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一种胶原蛋白海绵的制备方法

阅读:340发布:2020-05-11

专利汇可以提供一种胶原蛋白海绵的制备方法专利检索,专利查询,专利分析的服务。并且本 发明 公开了一种 胶原蛋白 海绵 的制备方法,包括以下步骤:S1:鱼皮的前处理,将鱼皮的鱼鳞和鱼肉除净后一次进行 水 淋洗,切成,双蒸水浸泡, 氯化钠 溶液浸泡和双蒸水冲洗;S2:胶原蛋白的提取,将处理好的鱼皮浸泡在胶原蛋白酶溶液中,再经离心,过滤,并合并滤液,即得胶原蛋白溶液;S3:向胶原蛋白溶液中加入饱和的氯化钠溶液进行盐析,并将离心出的沉淀进行 透析 ,即得胶原蛋白凝胶;S4:将胶原蛋白凝胶置于冻干机中,进行预冻,抽 真空 ,解冻,再进行灭菌即得胶原蛋白海绵。本发明提出的制备方法,过程简单,材料易得,设备要求低,胶原蛋白的提取效率高,有效资源浪费少,生产成本低,且冻干操作的 温度 易达到,冻干效果好。,下面是一种胶原蛋白海绵的制备方法专利的具体信息内容。

1.一种胶原蛋白海绵的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:
S1:鱼皮的前处理,将鱼皮的鱼鳞和鱼肉除净,并用淋洗3~5min,再将鱼皮切成,浸泡在双蒸水中2min,重复浸泡操作3次,最后使用氯化钠溶液浸泡10~15min后用双蒸水冲洗干净,备用;
S2:胶原蛋白的提取,将胶原蛋白酶溶液的pH值调节为6~7,并将上述处理好的鱼皮浸泡在胶原蛋白酶溶液中8~10小时,将浸泡液进行离心,离心后上清液置于反应器中,下部沉淀进行过滤,并将续滤液与上清液合并,即得胶原蛋白溶液;
S3:向胶原蛋白溶液中加入饱和的氯化钠溶液进行盐析,并将沉淀在高速离心机中进行离心,并将沉淀置于透析袋中进行透析,即得胶原蛋白凝胶;
S4:将胶原蛋白凝胶置于冻干机中,并将温度降低至-30~-40℃,进行预冻,然后开始抽真空,抽真空后迅速将温度升至5~15℃进行解冻2~3小时,将剩余的水分除去,再进行灭菌即得胶原蛋白海绵。
2.根据权利要求1所述的一种胶原蛋白海绵的制备方法,其特征在于,所述鱼皮为罗非鱼鱼皮、鳕鱼鱼皮和黄花鱼鱼皮中的一种。
3.根据权利要求1所述的一种胶原蛋白海绵的制备方法,其特征在于,所述双蒸水在使用前进行高温蒸汽灭菌处理,并放冷至室温。
4.根据权利要求1所述的一种胶原蛋白海绵的制备方法,其特征在于,所述S1步骤中的氯化钠溶液中氯化钠的浓度为0.8%~1.0%。
5.根据权利要求1所述的一种胶原蛋白海绵的制备方法,其特征在于,所述胶原蛋白酶溶液的浓度为0.1~0.4mg/ml。
6.根据权利要求1所述的一种胶原蛋白海绵的制备方法,其特征在于,所述S3步骤中的离心速度为10000~14000r/min,离心时间为25~35min。

说明书全文

一种胶原蛋白海绵的制备方法

技术领域

[0001] 本发明涉及生物医学材料技术领域,尤其涉及一种胶原蛋白海绵的制备方法。

背景技术

[0002] 胶原蛋白是人体的一种非常重要的蛋白质,主要存在于结缔组织中。它有很强的伸张能,是韧带和肌的主要成份,胶原蛋白也是细胞外基质的主要组成成分。胶原蛋白海绵是主要以胶原蛋白为主的一类生物医用材料,具有止血、修复和填充的作用,如今被广泛应用于手术中。由于胶原蛋白的提取过程较复杂,故胶原蛋白海绵的成本较高,而且胶原蛋白在提取过程中的提取利用率普遍较低,使得许多胶原蛋白损失,造成浪费。

发明内容

[0003] 本发明的目的是为了解决现有技术中存在的缺点,而提出的一种胶原蛋白海绵的制备方法。
[0004] 一种胶原蛋白海绵的制备方法,包括以下步骤:S1:鱼皮的前处理,将鱼皮的鱼鳞和鱼肉除净,并用淋洗3~5min,再将鱼皮切成,浸泡在双蒸水中2min,重复浸泡操作3次,最后使用氯化钠溶液浸泡10~15min后用双蒸水冲洗干净,备用;
S2:胶原蛋白的提取,将胶原蛋白酶溶液的pH值调节为6~7,并将上述处理好的鱼皮浸泡在胶原蛋白酶溶液中8~10小时,将浸泡液进行离心,离心后上清液置于反应器中,下部沉淀进行过滤,并将续滤液与上清液合并,即得胶原蛋白溶液;
S3:向胶原蛋白溶液中加入饱和的氯化钠溶液进行盐析,并将沉淀在高速离心机中进行离心,并将沉淀置于透析袋中进行透析,即得胶原蛋白凝胶;
S4:将胶原蛋白凝胶置于冻干机中,并将温度降低至-30~-40℃,进行预冻,然后开始抽真空,抽真空后迅速将温度升至5~15℃进行解冻2~3小时,将剩余的水分除去,再进行灭菌即得胶原蛋白海绵。
[0005] 优选的,所述鱼皮为罗非鱼鱼皮、鳕鱼鱼皮和黄花鱼鱼皮中的一种。
[0006] 优选的,所述双蒸水在使用前进行高温蒸汽灭菌处理,并放冷至室温。
[0007] 优选的,所述S1步骤中的氯化钠溶液中氯化钠的浓度为0.8%~1.0%。
[0008] 优选的,所述胶原蛋白酶溶液的浓度为0.1~0.4mg/ml。
[0009] 优选的,所述S3步骤中的离心速度为10000~14000r/min,离心时间为25~35min。
[0010] 本发明提出的一种胶原蛋白海绵的制备方法,制备过程简单,使用材料简单易得,设备要求低,且在胶原蛋白提取过程中采用离心、过滤双重处理,提高胶原蛋白溶液的提取率高,有效资源浪费少,降低生产成本,而且冻干操作所需的温度易达到,冻干效果好。

具体实施方式

[0011] 下面结合具体实施例对本发明作进一步解说。
[0012] 实施例一本发明提出的一种胶原蛋白海绵的制备方法,包括以下步骤:
S1:鱼皮的前处理,将罗非鱼鱼皮的鱼鳞和鱼肉除净,并用水淋洗4min,再将鱼皮切成块,浸泡在高温蒸汽灭菌后的双蒸水中2min,重复浸泡操作3次,最后使用0.9%氯化钠溶液浸泡15min后用高温蒸汽灭菌后的双蒸水冲洗干净,备用;
S2:胶原蛋白的提取,将浓度为0.3mg/ml的胶原蛋白酶溶液的pH值调节为6,并将上述处理好的鱼皮浸泡在胶原蛋白酶溶液中10小时,将浸泡液进行离心,离心后上清液置于反应器中,下部沉淀进行过滤,并将续滤液与上清液合并,即得胶原蛋白溶液;
S3:向胶原蛋白溶液中加入饱和的氯化钠溶液进行盐析,并将沉淀在高速离心机中进行离心,离心速度为12000r/min,离心时间为25min,并将沉淀置于透析袋中进行透析,即得胶原蛋白凝胶;
S4:将胶原蛋白凝胶置于冻干机中,并将温度降低至-35℃,进行预冻,然后开始抽真空,抽真空后迅速将温度升至10℃进行解冻2小时,将剩余的水分除去,再进行灭菌即得胶原蛋白海绵。
[0013] 实施例二本发明提出的一种胶原蛋白海绵的制备方法,包括以下步骤:
S1:鱼皮的前处理,将鳕鱼鱼皮的鱼鳞和鱼肉除净,并用水淋洗5min,再将鱼皮切成块,浸泡在高温蒸汽灭菌后的双蒸水中2min,重复浸泡操作3次,最后使用0.8%氯化钠溶液浸泡
15min后用高温蒸汽灭菌后的双蒸水冲洗干净,备用;
S2:胶原蛋白的提取,将浓度为0.1mg/ml的胶原蛋白酶溶液的pH值调节为7,并将上述处理好的鱼皮浸泡在胶原蛋白酶溶液中10小时,将浸泡液进行离心,离心后上清液置于反应器中,下部沉淀进行过滤,并将续滤液与上清液合并,即得胶原蛋白溶液;
S3:向胶原蛋白溶液中加入饱和的氯化钠溶液进行盐析,并将沉淀在高速离心机中进行离心,离心速度为14000r/min,离心时间为30min,并将沉淀置于透析袋中进行透析,即得胶原蛋白凝胶;
S4:将胶原蛋白凝胶置于冻干机中,并将温度降低至-40℃,进行预冻,然后开始抽真空,抽真空后迅速将温度升至15℃进行解冻3小时,将剩余的水分除去,再进行灭菌即得胶原蛋白海绵。
[0014] 实施例三本发明提出的一种胶原蛋白海绵的制备方法,包括以下步骤:
S1:鱼皮的前处理,将黄花鱼鱼皮的鱼鳞和鱼肉除净,并用水淋洗3min,再将鱼皮切成块,浸泡在高温蒸汽灭菌后的双蒸水中2min,重复浸泡操作3次,最后使用1.0%氯化钠溶液浸泡10min后用高温蒸汽灭菌后的双蒸水冲洗干净,备用;
S2:胶原蛋白的提取,将浓度为0.4mg/ml的胶原蛋白酶溶液的pH值调节为7,并将上述处理好的鱼皮浸泡在胶原蛋白酶溶液中8小时,将浸泡液进行离心,离心后上清液置于反应器中,下部沉淀进行过滤,并将续滤液与上清液合并,即得胶原蛋白溶液;
S3:向胶原蛋白溶液中加入饱和的氯化钠溶液进行盐析,并将沉淀在高速离心机中进行离心,离心速度为10000r/min,离心时间为35min,并将沉淀置于透析袋中进行透析,即得胶原蛋白凝胶;
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