发明领域
[0001] 本发明涉及为
磷酸二酯酶4(PDE4)
抑制剂和毒蕈
碱M3受体拮抗剂的新化合物。更具体地，本发明涉及如下所述的式(I)的化合物、制备这些化合物的方法、包含它们的组合物及其
治疗用途。
[0002] 发明背景
[0003] 慢性阻塞性
肺疾病(COPD)是呼吸病，其特征在于进行性的、不完全可逆的气流受限，与对有毒颗粒或气体的异常肺
炎症应答相关。
[0004] 由于该原因，支气管松弛和炎症应答抑制代表治疗COPD的机理性方法，其可改善例如呼吸困难、哮鸣、胸部紧迫感、咳嗽和粘液分泌这样的症状，改善
健康状态并且减轻恶化。
[0005] 目前，针对COPD的药物疗法的选择分成2个一般类别：支气管扩张药(β2-肾上腺素受体激动剂、抗毒蕈碱药和甲基黄嘌呤类)和抗炎药(糖皮质类固醇和选择性磷酸二酯酶-4(PDE4)抑制剂)。
[0006] 支气管扩张药是用于症状缓解的最新主要治疗依据。
[0007] 作为抗胆碱能支气管扩张药，毒蕈碱M3拮抗剂的效能基于如下事实：COPD患者中气流变窄的主要可逆要素是在一些病理性情况中由支气管神经节后迷走神经传出释放至气道平滑肌的乙酰胆碱(ACh)增加。因此，拮抗毒蕈碱受体处的ACh的作用的化合物能够抵抗支气管收缩且由此改善这些患者的肺功能。
[0008] 毒蕈碱拮抗剂阻断ACh在毒蕈碱受体处的作用。目前，存在5种已知的毒蕈碱受体亚型(M1-M5)；人气道平滑肌包含M1、M2和M3受体。M1受体有利于通过副交感神经节的神经传递，且在人气道中的粘膜下腺上微弱地表达。M2受体位于平滑肌
纤维上。一些研究已经启示介导例如β激动剂这样的化合物的腺苷酸环化酶活化导致的气道平滑肌松弛抑制的M2的微小作用。此外，在投射到气道平滑肌和产生粘液的细胞的神经节后副交感神经上发现了突触前M2受体。这些突触前M2自体受体提供
负反馈机制，当受到刺激时，其抑制ACh进一步释放。已知突触后M3受体介导
呼吸道中的平滑肌收缩和粘液分泌，使得它们成为COPD的症状缓解的主要目标。因此，在气道中，毒蕈碱拮抗剂的主要作用是支气管扩张和通过阻断ACh-诱导的在副交感神经系统中的作用减少粘液分泌。
[0009] 由于毒蕈碱受体的分布，所以结合呼吸道外部的毒蕈碱受体的全身可利用的活性剂存在产生不需要的
副作用的可能性，例如心动过速、
口腔干燥、尿潴留和便秘。然而，口腔干燥是最常见的全身抗胆碱能副作用，其与抗毒蕈碱拮抗剂的应用相关，这是全身阻断M1和M3受体的结果，最可能的严重全身作用是心动过速，这是因阻断心脏M2受体导致的。
[0010] 经批准用于治疗COPD的吸入抗胆碱能抗毒蕈碱药包括异丙托溴铵
氧托溴铵 和噻托溴铵 异丙托铵和氧托品是短效活性剂。相反，噻
托溴铵是唯一目前销售用于COPD的长效抗毒蕈碱剂(LAMA)，经证实其适合于每日一次作为干粉施用。几种其它较新的LAMAs新近注册用于治疗COPD，包括阿地溴铵和格隆溴铵或目前处于III期研发中，包括芜地溴铵(umeclidinium)。
[0011] 尽管支气管扩张药可十分有效地改善症状，但是它们无法解决潜在的慢性炎症或气道结构的改变。
[0012] 使用作为抗炎药的糖皮质
激素的标准治疗已经证实效能有限。然而，在目前研发的抗炎药中，经证实PDE4抑制剂通过其升高cAMP
水平的能
力有效地减弱各种炎症细胞应答。
[0013] PDE4是在中性粒细胞和T细胞中表达的主要的PDE，这启示PDE4抑制剂有效地控制COPD中的炎症。抑制炎症细胞中的PDE4影响各种特异性应答，例如促炎介体包括细胞因子和
活性氧的产生和/或释放，其中在模拟哮喘和COPD以及炎性肠病、特应性皮炎、
银屑病和类
风湿性关节炎的一些方面的动物模型中充分证明了效能。
[0014] 选择性PDE4抑制剂罗氟司特 是经批准的用于治疗与慢性支气管炎和恶化病史相关的COPD的磷酸二酯酶-4抑制剂。罗氟司特抑制小鼠中的COPD的吸烟模型中的肺部炎症和肺气肿。在COPD患者中，在4周内给予的口服罗氟司特显著地减少了痰中的中性粒细胞数量(达36％)和CXCL8浓度。在临床试验中，在12个月内给予的罗氟司特(500mg，每日1次)将COPD患者的肺功能改善至较小的程度，但在减轻恶化或改善
生活质量方面几乎没有影响。更近来，已经证实罗氟司特在具有存在频繁恶化和粘液分泌过多的严重疾病的患者中显著地改善FEV 1(约50ml)和减轻恶化(约15％)。罗氟司特在添加到沙美特罗或噻托溴铵中时提供临床有益性，且由此可以用作具有严重疾病的患者中的额外治疗。
[0015] 然而，迄今为止PDE4抑制剂的临床应用因发生与机理相关的副作用而受阻，所述副作用包括头痛、恶心和呕吐，它们通常限制了最大耐受剂量。这一问题可以通过吸入递送和设计具有潜在的更有利治疗窗的化合物来克服。
[0016] 由于支气管松弛和炎症应答抑制代表治疗COPD的机理性方法，所以毒蕈碱M3拮抗作用与选择性PDE4抑制作用的组合可以产生一类新的药物，其在一种分子中合并了支气管扩张和抗炎特性，这在处置COPD中打开了新的视
角。
[0017] 本发明通过提供本发明的化合物解决了上述需求。
[0018] 发明概述
[0019] 本发明涉及作为磷酸二酯酶4(PDE4)抑制剂和毒蕈碱M3受体拮抗剂起作用的化合物、制备所述化合物的方法、包含它们的组合物及其治疗用途。
[0020] 具体地，本发明涉及式(I)的化合物、其在吡啶环上的N-氧化物、氘代衍生物及其药学上可接受的盐或
溶剂合物，
[0021]
[0022] 其中
[0023] R1各自是氢或选自：卤素、(C1-C4)烷基、(C1-C4)烷氧基、(C1-C4)卤代烷基、羟基、-SO2NR6R7、-CN、-NR8SO2R9、-NR6R7、-CONR6R7和-NR8COR9，且其中所述(C1-C4)烷基任选地被选自(C3-C7)环烷基、羟基和-NR6R7的一个或多个基团取代，且其中所述(C1-C4)烷氧基任选地被一个或多个卤素或基团(C3-C7)环烷基取代，其中，
[0024] R6是氢或(C1-C6)烷基；
[0025] R7是氢或(C1-C6)烷基；
[0026] R8是氢或(C1-C6)烷基；
[0027] R9是氢或(C1-C6)烷基；
[0028] n是1-3的整数；
[0029] R2各自是氢或选自：卤素、(C1-C4)烷基、(C1-C4)烷氧基、(C1-C4)卤代烷基、羟基、-SO2NR10R11、-CN和-NR12SO2R13，且其中所述(C1-C4)烷基和所述(C1-C4)烷氧基任选地被一个或多个基团(C3-C7)环烷基取代，其中
[0030] R10是氢或(C1-C6)烷基；
[0031] R11是氢或(C1-C6)烷基；
[0032] R12是氢或(C1-C6)烷基；
[0033] R13是氢或(C1-C6)烷基；
[0034] m是1-3的整数；
[0035] R3和R4不同或相同且独立地选自：
[0036] -H；
[0037] -(C3-C7)环烷基羰基；
[0038] -(C1-C6)烷基，其任选地被一个或多个选自(C3-C7)环烷基或(C5-C7)环烯基的取代基取代；
[0039] -(C1-C6)卤代烷基；
[0040] -(C3-C7)环烷基；
[0041] -(C5-C7)环烯基；
[0042] -(C2-C6)烯基；和
[0043] -(C2-C6)炔基；
[0044] 或R3和R4与居间连接的
原子一起形成式(r)的2,2-二氟-1,3-二氧戊环环，其与具有基团–OR3和-OR4的苯基部分稠合，其中星号表示与该苯环共有的
碳原子：
[0045]
[0046] R5无论何时存在，都各自独立地选自：CN、NO2、CF3和卤原子；
[0047] k为0或1－3的整数；
[0048] L1选自：
[0049] -价键,
[0050] --(CH2)p-；
[0051] -[3]-(CH2)p-O-[4]；
[0052] -[3]-(CH2)p-NR10-(CH2)t-[4]；
[0053] -[3]-(CH2)p-OC(O)-[4]；
[0054] -[3]-(CH2)p-NR10C(O)-[4]；
[0055] -[3]-(CH2)p-NR10S(O2)-[4]；和
[0056] -[3]-(CH2)p-S(O2)-N(R10)-[4]，
[0057] 其中[3]和[4]分别表示基团L1连接至羰基基团和环W1的点，且其中
[0058] R10如上所述；
[0059] p为1－4的整数；且
[0060] t为1－4的整数；
[0061] W1选自二价(C5-C6)亚杂芳基基团；
[0062] W2选自芳基和杂芳基；
[0063] L2是选自-(CH2)q-的基团，其中q为1或2；
[0064] L3是价键或选自-(CH2)s-的基团，其中s为1或2；
[0065] X选自N和[1]-N(R19)-CH<[2]，其中[1]表示基团X连接至L2的点，且[2]表示基团X连接至基团W2和基团L3-C(O)OA的点，且其中R19选自氢、(C1-C6)烷基和苄基，或当W2是苯环时，R19任选地是与W2在相对于X的间位上连接的(C1-C6)亚烷基，以便与W2和居间连接的原子一起形成根据式(t)的稠合环，其中 表示连接至分子其余部分的点：
[0066]
[0067] A选自：
[0068] -基团–(CH2)s-NR16R17，其中s为1－4的整数，且R16和R17独立地是氢或(C1-C4)烷基；和
[0069] -包含一个N杂原子或NR18基团的饱和单环、双环或三环环系，其中R18选自(C1-C4)烷基和苄基。
[0070] 本发明还涉及式(I)的化合物的吡啶环上的相应N-氧化物，其表示为式(IA)[0071]
[0072] 其中R1、R2、R3、R4、R5、L1、W1、L2、W2、X、L3、A、m、n和k如上所述。
[0073] 本发明还涉及式(I)的化合物的相应氘代衍生物，其中至少一个氢原子被相应的氘原子取代。
[0074] 本发明还包括其药学上可接受的盐和/或溶剂合物。
[0075] 术语“药学上可接受的盐”是指式(I)的化合物或其在吡啶环上的相应N-氧化物的衍生物，其中母体化合物适当地通过将任意的游离酸或碱性基团(如果存在的话)用通常预作为药学上可接受的任意碱或酸转
化成相应的加成盐而被修饰。
[0076] 所述盐的适合的实例可以包括碱性残基例如
氨基和
无机酸或
有机酸残基例如羧基的无机酸或有机酸的加成盐。
[0077] 可以适当地用于制备本发明中的盐的无机碱的阳离子包含碱金属或碱土
金属离子，例如
钾、钠、
钙或镁。
[0078] 通过使作为碱起作用的主要化合物与无机酸或有机酸反应成盐得到的那些包含，例如
盐酸盐、
氢溴酸盐、
硫酸盐、
磷酸盐、乙酸盐、甲磺酸盐、樟脑磺酸盐、
草酸盐、
马来酸盐、富马酸盐、
琥珀酸盐和
柠檬酸盐。
[0079] 普通技术人员可以理解，许多有机化合物可以与它们在其中反应或它们从其中沉淀或结晶的溶剂形成配合物。这些配合物称作“溶剂合物”。本发明化合物的药学上可接受的溶剂合物属于本发明的范围。
[0080] 本发明范围内还包括式(I)化合物、其吡啶环上的N-氧化物或其药学上可接受的盐或溶剂合物的多晶型物和晶型。
[0081] 在本发明任意方面中定义的下文式(I)、(IA)、(IB)、(IC)、(ID)、(Ia)、(Ib)、(Ic)、(Id)和(I)’的化合物、其相应的吡啶环上的N-氧化物、其对映体、其非对映异构体、其药学上可接受的盐和溶剂合物及其多晶型物或晶型(除外化学方法中所述的中间体化合物)称作“本发明的化合物”。
[0082] 本发明还包含制备本发明化合物的方法。
[0083] 本发明还提供单独的本发明化合物或本发明化合物与一种或多种药学上可接受的载体的组合的药物组合物。
[0084] 在另一个方面，本发明提供本发明化合物作为药剂的用途。
[0085] 在一个方面，本发明提供本发明化合物用于制备药剂的用途。
[0086] 特别地，本发明提供本发明化合物在
预防和/或治疗任意疾病中的用途，其中抑制PDE4活性以及毒蕈碱M3受体拮抗作用是期望的。
[0087] 特别地，可以将本发明的化合物单独地施用或与其它活性成分组合施用，以预防和/或治疗特征在于气道阻塞的呼吸道疾病，例如哮喘和COPD。在一个实施方案中，可以为预防和/或治疗COPD施用本发明的化合物。
[0088] 在另一个方面，本发明提供本发明化合物在制备用于预防和/或治疗其中抑制PDE4活性以及毒蕈碱M3受体拮抗作用是期望的任意疾病的药剂中的用途。
[0089] 此外，本发明提供一种预防和/或治疗其中抑制PDE4活性以及毒蕈碱M3受体拮抗作用是期望的任意疾病的方法，所述方法包括给有此治疗需要的患者施用
治疗有效量的本发明的化合物。
[0090] 本发明的另一个方面提供适合的吸入装置，其包含本发明化合物的药物组合物，所述装置可以相应地选自单剂量或多剂量
干粉吸入器、加压定量吸入器或
雾化器，特别是软雾雾化器(soft mist nebulizer)。
[0091] 本发明的另一个方面提供药盒，其包含单独的或与一种或多种活性成分的组合的本发明化合物的药物组合物和装置，所述装置可以是单剂量或多剂量干粉吸入器、定量雾化吸入器或雾化器。
[0092] 定义
[0093] 术语“卤原子”包括氟、氯、溴和碘，优选氯。
[0094] 术语“(C1-Cx)烷基”，其中x是大于1的整数，是指直链和支链烷基，其中组分碳原子的数目是在1至x的范围内。具体的烷基是甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、仲丁基、异丁基和叔丁基。
[0095] 类似地，术语“(C1-Cx)亚烷基”是指二价(C1-Cx)烷基基团，其中(C1-Cx)烷基如上述所定义。
[0096] 术语“(C1-Cx)烷氧基”，其中x是大于1的整数，是指直链和支链烷氧基，其中组分碳原子的数目是在1至x的范围内。具体的烷氧基是甲氧基、乙氧基、正丙氧基、异丙氧基、正丁氧基、仲丁氧基、异丁氧基和叔丁氧基。
[0097] 表述“(C1-Cx)卤代烷基”是指上面定义的“(C1-Cx)烷基”基团，其中一个或多个氢原子被一个或多个卤原子替代，所述卤原子可以彼此相同或不同。
[0098] 因此，所述(C1-C6)卤代烷基的实例可以包括卤代的烷基、多卤代的烷基和其中所有氢原子被卤原子替代的全卤代的烷基，例如三氟甲基或二氟甲基。
[0099] 术语“(C3-Cy)环烷基”，在y是大于或等于3的整数的情况下，是指包含3至y个环碳原子的饱和环状
烃基。实例包括：环丙基、环丁基、环戊基、环己基和环庚基。
[0100] 表述“(C3-Cy)环烷基羰基”是指(C3-Cy)环烷基CO-基团，其中基团“(C3-Cy)环烷基”具有上述定义的含义。
[0101] 术语“(C2-C6)烯基”是指具有一个或多个双键的、处于顺式或反式构型的、直链或支链、共轭的或不共轭的碳链，其中原子数是在2至6的范围内。
[0102] 术语“(C5-Cz)环烯基”，其中z是大于或等于5的整数，是指包含5至z个环碳原子和一个或多个双键的环状烃基。
[0103] 术语“(C2-C6)炔基”是指具有一个或多个三键的直链或支链碳链，其中原子数是在2至6的范围内。
[0104] 表述“(C5-C6)亚杂芳基”是指具有5－6个环原子且其中至少一个环原子是杂原子(例如N、NH、S或O)的二价单环环系。适合的(C5-C6)亚杂芳基的非限制性实例包括，例如，在任意适合
位置上的噻吩二基、呋喃二基、吡咯二基、吡唑二基、咪唑二基、三唑二基、四唑二基、异噁唑二基、噁唑二基、异噻唑二基、噻唑二基、吡啶二基基团等。
[0105] 术语“芳基”是指具有6－10个环碳原子的单环或双环系统，其中至少一个环是芳族的。
[0106] 表述“杂芳基”是指具有5－11个环原子的单环或双环系统，其中至少一个环是芳族的且其中至少一个环原子是杂原子(例如N、NH、S或O)。
[0107] 具有5－6个环原子的适合的芳基或杂芳基的实例包括，例如苯、噻吩、吡咯、吡唑、咪唑、三唑、四唑、异噁唑、噁唑、异噻唑、噻唑、吡啶、呋喃衍生的残基等。
[0108] 具有6个以上环原子的适合的芳基或杂芳基的实例包括
萘、联苯撑、四氢化萘、嘌呤、蝶啶、苯并咪唑、苯并三唑、喹啉、异喹啉、吲哚、异吲哚、吲唑、苯并噻吩、苯并呋喃、苯并噁唑、二氢苯并二氧杂环戊烯、二氢苯并二氧杂环己烯、苯并噁嗪残基等。
[0109] 本文中使用的表述“杂环环系”是指任选取代的单环、双环或三环环系，其可以是饱和的、部分不饱和的或不饱和的，例如具有5－11个环原子的(C3-C7)杂环烷基或杂芳基，其中至少一个环原子是杂原子(例如N、S或O)，在本定义中包括桥接的单环、双环或三环环系。
[0110] “杂环环系”的实例为：吡咯烷基、咪唑烷基、哌嗪基、哌啶基、奎宁环基、8-氮杂双环[3.2.1]辛烷基或去羟基东莨菪碱(scopine)残基，它们均任选地在氮原子上被(C1-Cx)烷基或苄基取代。
[0111] 发明详述
[0112] 本发明涉及一类同时作为磷酸二酯酶4(PDE4)抑制剂和毒蕈碱M3受体拮抗剂起作用的化合物。
[0113] 本发明涉及式(I)的衍生物、其吡啶环上的N-氧化物、氘代衍生物及其药学上可接受的盐或溶剂合物，
[0114]
[0115] 其中R1、R2、R3、R4、R5、L1、W1、L2、W2、X、L3、A、n、m和k如上所定义。
[0116] 本领域技术人员显而易见，式(I)的化合物至少包含一个立体中心，即表示为碳原子(1)，且由此作为光学立体异构体存在。
[0117] 本领域技术人员显而易见，本发明的化合物可以具有至少2个立体中心，由此它们可以相应地至少作为4种非对映异构体存在。如果本发明的化合物具有2个以上立体中心，则它们作为2n个非对映异构体存在(其中n这里是指立体中心的数目)。应理解所有这样的异构体及其任意比例的混合物均包括在本发明范围内。
[0118] 在一个优选的实施方案中，本发明涉及式(I)’的化合物，其为如上述所定义的式(I)的化合物，其中碳(1)的绝对构型如下所示：
[0119]
[0120] 以基于基团优先性的Cahn-Ingold-Prelog命名法为
基础指定碳(1)的绝对构型。
[0121] 在一个优选的实施方案中，对于式(I)的化合物，碳(1)上的绝对构型为(S)。具有这类构型的化合物一般显示优于相应的在碳(1)上具有(R)构型的化合物的PDE4活性。
[0122] 在一个实施方案中，当A是如下所定义的式(i)的基团时，式(I)的化合物可以作为至少4种如下文所报道的非对映异构体
配对(Ia)、(Ib)、(Ic)和(Id)存在，它们包含在本发明范围内；当X是[1]-N(R19)-CH<[2]且[1]表示基团X连接至L2的点且[2]表示基团X连接至W2和羰基基团的点时，非对映体异构体(Ia)、(Ib)、(Ic)、(Id)的每个配对均由在基团X的碳原子的立体中心上的相应的差向异构体混合物构成。
[0123]
[0124] 本领域技术人员应当理解，式(Ia)、(Ib)、(Ic)、(Id)的化合物还可以作为单一非对映异构体得到，当X是[1]-N(R19)-CH<[2]且[1]表示基团X连接至L2的点且[2]表示基团X连接至W2和羰基基团的点时，将X的碳原子上的立体中心定义为R或S。
[0125] 在一个实施方案中，式(Ia)的化合物如上述所报道的提供或作为其单一非对映异构体提供。
[0126] 应当理解，上下文中对式(I)的化合物所述的所有优选的基团或实施方案可以彼此组合并且适用于式(IA)、(IB)、(IC)、(ID)、(Ia)、(Ib)、(Ic)、(Id)和(I)’的化合物，同样可以做必要的修正。
[0127] 在一个优选的实施方案中，本发明提供式(IA)的化合物，其为式(I)化合物的吡啶环上的N-氧化物、氘代衍生物及其药学上可接受的盐和溶剂合物：
[0128]
[0129] 其中R1、R2、R3、R4、R5、L1、W1、L2、W2、A、X、L3、m、n和k如上所述。
[0130] 在一个优选的实施方案中，k是2，且R5是卤原子。在另一个优选的实施方案中，R5是吡啶环的3和5位上的2个氯原子。
[0131] 在一个优选的实施方案中，R4选自(C1-C6)卤代烷基和(C1-C6)烷基，且R3选自(C3-C7)环烷基或(C1-C6)烷基，其任选地被(C3-C7)环烷基取代。
[0132] 在另一个优选的实施方案中，R3和R4与居间连接的原子一起形成与带有基团–OR3和–OR4的苯基部分稠合的式(r)的2,2-二氟-1,3-二氧戊环环，其中星号表示与这类苯环共有的碳原子：
[0133]
[0134] 在另一个优选的实施方案中，R4是(C1-C6)卤代烷基，且R3是被(C3-C7)环烷基取代的(C1-C6)烷基。
[0135] 在另一个优选的实施方案中，R3是(C1-C6)烷基，且R4是(C1-C6)烷基。
[0136] 在另一个实施方案中，X是[1]-N(R19)-CH<[2]，其中[1]表示基团X连接至L2的点，且[2]表示基团X连接至基团W2和基团L3-C(O)OA 的点，W2是苯环，R19是在相对于X的邻位上与W2连接的(C1-C6)亚烷基，以便与W2形成根据式(t)的稠合环：
[0137]
[0138] 在另一个优选的实施方案中，上述根据式(t)的稠合环是1,2,3,4-四氢异喹啉-1基-2基。
[0139] 一组优选的化合物是根据通式(IB)的化合物及其相应的吡啶环上的N-氧化物、氘代衍生物及其药学上可接受的盐和溶剂合物，其中4-吡啶基环在3和5位上被2个氯原子取代：
[0140]
[0141]
[0142] 其中R1、R2、R3、R4、A、L1、W1、L2、W2、X、L3、m和n如上述对式(I)的化合物所定义。
[0143] 另一组优选的化合物是如下所示的根据式(IC)的化合物及其相应的吡啶环上的N-氧化物或其药学上可接受的盐：
[0144]
[0145] 其中R1、R2、A、L1、W1、L2、W2、X、L3、m和n如上述对式(I)的化合物所定义。
[0146] 更优选的一组化合物是如下所示的根据式(ID)的化合物、其相应的吡啶环上的N-氧化物或其药学上可接受的盐和溶剂合物：
[0147]
[0148] 其中R1、R2、A、L1、W1、L2、W2、X、L3、m和n如上述对式(I)的化合物所定义。
[0149] 在一个实施方案中，A是由式(i)、(ii)、(iii)或(iv)的基团表示的基团(b)：
[0150]
[0151] 其中
[0152] f＝1、2或3；
[0153] g＝1、2或3。
[0154] 在另一个实施方案中，A是由式(i)的基团表示的基团(b)：
[0155]
[0156] 根据优选的实施方案，本发明提供下文报道的化合物：
[0157] 5-[(2-氟-N-[(3R)-奎宁环-3-基]氧基羰基-苯胺基)甲基]噻吩-2-
甲酸[(1S)-2-(3,5-二氯-1-氧化-吡啶-1-鎓-4-基)-1-(3,4-二甲氧基苯基)乙基]酯；
[0158] 5-[(2-氟-N-[(3S)-奎宁环-3-基]氧基羰基-苯胺基)甲基]噻吩-2-甲酸[(1S)-2-(3,5-二氯-1-氧化-吡啶-1-鎓-4-基)-1-(3,4-二甲氧基苯基)乙基]酯；
[0159] 5-[[2-氟-N-[[(1R,5S)-8-甲基-8-氮杂双环[3.2.1]辛-3-基]氧基羰基]苯胺基]甲基]噻吩-2-甲酸[(1S)-2-(3,5-二氯-1-氧化-吡啶-1-鎓-4-基)-1-(3,4-二甲氧基苯基)乙基]酯；
[0160] 5-[[2-氟-N-[(1-甲基-4-哌啶基)氧基羰基]苯胺基]甲基]噻吩-2-甲酸[(1S)-2-(3,5-二氯-1-氧化-吡啶-1-鎓-4-基)-1-(3,4-二甲氧基苯基)乙基]酯；
[0161] 5-[(2-羟基-N-[(3R)-奎宁环-3-基]氧基羰基-苯胺基)甲基]噻吩-2-甲酸[(1S)-2-(3,5-二氯-1-氧化-吡啶-1-鎓-4-基)-1-(3,4-二甲氧基苯基)乙基]酯；
[0162] 5-[(2-氟-N-[(3R)-奎宁环-3-基]氧基羰基-苯胺基)甲基]噻吩-2-甲酸[(1S)-2-(3,5-二氯-1-氧化-吡啶-1-鎓-4-基)-1-[4-(二氟甲氧基)-3-(三氘代甲氧基)苯基]乙基]酯；
[0163] 5-[(2-氟-N-[(3R)-奎宁环-3-基]氧基羰基-苯胺基)甲基]噻吩-2-甲酸[(1S)-2-(3,5-二氯-1-氧化-吡啶-1-鎓-4-基)-1-[4-(二氟甲氧基)-3-乙氧基-苯基]乙基]酯；
[0164] 5-[(2-氟-N-[(3R)-奎宁环-3-基]氧基羰基-苯胺基)甲基]噻吩-2-甲酸[(1S)-2-(3,5-二氯-1-氧化-吡啶-1-鎓-4-基)-1-[4-(二氟甲氧基)-3-甲氧基-苯基]乙基]酯；
[0165] 5-[[3-吡啶基-[(3R)-奎宁环-3-基]氧基羰基-氨基]甲基]噻吩-2-甲酸[(1S)-2-(3,5-二氯-1-氧化-吡啶-1-鎓-4-基)-1-(3,4-二甲氧基苯基)乙基]酯；
[0166] 5-[[2-吡啶基-[(3R)-奎宁环-3-基]氧基羰基-氨基]甲基]噻吩-2-甲酸[(1S)-2-(3,5-二氯-1-氧化-吡啶-1-鎓-4-基)-1-(3,4-二甲氧基苯基)乙基]酯；
[0167] 5-[(2-氟-N-[(3R)-奎宁环-3-基]氧基羰基-苯胺基)甲基]噻吩-2-甲酸[1-[3-(环丙基甲氧基)-4-甲氧基-苯基]-2-(3,5-二氯-1-氧化-吡啶-1-鎓-4-基)乙基]酯；
[0168] 5-[[2-吡啶基-[(3R)-奎宁环-3-基]氧基羰基-氨基]甲基]噻吩-2-甲酸[(1S)-1-[3-(环丙基甲氧基)-4-(二氟甲氧基)苯基]-2-(3,5-二氯-1-氧化-吡啶-1-鎓-4-基)乙基]酯；
[0169] 5-[[3-吡啶基-[(3R)-奎宁环-3-基]氧基羰基-氨基]甲基]噻吩-2-甲酸[(1S)-1-[3-(环丙基甲氧基)-4-(二氟甲氧基)苯基]-2-(3,5-二氯-1-氧化-吡啶-1-鎓-4-基)乙基]酯；
[0170] 5-[(2-氟-N-[(3R)-奎宁环-3-基]氧基羰基-苯胺基)甲基]噻吩-2-甲酸[(1S)-1-[3-(环丙基甲氧基)-4-(二氟甲氧基)苯基]-2-(3,5-二氯-1-氧化-吡啶-1-鎓-4-基)乙基]酯；
[0171] 5-[(2-甲氧基-N-[(3R)-奎宁环-3-基]氧基羰基-苯胺基)甲基]噻吩-2-甲酸[(1S)-2-(3,5-二氯-1-氧化-吡啶-1-鎓-4-基)-1-(3,4-二甲氧基苯基)乙基]酯；
[0172] 5-[[[(3R)-奎宁环-3-基]氧基羰基-噻唑-2-基-氨基]甲基]噻吩-2-甲酸[(1S)-2-(3,5-二氯-1-氧化-吡啶-1-鎓-4-基)-1-(3,4-二甲氧基苯基)乙基]酯；
[0173] 5-[(2-氟-N-[(3R)-奎宁环-3-基]氧基羰基-苯胺基)甲基]噻吩-2-甲酸[(1S)-2-(3,5-二氯-1-氧化-吡啶-1-鎓-4-基)-1-[4-(二氟甲氧基)-3-异丙氧基-苯基]乙基]酯；
[0174] 5-[[[(3R)-奎宁环-3-基]氧基羰基-噻唑-2-基-氨基]甲基]噻吩-2-甲酸[(1S)-1-[3-(环丙基甲氧基)-4-(二氟甲氧基)苯基]-2-(3,5-二氯-1-氧化-吡啶-1-鎓-4-基)乙基]酯；
[0175] 5-[[(2-甲氧基-3-吡啶基)-[(3R)-奎宁环-3-基]氧基羰基-氨基]甲基]噻吩-2-甲酸[(1S)-2-(3,5-二氯-1-氧化-吡啶-1-鎓-4-基)-1-(3,4-二甲氧基苯基)乙基]酯；
[0176] 5-[(3-氰基-N-[(3R)-奎宁环-3-基]氧基羰基-苯胺基)甲基]噻吩-2-甲酸[(1S)-2-(3,5-二氯-1-氧化-吡啶-1-鎓-4-基)-1-(3,4-二甲氧基苯基)乙基]酯；
[0177] 5-[(3-氟-N-[(3R)-奎宁环-3-基]氧基羰基-苯胺基)甲基]噻吩-2-甲酸[(1S)-2-(3,5-二氯-1-氧化-吡啶-1-鎓-4-基)-1-(3,4-二甲氧基苯基)乙基]酯；
[0178] 5-[(N-[(3R)-奎宁环-3-基]氧基羰基苯胺基)甲基]噻吩-2-甲酸[(1S)-2-(3,5-二氯-1-氧化-吡啶-1-鎓-4-基)-1-(3,4-二甲氧基苯基)乙基]酯；
[0179] 5-[[3-(二氟甲基)-N-[(3R)-奎宁环-3-基]氧基羰基-苯胺基]甲基]噻吩-2-甲酸[(1S)-2-(3,5-二氯-1-氧化-吡啶-1-鎓-4-基)-1-(3,4-二甲氧基苯基)乙基]酯；
[0180] 5-[(3-羟基-N-[(3R)-奎宁环-3-基]氧基羰基-苯胺基)甲基]噻吩-2-甲酸[(1S)-2-(3,5-二氯-1-氧化-吡啶-1-鎓-4-基)-1-(3,4-二甲氧基苯基)乙基]酯；
[0181] 5-[(3-羟基-N-[(3R)-奎宁环-3-基]氧基羰基-苯胺基)甲基]噻吩-2-甲酸[(1S)-1-[3-(环丙基甲氧基)-4-(二氟甲氧基)苯基]-2-(3,5-二氯-1-氧化-吡啶-1-鎓-4-基)乙基]酯；
[0182] 5-[(2-氟-N-[(3R)-1-甲基吡咯烷-3-基]氧基羰基-苯胺基)甲基]噻吩-2-甲酸[(1S)-2-(3,5-二氯-1-氧化-吡啶-1-鎓-4-基)-1-(3,4-二甲氧基苯基)乙基]酯；
[0183] 4-[(2-氟-N-[(3R)-奎宁环-3-基]氧基羰基-苯胺基)甲基]噻吩-2-甲酸[(1S)-2-(3,5-二氯-1-氧化-吡啶-1-鎓-4-基)-1-(3,4-二甲氧基苯基)乙基]酯；
[0184] 5-[[2-吡啶基-[(3R)-奎宁环-3-基]氧基羰基-氨基]甲基]噻吩-2-甲酸[(1S)-2-(3,5-二氯-1-氧化-吡啶-1-鎓-4-基)-1-[4-(二氟甲氧基)-3-甲氧基-苯基]乙基]酯；
[0185] 5-[[2-吡啶基-[(3R)-奎宁环-3-基]氧基羰基-氨基]甲基]噻吩-2-甲酸[(1S)-2-(3,5-二氯-1-氧化-吡啶-1-鎓-4-基)-1-[4-(二氟甲氧基)-3-异丙氧基-苯基]乙基]酯；
[0186] 5-[(2-氟-N-[(3R)-奎宁环-3-基]氧基羰基-苯胺基)甲基]-噻吩-3-甲酸[(1S)-2-(3,5-二氯-1-氧化-吡啶-1-鎓-4-基)-1-[4-(二氟甲氧基)-3-异丙氧基-苯基]乙基]酯；
[0187] 4-[(2-氟-N-[(3R)-奎宁环-3-基]氧基羰基-苯胺基)甲基]噻吩-2-甲酸[(1S)-2-(3,5-二氯-1-氧化-吡啶-1-鎓-4-基)-1-[4-(二氟甲氧基)-3-异丙氧基-苯基]乙基]酯；
[0188] 5-[(2-氟-N-[(3R)-奎宁环-3-基]氧基羰基-苯胺基)甲基]噻吩-3-甲酸[(1S)-2-(3,5-二氯-1-氧化-吡啶-1-鎓-4-基)-1-(3,4-二甲氧基苯基)乙基]酯；
[0189] 6-[(N-[(3R)-奎宁环-3-基]氧基羰基苯胺基)甲基]吡啶-3-甲酸[(1S)-2-(3,5-二氯-1-氧化-吡啶-1-鎓-4-基)-1-(3,4-二甲氧基苯基)乙基]酯；
[0190] 5-[(N-[(3R)-奎宁环-3-基]氧基羰基苯胺基)甲基]-呋喃-2-甲酸[(1S)-2-(3,5-二氯-1-氧化-吡啶-1-鎓-4-基)-1-(3,4-二甲氧基苯基)乙基]酯；
[0191] 6-[(N-[(3R)-奎宁环-3-基]氧基羰基苯胺基)甲基]吡啶-2-甲酸[(1S)-2-(3,5-二氯-1-氧化-吡啶-1-鎓-4-基)-1-(3,4-二甲氧基苯基)乙基]酯；
[0192] 2-[(N-[(3R)-奎宁环-3-基]氧基羰基苯胺基)甲基]噁唑-4-甲酸[(1S)-2-(3,5-二氯-1-氧化-吡啶-1-鎓-4-基)-1-(3,4-二甲氧基苯基)乙基]酯；
[0193] 5-[[[1-(3-氟苯基)-2-氧代-2-[(3R)-奎宁环-3-基]氧基-乙基]氨基]甲基]噻吩-2-甲酸[(1S)-2-(3,5-二氯-1-氧化-吡啶-1-鎓-4-基)-1-(3,4-二甲氧基苯基)乙基]酯；
[0194] 5-[[[1-(2-氟苯基)-2-氧代-2-[(3R)-奎宁环-3-基]氧基-乙基]氨基]甲基]噻吩-2-甲酸[(1S)-2-(3,5-二氯-1-氧化-吡啶-1-鎓-4-基)-1-(3,4-二甲氧基苯基)乙基]酯；
[0195] 5-[[[1-(2-甲氧基苯基)-2-氧代-2-[(3R)-奎宁环-3-基]氧基-乙基]氨基]甲基]噻吩-2-甲酸[(1S)-1-[3-(环丙基甲氧基)-4-(二氟甲氧基)苯基]-2-(3,5-二氯-1-氧化-吡啶-1-鎓-4-基)乙基]酯；
[0196] 5-[[[1-(2-氟苯基)-2-氧代-2-[(3R)-奎宁环-3-基]氧基-乙基]氨基]甲基]噻吩-2-甲酸[(1S)-1-[3-(环丙基甲氧基)-4-(二氟甲氧基)苯基]-2-(3,5-二氯-1-氧化-吡啶-1-鎓-4-基)乙基]酯；
[0197] 5-[[[2-氧代-1-苯基-2-[(3R)-奎宁环-3-基]氧基-乙基]氨基]甲基]噻吩-2-甲酸[(1S)-1-[3-(环丙基甲氧基)-4-(二氟甲氧基)苯基]-2-(3,5-二氯-1-氧化-吡啶-1-鎓-4-基)乙基]酯；
[0198] 5-[[[2-氧代-1-苯基-2-[(3R)-奎宁环-3-基]氧基-乙基]氨基]甲基]噻吩-2-甲酸[(1S)-2-(3,5-二氯-1-氧化-吡啶-1-鎓-4-基)-1-(3,4-二甲氧基苯基)乙基]酯；
[0199] 5-[[[1-(3-氟苯基)-2-氧代-2-[(3R)-奎宁环-3-基]氧基-乙基]氨基]甲基]噻吩-2-甲酸[(1S)-1-[3-(环丙基甲氧基)-4-(二氟甲氧基)苯基]-2-(3,5-二氯-1-氧化-吡啶-1-鎓-4-基)乙基]酯；
[0200] 5-[[[2-氧代-1-(3-吡啶基)-2-[(3R)-奎宁环-3-基]氧基-乙基]氨基]甲基]噻吩-2-甲酸[(1S)-1-[3-(环丙基甲氧基)-4-(二氟甲氧基)苯基]-2-(3,5-二氯-1-氧化-吡啶-1-鎓-4-基)乙基]酯；
[0201] 5-[[[1-(2-氟苯基)-2-[(1-甲基-4-哌啶基)氧基]-2-氧代-乙基]氨基]甲基]噻吩-2-甲酸[(1S)-2-(3,5-二氯-1-氧化-吡啶-1-鎓-4-基)-1-(3,4-二甲氧基苯基)乙基]酯；
[0202] 5-[[[2-[(1-苄基-4-哌啶基)氧基]-1-(2-氟苯基)-2-氧代-乙基]氨基]甲基]噻吩-2-甲酸[(1S)-2-(3,5-二氯-1-氧化-吡啶-1-鎓-4-基)-1-(3,4-二甲氧基苯基)乙基]酯；
[0203] 5-[[[1-(3-氟苯基)-2-氧代-2-[(3R)-奎宁环-3-基]氧基-乙基]氨基]甲基]噻吩-2-甲酸[(1S)-2-(3,5-二氯-1-氧化-吡啶-1-鎓-4-基)-1-(3,4-二甲氧基苯基)乙基]酯单一非对映异构体1；
[0204] 5-[[[1-(3-氟苯基)-2-氧代-2-[(3R)-奎宁环-3-基]氧基-乙基]氨基]甲基]噻吩-2-甲酸[(1S)-2-(3,5-二氯-1-氧化-吡啶-1-鎓-4-基)-1-(3,4-二甲氧基苯基)乙基]酯单一非对映异构体2；
[0205] 5-[[[2-氧代-1-苯基-2-[(3R)-奎宁环-3-基]氧基-乙基]氨基]甲基]噻吩-2-甲酸[(1S)-2-(3,5-二氯-1-氧化-吡啶-1-鎓-4-基)-1-(3,4-二甲氧基苯基)乙基]酯单一非对映异构体1；
[0206] 5-[[[2-氧代-1-苯基-2-[(3R)-奎宁环-3-基]氧基-乙基]氨基]甲基]噻吩-2-甲酸[(1S)-2-(3,5-二氯-1-氧化-吡啶-1-鎓-4-基)-1-(3,4-二甲氧基苯基)乙基]酯单一非对映异构体2；
[0207] 5-[[[1-(2-氟苯基)-2-氧代-2-[(3R)-奎宁环-3-基]氧基-乙基]氨基]甲基]噻吩-2-甲酸[(1S)-2-(3,5-二氯-1-氧化-吡啶-1-鎓-4-基)-1-(3,4-二甲氧基苯基)乙基]酯单一非对映异构体1；
[0208] 5-[[[1-(2-氟苯基)-2-氧代-2-[(3R)-奎宁环-3-基]氧基-乙基]氨基]甲基]噻吩-2-甲酸[(1S)-2-(3,5-二氯-1-氧化-吡啶-1-鎓-4-基)-1-(3,4-二甲氧基苯基)乙基]酯单一非对映异构体2；
[0209] 5-[[[1-(2-氟苯基)-2-氧代-2-[(3R)-奎宁环-3-基]氧基-乙基]氨基]甲基]噻吩-2-甲酸[(1S)-1-[3-(环丙基甲氧基)-4-(二氟甲氧基)苯基]-2-(3,5-二氯-1-氧化-吡啶-1-鎓-4-基)乙基]酯单一非对映异构体1；
[0210] 5-[[[1-(2-氟苯基)-2-氧代-2-[(3R)-奎宁环-3-基]氧基-乙基]氨基]甲基]噻吩-2-甲酸[(1S)-1-[3-(环丙基甲氧基)-4-(二氟甲氧基)苯基]-2-(3,5-二氯-1-氧化-吡啶-1-鎓-4-基)乙基]酯单一非对映异构体2；
[0211] 5-[[[2-氧代-1-苯基-2-[(3R)-奎宁环-3-基]氧基-乙基]氨基]甲基]噻吩-2-甲酸[(1S)-1-[3-(环丙基甲氧基)-4-(二氟甲氧基)苯基]-2-(3,5-二氯-1-氧化-吡啶-1-鎓-4-基)乙基]酯单一非对映异构体1；
[0212] 5-[[[2-氧代-1-苯基-2-[(3R)-奎宁环-3-基]氧基-乙基]氨基]甲基]噻吩-2-甲酸[(1S)-1-[3-(环丙基甲氧基)-4-(二氟甲氧基)苯基]-2-(3,5-二氯-1-氧化-吡啶-1-鎓-4-基)乙基]酯单一非对映异构体2；
[0213] 5-[[[1-(2-甲氧基苯基)-2-氧代-2-[(3R)-奎宁环-3-基]氧基-乙基]氨基]甲基]噻吩-2-甲酸[(1S)-1-[3-(环丙基甲氧基)-4-(二氟甲氧基)苯基]-2-(3,5-二氯-1-氧化-吡啶-1-鎓-4-基)乙基]酯单一非对映异构体1；
[0214] 5-[[[1-(3-氟苯基)-2-氧代-2-[(3R)-奎宁环-3-基]氧基-乙基]氨基]甲基]噻吩-2-甲酸[(1S)-1-[3-(环丙基甲氧基)-4-(二氟甲氧基)苯基]-2-(3,5-二氯-1-氧化-吡啶-1-鎓-4-基)乙基]酯单一非对映异构体1
[0215] 5-[(2-氟-3-羟基-N-[(3R)-奎宁环-3-基]氧基羰基-苯胺基)甲基]噻吩-2-甲酸[(1S)-2-(3,5-二氯-1-氧化-吡啶-1-鎓-4-基)-1-(3,4-二甲氧基苯基)乙基]酯
[0216] 5-[(3-氟-5-羟基-N-[(3R)-奎宁环-3-基]氧基羰基-苯胺基)甲基]噻吩-2-甲酸[(1S)-2-(3,5-二氯-1-氧化-吡啶-1-鎓-4-基)-1-(3,4-二甲氧基苯基)乙基]酯
[0217] 5-[(3-羟基-2-甲基-N-[(3R)-奎宁环-3-基]氧基羰基-苯胺基)甲基]噻吩-2-甲酸[(1S)-2-(3,5-二氯-1-氧化-吡啶-1-鎓-4-基)-1-(3,4-二甲氧基苯基)乙基]酯[0218] 5-[[2-(羟基甲基)-N-[(3R)-奎宁环-3-基]氧基羰基-苯胺基]甲基]噻吩-2-甲酸[(1S)-2-(3,5-二氯-1-氧化-吡啶-1-鎓-4-基)-1-(3,4-二甲氧基苯基)乙基]酯
[0219] 2-[4-[(2-氟-N-[(3R)-奎宁环-3-基]氧基羰基-苯胺基)甲基]吡唑-1-基]乙酸[(1S)-2-(3,5-二氯-1-氧化-吡啶-1-鎓-4-基)-1-(3,4-二甲氧基苯基)乙基]酯
[0220] 5-[(2-氟-N-[(3R)-奎宁环-3-基]氧基羰基-苯胺基)甲基]噻吩-2-甲酸[1-[3-(环丙基甲氧基)-4-甲氧基-苯基]-2-(3,5-二氯-1-氧化-吡啶-1-鎓-4-基)乙基]酯的非对映异构体1
[0221] 5-[(2-氟-N-[(3R)-奎宁环-3-基]氧基羰基-苯胺基)甲基]噻吩-2-甲酸[1-[3-(环丙基甲氧基)-4-甲氧基-苯基]-2-(3,5-二氯-1-氧化-吡啶-1-鎓-4-基)乙基]酯的非对映异构体2
[0222] 5-[(2,6-二羟基苯基)-N-[(3R)-奎宁环-3-基]氧基羰基-苯胺基)甲基]噻吩-2-甲酸[(1S)-2-(3,5-二氯-1-氧化-吡啶-1-鎓-4-基)-1-(3,4-二甲氧基苯基)乙基]酯
甲酸盐[0223] 5-[(2-羟基-5-甲氧基苯基)-N-[(3R)-奎宁环-3-基]氧基羰基-苯胺基)甲基]噻吩-2-甲酸[(1S)-2-(3,5-二氯-1-氧化-吡啶-1-鎓-4-基)-1-(3,4-二甲氧基苯基)乙基]酯[0224] 5-[(2-羟基-5-(三氟甲氧基)苯基)-N-[(3R)-奎宁环-3-基]氧基羰基-苯胺基)甲基]噻吩-2-甲酸[(1S)-2-(3,5-二氯-1-氧化-吡啶-1-鎓-4-基)-1-(3,4-二甲氧基苯基)乙基]酯甲酸盐
[0225] 5-[(2,3-二羟基苯基)-N-[(3R)-奎宁环-3-基]氧基羰基-苯胺基)甲基]噻吩-2-甲酸[(1S)-2-(3,5-二氯-1-氧化-吡啶-1-鎓-4-基)-1-(3,4-二甲氧基苯基)乙基]酯甲酸盐
[0226] 5-[[[2-氧代-1-苯基-2-[(3R)-奎宁环-3-基]氧基-乙基]氨基]甲基]噻吩-2-甲酸[(1R)-2-(3,5-二氯-1-氧化-吡啶-1-鎓-4-基)-1-(3,4-二甲氧基苯基)乙基]酯[0227] 5-[[[2-氧代-1-苯基-2-[(3R)-奎宁环-3-基]氧基-乙基]氨基]甲基]噻吩-2-甲酸[1-[3-(环戊氧基)-4-甲氧基-苯基]-2-(3,5-二氯-1-氧化-吡啶-1-鎓-4-基)乙基]酯二盐酸盐的差向异构体混合物1
[0228] 5-[[[2-氧代-1-苯基-2-[(3R)-奎宁环-3-基]氧基-乙基]氨基]甲基]噻吩-2-甲酸[1-[3-(环戊氧基)-4-甲氧基-苯基]-2-(3,5-二氯-1-氧化-吡啶-1-鎓-4-基)乙基]酯二盐酸盐的差向异构体混合物2
[0229] 5-[[[2-氧代-1-苯基-2-[(3R)-奎宁环-3-基]氧基-乙基]氨基]甲基]噻吩-2-甲酸[1-[3-(环丙基甲氧基)-4-甲氧基-苯基]-2-(3,5-二氯-1-氧化-吡啶-1-鎓-4-基)乙基]酯的差向异构体混合物1
[0230] 5-[[[2-氧代-1-苯基-2-[(3R)-奎宁环-3-基]氧基-乙基]氨基]甲基]噻吩-2-甲酸[1-[3-(环丙基甲氧基)-4-甲氧基-苯基]-2-(3,5-二氯-1-氧化-吡啶-1-鎓-4-基)乙基]酯的差向异构体混合物2
[0231] 5-[[[2-氧代-1-苯基-2-[(3R)-奎宁环-3-基]氧基-乙基]氨基]甲基]噻吩-2-甲酸[(1S)-2-(3,5-二氯-1-氧化-吡啶-1-鎓-4-基)-1-[4-(二氟甲氧基)-3-异丙氧基-苯基]乙基]酯；甲酸盐
[0232] 5-[[[2-氧代-1-苯基-2-[(3R)-奎宁环-3-基]氧基-乙基]氨基]甲基]噻吩-3-甲酸[(1S)-2-(3,5-二氯-1-氧化-吡啶-1-鎓-4-基)-1-(3,4-二甲氧基苯基)乙基]酯[0233] 5-[[[1-(2-氟苯基)-2-氧代-2-[(3R)-奎宁环-3-基]氧基-乙基]氨基]甲基]噻吩-3-甲酸[(1S)-2-(3,5-二氯-1-氧化-吡啶-1-鎓-4-基)-1-(3,4-二甲氧基苯基)乙基]酯[0234] 4-[[[2-氧代-1-苯基-2-[(3R)-奎宁环-3-基]氧基-乙基]氨基]甲基]噻吩-2-甲酸[(1S)-2-(3,5-二氯-1-氧化-吡啶-1-鎓-4-基)-1-(3,4-二甲氧基苯基)乙基]酯[0235] 5-[[[2-[2-(二甲氨基)乙氧基]-2-氧代-1-苯基-乙基]氨基]甲基]噻吩-2-甲酸[(1S)-2-(3,5-二氯-1-氧化-吡啶-1-鎓-4-基)-1-(3,4-二甲氧基苯基)乙基]酯
[0236] 5-[[[1-[3-(二氟甲基)苯基]-2-氧代-2-[(3R)-奎宁环-3-基]氧基-乙基]氨基]甲基]噻吩-2-甲酸[(1S)-2-(3,5-二氯-1-氧化-吡啶-1-鎓-4-基)-1-(3,4-二甲氧基苯基)乙基]酯
[0237] 5-[[甲基-[2-氧代-1-苯基-2-[(3R)-奎宁环-3-基]氧基-乙基]氨基]甲基]噻吩-2-甲酸[(1S)-2-(3,5-二氯-1-氧化-吡啶-1-鎓-4-基)-1-(3,4-二甲氧基苯基)乙基]酯[0238] 5-[[[2-[(3S)-1-甲基吡咯烷-3-基]氧基-2-氧代-1-苯基-乙基]氨基]甲基]噻吩-2-甲酸[(1S)-2-(3,5-二氯-1-氧化-吡啶-1-鎓-4-基)-1-(3,4-二甲氧基苯基)乙基]酯[0239] 5-[[[1-(3-羟基苯基)-2-氧代-2-[(3R)-奎宁环-3-基]氧基-乙基]氨基]甲基]噻吩-2-甲酸[(1S)-2-(3,5-二氯-1-氧化-吡啶-1-鎓-4-基)-1-(3,4-二甲氧基苯基)乙基]酯[0240] 2-[[5-[2-[(1S)-2-(3,5-二氯-1-氧化-吡啶-1-鎓-4-基)-1-(3,4-二甲氧基苯基)乙氧基]-2-氧代-乙基]-2-噻吩基]甲基氨基]-2-苯基-乙酸[(3R)-奎宁环-3-基]酯[0241] 5-[[[1-(噻吩-2-基)--2-氧代-2-(R)-奎宁环-3-基氧基-乙基]氨基]甲基]噻吩-
2-甲酸[(1S)-2-(3,5-二氯-1-氧化-吡啶-1-鎓-4-基)-1-(3,4-二甲氧基苯基)乙基]酯[0242] 5-[[[2-氧代-1-苯基-2-[(3R)-奎宁环-3-基]氧基-乙基]氨基]甲基]噻吩-2-甲酸[(1S)-2-(3,5-二氯-1-氧化-吡啶-1-鎓-4-基)-1-[4-(二氟甲氧基)-3-甲氧基-苯基]乙基]酯
[0243] 5-[[[2-[(3R)-1-甲基吡咯烷-3-基]氧基-2-氧代-1-苯基-乙基]氨基]甲基]噻吩-2-甲酸[(1S)-2-(3,5-二氯-1-氧化-吡啶-1-鎓-4-基)-1-(3,4-二甲氧基苯基)乙基]酯[0244] 5-[[[2-(1-甲基氮杂环
丁烷-3-基)氧基-2-氧代-1-苯基-乙基]氨基]甲基]噻吩-2-甲酸[(1S)-2-(3,5-二氯-1-氧化-吡啶-1-鎓-4-基)-1-(3,4-二甲氧基苯基)乙基]酯[0245] 5-[[[2-[[(3R)-1-甲基-3-哌啶基]氧基]-2-氧代-1-苯基-乙基]氨基]甲基]噻吩-2-甲酸[(1S)-2-(3,5-二氯-1-氧化-吡啶-1-鎓-4-基)-1-(3,4-二甲氧基苯基)乙基]酯；甲酸盐
[0246] 5-[[[2-[3-(二甲氨基)丙氧基]-2-氧代-1-苯基-乙基]氨基]甲基]噻吩-2-甲酸[(1S)-2-(3,5-二氯-1-氧化-吡啶-1-鎓-4-基)-1-(3,4-二甲氧基苯基)乙基]酯
[0247] 5-[[[2-氧代-1-苯基-2-[(3R)-奎宁环-3-基]氧基-乙基]氨基]甲基]噻吩-2-甲酸[2-(3,5-二氯-1-氧化-吡啶-1-鎓-4-基)-1-(3-乙氧基-4-甲氧基-苯基)乙基]酯的差向异构体混合物2
[0248] 5-[[[2-氧代-1-苯基-2-[(3R)-奎宁环-3-基]氧基-乙基]氨基]甲基]噻吩-2-甲酸[2-(3,5-二氯-1-氧化-吡啶-1-鎓-4-基)-1-(3-乙氧基-4-甲氧基-苯基)乙基]酯的差向异构体混合物1
[0249] 5-[[[2-[(8-甲基-8-氮杂双环[3.2.1]辛-3-基)氧基]-2-氧代-1-苯基-乙基]氨基]甲基]噻吩-2-甲酸[(1S)-2-(3,5-二氯-1-氧化-吡啶-1-鎓-4-基)-1-(3,4-二甲氧基苯基)乙基]酯
[0250] 5-[[[1-(2-氟苯基)-2-[(3R)-1-甲基吡咯烷-3-基]氧基-2-氧代-乙基]氨基]甲基]噻吩-2-甲酸[(1S)-2-(3,5-二氯-1-氧化-吡啶-1-鎓-4-基)-1-(3,4-二甲氧基苯基)乙基]酯
[0251] 5-[[[2-[(8-苄基-8-氮杂双环[3.2.1]辛-3-基)氧基]-2-氧代-1-苯基-乙基]氨基]甲基]噻吩-2-甲酸[(1S)-2-(3,5-二氯-1-氧化-吡啶-1-鎓-4-基)-1-(3,4-二甲氧基苯基)乙基]酯
[0252] 5-[[[2-[[(1R,5R)-8-苄基-8-氮杂双环[3.2.1]辛-3-基]氧基]-2-氧代-1-苯基-乙基]氨基]甲基]噻吩-2-甲酸[(1S)-2-(3,5-二氯-1-氧化-吡啶-1-鎓-4-基)-1-(3,4-二甲氧基苯基)乙基]酯
[0253] 5-[[[2-[[(1R,5R)-8-甲基-8-氮杂双环[3.2.1]辛-3-基]氧基]-2-氧代-1-苯基-乙基]氨基]甲基]噻吩-2-甲酸[(1S)-2-(3,5-二氯-1-氧化-吡啶-1-鎓-4-基)-1-(3,4-二甲氧基苯基)乙基]酯
[0254] 5-[[[2-[(1-苄基-4-哌啶基)氧基]-2-氧代-1-苯基-乙基]氨基]甲基]噻吩-2-甲酸[(1S)-2-(3,5-二氯-1-氧化-吡啶-1-鎓-4-基)-1-(3,4-二甲氧基苯基)乙基]酯[0255] 5-[[[2-[(1-甲基-4-哌啶基)氧基]-2-氧代-1-苯基-乙基]氨基]甲基]噻吩-2-甲酸[(1S)-2-(3,5-二氯-1-氧化-吡啶-1-鎓-4-基)-1-(3,4-二甲氧基苯基)乙基]酯[0256] 5-[[[1-(邻-
甲苯基)-2-氧代-2-[(3R)-奎宁环-3-基]氧基-乙基]氨基]甲基]噻吩-2-甲酸[(1S)-2-(3,5-二氯-1-氧化-吡啶-1-鎓-4-基)-1-(3,4-二甲氧基苯基)乙基]酯[0257] 5-[[[3-氧代-1-苯基-3-[(3R)-奎宁环-3-基]氧基-丙基]氨基]甲基]噻吩-2-甲酸[(1S)-2-(3,5-二氯-1-氧化-吡啶-1-鎓-4-基)-1-(3,4-二甲氧基苯基)乙基]酯[0258] 5-[[[1-(2-氟苯基)-3-氧代-3-[(3R)-奎宁环-3-基]氧基-丙基]氨基]甲基]噻吩-2-甲酸[(1S)-2-(3,5-二氯-1-氧化-吡啶-1-鎓-4-基)-1-(3,4-二甲氧基苯基)乙基]酯[0259] 5-[[[3-[(1-甲基-4-哌啶基)氧基]-3-氧代-1-苯基-丙基]氨基]甲基]噻吩-2-甲酸[(1S)-2-(3,5-二氯-1-氧化-吡啶-1-鎓-4-基)-1-(3,4-二甲氧基苯基)乙基]酯[0260] 5-[[[3-[(3R)-1-甲基吡咯烷-3-基]氧基-3-氧代-1-苯基-丙基]氨基]甲基]噻吩-2-甲酸[(1S)-2-(3,5-二氯-1-氧化-吡啶-1-鎓-4-基)-1-(3,4-二甲氧基苯基)乙基]酯[0261] 5-[[乙基-[2-氧代-1-苯基-2-[(3R)-奎宁环-3-基]氧基-乙基]氨基]甲基]噻吩-2-甲酸[(1S)-2-(3,5-二氯-1-氧化-吡啶-1-鎓-4-基)-1-(3,4-二甲氧基苯基)乙基]酯[0262] 2-[[5-[(1S)-2-(3,5-二氯-1-氧化-吡啶-1-鎓-4-基)-1-(3,4-二甲氧基苯基)乙氧基]羰基-2-噻吩基]甲基]-3,4-二氢-1H-异喹啉-1-甲酸[(3R)-奎宁环-3-基]酯[0263] 2-[2-[5-[2-[(1S)-2-(3,5-二氯-1-氧化-吡啶-1-鎓-4-基)-1-(3,4-二甲氧基苯基)乙氧基]-2-氧代-乙基]-2-噻吩基]乙基氨基]-2-苯基-乙酸[(3R)-奎宁环-3-基]酯[0264] 5-[2-[[2-氧代-1-苯基-2-[(3R)-奎宁环-3-基]氧基-乙基]氨基]乙基]噻吩-2-甲酸[(1S)-2-(3,5-二氯-1-氧化-吡啶-1-鎓-4-基)-1-(3,4-二甲氧基苯基)乙基]酯[0265] 5-[[[1-(2-氟苯基)-2-[(1-甲基-4-哌啶基)氧基]-2-氧代-乙基]氨基]甲基]噻吩-2-甲酸[(1S)-2-(3,5-二氯-1-氧化-吡啶-1-鎓-4-基)-1-(3,4-二甲氧基苯基)乙基]酯单一非对映异构体1
[0266] 5-[[[1-(2-氟苯基)-2-[(1-甲基-4-哌啶基)氧基]-2-氧代-乙基]氨基]甲基]噻吩-2-甲酸[(1S)-2-(3,5-二氯-1-氧化-吡啶-1-鎓-4-基)-1-(3,4-二甲氧基苯基)乙基]酯单一非对映异构体2
[0267] 5-[[[2-[(3R)-1-甲基吡咯烷-3-基]氧基-2-氧代-1-苯基-乙基]氨基]甲基]噻吩-2-甲酸[(1S)-2-(3,5-二氯-1-氧化-吡啶-1-鎓-4-基)-1-(3,4-二甲氧基苯基)乙基]酯单一非对映异构体1
[0268] 5-[[[2-[(3R)-1-甲基吡咯烷-3-基]氧基-2-氧代-1-苯基-乙基]氨基]甲基]噻吩-2-甲酸[(1S)-2-(3,5-二氯-1-氧化-吡啶-1-鎓-4-基)-1-(3,4-二甲氧基苯基)乙基]酯单一非对映异构体2
[0269] 5-[[[2-氧代-1-苯基-2-[(3R)-奎宁环-3-基]氧基-乙基]氨基]甲基]噻吩-2-甲酸[1-[3-(环戊氧基)-4-甲氧基-苯基]-2-(3,5-二氯-1-氧化-吡啶-1-鎓-4-基)乙基]酯的差向异构体混合物1的单一非对映异构体1
[0270] 5-[[[2-氧代-1-苯基-2-[(3R)-奎宁环-3-基]氧基-乙基]氨基]甲基]噻吩-2-甲酸[1-[3-(环戊氧基)-4-甲氧基-苯基]-2-(3,5-二氯-1-氧化-吡啶-1-鎓-4-基)乙基]酯的差向异构体混合物1的单一非对映异构体2
[0271] 5-[[甲基-[2-氧代-1-苯基-2-[(3R)-奎宁环-3-基]氧基-乙基]氨基]甲基]噻吩-2-甲酸[(1S)-2-(3,5-二氯-1-氧化-吡啶-1-鎓-4-基)-1-(3,4-二甲氧基苯基)乙基]酯单一非对映异构体1
[0272] 5-[[甲基-[2-氧代-1-苯基-2-[(3R)-奎宁环-3-基]氧基-乙基]氨基]甲基]噻吩-2-甲酸[(1S)-2-(3,5-二氯-1-氧化-吡啶-1-鎓-4-基)-1-(3,4-二甲氧基苯基)乙基]酯单一非对映异构体2
[0273] 5-[[[2-氧代-1-苯基-2-[(3R)-奎宁环-3-基]氧基-乙基]氨基]甲基]噻吩-2-甲酸[1-[3-(环戊氧基)-4-甲氧基-苯基]-2-(3,5-二氯-1-氧化-吡啶-1-鎓-4-基)乙基]酯的差向异构体混合物2的单一非对映异构体1
[0274] 5-[[[2-氧代-1-苯基-2-[(3R)-奎宁环-3-基]氧基-乙基]氨基]甲基]噻吩-2-甲酸[1-[3-(环戊氧基)-4-甲氧基-苯基]-2-(3,5-二氯-1-氧化-吡啶-1-鎓-4-基)乙基]酯的差向异构体混合物2的单一非对映异构体2
[0275] 2-[[5-[(1S)-2-(3,5-二氯-1-氧化-吡啶-1-鎓-4-基)-1-(3,4-二甲氧基苯基)乙氧基]羰基-2-噻吩基]甲基]-3,4-二氢-1H-异喹啉-1-甲酸[(3R)-奎宁环-3-基]酯单一非对映异构体1
[0276] 2-[[5-[(1S)-2-(3,5-二氯-1-氧化-吡啶-1-鎓-4-基)-1-(3,4-二甲氧基苯基)乙氧基]羰基-2-噻吩基]甲基]-3,4-二氢-1H-异喹啉-1-甲酸[(3R)-奎宁环-3-基]酯单一非对映异构体2
[0277] 5-[[[2-[[(1R,5R)-8-甲基-8-氮杂双环[3.2.1]辛-3-基]氧基]-2-氧代-1-苯基-乙基]氨基]甲基]噻吩-2-甲酸[(1S)-2-(3,5-二氯-1-氧化-吡啶-1-鎓-4-基)-1-(3,4-二甲氧基苯基)乙基]酯单一非对映异构体1
[0278] 5-[[[2-[[(1R,5R)-8-甲基-8-氮杂双环[3.2.1]辛-3-基]氧基]-2-氧代-1-苯基-乙基]氨基]甲基]噻吩-2-甲酸[(1S)-2-(3,5-二氯-1-氧化-吡啶-1-鎓-4-基)-1-(3,4-二甲氧基苯基)乙基]酯单一非对映异构体2
[0279] 5-[[[2-氧代-1-苯基-2-[(3R)-奎宁环-3-基]氧基-乙基]氨基]甲基]噻吩-2-甲酸[(1S)-2-(3,5-二氯-1-氧化-吡啶-1-鎓-4-基)-1-[4-(二氟甲氧基)-3-异丙氧基-苯基]乙基]酯单一非对映异构体1
[0280] 5-[[[2-氧代-1-苯基-2-[(3R)-奎宁环-3-基]氧基-乙基]氨基]甲基]噻吩-2-甲酸[(1S)-2-(3,5-二氯-1-氧化-吡啶-1-鎓-4-基)-1-[4-(二氟甲氧基)-3-异丙氧基-苯基]乙基]酯单一非对映异构体2
[0281] 5-[[乙基-[2-氧代-1-苯基-2-[(3R)-奎宁环-3-基]氧基-乙基]氨基]甲基]噻吩-2-甲酸[(1S)-2-(3,5-二氯-1-氧化-吡啶-1-鎓-4-基)-1-(3,4-二甲氧基苯基)乙基]酯；甲酸单一非对映异构体1
[0282] 5-[[乙基-[2-氧代-1-苯基-2-[(3R)-奎宁环-3-基]氧基-乙基]氨基]甲基]噻吩-2-甲酸[(1S)-2-(3,5-二氯-1-氧化-吡啶-1-鎓-4-基)-1-(3,4-二甲氧基苯基)乙基]酯单一非对映异构体2
[0283] 5-[[[2-[2-(二甲氨基)乙氧基]-2-氧代-1-苯基-乙基]氨基]甲基]噻吩-2-甲酸[(1S)-2-(3,5-二氯-1-氧化-吡啶-1-鎓-4-基)-1-(3,4-二甲氧基苯基)乙基]酯单一非对映异构体1
[0284] 5-[[[2-[2-(二甲氨基)乙氧基]-2-氧代-1-苯基-乙基]氨基]甲基]噻吩-2-甲酸[(1S)-2-(3,5-二氯-1-氧化-吡啶-1-鎓-4-基)-1-(3,4-二甲氧基苯基)乙基]酯单一非对映异构体2
[0285] 5-[[[1-(2-氟苯基)-2-[(3R)-1-甲基吡咯烷-3-基]氧基-2-氧代-乙基]氨基]甲基]噻吩-2-甲酸[(1S)-2-(3,5-二氯-1-氧化-吡啶-1-鎓-4-基)-1-(3,4-二甲氧基苯基)乙基]酯单一非对映异构体1
[0286] 5-[[[1-(2-氟苯基)-2-[(3R)-1-甲基吡咯烷-3-基]氧基-2-氧代-乙基]氨基]甲基]噻吩-2-甲酸[(1S)-2-(3,5-二氯-1-氧化-吡啶-1-鎓-4-基)-1-(3,4-二甲氧基苯基)乙基]酯单一非对映异构体2
[0287] 5-[[[2-[[(3R)-1-甲基-3-哌啶基]氧基]-2-氧代-1-苯基-乙基]氨基]甲基]噻吩-2-甲酸[(1S)-2-(3,5-二氯-1-氧化-吡啶-1-鎓-4-基)-1-(3,4-二甲氧基苯基)乙基]酯单一非对映异构体1
[0288] 5-[[[2-[[(3R)-1-甲基-3-哌啶基]氧基]-2-氧代-1-苯基-乙基]氨基]甲基]噻吩-2-甲酸[(1S)-2-(3,5-二氯-1-氧化-吡啶-1-鎓-4-基)-1-(3,4-二甲氧基苯基)乙基]酯单一非对映异构体2
[0289] 5-[[[2-[3-(二甲氨基)丙氧基]-2-氧代-1-苯基-乙基]氨基]甲基]噻吩-2-甲酸[(1S)-2-(3,5-二氯-1-氧化-吡啶-1-鎓-4-基)-1-(3,4-二甲氧基苯基)乙基]酯单一非对映异构体1
[0290] 5-[[[2-[3-(二甲氨基)丙氧基]-2-氧代-1-苯基-乙基]氨基]甲基]噻吩-2-甲酸[(1S)-2-(3,5-二氯-1-氧化-吡啶-1-鎓-4-基)-1-(3,4-二甲氧基苯基)乙基]酯单一非对映异构体2
[0291] 5-[[[2-氧代-1-苯基-2-[(3R)-奎宁环-3-基]氧基-乙基]氨基]甲基]噻吩-3-甲酸[(1S)-2-(3,5-二氯-1-氧化-吡啶-1-鎓-4-基)-1-(3,4-二甲氧基苯基)乙基]酯单一非对映异构体1
[0292] 5-[[[2-氧代-1-苯基-2-[(3R)-奎宁环-3-基]氧基-乙基]氨基]甲基]噻吩-3-甲酸[(1S)-2-(3,5-二氯-1-氧化-吡啶-1-鎓-4-基)-1-(3,4-二甲氧基苯基)乙基]酯单一非对映异构体2
[0293] 4-[[[2-氧代-1-苯基-2-[(3R)-奎宁环-3-基]氧基-乙基]氨基]甲基]噻吩-2-甲酸[(1S)-2-(3,5-二氯-1-氧化-吡啶-1-鎓-4-基)-1-(3,4-二甲氧基苯基)乙基]酯单一非对映异构体1
[0294] 4-[[[2-氧代-1-苯基-2-[(3R)-奎宁环-3-基]氧基-乙基]氨基]甲基]噻吩-2-甲酸[(1S)-2-(3,5-二氯-1-氧化-吡啶-1-鎓-4-基)-1-(3,4-二甲氧基苯基)乙基]酯单一非对映异构体2
[0295] 5-[[[1-(2-氟苯基)-2-氧代-2-[(3R)-奎宁环-3-基]氧基-乙基]氨基]甲基]噻吩-3-甲酸[(1S)-2-(3,5-二氯-1-氧化-吡啶-1-鎓-4-基)-1-(3,4-二甲氧基苯基)乙基]酯单一非对映异构体1
[0296] 5-[[[1-(2-氟苯基)-2-氧代-2-[(3R)-奎宁环-3-基]氧基-乙基]氨基]甲基]噻吩-3-甲酸[(1S)-2-(3,5-二氯-1-氧化-吡啶-1-鎓-4-基)-1-(3,4-二甲氧基苯基)乙基]酯单一非对映异构体2
[0297] 5-[[[2-[(3S)-1-甲基吡咯烷-3-基]氧基-2-氧代-1-苯基-乙基]氨基]甲基]噻吩-2-甲酸[(1S)-2-(3,5-二氯-1-氧化-吡啶-1-鎓-4-基)-1-(3,4-二甲氧基苯基)乙基]酯单一非对映异构体1
[0298] 5-[[[2-[(3S)-1-甲基吡咯烷-3-基]氧基-2-氧代-1-苯基-乙基]氨基]甲基]噻吩-2-甲酸[(1S)-2-(3,5-二氯-1-氧化-吡啶-1-鎓-4-基)-1-(3,4-二甲氧基苯基)乙基]酯单一非对映异构体2
[0299] 5-[[[1-(3-羟基苯基)-2-氧代-2-[(3R)-奎宁环-3-基]氧基-乙基]氨基]甲基]噻吩-2-甲酸[(1S)-2-(3,5-二氯-1-氧化-吡啶-1-鎓-4-基)-1-(3,4-二甲氧基苯基)乙基]酯单一非对映异构体1
[0300] 5-[[[1-(3-羟基苯基)-2-氧代-2-[(3R)-奎宁环-3-基]氧基-乙基]氨基]甲基]噻吩-2-甲酸[(1S)-2-(3,5-二氯-1-氧化-吡啶-1-鎓-4-基)-1-(3,4-二甲氧基苯基)乙基]酯单一非对映异构体2
[0301] 5-[[[2-[(1-甲基-4-哌啶基)氧基]-2-氧代-1-苯基-乙基]氨基]甲基]噻吩-2-甲酸[(1S)-2-(3,5-二氯-1-氧化-吡啶-1-鎓-4-基)-1-(3,4-二甲氧基苯基)乙基]酯单一非对映异构体1
[0302] 5-[[[2-[(1-甲基-4-哌啶基)氧基]-2-氧代-1-苯基-乙基]氨基]甲基]噻吩-2-甲酸[(1S)-2-(3,5-二氯-1-氧化-吡啶-1-鎓-4-基)-1-(3,4-二甲氧基苯基)乙基]酯单一非对映异构体2
[0303] 5-[[[2-氧代-1-苯基-2-[(3R)-奎宁环-3-基]氧基-乙基]氨基]甲基]噻吩-2-甲酸[(1R)-2-(3,5-二氯-1-氧化-吡啶-1-鎓-4-基)-1-(3,4-二甲氧基苯基)乙基]酯单一非对映异构体1
[0304] 5-[[[2-氧代-1-苯基-2-[(3R)-奎宁环-3-基]氧基-乙基]氨基]甲基]噻吩-2-甲酸[(1R)-2-(3,5-二氯-1-氧化-吡啶-1-鎓-4-基)-1-(3,4-二甲氧基苯基)乙基]酯单一非对映异构体2
[0305] 5-[2-[[2-氧代-1-苯基-2-[(3R)-奎宁环-3-基]氧基-乙基]氨基]乙基]噻吩-2-甲酸[(1S)-2-(3,5-二氯-1-氧化-吡啶-1-鎓-4-基)-1-(3,4-二甲氧基苯基)乙基]酯单一非对映异构体1
[0306] 5-[2-[[2-氧代-1-苯基-2-[(3R)-奎宁环-3-基]氧基-乙基]氨基]乙基]噻吩-2-甲酸[(1S)-2-(3,5-二氯-1-氧化-吡啶-1-鎓-4-基)-1-(3,4-二甲氧基苯基)乙基]酯单一非对映异构体2
[0307] 5-[[[1-(邻-甲苯基)-2-氧代-2-[(3R)-奎宁环-3-基]氧基-乙基]氨基]甲基]噻吩-2-甲酸[(1S)-2-(3,5-二氯-1-氧化-吡啶-1-鎓-4-基)-1-(3,4-二甲氧基苯基)乙基]酯单一非对映异构体1
[0308] 5-[[[1-(邻-甲苯基)-2-氧代-2-[(3R)-奎宁环-3-基]氧基-乙基]氨基]甲基]噻吩-2-甲酸[(1S)-2-(3,5-二氯-1-氧化-吡啶-1-鎓-4-基)-1-(3,4-二甲氧基苯基)乙基]酯单一非对映异构体2
[0309] 2-[2-[5-[2-[(1S)-2-(3,5-二氯-1-氧化-吡啶-1-鎓-4-基)-1-(3,4-二甲氧基苯基)乙氧基]-2-氧代-乙基]-2-噻吩基]乙基氨基]-2-苯基-乙酸[(3R)-奎宁环-3-基]酯单一非对映异构体1
[0310] 2-[2-[5-[2-[(1S)-2-(3,5-二氯-1-氧化-吡啶-1-鎓-4-基)-1-(3,4-二甲氧基苯基)乙氧基]-2-氧代-乙基]-2-噻吩基]乙基氨基]-2-苯基-乙酸[(3R)-奎宁环-3-基]酯单一非对映异构体2
[0311] 2-[[5-[2-[(1S)-2-(3,5-二氯-1-氧化-吡啶-1-鎓-4-基)-1-(3,4-二甲氧基苯基)乙氧基]-2-氧代-乙基]-2-噻吩基]甲基氨基]-2-苯基-乙酸[(3R)-奎宁环-3-基]酯单一非对映异构体1
[0312] 5-[[[3-氧代-1-苯基-3-[(3R)-奎宁环-3-基]氧基-丙基]氨基]甲基]噻吩-2-甲酸[(1S)-2-(3,5-二氯-1-氧化-吡啶-1-鎓-4-基)-1-(3,4-二甲氧基苯基)乙基]酯单一非对映异构体1
[0313] 5-[[[3-氧代-1-苯基-3-[(3R)-奎宁环-3-基]氧基-丙基]氨基]甲基]噻吩-2-甲酸[(1S)-2-(3,5-二氯-1-氧化-吡啶-1-鎓-4-基)-1-(3,4-二甲氧基苯基)乙基]酯单一非对映异构体2
[0314] 5-[[[1-(2-氟苯基)-3-氧代-3-[(3R)-奎宁环-3-基]氧基-丙基]氨基]甲基]噻吩-2-甲酸[(1S)-2-(3,5-二氯-1-氧化-吡啶-1-鎓-4-基)-1-(3,4-二甲氧基苯基)乙基]酯单一非对映异构体1
[0315] 5-[[[1-(2-氟苯基)-3-氧代-3-[(3R)-奎宁环-3-基]氧基-丙基]氨基]甲基]噻吩-2-甲酸[(1S)-2-(3,5-二氯-1-氧化-吡啶-1-鎓-4-基)-1-(3,4-二甲氧基苯基)乙基]酯单一非对映异构体2
[0316] 5-[[[3-[(3R)-1-甲基吡咯烷-3-基]氧基-3-氧代-1-苯基-丙基]氨基]甲基]噻吩-2-甲酸[(1S)-2-(3,5-二氯-1-氧化-吡啶-1-鎓-4-基)-1-(3,4-二甲氧基苯基)乙基]酯单一非对映异构体1
[0317] 5-[[[3-[(3R)-1-甲基吡咯烷-3-基]氧基-3-氧代-1-苯基-丙基]氨基]甲基]噻吩-2-甲酸[(1S)-2-(3,5-二氯-1-氧化-吡啶-1-鎓-4-基)-1-(3,4-二甲氧基苯基)乙基]酯单一非对映异构体2
[0318] 5-[[[3-[(1-甲基-4-哌啶基)氧基]-3-氧代-1-苯基-丙基]氨基]甲基]噻吩-2-甲酸[(1S)-2-(3,5-二氯-1-氧化-吡啶-1-鎓-4-基)-1-(3,4-二甲氧基苯基)乙基]酯单一非对映异构体1
[0319] 5-[[[3-[(1-甲基-4-哌啶基)氧基]-3-氧代-1-苯基-丙基]氨基]甲基]噻吩-2-甲酸[(1S)-2-(3,5-二氯-1-氧化-吡啶-1-鎓-4-基)-1-(3,4-二甲氧基苯基)乙基]酯单一非对映异构体2
[0320] 5-[(2,6-二羟基苯基)-N-[(3R)-奎宁环-3-基]氧基羰基-苯胺基)甲基]噻吩-2-甲酸[(1S)-2-(3,5-二氯-1-氧化-吡啶-1-鎓-4-基)-1-(3,4-二甲氧基苯基)乙基]酯；
[0321] 5-[(2-羟基-5-(三氟甲氧基)苯基)-N-[(3R)-奎宁环-3-基]氧基羰基-苯胺基)甲基]噻吩-2-甲酸[(1S)-2-(3,5-二氯-1-氧化-吡啶-1-鎓-4-基)-1-(3,4-二甲氧基苯基)乙基]酯；
[0322] 5-[(2,3-二羟基苯基)-N-[(3R)-奎宁环-3-基]氧基羰基-苯胺基)甲基]噻吩-2-甲酸[(1S)-2-(3,5-二氯-1-氧化-吡啶-1-鎓-4-基)-1-(3,4-二甲氧基苯基)乙基]酯；
[0323] 5-[[[2-氧代-1-苯基-2-[(3R)-奎宁环-3-基]氧基-乙基]氨基]甲基]噻吩-2-甲酸[1-[3-(环戊氧基)-4-甲氧基-苯基]-2-(3,5-二氯-1-氧化-吡啶-1-鎓-4-基)乙基]酯的差向异构体混合物1；
[0324] 5-[[[2-氧代-1-苯基-2-[(3R)-奎宁环-3-基]氧基-乙基]氨基]甲基]噻吩-2-甲酸[1-[3-(环戊氧基)-4-甲氧基-苯基]-2-(3,5-二氯-1-氧化-吡啶-1-鎓-4-基)乙基]酯的差向异构体混合物2；
[0325] 5-[[[2-氧代-1-苯基-2-[(3R)-奎宁环-3-基]氧基-乙基]氨基]甲基]噻吩-2-甲酸[(1S)-2-(3,5-二氯-1-氧化-吡啶-1-鎓-4-基)-1-[4-(二氟甲氧基)-3-异丙氧基-苯基]乙基]酯；
[0326] 5-[[[2-[[(3R)-1-甲基-3-哌啶基]氧基]-2-氧代-1-苯基-乙基]氨基]甲基]噻吩-2-甲酸[(1S)-2-(3,5-二氯-1-氧化-吡啶-1-鎓-4-基)-1-(3,4-二甲氧基苯基)乙基]酯；
[0327] 及其药学上可接受的盐和溶剂合物。
[0328] 在接近分离为单一非对映异构体的每种化合物的化学名称附近报道术语“单一非对映异构体”或“非对映异构体”，所述单一非对映异构体在立体中心上的绝对构型未测定。例如，在接近分离为单一非对映异构体的每种化合物的化学名称附近报道句子“单一非对映异构体”，所述单一非对映异构体在立体中心上的绝对构型未测定。例如，在接近分离为单一非对映异构体的每种化合物的化学名称附近报道句子“单一非对映异构体”，所述单一非对映异构体在X的碳原子上的绝对构型(当X是[1]-N(R19)-CH<[2]时)未测定。通过类比，在接近分离为单一非对映异构体的每种化合物的化学名称附近报道术语“非对映异构体”，所述单一非对映异构体在如上述所定义的式(I)’的化合物的碳(1)上的绝对构型未测定。
星号“*”被引入分离为单一非对映异构体或对映体的立体中心上的化学结构，但未指定绝对构型。
[0329] 本发明还涉及用于制备本发明化合物的方法。
[0330] 在下文所述和如下方案中报道的制备方法不应当被视为是对可用于制备本发明化合物的合成方法的范围的限制。
[0331] 在如下方案中，对于式I－XXVI的化合物，除非另有指示，否则R1、R2、R3、R4、R5、L1、W1、L2、W2、X、A、n、m和k如上述所定义。
[0332] 可以根据方案A、B和C中报道的一般合成路径或按照与方案A、B和C相同的方法，以适当修饰的易于由本领域技术人员确定的
试剂和/或按照本领域技术人员易于适用的适当
修改的方法得到式(I)的化合物。
[0333] 方案A
[0334]
[0335] 可以根据方案A制备式(Ie)的化合物，即式(I)的化合物，其为在吡啶环上的N-氧化物形式，且其中L1不存在(即L1为(CH2)p，且p为0)，以及L2为CH2，且X为N原子。
[0336] 在子-方案S1－S6中描述了方案A中代表的单一步骤。
[0337] 可以按照子-方案(S3)，通过使式(IX)的
羧酸与式(VIII)的醇在适合的溶剂例如DCM或DMF中、在偶合剂例如EDC/DMAP或HATU的存在下、在适合的
温度例如室(或环境)温度下反应得到式(VII)的
醛类。
[0338] 式(V)的胺类可以按照子-方案(S2)如下得到：使式(VII)的醛与式(VI)的胺在适合的溶剂、例如DCM中在酸，例如乙酸存在下，在还原条件下，例如使用
硼氢化钠、三乙酰氧基硼氢化钠或通过催化氢化并且使用任选的催化剂、例如DMAP在适合的温度例如室(或环境)温度或0℃或40℃或50℃下反应。
[0339] 式(II)的氯甲酸酯类可以按照子-方案S4如下得到：使式(IV)的醇与氯甲酸三氯甲酯在适合的溶剂，例如MeCN在适合的温度，例如0℃或室温下反应。
[0340] 式(X)的氨基甲酰基氯可以按照子-方案S5如下得到：使式(V)的胺与氯甲酸三氯甲酯在适合的溶剂，例如MeCN在适合的温度，例如0℃或室温下反应。
[0341] 式(Ie)的化合物可以按照子-方案S1如下得到：使式(V)的胺与式(II)的氯甲酸酯在适合的溶剂，例如THF或吡啶或CH3CN，在高温，典型地70℃－150℃下或通过
微波照射反应。
[0342] 式(Ie)的化合物还可以按照子-方案S6如下得到：使式(X)的氨基甲酰基氯与式(IV)的醇在适合的溶剂，例如THF或吡啶或CHCl3中、在适合的温度例如室温下反应。
[0343] 也可以根据方案B制备式(Ie)的化合物，即式(I)的化合物，其为在吡啶环上的N-氧化物形式，且其中L1不存在(即L1为(CH2)p，且p为0)，且L2为CH2，且X为N原子。
[0344] 方案B
[0345]
[0346] 在子-方案S7－S16中描述了方案B中代表的单一步骤。
[0347] 可以按照子-方案S16，通过使式(XX)的酯与还原剂例如硼氢化钠在溶剂例如THF中反应得到式(IXX)的醇。
[0348] 式(XVII)的醛可以按照子-方案S15如下得到：用
氧化剂例如MnO2在无溶剂条件下或在适合的溶剂例如DCM中，在室温或较高温度例如50℃下氧化式(IXX)的醇。
[0349] 式(XIII)的中间体可以按照子-方案S14如下得到：使式(VI)的胺与式(XVIII)的醛在适合的溶剂例如乙腈中，在酸例如乙酸和还原剂例如NaB(OAc)3H的存在下，在适合的温度例如室(或环境)温度或0℃或40℃下反应。
[0350] 式(XIII)的中间体还可以按照子-方案S11如下得到：使式(XIV)的化合物与酸例如HCl在适合的溶剂例如二噁烷或DCM中，在适合的温度例如室(或环境)温度或0℃下反应。
[0351] 中间体(XIV)可以按照子-方案S12如下得到：用式(XVI)的溴化物在适合的无质子溶剂例如DMF或THF中，在强碱例如NaH的存在下，在适合的温度例如室(或环境)温度或0℃下使式(XV)的化合物烷基化。
[0352] 式(XVI)的中间体可以按照子-方案S13如下得到：使式(XVII)的化合物与溴化剂例如NBS或溴在适合的溶剂例如DCM中，在适合的温度例如室(或环境)温度或0℃下反应。
[0353] 式(II)的氯甲酸酯类可以按照子-方案S10如下得到：使式(IV)的醇与氯甲酸三氯甲酯(III)在适合的溶剂例如MeCN中在适合的温度例如0℃下反应。
[0354] 式(XII)的中间体可以按照子-方案S9如下得到：使式(XIII)的胺与式(II)的氯甲酸酯在适合的溶剂例如THF或吡啶或CH3CN中，在高温，典型地70℃－150℃下或通过微波照射反应。
[0355] 式(XI)的中间体可以按照子-方案S8如下得到：在适合的溶剂混合物例如THF/MeOH/水中，在适合的碱例如氢氧化锂的存在下，在适合的温度例如室温或40℃下
水解式(XII)的化合物。
[0356] 式(Ie)的化合物可以按照子-方案S7如下得到：使式(VIII)的醇与式(XI)的羧酸在适合的溶剂例如DMF中，在偶合剂例如EDC/DMAP或HATU的存在下，在适合的温度例如室(或环境)温度或40℃下反应。
[0357] 可以根据方案C制备式(If)的化合物，即式(I)的化合物，其为在吡啶环上的N-氧化物形式，且其中L1不存在(即L1为(CH2)p，且p为0)，且L2为CH2，且X为基团[1]-N(R19)-CH<[2](其中R19选自氢、(C1-C6)烷基和苄基，且其中[1]表示基团X连接至L2的点，且[2]表示基团X连接至基团W2和羰基基团的点)。
[0358] 方案C
[0359]
[0360] 在子-方案S17－S21中描述了方案C中代表的单一步骤。
[0361] 式(XXV)的中间体可以是商购的，或式(XXV)的中间体可以按照子-方案S21通过下述得到：使式(XXVI)的甘氨酸衍生物与二碳酸二-叔丁酯在适合的溶剂例如二噁烷/水中，在碱例如NaOH的存在下，在0℃或室温下反应。
[0362] 式(XXIV)的中间体可以按照子-方案S20如下得到：使式(IV)的醇与式(XXV)的中间体在溶剂例如THF中，在缩合剂和脱水剂例如1-羟基苯并三唑和N,N′-二环己基碳二亚胺的存在下，在0℃或室温下反应。
[0363] 式(XXI)的中间体可以按照子-方案S19如下得到：使式(XXIV)的中间体与酸例如HCl在适合的溶剂例如二噁烷或DCM中，在适合的温度例如室(或环境)温度或0℃下反应。式(XXI)的中间体可以不经分离直接用于下一步(子方案S17)。
[0364] 式(XXII)的中间体可以按照子-方案S18如下得到：使式(VIII)的醇与式(XXIII)的羧酸在适合的溶剂例如DMF中，在偶合剂例如EDC/DMAP或HATU的存在下，在适合的温度例如室(或环境)温度或40℃下反应。
[0365] 式(If)的化合物可以按照子-方案S17通过下述得到：使式(XXII)的中间体与式(XXI)的中间体在如下条件下反应：在适合的溶剂例如DCM或
乙醇或CH3CN中，在酸例如乙酸的存在下，或采用(XXI)的盐，在还原条件下，例如使用硼氢化钠、三乙酰氧基硼氢化钠、氰基硼氢化钠，或通过催化氢化并且使用任选的催化剂例如DMAP，在适合的温度例如室(或环境)温度或0℃或40℃或50℃下。
[0366] 所述方法是特别有利的，因为它易于通过本领域技术人员已知的任何适当的变化形式的适当调整，以便得到任意的本发明期望的化合物。这类变化形式包含在本发明范围内。对于具体的化合物精确地描述未包含在上述方案中的合成方法。
[0367] 从所有上述描述中，本领域技术人员应当显而易见，任意所述的基团可以直接存在或以任何使得被保护的形式存在。
[0368] 具体地，存在于式II－XXVI化合物上的可能产生不需要的副反应和副产物的官能团需要适当地被保护，然后进行烷基化、酰化、偶合、氧化或磺酰化。同样，随后对于那些相同的被保护的基团的脱保护可以在完成所述反应后进行。
[0369] 在本发明中，除非另有指示，否则术语“保护基”表示保护基团，其适合于保护所键合的官能团。典型地，保护基用于保护氨基、羟基或羧基官能团。适合的保护基由此可以包括，例如苄基、苄基氧基羰基、叔丁氧羰基、烷基或苄基酯类等，它们是本领域技术人员众所周知的[对于一般性的参考文献，参见T.W.Green；Protective Groups in Organic Synthesis(Wiley,N.Y.1999)]。
[0370] 同样，可以根据常用于有机合成化学的极为众所周知的方法选择性保护和脱保护任意的所述基团，例如，包括羰基、羟基或氨基基团。
[0371] 可以根据文献中可获知和本领域技术人员众所周知的方法制备式(I)的化合物的4-吡啶基环上的N-氧化物及其实施方案。例如，可以通过将式(I)的化合物或其实施方案溶于CH2Cl2或CHCl3，然后向得到的溶液中添加氧化剂例如间-氯过
苯甲酸(mCPBA)制备它们。
可以使用的另外的氧化剂是过氧化氢、过苯甲酸和过乙酸。
[0372] 或者，尤其是对于包含对氧化敏感性的官能团的那些化合物而言，通过进行氧化步骤，然后进一步引入官能团制备相应的N-氧化物。
[0373] 在一个优选实施方案中，用于制备式(I)的化合物或其实施方案的方法以式(VIII)化合物的吡啶环上的N-氧化物为原料进行，由此能够制备吡啶环上的N-氧化物形式的式(I)的化合物或其实施方案。
[0374] 可以通过将任意的游离酸性或氨基基团转化成相应的药学上可接受的盐对式(I)的化合物或其吡啶环上的N-氧化物进行任选的成盐。也是在这种情况中，用于使本发明化合物任选成盐的操作条件属于本领域技术人员的一般知识范围。
[0375] 从所有上述描述中，本领域技术人员应当显而易见，用于制备本发明适合的化合物的上述方法、其任意的变化形式的综合可以进行便利地修改，以便例如通过选择适合的缩合剂、溶剂和保护基使反应条件适合于特定的需求，视具体情况而定。
[0376] 本发明也提供了与一种或多种药学上可接受的载体混合的本发明化合物的药物组合物，所述载体例如在Remington’s Pharmaceutical Sciences Handbook,XVII Ed.,Mack Pub.,N.Y.,U.S.A.中描述的那些。
[0377] 本发明的化合物的施用可以根据患者需要来进行，例如，口服施用、经鼻施用、胃肠外施用(皮下、静脉内、肌肉内、胸骨内和通过输注)、吸入施用、直肠施用、
阴道施用、表面施用、局部施用、透皮施用和眼施用。可以将各种固体口服剂型用于施用本发明的化合物，包括例如片剂、囊形片、胶囊、囊片、颗粒、锭剂和散装粉末等固体形式。可以将本发明的化合物单独施用，或与本领域已知的各种药学上可接受的载体、稀释剂(例如
蔗糖、甘露醇、乳糖、
淀粉)和赋形剂组合施用，所述赋形剂包括、但不限于助悬剂、增溶剂、缓冲剂、
粘合剂、崩解剂、
防腐剂、
着色剂、
调味剂、
润滑剂等。定时释放胶囊、片剂和凝胶剂对于本发明化合物的施用也是有利的。
[0378] 还可以将各种液体口服剂型用于施用本发明的化合物，包括水性和非水性溶液、乳剂、混悬剂、糖浆剂和酏剂。这些剂型还可以包含本领域已知的适宜的惰性稀释剂(如水)以及本领域已知的适宜的赋形剂(如防腐剂、润湿剂、
甜味剂、调味剂)以及用于乳化和/或悬浮本发明的化合物的试剂。例如，可以以等渗无菌溶液的形式静脉内注射本发明的化合物。其它制剂也是可能的。
[0379] 通过将化合物与适合的赋形剂例如可可脂、水杨酸盐和聚乙二醇混合，可以制备用于本发明化合物的直肠施用的栓剂。
[0380] 用于阴道施用的制剂可以为乳膏剂、凝胶、糊剂、
泡沫或喷雾剂形式，其除了活性成分之外还包含如本领域已知这样的适合的载体。
[0381] 对于局部施用，药物组合物可以为适合施用至
皮肤、眼、
耳或鼻的乳膏剂、
软膏剂、搽剂、洗剂、乳剂、混悬剂、凝胶、溶液、糊剂、粉剂、喷雾剂和滴剂的形式。局部施用还可以包括通过例如
透皮贴剂方式进行的透皮施用。
[0382] 对于治疗呼吸道疾病，根据本发明的化合物优选地通过吸入来施用。
[0383] 可吸入的制剂包括可吸入的散剂、包含推进剂的定量气雾剂或不含推进剂的可吸入制剂，它们都可以通过适合的装置来递施用，所述适合的装置可以相应地选自干粉吸入器、加压定量吸入器或雾化器。
[0384] 对于作为干粉施用，可以使用根据
现有技术已知的单或多剂量吸入器。在该情况下，该粉末可以填充在明胶、塑料或其它胶囊、药筒或泡罩
包装中或在贮库中。
[0385] 可以将通常无毒且对本发明化合物是化学惰性的稀释剂或载体(例如乳糖)或适于改善可吸收分数(respirable fraction)的任意其它添加剂加入到粉末化的本发明的化合物中。
[0386] 包含推进气体(如氢氟烷烃)的吸入气雾剂可以包含溶液或分散形式的本发明的化合物。推进剂驱动的制剂还可以包含其它成分，例如共溶剂、稳定剂或任选的其它赋形剂。
[0387] 包含本发明化合物的不含推进剂的可吸入制剂可以是在水性、醇性或水醇性介质中的溶液或混悬剂形式，且它们可以通过从现有技术已知的喷射或
超声雾化器或通过软薄雾雾化器例如 来递送。
[0388] 本发明的化合物可以作为唯一活性剂来施用，或与其它药物活性成分的组合产品(combination)来施用，所述其它药物活性成分包括目前用于治疗呼吸障碍的那些，例如，β2-激动剂、抗毒蕈碱药、皮质类固醇、丝裂原激活蛋白激酶类(P38MAP激酶)抑制剂、核因子κ-B激酶亚单位β(IKK2)抑制剂、人嗜中性细胞弹性蛋白酶(HNE)抑制剂、磷酸二酯酶4(PDE4)抑制剂、白三烯调节剂、非类固醇抗炎药(NSAIDs)和粘液调节剂。
[0389] 本发明还提供本发明化合物与β2-激动剂的组合，所述β2-激动剂选自卡莫特罗、维兰特罗(vilanterol)(GSK-642444)、茚达特罗、米维特罗、阿福特罗、福莫特罗、沙丁胺醇、左旋沙丁胺醇、特布他林、AZD-3199、奥达特罗(BI-1744-CL)、abediterol(LAS-100977)、班布特罗、异丙肾上腺素、丙卡特罗、克仑特罗、瑞普特罗、非诺特罗和ASF-1020及其盐。
[0390] 本发明还提供本发明化合物与皮质类固醇的组合，所述皮质类固醇选自丙酸氟替卡松、糠酸氟替卡松、糠酸莫米松、二丙酸倍氯米松、环索奈德、布地奈德、GSK 685698、GSK 870086。
[0391] 本发明还提供本发明化合物与抗毒蕈碱剂的组合，所述抗毒蕈碱剂选自阿地溴铵、噻托溴铵、异丙托铵、曲司氯铵(trospium)、
葡萄糖吡喀和氧托品盐。
[0392] 本发明还提供本发明化合物与PDE4抑制剂的组合，所述PDE4抑制剂选自AN-2728、AN-2898、CBS-3595、apremilast、ELB-353、KF-66490、K-34、LAS-37779、IBFB-211913、AWD-12-281、西潘茶碱、西洛司特、罗氟司特、BAY19-8004和SCH-351591、AN-6415、indus-82010、TPI-PD3、ELB-353、CC-11050、GSK-256066、奥米司特、OX-914、替托司特、MEM-1414和RPL-
554。
[0393] 本发明还提供本发明化合物与P38MAP激酶抑制剂的组合，所述P38MAP激酶抑制剂选自塞马莫德、他美莫德、吡非尼
酮、PH-797804、GSK-725、minokine和洛吡莫德及其盐。
[0394] 在一个优选的实施方案中，本发明提供本发明化合物与IKK2抑制剂的组合。
[0395] 本发明还提供本发明化合物与HNE抑制剂的组合，所述HNE抑制剂选自AAT、ADC-7828、Aeriva、TAPI、AE-3763、KRP-109、AX-9657、POL-6014、AER-002、AGTC-0106、respriva、AZD-9668、zemaira、AAT IV、PGX-100、弹力素、SPHD-400、α1抗胰蛋白酶C和吸入的α1抗胰蛋白酶。
[0396] 本发明还提供本发明化合物与白三烯调节剂的组合，所述白三烯调节剂选自孟鲁司特、扎鲁司特和普仑司特。
[0397] 本发明还提供本发明化合物与NSAID的组合，所述NSAID选自布洛芬和酮洛芬。
[0398] 本发明还提供本发明化合物与粘液调节剂的组合，所述粘液调节剂选自INS-37217、地夸磷索、西贝那德、CS-003、他奈坦、DNK-333、MSI-1956和吉非替尼。
[0399] 本发明的化合物的剂量取决于多种因素，包括要治疗的具体疾病、症状的严重性、
给药途径、剂量间隔
频率、使用的具体化合物、化合物的效能、毒理学特性和药代动力学特性。
[0400] 有利地，可以在例如0.001至1000mg/天、优选0.1至500mg/天的剂量，施用本发明的化合物。
[0401] 当通过吸入途径施用它们时，本发明的化合物的剂量有利地被包含在0.01至20mg/天之间，优选0.1至10mg/天之间。
[0402] 优选地，可以施用单独的或与其它活性成分的组合产品的本发明化合物，用于预防和/或治疗任意阻塞性呼吸疾病例如哮喘、慢性支气管炎和慢性阻塞性肺疾病(COPD)。
[0403] 可以施用本发明的化合物用于预防和/或治疗其中需要抑制PDE4或拮抗M3的任何疾病。所述疾病包括：变态
反应性疾病状态例如特应性皮炎、荨麻疹、变应性鼻炎、变应性结膜炎、春季结膜炎、嗜酸性粒细胞性肉芽肿、银屑病、炎症性关节炎、类风湿性关节炎、脓毒性休克、溃疡性结肠炎、克罗恩氏病、心肌和脑的
再灌注损伤、慢性肾小球肾炎、内毒素性休克、囊性纤维化、动脉
再狭窄、动脉粥样硬化、角化病、类风湿性脊柱炎、骨关节炎、热病、糖尿病、尘肺病、毒性和变应性
接触性湿疹、特应性湿疹、脂溢性湿疹、单纯苔藓、晒伤、肛
门与生殖器区域的
瘙痒、斑秃、肥大性疤痕、盘状红斑狼疮、系统性红斑狼疮、毛囊和广泛区域的脓皮病、内源性和外源性的痤疮、红斑痤疮、贝切特病、类过敏性紫癜肾炎、炎性肠病、白血病、多发性硬化、胃肠道疾病、自身免疫疾病等。
[0404] 它们还包括神经病学和
精神病学病症，例如阿尔茨海默氏病、多发性硬化、肌侧索硬化(amylolaterosclerosis，ALS)、多系统萎缩(MSA)、
精神分裂症、
帕金森病、亨廷顿病、皮克病、
抑郁症、中风和脊髓损伤。
[0405] 现在将通过下述非限制性
实施例进一步描述本发明。实施例
[0406] 缩写
[0407] DCC＝N,N'-二环己基碳二亚胺；HOBt＝羟基苯并三唑；HATU＝(二甲氨基)-N,N-二甲基(3H-[1,2,3]三唑并[4,5-b]吡啶-3-基氧基)甲铵六氟磷酸盐；CDI＝羰基二咪唑；EDC＝1-乙基-3-(3-二甲氨基丙基)碳二亚胺盐酸盐；DMAP＝4-二甲氨基吡啶；DMF＝二甲基甲酰胺；DMSO＝二甲亚砜；EtOAc＝乙酸乙酯；RT＝室温；THF＝四氢呋喃；DCM＝二氯甲烷；MeOH＝甲醇；EtOH＝乙醇；LHMDS＝双(三甲基甲
硅烷基)氨基锂；m-CPBA＝间氯过苯甲酸；TFA＝三氟乙酸；LC-MS＝液相色谱/质谱；NMR＝
核磁共振；HPLC＝高压液相色谱；MPLC＝中压液相色谱；SFC＝
超临界流体色谱
[0408] 一般实验细节
[0409] 分析方法
[0410] 液相色谱法-质谱法
[0411] 方法1
[0412] 使用Waters 2795Alliance HT HPLC与Waters 2996
二极管阵列检测器进行LC-MS，所述Waters 2996二极管阵列检测器偶联使用Phenomenex Luna C18(2)柱(5μm,100x 4.6mm+防护柱)的Micromass ZQ单个四极质谱仪，线性梯度为5-95％乙腈/水(每个流动相中包含0.1％甲酸)，3.5分钟内，保持在95％2.0分钟。
[0413] 方法2
[0414] 使用Waters 2795Alliance HT HPLC与Waters 2996二极管阵列检测器进行LC-MS，所述Waters 2996二极管阵列检测器偶联使用Waters Xterra MS C18柱(5μm,100x 4.6mm+防护柱)的Micromass ZQ单个四极质谱仪，最初保持在5％乙腈/水(每个水性流动相中包含10mM碳酸氢铵)0.5分钟，然后在3.5分钟内保持在5-95％的线性梯度，然后保持在
95％1.5分钟。
[0415] 方法3
[0416] 使用UPLC Acquity与AcquityPDA检测器进行UPLC-MS，所述AcquityQDA检测器偶联采用Waters BEH柱C18(1.7μm,50x 2.1mm)的Micromass ZQ单个四极质谱仪，线性梯度为1-99.9％乙腈/水(每个水性流动相中包含0.05％甲酸)，4分钟内，保持在99.9％3.5分钟；F＝1ml/min
[0417] 方法4
[0418] 使用Waters UPLC H级与二极管阵列检测器进行UPLC-MS，所述二极管阵列检测器偶联使用Acquity UPLC CSH C18 1.7um 50x2.10(Waters)的Waters XEVO-TQS三联四极质谱仪，其带有电喷雾电离(ESI)源。流动相A由甲酸铵缓冲液(25mM，pH 3)组成，且流动相B由0.1％甲酸的乙腈溶液组成。流速为0.35ml/min，且梯度从20％至80％的流动相B，5.5min，然后是在80％的等度步骤2分钟。质谱仪在正离子模式和负离子模式之间切换运行(质量范围150-1000)。
[0420] 通过手性高效液相色谱法(HPLC)、采用Gilson Trilution制备型HPLC系统(322
泵,155UV/VIS,GX281液体处理器和馏分采集器)或通过
超临界流体色谱法(SFC)、采用Waters Thar Prep100制备型SFC系统(P200CO2泵,2545调节泵,2998UV/VIS检测器,带有
叠加注射模
块的2767液体处理器)进行化合物的非对映异构体分离。Waters2767液体处理器作为自动
采样器和馏分采集器起作用。
[0421] 用于化合物的制备型纯化的柱是Diacel Chiralpak IA/IB/IC、Phenomenex Lux Cellulose-4、YMC Amylose-C或YMC Cellulose-C，5μm 250×20–21.2mm ID。
[0422] 基于甲醇、乙醇或异丙醇溶剂系统在未改性或碱性条件下选择适合的等度方法。
[0423] 所用的标准SFC方法是调节剂、CO2、100mL/min、120巴反压力、40℃柱温。所用的标准HPLC方法是调节剂、庚烷、5mL/min和室温。
[0424] 在碱性条件下使用的调节剂是二乙胺(0.1％V/V)。在酸性条件下使用的调节剂是甲酸(0.1％V/V)或三氟乙酸(0.1％V/V)。
[0425] 通过Waters Fractionlynx
软件、通过在210-400nm监测控制SFC纯化并且在
阈值采集值、典型地在260nm触发。通过SFC(带有Waters SQD的Waters/Thar SFC系统)分析采集的级分。通过
真空离心浓缩包含期望的产物的级分。
[0426] 通过监测2个
波长的Gilson Trilution软件控制HPLC纯化并且在阈值采集值、典型地在260nm触发。通过HPLC(Agilent 1200系列HPLC系统)分析采集的级分。通过真空离心浓缩包含期望的产物的级分。
[0427] 超临界流体色谱法—质谱法分析条件
[0428] 方法5
[0429] 使用带有Waters SQD的Waters/Thar SFC系统，采用Cellulose-
C柱，以5mL/min、120巴反压力、40℃柱温的YMC 40％异丙醇/CO2(含有0.1％二乙胺)等度运行进行SFC-MS。
[0430] 方法6
[0431] 使用带有Waters SQD的Waters/Thar SFC系统，采用YMCCellulose-C柱，以5mL/min、120巴反压力、40℃柱温的25％乙醇/CO2(含有0.1％二乙胺)等度运行进行SFC-MS。
[0432] 方法7
[0433] 使用带有Waters SQD的Waters/Thar SFC系统，采用ChiralpakIA柱，以5mL/min、120巴反压力、40℃柱温的45％异丙醇/CO2(含有0.1％二乙胺)的等度运行进行SFC-MS。
[0434] 方法8
[0435] 使用带有Waters SQD的Waters/Thar SFC系统，采用ChiralpakIA柱，以5mL/min、120巴反压力、40℃柱温的55％异丙醇/CO2(含有0.1％二乙胺)的等度运行进行SFC-MS。
[0436] 方法9
[0437] 使用带有Waters SQD的Waters/Thar SFC系统，采用ChiralpakIA柱，以5mL/min、120巴反压力、40℃柱温的30％乙醇/CO2(含有0.1％二乙胺)的等度运行进行SFC-MS。
[0438] 方法10
[0439] 使用带有Waters SQD的Waters/Thar SFC系统，采用ChiralpakIA柱，以5mL/min、120巴反压力、40℃柱温的40％乙醇/CO2(含有0.1％二乙胺)的等度运行进行SFC-MS。
[0440] 方法11
[0441] 使用带有Waters SQD的Waters/Thar SFC系统，采用ChiralpakI
B柱，以5mL/min、120巴反压力、40℃柱温的30％乙醇/CO2(含有0.1％二乙胺)的等度运行进行SFC-MS。
[0442] 方法12
[0443] 使用带有Waters SQD的Waters/Thar SFC系统，采用YMCAmylose-C柱，以5mL/min、120巴反压力、40℃柱温的30％异丙醇/CO2(含有0.1％二乙胺)的等度运行进行SFC-MS。
[0444] 方法13
[0445] 使用带有Waters SQD的Waters/Thar SFC系统，采用YMCAmylose-C柱，以5mL/min、120巴反压力、40℃柱温的40％异丙醇/CO2(含有0.1％二乙胺)的等度运行进行SFC-MS。
[0446] 方法14
[0447] 使用带有Waters SQD的Waters/Thar SFC系统，采用YMCAmylose-C柱，以5mL/min、120巴反压力、40℃柱温的45％异丙醇/CO2(含有0.1％二乙胺)的等度运行进行SFC-MS。
[0448] 方法15
[0449] 使用带有Waters SQD的Waters/Thar SFC系统，采用YMCAmylose-C柱，以5mL/min、120巴反压力、40℃柱温的55％异丙醇/CO2(含有0.1％二乙胺)的等度运行进行SFC-MS。
[0450] 方法16
[0451] 使用带有Waters SQD的Waters/Thar SFC系统，采用YMCCellulose-C柱，以5mL/min、120巴反压力、40℃柱温的35％乙醇/CO2(含有0.1％二乙胺)的等度运行进行SFC-MS。
[0452] 方法17
[0453] 使用带有Waters SQD的Waters/Thar SFC系统，采用YMCCellulose-C柱，以5mL/min、120巴反压力、40℃柱温的40％异丙醇/CO2(含有0.1％二乙胺)的等度运行进行SFC-MS。
[0454] 方法18
[0455] 使用带有Waters SQD的Waters/Thar SFC系统，采用YMCAmylose-C柱，以5mL/min、120巴反压力、40℃柱温的35％异丙醇/CO2(含有0.1％二乙胺)的等度运行进行SFC-MS。
[0456] 方法23
[0457] 使用带有Waters SQD的Waters/Thar SFC系统，采用ChiralpakIA柱与，5mL/min、120巴反压力、40℃柱温的40％异丙醇/CO2(含有0.1％二乙胺)的等度运行进行SFC-MS。
[0458] 方法24
[0459] 使用带有Waters SQD的Waters/Thar SFC系统，采用Chiralpak IA柱，以5mL/min、120巴反压力、40℃柱温的35％异丙醇/CO2(含有0.1％二乙胺)的等度运行进行SFC-MS。
[0460] 方法25
[0461] 使用带有Waters SQD的Waters/Thar SFC系统，采用Chiralpak IB柱，以5mL/min、120巴反压力、40℃柱温的35％乙醇/CO2(含有0.1％二乙胺)的等度运行进行SFC-MS。
[0462] 方法26
[0463] 使用带有Waters SQD的Waters/Thar SFC系统，采用YMC cellulose柱，以5mL/min、120巴反压力、40℃柱温的30％异丙醇/CO2(含有0.1％二乙胺)的等度运行进行SFC-MS。
[0464] 方法27
[0465] 使用带有Waters SQD的Waters/Thar SFC系统，采用Chiralpak IC柱，以5mL/min、120巴反压力、40℃柱温的55％异丙醇/CO2(含有0.1％二乙胺)的等度运行进行SFC-MS。
[0466] 方法28
[0467] 使用带有Waters SQD的Waters/Thar SFC系统，采用Lux Cellulose-4柱，以5mL/min、120巴反压力、40℃柱温的35％异丙醇/CO2(含有0.1％二乙胺)的等度运行进行SFC-MS。
[0468] 方法29
[0469] 使用带有Waters SQD的Waters/Thar SFC系统，采用Lux Cellulose-4柱，以5mL/min、120巴反压力、40℃柱温的55％乙醇/CO2(含有0.1％二乙胺)的等度运行进行SFC-MS。
[0470] 手性HPLC-分析条件
[0471] 方法19
[0472] 手性HPLC使用Agilent 1200系列HPLC系统、采用Chiralpak IA柱与50％异丙醇/庚烷(含有0.1％二乙胺)以1mL/min进行。
[0473] 方法20
[0474] 手性HPLC使用Agilent 1200系列HPLC系统、采用Chiralpak IC柱与50％四氢呋喃/庚烷(含有0.1％二乙胺)以1mL/min进行。
[0475] 方法21
[0476] 手性HPLC使用Agilent 1200系列HPLC系统、采用Chiralpak IB柱与50％乙醇/庚烷(含有0.1％二乙胺)以1mL/min进行。
[0477] 方法22
[0478] 手性HPLC使用Agilent 1200系列HPLC系统、采用Chiralpak IB柱与30％乙醇/70％庚烷(含有0.1％二乙胺)以1mL/min进行。
[0479] NMR
[0480] 使用在400MHz操作的Bruker仪器，采用在约室温下所述的溶剂进行1H核磁共振(NMR)
光谱测定，另有描述的除外。在所有情况中，NMR数据与提出的结构一致。采用指定主要峰的常规缩写以百万分率给出特征性化学位移(δ)：例如s，单峰；d，双峰；t，三重峰；q，四重峰；dd，双二重峰；dt,双三重峰；m＝多重峰，br＝宽峰。
[0481] 制备型反相HPLC条件
[0482] 通过反相HPLC，采用Waters Fract ionlynx制备型HPLC系统(2525泵,2996/2998UV/VIS检测器,2767液体处理器)或等效的HPLC系统例如Gilson Trilution UV定向系统进行制备型HPLC纯化。Waters 2767液体处理器作为自动采样器和级分收集器起作用。
[0483] 用于化合物的制备型纯化的柱是Waters Sunfire OBD Phenomenex Luna Phenyl Hexyl或Waters Xbridge Phenyl 10μm 19×150mm或Waters CSH Phenyl Hexyl 19×150,5μm柱。
[0484] 基于乙腈和甲醇溶剂系统在酸性或碱性条件下选择适合的聚焦的梯度。
[0485] 在酸性/碱性条件下使用的调节剂分别是甲酸或三氟乙酸(0.1％V/V)和碳酸氢铵(10mM)。
[0486] 使用Waters Fractionlynx软件通过在210-400nm监测控制纯化并且在260nm触发阈值采集值，以及，当使用Fractionlynx时，在APi条件下观察到存在目标分子离子。通过LCMS(带有Waters SQD的Waters Acquity系统)分析采集的级分。
[0487] 化合物制备
[0488] 如果未描述原料的制备，则它们是商购的、文献中已知的或易于由本领域技术人员使用标准方法得到。如果描述按照与上述实施例或中间体“类似地”或“相似地”制备化合物，则本领域技术人员应当理解，对于每种特定的反应可以改变反应时间、试剂的当量数和温度，且有必要或期望使用不同的后处理或纯化技术。
[0489] 快速色谱法是指硅胶色谱法并且采用Isolera MPLC系统(由Biotage制造)；预填充的硅胶柱(由Biotage提供)；或采用常规的玻璃柱色谱法进行。
[0490] 在如下方法中，在每种原料后，可以提供化合物编号。提供它仅用于辅助普通化学技术人员。原料不必由所涉及的批号制备。
[0491] 下列实施例中所述的许多化合物由立体化学纯的原料制备，所述原料例如95％对映体过量(ee)。
[0492] 如果指示，则将实施例中的化合物的立体化学归为如下推定：在任意随后的反应条件的至始至终保持原料的拆分的立体中心上的绝对构型。
[0493] 分离为其在通式(IE)中的立体中心(2)上的绝对构型未测定的单一非对映异构体的化合物在下文中称作单一非对映异构体，在其化学名称中未提及未知立体中心的绝对构型。
[0494] 中间体1/A(I-1/A)
[0495] (S)-3,5-二氯-4-(2-(3,4-二甲氧基苯基)-2-羟基乙基)吡啶1-氧化物
[0496]
[0497] 步骤1:(R,S)-2-(3,5-二氯吡啶-4-基)-1-(3,4-二甲氧基苯基)乙醇(I-1/Aa)的制备
[0498] 在氩气气氛中，将3,5-二氯-4-甲基吡啶(54g,331mmol)溶于干THF(480mL)，在-78℃在
干冰/丙酮浴中冷却。滴加LHMDS 1N THF溶液(331mL,331mmol)，保持温度在-78°。将该混合物在-78°搅拌1h。此后，滴加3,4-二甲氧基
苯甲醛(50g,301mmol)在干THF(120mL)中的溶液，保持温度在-78℃。当添加完成时，将该混合物在RT温热。
[0499] 将该反应体系倾入冰和水(1L)，将该混合物搅拌至形成大量沉淀。过滤固体，溶于乙酸乙酯(500mL)，用Na2SO4干燥，真空
蒸发。使粗产物在CHCl3/己烷中结晶。过滤沉淀，用己烷洗涤，在40℃真空干燥8h，得到55g标题化合物(45％收率)。在40℃真空蒸发母液，溶于乙酸乙酯(200mL)，用200mL水萃取。用Na2SO4干燥有机溶液，在40℃真空蒸发溶剂。使粗产物在CHCl3/己烷中结晶，又得到15g标题产物(70％总收率)。
[0500] 步骤2:(R)-2-(6-甲氧基萘-2-基)丙酸(R,S)-2-(3,5-二氯吡啶-4-基)-1-(3,4-二甲氧基苯基)乙基)酯(I-1/Ab)的制备
[0501] 将(R,S)-2-(3,5-二氯吡啶-4-基)-1-(3,4-二甲氧基苯基)乙醇(50g,152mmol)、(R)-2-(6-甲氧基萘-2-基)丙酸(38.6g,168mmol)、DMAP(20.5g,168mmol)和EDC(43.8g,229mmol)溶于DMF(300mL)，将该反应混合物在RT搅拌2h。此后，加入水(500mL)，将该溶液搅拌至沉淀完全。过滤固体，溶于DCM(500mL)。用HCl 1N水溶液(2x500mL)、NaHCO3水溶液(500mL)洗涤有机溶液，用Na2SO4干燥。真空蒸发溶剂，在EtOH(300mL)中超声处理固体残余物，
研磨1h。通过过滤收集得到的沉淀，在40℃真空干燥4h，得到79g(99％收率)的标题化合物，为非对映异构体混合物。
[0502] 步骤3:(R)-(2-(6-甲氧基萘-2-基)丙酸(S)-2-(3,5-二氯吡啶-4-基)-1-(3,4-二甲氧基苯基)乙基)酯(I-1/Ac)的制备
[0503] 将(R)-(6-甲氧基萘-2-基)丙酸(R,S)-2-(3,5-二氯吡啶-4-基)-1-(3,4-二甲氧基苯基)乙基)酯(非对映异构体混合物，79g,146mmol)溶于CHCl3(100mL)，缓慢地加入MeOH(30mL)至持续乳白色，将该混合物保持在RT 2h。通过过滤采集形成的固体，用CHCl3/MeOH(70mL/20mL)溶剂系统重结晶，得到35g期望的化合物(收率88％,ee98％)。手性HPLC分析：Chiralcel OD柱,10μm,250x4.6mm；流速＝0.8ml/min；洗脱液＝己烷:异丙醇97/3；Rt＝
42.33min；
[0504] 1H NMR(600MHz,CHLOROFORM-d)δ ppm 8.04(s,2H),7.67(d,J＝8.79Hz,1H),7.58(d,J＝8.52Hz,1H),7.53(m,1H),7.12-7.20(m,3H),6.95(dd,J＝8.24,1.92Hz,1H),6.78-6.88(m,2H),6.14(dd,J＝10.44,4.12Hz,1H),3.95(s,3H),3.88(s,3H),3.78-3.81(m,4H),
3.55(dd,J＝13.73,10.44Hz,1H),3.14(dd,J＝13.60,4.26Hz,1H),1.44(d,J＝7.14Hz,
3H)。
[0505] 步骤4:(S)-2-(3,5-二氯吡啶-4-基)-1-(3,4-二甲氧基苯基)乙醇(I-1/Ad)的制备
[0506] 将(R)-2-(6-甲氧基萘-2-基)丙酸(S)-2-(3,5-二氯吡啶-4-基)-1-(3,4-二甲氧基苯基)乙基)酯(30g,56mmol)溶于MeOH,，缓慢地加入甲苯。向该混悬液中缓慢地加入叔丁氧基钾。将该混合物在RT搅拌24h。用水(500mL)稀释该反应体系，用CHCl3(500mL)萃取水性混合物。用Na2SO4干燥有机层，真空蒸发溶剂。使残余物从CHCl3(100mL)和己烷(20mL)中结晶。浓缩母液，使用类似方法使其重结晶，得到第二批期望的化合物。总计得到16g标题化合物(87％收率)。手性HPLC分析：Chiralcel OD柱，10μm,250x4.6mm；流速＝0.8ml/min；洗脱液＝己烷:异丙醇95/5；Rt＝58.03min； (c＝0.506,甲醇)；1H NMR(400MHz,丙酮)δppm 8.47(s,2H),6.96-7.15(m,1H),6.87(m,2H),4.93-5.21(m,1H),4.50(d,J＝3.97Hz,1H),3.78(s,6H),3.44(dd,J＝12.79,8.38Hz,1H),3.22(dd,J＝13.01,
5.51Hz,1H)。MS/ESI+[MH]+:328.19.
[0507] 步骤5:(S)-3,5-二氯-4-(2-(3,4-二甲氧基苯基)-2-羟基乙基)吡啶1-氧化物(I-1/A)的制备
[0508] 将(S)-2-(3,5-二氯吡啶-4-基)-1-(3,4-二甲氧基苯基)乙醇(4g,12mmol)溶于乙酸乙酯，向该溶于中加入m-CPBA。将该混合物在RT搅拌5h。通过过滤采集形成的固体，用乙酸乙酯洗涤，真空干燥.，得到1.72g(S)-2-(3,5-二氯吡啶-4-基)-1-(3,4-二甲氧基苯基)乙醇(41％收率)。手性HPLC分析：Chiralcel OD柱,10μm,250x4.6mm；流速＝0.8ml/min；洗脱液＝己烷:异丙醇60/40；Rt＝22.16min； (c＝0.253,甲醇/CHCl3 1:1)；1H NMR(400MHz,CHLOROFORM-d)δppm 8.15(s,2H),6.99(m,1H),6.79-6.88(m,2H),5.03(dd,J＝8.50,5.32Hz,1H),3.75-3.98(m,6H),3.42(dd,J＝13.57,8.56Hz,1H),3.19(dd,J＝13.51,5.32Hz,1H),2.06-2.15(m,1H)；MS/ESI+[MH]+:344
[0509] 中间体1/O(I-1/O)
[0510] (R)-3,5-二氯-4-(2-(3,4-二甲氧基苯基)-2-羟基乙基)吡啶1-氧化物
[0511]
[0512] 按照与对I-1/A所述，在步骤2中使用(S)-2-(6-甲氧基萘-2-基)丙酸，得到(R)-3,5-二氯-4-(2-(3,4-二甲氧基苯基)-2-羟基乙基)吡啶1-氧化物。手性HPLC分析：Lux Cellulose-1柱，5μm,250x4.6mm；流速＝0.8ml/min；洗脱液＝己烷:异丙醇60/40；Rt＝
32.7min； (c＝0.25,甲醇/CHCl3 1:1)
[0513] 在这些条件下，(S)-对映体的Rt为27min。
[0514] 中间体I-1/B、I-1/C、I-1/D、I-1/E、I-1/F
[0515] 如
专利申请WO2009/018909中所述或可以按照上述方法(只是步骤1之后进行步骤5)，用适合的3,4-二烷氧基苯甲醛取代3,4-二甲氧基苯甲醛得到下表中报道的外消旋醇中间体：
[0516] 外消旋醇中间体的表
[0517]
[0518]
[0519]
[0520] 中间体1/G(I-1/G)
[0521] (S)-3,5-二氯-4-(2-(3-(环丙基甲氧基)-4-(二氟甲氧基)苯基)-2-羟基乙基)吡啶1-氧化物
[0522]
[0523] 可以按照专利申请WO2010/089107中所述的方法得到中间体I-1/G。
[0524] 中间体1/H(I-1/H)
[0525] (S)-3,5-二氯-4-(2-(4-(二氟甲氧基)-3-甲氧基苯基)-2-羟基乙基)吡啶1-氧化物
[0526]
[0527] 步骤1:(S)-3,5-二氯-4-(2-(4-(二氟甲氧基)-3-羟基苯基)-2-羟基乙基)吡啶1-氧化物(I-1/I)
[0528] 向(S)-3,5-二氯-4-(2-(3-(环丙基甲氧基)-4-(二氟甲氧基)苯基)-2-羟基乙基)吡啶1-氧化物(5g,11.90mmol)中加入100mL 37％HCl，在室温搅拌约3min.，得到黄色溶液。
[0529] 再搅拌3min后，将该溶液倾入NaOH(48g)在水(500mL)中的溶液。
[0530] 向红色溶液中加入1M HCl至pH 1。过滤棕色固体，用水洗涤，与热EtOH(50mL)一起研磨。在r.t.搅拌1h后，过滤固体，用EtOH洗涤，在40C真空干燥，得到2.4标题化合物。
[0531] 1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ ppm 9.84(br.s.,1H),8.54(s,2H),7.03(d,J＝8.38Hz,1H),6.98(t,J＝75.00Hz,1H),6.95(d,J＝1.76Hz,1H),6.74(dd,J＝8.16,1.54Hz,
1H),5.54(br.s.,1H),4.78(t,J＝6.39Hz,1H),3.14(dd,J＝13.23,8.38Hz,1H),2.97(dd,J＝13.23,5.29Hz,1H)
[0532] MS/ESI+[MH]+:366
[0533] 步骤2:(S)-3,5-二氯-4-(2-(4-(二氟甲氧基)-3-甲氧基苯基)-2-羟基乙基)吡啶1-氧化物(I-1/H)
[0534] 将(S)-3,5-二氯-4-(2-(4-(二氟甲氧基)-3-羟基苯基)-2-羟基乙基)吡啶1-氧化物(2g,5.46mmol)溶于DMF(16mL)，然后加入K2CO3(2g,14.47mmol)和碘甲烷(1.72g,12.12mmol)，将该混合物在r.t搅拌4h。将该混合物倾入200mL水，过滤，用水洗涤，在40℃真空干燥。
[0535] 得到1.98g白色固体。
[0536] 1H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ ppm 8.53(s,2H),7.08-7.13(m,2H),7.01(t,J＝75.00Hz,1H),6.88(dd,J＝7.94,1.76Hz,1H),5.64(d,J＝4.41Hz,1H),4.77-4.94(m,1H),+ +
3.81(s,3H),3.17(d,J＝8.38Hz,1H),3.05(d,J＝5.73Hz,1H)MS/ESI[MH]:380
[0537] 中间体I-1/J,I-1/K,I-1/L,I-1/M,I-1/N
[0538] 可以按照上述对中间体1/H所述的方法，通过使中间体1/I与适合的烷基化剂反应得到下表中报道的中间体I-1/J、I-1/K、I-1/L、I-1/M、I-1/N。
[0539]
[0540]
[0541] (接续)
[0542]
[0543]
[0544] 中间体2
[0545] (R)-氯甲酸奎宁环-3-基酯盐酸盐(I-2)
[0546]
[0547] 在0℃，向搅拌的(R)-3-奎宁环醇(2.5g,19.66mmol)在乙腈(200mL)中的溶液中滴加氯甲酸三氯甲酯(3.06mL,25.57mmol)，将该混合物在0℃搅拌1h。然后将该反应混合物在室温搅拌16h，然后真空除去溶剂，得到标题化合物，为白色固体(4.39g,98％)。
[0548] 1H NMR(400MHz,DMSO):δ 10.29(s,1H),4.05-3.95(m,1H),3.43(t,J＝10.8Hz,1H),3.12(m,3H),3.10-2.95(m,1H),2.79(d,J＝13.3Hz,1H),2.12-2.02(m,1H),1.98(m,J＝3.4Hz,1H),1.89-1.78(m,1H),1.75-1.59(m,2H).
[0549] 中间体62
[0550] 2-(4-甲酰基吡唑-1-基)乙酸叔丁酯
[0551]
[0552] 将1H-吡唑-4-甲醛(0.5g,5.2mmol)、叔丁醇钾(0.7g,6.25mmol)在N,N-二甲基甲酰胺(6mL)中的混合物在室温搅拌5分钟。加入溴乙酸叔丁酯(1.11g,5.72mmol)，将得到的混合物在室温搅拌2小时。使该反应体系在乙酸乙酯与饱和
碳酸氢钠水溶液之间分配。收集有机层，用水、然后用盐水洗涤，使其通过疏水性玻璃料
过滤器，真空除去溶剂，通过硅胶柱色谱法纯化粗物质，用15-100％乙酸乙酯的异己烷溶液洗脱，得到标题化合物(0.678g,62％)，为无色油状物。
[0553] 1H NMR(400MHz,CDCl3):δ 9.89(s,1H),8.02-8.00(m,2H),4.86(s,2H),1.48(s,9H).
[0554] 中间体63
[0555] 2-(4-甲酰基吡唑-1-基)乙酸
[0556]
[0557] 向2-(4-甲酰基吡唑-1-基)乙酸叔丁酯(0.67g,3.19mmol)在二噁烷(10mL)中的溶液中加入4N HCl的二噁烷溶液(10mL)，将该混合物在室温搅拌3天。通过减压蒸发除去溶剂，得到标题化合物(0.41g,98％)，为黄色油状物。
[0558] 1H NMR(400MHz,DMSO):δ 13.21(brs,1H),9.83(s,1H),8.46(s,1H),8.00(s,1H),5.07(s,2H).LCMS(方法1):[MH-]＝153，在1.64min.
[0559] 中间体3
[0560] 5-甲酰基噻吩-2-甲酸[(1S)-2-(3,5-二氯-1-氧化-吡啶-1-鎓-4-基)-1-(3,4-二甲氧基苯基)乙基]酯(I-3)
[0561]
[0562] 向搅拌的5-甲酰基-2-噻吩甲酸(400mg,2.56mmol)在二氯甲烷(20mL)中的溶液中加入(1S)-2-(3,5-二氯-1-氧化-吡啶-1-鎓-4-基)-1-(3,4-二甲氧基苯基)乙醇I-1/A(881mg,2.56mmol)，然后加入4-(二甲氨基)-吡啶(156mg,1.28mmol)和N-(3-二甲氨基丙基)-N′-乙基碳二亚胺盐酸盐(983mg,5.12mmol)。将得到的混合物在室温搅拌18h。使该反应体系在二氯甲烷与饱和碳酸氢钠水溶液之间分配。用盐水洗涤有机层，使其通过疏水性玻璃料过滤器，真空除去溶剂，通过硅胶柱色谱法纯化粗物质，用0-100％EtOAc的DCM溶液洗脱，得到标题化合物(488mg,39％)，为黄色油状物。
[0563] 1H NMR(400MHz,CDCl3):δ 9.97(s,1H),8.15(s,2H),7.81(d,J＝3.6Hz,1H),7.72(d,J＝3.6Hz,1H),7.03-6.99(m,2H),6.87(d,J＝8.7Hz,1H),6.26(dd,J＝4.4,10.0Hz,1H),3.91(s,3H),3.88(s,3H),3.72(dd,J＝10.0,14.0Hz,1H),3.33(dd,J＝4.4,14.0Hz,
1H).LCMS(方法2):[MH+]＝482，在3.38min.
[0564] 通过相同方法，使适合的羧酸中间体与适合的醇中间体反应合成下列中间体：
[0565]
[0566]
[0567] (接续)
[0568]
[0569]
[0570] (接续)
[0571]
[0572]
[0573] 通过对上述适合的外消旋混合物进行SFC纯化得到下列中间体：
[0574]
[0575]
[0576] 中间体10
[0577] 5-[(2-氟苯胺基)甲基]噻吩-2-甲酸[(1S)-2-(3,5-二氯-1-氧化-吡啶-1-鎓-4-基)-1-(3,4-二甲氧基苯基)乙基]酯(I-10)
[0578]
[0579] 向搅拌的5-甲酰基噻吩-2-甲酸[(1S)-2-(3,5-二氯-1-氧化吡啶-1-鎓-4-基)-1-(3,4-二甲氧基苯基)乙基]酯(128mg,0.265mmol)在二氯甲烷(5mL)中的溶液中加入2-氟苯胺(29mg,0.265mmol)，然后加入冰乙酸(0.015mL,0.265mmol)。将该反应体系在室温搅拌6h。加入三乙酰氧基硼氢化钠(140mg,0.662mmol)，将该反应体系在室温搅拌18h。加入水以使反应停止，用盐水洗涤有机层，使其通过疏水性玻璃料过滤器，真空除去溶剂，通过硅胶柱色谱法纯化粗物质，用0-100％EtOAc的DCM溶液洗脱，得到标题化合物(50mg,32％)，为黄色油状物。
[0580] 1H NMR(400MHz,CDCl3):δ8 .11(s,2H),7.65(d,J＝4.0Hz,1H),7.02-6.95(m,5H),6.84(d,J＝8.0Hz,1H),6.71-6.65(m,2H),6.18(dd,J＝4.4,9.6Hz,1H),4.57-4.56(m,2H),
4.51-4.48(m,1H),3.87(s,3H),3.86(s,3H),3.64(dd,J＝9.6,14.0Hz,1H),3.29(dd,J＝
4.4,14.0Hz,1H).LCMS(方法1):[MH+]＝577，在4.08min.
[0581]
[0582]
[0583]
[0584]
[0585]
[0586]
[0587]
[0588]
[0589]
[0590]
[0591]
[0592]
[0593]
[0594]
[0595]
[0596] 实施例1
[0597] 5-[(2-氟-N-[(3R)-奎宁环-3-基]氧基羰基-苯胺基)甲基]噻吩-2-甲酸[(1S)-2-(3,5-二氯-1-氧化-吡啶-1-鎓-4-基)-1-(3,4-二甲氧基苯基)乙基]酯甲酸盐(E1)[0598]
[0599] 向微波试管中装入5-[(2-氟苯胺基)甲基]噻吩-2-甲酸[(1S)-2-(3,5-二氯-1-氧化-吡啶-1-鎓-4-基)-1-(3,4-二甲氧基苯基)乙基]酯(50mg,0.09mmol)、(R)-氯甲酸奎宁环-3-基酯盐酸盐(81mg,0.36mmol)和无水乙腈(0.8mL)。将该混合物在80℃在微波照射下加热3分钟。将该反应体系蒸发至干。将残余物溶于DMSO(1.5mL)，通过制备型HPLC纯化，得到5-[(2-氟-N-[(3R)-奎宁环-3-基]氧基羰基-苯胺基)甲基]-噻吩-2-甲酸[(1S)-2-(3,5-二氯-1-氧化-吡啶-1-鎓-4-基)-1-(3,4-二甲氧基苯基)乙基]酯甲酸盐，为白色固体(26mg,41％)。
[0600] 1H N MR(400MHz,CDCl3):δ 8.40(s,1H),8.15(s,2H),7.59(d,J＝3.6Hz,1H),7.32-7.28(m,1H),7.15-7.11(m,3H),6.99-6.96(m,2H),6.86-6.84(m,2H),6.20(dd,J＝
4.8,10.0Hz,1H),4.95-4.93(m,3H),3.90(s,3H),3.88(s,3H),3.66(dd,J＝10.0,14.0Hz,
1H),3.38-3.28(m,2H),2.97-2.91(m,3H),2.83-2.61(m,2H),2.18-2.16(m,1H),1.84-1.79(m,1H),1.78-1.70(m,1H),1.50-1.37(m,2H).LCMS(方法2):[MH+]＝730，在3.21min.[0601] 根据与上述得到实施例1的那些类似的方法，以适合的原料为原料制备下文报道的化合物。通过手性SFC纯化得到单一非对映异构体。
[0602]
[0603]
[0604]
[0605]
[0606]
[0607]
[0608]
[0609]
[0610]
[0611]
[0612]
[0613]
[0614]
[0615]
[0616]
[0617]
[0618]
[0619]
[0620]
[0621]
[0622]
[0623] 中间体29
[0624] 3-((三甲基甲硅烷基)氧基)苯胺(I-29)
[0625]
[0626] 向3-氨基
苯酚(0.67g,6.15mmol)和六甲基二硅氮烷(10mL)中的混合物中加入催化量的浓硫酸(0.05mL)，将该混合物回流加热18h。冷却该混合物，真空除去过量的溶剂。与乙醚一起研磨，得到沉淀，过滤，真空蒸发滤液，通过硅胶柱色谱法纯化粗物质，用0-100％EtOAc的异己烷溶液洗脱，得到标题产物，为红棕色油状物(782mg,70％)。
[0627] 1H NMR(400MHz,CDCl3):δ 7.26(s,1H),7.00(t,J＝7.99Hz,1H),6.34-6.20(m,3H),3.60(s,2H),0.28-0.21(m,9H).LCMS(方法2):[MH+]＝182，在3.28min.
[0628] 实施例24
[0629] 5-[(3-羟基-N-[(3R)-奎宁环-3-基]氧基羰基-苯胺基)甲基]噻吩-2-甲酸[(1S)-2-(3,5-二氯-1-氧化-吡啶-1-鎓-4-基)-1-(3,4-二甲氧基苯基)乙基]酯(E24)
[0630]
[0631] 将3-((三甲基甲硅烷基)氧基)苯胺(0.14g,0.77mmol)和5-甲酰基噻吩-2-甲酸[(1S)-2-(3,5-二氯-1-氧化-吡啶-1-鎓-4-基)-1-(3,4-二甲氧基苯基)乙基]酯(0.186g,0.39mmol)在DCM(5mL)中的混合物在室温搅拌18h。加入NaBH(OAc)3(0.206g,0.97mmol)和乙酸(0.043mL,0.75mmol)，将该反应混合物在室温再搅拌3h。用DCM(10mL)稀释该反应混合物，用饱和NaHCO3水溶液(25mL)洗涤。再用DCM(10mL)萃取水相，用盐水(20mL)洗涤合并的有机相，通过相分离柱过滤，真空除去溶剂，与MeCN共蒸发，得到5-[(3-三甲基甲硅烷基氧基苯胺基)甲基]噻吩-2-甲酸[(1S)-2-(3,5-二氯-1-氧化-吡啶-1-鎓-4-基)-1-(3,4-二甲氧基苯基)乙基]酯，为浅棕色树胶状物。将该物质(0.185g,0.29mmol)和(R)-氯甲酸奎宁环-3-基酯(0.162g,0.72mmol)在MeCN(5mL)中的混合物在微波中在80℃加热6min。再加入(R)-氯甲酸奎宁环-3-基酯(0.08g,0.35mmol)，在微波中在80℃再加热6min。真空除去溶剂，使残余物在EtOAc(20mL)与水(20mL)之间分配。通过添加饱和NaHCO3水溶液碱化分离的水相，用EtOAc(2x20mL)萃取。合并有机萃取物，通过相分离器过滤，真空除去溶剂。通过制备型HPLC纯化，得到标题化合物，为白色固体(0.02g,9.6％)。
[0632] 1H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ 9.53(s,1H),8.55(s,2H),7.66(d,J＝3.78Hz,1H),7.15(t,J＝8.00Hz,1H),7.03-6.96(m,4H),6.70-6.61(m,3H),6.14(dd,J＝9.71,4.26Hz,
1H),5.00(s,2H),4.68-4.63(m,1H),3.76(d,J＝6.84Hz,6H),3.58(dd,J＝14.23,9.79Hz,
1H),3.54(dd,J＝14.19,9.83Hz,1H),3.25(dd,J＝14.20,4.22Hz,1H),3.10(dd,J＝14.57,
7.97Hz,1H),2.69-2.55(m,4H),1.87(s,1H),1.62-1.42(m,3H),1.21(s,1H).LCMS(方法1):
[MH+]＝728，在2.66min.
[0633] 按照类似方式合成下列化合物：
[0634]
[0635] 实施例26
[0636] 5-[(2-氟-N-[(3R)-1-甲基吡咯烷-3-基]氧基羰基-苯胺基)甲基]噻吩-2-甲酸[(1S)-2-(3,5-二氯-1-氧化-吡啶-1-鎓-4-基)-1-(3,4-二甲氧基苯基)乙基]酯甲酸盐(E26)
[0637]
[0638] 向5-[(2-氟苯胺基)甲基]噻吩-2-甲酸[(1S)-2-(3,5-二氯-1-氧化-吡啶-1-鎓-4-基)-1-(3,4-二甲氧基苯基)乙基]酯(177mg,0.306mmol)在乙腈(6mL)中的溶液中加入双光气(75μL,0.61mmol)，将该反应混合物在室温搅拌5分钟。此后，加入二异丙基乙胺(341μl,2.0mmol)和(R)-1-甲基吡咯烷-3-醇(220μl,2.0mmol)在乙腈(3mL)中的溶液，历时10分钟。将棕色混合物在室温搅拌1h，然后真空除去溶剂。将粗产物溶于氯仿(70mL)，用HCl 1M(50mL)洗涤有机层。用硫酸钠干燥有机层，真空蒸发。通过快速色谱法纯化粗物质(用反相C18 60g柱)。真空蒸发收集的级分，再通过制备型HPLC(Fraction Lynx)纯化产物。在45℃真空蒸发采集的级分。用丙酮和乙醚处理残余物，得到标题化合物，为甲酸盐，为泡沫体(32mg,15％)。
[0639] 1H NMR(400MHz,丙酮)δ ppm 8.25(s,2H),8.13(s,1H),7.52-7.72(m,1H),7.24-7.41(m,2H),7.16-7.22(m,2H),7.09-7.14(m,1H),6.96(m,3H),6.20-6.29(m,1H),5.10-
5.22(m,1H),5.00(s,2H),3.81和3.78(2s,6H,各自为3H),3.60-3.71(m,1H),3.18-3.46(m,
1H),2.64-2.89(m,2H),2.09-2.54(m,7H)
[0640] [MH+]＝704.
[0641] 中间体30
[0642] 6-(苯胺基甲基)吡啶-3-甲酸甲酯盐酸盐(I-30)
[0643]
[0644] 在0℃，向N-Boc-苯胺(350mg,1.81mmol)和6-(溴甲基)吡啶-3-甲酸甲酯(500mg,2.17mmol)在THF(10mL)中的混合物中加入氢化钠(108mg,60％的矿物油分散液,
2.71mmol)。将该反应体系在室温搅拌1h，然后在60℃加热5h。将该反应体系冷却至室温，用水使反应停止。使该混合物在乙酸乙酯与饱和
氯化铵水溶液之间分配。用盐水洗涤有机相，用MgSO4干燥，然后蒸发至干。将残余物溶于4N HCl的二噁烷溶液(5.5mL)，将得到的混合物在室温搅拌2h。减压浓缩该反应体系，将残余物与乙醚一起研磨，得到标题化合物(394mg,
78％)，为黄白色固体。
[0645] 1H NMR(400MHz,DMSO):δ 9.07(d,J＝2.0Hz,1H),8.33(dd,J＝2.0,8.0Hz,1H),7.59(d,J＝8.4Hz,1H),7.14-7.10(m,2H),6.74-6.70(m,3H),4.54(s,2H),3.88(s,3H),NH未观察到。
[0646] 通过相同方法合成下列中间体：
[0647]
[0648] 中间体33
[0649] 6-((苯基氨基)甲基)皮考啉酸甲酯(I-33)
[0650] 步骤1:6-甲酰基吡啶-2-甲酸甲酯(I-33a)的制备
[0651]
[0652] 将吡啶-2,6-二甲酸二甲酯(1.0g,5.12mmol)在甲醇(8mL)和THF(3mL)中的混悬液在75℃加热直到固体溶解。然后逐步加入NaBH4(184mg,4.87mmol)。将该混合物在70℃搅拌1h。将该混合物冷却至室温，加入10％柠檬酸(1.6mL)。过滤该溶液，将滤液蒸发至干，溶于二氯甲烷，用MgSO4干燥，真空除去溶剂。通过硅胶色谱法纯化残余物，用0-100％EtOAc的异己烷溶液洗脱，得到无色油状物，然后将其溶于甲苯(20mL)和氯仿(20mL)。加入MnO2(194mg,22.2mmol)，将该混合物在室温搅拌18h。通过Fluorosil垫过滤该混合物，用氯仿(30mL)洗脱，真空除去溶剂，得到标题化合物(249mg,29％)，为白色固体。
[0653] 1H NMR(400MHz,CDCl3):δ 10.20(s,1H),8.37(dd,J＝1.2,7.6Hz,1H),8.17(dd,J＝1.2,7.6Hz,1H),8.08-8.04(m,1H),4.07(s,3H).
[0654] 步骤2:6-((苯基氨基)甲基)皮考啉酸甲酯(I-33)的制备
[0655]
[0656] 将苯胺(128mg,1.38mmol)、6-甲酰基吡啶-2-甲酸甲酯(217mg,1.31mmol)和乙酸(75μL,1.31mmol)在二氯甲烷(10mL)中的混合物在室温搅拌24h。此后，一次加入三乙酰氧基硼氢化钠(695mg,3.28mmol)，将得到的混合物在室温搅拌18h。使该反应体系在二氯甲烷与饱和碳酸氢钠水溶液之间分配。用盐水洗涤有机层，使其通过疏水性玻璃料过滤器，真空除去溶剂，得到标题化合物(310mg,97％)，为黄色油状物。
[0657] 1H NMR(400MHz,CDCl3):δ 8.03-8.02(m,1H),8.00-7.99(m,1H),7.80-7.76(m,1H),7.19-7.14(m,2H),6.74-6.70(m,1H),6.64-6.62(m,2H),4.58(s,2H),4.02(s,3H).NH未观察到。
[0658] 通过与用于制备中间体10(或中间体33，步骤2)相同的方法合成下列中间体：
[0659]
[0660] 按照与用于制备实施例1相同的方法，通过使中间体2与为下表中所示的前体的适合的仲胺反应合成下列中间体：
[0661]
[0662]
[0663] 实施例27
[0664] 4-[(2-氟-N-[(3R)-奎宁环-3-基]氧基羰基-苯胺基)甲基]噻吩-2-甲酸[(1S)-2-(3,5-二氯-1-氧化-吡啶-1-鎓-4-基)-1-(3,4-二甲氧基苯基)乙基]酯甲酸盐(E27)[0665]
[0666] 在室温，向(R)-4-(((2-氟苯基)((奎宁环-3-基氧基)羰基)氨基)甲基)-噻吩-2-甲酸甲酯(370mg,0.88mmol)在MeOH(2.5mL)和THF(2.5mL)中的溶液中加入LiOH水溶液(1N,1.76mL,1.76mmol)。将得到的混合物搅拌16h，再加入LiOH(1N,0.8mL,0.8mmol)，持续搅拌
3h。然后将该溶液冷却至0℃，用2N HCl将pH调整至2。真空除去溶剂，将该混合物与甲苯一起共沸至干。将得到的浓稠油状物溶于DMF(8mL)，将一半物质用于下一步。
[0667] 向所述羧酸在DMF中的溶液(4mL,0.44mmol)中加入(1S)-2-(3,5-二氯-1-氧化-吡啶-1-鎓-4-基)-1-(3,4-二甲氧基苯基)乙醇I-1/A(181mg,0.53mmol)、DMAP(27mg,0.22mmol)，然后加入EDC·HCl(169mg,0.88mmol)。将得到的混合物在室温搅拌16h，使其在EtOAc(50mL)与水(20mL)之间分配。分离各层，用EtOAc(3x30mL)萃取水相。用MgSO4干燥合并的有机相。真空除去溶剂，通过制备型HPLC纯化残余物，得到4-[(2-氟-N-[(3R)-奎宁环-
3-基]氧基羰基-苯胺基)甲基]噻吩-2-甲酸[(1S)-2-(3,5-二氯-1-氧化-吡啶-1-鎓-4-基)-1-(3,4-二甲氧基苯基)乙基]酯甲酸盐(E27)，为白色固体(48mg,2步15％)。
[0668] 1H NMR(400MHz,CDCl3):δ 8.14(s,2H),7.67(s,1H),7.33(s,1H),7.31-7.27(m,1H),7.11(t,J＝8.1Hz,2H),7.04(t,J＝7.4Hz,1H),7.00-6.96(m,2H),6.86(d,J＝8.1Hz,
1H),6.20(dd,J＝9.8,4.4Hz,1H),4.93-4.87(m,1H),4.78(d,J＝15.1Hz,1H),4.72(d,J＝
15.3Hz,1H),3.91(s,3H),3.88(s,3H),3.67(dd,J＝14.0,9.9Hz,1H),3.31(dd,J＝14.0,
4.9Hz,1H),3.35-3.26(m,1H),2.95-2.83(m,3H),2.76(d,J＝15.3Hz,1H),2.72-2.62(m,
1H),2.13-2.06(m,1H),1.77-1.72(m,1H),1.68-1.62(m,1H),1.48-1.40(m,1H),1.39-1.34(m,1H).LCMS(方法1):[MH+]＝730，在2.72min.
[0669] 通过相同方法合成下列化合物：
[0670]
[0671]
[0672] (接续)
[0673]
[0674]
[0675] (接续)
[0676]
[0677]
[0678] (接续)
[0679]
[0680]
[0681]
[0682] (接续)
[0683]
[0684]
[0685] 中间体41
[0686] 2-((叔丁氧羰基)氨基)-2-苯基乙酸(I-41)
[0687]
[0688] 将苯基甘氨酸(1.51g,10mmol)溶于二噁烷和水(2:1,30mL)和1.0N氢氧化钠水溶液的混合物，将得到的混合物冷却至0℃。一次加入二碳酸二-叔丁酯(3.27g,15mmol)和碳酸氢钠(0.84g,10mmol)，将该混合物在0℃搅拌10分钟。除去冰浴，将该反应混合物在室温搅拌24h。此后，减压浓缩该反应混合物，使其在乙酸乙酯与水之间分配。用1.0N碳酸氢钾水溶液碱化水层(pH 2.5)，用乙酸乙酯(2×40mL)洗涤。用
硫酸镁干燥合并的有机级分，真空除去溶剂，得到标题化合物(1.8g,72％)，为澄清油状物，放置
固化。
[0689] 1H NMR(400MHz,CDCl3):δ 8.08(s,1H),7.47-7.27(m,5H), (dd,J＝72.0Hz,6.5Hz,1H), (d,J＝5.6Hz,1H),3.71(s,1H),1.43(s,3H),1.21(s,6H).*和是指不同的异构体。
[0690] 通过类似方法合成下列中间体：
[0691]
[0692] (接续)
[0693]
[0694] 中间体86和中间体87
[0695] (1R,3r,5S)-8-苄基-8-氮杂双环[3.2.1]辛-3-醇(中间体86)和(1R,3s,5S)-8-苄基-8-氮杂双环[3.2.1]辛-3-醇(中间体87)
[0696]
[0697] 向(1R,5R)-8-苄基-8-氮杂双环[3.2.1]辛-3-酮(540mg,2.51mmol)在甲醇(10mL)中的溶液中分批加入硼氢化钠(100mg,2.64mmol)，历时3分钟。在室温搅拌1小时后，用饱和
氯化钠溶液(50mL)稀释该混合物，用乙酸乙酯(3×25mL)萃取。合并有机萃取物，用硫酸镁干燥，过滤，真空除去溶剂。通过硅胶柱色谱法纯化粗物质，用0-100％在二氯甲烷中的溶液(20％甲醇/10％三乙胺/70％二氯甲烷)洗脱，得到标题化合物I-86(281mg,51％)，为白色固体。用KP-NH柱进一步纯化混合的级分，用0-50％乙酸乙酯的异己烷溶液洗脱，得到标题化合物I-87(183mg,34％)，为白色固体。
[0698] 中间体86:LCMS(方法2):[MH+]＝218，在2.53min.
[0699] 中间体87:LCMS(方法2):[MH+]＝218，在2.69min.
[0700] 中间体46
[0701] (R)-2-((叔丁氧羰基)氨基)-2-苯基乙酸(R)-奎宁环-3-基酯(I-46)
[0702]
[0703] 将(R)-2-((叔丁氧羰基)氨基)-2-苯基乙酸(5.0g,19.9mmol)、商购或使用已知方法例如手性制备型SFC得自I-41的(R)对映体纯的形式、(R)-奎宁环-3-醇(3.8g,29.8mmol)、N,N′-二环己基碳二亚胺(4.72g,22.9mmol)和1-羟基苯并三唑水合物(3.09g,
22.9mmol)在四氢呋喃(175mL)中的混合物在室温搅拌18h。此后，通过 垫过滤该反应混合物，真空浓缩。使残余物在乙酸乙酯(100mL)与10％碳酸钠水溶液(50mL)之间分配，用硫酸镁干燥有机级分，过滤，真空除去溶剂。与冷甲醇一起研磨，得到标题化合物，为白色固体(898mg,17％)，为单一非对映异构体。
[0704] 1H NMR(400MHz,CDCl3):δ 7.84(d,J＝7.8Hz,1H),7.49-7.31(m,5H),5.22(d,J＝8.2Hz,1H),4.73-4.66(m,1H),3.02(ddd,J＝14.5Hz,7.8Hz,1.5Hz,1H),2.69-2.51(m,3H),
2.46-2.33(m,1H),2.19(d,J＝14.5,1H),1.98-1.87(m,1H),1.70-1.53(m,2H),1.53-1.30(m,1H),1.43(s,9H),1.34-1.23(m,1H).
[0705] 通过类似方法，使商购的或上述的适合的前体与商购的或上述的适合的氨基-醇反应合成下列中间体：
[0706]
[0707]
[0708] (接续)
[0709]
[0710]
[0711]
[0712] (接续)
[0713]
[0714]
[0715] (接续)
[0716]
[0717]
[0718] (接续)
[0719]
[0720]
[0721] 中间体54
[0722] (R)-2-氨基-2-苯基乙酸(R)-奎宁环-3-基酯双盐酸盐(I-54)
[0723]
[0724] 向(R)-2-((叔丁氧羰基)氨基)-2-苯基乙酸(R)-奎宁环-3-基酯I-46(0.608g,1.687mmol)在无水二噁烷(6mL)中的溶液中加入2MHCl的乙醚溶液(5.2mL,10.4mmol)。将该反应混合物在室温搅拌20h。真空除去溶剂，得到标题化合物，为白色固体(0.564g,定量收率)。
[0725] 1H NMR(400MHz,DMSO):δ 10.56(br s,1H),9.24(br s,3H),7.65-7.59(m,2H),7.56-7.49(m,3H),5.34(s,1H),5.20-5.15(m,1H),3.69-3.60(m,1H),3.32-3.10(m,5H),
2.37-2.30(m,1H),2.15-2.04(m,1H),1.99-1.89(m,1H),1.89-1.80(m,1H),1.79-1.70(m,
1H).LCMS(方法2):[MH+]＝261，在2.11min.
[0726] 通过类似方法合成下列中间体：
[0727]
[0728] (接续)
[0729]
[0730]
[0731] (接续)
[0732]
[0733]
[0734] 中间体122
[0735] 2-氨基-2-苯基-乙酸(8-苄基-8-氮杂双环[3.2.1]辛-3-基)酯(内型)(I-122)[0736]
[0737] 向(1R,3r,5S)-2-(叔丁氧羰基氨基)-2-苯基-乙酸8-苄基-8-氮杂双环[3.2.1]辛-3-基)酯(中间体89,0.390g,0.84mmol)中加入4N HCl的二噁烷溶液(3mL)，将该混合物在室温搅拌过夜。通过减压蒸发除去溶剂，与乙醚一起共蒸发。将残余物加载到10g SCX柱上，用乙腈、然后用10％三乙胺/乙腈洗脱。通过减压蒸发除去溶剂，得到标题化合物的游离碱，为黄色树胶状物(0.280g,95％)。
[0738] LCMS(方法2):[MH+]＝351，在3.14min.
[0739] 通过相同方法合成下列中间体：
[0740]
[0741] 中间体128
[0742] 2-氨基-2-(3-羟基苯基)乙酸[(3R)-奎宁环-3-基]酯(I-128)
[0743]
[0744] 步骤1:2-氨基-2-(3-(苄基氧基)苯基)乙腈的制备
[0745]
[0746] 在0℃，向搅拌的3-苄氧基苯甲醛(2.12g,10mmol)在7N氨/甲醇溶液(50mL)中的溶液中滴加三甲基甲硅烷基氰化物(1.11mL,15mmol)。将得到的混合物在0℃搅拌10min，温热至45℃18h，浓缩至干，通过硅胶柱色谱法纯化粗物质，用0-100％二氯甲烷/10％甲醇的二氯甲烷溶液洗脱，得到标题化合物(1.26g,53％)，为浓稠橙色油状物。
[0747] 1H NMR(400MHz,CDCl3):δ 7.44-7.29(m,6H),7.16(dd,J＝2.1,2.1Hz,1H),7.11(d,J＝7.6Hz,1H),6.97(dd,J＝2.4,8.2Hz,1H),5.08(s,2H),4.86(s,1H),1.92(bs,2H).LCMS(方法2):[MH+]＝238，在3.65min.
[0748] 步骤2:2-氨基-2-(3-(苄基氧基)苯基)乙酸甲酯的制备
[0749]
[0750] 在室温,向搅拌的2-氨基-2-(3-(苄基氧基)苯基)乙腈(1.22g,5.3mmol)在甲醇(10mL)中的溶液中加入2N HCl的乙醚溶液(10mL,20mmol)。将得到的混合物回流加热18h，浓缩至干。将粗物质溶于乙酸乙酯(200mL)，用饱和碳酸氢钠水溶液(100mL)洗涤。分离各层，用硫酸镁干燥，过滤，真空除去溶剂。使残余物上SCX柱，用二氯甲烷/甲醇洗脱，然后加入7N氨的甲醇溶液，得到标题化合物(1.0g,70％)，为浓稠橙色油状物。
[0751] 1H NMR(400MHz,CDCl3):δ 7.44-7.20(m,6H),7.01(dd,J＝2.0,2.0Hz,1H),6.95(d,J＝7.8Hz,1H),6.89(dd,J＝1.9,8.2Hz,1H),5.03(s,2H),4.57(s,1H),3.65(s,3H),2.17(s,2H).LCMS(方法2):[MH+]＝272，在3.53min.
[0752] 步骤3:2-(苄氧基羰基氨基)-2-(3-苄氧基苯基)乙酸甲酯的制备
[0753]
[0754] 在0℃,向2-氨基-2-(3-(苄基氧基)苯基)乙酸甲酯(1.09g,4mmol)在四氢呋喃和水的混合物(1:1,90mL)中的溶液中同时加入氯甲酸苄酯(0.57mL,4mmol)和氢氧化钠水溶液(4N,1mL,4mmol)。将该混合物在0℃搅拌1小时。除去冰浴，将该反应混合物在室温搅拌16h。真空除去溶剂，加入乙酸乙酯(100mL)和水(30mL)。分离各层，再用乙酸乙酯(2×50mL)萃取水相。用硫酸镁干燥有机级分，过滤，真空除去溶剂。通过硅胶柱色谱法纯化残余物，用
0-40％乙酸乙酯的异己烷溶液洗脱，得到标题化合物(900mg,56％)，为棕色油状物。
[0755] 1H NMR(400MHz,CDCl3):δ 7.47-7.20(m,11H),7.04-6.90(m,3H),5.88(d,J＝7.1Hz,1H),5.35(d,J＝7.3Hz,1H),5.13(d,J＝12.9Hz,1H),5.06(d,J＝12.0Hz,1H),5.02(s,2H),3.68(s,3H).LCMS(方法2):[MH+]＝406，在3.67min.
[0756] 步骤4:2-(((苄基氧基)羰基)氨基)-2-(3-(苄基氧基)苯基)乙酸的制备
[0757]
[0758] 将2-(苄基氧基羰基氨基)-2-(3-苄基氧基苯基)乙酸甲酯(640mg,1.75mmol)和氢氧化锂水溶液(1N,3.50mL,3.50mmol)在甲醇(5mL)和四氢呋喃(5mL)中的溶液在室温搅拌1小时。真空浓缩该混合物，用二氯甲烷(30mL)稀释残余物，用2N HCl
酸化至pH 0.5。再用二氯甲烷(2×50mL)萃取水相。在疏水性玻璃料过滤器干上燥合并的有机级分，真空除去溶剂，得到标题化合物，为浅棕色油状物(460mg,67％)。将其不经进一步纯化用于下一步。
[0759] 1H NMR(400MHz,CDCl3):δ 7.37-7.24(m,9H),7.21-7.12(m,2H),7.01-6.90(m,2H),6.86(dd,J＝1.6,8.2Hz,1H),5.91(d,J＝7.1Hz,1H),5.32(d,J＝7.1Hz,1H),5.18(d,J＝5.6Hz,1H),5.01-4.87(m,4H).LCMS(方法2):[MH+]＝391，在2.4min.
[0760] 步骤5:2-(苄基氧基羰基氨基)-2-(3-苄基氧基苯基)乙酸[(3R)-奎宁环-3-基]酯的制备
[0761]
[0762] 将2-(((苄基氧基)羰基)氨基)-2-(3-(苄基氧基)苯基)乙酸(2.1g,5.3mmol)、N,N′-二环己基碳二亚胺(1.20g,5.83mmol)、1-羟基苯并三唑水合物(787mg,5.83mmol)和(R)-奎宁环-3-醇(1.70g,13.5mmol)在无水四氢呋喃(27mL)中的溶液在室温搅拌18h。然后向该混合物中再加入(R)-奎宁环-3-醇(1.70g,13.5mmol)，搅拌4天。然后通过垫过滤白色淤浆，用乙酸乙酯(100mL)漂洗，真空除去溶剂。使残余物在乙酸乙酯(100mL)与饱和碳酸钠(50mL)之间分配。分离各层，用乙酸乙酯(2x50mL)反萃取水相。用硫酸镁干燥合并的有机级分，过滤，真空除去溶剂。通过硅胶柱色谱法纯化残余物，用0-40％乙酸乙酯/
10％甲醇氨的乙酸乙酯溶液洗脱，得到标题化合物(1.5g,56％)，为澄清浓稠油状物。
[0763] 1H NMR(400MHz,CDCl3):δ 7.43-7.27(m,11H),7.02-6.90(m,3H),5.83(d,J＝6.6Hz,1H),5.34(d,J＝6.1Hz,1H),5.12-5.02(m,4H),4.84-4.77(m,1H), (dd,J＝
9.8,12.8Hz,1H), (dd,J＝8.8,15.5Hz,1H),2.77-2.67(m,4H),
(m,1H), (d,J＝15.2Hz,1H), (m,1H), (m,1H),
1.71-1.57(m,2H),1.50-1.43(m,1H), (m,1H), (m,1H),
和*是指不同的异构体(任意指定的).LCMS(方法1):[MH+]＝501，在2.93min.
[0764] 步骤6:2-氨基-2-(3-羟基苯基)乙酸[(3R)-奎宁环-3-基]酯(中间体128)的制备[0765]
[0766] 向2-(苄基氧基羰基氨基)-2-(3-苄基氧基苯基)乙酸[(3R)-奎宁环-3-基]酯(1.5g,3.0mmol)在乙酸乙酯(30mL)的溶液中加入甲酸铵(945mg,15mmol)和10％Pd/C(400mg)。将该混合物加热至60℃16h。再加入甲酸铵(400mg,6.3mmol)和10％Pd/C(200mg)，将黑色浆料在60℃搅拌4h。将该浆料冷却至室温并且通过 垫过滤后，用乙酸乙酯/乙醇(1:1,250mL)洗涤固体。真空除去溶剂，得到标题化合物，为黄色油状物(800mg,97％)，不经进一步纯化用于下一步。
[0767] LCMS(方法2):[MH+]＝277，在1.92min.
[0768] 中间体129
[0769] 2-(5-甲酰基-2-噻吩基)乙酸[(1S)-2-(3,5-二氯-1-氧化-吡啶-1-鎓-4-基)-1-(3,4-二甲氧基苯基)乙基]酯(I-129)
[0770]
[0771] 步骤1:2-(2-噻吩基)乙酸甲酯的制备
[0772]
[0773] 在0℃，向2-噻吩乙酸(1.50g,10.6mmol)在MeOH(20mL)中的溶液中滴加亚硫酰氯(3.80mL,53mmol)。将得到的溶液在室温搅拌18h。真空浓缩该反应混合物，得到标题化合物，为深棕色油状物(1.65g,定量收率)，不经进一步纯化直接用于下一步。
[0774] 1H NMR(400MHz,CDCl3):δ 7.22(dd,J＝1.6,5.1Hz,1H),6.98-6.93(m,2H),3.85(s,2H),3.73(s,3H).
[0775] 步骤2:2-(5-甲酰基-2-噻吩基)乙酸甲酯的制备
[0776]
[0777] 在-10℃，向三氯化
铝(853mg,6.4mmol)在二氯甲烷(4mL)中的混悬液中加入2-(2-噻吩基)乙酸甲酯(500mg,3.2mmol)在二氯甲烷(3mL)中的溶液。将得到的溶液在-10℃搅拌10分钟。然后滴加二氯(甲氧基)甲烷(434μL,4.8mmol)在二氯甲烷(3mL)中的溶液，历时30分钟。将该反应混合物在-10℃搅拌1h。将得到的溶液倾入包含水(20mL)、碎冰和浓HCl(1mL)的烧瓶，剧烈搅拌30分钟。用二氯甲烷(3×20mL)洗涤该溶液，用饱和碳酸氢钠水溶液(30mL)，然后用盐水(30mL)洗涤合并的有机相。用疏水性玻璃料过滤器分离各相，真空浓缩，得到标题化合物，为红色油状物(533mg,91％)，将其不经进一步纯化用于下一步。
[0778] LCMS(方法1):[MH+]＝185，在3.15min
[0779] 步骤3:2-[5-(羟基甲基)-2-噻吩基]乙酸甲酯的制备
[0780]
[0781] 在-10℃，向2-(5-甲酰基-2-噻吩基)乙酸甲酯(3.88g,21.1mmol)在甲醇(4mL)和四氢呋喃(16mL)中的溶液中加入硼氢化钠(399mg,10.5mmol)。将该反应混合物在0℃搅拌1h。加入硼氢化钠(399mg,10.5mmol)，将该混合物保持在0℃搅拌2h。加入乙酸(1.2mL)，真空浓缩该反应溶液。用水(30mL)稀释残余物，用乙酸乙酯(3×30mL)萃取。用盐水(20mL)洗涤合并的有机相，用硫酸镁干燥，真空浓缩。通过硅胶色谱法纯化残余物，用0-30％乙酸乙酯的异己烷溶液洗脱，得到标题化合物，为黄色油状物(1.1g,28％)。
[0782] 1H NMR(400MHz,CDCl3):δ 6.86(d,J＝3.4Hz,1H),6.80(d,J＝3.4Hz,1H),4.78(s,2H),3.81(s,2H),3.73(s,3H),OH质子不可见。
[0783] 步骤4:2-[5-(羟基甲基)-2-噻吩基]乙酸的制备
[0784]
[0785] 向2-[5-(羟基甲基)-2-噻吩基]乙酸甲酯在四氢呋喃(10mL)和甲醇(10mL)中的溶液中加入1N氢氧化锂水溶液(11.83mL)，将得到的溶液在室温搅拌4h。将该反应混合物冷却至0℃，用2N HCl水溶液酸化至pH 1。真空浓缩该溶液，使残余物在乙酸乙酯(30mL)与水(30mL)之间分配。用硫酸镁干燥有机相，过滤，真空浓缩，得到标题化合物，为橙色固体(1.02g,定量收率)，不经进一步纯化用于下一步。
[0786] LCMS(方法1):[MH-]＝171，在2.30min
[0787] 步骤5:2-[5-[[叔丁基(二甲基)甲硅烷基]氧基甲基]-2-噻吩基]乙酸的制备[0788]
[0789] 向2-[5-(羟基甲基)-2-噻吩基]乙酸(500mg,2.91mmol)和咪唑(415mg,6.11mmol)的溶液中逐步加入叔丁基二甲基氯硅烷基(916mg,6.11mmol)，历时20分钟。将得到的溶液在室温搅拌1小时，然后加入四氢呋喃(10mL)，用冰浴冷却该反应混合物。加入碳酸钾(500mg,3.62mmol)在水(10mL)中的溶液，将该反应混合物搅拌20分钟。用乙酸乙酯(30mL)稀释该反应溶液，用盐水(2×30mL)洗涤。用硫酸镁干燥有机相，过滤，真空浓缩。通过硅胶色谱法纯化残余物，用0-50％乙酸乙酯的异己烷溶液洗脱，得到标题化合物，为黄色油状物(200mg,24％)，不经进一步纯化用于下一步。
[0790] LCMS(方法2):[MH-]＝285，在2.90min.
[0791] 步骤6:2-[5-[[叔丁基(二甲基)甲硅烷基]氧基甲基]-2-噻吩基]乙酸[(1S)-2-(3,5-二氯-1-氧化-吡啶-1-鎓-4-基)-1-(3,4-二甲氧基苯基)乙基]酯的制备
[0792]
[0793] 向2-[5-[[叔丁基(二甲基)甲硅烷基]氧基甲基]-2-噻吩基]乙酸(995mg,3.48mmol)在二氯甲烷(40mL)中的溶液中加入(S)-3,5-二氯-4-(2-(3,4-二甲氧基苯基)-
2-羟基乙基)吡啶1-氧化物(1.43g,4.17mmol)，然后加入4-(二甲氨基)-吡啶(212mg,
1.74mmol)和N-(3-二甲氨基丙基)-N′-乙基碳二亚胺盐酸盐(1.33g,6.96mmol)。将得到的溶液在室温搅拌72h。用饱和碳酸氢钠水溶液(2×30mL)洗涤该反应溶液，使有机相通过疏水性玻璃料过滤器，真空浓缩。通过硅胶色谱法纯化残余物，用0-100％乙酸乙酯的异己烷溶液洗脱，得到标题化合物，为黄白色油状物(980mg,46％)。LCMS(方法2):[MH+]＝612，在
4.08min.
[0794] 步骤7:2-[5-(羟基甲基)-2-噻吩基]乙酸[(1S)-2-(3,5-二氯-1-氧化-吡啶-1-鎓-4-基)-1-(3,4-二甲氧基苯基)乙基]酯的制备
[0795]
[0796] 向2-[5-[[叔丁基(二甲基)甲硅烷基]氧基甲基]-2-噻吩基]乙酸[(1S)-2-(3,5-二氯-1-氧化-吡啶-1-鎓-4-基)-1-(3,4-二甲氧基苯基)乙基]酯(400mg,0.65mmol)在吡啶(5mL)中的溶液中滴加HF.吡啶(0.88mL)。将得到的溶液在室温搅拌3h。将该反应溶液冷却至0℃，用饱和碳酸氢钠水溶液(5mL)猝灭。用乙酸乙酯(3×10mL)萃取水相，合并有机相，用硫酸镁干燥，过滤，真空浓缩，得到标题化合物，为浅黄色固体(270mg,84％)，不经进一步纯化用于下一步。
[0797] LCMS(方法2):[MH+]＝498，在3.07min.
[0798] 步骤8:2-(5-甲酰基-2-噻吩基)乙酸[(1S)-2-(3,5-二氯-1-氧化-吡啶-1-鎓-4-基)-1-(3,4-二甲氧基苯基)乙基]酯(中间体129)的制备
[0799]
[0800] 在-78℃，向2-[5-(羟基甲基)-2-噻吩基]乙酸[(1S)-2-(3,5-二氯-1-氧化-吡啶-1-鎓-4-基)-1-(3,4-二甲氧基苯基)乙基]酯(100mg,0.20mmol)在二氯甲烷(2mL)中的溶液中加入戴斯-马丁试剂(Dess-Martin periodinane)(102mg,0.24mmol)。将该反应体系在室温搅拌30min。用饱和Na2S2O3水溶液(5mL)和饱和碳酸氢钠水溶液(5mL)洗涤该反应溶液。使有机相通过疏水性玻璃料过滤器，真空浓缩，得到标题化合物，为黄白色油状物(100mg,定量收率)，不经进一步纯化用于下一步。
[0801] LCMS(方法2):[MH+]＝496，在2.69min.
[0802] 实施例37
[0803] 5-[[[1-(3-氟苯基)-2-氧代-2-[(3R)-奎宁环-3-基]氧基-乙基]氨基]甲基]噻吩-2-甲酸[(1S)-2-(3,5-二氯-1-氧化-吡啶-1-鎓-4-基)-1-(3,4-二甲氧基苯基)乙基]酯(E37)
[0804]
[0805] 向(R)-2-氨基-2-(3-氟苯基)乙酸奎宁环-3-酯双盐酸盐(0.176g,0.500mmol)在EtOAc(5mL)中的混悬液中加入Et3N(0.150mL,1.10mmol)。将该反应混合物在室温搅拌2h。过滤得到的沉淀，用EtOAc(～5mL)洗涤，真空除去溶剂。将残余物溶于CH3CN(5mL)，向该溶液中加入5-甲酰基噻吩-2-甲酸[(1S)-2-(3,5-二氯-1-氧化-吡啶-1-鎓-4-基)-1-(3,4-二甲氧基苯基)乙基]酯(0.220g,0.456mmol)，然后加入乙酸(0.026mL,0.456mmol)。将该反应混合物在室温搅拌20h。加入NaBH(OAc)3(0.265g,1.25mmol)，将该反应混合物在室温再搅拌24h。真空除去过量的溶剂，使残余物在EtOAc(30mL)和饱和NaHCO3水溶液(20mL)之间分配。用饱和盐水(2×15mL)洗涤有机层，分离，通过相分离柱过滤，真空除去溶剂。通过制备型HPLC纯化，得到标题化合物(1:1的非对映异构体混合物)，为淡黄色固体(200mg,59％)。
[0806] 1H NMR(400MHz,DMSO):δ 8.56*或 (s,2H),8.55*或 (s,2H),7.69(dd,J＝3.8,1.6Hz,1H),7.44-7.39(m,1H),7.33-7.26(m,2H),7.18-7.15(m,1H),7.02-6.98(m,4H),
6.14(dd,J＝9.7,4.4Hz,1H),4.71-4.69(m,1H),4.50(d,J＝9.28Hz,1H),3.89-3.88(m,
2H),3.78-3.69(m,7H),3.61-3.56(m,1H),3.29-3.28(m,1H),3.10-3.03*或 (m,1H),3.03-
2.94*或 (m,1H),2.65-2.56(m,3H),2.50-2.45(m,1H),2.17(d,J＝14.68Hz,1H),1.88-
1.85*或 (m,1H),1.76-1.72*或 (m,1H),1.61-1.42(m,3H),1.40-1.10(m,1H). 和*是指不同的异构体(任意指定的).LCMS(方法2):[MH+]＝744，在3.77min.
[0807] 通过类似方法合成下列化合物，为1:1的非对映异构体混合物：
[0808]
[0809] (接续)
[0810]
[0811]
[0812] (接续)
[0813]
[0814]
[0815]
[0816] (接续)
[0817]
[0818]
[0819] (接续)
[0820]
[0821]
[0822]
[0823] (接续)
[0824]
[0825] 按照与对实施例37所述相同的方法，用氰基硼氢化钠代替三乙酰氧基硼氢化钠并且用乙醇取代乙腈合成下列化合物，为非对映异构体混合物。
[0826]
[0827] (接续)
[0828]
[0829]
[0830] (接续)
[0831]
[0832]
[0833]
[0834] (接续)
[0835]
[0836]
[0837]
[0838] (接续)
[0839]
[0840]
[0841]
[0842] (接续)
[0843]
[0844]
[0845] (接续)
[0846]
[0847]
[0848]
[0849] (接续)
[0850]
[0851] 通过将适合的醛和适合的甘氨酸酯溶于或混悬于EtOH，然后加入氰基硼氢化钠，然后按照与对实施例37所述相同的方法合成下列化合物，为非对映异构体混合物。
[0852]
[0853] (接续)
[0854]
[0855] 按照与对实施例37所述相同的方法，用二氯甲烷代替乙腈合成下列化合物，为非对映异构体混合物。
[0856]
[0857]
[0858] (接续)
[0859]
[0860]
[0861]
[0862] (接续)
[0863]
[0864]
[0865] 实施例91
[0866] 5-[[[2-氧代-1-苯基-2-[(3R)-奎宁环-3-基]氧基-乙基]氨基]甲基]噻吩-2-甲酸[2-(3,5-二氯-1-氧化-吡啶-1-鎓-4-基)-1-(3-乙氧基-4-甲氧基-苯基)乙基]酯的差向异构体混合物2
[0867]
[0868] 向2-氨基-2-苯基乙酸[(3R)-奎宁环-3-基]酯双盐酸盐(273mg,0.82mmol)在乙醇(10mL)中的溶液中加入5-甲酰基噻吩-2-甲酸[2-(3,5-二氯-1-氧化-吡啶-1-鎓-4-基)-1-(3-乙氧基-4-甲氧基-苯基)乙基]酯的单一对映体2(中间体75,135mg,0.27mmol)和乙酸(40μL,0.68mmol)。将得到的混合物在室温搅拌16h。加入氰基硼氢化钠(45mg,0.68mmol)，将该反应混合物在室温再搅拌24h。通过减压蒸发除去溶剂，使残余物在1M盐酸水溶液(3mL)与乙酸乙酯(3mL)之间分配。分离各层，用乙酸乙酯(2×3mL)萃取水相。用饱和碳酸氢钠溶液碱化有机相，然后用乙酸乙酯(2×3mL)萃取。用1M盐酸水溶液(2mL)萃取合并的有机级分。加入盐水(2mL)，用氯仿(5mL和2mL)萃取水层。用饱和碳酸氢钠水溶液(2mL)洗涤合并的有机级分，使其通过疏水性玻璃料过滤器，通过减压蒸发除去溶剂。通过制备型HPLC纯化，得到标题化合物，为黄白色固体(50mg,25％)。
[0869] 1H NMR(400MHz,CDCl3):δ 8.13(s,2H),7.64(d,J＝3.8Hz,1H),7.38-6.96(m,5H),7.00-6.96(m,2H),6.89-6.83(m,2H),6.21(dd,J＝4.4,9.7Hz,1H),4.84-4.79(m,1H),4.44(s,1H),4.16-4.07(m,2H),3.96(s,2H),3.86(s,3H),3.66(dd,J＝9.9,13.9Hz,1H),3.34-
3.27(m,1H),3.17-3.10(m,1H),2.80-2.69(m,3H),2.51-2.49(m,1H),2.40-2.35(m,1H),
2.08-2.00(m,1H),1.69-1.64(m,3H),1.48-1.46(m,3H),1.28-1.26(m,2H).LCMS(方法1):
[MH+]＝740，在2.66min.
[0870] 通过类似方法合成下列化合物，为非对映异构体混合物：
[0871]
[0872]
[0873] 实施例93
[0874] 5-[[[2-[(8-甲基-8-氮杂双环[3.2.1]辛-3-基)氧基]-2-氧代-1-苯基-乙基]氨基]甲基]噻吩-2-甲酸[(1S)-2-(3,5-二氯-1-氧化-吡啶-1-鎓-4-基)-1-(3,4-二甲氧基苯基)乙基]酯
[0875]
[0876] 将5-甲酰基噻吩-2-甲酸[(1S)-2-(3,5-二氯-1-氧化-吡啶-1-鎓-4-基)-1-(3,4-二甲氧基苯基)乙基]酯(0.17g,0.35mmol)、2-氨基-2-苯基-乙酸(8-甲基-8-氮杂双环[3.2.1]辛-3-基)酯(0.14g,0.53mmol)和乙酸(40μL,0.71mmol)在二氯甲烷(8mL)中的混合物在室温搅拌20h。加入三乙酰氧基硼氢化钠，将该反应混合物在室温再搅拌24h。用二氯甲烷(10mL)稀释该混合物，用饱和碳酸氢钠溶液(2×10mL)和饱和氯化钠溶液(10mL)洗涤。分离有机层，使其通过相分离器，通过减压蒸发除去溶剂。通过制备型HPLC纯化，得到标题化合物(非对映异构体混合物)，为淡黄色固体(72mg,28％)。
[0877] 1H NMR(400MHz,CDCl3):δ (s,2H), (s,2H),7.64(d,J＝3.8Hz,1H),7.34(d,J＝3.3Hz,5H),7.02-6.96(m,2H),6.88-6.84(m,2H),6.22(dd,J＝9.6,4.4Hz,
1H),5.03-4.99(m,1H),4.37(d,J＝2.3Hz,1H),3.97-3.91(m,2H), (s,3H),
(s,3H),3.88(s,3H),3.67(dd,J＝13.9,9.7Hz,1H),3.31(d,J＝14.0Hz,1H),3.16(d,J＝22.9Hz,2H),2.27(s,3H),2.01(s,2H),1.85-1.54(m,6H).NH不可见。
[0878] LCMS(方法1):[MH+]＝740，在2.62min.
[0879] 通过类似方法合成下列化合物，为非对映异构体混合物：
[0880]
[0881]
[0882]
[0883] (接续)
[0884]
[0885]
[0886]
[0887] (接续)
[0888]
[0889]
[0890] 实施例100
[0891] 5-[[[1-(邻-甲苯基)-2-氧代-2-[(3R)-奎宁环-3-基]氧基-乙基]氨基]甲基]噻吩-2-甲酸[(1S)-2-(3,5-二氯-1-氧化-吡啶-1-鎓-4-基)-1-(3,4-二甲氧基苯基)乙基]酯[0892]
[0893] 向2-(叔丁氧羰基氨基)-2-(邻-甲苯基)乙酸[(2R)-奎宁环-2-基]酯(240mg,0.64mmol)在乙酸乙酯(6mL)中的溶液中加入4N HCl/二噁烷(6mL)，将得到的溶液在室温搅拌18h。真空除去溶剂。将粗物质(220mg,0.63mmol)溶于乙醇(20mL)，加入5-甲酰基噻吩-2-甲酸[(1S)-2-(3,5-二氯-1-氧化-吡啶-1-鎓-4-基)-1-(3,4-二甲氧基苯基)乙基]酯(305mg,0.63mmol)，然后加入乙酸(74μL,1.26mmol)和三乙胺(351μL,2.52mmol)。将得到的溶液在室温搅拌20分钟，然后加入氰基硼氢化钠(79mg,1.26mmol)。将该溶液在室温再搅拌
18h。真空除去溶剂并将残余物溶于水(20mL)和乙酸乙酯(20mL)。分离各层，用乙酸乙酯(2×20mL)萃取水相。用0.2N盐酸水溶液(40mL)和水(40mL)萃取合并的有机相。合并水性萃取物，加入氯化钠(6g)。用氯仿(3×30mL)萃取该混合物，使合并的有机萃取物通过疏水性玻璃料过滤器，真空除去溶剂。通过制备型HPLC纯化粗物质，得到标题化合物(28mg,6％，2步)，为灰白色固体。
[0894] 1H NMR(400MHz,DMSO):δ (s,2H), (s,2H),7.73(dd,J＝1.0,3.8Hz,1H),7.47-7.41(m,1H),7.28-7.23(m,3H),7.07-7.04(m,2H),7.03(s,2H),6.19(dd,J＝4.3,9.9Hz,1H),4.81-4.73(m,1H),4.69(d,J＝6.3Hz,1H),4.00-3.85(m,2H),3.82(s,
3H), (s,3H), (s,3H),3.66-3.60(m,2H), (m,1H),
(m,1H),2.74-2.60(m,4H),2.36-2.34(m,3H),2.26-2.19(m,1H),
(m,1H), (m,1H),1.66-1.45(m,3H),1.35-1.15(m,2H).
和*是指不同的异构体(任意指定的).LCMS(方法1):[MH+]＝740，在2.64min.
[0895] 通过类似方法合成下列化合物，为非对映异构体混合物：
[0896]
[0897]
[0898] (接续)
[0899]
[0900]
[0901]
[0902] (接续)
[0903]
[0904] 实施例105
[0905] 5-[[乙基-[2-氧代-1-苯基-2-[(3R)-奎宁环-3-基]氧基-乙基]氨基]甲基]噻吩-2-甲酸[(1S)-2-(3,5-二氯-1-氧化-吡啶-1-鎓-4-基)-1-(3,4-二甲氧基苯基)乙基]酯[0906]
[0907] 将5-[[[2-氧代-1-苯基-2-[(3R)-奎宁环-3-基]氧基-乙基]氨基]甲基]噻吩-2-甲酸[(1S)-2-(3,5-二氯-1-氧化-吡啶-1-鎓-4-基)-1-(3,4-二甲氧基苯基)乙基]酯(实施例42,100mg,0.12mmol)在三氟乙醇(0.5mL)中的混悬液在40C加热5min。加入乙醛(11μL,0.19mmol)，然后加入乙酸(7μL,0.12mmol)，将该反应混合物在40℃加热18h。加入三乙酰氧基硼氢化钠(52mg,0.25mmol)，将该混合物在40℃加热2h。真空蒸发溶剂，使残余物在乙酸乙酯(1mL)与水(1mL)之间分配。加入0.2N HCl水溶液以调整pH＝1。用乙酸乙酯(3×1mL)洗涤酸性水相，将氯化钠(1g)加入到水相中，用氯仿(3×1mL)萃取，通过相分离器过滤合并的氯仿萃取物，真空除去溶剂。用0.2N HCl(1mL)、水(1mL)萃取合并的乙酸乙酯洗涤液。合并有机相，用固体氯化钠钠饱和，用氯仿(3×1mL)萃取。合并来自两次萃取的粗产物，通过制备型HPLC纯化，得到标题化合物，为灰白色固体(23mg,24％)。
[0908] 1H NMR(400MHz,DMSO):δ (s,2H), (s,2H),7.70(d,J＝3.8Hz,1H),7.51-7.36(m,5H),7.08-7.05(m,2H),7.03(s,2H),6.17(ddd,J＝2.2,4.4,9.8Hz,1H),
4.88(dd,J＝3.8,7.8Hz,1H),4.75(d,J＝8.3Hz,1H),4.03(dd,J＝5.2,16.0Hz,1H),3.88(d,J＝16.2Hz,1H), (s,3H), (s,3H),3.80(s,3H),3.68-3.60(m,1H),
3.37-3.30(m,1H),3.26-3.14(m,1H),2.75-2.58(m,6H),2.50-2.46(m,1H),
(m,1H), (m,1H),1.71-1.54(m,3H),1.40-1.28(m,1H),
1.09-1.02(m,3H), 和*是指不同的异构体(任意指定的).LCMS(方法1):[MH+]＝754，在
2.87min.
[0909] 实施例106
[0910] 2-[[5-[(1S)-2-(3,5-二氯-1-氧化-吡啶-1-鎓-4-基)-1-(3,4-二甲氧基苯基)乙氧基]羰基-2-噻吩基]甲基]-3,4-二氢-1H-异喹啉-1-甲酸[(3R)-奎宁环-3-基]酯[0911]
[0912] 向O2-叔丁基O1-[(3R)-奎宁环-3-基]3,4-二氢-1H-异喹啉-1,2-二甲酸酯(440mg,1.14mmol)在乙酸乙酯(1.42mL)中的溶液中加入4N HCl/二噁烷(1.42mL,5.70mmol)，将得到的溶液在室温搅拌18h。真空除去溶剂，得到白色固体。将所述粗物质(200mg,0.56mmol)溶于乙腈(5mL)，加入5-甲酰基噻吩-2-甲酸[(1S)-2-(3,5-二氯-1-氧化-吡啶-1-鎓-4-基)-1-(3,4-二甲氧基苯基)乙基]酯(270mg,0.56mmol)，然后加入乙酸(67μL,1.12mmol)。将得到的溶液在室温搅拌18h。真空除去溶剂，将残余物与甲苯一起共沸。用乙腈(5mL)再稀释残余物，加入三乙酰氧基硼氢化钠(237mg,1.12mmol)，将得到的溶液在室温搅拌18h。真空除去溶剂。将残余物溶于水(20mL)和乙酸乙基酯(20mL)。分离各层，用乙酸乙酯(2×20mL)萃取水相。用0.2N盐酸水溶液(40mL)和水(40mL)萃取合并的有机相。
合并有机萃取物，加入氯化钠(6g)。用氯仿(3×30mL)萃取该混合物，使合并的有机萃取物通过疏水性玻璃料过滤器，真空除去溶剂。通过制备型HPLC纯化粗物质，得到标题化合物(77mg,18％)，为淡黄色固体。
[0913] 1H NMR(400MHz,DMSO):δ (s,2H), (s,2H),7.76(dd,J＝1.7,3.8Hz,1H),7.32-7.22(m,4H),7.16(t,J＝3.3Hz,1H),7.07-7.05(m,1H),7.02(s,2H),
6.21-6.15(m,1H),4.82-4.75(m,1H),4.67(d,J＝8.6Hz,1H),4.14(d,J＝10.2Hz,2H),3.82(s,3H),3.80(s,3H),3.63(dd,J＝9.5,14.2Hz,1H),3.34(dd,J＝5.6,14.5Hz,1H),3.22-
3.09(m,1H),2.99-2.86(m,2H),2.84-2.64(m,6H),2.50-2.37(m,1H),1.95-1.90(m,1H),
1.71-1.59(m,2H),1.56-1.48(m,1H),1.40-1.29(m,1H), 和*是指不同的异构体(任意指定的).LCMS(方法2):[MH+]＝752，在3.97min.
[0914] 实施例107
[0915] 2-[2-[5-[2-[(1S)-2-(3,5-二氯-1-氧化-吡啶-1-鎓-4-基)-1-(3,4-二甲氧基苯基)乙氧基]-2-氧代-乙基]-2-噻吩基]乙基氨基]-2-苯基-乙酸[(3R)-奎宁环-3-基]酯[0916]
[0917] 步骤1:叔丁基-二甲基-[2-(2-噻吩基)乙氧基]硅烷的制备
[0918]
[0919] 将叔丁基二甲基氯硅烷(15.5g,103mmol)分批加入到2-(2-噻吩基)乙醇(11.0g,85.9mmol)和咪唑(7.0g,103mmol)在N,N-二甲基甲酰胺(35mL)中的溶液中。将得到的溶液在室温搅拌18h。使该反应混合物分配在乙酸乙酯(30mL)与水(30mL)之间，用水(3×50mL)洗涤有机相。用硫酸钠干燥有机相，过滤，真空浓缩。通过硅胶色谱法纯化残余物，用1-4％乙酸乙酯的异己烷溶液洗脱，得到标题化合物，为无色油状物(20g,96％).
[0920] LCMS(方法2):[MH+]＝243，在4.95min
[0921] 步骤2:5-[2-[叔丁基(二甲基)甲硅烷基]氧基乙基]噻吩-2-腈的制备
[0922]
[0923] 在-78℃，向叔丁基-二甲基-[2-(2-噻吩基)乙氧基](16.0g,66.1mmol)在四氢呋喃(250mL)中的溶液中滴加正丁基锂(2.5M的己烷溶液,30mL)。将该反应混合物温热至0℃，搅拌1h。然后将该反应混合物冷却至-78℃，加入N,N-二甲基甲酰胺，历时10分钟。将该混合物温热至室温，搅拌18h。使该反应混合物在乙酸乙酯(100mL)与水(100mL)之间分配，用水(3×100mL)洗涤有机相。用硫酸钠干燥有机相，过滤，真空浓缩，得到标题化合物，为黄色油状物(17.8g,定量收率)。
[0924] LCMS(方法2):[MH+]＝271，在4.60min.
[0925] 步骤3:[5-[2-[叔丁基(二甲基)甲硅烷基]氧基乙基]-2-噻吩基]甲醇的制备[0926]
[0927] 在0℃，向5-[2-[叔丁基(二甲基)甲硅烷基]氧基乙基]噻吩-2-甲醛(17.8g,66.1mmol)在乙醇(180mL)中的溶液中加入硼氢化钠(2.5g,66.1mmol)。将得到的溶液在0℃搅拌1.5h。真空浓缩该反应溶液，使其在乙酸乙酯(30mL)与盐水(30mL)之间分配。用硫酸钠干燥有机相，过滤，真空浓缩，得到标题化合物，为黄色油状物(17.5g,97％)，不经进一步纯化用于下一步。
[0928] 1H NMR(400MHz,CDCl3):δ 6.79(d,J＝3.3Hz,1H),6.65(d,J＝3.5Hz,1H),4.72(d,J＝6.1Hz,2H),3.78(t,J＝6.7Hz,2H),2.95(t,J＝6.7Hz,2H),1.59(t,J＝6.1Hz,1H),0.86(s,9H),0.00(s,6H).
[0929] 步骤4:2-[5-[2-[叔丁基(二甲基)甲硅烷基]氧基乙基]-2-噻吩基]乙腈的制备[0930]
[0931] 在0℃，向[5-[2-[叔丁基(二甲基)甲硅烷基]氧基乙基]-2-噻吩基]甲醇(5.47g,20.1mmol)在二氯甲烷(10mL)中的溶液中一次加入三苯膦(6.52g,24.9mmol)和四溴甲烷(7.86g,23.7mmol)。将得到的溶液在室温搅拌1h。将该反应混合物冷却至0℃，加入氰化四乙基铵(4.48g,28.7mmol)。用二氯甲烷(5mL)稀释该混合物，在室温搅拌40分钟。使该反应混合物在二氯甲烷(30mL)与盐水(30mL)之间分配。使有机相通过疏水性玻璃料过滤器，真空浓缩。通过硅胶色谱法纯化残余物，用0-6％乙酸乙酯的异己烷溶液洗脱，得到标题化合物，为黄色油状物(3.8g,67％).
[0932] LCMS(方法2):[MH+]＝282，在4.63min.
[0933] 步骤5:2-[5-(2-羟基乙基)-2-噻吩基]乙酸的制备
[0934]
[0935] 将2-[5-[2-[叔丁基(二甲基)甲硅烷基]氧基乙基]-2-噻吩基]乙腈(3.0g,10.7mmol)在乙醇(30mL)中的溶液加入搅拌的氢氧化钾(1.2g,21.4mmol)在水(30mL)中的溶液。将得到的混合物在100℃搅拌4h。真空浓缩该反应混合物，使残余物在乙酸乙酯(30mL)与盐水(30mL)之间分配。用冰
冷却水层，用浓HCl酸化至达到pH 1。然后用乙酸乙酯(3×30mL)萃取水溶液。用盐水(30mL)洗涤合并的有机相，用硫酸镁干燥，过滤，真空浓缩，得到标题化合物，为黄色固体(1.35g,68％)，将其不经进一步纯化用于下一步。
[0936] LCMS(方法1):[MH+]＝187，在2.49min.
[0937] 步骤6:2-[5-[2-[叔丁基(二甲基)甲硅烷基]氧基乙基]-2-噻吩基]乙酸的制备[0938]
[0939] 向2-[5-(2-羟基乙基)-2-噻吩基]乙酸(1.35g,7.26mmol)和咪唑(1.04g,15.25)在N,N-二甲基甲酰胺(18mL)中的溶液中加入叔丁基二甲基氯硅烷(2.29g,15.25mmol)，历时20分钟。将得到的溶液在室温搅拌1小时。然后加入四氢呋喃(18mL)，将反应溶液冷却至0℃。加入碳酸钾(1.04g,7.6mmol)在水(18mL)中的溶液，将该溶液搅拌20分钟。然后使该反应溶液在乙酸乙酯与盐水之间分配。合并有机相，用硫酸镁干燥，过滤，真空浓缩。通过硅胶色谱法纯化残余物，用0-50％乙酸乙酯的异己烷溶液洗脱，得到标题化合物，为黄色油状物(500mg,23％)。
[0940] LCMS(方法2):[MH+]＝301，在2.97min.
[0941] 步骤7:2-[5-[2-[叔丁基(二甲基)甲硅烷基]氧基乙基]-2-噻吩基]乙酸[(1S)-2-(3,5-二氯-1-氧化-吡啶-1-鎓-4-基)-1-(3,4-二甲氧基苯基)乙基]酯的制备
[0942]
[0943] 向2-[5-(2-羟基乙基)-2-噻吩基]乙酸(500mg,1.67mmol)在二氯甲烷(20mL)中的溶液中加入4-(二甲氨基)-吡啶(102mg,0.84mmol)、(S)-3,5-二氯-4-(2-(3,4-二甲氧基苯基)-2-羟基乙基)吡啶1-氧化物(687mg,2.00mmol)和N-(3-二甲氨基丙基)-N′-乙基碳二亚胺盐酸盐(640mg,3.34mmol)。将得到的溶液在室温搅拌18h。用饱和碳酸氰钠水溶液洗涤该反应混合物，使有机相通过疏水性玻璃料过滤器，真空浓缩。通过硅胶色谱法纯化残余物，用0-100％乙酸乙酯的异己烷溶液洗脱，得到标题化合物，为黄色油状物(800mg,76％)。
[0944] LCMS(方法1):[MH+]＝626，在4.70min.
[0945] 步骤8:2-[5-(2-羟基乙基)-2-噻吩基]乙酸[(1S)-2-(3,5-二氯-1-氧化-吡啶-1-鎓-4-基)-1-(3,4-二甲氧基苯基)乙基]酯的制备
[0946]
[0947] 向2-[5-[2-[叔丁基(二甲基)甲硅烷基]氧基乙基]-2-噻吩基]乙酸[(1S)]-2-(3,5-二氯-1-氧化-吡啶-1-鎓-4-基)-1-(3,4-二甲氧基苯基)乙基]酯(780mg,1.25mmol)在吡啶(10mL)中的溶液中加入HF.吡啶(70％)(1.7mL)，将得到的溶液在室温搅拌4h。将该反应溶液冷却至0℃，通过滴加饱和碳酸氢钠水溶液猝灭。用乙酸乙酯(3×10mL)萃取该溶液。合并有机相，使其通过疏水性玻璃料过滤器，真空浓缩，得到标题化合物，为黄色固体(520mg,
81％)，将其不经进一步纯化用于下一步。
[0948] LCMS(方法2):[MH+]＝512，在2.59min
[0949] 步骤9:2-[2-[5-[2-[(1S)-2-(3,5-二氯-1-氧化-吡啶-1-鎓-4-基)-1-(3,4-二甲氧基苯基)乙氧基]-2-氧代-乙基]-2-噻吩基]乙基氨基]-2-苯基-乙酸[(3R)-奎宁环-3-基]酯(实施例107)的制备
[0950]
[0951] 在-78℃，向2-[5-(2-羟基乙基)-2-噻吩基]乙酸[(1S)-2-(3,5-二氯-1-氧化-吡啶-1-鎓-4-基)-1-(3,4-二甲氧基苯基)乙基]酯(80mg,0.16mmol)在二氯甲烷(2mL)中的溶液中加入戴斯-马丁试剂(81mg,0.19mmol)。将该反应溶液在室温搅拌30分钟。用饱和
硫代硫酸钠水溶液(5mL)、然后用碳酸氢钠水溶液(5mL)洗涤该反应溶液。使有机相通过疏水性玻璃料过滤器，真空浓缩，得到[2-[5-(2-氧代乙基)-2-噻吩基]乙酸[(1S)-2-(3,5-二氯-1-氧化-吡啶-1-鎓-4-基)-1-(3,4-二甲氧基苯基)乙基]酯，为棕色固体(76mg,94％)，将其不经进一步纯化用于下一步。
[0952] 向所述粗残余物(199mg,0.39mmol)在乙醇(20mL)中的溶液中加入2-氨基-2-苯基-乙酸[(3R)-奎宁环-3-基]酯盐酸盐(260mg,0.78mmol)、三乙胺(219μL,1.56mmol)和乙酸(102μL,0.78mmol)。将得到的溶液在室温搅拌20分钟。然后加入硼氢化钠(49mg,0.78mmol)，将得到的溶液在室温搅拌18h。真空除去溶剂，将残余物溶于水(20mL)和乙酸乙酯(20mL)。分离各层，用乙酸乙酯(2×20mL)萃取水相。用0.2N盐酸水溶液(40mL)和水(40mL)萃取合并的有机相。合并有机萃取物，加入氯化钠(6g)。用氯仿(3×30mL)萃取该混合物，使合并的有机萃取物通过疏水性玻璃料过滤器，真空除去溶剂。通过制备型HPLC纯化粗物质，得到标题化合物(42mg,14％)，为灰白色固体。
[0953] 1H NMR(400MHz,CD3CN):δ 8.18(s,2H),7.43-7.31(m,5H),6.94(d,J＝1.6Hz,1H),6.92(d,J＝1.6Hz,2H),6.68(s,2H),6.01(dd,J＝4.9,9.7Hz,1H),4.79-4.72(m,1H),4.45(d,J＝2.6Hz,1H),3.81(s,3H),3.79(s,3H),3.74(s,2H),3.53(dd,J＝9.7,14.0Hz,1H),
3.23(dd,J＝4.7,14.0Hz,1H), (m,1H), (m,1H),2.97-
2.91(m,2H),2.86-2.79(m,1H),2.75-2.55(m,6H),1.81-1.77(m,1H),1.70-1.46(m,3H),
1.42-1.17(m,2H). 和*是指不同的异构体(任意指定)。LCMS(方法1):[MH+]＝754，在
2.39min.
[0954] 实施例108 5-[2-[[2-氧代-1-苯基-2-[(3R)-奎宁环-3-基]氧基-乙基]氨基]乙基]噻吩-2-甲酸[(1S)-2-(3,5-二氯-1-氧化-吡啶-1-鎓-4-基)-1-(3,4-二甲氧基苯基)乙基]酯
[0955]
[0956] 步骤1:5-[2-[叔丁基(二甲基)甲硅烷基]氧基乙基]噻吩-2-甲酸[(1S)-2-(3,5-二氯-1-氧化-吡啶-1-鎓-4-基)-1-(3,4-二甲氧基苯基)乙基]酯的制备
[0957]
[0958] 在-78℃，向如实施例107步骤1中所述合成的叔丁基-二甲基-[2-(2-噻吩基)乙氧基]硅烷(485mg,2mmol)在四氢呋喃(7.5mL)中的溶液中滴加正丁基锂(0.92mL,2.5M的己烷溶液,2.3mmol)。将该混合物温热至0℃，在0℃搅拌1h。将该混合物冷却至-78℃，然后使气体CO2鼓泡通过该混合物30分钟。通过添加饱和氯化铵水溶液(15mL)使该混合物猝灭，温热至室温。用乙酸乙酯(3×15mL)萃取该混合物，使合并的有机级分通过疏水性玻璃料过滤器，通过减压蒸发除去溶剂。将残余物溶于二氯甲烷(4mL)，加入(1S)-2-(3,5-二氯-1-氧化-吡啶-1-鎓-4-基)-1-(3,4-二甲氧基苯基)乙醇I-1/A(585mg,1.7mmol)、4-二甲氨基吡啶(110mg,0.9mmol)和N-(3-二甲氨基丙基)-N′-乙基碳二亚胺盐酸盐(658mg,3.4mmol)。将该混合物在室温搅拌18h，加入饱和碳酸氢钠水溶液(10mL)和二氯甲烷(10mL)。分离各层，使有机相通过疏水性玻璃料过滤器，通过减压蒸发除去溶剂，通过硅胶柱色谱法纯化粗物质，用0-100％二氯甲烷/10％甲醇的二氯甲烷溶液洗脱，得到标题化合物(710mg,68％)，为棕色油状物。
[0959] 1H NMR(400MHz,CDCl3):δ 8.13(s,2H),7.63(d,J＝3.8Hz,1H),7.01-6.96(m,2H),6.86-6.81(m,2H),6.23(dd,J＝4.5,10.1Hz,1H),3.90(s,3H),3.88(s,3H),3.83(t,J＝
6.8Hz,2H),3.66(dd,J＝9.7,14.0Hz,1H),3.31(dd,J＝5.1,13.6Hz,1H),3.02(t,J＝
6.3Hz,2H),0.90(s,9H),0.03(s,6H).LCMS(方法2):[MH+]＝612，在4.19min.
[0960] 步骤2:5-(2-羟基乙基)噻吩-2-甲酸[(1S)-2-(3,5-二氯-1-氧化-吡啶-1-鎓-4-基)-1-(3,4-二甲氧基苯基)乙基]酯的制备
[0961]
[0962] 向5-[2-[叔丁基(二甲基)甲硅烷基]氧基乙基]噻吩-2-甲酸[(1S)-2-(3,5-二氯-1-氧化-吡啶-1-鎓-4-基)-1-(3,4-二甲氧基苯基)乙基]酯(400mg,0.65mmol)在吡啶(6mL)中的溶液中滴加HF·吡啶(0.88ml)，将该混合物在室温搅拌3h。将该混合物冷却至0℃，用饱和碳酸氢钠水溶液(10mL)猝灭。用乙酸乙酯(3×30mL)萃取该混合物，使合并的有机级分通过疏水性玻璃料过滤器，通过减压蒸发除去溶剂，通过硅胶柱色谱法纯化粗物质，用0-
100％乙酸乙酯/10％甲醇的乙酸乙酯溶液洗脱，得到标题化合物(323mg,定量收率)，为白色固体。
[0963] 1H NMR(400MHz,CDCl3):δ 8.14(s,2H),7.64(d,J＝3.8Hz,1H),7.02-6.96(m,2H),6.87-6.84(m,2H),6.21(dd,J＝4.7,9.7Hz,1H),3.90(s,3H),3.90-3.84(m,2H),3.88(s,
3H),3.67(dd,J＝9.9,13.9Hz,1H),3.31(dd,J＝4.9,14.3Hz,1H),3.07(t,J＝6.3Hz,2H),
2.43(t,J＝5.1Hz,1H).LCMS(方法1):[MH+]＝498，在3.24min.
[0964] 步骤3:5-[2-[[2-氧代-1-苯基-2-[(3R)-奎宁环-3-基]氧基-乙基]氨基]乙基]噻吩-2-甲酸[(1S)-2-(3,5-二氯-1-氧化-吡啶-1-鎓-4-基)-1-(3,4-二甲氧基苯基)乙基]酯(实施例108)的制备
[0965]
[0966] 在-78℃，向5-(2-羟基乙基)噻吩-2-甲酸[(1S)-2-(3,5-二氯-1-氧化-吡啶-1-鎓-4-基)-1-(3,4-二甲氧基苯基)乙基]酯(100mg,0.2mmol)在二氯甲烷(2mL)中的混合物中加入戴斯-马丁试剂(102mg,0.24mmol)，将该混合物温热至室温。将该混合物在室温搅拌30min.，然后用饱和硫代硫酸钠水溶液(5mL)、然后用饱和碳酸钠水溶液(5mL)猝灭。
[0967] 用二氯甲烷(3×10mL)萃取该混合物，使有机相通过疏水性玻璃料过滤器，通过减压蒸发除去溶剂。将残余物溶于乙醇(8mL)，加入2-氨基-2-苯基-乙酸[(3R)-奎宁环-3-基]酯盐酸盐I-111(154mg,0.44mmol)，然后加入三乙胺(0.12ml,0.81mmol)和乙酸(0.025mL,0.44mmol)。加入氰基硼氢化钠(94mg,0.44mmol)，将该混合物在室温搅拌66h。通过减压蒸发除去溶剂，使残余物在1N盐酸水溶液(3mL)与乙酸乙酯(3mL)之间分配。分离各层，用乙酸乙酯(2×3mL)萃取水相。用碳酸氢钠水溶液碱化水相，然后用乙酸乙酯(2×3mL)萃取。用1N盐酸水溶液(2mL)萃取合并的有机级分。加入盐水(2mL)，用氯仿(5mL和2mL)萃取水层。用饱和碳酸氢钠水溶液(2mL)洗涤合并的有机级分，使其通过疏水性玻璃料过滤器，通过减压蒸发除去溶剂。通过制备型HPLC纯化，得到标题化合物，为灰白色固体(26mg,18％，2步内)。
[0968] 1H NMR(400MHz,CD3CN):δ 8.18(s,2H),7.67(d,J＝3.5Hz,1H),7.43-7.30(m,5H),7.07-7.01(m,2H),6.97-6.90(m,2H),6.17(dd,J＝4.3,9.6Hz,1H),4.78-4.71(m,1H),(s,1H), (s,1H),3.83(s,3H),3.82(s,3H),3.66(dd,J＝9.6,14.1Hz,
1H),3.33(dd,J＝4.5,14.1Hz,1H),3.16-3.04(m,1H),3.02(t,J＝6.4Hz,2H),2.93-2.85(m,1H),2.82-2.73(m,1H),2.71-2.23(m,5H),1.93-1.74(m,1H),1.68-1.25(m,3H),1.22-
1.13(m,1H),*和 是指不同的异构体，NH未观察到。LCMS(方法1):[MH+]＝740，在2.40min.[0969] 实施例47和实施例48
[0970] 5-[[[1-(3-氟苯基)-2-氧代-2-[(3R)-奎宁环-3-基]氧基-乙基]氨基]甲基]噻吩-2-甲酸[(1S)-2-(3,5-二氯-1-氧化-吡啶-1-鎓-4-基)-1-(3,4-二甲氧基苯基)乙基]酯的单一非对映异构体(非对映异构体1和2)
[0971]
[0972] 通过手性制备型SFC纯化实施例37的1:1的非对映异构体混合物，得到单一非对映异构体。
[0973] 得到标题化合物(实施例47，单一非对映异构体1)，为白色固体(50.4mg,13％)。
[0974] 1H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ 8.52-8.48(m,2H),7.62(d,J＝3.78Hz,1H),7.37-7.30(m,1H),7.26-7.18(m,2H),7.08(td,J＝8.58,2.57Hz,1H),6.95(d,J＝3.00Hz,2H),
6.91(s,2H),6.07(dd,J＝9.63,4.42Hz,1H),4.66-4.61(m,1H),4.43(d,J＝9.34Hz,1H),
3.82(d,J＝5.96Hz,2H),3.70(s,3H),3.69(s,3H),3.63(dt,J＝9.40,6.14Hz,1H),3.51(dd,J＝14.20,9.68Hz,1H),3.40-3.25(m,1H),2.99(dd,J＝14.62,8.24Hz,1H),2.63-2.46(m,5H),1.68(d,J＝4.12Hz,1H),1.56-1.12(m,4H).LCMS(方法1):[MH+]＝744，在2.70min.[0975] 手性分析(方法23)，在10.82min.
[0976] 得到标题化合物(实施例48，单一非对映异构体2)，为白色固体(58.2mg,16％)。
[0977] 1H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ 8.48(s,2H),7.61(d,J＝3.79Hz,1H),7.39-7.32(m,1H),7.27-7.17(m,2H),7.09(td,J＝8.59,2.55Hz,1H),6.99-6.87(m,4H),6.07(dd,J＝
9.69,4.30Hz,1H),4.62-4.57(m,1H),4.42(d,J＝9.38Hz,1H),3.88-3.76(m,2H),3.72-
3.59(m,7H),3.51(dd,J＝14.20,9.72Hz,1H),3.21(d,J＝4.97Hz,1H),2.92(dd,J＝14.71,
8.14Hz,1H),2.55-2.45(m,2H),2.38-2.27(m,1H),2.09(d,J＝14.65Hz,1H),1.79(s,1H),
1.54-1.42(m,2H),1.22-1.07(m,1H),0.97(d,J＝6.10Hz,1H).NH不可见。
[0978] 手性分析(方法23)，在12.48min.
[0979] 根据与制备实施例47和实施例48所述类似的方法制备下表中报道的化合物。手性制备型SFC或手性制备型HPLC得到单一非对映异构体。
[0980]
[0981]
[0982]
[0983] (接续)
[0984]
[0985]
[0986] (接续)
[0987]
[0988]
[0989] (接续)
[0990]
[0991]
[0992] (接续)
[0993]
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[0999] (接续)
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[1086]
[1087] (接续)
[1088]
[1089] 本发明化合物的药理学活性
[1090] PDE4抑制活性的体外测定
[1091] 可以根据下文报道的方案之一确定本发明化合物PDE4抑制作用的体外测定：
[1092] PDE4B2HTRF测定:
[1093] 使用得自Perkin Elmer的LANCE Ultra cAMP均匀时间分辨
荧光共振
能量转移(TR-FRET)测定法检测PDE4B2活性。本测定法基于铕(Eu)
螯合物-标记的cAMP示踪物与样品cAMP之间对用ULightTM染料标记的cAMP-特异性单克隆
抗体(mAb)上结合位点的竞争性。测定在384-孔小体积培养板中以10μl体积进行。将人重组PDE4B2(80pM)与3nM cAMP一起在包含1×HBSS、5mM HEPES、3mM MgCl2、0.1％BSA,pH 7.4与或不与试验的化合物的缓冲液中温育2h。通过添加500μM IBMX有效地终止酶反应，所述500μM IBMX存在于合并的终止/检测缓冲液中，该缓冲液包含铕(Eu)螯合物-标记的cAMP示踪物和用ULightTM染料标记的cAMP-特异性单克隆抗体(mAb)。然后将样品再温育1h，然后用EnVis ion读出器在340nm激发和665nm和615nm发射处读取培养板。使用非线性曲线拟合程序，根据竞争曲线确定IC50值。
[1094] PDE4非细胞(cell free)测定方案
[1095] 在U937人单核细胞上清液细胞裂解物中测定PDE4活性。基本上如在Torphy TJ等人J.Pharmacol.Exp.Ther.1992；263:1195-1205中所述，培养、
收获细胞和制备上清液级分。
[1096] 在37℃、5％CO2下，在包含GlutaMAXTM-I培养基的RPMI 1640中培养U937细胞，所述GlutaMAXTM-I培养基补充有10％胎
牛血清和100μg/ml Pen-strep(Gibco)。
[1097] 收获细胞，并通过在冷PBS中离心(150×g,8min)洗涤2次。以20×106个细胞/ml的终浓度将洗涤过的细胞再悬浮于冷Krebs-Ringer-Henseleit缓冲液中，并超声处理。在15000×g离心20min以后，合并上清液，分成等分试样，并在-80℃储存。
[1098] 通过测定cAMP从温育混合物中的消失，确定细胞上清液中的PDE4活性。
[1099] 试验化合物的浓度范围为10-12M至10-6M。通过酶热灭活(在100℃保持2.5分钟)来停止反应，并按照提供商的
说明书，使用得自PerkinElmer的‘LANCE cAMP Assay’，确定残余的cAMP含量。
[1100] 结果：表示为试验化合物产生cAMP消失的50％抑制的摩尔浓度的平均值±标准差(IC50)。
[1101] 假定在没有抑制剂存在下的cAMP消失为100％且在热灭活样品中的cAMP消失为0％，计算PDE4活性的抑制百分比。
[1102] 当在上述报道的方案之一中测试时，本发明有代表性的化合物展示出低于100nM的IC50。
[1103] M3拮抗作用的体外测定
[1104] 可以根据下文报道的方案之一确定本发明化合物M3拮抗作用的体外测定：
[1106] 将得自Perkin Elmer的人M3受体膜(15μg/孔)与0.52nM东莨菪碱甲基氯化物[N-甲基-3H]与或不与试验的化合物一起温育，或与饱和浓度的阿托品(5μM)一起温育以测定非特异性结合。测定在96-孔聚丙烯培养板中以250μl体积进行。所用的测定缓冲液是50mM Tris-HCl,154mM NaCl(pH 7.4)。DMSO的最终测定浓度为0.5％(v/v)。密封培养板，在室温在轨道
振荡器(慢速)上温育2h。使用过滤平台在用0.5％聚乙烯亚胺(v/v)预处理的96-孔unifilter GF/C滤板上收获膜，用200μl测定缓冲液洗涤4次。干燥培养板，然后添加50μl microscint-0，然后用Trilux Microbeta闪烁计数器读取。使用非线性曲线拟合程序根据竞争曲线确定IC50。用Cheng和Prusoff方程根据IC50值计算Ki值。
