一种具有控制高血糖的三黄颗粒中药制剂及其制备方法
阅读：0发布：2020-11-14
专利汇可以提供一种具有控制高血糖的三黄颗粒中药制剂及其制备方法专利检索，专利查询，专利分析的服务。并且本 发明 公开了一种中药组合物制剂，可以作为控制高血糖药物。在主要原料黄芪 发酵 萃取物、黄精发酵萃取物、黄连发酵萃取物、地骨皮提取物、苦瓜提取物、葛根提取物和富铬 酵母 的 基础 上添加本领域常用的药用辅料，可制备为颗粒剂。本发明创新地使用了黄芪、黄精和黄连三者配伍 治疗 糖尿病，尤其是黄连。三者配伍：黄芪配黄连，温寒并施，温不伤阴，寒不伤气；黄精配黄连，滋阴清热而不伤阴；黄芪配黄精能益气养阴，益 肺 健脾滋肾，上、中、下三焦并治。诸药合用，共奏益气滋阴清热之法。，下面是一种具有控制高血糖的三黄颗粒中药制剂及其制备方法专利的具体信息内容。
1.一种具有控制高血糖的三黄颗粒中药制剂，其特征在于：包括以下重量份数的物质:
黄芪发酵萃取物8-10份、黄精发酵萃取物10-16份、黄连发酵萃取物3-6份、地骨皮提取物
14-18份、苦瓜提取物16-18份、葛根提取物12-16份、富铬酵母0.5-1.5份，添加剂3-5份。
2.根据权利要求1所述的一种具有控制高血糖的三黄颗粒中药制剂，其特征在于：添加剂为木糖醇、微晶纤维素、麦芽糊精、甜味剂一种或一种以上的组合。
3.根据权利要求1所述的一一种具有控制高血糖的三黄颗粒中药制剂的制备方法，其特征在于：步骤一、黄芪、黄精、黄连三种原料发酵萃取物的生产工艺：分别称取一定量的黄芪、黄精、黄连茎粗粉后，分别一次性加入2250ml、1350ml、150ml的水，于4℃下分别浸泡8小时后，121℃灭菌1小时，分别形成黄芪、黄精、黄连三种原料发酵基质；使黄芪、黄精、黄连三种原料发酵基质冷却达4℃至40℃；冷却后的黄芪、黄精、黄连三种原料发酵基质中分别加入600ml、360ml、40ml量的0、5、10、15、20%的无菌葡萄糖、蔗糖或乳醣溶液，使糖类分别于黄芪、黄精、黄连基质中的浓度为0、0.5、1.0、1.5、2.0%；分别再将3000ml、1800ml、200mL菌数约为9.5LogCFU/mL的枯草杆菌菌液加入后翻搅均匀，置入30℃或37℃中培养；发酵时间为
24至120小时；将黄芪、黄精、黄连三种原料发酵产物进行萃取。首先分别将黄芪、黄精、黄连三种原料发酵产物磨碎，将溶剂与磨碎的黄芪、黄精、黄连发酵产物以重量比10：1至30：1的比例混合成混合物，溶剂为去离子水或浓度为50%重量百分比的乙醇溶液，于4℃至40℃搅拌混合物2小时至4小时；然后将经搅拌后的混合物以离心力6000rpm离心10分钟，去除混合物的固体成份，以获得不同混合发酵萃取条件的上清液，其中上清液分别包含黄芪、黄精、黄连类三种原料发酵萃取物；将上清液干燥后分别得黄芪、黄精、黄连三种原料发酵萃取物备用；
步骤二、地骨皮取物生产工艺：水浸取：分别取一定量验收合格的地骨皮原料用8-10倍量水分2-3次进行提取，温度70-85℃，然后收集提取液、减压浓缩、喷雾干燥得水提取物；乙醇回流提取：水提后的药渣用8-10倍量95％的乙醇分2-3次进行回流提取，温度80-90℃，然后收集提取液、回收乙醇、减压浓缩、喷雾干燥得乙醇提取物；合并水提取物和乙醇提取物得地骨皮活性成分提取物备用；步骤三、苦瓜提取物生产工艺：称取一定量的苦瓜饮片粗粉，先用20倍量体积的80%乙醇在高频超声波下提取80分钟，过滤，苦瓜药渣再加20倍量体积的水，方法和超声提取相同，水提取液经浓缩得苦瓜提取物；结果苦瓜提取物提取率为用
20倍量体积的70%乙醇、回流2.5h的索氏提取法的5倍左右；用80%乙醇回流提取3h进行苦瓜药材的前处理，然后称取处理过的苦瓜样品，加8倍量体积的蒸馏水，连接超声细胞粉碎仪，超声处理1h，过滤，滤渣再用6倍量体积的蒸馏水超声处理40分钟，过滤，合并滤液，浓缩；所得苦瓜多肽活性成分提取物；
步骤四、葛根提取物生产工艺：取一定量验收合格的葛根原料用8-10倍量水分2-3次进行提取，温度70-85℃，然后收集提取液、减压浓缩、喷雾干燥得水提取物；水提后的药渣用
8-10倍量95％的乙醇分2-3次进行回流提取，温度80-90℃，然后收集提取液、回收乙醇、减压浓缩、喷雾干燥得乙醇提取物；合并水提取物和乙醇提取物得葛根提取物备用；步骤五、取黄芪发酵萃取物8-10份、黄精发酵萃取物10-16份、黄连发酵萃取物3-6份、地骨皮提取物
14-18份、苦瓜提取物16-18份、葛根提取物12-16份、富铬酵母0.5-1.5份，混合均匀，过筛制备为颗粒剂装袋。
4.根据权利要求1所述的一种具有控制高血糖的三黄颗粒中药制剂的服用方法，其特征在于：取本品10g用100mL的温开水进行冲调，每天早、中、晚饭前半小时服用，连续服用三个月。
一种具有控制高血糖的三黄颗粒中药制剂及其制备方法
技术领域
背景技术
[0002] 糖尿病是危害全球人类健康的一个严重的问题，由于该病是无法治愈，只能药物控制血糖，因此患病人数逐年上涨，患病人数越来越多，随着血糖升高，可发生碳水化合物、蛋白质、脂肪等代谢紊乱，可造成全身多脏器系统紊乱，可危及生命，因此血糖控制至关重要，如何有效地治疗和预防糖尿病及其并发症，已成为中医、西医及中西医结合所重视的共同课题。
[0003] 糖尿病是一个多病因的综合病征，与多种因素有关，如遗传、肥胖、运动不足、饮食结构不合理、精神因素、病毒感染、自身免疫、化学物质和药物等。虽然糖尿病的病因十分复杂，但归根到底则是由于胰岛素绝对缺乏、胰岛素相对缺乏、胰岛素效应不足(即胰岛素抵抗：指胰岛素执行其正常生物作用的效应不足，表现为外周组织尤其是肌肉、脂肪组织对葡萄糖的利用障碍)引发的。
[0004] 糖尿病在中医中属于“消渴”范畴，消渴病以气阴两虚、燥热内盛为主，发展至后期则气阴两伤，阴阳俱虚，变证百出。其以阴虚为主，燥热为标，两者互为因果，因此，清热润燥，益气、养阴生津成为指导古今医家治疗“消渴”的基本法则。
[0005] 目前降糖药物临床上仍以西药为主，但因其存在低血糖症和胃肠道反应等诸多不良反应。近几年来，随着对糖尿病病因病机研究的不断深入，发现中草药物降血糖作用温和持久，毒副作用小，作用机理具有多效应、多位点及多功能等特点，能够改善糖耐量和有效缓解糖尿病并发症的发生发展，并且具有综合治疗作用，但是更加有效的中药配伍组方，提高生物利用度，实现有效降低血糖越来越成为医药领域关注的重点，是研制降血糖新药的一个新的途径，已成为我国糖尿病防治工作的一大特色和优势。
发明内容
[0006] 本发明的目的是为了解决上述技术问题存在的不足，提供一种具有控制高血糖的三黄颗粒中药制剂及其制备方法。
[0007] 本发明是本于益气滋阴清热之法，通过对糖尿病的古今用药，结合现代药理研究和临床试验，依据科学理论、经过反复试验、发明创新，筛选出安全、无任何副作用并可以直接服用的6种植物提取物和1种人体必需的矿物质微量元素进行完美地有机组合，以期通过动物实验，配以先进的工艺流程，结合科学配伍达到自然，环保，安全，健康有效之目的。
[0008] 本发明是一种中药组合物制剂，可以作为控制高血糖药物。在主要原料黄芪发酵萃取物、黄精发酵萃取物、黄连发酵萃取物、地骨皮提取物、苦瓜提取物、葛根提取物和富铬酵母的基础上添加本领域常用的药用辅料，可制备为颗粒剂。
[0009] 为了实现上述目的，本发明是通过如下的技术方案来实现：一种具有控制高血糖的三黄颗粒中药制剂，包括以下重量份数的物质:黄芪发酵萃取物8-10份、黄精发酵萃取物10-16份、黄连发酵萃取物3-6份、地骨皮提取物14-18份、苦瓜提取物16-18份、葛根提取物12-16份、富铬酵母0.5-1.5份，添加剂3-5份。
[0011] 一种具有控制高血糖的三黄颗粒中药制剂的制备方法为：步骤一、黄芪、黄精、黄连三种原料发酵萃取物的生产工艺：
分别称取一定量的黄芪、黄精、黄连茎粗粉后，分别一次性加入2250ml、1350ml、150ml的水，于4℃下分别浸泡8小时后，121℃灭菌1小时，分别形成黄芪、黄精、黄连三种原料发酵基质；
使黄芪、黄精、黄连三种原料发酵基质冷却达4℃至40℃；
冷却后的黄芪、黄精、黄连三种原料发酵基质中分别加入600ml、360ml、40ml量的0、5、
10、15、20%的无菌葡萄糖、蔗糖或乳醣溶液，使糖类分别于黄芪、黄精、黄连基质中的浓度为
0、0.5、1.0、1.5、2.0%；分别再将3000ml、1800ml、200mL菌数约为9.5LogCFU/mL的枯草杆菌菌液加入后翻搅均匀，置入30℃或37℃中培养；发酵时间为24至120小时；
将黄芪、黄精、黄连三种原料发酵产物进行萃取。首先分别将黄芪、黄精、黄连三种原料发酵产物磨碎，将溶剂与磨碎的黄芪、黄精、黄连发酵产物以重量比10：1至30：1的比例混合成混合物，溶剂为去离子水或浓度为50%重量百分比的乙醇溶液，于4℃至40℃搅拌混合物2小时至4小时；然后将经搅拌后的混合物以离心力6000rpm离心10分钟，去除混合物的固体成份，以获得不同混合发酵萃取条件的上清液，其中上清液分别包含黄芪、黄精、黄连类三种原料发酵萃取物；将上清液干燥后分别得黄芪、黄精、黄连三种原料发酵萃取物备用；
步骤二、地骨皮取物生产工艺：
水浸取：分别取一定量验收合格的地骨皮原料用8-10倍量水分2-3次进行提取，温度
70-85℃，然后收集提取液、减压浓缩、喷雾干燥得水提取物；
乙醇回流提取：水提后的药渣用8-10倍量95％的乙醇分2-3次进行回流提取，温度80-
90℃，然后收集提取液、回收乙醇、减压浓缩、喷雾干燥得乙醇提取物；
合并水提取物和乙醇提取物得地骨皮活性成分提取物备用；
步骤三、苦瓜提取物生产工艺：
称取一定量的苦瓜饮片粗粉，先用20倍量体积的80%乙醇在高频超声波下提取80分钟，过滤，苦瓜药渣再加20倍量体积的水，方法和超声提取相同，水提取液经浓缩得苦瓜提取物；结果苦瓜提取物提取率为用20倍量体积的70%乙醇、回流2.5h的索氏提取法的5倍左右；
用80%乙醇回流提取3h进行苦瓜药材的前处理，然后称取处理过的苦瓜样品，加8倍量体积的蒸馏水，连接超声细胞粉碎仪，超声处理1h，过滤，滤渣再用6倍量体积的蒸馏水超声处理40分钟，过滤，合并滤液，浓缩；所得苦瓜多肽活性成分提取物；
步骤四、葛根提取物生产工艺：
取一定量验收合格的葛根原料用8-10倍量水分2-3次进行提取，温度70-85℃，然后收集提取液、减压浓缩、喷雾干燥得水提取物；水提后的药渣用8-10倍量95％的乙醇分2-3次进行回流提取，温度80-90℃，然后收集提取液、回收乙醇、减压浓缩、喷雾干燥得乙醇提取物；合并水提取物和乙醇提取物得葛根提取物备用；
步骤五、取黄芪发酵萃取物8-10份、黄精发酵萃取物10-16份、黄连发酵萃取物3-6份、地骨皮提取物14-18份、苦瓜提取物16-18份、葛根提取物12-16份、富铬酵母0.5-1.5份，混合均匀，过筛制备为颗粒剂装袋。
分别称取一定量的黄芪、黄精、黄连茎粗粉后，分别一次性加入2250ml、1350ml、150ml的水，于4℃下分别浸泡8小时后，121℃灭菌1小时，分别形成黄芪、黄精、黄连三种原料发酵基质；
使黄芪、黄精、黄连三种原料发酵基质冷却达4℃至40℃；
冷却后的黄芪、黄精、黄连三种原料发酵基质中分别加入600ml、360ml、40ml量的0、5、
10、15、20%的无菌葡萄糖、蔗糖或乳醣溶液，使糖类分别于黄芪、黄精、黄连基质中的浓度为
0、0.5、1.0、1.5、2.0%；分别再将3000ml、1800ml、200mL菌数约为9.5LogCFU/mL的枯草杆菌菌液加入后翻搅均匀，置入30℃或37℃中培养；发酵时间为24至120小时；
将黄芪、黄精、黄连三种原料发酵产物进行萃取。首先分别将黄芪、黄精、黄连三种原料发酵产物磨碎，将溶剂与磨碎的黄芪、黄精、黄连发酵产物以重量比10：1至30：1的比例混合成混合物，溶剂为去离子水或浓度为50%重量百分比的乙醇溶液，于4℃至40℃搅拌混合物2小时至4小时；然后将经搅拌后的混合物以离心力6000rpm离心10分钟，去除混合物的固体成份，以获得不同混合发酵萃取条件的上清液，其中上清液分别包含黄芪、黄精、黄连类三种原料发酵萃取物；将上清液干燥后分别得黄芪、黄精、黄连三种原料发酵萃取物备用；
步骤二、地骨皮取物生产工艺：
水浸取：分别取一定量验收合格的地骨皮原料用8-10倍量水分2-3次进行提取，温度
70-85℃，然后收集提取液、减压浓缩、喷雾干燥得水提取物；
乙醇回流提取：水提后的药渣用8-10倍量95％的乙醇分2-3次进行回流提取，温度80-
90℃，然后收集提取液、回收乙醇、减压浓缩、喷雾干燥得乙醇提取物；
合并水提取物和乙醇提取物得地骨皮活性成分提取物备用；
步骤三、苦瓜提取物生产工艺：
称取一定量的苦瓜饮片粗粉，先用20倍量体积的80%乙醇在高频超声波下提取80分钟，过滤，苦瓜药渣再加20倍量体积的水，方法和超声提取相同，水提取液经浓缩得苦瓜提取物；结果苦瓜提取物提取率为用20倍量体积的70%乙醇、回流2.5h的索氏提取法的5倍左右；
用80%乙醇回流提取3h进行苦瓜药材的前处理，然后称取处理过的苦瓜样品，加8倍量体积的蒸馏水，连接超声细胞粉碎仪，超声处理1h，过滤，滤渣再用6倍量体积的蒸馏水超声处理40分钟，过滤，合并滤液，浓缩；所得苦瓜多肽活性成分提取物；
步骤四、葛根提取物生产工艺：
取一定量验收合格的葛根原料用8-10倍量水分2-3次进行提取，温度70-85℃，然后收集提取液、减压浓缩、喷雾干燥得水提取物；水提后的药渣用8-10倍量95％的乙醇分2-3次进行回流提取，温度80-90℃，然后收集提取液、回收乙醇、减压浓缩、喷雾干燥得乙醇提取物；合并水提取物和乙醇提取物得葛根提取物备用；
步骤五、取黄芪发酵萃取物8-10份、黄精发酵萃取物10-16份、黄连发酵萃取物3-6份、地骨皮提取物14-18份、苦瓜提取物16-18份、葛根提取物12-16份、富铬酵母0.5-1.5份，混合均匀，过筛制备为颗粒剂装袋。
[0012] 本发明的三黄颗粒中药制剂是从众多的与糖尿病治疗相关的药材中它们各自所能发挥的功效及将它们进行搭配所能产生的协调效果，按照以阴虚治疗为主，燥热治疗为标的原则科学选择适当药材配伍而成，即补气养阴、清热生津，各成分之间协同配伍，相互增加功效，配方独特，功效显著。依据糖尿病人的发病机理，进行针对性调节、系统性调理，补益结合有效降低血糖的功效显著增加。
[0013] 本发明创新地使用了黄芪、黄精和黄连三者配伍治疗糖尿病，尤其是黄连。三者配伍：黄芪配黄连，温寒并施，温不伤阴，寒不伤气；黄精配黄连，滋阴清热而不伤阴；黄芪配黄精能益气养阴，益肺健脾滋肾，上、中、下三焦并治。诸药合用，共奏益气滋阴清热之法。
[0014] 本发明创新地使用了黄芪、黄精、黄连三种原料发酵萃取物黄芪多糖、黄精多糖、黄连黄酮提高了各原料有效成分的提取率和吸收率：经过发酵进行益生菌转化，更易被动物体吸收，彻底发挥药效；经发酵后的黄芪多糖、黄精多糖、黄连黄酮疗效提速，药效比未发酵黄芪、黄精、黄连提高4-28倍，促免疫效果更好，用量更少；发酵黄芪多糖、黄精多糖、黄连黄酮不仅能够提高有效成分，显著降低药物的不良反应，达到脱毒增效的作用。而且还具有保护活性成分免受破坏，降解大分子物质，产生新的活性物质，降低中药毒副作用等优势。同时改善了中药黄芪、黄精、黄连的口味，增加了适口性。
[0015] 黄芪、黄精、黄连三者配伍对糖尿病并发症，特别是血管、微血管病变具有一定的预防作用，其机理是:调节脂质代谢，降低血液粘度，改善血液流变学，增加红细胞的含量，清除体内过多的过氧化物，从多环节来降低血糖并预防并发症的发生。所以，治疗糖尿病时，本发明认为应以益气滋阴清热为主要治法。总之，益气滋阴清热法是糖尿病的主要治疗方法之一，而黄芪、黄精、黄连配伍正是这一治法的具体体现。三者配伍对糖尿病及其并发症具有较好的治疗和预防作用，既符合中医药传统理论，又有一定的药理学依据，对于临床实践有一定的指导意义。
[0016] 本发明中各种原料的药学功效如下：1.黄芪提取物：中药黄芪为豆科草本植物蒙古黄芪、膜荚黄芪的根。现代研究发现，黄芪含皂甙、蔗糖、多糖、多种氨基酸等多种有效成分，这些活性成分均有促进抗体生成和免疫反应的作用，黄芪多糖是黄芪的主要活性成分之一，是黄芪发挥作用的主要成分。黄芪具有补气固表、利水退肿、托毒排脓、生肌等功效，具有增强机体免疫功能、保肝、利尿、抗衰老、抗应激、降压和较广泛的抗菌作用。
[0017] 2.黄精提取物：（1）降血糖。黄精里面含有黏质液、天门冬氨酸、高丝氨酸、醌类、强心苷等，对于冠状动脉的血流量的增加非常的有帮助，对于血糖和尿糖的抑制有显著的效果，尤其是因为肾上腺素引起的血糖过高，所以很适合糖尿病人和慢性疾病的人群来调理身体。（2）滋阴润肺。能够达到很好的生津止渴、补肾强身、益脾养血的作用。（3）增强免疫力。黄精是有很好的降血压、降血脂和降血糖的作用，对于动脉硬化和抗菌方面也是有很好的作用和效果，延缓衰老，免疫激活细胞。
[0018] 3.黄连提取物：黄连为毛莨科黄连属植物黄连、三角叶黄连或云莲的干燥根茎。近年来的中药药理学研究报道，黄连除了具有抗菌、抗病毒、抗炎、解热、增强免疫功能作用外，还具有抗血小板聚集，降血压、降血糖等作用。其降血糖机理为抑制肝脏糖元异生和／或促进外周组织的葡萄糖酵解，抗升糖激素作用以及促进胰岛β细胞再生及功能恢复也与降血糖有关。
[0019] 4.地骨皮提取物：又名枸杞根，是中药的一种，黑棕色粉末。具有凉血除蒸，清肺降火的功效。地骨皮煎剂给家兔灌胃，先使血糖短时间的升高，然后持久降低，4-5小时降低最明显，平均降低14%，维持4-8小时，然后恢复正常。地骨皮煎剂口服对实验性糖尿病小鼠胰岛B细胞的形态结构损害也有一定减轻作用。地骨皮对小鼠葡萄糖性及肾上腺素性高血糖均有显著的降血糖作用。药理学研究表明，地骨皮具有明显的降血压及降血糖的作用。
[0020] 5.苦瓜提取物：苦瓜中的“苦瓜多肽”是一种纯天然植物成分，通过激活胰岛素、激活胰岛素受体，提高胰岛素有效利用率来调节血糖，从而，实现了血糖按照人体正常生理自然规律表达的目的，且没有副作用。“苦瓜多肽”为糖尿病患者及血糖偏高人群提供了一种安全，持久的血糖调节的解决方案，缓解了人们在使用药物调节血糖时，给自身带来的一系列身心损害的难题。
[0021] 6.葛根提取物：葛根主要成分中的葛根黄酮具有降低血糖、降低血脂等功效，能对糖基化终产物致血管内皮细胞损伤有明显的修复作用。葛根中的葛根素能够提高胰岛素敏感性，减轻胰岛素抵抗并清除体内自由基，从而起到降血糖作用。葛根素还能扩张外周血管，改善糖尿病微血管病变所导致的周围神经损伤、视网膜病变和肾功能病变。
[0022] 7.富铬酵母：铬是人体必需的微量元素，是葡萄糖耐量因子(GTF)的中心活性成分，是胰岛素的一种“协同激素”。葡萄糖耐量因子在糖、脂肪及核酸代谢中具有重要的功能。GTF参与形成胰岛素三元复合物和膜受体，使胰岛素功能稳定，抑制胰岛素酶，可维持胰岛素量，并增强与胰岛素受体的结合。铬也可能与一些酶的活性有关，通过激活三羧酸循环中的琥珀酸脱氢酶加速琥珀酸的氧化，从而增加糖的利用。铬还可以增加人体细胞胰岛素受体的数量。因此，缺铬可引起周围组织对内外源性胰岛素敏感性下降。长期缺乏，可引起糖耐量降低。到一定程度后，胰腺分泌胰岛素的能力衰竭，则胰岛素依赖功能将严重受损及发生糖尿病。
具体实施方式
[0023] 下面结合实施例对本发明进行详细说明。
[0024] 实施例1黄芪发酵萃取物芪8份、黄精发酵萃取物10份、黄连发酵萃取物3份、地骨皮提取物18份、苦瓜提取物16份、葛根提取物16份、富铬酵母0.5份、木糖醇0.5份、微晶纤维素1份、麦芽糊精1.5份、甜味剂0.5份。
[0025] 实施例2黄芪发酵萃取物9份、黄精发酵萃取物10份、黄连发酵萃取物4份、地骨皮提取物14份、苦瓜提取物18份、葛根提取物12份、富铬酵母0.8份、木糖醇0.8份、微晶纤维素1.5份、麦芽糊精1.8份、甜味剂0.8份。
[0026] 实施例3黄芪发酵萃取物10份、黄精发酵萃取物12份、黄连发酵萃取物5份、地骨皮提取物17份、苦瓜提取物16份、葛根提取物15份、富铬酵母1份、木糖醇1.2份、微晶纤维素1.8份、麦芽糊精2份、甜味剂1份。
[0027] 实施例1、2、3的制备方法为：步骤一、黄芪、黄精、黄连三种原料发酵萃取物的生产工艺：
分别称取一定量的黄芪、黄精、黄连茎粗粉后，分别一次性加入2250ml、1350ml、150ml的水，于4℃下分别浸泡8小时后， 121℃灭菌1小时，分别形成黄芪、黄精、黄连三种原料发酵基质；
使黄芪、黄精、黄连三种原料发酵基质冷却达4℃至40℃；
冷却后的黄芪、黄精、黄连三种原料发酵基质中分别加入600ml、360ml、40ml量的0、5、
10、15、20%的无菌葡萄糖、蔗糖或乳醣溶液，使糖类分别于黄芪、黄精、黄连基质中的浓度为
0、0.5、1.0、1.5、2.0%；分别再将3000ml、1800ml、200mL菌数约为9.5LogCFU/mL的枯草杆菌菌液加入后翻搅均匀，置入30℃或37℃中培养；发酵时间为24至120小时；
将黄芪、黄精、黄连三种原料发酵产物进行萃取。首先分别将黄芪、黄精、黄连三种原料发酵产物磨碎，将溶剂与磨碎的黄芪、黄精、黄连发酵产物以重量比10：1至30：1的比例混合成混合物，溶剂为去离子水或浓度为50%重量百分比的乙醇溶液，于4℃至40℃搅拌混合物2小时至4小时；然后将经搅拌后的混合物以离心力6000rpm离心10分钟，去除混合物的固体成份，以获得不同混合发酵萃取条件的上清液，其中上清液分别包含黄芪、黄精、黄连类三种原料发酵萃取物；将上清液干燥后分别得黄芪、黄精、黄连三种原料发酵萃取物备用；
步骤二、地骨皮取物生产工艺：
水浸取：分别取一定量验收合格的地骨皮原料用8-10倍量水分2-3次进行提取，温度
70-85℃，然后收集提取液、减压浓缩、喷雾干燥得水提取物；
乙醇回流提取：水提后的药渣用8-10倍量95％的乙醇分2-3次进行回流提取，温度80-
90℃，然后收集提取液、回收乙醇、减压浓缩、喷雾干燥得乙醇提取物；
合并水提取物和乙醇提取物得地骨皮活性成分提取物备用；
步骤三、苦瓜提取物生产工艺：
称取一定量的苦瓜饮片粗粉，先用20倍量体积的80%乙醇在高频超声波下提取80分钟，过滤，苦瓜药渣再加20倍量体积的水，方法和超声提取相同，水提取液经浓缩得苦瓜提取物；结果苦瓜提取物提取率为用20倍量体积的70%乙醇、回流2.5h的索氏提取法的5倍左右；
用80%乙醇回流提取3h进行苦瓜药材的前处理，然后称取处理过的苦瓜样品，加8倍量体积的蒸馏水，连接超声细胞粉碎仪，超声处理1h，过滤，滤渣再用6倍量体积的蒸馏水超声处理40分钟，过滤，合并滤液，浓缩；所得苦瓜多肽活性成分提取物；
步骤四、葛根提取物生产工艺：
取一定量验收合格的葛根原料用8-10倍量水分2-3次进行提取，温度70-85℃，然后收集提取液、减压浓缩、喷雾干燥得水提取物；水提后的药渣用8-10倍量95％的乙醇分2-3次进行回流提取，温度80-90℃，然后收集提取液、回收乙醇、减压浓缩、喷雾干燥得乙醇提取物；合并水提取物和乙醇提取物得葛根提取物备用；
步骤五、取黄芪发酵萃取物8-10份、黄精发酵萃取物10-16份、黄连发酵萃取物3-6份、地骨皮提取物14-18份、苦瓜提取物16-18份、葛根提取物12-16份、富铬酵母0.5-1.5份，混合均匀，过筛制备为颗粒剂装袋。
分别称取一定量的黄芪、黄精、黄连茎粗粉后，分别一次性加入2250ml、1350ml、150ml的水，于4℃下分别浸泡8小时后， 121℃灭菌1小时，分别形成黄芪、黄精、黄连三种原料发酵基质；
使黄芪、黄精、黄连三种原料发酵基质冷却达4℃至40℃；
冷却后的黄芪、黄精、黄连三种原料发酵基质中分别加入600ml、360ml、40ml量的0、5、
10、15、20%的无菌葡萄糖、蔗糖或乳醣溶液，使糖类分别于黄芪、黄精、黄连基质中的浓度为
0、0.5、1.0、1.5、2.0%；分别再将3000ml、1800ml、200mL菌数约为9.5LogCFU/mL的枯草杆菌菌液加入后翻搅均匀，置入30℃或37℃中培养；发酵时间为24至120小时；
将黄芪、黄精、黄连三种原料发酵产物进行萃取。首先分别将黄芪、黄精、黄连三种原料发酵产物磨碎，将溶剂与磨碎的黄芪、黄精、黄连发酵产物以重量比10：1至30：1的比例混合成混合物，溶剂为去离子水或浓度为50%重量百分比的乙醇溶液，于4℃至40℃搅拌混合物2小时至4小时；然后将经搅拌后的混合物以离心力6000rpm离心10分钟，去除混合物的固体成份，以获得不同混合发酵萃取条件的上清液，其中上清液分别包含黄芪、黄精、黄连类三种原料发酵萃取物；将上清液干燥后分别得黄芪、黄精、黄连三种原料发酵萃取物备用；
步骤二、地骨皮取物生产工艺：
水浸取：分别取一定量验收合格的地骨皮原料用8-10倍量水分2-3次进行提取，温度
70-85℃，然后收集提取液、减压浓缩、喷雾干燥得水提取物；
乙醇回流提取：水提后的药渣用8-10倍量95％的乙醇分2-3次进行回流提取，温度80-
90℃，然后收集提取液、回收乙醇、减压浓缩、喷雾干燥得乙醇提取物；
合并水提取物和乙醇提取物得地骨皮活性成分提取物备用；
步骤三、苦瓜提取物生产工艺：
称取一定量的苦瓜饮片粗粉，先用20倍量体积的80%乙醇在高频超声波下提取80分钟，过滤，苦瓜药渣再加20倍量体积的水，方法和超声提取相同，水提取液经浓缩得苦瓜提取物；结果苦瓜提取物提取率为用20倍量体积的70%乙醇、回流2.5h的索氏提取法的5倍左右；
用80%乙醇回流提取3h进行苦瓜药材的前处理，然后称取处理过的苦瓜样品，加8倍量体积的蒸馏水，连接超声细胞粉碎仪，超声处理1h，过滤，滤渣再用6倍量体积的蒸馏水超声处理40分钟，过滤，合并滤液，浓缩；所得苦瓜多肽活性成分提取物；
步骤四、葛根提取物生产工艺：
取一定量验收合格的葛根原料用8-10倍量水分2-3次进行提取，温度70-85℃，然后收集提取液、减压浓缩、喷雾干燥得水提取物；水提后的药渣用8-10倍量95％的乙醇分2-3次进行回流提取，温度80-90℃，然后收集提取液、回收乙醇、减压浓缩、喷雾干燥得乙醇提取物；合并水提取物和乙醇提取物得葛根提取物备用；
步骤五、取黄芪发酵萃取物8-10份、黄精发酵萃取物10-16份、黄连发酵萃取物3-6份、地骨皮提取物14-18份、苦瓜提取物16-18份、葛根提取物12-16份、富铬酵母0.5-1.5份，混合均匀，过筛制备为颗粒剂装袋。
[0028] 服用方法：取本品1包（10g）用100mL的温开水进行冲调，每天早、中、晚饭前半小时服用，连续服用三个月。
[0029] 降血糖功能动物试验研究1、实验动物功效检测试验
【动物及分组】
由南方医科大学、中山大学、广州中医药大学联合实验室选用广东省医学实验动物中心繁殖的SPF级健康成年昆明种雄性SD大鼠，体重为200～250克，其中120只动物制造高血糖模型，用于测定样品对高血糖模型动物血糖的影响，80只动物用于样品对正常动物血糖影响实验。正常组、糖尿病模型组、阳性药物组、低剂量组、中剂量组、高剂量组。
【动物及分组】
由南方医科大学、中山大学、广州中医药大学联合实验室选用广东省医学实验动物中心繁殖的SPF级健康成年昆明种雄性SD大鼠，体重为200～250克，其中120只动物制造高血糖模型，用于测定样品对高血糖模型动物血糖的影响，80只动物用于样品对正常动物血糖影响实验。正常组、糖尿病模型组、阳性药物组、低剂量组、中剂量组、高剂量组。
[0030] 【动物实验过程】SPF级环境饲养100天，其中适应性饲养10天，造模60天，治疗30天。
[0031] 2型糖尿病造模方法：连续注射低剂量STZ（20mg/kg）3-5天，高脂饮食8周左右可成功建立2型糖尿病模型。
[0032] 【治疗过程】低剂量组、中剂量组、高剂量组：相应浓度的颗粒水溶液（或悬乳液）灌胃，1次/天，连续
30天。
30天。
[0033] 阳性药物组：相应浓度的阳性药物水溶液（或悬乳液）灌胃，1次/天，连续30天。
[0034] 正常组、糖尿病模型组：生理盐水灌胃，1次/天，连续30天实验结束，处死大鼠，取血液、尿液、胰腺、血管、肾脏、肝脏备检。
[0035] 【实验剂量】剂量选择配制：本发明产品人体口服推荐剂量为10g/次，以60kg体重计算，折合剂量为
0.05g／kg.bw，设低、中、高三个剂量组，分别为0.25g／kg.bw、0.50g／kg.bw、1.50g／kg.bw(分别相当于人体推荐剂量的5、10、30倍)。取实施例1样品内容物2.5g、5.0g、15.0g加蒸馏水至
200mL，配成低、中、高剂量所需浓度。每天灌胃一次，灌胃体积为0.2ml／10g.bw，对照组予以等体积的溶剂，连续30天。
0.05g／kg.bw，设低、中、高三个剂量组，分别为0.25g／kg.bw、0.50g／kg.bw、1.50g／kg.bw(分别相当于人体推荐剂量的5、10、30倍)。取实施例1样品内容物2.5g、5.0g、15.0g加蒸馏水至
200mL，配成低、中、高剂量所需浓度。每天灌胃一次，灌胃体积为0.2ml／10g.bw，对照组予以等体积的溶剂，连续30天。
[0036] 【降低空腹血糖实验】高血糖模型动物：大鼠禁食24小时后，尾静脉注射四氧嘧啶(45mg／kg.bw)，5天后禁食5小时，测血糖值，血糖值10～25mmol／L为高血糖模型成功动物。选高血糖模型成功动物40只，随机分为一个模型对照组和三个剂量组(组间差血糖值不大于1.1mmol／L)。剂量组给予低、中、高三个不同浓度受试液，模型对照组给予溶剂，连续30天，禁食5小时后测空腹血糖值，比较各组动物血糖值及血糖下降百分率。血糖下降百分率=(实验前血糖值-实验后血糖值)／实验前血糖值×100％。
[0037] 正常动物：40只大鼠按禁食5小时的血糖水平分组，随机分为1个对照组和3个受试样品组(低、中、高剂量组)。低、中、高剂量组给予受试液，对照组给予溶剂，连续30天，禁食5小时后测空腹血糖值，比较各组动物血糖值及血糖下降百分率。血糖下降百分率=(实验前血糖值-实验后血糖值)／实验前血糖值×100％。
[0038] 【糖耐量实验】高血糖模型成功动物禁食5小时，剂量组给予不同浓度受试液，模型对照组给予同体积溶剂，15～20分钟后经口给予葡萄糖2.0g／kg.bw，测定给葡萄糖0、0.5、2小时后的血糖值，观察模型对照组与受试样品组给予葡萄糖后各时点血糖曲线下面积的变化。血糖曲线下面积=0.25×(0小时血糖值+4×0.5小时血糖值+3×小时血糖值)。
[0039] 实验数据处理及结果判定：用Excel、Spss软件进行数据转化和统计分析，空腹血糖和糖耐量二项指标中一项指标阳性，且对正常动物空腹血糖无影响，即可判定该受试样品控制高血糖功能动物实验结果阳性。
[0040] 、实验检测（1）一般观察：外观特征、行为活动、精神症状、二便情况，每日记录进食量、饮水量、体重情况。
[0041] （2）血糖检测：造模前、造模成功、治疗结束分别检测血糖1次，共3次（特殊情况可随时检测）。
[0042] （3）尿液生化指标检测：尿酮体、尿蛋白、尿糖，实验结束时检测1次。
[0043] （4）血液生化指标检测：糖基化血红蛋白、糖化血清蛋白、血脂，实验结束时检测1次。
[0044] （5）血清胰岛素检测：实验结束时检测1次。
[0045] （6）形态学检查：胰腺、血管、肾脏、肝脏。
[0046] 、急性毒性试验【动物及分组】
SD大鼠，雌雄各半，200-250g，40只，分为4组：正常组、低剂量组、中剂量组、高剂量组。
SD大鼠，雌雄各半，200-250g，40只，分为4组：正常组、低剂量组、中剂量组、高剂量组。
[0047] 【动物实验过程】SPF级环境饲养21天，其中适应性饲养7天，给药14天。
[0048] 给药过程：低剂量组、中剂量组、高剂量组：相应浓度的颗粒水溶液（或悬乳液）灌胃，1次/天，连续
14天。
14天。
[0049] 正常组：生理盐水灌胃，1次/天，连续14天。
[0050] 实验结束，处死大鼠，取血液、尿液、心脏、肝脏、脾脏、肺脏、肾脏、胰腺、脑垂体、甲状腺、肾上腺、睾丸、卵巢备检。
[0051] 【检测】（1）尿常规生化指标检测：实验结束时检测1次。
[0052] （2）血液生化指标检测：血常规、心肌酶、肝功指标、激素指标，实验结束时检测1次。
[0053] （3）形态学检查：肝脏、脾脏、肺脏、肾脏、胰腺、脑垂体、甲状腺、肾上腺、睾丸、卵巢。
[0054] 、慢性毒性试验【动物及分组】
SD大鼠，雌雄各半，24-28g，40只，分为4组：正常组、低剂量组、中剂量组、高剂量组。
SD大鼠，雌雄各半，24-28g，40只，分为4组：正常组、低剂量组、中剂量组、高剂量组。
[0055] 【动物实验过程】SPF级环境饲养187天，其中适应性饲养7天，给药180天。
[0056] 给药过程：低剂量组、中剂量组、高剂量组：相应浓度的颗粒水溶液（或悬乳液）灌胃，1次/天，连续14天。
[0057] 正常组：生理盐水灌胃，1次/天，连续14天。
[0058] 实验结束，处死大鼠，取血液、尿液、心脏、肝脏、脾脏、肺脏、肾脏、胰腺、脑垂体、甲状腺、肾上腺、睾丸、卵巢备检。
[0059] 【检测】（1）尿常规生化指标检测：实验结束时检测1次。
[0060] （2）血液生化指标检测：血常规、心肌酶、肝功指标、激素指标，实验结束时检测1次。
[0061] （3）形态学检查：肝脏、脾脏、肺脏、肾脏、胰腺、脑垂体、甲状腺、肾上腺、睾丸、卵巢。
[0062] 、结果分析试验结果
【实施例1对大鼠体重的影响】
高血糖模型动物样品各剂量组大鼠的造模前初始体重、造模成功初始体重、中期和末期体重及增重与模型对照组比较，差异均无显著性(P>0.05)，见表1；正常动物试验组的体重在试验初始、中期和末期的体重及增重量，与阴性对照组比较，均无显著性差异(P>
0.05)，表2。结果表明，实施例1对高血糖模型大鼠和正常大鼠的体重无明显影响。
【实施例1对大鼠体重的影响】
高血糖模型动物样品各剂量组大鼠的造模前初始体重、造模成功初始体重、中期和末期体重及增重与模型对照组比较，差异均无显著性(P>0.05)，见表1；正常动物试验组的体重在试验初始、中期和末期的体重及增重量，与阴性对照组比较，均无显著性差异(P>
0.05)，表2。结果表明，实施例1对高血糖模型大鼠和正常大鼠的体重无明显影响。
[0063] 表1.对高血糖模型大鼠体重的影响注：各剂量组大鼠的造模前初始体重、造模成功初始体重、中期和末期体重及增重与模型对照组比较，差异均无显著(P>0.05)。
[0064] 表2.对正常大鼠体重的影响注：试验组大鼠的初始体重、中期和末期的体重及增重与空白对照组比较，差异均无显著性(P>0.05)。
[0065] 【实施例1对高血糖模型大鼠空腹血糖的影响】从表3可见，造模后4小时禁食后血糖值>10mmol／L，可见模型成立。经口给予大鼠不同剂量的试验样品30天，各剂量组的第30天血糖值均低于模型对照组，但各剂量组血糖值与模型对照组比较差异无显著性(P>0.05)；各剂量组的血糖下降值及血糖下降百分率均大于模型对照组，且高、中剂量组的血糖下降值及下降百分率与模型对照组的差异具有显著性(分别P<0.01和P<0.05)，表明实施例1具有降低高血糖模型大鼠的空腹血糖的作用。
[0066] 表3.高血糖模型大鼠的空腹血糖结果剂量组 动物数 造模后血糖值 第30天血糖值 血糖下降值 血糖下降百分率
(mg/kg BW) (只) (mmol/L) (mmol/L) (mmol/L) (%)
600 12 18.3 ± 1.4 13.99 ± 3.91 4.34 ± 2.7 24.60 ± 10.34**
300 12 18.2 ± 1.2 14.45 ± 3.17 3.78 ± 2.2 20.99 ± 7.94*
150 12 18.3 ± 3.33 15.70 ± 2.89 2.61 ± 1.38 14.13 ± 6.81
模型对照 12 18.2 ± 2.95 16.03 ± 3.47 2.23 ± 1.25 12.72 ± 7.10
注：与模型对照组比较，*P<0.05，**P<0.01。
(mg/kg BW) (只) (mmol/L) (mmol/L) (mmol/L) (%)
600 12 18.3 ± 1.4 13.99 ± 3.91 4.34 ± 2.7 24.60 ± 10.34**
300 12 18.2 ± 1.2 14.45 ± 3.17 3.78 ± 2.2 20.99 ± 7.94*
150 12 18.3 ± 3.33 15.70 ± 2.89 2.61 ± 1.38 14.13 ± 6.81
模型对照 12 18.2 ± 2.95 16.03 ± 3.47 2.23 ± 1.25 12.72 ± 7.10
注：与模型对照组比较，*P<0.05，**P<0.01。
[0067] 【实施例1对高血糖模型大鼠糖耐量试验的影响】表4.高血糖模型大鼠糖耐量试验结果
注：与模型对照组比较，*P<0.05。
注：与模型对照组比较，*P<0.05。
[0068] 从表4可见，经口给予高血糖模型大鼠不同剂量的试验样品30天后，样品各剂量组各时间点的血糖曲线下面积比模型对照组低，其中的高剂量组的血糖曲线下面积与模型对照组的差异具有显著性(P<0.05)，表明该样品具有降低高血糖大鼠糖耐量试验各时点血糖曲线下面积的作用。
[0069] 【实施例1对正常大鼠空腹血糖的影响】由表5可见，经口给予正常大鼠600mg／kgBW剂量30天，大鼠的血糖值与试验前比较无显著性差异(P>0.05)，与空白对照组比较亦无显著性差异(P>0.05)，表明该样品对正常大鼠的空腹血糖没有明显影响。
[0070] 表5.正常大鼠空腹血糖结果7、结果判定
分别以400、800、2400mg／kgBW(相当于人体推荐量5、10、20倍)剂量的试验给高血糖模型大鼠连续灌胃30天，能降低高血糖模型大鼠的空腹血糖值，降低高血糖模型大鼠的糖耐量试验各时点血糖曲线下面积，对大鼠的体重无明显影响；以600mg／kgBW剂量的给正常大鼠连续灌胃30天，对正常大鼠的空腹血糖值和大鼠的体重无明显影响。
分别以400、800、2400mg／kgBW(相当于人体推荐量5、10、20倍)剂量的试验给高血糖模型大鼠连续灌胃30天，能降低高血糖模型大鼠的空腹血糖值，降低高血糖模型大鼠的糖耐量试验各时点血糖曲线下面积，对大鼠的体重无明显影响；以600mg／kgBW剂量的给正常大鼠连续灌胃30天，对正常大鼠的空腹血糖值和大鼠的体重无明显影响。
[0071] 从上述实验结果分析来看，在益气滋阴清热治法的中医理论指导下，本发明具有控制高血糖的三黄颗粒中药组合物制剂对四氧嘧啶性大鼠的症状及实验室指标具有明显的改善作用，其机理是通过提高体内胰岛素的含量而产生的，当然并不能排除本发明具有控制高血糖的三黄颗粒中药组合物制剂降高血糖的其它机理，即胰外作用。综上结果，该剂量具有控制高血糖的功能。
[0072] 实施例3 降血糖功能受试者试验研究随机选取300名志愿者对本发明具有控制高血糖的三黄颗粒中药组合物制剂进行测试，服用方法为：每袋10g产品经100mL的温开水进行冲调，连续服用三个月，并反馈服用效果。结果显示：96.0％的服用者评价本发明提供的具有控制高血糖的三黄颗粒中药组合物制剂对于高血糖有显著的调节作用。
[0073] 本发明的有关实验资料如下：1、实验的目的
研究本发明的具有控制高血糖的三黄颗粒中药组合物制剂的效果。
研究本发明的具有控制高血糖的三黄颗粒中药组合物制剂的效果。
[0074] 、实验方法受试者每天按推荐剂量服用样品，连续服用3个月。试验期间不改变原来的饮食习惯，正常饮食。
[0075] 实验设计随机选择300名高血糖志愿者分成3组，每组100例，分别服用本发明实施例1制备的制品，排除以下患者：⑴患有恶性疾病，如肿瘤、严重心、肝、肾疾病；甲状腺疾病；⑵实验开始前1个月内曾服用降糖、降压、降脂药物。
[0076] 将上述300例受试者每天早、中、晚饭前半小时服用本发明具有控制高血糖的三黄颗粒中药组合物，连续服用3个月，其余时间不限制饮食，不改变生活方式。
[0077] 本实验采用患者自身对照法评价各组的效果。
[0078] 检测指标在进行实验前和实验结束时，各组均检测以下身体指标：血压、葡萄糖、总胆固醇、甘油三酯、高密度胆固醇、低密度胆固醇。
[0079] 患者实验前后自身对照任一血压指标和生化指标的变化大于1%为有效，大于5%为显效，小于1%的为无效。
[0080] 实验结果各组的具体实验结果如表6所示。
[0081] 表6降血糖实验结果。
[0082]由表6可知：本发明具有控制高血糖的三黄颗粒中药组合物制剂降血糖有明显的改善作用。
[0083] 结果分析：由本实施例2、3的实验结果表明，可以判定本发明具有控制高血糖的三黄颗粒中药组合物制剂选用以黄芪发酵萃取物、黄精发酵萃取物、黄连发酵萃取物、地骨皮提取物、苦瓜提取物、葛根提取物和富铬酵母为主要原料制备的本发明具有控制高血糖的三黄颗粒中药组合物制剂具有显著的控制高血糖作用。
[0084] 从上述实施例2、3的实验结果分析来看，在益气滋阴清热治法的中医理论指导下，本发明具有控制高血糖的三黄颗粒中药组合物制剂对糖尿病并发症，特别是血管、微血管病变具有一定的预防作用，其机理是:调节脂质代谢，降低血液粘度，改善血液流变学，增加红细胞的含量，清除体内过多的过氧化物，从多环节来降低血糖并预防并发症的发生。所以，治疗糖尿病时，本发明认为应以益气滋阴清热为主要治法。
[0085] 总之，益气滋阴清热法是糖尿病的主要治疗方法之一，而黄芪、黄精、黄连配伍正是这一治法的具体体现。本实验研究表明:三者配伍对糖尿病及其并发症具有较好的治疗和预防作用，既符合中医药传统理论，又有一定的药理学依据，对于临床实践有一定的指导意义。
[0086] 本发明具有控制高血糖的三黄颗粒中药组合物制剂将给所有类型高血糖患者带来一片生机，以黄芪发酵萃取物、黄精发酵萃取物、黄连发酵萃取物、地骨皮提取物、苦瓜提取物、葛根提取物和富铬酵母科学配伍结合现代医学，解决了高血糖病属于终身性疾病和无法治愈康复的难题。
[0087] 本发明中药组合物制剂以它的安全性、稳定性、普遍性、有效性、方便性、全面性给高血糖患者带来了福音，本发明具有控制高血糖的三黄颗粒中药组合物制剂是新一代的整体治疗糖尿病的传统特色疗法，为人类的健康事业和高血糖人群做出了应有的贡献，对于临床实践有一定的指导意义，在医疗行业中发挥其独特的作用。
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