本发明涉及快速定量分析动物骨骼肌纤维的方法。 背景技术
动物肌肉品质实际上是一个复杂而多变的概念，肉质涉及到感观指标（肉色、
大理石纹、口感等）、物理指标（剪切力、失水率、熟肉率）、生化指标（pH值、 肌间脂肪含量、肌苷酸含量、磷脂、肌纤维类型、肌纤维密度、肌纤维面积、肌纤 维直径等）等多个方面。越来越多的研究表明，嫩度是主导肉质的决定因素和最重 要的感官特征，是评定肌肉品质优劣的重要指标。
动物骨骼肌肌肉质地也是影响嫩度的重要因素之一，不论屠宰活重大小或日龄 早晚，都是肌纤维愈细者肉质愈嫩，肌束内的肌纤维数越多，肌纤维越细，相应地 肉品质也就越细嫩。有关研究也报道，肌纤维直径越细，单位肌肉横断面积内肌纤 维的数量越多，切断肌肉所需的剪切力也就越小。肌纤维比例也影响肉的嫩度，肌 纤维可根据其代谢方式的不同分为红肌纤维、白肌纤维和中间型纤维。红肌纤维直 径较细，单位面积的纤维数量多，肌红蛋白含量丰富，代谢和贮存脂肪的能力较强，
含有较多脂类物质，主要以有氧氧化形式供能，具有较高的ATP酶活性；白肌纤维
直径较大，单位面积的数量较少，含糖原较多，主要以糖原酵解形式供能。因此，
两种肌纤维可以根据ATP酶活性、NADH酶活性（Y.0N0，1993)或琥珀酸脱氢酶的活 性区分开来。快速生长的畜禽可能因为过快的生长速度导致肌肉形态学的改变，较 粗的纤维直径和糖酵解纤维（白肌纤维）数目增多，导致较低的蛋白质水解潜能， 屠宰后这些特点会引起肌肉较快地变得僵硬，形成颜色苍白、系水力低、嫩度差的 肉类产品，不利于深加工。
为了在性能测定过程中快速测得肌纤维指标以达到肉质评定的目的，必须对肌 纤维进行分型、染色和纤维测量。对肌纤维的分型， 一般都是利用琥珀酸脱氢酶 (SDH)染色，琥珀酸脱氢酶是三羧酸循环中的重要的脱氢酶，可以将糖代谢的中 间产物氧化脱氢。硝基蓝四唑（NBT)是无色染料，能被还原为蓝色甲脂，能促使具 有吞噬、杀菌能力的嗜中性粒细胞糖代谢能力增强。琥珀酸脱氢酶在糖代谢中的脱 掉的氢可以将NBT还原，呈现蓝色反应颗粒二甲^，沉淀于胞质内。因此通过SDH染色，可以根据不同纤维的琥珀酸脱氢酶的酶活性的高低，还原NBT程度的不同，形
成不同量的蓝色颗粒沉积于肌纤维中。这样，可根据蓝色反应的深浅程度区分不同
肌纤维类型。红肌纤维含有较高的琥珀酸脱氢酶活性，显示蓝紫色；白肌纤维琥珀 酸脱氢酶酶活性很低，显示为不着色或者很淡的着色；而琥珀酸脱氢酶酶活性一般 的肌纤维，着色程度处于这两者颜色之间，即为中间型纤维。
目前的琥珀酸脱氢酶（SDH)染色技术流程中，在组织与含有硝基蓝四唑（NBT) 的染色液反应之前，需要与中性甲醛作用2个小时以上，使组织的形态固定。染色 之后要经历梯度乙醇脱水，二甲苯透明等一系列过程。
在对肌纤维分析方面以往的方法大多主观性太强，其主要体现在显微拍摄后人 工计数，或者人为测量纤维横截面（近似于椭圆）的长轴与短轴在大致估计其面积， 这种方法不但费时费力，而且主观性强，准确性低。 发明内容
本发明的目的是提供快速定量分析动物骨骼肌纤维的方法。 本发明所提供的快速定量分析动物骨骼肌纤维的方法，包括如下步骤：
1) 取离体动物的骨骼肌，制成冰冻切片；
2) 对步骤l)中的冰冻切片进行琥珀酸脱氢酶染色；
3) 对步骤2)染色后的切片拍照，保存图片，然后用计算机图像处理分析软件 对图片进行定量分析。
其中，所述方法中的琥珀酸脱氢酶染色包括如下步骤：
a) 将所述冰冻切片在琥珀酸脱氢酶染色液中，37X:孵育40min;
b) 将步骤a)中染色后的切片在10%中性甲醛中固定10min;
c) 将步骤b)中固定后的切片用梯度浓度（75%、 85%、 95%和100%)的乙醇逐 级脱水；
d) 用体积比为l: 2至2: 1的乙醇和二甲苯混合液透明步骤c)中乙醇脱水后 的切片；
e) 用100%二甲苯透明经过步骤(1)处理的切片。
所述方法中，采用Image Pro-plus 5. 02版本软件对所述图片进行定量分析。 上述动物具体可为鸡。
本发明所述的方法可在畜或禽的肉质鉴定中应用。 所述禽具体可为鸡。本发明的快速定量分析动物骨骼肌纤维的方法，首先采取液氮冷冻处理骨骼肌 样品，液氮冷冻处理一方面能保持肌肉内部完整的原始形态，令其不会因时间、受 力等因素而变形从而影响测定，另一方面避免使肌肉内部的水分流失，导致肌肉萎 縮，同时避免肌肉内部的水分成核形成冰晶，冰晶对肌纤维形态破坏较大，直接影 响肌纤维直径和密度的测量；然后采用冰冻切片技术制备切片，冰冻切片技术能保 持组织原始形态，切片上肌纤维的测定指标几乎与其在动物体内的指标相同，另外 冰冻切片速度快，组织在切片时受力小，利于后期的定量分析，并且采用统一标准 的连续切片，使切片之间具有很高的相似性，利于大量的样本统计和彼此间的相关 分析；再次采用改进的琥珀酸脱氢酶染色方法对切片进行染色，目前的琥珀酸脱氢 酶（SDH)染色技术流程中，在染色之前，切片需要长时间的甲醛固定，染色时间 较长，而改进的琥珀酸脱氢酶染色方法将原来长达2个小时的染色前固定这一步骤 改为染色后的固定，并且将其时间控制在10分钟以内，另外与含有硝基蓝四唑(NBT) 的染色液反应着色这一步的时间也由原来的1个多小时縮短到现在的40分钟，并 且在染色之后的梯度乙醇脱水这一步骤中，去掉50%和60%这两个梯度对于整体效 果并无影响，这样在整体染色效果不变的情况下染色时间大大縮短，并且对染色效 果并无影响；最后，在染色后采用ImagePro-Plus软件定量分析图片，这一方法取 代了繁琐的人工手动测量，使得测量速度大大提高，同时也避免了人工操作所带来 的误差，利用加载了新的宏命令的软件，可以在一次操作中完成一张切片图像的肌 纤维的分类、计数、直径、面积和密度等多个指标的分析，分析后得到数据，可以 与剪切力、失水率等常规肉质指标相结合分析，使肉质评定数据更加完整准确。
通过本发明的快速定量分析动物骨骼肌纤维的方法， 一方面，可快速得到详细 的肌纤维特性分型和测量记录，这些数据可以更详细、准确地描述肌纤维特性，反 映肉质的优劣水平，从而客观地对测定样品的肌肉品质作出评价，以指导品种的继 代选育和杂交利用。另一方面，避免随机误差。本发明的快速定量分析动物骨骼肌 纤维的方法，解决了快速制片和自动分析两大关键问题，使得肌纤维数据的获得更 为简便。红肌纤维丰富就意味着肌纤维更纤细，它也更有利于保持肌纤维内的水分， 使肌肉更为细腻多汁。因此，本发明的快速定量分析动物骨骼肌纤维的方法可以从 肌纤维分类的角度筛选肉质优良的个体。 附图说明
图1为肌纤维的分型标准RF:红肌纤维，MF:中间型，WF:白肌纤维 图2为肌纤维类型的划分 a:白肌纤维，b:红肌纤维
图3为鲁西斗鸡和清远麻鸡不同类型胸浅肌组织类型百分比
图4为RMW型的鲁西斗鸡和清远麻鸡的胸浅肌肌纤维类型比例 图5为RMW型的鲁西斗鸡和清远麻鸡的胸浅肌肌纤维直径 图6为不同类型的鲁西斗鸡和清远麻鸡的体重
1:所有鲁西斗鸡的体重；2:所有清远麻鸡的体重；3:所有鲁西斗鸡和清远 麻鸡中的母鸡的体重；4:所有鲁西斗鸡和清远麻鸡中的公鸡的体重；5:所有鲁西 斗鸡和清远麻鸡中RMW型鸡的体重；6:所有鲁西斗鸡和清远麻鸡中丽型鸡的体重； 7:所有鲁西斗鸡和清远麻鸡中W型鸡的体重。
图7为不同类型的鲁西斗鸡和清远麻鸡的胸浅肌组织的剪切力
1:所有鲁西斗鸡的胸浅肌组织的剪切力；2:所有清远麻鸡的胸浅肌组织的剪 切力；3:所有鲁西斗鸡和清远麻鸡中RMW型鸡的胸浅肌组织的剪切力；4:所有鲁 西斗鸡和清远麻鸡中MW型鸡的胸浅肌组织的剪切力；5:所有鲁西斗鸡和清远麻鸡 中沐型鸡的胸浅肌组织的剪切力。
图8为不同类型的鲁西斗鸡和清远麻鸡的胸浅肌组织的失水率
1:所有鲁西斗鸡的胸浅肌组织的失水率；2:所有清远麻鸡的胸浅肌组织的失 水率；3:所有鲁西斗鸡和清远麻鸡中RMW型鸡的胸浅肌组织的失水率；4:所有鲁 西斗鸡和清远麻鸡中丽型鸡的胸浅肌组织的失水率；5:所有鲁西斗鸡和清远麻鸡 中W型鸡的胸浅肌组织的失水率。 具体实施方式
实施例l、定量分析骨骼肌肌纤维
一、定量分析鲁西斗鸡和清远麻鸡的骨骼肌肌纤维
鲁西斗鸡是一种中国的土著鸡种，属玩赏型，但是体型高达魁梧，体质健壮， 体躯长，胸腿肌发达，肌肉形态较有特点，清远麻鸡是一种中国的土著鸡种，以其 体型小、皮下和肌间脂肪发达、皮薄骨软而著名，现在已经成为我国活鸡出口的小 型肉用名产鸡之一。
选取处于生长曲线拐点处（210至260日龄）的鲁西斗鸡10只，8母2公，清 远麻鸡19只，13母6公，上述实验用鸡的饲养管理条件完全一致。分别定量分析鲁西斗鸡和清远麻鸡的骨骼肌肌纤维。实验方法如下：
1) 取样：
鲁西斗鸡和清远麻鸡停饲24个小时（饮用水正常供应）后口腔放血屠宰；将 屠宰放血后的鲁西斗鸡和清远麻鸡浸入冷水中，充分打湿羽毛，然后沥水放在手术 台上，喷撒双氧水于禽体，沿龙骨突剪开皮肤，在左侧胸浅肌上1/3处沿肌纤维反 向，采集2cmX0. 5cmX0. 5cm长方体肌肉块，液氮浸泡保存。
2) 制备冰冻切片：
启动Leica CM1900冰冻切片机，设置切片室温度一25t:，冰冻头温度为一20 °C，切片厚度为10um，预冷lh;将样品从液氮中取出，放入到冰冻切片室中平衡 0.5 h;取出样品，修剪成厚0.5cm的组织薄片，在预冷的冰冻头上滴一滴OCT冰 冻切片包埋剂，迅速将组织粘上，顺时针沿组织的边缘涂抹OCT冰冻切片包埋剂直 到完全覆盖为止，静置直至OCT冰冻切片包埋剂全部变为白色；将冰冻头连同组织 一起固定在冰冻头架上，旋紧螺丝，放下展片板，缓慢旋转手柄，直到切到组织样， 一旦有完整的组织切片出现，迅速用处理过的载玻片粘去组织切片，标记好，放入 切片室中预冷的载玻片盒中。
3) 琥珀酸脱氢酶（SDH)染色：
染色前lh，将事先配好的染色液放入到37"C培养箱中预热；染色液的组分如 下：0. 2M琥珀酸钠溶液100ml， 0. 2M NaH2P04 6 . 5ml， 0. 2M Na2HP04 43 . 5ml, 0. 1%石肖 基蓝四唑（NBT)200ml，去离子水50ml;从载玻片盒中取出粘有组织切片的载玻片， 室温下，自然凉干至切片发白；将载玻片放入到预热的染色液中，37'C孵育40min; 取出载玻片后，在去离子水中缓慢冲洗30s，放入到10^中性甲醛中固定10min; 固定后的切片再用去离子水缓慢冲洗30s，然后使用梯度浓度（75%、 85%、 95%和 100%)的乙醇逐级脱水；再用体积比为2: 1-1: 2的乙醇、二甲苯混合液过渡透明 脱水后的切片；最后用100%二甲苯透明组织切片，甘油明胶封片。
4) 观察与拍照：
静置2h后，在Olympus BX51研究级生物学正置显微镜，目镜IOX，物镜10X下 观察染色切片，拍摄目标区域，选择显微镜自带拍摄软件中"Show Scale (显示标 尺）" 一项，这时图片右下角出现长度为500微米的标尺，保存。
5) 计算机分析图片：
冰冻切片图片的分析处理均采用Image Pro-plus 5. 02版本软件完成。Image-Pro Plus (IPP)软件是Media Cybernetics公司著名的图像处理分析 软件，支持图像采集，增强，标定，彩色图像处理，计数，测量，分析，图像标注， 图像数据库，报表生成器，宏纪录，VBA宏编程进行功能扩展，全面的Internet支 持。同时，支持用[++,¥1)等扩展专对自己应用的特定功能。支持各种输入源，各 种图像格式，特别支持大尺寸图像.特有荧光，材料分析模块，以及显微镜控制模 块（用于自动显微镜控制），适用于生物医学，生命科学，工业应用等多个领域的 图像分析和处理。
Image-Pro Plus 5. 02可以运行于Microsoft® Windows 32位操作系统：Windows ® 2000 (service pack 4)， and Windows® XP Professional (service pack l及 以后版本）。
按照软件要求，将Image-Pro Plus安装在电脑的"C: \IpWin5\"目录下；"个 性化设置文件"（主要是标尺设置和自定义宏命令）安装在"D: \根目录下。
在批量图片处理前，选取形态保持完整、染色较好的肌纤维图片作为模板图片， 然后根据软件自身的标尺和图片采集时的标尺大小调整，使得两个标尺代表的长度 一致，随后设定IPP的灰度值，使之符合要求。其它图片均以此标准进行目标纤维 的捕捉和相关参数的统计分析。在选定的图片里面，设定好测定的参数——面积 (Area)、平均直径（Diamet er—mean)、平均灰度值(Density—mean)、 累禾只 灰度值（I0D)。在肌束内随机选择具有代表性的红肌纤维和白肌纤维，用IPP分 析其灰度值，此时会测定出一个红肌纤维和白肌纤维的灰度值的范围，选取红肌纤 维范围的下限和白肌纤维的上限作为三种肌纤维类型的评定界限，位于两个界限值 之间的肌纤维类型，判定为中间型纤维，如图l所示。
具体操作步骤如下：
1. 打开软件
双击"Image-Pro Plus"，打开进入界面，点击左上角的file按键，打开一 张肌纤维轮廓清晰的图片；
2. 更改光密度值
在组化染色中，肌纤维类型之间的鉴别是通过肌纤维染色程度的深浅程度不同 而区分的，表现在IPP中，就是intensity (光密度值）的不同。在IPP软件中， 默认的intensity格式，代表的是灰度值，即颜色越深值越小，颜色越浅值越大。 这显然与目标不符，而实际上测量的染色程度是光密度值，染色越深，光密度值越大。
具体操作如下：点击"measure-〉calibration-Mntensity，，，然后在窗口中 点"new"按钮，再点一下"std optical density"，此时可以看到窗口中的直线 变成了反向的曲线，再点最上方的"system"按钮，使得以后所有的操作都是按照 统一标准来操作，最后点击"close"关闭窗口。
3、 校正标尺
软件中的标尺和实际拍摄图片中的标尺往往不一致，为了统一两者之间的尺 度，需要在IPP里面校正标尺，使得软件和拍摄图片的尺度一致。具体操作是：点 击"measure-Calibration-〉spatial"，在弹出的标尺标定菜单中，然后点击"new"， 在最上方的"name"项下的"spatial cal 0"处点一下，改成英文字符"500ura"， 在"UNIT"项下填入"um"，给"um"下方的"Convert when change unit"选项 打勾。随后点击"pixels/unit"框里的"image"，弹出"scaling"对话框，同 时在标尺图片左上角显出一个标尺，将鼠标移到这个标尺的横杠上，点一下左键， 光标就立即变成小手，拖动光标到图片的标尺处，用左键拖动软件标尺的两端使之 与图片上标尺的两端对齐。如照片是在10倍物镜、IO倍目镜条件下拍摄，拍摄单 位填写"500"，点击"OK"关闭"scaling"窗口，回到"spatial calibration" 窗口，点击"close"结束。若标尺作的不对，可以直接点击"delete";
4、 肌纤维参数的选定
根据需要，选定常用的测量参数，其中，常用的参数有"Area" 、 "Density (mean) ，， 、 "Diameter (mean) ，， 、 "I0D(Integrated Optical Density)，，。 测量肌纤维的目的是测量其表观指标，所以选择前三者参数指标。具体操作步骤： 点"measure-〉count/size-〉measure-〉select measure"，点击目标参数，选定参 数，点击"OK"，回到"count/size"界面，完成参数选择。
5、 目标区域（A0I)选择
A0I是Image-Pro Plus中最有用、最重要的概念，这也是Image-Pro Plus使 用过程中的关键操作。肌纤维的横截面积并不是理想的圆形，而是各种不规则的闭 合图形。为了更加真实地再现肌纤维的实际参数，本方法中可以借助界面最上方的 的"Irregular"工具〕^K来完成。具体操作步骤如下：点击界面上方的，会出 现一个工具条，点击"Trace"寻迹工具，在右侧的"Auto"前打勾，同时将"Speed" 的值调整为"1"(慢速可以随时修正寻迹方向）。这个工具的标题叫Magic wand。将鼠标移至图中一个肌纤维的内膜，光标就变 成魔棒了，在一个位置左键点一下，就选中了这个位置及其周围灰度相似的区域。 这里"相似"的定量范围由Range的值来决定。较大的range值为较大的灰度范围， 点一下能选中一大片区域。较小的range值则为较小的灰度范围。在一个区域上多 点几下，就能选中这个区域的整个边界了。最后点一下右键，就确定了一个不规则 形状的选定区域。smooth值是用来平滑区域边界的。 一般不需要平滑，因此默认值 为零。选中一个区域后如果还要在同一张图片上再选另一个区域，不能直接点选， 要先点击一下工具栏上的Multiple A0I按纽，再点击add，接下去就可以到另一个 选择区域点选。选好一个新的区域后再回去点Multiple A0I—add确认，再继续下 一个，直到选取完所有的AOI。最后在图片上任一处点一下右键结束选择操作。结 束后如果又想再增加选择区域，只要再点一下"new A0I"按纽，就可以调出工具 条继续增加选择区域。如果肌纤维轮廓不是太清晰，可将"Auto"前的对勾去掉， 手动辅助选择AOI。
6、自定义宏
"宏"实际上不过是把一连串的操作组合到一个操作的有效工具，可有效的客 观的保证判断多张图片之间的一致性。操作的前提是，在所有待处理照片中，选择 一张具有形态保持完整、染色较好的典型图片，进行仔细的选色及分析测量。得到 满意的结果后，就可以按照这个既定的操作程式进行宏的编制了。
编制宏操作前的准备：把"count/size"窗口中各项选择完成后，包括各种参 数选择，点击file菜单中的"save setting"保存到另一个磁盘分区，命名为英 文名。打开"statistics"窗口，获取测量值后，点"file"菜单中的"DDE Option" 窗口，设置一下测量数据传往Excel的规则。在DDEOption窗口中从上到下，在 "Append next date set to the bottom"前打勾。设定了 "DDE option"后，不 要关闭"statistics"窗口，打开一个空白"Excel"表格。
录制宏：打开一张典型的照片，打开"count/size"窗口，还有空着的 "statistics"窗口，点击"Macro-〉Record Macro"，就调出来录制宏的开始窗口。
录制宏的步骤：点"Count/size"窗口的"file-load settings"，从弹出的 文件夹选在菜单中调出刚才保存的"count设定文件"，点击"Count"，计数，统 计数据会马上显示在"Statistics"窗口中，点击"Statistics"窗口中的"file-DDE to Excel"，点"Sh叩recording"结束录制宏。为了精准，以后每个肌纤维进行寻迹后，都可以使用宏快捷键，将测定数据保存在一个文件夹内。 7.肌纤维类型的区分
选择3~5张典型的图片，依据组化图谱限定红肌纤维和白肌纤维，并使用IPP
软件对其光密度值进行测定，随后将白肌纤维和红肌纤维的光密度值按照从小到大
的顺序排列，假定白肌纤维的光密度值最小值为L,最大值为IW2;红肌纤维的光密 度值的最小值Iw，最大值是IR2。在此，人为地认为三种肌纤维的光密度值分别为： 白肌纤维〈IW2，中间型纤维L〜IR1，红肌纤维〉IR,，所有的肌纤维的数据汇总后， 根据如上规则，进行对比，分析出肌纤维类型。
在本实验中，白肌纤维的光密度值最小值为O. 1483最大值为0.1821;红肌纤 维的光密度值的最小值0. 2644，最大值是0. 4735。 〈0. 1821的为白肌纤维， 0. 1821~0. 2644的为中间型纤维，〉0. 2644的为红肌纤维。
实验重复3次，每一次重复的图片上选取3个视野，计算平均值。
在单一组织的肌纤维分型上，又将骨骼肌组织划分为三个类型：RMW (混合有 红肌纤维、中间型纤维和白肌纤维的骨骼肌纤维组成类型）、MW (混合有中间型纤 维和白肌纤维的骨骼肌纤维组成类型）、W (完全由白肌纤维构成的骨骼肌纤维组 成类型），如图2所示。进一步分析得到各种肌纤维的平均灰度值、平均直径、肌 束内的肌纤维数目、每种类型肌纤维的数目以及所占的比例等等。所采集的定量化 描述的测定数据用于Duncan多重比较分析。
二、定量分析鲁西斗鸡和清远麻鸡的骨骼肌肌纤维的结果
1)三种类型肌纤维在不同骨骼肌组织中的分布
从切片染色观察和平均灰度值测定两个方面分析表明，SDH染色可以用来成功 地将骨骼肌中的肌纤维分为三种类型。又根据每个研究对象所含纤维类型的情况， 将骨骼肌分成三种类型，即：l)RMW型：含有红肌纤维、中间型纤维和白肌纤维； 2)MW型：含有中间型纤维和白肌纤维；3)W型：只含有白肌纤维。
鲁西斗鸡和清远麻鸡中不同胸浅肌组织类型的百分比（不同胸浅肌组织类型的
百分比=各个肌纤维类型的鸡的只数/测试鸡的只数，如RMW型百分比-RMW型鸡的只 数/测试鸡总数）的分析结果表明，在鲁西斗鸡和清远麻鸡中都出现了胸浅肌中含 有不同比例的红肌纤维和中间型肌纤维的个体，拥有不同类型胸浅肌的个体在鲁西 斗鸡和清远麻鸡两个品种中的分布比例见图3，在检测样本中鲁西斗鸡有30%的个 体为RMW型，而在清远麻鸡中，只有1例出现了RMW型胸浅肌，接近95%的清远麻鸡均为单纯含有白肌纤维的W型个体。
鲁西斗鸡和清远麻鸡中的RMW型的胸浅肌也表现出了明显的差异。 总体来讲，虽然清远麻鸡和鲁西斗鸡中都有个体的胸浅肌被定义为RMW类型， 但二者在肌纤维类型比例（肌纤维类型比例-各个肌纤维的数目/R丽类型鸡的肌纤 维的总数，）上仍然有所不同（图4)。清远麻鸡的白肌纤维比例髙，中间型纤维 的比例低，而二者的红肌纤维比例差异不明显。鲁西斗鸡的肌纤维直径总体大于清 远麻鸡，但不论对于哪个鸡种来说，同一部位的红肌纤维直径总是明显小于白肌纤 维直径，而中间型纤维的直径则介于二者之间，但更接近于白肌纤维，如图5所示。 2)生长性状及胸浅肌肉质性状的分析
本实验所用的两个鸡种，在胸浅肌取材时间都选取了生长曲线拐点处所对应的 生长阶段。两个品种在体重上稍有差别，但是差别不显著。将三种不同胸肌组织类 型个体进行比较，可以看出，RMW型个体生长较慢，体重较轻，MW型和W型个体体 重依次提高，如图6所示。胫骨长结果也类似体重结果，RMW型个体的胫骨长显著 小于MW型个体的胫骨长(P〈0. 05)。
剪切力和系水力（失水率）是反映肉质好坏的最常用指标。从剪切力的角度来 看，鲁西斗鸡与清远麻鸡的差异不显著，同一品种内三种类型胸浅肌之间的差异也 不显著，如图7所示。失水率方面，两个品种的差异不显著，但是IMW型胸浅肌的 失水率明显低于其他类型，如图8所示。说明红肌纤维的存在对保持肌肉水分有一 定帮助，从而可以使肌肉更加鲜嫩多汁。