专利汇可以提供一种羊水细胞培养基及其制备方法专利检索,专利查询,专利分析的服务。并且本 发明 公开了一种 羊 水 细胞培养基及其制备方法,包括 基础 培养基以及添加在所述基础培养基中的添加成分,以基础培养基的体积作为基准,所述添加成分组成及其含量分别为结合蛋白,10-15mg/L、转 铁 蛋白,10-15mg/L、胰岛素,15-20mg/L、L-谷 氨 酰胺,2-4mM、大豆胰酶,2-4mg/L、生长因子,5-15ug/L、孕 酮 ,1-2nmol/L、氢化皮质酮,2-3nmol/L、 葡萄糖 ,5-25mM、脂类复合物,2-4mM以及亚硒酸钠,20-40nmol/L。本发明采用无血清等动物源的成分,排除血清中含有许多不确定物质对于羊水细胞体外培养造成的不利影响,此外添加有维生素E和L- 抗坏血酸 作为抗 氧 化剂能够促进羊水细胞的成长,具有协同效应,使得羊水细胞体外培养过程中克隆总数以及增殖速率等均有一定的提高,进而能够大大缩短羊水细胞的培养周期。,下面是一种羊水细胞培养基及其制备方法专利的具体信息内容。
1.一种羊水细胞培养基,包括基础培养基以及添加在所述基础培养基中的添加成分,其特征在于:以基础培养基的体积作为基准,所述添加成分组成及其含量分别为结合蛋白,
10-15mg/L、转铁蛋白,10-15mg/L、胰岛素,15-20mg/L、L-谷氨酰胺,2-4mM、大豆胰酶,2-
4mg/L、生长因子,5-15ug/L、孕酮,1-2nmol/L、氢化皮质酮,2-3nmol/L、葡萄糖,5-25mM、脂类复合物,2-4mM以及亚硒酸钠,20-40nmol/L。
2.如权利要求1所述的一种羊水细胞培养基,其特征在于:所述基础培养基采用DMEM/F12(1:1,V/V)基础培养基。
3.如权利要求1或2所述的一种羊水细胞培养基,其特征在于:所述DMEM/F12(1:1,V/V)基础培养基另添加有15-20mmol/LHEPES作为氢离子缓冲剂。
4.如权利要求1或2所述的一种羊水细胞培养基,其特征在于:所述DMEM/F12(1:1,V/V)基础培养基另添加有10-20mg/L维生素E、10-20mg/LL-抗坏血酸作为抗氧化剂。
5.如权利要求1-4任一所述的一种羊水细胞培养基的制备方法,包括以下步骤:
S1:DMEM/F12(1:1,V/V)基础培养基用900mL的注射水溶解后,添加碳酸氢钠1.2g和HEPES15-20mmol/L,混匀后静置;
S2:往S1溶解的DMEM/F12(1:1,V/V)基础培养基中添加结合蛋白10-15mg/L、转铁蛋白
10-15mg/L、胰岛素15-20mg/L、L-谷氨酰胺2-4mM、大豆胰酶2-4mg/L、生长因子5-15ug/L、孕酮1-2nmol/L、氢化皮质酮2-3nmol/L、葡萄糖5-25mM、脂类复合物2-4mM以及亚硒酸钠20-
40nmol/L后,静置;
S3:往S2所得溶液中添加10-20mg/L维生素E、10-20mg/LL-抗坏血酸后,添加注射水定容至1L,置于-20℃条件下保存即可。
6.如权利要求5所述的一种羊水细胞培养基及其制备方法,其特征在于:所述置于-20℃保存之前用0.2μm滤膜进行过滤除菌。
7.如权利要求5所述的一种羊水细胞培养基及其制备方法,其特征在于:所述静置时间不低于30min。
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