用于清洁皮肤及其他用途的模拟胎脂组合物
阅读：481发布：2021-04-11
专利汇可以提供用于清洁皮肤及其他用途的模拟胎脂组合物专利检索，专利查询，专利分析的服务。并且本 发明 涉及一种模拟天然胎脂的 水 合作用、 净化 及其它特性的组合物及其制备方法。该组合物含有存在于脂质基质中的水合的合成细胞以保证它的 流变学 特性，这种水合的合成细胞基本上类似于天然的胎脂，而且还可含有 蛋白质 。具体地说，该组合物包含立方体 液晶 纳米颗粒(cubosomes)及可高达30％的蛋白质和大约5％到大约30％的脂质。该组合物可以用于清洁新生儿的 皮肤 ，以提供水合作用/屏障的功能及其它应用。，下面是用于清洁皮肤及其他用途的模拟胎脂组合物专利的具体信息内容。
1.一种生理学相容性组合物，其包含以有效量分散于脂质基质中的 大量的水合的合成细胞，以使得皮肤表面具有约20达因/厘米的最小表面 自由能。
2.权利要求1的组合物，其进一步包含一种蛋白质组分。
3.权利要求1的组合物，其能够从有污物的皮肤表面去除污物。
4.权利要求1的组合物，其中所述合成细胞选自由立方体液晶纳米 颗粒、磷脂脂质体、非磷脂脂质体、多聚体、纳米颗粒、微颗粒、胶质 体、及其组合组成的一组。
5.权利要求2的组合物，其中所述蛋白质组分选自由角蛋白、聚角 蛋白微丝蛋白、表皮生长因子、表面活性物质相关蛋白A、表面活性物 质相关蛋白B、表面活性物质相关蛋白D、天然保湿因子、及其组合组 成的一组。
6.权利要求1的组合物，其中所述脂质选自由胆固醇、胆固醇酯、 神经酰胺、甘油三酯、游离脂肪酸、磷脂、蜡酯、蜡二酯、鲨烯、及其 组合组成的一组。
7.权利要求1的组合物，其中所述脂质占整个组合物的大约5％到 大约30％。
8.权利要求2的组合物，其中所述蛋白质占整个组合物的大约5％ 到大约30％。
9.权利要求2的组合物，其中所述蛋白质占整个组合物的大约0.1％ 到大约30％。
10.权利要求2的组合物，其中所述蛋白质组分选自由合成的蛋白 质、商品化的蛋白质、分离的蛋白质、及其组合组成的一组。
11.权利要求6的组合物，其中所述胆固醇占全部脂质的大约5％到 大约10％。
12.权利要求6的组合物，其中所述胆固醇酯占全部脂质的大约20％ 到大约35％。
13.权利要求6的组合物，其中所述神经酰胺占全部脂质的大约10％ 到大约20％。
14.权利要求6的组合物，其中所述甘油三酯占全部脂质的大约10％ 到大约20％。
15.权利要求6的组合物，其中所述脂肪酸占全部脂质的大约5％到 大约10％。
16.权利要求6的组合物，其中所述磷脂占全部脂质的大约5％到大 约10％。
17.权利要求6的组合物，其中所述蜡酯占全部脂质的大约2％到大 约8％。
18.权利要求6的组合物，其中所述鲨烯占全部脂质的大约0.5％到 大约5％。
19.权利要求6的组合物，其中所述蜡二酯占全部脂质的大约0.5％ 到大约6％。
20.权利要求6的组合物，其中所述胆固醇硫酸酯占全部脂质的大 约0.1％到大约3％。
21.权利要求1的组合物，其具有天然胎脂的水合特征，所述特征 包括选自蒸发的水分的传输、蒸发的水分的损失速率的调节及其组合的 一种性质。
22.一种皮肤接触装置，其包括一种具有分散于脂质基质中的大量 的水合的合成细胞的组合物和支持该组合物的装置。
23.权利要求22所述的产品，其中所述装置选自由膜、薄膜、织物、 伤口敷料、粘合剂产品、造瘘术护理产品、医用衬垫、失禁护理用衬垫、 吸湿性衬垫、检查用衬垫、尿布和女性卫生用品组成的一组。
24.权利要求22所述的产品，其中所述组合物可形成薄膜。
25.一种处理皮肤病变的方法，该方法包括给皮肤表面提供有效量的 一种生理学相容性组合物以处理皮肤，该组合物包含存在于脂质基质中 的大量的水合的合成细胞。
26.权利要求25的方法，其中所述处理产生的作用选自皮肤生长、 皮肤成熟、伤口愈合、组织修复及其组合。
27.权利要求25的方法，其中所述处理产生的保护作用选自提供屏 障功能、提供保湿功能及其组合。
28.权利要求25的方法，其中所述皮肤是完好的。
29.权利要求25的方法，其中所述皮肤是受损的。
30.一种处理上皮细胞层的方法，该方法包括
将一种组合物施用到上皮细胞层，该组合物含有大量存在于脂质基 质中的水合的合成细胞，该组合物的施用厚度为大约10μm到大约 500μm，并且
在增强生长的条件下将该组合物保持在细胞层上直到获得成熟的上 皮细胞层。
31.权利要求30的方法，其中在将所述组合物施用于所述细胞之前 先将其加到一种装置上。
32.权利要求30的方法，其中所述装置选自由膜、薄膜、织物、伤 口敷料、粘合剂产品、造瘘术护理产品、医用衬垫、失禁护理用衬垫、 吸湿衬垫、检查用衬垫、尿布、和女性卫生用品组成的一组。
33.一种仪器，其包括一种用于接触皮肤表面的装置，所述装置带 有一种药物组合物，该组合物包含存在于脂质基质中的大量的水合的合 成细胞。
34.权利要求33所述的仪器，其中所述装置选自由膜、薄膜、织物、 伤口敷料、粘合剂产品、造瘘术护理产品、医用衬垫、失禁护理用衬垫、 吸湿衬垫、检查用衬垫、尿布、和女性卫生用品组成的一组。
35.一种处理皮肤表面的方法，该方法包括
在皮肤表面施用一种生理学相容性组合物，该组合物包含存在于脂 质基质中的大量的水合的合成细胞，施用的量足以使得施用于所述皮肤 表面的该组合物产生大约20达因/厘米的最小表面自由能。
36.一种处理皮肤表面的方法，该方法包括在皮肤表面施用一种生 理学相容性组合物，该组合物包含一种存在于脂质基质中的大量的水合 的合成细胞，施用的量足以使得该组合物与苯甲醇的接触角在约18.0到 约24.7之间；与二碘甲烷的接触角在约30.0到约38.3之间；与甘油的接 触角在约71.9到约76.5之间；以及与水的接触角在约82.7到约84.3之 间。
37.一种处理皮肤表面的方法，该方法包括在皮肤表面施用一种生 理学相容性组合物，该组合物包含存在于脂质基质中的大量的水合的合 成细胞，施用的量足以使得施用于皮肤表面的该组合物在该表面产生大 约38达因/厘米到大约41达因/厘米之间的临界表面张力。
38.一种生理学相容性组合物，该组合物包含有效量的存在于脂质 基质中的大量的水合的合成细胞，以使该表面具有大约38达因/厘米到大 约41达因/厘米之间的临界表面张力。
39.一种处理皮肤表面的方法，该方法包括在皮肤表面施用一种包 含存在于脂质基质中的大量的水合的合成细胞的生理学相容性组合物， 施用的量足以使得施用于所述皮肤表面的该组合物产生大于36达因/厘 米的临界表面张力。
40.一种生理学相容性组合物，其包含有效量的存在于脂质基质中 的大量的水合的合成细胞，以使该表面具有大于36达因/厘米的临界表面 张力。
41.一种皮肤处理方法，该方法包括在足以对皮肤进行处理的条件 下在皮肤上施用一种组合物，该组合物具有存在于选自如下一组的至少 一种脂质的基质中的大量的水合立方体液晶纳米颗粒，所述的组由胆固 醇、胆固醇酯、神经酰胺、甘油三酯、游离脂肪酸、磷脂、蜡酯、蜡二 酯、鲨烯、及其组合组成。
42.权利要求41的方法，其中施用所述组合物以实现伤口愈合、皮 肤保湿、和调节皮肤水合作用中的至少一种。
43.一种生理学可接受的组合物，其包含存在于一种基质中的大量 的水合立方体液晶纳米颗粒，所述基质包含选自如下一组中的至少一种 脂质，所述的组由胆固醇、胆固醇酯、神经酰胺、甘油三酯、游离脂肪 酸、磷脂、蜡酯、蜡二酯、鲨烯、及其组合组成。
44.权利要求43的组合物，其进一步包含一种蛋白质。
45.权利要求44的组合物，其中所述蛋白质组分的浓度为占整个组 合物的大约0.1％到大约30％之间。
46.权利要求44的组合物，其中所述蛋白质选自立方体液晶纳米颗 粒、磷脂脂质体、非磷脂脂质体、多聚体、纳米颗粒、微颗粒、胶质体、 及其组合。
47.一种处理皮肤表面的方法，该方法包括在皮肤表面施用一种生 理学相容性组合物，该组合物包含存在于脂质基质中的大量的水合的合 成细胞作为一种半透膜，所施用的量足以实现屏障修复。
48.一种生理学相容性组合物，其包含有效量的存在于脂质基质中 的大量的水合的合成细胞作为一种半透膜，以实现屏障修复。
49.一种处理个体的皮肤表面以自有污物的皮肤表面去除污物的方 法，该方法包括在有污物的皮肤表面施用一种含有分离的生理学相容性 胎脂的组合物，所述胎脂以能去除污物的有效量存在于该组合物中，然 后将该组合物和污物一起从所述皮肤表面去除。
50.权利要求49的方法，其中所述组合物和污物基本上完全被去除。
51.权利要求49的方法，其中所述组合物和污物部分被去除。
52.权利要求49的方法，其中所述个体是足月出生的婴儿或非足月 出生的婴儿。
53.权利要求49的方法，其中所述胎脂包含分散于脂质基质中的大 量的水合的合成细胞。
54.权利要求49的方法，该方法进一步包括处理分离的胎脂使之具 有生理学相容性。
55.权利要求49的方法，其中所述组合物进一步包含表面活性物质、 皂剂、及其组合。
56.权利要求49的方法，其中有污物的皮肤表面是受损的。
57.权利要求49的方法，其中胎脂是天然的、合成的、或其组合。
58.权利要求49的方法，用于清洁带有分娩时的污物的新生儿，其 中在清洁新生儿的条件下去除所述组合物和分娩时的污物。
59.权利要求58的方法，其中被去除的分娩时的污物选自血、粪便、 尿液、胎粪、羊水及其组合。
60.一种清洁被污物污染的皮肤表面的方法，该方法包括
将一种基本上由分离的生理学相容性胎脂组成的组合物施用于有污 物的皮肤，所述胎脂以能去除该污物的有效量存在于所述组合物中；
乳化所述污物和胎脂，以及
随后去除所述胎脂和污物。
61.权利要求60的方法，其中所述胎脂包含分散于脂质基质中的大 量的水合的合成细胞。
62.权利要求60的方法，其中包括以大约2mg/cm2到大约13mg/cm2 的用量施用所述分离的胎脂。
63.权利要求60的方法，其中包括以最高大约16mg/cm2的用量施 用所述分离的胎脂。
64.权利要求60的方法，其中的皂剂、表面活性物质及其组合乳化 所述污物和分离的胎脂。
65.一种组合物，其包含存在于一种生物相容性清洁载体配制品中 的胎脂和一种乳化剂，所述胎脂的形式选自天然胎脂、合成的胎脂、包 含分散于脂质基质中的大量的水合的合成细胞的胎脂、及其组合。
66.权利要求65的组合物，其中所述乳化剂选自皂剂、表面活性物 质、及其组合。
67.权利要求65的组合物，其制剂形式选自液体、固体、凝胶、乳 剂和洗涤剂。
68.一种清洁有污物的皮肤的方法，该方法包括将一种厚度最高为 大约16mg/cm2的且基本由分离的生理学相容性胎脂组成的无毒薄膜施 用于皮肤层，然后去除该胎脂薄膜和污物，以产生皮肤清洁作用。
69.权利要求68的方法，其中将所述胎脂薄膜覆于选自以下一组的 材料，所述的组由织物、伤口敷料、粘合剂产品、造瘘术护理产品、医 用衬垫、失禁护理用衬垫、吸湿衬垫、检查用衬垫、尿布、毛巾、清洁 用抹布、和女性卫生用品组成。
70.一种清洁有污物的上皮表面的方法，该方法包括将一种厚度最 高为大约16mg/cm2的且基本上由分离的生理学相容性胎脂组成的无毒 薄膜施用于有污物的上皮表面，并随后自所述上皮表面去除所述胎脂薄 膜和污物。
71.一种保护个体皮肤表面免受刺激性清洁产品伤害的方法，该方 法包括在将皮肤暴露于该产品之前，将一种基本上由分离的生理学相容 性胎脂组成的组合物施用于该表面，施用的量最高为16mg/cm2，然后再 用所述产品。
72.权利要求71的方法，其中所述个体患有遗传性过敏症。
73.一种自有污物的皮肤表面去除污物的方法，该方法包括
将分离的生理学相容性胎脂和至少一种皂剂或表面活性物质施用于 所述有污物的表面，所述胎脂以能够有效去除该污物的量存在于所述组 合物中，以使污物在所述皮肤表面絮凝和分离，以及
随后从所述皮肤表面去除污物。
相关申请
本申请要求美国临时申请号为60/377,430，申请日为2002年5月3 日的美国专利申请和美国临时申请号为60/439,966，申请日为2003年1 月14日的美国专利申请的优先权。
发明领域
一种模拟天然胎脂(vernix)的组合物及其应用。
发明背景
胎脂(vernix caseosa)是一种富含脂质的天然的皮肤保护剂，它由皮 脂，表皮层脂质，和脱落的上皮细胞组成。它覆盖在正在子宫中生长的 胎儿的皮肤上，这时胎儿被完全包裹在羊水中。胎脂由分散于脂质基质 中的水合细胞组成。天然的胎脂包含大约10％重量的脂质，约10％重量 的蛋白质，以及约80％重量的挥发物。脂质基质在生理温度下以及受到 剪切力例如在运动的情况下会不断变化而更具流动性。胎脂覆盖在胎儿 的皮肤上类似于角质层，但它缺少大量刚性桥粒连接。因此，胎脂表现 为一种粘稠流体的特征。
胎脂的脂质组分已经在J.Invest.Dermatol.78：291(1982)；Lipids 6： 901(1972)；J.Clin.& Lab.Investigation 13：70(1961)；J.Invest.Dermatol.， 44：333(1965)；和美国专利5631012中进行了报道。上述文献在这里作为 参考引用。脂质，在这里被定义为脂肪或类似脂肪的物质。包括卵磷脂 和其它磷脂，鲨烯(三十碳六烯)，蜡，蜡酯，固醇酯，二醇酯，甘油三 酯，神经酰胺，其中的脂肪酸成分可以是下述的一种或多种：α-羟基6- 羟基-4-鞘氨醇，α-羟基植物鞘氨醇，α-羟基鞘氨醇，连接ω-羟基6-羟 基-4-鞘氨醇的酯，不含羟基的植物鞘氨醇，不含羟基的鞘氨醇，和/或连 接ω-羟基鞘氨醇的酯；游离固醇，和碳链长度在C12到C26范围内的四类 脂肪酸(饱和直链，不饱和直链，饱和支链，和不饱和支链)。脂质组分 可以包含，以相对百分含量表示，鲨烯(三十碳六烯)(9％)，神经酰胺 (10％)，脂肪质蜡(12％)，固醇酯(33％)，二酯(7％)，甘油三酯(26％)， 游离固醇(9％)，及其它脂质(4％)。脂肪质蜡中的脂肪酸可以是支链且 支链脂肪酸可以被甲基化。
因为预计它具有使皮肤成熟和保护皮肤的特性，胎脂显示出作为临 床有效治疗剂的良好前景。不过，将胎脂应用于临床时，一些困难限制 了它的应用，如难以获得充足的样本，有可能引起疾病传染，以及天然 胎脂的一些物理特性。
鉴于它的物理特性，子宫内的胎脂是柔软的半固体形式，而在子宫 外的时候却是一种非均质的难以处理的化合物，像干酪或变硬的蛋糕一 样。胎脂不能完全溶解于一般的溶剂，例如无水乙醇，95％乙醇，2-丙醇， 以及氯仿和甲醇的混合物。因此，将其可控制地并均匀地施用于表面是 很困难的。据报道，表面活性物质聚山梨醇酯80(Tween 80)可以使胎脂 溶解，但是Tween 80对活细胞具有毒性，而且不能用于临床。一些个案 报告披露，胎脂可以直接从新生儿身体上刮下，用于涂抹伤口(美国专利 1718947A)或用于一种作为保湿化妆品的合成脂质组合物(美国专利 5,631,012)。
天然的胎脂包括蛋白质，一般来说，这种蛋白质是多决定簇抗原。 因此，胎脂中的蛋白质组分可能诱导免疫应答且可与免疫应答产物发生 反应。大量复杂的蛋白质通常会激发更强烈的免疫应答。
天然胎脂蛋白质由源自表皮的蛋白质(主要是角蛋白和聚角蛋白微 丝蛋白(filaggrin))、微量(微摩尔至毫摩尔浓度)的调节蛋白质(如表皮 生长因子)、和微量(微摩尔至毫摩尔浓度)的表面活性物质蛋白(如表面 活性物质相关蛋白A(surfactant associated protein-A)和表面活性物质相 关蛋白B(surfactant associated protein-B))组成。
实际上，所有的蛋白质在适当的个体中都会产生免疫性，且由于天 然胎脂中蛋白质种类的不同和其复杂性，当所提供的胎脂不是自身的(除 了婴儿和/或其母亲)皮脂时，至少一些免疫应答是可预见的。所述的免 疫应答包括物理变化，生化的变化，及分子变化，例如对T细胞，B细 胞和巨噬细胞的刺激，超敏反应和过敏反应，发烧、发热等。
我们已经报道了可以通过将一部分在分娩过程中直接从婴儿身体上 得到天然胎脂和任一下述指定比例的组分混合而制备合成的胎脂：这些 组分为大约0.005到0.05份的磷脂，或者是大约纳摩尔到微摩尔浓度的 微量肺部表面活性物质蛋白例如表面活性物质A和/或B，或有5份二甲 亚砜(DMSO)，或1份羊膜液体，或它们的混合物。或者，合成的胎脂 还可以通过将10％体积的脂质，10％体积的蛋白质，和剩余80％体积的 水结合起来而制备。下述脂质组分是以指定百分比结合的：鲨烯(9％)， 脂肪族蜡(12％)，固醇酯(33％)，二酯(7％)，甘油三酯(26％)，游离固 醇(9％)，和其它脂质(4％)。蜡中的脂肪酸可以是支链的，且支链脂肪 酸可以被甲基化。占合成胎脂的10％的蛋白质组分是源自表皮的蛋白质， 主要是角蛋白和聚角蛋白微丝蛋白，和大约微摩尔到毫摩尔浓度的微量 的调节蛋白质例如表皮生长因子，以及大约纳摩尔到微摩尔浓度的微量 的表面活性物质蛋白例如表面活性物质A和表面活性物质B。
皮肤净化配制品一般包括表面活性物质，它能乳化皮肤表面的污物， 然后用清水冲洗就可以去除。表面活性物质可以是阴离子，阳离子，非 离子或两性离子，并且可以以一种棒状物，一种脂质，一种乳剂，一种 凝胶等形式存在。不同表面活性物质对皮肤的效果是显著不同的，更值 得关注的是对皮肤的刺激性不同。它们已经显示出在角化细胞的膨胀， 崩解，和损坏方面的不同的作用。表面活性物质及其它局部的治疗，在 皮肤屏障的通透性上的效果表现出很大的不同，例如十二烷基硫酸钠 (SDS)和丙酮对人体皮肤的体内效果(活检样品)已经通过电子显微镜 进行了评估。用0.5％的SDS对皮肤进行处理发现，即使上层角质层是完 整的，也观察到有核表皮细胞的损坏及脂质溢出的破坏。用丙酮进行处 理会造成表皮脂质层的破裂且会减少贯穿于角质层的层状凝聚。
清洁后留在皮肤表面上的残留物的量随表面活性物质的特性而变 化，所述特性包括表面活性物质与氯和镁在蒸馏水中的相互作用。表面 活性物质在清洁中的用量和用蒸馏水稀释的浓度(例如，蒸馏水的体积) 对皮肤表面的残留物产生影响。为新生儿洗澡的程序一般要求尽量少的 清洗时间，以使得因整个身体暴露在水中引起的冷却效应最小化。一般 情况，由于减少了水的用量并缩短了清洁的时间，残留在婴儿皮肤的表 面活性物质含量就会较高。
由于表面活性物质会对皮肤产生刺激和使皮肤变干燥，用皮肤清洁 产品给婴儿洗澡的方法应该进行重新评估。推荐使用温和的或含刺激成 分少的清洁剂使对婴儿皮肤的刺激和过敏降低到最小，对于特殊的有皮 肤病的皮肤的要准备特殊的制剂(J Eur Acad Dermatol Venereol 2001；15， 12)。为新生儿洗澡的一个作用是洗去血和病原体，以确保不会传染给别 人。一项研究对比了一组62名用温和清洁剂洗澡的婴儿和一组65名仅 用清水洗澡的婴儿的病原体建群率。随着时间的增加两组婴儿的皮肤的 病原体建群现象都在增加，在微生物的种类和数量上没有区别。这些数 据表明，清洁剂不能阻挡细菌的建群。
用不同的清洁方法对从2周到16个月大的婴儿进行皮肤清洁处理的 结果进行了评估(Dermatology 1997；195，258)。对比各平行的处理组(每 组7到10名婴儿)分别只用水，一种合成的脂质清洁剂，一种合成的棒 状清洁剂，一种脂肪酸肥皂洗澡一次。测试清洁前和清洁完10分钟后的 皮肤的pH值，水合作用，和表面脂质含量。4种处理后的婴儿皮肤的pH 值比开始都有所升高，只用水清洁的结果是pH值升高的最少，使用肥皂 的结果是pH值升高的最多。用三种清洁剂比只用水清洁后的pH值明显 高出很多，用脂肪酸肥皂比用合成的脂质或棒状清洁剂清洁后的pH值明 显高出很多。作者指出洗澡用的自来水是碱性的(pH7.8-8.2)，但认为是 洗涤导致保湿因子中水溶性氨基酸丢失，从而引起pH值升高。洗澡或是 用清洁产品对皮肤的水合作用的影响没有发现什么不同。这个发现却与 另一个研究报告得到的结果不同，这个研究报道了洗澡以后皮肤的水合 作用减弱，但是在后一研究中，洗澡的时间比以前缩短了(10分钟VS 15 分钟)，婴儿的个头更小了，且年龄范围不同(3-6个月VS 2周-16个月)。 另一个研究确定了给一组大于2周的婴儿用一种基于乳清的产品 (Schweiz Rurdsch，Med.Prax 1998；87，617)洗澡后的效果，水合作用，pH 值和红斑都有降低和减少，但变化在统计学上不是非常明显。
根据先前皮肤的状况或其它环境因素能进一步加剧水和表面活性物 质的作用。在正常的和有遗传性过敏症(有过敏反应，例如，发烧，哮喘， 特应性皮炎)的被测试者之间，评估了用清洁剂清洗对角质层的影响和对 表皮层厚度的影响。肥皂减少了患有遗传性过敏症被试者的细胞层的数 量，而正常的人则没有出现这样的情况，说明有遗传性过敏症的个体对 清洁剂的易感性增加。
将用表面活性物质清洗和降低环境的湿度的结合也进行了探讨。在 成年人中，在绝对湿度减小的情况下，由于重复暴露在水和/或表面活性 物质中，造成了皮炎的加剧。与住在正常或高湿度环境下的动物相比， 短时间(2天)暴露在低温度环境的动物，在接触表面活性物质(SDS)之 后，显示出表皮层的增殖。此外，使动物暴露在高湿度的环境下2周， 受表面活性物质的影响，表皮细胞的增殖比在低湿度或正常环境下暴露2 周的动物快的多。这说明在极端湿度条件下水和表面活性物质对婴儿或 新生儿的影响更大。
早产新生儿的表皮屏障特性很差且易感性强，易受损伤。这些因素 及早产新生儿整体医学上的不稳定性，必须要通过练习来平衡，例如洗 澡，以减少被感染的危险。一项在一组早产新生儿中的研究考查了减少 洗澡频率对皮肤病原体建群的影响。在洗澡后的第2，3，或4天没有发 现皮肤菌群的变化(J obstet，Gynicol Neonatal Nurs 1999；29，584)。减少早 产新生儿的洗澡频率一直并且仍然被认为是新生儿护理的一个护理标准 而推荐使用(J obstet，Gynicol Neonatal Nurs 1999；28，241)。在一组10个被 试者中调查了洗澡对非足月婴儿生理和行为的特殊影响，观察洗澡前十 分钟，中间，和洗澡后10分钟被测试者的反应，显示出心率明显加快， 需氧量增加且身体运动增多，伴随有氧饱和度的明显下降。
与足月婴儿比较，由于未成熟的表皮屏障，非足月婴儿甚至直到真 皮都是易感的。含有3％的六氯酚的清洁产品曾经用作清洗早产新生儿全 身的清洁剂，但是随后对六氯酚的作用评估显示空泡脑病(vacuolar encephalopathy)与使用六氯酚中有关。所以对此类人群含有六氯酚的产 品已不再使用。通过对病原体细菌控制进行测试后，提出了一些替代品， 包括Lactacyd(一种烷基硫酸酯表面活性物质)和Hibitane(双氯苯双胍己 烷)。然而随后对Lactacyd的评估显示出它使表皮水分减少加剧且对早产 新生儿是不适用的，同时发现双氯苯双胍己烷对培养基中的纤维原细胞 和角化细胞是一种细胞毒素。所以它对于早产新生儿也是不适宜的。
因此，局部应用于早产新生儿的产品，包括表面活性物质，清洁剂， 灭菌剂等，一定要慎重考虑。对婴儿产生影响的因素包括角质层的厚度 和完整度，表面残留物的量，残留物质本身的刺激，以及通过角质层的 分布系数。在出生后相对干燥的环境的影响下，尽管胎儿出生后的角质 层的生长速度很快，但在出生几周内它的屏障的功能还不能完全发挥作 用，而且外界的物质更容易渗透进来。特别是，洗澡时对皮肤表面的冲 洗被最简化，其结果是，残留物质留在了皮肤表面。
角质层，在皮肤的最外层，由于脱落的过程而不断进行自我清洁。 胎儿在子宫里的第三个月，在机械压力和肺部的表面活性物质的影响下， 胎脂逐渐从皮肤上分离开，形成混浊的羊水。当婴儿出生的时候，残留 在皮肤上的胎脂在新生婴儿与消毒环境之间形成了物理接触面。
商品化的清洁产品中的大多数表面活性物质与屏障相互作用并且能 改变表皮屏障，这被在体外体统的众多研究中证明。为了确定这种处理 方法对早产新生儿潜在的影响，对比考察婴儿皮肤和成人皮肤对这种处 理方法的反应是有益的。例如，与成人相比，婴儿具有更大的身体面积 与体重的比值，并且按比例吸收量也较大。组织的分布依赖于年龄，且 组织间的关系在婴儿与成年人之间是不同的，这就导致了不同的综合结 果。
因此，需要确定能够用于易受损伤的皮肤及正常皮肤方法和组合物， 所述易受损伤的皮肤如可以是具有未完全发育好表皮屏障结构的早产儿 的易损伤的皮肤。
发明简述
本发明的一个实施方式是一种分散于脂质基质中的水合的合成细胞 (hydrated synthetic cells)(例如立方体液晶纳米颗粒(cubosomes)，聚合体 (polymersomes)，胶质体(colloidosomes))的模拟胎脂组合物(simulated vernix composition)。另一个实施方式是含有分散于脂质基质中的水合的 合成细胞和蛋白质(例如，角蛋白，聚角蛋白微丝蛋白，表皮生长因子， 与表面活性物质相关蛋白-A、-B、-D，天然保湿因子肽)的模拟胎儿组 合物。脂质基质可以包含胆固醇，胆固醇酯，神经酰胺，甘油三酯，脂 肪酸，磷脂，蜡酯，蜡二酯，和/或鲨烯。所述脂质的组分占整个组合物 的大约5％重量到大约30％重量。蛋白质，如果存在，其占整个组合物的 大约0.1％重量到大约30％重量。
另一实施方式是使用一种生理学相容性组合物处理皮肤的方法，该 组合物含有分散于脂质基质中的大量的水合的合成细胞，该组合物的量 足以有效处理皮肤。该方法可以用于完好的或受损的皮肤，以引起，例 如，皮肤的生长、使皮肤成熟、或用于伤口或溃疡使之愈合，或提供一 种屏障，例如，可用于正常的、皲裂的、或受到刺激的皮肤，以提供防 水或保湿的功能。
另一实施方式是一种仪器，它包括一种接触皮肤表面的装置(例如， 一种附垫、绷带、敷料等)，该装置载有一种药物组合物，该药物组合物 包含存在于脂质基质中的水合的合成细胞。
其它的实施方式是一种组合物及通过提供一种有效量的生理学相容 性组合物处理皮肤的方法，该组合物包含存在于脂质基质中的水合的合 成细胞，将有效量的这样的组合物施用于皮肤表面足以产生不同的物理 特性，例如约20达因/厘米的最小自由能；大约18.0到大约24.7的苯甲 醇接触角，大约30.0到大约38.3的二碘甲烷接触角，大约71.9到大约 76.5的甘油接触角，以及大约82.7到大约84.3的水接触角；大约38达 因/厘米到大约41达因/厘米的临界表面张力；临界表面张力大于36达因 /厘米；或其量足以使得该组合物作为半透膜起到修复屏障的作用。
另一实施方式是一种使用天然或合成胎脂，或使用一种模拟的胎脂 组合物，去除皮肤表面污物的方法。该组合物用于被污物污染的表面， 然后将该组合物随污物一起去除。所述的方法可以用于早产的或足月出 生的婴儿，儿童，成年人，老年病人，且该组合物可用于完整的或受损 的表面，例如伤口或溃疡。这种方法可使用包含皂剂和/或表面活性物质 的胎脂组合物。
另一实施方式是一种在婴儿(足月的或早产新生儿)出生后立即用 一种组合物清洁全身或部分身体的方法，该组合物含有分离的胎脂，通 过去除该组合物，可去除羊水，内生皮脂，胎尿、血液和其它液体。
另一实施方式是一种在能乳化胎脂中的污物的条件下，通过施用一 种基本上由分离的、生理学相容性胎脂组成的组合物，清洁有污物的皮 肤表面，然后去除该胎脂和乳化的污染物的方法。所用胎脂的量可以高 达大约16mg/cm2。
另一实施方式是一种将无毒薄膜清洁皮肤用于上皮细胞层以达到皮 肤清洁效果的方法，所述膜的厚度可厚达16mg/cm2，并基本上由分离的、 生理学相容性胎脂组成。可以直接或间接将该膜用于所述的表面，例如， 可将其用于毛巾，抹布，绷带，衬垫等。另一实施方式是一种通过使用 无毒薄膜清洁上皮细胞层然后从清洁的组织上去除该膜的方法，所述膜 的厚度最高可达16mg/cm2，并基本上是由分离的、生理学相容性胎脂组 成。
另一实施方式是一种保护可能对商品化的清洁产品敏感的个体(例 如，对一些商品化的肥皂或清洁剂过敏的人)的皮肤的方法。在该方法中， 在将皮肤暴露于这些商购产品之前，将一种基本上是由分离的、生理学 相容性胎脂组成的组合物用于这些个体的皮肤表面，所用的量最高可达 16mg/cm2。
另一实施方式是在能使污物在皮肤表面絮凝并从皮肤表面脱落的条 件下，通过使用一种分离的生理学相容性胎脂和至少一种皂剂或表面活 性物质，从皮肤表面去除污物的方法，
通过下面详细描述、附图和实施例将对本发明做进一步说明。
胎脂的脂质组分已经在J.Invest.Dermatol.78：291(1982)；Lipids 6： 901(1972)；J.Clin.& Lab.Investigation 13：70(1961)；J.Invest.Dermatol.， 44：333(1965)；和美国专利5631012中进行了报道。上述文献在这里作为 参考引用。脂质，在这里被定义为脂肪或类似脂肪的物质。包括卵磷脂 和其它磷脂，鲨烯(三十碳六烯)，蜡，蜡酯，固醇酯，二醇酯，甘油三 酯，神经酰胺，其中的脂肪酸成分可以是下述的一种或多种：α-羟基6- 羟基-4-鞘氨醇，α-羟基植物鞘氨醇，α-羟基鞘氨醇，连接ω-羟基6-羟 基-4-鞘氨醇的酯，不含羟基的植物鞘氨醇，不含羟基的鞘氨醇，和/或连 接ω-羟基鞘氨醇的酯；游离固醇，和碳链长度在C12到C26范围内的四类 脂肪酸(饱和直链，不饱和直链，饱和支链，和不饱和支链)。脂质组分 可以包含，以相对百分含量表示，鲨烯(三十碳六烯)(9％)，神经酰胺 (10％)，脂肪质蜡(12％)，固醇酯(33％)，二酯(7％)，甘油三酯(26％)， 游离固醇(9％)，及其它脂质(4％)。脂肪质蜡中的脂肪酸可以是支链且 支链脂肪酸可以被甲基化。
因为预计它具有使皮肤成熟和保护皮肤的特性，胎脂显示出作为临 床有效治疗剂的良好前景。不过，将胎脂应用于临床时，一些困难限制 了它的应用，如难以获得充足的样本，有可能引起疾病传染，以及天然 胎脂的一些物理特性。
鉴于它的物理特性，子宫内的胎脂是柔软的半固体形式，而在子宫 外的时候却是一种非均质的难以处理的化合物，像干酪或变硬的蛋糕一 样。胎脂不能完全溶解于一般的溶剂，例如无水乙醇，95％乙醇，2-丙醇， 以及氯仿和甲醇的混合物。因此，将其可控制地并均匀地施用于表面是 很困难的。据报道，表面活性物质聚山梨醇酯80(Tween 80)可以使胎脂 溶解，但是Tween 80对活细胞具有毒性，而且不能用于临床。一些个案 报告披露，胎脂可以直接从新生儿身体上刮下，用于涂抹伤口(美国专利 1718947A)或用于一种作为保湿化妆品的合成脂质组合物(美国专利 5,631,012)。
天然的胎脂包括蛋白质，一般来说，这种蛋白质是多决定簇抗原。 因此，胎脂中的蛋白质组分可能诱导免疫应答且可与免疫应答产物发生 反应。大量复杂的蛋白质通常会激发更强烈的免疫应答。
天然胎脂蛋白质由源自表皮的蛋白质(主要是角蛋白和聚角蛋白微 丝蛋白(filaggrin))、微量(微摩尔至毫摩尔浓度)的调节蛋白质(如表皮 生长因子)、和微量(微摩尔至毫摩尔浓度)的表面活性物质蛋白(如表面 活性物质相关蛋白A(surfactant associated protein-A)和表面活性物质相 关蛋白B(surfactant associated protein-B))组成。
实际上，所有的蛋白质在适当的个体中都会产生免疫性，且由于天 然胎脂中蛋白质种类的不同和其复杂性，当所提供的胎脂不是自身的(除 了婴儿和/或其母亲)皮脂时，至少一些免疫应答是可预见的。所述的免 疫应答包括物理变化，生化的变化，及分子变化，例如对T细胞，B细 胞和巨噬细胞的刺激，超敏反应和过敏反应，发烧、发热等。
我们已经报道了可以通过将一部分在分娩过程中直接从婴儿身体上 得到天然胎脂和任一下述指定比例的组分混合而制备合成的胎脂：这些 组分为大约0.005到0.05份的磷脂，或者是大约纳摩尔到微摩尔浓度的 微量肺部表面活性物质蛋白例如表面活性物质A和/或B，或有5份二甲 亚砜(DMSO)，或1份羊膜液体，或它们的混合物。或者，合成的胎脂 还可以通过将10％体积的脂质，10％体积的蛋白质，和剩余80％体积的 水结合起来而制备。下述脂质组分是以指定百分比结合的：鲨烯(9％)， 脂肪族蜡(12％)，固醇酯(33％)，二酯(7％)，甘油三酯(26％)，游离固 醇(9％)，和其它脂质(4％)。蜡中的脂肪酸可以是支链的，且支链脂肪 酸可以被甲基化。占合成胎脂的10％的蛋白质组分是源自表皮的蛋白质， 主要是角蛋白和聚角蛋白微丝蛋白，和大约微摩尔到毫摩尔浓度的微量 的调节蛋白质例如表皮生长因子，以及大约纳摩尔到微摩尔浓度的微量 的表面活性物质蛋白例如表面活性物质A和表面活性物质B。
皮肤净化配制品一般包括表面活性物质，它能乳化皮肤表面的污物， 然后用清水冲洗就可以去除。表面活性物质可以是阴离子，阳离子，非 离子或两性离子，并且可以以一种棒状物，一种脂质，一种乳剂，一种 凝胶等形式存在。不同表面活性物质对皮肤的效果是显著不同的，更值 得关注的是对皮肤的刺激性不同。它们已经显示出在角化细胞的膨胀， 崩解，和损坏方面的不同的作用。表面活性物质及其它局部的治疗，在 皮肤屏障的通透性上的效果表现出很大的不同，例如十二烷基硫酸钠 (SDS)和丙酮对人体皮肤的体内效果(活检样品)已经通过电子显微镜 进行了评估。用0.5％的SDS对皮肤进行处理发现，即使上层角质层是完 整的，也观察到有核表皮细胞的损坏及脂质溢出的破坏。用丙酮进行处 理会造成表皮脂质层的破裂且会减少贯穿于角质层的层状凝聚。
清洁后留在皮肤表面上的残留物的量随表面活性物质的特性而变 化，所述特性包括表面活性物质与氯和镁在蒸馏水中的相互作用。表面 活性物质在清洁中的用量和用蒸馏水稀释的浓度(例如，蒸馏水的体积) 对皮肤表面的残留物产生影响。为新生儿洗澡的程序一般要求尽量少的 清洗时间，以使得因整个身体暴露在水中引起的冷却效应最小化。一般 情况，由于减少了水的用量并缩短了清洁的时间，残留在婴儿皮肤的表 面活性物质含量就会较高。
由于表面活性物质会对皮肤产生刺激和使皮肤变干燥，用皮肤清洁 产品给婴儿洗澡的方法应该进行重新评估。推荐使用温和的或含刺激成 分少的清洁剂使对婴儿皮肤的刺激和过敏降低到最小，对于特殊的有皮 肤病的皮肤的要准备特殊的制剂(J Eur Acad Dermatol Venereol 2001；15， 12)。为新生儿洗澡的一个作用是洗去血和病原体，以确保不会传染给别 人。一项研究对比了一组62名用温和清洁剂洗澡的婴儿和一组65名仅 用清水洗澡的婴儿的病原体建群率。随着时间的增加两组婴儿的皮肤的 病原体建群现象都在增加，在微生物的种类和数量上没有区别。这些数 据表明，清洁剂不能阻挡细菌的建群。
用不同的清洁方法对从2周到16个月大的婴儿进行皮肤清洁处理的 结果进行了评估(Dermatology 1997；195，258)。对比各平行的处理组(每 组7到10名婴儿)分别只用水，一种合成的脂质清洁剂，一种合成的棒 状清洁剂，一种脂肪酸肥皂洗澡一次。测试清洁前和清洁完10分钟后的 皮肤的pH值，水合作用，和表面脂质含量。4种处理后的婴儿皮肤的pH 值比开始都有所升高，只用水清洁的结果是pH值升高的最少，使用肥皂 的结果是pH值升高的最多。用三种清洁剂比只用水清洁后的pH值明显 高出很多，用脂肪酸肥皂比用合成的脂质或棒状清洁剂清洁后的pH值明 显高出很多。作者指出洗澡用的自来水是碱性的(pH7.8-8.2)，但认为是 洗涤导致保湿因子中水溶性氨基酸丢失，从而引起pH值升高。洗澡或是 用清洁产品对皮肤的水合作用的影响没有发现什么不同。这个发现却与 另一个研究报告得到的结果不同，这个研究报道了洗澡以后皮肤的水合 作用减弱，但是在后一研究中，洗澡的时间比以前缩短了(10分钟VS 15 分钟)，婴儿的个头更小了，且年龄范围不同(3-6个月VS 2周-16个月)。 另一个研究确定了给一组大于2周的婴儿用一种基于乳清的产品 (Schweiz Rurdsch，Med.Prax 1998；87，617)洗澡后的效果，水合作用，pH 值和红斑都有降低和减少，但变化在统计学上不是非常明显。
根据先前皮肤的状况或其它环境因素能进一步加剧水和表面活性物 质的作用。在正常的和有遗传性过敏症(有过敏反应，例如，发烧，哮喘， 特应性皮炎)的被测试者之间，评估了用清洁剂清洗对角质层的影响和对 表皮层厚度的影响。肥皂减少了患有遗传性过敏症被试者的细胞层的数 量，而正常的人则没有出现这样的情况，说明有遗传性过敏症的个体对 清洁剂的易感性增加。
将用表面活性物质清洗和降低环境的湿度的结合也进行了探讨。在 成年人中，在绝对湿度减小的情况下，由于重复暴露在水和/或表面活性 物质中，造成了皮炎的加剧。与住在正常或高湿度环境下的动物相比， 短时间(2天)暴露在低温度环境的动物，在接触表面活性物质(SDS)之 后，显示出表皮层的增殖。此外，使动物暴露在高湿度的环境下2周， 受表面活性物质的影响，表皮细胞的增殖比在低湿度或正常环境下暴露2 周的动物快的多。这说明在极端湿度条件下水和表面活性物质对婴儿或 新生儿的影响更大。
早产新生儿的表皮屏障特性很差且易感性强，易受损伤。这些因素 及早产新生儿整体医学上的不稳定性，必须要通过练习来平衡，例如洗 澡，以减少被感染的危险。一项在一组早产新生儿中的研究考查了减少 洗澡频率对皮肤病原体建群的影响。在洗澡后的第2，3，或4天没有发 现皮肤菌群的变化(J obstet，Gynicol Neonatal Nurs 1999；29，584)。减少早 产新生儿的洗澡频率一直并且仍然被认为是新生儿护理的一个护理标准 而推荐使用(J obstet，Gynicol Neonatal Nurs 1999；28，241)。在一组10个被 试者中调查了洗澡对非足月婴儿生理和行为的特殊影响，观察洗澡前十 分钟，中间，和洗澡后10分钟被测试者的反应，显示出心率明显加快， 需氧量增加且身体运动增多，伴随有氧饱和度的明显下降。
与足月婴儿比较，由于未成熟的表皮屏障，非足月婴儿甚至直到真 皮都是易感的。含有3％的六氯酚的清洁产品曾经用作清洗早产新生儿全 身的清洁剂，但是随后对六氯酚的作用评估显示空泡脑病(vacuolar encephalopathy)与使用六氯酚中有关。所以对此类人群含有六氯酚的产 品已不再使用。通过对病原体细菌控制进行测试后，提出了一些替代品， 包括Lactacyd(一种烷基硫酸酯表面活性物质)和Hibitane(双氯苯双胍己 烷)。然而随后对Lactacyd的评估显示出它使表皮水分减少加剧且对早产 新生儿是不适用的，同时发现双氯苯双胍己烷对培养基中的纤维原细胞 和角化细胞是一种细胞毒素。所以它对于早产新生儿也是不适宜的。
因此，局部应用于早产新生儿的产品，包括表面活性物质，清洁剂， 灭菌剂等，一定要慎重考虑。对婴儿产生影响的因素包括角质层的厚度 和完整度，表面残留物的量，残留物质本身的刺激，以及通过角质层的 分布系数。在出生后相对干燥的环境的影响下，尽管胎儿出生后的角质 层的生长速度很快，但在出生几周内它的屏障的功能还不能完全发挥作 用，而且外界的物质更容易渗透进来。特别是，洗澡时对皮肤表面的冲 洗被最简化，其结果是，残留物质留在了皮肤表面。
角质层，在皮肤的最外层，由于脱落的过程而不断进行自我清洁。 胎儿在子宫里的第三个月，在机械压力和肺部的表面活性物质的影响下， 胎脂逐渐从皮肤上分离开，形成混浊的羊水。当婴儿出生的时候，残留 在皮肤上的胎脂在新生婴儿与消毒环境之间形成了物理接触面。
商品化的清洁产品中的大多数表面活性物质与屏障相互作用并且能 改变表皮屏障，这被在体外体统的众多研究中证明。为了确定这种处理 方法对早产新生儿潜在的影响，对比考察婴儿皮肤和成人皮肤对这种处 理方法的反应是有益的。例如，与成人相比，婴儿具有更大的身体面积 与体重的比值，并且按比例吸收量也较大。组织的分布依赖于年龄，且 组织间的关系在婴儿与成年人之间是不同的，这就导致了不同的综合结 果。
因此，需要确定能够用于易受损伤的皮肤及正常皮肤方法和组合物， 所述易受损伤的皮肤如可以是具有未完全发育好表皮屏障结构的早产儿 的易损伤的皮肤。
发明简述
本发明的一个实施方式是一种分散于脂质基质中的水合的合成细胞 (hydrated synthetic cells)(例如立方体液晶纳米颗粒(cubosomes)，聚合体 (polymersomes)，胶质体(colloidosomes))的模拟胎脂组合物(simulated vernix composition)。另一个实施方式是含有分散于脂质基质中的水合的 合成细胞和蛋白质(例如，角蛋白，聚角蛋白微丝蛋白，表皮生长因子， 与表面活性物质相关蛋白-A、-B、-D，天然保湿因子肽)的模拟胎儿组 合物。脂质基质可以包含胆固醇，胆固醇酯，神经酰胺，甘油三酯，脂 肪酸，磷脂，蜡酯，蜡二酯，和/或鲨烯。所述脂质的组分占整个组合物 的大约5％重量到大约30％重量。蛋白质，如果存在，其占整个组合物的 大约0.1％重量到大约30％重量。
另一实施方式是使用一种生理学相容性组合物处理皮肤的方法，该 组合物含有分散于脂质基质中的大量的水合的合成细胞，该组合物的量 足以有效处理皮肤。该方法可以用于完好的或受损的皮肤，以引起，例 如，皮肤的生长、使皮肤成熟、或用于伤口或溃疡使之愈合，或提供一 种屏障，例如，可用于正常的、皲裂的、或受到刺激的皮肤，以提供防 水或保湿的功能。
另一实施方式是一种仪器，它包括一种接触皮肤表面的装置(例如， 一种附垫、绷带、敷料等)，该装置载有一种药物组合物，该药物组合物 包含存在于脂质基质中的水合的合成细胞。
其它的实施方式是一种组合物及通过提供一种有效量的生理学相容 性组合物处理皮肤的方法，该组合物包含存在于脂质基质中的水合的合 成细胞，将有效量的这样的组合物施用于皮肤表面足以产生不同的物理 特性，例如约20达因/厘米的最小自由能；大约18.0到大约24.7的苯甲 醇接触角，大约30.0到大约38.3的二碘甲烷接触角，大约71.9到大约 76.5的甘油接触角，以及大约82.7到大约84.3的水接触角；大约38达 因/厘米到大约41达因/厘米的临界表面张力；临界表面张力大于36达因 /厘米；或其量足以使得该组合物作为半透膜起到修复屏障的作用。
另一实施方式是一种使用天然或合成胎脂，或使用一种模拟的胎脂 组合物，去除皮肤表面污物的方法。该组合物用于被污物污染的表面， 然后将该组合物随污物一起去除。所述的方法可以用于早产的或足月出 生的婴儿，儿童，成年人，老年病人，且该组合物可用于完整的或受损 的表面，例如伤口或溃疡。这种方法可使用包含皂剂和/或表面活性物质 的胎脂组合物。
另一实施方式是一种在婴儿(足月的或早产新生儿)出生后立即用 一种组合物清洁全身或部分身体的方法，该组合物含有分离的胎脂，通 过去除该组合物，可去除羊水，内生皮脂，胎尿、血液和其它液体。
另一实施方式是一种在能乳化胎脂中的污物的条件下，通过施用一 种基本上由分离的、生理学相容性胎脂组成的组合物，清洁有污物的皮 肤表面，然后去除该胎脂和乳化的污染物的方法。所用胎脂的量可以高 达大约16mg/cm2。
另一实施方式是一种将无毒薄膜清洁皮肤用于上皮细胞层以达到皮 肤清洁效果的方法，所述膜的厚度可厚达16mg/cm2，并基本上由分离的、 生理学相容性胎脂组成。可以直接或间接将该膜用于所述的表面，例如， 可将其用于毛巾，抹布，绷带，衬垫等。另一实施方式是一种通过使用 无毒薄膜清洁上皮细胞层然后从清洁的组织上去除该膜的方法，所述膜 的厚度最高可达16mg/cm2，并基本上是由分离的、生理学相容性胎脂组 成。
另一实施方式是一种保护可能对商品化的清洁产品敏感的个体(例 如，对一些商品化的肥皂或清洁剂过敏的人)的皮肤的方法。在该方法中， 在将皮肤暴露于这些商购产品之前，将一种基本上是由分离的、生理学 相容性胎脂组成的组合物用于这些个体的皮肤表面，所用的量最高可达 16mg/cm2。
另一实施方式是在能使污物在皮肤表面絮凝并从皮肤表面脱落的条 件下，通过使用一种分离的生理学相容性胎脂和至少一种皂剂或表面活 性物质，从皮肤表面去除污物的方法，
通过下面详细描述、附图和实施例将对本发明做进一步说明。
附图说明
图1A，1B，和1C是手部皮肤的数码照片，其或者是没有污物的(图 1A)，或者是在被施加污物之后的(图1B)，或者是在将胎脂(图1C)用 于有污物的区域后的照片。
图2A，2B，2C和2D是掌面前臂皮肤的数码照片，其或者是没有污 物的(图2A)，或者是在被施加污物之后的(图2B)，或者是在将胎脂(图 2C)或一种化学皂剂(图2D)用于有污物的区域后的照片。
图3A，3B，3C，和3D是定量皮肤表面的污物的量柱状图，没有污 染的(基线)，被污物污染的，和用Aquaphor(图3A)，商购清洁剂(图 3B和3C)，或胎脂(图3D)清洁护理后。
图4A，4B，4C，和4D是在被污物污染之前和用Aquaphor(图4A)， 商购清洁剂(图4B和4C)，或胎脂(图4D)清洁后的数码照片。
图5示出在用不同的处理方法清洁之前和之后的L-Scale积分的不 同。
图6是以先前的一幅代表性数码照片转换的黑白照片副本。
图7是显示胎脂在有表面活性物质存在的情况下从体外皮肤上分离 的曲线图。图7B是显示胎脂在有表面活性物质存在的情况下随着胎脂薄 膜厚度的增加而从体外皮肤上分离的柱状图。
详细描述
一种无毒的模拟胎脂的组合物，该组合物包含一种模拟细胞成分和 至少一种脂质成分。在一个具体的实施方案中，所述组合物包含至少一 种蛋白质组分。所述组合物提供了天然胎脂的屏障作用和水合功能，但 是减弱或消除了免疫应答。
这里所用的天然胎脂，包括从新生儿身上获得的胎脂，以及经过加 工而易于处理的从新生儿身上获得的胎脂，如美国专利5989577； 6113932；6333041和美国专利申请09/850844；10/241184；和60/377430 所描述的，每一个专利在这里作为参考引用。这里所述的免疫应答定义 为免疫系统引起的生理，生物化学的，和/或分子的变化，例如非自身的 蛋白质对个体引发的刺激，这样的免疫应答症状或者是亚临床的或者是 临床的。这里所述的减弱的免疫应答是降低或减弱免疫应答的种类，范 围，持续时间，严重程度等中的任何一种。这里所述的蛋白质也包含肽 和单个氨基酸。
在本发明的组合物中，天然胎脂的细胞成分被具有细胞水合功能的 合成结构所替代。这些结构可以被称为“模拟细胞”或“合成细胞”。这 种模拟细胞以小颗粒形式被混入脂质基质中。这种脂质基质包含至少一 种可商购的存在于天然胎脂中的脂质。可溶于水的蛋白质组分在水中， 其与模拟细胞组分双相连续。具体地说，存在有蛋白质的地方就提供了 基于蛋白质的在天然胎脂中的天然细胞的作用。这种蛋白质组分可以是 商品化的蛋白质，重组的蛋白质，合成的蛋白质等。蛋白质可以是一种 或多种角蛋白，聚角蛋白微丝蛋白，表皮生长因子，与表面活性物质相 关蛋白A、B、和/或D，和天然保湿因子肽(NMF)。还可以包含透明质 酸。蛋白质可以源自非天然胎脂来源的表皮。
模拟细胞分散于至少一种脂质基质中。任何一种或下述的全部脂质 都可使用，每一种脂质都以所示浓度存在于天然胎脂中，且每一种脂质 都是可以商购的：胆固醇酯，神经酰胺，甘油三酯，胆固醇，游离脂肪 酸，磷脂，蜡酯，鲨烯，蜡二酯，和胆固醇硫酸酯。
在一个实施方案中，模拟胎脂的脂质成分为大约5％到大约30％，且 模拟胎脂的蛋白质组分为大约5％到大约30％，剩余的浓度由模拟细胞/ 水组成。在另外一个实施方案中，脂质组分的范围为大约5％到大约30％， 且蛋白质的组分可达大约30％。脂质和蛋白质组分的绝对浓度是可变的， 以至于水被慢慢释放并且通过获得水分来保持水合作用。一种或多种脂 质成分的浓度一般是在一定范围内的，如所提供的模拟胎脂的脂质组分 范围是5％到30％，精确浓度并不关键：
胆固醇酯 大约20％到大约35％
神经酰胺 大约10％到大约20％
甘油三酯 大约10％到大约20％
胆固醇 大约5％到大约10％
游离脂肪酸 大约5％到大约10％
磷脂 大约5％到大约10％
蜡酯 大约2％到大约8％
鲨烯 大约0.5％到大约5％
蜡二酯 大约0.5％到大约6％
胆固醇硫酸酯 大约0.1％到大约3％
组合物的脂质相的组成可以变化，以提供期望的最终组合物所具有 的分散特性和粘度。例如，与蜡含量相对较低相比，含有相对高含量的 蜡将会产生低的分散性和高粘度的组合物；与相对较低含量的脂肪酸和/ 或甘油三酯相比，含有相对高含量的游离脂肪酸和/或甘油三酯将得到更 易分散的低粘度的组合物。
天然胎脂的蛋白质成分是通过一种或多种由除了天然胎脂外的一种 来源的蛋白质而提供的。例如，所述蛋白质可以通过采用本领域熟练技 术人员所公知的标准合成技术合成。所述蛋白质也可以通过采用本领域 熟练技术人员所公知的分子重组技术制备。所述蛋白质还可以商购获得， 例如自Sigma公司购得。因此，本发明所述组合物中的蛋白质组分可以 从除了天然胎脂外的任何来源获得；所述的蛋白质组分可实际包含一种 或多种来自天然来源的蛋白质。如一个实施例所述，可自培养非源自胎 脂的哺乳动物细胞，以此作为一种蛋白质组分的来源。另一实施例，非 人类的、非动物的细胞材料可以用于作为一种蛋白质组分的来源。另一 实施例，表面活性物质蛋白D可以从牛肺中获得并且可以用于作为一种 蛋白质组分的来源。另一实施例，角蛋白可以从动物和人类的头发，皮 毛等中提取且可以用于作为一种蛋白质组分的来源。
在本发明所述的组合物中，天然胎脂的细胞组分被一种能行使天然 胎脂中的细胞的功能的模拟细胞所代替。这种“细胞”组分(在这里也可 以称为模拟细胞)水合本发明组合物所应用的一种皮肤表面。这种水合是 通过释放水分且通过水分蒸发转移，像天然胎脂细胞那样。这种组合物 可以是内源性地行使这样的水合功能，或所述的组合物可以是遗传工程 化的、改良的等等，来实施这样的水合功能。要代替天然胎脂的细胞组 分，可以用任何在脂质环境中具有控制保留和释放水分能力的分散颗粒 来替代。
外源性制剂，例如水或者其它制剂，与天然的胎脂的作用和胎脂的 非极性组分(分散性的)和极性组分(无分散性的)及胎脂的临界面张力 (CST)相关联。水具有相对高的CST(72达因/厘米)。胎脂的疏水性(例 如，相对低的CST)是不曾预料到的，因为大约80％重量的天然胎脂是 水分。胎脂的非极性组分(脂质)基本上高于极性组分(由蛋白质组成的 细胞)，且使胎脂拥有疏水性，这是因为脂质是包围与水相关的细胞组分 的一个连续相。与所公知的疏水材料和皮肤保护剂矿脂(petrolatum)(其 具有极高的非极性成分)相比，天然胎脂中的非极性成分仅稍微低一些。 此外，胎脂和矿脂的CST是相当的。结果是，将胎脂用于表面例如皮肤， 无论是完好的皮肤或是受损的皮肤(例如，伤口，擦伤，切伤，刺破)， 胎脂保护了表面以使皮肤不接触到水。
胎脂具有的低CST产生的一种结果是胎脂与疏水性液体间几乎不会 发生相互作用。例如，应该可以预期，用胎脂处理的表面(这些表面的例 子可以是皮肤或施加了胎脂的一种基质)与该表面所暴露的一种外生的 疏水性液体中(例如水，盐，尿等)之间几乎没有相互作用。胎脂的低 CST赋予了胎脂对这些液体的疏水特性，因此，胎脂可作为一种保护剂 而抵制这些液体影响。
天然胎脂中的水结合于细胞中，且细胞是包埋在脂质材料中的，因 此，脂质组分为胎脂提供了这种环境。但是，如果脂质成分通过与疏水 剂接触被部分或全部去除，那么富含水的部分，例如细胞，会暴露在这 种环境中。本发明所述的模拟细胞组合物可以通过控制调节得到高的极 性组分来屏蔽非极性组分。这种组合物保护了非极性材料，即使在疏水 性脂质组分通过与环境的交互作用而被改性。
天然胎脂保护正在生长的皮肤免受有害物质的影响，例如在妊娠阶 段子宫内的水、尿和粪。本发明所述的组合物可以被应用于任何生物学 表面，大约40达因/厘米的表面能量对抵制外源性试剂是有益的。因此， 模拟胎脂的有效量是获得大约40达因/厘米的表面自由能，最小值是大约 20达因/厘米。例如，将有效量的本发明所述的组合物覆于尿布以保护皮 肤免受排泄物的刺激。粪便包含蛋白酶和脂肪酶，它们能通过接触皮肤 而损伤皮肤的表面。通过应用本发明所述的组合物而降低这些皮肤表皮 的表面能量以保护皮肤不接触含水的粪便。
可以用于本发明的组合物中的模拟细胞的例子，包含但并不限于立 方体液晶纳米颗粒，磷脂脂质体，纳米颗粒，微颗粒，胶质体，非磷脂 脂质体(Catezomes)，培养细胞等。这些物质中的每一种都可以被装载 于亲水分子中以提高它的水合作用。亲水分子包含但并不限制于甘油， 乳酸，吡咯烷酮羧酸(pyrrolidone carboxylic acid)，尿刊酸(urocanic acid) 和之前所定义的蛋白质，还包括氨基酸例如NMF。这些物质中的每一种 还可以包含透明质酸作为额外的水结合剂并且控制所述组合物的粘度。
双连续立方体相液晶(cubosomes)可用于本发明。立方体液晶纳米 颗粒是一种具有控释性能的立方体相液晶的分散的纳米结构颗粒。表面 活性物质聚集成双分子层，该双分子层呈螺旋状形成一种周期性的、三 维周期性最小表面，并形成具有水和脂质双连续结构域的一种“蜂巢状” 的紧密压缩的结构。
三种双连续脂质晶体结构是常见的：Pn3m(D-表面)和Ia3d(G-表面) 和Im3m(P-表面)。这些结构可以用结表面(nodal surface)这个名词来描 述。尽管广泛用于构建双连续立方体相的脂质是甘油单油酸酯 (monoolein)，但是双连续立方体相被发现存在于天然脂质中，阴离子和 阳离子的表面活性物质，和聚合体系统中的。根据Qiu和Caffrey生物材 料21；223(1999)的图表，在这里特别引用作为参考，在添加水的基础 上，甘油三酯自发形成双连续立方体相，相对是不可溶的(可形成立方体 液晶纳米颗粒的胶体分散配品)，且可抵抗温度的变化。
活性物可以通过直接添加到熔融的脂质或水中(例如，在水合之前)， 或通过扩散进已形成的结构中而装载。这种结构一般能保持活性物的功 效且可以帮助稳固活性物，例如维生素和蛋白质。装载可溶脂质活性物 的典型上限是10wt％(与立方体相有关)，它是通过添加而引起的立方体 相结构的减少而控制的。所述的活性物可被控制分布，扩散的地方是通 过将活性物穿过立方体相的“规则的”通道结构的弯曲的扩散而控制的。
立方体液晶纳米颗粒是热稳定的，并且如果没有液体的水解作用发 生，还可以无限期保持这种稳定性。立方体液晶纳米颗粒的胶状扩散可 以通过添加聚合物而稳固。立方体液晶纳米颗粒是一种由甘油的长链饱 和脂肪酸酯和水构成的，典型的甘油的长链饱和脂肪酸如可以是甘油单 油酸酯。甘油单油酸酯/水的比例是可以变化的，例如，60/40，65/35，70/30， 75/25，等，因此可以产生一种立方体液晶纳米颗粒相。例如，如果所述 的组合物包含20％的脂质和5％的蛋白质，立方体液晶纳米颗粒/水的组 分将占整个组合物的75％。因此，总组合物中脂质的浓度不包含立方体 液晶纳米颗粒中的单甘油浓度。一种含60％甘油单油酸酯(C17)含40％ 水凝胶的立方体液晶纳米颗粒可以被制备出来。立方体液晶纳米颗粒可 以根据在Langmuir 17；5748(2001)中提供的方法，通过成核作用来制备， 该文献在这里作为参考引用。
第一种构建和稳固立方体液晶纳米颗粒的方法包括将大量立方体液 晶材料以高剪切力分散成亚微米颗粒。第二种方法包括将以最小的输入 能将两种水溶液的简单混合。这种方法使得立方体液晶纳米颗粒比通过 第一种方法制备的立方体液晶纳米颗粒更小且更稳固。将用作立方体液 晶且基本上不溶于水的甘油单油酸酯，与能溶解脂质的助水溶物混合， 形成一种具有较低溶解度的似水溶液。只要稀释曲线(使用甘油单油酸酯 -乙醇-水相图)落于立方体相水可混溶的区间，即可自然形成立方体液晶 纳米颗粒。除了甘油单油酸酯以外，还可以使用任何在稀释时能形成立 方体液晶的脂质和助水溶物的组合。活性物和稳固剂可以加入到脂质和/ 或助水溶物中，得到胶状稳定的可控制释放的分散体系。第三种喷雾干 燥的方法用可以生产出干粉状立方体液晶纳米颗粒前体。通过对一种淀 粉水溶液中的立方体液晶颗粒的分散制品进行喷雾干燥，可以生产出淀 粉包囊化的甘油单油酸酯。通过将一种由乙醇-右旋糖苷-甘油单油酸酯- 水系统形成的乳状物进行喷雾干燥可以制备出右旋糖苷包囊化的甘油单 油酸酯颗粒。淀粉和右旋糖苷降低了干燥过程中粉末的粘合性，并且充 当粉末水合作用的可溶性胶体稳定剂。在加水后两种粉末均形成平均大 小为0.6μm的稳定的胶体颗粒状立方体液晶纳米颗粒。这种方法使得立 方体液晶纳米颗粒的表面状态能制作成适于特殊用途。例如，立方体液 晶纳米颗粒能够被装载于表面活性物质蛋白中以提供抗氧化剂和抗感染 剂的性能。
像前面所陈述的，其它类型的载体可以被用于作为模拟细胞。磷脂 脂质体可以包囊化水分，且任选地，还可以包囊化可溶于水的组分。它 们可以被用聚乙二醇(polyethylene glycol(PEG))包埋来进一步提高它 们的亲水特性。
纳米颗粒也可以被应用，例如，一种颗粒直径在500nm到750nm范 围内的聚乙烯醇(polyvinyl alcohol)水凝胶；一种聚-N-异丙基丙稀酰胺 水凝胶(50nm-1μm)；一种聚(环氧乙烷)-聚-(L-乳酸)的共聚物 (copolymer of poly(ethylene oxide)-poly(L-lactic acid))；或由聚(环氧乙烷) 包被的聚(L-乳酸)。
微颗粒也可以被应用，例如，聚(乳酸-共-乙交酯)和颗粒直径在 400nm到600nm范围内的PEG-右旋糖苷缀合物。还可以使用一种包囊化 水的脂质多层。
胶质体(Colloidosomes)也可以被应用。胶质体是微米大小的球形外 形的胶体颗粒，当胶体颗粒被引入乳状液滴模板中时胶体颗粒形成。它 们会自发聚集在滴状乳液的表面以通过消除界面部分而使总的界面能量 最小化。当有很多自发聚集的颗粒时，就形成了六折两维空间的晶体结 构。胶质体也可以有选择通透性，允许亚微米颗粒弥散进入，但是排除 了比较大的微米大小的颗粒。它们也可以制备为具有对不同大小的颗粒 的选择通透性。
非磷脂的脂质体(Catezomes，Collaborative Laboratories，Inc.East Setauket NY)包括的脂肪酸季胺盐也可以被应用。它们的结构允许亲水 的和疏水的两种材料的结合，因为分子与盐的结合部分是亲水的而分子 的烷基链部分是疏水的。包囊化材料的释放是通过在施用于皮肤时调节 周围环境的离子浓度而控制的。
培养的细胞也可以被应用。细胞可以被崩解(使用化学或机械的崩解 方法)，遗传工程化，装载亲水分子等。这些结构的任一结构都可以包含 透明质酸，其可控制粘度并进一步添加水结合剂。
在一个具体实施方式中，本发明所述的组合物可覆于一种液体形式 的生理学相容性的支持结构来形成一种薄膜。它以滴状形态而存在，当 遇到这种支持结构时形成薄膜。这种薄膜在这里被定义为一种界面表面 覆盖物，以液体或固体的形态存在，具有依赖温度的特性。成膜技术包 括但并不限制于喷雾，挤压，吹制(blowing)，灌注，蒸发，涂覆和涂漆。
在一个可选择的实施方案中，本发明组合物的一个成品薄膜是用于 一种生理学相容性支持物。这种生理学相容性支持物是一种能承受灭菌 作用的支持物，优选采用本领域熟练技术人员所公知的标准灭菌技术， 例如暴露在γ射线中，高温高压等等。所述的支持物不限制于特殊的组 合物或结构，取决于上面所述的用途，是否需要灭菌，且可以用不同的 方式。在一个具体实施方式中，这种薄膜被用于促进细胞的成熟并可以 应用于如滤膜，膜，珠状物，颗粒等结构。同样地，这种支持结构不限 制物质的特殊形态，可以是固体，半固体，胶体等。在一个具体实施方 式中，这种支持结构包括一种尼龙单纤维内置平面材料，例如分界面衬 垫(Winfield Laboratories，Inc Dallas TX)，Biobrane II(Sterling Drug Inc.， 纽约NY)或多孔的环形尼龙滤膜(Micro Separations Inc.，Westboro MA)。其它支持材料，也可以应用于本发明。
在另外一个具体实施方案中，本发明所述组合物的薄膜被用于促进 伤口的愈合和/或组织的修复。它可以被应用于实施在通过直接接触或间 接接触完好的或受损的皮肤处，例如伤口，擦伤，溃疡，烧伤区域，感 染处或痛处，疣等的各种材料。这种支持物可以渗透物理和/或化学剂， 并且具有形式的多样性，取决于它的目的和需要涂覆和处理的区域范围。 这种薄膜可以被用于各种各样的合成材料例如热塑性薄膜，吹气薄膜和 呼吸薄膜，和各种天然和合成的织品组合物例如织物，非织物，织品和 缝合织品。本发明可以被用于各种产品，实例包括包裹和覆盖伤口的产 品例如绷带，线带，纱布，胶布产品，所述产品将短期或长期用于皮肤， 造瘘术护理衬垫，医用衬垫例如失禁护理用衬垫，吸收性衬垫，和检查 用衬垫，可随意使用的衬垫和尿布，及女性卫生用品例如内用物 (intralabial devices)。
本发明所述的组合物可以被用于医疗上以促进皮肤生长，皮肤成熟， 形成皮肤的屏障，伤口愈合，恢复皮肤弹性和组织修复。它还可以被用 于作为一种促进皮肤形成屏障的皮肤保护剂，皮肤保湿剂，和皮肤弹性 剂。
本发明所述的组合物总体来说具有中性pH值。所述的模拟细胞组合 物和/或添加的氨基酸具有常规的酸性pH值。本发明所述的组合物具有 一种粘性特征，一种流变学特征，具有通透性，和蒸发的水分的传输的 特性，这些基本上与天然胎脂类似。
根据美国专利申请09/850,844的记载，在这里可合并作为一个整体 参考，刚出生婴儿的和7周大婴儿的胎脂的接触角(度)数据和可控的矿 脂数据如下： 新鲜的胎脂 7周大婴儿的胎脂 矿脂 角度 SD 角度 SD 角度 SD 苯甲醇 21.8 2.9 19.6 1.6 34.4 3.0 二碘甲烷 36.2 2.1 31.8 1.8 38.4 2.2 甘油 74.3 1.9 74.2 2.3 79.1 2.1 水 83.5 0.8 -- -- -- --
本发明所述的组合物含有占整个组合物约5％到大约30％的蛋白质 组分，占整个组合物约5％到大约30％的脂质组分，和占由剩余量的水/ 模拟细胞组分，该组合物提供了模拟天然胎脂的上述制剂的接触角。特 别地，所述的组合物使皮肤表面苯甲醇接触角在大约18.0到大约24.7； 二碘甲烷接触角在大约30.0到大约38.3；甘油接触角在大约71.9到大约 76.5；以及水接触角在大约82.7到大约84.3。
根据美国专利申请09/850,844的记载，确定了新鲜胎脂和7周大婴 儿的胎脂的临界表面张力(CST)，连同矿脂的控制一起被确定。结果如 下表： CST(dyne/cm) 新鲜胎脂(动态θ) 40.47 新鲜胎脂(静态θ) 38.65 7周大婴儿的胎脂(静态θ) 39.80 矿脂(静态θ) 35.79
用于皮肤表面合成的胎脂提供了大约38达因/厘米到41达因/厘米的 CST值且CST至少要大于36达因/厘米。
CST是一种“吸湿性指数”而确定对于需要在一种质粒材料表面完 全分散的(即，零度接触角)溶液的表面张力的最小值。任何一种液体的 表面张力等于或小于CST将使得接触角为0(θ＝0，Cosθ＝1)，且将完全 分散在其表面，当任何液体的表面张力大于CST时将形成有限的接触角 的液滴。
本发明所述组合物含有蛋白质组分，其含量占整个组合物的大约5％ 到大约30％，脂质组分，其含量占整个组合物的大约5％到大约30％，和 水/模拟细胞组分，占总组合物的剩余量，得到了一种具有模拟胎脂特性 的CST的组合物。
根据美国专利申请09/850.844的记载，新鲜胎脂极性组分的表面自 由能是1.48达因/厘米，矿脂几乎没有极性SFE(0.03达因/厘米)，即非极 性。胎脂中的非极性组分稍微少于矿脂，矿脂含有非常低的极性组分。
本发明所述组合物含有蛋白质组分，其含量占整个组合物的大约5％ 到大约30％，脂质组分，其含量占整个组合物的大约5％到大约30％，和 水/模拟细胞组分，占总组合物的剩余量，得到了一种具有模拟胎脂特性 的SFE的组合物。
根据美国专利申请09/850.844的记载，天然胎脂提供了屏障的特性， 其在例如Vigilon，Exxaire，Silon，和Flexzan等半透膜范围内，并提供 了中等水平的水合作用。与或高或低水平的水合作用相比，中等水平的 水合作用提供了更适宜的进行屏障修复的环境。
本发明所述的组合物因此具有模拟胎脂的屏障特性。
本发明将进一步以下述参考实施例进行描述。
实施例
实施例1
制备甘油单油酸酯和水的立方体液晶纳米颗粒(60％甘油单油酸酯， 40％水)。得到的立方凝胶体进一步进行处理来制备一种较小立方体液晶 纳米颗粒的分散体系。这种颗粒被混合进胆固醇酯(大约20％到大约 35％)，神经酰胺(大约10％到大约20％)，甘油三酯(大约10％到大约 20％)，胆固醇(大约5％到大约10％)，FFA(大约5％到大约10％)，磷脂(大 约5％到大约10％)，蜡酯(大约2％到大约8％)，鲨烯(大约0.5％到大约 5％)，蜡二酯(大约0.5％到大约6％)，和胆固醇硫酸酯(大约0.1％到大 约3％)的脂质相。立方体液晶纳米颗粒的水相可以装载亲水分子(甘油， 乳酸，吡咯烷酮羧酸，尿刊酸，氨基酸)以提供结合水的材料的来源。
实施例2
合成的胎脂组合物是按照实施例1所述用长链的饱和脂肪酸的油酸 甘油单酯的立方体液晶纳米颗粒制备的。
实施例3
合成的胎脂组合物是按照实施例1所述用方法制备，不同的是用磷 脂脂质体，非磷脂脂质体，胶体，纳米颗粒，或微颗粒代替立方体液晶 纳米颗粒。
脂质体可以是单或多脂质层以包囊化水，且在外面附上一层聚乙二 醇体以给体系中供应额外的水。水相也可以包括可溶于水的组分。纳米 颗粒可以是聚乙烯醇水凝胶，颗粒直径为大约500nm到大约750nm。纳 米颗粒也可以是聚-N-异丙基丙稀酰胺(pNIP Am)水凝胶；这些是颗粒直 径大小在50nm到1μm的单分散性的水凝胶颗粒。此外，纳米颗粒可作 为一种聚合物体系，可以是聚(环氧乙烷)-聚(L-乳酸)。聚(L-乳酸)的纳米 颗粒可以外包有聚环氧乙烷。微球体可以是颗粒直径为大约400nm到大 约600nm，包含有添加了聚乙二醇右旋糖苷缀合物的聚(丙交酯-共-乙交 酯)。微球体可以包囊化其中已经加入了脂质多层的水。
实施例4
合成的胎脂组合物可以通过实施例1-3的任何一个实施例所述，用添 加的透明质酸提供的额外的结合水的材料而制备，并且可以控制该组合 物的粘度。
实施例5
具有控释特性的立方体液晶纳米颗粒的制备如J.Colloid Interface Science(2003待发表)所描述，不同在于以天然保湿因子(NMF)替代了 酮洛芬。
将大约0.5g甘油单油酸酯在1000ml的圆柱形玻璃器皿中融化。将表 面活性物质和NMF溶入融化物中。充足量的缓冲剂被加入到甘油单油酸 酯中以形成立方体相液晶。一旦成形，再将50ml的缓冲剂加入到该容器 中。在液态晶体上方用搅拌器快速搅拌溶液。这种排列具有单向扩散特 征，以NMF通过凝胶体的扩散作为限制速率的步骤。少量的缓冲剂被周 期性的去除，且NMF的浓度是通过在紫外光/可见波长光的分光光度分 析来测定的。
实施例6
本发明的所装载的固体脂质纳米颗粒是通过用Eur.J.Pharmaceutics Biopharm 49(2000)211的方法制备的，此方法在这里特别引用作为参考， 除了用NMF替代维生素A。
固体脂质纳米颗粒和纳米乳液是用5％的NMF(相对于所述的脂质) 制备的。将甘油单油酸酯在85℃被融化，然后加入NMF。热的脂质相被 分散于表面活性物质溶液中且使用一种ultra turrax(IKA，Sthfen德国)而 形成一种预混合料。将该预混合料通过一种Lab 60高压匀浆器(APV Gaulin Lubeck德国)。在85℃和500bar压力下进行两个循环。纳米乳液 是用同样的方法制备的，除了用Miglyol 812替代甘油单油酸酯。在纳米 颗粒或纳米乳液中，NMF的最终浓度是0.5％。
实施例7
聚合体(polymersomes)，如Discher等人在科学(2003待发)上的文 章中所描述的，特别引用在这里可作为参考，是由双二嵌段共聚物 (amphilic diblock copolymers)制得的。这些聚合物可以是聚环氧乙烷-聚 乙烯-乙烯(EO40-EE37)。膜对于水的通透性至少要比脂质体的磷脂双分子 层的通透性低十倍，且其被用以提供天然胎脂的水份处理特征，尤其是， 调节蒸发的水分的传输和失水速率。
实施例8
没有表面活性物质的聚(DL-丙交酯-共-乙交酯)(PLGA)纳米颗粒是 采用如J.App.Polymer Sci.80(2001)2228所描述的透析方法制备的，在 这里特别引用作为参考。PLGA纳米颗粒被装载了蛋白质，肽，和/或氨 基酸，例如表皮生长因子、NMF等，和水。
实施例9
聚(谷氨酸)聚(乙二醇)水凝胶(Poly(glutamic acid)poly (ethyleneglycol)hydrogel)是如J.Biomed.Mater.res.62(2002)14所述的方 法制备的，在这里特别引用作为参考。聚(谷氨酸)是聚合物的骨架，而 聚(乙二醇)是交联剂。所述的水凝胶是用光引发的交联化学方法合成的， 且被装载了蛋白质，肽，和/或氨基酸，例如表皮生长因子、NMF等，和 水。
实施例10
用于控释特性的蛋白质被包囊化在聚(丙交酯-联-乙交酯)(PLGA) 内，如自然生物技术18(2002)52所描述的，在这里特别引用作为参考。 为制备PLGA microylinder，将蛋白质如先前所述悬浮在丙酮-PGLA中， 其中含有或不含有碱性盐。悬浮液被装入注射器然后注入硅树脂橡胶管 中。将溶解的被挤压出的悬浮液在室温下干燥然后置于真空环境下。为 制备PLGA微球体，将蛋白质注入10mM磷酸盐缓冲液(pH7.4)，其中 含有或不含有碱性盐，再加入PLGA/CH2CL2溶液，且以10000r.m.p.的 速度混匀，移到2％的聚乙烯醇(PVA)溶液中。一种水包油包水 (water-in-oil-in-water)的乳状液通过搅拌形成了。颗粒在0.5％PVA中变 硬且通过离心收集，洗涤，并冷冻干燥。
实施例11
一种高度多孔渗水的聚乙交酯是用一种固体缩聚反应制备的，如 Macromol.Chem.Phys.200(1999)2221所描述的，在这里特别引用作为参 考。重质氯代醋酸钠(Ground sodium chloroacetate)在连续搅拌下在 160℃或180℃下加热。用水洗涤聚乙交酯以去除残留的氯代醋酸钠然后 生成氯化钠。
应用外源性生理学相容性胎脂从皮肤上去除污物，它的效力在定量 上至少等于，且可能比商品化清洁剂更好。在皮肤表面的胎脂与外源性 清洁剂例如肥皂和/或表面活性物质相互作用，在后来的絮凝和分离过程 中，它的作用与作为一种内源性皮肤清洁剂的胎脂的功能是一致的。这 里所用的皂剂，是一种长链脂肪酸的钠盐混合物，典型的是C12到C18的 脂肪酸。这里所用的表面活性物质，是一种具有表面活性的物质。皂剂 和表面活性物质都是清洁剂。
评价分离的胎脂的清洁方面。在一项研究中，10mg相同的黑碳颗粒 状的污物被涂在正常成年人的掌侧皮肤上(面积＝16cm2)。然后手工涂抹 并去除了大约2mg/cm2的被照射的胎脂或所选择的皮肤清洁剂。污物的 去除是根据光亮度的改变而被量化，使用L-SCALE分析数码照片。另一 研究，胎脂被用于人类的尸体皮肤，皮肤上没有胎脂或胎脂薄膜的厚度 在2mg/cm2到大约16mg/cm2范围内。将皮肤切片置于Franz扩散细胞中 且暴露于0.25％W/V的十二烷基硫酸钠(SLS)溶液中，SLS是一种普通的 表面活性物质被发现存在于肥皂液中。继续浸泡24小时，以分光光度计 方法在600nm测量溶液的混浊度以测量胎脂的絮凝。
胎脂是从足月出生的婴儿表面皮肤收集得到且被储存在4℃下待用。 被血液和/或胎尿、胎粪污染的样本被作为废弃品。成人手部和掌侧前臂 的数码照片用一种皮肤表面分析器被扩大30倍影印下来。通过操作使用 两种不同的照明源能获得从扩大10倍到700倍的数码照片。一种形式是 用正面光源，提供表面皮肤的细节。第二种方式是采用背景散射光照明， 使得光源发生偏振；对于当由于皮肤表面发生镜面反射而干预照片的分 析这是很有用的方式。
对于清洁实验，10mg前述的污物被均匀地涂于事先清洁干净的正常 成年人的手部和掌侧前臂皮肤(面积＝16cm2)。随后将用量为12.5mg/cm2 的制备的清洁组合物手工施加涂有污物的皮肤上并清洁干净，该组合物 为经照射的胎脂，Pond’s Cold CreamTM或Johnson & Johnson Baby WashTM。所有用于手部的按压操作和去除操作都是在常规条件下完成的。 用柯达DCS420C数码相机可获得在涂抹污物之前和之后，和清洁干净之 后的高清晰度的数码照片。
在清洁过程中获得的数码照片通过分析评定出胎脂和两种商购清洁 剂的效力。污物通过以两种方式的照相过程中被量化。一种方式，用Adobe Photoshop L-SCALE分析方法改变光的亮度来量化污物。另一种方式，通 过使用Matlab技术的计算机软件写入一种程序，由此使原始的数码照片 被第一次分割成16个相等大小的区域来区分皮肤的污物和背景之间的特 点。这个过程产生了一种黑白的照片被用于计算被污物覆盖区域的百分 比。在处理组间的对比可以单因素ANOVA进行统计比较。
表1提供了从实验中通过L-SCALE分析和灰度测量分析所得到的具 代表性的数据。对于表面皮肤的评估或者是干净的(处理前)，或者是全 部沾满污物，或者是全部沾满污物且用指定的清洁剂处理的，在用指定 的清洁剂清洁之后评估(Aquaphor，Johnson & Johnson Baby WashTM， Pond’s Cold CreamTM，胎脂，水)，或用酒精清洁后进行评估。
表1
照片 L-SCALE 灰度-SCALE 清洁制剂
平均数 SD 平均数 SD
处理前 192 5 185 6 Aquaphor
全部沾满污物 83 17 77 16
全部沾满污物且处理 65 16 61 14
处理清洁后 174 7 166 8
酒精清洁后 154 7 145 7
处理前 197 5 191 6 Johnson & Johnson Baby WashtnTM
全部沾满污物 129 17 121 17
全部沾满污物且处 54 12 51 10
处理清洁后 182 6 175 7
酒精清洁后 196 4 190 4
处理前 182 5 175 8 Ponds Cold CreamTM
全部沾满污物 108 14 99 14
全部沾满污物且处理 77 19 71 17
处理清洁后 197 5 191 6
处理前 120 5 112 4 胎脂
全部沾满污物 85 18 79 16
全部沾满污物且处理 41 7 40 6
处理清洁后 135 5 126 5
酒精清洁 120 5 112 4
处理前 193 5 187 6 水
全部沾满污物 53 16 50 14
全部沾满污物且处理 96 25 89 23
处理清洁后 183 7 175 7
酒精清洁后 162 7 154 7
图1.A证明了胎脂的清洁能力。手部的数码照片被用一种皮肤表面 分析器扩大30倍而影印下来，如先前所描述的。这副照片是使用皮肤的 正面照明源而得到的。图1.A显示了未被污染的皮肤表面。图1.B显示 了用碳颗粒弄后脏皮肤。碳颗粒残留在皮肤的皱纹和毛孔中，并残留在 汗腺中。图1.C显示了用过胎脂后的有污物的皮肤，由此看来在可见的 皮肤上没有碳颗粒的存在，包括皱纹和毛孔。
图2也证明了胎脂的清洁能力。此图片是在先前描述的相同条件下 获得的，除了掌侧前臂皮肤被用以外，光源穿过皮肤，而不是像以前用 的从上方照射。图2A，2B，和2C分别显示了未被污物污染，被碳污染 的，和用胎脂清洁过的皮肤。图2D显示了用商品化的肥皂液代替胎脂清 洁有污物的手部皮肤的面积。
由得到的掌侧前臂皮肤的L-分值来测定用于皮肤表面的污物的量。 使用Adobe Photoshop L-SCALE分析数码照片来评估成人的掌侧前臂皮 肤。以图3作为参考，收集到用手将污物涂擦在皮肤上之前(基线)，之 后(有污物的)，和清洁之后(干净的)的数据。所述的清洁处理或者 Aquaphor，Johnson & Johnson Baby WashTM，Pond’s Cold CreamTM，或 胎脂。结果在图3A，3B，3C，和3D中显示。这些数据证明了所有所尝 试的清洁剂都使皮肤回到了接近基线的L-SCALE水平。
在下面的数据中显示，当用L-平分数据以比较基线(污染前)和清 洁后的掌侧前臂皮肤，单因素ANOVA没有显示出实验的清洁剂之间的 统计学上的明显不同。
表2
采用单因素ANOVA比较事先涂抹污物的和清洁的皮肤
清洁用品
Pond’s Cold CreamTM Johnson & Johnson Baby WashTM 天然的胎脂
平均值 0.47％ 1.19％ 0.22％
平均值的标准误差(SEM) ±0.08 ±0.15 ±0.03
样本数量(N) 48 48 48
这些数据显示了所有所讨论的清洁剂都可以充分地将皮肤表面清洁 干净。Johnson & Johnson Baby WashTM和Pond’s Cold CreamTM通常用于 清洁皮肤，关于胎脂生物膜的使用先前没有报道。
图4显示了施加污物之前和用四种中的一种清洁剂处理后的数码照 片。Aquaphor(图.4A)，Johnson & Johnson Baby WashTM(图.4B)，Pond’s Cold CreamTM(图.4C)，或胎脂(图.4D)。所得到的照片如图2先前所展 现的一样。对于每一个皮肤处理，清洁后皮肤上的污物是可见的。毛孔 中的污物看起来像小点状的，且汗毛上的污物看起来像分散成条文样的。 通过视觉观察，用胎脂处理过的皮肤显示的是污物被去除得最彻底。
图5从数量上显示了图4的结果，清洁之前和之后，采用的是不同 L-Scale积分。负值表示在皮肤上还残留一些污物，一个很大的负值表示 残留了更多的污物。绝对值表示在清洁程序后皮肤变得干净。每一个皮 肤处理后的近似值如下：Aquapuor-8；Johnson & Johnson Baby Wash+7； Pond’s Cold Cream-1；胎脂＜-0.5；和水-11。这些数据表示水和Aquapuor 的处理使皮肤残留了些污物，稍微有些“脏”；Johnson & Johnson Baby Wash的处理使皮肤“干净一些”；Pond’s Cold Cream和胎脂去除污物的 效果同样好。
覆盖率的测定是清洁效果的另一种比较方法。单因素ANOVA的这 些数据很明显的表明用胎脂清洁后残留的污物量很少，与Johnson & Johnson Baby Wash(p＜0.05)比较，没有观察到两组间的明显不同。
图6显示了从清洁实验中得到的具代表性的照片的转变，用于后来 的覆盖率计算的黑白照片副本。Matlab技术的计算机软件被用于将原始 的照片分割成相等大小的16个区域。将照片先转换到灰度范围，然后开 始在灰度范围的照片实施开端运算以区分皮肤的污物和内源性局部特 点。这个过程就产生了黑白照片。
要测定实验用的表面活性物质的最小浓度需要最大程度的分离胎 脂，均匀地将12立方厘米的胎脂涂层用Accu-gate涂布器涂布在圆环的 Gortex膜(1.9cm2)上。被施加涂层的膜被在37℃，在12ml双蒸馏水(空 白组)或在稀释到0.1％/w/v，0.5％w/v，1.0％w/v的十二烷基硫酸钠(SLS)中 轻轻的摇动。SLS是一种普通的用于经验模型表面活性物质/皮肤交互作 用的表面活性物质，并且是用于一些清洁皮肤的配制品。在18个小时之 后，用分光光度计方法在650nm测量SLS溶液混浊度以评定分离的胎脂 的量。结果在图7A中显示。
在分离实验中，引入表面活性物质来评估从皮肤表面分离的胎脂。 胎脂被用于人类尸体的皮肤，所用薄膜的厚度在2mg/cm2到16mg/cm2。 浸入0.5％w/vSLS中的被处理的皮肤部分聚集了Franz分散细胞。浸泡 SLS24小时后，絮凝的胎脂被用分光光度滴定的方法在650nm测量溶液 的混浊度。结果在图7B中显示。
如图7A所示，用0.5％w/v浓度的SLS浸泡所得到的是最大程度分离 的胎脂。SLS的浓度达到0.5％w/v证明使得胎脂分离程度的增加。SLS的 浓度大于0.5％w/v时证明只是使得胎脂的分离程度很小的增加。如图7B 所示，存在于0.5％w/v浓度的SLS的溶液中，当所用的胎脂薄膜越厚， 用表面活性物质分离胎脂的量越多。用于浸泡在SLS中Gortex或人类尸 体皮肤上分离的胎脂上的给药剂量的增加证明了所用的普通的表面活性 物质可从刚出生的新生儿身体上去除胎脂。
这些数据证明了所有的清洁剂，包括胎脂，可以从皮肤表面去除污 物，如使用完整的照片分析测量到的L-值的明显增加。所有清洁剂的效 果用统计学是不能区分的。扩大数码照片的分析显示胎脂对毛孔深处有 更好的清洁能力，通过在这些部位的碳颗粒数量的明显减少而证明。这 些数据还证明，在浸于SLS中(p＜0.05)后，在600nm的混浊度呈剂量 依赖性增加，说明使胎脂的分离程度增加。在样品或皮肤上覆盖等量的 矿脂时没有观察到混浊度的增加。
本发明在临床上的应用是将胎脂用于体外的皮肤清洁剂。在婴儿出 生之前，受肺表面活性物质的影响，胎脂游离在羊水中。这种过程与角 质层的自我清洁过程相似。胎脂作为内源性清洁剂，利用这种清洁剂的 功能来优化产房的管理，处理足月或非足月的婴儿的各种变化，处理未 消毒的环境。胎脂的亲水成分有助于去除亲水污物。胎脂的疏水成分有 助于去除疏水污物。对于刚出生婴儿的外源性清洁剂的选择可以选自适 合于分离污物的和内源性胎脂，用胎脂进行所期望的部分的或全部的分 离。
在一个实施方式中，胎脂是从新生儿的身体上取下，收集，并在4℃ 储存的。被分离的胎脂将进一步用于清洁获得该胎脂的新生儿的皮肤， 和/或从其获得胎脂的该新生儿的母亲身体的皮肤。这可继续用于任何清 洁程序直到新生儿及其母亲离开医院，或者可以被用于清洁局部的皮肤， 或完好的或受损的皮肤，或可以用于其它方面直到分离的胎脂被用完。
在另一个实施方式中，胎脂是从新生儿身体上取下的。分离的胎脂 经过处理可使其具有生理相容性以应用于不同个体的皮肤，即，不是从 其自己身体上获得的或其母亲身上获得胎脂的新生儿。这种处理是有效 的，因此，可杀死、灭活或去除病原体例如人免疫缺陷病毒，丙型肝炎 病毒等，和/或可以能够携带病原体的物质如血液，胎粪，胎尿等。例如 胎脂可以被收集在试管中，被覆盖，用高压灭菌锅进行加热灭菌处理， 用射线照射(光，X射线等)，或采用本领域技术人员公知的方法。为了 进一步证明关于分离的胎脂的生理学相容性，可在获得胎脂的新生儿自 身或该新生儿的母亲上分析血清学/免疫学的特征。分离的生理学相容性 的胎脂可用于清洁任何个体的皮肤表面，例如皮肤受损的个体，皮肤易 受损伤的个体，皮肤易受刺激的个体等。
从上述的内容可知，本发明的其它变化和实施例也很显然是本领域 的技术之内。例如，一种模拟的新的细胞组分可以被作为一种媒介物以 供给表面活性物质蛋白使得皮肤表面具有抗感染的作用，且还可作为一 种媒介物以提供皮肤的抗氧化剂例如维生素E。所述组合物可以包含其它 皮肤清洁剂，和/或其它组分例如润肤剂，保湿剂等。因此，具体的实施 例不能限制本发明的范围。
图2A，2B，2C和2D是掌面前臂皮肤的数码照片，其或者是没有污 物的(图2A)，或者是在被施加污物之后的(图2B)，或者是在将胎脂(图 2C)或一种化学皂剂(图2D)用于有污物的区域后的照片。
图3A，3B，3C，和3D是定量皮肤表面的污物的量柱状图，没有污 染的(基线)，被污物污染的，和用Aquaphor(图3A)，商购清洁剂(图 3B和3C)，或胎脂(图3D)清洁护理后。
图4A，4B，4C，和4D是在被污物污染之前和用Aquaphor(图4A)， 商购清洁剂(图4B和4C)，或胎脂(图4D)清洁后的数码照片。
图5示出在用不同的处理方法清洁之前和之后的L-Scale积分的不 同。
图6是以先前的一幅代表性数码照片转换的黑白照片副本。
图7是显示胎脂在有表面活性物质存在的情况下从体外皮肤上分离 的曲线图。图7B是显示胎脂在有表面活性物质存在的情况下随着胎脂薄 膜厚度的增加而从体外皮肤上分离的柱状图。
详细描述
一种无毒的模拟胎脂的组合物，该组合物包含一种模拟细胞成分和 至少一种脂质成分。在一个具体的实施方案中，所述组合物包含至少一 种蛋白质组分。所述组合物提供了天然胎脂的屏障作用和水合功能，但 是减弱或消除了免疫应答。
这里所用的天然胎脂，包括从新生儿身上获得的胎脂，以及经过加 工而易于处理的从新生儿身上获得的胎脂，如美国专利5989577； 6113932；6333041和美国专利申请09/850844；10/241184；和60/377430 所描述的，每一个专利在这里作为参考引用。这里所述的免疫应答定义 为免疫系统引起的生理，生物化学的，和/或分子的变化，例如非自身的 蛋白质对个体引发的刺激，这样的免疫应答症状或者是亚临床的或者是 临床的。这里所述的减弱的免疫应答是降低或减弱免疫应答的种类，范 围，持续时间，严重程度等中的任何一种。这里所述的蛋白质也包含肽 和单个氨基酸。
在本发明的组合物中，天然胎脂的细胞成分被具有细胞水合功能的 合成结构所替代。这些结构可以被称为“模拟细胞”或“合成细胞”。这 种模拟细胞以小颗粒形式被混入脂质基质中。这种脂质基质包含至少一 种可商购的存在于天然胎脂中的脂质。可溶于水的蛋白质组分在水中， 其与模拟细胞组分双相连续。具体地说，存在有蛋白质的地方就提供了 基于蛋白质的在天然胎脂中的天然细胞的作用。这种蛋白质组分可以是 商品化的蛋白质，重组的蛋白质，合成的蛋白质等。蛋白质可以是一种 或多种角蛋白，聚角蛋白微丝蛋白，表皮生长因子，与表面活性物质相 关蛋白A、B、和/或D，和天然保湿因子肽(NMF)。还可以包含透明质 酸。蛋白质可以源自非天然胎脂来源的表皮。
模拟细胞分散于至少一种脂质基质中。任何一种或下述的全部脂质 都可使用，每一种脂质都以所示浓度存在于天然胎脂中，且每一种脂质 都是可以商购的：胆固醇酯，神经酰胺，甘油三酯，胆固醇，游离脂肪 酸，磷脂，蜡酯，鲨烯，蜡二酯，和胆固醇硫酸酯。
在一个实施方案中，模拟胎脂的脂质成分为大约5％到大约30％，且 模拟胎脂的蛋白质组分为大约5％到大约30％，剩余的浓度由模拟细胞/ 水组成。在另外一个实施方案中，脂质组分的范围为大约5％到大约30％， 且蛋白质的组分可达大约30％。脂质和蛋白质组分的绝对浓度是可变的， 以至于水被慢慢释放并且通过获得水分来保持水合作用。一种或多种脂 质成分的浓度一般是在一定范围内的，如所提供的模拟胎脂的脂质组分 范围是5％到30％，精确浓度并不关键：
胆固醇酯 大约20％到大约35％
神经酰胺 大约10％到大约20％
甘油三酯 大约10％到大约20％
胆固醇 大约5％到大约10％
游离脂肪酸 大约5％到大约10％
磷脂 大约5％到大约10％
蜡酯 大约2％到大约8％
鲨烯 大约0.5％到大约5％
蜡二酯 大约0.5％到大约6％
胆固醇硫酸酯 大约0.1％到大约3％
组合物的脂质相的组成可以变化，以提供期望的最终组合物所具有 的分散特性和粘度。例如，与蜡含量相对较低相比，含有相对高含量的 蜡将会产生低的分散性和高粘度的组合物；与相对较低含量的脂肪酸和/ 或甘油三酯相比，含有相对高含量的游离脂肪酸和/或甘油三酯将得到更 易分散的低粘度的组合物。
天然胎脂的蛋白质成分是通过一种或多种由除了天然胎脂外的一种 来源的蛋白质而提供的。例如，所述蛋白质可以通过采用本领域熟练技 术人员所公知的标准合成技术合成。所述蛋白质也可以通过采用本领域 熟练技术人员所公知的分子重组技术制备。所述蛋白质还可以商购获得， 例如自Sigma公司购得。因此，本发明所述组合物中的蛋白质组分可以 从除了天然胎脂外的任何来源获得；所述的蛋白质组分可实际包含一种 或多种来自天然来源的蛋白质。如一个实施例所述，可自培养非源自胎 脂的哺乳动物细胞，以此作为一种蛋白质组分的来源。另一实施例，非 人类的、非动物的细胞材料可以用于作为一种蛋白质组分的来源。另一 实施例，表面活性物质蛋白D可以从牛肺中获得并且可以用于作为一种 蛋白质组分的来源。另一实施例，角蛋白可以从动物和人类的头发，皮 毛等中提取且可以用于作为一种蛋白质组分的来源。
在本发明所述的组合物中，天然胎脂的细胞组分被一种能行使天然 胎脂中的细胞的功能的模拟细胞所代替。这种“细胞”组分(在这里也可 以称为模拟细胞)水合本发明组合物所应用的一种皮肤表面。这种水合是 通过释放水分且通过水分蒸发转移，像天然胎脂细胞那样。这种组合物 可以是内源性地行使这样的水合功能，或所述的组合物可以是遗传工程 化的、改良的等等，来实施这样的水合功能。要代替天然胎脂的细胞组 分，可以用任何在脂质环境中具有控制保留和释放水分能力的分散颗粒 来替代。
外源性制剂，例如水或者其它制剂，与天然的胎脂的作用和胎脂的 非极性组分(分散性的)和极性组分(无分散性的)及胎脂的临界面张力 (CST)相关联。水具有相对高的CST(72达因/厘米)。胎脂的疏水性(例 如，相对低的CST)是不曾预料到的，因为大约80％重量的天然胎脂是 水分。胎脂的非极性组分(脂质)基本上高于极性组分(由蛋白质组成的 细胞)，且使胎脂拥有疏水性，这是因为脂质是包围与水相关的细胞组分 的一个连续相。与所公知的疏水材料和皮肤保护剂矿脂(petrolatum)(其 具有极高的非极性成分)相比，天然胎脂中的非极性成分仅稍微低一些。 此外，胎脂和矿脂的CST是相当的。结果是，将胎脂用于表面例如皮肤， 无论是完好的皮肤或是受损的皮肤(例如，伤口，擦伤，切伤，刺破)， 胎脂保护了表面以使皮肤不接触到水。
胎脂具有的低CST产生的一种结果是胎脂与疏水性液体间几乎不会 发生相互作用。例如，应该可以预期，用胎脂处理的表面(这些表面的例 子可以是皮肤或施加了胎脂的一种基质)与该表面所暴露的一种外生的 疏水性液体中(例如水，盐，尿等)之间几乎没有相互作用。胎脂的低 CST赋予了胎脂对这些液体的疏水特性，因此，胎脂可作为一种保护剂 而抵制这些液体影响。
天然胎脂中的水结合于细胞中，且细胞是包埋在脂质材料中的，因 此，脂质组分为胎脂提供了这种环境。但是，如果脂质成分通过与疏水 剂接触被部分或全部去除，那么富含水的部分，例如细胞，会暴露在这 种环境中。本发明所述的模拟细胞组合物可以通过控制调节得到高的极 性组分来屏蔽非极性组分。这种组合物保护了非极性材料，即使在疏水 性脂质组分通过与环境的交互作用而被改性。
天然胎脂保护正在生长的皮肤免受有害物质的影响，例如在妊娠阶 段子宫内的水、尿和粪。本发明所述的组合物可以被应用于任何生物学 表面，大约40达因/厘米的表面能量对抵制外源性试剂是有益的。因此， 模拟胎脂的有效量是获得大约40达因/厘米的表面自由能，最小值是大约 20达因/厘米。例如，将有效量的本发明所述的组合物覆于尿布以保护皮 肤免受排泄物的刺激。粪便包含蛋白酶和脂肪酶，它们能通过接触皮肤 而损伤皮肤的表面。通过应用本发明所述的组合物而降低这些皮肤表皮 的表面能量以保护皮肤不接触含水的粪便。
可以用于本发明的组合物中的模拟细胞的例子，包含但并不限于立 方体液晶纳米颗粒，磷脂脂质体，纳米颗粒，微颗粒，胶质体，非磷脂 脂质体(Catezomes)，培养细胞等。这些物质中的每一种都可以被装载 于亲水分子中以提高它的水合作用。亲水分子包含但并不限制于甘油， 乳酸，吡咯烷酮羧酸(pyrrolidone carboxylic acid)，尿刊酸(urocanic acid) 和之前所定义的蛋白质，还包括氨基酸例如NMF。这些物质中的每一种 还可以包含透明质酸作为额外的水结合剂并且控制所述组合物的粘度。
双连续立方体相液晶(cubosomes)可用于本发明。立方体液晶纳米 颗粒是一种具有控释性能的立方体相液晶的分散的纳米结构颗粒。表面 活性物质聚集成双分子层，该双分子层呈螺旋状形成一种周期性的、三 维周期性最小表面，并形成具有水和脂质双连续结构域的一种“蜂巢状” 的紧密压缩的结构。
三种双连续脂质晶体结构是常见的：Pn3m(D-表面)和Ia3d(G-表面) 和Im3m(P-表面)。这些结构可以用结表面(nodal surface)这个名词来描 述。尽管广泛用于构建双连续立方体相的脂质是甘油单油酸酯 (monoolein)，但是双连续立方体相被发现存在于天然脂质中，阴离子和 阳离子的表面活性物质，和聚合体系统中的。根据Qiu和Caffrey生物材 料21；223(1999)的图表，在这里特别引用作为参考，在添加水的基础 上，甘油三酯自发形成双连续立方体相，相对是不可溶的(可形成立方体 液晶纳米颗粒的胶体分散配品)，且可抵抗温度的变化。
活性物可以通过直接添加到熔融的脂质或水中(例如，在水合之前)， 或通过扩散进已形成的结构中而装载。这种结构一般能保持活性物的功 效且可以帮助稳固活性物，例如维生素和蛋白质。装载可溶脂质活性物 的典型上限是10wt％(与立方体相有关)，它是通过添加而引起的立方体 相结构的减少而控制的。所述的活性物可被控制分布，扩散的地方是通 过将活性物穿过立方体相的“规则的”通道结构的弯曲的扩散而控制的。
立方体液晶纳米颗粒是热稳定的，并且如果没有液体的水解作用发 生，还可以无限期保持这种稳定性。立方体液晶纳米颗粒的胶状扩散可 以通过添加聚合物而稳固。立方体液晶纳米颗粒是一种由甘油的长链饱 和脂肪酸酯和水构成的，典型的甘油的长链饱和脂肪酸如可以是甘油单 油酸酯。甘油单油酸酯/水的比例是可以变化的，例如，60/40，65/35，70/30， 75/25，等，因此可以产生一种立方体液晶纳米颗粒相。例如，如果所述 的组合物包含20％的脂质和5％的蛋白质，立方体液晶纳米颗粒/水的组 分将占整个组合物的75％。因此，总组合物中脂质的浓度不包含立方体 液晶纳米颗粒中的单甘油浓度。一种含60％甘油单油酸酯(C17)含40％ 水凝胶的立方体液晶纳米颗粒可以被制备出来。立方体液晶纳米颗粒可 以根据在Langmuir 17；5748(2001)中提供的方法，通过成核作用来制备， 该文献在这里作为参考引用。
第一种构建和稳固立方体液晶纳米颗粒的方法包括将大量立方体液 晶材料以高剪切力分散成亚微米颗粒。第二种方法包括将以最小的输入 能将两种水溶液的简单混合。这种方法使得立方体液晶纳米颗粒比通过 第一种方法制备的立方体液晶纳米颗粒更小且更稳固。将用作立方体液 晶且基本上不溶于水的甘油单油酸酯，与能溶解脂质的助水溶物混合， 形成一种具有较低溶解度的似水溶液。只要稀释曲线(使用甘油单油酸酯 -乙醇-水相图)落于立方体相水可混溶的区间，即可自然形成立方体液晶 纳米颗粒。除了甘油单油酸酯以外，还可以使用任何在稀释时能形成立 方体液晶的脂质和助水溶物的组合。活性物和稳固剂可以加入到脂质和/ 或助水溶物中，得到胶状稳定的可控制释放的分散体系。第三种喷雾干 燥的方法用可以生产出干粉状立方体液晶纳米颗粒前体。通过对一种淀 粉水溶液中的立方体液晶颗粒的分散制品进行喷雾干燥，可以生产出淀 粉包囊化的甘油单油酸酯。通过将一种由乙醇-右旋糖苷-甘油单油酸酯- 水系统形成的乳状物进行喷雾干燥可以制备出右旋糖苷包囊化的甘油单 油酸酯颗粒。淀粉和右旋糖苷降低了干燥过程中粉末的粘合性，并且充 当粉末水合作用的可溶性胶体稳定剂。在加水后两种粉末均形成平均大 小为0.6μm的稳定的胶体颗粒状立方体液晶纳米颗粒。这种方法使得立 方体液晶纳米颗粒的表面状态能制作成适于特殊用途。例如，立方体液 晶纳米颗粒能够被装载于表面活性物质蛋白中以提供抗氧化剂和抗感染 剂的性能。
像前面所陈述的，其它类型的载体可以被用于作为模拟细胞。磷脂 脂质体可以包囊化水分，且任选地，还可以包囊化可溶于水的组分。它 们可以被用聚乙二醇(polyethylene glycol(PEG))包埋来进一步提高它 们的亲水特性。
纳米颗粒也可以被应用，例如，一种颗粒直径在500nm到750nm范 围内的聚乙烯醇(polyvinyl alcohol)水凝胶；一种聚-N-异丙基丙稀酰胺 水凝胶(50nm-1μm)；一种聚(环氧乙烷)-聚-(L-乳酸)的共聚物 (copolymer of poly(ethylene oxide)-poly(L-lactic acid))；或由聚(环氧乙烷) 包被的聚(L-乳酸)。
微颗粒也可以被应用，例如，聚(乳酸-共-乙交酯)和颗粒直径在 400nm到600nm范围内的PEG-右旋糖苷缀合物。还可以使用一种包囊化 水的脂质多层。
胶质体(Colloidosomes)也可以被应用。胶质体是微米大小的球形外 形的胶体颗粒，当胶体颗粒被引入乳状液滴模板中时胶体颗粒形成。它 们会自发聚集在滴状乳液的表面以通过消除界面部分而使总的界面能量 最小化。当有很多自发聚集的颗粒时，就形成了六折两维空间的晶体结 构。胶质体也可以有选择通透性，允许亚微米颗粒弥散进入，但是排除 了比较大的微米大小的颗粒。它们也可以制备为具有对不同大小的颗粒 的选择通透性。
非磷脂的脂质体(Catezomes，Collaborative Laboratories，Inc.East Setauket NY)包括的脂肪酸季胺盐也可以被应用。它们的结构允许亲水 的和疏水的两种材料的结合，因为分子与盐的结合部分是亲水的而分子 的烷基链部分是疏水的。包囊化材料的释放是通过在施用于皮肤时调节 周围环境的离子浓度而控制的。
培养的细胞也可以被应用。细胞可以被崩解(使用化学或机械的崩解 方法)，遗传工程化，装载亲水分子等。这些结构的任一结构都可以包含 透明质酸，其可控制粘度并进一步添加水结合剂。
在一个具体实施方式中，本发明所述的组合物可覆于一种液体形式 的生理学相容性的支持结构来形成一种薄膜。它以滴状形态而存在，当 遇到这种支持结构时形成薄膜。这种薄膜在这里被定义为一种界面表面 覆盖物，以液体或固体的形态存在，具有依赖温度的特性。成膜技术包 括但并不限制于喷雾，挤压，吹制(blowing)，灌注，蒸发，涂覆和涂漆。
在一个可选择的实施方案中，本发明组合物的一个成品薄膜是用于 一种生理学相容性支持物。这种生理学相容性支持物是一种能承受灭菌 作用的支持物，优选采用本领域熟练技术人员所公知的标准灭菌技术， 例如暴露在γ射线中，高温高压等等。所述的支持物不限制于特殊的组 合物或结构，取决于上面所述的用途，是否需要灭菌，且可以用不同的 方式。在一个具体实施方式中，这种薄膜被用于促进细胞的成熟并可以 应用于如滤膜，膜，珠状物，颗粒等结构。同样地，这种支持结构不限 制物质的特殊形态，可以是固体，半固体，胶体等。在一个具体实施方 式中，这种支持结构包括一种尼龙单纤维内置平面材料，例如分界面衬 垫(Winfield Laboratories，Inc Dallas TX)，Biobrane II(Sterling Drug Inc.， 纽约NY)或多孔的环形尼龙滤膜(Micro Separations Inc.，Westboro MA)。其它支持材料，也可以应用于本发明。
在另外一个具体实施方案中，本发明所述组合物的薄膜被用于促进 伤口的愈合和/或组织的修复。它可以被应用于实施在通过直接接触或间 接接触完好的或受损的皮肤处，例如伤口，擦伤，溃疡，烧伤区域，感 染处或痛处，疣等的各种材料。这种支持物可以渗透物理和/或化学剂， 并且具有形式的多样性，取决于它的目的和需要涂覆和处理的区域范围。 这种薄膜可以被用于各种各样的合成材料例如热塑性薄膜，吹气薄膜和 呼吸薄膜，和各种天然和合成的织品组合物例如织物，非织物，织品和 缝合织品。本发明可以被用于各种产品，实例包括包裹和覆盖伤口的产 品例如绷带，线带，纱布，胶布产品，所述产品将短期或长期用于皮肤， 造瘘术护理衬垫，医用衬垫例如失禁护理用衬垫，吸收性衬垫，和检查 用衬垫，可随意使用的衬垫和尿布，及女性卫生用品例如内用物 (intralabial devices)。
本发明所述的组合物可以被用于医疗上以促进皮肤生长，皮肤成熟， 形成皮肤的屏障，伤口愈合，恢复皮肤弹性和组织修复。它还可以被用 于作为一种促进皮肤形成屏障的皮肤保护剂，皮肤保湿剂，和皮肤弹性 剂。
本发明所述的组合物总体来说具有中性pH值。所述的模拟细胞组合 物和/或添加的氨基酸具有常规的酸性pH值。本发明所述的组合物具有 一种粘性特征，一种流变学特征，具有通透性，和蒸发的水分的传输的 特性，这些基本上与天然胎脂类似。
根据美国专利申请09/850,844的记载，在这里可合并作为一个整体 参考，刚出生婴儿的和7周大婴儿的胎脂的接触角(度)数据和可控的矿 脂数据如下： 新鲜的胎脂 7周大婴儿的胎脂 矿脂 角度 SD 角度 SD 角度 SD 苯甲醇 21.8 2.9 19.6 1.6 34.4 3.0 二碘甲烷 36.2 2.1 31.8 1.8 38.4 2.2 甘油 74.3 1.9 74.2 2.3 79.1 2.1 水 83.5 0.8 -- -- -- --
本发明所述的组合物含有占整个组合物约5％到大约30％的蛋白质 组分，占整个组合物约5％到大约30％的脂质组分，和占由剩余量的水/ 模拟细胞组分，该组合物提供了模拟天然胎脂的上述制剂的接触角。特 别地，所述的组合物使皮肤表面苯甲醇接触角在大约18.0到大约24.7； 二碘甲烷接触角在大约30.0到大约38.3；甘油接触角在大约71.9到大约 76.5；以及水接触角在大约82.7到大约84.3。
根据美国专利申请09/850,844的记载，确定了新鲜胎脂和7周大婴 儿的胎脂的临界表面张力(CST)，连同矿脂的控制一起被确定。结果如 下表： CST(dyne/cm) 新鲜胎脂(动态θ) 40.47 新鲜胎脂(静态θ) 38.65 7周大婴儿的胎脂(静态θ) 39.80 矿脂(静态θ) 35.79
用于皮肤表面合成的胎脂提供了大约38达因/厘米到41达因/厘米的 CST值且CST至少要大于36达因/厘米。
CST是一种“吸湿性指数”而确定对于需要在一种质粒材料表面完 全分散的(即，零度接触角)溶液的表面张力的最小值。任何一种液体的 表面张力等于或小于CST将使得接触角为0(θ＝0，Cosθ＝1)，且将完全 分散在其表面，当任何液体的表面张力大于CST时将形成有限的接触角 的液滴。
本发明所述组合物含有蛋白质组分，其含量占整个组合物的大约5％ 到大约30％，脂质组分，其含量占整个组合物的大约5％到大约30％，和 水/模拟细胞组分，占总组合物的剩余量，得到了一种具有模拟胎脂特性 的CST的组合物。
根据美国专利申请09/850.844的记载，新鲜胎脂极性组分的表面自 由能是1.48达因/厘米，矿脂几乎没有极性SFE(0.03达因/厘米)，即非极 性。胎脂中的非极性组分稍微少于矿脂，矿脂含有非常低的极性组分。
本发明所述组合物含有蛋白质组分，其含量占整个组合物的大约5％ 到大约30％，脂质组分，其含量占整个组合物的大约5％到大约30％，和 水/模拟细胞组分，占总组合物的剩余量，得到了一种具有模拟胎脂特性 的SFE的组合物。
根据美国专利申请09/850.844的记载，天然胎脂提供了屏障的特性， 其在例如Vigilon，Exxaire，Silon，和Flexzan等半透膜范围内，并提供 了中等水平的水合作用。与或高或低水平的水合作用相比，中等水平的 水合作用提供了更适宜的进行屏障修复的环境。
本发明所述的组合物因此具有模拟胎脂的屏障特性。
本发明将进一步以下述参考实施例进行描述。
实施例
实施例1
制备甘油单油酸酯和水的立方体液晶纳米颗粒(60％甘油单油酸酯， 40％水)。得到的立方凝胶体进一步进行处理来制备一种较小立方体液晶 纳米颗粒的分散体系。这种颗粒被混合进胆固醇酯(大约20％到大约 35％)，神经酰胺(大约10％到大约20％)，甘油三酯(大约10％到大约 20％)，胆固醇(大约5％到大约10％)，FFA(大约5％到大约10％)，磷脂(大 约5％到大约10％)，蜡酯(大约2％到大约8％)，鲨烯(大约0.5％到大约 5％)，蜡二酯(大约0.5％到大约6％)，和胆固醇硫酸酯(大约0.1％到大 约3％)的脂质相。立方体液晶纳米颗粒的水相可以装载亲水分子(甘油， 乳酸，吡咯烷酮羧酸，尿刊酸，氨基酸)以提供结合水的材料的来源。
实施例2
合成的胎脂组合物是按照实施例1所述用长链的饱和脂肪酸的油酸 甘油单酯的立方体液晶纳米颗粒制备的。
实施例3
合成的胎脂组合物是按照实施例1所述用方法制备，不同的是用磷 脂脂质体，非磷脂脂质体，胶体，纳米颗粒，或微颗粒代替立方体液晶 纳米颗粒。
脂质体可以是单或多脂质层以包囊化水，且在外面附上一层聚乙二 醇体以给体系中供应额外的水。水相也可以包括可溶于水的组分。纳米 颗粒可以是聚乙烯醇水凝胶，颗粒直径为大约500nm到大约750nm。纳 米颗粒也可以是聚-N-异丙基丙稀酰胺(pNIP Am)水凝胶；这些是颗粒直 径大小在50nm到1μm的单分散性的水凝胶颗粒。此外，纳米颗粒可作 为一种聚合物体系，可以是聚(环氧乙烷)-聚(L-乳酸)。聚(L-乳酸)的纳米 颗粒可以外包有聚环氧乙烷。微球体可以是颗粒直径为大约400nm到大 约600nm，包含有添加了聚乙二醇右旋糖苷缀合物的聚(丙交酯-共-乙交 酯)。微球体可以包囊化其中已经加入了脂质多层的水。
实施例4
合成的胎脂组合物可以通过实施例1-3的任何一个实施例所述，用添 加的透明质酸提供的额外的结合水的材料而制备，并且可以控制该组合 物的粘度。
实施例5
具有控释特性的立方体液晶纳米颗粒的制备如J.Colloid Interface Science(2003待发表)所描述，不同在于以天然保湿因子(NMF)替代了 酮洛芬。
将大约0.5g甘油单油酸酯在1000ml的圆柱形玻璃器皿中融化。将表 面活性物质和NMF溶入融化物中。充足量的缓冲剂被加入到甘油单油酸 酯中以形成立方体相液晶。一旦成形，再将50ml的缓冲剂加入到该容器 中。在液态晶体上方用搅拌器快速搅拌溶液。这种排列具有单向扩散特 征，以NMF通过凝胶体的扩散作为限制速率的步骤。少量的缓冲剂被周 期性的去除，且NMF的浓度是通过在紫外光/可见波长光的分光光度分 析来测定的。
实施例6
本发明的所装载的固体脂质纳米颗粒是通过用Eur.J.Pharmaceutics Biopharm 49(2000)211的方法制备的，此方法在这里特别引用作为参考， 除了用NMF替代维生素A。
固体脂质纳米颗粒和纳米乳液是用5％的NMF(相对于所述的脂质) 制备的。将甘油单油酸酯在85℃被融化，然后加入NMF。热的脂质相被 分散于表面活性物质溶液中且使用一种ultra turrax(IKA，Sthfen德国)而 形成一种预混合料。将该预混合料通过一种Lab 60高压匀浆器(APV Gaulin Lubeck德国)。在85℃和500bar压力下进行两个循环。纳米乳液 是用同样的方法制备的，除了用Miglyol 812替代甘油单油酸酯。在纳米 颗粒或纳米乳液中，NMF的最终浓度是0.5％。
实施例7
聚合体(polymersomes)，如Discher等人在科学(2003待发)上的文 章中所描述的，特别引用在这里可作为参考，是由双二嵌段共聚物 (amphilic diblock copolymers)制得的。这些聚合物可以是聚环氧乙烷-聚 乙烯-乙烯(EO40-EE37)。膜对于水的通透性至少要比脂质体的磷脂双分子 层的通透性低十倍，且其被用以提供天然胎脂的水份处理特征，尤其是， 调节蒸发的水分的传输和失水速率。
实施例8
没有表面活性物质的聚(DL-丙交酯-共-乙交酯)(PLGA)纳米颗粒是 采用如J.App.Polymer Sci.80(2001)2228所描述的透析方法制备的，在 这里特别引用作为参考。PLGA纳米颗粒被装载了蛋白质，肽，和/或氨 基酸，例如表皮生长因子、NMF等，和水。
实施例9
聚(谷氨酸)聚(乙二醇)水凝胶(Poly(glutamic acid)poly (ethyleneglycol)hydrogel)是如J.Biomed.Mater.res.62(2002)14所述的方 法制备的，在这里特别引用作为参考。聚(谷氨酸)是聚合物的骨架，而 聚(乙二醇)是交联剂。所述的水凝胶是用光引发的交联化学方法合成的， 且被装载了蛋白质，肽，和/或氨基酸，例如表皮生长因子、NMF等，和 水。
实施例10
用于控释特性的蛋白质被包囊化在聚(丙交酯-联-乙交酯)(PLGA) 内，如自然生物技术18(2002)52所描述的，在这里特别引用作为参考。 为制备PLGA microylinder，将蛋白质如先前所述悬浮在丙酮-PGLA中， 其中含有或不含有碱性盐。悬浮液被装入注射器然后注入硅树脂橡胶管 中。将溶解的被挤压出的悬浮液在室温下干燥然后置于真空环境下。为 制备PLGA微球体，将蛋白质注入10mM磷酸盐缓冲液(pH7.4)，其中 含有或不含有碱性盐，再加入PLGA/CH2CL2溶液，且以10000r.m.p.的 速度混匀，移到2％的聚乙烯醇(PVA)溶液中。一种水包油包水 (water-in-oil-in-water)的乳状液通过搅拌形成了。颗粒在0.5％PVA中变 硬且通过离心收集，洗涤，并冷冻干燥。
实施例11
一种高度多孔渗水的聚乙交酯是用一种固体缩聚反应制备的，如 Macromol.Chem.Phys.200(1999)2221所描述的，在这里特别引用作为参 考。重质氯代醋酸钠(Ground sodium chloroacetate)在连续搅拌下在 160℃或180℃下加热。用水洗涤聚乙交酯以去除残留的氯代醋酸钠然后 生成氯化钠。
应用外源性生理学相容性胎脂从皮肤上去除污物，它的效力在定量 上至少等于，且可能比商品化清洁剂更好。在皮肤表面的胎脂与外源性 清洁剂例如肥皂和/或表面活性物质相互作用，在后来的絮凝和分离过程 中，它的作用与作为一种内源性皮肤清洁剂的胎脂的功能是一致的。这 里所用的皂剂，是一种长链脂肪酸的钠盐混合物，典型的是C12到C18的 脂肪酸。这里所用的表面活性物质，是一种具有表面活性的物质。皂剂 和表面活性物质都是清洁剂。
评价分离的胎脂的清洁方面。在一项研究中，10mg相同的黑碳颗粒 状的污物被涂在正常成年人的掌侧皮肤上(面积＝16cm2)。然后手工涂抹 并去除了大约2mg/cm2的被照射的胎脂或所选择的皮肤清洁剂。污物的 去除是根据光亮度的改变而被量化，使用L-SCALE分析数码照片。另一 研究，胎脂被用于人类的尸体皮肤，皮肤上没有胎脂或胎脂薄膜的厚度 在2mg/cm2到大约16mg/cm2范围内。将皮肤切片置于Franz扩散细胞中 且暴露于0.25％W/V的十二烷基硫酸钠(SLS)溶液中，SLS是一种普通的 表面活性物质被发现存在于肥皂液中。继续浸泡24小时，以分光光度计 方法在600nm测量溶液的混浊度以测量胎脂的絮凝。
胎脂是从足月出生的婴儿表面皮肤收集得到且被储存在4℃下待用。 被血液和/或胎尿、胎粪污染的样本被作为废弃品。成人手部和掌侧前臂 的数码照片用一种皮肤表面分析器被扩大30倍影印下来。通过操作使用 两种不同的照明源能获得从扩大10倍到700倍的数码照片。一种形式是 用正面光源，提供表面皮肤的细节。第二种方式是采用背景散射光照明， 使得光源发生偏振；对于当由于皮肤表面发生镜面反射而干预照片的分 析这是很有用的方式。
对于清洁实验，10mg前述的污物被均匀地涂于事先清洁干净的正常 成年人的手部和掌侧前臂皮肤(面积＝16cm2)。随后将用量为12.5mg/cm2 的制备的清洁组合物手工施加涂有污物的皮肤上并清洁干净，该组合物 为经照射的胎脂，Pond’s Cold CreamTM或Johnson & Johnson Baby WashTM。所有用于手部的按压操作和去除操作都是在常规条件下完成的。 用柯达DCS420C数码相机可获得在涂抹污物之前和之后，和清洁干净之 后的高清晰度的数码照片。
在清洁过程中获得的数码照片通过分析评定出胎脂和两种商购清洁 剂的效力。污物通过以两种方式的照相过程中被量化。一种方式，用Adobe Photoshop L-SCALE分析方法改变光的亮度来量化污物。另一种方式，通 过使用Matlab技术的计算机软件写入一种程序，由此使原始的数码照片 被第一次分割成16个相等大小的区域来区分皮肤的污物和背景之间的特 点。这个过程产生了一种黑白的照片被用于计算被污物覆盖区域的百分 比。在处理组间的对比可以单因素ANOVA进行统计比较。
表1提供了从实验中通过L-SCALE分析和灰度测量分析所得到的具 代表性的数据。对于表面皮肤的评估或者是干净的(处理前)，或者是全 部沾满污物，或者是全部沾满污物且用指定的清洁剂处理的，在用指定 的清洁剂清洁之后评估(Aquaphor，Johnson & Johnson Baby WashTM， Pond’s Cold CreamTM，胎脂，水)，或用酒精清洁后进行评估。
表1
照片 L-SCALE 灰度-SCALE 清洁制剂
平均数 SD 平均数 SD
处理前 192 5 185 6 Aquaphor
全部沾满污物 83 17 77 16
全部沾满污物且处理 65 16 61 14
处理清洁后 174 7 166 8
酒精清洁后 154 7 145 7
处理前 197 5 191 6 Johnson & Johnson Baby WashtnTM
全部沾满污物 129 17 121 17
全部沾满污物且处 54 12 51 10
处理清洁后 182 6 175 7
酒精清洁后 196 4 190 4
处理前 182 5 175 8 Ponds Cold CreamTM
全部沾满污物 108 14 99 14
全部沾满污物且处理 77 19 71 17
处理清洁后 197 5 191 6
处理前 120 5 112 4 胎脂
全部沾满污物 85 18 79 16
全部沾满污物且处理 41 7 40 6
处理清洁后 135 5 126 5
酒精清洁 120 5 112 4
处理前 193 5 187 6 水
全部沾满污物 53 16 50 14
全部沾满污物且处理 96 25 89 23
处理清洁后 183 7 175 7
酒精清洁后 162 7 154 7
图1.A证明了胎脂的清洁能力。手部的数码照片被用一种皮肤表面 分析器扩大30倍而影印下来，如先前所描述的。这副照片是使用皮肤的 正面照明源而得到的。图1.A显示了未被污染的皮肤表面。图1.B显示 了用碳颗粒弄后脏皮肤。碳颗粒残留在皮肤的皱纹和毛孔中，并残留在 汗腺中。图1.C显示了用过胎脂后的有污物的皮肤，由此看来在可见的 皮肤上没有碳颗粒的存在，包括皱纹和毛孔。
图2也证明了胎脂的清洁能力。此图片是在先前描述的相同条件下 获得的，除了掌侧前臂皮肤被用以外，光源穿过皮肤，而不是像以前用 的从上方照射。图2A，2B，和2C分别显示了未被污物污染，被碳污染 的，和用胎脂清洁过的皮肤。图2D显示了用商品化的肥皂液代替胎脂清 洁有污物的手部皮肤的面积。
由得到的掌侧前臂皮肤的L-分值来测定用于皮肤表面的污物的量。 使用Adobe Photoshop L-SCALE分析数码照片来评估成人的掌侧前臂皮 肤。以图3作为参考，收集到用手将污物涂擦在皮肤上之前(基线)，之 后(有污物的)，和清洁之后(干净的)的数据。所述的清洁处理或者 Aquaphor，Johnson & Johnson Baby WashTM，Pond’s Cold CreamTM，或 胎脂。结果在图3A，3B，3C，和3D中显示。这些数据证明了所有所尝 试的清洁剂都使皮肤回到了接近基线的L-SCALE水平。
在下面的数据中显示，当用L-平分数据以比较基线(污染前)和清 洁后的掌侧前臂皮肤，单因素ANOVA没有显示出实验的清洁剂之间的 统计学上的明显不同。
表2
采用单因素ANOVA比较事先涂抹污物的和清洁的皮肤
清洁用品
Pond’s Cold CreamTM Johnson & Johnson Baby WashTM 天然的胎脂
平均值 0.47％ 1.19％ 0.22％
平均值的标准误差(SEM) ±0.08 ±0.15 ±0.03
样本数量(N) 48 48 48
这些数据显示了所有所讨论的清洁剂都可以充分地将皮肤表面清洁 干净。Johnson & Johnson Baby WashTM和Pond’s Cold CreamTM通常用于 清洁皮肤，关于胎脂生物膜的使用先前没有报道。
图4显示了施加污物之前和用四种中的一种清洁剂处理后的数码照 片。Aquaphor(图.4A)，Johnson & Johnson Baby WashTM(图.4B)，Pond’s Cold CreamTM(图.4C)，或胎脂(图.4D)。所得到的照片如图2先前所展 现的一样。对于每一个皮肤处理，清洁后皮肤上的污物是可见的。毛孔 中的污物看起来像小点状的，且汗毛上的污物看起来像分散成条文样的。 通过视觉观察，用胎脂处理过的皮肤显示的是污物被去除得最彻底。
图5从数量上显示了图4的结果，清洁之前和之后，采用的是不同 L-Scale积分。负值表示在皮肤上还残留一些污物，一个很大的负值表示 残留了更多的污物。绝对值表示在清洁程序后皮肤变得干净。每一个皮 肤处理后的近似值如下：Aquapuor-8；Johnson & Johnson Baby Wash+7； Pond’s Cold Cream-1；胎脂＜-0.5；和水-11。这些数据表示水和Aquapuor 的处理使皮肤残留了些污物，稍微有些“脏”；Johnson & Johnson Baby Wash的处理使皮肤“干净一些”；Pond’s Cold Cream和胎脂去除污物的 效果同样好。
覆盖率的测定是清洁效果的另一种比较方法。单因素ANOVA的这 些数据很明显的表明用胎脂清洁后残留的污物量很少，与Johnson & Johnson Baby Wash(p＜0.05)比较，没有观察到两组间的明显不同。
图6显示了从清洁实验中得到的具代表性的照片的转变，用于后来 的覆盖率计算的黑白照片副本。Matlab技术的计算机软件被用于将原始 的照片分割成相等大小的16个区域。将照片先转换到灰度范围，然后开 始在灰度范围的照片实施开端运算以区分皮肤的污物和内源性局部特 点。这个过程就产生了黑白照片。
要测定实验用的表面活性物质的最小浓度需要最大程度的分离胎 脂，均匀地将12立方厘米的胎脂涂层用Accu-gate涂布器涂布在圆环的 Gortex膜(1.9cm2)上。被施加涂层的膜被在37℃，在12ml双蒸馏水(空 白组)或在稀释到0.1％/w/v，0.5％w/v，1.0％w/v的十二烷基硫酸钠(SLS)中 轻轻的摇动。SLS是一种普通的用于经验模型表面活性物质/皮肤交互作 用的表面活性物质，并且是用于一些清洁皮肤的配制品。在18个小时之 后，用分光光度计方法在650nm测量SLS溶液混浊度以评定分离的胎脂 的量。结果在图7A中显示。
在分离实验中，引入表面活性物质来评估从皮肤表面分离的胎脂。 胎脂被用于人类尸体的皮肤，所用薄膜的厚度在2mg/cm2到16mg/cm2。 浸入0.5％w/vSLS中的被处理的皮肤部分聚集了Franz分散细胞。浸泡 SLS24小时后，絮凝的胎脂被用分光光度滴定的方法在650nm测量溶液 的混浊度。结果在图7B中显示。
如图7A所示，用0.5％w/v浓度的SLS浸泡所得到的是最大程度分离 的胎脂。SLS的浓度达到0.5％w/v证明使得胎脂分离程度的增加。SLS的 浓度大于0.5％w/v时证明只是使得胎脂的分离程度很小的增加。如图7B 所示，存在于0.5％w/v浓度的SLS的溶液中，当所用的胎脂薄膜越厚， 用表面活性物质分离胎脂的量越多。用于浸泡在SLS中Gortex或人类尸 体皮肤上分离的胎脂上的给药剂量的增加证明了所用的普通的表面活性 物质可从刚出生的新生儿身体上去除胎脂。
这些数据证明了所有的清洁剂，包括胎脂，可以从皮肤表面去除污 物，如使用完整的照片分析测量到的L-值的明显增加。所有清洁剂的效 果用统计学是不能区分的。扩大数码照片的分析显示胎脂对毛孔深处有 更好的清洁能力，通过在这些部位的碳颗粒数量的明显减少而证明。这 些数据还证明，在浸于SLS中(p＜0.05)后，在600nm的混浊度呈剂量 依赖性增加，说明使胎脂的分离程度增加。在样品或皮肤上覆盖等量的 矿脂时没有观察到混浊度的增加。
本发明在临床上的应用是将胎脂用于体外的皮肤清洁剂。在婴儿出 生之前，受肺表面活性物质的影响，胎脂游离在羊水中。这种过程与角 质层的自我清洁过程相似。胎脂作为内源性清洁剂，利用这种清洁剂的 功能来优化产房的管理，处理足月或非足月的婴儿的各种变化，处理未 消毒的环境。胎脂的亲水成分有助于去除亲水污物。胎脂的疏水成分有 助于去除疏水污物。对于刚出生婴儿的外源性清洁剂的选择可以选自适 合于分离污物的和内源性胎脂，用胎脂进行所期望的部分的或全部的分 离。
在一个实施方式中，胎脂是从新生儿的身体上取下，收集，并在4℃ 储存的。被分离的胎脂将进一步用于清洁获得该胎脂的新生儿的皮肤， 和/或从其获得胎脂的该新生儿的母亲身体的皮肤。这可继续用于任何清 洁程序直到新生儿及其母亲离开医院，或者可以被用于清洁局部的皮肤， 或完好的或受损的皮肤，或可以用于其它方面直到分离的胎脂被用完。
在另一个实施方式中，胎脂是从新生儿身体上取下的。分离的胎脂 经过处理可使其具有生理相容性以应用于不同个体的皮肤，即，不是从 其自己身体上获得的或其母亲身上获得胎脂的新生儿。这种处理是有效 的，因此，可杀死、灭活或去除病原体例如人免疫缺陷病毒，丙型肝炎 病毒等，和/或可以能够携带病原体的物质如血液，胎粪，胎尿等。例如 胎脂可以被收集在试管中，被覆盖，用高压灭菌锅进行加热灭菌处理， 用射线照射(光，X射线等)，或采用本领域技术人员公知的方法。为了 进一步证明关于分离的胎脂的生理学相容性，可在获得胎脂的新生儿自 身或该新生儿的母亲上分析血清学/免疫学的特征。分离的生理学相容性 的胎脂可用于清洁任何个体的皮肤表面，例如皮肤受损的个体，皮肤易 受损伤的个体，皮肤易受刺激的个体等。
从上述的内容可知，本发明的其它变化和实施例也很显然是本领域 的技术之内。例如，一种模拟的新的细胞组分可以被作为一种媒介物以 供给表面活性物质蛋白使得皮肤表面具有抗感染的作用，且还可作为一 种媒介物以提供皮肤的抗氧化剂例如维生素E。所述组合物可以包含其它 皮肤清洁剂，和/或其它组分例如润肤剂，保湿剂等。因此，具体的实施 例不能限制本发明的范围。
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