分钟内用含0.2％磷酸的 10-90％甲醇水溶液洗脱，4mL/min，于220nm检测)。MS(ESI)：m/z 382.2[M+NH4]+。

                                      实施例473

(3aα，4β，5β，7β，7aα)-4-[5-(乙酰基氧基)-八氢-4，7-二甲基-1，3-二氧代-4，7- 环氧-2H-异吲哚-2-基]-2-(三氟甲基)苄腈(473)

在氩气气氛中，往冷却至0℃的化合物471C(1.50g，3.95mmol) 在10mL吡啶中的溶液内依次滴加入乙酸酐(0.42mL，4.4mmol)和 DMAP(5mg，0.04mmol)。在室温下继续搅拌4h。将所述溶液真空浓 缩，将所得的剩余物用乙酸乙酯稀释，依次用1N HCl(2×)、盐水(2×)、 饱和碳酸氢钠溶液和盐水(2×)洗涤。有机层经硫酸镁干燥，真空浓缩。 将所得的固体在60℃(20h，0.5托)下干燥，得到1.55g(3.67mmol， 93％)化合物473，为白色晶体。HPLC：99％，于2.10min(保留时 间)(Phenomenex Luna C18柱，2×30mm，在3分钟内用含10mM乙 酸铵的0-100％乙腈水溶液以1mL/min的速率洗脱，于220nm检测)。 MS(ESI)：m/z 421.4[M-H]-。

                                    实施例474

(3aα，4β，7β，7aα)-六氢-4，7-二甲基-2-(2-甲基-4-苯并噁唑基)-4，7-环氧- 1H-异吲哚-1，3(2H)-二酮(474F)

A.2-甲基-4-硝基苯并噁唑(474A)

往2-氨基-3-硝基苯酚(6.17g，40.0mmol)中加入原乙酸三乙酯 (25.96g，160.0mmol)，将混合物在100℃加热12h，得到深红色溶液。 将所述溶液冷至室温，得到结晶物质，将该物质过滤并用己烷洗涤， 得到化合物474A(6.78g，95％)，为浅褐紫红色针状物。HPLC：98.1％， 于1.86min(保留时间)(YMC S5 ODS柱，4.6×50mm，在4分钟内用含 0.2％磷酸的10-90％甲醇水溶液洗脱，4mL/min，于220nm检测)。 MS(ES)：m/z 179.08[M+H]+。

B.4-氨基-2-甲基苯并噁唑(474B)

将化合物474A(6.78g，38.1mmol)溶解在10％乙酸/乙酸乙酯 (1∶1，总体积100mL)的混合物中，在65℃下加热。分批加入铁粉(10.63 g，190.2mmol)。搅拌3h后，TLC检测表明原料消耗完全。将冷却的 反应混合物通过硅胶垫过滤，用50mL乙酸乙酯洗涤。将有机层分离， 依次用水(2×25mL)和盐水(1×25mL)洗涤，经硫酸镁干燥，过滤并 真空浓缩。所得的粗制物质经硅胶快速层析纯化，用25％乙醚/二氯 甲烷洗脱，得到3.90g(69％)化合物474B，为浅棕色固体。HPLC： 95.8％，于2.43min(保留时间)(YMC S5 ODS柱，4.6×50mm，在4分 钟内用含0.2％磷酸的10-90％甲醇水溶液洗脱，4mL/min，于220nm 检测)。MS(ES)：m/z 149.11[M+H]+。

C.4-氨基-7-溴-2-甲基苯并噁唑(474C)

将化合物474B(3.90g，26.3mmol)溶解在DMF(45mL)中，冷却 至-5℃，将N-溴代琥珀酰亚胺(4.68g，26.3mmol)分少量多次加入， 将反应物搅拌5h。将混合物倒入150mL冰水中，得到乳色固体， 将该固体过滤，用水洗涤，溶于二氯甲烷中，经硫酸镁干燥，过滤 并真空浓缩。所得的粗制物质经硅胶快速层析，用20％乙醚/二氯甲 烷洗脱，得到化合物474C(3.36g，56％)，为米色固体。HPLC：95.4％， 于2.583min(保留时间)(YMC S5 ODS柱，4.6×50mm，在4分钟内用 含0.2％磷酸的10-90％甲醇水溶液洗脱，4mL/min，于220nm检测)。 MS(ES)：m/z 228.03[M+H]+。

D.1-(7-溴-2-甲基-苯并噁唑-4-基)-吡咯-2，5-二酮(474D)

将化合物474C(1.40g，6.17mmol)溶解在20mL乙酸中，加入马 来酸酐(0.635g，6.47mmol)，将反应物在氮气气氛中加热回流5h。 真空除去溶剂，将粗制产物经硅胶快速层析纯化，用10％乙醚/二氯 甲烷洗脱，得到化合物474D(1.73g，91％)，为浅黄色固体。HPLC： 93.6％，于1.36min.(Phenomenex柱，30×4.6mm，在2分钟内用含0.1％ TFA的10-90％甲醇水溶液洗脱，5mL/min，于220nm检测)。MS(ES)： m/z 308.02[M+H]+。

E.(3α，4β，7β，7aα)-2-(7-溴-2-甲基-4-苯并噁唑基)-3a，4，7，7a-四氢-4，7-二 甲基-4，7-环氧-1H-异吲哚-1，3(2H)-二酮(474E)

将化合物474D(0.307g，1.00mmol)溶解在苯(2mL)中，用注射器 加入2，5-二甲基呋喃(0.154g，1.60mmol)。将反应混合物在60℃下加 热12h。将冷却的反应混合物在40℃下真空浓缩，得到化合物474E， 为浅白色泡沫体。该产物未经进一步纯化直接用于下一步反应中。

F.(3aα，4β，7β，7aα)-六氢-4，7-二甲基-2-(2-甲基-4-苯并噁唑基)-4，7-环氧- 1H-异吲哚-1，3(2H)-二酮(474F)

将化合物474E(0.403g，1.00mmol)溶解在乙醇/EtOAc(4mL/4mL) 中，加入10％Pd/C(100mg)。在室温、氢气气氛(由气囊供气)中，将 反应混合物搅拌6h，随后经Celite过滤。真空浓缩滤液，得到棕色 固体。经硅胶快速色谱纯化，用10％丙酮/三氯甲烷(250mL)、15％ 丙酮/三氯甲烷(250mL)和20％丙酮/三氯甲烷(250mL)洗脱，得到化 合物474F(0.089g，27％)，为白色泡沫体。HPLC：91％，于2.28min(保 留时间)(YMC S5 ODS柱，4.6×50mm，在4分钟内用含0.2％磷酸的 10-90％甲醇水溶液洗脱，4mL/min，于220nm检测)。MS(ES)：m/z 328.34[M+H]+。

                                    实施例475

(3aα，4β，7β，7aα)-2-(7-溴-2-甲基-4-苯并噁唑基)-六氢-4，7-二甲基-4，7-环 氧-1H-异吲哚-1，3(2H)-二酮(475)

将化合物474E(0.202g，0.501mmol)溶解在1/1 EtOAc/乙醇(10 mL)中，加入10％Pt/C(100mg)。在室温、氢气气氛(由气囊供气)中， 将反应混合物搅拌6h。随后将反应物经Celite过滤，真空浓缩滤液。 经硅胶快速色谱纯化，用10％乙醚/二氯甲烷洗脱，得到0.063g(31％) 化合物475，为无色油状物，该油状物在静置时固化，得到白色固体。 HPLC：92.5％，于2.83min(保留时间)(YMC S5 ODS柱，4.6×50mm， 在4分钟内用含0.2％磷酸的10-90％甲醇水溶液洗脱，4mL/min，于 220nm检测)。MS(ES)：m/z 406.21[M+H]+。

                                实施例476

(3aα，4β，7β，7aα)-六氢-4，7-二甲基-2-[2-(三氟甲基)-4-苯并噁唑基]- 4，7-环氧-1H-异吲哚-1，3(2H)-二酮(476D)

A.4-硝基-2-三氟甲基苯并噁唑(476A)

将2-氨基-3-硝基苯酚(10.00g，64.88mmol)加入至100mL剧烈 搅拌着的三氟乙酸酐中，将所得的混合物在室温下搅拌12h。真空除 去溶剂，得到深蓝色固体物，将该固体物溶解在200mL二氯甲烷中，， 依次用10％NaOH(2×100mL)、水(100mL)和盐水(100mL)洗涤，经 硫酸镁干燥。过滤并真空浓缩，得到化合物476A(10.78g，72％)，为 棕色固体物。不要求进一步纯化。HPLC：92.9％，于2.43min(保留时 间)(YMC S5 ODS柱，4.6×50mm，在4分钟内用含0.2％磷酸的10- 90％甲醇水溶液洗脱，4mL/min，于220nm检测)。

B.4-氨基-2-三氟甲基苯并噁唑(476B)

将化合物476A(10.75g，46.30mmol)溶解在

1∶1EtOAc/10％HOAc(250mL)中，然后加热至65℃。分批加入铁粉 (12.93g，231.5mmol)，将反应物在65℃下搅拌6h。冷却后，将混合 物经Celite过滤，用乙酸乙酯漂洗。分离出有机层，依次用水(3×100 mL)和盐水(100mL)洗涤，经硫酸镁干燥，真空浓缩，得到棕色油状 物。将所得的粗制物质经硅胶快速层析纯化，用70/30二氯甲烷/己 烷洗脱，得到化合物476B(7.02g，75％)，为黄色结晶固体。HPLC： 96.7％，于2.68min(保留时间)(YMC S5 ODS柱，4.6×50mm，在4分 钟内用含0.2％磷酸的10-90％甲醇水溶液洗脱，4mL/min，于220nm 检测)。

C.1-(2-三氟甲基-苯并噁唑-4-基)-吡咯-2，5-二酮(476C)

将化合物476B(0.500g，2.48mmol)溶解在乙酸(10mL)中，加入 马来酸酐(0.267g，2.72mmol)。将混合物加热回流3h，冷却并真空 除去溶剂，得到黄褐色固体。粗制产物经硅胶快速层析纯化，用 2％MeOH/二氯甲烷洗脱，得到化合物476C(0.40g，57％)，为灰白色 固体。HPLC：89.7％，于2.38min(保留时间)(YMC S5 ODS柱，4.6×50 mm，在4分钟内用含0.2％磷酸的10-90％甲醇水溶液洗脱，4mL/min， 于220nm检测)。MS(ES)：m/z 283.21[M+H]+。

D.(3aα，4β，7β，7aα)-六氢-4，7-二甲基-2-[2-(三氟甲基)-4-苯并噁唑基]- 4，7-环氧-1H-异吲哚-1，3(2H)-二酮(476D)

在密封试管中，将化合物476C(0.24g，0.85mmol)和2，5-二甲基 呋喃(0.132g，1.37mmol)在3mL苯中混合，然后在60℃下加热12h。 将混合物冷却并真空浓缩，得到黄色油状物，将所述油状物溶解在1/1 EtOAc/乙醇(6mL)中。加入10％Pd/C(100mg)，将混合物在氢气气氛 (气囊供气)中搅拌3.5h。将反应物经Celite过滤，真空除去溶剂，得 到粗制产物，为浅黄色油状物。该油状物经硅胶快速色谱纯化，用2％ 乙醚/二氯甲烷洗脱，得到0.107g(33％)化合物476D，为白色泡沫体。 HPLC：96.5％，于2.80min(保留时间)(YMC S5 ODS柱，4.6×50mm， 在4分钟内用含0.2％磷酸的10-90％甲醇水溶液洗脱，4mL/min，于 220nm检测)。MS(ES)：m/z 381.17[M+H]+。

                                   实施例477

(3aα，4β，7β，7aα)-2-甲基-4-(八氢-4，7-二甲基-1，3-二氧代-4，7-环氧-2H-异 吲哚-2-vl)-7-苯并噁唑甲腈(477E)

A.2-氰基-5-硝基苯酚(477A)

将3，4-亚甲二氧基硝基苯(1.67g，10.0mmol)溶解在20mL HMPA 中，加入氰化钠(0.49g，10.0mmol)。在氮气气氛中、在150℃下将反 应物加热，在15分钟内分三次加入氰化钠(0.245g，总共5.00mmol)。 将反应物在150℃下保持45min，冷却并倒入50mL水中，随后加入 50mL 5％NaOH。将水层用乙醚(2×25mL)萃取，弃去有机层。通过 加入10％HCl，将碱性的水层小心酸化至pH为4，用乙醚萃取(3×25 mL)。将合并的有机层用盐水洗涤(25mL)，经干燥硫酸钠并真空浓 缩。经硅胶快速色谱纯化，用5％MeOH/二氯甲烷洗脱，得到1.05g(64％) 化合物477A，为黄棕色固体。HPLC：91.6％，于1.03min(保留时 间)(Phenomenex柱，30×4.6mm，在2分钟内用含0.1％TFA的10-90％ 甲醇水溶液洗脱，5mL/min，于220nm检测)。MS(ES)：m/z 165.23[M+H]+。

B.2-氨基-4-氰基-3-羟基硝基苯(477B)

将化合物477A(0.438g，2.67mmol)溶解在25mL DMSO中，然 后加入碘化三甲基_(0.534g，2.67mmol)。在氮气气氛中，加入五氧 化钠(0.880g，8.01mmol)，得到深红色溶液，室温下继续搅拌过夜。 将反应混合物倒入50mL10％HCl中，用EtOAc(2×25mL)萃取。将 合并的有机层依次用水(25mL)和盐水(25mL)洗涤，经硫酸钠干燥并 真空浓缩，得到化合物477B，为红色油状固体，该油状固体未经进 一步纯化直接用于下一步反应中。

C.7-氰基-2-甲基-4-硝基苯并噁唑(477C)

将化合物477B(0.360g，2.01mmol)和原乙酸三乙酯(1.30g，8.04 mmol)混合，然后在氮气气氛中加热回流1h。真空除去溶剂，将所 得的剩余物经快速色谱纯化，用5％乙醚/二氯甲烷洗脱，得到0.255 g(63％)化合物477C，为棕色固体。HPLC：98.4％，于1.80min(保留 时间)(YMC S5 ODS柱，4.6×50mm，在4分钟内用含0.2％磷酸的 10-90％甲醇水溶液洗脱，4mL/min，于220nm检测)。MS(ES)：m/z 204.28[M+H]+。

D.4-氨基-7-氰基-2-甲基苯并噁唑(477D)

将化合物477C(0.156g，0.77mmol)溶解在EtOAc/10％HOAc的 混合物(1∶1，20mL)中，然后加热至65℃。加入铁粉(325目，0.214g，3.83 mmol)，将反应物搅拌4h。随后将冷却后的混合物经Celite过滤， 将所得的滤液用水(25mL)和盐水(25mL)洗涤，经硫酸镁干燥，浓缩 得到化合物477D(0.118g，89％)，为橙色固体。HPLC：87％，于2.03 min(保留时间)(YMC S5 ODS柱，4.6×50mm，在4分钟内用含0.2％ 磷酸的10-90％甲醇水溶液洗脱，4mL/min，于220nm检测)。MS(ES)： m/z 174.05[M+H]+。

E.(3aα，4β，7β，7aα)-2-甲基-4-(八氢-4，7-二甲基-1，3-二氧代-4，7-环氧-2H- 异吲哚-2-基)-7-苯并噁唑甲腈(477E)

在密封试管中，将化合物477D(0.060g，0.35mmol)和化合物 20A(0.071g，0.37mmol)与甲苯(2mL)、三乙胺(0.24mL，1.7mmol)和 硫酸镁(0.104g，0.866mmol)一起混合。将所述密封试管在135℃下加 热2天。将经冷却的反应混合物用EtOAc稀释，过滤，真空浓缩， 得到粗制产物，为棕色油状物。该油状物经硅胶快速色谱纯化，用1/1 EtOAc/己烷洗脱，得到0.014g(12％)化合物477E，为灰白色固体。 HPLC：96.5％，于2.27min(保留时间)(YMC S5 ODS柱，4.6×50mm，在 4分钟内用含0.2％磷酸的10-90％甲醇水溶液洗脱，4mL/min，于 220nm检测)。MS(ES)：m/z 352.23[M+H]+。

                                       实施例478

(3aα，4β，5β，7β，7aα)-4-[7-[2-(4-氰基苯氧基)乙基]八氢-5-甲氧基-4-甲基- 1，3-二氧代-4，7-环氧-2H-异吲哚-2-基]-1-萘甲腈，较慢洗脱的对映异 构体(478)

在-78℃、氩气气氛中，将n-BuLi(0.050mL，1.6M，0.075mmol) 加入至化合物244ii(33.7mg，0.0683mmol)的THF(1.0mL)溶液中。将 反应混合物温热至室温，滴加入氟磺酸甲酯(0.010mL，0.12mmol)。 待原料消耗完全(由HPLC证实)，立即将反应物用水猝灭，所得的含 水混合物用二氯甲烷萃取(3×5mL)。合并的有机层经硫酸镁干燥， 减压浓缩。经反相制备型HPLC纯化[22.09min(YMC S5 ODS柱，20× 100mm，在25分钟内用含0.1％TFA的0-100％甲醇水溶液洗脱， 20mL/min，于220nm检测)]，得到13.0mg(38％)化合物478，为白色 固体。HPLC：93％，于3.35min(YMC S5 ODS柱，4.6×50mm，在4 分钟内用含0.2％磷酸的10-90％甲醇水溶液洗脱，4mL/min，于220nm 检测)。MS(ES)：m/z 508.17[M+H]+。

                               实施例479

(3aα，4β，7β，7aα)-六氢-4，7-二甲基-2-(2-甲基-6-苯并噁唑基)-4，7-环 氧-1H-异吲哚-1，3(2H)-二酮(479B)

A.2-甲基-6-氨基苯并噁唑(479A)

在70℃下，往2-甲基-6-硝基苯并噁唑(100mg，0.560mmol)的 AcOH(2mL)溶液中一次性加入铁粉(325目，63.0mg，1.12mmol)。在 70℃下15分钟后，再加入铁粉(325目，63.0mg，1.12mmol)，继续搅 拌15min。将混合物冷却并减压浓缩。将所得的剩余物吸收到EtOAc 中，依次用饱和碳酸钠和水洗涤。有机层经硫酸镁干燥，减压浓缩， 经硅胶快速色谱纯化，用0至25％EtOAc的二氯甲烷溶液梯度洗脱， 得到69mg(83％)化合物479A，为固体物。HPLC：97％，于0.24min(保 留时间)(YMC S5 ODS柱，4.6×50mm Ballistic，在4分钟内用含0.2％ 磷酸的10-90％甲醇水溶液洗脱，4mL/min，于220nm检测)。MS(ES)： m/z 149.2[M+H]+。

B.(3aα，4β，7β，7aα)-六氢-4，7-二甲基-2-(2-甲基-6-苯并噁唑基)-4，7-环氧- 1H-异吲哚-1，3(2H)-二酮(479B)

将化合物479A(30mg，0.20mmol)、硫酸镁(60mg，0.50mmol)、 三乙胺(140μL，1.00mmol)和化合物20A(45mg，0.23mmol)溶于 0.25mL甲苯中，然后置于在密封试管中。将密封试管在135℃下加 热14h，随后将反应物冷却至室温。将混合物通过Celite短滤柱过滤， 用MeOH洗脱，真空除去溶剂。剩余物经硅胶快速层析纯化，用0 至50％乙酸乙酯的二氯甲烷溶液梯度洗脱，得到49mg(65％)化合物 479B，为黄褐色固体。HPLC：98％，于2.30min(保留时间)(YMC S5 ODS柱，4.6×50mm，在4分钟内用含0.2％磷酸的10-90％甲醇水溶 液洗脱，于220nm检测)。MS(ES)：m/z 326.9[M+H]+。

                                      实施例480

(3aα，4β，7β，7aα)-2-(2，1，3-苯并噁二唑-5-基)-六氢-4，7-二甲基-4，7-环氧- 1H-异吲哚-1，3(2H)-二酮(480B)

A.5-氨基-2，1，3-苯并噁二唑(480A)

在室温下，往2，1，3-苯并噁二唑-5-甲酸(102mg，0.621mmol)的 THF(3mL)溶液中依次加入三乙胺(103μL，0.739mmol)和DPPA(160 μL，0.739mmol)。将混合物搅拌4h，用二氯甲烷稀释，用水洗涤。 有机层经硫酸镁干燥，浓缩并经硅胶快速色谱纯化，用0至50％乙 酸乙酯的二氯甲烷溶液洗脱。将所得的物质溶解在AcOH(2mL)中， 滴加入水(0.7mL)，得到稍微浑浊的溶液，将该溶液在105℃下加热 30min。将混合物冷却，用饱和碳酸钠溶液碱化，然后用THF萃取 数次。将合并的有机层经硫酸镁干燥，浓缩并经硅胶快速色谱纯化， 用0至15％MeOH的二氯甲烷洗脱液洗脱，得到34mg(41％)化合物 480A，为黄色固体。HPLC：100％，于1.27min(保留时间)(YMC S5 ODS 柱，4.6×50mm Ballistic，在4分钟内用含0.2％磷酸的10-90％甲醇水 溶液洗脱，4mL/min，于220nm检测)。MS(ES)：m/z 136.0[M+H]+。

B.(3aα，4β，7β，7aα)-2-(2，1，3-苯并噁二唑-5-基)-六氢-4，7-二甲基-4，7-环 氧-1H-异吲哚-1，3(2H)-二酮(480B)

将化合物480A(34mg，0.25mmol)、硫酸镁(76mg，0.63mmol)、 三乙胺(180μL，1.26mmol)和化合物20A(74mg，0.38mmol)溶解在0.25 mL甲苯中，然后置于密封试管中。将密封试管在135℃下加热14h。 将冷却的反应混合物通过Celite短滤柱过滤，用丙酮洗脱，真空除去 溶剂。剩余物经反相制备型HPLC纯化(YMC S5 ODS 20×100mm，在 10分钟内用含0.1％TFA的30-100％甲醇水溶液洗脱，20mL/min)。浓 缩需要的洗脱部分，得到剩余物，将剩余物在二氯甲烷和饱和碳酸 氢钠溶液间分配。将水层用二氯甲烷萃取一次，将合并的有机相用 硫酸钠干燥。减压浓缩得到42mg(53％)化合物480B，为黄色固体。 HPLC：100％，于2.62min(保留时间)(YMC S5 ODS柱，4.6×50mm，在 4分钟内用含0.2％磷酸的10-90％甲醇水溶液洗脱，4mL/min，于 220nm检测)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ＝7.91(d，1H)，7.90(dd， 1H)，7.37(dd，1H)，3.09(s，2H)，1.85(s，4H)，1.67(s，6H)。

                                       实施例481

[3aR-(3aα，4β，5β，7β，7aα)]-2-(6-苯并噻唑基)-7-[2-[(5-氯-2-吡啶基)氧基] 乙基]六氢-5-羟基-4-甲基-4，7-环氧-1H-异吲哚-1，3(2H)-二酮(481D)和 [3aS-(3aα，4β，5β，7β，7aα)]-2-(6-苯并噻唑基)-7-[2-[(5-氯-2-吡啶基)氧基] 乙基]六氢-5-羟基-4-甲基-4，7-环氧-1H-异吲哚-1，3(2H)-二酮(481E)

A.1-苯并噻唑-6-基-吡咯-2，5-二酮(481A)

将5-氨基苯并噻唑(2.00g，13.3mmol)和马来酸酐(1.96g，20.0 mmol)在AcOH(27mL)中的混合物在115℃下加热20h。将混合物冷 却并减压浓缩。将剩余物溶于THF中，用饱和碳酸钠洗涤。将水层 用THF萃取数次，将合并的有机层用硫酸镁干燥。经硅胶快速色谱 纯化，用0至50％乙酸乙酯的二氯甲烷洗脱液洗脱，得到1.37g(45％) 化合物481A，为浅黄色固体。HPLC：100％，于2.62min(保留时 间)(YMC S5 ODS柱，4.6×50mm，在4分钟内用含0.2％磷酸的10-90％ 甲醇水溶液洗脱，4mL/min，于220nm检测)。MS(ES)：m/z 231.0[M+H]+。

B.(3aα，4β，7β，7aα)-2-(6-苯并噻唑基)-4-[2-[[(1，1-二甲基乙基)二甲基甲 硅烷基]氧基]乙基]-3a，4，7，7a-四氢-7-甲基-4，7-环氧-1H-异吲哚- 1，3(2H)-二酮(481B)

将化合物481A(445mg，1.93mmol)和化合物204A(929mg，3.87 mmol)在苯(2mL)中的悬浮液加热至60℃，加入丙酮直至得到透明的 溶液。将所得的混合物在60℃下搅拌24h，随后缓慢真空浓缩。将 所得的剩余物溶解在丙酮中，然后缓慢真空浓缩。总共重复该过程3 次。经硅胶快速色谱纯化，用0至30％丙酮的己烷洗脱液洗脱，得 到820mg(90％)化合物481B，为白色固体。HPLC：100％，于2.62min(保 留时间)(YMC S5 ODS柱，4.6×50mm，在4分钟内用含0.2％磷酸的 10-90％甲醇水溶液洗脱，4mL/min，于220nm检测)。MS(ES)：m/z 471.3[M+H]+。

C.[3aR-(3aα，4β，5β，7β，7aα)]-2-(6-苯并噻唑基)-7-[2-[[(1，1-二甲基乙基) 二甲基甲硅烷基]氧基]乙基]六氢-5-羟基-4-甲基-4，7-环氧-1H-异吲哚- 1，3(2H)-二酮(481Ci)和[3aS-(3aα，4β，5β，7β，7aα)]-2-(6-苯并噻唑基)-7-[2- [[(1，1-二甲基乙基)二甲基甲硅烷基]氧基]乙基]六氢-5-羟基-4-甲基- 4，7-环氧-1H-异吲哚-1，3(2H)-二酮(481Cii)

在室温、氮气气氛中，往化合物481B(75mg，0.16mmol)的 THF(1mL)溶液中加入Wilkinson催化剂(32mg，0.030mmol)和儿茶酚 硼烷(1.0M的THF溶液，1.6mL，1.6mmol)。将所得的混合物搅拌2.5 h，随后将其冷却至0℃。依次加入乙醇(5mL)、3N NaOH(2mL)和 过氧化氢(30％，1mL)，将混合物在0℃下搅拌2h。通过依次加入冷 的10％亚硫酸钠溶液(过量)和水将反应物猝灭。将水层用二氯甲烷萃 取数次，将合并的有机层用硫酸钠干燥。减压浓缩，随后经硅胶快 速色谱纯化，用0至100％乙酸乙酯的己烷洗脱液洗脱，得到13 mg(17％)化合物481Ci和481Cii的外消旋混合物，为黄褐色固体。 HPLC：96％，于3.58min(保留时间)(YMC S5 ODS柱，4.6×50mm Ballistic，在4分钟内用含0.2％磷酸的10-90％甲醇水溶液洗脱，4 mL/min，于220nm检测)。MS(ES)：m/z 489.3[M+H]+。通过正相制备 型手性HPLC(CHIRALPAK AD 5×50cm柱；用20％MeOH/乙醇(1∶1) 的庚烷洗脱液洗脱(等度洗脱)，50mL/min)，将所述外消旋混合物分 离成其单一的对映异构体，得到较快洗脱出的对映异构体化合物 481Ci：(手性HPLC：9.40min；CHIRALPAK AD 4.6×250mm柱； 用20％MeOH/乙醇(1∶1)的庚烷洗脱液洗脱，1mL/min)；和较慢洗脱 出的对映异构体化合物481Cii：(手性HPLC：10.47min；CHIRALPAK AD 4.6×250mm柱；用20％MeOH/乙醇(1∶1)的庚烷洗脱液洗脱，1 mL/min)。没有确定化合物481Ci和481Cii的绝对构型。为了便于命 名起见，将化合物481Ci记为″R″构型，而将化合物481Cii记为″S″ 构型。在本文中将衍生自化合物481Ci的对映异构体纯产物标记为 “R”构型，衍生自化合物481Cii的对映异构体纯产物标记为“S” 构型。

D.[3aR-(3aα，4β，5β，7β，7aα)]-2-(6-苯并噻唑基)-7-[2-[(5-氯-2-吡啶基)氧 基]乙基]六氢-5-羟基-4-甲基-4，7-环氧-1H-异吲哚-1，3(2H)-二酮(481D)

将化合物481Ci(84mg，0.17mmol)悬浮在乙醇(2mL)中，在室温 下加入浓HCl(40μL)。将混合物搅拌15min，随后滴入数滴饱和碳酸 氢钠溶液。减压浓缩，得到剩余物。将该剩余物在二氯甲烷和饱和 碳酸氢钠溶液间分配。将水层用二氯甲烷萃取数次，最后用EtOAc 萃取。将合并的有机相用硫酸钠干燥，浓缩并经制备型TLC纯化， 用50％丙酮的氯仿洗脱液洗脱。该方法用于从化合物481Ci中除去 TBS基团，得到游离的伯醇。按照实施例244中所述的通用方法， 室温下使12mg(0.03mmol)的一部分化合物481Ci游离醇与5-氯-2-吡 啶酚(8mg，0.06mmol)、PPh3(17mg，0.060mmol)和偶氮二甲酸二叔 丁酯(15mg，0.060mmol)的THF溶液(0.5mL)反应。室温下将混合物 搅拌24h，用1N NaOH稀释，将水层用二氯甲烷萃取数次。将合并 的有机层用硫酸钠干燥，浓缩，经制备型TLC纯化，用25％丙酮 的三氯甲烷洗脱液洗脱，得到9mg(58％)化合物481D，为白色固体。 HPLC：98％，于2.94min(保留时间)(YMC S5 ODS柱，4.6×50mm Ballistic，在4分钟内用含0.2％磷酸的10-90％甲醇水溶液洗 脱，4mL/min，于220nm检测)。MS(ES)：m/z 486.2[M+H]+。

E.[3aS-(3aα，4β，5β，7β，7aα)]-2-(6-苯并噻唑基)-7-[2-[(5-氯-2-吡啶基)氧 基]乙基]六氢-5-羟基-4-甲基-4，7-环氧-1H-异吲哚-1，3(2H)-二酮(481E)

按照实施例481D描述的方法，将化合物481Cii(58mg，0.12mmol) 用含有12N HCl(40μL)的乙醇(2mL)处理，得到化合物481Cii的游 离伯醇产物。按照上述方式，使15mg(0.040mmol)化合物481Cii的 游离伯醇与5-氯-2-吡啶酚(10mg，0.080mmol)、PPh3(21mg，0.080 mmol)和偶氮二甲酸二叔丁酯(18mg，0.080mmol)的THF(0.5mL)溶液 反应，将所得的产物按如上所述进行纯化，得到8mg(41％)化合物 481E，为白色固体。HPLC：99％，于2.93min(保留时间)(YMC S5 ODS 柱，4.6×50mm Ballistic，在4分钟内用含0.2％磷酸的10-90％甲醇水 溶液洗脱，4mL/min，于220nm检测)。MS(ES)：m/z 486.2[M+H]+。

                                       实施例482

[3aR-(3aα，4β，5β，7β，7aα)]-7-[7-[2-[(5-氯-2-吡啶基)氧基]乙基]八氢-5-羟 基-4-甲基-1，3-二氧代-4，7-环氧-2H-异吲哚-2-基]-2，1，3-苯并噻二唑-4- 甲腈(482F)和[3aS-(3aα，4β，5β，7β，7aα)]-7-[7-[2-[(5-氯-2-吡啶基)氧基]乙 基]八氢-5-羟基-4-甲基-1，3-二氧代-4，7-环氧-2H-异吲哚-2-基]-2，1，3-苯 并噻二唑-4-甲腈(482G)

A.7-(2，5-二氧代-2，5-二氢-吡咯-1-基)-苯并[1，2，5]噻二唑-4-甲腈(482A)

将马来酸酐(667mg，6.80mmol)加入至化合物424A(600mg，3.41 mmol)的THF(9mL)溶液中。将混合物在110℃下加热10h。将反应 物减压浓缩，将乙酸酐(1mL)加入至所述剩余物中。将反应混合物在 75℃下加热30min，随后冷却至室温。经硅胶快速色谱纯化，用3％ 丙酮/三氯甲烷洗脱，得到758mg(2.96mmol，67％)化合物482A。HPLC： 97％，于1.98min(保留时间)(YMC S5 ODS 4.6×50mm，在4分钟内 用含0.2％磷酸的10-90％甲醇水溶液梯度洗脱，于220nm检测)。 MS(ES)：m/z 257.01[M+H]+。

B.(3aα，4β，7β，7aα)-7-[4-[2-[[(1，1-二甲基乙基)二甲基甲硅烷基]氧基]乙 基]-1，3，3a，4，7，7a-六氢-7-甲基-1，3-二氧代-4，7-环氧-2H-异吲哚-2-基]- 2，1，3-苯并噻二唑-4-甲腈(482B)

将化合物482A(758mg，2.96mmol)和化合物204A(711mg，2.96 mmol)在苯(2mL)和丙酮(2mL)中的溶液在60℃下加热6h。将反应混 合物在42℃下真空浓缩40min，得到1.5g粗制的化合物482B，所 述产物未经进一步纯化直接用于下一步骤中。

C.(3aα，4β，5β，7β，7aα)-7-[7-[2-[[(1，1-二甲基乙基)二甲基甲硅烷基]氧基] 乙基]八氢-5-羟基-4-甲基-1，3-二氧代-4，7-环氧-2H-异吲哚-2-基]-2，1，3- 苯并噻二唑-4-甲腈(482C)

在0℃下，将硼烷-二甲硫醚络合物(0.66mL，6.96mmol)加入至化 合物482B(1.15g，2.32mmol)的THF(6mL)溶液中。在0℃下搅拌2h 后，将反应混合物用磷酸盐缓冲液(60mL，pH7.2)猝灭，随后加入乙 醇(35mL)、过氧化氢(8mL，30％水溶液)和THF(4mL)。将反应混合物 在0℃下搅拌1h，随后用二氯甲烷萃取(4×100mL)。将合并的有机 层依次用10％亚硫酸钠水溶液(1×160mL)和盐水(1×160mL)洗涤， 经硫酸钠干燥。经硅胶快速色谱纯化，用10％丙酮/三氯甲烷洗脱， 得到250mg(0.486mmol，21％)化合物482C，为橙色固体物。HPLC： 85％，于3.70min(保留时间)(YMC S5 ODS 4.6×50mm，在4分钟内 用含0.2％磷酸的10-90％甲醇水溶液梯度洗脱，于220nm检测)。 MS(ES)：m/z 515.27[M+H]+。

D.[3aR-(3aα，4β，5β，7β，7aα)]-7-[7-[2-[[(1，1-二甲基乙基)二甲基甲硅烷 基]氧基]乙基]八氢-5-羟基-4-甲基-1，3-二氧代-4，7-环氧-2H-异吲哚-2- 基]-2，1，3-苯并噻二唑-4-甲腈和[3aS-(3aα，4β，5β，7β，7aα)]-7-[7-[2-[[(1，1- 二甲基乙基)二甲基甲硅烷基]氧基]乙基]八氢-5-羟基-4-甲基-1，3-二氧 代-4，7-环氧-2H-异吲哚-2-基]-2，1，3-苯并噻二唑-4-甲腈(482Di和 482Dii)

经正相制备型手性HPLC，将外消旋化合物482C分离，使用 Chiracel OD柱(5cm×50cm)，用10％乙醇的己烷溶液洗脱， 50mL/min，得到较快洗脱出的化合物482Di(手性HPLC：11.89min； CHIRALCEL OD 4.6×250mm柱；用12％乙醇的己烷溶液等度洗 脱，2mL/min)和较慢洗脱出的化合物482Dii(手性HPLC：16.10min； CHIRALCEL OD 4.6×250mm柱；用12％乙醇的己烷溶液等度洗 脱，2mL/min)。没有确定化合物482Di和482Dii的绝对构型。为了 便于命名起见，将化合物482Di标记为″R″构型，而将化合物482Dii 标记为″S″构型。在本文中将衍生自化合物482Di的对映异构体纯产 物标记为“R”构型，衍生自化合物482Dii的对映异构体纯产物标记 为“S”构型。

E.[3aR-(3aα，4β，5β，7β，7aα)]-7-[八氢-5-羟基-7-(2-羟乙基)-4-甲基-1，3-二 氧代-4，7-环氧-2H-异吲哚-2-基]-2，1，3-苯并噻二唑-4-甲腈(482Ei)和 [3aS-(3aα，4β，5β，7β，7aα)]-7-[八氢-5-羟基-7-(2-羟乙基)-4-甲基-1，3-二氧 代-4，7-环氧-2H-异吲哚-2-基]-2，1，3-苯并噻二唑-4-甲腈(482Eii)

将化合物482Di(91mg，0.18mmol)溶解在2％12N HCl/乙醇 (3.0mL)中，将混合物在室温下搅拌20min。将冷饱和碳酸氢钠加入 至所述混合物中直至呈碱性(pH8)。将反应物用EtOAc萃取。随后将 有机层用盐水洗涤，经无水硫酸钠干燥。真空浓缩得到73mg(0.18 mmol，100％)化合物482Ei，为黄色固体，该固体未经进一步纯化。HPLC： 95％，于1.73min(保留时间)(YMC S5 ODS 4.6×50mm，在4分钟内 用含0.2％磷酸的10-90％甲醇水溶液梯度洗脱，于220nm检测)。 MS(ES)：m/z 401.13[M+H]+。

将化合物482Dii(90mg，0.17mmol)溶解在2％12N HCl/乙醇(3.0 mL)中，将混合物在室温下搅拌20min。将冷饱和碳酸氢钠加入至混 合物中直至呈碱性(pH8)。将反应物用EtOAc萃取。随后将有机层用 盐水洗涤，经无水硫酸钠干燥。真空浓缩得到70mg(0.17mmol，100％) 化合物482Eii，为橙色固体，该固体未经进一步纯化。HPLC：90％， 于1.74min(保留时间)(YMC S5 ODS 4.6×50mm，在4分钟内用含 0.2％磷酸的10-90％甲醇水溶液梯度洗脱，于220nm检测)。MS(ES)： m/z 401.14[M+H]+。

F.[3aR-(3aα，4β，5β，7β，7aα)]-7-[7-[2-[(5-氯-2-吡啶基)氧基]乙基]八氢-5- 羟基-4-甲基-1，3-二氧代-4，7-环氧-2H-异吲哚-2-基]-2，1，3-苯并噻二唑- 4-甲腈(482F)

将DBAD(21mg，0.090mmol)加入到PPh3(24mg，0.090mmol)的 THF(0.4mL)溶液中。搅拌10min后，加入5-氯-2-吡啶酚(12mg，0.090 mmol)，再将反应混合物搅拌5min。加入化合物482Ei(18mg，0.045 mmol)，将混合物在室温下搅拌1h。随后将反应物减压浓缩。经制 备型TLC纯化，用20％丙酮/三氯甲烷洗脱，得到12mg(0.023mmol， 52％)化合物482F。HPLC：98％，于3.15min(保留时间)(YMC S5 ODS 4.6×50mm，在4分钟内用含0.2％磷酸的10-90％甲醇水溶液梯度洗 脱，于220nm检测)。MS(ES)：m/z 512.11[M+H]+。

G.[3aS-(3aα，4β，5β，7β，7aα)]-7-[7-[2-[(5-氯-2-吡啶基)氧基]乙基]八 氢-5-羟基-4-甲基-1，3-二氧代-4，7-环氧-2H-异吲哚-2-基]-2，1，3-苯并噻 二唑-4-甲腈(482G)

将DBAD(21mg，0.090mmol)加入到PPh3(24mg，0.090mmol)的 THF(0.4mL)溶液中。搅拌10min后，加入5-氯-2-吡啶酚(12mg，0.090 mmol)，再将反应混合物搅拌5min。加入化合物482Eii(18mg，0.045 mmol)，将混合物在室温下搅拌1h。随后将反应物减压浓缩。经制 备型TLC纯化，用20％丙酮/三氯甲烷洗脱，得到11mg(0.021mmol， 47.0％)化合物482G。HPLC：98％，于3.15min(保留时间)(YMC S5 ODS 4.6×50mm，在4分钟内用含0.2％磷酸的10-90％甲醇水溶液梯度洗 脱，于220nm检测)。MS(ES)：m/z 512.15[M+H]+。

                               实施例483

(1S，4R)-4，7，7-三甲基-3-氧代-2-氧杂双环[2，2.1]庚烷-1-甲酸[3aS- (3aα，4β，5β，7β，7aα)]-2-[4-氰基-3-(三氟甲基)苯基]八氢-4，7-二甲基-1，3- 二氧代-4，7-环氧-1H-异吲哚-5-基酯(483)

在室温、氩气气氛中，往化合物471Di(25mg，0.066mmol)在0.25 mL二氯甲烷中的溶液内加入(1S)-(-)-樟脑酸(20mg，0.10mmol)在0.2 mL二氯甲烷中的溶液。随后依次加入DCC(20mg，0.10mmol)在0.25 mL二氯甲烷中的溶液和DMAP(4.0mg，0.034mmol)。立即得到白色 沉淀物，继续搅拌过夜。过滤除去沉淀物，将滤液用EtOAc稀释。 将所得溶液依次用1N HCI、盐水、饱和碳酸氢钠溶液和盐水洗涤， 随后用硫酸镁干燥。真空浓缩得到粘稠油状剩余物。将所述粗制的 物质经20cm3硅胶柱快速色谱纯化，用50％乙酸乙酯的己烷洗脱液 洗脱，得到32mg白色固体。从二氯甲烷/己烷中重结晶，得到20 mg(86％)化合物483，为较大晶体。对该物质进行X-射线晶体衍射分 析，并参照(1S)-(-)-樟脑酸附属物的已知的确定的立体化学构型，确 定化合物471Di的确切立体化学构型。LCMS：100％，于1.9min(保 留时间)(Phenomenex Luna C18柱，2×30mm，在3分钟内，用含10mM 乙酸铵的0-100％乙腈水溶液洗脱，1mL/min，于220nm检测)。MS(ESI)： m/z 559.3[M-H]-。

                                        实施例484

(3aα，4β，5β，7β，7aα)-5-[7-[2-[[(1，1-二甲基乙基)二甲基甲硅烷基]氧基]乙 基]八氢-5-羟基-4-甲基-L3-二氧代-4，7-环氧-2H-异吲哚-2-基]-8-喹啉甲 腈(484)

向干燥的25mL三颈圆底烧瓶中加入TiCl2Cp2(0.500g，2.01mmol) 和THF(4mL)，得到深红色溶液。加入活性锌粉(0.392g，6mmol，按 照Fieser and Fieser，卷1，1276页中描述的方法制备)，将所得悬浮液 搅拌30min，在此过程中颜色由砖红色转变为翠绿色。使未反应的 锌粉沉降。在另一个25mL三颈烧瓶中，加入化合物464F(0.202g， 0.399mmol)、THF(1mL)和1，4-环己二烯(0.380mL，4.02mmol)。通过 加料漏斗(在其底部带有棉花管堵)加入Ti(iii)试剂(0.90mL，0.45 mmol)，用THF(1mL)清洗。1小时后，HPLC显示～50％的转化率， 再加入0.9mL(0.45mmol)的钛试剂。1小时后，HPLC显示原料消耗 完全。依次加入饱和氯化铵(5mL)和10mLEtOAc。分离出有机层， 用盐水洗涤(5mL)，经硫酸钠干燥，真空浓缩，得到粗制产物，为橙 色半固体物。粗制的物质经硅胶快速层析纯化，用50％二氯甲烷/48％ EtOAc/2％MeOH洗脱，得到0.10g(59％)化合物484，为浅黄色泡沫 体。HPLC：91％，于3.65min(保留时间)(YMC S5 ODS柱，4.6×50mm， 在4分钟内用含0.2％磷酸的10-90％甲醇水溶液洗脱，4mL/min，于 220nm检测)。MS(ES)：m/z 508.27[M+H]+。

                                       实施例485

[3aR-(3aα，4β，5β，7β，7aα)]-5-[7-[2-[[(1，1-二甲基乙基)二甲基甲硅烷基] 氧基]乙基]八氢-5-羟基-4-甲基-1，3-二氧代-4，7-环氧-2H-异吲哚-2-基]- 8-喹啉甲腈(485i)和[3aS-(3aα，4β，5β，7β，7aα)]-5-[7-[2-[[(1，1-二甲基乙基) 二甲基甲硅烷基]氧基]乙基]八氢-5-羟基-4-甲基-1，3-二氧代-4，7-环氧- 2H-异吲哚-2-基]-8-喹啉甲腈(485ii)

通过正相制备型手性HPLC，将外消旋化合物484分离成其单一 对映异构体。Chiralcel OD柱(50×500nm)，流速50mL/min(20％乙醇 /己烷)，于220nm处检测。较快洗脱出的对映体化合物485i的保留 时间为35.8min，较慢洗脱出的对映体化合物485ii的保留时间为49.7 min。分离后，两种对映体均为白色固体。化合物485i：HPLC：100％， 于4.980min(保留时间)(Chiracel OD柱(5×50mm)，2.0mL/min，20％ 乙醇/己烷，于220nm检测)，＞99％ee.MS(ES)：m/z 508.23[M+H]+。 化合物485ii：HPLC：98.6％，于7.357min(保留时间)(Chiracel OD柱 (5×50mm)，2.0mL/min，20％乙醇/己烷，于220nm检测)，97.2％ee. MS(ES)：m/z 508.21[M+H]+。没有确定化合物485i和485ii的绝对构 型。为便于命名起见，在本文中将化合物485i标记为″R″构型而将化 合物485ii标记为″S″构型。在本文中将衍生自化合物485i的对映异 构体纯产物标记为“R”构型，衍生自化合物485ii的对映异构体纯 产物标记为“S”构型。

                                      实施例486

[3aR-(3aα，4β，5β，7β，7aα)]-5-[八氢-5-羟基-7-(2-羟乙基)-4-甲基-1，3-二氧 代-4，7-环氧-2H-异吲哚-2-基]-8-喹啉甲腈(486i)和[3aS- (3aα，4β，5β，7β，7aα)]-5-[八氢-5-羟基-7-(2-羟乙基)-4-甲基-1，3-二氧代- 4，7-环氧-2H-异吲哚-2-基]-8-喹啉甲腈(486ii)

按照实施例466描述的方法，将化合物485i和485ii转化成游 离伯醇产物，得到化合物486i和486ii，为白色固体。

化合物486i：HPLC：98％，于1.650min(保留时间)(YMC S5 ODS 柱，4.6×50mm，在4分钟内用含0.2％磷酸的10-90％甲醇水溶液洗脱， 4mL/min，于220nm检测)。MS(ES)：m/z 394.21[M+H]+。

化合物486ii：HPLC：98％，于1.663min(保留时间)(YMC S5 ODS 柱，4.6×50mm，在4分钟内用含0.2％磷酸的10-90％甲醇水溶液洗 脱，4mL/min，于220nm检测)。MS(ES)：m/z 394.20[M+H]+。

                   实施例487

[3aR-(3aα，4β，7β，7aα)]-5-[7-[2-[(5-氯-2-吡啶基)氧基]乙基]八氢-5-羟基- 4-甲基-1，3-二氧代-4，7-环氧-2H-异吲哚-2-基]-8-喹啉甲腈(487)

在22℃下，将DBAD(0.088g，0.38mmol)加入至三苯基膦(0.100g， 0.382mmol)的THF(1.0mL)溶液中，搅拌10min。加入固体5-氯-2- 吡啶酚(0.049g，0.38mmol)，继续搅拌10min。将反应混合物加入化 合物486i(0.100g，0.250mmol)的THF溶液(1.0mL)中。搅拌3h后， 将反应物真空浓缩，经硅胶快速色谱纯化，用20-50％丙酮/氯仿洗 脱，得到0.080g(63％)化合物487，为白色固体。HPLC：100％，于3.023 min(保留时间)(YMC S5 ODS柱，4.6×50mm，在4分钟内用含0.2％ 磷酸的10-90％甲醇水溶液洗脱，4mL/min，于220nm检测)。

MS(ES)：m/z 505.16[M+H]+。

                                     实施例488

[3aS-(3aα，4β，7β，7aα)]-5-[7-[2-[(5-氯-2-吡啶基)氧基]乙基]八氢-5-羟基- 4-甲基-1，3-二氧代-4，7-环氧-2H-异吲哚-2-基]-8-喹啉甲腈(488)

在22℃下，将DBAD(0.088g，0.38mmol)加入至三苯基膦(0.100g， 0.382mmol)的THF(1.0mL)溶液中，搅拌10min。加入固体5-氯-2- 吡啶酚(0.049g，0.38mmol)，继续搅拌10min。将反应混合物加入到 化合物486ii(0.100g，0.250mmol)的THF(1.0mL)溶液中。搅拌3h后， 将反应物真空浓缩，经硅胶快速色谱纯化，用10-50％丙酮/氯仿洗 脱，得到0.080g(63％)化合物488，为白色固体。HPLC：95％，于3.023 min(保留时间)(YMC S5 ODS柱，4.6×50mm，在4分钟内用含0.2％ 磷酸的10-90％甲醇水溶液洗脱，4mL/min，于220nm检测)。

MS(ES)：m/z 505.12[M+H]+。

                                       实施例489

[3aR-(3aα，4β，5β，7β，7aα)]-4-(八氢-5-羟基-4，7-二甲基-1，3-二氧代-4，7-环 氧-2H-异吲哚-2-基)-2-碘代苄腈(489Gi)和[3aS-(3aα，4β，5β，7β，7aα)]-4- (八氢-5-羟基-4，7-二甲基-1，3-二氧代-4，7-环氧-2H-异吲哚-2-基)-2-碘代 苄腈(489Gii)

A.2-碘-4-硝基-苯胺(489A)

向碘(46.0g，0.180mol)和硫酸银(56.3g，0.180mol)在无水乙醇 (500mL)中的混合物内加入4-硝基苯胺(25.0g，0.180mol)，将反应混 合物在室温下搅拌5h。将所得的黄色溶液过滤，真空浓缩。将所得 的剩余物溶于400mL乙酸乙酯中，用1N氢氧化钠溶液(2×250mL) 洗涤，经硫酸钠干燥，过滤并真空浓缩，得到45.5(95％)化合物489A， 为黄色固体。HPLC：98％，于2.837min(保留时间)(Shimadzu VP-ODS 柱，4.6×50mm，在4分钟内用含0.1％三氟乙酸的10至90％甲醇水 溶液洗脱，4mL/min，于220nm检测)。MS(ES)：m/z 265.08[M+H]+。

B.2-碘-4-硝基-苄腈(489B)

将化合物489A(10.0g，37.9mmol)溶解在20mL 12N HCl/40mL 水的混合物中，随后冷却至0℃。往该混合物中缓慢加入亚硝酸钠(5.23 g，75.8mmol)在10mL水中的溶液，同时保持反应温度在0℃。在0 ℃下搅拌反应物1h，随后缓慢加入至机械搅拌下的、50℃、新鲜制 备的氰化亚铜(3.0g，33mmol，按照Vogel′s Textbook of Practical Organic Chemistry，第五版，429页所述制备)和氰化钾(6.30g，96.7 mmol)在水(50mL)中的溶液内。在50℃下搅拌反应物1h，冷却至25 ℃，用二氯甲烷(2×200mL)萃取。将有机层用硫酸钠干燥，过滤并 真空浓缩。所得的剩余物经硅胶色谱纯化，用4∶1的己烷∶乙酸乙酯 洗脱，得到4.6g(44％)化合物489B，为橙色固体物。HPLC：98％， 于2.647min(保留时间)(YMC S5 ODS柱，4.6×50mm，在4分钟内用 含0.2％磷酸的10-90％甲醇水溶液洗脱，4mL/min，于220nm检测)。

C.4-氨基-2-碘-苄腈(489C)

将化合物489B(4.60g，16.8mmol)、四氢呋喃(75mL)、乙醇(100 mL)、氯化铵溶液(1.51g，28.3mmol，溶于100mL水中)和铁(325目， 4.21g，75.4mmol)的混合物机械搅拌。将所述反应混合物加热回流3h 或直至所有原料消耗完全。将反应混合物冷却，经Celite过滤，真空 浓缩。将所得的剩余物溶解在乙酸乙酯(200mL)中，用1N氢氧化钠(2 ×150mL)洗涤，经硫酸钠干燥，过滤并真空浓缩，得到3.97g(97％) 化合物489C，为深色固体。HPLC：95％，于1.877min(保留时间)(YMC S5 ODS柱，4.6×50mm，在4分钟内用含0.2％磷酸的10-90％甲醇水 溶液洗脱，4mL/min，于220nm检测)。MS(ES)：m/z 245.13[M+H]+。

D.4-(2，5-二氧代-2，5-二氢-吡咯-1-基)-2-碘-苄腈(489D)

将化合物489C(3.97g，16.3mmol)和马来酸酐(2.41g，24.4mmol) 在冰醋酸(15mL)中回流5h。将反应物冷却至25℃，随后倒入冰(100 mL)中。过滤分离出所得的沉淀物，用水(2×25mL)洗涤，真空干燥 得到4.78g(90％)化合物489D，为黄褐色固体。HPLC：82％，于2.68 min(保留时间)C Shimadzu VP-ODS柱，4.6×50mm，在4分钟内用含 0.1％三氟乙酸的10至90％甲醇水溶液洗脱，4mL/min，于220nm检 测)。MS(ES)：m/z 325.04[M+H]+。

E.(3aα，4β，7β，7aα)-4-(1，3，3a，4，7，7a-六氢-4，7-二甲基-1，3-二氧代-4，7-环 氧-2H-异吲哚-2-基)-2-碘代苄腈(489E)

将化合物489D(0.40g，1.2mmol)在2，5-二甲基呋喃(2.0g)中的溶 液在75℃下搅拌2h。从任何不溶物质中倾析出反应液，用乙醚洗涤 沉淀物。将合并的倾析液和乙醚洗液合并，真空浓缩，同时保持温 度＜50℃。将所得的剩余物在己烷中研磨，得到0.56g(94％纯度) 化合物489E，为黄褐色固体。由于反应容易发生逆Diels-Alder反应， 不进行进一步纯化。HPLC：85％，于3.01min(保留时间)(Shimadzu VP-ODS柱，4.6×50mm，在4分钟内用含0.1％三氟乙酸的10至90％ 甲醇水溶液洗脱，4mL/min，于254nm检测)。MS(ES)：m/z 421.05[M+H]+。

F.(3aα，4β，5β，7β，7aα)-4-(八氢-5-羟基-4，7-二甲基-1，3-二氧代-4，7-环氧- 2H-异吲哚-2-基)-2-碘代苄腈(489F)

将化合物489E(0.40g，0.95mmol)的无水THF(5mL)溶液冷却至 0℃，加入硼烷-二甲硫醚络合物(0.2mL，1.9mmol，10M)，将反应溶液 升温至25℃。搅拌30min后，将反应物冷却至0℃，缓慢加入pH 为7的磷酸盐缓冲液(6.6mL)，接着加入30％过氧化氢(0.7mL)。在25 ℃下搅拌反应物1h，随后使其在乙酸乙酯(100mL)和水(100mL)间分 配。分离出有机部分，经硫酸钠干燥，过滤并真空浓缩。所得的剩余 物经硅胶纯化，用3∶1二氯甲烷∶乙酸乙酯洗脱，得到0.11g(25％)化 合物489F，为白色固体。HPLC：99％，于2.527min(保留时间)(Shimadzu VP-ODS柱，4.6×50mm，在4分钟内用含0.1％三氟乙酸的10至90％ 甲醇水溶液洗脱，4mL/min，于220nm检测)。MS(ES)：m/z 439.09[M+H]+。

G.[3aR-(3aα，4β，5β，7β，7aα)]-4-(八氢-5-羟基-4，7-二甲基-1，3-二氧代- 4，7-环氧-2H-异吲哚-2-基)-2-碘代苄腈(489Gi)和[3aS-

(3α，4β，5β，7β，7aα)]-4-(八氢-5-羟基-4，7-二甲基-1，3-二氧代-4，7-环氧-2H- 异吲哚-2-基)-2-碘代苄腈(489Gii)

通过正相制备型手性HPLC，将外消旋化合物489F分离成其单 一对映异构体。使用Chiralcel AD柱(50×500mm)，流速50mL/min(70％ 异丙醇/己烷)，于220nm检测。较快洗脱出的对映体化合物489Gi的 保留时间为4.587min，较慢洗脱出的对映体化合物489Gii的保留时 间为6.496min。分离后，两种对映体均为白色固体。没有确定化合 物489Gi和489Gii的绝对构型。为便于命名起见，在本文中将化合 物489Gi标记为″R″构型，而将化合物489Gii标记为″S″构型。

                                        实施例490

(3aα，4β，5β，7β，7aα)-4-[7-[2-[(5-氯-2-吡啶基)氧基]乙基]八氢-5-甲氧基- 4-甲基-1，3-二氧代-4，7-环氧-2H-异吲哚-2-基]-1-萘甲腈(490B)

A.(3aα，4β，7β，7aα)-4-[7-[2-[(5-氯-2-吡啶基)氧基]乙基]八氢-5-羟基-4- 甲基-1，3-二氧代-4，7-环氧-2H-异吲哚-2-基]-1-萘甲腈(490A)

在氮气气氛中，将三苯基膦(166mg，0.633mmol)和DBAD(146 mg，0.633mmol)的混合物溶解在THF(4mL)中，将所得黄色溶液搅拌 10min。加入5-氯-吡啶-2-酚(82mg，0.63mmol)，将混合物搅拌5 min，随后加入化合物242B(165mg，0.327mmol)。将混合物搅拌12 h，然后在氮气气流中除去溶剂。将所得的油状物吸收到硅胶(1g)中， 经Jones色谱硅胶柱(5g/25mL)快速色谱纯化，用0至50％丙酮的氯 仿溶液梯度洗脱，得到79.4mg(47％)化合物490A，为白色泡沫体。 HPLC：99％，于3.48min(保留时间)(Phenomenex ODS柱，4.6×50mm， 在4分钟内用含0.1％TFA的10至90％甲醇水溶液洗脱，4mL/min，于 220nm检测)。MS(ES)：m/z 504.17[M+H]+。

B.(3aα，4β，5β，7β，7aα)-4-[7-[2-[(5-氯-2-吡啶基)氧基]乙基]八氢-5-甲氧 基-4-甲基-1，3-二氧代-4，7-环氧-2H-异吲哚-2-基]-1-萘甲腈(490B)

将干燥的化合物490A(24mg，0.048mmol)置于带磁力搅拌棒的1 英钱的管瓶中。在氮气气氛中，加入氧化银(57mg，0.24mmol)、 CH3CN(500μL)和碘甲烷(20μL，0.32mmol)，将混合物置于加热套(82 ℃)中并搅拌14h。20分钟后混合物变为棕色，随后又变为绿色。将 混合物经Celite和Florisil过滤，经反相制备型HPLC纯化(Shimadzu Shimpac VP ODS柱，20×50mm，在6分钟内用含0.1％TFA的0-100％ 甲醇水溶液洗脱，于220nm检测)，得到6.9mg(28％)化合物490B， 为白色泡沫体。HPLC：99％，于3.64min，3.76min(阻转异构体，保留 时间)(Phenomenex ODS柱，4.6×50mm，在4分钟内用含0.1％TFA 的0-100％甲醇水溶液洗脱，4mL/min，于220nm检测)。MS(ES)：m/z 518.19[M+H]+。

                                       实施例491

[3aR-(3aα，4β，5β，7β，7aα)]-4-[7-[2-[(5-氯-2-吡啶基)氧基]乙基[八氢-5-甲 氧基-4-甲基-1，3-二氧代-4，7-环氧-2H-异吲哚-2-基]-1-萘甲腈(491Ci)和 [3aR-(3aα，4β，5β，7β，7aα)]-4-[7-[2-(5-氯-2-氧代-1(2H)-吡啶基)乙基]八氢 -5-甲氧基-4-甲基-1，3-二氧代-4，7-环氧-2H-异吲哚-2-基]-1-萘甲腈 (491Cii)

A.(3aα，4β，5β，7β，7aα)-4-[7-[2-[[(1，1-二甲基乙基)二甲基甲硅烷基]氧基] 乙基]八氢-5-甲氧基-4-甲基-1，3-二氧代-4，7-环氧-2H-异吲哚-2-基]-1- 萘甲腈(491A)

将干燥的化合物243Cii(142mg，0.280mmol)置于带磁力搅拌棒 和带Teflon塞的1英钱的管瓶中。在氮气气氛中，加入氧化银(324mg， 1.40mmol)、CH3CN(3mL)和碘甲烷(90μL，1.4mmol)，将混合物置于 加热套(82℃)中。将反应物搅拌过夜，随后经Celite过滤，真空浓缩。 所得剩余物经硅胶快速色谱纯化，用0-50％丙酮的氯仿溶液梯度洗 脱，得到62.2mg(43％)化合物491A。HPLC：99％，于3.87和3.95min(阻 转异构体，保留时间)(Phenomenex ODS柱，4.6×50mm，在4分钟内 用含0.1％TFA的10-90％甲醇水溶液洗脱，4mL/min，于220nm检测)。 MS(ES)：m/z 521.37[M+H]+。

B.(3aα，4β，5β，7β，7aα)-4-[八氢-7-(2-羟乙基)-5-甲氧基-4-甲基-1，3-二氧 代-4，7-环氧-2H-异吲哚-2-基]-1-萘甲腈(491B)

将化合物491A(62.2mg，0.119mmol)溶解在乙醇(2mL)中，加入 12N盐酸(50μL)，将混合物搅拌10min。真空除去溶剂，将所得产 物经硅胶快速层析纯化，用0-20％丙酮的氯仿溶液梯度洗脱，得到 40.3mg(83％)化合物491B，为白色固体。HPLC：96％，于2.30和2.45 min(阻转异构体，保留时间)(Phenomenex ODS柱，4.6×50mm，在4 分钟内用含0.1％TFA的10至90％甲醇水溶液洗脱，4mL/min，于 220nm检测)。MS(ES)：m/z 407.22[M+H]+。

C.[3aR-(3aα，4β，5β，7β，7aα)]-4-[7-[2-[(5-氯-2-吡啶基)氧基]乙基]八氢-5- 甲氧基-4-甲基-1，3-二氧代-4，7-环氧-2H-异吲哚-2-基]-1-萘甲腈，较慢 洗脱的对映异构体(491Ci)和[3aR-(3a(α，4β，5β，7β，7aα)]-4-[7-[2-(5-氯- 2-氧代-1(2H)-吡啶基)乙基]八氢-5-甲氧基-4-甲基-1，3-二氧代-4，7-环氧 -2H-异吲哚-2-基]-1-萘甲腈(491Cii)

在氮气气氛中，将三苯基膦(40mg，0.15mmol)和DBAD(35mg， 0.15mmol)溶解在THF中，搅拌10min。加入5-氯吡啶-2-酚(20mg， 0.15mmol)，将混合物搅拌5min。加入化合物491B(40.3mg，0.0991 mmol)，将所得的混合物搅拌2.5h。真空浓缩溶剂，将所得的剩余物 经Florisil(1.3g)色谱纯化，用0-40％丙酮的氯仿溶液梯度洗脱，得 到140mg 491Ci、491Cii和DBAD的混合物。将该油状物悬浮于二 氯甲烷(3mL)中，加入三氟乙酸(2mL)。45min后，真空除去溶剂， 将所得的油状物在饱和碳酸氢钠(20mL)和EtOAc(20mL)间分配。水 层用EtOAc(2×20mL)萃取，将合并的有机层经硫酸镁干燥。经反 相制备型HPLC纯化(Shimadzu Shimpac VP ODS柱，20×50mm，在 6分钟内用含0.1％TFA的10-90％甲醇水溶液洗脱，于220nm检测)， 得到22mg(44％)化合物491Ci和4.6mg(9％收率)化合物491Cii。化 合物491Ci：HPLC：95％，于3.50min(保留时间)(Phenomenex ODS 柱，4.6×50mm，在4分钟内用含0.1％TFA的10-90％甲醇水溶液洗 脱，4mL/min，于220nm检测)。MS(ES)：m/z 518.28[M+H]+。化合物 491Cii：HPLC：85％，于2.94和3.07min(阻转异构体，保留时 间)(Phenomenex ODS柱，4.6×50mm，在4分钟内用含0.1％TFA的 10-90％甲醇水溶液洗脱，4mL/min，于220nm检测)。MS(ES)：m/z 518.27[M+H]+。

                                       实施例492

[3aR-(3aα，4β，5β，7β，7aα)]-4-[5-(乙酰基氧基)-7-[2-[(5-氯-2-嘧啶基)氧基] 乙基]八氢-4-甲基-1，3-二氧代-4，7-环氧-2H-异吲哚-2-基]-1-萘甲腈，较 慢洗脱的对映异构体(492)

将乙酰氯(25μL，0.35mmol)加入化合物490A(30mg，0.060mmol) 的吡啶(600μL)溶液中。将混合物搅拌过夜，用盐酸(0.5N，10mL)稀 释，用氯仿(3×7mL)萃取。合并有机层，用水(3×4mL)和盐水(4mL) 洗涤，经硫酸镁干燥，真空浓缩。经硅胶快速色谱纯化，用0至50％ 丙酮的氯仿溶液梯度洗脱，得到17mg(53％)化合物492。HPLC：99％， 于3.48和3.63min(阻转异构体，保留时间)(Phenomenex ODS柱，4.6× 50mm，在4分钟内用含0.1％TFA的10-90％甲醇水溶液洗脱，4 mL/min，于220nm检测)。MS(ES)：m/z 546.15[M+H]+。

                               实施例493

二甲基氨基甲酸[3aR-(3aα，4β，5β，7β，7aα)]-7-[2-(5-氯-2-吡啶基)氧基]乙 基]-2-(4-氰基-1-萘基)八氢-4-甲基-1，3-二氧代-4，7-环氧-1H-异吲哚-5- 基酯，较慢洗脱出的对映异构体(493)

往化合物490A(30mg，0.060mmol)的吡啶(300μL)溶液中加入二 甲基氨基甲酰氯(28μL，0.30mmol)，将混合物在25℃下搅拌12h。 再加入另外部分的二甲基氨基甲酰氯(28μL，0.30mmol)，将所得反应 物在70℃下加热12h。加入第三部分的二甲氨基甲酰氯(28μL，0.30 mmol)以及吡啶(300μL)并将混合物在100℃下搅拌24h。将溶液用0.5 N HCl(10mL)稀释，用氯仿萃取(3×7mL)。合并有机层，用水(3×4mL) 和盐水(4mL)洗涤，经硫酸镁干燥，真空浓缩。经反相制备型HPLC 纯化(Shimadzu Shimpac VP ODS柱，20×50mm，在6分钟内用含 0.1％TFA的0-100％甲醇水溶液洗脱，于220nm检测)，得到15.7 mg(46％)化合物493，为白色固体。HPLC：99％，于3.52min和3.69 min(阻转异构体，保留时间)(Phenomenex ODS柱，4.6×50mm，在4 分钟内用含0.1％TFA的10-90％甲醇水溶液洗脱，4mL/min，于220nm 检测)。MS(ES)：m/z 575.10[M+H]+。

                                       实施例494

[3aR-(3aα，4β，5β，7β，7aα)]-4-[7-[2-[(5-氯-2-吡啶基)氧基]乙基]八氢-4-甲 基-5-[[(甲基氨基)羰基]氧基]-1，3-二氧代-4，7-环氧-2H-异吲哚-2-基]-1- 萘甲腈，较慢洗脱出的对映异构体(494)

将异氰酸甲酯(36μL，0.60mmol)加入到化合物490A(30mg，0.060 mmol)的二噁烷(600μL)溶液中，在80℃下加热过夜。加入另外部分 的异氰酸甲酯(36μL，0.60mmol)，将混合物在100℃下加热24h。加 入第三部分的异氰酸甲酯(36μL，0.60mmol)，将混合物在100℃下搅 拌24h。真空除去溶剂，将所得油状物经反相制备型HPLC纯化 (Shimadzu Shimpac VP ODS柱，20×50mm，在6分钟内用含0.1％TFA 的0-100％甲醇水溶液洗脱，于220nm检测)，得到20mg(59％)化合 物494，为透明玻璃状物质。HPLC：99％，于3.33min和3.42min(阻 转异构体，保留时间)(Phenomenex ODS柱，4.6×50mm，在4分钟内 用含0.1％TFA的10-90％甲醇水溶液洗脱，4mL/min，于220nm检 测)。MS(ES)：m/z 561.08[M+H]+。

                                 实施例495

[3aR(3aα，4β，5β，7β，7aα)]-4-[八氢-4-(2-羟乙基)-7-甲基-1，3-二氧代- 4，7-环氧-2H-异吲哚-2-基]-1-萘甲腈(495Ai)和[3aS(3aα，4β，5β，7β，7aα)]- 4-[八氢-4-(2-羟乙基)-7-甲基-1，3-二氧代-4，7-环氧-2H-异吲哚-2-基]-1- 萘甲腈(495B)

A.[3aS-(3aα，4β，5β，7β，7aα)]-4-[八氢-4-(2-羟乙基)-7-甲基-1，3-二氧代- 4，7-环氧-2H-异吲哚-2-基]-1-萘甲腈(495Ai)和(3aα，4β，5β，7β，7aα)-4-[2- (乙酰基氧基)乙基]-2-(4-氰基-1-萘基)-六氢-7-甲基-4，7-环氧-1H-异吲 哚-1，3(2H)-二酮(495Aii)

将外消旋化合物223B(10.26g，27.26mmol)溶于装于10L瓶内的 无水THF(500mL)中。加入叔丁基·甲基醚(4.86L)、醋酸乙烯酯(216mL) 和脂肪酶(108g，[Sigma，II型脂肪酶，由猪胰腺制得粗品，产品编号 L3126，批号021K1445])。将反应混合物在室温下搅拌24h，反应由 HPLC监测，使用以下条件：将200μL反应混合物样品过滤，在氮 气气流中干燥，经HPLC分析(YMC ODS柱，4.6×50mm，在4分钟 内用含0.1％TFA的10-90％甲醇水溶液洗脱，4mL/min，于220nm检 测)。当消耗了60％的原料后，停止反应。过滤除去酶，真空浓缩滤 液。将所得的剩余物溶解在三氯甲烷中，吸附到硅胶上。经硅胶快 速色谱纯化，用1-5％甲醇的三氯甲烷溶液梯度洗脱，得到3.78g(37％) 化合物495Ai和6.84g(60％)化合物495Aii，两者均为白色固体。化 合物495Ai：HPLC：99％，于3.47min(保留时间)(YMC S5 ODS柱，4.6 ×50mm，在4分钟内用含0.1％TFA的10-90％甲醇水溶液洗脱，4 mL/min，于220nm检测)。MS(ES)：m/z 377.09[M+H]+。正相制备型手 性HPLC：37.8min(保留时间)(chiralpak AD柱，4.6×250mm，10微米， 40℃，用8％乙醇/MeOH(1∶1)的庚烷溶液等度洗脱，于220nm检 测)，99％ee。化合物495Aii：HPLC：99％，于2.92min(保留时间)(YMC S5 ODS柱，4.6×50mm，在4分钟内用含0.1％TFA的10至90％甲醇 水溶液洗脱，4mL/min，于220nm检测)。

B.[3aR-(3aα，4β，5β，7β，7aα)]-4-[八氢-4-(2-羟乙基)-7-甲基-1，3-二氧代- 4，7-环氧-2H-异吲哚-2-基]-1-萘甲腈(495B)

将脂肪酶(134g，[Sigma，II型脂肪酶，由猪胰腺制得粗品，产品 编号L3126，批号021K1445])加入到3.5L去离子水中。将混合物离 心以除去大部分的悬浮物质。用1N氢氧化钠将上清液的pH值调节 至7.06，接着加入化合物495Aii(8.04g，19.2mmol)的TBME(1.5L)溶 液。加入1N氢氧化钠将pH值提高至7.16。将反应混合物在室温下 搅拌，按照实施例495A的描述通过分析性HPLC监测。30min后， 将反应物经Celite过滤，将滤液用乙酸乙酯萃取(4×1L)，直至HPLC 显示所有的醇均被除去。将有机部分合并，经硫酸镁干燥，过滤并真 空浓缩。经硅胶快速色谱纯化(Jones，50g柱)，依次使用0-70％丙酮 的氯仿溶液和5％MeOH的氯仿溶液洗脱，得到2.44g(33％)化合物 495B，为白色固体。HPLC：99％，于2.89min(保留时间)(YMC S5 ODS 柱，4.6×50mm，在4分钟内用含0.1％TFA的10-90％甲醇水溶液洗 脱，4mL/min，于220nm检测)。MS(ES)：m/z 377.09[M+H]+。正相制备 型手性HPLC：11.1min(保留时间)(chiralpak AD柱，4.6×250mm，10 微米，40℃，用8％乙醇/MeOH(1∶1)的庚烷溶液等度洗脱，于220nm检 测)，95％ee。

                                     实施例496

[3aR-(3aα，4β，7β，7aα)]-4-[4-[2-[(5-氯-2-吡啶基)氧基]乙基]八氢-7-甲基- 1，3-二氧代-4，7-环氧-2H-异吲哚-2-基]-1-萘甲腈(496Bi)和[3aR- (3aα，4β，7β，7aα)]-4-[4-[2-(5-氯-2-氧代-1(2H)-吡啶基)乙基]八氢-7-甲基- 1，3-二氧代-4，7-环氧-2H-异吲哚-2-基]-1-萘甲腈(496Bii)

A.固体载体的制备(496A)

在氮气气氛中，将无水二氯甲烷(10mL)和吡啶(10mL)的混合物 加入装于合成聚合物管内的氯磺酰基聚苯乙烯(Argonaut，1.70mmol/g， 3.0g，5.1mmol)和化合物495Ai(3.78g，10.0mmol)中。混合物变为黄 色凝胶，剧烈摇荡(手腕作用式摇动器摇荡4h.)。所有溶剂均被树脂 吸附，外观上呈显干燥。用二氯甲烷(200mL)分次洗涤所述树脂，将 洗液合并，用200mL 1N HCl萃取。将所述HCl萃取液再用乙酸乙 酯(200mL)萃取。将有机部分合并，用水(50mL)和盐水(50mL)萃取， 有机部分经硫酸钠干燥，过滤并浓缩，得到2.1g结合在树脂上的化 合物496A(89％的装载量，基于回收的未结合的化合物495Ai计算)。 将该树脂依次用DMF(5×)、DMF∶水(3∶1，5×)、THF(3×)和二氯甲烷 (3×)(每次～30mL)洗涤。将树脂真空干燥1h，得到5.35g树脂。所 述树脂仍较湿，再次用醇处理。使用回收自上述步骤的未反应的化 合物495Ai重复上述装载过程。将回收的化合物495Ai(2.1g，5.6 mmol)、无水二氯甲烷(15mL)、吡啶(15mL)和所述树脂混合，然后 进行上述反应。将所得的树脂按如上所述进行洗涤，真空干燥过夜， 得到4.49g树脂(87％的装载量，基于回收的非结合的化合物495Ai 计算)。按如上所述从二氯甲烷：吡啶混合物中回收原料醇(2.04g白色 固体，这表明装载量为92％，基于回收的醇计算)。通常可用树脂重 量的增加量更准确地估算装载量。经计算，树脂的装载量为0.87(由 树脂重量的增加量确定)×1.08mmol/g(计算值100％装载量)＝ 0.94mmol/g。该树脂用于以下步骤中。

B.[3aR-(3aα，4β，7β，7aα)]-4-[4-[2-[(5-氯-2-吡啶基)氧基]乙基]八氢-7-甲 基-1，3-二氧代-4，7-环氧-2H-异吲哚-2-基]-1-萘甲腈(496Bi)和[3aR- (3aα，4β，7β，7aα)]-4-[4-[2-(5-氯-2-氧代-1(2H)-吡啶基)乙基]八氢-7-甲基- 1，3-二氧代-4，7-环氧-2H-异吲哚-2-基]-1-萘甲腈(496Bii)

以下描述的是可使用自动方法来制备式I化合物组的通用方法。 关于这种自动合成方法其它信息可参见实施例8。以化合物496Bi和 496Bii为例来描述这种方法。对于化合物496Bi和496Bii来说，4- 氯吡啶酚代表亲核试剂。本文中采用的是广义的“亲核试剂”含义， 并为本领域技术人员所熟知。采用装备有加热/冷却套的Bohdan微型 反应器，该反应器带有彼此层叠以获得相同效果作为反应管的0.5英 钱的管瓶。使用Bohdan树脂转移模板“10mg”和“20mg”(每次)， 称量树脂(化合物496A)并装入各个管瓶中。所传送的树脂的重量为 17-23mg(0.016-0.022mmol)。使用能传送～57-60mg(0.17-0.18mmol) 的Bohdan″20mg″板加碳酸铯。将亲核试剂称量加入到1英钱的管瓶 中，然后用Tecan八通道液体处理器用THF稀释至0.06M。通过微 量移液管，将所得的溶液(250μL，0.015mmol)手工加入到各装有树脂 的反应管瓶中，将所得的反应管瓶组置于Bohdan反应器中。当所述 亲核试剂为胺时，将～13μL二异丙基乙胺加入到所述胺的THF溶液 中。将各管瓶密封(采用衬Teflon的塞密封)，在轨道式摇荡(短的冲 程500rpm)下，将反应物在70℃下加热24h。将反应物冷却至25℃， 依次加入1mL庚烷和乙酸乙酯(1∶1)的混合物和0.5mL水。人工萃取 有机层，然后单独转移至装有硫酸镁(～150mg)的合成组板式试管 (synthesis block tube)中。将所述合成组板式试管组同时过滤，并将各 种滤液各自收集到微管中(96孔板)。再次将水层用1mL庚烷和乙酸 乙酯的混合物(1∶1)萃取，如上所述过滤有机层，并如上所述分别收 集滤液至各已有的微管中。

将由上述方法制得的化合物组使用以下自动方法进行分析。将 上述各反应物(滤液)各取120μL等量分配到两个分析用96深孔板中。 真空浓缩溶剂，再次将各板用甲醇(500μL)稀释。将一个板进行LCMS 分析(Phenomenex ODS柱，4.6×50mm，4mL/min，用0％A至100％B 梯度洗脱(A：90％水，10％MeOH，0.1％TFA；B：A：90％MeOH，10％水， 0.1％TFA)，另一个板经流动NMR(flow NMR)分析(Varian Inova-500 MHz，MeOH，WET溶剂抑制脉冲顺序，128次扫描，60μL流式细胞探 针)。提交的标准为：存在正确的分子离子，HPLC/NMR纯度＞70％。 将不符合所要求标准的化合物经反相制备型HPLC纯化(Shimadzu UP-ODS柱，20×50mm，20mL/min，用6分钟内40％B至100％B的 梯度洗脱液洗脱，保持2min(A：90％水，10％MeOH，0.1％TFA；B：A： 90％MeOH，10％水，0.1％TFA)。经HPLC纯化得到3.4mg(21％)化 合物496Bi(为玻璃状固体)和6.8mg(41％)化合物496Bii(为玻璃状固 体)。化合物496Bi：HPLC：96％，于3.47min和3.62min(阻转异构体，保 留时间)(Phenominex ODS柱，4.6×50mm，4mL/min，用0％A至100％ B梯度洗脱(A：90％水，10％MeOH，0.1％TFA；B：A：90％MeOH，10％ 水，0.1％TFA)，于220nm检测)。MS(ES)：m/z 487.94[M+H]+。化合物 496Bii：HPLC：96％，于3.00min和3.12min(阻转异构体，保留时 间)(Phenominex ODS柱，4.6×50mm，4mL/min，用0％A至100％B 梯度洗脱(A：90％水，10％MeOH，0.1％TFA；B：A：90％MeOH，10％ 水，0.1％TFA)，于220nm检测)。MS(ES)：m/z 488.12[M+H]+。采用 本方法制备的其它化合物在表17中阐述。

                                       实施例497

(3aα，4β，5β，7β，7aα)-六氢-4，7-二甲基-2-(7-甲基-6-苯并噻唑基)-4，7-环氧 -1H-异吲哚-1.3(2H)-二酮(497B)

A.6-氨基-7-甲基苯并噻唑(497A)

按照Bartoli等，Synlett 270(1976)描述的通用方法，由6-硝基苯 并噻唑制备7-甲基-6-亚硝基苯并噻唑。70℃下，向7-甲基-6-亚硝基 苯并噻唑(889mg，5.00mmol)的AcOH(40mL)溶液中一次性加入铁粉 (325目，559mg，10.0mmol)。将所得的深色反应混合物搅拌15min， 随后将其冷却，然后真空浓缩至剩下剩余物，将所述剩余物在1N HCl(50mL)和二氯甲烷(50mL)间分配。分离各层，将有机层用1N HCl(25mL)洗涤一次。将合并的水层通过加入固体碳酸氢钠碱化， 然后用乙酸乙酯萃取两次。将有机相合并，用硫酸镁干燥，真空浓 缩，得到534mg(65％)化合物497A，为浅棕色固体。HPLC：96％， 于0.55min(保留时间)(YMC S5 ODS柱，4.6×50mm Ballistic，在4分 钟内用含0.2％磷酸的10-90％甲醇水溶液洗脱，4mL/min，于220nm 检测)。MS(ES)：m/z 165.0[M+H]+。

B.(3aα，4β，5β，7β，7aα)-六氢-4，7-二甲基-2-(7-甲基-6-苯并噻唑基)-4，7-环 氧-1H-异吲哚-1，3(2H)-二酮(497B)

将6-氨基-7-甲基苯并噻唑(29mg，0.18mmol)、硫酸镁(54mg，0.45 mmol)、三乙胺(125μL，0.897mmol)和化合物20A(52mg，0.26mmol) 溶于0.18mL的DME中，并置于密封试管内。将所述密封试管在135 ℃下加热14h。将冷却的反应混合物通过Celite短滤柱过滤，用EtOAc 洗脱，真空除去溶剂。剩余物经反相制备型HPLC纯化(YMC S5 ODS 柱，20×100mm，在10分钟内用含0.1％TFA的30-100％甲醇水溶液 洗脱，20mL/min，于220nm检测)。浓缩需要的洗脱部分，得到剩余 物，使其在二氯甲烷(10mL)和饱和碳酸氢钠溶液(10mL)间分配。将 水层用二氯甲烷萃取一次，将合并的有机相经硫酸钠干燥，真空浓 缩，得到42mg(68％)化合物497B，为黄褐色固体。HPLC：2.36min 和2.55min(阻转异构体，保留时间)(YMC S5 ODS柱，4.6×50mm，在 4分钟内用含0.2％磷酸的10-90％甲醇水溶液洗脱，4mL/min，于 220nm检测)。MS(ES)：m/z 343.3[M+H]+。

                                      实施例498

(3aα，4β，5β，7β，7aα)-5-[八氢-5-羟基-7-(2-羟乙基)-4-甲基-1，3-二氧代- 4，7-环氧-2H-异吲哚-2-基]-8-喹啉甲腈(498i)和(3aα，4β，5β，7β，7aα)-5-[八 氢-5-羟基-4-(2-羟乙基)-7-甲基-1，3-二氧代-4，7-环氧-2H-异吲哚-2-基]- 8-喹啉甲腈(498ii)

将化合物464E(0.500g，1.02mmol)溶解在THF(5.00mL)中，冷 却至0℃。随后缓慢加入BH3·DMS(0.193mL，2.04mmol)，接着温热 至25℃。1小时后，将反应物冷却至0℃，加入pH为7的磷酸盐缓 冲液(15.0mL)，反应体系释放出气体。随后加入乙醇(7.0mL)和过氧 化氢(30％，1.5mL)，将反应物在2小时内升温至25℃。3h后，将混 合物用二氯甲烷萃取(3×50mL)。将合并的有机层用盐水洗涤一次， 经无水硫酸钠干燥。后处理后，所得产物与硼络合。所有裂开该络 合物以得到游离产物的尝试均不成功。所述粗制物质未经进一步纯 化直接用于下一步骤中。

室温下，将所述粗制的反应混合物溶解在2％浓HCl/MeOH(5.0 mL)中。1小时后，真空除去挥发物，将所得的剩余物溶于二氯甲烷 中，用饱和碳酸氢钠水溶液洗涤一次，经无水硫酸钠干燥。真空除 去溶剂，得到粗制的化合物498i和498ii的混合物，为黄色固体。将 所述化合物的混合物通过反相制备型HPLC分离，得到：化合物498i， 17.994min(保留时间)，和化合物498ii，19.767min(保留时间)(YMC S5 ODS柱，30×250mm，25mL/min，在35分钟内用含0.1％TFA的10- 90％甲醇水溶液洗脱，于220nm检测)。真空除去溶剂，得到0.012g(3％) 化合物498i，为白色固体；和0.009g(2％)化合物498ii，为白色固体。 化合物498i：HPLC：85％，于1.843min(保留时间)(YMC S5 ODS柱，4.6 ×50mm，在4分钟内用含0.2％磷酸的10-90％甲醇水溶液洗脱， 4mL/min，于220nm检测)。MS(ES)：m/z 394.21[M+H]+。化合物498ii： HPLC：98％，于1.650min(保留时间)(YMC S5 ODS柱，4.6×50mm，在 4分钟内用含0.2％磷酸的10-90％甲醇水溶液洗脱，4mL/min，于 220nm检测)。MS(ES)：m/z 394.21[M+H]+。

                                       实施例499

[3aR-(3aα，4β，5β，7β，7aα)]-4-[7-[2-[[(1，1-二甲基乙基)二甲基甲硅烷基] 氧基]乙基]-4-乙基八氢-5-羟基-1，3-二氧代-4，7-环氧-2H-异吲哚-2-基]- 1-萘甲腈(499i)和[3aS-(3aα，4β，5β，7β，7aα)]-4-[7-[2-[[(1，1-二甲基乙基)二 甲基甲硅烷基]氧基]乙基]-4-乙基八氢-5-羟基-1，3-二氧代-4，7-环氧- 2H-异吲哚-2-基]-1-萘甲腈(499ii)

将外消旋化合物434C通过正相制备型手性HPLC(使用Chiracel AD柱(5cm×50cm)，用8％乙醇的己烷溶液洗脱，50mL/min)分离 成为其单一的对映体，得到较快洗脱出的化合物499i(手性HPLC：6.74 min；CHIRALCEL AD 4.6×250mm柱；用10％乙醇的己烷溶液等 度洗脱，2mL/min)和较慢洗脱出的化合物499ii(手性HPLC：9.99 min；CHIRALCEL AD 4.6×250mm柱；用10％乙醇的己烷溶液等 度洗脱，2mL/min)。对于化合物499i或499ii：HPLC：100％，于3.96 min(保留时间)(YMC CombiSreen ODS柱，4.6×50mm，在4分钟内用 含0.2％磷酸的10-90％甲醇水溶液洗脱，4mL/min，于220nm检测)。 MS(ES)：m/z 521.25[M+H]+。没有确定化合物499i和499ii的绝对构 型。为便于命名起见，在本文中将化合物499i标记为″R″构型而将化 合物499ii标记为″S″构型。在本文中将衍生自化合物499i的对映异 构体纯产物标记为“R”构型，衍生自化合物499ii的对映异构体纯 产物标记为“S”构型。

                                      实施例500

[3aR-(3aα，4β，5β，7β，7aα)]-4-[4-乙基八氢-5-羟基-7-(2-羟乙基)-1，3-二氧 代-4，7-环氧-2H-异吲哚-2-基]-1-萘甲腈(500i)和[3aS- (3aα，4β，5β，7β，7aα)]-4-[4-乙基八氢-5-羟基-7-(2-羟乙基)-1，3-二氧代- 4，7-环氧-2H-异吲哚-2-基]-1-萘甲腈(500ii)

将化合物499i(24.0mg，0.0461mmol)溶解在2％浓HCl/乙醇(0.8 mL)中，将混合物在室温下搅拌20min。将冷的饱和碳酸氢钠加入至 所述混合物中，直至溶液的pH值为8，随后用EtOAc萃取。将有机 层合并，用盐水洗涤，经无水硫酸钠干燥。真空浓缩得到14.7mg(78％) 化合物500i，为白色固体，不要求将该产物进一步纯化。HPLC：95％， 于2.40min(保留时间)(YMC S5 ODS 4.6×50mm，在4分钟内用含 0.2％磷酸的10-90％甲醇水溶液梯度洗脱，于220nm检测)。

将化合物499ii(18.0mg，0.0346mmol)溶解在2％浓盐酸/乙醇(0.6 mL)中，将混合物在室温下搅拌20min。将冷的饱和碳酸氢钠加入至 混合物中，直至溶液的pH值为8，随后用EtOAc萃取。将有机层合 并，用盐水洗涤，经无水硫酸钠干燥。真空浓缩得到14.1mg(99％)化 合物500ii，为白色固体，不要求将该产物进一步纯化。HPLC：95％， 于2.40min(保留时间)(YMC S5 ODS 4.6×50mm，在4分钟内用含 0.2％磷酸的10-90％甲醇水溶液梯度洗脱，于220nm检测)。

                                     实施例501

[3aR-(3aα，4β，7β，7aα)]-4-[4-[2-[(5-氯-2-吡啶基)氧基]乙基]八氢-1，3-二 氧代-7-丙基-4，7-环氧-2H-异吲哚-2-基]-1-萘甲腈(501D)

A.2-(5-丙基-呋喃-2-基)-乙醇(501A)

在-78℃下，在10分钟内向2-丙基呋喃(3.00g，31.2mmol)的THF 溶液(31mL)中滴加n-BuLi(15.0mL，2.5M，37.4mmol)。将反应物温 热至室温，并搅拌3.5h。冷却至0℃后，加入环氧乙烷(2.33mL，46.8 mmol)，将反应物温热至室温并继续搅拌19h。随后将反应物冷却至 0℃，用饱和氯化铵溶液(20mL)猝灭，接着用乙醚萃取(2×50mL)。 将合并的有机层用盐水洗涤，经硫酸钠干燥，过滤并浓缩，得到4.38 g(91％)化合物501A，为浅橙色油状物。该物质未经进一步纯化直接 使用。HPLC：94％，于2.91min(保留时间)(YMC Combiscreen ODS-A 柱，4.6×50mm，在4分钟内用含0.2％磷酸的10-90％甲醇水溶液洗 脱，4mL/min，于220nm检测)。MS(ES)：m/z 137.13[M-H20+H]+。

B.(3aα，4β，7β，7aα)-4-[1，3，3a，4，7，7a-六氢-4-(2-羟乙基)-1，3-二氧代-7-丙 基-4，7-环氧-2H-异吲哚-2-基]-1-萘甲腈(501B)

将2-(5-丙基-呋喃-2-基)-乙醇(2.50g，16.2mmol)和4-(2，5-二氢- 2，5-二氧代-1H-1-基)-1-萘甲腈(4.02g，16.2mmol)在苯(16mL)中的悬 浮液温热至60℃。3h后，将反应物真空浓缩，得到棕色泡沫体。加 入甲醇(17mL)，将混合物超声处理，得到带有棕色的上清液的细的 米色固体物。过滤得到1.75g(27％)化合物501B，为灰白色固体。该 物质未经进一步纯化直接使用。HPLC：85％，于3.02min和3.14min(阻 转异构体，保留时间)(YMC Combiscreen ODS-A柱，4.6×50mm，在4 分钟内用含0.2％磷酸的10-90％甲醇水溶液洗脱，4mL/min，于220nm 检测)。MS(ES)：m/z 403.31[M+H]+。

C.[3aR-(3aα，4β，7β，7aα)]-4-[八氢-4-(2-羟乙基)-1，3-二氧代-7-丙基-4，7- 环氧-2H-异吲哚-2-基]-1-萘甲腈(501Ci)和[3aS-(3aα，4β，7β，7aα)]-4-[八 氢-4-(2-羟乙基)-1，3-二氧代-7-丙基-4，7-环氧-2H-异吲哚-2-基]-1-萘甲 腈(501Cii)

向往化合物501B(1.60g，3.97mmol)的乙酸乙酯(79.5mL)悬浮液 中加入10％Pd/C(0.422g，0.397mmol)。将氢气鼓泡通过反应物中数 分钟，将反应物在氢气气氛中搅拌3h。反应物经Celite过滤，将滤 液真空浓缩，得到白色固体(1.74g)。将粗制的物质溶解在少量二氯 甲烷中，然后装入120g硅胶ISCO柱中。用0至100％乙酸乙酯/ 己烷梯度液洗脱，得到1.06g(66％)化合物501Ci和501Cii的外消旋 混合物，为白色泡沫体。将500mg的一部分所述外消旋混合物通过 正相制备型手性HPLC分离(Chiralpak AD；5×50cm柱；用13％ MeOH/乙醇(1∶1)的庚烷溶液等度洗脱，50mL/min，于220nm检测)， 得到245mg较快洗脱出的对映异构体化合物501Ci和245mg较慢 洗脱出的对映异构体化合物501Cii，两者均为白色泡沫体。化合物 501Ci：正相制备型手性HPLC：28.0min(保留时间)，＞95％ ee(Chiralpak AD 4.6×250mm柱，用12％MeOH/乙醇(1∶1)的庚烷溶 液洗脱，1.0mL/min)。HPLC：99％，于3.04和3.17min(阻转异构体，保 留时间)(YMC Combiscreen ODS-A柱，4.6×50mm，在4分钟内用含 0.2％磷酸的10-90％甲醇水溶液洗脱，4mL/min，于220nm检测)。

HRMS m/z对C24H23N2O4[M-H]-的计算值：403.1658。实测值： 403.1644。化合物501Cii：手性HPLC：65.7min(保留时间)，＞95％ ee(手性HPLC：65.7min；＞95％ee；Chiralpak AD 4.6×250mm柱； 用12％MeOH/乙醇(1∶1)的庚烷溶液洗脱，1.0mL/min)。HPLC：98％， 于3.02和3.15min(阻转异构体，保留时间)(YMC CombiscreenODS-A 柱，4.6×50mm，在4分钟内用含0.2％磷酸的10-90％甲醇水溶液洗 脱，4mL/min，于220nm检测)。没有确定化合物501Ci和501Cii的 绝对构型。为便于命名起见，在本文中将化合物501Ci标记为″R″构 型而将化合物501Cii标记为″S″构型。在本文中将衍生自化合物501Ci 的对映异构体纯产物标记为“R”构型，衍生自化合物501Cii的对映 异构体纯产物标记为“S”构型。

D.[3aR-(3aα，4β，7β，7aα)]-4-[4-[2-[(5-氯-2-吡啶基)氧基]乙基]八氢-1，3- 二氧代-7-丙基-4，7-环氧-2H-异吲哚-2-基]-1-萘甲腈(501D)

向DBAD(17.1mg，0.0741mmol)的THF溶液(0.5mL)溶液中加入 PPh3(19.4mg，0.0741mmol)。10min后，加入5-氯-2-吡啶酚(9.6mg， 0.074mmol)。5min后，加入化合物501Ci(20.0mg，0.0494mmol)。1 小时后，加入DBAD(17.1mg，0.0741mmol)、PPh3(19.4mg，0.0741 mmol)和5-氯-2-吡啶酚(9.6mg，0.074mmol)。3h后，真空除去溶剂， 得到黄色剩余物。反相制备型HPLC(YMC ODS柱，20×100mm，在 30分钟内用含0.1％TFA的40-100％甲醇水溶液洗脱，25mL/min，于 220nm处检测)，得到9.5mg(37％)化合物501D的三氟乙酸盐，为透 明、无色剩余物。HPLC：99％，于7.88min和8.11min(阻转异构体，保 留时间)(Zorbax SB C18 4.6×75mm，在8分钟内用含0.2％磷酸的10- 90％甲醇水溶液洗脱，2.5mL/min，于220nm检测)。HRMS m/z对 C29H27N3O4Cl[M+H]+的计算值：516.1690。实测值516.1676。

                     实施例502

[3aR-(3aα，4β，7β，7aα)]-4-[4-丁基-7-[2-[(5-氯-2-吡啶基)氧基]乙基]八氢- 1，3-二氧代-4，7-环氧-2H-异吲哚-2-基]-1-萘甲腈(502D)

A.2-(5-丁基-呋喃-2-基)-乙醇(502A)

在-78℃下，在10分钟内向2-丁基呋喃(3.00g，24.2mmol)的THF 溶液(24mL)中滴加n-BuLi(11.6mL，2.5M，29.0mmol)。将反应物温热 至室温并搅拌3.5h。冷却至0℃后，加入环氧乙烷(1.81ml，36.2 mmol)，将反应物温热至室温并继续搅拌19h。随后将反应物冷却至 0℃，用饱和氯化铵溶液(20mL)猝灭，接着用乙醚(2×50mL)萃取。 将合并的有机层用盐水洗涤，经硫酸钠干燥，过滤并真空浓缩，得 到4.07g(100％)化合物502A，为浅橙色油状物。该物质未经进一步 纯化直接使用。HPLC：96％，于3.23min(保留时间)(YMC Combiscreen ODS-A柱，4.6×50mm，在4分钟内用含0.2％磷酸的10-90％甲醇水 溶液洗脱，4mL/min，于220nm处检测)。MS(ES)：m/z 169.22[M+H]+。

B.(3aα，4β，7β，7aα)-4-[4-丁基-1，3，3a，4，7，7a-六氢-7-(2-羟乙基)-1，3-二氧 代-4，7-环氧-2H-异吲哚-2-基]-1-萘甲腈(502B)

将化合物502A(2.50g，14.9mmol)和4-(2，5-二氢-2，5-二氧代-1H- 1-基)-1-萘甲腈(3.70g，14.9mmol)在苯(15mL)中的悬浮液温热至60 ℃。3h后，将反应物真空浓缩，得到棕色泡沫体。加入甲醇(17mL)， 将混合物超声处理，得到带有橙棕色的上层液的细的米色固体物。 过滤沉淀物，得到2.64g(44％)化合物502B，为灰白色固体。该物质 未经进一步纯化直接使用。HPLC：95％，于3.25min和3.35min(阻 转异构体，保留时间)(YMC Combiscreen ODS-A柱，4.6×50mm，在4 分钟内用含0.2％磷酸的10-90％甲醇水溶液洗脱，4mL/min，于220nm 检测)。MS(ES)：m/z 417.29[M+H]+。

C.[3aR-(3aα，4β，7β，7aα)]-4-[4-丁基八氢-7-(2-羟乙基)-1，3-二氧代-4，7- 环氧-2H-异吲哚-2-基]-1-萘甲腈(502Ci)和[3aS-(3aα，4β，7β，7aα)]-4-[4-丁 基八氢-7-(2-羟乙基)-1，3-二氧代-4，7-环氧-2H-异吲哚-2-基]-1-萘甲腈 (502Cii)

将往化合物502C(1.47g，3.52mmol)在乙酸乙酯(70mL)中的悬浮 液内加入10％Pd/C(0.375g，0.352mmol)。将氢气鼓泡通过反应物数 分钟，将反应物在氢气气氛中搅拌3h。反应物经Celite_过滤，用乙 酸乙酯漂洗(2×70mL)。将滤液真空浓缩，得到白色泡沫体(1.50g)。 将粗制的物质溶解在少量二氯甲烷中，然后装入120g硅胶ISCO柱 中。用0至100％乙酸乙酯/己烷梯度淮洗脱，得到1.05g(74％)化合 物502Ci和502Cii的外消旋混合物，为白色泡沫体。将438mg的一 部分所述化合物502Ci和502ii的外消旋混合物通过正相制备型手性 HPLC分离(Chiralpak AD；5×50cm柱；用12％MeOH/乙醇(1∶1)的 庚烷溶液等度洗脱，50mL/min，于220nm检测)，得到178mg较快 洗脱出的对映异构体化合物502Ci，为白色泡沫体；和132mg较慢 洗脱出的对映异构体化合物502Cii，为透明粘稠的油状物。化合物 502Ci：手性HPLC：25.5min(保留时间)，＞95％ee(手性HPLC： Chiralpak AD 4.6×250mm柱，用12％MeOH/乙醇(1∶1)的庚烷溶液 洗脱，1.0mL/min)和HPLC：99％，于6.50min和6.71min(阻转异构 体，保留时间)(YMC Combiscreen ODS-A柱，4.6×50mm，在4分钟内 用含0.2％磷酸的10-90％甲醇水溶液洗脱，4mL/min，于220nm检测)。 HRMS m/z对C25H25N2O4[M-H]-的计算值：417.1814。实测值417.1800。 化合物502Cii：HPLC：55.6min(保留时间)，＞95％ee(手性HPLC： Chiralpak AD 4.6×250mm柱；用12％MeOH/乙醇(1∶1)的庚烷溶液 洗脱，1.0mL/min)。HPLC：99％，于3.26min和3.38min(阻转异构 体，保留时间)(YMC Combiscreen ODS-A柱，4.6×50mm，在4分钟内 用含0.2％磷酸的10-90％甲醇水溶液洗脱，4mL/min，于220nm检 测)。没有确定化合物502Ci和502Cii的绝对构型。为便于命名起见， 在本文中将化合物502Ci标记为″R″构型，将化合物502Cii标记为″S″ 构型。在本文中将衍生自化合物502Ci的对映异构体纯产物标记为 “R”构型，衍生自化合物502Cii的对映异构体纯产物标记为“S” 构型。

D.[3aR-(3aα，4β，7β，7aα)]-4-[4-丁基-7-[2-[(5-氯-2-吡啶基)氧基]乙基]八 氢-1，3-二氧代-4，7-环氧-2H-异吲哚-2-基]-1-萘甲腈(502D)

向化合物502Ci(20.0mg，0.0478mmol)、PPh3(37.6mg，0.143mmol) 和5-氯-2-吡啶酚(18.6mg，0.143mmol)的THF溶液(0.5mL)中加入 DBAD(33.0mg，0.143mmol)。将所得溶液在室温下搅拌15.5h。真空 除去溶剂，得到黄色剩余物。制备型HPLC(Shimadzu VP ODS柱，20× 250mm，在30分钟内用含0.1％TFA的40-100％甲醇水溶液洗脱，接 着在25分钟内用100％甲醇洗脱，25mL/min，于220nm处检测)，得 到9.4mg(37％)化合物502D的三氟乙酸盐，为透明无色剩余物。HPLC： 99％，于8.14min和8.36min(阻转异构体，保留时间)(Zorbax SB C18 柱，4.6×75mm，在8分钟内用含0.2％磷酸的10-90％甲醇水溶液洗 脱，2.5mL/min，于220nm检测)。HRMS m/z对C30H29N3O4Cl[M+H]+ 的计算值：530.1847。实测值530.1855。

                                     实施例503

(3aα，4β，7β，7aα)-六氢-4，7-二甲基-2-[4-(5-噁唑基)-1-萘基]-4，7-环氧-1H- 异吲哚-1，3(2H)-二酮(503E)

A.(4-氰基-萘-1-基)-氨基甲酸叔丁酯(503A)

在室温下，在10分钟内向4-氨基-1-萘甲腈(9.67g，57.5mmol)的 THF溶液(100mL)内加入六甲基二甲硅烷基氨基化钠(1.0M的THF 溶液，133mL，133mmol)。搅拌15min后，加入二碳酸二叔丁酯(15.1g， 69.0mmol)的THF溶液(20mL)。室温下搅拌18h后，将反应混合物 在乙醚(400mL)和饱和硫酸氢钾溶液(200mL)间分配。将有机层用饱 和硫酸氢钾溶液(200mL)，饱和碳酸氢钠溶液(200mL)和盐水(100mL) 洗涤。经无水硫酸镁干燥，用碳脱色处理，然后真空浓缩，得到剩 余物，该剩余物经硅胶快速色谱部分纯化，用20％乙酸乙酯的己烷 溶液洗脱。将所述部分纯化的物质从乙酸乙酯/己烷中结晶，得到5.26 g化合物503A，为无色晶体。将母液浓缩，从乙酸乙酯/己烷中结 晶，又得到2.8g化合物503A，总共得到8.06g(52％)化合物503A。 1H NMR(400MHz，DMSO-d6)：δ9.81(s，1H)，8.36(d，1H，J＝8.5Hz)， 8.11(m，2H)，7.92(d，1H，J＝8Hz)，7.78(m，1H)，7.67(m，1H)，1.53(s， 9H)。

B.(4-甲酰基-萘-1-基)-氨基甲酸叔丁酯(503B)

将化合物503A(4.02g，15.0mmol)、阮内镍(1.5g)、次磷酸钠(9.00 g，86.5mmol)、吡啶(50mL)、水(25mL)和乙酸(25mL)的混合物在45 ℃下搅拌5h。将混合物经Celite过滤，将滤饼用温热的乙醇(100mL) 漂洗。向滤液中加入水(600mL)后，使其静置1h，将所得的沉淀过 滤，用水清洗。真空干燥，得到3.38g白色固体，其为化合物503B 和503A的3∶1的混合物。所述物质未经进一步纯化直接在下一步骤 中使用。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)：δ10.28(s，1H)，9.77(s，1H)， 9.27(d，1H，J＝8.5Hz)，8.31(m，1H)，8.13(m，1H)，8.00(d，1H，J＝8Hz)， 7.80(m，1H)，7.70(m，1H)，1.54(s，9H)。

C.(4-噁唑-5-基-萘-1-基)-氨基甲酸叔丁基酯(503C)

将上述化合物503A和503B(3.37g，10.0mmol；校正化合物503A 的存在)、甲苯-磺酰基异氰化物(2.15g，11.0mmol)和碳酸钾(1.66g， 12.0mmol)在50mL甲醇中的混合物回流4h。将反应混合物在水 (200mL)和氯仿(200mL)间分配。将水层用氯仿(100mL)萃取后，将合 并的有机层经硫酸镁干燥，真空浓缩。粗制的剩余物经硅胶快速层 析纯化，用10-40％乙酸乙酯的己烷溶液梯度洗脱，得到1.35g(44％) 化合物503C，为白色固体物。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)：δ9.45(s， 1H)，8.57(s，1H)，8.20(m，2H)，7.76(m，2H)，7.64(s，1H)，7.62(m，2H)， 1.51(s，9H)。

D.4-噁唑-5-基-萘-1-胺(503D)

将化合物503C(1.34g，4.3mmol)溶解在三氟乙酸(10mL)中，将 所得的混合物在室温下静置1小时。真空除去挥发物后，将剩余物 从乙酸乙酯/庚烷(2×50mL)中共蒸发，以除去痕量的三氟乙酸。将 剩余物在乙酸乙酯(100mL)和1N NaOH(75mL)间分配后，将有机层 用盐水洗涤(50mL)，经硫酸镁干燥，真空浓缩得到900mg(99％)化 合物503D，为黄色晶体。HPLC条件：95％，于0.92min(保留时 间)(Phenomenex 5微米ODS柱，4.6×30mm，在2分钟内用含 0.1％TFA的10-90％甲醇水溶液洗脱，于254nm检测)。MS(ES)：m/z 211.22[M+H]+。

E.(3aα，4β，7β，7aα)-六氢-4，7-二甲基-2-[4-(5-噁唑基)-1-萘基]-4，7-环氧- 1H-异吲哚-1，3(2H)-二酮(503E)

将化合物503D(42mg，0.020mmol)和20A(78mg，0.40mmol)在 乙酸(1.0mL)中的混合物回流18h。将反应混合物冷却至室温，真空 浓缩，然后使剩余物在乙酸乙酯(30mL)和饱和碳酸氢钠溶液(30mL) 间分配。分离出有机层，经硫酸镁干燥，真空浓缩。经2.5×15cm硅 胶柱快速色谱纯化，使用40-60％乙酸乙酯的己烷溶液梯度洗脱，得 到28mg(37％)化合物503E，为白色粉末。HPLC：99％，于1.46min 和1.36min(阻转异构体，保留时间)(Phenomenex 5微米ODS 4.6×30 mm，在2分钟内用含0.1％TFA的10-90％甲醇水溶液洗脱，于254nm 检测)。MS(ES)：m/z 389.10[M+H]+。

                                       实施例504

[3aS-(3aα，4β，5β，7β，7aα)]-4-[7-[2-(4-氰基苯氧基)乙基]-4-乙基八氢-5-甲 氧基-1，3-二氧代-4，7-环氧-2H-异吲哚-2-基]-1-萘甲腈(504C)

A.[3aS-(3aα，4β，5β，7β，7aα)]-4-[7-[2-[[(1，1-二甲基乙基)二甲基甲硅烷基] 氧基]乙基]-4-乙基八氢-5-甲氧基-1，3-二氧代-4，7-环氧-2H-异吲哚-2- 基]-1-萘甲腈(504A)

向化合物499ii(0.235g，0.451mmol)的CH3CN(6mL)溶液中加入 氧化银(0.523g，2.26mmol)和碘代乙烷(0.56mL，9.0mmol，在加入前 在碳酸钾存在下搅拌)。将所得悬浮液置于经预热的油浴(80℃)中。24 h后，将反应物冷却至室温，用CH3CN(20mL)稀释，通过Celite柱过 滤，真空浓缩，得到棕色胶状物。该物质经硅胶快速色谱纯化，用30％ 乙酸乙酯/己烷洗脱，得到0.156g(65％)化合物504A，为白色固体。 HPLC：95％，于4.17min和4.25min(阻转异构体，保留时间)(YMC CombiSreen ODS柱，4.6×50mm，在4分钟内用含0.2％磷酸的10-90％ 甲醇水溶液洗脱，4mL/min，于220nm检测)。MS(ES)：m/z 521.25[M+H]+。

B.(3aα，4β，5β，7β，7aα)-4-[4-乙基八氢-7-(2-羟乙基)-5-甲氧基-1，3-二氧 代-4，7-环氧-2H-异吲哚-2-基]-1-萘甲腈(504B)

向化合物504A(0.156g，0.292mmol)的乙醇(6mL)溶液中加入1N HCl(0.44mL，0.44mmol)。20min后，将反应物冷却至0℃，然后用 饱和碳酸氢钠水溶液(2mL)猝灭，得到白色悬浮液。加入水，直至固 体溶解。将混合物用乙酸乙酯(3×30mL)萃取。将合并的有机层用盐 水洗涤(20mL)，经硫酸钠干燥，过滤并真空浓缩，得到白色固体。 经硅胶快速色谱纯化，用5％MeOH/二氯甲烷洗脱，得到120mg(99％) 化合物504A，为白色固体。HPLC：98％，于5.17和5.44min(阻转异 构体，保留时间)(YMC CombiSreen ODS柱，4.6×50mm，在8分钟内 用含0.2％磷酸的10-90％甲醇水溶液洗脱，2.5mL/min，于220nm检 测)。HRMS m/z对C24H24N2O5[M-H]+的计算值：419.1607。实测值 419.1611。

C.[3aS-(3aα，4β，5β，7β，7aα)]-4-[7-[2-(4-氰基苯氧基)乙基]-4-乙基八氢- 5-甲氧基-1，3-二氧代-4，7-环氧-2H-异吲哚-2-基]-1-萘甲腈(504C)

向化合物504B(20mg，0.048mmol)的无水THF溶液(0.5mL)中加 入PPh3(37.0mg，0.143mmol)、对氰基苯酚(17.0mg，0.143mmol)和 DBAD(32.0mg，0.143mmol)。30min后，浓缩溶液，得到棕色胶状物。 该胶状物经反相制备型HPLC纯化(YMC S5 ODS柱，20×250mm，在 35分钟内用含0.2％磷酸的10-90％甲醇水溶液洗脱，20mL/min，于 220nm检测)，得到16mg(64％)化合物504C，为透明无色油状物。HPLC 98％，于6.84和7.10min(阻转异构体，保留时间)(Zorbax SB C18柱， 4.6×75mm，在8分钟内用含0.2％磷酸的10-90％甲醇水溶液洗脱，2.5 mL/min，于220nm检测)。HRMS m/z对C31H27N3O5[M+NH4]+的计 算值：539.2295。实测值539.2302。

                                        实施例505

(3aα，4β，5β，7β，7aα)-4-[7-[2-[[(1，1-二甲基乙基)二甲基甲硅烷基]氧基]乙 基]-4-乙基八氢-5-羟基-1，3-二氧代-4，7-环氧-2H-异吲哚-2-基]-1-萘甲 腈(505Bi)和(3aα，4β，5β，7β，7aα)-4-[4-[2-[[(1，1-二甲基乙基)二甲基甲硅 烷基]氧基]乙基]-7-乙基八氢-5-羟基-1，3-二氧代-4，7-环氧-2H-异吲哚- 2-基]-1-萘甲腈(505Bii)

A.(1aα，2β，2aα，5aα，6β，7aα)-4-[2-[2-[[(1，1-二甲基乙基)二甲基甲硅烷基] 氧基]乙基]-6-乙基八氢-3，5-二氧代-2，6-环氧-4H-环氧乙烯并[f]异吲哚 -4-基]-1-萘甲腈(505)

向化合物434B(1.01g，2.01mmol)的二氯甲烷(20mL)溶液中加入 60％m-CPBA(0.863g，3.00mmol)。48h后，将反应物用二氯甲烷(50mL) 稀释，用饱和亚硫酸钠(20mL)和饱和碳酸氢钠(20mL)洗涤。将合并 的水层用二氯甲烷(20mL)萃取。将合并的有机层用盐水(30mL)洗涤， 经硫酸钠干燥，过滤并真空浓缩，得到1.01g(97％)化合物505A，为 黄色固体。该物质无需一步纯化直接使用。HPLC：95％，于4.22min(保 留时间)(Phenominex Luna C18柱，4.6×50mm，在4分钟内用含0.2％ 磷酸的10-90％甲醇水溶液洗脱，4mL/min，于220nm检测)。HRMS m/z 对C29H34N2O5Si[M-H]+的计算值：517.2159。实测值517.2163。

B.(3aα，4β，5β，7β，7aα)-4-[7-[2-[[(1，1-二甲基乙基)二甲基甲硅烷基]氧基] 乙基]-4-乙基八氢-5-羟基-1，3-二氧代-4，7-环氧-2H-异吲哚-2-基]-1-萘 甲腈(505Bi)和(3aα，4β，5β，7β，7aα)-4-[4-[2-[[(1，1-二甲基乙基)二甲基甲 硅烷基]氧基]乙基]-7-乙基八氢-5-羟基-1，3-二氧代-4，7-环氧-2H-异吲 哚-2-基]-1-萘甲腈(505Bii)

向二氯化环戊二烯钛(0.500g，2.00mmol)在无水THF(4.0mL)中 的红色溶液内加入锌粉(0.392g，6.00mmol)。将所得悬浮液在氩气气 氛中剧烈搅拌1小时，得到绿色悬浮液。通过0.45μm微孔滤器除去 过量的锌粉，得到氯化二环戊二烯基钛(III)的绿色溶液。往化合物 505A(0.207g，0.399mmol)和1，4-环己二烯(0.380mL，4.02mmol)的无 水THF溶液(1mL)中滴加0.5M上述氯化二环戊二烯基钛(III)溶液(0.9 mL，0.45mmol)。1小时后，加入另外等份的0.5M氯化二环戊二烯 基钛(III)溶液(0.9mL，0.45mmol)，继续搅拌1h。将反应物用水(2mL) 猝灭，然后用乙酸乙酯(10mL)稀释。分离各层，将有机层用盐水洗 涤(5mL)，经硫酸钠干燥，过滤并真空浓缩，得到黄色胶状物。将粗 制的物质溶解在少量二氯甲烷中，然后装于35g硅胶ISCO柱上， 用0-80％乙酸乙酯的己烷溶液梯度洗脱，得到0.043g(21％)化合物 505Bi(白色固体)和0.023g(11％)化合物505Bii(白色固体)。化合物 505Bi：HPLC：3.92min(保留时间)(YMC CombiSreen ODS-A柱，4.6× 50mm，在4分钟内用含0.2％磷酸的10-90％甲醇水溶液洗脱，4 mL/min，于220nm检测)。MS(ES)：m/z 521.36[M+H]+。化合物505Bii： HPLC：91％，于3.97min(保留时间)(YMC CombiScreen ODS-A柱，4.6 ×50mm，在4分钟内用含0.2％磷酸的10-90％甲醇水溶液洗脱， 4mL/min，于220nm检测)。MS(ES)：m/z 521.34[M+H]+。

                                        实施例506

4-[[3aS-(3aα，4β，5β，7β，7aα)]-5-(α-D-吡喃葡萄糖基氧基)八氢-4，7-二甲 基-1.3-二氧代-4，7-环氧-2H-异吲哚-2-基]-2-(三氟甲基)苄腈(506B)

A.[3aS-(3aα，4β，5β，7β，7aα)]-4-[八氢-4，7-二甲基-1，3-二氧代-5-[[2，3，4，6- 四-O-(苯基甲基)-α-D-吡喃葡萄糖基]氧基]-4，7-环氧-2H-异吲哚-2-基]- 2-(三氟甲基)苄腈(506A)

按照Spohr等，Can.J.Chem.71，1928-42(1993)描述的方法制备 2，3，4，6-四-O-苄基-α-D-吡喃葡萄糖基溴。室温、氩气气氛中，将草酰 溴(0.48mL，0.95mmol，2M的二氯甲烷溶液)滴加至2，3，4，6-四-O-苄基 -D-吡喃葡萄糖(412mg，0.763mmol)在二氯甲烷(5mL)和 DMF(0.28mL)中的溶液内。将反应混合物搅拌20min，倒入冰和水 (1∶1，30mL)的混合物中，用二氯甲烷(30mL)稀释。分离各层，将有 机层用冷水(2×30mL)和盐水(1×30mL)洗涤，然后经硫酸镁干燥。 真空浓缩得到所需溴化物，为棕色油状物。将该油状物溶于二氯甲 烷(2mL)和DMF(1mL)中。将化合物471Dii(100mg，0.763mmol)、 溴化四丁铵(111mg，0.526mmol)和4_分子筛(600mg)加入到该溶液 中，将所得反应物在氩气气氛中搅拌4天。将反应物用MeOH(2mL) 猝灭，搅拌0.5h，用二氯甲烷(10mL)稀释，随后通过中孔径烧结漏 斗过滤，用二氯甲烷(5mL)漂洗。真空除去溶剂，将所得的剩余物溶 于二氯甲烷(25mL)中。将有机溶液用饱和碳酸氢钠水溶液(1×20mL) 和水(1×20mL)洗涤，经硫酸镁干燥。经硅胶快速层析纯化，用50％ EtOAc/己烷洗脱，得到79mg(33％)的506A，为白色固体。HPLC： 99％，于4.56min(保留时间)(YMC S5 ODS柱，4.6×50mm，在4分钟 内用含0.2％磷酸的10-90％甲醇水溶液洗脱，4mL/min，于220nm检 测)。MS(ES)：m/z 902[M+H]+。

B.4-[[3aS-(3aα，4β，5β，7β，7aα)]-5-(α-D-吡喃葡萄糖基氧基)八氢-4，7-二 甲基-1，3-二氧代-4，7-环氧-2H-异吲哚-2-基]-2-(三氟甲基)苄腈(506B)

将氢氧化钯(62mg，20％重量装载于碳上的Pd(干重)，湿重)加到 506A(65mg，0.07mmol)的EtOAc溶液(2mL)中，将混合物在氢气气 氛(通过气囊引入)中搅拌。5h后，HPLC证实反应完全，因此将混 合物通过中孔径烧结漏斗过滤，用MeOH(2mL)漂洗，然后真空浓缩。 将所得的剩余物溶解在MeOH(2mL)中，通过采用0.45μMPTFE膜的 Gelman Acrodisc CR 13mm注射器滤器过滤。浓缩得到38mg 506B， 为白色固体。HPLC：90％，于2.16min(保留时间)(YMC S5 ODS柱，4.6 ×50mm，在4分钟内用含0.2％磷酸的10-90％甲醇水溶液洗脱，4 mL/min，于220nm检测)。MS(ES)：m/z 543.20[M+H]+。将10mg的部 分产物在MeOH∶水中重结晶，得到适合于X-射线晶体衍射研究的晶 体，然后参照所述D-葡糖苷附属物的已知的确定的立体化学构型， 确定化合物506B的准确立体化学构型。

                                          实施例507

(3aα，4β，7β，7aα)-4-(1，3，3a，4，7，7a-六氢-4，7-二甲基-1，3-二氧代-4，7-环氧- 2H-异吲哚-2-基)-2-(三氟甲基)苄腈(507)

向25g(94.2mmol)化合物471A中加入纯的2，5-二甲基呋喃(30 mL，280mmol)，在机械搅拌下，将所得的淤浆在60℃下加热1至3h。 将所得的淤浆冷却至0-5℃，用冷甲苯(25mL，0-10℃)稀释。将该冷 淤浆真空过滤。将烧瓶和滤饼用冷甲苯(2×25mL)洗涤，将滤饼用民 用真空器脱水。将沉淀物真空干燥，得到31.3g(91.6％)化合物507， 为黄褐色固体。HPLC：99.6％，19.43min(保留时间)(柱：ZorbaxTM SB- C18，4.6×15cm；流动相：40％CH3CN/60％H2Ow/0.1％v/v TFA，等度 洗脱；流速：1mL/min；检测：λmax210nm；温度：30℃；注射体积：5μL)。

                                      实施例508

(3aα，4β，5β，7β，7aα)-4-(八氢-5-羟基-4，7-二甲基-1.3-二氧代-4，7-环氧- 2H-异吲哚-2-基)-2-(三氟甲基)苄腈(508)

向已冷却至-3℃的THF(275mL)中加入化合物507(55.0g，152 mmol)，由此形成一种淤浆物。向所得淤浆加入硼烷·甲硫醚 (14.4mL，152mmol)，加入速度应使得温度不超过0℃。将反应混合物 在2.5h内缓慢升温至20℃。随后将反应混合物温度重新降低至0℃， 此时小心加入磷酸盐缓冲液(1056mL，pH7)，加入速率应能控制氢气 的释放程度并保持温度≤20℃。通过加入乙醇(528mL，190标准强度) 溶解所得悬浮液。在15℃下加入过氧化氢(55ml，30重量％)，加入 速率使得温度保持≤20℃。在20℃和pH7.8下，继续搅拌所得均相 溶液12h，由此发生结晶。过滤收集所得的淤浆，用水(4×100mL) 和甲基·叔丁基醚(2×100mL)洗涤。真空干燥，得到37.3g(64.6％)化 合物508。将含水母液用乙酸乙酯(3×500mL)萃取。将合并的浓的 有机物依次用10重量％亚硫酸钠水溶液(1×100mL)和25重量％氯 化钠水溶液(1×100mL)洗涤。将有机物经硫酸钠干燥，过滤并浓缩， 得到8.9g(15.4％)化合物508，从甲基·叔丁基醚滤饼洗液中得到第三 部分的11.5g(20％)化合物508。将以上三部分的粗制物质的固体样 品从190标准强度乙醇(1g/10mL)中分离重结晶，总共得到35.6 g(61.7％)化合物508，经HPLC分析(条件如下)测定纯度为98.7％。 从母液中分离出第二批收获的化合物508，得到9.3g(16.1％)固体物， 经HPLC分析，测定纯度为98.7％。剩余的母液经硅胶色谱纯化，使 用200g SiO2，用4L 50体积％乙酸乙酯和50体积％庚烷洗脱，得到 5.6g(9.7％)化合物508，经HPLC分析测定纯度为94.0％。HPLC条 件：保留时间9.74min，YMC S5 ODS-AQ柱(4.6×150mm)，15分 钟内使用100％溶剂A至100％溶剂B梯度洗脱，1.0mL/min。溶剂A ＝95体积％水(0.01M乙酸铵)；5体积％乙腈。溶剂B＝5体积 ％水(0.01M乙酸铵)；95体积％乙腈。双波长检测器设置在210 和245nm。MS(ES)：m/z 381.11[M+H]+。

                                      实施例509

(3aα，4β，5β，7β，7aα)-4-(八氢-5-羟基-4，7-二甲基-1，3-二氧代-4，7-环氧- 2H-异吲哚-2-基)-2-(三氟甲基)苄腈(509)

将化合物471A(0.37g，1.4mmol)和2，5-二甲基呋喃(0.73mL，6.9 mmol)混合，形成淤浆，将所述淤浆在60℃下加热1h。将所述反应 混合物冷却至-10℃。加入THF(1.0mL)，接着加入硼烷·四氢呋喃 (2.1mL，1M)。将反应混合物在0℃下搅拌30min，然后在+10℃下搅 拌30min。向所述反应混合物中加入丙酮(3.0mL)，将所得的混合物 温热至20℃，在20℃下保持1h。向该溶液中加入碳酸氢钠(1.5mL，pH 9，8重量％)，随后将混合物冷却至5℃，接着加入过氧化氢(0.3ml，30 重量％)。过氧化氢的加入发生放热现象，使温度升高至20℃。在20 ℃下加入亚硫酸钠(4.0mL，10重量％)的溶液，发生放热使得温度升高 至30℃。使所述双相混合物在25℃静置12h。随后分离各相，将含 水废液用乙酸乙酯(5mL)反萃取两次，将合并的有机层用水(2mL)和 氯化钠(2mL，25重量％)顺次洗涤。将有机层真空浓缩，得到黄色油 状物，该油状物快速结晶。向粗制产物中加入190标准强度的乙醇(5.0 mL)，将混合物加热至60℃，使得完全溶解。冷却至20℃下17h， 发生结晶。过滤收集晶体淤浆，用庚烷(5mL)洗涤，然后在60℃下 真空干燥(30in/Hg)，得到0.23g(44％)化合物509，HPLC面积％为 93.1。HPLC条件：保留时间9.74min，YMC S5 ODS-AQ柱(4.6× 150mm)15分钟内使用100％溶剂A至100％溶剂B梯度洗脱， 1.0mL/min。溶剂A＝95体积％水(0.01M乙酸铵)；5体积％乙腈。 溶剂B＝5体积％水(0.01M乙酸铵)；95体积％乙腈。检测器设 置在245nm。MS(ES)：m/z381.11[M+H]+。

                                       实施例510

[3aR-(3aα，4β，5β，7β，7aα)]-4-(八氢-5-羟基-4，7-二甲基-1，3-二氧代-4，7-环 氧-2H-异吲哚-2-基)-2-(三氟甲基)苄腈(510i)和[3aS-(3aα，4β，5β，7β，7aα)- 4-[5-(乙酰氧基)八氢-4，7-二甲基-1.3-二氧代-4，7-环氧基-2H-异吲哚-2- 基]-2-(三氟甲基)苄腈(510ii)

将化合物509(4mg)、醋酸乙烯酯(0.1mL)和甲苯(2mL)混合，加 入20mg表12中所示的各种酶。在室温下，在16×100mm的密封 管中，用磁力搅拌棒搅拌混合物一段表12所示的时间。所述外消旋 混合物的对映体选择性乙酰化作用形成了化合物510i和乙酰化化合 物510ii。经手性HPLC测定(方法如下)化合物510i的对映异构体纯 度，各种酶得到的结果在表12中显示。按如下所述，采用所得的信 息制备大批量的化合物510i和510ii。

表12

酶           供应商        来源            时间    化合物    化合    化合    化合物

                                                   510i      物      物      510i

                                                             510i    510i

                                           H       mg/mL     收率    ％ee    mg/mL

                                                             ％

AK-20        Amano         荧光假单胞菌    15      0.74      39      100     1.02

                           (Pseudomonas

                           fluorescens)

AP-12        Amano         黑曲霉          144     1.10      58      55.4    0.74

                           (Aspergillus

                           niger)

PS-30        Amano         洋葱伯克霍尔    15      0.46      24      100     1.24

                           德氏菌

                           (Pseudomonas

                           cepacia)

酰基转移酶   Amano         曲霉属          15      0.51      27      12.2    1.26

(Acylase)                  (Aspergillus)

30000

手性酶       Boehringer    皱落假丝酵母    144     0.81      42      87.2    1.04

(Chirazyme)                (Candida

L3                         rugosa)

VII型脂肪    Sigma         皱落假丝酵母    144     0.74      39      100     1.06

酶

向500mL带保温套的烧瓶中加入来源于荧光假单胞菌 (Pseudomonas fluorescens)的Amano脂肪酶AK20(25g)、化合物509(25 g)、甲基·异丁基酮(475mL)和醋酸乙烯酯(25mL)。将烧瓶用循环水 浴保持在25℃下，并用磁力搅拌棒搅拌。继续培养42h，此时，化 合物510i的对映异构体过量达到100％。将溶液通过Whatman 4滤 纸过滤以除去酶，将滤饼用50mL甲基·异丁基酮洗涤。将滤液真空 浓缩，将所得的剩余物溶解在EtOAc(50mL)中，随后加入庚烷(50 mL)。将所得溶液装入Biotage 75L体系的Phenomenex填料柱(硅胶800 g)中，将所述柱用75％EtOAc/庚烷洗脱，流速110mL/min。收集含 化合物510ii的洗脱部分(500mL)，随后将洗脱出的溶剂换为100％ EtOAc，用以洗脱出化合物510i。汇集所需的洗脱部分，真空除去溶 剂，得到11.0g化合物510i(44％，100％ee)和12.10g化合物 510ii(44％)。将化合物510i从95％乙醇(5mL/g)中分两批重结晶， 得到9.61g(38％)化合物510i，为白色晶体。化合物510i：手性HPLC： 10.02min(保留时间)(CHIRALPAK AD 4.6×250mm柱；用20％ MeOH/乙醇(1∶1)的庚烷溶液等度洗脱，1mL/min)。HPLC：99％，2.45 min(保留时间)(YMC S5 ODS柱，4.6×50mm，在4分钟内用含0.2％ 磷酸的10-90％甲醇水溶液洗脱，4mL/min，于220nm检测)。 MS(ES)：m/z 381.11[M+H]+。

                                       实施例511

[3aR-(3aα，4β，5β，7β，7aα)]-4-(八氢-5-羟基-4，7-二甲基-1，3-二氧代-4，7-环 氧-2H-异吲哚-2-基)-2-(三氟甲基)苄腈(511i)和丁二酸单[3aS- (3aα，4β，5β，7β，7aα)-[2-[4-氰基-3-(三氟甲基)苯基]八氢-4，7-二甲基-1，3- 二氧代-4，7-环氧-1H-异吲哚-5-基]酯-(511ii)

在室温下，将外消旋化合物509(10mg)、琥珀酸酐(100mg)和脂 肪酶AK-20 Amano(50mg)在甲苯或MTBE(5mL)中的混合物搅拌20 小时。16和20h后，从各反应混合物中取出样品(0.1mL)，蒸发， 再溶于乙腈(1mL)中，经反相HPLC分析(YMC Pro-pack ODS-A，3μ，15 ×0.6cm，在12min内，乙腈∶水20∶80至90∶10)，以测定产物化合物 511i(RT＝8.8min)和化合物511ii(RT＝9.9min)的面积比。取出各反 应混合物的第二个样品(0.1mL)，蒸发，再溶于1mL异丙醇-庚烷(1∶1) 中，经手性HPLC分析(Chiralpak AD，25×0.46cm，20℃，庚烷∶乙醇 85∶15，0.5mL/min，UV 210nm)，以测定化合物511i(RT＝32.2min)和 化合物471Dii(RT＝34.8min)的％ee。20h后，将反应混合物过滤， 以分离出不溶的组分(酶等)。将滤液用5％碳酸氢钠水溶液(3×1体 积)和水(3×1体积)洗涤，真空蒸发，如上述经HPLC分析。结果表 明化合物511i的平均收率为48％(理论上最高收率为50％)和100％ ee。通过上述碳酸氢钠萃取，完全分离出化合物511ii。表13给出按 照上述方法测定的各反应的详细情况。化合物511i：手性HPLC：10.02 min；CHIRALPAK AD 4.6×250mm柱；用20％MeOH/乙醇(1∶1)的 庚烷溶液等度洗脱，1mL/min，100％ee。HPLC：99％，于2.45min(保 留时间)(YMC S5 ODS柱，4.6×50mm，在4分钟内用含0.2％磷酸的 10-90％甲醇水溶液洗脱，4mL/min，于220nm检测)。MS(ES)：m/z 381.11[M+H]+。

                                                    表13   溶剂   溶剂     化合物     509     脂肪酶     AK-20   琥珀酸   酐   时间   化合物   511i   化合物   511ii   化合物   511i   化合物   471Dii   化合物   511i   体积，   ml     mg     mg   mg   Hr   8.8min   9.9min   32.2mi   n   34.8mi   n   ee％   面积比   面积比   ％   ％   甲苯   5     10     50   1000   16   53％   47％   93.1％   6.9％   86.2％   20   54％   46％   96.0％   4.0％   92.0％   甲苯   洗液   碳酸氢   钠   100％   0％   96.1％   3.9％   92.2％   MTBE   5     10     50   100   16   49％   51％   100.0％   0.0％   100.0％   20   50％   50％   100.0％   0.0％   100.0％   MTBE   100％   0％   100.0％   0.0％   100.0％

  洗液   碳酸氢   钠

                                       实施例512

[3aR-(3aα，4β，5β，7β，7aα)-4-[5-(乙酰基氧基)八氢-4，7-二甲基-1，3-二氧代 -4，7-环氧-2H-异吲哚-2-基]-2-(三氟甲基)苯甲腈(512i)和[3aS- (3aα，4β，5β，7β，7aα)]-4-(八氢-5-羟基-4，7-二甲基-1，3-二氧代-4，7-环氧- 2H-异吲哚-2-基)-2-(三氟甲基)苄腈(512ii)

排列一系列50mL的烧瓶，称量各种酶(关于各种酶的类型和量 参见表14)并置于各烧瓶中，接着加入磷酸盐缓冲液(BF45，5mL，100 mM，pH7)。将化合物473(5mg)的DMSO(50μL)的溶液加入至各烧 瓶中。将各烧瓶在28℃下摇荡(200rpm)24小时。24小时后，将反应 混合物用EtOAc(10mL)萃取。蒸发出一部分EtOAc萃取液(1mL)， 再溶于乙腈(1mL)中，然后经反相HPLC分析(C-18，在12min内乙 腈∶水20∶80至90∶10)，以确定化合物512i(RT＝11.0min)和化合物 512ii(RT＝8.9min)的面积比。蒸发出另一部分的EtOAc萃取物(4 mL)，再次溶于1mL异丙醇-庚烷(1∶1)中，经手性HPLC分析(Chiralpak AD，庚烷∶乙醇85∶15，0.5mL/min)，以确定该系统中化合物512ii(RT ＝34.8min)和化合物471Di(RT＝32.2min)的％ee。表14给出了不同 受测酶组的详细情况以及所需产物的收率和％ee。

                                                   表14   酶   供应商     来源   酶含   量   HPLC测定的面积比率   外(Exo)-   醇   外(Exo)-   醇   ％4ee   mg   化合物   512ii     化合物     512i   化合物   471Di   化合物   511ii   化合物   512ii   脂肪酶   AP-12   Amano     黑曲霉   5   18％     82％   18.8％   81.2％   62.5％   脂肪酶   AP-12   Amano     黑曲霉   25   50％     50％   41.0％   59.0％   17.9％   脂肪酶PS   Amano     洋葱伯克霍尔     德氏菌   5   20％     80％   31.3％   68.7％   37.4％   脂肪酶PS   Amano     洋葱伯克霍尔     德氏菌   25   46％     54％   40.2％   59.8％   19.6％   酰基   转移酶   150000   Amano     曲霉属   5   30％     70％   52.0％   48.0％   -3.9％   酰基   转移酶   150001   Amano     曲霉属   25   71％     29％   50.4％   49.6％   -0.8％   Newlase F   Amano     雪白根霉     (Rhizopus     niveus)   50   3％     97％   31.3％   68.7％   37.5％   Newlase F   Amano     雪白根霉   100   3％     97％   25.7％   74.3％   48.5％   酰基   转移酶I   Sigma     蜜蜂曲霉     (Apergillus     melleus)   5   10％     90％   9.7％   90.3％   80.6％   酰基   转移酶I   Sigma     蜜蜂曲霉   25   38％     62％   10.9％   89.1％   78.3％   酯酶   Sigma     猪肝   5   76％     24％   36.0％   64.0％   27.9％

                                       实施例513

[3aR-(3aα，4β，5β，7β，7aα)]-4-(八氢-5-羟基-4，7-二甲基-1，3-二氧代-4，7-环 氧-2H-异吲哚-2-基)-2-(三氟甲基)苄腈(513i)、[3aS-(3aα，4β，5β，7β，7aα)- 4-(八氢-5-羟基-4，7-二甲基-1，3-二氧代-4，7-环氧-2H-异吲哚-2-基)-2-(三 氟甲基)苄腈(513ii)和(3aα，4β，5α，7β，7aα)-4-(八氢-5-羟基-4，7-二甲基- 1，3-二氧代-4，7-环氧-2H-异吲哚-2-基)-2-(三氟甲基)苄腈(513iii)

构建一系列的微生物生物转化反应以产生化合物513i、513ii和 513iii。几种微生物反应的详细情况在表15中显示，以下描述一种通 用方法。将一解冻管瓶内的微生物(1mL，培养物)接种到50mL烧瓶 内的无菌大豆葡萄糖培养基(10mL)中。在28℃下，以200rpm摇荡下 使微生物生长40h。向各烧瓶中加入化合物472(10mg)在100μL DMSO 中的溶液，然后在28℃，将烧瓶以200rpm摇荡。在24和48小时， 用EtOAc(10mL)萃取5mL反应混合物。蒸发去一部分乙酸乙酯萃取 液(1mL)，再溶于乙腈(1mL)中，经反相HPLC分析(C-18，12分钟内 为乙腈∶水20∶80至90∶10)，以确定化合物472(RT＝11.2min)和产物化 合物513i(RT＝8.9min)、513ii(RT＝8.9min)和513iii(RT＝9.6min)的面 积比率。蒸发出第二部分的乙酸乙酯萃取液(4mL)，再溶解于异丙醇- 庚烷(1∶1，1mL)中，经手性HPLC分析(Chiralpak AD，庚烷∶乙醇85∶15， 0.5mL/min)，以确定体系中化合物513i(RT＝32.2min)和化合物 513ii(RT＝34.8min)的％ee。

                                                    表15   微生物   ID   时间         反相HPLC分析(面积比)         HPLC测定的％ee   ％ee   小时   化合物   513i     化合物     513ii     化合物     472   化合物   513i   化合物   513ii   化合物   513i   链霉菌属   (Streptomyces   sp)   SC1754   24   7％     0％     93％   96.9％   3.1％   93.9％   48   12％     0％     88％   96.7％   3.3％   93.3％   链霉菌属   SC3740   24   1％     0％     99％   88.0％   12.0％   76.0％   48   2％     0％     98％   85.8％   14.2％   71.7％   中间型诺卡氏   菌   ATCC   21072   24   5％     0％     95％   93.2％   6.8％   86.3％   48   8％     0％     92％   92.6％   7.4％   85.1％   抗生链霉菌   (Streptomyces   antibioticus)   ATCC   14890   24   11％     1％     88％   95.7％   4.3％   91.4％   48   48％     13％     39％   94.1％   5.9％   88.2％   中杀菌素链霉   菌   (Streptomyces   mediocidicus)   ATCC   13278   24   1％     0％     99％   82.0％   18.0％   64.1％   48   7％     0％     93％   79.4％   20.6％   58.8％   灰色链霉菌   (Streptomyces   griseus)   NRRL   B8090   24   23％     0％     77％   85.0％   15.0％   70.0％   48   28％     0％     72％   85.9％   14.1％   71.8％   东方拟无枝酸   菌   (Amycolatopsi   s orientalis)   ATCC   43490   24   12％     1％     86％   81.3％   18.7％   62.5％   48   25％     4％     71％   77.4％   22.6％   54.9％

                                      实施例514

[3aR-(3aα，4β，5β，7β，7aα)]-4-(八氢-5-羟基-4，7-二甲基-1，3-二氧代-4，7-环 氧-2H-异吲哚-2-基)-2-(三氟甲基)苄腈(514i)、[3aS-(3aα，4β，5β，7β，7aα)- 4-(八氢-5-羟基-4，7-二甲基-1，3-二氧代-4，7-环氧-2H-异吲哚-2-基)-2-(三 氟甲基)苄腈和(514ii)和(3aα，4β，5α，7β，7aα)-4-(八氢-5-羟基-4，7-二甲基- 1，3-二氧代-4，7-环氧-2H-异吲哚-2-基)-2-(三氟甲基)苄腈(514iii)

构建一系列的微生物生物转化反应以产生化合物514i、514ii和 514iii。几种微生物的详细反应情况在表16中显示，以下描述一种通 用方法。将取自冷冻管瓶的1mL灰色链霉菌SC13971培养物接种至 500mL三角瓶内的100mL培养基中(0.5％烘烤过的大豆培养基、2％ 葡萄糖、0.5％酵母提取物、0.5％磷酸氢二钾、0.5％NaCl，用1N HCl将pH值调节至7(R.V.Smith和J.P.Rosazza，Arch.Biochem. Biophys.，161，551-558(1974))，在28℃下，将烧瓶以200rpm速率摇 动培养3天。使用10mL这种培养物接种至500mL三角瓶内的100mL 培养基(与上同)中，在28℃下，将烧瓶以200rpm速率摇动培养1天。 对于丝状真菌鲁毛霉(Mucor rouxii)和刺孢小克银汉霉 (Cunninghamella echinulata)，使用1mL孢子悬浮液(使用10mL水洗 涤斜面制得)接种至500mL三角瓶内的100mL培养基(与上同)中，在 28℃下，将烧瓶以200rpm速率摇动培养1天。将化合物472(30mg 在1mL甲醇中的溶液)加入至各培养物中，继续培养6至10天。从 各烧瓶中取出10mL培养液样品，用乙酸乙酯(20mL)萃取。将10mL 各有机层样品分别独立在氮气气流、40℃下蒸发至干燥。将剩余物 溶解在1.2mL异丙醇中，经反相HPLC分析(YMC Pak ODS 150×6mm， 3μC-18，在12min内为乙腈∶水20∶80至90∶10，1mL/min，40℃)，以 测定化合物472(RT＝11.2min)和产物化合物514i(RT＝8.9min)、 514ii(RT＝8.9min)和514iii(RT＝9.6min)的浓度。相同的样品经手性 HPLC测定(Chiralpak AD，庚烷∶乙醇85∶15，0.5mL/min)，以确定该体 系中化合物514i(RT＝32.2min)和化合物514ii(RT＝34.8min)的％ ee。

                                            表16     菌株   SC   ATCC     时间   化合物   472   化合物   514i   化合物   514i   化合物   514iii     天   mg/ml   mg/ml   ee％   mg/ml     1.鲁毛霉   13920   24905     3   0.30   0.01   100.00   0.000     6   0.27   0.01   100.00   0.000     2.灰色链霉菌   13971   13273     3   029   0.01   100.00   0.000     6   0.30   0.01   100.00   0.000     3.刺孢小克银汉霉   16027   9244     3   0.34   0.02   100.00   0.002     6   0.06   0.02   100.00   0.001     10   0.16   0.02   100.00   0.001

                                      实施例515 

[3aR-(3aα，4β，5β，7β，7aα)]-4-(八氢-5-羟基-4，7-二甲基-1，3-二氧代-4，7-环 氧-2H-异吲哚-2-基)-2-(三氟甲基)苄腈(515)

在一个5L的发酵罐中，以3L的规模将化合物472微生物转化 为化合物515，该转化使用刺孢小克银汉霉SC 16027(ATCC 9244)和 由以下组成的培养基：0.5％烘烤过的大豆培养基、2％葡萄糖、0.5％ 酵母提取物，0.5％磷酸氢二钾、0.5％NaCl，用1N HCl将pH值调节至 7(R.V.Smith和J.P.Rosazza，Arch.Biochem.Biophys.，161，551- 558(1974))。在灭菌前，将所述发酵罐用0.05％SAG消泡剂分批次处 理。用0.9盐水/0.1％吐温80洗涤得自刺孢小克银汉霉SC 16027(ATCC 9244)的10天斜面培养物的孢子，制得孢子接种物。通过向500mL 烧瓶内的100mL培养基中加入1mL孢子接种物制备接种物，随后在 28℃下，将所述培养物以200rpm速率摇动培养1天。将取自所述烧 瓶的10％接种物在无菌Waring混合器中混合，然后接种至装有3L 无菌培养基的无菌发酵罐中。在28℃下、将所述发酵罐以600rpm和 1vvm换气下运行。接种后，向所述发酵罐中加入三种抗生素的无菌 溶液：12mg盐酸四环素(tetracycline chloride)、12mg硫酸卡那霉素 和60mg水合头孢氨苄在10mL去离子水中的溶液。在发酵罐中生 长22小时后，加入无菌底物溶液(含溶于30mL甲醇中的0.75g化合 物472)，2小时后，重复该步骤，使得在生物转化中化合物472的总 浓度为0.5g/L。发酵保持在28℃、600rpm和1vvm换气的条件下。 通过自动添加1％硫酸或10％氢氧化钠来维持pH在6.5的水平。定 期取出10mL无菌样品，用10mL的乙酸乙酯萃取两次。分离出乙酸 乙酯，在氮气气流、40℃下干燥，将剩余物溶于2.0mL异丙醇中。 所述样品经反相HPLC分析(方法如下)，以测定化合物472和产物化 合物515的比率。另外，将各样品经手性HPLC分析(方法如下)，以 测定化合物515的％ee。在生物转化过程中，以～5mL/小时的速率， 将30％葡萄糖和1.5％酵母萃取液的无菌溶液加入到反应物中。从加 入底物起114h后，反相HPLC分析表明产生了78％收率的化合物 515。手性HPLC分析测得化合物515的％e.e.为94.9％。在另一个3L 的生物转化中重复上述过程，所述反应在28℃、600rpm及1vvm换 气下，采用0.5g/L化合物472进行。44h后，该反应得到80％收率 的化合物515，95％e.e.。将所述发酵液通过HyFloTM滤垫过滤，得 到澄清的发酵液。将化合物515完全吸收到55g XAD-16中，并萃 取回至1∶1的EtOAc和丙酮的混合物中(3×100mL)或萃取回至甲 基·叔丁基醚(3×100mL)中。真空除去溶剂，将所得的剩余物经硅胶 滤垫纯化(5g)，用EtOAc洗脱。收集所需的洗脱份，然后用活性炭(0.5 g)处理，以将溶液脱色，真空除去溶剂，得到1.27g化合物515。将 该物质从EtOAc/庚烷(10mL/20mL)中重结晶，得到950mg晶体化 合物515，经反相HPLC测定，纯度为97％，经手性HPLC测定具有 95％ee。反相HPLC：YMC Pak ODS-A C18柱，4.6×50mm，用以下 梯度洗脱：0min 20％乙腈/80％0.1％TFA的水溶液，12min 90％乙腈 /10％0.1％TFA的水溶液，12.01-15min 20％乙腈/80％0.1％TFA的 水溶液，于250nm处检测，40℃，5μL注射体积)。化合物515：RT＝ 8.86min。手性HPLC：CHIRALPAK OD 25×0.46cm柱；用15％乙醇 /85％庚烷等度洗脱，0.5mL/min，18℃，于220nm检测，注射体积： 20μL。化合物515：RT＝36.5min。

在另一种回收方法中，将得自上述生物羟基化反应的发酵液(1L) 过滤，将细胞滤饼用100mL水洗涤。将透明的发酵液用乙酸乙酯萃 取(2×600mL)，然后将细胞滤饼用400mL乙酸乙酯萃取。将合并 的乙酸乙酯层浓缩，将所得的剩余物溶解在5mL庚烷/乙酸乙酯(1∶1) 中，然后装入硅胶滤垫(70g，在250mL烧结玻璃过滤器中)中。将 所述硅胶滤垫用80至90％EtOAc/庚烷梯度洗脱。收集洗脱液，收集 含化合物515的洗脱液。真空除去溶剂，将所得产物从EtOAc/庚烷 中结晶，得到90％收率的化合物515，经反相HPLC测定纯度为98％， 经手性HPLC测定具有95％ee。反相HPLC：YMC Pak ODS-A C18 柱，4.6×50mm，用以下梯度洗脱：0min 20％乙腈/80％0.1％TFA的 水溶液，12min 90％乙腈/10％0.1％TFA的水溶液，12.01-15min 20％ 乙腈/80％0.1％TFA的水溶液，于250nm处检测，40℃，5μL注射 体积)。化合物472：RT＝11.12min。化合物515：RT＝8.86min。手 性HPLC：CHIRALPAK OD 25×0.46cm柱；用15％乙醇/85％庚烷等 度洗脱，0.5mL/min，18C，于220nm检测，注射体积：20μL。化合 物472：RT＝27.4min。化合物515：RT＝36.5min。化合物(514iii)RT＝ 39.1min。

                               实施例516

4-(2，5-二氧代-2，5-二氢-吡咯-1-基)-2-三氟甲基苄腈(516B)

以下实施例说明用于制备本发明式I化合物的中间体的制备方 法。

A.3-(4-氰基-3-三氟甲基苯基氨基甲酰基)丙烯酸(516A)

将5-氨基-2-氰基三氟甲苯(210.6mmol；40.00g)和乙酸丁酯(80 mL)加入到250mL圆底烧瓶中，接着加入马来酸酐(231.9mmol，23.20 g)。将所得悬浮液加热至60℃下3.5h。将所述反应混合物冷却至25 ℃，随后在25分钟内滴加庚烷(160mL)。将所得的悬浮液过滤，用 4∶1的庚烷∶乙酸丁酯的混合物(30mL)和庚烷(45mL)洗涤。将滤饼真 空干燥，得到60g(95％收率)的化合物516A。

B.4-(2，5-二氧代-2，5-二氢-吡咯-1-基)-2-三氟甲基-苄腈(516B)

将化合物516A(17.42mmol，5.000g)加入至反应烧瓶中，接着加 入溴化锌(17.58mmol，3.960g)，随后将甲苯(50.00mL，43.25g)加入 到所述混合物中。将所得悬浮液搅拌20min。往该悬浮液中加入六 甲基二甲硅烷基胺(26.35mmol，5.560mL，4.253g)，随后在60℃下加 热4.5h。将所述反应混合物用EtOAc(25mL)稀释，接着在25℃下倒 入1N HCl溶液(30mL)中。收集有机相，将水相用EtOAc(15mL)萃 取。分离有机相，与前述有机相合并，依次用饱和碳酸氢钠(15mL)、 1∶1水∶盐水溶液的混合物(15mL)和盐水(15mL)洗涤。所得溶液经硫 酸镁干燥，过滤，然后真空浓缩至50mL悬浮液。在搅拌下，将庚 烷(125mL)滴加至该悬浮液中。将所得的浓厚的悬浮液过滤，依次用 2∶1庚烷∶甲苯的混合物(15mL)和庚烷(15mL)洗涤，得到4g(85％收率) 化合物516B。HPLC：100％，于2.11min(保留时间)(YMC S5 ODS柱， 4.6×50mm，在4分钟内用含0.2％磷酸的10-90％甲醇水溶液洗脱， 4mL/min，于220nm检测)。

                   实施例517至746

本发明的其它化合物通过类似于上述的方法制备。实施例517 至746的化合物具有下表17中所示的结构。

表17还提供了化合物名称、保留时间/分子量和用于制备这些化 合物的方法。用于测定表17化合物保留时间的色谱技术如下：LC 和LCMS在实施例439至454(表9)中描述。表17所提供的化合物的 分子量通过MS(ES)以式m/z方式测定。 实施例编号 化合物结构 化合物名称 保留时间 min/分子量 实施例的制 备方法

                              实施例747

[3aR-(3aα.4β.7β，7aα)]-4-[7-[2-[(5-氯-2-吡啶基)氧基]乙基]八氢-4- 甲基-1，3，5-三氧代-4，7-环氧-2H-异吲哚-2-基]-1-萘甲腈(747)

在氮气气氛中，将Dess-Martin periodinane(122mg，0.29mmol，按 照Ishiharaa，J.，T.Fukuzakia等.Tetrahedron Letters 40(10)，1907- 1910(1999)中描述的方法制备)加入到化合物490A(120mg，0.24mmol) 的二氯甲烷溶液(2.5mL)溶液中，将混合物搅拌4h。将反应物在氮气 流中浓缩一半体积，然后装入在顶端装配有Celite的快速柱(Jones 2g) 中，用氯仿∶庚烷(9∶1)至氯仿∶丙酮(4∶1)洗脱，得到148mg仍为不纯 的白色固体。将所述固体溶于二氯甲烷(5mL)和庚烷(3mL)中，通过 1g硅胶过滤出沉淀，用二氯甲烷至氯仿∶丙酮(4∶1)洗脱。洗脱份3-9(58.8 mg白色固体)基本上是纯的，洗脱份10-13(68mg白色泡沫体)仍含 有杂质。洗脱份3-9经硅胶(1g)纯化，使用庚烷至庚烷∶乙酸乙酯(1∶1) 为洗脱液，得到35.8mg(30％收率)化合物747，为白色固体。洗脱份 10-13通过如下纯化：将～400mg硅胶加入过量的粗制的化合物747 在乙酸乙酯和庚烷的溶液中，然后浓缩。随后将硅胶置于预处理(庚 烷)的硅胶柱(1g)的顶部，用庚烷至庚烷-乙酸乙酯(1∶1)梯度洗脱液洗 脱，得到另外的36.7mg(31％收率)化合物747，为白色固体。HPLC： 94％，于3.46和3.59min(阻转异构体，保留时间)(YMC S5 ODS 4.6× 50mm，4mL min，在4min内为100％A至100％B的梯度洗脱液 (A：10％甲醇，89.1％水，0.1％TFA；B：10％水，89.1％甲醇，0.1％ TFA，4mL/min，于220nm检测)。MS(ES)：m/z 502.11[M+H]+。

                              实施例748

(3aα，4β，5β，7β，7aα)-4-[八氢-5-羟基-4，7-二甲基-1，3-二氧代-4，7-环氧- 2H-异吲哚-2-基]-1-异喹啉甲腈(748D)

A.4-(2，5-二氧代-2，5-二氢-吡咯-1-基)-异喹啉-1-甲腈(748A)

将化合物470D(200mg，1.18mmol)和马来酸酐(470mg，4.7mmol) 在冰醋酸(5mL)中的混合物加热回流4小时。真空除去挥发物后，将 剩余物在乙酸乙酯(50mL)和水(50mL)间分配。将有机层用饱和碳酸 氢钠溶液(2×50mL)和盐水(50mL)洗涤。经硫酸镁干燥后，经1×5cm 的硅胶柱过滤有机层。浓缩滤液得到263mg(90％)748a，为灰白色固 体。HPLC：99％，于1.12min(Phenomenex 5微米ODS 4.6×30mm，在 2分钟内用含0.1％TFA的10％-90％甲醇水溶液梯度洗脱，于254nm 处检测)。MS(ES)：m/z 250.2[M+H]+。

B.(3aα，4β，7β，7aα)-4-(1，3，3a，4，7，7a-六氢-4，7-二甲基-1，3-二氧代- 4，7-环氧-2H-异吲哚-2-基)-1-异喹啉甲腈(748B)

将化合物748A(250mg，1mmol)和2，5-二甲基呋喃(4mL)的混合 物加热至60℃下2h。在15min时，反应混合物变为均相。在45分 钟时产生沉淀物。冷却至25℃后，将反应混合物用己烷稀释，将滤 饼用1∶1的乙醚∶己烷洗涤。高真空干燥，得到270mg(78％)化合物 748B，为浅黄色固体物。1H NMR-400MHz(CDCl3)：δ8.55(s，1H)， 8.54(m，1H)，7.86(m，3H)，6.45(s，2H)，3.18(s，2H)，1.81(s，6H)。

C.(1aα，2β，2aα，5aα，6β，6aα)-4-[八氢-2，6-二甲基-3，5-二氧代-2，6-环 氧-4H-环氧乙烯并[f]异吲哚-4-基]-1-异喹啉甲腈(748C)

25℃下，将m-CPBA(70％，110mg，0.45mmol)加入至化合物 748B(100mg，0.29mmol)在3mL二氯甲烷中的溶液内。1小时后， 再加入m-CPBA(70％，110mg，0.45mmol)，将反应混合物再搅拌18 h。使反应混合物在乙酸乙酯(30mL)和水(30mL)之间分配后，将有 机层依次用饱和硫酸氢钠溶液(30mL)、饱和碳酸氢钠溶液(2×30mL) 和盐水(30mL)洗涤。样品经硫酸镁干燥并浓缩，得到103mg(98％) 化合物748C，为灰白色固体。HPLC：99％，于1.09和1.22min(阻转 异构体，保留时间)(Phenomenex 5微米ODS 4.6×30mm，在2分钟内 用含0.1％TFA的10％-90％甲醇水溶液梯度洗脱，于254nm处检测)。 MS(ES)：m/z 362.07[M+H]+。

D.(3aα，4β，5β，7β，7aα)-4-[八氢-5-羟基-4，7-二甲基-1，3-二氧代-4，7- 环氧-2H-异吲哚-2-基]-1-异喹啉甲腈(748D)

在60℃下，用20分钟将0.5M的氯化双(环戊二烯基)合钛的THF 溶液(1.2mL，0.6mmol)滴加至充分搅拌的化合物748C(103mg，0.29 mmol)在THF(2.5mL)和1，4-环己二烯(1.2mL)中的悬浮液内。在60℃ 下搅拌1h后，将反应混合物在1N HCl(40mL)和乙酸乙酯(50mL)间 分配。用固体碳酸氢钠将水层的pH调节至7。用乙酸乙酯萃取水相 后，将合并的有机层经硫酸钠干燥。加入脱色碳(～1g)，将混合物静 置18h。过滤并真空浓缩滤液，得到黄色油状物，将该油状物在2.5× 15cm的硅胶柱上层析纯化，使用6∶4的二氯甲烷∶丙酮为流动相。真 空浓缩含产物的洗脱份得到部分纯的剩余物，将该剩余物经硅胶制 备薄层层析纯化，使用6∶4的二氯甲烷∶丙酮为流动相。用二氯甲烷 萃取需要的层析带，过滤并真空浓缩滤液，得到3mg(31％)化合物 748D，为灰白色固体。HPLC条件：95％，于1.46min(Phenomenex 5 微米ODS 4.6×30mm，在2分钟内用含0.1％TFA的10％-90％甲醇 水溶液梯度洗脱，于254nm处检测)。MS(ES)：m/z 364.19[M+H]+。

                                   实施例749

(3aα，4β，7β，7aα)-4-[八氢-4，7-二甲基-1，3-二氧代-4，7-环氧-2H-异吲哚-2- 基]-2-噻吩甲腈(749C)

A.2-氰基-4-硝基噻吩(749Ai)和2-氰基-5-硝基噻吩(749Aii)

将发烟硝酸(21mL)缓慢加入冰醋酸(105mL)中，然后将混合物 用冰浴冷却。将2-氰基噻吩(7.98g，73.1mmol)溶解在20mL乙酸酐 中，然后滴加至上述酸混合物中，同时保持温度不超过25℃。加入 完成后，将反应混合物升温至22℃并搅拌48h。将反应物倒入400mL 冰中。用200mL乙醚萃取。分离出醚层，依次用水和盐水洗涤，经 硫酸镁干燥。过滤并真空浓缩得到粘稠的橙色剩余物，该剩余物经 柱层析纯化，使用1∶1的己烷/二氯甲烷为洗脱液，得到1.69g(15％) 为白色固体的化合物749Ai和1.71g(15％)为黄色晶体的化合物 749Aii。化合物749Ai：HPLC：0.73分钟(保留时间)(Phenomenex柱30 ×4.6mm，在2分钟内用含0.1％TFA的10-90％甲醇水溶液洗脱， 5mL/min，于220nm检测)。化合物749Aii：HPLC：99％，于0.89分 钟(保留时间)(Phenomenex柱30×4.6mm在2分钟内用含0.1％TFA 的10-90％甲醇水溶液洗脱，5mL/min，于220nm检测)。

B.4-氨基-2-氰基噻吩(749B)

往100mL的三颈烧瓶中加入化合物749Ai(1.42g，9.21mmol)在 乙酸乙酯(20mL)中的溶液，接着加入10％乙酸溶液(20mL)。将所得 双相混合物加热至65℃，随后在5分钟内分次加入铁粉(2.95g，52.9 mmol)。在65℃下搅拌1.5h后，经Celite滤垫过滤反应物，将滤垫 用乙酸乙酯洗涤。分离出有机层，依次用水(3×20mL)和盐水洗涤经 硫酸镁干燥。过滤并真空浓缩，得到深琥珀色剩余物。该剩余物经 柱层析纯化，使用30％乙醚/二氯甲烷为洗脱液，得到84mg(73％)化 合物749B，为棕色固体物。HPLC：93.4％，于0.26分钟(保留时间)(YMC S5 ODS柱4.6×50mm，在4分钟内用含0.2％磷酸的10-90％甲醇 水溶液洗脱，于220nm检测)。

C.(3aα，4β，7β，7aα)-4-[八氢-4，7-二甲基-1，3-二氧代-4，7-环氧-2H-异 吲哚-2-基]-2-噻吩甲腈(749C)

往Pyrex试管中加入化合物749B(0.06g，0.5mmol)、甲苯(1mL)、 三乙胺(0.25g，0.35mL，2.5mmol)、硫酸镁(0.15g，1.3mmol)和化合物 20A。用Teflon盖密封所述试管，在145℃下加热过夜。冷却反应物， 用二氯甲烷稀释并经硅藻土过滤。真空浓缩滤液，剩余物经柱层析 纯化，使用10％乙醚/二氯甲烷为洗脱液，得到14mg(95％)化合物 749C，为浅黄色晶体。HPLC：94.6％，于2.6分钟(保留时间)(YMC S5 ODS柱4.6×50mm，在4分钟内用含0.2％磷酸的10-90％甲醇水溶 液洗脱，4mL/min，于220nm检测。MS(ES)：m/z 303.05[M+H]+。

                                    实施例750

(3aα，4β，7β，7aα)-5-[八氢-4，7-二甲基-1，3-二氧代-4，7-环氧-2H-异吲哚-2- 基]-2-噻吩甲腈(750B)

A.5-氨基-2-氰基噻吩(750A)

往100mL的三颈烧瓶中依次加入化合物749Aii(1.63g，10.1mmol) 在乙酸乙酯(20mL)中的溶液和10％的乙酸溶液(20mL)。将所得双相 混合物加热至65℃，随后在5分钟内分次加入铁粉(2.95g，52.9 mmol)。在65℃下搅拌1.5h后，经Celite滤垫过滤反应物，并将滤 垫用乙酸乙酯洗涤。分离出有机层，依次用水(3×20mL)和盐水洗涤 然后经硫酸镁干燥。过滤并真空浓缩得到深琥珀色剩余物。该剩余 物经柱层析纯化，使用10％乙醚/二氯甲烷为洗脱液，得到87mg(66％) 化合物750A，为棕色固体物。HPLC：94.2％，于1.05分钟(保留时 间)(YMC S5 ODS柱4.6×50mm，在4分钟内用含0.2％磷酸的 10-90％甲醇水溶液洗脱，4mL/min，于220nm检测)。

B.(3aα，4β，7β，7aα)-5-[八氢-4，7-二甲基-1，3-二氧代-4，7-环氧-2H-异 吲哚-2-基]-2-噻吩甲腈(750B)

往Pyrex试管中加入化合物750A(0.06g，0.5mmol)、甲苯(1mL)、 三乙胺(0.25g，0.35mL，2.5mmol)、硫酸镁(0.15g，1.3mmol)和化合物 20B。用Teflon盖密封所述试管，在145℃下加热过夜。冷却反应物， 用二氯甲烷稀释并经硅藻土过滤。真空浓缩滤液，剩余物经柱层析 纯化，使用10％乙醚/二氯甲烷为洗脱液，得到143mg(96％)化合物 750B，为浅黄色晶体。HPLC：92.7％，于2.93分钟(保留时间)(YMC S5 ODS柱4.6×50mm，在4分钟内用含0.2％磷酸的10-90％甲醇水 溶液洗脱，4mL/min，于220nm检测。MS(ES)：m/z 303.21[M+H]+。

                                   实施例751

[3aS-(3aα，4β，7β，7aα)]-六氢-5-羟基-4，7-二甲基-4，7-环氧异苯并呋喃- 1，3-二酮(751)

往冰浴冷却(～5℃)的化合物471Dii(2.36g，6.21mmol)的四氢呋 喃溶液(THF，20mL)中一次性加入1M NaOH水溶液(10mL，10 mmol)。将所得的浅黄色反应混合物搅拌30min，随后加入1M HCl水溶液(12mL，12mmol)酸化，然后在水(100mL)和EtOAc(40mL)间 分配。分离出水层，用EtOAc(25mL)萃取。将有机相合并，经硫酸 钠快速干燥并过滤，用热THF漂洗以溶解一些沉淀固体产物。真空 浓缩滤液，得到粗制的开环的酰氨基酸中间体，为白色固体。将粗 制物质的淤浆悬浮在60mL无水THF和25mL冰醋酸中，接着在搅 拌下加热至60℃，期间混合物变为均相。9h后，将反应混合物冷却 并真空浓缩，得到浅黄色固体。将所述固体在30mL甲苯中研磨， 升温(～50℃)，随后冷却至室温。经布氏漏斗收集不溶产物，用甲苯 洗涤并真空干燥，得到化合物751(75％)，为白色固体。400MHz

1H NMR(DMSO-d6)δ1.34(s，3H)，1.34(m，1H)，1.45(s，3H)，2.32(dd，J＝7.3， 13.1，1H)，3.20(d，J＝7.3，1H)，3.28(d，J＝7.2，1H)，3.79(m，1H)，5.11(d，J＝6.1，1H)； 100MHz 13C NMR(DMSO-d6)δ169.6，86.7，82.3，72.8，52.9，50.3，46.5，16.0，11.2.

化合物751的绝对立体化学构型通过中间体化合物471Dii的已 知立体化学构型以及其所保留构型确定。绝对立体化学构型如上式 所示。

                                    实施例752

[3aR-(3aα，4β，7β，7aα)]-六氢-5-羟基-4，7-二甲基-4，7-环氧异苯并呋喃- 1，3-二酮(752)

化合物752按照实施例751中描述的方法合成，不同之处在于 使用原料化合物471Di而非化合物471Dii作为原料。 400MHz 1HNMR(DMSO-dδ)1.34(s，3H)，1.34(m，1H)， 1.45(s，3H)，2.32(dd，J＝7.3，13.1，1H)，3.20(d，J＝7.3，1H)，3.28(d，J＝7.2，1H)，3.79 (m，1H)，5.11(d，J＝6.1，1H)；100MHz 13C NMR(DMSO-dδ)169.6，86.7，82.3， 72.8，52.9，50.3，46.5，16.0，11.2. 化合物752的绝对立体化学构型通过中间体化合物471Di的已知立 体化学构型及其所保留的构型确定。绝对立体化学构型如上式所示。

                                   实施例753

[3aR-(3aα，4β，5β，7β，7aα)-4-(八氢-5-羟基-4，7-二甲基-1，3-二氧代-4，7-环 氧-2H-异吲哚-2-基)-2-碘代苄腈(753G)

A.4-(2，5-二氧代-2，5-二氢-吡咯-1-基)-2-三氟甲基-苄腈(453A)

将3-三氟甲基-4-氰基-苯胺(24.0g，129mmol)和马来酸酐(14.0g， 143mmol)在50mL乙酸中的混合物在115℃下加热过夜。在加热过 程中得到沉淀物。再将反应物在室温下静置过夜。过滤出固体，将 滤饼用乙醚洗涤并干燥，得到21g(79mmol，61％)化合物753A，为浅 白色固体。HPLC：100％，于2.11min(保留时间)(YMC S5 ODS柱，4.6 ×50mm，在4分钟内用含0.2％磷酸的10-90％甲醇水溶液洗脱，4 mL/min，于220nm检测)。

B.(3aα，4β，7β，7α)-4-(1，3，3a，4，7，7a-六氢-4，7-二甲基-1，3-二氧代-4，7- 环氧-2H-异吲哚-2-基)-2-(三氟甲基)苄腈(753B)

A在60℃下，将4-(2，5-二氢-2，5-二氧代-1H-吡咯-1-基)-2-三氟甲 基-苄腈(15.0g，56.35mmol)和2，5-二甲基呋喃(32.5g，338mmol)的淤浆 搅拌3h，接着再于23℃下继续搅拌14h。将混合物用冷(～5℃)甲苯(15 mL)稀释，在冷却下过滤收集所得的灰白色固体。将滤饼用冷甲苯(20 mL)洗涤，然后在23℃的真空烘箱中干燥24h，得到化合物753B(18.6g， 91％收率)，经HPLC测定纯度为98.7％。

C.[3aR-(3aα，4β，5β，7β，7aα)]-4-(八氢-5-羟基-4，7-二甲基-1，3-二氧 代-4，7-环氧-2H-异吲哚-2-基)-2-(三氟甲基)苄腈(753C)

将化合物753B(5.0g，13.81mmol)，氯化烯丙基钯二聚体(10mg， 0.027mmol)和(R)-2-甲氧基-2′-二苯基膦-1，1′-联萘(R-MOP，26mg， 0.055mmol)的THF淤浆(14mL)用氮气吹扫并冷却至10℃。在10分 钟内，往上述混合物中缓慢加入三氯硅烷(3.7g，27.62mmol)，然后将 所得的多相混合物在10℃下搅拌24h。将所述混合物用THF(85mL) 稀释，然后冷却至-20℃。往上述混合物中缓慢加入三乙胺(9.76g， 96.67mmol)的乙醇(6.35g，138.1mmol)溶液，同时保持温度＜25℃， 并再于室温下搅拌2小时。过滤出白色固体物，将滤饼用THF(50mL) 洗涤，减压蒸发滤液。将油状剩余物溶解在乙酸乙酯(100mL)中，在 三聚硫氰酸(TMT，500mg)和活性炭(500mg)存在下，于23℃下搅拌 5小时。淤浆经celite和硅胶滤垫过滤，减压蒸发滤液。将剩余物溶 于THF(175mL)和甲醇(125mL)中，往所得混合物中加入无水氟化钾 (2.0g，34.5mmol)、碳酸氢钾(6.9g，69mmol)，接着加入脲-过氧化氢 加合物(6.5g，69mmol)。将所得悬浮液在室温下搅拌14小时，再加 入氟化钾(800mg，13.81mmol)、碳酸氢钾(1.38g，13.81mmol)和脲-过 氧化氢加合物(2.59g，27.63mmol)。再搅拌12小时，过滤淤浆，将 滤饼用乙酸乙酯(100mL)洗涤。将滤液依次用10％亚硫酸氢钠水溶液 (50mL×2)、水(50mL)和盐水(50mL)洗涤。减压蒸发溶剂，得到浅棕 色泡沫体。该泡沫体经硅胶柱层析纯化，以乙酸乙酯-庚烷(2∶3)洗脱 得到化合物753C(4.72g，90％，纯度＞99％(HPLC))，为灰白色固体。 经手性HPLC测定，该物质的对映异构体纯度＞96％ee，LC-MS：m/z 379(M+H-)。化合物753C的绝对立体化学构型通过与实施例483描 述的已知物质的已知立体化学构型进行比较确定。

D.[1S(-(1β，2α，3α，4β，6β)]-3-[[(4-氰基-3-(三氟甲基)苯基)氨基]羰 基]-6-羟基-1，4-二甲基-7-氧杂-二环[2.2.1]庚烷-2-甲酸和[1R- (1β，2α，3α，4β，5β)]-3-[[(4-氰基-3-(三氟甲基)苯基)氨基]羰基]-5-羟基- 1，4-二甲基-7-氧杂-二环[2.2.1]庚烷-2-甲酸(753Di和753Dii)

在22℃下，将化合物753C(25.0g，65.7mmol)溶解在THF(100mL) 中，加入1N NaOH(100mL)。1小时后，加入THF(100mL)、1N HCl(110 mL)和盐水(100mL)。随后将混合物用EtOAc(200mL)萃取一次，再 用1∶1的THF/EtOAc(200mL)萃取两次。将合并的有机萃取液经无水 硫酸镁干燥，过滤并真空浓缩，得到化合物753Di和753Dii(经HPLC 测定为1∶1)，为白色固体。不必进行纯化。HPLC：100％，于2.217 和2.413min(保留时间)(YMC S5 ODS-A柱，4.6×50mm，在4分钟 内用含0.2％磷酸的10-90％甲醇水溶液洗脱，4mL/min，于220nm检 测)。

E.[3aR-(3aα，4β，7β，7aα)]-六氢-5-羟基-4，7-二甲基-4，7-环氧异苯并 呋喃-1，3-二酮(753E)

将化合物753Di和753Dii悬浮在THF(500mL)和AcOH(200mL) 的混合物中，于60℃下加热16h。4小时后反应物变为均相。将反 应物冷却至22℃并真空浓缩。随后加入甲苯(200mL)，将混合物加 热至90℃下4小时，直至所有产物溶解。接着将混合物冷却至22℃， 静置20h。在这20小时内，化合物753E从溶液中沉淀出来。将所 得的固体过滤，用甲苯清洗，接着真空干燥。得到粗制的化合物753E， 收率11.93g，为灰白色固体。将粗制的化合物753E(10g)溶解在350mL 温热的EtOAc中(溶液浑浊)，接着加入5g脱色碳，将混合物在室温 下搅拌40min。经celite过滤后，将滤饼用热EtOAc洗涤(2×50ml)。 浓缩滤液得到灰白色固体，将该固体溶解在40mL热乙腈中。小心 加入200mL乙醚后，加入300mL己烷，将烧瓶在室温下静置18小 时。过滤并干燥得到8.32g化合物753E，为无色晶体。

1H NMR(DMSO-d6)：δ＝ 5.11(d，1H，J＝6.0Hz)，3.78(dd，1H，J＝7.2，30.6Hz)，3.27(d，1H，J＝7.2Hz)， 3.20(d，1H，J＝7.3Hz)，2.27(dd，1H，J＝7.3，13.1Hz)，1.44(s，3H)，1.33(s，3H) and 1.32ppm(m，1H).

F.4-氨基-2-碘-苄腈(753F)

在机械搅拌下，将2-碘-4-硝基-苄腈(1.00g，3.65mmol，按照J. Med.Chem.2000，43，3344-47所给出的方法制备)溶解在60℃的 THF(20mL)中。随后依次加入乙醇(25mL)和氯化铵水溶液(0.293g， 5.48mmol在20mL的H2O中)。接着在剧烈搅拌下加入铁粉(325目， 0.815g，14.6mmol)。2h后，反应完全。冷却至22℃，经硅藻土过滤 并用乙酸乙酯清洗。随后将混合物浓缩至～20mL，用EtOAc(200mL) 稀释，用1N NaOH(50mL)和盐水(50mL)各洗涤一次，经无水硫酸镁 干燥，得到化合物753F(0.710g)，为浅黄色固体物。不必进一步纯 化。HPLC：99％，于2.147min(保留时间)(YMC S5 ODS柱，4.6×50mm， 在4分钟内用含0.2％磷酸的10-90％甲醇水溶液洗脱，4mL/min，于 220nm检测)。

G.[3aR-(3aα，4β，5β，7β，7aα)]-4-(八氢-5-羟基-4，7-二甲基-1，3-二氧 代-4，7-环氧-2H-异吲哚-2-基)-2-碘代苄腈(753G)

将化合物753E(1.60g，7.57mmol)、化合物753F(1.32g，5.41 mmol)，4_分子筛(2.0g)在二甲基乙酰胺(8mL)中的混合物在175℃ 的油浴中搅拌4h。将所得的深色混合物冷却，用EtOAc(50mL)稀释， 随后过滤除去分子筛并用EtOAc清洗。使滤液在EtOAc(50mL)和水(75 mL)间分配。分离有机相，用水(2×75mL)、盐水(50mL)洗涤，随后 用四氢呋喃(20mL)稀释，经硫酸钠干燥并真空浓缩，得到固体泡沫 体。将粗制的物质在乙醚(100mL)中研磨，随后搅拌1.5h。用布氏漏 斗收集固体沉淀物，然后将固体沉淀物悬浮于乙醚(50mL)中并搅拌 16h。用布氏漏斗收集所得的固体物，用乙醚洗涤，真空干燥(90℃)， 得到化合物753G(67％)，为灰白色固体。HPLC：96％，于3.00min(保 留时间)(YMC S5 ODS柱，4.6×50mm，在4分钟内用含0.2％磷酸的 10-90％甲醇水溶液洗脱，4mL/min，于220nm检测)。MS(ES)：m/z 438.90[M+H]+。化合物753G的绝对立体化学构型通过中间体化合物 753C的已知立体化学构型及其所保留的构型确定。绝对立体化学构 型如上式所示并按命名法命名。

                                    实施例754

3aS-(3aα，4β，5β，7β，7aα)]-4-(八氢-5-羟基-4，7-二甲基-1，3-二氧代-4，7-环 氧-2H-异吲哚-2-基)-2-碘代苄腈(754)

将化合物751(850mg，4.01mmol)、4-氰基-3-碘-苯胺(975mg，4.01 mmol)，4_分子筛(1.2g)在二甲基乙酰胺(4.5mL)中的混合物在175 ℃油浴中搅拌4h。将所得的深色混合物冷却，过滤除去分子筛并用 EtOAc清洗。将滤液在EtOAc(50mL)和水(50mL)间分配。分离有机 相，用水(2×50mL)、盐水(25mL)洗涤，经硫酸钠干燥并真空浓缩。 将粗制物质溶于四氢呋喃溶液中，经硅胶快速层析纯化，用1∶4丙 酮/二氯甲烷洗脱，得到含杂质的白色固体。将所述含杂质物悬浮于 乙醚(75mL)中，搅拌18h，随后经布氏漏斗收集，得到650mg(37％) 化合物754，为白色固体。HPLC：100％，于2.90min(保留时间)(YMC S5 ODS柱，4.6×50mm，在4分钟内用含0.2％磷酸的10-90％甲醇水 溶液洗脱，4mL/min，于220nm检测)。MS(ES)：m/z 438.95[M+H]+。 化合物754的绝对立体化学构型通过中间体化合物751的已知立体 化学构型及其所保留的构型确定。绝对立体化学构型如上式所示并 按命名法命名。

                     实施例755

将化合物471Di(80mg，0.21mmol)、异氰酸乙酯(30mg，0.43 mmol)和4-二甲氨基吡啶(5mg，0.04mmol)的无水四氢呋喃(1mL)溶 液加热至55℃下2h，随后再加入异氰酸乙酯(30mg)，再加热2h。 加入最后一部分EIC(异氰酸乙酯)(30mg)，16h后将反应混合物冷 却，真空浓缩并经硅胶快速层析纯化，用2∶1 EtOAc/庚烷洗脱，得到 80mg(86％)化合物755，为白色固体。HPLC：94％，于3.51min(保留 时间)(YMC S5 ODS柱，4.6×50mm，在4分钟内用含0.2％磷酸的10- 90％甲醇水溶液洗脱，4mL/min，于220nm检测)。MS(ES)：m/z 452.29[M+H]+。化合物755的绝对立体化学构型通过中间体化合物 471Di的已知立体化学构型及其所保留的构型确定。绝对立体化学构 型如上式所示并按命名法命名。

                     实施例756

将化合物471Dii(80mg，0.21mmol)、异氰酸乙酯(100mg，1.4 mmol)和4-二甲氨基吡啶(8mg，0.07mmol)的无水四氢呋喃(2mL)溶液 加热至60℃下16h，随后冷却，加入MeOH，将溶液真空浓缩。将 反应混合物经硅胶快速层析纯化，用2∶1 EtOAc/庚烷洗脱，得到84 mg(90％)化合物756，为白色固体泡沫体。HPLC：94％，于3.54min(保 留时间)(YMC S5 ODS柱，4.6×50mm，在4分钟内用含0.2％磷酸的 10-90％甲醇水溶液洗脱，4mL/min，于220nm检测)。MS(ES)：m/z 452.34[M+H]+。化合物756的绝对立体化学构型通过中间体化合物 471Dii的已知立体化学构型及其所保留的构型确定。绝对立体化学 构型如上式所示并按命名法命名。

                     实施例757

A.(757A)

将化合物471Di(620mg，1.63mmol)，氧化银(I)(3.78g，16.3 mmol)，烯丙基碘(2.74g，16.3mmol)和无水甲腈(15mL)在75-80℃下 快速搅拌7.5h。将所得的混合物冷却并经Celite滤垫过滤，用乙酸 乙酯清洗。真空浓缩滤液，将粗制物质经硅胶快速层析纯化，用1∶1 EtOAc/庚烷洗脱，得到570mg(83％)化合物757A，为玻璃状物。HPLC： 96％，于3.72min(保留时间)(YMC S5 ODS柱，4.6×50mm，在4分 钟内用含0.2％磷酸的10-90％甲醇水溶液洗脱，4mL/min，于220nm 检测)。MS(ES)：m/z 421.27[M+H]+。

B.(757B)

室温下，向化合物757A(85mg，0.20mmol)、4-甲基吗啉-N-氧化 物(26mg，0.22mmol)和丙酮(1.6mL)的混合物中依次加入水(0.4mL)和 2.5％四氧化锇的叔丁醇(17mg，0.002mmol)溶液。搅拌反应混合物5 h，随后经Florosil滤垫过滤。将滤液真空浓缩，将剩余物在EtOAc 和1M氯化氢水溶液间分配。分离有机相，经硫酸钠干燥，真空浓缩， 将粗制物质经硅胶快速层析纯化，用2∶1丙酮/庚烷洗脱，得到化合 物757B(52mg，55％)，为白色固体。HPLC：100％，于3.11min(保留 时间)(YMC S5 ODS柱，4.6×50mm，在4分钟内用含0.2％磷酸的 10-90％甲醇水溶液洗脱，4mL/min，于220nm检测)。MS(ES)：m/z 455[M+H]+。化合物757B的绝对立体化学构型通过中间体化合物 471Di的已知立体化学构型及其所保留的构型确定。绝对立体化学构 型如上式所示并按命名法命名。

实施例758

室温下，往化合物757A(45mg，0.11mmol)、四氯化碳(0.50mL)、 乙腈(0.5mL)和水(0.75mL)的溶液中加入高碘酸钠(94mg，0.44 mmol)，几分钟后，加入水合三氯化钌(III)(50mg，0.24mmol)。30min 后，使该深色混合物在二氯甲烷(20mL)和水(20mL)间分配。将混合 物过滤除去固体物，随后分离有机相，经硫酸钠干燥并真空浓缩。 粗制的物质经硅胶快速层析纯化，依次用1∶20 MeOH/EtOAc及1∶5∶100 HOAc/MeOH/EtOAc洗脱，得到化合物758(19mg，36％)，为白色固 体泡沫体。HPLC：99％，于3.31min(保留时间)(YMC S5 ODS柱，4.6× 50mm，在4分钟内用含0.2％磷酸的10-90％甲醇水溶液洗脱，4 mL/min，于220nm检测)。MS(ES)：m/z 437.23[M-H]-。化合物758的 绝对立体化学构型通过中间体化合物471Di的已知立体化学构型及 其所保留的构型确定。绝对立体化学构型如上式所示并按命名法命 名。

                     实施例759

往冰浴冷却的化合物471Di(100mg，0.26mmol)和三乙胺(50mg， 0.50mmol)在无水二氯甲烷(3mL)中的溶液内加入氯甲酸乙酯(40μL， 0.40mmol)。将反应物升温至室温下2h，加入另外部分的氯甲酸乙 酯(40μL)、三乙胺(50mg)、4-二甲氨基吡啶(10mg，0.08mmol)。室温 下搅拌反应混合物18h，随后在25mLEtOAc和25mL 1M氯化氢水 溶液间分配。分离有机相，用1M HCl水溶液(2×25mL)、盐水(1×25 mL)洗涤，干燥(硫酸钠)并真空浓缩。经硅胶快速层析纯化，用1∶1 EtOAc/庚烷洗脱，接着重结晶(EtOAc/庚烷)得到76mg(65％)化合物 759，为白色固体。HPLC：100％，于3.85min(保留时间)(YMC S5 ODS 柱，4.6×50mm，在4分钟内用含0.2％磷酸的10-90％甲醇水溶液洗脱， 4mL/min，于220nm检测)。MS(ES)：m/z 453.01[M+H]+。化合物759 的绝对立体化学构型通过中间体化合物471Di的已知立体化学构型 及其所保留的构型确定。绝对立体化学构型如上式所示并按命名法 命名。

                     实施例760

[3aS-(3aα，4β，5β，7β，7aα)]-2-(4-氯-2-甲基-3-(三氟甲基)苯基)-六氢- 5-羟基-4，7-二甲基-4，7-环氧-1H-异吲哚-1，3(2H)-二酮(760D)

A.N-(4-氯-3-三氟甲基苯基)-2，2-二甲基丙酰胺(760A)

在30min内，往冷却至0-5℃的商品4-氯-3-(三氟甲基)苯胺(15.0g， 76.7mmol)的无水THF(200mL)溶液中依次加入三乙胺(11.7mL，84.4 mmol)和新戊酰氯(10.4mL，84.4mmol)。移开冰浴，将混合物室温下 搅拌1h。将混合物用乙醚稀释并过滤。将滤液用水(2X)和盐水洗涤， 经硫酸镁干燥，过滤并浓缩。剩余物在己烷中研磨，过滤出固体物 然后真空干燥，得到化合物760A(20.4g，95％)；MS(ES)：m/z ＝280[M+1]+。

B.N-(4-氯-2-甲基-3-三氟甲基苯基)-2，2-二甲基-丙酰胺(760B)

往冷却至0-5℃的N-(4-氯-3-三氟甲基苯基)-2，2-二甲基丙酰胺 (2.29g，8.19mmol)的无水THF溶液(25mL)中缓慢加入1.6M正丁基 锂的己烷溶液(12.3mL，19.7mmol)，保持温度低于5℃。将所得溶液 在0-5℃下搅拌1.5h。在20分钟内加入碘甲烷(0.56mL，9.01mmol) 的石油醚(2mL)溶液，同时保持温度低于5℃。将所得悬浮液在0-5 ℃下搅拌1h，用水和乙醚稀释。将水层用乙醚萃取，将合并的有机 层用盐水洗涤，经硫酸镁干燥，过滤并浓缩。剩余物经硅胶层析纯 化，用二氯甲烷洗脱，得到化合物760B(1.60g，67％)。MS(ES)：m/z＝ 294[M+1]+。

C.4-氯-2-甲基-3-三氟甲基苯胺(760C)

将N-(4-氯-2-甲基-3-三氟甲基苯基)-2，2-二甲基-丙酰胺(1.0g，3.4 mmol)加入至浓盐酸和乙醇的混合物(1∶1，15mL)中，加热回流过夜。 将反应物冷却并真空浓缩，得到黄褐色固体物，随后将其在乙酸乙 酯和饱和碳酸氢钠溶液间分配。分离有机层，依次用水和盐水洗涤， 干燥(硫酸钠)，过滤并浓缩，得到化合物760C(0.54g，76％)，为棕色 油状固体物。

D.[3aS-(3aα，4β，5β，7β，7aα)]-2-(4-氯-2-甲基-3-(三氟甲基)苯基)-六 氢-5-羟基-4，7-二甲基-4，7-环氧-1H-异吲哚-1，3(2H)-二酮(760D)

往可密封的Pyrex试管中加入4-氯-2-甲基-3-三氟甲基苯胺(0.1g， 0.48mmol)、化合物751(0.15g，0.72mmol)、TEA(0.24g，0.33mL，2.4 mmol)、硫酸镁(0.14g，1.2mmol)和甲苯(0.5mL)。将密封试管中的反 应物在150℃下加热18h。将冷却的反应物用EtOAc稀释，过滤， 浓缩，然后经制备型TLC纯化，使用二氯甲烷洗脱，得到化合物 760D(0.078g，40％)，为灰白色固体。HPLC：90％，于3.26min(YMC S5 ODS柱)，在4分钟内用含0.2％磷酸的10-90％甲醇水溶液梯度洗 脱，于220nm检测。MS(ES)：m/z 404.01[M+H]+。化合物760D的绝 对立体化学构型通过中间体化合物751的已知立体化学构型及其所 保留的构型确定。绝对立体化学构型如上式所示并按命名法命名。

                     实施例761

[3aR-(3aα，4β，5β，7β，7aα)]-2-(4-氯-2-甲基-3-(三氟甲基)苯基)六氢-5-羟 基-4，7-二甲基-4，7-环氧-1H-异吲哚-1，3(2H)-二酮(761)

往可密封的Pyrex试管中加入化合物760C(0.1g，0.48mmol)、化 合物752(0.15g，0.72mmol)、TEA(0.24g，0.33mL，2.4mmol)、硫酸镁 (0.14g，1.2mmol)和甲苯(0.5mL)。将密封试管中的反应物在150℃下 加热18h。将冷却的反应物用EtOAc稀释，过滤，浓缩，然后经硅 胶制备型TLC纯化，使用二氯甲烷洗脱，得到化合物761(0.056g， 29％)，为灰白色固体。HPLC：90％，于3.27min(YMC S5 ODS柱)在 4分钟内用含0.2％磷酸的10-90％甲醇水溶液梯度洗脱，于220nm检 测。MS(ES)：m/z 403.91[M+H]+。化合物761的绝对立体化学构型通 过中间体化合物752的已知立体化学构型及其所保留的构型确定。 绝对立体化学构型如上式所示并按命名法命名。

                     实施例762

A.3-甲氧基吡啶-1-氧化物(762A)

将3-甲氧基吡啶(20.08g，209mmol)溶解在100mL乙酸中。加入 30％过氧化氢(28.3mL，275mmol)，将反应混合物在70℃下加热6小 时。将经冷却的反应混合物浓缩，将剩余物溶于二氯甲烷中，与20g 固体碳酸钾一起搅拌过夜。将混合物过滤并浓缩，得到化合物 762A(25.2g，100％)，为浅黄色固体物，产物经1H NMR表征确定， 用于下一步骤中。

B.2-氰基-3-甲氧基吡啶(762B)

将3-甲氧基吡啶-1-氧化物(25.2g，209mmol)溶解在乙腈(260mL) 中。加入三甲基甲硅烷基氰化物(66.35g，669mmol)和三乙胺(45.13g， 446mmol)，将反应混合物加热回流过夜。将经冷却的溶液真空浓缩， 得到棕色固体物，使其在二氯甲烷和3M碳酸钠间分配。分离出有机 层，用盐水洗涤，干燥(硫酸镁)，过滤并真空浓缩。剩余物经硅胶层 析纯化，使用1∶1EtOAc/己烷作为洗脱液。分离出化合物 762B(17.63g，63％)，为浅黄色固体物。HPLC：96.2％，于1.37min(YMC S5 ODS柱)，在4分钟内用含0.2％磷酸的10-90％甲醇水溶液梯度 洗脱，于220nm检测。MS(ES)：m/z 134.88[M+H]+。

C.2-氰基-3-甲氧基-5-硝基吡啶(762C)

将2-氰基-3-甲氧基吡啶(17.63g，131.4mmol)溶于二氯甲烷(400 mL)中，在冰浴中冷却。将硝酸四丁铵(52.02g，170.8mmol)和三氟乙 酸酐(35.88g，170.8mmol)溶解在200mL二氯甲烷中，随后通过滴液 漏斗以细流形式加入至上述溶液中。将所得混合物升温至23℃并搅 拌60h。将反应混合物与饱和碳酸氢钠一起搅拌1h。分离出有机层， 用盐水洗涤，干燥(硫酸镁)，过滤，真空浓缩，经硅胶柱层析纯化， 使用二氯甲烷作为洗脱液，得到化合物762C(18.07g，79％)，为浅黄 色晶体。HPLC：100％，于1.67min(YMC S5 ODS柱)，在4分钟内 用含0.2％磷酸的10-90％甲醇水溶液梯度洗脱，于220nm检测。 MS(ES)：m/z 179.93[M+H]+。

D.5-氨基-2-氰基-3-甲氧基吡啶(762D)

将2-氰基-3-甲氧基-5-硝基吡啶(1.0g，5.6mmol)溶解在1∶1 EtOAc/AcOH(10mL)中，加热至65℃。加入铁粉(1.61g，28mmol，325 目)，将混合物搅拌2h。将混合物经Celite过滤，将滤液真空浓缩。 将剩余物在EtOAc和饱和碳酸氢钠水溶液间分配。分离出有机层， 用盐水洗涤，干燥(硫酸镁)，过滤并浓缩。剩余物经硅胶制备型TLC 纯化，使用二氯甲烷为洗脱液，得到化合物762D(0.805g，97％)，为 灰白色固体。HPLC：100％，于1.31min(YMC S5 ODS柱)，在4分 钟内用含0.2％磷酸的10-90％甲醇水溶液梯度洗脱，于220nm检测。 MS(ES)：m/z 149.90[M+H]+。

E.(762E)

将5-氨基-2-氰基-3-甲氧基吡啶(0.1g，0.67mmol)、4_分子筛 (0.4g)、化合物751(0.142g，0.67mmol)和N，N-二甲基乙酰胺(0.67mL) 在可密封的Pyrex试管中混合，并于170℃下加热1h。将经冷却的 反应混合物用EtOAc稀释并过滤。将滤液用1∶1饱和氯化铵/水洗涤 三次，随后用盐水洗涤。滤液经硫酸钠干燥，过滤，浓缩，然后经 制备型TLC纯化，使用4∶1氯仿/丙酮洗脱，得到化合物 762E(0.062g，27％)，为白色固体。HPLC：94％，于1.85min(YMC S5 ODS 柱)，在4分钟内用含0.2％磷酸的10-90％甲醇水溶液梯度洗脱，于 220nm检测。MS(ES)：m/z 344.02[M+H]+。化合物762E的绝对立体化 学构型通过中间体化合物751的已知立体化学构型及其所保留的构 型确定。绝对立体化学构型如上式所示并按命名法命名。

                     实施例763

[3aR-(3aα，4β，5β，7β，7aα)]-5-(八氢-5-羟基-4，7-二甲基-1，3-二氧代-4，7-环 氧-2H-异吲哚-2-基)-3-(三氟甲基)-2-吡啶甲腈(763F)

A.3-溴吡啶-1-氧化物(763A)

将3-溴吡啶(11.06g，70mmol)、30％H2O2(14mL，140mmol)和甲基 三氧化铼(trioxorhenium)(0.035g，0.14mmol)加入至28mL二氯甲烷中 在室温下搅拌过夜。加入25mg的部分二氧化锰，搅拌反应物直至 完全释放氧气(～1h)。分离出有机层，用盐水洗涤，经硫酸镁干燥， 过滤并真空浓缩，得到化合物673A(9.84g(81％))，为黄色油状物。

B.3-溴-2-氰基吡啶(763B)

按照实施例762B的方法，将3-溴吡啶-1-氧化物转化为化合物 763B。粗制产物经硅胶层析纯化，使用二氯甲烷作为洗脱液，得到 化合物763B(6.64g，65％)，为灰白色固体。产物经1H NMR表征确认。

C.3-溴-2-氰基-5-硝基吡啶(763C)

按照实施例762C的方法，将3-溴-2-氰基吡啶转化为化合物 763C。粗制产物经硅胶层析纯化，使用20％己烷/二氯甲烷作为洗脱 液，得到化合物763C(1.27g，16％)，为灰白色固体。产物经1H NMR 表征确认。

D.2-氰基-5-硝基-3-三氟甲基吡啶(763D)

将3-溴-2-氰基-5-硝基吡啶(0.23g，1mmol)溶解在DMF(3mL) 中。加入碘化亚铜(0.023g，0.12mmol)和2，2-二氟-2-(氟磺酰基)乙酸甲 酯(0.1g，0.5mmol)，将反应混合物在80℃下加热7h。再加入2，2-二 氟-2-(氟磺酰基)乙酸甲酯(0.05g，0.25mmol)，继续在80℃下加热8h。 将经冷却的反应混合物倒入水中，得到深色油状物。倾除去水，将 所述油状物溶解在EtOAc中，用水和盐水洗涤。有机层经硫酸镁干 燥，过滤并真空浓缩。剩余物经硅胶层析纯化，使用二氯甲烷作为 洗脱液，得到化合物763D(0.065g，43％)，为黄色油状物。HPLC：90％， 于2.09min(YMC S5 ODS柱)，在4分钟内用含0.2％磷酸的10-90％甲 醇水溶液梯度洗脱，于220nm检测。

E.5-氨基-2-氰基-3-三氟甲基吡啶(763E)

按照实施例762D所述的相同方法，使2-氰基-5-硝基-3-三氟甲 基吡啶(0.065g，0.3mmol)进行反应，得到所需的化合物763E(0.046g， 82％)，与乙醚一起研磨后，得到金色固体物。HPLC：100％，于2.07 min(YMC S5 ODS柱)，在4分钟内用含0.2％磷酸的10-90％甲醇水 溶液梯度洗脱，于220nm检测。MS(ES)：m/z 187.82[M+H]+。

F.[3aR-(3aα，4β，5β，7β，7aα)]-5-(八氢-5-羟基-4，7-二甲基-1，3-二氧 代-4，7-环氧-2H-异吲哚-2-基)-3-(三氟甲基)-2-吡啶甲腈(763F)

按照合成化合物762所述的方法，使5-氨基-2-氰基-3-三氟甲基 吡啶(0.044g，0.24mmol)与化合物752(0.087g，0.41mmol)反应。粗制 产物经硅胶制备型TLC纯化，使用15％丙酮/三氯甲烷作为洗脱液， 得到化合物763F(0.058g，65％)，为灰白色固体。HPLC：92％，于2.58 min(YMC S5 ODS柱)，在4分钟内用含0.2％磷酸的10-90％甲醇水 溶液梯度洗脱，于220nm检测。MS(ES)：m/z 382.33[M+H]+。化合物 763F的绝对立体化学构型通过中间体化合物752的已知立体化学构 型及其所保留的构型确定。绝对立体化学构型如上式所示并按命名 法命名。

                                   实施例764

[3aS-(3aα，4，5β，7β，7aα)]-5-(八氢-5-羟基-4，7-二甲基-1，3-二氧代-4，7-环 氧-2H-异吲哚-2-基)-3-(三氟甲基}-2-吡啶甲腈(764)

按照实施例763F所述的方法，使5-氨基-2-氰基-3-三氟甲基吡 啶(0.2g，1.07mmol)与化合物751(0.386g，1.82mmol)反应。粗制产物 经硅胶制备型TLC纯化，使用15％丙酮/三氯甲烷为洗脱液，得到化 合物764(0.293g，72％)，为灰白色固体。HPLC：92％，于2.58min(YMC S5 ODS柱)，在4分钟内用含0.2％磷酸的10-90％甲醇水溶液梯度 洗脱，于220nm检测。MS(ES)：m/z 382.23[M+H]+。化合物764的绝 对立体化学构型通过的中间体化合物751已知立体化学构型及其所 保留的构型确定。绝对立体化学构型如上式所示并按命名法命名。

                     实施例765

                     (765D)

A.2-羟基-3-碘-5-硝基吡啶(765A)

将2-羟基-5-硝基吡啶(7.0g，50mmol)悬浮于100mL 20％硫酸 中，随后用溶于10mL水中的碘酸钾(4.2g，19.6mmol)处理。将混合 物加热至100℃，在1小时内滴加溶于20mL水中的碘化钾(8.0g，48.2 mmol)。反应混合物变成紫红色并形成沉淀物。0.5h后，将反应混合 物冷却并过滤。将固体物与10％偏亚硫酸氢钠溶液一起搅拌15min， 过滤，用水洗涤，然后在80℃下真空干燥过夜，得到所需的化合物 765A(12.32g，92％)，为黄色固体物。产物经1H NMR表征确认。

B.2-氯-3-碘-5-硝基吡啶(765B)

在氮气气氛中，将2-羟基-3-碘-5-硝基吡啶(2.55g，9.5mmol)、五 氯化磷(2.60g，12mmol)和磷酰氯(2mL)在烧瓶中混合，然后加热至140 ℃下45min。将经冷却的反应混合物倒入冰中，得到固体物，将其 在二氯甲烷和水间分配。分离出有机层，用盐水洗涤，干燥(硫酸镁)， 过滤并真空除去溶剂，得到化合物765B(2.25g，83％)，为黄色固体物。 HPLC：98.5％，于2.75min(YMC S5 ODS柱)，在4分钟内用含0.2％ 磷酸的10-90％甲醇水溶液梯度洗脱，于220nm检测。

C.5-氨基-2-氯-3-碘吡啶(765C)

按照实施例762D中描述的方式，使2-氯-3-碘-5-硝基吡啶(0.25g， 0.88mmol)与铁粉(0.25g，4.4mmol)反应。真空除去溶剂，得到化合物 765C(0.172g，77％)，为金黄色固体物。HPLC：100％，于2.32min(YMC S5 ODS柱)，在4分钟内用含0.2％磷酸的10-90％甲醇水溶液梯度洗 脱，于220nm检测。MS(ES)：m/z 255.03[M+H]+。

D.(765D)

按前述实施例762E的方法，使5-氨基-2-氯-3-碘代吡啶(0.06g， 0.24mmol)和化合物752(0.085g，0.4mmol)反应。粗制产物经后处理 后，经硅胶制备型TLC纯化，使用10％丙酮/三氯甲烷作为洗脱液， 得到化合物765D(0.067g，62％)，为白色泡沫体。HPLC：95％，于2.65 min(YMC S5 ODS柱)，在4分钟内用含0.2％磷酸的10-90％甲醇水 溶液梯度洗脱，于220nm检测。MS(ES)：m/z 448.96[M+H]+。化合物 765D的绝对立体化学构型通过中间体化合物752的已知立体化学构 型及其保留的构型确定。绝对立体化学构型如上式所示并按命名法 命名。

                                     实施例766

[3aR-(3aα，4β，5β，7β，7aα)-2-(4-氯-3-(三氟甲基)吡啶基)-六氢-5-羟基- 4，7-二甲基-4，7-环氧-1H-异吲哚-1，3(2H)-二酮(766C)

A.2-氯-5-硝基-3-三氟甲基吡啶(766A)

按照实施例763D中描述的方法，使2-氯-3-碘-5-硝基吡啶(1.0g， 3.5mmol)、2，2-二氟-2-(氟磺酰基)乙酸甲酯(0.35g，1.82mmol)和碘化 亚铜(0.083g，0.44mmol)在DMF(10mL)中反应。粗制产物经硅胶层 析纯化，使用30％二氯甲烷/己烷为洗脱液，得到化合物766A(0.278g， 35％)，为无色油状物。产物经1H NMR和19F NMR表征确认。

B.5-氨基-2-氯-3-三氟甲基吡啶(766B)

按照实施例762D的方法，使2-氯-5-硝基-3-三氟甲基吡啶(0.16g， 0.68mmol)和铁粉(0.2g，3.42mmol，325目)反应。经制备型TLC纯化 粗制产物，使用10％乙醚/二氯甲烷作为洗脱液，得到化合物 766B(0.098g，73％)，为黄色固体物。HPLC：89％，于2.52min(YMC S5 ODS柱)，在4分钟内用含0.2％磷酸的10-90％甲醇水溶液梯度洗脱， 于220nm检测。MS(ES)：m/z 197.01[M+H]+。

C.[3aR-(3aα，4β，5β，7β，7aα)]-2-(4-氯-3-(三氟甲基)吡啶基)六氢-5- 羟基-4，7-二甲基-4，7-环氧-1H-异吲哚-1，3(2H)-二酮(766C)

按照实施例762E的方法，使5-氨基-2-氯-3-三氟甲基吡啶(0.045g， 0.23mmol)和化合物751(0.085g，0.4mmol)进行的反应。后处理后， 粗制产物经制备型TLC纯化，使用10％丙酮/三氯甲烷为洗脱液，得 到化合物766C(0.038g，42％)，为灰白色固体。HPLC：100％，于2.92 min(YMC S5 ODS柱)，在4分钟内用含0.2％磷酸的10-90％甲醇水 溶液梯度洗脱，于220nm检测。MS(ES)：m/z 391.06[M+H]+。化合物 766C的绝对立体化学构型通过中间体化合物751的已知立体化学构 型及其所保留的构型确定。绝对立体化学构型如上式所示并按命名 法命名。

                     实施例767

按照实施例762E的方法，使5-氨基-2-氯-3-碘代吡啶(0.06g，0.24 mmol)和化合物752(0.085g，0.4mmol)进行反应。将粗制的反应产物 经制备型TLC纯化，使用20％丙酮/三氯甲烷为洗脱液，得到化合 物767(0.061g，58％)，为黄色固体物。HPLC：100％，于2.64min(YMC S5 ODS柱)，在4分钟内用含0.2％磷酸的10-90％甲醇水溶液梯度洗 脱，于220nm检测。MS(ES)：m/z 449.02[M+H]+。化合物767的绝对 立体化学构型通过中间体化合物752的已知立体化学构型及其所保 留的构型确定。绝对立体化学构型如上式所示并按命名法命名。

                                  实施例768

[3aS-(3aα，4β，5β，7β，7aα)]-2-(4-氯-3-(三氟甲基)吡啶基)六氢-5-羟 基-4，7-二甲基-4，7-环氧-1H-异吲哚-1，3(2H)-二酮(768)

按照实施例762E的方法，使6-氯-5-三氟甲基-吡啶-3-胺(0.045g， 0.23mmol)和化合物752(0.085g，0.4mmol)进行反应。将粗制的反应 产物经制备型TLC纯化，使用10％丙酮/三氯甲烷为洗脱液，得到 化合物768(0.048g，54％)，为白色固体物。HPLC：100％，于2.91 min(YMC S5 ODS柱)，在4分钟内用含0.2％磷酸的10-90％甲醇水 溶液梯度洗脱，于220nm检测。MS(ES)：m/z 391.21[M+H]+。化合物 768的绝对立体化学构型通过中间体化合物752的已知立体化学构型 及其所保留的构型确定。绝对立体化学构型如上式所示并按命名法 命名。

                     实施例769

A.5-氨基-3-溴-2-氰基吡啶(769A)

按照实施例762D的方法，使3-溴-2-氰基-5-硝基吡啶(0.4g，1.75 mmol)和铁粉(0.51g，8.8mmol，325目)进行反应。将得到的粗制固体 物与乙醚一起研磨。经硅胶制备型TLC纯化，使用4∶1二氯甲烷/乙 醚作为洗脱液，得到化合物769A(0.16g，(65％))，为灰白色固体。HPLC： 100％，于1.77min(YMC S5 ODS柱)，在4分钟内用含0.2％磷酸的 10-90％甲醇水溶液梯度洗脱，于220nm检测。MS(ES)：m/z 197.93[M+H]+。

B.(769B)

按照前述实施例762E的方法，使5-氨基-3-溴-2-氰基吡啶(0.06g， 0.3mmol)和化合物752(0.096g，0.45mmol)进行反应。粗制产物经硅 胶制备型TLC纯化，使用20％丙酮/三氯甲烷为洗脱液，得到化合 物769B(0.036g，30％)，为灰白色固体。HPLC：100％，于2.29min(YMC S5 ODS柱)，在4分钟内用含0.2％磷酸的10-90％甲醇水溶液梯度洗 脱，于220nm检测。MS(ES)：m/z 393.33[M+H]+。化合物769B的绝 对立体化学构型通过中间体化合物752的已知立体化学构型及其所 保留的构型确定。绝对立体化学构型如上式所示并按命名法命名。

                     实施例770

按照前述实施例762E的方法，使5-氨基-3-溴-2-氰基吡啶(0.06g， 0.3mmol)和化合物751(0.096g，0.45mmol)进行反应。粗制产物经硅 胶制备型TLC纯化，使用20％丙酮/三氯甲烷洗脱，得到化合物 770(0.038g(31％))，为灰白色固体。HPLC：99.2％，于2.28min(YMC S5 ODS柱)，在4分钟内用含0.2％磷酸的10-90％甲醇水溶液梯度洗脱， 于220nm检测。MS(ES)：m/z 392.27[M]+。化合物770的绝对立体化 学构型通过中间体化合物751的已知立体化学构型及其所保留的构 型确定。绝对立体化学构型如上式所示并按命名法命名。

                     实施例771

A.3-氟吡啶-1-氧化物(771A)

按照实施例760C描述的相同方法，使3-氟吡啶(9.71g，100 mmol)、30％过氧化氢(20mL，200mmol)和甲基三氧化铼(0.13g，0.5 mmol)在40mL二氯甲烷中反应。过滤并真空浓缩溶剂，得到化合物 771A(8.79g，78％)，为黄色固体。

B.2-氰基-3-氟吡啶(771B)

使用实施例762B中描述的方法，使3-氟吡啶-1-氧化物(10.0g， 88.4mmol)、三甲基甲硅烷基氰化物(26.32g，265.3mmol)和三乙胺 (17.89g，177mmol)在90mL乙腈中反应。经硅胶层析纯化粗产物， 使用二氯甲烷作为洗脱液，得到化合物771B(7.5g，70％)，为浅黄色 固体物。

C.2-氰基-3-氟-5-硝基吡啶(771C)

使用实施例762C中描述的方法，使2-氰基-3-氟吡啶(6.5g，53.2 mmol)、硝酸四丁铵(21.07g，69.2mmol)和三氟乙酸酐(14.53g，69.2 mmol)在245mL二氯甲烷中反应。经硅胶层析纯化粗产物，使用20％ 己烷/二氯甲烷洗脱，得到化合物771C(0.12g，1.3％)，为黄色油状物。

D.5-氨基-2-氰基-3-氟吡啶(771D)

使用实施例762D中描述的方法，使2-氰基-3-氟-5-硝基吡啶 (0.12g，0.72mmol)和铁粉(0.21g，3.6mmol，325目)在 EtOAc/AcOH(1∶1，10mL)中反应。将粗制产物与乙醚一起研磨，得 到化合物771D(0.093g，94％)，为浅黄色固体。HPLC：99％，于1.27 min(YMCS5 ODS柱)，在4分钟内用含0.2％磷酸的10-90％甲醇水 溶液梯度洗脱，于220nm检测。MS(ES)：m/z 138.02[M+H]+。

E.(771E)

使用实施例762E中描述的方法，使5-氨基-2-氰基-3-氟吡啶(0.45g， 0.33mmol)和化合物752(0.104g，0.49mmol)在0.33mL二甲基乙酰胺 中反应。将粗制的剩余物经制备型TLC纯化，使用20％丙酮/三氯甲 烷为洗脱液，得到化合物771E(0.026g，23％)，为浅桃色固体。HPLC： 90.2％，于1.97min(YMC S5 ODS柱)，在4分钟内用含0.2％磷酸的 10-90％甲醇水溶液梯度洗脱，于220nm检测。MS(ES)：m/z 332.2[M+H]+。化合物771E的绝对立体化学构型通过中间体化合物752 的已知立体化学构型及其所保留的构型确定。绝对立体化学构型如 上式所示并按命名法命名。

                     实施例772

A.2-氰基-3-甲基-5-硝基吡啶(772A)

使用实施例762B中描述的方法，使商品2-氰基-3-甲基吡啶(2.36g， 20mmol)、硝酸四丁铵(6.7g，22mmol)和三氟乙酸酐(4.20g，20mmol) 在65mL二氯甲烷中反应。经硅胶层析纯化粗产物，使用20％己烷 /二氯甲烷为洗脱液，得到化合物772A(1.05g(32％)，为浅黄色固体。

B.5-氨基-2-氰基-3-甲基吡啶(772B)

使2-氰基-3-甲基-5-硝基吡啶(0.2g，1.23mmol)溶解在6mL 90％ 乙醇中，随后依次加入二氯化钙(0.07g，0.64mmol)和铁粉(0.62g，11.1 mmol，325目)。将所得多相混合物搅拌1h。将混合物经Celite过滤 并浓缩，得到化合物772B(0.13g，81％)，为浅棕色固体。

C.(772C)

将5-氨基-2-氰基-3-甲基吡啶(0.067g，0.5mmol)、化合物 20A(0.103g，0.53mmol)、硫酸镁(0.15g，1.25mmol)、三乙胺(0.25g，2.5 mmol)和1mL甲苯在密封试管中混合，然后在145℃下加热16h。 将冷却的混合物用二氯甲烷稀释，过滤并经硅胶层析纯化，使用5％ 乙醚/二氯甲烷为洗脱液，得到化合物772C(0.055g，35％)，为灰白色 固体。HPLC：100％，于2.49min(YMC S5 ODS柱)，在4分钟内用 含0.2％磷酸的10-90％甲醇水溶液梯度洗脱，于220nm检测。MS(ES)： m/z 312.2[M+H]+。

                     实施例773

A.2-氰基-3，4-二甲基-5-硝基吡啶(773A)

将2-氰基-3-甲基-5-硝基吡啶(0.33g，2mmol)溶解在10mL THF 中，然后在氮气气氛中，在干冰/丙酮浴中冷却。在5分钟内，通过 注射器加入溴化甲基镁(1.33mL，4mmol)。将反应物在-70℃下搅拌2 h。加入DDQ(0.068g，3mmol)在7mLTHF中的溶液，将混合物升温 至25℃。真空除去溶剂，将剩余物经硅胶层析纯化，使用二氯甲烷 为洗脱液，得到化合物773A(0.15g，42％)，为红色油状物。

B.5-氨基-2-氰基-3，4-二甲基吡啶(773B)

按照实施例772B的方法，使2-氰基-3，4-二甲基-5-硝基吡啶(0.15g， 0.85mmol)、二氯化钙(0.05g，0.42mmol)和铁粉(0.44g，7.8mmol，325 目)进行反应。经硅胶层析纯化粗产物，使用1∶1乙醚/二氯甲烷为洗 脱液，得到化合物773B(0.054g，50％)，为黄色固体。

C.(773C)

按照实施例772C的方法，使5-氨基-2-氰基-3，4-二甲基吡啶(0.05g， 0.34mmol)和化合物20A(0.1g，0.5mmol)进行反应。将得到的粗产物 经Celite过滤后，经硅胶层析纯化，使用10％乙醚/二氯甲烷为洗脱 液，得到化合物773C(0.33g，30％)，为黄色固体物。HPLC：90％，于 2.58min(YMC S5 ODS柱)，在4分钟内用含0.2％磷酸的10-90％甲 醇水溶液梯度洗脱，于220nm检测。MS(ES)：m/z 326.22[M+H]+。

                                    实施例774

[3aR-(3aα，4β，5α，7β，7aα)]-4-(八氢-5-羟基-4，7-二甲基-1，3-二氧代-4，7-环 氧-2H-异吲哚-2-基)-2-(三氟甲基)苄腈和[3aS-(3aα，4β，5α，7β，7aα)]-4-(八 氢-5-羟基-4，7-二甲基-1，3-二氧代-4，7-环氧-2H-异吲哚-2-基)-2-(三氟甲 基)苄腈(774Bi和774Bii)

A.[3aR-(3aα，4β，5α，7β，7α)]-4-[5-[[(1，1-二甲基乙基)二甲基甲硅烷 基]氧基]八氢-4，7-二甲基-1，3-二氧代-4，7-环氧-2H-异吲哚-2-基]-2-(三 氟甲基)苄腈和[3aS-(3aα，4β，5α，7β，7aα)]-4-[5-[[(1，1-二甲基乙基)二甲基 甲硅烷基]氧基]八氢-4，7-二甲基-1，3-二氧代-4，7-环氧-2H-异吲哚-2- 基]-2-(三氟甲基)苄腈(774Ai&774Aii)

通过正相制备型手性HPLC(CHIRALPAK AD 5×50cm柱；用7％ 乙醇的己烷溶液洗脱(等度洗脱)，50mL/min)，将外消旋化合物222C 分离成为其对映异构体，得到较快洗脱出的化合物774Ai(18mins)和 较慢洗脱出的化合物774Aii。

B.[3aR-(3aα，4β，5α，7β，7aα)]-4-(八氢-5-羟基-4，7-二甲基-1，3-二氧 代-4，7-环氧-2H-异吲哚-2-基)-2-(三氟甲基)苄腈和[3aS- (3aα，4β，5α，7β，7aα)]-4-(八氢-5-羟基-4，7-二甲基-1，3-二氧代-4，7-环氧- 2H-异吲哚-2-基)-2-(三氟甲基)苄腈(774Bi和774Bii)

将774Ai和774Aii(0.12g，0.25mmol)分别溶于2mL THF中，然 后加入2mL 10％HCl/MeOH，室温下搅拌反应物过夜。加入饱和碳 酸氢钠和EtOAc，分离出有机层，用盐水洗涤，干燥(硫酸钠)，过滤 并真空浓缩，得到化合物774Bi(0.084mg，88％)和化合物774Bii(0.076g， 82％)，均为白色固体物。化合物774Bi：HPLC：100％，于2.89min(YMC S5 ODS柱)，在4分钟内用含0.2％磷酸的10-90％甲醇水溶液梯度洗 脱，于220nm检测。MS(ES)：m/z 381.19[M+H]。化合物774Bii：HPLC： 100％，于2.89min(YMC S5 ODS柱)，在4分钟内用含0.2％磷酸的 10-90％甲醇水溶液梯度洗脱，于220nm检测。MS(ES)：m/z 381.16[M+H]+。化合物774Bi和774Bii的绝对立体化学构型没有确 定。虽然各化合物代表单独的对映体，但其命名和结构没有反映出 化合物的绝对立体化学构型。

实施例775(775F)

A.3-氯吡啶-1-氧化物(775A)

将商品3-氯吡啶(11.36g，100mmol)溶解在60mL乙酸中，然后 加入30％过氧化氢(15mL)。将所得反应混合物加热至70℃下16h。 将经冷却的反应混合物用氯仿稀释，与固体碳酸钾一起搅拌。将混 合物过滤，真空除去溶剂，得到化合物775A(10.21g，79％)，为黄绿 色油状物。

B.3-氯-2-氰基吡啶(775B)

使3-氯吡啶-1-氧化物(2.59g，20mmol)、三甲基甲硅烷基氰化物 (5.95g，60mmol)和三乙胺(4.05g，40mmol)在40mL乙腈中混合，按 照实施例763A的方法进行反应。真空除去溶剂，将剩余物在二氯甲 烷和3M碳酸钾间分配。分离出有机层，用盐水洗涤，干燥(硫酸镁) 并真空浓缩。经硅胶层析纯化粗产物，使用5％乙醚/二氯甲烷作为洗 脱液，得到化合物775B(1.84g，67％)，为白色晶体。HPLC：100％， 于1.64min(YMC S5 ODS柱)，在4分钟内用含0.2％磷酸的10-90％ 甲醇水溶液梯度洗脱，于220nm检测。MS(ES)：m/z 139.0[M+H]+。

C.3-氯-2-氰基-5-硝基吡啶(775C)

将3-氯-2-氰基吡啶(1.75g，12.7mmol)、硝酸四丁铵(5.02g，16.5 mmol)和三氟乙酸酐(3.15g，15mmol)在65mL二氯甲烷中混合，然后 按照实施例762C的方法进行反应。粗制产物经硅胶层析纯化，使用 二氯甲烷为洗脱液，得到化合物775C(0.43g，16％)，为浅黄色固体。

D.5-氨基-3-氯-2-氰基吡啶(775D)

将3-氯-2-氰基-5-硝基吡啶(0.35g，1.9mmol)、铁粉(0.56g，10 mmo1，325目)和二氯化钙(0.06g，0.55mmol)在10mL 90％乙醇中混合 然后按照实施例772B的方法进行反应。粗产物经硅胶层析纯化，使 用10％乙醚/二氯甲烷为洗脱液，得到化合物775D(0.14g，43％)，为 浅棕色固体。HPLC：95.5％，于1.69min(YMC S5 ODS柱)，在4分 钟内用含0.2％磷酸的10-90％甲醇水溶液梯度洗脱，于220nm检测。

MS(ES)：m/z 154.03[M+H]+。

E.(775E)

按照实施例772C的方法，使5-氨基-3-氯-2-氰基吡啶(0.05g，0.33 mmol)和化合物20A(0.07g，0.36mmol)进行反应。得到粗制产物经后 处理后，经硅胶层析纯化，使用5％乙醚/二氯甲烷洗脱，得到化合 物775E(0.054g，50％)，为灰白色固体。HPLC：97.6％，于2.86min(YMC S5 ODS柱)，在4分钟内用含0.2％磷酸的10-90％甲醇水溶液梯度洗 脱，于220nm检测。MS(ES)：m/z 332.16[M+H]+。

                     实施例776

室温及氩气气氛下，往化合物741Di(190mg，0.5mmol)的无水二 噁烷(3.5mL)透明溶液中加入Burgess试剂(143mg，0.6mmol)。将混 合物在室温下搅拌70min后，加入二氯化双(环戊二烯基)合钛(137mg， 0.55mmol)。在100℃下搅拌混合物1天，随后冷却至室温。加入水 和饱和硫酸氢钾水溶液。将混合物用EtOAc(3X)萃取。合并的萃取液 经硫酸钠干燥并减压浓缩。经硅胶快速层析纯化，用EtOAc/庚烷洗 脱(1∶4至1∶0的梯度洗液)，得到化合物776(170mg，74％)，为黄色玻 璃状固体。HPLC：99％，于3.27min(保留时间)(YMC S5 ODS-A柱4.6 ×50mm，在4分钟内用含0.2％磷酸的10-90％甲醇水溶液洗脱， 4mL/min，于220nm检测)。MS(ES)：m/z 458[M-H]-。化合物776的绝 对立体化学构型通过中间体化合物741Di的已知立体化学构型及其 所保留的构型确定。绝对立体化学构型如上式所示并按命名法命名。

                     实施例777

A.吡唑并[1，5-a]吡啶-4-甲酸乙酯(777A)

0℃下，往2-甲基-烟酸乙酯(50.6g，306mmol)的无水二氯甲烷 (200mL)澄清溶液中分多次加入O-1，3，5-三甲苯磺酰基羟胺(73g，337 mmol；按照Krause；J.G.，Synthesis，1972，140中描述的文献方法制 备)。将所得溶液在0℃下搅拌15min，随后在室温下搅拌1h。减压 浓缩得到黄色固体物。将所述固体溶解在无水DMF(300mL)中后， 于0℃下加入N，N-二甲基甲酰胺缩二甲醇(122mL，918mmol)。将混 合物在0℃下搅拌15min，随后在90℃下搅拌3h。将反应混合物减 压浓缩，与水(200mL)混合，然后用乙醚(3×180mL)萃取。将合并的 有机溶液依次用盐水(50mL)、1N氯化氢水溶液(50mL)和盐水(50mL) 洗涤，经硫酸钠干燥。经硅胶柱过滤，随后用30％EtOAc的庚烷溶 液洗脱，得到化合物777A(43.3g，74％)，为黄色固体物。HPLC：80％， 于3.20min(保留时间)，20％相应的甲酯，于2.83min(保留时间)(YMC S5 ODS-A柱4.6×50mm，在4分钟内用含0.2％磷酸的10-90％甲 醇水溶液洗脱，4mL/min，于220nm检测)。MS(ES)：m/z 191[M+H]+。

B.吡唑并[1，5-a]吡啶-4-甲酸(777B)

往水浴冷却至室温并搅拌着的吡唑并[1，5-a]吡啶-4-甲酸酯(35.1g， 185mmol)，KOH(85％，25g，379mmol)和MeOH(200mL)混合液中缓 慢加入水。将所得反应混合物在室温下搅拌1.5h，随后减压浓缩除 去MeOH。往剩余物中加入少量的水以得到透明溶液。接着在0℃下 用氯化氢水溶液将所述溶液酸化至pH为1(浓盐酸，11mL；5N HCl， 10mL，接着为2N和1NHCl)。在蒸气浴中加热后，冷却混合物。过 滤出固体物，用水洗涤并真空干燥，得到化合物777B(29g，97％)， 为黄色固体物。HPLC：100％，于2.14min(保留时间)(YMC S5 ODS- A柱4.6×50mm，在4分钟内用含0.2％磷酸的10-90％甲醇水溶液 洗脱，4mL/min，于220nm检测)。MS(ES)：m/z 163[M+H]+。

C.7-碘-吡唑并[1，5-a]吡啶-4-甲酸(777C)

往于0℃下冷却并搅拌着的吡唑并[1，5-a]吡啶-4-甲酸(29g，179 mmol)的无水THF(1000mL)悬浮液中加入六甲基二甲硅烷基氨基化锂 溶液(1M的THF溶液，200mL，200mmol)。将混合物在0℃下搅拌30 min后，在-4℃下再加入LHMDS溶液(1M的THF溶液，320ml，320 mmol)。搅拌混合物10min后，分多次加入碘(55g，215mmol)。将 反应混合物在-4℃下搅拌1.5h，再于室温下搅拌1h，随后冷却至0 ℃。加入氯化氢水溶液(5N，40mL)和硫代亚硫酸钠溶液(10g在40mL 水溶液中)。将混合物在0℃下搅拌30min，随后减压浓缩。将剩余 混合物与饱和碳酸氢钠溶液(100mL)、乙醚(150mL)和H2O(130mL) 混合。分离出乙醚溶液，然后用H2O(50mL)萃取。将合并的水溶液 用乙醚洗涤(150mL)，用饱和硫酸氢钾水溶液酸化至pH＝1，在蒸气 浴中加热，随后冷却。过滤出固体物，用H2O洗涤，随后干燥，得 到化合物777C(50g，97％)，为黄色固体物。HPLC：100％，于2.88 min(保留时间)(YMC S5 ODS-A柱4.6×50mm，在4分钟内用含0.2％ 磷酸的10-90％甲醇水溶液洗脱，4mL/min，于220nm检测)。MS(ES)： m/z 289[M+H]+。

D.(7-碘-吡唑并[1，5-a]吡啶-4-基)-氨基甲酸叔丁酯(777D)

在氩气气氛中，往7-碘-吡唑并[1，5-a]吡啶-4-甲酸(23.4g，81.2 mmol)和二异丙基乙胺(65mL)在叔丁醇(250mL)和无水甲苯(200mL) 中的透明溶液内加入二苯基磷酰基叠氮化物(25mL，114mmol)。将混 合物在室温下搅拌30min后，缓慢将温度升高至90℃。将混合物在 90℃下搅拌过夜，减压浓缩以除去溶剂。将剩余物在EtOAc(200mL) 和NaOH水溶液(2N，75mL)间分配。分离出水溶液，用EtOAc(100mL) 萃取。将合并的有机溶液用氢氧化钠水溶液(1N，75mL)洗涤，经硫 酸钠干燥并减压浓缩。经硅胶快速层析纯化，用EtOAc/庚烷洗脱(0∶1 至1∶1的梯度)，得到棕色固体物。在含少量乙酸乙酯的庚烷溶液中 重结晶，得到化合物777D(19.6g，67％)，为黄色固体物。HPLC：95％， 于3.83min(保留时间)(YMC S5 ODS-A柱4.6×50mm，在4分钟内 用含0.2％磷酸的10-90％甲醇水溶液洗脱，4mL/min，于220nm检测)。

MS(ES)：m/z 360[M+H]+。

E.(7-氰基-吡唑并[1，5-a]吡啶-4-基)-氨基甲酸叔丁酯(777E)

将(7-碘-吡唑并[1，5-a]吡啶-4-基)-氨基甲酸叔丁酯(36mg，0.1 mmol)、氰化锌(24mg，0.2mmol)、四(三苯基膦)合钯(O)(23mg，0.02 mmol)和无水DMF(1mL)的混合物用氩气脱气。随后将混合物在80 ℃下搅拌4.5h，冷却至室温，与EtOAc(6mL)混合，然后过滤。减 压浓缩滤液。经硅胶快速层析纯化，用EtOAc/庚烷洗脱(1∶4至1∶2的 梯度)，得到化合物777E(24mg，93％)，为白色固体。HPLC：93％，于 3.64min(保留时间)(YMC S5 ODS-A柱4.6×50mm，在4分钟内用 含0.2％磷酸的10-90％甲醇水溶液洗脱，4mL/min，于220nm检测)。

MS(ES)：m/z 259[M+H]+。

F.4-氨基-吡唑并[1，5-a]吡啶-7-甲腈(777F)

往(7-氰基-吡唑并[1，5-a]吡啶-4-基)-氨基甲酸叔丁酯(3g，11.6 mmol)的二氯甲烷(40mL)透明溶液中加入TFA(8mL)。将混合物在室 温下搅拌3h，随后减压浓缩。将剩余物在EtOAc(100mL)和饱和碳 酸氢钠溶液(50mL)间分配。分离出水溶液，用EtOAc(2×50mL)萃取。 将合并的有机溶液经硫酸钠干燥，经硅胶滤垫过滤，然后减压浓缩。 在EtOAc和95％乙醇中结晶，得到化合物777F(1.07g，58％)，为深黄 色固体物。HPLC：97％，于1.96min(保留时间)(YMC S5 ODS-A柱4.6 ×50mm，在4分钟内用含0.2％磷酸的10-90％甲醇水溶液洗脱， 4mL/min，于220nm检测)。MS(ES)：m/z 159[M+H]+。

G.(777G)

将4-氨基-吡唑并[1，5-a]吡啶-7-甲腈(135mg，0.85mmol)、化合物 752(225mg，1.06mmol)、4_分子筛粉末(850mg)和DMA(0.85mL)的 混合物在氩气气氛、室温下搅拌10min，然后于170℃下搅拌3h， 随后冷却至室温。将所述分子筛粉末滤出，减压浓缩滤液。经硅胶 快速层析纯化，用EtOAc洗脱(含0％至5％的MeOH梯度洗脱液)， 得到化合物777G(98mg，33％)，为黄色固体物。HPLC：99％，于2.28 min(保留时间)(YMC S5 ODS-A柱4.6×50mm，在4分钟内用含0.2％ 磷酸的10-90％甲醇水溶液洗脱，4mL/min，于220nm检测)。MS(ES)： m/z 353[M+H]+。化合物777G的绝对立体化学构型通过中间体化合 物752的已知立体化学构型及其所保留的构型确定。绝对立体化学 构型如上式所示并按命名法命名。

                     实施例778

将4-氨基-吡唑并[1，5-a]吡啶-7-甲腈(60mg，0.38mmol)、化合物 751(110mg，0.52mmol)、硫酸镁(360mg，3mmol)、二异丙基乙胺(0.35 mL，2mmol)和无水甲苯(0.6mL)的混合物在氩气气氛、135℃下搅拌 20h。经硅胶快速层析纯化，用EtOAc洗脱(含0％至5％的MeOH梯 度洗脱液)，得到化合物778(115mg，86％)，为淡灰色固体物。HPLC： 98％，于2.28min(保留时间)(YMC S5 ODS-A柱4.6×50mm，在4 分钟内用含0.2％磷酸的10-90％甲醇水溶液洗脱，4mL/min，于220nm 检测)。MS(ES)：m/z 353[M+H]+。化合物778的绝对立体化学构型通 过中间体化合物751的已知立体化学构型及其所保留的构型确定。 绝对立体化学构型如上式所示并按命名法命名。

                     实施例779

将化合物20A(50mg，0.25mmol)、对氨基苯乙酮(68mg，0.5mmol) 和N，N-二甲基甲酰胺缩二甲醇(0.065mL，0.49mmol)在无水N，N-二甲 基甲酰胺(0.2mL)中的透明溶液在氩气气氛、100℃下搅拌18h，随 后浓缩。经硅胶快速层析纯化，用EtOAc/庚烷洗脱(1∶4至1∶0的梯度)， 得到固体物，将该固体物在EtOAc和庚烷的混合物中结晶，得到化 合物779(11mg，14％)，为白色固体。HPLC：98％，于2.89min(保留 时间)(YMC S5 ODS-A柱，4.6×50mm，在4分钟内用含0.2％磷酸 的10-90％甲醇水溶液洗脱，4mL/min，于220nm检测)。MS(ES)：m/z 314[M+H]+。

                     实施例780

A.1，4-二甲基-7-氮杂-二环[2.2.1]庚-2，5-二烯-2，3，7-三甲酸7-叔丁 基酯2，3-二甲基酯(780A)

在120℃、氩气气氛中，将粗制2，5-二甲基-吡咯-1-甲酸叔丁酯(按 照文献方法制备(Haiser，H.-P.等，J.Org.Chem.，1984，49(22)4203- 4209；500mg)和亚乙酰基二甲酸二甲酯(0.5mL，约4当量)的混合物 搅拌2h。经硅胶快速层析纯化，用EtOAc/庚烷洗脱(1∶20至1∶2的梯 度)，得到化合物780A(166mg，50％收率)，为无色液体。HPLC：90％， 于3.67min(保留时间)(YMC S5 ODS-A柱，4.6×50mm，在4分钟 内用含0.2％磷酸的10-90％甲醇水溶液洗脱，4mL/min，于220nm检 测)。

B.(780B)

往冰水冷却的1，4-二甲基-7-氮杂-二环[2.2.1]庚-2，5-二烯-2，3，7-三 甲酸7-叔丁基酯2，3-二甲基酯(1.5g，4.4mmol)在MeOH(10mL)和水(5 mL)中的透明溶液内分批加入KOH(2.9g，44mmol)。随后加入更多的 水(5mL)。将反应混合物室温下搅拌1h后，在0℃下依次加入肼(1.4mL， 44mmol)、HCl(2N水溶液，17ml，34mmol)和过氧化氢(50％水溶液， 1.27mL，22mmol)。将反应混合物室温下搅拌3h，随后减压浓缩以 除去MeOH。将得到的水溶液用饱和硫酸氢钾水溶液酸化至pH为1。 用EtOAc萃取(3X)。将合并的萃取液经硫酸钠干燥并减压浓缩，得 到黄色固体物。将上述黄色固体物溶解在乙酸酐(15mL)中。将所得 溶液在100℃下搅拌1h。减压浓缩得到1.3g(100％)化合物780B，为 橙色固体物。

C.(780C)

将化合物780B(0.8g，2.7mmol)、4-氨基-2三氟甲基苄腈(0.5g， 2.7mmol)、硫酸镁(2.6g，22mmol)、二异丙基乙胺(2.35mL，13.5mmol) 和无水甲苯(2.9mL)的混合物在氩气气氛、135℃下搅拌15h.。过滤 出固体物，并用EtOAc洗涤。减压浓缩滤液。经硅胶快速层析纯化， 用EtOAc/庚烷洗脱(1∶4至1∶2的梯度)，得到化合物780C(1.03g， 82％)，为玻璃状固体。HPLC：100％，于4.26min(保留时间)(YMC S5 ODS-A柱4.6×50mm，在4分钟内用含0.2％磷酸的10-90％甲醇水 溶液洗脱，4mL/min，于220nm检测)。MS(ES)：m/z 462.34[M-H]-。

                     实施例781

往化合物780C(770mg，1.66mmol)的二氯甲烷(10mL)溶液中加 入三氟乙酸(5mL)。将反应混合物在室温下搅拌40min。随后将混合 物减压浓缩，用饱和碳酸氢钠溶液碱化，用EtOAc(3X)萃取。合并的 萃取液经硫酸钠干燥并减压浓缩，得到化合物781(600mg，99％)，为 橙色固体。HPLC：100％，于2.55min(保留时间)(YMC S5 ODS-A柱 4.6×50mm，在4分钟内用含0.2％磷酸的10-90％甲醇水溶液洗脱， 4mL/min，于220nm检测)。MS(ES)：m/z 364[M+H]+。

                     实施例782

在0℃、氩气气氛中，往化合物781(27mg，0.074mmol)和三乙 胺(0.061mL，0.44mmol)在无水二氯甲烷(3mL)中的透明溶液内加入乙 酰氯(0.016mL，0.22mmol)。在0℃下搅拌混合物30min，随后在室温 下再搅拌30min，加入饱和碳酸氢钠溶液。搅拌混合物15min后， 分离出有机溶液，经硫酸钠干燥，经硅胶滤垫过滤，随后用EtOAc 漂洗。减压浓缩滤液。在EtOAc和庚烷的混合物中结晶，得到化合 物782(19mg，63％)，为白色固体。HPLC：99％，于3.56min(保留时 间)(YMC S5 ODS-A柱，4.6×50mm，在4分钟内用含0.2％磷酸的 10-90％甲醇水溶液洗脱，4mL/min，于220nm检测)。MS(ES)：m/z 406[M+H]+。

                     实施例783

(3aα，4β，7β，7aα)-4-(八氢-4，7，8-三甲基-1，3-二氧代-4，7-亚氨基-2H-异吲 哚-2-基)-2-(三氟甲基)苄腈(783)

将化合物781(180mg，0.5mmol)、甲醛(37％水溶液，0.11 mL，1.5mmol)、NaHB(OAc)3(318mg，1.5mmol)和1，2-二氯乙烷(9mL) 的混合物在室温、氩气气氛中搅拌过夜，随后用硫酸钠干燥。经硅 胶快速层析纯化，用EtOAc洗脱(含2％至10％三乙胺梯度洗脱)，得 到化合物783(160mg，84％)，为白色固体。HPLC：100％，于2.46min(保 留时间)(YMC S5 ODS-A柱，4.6×50mm，在4分钟内用含0.2％磷 酸的10-90％甲醇水溶液洗脱，4mL/min，于220nm.检测)。MS(ES)：m/z 378[M+H]+。

                     实施例784

往冷却至0℃的化合物781(20mg，0.055mmol)和三乙胺(0.04mL， 0.24mmol)在无水二氯甲烷(1mL)中的透明溶液内加入甲磺酰氯 (0.01mL，0.13mmol)。将反应混合物在0℃下搅拌30min后，加入饱 和碳酸氢钠溶液(0.1mL)。搅拌混合物10min，经碳酸钠干燥并经硅 胶滤垫过滤，随后用EtOAc漂洗。减压浓缩滤液。在EtOAc和庚烷 的混合物中结晶，得到化合物784(14mg，58％)，为白色固体。HPLC： 98％，于3.58min(保留时间)(YMC S5 ODSA柱，4.6×50mm，在4 分钟内用含0.2％磷酸的10-90％甲醇水溶液洗脱，4mL/min，于220nm 检测)。MS(ES)：m/z 440[M-H]-。

                     实施例785

往搅拌着的化合物230Bi(50mg，0.13mmol)和三乙胺(0.09mL， 0.65mmol)的无水二氯甲烷(5mL)溶液中滴加入碳酰氯(20％的甲苯溶 液，0.25mL，0.48mmol)。反应完全后，加入饱和碳酸氢钠溶液。将 混合物用EtOAc萃取(3X)。合并的萃取液经硫酸钠干燥，经硅胶滤 垫过滤并减压浓缩。在乙醇和水的混合物中结晶，得到化合物785(40 mg，73％)，为白色固体。HPLC：100％，于3.55min(保留时间)(YMC S5 ODS-A柱，4.6×50mm，在4分钟内用含0.2％磷酸的10-90％甲醇 水溶液洗脱，4mL/min，于220nm检测)。MS(ES)：m/z 377[M-CO2-H]-。

                     实施例786i和786ii

[3aR-(3aα，4β，5β，6α，7β，7aα)]-4-(八氢-5，6-二氯-4，7-二甲基-1，3-二氧代- 4，7-环氧-2H-异吲哚-2-基)-2-(三氟甲基)苄腈和[3aR- (3aα，4β，5β，6α，7β，7aα)-4-(八氢-5，6-二氯-4，7-二甲基-1，3-二氧代-4，7-环 氧-2H-异吲哚-2-基)-2-(三氟甲基)苄腈(786i和786ii)

在冷却至0℃的搅拌着的化合物230Bi(544mg，1.5mmol)、丙酮 (10mL)，乙酸(2mL)和盐水(2mL)混合物中滴加入漂白剂(5mL)。将 所得的透明溶液在室温下搅拌1h，随后减压浓缩。将剩余的混合物 用EtOAc萃取(3X)。合并的萃取液经硫酸钠干燥并减压浓缩。经硅 胶快速层析纯化，用EtOAc/庚烷洗脱(1∶9至1∶2的梯度洗脱)，得到 白色固体，将产物在EtOAc和庚烷的混合物中结晶，得到301mg(46％) 化合物786i和786ii的外消旋混合物，为白色固体。HPLC：100％， 于4.11min(保留时间)(YMC S5 ODS-A柱，4.6×50mm，在4分钟 内用含0.2％磷酸的10-90％甲醇水溶液洗脱，4mL/min，于220nm检 测)。MS(ES)：m/z 395[M-HCl-H]-。

采用手性HPLC分离外消旋混合物得到两种对映异构体：化合 物786i和化合物786ii。

用于分离的手性HPLC条件为：

手性HPLC条件

柱：        CHIRALPAK AD

            50×500mm，20μ

温度：      室温

注射体积：  20mL

流动相：    A：               含0.1％二乙胺的IPA

            B：               含二乙胺的庚烷

            等度洗脱，45％的A，60min

流速：      50mL/min

紫外检测器  245nm

用于分析的手性HPLC条件为：

手性HPLC条件

柱：        CHIRALPAK AD

            4.6×250mm，10μ

温度：      25℃ 

注射体积：  10μL

流动相：    A：    含0.1％二乙胺的IPA

            B：    含二乙胺的庚烷

            等度洗脱，45％的A，15min

流速：      1mL/min

紫外检测器  245nm

RT：        化合物786i     10.6min

            化合物786ii    7.0min

化合物786i和786ii的绝对立体化学构型没有确定。虽然各化 合物代表单独的对映体，但其命名和结构没有反映出化合物的绝对 立体化学构型。

           实施例787i和787ii

[3aR-(3aα，4β，5β，6β，7β，7aα)]-4-(八氢-5-氯-6-羟基-4，7-二甲基-1，3-二氧 代-4，7-环氧-2H-异吲哚-2-基)-2-(三氟甲基)苄腈和[3aS- (3aα，4β，5β，6β，7β，7aα)-4-(八氢-5-氯-6-羟基-4，7-二甲基-1，3-二氧代-4，7- 环氧-2H-异吲哚-2-基)-2-(三氟甲基)苄腈(787i和787ii)

氩气气氛中，往搅拌着并冷却至-78℃的化合物230Bi(181mg，0.5 mmol)的无水二氯甲烷(4mL)溶液中滴加入铬酰氯(0.048mL，0.6 mmol)。随后将反应混合物在-78℃下搅拌1h，将反应物温度缓慢升 高至室温。将反应混合物室温下搅拌2h。随后在0℃、剧烈搅拌下 加入饱和碳酸氢钠溶液(10mL)。将混合物用EtOAc萃取(3X)。将合 并的萃取液经硫酸钠干燥并减压浓缩。经硅胶快速层析纯化，用 EtOAc/庚烷洗脱(1∶4至1∶0的梯度)，得到98mg(47％)化合物787i和 787ii的外消旋混合物，为白色固体。HPLC：100％，于3.32min(保留 时间)(YMC S5 ODS-A柱，4.6×50mm，在4分钟内用含0.2％磷酸 的10-90％甲醇水溶液洗脱，4mL/min，于220nm处监测)。MS.(ES)： m/z 377[M-HCl-H]-。

采用手性HPLC分离外消旋混合物，得到两种对映异构体：化 合物787i和化合物787ii。

用于分离的手性HPLC条件为：

手性HPLC条件

柱：          CHIRALCEL OD

              50×500mm，20μ

温度：        室温

注射体积：    20mL

流动相：      A：    含0.1％二乙胺的IPA

              B：    含0.1％二乙胺的庚烷

              等度洗脱，35％的A，90min

流速：        50mL/min

紫外检测器    245nm

RT：          化合物787i     41min

              化合物787ii    51min

化合物787i和787ii的绝对立体化学构型没有确定。虽然各化 合物代表单独的对映体，但其命名和结构没有反映出化合物的绝对 立体化学构型。

                            实施例788

(3aα，4β，5β，6α，7β，7aα)-4-(八氢-5，6-二羟基-4，7-二甲基-1，3-二氧代-4，7- 环氧-2H-异吲哚-2-基)-2-(三氟甲基)苄腈(788B)

A.(3aα，4β，5 α，6β，7β，7aα)-4-(八氢-5-[[(1，1-二甲基乙基)二甲基甲硅 烷基]氧基]-6-羟基-4，7-二甲基-1，3-二氧代-4，7-环氧-2H-异吲哚-2-基)- 2-(三氟甲基)苄腈(788A)

在室温、氩气气氛中，向搅拌着的化合物222B(1.49g，3mmol) 的无水THF溶液(31mL)中滴加入硼烷-甲硫醚络合物(0.61mL，6.1 mmol)。将反应混合物在室温下搅拌1.5h后，在0℃下缓慢加入乙醇 (20mL)，随后加入磷酸盐缓冲液(pH＝7.2，39mL)和过氧化氢(30％水 溶液，12mL)。将混合物在0℃下剧烈搅拌30min，然后于室温下搅 拌21h，随后在室温下减压浓缩除去THF。使剩余物在EtOAc(160mL) 和盐水(160mL)间分配。分离出有机溶液，用5％亚硫酸钠溶液(120mL) 洗涤，经硫酸钠干燥并减压浓缩。经硅胶快速层析纯化，用EtOAc/ 庚烷洗脱(1∶8至1∶0的梯度)，得到化合物788A(1.15g，75％)，为泡沫 状固体。

B.[3aS-(3aα，4β，5β，6α，7β，7aα)]-4-(八氢-5，6-二羟基-4，7-二甲基- 1，3-二氧代-4，7-环氧-2H-异吲哚-2-基)-2-(三氟甲基)苄腈(788B)

往搅拌着的化合物788A(0.67g，1.3mmol)的乙醇溶液(100％，19 mL)中加入浓盐酸(3.7mL)。将混合物在室温下搅拌21h，接着在40 ℃下搅拌3h，随后减压浓缩。经硅胶快速层析纯化，用EtOAc/庚烷 洗脱(1∶1至1∶0的梯度)，得到化合物788B(0.47mg，92％)，为玻璃状 固体。HPLC：98％，于3.07min(保留时间)(YMC S5 ODS-A柱，4.6× 50mm，在4分钟内用含0.2％磷酸的10-90％甲醇水溶液洗脱，4 mL/min，于220nm检测)。MS(ES)：m/z 397[M+H]+。化合物788B为 各对映体的外消旋混合物。其命名和结构没有反映出化合物的绝对 立体化学构型。

                    实施例789

在0℃、氩气气氛中，往搅拌着的化合物788B(40mg，0.1mmol) 和三乙胺(0.16mL，1.1mmol)的无水二氯甲烷(1mL)溶液中加入甲磺酰 氯(0.042mL，0.54mmol)。将反应混合物在0℃中搅拌10min，接着 在室温下搅拌30min。经硅胶快速层析纯化，用EtOAc/庚烷洗脱(1∶2 至1∶0的梯度)，得到化合物789(50mg，90％)，为玻璃状固体。HPLC： 100％，于3.66min(保留时间)(YMC S5 ODS-A柱，4.6×50mm，在 4分钟内用含0.2％磷酸的10-90％甲醇水溶液洗脱，4mL/min，于 220nm检测)。MS(ES)：m/z 575[M+Na]+。化合物789为各种对映体 的外消旋混合物。其命名和结构没有反映出化合物的绝对立体化学 构型。

                    实施例790

在室温下，将化合物788B(40mg，0.1mmol)、吡啶(0.04mL，0.49 mmol)和甲磺酰氯(0.032mL，0.41mmol)的无水二氯甲烷(1mL)透明溶 液搅拌1天。经制备型HPLC纯化(YMC S5 ODS柱20×100mm，20 mL/min，于245nm检测，在10分钟用10-100％溶剂B梯度洗脱。 溶剂A：10％MeOH-90％H2O-0.1％TFA。溶剂B：90％MeOH- 10％H2O-0.1％TFA.)，得到化合物790(23mg，48％)，为玻璃状固体。 HPLC：98％，于3.46min(保留时间)(YMC S5 ODS-A柱，4.6×50 mm，在4分钟内用含0.2％磷酸的10-90％甲醇水溶液洗脱，4mL/min， 于220nm检测)。MS(ES)：m/z 475[M+H]+。化合物790为各对映体的 外消旋混合物。其命名和结构没有反映出化合物的绝对立体化学构 型。

                                        实施例791

[3aS-(3aα，4β，5β，6α，7β，7aα)]-4-(八氢-5，6-二羟基-4，7-二甲基-1，3-二氧代 -4，7-环氧-2H-异吲哚-2-基)-2-(三氟甲基)苄腈和[3aR- (3aα，4β，5β，6α，7β，7aα)]-4-(八氢-5，6-二羟基-4，7-二甲基-1，3-二氧代-4，7- 环氧-2H-异吲哚-2-vl)-2-(三氟甲基)苄腈(791i和791ii)

经正相制备型手性HPLC(CHIRALPAK OJ 5×50cm柱；用20％ MeOH/乙醇(1∶1)的庚烷溶液(等度洗脱)+0.1％二乙胺洗脱，50 mL/min)将外消旋化合物788B(1g)分离成其对映异构体，得到296mg 较快洗脱出的化合物791i(手性HPLC：8.92min；CHIRALPAK OJ 4.6× 250mm柱；用20％MeOH/乙醇(1∶1)的庚烷溶液+0.1％二乙胺洗 脱，1mL/min)；HPLC：95％，于1.25min(保留时间)(Phenomenex S5 ODS柱，4.6×50mm，在2分钟内用含0.1％TFA的10-90％甲醇水 溶液洗脱，4mL/min，于254nm处检测)；MS(ES)：m/z 397.37[M+H]+ 和274mg较慢洗脱出的化合物791ii(手性HPLC：11.25min； CHIRALPAK OJ 4.6×250mm柱；用20％MeOH/乙醇(1∶1)的庚烷 溶液+0.1％二乙胺洗脱，1mL/min)；HPLC：95％，于1.25min(保留 时间)(Phenomenex S5 ODS柱4.6×50mm，在2分钟内用含0.1％TFA 的10-90％甲醇水溶液洗脱，4mL/min，于254nm检测)；MS(ES)：m/z 397.43[M+H]+。化合物791i和791ii的绝对立体化学构型没有确定。 虽然各化合物代表单独的对映体，但其命名和结构没有反映出化合 物的绝对立体化学构型。

                                      实施例792

(3aα，4β，5α，7β，7aα)-2-(4-氰基-3-(三氟乙基)苯基)-六氢-4，7-二甲基-1，3- 二氧代-4，7-环氧-1H-异吲哚-5-甲酸(792B)

A.(3aα，4β，7β，7aα)-2-(4-氰基-3-(三氟甲基)苯基)四氢-4，7-二甲基- 1，3-二氧代-4，7-环氧-1H-异吲哚-5-甲酸(792A)

将2，5-二甲基-3-呋喃甲酸(11.2g；80mmol)和4-(2，5-二氢-2，5-2，5- 二氧代-1H-吡咯-1-基)-2-三氟甲基苄腈(5.32g；20mmol)在20mLTHF 中的混合物加热至65℃下2h。冷却至室温后，将固态剩余物在乙酸 乙酯中淤浆化，装入其中装有己烷的5×30cm硅胶柱中。将柱依次 用2L EtOAc和1.5L 1％AcOH/EtOAc洗脱。将含有所需丙烯酸的 洗脱份浓缩，将剩余物与EtOAc/庚烷共蒸发(3×100mL)。将固态剩 余物溶于约15mL EtOAc中后，加入庚烷(-50mL)，将混合物浓缩至 约25mL体积。将所得悬浮液过滤，将滤饼用己烷洗涤。真空除去 溶剂得到化合物792A(1.5g，16％)，为白色粉末。

B.(3aα，4β，5α，7β，7aα)-2-(4-氰基-3-(三氟甲基)苯基)-六氢-4，7-二甲 基-1，3-二氧代-4，7-环氧-1H-异吲哚-5-甲酸(792B)

在10％Pd/C(20mg)存在下，将化合物792A(220mg；0.54mmol) 在EtOAc(5mL)中的溶液在1atm压力氢气中氢化4小时。经Celite 过滤后，浓缩滤液，将剩余物经2.5×15cm硅胶柱层析，用EtOAc∶ 庚烷(1∶1)+0.5％AcOH洗脱。浓缩纯洗脱份，得到化合物792B(173mg， 79％)，为无色玻璃状物。HPLC：95.7％，于1.64min(保留时 间)(Phenomonex S5 ODS柱，4.6×50mm，在2分钟内用含0.1％TFA 的10-90％甲醇水溶液洗脱，4mL/min，于254nm检测)；MS(ES)：m/z 409.23[M+H]+。

                                      实施例793

(3aα，4β，5α，7β，7aα)-2-(4-氰基-3-(三氟甲基)苯基)-六氢-4，7-二甲基-1，3- 二氧代-4，7-环氧-1H-异吲哚-5-甲酸甲酯(793B)

A.(3aα，4β，7β，7aα)-2-(4-氰基-3-(三氟甲基)苯基)四氢-4，7-二甲基- 1，3-二氧代-4，7-环氧-1H-异吲哚-5-甲酸甲酯(793A)

将2，5-二甲基-3-呋喃甲酸甲酯(30mL；200mmol)和4-(2，5-二氢- 2，5-2，5-二氧代-1H-吡咯-1-基)-2-三氟甲基苄腈(13.3g；50mmol)的混 合物在120℃下加热5h。在18小时内缓慢冷却至室温后，加入乙醚 (～150mL)，将所得的粘稠悬浮液过滤。用乙醚充分洗涤，然后干燥 得到化合物793A(11.3g，54％)，为白色粉末。

B.(3aα，4β，5α，7β，7aα)-2-(4-氰基-3-(三氟甲基)苯基)-六氢-4，7-二甲 基-1，3-二氧代-4，7-环氧-1H-异吲哚-5-甲酸甲酯(793B)

在10％Pd/C(100mg)存在下，将化合物793A(1g；2.38mmol)在 EtOAc(25mL)中的溶液在1atm压力氢气中氢化4小时。经Celite过 滤后，浓缩滤液，将剩余物经2.5×15cm硅胶柱层析，用EtOAc∶庚 烷(1∶3)洗脱。浓缩纯洗脱份，得到化合物793B(665mg，65％)，为黄 色粉末。HPLC：99％，于1.67min(保留时间)(Phenominex S5 ODS柱， 4.6×50mm，在2分钟内用含0.1％TFA的10-90％甲醇水溶液洗脱， 4mL/min，于254nm检测)；MS(ES)：m/z 423.27[M+H]+。化合物793B 为各对映体的外消旋混合物。其命名和结构没有反映出化合物的绝 对立体化学构型。

                    实施例794B

A.(794A)

室温下，将一滴DMF加入至化合物792B(160mg；0.4mmol)和 草酰氯(0.09mL；1mmol)的二氯甲烷(4mL)溶液中。室温下搅拌1小 时后，真空除去挥发物，将剩余物溶解在2mL THF中，得到0.2M化 合物794A的THF溶液。

C.(794B)

室温下，将0.2M化合物794A的THF溶液(1mL；0.2mmol)加 入至0.5M氨的二噁烷(5mL；2.5mmol)溶液中。室温下静置1小时 后，将反应混合物在EtOAc(25mL)和水(25mL)间分配。将有机层用 饱和硫酸氢钾溶液(25mL)和盐水(25mL)洗涤。经硫酸镁干燥，随后 经真空浓缩得到固体剩余物，将该剩余物在乙醚中研磨，得到化合 物794B(60mg，74％)，为白色固体。HPLC：95.6％，于1.41min(保留 时间)(Phenominex S5 ODS柱，4.6×50mm，在2分钟内用含0.1％TFA 的10-90％甲醇水溶液洗脱，4mL/min，于254nm检测)；MS(ES)：m/z 408.03[M+H]+。化合物794B为各对映体的外消旋混合物。其命名和 结构没有反映出化合物的绝对立体化学构型。

                    实施例795

室温下，将0.2M化合物794A的THF溶液(1mL；0.2mmol)加 入至2.0M二甲胺的二噁烷(2.5mL；5mmol)溶液中。室温下静置1 小时后，将反应混合物在EtOAc(25mL)和水(25mL)间分配。将有机 层用饱和硫酸氢钾溶液(25mL)和盐水(25mL)洗涤。经硫酸镁干燥， 随后真空浓缩得到剩余物，该剩余物经制备型TLC纯化(EtOAc∶己烷， 3∶2)，得到化合物795(45mg，52％)，为白色粉末。HPLC：99％，于1.52 min(保留时间)(Phenominex S5 ODS柱，4.6×50mm，在2分钟内用 含0.1％TFA的10-90％甲醇水溶液洗脱，4mL/min，于254nm检测)； MS(ES)：m/z 435.10[M+H]+。化合物795表示各对映体的外消旋混合 物。其命名和结构没有反映出化合物的绝对立体化学构型。

                                    实施例796

[3aR-(3aα，4β，7β，7aα)]-4-(八氢-4，7-二甲基-1，3，5-三氧代-4，7-环氧-2H-异 吲哚-2-基)-2-(三氟甲基)苄腈(796)

22℃下，将化合物471Di(0.10g，0.263mmol)溶于二氯甲烷(1.0 mL)和THF(2.0mL)的混合物中。在搅拌下加入Dess-Martin periodinane(0.279g，0.658mmol)。3h后，将反应物用饱和碳酸氢钠 水溶液和饱和亚硫酸氢钠水溶液的混合物(5mL)(1∶1)猝灭。搅拌15 min后，将混合物用二氯甲烷(3×10mL)萃取，将合并的有机萃取液 用硫酸钠干燥。粗制物质经硅胶快速层析纯化，用5-10-20％丙酮的 氯仿溶液洗脱，得到化合物796(0.090g)，为白色固体。HPLC：100％， 于3.170min(保留时间)(YMC S5 ODS柱，4.6×50mm，在4分钟内 用含0.2％磷酸的10-90％甲醇水溶液洗脱，4mL/min，于220nm检测)， MS(ES)：m/z 379.11[M+H]+。手性分析HPLC，使用Chiracel OD柱， 4.6×250mm，用20％(1∶1)乙醇/MeOH的己烷溶液洗脱，2.0mL/min， 于220nm检测，保留时间为9.097min。化合物796的绝对立体化学 构型通过中间体化合物741Di的已知立体化学构型及其所保留的构 型确定。绝对立体化学构型如上式所示并按命名法命名。

                                    实施例797

[3aR-(3aα，4β，7β，7aα)]-4-(八氢-4，7-二甲基-1，3，5-三氧代-4，7-环氧-2H-异 吲哚-2-基)-2-(三氟甲基)苄腈(797)

在22℃下，将化合物471Dii(0.10g，0.263mmol)溶解在二氯甲烷 (1.0mL)和THF(2.0mL)的混合物中。在搅拌下加入Dess-Martin periodinane(0.279g，0.658mmol)。3h后，将反应物用饱和碳酸氢钠 水溶液和饱和亚硫酸氢钠水溶液的混合物(5mL)(1∶1)猝灭。搅拌15 min后，将混合物用二氯甲烷(3×10mL)萃取，将合并的有机萃取液 用硫酸钠干燥。粗制物质经硅胶快速层析纯化，用5-10-20％丙酮的 氯仿溶液洗脱，得到化合物797(0.094g)，为白色固体。HPLC：100％， 于3.170min(保留时间)(YMC S5 ODS柱，4.6×50mm，在4分钟内 用含0.2％磷酸的10-90％甲醇水溶液洗脱，4mL/min，于220nm检测)， MS(ES)：m/z 379.11[M+H]+。手性分析HPLC，使用Chiracel OD柱， 4.6×250mm，用20％(1∶1)乙醇/MeOH的己烷溶液洗脱，2.0mL/min， 于220nm检测，保留时间为5.710min。化合物797的绝对立体化学 构型通过中间体化合物471Dii的已知立体化学构型及其所保留的构 型确定。绝对立体化学构型如上式所示并按命名法命名。

                               实施例798

[3aR-(3aα，4β，7β，7aα]-4-[5-[[(1，1-二甲基乙基)二甲基甲硅烷基]氧 基]四氢-4，7-二甲基-1.3-二氧代-4，7-环氧-2H-异吲哚-2-基]-2-(三氟甲基) 苄腈和[3aR-(3aα，4β，7β，7aα)]-4-[5-[[(1，1-二甲基乙基)二甲基甲硅烷基] 氧基]四氢-4，7-二甲基-1，3-二氧代-4，7-环氧2H-异吲哚-2-基]-2-(三氟甲 基)苄腈(798i和798ii)

经手性制备性HPLC分离出化合物222B的单独对映异构体，使 用Chiracel OD柱，50×500mm，用12％乙醇的己烷溶液洗脱，50 mL/min，于220nm检测。化合物798i的保留时间为22min(经分析＞ 99％ee)而化合物798ii的保留时间为40min(经分析95％ee)。通过 酸水解将甲硅烷基烯醇醚转变成为相应的酮(化合物796和797)确认 绝对立体化学构型。通过手性分析HPLC对比可清楚证明衍生自化 合物798i的酮的保留时间与化合物796的相同，而衍生自化合物798ii 的酮产物的保留时间与化合物797的一致。这样，化合物798i和798ii 的绝对立体化学构型可通过化合物796和797的已知立体化学构型 推断出来。化合物798i：HPLC：100％，于4.211min(保留时间)(YMC S5 ODS柱，4.6×50mm，在4分钟内用含0.2％磷酸的10-90％甲醇水 溶液洗脱，4mL/min，于220nm检测)。化合物798ii：HPLC：100％， 于4.210min(保留时间)(YMC S5 ODS柱，4.6×50mm，在4分钟内 用含0.2％磷酸的10-90％甲醇水溶液洗脱，4mL/min，于220nm检测)。

                                       实施例799

[3aS-(3aα，4β，6β，7β，7aα)]-4-(八氢-6-氟-5，5-二羟基-4，7-二甲基-1，3-二氧 代-4，7-环氧-2H-异吲哚-2-基)-2-(三氟甲基)苄腈(799)

将化合物798i(2.20g，4.47mmol)溶解在乙腈(45mL)中并冷却至 0℃。随后在剧烈搅拌下加入1-氟-4-羟基-1，4-二氮杂鎓(diazoniabicyclo) 二环[2.2，2]辛烷双-(四氟硼酸盐)(50％重量，于氧化铝上，5.75g，8.94 mmol)。0.5h后，将反应物用饱和碳酸氢钠水溶液(20mL)和盐水(20mL) 猝灭。将所得的混合物用EtOAc萃取(3×50mL)。合并的有机萃取 液经无水硫酸镁干燥并真空浓缩。粗制的物质经硅胶快速层析纯化， 用0-35％丙酮的氯仿溶液洗脱，得到酮和水合物的混合物。将混合 物溶解在CH3CN(50mL)中，加入水(5.0mL)。将混合物搅拌3h，真 空浓缩，随后与另外的CH3CN共沸三次，接着在50℃下真空干燥12 h，得到化合物799(1.09g)，为白色固体。仅通过1H和19F NMR波 谱显示化合物799为水合物。HPLC：100％，于2.687min(保留时 间)(YMC S5 ODS柱，4.6×50mm，在4分钟内用含0.2％磷酸的 10-90％甲醇水溶液洗脱，4mL/min，于220nm检测)，MS(ES)：m/z 413.27[M-H]+。化合物799的绝对立体化学构型通过中间体化合物798i 的已知立体化学构型及其所保留的构型确定。绝对立体化学构型如 上式所示并按命名法命名。

                                     实施例800

[3aS-(3aα，4β，6β，7β，7aα)]-4-(八氢-6-羟基-4-甲基-1，3-二氧代-4，7-环氧- 2H-异吲哚-2-基)-2-(三氟甲基)苄腈和[3aR-(3aα，4β，6β，7β，7aα)]-4-(八氢 -6-羟基-4-甲基-1，3-二氧代-4，7-环氧-2H-异吲哚-2-基)-2-(三氟甲基)苄 腈(799Ci和799Cii)

A.(800A)

将2-甲基呋喃(5.33mL，59.1mmol)加入至4-(2，5-二氧代-2，5-二氢 -吡咯-1-基)-2-三氟甲基-苄腈(1.50g，5.91mmol)中，将混合物在60℃ 下加热3h。在加热过程中，反应物先是变为均相，紧接着产物便从 溶液中析出。将混合物冷却至22℃，用庚烷(25mL)稀释和过滤， 用冷庚烷清洗。真空浓缩得到化合物800A(1.76g)，为白色固体。该 化合物未经进一步纯化直接在下一步骤中使用。HPLC：100％，于2.250 min(保留时间)(YMC S5 ODS柱，4.6×50mm，在4分钟内用含0.2％ 磷酸的10-90％甲醇水溶液洗脱，4mL/min，于220nm检测)。

B.(3aα，4β，6β，7β，7aα)]-4-(八氢-6-羟基-4-甲基-1，3-二氧代-4，7-环 氧-2H-异吲哚-2-基)-2-(三氟甲基)苄腈(800B)

将化合物800A(0.500g，1.49mmol)溶解在无水THF(15mL)中， 加入Wilkinson催化剂(0.028g，0.029mmol)。搅拌10min后，在5 分钟内加入儿荼酚硼烷(1.0M的THF溶液，3.00ml，3.00mmol)。1小 时后，将反应物冷却至0℃，随后依次加入乙醇(7.0mL)、pH7.4的 磷酸盐缓冲液(16.0mL)和30％过氧化氢水溶液(1.5g)。将混合物缓慢 升温至22℃，2h后，用二氯甲烷(3×50mL)萃取。将合并的有机萃 取液用1N NaOH/饱和亚硫酸氢钠水溶液的混合物(50mL)(1∶1)洗涤一 次，用盐水洗涤一次，然后经无水亚硫酸钠干燥。将粗制的物质经 硅胶快速层析纯化，用5-10-20-40％丙酮的氯仿溶液洗脱，得到化 合物800B(0.344g)，为白色泡沫体。NMR光谱确认不存在其它异构 体。HPLC：94％，于2.460min(保留时间)(YMC S5 ODS柱4.6×50 mm在4分钟内用含0.2％磷酸的10-90％甲醇水溶液洗脱，4mL/min，于 220nm检测)，MS(ES)：m/z 367.22[M+H]+。

C.[3aS-(3aα，4β，6β，7β，7aα)]-4-(八氢-6-羟基-4-甲基-1，3-二氧代- 4，7-环氧-2H-异吲哚-2-基)-2-(三氟甲基)苄腈和[3aR- (3aα，4β，6β，7β，7aα)]-4-(八氢-6-羟基-4-甲基-1，3-二氧代-4，7-环氧-2H-异 吲哚-2-基)-2-(三氟甲基)苄腈(800Ci和800Cii)

经手性制备性HPLC分离出化合物800B的单独对映异构体，使 用Chiracel OD柱(50×500mm)，用17％乙醇/己烷洗脱，50mL/min， 于220nm检测。化合物800Ci的保留时间为69.4min而化合物800Cii 的保留时间为84.1min。没有确定绝对立体化学构型。化合物800Ci： HPLC：100％，于2.460min(保留时间)(YMC S5 ODS柱，4.6×50 mm，在4分钟内用含0.2％磷酸的10-90％甲醇水溶液洗脱，4mL/min， 于220nm检测)。化合物800Cii：HPLC：100％，于2.460min(保留时 间)(YMC S5 ODS柱，4.6×50mm，在4分钟内用含0.2％磷酸的 10-90％甲醇水溶液洗脱，4mL/min，于220nm检测)。化合物800Ci 和800Cii的绝对立体化学构型没有确定。虽然各化合物代表单独的 对映体，但其命名和结构没有反映出化合物的绝对立体化学构型。

                                 实施例801

[3aR-(3aα，4β，6β，7β，7aα)]-2-(4-氯-3-碘代苯基)-六氢-5-羟基-4，7-二 甲基-4，7-环氧-1H-异吲哚-1，3(2H)-二酮(801C)

A.1-氯-2-碘-4-硝基-苯(801A)

将2-氨基-5-硝基-碘苯(10.00g，37.9mmol)悬浮于12 N HCl(25mL) 和水(40mL)中，在22℃下搅拌30min。随后将混合物冷却至0℃， 在10分钟内加入亚硝酸钠(5.23g，75.8mmol在18mL的H2O中)。1 小时后，在60℃下，将该溶液转移至CuCl(3.75g，37.9mmol)的水(50 mL)溶液中。2h后，将混合物冷却至22℃，用EtOAc(3×150mL)萃 取，将有机萃取液经无水硫酸镁干燥。粗制产物经硅胶快速层析纯 化，用10-20％二氯甲烷的己烷溶液洗脱，得到化合物801A(4.20g)， 为黄色固体物。HPLC：100％，于3447min(保留时间)(YMC S5 ODS 柱，4.6×50mm，在4分钟内用含0.2％磷酸的10-90％甲醇水溶液洗 脱，4mL/min，于220nm检测)。

B.4-氯-3-碘-苯胺(801B)

60℃下将1-氯-2-碘-4-硝基-苯(2.00g，7.09mmol)溶解在THF(30 mL)中，随后依次加入乙醇(35mL)、氯化铵(0.569g，10.6mmol，在30 mL水中的溶液)和铁粉(1.58g，28.4mmol)。将该混合物剧烈搅拌3h， 随后在22℃下冷却，经Celite过滤，用乙酸乙酯清洗。将溶液真空 浓缩至～30mL，随后倒入1N NaOH/盐水(100mL)的混合物(1∶1)中。 接着将该混合物用EtOAc萃取(3×50mL)，有机萃取液经无水硫酸 镁干燥。过滤并浓缩，得到化合物801B，为黄色固体。不必进行纯 化。HPLC：100％，2.310min(保留时间)(YMC S5 ODS柱，4.6×50 mm，在4分钟内用含0.2％磷酸的10-90％甲醇水溶液洗脱，4mL/min， 于220nm检测)，MS(ES)：m/z 517.6[M+Na]+。

C.[3aR-(3aα，4β，5β，7β，7aα)]-2-(4-氯-3-碘代苯基)-六氢-5-羟基-4，7- 二甲基-4，7-环氧-1H-异吲哚-1，3(2H)-二酮(801C)

将化合物801B(0.300g，1.19mmol)和化合物752(0.229g，1.08 mmol)加入至装在高压反应容器中的DMA(1.2mL)内。接着加入4_ 分子筛(0.300g)，将所述容器密封并加热至190℃。45min后，将反 应物冷却至室温，然后倒入EtOAc(50mL)中。接着将溶液用水(20mL) 洗涤一次，用饱和氯化铵水溶液(20mL)洗涤三次，然后经无水硫酸 镁干燥。粗制的物质经硅胶快速层析纯化，用10-20-30％丙酮的氯仿 溶液洗脱，得到化合物801C(0.217g)，为黄褐色固体。HPLC：100％， 于3.000min(保留时间)(YMC S5 ODS柱，4.6×50mm，在4分钟内 用含0.2％磷酸的10-90％甲醇水溶液洗脱，4mL/min，于220nm检测)， MS(ES)：m/z 448.18[M+H]+。化合物801C的绝对立体化学构型通过 中间体化合物752的已知立体化学构型及其所保留的构型确定。绝 对立体化学构型如上式所示并按命名法命名。

                    实施例802

A.(802A)

将4-(2，5-二氧代-2，5-二氢-吡咯-1-基)-2-三氟甲基-苄腈(0.200g， 0.79mmol)和2-(N，N-二甲氨基甲基)-5-甲基呋喃(0.548g，3.94mmol) 溶解在THF(0.5mL)中，在60℃下加热3h。随后将混合物真空浓缩， 得到化合物802A，为棕色油状物。粗制物质未经纯化直接使用。

B.(802B)

将化合物802A(-0.4mmol)溶解在EtOAc(5.0mL)中，加入 Pd/C(10％Pd，0.020g)，随后通过气囊引入H2。3h后，用N2吹扫反 应物，经硅藻土过滤，用乙酸乙酯清洗。粗制物质经硅胶快速层析 纯化，用10-20-30％丙酮的氯仿溶液洗脱，得到化合物802B(0.080g)， 为黄褐色油状物。HPLC：95％，于2.040min(保留时间)(YMC S5 ODS 柱，4.6×50mm，在4分钟内用含0.2％磷酸的10-90％甲醇水溶液洗 脱，4mL/min，于220nm检测)，MS(ES)：m/z 408.31[M+H]+。化合物 802B为各对映体的外消旋混合物。其命名和结构没有反映出化合物 的绝对立体化学构型。

                    实施例803

A.2，5-二甲基呋喃-3-甲酸2-甲氧基乙氧基甲基酯(803A)

往装备有机械搅拌器的2L圆底烧瓶中装入2，5-二甲基-3-呋喃 甲酸(81.0g，0.58mol)和碳酸钾(95.9g，0.69mol)的DMF(500mL)溶 液。分次加入2-甲氧基乙氧基甲基氯(72.2g，0.58mol)过程中，使用 冰浴冷却反应物。室温下搅拌反应物5h。随后将混合物用水(1.5L) 稀释，用EtOAc萃取(2×600mL)。将合并的有机萃取液用水(2×900 mL)和饱和氯化钠溶液(1L)洗涤，经硫酸镁干燥，过滤并真空浓缩， 得到化合物803A(103g，82％)，为黄色油状物。1HNMR(CDCl3)：δ＝ 6.23(s，1H)，5.47(s，1H)，3.84(m，2H)，3.56(m，2H)，3.38(s，3H)，2.51(s， 3H)和2.20ppm(s，3H)。

B.(803B)

往250mL圆底烧瓶中装入4-(2，5-二氧代-2，5-二氢吡咯-1-基)-2- 三氟甲基苄腈(15.0g，0.056mol)和2，5二甲基呋喃-3-甲酸2-甲氧基乙 氧基甲基酯(22.8g，0.10mol)。将混合物在125℃下加热1.5h，随后 在室温下搅拌过夜。将粗制产物溶解在EtOAc中，然后吸附于硅胶 上。经硅胶层析纯化，用30％乙酸乙酯的己烷液洗脱，得到化合物 803B(8.21g，30％)，为粘稠油状物。

1H NMR(CDCl3)：δ＝7.95(d，J＝8.3Hz，1H)，7.86 (d，J＝1.9Hz，1H)，7.75(m，1H)，7.13(s，1H)，5.44(m，2H)，3.83(m，2H)，3.57(m， 2H)，3.39(s，3H)，3.19(d，J＝6.5Hz，1H)，3.09(d，J＝6.5Hz，1H)，2.04(s，3H)and 1.91ppm(s，3H).

C.(803C)

往250mL Parr氢化瓶中装入化合物803B(7.75g，0.015mol)， EtOAc(80mL)和披钯碳(0.40g，10％Pd，50％wet)。将所述瓶置于Parr 氢化装置中，用氢气加压至5psi，摇荡直至氢气的吸收停止。经Celite 过滤内容物并浓缩，得到黄色油状物。经硅胶层析纯化，用30％乙 酸乙酯的己烷液洗脱，得到化合物803C(3.92g，50％)，为白色固体。 HPLC：100％，于14.5min(保留时间)(HypersilC18 BDS柱，250×4.6 mm，5μm，检测波长254nm，流速1mL/min。线性梯度：15分钟内为 90％的0.1％三氟乙酸的水溶液，10％乙腈(起始)至100％乙腈，接着 的5分钟内使用100％乙腈)。Rf＝0.61(SiO2，60％乙酸乙酯的己烷洗 脱液)。Mpt＞300℃.1H NMR(CDCl3)：δ＝7.94(d，J＝8.3Hz，1H)，7.84(d，J＝1.9Hz，1H)，7.74(m，1H)， 5.46(d，J＝6.1Hz，1H)，5.34(d，J＝6.1Hz，2H)，3.85(m，2H)，3.57(t，J＝4.5Hz， 2H)，3.38(s，3H)，3.33(d，J＝7.2Hz，1H)，3.19(d，J＝7.2Hz，1H)，3.04(m，1H)， 2.28(m，1H)，2.05(t，J＝12.2Hz，1H)，1.78(s，3H)and 1.64ppm(s，3H).m/z＝496 [M+H]+.

D.(803Di和803Dii)

经手性制备性HPLC将外消旋化合物803C分离成其两种对映异 构体，使用Chiracel OD柱(50×500mm)，用50％乙醇/庚烷洗脱，于 290nm检测。化合物803Di的保留时间为6.68min，[α]25D＝+28.7°(c＝ 1.0，MeOH)。化合物803Dii的保留时间为13.9min，[α]25D＝-29.2°(c＝ 1.0，MeOH)。化合物803Di和803Dii的绝对立体化学构型没有确定。 虽然各种化合物代表单独的对映体，但其命名和结构没有反映出化 合物的绝对立体化学构型。

                    实施例804

[3aR-(3aα，4β，5α，7β，7aα)]-2-(4-氰基-3-(三氟甲基)苯基)-六氢-4，7-二甲 基-1，3-二氧代-4，7-环氧-1H-异吲哚-5-甲酸(804)

往250mL圆底烧瓶中装入化合物803Di(9.85g，19.8mmol)和 THF(60mL)。加入3N盐酸(50mL)的溶液并在室温下搅拌反应混合 物16h。随后加入水(60mL)，将水层用EtOAc萃取(3×120mL)。合 并的有机萃取液经硫酸钠干燥，过滤并浓缩，得到化合物804(8.00 g，98％)，该化合物与化合物791相同。HPLC：100％，于13.3min(保 留时间)(Hypersil C18 BDS柱，250×4.6mm，5μm，检测波长254nm，流 速1mL/min。线性梯度：15分钟内为90％的0.1％三氟乙酸的水溶 液，10％乙腈(起始)至100％乙腈，接着的5分钟内使用100％乙腈)， MS(ES)：m/z 409[M+H]+。Rf＝0.41(SiO2，10％MeOH的二氯甲烷溶 液)。Mpt＞300℃.[α]25D＝- 28.5°(c＝1.0，MeOH).1H NMR(CD3OD)：δ＝8.12(d，J＝8.3Hz，1H)，7.92(s，1H)， 7.82(dd，J＝8.3 and 2.0Hz，1H)，3.39(t，J＝6.7Hz，1H)，3.30(d，J＝6.7Hz，1H)， 3.00(dd，J＝12.0 and 5.2Hz，1H)，2.23(dd，J＝12.0 and 5.2Hz，1H)，2.01(t，J＝ 12.0Hz，1H)，1.70(s，3H)and 1.57ppm(s，3H). 化合物804的绝对立体化学构型没有确定。虽然该化合物代表单独 的对映体，但其命名和结构没有反映出化合物的绝对立体化学构型。

                    实施例805

[3S-(3aα，4β，5α，7β，7aα)]-2-(4-氰基-3-(三氟甲基)苯基)-六氢-4，7-二甲基- 1，3-二氧代-4，7-环氧-1H-异吲哚-5-甲酸(805)

按照与实施例804描述的相同方法制备化合物805，不同之处在 于采用化合物803Dii代替化合物803Di作为原料。所得化合物805 的收率为98％。[α]25D＝+28.0(c＝1.0，MeOH)。化合物805的绝对立 体化学构型没有确定。虽然该化合物代表单独的对映体，但其命名 和结构没有反映出化合物的绝对立体化学构型。

                    实施例806

往50mL圆底烧瓶中装入二噁烷(6mL)、化合物804(400mg， 0.984mmol)、二苯基磷酰基叠氮化物(334mg，1.21mmol)、三乙胺(123 mg，1.22mmol)和粉末状4_分子筛(400mg)。将所得悬浮液在50℃ 下加热1.5h，接着将温度升高至75℃，加入2-(三甲基甲硅烷基)乙 醇(590mg，5.02mmol)。再继续加热1.5h。随后将反应混合物冷却， 经Celite滤垫过滤并减压浓缩滤液。剩余物经硅胶层析纯化，用20％ 及40％乙酸乙酯的己烷液顺次洗脱，得到化合物806(400mg，78％)， 为白色固体。HPLC：100％，于15.3min(保留时间)(Hypersil C18 BDS 柱，250×4.6mm，5μm，检测波长254nm，流速1mL/min。线性梯度： 15分钟内为90％的0.1％三氟乙酸的水溶液，10％乙腈(起始)至100％ 乙腈，接着的5分钟内使用100％乙腈)，MS(ES)：m/z 524[M+H]+。Rf＝ 0.79(SiO2，50％乙酸乙酯的己烷液)。Mpt＞300℃.[α]25D＝-1.8° (c＝1.0，MeOH).1H NMR(CDCl3)：δ＝7.96(d，J＝8.3Hz，1H)，7.83(s，1H)，7.73 (dd，J＝8.3 and 2.0Hz，1H)，4.72(bs，1H)，4.19(t，J＝12.0Hz，2H)，4.05(m，1H)， 3.45(d，J＝8.3Hz，1H)，3.12(d，J＝8.3Hz，1H)，2.36(t，J＝12.0Hz，1H)，1.61(s， 6H)，1.04(t，J＝12.0Hz，2H)and 0.05ppm(s，6H). 化合物806的绝对立体化学构型没有确定。虽然该化合物代表单独 的对映体，但其命名和结构没有反映出化合物的绝对立体化学构型。

                    实施例807

按照与实施例806中描述的相同方法制备化合物807，不同之处 在于使用化合物805代替化合物804作为原料。所得化合物807的 收率为80％。[α]25D＝+1.1(c＝1.0，MeOH)。化合物807的绝对立体化 学构型没有确定。虽然该化合物代表单独的对映体，但其命名和结 构没有反映出化合物的绝对立体化学构型。

                    实施例808

[3aR-(3aα，4β，5α，7β，7aα)]-4-(八氢-5-氨基-4，7-二甲基-1，3-二氧代-4，7-环 氧-2H-异吲哚-2-基)-2-(三氟甲基)苄腈(808)

将化合物806(400mg，0.76mmol)的二氯甲烷(10mL)溶液用三氟 乙酸(2mL)处理，然后将混合物在室温下搅拌2h。随后加入饱和碳 酸钠水溶液(20mL)和固体碳酸钾将反应物碱化(pH＝9)。分离出有机 相，将水层用二氯甲烷萃取(3×40mL)。合并的有机萃取液经硫酸钠 干燥，过滤并浓缩，得到化合物808(283mg，99％)，为白色固体。HPLC： 100％，于10.5min(保留时间)(Hypersil C18 BDS柱，250×4.6mm，5μm， 检测波长254nm，流速1mL/min。线性梯度：15分钟内为90％的0.1％ 三氟乙酸的水溶液，10％乙腈(起始)至100％乙腈，接着的5分钟内使 用100％乙腈)，MS(ES)：m/z 380[M+H]+。Rf＝0.59(SiO2，5％MeOH 的二氯甲烷溶液)。[α]25D＝-26.7°(c＝1.0， MeOH).Mpt＝150-152℃.1H NMR(CD3OD)：δ＝8.12(d，J＝8.3Hz，1H)，7.94 (s，1H)，7.83(dd，J＝8.3 and 2.0Hz，1H)，3.66(d，J＝7.2Hz，1H)，3.21(m，4H)，2.16 (t，J＝12.0Hz，1H)，1.51(s，3H)，1.49(s，3H)and 1.42ppm(dd，J＝12.0 and 5.0Hz， 1H). 化合物808的绝对立体化学构型没有确定。虽然该化合物代表单独 的对映体，但其命名和结构没有反映出化合物的绝对立体化学构型。

                                       实施例809

[3aS-(3aα，4β，5α，7β，7aα)]-4-(八氢-5-氨基-4，7-二甲基-1，3-二氧代-4，7-环 氧-2H-异吲哚-2-基)-2-(三氟甲基)苄腈(809)

按照与实施例808中描述的相同方法制备化合物809，不同之处 在于使用化合物807代替化合物806作为原料。分离出的化合物809 的总收率为94％。[α]25D＝+27.3(c＝1.0，MeOH)。化合物809的绝对 立体化学构型没有确定。虽然该化合物代表单独的对映体，但其命 名和结构没有反映出化合物的绝对立体化学构型。

                                      实施例810

(3aα，4β，5α，7β，7aα)-4-(八氢-5-乙基磺酰氨基-4，7-二甲基-1，3-二氧代- 4，7-环氧-2H-异吲哚-2-基)-2-(三氟甲基)苄腈(810)

往25mL圆底烧瓶中装入化合物808和809的外消旋混合物(102 mg，0.27mmol)和二氯甲烷(10mL)。加入乙磺酰氯(54.3mg，0.42mmol) 和三乙胺(43.6mg，0.43mmol)，将所得的混合物在室温下搅拌过夜。 反应混合物经TLC分析(SiO2，EtOAc)表明仍存在原料，因此再加入 等量的乙磺酰氯(54.3mg，0.42mmol)并在室温下继续搅拌4h。随后 将反应混合物用二氯甲烷(25mL)稀释，用水(10mL)洗涤。经硫酸镁 干燥，过滤并浓缩，得到黄色油状物。将所述油状物经硅胶层析纯 化，依次用25％乙酸乙酯的己烷液、50％乙酸乙酯的己烷和EtOAc 洗脱，得到化合物810(55.9mg，44％)，为白色固体。HPLC：100％， 于13.8min(保留时间)(Hypersil C18 BDS柱，250×4.6mm，5μm，检测 波长254nm，流速1mL/min。线性梯度：15分钟内为90％的0.1％ 三氟乙酸的水溶液，10％乙腈(起始)至100％乙腈，接着的5分钟内使 用100％乙腈)，MS(ES)：m/z 472[M+H]+。Rf＝0.72(EtOAc)。 Mpt＝189-192℃.1H NMR(CDCl3)：δ＝7.94(d， J＝8.3Hz，1H)，7.85(s，1H)，7.74(dd，J＝8.3 and 2.0Hz，1H)，5.72(d，J＝8.3Hz， 1H)，3.71(m，1H)，3.51(d，J＝7.2Hz，1H)，3.18(d，J＝7.2Hz，1H)，3.11(q，J＝7.2 Hz，2H)，2.37(t，J＝12.0Hz，1H)，1.67(m，1H)，1.62(s，3H)，1.61(s，3H)and 1.40 ppm(t，J＝7.2Hz，3H). 化合物810的绝对立体化学构型没有确定。虽然该化合物代表单独 的对映体，但其命名和结构没有反映出化合物的绝对立体化学构型。

                                   实施例811

(3aα，4β，5α，7β，7aα)-4-(八氢-5-[[((苯基甲基)氨基)羰基]氧基]-4，7-二甲 基-1，3-二氧代-4，7-环氧-2H-异吲哚-2-基)-2-(三氟甲基)苄腈(811)

往25mL圆底烧瓶中装入化合物222D(102mg，0.27mmol)和 THF(2mL)。加入异氰酸苄酯(37.7mg，0.28mmol)，将所得的混合物 在室温下搅拌1.5h，随后再于60℃下加热1.5h。接着依次加入氢化 钠(50mg，60％悬浮于矿物油中)和另外的异氰酸苄酯(37.7mg，0.28 mmol)。继续在60℃下加热过夜。随后加入异氰酸苄酯(75.4mg，0.56 mmol)和THF(2mL)，将反应物再次于60℃下加热3h。随后将反应 混合物冷却至室温，减压浓缩，得到灰白色固体。加入乙醚(20mL)， 形成沉淀物。将混合物过滤，将滤液浓缩至白色固体，该产物经制 备型HPLC进一步纯化。将含所需产物的洗脱份浓缩，加入饱和碳 酸氢钠溶液(15mL)。将水层用二氯甲烷(3×25mL)萃取，经硫酸镁 干燥，过滤并浓缩，得到化合物811(119mg，80％)，为白色固体。HPLC： 100％，于15.3min(保留时间)(Hypersil C18 BDS柱，250×4.6mm，5um， 检测波长254nm，流速1mL/min.线性梯度：15分钟内为90％0.1％ 三氟乙酸的水溶液，10％乙腈(起始)至100％乙腈，接着的5分钟内使 用100％乙腈)，MS(ES)：m/z 514[M+H]+。Rf＝0.58(SiO2，50％乙酸乙 酯的己烷液)。 Mpt＞300℃。1H NMR(CDCl3)：δ＝7.94(d，J＝8.1Hz，1H)，7.85(s，1H)，7.74(m， 1H)，7.36-734(m，5H)，5.07(bs，1H)，4.92(m，1H)，4.39(bs，2H)，3.59(m，1H)，3.11 (m，1H)，2.35(t，J＝12.0Hz，1H)and 1.61ppm(s，6H). 化合物811的绝对立体化学构型没有确定。虽然该化合物代表单独 的对映体，但其命名和结构没有反映出化合物的绝对立体化学构型。

                    实施例812

[3aR-(3aα，4β，5α，7β，7aα)]-2-(4-氰基-3-(三氟甲基)苯基)-六氢-4，7-二甲 基-1，3-二氧代-4，7-环氧-N-甲基-N-苯基-1H-异吲哚-5-甲酰胺(812)

往干燥、经氮气吹扫的100mL圆底烧瓶中加入化合物804(100 mg，0.245mmol)和二氯甲烷(10mL)。将所述溶液在室温下搅拌，加 入草酰氯(311mg，2.45mmol)和N，N-二甲基甲酰胺(28.0mg，0.387 mmol)。观察到有气体释放出，将反应物在室温下搅拌1h。随后将 所得溶液减压浓缩至干，加入二氯甲烷(10mL)。加入N-甲基苯胺(262 mg，2.45mmol)，在室温下搅拌反应物15h。减压浓缩所得溶液后， 将所得的油状物经硅胶层析纯化，使用50％乙酸乙酯的己烷液洗脱， 得到含N-甲基苯胺的橙色油状物。该物质再次经硅胶层析纯化，使 用40％乙酸乙酯的己烷液洗脱，得到化合物812(115mg，94％)，为白 色泡沫体。HPLC：100％，于18.7min(保留时间)(HypersilC18 BDS柱， 250×4.6mm，5μm，检测波长254nm，流速1mL/min.线性梯度：15 分钟内为90％的0.1％三氟乙酸的水溶液，10％乙腈(起始)至100％乙 腈，接着的5分钟内使用100％乙腈)，MS(ES)：m/z 498[M+H]+。Rf＝ 0.37(SiO2，40％乙酸乙酯的己烷液)。Mpt＞300℃.[α]25D＝- 30.0°(c＝1.0，MeOH).1H NMR(CDCl3)：δ＝7.92(d，J＝8.4Hz，1H)，7.84(d，J＝ 1.5Hz，1H)，7.73(dd，J＝8.3 and 2.0Hz，1H)，7.52-7.35(m，3H)，7.17(d，J＝7.1Hz， 2H)，4.24(d，J＝7.3Hz，1H)，3.30(s，3H)，3.28(d，J＝7.3Hz，1H)，3.09-2.96(m， 1H)，2.10-1.99(m，1H)，1.81(t，J＝12.0Hz，1H)，1.56(s，3H)and 1.41ppm(s，3H). 化合物812的绝对立体化学构型没有确定。虽然该化合物代表单独 的对映体，但其命名和结构没有反映出化合物的绝对立体化学构型。

                    实施例813

往25mL圆底烧瓶中装入二噁烷(3mL)、化合物805(76.3mg， 0.187mmol)、二苯基磷酰基叠氮化物(62.6mg，0.227mmol)、三乙胺 (23.2mg，0.230mmol)和粉末状4_分子筛(200mg)，将所得悬浮液在 50℃下加热1.5h。将温度升高至75℃，加入苯酚(93.0mg，0.988 mmol)。继续加热1.5h。随后将反应混合物冷却，经Celite滤垫过滤， 将滤液减压浓缩。剩余物经硅胶层析纯化，用10％-50％乙酸乙酯的 己烷液洗脱，得到化合物813(71.5mg，77％)，为白色固体。HPLC： 100％，于15.9min(保留时间)(Hypersil C18 BDS柱，250×4.6mm，5um， 检测波长254nm，流速1mL/min.线性梯度：15分钟内为90％的0.1％ 三氟乙酸的水溶液，10％乙腈(起始)至100％乙腈，接着的5分钟内使 用100％乙腈)，Rf＝0.70(SiO2，50％乙酸乙酯的己烷洗脱液)。 [α]25D＝+13.0°(c＝1.0，Me0H).Mpt＞300℃.HPLC：Rt＝15.9min.1H NMR (CD3OD)；δ＝8.14(d，J＝8.3Hz，1H)，7.95(s，1H)，7.85(dd，J＝8.3 and 2.0Hz， 1H)，7.41-7.12(m，5H)，4.06(dd，J＝12.0 and 5.0Hz，1H)，3.55(d，J＝7.2Hz，1H)， 3.29(d，J＝7.2Hz，1H)，2.29(t，J＝12.0Hz，1H)，1.71(dd，J＝12.0 and 5.0Hz，1H)， 1.56(s，3H) and 1.54ppm(s，3H). 化合物813的绝对立体化学构型没有确定。虽然该化合物代表单独 的对映体，但其命名和结构没有反映出化合物的绝对立体化学构型。

                    实施例814

按照与实施例813中描述的相同方法制备化合物814，不同之处 在于使用化合物804代替化合物805作为原料。分离出的化合物814 的总收率为62％。[α]25D＝-11.7°(c＝1.0，MeOH)。化合物814的绝对 立体化学构型没有确定。虽然该化合物代表单独的对映体，但其命 名和结构没有反映出化合物的绝对立体化学构型。

                    实施例815

将化合物807(0.060g，0.15mmol)溶解在2mL二氯甲烷中，加入 三乙胺(0.020g，0.16mmol)和催化量的DMAP，接着加入异丁酰氯 (0.02g，0.16mmol)。在23℃下搅拌反应物1h，此时HPLC显示原料 消耗完全。将反应物用二氯甲烷稀释，依次用1N HCl、饱和碳酸氢 钠和盐水洗涤，干燥(硫酸镁)，过滤并真空浓缩，得到化合物815(0.06 g，83％)，为白色固体。不必进行纯化。HPLC：100％，于3.12min(YMC S5 ODS柱)，在4分钟内用含0.2％磷酸的10-90％甲醇水溶液梯度洗 脱，于220nm检测。LC/MS-[M+H]＝450.12。化合物815的绝对立 体化学构型没有确定。虽然该化合物代表单独的对映体，但其命名 和结构没有反映出化合物的绝对立体化学构型。

                                     实施例816

[3aR-(3aα，4β，5α，7β，7aα)]-4-(八氢-5-[[[(环丙基甲基)氨基]羰基]氨基]- 4，7-二甲基-1，3-二氧代-4，7-环氧-2H-异吲哚-2-基)-2-(三氟甲基)苄腈 (816)

往50mL圆底烧瓶中装入化合物815(0.052g，0.10mmol)、甲基 亚砜(2mL)和氨基甲基环丙烷(10μL，8.2mg，0.11mmol)。搅拌反应物 4h后，将反应混合物用水(9mL)和饱和碳酸氢钠溶液(1mL)稀释。 用二氯甲烷萃取(1×20mL，随后1×10mL)，经硫酸镁干燥，过滤并 浓缩，得到粗制产物，为黄色油状物。经硅胶层析纯化，用20％至50％ 乙酸乙酯的己烷液洗脱，得到化合物816(33.6mg，67％)。HPLC： 100％，于12.9min(保留时间)(Hypersil C18 BDS柱，250×4.6mm，5μm， 检测波长254nm，流速1mL/min。线性梯度：15分钟内为90％的0.1％ 三氟乙酸的水溶液，10％乙腈(起始)至100％乙腈，接着的5分钟内使 用100％乙腈)，MS(ES)：m/z 477[M+H]+。Rf＝0.42(SiO2，50％乙酸乙 酯的己烷液)。Mpt＞300℃.[α]25D＝- 31.5°(c＝1.0，MeOH).1H NMR(CDCl3)：δ＝8.12(d，J＝8.3Hz，1H)，7.94(s，1H)， 7.84(d，J＝8.3Hz，1H)4.12-4.06(m，1H)，3.46(d，J＝8.3Hz，1H)，3.34(bs，1H)， 3.22(d，J＝8.3Hz，1H)，1.41(t，J＝12.3Hz，1H)，1.54(s，3H)，1.50(s，3H)，1.01- 0.92(m，1H)，0.51-0.45(m，2H)and 0.21-0.17ppm(m，2H). 化合物816的绝对立体化学构型没有确定。虽然该化合物代表单独 的对映体，但其命名和结构没有反映出化合物的绝对立体化学构型。

                    实施例817

往50mL圆底烧瓶中装入化合物809(0.057g，0.15mmol)和异氰 酸苯酯(0.1mL，0.9mmol)。在65℃-70℃下加热3h后，HPLC分析反 应物表明原料消耗完全。用EtOAc(0.5mL)稀释，经硅胶层析纯化， 用60％乙酸乙酯的己烷液洗脱，得到化合物817(39mg，52％)，为白 色固体。HPLC：100％，于14.2min(保留时间)(HypersilC18 BDS柱，250 ×4.6mm，5μm，检测波长254nm，流速1mL/min.线性梯度：15分钟 内为90％的0.1％三氟乙酸的水溶液，10％乙腈(起始)至100％乙腈， 接着的5分钟内使用100％乙腈)，MS(ES)：m/z 499[M+H]+。Rf＝ 0.17(50％乙酸乙酯的己烷液)。Mpt＞ 300℃.[α]25D＝+30.7°(c＝1.0，MeOH).1H NMR(CDCl3)：δ＝8.12(d，J＝8.3Hz， 1H)，7.94(s，1H)，7.84(d，J＝8.3Hz，1H)，7.35(d，J＝7.8Hz，2H)，7.26(t，J＝7.7 Hz，2H)，6.99(t，J＝7.1Hz，1H)，4.19-4.14(m，1H)，3.51(d，J＝7.1Hz，1H)，3.27- 3.25(m，2H)，2.31(t，J＝12.3Hz，1H)，1.63-1.61(m，1H)，1.56(s，3H)and 1.55ppm (s，3H). 化合物817的绝对立体化学构型没有确定。虽然该化合物代表单独 的对映体，但其命名和结构没有反映出化合物的绝对立体化学构型。

                    实施例818

[3aR-(3aα，4β，5α，7β，7aα)]-4-(八氢-5-[[(二甲氨基)磺酰基]氨基]-4，7-二甲 基-1，3-二氧代-4，7-环氧-2H-异吲哚-2-基)-2-(三氟甲基)苄腈(817)

往50mL圆底烧瓶中装入化合物808(100mg，0.28mmol)、二氯 甲烷(2mL)、三乙胺(28.3mg，0.28mmol)和二甲基氨磺酰氯(40.2mg， 0.28mmol)。随后将反应物在室温下搅拌3h，此时用水(10mL)猝灭 然后用二氯甲烷(2×20mL)萃取。将有机层再用水(10mL)洗涤一次， 经硫酸镁干燥，过滤并浓缩至黄色油状物。经硅胶层析纯化，用20％ 乙酸乙酯的己烷溶液至100％EtOAc洗脱，得到化合物818(64.2mg， 47％)。HPLC：100％，于14.2min(保留时间)(HypersilC18 BDS柱，250× 4.6mm，5μm，检测波长254nm，流速1mL/min.线性梯度：15分钟 内为90％的0.1％三氟乙酸的水溶液，10％乙腈(起始)至100％乙腈， 接着的5分钟内使用100％乙腈)，MS(ES)：m/z 487[M+H]+。Rf＝ 0.19(SiO2，50％乙酸乙酯的己烷液)。 [α]25D＝-22.8°(c＝1.0，MeOH).Mpt＝262-269℃.1H NMR(CDCl3)：δ＝8.12(d，J ＝8.3Hz，1H)，7.94(s，1H)，7.84(d，J＝8.2Hz，1H)，3.61(m，1H)，3.54(d，J＝7.2 Hz，1H)，3.35(s，1H)，3.22(d，J＝7.2Hz，1H)，2.79(s，6H)，2.27(t，J＝12.4Hz，1H)， 1.68(m，1H)，1.54(s，3H)and 1.53ppm(s，3H). 化合物818的绝对立体化学构型没有确定。虽然该化合物代表单独 的对映体，但其命名和结构没有反映出化合物的绝对立体化学构型。

                    实施例819

将4-(2，5-二氧代-2，5-二氢-吡咯-1-基)-异喹啉-1-甲腈(1g， 4mmol)、2，5-二甲基-2，3-二氢呋喃-3-酮(0.45g，4mmol)、DMAP(20mg， 0.16mmol)、无水二氯甲烷(10mL)和THF(20mL)的混合物在80℃下 搅拌过夜，随后减压浓缩。经硅胶快速层析纯化，用EtOAc/庚烷洗 脱(1∶4至1∶0的梯度)，得到固体物，将该固体物在EtOAc和庚烷的 混合物中结晶，得到0.4g(28％)化合物819，为黄色固体物。HPLC： 90％，于3.37min(保留时间)(YMC S5 ODS-A柱，4.6×50mm，在4 分钟内用含0.2％磷酸的10-90％甲醇水溶液洗脱，4mL/min，于220nm 检测)。MS(ES)：m/z 362[M+H]+。化合物819为各对映体的外消旋混 合物。其命名和结构没有反映出化合物的绝对立体化学构型。

                    实施例820

氩气气氛中，往搅拌着的冷却至0℃的化合物819(36mg，0.1 mmol)的无水THF溶液(1mL)中滴加入MeMgBr(1.4M THF溶液， 0.3mL，0.4mmol)。将混合物在0℃下搅拌1h后，再于室温下搅拌10 min，在搅拌下加入饱和氯化铵水溶液。将混合物用EtOAc萃取(3X)。 合并的萃取液经硫酸钠干燥并减压浓缩。经硅胶快速层析纯化，用 EtOAc/庚烷(1∶2至1∶0的梯度)洗脱，得到固体物，将该固体物在乙 醇和水的混合物中结晶，得到化合物820(8mg，21％)，为白色固体。 HPLC：97％，于3.36min(保留时间)(YMC S5 ODS-A柱，4.6×50 mm，在4分钟内用含0.2％磷酸的10-90％甲醇水溶液洗脱，4mL/min， 于220nm检测)。MS(ES)：m/z 378[M+H]+。化合物820为各对映体的 外消旋混合物。其命名和结构没有反映出化合物的绝对立体化学构 型。

                                     实施例821

[3aS-(3aα，4β，5β，7β，7aα)]-5-(八氢-5-羟基-4，7-二甲基-1，3-二氧代-4，7-环 氧-2H-异吲哚-2-基)-3-甲基-2-吡啶甲腈(821)

将化合物772B(20mg，0.14mmol)、化合物751(48mg，0.20mmol) 和4_分子筛(100mg)在DMA(0.2mL)中的混合物在70℃的密封试管 中加热5小时。将反应混合物过滤，将剩余物用EtOAc洗涤。将滤 液合并，用H2O(2×5mL)和盐水(1×5mL)洗涤。将合并的水层用 EtOAc(2×5mL)萃取，将合并的有机层经硫酸钠干燥并减压浓缩。 经硅胶快速层析纯化，用30％丙酮/三氯甲烷洗脱，得到55mg含化 合物751的产物。将产物再次经硅胶快速层析纯化，用90％EtOAc/ 己烷洗脱，得到化合物821(46mg，62％)，为白色固体。HPLC：100％， 于2.27min(保留时间)(YMC S5 ODS柱，4.6×50mm，在4分钟内 用含0.2％磷酸的10-90％甲醇水溶液洗脱，4mL/min，于220nm检测)。 MS(ES)：m/z 328.2[M+H]+。化合物821的绝对立体化学构型通过中间 体化合物751的已知立体化学构型及其所保留的构型确定。绝对立 体化学构型如上式所示并按命名法命名。

                                     实施例822

[3aR-(3aα，4β，4aα，5aα，6β，7aα)]-4-(八氢-4a-羟基-4，6-二甲基-1，3-二氧代- 4，6-环氧环丙烷并[f]异吲哚-2(1H)-基)-2-(三氟甲基)苄腈(822)

在氩气气氛中，将在干燥烧瓶中的化合物222B(114mg，0.231 mmol)的1，2-二氯乙烷(2.30mL)溶液用冰浴冷却至0℃。往该溶液中 加入Et2Zn溶液(0.460mL，0.462mmol，1M己烷溶液)，随后滴加氯碘 代甲烷(70.0μL，0.926mmol)。将反应混合物在0℃下搅拌1h，随后 在室温下搅拌18h。经TLC和HPLC方法判断反应仅仅完成50％， 加入更多的Et2Zn(0.469mL)和氯碘代甲烷(70μL)，将混合物在室温下 搅拌2.5h。将反应混合物用饱和氯化铵溶液猝灭，用叔丁基甲基醚 萃取(2×10mL)，将合并的有机层经硫酸镁干燥，随后真空干燥。 将粗制物质(174mg)溶解在乙醇(5mL)和浓盐酸(2mL)的混合物中， 在室温下搅拌1h。随后将混合物用水稀释，用EtOAc萃取(1×25 mL)。将有机层用盐水洗涤(1×25mL)，干燥并减压浓缩。经制备型 TLC(SiO2)纯化，用30％丙酮/三氯甲烷洗脱，得到化合物822(9.1mg， 10％)，为黄褐色固体。HPLC：90％，于3.15min(保留时间)(YMC S5 ODS柱，4.6×50mm，在4分钟内用含0.2％磷酸的10-90％甲醇水溶 液洗脱，4mL/min，于220nm检测)。MS(ES)：m/z 393.03[M+H]+。化合 物822为各对映体的外消旋混合物。其命名和结构没有反映出化合 物的绝对立体化学构型。

                                           实施例823

[3′aR-(3′aα，4′β，7′β，7′aα]-四氢-4′，7′-二甲基-2′-[4-氰基-3(三氟甲基)苯基]- 螺[1，3-二氧戊环-2，5′-4，7-环氧(5H)异吲哚]-1′，3′(2′H，4′H)-二酮(823)

将化合物796(44.3mg，0.117mmol)、乙二醇(0.065mL，1.17mmol) 和对甲苯磺酸(2.2mg，0.012mmol)在苯(3mL)中的混合物回流18h。 随后将反应混合物用苯稀释，用5％碳酸钠(1×10mL)、H2O(1×10 mL)洗涤，干燥(硫酸钠)并真空浓缩。经硅胶快速层析纯化，用10％ 丙酮/三氯甲烷洗脱，得到化合物823(44.5mg，90％)，为白色固体。 HPLC：99％，于3.11min(保留时间)(YMC S5 ODS柱，4.6×50mm，在 4分钟内用含0.2％磷酸的10-90％甲醇水溶液洗脱，4mL/min，于 220nm检测)。MS(ESI)：m/z 423.01[M+H]+。化合物823为各对映体 的外消旋混合物。其命名和结构没有反映出化合物的绝对立体化学 构型。

                                              实施例824

[3′aR-(3′aα，4′β，6′β，7′β，7′aα)]-四氢-6′-羟基-4′，7′-二甲基-2′-[4-氰基-3(三 氟甲基)苯基]-螺[1，3-二氧戊环-2，5′-4，7-环氧(5H)异吲哚]-1′，3′(2′H，4′H)- 二酮(824B)

A.(824A)

室温下，将二甲基二氧杂环丙烷溶液(32mL，1.588mmol，0.05M) 加入至化合物222B(521.6mg，1.059mmol)的丙酮溶液(1mL)中。2.5h 后，HPLC显示反应完全，随后减压浓缩，得到559mg(定量)粗制的 化合物824A，为黄色固体。

B.[3′aR-(3′aα，4′β，6′β，7′β，7′aα)]-四氢-6′-羟基-4′，7′-二甲基-2′-[4-氰 基-3(三氟甲基)苯基]-螺[1，3-二氧戊环-2，5′-4，7-环氧(5H)异吲哚]- 1′，3′(2′H，4′H)-二酮(824B)

将化合物824A(57.5mg，0.113mmol)、乙二醇(0.100mL，1.13 mmol)和对甲苯磺酸(11.0mg，0.057mmol)在苯(5mL)中的混合物回流 18h。将反应混合物真空浓缩。经硅胶快速层析纯化，用30％丙酮/ 三氯甲烷洗脱，得到化合物824B(43mg，88％)，为白色固体。HPLC： 98％，于2.87min(保留时间)(YMC S5 ODS柱，4.6×50mm，在4分 钟内用含0.2％磷酸的10-90％甲醇水溶液洗脱，4mL/min，于220nm 检测)。MS(ESI)：m/z 439.07[M+H]+。化合物824B为各对映体的外消 旋混合物。其命名和结构没有反映出化合物的绝对立体化学构型。

                                    实施例825

[3aR-(3aα，4β，5β，7β，7aα)-4-[八氢-5-羟基-4，7-二甲基-1，3-二氧代-4，7-环 氧-2H-异吲哚-2-基]-3-氯-2-甲基苄腈(825)

将在密封试管中的4-氨基-3-氯-2-甲基-苄腈(23mg，0.14mmol)、 化合物752(44mg，0.21mmol)和4_分子筛(100mg)在DMA(0.2mL) 中的混合物在135℃下加热18h。经制备型TLC(SiO2)纯化，用30％ 丙酮/三氯甲烷洗脱，得到化合物825(5.0mg，10％)，为黄色薄膜状物。 HPLC：90％，于2.37min(保留时间)(YMC S5 ODS柱，4.6×50mm， 在4分钟内用含0.2％磷酸的10-90％甲醇水溶液洗脱，4mL/min，于 220nm检测)。MS(ES)：m/z 360.97[M+H]+。化合物825的绝对立体化 学构型通过中间体化合物752的已知立体化学构型及其所保留的构 型确定。绝对立体化学构型如上式所示并按命名法命名。

                                    实施例826

[3aR-(3aα，4β，5β，7β，7aα)-4-[八氢-5-羟基-4，7-二甲基-1，3-二氧代-4，7-环 氧-2H-异吲哚-2-基]-2-(三氟甲基)苯硫代甲酰胺(826)

将H2S气体浓缩至-78℃的pyrex试管中，直至得到5mL液体。 在-78℃下加入化合物471Di(108mg，0.284mmol)、Et3N(50.0μL，0.341 mmol)和DMF(1mL)，密封试管。将反应混合物温热至室温，同时在 鼓风罩下搅拌，接着在90℃下加热50min。此时，反应物的颜色变 为绿色。将反应混合物再次冷却至-78℃，通过HPLC检测反应进程。 所有原料已经完全消耗，因此将混合物温热至室温以除去H2S，用 EtOAc稀释，用水洗涤(4×10mL)。经硅胶快速层析纯化，用50％ 丙酮/三氯甲烷洗脱，得到化合物826(116mg，98％)，为白色固体。 HPLC：98％，于1.90min(保留时间)(YMC S5 ODS柱，4.6×50mm， 在4分钟内用含0.2％磷酸的10-90％甲醇水溶液洗脱，4mL/min，于 220nm检测)。MS(ES)：m/z 415.23[M+H]+。化合物826的绝对立体化 学构型通过中间体化合物471Di的已知立体化学构型及其所保留的 构型确定。绝对立体化学构型如上式所示并按命名法命名。

                                  实施例827

[3aR-(3aα，4β，5β，7β，7aα]-2-[3-(三氟甲基)-4-(2-噻唑基)苯基]-5-(乙 酰氧基)-六氢-4，7-二甲基-4，7-环氧-1H-异吲哚-1，3(2H)-二酮(827i)和 [3aR-(3aα，4β，5β，7β，7aα)]-2-[3-(三氟甲基)-4-(2-噻唑基)苯基]六氢-5-羟 基-4，7-二甲基-4，7-环氧-1H-异吲哚-1，3(2H)-二酮(827ii)

将化合物826(61.6mg，0.149mmol)、溴代乙醛缩二乙醇(30.0μL， 0.186mmol)和对甲苯磺酸(1mg，约量)的AcOH(1mL)溶液在100℃ 下加热1h。将所述反应混合物冷却至室温，用H2O稀释。将混合物 用EtOAc(1×10mL)萃取，将所得的有机层用水(1×10mL)、饱和碳 酸氢钠(1×10mL)和盐水(1×10mL)洗涤，随后用硫酸镁干燥并真空 浓缩。经制备型TLC(SiO2)纯化，用30％丙酮/三氯甲烷洗脱，得到 两种产物，均将它们进行进一步纯化。将较低极性产物经硅胶快速 层析进一步纯化，用50％EtOAc/己烷洗脱，得到化合物827i(30.0mg， 42％)，为白色固体。较高极性产物经硅胶快速层析进一步纯化，用10％ 丙酮/三氯甲烷洗脱，得到化合物827ii(4.6mg，7％)，为白色固体。化 合物827i：HPLC：99％，于3.12min(保留时间)(YMC S5 ODS柱，4.6× 50mm，在4分钟内用含0.2％磷酸的10-90％甲醇水溶液洗脱，4 mL/min，于220nm检测)。MS(ES)：m/z 481.04[M+H]+。化合物827ii： HPLC：99％，于2.62min(保留时间)(YMC S5 ODS柱，4.6×50mm， 在4分钟内用含0.2％磷酸的10-90％甲醇水溶液洗脱，4mL/min，于 220nm检测)。MS(ES)：m/z 439.02[M+H]+。化合物827i和827ii的绝 对立体化学构型通过中间体化合物471Di的已知立体化学构型及其 所保留的构型确定。绝对立体化学构型如上式所示并按命名法命名。

                                     实施例828

[3aR-(3aα，4β，5β，7β，7aα)]-5-(八氢-5-羟基-4，7-二甲基-1，3-二氧代-4，7-环 氧-2H-异吲哚-2-基)-3，4-二甲基-2-吡啶甲腈(828)

将在密封试管中的5-氨基-3，4-二甲基吡啶-2-甲腈(30mg，0.20 mmol)、化合物752(65mg，0.31mmol)和4_分子筛(200mg)的DMA(1 mL)混合物在160℃下加热18h。将反应混合物过滤，将剩余物用 EtOAc洗涤，将合并的滤液减压浓缩。经制备型TLC(SiO2)纯化，用 90％EtOAc/己烷洗脱，得到化合物828(42mg，40％)，为浅粉红色固 体。HPLC：94％，于1.92和2.00min(保留时间-阻转异构体)(YMC S5 ODS柱，4.6×50mm，在4分钟内用含0.2％磷酸的10-90％甲醇水 溶液洗脱，4mL/min，于220nm检测)。MS(ES)：m/z 342.21[M+H]+。 化合物828的绝对立体化学构型通过中间体化合物752的已知立体 化学构型及其所保留的构型确定。绝对立体化学构型如上式所示并 按命名法命名。

                                     实施例829

[3aS-(3aα，4β，5β，7β，7aα)]-5-(八氢-5-羟基-4，7-二甲基-1，3-二氧代-4，7-环 氧-2H-异吲哚-2-基)-3，4-二甲基-2-吡啶甲腈(829)

将在密封试管中的5-氨基-3，4-二甲基吡啶-2-甲腈(30mg，0.20 mmol)、化合物751(65mg，0.31mmol)和4_分子筛(200mg)在 DMA(0.25mL)中的混合物在160℃下加热18h。将反应混合物过滤， 将剩余物用EtOAc洗涤，将合并的滤液用H2O(2×10mL)、盐水(1× 10mL)洗涤，干燥(硫酸钠)并减压浓缩。经硅胶快速层析纯化，用 90％EtOAc/己烷洗脱，接着经制备型TLC(SiO2)纯化，用90％EtOAc/ 己烷洗脱，得到化合物829(35mg，33％)，为浅粉红色固体。HPLC： 98％，于1.92和2.00min(保留时间-阻转异构体)(YMC S5 ODS柱， 4.6×50mm，在4分钟内用含0.2％磷酸的10-90％甲醇水溶液洗脱， 4mL/min，于220nm检测)。MS(ES)：m/z 342.21[M+H]+。化合物829 的绝对立体化学构型通过中间体化合物751的已知立体化学构型及 其所保留的构型确定。绝对立体化学构型如上式所示并按命名法命 名。

                    实施例830

将化合物791B(41mg；0.1mmol)、2.0M甲胺的THF溶液(0.2mL； 0.4mmol)、1-羟基-7-氮杂苯并三唑(17mg；0.12mmol)、EDCI(40mg； 0.2mmol)和二异丙基乙胺(0.075mL；0.4mmol)在0.5mLDMF中的溶 液在55℃下加热3h。使反应混合物在EtOAc(20mL)和水(20mL)间 分配后，将有机层依次用1N NaOH(2×20mL)、饱和硫酸氢钾溶液(2 ×20mL)和盐水(20mL)洗涤。干燥(硫酸镁)并真空浓缩，得到剩余物， 将该剩余物在乙醚中结晶，得到化合物830(30mg，71％)，为白色固 体。HPLC：97.5％，于1.48min(保留时间)(Phenominex S5 ODS柱4.6 ×50mm，在2分钟内用含0.1％TFA的10-90％甲醇水溶液洗脱，4 mL/min，于254nm检测)；MS(ES)：m/z 422.30[M+H]+。化合物830为 各对映体的外消旋混合物。其命名和结构没有反映出化合物的绝对 立体化学构型。

                    实施例831

室温下，将一滴DMF加入至化合物792B(60mg；0.15mmol)和 草酰氯(0.026mL；0.3mmol)的二氯甲烷(1mL)溶液中。室温下搅拌2 小时后，真空除去挥发物。将剩余物溶于2mL异丙醇中。室温下静 置30分钟后，真空除去挥发物，将剩余物溶解在EtOAc∶异丙醇(9∶1， 20mL)中。使溶液在脱色碳存在下静置15min。经Celite过滤并浓缩 滤液，得到化合物831(56mg，83％)，为浅黄色泡沫体。HPLC：96.9％， 于1.52min(保留时间)(Phenominex S5 ODS柱，4.6×50mm，在2分 钟内用含0.1％TFA的10-90％甲醇水溶液洗脱，4mL/min，于254nm 检测)；MS(ES)：m/z 451.08[M+H]+。化合物831为各对映体的外消旋 混合物。其命名和结构没有反映出化合物的绝对立体化学构型。

                    实施例832

                    832i和832ii

采用正相制备型手性HPLC(CHIRALPAK OJ 5×50cm柱；用 25％MeOH/乙醇(1∶1)的己烷溶液洗脱(等度洗脱)，50mL/min)，将外 消旋化合物831(0.4g)分离成其对映异构体，得到170mg较快洗脱出 的对映异构体化合物832i(手性HPLC：8.97min；CHIRALPAK OJ 4.6 ×250mm柱；用20％MeOH/乙醇(1∶1)的己烷溶液洗脱，1mL/min)； HPLC：99％，于1.84min(保留时间)(Phenominex S5 ODS柱，4.6×50 mm，在2分钟内用含0.1％TFA的10-90％甲醇水溶液洗脱，4mL/min， 于254nm检测)；MS(ES)：m/z 451.06[M+H]+；和190mg较慢洗脱出 的对映异构体化合物832ii(手性HPLC：14.79min；CHIRALPAK OJ 4.6 ×250mm柱；用20％MeOH/乙醇(1∶1)的己烷溶液洗脱，1mL/min)； HPLC：99％，于1.85min(保留时间)(Phenominex S5 ODS柱4.6×50 mm，在2分钟内用含0.1％TFA的10-90％甲醇水溶液洗脱，4mL/min， 于254nm检测)；MS(ES)：m/z 451.03[M+H]+。化合物832i和832ii的 绝对立体化学构型没有确定。虽然各化合物代表单独的对映体，但 其命名和结构没有反映出化合物的绝对立体化学构型。

                    实施例833

室温下将化合物792B(45mg；0.11mmol)、甲磺酰胺(27mg； 0.28mmol)、4-二甲氨基吡啶(34mg；0.28mmol)和EDCI(24mg；0.12 mmol)在1mL二氯甲烷中的溶液搅拌18h。使反应混合物在 EtOAc(25mL)和水(25mL)间分配后，将有机层用饱和硫酸氢钾溶液 (25mL)，水(25mL)和盐水(25mL)洗涤。干燥(硫酸镁)并浓缩，得到 剩余物，该剩余物在乙醚中研磨，得到化合物833(29mg，55％)，为 灰白色粉末。HPLC：98％，于1.44min(保留时间)(Phenominex S5 ODS 柱4.6×50mm，在2分钟内用含0.1％TFA的10-90％甲醇水溶液洗 脱，4mL/min，于254nm检测)；MS(ES)：m/z 485.94[M+H]+。化合物 833为各对映体的外消旋混合物。其命名和结构没有反映出化合物的 绝对立体化学构型。

                                     实施例834

(3aα，4β，5α，7β，7aα)-2-(4-氰基-3-(三氟甲基)苯基)-六氢-4，7-二甲基-1，3- 二氧代-4，7-环氧-1H-异吲哚-5-甲腈(834)

将化合物792B(100mg；0.24mmol)、(甲氧基羰基氨磺酰基)三 乙基氢氧化铵、内盐(125mg；0.5mmol)和三乙胺(0.15mL；1mmol) 在2.5mLTHF中的混合物在室温下搅拌2h。使反应混合物在乙醚(30 mL)和水(30mL)间分配后，将有机层用饱和硫酸氢钾溶液(30mL)、 饱和碳酸氢钠溶液(30mL)和盐水(30mL)洗涤。干燥(硫酸镁)并真空 浓缩，得到化合物834(80mg，97％)，为白色粉末。HPLC：99％，于1.51 min(保留时间)(Phenominex S5 ODS柱，4.6×50mm，在2分钟内用 含0.1％TFA的10-90％甲醇水溶液洗脱，4mL/min，于254nm检测)； MS(ES)：m/z 390.03[M+H]+。化合物834为各对映体的外消旋混合物。 其命名和结构没有反映出化合物的绝对立体化学构型。

                    实施例835

将化合物793A(121mg；0.29mmol)和苄基胺(0.032mL；0.29 mmol)在0.6mL THF中的混合物在室温下搅拌18h。加入～5mL己 烷后，将所得悬浮液过滤并干燥，得到化合物835(135mg，89％)，为 白色粉末。HPLC：99％，于1.42min(保留时间)(Phenominex S5 ODS柱 4.6×50mm，在2分钟内用含0.1％TFA的10-90％甲醇水溶液洗脱， 于254nm检测)；MS(ES)：m/z 528.39[M+H]+。化合物835为各对映体 的外消旋混合物。其命名和结构没有反映出化合物的绝对立体化学 构型。

                    实施例836

将化合物793A(190mg；0.45mmol)和2.0M氨的THF溶液(0.3 mL；0.6mmol)在0.7mLTHF中的混合物在室温下搅拌。1小时后， 再加入2.0M氨的THF溶液(0.7mL；1.4mmol)，将反应混合物在室 温下搅拌18h。真空除去挥发物，将剩余物在己烷中研磨，得到化 合物835(145mg，74％)，为灰白色粉末。HPLC：95.1％，于1.28min(保 留时间)(Phenominex S5 ODS柱4.6×50mm，在2分钟内用含 0.1％TFA的10-90％甲醇水溶液洗脱，4mL/min，于254nm检测)； MS(ES)：m/z 438.26[M+H]+。化合物836为各对映体的外消旋混合物。 其命名和结构没有反映出化合物的绝对立体化学构型。

                    实施例837

将化合物793A(42mg；0.1mmol)和2.0M二甲胺的MeOH溶液 (0.1mL；0.1mmol)在0.5mLTHF中的混合物在室温下搅拌18h。真 空除去挥发物，将剩余物经0.5×5cm硅胶柱过滤，用～50mL EtOAc 洗脱。浓缩滤液后，将浅黄色剩余物溶解在乙醚中，加入0.3mL 1M HCl的乙醚溶液。真空除去挥发物，将固体剩余物在乙醚中研磨，得 到化合物837(25mg，50％)，为奶油色粉末。HPLC：99％，于1.31min(保 留时间)(Phenominex S5 ODS柱4.6×50mm，在2分钟内用含 0.1％TFA的10-90％甲醇水溶液洗脱，4mL/min，于254nm检测)； MS(ES)：m/z 466.33[M+H]+。化合物837为各对映体的外消旋混合物。 其命名和结构没有反映出化合物的绝对立体化学构型。

                    实施例838

将化合物793A(42mg；0.1mmol)和2.0M二甲胺的THF溶液 (0.1mL；0.1mmol)在0.5mLTHF中的混合物在室温下搅拌18h。真 空除去挥发物，将剩余物经0.5×5cm硅胶柱过滤，用～50mLEtOAc 洗脱。浓缩滤液后，将黄色剩余物溶解在乙醚中，加入0.3mL1M HCl的乙醚溶液。真空除去挥发物，将固体剩余物在乙醚中研磨，得到 化合物838(22mg，46％)，为黄色粉末。HPLC：99％，于1.28min(保 留时间)(Phenominex S5 ODS柱4.6×50mm，在2分钟内用含 0.1％TFA的10-90％甲醇水溶液洗脱，4mL/min，于254nm检测)； MS(ES)：m/z 452.31[M+H]+。化合物838为各对映体的外消旋混合物。 其命名和结构没有反映出化合物的绝对立体化学构型。

                    实施例839

A.4-甲基-苯并[1，2，5]噻二唑(839A)

0℃下，往2，3-二氨基甲苯(5.0g，40.9mmol)的吡啶(40mL)溶液 中滴加入亚磺酰氯(7.0mL，98.2mmol)。将反应混合物在0℃下搅拌30 min，随后加入水(200mL)。将溶液用二氯乙烷(2×250mL)萃取。将 合并的有机层用盐水洗涤，经硫酸钠干燥并真空浓缩，得到化合物 839A(5.57g)，为深棕色液体。

B.4-甲基-5-硝基-苯并[1，2，5]噻二唑(839B)

在0℃下，往4-甲基-苯并[1，2，5]噻二唑(5.57g，37.1mmol)的浓 硫酸(14.5mL)溶液中缓慢加入硝酸/硫酸(3.25mL/4.25mL)。将反应 混合物在0℃下搅拌20min，随后在室温下搅拌30min，接着倒入冰 水(200mL)中。过滤分离出所得的沉淀物，用水洗涤，经硅胶快速层 析纯化，用三氯甲烷洗脱，得到黄色固体状的化合物839B(1.5g)和 黄色固体的4-甲基-7-硝基苯并[1，2，5]噻二唑(2.0g)。

C.4-甲基-苯并[1，2，5]噻二唑-5-胺(839C)

将4-甲基-5-硝基-苯并[1，2，5]噻二唑(1.4g，7.18mmol)溶解在 THF(10mL)、乙酸(1mL)和水(21mL)中，加入铁粉(1.4g，25.0mmol， 325目)。将反应混合物在80℃下加热1.5h，冷却至室温，经Celite 过滤以除去铁粉。将溶液用三氯甲烷(2×250mL)萃取。将合并的有 机层用盐水洗涤，经硫酸钠干燥并真空浓缩，得到化合物839C(1.1g)， 为浅棕色固体物。

D.(839D)

将4-甲基-苯并[1，2，5]噻二唑-5-胺(0.10g，0.610mmol)、4_分子 筛(0.46g)和化合物752(0.128g，0.610mmol)溶解在装于密封试管中的 DMA(0.60mL)中。将反应混合物在190℃下加热1h，随后冷却至室 温。将溶液经Celite过滤以除去分子筛，接着将滤液依次用饱和氯化 铵(10mL)和盐水(10mL)洗涤。随后将有机层经硫酸钠干燥并真空浓 缩，得到黄色油状物。所得的物质经制备型TLC(硅胶)纯化，用20％丙 酮的三氯甲烷溶液洗脱，得到化合物839D(70mg)，为浅黄色固体物。 HPLC：98％，2.87min(保留时间)(YMC S-5 ODS-A柱，4.6×50mm，在 4分钟内用含0.2％磷酸的10-90％甲醇水溶液洗脱，4mL/min，于 220nm检测)。MS(ESI)：m/z 360.19[M+H]。化合物752的绝对立体化 学构型通过中间体化合物839D的已知立体化学构型及其所保留的构 型确定。绝对立体化学构型如上式所示并按命名法命名。

                    实施例840

将4-甲基-苯并[1，2，5]噻二唑-5-胺(0.078g，0.47mmol)、4_分子 筛(0.46g)和化合物751(0.100g，0.47mmol)溶解在装于密封试管中的 DMA(0.50mL)内。将反应混合物在190℃下加热1h，随后冷却至室 温。将溶液经Celite过滤以除去分子筛，随后将滤液依次用饱和氯化 铵(10mL)和盐水(10mL)洗涤。接着将有机层经硫酸钠干燥并真空浓 缩得到黄色油状物。所得的物质经制备型TLC(硅胶)纯化，用20％丙 酮的三氯甲烷溶液洗脱，得到化合物840(20mg)，为浅黄色固体物。 HPLC：97％，于2.87min(保留时间)(YMC S-5 ODS-A柱，4.6×50mm， 在4分钟内用含0.2％磷酸的10-90％甲醇水溶液洗脱，4mL/min，于 220nm检测)。MS(ESI)：m/z 360.30[M+H]。化合物840的绝对立体化 学构型通过中间体化合物751的已知立体化学构型及其所保留的构 型确定。绝对立体化学构型如上式所示并按命名法命名。

                                     实施例841

[3aR-(3aα，4β，5β，7β，7aα)]-4-(八氢-5-羟基-4，7-二甲基-1，3-二氧代-4，7-环 氧-2H-异吲哚-2-基)-3-甲基-2-(三氟甲基)苄腈(841E)

A.N-(4-氯-3-三氟甲基苯基)-2，2-二甲基丙酰胺(841A)

在30分钟内，往冷却至0-5℃的商品4-氯-3-(三氟甲基)苯胺(15.0 g，76.7mmol)的无水THF溶液(200mL)中依次加入三乙胺(11.7mL， 84.4mmol)和新戊酰氯(10.4mL，84.4mmol)。移开冰浴，将混合物在 室温下搅拌1h。将混合物用乙醚稀释并过滤。将滤液用水(2X)和盐 水洗涤，经硫酸镁干燥，过滤并浓缩。将剩余物在己烷中研磨，过 滤出固体物并真空干燥，得到化合物841A(20.4g，95％)。MS(ES)：m/z ＝280[M+1]+。

B.N-(4-氯-2-甲基-3-三氟甲基苯基)-2，2-二甲基-丙酰胺(841B)

往冷却至0-5℃的N-(4-氯-3-三氟甲基苯基)-2，2-二甲基丙酰胺 (2.29g，8.19mmol)的无水THF溶液(25mL)中加入1.6M正丁基锂的 己烷溶液(12.3mL，19.7mmol)，缓慢加入以保持温度低于5℃。将溶 液在0-5℃下搅拌1.5h。在20分钟内加入碘甲烷(0.56mL，9.01mmol) 的石油醚(2mL)溶液，同时保持温度低于5℃。将悬浮液在0-5℃下 搅拌1h，用水和乙醚稀释。将水层用乙醚萃取，将合并的有机层用 盐水洗涤，经硫酸镁干燥，过滤并真空浓缩。将剩余物经硅胶层析 纯化，用二氯甲烷洗脱，得到化合物841B(1.60g，67％)。MS(ES)：m/z ＝294[M+1]+。

C.N-(4-氰基-2-甲基-3-三氟甲基苯基)-2，2-二甲基丙酰胺(841C)

将N-(4-氯-2-甲基-3-三氟甲基苯基)-2，2-二甲基丙酰胺(8.36g， 28.5mmol)和CuCN(4.33g，65.5mmol)的无水N-甲基吡咯烷酮(85mL) 悬浮液回流38h。冷却至室温后，在搅拌下将所述悬浮液倒入冰水 中。将所得的固体物过滤，用水洗涤并干燥，得到化合物841C和841D 的混合物(85∶15，7.55g)。所得的混合物直接用于下一步骤。

D.4-氨基-3-甲基-2-三氟甲基苄腈(841D)

将得自实施例841C的混合产物溶液(7.53g，26.5mmol)溶解在 120mL浓盐酸/乙醇(1∶1)中，回流14h。冷却至室温后，将溶液真空 浓缩。将所得的剩余物溶解在EtOAc中，用饱和碳酸氢钠水溶液(2X) 和盐水(1X)洗涤，经硫酸镁干燥，过滤并真空浓缩。将剩余物经硅胶 层析纯化，用氯仿/甲醇(98∶2)洗脱得到化合物841D(4.62g，87％)。

MS(ES)：m/z＝201[M+1]+。

E.[3aR-(3aα，4β，5β，7β，7aα)]-4-(八氢-5-羟基-4，7-二甲基-1，3-二氧 代-4，7-环氧-2H-异吲哚-2-基)-3-甲基-2-(三氟甲基)苄腈(841E)

将4-氨基-3-甲基-2-三氟甲基苄腈(0.051g，0.25mmol)、4_分子 筛(0.20g)和化合物752(0.059g，0.28mmol)溶解在装于密封试管中的 DMA(0.30mL)中。将反应混合物在175℃下加热30min，随后冷却至 室温。将溶液经Celite过滤以除去分子筛，随后将滤液依次用饱和氯 化铵(10mL)和盐水(10mL)洗涤。接着将有机层经硫酸钠干燥并真空 浓缩，得到黄色油状物。所得的物质经制备型TLC(硅胶)纯化，用25％ 丙酮的三氯甲烷溶液洗脱，得到化合物841E(40mg)，为浅棕色固体 物。HPLC：97％，于3.18min(保留时间)(YMC S-5 ODS-A柱，4.6×50 mm，在4分钟内用含0.2％磷酸的10-90％甲醇水溶液洗脱，4mL/min， 于220nm检测)。MS(ESI)：m/z 393.18[M-H]-。化合物841E的绝对立 体化学构型通过中间体化合物752的已知立体化学构型及其所保留 的构型确定。绝对立体化学构型如上式所示并按命名法命名。

                                      实施例842

[3aS-(3aα，4β，5β，7β，7aα)]-5-(八氢-5-羟基-4，7-二甲基-1，3-二氧代-4，7-环 氧-2H-异吲哚-2-基)-3-氯-2-吡啶甲腈(842)

将化合物752(500mg，2.36mmol)、4_分子筛(1.5g)、5-氨基-3- 氯-2-氰基吡啶(357mg，2.34mmol)和DMA(2mL)在密封试管中混合。 将混合物在预热至170℃的油浴中加热25min，冷却并经过滤除去分 子筛，用EtOAc洗脱。将有机相用水洗涤3次，接着用盐水洗涤。 所得的有机相经硫酸镁干燥并真空浓缩。将剩余物预吸附在Celite 中，经硅胶快速层析纯化，用0至40％丙酮的二氯甲烷洗脱，得到 化合物842(480mg，63％)，为黄褐色固体。HPLC：97％，于2.66min(保 留时间)(YMC S5 ODS-A柱，4.6×50mm Ballistic，在4分钟内用含 0.2％磷酸的10-90％甲醇水溶液洗脱，4mL/min，于220nm检测)。 MS(ES)：m/z 348.30[M+H]+。化合物842的绝对立体化学构型通过中 间体化合物752的已知立体化学构型及其所保留的构型确定。绝对 立体化学构型如上式所示并按命名法命名。

实施例843

A.5-甲基-咪唑并[1，2-a]吡啶-6-胺(843A)

将2-甲基-3-硝基-6-氨基吡啶(63mg，0.41mmol)悬浮于含0.3mL 浓盐酸的1.3mL乙醇中。加入2-溴-1，1-二甲氧基-乙烷(73μL，0.62 mmol)，将所得的混合物回流8h，此时再加入2-溴-1，1-二甲氧基-乙 烷(0.1mL，0.85mmol)。将混合物在回流下搅拌过夜，冷却并用二氯 甲烷稀释。将有机相用饱和碳酸氢钠溶液洗涤，经硫酸镁干燥并真 空浓缩。将剩余物溶解在4mL AcOH/EtOAc(1∶1)中，将所得溶液加 热至75℃。加入铁粉(46mg，0.82mmol，325目)，将混合物搅拌20 min。再加入铁粉(46mg，0.82mmol，325目)，继续搅拌30min。将 混合物冷却至室温并浓缩。将所得的剩余物经硅胶快速层析纯化， 用20％MeOH的二氯甲烷溶液洗脱，得到化合物843A(51mg，85％)， 为黄色-棕色固体物。HPLC：72％于0.18min和28％于0.27min(保留 时间)(YMC S5 ODS-A柱，4.6×50mm Ballistic，在4分钟内用含0.2％ 磷酸的10-90％甲醇水溶液洗脱，4mL/min，于220nm检测)。

MS(ES)：m/z 147.85[M+H]+。

C.(843B)

在密封试管中装入5-甲基-咪唑并[1，2-a]吡啶-6-胺(46mg，0.31 mmol)、化合物20A(92mg，0.47mmol)、250mg 4_分子筛和0.3mL DMA。将试管密封，在预热至170℃的油浴中加热30min。将混合 物冷却并过滤，用EtOAc洗脱。将滤液用水洗涤3次，接着用盐水 洗涤。有机层经硫酸镁干燥，真空浓缩，经制备型TLC(硅胶)纯化， 用50％丙酮的三氯甲烷溶液洗脱，得到化合物843B(32mg，32％)， 为浅黄色固体。HPLC：99％，于1.47min(保留时间)(YMC S5 ODS-A 柱4.6×50mm Ballistic，在4分钟内用含0.2％磷酸的10-90％甲醇水 溶液洗脱，4mL/min，于220nm处检测)。MS(ES)：m/z 326.39[M+H]+。

                    实施例844

将5-甲基-咪唑并[1，2-a]吡啶-6-胺(50mg，0.34mmol)、化合物 752(108mg，0.51mmol)、硫酸镁(102mg，0.85mmol)、Et3N(0.24mL，1.7 mmol)和0.3mL 1，2-二甲氧基-乙烷在密封试管中混合。将试管密封， 在135℃下加热14h。将混合物冷却至室温，过滤除去分子筛，用MeOH 洗脱并真空浓缩。经硅胶快速层析纯化所得剩余物，用0至10％甲 醇的二氯甲烷溶液洗脱，得到化合物844(86mg，74％)，为黄褐色固 体。HPLC：100％，于0.85min(保留时间)(YMC S5 ODS-A柱4.6×50 mm Ballistic，在4分钟内用含0.2％磷酸的10-90％甲醇水溶液洗脱， 4mL/min，于220nm检测)。MS(ES)：m/z 342.20[M+H]+。化合物844 的绝对立体化学构型通过中间体化合物752的已知立体化学构型及 其所保留的构型确定。绝对立体化学构型如上式所示并按命名法命 名。

                    实施例845

按照实施例843的方法，使5-甲基-咪唑并[1，2-a]吡啶-6-胺(50mg， 0.34mmol)、化合物751(108mg，0.51mmol)、硫酸镁(102mg，0.85 mmol)、Et3N(0.24mL，1.7mmol)在0.3mL 1，2-二甲氧基乙烷中反应。 经纯化得到化合物845(79mg，68％)，为黄褐色固体。HPLC：100％， 于0.85min(保留时间)(YMC S5 ODS-A柱，4.6×50mm Ballistic，在 4分钟内用含0.2％磷酸的10-90％甲醇水溶液洗脱，4mL/min，于 220nm检测)。MS(ES)：m/z 342.20[M+H]+。化合物845的绝对立体化 学构型通过中间体化合物751的已知立体化学构型及其所保留的构 型确定。绝对立体化学构型如上式所示并按命名法命名。

                    实施例846

A.咪唑并[1，2-a]吡啶-6-胺(846A)

将2-氨基-5-硝基吡啶悬浮于40mL乙醇/浓盐酸(3∶1)溶液中。 往该悬浮液中加入2-溴-1，1-二甲氧基-乙烷(6.37mL，53.91mmol)，将 所得混合物加热回流8h，随后再加入2-溴-1，1-二甲氧基-乙烷(6.37mL， 53.91mmol)。将混合物加热回流过夜，冷却至室温，然后置于冰箱 中24h。收集沉淀物，用冰冷的乙醇洗涤，空气干燥，然后使用标准 方法转化成游离碱，得到黄色固体物。将所得的粗制黄色固体物(404 mg)溶解在150mL THF/MeOH(1∶1)中，将所得溶液在Pd/C(250mg， 10％)存在下，使用氢气气囊氢化4h。将混合物经Celite过滤，用 THF/MeOH(1∶1)洗脱，浓缩滤液。经硅胶快速层析纯化，使用20％ MeOH的二氯甲烷溶液洗脱，得到化合物846A(241mg，75％)，为无 色油状物。该油状物在静置时颜色变深。

B.(846B)

将咪唑并[1，2-a]吡啶-6-胺(64mg，0.48mmol)、化合物752(148mg， 0.71mmol)、硫酸镁(146mg，1.21mmol)、Et3N(0.34mL，2.40mmol)和 0.4mL 1，2-二甲氧基-乙烷在密封试管中混合。将试管密封，在135℃ 加热14h。将混合物冷却，经Celite过滤，用MeOH洗脱并浓缩。 经硅胶快速层析纯化，使用10％MeOH的二氯甲烷溶液洗脱，得到 化合物846B(107mg，64％)，为浅黄色固体。HPLC：40％0.19min和 60％0.38min(保留时间)(YMC S5 ODS-A柱4.6×50mm Ballistic，在 4分钟内用含0.2％磷酸的10-90％甲醇水溶液洗脱，4mL/min，于 220nm检测)。MS(ES)：m/z 328.16[M+H]+。化合物846B的绝对立体 化学构型通过中间体化合物752的已知立体化学构型及其所保留的 构型确定。绝对立体化学构型如上式所示并按命名法命名。

                    实施例847

按照实施例846的方法，使咪唑并[1，2-a]吡啶-6-胺(50mg，0.38 mmol)、化合物751(119mg，0.56mmol)、硫酸镁(114mg，0.95mmol)、 Et3N(0.26mL，1.9mmol)在0.35mL 1，2-二甲氧基乙烷中反应。纯化得 到化合物847(87mg，70％)，为白色固体。HPLC：32％0.20min和68％ 0.37min(保留时间)(YMC S5 ODS-A柱4.6×50mm Ballistic，在4分 钟内用含0.2％磷酸的10-90％甲醇水溶液洗脱，4mL/min，于220nm 检测)。MS(ES)：m/z 328.12[M+H]+。化合物847的绝对立体化学构型 通过中间体化合物751的已知立体化学构型及其所保留的构型确定。 绝对立体化学构型如上式所示并按命名法命名。

                    实施例848

A.4-氨基-2-甲氧基-苄腈(848A)

将2-甲氧基-4-硝基-苄腈(500mg，2.81mmol)悬浮在4mL AcOH/EtOAc(1∶1)中，将所得的混合物加热至75℃，得到透明溶液。 加入Fe粉(313mg，5.61mmol，325目)，将混合物搅拌30min，再加 入铁粉(313mg，5.61mmol，325目)后。将混合物在75℃下再搅拌30 min，随后冷却至室温并过滤，用EtOAc洗脱。真空浓缩滤液，再溶 于EtOAc中，过滤(用EtOAc洗脱)并浓缩。经硅胶快速层析纯化， 用0至10％MeOH的二氯甲烷溶液洗脱，得到化合物848A，为黄褐 色固体物。

B.(848B)

将4-氨基-2-甲氧基-苄腈(40mg，0.27mmol)、化合物752(86mg， 0.41mmol)、硫酸镁(81mg，0.68mmol)、Et3N(0.19mL，1.4mmol)和 0.25mL 1，2-二甲氧基-乙烷在密封试管中混合。将密封试管，在135 ℃下加热14h。将混合物冷却至室温，过滤(用MeOH洗脱)并真空浓 缩。所得的剩余物经硅胶快速层析纯化，使用0至100％EtOAc的二 氯甲烷溶液洗脱，得到化合物848B(36mg，39％)，为灰白色固体。HPLC： 100％，于2.36min(保留时间)(YMC S5 ODS-A柱4.6×50mm Ballistic，在4分钟内用含0.2％磷酸的10-90％甲醇水溶液洗脱， 4mL/min，于220nm检测)。MS(ES)：m/z 341.23[M-H]-。化合物848B 的绝对立体化学构型通过中间体化合物752的已知立体化学构型及 其所保留的构型确定。绝对立体化学构型如上式所示并按命名法命 名。

                    实施例849

A.6-氨基-2-甲基-烟腈(hicotinonitrile)(849A)

将6-氨基-2-甲基-烟腈(500mg，2.67mmol)、CuCN(478mg，5.34 mmol)和DMA(2mL)的混合物在氮气气氛中、在170℃下搅拌20h。 将反应混合物冷却，然后加入至50mL 20％乙烷-1，2-二胺水溶液中。 分离各层，将水层用乙酸乙酯萃取3次。将合并的有机萃取液依次 用水和盐水洗涤，用硫酸镁干燥并真空浓缩。经硅胶快速层析纯化， 用0至100％EtOAc的二氯甲烷溶液洗脱，得到化合物849A(199mg， 56％)，为白色固体。

B.(849B)

在密封试管中装入6-氨基-2-甲基-烟腈(50mg，0.38mmol)、化合 物752(119mg，0.56mmol)、硫酸镁(114mg，0.95mmol)、Et3N(0.26 mL，1.9mmol)和0.3mL 1，2-二甲氧基-乙烷。密封试管，在135℃下加 热14h。将混合物冷却至室温，过滤(用MeOH洗脱)并真空浓缩。浓 缩滤液，经硅胶快速层析纯化，用0至100％乙酸乙酯的二氯甲烷 溶液洗脱，得到化合物849B(36mg，29％)，为白色固体。HPLC：100％， 于1.99min(保留时间)(YMC S5 ODSA柱4.6×50mm Ballistic，在4 分钟内用含0.2％磷酸的10-90％甲醇水溶液洗脱，4mL/min，于220nm 检测)。MS(ES)：m/z 328.04[M+H]+。化合物849B的绝对立体化学构 型通过中间体化合物752的已知立体化学构型及其所保留的构型确 定。绝对立体化学构型如上式所示并按命名法命名。

                    实施例850

A.6-氨基-4，5-二甲基-烟腈(850A)

在氮气气氛中，在170℃下，将5-溴-3，4-二甲基-吡啶-2-胺(500mg， 2.49mmol)、CuCN(445mg，4.97mmol)和DMA(3.5mL)的混合物搅拌 20h。将反应混合物冷却，然后加入至50mL 20％乙烷-l，2-二胺的水 溶液中。分离各层，将水层用乙酸乙酯萃取3次。将合并的有机萃 取液依次用水和盐水洗涤，并经硫酸镁干燥。真空浓缩，得到化合 物850A(362mg，99％)，为白色固体。

B.(850B)

将6-氨基-4，5-二甲基-烟腈(50mg，0.34mmol)、化合物752(108mg， 0.50mmol)、硫酸镁(102mg，0.85mmol)、三乙胺(0.24mL，1.7mmol) 和0.3mL 1，2-二甲氧基-乙烷在密封试管中混合。密封试管，在135 ℃下加热14h。将混合物冷却至室温，过滤(用MeOH洗脱)并真空浓 缩。经硅胶快速层析纯化所得剩余物，用0至100％乙酸乙酯的二 氯甲烷溶液洗脱，得到化合物850B(68mg，59％)，为灰白色固体。HPLC： 10％于2.15min和82％于2.31min(保留时间)(YMC S5 ODS-A柱4.6 ×50mm Ballistic，在4分钟内用含0.2％磷酸的10-90％甲醇水溶液洗 脱，4mL/min，于220nm检测)。MS(ES)：m/z 342.06[M+H]+。化合物 850B的绝对立体化学构型通过中间体化合物752的已知立体化学构 型及其所保留的构型确定。绝对立体化学构型如上式所示并按命名 法命名。

                    实施例851

A.6-氨基-4-甲基-烟腈(851A)

在氮气气氛中，在170℃下，将5-溴-4-甲基-吡啶-2-胺(500mg， 2.67mmol)、CuCN(478mg，5.34mmol)和DMA(2mL)的混合物搅拌20 h。将反应混合物冷却，然后加入至50mL 20％乙烷-1，2-二胺的水溶 液中。分离各层，将水层用乙酸乙酯萃取3次。将合并的有机萃取 液依次用水和盐水洗涤，经硫酸镁干燥。真空浓缩得到化合物 851A(309mg，87％)，为白色固体。

B.(851B)

在密封试管中装入6-氨基-4-甲基-烟腈(50mg，0.38mmol)、化合 物752(119mg，0.56mmol)、硫酸镁(114mg，0.95mmol)、三乙胺 (0.26mL，1.9mmol)和0.3mL 1，2-二甲氧基-乙烷。将试管密封并在135 ℃下加热14h。将混合物冷却至室温并过滤，用MeOH洗脱。真空 浓缩滤液，经硅胶快速层析纯化，用0至100％乙酸乙酯的二氯甲 烷溶液洗脱，得到化合物851B(67mg，54％)，为白色固体。HPLC： 100％，于1.95min(保留时间)(YMC S5 ODS-A柱4.6×50mm Ballistic，在4分钟内用含0.2％磷酸的10-90％甲醇水溶液洗脱， 4mL/min，于220nm检测)。MS(ES)：m/z 328.04[M+H]+。化合物851B 的绝对立体化学构型通过中间体化合物752的已知立体化学构型及 其所保留的构型确定。绝对立体化学构型如上式所示并按命名法命 名。

                    实施例852

A.叔丁基-(2，5-二甲基-呋喃-3-基甲氧基)-二甲基-硅烷(852A)

在干燥的100mL圆底烧瓶中，在惰性气氛中制备2，5-二甲基-3- 呋喃甲酸甲酯(2.00g，13.0mmol)的无水乙醚(10mL)溶液。0℃下，往 该溶液中滴加1.0M氢化锂铝的乙醚溶液(13mL，13mmol)。将所得 悬浮液在0℃下搅拌30min，随后温热至室温，保持在该温度下4h。 小心加入硫酸钠+水合物(过量)和Celite(过量)将反应物猝灭。为便 于搅拌，必要时加入乙醚。将所得的混合物搅拌过夜，过滤并小心 真空浓缩，得到挥发性醇。在惰性气氛中将所述醇溶解在无水 DMF(5mL)中。往该溶液中加入咪唑(1.32g，19.5mmol)和TBSCl(2.05 g，13.6mmol)，将混合物搅拌6h。将反应混合物用EtOAc稀释，加 入水。分离各层，将有机层用水洗涤数次。有机相经硫酸镁干燥， 真空浓缩，经硅胶快速层析纯化，用0至50％乙酸乙酯的己烷，液 洗脱，得到化合物852A(3.08g，99％)，为无色油状物。

B.(852B)

在一密封试管中将叔丁基-(2，5-二甲基-呋喃-3-基甲氧基)二甲基- 硅烷(2.60g，10.8mmol)、4-(2，5-二氢-2，5-2，5-二氧代-1H-吡咯-1-基)-2- 三氟甲基苄腈(1.44g，5.41g)和THF(1mL)混合。将试管密封并快速 加热至95℃，得到几乎透明的溶液。随后将混合物冷却至室温，在 室温下搅拌过夜。经硅胶快速层析纯化，使用0至100％乙酸乙酯 的己烷液洗脱，得到化合物852B(2.37g，86％)，为白色固体。

C.(852C)

在Pd/C(10％，800mg)存在下，将化合物852B(1.4g，2.8mmol)的 EtOAc(50mL)溶液氢化(用氢气气囊提供氢气)6h。将混合物过滤， 用EtOAc洗脱并真空浓缩。经硅胶快速层析纯化，使用0至100％乙 酸乙酯的己烷洗脱液，得到化合物852C(0.9g，64％)，为白色泡沫体。

D

室温下，将化合物852C(0.9g，1.8mmol)溶解在含2％浓盐酸的 7mL乙醇中，将所得的混合物搅拌2h。将反应混合物小心倒入饱和 碳酸氢钠溶液中，将水层用乙酸乙酯萃取两次。合并的有机萃取液 经硫酸镁干燥，真空浓缩并经硅胶快速层析纯化，用0至100％乙 酸乙酯的二氯甲烷溶液洗脱，得到化合物852Di和852Dii(0.7g，100％) 的外消旋混合物，为白色固体。通过正相制备型手性 HPLC(CHIRALPAK OJ 5×50cm柱；用30％MeOH/乙醇(1∶1)的庚烷 溶液洗脱(等度洗脱)，50mL/min)将所述外消旋物质分离成为其对映 异构体，得到较快洗脱出的对映异构体化合物852Di(手性HPLC：5.56 min；CHIRALPAK OJ 4.6×250mm柱；用含0.1％DEA的30％ MeOH/乙醇(1∶1)的庚烷溶液洗脱，1mL/min)和较慢洗脱出的对映异 构体化合物852Dii(手性HPLC：7.01min；CHIRALPAK OJ 4.6×250 mm柱；用30％MeOH/乙醇(1∶1)的庚烷溶液洗脱，1mL/min)。化合 物852Di和852Dii的绝对立体化学构型没有确定。虽然各化合物代 表单独的对映体，但其命名和结构没有反映出化合物的绝对立体化 学构型。

                                      实施例853

(3aα，4β，5α，7β，7aα)-4-(八氢-5-[[[6-(三氟甲基)-4-嘧啶基]氧基]甲基]-4，7- 二甲基-1，3-二氧代-4，7-环氧-2H-异吲哚-2-基)-2-(三氟甲基)苄腈(853)

将三苯基膦(0.066g，0.254mmol)和偶氮二甲酸二叔丁酯(0.058g， 0.254mmol)的THF溶液(0.5mL)在室温、N2下搅拌10min，随后加 入6-三氟甲基-4-嘧啶酚(0.042g，0.254mmol)。将反应混合物在氮气 气氛中再搅拌15min，随后加入化合物852Di和852Dii外消旋混合 物(0.050g，0.127mmol)。进行反应2h，随后加入二氯甲烷(15mL)。 分离出有机层，依次用1N NaOH(15mL)和盐水(15mL)洗涤，经硫酸 镁干燥并真空浓缩。将所得的固体物经硅胶层析纯化，用0％至100％ 的EtOAc/己烷洗脱，得到化合物853(60mg)，为白色固体。HPLC： 99％，于4.083min(保留时间)(YMC S-5 ODS-A柱，4.6×50mm，在4 分钟内用含0.2％磷酸的10-90％甲醇水溶液洗脱，4mL/min，于220nm 检测)。MS(ESI)：m/z 541.06[M+H]。化合物853为各对映体的外消旋 混合物。其命名和结构没有反映出化合物的绝对立体化学构型。

                    实施例854

在密封试管中制备化合物852Di(150mg，0.38mmol)、 MeI(0.24ml，3.8mmol)和Ag2O(881mg，3.8mmol)在2mL CH3CN中的 混合物。将试管密封并在80℃下加热过夜。将混合物冷却至室温， 过滤，用EtOAc洗脱并浓缩。用硅胶快速层析纯化，使用0至100％乙 酸乙酯的己烷液洗脱，得到化合物854(49mg，32％)，为无色油状物。 HPLC：97％，于3.58min(保留时间)(YMC S5 ODS-A柱4.6×50mm Ballistic，在4分钟内用含0.2％磷酸的10-90％甲醇水溶液洗脱， 4mL/min，于220nm检测)。MS(ES)：m/z 407.20[M+H]+。化合物854 的绝对立体化学构型没有确定。虽然该化合物代表单独的对映体， 但其命名和结构没有反映出化合物的绝对立体化学构型。

                    实施例855

按照实施例854中描述的方法，使化合物852Dii(150mg， 0.38mmol)、MeI(0.24ml，3.8mmol)和Ag2O(881mg，3.8mmol)在2mL CH3CN中反应，并将反应混合物纯化，得到化合物855(45mg，29％)， 为无色油状物。HPLC：98％，于3.58min(保留时间)(YMC S5 ODS-A 柱4.6×50mm Ballistic，在4分钟内用含0.2％磷酸的10-90％甲醇水 溶液洗脱，4mL/min，于220nm检测)。MS(ES)：m/z 407.19[M-H]-。 化合物855的绝对立体化学构型没有确定。虽然该化合物代表单独 的对映体，但其命名和结构没有反映出化合物的绝对立体化学构型。

                    实施例856

0℃下，往化合物852B(835mg，1.65mmol)的10mL THF溶液中 加入1.0M BH3·THF(3.3ml，3.30mmol)溶液。将所得的混合物在0℃ 下搅拌2h，随后加入15mL乙醇、5mL THF、30mL pH为7的磷 酸盐缓冲液和2.1mL 30％过氧化氢。将所得的混合物在0℃下搅拌2 h，接着加入水和EtOAc。分离各层，将水层再次用乙酸乙酯萃取。 将合并的有机相依次用10％Na2S2O3溶液和盐水洗涤。将有机相经硫 酸镁干燥，浓缩并经快速层析纯化，使用0至25％乙酸乙酯的二氯 甲烷溶液洗脱。将所得物质溶解在含2％浓盐酸的8mL乙醇中，将 所得的混合物搅拌2h。将反应混合物用EtOAc稀释，然后小心倒入 饱和碳酸氢钠溶液中。分离各层，将水层再次用乙酸乙酯萃取。将 合并的有机层用硫酸镁干燥并真空浓缩。通过正相制备型手性 HPLC(CHIRALPAK OD 5×50cm柱；用15％MeOH/乙醇(1∶1)的庚 烷溶液洗脱(等度洗脱)，50mL/min)，将所得的外消旋物质分离成为 其对映异构体，得到较快洗脱出的化合物856i(128mg)(手性HPLC： 13.64min；CHIRALPAK OD 4.6×250mm柱；用含15％MeOH/乙 醇(1∶1)的庚烷溶液洗脱，1mL/min)；和较慢洗脱出的化合物856ii(137 mg，总收率39％)(手性HPLC：16.31min；CHIRALPAK OD 4.6×250 mm柱；用15％MeOH/乙醇(1∶1)的庚烷溶液洗脱，1mL/min)。 MS(ES)：m/z 411.01[M+H]+。化合物856i和856ii的绝对立体化学构 型没有确定。虽然各化合物代表单独的对映体，但其命名和结构没 有反映出化合物的绝对立体化学构型。

                    实施例857

A.(857A)

按照实施例774中描述的方法，将化合物798i转化为化合物 857A。HPLC：95％，于4.307min(保留时间)(YMC S5 ODS-A柱，4.6 ×50mm，在4分钟内用含0.2％磷酸的10-90％甲醇水溶液洗脱，4 mL/min，于220nm检测)。

B.(857B)

按照实施例774中描述的方法，将化合物857A转化为化合物 857B。HPLC：100％，于2.89min(保留时间)(YMC S5 ODS-A柱，4.6 ×50mm，在4分钟内用含0.2％磷酸的10-90％甲醇水溶液洗脱，4 mL/min，于220nm检测)。MS(ES)：m/z 381.16[M+H]+。

C.(857C)

将化合物857B(0.100g，0.26mmol)、MeI(0.163mL，2.6mmol)、 Ag2O(0.603g，2.60mmol)和乙腈(2.5mL)加入至高压反应容器中。将 容器密封并加热至75℃。16h后，将反应物冷却至室温，用EtOAc 稀释并经硅藻土过滤，用乙酸乙酯清洗。粗制物质经硅胶快速层析 纯化，用0-5-8％丙酮的氯仿溶液洗脱，得到化合物857C，为白色 固体。HPLC：90％，于2.887min(保留时间)(YMC S5 ODS-A柱，4.6× 50mm，在4分钟内用含0.2％磷酸的10-90％甲醇水溶液洗脱，4mL/min， 于220nm检测)。MS(ES)：m/z 395.07[M+H]+。化合物857C的绝对立 体化学构型没有确定。虽然该化合物代表单独的对映体，但其命名 和结构没有反映出化合物的绝对立体化学构型。

                    实施例858

A.(858Ai & 858Aii)

在22℃下，将化合物857B(2.50g，6.57mmol)溶解在THF(10.0mL) 中，然后加入1N NaOH(10.0mL)。1小时后，加入THF(10.0mL)、1N HCl(1.10mL)和盐水(10.0mL)。随后将混合物用EtOAc(20.0mL)萃取 一次，再用THF/EtOAc(1∶1，20.0mL)萃取两次。将合并的有机萃取 液经无水硫酸镁干燥，过滤并真空浓缩，得到化合物858Ai和 858Aii(经HPLC测定为1∶1)，为白色固体。不必进行纯化。HPLC： 100％，于2.383和2.573min(保留时间)(YMC S5 ODS-A柱，4.6×50 mm，在4分钟内用含0.2％磷酸的10-90％甲醇水溶液洗脱，4mL/min， 于220nm检测)。

B.(858B)

将化合物858Ai和858Aii悬浮在THF(50.0mL)和AcOH(20.0mL) 的混合物中，在60℃下加热16h。4小时后反应物变为均相。将反 应物冷却至22℃并真空浓缩。随后加入甲苯(20.0mL)，将混合物在 90℃下加热4h，直至所有产物溶解。接着将混合物冷却至22℃，静 置20h。在此20小时期间，化合物858B从溶液中沉淀出。将产物 过滤，用甲苯清洗，随后真空干燥。分离出化合物858B(1.10g)，为 灰白色固体，该产物未经纯化直接使用。1H NMR(DMSO-d6)：δ＝ 4.91(d，1H，J＝6.2Hz)，3.97(dd，1H，J＝3.9，6.2Hz)，3.82(d，1H，J＝7.6 Hz)，3.31(d，1H，J＝7.6Hz)，2.27(dd，1H，J＝10.2，12.8Hz)，1.77(s， 3H)，1.49(m，1H)和1.47ppm(s，3H)。化合物858B的绝对立体化学构 型没有确定。虽然该化合物代表单独的对映体，但其命名和结构没 有反映出化合物的绝对立体化学构型。

                                      实施例859

(3aα，4β，5α，6β，7β，7aα)-2-(4-氰基-3-(三氟甲基)苯基)六氢-6-氰基-4，7-二 甲基-1，3-二氧代-4，7-环氧-1H-异吲哚-5-甲酸甲酯(859)

将化合物792A(84mg；0.2mmol)、KCN(15mg；0.22mmol)和 氯化铵(12mg；0.22mmol)在1mL DMF和0.25mL水中的混合物在 室温下搅拌18hr。静置过夜，形成沉淀物。再加入10mL水后，将 悬浮液过滤，将滤饼用水洗涤。干燥，然后在己烷中研磨，得到化 合物859(25mg，28％)，为黄褐色粉末。HPLC：95％，于1.67min(保 留时间)(Phenominex S5 ODS柱，4.6×50mm，在2分钟内用含 0.1％TFA的10-90％甲醇水溶液洗脱，4mL/min，于254nm检测)； MS(ES)：m/z 448.29[M+H]+。化合物859为各对映体的外消旋混合物。 其命名和结构没有反映出化合物的绝对立体化学构型。

                    实施例860

将化合物792A(44mg；0.1mmol)和乙酸酐(0.25ml)的混合物在60 ℃下加热2hr。真空除去挥发物，将剩余物与庚烷(3×2ml)共蒸发， 得到化合物860(47mg，99％)，为白色粉末。HPLC：95.8％，于1.49 min(保留时间)(Phenominex S5 ODS柱，4.6×50mm，在2分钟内用 含0.1％TFA的10-90％甲醇水溶液洗脱，4mL/min，于254nm检测)； MS(ES)：m/z 480.35[M+H]+。化合物860为各对映体的外消旋混合物。 其命名和结构没有反映出化合物的绝对立体化学构型。

                    实施例861

在10min内，于室温下，将氢化钠(60％保存于矿物油中，120mg； 3mmol)分次加入到化合物792A(1.9g；4.5mmol)和丙酮肟(667mg； 9mmol)的THF溶液中。搅拌45min后，将反应混合物在盐水(100ml) 和EtOAc(150ml)间分配。将有机层用盐水洗涤(50ml)，干燥(硫酸镁) 并真空浓缩。剩余物经5×20cm硅胶柱层析纯化，用1000mL 25％ EtOAc/己烷和500mL 40％EtOAc/己烷洗脱纯化。真空浓缩纯洗脱份， 得到化合物861(1.75g，80％)，为白色粉末。HPLC：98％，于1.82min(保 留时间)(Phenominex S5 ODS柱，4.6×50mm，在2分钟内用含 0.1％TFA的10-90％甲醇水溶液洗脱，4mL/min，于254nm检测)； MS(ES)：m/z 494.05[M+H]+。化合物861为各对映体的外消旋混合物。 其命名和结构没有反映出化合物的绝对立体化学构型。

                                       实施例862

(3aα，4β，5α，6β，7β，7aα)]-2-(4-氰基-3-(三氟甲基)苯基)-六氢-6-羟基-4，7- 二甲基-1，3-二氧代-4，7-环氧-1H-异吲哚-5-甲酸甲酯(862)

将化合物861(1.75g；3.5mmol)和锌粉(6.07g，87.50mA)在19mL 甲酸中的混合物回流20min。冷却至室温后，将反应混合物用～50mL EtOAc稀释，然后经Celite过滤。将滤液用～200mL EtOAc稀释， 将有机层用水(200ml)、0.5M NaOH(2×200ml)、水(200ml)和盐水(100 ml)洗涤。经硫酸镁干燥并真空浓缩，得到剩余物，该剩余物经2.5×20 cm硅胶柱层析纯化，用1000mL 40％EtOAc/己烷和500mL 50％ EtOAc/己烷洗脱。真空浓缩纯洗脱份，得到化合物862(820g，54％)， 为无色泡沫体。HPLC：99％，于1.47min(保留时间)(Phenominex S5 ODS柱，4.6×50mm，在2分钟内用含0.1％TFA的10-90％甲醇水 溶液洗脱，4mL/min，于254nm检测)；MS(ES)：m/z 438.99[M+H]+。 化合物862为各对映体的外消旋混合物。其命名和结构没有反映出 化合物的绝对立体化学构型。

                                         实施例863

[3aS-(3aα，4β，5α，6β，7β，7aα)]-2-(4-氰基-3-(三氟甲基)苯基)-六氢-6-羟基- 4，7-二甲基-1，3-二氧代-4，7-环氧-1H-异吲哚-5-甲酸甲酯(863i)和[3aS- (3aα，4β，5α，6β，7β，7aα)]-2-(4-氰基-3-(三氟甲基)苯基)-六氢-6-羟基-4，7- 二甲基-1，3-二氧代-4，7-环氧-1H-异吲哚-5-甲酸甲酯(863ii)

通过正相制备型手性HPLC(CHIRALPAK OD 5×50cm柱；用 15％乙醇的己烷溶液洗脱(等度洗脱)，50mL/min)，将外消旋化合物 862(0.8g)分离成其对映异构体。得到355mg较快洗脱出的化合物 863i(手性HPLC：8.89min；CHIRALPAK OD 4.6×250mm柱；用15％ 乙醇的己烷溶液洗脱，2mL/min)；HPLC：99％，于2.91min(保留时 间)(YMC S5 ODS柱，4.6×50mm，在2分钟内用含0.2％磷酸的10- 90％甲醇水溶液洗脱，4mL/min，于220nm检测)；MS(ES)：m/z 471.00[M+MeOH]+；和330mg较慢洗脱出的化合物863ii(手性HPLC： 12.30min；CHIRALPAK OD 4.6×250mm柱；用15％乙醇的己烷溶 液洗脱，2mL/min)；HPLC：99％，于2.89min(保留时间)(YMC S5 ODS 柱，4.6×50mm，在2分钟内用含0.2％磷酸的10-90％甲醇水溶液洗 脱，4mL/min，于220nm检测)；MS(ES)：m/z 471.99[M+MeOH]+。化 合物863i和863ii的绝对立体化学构型没有确定。虽然各化合物代表 单独的对映体，但其命名和结构没有反映出化合物的绝对立体化学 构型。

                                      实施例864

(3aα，4β，5α，7β，7aα)-2-(4-氰基-3-(三氟甲基)苯基)-六氢-5-羟基-4，7-二甲 基-1，3-二氧代-4，7-环氧-1H-异吲哚-5-甲酸甲酯(864)

在大气气氛中，室温下，将化合物792A(210mg；0.5mmol)、 苯基硅烷(0.13ml，1mmol)和Mn(acac)2(5mg；0.01mmol)在2.5ml异 丙醇和0.25mL THF中的混合物搅拌3天。加入5％亚硫酸氢钠溶 液(5ml)后，搅拌30min，将反应混合物在EtOAc(30ml)和水(30ml) 间分配。用盐水(20ml)洗涤有机层，接着经硫酸镁干燥并真空浓缩， 得到剩余物，该剩余物经2.5×15cm硅胶柱层析纯化，用50％EtOAc/ 己烷洗脱。真空浓缩纯洗脱份，得到化合物864(109mg，50％)，为白 色粉末。HPLC：98.6％，于1.18min(保留时间)(Phenominex S5 ODS 柱，4.6×50mm，在2分钟内用含0.1％TFA的10-90％甲醇水溶液洗 脱，4mL/min，于254nm检测)；MS(ES)：m/z 438.98[M+H]+。化合物 864为各对映体的外消旋混合物。其命名和结构没有反映出化合物的 绝对立体化学构型。

                                    实施例865

(3aα，4β，5α，7β，7aα)-2-(4-氰基-3-(三氟甲基)苯基)-六氢-5-羟基-4，7-二甲 基-1，3-二氧代-4，7-环氧-1H-异吲哚-5-甲酸(1-甲基乙基)酯(865C)

A.2，5-二甲基-呋喃-3-甲酸异丙基酯(865A)

在室温下，将异丙醇(5ml)加入2，5-二甲基呋喃-3-甲酰氯(1.64g； 10.3mmol)在15ml二氯甲烷中的溶液内。将反应混合物在室温下静 置30mins，真空除去挥发物，将剩余物与异丙醇共蒸发，得到化合 物865A(1.8g，96％)，为浅琥珀色液体。1HNMR(CDCl3)：δ1.30(d，j＝6.5 Hz，6H)，2.23(s，3H)，2.52(s，3H)，5.14(m，1H)，6.21(s，1H)。

B.(3aα，4β，7β，7aα)-2-(4-氰基-3-(三氟甲基)苯基)四氢-4，7-二甲基- 1，3-二氧代-4，7-环氧-1H-异吲哚-5-甲酸(1-甲基乙基)酯(865B)

将4-(2，5-二氢-2，5-2，5-二氧代-1H-吡咯-1-基)-2-三氟甲基-苄腈 (851mg；3.2mmol)和化合物865A(1.7g；9.4mmol)的混合物在140 ℃下加热4h。将混合物冷却至室温后，静置4天。反应混合物经5× 25cm硅胶柱层析纯化，用25％EtOAc/己烷洗脱。真空浓缩纯洗脱 份，得到化合物865B(869mg，60％)，为粘稠黄色油状物。由于该化 合物不稳定，将其在-20℃下贮存并尽快使用。

C.(3aα，4β，5α，7β，7aα)-2-(4-氰基-3-(三氟甲基)苯基)-六氢-5-羟基- 4，7-二甲基-1，3-二氧代-4，7-环氧-1H-异吲哚-5-甲酸(1-甲基乙基)酯 (865C)

使用实施例791B中描述的方法，将化合物865B(224；0.5mmol) 转化为化合物865C，得到化合物865C(82mg，35％)，为白色粉末。 HPLC：98.4％，于1.18min(保留时间)(Phenominex S5 ODS柱，4.6×50 mm，在2分钟内用含0.1％TFA的10-90％甲醇水溶液洗脱，4mL/min， 于254nm检测)；MS(ES)：m/z 466.98[M+H]+。化合物865C为各对映 体的外消旋混合物。其命名和结构没有反映出化合物的绝对立体化 学构型。

                                     实施例866

(3aα，4β，5α，7β，7aα)-2-(4-氰基-3-(三氟甲基)苯基)六氢-5-羟基-4 7-二甲 基-1，3-二氧代-4，7-环氧-N，N-二甲基-1H-异吲哚-5-甲酰胺(866C)

A.2，5-二甲基-呋喃-3-(N，N-二甲基)甲酰胺(866A)

在室温下，将2，5-二甲基呋喃-3-甲酰氯(2.19g；13.8mmol)的 10mLTHF溶液加入至2M二甲胺/二噁烷(21ml；42mmol)在80mL THF中的溶液内。搅拌1hr后，真空除去挥发物，将剩余物在 EtOAc(100ml)和水(100ml)间分配。将有机层用饱和硫酸氢钾溶液(100 ml)、1N NaOH(50ml)和盐水(50ml)洗涤。经硫酸镁干燥并真空浓缩， 得到化合物866A(1.84g，80％)，为琥珀色液体。1H NMR(CDCl3)：δ 2.23(s，3H)，2.33(s；3H)，3.04(s，6H)，5.96(s，1H)。

B.(866B)

将4-(2，5-二氢-2，5-2，5-二氧代-1H-吡咯-1-基)-2-三氟甲基-苄腈 (1.45mg；5.4mmol)和化合物866A(1.82g；10.9mmol)的混合物在125 ℃下直接加热1h。将混合物冷却至室温过夜，然后将反应混合物溶 于～75mL EtOAc中。用脱色碳处理，经Celite过滤并真空浓缩滤液， 得到剩余物，将该剩余物溶于～20mL乙醚中。加入～30mL己烷， 接着过滤并干燥，得到化合物866B(1.89g，81％)，为浅粉红色固体物。

C.(3aα，4β，5α，7β，7aα)-2-(4-氰基-3-(三氟甲基)苯基)-六氢-5-羟基- 4，7-二甲基-1，3-二氧代-4，7-环氧-N，N-二甲基-1H-异吲哚-5-甲酰胺 (866C)

使用实施例792B中描述的方法，将化合物866B(433；1mmol) 转化为化合物866C，得到化合物866C(85mg，18％)，为白色粉末。 HPLC：97.9％，于1.39min(保留时间)(Phenominex S5 ODS柱，4.6×50 mm，在2分钟内用含0.1％TFA的10-90％甲醇水溶液洗脱，4mL/min， 于254nm检测)；MS(ES)：m/z 452.00[M+H]+。化合物866C为各对映 体的外消旋混合物。其命名和结构没有反映出化合物的绝对立体化 学构型。

                    实施例867

室温下，将一滴DMF加入至化合物792B(50mg；0.125mmol) 和草酰氯(0.03ml；0.36mmol)的二氯甲烷(1ml)溶液中。室温下搅拌 1.5h后，真空除去挥发物。将剩余物依次用1mL 1，3-六氟-2-丙醇、 0.04mL吡啶和2mg 4-二甲基吡啶处理。搅拌18h后，室温下将反 应混合物在EtOAc(20ml)和饱和碳酸氢钠溶液(20ml)间分配。将有 机层用饱和硫酸氢钾溶液(20ml)和盐水(20ml)洗涤。经硫酸镁干燥并 真空浓缩，得到剩余物，该剩余物经2.5×15cm硅胶柱层析纯化， 用25％EtOAc/己烷洗脱。真空浓缩纯洗脱份，得到化合物867(36 mg，52％)，为白色固体。HPLC：99％，于1.96min(保留时间)(Phenominex S5 ODS柱，4.6×50mm，在2分钟内用含0.1％TFA的10-90％甲醇 水溶液洗脱，4mL/min，于254nm检测)；MS(ES)：m/z 558.00[M+H]+。 化合物867为各对映体的外消旋混合物。其命名和结构没有反映出 化合物的绝对立体化学构型。

                                      实施例868

(3aα，4β，5α，7β，7aα)-2-(4-氰基-3-(三氟甲基)苯基)-六氢-5-羟基-4，7-二甲 基-1，3-二氧代-4，7-环氧-1H-异吲哚-5-甲酸丙酯(868B)

A(3aα，4β，5α，7β，7aα)-2-(4-氰基-3-(三氟甲基)苯基)-六氢-5-羟基- 4，7-二甲基-1，3-二氧代-4，7-环氧-1H-异吲哚-5-甲酸(868A)

在室温下，将1N NaOH(2.2ml；2.2mmol)加入至化合物867(238 mg；0.54mmol)在5mL甲醇中的溶液内。室温下搅拌5h后，真空 除去挥发物，将剩余物用2mL三氟乙酸处理18hr。真空浓缩反应混 合物，接着与甲苯共蒸发(3×8ml)，得到剩余物，使其在EtOAc(40ml) 和盐水(20ml)间分配。经硫酸镁干燥并真空浓缩，得到固体物，将 该固体物在己烷中研磨，得到化合物868A(120mg，53％)，为奶油色 固体物。HPLC：93％，于1.35min(保留时间)(Phenominex S5 ODS柱， 4.6×50mm，在2分钟内用含0.1％TFA的10-90％甲醇水溶液洗脱， 4mL/min，于254nm检测)；MS(ES)：m/z 425.08[M+H]+。

B.(3aα，4β，5α，7β，7aα)-2-(4-氰基-3-(三氟甲基)苯基)-六氢-5-羟基- 4，7-二甲基-1，3-二氧代-4，7-环氧-1H-异吲哚-5-甲酸丙酯(868B)

室温下，将草酰氯(0.18ml，2mmol)加入至化合物868A(135mg； 0.32mmol)在4mLTHF中的溶液内。立即观察到鼓泡。加入一滴DMF 将反应混合物搅拌4hrs。加入2mL正丙醇后，在室温下搅拌18h， 将反应混合物在EtOAc(30ml)和水(30ml)间分配。将有机层用饱和碳 酸氢钠溶液(30ml)洗涤，用硫酸镁干燥并真空浓缩。剩余物经2.5×15 cm硅胶柱层析纯化，用25％EtOAc/己烷洗脱。真空浓缩纯洗脱份， 得到化合物868B(78mg，52％)，为白色粉末。HPLC：95.4％，于1.63 min(保留时间)(Phenominex S5 ODS柱，4.6×50mm，在2分钟内用 含0.1％TFA的10-90％甲醇水溶液洗脱，4mL/min，于254nm检测)； MS(ES)：m/z 467.10[M+H]+。化合物868B为各对映体的外消旋混合 物。其命名和结构没有反映出化合物的绝对立体化学构型。

                    实施例869

100℃下，将30％过氧化氢(0.1ml)加入至化合物748(36mg；0.1 mmol)在1mL AcOH中的溶液内。再往反应混合物中加入四等份0.1 ml 30％过氧化氢，加入间隔为30分钟。在最后一次加入30％过氧化 氢30分钟后，往反应混合物中加入水(8ml)。冷却至室温后，静置2 日。将所得的悬浮液过滤，将滤饼用水洗涤。干燥后，将所得固体 溶于～2mL丙酮中，将所述溶液置于硅胶制备薄层层析板上，用30％ 丙酮/氯仿洗脱，对极性较高的谱带进行萃取，过滤并浓缩，得到化 合物869(6mg，16％)，为灰白色固体。HPLC：99％，于1.06min(保留 时间)(Phenominex S5 ODS柱，4.6×50mm，在2分钟内用含0.1％TFA 的10-90％甲醇水溶液洗脱，4mL/min，于254nm检测)；MS(ES)：m/z 380.43[M+H]+。化合物869为各对映体的外消旋混合物。其命名和结 构没有反映出化合物的绝对立体化学构型。

                    实施例870

在氮气气氛中，将化合物852Di和852Dii的外消旋混合物(150mg， 0.38mmol)溶解在THF(2mL)中，接着依次加入硒代氰酸2-硝基苯基 酯(202mg，0.89mmol)和PBu3(0.22mL，0.89mmol)。将所得的混合物 搅拌20h，浓缩并经快速层析纯化，使用0至100％乙酸乙酯的己烷 液洗脱。将所得的产物溶解在THF(11mL)中，在0℃下用2mL 30％ 过氧化氢处理。将反应混合物搅拌10min，随后升温至室温，搅拌 过夜。通过往反应物中加入5％硫代硫酸钠溶液和盐水猝灭。分离 各层，将水层用二氯甲烷萃取两次。将合并的有机层经硫酸镁干燥， 真空浓缩并经快速层析纯化，使用0至100％乙酸乙酯的己烷洗脱 液，得到化合物870(114mg，80％)，为黄色固体物。HPLC：100％， 于3.67min(保留时间)(YMC S5 ODS-A柱，4.6×50mm Ballistic，在 4分钟内用含0.2％磷酸的10-90％甲醇水溶液洗脱，4mL/min，于 220nm检测)。MS(ES)：m/z 375.23[M-H]-。化合物870为各对映体的 外消旋混合物。其命名和结构没有反映出化合物的绝对立体化学构 型。

                    实施例871

                    (871Bi和871Bii)

A.(871A)

往化合物852Di和852Dii(33mg，0.09mmol)在0.5mL丙酮 /0.4mL水中的外消旋混合物内依次加入50％重量NMO水溶液(22μL， 0.11mmol)和4％重量OsO4水溶液(54μL，8.7mol)。将所得混合物搅 拌12h，加入5％硫代亚硫酸钠溶液将反应物猝灭。加入二氯甲烷， 分离各层，将水层用二氯甲烷萃取。将合并的有机层经硫酸镁干燥， 真空浓缩，经硅胶制备型TLC纯化，使用40％丙酮的二氯甲烷溶 液洗脱，得到外消旋化合物871A(30mg，83％)，为白色固体。HPLC： 100％，于2.91min(保留时间)(YMC S5 ODSA柱，4.6×50mm Ballistic， 在4分钟内用含0.2％磷酸的10-90％甲醇水溶液洗脱，4mL/min，于 220nm检测)。MS(ES)：m/z 469.26[M+OAc]-。化合物871A为各对映 体的外消旋混合物。其命名和结构没有反映出化合物的绝对立体化 学构型。

B.(871Bi和871Bii)

通过正相制备型手性HPLC(CHIRALPAK OJ 5×50cm柱；用 30％MeOH/乙醇(1∶1)的庚烷溶液洗脱(等度洗脱)，50mL/min)，将外 消旋化合物871A分离成为其对映异构体，得到较快洗脱出的对映体 化合物871Bi(手性HPLC：7.35min；CHIRALPAK OJ 4.6×250mm 柱；用30％MeOH/乙醇(1∶1)的庚烷溶液洗脱，1mL/min)和较慢洗脱 出的对映体化合物871Bii(手性HPLC：11.49min；CHIRALPAK OJ 4.6 ×250mm柱；用30％MeOH/乙醇(1∶1)的庚烷溶液洗脱，1mL/min)。 化合物871Bi和871Bii的绝对立体化学构型没有确定。虽然各化合 物代表单独的对映体，便其命名和结构没有反映出化合物的绝对立 体化学构型。

                                     实施例872

(3aα，4β，5α，7β，7aα)-4-(八氢-5-[[[二氟甲基]氧基]甲基]-4，7-二甲基-1，3- 二氧代-4，7-环氧-2H-异吲哚-2-基)-2-(三氟甲基)苄腈(872)

在氮气气氛中，将化合物852Di和852Dii的外消旋混合物(50mg， 0.13mmol)溶于1mL CH3CN中，加入CuI(2mg，8.9，umol)。将该混 合物加热至45℃，通过注射器加入2-(氟磺酰基)二氟乙酸(27mg，0.15 mmol)。将反应混合物在45℃下搅拌1.5h，随后冷却至室温。通过 加入水和二氯甲烷将反应物猝灭。分离各层，将水层用二氯甲烷萃 取。将合并的有机相经硫酸镁干燥，真空浓缩并经硅胶快速层析纯 化两次，使用0至100％乙酸乙酯的己烷液洗脱，得到化合物872(10 mg，18％)，为白色泡沫体。HPLC：92％，于3.72min(保留时间)(YMC S5 ODS-A柱，4.6×50mm Ballistic，在4分钟内用含0.2％磷酸的10-90％ 甲醇水溶液洗脱，4mL/min，于220nm检测)。MS(ES)：m/z 443.22[M- H]-。化合物872表示各对映体的外消旋混合物。其命名和结构没有 反映出化合物的绝对立体化学构型。

                    实施例873

                    (873i和873ii)

按照实施例872的方法，使化合物471Di(50mg，0.13mmol)、CuI(2 mg，8.9μmol)和2-(氟磺酰基)二氟乙酸(28mg，0.16mmol)在1mL CH3CN中反应并纯化。得到的化合物873i和873ii(15mg，0.03mmol) 为没有分离的6∶1的混合物(1H-NMR测定)。HPLC：91％，于3.64min(保 留时间)(YMC S5 ODS-A柱，4.6×50mm Ballistic，在4分钟内用含 0.2％磷酸的10-90％甲醇水溶液洗脱，4mL/min，于220nm检测)。 MS(ES)：m/z489.22[M+OAc]-。化合物873i和873ii各代表对映体的 外消旋混合物，其命名和结构没有反映出化合物的绝对立体化学构 型。

                    实施例874

                    (874i和874ii)

在室温、氮气气氛中，将三苯基膦(0.067g，0.254mmol)和偶氮二 甲酸二叔丁酯(0.059g，0.254mmol)的THF溶液(1mL)搅拌10min，随 后加入糖精(0.047g，0.254mmol)。再将反应混合物于氮气气氛中搅拌 15min，随后加入化合物429i(0.050g，0.127mmol)。进行反应24h， 随后加入二氯甲烷(15mL)。分离出有机层，依次用1N NaOH(15mL) 和盐水(15mL)洗涤，经硫酸镁干燥并真空浓缩。所得的固体物经硅 胶制备型TLC纯化，用25％丙酮的三氯甲烷溶液洗脱，得到化合物 874i(18mg，25％)，为白色固体(HPLC：91％，于2.96min(保留时 间)(YMC S-5 ODS-A柱，4.6×50mm，在4分钟内用含0.2％磷酸的 10-90％甲醇水溶液洗脱，于220nm检测)。MS(ESI)：m/z 559.42[M+H]+)；以及化合物874ii(18mg，25％)，为白色固体(HPLC： 93％，于2.85min(保留时间)(YMC S-5 ODS-A柱，4.6×50mm，在4 分钟内用含0.2％磷酸的10-90％甲醇水溶液洗脱，4mL/min，于220nm 检测)。MS(ESI)：m/z 557.12[M-H]-)。化合物874i和874ii的绝对立体 化学构型没有确定。虽然各种化合物代表单独的对映体，但其命名 和结构没有反映出化合物的绝对立体化学构型。

                                实施例875

[3aR-(3aα，4β，5β，7β，7aα)]-4-(八氢-5-环丙基氧基-4，7-二甲基-1，3-二氧代 -4，7-环氧-2H-异吲哚-2-基)-2-(三氟甲基)苄腈(875B)

A.(875A)

将化合物471Di(300mg，0.79mmol)、三氟乙酸汞(17mg，0.04 mmol)的四氢呋喃溶液(THF，1.5mL)和乙基·乙烯基醚(3mL)在三颈密 封试管中加热至45℃下48h。将试管冷却，打开，然后将反应混合 物真空浓缩，得到油状物。粗制物质经硅胶快速层析纯化，用1∶4∶4 EtOAc/二氯甲烷/庚烷洗脱，得到化合物875A(115mg，36％)，为白色 固体。HPLC：99％，于3.80min(保留时间)(YMC S5 ODS柱，4.6×50 mm，在4分钟内用含0.2％磷酸的10-90％甲醇水溶液洗脱，4mL/min， 于220nm检测)。MS(ES)：m/z 407.09[M+H]+。化合物875A的绝对立 体化学构型通过中间体化合物471Di的已知立体化学构型及其所保 留的构型确定。绝对立体化学构型如上式所示并按命名法命名。

B.[3aR-(3aα，4β，5β，7β，7aα)]-4-(八氢-5-环丙氧基-4，7-二甲基-1，3- 二氧代-4，7-环氧-2H-异吲哚-2-基)-2-(三氟甲基)苄腈(875B)

往冷却至5℃的化合物875A(100mg，0.25mmol)的无水二氯甲烷 (5mL)溶液中滴加入二乙基锌溶液(1.0M的己烷溶液，1.4mL，1.4 mmol)。将反应混合物升温至室温，随后加入二碘甲烷(80mL，1.0 mmol)。3h后，HPLC检测表明反应完成2/3。再依次加入二乙基锌 和二碘代乙烷，接着将反应混合物在冰浴中冷却，用水猝灭，在1M HCl溶液(20mL)和EtOAc(20mL)间分配。分离有机相，经硫酸钠干燥，真 空浓缩并经硅胶快速层析纯化，用2∶3 EtOAc/庚烷洗脱，得到化合物 875B，为白色固体。HPLC：100％，于3.72min(保留时间)(YMC S5 ODS 柱，4.6×50mm，在4分钟内用含0.2％磷酸的10-90％甲醇水溶液洗 脱，4mL/min，于220nm检测)。MS(ES)：m/z 421.08[M+H]+。化合物 875B的绝对立体化学构型通过中间体化合物471Di的已知立体化学 构型及其所保留的构型确定。绝对立体化学构型如上式所示并按命 名法命名。

实施例876

(876)

将化合物808和809(0.057g，0.15mmol)的外消旋混合物溶解在2 mL二氯甲烷中。加入三乙胺(0.018g，0.18mmol)、催化量的DMAP 和4-氟苯甲酰氯(0.075g，0.48mmol)，搅拌反应物6h。将反应混合物 用二氯甲烷稀释，依次用1N HCl、10％碳酸钾和盐水洗涤，经硫酸 镁干燥，过滤并真空浓缩。剩余物经硅胶制备型TLC纯化，使用2∶1 EtOAc/己烷作为洗脱液。除去溶剂得到化合物876(0.066g，70％)，为 白色固体。HPLC：100％，于3.94min(YMC S5 ODS柱)，在4分钟 内用含0.2％磷酸的10-90％甲醇水溶液梯度洗脱，于220nm检测。 MS(ES)：m/z 552.11[M+H]+。

                    实施例877

                    (877)

A.(877A)

-20℃下，将1.6M正丁基锂(54.6mL，87.4mL)的溶液滴加至二 异丙基胺(12.8mL，91.6mmol)的THF溶液(40mL)中。将所述反应混 合物冷却至-78℃，滴加入苯并呋咱(10.0g，83.3mmol)的THF溶液(34 mL)。搅拌35mins后，将混合物倒入-78℃的DMF(10.3mL，133.2mmol) 的THF溶液(34mL)中，加入3∶1水∶AcOH(80mL)溶液。室温下搅拌12 h后，加入甲苯(150mL)，分离各层。浓缩有机层至～30mL，在己 烷(150mL)中研磨。将所得的固体过滤，用己烷清洗。经硅胶快速色 谱纯化，用50％EtOAc/己烷洗脱，得到化合物877A(7.77g，63％)， 为黄褐色固体。HPLC：99％，于1.22min(保留时间)(YMC S5 ODS柱， 4.6×50mm，在4分钟内用含0.2％磷酸的10-90％甲醇水溶液洗脱，4 mL/min，于220nm检测)。MS(ES)：m/z 149.08[M+H]+。

B.(877B)

0℃下，将NaBH4(2.00g，52.5mmol)滴加入化合物877A(7.77g， 52.5mmol)的MeOH(100mL)溶液中。5mins后，使混合物在水(100mL) 和二氯甲烷(100mL)间分配。将水层用EtOAc萃取(2×100mL)，将 合并的有机层干燥(硫酸镁)并减压浓缩，得到粗制的化合物877B(7.55 g，96％)，该产物未经纯化直接使用。HPLC：99％，于1.63min(保留 时间)(YMC S5 ODS柱，4.6×50mm，在4分钟内用含0.2％磷酸的 10-90％甲醇水溶液洗脱，4mL/min，于220nm检测)。MS(ES)：m/z 133.05[M+H-水]+。

C.(877C)

0℃下，将发烟硝酸(4.25mL，100.58mmol)滴加至粗制的化合物 877B(7.55g，50.29mmol)的硫酸(50mL)溶液中。将混合物在室温下搅 拌20mins，倒入至冰(1L)上，升温至室温，随后用EtOAc萃取(3×250 mL)。将合并的有机层干燥(硫酸镁)并减压浓缩。将所得的固体物用 水洗涤并风干，得到化合物877C(6.0g)，为橙色固体。通过用EtOAc 萃取水洗液，又回收了2.7g固体物，总收率8.7g(83％)。HPLC：99％， 于1.63min(保留时间)(YMC S5 ODS柱，4.6×50mm，在4分钟内用 含0.2％磷酸的10-90％甲醇水溶液洗脱，4mL/min，于220nm检测)。 MS(ES)：m/z 210.18[M+H]+。

D.(877D)

在50℃及剧烈搅拌下，将脲(29.3mg，0.488mmol)分次加入至化 合物877C(100mg，0.488mmol)在发烟H2SO4(2mL)中的溶液内。随后 将混合物加热至100℃ 30mins，冷却至室温，然后倒入至冰(100mL) 上。将所得的含水混合物用EtOAc萃取(3×50mL)，将合并的有机 层用H2O洗涤(1×100mL)，干燥(硫酸镁)并减压浓缩。经硅胶快速 色谱纯化，用50％EtOAc/己烷洗脱，得到化合物877D(76.3mg，77％)， 为黄色-橙色固体物。HPLC：96％，于1.39min(保留时间)(YMC S5 ODS 柱，4.6×50mm，在4分钟内用含0.2％磷酸的10-90％甲醇水溶液洗 脱，4mL/min，于220nm检测)。MS(ES)：m/z 209.17[M+H]+。

E.(877E)

将化合物877D(1.01mg，4.85mmol)和P2O5(2.75g，9.70mmol)的 甲苯(24mL)混合物回流30min。加入水(50mL)，将所得的混合物用 EtOAc萃取(3×100mL)。将合并的有机层干燥(硫酸镁)并减压浓缩， 得到棕色固体状化合物877E(0.90g，98％)，该化合物未经纯化直接使 用。HPLC：90％，于1.78min(保留时间)(YMC S5 ODS柱，4.6×50mm， 在4分钟内用含0.2％磷酸的10-90％甲醇水溶液洗脱，4mL/min，于 220nm检测)。

F.(877F)

70℃下，将铁粉(0.53g，9.47mmol，325目)一次性加入至化合物 877E(0.90g，4.73mmol)的AcOH(24mL)溶液中。30分钟后，反应完 全(HPLC测定)。将混合物减压浓缩，溶于EtOAc(50mL)中，然后用 饱和碳酸氢钠洗涤(2×50mL)。将水层用EtOAc萃取(4×20mL)， 将合并的有机层干燥(硫酸钠)并减压浓缩。经硅胶快速色谱纯化，用 50％EtOAc/己烷洗脱，得到化合物877F(0.62g，82％)，为深橙色固体 物。HPLC：94％，于1.94min(保留时间)(YMC S5 ODS柱，4.6×50mm， 在4分钟内用含0.2％磷酸的10-90％甲醇水溶液洗脱，4mL/min，于 220nm检测)。MS(ES)：m/z 161.00[M+H]+。

G.(877G)

往小管瓶中加入化合物752(22.1mg，0.104mmol)、化合物 877F(11.1mg，0.069mmol)和硫酸镁(21mg，0.173mmol)。随后依次加 入DME(0.07mL)和三乙胺(0.05mL)，用Teflon胶带将管瓶密封，在 135℃下加热18h。经制备型TLC(硅胶)纯化，用30％丙酮/三氯甲 烷洗脱，得到化合物877G(6.3mg，17％)，为棕色固体物。HPLC：98％， 于2.15min(保留时间)(YMC S5 ODS柱，4.6×50mm，在4分钟内用 含0.2％磷酸的10-90％甲醇水溶液洗脱，4mL/min，于220nm检测)。 MS(ES)：m/z 337.16[M+H-水]+。化合物877G的绝对立体化学构型通 过中间体化合物752的已知立体化学构型及其所保留的构型确定。 绝对立体化学构型如上式所示并按命名法命名。

                          实施例878

[3aR-(3aα，4β，5β，7β，7aα)-4-[八氢-5-羟基-4，7-二甲基-1，3-二氧代-4，7-环 氧-2H-异吲哚-2-基]-2-氯-3-甲基苄腈(878)

在密封试管中、在150℃下，将4-氨基-2-氯-3-甲基-苄腈(54.5mg， 0.327mmol)、化合物752(104mg，0.491mmol)、硫酸镁(98mg，0.818 mmol)和二异丙基乙基胺(0.28mL，1.64mmol)在DME(0.33mL)中的混 合物加热18h。经制备型TLC(硅胶)纯化，用30％丙酮/三氯甲烷洗 脱，得到53.0mg(45％)化合物878，为黄褐色固体。HPLC：95％，于 2.63min(保留时间)(YMC S5 ODS柱，4.6×50mm，在4分钟内用含 0.2％磷酸的10-90％甲醇水溶液洗脱，于220nm检测)。MS(ES)：m/z 361.03[M+H]+。化合物878的绝对立体化学构型通过中间体化合物752 的已知立体化学构型及其所保留的构型确定。绝对立体化学构型如 上式所示并按命名法命名。

                  实施例879至1020

其它本发明化合物按照类似于上述的方法制备。实施例879至 1020的化合物具有以下结构(L为键)：

其中所述结构、化合物名称、保留时间、分子量和所用方法描 述于表18中。所述的各化合物的绝对构型没有测定。具有一个或多 个光学中心的化合物为外消旋分子或手性分子。外消旋化合物为两 种可能对映体的混合物。手性指代表一对可能对映体中的一个单一 对映体的化合物。对于不知道其绝对立体化学构型的手性化合物而 言，其结构没有反映出其绝对立体化学构型。对于通过参考原料而 已知绝对立体化学构型的手性化合物而言，则该化合物结构式反映 出其绝对立体化学构型。

用于测定表18中化合物的保留时间的色谱技术如下：LCMS＝ YMC S5 ODS柱，4.6×50mm，在4分钟内用含0.1％TFA的10- 90％MeOH/水溶液洗脱；4mL/min，于220nm检测。LCMS*＝YMC S5 ODS柱，4.6×50mm，在2分钟内用含0.1％TFA的10-90％ MeOH/H2O溶液洗脱；4mL/min，于220nm检测。LC*＝Hypersil C18 BDS柱，250×4.6mm，5μm，检测波长254nm，流速1mL/min。线性 梯度：15分钟内为90％0.1％三氟乙酸的水溶液，10％乙腈(起始)至 100％乙腈，接着的5分钟内使用100％乙腈.LC＝YMC S5 ODS柱， 4.6×50mm，在4分钟内用含0.2％磷酸的10-90％MeOH/H2O洗脱，于 220nm检测。

表18所列化合物的分子量通过MS(ES)测定，以式m/z表示。

                    表18