黑色素浓集激素，或MCH，是一种由19个氨基酸组成的环状神经肽， 其功能是作为食物摄取和能量平衡的调控因子(modulator)。MCH产生于许多 脊椎动物，包括人类的下丘脑，并作为下丘脑侧面和后面的神经传递素。这 两个区域与某些行为有关，例如进食、饮水、进攻(aggression)和性行为。 MCH也产生于多种周边位置，包括胃肠道和睾丸。
与进行相同处理的对照动物相比，人们发现将MCH通过I.C.V注射进 入下丘脑的侧室，提高了大鼠体内的热量消耗，从而确立了MCH在进食行 为和体重中的预先推定作用。进一步地，具有ob/ob基因型的大鼠与瘦的ob/ +基因型的大鼠相比，在MCHmRNA表达方面增长了50-80％。由于缺乏 食欲(hypophagia)和代谢速度增长，MCH基因敲除(knockout)的小鼠比其生产 MCH的同胞更为瘦弱。
通过结合到特定的受体，可调节MCH的活性。Lakaye，等人.(BBA(1998) 1401：216-220)首先报道了MCH1型的受体(MCHR1)为具有353个氨基酸的， 7-横跨膜的，α螺旋的，G-偶联的蛋白质受体。MCHR1也被称为SLC-1。 对大鼠脑部的免疫组织化学研究表明MCHR1受体在大脑内被广泛表达。人 们在嗅结节、大脑皮层、黑质(substantia nigra)、海马的基底前脑CA1、CA2、 和CA3域、扁桃体以及在下丘脑、丘脑、中脑和后脑的核心处发现了MCHR1 受体表达。在下丘脑的腹正中和背正中中心处，即在脑部已知与进食行为相 关的两个部分检测到了强信号。通过结合MCH，在HEK293细胞内进行表 达的MCHR1受体对细胞内钙的剂量依赖性释放进行调节。已证实表达MCH 受体的细胞显示出对毛喉素-提高型环状AMP具有百日咳毒素敏感性剂量- 依赖型的抑制作用，这表明了受体与Gi/OG-蛋白质α亚单元相偶联。
近来，已经鉴定出第二种MCH受体(MCHR2)(An等人.，Proc.Natl.Acad. Sci.USA(2001)98：7576-7581；Sailer等人.，Proc.Natl.Acad.Sci.USA(2001) 98：7564-7569；Hill等人.，J.Biol.Chem.(2001)276：20125-20129；Mori等人.， Biochem.Biophys.Res.Commun.(2001)283：1013-1018).MCHR2的全部氨基 酸中有超过30％的部分与RCHR1中完全相同，且已经检测到MCHR2在脑 部的大部分区域内与MCHR1具有相似的表达方式。
由于MCH是一种食物摄取和能量平衡的重要调控因子，因此能够调节 MCH受体活性的调控因子特别是MCHR1是特别需要的，其适用于治疗肥 胖症、进食失调(如易饿病和厌食症)、性疾病(如性快感缺失或心理性阳痿) 以及代谢疾病如糖尿病。小分子，MCH受体的非肽拮抗剂对于此类治疗特 别有价值。本发明实现了这种需要，并提供了进一步相关的优点。
发明概述
本发明提供了MCH与MCH受体相结合和/或MCH受体活性起抑制或 提高作用的MCH受体调控因子。此类调控因子包括取代的1-苄基-4-芳基哌 嗪或哌啶类似物，其在MCH受体结合试验和/或MCH受体-调节信号转换试 验(钙移动试验)中显示出1微摩尔或更小的Ki值，且其特征在于下列通式：

通式I
或其药学上可接受的盐，其中：
V为单键或-(C＝O)-；
W为N，CH，COH或CCN；
X为卤素，羟基，硝基，氰基，-COOH，氧基或式L-M的基团；
Y和Z分别独立地为：(i)CH，(ii)N，或(iii)与R5相连接成为包括W和 V，且具有5到8个环原子地碳环或杂环，条件是Y和Z不都是N；
n为1或2；
R1和R2分别独立地选自：氢，卤素，羟基，硝基，氰基，-COOH，氧 基或式L-M的基团，条件是当R1和R2为氢时，V为-(C＝O)-；
R3为：(i)选自氢，(C1-C6)烷基，(C2-C6)烯基和卤代(C1-C6)烷基；或
(ii)与R6和R10之一或两者相连接形成具有一个环或两个稠合环的碳环 或杂环基团，其中的每个环包括5到8个环原子和0，1或2个独立选自氧、 氮或硫的杂原子。
R4为氢，(C1-C6)烷基或卤代(C1-C6)烷基；
R5为：(i)每次出现时都独立地选自氢，卤素，羟基，硝基，氰基，氨 基，氧基，(C1-C6)烷基，(C2-C6)烯基，(C2-C6)炔基，(C1-C6)烷氧基，卤代(C1-C6) 烷基，卤代(C1-C6)烷氧基，单-或二-(C1-C6)烷基氨基，以及氨基(C1-C6)烷基； 或
(ii)与R6，Y或Z相连接形成具有5到8个环原子的碳环或杂环；
R6为：(i)选自氢，卤素，羟基，硝基，氰基，氨基，氧基，(C1-C6)烷 基，(C2-C6)烯基，(C2-C6)炔基，(C1-C6)烷氧基，卤代(C1-C6)烷基，卤代(C1-C6) 烷氧基，单-或二-(C1-C6)烷基氨基，以及氨基(C1-C6)烷基；或
(ii)与R3或R5相连接形成前述的碳环或杂环；
R7为：(i)选自氢，卤素，羟基，硝基，氰基，-COOH，氧基；以及式 L-M基团；或
(ii)与R8或R12相连接形成稠合的5-或6-员碳环或杂环基团；
R8为：(i)选自氢，卤素，羟基，硝基，氰基，-COOH，氧基；以及式 L-M的基团；或
(ii)与R7或R11相连接形成稠合的5-到10-员碳环或杂环基团；
U为N，O或CR9；
T为N，O或CR10；
R9为：(i)选自氢，卤素，羟基，硝基，氰基，-COOH，氧基；以及式 L-M的基团；或
(ii)与R10或R11相连接形成稠合的5-到10-员碳环或杂环基团；
Ri0为：(i)选自氢，卤素，羟基，硝基，氰基，-COOH，氧基；以及式 L-M的基团；或
(ii)与R3，R8或R9相连接形成碳环或杂环基团；
R11为：(i)选自氢，卤素，羟基，硝基，氰基，-COOH，氧基；以及式 L-M的基团；或
(ii)与R8和R9中之一或全部相连接形成稠合的5-到10-员碳环或杂环基 团；
R12为：(i)每次出现时都独立选自氢，卤素，羟基，硝基，氰基，氨基， 氧基，(C1-C6)烷基，(C2-C6)烯基，(C2-C6)炔基，(C1-C6)烷氧基，卤代(C1-C6) 烷基，卤代(C1-C6)烷氧基，单-或二-(C1-C6)烷基氨基，以及氨基(C1-C6)烷基； 或
(ii)与R7相连接形成稠合的碳环或杂环基团；
每次出现的L独立地选自单键，-NR11-，-O-，-SO2-，-SO2NH-，C(＝O)NR11-和NR11C(＝O)-，其中每次出现的R11独立地选自氢，(C1-C6)烷基，(C2-C6)烯 基，(C2-C6)炔基和卤代(C1-C6)烷基；以及
每次出现的M独立地选自氢，(C1-C6)烷基，(C2-C6)烯基，(C2-C6)炔基和 卤代(C1-C6)烷基，氨基(C1-C6)烷基和5到10员碳环；
条件是当R11为卤素且V为单键时，至少R10，R3和R4的其中之一不为 氢。
本发明进一步提供了MCH受体调控因子，包括一个或多个上述的化合 物，其与至少一个其它的成分，如药物、目标组分或载体相联合(即相结合)。
另一方面，本发明提供了药物组合物，包括上述的一种化合物或调控因 子，其与一种生理学上可接受的载体或赋形剂相结合。在某些实施方式中， 本发明提供的药物组合物可进一步地包括一种或多种其它的活性剂(即，药 物)。本发明提供的药物组合物可被制剂成例如注射性流体，气雾剂，乳膏， 凝胶，丸剂，胶囊，糖浆或经皮肤的贴片。
另一方面，本发明进一步提供了治疗与MCH受体活化相关的疾病和失 调的方法，包括对需要此类治疗的患者给予有效量的上述的化合物或调控因 子。此类疾病和失调包括：例如进食失调(如肥胖症和易饿病)，性失调，糖 尿病，心脏疾病和中风。化合物或调控因子可通过口服给药，或通过其它方 式例如鼻内，静脉内或局部方式进行给药。在某些实施方式中，患者为人类， 陪伴型动物或牲畜。
更进一步，本发明提供了上述化合物，其中上述化合物是被放射性 同位素标记的。
在另一方面，本发明提供了在样品中测定MCH受体是否存在的方法， 包括以下步骤：(a)使样品和含有上述化合物的试剂在允许该试剂和MCH受 体相结合的条件下接触；以及(b)检测与MCH受体相结合的试剂的量。在 某些实施方式中，该试剂为放射性同位素标记的化合物，且检测步骤包括： (i)将结合的试剂与未结合的试剂分离；并(ii)确定样品中已结合的试剂的 量。检测可采用例如放射自显影术实现。
另一方面，本发明进一步提供了对将配体结合到MCH受体进行调节的 方法。某些此类方法在体外进行，包括使MCH受体和上述的化合物或调控 因子在一定条件下相接触，其量足以对MCH与MCH受体的结合进行可检 测性地调节。另一些此类方法可在体内进行，包括使表达MCH受体的细胞 与上述的化合物或调控因子在其量足以对MCH与在体外表达克隆MCH受 体的细胞的结合进行可检测性调节的条件下相接触。可采用例如本发明所提 供的配体结合试验检测到对MCH结合的调节。
本发明进一步提供了在病人中对MCH结合到MCH受体进行调节的方 法，包括对患者(即人类或非人类动物)给予上述的化合物或调控因子。例如， 患者可包括陪伴型动物如狗。
在上述方法的某些实施方式中，调节是抑制和/或MCH受体是人类的 MCH受体。
另一方面，本申请提供了调节MCH受体的信号-转换活性的方法，包括 使MCH受体，在适合于MCH结合到MCH受体的条件下，在体内或是体外 与足量的MCH受体调控因子相接触。优选地，MCH受体为存在于下丘脑中 的MCH1受体。
本发明还提供了包装的药物制剂，包括：(a)包装内的上述药物组合物； 以及(b)对使用组合物对遭受与MCH受体活性相关的疾病或病症的患者进 行治疗的说明。此类失调包括如进食失调(如肥胖症和易饿病)，性失调， 糖尿病，心脏性疾病和中风。
通过以下的详述，可使本发明的各方面变得明显。
发明详述
如上所述，本发明提供了MCH受体调控因子，其含有取代的1-苄基-4- 芳基哌嗪和哌啶类似物的小分子MCH受体配体。如下文的进一步详细讨论， 此类调控因子可在体外或体内应用，以抑制或提高在多种环境中MCH与 MCH受体的结合。
在详细描述本发明之前，先提供本发明中所采用的定义和某些术语是有 帮助的。对本发明的化合物一般采用标准命名法。对于具有不对称中心的化 合物，应该理解为涵盖了所有的光学异构体及其混合物(除非特别指出)。此 外，具有碳-碳双键的化合物可能以Z-或E-形式出现，其所有异构体形式都 包含于本发明中。当化合物以多种互变异构体形式存在时，本发明并不限于 任何一种特定的互变异构体，而是包括了所有的互变异构体形式。本发明采 用包括多个变量的通式对某些化合物进行描述。除非特别指出，此类通式中 的任何变量相对于其它变量是独立定义的，且通式I中任何一个多次出现的 变量在每次出现时也是独立定义的。此外很明显的是，允许对取代基和/或变 量进行结合，但条件是结合生成了稳定的化合物。
本发明中，“(C1-C6)烷基”是指任选取代的、具有1-6个碳原子的直链 或支链烷基基团或环烷基基团，例如甲基、乙基、丙基、异丙基、正丁基、 仲-丁基、叔-丁基、戊基、2-戊基、异戊基、新戊基、己基、2-己基、3-己基、 3-甲基戊基、环丙基、环丙基甲基和环己基。(C1-C6)烷基基团可通过(C1-C6) 烷基中的任何化学合适部分与利害相关的分子内的某个原子相结合。优选的 烷基基团包括甲基、乙基、丙基、丁基、环丙基、环丙基甲基、环戊基和环 己基。特别优选的烷基基团为(C1-C4)烷基，特别是甲基和乙基。
相似地，“(C2-C6)烯基”是指任选取代的，具有2-6个碳原子的直链或 支链烯基基团或环烯基基团，优选(C2-C4)烯基。在烯基基团中存在一个或多 个不饱和碳-碳双键，且碳-碳双键可能存在于沿着链长的任何一个稳定点(如 乙烯基，烯丙基和异丙基)。“(C2-C6)炔基”是指具有2-6个碳原子的直链 或支链炔基基团或环炔基基团，优选(C2-C4)炔基。在炔基基团中存在一个或 多个不饱和碳-碳叁键，且碳-碳叁键可能存在于沿着链长的任何一个稳定点 (如乙炔基和炔丙基)。“稳定点”是一种键，当其为不饱和键时，得到化学 稳定的化合物(即，能被分离，表征和测试生物活性的化合物)。
本发明中“(C1-C6)烷氧基”是指任选取代的，通过氧桥连接的具有1-6 个碳原子的线性、支链烷基基团或环烷基。(C1-C6)烷氧基包括如甲氧基、乙 氧基、丙氧基、异丙氧基、正丁氧基、仲-丁氧基、叔-丁氧基、正戊氧基、 2-戊氧基、3-戊氧基、异戊氧基、新戊氧基、己氧基、2-己氧基、3-己氧基、 3-甲基戊氧基。一般优选(C1-C4)烷氧基，特别是甲氧基和乙氧基。同样地， “(C1-C6)烷硫基”是指通过一个硫桥连接的具有1-6个碳原子的烷基基团。
“(C2-C6)烷酰基”是指在线性、支链或环烷基排列中具有2-6个碳原子 的酰基基团。一般优选(C2-C4)烷酰基。
“(C2-C6)烷酮基”是指在线性、支链或环状排列中具有2-6个碳原子的 酮取代基。一般优选(C2-C4)烷酮基。
“(C1-C6)烷氧基羰基”是指通过羰基连接的烷氧基取代基。换句话说， 烷氧基羰基取代基具有的通式结构为-C(＝O)-O-烷基。
“(C2-C6)烷基酰胺基”是指通过酰胺基连接的烷基取代基。换句话说， 烷基酰胺基取代基具有的通式结构为-C(＝O)-NH-烷基。
“(C2-C6)烷基亚磺酰胺基”是指通过氨磺酰基连接的烷基取代基。换句 话说，烷基亚磺酰胺基取代基具有的通式结构为-SO2-NH-烷基。
“(C1-C6)烷酰基氧基”是指通过氧桥连接的烷酰基基团。换句话说，烷 酰基氧基具有的通式结构为-O-C(＝O)-烷基。一般优选(C1-C4)烷酰基氧基。
术语“(C1-C6)碳酸酯”是指通过氧桥连接的烷氧基羰基基团。换句后说， 碳酸酯基团具有的一般结构为-O-C(＝O)-O-烷基。一般优选(C1-C4)碳酸酯基 团。
同样地，“(C2-C6)烷基醚”是指通过碳-碳键连接的具有2到6个碳原子 所取代的醚取代基。优选(C2-C6)烷基醚基团。
本发明中所采用的术语“(C1-C6)氨基甲酸酯基”是指通式结构为 -N-C(＝O)-O-烷基。通常优选(C1-C4)氨基甲酸酯。
本发明中所采用的术语“氧基”是指酮基(C＝O)基团。作为非芳香环取 代基的氧基基团导致了-CH2-转化为-C(＝O)-。很明显的是，在芳香环上引入 氧基取代基破坏了芳香性。
术语“肟”是指下列结构的基团：

如果指定肟为取代基，则只有加入了＝NOH，碳原子一般为基本结构 的一部分。当然，肟的碳原子可能为碳环或杂环上的一员。在环为芳香 环的情况下，很明显的是，引入肟取代基就会破坏芳香性。
术语“卤素”包括氟、氯、溴和碘。“卤代烷基”可以是任选被一 个或多个卤素取代的枝化或直链的饱和脂肪烃基团。“卤代(C1-C6)烷基” 具有1到6个碳原子；“卤代(C1-C4)烷基”具有1到4个碳原子。卤代 烷基的例子包括但不限于单-，二-或三-氟甲基；单-，二-或三-氯甲基； 单-，二-，三-，四-或五-氟乙基；以及单-，二-，三-，四-或五-氯乙基。 典型的卤代烷基基团为三氟甲基和二氟甲基。本发明的化合物中存在的 卤代烷基优选不超过5个，更优选不超过3个。术语“卤代烷氧基”是 指通过氧桥连接的上述卤代烷基。“卤代(C1-C6)烷氧基”具有1到6个 碳原子。
本发明中所采用的“取代基”，是指以共价键接到相关分子(a molecular ofinterest)内的某个原子上的分子的某一部分。例如，“环取 代基”可为通过共价键接到环的一个原子上(优选碳或氮)的卤素、烷基、 烷氧基、卤代烷基或其它本发明中所讨论的基团等部分。术语“取代” 是指以上述的一个取代基代替分子结构中的氢，结果不超过指定原子的 化合价，并由于该取代而获得了化学稳定的化合物(即，能被分离，表 征并对其生物活性进行测试的化合物)。
“任选取代”的基团是未取代或是在一个或多个可能的位置上，通常为 1，2，3或4位上被独立选自以下的非氢的一个或多个其它取代基所取代： 卤素，氰基，硝基，氧基，肟，(C1-C6)烷基，(C2-C6)烯基，(C2-C6)炔基，(C1-C6) 烷氧基，(C1-C6)烷硫基，羟基，氨基，单-或二-(C1-C6)烷基氨基，卤代(C1-C6) 烷基，卤代(C1-C6)烷氧基，(C1-C6)烷酰基，(C1-C6)烷酮基，(C1-C6)烷氧基羰 基，(C1-C6)烷酰基氧基，(C1-C6)碳酸酯基，(C1-C6)烷基醚，(C1-C6)氨基甲酸 酯基，-COOH，-CONH2，单-或二-(C1-C8)烷基酰胺基，-SO2NH2，单-和二-(C1-C8) 烷基亚磺酰胺基，以及下述的碳环或杂环基团。优选地，任选取代的基团被 0到5个独立挑选的取代基所取代，更优选被0到3个独立挑选的取代基所 取代。取代基可位于任何得到稳定化合物的点上。
不位于两个字母或符号之间的短线(“-”)用于表明取代基的连接点。例 如-CONH2通过碳原子进行连接。
本发明中所采用的“杂原子”是指氧，硫或氮。
“碳环(carbocycle)”或“碳环基团”包括至少一个完全由碳-碳键形成的 环(即碳环(carbocyclic ring))。除非特别指明，此类环可为芳香性或非芳香性 的(不饱和，部分饱和或饱和)，并任选被取代。本发明中所采用的术语“碳 环(carbocyclic ring)”包括环碳原子未被取代或发生下述取代。碳环基团一般 具有1到3个稠合碳环或悬垂的(pendant)碳环，优选为一个环或两个稠合的 环。通常，每个环包括3到8个(优选为5到7个)环原子；包括稠合或悬垂 的环系统的碳环基团典型具有9到14个环原子。“环原子”是构成环一部 分并直接键接到两个其它的此类原子上的碳原子或杂原子。例如，无论环取 代基内存在多少个原子，苯基或吡啶基基团始终具有6个环原子。碳环基团 的代表性例子是任选取代的环烷基基团(如环戊烷和环己烷)，以及芳香基 团如任选取代的苯基，苄基，萘基，苯氧基，苄氧基和苯基乙酮基 (phenylethanonyl)。优选的取代包括上述所列的取代。如果环包括一种或多种 取代，每一种取代独立于任何其它取代。含有1个碳环或2个稠合碳环(共有 5到10个环原子)的(C5-C10)碳环基团优选发生上述的任选取代。
“杂环”或“杂环基团”包括至少一个环，其中至少一个环原子为杂原 子(即，N，O或S)，且其余的环原子为碳原子(此类环指杂环)。优选地，杂 环基团包括1-4个杂原子；在某些实施方式中，优选含有1或2个杂原子的 基团。杂环基团一般具有1到3个稠合或悬垂的环，优选一个环或两个稠合 环，其中的每一个被任选取代。本发明中所采用的术语“杂环”包括其中碳 环原子发生下述取代的环。杂环基团中的每一个环独立地为芳香性或非芳香 性的(不饱和，部分饱和或饱和)。通常，每个环包括3到8个(优选为5到7 个)环原子；包括稠合或悬垂的环系统的杂环基团典型具有9到14个环原子。 杂环基团可任选被1到5个取代基所取代，每一个取代基独立地选自上述的 任意一个取代基。除非特别指明，杂环基团可为芳香性或非芳香性的(例如， 杂环烷基如哌嗪或地西泮(diazepan))。优选包括1个杂环或2个稠合环(其中 至少一个为杂环，共有3到10个环原子)的3-到10-员杂环基团，其任选发 生上述的取代；特别优选5-到10-员的杂环基团(即具有5到10个环原子和 任意取代基)。
杂环基团的例子包括但不限于吖啶基，吖辛因基，苯并咪唑基，苯并呋 喃基，苯并硫代(benzothio)-呋喃基，苯并苯硫基(benzothiophenyl)，苯并噁唑 基，苯并噻唑基，苯并三唑基，苯并四唑基，苯并异噁唑基，苯并异噻唑基， 苯并咪唑啉基，咔唑基，NH-咔唑基，咔啉基，苯并二氢吡喃基，苯并吡喃 基，肉啉基，十氢喹啉基，地西泮基(diazepanyl)，二氧戊环基，二噻嗪基， 二氢氟四氢呋喃基(dihydrofurotrtrahydrofuran)，呋喃基，呋咱基，咪唑烷基， 咪唑啉基，咪唑基，吲唑基，假吲唑基(indolenyl)，二氢吲哚基，中氮茚基， 吲哚基，异苯并呋喃基，异苯并二氢吡喃基，异吲唑基，异二氢氮茚基，异 氮茚基，异喹啉基，异噻唑基，异噁唑基，吗啉基，萘啶基，八氢异喹啉基， 噁二唑基，噁唑烷基，噁唑基，噁唑烷基，嘧啶基，菲啶基，菲咯啉基 (phenanthralinyl)，吩嗪基，吩噻嗪基，氧硫杂蒽基(phenoxathiinyl)，吩噁嗪 基，酞嗪基，哌嗪基，哌啶基，碟啶基，嘌呤基，吡喃基，吡嗪基，吡唑烷 基，吡唑啉基，吡唑基，哒嗪基，吡啶并噁唑基，吡啶并咪唑基，吡啶并噻 唑基，吡啶基(pyridinyl)，吡啶基，嘧啶基，吡咯烷基，吡咯啉基，吡咯基， 喹唑啉基，喹啉基，喹喔啉基，喹宁环基，四氢呋喃基，四氢异喹啉基，四 氢喹啉基，噻二嗪基，噻二唑基，噻蒽基，噻唑基，噻吩基，噻吩并噻唑基， 噻吩并噁唑基，噻吩并咪唑基，苯硫基，三嗪基和呫吨基。在某些实施方式 中，优选吡啶环。明显的是，任何此类的杂环基团都可被一个或多个上述的 取代基所取代。
术语“MCH受体”是指包括任何MCH受体序列的蛋白质(即一类细胞 蛋白质，其能可检测性地结合MCH，并对细胞内钙的剂量依赖型释放进行 调节)。一般优选天然存在的哺乳动物(特别是人类和猴子)的MCH1型和 MCH2型受体序列。MCH受体可包括整个内源序列，或可包括其它的成分 (如N-端前导序列)，其基本不会抑制受体结合MCH的能力(即，保留了至 少50％的受体对MCH的结合亲和力)。可以使用被删节的MCH受体序列或 含有氨基酸缺失、取代基、添加或变体的序列(例如嵌合受体)，条件是MCH 受体的结合特性没有大量消失(即保留了至少50％的内源MCH-结合亲和力)。 候选MCH受体对MCH的结合亲和力可用本文提供的标准配体结合试验评 估。
“MCH受体调控因子”，本发明中也称为“调控因子”，是一种对MCH 结合到一个或多个MCH受体，以及对MCH受体-调节的信号转换进行调节 (即增加或降低)的化合物。换句话说，调控因子可为MCH受体激动剂或拮 抗剂。本发明提供的调控因子包括取代的1-苄基-4-芳基哌嗪或哌啶类似物的 化合物，其具有MCH受体调节活性。调控因子可基本上由这样的化合物组 成，或可进一步包括一个或多个附加的部分，条件是活性化合物的调节活性 基本上没有减少(即采用本发明提供的结合试验测定而得的增长或降低MCH 结合到MCH受体上的能力的下降幅度不超过50％)。此类其它的部分包括如 目标部分、其它的活性剂和载体，其中的任何一种可通过多种标准技术如直 接缩合，或通过双-或多-官能连接物连接到活性化合物上。或者，在无共价 连接的情况下，此类附加的部分可与活性化合物结合。如果调控因子以10 倍，优选100倍，更优选为1000倍的Ki值结合到MCH受体(总结合减去非 特定结合)，该Ki值小于调控因子结合到其它G蛋白质-偶联受体时所测得的 Ki值，则调控因子“特定地”结合到MCH受体上。如果在MCH受体上的 Ki值小于1微摩尔，优选小于500毫微摩尔，100毫微摩尔或10毫微摩尔 时，调控因子以“高亲和力”结合。分别采用本发明实施例2和3中所提供 的结合以及钙移动试验，可对MCH结合到MCH受体，以及MCH受体-调 节的信号转换的效果进行评估试验。
本发明中所采用的“取代的1-苄基-4-芳基哌嗪或哌啶类似物”是任何符 合通式I结构的化合物。
“目标部分”是增加调控因子在患者的目标位置附近的局部浓度的物质 (如一种化合物或一个细胞)。本领域有大量公知的目标部分，包括其抗体 和片断，受体，配体和其它结合到目标组织，或与目标组织邻近的细胞的分 子。
“载体”、“载体基团”或“载体分子”是在对患者进行给药前可与活 性化合物相联合的物质，其目的一般是控制化合物的稳定性或生物利用度。 用在此类制剂中的载体一般是生物相容的，并且可能是可生物降解的。载体 包括有单价或多价分子，如血清白蛋白(如人的或牛的)，卵白蛋白，蛋白 质，聚赖氨酸和聚糖如氨基葡聚糖和聚酰胺型胺类。载体也包括固体支持材 料如微珠或微粒，包括如聚乙酸酯(polyactate)聚甘醇酸酯，聚(丙交酯-共- 乙交酯)，聚丙烯酸酯，乳胶，淀粉，纤维素或葡聚糖。载体可以多种形式支 撑化合物，包括共价结合(直接或通过连接物基团)，非共价相互作用或混合。
本发明中“连接物”是不包括有可检测性调节MCH结合到MCH受体 上的化合物的任何分子，以及能共价连接到至少两个化学部分的分子。连接 物可用来将另一部分连接到调节MCH结合到MCH受体上的化合物。一般 来说，连接物为双官能或多官能的(如枝化结构)。本领域中有多种公知的 连接物，可采用任何合适的本领域公知的方法结合到MCH受体调控因子中。
如果某部分被连接(共价或非共价)到活性化合物或与活性化合物相结合 时，则该部分与活性化合物“缔合”。
“前药”是一种并不完全满足本发明提供的化合物结构要求的化合物， 但在对患者给药之后，其能在体内变性产生本发明所述的化合物。例如，前 药可为本发明提供化合物的酰化衍生物。前药包括其中羟基，氨基或巯基被 结合到任何基团的化合物，当对哺乳动物主体给药时，这些基团分别断裂开 来形成游离的羟基，氨基或巯基基团。前药的例子包括但不限于本发明提供 的化合物中醇或胺官能团的乙酸酯、甲酸酯和苯甲酸酯衍生物。
“患者”是指任何用本发明提供的MCH受体调控因子治疗的个体。患 者包括人，以及其它动物例如陪伴型动物和牲畜。患者可能遭受与不希望的 MCH受体活性相关的病症的折磨，或并未遭受此类病症(即该治疗可能是 预防性的)。
黑色素浓集激素受体调控因子
如上所述，本发明提供了一种通式I的化合物，优选此类化合物为黑色 素浓集的激素(MCH)受体调控因子(即对MCH结合到MCH受体上以及 MCH-调节的信号转换进行可检测性调节的试剂)。此类调控因子对特定的 MCH受体(如1型或2型)可为特定性的，或可抑制或提高配体结合到多个 MCH受体。MCH受体调控因子可用于在体内调节MCH与MCH受体的结 合，特别是在人类、驯养的陪伴型动物和牲畜动物的代谢，进食和性疾病治 疗中。调控因子也可用于多种体外试验中，例如受体活性试验，作为检测和 定位MCH受体的探针，以及作为MCH结合和MCH-调节的信号转换试验中 的标准物。
本发明提供的MCH受体调控因子包括多-芳基的(即多个稠合或未稠合 的芳基基团)，非-肽的和不含氨基酸的活性化合物，其能对MCH结合到毫 微摩尔浓度级，优选低于毫微摩尔浓度级的MCH受体进行可检测性调节。 本发明提供的活性化合物通常是如上定义的1-苯基-4-芳基哌嗪或哌啶类似 物。优选的化合物以高的结合亲和力特定结合到MCH受体上。一般来说， 本发明的活性化合物在MCH受体上的Ki值小于1微摩尔。不需要与任何特 殊的理论相联系，应该相信本发明提供的化合物与MCH受体之间的相互作 用导致了MCH受体对这些化合物的活性进行调节。活性化合物包括受体激 动剂和拮抗剂。
本发明部分基于具有通式I的小分子(以及药学上可接受的盐及其前药) 对MCH结合到MCH受体具有调节作用这一发现。

通式I
在通式I中，V为一单键或-(C＝O)-且W为N，CH，COH或CCN。变 量“n”是1或2，换句话说，包括W的杂环可为6-员或7-员环，一般优选 为6-员环。
X选自卤素，羟基，硝基，氰基，-COOH，氧基，以及如下所定义 的式L-M的基团。如上所述，任何碳环可为饱和、部分饱和或不饱和的， 且可(但可不需要)任选被一个或多个(优选从1个到3个)取代基所取代。 优选地，X为卤素，(C1-C3)烷基，卤代(C1-C3)烷基，(C1-C3)烷氧基或卤 代(C1-C3)烷氧基，特别优选卤素，甲氧基和三氟甲基。
Y和Z分别独立地为：(i)CH，(ii)N，或(iii)与R5相连接成为含有W和 V，且具有5到8个环原子的碳环或杂环。如上所述，任何这样形成的碳环 或杂环可为饱和、部分饱和的或不饱和，及任选被一个或多个(优选从1个到 3个)上述独立挑选的取代基所取代。显然，除了W和V之外，此类碳环或 杂环还包括与V连接的碳原子以及与W相邻的碳原子。在某些实施方式中， Y和Z都为CH。在某些实施方式中，Y或Z为N；优选Y和Z不都是N。 如果Y或Z其中之一与R5相连接，则Y或Z之中的另一个为CH或为N。
R1和R2分别独立地选自：(a)氢，卤素，羟基，硝基，氰基，-COOH， 以及氧基；(b)如下所定义的式L-M的基团。优选地，R1和R2独立地选自氢， 卤素，(C1-C3)烷基，卤代(C1-C3)烷基，(C1-C3)烷氧基和卤代(C1-C3)烷氧基， 特别优选氢，卤素，甲基，甲氧基以及二-和三-氟甲基。在某些优选的实施 方式中，R1和R2的其中之一为氢。如果R1和R2都为氢，则V优选为-(C＝O)-。
R3为：(i)选自氢，(C1-C6)烷基，(C2-C6)烯基和卤代(C1-C6)烷基；或(ii) 与r6和R10之一或两者相连接形成具有一个环或两个稠合环的碳环或杂环基 团，其中的每个环包括5到8个环原子和0，1或2个独立选自氧原子、N或硫原子的杂原子，且其中每个环发生上述的任选取代。显然，任何与R6 形成的环包括与R3和R6相连接的碳原子，以及与这些碳原子相连接的N。 类似地，与R10形成的环包括与R3和R10相连接的碳原子，以及插入的碳原 子。优选R3基团为氢，(C1-C3)烷基(如甲基或乙基)，卤代(C1-C3)烷基(如 三氟甲基)和以下基团，该基团与R10形成5-员的部分饱和环，或与R6形成 5-员或6-员饱和或部分饱和的环。
R4为氢，(C1-C6)烷基或卤代(C1-C6)烷基；优选氢，甲基或三氟甲基，特 别优选是氢。
R5为：(i)每次出现时都独立选自氢，卤素，羟基，硝基，氰基，氨基， 氧基，(C1-C6)烷基，(C2-C6)烯基，(C2-C6)炔基，(C1-C6)烷氧基，卤代(C1-C6) 烷基，卤代(C1-C6)烷氧基，单-或二-(C1-C6)烷基氨基，以及氨基(C1-C6)烷基； 或(ii)与R6，Y或Z相连接形成具有5到8个环原子的碳环或杂环，任选 发生上述的取代。例如，R5可直接键接到R6，Y或Z上，或可为任何取代 基，当该取代基连接到R6，Y或Z时，形成了大小合适的碳环或杂环。如上 所述，此类碳环或杂环包括W和V，以及与V相连接的碳原子和与W相邻 的碳原子。优选地，每个R5独立地为氢或甲基。
R6为：(i)选自氢，卤素，羟基，硝基，氰基，氨基，氧基，(C1-C6)烷 基，(C2-C6)烯基，(C2-C6)炔基，(C1-C6)烷氧基，卤代(C1-C6)烷基，卤代(C1-C6) 烷氧基，单-或二-(C1-C6)烷基氨基，以及氨基(C1-C6)烷基；或(ii)与R3或 R5相连接形成前述的碳环或杂环。优选地，R6为氢或甲基，或与R3相连接 形成饱和或部分饱和的5-员或6-员环。
R7为：(a)选自氢，卤素，羟基，硝基，氰基，-COOH，氧基，以及下 述的式L-M的基团；或(b)与R8或R12相连接形成稠合的5-或6-员碳环或 杂环基团(饱和的，部分饱和的或不饱和的，且任选被取代)。显然，任何与 R8形成的环包括与R7和R8相连接的碳原子。类似地，任何与R12形成的环 包括与R7和R12相连接的碳原子。
R8为：(a)选自氢，卤素，羟基，硝基，氰基，-COOH，氧基；以及如 下所述的式L-M的基团；或(b)与R7或R11相连接形成稠合的5-到10-员碳 环或杂环基团。优选地，R8为氢，卤素，(C1-C3)烷基，卤代(C1-C3)烷基，(C1-C3) 烷氧基或卤代(C1-C3)烷氧基，或R8与R7或R11相连接形成5-员或6-员环， 或稠合的9-员或10-员的双环基团。
U为N，O或CR9；且R9为：(a)选自氢，卤素，羟基，硝基，氰基， -COOH，氧基，以及下述的式L-M的基团；或(b)与R10或R11相连接形成 稠合的5-到10-员碳环或杂环基团。显然，任何与R10相连接的环包括与R9 和R10相连接的碳原子。类似地，与R11形成的环包括与R9和R11相连接的 碳原子。优选地，R9为氢，卤素，(C1-C3)烷基(如甲基)或(C1-C3)烷氧基(如 甲氧基)，或与R10或R11相连接形成6-员芳香环。
T为N，O或CR10；R10为：(a)选自氢，卤素，羟基，硝基，氰基，-COOH， 氧基；以及下述的式L-M的基团；或(b)与R3，R8或R9相连接形成上述的 碳环或杂环基团。
R11为：(a)选自氢，卤素，羟基，硝基，氰基，-COOH，氧基；以及下 述的式L-M的基团；或(b)与R8和R9的其中之一或两者相连接形成稠合的 5-到10-员碳环或杂环基团；优选地，R11为氢，羟基，卤素，(C1-C3)烷基， 卤代(C1-C3)烷基(如三氟甲基)或(C1-C3)烷氧基(如甲氧基或乙氧基)。
R12为：(i)每次出现时都独立选自氢，卤素，羟基，硝基，氰基，氨基， 氧基，(C1-C6)烷基，(C2-C6)烯基，(C2-C6)炔基，(C1-C6)烷氧基，卤代(C1-C6) 烷基，卤代(C1-C6)烷氧基，单-或二-(C1-C6)烷基氨基，以及氨基(C1-C6)烷基； 或(ii)与R7相连接形成上述稠合的碳环或杂环基团。优选R12为氢或甲基。
每次出现的L独立地选自单键，-NR11-，-O-，-SO2-，-SO2NH-，C(＝O)NR11-和NR11C(＝O)-，其中每次出现的R11独立地选自氢，(C1-C6)烷基，(C2-C6)烯 基，(C2-C6)炔基和卤代(C1-C6)烷基。
每次出现的M独立地选自氢，(C1-C6)烷基，(C2-C6)烯基，(C2-C6)炔基， 卤代(C1-C6)烷基，氨基(C1-C6)烷基或5-到10-员碳环。
在某些优选的实施例中，至少R10，R3和R4的其中之一不为氢。尤其是， 如果R11为氢且V为单键，则R10，R3和R4不都为氢。
在某些实施方式中，优选的化合物为手性的，且满足下式Ia：

式Ia
在通式Ia中，R3和R12的其中之一或两者都不是氢。其它式Ia中的 变量的定义如通式I。如果R3不为氢，则与R3相连接的碳原子为R构型 (设定与其它与该碳原子相连接的基团相比，R3具有较低的优先等级)； 换句话说，对于具有α-甲基或乙基苄基基团(R3为甲基或乙基，R4为氢) 的化合物，优选R对映体。类似地，如果R12不是氢，则与R12相连接的 碳原子为S构型(设定与其它与该碳原子相连接的基团，R12具有较低的 优先等级)。具有手性碳原子的化合物可被指定为R或S对映体；本发明 中R3或R4都不是氢的化合物可被指定为(R，S)对映体。在缺乏此类指定 的情况下，本发明中所特别列举的化合物应该被解释为涵盖外消旋和手 性形式。此外，本发明提供的某些结构中采用同宽的黑色实线来表示一 个立体中心相对于另一个立体中心的相对立体化学。此类线并不表示绝 对的立体化学(绝对立体化学采用标准的楔形线来表示)。
本发明所提供的某些化合物满足通式II-IV中的一个或多个，其中多 种位置的定义如通式I：

通式II                            通式III                   通式IV
在通式II中，R3和R6连接形成不饱和的、部分不饱和的或饱和的环， 其中该环包括5到8个环原子，环原子中有0，1或2个杂原子(独立选 自氧，氮或硫原子)。类似地，在通式III中，R3和R10连接形成含有5 到8个环原子的不饱和的、部分不饱和的或饱和的环，环原子中有0，1 或2个杂原子。在通式IV中，R3，R6和R10连接形成两个稠合环，其中 的每一个独立为不饱和的，部分饱和或饱和的环，且包括5到8个环原 子，环原子中有0，1或2个杂原子。
通式II代表性的例子如下所示：

通式IIa
在通式IIa中，A和B分别独立选自O、N、S、CR13和CHR13，其中每 次出现的R13独立选自氢、卤素、氰基、羟基、氧基、肟、(C1-C6)烷基、(C1-C6) 烷氧基、(C1-C6)烷酰基、(C1-C6)烷酰基氧基、(C1-C6)烷氧基羰基、卤代(C1-C6) 烷基和卤代(C1-C6)烷氧基。优选地，R4是氢或甲基，每次出现的R5独立地 选自氢和甲基，R11为氢、卤素、甲氧基或羟基，R7，R8和R9分别独立地选 自氢、(C1-C6)烷基、(C1-C6)烷氧基和卤素。
通式I代表性的化合物包括但不限于其中W为N，R3和R4都是H的化合物。此类化合物包括有例如：1-(4-溴-3-甲氧基苯基)-4-(3，4-二甲氧 基苄基)哌嗪；1-(4-溴-3-甲氧基苯基)-4-(4-氯苄基)哌嗪；1-[4-氯-3-(三氟 甲基)苯基]-4-(3，4-二甲氧基苄基)哌嗪；1-(3，4-二氯苯基)-4-(3，4-二甲氧基 苄基)哌嗪；1-(4-溴-3-甲氧基苯基)-4-(4-甲氧基-2，5-二甲基苄基)哌嗪； 1-(4-溴-3-甲氧基苯基)-4-(4-甲氧基-2，3-二甲基苄基)哌嗪；1-(3-溴4-甲氧 基苄基)-4-(4-溴-3-甲氧基苯基)哌嗪；4-{[4-(4-溴-3-甲氧基苯基)哌嗪-1- 基]甲基}-2-甲氧基苯酚；4-({4-[4-氯-3-(三氟甲基)苯基]哌嗪-1-基}甲 基)-2-甲氧基苯酚；1-[4-氯-3-(三氟甲基)苯基]-4-(4-甲氧基-2，3-二甲基苄 基)哌嗪；1-(3-溴-4-甲氧基苯基)-4-[4-氯-3-(三氟甲基)苯基]哌嗪；1-(4- 溴-3-甲氧基苯基)-4-(4-甲氧基-3-甲基苄基)哌嗪；1-[4-氯-3-(三氟甲基)苯 基]-4-(4-甲氧基-3-甲基苄基)哌嗪；1-(4-氯-3-三氟甲氧基苯基)-4-[1-(3，4- 二甲氧基苄基)]-2-甲基-哌嗪；4-(4-氯-3-三氟甲基-苯基)-1-(3，4-二甲氧基- 苄基)]-2-甲基-哌嗪；4-(4-氯-3-甲氧基-苯基)-1-(3，4-二甲氧基-苄基)]-2-甲 基-哌嗪；4-(4-氯-3-甲氧基-苯基)-[1-(3，4-二甲氧基-苄基)-乙基]-2-甲基- 哌嗪；3-{[4-(4-溴-3-甲氧基苯基)哌嗪-1-基]甲基}-9-乙基-9H-咔唑；1-(5- 溴-6-甲氧基吡啶-2-基)-4-(3，4-二甲氧基苄基)哌嗪；1-(5-溴-6-甲氧基吡啶 -2-基)-4-(4-氯苄基)哌嗪；1-(5-溴-6-甲氧基吡啶-2-基)-4-(4-甲氧基-2，5-二 甲基苄基)哌嗪；1-(5-溴-6-甲氧基吡啶-2-基)-4-(4-甲氧基-2，3-二甲基苄基) 哌嗪；1-(3-溴-4-甲氧基苄基)-4-(5-溴-6甲氧基吡啶-2-基)哌嗪；4-(5-溴-6- 甲氧基吡啶-2-基)-1-(3，4-二甲氧基-苄基)-2-甲基哌嗪；4-(5-溴-6-甲氧基吡 啶-2-基)-1-(3，4-二甲氧基-苄基)-2-甲基哌嗪；1-(5-溴-6-甲氧基吡啶-2- 基)-4-(4-甲氧基-3-甲基苄基)哌嗪；3-{[4-(5-溴-6-甲氧基吡啶-2-基)哌嗪 -1-基]甲基}-9-乙基-9H-咔唑；4-{[4-(5-溴-6-甲氧基吡啶-2-基)哌嗪-1-基] 甲基}-2-甲氧基苯酚；以及1-(4-溴-3-甲氧基苯基)-4-(3，4-二甲氧基苄 基)-1，4-地西泮(diazepane)。
在其它的优选方式中，W是氮且R3不是氢，此类化合物包括有：1-(4- 溴-3-甲氧基苯基)-4-[1-(3，4-二甲氧基苯基)乙基]哌嗪；1-[4-氯-3-(三氟甲 基)苯基]-4-[1-(3，4-二甲氧基苯基)乙基]哌嗪；1-(4-溴-3-甲氧基苯 基)-4-[1-(4-甲氧基苯基)乙基]哌嗪；1-(4-氯-3-甲氧基苯基)-4-[1-(3，4-二甲 氧基苯基)乙基]哌嗪；1-(4-溴-3-甲氧基苯基)-4-[1-(3，4-二甲氧基苯基)乙 基]哌嗪；4-{1-[4-(4-溴-3-甲氧基苯基)哌嗪-1-基]乙基}-2-甲基苯酚；1-(4- 溴-3-甲氧基苯基)-4-[1-(4-氟-3-甲氧基苯基)-乙基]哌嗪；1-(4-氯-3-甲氧基 苯基)-4-[1-(3，4-二甲氧基苯基)乙基]哌嗪；1-(4-氯-3-甲氧基苯 基)-4-[1-(3，4-二甲氧基苯基)乙基]哌嗪；1-(4-溴-3-三氟甲氧基苯 基)-4-[1-(3-氟-4-甲氧基苯基)乙基]哌嗪；1-(4-溴-3-三氟甲氧基苯 基)4-[1-(3-氟-4-甲氧基苯基)乙基]哌嗪；1-(4-溴-3-三氟甲基苯 基)-4-[1-(3-氟-4-甲氧基苯基)乙基]哌嗪；1-(4-甲氧基-苯基)-4-[1-(3，4-二甲 氧基苯基)乙基]哌嗪；1-(4-甲氧基苯基)-4-[1-(3，4-二甲氧基苯基)乙基]哌 嗪；1-(4-溴-3-甲氧基苯基)-4-[1-(4-氯-苯基)-乙基]-哌嗪；1-(4-氯-3-甲氧 基-苯基)-4-[1-(4-甲氧基-2，3-二甲基-苯基)-乙基]-哌嗪；1-(4-氯-3-甲氧基- 苯基)-4-[1-(4-氯-3-甲氧基-苯基)-乙基]-哌嗪；1-(4-溴-3-甲氧基-苯 基)-4-[1-(4-甲氧基-2，5-二甲基-苯基)-乙基]-哌嗪；1-(4-氟-3-三氟甲基-苯 基)-4-[1-(3，4-二甲氧基-苯基)-乙基]-哌嗪；1-(4-溴-3-甲氧基-苯 基)-4-[1-(3，4-二甲氧基-苯基)-乙基]-哌嗪；1-(4-氯-3-三氟甲基-苯 基)-4-[1-(3，4-二甲氧基-苯基)-乙基]-哌嗪；1-(4-溴-3-甲氧基-苯 基)-4-[1-(4-乙氧基-3-甲氧基-苯基)-乙基]-哌嗪；1-(4-氯-3-甲氧基-苯 基)-4-[1-(4-氟-3-甲氧基-苯基)-乙基]-哌嗪；1-(4-溴-3-甲氧基-苯 基)-4-[1-(2，4，5-三甲基-苯基)-乙基]-哌嗪；1-(4-溴-3-甲氧基-苯基)-4-[1-(3- 氟-4-甲氧基-苯基)-乙基]-哌嗪；1-(4-氯-3-三氟甲基-苯基)-4-[1-(4-甲氧基 -2，3-二甲基-苯基)-乙基]-哌嗪；1-(4-氟-3-甲氧基-苯基)-4-[1-(3，4-二甲氧 基-苯基)-乙基]-哌嗪；1-(4-氯-3-三氟甲基-苯基)-4-[1-(4-氯-3-甲氧基-苯 基)-乙基]-哌嗪；1-(4-氯-3-三氟甲基-苯基)-4-[1-(4-甲氧基-3-甲基-苯基)- 乙基]-哌嗪；1-(4-溴-3-甲氧基-苯基)-4-[1-(3-甲氧基-苯基)-乙基]-哌嗪； 1-(4-溴-3-甲氧基-苯基)-4-[1-(4-三氟甲基-苯基)-乙基]-哌嗪；4-(4-氟-3-三 氟甲基-苯基)-1-[1-(3，4-二甲氧基-苯基)-乙基]-哌嗪；1-(4-氯-3-甲氧基-苯 基)-4-[1-(3-氟-4-甲氧基-苯基)-乙基]-哌嗪；1-(4-溴-3-甲氧基-苯 基)-4-[1-(3-乙氧基-苯基)-乙基]-哌嗪；1-(5-{1-[4-(4-溴-3-甲氧基-苯基)- 哌嗪-1-基]-乙基}-2-氟-苯基)-乙基酮；1-(4-氯-3-甲基-苯基)-4-[1-(4-甲氧 基-3-甲基-苯基)-乙基]-哌嗪；1-(4-溴-3-甲氧基-苯基)-4-[1-(3，5-二甲氧基- 苯基)-乙基]-哌嗪；1-(4-甲氧基-3-甲基-苯基)-4-[1-(4-甲氧基-2，3-二甲基- 苯基)-乙基]-哌嗪；1-(4-氯-3-甲基-苯基)-4-[1-(3，4-二甲氧基-苯基)-乙基]- 哌嗪；1-(4-溴-3-甲氧基苯基)-4-[1-(3，4-二乙氧基-苯基)-乙基]-哌嗪；1-(4- 氯-3-氟-苯基)-4-[1-(4-甲氧基-2，3-二甲基-苯基)-乙基]-哌嗪；1-(4-氯-3-甲 基-苯基)-4-[1-(4-甲氧基-2，3-二甲基-苯基)-乙基]-哌嗪；1-(4-氯-3-氟-苯 基)-4-[1-(3，4-二甲氧基-苯基)-乙基]-哌嗪；1-(4-甲氧基-3-甲基-苯 基)-4-[1-(3-甲基-4-甲氧基-苯基)-乙基]-哌嗪；1-(4-甲氧基-3-甲基-苯 基)-4-[1-(3，4-二甲氧基-苯基)-乙基]-哌嗪；1-(3，4-二甲氧基-苯基)-4-[1-(4- 甲氧基-2，3-二甲基-苯基)-乙基]-哌嗪；1-(4-氟-3-氟甲基-苯基)-4-[1-(3，4- 二甲氧基-苯基)-乙基]-哌嗪；1-(4-溴-3-甲氧基-苯基)-4-{1-[4-(4-溴-苯基)- 苯基]乙基}-哌嗪；4-(4-氯-3-三氟甲基-苯基)-[1-(3，4-二甲氧基-苄基)-乙 基]-哌嗪；1-(1-苯并[1，3]-二氧戊烯(dioxol)-5-基-乙基)-4-(4-溴-3-甲氧基- 苯基)-哌嗪；1-(4-溴-3-甲氧基-苯基)-4-[1-(3，4-二甲氧基-苯基)-乙 基]-[1，4]-地西泮；1-(4-溴-3-甲氧基-苯基)-4-[1-(3-氟-4-甲氧基-苯基)-乙 基]-[1，4]-地西泮；1-[1-(3，4-二甲氧基-苯基)-乙基]-4-[3-甲氧基-苯基)-哌 嗪-2，5-二酮；1-(4-溴-3-甲氧基-苯基)-4-[1-(3，4-二甲氧基-苯基)-丙基]-哌 嗪；1-(4-氯-3-三氟甲基-苯基)-4-[1-(3，4-二甲氧基-苯基)-丙基]-哌嗪；1-(5- 溴-6-甲氧基吡啶-2-基)-4-[1-(3，4-二甲氧基苯基)-乙基]-哌嗪；1-(5-溴-6- 甲氧基吡啶-2-基)-4-[1-(4-三氟甲基-苯基)-乙基]-哌嗪；1-(4-溴-3-甲氧基- 苯基)-4-[1-(6-甲氧基-萘-2-基)-乙基]-哌嗪；1-(4-氯-3-甲氧基-苯 基)-4-[1-(3，4-二甲氧基-二甲基-苯基)-乙基]-哌嗪；1-(4-溴-3-甲基-苯 基)-4-[1-(4-氟-3-甲氧基-苯基)-乙基]-哌嗪；以及1-(4-溴-3-甲氧基-苯 基)-4-[1-(6-甲氧基-吡啶-2-基)-乙基]-哌嗪。
其中W为C、COH或CCN的代表性化合物包括有：4-(4-氯-3-三氟 甲基-苯基)-1-[1-(3，4-二甲氧基-苯基)-乙基]-哌嗪；和4-[4-氯-3-(三氟甲基) 苯基)-1-[(3，4-二甲氧基苄基)-哌嗪-4-醇。
代表性的式II化合物包括有：2-(4-氯-3-甲氧基-苯基)-6-(3，4-二甲氧 基-苯基)-八氢-吡啶并[1，2-α]-吡嗪；2-(4-氯-3-氟甲基-苯基)-6-(3，4-二甲 氧基-苯基)-八氢-吡啶并[1，2-α]-吡嗪；2-(4-氯-3-甲氧基-苯基)-6-(3-氟-4- 甲氧基-苯基)-八氢-吡啶并[1，2-α]-吡嗪；2-(4-氟-3-甲氧基-苯基)-6-(3，4- 二甲氧基-苯基)-八氢-吡啶并[1，2-α]-吡嗪；2-(4-氟-3-氟甲基-苯 基)-6-(3，4-二甲氧基-苯基)-八氢-吡啶并[1，2-α]-吡嗪；2-(4-氯-3-甲氧基- 苯基)-6-(甲氧基-萘-2-基)-八氢-吡啶并[1，2-α]-吡嗪；2-(4-氯-3-甲基-苯 基)-6-(3，4-二甲氧基-苯基)-八氢-吡啶并[1，2-α]-吡嗪；2-(4-甲氧基-3-甲基 -苯基)-6-(3，4-二甲氧基-苯基)-八氢-吡啶并[1，2-α]-吡嗪；2-(4-氯-3-甲氧 基-苯基)-6-(3-甲氧基-苯基)-八氢-吡啶并[1，2-α]-吡嗪；2-(2，4-二溴-5-甲 氧基-苯基)-6-(3，4-二甲氧基-苯基)-八氢-吡啶并[1，2-α]-吡嗪；2-(3，4-二甲 氧基-苯基)-6-(3，4-二甲氧基-苯基)-八氢-吡啶并[1，2-α]-吡嗪；2-(4-氯-3- 氟-苯基)-6-(3，4-二甲氧基-苯基)-八氢-吡啶并[1，2-α]-吡嗪；1-(4-氟-3-甲 氧基-苯基)-6-(3，4-二甲氧基-苯基)-八氢-吡啶并[1，2-α]-吡嗪；2-(4-氯-3- 甲氧基-苯基)-6-(3，4-二甲氧基-苯基)-八氢-吡啶并[1，2-α]-吡嗪-8-醇； 2-(4-氯-3-甲氧基-苯基)-6-(3，4-二甲氧基-苯基)-八氢-吡啶并[1，2-a]-吡嗪 -8-酮；2-(4-氯-3-甲氧基-苯基)-6-(3-氟-4-甲氧基-苯基)-八氢-吡啶并 [1，2-a]-吡嗪-8-酮；2-(4-氯-3-甲氧基-苯基)-6-(6-甲氧基-萘-2-基)-八氢-吡 啶并[1，2-a]-吡嗪-8-酮；8-(4-氯-3-甲氧基-苯基)-4-(3，4-二甲氧基-苯基)-八 氢-吡嗪并[2，1-c][1，4]-噻嗪；2-(4-氯-3-甲氧基-苯基)-6-(3，4-二甲氧基-苯 基)-八氢-吡咯并[1，2-a]-吡嗪；2-(4-氯-3-甲氧基-苯基)-6-(3，4-二甲氧基- 苯基)-1，3，4，6，9，9a-六氢-2H-吡啶并[1，2-a]-吡嗪；8-溴-3-(3，4-二甲氧基-苄 基)-9-甲氧基-2，3，4，4a-四氢-1H，6H-吡嗪并[1，2-a]-喹喔啉-5-酮；7-(4-氯-3- 甲氧基-苯基)-4-(3，4-二甲氧基-苯基)-十氢-萘-2-酚；以及2-(4-氯-3-甲氧 基-苯基)-6-(3，4-二甲氧基-苯基)-8-氟-八氢-吡啶并[1，2-a]-吡嗪；
典型的式III化合物包括有：1-(4-溴-3-甲氧基苯基)-4-(5，6-二甲氧基 -2，3-二氢-1H-茚满-1-基)-哌嗪；1-(5-溴-6-甲氧基吡啶-2-基)-4-(5，6-二甲氧 基-2，3-二氢-1H-茚满-1-基)-哌嗪；1-(4-氯-3-三氟甲基-苯基)-4-(4，5-二甲氧 基-茚满-1-基)-哌嗪；以及1-(4-溴-3-甲氧基-苯基)-4-(4，5-二甲氧基-茚满 -1-基)-哌嗪。
其中V为-C(＝O)-的典型的化合物包括有：(4-氯-苯基)-{4-[1-(2，3-二 甲基-苯基)-乙基]哌嗪-1-基}甲酮；(4-氯-苯基)-{4-[1-(4-甲氧基-2，3-二甲 基-苯基)-乙基]哌嗪-1-基}甲酮；(4-三氟-甲基-苯基)-{4-[1-(4-甲氧基-2，3- 二甲基-苯基)-乙基]哌嗪-1-基}甲酮；(3，4-二氯-苯基)-{4-[1-(4-甲氧基-2，3- 二甲基-苯基)-乙基]哌嗪-1-基}甲酮；(4-氯-苯基)-{4-[1-(4-甲基-萘-1-基)- 乙基]哌嗪-1-基}甲酮；(4-三氟-甲基-苯基)-{4-[1-(4-甲氧基-2-甲基-苯基)- 乙基]哌嗪-1-基}甲酮；(4-三氟甲基-苯基)-{4-[1-(4-甲氧基-2，3-二甲基-苯 基)-乙基]哌嗪-1-基}甲酮；(4-三氟甲基-苯基)-{4-[1-(4-甲氧基-3-甲基-苯 基)-乙基]哌嗪-1-基}甲酮；(4-氯-苯基)-{4-[1-(4-甲氧基-萘-1-基)-乙基]哌 嗪-1-基}甲酮；(4-三氟甲基-苯基)-{4-[1-(4-甲氧基-2，3-二甲基-苯基)-丙基] 哌嗪-1-基}甲酮；(4-氯-苯基)-{4-[1-(4-甲氧基-2，3-二甲基-苯基)-烯丙基] 哌嗪-1-基}甲酮；(4-氟-苯基)-{4-[1-(4-甲氧基-2，3-二甲基-苯基)-乙基]哌 嗪-1-基}甲酮；(4-溴-3-甲基-苯基)-{4-[1-(4-甲氧基-2，3-二甲基-苯基)-乙基] 哌嗪-1-基}甲酮；(3，4-二氯-苯基)-{4-[1-(4-甲基-萘-1-基)-乙基]哌嗪-1-基} 甲酮；[6-(3，4-二甲氧基-苯基)-八氢-吡啶并[1，2-a]-哌嗪-2-基]-(4-三氟甲基 -苯基)-甲酮；(4-氯-苯基)-{4-[1-(4-甲氧基-2，3-二甲基-苯基)-丙基]哌嗪-1- 基}甲酮；{4-[1-(4-甲氧基-2，3-二甲基-苯基)-乙基]-[1，4-]苯二氮酌-1- 基}-(4-三氟甲基-苯基)-甲酮；以及{5-[1-(4-甲氧基-2，3-二甲基-苯基)-乙 基]-2，5-二氮-双环[2.2.1]庚-2-基}-(4-三氟甲基-苯基)-甲酮。
其中U为氮或氧原子的典型化合物包括有：3-{1-[4-(4-溴-3-甲氧基- 苯基)-哌嗪-1-基]-乙基}-6-甲氧基-喹啉；3-{1-[4-(4-溴-3-甲氧基-苯基)-哌 嗪-1-基]-乙基}-2-氯-6-甲氧基-喹啉；3-{1-[4-(4-溴-3-甲氧基-苯基)-哌嗪 -1-基]-乙基}-喹啉；1-(4-溴-3-甲氧基-苯基)-4-[1-(6-甲氧基-吡啶-3-基)-乙 基]-哌嗪；以及3-{1-[4-(4-溴-3-甲氧基-苯基)-哌嗪-1-基]-乙基}-6-氟-4-甲 基-2H-苯并吡喃-2-醇。
本发明中典型的手性化合物包括有：(3S)-1-(4-氯-3-三氟甲氧基苯 基)-4-[1-(3，4-二甲氧基-苄基)]-2-甲基-哌嗪；(2S)-4-(5-溴-6-甲氧基吡啶-2- 基)-1-(3，4-二甲氧基-苄基)]-2-甲基哌嗪；R-1-(4-氯-3-甲氧基苯 基)-4-[1-(3，4-二甲氧基苯基)乙基]哌嗪；S-1-(4-氯-3-甲氧基苯 基)-4-[1-(3，4-二甲氧基苯基)乙基]哌嗪；R-1-(4-溴-3-三氟甲基苯 基)-4-[1-(3-氟-4-甲氧基苯基)乙基]哌嗪；S-1-(4-溴-3-三氟甲基苯 基)-4-[1-(3-氟-4-甲氧基苯基)乙基]哌嗪；S-1-(4-甲氧基-苯基)-4-[1-(3，4- 二甲氧基苯基)乙基]哌嗪；R-1-(4-甲氧基-苯基)-4-[1-(3，4-二甲氧基苯基) 乙基]哌嗪；R-1-(4-氯-3-甲氧基-苯基)-4-[1-(3，4-二甲氧基苯基)乙基]哌嗪； {5-[1-(4-甲氧基-2，3-二甲基-苯基)-乙基]-(1S，4S)-2，5-二氮-双环[2.2.1]庚 -2-基}-(4-三氟甲基-苯基)-甲酮；(6R，10S)-2-(4-氯-3-甲氧基-苯基)-6-(3，4- 二甲氧基-苯基)-八氢-吡啶并[1，2-a]-吡嗪-8-酮；R-1-(4-溴-3-甲氧基-苯 基)-4-[1-(3，4-二甲氧基苯基)乙基]哌嗪；(2S)-4-(4-氯-3-甲氧基-苯 基)-1-(3，4-二甲氧基苄基)-2-甲基-哌嗪；(2R)-4-(4-氯-3-甲氧基-苯 基)-1-(3，4-二甲氧基苄基)-2-甲基-哌嗪；(3R)-1-(4-氟-3-三氟甲基-苯 基)-4-[1-(3，4-二甲氧基苯基)-乙基]-哌嗪；(3S)-1-(4-氟-3-三氟甲基-苯 基)-4-[1-(3，4-二甲氧基苯基)-乙基]-哌嗪；(3R)-1-(4-氯-3-三氟甲基-苯 基)-4-[1-(3，4-二甲氧基苯基)-乙基]-哌嗪；(3S)-1-(4-氟-3-三氟甲基-苯 基)-4-[1-(3，4-二甲氧基苯基)-乙基]-哌嗪；(6R，10S)-2-(4-氯-3-甲氧基-苯 基)-6-(3，4-二甲氧基-苯基)-八氢-吡啶并[1，2-a]-吡嗪；(3R)-1-(4-氟-3-甲氧 基-苯基)-4-[1-(3，4-二甲氧基苯基)-乙基]-哌嗪；(2R)-4-(4-氯-3-三氟甲基- 苯基)-[1-(3，4-二甲氧基苄基)-乙基]-哌嗪；(6R，9S)-2-(4-氯-3-甲氧基-苯 基)-6-(3，4-二甲氧基-苯基)-八氢-吡咯并[1，2-a]-吡嗪；(6R，10S)-2-(4-氯-3- 甲氧基-苯基)-6-(3，4-二甲氧基-苯基)-八氢-吡啶并[1，2-a]-吡嗪-8-醇； (6R，10S)-[6-(3，4-二甲氧基-苯基)-八氢-吡啶并[1，2-a]-吡嗪-2-基]-(4-三氟 甲基-苯基)-甲酮；(6R，10S)-2-(4-氯-3-甲氧基-苯基)-6-(3-氟，4-甲氧基-苯 基)-八氢-吡啶并[1，2-a]-吡嗪；以及{5-[1-(4-甲氧基-2，3-二甲基-苯基)-乙 基]-(1S，4S)-2，5-二氮-双环[2.2.1]庚-2-基}-(4-三氟甲基-苯基)-甲酮。
显然，上述的特定化合物为本发明的阐释性的化合物例子，并非用 于限定本发明的范围。如上所述，本发明所有的化合物可以游离碱或以 药学上可接受的酸加成盐存在。此外，在未指定手性时，尽管可能会优 选手性形式，但手性化合物和外消旋混合物都涵盖在本发明中。
本发明提供的取代的1-苄基-4-芳基哌嗪和哌啶类似物对MCH结合 到MCHR1和/或MCHR2受体进行可测定性地改变(调节)，如采用标准体 外MCH受体结合试验和/或钙移动试验测定。本发明所引用的“MCH受 体配体结合试验”是指实施例2中所提供的体外受体结合试验。简单来 说，将MCH受体制剂和标记的(如125I)MCH和未标记的测试化合物一起 培养，从而进行竞争试验。在此处的试验中，优选采用的MCH受体为哺 乳动物MCHR1或MCHR2受体，更优选的是人类或猴子的MCHR1或 MCHR2受体。受体可为重组性表达的或为天然表达的，且可包括天然序 列或修饰的序列(如被截断和/或被稠合到非天然的N-端序列上)。MCH 受体制剂可为如来自HEK293细胞的膜制剂，该细胞重组性表达人体 MCH受体(如Genbank Accession No.Z86090)，猴子MCHR1受体(如 SEQ ID No：1中的MCHR1序列)，或人类MCHR1/人类β-2-肾上腺素 的嵌合受体。
与对MCH与MCH受体的结合进行可测定性调节的化合物一起培 养，会导致结合到MCH受体制剂上的标记量增长或减少(相对于缺乏化 合物时的标记结合量)。优选地，在实施例2所述的MCH受体配体结合 试验中，此类化合物表现出在MCH受体上的Ki值小于1微摩尔，更优 选小于500nM，100nM，20nM或10nM。如实施例3所提供的标准体外 MCH受体调节的钙移动试验中，一般优选的化合物为MCH受体的拮抗 剂，且其EC50值为约4微摩尔或更少，更优选1微摩尔或更少，更优选 约100nM或更少，10nM或更少，1nM或更少。
如果希望，可评价本发明化合物的某些药学性质，包括但不限于口 服生物利用度、毒性、血清蛋白结合性，以及体外和体内的半衰期。此 外，对于用于治疗CNS疾病，理想的是能渗透血脑屏障的化合物，可优 选低脑含量的用于治疗周边性疾病的化合物。可采用本领域公知的常规 试验对这些性质进行测定，并鉴定用于特定用途的优质化合物。例如， 预测生物利用度的试验包括运送通过人类肠细胞单层，该细胞单层包括 Caco-2细胞单层。可采用任何标准的方法测定毒性，如实施例5所提供 的检测细胞ATP生产的影响的试验。采用化合物对实验动物进行静脉给 药，通过化合物在脑中的水平，可预测人体中化合物的血脑屏障的渗透。 可从白蛋白结合试验预测血清蛋白的结合性。此类试验在Oravcova，等 人.(Journal of Chromatography B(1996)677卷，1-27页)的评论文章中有 所描述。化合物半衰期与化合物剂量的频率成反比。化合物的体外半衰 期可通过如Kuhn和Gieschen(Drug Metabolism and Disposition，(1998) volume 26，pages1120-1127)中所描述的微粒体半衰期试验来预测。
一般来说，本发明优选的化合物基本上不与多巴胺受体发生相互作 用，特别是人类的多巴胺D2和D4受体。可用标准的方法进行多巴胺受 体结合试验，例如实施例4所述的试验。优选地，此类试验中化合物的 Ki值大于1微摩尔。
如上所述，除通式I活性化合物之外，本发明提供的MCH受体调控 因子还可包括的一种或多种另加的缔合部分。该部分可为直接连接(即 通过键)，或通过连接物进行连接，可为非共价连接或可与化合物相结 合。此类另加的部分可用于例如使化合物的传递，命中目标或检测变得 容易。该部分可直接连接(如通过键)或通过连接物连接。例如，当上述化 合物可充分命中体内的某个预定位置时，对某些应用有利的是包括另一 个目标部分，有助于命中一个或多个特定组织。优选的目标部分包括如 特定地指向与MCH活性相关的脑区域的那些。
在某些实施方式中，有利的是同时或选择性地使药物和一个调控因 子相缔合。此处术语“药物”是指任何对哺乳动物进行给药的生物活性 剂，以预防或治疗疾病或其它不希望的病症。药物包括激素，生长因子， 蛋白质，肽和其它化合物。例如治疗肥胖症的调控因子可包括瘦素 (leptin)，瘦素受体激动剂，黑皮质素(melanocortin)受体4(MC4)激动剂， 西布曲明(Sibutramine)，右芬氟拉明(Dexfenfluramine)，生长激素促分泌 素，β-3激动剂，5HT-2激动剂，食欲素(Orexin)拮抗剂，神经肽Y1 或Y5拮抗剂，甘丙素(galanin)拮抗剂，CCK激动剂，GLP-1激动剂和/ 或促肾上腺皮质激素-释放激素激动剂。促进检测的部分包括放射性核 素，发光基团，荧光基团以及酶，其中的任何一个可通过标准方法和化 合物相连接。
如下所详细讨论的，为进行检测，可对本发明所提供的化合物进行 同位素标记或放射性标记。此类化合物与通式I的化合物相同，但其中 的一个或多个原子被原子量或质量数与大多数通常天然存在的原子量或 质量数所不同的原子所取代。本发明中可被引入化合物的同位素的例子 包括氢，碳，氮，氧，磷，氟和氯的同位素，例如2H，3H，11C，13C，14C， 15N，18O，17O，31P，32P，35S，18F和36Cl。此外，以重同位素如氘(即2H) 所进行的取代带来了某些治疗优点，其来自于较高的生物稳定性，如体 内半衰期增加或剂量要求减少，因此，在某些环境下成为优选方式。
另一些与活性化合物缔合的部分包括载体。此类物质可调节化合物的生 物利用度或稳定性。代表性的载体包括有分子，如白蛋白，聚赖氨酸，聚酰 胺型胺类，肽，蛋白质，聚苯乙烯，聚丙烯酰胺，脂质体，神经酰胺和生物 素，固体支持材料如微珠或微粒，包括有聚乙酸酯(polyactate)，聚甘醇酸酯， 聚(丙交酯-共-乙交酯)，聚丙烯酸酯，乳胶，淀粉，纤维素或葡聚糖。
MCH受体调控因子的制备
本发明所提供的化合物一般可采用标准的合成方法制备而得。起始 原料一般可从商业途径获得，如Sigma-Aldrich Corp.(St.Louis，MO)。例 如，一种合成途径和路线A到K中的任何一个所示的方法相类似。显然， 下列路线中的最终产物以及任何中间体都可被洗提，干燥，过滤和/或浓 缩，并可被进一步纯化(如通过色谱法)。合成代表性化合物的进一步的细 节通过实施例1中的路线表达。
路线A(还原性胺化)

简单来说，采用1当量的每种取代哌嗪和苯甲醛与过量的 NaBH(OAc)3在氮气氛下进行反应，直到用TLC检测不到起始原料。此 时，用含水的饱和NaHCO3猝灭反应并用乙酸乙酯洗提得到1-苄基-4-芳 基哌嗪类似物。洗提物可用无水MgSO4干燥，在真空中浓缩并用色谱法 分离。
路线B(还原性胺化)

简单来说，采用1当量的每种取代哌嗪和苯乙酮与Ti(OiPr)4一起加 热(如70℃，2小时)。反应溶液冷却后和NaBH4反应生成1-苄基-4- 芳基哌嗪类似物。加入1N NaOH猝灭反应，可用CH2Cl2进行洗提。CH2Cl2洗提物可通过无水MgSO4干燥，在真空下浓缩并用色谱法分离。
路线C(还原性烷基化代替还原性胺化)

简单来说，加热含有芳香性羧基醛，苯并三唑和芳香性哌嗪的乙醇/ 甲苯溶液，然后浓缩溶液。残留物与甲苯一起蒸发，然后溶解于THF中， 并用溴化甲基镁的二乙醚溶液处理，得到1-苄基-4-芳基哌嗪类似物。
路线D(乙基哌嗪类似物的非对称合成)
1.旋光拆分



2.Buchwald偶联


路线E(从手性烯丙基氨基乙酸合成八氢-吡啶并[1，2-a]哌嗪衍生物)





简单地说，二碳酸二-叔丁酯和L-2-氨基-戊-4-烯酸在1N NaOH和二 噁烷中进行反应，然后进行浓缩(步骤1)。水性残留物在冰上冷却，用 EtOAc分层并酸化。步骤2中，反应产物，氯化1-(3-二甲基氨基丙基)-3- 乙基碳化二亚胺(EDCI)，和苯胺在吡啶中进行合并。步骤3中，加入 溶于甲苯中的铝烷-N，N-二甲基乙胺络合物。步骤4中加入氯化乙酰氯， 并分层。步骤5中，加入三氟乙酸，且在步骤6中加入溶于甲苯中的铝 烷-N，N-二甲基乙胺络合物。步骤7中，反应产物和二碳酸二叔丁基酯进 行反应。在步骤8中加入氯化钯(II)和氯化亚铜(I)，并在溶液中鼓入氧气， 形成气泡。步骤9中，加入三氟乙酸，在冰上搅拌反应然后进行浓缩。 在溶液中加入苯甲醛衍生物和NaOH。对-甲苯磺酰肼，然后加入硼氢化 钠(步骤10)。显然，在该路线的不同点可能需要进行洗提，干燥，过 滤，浓缩和提纯，如实施例1，分步V所述。
路线F(八氢-吡啶并[1，2-a]哌嗪衍生物的另一种合成)



简单地说，2-(4-苄基-哌嗪-2-基)-乙醇开始和二碳酸二叔丁酯(BOC 酸酐)反应，生成4-苄基-2-(2-羟基-乙基)-哌嗪-1-羧酸叔丁基酯(I)。在步 骤1中，将I溶解于含有预先活化的4分子筛和4-甲基吗啉N-氧化物的 无水二氯甲烷中。加入过镣酸四丙基铵开始反应，直到LC/MS分析表明 检测不到残留的起始原料(通常为1h)。过滤悬浮液，并用5％溶于氯 仿中的甲醇溶液洗脱4-苄基-2-(2-氧-乙基)-哌嗪-1-羧酸叔丁酯(II)。步 骤2中，将II在氮气氛中溶解于无水四氢呋喃中，并加入溴化甲基镁， 生成4-苄基-2-(2-羟基-丙基)-哌嗪-1-羧酸叔丁酯(III)。步骤3中，如上所 述对III进行与I相同的处理，生成4-苄基-2-(2-氧-丙基)-哌嗪-1-羧酸叔 丁酯(IV)。步骤4中，向IV的二氯甲烷溶液中加入三氟乙酸。与苯甲醛 衍生物(ArCHO)和NaOH进行后续反应生成化合物V。在步骤5中，化合 物V和对-甲苯磺酰肼的甲醇溶液反应。加入硼氢化钠并使反应完成，用 TCL分析测定出反应完全(如18小时)，得到了化合物VI。在步骤6中， 化合物VI和10％的Pd/C以及甲酸铵一起加热(如回流6小时)。可添 加另一部分甲酸铵，在回流下搅拌反应(如再进行15小时)，得到化合 物VII。化合物VII然后可溶于二氯甲烷中，并和三乙胺以及三氟甲基苯 甲酰一起在室温下搅拌(步骤7a)。有乙酸乙酯洗提，得到化合物VIII， 其可在250微分析TLC上被纯化。可选择性地(步骤7b)，化合物VII 可用于制备化合物IX。
路线G(硫代吗啉衍生物的合成)



简单地说，用氢氧化钾的甲醇溶液处理2-叔丁氧碳酰胺-3-巯基-丙酸 甲酯。向反应物中加入2-氯-芳基-乙酮溶液。然后加入三氟乙酸，之后加 入三乙酰氧硼氢化物，生成了硫代吗啉。与三甲基铝和苯胺反应生成酰 胺，用铝烷还原。用二溴乙烷和三乙胺处理，生成八氢-吡嗪并噻嗪衍生 物。
路线H(通过Suzuki途径进行八氢-吡啶并[1，2-a]哌嗪衍生物的外消 旋合成)



简单来说，5-溴-吡啶甲酸与亚硫酰氯进行反应，然后与羟基乙胺反 应生成酰胺。该酰胺然后与芳基硼酸和三(二苄亚甲基丙酮)-二钯(0)反应， 直到TLC表明未检测到起始原料。用二氧化钯处理，得到哌啶化合物， 用LiAlH4对其进行还原。用三苯基膦和偶氮二羧酸二乙酯成环，直到TLC 表明未检测到起始原料。最后，通过与溴-芳基化合物进行反应而引入了 芳基取代基。
路线I-从酮化合物得到的类似物
可从酮化合物开始(如代表性结构A的代表)合成多种化合物，如 下所述：

简单地说，酮A到仲醇B的还原可通过本领域公知的多种方法实现， 包括(但不限于)与氢氧化钠的甲醇溶液反应，如实施例1所述。仲醇B 到仲烷基氟化物C的氟化反应可通过本领域技术人员公知的多种方法实 现，如与二乙基氨基硫三氟化物(diethylaminosulfurtrifluoride)(DAST， Hudlicky，Org.React.1998，35，513)在溶剂如二氯甲烷或氯仿中，于 -78到120℃的温度范围内进行反应。仲醇B脱氢生成相应的烯烃D的反 应可通过多种本领域公知的方法进行，包括(但不限于)与试剂例如OPCl3或PCl5在溶剂例如吡啶中，于0到200℃的温度范围内进行反应而得。 烯烃D转化为碳-或杂环例如E的反应可通过本领域普通技术人员所公知 的Diels-Alder反应实现(如L.W.Butz和A.W.Rytina Org.React 1949，5， 136；M.C.Kloetzel，Org.React.1948，4，1)。这些反应能通过使D和二烯 反应而实现，二烯如(但不限于)1，3-丁二烯，2，3-二甲基丁二烯，1，3- 环己二烯，1-甲氧基-3-三甲基硅氧基-1，3-丁二烯(“Danishefsky’s二烯”， S.Danishefsky和T.Kitahara，J.Am.Chem.Soc.1974，96，7807)，o-醌二 甲烷，二苯基苯并[c]呋喃，或蒽(antracene)。
酮A转化到通式F的叔醇可通过与合适的有机金属试剂在溶剂，如 但不限于四氢呋喃，乙醚，甲基-叔丁基醚，二异丙基醚，苯，甲苯或己 烷中，在介于-78℃到反应混合物的相应沸点的温度范围内反应而实现， 有机金属试剂例如但不限于烷基或芳基锂，烷基卤或卤代芳基镁，烷基 或芳基钠，烷基或芳基钾等。叔醇F到相应的叔氟化物F’的直接转化反 应可通过本领域技术人员所公知的方法实现，包括但不限于与二乙基氨 基硫三氟化物在溶剂，如二氯甲烷或氯仿中，于-78℃到120℃的温度范 围内进行反应。叔醇F到相应的烷烃G的脱氧反应可通过多种方法实现， 例如用三乙基硅烷(或等量的氢气供体)在Broensted酸(如三氟乙酸) 或路易斯酸(如三氟化硼)的存在下，在溶剂如二氯甲烷，己烷或乙基 醚中，在介于-78℃到相应的反应混合物的沸点的温度范围内处理。酮A 转化为通式J表示的多种取代的肟的转化反应可通过多种本领域技术人 员所公知的方法实现，包括但不限于A和盐酸羟基胺，O-甲基盐酸羟基 胺，O-苄基盐酸羟基胺等，在例如但不限于甲醇，乙醇，吡啶，N，N-二 甲基甲酰胺，二甲基亚砜或乙腈的溶剂中，在例如三乙基胺、碳酸钠或 氢氧化钠等碱的存在下，于-5℃到反应混合物的沸点的温度范围内进行 反应。通过本领域技术人员公知的多种方法(如Beckmann重排，L.G.和 Heldt，W.Z.Org.React.1960，11，1)，可将相应的肟J(R＝H)重新排列 为内酰胺K或L。此类方法包括但不限于用脱水试剂如PCl5，TsCl，硫 酸等进行处理。内酰胺K和L可然后分别被还原为相应的高哌嗪 (homopiperazine)O和P，如本领域的技术人员所公认的。用于此类转化 的方法包括但不限于用还原剂如氢化锂铝，铝烷，硼烷，氢化二(2-甲氧 基乙基)铝钠(Vitride，Red-Al)，在合适的溶剂例如四氢呋喃，乙醚，甲 苯等中，于-78℃到反应混合物的沸点的温度范围内处理(如M.Hudlicky； Reductions in Organic Chemistry；Ellis Horwood Ltd.；Great Britain，1984， pp 168.)此外，内酰胺K和L可能被分别N-烷基化或N-芳基化成为相 应的N-取代内酰胺M和N。这一转化可通过用强碱，例如但不限于氢化 钠，氢化钾，四甲基哌啶锂(lithium tetramethylpiperidide)，或叔-丁氧化 钾进行处理，然后用合适的烷基卤、芳基卤或杂芳基卤，例如但不限于 甲基碘，乙基碘，苄基溴，2-氟硝基苯，2-氯-5-氟甲基哌啶，在催化剂， 例如但不限于碘化钠，碘化钾或碘化四甲基铵的存在下，在合适的溶剂 例如但不限于四氢呋喃，乙腈，二甲基亚砜，N，N-二甲基甲酸胺，叔-丁 醇中，在-78℃到相应反应混合物的沸点的温度范围内进行处理而得。
酮A到取代的烯烃H的烯烃化反应可通过多种本领域技术人员公知 的化学反应实现。其中磷叶立徳(Wittig试剂)可由磷鎓盐去质子化制 备而得，而磷鎓盐由三苯基膦和烷基卤反应制备而得(如F.A.Carey和 R.J.Sunderg；Advanced Organic Chemistry，Part B，Plenum Press，New York，1983，pp71)。烷基卤包括但不限于甲基碘，乙基碘，苄基溴，溴 代乙酸乙酯，2-溴代丙酸甲酯等等。去质子化反应所需的碱包括但不限 于氢氧化钠，氢化钠，二异丙基氨基化锂(lithium diisopropylamide)，叔- 丁氧基钾，正丁基锂和叔-丁基锂。合适于此类反应的溶剂包括但不限于 水，甲醇，乙醇，四氢呋喃，二甲基亚砜，苯或乙醚。反应可在介于-78℃ 到相应的反应混合物的沸点的温度范围内进行。
酮A到单-或多烷基化酮I的α-烷基化反应可通过用碱和烷基化试 剂在合适的溶剂中处理A制备。合适的碱包括但不限于二异丙基氨化锂， 六甲基二硅叠氮烷基锂(LiHMDS)，叔-丁氧基钾，甲氧基钠以及2，2，6，6- 四甲基哌啶基锂。烷基化试剂包括但不限于甲基碘，乙基碘，2-碘代丙 烷，原甲酸甲酯，苄基溴，以及苯乙基溴。合适的溶剂包括但不限于四 氢呋喃，二甲基亚砜，N，N-二甲基甲酰胺，叔-丁醇和甲醇。反应温度为 -78℃到相应的反应混合物的沸点之间。
酮A到内酯Q和R的转化可通过本领域技术人员公知的 Baeyer-Villiger反应实现。该反应包括用氧化剂，包括但不限于过氧化氢， 过氧化苯甲酸，过氧乙酸或m-氯代过氧化苯甲酸在溶剂，例如但不限于 二氯甲烷，氯仿，苯中，于-30℃到反应混合物的沸点温度之间对A处理。
酮A到gem-二氟化物S的转化可通过如用二乙基胺硫三氟化物在溶 剂如二氯甲烷或氯仿中，于-78℃到120℃的温度范围内进行处理而得。
酮A到腈T的转化可通过多种本领域公知的方法实现。此类方法的 一个例子是与甲苯磺酰基甲基异腈化物在碱，例如但不限于叔-丁氧基钾 的存在下，在溶剂例如1，2-二甲氧基乙烷中，于10℃到溶剂沸点之间的 温度范围内进行反应(参见如.O.H.Oldenziel等人.，J.Org.Chem.1977， 42，3114)。
路线J(通过6，5双环合成方法合成八氢-吡咯并[1，2-a]吡嗪衍生物)






简单来说，用1当量的苄基溴和2.5当量的碳酸钾将BOC保护的5- 氧-吡咯烷-1，2-二羧酸(dicarboxylatic acid)(1)转化为苄基酯(2)。加入溶解 于THF中的溴化芳基镁格氏试剂(如0℃，2h)，然后进行水性反应， 得到了酮，2-叔-丁氧基碳酰基氨基-5-芳基-5-氧-戊酸苄基酯(3)。用溶 于二氯甲烷的三氟乙酸进行处理(如在0℃进行，然后在超过2小时的时 间内缓慢加热到室温)，从而进行解保护和环化反应。用1N NaOH进行 碱化至pH为7，进行有机物洗提，得到5-芳基-3，4-二氢-2H-吡咯-2-羧酸 苄基酯TFA盐(4)。用Pd/C催化剂在50psi的压力下和在甲醇中进行 氢化反应(如进行15小时)，得到了5-芳基-吡咯烷-2-碳酸TFA盐(5)。 在二氯甲烷和二异丙基乙胺中用二-叔丁基二碳酸酯进行氨基保护反应， 然后用pyBrop和二异丙基乙胺偶联到芳香胺上，得到酰胺，叔-丁基酯 (7)。用三氟乙酸断开Boc，然后用铝烷进行还原，得到仲胺(9)。 用溴代乙酸乙酯进行烷基化反应，得到氨基酯，该氨基酯可用溶于THF 中的氢化钠环化，得到内酰胺(11)。还原内酰胺得到最终产物(12)。
路线K(哌嗪苯甲酰溴的合成)


简单地说，用1当量的任意取代的苯甲醛，哌嗪-1-羧酸叔-丁基酯和 苯并三唑反应，生成任选取代的苯基-乙基-哌嗪-1-羧酸叔丁酯。与三氟 乙酸和二氯甲烷进行反应，得到任选取代的苯基-乙基-哌嗪。然后与任选 取代的苯甲酰氯进行反应，得到苯甲酰胺。
路线L(烯烃易位)


简单地说，按照路线K中所述的方法进行3-烯丙基-1-(4-芳基)-哌嗪 的还原性烷基化反应：在乙醇和甲苯中将哌嗪类似物、1当量的苯并三唑 和1当量的任选取代的苯甲醛一起进行加热。约20分钟后浓缩溶液。将 残留物溶解于THF中，然后用2.5当量的溴代乙烯基镁进行处理。然后 进行水性有机物洗提，并用制备性TLC纯化，获得了二乙烯基产物。将 二乙烯基化合物溶解于二氯甲烷中成为0.05M的溶液，加入0.1当量的 Grubb’s催化剂，苯亚甲基-二(三环己基膦)二氯化钌。在室温下搅拌进 行反应(如18小时)，过滤并用制备性TLC纯化。
路线M(吡嗪[1，2-a]喹喔啉-5-酮衍生物)


简单地说，使硝基取代的芳基环连接到哌嗪酯(1)上，得到化合物 2。还原硝基取代基生成胺(3)，然后对其进行环化。加入第二种芳香 基，得到了化合物5。任选地，可加入其它的环取代基(如生成化合物6)。 显然，上述的特定芳香族取代基仅为代表性的，而并非是用于限定可用 于本发明化合物的此类基团的范围。
在某些条件下，本发明的化合物可包括一个或多个不对称碳原子， 以使化合物能以不同的立体异构形式存在。例如，这些化合物可为外消 旋或为光学活性形式。如上所述，所有的立体异构体都含盖在本发明的 范围内。然而，理想的是获得单一的对映体(即光学活性形式)。制备 单一对映体的标准方法包括不对称合成和外消旋体的拆分。外消旋体的 拆分可采用常规的方法，如在拆解试剂的存在下结晶，或采用具有如手 性HPLC柱的色谱法来实现。如上所述，对具有α-甲基苄基基团(R3 为甲基，R4为氢)的化合物，优选R对映体。此类化合物的不对称合成 可通过采用路线D和实施例1中所述的方法实现。
如上所述，本发明涵盖了此处所述化合物的药学可接受的盐。本发 明中，“药学可接受的盐”是酸式盐或碱式盐，本领域内通常认为其适 合用于与人类或动物的组织相接触，而不产生过度的毒性，刺激性，敏 感反应或其它问题或并发症。此类盐包括碱性残留物如胺的有机酸盐和 无机酸盐，以及酸性残留物如羧酸的碱盐或有机盐类。特定的药用盐包 括但不限于酸盐如盐酸，磷酸，氢溴酸，苹果酸，羟基乙酸，富马酸， 硫酸，氨基磺酸，对氨基苯磺酸，甲酸，甲基苯磺酸，甲磺酸，乙二磺 酸，2-羟基乙基磺酸，硝酸，苯甲酸，2-酰氧基苯甲酸，柠檬酸，酒石酸， 乳酸，硬脂酸，水杨酸，谷氨酸，抗坏血酸，棕榈酸(pamoic)，琥珀酸， 富马酸，马来酸，丙酸，羟基马来酸，氢碘酸，苯乙酸，链烷酸例如乙 酸，n为0-4的HOOC-(CH2)n-COOH等等的盐类。类似地，药学上可接 受的阳离子包括但不限于钠，钾，钙，铝，锂和铵离子。本领域的技术 人员能进一步识别用于本发明化合物的药学上可接受的盐，包括 Remington’s Pharmaceutical Sciences，17th ed.，Mack Publishing Company， Easton，PA，p.1418(1985)中所列出的盐。因此，本公开应该被解释为包括 所有特别举出的化合物的药学上的盐。
可用多种合成方法制备药学可接受的盐。一般来说，可用任何常规 的化学方法从含有碱或酸部分的母体化合物制备药学上可接受的盐。简 单地说，可通过将这些化合物的游离酸或碱的形式与化学剂量的合适的 碱或酸在水或有机溶剂，或两者的混合物中反应；通常，优选非水性介 质如醚、乙酸乙酯、乙醇、异丙醇或乙腈。
本发明中化合物的前药可通过修饰化合物中的官能团这一方法而制 备，修饰体可断裂离开生成母体化合物。前药包括其中羟基、氨基或巯 基连接到任何基团的化合物，当对哺乳动物患者给药时，分别断开形成 了游离羟基，氨基或巯基。前药的例子包括但不限于本发明化合物内的 醇或胺官能团的乙酸酯、甲酸酯和苯甲酸酯衍生物。优选的前药包括酰 化的衍生物。本领域的普通技术人员能识别多种可用来制备本发明化合 物的前药的合成方法。
可用任何合适的方法可使其它部分和化合物缔合。采用化合物或其 它部分上的合适官能团(如羟基，羧基，巯基或氨基基团)，通常可实 现共价连接。举例来说，亲核基团如氨基或巯基，可能与一个含有羰基 基团的化合物如酸酐或酰卤反应，或与另一个具有含良好离去基的烷基 基团的化合物(如卤代物)发生反应。双官能基、多官能基和/或可离去连 接物的采用对于某些应用也是理想的。此类连接物在本领域中是公知的。 与载体相缔合的化合物可为共价连接，或优选此类缔合不包括共价作用 而是由混合实现的。
采用含有至少一个放射性同位素原子，如碳(优选14C)，氢(优选 为3H)，硫(优选为35S)或碘(优选为125I)的前体进行合成，可对化 合物进行放射性标记。此类放射性标记的化合物的合成可通过放射性同 位素供体方便地实现，该类放射性同位素供体专用于放射性标记探针化 合物的常规合成中，如Amersham Corporation，Arlington Heights，IL； Cambridge Isotope Laboratories，Inc.Andover，MA；SRI International， Menlo Park，CA；Wizard Laboratories，West Sacramento，CA；ChemSyn Laboratories，Lexena，KS；American Radiolabeled Chemicals，Inc.，St.Louis， MO；以及Moravek Biochemicals Inc.，Brea，CA.氚标记的化合物也可通 过在氚化的乙酸中进行铂催化交换，在氚化的三氟乙酸中进行酸催化交 换，或用氚气进行的不均匀催化交换方便地制备得到。此类制备也可通 过任何上述用化合物作为基质的供体进行常规的放射性标记而方便地实 现。此外，某些前体可用氚气进行氚-卤素交换，进行不饱和键的氚气还 原，或采用硼氚化钠还原。
药物组合物
本发明还提供了药物组合物，其包括本文所述的MCH受体调控因 子，以及至少一种生理学上可接受的载体或赋形剂。药物组合物可能包 括有水，缓冲剂(如中性缓冲盐或磷酸缓冲盐)，乙醇，矿物油，植物 油，二甲基亚砜，碳水化合物(如葡萄糖，甘露糖，蔗糖或葡聚糖)， 甘露醇，蛋白质，辅剂，多肽或氨基酸如甘氨酸，抗氧化剂，鳌合剂如 EDTA或谷吡啶和/或防腐剂。优选的药物组合物被制成通过口服输送到 人体或其它动物(如陪伴型动物如狗)的形式。
如果需要，也可包括其它活性组分。例如，用于治疗进食失调，特 别是肥胖症和易饿病的组合物，可进一步包括瘦素，瘦素受体激动剂， 黑皮质素受体4(MC4)激动剂，西布曲明，右芬氟拉明，生长激素促分 泌素，β-3激动剂，5HT-2激动剂，食欲素拮抗剂，神经肽Y1或Y5拮 抗剂，甘丙素拮抗剂，CCK激动剂，GLP-1激动剂和/或促肾上腺皮质激 素-释放激素激动剂。
药物组合物可被制剂成任何合适给药的形式，包括如局部、口服、 鼻内、直肠或非肠道给药。本发明中的术语非肠道包括皮下，皮内，血 管内(如静脉内)，肌内，脊柱，颅骨内，胸内和腹膜内注射，以及任 何相似的注射或灌注技术。在某些实施方式中，组合物优选为适合用于 口服的形式。这些形式包括有片剂，锭剂，糖锭，水性或油性悬浮液， 可分散的粉末或颗粒，乳液，硬或软胶囊，或糖浆或酏剂。而在其它实 施方式中，本发明的组合物可制成冻干剂。
用于口服的组合物还可进一步包括一种或多种组分，如甜味剂、调 味剂、着色剂和防腐剂，以提供吸引人和可口的制剂。片剂包括与适合 于制造片剂的生理学上可接受的赋形剂预先混合的活性成分。此类赋形 剂包括有惰性稀释剂(如碳酸钙，碳酸钠，乳糖，磷酸钙或磷酸钠)， 成粒剂和崩解剂(如玉米淀粉或褐藻酸)，粘合剂(如淀粉，明胶或阿 拉伯树胶)以及润滑剂(如硬脂酸镁，硬脂酸或滑石)。片剂可为未包 衣的，或用公知技术包衣的，以延缓在胃肠道中的分解和吸收，从而提 供长时期的缓释作用。例如，可采用延时材料如单硬脂酸甘油酯或二硬 脂酸甘油酯。
用于口服的制剂可为硬明胶胶囊，其中活性成分与惰性固体稀释剂 (如碳酸钙，磷酸钙或高岭土)相混合，或为软明胶胶囊，其中活性成 分与水或油介质(如花生油、液体石蜡或橄榄油)相混合。
水性悬浮液包括与合适于制造水性悬浮液的赋形剂预先混合的活性 材料。此类赋形剂为悬浮剂(如羧甲基纤维素钠、甲基纤维素、氢化丙 基甲基纤维素、藻酸钠、聚乙烯吡咯烷酮、龙须胶和阿拉伯树胶)；以 及分散或润湿剂(如天然存在的磷脂如卵磷脂，氧化乙烯和脂肪酸如聚 氧乙烯硬脂酸酯的缩合产物，氧化乙烯和长链脂肪醇如十七乙烯氧基鲸 蜡醇(heptadecaethyleneoxycetanol)的缩合产物，氧化乙烯和由脂肪酸与己 糖醇如聚氧乙烯山梨糖醇单油酸酯衍生的部分酯的缩合产物，或氧化乙 烯和从脂肪酸与己糖醇酐如聚乙烯山梨糖醇酐单油酸酯衍生的部分酯的 缩合产物)。含水悬浮液还可包括一种或多种防腐剂，如p-羟基苯甲酸乙 酯或正丙酯，一种或多种着色剂，一种或多种调味剂，以及一种或多种 甜味剂如蔗糖或糖精。
油性悬浮液可通过将活性成分悬浮在植物油(如花生油、橄榄油、芝 麻油或椰子油)或矿物油如液体石蜡中制备而得。油性悬浮液可包括增稠 剂如蜂蜡、硬石蜡或鲸蜡醇。甜味剂如上述甜味剂，和/或可加入调味剂 以提供可口的口服制剂。此类悬浮液可通过加入抗氧化剂如抗坏血酸加 以保存。
适于制备加入水的水性悬浮液的可分散粉末或颗粒，提供了与分散 或润湿剂，悬浮剂和一种或多种防腐剂预先混合的活性成分。合适的分 散剂或润湿剂及悬浮剂的示例如上述提到的例子。也可存在其它的赋形 剂，如甜味剂，调味剂和着色剂。
药物组合物也可为水包油的乳液形式。油相可为植物油(如橄榄油或 落花生油)或矿物油(如液体石蜡)或其混合物。合适的乳化剂可为天然 存在的胶(如阿拉伯树胶或龙须胶)，天然存在的磷脂(如大豆磷脂， 卵磷脂，以及从脂肪酸和己糖醇衍生的酯或部分酯)，酸酐(如山梨糖 醇酐单油酸酯)以及从脂肪酸和己糖醇衍生的部分酯和氧化乙烯的缩合 产物(如聚氧化乙烯山梨糖醇酐单油酸酯)。乳液可含有甜味剂和/或调 味剂。
糖浆和酏剂可与甜味剂如甘油，丙二醇，山梨糖醇或蔗糖一起制剂。 此类制剂可包括一种或多种缓和剂，防腐剂，调味剂和/或着色剂。
药物组合物可被制成可无菌注射的水性或油性悬浮液。取决于所采 用的载体以及浓度，调控因子可被悬浮于或被溶于载体中。此类组合物 可按照公知技术，采用合适的分散剂，润湿剂和/或如上所述的悬浮剂制 备而得。能采用的可接受的载体或溶剂为水，1，3-丁二醇，Ringer’s溶剂 和等压氯化钠溶液。此外，可采用无菌、不易挥发的油作为溶剂或悬浮 介质。为此目的可采用无刺激性、不易挥发的油，包括合成的单-或二甘 油酯。此外，制备可注射的组合物中可采用脂肪酸如油酸，且载体中可 溶解辅剂如局部麻醉剂，防腐剂和/或缓冲剂。
调控因子也可制成栓剂的形式(如用于直肠给药)。此类组合物可 通过使药物和合适的非刺激性赋形剂相混合而制得，所述的赋形剂在常 温下为固体，而在直肠温度下为液体，因此在直肠处会溶解释放出药物。 合适的赋形剂包括可可脂和聚乙二醇。
为对非人类的动物给药，可将组合物加到动物的饲料或饮用水中。 可方便地制备动物饲料和饮用水组合物，以使动物随着食物一起摄取合 适量的组合物。将组合物作为添加到饲料或饮用水中的预混物提供也很 方便。
药物组合物也可被制成缓释制剂(即例如一种在给药后缓慢释放调 控因子的方式作用的制剂)。此类制剂通常采用公知的技术制备，且通 过如口服，直肠或皮下注入，或通过在希望的目标位置注入的方式进行 给药。在此类制剂中采用的载体是生物相容的，且可为生物可降解的， 优选制剂提供相对稳定水平的调控因子释放。缓释制剂中调控因子的量 取决于注入的位置、速度和预期的释放周期，以及被治疗或预防的病症 的性质。
药物组合物中的调控因子通常以治疗有效量存在。治疗有效量是指 导致可辨别的疗效，例如增长与本文中所述的致病MCH受体相关的疾病 或症状的愈合。优选的浓度为足以抑制体内MCH结合到MCHR1受体的 浓度。组合物提供的剂量范围优选每天每公斤体重约0.1mg到约140mg (每天每患者约0.5mg到约7g)。随着治疗主体和给药特定形式的变化， 可与载体材料联合形成单剂量形式的活性成分的量可能会有所不同。剂 量单位形式一般包括从约1mg到约500mg之间的活性成分。然而应该理 解，对任何特殊患者的最佳剂量取决于多种因素，包括采用的特定化合 物的活性、年龄、体重、健康状况、性别和病人的胃口、给药时间和途 径、排泄速度、任何同步的治疗如联合给药；以及正在治疗的特定疾病 的严重程度。可采用常规试验和本领域公知的方法来确定最佳剂量。
药物组合物可进行包装，治疗相应于黑色素浓集的激素受体调节的 病症(例如，治疗代谢失调如糖尿病，心脏疾病，中风，进食失调如肥 胖症或易饿病，或性疾病如性快感缺乏或心理性阳痿)。包装的药物组 合物包括包装物，其盛有如本发明所述的治疗有效量的至少一种MCH受 体调控因子，以及指示(如标签)，其表明所含的组合物用于治疗与病 人的MCH受体调节的相关疾病。
在某一方面，本发明提供了抑制与致病MCH受体相关的疾病或病症 的发展的方法。话句话说，本发明提供的治疗方法可用于治疗疾病，或 可用于防止或延迟此类疾病在病人中发生，该病人未患有可检测到的与 致病MCH受体相关的疾病。无论局部存在的MCH的量为多少，如果特 征表现为MCH受体受到不合宜的刺激，则本发明中的疾病或病症“与致 病性MCH受体相关”。此类病症包括有代谢失调(如糖尿病)，心脏病， 中风，进食失调(如肥胖症和易饿病)，或性疾病如性快感缺乏或心理 性阳痿。这些病症可通过采用本领域中己建立的标准进行诊断。病人包 括人类，驯化的陪伴型动物(宠物如狗)以及牲畜，采用上述的剂量和 治疗法进行治疗。
剂量频率随着采用的化合物和被治疗或预防的特定疾病不同而有所 不同。一般来说，为治疗大多数的疾病，优选剂量疗法为每天4次或更 少。为治疗包括肥胖症的进食失调，特别优选每天1到2次的剂量疗法。 为治疗阳痿，希望采用能快速达到有效浓度的单剂量。然而应该理解， 对于任何特定患者的特定剂量取决于多种因素，包括采用的特定化合物 的活性，患者年龄，体重，一般健康状况，性别，胃口，给药时间，给 药途径，排泄速度，联合给药，以及正在治疗的特定疾病的严重程度。 一般来说，优选采用足以提供有效治疗的最小剂量。可采用本领域普通 技术人员公知的适合于被治疗或预防的病人的方法，可对病人进行一般 性的监测。
在另一方面，本发明提供了多种本发明的组合物在体内的应用。例 如，此类化合物可用作检测和定位存在于如组织部分的样品中的MCH受 体，作为受体活性试验中的阳性对照物，作为测定候选试剂结合MCH受 体的能力的标准和试剂，或作为正电子发射段层造影(PET)成像或单光 子发射计算机化段层造影(SPECT)的放射性示踪剂。此类试验可被用 于表征活体中的MCH受体。此类化合物也可用作测定潜在药物结合到黑 色素浓集激素受体的能力的标准和试剂。
为测定样品中存在或缺乏MCH受体的方法中，样品应和本发明化合 物在允许化合物结合到MCH受体上的条件下进行孵育。然后测定结合到 样品中MCH受体上的化合物的量。例如，采用多种公知技术中的一种对 化合物进行标记(例如，用放射性核素如本发明所述的氚进行放射性标 记)，并与样品一起孵育(样品可为培养细胞的制品，组织制品或其片 断)。适宜的孵育时间通常取决于对一段时间内发生的结合程度的测试 结果。孵育后，除去未结合的化合物，并采用任何可用的标记方法(如 对于放射性标记的化合物的放射自显影术或闪烁计数法)检测结合的化 合物。作为对照，可同时将相符的样品与放射性标记的化合物以及大量 的未标记的化合物相接触。然后以相同的方式除去未结合的标记和未标 记的化合物，检测结合的标记物。试验的样品中可检测到的标记物比对 照样品中的标记物多得多，这表明样品中存在有辣椒素受体。检测试验， 包括对培养的细胞或组织样品中MCH受体的放射自显影术(受体作图)， 可按照Kuhar在Current Protocols in Pharmacology(1998)John Wiley& Sons，New York的8.1.1到8.1.9部分的描述方法进行。
本发明提供的调控因子也可用于多种公知的细胞培养和细胞分离方 法。例如，调控因子可连接到组织培养皿或其它细胞培养物载体的内表 面，来固定MCH受体-表达细胞，用于筛选，分析和在培养物中生长。 此类连接可用任何合适的技术实现，如上述的方法以及其它的标准技术。 调控因子也可促进在体内细胞的识别和分选，其允许挑选表达MCH受体 的细胞。优选地，用于此类方法中的调控因子被本发明所述的方法进行 标记。在一种优选实施方式中，连接到荧光标记物如荧光素的调控因子 与细胞相接触，然后采用荧光活化细胞分选法(FACA)进行分析。
另一方面，本发明中在体内或体外对MCH与MCH受体的结合进行 调节的方法，包括使MCH受体和足量的本发明的调控因子在适于将 MCH结合到受体的条件下相接触。优选地，在此类方法中，MCH与受 体的结合受到调控因子的抑制。MCH受体可存在于溶液、培养的或离析 的细胞制剂，或患者体内。优选地，MCH受体为存在于下丘脑中的 MCHR1受体。一般来说，例如在实施例2所述的结合试验中，与受体相 接触的化合物的量应该足以在体内调节MCH与MCH受体的结合。用于 在体内进行测定的MCH受体制剂可有多种来源，如此处所述，如来自于 被MCH受体表达载体转染的HEK293细胞或Chinese Hamster Ovary (CHO)细胞。
本发明还提供了通过使体内或体外的MCH受体与足量的上述调控 因子在适于使MCH结合到和受体上的条件下接触，从而调节细胞的 MCH受体的信号-转换活性的方法。优选地，在该方法中，信号转换活 性受到了调控因子的抑制。MCH受体可存在于溶液，培养的或离析的细 胞制剂，或患者体内。一般来说，例如在实施例3所述的钙移动试验中， 与受体相接触的调控因子的量应该足以调节体内MCH受体信号转换活 性。可采用标准技术，如细胞内的膜片箝记录或膜片箝记录，评估信号 转换活性结果，其为细胞电生理学变化的指标。如果受体存在于动物中， 细胞的电生理学变化可由于动物进食行为的变化被检测到。
以下提供的实施例是阐释性，而并非是限定性的。除非特别指出， 所有的试剂和溶剂都是标准的商业级，使用时无需进一步提纯。
实施例
实施例1
代表性1-苄基-4-芳基哌嗪的制备
本实施例阐述了代表性1-苄基-4-芳基哌嗪的合成方法。显然，采用 多种起始化合物，可通过这些方法制备非常多的此类化合物。本实施例 中参照的路线均引自上述的路线A-K。
I.由路线A制备1-(5-溴-6-甲氧基吡啶-2-基)-4-(3，4-二甲氧基苄基) 哌嗪

将0.1g(0.4mmol，leq)的1-(5-溴-6-甲氧基吡啶-2-基)哌嗪和0.061g (0.4mmol，leq)的3，4-二甲氧基苯甲醛溶解在5ml无水甲苯中，加入3 滴冰醋酸。向溶液中加入过量的NaBH(OAc)3并在氮气氛中于室温下搅 拌，直到用TLC检测不到起始原料。此时用饱和NaHCO3溶液猝灭反应， 并用乙酸乙酯进行洗提。用无水MgSO4干燥乙酸乙酯的洗提物，并在真 空中进行浓缩。残留物在SiO2上用10％的CH3OH(2M NH3)/CH2Cl2进行色谱纯化，得到1-(5-溴-6-甲氧基吡啶-2-基)-4-(3，4-二甲氧基苄基)哌 嗪(化合物1)。分析：1H NMR(400MHz，DMSO)：7.71(1H，d)，7.36 (1H，s)，7.05(2H，m)，6.39(1H，d)，4.38(4H，m)，3.80(9H，m)， 3.39(4H，m)，3.02(2H，m)。MS(LC-MS)：C19H24BrN3O3的计算值422.32， 测定值436.3424.31(M+2)。
II.由路线B制备1-(4-氯-3-三氟甲基-苯基)-4-[1-(3，4-二甲氧基-苯 基)-乙基]-哌嗪

将0.17g(0.6mmol，leq)的1-(4-氯-3-三氟甲基-苯基)-哌嗪和0.1g (0.6mmol，leq)的3，4-二甲氧基苯乙酮以及2ml Ti(OiPr)4一起加热到 70℃达2小时。反应溶液冷却到室温，加入20ml无水甲醇，然后加入 1.0gNaBH4，并在室温下搅拌得到的溶液达2小时。用1N NaOH溶液猝 灭反应，并用CH2Cl2进行洗提。用无水MgSO4干燥CH2Cl2的洗提物， 并在真空中进行浓缩。具有乙基的残留物在SiO2上进行色谱纯化，得到 1-(4-氯-3-三氟甲基-苯基)-4-[1-(3，4-二甲氧基-苯基)-乙基]-哌嗪(化合物 2)。分析：1H NMR(400MHz，CDCl3)：7.31(1H，d)，7.19(1H，m)， 6.90(4H，m)，3.89(6H，d)，3.38(1H，m)，3.20(4H，m)，2.61(4H， m)。MS(LC-MS)：C21H24ClF3N2O2的计算值428.88，测定值429.30(M+)。
III.由路线C制备3-{1-[4-(4-溴-3-甲氧基-苯基)-哌嗪-1-基]-乙基}- 喹啉

将含有3-喹啉羧基醛(25mg，0.16mmol，1.0eq)，苯并三唑(19mg， 0.16mmol，1.0eq)以及1-(4-溴-3-甲氧基-苯基)-哌嗪(39mg，0.17mmol， 1.1当量)的乙醇(1ml)和甲苯(2ml)溶液在60℃加热20分钟，然后 浓缩溶液。残留物与甲苯一起共蒸发，然后溶解于THF中并用浓度为 3.0M的溴代甲基镁的二乙醚溶液(0.13ml，0.4mmol，2.5eq)进行处理。 反应物在室温下搅拌18小时。用醋酸乙酯稀释反应物并用1N NaOH，盐 水洗涤两次，干燥(MgSO4)，过滤并浓缩。残留物用制备性TLC纯化， 得到3-{1-[4-(4-溴-3-甲氧基-苯基)-哌嗪-1-基]-乙基}-喹啉(化合物3)。 收率：41mg，81％。分析：1H NMR(400MHz，CDCl3)：8.96(1H，s)，8.08 (2H，m)，7.82(1H，d)，7.70(1H，t)，7.56(1H，t)，7.34(1H，t)， 6.45(1H，m)，6.36(1H，dd)，3.85(3H，s)，3.68(1H，q)，3.18(4H， m)，2.73(2H，m)，2.60(2H，m)，1.54(3H，d)。MS(LC-MS)：C22H24BrN3O的计算值426.11，测定值426.14，M+2。
IV(R)-1-(4-氯-3-甲氧基-苯基)-4-[1-(3，4-二甲氧基-苯基)-乙基]-哌嗪

将40g(0.22mol，leq)的1-(3，4-二甲氧基-苯基)-乙酮，35g(0.22mol， leq)的哌嗪-1羧酸乙酯和125ml(0.44mol，2.0当量)的异丙基钛(IV) 在氮气氛中于室温下搅拌过夜。将反应混合物冷却到0℃，加入200ml 的MeOH，然后仔细加入9.1g的NaBH4。室温下搅拌混合物过夜。用250ml 的1N NaOH猝灭反应并用二氯甲烷洗提。用盐水洗涤洗提物，用Na2SO4干燥，并浓缩得到70g黄色油状物。
将原油和100g KOH溶解在250mL乙醇和125mL水中。将混合物 回流加热过夜。除去溶剂，将残余物溶解在1N HCl中，然后用乙酸乙酯 洗提。用盐水洗涤洗提物，用Na2SO4干燥，并浓缩得到黄色油状物(38g， 65％)。分析：MS(LC-MS)：C14H22N2O2的计算值250.17，测定值251.27 (M+)。
将39g(0.15mol，leq)的1-[1-(3，4-二甲氧基-苯基)-乙基]-哌嗪溶解 于150ml的叔丁基甲醚和150ml的甲醇中，然后加热到45℃。在该溶液 中缓慢加入被加热至40℃，且溶于50ml叔丁基甲基醚和30ml甲醇的 11.7g(.076mol，0.5eq)L-酒石酸。缓慢冷却并维持在室温下过夜后，过 滤收集白色沉淀物，得到了26g固体产物。固体在300ml 90％的甲醇-水 中重结晶两次，得到白色固体12g，其被转化为7.4g游离碱(回收率38 ％)。分析：1H NMR(300MHz，CDCl3)：6.86(1H，s)，6.79(2H，d)， 3.85(6H，d)，3.24(4H，t)，2.84(4H，t)，2.35(4H，m)，1.32(3H， d)。MS(LC-MS)：C14H22N2O2的计算值250.17，测定值251.27(M+)。用 产物的Mosher’s酰胺衍生物鉴定产品的手性纯度为100％，并用手性 HPLC进行检测。
将4.2g(17mmol，1.2eq)的(R)-1-[1-(3，4-二甲氧基-苯基)-乙基]-哌 嗪和4.4g(20mmol，1.2eq)的5-溴-2-氯-苯甲醚溶解于110ml的无水甲 苯中，然后用N2清洗该溶液20分钟。向溶液中依次加入0.33g(0.5mmol， 0.03eq)rac-2，2’-二(二苯基-膦)-1，1’-联萘基(binapphtyl)，0.031g (0.34mmol，0.02eq)三(二亚苄基丙酮)-二钯(0)和2.4g(22mmol， 1.3eq)叔-丁氧基钾。混合物在氮气氛中加热至80℃过夜。冷却之后， 用硅藻土过滤反应物。用1N NaOH和盐水洗涤有机溶液，用NaSO4干燥 并浓缩。在硅胶上，残留物用以1∶1乙酸乙酯：己烷洗脱的快速色谱法 纯化，得到棕色的油状物。将该产品(化合物4)转化为其盐酸盐，得到黄 色固体(4.1g，53％)。Mp：172-6℃。分析：1H NMR(400MHz，DMSO)： 11.8(1H，s)，9.2(1H，s)，7.48(1H，s)，7.21(1H，d)，7.12(1H，dd)， 6.99(1H，d)，6.68(1H，d)，6.59(1H，dd)，4.42(1H，t)，3.80(12H， m)，3.39(1H，t)，3.19(1H，t)，2.99(3H，m)，1.73(3H，d)。 MS(LC-MS)：C21H27ClN2O3的计算值390.90，测定值391.38(M+)。
V.由路线E制备(6R，10S)-2-(4-氯-3-甲氧基-苯基)-6-(3，4-二甲氧基- 苯基)-八氢-吡啶并[1，2-a]吡嗪

将固体的碳酸氢二-叔丁酯(16.68g，76.43mmol，1.10eq)在超过 30分钟的时间内以等分试样加入到溶解于1N NaOH(140ml)和二噁烷 (140ml)的L-2-氨基-戊-4-烯酸(8.0g，69.48g，1.0eq)的冰冷溶液中。 移去冰浴，在室温下搅拌反应达4小时。浓缩反应溶液。在冰上冷却水 性残留物，用EtOAc分层，然后用冰冷的1N HCl酸化至pH值为2。用 EtOAc洗提含水残留物两次。用盐水洗涤合并的EtOAc提取物两次，通 过MgSO4干燥，过滤并浓缩得到清澈的液体(14.9g，100％收率)。分 析：1H NMR(400MHz，CDCl3)：5.72(1H，m)，5.18(2H，m)，5.06(1H， 宽d)，4.38(1H，m)，2.54(2H，m)，1.38(9H，s)。MS(LC-MS)：基 峰116，M+1-CO2C(CH3)3。
将溶于吡啶(20ml)的L-2-叔丁氧基羰基氨基-戊-4-烯酸(1.55g， 7.23mmol.，1.0当量)，氯化1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺(EDCI， 1.525g，7.95mmol，1.1当量)，4-氯-3-甲氧基苯胺(1.135g，7.23mmol， 1.0当量)的溶液在室温下搅拌18小时。浓缩反应物。用EtOAc稀释残 留物并用水洗涤。用EtOAc洗提水溶液。用盐水洗涤合并的EtOAc洗提 物，用MgSO4干燥，过滤并浓缩。用二乙基醚研磨残留物。过滤收集浅 褐色的固体(1.85g，5.21mmol，72％收率)。分析：1H NMR(400MHz， CDCl3)：8.5(1H，宽s)，7.49(1H，d)，7.22(1H，m)，6.79(1H，dd)， 5.83(1H，m)，5.23(2H，m)，5.00(1H，宽s)，4.28(1H，m)，3.89 (3H，s)，2.57(2H，m)，1.25(9H，s)。MS(LC-MS)：C17H23ClN2O4的计算值354.1，测定值355.25(M+)。
向溶于甲苯(112ml)的(S)[1-(4-氯-3-甲氧基-苯基氨基甲酰基)-丁-3- 烯基]-氨基甲酸叔丁酯(7.75g，22.40mmol，1.0当量)的冰冷溶液中加 入浓度为0.5M的铝烷-N，N-二甲基乙基胺络合物的甲苯溶液(141ml， 70.56mmol，3.13mmol)。添加完毕之后，在室温下搅拌反应达18小时。 在0℃加入1N NaOH猝灭反应。用硅藻土过滤混合物，并用EtOAc洗提 3次。用盐水洗涤EtOAc洗提物，用MgSO4干燥，过滤，浓缩并与甲苯 一起共蒸发。通过同样的方法，采用反应粗产物，甲苯(112ml)和浓度 为0.5M的铝烷-N，N-二甲基乙基胺络合物的甲苯溶液(70ml，35.0mmol， 1.56当量)对残留物重复铝烷还原反应。经过相同的方法获得的最终产 物为油状物(7.62g，22.35mmol，100％收率)。分析：1H NMR(400MHz， CDCl3)：7.09(1H，d)，6.21(1H，宽s)，6.14(1H，dd)，5.78(1H，m)， 5.18(2H，m)，4.50(1H，宽s)，4.23(1H，宽s)，3.88(3H，s)， 3.18(2H，m)，2.32(2H，m)，1.39(9H，s)。MS(LC-MS)：C17H25ClN2O3的计算值340.16，测定值341.25(M+)。
向EtOAc(95ml)和饱和碳酸氢钠(122ml)中含有(S)-{1-[(4-氯-3- 甲氧基-苯基氨基)-甲基]-丁-3-烯基}-氨基甲酸叔丁酯(7.00g，20.53mmol， 1.0eq)的冰冷两相溶液中加入氯代乙酰氯(1.96ml，24.64mmol，1.2eq) 溶液。添加完毕之后，在室温下搅拌反应30分钟。分层，用EtOAc洗提 溶液。用盐水洗涤合并的EtOAc提取物，用MgSO4干燥，过滤并浓缩得 到油状物(7.58g，18.22mmol，收率89％)。分析：1H NMR(400MHz， CDCl3)：7.42(1H，d)，7.02(1H，宽s)，6.82(1H，m)，5.70(1H，m)， 5.09(2H，m)，4.80(1H，d)，4.30(1H，m)，3.94(4H，m)，3.80(2H， s)，3.11(1H，m)，2.20(2H，m)，1.42(9H，s)。MS(LC-MS)：C19H26Cl2N2O4的计算值416.13，测定值417.19(M+)。
向含有(S)-({1-[(2-氯-乙酰基)-(4-氯-3-甲氧基-苯基)-氨基]-甲基}-丁 -3-烯基)-氨基甲酸叔丁酯(7.58g，18.22mmol，1.0eq)的冰冷溶液中滴加 三氟乙酸。在冰上搅拌反应达30分钟。浓缩反应物。残留物溶解于DMF (455ml)和三乙胺(12.75ml，90.91mmol，5.0eq)中，并在50℃下搅 拌5小时之后，浓缩反应物。通过酸碱洗提除去残留物中的中性副产物。 残留物在1N HCl和EtOAc之间进行分配。用EtOAc洗提水溶液，丢弃 EtOAc提取物部分。碱化水溶液，并用二氯甲烷进行洗提。用MgSO4干 燥二氯甲烷提取物，过滤并浓缩得到油状物(4.0g，14.28mmol，1.0当 量，收率78％)。分析：1H NMR(400MHz，CDCl3)：7.36(1H，d)，6.85 (1H，m)，6.77(1H，dd)，5.78(1H，m)，5.19(2H，m)，3.90(3H， s)，3.73(2H，dd)，3.50(2H，m)，3.22(1H，m)，2.29(2H，m)。 MS(LC-MS)：C14H17Cl2N2O2的计算值280.10，测定值281.15(M+)。
向甲苯(50ml)中含有(S)5-烯丙基-1-(4-氯-3-甲氧基-苯基)-哌嗪-2-酮 (4.00g，14.28mmol，1.0当量)的冰冷溶液中滴加入，浓度为0.5M的铝烷 -N，N-二甲基乙胺络合物的甲苯溶液(86ml，42.86mmol，3.0当量)。滴 加完毕之后，在室温下搅拌反应过夜达18小时。用1N NaOH在0℃猝灭 反应，用EtOAc洗提两次，二氯甲烷洗提2次。用MgSO4干燥有机提取 物，过滤并浓缩得到油状物(3.80g，14.28mmol，收率100％)。分析： 1H NMR(400MHz，CDCl3)：7.20(1H，d)，6.48(1H，m)，6.43(1H，dd)， 5.82(1H，m)，5.14(2H，m)，3.88(3H，s)，3.47(2H，d)，3.12(1H， m)，2.96(1H，dt)，2.90(1H，m)，2.89(1H，dt)，2.45(1H，t)， 2.26(1H，m)，2.22(1H，m)。MS(LC-MS)：C14H19ClN2O的计算值266.12， 测定值267.19(M+)。
将含有(S)-3-烯丙基-1-(4-氯-3-甲氧基-苯基)-哌嗪(3.81g，14.28mmol， 1.0eq)和碳酸氢二-叔丁酯(3.428g，15.71mmol，1.1eq)的THF溶液(71ml) 在室温下搅拌达18小时。然后将溶液浓缩为油状物(5.23g，14.28mmol， 收率100％)。分析：1H NMR(400MHz，CDCl3)：7.19(1H，d)，6.45(1H， m)，6.38(1H，dd)，5.82(1H，m)，5.11(2H，m)，4.23(1H宽s)， 4.00(1H，m)，3.87(3H，s)，3.42(2H，m)，3.19(1H，m)，2.84(1H， dd)，2.74(1H，dt)，2.50(2H，m)，1.48(9H，s)。MS(LC-MS)：C19H27ClN2O3的计算值366.17，测定值367.18(M+)。
向DMF(39ml)和水(5.5ml)中含有(S)-2-烯丙基-4-(4-氯-3-甲氧基- 苯基)-哌嗪-1-羧酸叔丁基酯(5.23g，14.28mmol，1.0当量)的溶液中加入 氯化钯(II)(2.616g，14.75mmol，1.03当量)和氯化亚铜(I)(1.460g， 14.75mmol，1.03当量)。向溶液中鼓入氧气气泡。在氧气气泡的存在下 于室温下搅拌反应达18小时。用硅藻土过滤混合物。滤液在EtOAc和水 之间进行分配。用EtOAc洗提水溶液。用盐水洗涤EtOAc提取物，用 MgSO4干燥，过滤并浓缩。在硅凝胶上，用50％EtOAc：己烷洗脱的快 速色谱纯化残留物。产物为黄色油状物(3.45g，9.07mmol，收率63％)。 分析：1H NMR(400MHz，CDCl3)：7.19(1H，d)，6.44(1H，m)，6.36(1H， dd)，4.61(1H，宽s)，3.99(1H，m)，3.87(3H，s)，3.48(2H，m)， 3.16(2H，m)，2.93(1H，dd)，2.88(1H，dt)，2.68(1H，m)，2.19 (3H，s)，1.60(3H，s)。MS(LC-MS)：C19H27Cl2N2O4的计算值382.17， 测定值383.17(M+)。用手性HPLC测定手性纯度。外消旋的标准表明1： 1的两个峰的混合物的滞留时间为10.64和12.13分钟。对从L-烯丙基甘 氨酸合成的酮进行的分析表明只存在10.64分钟处的一个峰，而不存在对 映体。
向溶于二氯甲烷(4ml)的(S)4-(4-氯-3-甲氧基-苯基)-2-(2-氧-丙基)- 哌嗪-1-羧酸叔丁酯(363mg，0.955mmol，1.0eq)的冰冷溶液中加入三 氟乙酸(4ml)。反应在冰上搅拌30分钟后进行浓缩。残余物溶解于甲 醇(8ml)中并在冰上冷却。向该溶液中加入3，4-二甲氧基苯甲醛(206mg， 1.24mmol，1.3当量)和6N NaOH(0.96ml，5.73mmol，6.0当量)。反 应在55℃搅拌过夜。浓缩反应物。残留物在1N NaOH和二氯甲烷之间进 行分配。用二氯甲烷洗提水溶液。通过MgSO4干燥有机提取物，过滤并 浓缩。在硅凝胶上，用2.5％甲醇/二氯甲烷洗脱的快速色谱纯化残留物。 产物为白色泡沫体(115mg，0.27mmol，收率29％)。分析：1H NMR(400 MHz，CDCl3)：7.19(1H，d)，6.86(3H，m)，6.46(1H，m)，6.41(1H，dd)， 3.91(3H，s)，3.89(3H，s)，3.87(3H，s)，3.44(2H，m)，3.30(2H， dd)，2.78(4H，m)，2.50(3H，m)，2.08(1H，td)。MS(LC-MS)：C23H27ClN2O4的计算值430.17，测定值431.15(M+)。检测到了移动相中分解得到的其 它片断产物。
向(6R，10S)2-(4-氯-3-甲氧基-苯基)-6-(3，4-二甲氧基-苯基)-八氢-吡啶 并[1，2-a]吡嗪-8-酮(38g，0.09mmol，1.0当量)的溶液中加入p-甲苯磺 酰肼(21mg，1.3当量)。反应在室温下搅拌达18小时。加入硼氢化钠 (34mg，0.89mmol，10.0当量)。反应在65℃回流下搅拌达4小时。用 10％的氯化铵猝灭反应，然后在1N NaOH和二氯甲烷之间进行分配。用 盐水洗涤有机提取物，用MgSO4干燥，过滤并浓缩。用1∶1乙酸乙酯∶ 己烷洗脱的500微米制备性TLC盘上纯化残留物。得到油状的(6R， 10S)2-(4-氯-3-甲氧基-苯基)-6-(3，4-二甲氧基-苯基)-八氢-吡啶并[1，2-a]吡 嗪(化合物5)(25mg，0.06mmol，收率67％)。分析：1H NMR(400MHz， CDCl3)：7.19(1H，d)，6.90(2H，m)，6.45(1H，m)，6.41(1Hm，dd)， 3.91(3H，s)，3.87(3H，s)，3.41(2H，m)，2.97(1H，dd)，2.75(1H， m)，2.62(1H，m)，2.37(1H，m)，2.03(1H，dt)，1.42-1.80(6H，m)。 MS(LC-MS)：C23H29Cl2N2O3的计算值416.19，测定值417.19(M+)。
VI.(6R，10S)[6-(3，4-二甲氧基-苯基)-八氢-吡啶并[1，2-a]吡嗪-2- 基]-(4-三氟甲基-苯基)-甲酮(由路线F制备)

室温下将(S)2-(4-苄基-哌嗪-2-基)-乙醇(2.2g，10mmol)溶解于无水 二氯甲烷(100ml)中。加入碳酸氢二-叔丁酯(BOC酐)(2.20g，11mmol)， 并在室温下搅拌过夜。用盐水进行稀释以猝灭反应。分离有机相并用二 氯甲烷洗涤水相。合并有机相并用盐水洗涤(2×50ml)，干燥(MgSO4)， 并过滤。减压除去溶剂得到清澈的油状物4-苄基-2-(2-羟基-乙基)-哌嗪-1- 羧酸叔丁酯(3.13g，收率98％)。MS：320(M+)。H-1NMR(400MHz， CDCl3)：7.3(5H，br)，4.28(1H，br)，4.0(1H，br)，3.8(1H，br)，3.6 (1H，br)，3.5(2H，br)，3.4(1H，m)，3.0(1H，t)，2.6-2.8(2H，br)， 2.22(1H，dd，J＝4，11.4Hz)2.02(1H，dt，J＝3.5；11.7Hz)，1.46(s，9H)。
在氮气氛(气泡)下，将(S)4-苄基-2-(2-羟基-乙基)-哌嗪-1-羧酸叔丁 酯(3.1g，97mmol)溶解于含有预先活化的4分子筛(1.0g)和4-甲基 吗啉N-氧化物(13mmol，1.5g)的无水二氯甲烷(100ml)中。加入过 镣酸四丙基铵盐(150mg，0.15mmol)开始反应。1小时后，LC/MS分析 表明无剩余的起始原料。用硅胶塞过滤黑色悬浮物，用5％甲醇溶于氯仿 的溶液洗脱得到的产品，并在减压下蒸发溶剂，得到清澈的油状物4-苄 基-2-(2-氧-乙基)-哌嗪-1-羧酸叔丁酯(2.9g，收率94％)。MS：318(M+)。 H-1NMR明显的信号(400MHz，CDCl3)：9.78(1H，t，J＝13.2Hz)，7.25(5H， s)，3.68(2H，t，3Hz)，3.48(1H，d，J＝13.2Hz)，3.36(1H，d，J＝13.2Hz)， 2.2(1H，dd，J＝4；11Hz)，2.08(1H，dt，J＝3.5，11.7Hz)，1.44(9H，s)。
在0℃，氮气(气泡)氛下，将(S)4-苄基-2-(2-氧-乙基)-哌嗪-1-羧酸 叔丁基酯(2.9g，9.1mmol)溶解于无水四氢呋喃中。滴加溴代甲基镁 (12mmol，3.0M溶于THF中的溶液，4.0ml)并在室温下反应。3小时 后，将反应物降温到0℃并滴加入饱和氯化铵溶液以猝灭反应。进行相分 离，用盐水(2×100ml)洗涤有机层，干燥(MgSO4)并过滤。减压下 蒸发溶剂得到4-苄基-2-(2-羟基-丙基)-哌嗪-1-羧酸叔丁基酯粗产物，其为 非对应异构体的混合物(2.8g，收率85％。)MS：334(M+)。H-1NMR明 显的信号(400MHz，CDCl3)：7.27(5H，s)，1.44(9H，s)，1.17和1.18(d，3H 联合峰)。
在氮气氛(气泡)下，将(S)4-苄基-2-(2-羟基-丙基)-哌嗪-1-羧酸叔丁 基酯(2.8g，97mmol)溶解于含有预先活化的4分子筛(1.0g)和4-甲 基吗啉N-氧化物(13mmol，1.5g)的无水二氯甲烷(100ml)中。加入 过钌酸四丙基铵盐(200mg，0.2mmol)开始反应。1小时后，LC/MS分 析表明无剩余的起始原料。用硅胶塞过滤黑色悬浮物，并在减压下蒸发 溶剂，得到棕色的油状物(2.7g)。用快速色谱法纯化，得到1.4g(收率 43％)的4-苄基-2-(2-氧-丙基)-哌嗪-1-羧酸叔丁酯。MS：318(M+)。H-1 NMR明显的信号(400MHz，CDCl3)：7.25(5H，s)，3.38(1H，d，J＝13.2)， 3.36(1H，d，J＝13.2Hz)，2.1(3H，s)，1.42(9H，s)。C-13NMR明显 的信号(100Hz，CDCl3)：206.8ppm。
向二氯甲烷(4ml)中含有(S)4-苄基-2-(2-羟基-丙基)-哌嗪-1-羧酸叔 丁酯(199mg，0.60mmol，1.0eq)的冰冷溶液中加入三氟乙酸(4ml)。 在0℃搅拌反应30分钟，浓缩并与甲苯一起蒸发。残留物溶解于甲醇 (5ml)中。在室温下向该溶液中加入3，4-二甲氧基苯甲醛(130mg， 0.78mmol，1.3当量)和6N NaOH(0.6ml，3.6mmol，6.0当量)。反应物 在55℃下加热15小时。在二氯甲烷和1N NaOH之间分配反应物。用二 氯甲烷洗提水相。用盐水洗涤二氯甲烷提取物，用MgSO4干燥，过滤并 浓缩。在两个1000微米的制备性TLC板上，以4％MeOH/二氯甲烷洗脱。 得到44mg顺式立体异构体(0.12mmol，收率19％)和16mg反式立体 异构体(0.04mmol，收率7％)。分析：对顺式产物的1H NMR(400MHz， CDCl3)：7.29(5H，m)，6.86(3H，m)，3.89(3H，s)，3.87(3H，3H)， 3.50(2H，m)，3.25(1H，dd)，2.67(4H，m)，2.44(2H，m)，2.28 (m，1H)，2.08(3H，m)。MS(LC-MS)：C23H28N2O3的计算值380.21， 测定值381.20(M+)。
在室温下搅拌溶于甲醇(1.0ml)中的2-苄基-6-(3，4-二甲氧基-苯基)- 八氢-吡啶并[1，2-a]吡嗪-8-酮(43mg，0.11mmol，1.0当量)和p-甲苯磺酰 肼(27mg，0.15mmol，1.3当量)达15小时。加入硼氢化钠(43mg，1.1mmol， 10.0当量)，在65℃回流下加热。TLC表明反应在5小时后完成，然后 加入另一部分硼氢化钠(52mg，1.37mmol，12当量)，在65℃下搅拌 反应18小时。在1N NaOH和二氯甲烷之间分配反应物。水相用二氯甲 烷洗提。用盐水洗涤二氯甲烷提取物，用MgSO4干燥，过滤并浓缩。在 用(4％MeOH/二氯甲烷)洗脱的500微米制备性TLC上纯化残留物， 得到14mg(6R，10S)-2苄基-6-(3，4-二甲氧基-苯基)-八氢-吡啶并[1，2-a]- 吡嗪(0.04mmol，收率38％)。分析：1H NMR(400MHz，CDCl3)：7.29(5H， m)，6.80(3H，m)，3.88(3H，s)，3.86(3H，s)，3.48(2H，m)， 2.89(1H，宽d)，2.65(2H，m)，2.54(1H，宽d)，2.22(1H，m)，2.05(1H，m)，1.96 (2H，m)，1.54(6H，m)。MS(LC-MS)：C23H30N2O2的计算值366.23， 测定值367.26(M+)。
将(6R，10S)-2苄基-6-(3，4-二甲氧基-苯基)-八氢-吡啶并[1，2-a]-吡嗪 (14mg，0.04mmol)溶液，10％Pd/C(3mg)以及甲酸铵(12mg，0.19mmol) 在回流下加热6小时。加入另一部分甲酸铵(11mg，0.17mmol)，在回 流下搅拌反应15小时。用硅藻土过滤，滤液进行浓缩。残余物溶解于二 氯甲烷(0.5ml)中，并用三乙基胺(42微升，0.19mmol，5.0当量)和 三氟甲基苯甲酰氯(4微升，0.03mmol，1.5eq)处理。在室温下搅拌反 应1小时。将反应物移入管形小瓶中，并与乙酸乙酯和1N NaOH一起摇 晃。再次采用乙酸乙酯进行洗提。浓缩乙酸乙酯提取物。残留物用250 微米的分析TLC进行纯化，得到3mg(6R，10S)[6-(3，4-二甲氧基-苯基)- 八氢-吡啶并[1，2-a]-吡嗪-2-基]-(4-氟-甲基-苯基)-甲基酮(化合物6； 0.007mmol，收率18％)。MS(LC-MS)：C24H27N2O3的计算值448.20，测 定值449.15(M+)。手性HPLC表明产物含有97％的一种对映体，3％的 相反对映体。
VII.(6R，10S)2-(4-氯-3-甲氧基-苯基)-6-(3，4-二甲氧基-苯基)-八氢- 吡啶并[1，2-a]-吡嗪-8-醇

将溶于甲醇(2ml)的(6R，10S)2-(4-氯-3-甲氧基-苯基)-6-(3，4-二甲 氧基-苯基)-八氢-吡啶并[1，2-a]-吡嗪-8-酮(20mg，0.05mmol，1.0当量) 和硼氢化钠(9mg，0.24mmol，5.1当量)在室温下搅拌90分钟。用1N NaOH猝灭反应并用二氯甲烷洗提两次。用盐水洗涤二氯甲烷提取物，干燥 (MgSO4)，过滤并浓缩得到15mg膜。得到2-(4-氯-3-甲氧基-苯基)-6-(3， 4-二甲氧基-苯基)-八氢-吡啶并[1，2-a]-吡嗪-8-醇(化合物7)的收率为75 ％。分析：1H NMR(400MHz，CDCl3)：7.19(1H，d)，6.87(3H，m)，6.44 (2H，m)，3.89(3H，s)，3.85(s，3H)，3.81(3H，s)，3.35(2H， m)，2.90(1H，dd)，2.71(3H，m)，2.38(1H，t)，2.04(3H，m)， 1.58(m，3H)。MS(LC-MS)：C23H29ClN2O4的计算值433.18，433.4。
VIII.由路线G合成8-(4-氯-3-甲氧基-苯基)-4-(3，4-二甲氧基-苯基)- 八氢-吡嗪并[1，2-c][1，4]噻嗪

向溶于甲醇(32ml)的氢氧化钾(655mg，11.68mmol，1.0eq)的冰 冷溶液中加入L-2-叔丁氧羰基氨基-3-巯基-丙酸甲酯(2.64ml，12.85mmol， 1.1eq)。在冰上搅拌反应10分钟。向反应溶液中加入2-氯-1-(3，4-二甲 氧基-苯基)-乙酮(2500mg，11.68mmol，1.0当量)，然后加入THF(7ml)。 在冰上搅拌反应达4小时。浓缩溶液，残留物用二氯甲烷洗提。用MgSO4干燥二氯甲烷的提取物，过滤并浓缩。在硅胶上，用25％乙酸乙酯∶己 烷洗脱的快速色谱法纯化残留物，得到油状物2-叔丁氧基羰基氨基 -3-[2-(3，4-二甲氧基-苯基)-2-氧-乙基巯基(sulfanyl)]-丙酸甲酯(4.72g，收 率98％)。分析：1H NMR(400MHz，CDCl3)：7.55(2H，m)，6.88(1H，d)， 5.43(1H，宽d)，4.57(1H，m)，3.95(3H，s)，3.93(3H，s)，3.85 (2H，s)，3.73(3H，s)，3.00(2H，dp)，1.41(9H，s)。MS(LC-MS)： C19H27NO7S的计算值414.15，测定值414.21。
向溶于二氯甲烷(9ml)的2-叔丁氧基羰基氨基-3-[2-(3，4-二甲氧基- 苯基)-2-氧-乙基巯基]-丙酸甲基酯(2.00g，9.34mmol，1.0eq)的冰冷溶液 中加入三氟乙酸(9ml)。在冰上搅拌反应4小时。浓缩溶液，与甲苯一 起共蒸发。残留物溶解于二氯甲烷(9ml)中并在冰上冷却。向该溶液中 加入三乙酰氧基硼氢化钠(2.97g，14.02mmol，1.5eq)，然后加入二氯 甲烷(7ml)。在室温下搅拌反应达18小时。加入饱和碳酸氢钠，然后 用二氯甲烷洗提反应混合物。用MgSO4干燥二氯甲烷提取物，过滤浓缩。 得到油状物5-(3，4-二甲氧基-苯基)-硫代吗啉-3-羧酸甲酯(1.63g，收率59 ％)。分析：1H NMR(400MHz，CDCl3)：6.92(2H，m)，6.83(1H，d)， 3.95(3H，s)，3.93(3H，s)，3.87(2H，m)，3.85(3H，s)，2.77(3H， m)，2.42(1H，m)。MS(LC-MS)：C14H19NO4S的计算值297.10，测定 值298.17。
将浓度为2.0M的三甲基铝(0.39ml，0.78mmol，3.5当量)溶液加 入5-(3，4-二甲氧基-苯基)-硫代吗啉-3-羧酸甲基酯(67mg，0.22mmol，1.0 当量)和4-氯-3-甲氧基苯胺(106mg，0.68mmol，3.0当量)的溶液中。 得到的溶液在50℃下搅拌达18小时。用1N NaOH猝灭反应并用二氯甲 烷进行洗提。二氯甲烷提取物用MgSO4干燥，过滤并浓缩。残留物在1000 微米的制备性TCL上纯化，得到桃红色的固体5-(3，4-二甲氧基-苯基)-硫 代吗啉-3-羧酸(4-氯-3-甲氧基-苯基)酰胺(71mg，收率76％)。分析：1H NMR(400MHz，CDCl3)：8.61(1H，s)，7.58(1H，m)，7.26(1H，m)， 6.90(2H，m)，6.78(1H，d)，4.04(1H，m)，3.91(10H，m)，2.98 (1H，m)，2.78(2H，m)，2.59(1H，m)。MS(LC-MS)：C20H23ClN2O4S的计算值423.11，测定值423.22。
向甲苯(1.5ml)中含有5-(3，4-二甲氧基-苯基)-硫代吗啉-3-羧酸(4- 氯-3-甲氧基-苯基)酰胺(71mg，0.17mmol，1.0当量)的冰冷溶液中加入 浓度为0.5M的铝烷溶液(1.6ml，0.8mmol，4.8当量)。在室温下搅拌 反应达2小时。用1N NaOH猝灭反应并用二氯甲烷洗提三次。二氯甲烷 提取物通过MgSO4干燥，过滤并浓缩，得到油状物(4-氯-3-甲氧基-苯 基)-[5-(3，4-二甲氧基-苯基)-硫代吗啉-3-基甲基]-胺(65mg，收率95％)。 分析：1H NMR(400MHz，CDCl3)：7.11(1H，d)，6.93(2H，m)，6.80(1H， m)，6.19(m，2H)，3.86(10H，m)，3.19(3H，m)，2.80(2H，m)， 2.50(2H，m)。(LC-MS)：C20H25ClN2O3S的计算值409.13，测定值409.23。
将溶于二甲基乙酰胺(2ml)的(4-氯-3-甲氧基-苯基)-[5-(3，4-二甲氧 基-苯基)-硫代吗啉-3-基甲基]-胺(100mg，0.245mmol，1.0eq)，二溴甲 烷(031ml，3.55mmol，14.5eq)和三乙胺(0.15ml，1.09mmol，4.5eq)的溶 液在90℃下加热4小时。加入另一部分二溴甲烷(0.16ml，1.84mmol， 7.5eq)和三乙基胺(0.25ml，1.76mmol，7.2eq)，并在90℃下搅拌达4 小时。加入再一部分二溴甲烷(0.14ml，1.62mmol，6.6eq)和三乙基胺 (0.10ml，0.71mmol，2.9eq)，并在90℃下搅拌达18小时。冷却反应 物并过滤除去三乙铵的氢溴酸盐。浓缩滤液，残留物在1000微米的制备 性TLC上进行纯化。得到34mg 8-(4-氯-3-甲氧基-苯基)-4-(3，4-二甲氧基- 苯基)-八氢-吡嗪并[2，1-c][1，4]噻嗪(化合物8)，以及36mg回收的起始原 料。产品收率：32％。1H NMR(400MHz，CDCl3)：7.19(1H，d)，6.86(3H， m)，6.42(2H，m)，3.89(3H，s)，3.88(3H，s)，3.86(3H，s)，3.50 (1H，m)，3.19(2H，dd)，2.92(1H，m)，2.75(5H，m)，2.48(2H， t)，2.15(1H，dt)。MS(LC-MS)：C22H27ClN2O3S的计算值435.14，测 定值435.24。
IX.由路线H制备2-(4-氯-3-甲氧基-苯基)-6-(3，4-二甲氧基-苯基)-八 氢-吡啶[1，2-a]吡嗪

向悬浮于5ml DCM中的2.2g(0.011mol，1当量)5-溴-吡啶甲酸 (piconilic acid)的悬浮液中加入4.0mi亚硫酰氯。混合物回流2.5小时，然 后浓缩，并进一步与甲苯一起共-蒸发。残留物溶解于10ml DCM中。
将2.8g(0.022mol，2.0当量)K2CO3和1ml(0.01mol，1.5当量) 羟基乙基胺溶解于23ml水中，并在冰浴中冷却。缓慢加入上述制备的 DCM溶液，将反应物升温至室温并搅拌达2小时。反应物用DCM稀释 并分离。有机层用盐水洗涤，在Na2SO4上干燥并浓缩得到黄色油状物6- 溴-吡啶-2-羧酸(2-羟基-乙基)-酰胺(2.3g，86％)。分析：MS(LC-MS)： C8H9BrN2O2的计算值245.07，测定值245.20(M+)和247.20(M+2)。
将0.25g(1.0mmol，1.5当量)6-溴-吡啶-2-羧酸(2-羟基-乙基)-酰 胺和0.28g(1.5mmol，1.5当量)3，4-二甲氧基苯基硼酸与2ml乙醇和2ml 浓度为2M的Na2CO3一起加入20ml乙二醇二甲醚中。用N2清洗混合物 达20分钟，然后加入57mg(0.05mmol，0.05当量)的三(二苯亚甲基丙 酮)-二钯(0)。在80℃下加热反应6小时，TLC监测表明此时反应体系 中无起始原料。用硅藻土过滤反应物并除去溶剂。用乙酸乙酯溶解残留 物，用Na2CO3和盐水洗涤，用Na2SO4干燥并浓缩得到黄色油状物6-(3，4- 二甲氧基-苯基)-吡啶-2-羧酸(2-羟基-乙基)-酰胺(2.3g，86％)，无需提 纯用于下一步骤。分析：MSLC-，S)：C16H18N2O4计算值为302.33，测定值 303.39(M+1)。
将3.0g(10mmol，leq)的6-(3，4-二甲氧基-苯基)-吡啶-2-羧酸(2-羟基- 乙基)-酰胺和2.3g(1.0mmol，0.1eq)的二氧化珀加入35ml的乙醇和2.0ml 浓HCl中。在室温下，将悬浮液在50psi的H2下进行整夜加氢反应。TLC 检测没有起始原料后，用硅藻土过滤，并除去溶剂。用乙酸乙酯抽提残 留物，永饱和Na2CO3和盐水洗提，用Na2SO4干燥浓缩得到黄色油状物 6-(3，4-二甲氧基-苯基)-吡啶-2-羧酸(2-羟基-乙基)-酰胺。用乙酸乙酯 和己烷粉碎油状物，得到白色固体(1.6g，52％)。分析：1H NMR(400 MHz，CDCl3)：7.18(1H，t)，6.90(2H，m)，6.82(1H，m)，3.87(6H， d)，3.66(3H，m)，3.39(3H，m)，2.00(2H，m)，1.80(1H，m)和 1.22(2H，m)。MS(LC-MS)：C16H24N2O4的计算值308.37，测定值309.34 (M+1)。
将溶于18ml THF的1.5g(5.0mmol，1当量)的6-(3，4-二甲氧基-苯 基)-吡啶-2-羧酸(2-羟基-乙基)-酰胺的溶液缓慢加入到15ml，浓度为 1M的LiAlH4的THF溶液中。在60℃，N2氛下加热反应6h。TLC监测 表明此时反应体系中无起始原料。在冰浴中冷却，向反应体系中缓慢地 顺次加入0.5ml水，0.5ml NaOH和1.5ml水。最后，加入一些无水MgSO4， 然后用硅藻土过滤反应混合物。除去溶剂，残留物用乙酸乙酯提取，用 盐水洗涤，通过Na2SO4干燥并浓缩得到油状物2-{[6-(3，4-二甲氧基-苯基) 哌啶-2-基甲基]-氨基}-乙醇(1.5g，68％)，其无须纯化即可用于下一步 骤。分析：MS(LC-MS)：C16H26N2O3的计算值294.39，测定值295.37 (M+1)。
向溶于120ml THF的3.4g(11.6mmol，1当量)2-{[6-(3，4-二甲氧基 -苯基)哌啶-2-基甲基]-氨基}-乙醇和0.20g(17.5mmol，1.5当量)三苯基 膦的溶液中加入1.9ml(12.7mmol，1.1当量)偶氮二羧酸二乙酯，在室 温下搅拌反应过夜。TLC检测表明此时反应体系中无起始原料。除去溶 剂，残留物溶于乙酸乙酯中并用1N HCl洗提。用1N NaOH碱化酸性水 溶液至pH为10，然后用二氯甲烷洗提三次。用盐水洗涤有机提取物， 用Na2SO4干燥并浓缩得到油状产物，该产物在硅凝胶上以50∶10∶1的 DCM∶MeOH∶NH4OH洗脱的快速色谱进行纯化，得到棕色棒状固体 6-(3，4-二甲氧基-苯基)-八氢吡啶并[1，2a]吡嗪(0.85g，27％)。分析：1H NMR(300MHz，CDCl3)：6.80(3H，m)，3.87(3H，s)，3.84(3H，s)， 3.29(1H，s)，2.92～2.68(4H，m)，2.60(2H，m)，2.13(1H，m)， 1.82～1.05(8H，m)。MS(LC-MS)：C16H18N2O4的计算值302.33，测定值 303.39(M+1)。
将0.85g(3.0mmol，1当量)6-(3，4-二甲氧基-苯基)-八氢吡啶并[1，2a] 吡嗪和0.76g(3.4mmol，1.1当量)5-溴-2-氯-苯甲醚溶解于25ml无水甲 苯中，然后用N2清洗该溶液达20分钟。向溶液中顺次加入0.18g (0.30mmol，0.10当量)rac-2，2’-二(联苯基-膦基)-1，1’-联萘基 (dinapphtyl)，0.14g(0.15mmol，0.05当量)三(二苯亚甲基丙酮)-二钯 (0)和0.52g(4.6mmol，1.5当量)叔丁氧基锂。混合物在80℃，N2气 氛中加热过夜。冷却之后，用硅藻土过滤反应物。用1N NaOH和盐水洗 涤有机溶液，在Na2SO4上干燥并浓缩。残留物用硅凝胶上以50：1二氯 甲烷：甲醇洗脱的快速色谱进行纯化，得到棕色棒状固体2-(4-氯-3-甲氧 基-苯基)-6-(3，4-二甲氧基-苯基)-八氢吡啶并[1，2a]吡嗪(化合物5)(0.85g， 68％)。分析：1H NMR(300MHz，CDCl3)：7.16(1H，d)，6.80(3H，m)， 6.40(2H，m)，3.88(3H，s)，3.86(3H，S)，3.85(3H，s)，3.40(2H， m)，2.95(1H，m)，2.70(3H，m)，2.30(1H，m)，2.00(1H，m)， 1.82-1.40(6H，m)。MS(LC-MS)：C23H29N2O3的计算值416.94，测定值 417.23(M+1)。
X.由路线J制备(6R，9S)2-(4-氯-3-甲氧基-苯基)-6-(3，4-二甲氧基-苯 基)-八氢-吡咯并[1，2-a]吡嗪

将DMF(200ml)中含有(2S)5-氧-吡咯烷-1，2-二羧酸1-叔丁酯 (10.00g，0.044mol，1.0当量)，苄基溴(7.88g，0.046mmol，1.05当 量)以及碳酸钾(15.20g，0.11mol，2.5当量)的悬浮液在65℃下搅拌 过夜。反应物冷却到室温并用硅藻土过滤该混合物。用乙酸乙酯(100ml) 冲洗固体，得到的滤液在乙酸乙酯和饱和的盐水溶液之间进行分配。用 饱和的盐水(3×100ml)洗涤有机层，用无水Na2SO4干燥并在真空中浓 缩。粗产物，无色的油状物在硅上进行色谱纯化，得到无色的油状物5- 氧-吡咯烷-1，2-二羧酸2-苄基酯1-叔丁酯(8.20g，0.026mmol。收率59 ％)。分析：1H NMR(400MHz，CDCl3)：7.36(5H，宽s)，5.20(2H，d)， 4.64(1H，dd)，2.44-1.96(4H，m)，1.41(9H，s)。MS(LC-MS)：C17H21NO5的计算值319.14，测定值320.19(M+H)+。
N2气氛下，在冰浴中将溶于无水THF的(2S)5-氧-吡咯烷-1，2-二羧酸 2-苄基酯1-叔丁酯(8.20g，0.026mmol，1.0当量)的溶液冷却到0℃。缓慢 加入浓度为0.5M，溶于THF的溴代3，4-二甲氧基苯基镁溶液(52.1ml， 0.026mmol，1.0当量)。搅拌反应混合物达2小时。加入饱和NH4Cl溶液 (10ml)以猝灭反应。混合物在乙酸乙酯和盐水之间进行分配。用盐水 (3×100ml)洗涤有机提取物。用无水Na2SO4干燥乙酸乙酯层并在真空 中进行浓缩。得到的粗产物，即蓝色的油状物用二氧化硅层进行过滤。 滤液在真空中浓缩，得到2-叔丁氧基羰基氨基-5-(3，4-二甲氧基-苯基)-5- 氧-戊酸苄基酯(10.46g，0.023mmol，收率88％)。分析：1H NMR(400 MHz，CDCl3)：7.5-7.3(6H，m)，7.0-6.7(2H，m)，5.2(2H，m)，4.0-3.8 (6H，m)，3.0(1H，m)，2.6-1.9(4H，m)，1.4(9H，s)。MS(LC-MS)：C25H31NO7的计算值457.21，测定值458.19(M+H)+。
将溶于二氯甲烷(150ml)的(2S)2-叔丁氧基羰基氨基-5-(3，4-二甲氧 基-苯基)-5-氧-戊酸苄基酯(10.46g，0.023mmol)的溶液在冰浴中冷却到 0℃。在搅拌的混合物中缓慢加入TFA(40ml)，将反应混合物升温到室 温并维持2小时以上。在真空中浓缩反应混合物。将得到的残留物溶解 于乙酸乙酯中，并用1N NaOH调节pH至7。用盐水(100ml)洗涤有机 提取物。用Na2SO4干燥乙酸乙酯提取物，在真空中浓缩得到(2S)5-(3，4- 二甲氧基-苯基)-3，4-二氢-2H-吡咯-2-羧酸苄基酯TFA盐(7.24g， 0.021mol，收率91％)。MS(LC-MS)：C20H21NO4的计算值339.15，测定 值340.16(M+H)+。
将(2S)5-(3，4-二甲氧基-苯基)-3，4-二氢-2H-吡咯-2-羧酸苄基酯 (7.24g，0.021mol)溶解于甲醇(100ml)中，并加入到含有Pd/C催化 剂(75mg)的氢化瓶中。反应物在室温下，于50psi的压力下整夜进行 氢化反应。用硅藻土过滤反应混合物，并用甲醇/乙酸乙酯(1∶1，100ml) 冲洗。滤液在真空中进行浓缩。用乙醚和乙酸乙酯粉碎得到的粗残留物， 过滤并干燥得到白色固体(2S，5R)5-(3，4-二甲氧基-苯基)-吡咯烷-2-羧酸 TFA盐(3.00g，0.012mol，收率57％)。分析：1H NMR(400MHz，DMSO)： 7.18(1H，s)，6.98(2H，s)，4.42(1H，d)，4.64(1H，dd)，3.76(7H，宽 s)，2.24-2.10(3H，m)，1.74(1H，m)。MS(LC-MS)：C13H17NO4的计算 值251.12，测定值252.08(M+H)+。
使(2S，5R)5-(3，4-二甲氧基-苯基)-吡咯烷-2-羧酸(3.00g，0.012mol， 1.0当量)悬浮于二氯甲烷(50ml)和DIEA(2.50ml，0.014mol，1.2当量) 中，并在冰浴中冷却到0℃。加入浓度为1.0M，溶于THF的Boc酐的溶 液(12.0ml，0.012mol，1.0当量)，搅拌反应并升温至室温过夜。用盐 水(2×50ml)洗涤反应混合物。用无水Na2SO4干燥有机提取物，并在 真空中浓缩得到(2S，5R)5-(3，4-二甲氧基-苯基)-吡咯烷-1，2-二羧酸1-叔丁 基酯(4.22，0.012mol，收率100％)。分析：1H NMR(400MHz，CDCl3)： 6.95(1H，s)，6.80(2H，s)，4.67(1H，m)，4.50(1H，m)，3.86(6H，s)， 2.52-1.89(4H，m)，1.19(9H，宽s)。MS(LC-MS)：C18H25NO6的计算值 351.17，测定值352.22(M+H)+。
将溶于二氯甲烷(35ml)的(2S，5R)5-(3，4-二甲氧基-苯基)-吡咯烷-1，2- 二羧酸1-叔丁基酯(2.50g，7.11mmol，1.0当量)，4-氯-3-甲氧基苯胺 (1.12g，7.11mmol，1.0当量)，PyBrop偶联试剂(3.98g，8.54mmol， 1.2当量)，以及DIEA(1.86ml，10.7mmol，1.5当量)的溶液在室温下 搅拌过夜。在真空中浓缩反应混合物。将得到的残留物溶解于乙酸乙酯 (100ml)中，并用1N NaOH(3×100ml)洗涤。用无水Na2SO4干燥有机 提取物，并在真空中浓缩。用二氧化硅层过滤粗的油状物，并用乙酸乙 酯∶己烷(1∶1)进行洗脱。滤液在真空中浓缩得到(2S，5R)2-(4-氯-3- 甲氧基-苯基氨基甲酰基)-5-(3，4-二甲氧基-苯基)-吡咯烷-1-羧酸叔丁基酯 (3.48g，7.09mmol，收率100％)。分析：1H NMR(400MHz，CDCl3)：7.59 (1H，宽s)，7.23(1H，m)，6.85-6.60(4H，m)，4.64(2H，m)，3.00 (3H，s)，3.83(3H，s)，3.56(3H，宽s)，2.62(1H，宽s)，2.36(1H， m)，2.11-1.89(2H，m)，1.22(9H，宽s)。MS(LC-MS)：C25H31N2O6的计算 值490.19，测定值491.15(M+H)+。
将(2S，5R)2-(4-氯-3-甲氧基-苯基氨基甲酰基)-5-(3，4-二甲氧基-苯 基)-吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(3.48g，7.09mmol)溶解于二氯甲烷(100ml)中， 并在冰浴中冷却到0℃。然后缓慢加入TFA(30ml)到搅拌的溶液中。搅拌 反应并升温到室温过夜。在真空中浓缩反应混合物。用1N NaOH调节得 到的残留物的pH至8，用乙酸乙酯洗提产物。然后用盐水溶液(2×100ml) 洗涤提取物，用Na2SO4干燥并在真空中浓缩。粗油状物通过色谱纯化得 到(2S，5R)5-(3，4-二甲氧基-苯基)-吡咯烷-2-羧酸(4-氯-3-甲氧基-苯基)-酰 胺(2.77g，7.09mmol，收率100％)。分析：1H NMR(400MHz，CDCl3)： 10.02(1H，宽s)，7.59(1H，宽s)，7.21(1H，d)，7.03-6.82(4H，m)， 4.52-4.30(2H，m)，3.90(9H，m)，2.70-1.88(5H，m)。MS(LC-MS)： C20H23N2O4的计算值390.13，测定值391.16(M+H)+。
将(2S，5R)5-(3，4-二甲氧基-苯基)-吡咯烷-2-羧酸(4-氯-3-甲氧基-苯 基)-酰胺溶解于无水THF中，并在冰浴中冷却到0℃。然后缓慢加入浓度 为0.5M，溶解于甲苯中的铝烷络合物(42.6ml，21.3mmol，3.0当量)。 搅拌反应并升温到室温过夜。加入乙酸乙酯∶甲醇(1∶1，5ml)猝灭反 应。用硅藻土过滤得到的浆状物，并用乙酸乙酯进行冲洗。在真空中浓 缩滤液，得到(2S，5R)(4-氯-3-甲氧基-苯基)-[5-(3，3-二甲氧基-苯基)-吡咯 烷-2-基甲基]-胺(1.80g，4.78mmol，收率67％)。分析：1H NMR(400MHz， CDCl3)：7.12(1H，d)，6.98-6.90(3H，m)，6.23(1H，s)，6.19(1H，d)， 4.39-4.15(2H，m)，3.76-3.53(1H，m)，3.30-2.97(2H，m)，2.34-1.55(6H，m)。 MS(LC-MS)：C20H25ClN2O3的计算值376.16，测定值377.21(M+H)+。
在室温下搅拌含有(2S，5R)(4-氯-3-甲氧基-苯基)-[5-(3，3-二甲氧基-苯 基)-吡咯烷-2-基甲基]-胺(1.80g，4.78mmol，1.0当量)和DIEA(0.87ml， 5.02mmol，1.05当量)的乙腈溶液过夜(25ml)。在真空中浓缩反应混合 物。得到的残留物溶解于乙酸乙酯(50ml)中，并用1N NaOH(2×25ml) 洗涤。用Na2SO4干燥乙酸乙酯提取物，并在真空中浓缩得到区域异构体 (regioisomer)的2∶1混合物，(2S，5R)[2-[(4-氯-3-甲氧基-苯基氨基)- 甲基]-5-(3，4-二甲氧基-苯基)-吡咯烷-1-基]-乙酸乙酯和{(4-氯-3-甲氧基- 苯基)-[5-(3，4-二甲氧基-苯基)-吡咯烷-2-基甲基]-氨基}乙酸乙酯(2.21g， 4.78mmol，收率100％)。分析：1H NMR(400MHz，CDCl3)：7.12(1H，d)， 6.90(1H，d)，6.82(1H，dd)，6.74(1H，m)，6.25-6.16(2H，m)，4.64-4.50(1H， m)，4.37，3.60(1H，分裂的m)，4.27-3.90(2H，m)，3.87(9H，m)， 3.46-3.00(4H，m)，2.40-2.06(2H，m)，1.92-1.66(2H，m)，1.34-1.14(3H， m)。MS(LC-MS)：C24H31ClN2O5的计算值462.19，测定值463.21(M+H)+。
将溶于THF(5ml)的(2S，5R)[2-[(4-氯-3-甲氧基-苯基氨基)-甲 基]-5-(3，4-二甲氧基-苯基)-吡咯烷-1-基]-乙酸乙酯(125mg，0.27mmol， 1.0当量)的溶液在冰浴中冷却到0℃。向搅拌的溶液中缓慢加入NaH(16mg，0.40mmol，1.5当量)。搅拌反应并升温至室温过夜。反应混 合物冷却到室温并在乙酸乙酯和1N NaOH之间进行分配。有机提取物用 Na2SO4干燥并在真空中浓缩。将粗油状物装载到二氧化硅上，并用己烷 冲洗以除去杂质。用乙酸乙酯洗脱产物并重新浓缩得到(6R，9S)2-(4-氯-3- 甲氧基-苯基)-6-(3，4-二甲氧基-苯基)-六氢-吡咯并[1，2-a]吡嗪-3-酮 (80mg，0.19mmol，收率70％)。分析：1H NMR(400MHz，CDCl3)：7.39(1H， d)，6.95(1H，s)，6.91(2H，m)，6.83(2H，d)，3.90(9H，m)，3.71 (2H，m)，3.58(1H，d)，3.25(1H，t)，2.96(1H，d)，2.84(1H，m)， 2.29(1H，m)，2.08(1H，m)，1.88(1H，m)，1.71(1H，m)。MS(LC-MS)： C22H25ClN2O4的计算值416.15，测定值417.23(M+H)+。如果扩大工艺， 需要加热(50℃)以闭环。出现差向异构。可通过快速色谱法分离顺式 和反式异构体。
将溶于THF(2ml)的2-(4-氯-3-甲氧基-苯基)-6-(3，4-二甲氧基-苯基)- 六氢-吡咯并[1，2-a]吡嗪-3-酮(80mg，0.19mmol，1.0当量)的溶液在冰 浴中冷却到0℃。缓慢加入浓度为0.5M，溶于甲苯中的铝烷络合物 (1.14ml，0.57mmol，3.0当量)，并搅拌反应达1小时。加入乙酸乙酯∶ 甲醇(1∶1，1ml)以猝灭反应。用二氧化硅层过滤得到的浆状物，并在 真空中浓缩得到(6R，9S)2-(4-氯-3-甲氧基-苯基)-6-(3，4-二甲氧基-苯基)-八 氢-吡咯并[1，2-a]吡嗪(化合物9，49mg，0.12mmol，收率63％)。分析： 1H NMR(400MHz，CDCl3)：7.20(1H，d)，6.93(1H，s)，6.90(1H，d)， 6.82(1H，d)，6.52(1H，s)，6.49(1H，d)，3.90(9H，m)，3.73(1H， d)，3.51(1H，d)，3.21(1H，t)，2.93(2H，m)，2.68(1H，t)，2.44 (1H，m)，2.20(2H，宽t)，1.92(1H，m)，1.65(2H，m)。MS(LC-MS)： C22H27ClN2O3的计算值402.17，测定值403.23(M+H)+。手性HPLC分析 表明对映体的纯度大于98％。
XI.由路线K制备(4-三氟甲基-苯基)-{4-[1-(4-甲氧基-2，3-二甲基-苯 基)-乙基]-哌嗪-1-基}-甲酮

将溶于乙醇的2，3-二甲基4-甲氧基-苯甲醛(1g，3.05mmol)，1当 量的哌嗪-1-羧酸叔丁酯(0.57g，3.05mmol)，1当量的苯并三唑的混合 物在室温下搅拌30分钟。除去溶剂并在真空中干燥。然后在N2气氛中， -78℃下将此反应混合物溶解于无水THF(20ml)中。向溶液中缓慢加入 3当量(3.05ml)溴代甲基镁(溶于THF中，浓度为3M)。在此温度下 保持2小时，然后升温到室温过夜。用2N NaOH洗涤混合物并用乙酸乙 酯(2×30ml)洗提。合并的有机层用MgSO4干燥。除去有机溶剂后， 残留物用硅凝胶上依次以1∶1EtOAC：己烷和10％溶于二氯甲烷的 MeOH(NH3)洗脱的快速色谱柱进行纯化。得到黄色油状物4-[1-(4-甲氧基 -2，3-二甲基-苯基)-乙基]-哌嗪-1-羧酸叔丁酯(0.59g，56％)。分析：1H NMR (400MHz，CDCl3)：7.21(1H，d)，6.68(1H，d)，3.8(3H，s)，3.58(1H， q)，3.38(3H，m)，2.45(2H，m)，2.24(3H，s)，2.18(3H，s)， 1.43(9H，s)，1.24(3H，d)。MS(LC-MS)：C20H32N2O3的计算值348.48， 测定值349.29(M+H)+。
向含有4-[1-(4-甲氧基-2，3-二甲基-苯基)-乙基]-哌嗪-1-羧酸叔丁酯 (0.4g，1.38mmol)和10ml二氯甲烷的冰冷溶液中滴加入三氟乙酸(2ml)。 在室温下搅拌溶液达2小时。浓缩反应物。在硅凝胶上以10％ MeOH(NH3)/二氯甲烷洗脱的快速色谱法纯化残留物，得到黄色油状物 1-[1-(4-甲氧基-2，3-二甲基-苯基)-乙基]-哌嗪(0.16g，47％)。分析：1H NMR (400MHz，CDCl3)：7.23(1H，d)，6.69(1H，d)，3.8(3H，s)，3.55(1H， q)，3.484(2H，s)，2.838(4H，m)，2.47(2H，m)，2.38(2H，m)， 2.271(3H，s)，2.167(3H，s)，1.26(3H，d)。MS(LC-MS)：C15H24N2O的计算值248.36，测定值249.25(M+)。
在室温下，将1-[1-(4-甲氧基-2，3-二甲基-苯基)-乙基]-哌嗪(0.02g， 0.081mmol)溶解于无水甲苯和1N NaOH(1∶1)中。将4-三氟甲基苯 甲酰氯(0.013ml，0.081mmol)加入反应混合物中。在室温下搅拌反应 混合物达30分钟。用1N NaOH洗涤混合物，并用EtOAC洗提。通过 MgSO4干燥合并的有机层。除去有机溶剂之后，残留物用以MeOH和溶 解于二氯甲烷中浓度为10％的MeOH(NH3)洗脱的SCX柱进行纯化。 得到浅黄的油状物(4-三氟甲基-苯基)-{4-[1-(4-甲氧基-2，3-二甲基-苯基)- 乙基]-哌嗪-1-基}-甲酮(化合物10)(0.010g，30％)。分析：1H NMR(400 MHz，CDCl3)：7.65(2H，d)，7.495(2H，d)，7.19(1H，d)，6.689(1H， d)，3.764(3H，s)，3.682(1H，q)，3.317(3H，m)，2.506(6H，m)， 2.266(3H，s)，2.164(3H，s)，1.286(3H，d)。MS(LC-MS)：C23H27N2O2的计算值420.47，测定值421.26(M+)。
XII.{5-[1-(4-甲氧基-2，3-二甲基-苯基)-乙基]-(1S，4S)-2，5-二氮-双环 [2.2.1]己-2-基}-(4-三氟甲基-苯基)-甲酮(化合物11)

将(1S，4S)-(-)-2，5-二氮-双环[2.2.1]己-2-羧酸叔丁酯(0.2M，5％NMM/ 甲苯，0.100ml，0.020mmol)加入1/2液量打兰莫钱的管形瓶中，然后加 入4-甲氧基-2，3-二甲基-苯甲醛(0.2M甲苯，0.110rnl，0.022mmol)。40℃ 在减压下浓缩瓶中物(IR-Dancer)。将得到的残留物溶解于THF(0.20ml， 无水)中，在N2流下盖上管形瓶，然后用MeMgBr(1.0M THF，0.050ml， 0.050mmol)处理。室温下摇晃管形瓶达0.5小时，然后用HCl(4.0M二 噁烷，0.10ml)进行处理。管形瓶在50℃下保持过夜，然后用NaOH(10 ％水溶液(w/w)，0.50ml)进行碱化，并用4-三氟甲基苯甲酰氯(0.2M 甲苯，0.15ml，0.03mmol)进行处理。短时间地摇晃管形瓶，然后使其 在室温下保持稳定达0.5小时，接着用溶于甲苯的浓度为1％的Et2NH溶 液(v/v，0.50ml)进行稀释。猛烈摇晃管形瓶，然后使其保持稳定直到 完全相分离。除去上部的有机相，并在SCX SPE柱体(0.5g SCX，3ml 柱体)上沉降。丢弃用溶于EtOAc，浓度为25％的MeOH溶液(v/v，3ml) 洗脱柱体得到的部分，而收集用EtOAc/MeOH/Et3N(10∶1∶1v/v/v，3ml) 洗脱的部分。依次在N2流和减压下浓缩洗脱溶液，得到深粘稠的黄色油 状产物(化合物11)(0.0057g，66％)。分析：1H NMR(400MHz，CDCl3)： 非对映异构体/旋转异构体的混合物，特征共振：3.821，3.816，3.791， 3.782(3H，(联合峰))，S(OCH3)MS(LCMS)：C24H27F3N2O2的计算 值432.20，测定值433.17(M+H)+。
XIII.(±)-反式-和(±)-顺式-2-(4-氯-3-甲氧基-苯基)-6-(3，4-二甲氧基- 苯基)-六氢-吡咯并[1，2-a]吡嗪(化合物12)

将如上述制备的(4-氯-3-甲氧基-苯基)-[5-(3，4-二甲氧基-苯基)-吡咯 烷-2-基甲基]-胺(104g，0.276mmol)溶解于CH2Cl2(10ml)和 DMAP(74.1mg，0.667mmol)的溶液中。将溶液冷却到0℃，并滴加入乙 二酰氯(0.029ml，0.331mmol)。30分钟后，加入冰水(10ml)以猝灭 反应。用1N HCl(20ml)，1N NaOH(20ml)和盐水(20ml)洗提有机相。 用Na2SO4干燥有机相并在减压下除去溶剂。用以己烷/丙酮(2∶1)洗脱 的制备性TLC纯化粗产物(±)-顺式-2-(4-氯-3-甲氧基-苯基)-6-(3，4-二甲 氧基-苯基)-六氢-吡咯并[1，2-a]吡嗪-3，4-二酮，得到玻璃状无色固体 (49.7mg，41.8％)。1H NMR(CDCl3)δ7.39(d，J＝8.7Hz，1H，ArH)，7.08(d， J＝2.1Hz，1H，ArH)，6.85-6.81(m，3H，ArH)，6.75(dd，J＝8.7，2.1Hz， 1H，ArH)，5.20(d，J＝9.0Hz，1H)，4.35-4.32(m，1H)，4.16-3.95(m， 2H)，3.90(s，3H，OCH3)，3.89(S，3H，OCH3)，3.86(S，3H， OCH3)2.46-2.40(m，1H)，2.17-1.87(m，2H)。LCMS m/z 331(M++1，100， 2.07分钟)。
将(±)-顺式-2-(4-氯-3-甲氧基-苯基)-6-(3，4-二甲氧基-苯基)-六氢-吡 咯并[1，2-a]吡嗪-3，4-二酮(49.7mg，0.115mmol)溶解于干燥的THF(10ml) 中，并滴加BH3.THF(1ml，1mmol)至混合物中，整夜回流加热混合物。 将溶液冷却到0℃并滴加入MeOH(2ml)。蒸发除去溶剂，并将粗产物溶 解于MeOH(10ml)和12N HCl(2ml)中。溶液回流4小时。浓缩反应 混合物(～2ml)，然后用1N NaOH碱化。用CH2Cl2(3×25ml)洗提水 溶液。用盐水洗涤合并的有机提取物，通过Na2SO4干燥并在减压下浓缩。 用以CH2Cl2/MeOH(97∶3)洗脱的制备性TLC纯化粗产物，得到(±)-反式 -2-(4-氯-3-甲氧基-苯基)-6-(3，4-二甲氧基-苯基)-六氢-吡咯并[1，2-a]吡嗪。 1H NMR(CDCl3)δ7.20(d，J＝8.7Hz，1H，ArH)，6.89-6.83(m，3H，ArH)， 6.47-6.40(m，2H，ArH)，4.16(m，1H)，3.95-3.84(m，1H)，3.90(s， 3H，OCH3)，3.88(s，3H，OCH3)，3.58-3.46(m，1H)，3.41-3.36 (m.1H)，3.26-3.22(m，1H)，2.99-2.71(m，3H)，2.34-2.20(m， 2H)，1.95-1.83(m，1H)，1.64-1.54(m，1H)。LCMS m/z 403(M+ +1，100，1.90分钟)。
XIV.化合物13-143
表I中所示的化合物13-143由上述的方法A-M制备而得。
表I


































实施例2
黑色素浓集的激素受体结合试验
本实施例阐述了一种黑色素浓集激素受体结合的标准试验，可用于 测定化合物与MCH受体的结合亲和力。
从食蟹猴(cynomolgus macaque)下丘脑制备总RNA。采用随机引物和 逆转录酶按照标准方法制备猴下丘脑的cDNA。采用SEQ ID NO：3的正 向引物(5’)和SEQ ID NO：4的逆向引物(3’)由PCR扩增得到编码猴MCH1 受体的cDNA。整个长度的PCR产物一开始就被克隆到载体Pcr 2.1中 (Invitrogen，Carlsbad，CA)。采用正向引物对cDNA再扩增，该正向引 物包括一个最佳转译开始位点(Kozak序列)。编码猴的MCH1受体的 cDNA表达框片断是连接到PCR-SCRIPT载体的平端上(STRATAGENE， La Jolla，CA)。用EcoRI和Not I从该载体上切除受体序列，并将受体 序列亚克隆到PCDNA 3.1(INVITROGEN Corp.，Carlsbad，CA)的 EcoRI/Not位点上。SEQ ID NO：1提供了MCH1受体DNA序列，SEQ ID NO：2中提供了被编码的氨基酸序列。
由标准的磷酸钙沉淀作用，使HEK 293细胞(American Type Culture Collection，Manassas，VA)与MCH受体表达载体进行稳定的转染，并在 DMEM高葡萄糖培养物介质中(目录号#10-017-CV，MEDIATECH， Herndon，VA)生长融汇(接近48-72小时)，其中该DMEM高葡萄糖培养 物介质用10％胎牛血清和25mM HEPES，以及500μg/ml G418在37℃， 5％CO2中补充48-72小时。通过轻度离心使细胞成为球状颗粒。用冷的 PBS洗涤细胞球状颗粒两次，在含有5mM EDTA的冷PBS中收集细胞球 状颗粒，并在-80℃下储存。
试验时，加入洗涤缓冲液(含有1.0mM CaCl2，5.0mM MgCl2，120mM NaCl的25mM Hepes，pH7.4)融化球状颗粒，并用BRINKMAN POLYTRON，第5套(setting 5)匀化30秒。在48,000x g下离心细胞达 10分钟。丢弃上清液，球状颗粒在新鲜的洗涤缓冲液中重悬浮，并再次 匀化。通过Bradford方法(BIO-RAD蛋白质试验试剂盒，#500-0001， BIO-RAD，Hercules，CA)，用该膜匀浆的等分试样检测蛋白质浓度。通 过这种检测，测定出1升细胞培养物通常得到50-75mg的总膜蛋白。为 使试验体积为50μg膜蛋白质/150ul结合缓冲液(洗涤缓冲液+0.1％BSA 和1.0μm最终的膦酰二肽)，象前面一样对匀浆进行离心，重悬浮，使 结合缓冲液中蛋白质浓度为333μg/ml。膦酰二肽来自于SIGMA BIOCHEMICALS，St.Louis，MO(目录号t#R-7385)。
室温下于Falcon 96孔圆底聚丙烯盘中进行竞争结合试验。每一试验 孔中含有150μl MCH受体，该受体含有如前所制备的膜；50μ125I-Tyr MCH；50μl结合缓冲液；以及2μl溶于DMSO中的试验化合物。125I-Tyr MCH(比活性＝2200Ci/mMol)从NEN，Boston，MA购得(目录号#NEX 373)，将其稀释于结合缓冲液中以得到30pM的最终试验浓度。
非特异性结合的定义为在1μm未标记的MCH存在下测定出的结合。 MCH购于BACHEM U.S.A.，King of Rrussia，PA(目录号#H-1482)。用 于测定MCH结合的试验孔含有150μl含膜的MCH受体，50μl 125I-Tyr MCH，25μl结合缓冲液，以及25μl结合缓冲液。
在室温下孵育试验盘达1小时。将膜收集至WALLACTM玻璃纤维 过滤器(PERKIN-ELMER，Gaithersburg，MD)上，该过滤器在使用前用1.0 ％PEI(聚乙烯亚胺)预浸泡2小时。使过滤器干燥过夜，然后在加入 WALLAC BETA SCINTTM闪烁流体之后在WALLAC 1205 BETA PLATE计数器中进行计数。
为进行饱和结合，使125I-Tyr MCH的浓度在7到1,000pM的范围 内变化。通常，每一饱和结合曲线上收集11个浓度点。在计算机程序 FitPTM(BIOSOFT，Ferguson，MO)的辅助下，通过使变构Hill方程与测定 值相适配，从而测定出平衡结合参数。对于本发明中的化合物，Ki值小 于1微摩尔，优选小于500毫微摩尔，更优选低于100毫微摩尔。
实施例3
钙移动试验
本实施例阐述了一种代表性的功能试验，用于监测将黑色素浓集的 激素受体表达到黑色素浓集激素的细胞的响应。该试验也可用于检测试 验化合物是否起到黑色素浓集激素受体的激动剂或拮抗剂的作用。
通过磷酸钙沉淀作用，使中国仓鼠卵巢(CHO)细胞(American Type Culture Collection；Manassas，VA)与实施例2中所述的MCH表达载体 一起稳定地转染，并在Ham’s F12培养物介质中具有FALCONTM黑色 壁，清澈底的96-孔盘(#3904，BECTON-DICKINSON，Franklin Lakes， NJ)内生长至密度达到15,000个细胞/孔，其中的Ham’s F12培养物介 质用10％胎牛血清，25mM HEPES和500μg/ml(活性)G418进行补充。 在进行试验之前，从96孔盘中清空培养物介质。将Fluo-3钙敏感染料 (Molecular Probes，Eugene，OR)加入每个孔中(染料溶液：1mgFLUO-3 AM， 440μl DMSO和440μl溶于DMSO中浓度为20％的普流罗尼酸(pluronic acid)，以1∶4的比例稀释，每孔有50μl稀释溶液)。用铝膜覆盖盘，然 后在37℃下孵育1-2小时。孵育之后，从盘中清空染料，在100μl KRH 缓冲液中(0.05mM KCl，0.115M NaCl，9.6mM NaH2PO4，0.01mM MgSO4， 25mM HEPES，pH7.4)洗涤细胞一次以除去过量的染料，洗涤之后，向每 个孔中加入80μl KRH。
加入人类MCH受体或试验化合物，通过在480nM处激发，在530nM 处发射的FLIPRTM盘读取装置(Molecular Devices，Sunnyvale，CA)监 测荧光响应。
为测定试验化合物对表达MCH受体到MCH的细胞响应的拮抗能 力，首先测定MCH的EC50。将另一部分20μl KRH缓冲液和1μl DMSO 加至如上制备的细胞的每个孔中。100μl溶于KRH缓冲液中的人类MCH 通过FLIPR仪自动转移到每个孔中。采用最终MCH最终浓度范围为1nM 到3μM的8点浓度响应曲线测定MCH EC50。
将试验化合物溶解于DMSO中，并在20μl KRH缓冲液中稀释，然 后加入到前述制备的细胞中。含有制备细胞和试验化合物的96孔盘在暗 处，于室温下温育0.5-6小时。重要的是温育不宜连续超过6小时。在即 将测定荧光响应之前，将100μl在KRH缓冲液中稀释到2×EC50的人类 MCH通过FLIPR仪自动加入到96孔盘的每个孔中，以使最后的样品体 积为200μl，最终的MCH浓度为EC50。试验孔中的试验化合物的最终浓 度在1μM到5μM之间。通常，曝露于MCH的1个EC50的细胞表现出 的荧光响应为约10,000相对荧光单位。采用统计学意义的参数测试测 定而得的MCH受体的拮抗剂表现出的响应明显小于对照细胞中的响应， 达p≤0.05水平。通常，与相应的对照组相比，MCH受体拮抗剂的荧光 响应下降约20％，优选下降约50％，最优选下降至少80％。
采用上述方法，在MCH不存在的情况下，可通过测定表达MCH受 体的细胞的荧光响应这一方法，可对化合物作为MCH受体激动剂的能力 进行测定。导致细胞在背景上展现荧光的化合物为MCH受体激动剂。
实施例4
测定多巴胺D2和D4受体结合活性
本实施例阐述了测定化合物与多巴胺D4和D2受体的结合亲和力的 代表性标准试验。
采用中国仓鼠卵巢(CHO)细胞的球状颗粒进行试验，其中该细胞含有 重组表达灵长类动物D2，人类D4的多巴胺受体。4℃下，在100体积 (w/vol)，浓度为0.05M的Tris HCl缓冲液中匀化样品，其中该Tris HCl缓 冲液含有120mM NaCl，5mM MgCl2和1mM EDTA，且pH为7.4。然后 样品在30,000x g下离心，重悬浮和再次匀化。然后将样品如上述进行 离心，冷冻最终的组织样品直至使用。组织在浓度为0.05M，且含有 120mM NaCl的Tris HCl中以1∶20(wt/wol)进行重悬浮。
在25℃下孵育进行多巴胺能的结合实验，且1.0ml总的培养物中含 有0.4ml组织样品，0.1nM3H-YM 09151-2(奈莫必利(Nemonapride)，顺-5- 氯-2-甲氧基-4-(甲基氨基)-N-(2-甲基-2-(苯基甲基)-3-吡咯烷基)苯甲酰胺) 和感兴趣的化合物。非特异性结合的定义为在1微摩尔螺环哌啶酮的存 在下测得的结合；在不存在进一步的添加物时，非特异性结合小于总结 合的20％。
实施例5
MDCK细胞毒性试验
本实施例阐述了采用Madin Darby狗肾(MDCK)细胞毒性试验对化 合物的毒性进行评价的方法。
将1μl试验化合物加入到具有清洁底部的96孔盘(PACKARM Meriden，CT)的每一个孔中，使试验化合物的最终浓度为10微摩尔，100 微摩尔或200微摩尔。将不含试验化合物的溶剂加入到对照孔中。
根据ATCC产品信息页上的指示，将MDCK细胞，ATTC no. CCL-34(American Type Culture Collection，Manassas，VA)保存在无菌条 件下。使融汇的MDCK细胞发生胰蛋白酶化，收集后用温暖的(37℃)培 养基(VITACELL最低必需培养基(Minimum Essential Medium)Eagle， ATTC目录号#30-2003)稀释到浓度为0.1×106细胞/ml。将100μl稀释 的细胞加入到每个孔中，但不加入含有100μl温暖培养基的5个标准曲 线对照孔中，所述的温暖培养基中不含细胞。然后在稳定的摇动条件下， 使盘在95％O2，5％CO2中于37℃孵育2小时。孵育后，向每个孔中加 入50μl哺乳动物细胞溶菌溶液，每个孔用PACKARD TOPSEAL不干胶 贴纸盖上，并使盘在合适的摇晃器中于约700rpm的转速摇动2分钟。
相对于未处理的细胞，产生毒性的化合物将会使ATP的产量降低。 PACKARD，(Meriden，CT)ATP-LITE-M发光ATP检测试剂盒(产品号 为no.6016941)通常按照厂商说明书用于测定处理过的或未处理过的 MDCK细胞中的ATP产量。平衡PACKARD ATP LITE-M试剂至室温。 一旦达到平衡，在5.5ml基质缓冲溶液(来自于试剂盒)中再生冻干基质溶 液。在去离子水中再生冻干的ATP标准溶液，得到10mM料(stock)。对 于5个对照孔，向每个标准曲线对照孔中加入10μl连续稀释的PACKARD 标准物，得到每个连续的孔中的最终浓度为200nM，100nM，50nM，25nM 以及12.5nM。向所有孔中加入PACKARDA基质溶液(50μl)，然后盖 上所有孔，使盘在合适的摇晃器上在约700rpm的转速下摇动2分钟。在 每个盘的底部粘上白色的PACKARD不干胶贴纸，通过将盘包覆于箔内 并置于黑暗中达10分钟，使样品适应黑暗。然后采用发光计数仪(如 PACKARD TOPCOUNT微盘闪烁和发光计数仪或TECAN SPECTRAFLUOR PLUS)，在22℃下对发光进行测定，并从标准曲线计 算ATP水平。比较试验化合物处理的细胞内ATP水平与未处理细胞内 ATP水平。用10μM优选试验化合物处理的细胞内ATP水平为未处理的 细胞内测得的ATP水平的至少80％，优选为至少90％。当采用浓度为 100μM的试验化合物时，用优选试验化合物处理的细胞表现出的ATP水 平为未处理细胞内检测到的ATP水平的至少50％，优选为至少80％。
从上述内容应该理解的是，为了达到阐述的目的，本文描述了本发 明的特定实施方式，但可作出多种不偏离本发明的精神和范围的修改。
序列描述
SEQ ID NO：1  食蟹猴MCH1R DNA序列
SEQ ID NO：2  食蟹猴MCH1R氨基酸序列
SEQ ID NO：3  5’食蟹猴MCH1R引物
SEQ ID NO：4  3’食蟹猴MCH1R引物
                                   序列表
                              SEQUENCE LISTING
<110>神经原公司
<120>黑色素浓集激素受体的配体：取代的1-苄基-4-芳基哌嗪类似物
<130>PC031007C
<150>US 60/292，719
<151>2001-05-22
<160>4
<170>PatentIn version 3.1
<210>1
<211>1062
<212>DNA
<213>Macaca fasciculari s
atggacctgg aagcctcgct gctgcccact ggtcccaaca ccagcaacac ctctgatggc   60
cccgataacc tcacctcggc aggatcacct cctcgctcag ggagcgtctc ctacatcaac  120
atcatcatgc cttcggtgtt cggcaccatc tgcctcctgg gcatcatcgg gaactccatg  180
gtcatcttcg cggtcgtgaa gaagtccaag ctgcactggt gcaacaatgt ccccgacatc  240
ttcatcatca acctctcggt ggtggatctc ctctttctcc tgggcatgcc cttcatgatc  300
caccagctca tgggcaatgg ggtgtggcac tttggggaga ccatgtgcac cctcatcacg  360
gccatggatg ccaatagtca gttcaccagc acctacatcc tgaccgccat ggccattgac  420
cgctacctgg ccaccgtcca ccccatctct tccacaaagt tccggaagcc ctctgtggcc  480
accctggtga tctgcctcct gtgggccctc tccttcatca gcatcacccc cgtgtggttg  540
tatgccagac tcatcccctt cccaggaggt gcagtgggct gcggcatccg cttgcccaac  600
ccggacactg acctttactg gttcaccctg taccagtttt tcctggcctt tgccctgccc  660
ttcgtggtca tcacggccgc atacgtgagg atcctgcagc gcatgacgtc ctcagtggcc  720
cccgcctccc agcgcagcat ccggctgcgg acaaagaggg tgacccgcac agccatcgcc  780
atctgcctgg tcttctttgt gtgctgggca ccctactatg tgctacagct gacccagttg  840
tccatcagcc gcccgaccct cacctttgtc tacctgtaca atgcggccat cagcttgggc  900
tacgccaaca gctgcctcaa cccctttgtg tacattgtgc tctgcgagac gttccgcaaa  960
cgcttggtcc tttcggtgaa gcctgcagcc caggggcagc ttcgcgctgt cagcaacgct 1020
cagacggctg acgaggagag gacagaaagc aaaggtacct ga                    1062
<210>2
<211>353
<212>PRT
<213>Macaca fascicularis
<400>2
Met Asp Leu Glu Ala Ser Leu Leu Pro Thr Gly Pro Asn Thr Ser Asn
1               5                   10                  15
Thr Ser Asp Gly Pro Asp Asn Leu Thr Ser Ala Gly Ser Pro Pro Arg
            20                  25                  30
Ser Gly Ser Val Ser Tyr Ile Asn Ile Ile Met Pro Ser Val Phe Gly
        35                  40                  45
Thr Ile Cys Leu Leu Gly Ile Ile Gly Asn Ser Met Val Ile Phe Ala
    50                  55                  60
Val Val Lys Lys Ser Lys Leu His Trp Cys Asn Asn Val Pro Asp Ile
65                  70                  75                  80
Phe Ile Ile Asn Leu Ser Val Val Asp Leu Leu Phe Leu Leu Gly Met
                85                  90                  95
Pro Phe Met Ile His Gln Leu Met Gly Asn Gly Val Trp His Phe Gly
            100                 105                 110
Glu Thr Met Cys Thr Leu Ile Thr Ala Met Asp Ala Asn Ser Gln Phe
        115                 120                 125
Thr Ser Thr Tyr Ile Leu Thr Ala Met Ala Ile Asp Arg Tyr Leu Ala
    130                 135                 140
Thr Val His Pro Ile Ser Ser Thr Lys Phe Arg Lys Pro Ser Val Ala
145                 150                 155                 160
Thr Leu Val Ile Cys Leu Leu Trp Ala Leu Ser Phe Ile Ser Ile Thr
                165                 170                 175
Pro Val Trp Leu Tyr Ala Arg Leu Ile Pro Phe Pro Gly Gly Ala Val
            180                 185                 190
Gly Cys Gly Tle Arg Leu Pro Asn Pro Asp Thr Asp Leu Tyr Trp Phe
        195                 200                 205
Thr Leu Tyr Gln Phe Phe Leu Ala Phe Ala Leu Pro Phe Val Val Ile
    210                 215                 220
Thr Ala Ala Tyr Val Arg Ile Leu Gln Arg Met Thr Ser Ser Val Ala
225                 230                 235                 240
Pro Ala Ser Gln Arg Ser Ile Arg Leu Arg Thr Lys Arg Val Thr Arg
                245                 250                 255
Thr Ala Ile Ala Ile Cys Leu Val Phe Phe Val Cys Trp Ala Pro Tyr
            260                 265                 270
Tyr Val Leu Gln Leu Thr Gln Leu Ser Ile Ser Arg Pro Thr Leu Thr
        275                 280                 285
Phe Val Tyr Leu Tyr Asn Ala Ala Ile Ser Leu Gly Tyr Ala Asn Ser
    290                 295                 300
Cys Leu Asn Pro Phe Val Tyr Ile Val Leu Cys Glu Thr Phe Arg Lys
305                 310                 315                 320
Arg Leu Val Leu Ser Val Lys Pro Ala Ala Gln Gly Gln Leu Arg Ala
                325                 330                 335
Val Ser Asn Ala Gln Thr Ala Asp Glu Glu Arg Thr Glu Ser Lys Gly
       340                 345                 350
Thr
<210>3
<211>24
<212>DNA
<213>Artificial
<220>
<223>5’macaque MCH1R primer
<400>3
gagcaggcga ccggcactgg ctgg                         24
<210>4
<211>28
<212>DNA
<213>Artificial
<220>
<223>3’macaque MCH1R primer
<400>4
ggaggtgtgc agggtggcag gggaagta                     28