技术领域

本发明涉及医药领域，具体而言，是涉及以中药为原料制成的治疗失眠的制剂。

                            背景技术

随着中国社会经济的快速发展，城市化和人口老龄化进程的加快，以及竞争压力、失业、 生活节奏变化等因素的影响，精神障碍对中国人民健康的危害“越来越突出和严重”，导致失 眠、抑郁、神经症、精神分裂症等各种精神疾病急剧上升，由于该病发病率日趋增多，被称 为“新世纪的杀手”。精神疾病越来越受到人们的重视，原因在于精神疾病不仅危害病人自身 健康和生命，而且还危害家人和社会治安，造成巨大经济损失和不良社会影响。精神疾病包 括很多种如失眠症、抑郁症、神经症、精神分裂症等等。据估计，目前全国有严重精神疾病 患者约1600万人，每年约有25万人死于自杀。当前神经精神疾病在我国疾病总负担中排名 第一，占到了20％，因此，精神疾病是一个严重的医学问题和社会问题。失眠是一种持续相 当长时间的睡眠的质和/或量令人不满意的状况，常表现为难以入眠、不能入睡、维持睡眠困 难、过早或间歇性醒来而引致睡眠不足。失眠是一种最常见的睡眠紊乱，几乎每个人都有过 失眠的经历。随着社会的发展，生活节奏的加快，失眠症的发生率有上升趋势。据统计，美 国、欧洲和澳大利亚约有10％～49％的人患有失眠，全球人口中20％～30％(包括 成人和儿童)受到失眠的严重影响，其中5％由睡眠呼吸障碍所致，严重者可影响日常行为 和生活。短期睡眠限制可以导致糖耐量减退，可能是形成有症状性糖尿病的一个独立危险因 素，睡眠不足会对碳水化合物代谢和内分泌功能产生有害影响。充足的睡眠除了可以消除疲 劳外，还与提高机体免疫力、增强抵抗疾病的能力密切相关。

中医对失眠早有记载，《灵枢·大惑论》较为详细地论述了“目不暝”的病机。《灵枢·邪 客》篇对“目不瞑”更提出具体的治法和方药。汉·张仲景对不寐的临床证候和治法丰富了 《内经》的内容，如：“少阴病，得之二三日以上，心中烦，不得卧，黄连阿胶汤主之。”(《伤 寒论·辨少阴病脉证并治》)“虚劳虚烦不得眠，酸枣仁汤主之。”二方至今仍为临床所常用。 唐·孙思邈《千金翼方·卷一》中记载了丹砂、琥珀等一些重镇安神药，以及在半夏秫米汤 基础上，拟选温胆汤等治疗“大病后虚烦不眠”，为秦汉以来治疗不寐增添了新的内容。明·张 介宾《景岳全书·卷十八·不寐》中明确地提出以邪正虚实作为本病辨证的纲要，在治疗方 面，他根据不寐的不同证候，分别采用不同的治疗原则和方药，不论在病因病机上，或在论 治用药上都作了系统的论述，迄今仍有较高的参考价值。明·李中梓《医宗必读·卷十·不 得卧》对不寐的病因和治法论述亦颇具体而实用。明·戴元礼《证治要诀·虚损门》有“年 高人阳衰不寐”之论，说明不寐的病因与阳虚有关，其论点颇值得注意。其后医家多以《内 经》、《难难》、《伤寒》、《金匮》等理论为指导，结合历代医家的观点和自己的临床经验，对 不寐证的病因、病机、治法、方药等方面都有所发挥，从而使不寐一证，从理论到实践，均 有了比较系统的认识。

中医根据失眠的特点将失眠分为心火炽盛型失眠，采用朱砂安神丸治疗；肝郁化火型失 眠，采用龙胆泻肝汤治疗；痰热内扰型失眠，采用温胆汤治疗；阴虚火旺型失眠，采用六味 地黄丸合黄连阿胶汤治疗；心脾两虚型失眠，采用归脾汤治疗；心胆气虚型失眠，采用安神 定志丸合酸枣仁汤治疗。除以上药物外，目前常用的中成药还有天王补心丹、安神补心丸、 补肾益脑片、夜宁糖浆、败酱片、滋心阴口服液、柏子养心丸、脑乐静、安神补脑液、养血 安神片、琥珀安神丸、三宝丹、孔圣枕中丹、血府逐瘀丸、刺五加片、养血安神丸、磁朱丸、 癫痫宁片、健儿乐、眠安康口服液、甜梦口服液、补中益气丸(片)、珍珠粉、复方北五味子 片、七叶神安片、复方枣仁胶囊、枕中健脑液、宁神补心片、安神胶囊等。西医治疗失眠主 要使用镇静、催眠类药物，其主要分为三大类：1、苯二氮类：这类药物主要有利眠宁、安定、 去甲羟基安定、硝基安定、氯羟安定等。2、巴比妥类：这类药物主要有苯巴比妥、苯巴比妥 钠等。3、其他杂类：如副醛、水合氯醛、导眠能、安眠酮、氯丙嗪、异丙嗪等。安眠药是一 类对中枢神经系统产生抑制作用，可引起镇静和催眠的药物，其镇静作用与催眠作用并无严 格的差别。

目前，治疗失眠的中成药，所用药味较多，难以控制其药物的质量、不适应工业化大生 产；此外，治疗失眠的中成药中多采用重镇安神的矿物质药或朱砂，在治疗失眠的同时，又 会对身体造成损害；此外此类药物的剂型多为片剂、丸剂、口服液等、药物起效作用缓慢， 服用麻烦。而目前所有的西药都存在以下问题：1、几乎所有的安眠药，长期连续使用都可产 生耐受性和依赖性。突然停药会产生渴望此药、易激惹、失眠、躯体震颤、出汗、心跳加快 等症状。2、本类药物，尤其是作用时间较长的镇静催眠药，用后常有延续效应，次晨出现头 晕、困倦、精神不振、思睡等。心理试验表明，病人晚间1次服用此类药物之后，于第二天 下午，测量病人的反应速度明显受损，本人还意识不到这种损害的存在；这对于从事机械工 作的人常形成潜在危险。因此，服药的患者，不可驾驶车辆和操纵机器，以免发生事故。3、 其他中枢抑制药物，如抗组织胺药、镇痛药以及乙醇等，与本类药物合用时，能增强对中枢 的抑制作用，特别是与乙醇同用时，对中枢系统有协同抑制作用，可出现严重的后果。4、巴 比妥类和二氯醛安替吡琳，不能用于患急性间歇性血卟啉病的病人。5、儿童不宜使用安眠药， 对智力有副作用；对于老年病人，则应慎重使用，因为用药之后可能会出现意识模糊。6、肝 肾功能减退者慎用，肝功能严重障碍者禁用，尤其是巴比妥类药。7、哺乳期妇女及孕妇不适 宜应用。

因此发现一种药味较少、毒副作用低、疗效显著、疗程短、价格适中、适应工业化大生 产的纯中药制剂尤为重要。

                                 发明内容

本发明的目的就是提供一种治疗各种原因所导致的失眠、精神性疾病的药物。

本发明的另一目的是提供了该药物的制备方法。

本发明药物选择性甘味平归心、肝经，具有养心安神，敛汗功效的酸枣仁属为君药，其 可主治心肝血虚而引起虚烦不眠，惊悸怔忡，烦渴，虚汗等症状。选择性平味苦无毒，归心、 肝经，具有解郁安神，理气开胃，活络止痛的功效的合欢花为臣药，其可主治郁结胸闷，失 眠，健忘，风火眼疾，视物不清，咽痛，痈肿，跌打损伤疼痛等症。选择三七叶总皂甙为佐 药，据《本草纲目》记载，三七叶主治折伤跌打出血，敷之即止，青肿经夜即散，其功同根。 三七叶总皂甙是从三七茎叶中经科学方法提纯的有效成分，具有纯度高、疗效稳定确切的特 点。现代药理实验证明，三七叶皂甙具有镇静作用，三七叶总皂甙能明显抑制小鼠的自发活 动，可使动物安静、伏卧、眼睑下垂。三七叶总皂甙对中枢抑制药物氯丙嗪、戊巴比妥钠、 硫喷妥钠有协同作用：协同氯丙嗪对小鼠自主活动的抑制作用；协同戊巴比妥钠使小鼠入睡； 显著地延长硫喷妥钠对小鼠的睡眠时间。三七叶总皂甙对中枢兴奋药物苯丙胺、咖啡因所致 的小鼠的兴奋有拮抗作用。对戊四唑及士的宁引起的小鼠惊厥有拮抗作用。此外还有镇痛、 脑缺血保护作用。选择甘草为使药，利用甘草补脾益气、止咳祛痰、清热解毒、缓急定痛和 调和药性之功效以加强本方剂镇静、安眠的功效。

本发明药物组分的用量也是经过发明人进行大量摸索总结得出的，各组分用量在下述范 围都有较好的疗效：

酸枣仁690～2070份、合欢花414～1242份、三七叶皂甙10.3～30份、甘草207～621 份。

优选范围为：

酸枣仁1035～1725份、合欢花621～1035份、三七叶皂甙15.5～25.5份、甘草310～517 份。

最佳范围为：

酸枣仁1380份 合欢花828份 三七叶皂甙20.7份 甘草414份。

滴丸制备工艺研究

我们对安神滴丸的滴制工艺，做了筛选实验，考察浸膏与PEG-6000的比例。取膏与不 同比例(2、2.5、3、3.5倍量)的聚乙二醇-6000分别化料滴丸，以滴丸硬度、外观色泽、 滴丸圆整度为指标进行考察，结果见表1。

                      表1滴丸制备工艺研究

聚乙二醇量    2倍               2.5倍        3倍        3.5倍

色泽          色均匀            色均匀       色均匀     色均匀

圆整度        稍差，有异形丸    圆整         圆整       圆整

硬度          适中              适中         较硬       较硬

综合上述结果，最终确定为加膏量的2.5-3倍量聚乙二醇-6000。

经实验证实：滴丸温度高于90℃，滴丸速度过快，冷凝效果差，易粘丸，有时滴丸的圆 整度较差；低于70℃，则滴丸速度太慢，滴丸圆整度差。化料温度应略高于滴丸温度，这样 不致在倒料过程中温度过低。化料温度：80-90℃，滴丸温度：75-85℃。

最终确定滴制工艺为：取三七叶皂甙粉末加入酸枣仁、合欢花提取物中，水浴加热，搅 拌，使三七叶皂甙与浸膏充分混匀，加入甘草浸膏，混匀，加入熔融的聚乙二醇6000(80-90 ℃，为总浸膏的2.5～3倍)，化料均匀(80～90℃)，滴制(75～85℃)，即得。

本发明药物可以采用中药制剂常规方法制备。本发明药物有效成分的制备可以采用以下 方法：水提法、水提醇沉法、萃取法、浸渍法、渗漉法、回流提取法、连续回流提取法、大 孔树脂吸附法制备。例如，可将这些原料药研成粉末混合均匀制成散剂冲服；也可以将这些 药物一起水煎，然后浓缩水煎液，制成口服液；但是为了使该药物各原料药更好地发挥药效， 优选对原料采用如下工艺提取，但是这不能限制本发明的保护范围。

本发明药物的制备方法如下：

(a)按配比称取各原料药酸枣仁690～2070份、合欢花414～1242份、三七叶皂甙10.3～ 30份、甘草207～621份备用；

(b)取酸枣仁粗粉、合欢花、甘草加6～14倍生药量水，回流提取0.5～5小时，滤过，滤液 备用，药渣加入6～14倍生药量水，回流提取0.5～5小时，滤过，滤液备用，药渣再加入6～14 倍生药量水，回流提取0.5～5小时，滤过，合并3次提取液，40～90℃以下、P60＝1.06～1.09减 压浓缩至1g生药/ml，加入90～99％乙醇使含醇量达到50～70％，静置过夜，滤过，滤液回收 乙醇、在P60＝1.12～1.14下浓缩至3g生药/ml，加入90～99％乙醇使含醇量达到75～85％，静置 过夜，滤过，滤液减压浓缩至稠膏；

(c)取三七叶皂甙干粉加入酸枣仁、合欢花、甘草提取物中，水浴加热使溶解，混合均匀， 加入60～110℃熔融的辅料，60～110℃化料均匀，滴入冷凝剂中，取出，擦净冷凝剂，即得。

优选的本发明药物制备方法包括下列步骤：

(a)按配比称取各原料药酸枣仁1035～1725份、合欢花621～1035份、三七叶皂甙15.5～ 25.5份、甘草310～517份；

(b)取过10～30目筛酸枣仁粗粉，合欢花，甘草加8～12倍生药量水，回流提取1～3小 时，滤过，滤液备用，药渣加入8～12倍生药量水，回流提取1～3小时，滤过，滤液备用， 药渣再加入8～12倍生药量水，回流提取1～3小时，滤过，合并3次提取液，60～80℃以下 P60＝1.06～1.09减压浓缩至1g生药/ml，加入95％乙醇使含醇量达到60％，静置过夜，滤过， 滤液回收乙醇在P60＝1.12～1.14下浓缩至3g生药/ml，加入93～97％乙醇使含醇量达到77～ 83％，静置过夜，滤过，滤液在P60＝1.30～1.35减压浓缩至稠膏；

(c)取三七叶皂甙干粉加入酸枣仁、合欢花、甘草提取物中，水浴加热使溶解，混合均匀， 加入70-100℃熔融的、为总浸膏的1-6倍量的聚乙二醇，70～100℃化料均匀，滴入5～10℃冷 却的液体石蜡、甲基硅油或植物油中，取出，即得。

最佳的本发明药物制备方法包括下列步骤：

(a)按原料配比称取酸枣仁1380份、合欢花828份、三七叶皂甙20.7份、甘草414份；

(b)取过20目筛的酸枣仁粗粉，合欢花，甘草加10倍生药量水，回流提取2小时，滤过， 滤液备用，药渣加入10倍生药量水，回流提取2小时，滤过，滤液备用，药渣再加入10倍 生药量水，回流提取2小时，滤过，合并3次提取液，70℃以下、P60＝1.06～1.09减压浓缩至 1g生药/ml，加入95％乙醇使含醇量达到60％，静置过夜，滤过，滤液回收乙醇、在P60＝1.12～1.14 下浓缩至3g生药/ml，加入95％乙醇使含醇量达到80％，静置过夜，滤过，滤液减压浓缩至 稠膏P60＝1.30～1.35；

(c)取三七叶皂甙干粉加入酸枣仁、合欢花、甘草提取物中，水浴加热使溶解，混合均匀， 加入80-95℃，为总浸膏的2.5-3倍的熔融的聚乙二醇6000，在80～95℃化料均匀，滴入冷却 的6～8℃液体石蜡中，制成1000g滴丸，取出，擦净石蜡，即得。

在本发明药物制备中，加入的辅料可以是：淀粉、蔗糖、乳糖、甘露醇、硅衍生物、纤 维素及其衍生物、明胶、甘油、琼脂、碳酸钙、表面活性剂、糊精等或者是上述辅料的一定 配比混合物；所制成的剂型可以是：片剂、糖衣片剂、薄膜衣片剂、肠溶衣片剂、胶囊剂、 硬胶囊剂、软胶囊剂、口服液、口含剂、颗粒剂、冲剂、丸剂、散剂、膏剂、丹剂、混悬剂、 粉剂、溶液剂、注射剂、栓剂、软膏剂、硬膏剂、喷雾剂、滴丸剂等，优选的是滴丸剂、胶 囊剂、颗粒剂、片剂、口服液、丸剂等。

以上组成在生产时可按照相应的比例增大或减少，如大规模生产可以以公斤或以吨为单 位，小规模生产也可以以克为单位，重量可以增大或减小，但各组成之间的生药材料重量配 比比例不变。

以上各组成中的单味中药，尤其是佐药、使药或佐药与使药，可以单独或同时被适当的 具有相同药性、功效的中药替换，替换后中药制剂及其药物作用不变。

本发明的药物在使用时可根据病人的情况确定用法用量，可每日1-3次，每日各生药用 量以国家药典用药量为准，不超过药典规定量。

本发明是在中医理论指导下，经过大量的制备工艺试验以及药理学、药效学试验所得到 的制剂。本发明疗效显著，具有养血活血，益气安神之功效，临床上用于神经衰弱，失眠多 梦，心神不安等症。适用于各型失眠症，如压力型失眠、不良嗜好型失眠、焦虑型失眠、抑 郁型失眠等，对神经衰弱及神经衰弱综合征、失眠心悸以及偏头痛、神经血管性头痛、神经 官能性头痛、广泛性焦虑障碍、更年期综合征、老年性睡眠不足、戒毒辅助治疗及学生考试 前紧张综合征、慢性脑功能不全综合征，学习和记忆能力障碍，脑血栓、脑动脉硬化等的临 床症状均有效。此外该药物还可以在治疗精神疾病药物中的应用，如抑郁症、神经症、精神 分裂症、老年痴呆、焦虑症、强迫症、边缘性人格障碍等药物中的应用。

本发明组方合理，药物毒副作用低，克服了西药治疗失眠毒副作用较大、费用高，中药 疗效低、药味多、不适应大规模生产的缺点，是一种经济、实惠、疗效确定的治疗神经衰弱 及神经衰弱综合征、失眠心悸以及偏头痛、神经血管性头痛、神经官能性头痛、广泛性焦虑 障碍、更年期综合征、老年性睡眠不足、戒毒辅助治疗及学生考试前紧张综合征、老年痴呆、 慢性脑功能不全综合征，学习和记忆能力障碍，脑血栓、脑动脉硬化、以及精神疾病的药物。

为了更好的理解本发明，以下通过实验例来进一步阐述发明药物的有益效果，实验例包 括本发明药物(以下称安神滴丸)的药效学动物试验。下面试验旨在进一步说明安神滴丸的 作用，而非对本发明的限制。本实验例采用的发明药物是按实施例1制备而成。

【实验例】安神滴丸的主要药效学试验

试验目的

天士安神滴丸由酸枣仁、甘草等药味组成，具有养血活血，益气安神之功效，临床上用 于神经衰弱，失眠多梦，心神不安等症。为将其开发成中药三类新药，对该药进行了主要药 效学试验研究，以期为该药提供科学的实验依据。

受试药物

1.天士安神滴丸流浸膏，由天津天士力制药集团有限公司研制提供，每克膏相当生药7.6g， 批号：20011015。原液冰箱中保存，于试验前取出，用蒸馏水配成适当浓度，供动物灌胃 给药。

小鼠试验选用剂量：10g生药/kg、5g生药/kg、2.5g生药/kg、1.25g生药/kg。

小鼠给药浓度：0.316g生药/ml、0.158g生药/ml、0.079g生药/ml、0.0395g生药/ml。

小鼠给药体积：0.32ml/10g。

大鼠试验选用剂量：5g生药/kg、2.5g生药/kg、1.25g生药/kg。

大鼠给药浓度：0.5g生药/ml、0.25g生药/ml、0.125g生药/ml、

大鼠给药体积：1ml/100g

2.阳性对照药：

(1)益心宁神片：辽宁省恒仁药业有限公司生产，批号；000501。

给药剂量：1.58g粉/kg

小鼠给药浓度：0.049g粉/ml，小鼠给药体积：0.32ml/10g

大鼠给药浓度：0.156g粉/ml，大鼠给药体积：1ml/100g。

(2)安定：天津市氨基酸公司人民制药厂生产，批号：001120。

给药剂量：5mg/kg，小鼠给药浓度：0.2mg/ml，给药体积：0.25ml/10g.

3.工具药：

戊巴比妥钠：中国医药(集团)上海化学试剂公司进口分装，批号；971104

配制浓度：3mg/ml，给药体积：0.1ml/10g。剂量30mg/kg

          4mg/ml，给药体积：0.1ml/10g。剂量40mg/kg

咖啡因：由天津天士力制药集团有限公司提供，批号00011109。

配制浓度0.5mg/ml，给药体积0.1ml/10g。剂量5mg/kg。

实验动物

1.昆明种小鼠，体重20(g)左右，雌雄兼用。

2.Wistar种大鼠，体重200g左右，雌雄兼用。

均由天津药物研究院动物室生产提供，合格证：W-J津实动质R准字001号。饲养在有 中央空调的观察室中，饲料为中国生物制品检定所生产的全价营养块料，饮自来水。

实验仪器

1.Jzz98自主活动测定仪，医科院北京药物研究所生产。

2.库尔特AC-T血细胞计数仪：Beckman公司生产。

3.LBY-N6血粘度仪：北京普利生公司生产。

4.显微镜、计数器等。

试验方法和结果

一.镇静试验

1.对小鼠自主活动的影响(自主活动仪法)

试验选用60只小鼠，雌雄各半，随机分为6组：(1)对照组，灌胃给予同体积的蒸 馏水；(2)安定组，于试验前1次灌胃给药5mg/kg剂量；(3)阳性药组，灌胃给予益心宁 神片1.58g粉/kg；(4)天士安神滴丸高剂量组，灌胃给予10g生药/kg剂量；(5)天士安神 滴丸中剂量组，灌胃给予5g生药/kg剂量；(6)天士安神滴丸低剂量组，灌胃给予2.5g生 药/kg剂量。除第(2)组外，其余各组每日灌胃给药1次，连续给予3天。于末次给药后 40分钟，将每只小鼠分别置于Jzz98自主活动仪(医科院北京药物研究所生产)中，待其适 应5分钟，然后记录5分钟内小鼠自主活动次数，将给药组的平均数与对照组平均数进行统 计学T测验，结果(见表1)显示，10g生药/kg、5g生药/kg剂量的天士安神滴丸能够显著 地减少小鼠自主活动次数，具有较好的镇静作用。

表1.天士安神滴丸对小鼠自主活动的影响

分组                剂量(g生药/kg；)         自主活动次数(X±SD)

对照组              0                        483±93

安定                5mg/kg                   188±95***

益心宁神片          1.58g粉/kg；             402±153

天士安神滴丸        10                       297±119**

天士安神滴丸        5                        266±223*

天士安神滴丸        2.5                      363±238

*p＜0.05  **p＜0.01  ***p＜0.001

2.对小鼠自发活动的影响(走动时间及举双前肢法)

试验选用50只小鼠，雌雄各半，随机分为5组：(1)对照组，灌胃给予同体积的蒸馏水；(2) 阳性药组，灌胃给予益心宁神片1.58g粉/kg；(3)天士安神滴丸高剂量组，灌胃给予10g生 药/kg剂量；(4)天士安神滴丸中剂量组，灌胃给予5g生药/kg剂量；(5)天士安神滴丸低 剂量组，灌胃给予2.5g生药/kg剂量。每日灌胃给药1次，连续给予3天，于末次给药后40 分钟，将每只小鼠分别放置于50×30×15(cm)的塑料盒中，使其适应2分钟，然后记录2 分钟内的走动时间及抬举双前肢次数，将给药组平均数与对照组平均数进行统计学T测验， 结果(见表2)显示，天士安神滴丸能够非常显著地减少小鼠的走动时间及抬举双前肢次数。

表2.天士安神滴丸对小鼠走动时间及举双前肢次数的影响

                剂量            走动时间(X±SD)  抬举次数(X±SD)

分组

               (g生药/kg)       (s)              (次)

对照组         0                45±8            34±10

益心宁神片     1.58g粉/kg       27±11**        18±5***

天士安神滴丸   10               25±11***       16±4***

天士安神滴丸   5                25±9***        22±6***

天士安神滴丸   2.5              26±13**        20±7***

**p＜0.01  ***p＜0.001

3.对咖啡因的拮抗作用

试验选用70只小鼠，雌雄各半，随机分为7组：(1)正常对照组，灌胃给予同体积的 蒸馏水；(2)模型对照组，灌胃给予同体积的蒸馏水；(3)安定组，于试验前1次灌胃给 药，5mg/kg剂量；(4)阳性药组，灌胃给予益心宁神片1.58g粉/kg；(5)天士安神滴丸高 剂量组，灌胃给予5g生药/kg剂量药液；(6)天士安神滴丸中剂量组，灌胃给予2.5g生药 /kg剂量药液；(7)天士安神滴丸低剂量组，灌胃给予1.25g生药/kg剂量药液。除第3组 外，其余各组每日灌胃给药1次，连续给予3天。于末次给药后25分钟，除正常对照组外， 其余各组腹腔注射5mg/kg的咖啡因，10分钟后，将每只小鼠分别置于Jzz98自主活动仪(医 科院北京药物研究所生产)中，待其适应5分钟，然后记录5分钟内小鼠自主活动次数， 将给药组的平均数与模型对照组平均数进行统计学T测验，结果(见表3)显示，各给药 组均能显著地减少小鼠自主活动次数，表明天士安神滴丸对咖啡因具有一定的拮抗作用。

表3天士安神滴丸对咖啡因的拮抗作用

分组             剂量(g生药/kg)       自主活动次数(X±SD)

正常对照组       0                    413±99

模型对照组       0                    569±181Δ

安定组           5mg/kg               312±136**

益心宁神片       1.58g粉/kg           459±118

天士安神滴丸     5                    357±148*

天士安神滴丸     2.5                  403±132*

天士安神滴丸     1.25                 423±100*

*表示给药组与模型对照组比较*p＜0.05  **p＜0.01

Δ表示模型对照组与正常对照组比较p＜0.05

二.睡眠试验

1.对戊巴比妥钠阈下剂量的协同作用

试验选用60只小鼠，雌雄各半，随机分为6组：(1)对照组，灌胃给予同体积的蒸馏 水；(2)安定对照组，于试验1次前灌胃给药，5mg/kg剂量；(3)阳性药组，灌胃给予益 心宁神片1.58g粉/kg剂量药液；(4)天士安神滴丸高剂量组，灌胃给予5g生药/kg剂量药 液；(5)天士安神滴丸中剂量组，灌胃给予2.5g生药/kg剂量药液；(6)天士安神滴丸低剂 量组，灌胃给予1.25g生药/kg剂量药液。除第2组外，其余各组每日灌胃给药1次，连续 给予3天，于末次给药后40分钟，各组腹腔注射30mg/kg剂量的戊巴比妥钠，记录15分钟 内小鼠睡眠只数(以翻正反射消失1分钟以上者为睡眠)，将给药组的睡眠动物数与对照组 相比较，进行x2测验，结果(见表4)显示，5g生药/kg、2.5g生药/kg剂量组与对照组比 较有显著差异，表明天士安神滴丸与戊巴比妥钠有明显的协同作用。

表4.天士安神滴丸对戊巴比妥钠阈下剂量的协同作用

            剂量         动物数         未睡动物数      睡眠动物数

分组

            (g生药/kg)   (只)           (只)             (只)

对照组      0            10             9                1

安定组      5mg/kg       10             1                9**

益心宁神片  1.58g粉/kg   10             8                2

天士安神滴丸  5        10         3         7**

天士安神滴丸  2.5      10         4         6*

天士安神滴丸  1.25     10         5         5

*p＜0.05  **p＜0.01

2.对阈剂量戊巴比妥钠睡眠时间的影响

试验选用50只小鼠，雌雄各半，随机分为5组：(1)对照组，灌胃给予同体积的蒸馏 水；(2)阳性药组，灌胃给予益心宁神片1.58g粉/kg剂量药液；(3)天士安神滴丸高剂量组， 灌胃给予10g生药/kg剂量药液；(4)天士安神滴丸中剂量组，灌胃给予5g生药/kg剂量药 液；(5)天士安神滴丸低剂量组，灌胃给予2.5g生药/kg剂量药液。每日灌胃给药1次，连 续给予3天，于末次给药后40分钟，各组腹腔注射40mg/kg剂量的戊巴比妥钠，记录小鼠在 给予戊巴比妥钠后的睡眠潜伏期及睡眠时间(若睡眠时间超过30分钟，以30分钟计)，各给 药组平均数与对照组比较，进行统计学T测验，结果(见表5)显示，高剂量组能够明显缩 短小鼠戊巴比妥钠睡眠潜伏期并延长其睡眠时间，而中、低剂量组则只延长小鼠的睡眠时间。 表明天士安神滴丸对小鼠的睡眠有一定的影响。

表5.天士安神滴丸对小鼠戊巴比妥钠睡眠时间的影响

              剂量                   注射戊巴比妥钠后

分组

              (g生药/kg)       睡眠潜伏期(min)      睡眠时间(min)

对照组        0                6.3±2.4             9.8±8.3

益心宁神片    1.58g粉/kg       4.4±0.8*           22.6±8.6***

天士安神滴丸  10               3.2±0.9**          20.5±10.6**

天士安神滴丸  5                4.8±0.7             20.6±11.0**

天士安神滴丸  2.5              7.4±2.3             23.1±10.8***

*p＜0.05  **p＜0.01  ***p＜0.001

3.对阈剂量戊巴比妥钠睡眠小鼠再入睡的影响

试验选用50只小鼠，雌雄各半，随机分为5组：(1)对照组，灌胃给予同体积的蒸馏 水；(2)阳性药组，灌胃给予益心宁神片1.58g粉/kg剂量药液；(3)天士安神滴丸高剂量组， 灌胃给予10g生药/kg剂量药液；(4)天士安神滴丸中剂量组，灌胃给予5g生药/kg剂量药 液；(5)天士安神滴丸低剂量组，灌胃给予2.5g生药/kg剂量药液。每日灌胃给药1次，连 续给予3天，于末次给药后40分钟，各组腹腔注射40mg/kg剂量的戊巴比妥钠，观察并记录 睡眠小鼠苏醒后再次入睡的动物数(以翻正反射消失达1分钟以上者为睡眠)，各组再入睡动 物数与对照组相比较，进行x2测验，结果(见表6)显示，5g生药/kg剂量组与对照组比较 有显著性差异，表明天士安神滴丸对阈剂量戊巴比妥钠睡眠小鼠的再入睡有一定的促进作用。

表6.天士安神滴丸对阈剂量戊巴比妥钠睡眠小鼠再入睡的影响

                剂量           睡眠动物数        再入睡动物数(只)

分组

                (g生药/kg)       (只)

对照组          0                10                 1

益心宁神片      1.58             10                 4

天士安神滴丸    5                10                 7**

天士安神滴丸    2.5              10                 5

天士安神滴丸    1.25             10                 2

**p＜0.01

三.养血、活血、益气作用

1.对失血小鼠RBC和HGB的影响

(1).预防给药对失血小鼠RBC和HGB的影响

试验选用KM种小鼠，体重20g左右，雌雄兼用，随机分组：(1)正常对照组，灌胃 给予同体积的蒸馏水；(2)模型对照组，灌胃给予同体积的蒸馏水(3)阳性药组，灌胃给予 益心宁神片1.58g粉/kg剂量药液；(4)天士安神滴丸组，灌胃给予10g生药/kg剂量药液； (5)天士安神滴丸组，灌胃给予5g生药/kg剂量药液；(6)天士安神滴丸组，灌胃给予2.5 g生药/kg剂量药液；(7)天士安神滴丸组，灌胃给予1.25g生药/kg剂量药液。每日灌胃给 药1次，连续给予10天。于第3次给药后1小时，除正常对照组外，其余各组眼静脉丛取血 10自然滴/只(约0.5ml/只)，然后每日继续灌胃给药，于给药第6天，药后1小时，将部分 动物剪尾取血20ul/只，放入血球稀释液，用BECKMAN公司生产的COULTER AC.T diff血 细胞计数仪测定小鼠的红细胞数及血红蛋白含量；剩余动物继续给药，于给药第10天，药后 1小时，同法取血、测定，各给药组平均数与模型对照组相比较，进行统计学T测验，结果 (见表7、8)显示，天士安神滴丸对失血性血虚小鼠有较好的补血作用，在造模给药3天， RBC、HGB即有明显改善，在造模给药7天后，RBC、HGB平均值与模型对照组有显著性 差异，甚至可恢复到正常值范围。

表7天士安神滴丸预防给药造模后3天对RBC、HGB的影响

               剂量         动物数     造模后3天RBC、HGB平均数

分组

              (g生药/kg)   (只)      RBC(×1012个/L) HGB(g/L)

正常对照组    0            5         10.57±1.12      175.2±18.9

模型对照组    0            10        7.03±0.97ΔΔ     115.6±16.4ΔΔ

益心宁神片    1.5g粉/kg    9         6.24±1.18       108.5±14.4

天士安神滴丸  10           7         8.18±0.67*     136.5±12.5**

天士安神滴丸  5            10        7.55±0.88       131.1±15.3*

天士安神滴丸  2.5          10        7.57±1.32       133.2±25.1

天士安神滴丸  1.25         9         8.02±1.06*     138.5±16.1**

表8.天士安神滴丸预防给药造模第7天对RBC、HGB的影响

              剂量        动物数     造模后7天RBC、HGB平均数

分组

              (g生药/kg)   (只)      RBC(×1012个/L)  HGB(g/L)

正常对照组    0            8         9.31±1.81        154.5±28.8

模型对照组    0            10        7.37±1.59Δ          124.4±26.6Δ

益心宁神片    1.5g粉/kg    10        8.41±1.20        144.8±19.8

天士安神滴丸  10           10        9.18±0.83**     153.8±11.3**

天士安神滴丸  5            10        8.14±1.14        142.6±17.9

天士安神滴丸  2.5          10        9.35±1.81*      160.8±32.4*

天士安神滴丸  1.25         10        9.46±1.22**     163.8±19.9**

*表示给药组与模型对照组比较   *p＜0.05      **p＜0.01

Δ表示模型组与正常对照组比较  Δp＜0.05      ΔΔp＜0.01

(2).治疗给药对失血性小鼠RBC、HGB的影响

试验选用KM种小鼠60只，体重20g左右，雌雄各半。分组前，除留10只动物作为 正常对照组外，其余动物均眼静脉丛放血0.5ml/只，造成失血性贫血。24小时后，各组动物 尾尖取血10ul/只，放入血球稀释液，用BECKMAN公司生产的库尔特AC-T血液分析仪测 定小鼠的红细胞数及血红蛋白含量。将失血性贫血动物按RBC、HGB值均匀分组：(1)模型 对照组，灌胃给予同体积的蒸馏水(2)阳性药组，灌胃给予益心宁神片1.58g粉/kg剂量药 液；(3)天士安神滴丸组，灌胃给予5g生药/kg剂量药液；(4)天士安神滴丸组，灌胃给予 2.5g生药/kg剂量药液；(5)天士安神滴丸组，灌胃给予1.25g生药/kg剂量药液。每日灌胃 给药1次，连续给予7天，末次给药后1小时，尾尖取血，同法测定各组动物的RBC、HGB 值，给药各组平均值与模型组进行统计学T测验，结果(见表9)显示，天士安神滴丸对失 血性血虚小鼠有很好的治疗作用，经7天给药治疗，RBC、HGB值与模型对照组比较有显著 性差异并能恢复到正常值范围。

表9.天士安神滴丸治疗给药对失血性小鼠RBC、HGB的影响

              剂量        RBC平均值(×1012个)             HGB平均值(g/L)

分组

              (g生药/kg)  造模24h         给药7d          造模24h      给药7d

正常对照组    0           8.65±0.74      8.69±0.67      145±12      144±13

模型组        0           6.57±0.82ΔΔ   7.33±0.91ΔΔ    114±14ΔΔ   122±15ΔΔ

益心宁神片    1.58粉/kg   6.58±0.76      8.01±0.46*    113±12      134±7*

天士安神滴丸  5           6.52±0.84      8.17±0.74*    114±14      138±12*

天士安神滴丸  2.5         6.51±0.74      7.94±0.89      111±11      133±15

天士安神滴丸  1.25        6.51±0.71      8.32±1.01*    111±10      141±16*

*表示给药组与模型组比较  *p＜0.05

Δ表示模型组与正常对照组比较  ΔΔp＜0.01

2.对正常大鼠全血粘度的影响

试验选用Wistar大鼠50只，体重220-280g，雌雄各半，随机分组：(1)对照组，灌 胃给予同体积的蒸馏水；(2)阳性药组，灌胃给予益心宁神片1.58g粉/kg剂量药液；(3) 天士安神滴丸组，灌胃给予5g生药/kg剂量药液；(4)天士安神滴丸组，灌胃给予2.5g 生药/kg剂量药液；(5)天士安神滴丸组，灌胃给予1.25g生药/kg剂量药液。每日灌胃 给药1次，连续给药7天，于末次给药后1小时，乙醚麻醉，眼眶静脉丛取血，肝素钠 抗凝，用LBY-N6血粘度仪(北京普利生公司生产)测定全血粘度，切速变率120s-1、20s-1； 离心3000r/min，约30min，测红细胞压积。将给药组平均值与对照组比较，进行统计学 T测验，结果(见表10)显示，天士安神滴丸能够非常显著的改善高切速变率、低切速 变率下全血粘度，而对红细胞压积无明显影响，表明该药有较好的活血作用。

表10.天士安神滴丸对正常大鼠全血粘度的影响

              剂量        红细胞压积  高切粘度      低切粘度

分组

              (g生药/kg)  (％)        120s-1       20s-1

对照组        0           51.7±2.8   12.36±0.72   6.97±0.41

益心宁神片    1.58g粉/kg  51.5±3.1   12.45±0.93   6.51±0.40

天士安神滴丸  5           51.7±3.8   11.54±0.73* 6.22±0.20***

天士安神滴丸  2.5         49.0±4.3   11.54±0.80* 6.40±0.61*

天士安神滴丸  1.25        50.9±1.3   12.19±0.56   6.62±0.31*

*p＜0.05      ***p＜0.001

3.对气虚小鼠的影响

试验选用KM种小鼠60只，体重20g左右，雄性，随机分组：(1)正常对照组， 灌胃给予同体积的蒸馏水；(2)模型对照组，灌胃给予同体积的蒸馏水(3)阳性药组， 灌胃给予益心宁神片1.58g粉/kg剂量药液；(4)天士安神滴丸组，灌胃给予5g生药/kg 剂量药液；(5)天士安神滴丸组，灌胃给予2.5g生药/kg剂量药液；(6)天士安神滴丸 组，灌胃给予1.25g生药/kg剂量药液每日灌胃给药1次，连续给药1周。给药当日开始， 除正常对照组外，其余各组小鼠限制食量，饲料量为100g/kg体重/天，用漏底饲养盒饲 养，正常饮水。于末次给药后1小时，尾尖采血、涂片，进行酯酶染色，在油镜下计数 淋巴细胞100个，算出T淋巴细胞的百分数。小鼠脱颈处死，称体重、胸腺、脾脏的重 量，计算脏器系数。将给药组平均值与模型对照组进行统计学T测验，结果(见表11) 显示，天士安神滴丸连续给药1周，能够非常显著地增加模拟气虚小鼠的外周血中T淋 巴细胞百分数、胸腺系数、脾脏系数，而对小鼠体重增加不明显，表明天士安神滴丸具 有很好的补气作用。

表11.天士安神滴丸对模拟气虚小鼠的影响

              剂量       体重           胸腺系数        脾脏系数        T淋巴细胞

分组

              (g生药/kg) (g)            (mg/g)          (mg/g)          (％)

正常对照组    0          24.6±2.6      2.80±0.86      7.48±2.42      56.1±2.5

模型组        0          15.8±1.7ΔΔ   0.60±0.18ΔΔ   1.74±0.27ΔΔ    43.6±4.9ΔΔ

益心宁神片    1.58g/kg   15.8±2.3      0.62±0.20      2.12±0.28**   44.4±8.9

天士安神滴丸  5          16.9±2.7      1.00±0.30**   2.16±0.28**   53.9±5.4**

 天士安神滴丸  2.5    16.9±2.5   0.94±0.16** 2.23±0.43** 52.6±2.7**

 天士安神滴丸  1.25   15.8±1.8   1.02±0.28** 2.13±0.31** 48.7±8.3

 *表示给药组与模型组比较  **P＜0.01

Δ表示模型组与正常对照组比较  ΔΔp＜0.01

试验结果

结果显示，天士安神滴丸灌胃给药，在(10-1.25g生药/kg)试验所选用剂量范围内，能 够显著地减少小鼠的自主活动次数、抑制咖啡因引起的兴奋；增加阈下剂量戊巴比妥钠小鼠 睡眠只数、缩短阈剂量戊巴比妥钠小鼠睡眠潜伏期、延长睡眠时间、增加再入睡动物数，同 时能显著地增加失血性血虚小鼠外周血的RBC个数、HGB含量；增加气虚小鼠的T细胞百 分数、胸腺、脾脏系数；降低大鼠全血粘度等。以上试验结果表明，天士安神滴丸确有较好 的镇静、催眠作用，特别是对因虚症或瘀血阻滞引起的失眠有更独特的效果。

                            具体实施方式

实施例1

(a)：取酸枣仁1380g、合欢花828g、三七叶皂甙20.7g、甘草414g备用；

(b)：取酸枣仁粗粉(过20目筛)、合欢花、甘草加10倍生药量水，回流提取2小时，滤过， 滤液备用，药渣加入10倍生药量水，回流提取2小时，滤过，滤液备用，药渣再加入10倍 生药量水，回流提取2小时，滤过，合并3次提取液，70℃以下减压浓缩至1g生药/ml (P60＝1.06～1.09)，加入95％乙醇使含醇量达到60％，静置过夜，滤过，滤液回收乙醇至3g 生药/ml(P60＝1.12～1.14)，加入95％乙醇使含醇量达到80％，静置过夜，滤过，滤液减压浓 缩至稠膏(P60＝1.30～1.35)；

(c)取三七叶皂甙干粉加入酸枣仁、合欢花、甘草提取物中，水浴加热使溶解，混合均匀， 加入为总浸膏的2.5倍的熔融的聚乙二醇6000，化料均匀(80～95℃)，在75～85℃滴入冷却 的液体石蜡中(6～8℃)，取出，制成1000g滴丸，擦净石蜡，即得。

实施例2

(a)：取酸枣仁690g、合欢花500g、三七叶皂甙12.5g、甘草220g备用；

(b)：取酸枣仁粗粉(过20目筛)、合欢花、甘草加12倍生药量水，回流提取3小时，滤过， 滤液备用，药渣加入10倍生药量水，回流提取2小时，滤过，滤液备用，药渣再加入8倍生 药量水，回流提取1小时，滤过，合并3次提取液，70摄氏度以下减压浓缩至1g生药/ml (P60＝1.06～1.09)，加入95％乙醇使含醇量达到60％，静置过夜，滤过，滤液回收乙醇至3g 生药/ml(P60＝1.12～1.14)，加入95％乙醇使含醇量达到80％，静置过夜，滤过，滤液减压浓 缩至稠膏(P60＝1.30～1.35)。取三七叶皂甙干粉加入酸枣仁、合欢花、甘草提取物中，水浴加 热使溶解，混合均匀，加入熔融的聚乙二醇6000与400混合物，滴入甲基硅油中，制成1000g 滴丸，取出，擦净，即得。

实施例3

(a)取酸枣仁2070g、合欢花1200g、三七叶皂甙15g、甘草500g备用；

(b)取酸枣仁粗粉、合欢花、甘草加14倍生药量水，回流提取5小时，滤过，滤液备用， 药渣加入12倍生药量水，回流提取3小时，滤过，滤液备用，药渣再加入10倍生药量水， 回流提取2小时，滤过，合并3次提取液，80℃以下、P60＝1.06～1.09减压浓缩至1g生药/ml， 加入99％乙醇使含醇量达到70％，静置过夜，滤过，滤液回收乙醇、在P60＝1.12～1.14下浓缩 至3g生药/ml，加入90～99％乙醇使含醇量达到75～85％，静置过夜，滤过，滤液减压浓缩至 稠膏；

(c)取三七叶皂甙干粉加入酸枣仁、合欢花、甘草提取物中，水浴加热使溶解，混合均匀， 加入60～110℃熔融的聚乙二醇6000中，80～110℃化料均匀，保温滴入植物油中，制成1000g 滴丸，取出，擦净冷凝剂，即得。

实施例4

(a)取酸枣仁1035g、合欢花621g、三七叶皂甙15.5g、甘草310g备用；

(b)取过30目筛酸枣仁粗粉，合欢花，甘草加12倍生药量水，回流提取3小时，滤过， 滤液备用，药渣加入8倍生药量水，回流提取3小时，滤过，滤液备用，药渣再加入8倍生 药量水，回流提取1小时，滤过，合并3次提取液，80℃以下P60＝1.06～1.09减压浓缩至1g 生药/ml，加入95％乙醇使含醇量达到60％，静置过夜，滤过，滤液回收乙醇在P60＝1.12～1.14 下浓缩至3g生药/ml，加入93～97％乙醇使含醇量达到77～83％，静置过夜，滤过，滤液在 P60＝1.30～1.35减压浓缩至稠膏；

(c)取三七叶皂甙干粉加入酸枣仁、合欢花、甘草提取物中，水浴加热使溶解，混合均匀， 加入70-100℃熔融的、为总浸膏的1-6倍量的聚乙二醇6000与4000混合物中，90～100℃化 料均匀，滴入5～10℃冷却的液体石蜡中，制成1000g滴丸，取出，即得。

实施例5

(a)取酸枣仁1725g、合欢花1035g、三七叶皂甙25.5g、甘草310g备用；

(b))取过10目筛酸枣仁粗粉，合欢花，甘草加11倍生药量水，回流提取2.5小时，滤过， 滤液备用，药渣加入9倍生药量水，回流提取1.5小时，滤过，滤液备用，药渣再加入8倍 生药量水，回流提取1小时，滤过，合并3次提取液，70℃以下P60＝1.06～1.09减压浓缩至1g 生药/ml，加入95％乙醇使含醇量达到60％，静置过夜，滤过，滤液回收乙醇在P60＝1.12～1.14 下浓缩至3g生药/ml，加入93～97％乙醇使含醇量达到77～83％，静置过夜，滤过，滤液在 P60＝1.30～1.35减压浓缩至稠膏；

(c)取三七叶皂甙干粉加入酸枣仁、合欢花、甘草提取物中，水浴加热使溶解，混合均匀， 加入70-100℃熔融的、为总浸膏的3.5倍量的聚乙二醇6000，85～100℃化料均匀，滴入5～10 ℃冷却的甲基硅油中，制成1000g滴丸，取出，即得。

实施例6

(a)取酸枣仁140g、合欢花750g、三七叶皂甙20.7g、甘草300g备用；

(b)取过20目筛的酸枣仁粗粉，合欢花，甘草加10倍生药量水，回流提取2小时，滤过， 滤液备用，药渣加入10倍生药量水，回流提取2小时，滤过，滤液备用，药渣再加入10倍 生药量水，回流提取2小时，滤过，合并3次提取液，70℃以下、P60＝1.06～1.09减压浓缩至 1g生药/ml，加入95％乙醇使含醇量达到60％，静置过夜，滤过，滤液回收乙醇、在P60＝1.12～1.14 下浓缩至3g生药/ml，加入95％乙醇使含醇量达到80％，静置过夜，滤过，滤液减压浓缩至 稠膏P60＝1.30～1.35；

(c)取三七叶皂甙干粉加入酸枣仁、合欢花、甘草提取物中，水浴加热使溶解，混合均匀， 加入80-95℃，为总浸膏的2.5-3倍的熔融的聚乙二醇6000，在80～95℃化料均匀，在75～85 ℃滴入冷却的0～20℃液体石蜡中，制成1000g滴丸，取出，擦净石蜡，即得。