背景技术

沉默信息调节因子(SIR)家族基因是存在于古细菌到各种真核生物的有机 体基因组中的高度保守基因(Frye，2000)。编码SIR蛋白涉及从基因沉默调节 至DNA修复的多种过程。由SIR基因族成员编码的蛋白质在250个氨基酸的核 心域显示高度序列保守性。该族基因中极具特征的基因是S.cerevisiae SIR2，其 涉及含有决定酵母交配型、端粒位置效应和细胞衰老信息的沉默HM位点 (Guarente，1999；Kaeberlein等，1999；Shore，2000)。酵母Sir2蛋白属于组蛋白脱 乙酰基酶族(综述于Guarente，2000；Shore，2000)。鼠伤寒沙门氏菌中Sir2的同 系物CobB功能等同于依赖于NAD(烟酰胺腺嘌呤二核苷酸)的ADP核糖转 移酶(Tsang和Escalante-Semerena，1998)。

Sir2蛋白属于III型脱乙酰基酶，以NDA为协同底物(Imai等，2000；Moazed， 2001；Smith等，2000；Tanner等，2000；Tanny和Moazed，2001)。许多脱乙酰基酶 参与了基因沉默，与其他脱乙酰基酶不同的是，Sir2对I型和II型脱乙酰基酶 抑制剂如曲古抑菌素A(TSA)不敏感(Imai等，2000；Landry等，2000a；Smith 等，2000)。

由Sir2引起的乙酰赖氨酸脱乙酰作用与NAD水解作用紧密相关，生成烟 酰胺和新的乙酰ADP核糖化合物(Tanner等，2000；Landry等，2000b；Tanny和 Moazed，2001)。Sir2的依赖于NAD的脱乙酰基酶活性对于其能够在酵母中产 生细胞代谢生物学作用的功能很重要(Guarente，2000；Imai等，2000；Lin等， 2000；Smith等，2000)。哺乳动物Sir2同系物具有依赖于NAD的组蛋白脱乙酰 酶活性(Imai等，2000；Smith等，2000)。许多关于Sir2介导的功能的信息源于 对酵母的研究(Gartenberg，2000；Gottschling，2000)。

生化研究表明，Sir2可容易地将组蛋白H3和H4的氨基端脱乙酰化，从而 生成1-O-乙酰-ADP-核糖和烟酰胺。含有扩增SIR2的菌株rDNA沉默增长，寿 命也延长30％。近来发现，C.elegans SIR2同系物，Sir-2.1和D.melanogaster dSir2 基因的扩增极大地延长了有机体的寿命。由此暗示依赖于SIR-2的衰老调节通 路出现在发展的早期，并将被很好保持。现在Sir2基因被认为发展成改善有机 体健康并具有逆境抗性以增加其逆境存活的机会。

SIRT3是SIRT1的同系物，存在于原核生物和真核生物(P.Onyango等，Proc. Natl.Acad.Sci.USA 99：13653-13658(2002))。SIRT3蛋白通过其位于N端的独 特区域定位于线粒体嵴。SIRT3具有依赖于NAD+蛋白脱乙酰基酶活性，并且 无所不在地被表达，尤其是在代谢活性组织中被表达。转移至线粒体后，SIRT3 立即被线粒体基质加工肽酶(MPP)裂解为更小的活性形式(B.Schwer等，J.Cell Biol.158：647-657(2002))。

通过限制热量来改善哺乳动物的健康和延长生命已经已知超过70年 (Masoro，2000)。酵母的寿命，类似于后生动物，也可以通过类似于热量限制 如低糖的干扰来延长。酵母和苍蝇缺乏SIR2基因使其在热量限制时寿命不能延 长的发现表明SIR2基因介导了该饮食对健康的有益效果(Anderson等，2003； Helfand和Rogina，2004)。此外，降低酵母葡萄糖响应的依赖于cAMP(腺苷 3’，5’-单磷酸)(PKA)通路活性的突变能够延长野生型细胞的寿命却不能延长突 变sir2菌株的寿命，由此表明SIR2有可能是热量限制通路的下游区关键组分 (Lin等，2001)。

发明概述

本发明提供了新的sirtuin-调节化合物和使用它们的方法。

一方面，本发明提供了式(I)的sirtuin-调节化合物或其盐，

其中：

环A是可选择地被取代、或与另一个环稠合或者两种情况同时存在；并且

环B是被至少一个羧基、取代或未取代的芳基酰胺(arylcarboxamine)、取 代或未取代的芳烷基酰胺(aralkylcarboxamine)、取代或未取代的杂芳基基团、 取代或未取代的杂环基羰基乙烯基、或者多环芳基集团所取代或者与芳环稠合， 并且可选择地被一个或多个附加的基团所取代。

在另一个方面，本发明提供了式(II)的sirtuin-调节化合物或其盐，

其中：

环A是可选择地被取代；

R1，R2，R3和R4是独立地选自：-H，卤素，-OR5，-CN，-CO2R5，-OCOR5， -OCO2R5，-C(O)NR5R6，-OC(O)NR5R6，-C(O)R5，-COR5，-SR5， -OSO3H，-S(O)nR5，-S(O)nOR5，-S(O)nNR5R6，-NR5R6，-NR5C(O)OR6，-NR5C(O)R6 和-NO2；

R5和R6独立地是-H、取代或未取代的烷基基团、取代或未取代的芳基 基团或者取代或未取代的杂环基团；和

n是1或2。

在还有另一个方面，本发明提供了式(III)的sirtuin-调节化合物或其盐，

其中：

环A是可选择地被取代；

R5和R6独立地是-H、取代或未取代的烷基基团、取代或未取代的芳基 基团或者取代或未取代的杂环基团；

R7，R9，R10和R11独立地选自：-H，卤素，-R5，-OR5，-CN，-CO2R5，-OCOR5， -OCO2R5，-C(O)NR5R6，-OC(O)NR5R6，-C(O)R5，-COR5， -SR5，-OSO3H，-S(O)nR5，-S(O)nOR5，-S(O)nNR5R6，-NR5R6，-NR5C(O)OR6， -NR5C(O)R6和-NO2；

R8是多环芳基基团；并且

n是1或2。

在另一个方面，本发明提供了式(IV)的sirtuin-调节化合物或其盐，

Ar-L-J-M-K-Ar′(IV)

其中：

每个Ar和Ar′独立地是可选择取代的碳环或杂环芳基基团；

L是可选择取代的碳环或杂环亚芳基基团；

每个J和K独立地是NR1′，O，S，或是可选择独立地不存在；或者当J是NR1′ 时，R1′是与Ar′相连形成稠合至Ar′的环的C1-C4亚烷基或C2-C4亚烯基；或 当K是NR1′时，R1′是与L相连形成稠合至L的环的C1-C4亚烷基或C2-C4 亚烯基；

每个M是C(O)，S(O)，S(O)2，或CR1′R1′；

每个R1′独立地选自H，C1-C10烷基；C2-C10烯基；C2-C10炔基；C3-C10 环烷基；C4-C10环烯基；芳基；R5′；卤素；卤烷基；CF3；SR2′；OR2′；NR2′R2′； NR2′R3′；COOR2′；NO2；CN；C(O)R2′；C(O)C(O)R2′；C(O)NR2′R2′；OC(O)R2′； S(O)2R2′；S(O)2NR2′R2′；NR2′C(O)NR2′R2′；NR2′C(O)C(O)R2′；NR2′C(O)R2′； NR2′(COOR2′)；NR2′C(O)R5′；NR2′S(O)2NR2′NR2′；NR2′S(O)2R2′；NR2′S(O)2R5′； NR2′C(O)C(O)NR2′R2′；NR2′C(O)C(O)NR2′R3′；被芳基、R4′或R5′取代的C1-C10 烷基；或被芳基、R4′或R5′取代的C2-C10烯基；

每个R2′独立地是H；C1-C10烷基；C2-C10烯基；C2-C10炔基；C3-C10环烷 基；C4-C10环烯基；芳基；R6′；被1-3个独立的芳基、R4′或R6′基团所取代的 C1-C10烷基；被1-3个独立的芳基、R4′或R6′基团所取代的C3-C10环烷基； 或被1-3个独立的芳基、R4′或R6′基团所取代的C2-C10烯基；

每个R3′独立地是C(O)R2′，COOR2′，或S(O)2R2′；

每个R4′独立地是卤素，CF3，SR7′，OR7′，OC(O)R7′，NR7′R7′，NR7′R8′，NR8′R8′， COOR7′，NO2，CN，C(O)R7′，或C(O)NR7′R7′；

每个R5′独立地是5-8元单环，8-12元双环，或11-14元三环的环体系，所 述环体系如果是单环则含有1-3个杂原子，如果是双环则含有1-6个杂原子，或 者如果是三环则含有1-9个杂原子，所述杂原子选自O，N，或S，这些环体系可 以是饱和的或不饱和的，并且其中每个环的0，1，2或3个原子可以被独立地选自 下述的取代基所取代：C1-C10烷基；C2-C10烯基；C2-C10炔基；C3-C10环烷 基；C4-C10环烯基；芳基；R6′；卤素；硫；氧；CF3；卤烷基；SR2′；OR2′；OC(O)R2′； NR2′R2′；NR2′R3′；NR3′R3′；COOR2′；NO2；CN；C(O)R2′；C(O)NR2′R2′；被1-3个独 立的R4′，R6′，或芳基所取代的C1-C10烷基；或者被1-3个独立的R4′，R6′，或芳 基所取代的C2-C10烯基。

每个R6′独立地是5-8元单环，8-12元双环，或11-14元三环的环体系，所述 环体系如果是单环则含有1-3个杂原子，如果是双环则含有1-6个杂原子，或者 如果是三环则含有1-9个杂原子，所述杂原子选自O，N，或S，这些环体系可以 是饱和的或不饱和的，并且其中每个环的0，1，2或3个原子被独立地选自下述的 取代基所取代：C1-C10烷基；C2-C10烯基；C2-C10炔基；C3-C10环烷基； C4-C10环烯基；卤素；硫；氧；CF3；卤烷基；SR7′；OR7′；NR7′R7′；NR7′R8′；NR8′R8′； COOR7′；NO2；CN；C(O)R7′；或C(O)NR7′R7′；

每个R7′独立地是H，C1-C10烷基；C2-C10烯基；C2-C10炔基；C3-C10环 烷基；C4-C10环烯基；卤烷基；选择性地被1-3个独立的C1-C10烷基，C2-C10 烯基，C2-C10炔基，C3-C10环烷基，C4-C10环烯基，卤素，CF3，OR10′，SR10′， NR10′R10′，COOR10′，NO2，CN，C(O)R10′，C(O)NR10′R10′，NHC(O)R10′，或 OC(O)R10′所取代的C1-C10烷基；或者选择性地被1-3个独立的C1-C10烷基， C2-C10烯基，C2-C10炔基，C3-C10环烷基，C4-C10环烯基，卤素，CF3，OR10′， SR10′，NR10′R10′，COOR10′，NO2，CN，C(O)R10′，C(O)NR10′R10′，NHC(O)R10′，或 OC(O)R10′所取代的苯基；

每个R8′独立地是C(O)R7′，COOR7′，或S(O)2R7′；

每个R9′独立地是H，C1-C10烷基，C2-C10烯基，C2-C10炔基，C3-C10环 烷基，C4-C10环烯基，或者选择性地被1-3个独立地C1-C10烷基，C2-C10烯 基，C2-C10炔基，C3-C10环烷基，C4-C10环烯基，卤素，CF3，OR10′，SR10′， NR10′R10′，COOR10′，NO2，CN，C(O)R10′，C(O)NR10′R10′，NHC(O)R10′，或OC(O)R10′ 所取代的苯基；

每个R10′独立地是H；C1-C10烷基；C2-C10烯基；C2-C10炔基；C3-C10环 烷基；C4-C10环烯基；可选择性地被卤素，CF3，OR11′，SR11′，NR11′R11′，COOR11′， NO2，CN所取代的C1-C10烷基；或可选择性地被卤素，CF3，OR11′，SR11′，NR11′R11′， COOR11′，NO2，CN所取代的苯基；

每个R11′独立地是H；C1-C10烷基；C3-C10环烷基或苯基；

每个卤烷基独立地是被一个或多个选自F，Cl，Br，或I的卤原子所取代的 C1-C10烷基，其中卤原子的个数不能超过导致形成全卤代烷基基团的个数；并 且

每个芳基独立地可选择性地被1-3个独立的下述取代基：C1-C10烷基； C2-C10烯基；C2-C10炔基；C3-C10环烷基；C4-C10环烯基；R6′；卤素；卤烷 基；CF3；OR9′；SR9′；NR9′R9′；COOR9′；NO2；CN；C(O)R9′；C(O)C(O)R9′； C(O)NR9′R9′；S(O)2R9′；N(R9′)C(O)R9′；N(R9′)(COOR9′)；N(R9′)S(O)2R9′； S(O)2NR9′R9′；OC(O)R9′；NR9′C(O)NR9′R9′；NR9′C(O)C(O)R9′；NR9′C(O)R6′； NR9′S(O)2NR9′R9′；NR9′S(O)2R6′；NR9′C(O)C(O)NR9′R9′；被1-3个独立的R6′，卤素， CF3，OR9′，SR9′，NR9′R9′，COOR9′，NO2，CN，C(O)R9′，C(O)NR9′R9′，NHC(O)R9′， NH(COOR9′)，S(O)2NR9′R9′，OC(O)R9′所取代的C1-C10烷基；被1-3个独立的 R6′，卤素，CF3，OR9′，SR9′，NR9′R9′，COOR9′，NO2，CN，C(O)R9′，C(O)NR9′R9′， NHC(O)R9′，NH(COOR9′)，S(O)2NR9′R9′，OC(O)R9′所取代的C2-C10烯基；或 R9′。

在另一个方面，本发明提供了式(IVA)的sirtuin调节化合物或其盐：

Het-L-Q-AR′(IVa)

其中：

Het是一个可选择地取代的杂环芳基基团；

L是一个可选择地取代的碳环或杂环亚芳基基团；

Ar′是一个可选择地取代的碳环或杂环芳基基团；以及

Q选自 -NR1′-C(O)-，-NR1′-S(O)2-，-NR1′-C(O)-NR1′-，-NR1′-C(S)-NR1′-，-NR1′-C(O)-CR1′R′1 -NR1′-，-NR1′-C(＝NR1′)-NR1′-，-C(O)-NR1′-，-C(O)-NR1′-S(O)2-，-NR1′-，-CR1′R′1-，- NR1′-C(O)-CR1′＝CR1′-，-NR1′-S(O)2-NR1′-，-NR1′-C(O)-NR1′-S(O)2-，-NR1′-CR1′R′1-C (O)-NR1′-，-CR1′R′1-C(O)-NR1′-，-NR1′-C(O)-CR1′＝CR1′-CR1′R1′-，-NR1′-C(＝N-CN)- NR1′-，-NR1′-C(O)-CR1′R′1-，和

每个R1′独立地选自H或可选择地取代的C1-C3直链或支链烷基，其中：

当Het是一个多环杂芳基，L是一个可选择地取代的亚苯基，Q和Het以间 位定向地连接至L，和Ar′是一个可选择地取代的苯基时；那么Q不是-NH-C(O)-。

在还有另一个方面中，本发明提供了式(V)的sirtuin调节化合物或其盐，

其中：

环A是可选择地被至少一个R1′基团所取代；

Y1，Y2，Y3，Y4，和Y5独立地是R1′；

每个R1′独立地选自H，C1-C10烷基；C2-C10烯基；C2-C10炔基；C3-C10 环烷基；C4-C10环烯基；芳基；R5′；卤素；卤烷基；CF3；SF3′；OR2′；NR2′R2′； NR2′R3′；COOR2′；NO2；CN；C(O)R2′；C(O)C(O)R2′；C(O)NR2′R2′；OC(O)R2′； S(O)2R2′；S(O)2NR2′R2′；NR2′C(O)NR2′R2′；NR2′C(O)C(O)R2′；NR2′C(O)R2′； NR2′(COOR2′)；NR2′C(O)R5′；NR2′S(O)2NR2′R2′；NR2′S(O)2R2′；NR2′S(O)2R5′； NR2′C(O)C(O)NR2′R2′；NR2′C(O)C(O)NR2′R3′；被芳基，R4′或R5′取代的C1-C10 烷基；或者被芳基，R4′或R5取代的C2-C10烯基；

每个R2′独立地是H；C1-C10烷基；C2-C10烯基；C2-C10炔基；C3-C10 环烷基；C4-C10环烯基；芳基；R6′；被1-3个独立的芳基，R4′或R6′基团所取 代的C1-C10烷基；被1-3个独立的芳基，R4′或R6′基团所取代的C3-C10环烷 基；或者被1-3个独立的芳基，R4′或R6′基团所取代的C2-C10烯基；

每个R3′独立地是C(O)R2′，COOR2′，或S(O)2R2′；

每个R4′独立地是卤素，CF3，SR7′，OR7′，OC(O)R7′，NR7′R7′，NR7′R8′，NR8′R8′， COOR7′，NO2，CN，C(O)R7′，或C(O)NR7′R7′；

每个R5′独立地是5-8元单环，8-12元双环，或11-14元三环环体系，环 体系如是单环则含有1-3个杂原子，如是双环则含有1-6个杂原子，或如是三环 则含有1-9个杂原子，所述杂原子选自O，N，或S，所述环体系可以是饱和的或 不饱和的，并且其中每个环的0，1，2或3个原子被独立地选自下述的取代基 所取代：C1-C10烷基；C2-C10烯基；C2-C10炔基；C3-C10环烷基；C4-C10环 烯基；芳基；R6′；卤素；硫；氧；CF3；卤烷基；SR2′；OR2′；OC(O)R2′；NR2′R2′； NR2′R3′；NR3′R3′；COOR2′；NO2；CN；C(O)R2′；C(O)NR2′R2′；被1-3个独立的R4′， R6′，或芳基所取代的C1-C10烷基；或被1-3个独立的R4′，R6′，或芳基所取代的 C2-C10烯基；

每个R6′独立地是5-8元单环，8-12元双环，或11-14元三环环体系，环 体系如是单环则含有1-3个杂原子，如是双环则含有1-6个杂原子，或如是三环 则含有1-9个杂原子，所述杂原子选自O，N，或S，所述环体系可以是饱和的或 不饱和的，并且其中每个环的0，1，2或3个原子被独立地选自下述的取代基 所取代：C1-C10烷基；C2-C10烯基；C2-C10炔基；C3-C10环烷基；C4-C10环 烯基；卤素；硫；氧；CF3；卤烷基；SR7′；OR7′；NR7′R7′；NR7′R8′；NR8′R8′；COOR7′； NO2；CN；C(O)R7′；或C(O)NR7′R7′；

每个R7′独立地是H，C1-C10烷基；C2-C10烯基；C2-C10炔基；C3-C10 环烷基；C4-C10环烯基；卤烷基；选择性地被1-3个独立的C1-C10烷基， C2-C10烯基，C2-C10炔基，C3-C10环烷基，C4-C10环烯基，卤素，CF3，OR10′， SR10′，NR10′R10′，COOR10′，NO2，CN，C(O)R10′，C(O)NR10′R10′，NHC(O)R10′，或 OC(O)R10′所取代的C1-C10烷基；或选择性地被1-3个独立的C1-C10烷基， C2-C10烯基，C2-C10炔基，C3-C10环烷基，C4-C10环烯基，卤素，CF3，OR10′， SR10′，NR10′R10′，COOR10′，NO2，CN，C(O)R10′，C(O)NR10′R10′，NHC(O)R10′，或 OC(O)R10′所取代的苯基；

每个R8′独立地是C(O)R7′，COOR7′，或S(O)2R7′；

每个R9′独立地是H，C1-C10烷基，C2-C10烯基，C2-C10炔基，C3-C10 环烷基，C4-C10环烯基，或选择性地被1-3个独立的C1-C10烷基，C2-C10烯 基，C2-C10炔基，C3-C10环烷基，C4-C10环烯基，卤素，CF3，OR10′，SR10′， NR10′R10′，COOR10′，NO2，CN，C(O)R10′，C(O)NR10′R10′，NHC(O)R10′，或OC(O)R10′ 所取代的苯基；

每个R10′独立地是H；C1-C10烷基；C2-C10烯基；C2-C10炔基； C3-C10环烷基；C4-C10环烯基；选择性地被卤素，CF3，OR11′，SR11′，NR11′R11′， COOR11′，NO2，CN取代的C1-C10烷基；或选择性地被卤素，CF3，OR11′，SR11′， NR11′R11′，COOR11′，NO2，CN所取代的苯基；

每个R11′独立地是H；C1-C10烷基；C3-C10环烷基或苯基；

每个卤烷基独立地是被1个或多个卤原子所取代的C1-C10烷基，所述卤 原子选自F，Cl，Br，或I，其中卤原子的个数不能超过导致形成全卤代烷基基团 的个数；和

每个芳基独立地是5-至7-元单环体系或9-至12-元双环体系，所述环体系 可选择地被1-3个独立的C1-C10烷基；C2-C10烯基；C2-C10炔基；C3-C10环 烷基；C4-C10环烯基；R6′；卤素；卤烷基；CF3；OR9′；SR9′；NR9′R9′；COOR9′；NO2； CN；C(O)R9′；C(O)C(O)R9′；C(O)NR9′R9′；S(O)2R9′；N(R9′)C(O)R9′；N(R9′)(COOR9′)； N(R9′)S(O)2R9′；S(O)2NR9′R9′；OC(O)R9′；NR9′C(O)NR9′R9′；NR9′C(O)C(O)R9′； NR9′C(O)R6′；NR9′S(O)2NR9′R9′；NR9′S(O)2R6′；NR9′C(O)C(O)NR9′R9′；被1-3个独 立的R6′，卤素，CF3，OR9′，SR9′，NR9′R9′，COOR9′，NO2，CN，C(O)R9′，C(O)NR9′R9′， NHC(O)R9′，NH(COOR9′)，S(O)2NR9′R9′，OC(O)R9′所取代的C1-C10烷基；被1-3 个独立的R6′，卤素，CF3，OR9′，SR9′，NR9′R9′，COOR9′，NO2，CN，C(O)R9′， C(O)NR9′R9′，NHC(O)R9′，NH(COOR9′)，S(O)2NR9′R9′，OC(O)R9′所取代的C2-C10 烯基；或R9′。

在一个方面，本发明提供了式(VI)的sirtuin-调节化合物或其盐：

其中：

Het是可选择地取代的杂环芳基基团；并且

Ar′是可选择地取代的碳环或杂环芳基基团。

本发明还包括此处所公开的化合物的前药和代谢物。

在另一个方面，本发明提供了式(VII)的sirtuin-调节化合物或其盐：

其中：

X7，X8，X9和X10中的每个独立地选自N，CR20，或CR1′，其中：

每个R20独立地选自H或增溶基团；

每个R1′独立地选自H或可选择地取代的C1-C3直链或支链烷基；

X7，X8，X9和X10中的一个是N，和其它的是选自CR20或CR1′；和

0至1个R20是增溶基团；

R19选自：

其中：

每个Z10，Z11，Z12和Z13独立地选自N，CR20，或CR1′；和

每个Z14，Z15和Z16独立地选自N，NR1′，S，O，CR20，或CR1′，其中：

Z10，Z11，Z12或Z13中的0至2个是N；

Z14，Z15和Z16中的至少一个是N，NR1′，S或O；

Z14，Z15和Z16中的0至1个是S或O；

Z14，Z15和Z16中的0至2个是N或NR1′；

0至1个R20是增溶基团；

0至1个R1′是可选择地取代的C1-C3直链或支链烷基；和

R21选 自-NR1′-C(O)-，-NR1′-S(O)2-，-NR1′-C(O)-NR1′-，-NR1′-C(S)-NR1′-，-NR1′-C(S)-NR1′ -CR1′R1′-，-NR1′-C(O)-CR1′R1′-NR1′-，-NR1′-C(＝NR1′)-NR1′-，-C(O)-NR1′-，-C(O)-NR 1′-S(O)2-，-NR1′-，-CR1′R1′-，-NR1′-C(O)-CR1′＝CR1′-，-NR1′-S(O)2-NR1′-，-NR1′-C(O) -NR1′-S(O)2-，-NR1′-CR1′R1′-C(O)-NR1′-，-CR1′R1′-C(O)-NR1′-，-NR1′-C(O)-CR1′＝CR 1′-CR1′R1′-，-NR1′-C(＝N-CN)-NR1′-，-NR1′-C(O)-CR1′R1′-O-，-NR1′-C(O)-CR1′R1′-C R1′R1′-O-，-NR1′-S(O)2-CR1′R1′-，-NR1′-S(O)2-CR1′R1′-CR1′R1′-，-NR1′-C(O)-CR1′R1′ -；-NR1′-C(O)-CR1′R′1-CR1′R′1-，-NR1′-C(S)-NR1′-CR1′R′1-CR1′R′1-， -NR1′-C(O)-O-，和

R31选自可选择地取代的单环或双环芳基，或可选择地取代的单环或双环杂 芳基，条件是所述化合物不是：

当R19是和R21是-NHC(O)-时，R31不是可选择地取代 的苯基。

在一些实施方案中，结构式(VII)的化合物具有以下的值：

每个X7，X8，X9和X10独立地选自N，CR20，或CR1′，其中：

每个R20独立地选自H或增溶基团；

每个R1′独立地选自H或可选择地取代的C1-C3直链或支链烷基；

X7，X8，X9和X10中的一个是N和其他的是选自CR20或CR1′；和

0至1个R20是增溶基团；

R19选自：

其中：

每个Z10，Z11，Z12和Z13独立地是选自N，CR20，或CR1′；和

每个Z14，Z15和Z16独立地是选自N，NR1′，S，O，CR20，或CR1′，其中：

Z10，Z11，Z12或Z13中的0至2个是N；

Z14，Z15和Z16中的至少一个是N，NR1′，S或O；

Z14，Z15和Z16中的0至1个是S或O；

Z14，Z15和Z16中的0至2个是N或NR1′；

0至1个R20是增溶基团；

0至1个R1′是可选择地取代的C1-C3直链或支链烷基；和

R21选 自-NR1′-C(O)-，-NR1′-S(O)2-，-NR1′-C(O)-NR1′-，-NR1′-C(S)-NR1′-，-NR1′-C(S)-NR1′- CR1′R1′-，-NR1′-C(O)-CR1′R1′-NR1′-，-NR1′-C(＝NR1′)-NR1′-，-C(O)-NR1′-，-C(O)-NR1′ -S(O)2-，-NR1′-，-CR1′R1′-，-NR1′-C(O)-CR1′＝CR1′-，-NR1′-S(O)2-NR1′-，-NR1′-C(O)- NR1′-S(O)2-，-NR1′-CR1′R1′-C(O)-NR1′-，-CR1′R′1-C(O)-NR1′-，-NR1′-C(O)-CR1′＝CR1′ -CR1′R1′-，-NR1′-C(＝N-CN)-NR1′-，-NR1′-C(O)-CR1′R1′-O-，-NR1′-C(O)-CR1′R1′-CR 1′R1′-O-，-NR1′-S(O)2-CR1′R1′-，-NR1′-S(O)2-CR1′R1′-CR1′R1′-，或-NR1′-C(O)-CR1′R1′-； 和

R31选自可选择地取代的单环或双环芳基，或可选择地取代的单环或双环杂 芳基，条件是：

所述化合物不是：

和

当X8和X9各自独立地选自CR20或CR1′，R19是和每个 Z10，Z11，Z12和Z13独立地是选自CR20，或CR1′，那么：

a)X8和X9中的至少一个不是CH；或

b)Z10，Z11，Z12和Z13中的至少一个是CR20，其中R20是增溶基团。

在还有另一个实施方案中，本发明提供了结构式(VIII)的sirtuin-调节化合 物或其盐：

其中：

R1′选自H或可选择地取代的C1-C3直链或支链烷基；

R21选 自-NR1′-C(O)-，-NR1′-S(O)2-，-NR1′-C(O)-NR1′-，-NR1′-C(S)-NR1′-，-NR1′-C(S)-NR1′ -CR1′R1′-，-NR1′-C(O)-CR1′R1′-NR1′-，-NR1′-C(＝NR1′)-NR1′-，-C(O)-NR1′-，-C(O)-NR 1′-S(O)2-，-NR1′-，-CR1′R1′-，-NR1′-C(O)-CR1′＝CR1′-，-NR1′-S(O)2-NR1′-，-NR1′-C(O) -NR1′-S(O)2-，-NR1′-CR1′R1′-C(O)-NR1′-，-CR1′R1′-C(O)-NR1′-，-NR1′-C(O)-CR1′＝CR 1′-CR1′R1′-，-NR1′-C(＝N-CN)-NR1′-，-NR1′-C(O)-CR1′R1′-O-，-NR1′-C(O)-CR1′R1′-C R1′R1′-O-，-NR1′-S(O)2-CR1′R1′-，-NR1′-S(O)2-CR1′R1′-CR1′R1′-，-NR1′-C(O)-CR1′R1′ -；-NR1′-C(O)-CR1′R′1-CR1′R′1-，-NR1′-C(S)-NR1′-CR1′R′1-CR1′R′1-， -NR1′-C(O)-O-，和

R31选自可选择地取代的单环或双环芳基，或可选择地取代的单环或双环杂 芳基，条件是：

当R1′是甲基，和R21是-NH-C(O)-时，R31不是1- 甲氧基萘基；2-甲氧基萘基；或未取代的2-噻吩基；

当R1′是甲基，和R21是-NH-C(O)-CH＝CH-时，R31不是

当R1′是甲基，和R21是-NH-C(O)-CH-O-时，R31不是未取代的萘基；2-甲氧 基，4-硝基苯基；4-氯，2-甲基苯基；或4-叔-丁基苯基；和

当R21是-NH-C(O)-时，R31不是可选择地取代的苯基。

在另一个实施方案中，本发明提供了结构式(IX)的sirtuin-调节化合物或其 盐：

其中：

R1选自H或可选择地取代的C1-C3直链或支链烷基；和

R50选自2，3-二甲氧基苯基，苯氧基苯基，2-甲基-3-甲氧基苯基，2-甲氧基-4- 甲基苯基，或被1至3个取代基取代的苯基，其中所述取代基中的一个是增溶基 团；条件是R50不同时被增溶基团和硝基基团所取代，和R50不在4-位被环状增 溶基团单独取代或不在2-位被吗啉代基团单独取代。

在一个方面，本发明提供了结构式(X)的sirtuin-调节化合物或其盐：

其中：

R1选自H或可选择地取代的C1-C3直链或支链烷基；和

R51选自可选择地取代的单环杂芳基，可选择地取代的双环杂芳基，或可选择 地取代的萘基，其中R51不是氯苯并(b)噻吩基，未取代的苯并间二氧杂环戊烯 基，未取代的苯并呋喃基，甲基-苯并呋喃基，未取代的呋喃基，苯基-，溴-，或硝 基-呋喃基，氯苯基-异噁唑基，氧代苯并吡喃基，未取代的萘基，甲氧基-，甲基-， 或卤代-萘基，未取代的噻吩基，未取代的吡啶基，或氯吡啶基

在另一个方面，本发明提供了结构式(XI)的sirtuin-调节化合物或其盐：

其中：

R1′选自H或可选择地取代的C1-C3直链或支链烷基；

R22选 自-NR23-C(O)-，-NR1′-S(O)2-，-NR1′-C(O)-NR1′-，-NR1′-C(S)-NR1′-，-NR1′-C(S)-N R1′-CR1′R1′-，-NR1′-C(O)-CR1′R1′-NR1′-，-NR1′-C(＝NR1)-NR1′-，-C(O)-NR1′-，-C(O)- NR1′-S(O)2-，-NR1′-，-CR1′R1′-，-NR1′-C(O)-CR1′＝CR1′-，-NR1′-S(O)2-NR1′-，-NR1′-C (O)-NR1′-S(O)2-，-NR1′-CR1′R1′-C(O)-NR1′-，-CR1′R1′-C(O)-NR1′-，-NR1′-C(O)-CR1′＝ CR1′-CR1′R1′-，-NR1′-C(＝N-CN)-NR1′-，-NR1′-C(O)-CR1′R1′-O-，-NR1′-C(O)-CR1′R1′- CR1′R1′-O-，-NR1′-S(O)2-CR1′R1′-，-NR1′-S(O)2-CR1′R1′-CR1′R1′-，-NR1′-C(O)-CR1′ R′1-CR1′R′1-，-NR1′-C(S)-NR1′-CR1′R′1-CR1′R′1-，-NR1′-C(O)-O- 或-NR1′-C(O)-CR1′R1′-，其中R23是可选择地取代的C1-C3直链或支链烷基；和

R31是选自可选择地取代的单环或双环芳基，或可选择地取代的单环或双环 杂芳基，条件是：

当R22是-NH-C(O)-CH＝CH-时，R31不是未取代的呋喃基，5-(2-甲基-3-氯苯 基)-呋喃基，2，4-二氯苯基，3，5-二氯-2-甲氧基苯基，3-硝基苯基，4-氯苯基，4-氯-3- 硝基苯基，4-异丙基苯基，4-甲氧基苯基，2-甲氧基-5-溴苯基，或未取代的苯基；

当R22是-NH-C(O)-CH2-时，R31不是3，4-二甲氧基苯基，4-氯苯基，或未取代 的苯基；

当R22是-NH-C(O)-CH2-O-时，R31不是2，4-二甲基-6-硝基苯基，2-或4-硝 基苯基，4-环己基苯基，4-甲氧基苯基，未取代的萘基，或未取代的苯基，或单独被 选自直链-或支链-烷基或卤素的取代基单取代，双取代或三取代的苯基；

当R22是-NH-C(O)-CH(CH3)-O-时，R31不是2，4-二氯苯基，4-氯苯基，或未 取代的苯基；和

当R22是-NH-S(O)2-时，R31不是未取代的苯基。

在还有另一个方面，本发明提供了结构式(XII)的sirtuin-调节化合物或其盐：

其中：

每个X7，X8，X9和X10独立地是选自N，CR20，或CR1′，其中：

每个R20独立地是选自H或增溶基团；

每个R1′独立地是选自H或可选择地取代的C1-C3直链或支链烷基；

X7，X8，X9和X10中的一个是N和其他的是选自CR20或CR1′；和

0至1个R20是增溶基团；

R19选自：

其中：

每个Z10，Z11，Z12和Z13独立地是选自N，CR20，或CR1′；和

每个Z14，Z15和Z16独立地是选自N，NR1′，S，O，CR20，或CR1′，其中：

Z10，Z11，Z12或Z13中的0至2个是N；

Z14，Z15和Z16中的至少一个是N，NR1′，O或S；

Z14，Z15和Z16中的0至1个是S或O；

Z14，Z15和Z16中的0至2个是N或NR1′；

0至1个R20是增溶基团；

0至1个R1′可选择地取代的C1-C3直链或支链烷基；和

R21选 自-NR1′-C(O)-，-NR1′-S(O)2-，-NR1′-C(O)-NR1′-，-NR1′-C(S)-NR1′-，-NR1′-C(S)-NR1′ -CR1′R1′-，-NR1′-C(O)-CR1′R1′-NR1′-，-NR1′-C(＝NR1)-NR1′-，-C(O)-NR1′-，-C(O)-NR 1′-S(O)2-，-NR1′-，-CR1′R1′-，-NR1′-C(O)-CR1′＝CR1′-，-NR1′-S(O)2-NR1′-，-NR1′-C(O) -NR1′-S(O)2-，-NR1′-CR1′R1′-C(O)-NR1′-，-CR1′R1′-C(O)-NR1′-，-NR1′-C(O)-CR1′＝CR 1′-CR1′R1′-，-NR1′-C(＝N-CN)-NR1′-，-NR1′-C(O)-CR1′R1′-O-，-NR1′-C(O)-CR1′R1′-C R1′R1′-O-，-NR1′-S(O)2-CR1′R1′-，-NR1′-S(O)2-CR1′R1′-CR1′R1′-，-NR1′-C(O)-CR1′R1′ -；-NR1′-C(O)-CR1′R′1-CR1′R′1-，-NR1′-C(S)-NR1′-CR1′R′1-CR1′R′1-， -NR1′-C(O)-O-，和

R31选自可选择地取代的单环或双环芳基，或可选择地取代的单环或双环杂 芳基， 条件是当R19是每个Z10，Z11，Z12和Z13都是CH，和R21 是-NHC(O)-时，R31不是可选择地取代的苯基。

在某些实施方案中，结构式(XI)的化合物具有以下的值：

每个X7，X8，X9和X10独立地是选自N，CR20，或CR1′，其中：

每个R20独立地是选自H或增溶基团；

每个R1′独立地是选自H或可选择地取代的C1-C3直链或支链烷基；

X7，X8，X9和X10中的一个是N和其他的是选自CR20或CR1′；和

0至1个R20是增溶基团；

R19选自：

其中：

每个Z10，Z11，Z12和Z13独立地是选自N，CR20，或CR1′；和

每个Z14，Z15和Z16独立地是选自N，NR1′，S，O，CR20，或CR1′，其中：

Z10，Z11，Z12或Z13中的0至2个是N；

Z14，Z15和Z16中的至少一个是N，NR1′，S或O；

Z14，Z15和Z16中的0至1个是S或O；

Z14，Z15和Z16中的0至2个是N或NR1′；

0至1个R20是增溶基团；

0至1个R1′是可选择地取代的C1-C3直链或支链烷基；和

R21选 自-NR1′-C(O)-，-NR1′-S(O)2-，-NR1′-C(O)-NR1′-，-NR1′-C(S)-NR1′-，-NR1′-C(S)-NR1′ -CR1′R1′-，-NR1′-C(O)-CR1′R1′-NR1′-，-NR1′-C(＝NR1′)-NR1′-，-C(O)-NR1′-，-C(O)-NR 1′-S(O)2-，-NR1′-，-CR1′R1′-，-NR1′-C(O)-CR1′＝CR1′-，-NR1′-S(O)2-NR1′-，-NR1′-C(O) -NR1′-S(O)2-，-NR1′-CR1′R1′-C(O)-NR1′-，-CR1′R1′-C(O)-NR1′-，-NR1′-C(O)-CR1′＝CR 1′-CR1′R1′-，-NR1′-C(＝N-CN)-NR1′-，-NR1′-C(O)-CR1′R1′-O-，-NR1′-C(O)-CR1′R1′-CR1 ′R1′-O-，-NR1′-S(O)2-CR1′R1′-，-NR1′-S(O)2-CR1′R1′-CR1′R1′-，-NR1′-C(O)-CR1′R′1-C R1′R′1-，-NR1′-C(S)-NR1′-CR1′R′1-CR1′R′1-，-NR1′-C(O)-O-或-NR1′-C(O)-CR1′R1′-； 和

R31选自可选择地取代的单环或双环芳基，或可选择地取代的单环或双环杂 芳基，条件是：

当X7是N，R19是和每个Z10，Z11，Z12和Z13独立地是选 自CR20，或CR1′时，那么：

a)X8，X9或X10中的至少一个是C-(C1-C3直链或支链烷基)或C-(增溶基 团)；或

b)Z10，Z11，Z12和Z13中的至少一个是CR20，其中R20是增溶基团。

在另一个方面，本发明提供了结构式(XIII)的化合物或其盐：

其中：

R1′是选自H或可选择地取代的C1-C3直链或支链烷基；

R21选 自-NR1′-C(O)-，-NR1′-S(O)2-，-NR1′-C(O)-NR1′-，-NR1′-C(S)-NR1′-，-NR1′-C(S)-NR1′ -CR1′R1′-，-NR1′-C(O)-CR1′R1′-NR1′-，-NR1′-C(＝NR1′)-NR1′-，-C(O)-NR1′-，-C(O)-NR 1′-S(O)2-，-NR1′-，-CR1′R1′-，-NR1′-C(O)-CR1′＝CR1′-，-NR1′-S(O)2-NR1′-，-NR1′-C(O) -NR1′-S(O)2-，-NR1′-CR1′R1′-C(O)-NR1′-，-CR1′R1′-C(O)-NR1′-，-NR1′-C(O)-CR1′＝CR 1′-CR1′R1′-，-NR1′-C(＝N-CN)-NR1′-，-NR1′-C(O)-CR1′R1′-O-，-NR1′-C(O)-CR1′R1′-C R1′R1′-O-，-NR1′-S(O)2-CR1′R1′-，-NR1′-S(O)2-CR1′R1′-CR1′R1′-，-NR1′-C(O)-CR1′R1′ -；-NR1′-C(O)-CR1′R′1-CR1′R′1-，-NR1′-C(S)-NR1′-CR1′R′1-CR1′R′1-， -NR1′-C(O)-O-，和

R31选自可选择地取代的单环或双环芳基，或可选择地取代的单环或双环杂 芳基，条件是：

当R21是-NH-C(O)-时，R31不是未取代的呋喃基，5-溴呋喃基，未取代的苯基， 卤素或甲基单取代的苯基，3-或4-甲氧基苯基，4-丁氧基苯基，4-叔-丁基苯基，3- 三氟甲基苯基，2-苯甲酰基苯基，2-或4-乙氧基苯基，2，3-，2，4-，3，4-，或3，5-二甲氧 基苯基，3，4，5-三甲氧基苯基，2，4-或2-6二氟苯基，3，4-二氧亚甲基苯基，3，4-或 3，5-二甲基苯基，2-氯-5-溴苯基，2-甲氧基-5-氯苯基，未取代的喹啉基，甲基和苯 基同时取代的噻唑基，或乙氧基取代的吡啶基；

当R21是-NH-C(O)-CH(CH2-CH3)-时，R31不是未取代的苯基；

当R21是-NH-C(O)-CH2-时，R31不是未取代的苯基，3-甲基苯基，4-氯苯基， 4-乙氧基苯基，4-氟苯基或4-甲氧基苯基；

当R21是-NH-C(O)-CH2-O-时，R31不是未取代的苯基或4-氯苯基；和

当R21是-NH-S(O)2-时，R31不是3，4-二氧亚甲基苯基，2，4，5-三甲基苯基， 2，4，6-三甲基苯基，2，4-或3，4-二甲基苯基，2，5-二氟苯基，2，5-或3，4-二甲氧基苯基， 氟苯基，4-氯苯基，4-溴苯基，4-乙基苯基，4-甲基苯基，3-甲基-4-甲氧基苯基，未 取代的苯基，未取代的吡啶基，未取代的噻吩基，氯取代的噻吩基，或甲基取代 的苯并噻唑基。

在一个方面，本发明提供了结构式(XIV)的sirtuin-调节化合物或其盐：

其中：

每个R23和R24独立地是选自H，-CH3或增溶基团；

R25选自H，或增溶基团；和

R19选自：

其中：

每个Z10，Z11，Z12和Z13独立地是选自N，CR20，或CR1′；和

每个Z14，Z15和Z16独立地是选自N，NR1′，S，O，CR20，或CR1′，其中：

Z10，Z11，Z12或Z13中的0至2个是N；

Z14，Z15和Z16中的至少一个是N，NR1′，O或S；

Z14，Z15和Z16中的0至1个是S或O；

Z14，Z15和Z16中的0至2个是N或NR1′；

0至1个R20是增溶基团；和

0至1个R1′是可选择地取代的C1-C3直链或支链烷基；

每个R20独立地是选自H或增溶基团；

R21选 自-NR1′-C(O)-，-NR1′-S(O)2-，-NR1′-C(O)-NR1′-，-NR1′-C(S)-NR1′-，-NR1′-C(S)-NR1′ -CR1′R1′-，-NR1′-C(O)-CR1′R1′-NR1′-，-NR1′-C(＝NR1′)-NR1′-，-C(O)-NR1′-，-C(O)-NR 1′-S(O)2-，-NR1′-，-CR1′R1′-，-NR1′-C(O)-CR1′＝CR1′-，-NR1′-S(O)2-NR1′-，-NR1′-C(O) -NR1′-S(O)2-，-NR1′-CR1′R1′-C(O)-NR1′-，-CR1′R1′-C(O)-NR1′-，-NR1′-C(O)-CR1′＝CR 1′-CR1′R1′-，-NR1′-C(＝N-CN)-NR1′-，-NR1′-C(O)-CR1′R1′-O-，-NR1′-C(O)-CR1′R1′-C R1′R1′-O-，-NR1′-S(O)2-CR1′R1′-，-NR1′-S(O)2-CR1′R1′-CR1′R1′-，-NR1′-C(O)-CR1′R1′ -；-NR1′-C(O)-CR1′R′1-CR1′R′1-，-NR1′-C(S)-NR1′-CR1′R′1-CR1R′1-， -NR1′-C(O)-O-，

每个R1′独立地是选自H或可选择地取代的C1-C3直链或支链烷基；和

R31选自可选择地取代的单环或双环芳基，或可选择地取代的单环或双环杂 芳基，

其中当R19是R21是-NH-C(O)-和R25是-H时，R31 不是可选择地取代的苯基基团，和其中所述化合物不是2-氯-N-[3-[3-(环己基氨基) 咪唑并[1，2-a]吡啶-2-基]苯基]-4-硝基苯甲酰胺。

在另一个方面，本发明提供了结构式(XV)的sirtuin-调节化合物或其盐：

其中：

R21选 自-NR1′-C(O)-，-NR1′-S(O)2-，-NR1′-C(O)-NR1′-，-NR1′-C(S)-NR1′-，-NR1′-C(S)-NR1′ -CR1′R1′-，-NR1′-C(O)-CR1′R1′-NR1′-，-NR1′-C(＝NR1′)-NR1′-，-C(O)-NR1′-，-C(O)-NR 1′-S(O)2-，-NR1′-，-CR1′R1′-，-NR1′-C(O)-CR1′＝CR1′-，-NR1′-S(O)2-NR1′-，-NR1′-C(O) -NR1′-S(O)2-，-NR1′-CR1′R1′-C(O)-NR1′-，-CR1′R1′-C(O)-NR1′-，-NR1′-C(O)-CR1′＝CR 1′-CR1′R1′-，-NR1′-C(＝N-CN)-NR1′-，-NR1′-C(O)-CR1′R1′-O-，-NR1′-C(O)-CR1′R1′-C R1′R1′-O-，-NR1′-S(O)2-CR1′R1′-，-NR1′-S(O)2-CR1′R1′-CR1′R1′-，-NR1′-C(O)-CR1′R1′ -；-NR1′-C(O)-CR1′R′1-CR1′R′1-，-NR1′-C(S)-NR1′-CR1′R′1-CR1′R′1-， -NR1′-C(O)-O-，和

每个R1′独立地是选自H或可选择地取代的C1-C3直链或支链烷基；和

R32选自可选择地取代的双环芳基，或可选择地取代的单环或双环杂芳基，

其中：

当R21是-NH-C(O)-时，R32不是未取代的2-呋喃基，2-(3-溴呋喃基)，未取代 的2-噻吩基，未取代的3-吡啶基，未取代的4-吡啶基，或 和

当R21是-NR1′-S(O)2-时，R32不是未取代的2-噻吩基或未取代的萘基。

在还有另一个方面，本发明提供了结构式(XVI)的sirtuin-调节化合物或其 盐：

其中：

R21选 自-NR1′-C(O)-，-NR1′-S(O)2-，-NR1′-C(O)-NR1′-，-NR1′-C(S)-NR1′-，-NR1′-C(S)-NR1′ -CR1′R1′-，-NR1′-C(O)-CR1′R1′-NR1′-，-NR1′-C(＝NR1′)-NR1′-，-C(O)-NR1′-，-C(O)-NR 1′-S(O)2-，-NR1′-，-CR1′R1′-，-NR1′-C(O)-CR1′＝CR1′-，-NR1′-S(O)2-NR1′-，-NR1′-C(O) -NR1′-S(O)2-，-NR1′-CR1′R1′-C(O)-NR1′-，-CR1′R1′-C(O)-NR1′-，-NR1′-C(O)-CR1′＝CR 1′-CR1′R1′-，-NR1′-C(＝N-CN)-NR1′-，-NR1′-C(O)-CR1′R1′-O-，-NR1′-C(O)-CR1′R1′-C R1′R1′-O-，-NR1′-S(O)2-CR1′R1′-，-NR1′-S(O)2-CR1′R1′-CR1′R1′-，-NR1′-C(O)-CR1′R1′ -；-NR1′-C(O)-CR1′R′1-CR1′R′1-，-NR1′-C(S)-NR1′-CR1′R′1-CR1′R′1-， -NR1′-C(O)-O-，和

每个R1′独立地是选自H或可选择地取代的C1-C3直链或支链烷基；和

R33是可选择地取代的苯基，其中：

当R21是-NH-C(O)-时，R33是一个取代的苯基除了苯基被卤素，甲基，硝基 或甲氧基单取代的情况；2-羧基苯基；4-正-戊基苯基；4-乙氧基苯基；2-羧基-3-硝 基苯基；2-氯-4-硝基苯基；2-甲氧基-5-乙基苯基；2，4-二甲氧基苯基；3，4，5-三甲氧 基苯基；2，4-二氯苯基；2，6-二氟苯基；3，5-二硝基苯基；或3，4-二甲基苯基；

当R21是-NR1′-C(O)-CR1′R1′-或-NH-C(O)-CH(CH3)-O时，R33是一个取代的 苯基；

当R21是-NH-C(O)-CH2时，R33不是未取代的苯基，4-甲氧基苯基；3，4-二甲氧 基苯基或4-氯苯基；

当R21是-NH-C(O)-CH2-O时，R33不是2，4-双(1，1-二甲基丙基)苯基；

当R21是-NH-C(O)-NH-时，R33不是4-甲氧基苯基；和

当R21是-NH-S(O)2-时，R33是取代的苯基除了3-甲基苯基，3-三氟甲基苯基， 2，4，5-或2，4，6-三甲基苯基，2，4-或3，4-二甲基苯基，2，5-或3，4-二甲氧基苯基，2，5- 二甲氧基-4-氯苯基，3，6-二甲氧基，4-甲基苯基，2，5-或3，4-二氯苯基，2，5-二乙氧 基苯基，2-甲基-5-硝基苯基，2-乙氧基-5-溴苯基，2-甲氧基-5-溴苯基，2-甲氧基 -3，4-二氯苯基，2-甲氧基-4-甲基-5-溴苯基，3，5-二硝基-4-甲基苯基，3-甲基-4-甲氧 基苯基，3-硝基-4-甲基苯基，3-甲氧基-4-卤代苯基，3-甲氧基-5-氯苯基，4-正-丁氧 基苯基，4-卤代苯基，4-乙基苯基，4-甲基苯基，4-硝基苯基，4-乙氧基苯基，4-乙酰 基氨基苯基，4-甲氧基苯基，4-叔-丁基苯基，或对-联苯基。

在另一个方面，本发明提供了结构式(XVII)的sirtuin-调节化合物或其盐：

其中：

每个R23和R24独立地是选自H或-CH3，其中R23和R24中的至少一个是H； 和

R29是被下述取代基取代的苯基：

a)两个-O-CH3基团；

b)三个-O-CH3基团，位于2，3和4位；或

c)一个-N(CH3)2基团；和；

d)当R23是CH3时，一个在2或3位的-O-CH3基团， 其中R29是可选择地附加地被增溶基团取代。

在一个方面，本发明提供了结构式(XVIII)的sirtuin-调节化合物或其盐：

其中：

R19选自：

其中：

每个Z10，Z11，Z12和Z13独立地是选自N，CR20，或CR1′；和

每个Z14，Z15和Z16独立地是选自N，NR1′，S，O，CR20，或CR1′，

其中：

Z10，Z11，Z12或Z13中的0至2个是N；

Z14，Z15和Z16中的至少一个是N，NR1′，S或O；

Z14，Z15和Z16中的0至1个是S或O；

Z14，Z15和Z16中的0至2个是N或NR1′；

0至1个R20是增溶基团；和

0至1个R1′是可选择地取代的C1-C3直链或支链烷基；

每个R20独立地是选自H或增溶基团；

R21选 自-NR1′-C(O)-，-NR1′-S(O)2-，-NR1′-C(O)-NR1′-，-NR1′-C(S)-NR1′-，-NR1′-C(S)-NR1′ -CR1′R1′-，-NR1′-C(O)-CR1′R1′-NR1′-，-NR1′-C(＝NR1′)-NR1′-，-C(O)-NR1′-，-C(O)-NR 1′-S(O)2-，-NR1′-，-CR1′R1′-，-NR1′-C(O)-CR1′＝CR1′-，-NR1′-S(O)2-NR1′-，-NR1′-C(O) -NR1′-S(O)2-，-NR1′-CR1′R1′-C(O)-NR1′-，-CR1′R1′-C(O)-NR1′-，-NR1′-C(O)-CR1′＝CR 1′-CR1′R1′-，-NR1′-C(＝N-CN)-NR1′-，-NR1′-C(O)-CR1′R1′-O-，-NR1′-C(O)-CR1′R1′-C R1′R1′-O-，-NR1′-S(O)2-CR1′R1′-，-NR1′-S(O)2-CR1′R1′-CR1′R1′-，-NR1′-C(O)-CR1′R1′ -；-NR1′-C(O)-CR1′R′1-CR1′R′1-，-NR1′-C(S)-NR1′-CR1′R′1-CR1′R′1-， -NR1′-C(O)-O-，其中每个R1′独立地是 选自H或可选择地取代的C1-C3直链或支链烷基；和

R31是选自可选择地取代的单环或双环芳基，或可选择地取代的单环或双 环杂芳基，条件是当R19是每个Z10，Z11，Z12和Z13都是 CH，R20是H，和R21是-NHC(O)-时，R31不是可选择地取代的苯基。

在另一个方面，本发明提供了结构式(XX)的sirtuin-调节化合物或其盐：

其中：

R19选自：

其中：

每个Z10，Z11，Z12和Z13独立地是选自N，CR20，或CR1′；和

每个Z14，Z15和Z16独立地是选自N，NR1′，S，O，CR20，或CR1′，

其中：

Z10，Z11，Z12或Z13中的0至2个是N；

Z14，Z15和Z16中的至少一个是N，NR1′，O或S；

Z14，Z15和Z16中的0至1个是S或O；

Z14，Z15和Z16中的0至2个是N或NR1′；

0至1个R20是增溶基团；和

0至1个R1′是可选择地取代的C1-C3直链或支链烷基；

每个R20独立地是选自H或增溶基团；

R20a独立地是选自H或增溶基团；

R21选 自-NR1′-C(O)-，-NR1′-S(O)2-，-NR1′-C(O)-NR1′-，-NR1′-C(S)-NR1′-，-NR1′-C(S)-NR1′ -CR1′R1′-，-NR1′-C(O)-CR1′R1′-NR1′-，-NR1′-C(＝NR1′)-NR1′-，-C(O)-NR1′-，-C(O)-NR 1′-S(O)2-，-NR1′-，-CR1′R1′-，-NR1′-C(O)-CR1′＝CR1′-，-NR1′-S(O)2-NR1′-，-NR1′-C(O) -NR1′-S(O)2-，-NR1′-CR1′R1′-C(O)-NR1′-，-CR1′R1′-C(O)-NR1′-，-NR1′-C(O)-CR1′＝CR 1′-CR1′R1′-，-NR1′-C(＝N-CN)-NR1′-，-NR1′-C(O)-CR1′R1′-O-，-NR1′-C(O)-CR1′R1′-C R1′R1′-O-，-NR1′-S(O)2-CR1′R1′-，-NR1′-S(O)2-CR1′R1′-CR1′R1′-，-NR1′-C(O)-CR1′R1′ -；-NR1′-C(O)-CR1′R′1-CR1′R′1-，-NR1′-C(S)-NR1′-CR1′R′1-CR1′R′1-， -NR1′-C(O)-O-，其中：

每个R1′独立地是选自H或可选择地取代的C1-C3直链或支链烷基； 和 R31选自可选择地取代的单环或双环芳基，或可选择地取代的单环或双环杂 芳基，其中当R19是以及Z10，Z11，Z12和Z13各自是CH时， R20a是增溶基团。

在还有另一个方面，本发明提供了结构式(XXI)的sirtuin-调节化合物或其 盐：

其中：

R21选 自-NR1′-C(O)-，-NR1′-S(O)2-，-NR1′-C(O)-NR1′-，-NR1′-C(S)-NR1′-，-NR1′-C(S)-NR1′ -CR1′R1′-，-NR1′-C(O)-CR1′R1′-NR1′-，-NR1′-C(＝NR1′)-NR1′-，-C(O)-NR1′-，-C(O)-NR 1′-S(O)2-，-NR1′-，-CR1′R1′-，-NR1′-C(O)-CR1′＝CR1′-，-NR1′-S(O)2-NR1′-，-NR1′-C(O) -NR1′-S(O)2-，-NR1′-CR1′R1′-C(O)-NR1′-，-CR1′R1′-C(O)-NR1′-，-NR1′-C(O)-CR1′＝CR 1′-CR1′R1′-，-NR1′-C(＝N-CN)-NR1′-，-NR1′-C(O)-CR1′R1′-O-，-NR1′-C(O)-CR1′R1′-C R1′R1′-O-，-NR1′-S(O)2-CR1′R1′-，-NR1′-S(O)2-CR1′R1′-CR1′R1′-，-NR1′-C(O)-CR1′R1′ -；-NR1′-C(O)-CR1′R′1-CR1′R′1-，-NR1′-C(S)-NR1′-CR1′R′1-CR1′R′1-， -NR1′-C(O)-O-，其中

每个R1′独立地是选自H或可选择地取代的C1-C3直链或支链烷基；

和

R32是可选择地取代的单环或双环杂芳基，或可选择地取代的双环芳基，其 中：

当R21是-NH-C(O)-CH2-时，R32不是未取代的噻吩-2-基；

当R21是-NH-C(O)-时，R32不是呋喃-2-基，5-溴呋喃-2-基，或2-苯基-4-甲基 噻唑-5-基；

当R21是-NH-S(O)2-时，R32不是未取代的萘基或5-氯噻吩-2-基。

在另一个方面，本发明提供了结构式(XXII)的sirtuin-调节化合物或其盐：

其中：

R21选自 -NR1′-C(O)-，-NR1′-S(O)2-，-NR1′-C(O)-NR1′-，-NR1′-C(S)-NR1′-，-NR1′-C(S)-NR1′-C R1′R1′-，-NR1′-C(O)-CR1′R1′-NR1′-，-NR1′-C(＝NR1′)-NR1′-，-C(O)-NR1′-，-C(O)-NR1′- S(O)2-，-NR1′-，-CR1′R1′-，-NR1′-C(O)-CR1′＝CR1′-，-NR1′-S(O)2-NR1′-，-NR1′-C(O)- NR1′-S(O)2-，-NR1′-CR1′R1′-C(O)-NR1′-，-CR1′R1′-C(O)-NR1′-，-NR1′-C(O)-CR1′＝CR1′ -CR1′R1′-，-NR1′-C(＝N-CN)-NR1′-，-NR1′-C(O)-CR1′R1′-O-，-NR1′-C(O)-CR1′R1′-CR 1′R1′-O-，-NR1′-S(O)2-CR1′R1′-，-NR1′-S(O)2-CR1′R1′-CR1′R1′-，-NR1′-C(O)-CR1′R1′-； -NR1′-C(O)-CR1′R′1-CR1′R′1-，-NR1′-C(S)-NR1′-CR1′R′1-CR1′R′1-，-NR1′-C(O)-O-， 其中每个R1′独立地是选自H或可选 择地取代的C1-C3直链或支链烷基；和

R33是可选择地取代的苯基，其中：

当R21是-NR1′-C(O)-时，R1′不是H；

当R21是-NH-C(O)-CH2或-NH-C(O)-CH2-O-时，R33不是未取代的苯基或 4-卤代苯基；和

当R21是-NH-S(O)2-时，R33不是未取代的苯基，2，4-或3，4-二甲基苯基，2，4-二 甲基-5-甲氧基苯基，2-甲氧基-3，4-二氯苯基，2-甲氧基，5-溴苯基-3，4-二氧亚乙基 苯基，3，4-二甲氧基苯基，3，4-二氯苯基，3，4-二甲基苯基，3-或4-甲基苯基，4-烷氧 基苯基，4-苯氧基苯基，4-卤代苯基，4-联苯基，或4-乙酰基氨基苯基。

在一个方面，本发明提供了结构式(XXII)的sirtuin-调节化合物或其盐：

其中：

R21是选自-NH-C(O)-，或-NH-C(O)-CH2-；和

R33是被下述取代基取代的苯基：

a)一个-N(CH3)2基团；

b)一个在3位的CN基团；

c)一个-S(CH3)基团；或

d)在3和4位桥连。

在另一个方面，本发明提供了结构式(XXIII)的sirtuin-调节化合物或其盐：

其中：

每个R20和R20a独立地是选自H或增溶基团；

每个R1′，R1″和R1″′独立地是选自H或可选择地取代的C1-C3直链或支 链烷基；

R21选 自-NR1′-C(O)-，-NR1′-S(O)2-，-NR1′-C(O)-NR1′-，-NR1′-C(S)-NR1′-，-NR1′-C(S)-NR1′ -CR1′R′1-，-NR1′-C(O)-CR1′R1′-NR1′-，-NR1′-C(＝NR1′)-NR1′-，-NR1′-C(O)-CR1′＝CR1′-， -NR1′-S(O)2-NR1′-，-NR1′-C(O)-NR1′-S(O)2-，-NR1′-CR1′R′1-C(O)-NR1′-，-NR1′-C(O) -CR1′＝CR1′-CR1′R1′-，-NR1′-C(＝N-CN)-NR1′-，-NR1′-C(O)-CR1′R′1-O-，-NR1′-C(O)-C R1′R1′-CR1′R1′-O-，-NR1′-S(O)2-CR1′R′1-，-NR1′-S(O)2-CR1′R1′-CR1′R1′-， 或-NR1′-C(O)-CR1′R1′-；和

R31选自可选择地取代的单环或双环芳基，或可选择地取代的单环或双环 杂芳基，条件是：

当R21是-NH-C(O)-时，R31不是3，5-二硝基苯基，4-丁氧基苯 基，

当R21是-NH-C(O)-和每个R20，R20a，R1′，R1″和R1″′是氢时，R31不是 未取代的苯基，2-或4-硝基苯基，2，4-二硝基苯基，2-或4- 氯苯基，2-溴苯基，4-氟苯基，2，4-二氯苯基，2-羧基苯基，2-叠氮基苯基，2-或4-氨 基苯基，2-乙酰氨基苯基，4-甲基苯基，或4-甲氧基苯基；

当R21是-NH-C(O)-时，R1″是甲基；和每个R20，R20a，R1′和R1″′都是氢时，R31 不是2-甲基氨基苯基，

当R21是-NH-C(O)-CH2-或NH-C(S)-NH-，和每个R20，R20a，R1′，R1″和R1″′ 都是氢时，R31不是未取代的苯基；

当R21是-NH-S(O)2-，R1″是氢或甲基，和每个R20，R20a，R1′和R1″′都是氢时， R31不是4-甲基苯基；和

当R21是-NH-S(O)2-，R20a是氢或-CH2-N(CH2CH3)2，和每个R20，R1′，R1″和 R1″′都是氢时，R31不是

在一个特别的方面，本发明提供了结构式(XXIII)的sirtuin-调节化合物或 其盐：

其中：

每个R20和R20a独立地是选自H或增溶基团；

每个R1′，R1″和R1″′独立地是选自H或可选择地取代的C1-C3直链或支 链烷基；

R21选 自-NR1′-C(O)-，-NR1′-S(O)2-，-NR1′-C(O)-NR1′-，-NR1′-C(S)-NR1′-，-NR1′-C(S)-NR1′ -CR1′R′1-，-NR1′-C(O)-CR1′R1′-NR1′-，-NR1′-C(＝NR1′)-NR1′-，-NR1′-C(O)-CR1′＝CR1′-， -NR1′-S(O)2-NR1′-，-NR1′-C(O)-NR1′-S(O)2-，-NR1′-CR1′R′1-C(O)-NR1′-，-NR1′-C(O) -CR1′＝CR1′-CR1′R1′-，-NR1′-C(＝N-CN)-NR1′-，-NR1′-C(O)-CR1′R′1-O-，-NR1′-C(O)-C R1′R1′-CR1′R1′-O-，-NR1′-S(O)2-CR1′R′1-，-NR1′-S(O)2-CR1′R1′-CR1′R1′-， 或-NR1′-C(O)-CR1′R1′-；和

R31选自可选择地取代的单环或双环芳基，或可选择地取代的单环或双环 杂芳基，

其中：

至少一个R20是增溶基团或至少一个R1″′是可选择地取代的C1-C3直 链或支链烷基或二者都是；或

R20a是除CH2-N(CH2CH3)2之外的增溶基团。

在还有另一个方面，本发明提供了结构式(XXIV)的sirtuin-调节化合物或 其盐：

其中：

每个R20和R20a独立地是选自H或增溶基团；

每个R1′，R1″和R1″′独立地是选自H或可选择地取代的C1-C3直链或支链 烷基；

R21选 自-NR23-C(O)-，-NR1′-S(O)2-，-NR1′-C(O)-NR1′-，-NR1′-C(S)-NR1′-，-NR1′-C(S)-NR1 ′-CR1′R′1-，-NR1′-C(O)-CR1′R1′-NR1′-，-NR1′-C(＝NR1′)-NR1′-，-NR1′-C(O)-CR1′＝CR1′- ，-NR1′-S(O)2-NR1′-，-NR1′-C(O)-NR1′-S(O)2-，-NR1′-CR1′R′1-C(O)-NR1′-，-NR1′-C(O) -CR1′＝CR1′-CR1′R1′-，-NR1′-C(＝N-CN)-NR1′-，-NR1′-C(O)-CR1′R′1-O-，-NR1′-C(O)-C R1′R1′-CR1′R1′-O-，-NR1′-S(O)2-CR1′R′1-，-NR1′-S(O)2-CR1′R1′-CR1′R1′-， 或-NR1′-C(O)-CR1′R1′-；和

R31选自可选择地取代的单环或双环芳基，或可选择地取代的单环或双环 杂芳基，条件是：

当R21是-NH-C(O)-CH2-时，R31不是2-甲基苯基，或3，4-二甲氧基苯基；

当R21是-NH-C(O)-CH＝CH-时，R31不是2-氯苯基；

当R21是-NH-C(O)-NH-时，R31不是未取代的苯并咪唑基；

当R21是-NH-S(O)2-，和每个R20，R2a，R1′，R1″和R1″′都是氢时，R31不是未取 代的苯基，4-氯苯基，4-甲基苯基，或4-乙酰氨基苯基；

当R21是-NH-S(O)2-，每个R1′和R1″′都是甲基或氢，和每个R20，R20a，和R1″ 都是氢时，R31不是4-硝基苯基；

当R21是-NH-C(O)-CH2-O-，R1″′是甲基或氢，和每个R20，R20a，R1′，和R1″都是 氢时，R31不是2，3-，2，5-，2，6-，3，4-或3，5-二甲基苯基，2，4-二氯甲基，2，4-二甲基-6- 溴苯基，2-或4-氯苯基，2-(1-甲基丙基)苯基，5-甲基-2-(1-甲基乙基)苯基，2-或4- 甲基苯基，2，4-二氯-6-甲基苯基，硝基苯基，2，4-二甲基-6-硝基苯基，2-或4-甲氧 基苯基，4-乙酰基-2-甲氧基苯基，4-氯-3，5-二甲基苯基，3-乙基苯基，4-溴苯基，4- 环己基苯基，4-(1-甲基丙基)苯基，4-(1-甲基乙基)苯基，4-(1，1-二甲基乙基)苯基， 或未取代的苯基；

当R21是-NH-C(O)-CH2-，R1″′是甲基或氢，和每个R20，R20a，R1′，和R1″都是氢 时，R31不是未取代的萘基，4-氯苯基，4-硝基苯基，4-甲氧基苯基，未取代的苯基， 未取代的噻吩基、

当R21是-NH-C(O)-CH2-，R1′是甲基，和每个R20，R20a，R1″，和R1″′都是氢时， R31不是未取代的苯基；

当R21是-NH-C(O)-CH＝CH，R1″′是甲基或氢，和每个R20，R20a，R1′，和R1″ 都是氢时，R31不是未取代的呋喃基，硝基苯基取代的呋喃基，2，4-二氯苯基，3，5- 二氯-2-甲氧基苯基，3-或4-硝基苯基，4-甲氧基苯基，未取代的苯基，或硝基取代 的噻吩基；

当R21是-NH-C(O)-CH(CH2CH3)-，和每个R20，R20a，R1′，R1″，和R1″′都是氢时， R31不是未取代的苯基；

当R21是-NH-C(O)-CH(CH3)-O-，R1″′是甲基或氢，和每个R20，R20a，R1′，和R1″ 是氢时，R31不是2，4-二氯苯基。

在一个特别的方面，本发明提供了结构式(XXIV)的sirtuin-调节化合物或 其盐：

其中：

每个R20和R20a独立地是选自H或增溶基团，和R20和R20a中的至少一 个是增溶基团；

每个R1′，R1″和R1″′独立地是选自H或可选择地取代的C1-C3直链或支 链烷基；

R21选 自-NR23-C(O)-，-NR1′-S(O)2-，-NR1′-C(O)-NR1′-，-NR1′-C(S)-NR1′-，-NR1′-C(S)-NR1 ′-CR1′R′1-，-NR1′-C(O)-CR1′R1′-NR1′-，-NR1′-C(＝NR1′)-NR1′-，-NR1′-C(O)-CR1′＝CR1′- ，-NR1′-S(O)2-NR1′-，-NR1′-C(O)-NR1′-S(O)2-，-NR1′-CR1′R′1-C(O)-NR1′-，-NR1′-C(O) -CR1′＝CR1′-CR1′R1′-，-NR1′-C(＝N-CN)-NR1′-，-NR1′-C(O)-CR1′R′1-O-，-NR1′-C(O)-C R1′R1′-CR1′R1′-O-，-NR1′-S(O)2-CR1′R′1-，-NR1′-S(O)2-CR1′R1′-CR1′R1′-， 或-NR1′-C(O)-CR1′R1′-，其中R23是可选择地取代的C1-C3直链或支链烷基；和

R31选自可选择地取代的单环或双环芳基，或可选择地取代的单环或双环 杂芳基。

在另一个方面，本发明提供了结构式(XXV)的sirtuin-调节化合物或其盐：

其中：

每个R20和R20a独立地是选自H或增溶基团，其中R20和R20a中的至少 一个是增溶基团；

每个R1′，R1″和R1″′独立地是选自H或可选择地取代的C1-C3直链或支链 烷基；和

R32是可选择地取代的苯基。

在一个方面，本发明提供了结构式(XXVI)的sirtuin-调节化合物或其盐：

其中：

每个R20和R20a独立地是选自H或增溶基团；

每个R1′，R1″和R1″′独立地是选自H或可选择地取代的C1-C3直链或支链 烷基；和

R33选自可选择地取代的杂芳基或可选择地取代的双环芳基，条件是：

当每个R1′和R1″′都是氢或甲基和每个R1″，R20和R20a都是氢时，R33不是 5，6，7，8-四氢萘基，未取代的苯并呋喃基，未取代的苯并噻唑基，氯-或硝基取代 的苯并噻吩基，未取代的呋喃基，苯基-，溴-或硝基取代的呋喃基，二甲基取代 的异噁唑基，未取代的萘基，5-溴萘基，4-甲基萘基，1-或3-甲氧基萘基，偶氮取 代的萘基，未取代的吡嗪基，S-甲基取代的吡啶基，未取代的吡啶基，噻吩基-或 苯基取代的喹啉基，氯-，溴-或硝基取代的噻吩基，未取代的噻吩基，或

在一个特别的方面，本发明提供了结构式(XXVI)的sirtuin-调节化合物或 其盐：

其中：

每个R20和R20a独立地是选自H或增溶基团，其中R20或R20a中的至少一 个是增溶基团；

每个R1′，R1″和R1″′独立地是选自H或可选择地取代的C1-C3直链或支链 烷基；和

R33选自可选择地取代的杂芳基或可选择地取代的双环芳基。

在另一个方面，本发明提供了结构式(XXVII)的sirtuin-调节化合物或其盐：

其中：

每个R20和R20a独立地是选自H或增溶基团；

每个R1′和R1″独立地是选自H或可选择地取代的C1-C3直链或支链烷 基；

R19选自：

其中：

每个Z10，Z11，Z12和Z13独立地是选自N，CR20，或CR1′；和

每个Z14，Z15和Z16独立地是选自N，NR1′，S，O，CR20，或CR1′，其中：

Z10，Z11，Z12或Z13中的0至2个是N；

Z14，Z15和Z16中的至少一个是N，NR1′，S或O；

Z14，Z15和Z16中的0至1个是S或O；

Z14，Z15和Z16中的0至2个是N或NR1′；

0至1个R20是增溶基团；

0至1个R1′是可选择地取代的C1-C3直链或支链烷基；和

R21选 自-NR1′-C(O)-，-NR1′-S(O)2-，-NR1′-C(O)-NR1′-，-NR1′-C(S)-NR1′-，-NR1′-C(S )-NR1′-CR1′R1′-，-NR1′-C(O)-CR1′R1′-NR1′-，-NR1′-C(＝NR1′)-NR1′-，-C(O)-NR1′ -，-C(O)-NR1′-S(O)2-，-NR1′-，-CR1′R1′-，-NR1′-C(O)-CR1′＝CR1′-，-NR1′-S(O)2 -NR1′-，-NR1′-C(O)-NR1′-S(O)2-，-NR1′-CR1′R1′-C(O)-NR1′-，-CR1′R1′-C(O)-NR 1′-，-NR1′-C(O)-CR1′＝CR1′-CR1′R1′-，-NR1′-C(＝N-CN)-NR1′-，-NR1′-C(O)-CR1′ R1′-O-，-NR1′-C(O)-CR1′R1′-CR1′R1′-O-，-NR1′-S(O)2-CR1′R1′-，-NR1′-S(O)2-CR 1′R1′-CR1′R′1-，或-NR1′-C(O)-CR1′R1′-；和

R31选自可选择地取代的单环或双环芳基，或可选择地取代的单环或双环杂 芳基，

条件是：当R21是-NH-C(O)-和R19是时，R31不 是未取代的吡啶基，2，6-二甲氧基苯基，3，4，5-三甲氧基苯基或未取代的呋 喃基。

在一个特别的方面，本发明提供了结构式(XXVII)的sirtuin-调节化合物或 其盐：

其中：

每个R20和R20a独立地是选自H或增溶基团；

每个R1′和R1″独立地是选自H或可选择地取代的C1-C3直链或支链烷 基；

R19选自：

其中：

每个Z10，Z11，Z12和Z13独立地是选自N，CR20，或CR1′；和

每个Z14，Z15和Z16独立地是选自N，NR1′，S，O，CR20，或CR1′，其中：

Z10，Z11，Z12或Z13中的0至2个是N；

Z14，Z15和Z16中的至少一个是N，NR1′，S或O；

Z14，Z15和Z16中的0至1个是S或O；

Z14，Z15和Z16中的0至2个是N或NR1′；

0至1个R20是增溶基团；

0至1个R1′是可选择地取代的C1-C3直链或支链烷基；和

R21选 自-NR1′-C(O)-，-NR1′-S(O)2-，-NR1′-C(O)-NR1′-，-NR1′-C(S)-NR1′-，-NR1′-C(S)-NR1′ -CR1′R′1-，-NR1′-C(O)-CR1′R1′-NR1′-，-NR1′-C(＝NR1′)-NR1′-，-C(O)-NR1′-，-C(O)-NR 1′-S(O)2-，-NR1′-，-CR1′R′1-，-NR1′-C(O)-CR1′＝CR1′-，-NR1′-S(O)2-NR1′-，-NR1′-C(O)- NR1′-S(O)2-，-NR1′-CR1′R′1-C(O)-NR1′-，-CR1′R′1-C(O)-NR1′-，-NR1′-C(O)-CR1′＝CR1′ -CR1′R1′-，-NR1′-C(＝N-CN)-NR1′-，-NR1′-C(O)-CR1′R′1-O-，-NR1′-C(O)-CR1′R1′-CR1′ R1′-O-，-NR1′-S(O)2-CR1′R′1-，-NR1′-S(O)2-CR1′R1′-CR1′R1′-，或-NR1′-C(O)-CR1′R1′-； 和

R31选自可选择地取代的单环或双环芳基，或可选择地取代的单环或双环 杂芳基，条件是：

当R21是-NH-C(O)-时，R19不是吡唑基；

当R21是-NH-，和R19是噻唑基时，R31不是可选择地取代的苯基或可选择地 取代的吡啶基；

当R21是-NH-C(O)-CH2-，和R19是吡唑基时，R31不是未取代的吲哚基或未 取代的苯基；

当R21是-NH-C(O)-CH2-，和R19是时，R31不是2-甲 基苯基或3，4-二甲氧基苯基；

当R21是-NH-C(O)-CH＝CH-，和R19是时，R31不是2- 氯苯基；

当R21是-NH-C(O)-NH-，和R19是吡唑基时，R31不是未取代的异噁唑基，未 取代的萘基，未取代的苯基，2，6-二氟苯基，2，5-二甲基苯基，3，4-二氯苯基，或4-氯 苯基；

当R21是-NH-C(O)-NH-，和R19是时，R31不是未取 代的苯并咪唑基；

当R21是-NH-，和R19是吡唑基时，R31不是未取代的吡啶基；

当R20a是增溶基团，R19是1-甲基吡咯基和R21是-NH-C(O)-时，R31不是未 取代的苯基，未取代的呋喃基，未取代的吡咯基，未取代的吡唑基，未取代的异 喹啉基，未取代的苯并噻吩基，氯取代的苯并噻吩基，2-氟-4-氯苯基或被增溶基 团单取代的苯基；

当R20a是增溶基团，R19是噻吩基和R21是-NH-C(O)-时，R31不是未取代的 苯基；

当R20a是增溶基团，R19是甲基咪唑基和R21是-NH-C(O)-时，R31不是1- 甲基-4-(1，1-二甲基乙氧基羰基氨基)吡咯-2-基或被增溶基团单取代的苯基；

当R21是-NH-和R19是吡啶基，噁二唑基(oxadiazolyl)或噻二唑基时，R31 不是未取代的苯基，3-甲氧基苯基或4-甲氧基苯基；

当R21是-NH-C(O)-和R19是噻唑基或嘧啶基时，R31不是未取代的苯基；

当R21是-NH-C(O)-和R19是时，R31不是未取代的 吡啶基，未取代的噻吩基，未取代的苯基，2-甲基苯基，4-氟苯基，4-甲氧基苯基， 4-甲基苯基，3，4-二氧亚乙基苯基，3-乙酰基氨基-4-甲基苯基，3-[(6-氨基-1-氧己基) 氨基]-4-甲基苯基，3-氨基-4-甲基苯基，2，6-二甲氧基苯基，3，5-二甲氧基苯基，3- 卤代-4-甲氧基苯基，3-硝基-4-甲基苯基，4-丙氧基苯基，3，4，5-三甲氧基苯基或未 取代的呋喃基；

当R21是-NH-C(O)-和R19是时，R31不是3，5-二硝基苯基， 4-丁氧基苯基，或

在一个更特殊的实施方案中，本发明提供了结构式(XXVII)的sirtuin-调节 化合物或其盐：

其中：

每个R20和R20a独立地是选自H或增溶基团；

每个R1′和R1″独立地是选自H或可选择地取代的C1-C3直链或支链 烷基；

R19选自：

其中：

每个Z10，Z11，Z12和Z13独立地是选自N，CR20，或CR1′；和

每个Z14，Z15和Z16独立地是选自N，NR1′，S，O，CR20，或CR1′，其中：

Z10，Z11，Z12或Z13中的1至2个是N；

Z14，Z15和Z16中的至少一个是N，NR1′，S或O；

Z14，Z15和Z16中的0至1个是S或O；

Z14，Z15和Z16中的0至2个是N或NR1′；

0至1个R20是增溶基团；

0至1个R1″′是可选择地取代的C1-C3直链或支链烷基；和

R21选 自-NR1′-C(O)-，-NR1′-S(O)2-，-NR1′-C(O)-NR1′-，-NR1′-C(S)-NR1′-，-NR1′-C(S)-NR1′ -CR1′R′1-，-NR1′-C(O)-CR1′R1′-NR1′-，-NR1′-C(＝NR1′)-NR1′-，-NR1′-C(O)-CR1′＝CR1′-， -NR1′-S(O)2-NR1′-，-NR1′-C(O)-NR1′-S(O)2-，-NR1′-CR1′R′1-C(O)-NR1′-，-NR1′-C(O) -CR1′＝CR1′-CR1′R1′-，-NR1′-C(＝N-CN)-NR1′-，-NR1′-C(O)-CR1′R′1-O-，-NR1′-C(O)-C R1′R1′-CR1′R1′-O-，-NR1′-S(O)2-CR1′R′1-，-NR1′-S(O)2-CR1′R1′-CR1′R1′-， 或-NR1′-C(O)-CR1′R1′-；和

R31选自可选择地取代的单环或双环芳基，或可选择地取代的单环或双环 杂芳基，条件是：

当R21是-NH-C(O)-时，R19不是吡唑基；

当R21是-NH-C(O)-CH2-，和R19是吡唑基时，R31不是未取代的吲哚基或 未取代的苯基；

当R21是-NH-C(O)-NH-，和R19是吡唑基时，R31不是未取代的异噁唑基， 未取代的萘基，未取代的苯基，2，6-二氟苯基；2，5-二甲基苯基；3，4-二氯苯基；或4- 氯苯基；

当R20a是增溶基团，R19是1-甲基吡咯基和R21是-NH-C(O)-时，R31不是未 取代的苯基；未取代的呋喃基；未取代的吡咯基；未取代的吡唑基；未取代的异 喹啉基；未取代的苯并噻吩基；氯取代的苯并噻吩基；2-氟-4-氯苯基或被增溶基 团单取代的苯基；

当R20a是增溶基团，R19是噻吩基和R21是-NH-C(O)-时，R31不是未取代的 苯基；

当R20a是增溶基团，R19是甲基咪唑基和R21是-NH-C(O)-时，R31不是1-甲 基-4-(1，1-二甲基乙氧基羰基氨基)吡咯-2-基或被增溶基团单取代的苯基；和

当R21是-NH-C(O)-和R19是噻唑基或嘧啶基时，R31不是未取代的苯基。 在还有另一个方面，本发明提供了结构式(XXVIII)的化合物或其盐：

其中：

每个R20和R20a独立地是选自H或增溶基团；

每个R1′和R1″独立地是选自H或可选择地取代的C1-C3直链或支链 烷基；

R29选自：

其中：

每个Z10，Z11，Z12和Z13独立地是选自N，CR20，或CR1′，其中Z10，Z11，Z12 或Z13中的一个是N；和

0至1个R20是增溶基团；

0至1个R1″′是可选择地取代的C1-C3直链或支链烷基；和

R21选 自-NR1′-C(O)-，-NR1′-S(O)2-，-NR1′-C(O)-NR1′-，-NR1′-C(S)-NR1′-，-NR1′-C(S)-NR1′ -CR1′R′1-，-NR1′-C(O)-CR1′R1′-NR1′-，-NR1′-C(＝NR1′)-NR1′-，-NR1′-C(O)-CR1′＝CR1′-， -NR1′-S(O)2-NR1′-，-NR1′-C(O)-NR1′-S(O)2-，-NR1′-CR1′R′1-C(O)-NR1′-，-NR1′-C(O) -CR1′＝CR1′-CR1′R1′-，-NR1′-C(＝N-CN)-NR1′-，-NR1′-C(O)-CR1′R′1-O-，-NR1′-C(O)-C R1′R1′-CR1′R1′-O-，-NR1′-S(O)2-CR1′R′1-，-NR1′-S(O)2-CR1′R1′-CR1′R1′-， 或-NR1′-C(O)-CR1′R1′-；和

R31选自可选择地取代的单环或双环芳基，或可选择地取代的单环或双环 杂芳基。

本发明还提供了含有一种或多种式(I)-(XXVIII)化合物、或其盐、其前药、 或其代谢物的药物组合物。

在另一个方面，本发明提供了使用sirtuin-调节化合物，或含有sirtuin-调节 化合物的组合物的方法。在某些实施方案中，增加sirtuin蛋白的水平和/或活性 的sirtuin-调节化合物可用于多种治疗应用，包括，例如，增加细胞的寿命，和治 疗和/或预防多种疾病和障碍，包括例如，与衰老或应激有关的疾病或障碍，糖尿 病，肥胖，神经变性疾病，化疗导致的神经病，和缺血性事件相关的神经病，视觉 疾病和/或障碍，心血管疾病，血液凝结疾病，炎症，和/或潮红等。增加sirtuin蛋 白的水平和/或活性的sirtuin-调节化合物还可以用于在对象中治疗疾病或障 碍——所述对象能从增加线粒体活性中受益、用于增强肌肉性能、用于增加肌 肉ATP水平、或用于治疗或预防与缺氧或缺血相关的肌肉组织损伤。在其他实 施方案中，增加sirtuin蛋白的水平和/或活性的sirtuin-调节化合物可用于多种治 疗应用，包括，例如，提高细胞对应激的敏感性、增加细胞凋亡、治疗癌症、 刺激食欲、和/或刺激体重增加等等。如下文进一步描述的，所述方法包括向有 需要的对象施用药学有效量的sirtuin-调节化合物。

在一些方面，sirtuin-调节化合物可以单独施用或者和其他化合物联合施 用，所述其他化合物包括其他的sirtuin-调节化合物或其他的治疗剂。

附图简述

图1显示了实施例5中描述的ATP细胞试验的示意图。

图2显示了白藜芦醇治疗之后的细胞中的ATP水平的剂量反应曲线。

发明详述

1.定义

如此处所使用的，以下的术语和短语应该具有以下所述的含义。除非另有定 义，此处所使用的所有技术和科学术语具有本领域普通技术人员所一般理解的 相同含义。

单数形式“一个(a)，”“一个(an)，”和“这个(the)”包括复数含义，除非上下文清 楚地另外指明。

术语“剂(agent)”此处用于指一种化合物，化合物的混合物，一种生物大分子 (例如核酸，抗体，蛋白质或其一部分，例如，肽)，或一种从生物材料如细菌， 植物，真菌，或动物(特别是哺乳动物)细胞或组织中制得的提取物。这些剂的活 性可以使它适合作为一种“治疗剂(therapeutic agent)”，所述治疗剂是一种生物 上的、生理上的或药理上的活性物质(或物质类)，从而在对象中局部地或全身地 起作用。

当提及一种化合物时，术语“生物可利用的(bioavailable)”是指本领域公认 的含义，并且是指一种形式的化合物，该化合物的形式允许化合物或给予的化 合物量的一部分被化合物所给予的对象或病人吸收、掺入化合物所给予的对象 或病人，或者以其它方式为化合物所给予的对象或病人生理上可利用。

“sirtuin的生物活性部分”指的是具有生物活性如脱乙酰化能力的sirtuin蛋 白的部分。sirtuin的生物活性部分可以包括sirtuin的核心区。例如，包括NAD+ 结合区和底物结合区的GenBank登录号为No.NP_036370的SIRT1的生物活 性部分，可以包括但不限于GenBank登录号为No.NP_036370的氨基酸 62-293，它被GenBank登录号为No.NM_012238的核苷酸237-932所编码。 因此，该区域有时称为核心区。SIRT1的其他生物活性部分，有时也称为核心 区，包括GenBank登录号为No.NP_036370的约氨基酸261-447，它被GenBank 登录号No.NM_012238的核苷酸834-1394所编码；GenBank登录号为No. NP_036370的约氨基酸242-493，它被GenBank登录号为No.NM_012238的 核苷酸777-1532所编码；或GenBank登录号为No.NP_036370的约氨基酸 254-495，它被GenBank登录号No.NM_012238的核苷酸813-1538所编码。

术语“宠物”是指猫和狗。如此处所使用的，术语“狗(类)”表示犬家族种(the species Canis familiaris)中的任何成员，所述犬家族种中有大量不同的种类。术语 “猫(类)”指的是猫科动物，包括驯养的猫和猫科、猫属中的其他成员。

术语“包含(comprise)”和“包含(comprising)”被用于范围广的、开放的含 义，意思是指可以包括另外的成分。

术语“保守的残基”指的是具有一定共性的一组氨基酸中的一个氨基酸成 员。术语“保守氨基酸置换”指的是一个这样的组中的氨基酸被相同组中的不同 的氨基酸所置换。一种定义个体氨基酸之间共性的功能性方式是分析同源性生 物相应蛋白质之间氨基酸变化的归一化频率(Schulz，G.E.和R.H.Schirmer.， Principles of Protein Structure，Springer-Verlag)。根据这些分析，氨基酸的组可以 被定义为在一组中的氨基酸彼此优先交换，并因此在他们对总体蛋白质结构的 影响方面彼此具有最大的相似性(Schulz，G.E.和R.H.Schirmer，Principles of Protein Structure，Springer-Verlag)。以这种方式定义的一组氨基酸组的一个例子 包括：(i)带电荷基团，由Glu和Asp，Lys，Arg和His组成，(ii)带正电荷基团， 由Lys，Arg和His组成，(iii)带负电荷基团，由Glu和Asp组成，(iv)芳香基团， 由Phe，Tyr和Trp组成，(v)氮环基团，由His和Trp组成，(vi)大的脂肪非极性 基团，由Val，Leu和Ile组成，(vii)弱极性基团，由Met和Cys组成，(viii)小 的残基基团，由Ser，Thr，Asp，Asn，Gly，Ala，Glu，Gln和Pro组成，(ix)脂肪基团， 由Val，Leu，Ile，Met和Cys组成和(x)小的羟基基团，由Ser和Thr组成。

“糖尿病”是指高血糖或酮酸症，和长期高血糖状态或葡萄糖耐受下降所引 起的慢性的、一般的代谢异常。“糖尿病”包括该疾病的所有I型和II型(非胰 岛素依赖糖尿病或NIDDM)形式。糖尿病的风险因素包括以下的因素：男性腰 围超过40英寸或女性腰围超过35英寸，血压为130/85mmHg或更高，甘油三 酯高于150mg/dl，快速血糖超过100mg/dl或高密度脂蛋白在男性中低于40 mg/dl或在女性中低于50mg/dl。

sirtuin的“直接的活化剂”是通过与sirtuin结合来活化它的分子。sirtuin的 “直接的抑制剂”是通过与sirtuin结合来抑制它的分子。

术语“ED50”是本领域公认的含义。在一些实施方案中，ED50意思是指产 生50％的最大反应或效果的药物剂量，或者供选择地，在50％的试验对象或制 剂中产生预定反应的药物剂量。术语“LD50”是本领域公认的含义。在一些实施 方案中，LD50是指在50％的试验对象中致死的药物剂量。术语“治疗指数 (therapeutic index)”是本领域公认的术语，其指的是药物的治疗指数，定义为 LD50/ED50。

术语“高胰岛素血症”指的是在个体中的血液胰岛素水平高于正常的状态。

术语“包括”意思是“包括但不限于”。“包括”和“包括但不限于”被相互替换 地使用。

术语“抗胰岛素性(insulin resistance)”指的是一种状态，其中相对于在没有 抗胰岛素性的对象中所产生的生物反应而言，正常量的胰岛素产生低于正常水 平的生物反应。

此处所讨论的“抗胰岛素性障碍(insulin resistance disorder)”指的是，由抗胰 岛素性导致的或归因于抗胰岛素性的任何疾病或病况。例子包括：糖尿病，肥 胖，代谢综合征，抗胰岛素性代谢综合征，X综合征，抗胰岛素性，高血压(high blood pressure)，高血压(hypertension)，高血胆固醇，血脂异常，高脂血症，血脂 异常，动脉粥样硬化疾病包括中风，冠状动脉病或心肌梗死，高血糖症，高胰岛 素血症，和/或高前胰岛素血症，葡萄糖耐受损伤，延迟的胰岛素释放，糖尿病并 发症，包括冠心病，心绞痛，充血性心力衰竭，中风，痴呆病人的认知功能，视 网膜病，外周神经病，肾病，肾小球肾炎，肾小球硬化症，肾病综合征，高血 压性肾硬化，一些癌症(例如子宫内膜癌，乳腺癌，前列腺癌和结肠癌)，妊娠并 发症，差的女性生殖健康(例如月经失调，不育症，不规律排卵，多囊卵巢综合 征(PCOS))，脂肪代谢障碍，胆固醇相关的障碍，例如胆结石，胆囊炎和胆石病， 痛风，阻塞性睡眠呼吸暂停和呼吸问题，骨关节炎，和预防和治疗骨丢失，例 如，骨质疏松。

术语“家畜动物(livestock animals)”指的是驯化了的四足动物，包括提供 肉类和不同副产品的生物种类，例如，牛类动物包括牛和牛属其他动物，猪类 动物包括驯养的猪和其他的猪属动物，绵羊类动物包括绵羊和其他绵羊属动物， 驯养的山羊和其他山羊属动物；用于特定任务的驯化了的四足动物，比如用于 驮畜，例如，马类动物包括驯养的马和其他的马科、马属动物。

术语“哺乳动物”是本领域已知的，示例性的哺乳动物包括人，灵长类动物， 家畜动物(包括牛类，猪类等)，宠物(包括犬类，猫类等)和啮齿动物(例如，小鼠 和大鼠)。

术语“天然存在的形式(naturally occurring form)”当指的是化合物时，意思是 化合物以天然界中可找到的形式存在，例如组合物。例如，因为白藜芦醇可以 在红酒中找到，它就以天然存在的形式存在于红酒中。如果化合物不是天然存 在的形式，例如，化合物是从自然界中发现的带有该化合物的至少一些其他分 子中纯化和分离得到的。“天然存在的化合物”指的是化合物能在自然界中找 到，即，该化合物不是被人为设计出来的。天然存在的化合物可以人为制造或 从自然界得到。

“天然存在的化合物”指的是化合物能在自然界中找到，即，该化合物不 是被人为设计出来的。天然存在的化合物可以人为制造或从自然界得到。例如， 白藜芦醇是天然存在的化合物。“非天然存在的化合物”是指不是已知存在于 自然界中或不存在于自然界中的化合物。

“肥胖的”个体或遭受肥胖病的个体一般指体重指数(BMI)为25或更大的个 体。肥胖病可以是或者可以不是与抗胰岛素性相联系。

术语“肠胃外施用(parenteral administration)”和“肠胃外施用(administered parenterally)”是本领域公认的含义，指的是施用模式不是经由肠内的和局部施 用，通常是通过注射施用，和包括但不限于静脉内、肌肉内、动脉内、鞘内、 囊内、眶内、心内、真皮内、腹腔膜内、经气管的、皮下的、表皮下的、关节 内、囊下的、蛛网膜下的、脊柱内、和胸骨内注射和输液。

“病人”、“对象”、“个体”或“宿主”指的是人或非人的动物。

术语“等同百分数(percent identical)”指的是两个氨基酸序列或两个核苷酸 序列之间的序列同一性。同一性可以各自测定，经由比较被对比用于比较目的 的每个序列的位置而测定。当对比序列中的对等位置被相同的碱基或氨基酸所 占据时，那么分子在该点上是同一的。当对等点被相同的或相似的氨基酸残基 (例如，立体性和/或电性相似)，那么分子在该点上是同源的(相似)。以百分比形 式表示的同源性、相似性、相同性，指的是在相同位置与对比序列所共有的相 同或相似氨基酸数目的函数。可以使用不同的对比算法和/或程序，包括FASTA， BLAST，或ENTREZ。FASTA和BLAST作为GCG序列分析包(GCG sequence analysis package)(University of Wisconsin，Madison，Wis.)的一部分是可以得到 的，并且可以在例如默认设定的参数下使用。ENTREZ通过the National Center for Biotechnology Information，National Library of Medicine，National Institutes of Health，Bethesda，MD是可以得到的。在一个实施方案中，两个序列的等同百分 数可以通过GCG程序来确定，使用间隙重量(gap weight)为1，例如，每个氨 基酸间隙都被计重，好象它是两个序列中不匹配的单氨基酸或核苷酸。

其他的对比技术被描述于Enzymology，vol.266：Computer Methods for Macromolecular Sequence Analysis(1996)，ed.Doolittle，Academic Press，Inc.，a division of Harcourt Brace&Co.，San Diego，California，USA的方法中。优选地， 使用一种允许序列中的间隙的对比程序来对比序列。Smith-Waterman是一种在 序列对比中允许间隙的算法。见，Meth.Mol.Biol.70：173-187(1997)。还有，使 用Needleman和Wunsch对比方法的GAP程序也可以用于对比序列。一种选择 性的检索策略使用MPSRCH软件，该软件在MASPAR计算机上运行。MPSRCH 使用Smith-Waterman算法在大型并联计算机上评价序列。这些方法改善了挑出 明显相关匹配的能力，并且特别是对小的间隙和核苷酸序列错误耐受。核酸编 码的氨基酸序列可以被用于检索蛋白质和DNA数据库。

术语“药学上可接受的载体”是本领域公认含义，并且指的是药学上可接受 的材料、组合物或载体，例如一种液体或固体填充剂、稀释剂、赋形剂、溶剂 或胶囊化材料，它们涉及携带或运输任何受试组合物或其组分。每种载体必须 是“可接受的”，意思就是与受试组合物和其组分相容，并且对病人没有伤害。 一些可作为药学上可接受载体的材料的例子包括：(1)糖，例如乳糖，葡萄糖和 蔗糖；(2)淀粉，例如玉米淀粉和土豆淀粉；(3)纤维素及其衍生物，例如羧甲 基纤维素钠，乙基纤维素和纤维素醋酸酯；(4)粉末化的西黄蓍胶；(5)麦芽；(6) 明胶；(7)滑石粉；(8)赋形剂，例如可可脂和腊栓；(9)油类，例如花生油，棉 花籽油，红花油，芝麻油，橄榄油，玉米油和大豆油；(10)二醇类，例如丙二醇； (11)多元醇类，例如甘油，山梨醇，甘露醇和聚乙二醇；(12)酯类，例如油酸 乙酯和月桂酸乙酯；(13)琼脂；(14)缓冲剂，例如氢氧化镁和氢氧化铝；(15)海 藻酸；(16)无热原水；(17)等渗盐水；(18)Ringer’s溶液；(19)乙醇；(20)磷 酸盐缓冲溶液；和(21)药物制剂中使用的其他非毒性相容物质。

术语“多核苷酸(polynucleotide)”，和“核酸(nucleic acid)”被相互替换地使 用。他们指的是任何长度核苷酸的聚合物形式，所述核苷酸是脱氧核糖核苷酸 或核糖核苷酸，或他们的类似物。多核苷酸可以具有任何三维结构，和可以表 现出任何功能，已知的或未知的。下述的是多核苷酸的非限制性例子：基因或 基因片段的编码区或非编码区，从连锁分析所定义的位点(loci(locus))，外显子， 内含子，信使RNA(mRNA)，转移RNA，核蛋白体RNA，核酶，cDNA，重组 多核苷酸，支链多核苷酸，质粒，载体，任何序列的分离的DNA，任何序列的 分离的RNA，核酸探针和引物。多核苷酸可以包含修饰过的核苷酸，例如甲基 化的核苷酸和核苷酸类似物。如果存在的话，核苷酸结构的修饰可以在聚合体 装配之前或之后进行。核苷酸序列可以被非核苷酸组分所中断。一种多核苷酸 可以被进一步修饰，例如通过与一种标记组分共轭。术语“重组多核苷酸”意 思是指基因组、cDNA、半合成或合成来源的多核苷酸，所述多核苷酸或者是在 自然界中不存在或者是以非天然排列方式与另一个多核苷酸相连。

术语“预防性的”或“治疗性”治疗是本领域技术公认的含义，是指向宿主 施用药物。如果施用是先于所不希望的病况(例如，疾病或其他不希望的宿主动 物的状态)的临床表现，那么治疗是预防性的，即，它保护了宿主不发展不希望 的病况；然而当施用是在不希望的病况表现出来之后，该治疗是治疗性的(即， 其目的是降低、缓解或维持已经存在的不希望病况或其副作用)。

术语“保护基团”是本领域公认含义，指的是暂时的取代基，所述取代基 保护可能的反应性官能团从而不发生不希望的化学转变。此种保护基团的例子 包括羧酸的酯、醇的甲硅烷基醚、醛和酮各自的缩醛和缩酮。保护基团化学的 领域被Greene和Wuts综述于Protective Groups in Organic Synthesis(2nd ed.， Wiley：New York，1991)中。

当涉及组合物时，术语“无热原(pyrogen-free)”指的是组合物不含有在组合 物施用对象中能导致不利效果(例如，刺激性，发热，炎症，腹泻，呼吸困难， 内毒素性休克等)的量的热原。例如，该术语的意思是指包含的组合物不含，或 基本上不含，内源性毒素，例如，脂多糖(LPS)。

细胞的“重复的寿命”指的是由“母细胞”个体产生的子细胞的数量。在另 一方面，“时间性老化”或“时间性寿命”指的是当被取走营养物后非分裂细胞种 群保持存活的时间长度。“增加细胞的寿命”或“延长细胞的寿命”被用于细胞或 生物体，指的是增加某个细胞产生的子细胞的数目；增加细胞或生物体处理应 激或对抗损伤的能力，例如对DNA，蛋白质；和/或增加细胞或生物体在特殊 条件下以活着的状态存活和生存更长时间的能力，所述特殊条件例如是应激 (stress)(例如，热激，渗透应激，高能量辐射，化学诱导的应激，DNA损伤， 不足的盐水平，不足的氮水平，或不足的营养物水平)。使用此处所描述的方法， 寿命可以被增加至少约20％，30％，40％，50％，60％或20％和70％之间，30％和 60％之间，40％和60％之间，或更多。

“Sirtuin-活化化合物”指的是增加sirtuin蛋白的水平和/或增加sirtuin蛋白 的至少一种活性的化合物。在一个示例性的实施方案中，sirtuin-活化化合物可 以增加sirtuin蛋白的至少一种生物活性至少大约10％，25％，50％，75％，100％， 或更多。示例性的sirtuin蛋白生物活性包括脱乙酰化，例如，组织蛋白和p53 的脱乙酰化；延长寿命；增加基因稳定性；沉默转录；和控制子母细胞之间氧 化蛋白质的分离。

“Sirtuin-抑制化合物”指的是降低sirtuin蛋白的水平和/或降低sirtuin蛋白的 至少一种活性的化合物。在一个示例性的实施方案中，sirtuin-抑制化合物可以 降低sirtuin蛋白的至少一种生物活性至少大约10％，25％，50％，75％，100％，或更 多。示例性的sirtuin蛋白的生物活性包括脱乙酰化，例如，组织蛋白和p53的 脱乙酰化；延长寿命；增加基因稳定性；沉默转录；和控制子母细胞之间氧化 蛋白质的分离。

“Sirtuin-调节化合物”指的是此处所述的式(I)-(XXVIII)的化合物。在示例 性的实施方案中，sirtuin-调节化合物可以上调(例如，活化或刺激)，下调(例如， 抑制或抑制(inhibit或suppress))或另外改变sirtuin蛋白的功能性质或生物活性。 Sirtuin-调节化合物可以用于直接或间接地调节sirtuin蛋白。在一些实施方案中， sirtuin-调节化合物可以是sirtuin-活化化合物或sirtuin-抑制化合物。

“Sirtuin蛋白”指的是sirtuin脱乙酰酶蛋白家族中的一个成员，或优选sir2 家族的成员，其包括酵母Sir2(GenBank登录号为No.P53685)，线虫(C.elegans) Sir-2.1(GenBank登录号为No.NP_501912)，和人SIRT1(GenBank登录号为 No.NM_012238和NP_036370(或AF083106))和SIRT2(GenBank登录号为No. NM_012237，NM_030593，NP_036369，NP_085096，和AF083107)蛋白。其他的 家族成员包括四种附加的酵母Sir2-样基因，称为″HST基因″(Sir2同源物)HST1， HST2，HST3和HST4，和五种其他的人同源物hSIRT3，hSIRT4，hSIRT5，hSIRT6 和hSIRT7(Brachmann et al.(1995)Genes Dev.9：2888和Frye et al.(1999)BBRC 260：273)。优选的sirtuins是这样的，即与SIRT2相比，其与SIRT1，即hSIRT1， 和/或Sir2分享更多的相似性，例如那些具有至少一部分SIRT1中存在的且在 SIRT2中没有的N-端序列的蛋白，例如SIRT3。

“SIRT1蛋白”指的是sirtuin脱乙酰蛋白酶中的sir2家族中的一个成员。在 一个实施方案中，SIRT1蛋白包括酵母Sir2(GenBank登录号为No.P53685)，线 虫(C.elegans)Sir-2.1(GenBank登录号为No.NP_501912)，人SIRT1(GenBank 登录号为No.NM_012238或NP_036370(或AF083106))，和人SIRT2(GenBank 登录号为No.NM_012237，NM_030593，NP_036369，NP_085096，或AF083107) 蛋白，和等同物和其片段。在另一个实施方案中，SIRT1蛋白包括多肽，所述 多肽包含一种序列，该序列由或者基本上由GenBank登录号为No.NP_036370， NP_501912，NP_085096，NP_036369，或P53685中所述的氨基酸序列所组成。 SIRT1蛋白包括多肽，所述多肽包含GenBank登录号为Nos.NP_036370， NP_501912，NP_085096，NP_036369，或P53685中所述的全部或部分氨基酸序 列；GenBank登录号为Nos.NP_036370，NP_501912，NP 085096，NP_036369， 或P53685中所述的带有1至约2，3，5，7，10，15，20，30，50，75或更多保守性氨基 酸取代基的氨基酸序列；与GenBank登录号为Nos.NP_036370，NP_501912， NP_085096，NP_036369，或P53685，和他们的功能性片段至少60％，70％，80％， 90％，95％，96％，97％，98％，或99％同源的氨基酸序列。本发明的多肽还包括 GenBank登录号为Nos.NP_036370，NP_501912，NP_085096，NP_036369，或 P53685的同源物(例如，直系同源物和旁系同源物)，变体或片段。

“SIRT3蛋白”指的是sirtuin脱乙酰酶蛋白家族中的一个成员和/或SIRT1 蛋白的同源物。在一个实施方案中，SIRT3蛋白包括人SIRT3(GenBank登录号 为No.AAH01042，NP_036371，或NP_001017524)和小鼠SIRT3(GenBank登录 号为No.NP_071878)蛋白，和等同物和其片段。在另一个实施方案中，SIRT3蛋 白包括多肽，所述多肽包含一种序列，该序列由或者基本上由GenBank登录号 为AAH01042，NP_036371，NP_001017524，或NP_071878中所述的氨基酸序列 所组成。SIRT3蛋白包括多肽，所述多肽包含GenBank登录号为AAH01042， NP_036371，NP_001017524，或NP_071878中所述的全部或部分氨基酸序列； GenBank登录号为Nos.AAH01042，NP_036371，NP_001017524，或NP_071878 中所述的带有1至约2，3，5，7，10，15，20，30，50，75或更多保守性氨基酸取代基 的氨基酸序列；与GenBank登录号为Nos.AAH01042，NP_036371， NP_001017524，或NP_071878，和他们的功能性片段至少60％，70％，80％，90％， 95％，96％，97％，98％，或99％同源的氨基酸序列。本发明的多肽还包括GenBank 登录号为Nos.AAH01042，NP_036371，NP_001017524，或NP_071878的同源物 (例如，直系同源物和旁系同源物)，变体或片段。在一个实施方案中，SIRT3蛋 白包括SIRT3蛋白的片段，所述SIRT3蛋白的片段通过被线粒体基质加工肽酶 (mitochondrial processing peptidase，MPP)和/或线粒体中间体肽酶(mitochondrial intermediate peptidase，MIP)切除后制得。

术语“基本上同源”当和氨基酸序列联合使用时，指的是下述序列：这些序 列在序列上基本上相同或相似，导致构象同源，从而保留一种或多种生物(包括 免疫学的)活性至有用的程度。该术语不意图暗含序列的共同进化。

术语“合成的”是本领域公认的含义和指的是由体外化学或酶合成制备得 到。

术语“全身施用(systemic administration)”，“全身地施用(administered systemically)”，“外周施用(peripheral administration)”和“外周地施用(administered peripherally)”是本领域公认的含义和指的是将受试组合物、治疗剂或其他材料非 直接地施用到中枢神经系统，使得它能进入到病人的体系内并且进行代谢和其 他类似的过程。

术语“治疗剂”是本领域公认的含义和指的是任何为生物学、生理学、或药 理学活性物质的化学部分，其在对象中局部或全身地起作用。该术语还指任何 在人或动物中用于诊断，治愈，缓和，治疗或预防疾病，或被用于强化所期望 的身体或精神进展和/或病况的物质。

术语“治疗效果”是本领域公认的含义和指的是在动物，特别是哺乳动物， 更特别是人中由药理学活性物质引起的局部或全身效果。短语“治疗有效量” 意思是指该物质以适用于任何治疗的合理得益/风险比产生一些期望的局部或 全身效果的量。治疗有效量的这种物质会依据被治疗的对象和疾病状况，对象 的体重和年龄，疾病状况的严重度，施用方式等的不同而发生变化，而这可以 由本领域普通技术人员容易地确定。例如，一些描述于此处的组合物可以以充 足的量施用从而以适用于这种治疗的合理得益/风险比产生期望的效果。

“转录调节序列”是一个基因术语，它的使用贯穿于涉及DNA序列的说明， 例如启动信号，增强子和启动子，它们引导或控制与它们可操作连接的蛋白编 码序列的转录。在优选的实施方案中，重组基因之一的转录是在启动子序列(或 其他的转录调节序列)的控制之下，所述启动子序列控制重组基因以所期望表达 的细胞模式进行表达。还应理解的是，重组基因可以受转录调节序列的控制， 所述转录调节序列与那些控制此处所述的天然存在形式基因转录的序列相同或 不同。

“治疗”病况或疾病指的是治愈和缓解至少一种病况或疾病的症状。

“载体”是自我复制的核酸分子，其向宿主细胞内和/或在宿主细胞之间转移 插入的核酸分子。该术语包括功能主要为向细胞中插入核酸分子的载体，功能 主要为复制核酸的复制载体，和功能为转录和/或翻译DNA或RNA的表达载体。 还包括提供多于一种上述功能的载体。如此处所使用的，“表达载体”被定义 为多核苷酸，所述多核苷酸当被引入到合适的宿主细胞中时，能被转录和翻译 成多肽。“表达体系”通常意味着由功能可以为产生期望的表达产品的表达载 体构成的合适的宿主细胞。

术语“视觉损伤”指的是降低的视力，其通常是经治疗(例如，手术)时仅仅 部分可逆的或不可逆的。特别严重的视觉损伤称为“眼盲”或“视觉丢失”， 指的是视觉完全丢失，视力比20/200更差且不能通过正确的透镜所改善或者视 觉范围小于20度直径(10度半径)。

2.Sirtuin 调节剂

在一个方面，本发明提供了新的sirtuin-调节化合物，其用于治疗和/或预防 大量的各种疾病和障碍，包括，例如，与衰老或应激有关的疾病或障碍，糖尿 病，肥胖，神经变性疾病，眼部疾病或障碍，心血管疾病，血液凝结障碍，炎 症，癌症，和/或潮红等。增加sirtuin蛋白的水平和/或活性的sirtuin-调节化合物 还可以用于在对象中治疗疾病或障碍——所述对象能从增加的线粒体活性中受 益、用于增强肌肉性能、用于增加肌肉ATP水平、或用于治疗或预防与缺氧或 缺血相关的肌肉组织损伤。此处所公开的其他化合物可以适合用于药物组合物 和/或一种或多种此处所公开的方法。

在一个实施方案中，本发明的sirtuin-调节化合物或其盐用结构式(I)表示：

其中：

环A是可选择地取代的；和

环B被至少一个羧基，取代或未取代的芳基酰胺，取代或未取代的芳烷基 酰胺，取代或未取代的杂芳基基团，取代或未取代的杂环羰基乙烯基，或多环芳 基基团所取代或与芳环稠合，和可选择地被一个或多个附加的基团取代。

在一些实施方案中，环B被至少一个羧基基团取代。

在一些实施方案中，环B被至少一个取代或未取代的芳基酰胺，取代或 未取代的芳烷基酰胺或多环芳基基团所取代。

在一些实施方案中，环B被至少一个取代或未取代的杂芳基基团或者取 代或未取代的杂环羰基乙烯基基团所取代。

在另一个实施方案中，本发明sirtuin-调节化合物或其盐用结构式(II)来表 示：

其中：

环A是可选择地取代的；

R1，R2，R3和R4是独立地选自-H，卤素，-OR5，-CN，-CO2R5，-OCOR5， -OCO2R5，-C(O)NR5R6，-OC(O)NR5R6，-C(O)R5，-COR5，-SR5， -OSO3H，-S(O)nR5，-S(O)nOR5，-S(O)nNR5R6，-NR5R6，-NR5C(O)OR6，-NR5C(O)R6 和-NO2；

R5和R6独立地是-H，取代或未取代的烷基基团，取代或未取代的芳基 基团或取代或未取代的杂环基团；和

n是1或2。

在另一个实施方案中，本发明sirtuin-调节化合物或其盐用结构式(IIa)来 表示：

其中：

环A是可选择地取代的；

R1，R2，R3和R4独立地选自-H，卤素，-OR5，-CN，-CO2R5，-OCOR5， -OCO2R5，-C(O)NR5R6，-OC(O)NR5R6，-C(O)R5，-COR5，-SR5， -OSO3H，-S(O)nR5，-S(O)nOR5，-S(O)nNR5R6，-NR5R6，-NR5C(O)OR6，-NR5C(O)R6 和-NO2；

R5和R6独立地是-H，取代或未取代的烷基基团，取代或未取代的芳基 基团或者取代或未取代的杂环基团；和

n是1或2。

在还有另一个实施方案中，本发明sirtuin-调节化合物或其盐用结构式(II) 来表示：

其中：

环A是可选择地取代的；

R1，R2，R3和R4独立地选自-H，卤素，-OR5，-CN，-CO2R5，-OCOR5， -OCO2R5，-C(O)NR5R6，-OC(O)NR5R6，-C(O)R5，-COR5，-SR5， -OSO3H，-S(O)nR5，-S(O)nOR5，-S(O)nNR5R6，-NR5R6，-NR5C(O)OR6，-NR5C(O)R6 和-NO2；

R5和R6独立地是-H，取代或未取代的烷基基团，取代或未取代的芳基基 团或者取代或未取代的杂环基团；和

n是1或2。

在某些实施方案中，结构式(II)-(IIb)中的R1，R2，R3和R4独立地选自-H， -OR5和-SR5，特别是-H和-OR5(例如，-H，-OH，-OCH3)。

环A优选是被取代的。合适的取代基包括卤素(例如溴)，酰氧基(例如， 乙酰氧基)，氨基羰基基团(例如，芳基氨基羰基例如取代的，特别是羧基取代 的，苯基氨基羰基基团)和烷氧基(例如，甲氧基，乙氧基)基团。

在还有另一个方面，本发明提供了新的式(III)的sirtuin-调节化合物或其 盐：

其中：

环A是可选择地取代的；

R5和R6独立地是-H，取代或未取代的烷基基团，取代或未取代的芳基基 团或者取代或未取代的杂环基团；

R7，R9，R10和R11独立地选自-H，卤素，-R5，-OR5，-CN，-CO2R5，-OCOR5， -OCO2R5，-C(O)NR5R6，-OC(O)NR5R6，-C(O)R5，-COR5，-SR5， -OSO3H，-S(O)nR5，-S(O)nOR5，-S(O)nR5R6，-NR5R6，-NR5C(O)OR6，-NR5C(O)R6 和-NO2；

R8是多环芳基基团；和

n是1或2。

在某些实施方案中，R7，R9，R10和R11中的一个或多个是-H。在特别的 实施方案中，R7，R9，R10和R11各自是-H。

在某些实施方案中，R8是杂芳基基团，例如噁唑并[4，5-b]吡啶基基团。在 特别的实施方案中，R8是杂芳基基团和R7，R9，R10和R11中的一个或多个是-H。

环A优选是被取代的。合适的取代基包括卤素(例如，溴)，酰氧基(例如， 乙酰氧基)，氨基羰基基团(例如，芳基氨基羰基，例如取代的，特别是羧基取代 的，苯基氨基羰基基团)和烷氧基(例如，甲氧基，乙氧基)基团，特别是烷氧基 基团。在某些实施方案中，环A被至少一个烷氧基或卤素基团，特别是甲氧基 取代。

在某些实施方案中，环A是可选择地被至多3个独立地选自(C1-C3直链 或支链烷基)，O-(C1-C3直链或支链烷基)，N(C1-C3直链或支链烷基)2，卤素，或5- 6-元杂环的取代基所取代。

在某些实施方案中，环A不是被腈基或吡咯烷基基团所取代。

在某些实施方案中，R8是取代或未取代的双环杂芳基基团，例如包括一个 环N原子和1-2个独立地选自N，O或S的附加环杂原子的双环杂芳基基团。 优选地，R8通过碳-碳键与化合物剩余部分相连。在某些这样的实施方案中，2 个附加的环杂原子存在，典型的是其中至少一个附加的环杂原子是O或S。在 某些这样的实施方案中，2个总的环氮原子存在(存在0或1个O或S)，和典型 的是每个氮原子在不同的环中。在某些这样的实施方案中，R8不是被含羰基- 基团取代，特别是当R8是噻吩并嘧啶基或噻吩并吡啶基时。

在某些这样的实施方案中，R8选自噁唑并吡啶基，苯并噻吩基，苯并呋喃 基，吲哚基，喹喔啉基，苯并噻唑基，苯并噁唑基，苯并咪唑基，喹啉基，异喹啉 基或异吲哚基。在某些这样的实施方案中，R8选自噻唑并吡啶基，咪唑并噻唑 基，苯并噁嗪酮基(benzoxazinonyl)，或咪唑并吡啶基。

R8特别的例子中，当表示与结构式(III)的其余部分相连时，包括：

其中至多2个不与所示连接点直接相邻的 环碳原子独立地被O-C1-C3直链或支链烷基，C1-C3直链或支链烷基或者卤素， 特别是C1-C3直链或支链烷基或卤素所取代。在某些实施方案中，R8是

在一些实施方案中(例如，当调节剂是sirtuin活化剂时)，R8是

和环A是可选择地被至多3个独立地选自(C1-C3直链或支链 烷基)，O-(C1-C3直链或支链烷基)，N(C1-C3直链或支链烷基)2，卤素，或5至6- 元杂环的取代基所取代。在某些这样的实施方案中，环A不是同时在2-和6-位 被O-(C1-C3直链或支链烷基)所取代。在某些这样的实施方案中，环A不是同 时在2-，4-和6-位被O-(C1-C3直链或支链烷基)所取代。在某些这样的实施方案 中，环A不是同时在2-，3-，和4-位被O-(C1-C3直链或支链烷基)所取代。在某 些这样的实施方案中，环A不是在4-位被5至6-元杂环所取代。在某些这样的 实施方案中，环A不是在3-或4-位(特别是4-位)被O-(C1-C3直链或支链烷 基)单取代。在某些这样的实施方案中，环A不是在4-位被O-(C1-C3直链或支 链烷基)和在2-或3-位被C1-C3直链或支链烷基所取代。

在某些实施方案中，R8是和环A是可选择地被至多3 个取代基所取代，所述取代基独立地选自(C1-C3直链或支链烷基)，(C1-C3直链 或支链卤烷基，其中卤烷基基团是被1个或多个卤素原子取代的烷基基团)， O-(C1-C3直链或支链烷基)，N(C1-C3直链或支链烷基)2，卤素，或5至6-元杂环。 在某些这样的实施方案中，环A不是在3-或4-位被O-(C1-C3直链或支链烷基) 单取代。在某些这样的实施方案中，环A不是在4-位被O-(C1-C3直链或支链 烷基)和在2-或3-位被C1-C3直链或支链烷基所取代。

在一些实施方案中，R8是(例如，其中一个或 多个halo(卤素)是氯)和环A是可选择地被至多3个取代基取代，所述取代基 独立地选自(C1-C3直链或支链烷基)，O-(C1-C3直链或支链烷基)，N(C1-C3直链 或支链烷基)2，卤素，或5至6-元杂环，但不是在3-位被O-(C1-C3直链或支链 烷基)单取代。

在某些实施方案中，例如当R8具有一个上述值时，环A被至多3个取代 基取代，所述取代基独立地选自氯，甲基，O-甲基，N(CH3)2或吗林代。在某些这 样的实施方案中，R8是选自

其

中至多2个不直接与所示连接点相邻的环碳原子独立地被选自C1-C3直链或支 链烷基或卤素所取代；每个R7，R9，和R11是-H；和R10是选自-H， -CH2OH，-CO2H，-CO2CH3，-CH2-哌嗪基， CH2N(CH3)2，-C(O)-NH-(CH2)2-N(CH3)2，或-C(O)-哌嗪基。在某些这样的实施方 案中，当R8是和环A是3-二甲基氨基苯基时，R7，R9，R10和 R11中没有一个是-CH2-N(CH3)2或-C(O)-NH-(CH2)2-N(CH3)2，和/或当R8是

和环A是3，4-二甲氧基苯基时，R7，R9，R10和R11中没有一个是 C(O)OCH3或C(O)OH。

在某些实施方案中，例如当R8具有上述值之一和/或环A如上所述可选 择地被取代时，R7，R9，R10和R11中的至少一个是-H.在某些这样的实施方案 中，R7，R9，R10和R11各自是-H。

在某些实施方案中，R7，R9，R10或R11选 自-C(O)OH，-N(CH3)2，-CH2OH，-CH2OCH3，-CH2-哌嗪基，-CH2-甲基哌嗪 基，-CH2-吡咯烷基，-CH2-哌啶基，-CH2-吗啉 代，-CH2-N(CH3)2，-C(O)-NH-(CH2)n-哌嗪基，-C(O)-NH-(CH2)n-甲基哌嗪 基，-C(O)-NH-(CH2)n-吡咯烷基，-C(O)-NH-(CH2)n-吗啉代，-C(O)-NH-(CH2)n-哌啶 基，或-C(O)-NH-(CH2)n-N(CH3)2，其中n是1或2.在某些这样的实施方案中， R10选自-C(O)OH，-N(CH3)2，-CH2OH，-CH2OCH3，-CH2-哌嗪基，-CH2-甲基哌嗪 基，-CH2-吡咯烷基，-CH2-哌啶基，-CH2-吗啉 代，-CH2-N(CH3)2，-C(O)-NH-(CH2)n-哌嗪基，-C(O)-NH-(CH2)n-甲基哌嗪 基，-C(O)-NH-(CH2)n-吡咯烷基，-C(O)-NH-(CH2)n-吗啉代，-C(O)-NH-(CH2)n-哌啶 基，或-C(O)-NH-(CH2)n-N(CH3)2，其中n是1或2，和每个R7，R9，和R11是H。

在某些实施方案中，环A被腈基基团或在对位被5-或6-元杂环所取代。 杂环典型的例子包括吡咯烷基，哌啶基和吗啉基。

在还有另一个方面，本发明提供了新的式(IV)的sirtuin-调节化合物或其 盐：

Ar-L-J-M-K-Ar′(IV)

其中：

每个Ar和Ar′独立地是可选择地取代的碳环或杂环芳基基团；

L是可选择地取代的碳环或杂环亚芳基基团；

每个J和K独立地是NR1′，O，S，或是可选择地独立地不存在； 或当J是NR1′时，R1′是与Ar′相连形成与Ar′稠合的环的C1-C4亚烷基或C2-C4 亚烯基；或当K是NR1′时，R1′是与L相连形成与L稠合的环的C1-C4亚烷基或 C2-C4亚烯基；

每个M是C(O)，S(O)，S(O)2，或CR1′R1′；

每个R1′独立地是选自H，C1-C10烷基；C2-C10烯基；C2-C10炔基； C3-C10环烷基；C4-C10环烯基；芳基；R5′；卤素；卤烷基；CF3；SR2′；OR2′； NR2′R2′；NR2′R3′；COOR2′；NO2；CN；C(O)R2′；C(O)C(O)R2′；C(O)NR2′R2′；OC(O)R2′； S(O)2R2′；S(O)2NR2′R2′；NR2′C(O)NR2′R2′；NR2′C(O)C(O)R2′；NR2′C(O)R2′； NR2′(COOR2′)；NR2′C(O)R5′；NR2′S(O)2NR2′R2′；NR2′S(O)2R2′；NR2′S(O)2R5′； NR2′C(O)C(O)NR2′R2′；NR2′C(O)C(O)NR2′R3′；被芳基，R4′或R5′取代的C1-C10烷 基；或被芳基，R4′或R5′取代的C2-C10烯基；

每个R2′独立地是H；C1-C10烷基；C2-C10烯基；C2-C10炔基；C3-C10 环烷基；C4-C10环烯基；芳基；R6′；被1-3个独立的芳基，R4′或R6′基团取代的 C1-C10烷基；被1-3个独立的芳基，R4′或R6′基团取代的C3-C10环烷基；或被 1-3个独立的芳基，R4′或R6′取代的C2-C10烯基；

每个R3′独立地是C(O)R2′，COOR2′，或S(O)2R2′；

每个R4′独立地是卤素，CF3，SR7′，OR7′，OC(O)R7′，NR7′R7′，NR7′R8′， NR8′R8′，COOR7′，NO2，CN，C(O)R7′，或C(O)NR7′R7′；

每个R5′独立地是5-8元单环，8-12元双环，或11-14元三环的环体系，所 述环体系如果是单环则含有1-3个杂原子，如果是双环则含有1-6个杂原子，或 者如果是三环则含有1-9个杂原子，所述杂原子选自O，N，或S，这些环体系可 以是饱和的或不饱和的，并且其中每个环的0，1，2或3个原子被独立地选自下述 的取代基所取代：C1-C10烷基；C2-C10烯基；C2-C10炔基；C3-C10环烷基； C4-C10环烯基；芳基；R6′；卤素；硫；氧；CF3；卤烷基；SR2′；OR2′；OC(O)R2′； NR2′R2′；NR2′R3′；NR3′R3′；COOR2′；NO2；CN；C(O)R2′；C(O)NR2′R2′；被1-3个独 立的R4′，R6′，或芳基所取代的C1-C10烷基；或者被1-3个独立的R4′，R6′，或芳 基所取代的C2-C10烯基。

每个R6′独立地是5-8元单环，8-12元双环，或11-14元三环的环体系，所述 环体系如果是单环则含有1-3个杂原子，如果是双环则含有1-6个杂原子，或者 如果是三环则含有1-9个杂原子，所述杂原子选自O，N，或S，这些环体系可以 是饱和的或不饱和的，并且其中每个环的0，1，2或3个原子被独立地选自下述的 取代基所取代：C1-C10烷基；C2-C10烯基；C2-C10炔基；C3-C10环烷基； C4-C10环烯基；卤素；硫；氧；CF3；卤烷基；SR7′；OR7′；NR7′R7′；NR7′R8′；NR8′R8′； COOR7′；NO2；CN；C(O)R7′；或C(O)NR7′R7′；

每个R7′独立地是H，C1-C10烷基；C2-C10烯基；C2-C10炔基；C3-C10环 烷基；C4-C10环烯基；卤烷基；选择性地被1-3个独立的C1-C10烷基，C2-C10 烯基，C2-C10炔基，C3-C10环烷基，C4-C10环烯基，卤素，CF3，OR10′，SR10′， NR10′R10′，COOR10′，NO2，CN，C(O)R10′，C(O)NR10′R10′，NHC(O)R10′，或OC(O)R10′ 所取代的C1-C10烷基；或者选择性地被1-3个独立的C1-C10烷基，C2-C10 烯基，C2-C10炔基，C3-C10环烷基，C4-C10环烯基，卤素，CF3，OR10′，SR10′， NR10′R10′，COOR10′，NO2，CN，C(O)R10′，C(O)NR10′R10′，NHC(O)R10′，或OC(O)R10′ 所取代的苯基；

每个R8′独立地是C(O)R7′，COOR7′，或S(O)2R7′；

每个R9′独立地是H，C1-C10烷基，C2-C10烯基，C2-C10炔基，C3-C10环 烷基，C4-C10环烯基，或者选择性被1-3个独立的C1-C10烷基，C2-C10烯基， C2-C10炔基，C3-C10环烷基，C4-C10环烯基，卤素，CF3，OR10′，SR10′，NR10′R10′， COOR10′，NO2，CN，C(O)R10′，C(O)NR10′R10′，NHC(O)R10′，或OC(O)R10′所取代的 苯基；

每个R10′独立地是H；C1-C10烷基；C2-C10烯基；C2-C10炔基；C3-C10环 烷基；C4-C10环烯基；可选择性地被卤素，CF3，OR11′，SR11′，NR11′R11′，COOR11′， NO2，CN所取代的C1-C10烷基；或可选择性地被卤素，CF3，OR11′，SR11′， NR11′R11′，COOR11′，NO2，CN所取代的苯基；

每个R11′独立地是H；C1-C10烷基；C3-C10环烷基或苯基；

每个卤烷基独立地是被一个或多个选自F，Cl，Br，或I的卤原子所取代的 C1-C10烷基，其中卤原子的个数不能超过导致形成全卤代烷基基团的个数；并 且

每个烷基独立地可选择性地被1-3个独立的下述取代基取代：C1-C10烷基； C2-C10烯基；C2-C10炔基；C3-C10环烷基；C4-C10环烯基；R6′；卤素；卤烷 基；CF3；OR9′；SR9′；NR9′R9′；COOR9′；NO2；CN；C(O)R9′；C(O)C(O)R9′； C(O)NR9′R9′；S(O)2R9′；N(R9′)C(O)R9′；N(R9′)(COOR9′)；N(R9′)S(O)2R9′； S(O)2NR9′R9′；OC(O)R9′；NR9′C(O)NR9′R9′；NR9′C(O)C(O)R9′；NR9′C(O)R6′； NR9′S(O)2NR9′R9′；NR9′S(O)2R6′；NR9′C(O)C(O)NR9′R9′；被1-3个独立的R6′，卤 素，CF3，OR9′，SR9′，NR9′R9′，COOR9′，NO2，CN，C(O)R9′，C(O)NR9′R9′，NHC(O)R9′， NH(COOR9′)，S(O)2NR9′R9′，OC(O)R9′所取代的C1-C10烷基；被1-3个独立的 R6′，卤素，CF3，OR9′，SR9′，NR9′R9′，COOR9′，NO2，CN，C(O)R9′，C(O)NR9′R9′， NHC(O)R9′，NH(COOR9′)，S(O)2NR9′R9′，OC(O)R9′所取代的C2-C10烯基；或 R9′。

在本发明的一个优选实施方案中，每个Ar，L，和Ar′独立地是可选择地取 代的5-至7-元单环环体系或可选择地取代的9- to 12-元双环环体系。

根据另一个优选的实施方案，

Ar是

X1，X2，X3，X4，和X5独立地是选自CR1′和N；和

X6是选自NR1′，O，和S；

根据还有另一个优选的实施方案，X1和X2是N；X3，X4，和X5是CR1′；和 X6是O。

根据还有另一个优选的实施方案，X1和X3是N；X2，X4，和X5是CR1′；和 X6是O。

根据还有另一个优选的实施方案，X1和X4是N；X2，X3，和X5是CR1′；和 X6是O。

根据还有另一个优选的实施方案，X1和X5是N；X2，X3，和X4是CR1′；和 X6是O。

在另一个实施方案中，上述式中的化合物为其中J是NR1′，K不存在，和M 是C(O)的那些化合物。

在还有另一个实施方案中，上述式中的化合物为其中J不存在，K是NR1′， 和M是C(O)的那些化合物。

在另一个实施方案中，式(IV)化合物为其中当J不存在和K是NR1′时，M 不是C(O)和当J是NR1′和K不存在时，M不是C(O)的那些化合物。

在一个优选的实施方案中，上述化合物为其中L是可选择地取代的5-至 7-元碳环或杂环芳基基团的那些化合物。

在还有另一个优选的实施方案中，化合物为其中L是可选择地取代的亚 苯基，亚吡啶基，亚咪唑基，亚噁唑基，或亚噻唑基的那些化合物。

在一个特别优选的实施方案中，L是可选择地取代的亚苯基。

在另一个特别优选的实施方案中，L是可选择地取代的亚吡啶基。

在一个更优选的实施方案中，L是亚苯基。

在另一个甚至更优选的实施方案中，L是亚吡啶基。

在这些实施方案的任一个中，Ar和J可以与L在邻、间或对位相连接。 特别优选的是连接在间位的那些实施方案。

在某些实施方案中，当Ar′是苯基时，L不是亚苯基。这种实施方案的实 例包括那些实施方案，其中L是可选择地取代的杂环芳基基团和Ar′是可选择 地取代的碳环或杂环芳基基团，或其中L是可选择地取代的碳环或杂环芳基基 团和Ar′是可选择地取代的杂环芳基基团。

在还有另一个方面，本发明提供了新的式(I)的sirtuin-调节化合物或其盐， 其中：

环A被至少一个R1′基团取代；

R1′，R2′，R3′，R4′，R5′，R6′，R7′，R8′，R9′，R10′，和R11′如上所定义；

每个卤烷基独立地是被一个或多个卤素原子所取代的C1-C10烷基，所 述卤素原子选自F，Cl，Br，或I，其中卤素原子的个数不超过形成全卤代烷基基团 的卤原子数；

每个芳基独立地是5-至7-元单环环体系或9-至12-元双环环体系，所 述环体系可选择地被1-3个独立的下述取代基所取代：C1-C10烷基；C2-C10 烯基；C2-C10炔基；C3-C10环烷基；C4-C10环烯基；R6′；卤素；卤烷基；CF3； OR9′；SR9′；NR9′R9′；COOR9′；NO2；CN；C(O)R9′；C(O)C(O)R9′；C(O)NR9′R9′； S(O)2R9′；N(R9′)C(O)R9′；N(R9′)(COOR9′)；N(R9′)S(O)2R9′；S(O)2NR9′R9′；OC(O)R9′； NR9′C(O)NR9′R9′；NR9′C(O)C(O)R9′；NR9′C(O)R6′；NR9′S(O)2NR9′R9′；NR9′S(O)2R6′； NR9′C(O)C(O)NR9′R9′；被1-3个独立的R6′，卤素，CF3，OR9′，SR9′，NR9′R9′， COOR9′，NO2，CN，C(O)R9′，C(O)NR9′R9′，NHC(O)R9′，NH(COOR9′)，S(O)2NR9′R9′， OC(O)R9′取代的C1-C10烷基；被1-3个独立的R6′，卤素，CF3，OR9′，SR9′， NR9′R9′，COOR9′，NO2，CN，C(O)R9′，C(O)NR9′R9′，NHC(O)R9′，NH(COOR9′)， S(O)2NR9′R9′，OC(O)R9′取代的C2-C10烯基；或R9′；和

环B被至少一个取代；其中

X1，X2，X3，X4，和X5独立地是选自CR1′和N；和

X6选自NR1′，O，和S。

在一个优选的实施方案中，环B是苛苯基或吡啶基。

在另一个方面，本发明提供了新的式(IVa)的sirtuin-调节化合物或其盐：

Het-L-Q-Ar′(IVa)

其中：

Het是可选择地取代的杂环芳基基团；

L是可选择地取代的碳环或杂环亚芳基基团；

Ar′是可选择地取代的碳环或杂环芳基基团；和

Q选自 -NR1′-C(O)-，-NR1′-S(O)2-，-NR1′-C(O)-NR1′-，-NR1′-C(S)-NR1′-，-NR1′-C(O)-CR1′R′1 -NR1′-，-NR1′-C(＝NR1′)-NR1′-，-C(O)-NR1′-，-C(O)-NR1′-S(O)2-，-NR1′-，-CR1′R′1-，- NR1′-C(O)-CR1′＝CR1′-，-NR1′-S(O)2-NR1′-，-NR1′-C(O)-NR1′-S(O)2-，-NR1′-CR1′R′1-C (O)-NR1′-，-CR1′R′1-C(O)-NR1′-，-NR1′-C(O)-CR1′＝CR1′-CR1′R1′-，-NR1′-C(＝N-CN)- NR1′-，-NR1′-C(O)-CR1′R′1-，和

每个R1′独立地是选自H或可选择地取代的C1-C3直链或支链烷基， 其中： 当Het是多环杂芳基，L是可选择地取代的亚苯基，Q和Het与L以间位定向相 连，和Ar′是可选择地取代的苯基时；那么Q不是-NH-C(O)-。

在某些实施方案中，当Het是多环杂芳基，L是可选择地取代的亚苯基， 和Ar′是可选择地取代的苯基时；那么Q不是-NH-C(O)-。

在某些实施方案中(例如，当化合物是sirtuin活化剂时)，Het和Q与L以 1-，2-或1-，3-构象相连(例如，当L是亚苯基时，Het和Q在邻位或间位定向相 连)。在某些实施方案中，其中Het和Q与L以1-，3-构象相连，如果Het是苯 并噁唑基，L是亚吡啶基和Q是-NH-C(O)-NH，那么Ar′不是3，4二氧亚甲基苯 基；如果Het是甲基噻唑基，L是亚苯基和Q是-NH-C(O)-，那么Ar′不是3-二甲 基氨基苯基；如果Het是噁唑并吡啶基，L是亚吡啶基和Q是-NH-C(O)-NH，那 么Ar不是4-二甲基氨基苯基；如果Het是噁唑并吡啶基或苯并噁唑基和L是

那么Q不是-NH-(SO)2-；和如果Het是噁唑并吡啶 基，L是和Q是-NH-C(O)-，那么Ar′不是3，4-二甲氧基苯基或吡啶 基。

当Het被取代时，取代一般在至多2个碳原子上，取代基独立地选自R12， N(R12)2，NH(R12)，OR12，C(O)-NH-R12，C(O)-N(R12)2，N(R12)-OR12，CH2-N(R12)2， C(O)OR12，C(O)OH，

其中每个R12独立地是选自可选择地取代的C1-C3直链或支 链烷基。

在某些实施方案中，Het是选自噁唑并吡啶基，苯并噻吩基，苯并呋喃基， 吲哚基，喹喔啉基，苯并噻唑基，苯并噁唑基，苯并咪唑基，喹啉基，异喹啉基或 异吲哚基。在其它实施方案中，Het包含一个环N杂原子和1至2个独立 地选自N，O或S的附加环杂原子，例如噻唑基，三唑基，噁二唑基(oxadiazolyl)， 噻唑并吡啶基，咪唑并噻唑基，苯并噁嗪酮基(benzoxazinonyl)，或咪唑并吡啶 基。

Het的具体例子包括：

其中至多2个不直接与所示连接点相邻的环碳原子独立地被取代，取代基为可 选择取代的C1-C3直链或支链烷基，苯基，卤素，N(R12)2，NH(R12)，OR12， C(O)-NH-R12，C(O)-N(R12)2，N(R12)-OR12，CH2-N(R12)2，C(O)OR12，C(O)OH，

其

中每个R12独立地是选自可选择地取代的C1-C3直链或支链烷基。

在某些实施方案中，L是选自

其中：

每个Z1，Z2，Z3和Z4独立地是选自CH或N，其中不超过三个所述的Z1， Z2，Z3或Z4是N；

每个Z5和Z6独立地是选自C，N，O或S，条件是至少一个Z5和Z6是N；和

L是可选择地在1至2个碳原子上被取代，取代基独立地选自R12，N(R12)2， NH(R12)，OR12，C(O)-NH-R12，C(O)-N(R12)2，N(R12)-OR12，CH2-N(R12)2，C(O)OR12， C(O)OH，

在优选的实施方案中，L选自亚苯基或亚吡啶基，例如未取代的亚苯基或 被一个选自C(O)OCH3，C(O)OH，CH2OH，N(CH3)2，或CH2N(CH3)2的取代基取代 的亚苯基，或未取代的亚吡啶基。

在某些实施方案中，Q选 自-NH-C(O)-，-NH-S(O)2-，-NH-C(O)-NH-，-C(O)-NH-，-CH2-，-N(CH3)-C(O)-N H-，-NH-C(O)-N(CH3)-，或-NH-S(O)2-NH-，特别是 -NH-C(O)-，-C(O)-NH-，-NH-，-NH-C(O)-NH，或-NH-S(O)2-。

在某些实施方案中，Ar′选自可选择地取代的苯基，苯并噻唑基，或苯并噁唑 基。当Ar′是苯基，典型的可选择取代基是1至3个取代基，该取代基独立地 选自卤素，(可选择地取代的C1-C3直链或支链烷基)，O-(可选择地取代的C1-C3 直链或支链烷基)，S-(可选择地取代的C1-C3直链或支链烷基)，N(CH3)2或可选择 地取代的杂环基，或其中相邻环原子上的两个取代基一起形成二氧亚甲基。

在某些实施方案中，Het是选自

和其中至多2个不 与所示连接点直接相连的环碳原子独立地被取代，取代基为可选择地取代的 C1-C3直链或支链烷基，苯基或卤素；

L选自未取代的亚苯基，被一个选自C(O)OCH3，C(O)OH，CH2OH， N(CH3)2，或CH2N(CH3)2的取代基取代的亚苯基，或未取代的亚吡啶基；

Q选自-NH-C(O)-，-C(O)-NH-，-NH-，-NH-C(O)-NH，或-NH-S(O)2-；和

Ar′选自可选择地取代的苯基，苯并噻唑基，或苯并噁唑基，其中所述的苯 基是可选择地被1-3个取代基所取代，所述取代基独立地选自氯，甲基，O-甲基， S-甲基，N(CH3)2，吗啉代，或3，4-二氧亚甲基。

在某些实施方案中，Q选自 -NH-C(O)-，-C(O)-NH-，-NH-或-NH-C(O)-NH。

在某些实施方案中，Ar′上的取代基选自氯，甲基，O-甲基，S-甲基或 N(CH3)2。在某些实施方案中，Ar′上唯一取代基是O-甲基基团，特别是在Q邻 位或间位的O-甲基基团。在某些实施方案中，当有两个或更多O-甲基基团或 Ar′时，至少一个在Q的邻位或间位。

在某些实施方案中，L是吡啶基以及Het和Q是在吡啶基氮原子的1，3- 或2，4-位。在某些这样的实施方案中，Q是-NH-S(O)2-。

在某些实施方案中，其中L进一步被取代，取代基一般是均在Het和Q 二者的间位。

在某些实施方案中，Q是-NH-和Het是噻唑基或噁唑并吡啶基。

在某些实施方案中，Q 是-NH-和Ar是苯并噻唑基或苯并噁唑基。

在某些实施方案中，例如当sirtuin调剂是sirtui活化剂时，L是

和Q是-NH-(SO)2-。在某些这样的实施方案中，Het是噁唑并吡 啶基。当L，Q和可选择地Het具有这些值时，Ar′有利地是萘基或苯基，其中 Ar′可选择地被1-3个取代基所取代，该取代基独立地选自CN，卤素，(C1-C3直 链或支链烷基)，O-(C1-C3直链或支链烷基)，N(C1-C3直链或支链烷基)2，或5至 6-元杂环。

在某些实施方案中，例如当sirtuin调节剂是sirtuin活化剂时，L是

和Q 是-NH-C(O)-。在某些这样的实施方案中，Het是噁唑并吡啶基。 当L，Q和可选择地Het具有这些值时，Ar′有利地是可选择地被1-3个取代基 取代的吡啶基或苯基，所述取代基独立地选自CN，卤素，(C1-C3直链或支链烷 基)，O-(C1-C3直链或支链烷基)，N(C1-C3直链或支链烷基)2，或5至6-元杂环。

在某些实施方案中，例如当sirtuin调节剂是sirtuin抑制剂时，Het包含一 个N杂原子和1至2个独立地选自N，O或S的附加杂原子；

L是和是可选择地取代的；

Q是-NH-C(O)-；和

Ar′是被1-3个取代基取代的苯基，该取代基独立地选自CN，卤素，C1-C3直 链或支链烷基，O-(C1-C3直链或支链烷基)，N(C1-C3直链或支链烷基)2，或5至 6-元杂环， 其中当R8是未取代的时，那么环A是：

a)  不同时在2-和6-位被O-(C1-C3直链或支链烷基)取代；

b)  不同时在2-位被C1-C3直链或支链烷基或O-(C1-C3直链或支链烷 基)和在3-位被O-(C1-C3直链或支链烷基)所取代；

c)  不在4-位被O-(C1-C3直链或支链烷基)所取代——除非同时在3-位 被卤素或O-(C1-C3直链或支链烷基)所取代和在所有其他位置未被 取代； 不在4-位被N(C1-C3直链或支链烷基)2取代，或所述5-至6-元杂环。在某些这 样的实施方案中，L是未取代的和/或Het是噁唑并吡啶基。

在还有另一个方面，本发明提供了新的式(V)的sirtuin-调节化合物或其盐：

其中：

环A是可选择地被至少一个R1’基团所取代；

Y1，Y2，Y3，Y4，和Y5独立地是R1′；

R1′，R2′，R3′，R4′，R5′，R6′，R7′，R8′，R9′，R10′，和R11′如上所定义；

每个卤烷基独立地是被1个或多个选自F，Cl，Br，或I的卤原子所取代的 C1-C10烷基，其中卤原子的个数不能超过导致形成全卤代烷基的个数；和

每个芳基独立地是5-至7-元单环体系或9-至12-元双环体系，所述环体 系可选择地被1-3个独立的下述取代基所取代：C1-C10烷基；C2-C10烯基； C2-C10炔基；C3-C10环烷基；C4-C10环烯基；R6′；卤素；卤烷基；CF3；OR9′； SR9′；NR9′R9′；COOR9′；NO2；CN；C(O)R9′；C(O)C(O)R9′；C(O)NR9′R9′；S(O)2R9′； N(R9′)C(O)R9′；N(R9′)(COOR9′)；N(R9′)S(O)2R9′；S(O)2NR9′R9′；OC(O)R9′； NR9′C(O)NR9′R9′；NR9′C(O)C(O)R9′；NR9′C(O)R6′；NR9′S(O)2NR9′R9′；NR9′S(O)2R6′； NR9′C(O)C(O)NR9′R9′；被1-3个独立的R6′，卤素，CF3，OR9′，SR9′，NR9′R9′， COOR9′，NO2，CN，C(O)R9′，C(O)NR9′R9′，NHC(O)R9′，NH(COOR9′)，S(O)2NR9′R9′， OC(O)R9′所取代的C1-C10烷基；被1-3个独立的R6′，卤素，CF3，OR9′，SR9′， NR9′R9′，COOR9′，NO2，CN，C(O)R9′，C(O)NR9′R9′，NHC(O)R9′，NH(COOR9′)， S(O)2NR9′R9′，OC(O)R9′所取代的C2-C10烯基；或R9′。

在上述化合物的一个优选的实施方案中，

Y2或Y3中任一个是

X1，X2，X3，X4，和X5独立地是选自CR1′和N；和

X6选自NR1′，O，和S。

根据一个更优选的实施方案，X1和X2是N；X3，X4，和X5是CR1′；和X6 是O。

根据另一个更优选的实施方案，X1和X3是N；X2，X4，和X5是CR1′；和 X6是O。

根据另一个更优选的实施方案，X1和X4是N；X2，X3，和X5是CR1′；和 X6是O。

根据另一个更优选的实施方案，X1和X5是N；X2，X3，和X4是CR1′；和 X6是O。

在另一个方面，本发明提供了结构式(VII)的sirtuin-调节化合物或其盐：

其中：

每个X7，X8，X9和X10独立地是选自N，CR20，或CR1′，其中：

每个R20独立地是选自H或增溶基团；

每个R1′独立地是选自H或可选择地取代的C1-C3直链或支链烷基；

X7，X8，X9和X10中的一个是N和其它的是选自CR20或CR1′；和

0至1个R20是增溶基团；

R19选自：

其中：

每个Z10，Z11，Z12和Z13独立地是选自N，CR20，或CR1′；和

每个Z14，Z15和Z16独立地是选自N，NR1′，S，O，CR20，或CR1′，其中：

Z10，Z11，Z12或Z13中的0至2个是N；

Z14，Z15和Z16中的至少一个是N，NR1′，S或O；

Z14，Z15和Z16中的0至1个是S或O；

Z14，Z15和Z16中的0至2个是N或NR1′；

0至1个R20是增溶基团；

0至1个R1′是可选择地取代的C1-C3直链或支链烷基；和

R21选 自-NR1′-C(O)-，-NR1′-S(O)2-，-NR1′-C(O)-NR1′-，-NR1′-C(S)-NR1′-，-NR1′-C(S)-NR1′ -CR1′R1′-，-NR1′-C(O)-CR1′R1′-NR1′-，-NR1′-C(＝NR1′)-NR1′-，-C(O)-NR1′-，-C(O)-NR 1′-S(O)2-，-NR1′-，-CR1′R1′-，-NR1′-C(O)-CR1′＝CR1′-，-NR1′-S(O)2-NR1′-，-NR1′-C(O) -NR1′-S(O)2-，-NR1′-CR1′R1′-C(O)-NR1′-，-CR1′R1′-C(O)-NR1′-，-NR1′-C(O)-CR1′＝CR 1′-CR1′R1′-，-NR1′-C(＝N-CN)-NR1′-，-NR1′-C(O)-CR1′R1′-O-，-NR1′-C(O)-CR1′R1′-CR1 ′R1′-O-，-NR1′-S(O)2-CR1′R1′-，-NR1′-S(O)2-CR1′R1′-CR1′R1′-，或-NR1′-C(O)-CR1′R1′-； 和

R31选自可选择地取代的单环或双环芳基，或可选择地取代的单环或双环杂 芳基，条件是所述化合物不是：

当R19是和R21是-NHC(O)-时，R31不是可选择地取代 的苯基。

在某些实施方案中，结构式(VII)的化合物具有以下的值：

每个X7，X8，X9和X10独立地是选自N，CR20，或CR1′，其中：

每个R20独立地是选自H或增溶基团；

每个R1′独立地是选自H或可选择地取代的C1-C3直链或支链烷基；

X7，X8，X9和X10中的一个是N和其他的是选自CR20或CR1′；和

0至1个R20是增溶基团；

R19选自：

其中：

每个Z10，Z11，Z12和Z13独立地是选自N，CR20，或CR1′；和

每个Z14，Z15和Z16独立地是选自N，NR1′，S，O，CR20，或CR1′，其中：

Z10，Z11，Z12或Z13中的0至2个是N；

Z14，Z15和Z16中的至少一个是N，NR1′，S或O；

Z14，Z15和Z16中的0至1个是S或O；

Z14，Z15和Z16中的0至2个是N或NR1′；

0至1个R20是增溶基团；

0至1个R1′是可选择地取代的C1-C3直链或支链烷基；和

R21选 自-NR1′-C(O)-，-NR1′-S(O)2-，-NR1′-C(O)-NR1′-，-NR1′-C(S)-NR1′-，-NR1′-C(S)-NR1′ -CR1′R1′-，-NR1′-C(O)-CR1′R1′-NR1′-，-NR1′-C(＝NR1′)-NR1′-，-C(O)-NR1′-，-C(O)-NR 1′-S(O)2-，-NR1′-，-CR1′R1′-，-NR1′-C(O)-CR1′＝CR1′-，-NR1′-S(O)2-NR1′-，-NR1′-C(O) -NR1′-S(O)2-，-NR1′-CR1′R1′-C(O)-NR1′-，-CR1′R′1-C(O)-NR1′-，-NR1′-C(O)-CR1′＝CR 1′-CR1′R1′-，-NR1′-C(＝N-CN)-NR1′-，-NR1′-C(O)-CR1′R1′-O-，-NR1′-C(O)-CR1′R1′-C R1′R1′-O-，-NR1′-S(O)2-CR1′R1′-，-NR1′-S(O)2-CR1′R1′-CR1′R1′-， 或-NR1′-C(O)-CR1′R1′-；和

R31选自可选择地取代的单环或双环芳基，或可选择地取代的单环或双环杂 芳基，条件是：

所述化合物不是：

和

当X8和X9各自独立地选自CR20或CR1′，R19是和每个 Z10，Z11，Z12和Z13独立地是选自CR20，或CR1′，那么：

a)  X8和X9中的至少一个不是CH；或

b)  Z10，Z11，Z12和Z13中的至少一个是CR20，其中R20是增溶基团。

在某些实施方案中，当Z12是CR20和R20是增溶基团时，所述增溶基团 不是-C(O)OCH2CH3，-COOH，

在某些实施方案中，当X8和X9各自独立地选自CR20或CR1′，R19是 和每个Z10，Z11，Z12和Z13独立地是选自CR20，或CR1′时，那么：

a)  X8和X9中的至少一个不是CH；或

b)  Z10，Z11，和Z13中的至少一个是CR20，其中R20是增溶基团。

在某些实施方案中，当R19是和每个Z10，Z11，Z12和Z13是 CR20，或CR1′；X8和X9是CR20或CR1′；R21是-NHC(O)-；和R31是可选择地取代的 苯基时，那么R31是取代的苯基，在CR1′部分中的至少一个R1′是可选择地取代 的C1-C3直链或支链烷基，或在CR20中的至少一个R20是增溶基团，或他们的 组合。

在某些实施方案中，R19选自苯基，吡啶基，噻吩基或呋喃基。

在某些实施方案中，R19是其中每个Z10，Z11，Z12和Z13独 立地是选自CR20或CR1′；和

R21是-NH-C(O)-；和

R31是取代的苯基。

在某些这样的实施方案中，当X9是N时，R31不是2，4-二甲氧基苯基和/ 或当X10是N时，R31不是卤素取代的苯基；3，4-二氧代亚乙基苯基；或3，5-二甲 氧基苯基。

在优选的实施方案中，R31可选择地被1-3个独立地选自 -OCH3，-CH3，-N(CH3)2，吡嗪氧基(pyrazinoxy)或增溶基团的取代基取代。R31 的合适例子包括3-甲氧基-4-((4-甲基哌嗪-1-基)甲基)苯基，3-甲氧基-4-吗啉代甲 基苯基，3-甲氧基-4-二氨基甲基苯基，3-甲氧基-4-((吡咯烷-1-基)甲基)苯基，3，4- 二甲氧基苯基，3，5-二甲氧基苯基，2，3，4-三甲氧基苯基，3，4，5-三甲氧基苯基，2-二 甲基氨基苯基，3-二甲基氨基苯基，4-二甲基氨基苯基，或3，5-二甲基苯基。

在某些实施方案中，R19是

选自或其中Z10，Z11，Z12，和Z13中的一个是N和 其他的是独立地选自CR20或CR1′；

R21选自-NH-，-NH-C(O)-，-NH-C(O)-NH，-NH-C(S)-NH-或-NH-S(O)2-；和

R31选自可选择地取代的苯基，可选择地取代的萘基，或可选择地取代的杂 芳基。

在某些这样的实施方案中，

a)  当R21是-NH-S(O)2-时，

i)  Z10是N；或者

ii)  Z11是N和R31是卤代苯基或2-甲氧基-5-甲基苯基；

b)  当R19是时，R31不是4-二甲基氨基苯基，2，3，4-三甲氧 基苯基，或3，5-二甲氧基苯基；和/或

c)  当R21是-NH-C(O)-NH-和Z10是N时，R31不是4-二甲基氨基苯基。 在某些这样的实施方案中，R31选自可选择地取代的苯基，苯并噻唑基， 或苯并噁唑基。

在还有另一个实施方案中，本发明提供了结构式(VIII)的sirtuin-调节化合 物或其盐：

其中：

R1′选自H或可选择地取代的C1-C3直链或支链烷基；

R21选 自-NR1′-C(O)-，-NR1′-S(O)2-，-NR1′-C(O)-NR1′-，-NR1′-C(S)-NR1′-，-NR1′-C(S)-NR1′ -CR1′R1′-，-NR1′-C(O)-CR1′R1′-NR1′-，-NR1′-C(＝NR1′)-NR1′-，-C(O)-NR1′-，-C(O)-NR 1′-S(O)2-，-NR1′-，-CR1′R′1-，-NR1′-C(O)-CR1′＝CR1′-，-NR1′-S(O)2-NR1′-，-NR1′-C(O)- NR1′-S(O)2-，-NR1′-CR1′R1′-C(O)-NR1′-，-CR1′R1′-C(O)-NR1′-，-NR1′-C(O)-CR1′＝CR1′ -CR1′R1′-，-NR1′-C(＝N-CN)-NR1′-，-NR1′-C(O)-CR1′R1′-O-，-NR1′-C(O)-CR1′R1′-CR1′ R1′-O-，-NR1′-S(O)2-CR1′R1′-，-NR1′-S(O)2-CR1′R1′-CR1′R1′-，或-NR1′-C(O)-CR1′R1′-； 和

R31选自可选择地取代的单环或双环芳基，或可选择地取代的单环或双环杂芳 基，条件是：

当R1′是甲基，和R21是-NH-C(O)-时，R31不是1- 甲氧基萘基，2-甲氧基萘基，或未取代的2-噻吩基；

当R1′是甲基，和R21是-NH-C(O)-CH＝CH-时，R31不是

当R1’是甲基，和R21是-NH-C(O)-CH-O-时，R31不是未取代的萘基，2-甲氧 基，4-硝基苯基，4-氯-2-甲基苯基，或4-叔-丁基苯基；和

当R21是-NH-C(O)-时，R31不是可选择地取代的苯基。

在某些实施方案中，R21是-NH-C(O)-；和R31是可选择地被1-3个取代基取 代的苯基，所述取代基独立地选自-OCH3，-CH3，-N(CH3)2，或增溶基团。

在某些这样的实施方案中，R21是-NH-C(O)-和R31选自未取代的苯基，2-甲 氧基苯基，3-甲氧基苯基，2，3，4-三甲氧基苯基，3，4，5-三甲氧基苯基，2，4-二甲氧基 苯基，3，5-二甲氧基苯基，2-甲基-3-甲氧基苯基，2-吗啉代苯基，2-甲氧基-4-甲基苯 基，2-二甲基氨基苯基，4-二甲基氨基苯基，或特别是苯基；2-甲氧 基苯基；3-甲氧基苯基；2，3，4-三甲氧基苯基；3，4，5-三甲氧基苯基；2，4-二甲氧基苯 基；3，5-二甲氧基苯基；2-甲基-3-甲氧基苯基；2-吗啉代苯基；2-甲氧基-4-甲基苯 基；2-二甲基氨基苯基；或4-二甲基氨基苯基。

在另一个实施方案中，本发明提供了结构式(IX)的sirtuin-调节化合物或其 盐：

其中：

R1′选自H或可选择地取代的C1-C3直链或支链烷基；和

R50选自2，3-二甲氧基苯基，苯氧基苯基，2-甲基-3-甲氧基苯基，2-甲氧基-4- 甲基苯基，或被1-3个取代基取代的苯基，其中所述取代基中的一个是增溶基团； 条件是R50不是同时被增溶基团和硝基基团取代，和R50不是在4-位被环状增溶 基团或在2-位被吗啉代基团单取代。

在一个方面，本发明提供了结构式(X)的sirtuin-调节化合物或其盐：

其中：

R1′选自H或可选择地取代的C1-C3直链或支链烷基；和

R51选自可选择地取代的单环杂芳基，可选择地取代的双环杂芳基，或可选择 地取代的萘基，其中R51不是氯苯并(b)噻吩基，未取代的苯并间二氧杂环戊烯基 (benzodioxolyl)，未取代的苯并呋喃基，甲基-苯并呋喃基，未取代的呋喃基， 苯基-，溴-，或硝基-呋喃基，氯苯基-异噁唑基，氧代苯并吡喃基，未取代的萘基， 甲氧基-，甲基-，或卤代-萘基，未取代的噻吩基，未取代的吡啶基，或氯吡啶基。

在某些实施方案中，R51是选自吡唑基，噻唑基，噁唑基，嘧啶基，呋喃基， 噻吩基，吡啶基，异噁唑基，吲哚基，苯并吡唑基，苯并噻唑基，苯并噁唑基，喹 喔啉基，苯并呋喃基，苯并噻吩基，喹啉基，苯并异噁唑基，苯并三嗪基，三嗪 基，萘基，或和其中R51是可选择取代的。在某些这样的实施 方案中，R51是选自吡唑基，噻唑基，噁唑基，嘧啶基，吲哚基，吡嗪基，三嗪基， 或和R51是可选择取代的。

在另一个方面，本发明提供了结构式(XI)的sirtuin-调节化合物或其盐：

其中：

R1′选自H或可选择地取代的C1-C3直链或支链烷基；

R22选 自-NR23-C(O)-，-NR1′-S(O)2-，-NR1′-C(O)-NR1′-，-NR1′-C(S)-NR1′-，-NR1′-C(S)-NR1 ′-CR1′R1′-，-NR1′-C(O)-CR1′R1′-NR1′-，-NR1′-C(＝NR1′)-NR1′-，-C(O)-NR1′-，-C(O)-NR 1′-S(O)2-，-NR1′-，-CR1′R1′-，-NR1′-C(O)-CR1′＝CR1′-，-NR1′-S(O)2-NR1′-，-NR1′-C(O) -NR1′-S(O)2-，-NR1′-CR1′R1′-C(O)-NR1′-，-CR1′R1′-C(O)-NR1′-，-NR1′-C(O)-CR1′＝CR 1′-CR1′R1′-，-NR1′-C(＝N-CN)-NR1′-，-NR1′-C(O)-CR1′R1′-O-，-NR1′-C(O)-CR1′R1′-CR1 ′R1′-O-，-NR1′-S(O)2-CR1′R1′-，-NR1′-S(O)2-CR1′R1′-CR1′R1′-，或-NR1′-C(O)-CR1′R1′-， 其中R23是可选择地取代的C1-C3直链或支链烷基；和

R31是选自可选择地取代的单环或双环芳基，或可选择地取代的单环或双环 杂芳基，条件是：

当R22是-NH-C(O)-CH＝CH-时，R31不是未取代的呋喃基，5-(2-甲基-3-氯苯 基)-呋喃基，2，4-二氯苯基，3，5-二氯-2-甲氧基苯基，3-硝基苯基，4-氯苯基，4-氯-3- 硝基苯基，4-异丙基苯基，4-甲氧基苯基，2-甲氧基-5-溴苯基，或未取代的苯基；

当R22是-NH-C(O)-CH2-时，R31不是3，4-二甲氧基苯基，4-氯苯基，或未取 代的苯基；

当R22是-NH-C(O)-CH2-O-时，R31不是2，4-二甲基-6-硝基苯基，2-或4-硝 基苯基，4-环己基苯基，4-甲氧基苯基，未取代的萘基，或未取代的苯基，或只被 选自直链-或支链-烷基或卤素所取代的单取代、双取代或三取代的苯基；

当R22是-NH-C(O)-CH(CH3)-O-时，R31不是2，4-二氯苯基，4-氯苯基，或未 取代的苯基；和

当R22是-NH-S(O)2-时，R31不是未取代的苯基。

在某些实施方案中，R22选自-C(O)-NH-，-NH-，或-C(O)-NH-CH3。

在某些实施方案中，例如当R22是选自-C(O)-NH-，-NH-，或-C(O)-NH-CH3 时，R31是选自可选择地取代的苯基，苯并噻唑基，喹喔啉基，或苯并噁唑基。

在还有另一个方面，本发明提供了结构式(XII)的sirtuin-调节化合物或其盐：

其中：

每个X7，X8，X9和X10独立地是选自N，CR20，或CR1′，其中：

每个R20独立地是选自H或增溶基团；

每个R1′独立地是选自H或可选择地取代的C1-C3直链或支链烷基；

X7，X8，X9和X10中的一个是N和其他的是选自CR20或CR1′；和

0至1个R20是增溶基团；

R19选自：

其中：

每个Z10，Z11，Z12和Z13独立地是选自N，CR20，或CR1′；和

每个Z14，Z15和Z16独立地是选自N，NR1′，S，O，CR20，或CR1′，其中：

Z10，Z11，Z12或Z13中的0至2个是N；

Z14，Z15和Z16中的至少一个是N，NR1′，O或S；

Z14，Z15和Z16中的0至1个是S或O；

Z14，Z15和Z16中的0至2个是N或NR1′；

0至1个R20是增溶基团；

0至1个R1′是可选择地取代的C1-C3直链或支链烷基；和

R21选 自-NR1′-C(O)-，-NR1′-S(O)2-，-NR1′-C(O)-NR1′-，-NR1′-C(S)-NR1′-，-NR1′-C(S)-NR1′ -CR1′R1′-，-NR1′-C(O)-CR1′R1′-NR1′-，-NR1′-C(＝NR1′)-NR1′-，-C(O)-NR1′-，-C(O)-NR 1′-S(O)2-，-NR1′-，-CR1′R1′-，-NR1′-C(O)-CR1′＝CR1′-，-NR1′-S(O)2-NR1′-，-NR1′-C(O) -NR1′-S(O)2-，-NR1′-CR1′R1′-C(O)-NR1′-，-CR1′R1′-C(O)-NR1′-，-NR1′-C(O)-CR1′＝CR 1′-CR1′R1′-，-NR1′-C(＝N-CN)-NR1′-，-NR1′-C(O)-CR1′R1′-O-，-NR1′-C(O)-CR1′R1′-CR1 ′R1′-O-，-NR1′-S(O)2-CR1′R1′-，-NR1′-S(O)2-CR1′R1′-CR1′R1′-，或-NR1′-C(O)-CR1′R1′-； 和

R31选自可选择地取代的单环或双环芳基，或可选择地取代的单环或双环杂 芳基， 条件是当R19是Z10，Z11，Z12和Z13各自是CH，和R21 是-NHC(O)-时，R31不是可选择地取代的苯基。

在某些实施方案中，结构式(XI)的化合物具有以下的值：

每个X7，X8，X9和X10独立地是选自N，CR20，或CR1′，其中：

每个R20独立地是选自H或增溶基团；

每个R1′独立地是选自H或可选择地取代的C1-C3直链或支链烷基；

X7，X8，X9和X10中的一个是N和其他的是选自CR20或CR1′；和

0至1个R20是增溶基团；

R19选自：

其中：

每个Z10，Z11，Z12和Z13独立地是选自N，CR20，或CR1′；和

每个Z14，Z15和Z16独立地是选自N，NR1′，S，O，CR20，或CR1′，其中：

Z10，Z11，Z12或Z13中的0至2个是N；

Z14，Z15和Z16中的至少一个是N，NR1′，S或O；

Z14，Z15和Z16中的0至1个是S或O；

Z14，Z15和Z16中的0至2个是N或NR1′；

0至1个R20是增溶基团；

0至1个R1′是可选择地取代的C1-C3直链或支链烷基；和

R21选 自-NR1′-C(O)-，-NR1′-S(O)2-，-NR1′-C(O)-NR1′-，-NR1′-C(S)-NR1′-，-NR1′-C(S)-NR1′ -CR1′R1′-，-NR1′-C(O)-CR1′R1′-NR1′-，-NR1′-C(＝NR1′)-NR1′-，-C(O)-NR1′-，-C(O)-NR 1′-S(O)2-，-NR1′-，-CR1′R1′-，-NR1′-C(O)-CR1′＝CR1′-，-NR1′-S(O)2-NR1′-，-NR1′-C(O) -NR1′-S(O)2-，-NR1′-CR1′R1′-C(O)-NR1′-，-CR1′R1′-C(O)-NR1′-，-NR1′-C(O)-CR1′＝CR 1′-CR1′R1′-，-NR1′-C(＝N-CN)-NR1′-，-NR1′-C(O)-CR1′R1′-O-，-NR1′-C(O)-CR1′R1′-CR1 ′R1′-O-，-NR1′-S(O)2-CR1′R1′-，-NR1′-S(O)2-CR1′R1′-CR1′R1′-，或-NR1′-C(O)-CR1′R1′-； 和

R31选自可选择地取代的单环或双环芳基，或可选择地取代的单环或双环杂 芳基，条件是：

当X7是N，R19是和每个Z10，Z11，Z12和Z13独立地是 选自CR20，或CR1′，那么：

a)X8，X9或X10中的至少一个是C-(C1-C3直链或支链烷基)或C-(增溶基 团)；或

b)Z10，Z11，Z12和Z13中的至少一个是CR20，其中R20是增溶基团。

在某些实施方案中，R21是-NH-C(O)-和R19选自：

在某些实施方案中，R19选自可选择地取代的苯基，可选择地取代的吡啶基， 可选择地取代的噻吩基或可选择地取代的呋喃基。

在某些实施方案中，R19是其中每个Z10，Z11，Z12和Z13独立 地是选自CR20或CR1′；和

R21选自-NH-C(O)-，-NH-C(O)-CH(CH3)-O-，-NH-C(O)-CH2-O-， 或-NH-S(O)2-CH2-CH2-；和

R31选自可选择地取代的芳基，或可选择地取代的杂芳基。

在某些这样的实施方案中，R31是被1-3个取代基可选择地取代，所述取代 基独立地选自-OCH3，-CH3，-N(CH3)2，苯基，苯氧基，3，4-二氧亚甲基，氟，或另 一个增溶基团。R31的合适的例子包括未取代的喹啉基，2，4-二甲氧基苯基，3，4- 二甲氧基苯基，3，5-二甲氧基苯基，3，4，5-三甲氧基苯基，2，3，4-三甲氧基苯基，2-二 甲基氨基苯基，3-二甲基氨基苯基，4-二甲基氨基苯基，3，5-二甲基苯基，3，5-二氟 苯基，3-三氟甲氧基苯基，未取代的喹喔啉基，未取代的苯并嘧啶基，

在某些这样的实施方案中，R31不是苯基取代的呋喃基。

在某些实施方案中，R19是选自

每个Z10，Z11，Z12和Z13独立地是选自CR20，或CR1′；

R21选自-NH-C(O)-， NH-C(O)-CH2-CH(CH3)-O，-NH-C(O)-NH-，-NH-C(S)-NH-，-NH-C(S)-NH-CH2-， 或-NH-S(O)2-；和

R31选自可选择地取代的苯基，可选择地取代的萘基，或可选择地取代的杂芳 基。

在某些这样的实施方案中，R31选自苯基，萘基，吡唑基，呋喃基，噻吩基， 吡啶基，异噁唑基，苯并吡唑基，苯并呋喃基，苯并噻吩基，喹啉基，苯并异噁 唑基，或和R31是可选择地取代的(例如，被至多3个取代基可 选择地取代，所述取代基独立地选自-OCH3，-CH3，-N(CH3)2，-O-苯基，或另一个 增溶基团)。R31的合适的例子包括未取代的苯基，3-甲氧基苯基，4-甲氧基苯基， 2，3-二甲氧基苯基，2，4-二甲氧基苯基，2，5-二(三氟甲基)苯基，3，4-二甲氧基苯基， 3，5-二甲氧基苯基，3，4，5-三甲氧基苯基，2，3，4-三甲氧基苯基，2-甲氧基-4-甲基苯 基，2-苯氧基苯基，3-二甲基氨基苯基，4-二甲基氨基苯基，未取代的2-呋喃基， 未取代的2-噻吩基，

在某些实施方案中，以下情况中的一个或多个适用：

当X8是N，R21是-NH-C(S)-NH-，和R19是苯基时，R31不是2-甲氧基-5-硝基 苯基，2-S-甲基苯基或2-乙酰基苯基；

当X8是N，R21是-NH-S(O)2-，和R19是苯基时，R31不是噻二唑取代的噻吩基 或4-甲基磺酰基苯基；

当X8是N，R21是-NH-CO-，和R19是苯基时，R31不是2，4-二氟苯基，吡啶 基取代的噻吩基，3，4-二氯苯基，4-叔-丁基苯基，或3-苄氧基苯基；

当X9是N，R21是-NH-C(O)-和R19是时，R31不是2，3，4-三甲 氧基苯基或3，5-二甲氧基苯基；和

当X9是N，R21是-NH-C(O)-和R19是苯基时，R31不是3，5-二甲氧基苯基。

在另一个实施方案中，本发明提供了结构式(XIII)的化合物或其盐：

其中：

R1′是选自H或可选择地取代的C1-C3直链或支链烷基；

R21选 自-NR1′-C(O)-，-NR1′-S(O)2-，-NR1′-C(O)-NR1′-，-NR1′-C(S)-NR1′-，-NR1′-C(S)-NR1′ -CR1′R1′-，-NR1′-C(O)-CR1′R1′-NR1′-，-NR1′-C(＝NR1′)-NR1′-，-C(O)-NR1′-，-C(O)-NR 1′-S(O)2-，-NR1′-，-CR1′R1′-，-NR1′-C(O)-CR1′＝CR1′-，-NR1′-S(O)2-NR1′-，-NR1′-C(O) -NR1′-S(O)2-，-NR1′-CR1′R1′-C(O)-NR1′-，-CR1′R1′-C(O)-NR1′-，-NR1′-C(O)-CR1′＝CR 1′-CR1′R1′-，-NR1′-C(＝N-CN)-NR1′-，-NR1′-C(O)-CR1′R1′-O-，-NR1′-C(O)-CR1′R1′-CR1 ′R1′-O-，-NR1′-S(O)2-CR1′R1′-，-NR1′-S(O)2-CR1′R1′-CR1′R1′-，或-NR1′-C(O)-CR1′R1′-； 和

R31选自可选择地取代的单环或双环芳基，或可选择地取代的单环或双环杂芳 基，条件是：

当R21是-NH-C(O)-时，R31不是未取代的呋喃基，5-溴呋喃基，未取代的苯 基，卤素或甲基单取代的苯基，3-或4-甲氧基苯基，4-丁氧基苯基，4-叔-丁基苯基， 3-三氟甲基苯基，2-苯甲酰基苯基，2-或4-乙氧基苯基，2，3-，2，4-，3，4-，或3，5-二甲 氧基苯基，3，4，5-三甲氧基苯基，2，4-或2-6二氟苯基，3，4-二氧亚甲基苯基，3，4-或 3，5-二甲基苯基，2-氯-5-溴苯基，2-甲氧基-5-氯苯基，未取代的喹啉基，被甲基和 苯基同时取代的噻唑基，或乙氧基取代的吡啶基；

当R21是-NH-C(O)-CH(CH2-CH3)-时，R31不是未取代的苯基；

当R21是-NH-C(O)-CH2-时，R31不是未取代的苯基，3-甲基苯基，4-氯苯 基，4-乙氧基苯基，4-氟苯基或4-甲氧基苯基；

当R21是-NH-C(O)-CH2-O-时，R31不是未取代的苯基或4-氯苯基；和

当R21是-NH-S(O)2-时，R31不是3，4-二氧亚甲基苯基，2，4，5-三甲基苯基， 2，4，6-三甲基苯基，2，4-或3，4-二甲基苯基，2，5-二氟苯基，2，5-或3，4-二甲氧基苯基， 氟苯基，4-氯苯基，4-溴苯基，4-乙基苯基，4-甲基苯基，3-甲基-4-甲氧基苯基，未 取代的苯基，未取代的吡啶基，未取代的噻吩基，氯取代的噻吩基，或甲基取代 的苯并噻唑基。

在某些实施方案中，R1选自H或可选择地取代的C1-C3直链或支链烷基；

R21选 自-NR1′-C(O)-，-NR1′-S(O)2-，-NR1′-C(O)-NR1′-，-NR1′-C(S)-NR1′-，-NR1′-C(S)-NR1′ -CR1′R1′-，-NR1′-C(O)-CR1′R1′-NR1′-，-NR1′-C(＝NR1′)-NR1′-，-C(O)-NR1′-，-C(O)-NR 1′-S(O)2-，-NR1′-，-CR1′R1′-，-NR1′-C(O)-CR1′＝CR1′-，-NR1′-S(O)2-NR1′-，-NR1′-C(O) -NR1′-S(O)2-，-NR1′-CR1′R1′-C(O)-NR1′-，-CR1′R1′-C(O)-NR1′-，-NR1′-C(O)-CR1′＝CR 1′-CR1′R1′-，-NR1′-C(＝N-CN)-NR1′-，-NR1′-C(O)-CR1′R1′-O-，-NR1′-C(O)-CR1′R1′-CR1 ′R1′-O-，-NR1′-S(O)2-CR1′R1′-，-NR1′-S(O)2-CR1′R1′-CR1′R1′-，或-NR1′-C(O)-CR1′R1′-； 和

R31选自单环或双环芳基或单环或双环杂芳基，和包含增溶基团取代基。

在某些实施方案中，R31选自苯基，萘基，吡唑基，呋喃基，噻吩基，吡啶基， 异噁唑基，苯并吡唑基，苯并呋喃基，苯并噻吩基，喹啉基，苯并异噁唑基，或 和R31是可选择取代的。

在某些实施方案中，R21选自-NH-C(O)-， NH-C(O)-CH2-CH(CH3)-O，-NH-C(O)-NH-，-NH-C(S)-NH-，-NH-C(S)-NH-CH2-， 或-NH-S(O)2-；和

R31选自可选择地取代的苯基，可选择地取代的萘基，或可选择地取代的杂 芳基。

在某些这样的实施方案中，特别是当R21是-NH-C(O)-时，R31是选自未取 代的苯基，3-甲氧基苯基，4-甲氧基苯基，2，3-二甲氧基苯基，2，4-二甲氧基苯基， 2，5-二(三氟甲基)苯基，3，4-二甲氧基苯基，3，5-二甲氧基苯基，3，4，5-三甲氧基苯基， 2，3，4-三甲氧基苯基，2-甲氧基-4-甲基苯基，2-苯氧基苯基，3-二甲基氨基苯基，4- 二甲基氨基苯基，未取代的2-呋喃基，未取代的2-噻吩基，

在一个方面，本发明提供了结构式(XIV)的sirtuin-调节化合物或其盐：

其中：

每个R23和R24独立地是选自H，-CH3或增溶基团；

R25选自H或增溶基团；和

R19选自：

其中：

每个Z10，Z11，Z12和Z13独立地是选自N，CR20，或CR1′；和

每个Z14，Z15和Z16独立地是选自N，NR1′，S，O，CR20，或CR1′，其中：

Z10，Z11，Z12或Z13中的0至2个是N；

Z14，Z15和Z16中的至少一个是N，NR1′，O或S；

Z14，Z15和Z16中的0至1个是S或O；

Z14，Z15和Z16中的至少一个是N或NR1′；

0至1个R20是增溶基团；和

0至1个R1′是可选择地取代的C1-C3直链或支链烷基；

每个R20独立地是选自H或增溶基团；

R21选 自-NR1′-C(O)-，-NR1′-S(O)2-，-NR1′-C(O)-NR1′-，-NR1′-C(S)-NR1′-，-NR1′-C(S)-NR1′ -CR1′R′1-，-NR1′-C(O)-CR1′R′1-NR1′-，-NR1′-C(＝NR1′)-NR1′-，-C(O)-NR1′-，-C(O)-NR1 ′-S(O)2-，-NR1′-，-CR1′R′1-，-NR1′-C(O)-CR1′＝CR1′-，-NR1′-S(O)2-NR1′-，-NR1′-C(O) -NR1′-S(O)2-，-NR1′-CR1′R′1-C(O)-NR1′-，-CR1′R′1-C(O)-NR1′-，-NR1′-C(O)-CR1′＝CR 1′-CR1′R1′-，-NR1′-C(＝N-CN)-NR1′-，-NR1′-C(O)-CR1′R′1-O-，-NR1′-C(O)-CR1′R′1-C R1′R′1-O-，-NR1′-S(O)2-CR1′R′1-，-NR1′-S(O)2-CR1′R′1-CR1′R′1-，-NR1′-C(O)-CR1′R′1 -CR1′R′1-，-NR1′-C(S)-NR1′-CR1′R′1-CR1′R′1-，-NR1′-C(O)-O-或-NR1′-C(O)-CR1′R1′-； 和

每个R1′独立地是选自H或可选择地取代的C1-C3直链或支链烷基；和

R31选自可选择地取代的单环或双环芳基，或可选择地取代的单环或双环杂芳 基，

其中当R19是R21是-NH-C(O)-和R25是-H时，R31不 是可选择地取代的苯基基团，和其中所述化合物不是2-氯-N-[3-[3-(环己基氨基) 咪唑并[1，2-a]吡啶-2-基]苯基]-4-硝基苯甲酰胺。

在某些实施方案中，每个R23和R24独立地是选自H，-CH3或增溶基团；

R25选自H，或增溶基团；和

R19选自：

其中：

每个Z10，Z11，Z12和Z13独立地是选自N，CR20，或CR1′；和

每个Z14，Z15和Z16独立地是选自N，NR1′，S，O，CR20，或CR1′，

其中：

Z10，Z11，Z12或Z13中的0至2个是N；

Z14，Z15和Z16中的至少一个是N，NR1′，O或S；

Z14，Z15和Z16中的0至1个是S或O；

Z14，Z15和Z16中的0至2个是N或NR1′；

0至1个R20是增溶基团；和

0至1个R1′是可选择地取代的C1-C3直链或支链烷基；

每个R20独立地是选自H或增溶基团；

R21选 自-NR1′-C(O)-，-NR1′-S(O)2-，-NR1′-C(O)-NR1′-，-NR1′-C(S)-NR1′-，-NR1′-C(S)-NR1′ -CR1′R′1-，-NR1′-C(O)-CR1′R′1-NR1′-，-NR1′-C(＝NR1′)-NR1′-，-C(O)-NR1′-，-C(O)-NR 1′-S(O)2-，-NR1′-，-CR1′R′1-，-NR1′-C(O)-CR1′＝CR1′-，-NR1′-S(O)2-NR1′-，-NR1′-C(O) -NR1′-S(O)2-，-NR1′-CR1′R′1-C(O)-NR1′-，-CR1′R′1-C(O)-NR1′-，-NR1′-C(O)-CR1′＝CR 1′-CR1′R1′-，-NR1′-C(＝N-CN)-NR1′-，-NR1′-C(O)-CR1′R′1-O-，-NR1′-C(O)-CR1′R′1-C R1′R′1-O-，-NR1′-S(O)2-CR1′R′1-，-NR1′-S(O)2-CR1′R′1-CR1′R′1-，-NR1′-C(O)-CR1′R′1 -CR1′R′1-，-NR1′-C(S)-NR1′-CR1′R′1-CR1′R′1-，-NR1′-C(O)-O- 或-NR1′-C(O)-CR1′R1′-(特别是-NH-C(O)-)；和

每个R1′独立地是选自H或可选择地取代的C1-C3直链或支链烷基；和

R31选自可选择地取代的单环或双环芳基，或可选择地取代的单环或双环杂 芳基。

在某些这样的实施方案中，R31不是2，4-二甲氧基苯基。

典型地，R25选自H，-CH2-N(CH3)2，或

典型地，R23和R24是H。

典型地，R19是选自苯基，吡啶基，噻吩基或呋喃基，特别地是可选择地 取代的苯基。优选地，苯基可选择地被下述基团取代：

a)  至多三个-O-CH3基团；或

b)  1个-N(CH3)2基团。

在某些实施方案中，每个R23和R24独立地是选自H，-CH3或增溶基团；

R25选自H，或增溶基团；和

R19选自：

其中：

每个Z10，Z11，Z12和Z13独立地是选自N，CR20，或CR1′；和

每个Z14，Z15和Z16独立地是选自N，NR1′，S，O，CR20，或CR1′，其中：

Z10，Z11，Z12或Z13中的0至2个是N；

Z14，Z15和Z16中的至少一个是N，NR1′，O或S；

Z14，Z15和Z16中的0至1个是S或O；

Z14，Z15和Z16中的0至2个是N或NR1′；

0至1个R20是增溶基团；和

0至1个R1′是可选择地取代的C1-C3直链或支链烷基；

每个R20独立地是选自H或增溶基团；

R21选 自-NR1′-C(O)-，-NR1′-S(O)2-，-NR1′-C(O)-NR1′-，-NR1′-C(S)-NR1′-，-NR1′-C(S)-NR1′ -CR1′R′1-，-NR1′-C(O)-CR1′R′1-NR1′-，-NR1′-C(＝NR1′)-NR1′-，-C(O)-NR1′-，-C(O)-NR 1′-S(O)2-，-NR1′-，-CR1′R′1-，-NR1′-C(O)-CR1′＝CR1′-，-NR1′-S(O)2-NR1′-，-NR1′-C(O) -NR1′-S(O)2-，-NR1′-CR1′R′1-C(O)-NR1′-，-CR1′R′1-C(O)-NR1′-，-NR1′-C(O)-CR1′＝CR 1′-CR1′R1′-，-NR1′-C(＝N-CN)-NR1′-，-NR1′-C(O)-CR1′R′1-O-，-NR1′-C(O)-CR1′R′1-C R1′R′1-O-，-NR1′-S(O)2-CR1′R′1-，-NR1′-S(O)2-CR1′R′1-CR1′R′1-，-NR1′-C(O)-CR1′R′1 -CR1′R′1-，-NR1′-C(S)-NR1′-CR1′R′1-CR1′R′1-，-NR1′-C(O)-O- 或-NR1′-C(O)-CR1′R1′-(特别是-NH-C(O)-)；和

每个R1′独立地是选自H或可选择地取代的C1-C3直链或支链烷基；和

R31是选自可选择地取代的单环或双环芳基，或可选择地取代的单环或双环 杂芳基， 其中当R19是苯基时，R23，R24，或R25中的至少一个是增溶基团和其中所述化合 物不是2-氯-N-[3-[3-(环己基氨基)咪唑并[1，2-a]吡啶-2-基]苯基]-4-硝基苯甲酰 胺。

典型地，R25选自H，-CH2-N(CH3)2，或

典型地，R23和R24是H。

典型地，R19选自苯基，吡啶基，噻吩基或呋喃基，特别是可选择地取代的 苯基。优选地，苯基是可选择地被下述基团取代：

b)  至多3个-O-CH3基团；或

b)  一个-N(CH3)2基团。

在另一个方面，本发明提供了结构式(XV)的sirtuin-调节化合物或其盐：

其中：

R21选 自-NR1′-C(O)-，-NR1′-S(O)2-，-NR1′-C(O)-NR1′-，-NR1′-C(S)-NR1′-，-NR1′-C(S)-NR1′ -CR1′R′1-，-NR1′-C(O)-CR1′R′1-NR1′-，-NR1′-C(＝NR1′)-NR1′-，-C(O)-NR1′-，-C(O)-NR 1′-S(O)2-，-NR1′-，-CR1′R′1-，-NR1′-C(O)-CR1′＝CR1′-，-NR1′-S(O)2-NR1′-，-NR1′-C(O) -NR1′-S(O)2-，-NR1′-CR1′R′1-C(O)-NR1′-，-CR1′R′1-C(O)-NR1′-，-NR1′-C(O)-CR1′＝CR 1′-CR1′R1′-，-NR1′-C(＝N-CN)-NR1′-，-NR1′-C(O)-CR1′R′1-O-，-NR1′-C(O)-CR1′R′1-C R1′R′1-O-，-NR1′-S(O)2-CR1′R′1-，-NR1′-S(O)2-CR1′R′1-CR1′R′1-，-NR1′-C(O)-CR1′R′1 -CR1′R′1-，-NR1′-C(S)-NR1′-CR1′R′1-CR1′R′1-，-NR1′-C(O)-O- 或-NR1′-C(O)-CR1′R1′-(特别是-NH-C(O)-)；和

每个R1′独立地是选自H或可选择地取代的C1-C3直链或支链烷基；和

R32选自可选择地取代的双环芳基，或可选择地取代的单环或双环杂芳基，其 中：

当R21是-NH-C(O)-时，R32不是未取代的2-呋喃基，2-(3-溴呋喃基)，未取 代的2-噻吩基，未取代的3-吡啶基，未取代的4-吡啶基，

和

当R21是-NR1′-S(O)2-时，R32不是未取代的2-噻吩基或未取代的萘基。

在还有另一个方面，本发明提供了结构式(XVI)的sirtuin-调节化合物或其 盐：

其中：

R21选 自-NR1′-C(O)-，-NR1′-S(O)2-，-NR1′-C(O)-NR1′-，-NR1′-C(S)-NR1′-，-NR1′-C(S)-NR1′ -CR1′R′1-，-NR1′-C(O)-CR1′R′1-NR1′-，-NR1′-C(＝NR1′)-NR1′-，-C(O)-NR1′-，-C(O)-NR 1′-S(O)2-，-NR1′-，-CR1′R′1-，-NR1′-C(O)-CR1′＝CR1′-，-NR1′-S(O)2-NR1′-，-NR1′-C(O) -NR1′-S(O)2-，-NR1′-CR1′R′1-C(O)-NR1′-，-CR1′R′1-C(O)-NR1′-，-NR1′-C(O)-CR1′R′1- O-，-NR1′-C(O)-CR1′R′1-CR1′R′1-O-，-NR1′-S(O)2-CR1′R′1-，-NR1′-S(O)2-CR1′R′1-CR1′ R′1-，-NR1′-C(O)-CR1′＝CR1′-CR1′R1′-，-NR1′-C(＝N-CN)-NR1′-，-NR1′-C(O)-CR1′R′1- CR1′R′1-，-NR1′-C(S)-NR1′-CR1′R′1-CR1′R′1-，-NR1′-C(O)-O- 或-NR1′-C(O)-CR1′R1′-(特别是-NH-C(O)-)；和

每个R1′独立地是选自H或可选择地取代的C1-C3直链或支链烷基；和

R33是可选择地取代的苯基，其中：

当R21是-NH-C(O)-时，R33是除了被卤素，甲基，硝基或甲氧基单取代的苯 基之外的取代的苯基；2-羧基苯基；4-正-戊基苯基；4-乙氧基苯基；2-羧基-3-硝基 苯基；2-氯-4-硝基苯基；2-甲氧基-5-乙基苯基；2，4-二甲氧基苯基；3，4，5-三甲氧基 苯基；2，4-二氯苯基；2，6-二氟苯基；3，5-二硝基苯基；或3，4-二甲基苯基；

当R21是-NR1′-C(O)-CR1′R1′-或-NH-C(O)-CH(CH3)-O时，R33是取代的苯 基；

当R21是-NH-C(O)-CH2时，R33不是未取代的苯基，4-甲氧基苯基；3，4-二 甲氧基苯基或4-氯苯基；

当R21是-NH-C(O)-CH2-O时，R23不是2，4-二(1，1-二甲基丙基)苯基；

当R21是-NH-C(O)-NH-时，R33不是4-甲氧基苯基；和

当R21是-NH-S(O)2-时，R33是取代的苯基，但不是3-甲基苯基，3-三氟甲基 苯基，2，4，5-或2，4，6-三甲基苯基，2，4-或3，4-二甲基苯基，2，5-或3，4-二甲氧基苯基， 2，5-二甲氧基-4-氯苯基，3，6-二甲氧基，4-甲基苯基，2，5-或3，4-二氯苯基，2，5-二乙 氧基苯基，2-甲基-5-硝基苯基，2-乙氧基-5-溴苯基，2-甲氧基-5-溴苯基，2-甲氧基 -3，4-二氯苯基，2-甲氧基-4-甲基-5-溴苯基，3，5-二硝基-4-甲基苯基，3-甲基-4-甲氧 基苯基，3-硝基-4-甲基苯基，3-甲氧基-4-卤代苯基，3-甲氧基-5-氯苯基，4-正-丁氧 基苯基，4-卤代苯基，4-乙基苯基，4-甲基苯基，4-硝基苯基，4-乙氧基苯基，4-乙酰 基氨基苯基，4-甲氧基苯基，4-叔-丁基苯基，或对-联苯基。

在某些实施方案中，R21选 自-NR22-C(O)-，-NR1′-S(O)2-，-NR1′-C(O)-NR1′-，-NR1′-C(S)-NR1′-，-NR1′-C(S)-NR1 ′-CR1′R′1-，-NR1′-C(O)-CR1′R′1-NR1′-，-NR1′-C(＝NR1′)-NR1′-，-C(O)-NR1′-，-C(O)-NR 1′-S(O)2-，-NR1′-，-CR1′R′1-，-NR1′-C(O)-CR1′＝CR1′-，-NR1′-S(O)2-NR1′-，-NR1′-C(O) -NR1′-S(O)2-，-NR1′-CR1′R′1-C(O)-NR1′-，-CR1′R′1-C(O)-NR1′-，-NR1′-C(O)-CR1′R′1- O-，-NR1′-C(O)-CR1′R′1-CR1′R′1-O-，-NR1′-S(O)2-CR1′R′1-，-NR1′-S(O)2-CR1′R′1-CR1′ R′1-，-NR1′-C(O)-CR1′＝CR1′-CR1′R1′-，-NR1′-C(＝N-CN)-NR1′-， 或-NR1′-C(O)-CR1′R1′-；和

每个R1′独立地是选自H或可选择地取代的C1-C3直链或支链烷基；

R22是可选择地取代的C1-C3直链或支链烷基；和

R33是含有增溶基团取代基的苯基，其中：当R21是-NH-S(O)2时，所述 苯基含有一个附加的取代基。

在某些实施方案中，R21选 自-NR22-C(O)-，-NR1′-C(S)-NR1′-，-NR1′-C(S)-NR1′-CR1′R′1-，-NR1′-C(O)-CR1′R′1- NR1′-，-NR1′-C(＝NR1′)-NR1′-，-C(O)-NR1′-，-C(O)-NR1′-S(O)2-，-NR1′-，-CR1′R′1-，- NR1′-C(O)-CR1′＝CR1′-，-NR1′-S(O)2-NR1′-，-NR1′-C(O)-NR1′-S(O)2-，-NR1′-CR1′R′1-C (O)-NR1′-，-CR1′R′1-C(O)-NR1′-，-NR1′-C(O)-CR1′R′1-CR1′R′1-O-，-NR1′-S(O)2-CR1′ R′1-，-NR1′-S(O)2-CR1′R′1-CR1′R′1-，-NR1′-C(O)-CR1′＝CR1′-CR1′R1′-， 或-NR1′-C(＝N-CN)-NR1′-，

每个R1′独立地是选自H或可选择地取代的C1-C3直链或支链烷基；和

R22是可选择地取代的C1-C3直链或支链烷基。

在某些实施方案中，R33是被可选择地在至多3个碳原子上被取代，取代 基独立地选自-O-CH3，-CH3，-N(CH3)2，-S(CH3)，或CN；或在相邻碳原子上被与所 述相邻碳原子桥连的所取代。

在另一个实施方案中，本发明提供了结构式(XVII)的sirtuin-调节化合物或 其盐：

其中：

每个R23和R24独立地是选自H或-CH3，其中R23和R24中的至少一个是 H；和

R29是被下述取代基取代的苯基：

a)  两个-O-CH3基团；

b)  位于2，3和4位的三个-O-CH3基团；或

c)  一个-N(CH3)2基团；和

d)  当R23是CH3时，一个在2或3位的-O-CH3基团， 其中R29是可选择地附加地被增溶基团取代。

在某些个实施方案中，R29是被下述取代基取代的苯基：

a)  位于2，3和4位的三个-O-CH3基团；或

b)  一个-N(CH3)2基团。

在一个方面，本发明提供了结构式(XVIII)的sirtuin-调节化合物或其盐：

其中：

R19选自：

其中：

每个Z10，Z11，Z12和Z13独立地是选自N，CR20，或CR1′；和

每个Z14，Z15和Z16独立地是选自N，NR1′，S，O，CR20，或CR1′，

其中：

Z10，Z11，Z12或Z13中的0至2个是N；

Z14，Z15和Z16中的至少一个是N，NR1′，S或O；

Z14，Z15和Z16中的0至1个是S或O；

Z14，Z15和Z16中的0至2个是N或NR1′；

0至1个R20是增溶基团；和

0至1个R1′是可选择地取代的C1-C3直链或支链烷基；

每个R20独立地是选自H或增溶基团；

R21选 自-NR1′-C(O)-，-NR1′-S(O)2-，-NR1′-C(O)-NR1′-，-NR1′-C(S)-NR1′-，-NR1′-C(S)-NR1′ -CR1′R1′-，-NR1′-C(O)-CR1′R1′-NR1′-，-NR1′-C(＝NR1′)-NR1′-，-C(O)-NR1′-，-C(O)-NR 1′-S(O)2-，-NR1′-，-CR1′R1′-，-NR1′-C(O)-CR1′＝CR1′-，-NR1′-S(O)2-NR1′-，-NR1′-C(O) -NR1′-S(O)2-，-NR1′-CR1′R1′-C(O)-NR1′-，-CR1′R1′-C(O)-NR1′-，-NR1′-C(O)-CR1′＝CR 1′-CR1′R1′-，-NR1′-C(＝N-CN)-NR1′-，-NR1′-C(O)-CR1′R1′-O-，-NR1′-C(O)-CR1′R1′-C R1′R1′-O-，-NR1′-S(O)2-CR1′R1′-，-NR1′-S(O)2-CR1′R1′-CR1′R1′-，-NR1′-C(O)-CR1′R1′ -；-NR1′-C(O)-CR1′R′1-CR1′R′1-，-NR1′-C(S)-NR1′-CR1′R′1-CR1′R′1-， -NR1′-C(O)-O-，其中每个R1′独立地是 选自H或可选择地取代的C1-C3直链或支链烷基；和

R31选自可选择地取代的单环或双环芳基，或可选择地取代的单环或双环 杂芳基，条件是当R19是Z10，Z11，Z12和Z13各自是CH，R20 是H，和R21是-NHC(O)-时，R31不是可选择地取代的苯基。

在某些实施方案中，R19选自：

其中：

每个Z10，Z11，Z12和Z13独立地是选自N，CR20，或CR1′；和

每个Z14，Z15和Z16独立地是选自N，NR1′，S，O，CR20，或CR1′，

其中：

Z10，Z11，Z12或Z13中的0至2个是N；

Z14，Z15和Z16中的至少一个是N，NR1′，S或O；

Z14，Z15和Z16中的0至1个是S或O；

Z14，Z15和Z16中的0至2个是N或NR1′；

0至1个R20是增溶基团；和

0至1个R1′是可选择地取代的C1-C3直链或支链烷基；

每个R20独立地是选自H或增溶基团；

R21选 自-NR1′-C(O)-，-NR1′-S(O)2-，-NR1′-C(O)-NR1′-，-NR1′-C(S)-NR1′-，-NR1′-C(S)-NR1′ -CR1′R1′-，-NR1′-C(O)-CR1′R1′-NR1′-，-NR1′-C(＝NR1′)-NR1′-，-C(O)-NR1′-，-C(O)-NR 1′-S(O)2-，-NR1′-，-CR1′R1′-，-NR1′-C(O)-CR1′＝CR1′-，-NR1′-S(O)2-NR1′-，-NR1′-C(O) -NR1′-S(O)2-，-NR1′-CR1′R1′-C(O)-NR1′-，-CR1′R1′-C(O)-NR1′-，-NR1′-C(O)-CR1′＝CR 1′-CR1′R1′-，-NR1′-C(＝N-CN)-NR1′-，-NR1′-C(O)-CR1′R1′-O-，-NR1′-C(O)-CR1′R1′-C R1′R1′-O-，-NR1′-S(O)2-CR1′R1′-，-NR1′-S(O)2-CR1′R1′-CR1′R1′-，-NR1′-C(O)-CR1′R1′ -；-NR1′-C(O)-CR1′R′1-CR1′R′1-，-NR1′-C(S)-NR1′-CR1′R′1-CR1′R′1-， -NR1′-C(O)-O-，

每个R1′独立地是选自H或可选择地取代的C1-C3直链或支链烷基；和

R31选自可选择地取代的单环或双环芳基，或可选择地取代的单环或双环 杂芳基。

在某些这样的实施方案中，结构式(XVIII)的化合物具有下式或其盐：

其中：

R20选自H或增溶基团；

R21选自-NH-C(O)-，或-NH-C(O)-CH2-；和

R31选自可选择地取代的单环或双环芳基，或可选择地取代的单环或双环杂芳 基。

典型地，结构式(XVIII)的化合物中的R19是选自苯基，吡啶基，噻吩基或呋 喃基，特别是可选择地取代的苯基。

典型地，R20选自H，-CH2-N(CH3)2，

典型地，R31选自苯基，吡唑基，呋喃基，吡啶基，嘧啶基，噻吩基，萘基， 苯并吡唑基，苯并呋喃基，喹啉基，喹喔啉基，或苯并噻吩基，和其中R31是可选 择地取代的。

典型地，R21选自-NH-C(O)-或-NH-C(O)-CH2-。

在某些这样的实施方案中，当R21是-NR1′-C(O)-时，R31不是4-氰基苯基或 和/或当R21是-NR1′-S(O)2-时，R31不是4-甲氧基苯基或4-叔-丁基 苯基。

在某些这样的实施方案中，当R19是和 R21是-NR1′-C(O)-时，R31不是4-氰基苯基或和/或当R19是 和R21是-NR1′-S(O)2-时，R31不是4-甲氧基苯基 或4-叔-丁基苯基。

在另一个方面，本发明提供了结构式(XX)的sirtuin-调节化合物或其盐：

其中：

R19选自：

其中：

每个Z10，Z11，Z12和Z13独立地是选自N，CR20，或CR1′；和

每个Z14，Z15和Z16独立地是选自N，NR1′，S，O，CR20，或CR1′，

其中：

Z10，Z11，Z12或Z13中的0至2个是N；

Z14，Z15和Z16中的至少一个是N，NR1′，O或S；

Z14，Z15和Z16中的0至1个是S或O；

Z14，Z15和Z16中的0至2个是N或NR1′；

0至1个R20是增溶基团；和

0至1个R1′是可选择地取代的C1-C3直链或支链烷基；

每个R20独立地是选自H或增溶基团；

R20a独立地是选自H或增溶基团；

R21选 自-NR1′-C(O)-，-NR1′-S(O)2-，-NR1′-C(O)-NR1′-，-NR1′-C(S)-NR1′-，-NR1′-C(S)-NR1′ -CR1′R1′-，-NR1′-C(O)-CR1′R1′-NR1′-，-NR1′-C(＝NR1′)-NR1′-，-C(O)-NR1′-，-C(O)-NR 1′-S(O)2-，-NR1′-，-CR1′R1′-，-NR1′-C(O)-CR1′＝CR1′-，-NR1′-S(O)2-NR1′-，-NR1′-C(O) -NR1′-S(O)2-，-NR1′-CR1′R1′-C(O)-NR1′-，-CR1′R1′-C(O)-NR1′-，-NR1′-C(O)-CR1′＝CR 1′-CR1′R1′-，-NR1′-C(＝N-CN)-NR1′-，-NR1′-C(O)-CR1′R1′-O-，-NR1′-C(O)-CR1′R1′-C R1′R1′-O-，-NR1′-S(O)2-CR1′R1′-，-NR1′-S(O)2-CR1′R1′-CR1′R1′-，-NR1′-C(O)-CR1′R1′ -；-NR1′-C(O)-CR1′R′1-CR1′R′1-，-NR1′-C(S)-NR1′-CR1′R′1-CR1′R′1-， -NR1′-C(O)-O-，其中

每个R1′独立地是选自H或可选择地取代的C1-C3直链或支链烷基；和 R31选自可选择地取代的单环或双环芳基，或可选择地取代的单环或双环杂芳 基，其中当R19是以及Z10，Z11，Z12和Z13各自是CH时， R20a是增溶基团。

典型地，结构式(XX)化合物中的R19选自苯基，吡啶基，噻吩基或呋喃基，特 别是可选择地取代的苯基。

典型地，R20a选自H，-CH2-N(CH3)2，

典型地，R31选自苯基，吡唑基，呋喃基，吡啶基，嘧啶基，噻吩基，萘基， 苯并吡唑基，苯并呋喃基，喹啉基，喹喔啉基，或苯并噻吩基和其中R31是可选 择地取代的。

典型地，R21选自-NH-C(O)-或-NH-C(O)-CH2-。

在还有另一个方面，本发明提供结构了式(XXI)的sirtuin-调节化合物或其 盐：

其中：

R21选 自-NR1′-C(O)-，-NR1′-S(O)2-，-NR1′-C(O)-NR1′-，-NR1′-C(S)-NR1′-，-NR1′-C(S)-NR1′ -CR1′R1′-，-NR1′-C(O)-CR1′R1′-NR1′-，-NR1′-C(＝NR1′)-NR1′-，-C(O)-NR1′-，-C(O)-NR 1′-S(O)2-，-NR1′-，-CR1′R1′-，-NR1′-C(O)-CR1′＝CR1′-，-NR1′-S(O)2-NR1′-，-NR1′-C(O) -NR1′-S(O)2-，-NR1′-CR1′R1′-C(O)-NR1′-，-CR1′R1′-C(O)-NR1′-，-NR1′-C(O)-CR1′＝CR 1′-CR1′R1′-，-NR1′-C(＝N-CN)-NR1′-，-NR1′-C(O)-CR1′R1′-O-，-NR1′-C(O)-CR1′R1′-C R1′R1′-O-，-NR1′-S(O)2-CR1′R1′-，-NR1′-S(O)2-CR1′R1′-CR1′R1′-，-NR1′-C(O)-CR1′R1′ -；-NR1′-C(O)-CR1′R′1-CR1′R′1-，-NR1′-C(S)-NR1′-CR1′R′1-CR1′R′1-， -NR1′-C(O)-O-，其中

每个R1′独立地是选自H或可选择地取代的C1-C3直链或支链烷基；和

R32是可选择地取代的单环或双环杂芳基，或可选择地取代的双环芳基，其 中：

当R21是-NH-C(O)-CH2-时，R32不是未取代的噻吩-2-基；

当R21是-NH-C(O)-时，R32不是呋喃-2-基，5-溴呋喃-2-基，或2-苯基-4-甲基噻 唑-5-基；

当R21是-NH-S(O)2-时，R32不是未取代的萘基或5-氯噻吩-2-基。

在某些实施方案中，R32选自吡咯基，吡唑基，吡嗪基，呋喃基，吡啶基，嘧 啶基，或噻吩基，和R32是可选择地取代的和是可选择地苯并稠合的。

在某些实施方案中，R21选 自-NR1′-C(O)-，-NR1′-S(O)2-，-NR1′-C(O)-NR1′-，-NR1′-C(S)-NR1′-，-NR1′-C(S)-NR1′ -CR1′R1′-，-NR1′-C(O)-CR1′R1′-NR1′-，-NR1′-C(＝NR1′)-NR1′-，-C(O)-NR1′-，-C(O)-NR 1′-S(O)2-，-NR1′-，-CR1′R1′-，-NR1′-C(O)-CR1′＝CR1′-，-NR1′-S(O)2-NR1′-，-NR1′-C(O) -NR1′-S(O)2-，-NR1′-CR1′R1′-C(O)-NR1′-，-CR1′R1′-C(O)-NR1′-，-NR1′-C(O)-CR1′＝CR 1′-CR1′R1′-，-NR1′-C(＝N-CN)-NR1′-，-NR1′-C(O)-CR1′R1′-O-，-NR1′-C(O)-CR1′R1′-C R1′R1′-O-，-NR1′-S(O)2-CR1′R1′-，-NR1′-S(O)2-CR1′R1′-CR1′R1′-，-NR1′-C(O)-CR1′R1′ -；-NR1′-C(O)-CR1′R′1-CR1′R′1-，-NR1′-C(S)-NR1′-CR1′R′1-CR1′R′1-， -NR1′-C(O)-O-，其中

每个R1′独立地是选自H或可选择地取代的C1-C3直链或支链烷基；和

R32选自苯并呋喃基，甲基呋喃基，苯并噻吩基，吡啶基，吡嗪基，嘧啶基， 吡唑基，其中所述甲基呋喃基，吡啶基，吡嗪基，嘧啶基或吡唑基是可选择地苯 并稠合的和其中R32是可选择地取代的或进一步被取代的。

在另一个方面，本发明提供了结构式(XXII)的sirtuin-调节化合物或其盐：

其中：

R21选自 -NR1′-C(O)-，-NR1′-S(O)2-，-NR1′-C(O)-NR1′-，-NR1′-C(S)-NR1′-，-NR1′-C(S)-NR1′-C R1′R1′-，-NR1′-C(O)-CR1′R1′-NR1′-，-NR1′-C(＝NR1′)-NR1′-，-C(O)-NR1′-，-C(O)-NR1′- S(O)2-，-NR1′-，-CR1′R1′-，-NR1′-C(O)-CR1′＝CR1′-，-NR1′-S(O)2-NR1′-，-NR1′-C(O)- NR1′-S(O)2-，-NR1′-CR1′R1′-C(O)-NR1′-，-CR1′R1′-C(O)-NR1′-，-NR1′-C(O)-CR1′＝CR1′ -CR1′R1′-，-NR1′-C(＝N-CN)-NR1′-，-NR1′-C(O)-CR1′R1′-，-NR1′-C(O)-CR1′R1′-CR1′R 1′-O-，-NR1′-C(O)-CR1′R1′-O-，-NR1′-S(O)2-CR1′R1′-，-NR1′-S(O)2-CR1′R1′-CR1′R1′-，

其中每个R1′独立地是选自H或可选 择地取代的C1-C3直链或支链烷基；和

R33是可选择地取代的苯基，其中：

当R21是-NR1′-C(O)-时，R1′不是H；

当R21是-NH-C(O)-CH2或-NH-C(O)-CH2-O-时，R33不是未取代的苯基或 4-卤代苯基；和

当R21是-NH-S(O)2-时，R33不是未取代的苯基，2，4-或3，4-二甲基苯基，2，4- 二甲基-5-甲氧基苯基，2-甲氧基-3，4-二氯苯基，2-甲氧基，5-溴苯基-3，4-二氧亚乙 基苯基，3，4-二甲氧基苯基，3，4-二氯苯基，3，4-二甲基苯基，3-或4-甲基苯基，4-烷 氧基苯基，4-苯氧基苯基，4-卤代苯基，4-联苯基，或4-乙酰基氨基苯基。

优选地，R21选自-NH-C(O)-或-NH-C(O)-CH2-。

在一个方面，本发明提供了结构式(XXII)的sirtuin-调节化合物或其盐：

其中：

R21是选自-NH-C(O)-，或-NH-C(O)-CH2-；和

R33是被下述取代基取代的苯基：

e)  一个-N(CH3)2基团；

f)  一个在3位的CN基团；

g)  一个-S(CH3)基团；或

桥连3和4位的

在另一个方面，本发明提供了结构式(XXIII)的sirtuin-调节化合物或其盐：

其中：

每个R20和R20a独立地是选自H或增溶基团；

每个R1′，R1″和R1″′独立地是选自H或可选择地取代的C1-C3直链或 支链烷基；

R21选 自-NR1′-C(O)-，-NR1′-S(O)2-，-NR1′-C(O)-NR1′-，-NR1′-C(S)-NR1′-，-NR1′-C(S)- NR1′-CR1′R′1-，-NR1′-C(O)-CR1′R1′-NR1′-，-NR1′-C(＝NR1′)-NR1′-，-NR1′-C(O)-CR1 ′＝CR1′-，-NR1′-S(O)2-NR1′-，-NR1′-C(O)-NR1′-S(O)2-，-NR1′-CR1′R′1-C(O)-NR1′-，- NR1′-C(O)-CR1′＝CR1′-CR1′R1′-，-NR1′-C(＝N-CN)-NR1′-，-NR1′-C(O)-CR1′R′1-O-， -NR1′-C(O)-CR1′R1′-CR1′R1′-O-，-NR1′-S(O)2-CR1′R′1-，-NR1′-S(O)2-CR1′R1′-CR1′ R1′-，或-NR1′-C(O)-CR1′R1′-；和

R31选自可选择地取代的单环或双环芳基，或可选择地取代的单环或双 环杂芳基，条件是：

当R21-NH-C(O)-时，R31不是3，5-二硝基苯基，4-丁氧基苯 基，

当R21是-NH-C(O)-和每个R20，R20a，R1′，R1″和R1″′是氢时，R31不是

未取代的苯基，2-或4-硝基苯基，2，4-二硝基苯基，2-或 4-氯苯基，2-溴苯基，4-氟苯基，2，4-二氯苯基，2-羰基苯基，2-叠氮基苯基，2-或 4-氨基苯基，2-乙酰氨基苯基，4-甲基苯基，或4-甲氧基苯基；

当R21是-NH-C(O)-，R1″是甲基；和每个R20，R20a，R1′和R1″′是氢时，R31 不是2-甲基氨基苯基，

当R21是-NH-C(O)-CH2-或NH-C(S)-NH-，和每个R20，R20a，R1′，R1″和R1″′ 是氢时，R31不是未取代的苯基；

当R21是-NH-S(O)2-，R1″是氢或甲基，和每个R20，R20a，R1′和R1″′是氢时， R31不是4-甲基苯基；和

当R21是-NH-S(O)2-，R20a是氢或-CH2-N(CH2CH3)2，和每个R20，R1′，R1″和 R1″′是氢时，R31不是

在某些实施方案中，R21是选自-NH-C(O)-，或-NH-C(O)-NR1′-。

在某些实施方案中，R31是选自可选择地取代的苯基，喹喔啉基或喹啉 基。例如，R31是可选择地被至多3个取代基取代，所述取代基独立地选 自-OCH3，-N(CH3)2，或增溶基团。R31的合适例子包括4-二甲基氨基苯基，3，4- 二甲氧基苯基，3，5-二甲氧基苯基，3，4，5-三甲氧基苯基，3-甲氧基-4-((哌嗪-1-基) 甲基)苯基，3-甲氧基-4-((吗啉代)甲基)苯基，3-甲氧基-4-((吡咯烷-1-基)甲基)苯基， 未取代的苯基，未取代的喹喔啉基，和未取代的喹啉基。

在一个特别的方面，本发明提供了结构式(XXIII)的sirtuin-调节化合物或 其盐：

其中：

每个R20和R20a独立地是选自H或增溶基团；

每个R1′，R1″和R1″′独立地是选自H或可选择地取代的C1-C3直链或 支链烷基；

R21选 自-NR1′-C(O)-，-NR1′-S(O)2-，-NR1′-C(O)-NR1′-，-NR1′-C(S)-NR1′-，-NR1′-C(S)- NR1′-CR1′R′1-，-NR1′-C(O)-CR1′R1′-NR1′-，-NR1′-C(＝NR1′)-NR1′-，-NR1′-C(O)-CR1 ′＝CR1′-，-NR1′-S(O)2-NR1′-，-NR1′-C(O)-NR1′-S(O)2-，-NR1′-CR1′R′1-C(O)-NR1′-，- NR1′-C(O)-CR1′＝CR1′-CR1′R1′-，-NR1′-C(＝N-CN)-NR1′-，-NR1′-C(O)-CR1′R′1-O-， -NR1′-C(O)-CR1′R1′-CR1′R1′-O-，-NR1′-S(O)2-CR1′R′1-，-NR1′-S(O)2-CR1′R1′-CR1′ R1′-，或-NR1′-C(O)-CR1′R1′-；和

R31选自可选择地取代的单环或双环芳基，或可选择地取代的单环或双 环杂芳基，

其中：

i)至少一个R20是增溶基团或至少一个R1″′是可选择地取代的C1-C3直 链或支链烷基或二者都是；或者

ii)R20a是增溶基团但不是CH2-N(CH2CH3)2。

在某些实施方案中，R21选自-NH-C(O)-，或-NH-C(O)-NR1′-。

在某些实施方案中，R31选自可选择地取代的苯基，喹喔啉基或喹啉基。 例如，R31可选择地被至多3个取代基取代，所述取代基独立地选 自-OCH3，-N(CH3)2，或增溶基团。R31的合适例子包括4-二甲基氨基苯基，3，4-二 甲氧基苯基，3，5-二甲氧基苯基，3，4，5-三甲氧基苯基，3-甲氧基-4-((哌嗪-1-基)甲 基)苯基，3-甲氧基-4-((吗啉代)甲基)苯基，3-甲氧基-4-((吡咯烷-1-基)甲基)苯基， 未取代的苯基，未取代的喹喔啉基，和未取代的喹啉基。

在还有另一个方面，本发明提供了结构式(XXIV)的sirtuin-调节化合物或 其盐：

其中：

每个R20和R20a独立地是选自H或增溶基团；

每个R1′，R1″和R1″′独立地是选自H或可选择地取代的C1-C3直链或 支链烷基；

R21选 自-NR23-C(O)-，-NR1′-S(O)2-，-NR1′-C(O)-NR1′-，-NR1′-C(S)-NR1′-，-NR1′-C(S)- NR1′-CR1′R′1-，-NR1′-C(O)-CR1′R1′-NR1′-，-NR1′-C(＝NR1′)-NR1′-，-NR1′-C(O)-CR1 ′＝CR1′-，-NR1′-S(O)2-NR1′-，-NR1′-C(O)-NR1′-S(O)2-，-NR1′-CR1′R′1-C(O)-NR1′-，- NR1′-C(O)-CR1′＝CR1′-CR1′R1′-，-NR1′-C(＝N-CN)-NR1′-，-NR1′-C(O)-CR1′R′1-O-， -NR1′-C(O)-CR1′R1′-CR1′R1′-O-，-NR1′-S(O)2-CR1′R′1-，-NR1′-S(O)2-CR1′R1′-CR1′ R1′-，或-NR1′-C(O)-CR1′R1′-；和

R31选自可选择地取代的单环或双环芳基，或可选择地取代的单环或双 环杂芳基，条件是：

当R21是-NH-C(O)-CH2-时，R31不是2-甲基苯基，或3，4-二甲氧基苯基；

当R21是-NH-C(O)-CH＝CH-时，R31不是2-氯苯基；

当R21是-NH-C(O)-NH-时，R31不是未取代的苯并咪唑基；

当R21是-NH-S(O)2-，和每个R20，R20a，R1′，R1″和R1″′是氢时，R31不是未取 代的苯基，4-氯苯基，4-甲基苯基，或4-乙酰氨基苯基；

当R21是-NH-S(O)2-，每个R1′和R1″′是甲基或氢，和每个R20，R20a，和R1″ 是氢时，R31不是4-硝基苯基；

当R21是-NH-C(O)-CH2-O-，R1″′是甲基或氢，和每个R20，R20a，R1′，和R1″ 是氢时，R31不是2，3-，2，5-，2，6-，3，4-或3，5-二甲基苯基，2，4-二氯甲基，2，4-二甲 基-6-溴苯基，2-或4-氯苯基，2-(1-甲基丙基)苯基，5-甲基-2-(1-甲基乙基)苯基， 2-或4-甲基苯基，2，4-二氯-6-甲基苯基，硝基苯基，2，4-二甲基-6-硝基苯基，2- 或4-甲氧基苯基，4-乙酰基-2-甲氧基苯基，4-氯-3，5-二甲基苯基，3-乙基苯基， 4-溴苯基，4-环己基苯基，4-(1-甲基丙基)苯基，4-(1-甲基乙基)苯基，4-(1，1-二甲 基乙基)苯基，或未取代的苯基；

当R21是-NH-C(O)-CH2-，R1″′是甲基或氢，和每个R20，R20a，R1′，和R1″是 氢时，R31不是未取代的萘基，4-氯苯基，4-硝基苯基，4-甲氧基苯基，未取代的 苯基，未取代的噻吩基

当R21是-NH-C(O)-CH2-，R1′是甲基，和每个R20，R20a，R1″，和R1″′是氢时， R31不是未取代的苯基；

当R21是-NH-C(O)-CH＝CH，R1″′是甲基或氢，和每个R20，R20a，R1′，和R1″ 是氢时，R31不是未取代的呋喃基，硝基苯基取代的呋喃基，2，4-二氯苯基，3，5- 二氯-2-甲氧基苯基，3-或4-硝基苯基，4-甲氧基苯基，未取代的苯基，或硝基取 代的噻吩基；

当R21是-NH-C(O)-CH(CH2CH3)-，和每个R20，R20a，R1′，R1″，和R1″′是氢 时，R31不是未取代的苯基；

当R21是-NH-C(O)-CH(CH3)-O-，R1″′是甲基或氢，和每个R20，R20a，R1′， 和R1″是氢时，R31不是2，4-二氯苯基。

在一个特别的方面，本发明提供了结构式(XXIV)的sirtuin-调节化合物或 其盐：

其中：

每个R20和R20a独立地是选自H或增溶基团，和R20和R20a中的至少 一个是增溶基团；

每个R1′，R1″和R1″′独立地是选自H或可选择地取代的C1-C3直链或 支链烷基；

R21选 自-NR23-C(O)-，-NR1′-S(O)2-，-NR1′-C(O)-NR1′-，-NR1′-C(S)-NR1′-，-NR1′-C(S)- NR1′-CR1′R′1-，-NR1′-C(O)-CR1′R1′-NR1′-，-NR1′-C(＝NR1′)-NR1′-，-NR1′-C(O)-CR1 ′＝CR1′-，-NR1′-S(O)2-NR1′-，-NR1′-C(O)-NR1′-S(O)2-，-NR1′-CR1′R′1-C(O)-NR1′-，- NR1′-C(O)-CR1′＝CR1′-CR1′R1′-，-NR1′-C(＝N-CN)-NR1′-，-NR1′-C(O)-CR1′R′1-O-， -NR1′-C(O)-CR1′R1′-CR1′R1′-O-，-NR1′-S(O)2-CR1′R′1-，-NR1′-S(O)2-CR1′R1′-CR1′ R1′-，或-NR1′-C(O)-CR1′R1′-，其中R23是可选择地取代的C1-C3直链或支链 烷基；和

R31选自可选择地取代的单环或双环芳基，或可选择地取代的单环或双 环杂芳基。

在某些实施方案中，当R21是-NH-C(O)-CH2-时，R31不是2-甲基苯基；或 3，4-二甲氧基苯基；当R21是-NH-C(O)-CH＝CH-时，R31不是2-氯苯基；和/或当 R21是-NH-C(O)-NH-时，R31不是未取代的苯并咪唑基。

在另一个方面，本发明提供了结构式(XXV)的sirtuin-调节化合物或其盐：

其中：

每个R20和R20a独立地是选自H或增溶基团，其中R20和R20a中的至少一 个是增溶基团；

每个R1′，R1″和R1″′独立地是选自H或可选择地取代的C1-C3直链或支链 烷基；和

R32是可选择地取代的苯基。

在某些实施方案中，R32选自3，4-二甲氧基苯基，2，6-二甲氧基苯基，或2，4- 二甲氧基苯基；其中R32是进一步可选择地被增溶基团取代。

在某些实施方案中，R32不是未取代的噻吩基；未取代的苯基；2-甲基苯基； 4-氟苯基；4-甲氧基苯基；4-甲基苯基；3，4-二氧亚乙基撑苯基；3-乙酰基氨基-4-甲 基苯基；3-[(6-氨基-1-氧代己基)氨基]-4-甲基苯基；3-氨基-4-甲基苯基；3，5-二甲 氧基苯基；3-卤代-4-甲氧基苯基；3-硝基-4-甲基苯基；或4-丙氧基苯基。

在一个方面，本发明提供了结构式(XXVI)的sirtuin-调节化合物或其盐：

其中：

每个R20和R20a独立地是选自H或增溶基团；

每个R1′，R1″和R1″′独立地是选自H或可选择地取代的C1-C3直链或 支链烷基；和

R33选自可选择地取代的杂芳基或可选择地取代的双环芳基，条件是：

当每个R1′和R1″′是氢或甲基和每个R1″，R20和R20a是氢时，R33不是 5，6，7，8-四氢萘基，未取代的苯并呋喃基，未取代的苯并噻唑基，氯-或硝基取 代的苯并噻吩基，未取代的呋喃基，苯基-，溴-或硝基取代的呋喃基，二甲基 取代的异噁唑基，未取代的萘基，5-溴萘基，4-甲基萘基，1-或3-甲氧基萘基， 偶氮取代的萘基，未取代的吡嗪基，S-甲基取代的吡啶基，未取代的吡啶基， 噻吩基-或苯基取代的喹啉基，氯-，溴-或硝基取代的噻吩基，未取代的噻吩 基，或

在一个特别的方面，本发明提供了结构式(XXVI)的sirtuin-调节化合物或 其盐：

其中：

每个R20和R20a独立地是选自H或增溶基团，其中R20或R20a中的至 少一个是增溶基团；

每个R1′，R1″和R1″′独立地是选自H或可选择地取代的C1-C3直链或 支链烷基；和

R33选自可选择地取代的杂芳基或可选择地取代的双环芳基。

在另一个方面，本发明提供了结构式(XXVII)的sirtuin-调节化合物：

其中：

每个R20和R20a独立地是选自H或增溶基团；

每个R1′和R1″独立地是选自H或可选择地取代的C1-C3直链或支链 烷基；

R19选自：

其中：

每个Z10，Z11，Z12和Z13独立地是选自N，CR20，或CR1′；和

每个Z14，Z15和Z16独立地是选自N，NR1′，S，O，CR20，或CR1′，其中：

Z10，Z11，Z12或Z13中的0至2个是N；

Z14，Z15和Z16中的至少一个N，NR1′，S或O；

Z14，Z15和Z16中的0至1个是S或O；

Z14，Z15和Z16中的0至2个是N或NR1′；

0至1个R20是增溶基团；

0至1个R1′是可选择地取代的C1-C3直链或支链烷基；和

R21选 自-NR1′-C(O)-，-NR1′-S(O)2-，-NR1′-C(O)-NR1′-，-NR1′-C(S)-NR1′-，-NR1′-C(S)-NR1′ -CR1′R1′-，-NR1′-C(O)-CR1′R1′-NR1′-，-NR1′-C(＝NR1′)-NR1′-，-C(O)-NR1′-，-C(O)-NR 1′-S(O)2-，-NR1′-，-CR1′R1′-，-NR1′-C(O)-CR1′＝CR1′-，-NR1′-S(O)2-NR1′-，-NR1′-C(O) -NR1′-S(O)2-，-NR1′-CR1′R1′-C(O)-NR1′-，-CR1′R1′-C(O)-NR1′-，-NR1′-C(O)-CR1′＝CR 1′-CR1′R1′-，-NR1′-C(＝N-CN)-NR1′-，-NR1′-C(O)-CR1′R1′-O-，-NR1′-C(O)-CR1′R1′-CR1 ′R1′-O-，-NR1′-S(O)2-CR1′R1′-，-NR1′-S(O)2-CR1′R1′-CR1′R′1-，或-NR1′-C(O)-CR1′R1′-； 和

R31选自可选择地取代的单环或双环芳基，或可选择地取代的单环或双环杂 芳基，

条件是当R21是-NH-C(O)-和R19是时，R31不是未 取代的吡啶基，2，6-二甲氧基苯基，3，4，5-三甲氧基苯基或未取代的呋喃基。

在一个特别的方面，本发明提供了结构式(XXVII)的sirtuin-调节化合物或 其盐：

其中：

每个R20和R20a独立地是选自H或增溶基团；

每个R1′和R1″独立地是选自H或可选择地取代的C1-C3直链或支链 烷基；

R19选自：

其中：

每个Z10，Z11，Z12和Z13独立地是选自N，CR20，或CR1′；和

每个Z14，Z15和Z16独立地是选自N，NR1′，S，O，CR20，或CR1′，其中：

Z10，Z11，Z12或Z13中的0至2个是N；

Z14，Z15和Z16中的至少一个是N，NR1′，S或O；

Z14，Z15和Z16中的0至1个是S或O；

Z14，Z15和Z16中的0至2个是N或NR1′；

0至1个R20是增溶基团；

0至1个R1′是可选择地取代的C1-C3直链或支链烷基；和

R21是选 自-NR1′-C(O)-，-NR1′-S(O)2-，-NR1′-C(O)-NR1′-，-NR1′-C(S)-NR1′-，-NR1′-C(S)-NR1′ -CR1′R′1-，-NR1′-C(O)-CR1′R1′-NR1′-，-NR1′-C(＝NR1′)-NR1′-，-C(O)-NR1′-，-C(O)-NR 1′-S(O)2-，-NR1′-，-CR1′R′1-，-NR1′-C(O)-CR1′＝CR1′-，-NR1′-S(O)2-NR1′-，-NR1′-C(O)- NR1′-S(O)2-，-NR1′-CR1′R′1-C(O)-NR1′-，-CR1′R′1-C(O)-NR1′-，-NR1′-C(O)-CR1′＝CR1′ -CR1′R1′-，-NR1′-C(＝N-CN)-NR1′-，-NR1′-C(O)-CR1′R′1-O-，-NR1′-C(O)-CR1′R1′-CR1′ R1′-O-，-NR1′-S(O)2-CR1′R′1-，-NR1′-S(O)2-CR1′R1′-CR1′R1′-，或-NR1′-C(O)-CR1′R1′-； 和

R31选自可选择地取代的单环或双环芳基，或可选择地取代的单环或 双环杂芳基，条件是：

当R21是-NH-C(O)-时，R19不是吡唑基；

当R21是-NH-，和R19是噻唑基时，R31不是可选择地取代的苯基或可 选择地取代的吡啶基；

当R21是-NH-C(O)-CH2-，和R19是吡唑基时，R31不是未取代的吲哚 基或未取代的苯基；

当R21是-NH-C(O)-CH2-，和R19是时，R31不是 2-甲基苯基或3，4-二甲氧基苯基；

当R21是-NH-C(O)-CH＝CH-，和R19是时，R31 不是2-氯苯基；

当R21是-NH-C(O)-NH-，和R19是吡唑基时，R31不是未取代的异噁 唑基，未取代的萘基，未取代的苯基，2，6-二氟苯基，2，5-二甲基苯基，3，4-二 氯苯基，或4-氯苯基；

当R21是-NH-C(O)-NH-，和R19是时，R31不 是未取代的苯并咪唑基；

当R21是-NH-，和R19是吡唑基时，R31不是未取代的吡啶基；

当R20a是增溶基团，R19是1-甲基吡咯基和R21是-NH-C(O)-时，R31 不是未取代的苯基，未取代的呋喃基，未取代的吡咯基，未取代的吡唑基， 未取代的异喹啉基，未取代的苯并噻吩基，氯取代的苯并噻吩基，2-氟-4- 氯苯基或被增溶基团单取代的苯基；

当R20a是增溶基团，R19是噻吩基和R21是-NH-C(O)-时，R31不是未取 代的苯基；

当R20a是增溶基团，R19是甲基咪唑基和R21是-NH-C(O)-时，R31不 是1-甲基-4-(1，1-二甲基乙氧基羰基氨基)吡咯-2-基或被增溶基团单取代的苯 基；

当R21是-NH-和R19是吡啶基，噁二唑基(oxadiazolyl)或噻二唑基 时，R31不是未取代的苯基，3-甲氧基苯基或4-甲氧基苯基；

当R21是-NH-C(O)-和R19是噻唑基或嘧啶基时，R31不是未取代的 苯基；

当R21是-NH-C(O)-和R19是时，R31不是未取 代的吡啶基，未取代的噻吩基，未取代的苯基，2-甲基苯基，4-氟苯基，4-甲 氧基苯基，4-甲基苯基，3，4-二氧亚乙基苯基，3-乙酰基氨基-4-甲基苯基， 3-[(6-氨基-1-氧代己基)氨基]-4-甲基苯基，3-氨基-4-甲基苯基，2，6-二甲氧 基苯基， 3，5-二甲氧基苯基，3-卤代-4-甲氧基苯基，3-硝基-4-甲基苯基，4-丙 氧基苯基，3，4，5-三甲氧基苯基或未取代的呋喃基；

当R21是-NH-C(O)-和R19是时，R31不是3，5-二硝基苯基， 4-丁氧基苯基，

在某些实施方案中，R21选自-NH-C(O)-或-NH-C(O)-NR1′-，优选 -NH-C(O)-。

在某些实施方案中，R31选自可选择地取代的苯基，喹喔啉基或喹啉基； 优选可选择地取代的苯基。例如，R31是可选择地被至多3个取代基取代，所述 取代基独立地选自-OCH3，-N(CH3)2，或增溶基团。R31的合适例子包括4-二甲基 氨基苯基；3，4-二甲氧基苯基；3，5-二甲氧基苯基；3，4，5-三甲氧基苯基；3-甲氧基 -4-((哌嗪-1-基)甲基)苯基；3-甲氧基-4-((吗啉代)甲基)苯基；3-甲氧基-4-((吡咯烷 -1-基)甲基)苯基；未取代的苯基；未取代的喹喔啉基；和未取代的喹啉基。R31的 优选例子包括3，4-二甲氧基苯基；2，6-二甲氧基苯基；或2，4-二甲氧基苯基；其中 R31进一步可选择地被增溶基团所取代。

在优选的实施方案中，R21是-NH-C(O)-和R31是选自3-甲氧基苯基；3，4- 二甲氧基苯基；3，4，5-三甲氧基苯基；或4-二甲基氨基苯基。

在某些实施方案中，当R21是-NH-C(O)-时，R19不是

在某些实施方案中，当R21是-NH-C(O)-时，R19不是可选择地取代的吡唑 基，噻唑基，噻吩基，吡咯基或嘧啶基；当R21 是-NH-C(O)-CH2-或-NH-C(O)-NH-时，R19不是吡唑基；和/或当R21是-NH-时， R19不是可选择地取代的吡啶基，噻唑基，吡唑基，噻二唑基，或噁二唑基 (oxadiazolyl)。

在一个更特别的方面，本发明提供了结构式(XXVII)的sirtuin-调节化合物 或其盐：

其中：

每个R20和R20a独立地是选自H或增溶基团；

每个R1′和R1″独立地是选自H或可选择地取代的C1-C3直链或支链 烷基；

R19选自：

其中：

每个Z10，Z11，Z12和Z13独立地是选自N，CR20，或CR1′；和

每个Z14，Z15和Z16独立地是选自N，NR1′，S，O，CR20，或CR1′，其中：

Z10，Z11，Z12或Z13中的0至2个是N；

Z14，Z15和Z16中的至少一个是N，NR1′，S或O；

Z14，Z15和Z16中的0至1个是S或O；

Z14，Z15和Z16中的0至2个是N或NR1′；

0至1个R20是增溶基团；

0至1个R1″′是可选择地取代的C1-C3直链或支链烷基；和

R21选 自-NR1′-C(O)-，-NR1′-S(O)2-，-NR1′-C(O)-NR1′-，-NR1′-C(S)-NR1′-，-NR1′-C(S)- NR1′-CR1′R′1-，-NR1′-C(O)-CR1′R1′-NR1′-，-NR1′-C(＝NR1′)-NR1′-，-NR1′-C(O)-CR1 ′＝CR1′-，-NR1′-S(O)2-NR1′-，-NR1′-C(O)-NR1′-S(O)2-，-NR1′-CR1′R′1-C(O)-NR1′-，- NR1′-C(O)-CR1′＝CR1′-CR1′R1′-，-NR1′-C(＝N-CN)-NR1′-，-NR1′-C(O)-CR1′R′1-O-， -NR1′-C(O)-CR1′R1′-CR1′R1′-O-，-NR1′-S(O)2-CR1′R′1-，-NR1′-S(O)2-CR1′R1′-CR1′ R1′-，或-NR1′-C(O)-CR1′R1′-；和

R31选自可选择地取代的单环或双环芳基，或可选择地取代的单环或双 环杂芳基，条件是：

当R21是-NH-C(O)-时，R19不是吡唑基；

当R21是-NH-C(O)-CH2-，和R19是吡唑基时，R31不是未取代的吲哚基或 未取代的苯基；

当R21是-NH-C(O)-NH-，和R19是吡唑基时，R31不是未取代的异噁唑基， 未取代的萘基，未取代的苯基，2，6-二氟苯基；2，5-二甲基苯基；3，4-二氯苯基； 或4-氯苯基；

当R20a是增溶基团，R19是1-甲基吡咯基和R21是-NH-C(O)-时，R31不是 未取代的苯基；未取代的呋喃基；未取代的吡咯基；未取代的吡唑基；未取 代的异喹啉基；未取代的苯并噻吩基；氯取代的苯并噻吩基；2-氟-4-氯苯基 或被增溶基团单取代的苯基；

当R20a是增溶基团，R19是噻吩基和R21是-NH-C(O)-时，R31不是未取代 的苯基；

当R20a是增溶基团，R19是甲基咪唑基和R21是-NH-C(O)-时，R31不是1- 甲基-4-(1，1-二甲基乙氧基羰基氨基)吡咯-2-基或被增溶基团单取代的苯基；和

当R21是-NH-C(O)-和R19是噻唑基或嘧啶基时，R31不是未取代的苯基。

在某些实施方案中，R21选自-NH-C(O)-或-NH-C(O)-NR1′-，优选 -NH-C(O)-。

在某些实施方案中，R31选自可选择地取代的苯基，喹喔啉基或喹啉基； 优选可选择地取代的苯基。例如，R31可选择地被至多3个取代基取代，所述取 代基独立地选自-OCH3，-N(CH3)2，或增溶基团。R31的合适例子包括4-二甲基氨 基苯基；3，4-二甲氧基苯基；3，5-二甲氧基苯基；3，4，5-三甲氧基苯基；3-甲氧基 -4-((哌嗪-1-基)甲基)苯基；3-甲氧基-4-((吗啉代)甲基)苯基；3-甲氧基-4-((吡咯烷 -1-基)甲基)苯基；未取代的苯基；未取代的喹喔啉基；和未取代的喹啉基。R31的 优选例子包括3，4-二甲氧基苯基；2，6-二甲氧基苯基；或2，4-二甲氧基苯基；其中 R31进一步可选择地被增溶基团所取代。

在优选的实施方案中，R21是-NH-C(O)-和R31是选自3-甲氧基苯基； 3，4-二甲氧基苯基；3，4，5-三甲氧基苯基；或4-二甲基氨基苯基。

在还有另一个方面，本发明提供了结构式(XXVIII)的化合物或其盐：

其中：

每个R20和R20a独立地是选自H或增溶基团；

每个R1′和R1″独立地是选自H或可选择地取代的C1-C3直链或支链 烷基；

R29选自：

其中：

每个Z10，Z11，Z12和Z13独立地是选自N，CR20，或CR1′，其中Z10，Z11， Z12或Z13中的一个是N；和

0至1个R20是增溶基团；

0至1个R1″′是可选择地取代的C1-C3直链或支链烷基；和

R21选 自-NR1′-C(O)-，-NR1′-S(O)2-，-NR1′-C(O)-NR1′-，-NR1′-C(S)-NR1′-，-NR1′-C(S)- NR1′-CR1′R′1-，-NR1′-C(O)-CR1′R1′-NR1′-，-NR1′-C(＝NR1′)-NR1′-，-NR1′-C(O)-CR1 ′＝CR1′-，-NR1′-S(O)2-NR1′-，-NR1′-C(O)-NR1′-S(O)2-，-NR1′-CR1′R′1-C(O)-NR1′-，- NR1′-C(O)-CR1′＝CR1′-CR1′R1′-，-NR1′-C(＝N-CN)-NR1′-，-NR1′-C(O)-CR1′R′1-O-， -NR1′-C(O)-CR1′R1′-CR1′R1′-O-，-NR1′-S(O)2-CR1′R′1-，-NR1′-S(O)2-CR1′R1′-CR1′ R1′-，或-NR1′-C(O)-CR1′R1′-；和

R31选自可选择地取代的单环或双环芳基，或可选择地取代的单环或双 环杂芳基。

在某些实施方案中，R31可选择地取代的苯基，例如3-甲氧基苯基，3，4- 二甲氧基苯基，3，4，5-三甲氧基苯基，或4-二甲基氨基苯基。

在某些实施方案中，R21是-NH-C(O)-。

在优选的实施方案中，R21是-NH-C(O)-和R31是可选择地取代的苯基，例 如3-甲氧基苯基，3，4-二甲氧基苯基，3，4，5-三甲氧基苯基，或4-二甲基氨基苯基。

在另一个方面，例如当sirtuin调节剂是sirtuin抑制剂时，本发明提供了新 的sirtuin-调节化合物或其盐(VI)：

其中：

Het是可选择地取代的杂环芳基基团；和

Ar′是可选择地取代的碳环或杂环芳基基团。

在某些实施方案中，Het包含一个N杂原子和1至2个独立地选自N， O或S的附加杂原子，例如噁唑并吡啶基。

在某些实施方案中，Ar′是选自可选择地取代的苯基，苯并噻唑基，或苯并 噁唑基。当Ar′是取代的苯基时，典型地它是被1至3个取代基所取代，所述取 代基独立地选自卤素，甲基，O-甲基，S-甲基或N(CH3)2，吗啉代，或3，4-二氧亚甲 基。

本发明的化合物，包括本发明的新化合物，都可被用于此处所描述的方法 中。

此处所描述的化合物及其盐还包括他们相应的水合物(例如，半水合物，一 水合物，二水合物，三水合物，四水合物)和溶剂化物。制备溶剂化物和水合物 的合适的溶剂可被本领域普通技术人员一般的选择出来。

化合物及其盐可以呈现无定形或晶形的形式(包括共结晶和多晶形)。

在以上所描述的化合物中，作为可能的变量的值公开的二价基团可具有任 一的取向，条件是该取向导致形成稳定的分子。然而，二价基团(例如，-NR1′-C(O)-) 的左手端优选与二价亚芳基或杂亚芳基基团(例如，R19)相连，而二价基团的右 手端与一价芳基基团(例如，R31)相连。

除非另外指明，具有羟基取代基的本发明Sirtuin-调节化合物还包括相关 的次生代谢物，例如，磷酸盐，硫酸盐，酰基(例如，乙酰基，脂肪酸酰基)和糖 (例如，葡糖醛酸(glucurondate)，葡萄糖)衍生物(例如，羟基基团的衍生物)， 特别是硫酸盐，酰基和糖衍生物。换句话说，-OH取代基团还包括-OSO3-M+， 其中M+是合适的阳离子(优选H+，NH4+或碱金属离子例如Na+或K+)和糖例如

这些基团一般通过水解或通过代谢(例如酶催)裂解分裂成-OH。

在某些实施方案中，本发明化合物排除了表4-6中公开的一种或多种物质。 在某些这样的实施方案中，本发明的化合物排除了化合物7。

本发明Sirtuin-调节化合物有利地调节sirtuin蛋白的水平和/或活性，特别是 sirtuin蛋白的脱乙酰酶活性。

单独地或除上述性质之外，在有效调节sirtuin蛋白(例如，比如SIRT1和/或 SIRT3蛋白)的脱乙酰酶活性的化合物浓度下，本发明一些sirtuin-调节化合物不 同时具有一种或多种下述的活性：抑制PI3-激酶，抑制醛糖还原酶，抑制酪氨 酸激酶，反式激活EGFR酪氨酸激酶，扩张冠状脉或解痉活性。

烷基基团是完全饱和的直链、支链或环状非芳香烃。一般地，直链或支链 烷基基团具有1至约20个碳原子，优选1至约10个碳原子，而环状烷基基团 具有3至约10个碳原子，优选3至约8个碳原子。直链和支链烷基基团的例子 包括甲基，乙基，正丙基，异丙基，正丁基，仲丁基，叔丁基，戊基，己基，戊基 和辛基。C1-C4直链或支链烷基基团也称为″低级烷基″基团。

烯基基团是含有一个或多个双键的直链、支链或环状非芳香烃。一般地， 双键不位于烯基基团的末端，这样双键就不与另一个官能团相邻。

炔基基团是含有一个或多个三键的直链、支链或环状非芳香烃。一般地，三 键不位于炔基基团的末端，这样三键就不与另一个官能团相邻。

环(例如，5-至7-元环)或环状基团包括碳环和杂环。这样的环可以是饱和的 或不饱和的，包括芳香环。杂环一般含有1至4个杂原子，但氧原子和硫原子 不能彼此相邻。

芳香(芳基)基团包括碳环芳香基团例如苯基，萘基，和蒽基，和杂芳基基团例 如咪唑基，噻吩基，呋喃基，吡啶基，嘧啶基，吡喃基，吡唑基，吡咯基，吡嗪基， 噻唑基，噁唑基，和四唑基。

芳香基团还包括稠合的多环芳香环体系，其中碳环芳香环或杂环芳香环与 一个或多个其他的杂芳基环稠合。例子包括苯并噻吩基，苯并呋喃基，吲哚基， 喹啉基，苯并噻唑，苯并噁唑，苯并咪唑，喹啉基，异喹啉基和异吲哚基。

非芳香杂环是非芳香的碳环，在环中包括一个或多个杂原子，例如氮、氧 或硫。该环可以是五、六、七或八元的。例子包括四氢呋喃基，四氢噻吩基 (tetrahyrothiophenyl)，吗啉代，硫代吗啉代，吡咯烷基，哌嗪基，哌啶基，和噻唑 烷基，还有环状的糖。

与第二个环稠合的环分享至少一个共同的键。

在烷基，烯基，炔基，芳基，非芳香杂环或芳基基团(碳环和杂芳基)上的 合适取代基是那些基本上不干扰所公开的化合物具有此处所公开的一种或多种 性质的能力的取代基。与不含有该取代基的化合物相比较，如果化合物性质的 大小被降低多于约50％，那么该取代基就是基本上干扰了化合物的性质。合适 的取代基的例子包括-OH，卤素(-Br，-Cl，-I和-F)，-ORa， -O-CORa，-CORa，-C(O)Ra，-CN，-NO2，-COOH，-COORa，-OCO2Ra，-C(O)NRaRb， -OC(O)NRaRb，-SO3H，-NH2，-NHRa，-N(RaRb)，-COORa，-CHO，-CONH2， -CONHRa，-CON(RaRb)，-NHCORa，-NRCORa，-NHCONH2，-NHCONRaH， -NHCON(RaRb)，-NRcCONH2，-NRcCONRaH，-NRcCON(RaRb)，-C(＝NH)-NH2， -C(＝NH)-NHRa，-C(＝NH)-N(RaRb)，-C(＝NRc)-NH2，-C(＝NRc)-NHRa， -C(＝NRc)-N(RaRb)，-NH-C(＝NH)-NH2，-NH-C(＝NH)-NHRa，-NH-C(＝NH)-N(RaRb)， -NH-C(＝NRc)-NH2，-NH-C(＝NRC)-NHRa，-NH-C(＝NRc)-N(RaRb)， -NRdH-C(＝NH)-NH2，-NRd-C(＝NH)-NHRa，-NRd-C(＝NH)-N(RaRb)， -NRd-C(＝NRc)-NH2，-NRd-C(＝NRc)-NHRa，-NRd-C(＝NRc)-N(RaRb)，-NHNH2， -NHNHRa，-NHRaRb，-SO2NH2，-SO2NHRa，-SO2NRaRb，-CH＝CHRa，-CH＝CRaRb， -CRc＝CRaRb，CRc＝CHRa，-CRc＝CRaRb，-CCRa，-SH，-SOkRa(k是0，1或2)， -S(O)kORa(k是0，1或2)和-NH-C(＝NH)-NH2。Ra-Rd各自独立地是脂肪族的，取 代的脂肪族的，苄基的，取代的苄基的，芳香的或取代的芳香的基团，优选烷基， 苄基或芳基基团。另外，-NRaRb一起也可以形成取代或未取代的非芳香杂环基 团。非芳香杂环基团，苄基基团或芳基基团也可以具有脂肪族的或取代的脂肪族 基团作为取代基。取代的脂肪族基团还可以有非芳香杂环，取代的非芳香杂环， 苄基，取代的苄基，芳基或取代的芳基基团作为取代基。取代的脂肪族基团，非 芳香杂环基团，取代的芳基，或取代的苄基基团可以有多于一个的取代基。

本发明预想的取代基和变量的组合仅仅是导致形成稳定化合物的那些。如 此处所使用的，术语“稳定”指的是那些化合物，所述化合物具有足以允许生 产的稳定性，并且在足够长的时间内保持化合物的完整性以用于此处详细描述 的目的。

能给出氢键的基团是含有部分正电荷的氢原子的官能团(例如，-OH，-NH2， -SH)或一种代谢形成能给出氢键基团的基团(例如，酯)。

如此处所使用的，“增溶基团”是一个部分，与不包括该基团的类似化合 物相比，所述片段具有足以改善或增加它所在化合物的水溶性的亲水性。亲水 性可以用任何方法实现，例如通过包含在使用条件下电离形成带电荷部分的官 能团(例如，羧酸，磺酸，磷酸，胺，等)；包含持久电荷的基团(例如，季铵基团)； 和/或杂原子或杂原子基团(例如，O，S，N，NH，N-(CH2)y-Ra，N-(CH2)y-C(O)Ra， N-(CH2)y-C(O)ORa，N-(CH2)y-S(O)2Ra-，N-(CH2)y-S(O)2ORa，N-(CH2)y-C(O)NRaRa， 等，其中Ra选自氢，低级烷基，低级环烷基，(C6-C14)芳基，苯基，萘基， (C7-C20)芳基烷基和苄基，其中Ra是可选择地取代的；和y是0至6的整数)， 可选择地取代的杂环基团(例如-(CH2)n-Rb，-(CH2)n-C(O)-Rb，-(CH2)n-O-(CH2)n-Rb， 其中Rb选自可选择地取代的饱和单环杂环，可选择地取代的饱和双环稠合杂环， 可选择地取代的饱和双环螺环杂环，可选择地取代的杂芳基和可选择地取代的 部分饱和的非-芳基杂环；和n是0至2的整数)。应该理解的是，与该定义范围 内的未取代的对应物相比，存在于Ra或Rb上的取代基不必改善或增加其水溶 性。所必须的是，这些取代基不能明显地逆转未取代的Ra或Rb部分所提供的 水溶性的改善。

在一个实施方案中，增溶基团将相应的缺少增溶基团化合物的水溶性增加 至少5倍，优选至少10倍，更优选至少20倍和最优选至少50倍。

在一个优选的实施方案中，增溶基团是下式的部分：

-(CH2)n-R100-N(R101)(R101)，其中：

n选自0，1或2；

R100选自键，-C(O)-，或-O(CH2)n；和

每个R101独立地选自：

a.氢；

b.C1-C4直链或支链烷基，其中所述烷基是可选择地被卤素，CN，OH， O-(C1-C4直链或支链烷基)，N(R1′)(R1′)，或＝O所取代；

c.

d.

e.

f.全部的R101部分与他们所键合的氮原子一起形成以下结构的环

g.全部的R101部分与他们所键合的氮原子一起形成含有1至3个附加氮原 子的5元杂芳基环，其中所述杂芳基环可选择地被R1′取代：

其中：

每个Z独立地是选自-O-，-S-，-NR1′，或-C(R50)(R50)-，其中：

Z20，Z21，Z22，和Z23中的至少三个是-C(R50)(R50)-；

Z24，Z25，Z26，Z27，和Z28中的至少三个是-C(R50)(R50)-；

Z30，Z31，Z32，和Z33中的至少四个是-C(R50)(R50)-；和

Z34，Z35，Z36，Z37，和Z38中的至少四个是-C(R50)(R50)-；

每个R1′独立地是选自氢或C1-C3直链或支链烷基，所述烷基可选择地被一 个或多个取代基所取代，所述取代基独立地选自卤 素，-CN，-OH，-OCH3，-NH2，-NH(CH3)，-N(CH3)2，或＝O；

每个R50独立地是选自R1′，卤素，CN，OH，O-(C1-C4直链或支链烷基)， N(R1′)(R1′)，＝CR1′，SR1′，＝NR1′，＝NOR1′，或＝O；

任何两个合适的非环R50可选择地彼此直接地或经由C1至C2亚烷基，亚烯 基或亚烷二基(alkanediylidene)桥键合，形成双环的稠环或螺环；和 任何环结构 是可选择地苯并稠合或与单环杂芳基稠合形成双环。

为清楚起见，术语“C1至C2亚烷基，亚烯基或亚烷二基(alkanediylidene) 桥”指的是这些多价结构：-CH2-，-CH2-CH2-，-CH＝，＝CH-，-CH＝CH-，或 ＝CH-CH＝。可选择地彼此键合的两个R50部分可以在同一个碳原子上或不同的 碳原子上。前者形成螺双环，而后者形成稠合双环。对于本领域技术人员明显 的是，当两个R50彼此键合形成环时(无论直接或通过一个所述的桥)，在每个 R50上的一个或多个末端氢原子将会失去。因此，适合形成环的“合适的非环 R50”部分是那些包含至少一个末端氢原子的非环R50。

在另一个优选的实施方案中，增溶基团是下式部分：-(CH2)n-O-R101，其中n 和R101如上所定义。

在另一个优选的实施方案中，增溶基团是下式部分：-(CH2)n-C(O)-R1′，其 中n和R1′如上所定义。

在一个更优选的实施方案中，增溶基团选自-(CH2)n-R102，其中n是0，1或 2；和R102选自

其中R1′如上 所定义。

在一个更优选的实施方案中，增溶基团选自2-二甲基氨基乙基氨基甲酰基， 哌嗪-1-基羰基，哌嗪基甲基，二甲基氨基甲基，4-甲基哌嗪-1-基甲基，4-氨基哌 啶-1-基-甲基，4-氟哌啶-1-基-甲基，吗啉代甲基，吡咯烷-1-基甲基，2-氧代-4-苄 基哌嗪-1-基甲基，4-苄基哌嗪-1-基甲基，3-氧代哌嗪-1-基甲基，哌啶-1-基甲基， 哌嗪-1-基乙基，2，3-二氧代丙基氨基甲基，噻唑烷-3-基甲基，4-乙酰基哌嗪-1-基 甲基，4-乙酰基哌嗪-1-基，吗啉代，3，3-二氟吖丁叮-1-基甲基，2H-四唑-5-基甲基， 硫代吗啉-4-基甲基，1-氧代硫代吗啉-4-基甲基，1，1-二氧代硫代吗啉-4-基甲基， 1H-咪唑-1-基甲基，3，5-二甲基哌嗪-1基甲基，4-羟基哌啶-1-基甲基，N-甲基(1-乙 酰基哌啶-4-基)-氨基甲基，N-甲基奎宁环-3-基氨基甲基，1H-1，2，4-三唑-1-基甲基， 1-甲基哌啶-3-基-氧甲基，或4-氟哌啶-1-基。

至上述任一定义中均不包括的程度，术语“增溶基团”还包括，即所公开的 与1-环丙基-6-氟-1，4-二氢-4-氧代喹啉-3-甲酸(环丙沙星)及其衍生物的7位相连 的部分，公开于PCT公开WO 2005026165，WO 2005049602，和WO 2005033108， 和欧洲专利公开EP 0343524，EP 0688772，EP 0153163，EP 0159174中；和“水增 溶基团”，描述于美国专利公开US 2006/0035891中。这些专利公开中的公开内 容均引入本文作为参考。

以结构表示的双键意味着包括所有的(E)-和(Z)-构型。优选 地，双键是(E)-构型。

糖是直链多羟基醇的醛或酮衍生物，其含有至少三个碳原子。糖可以线性 分子的形式存在，或优选地，以环状分子的形式存在(例如，吡喃糖或呋喃糖的 形式)。优选地，糖是单糖，例如葡萄糖或葡萄糖醛酸。在本发明那些例如期望 用糖衍生的化合物延长存留的实施方案中，糖优选是非天然存在的糖。例如， 一个或多个羟基被另一个基团如卤素(例如氯)取代。与天然存在的糖相比，一个 或多个碳原子的立体化学构型也可以被改变。合适的非天然存在的糖的一个例 子是三氯蔗糖(sucralose)。

脂肪酸是具有长链烃部分的羧酸。一般地，脂肪酸具有偶数碳原子，范围 是从12至24，经常是从14至20。脂肪酸可以是饱和的或不饱和的，和取代的 或未取代的，但一般是未取代的。脂肪酸可以是天然存在的或非天然存在的形 式。在本发明的那些例如期望含有脂肪酸部分的化合物延长存留时间的实施方 案中，脂肪酸优选是非天然存在的。脂肪酸的酰基基团由烃部分和羧酸官能团 的羰基部分所组成，但不包括与羧酸官能团相连的-OH部分。

本发明中还包括此处所描述的sirtuin调节化合物的盐，特别是药学上可接 受的盐。具有足够酸性、足够碱性、或二者都有的官能团的本发明化合物可以 与许多无机碱以及无机和有机酸中的任一种反应形成盐。供选择地，具有固有 电荷的化合物，例如含有季氮的化合物，可以与合适的抗衡离子(例如，卤化 物如溴化物、氯化物或氟化物，特别是溴化物)形成盐。

通常用来形成酸加成盐的酸是无机酸例如盐酸、氢溴酸、氢碘酸、硫酸、 磷酸等，和有机酸例如对甲苯磺酸、甲磺酸、草酸、对溴苯磺酸、碳酸、琥珀 酸、柠檬酸、苯甲酸、醋酸等。这些盐的例子包括硫酸盐、焦硫酸盐、硫酸氢 盐、亚硫酸盐、亚硫酸氢盐、磷酸盐、一氢磷酸盐、二氢磷酸盐、偏磷酸盐、 焦磷酸盐、氯化物、溴化物、碘化物、醋酸盐、丙酸盐、癸酸盐、辛酸盐、丙 烯酸盐、甲酸盐、异丁酸盐、己酸盐、庚酸盐、丙炔酸盐、草酸盐、丙二酸盐、 琥珀酸盐、辛二酸盐、癸二酸盐、延胡索酸盐、马来酸盐、丁炔-1，4-二甲酸盐、 己炔-1，4-二甲酸盐、苯甲酸盐、氯苯甲酸盐、甲基苯甲酸盐、二硝基苯甲酸盐、 羟基苯甲酸盐、甲氧基苯甲酸盐、邻苯二甲酸盐、磺酸盐、二甲苯磺酸盐、苯 基乙酸盐、苯基丙酸盐、苯基丁酸盐、柠檬酸盐、乳酸盐、γ-羟基丁酸盐、甘 醇酸盐、酒石酸盐、甲磺酸盐、丙磺酸盐、萘-1-磺酸盐、萘-2-磺酸盐、扁桃酸 盐等等。

碱加成盐包括从无机碱衍生得到的那些盐，例如铵或碱金属或碱土金属的 氢氧化物，碳酸盐、碳酸氢盐等。可用于制备本发明盐的这样的碱因而包括氢 氧化钠、氢氧化钾、氢氧化铵、碳酸钾等等。

根据另一个实施方案，本发明提供了制备以上定义的sirtuin-调节化合物 的方法。这些化合物可以使用常规技术合成。有利地，这些化合物是从容易获 得的原料方便地合成得到。

因此，一个实施方案涉及制备此处所述结构化合物的方法，使用以下的合 成方案：

本领域技术人员会认识到该合成方案，或类似的变动，有用地允许将大量R基 团引入化合物中而化合物依然落入本发明的范围，例如，以下表格中的化合物。

如本领域技术人员可以想到的，以上的合成方案不意在包含可用于合成本申 请中所描述的和权利要求中所要求保护的化合物的所有合成方法的全面的列 表。进一步的方法对于本领域普通技术人员是很明显的。另外，上述各种合成 步骤可以以可交换的次序或顺序进行来得到期望的化合物。可用于合成此处所 述的sirtuin调节化合物的合成化学转变和方法是本领域已知的，包括，例如， 描述于R.Larock，Comprehensive Organic Transformations(1989)；T.W.Greene和 P.G.M.Wuts，Protective Groups in Organic Synthesis，2d.Ed.(1991)；L.Fieser和M. Fieser，Fieser and Fieser′s Reagents for Organic Synthesis(1994)；和L.Paquette，ed.， Encyclopedia of Reagents for Organic Synthesis(1995)中的方法。

在一个示例性的实施方案中，sirtuin调节化合物可以穿过细胞的细胞质膜。 例如，化合物可以具有至少约20％、50％、75％、80％、90％或95％的细胞通透 性。

本文描述的sirtuin调节化合物也可以具有一种或多种下述特性：化合物对 细胞或对象基本上可以是无毒的；sirtuin调节化合物可以是有机分子或者 2000amu或更小、1000amu或更小的小分子；在标准大气条件下化合物可以具 有至少约30天、60天、120天、6个月或1年的半衰期；在溶液中化合物可以 具有至少约30天、60天、120天、6个月或1年的半衰期；sirtuin调节化合物 在溶液中可以比白藜芦醇更稳定至少约50％、2倍、5倍、10倍、30倍、50倍 或100倍；sirtuin调节化合物可以促进DNA修复因子Ku70的脱乙酰化；sirtuin 调节化合物可以促进RelA/p65的脱乙酰化；化合物可以增加一般逆转率并增强 细胞对TNF诱导的细胞凋亡的敏感性。

在某些实施方案中，在有效调节sirtuin脱乙酰酶活性的浓度下(例如，在 体内)，sirtuin调节化合物不具有任何实质的抑制I类组蛋白脱乙酰酶 (HDACs)、II类HDAC或者I和II类HDACs的能力。例如，在优选的实施 方案中，sirtuin调节化合物为sirtuin活化化合物，并选择其活化sirtuin脱乙酰 酶活性的EC50小于抑制HDAC I和/或HDAC II的EC50至少5倍，甚至更优选 至少10倍、100倍或甚至1000倍。测定HDAC I和/或HDAC II活性的方法是 本领域熟知的，实施这种测定的试剂盒可以商业上购买。参见例如，BioVision， Inc.(Mountain VIew，CA；world wide web at biovision.com)和Thomas Scientific (Swedesboro，NJ；world wide web at tomassci.com)。

在某些实施方案中，sirtuin调节化合物不具有任何实质的调节sirtuin同系 物的能力。在一个实施方案中，在有效活化人sirtuin脱乙酰酶活性的浓度下(例 如，在体内)，人sirtuin蛋白活化剂不具有任何实质的活化来源于低等真核生 物，特别是酵母或人病原体的sirtuin蛋白的能力。例如，可选择sirtuin活化化 合物活化人sirtuin，例如SIRT1和/或SIRT3脱乙酰酶活性的EC50小于活化酵 母sirtuin，例如Sir2(例如假丝酵母属、S.啤酒属等)的EC50至少5倍，甚至 更优选至少10倍、100倍或甚至1000倍。在另一个实施方案中，在有效抑制 来源于低等真核生物的sirtuin蛋白脱乙酰酶活性的浓度下(例如，在体内)， 来源于低等真核生物，特别是酵母或人病原体的sirtuin蛋白的抑制剂不具有任 何实质的抑制来源于人的sirtuin蛋白的能力。例如，可以选择sirtuin抑制化合 物抑制人sirtuin，例如SIRT1和/或SIRT3脱乙酰酶活性的IC50小于抑制酵母 sirtuin，例如Sir2(例如假丝酵母属、S.啤酒属等)的IC50至少5倍，甚至更优 选至少10倍、100倍或甚至1000倍。

在某些实施方案中，sirtuin调节化合物可以具有调节一种或多种sirtuin蛋 白同系物，例如，人SIRT1、SIRT2、SIRT3、SIRT4、SIRT5、SIRT6或SIRT7 的一种或多种的能力。在一个实施方案中，sirtuin调节化合物具有调节SIRT1 和SIRT3蛋白质的能力。

在其他实施方案中，在有效调节人SIRT1脱乙酰酶活性的浓度下(例如， 在体内)，SIRT1调节剂不具有任何实质的调节其他sirtuin蛋白同系物，例如， 人SIRT2、SIRT3、SIRT4、SIRT5、SIRT6或SIRT7的一种或多种的能力。例 如，可以选择sirtuin调节化合物调节人SIRT1脱乙酰酶活性的ED50小于调节 人SIRT2、SIRT3、SIRT4、SIRT5、SIRT6或SIRT7的一种或多种的ED50至少 5倍，甚至更优选至少10倍、100倍或甚至1000倍。在一个实施方案中，SIRT1 调节剂不具有任何实质的调节SIRT3蛋白质的能力。

在其他实施方案中，在有效调节人SIRT3脱乙酰酶活性的浓度下(例如， 在体内)，SIRT3调节剂不具有任何实质的调节其他sirtuin蛋白同系物，例如， 人SIRT1、SIRT2、SIRT4、SIRT5、SIRT6或SIRT7的一种或多种的能力。例 如，可以选择sirtuin调节化合物调节人SIRT3脱乙酰酶活性的ED50小于调节 人SIRT1、SIRT2、SIRT4、SIRT5、SIRT6或SIRT7的一种或多种的ED50至少 5倍，甚至更优选至少10倍、100倍或甚至1000倍。在一个实施方案中，SIRT3 调节剂不具有任何实质的调节SIRT1蛋白质的能力。

在某些实施方案中，sirtuin调节化合物可以具有对sirtuin蛋白的约10-9M、 10-10M、10-11M、10-12M或更少的结合亲和力。sirtuin调节化合物可以降低(活 化剂)或增加(抑制剂)sirtuin蛋白对其底物或NAD+(或其他辅助因子)的 表观Km至少约2、3、4、5、10、20、30、50或100倍。在某些实施方案中， Km值可使用本文描述的质谱测定法来测定。在相似的浓度下，优选的活化化 合物比白藜芦醇降低sirtuin对其底物或辅助因子的Km到更大的程度，或在更 低浓度下降低sirtuin对其底物或辅助因子的Km与白藜芦醇相似。sirtuin调节 化合物可以增加sirtuin蛋白的Vmax至少约2、3、4、5、10、20、30、50或 100倍。sirtuin调节化合物调节SIRT1和/或SIRT3蛋白质的脱乙酰酶活性的ED50 可以小于约1nM、小于约10nM、小于约100nM、或约1-10nM、约10-100nM、 约0.1-1μM、约1-10μM或约10-100μM。如在细胞分析或基于细胞的分析中 测定的，sirtuin调节化合物可以调节SIRT1和/或SIRT3蛋白质的脱乙酰酶活性 至少约5、10、20、30、50或100倍。相对于白藜芦醇相同的浓度，sirtuin活 化化合物可以引起至少约10％、30％、50％、80％、2倍、5倍、10倍、50倍 或100倍更大的sirtuin蛋白脱乙酰酶活性的诱导。sirtuin调节化合物具有的调 节SIRT5的ED50比调节SIRT1和/或SIRT3的ED50大至少约10倍、20倍、30 倍、50倍。

3.示例性应用

在某些方面，本发明提供调节sirtuin蛋白的水平和/或活性的方法及其使用 方法。

在某些实施方案中，本发明提供使用sirtuin调节化合物的方法，其中sirtuin 调节化合物活化sirtuin蛋白，例如，增加sirtuin蛋白的水平和/或活性。增加sirtuin 蛋白的水平和/或活性的sirtuin调节化合物对许多治疗应用是有用的，包括例如， 增加细胞的寿命、和治疗和/或预防许多种疾病和障碍，包括例如，与衰老或应 激有关的疾病或障碍、糖尿病、肥胖、神经变性疾病、心血管疾病、凝血障碍、 炎症、癌症、和/或潮红等。该方法包括给予需要的对象药学上有效量的sirtuin 调节化合物，例如，sirtuin活化化合物。

在其他实施方案中，本发明提供使用sirtuin调节化合物的方法，其中sirtuin 调节化合物降低sirtuin的活性，例如，降低sirtuin蛋白的水平和/或活性。降低 sirtuin蛋白的水平和/或活性的sirtuin调节化合物对许多治疗应用是有用的，包 括例如，增加对应激的细胞敏感性(包括增加放射敏感性和/或化学敏感性)、 增加细胞凋亡的数量和/或比率、癌症的治疗(任选与其他化疗药物组合)、刺 激食欲、和/或刺激体重增加等。该方法包括给予需要的对象药学上有效量的 sirtuin调节化合物，例如，sirtuin抑制化合物。

申请人不愿受到理论的束缚，认为本发明的活化剂和抑制剂会在sirtuin蛋 白内的相同位置(例如，活性位点或影响活性位点Km或Vmax的位点)与sirtuin 相互作用。这被认为是某些种类的sirtuin活化剂和抑制剂可以具有实质的结构 相似性的原因。

在某些实施方案中，本文描述的sirtuin调节化合物可以单独或与其他化合 物组合使用。在一个实施方案中，两种或多种sirtuin调节化合物的混合物可以 给予需要的对象。在另一个实施方案中，增加sirtuin蛋白的水平和/或活性的 sirtuin调节化合物可以与下列化合物中的一种或多种一起给予：白藜芦醇、紫 铆花素、漆树黄酮、piceatannol、或槲皮素。在一个示例性的实施方案中，增加 sirtuin蛋白的水平和/或活性的sirtuin调节化合物可以与烟酸组合给予。在另一 个实施方案中，降低sirtuin蛋白的水平和/或活性的sirtuin调节化合物可以与下 列化合物中的一种或多种一起给予：烟酰胺(NAM)、suranim；NF023(G蛋 白拮抗剂)；NF279(嘌呤能受体拮抗剂)；Trolox(6-羟基-2，5，7，8，四甲基色原烷 -2-羧酸)；(-)-表儿茶素(3，5，7，3′，4′，5′位羟基)；(-)-表儿茶素棓酸酯(5，7，3′，4′，5′ 位羟基以及3位棓酸酯)；矢车菊素氯化物(3，5，7，3′，4′-五羟基黄盐氯化物)； 翠雀素氯化物(3，5，7，3′，4′，5′-六羟基黄盐氯化物)；杨梅黄酮(大麻黄酮； 3，5，7，3′，4′，5′-六羟基黄酮)；3，7，3′，4′，5′-五羟基黄酮；棉黄素(3，5，7，8，3′，4′-六羟基 黄酮)；sirtinol；和splitomicin(参见例如，Howitz等，(2003)Nature 425：191； Grozinger等，(2001)J.Biol.Chem.276：38837；Dedalov等，(2001)PNAS 98：15113； 和Hirao等，(2003)J.Biol.Chem 278：52773)。在另一个实施方案中，一种或多 种sirtuin调节化合物可以与一种或多种治疗或预防各种疾病的治疗药物一起给 予，所述疾病包括例如，癌症、糖尿病、神经变性疾病、心血管疾病、血液凝 固、炎症、潮红、肥胖、衰老、应激等。在各种实施方案中，包含sirtuin调节 化合物的组合治疗可能是指(1)包含一种或多种sirtuin调节化合物与一种或多 种治疗药物(例如，本文描述的一种或多种治疗药物)组合的药物组合物；和 (2)一种或多种sirtuin调节化合物与一种或多种治疗药物联合给药，其中sirtuin 调节化合物与治疗药物没有配制在同一个组合物中(但是可能存在于同一试剂 盒或包装中，例如泡罩包(blister pack)或其他多室包装；使用者可以分离的连 接的、单独密封的容器(例如，金属箔袋(foil pouches))；或者sirtuin调节化 合物和其他治疗药物处于分离容器中的试剂盒)。当使用分离制剂时，sirtuin调 节化合物可与另一种治疗药物同时、间隔、交叉、在先、随后、或组合给予。

在某些实施方案中，使用sirtuin调节化合物降低、预防或治疗疾病或障碍 的方法还可以包括增加sirtuin如人SIRT1、SITR2和/或SIRT3、或其同系物的 蛋白质水平。增加蛋白质水平可以通过将编码sirtuin的一份或多份核酸引入细 胞中来实现。例如，哺乳动物细胞中sirtuin水平的增加可以通过将编码sirtuin 的核酸引入哺乳动物细胞来实现，例如，通过引入编码GenBank登录号 NP_036370所述的氨基酸序列的核酸增加SIRT1水平和/或通过引入编码 GenBank登录号AAH01042的氨基酸序列的核酸增加SIRT3水平。核酸可以处 于调节SIRT1和/或SIRT3核酸表达的启动子的控制下。供选择地，核酸可以引 入处于基因组中启动子下游位置的细胞中。使用这些方法增加蛋白质水平的方 法是本领域熟知的。

引入细胞增加sirtuin蛋白水平的核酸可编码与sirtuin序列至少约80％、 85％、90％、95％、98％或99％同源的蛋白质，例如，SIRT1(GenBank登录号 NP 036370)和/或SIRT3(GenBank登录号AAH01042)蛋白质。例如，编码 蛋白质的核酸可以至少约80％、85％、90％、95％、98％或99％同源于编码SIRT1 (例如，GenBank登录号NM 012238)和/或SIRT3(例如，GenBank登录号 BC001042)蛋白质的核酸。核酸也可以是优选在严格杂交条件下杂交至编码野 生型sirtuin如SIRT1(例如，GenBank登录号NM_012238)和/或SIRT3(例如， GenBank登录号BC001042)蛋白质的核酸的核酸。严格杂交条件可以包括65℃ 下杂交和0.2xSSC的洗涤。当使用编码不同于野生型sirtuin蛋白的蛋白质如野 生型sirtuin蛋白片断的蛋白质的核酸时，蛋白质优选是生物活性的，例如，能 够脱乙酰化。唯一需要的是在细胞中表达生物活性的sirtuin的一部分。例如， 不同于GenBank登录号NP_036370的野生型SIRT1的蛋白质，优选包含其核心 结构。核心结构有时指GenBank登录号NP_036370的氨基酸62-293，其由 GenBank登录号NM_012238的核苷酸237-932编码，包括NAD结合以及底物 结合域。SIRT1的核心域也可以是指GenBank登录号NP_036370的大约氨基酸 261-447，其由GenBank登录号NM_012238的核苷酸834-1394编码，是指 GenBank登录号NP_036370的大约氨基酸242-493，其由GenBank登录号 NM_012238的核苷酸777-1532编码，或是指GenBank登录号NP_036370的氨 基酸254-495，其由GenBank登录号NM_012238的核苷酸813-1538编码。蛋 白质是否保留生物学功能，例如脱乙酰化能力，可以根据本领域已知的方法来 确定。

在某些实施方案中，使用sirtuin调节化合物降低、预防或治疗疾病或障碍 的方法还可以包括降低sirtuin如人SIRT1、SITR2和/或SIRT3、或其同系物的 蛋白质水平。降低sirtuin蛋白水平可以根据本领域已知的方法实现。例如，靶 向于sirtuin的siRNA、反义核酸或核酶可以在细胞中表达。也可以使用显性负 相sirtuin突变体，例如不能脱乙酰化的突变体。例如可以使用描述于Luo等， (2001)Cell 107：137的SIRT1的H363Y突变体。供选择地，可以使用抑制转 录的药物。

调节sirtuin蛋白水平的方法也包括调节编码sirtuin的基因转录的方法、相 应的mRNAs的稳定化/去稳定化的方法、和其他本领域已知的方法。

衰老/应激

在一个实施方案中，本发明提供通过将细胞与增加sirtuin蛋白水平和/或活 性的本发明sirtuin调节化合物接触来延长细胞寿命、延长细胞增殖能力、延缓 细胞的老化、促进细胞存活、延缓细胞中的细胞衰老、模拟热量限制作用、增 加细胞对应激的耐受力、或预防细胞凋亡的方法。在一个示例性的实施方案中， 所述方法包括将细胞与sirtuin活化化合物接触。

本文描述的方法可以用于增加细胞，特别是原代细胞(例如，从例如人的 有机体获得的细胞)在细胞培养中保持存活时间的量。胚胎干(ES)细胞和多 潜能细胞以及从其分化的细胞也可以使用增加sirtuin蛋白水平和/或活性的 sirtuin调节化合物处理来在培养物中保存细胞或其子代更长的时间。这种细胞 也可以用于向对象移植，例如，在先体外后体内修饰后。

在一个实施方案中，预期长期保存的细胞可以使用增加sirtuin蛋白水平和/ 或活性的sirtuin调节化合物处理。细胞可以在混悬液(例如，血细胞、血清、 生物生长培养基等)、或组织或器官中。例如，为输血的目的从个体收集的血液 可以使用增加sirtuin蛋白水平和/或活性的sirtuin调节化合物处理来保存血细胞 更长的时间。附加地，用于法医目的的血液也可以使用增加sirtuin蛋白水平和/ 或活性的sirtuin调节化合物处理。其他可以经过处理以延长寿命或保护免于细 胞凋亡的细胞包括用于消耗的细胞，例如，来自于非人的哺乳动物的细胞(例 如肉)或植物细胞(例如蔬菜)。

增加sirtuin蛋白水平和/或活性的sirtuin调节化合物也可以应用于哺乳动 物、植物、昆虫或微生物的发育和生长过程中，以便，例如，改变、延缓或加 速发育和/或生长过程。

在另一个实施方案中，增加sirtuin蛋白水平和/或活性的sirtuin调节化合物 也可以用于处理用于移植或细胞治疗的细胞，包括，例如，固体组织移植、器 官移植、细胞混悬液、干细胞、骨髓细胞等。细胞或组织可以是自体移植、异 体移植、同系移植或移种移植。使用sirtuin调节化合物处理细胞或组织可以在 向对象给药/植入前、给药/植入的同时、和/或给药/植入后。细胞或组织可以在 从供体个体移除前、或细胞或组织从供体个体移除离体后先体外后体内、或植 入受体后进行处理。例如，供体或受体个体可以全身地使用sirtuin调节化合物 处理或可以具有局部地使用增加sirtuin蛋白水平和/或活性的sirtuin调节化合物 处理的细胞/组织的亚型。在某些实施方案中，细胞或组织(或供体或受体个体) 可以附加地使用用于延长移植存活的另一种治疗药物处理，所述另一种治疗药 物例如是，免疫抑制剂、细胞因子、血管生成因子等。

在其他实施方案中，细胞可以使用在体内增加sirtuin蛋白水平和/或活性的 sirtuin调节化合物处理，例如来增加其寿命或预防细胞凋亡。例如，通过使用 增加sirtuin蛋白水平和/或活性的sirtuin调节化合物处理皮肤或表皮细胞来保护 皮肤免于衰老(例如，产生皱纹、丧失弹性等)。在一个示例性的实施方案中， 皮肤与含有增加sirtuin蛋白水平和/或活性的sirtuin调节化合物的药物或化妆用 组合物接触。可以根据本文描述的方法处理的示例性的皮肤烦恼或皮肤病况包 括与炎症、日光损伤或自然衰老有关或由其引起的障碍或疾病。例如，组合物 用于预防或治疗接触性皮炎(包括刺激性接触性皮炎和过敏性接触性皮炎)、特 应性皮炎(也已知为过敏性湿疹)、光化性角化病、角质化障碍(包括湿疹)、 大疱性表皮松解症(包括penfigus)、剥脱性皮炎、脂溢性皮炎、红斑(包括多 形性红斑和结节性红斑)、日光或其他光源引起的损伤、盘状红斑狼疮、皮肌炎、 银屑病、皮肤癌和自然衰老作用。在另一个实施方案中，增加sirtuin蛋白水平 和/或活性的sirtuin调节化合物可以用于治疗创伤和/或烧伤来促进愈合，包括， 例如，一度、二度或三度烧伤和/或热、化学或电灼伤。如本文进一步描述的， 在产生期望的效果的有效给药方案背景下，制剂可以以软膏、洗剂、乳膏、微 乳液、凝胶、溶液等局部给予皮肤或粘膜组织。

包含一种或多种增加sirtuin蛋白水平和/或活性的sirtuin调节化合物的局部 制剂也可以用作例如化学预防性的预防性组合物。当在化学预防性方法中使用 时，在特殊的个体中在任何可见的病况前处理易受感染的皮肤。

sirtuin调节化合物可以局部或全身性地递送给对象。在一个实施方案中， sirtuin调节化合物通过注射、局部制剂等局部地递送至对象的组织或器官。

在另一个实施方案中，增加sirtuin蛋白水平和/或活性的sirtuin调节化合物 可以用于治疗或预防对象中细胞衰老诱导或加剧的疾病或病况；降低对象衰老 率的方法，例如，在衰老开始后；延长对象寿命的方法；治疗或预防与寿命相 关的疾病或病况的方法；治疗或预防涉及细胞增殖能力的疾病或病况的方法； 和治疗或预防细胞损伤或死亡导致的疾病或病况的方法。在某些实施方案中， 该方法不通过降低缩短对象寿命的疾病的发生率来起作用。在某些实施方案中， 该方法不通过减少疾病例如癌症引起的致死率起作用。

在另一个实施方案中，增加sirtuin蛋白水平和/或活性的sirtuin调节化合物 可以给予对象来一般地增加其细胞寿命和保护其细胞对抗应激和/或对抗细胞 凋亡。申请人相信，使用本文描述的化合物治疗对象与使对象经历毒物刺激作 用如有益于有机体的温和应激是相似的，并可延长其寿命。

增加sirtuin蛋白水平和/或活性的sirtuin调节化合物可以给予对象来预防衰 老和衰老相关的结果或疾病，例如中风、心脏病、心力衰竭、关节炎、高血压 和阿耳茨海默氏病。其他可以治疗的病况包括例如，与眼睛的老化相关的眼部 障碍，例如，白内障、青光眼和黄斑变性。增加sirtuin蛋白水平和/或活性的sirtuin 调节化合物也可以给予对象治疗例如与细胞死亡相关的慢性疾病等疾病来保护 细胞免于细胞死亡。示例性的疾病包括与中性细胞死亡相关的疾病、神经元功 能障碍、或肌细胞死亡或功能障碍，例如帕金森病、阿耳茨海默氏病、多发性 硬化症、amniotropic侧索硬化和肌营养不良；AIDS；爆发型肝炎；与大脑退化 相关的疾病，例如克-雅氏病、色素性视网膜炎和小脑变性；脊髓发育不良例如 再生障碍性贫血；缺血性疾病例如心肌梗塞和中风；肝病例如酒精肝、乙型肝 炎和丙型肝炎；关节病例如骨关节炎；动脉粥样硬化；秃发症；紫外线导致的 皮肤损失；扁平苔藓；皮肤萎缩；白内障和移植排斥。细胞死亡可以由手术、 药物治疗、化学接触或放射接触引起。

增加sirtuin蛋白水平和/或活性的sirtuin调节化合物也可以给予患有急性疾 病如器官或组织损伤的对象，例如，患有中风或心肌梗塞的对象或患有脊髓损 伤的对象。增加sirtuin蛋白水平和/或活性的sirtuin调节化合物也可以用于修复 酒精肝。

心血管疾病

在另一个实施方案中，本发明提供通过给予需要的对象增加sirtuin蛋白水 平和/或活性的sirtuin调节化合物而治疗和/或预防心血管疾病的方法。

使用增加sirtuin蛋白水平和/或活性的sirtuin调节化合物可以治疗或预防的 心血管疾病包括心肌病或心肌炎；例如特发性心肌病、代谢性心肌病、酒精中 毒性心肌病、药物诱导的心肌病、缺血性心肌病、和高血压心肌病。使用本文 描述的化合物和方法也可以治疗或预防的是主要血管(大血管疾病)如大动脉、 冠状动脉、颈动脉、脑动脉、肾动脉、髂动脉、股动脉和腘动脉的动脉粥样障 碍。其他可以治疗或预防的血管疾病包括与血小板聚集、视网膜微动脉、血管 小球微动脉、神经滋养血管、心脏微动脉、眼伴随毛细血管床、肾、心脏和中 枢和外周神经系统相关的疾病。增加sirtuin蛋白水平和/或活性的sirtuin调节化 合物也可以用于增加个体血浆中的HDL水平。

使用增加sirtuin蛋白水平和/或活性的sirtuin调节化合物可以治疗的其他障 碍包括例如冠状介入后再狭窄，和与高密度和低密度胆固醇水平异常相关的障 碍。

在一个实施方案中，增加sirtuin蛋白水平和/或活性的sirtuin调节化合物可 以作为与其他心血管药物组合治疗的部分给予，其他治疗心血管药物包括，例 如，抗心律失常药物、抗高血压药物、钙通道阻滞剂、心停博液、强心药、纤 维蛋白溶解剂、硬化溶液、血管收缩药、血管扩张药、一氧化氮供体、钾通道 阻滞剂、钠通道阻滞剂、他汀类药物或naturiuretic药物。

在一个实施方案中，增加sirtuin蛋白水平和/或活性的sirtuin调节化合物可 以作为与其他抗心率不齐药物组合治疗的部分给予。抗心率不齐药物通常根据 其作用机理分为四个主要组：I型，钠离子通道阻断；II型，β肾上腺素能阻 断；III型，复极化延长；和IV型，钙通道阻断。I型抗心率不齐药物包括利多 卡因、莫雷西嗪、美西律、妥卡尼、普鲁卡因胺、恩卡尼、氟卡尼、妥卡尼、 苯妥英、普罗帕酮、奎尼丁、丙吡胺和氟卡尼。II型抗心率不齐药包括普萘洛 尔和艾司洛尔。III型包括通过延长动作电位时程而作用的药物，例如，胺碘酮、 阿替利特、溴苄胺、氯非铵、isobutilide、索他洛尔、阿齐利特、多非利特、决 奈达隆、艾生利特、伊布利特、替地沙米和曲西利特。IV型抗心率不齐药包括 维拉帕米、地尔硫(diltaizem)、洋地黄、阿糖腺苷、氯化镍和镁离子。

在另一个实施方案中，增加sirtuin蛋白水平和/或活性的sirtuin调节化合物 可以作为与另外的心血管药物组合治疗的部分给予。心血管药物的实例包括血 管扩张剂，例如，肼曲嗪；血管紧张素转化酶抑制剂，例如，卡托普利；抗心 绞痛药物，例如，硝酸异山梨酯、三硝酸甘油酯和四硝酸季戊四醇酯；抗心率 失常药，例如，奎尼丁、普鲁卡因胺和利多卡因；强心配糖体，例如，地高辛 和洋地黄毒苷；钙拮抗剂，例如，维拉帕米和硝苯地平；利尿剂，例如噻嗪类 和相关化合物，例如，苄氟噻嗪、氯噻嗪、氯噻酮、氢氯噻嗪和其他利尿剂， 例如，呋塞米和氨苯蝶啶，和镇静药，例如，硝西泮、氟西泮和地西泮。

其他示例性的心血管药物包括，例如，环氧合酶抑制剂例如阿司匹林或吲 哚美辛，血小板凝集抑制剂如氯吡格雷、噻氯匹定或阿司匹林，纤维蛋白原拮 抗剂或利尿剂例如氯噻嗪、氢氯噻嗪、氟甲噻嗪、氢氟噻嗪、苄氟噻嗪、甲氯 噻嗪、三氯噻嗪、泊利噻嗪或苄噻嗪以及依他尼酸tricrynafen、氯噻酮、呋塞米、 musolimine、布美他尼、氨苯蝶啶、阿米洛利和螺内酯和这些化合物的盐，血管 紧张素转化酶抑制剂例如卡托普利、佐芬普利、福辛普利、依那普利、ceranopril、 cilazopril、地拉普利、喷托普利、喹那普利、雷米普利、赖诺普利和这些化合物 的盐，血管紧张素II拮抗剂例如氯沙坦、厄贝沙坦或缬沙坦，血栓溶解剂例如 组织纤维蛋白溶酶原激活剂(tPA)、重组tPA、链激酶、尿激酶、尿激酶原、和 茴酰化纤溶酶原链激酶激活剂复合体(APSAC，依米那酶，Beecham实验室)， 或动物唾液腺纤溶酶原活化因子，钙通道阻滞剂例如维拉帕米、硝苯地平或地 尔硫血栓素受体拮抗剂例如伊非曲班、前列环素类似物或磷酸二酯酶抑制 剂。如果以固定的剂量配制，这种组合产品使用在上述剂量范围内的本发明化 合物和在其批准的剂量范围内的其他药学活性药物。

还有其他示例性的心血管药物包括，例如，血管扩张剂，例如，苄环烷、 桂利嗪、胞磷胆碱、环扁桃酯、环烟酯(cyclonicate)、ebumamonine、phenoxezyl、 氟桂利嗪、异丁司特、艾芬地尔、洛美利嗪、naphlole、nikamate、nosergoline、 尼莫地平、罂粟碱、喷替茶碱、nofedoline、长春胺、长春西丁、vichizyl、己酮 可可碱、前列环素衍生物(例如前列腺素E1和前列腺素I2)、内皮素受体阻断 药(例如波生坦)、地尔硫尼可地尔和硝酸甘油。脑保护药物的例子包括自 由基清除剂(例如抑达拉奉、维生素E和维生素C)、谷氨酸盐拮抗剂、AMPA 拮抗剂、红藻氨酸盐拮抗剂、NMDA拮抗剂、GABA拮抗剂、生长因子、阿片 样物质拮抗剂、磷酸卵磷脂前体、5-羟色胺激动剂、Na+/Ca2+通道抑制药和K+ 通道开放药。脑代谢兴奋药的例子包括金刚烷胺、硫必利和γ-氨基丁酸。抗凝 血剂的例子包括肝素(例如肝素钠、肝素钾、达肝素钠、达肝素钙、帕肝素钠、 瑞肝素钠和达那肝素钠)、华法林、依诺肝素、阿加曲班、巴曲酶和柠檬酸钠。 抗血小板药的例子包括盐酸塞氯匹定、双嘧达莫、西洛他唑、乙基icosapentate、 盐酸沙格雷酯、盐酸地拉曲匹地尔、非类固醇性抗炎剂(例如阿司匹林)、 伯罗普罗、伊洛前列素和indobufene。溶栓药的例子包括尿激酶、组织型纤维蛋 白溶酶原激活剂(例如阿替普酶、替来激酶、那替普酶、帕米普酶、孟替普酶 和rateplase)和那沙普酶。抗高血压药的例子包括血管紧张素转换酶抑制剂(例 如卡托普利、阿拉普利、赖诺普利、咪达普利、喹那普利、替莫普利、地拉普 利、贝那普利、西拉普利、群多普利、依那普利、西罗普利、福辛普利、imadapril、 mobertpril、培哚普利、雷米普利、螺普利和丁酰拉嗪)、血管紧张素II(例如氯 沙坦、坎地沙坦、缬沙坦、依普罗沙坦和厄贝沙坦)、钙通道阻断药(例如阿雷 地平、依福地平、尼卡地平、bamidipine、贝尼地平、马尼地平、西尼地平、尼 索地平、尼群地平、硝苯地平、尼伐地平、非洛地平、氨氯地平、地尔硫 苄普地尔、克仑硫苯乙肼、galopamil、米贝拉地尔、普尼拉明、司莫地尔、 特罗地林、维拉帕米、西尼地平、依高地平、依拉地平、拉西地平、乐卡地平、 尼莫地平、桂利嗪、氟桂利嗪、利多氟嗪、洛美利嗪、苄环烷、依他苯酮和哌 克昔林)、β-肾上腺素受体阻断药(普萘洛尔、吲哚洛尔、茚诺洛尔、卡替洛 尔、布尼洛尔、阿替洛尔、醋丁洛尔、美托洛尔、噻吗洛尔、尼普地洛、喷布 洛尔、纳多洛尔、替利洛尔、卡维地洛、比索洛尔、倍他洛尔、塞利洛尔、波 吲洛尔、贝凡洛尔、拉贝洛尔、阿普洛尔、氨磺洛尔、阿罗洛尔、苯呋洛尔、 布库洛尔、布非洛尔、buferalol、布拉洛尔、次丁基、丁非洛尔、卡拉洛尔、塞 他洛尔、氯拉洛尔、地来洛尔、依泮洛尔、左布诺洛尔、甲吲洛尔、美替洛尔、 莫普洛尔、萘肟洛尔、nevibolol、氧烯洛尔、普拉洛尔、丙萘洛尔、索他洛尔、 sufinalol、他林洛尔、特他洛尔、托利洛尔、xybenolol和艾司洛尔)、α-受体阻 断药(例如氨磺洛尔、哌唑嗪、特拉唑嗪、多沙唑嗪、布那唑嗪、乌拉地尔、 酚妥拉明、阿罗洛尔、达哌唑、芬司匹利、吲哚拉明、拉贝洛尔、萘哌地尔、 麦角溴烟酯、坦洛新、妥拉唑林、曲马唑嗪和育亨宾)、交感神经抑制剂(例如 可乐定、胍法辛、胍那苄、甲基多巴和利血平)、肼屈嗪、托屈嗪、布屈嗪和卡 屈嗪。抗心绞痛药的例子包括硝酸盐药物(例如亚硝酸异戊酯、硝酸甘油和异 山梨醇)、β-肾上腺素受体阻断药(例如普萘洛尔、吲哚洛尔、茚诺洛尔、卡 替洛尔、布尼洛尔、阿替洛尔、醋丁洛尔、美托洛尔、噻吗洛尔、尼普地洛、 喷布洛尔、纳多洛尔、替利洛尔、卡维地洛、比索洛尔、倍他洛尔、塞利洛尔、 波吲洛尔、贝凡洛尔、拉贝洛尔、阿普洛尔、氨磺洛尔、阿罗洛尔、苯呋洛尔、 布库洛尔、布非洛尔、bufetolol、布拉洛尔、次丁基、丁非洛尔、卡拉洛尔、塞 他洛尔、氯拉洛尔、地来洛尔、依泮洛尔、左布诺洛尔、甲吲洛尔、美替洛尔、 莫普洛尔、萘肟洛尔、nevibolol、氧烯洛尔、普拉洛尔、丙萘洛尔、索他洛尔、 sufinalol、他林洛尔、特他洛尔、托利洛尔、andxybenolol)、钙通道阻断药(例 如阿雷地平、依福地平、尼卡地平、bamidipine、贝尼地平、马尼地平、西尼地 平、尼索地平、尼群地平、硝苯地平、尼伐地平、非洛地平、氨氯地平、地尔 硫苄普地尔、克仑硫苯乙肼、galopamil、咪拉地尔、普尼拉明、司莫 地尔、特罗地林、维拉帕米、西尼地平、依高地平、依拉地平、拉西地平、乐 卡地平、尼莫地平、桂利嗪、氟桂利嗪、利多氟嗪、洛美利嗪、苄环烷、依他 苯酮和哌克昔林)曲美他嗪、双嘧达莫、依他苯酮、地拉曲匹地尔、尼可 地尔、依诺肝和阿司匹林。利尿剂的例子包括噻嗪类利尿剂(例如氢氯噻嗪、 甲氯噻嗪、三氯噻嗪、苄氢氯噻嗪和戊氟噻嗪)、髓袢利尿剂(例如呋塞米、依 他尼酸、布美他尼、吡咯他尼、阿佐塞米和托拉塞米)、K+保守利尿剂(螺内酯、 氨苯蝶啶和烯睾丙酸钾)、渗透压利尿剂(例如异山梨醇、D-甘露醇和甘油)、 nonthiazide利尿剂(例如美替克仑、曲帕胺、氯噻酮和美夫西特)和乙酰唑胺。 强心剂的例子包括洋地黄制剂(例如洋地黄毒苷、地高辛、甲地高辛、去乙酰 毛花苷、维司力农、毛花苷C和海葱次苷)、黄嘌呤制剂(例如氨茶碱、胆茶碱、 二羟丙茶碱和羟丙可可碱)、儿茶酚胺制剂(例如多巴胺、多巴酚丁胺和多卡巴 胺)、PDE III抑制剂(例如氨力农、奥普力农和米力农)、地诺帕明、泛癸利 酮、匹莫苯、左西孟旦、牛磺酸、维司力农、卡培立肽和考福新。抗心律失常 药物的例子包括阿马灵、吡美诺、普鲁卡因胺、西苯唑啉、丙吡胺、奎尼丁、 阿普林定、美西律、利多卡因、安替比林、吡西卡尼、普罗帕酮、氟卡尼、阿 替洛尔、醋丁洛尔、索他洛尔、普萘洛尔、美托洛尔、吲哚洛尔、胺碘酮、尼 非卡兰、地尔硫苄普地尔和维拉帕米。抗高血脂药的例子包括阿伐他汀、 辛伐他汀、普伐他汀钠、氟伐他汀钠、克利贝特、氯贝丁酯、双贝特、非诺贝 特、苯扎贝特、2-甲基咪唑和1-氯-2，3-环氧丙烷的聚合物(colestimide)以及考 来烯胺。免疫抑制剂的例子包括硫唑嘌呤、咪唑立宾、环孢霉素A、他克莫司、 胍立莫司和甲氨喋呤。

细胞死亡/癌症

增加sirtuin蛋白水平和/或活性的sirtuin调节化合物可以给予最近接受或可 能接受一定剂量放射或毒素的对象。在一个实施方案中，放射或毒素的剂量作 为与工作相关的或医疗过程的部分接受，例如，工作在核电站、飞行飞机、X 射线、CAT扫描或医疗成像的放射染料给药。在这样一个实施方案中，化合物 作为预防措施给予。在另一个实施方案中，放射或毒素接触是无意中接受的， 例如，工业事故的结果、居住在天然辐射位置、恐怖袭击或包含放射或毒性物 质的战争袭击。在这种情形下，化合物优选在接触后尽可能快地给予以抑制细 胞凋亡和急性辐射综合征的后续发展。

sirtuin调节化合物也可以用于治疗和/或预防癌症。在某些实施方案中，增 加sirtuin蛋白水平和/或活性的sirtuin调节化合物可以用于治疗和/或预防癌症。 能量限制已经与包括癌症的衰老相关的障碍发生率的降低相联系(参见例如， Bordone and Guarente，Nat.Rev.Mol.Cell Biol.(2005 epub)；Guarente and Picard，Cell 120：473-82(2005)；Berrigan，等，Carcinogenesis 23：817-822(2002)；和Heilbronn and Ravussin，Am.J.Clin.Nutr.78：361-369(2003))。附加地，已经显示来自于 酵母的Sir蛋白质对通过葡萄糖限制的寿命延长是必需的(参见例如，Lin等， Science 289：2126-2128(2000)；Anderson等，Nature 423：181-185(2003))， 一种能量限制的酵母模型。相应地，sirtuin蛋白水平和/或活性的增加可能对治 疗和/或预防例如癌症的衰老相关的障碍的发生率事有益的。在其他实施方案 中，降低sirtuin蛋白水平和/或活性的sirtuin调节化合物可以用于治疗或预防癌 症。例如，抑制化合物可以用于刺激例如p53的底物乙酰化，由此增加细胞凋 亡，以及减少细胞和有机体的寿命，使它们对应激更敏感，和/或增加细胞或有 机体的辐射敏感性和/或化学敏感性。因此，抑制化合物可以用于例如治疗癌症。 可以使用sirtuin调节化合物治疗的示例性癌症为脑和肾的癌症；激素依赖型癌 症，包括乳腺、前列腺、睾丸和卵巢癌；淋巴瘤和白血病。在与实体瘤相关的 癌症中，调节化合物可以直接给药于肿瘤中。血细胞癌，例如白血病，可以通 过将调节化合物给药于血流或骨髓中治疗。良性细胞生长也可以被治疗，例如 疣。可以治疗的其他疾病包括自身免疫性疾病，例如，全身性红斑狼疮、硬皮 病和关节炎，其中自身免疫细胞应该被移除。病毒感染，例如疱疹、HIV、腺 病毒和HTLV-1相关的恶性和良性障碍也可以通过给予sirtuin调节化合物治疗。 供选择地，细胞可以取自经过先体外后体内处理以去除某些不希望有的细胞如 癌细胞的对象，并给予回至相同或不同的对象。

可以与本文描述的具有抗癌活性的调节化合物(例如，诱导细胞凋亡的化 合物，减少寿命的化合物或使细胞对应激敏感的化合物)一起给予的化学治疗 剂包括：氨鲁米特、安吖啶、阿那曲唑、门冬酰胺酶、bcg、比卡鲁胺、博来霉 素、布舍瑞林、白消安、喜树碱、卡培他滨、卡铂、卡莫司汀、苯丁酸氮芥、 顺铂、克拉曲滨、氯膦酸盐、秋水仙碱、环磷酰胺、环丙孕酮、阿糖胞苷、达 卡巴嗪、放线菌素D、柔红霉素、双烯雌酚、己烯雌酚、多西他赛、多柔比星、 表柔比星、雌二醇、雌莫司汀、依托泊苷、依西美坦、非格司亭、氟达拉滨、 氟氢可的松、氟尿嘧啶、氟甲睾酮、氟他胺、吉西他滨、染料木素、戈舍瑞林、 羟基脲、伊达比星、异环磷酰胺、伊马替尼、干扰素、依立替康、ironotecan、 来曲唑、亚叶酸钙、醋酸亮丙瑞林、左旋咪唑、洛莫司汀、氮芥、甲羟孕酮、 甲地孕酮、美法仑、巯嘌呤、美司钠、氨甲喋呤、丝裂霉素、米托坦、米托蒽 醌、尼鲁米特、诺考达唑、奥曲肽、奥沙利铂、紫杉醇、氨羟二磷酸二钠、喷 司他丁、普卡霉素、卟菲尔钠、丙卡巴肼、雷替曲塞、美罗华、链佐星、苏拉 明、三苯氧胺、替莫唑氨、替尼泊苷、睾丸酮、硫鸟嘌呤、塞替派、二氯环戊 二烯钛、托泊替康、曲妥单抗、维甲酸、长春碱、长春新碱、长春地辛和长春 瑞滨。

这些化学治疗剂可以根据它们的作用机理分为例如以下的组：抗代谢物/抗 癌药，例如嘧啶类似物(5-氟尿嘧啶、氟脲嘧啶脱氧核苷、卡培他滨、吉西他 滨和阿糖胞苷)和嘌呤类似物，叶酸盐拮抗剂和相关抑制剂(巯嘌呤、硫乌嘌 呤、喷司他丁和2-氯脱氧腺苷(克拉曲滨))；抗增殖/抗有丝分裂药，包括天 然产物例如长春花碱(长春碱、长春新碱和长春瑞滨)，微管破裂剂例如紫杉 烷(紫杉醇、多西紫杉醇)、新长春碱、长春碱、诺考达唑、埃坡霉素和诺维 本，epidipodophyllotoxins(替尼泊苷)，DNA损伤剂(放射菌素、安吖啶、蒽 环类抗生素、博来霉素、白消安、喜树碱、卡铂、苯丁酸氮芥、顺铂、环磷酰 胺、环磷酰胺、放线菌素D、柔红霉素、多西紫杉醇、多柔比星、表柔比星、 六甲蜜胺奥沙利铂(hexamethylmelamineoxaliplatin)、异环磷酰胺、美法仑、 merchlorethamine、丝裂霉素、米托蒽醌、亚硝脲、紫杉醇、普卡霉素、丙卡巴 肼、替尼泊苷、噻替派和依托泊苷(VP16))；抗生素例如放线菌素D(放线 霉素D)、柔红霉素、多柔比星(阿霉素)、伊达比星、蒽环类抗生素、米托 蒽醌、博来霉素、普卡霉素(光辉霉素)和丝裂霉素；酶(系统地代谢L-天冬 氨酸并剥夺没有能力合成自己的天冬氨酸的细胞的L-门冬酰胺酶)；抗血小板 药；抗增殖/抗有丝分裂烷化剂例如氮芥(氮芥、环磷酰胺和类似物、美法仑、 苯丁酸氮芥)、氮丙啶和安乃近(六甲蜜胺和硫替派)、烷基磺酸盐-白消安、 亚硝脲(卡莫司汀(BCNU)和类似物、链佐星)、trazenes-氮烯咪胺(DTIC)； 抗增殖/抗有丝分裂抗代谢物例如叶酸类似物(甲氨喋呤)；铂配位络合物(顺 铂、卡铂)、丙卡巴肼、羟基脲、米托坦、氨鲁米特；激素、激素类似物(雌 激素、他莫昔芬、戈舍瑞林、比卡鲁胺、尼鲁米特)和芳香酶抑制剂(来曲唑、 阿那曲唑)；抗凝剂(肝素、合成肝素盐和其他凝血酶抑制剂)；纤维蛋白溶 解剂(例如组织纤维蛋白溶酶原激活剂、链激酶和尿激酶)、阿司匹林、COX-2 抑制剂、双嘧达莫、噻氯匹定、氯吡格雷、阿昔单抗；抗迁移药；抗分泌药 (breveldin)；免疫抑制剂(环孢霉素A、他克莫司(FK-506)、西罗莫司(雷 帕霉素)、硫唑嘌呤、霉酚酸酯)；抗血管生成化合物(TNP-470、染料木素) 和生长因子抑制剂(血管内皮生长因子(VEGF)抑制剂、纤维原细胞生长因子 (FGF)抑制剂、表皮生长因子(EGF)抑制剂)；血管紧张素受体阻断剂；一 氧化氮供体；反义寡核苷酸；抗体(曲妥单抗)；细胞周期抑制剂和分化诱导 剂(维甲酸)；mTOR抑制剂，拓扑异构酶抑制剂(多柔比星(阿霉素)、安 吖啶、喜树碱、柔红霉素、放线菌素D、eniposide、表柔比星、依托泊苷、伊 达比星、伊立替康(CPT-11)和米托蒽醌、托泊替康、伊立替康)、皮质激素 (可的松、地塞米松、氢化可的松、甲基强的松龙、泼尼松和普瑞司坦)；生 长因子信号转导激酶抑制剂；线粒体功能障碍诱导剂和半胱天冬酶活化剂；染 色质破裂剂。

这些化学治疗剂可以与本文描述的作为诱导细胞死亡或减少寿命或增加对 应激敏感性的sirtuin调节化合物一起使用和/或组合其他化学治疗药物。已经开 发了许多组合治疗，包括但不限于表1中所列的那些。

表1 治疗癌症的示例性组合治疗

  名称   治疗药物   ABV   多柔比星、博来霉素、长春碱   ABVD   多柔比星、博来霉素、长春碱、达卡巴嗪   AC(乳腺)   多柔比星、环磷酰胺   AC(肉瘤)   多柔比星、顺铂   AC(成神经细胞瘤)   环磷酰胺、多柔比星   ACE   环磷酰胺、多柔比星、依托泊苷   ACe   环磷酰胺、多柔比星   AD   多柔比星、达卡巴嗪   AP   多柔比星、顺铂   ARAC-DNR   阿糖胞苷、柔红霉素   B-CAVe   博来霉素、洛莫司汀、多柔比星、长春碱   BCVPP   卡莫司汀、环磷酰胺、长春碱、丙卡巴肼、泼尼   松   BEACOPP   博来霉素、依托泊苷、多柔比星、环磷酰胺、长   春新碱、丙卡巴肼、泼尼松、非格司亭   BEP   博来霉素、依托泊苷、顺铂

  名称   治疗药物   BIP   博来霉素、顺铂、异环磷酰胺、美司钠   BOMP   博来霉素、长春新碱、顺铂、丝裂霉素   CA   阿糖胞苷、天冬酰胺酶   CABO   顺铂、甲氨喋呤、博来霉素、长春新碱   CAF   环磷酰胺、多柔比星、氟尿嘧啶   CAL-G   环磷酰胺、柔红霉素、长春新碱、泼尼松、天冬   氨酰酶   CAMP   环磷酰胺、多柔比星、甲氨喋呤、丙卡巴肼   CAP   环磷酰胺、多柔比星、顺铂   CaT   卡铂、紫杉醇   CAV   环磷酰胺、多柔比星、长春新碱   CAVE ADD   CAV和依托泊苷   CA-VP16   环磷酰胺、多柔比星、依托泊苷   CC   环磷酰胺、卡铂   CDDP/VP-16   顺铂、依托泊苷   CEF   环磷酰胺、表柔比星、氟尿嘧啶   CEPP(B)   环磷酰胺、依托泊苷、泼尼松、有或没有/博来霉   素   CEV   环磷酰胺、依托泊苷、长春新碱   CF   顺铂、氟尿嘧啶或卡铂、氟尿嘧啶   CHAP   环磷酰胺或环磷酰胺、六甲蜜胺、多柔比星、顺   铂   ChlVPP   苯丁酸氮芥、长春碱、丙卡巴肼、泼尼松   CHOP   环磷酰胺、多柔比星、长春新碱、泼尼松   CHOP-BLEO   将博来霉素加到CHOP中   CISCA   环磷酰胺、多柔比星、顺铂   CLD-BOMP   博来霉素、顺铂、长春新碱、丝裂霉素   CMF   甲氨喋呤、氟尿嘧啶、环磷酰胺   CMFP   环磷酰胺、甲氨喋呤、氟尿嘧啶、泼尼松   CMFVP   环磷酰胺、甲氨喋呤、氟尿嘧啶、长春新碱、泼   尼松   CMV   顺铂、甲氨喋呤、长春碱   CNF   环磷酰胺、米托蒽醌、氟尿嘧啶   CNOP   环磷酰胺、米托蒽醌、长春新碱、泼尼松   COB   顺铂、长春新碱、博来霉素

 名称   治疗药物  CODE   顺铂、长春新碱、多柔比星、依托泊苷  COMLA   环磷酰胺、长春新碱、甲氨蝶呤、亚叶酸钙、阿   糖胞苷  COMP   环磷酰胺、长春新碱、甲氨喋呤、泼尼松  Cooper疗法   环磷酰胺、甲氨喋呤、氟尿嘧啶、长春新碱、泼   尼松  COP   环磷酰胺、长春新碱、泼尼松  COPE   环磷酰胺、长春新碱、顺铂、依托泊苷  COPP   环磷酰胺、长春新碱、丙卡巴肼、泼尼松  CP(慢性淋巴细胞白  血病)   苯丁酸氮芥、泼尼松  CP(卵巢癌)   环磷酰胺、顺铂  CT   顺铂、紫杉醇  CVD   顺铂、长春碱、达卡巴嗪  CVI   卡铂、依托泊苷、异环磷酰胺、美司钠  CVP   环磷酰胺、长春新碱、泼尼松  CVPP   洛莫司汀、丙卡巴肼、泼尼松  CYVADIC   环磷酰胺、长春新碱、多柔比星、达卡巴嗪  DA   柔红霉素、阿糖胞苷  DAT   柔红霉素、阿糖胞苷、硫鸟嘌呤  DAV   柔红霉素、阿糖胞苷、依托泊苷  DCT   柔红霉素、阿糖胞苷、硫鸟嘌呤  DHAP   顺铂、阿糖胞苷、地塞米松  DI   多柔比星、异环磷酰胺  DTIC/他莫昔芬   达卡巴嗪、他莫昔芬  DVP   柔红霉素、长春新碱、泼尼松  EAP   依托泊苷、多柔比星、顺铂  EC   依托泊苷、卡铂  EFP   依托泊苷、氟尿嘧啶、顺铂  ELF   依托泊苷、亚叶酸钙、氟尿嘧啶  EMA 86   米托蒽醌、依托泊苷、阿糖胞苷  EP   依托泊苷、顺铂  EVA   依托泊苷、长春碱  FAC   氟尿嘧啶、多柔比星、环磷酰胺  FAM   氟尿嘧啶、多柔比星、丝裂霉素

  名称   治疗药物   FAMTX   甲氨喋呤、亚叶酸钙、多柔比星   FAP   氟尿嘧啶、多柔比星、顺铂   F-CL   氟尿嘧啶、亚叶酸钙   FEC   氟尿嘧啶、环磷酰胺、表柔比星   FED   氟尿嘧啶、依托泊苷、顺铂   FL   氟他胺、醋酸亮丙瑞林   FZ   氟他胺、醋酸性瑞林植入剂   HDMTX   甲氨喋呤、亚叶酸钙   Hexa-CAF   六甲蜜胺、环磷酰胺、甲氨喋呤、氟尿嘧啶   ICE-T   异环磷酰胺、卡铂、依托泊苷、紫杉醇、美司钠   IDMTX/6-MP   甲氨喋呤、巯嘌呤、亚叶酸钙   IE   异环磷酰胺、依托泊苷、美司钠   IfoVP   异环磷酰胺、依托泊苷、美司钠   IPA   异环磷酰胺、顺铂、多柔比星   M-2   长春新碱、卡莫司汀、环磷酰胺、泼尼松、美法   仑   MAC-III   甲氨喋呤、亚叶酸钙、放线菌素D、环磷酰胺   MACC   甲氨喋呤、多柔比星、环磷酰胺、洛莫司汀   MACOP-B   甲氨喋呤、亚叶酸钙、多柔比星、环磷酰胺、长   春新碱、博来霉素、泼尼松   MAID   美司钠、多柔比星、异环磷酰胺、达卡巴嗪   m-BACOD   博来霉素、多柔比星、环磷酰胺、长春新碱、地   塞米松、甲氨喋呤、亚叶酸钙   MBC   甲氨喋呤、博来霉素、顺铂   MC   米托蒽醌、阿糖胞苷   MF   甲氨喋呤、氟尿嘧啶、亚叶酸钙   MICE   异环磷酰胺、卡铂、依托泊苷、美司钠   MINE   美司钠、异环磷酰胺、米托蒽醌、依托泊苷   mini-BEAM   卡莫司汀、依托泊苷、阿糖胞苷、美法仑   MOBP   博来霉素、长春新碱、顺铂、丝裂霉素   MOP   氮芥、长春新碱、丙卡巴肼   MOPP   氮芥、长春新碱、丙卡巴肼、泼尼松   MOPP/ABV   氮芥、长春新碱、丙卡巴肼、泼尼松、多柔比星、   博来霉素、长春碱   MP(多发性骨髓瘤)   美法仑、泼尼松

  名称   治疗药物   MP(前列腺癌)   米托蒽醌、泼尼松   MTX/6-MO   甲氨喋呤、巯嘌呤   MTX/6-MP/VP   甲氨喋呤、巯嘌呤、长春新碱、泼尼松   MTX-CDDPAdr   甲氨喋呤、亚叶酸钙、顺铂、多柔比星   MV(乳腺癌)   丝裂霉素、长春碱   MV(急性髓细胞白   血病)   米托蒽醌、依托泊苷   M-VAC甲氨喋呤   长春碱、多柔比星、顺铂   MVP丝裂霉素   长春碱、顺铂   MVPP   氮芥、长春碱、丙卡巴肼、泼尼松   NFL   米托蒽醌、氟尿嘧啶、亚叶酸钙   NOVP   米托蒽醌、长春碱、长春新碱   OPA   长春新碱、泼尼松、多柔比星   OPPA   将丙卡巴嗪加到OPA中   PAC   顺铂、多柔比星   PAC-I   顺铂、多柔比星、环磷酰胺   PA-CI   顺铂、多柔比星   PC   紫杉醇、卡铂或紫杉醇、顺铂   PCV   洛莫司汀、丙卡巴肼、长春新碱   PE   紫杉醇、雌莫司汀   PFL   顺铂、氟尿嘧啶、亚叶酸钙   POC   泼尼松、长春新碱、洛莫司汀   ProMACE   泼尼松、甲氨喋呤、亚叶酸钙、多柔比星、环磷   酰胺、依托泊苷   ProMACE/cytaBOM   泼尼松、多柔比星、环磷酰胺、依托泊苷、阿糖   胞苷、博来霉素、长春新碱、甲氨喋呤、亚叶酸   钙、磺胺甲基异噁唑   PRoMACE/MOPP   泼尼松、多柔比星、环磷酰胺、依托泊苷、氮芥、   长春新碱、丙卡巴肼、甲氨喋呤、亚叶酸钙   Pt/VM   顺铂、替尼泊苷   PVA   泼尼松、长春新碱、天冬氨酰酶   PVB   顺铂、长春碱、博来霉素   PVDA   泼尼松、长春新碱、柔红霉素、天冬氨酰酶   SMF   链佐星、丝裂霉素、氟尿嘧啶   TAD   氮芥、多柔比星、长春碱、长春新碱、博来霉素、

  名称   治疗药物   依托泊苷、泼尼松   TCF   紫杉醇、顺铂、氟尿嘧啶   TIP   紫杉醇、异环磷酰胺、美司钠、顺铂   TTT   甲氨喋呤、阿糖胞苷、氢化可的松   Topo/CTX   环磷酰胺、托泊替康、美司钠   VAB-6   环磷酰胺、放线菌素D、长春碱、顺铂、博来霉   素   VAC   长春新碱、放线菌素D、环磷酰胺   VACAdr   长春新碱、环磷酰胺、多柔比星、放线菌素D、   长春新碱   VAD   长春新碱、多柔比星、地塞米松   VATH   长春碱、多柔比星、塞替派、氟甲睾酮   VBAP   长春新碱、卡莫司汀、多柔比星、泼尼松   VBCMP   长春新碱、卡莫司汀、美法仑、环磷酰胺、泼尼   松   VC   长春瑞滨、顺铂   VCAP   长春新碱、环磷酰胺、多柔比星、泼尼松   VD   长春瑞滨、多柔比星   VelP   长春碱、顺铂、异环磷酰胺、美司钠   VIP   依托泊苷、顺铂、异环磷酰胺、美司钠   VM   丝裂霉素、长春碱   VMCP   长春新碱、美法仑、环磷酰胺、泼尼松   VP   依托泊苷、顺铂   V-TAD   依托泊苷、硫鸟嘌呤、柔红霉素、阿糖胞苷   5+2   阿糖胞苷、柔红霉素、米托蒽醌   7+3   阿糖胞苷，和/柔红霉素或伊达比星或米托蒽醌   “8合1”   甲泼尼龙、长春新碱、洛莫司汀、丙卡巴肼、羟   基脲、顺铂、阿糖胞苷、达卡巴嗪

除了常规的化学治疗外，本文描述的能够诱导细胞死亡或减少寿命的sirtuin 调节化合物也可以与反义RNA、RNAi或其他多核苷酸一起使用，来抑制细胞 性部分的表达，细胞性部分导致不希望的细胞增殖，是常规化学治疗的靶点。 仅仅举例说明，这些靶点是生长因子、生长因子受体、细胞周期调节蛋白、转 录因子或信号转导激酶。

包含sirtuin调节化合物和常规化学治疗药物的组合治疗可能比本领域已知 的组合治疗有利，因为组合允许常规化学治疗药物在较低剂量下发挥更大的作 用。在一个优选的实施方案中，当与sirtuin调节化合物组合使用时，化学治疗 药或常规化学治疗药的组合的有效剂量(ED50)至少比单独化学治疗药的ED50 小2倍，甚至更优选小5倍、10倍、或甚至25倍。相反，当与本文描述的sirtuin 调节化合物组合使用时，这种化学治疗药或其组合的治疗指数(TI)至少比单 独的常规化学治疗药物疗法高2倍，甚至更优选高5倍、10倍或甚至25倍。 神经元疾病/障碍

在某些方面，增加sirtuin蛋白水平和/或活性的sirtuin调节化合物可以用于 治疗患有神经变性疾病和中枢神经系统(CNS)、脊髓或外周神经系统(PNS) 的创伤性或机械性损伤的病人。神经变性疾病一般包括人脑质量和体积的减少， 这是由于脑细胞的萎缩和/或死亡，这比健康人更为深奥并且归因于衰老。由于 特定脑区域的进行性退化(例如，神经细胞功能障碍和死亡)，神经变性疾病可 以在长期正常脑功能后逐渐进展。供选择地，神经变性疾病可以快速发病，例 如与创伤或毒素相关的神经变性疾病。脑变性的实际发生可以先与临床表现很 多年。神经变性疾病的例子包括但不限于阿尔茨海默病(AD)、帕金森病(PD)、 亨廷顿舞蹈病(HD)、肌萎缩性侧索硬化(ALS；Lou Gehrig病)、弥漫性Lewy 体疾病、舞蹈病-棘状红细胞增多、原发性侧束硬化症、眼部疾病(视觉神经炎)、 化疗诱导的神经病(例如，来源于长春新碱、紫杉醇、bortezomib)、糖尿病诱 导的神经病和遗传性共济失调。增加sirtuin蛋白水平和/或活性的sirtuin调节化 合物可以用于治疗这些障碍和下面所述的其它障碍。

AD是慢性、无法治愈和不能停止的CNS障碍，其逐渐发生，导致记忆丧 失、异常行为、人格改变和思考能力的下降。这些损失与特定类型脑细胞的死 亡和其之间的连接与支持网络(例如，神经胶质细胞)的破坏相关。AD描述为 童年发育的逆转。在患有AD的大部分人中，症状出现于60岁后。最早期的症 状包括近期记忆的丧失、错误判断和人格改变。疾病随后，患有AD的病人会 忘记怎么做像洗手这样简单的工作。终于，患有AD的病人丧失所有推理能力 并变得依赖他人进行日常护理。最后，疾病使病人变得虚弱而卧床不起，并通 常会发展共存性疾病。

PD是慢性、无法治愈和不能停止的CNS障碍，其逐渐发生并导致不受控 制的身体运动、僵硬、震颤和运动障碍。这些运动系统问题与产生多巴胺的脑 部区域的脑细胞死亡相关，多巴胺是帮助控制肌肉活动性的化学物质。在患有 PD的大多数人中，症状出现于50岁后。PD的始发症状为影响四肢的显著震颤， 特别在手或唇。PD随后特征性症状是僵硬或运动迟缓、行动缓慢、弯腰体位和 损伤性平衡力。广泛的继发症状例如记忆丧失、痴呆、抑郁、情绪变化、吞咽 困难、异常言语、性功能障碍和膀胱和肠道问题。这些症状会开始妨碍常规的 活动，例如把持叉子或读报。最后，患有PD的病人变得深度残疾并卧床不起。

ALS(运动神经元病)是慢性、无法治愈和不能停止的CNS障碍，其攻击 运动神经元，运动神经元为连接脑与骨骼肌的CNS部分。在ALS中，运动神 经元变质并最终死亡，虽然人脑正常地保留完全的功能和灵敏，运动指令不会 到达肌肉。大多数患有ALS的人在40岁和70岁间。首先衰弱的运动神经元为 控制手臂或腿的运动神经元。患有ALS的人行动不便，他们会掉落物品、跌倒、 含糊言语并不受控制的笑或哭。最终四肢肌肉停用而开始萎缩。这种肌无力会 变得虚弱，病人会需要轮椅或变得不能起床活动。

这些神经性疾病的诱因大部分依然未知。它们通常定义为不同的疾病，但 在基本过程中清楚地表现特别的相似性，并且通常显示交错的症状比偶然预期 其单一症状要更多。当前疾病定义不能合适地处理交错的问题，需要新的神经 变性障碍的分类。

HD是另一种神经变性疾病，起因于大脑某些区域的神经元遗传性程序性退 化。这种退化引起不受控制的运动、智能丧失和情感障碍。HD是家族性疾病。 通过野生性基因的显性突变由父母传递于孩子。HD的一些早期症状为心境不 稳、抑郁、易怒或驾驶、学习新事物、记忆事情或作决定困难。随着疾病进行， 集中注意力于智力任务变得愈来愈困难，病人在进食和吞咽上会有困难。

泰-萨克斯病和桑德霍夫病是缺乏溶酶体β-己酮胺酶引起的糖脂贮存病 (Gravel等，The Metabolic Basis of Inherited Disease，编.Scriver等，McGraw-Hill， New York，2839-2879页，1995)。在这两种病中，GM2神经节苷脂和β-己酮 胺酶相关的糖脂的底物在神经系统中聚集并引发急性神经变性。在大多数严重 形式中，症状发病开始于早期婴儿期。严重的神经变性病程随后发生，受侵袭 的婴儿表现出运动功能障碍、癫痫发作、视力丧失和耳聋。死亡通常发生于在 2-5岁。已经证实了通过细胞凋亡机理的神经元丧失(Huang等， Hum.Mol.Genet.6：1879-1885，1997)。

细胞凋亡在免疫系统AIDS发病机理中起到重要作用是公知的。但是，HIV-1 也诱导神经性疾病。Shi等，(J.Clin.Invest.98：1979-1990，1996)检测了体外模 型中CNS和来源于AIDS病人的脑组织中HIV-1感染诱导的细胞凋亡，发现初 期脑培养物的HIV-1感染诱导体外神经元和星形细胞的细胞凋亡。在来源于 10/11 AIDS病人的脑组织中也检测出神经元和星形细胞的细胞凋亡，这些病人 包括5/5患有HIV-1痴呆的病人和4/5非痴呆的病人。

有四种与HIV相关的外周神经病，即感觉神经病、AIDP/CIPD、药物造成 的神经病和CMV相关。

与AIDS相关的神经病的最普通类型是末梢对称性多发性神经病(DSPN)。 这种综合征是严重变性的结果，其特征为麻木和感觉发麻。DSPN很少引起严 重的异常，多数导致麻木或脚发麻和踝关节反射迟缓。其与更多严重的免疫抑 制广泛发生，并稳定地进展。使用三环抗抑郁药治疗缓解症状，但不会影响潜 在的神经损伤。

已知的较不常见但更严重的神经病类型为急性或慢性炎性脱髓鞘性多神经 病(AIDP/CIDP)。在AIDP/CIDP中，有覆盖神经冲动的脂肪膜损伤。这种神 经病包括炎症，类似于经常认为的长期使用AZT的肌肉退化。这是HIV感染的 初期表现，病人不会抱怨疼痛，但却不能回应标准的反射试验。这种神经病可 能与血清转化相关，在这种情况中有时它会自发地溶解。它可以作为HIV感染 的征兆，并显示是可以考虑抗病毒疗法的时机。AIDP/CIDP可能起源是自身免 疫。

药物诱导或毒性神经病会非常痛苦。和其他药物例如，长春新碱、苯妥英 (抗癫痫药物)、高剂量维生素、异烟肼和叶酸拮抗剂一样，抗病毒药物通常引 起外周神经病。外周神经病常常用于抗病毒药物剂量限制副作用的临床试验， 其意味着不能给予更多的药物。另外，这种药物的使用会使神经病恶化而非减 轻。通常，这些药物诱导的神经病在停药后是可逆的。

CMV会引起AIDS中一些神经综合征，包括脑炎、脊髓炎和多发性神经根 病。

神经元丧失也是朊病毒病的突出特征，例如人克罗伊茨费尔特-雅各布病， 牛BSE(疯牛病)，绵羊和山羊的羊痒病(Scrapie Disease)和猫海绵状脑病(FSE)。 增加sirtuin蛋白水平和/或活性的sirtuin调节化合物对治疗或预防由于这些在先 疾病引起的神经元丧失是有益的。

在另一个实施方案中，增加sirtuin蛋白水平和/或活性的sirtuin调节化合物 可以用于治疗或预防任何包括轴索病的疾病或障碍。末梢轴索病是一种外周神 经病，起因于外周神经系统(PNS)神经元的一些代谢或毒性障碍。它是神经 对代谢或毒性障碍最普通的反应，会由例如糖尿病、肾衰竭、缺失综合征例如 营养不良和酒精中毒等代谢疾病和毒素或药物的作用引起。末梢轴索病最常见 的起因是糖尿病，最常见的末梢轴索病是糖尿病性神经病。轴突最末梢的部分 通常首先退化，轴突萎缩向神经细胞体缓慢延伸。如果伤害性刺激被移除，再 生是可能的，尽管预后根据刺激的持续时间和严重度而降低。那些患有末梢轴 索病的人通常表现对称glove-stocking感觉运动障碍。深度腱反射和自主神经系 统(ANS)功能在侵袭区域也会丧失或缩减。

糖尿病性神经病是与糖尿病相关的神经性障碍。这些症况通常起因于糖尿 病微血管损伤，包括供应神经的小血管(神经滋养血管)。与糖尿病性神经病相 关的相对普通的病况包括第三脑神经；单一神经病变；多发性单神经炎；糖尿 病性肌萎缩；疼痛多发性神经病；自主神经病；和胸腹神经病。糖尿病性神经 病的临床表现包括，例如，感觉运动多发性神经病例如麻木、感觉缺失、感觉 迟钝和夜间疼痛；自主神经病例如胃排空延迟或胃轻瘫；和颅性神经病例如眼 球运动(第三)神经病或胸或腰脊神经的单一神经病变。

外周神经病是用于外周神经系统神经损伤的医学术语，其可以由神经疾病 或全身性疾病的副作用引起。外周神经病在其表现和起因上不同，会影响神经 或神经肌接点。外周神经病的主要诱因包括癫痫发作、营养缺乏、和HIV，虽 然糖尿病是最可能的诱因。停留在一个位置太长时间的机械压迫、肿瘤、神经 内出血、暴露身体于极端的条件例如放射、低温或毒物也会引起外周神经病。

在一个示例性的实施方案中，增加sirtuin蛋白水平和/或活性的sirtuin调 节化合物可以用于治疗或预防多发性硬化症(MS)，包括复发性MS和单症状 MS、和其他脱髓鞘病况，例如，慢性炎性脱髓鞘性多神经病、或与之相关的症 状。

MS是慢性的、中枢神经系统常常致残的疾病。各种证据集中地指向这样的 可能性，即该疾病是由免疫功能的障碍引起的，虽然这种障碍的诱因还没有确 定。这种障碍使免疫系统的细胞攻击髓磷脂，髓磷脂是包含环绕位于中枢神经 系统(“CNS”)中的神经轴突的绝缘鞘的脂肪。当髓磷脂受损时，电脉冲不能 在脑和脊髓中沿神经纤维途径迅速或正常传导。这导致轴突中正常导电性的破 裂、疲劳和视觉、力量、协调、平衡、感觉、和膀胱和肠功能的障碍。

这样，MS是现在普通和熟知的神经障碍，其特征在于可能发生于CNS的 任何部位的炎症斑块和脱髓鞘，但是，几乎总是没有与其相关的外周神经的参 与。脱髓鞘产生与围绕着电索的绝缘体中的裂化或撕裂相类似的情况。即，当绝 缘鞘破裂时，电路会短路，与其相连的电装置会间歇工作或不工作。这种环绕 神经纤维的鞘损伤导致穿过大脑和脊髓的神经短路并因而导致MS症状。进一 步发现这种脱髓鞘出现斑块，与沿着整个CNS是相反的。另外，这种脱髓鞘可 能是间歇性的。因此，这种斑块在时间和空间上是散布的。

相信发病包括血脑屏障的局部破坏，其引起局限性免疫和炎症应答，并伴 有对髓磷脂及神经元的后续损伤。

临床上，MS存在于两性并在任何年龄发生。但是，其最通常表现于相对年 轻的成年人，常常伴有单一局灶性损伤，例如视神经损伤、局部麻木(感觉丧 失)、或感觉异常(感觉局部丧失)、或肌无力。另外，眩晕、复视、局部痛、 无节制和手臂和腿的疼痛会发生于颈曲，以及大量不同种类的不常见的症状。

MS最初的攻击通常是暂时的，在进一步攻击发生前它可以是数周、数月或 数年。一些个体会很多年里享受稳定、相对没有症状的情况，而一些其他不幸 的个体会经历持续的恶化的病程，并最终完全麻痹。最通常存在一连串的缓和 和复发，其中复发会使病人比以前多少更糟糕。复发可以由应激事件、病毒感 染或毒物而引发。其中，升高的体温例如发热会使情况更糟，或通过例如冷水 浴降低温度会使情况好转。

在另一个实施方案中，增加sirtuin蛋白水平和/或活性的sirtuin调节化合物 可以用于治疗神经创伤，包括由于疾病、损伤(包括外科手术)、或环境创伤(例 如，神经毒素、酒精中毒等)的创伤。

增加sirtuin蛋白水平和/或活性的sirtuin调节化合物也可用于预防、治疗和 缓解各种PNS障碍的症状，例如下列所述的症状。PNS是由通向或从脊髓和 CNS的神经分支的神经组成。外周神经处理身体不同系列的功能，包括感觉、 运动和自律性功能。当个体患有外周神经病时，PNS神经被损伤。神经损伤会 起因于多种原因，例如疾病、躯体损伤、中毒、或营养不良。这些药物既会影 响传入神经也会影响传出神经。取决于损伤的原因，神经细胞轴突、其保护髓 鞘、或二者会被损伤或破坏。

术语“外周神经病”包括大量障碍，其中脑和脊髓外的神经-外周神经-已经 损坏。外周神经病也称为外周神经炎，或者如果涉及许多神经，会使用术语多 发性神经病或多发性神经炎。

外周神经病是广泛分布的障碍，存在许多根本的原因。这些原因中的一些 是普通的，例如糖尿病，其他是非常罕见的，例如，丙烯酰胺中毒和某些遗传 疾病。外周神经病最普通的世界性的原因是麻风病。麻风病是由细菌麻风分枝 杆菌引起的，其攻击受侵袭的人的外周神经。

麻风病在美国非常罕见，在美国，糖尿病是外周神经病的最普通的已知原 因。据估计，在美国和欧洲超过1千7百万的人患有糖尿病相关的多发性神经 病。许多神经病是自发性的；没有找到已知的原因。在美国最普通的遗传性外 周神经病是进行性神经性肌萎缩，其影响大约125,000人。

较为熟知的外周神经病另一种是Guillain-Barré综合征，其起因于与病毒性 疾病相关的并发症，例如细胞巨化病毒、Epstein-Barr病毒、和人类免疫缺陷病 毒(HIV)、或细菌感染，包括空肠弯曲杆菌和莱姆病。全世界发病率是每年大 约每100,000人中1.7例。外周神经病的其他众所周知的原因包括慢性酒精中毒、 水痘-带状疱疹病毒感染、肉毒杆菌中毒、和脊髓灰质炎。外周神经病会作为原 发性症状发展，或其归因于另外的疾病。例如，外周神经病只是例如淀粉样变 性神经病、某些癌症、或遗传神经学障碍的疾病的一种症状，这种疾病会影响 PNS和CNS，以及其他身体组织。

增加sirtuin蛋白水平和/或活性的sirtuin调节化合物可治疗的其他PNS疾病 包括：Brachial Plexus神经病(颈背根和第一胸根、神经干、束、和臂神经丛的 外周神经部分的疾病。临床表现包括区域性疼痛、感觉异常；肌无力、和上肢 感觉减退。这些疾病与创伤相关，包括产伤；胸腔出口综合征；赘生物、神经 炎、放射疗法；和其他疾病。参见Adams等，Principles of Neurology，第6版， 1351-2页)；糖尿病性神经病(与糖尿病相关的外周性、自律的、和颅神经症状)。 这些病况通常是因糖尿病性微血管损伤引起，包括供应神经的小血管(神经滋 养血管)。与糖尿病神经病相关的相对普通的病况包括：第三脑神经麻痹；单一 神经病变；多发性单神经炎；糖尿病性肌萎缩；疼痛性多发性神经病；自主神 经病；和胸腹神经病(参见Adam等，Principles of Neurology，第6版，1325页)； 单一神经病变(不同于弥散型外周神经功能障碍或与其迹象不相称的涉及单一 外周神经的疾病或创伤)。多发性单神经炎是指特征为多发的孤立神经损伤的疾 病。单一神经病变可能起因于广泛的原因，包括局部缺血；创伤损伤；压迫； 结缔组织疾病；累积创伤障碍；和其他疾病；神经痛(沿着外周或脑神经的路 径或分布发生的激烈的或酸痛)；外周神经系统赘生物(起因于外周神经组织的 赘生物)。这包括神经纤维瘤；神经鞘瘤；颗粒细胞瘤；和恶性外周鞘瘤(参见 DeVita Jr等，Cancer：Principles and Practice of Oncology，第5版，1750-1页)； 和神经压迫综合征(因内部或外部原因的神经或神经根的机械压迫)。这些会导 致由于例如髓鞘功能障碍或轴突损失，对神经冲动的传导阻滞。神经和神经鞘 损伤可以由局部缺血；炎症；或直接机械作用；神经炎(指示外周或脑神经炎 症的普通术语)引起。临床表现可包括疼痛；感觉异常；麻痹性痴呆；或感觉 过敏；多发性神经病(多发的外周神经病)。不同形式的分类是根据影响的神经 类型(例如，感觉的、运动的、或自律的)、神经损伤的分布(例如，末梢的对 近身体中央的)、原发受侵袭的神经部分(例如，脱髓鞘对轴突的)、病因学、 或遗传方式。

在另一个实施方案中，sirtuin活化化合物可以用于治疗或预防化学治疗诱导 的神经病。Sirtuin调节化合物可以先于化学治疗药给药前、在化学治疗药给药 的同时、和/或化学治疗药给药开始后给药。如果sirtuin活化化合物在化学治疗 药给药开始后给药，sirtuin活化化合物先于或在化学治疗诱导的神经病症状一 开始给药是希望的。

化学治疗药物会损伤神经系统的任何部分。幸运的是，脑病和脊髓病非常 罕见。外周神经损伤更为普通，会成为患有癌症如淋巴瘤的人经历的治疗的副 作用。大多数神经病影响感觉神经而非运动神经。因此，普通的症状是麻刺感、 麻木或丧失平衡。体内最长的神经看起来是最敏感的，因此大多数病人会报告 麻木或在他们的手和脚的发麻。

与神经病通常最相关的化学治疗药是长春花碱(最初衍生自一种长春花属 植物-Vinca plant genus的一种抗癌药物)和称为顺铂的含有铂的药物。长春花 碱包括药物长春碱、长春新碱和长春地辛。许多淋巴瘤的组合治疗例如CHOP 和CVP包括长春新碱，其为已知的最常引起这种问题的药物。事实上，正是神 经病的风险限制长春新碱的可以给予的剂量。

已经进行的研究表明大多数病人由于长春新碱治疗会丧失某些腿部反射并 会经历手指和脚趾的某种程度的麻刺感(感觉异常)。神经病在治疗的开始常常 不表现其症状但通常在几周后出现。在症状最初发生时停药不是必要的，但如 果神经病进展，这是必要的。病人向他们的医生报告这种症状是很重要的，因 为如果药物停用神经损伤是大多可逆的。如果症状缓和，大多数医生经常会减 少长春新碱的剂量或转用另外形式的长春花碱，例如长春碱或长春地辛。偶然 地，供应肠的神经会受影响，引起腹痛和便秘。

在另一个实施方案中，sirtuin 活化化合物可以用于治疗或预防聚谷氨酰胺 疾病(ployglutamine disease)。亨廷顿舞蹈病(HD)和1型脊髓小脑性共济失 调(SCA1)只是由包括三联体(triplet)序列重复扩张的动态突变引起的一类 遗传疾病的两个实例。关于这种共同的机理，这些疾病称为三核苷酸串连重复 疾病。已知至少14种这种疾病是影响人类的。其中9种，包括SCA1和亨廷顿 舞蹈病，具有CAG作为重复序列(参见下表2)。既然CAG编码的氨基酸称为 谷氨酰胺，这9种三核苷酸串联重复疾病统一称为聚谷氨酰胺疾病 (ployglutamine disease)。

尽管不同的聚谷氨酰胺疾病涉及的基因几乎没有共同点，但是它们引起的 疾病遵循明显相似的病程。每种疾病特征为不同组的神经细胞的进行性退化。 这些疾病的主要症状相似，虽然不相同，通常影响中年人。既然症状相似，聚 谷氨酰胺病假定通过共同的细胞性机理发展。在近些年中，科学家在解释这种 机理是什么上已经有了很大的进展。

在某些阈值上，在蛋白质中重复的谷氨酰胺数目越多，疾病发生越早，症 状越严重。这表明反常的长谷氨酰胺束使它们的宿主蛋白对神经细胞有毒性。

为了验证这种假设，科学家已经制造了表达具有长聚谷氨酰胺束蛋白质的 遗传工程小鼠。不管小鼠是否表达全长的蛋白质或只是蛋白的那些含有聚谷氨 酸盐束的部分，他们发展聚谷氨酰胺疾病的症状。这表明长聚谷氨酰胺束自身 损伤细胞，且不是引起其损伤的功能蛋白的一部分。

例如，SCA1的症状被认为不是由正常ataxin-1功能丧失直接引起的，而是 由ataxin-1和另一种称为LANP的蛋白质之间的相互作用引起的。LANP对神 经细胞相互联系从而为其生存是需要的。当突变体ataxin-1蛋白质在神经细胞中 聚集时，它“捕获”LANP蛋白质，干扰其正常功能。不久，LANP功能缺失 似乎引起神经细胞功能障碍。

表2 聚谷氨酰胺疾病概述

  疾病   基因   名称   染色体定   位   遗传方   式   蛋白质   正常   重复   序列   长度   疾病重   复序列   长度   脊髓延髓肌萎缩症   (Kennedy疾病)   AR   Xq13-21   x-连锁   隐性   雄激素受   体(AR)   9-36   38-62   亨延顿舞蹈病   HD   4p16.3   常染色   体显性   亨廷顿蛋   白   6-35   36-121   齿状核红核苍白球   丘脑下部核萎缩   (Haw River综合征)   DRPL   A   12p13.31   常染色   体显性   atrophin-1   6-35   49-88   1型脊髓小脑性共   济失调   SCA1   6p23   常染色   体显性   ataxin-1   6-44   39-82   2型脊髓小脑性共济   失调   SCA2   12q24.1   常染色   体显性   ataxin-2   15-31   36-63   3型脊髓小脑性共济   SCA3   14q32.1   常染色   ataxin-3   12-40   55-84

  疾病   基因   名称   染色体定   位   遗传方   式   蛋白质   正常   重复   序列   长度   疾病重   复序列   长度   失调   (Machado-Joseph   病)   体显性   6型脊髓小脑性共济   失调   SCA6   19p13   常染色   体显性   α1A电压   依赖性钙   通道亚基   4-18   21-33   7型脊髓小脑性共济   失调   SCA7   3p12-13   常染色   体显性   ataxin-7   4-35   37-306   17型脊髓小脑性共   济失调   SCA1   7   6q27   常染色   体显性   TATA结   合蛋白   25-42   45-63

在不同疾病的神经元内含物中也已发现许多转录因子。这些转录因子与包 含聚谷氨酰胺的蛋白质相互作用并在神经元内含物中被捕获是可能的。这可能 又阻止转录因子根据细胞需要打开和关闭基因。另一种看法是受袭细胞中组蛋 白的乙酰化过低。这导致了I/II类组蛋白脱乙酰酶(HDAC I/II)抑制剂的假设， 其已知增加组蛋白脱乙酰化，可能是聚谷氨酰胺疾病的新的疗法(美国专利申 请10/476,627；“用脱乙酰酶抑制剂治疗神经变性、精神性和其它疾病的方法”)。

在又一个实施方案中，本发明提供治疗或预防与局部缺血性损伤或疾病相 关的神经病的方法，例如，冠心病(包括充血性心力衰竭和心肌梗塞)、中风、 气肿、出血性休克、外周血管病(上肢和下肢)和移植相关损伤。

在某些实施方案中，本发明提供治疗中枢神经系统细胞对流向细胞的血流 减少来预防损伤。通常可以预防的损伤的严重度大部分取决于流向细胞的血流 减少程度和减少的持续时间。举例来说，在人类中向大脑灰质灌注的正常量是 约60-70mL/100g脑组织/min。当血流降到低于大约8-10mL/100g脑组织/min时， 中枢神经系统细胞的死亡通常会发生，而在稍高水平时(例如，20-35mL/100g 脑组织/min)，组织保持存活但不能起作用。在一个实施方案中，可以预防细胞 凋亡的或坏死的细胞坏死。在进一步的又一个实施方案中，可以预防局部缺血 介导的损伤，例如细胞毒水肿或中枢神经系统组织缺氧血症。在每一个实施方 案中，中枢神经系统细胞可以是脊髓细胞或脑细胞。

另一方面包括给予对象sirtuin活化化合物来治疗中枢神经系统局部缺血病 况。一些中枢神经系统局部缺血病况可以通过本文描述的sirtuin活化化合物来 治疗。在一个实施方案中，局部缺血病况是中风，其导致任何类型的局部缺血 性中枢神经系统损伤，例如细胞凋亡的或坏死的细胞坏死，细胞毒水肿或中枢 神经系统组织缺氧。中风会影响大脑的任何区域或由通常已知导致中风发生的 任何病因引起。在一个可选择的该实施方案中，中风是脑干中风。一般来说， 脑干中风袭击控制无意识生命支持功能例如呼吸、血压和心跳的脑干。在另一 个可选择的该实施方案中，中风是小脑中风。通常，小脑中风影响控制平衡和 协调的脑的小脑区域。在另一个实施方案中，中风是脑栓塞。总的来讲，脑栓 塞会影响脑的任何区域，通常是由血管阻塞的动脉阻塞引起的。在另一个选择 中，中风是出血性卒中。像缺血性中风，出血性卒中会影响脑的任何区域，通 常是由以脑中或周围出血(出血)为特征的血管破裂引起的。在进一步的实施 方案中，中风是血栓性中风。通常，血栓性中风是由累积的沉积物阻塞血管引 起的。

在另一个实施方案中，局部缺血性病况会起因于发生于中枢神经系统外的 对象身体部分，但仍然引起向中枢神经系统血流减少的障碍。这些障碍可以包 括，但不限于外周血管障碍，静脉血栓形成、肺栓塞、心律不齐(例如，心房 颤动)、心肌梗死、短暂性缺血发作、不稳定心绞痛、或镰状细胞贫血。此外， 中枢神经系统局部缺血性病况会由于对象经历外科手术而发生。举例来说，对 象可以经历心脏手术、肺手术、脊柱手术、脑手术、血管手术、腹部手术、或 器官移植手术。器官移植手术可以包括心脏、肺、胰腺、肾脏或肝移植手术。 此外，中枢神经系统缺血性病况会由于对象中枢神经系统外的身体部分的外伤 或损伤而发生。举例来说，外伤或损伤会引起一定程度的显著减少对象体内总 血量的出血。由于这种减少的总量，流向中枢神经系统的血流量同时减少。进 一步举例来说，外伤或损伤也会导致限制流向神经系统血流的血管阻塞形成。

当然，可以预期sirtuin活化化合物可以用于治疗中枢神经系统局部缺血性 病况而不管病况的起因。在另一个实施方案中，局部缺血性病况起因于血管阻 塞。血管阻塞可以是任何类型的阻塞，但通常是脑血栓或栓塞。在进一步的实 施方案中，局部缺血性病况起因于出血。出血可以是任何类型的出血，但通常 是脑出血或蛛网膜下腔出血。在另一个实施方案中，局部缺血性病况会起因于 血管狭窄。一般来说，血管会由于例如发生于血管痉挛时血管收缩而狭窄。在 另一个实施方案中，局部缺血性病况起因于脑或脊髓的损伤。

另一个方面，可以给药sirtuin活化化合物来减少中枢神经系统局部缺血性 病况后局部缺血中心的梗塞面积。此外，sirtuin活化化合物可以有益地给药来 减少中枢神经系统局部缺血性病况后缺血半影区或移形带的面积。

在一个实施方案中，组合药物疗法包括用于治疗或预防神经变性疾病或与 这些病况相关的继发病况的药物或化合物。因此，组合药物疗法包括一种或多 种sirtuin活化剂和一种或多种抗神经变性的药物。例如，一种或多种sirtuin活 化化合物可以与有效量的下述中的一种或多种组合：L-DOPA；多巴胺激动剂； 腺苷A2A受体拮抗剂；COMT抑制剂；MAO抑制剂；N-NOS抑制剂；钠通道 拮抗剂；选择性N-甲基D天冬氨酸(NMDA)受体拮抗剂；AMPA/红藻氨酸盐 受体拮抗剂；钙通道拮抗剂；GABA-A受体激动剂；乙酰胆碱酯酶抑制剂；基 质金属蛋白酶抑制剂；PARP抑制剂；p38MAP激酶或c-jun-N-端激酶抑制剂； TPA；NDA拮抗剂；β-干扰素；生长因子；谷氨酸抑制剂；和/或细胞治疗的 部分。

示例性的N-NOS抑制剂包括4-(6-氨基-吡啶-2-基)-3-甲氧基苯酚6-[4-(2-二 甲氨基-乙氧基)-2-甲氧基-苯基]-吡啶-2-基-胺、6-[4-(2-二甲氨基-乙氧基)-2，3-二 甲基-苯基]-吡啶-2-基-胺、6-[4-(2-吡咯烷基-乙氧基)-2，3-二甲基-苯基]-吡啶-2-基- 胺、6-[4-(4-(n-甲基)哌啶氧基)-2，3-二甲基-苯基]-吡啶-2-基-胺、6-[4-(2-二甲氨基 -乙氧基)-3-甲氧基-苯基]-吡啶-2-基-胺、6-[4-(2-吡咯烷基-乙氧基)-3-甲氧基-苯 基]-吡啶-2-基-胺、6-{4-[2-(6，7-二甲氧基-3，4-二氢-1h-异喹啉-2-基)-乙氧基]-3-甲 氧基-苯基}-吡啶-2-基-胺、6-{3-甲氧基-4-[2-(4-苯乙基-哌嗪-1-基)-乙氧基]-苯 基}-吡啶-2-基-胺、6-{3-甲氧基-4-[2-(4-甲基-哌嗪-1-基)-乙氧基]-苯基}-吡啶-2- 基-胺、6-{4-[2-(4-二甲氨基-哌啶-1-基)-乙氧基]-3-甲氧基-苯基}-吡啶-2-基-胺、 6-[4-(2-二甲氨基-乙氧基)-3-乙氧基-苯基]-吡啶-2-基-胺、6-[4-(2-吡咯烷基-乙氧 基)-3-乙氧基-苯基]-吡啶-2-基-胺、6-[4-(2-二甲氨基-乙氧基)-2-异丙基-苯基]-吡 啶-2-基-胺、4-(6-氨基-吡啶-基)-3-环丙基-苯酚6-[2-环丙基-4-(2-二甲氨基-乙氧 基)-苯基]-吡啶-2-基-胺、6-[2-环丙基-4-(2-吡咯烷-1-基-乙氧基)-苯基]-吡啶-2-基- 胺、3-[3-(6-氨基-吡啶-2基)-4-环丙基-苯氧基]-吡咯烷-1-甲酸叔丁基酯6-[2-环丙 基-4-(1-甲基-吡咯烷-3-基-氧)-苯基]-吡啶-2-基-胺、4-(6-氨基-吡啶-2-基)-3-环丁 基-苯酚6-[2-环丁基-4-(2-二甲氨基-乙氧基)-苯基]-吡啶-2-基-胺、6-[2-环丁基 -4-(2-吡咯烷-1-基-乙氧基)-苯基]-吡啶-2-基-胺、6-[2-环丁基-4-(1-甲基-吡咯烷-3- 基-氧)-苯基]-吡啶-2-基-胺、4-(6-氨基-吡啶-2-基)-3-环戊基-苯酚6-[2-环戊基 -4-(2-二甲氨基-乙氧基)-苯基]-吡啶-2-基-胺、6-[2-环戊基-4-(2-吡咯烷-1基-乙氧 基)-苯基]-吡啶-2-基-胺、3-[4-(6-氨基-吡啶-2基)-3-甲氧基-苯氧基]-吡咯烷-1-甲酸 叔丁基酯6-[4-(1-甲基-吡咯烷-3-基-氧)-2-甲氧基-苯基]-吡啶-2-基-胺、4-[4-(6- 氨基-吡啶-2基)-3-甲氧基-苯氧基-]-哌啶-1-甲酸叔丁基酯6-[2-甲氧基-4-(1-甲基- 哌啶-4-基-氧)-苯基]-吡啶-2-基-胺、6-[4-(烯丙氧基)-2-甲氧基-苯基]-吡啶-2-基- 胺、4-(6-氨基-吡啶-2-基)-3-甲氧基-6-烯丙基-苯酚12和4-(6-氨基-吡啶-2- 基)-3-甲氧基-2-烯丙基-苯酚 13 4-(6-氨基-吡啶-2-基)-3-甲氧基-6-丙基-苯酚 6-[4-(2-二甲氨基-乙氧基)-2-甲氧基-5-丙基-苯基]-吡啶-基-胺、6-[2-异丙基-4-(吡 咯烷-3-基-氧)-苯基]-吡啶-2-基-胺、6-[2-异丙基-4-(哌啶-3-基-氧)-苯基]-吡啶-2- 基-胺、6-[2-异丙基-4-(1-甲基-吖丁啶-3-基-氧)-苯基]-吡啶-2-基-胺、6-[2-异丙基 -4-(1-甲基-哌啶-4-基-氧)-苯基]-吡啶-2-基-胺、6-[2-异丙基-4-(1-甲基-吡咯烷-3- 基-氧)-苯基]-吡啶-2-基-胺6-[2-异丙基-4-(1-甲基-吡咯烷-3-基-氧)-苯基]-吡啶-2- 基-胺、6-[2-异丙基-4-(2-甲基-2-氮杂-二环[2.2.1]庚-5-基-氧)-苯基]-吡啶-2-基-胺、 6-[4-(2-二甲氨基-乙氧基)-2-甲氧基-苯基]-吡啶-2-基-胺、6-{4-[2-(苄基-甲基-氨 基)-乙氧基]-2-甲氧基-苯基}-吡啶-2-基-胺、6-[2-甲氧基-4-(2-吡咯烷-1-基-乙氧 基)-苯基]-吡啶-2-基-胺、2-(6-氨基-吡啶-2-基)-5-(2-二甲氨基-乙氧基)-苯酚 2-[4-(6-氨基-吡啶-2-基)-3-甲氧基-苯氧基]-乙酰胺6-[4-(2-氨基-乙氧基)-2-甲氧 基-苯基]-吡啶-2-基-胺、6-{4-[2-(3，4-二氢-1h-异喹啉-2-基)-乙氧基]-2-甲氧基-苯 基}-吡啶-2-基-胺、2-[4-(6-氨基-吡啶-2-基)-3-甲氧基-苯氧基]-乙醇 6-{2-甲氧基 -4-[2-(2，2，6，6-四甲基-哌啶-1-基)-乙氧基]-苯基}-吡啶-2-基-胺、6-{4-[2-(2，5-二甲 基-吡咯烷-1-基)-乙氧基]-2-甲氧基-苯基}-吡啶-2-基-胺、6-{4-[2-(2，5-二甲基-吡咯 烷-1-基)-乙氧基]-2-甲氧基-苯基}-吡啶-2-基-胺、2-[4-(6-氨基-吡啶-2-基)-3-甲氧 基-苯氧基]-1-(2，2，6，6-四甲基-哌啶-1-基)-乙酮6-[2-甲氧基-4-(1-甲基-吡咯烷-2- 基-甲氧基)-苯基]-吡啶-2-基-胺、6-[4-(2-二甲氨基-乙氧基)-2-丙氧基-苯基]-吡啶 -2-基-胺、6-{4-[2-(苄基-甲基-氨基)-乙氧基]-2-丙氧基-苯基}-吡啶-2-基-胺 6-[4-(2-乙氧基-乙氧基)-2-甲氧基-苯基]-吡啶-2-基-胺、6-[4-(2-二甲氨基-乙氧 基)-2-异丙氧基-苯基]-吡啶-2-基-胺、6-[4-(2-乙氧基-乙氧基)-2-异丙氧基-苯基]- 吡啶-2-基-胺、6-[2-甲氧基-4-(3-甲基-丁氧基)-苯基]-吡啶-2-基-胺、6-[4-(2-二甲 氨基-乙氧基)-2-乙氧基-苯基]-吡啶-2-基-胺、6-{4-[2-(苄基-甲基-氨基)-乙氧基]-2- 乙氧基-苯基}-吡啶-2-基-胺、6-[2-乙氧基-4-(3-甲基-丁氧基)-苯基]-吡啶-2-基-胺、 1-(6-氨基-3-氮杂-二环[3.1.0]己-3-基)-2-[4-(6-氨基-吡啶-2-基)-3-乙氧基-苯氧基]- 乙酮6-[2-乙氧基-4-(2-吡咯烷-1-基-乙氧基)-苯基]-吡啶-2-基-胺、3-{2-[4-(6-氨基 -吡啶-2-基)-3-乙氧基-苯氧基]-乙基}-3-氮杂-二环[3.1.0]己-6-基-胺、1-(6-氨基-3- 氮杂-二环[3.1.0]己-3-基)-2-[4-(6-氨基-吡啶-2-基)-3-甲氧基-苯氧基]-乙酮 3-{2-[4-(6-氨基-吡啶-2-基)-3-甲氧基-苯氧基]-乙基}-3-氮杂-二环[3.-1.0]己-6-基- 胺、6-[2-异丙氧基-4-(2-吡咯烷-1-基-乙氧基)-苯基]-吡啶-2-基-胺、6-{4-[2-(苄基- 甲基-氨基)-乙氧基]-2-异丙氧基-苯基-}-吡啶-2-基-胺、6-[4-(2-二甲氨基-乙氧 基)-2-甲氧基-5-丙基-苯基]-吡啶-2-基-胺、6-[5-烯丙基-4-(2-二甲氨基-乙氧基)-2- 甲氧基-苯基]-吡啶-2-基-胺、6-[5-烯丙基-2-甲氧基-4-(2-吡咯烷-1-基-乙氧基)-苯 基]-吡啶-2-基-胺、6-[3-烯丙基-4-(2-二甲氨基-乙氧基)-2-甲氧基-苯基]-吡啶-2-基 -胺、6-[2-甲氧基-4-(吡咯烷-3-基-氧)-苯基]-吡啶-2-基-胺、6-[2-甲氧基-4-(1-甲基 -吡咯烷-3-基-氧)-苯基]-吡啶-2-基-胺、6-[2-乙氧基-4-(吡咯烷-3-基-氧)-苯基]-吡 啶-2-基-胺、6-[2-异丙氧基-4-(吡咯烷-3-基-氧)-苯基]-吡啶-2-基-胺、6-[2-甲氧基 -4-(哌啶-4-基-氧)-苯基]-吡啶-2-基-胺、6-[2-甲氧基-4-(2，2，6，6-四甲基-哌啶-4-基- 氧)-苯基]-吡啶-2-基-胺、6-[2-异丙氧基-4-(吡咯烷-3-基-氧)-苯基]-吡啶-2-基-胺、 3-[4-(6-氨基-吡啶-2-基)-3-甲氧基-苯氧基]-吖丁啶-1-甲酸叔丁基酯6-[4-(吖丁啶 -3-基-氧)-2-甲氧基-苯基]-吡啶-2-基-胺、6-[2-甲氧基-4-(1-甲基-吖丁啶-3-基-氧)- 苯基]-吡啶-2-基-胺、6-[2-异丙氧基-4-(吡咯烷-3-基-氧)-苯基]-吡啶-2-基-胺、6-[2- 异丙氧基-4-(吡咯烷-3-基-氧)-苯基]-吡啶-2-基-胺、6-[2-甲氧基-4-(吡咯烷-3-基- 氧)-苯基]-吡啶-2-基-胺、6-[2-甲氧基-4-(1-甲基-吡咯烷-3-基-氧)-苯基]-吡啶-2-基 -胺、6-[2-甲氧基-4-(1-甲基-吡咯烷-3-基-氧)-苯基]-吡啶-2-基-胺、6-[2-甲氧基 -4-(2-甲基-2-氮杂-二环[2.2.1]庚-5-基-氧)-苯基]-吡啶-2-基-胺、6-[2-甲氧基-4-(1- 甲基-哌啶-4-基-氧)-苯基]-吡啶-2-基-胺、6-[4-(1-乙基-哌啶-4-基-氧)-2-甲氧基-苯 基]-吡啶-2-基-胺、6-[5-烯丙基-2-甲氧基-4-(1-甲基-吡咯烷-3-基-氧)-苯基]-吡啶 -2-基-胺、6-[4-(2-二甲氨基-乙氧基)-2，6-二甲基-苯基]-吡啶-2-基-胺、6-[2，6-二甲 基-4-(3-哌啶-1-基-丙氧基)-苯基]-吡啶-2-基-胺、6-[2，6-二甲基-4-(2-吡咯烷-1-基- 乙氧基)-苯基]-吡啶-2-基-胺、6-{2，6-二甲基-4-[3-(4-甲基-哌嗪-1-基)-丙氧基]-苯 基}-吡啶-2-基-胺、6-[2，6-二甲基-4-(2-吗啉-4-基-乙氧基)-苯基]-吡啶-2-基-胺、 6-{4-[2-(苄基-甲基-氨基)-乙氧基]-2，6-二甲基-苯基}-吡啶-2-基-胺、2-[4-(6-氨基- 吡啶-2-基)-3，5-二甲基-苯氧基]-乙酰胺6-[4-(2-氨基-乙氧基)-2，6-二甲基-苯基]- 吡啶-2-基-胺、6-[2-异丙基-4-(2-吡咯烷-1-基-乙氧基)-苯基]-吡啶-2-基-胺、2-(2，5- 二甲基-吡咯烷-1-基)-6-[2-异丙基-4-(2-吡咯烷-1-基-乙氧基)-苯基]-吡啶 6-{4-[2-(3，5-二甲基-哌啶-1-基)-乙氧基]-2-异丙基-苯基}-吡啶-2-基-胺、6-[4-(2- 二甲氨基-乙氧基)-2-异丙基-苯基]-吡啶-2-基-胺、6-[2-四-丁基-4-(2-二甲氨基-乙 氧基)-苯基]-吡啶-2-基-胺、6-[2-四-丁基-4-(2-吡咯烷-1-基-乙氧基)-苯基-]-吡啶-2- 基-胺、6-[4-(2-吡咯烷基-乙氧基)-2，5-二甲基-苯基]-吡啶-2-基-胺、6-[4-(2-二甲氨 基-乙氧基)-2，5-二甲基-苯基]-吡啶-2-基-胺、6-[4-(2-(4-苯乙基哌嗪-1-基)-乙氧 基)-2，5-二甲基-苯基]-吡啶-2-基-胺、6-[2-环丙基-4-(2-二甲氨基-1-甲基-乙氧基)- 苯基]-吡啶-2-基-胺、6-[环丁基-4-(2-二甲氨基-1-甲基-乙氧基)-苯基]-吡啶-2-基- 胺、6-[4-(烯丙氧基)-2-环丁基-苯基]-吡啶-2基胺、2-烯丙基-4-(6-氨基-吡啶-2- 基)-3-环丁基-苯酚和2-烯丙基-4-(6-氨基-吡啶-2-基)-5-环丁基-苯酚 4-(6-氨基-吡 啶-2基)-5-环丁基-2-丙基-苯酚 4-(6-氨基-吡啶-2基)-3-环丁基-2-丙基-苯酚6-[2- 环丁基-4-(2-二甲氨基-1-甲基-乙氧基)-5-丙基-苯基]-吡啶-2-基-胺、6-[2-环丁基 -4-(2-二甲氨基-1-甲基-乙氧基)-3-丙基-苯基]-吡啶-2-基-胺、6-[2-环丁基-4-(2-二 甲氨基-乙氧基)-5-丙基-苯基]-吡啶-2-基-胺、6-[2-环丁基-4-(2-二甲氨基-乙氧 基)-3-丙基-苯基]-吡啶-2-基-胺、6-[2-环丁基-4-(1-甲基-吡咯烷-3-基-氧)-5-丙基- 苯基]-吡啶-2-基-胺、6-[环丁基-4-(1-甲基-1-吡咯烷-3-基-氧)-3-丙基-苯基]-吡啶-2- 基-胺、2-(4-苯甲氧基-5-羟基-2-甲氧基-苯基)-6-(2，5-二甲基-吡咯-1-基)-吡啶 6-[4-(2-二甲氨基-乙氧基)-5-乙氧基-2-甲氧基-苯基]-吡啶-2-基-胺、6-[5-乙基-2- 甲氧基-4-(1-甲基-哌啶-4-基-氧)-苯基]-吡啶-2-基-胺、6-[5-乙基-2-甲氧基-4-(哌啶 -4-基-氧)-苯基]-吡啶-2-基-胺、6-[2，5-二甲氧基-4-(1-甲基-吡咯烷-3-基-氧)-苯基]- 吡啶-2-基-胺、6-[4-(2-二甲氨基-乙氧基)-5-乙基-2-甲氧基-苯基]-吡啶-2-基-胺。

示例性的NMDA受体拮抗剂包括(+)-(1S，2S)-1-(4-羟基-苯基)-2-(4-羟基-4-苯 基哌啶子基)-1-丙醇、(1S，2S)-1-(4-羟基-3-甲氧基苯基)-2-(4-羟基-4-苯基哌啶子 基)-1-丙醇、(3R，4S)-3-(4-(4-氟苯基)-4-羟基哌啶-1-基-)-色满-4，7-二醇、甲磺酸 (1R*，2R*)-1-(4-羟基-3-甲基苯基)-2-(4-(4-氟-苯基)-4-甲基哌啶-1-基)-丙烷-1-醇酯 或其药学上可接受的酸加成盐。

示例性的多巴胺激动剂包括左旋多巴；L-多巴脱羧酶抑制剂例如卡比多巴 或苄丝肼、溴麦角环肽、双氢麦角隐亭、乙舒麦角、AF-14、alaptide、培高利特、 双哌嘧啶；多巴胺D1受体激动剂例如A-68939、A-77636、dihydrexine和 SKF-38393；多巴胺D2受体激动剂例如carbergoline，麦角乙脲、N-0434，那高利 特、PD-118440、普拉克索、喹吡罗和罗平尼咯；多巴胺/β-肾上腺素能受体激动 剂例如DPDMS和多培沙明；多巴胺/5-HT摄取抑制剂/5-HT-1A激动剂例如罗克 吲哚；多巴胺/阿片受体激动剂例如NIH-10494；α2-肾上腺素能拮抗剂/多巴胺激 动剂例如特麦角脲；α2-肾上腺素能拮抗剂/多巴胺D2激动剂例如麦角灵和他利 克索；多巴胺摄取抑制剂例如GBR-12909、GBR-13069、GYKI-52895和NS-2141； 单胺氧化酶-B抑制剂例如司来吉兰、N-(2-丁基)-N-甲基炔丙基胺、N-甲基N-(2- 戊基)炔丙基胺、AGN-1133、麦角衍生物、拉扎贝胺、LU-53439、MD-280040 和mofegiline；和COMT抑制剂例如CGP-28014。

示例性的乙酰胆碱酯酶抑制剂包括多哌奈齐，1-(2-甲基-1H-苯并咪唑-5- 基)-3-[1-(苯甲基)-4-哌啶基]-1-丙酮；1-(2-苯基-1H-苯并咪唑-5-基)-3-[1-(苯甲 基)-4-哌啶基]-1-丙酮；1-(1-乙基-2-甲基-1H-苯并咪唑-5-基)-3-[1-(苯甲基)-4-哌啶 基]-1-丙酮；1-(2-甲基-6-苯并噻唑基)-3-[1-(苯甲基)-4-哌啶基]-1-丙酮；1-(2-甲基 -6-苯并噻唑基)-3-[1-[(2-甲基-4-噻唑基)甲基]-4-哌啶基]-1-丙酮；1-(5-甲基-苯并 [b]噻酚-2-基)-3-[1-(苯甲基)4-哌啶基]-1-丙酮；1-(6-甲基-苯并[b]噻酚-2- 基)-3-[1-(苯甲基)-4-哌啶基]-1-丙酮；1-(3，5-二甲基-苯并[b]噻酚-2-基)-3-[1-(苯甲 基)-4-哌啶基]-1-丙酮；1-(苯并[b]噻酚-2-基)-3-[1-(苯甲基)-4-哌啶基]-1-丙酮； 1-(苯并呋喃-2-基)-3-[1-(苯甲基)-4-哌啶基]-1-丙酮；1-(1-苯磺酰基-6-甲基-吲哚 -2-基)-3-[1-(苯甲基)-4-哌啶基]-1-丙酮；1-(6-甲基-吲哚-2-基)-3-[1-(苯甲基)-4-哌 啶基]-1-丙酮；1-(1-苯磺酰基-5-氨基-吲哚-2-基)-3-[1-(苯甲基)-4-哌啶基]-1-丙酮； 1-(5-氨基-吲哚-2-基)-3-[1-(苯甲基)-4-哌啶基]-1-丙酮；和1-(5-乙酰氨基-吲哚-2- 基)-3-[1-(苯甲基)-4-哌啶基]-1-丙酮。1-(6-喹啉基)-3-[1-(苯甲基)-4-哌啶基]-1-丙 酮；1-(5-吲哚基)-3-[1-(苯甲基)-4-哌啶基]-1-丙酮；1-(5-苯并噻酚基)-3-[1-(苯甲 基)-4-哌啶基]-1-丙酮；1-(6-喹唑啉基)-3-[1-(苯甲基)-4-哌啶基]-1-丙酮；1-(6-苯 并噁唑基)-3-[1-(苯甲基)-4-哌啶基]-1-丙酮；1-(5-苯并呋喃基)-3-[1-(苯甲基)-4-哌 啶基]-1-丙酮；1-(5-甲基-苯并咪唑-2-基)-3-[1-(苯甲基)-4-哌啶基]-1-丙酮；1-(6- 甲基-苯并咪唑-2-基)-3-[1-(苯甲基)-4-哌啶基]-1-丙酮；1-(5-氯-苯并[b]噻酚-2- 基)-3-[1-(苯甲基)-4-哌啶基]-1-丙酮；1-(5-氮杂吲哚-2-基)-3-[1-(苯甲基)4-哌啶 基]-1-丙酮；1-(6-氮杂苯并[b]噻酚-2-基)-3-[1-(苯甲基)-4-哌啶基]-1-丙酮；1-(1H-2- 氧代-吡咯并[2′，3′，5，6]苯并[b]噻吩并-2-基)-3-[1-(苯甲基)-4-哌啶基]-1-丙酮；1-(6- 甲基-苯并噻唑-2-基)-3-[1-(苯甲基)-4-哌啶基]-1-丙酮；1-(6-甲氧基-吲哚-2- 基)-3-[1-(苯甲基)-4-哌啶基]-1-丙酮；1-(6-甲氧基-苯并[b]噻酚-2-基)-3-[1-(苯甲 基)-4-哌啶基]-1-丙酮；1-(6-乙酰氨基-苯并[b]噻酚-2-基)-3-[1-(苯甲基)-4-哌啶 基]-1-丙酮；1-(5-乙酰氨基-苯并[b]噻酚-2-基)-3-[1-(苯甲基-)-4-哌啶基]-1-丙酮； 6-羟基-3-[2-[1-(苯甲基)-4-哌啶基]乙基]-1，2-苯并异噁唑；5-甲基-3-[2-[1-(苯甲 基)-4-哌啶基]乙基]-1，2-苯并异噁唑；6-甲氧基-3[2-[1(苯甲基)-4-哌啶基]乙 基]-1，2-苯并异噁唑；6-乙酰胺-3-[2-[1-(苯甲基)-4-哌啶基]-乙基]-1，2-苯并异噁唑； 6-氨基-3-[2-[1-(苯甲基)-4-哌啶基]乙基]-1，2-苯并异噁唑；6-(4-吗啉基)-3-[2-[1-(苯 甲基)-4-哌啶基]乙基]-1，2-苯并异噁唑；5，7-二氢-3-[2-[1-(苯甲基)-4-哌啶基]乙 基]-6H-吡咯并[4，5-f]-1，2-苯并异噁唑-6-酮；3-[2-[1-(苯甲基)-4-哌啶基]乙基]-1，2- 苯并异噻唑；3-[2-[1-(苯甲基)-4-哌啶基]乙烯基]-1，2-苯并异噁唑；6-苯氨基 -3-[2-[1-(苯甲基)-4-哌啶基]乙基]-1，2，-苯并异噁唑；6-(2-噻唑基)-3-[2-[1-(苯甲 基)-4-哌啶基]乙基]-1，2-苯并异噁唑；6-(2-噁唑基)-3-[2-[1-(苯甲基)-4-哌啶基]乙 基]-1，2-苯并异噁唑；6-吡咯烷基-3-[2-[1-(苯甲基)-4-哌啶基]乙基]-1，-2-苯并异噁 唑；5，7-二氢-5，5-二甲基-3-[2-[1-(苯甲基)-4-哌啶基]乙基]-6H-吡咯并[4，5-f]-1，2- 苯并异噁唑-6-酮；6，8-二氢-3-[2-[1-(苯甲基)-4-哌啶基]乙基]-7H-吡咯并 [5，4-g]-1，2-苯并异噁唑-7-酮；3-[2-[1-(苯甲基)-4-哌啶基]乙基]-5，6，8-三氢-7H-异 噁唑[4，5-g]-喹啉-7-酮；1-苄基-4-((5，6-二甲氧基-1-茚满酮)-2-基)甲基哌啶、1-苄 基-4-((5，6-二甲氧基-1-茚满酮)-2-ylidenyl)甲基哌啶、1-苄基-4-((5-甲氧基-1-茚满 酮)-2-基)甲基哌啶、1-苄基-4-((5，6-二乙氧基-1-茚满酮)-2-基)甲基哌啶、1-苄基 -4-((5，6-亚甲二氧基-1-茚满酮)-2-基)甲基哌啶、1-(间-硝基苄基)-4-((5，6-二甲氧基 -1-茚满酮)-2-基)甲基哌啶，1-环己基甲基-4-((5，6-二甲氧基-1-茚满酮)-2-基)甲基 哌啶、1-(间-氟苄基)-4-((5，6-一二甲氧基-1-茚满酮)-2-基)甲基哌啶、1-苄基-4-((5，6- 二甲氧基-1-茚满酮)-2-基)丙基哌啶和1-苄基-4-((5-异丙氧基-6-甲氧基-1-茚满 酮)-2-基)甲基哌啶。

示例性的钙通道拮抗剂包括地尔硫ω-芋螺毒素GVIA、甲氧戊脉安、氨 氯地平、费乐地平、乐息平和咪拉地尔。

示例性的GABA-A受体调节剂包括氯甲噻唑；IDDB；加波沙朵(4，5，6，7-四氢 异噁唑并[5，4-c]吡啶-3-醇)；加奈索酮(3α-羟基-3β-甲基-5α-孕(甾)烷-20-酮)；酚 加宾(2-[(丁基亚氨基)-(2-氯苯基)甲基]-4-氯酚)；2-(4-甲氧基苯基)-2，5，6，7，8，9-六 氢-吡唑并[4，3-c]噌啉-3-酮；7-环丁基-6-(2-甲基-2H-1，2，4-三唑-3-基甲氧基)-3-苯 基-1，2，4-三唑并[4，3-b]哒嗪；(3-氟-4-甲基苯基)N-({-1-[(2-甲基苯基)甲基]-苯并 咪唑-2-基}甲基)N-戊基甲酰胺；和3-(氨甲基)-5-甲基己酸。

示例性的钾通道开放剂包括二氮嗪、氟吡丁、吡那地尔、左克罗卡林、利 马卡林、色洛卡林、PCO-400和SKP-450(2-[2″(1″，3″-二氧杂环戊二烯酮)-2-甲 基]-4-(2′-氧代-1′-吡咯烷基)-6-硝基-2H-1-苯并吡喃)。

示例性的AMPA/红藻氨酸盐受体拮抗剂包括6-氰基-7-硝基喹噁啉-2，3-二-酮 (CNQX)；6-硝基-7-氨磺酰基苯并[f]喹噁啉-2，3-二酮(NBQX)；6，7-二硝基喹噁啉 -2，3-二酮(DNQX)；1-(4-氨基苯基)-4-甲基-7，8-间-乙二氧基-5H-2，3-苯并二氮盐 酸盐；和2，3-二羟基-6-硝基-7-氨磺酰基苯并-[f]喹噁啉。

示例性的钠通道拮抗剂包括阿义马林、普鲁卡因胺、氟卡胺和利鲁唑。

示例性的基质-金属蛋白酶抑制剂包括4-[4-(4-氟苯氧基)苯磺酰氨基]四氢吡 喃-4-甲酸羟基酰胺；5-甲基-5-(4-(4′-氟苯氧基)-苯氧基)-嘧啶-2，4，6-三酮；5-正- 丁基-5-(4-(4′-氟苯氧基)-苯氧基)-嘧啶-2，4，6-三酮和普啉司他。

聚(ADP核糖)聚合酶(PARP)是丰富的核酶，其由DNA单链断裂活化 来由NAD合成聚(ADP核糖)。在标准条件下，PARP通过核中的DNA修复 酶活化和募集参与由氧化应激引起的碱基切除修复。因此，PARP在细胞坏死和 DNA修复中起作用。PARP也参与调节介导炎症的细胞因子的表达。在DNA 损伤过度的情况下(例如急性过度暴露于病理性的损伤)，PARP过度活化，导 致特征为NAD衰竭的基于细胞的能量衰竭并导致ATP消耗、细胞坏死、组织 损伤和器官损伤/衰竭。PARP被认为有助于神经变性，通过减少烟酰胺腺嘌呤 二核苷酸(NAD+)，随后减少导致可以通过PARP抑制剂预防的细胞死亡的三 磷酸腺苷(ATP；Cosi and Marien，Ann.N.Y.Acad.Sci.，890：227，1999)。示例性的 PARP抑制剂可见Southan and Szabo，Current Medicinal Chemistry，10：321，2003。

示例性的P38MAP激酶和c-jun-N-端激酶的抑制剂包括吡啶基咪唑，例如 PD 169316、异构化的PD 169316、SB 203580、SB 202190、SB 220026和RWJ 67657。其他描述于美国专利6,288,089，并引入本文作为参考。

在一个示例性的实施方案中，治疗或预防MS的组合治疗包括治疗有效量 的一种或多种增加sirtuin蛋白水平和/或活性的sirtuin调节化合物和一种或多种 Avonex(干扰素β-1a)、Tysabri(那他珠单抗)或Fumaderm(BG-12/口服 延胡索酸)。

在另一个实施方案中，治疗或预防糖尿病性神经病或与之相关病况的组合 治疗包括治疗有效量的一种或多种增加sirtuin蛋白水平和/或活性的sirtuin调节 化合物和一种或多种三环抗抑郁药(TCAs)(包括，例如，米帕明、阿米替林、 地昔帕明和去甲替林)、5-羟色胺再摄取抑制剂(SSRIs)(包括，例如，氟西汀、 帕罗西丁、舍曲林和西他罗仑)和抗癫痫药(AEDs)(包括，例如，加巴喷丁、 卡马西平和topimirate)。

在另一个实施方案中，本发明提供一种使用包含至少一种sirtuin活化化合 物和至少一种HDAC I/II抑制剂的组合治疗或预防聚谷氨酰胺疾病的方法。 HDAC I/II抑制剂的例子包括异羟肟酸、环肽、苯甲酰胺类、短链脂肪酸和 depudecin。

异羟肟酸和异羟肟酸衍生物的例子，但不限于，曲古抑菌素A(TSA)、N -辛二酰苯胺异羟肟酸(SAHA)、oxamflatin、辛二酸双异羟肟酸(suberic bishydroxamic acid)(SBHA)、间-羧基-肉桂酸双异羟肟酸(CBHA)、丙戊酸和苯 苄吡咯烷。TSA作为抗真菌抗生素分离(Tsuji等(1976)J.Antibiot(Tokyo)29：1-6) 并发现是哺乳动物HDAC的强效抑制剂(Yoshida等。(1990)J.Biol.Chem. 265：17174-17179)。TSA耐受细胞系具有改变的HDAC的发现证明，该酶是TSA 的重要靶点。其他基于异羟肟酸的HDAC抑制剂、SAHA、SBHA和CBHA是 合成化合物，其可以在体外或体内在微摩尔或更低浓度下抑制HDAC。Glick等， (1999)Cancer Res.59：4392-4399。这些基于异羟肟酸的HDAC抑制剂都具有基 本的结构特征：极性异羟肟酸端基通过疏水亚甲基间隔物(例如，6碳长度)与 连接至端基疏水部分(例如，苯环)的另一个极性位点相连。研发的具有这种 基本特征的化合物也落入可以用作HDAC抑制剂的异羟肟酸的范围。

用作HDAC抑制剂的环肽主要是环四肽。环肽的例子包括，但不限于， trapoxin A、apicidin和羧酚酸肽。Trapoxin A是包含2-氨基-8-氧代-9，10-环氧-癸 酰(AOE)部分的环肽。Kijima等，(1993)J.Biol.Chem.268：22429-22435。 Apicidin是显示强效、广谱抗原虫活性并在纳摩尔浓度下抑制HDAC活性的真 菌代谢物。Darkin-Rattray等，(1996)Proc.Natl.Acad.Sci.USA.93；13143-13147。 缩酚环肽从青紫色素杆菌(Chromobacterium violaceum)分离并显示在微摩尔浓 度下抑制HDAC活性。

苯甲酰胺类的例子包括但不限于MS-27-275。Saito等，(1990)Proc.Natl. Acad.Sci.USA.96：4592-4597。短链脂肪酸的例子包括但不限于丁酸盐(例如， 丁酸、丁酸精氨酸和丁酸苯酯(PB))。Newmark等，(1994)Cancer Lett.78：1-5； 和Carducci等，(1997)Anticancer Res.17：3972-3973。另外，在微摩尔浓度下显 示抑制HDAC的depudecin(Kwon et al.(1998)Proc.Natl.Acad.Sci.USA. 95：3356-3361)也落入本文描述的组蛋白脱乙酰基酶抑制剂的范围内。

血液凝固障碍

在其他方面，增加sirtuin蛋白水平和/或活性的sirtuin调节化合物可以用于 治疗或预防血液凝固障碍(或止血障碍)。如本文互换使用地，术语“止血”、“血 液凝固”和“凝血”是指出血控制，包括血管收缩和血凝固的生理学性质。血 液凝固有助于在损伤、炎症、疾病、先天性缺陷、功能障碍或其他破坏后维持 哺乳动物循环的完整性。在凝固开始后，血液凝固通过某些血浆酶原顺序活化 至它们的酶形式而进行(参见，例如，Coleman，R.W.et al.(eds.)Hemostasis and Thrombosis，第二版，(1987))。这些血浆糖蛋白，包括因子XII、因子XI、因子 IX、因子X、因子VII和凝血素，是丝氨酸蛋白酶的酶原。只有当与例如因子 VIII和因子V的蛋白质辅助因子在膜表面组合成复合体时，这些凝血酶的大多 数在生理规模上是有效的。其他血液因子调节和局部化血块形成，或溶解血块。 激活蛋白C是灭活前凝血剂成分的特异性酶。钙粒子参与许多组分反应。血液 凝固遵循内在途径，其中所有的蛋白组分存在于血中，或遵循外在途径，其中 细胞膜蛋白组织因子起到关键作用。当纤维蛋白原通过凝血酶切割形成纤维蛋 白原时血块形成发生。血块由活化的血小板和纤维蛋白原构成。

进一步地，血块形成不仅限制在损伤(止血)的情况下的出血，而且会通 过重要的动脉或静脉闭塞在动脉粥样硬化病中导致严重器官损伤和死亡。因此， 血栓是在错误的时间和地点的血块形成。它包括级联的复杂性和调控的在循环 血蛋白(凝血因子)、血细胞(特别是血小板)和损伤的血管壁成分间的生化反 应。

相应地，为了预防或治疗血凝障碍，例如心肌梗塞、中风、外周动脉疾病 或肺栓塞的肢体丧失，本发明提供目的在于抑制血块形成的抗凝和抗血栓治疗。

如本文互换使用地，“止血的调节”和“止血的调控”包括止血诱导(例如， 刺激或增加)，以及止血抑制(例如，减少或降低)。

一方面，本发明提供通过给予增加sirtuin蛋白水平和/或活性的sirtuin调节 化合物减少或抑制对象止血的方法。本文公开的组合物和方法对治疗或预防血 栓性疾病是有益的。如本文所用的，术语“血栓形成障碍”包括特征为过度或 不需要的凝结或止血活性、或凝固性过高状态的任何障碍或病况。血栓形成障 碍包括包含血小板粘附和血栓形成的疾病或障碍，并会表现为形成血栓的增加 倾向，例如，增加的血栓数量、早期血栓形成、血栓形成的家族性倾向和非通 常位点的血栓形成。血栓形成障碍的例子包括，但不限于，血栓栓塞、深静脉 血栓形成、肺栓塞、中风、心肌梗塞、流产、与抗凝血酶III缺乏相关的血栓形 成倾向、C蛋白缺乏症、S蛋白缺乏症、对活化的C蛋白的抗性、异常纤维蛋 白原血症、溶解纤维蛋白疾病、高胱氨酸尿症、妊娠、炎症疾病、骨髓增生障 碍、血管硬化、心绞痛，例如，不稳定心绞痛、播散性血管内凝血、血栓性血 小板减少性紫癜、癌症转移、镰状红细胞病、肾小球肾炎和药物诱导的血小板 减少(包括，例如，肝素诱导的血小板减少)。另外，增加sirtuin蛋白水平和/ 或活性的sirtuin调节化合物可以给予来预防血栓形成事件或预防治在疗性血块 溶解或操作例如血管成形术或手术期间或之后的再闭塞。

在另一个实施方案中，组合药物方案可以包括用于治疗或预防血液凝固障 碍或与这些病况相关的继发病况的药物或化合物。因此，组合药物方案可以包 括一种或多种增加sirtuin蛋白水平和/或活性的sirtuin调节化合物和一种或多种 抗凝或抗血栓药物。例如，一种或多种sirtuin调节化合物可以与有效量的一种 或多种下述药物结合：阿司匹林、肝素和抑制维生素K依赖因子的口服华法林、 抑制因子X和II的低分子量肝素、凝血酶抑制剂、血小板GP IIbIIIa受体抑制 剂、组织因子(TF)抑制剂、人血管性血友病因子抑制剂、一种或多种参与止 血(特别是在凝血级联中)的因子抑制剂。另外，增加sirtuin蛋白水平和/或活 性的sirtuin调节化合物可以与血栓溶解药物如t-PA、链激酶、立止血、TNK-t-PA 和葡激酶组合。

重量控制

在另一个方面，增加sirtuin蛋白水平和/或活性的sirtuin调节化合物可以用 于治疗或预防对象重量增加或肥胖症。例如，增加sirtuin蛋白水平和/或活性的 sirtuin调节化合物可以用于，例如，治疗或预防遗传性肥胖症、饮食性肥胖症、 激素相关肥胖症、与用药相关的肥胖症，用于减少对象的重量或减少或预防对 象重量增加。需要这种治疗的对象可以是肥胖的、可能变肥胖、超重、或可能 变得超重的对象。可能变肥胖或超重的对象可以被鉴别，例如，基于家族史、 遗传学、饮食、活动水平、药物摄入或其不同的组合。

在其它实施方案中，增加sirtuin蛋白水平和/或活性的sirtuin调节化合物可 以给予患有各种可以通过促进对象重量降低治疗或预防的其他疾病和病况的对 象。这种疾病包括，例如，高血压、高血压、高血胆固醇、血脂障碍、2型糖尿 病、胰岛素抗性、葡萄糖耐受不良、高胰岛素血症、冠心病、心绞痛、充血性 心力衰竭、中风、胆结石、胆囊炎和胆石病、痛风、骨关节炎、阻塞性睡眠呼 吸暂停核呼吸问题、某些类型的癌症(例如子宫内膜、乳腺、前列腺、和结肠)、 妊娠并发症、差的女性生殖健康(例如月经不规则、不育、不规则排卵)、膀胱 控制问题(例如压力性失禁)；尿酸性肾石病；心理障碍(例如抑郁症、进食障 碍、扭曲的身体形象和缺乏自尊)。Stunkard AJ，Wadden TA.(编辑)Obesity：theory and therapy，第二版.NewYork：Raven Press，1993。最终，患有AIDS的病人对治 疗AIDS的组合疗法会发展脂肪代谢障碍或抗胰岛素性。

在另一个实施方案中，增加sirtuin蛋白水平和/或活性的sirtuin调节化合物 可以用于抑制脂肪形成或脂肪细胞分化，不论是体外或体内。特别地，胰岛素 和/或胰岛素样生长因子(IGF)1的高循环水平会被阻止来募集前脂肪细胞分化 为脂肪细胞。这种方法可以用于治疗或预防肥胖症。

在其他实施方案中，增加sirtuin蛋白水平和/或活性的sirtuin调节化合物可 以用于减少食欲和/或增加饱感，从而引起重量降低或避免重量增加。需要这种 治疗的对象可以是超重的、肥胖的对象或者可能变得超重或肥胖的对象。该方 法可以包括每日或、隔日、或一周一次，给予对象一定剂量，例如丸剂的形式。 该剂量为“食欲降低剂量”。

在其他实施方案中，降低sirtuin蛋白水平和/或活性的sirtuin调节化合物可 以用于刺激食欲和/或重量增加。该方法可以包括给予对象，例如需要的对象， 药学有效量的降低sirtuin蛋白如SIRT1和/或SIRT3的水平和/或活性的sirtuin 调节化合物。需要这种治疗的对象可以是患有恶病质或可能发展恶病质的对象。 也可以给予组合的药物。该方法可以进一步包括在对象中监测疾病或sirtuin活 化的状态，例如，在脂肪组织中。

刺激细胞中脂肪蓄积的方法可以用于体外，来建立重量增加的细胞模型， 其可以用于，例如，鉴定预防重量增加的其他药物。

还提供调节脂肪形成或脂肪细胞分化的方法，不论体外或体内。特别地， 胰岛素和/或胰岛素样生长因子(IGF)1的高循环水平会被阻止来募集前脂肪细 胞分化为脂肪细胞。这种方法可以用于治疗或预防肥胖症。这种方法可以用于 调节肥胖症。刺激脂肪形成的方法可以包括使细胞接触降低sirtuin蛋白水平和/ 或活性的sirtuin调节化合物。

在另一个实施方案中，本发明提供通过给予降低sirtuin蛋白水平和/或活性 的sirtuin调节化合物减少对象体内脂肪或脂质代谢的方法。该方法包括给予对 象一定量的sirtuin调节化合物，例如，以减少脂肪从WAT细胞运动至血中和/ 减少BAT细胞燃烧脂肪的有效量。

促进食欲和/或重量增加的方法可以包括，例如，在先鉴定对象需要减少脂 肪或脂质代谢，例如，通过称量对象，测定对象的BMI，或评估对象的脂肪含 量或对象细胞中的sirtuin活性。该方法也可以包括监测对象，例如，sirtuin调 节化合物给药期间和/或之后。给药可以包括一种或多种剂量，例如，以缓释丸 递送或连续地。监测可以包括评估激素或代谢产物。示例性的激素包括来普汀、 脂联素、抵抗素和胰岛素。示例性的代谢产物包括甘油三酯、胆固醇和脂肪酸。

在一个实施方案中，降低sirtuin蛋白水平和/或活性的sirtuin调节化合物可 以用于调节(例如，增加)组织中皮下脂肪的量，例如，面部组织或其他颈、 手、腿或唇的表面相关组织。sirtuin调节化合物可以用于增加硬度、水分保持 或组织支持特性。例如，sirtuin调节化合物可以局部应用，例如，与其他药物 联合，例如，用于表面相关组织的治疗。sirtuin调节化合物也可以皮下注射， 例如，在需要皮下脂肪改变的区域。

调节重量的方法可以进一步包括监测对象重量和/或sirtuin调节的水平，例 如，在脂肪组织中。

在一个示例性的实施方案中，增加sirtuin蛋白水平和/或活性的sirtuin调节 化合物可以作为治疗或预防重量或肥胖症的组合治疗给药。例如，一种或多种 增加sirtuin蛋白水平和/或活性的sirtuin调节化合物可以与一种或多种抗肥胖症 药物组合给药。示例性的抗肥胖症药物包括，例如，苯丙醇胺、麻黄素、假麻 黄素、苯丁胺、胆囊收缩素-A激动剂、单胺再摄取抑制剂(例如西布曲明)、 拟交感神经药、5-羟色胺能药(例如右旋酚氟拉明或氟苯丙胺)、多巴胺激动剂 (例如溴麦角环肽)、黑素细胞-刺激激素受体激动剂或模拟的、黑素细胞-刺激 激素类似物、大麻素受体拮抗剂、黑色素聚集激素激动剂、OB蛋白(来普汀)、 来普汀类似物、来普汀受体激动剂、促生长激素神经肽拮抗剂或GI脂酶抑制剂 或降低剂(例如奥利斯特)。其他厌食药包括蛙皮素激动剂、脱氢表雄酮或其类 似物、糖皮质激素受体激动剂和拮抗剂、食欲素受体拮抗剂、尿皮质醇结合蛋 白拮抗剂、高血糖素样肽1受体激动剂例如Exendin和睫状神经营养因子例如 Axokine。

在另一个实施方案中，增加sirtuin蛋白水平和/或活性的sirtuin调节化合物 可以给药来减少药物诱导的重量增加。例如，增加sirtuin蛋白水平和/或活性的 sirtuin调节化合物可以与可以刺激食欲或引起重量增加的药物组合给药，特别 地，重量增加是由于除了水潴留之外的因素。可以引起重量增加的药物的例子， 包括例如，糖尿病治疗，例如，磺脲类(例如格列吡嗪和格列本脲)、噻唑烷二 酮类(例如匹格列酮和罗西格列酮)、氯茴苯酸类、那格列奈、瑞格列奈、磺酰 脲药物和胰岛素；抗抑郁药，包括，例如，三环抗抑郁药(例如阿米替林和米 帕明)、不可逆的单胺氧化酶抑制剂(MAOIs)、选择性5-羟色胺再摄取抑制剂 (SSRIs)、丁氨苯丙酮、帕罗西丁和米尔塔扎平；类固醇类，例如，泼尼松； 激素疗法；碳酸锂；丙戊酸；卡马西平；氯丙嗪；替沃噻吨；β-阻滞剂(例如 普萘洛尔)；α-阻滞剂(例如可乐定、哌唑嗪和特拉唑嗪)；和避孕药，包括口 服避孕药(节育药)或其他包含雌激素和/或黄体酮(Depo-Provera，Norplant， Ortho)、睾丸酮或甲地孕酮的避孕药。在另一个示例性的实施方案中，增加sirtuin 蛋白水平和/或活性的sirtuin调节化合物可以作为戒烟方案的一部分来预防重量 增加或减少已增加的重量。

代谢障碍/糖尿病

在另一个方面，增加sirtuin蛋白水平和/或活性的sirtuin调节化合物可以用 于治疗或预防代谢障碍，例如胰岛素抗性、糖尿病前期、II型糖尿病和/或其并 发症。增加sirtuin蛋白水平和/或活性的sirtuin调节化合物的给药可以增加胰岛 素敏感性和/或降低对象胰岛素水平。需要这种治疗的对象可以是具有胰岛素抗 性或其他II型糖尿病前期症状的对象、患有II型糖尿病的对象或可能发展任何 这些病况的对象。例如，对象可以是具有胰岛素抗性的对象，例如，具有高的 胰岛素循环水平和/或相关病况，例如高脂血症、脂肪代谢障碍、高胆固醇血症、 葡萄糖耐量降低、高血糖血糖水平、X综合征其他表现、高血压、动脉粥样硬 化和脂肪营养障碍。

在一个示例性的实施方案中，增加sirtuin蛋白水平和/或活性的sirtuin调节 化合物可以作为治疗或预防代谢障碍的组合治疗给药。例如，一种或多种增加 sirtuin蛋白水平和/或活性的sirtuin调节化合物可以与一种或多种抗糖尿病药组 合。示例性的抗糖尿病药物包括，例如，醛糖还原酶抑制剂、糖原磷酸化酶抑 制剂、山梨醇脱氢酶抑制剂、蛋白酪氨酸磷酸酶1B抑制剂、二肽蛋白酶抑制剂、 胰岛素(包括口服生物可利用胰岛素制剂)、拟胰岛素、二甲双胍、阿卡玻糖、 过氧化物酶体增生物激活受体-γ(PPAR-γ)配体例如曲格列酮、rosaglitazone、 匹格列酮或GW-1929、磺酰脲类、茴磺环戊脲、格列本脲或氯磺丙脲，其中第 一和第二化合物的量产生治疗效果。其他糠尿病药物包括葡萄糖苷酶抑制剂、 胰高血糖素样肽-1(GLP-1)、胰岛素、PPAR α/γ双重激动剂、氯茴苯酸和α P2抑制剂。在一个示例性的实施方案中，抗糖尿病药物可以是二肽基肽酶IV(DI- IV或DPP-IV)抑制剂，例如，来自Novartis的LAF237(NVP DPP728；1-[[[2-[(5- 氰基吡啶-2-基)氨基]乙基]氨基]乙酰基]-2-氰基-(S)-吡咯烷)或来自Merck的 MK-04301(参见例如e.g.，Hughes等，Biochemistry 38：11597-603(1999))。

炎症疾病

在其他方面，增加sirtuin蛋白水平和/或活性的sirtuin调节化合物可以用于 治疗或预防与炎症相关的疾病或障碍。增加sirtuin蛋白水平和/或活性的sirtuin 调节化合物可以在炎症开始发生前、发生时、或发生后给药。当预防性使用时， 优选化合物先于任何炎症应答或症状提供。化合物给药可以预防或减轻炎症应 答或症状。

示例性的炎症病况包括，例如，多发性硬化症、类风湿性关节炎、银屑病 关节炎、变性关节病、脊柱关节病、痛风性关节病、全身性红斑狼疮、幼年型 关节炎、类风湿性关节炎、骨关节炎、骨质疏松症、糖尿病(例如，胰岛素依 赖型糖尿病或青少年型糖尿病)、经期痉挛、纤维囊泡症、炎性肠病、过敏性肠 综合征、Crohn′s病、粘液性结肠炎、溃疡性结肠炎、胃炎、食管炎、胰腺炎、 腹膜炎、阿尔茨海默病、休克、强直性脊柱炎、胃炎、结膜炎、胰腺炎(急性 或慢性)、多发性器官损伤综合征(例如，败血症或外伤并发症)、心肌梗塞、 动脉粥样硬化、中风、再灌注损伤(例如，由于心肺分流术或肾透析)、急性肾 小球肾炎、血管炎、热损伤(例如，晒伤)、坏死性小肠结肠炎、粒细胞转移相 关综合征和/或Sjogren′s综合征。示例性的皮肤炎症病况包括，例如，湿疹、特 应性皮炎、接触性皮炎、荨麻疹、硬皮病、银屑病和具有急性炎症成分的皮肤 病。

在另一个实施方案中，增加sirtuin蛋白水平和/或活性的sirtuin调节化合物 可以用于治疗或预防变态反应和呼吸病况，包括哮喘、支气管炎、肺纤维化、 过敏性鼻炎、氧中毒、肺气肿、慢性支气管炎、急性呼吸窘迫综合征和任何慢 性阻塞性肺病(COPD)。该化合物可以用于治疗慢性肝炎感染，包括乙型肝炎 和丙型肝炎。

另外，增加sirtuin蛋白水平和/或活性的sirtuin调节化合物可以用于治疗自 身免疫疾病和/或与自身免疫疾病相关炎症例如器官-组织自身免疫疾病(例如， Raynaud′s综合征)、硬皮病、重症肌无力、移植排斥、内毒素休克、脓毒症、 银屑病、湿疹、皮炎、多发性硬化病、自身免疫性甲状腺炎、眼色素层炎、全 身性红斑狼疮、阿狄森综合征、自身免疫性多腺体疾病(也被称为自身免疫性 多腺体综合征)和Grave′s疾病。

在某些实施方案中，增加sirtuin蛋白水平和/或活性的sirtuin调节化合物可 以单独或与其他用于治疗或预防炎症的化合物组合使用。示例性的抗炎症药物 包括，例如，类固醇(例如，皮质醇、肾上腺皮质素、氟可的松、泼尼松、6α -甲基强的松、去炎松、倍他米松或地塞米松)、非甾体抗炎药物(NSAIDS(例 如，阿司匹林、扑热息痛、托美汀、布洛芬、甲芬那酸、吡罗昔康、萘普酮、 罗非考昔、塞来考昔、依托度酸或尼美舒利)。在另一个实施方案中，其他治疗 药物是抗生素(例如，万古霉素、青霉素、阿莫西林、氨比西林、头孢噻肟、 头孢三嗪、头孢克肟、rifampinmetronidazole、脱氧土霉素或链霉素)。在另一个 实施方案中，其他治疗药物是PDE4抑制剂(例如，罗氟司特或咯利普兰)。在 另一个实施方案中，其他治疗药物是抗组胺剂(例如，赛克利嗪、安他乐、普 鲁本近或可他敏)。在另一个实施方案中，其他治疗药物是抗疟药(例如，青蒿 素、蒿甲醚、artsunate、磷酸氯喹、盐酸甲氟喹、盐酸多西环素、盐酸氯胍、阿 托伐醌或氯氟菲醇)。在一个实施方案中，其他治疗药物是drotrecogin alfa。

抗炎药进一步的例子包括，例如，醋氯芬酸、醋炎痛、e-乙酰氨基己酸、扑 热息痛、乙酰氨萨罗、乙酰苯胺、乙酰水杨酸、S-腺苷甲硫氨酸、阿氯芬酸、 阿氯米松、阿芬他尼、阿尔孕酮、烯丙苯哌啶、阿明洛芬、阿洛普令、安侬痛、 铝二(乙酰水杨酸盐)、安西奈德、氨芬酸、氨氯苯嗪、3-氨基-4-羟基丁酸、 2-氨基-4-甲基吡啶、氨丙吡酮、氨基比林、阿米西群、水杨酸铵、安吡昔康、 呱氨托美丁、阿尼利定、安替比林、安曲非宁、阿扎丙宗、倍氯米松、苄吲酸、 贝诺酯、苯噁丙酸、苄哌吡酮、苄达明、苄吗啡、柏莫洛芬、倍他米松、倍他 米松-17-戊酸盐、氰苯咪呱啶、α-甜没药萜醇(α-bisabolol)、溴芬酸、对溴 乙酰苯胺、乙酸5-溴水杨酸酯、5-溴水杨醇、丁西丁、氯环己苯酰丙酸、丁环 己巴比妥、布地奈德、丁苯羟酸(bufexamac)、丁丙二苯肼、丁丙诺啡叔丁啡、 丁醋苯胺、布替布芬、环丁笄吗喃、酰胺咪嗪、卡必芬、卡布洛芬、苯噁嗪二 酮、三氯叔丁醇、氯强的松、氯乙苯噁嗪酮、水杨酸胆碱、辛可芬、吲哚拉新、 胺酚环醇、环氯茚酸、氯氟美松、氯氟土龙、氯苯酰吲酸、氯尼他秦、氯尼辛、 氯苯吡咯酸、氯泼尼醇、clove、可待因、溴甲可待因、磷酸可待因、硫酸可待 因、考的松、可的伐唑、克罗丙胺、克罗乙胺、环唑辛、地夫可特、去氢睾甾 酮、地索吗啡、丙缩羟强龙、去羟米松、地塞米松、地塞米松-21-异烟酸酯、右 旋二苯哌啶二噁烷、吗拉迈得、右丙氧芬、去氧皮甾酮、地佐辛、地恩丙胺、 二醋吗啡(diamorphone)、双氯芬酸、二苯酰胺吡唑、联苯吡胺、二氟拉松、 二氟可龙、双氟尼酸、醋丁二氟龙、二氢可待因、醋氢可待酮、双氢吗啡、二 羟化铝乙酰水杨酸盐、苯醋胺乙酯、地美庚醇、二甲噻丁、吗苯丁酯、二苯哌 己酮、diprocetyl、安乃近、地他唑、喜康、依莫法宗、苯乙氨茴酸、乌拉尔 甘草次酸、依匹唑、依他佐辛、依特柳酯、乙水杨胺、氢氮革乙酯、乙氧二氨 偶氮苯、乙甲噻嗯厂烯、乙基吗啡、依托度酸、依托芬那酯、依托尼秦、丁香 酚、联苯乙酸、芬布芬、芬克洛酸、苯吲柳酸、非诺洛芬、芬太尼、双苯噻酸、 非普地醇、非普拉酮、夫洛非宁、氟扎可特、氟二氯松、氟芬那酸、二氟美松、 去氟肤轻松、氟胺烟酸、氟诺洛芬、氟轻松、氟轻松、氟轻松、氟考丁酯、氟 考龙、对氟苯乙砜、丙酮缩氟氢羟龙、醋酸甲氟龙、氟吡丁、氟泼尼定、氟强 的松龙、氟丙喹酮、氟羟可舒松、氟吡洛芬、氟地松、氟甲酰龙、磷柳酸、龙 胆酸、格拉非宁、葡卡美新、水杨酸羟乙酯、愈创蓝油烃、氯氟舒松、卤贝他 索、氯二氟美松、卤泼尼松、二酯吗啡、二氢可待因酮、氢化松氨酯、氢化可 的松、醋酸氢化可的松、氢化可的松琥珀酸、氢化可的松半琥酯、氢化可的松21- 赖氨酸盐、氢化可的松环戊丙酸盐、氢吗啡酮、羟基哌替啶、异丁芬酸、布洛 芬、异丁普生、水杨酸咪唑、吲哚美辛、吲哚布洛芬、三苯唑酸、异氟泼尼龙、 醋异氟龙、isoladol、异美沙酮、异尼辛、依索克酸(isoxepac)、伊索昔康、酚 哌丙酮、酮基布洛芬、酮咯酸、对-乳酰乙氧苯胺、来苯胺、左洛啡烷、左吗南、 左芬啡烷、罗芬太尼、氯那唑酸、氯诺昔康、氯索洛芬、赖氨酸乙酰水杨酸、 甲哌地强龙、甲氯灭酸、甲羟松、甲芬那酸、美洛昔康、麦啶、甲基强的松、 甲氮草酚、mesalamine、间唑辛、美沙酮、甲氧异丁嗪、甲基氢化泼尼松、醋 酸甲基氢化泼尼松、甲泼尼龙琥珀酸钠、甲基氢化泼尼、磺庚甲泼尼龙、甲噻 吩嗪乙酸、甲氧夫啉、美托酮、单苯保泰松、莫苯唑酸、莫米松、吗拉宗、吗 啡、盐酸吗啡、硫酸吗啡、水杨酸吗啉、苄吗啡十四酸酯、萘普酮、环丁甲羟 氢吗啡、烯丙吗啡、水杨酸1-萘酯、甲氧萘丙酸、那碎因、奈福泮、二烟酰吗 啡、烟胺比林、尼氟灭酸、尼美舒利、5′-硝基-2′-丙氧基乙酰苯胺、去甲左啡烷、 去甲美沙酮、去甲吗啡、二苯哌己酮、奥沙拉嗪、阿片、奥沙西罗、奥沙美辛 (oxametacine)、噁丙嗪、羟氢可待酮、氧吗啡酮、羟基保泰松、阿片全碱、 对氟米松、瑞尼托林、丙炔柳胺、镇痛新、哌异噁唑、非那西汀、苯吗庚酮、 非那佐辛、盐酸非那吡啶、非诺可、苯哌利定、苯吡唑酮、羟苯乙吗喃、乙酰 水杨酸苯酯、保泰松、水杨酸苯酯、非尼拉朵、吡酮洛芬、去痛定、哌布宗、 哌吡唑酮、氯氟吡唑酸、氰苯双哌酰胺、吡罗昔康、吡洛芬、吡喃洛芬、泼尼 卡酯、去氢氢化可的松、泼尼松、强的松龙戊酸酯、甲烯强的松龙、丙谷美辛、 丙庚嗪、二甲哌替啶、丙帕他莫、异丙哌替啶、丙吡胺、丙吡胺、异丙安替比 林、普罗喹宗、吩噻嗪丙酸、胺丙噁二唑、雷米那酮、雷米芬太尼、利马唑甲 硫酸盐、乙酰水杨酰胺、水杨素、水杨酰胺、水杨酰胺O-乙酸、水杨酸、水杨 酰硫酸酯、双水杨酯、胺乙氧苯酰苯胺、西美曲特、舒芬太尼、柳氮磺吡啶、 舒林酸、超氧化物歧化酶、舒洛芬、琥丁唑酮、氟烟酞酯、替尼达普、替诺昔 康、氯苯氨茴酯、粉防已碱、噻唑丁炎酮(thiazolinobutazone)、噻洛芬酸、羟 哌苯酮、替立定、氨苄噻吡酯、巯氢可的松、邻甲氯灭酸、托美汀、曲蚂多、 去炎松、曲安缩松、tropesin、氯苄吡醇、联苯丁酸、肟环苯丙酸、扎托洛芬和 苯酰吡酸钠。

在一个示例性的实施方案中，增加sirtuin蛋白水平和/或活性的sirtuin调节 化合物可以与选择性COX-2抑制剂一起给药来治疗或预防炎症。示例性的选择 性COX-2抑制剂包括，例如，地拉考昔、帕瑞考昔、塞来考昔、伐地考昔、罗 非考昔、艾托考昔、罗美昔布(lumiracoxib)、2-(3，5-二氟苯基)-3--[4-(甲磺酰 基)苯基]-2-环戊烯-1-酮、(S)-6，8-一二氯-2-(三氟甲基)-2H-1-苯并吡喃-3-甲酸、 2-(3，4-二氟苯基)-4-(3-羟基-3-甲基-1-丁氧基)-5-[4-(甲磺酰基)苯基]-3-(2H)-哒嗪 酮、4-[5-(4-氟苯基)-3-(三氟甲基)-1H-吡唑-1-基]苯磺酰胺、叔丁基1苄基-4-[(4- 氧代哌啶-1-基}磺酰基]哌啶-4-甲酸盐，4-[5-(苯基)-3-(三氟甲基)-1H-吡唑-1-基] 苯磺酰胺、及其盐和前药。

潮红

在另一方面，增加sirtuin蛋白水平和/或活性的sirtuin调节化合物可以用于 减少潮红和/或疾病症状热潮红的发生率或严重度。例如，本发明方法包括单独 或与其他药物组合使用增加sirtuin蛋白水平和/或活性的sirtuin调节化合物，来 减少癌症病人潮红和/或热潮红的发生率或严重度。在其他实施方案中，该方法 提供增加sirtuin蛋白水平和/或活性的sirtuin调节化合物减少绝经和绝经后妇女 潮红和/或热潮红的发生率或严重度的应用。

在另一个方面，增加sirtuin蛋白水平和/或活性的sirtuin调节化合物可以用 于减少为其他药物治疗副作用的潮红和/或热潮红的发生率或严重度，例如，药 物诱导的潮红。在某些实施方案中，治疗和/或预防药物诱导的潮红的方法包括 给予需要其的病人一种包含至少一种潮红诱导化合物和至少一种增加sirtuin蛋 白水平和/或活性的sirtuin调节化合物的制剂。在其他实施方案中，治疗药物诱 导的潮红的方法包括分别给予一种或多种诱导潮红的化合物和一种或多种 sirtuin调节化合物，例如，其中sirtuin调节化合物和潮红诱导药物没有配制在 相同的组合物中。当使用分开的制剂时，sirtuin调节化合物可以(1)在潮红诱 导药物给药的同时给药，(2)与潮红诱导药物间歇地给药，(3)相对于潮红诱 导药物给药交叉给药，(4)先于潮红诱导药物给药给药，(5)潮红诱导药物给 药后给药，和(6)其不同的组合。示例性的潮红诱导药物包括，例如，烟酸、 faloxifene、抗抑郁药、抗精神病药、化学治疗药、钙通道阻滞剂和抗生素。

在一个实施方案中，增加sirtuin蛋白水平和/或活性的sirtuin调节化合物可 以用于减少血管舒张剂或抗血脂剂(包括抗胆甾醇血药和抗脂肪肝药)的潮红 副作用。在一个示例性的实施方案中，增加sirtuin蛋白水平和/或活性的sirtuin 调节化合物可以用于减少与烟酸给药相关的潮红。

烟酸、3-吡啶甲酸或烟酸，是以例如商品名Nicolar、SloNiacin、Nicobid 和Time Release Niacin销售的抗类脂药物。烟酸用于例如高脂血症、高胆固醇 血症和动脉粥样硬化的血脂障碍的治疗已经很多年。长期以来人们知道这个化 合物表现下述有益效果：减少人体总胆固醇、低密度脂蛋白或“LDL胆固醇”、 甘油三酯和载脂蛋白a(Lp(a))，同时增加期望的高密度脂蛋白或“HDL胆固 醇”。

一般的剂量范围为每天约1克至约3克。烟酸通常每天饭后给药2到4次， 取决于所选的剂型。目前烟酸商业可获得其两种剂型。一种剂型是每天给药3 或4次的立即或快速释放片。立即释放(″IR″)烟酸制剂通常在摄入后约30到 60分钟内释放所有的烟酸。另一个剂型是适于每天给药2到4次的缓释形式。 与IR制剂相反，缓释(″SR″)烟酸制剂设计在特定的时间间隔内释放大量的药 物，以吸收入血流中来维持烟酸在摄入后例如12或24小时的长时间内的治疗 水平。

如此处使用地，术语“烟酸”是指包含烟酸或除烟酸本身外的其机体代谢 为烟酸、因此产生与烟酸实质上相同作用的化合物。产生与烟酸相似作用的示 例性的化合物包括，例如，酒石酸烟醇酯(nicotinyl alcohol tartrate)、六盐酸d- 山梨糖醇酯(d-glucitol hexanicotinate)、烟酸铝、烟酸戊四醇酯和d，1-α-烟酸 生育酚酯。每个这种化合物在本文总称为“烟酸”。

在另一个实施方案中，本发明提供治疗和/或预防具有减少的潮红副作用的 高脂血症的方法。该方法包括给予需要的对象治疗有效量的烟酸和足够减少潮 红的量的增加sirtuin蛋白水平和/或活性的sirtuin调节化合物的步骤。在一个示 例性的实施方案中，烟酸和/或sirtuin调节化合物可以夜间给药。

在另一个代表性的实施方案中，该方法包括增加sirtuin蛋白水平和/或活性 的sirtuin调节化合物减少雷洛昔芬潮红副作用的应用。雷洛昔芬在体内某些部 位像雌激素样起作用，但不是激素。它有助于预防达到绝经期的妇女的骨质疏 松。骨质疏松引起骨逐渐变薄、脆、并更可能折断。易维特(Evista)减缓绝经 期发生的骨质流失，降低由于骨质疏松而脊柱骨折的风险。雷洛昔芬通常的副 作用是热潮红(出汗和潮红)。这对由于绝经期已患有热潮红的妇女是不舒适的。

在另一个代表性的实施方案中，该方法包括增加sirtuin蛋白水平和/或活性 的sirtuin调节化合物减少抗抑郁药或抗精神病药潮红副作用的应用。例如，增 加sirtuin蛋白水平和/或活性的sirtuin调节化合物可以结合(分别或共同给药) 羟色胺再摄取抑制剂、5HT2受体拮抗剂、抗惊厥剂、去甲肾上腺素再摄取抑制 剂、α-肾上腺素受体拮抗剂、NK-3拮抗剂、NK-1受体拮抗剂、PDE4抑制剂、 神经肽Y5受体拮抗剂、D4受体拮抗剂、5HT1A受体拮抗剂、5HT1D受体拮 抗剂、CRF拮抗剂、单胺氧化酶抑制剂或镇静催眠药使用。

在某些实施方案中，增加sirtuin蛋白水平和/或活性的sirtuin调节化合物可 以用作5羟色胺再摄取抑制剂(SRI)减少潮红的治疗的部分。在某些优选实施 方案中，SRI是选择性的5羟色胺再摄取抑制剂(SSRI)，例如fluoxetinoid(氟 西汀、诺氟西汀)或nefazodonoid(萘法唑酮、hydroxynefazodone、oxonefazodone)。 其他示例性的SSRI包括度洛西汀、文拉法辛、米那普仑、西他罗仑、三氟戊肟 胺、帕罗西丁和舍曲林。增加sirtuin蛋白水平和/或活性的sirtuin调节化合物也 可以用作镇静催眠药治疗的部分，所述镇静催眠药例如选自苯并二氮类(例 如阿普唑仑、甲氨二氮甲氨二氮氯氮盐、氧异安定、地西泮、哈拉 西泮、劳拉西泮、奥沙西泮和普拉西泮)、唑吡坦和巴比妥类。在其他实施方 案中，增加sirtuin蛋白水平和/或活性的sirtuin调节化合物可以用作5-HT1A受 体部分激动剂治疗的部分，5-HT1A受体部分激动剂例如选自丁螺环酮、氟噁克 生、吉吡隆和伊沙匹降。增加sirtuin蛋白水平和/或活性的sirtuin调节化合物也 可用作去甲肾上腺素再摄取抑制剂治疗的部分，去甲肾上腺素再摄取抑制剂例 如选自叔胺类三环抗抑郁药和仲胺类三环抗忧郁药。示例性的叔胺类三环抗抑 郁药包括阿米替林、氯丙咪嗪、多虑平、米帕明和三甲丙咪嗪。示例性的仲胺 类三环抗抑郁药包括氯氧平、地昔帕明、马普替林、去甲替林和丙氮环庚烯。 在某些实施方案中，增加sirtuin蛋白水平和/或活性的sirtuin调节化合物可以用 作单胺氧化酶抑制剂治疗的部分，单胺氧化酶抑制剂例如选自异卡波肼、苯乙 肼、反苯环丙胺、司来吉兰和摩氯苯胺。

在另一个代表性的实施方案中，增加sirtuin蛋白水平和/或活性的sirtuin调 节化合物可以用于减少例如环磷酰胺、三苯氧胺的化学治疗药的潮红副作用。

在另一个实施方案中，增加sirtuin蛋白水平和/或活性的sirtuin调节化合物 可以用于例如氨氯地平的钙通道阻滞剂的潮红副作用。

在另一个实施方案中，增加sirtuin蛋白水平和/或活性的sirtuin调节化合物 可以用于减少抗生素的潮红副作用。例如，增加sirtuin蛋白水平和/或活性的 sirtuin调节化合物可以与左氧氟沙星组合使用。左氧氟沙星用于治疗易感染的 细菌引起的鼻窦、皮肤、肺、耳、气道、骨和关节的感染。左氧氟沙星也常常 用于治疗泌尿系感染，包括那些对其他抗生素耐药的感染，以及前列腺炎。左 氧氟沙星在治疗大肠杆菌、空肠弯曲杆菌和志贺氏杆菌引起的传染性腹泻中是 有效的。左氧氟沙星也可以用于治疗不同的产科感染，包括乳腺炎。

眼部疾病

本发明一方面是通过给予病人治疗剂量的选自本文公开的化合物或其药学 上可接受的盐、前药或代谢衍生物的sirtuin调节剂，抑制、减少或其他方式治 疗视力损伤的方法。

在本发明的某些方面，视力损伤是由视神经或中枢神经系统损伤引起的。 在特别的实施方案中，视神经损伤是例如青光眼造成的高眼内压引起的。在其 他特别的实施方案中，视神经损伤是神经肿胀引起的，神经肿胀经常与例如在 视神经炎中的感染或免疫(例如自身免疫)应答有关。

青光眼描述一组与视野缺陷、视盘拔罐(cupping of the optic disc)和视神 经损伤相关的疾病。这些通常被称为青光眼视神经神经病变。大多数青光眼通 常，但不总是，与眼内压升高有关。青光眼示例性的形式包括青光眼和全层角 膜移植术、急性闭角型、慢性闭角型、慢性开角型、眼前房角退缩、无晶状体 的和人工晶状体的、药物造成的、眼前房出血、眼内瘤、青少年、Lens-Particle、 低压力、恶性的、新生血管性、晶状体溶解的、Phacomorphic、色素的、高褶 型虹膜、原发先天性的、原发性开角、剥落、继发先天性的、Aduit Suspect、单 侧的、色素层炎的、眼内高压、眼张力过低、波-施二氏综合征(Posner-Schlossman Syndrome)以及眼内高压和原发性开角青光眼中的巩膜扩张过程。

眼内压也可以由例如晶状体乳化法(即，白内障外科)的各种手术操作和 例如人工晶状体的结构植入而升高。另外，尤其是脊柱外科手术、或任何病人 较长期的时间内手术会导致升高的眼内压的手术。

视神经炎(ON)是视神经炎症并引起急性视力丧失。其与多发性硬化症 (MS)高度相关，正如15-25％的MS病人最初表现ON，50-75％的ON病人诊 断患有MS。ON也与感染(例如，病毒感染、脑膜炎、梅毒)、炎症(例如， 来源于疫苗)、浸润和局部缺血相关。

导致视神经损伤的另一个病况是眼前部缺血性视神经病变(AION)。存在 两种类型的AION。动脉炎性AION起因于巨细胞动脉炎(血管炎)并导致急 性视力丧失。非动脉炎AION包括除起因于巨细胞动脉炎外的缺血性视神经病 的所有病例。虽然似乎结合了炎症和局部缺血的机理，但AION的病理生理学 是不清楚的。

其他视神经损伤通常与脱髓鞘(demyleination)、炎症、局部缺血、毒素或 视神经创伤有关。视神经损伤的示例性的病况包括脱髓鞘性视神经病变(视神 经炎、球后视神经炎)、视神经鞘脑膜瘤、成人视神经炎、儿童视神经炎、眼前 部缺血性视神经病变、后部缺血性视神经病、压缩性视神经病变、视神经乳头 水肿、假视神经乳头水肿和中毒性/营养性视神经病变。

其他与视力丧失相关的神经学病况，虽然不直接与视神经损伤相关，包括 弱视、贝尔麻痹、慢性进行性外眼肌麻痹、多发性硬化症、脑假瘤和三叉神经 痛。

在本发明的某些方面，视力损伤是由视网膜损伤引起的。在特别的实施方 案中，视网膜损伤是由流向眼睛的血流障碍引起的(例如，动脉硬化、血管炎)。 在特别的实施方案中，视网膜损伤是由黄斑破裂引起的(例如渗出性或非渗出 性黄斑变性)。

示例性的视网膜疾病包括渗出性老年黄斑变性、非渗出性老年黄斑变性、 视网膜电子修复术和RPE移植性老年黄斑变性、急性多病灶鱼鳞板状色素上皮 病、急性视网膜坏死、卵黄状黄斑变性、视网膜分支动脉闭塞、视网膜分支静 脉闭塞、癌症相关和有关自身免疫性视网膜病变、视网膜中央动脉闭塞、视网 膜中央静脉闭塞、中心性浆液性脉络膜视网膜病变、伊尔斯病、黄斑前膜、格 子样变性、大动脉瘤、糖尿病性黄斑水肿、Irvine-Gass黄斑水肿、黄斑裂洞、 视网膜下新生血管膜、弥散性单侧亚急性视神经视网膜炎、非人工晶状体黄斑 囊样水肿、眼假组织胞浆菌病综合征、渗出性视网膜脱离、术后视网膜剥离、 增殖性视网膜剥离、孔源性视网膜剥离、牵引性视网膜脱离、色素性视网膜炎、 CMV视网膜炎、视网膜成神经细胞瘤、早产儿视网膜病、鸟枪弹样视网膜病变、 背景性糖尿病性视网膜病变、增殖型糖尿病视网膜病变、血红蛋白病、Purtscher 视网膜病变、Valsalva视网膜病变、青年性视网膜劈裂症、老年性视网膜劈裂症、 太尔松综合征和白点综合征。

其他示例性的疾病包括眼部细菌感染(例如，结膜炎、角膜炎、结核、梅 毒、淋病)、病毒感染(例如，眼单纯疱疹病毒、水痘-带状疱疹病毒、细胞巨 化病毒视网膜炎、人类免疫缺陷病毒(HIV))以及HIV继发的进行性外部视 网膜坏死或其他HIV相关的和其他免疫缺陷性相关的眼部疾病。另外，眼部疾 病包括霉菌感染(例如，念珠霉属脉络膜炎、组织胞浆菌病)、原生动物感染 (例如，弓形虫病)和例如眼弓蛔虫病和结节病的其他疾病。

本发明一方面是通过给予需要这种治疗的对象治疗剂量的本文公开的 sirtuin调节剂，抑制、减少或治疗经历化学治疗药物(例如，神经中毒药、例 如类固醇的升高眼内压的药物)治疗的对象的视力损伤的方法。

本发明另一方面是通过给予需要这种治疗的对象治疗剂量的本文公开的 sirtuin调节剂，抑制、减少或治疗经历包括眼部或其他俯卧位进行的手术例如 脊髓手术的对象的视力损伤的方法。眼部手术包括白内障、虹膜切开术和晶状 体置换术。

本发明另一个方面是通过给予需要这种治疗的对象治疗剂量的本文公开的 sirtuin调节剂，治疗，包括抑制和预防性治疗，包括白内障、干眼病、视网膜 损伤等的老年眼部疾病。

白内障的形成与眼晶状体的一些生化变化相关，例如水平下降的抗氧化剂 抗坏血酸和谷胱甘肽、增加的脂质、氨基酸和蛋白质氧化、增加的钠和钙、氨 基酸丧失和晶状体代谢下降。缺乏血管的晶状体悬浮在眼睛前部的细胞外液中。 营养素，例如抗坏血酸、谷胱甘肽、维生素E、硒、生物类黄酮和类胡萝卜素 是维持晶状体透明度所必需的。低水平的硒导致引起游离基的过氧化氢的增加， 其被硒-依赖性抗氧化酶谷胱甘肽过氧化酶中和。晶状体保护性谷胱甘肽过氧化 酶也依赖于氨基酸甲硫氨酸、半胱氨酸、甘氨酸和谷氨酸。

白内障也可以由于不能适当代谢发现于含有乳糖、单糖半乳糖和葡萄糖组 成的双糖的乳制品的半乳糖而发展。如果可以及早发现并矫正代谢作用，白内 障可以被预防、延迟、放慢并甚至可能被逆转。

视网膜损伤尤其是归因于在青光眼、糖尿病性视网膜病和与年龄相关的黄 斑变性改变(AMD)中自由基引发的反应。眼睛是中枢神经系统的一部分，具 有有限的再生能力。视网膜由众多的含有最高浓度的多不饱和脂肪酸(PFA) 和易受氧化的神经细胞组成。游离基由进入眼睛的紫外线和棒和椎中的线粒体 产生，其产生转换光线为视觉冲动需要的能量。自由基通过羟基或超氧化物基 团引起PFA的过氧化作用，所述羟基或超氧化物基团又繁殖另外的游离基。游 离基引起视网膜组织的暂时或永久性损伤。

青光眼通常被视为引起升高的眼内压(IOP)的障碍，其导致视神经纤维永 久性损伤，但六分之一的青光眼病例不会发展升高的IOP。这种疾病现在被理 解为是一种减少的血管灌注和神经中毒因素的增加。最近的研究已经暗示作为 视网膜神经节细胞死亡原因的眼中谷氨酸、一氧化氮和过氧亚硝酸盐水平升高。 神经保护药物可能是青光眼护理的未来。例如，一氧化氮合酶抑制剂阻断从一 氧化氮和超氧化物形成过氧亚硝酸盐。在最近的研究中，氨基胍、一氧化氮合 酶抑制剂治疗的动物视网膜神经节细胞损失减少。它得到结论认为眼中一氧化 氮在许多组织中引起细胞毒性并在中枢神经系统引起神经毒性。

当根本的血管发展主要由微动脉瘤性紫癜的特征和视网膜内出血组成的微 血管异常时，糖尿病性视网膜病发生。氧化代谢产物直接参与糖尿病性视网膜 病的发病，游离基增加生长因子的生成，导致提高的增殖活性。血管内皮细胞 生成的一氧化氮也可以引起平滑肌细胞松弛导致血管段的血管舒张。视网膜局 部缺血和缺氧发生于动脉基底膜增厚、内皮增殖和周皮细胞损失之后。氧合作 用不充足引起毛细血管闭塞或无灌注、动静脉分流、血流缓慢和RBC释放氧气 能力受损。视网膜组织的脂质过氧化也会由于自由基损伤而发生。

黄斑负责我们的急性中央视觉，由光感觉细胞(椎)组成，根本的视网膜 色素上皮细胞(RPE)和脉络膜滋养并有助于移除废料。RPE与光敏色素的维 生素A底物滋养椎和消化椎棚外尖(cones shed outer tips)。RPE暴露于高水平 的紫外辐射和抑制血管发生的分泌因素。脉络膜包含提供营养物和移除废料的 密集血管网。

在AMD中，棚锥尖(the shed cone tips)被RPE变为不可消化的，其细胞 在收集了太多的不消化物质后膨胀并死亡。不消化废料的收集，称为脉网膜小 疣，在RPE下形成。光毒性损伤也引起RPE细胞中脂褐素的聚集。细胞内脂褐 素和Bruch′s膜中脉网膜小疣聚集妨碍氧和营养素转运至视网膜组织，并最终导 致RPE和光感受器功能障碍。在渗出性AMD中，血管通过Bruch′s膜缺损从脉 络膜内层生长并可在RPE下生长、从脉络膜脱离并渗出液体或出血。

黄斑色素，一种预防阳光损伤视网膜的保护因子，是由营养性衍生类胡萝 卜素聚集形成的，例如叶黄素、作为其他重要营养素和玉米黄素运送载体的脂 肪黄色色素。抗氧化剂，例如维生素C和E、β-胡萝卜素和叶黄素、以及锌、 硒和铜，都发现于健康的黄斑中。除了提供营养，这些抗氧化剂保护免于引发 黄斑变性的自由基损伤。

本发明的另一个方面是通过给予需要这种治疗的对象治疗剂量的本文公开 的sirtuin调节剂，预防或治疗应激、化学损伤或辐射引起的眼损伤。眼睛的辐 射或电磁损伤可包括CRT’s或暴露于阳光或UV引起的损伤。

在一个实施方案中，组合药物疗法可包括治疗或预防眼部疾病或与这些病 况相关的继发病况的药物或化合物。因此，组合药物疗法可以包括一种或多种 sirtuin活化剂和一种或多种治疗眼部疾病的治疗药物。例如，一种或多种sirtuin 活化化合物可以与有效量的一种或多种下述药物组合：减少眼内压的药物、治 疗青光眼的药物、治疗视神经炎的药物、治疗CMV视网膜的药物，治疗多发 性硬化症的药物和/或抗生素等。

在一个实施方案中，sirtuin调节剂可以结合降低眼内压的疗法给药。一组疗 法包括阻断眼房水的生成。例如，局部β-肾上腺素拮抗剂(噻吗洛尔和倍他洛 尔)降低眼房水的生成。局部噻吗洛尔在30分钟内引起IOP下降并在1-2小时 达到峰效应。合理的方案是0.5％噻吗洛尔、每30分钟1滴，给药2次。碳酸 酐酶抑制剂乙酰唑胺也降低眼房水的生成并应结合局部β-拮抗剂给予。给予 500mg的初始剂量后，每6小时给予250mg。这样药物可以口服、肌内或静脉 内给予。另外，α2-拮抗剂(例如，阿拉可乐定)通过降低眼房水起作用。他 们的作用是对局部给予β-阻断剂的附加。他们已获准用于控制前房激光术后压 力急性上升，但已经报道治疗急性闭角型青光眼的有效性。合理的方案是每30 分钟1滴，给药2次。

第二组减少眼内压的疗法包括减少玻璃体体积。高渗药物可以用于治疗急 性发作。这些药物通过使血液高渗将水带出眼球。口服剂量1mL/kg甘油的50％ 冷溶液(与柠檬汁混合使其更可口)是经常使用的。甘油在肝中转变为葡萄糖； 如果患有糖尿病的人在接受甘油后变得血糖过多他们会需要附加的胰岛素。口 服异山梨醇是一种代谢惰性的醇，也可以用作患有急性闭角型青光眼病人的渗 透药。通常剂量是口服100g(220cc的45％溶液)。这种惰性醇不应该与用于心 绞痛和充血性心力衰竭的基于硝酸盐的心脏药物二硝酸异山梨酯混淆。以 1.0-1.5mg/kg的剂量静脉给予甘露醇也是有效的并且恶性和呕吐的病人可以很 好地耐受。这些高渗药物在任何有充血性心力衰竭病史的病人中应当小心使用。

第三组疗法包括促进眼房水从眼中外流。缩瞳剂从虹膜角膜角牵拉虹膜并 通过外周虹膜有助于减轻小梁网阻塞。2％(蓝眼睛)-4％(棕眼睛)毛果云香 碱可以在最初的1-2小时每15分钟给药。更频繁的给药或更高剂量可以诱发全 身性胆碱能危象。有时NSAIDS也用于减少炎症。

示例性的减少眼内压的治疗药物包括ALPHAGANP(Allergan)(酒石 酸溴莫尼定眼用溶液)、AZOPT(Alcon)(布林唑胺眼悬液)、BETAGAN (Allergan)(盐酸左布诺洛尔眼用溶液，USP)、BETIMOL(Vistakon)(噻吗 洛尔眼用溶液)、BETOPTIC S(Alcon)(盐酸倍他洛尔)、酒石酸溴莫尼定 (Bausch&Lomb)、喹酮心安氢氯化物(Bausch&Lomb)、COSOPT(Merck) (盐酸多佐胺-马来酸噻吗心安眼用溶液)、LUMIGAN(Allergan)(比马前列 素眼用溶液)、OPTIPRANOLOL(Bausch&Lomb)(美替洛尔眼用溶液)、 TIMOLOL GFS(Falcon)(马来酸噻吗心安眼用成凝胶溶液)、TIMOPTIC (Merck)(马来酸噻吗心安眼用溶液)、TRAVATAN(Alcon)(曲伏前列素眼 用溶液)、TRUSOPT(Merck)(多佐胺氢氯化物眼用溶液)和XALATAN (Pharmacia&Upjohn)(拉坦前列素眼用溶液)。

在一个实施方案中，sirtuin调节剂可以结合治疗和/或预防青光眼的疗法给 药。一个青光眼药物的例子是DARANIDE片剂(Merck)(二氯磺胺)。

在一个实施方案中，sirtuin调节剂可以结合治疗和/或预防视神经炎的疗法 给药。视神经炎药物的例子包括DECADRON磷酸盐注射剂(Merck)(地塞米 松磷酸钠)、DEPO-MEDROL(Pharmacia&Upjohn)(甲基氢化泼尼松醋酸盐)、 HYDROCORTONE片剂(Merck)(皮质醇)、ORAPRED(Biomarin)(泼尼 松龙磷酸钠口服溶液剂)和PEDIAPRED(Celltech)(强的松龙磷酸钠，USP)。

在一个实施方案中，sirtuin调节剂可以结合治疗和/或预防CMV视网膜病 的疗法给药。治疗CMV视网膜病的药物包括CYTOVENE(更昔洛韦胶囊) 和VALCYTE(Roche Laboratories)(缬更昔洛韦盐酸盐片剂)。

在一个实施方案中，sirtuin调节剂可以结合治疗和/或预防多发性硬化症的 疗法给药。这类药物的例子包括DANTRIUM(Procter&Gamble Pharmaceuticals)(丹曲洛林钠盐)、NOVANTRONE(Serono)(米托蒽醌)、 AVONEX(Biogen Idec)(干扰素β-1a)、BETASERON(Berlex)(干扰素 β-1b)、COPAXONE(Teva Neuroscience)(格拉默醋酸盐注射剂)和REBIF (Pfizer)(干扰素β-1a)。

另外，具有多种活性的大环内酯和/或霉酚酸可以与sirtuin调节剂共同给药。 大环内酯类抗生素包括他克莫司、环孢霉素、西罗莫司、依维莫司、子囊霉素、 乙琥红霉素、阿齐红霉素、克拉仙霉素、克林霉素、林可霉素、他红霉素、角 沙霉素、螺旋霉素、二乙酰麦迪霉素、太乐菌素、罗红霉素、ABT-773、泰利霉 素、柱晶白霉素和林可酰胺。

线粒体相关疾病和障碍

在某些实施方案中，本发明提供治疗会受益于线粒体活性增加的疾病或障 碍的方法。该方法包括给予需要的对象治疗有效量的sirtuin活化化合物。增加 的线粒体活性是指线粒体活性增加，同时保持线粒体的总数(例如，线粒体质 量)、增加线粒体数目因而增加线粒体活性(例如，通过刺激线粒体生物发生) 或其组合。在某些实施方案中，会受益于线粒体活性增加的疾病和障碍包括与 线粒体功能障碍相关的疾病或障碍。

在某些实施方案中，治疗会受益于线粒体活性增加的疾病或障碍的方法可 以包括鉴定患有线粒体功能障碍的对象。诊断线粒体功能障碍的方法可能涉及 分子遗传的、病理学的和/或生化分析，这些总结于Cohen和Gold，Cleveland Clinic Journal of Medicine，68：625-642(2001)中。诊断线粒体功能障碍的一 种方法是Thor-Byrne-ier scale(参见例如，Cohen和Gold，supra；Collin S.et al.， Eur Neurol.36：260-267(1996))。测定线粒体数目和功能的其它方法包括，例 如，酶分析(例如，线粒体酶或ATP生物合成因子例如ETC酶或三羧酸循环酶)、 测定或线粒体质量、线粒体体积、和/或线粒体数目、线粒体DNA量化、监测 细胞内钙稳态和/或对该稳态微扰的细胞反应、对促调亡刺激反应的评价、自由 基生成的测定。这类方法是本领域已知的并描述于，例如，美国专利公开 No.2002/0049176和其中引用的参考文献。

线粒体对几乎所有类型的真核细胞的存活和适当的功能是至关重要的。事 实上任何细胞类型中的线粒体可以患有影响其功能的先天性的或后天性缺陷。 因此，临床上影响呼吸链功能的线粒体缺陷的显著性征兆和症状是异质的和可 变的，这取决于有缺陷的线粒体在细胞中的分布和它们缺陷的严重性和受影响 细胞的生理学需求。具有高能量需求的不分裂组织，例如，神经组织、骨骼肌 和心肌对线粒体呼吸链功能障碍特别敏感，但任何器官体系都可能受到影响。

与线粒体功能障碍相关的疾病和障碍包括线粒体呼吸链活性缺陷导致哺乳 动物中该疾病或障碍病理生理学发展的疾病和障碍。这包括1)线粒体呼吸链一 个或多个部分活性的先天性遗传缺陷；和2)线粒体呼吸链一个或多个部分活性 的后天缺陷，其中这种缺陷由以下因素引起：a)衰老过程中的氧化损伤；b) 升高的细胞内钙；c)受侵袭细胞暴露于一氧化氮；d)缺氧或局部缺血；e)线 粒体轴突转运中微管相关缺陷；或f)线粒体解偶联蛋白的表达。

会受益于线粒体活性增加的疾病或障碍通常包括例如，自由基介导的氧化 损伤导致组织退化的疾病、细胞不适当地经历细胞调亡的疾病、和细胞无法经 历细胞调亡的疾病。会受益于线粒体活性增加的示例性的疾病或障碍包括，例 如，AD(阿尔茨海默病)、ADPD(阿尔茨海默病和帕金森病)、AMDF(共济 失调、肌阵挛和耳聋)、自身免疫病、癌症、CIPO(慢性小肠假性梗阻伴肌病 和眼肌麻痹)、先天性肌营养不良症、CPEO(慢性进行性外眼肌麻痹)、DEAF (母体遗传性耳聋或氨基糖苷诱导的耳聋)、DEMCHO(痴呆和舞蹈病)、糖尿 病(I型或II型)、DIDMOAD(尿崩症、糖尿病、视神经萎缩、耳聋)、DMDF (糖尿病和耳聋)、张力障碍、运动不耐受、ESOC(癫痫、中风、视神经萎缩、 和认知下降)、FBSN(家族性两侧纹状体坏死)、FICP(致病的婴儿心肌病加、 MELAS-相关性心肌病)、GER(胃肠道返流)、HD(亨廷顿舞蹈病)、KSS(卡 恩斯-塞尔综合征)、“稍后-发病的”肌病、LDYT(Leber’s遗传性视神经病和张 力障碍)、利氏综合征、LHON(莱伯遗传性视神经病)、LIMM(致命性婴儿线 粒体性肌病)、MDM(肌病和糖尿病)、MELAS(线粒体病肌病、乳酸酸中毒 和中风样发作)、MEPR(肌阵挛型癫痫和意识退化)、MERME(MERRF/MELAS 重叠疾病)、MERRFS(肌阵挛型癫痫和破碎红肌纤维)、MHCM(母体遗传性 肥大型心肌病)、MICM(母体遗传性心肌病)、MILS(母体遗传性亚急性坏死 性脑病)、线粒体Encephalocardiomyopathy、线粒体脑肌病、MM(线粒体性肌 病)、MMC(母体肌病和心肌病)、MNGIE(肌病和外眼肌麻痹、神经病、胃 肠、脑病)、多体系线粒体障碍(肌病、脑病、失眠、听觉缺失、外周神经病)、 NARP(神经性肌无力、共济失调、和色素性视网膜炎；在此部位的替代表型 (alternate phenotype)被报道为利氏病)、PD(帕金森病)、皮尔森综合征、PEM (进行性脑病)、PEO(进行性外眼肌麻痹)、PME(进行性癫痫性肌阵挛)、PMPS (皮尔森骨髓-胰腺综合征)、银屑病、RTT(Rett综合征)、精神分裂症、SIDS (婴儿猝死综合征)、SNHL(感觉神经性耳聋)、不同家族性表现(临床表现范 围从痉挛下肢轻瘫到多体系进行性障碍和致命性心肌病到躯干共济失调、发音 困难、严重的听力损伤、精神退化、眼睑下垂、眼肌瘫痪、远端气旋和糖尿病)、 或Wolfram综合征。

其他会受益于线粒体活性增加的疾病或障碍通常包括，例如，弗里德赖希 (氏)共济失调和其他共济失调、肌萎缩性(脊髓)侧索硬化(ALS)和其他运动神 经元疾病、黄斑变性、癫痫、弥漫性进行性脑灰质变性、多发性线粒体缺失综 合征、MtDNA缺失综合征、复合体I缺乏症、复合体II(SDH)缺乏症、复合体 III缺乏症、细胞色素C氧化酶(COX，复合体IV)缺乏症、复合体V缺乏症、 腺嘌呤核苷酸转位子(ANT)缺陷、丙酮酸脱氢酶(PDH)缺陷、乙基丙二酸酸尿 伴乳酸血症、3-甲基戊烯二酸酸尿伴乳酸血症、感染期减退性顽固性癫痫、感 染期减退性阿斯佩各综合征、感染期减退性孤独症、注意缺陷多动症(ADHD)、 感染期减退性脑性麻痹、感染期减退性诵读困难、母系遗传性血小板减少和白 血病综合征、MARIAHS综合征(线粒体性共济失调、复发性感染、失语、低 尿酸血症/脊髓发育不全(hypomyelination)、癫痫发作和二羧酸酸尿)、ND6 肌张力障碍、感染期渐退性周期性呕吐综合征、3-羟基异丁酸血尿伴乳酸血症、 糖尿病伴乳酸血症、尿苷反应性神经综合征(URNS)、扩张性心肌病、脾淋巴 瘤和肾小管性酸中毒/糖尿病/共济失调综合征。

在其他实施方案中，本发明提供治疗患有线粒体障碍的对象的方法，该障 碍起因于，但不限于，创伤后颅脑损伤和脑水肿、中风(本发明方法对预防或 防止再灌注损伤有用)、卢伊体痴呆、肝肾综合征、急性肝衰竭、NASH(非酒 精性肝衰脂肪性肝炎)、抗癌转移/未分化癌治疗、特发性充血性心力衰竭、心 房纤颤(非瓣膜性)、Wolff-Parkinson-White综合征、特发性心传导阻滞、急性 心肌梗塞病灶扩散的预防、家族性偏头痛、过敏性肠综合征、非Q波心肌梗塞 继发性预防、月经前期综合征、肝肾肾衰竭综合征的预防、抗磷脂抗体综合征、 子痫/先兆子痫、卵性不育症、缺血性心脏病/心绞痛、和Shy-Drager和未分类的 自主神经功能障碍综合征。

在另一个实施方案中，提供治疗与药理学药物有关的副作用相关的线粒体 障碍的方法。与线粒体障碍相关的药剂类型包括反转录酶抑制剂、蛋白酶抑制 剂、DHOD抑制剂等。反转录酶抑制剂的例子包括，例如，叠氮胸苷(AZT)、 司他夫定(D4T)、扎西他宾(ddC)、地达诺新(DDI)、Fluoroiodoarauracil(FIAU)、 拉米夫定(3TC)、阿巴卡韦等。蛋白酶抑制剂的例子包括，例如，利托那韦、 印地那韦、沙奎那韦、那非那韦等。二氢乳清酸脱氢酶抑制剂(DHOD)的例 子包括，例如，来氟米特、布喹那等。

反转录酶抑制剂不仅抑制反转录酶，也抑制线粒体功能所需的聚合酶γ。 因此聚合酶γ活性抑制(例如，使用反转录酶抑制剂)导致线粒体功能障碍和/ 或线粒体质量下降，其在病人中表现为高乳酸血症。这种类型的病况可以受益 于线粒体数目的增加和/或线粒体功能的改善，例如，通过给予sirtuin活化化合 物。

线粒体疾病的常见症状包括心肌病、肌无力和萎缩、发育迟缓(包括运动、 语言、认知或执行功能)、共济失调、癫痫、肾小管性酸中毒、外周神经病、视 神经病、自主神经病、神经源性肠道功能障碍、感觉神经性耳聋、神经原性膀 胱功能障碍、扩张性心肌病、偏头痛、肝衰竭、乳酸血症和糖尿病。

在某些实施方案中，本发明提供治疗会受益于线粒体活性增加的疾病或障 碍的方法，包括给予需要其的对象一种或多种sirtuin活化化合物和其他治疗药 物的组合，其他治疗药物例如，用于治疗线粒体功能障碍的药物(例如抗氧化 剂、维生素或呼吸链辅助因子)、用于减少与包含线粒体功能障碍的疾病或障碍 相关的症状的药物(例如，抗癫痫发作药、用于减轻神经性疼痛的药物、用于 心功能障碍的药物)、心血管药物(如下文进一步描述地)、化学治疗药(如下 文进一步描述地)或抗神经变性药(如下文进一步描述地)。在一个示例性的实 施方案中，本发明提供治疗会受益于线粒体活性增加的疾病或障碍的方法，包 括给予需要其的对象一种或多种sirtuin活化化合物与一种或多种下列药物的结 合：辅酶Q10、L-肉碱、硫胺素、核黄素、烟酰胺、叶酸、维生素E、硒、硫辛 酸或强的松。本文也提供包含这种组合的组合物。

在示例性的实施方案中，本发明提供通过给予对象治疗有效量的sirtuin活 化化合物治疗会受益于线粒体活性增加的疾病或障碍的方法。示例性的疾病或 障碍包括，例如，神经肌肉障碍(例如，Friedreich’s共济失调、肌营养不良、 多发性硬化症等)、神经不稳定障碍(例如癫痫障碍、偏头痛等)、发育迟缓、 神经变性障碍(例如，阿尔茨海默病、帕金森病、肌萎缩性侧索硬化等)、局部 缺血、肾小管性酸中毒、年龄相关性神经变性和认知下降、化疗疲劳、年龄相 关性或化疗诱导的绝经或月经周期或排卵不规则、线粒体肌病、线粒体损伤(例 如，钙积聚、兴奋性中毒、一氧化氮暴露、缺氧等)和线粒体反常。

弗里德赖希氏共济失调(FA)基因缺失，最常见的遗传性共济失调，最近 被鉴定并命名为“frataxin”。在FA中，一段正常发育后，发展到麻痹和死亡 的协调缺乏通常在30和40岁间发展。受影响最严重的组织是脊髓、外周神经、 心肌和胰腺。病人通常丧失运动控制并被限制于轮椅中，并通常受到心力衰竭 和糖尿病的折磨。FA的遗传基础包括编码frataxin基因内含子区域中的GAA 三核苷酸串联重复。这些重复的存在导致减少的基因转录和表达。Frataxin与线 粒体铁含量调控有关。当细胞frataxin含量低下时，过度铁聚集于线粒体中，促 进氧化损伤和随后的线粒体变性和功能障碍。当中等数目的GAA重复出现在 frataxin基因内含子中时，共济失调的严重临床表型不会发展。但是，与大约5％ 的非糖尿病人相比，这些中等长度的三核苷酸发现于25-30％的患有非胰岛素依 赖型糖尿病的病人中。在某些实施方案中，sirtuin活化化合物可以用于治疗患 有与frataxin缺失或缺陷相关的障碍的病人，该障碍包括弗里德赖希氏共济失 调、心肌功能障碍、糖尿病和如外周神经病的糖尿病并发症。

肌营养不良是指包括神经肌肉结构和功能退化的家族病，通常导致骨骼肌 萎缩和心肌功能障碍。对于进行性假肥大性肌营养不良，特异蛋白突变或缺失、 肌营养不良蛋白都与其病因学相关。具有灭活的肌营养不良蛋白基因的小鼠显 示肌营养不良的一些特点，并有大约50％的线粒体呼吸链活性缺陷。大多数病 例中神经肌肉退化的最后共同通路是钙介导的线粒体功能损伤。在某些实施方 案中，sirtuin活化化合物可以用于减少肌肉功能能力的下降率和改善患有肌营 养不良的病人肌肉功能状态。

多发性硬化症(MS)是以病灶炎症和大脑白质自身免疫性退化为特征的神 经肌肉病。周期性的恶化或发作显著与无论细菌性的和病毒性的上呼吸道和其 他感染相关，表明线粒体功能障碍在MS中起作用。一氧化氮(由涉及炎症的 星形细胞和其他细胞生成)引起的神经元线粒体呼吸链抑制涉及作为导致MS 的分子机理。在某些实施方案中，sirtuin活化化合物可以用于患有多发性硬化 症病人无论是预防和疾病恶化发作时的治疗。

癫痫通常存在于患有线粒体细胞病的病人中，包括一系列发作严重度和频 率，例如，缺失、增强、迟缓、肌阵挛、和癫痫持续状态，发生于孤立的癫痫 或一天许多次。在某些实施方案中，sirtuin活化化合物可以用于治疗患有线粒 体功能障碍继发癫痫的病人，包括减少癫痫活动的频率和严重度。

对患有再发性偏头痛病人的代谢研究表明，线粒体活性缺陷通常与这种障 碍相关，表现为受损的氧化磷酸化和过多的乳酸生成。这种缺陷不一定是由于 线粒体DNA遗传缺陷。偏头痛对象对一氧化氮高度敏感，一氧化氮是细胞色素 c氧化酶的内源性抑制剂。此外，患有线粒体细胞病例如MELAS的病人通常患 有再发性偏头痛。在某些实施方案中，sirtuin活化化合物可以用于治疗患有再 发性偏头痛的病人，包括对麦角化合物或5-羟色胺受体拮抗剂不显疗效的头痛。

神经或神经精神发育迟缓通常发现于患有线粒体疾病的儿童。神经连接的 发育和重塑需要强烈的生物合成活性，特别包括神经元膜和髓鞘的合成，二者 都需要嘧啶核苷酸作为辅助因子。尿嘧啶核苷涉及糖的失活和向糖脂和糖蛋白 的转移。胞苷核苷酸衍生自尿嘧啶核苷酸，对例如磷脂酰胆碱的主要膜磷脂成 分的合成是重要的，磷脂酰胆碱从胞苷二磷酸胆碱(cytidine diphosphocholine) 接受其胆碱部分。对于线粒体功能障碍(由于线粒体DNA缺陷或任何如同 exicitoxic或一氧化氮介导的线粒体功能障碍的获得的或有条件的缺陷)或其他 导致嘧啶合成受损的病况，细胞增殖和轴突延伸在神经元互相连络和回路发育 的关键阶段受损，导致神经精神功能例如语言、运动、社交、执行功能和认知 技能的发育迟缓或停止。以孤独症为例，大脑中磷酸化合物磁共振波谱测定显 示存在膜和膜前体的球形欠合成(undersynthesis)，显示通过减少的尿苷二磷 酸-糖和包含于膜合成中的胞苷核苷衍生物水平。以发育迟缓为特点的疾病包括 雷特氏综合征、蔓延性发育迟缓(或PDD-NOS“未另行规定的蔓延性发育迟缓” 将其与具体的例如孤独症的亚类区分)、孤独症、Asperger’s综合征、和正成为 公认的神经回路根本执行功能发育迟缓或落后的注意缺陷/多动症(ADHD)。 在某些实施方案中，sirtuin活化化合物可以用于治疗患有神经发育迟缓(例如， 包括运动、语言、执行功能和认知技能)或神经系统其他神经学和神经精神发 育和例如肌肉和内分泌腺的非神经组织躯体发育迟缓或停止的病人。

与衰老、阿尔茨海默病(AD)和帕金森病相关的两个最显著的严重神经变 性疾病的发病学都包括线粒体功能障碍。特别地，复合体I缺陷不仅经常发现 于在帕金森病中退化的黑质纹状体神经元，也发现于象帕金森病人的肌肉和血 小板的外周组织和细胞中。在阿尔茨海默病中，线粒体呼吸链活性常常被抑制， 尤其是复合体IV(细胞色素c氧化酶)。还有，线粒体呼吸功能由于衰老而被完 全抑制，进一步增强影响呼吸链功能的附加分子损伤的有害后遗症。其他除了 原发线粒体功能障碍之外的因素成为AD、PD和相关障碍中神经变性的基础。 兴奋性刺激和一氧化氮都涉及这两种疾病，加剧线粒体呼吸链缺陷和其有害作 用在呼吸链功能障碍的背景被扩大的因素。亨廷顿舞蹈病也包括在受侵袭脑区 域中的线粒体功能障碍，伴有兴奋性刺激和导致神经元变性的线粒体功能障碍 的相互协同作用。在某些实施方案中，sirtuin活化化合物对治疗和减缓包括AD 和PD的年龄相关的神经变性疾病进展是有益的。

患有肌萎缩性脊髓侧索硬化(ALS或Lou Gehrig’s病)的病人主要遗传缺 陷之一是铜-锌超氧化物歧化酶(SOD1)(一种抗氧化物酶)的突变或缺乏。 线粒体既产生又是活性氧物质的主要靶点。线粒体中电子向氧的无效转移是哺 乳动物体系中自由基最显著的生理学来源。抗氧化剂或抗氧化剂酶的缺乏会导 致或加剧线粒体变性。突变型SOD1转基因小鼠发展与人ALS中相似的症状和 病理学。这些动物中疾病的发展已证实涉及线粒体的氧化破坏，接下来是运动 神经元功能衰退和临床症状发生。ALS病人的骨骼肌具有低的线粒体复合体I 活性。在某些实施方案中，sirtuin活化化合物可以用于治疗ALS来逆转或延缓 临床症状的进展。

通过在复合体IV丧失细胞色素c再氧化的末端电子受体细胞，缺氧导致线 粒体呼吸链活性的直接抑制，并间接地，特别是在神经系统，通过二次缺氧后 兴奋性中毒和一氧化氮形成。在诸如脑缺氧、心绞痛或镰状细胞性贫血危象的 病况中，组织相对含氧量低。在这些情况中，增加线粒体活性的化合物保护受 侵袭组织免于缺氧的有害作用，减弱继发的细胞延缓死亡，并加速从含氧量低 的组织压力和损伤中恢复。在某些实施方案中，sirtuin活化化合物可以用于预 防大脑局部缺血或缺氧创伤后的细胞延缓死亡(发生于脑缺血发作后约2至5 天的诸如海马或皮质的区域的细胞凋亡)。

无论根本的呼吸链功能障碍是先天的或是局部缺血或诸如顺铂的细胞毒药 物诱导的，在患有线粒体疾病的病人中经常观察到肾功能不全导致的酸中毒。 肾小管性酸中毒经常需要给予外源性碳酸氢钠来维持血和组织的pH值。在某些 实施方案中，sirtuin活化化合物可以用于治疗线粒体呼吸链缺陷导致的肾小管 性酸中毒和其他形式的肾功能障碍。

在正常的衰老过程中，存在线粒体呼吸链功能进行性减退。约40岁开始， 人线粒体DNA缺陷聚集指数性上升，线粒体呼吸链活性核-调节元素同时下降。 许多线粒体DNA损伤在线粒体周转中，尤其是有丝分裂后细胞中具有选择优 势。提出的机理是呼吸链缺陷的线粒体比完整功能呼吸链的线粒体对其造成更 少的氧化损伤(线粒体呼吸是体内自由基的主要来源)。因此，正常功能的线粒 体比有缺陷的线粒体更快地蓄积对膜脂质的氧化损伤，并因此被溶酶体“标记” 降解。由于细胞内线粒体的半衰期大约为10天，选择优势会导致功能性线粒体 快速取代那些呼吸活性减少的线粒体，尤其是在慢分化细胞中。净结果是一旦 降低对线粒体氧化损伤的线粒体蛋白的基因发生突变，这种缺陷性线粒体会快 速遍及细胞，减少或消除或其呼吸能力。这种细胞的聚集在有机体水平导致衰 老或变性疾病。这与肌肉中电子传递活性缺陷的细胞的进行性镶嵌现象是一致 的，与随机散步于正常活性的细胞中几乎缺乏细胞色素c氧化酶(COX)活性 的细胞以及来自年老对象活检的COX-阴性细胞高发生率一致。因而，生物体在 衰老或各种线粒体疾病中会面对这样的情况，即在面对不可抗拒的线粒体呼吸 链功能进行性下降时，不能替代的有丝分裂后细胞(例如，神经元、骨骼和心 肌)必须被保护并且其功能保持显著的程度。功能障碍的线粒体神经元变为逐 渐对例如兴奋性损伤的损伤更敏感。线粒体衰竭导致大多数伴随衰老的变性疾 病(尤其是神经变性)。先天性线粒体疾病通常包括早期发生的神经变性，其在 基本机理上与在生来具有正常线粒体的人衰老过程中发生的疾病相似。在某些 实施方案中，sirtuin活化化合物可以用于治疗或减弱认知下降和其他衰老的变 性后果。

在受到氧化应激或例如顺铂的癌化疗药物的细胞中，由于线粒体DNA更大 的易损性和更小的有效修复性，线粒体DNA损伤比核DNA损伤更为广泛并持 续更长。虽然线粒体DNA比核DNA对损伤更为敏感，但在某些情况下，其对 化学致癌物的诱变作用相对耐受。这是因为线粒体对某些类型的线粒体DNA损 伤是通过破坏其缺陷的基因组而非尝试修复它们。这导致在细胞毒性化疗后一 段时间内整体线粒体功能障碍。诸如顺铂、丝裂霉素和环磷酰氨的化疗药物的 临床应用通常伴有衰弱的“化疗疲劳”、长期虚弱和运动不耐受，这些甚至会 在这类药物的血液和胃肠毒性恢复后持续。在某些实施方案中，sirtuin活化化 合物可以用于与线粒体功能障碍相关的癌症化疗副作用的治疗和预防。

由于传递于胎儿的线粒体都是来自在怀孕时存在于卵母细胞的那些，卵巢 的关键功能是保持卵母细胞中线粒体基因组的完整性。线粒体DNA缺失在绝经 的年龄左右可被检测到，并也与不正常的月经周期相关。由于细胞不能直接检 测并对线粒体DNA缺陷反应，而只能检测影响细胞质的继发效应，例如呼吸受 损、氧化还原状态或嘧啶合成缺陷，这种线粒体功能的产物作为卵母细胞选择 和卵泡闭锁的信号参与，当线粒体基因组精确度和功能性活性不能保证时，最 终会引发绝经。这类似于DNA损伤的细胞中的细胞凋亡，当基因组精确度不能 通过修复过程来完成时其经历细胞自杀的活动过程。患有影响生殖腺的线粒体 细胞病的女性通常会经历早闭经或表现原发性循环异常。细胞毒性癌症化疗通 常诱导早闭经，伴有相应的增加的骨质疏松的风险。化疗诱导的闭经通常是由 于原发性卵巢功能衰竭。化疗诱导的闭经的发生率作为接受化疗的绝经女性年 龄的函数而增加，并指向涉及线粒体。线粒体呼吸或蛋白合成抑制剂抑制激素诱 导的排卵，而且抑制响应垂体促性腺激素的卵巢类固醇激素的生成。患有 Down’s综合征的女性通常经历过早地绝经，也容易早发阿尔茨海默样痴呆。在 Down’s综合征病人和迟发阿尔茨海默病中一致地发现细胞色素氧化酶的低活 性。线粒体功能适当地支持或线粒体功能障碍代偿因而对保护免于年龄相关或 化疗诱导的绝经或月经周期或排卵不规则是有用的。在某些实施方案中，sirtuin 活化化合物对治疗和预防闭经、不规则排卵、绝经或绝经继发后果是有用的。

在某些实施方案中，sirtuin调节化合物对治疗线粒体性肌病是有用的。线粒 体性肌病的范围从眼外肌的温和的、缓慢进行性无力到严重的、致命婴儿肌病 和多体系脑肌病。一些症状已经确定了，它们之间有些重叠。影响肌肉的确定 的症状包括进行性外眼肌麻痹、卡恩斯-塞尔综合征(眼肌麻痹、色素性视网膜 病变、心脏传导缺陷、小脑性共济失调和感觉神经性耳聋)、MELAS综合征(线 粒体脑肌病，乳酸酸中毒和中风样发作)、MERFF综合征(肌阵挛型癫痫和蓬 毛样红纤维)、脐带分布无力和婴儿肌病(良性或严重的和致命的)。由于线 粒体过度聚集，采用改良的Gomoris三色染料染色的肌肉活检标本显示蓬毛样 红纤维。在底物的转运和利用、三羧酸循环、氧化磷酸化、或呼吸链的生化缺 陷可被检测到。大量的线粒体DNA点突变和缺失已经以母体的、非孟德尔式遗 传的方式加以描述、传达。核编码线粒体酶发生突变。

在某些实施方案中，sirtuin活化化合物可以用于治疗患有线粒体毒性损伤的 病人，例如起因于钙蓄积的毒性损伤、兴奋性中毒、一氧化氮暴露、药物诱导 的毒性损伤或缺氧。

细胞损伤的基本机理，尤其是在可兴奋组织中，涉及由于通过质膜的渗漏 或细胞内钙处理机理缺陷进入细胞的过多的钙。线粒体是钙聚集的主要位点， 优先利用来自呼吸链的能量来摄取钙而非用于ATP合成，其导致线粒体衰竭螺 旋下降，因为摄入线粒体的钙导致降低能量传导的能力。

兴奋性氨基酸过度刺激神经元是中枢神经系统细胞死亡或损伤的常见机 理。谷氨酸受体的激活，尤其是名为NMDA受体亚型的激活，部分通过兴奋性 刺激中细胞内钙升高导致线粒体功能障碍。相反地，线粒体呼吸和氧化磷酸化 缺乏使细胞对兴奋性刺激敏感，导致在接触对正常细胞可能无害的兴奋性神经 递质或毒素时细胞死亡或损伤。

一氧化氮(约1微摩尔)抑制细胞色素氧化酶(复合体IV)并因而抑制线 粒体呼吸，此外，延长接触一氧化氮(NO)不可逆地降低复合体I的活性。生 理学或病理学浓度的NO从而抑制嘧啶的生物合成。一氧化氮涉及包含中枢神 经系统炎症和自身免疫疾病的多种神经变性疾病，并与神经元兴奋性和缺氧后 损伤的间介有关。

氧是呼吸链末端电子受体。氧缺乏损害电子传输链活性，导致通过氧化磷 酸化减少嘧啶合成以及减少ATP合成。在真正的无氧条件下，如果提供尿苷和 丙酮酸(或一种氧化NADH以优化糖酵解ATP生成的类似有效药物)，人细胞 增殖并保持生存能力。

在某些实施方案中，sirtuin活化化合物可以用于治疗与线粒体异常相关的疾 病或障碍。

编码呼吸链组分的线粒体DNA的转录需要核转录因子。在神经元轴突中， 线粒体必须来回穿梭于细胞核以保持呼吸链活性。如果轴突运输由于缺氧或由 于诸如影响微管稳定性的紫杉酚的药物而受损，则远离细胞核的线粒体的细胞 色素氧化酶受到损失。相应地，使用sirtuin活化化合物治疗可以用于促进核-线 粒体相互作用。

由于从线粒体呼吸链溢出，特别是当在一种或多种呼吸链组分的缺陷损害 电子从代谢中间物有序地传递到分子氧时，线粒体是自由基和活性氧物质的主 要来源。为了减少氧化性损伤，细胞可以通过表达线粒体解偶联蛋白(UCP) 而补偿，已经鉴定出其中的几种蛋白。在应答氧化性损伤、炎性细胞因子或过 多脂质负载例如脂肪肝和脂肪肝炎时转录UCP-2。经释放跨越线粒体内膜的质 子梯度，UCP减少从线粒体溢出活性氧物质，实际上消耗由新陈代谢产生的能 量并作为一种减少氧化性损伤的交换而使细胞对能量胁迫变得易受伤。

肌肉性能

在其他实施方案中，本发明提供通过给予治疗有效量的sirtuin活化化合物 提高肌肉性能的方法。例如，sirtuin活化化合物可以用于改善身体耐力(例如， 执行例如运动、体力劳动、体育运动等身体任务的能力)、抑制或延缓身体疲 劳、提高血氧水平、提高健康个体活力、提高工作能力和耐受力、减少肌肉疲 劳、减少压力、提高心脏和心血管功能、提高性能力、增加肌肉ATP水平和/ 或减少血中乳酸。在某些实施方案中，该方法包括给予一定量的增加线粒体活 性、增加线粒体生物合成和/或增加线粒体质量的sirtuin活化化合物。

运动性能是指参加体育活动时运动员肌肉执行的能力。增强的运动性能、 力量、速度和耐受力通过肌肉收缩力的增加、肌肉收缩幅度的增加、在刺激和 收缩时肌肉反应时间的缩短来测定。运动员是指参加任何水平运动和试图在其 表现中取得力量、速度和耐受力水平提高的人，例如，健身运动员、自行车运 动员、长跑运动员、短跑运动员等。运动员会刻苦训练，即每周三天以上进行 激烈的体育活动或比赛。运动员也可以是试图提高一般健康和幸福、提高能量 水平的健身爱好者，他们每周约三次每次运动约1-2小时。提高的运动性能是 通过克服肌肉疲劳的能力、长时间保持活力的能力和更有效锻炼表现的。

在运动员肌肉性能的舞台中，创造允许在更高耐受水平长时间比赛或训练 的条件是令人期望的。但是，骨骼肌急剧和激烈的缺氧使用经常会导致损伤的 运动性能，并伴有力量和工作输出的丧失和增加的肌肉疲劳、疼痛和功能障碍 的发生。现在已经认识到，即使单一力竭运动期，或为此例如肌肉损伤、耐受 或力竭运动的任何对躯体的急性创伤，或择期手术具有在短期和长期阶段影响 肌肉性能的扰乱的新陈代谢的特点。肌肉代谢/酶活性和基因表达都受到影响。 例如，骨骼肌氮代谢障碍以及代谢能量来源衰竭发生于广泛的肌肉活动中。在 脱氨作用提高血清氨和作为肌肉燃料源的局部氧化后，氨基酸，包括支链氨基 酸，从肌肉中释放，这增强了代谢性酸中毒。另外，肌收缩活动催化效率以及 氮酶活性改变和能量代谢会有所下降。进而，蛋白质代谢作用开始于蛋白质合 成率下降以及非收缩蛋白质降解增加的部位。这些代谢过程也伴有进一步损伤 肌肉细胞的自由基生成。

在急剧的和长期的运动中从疲劳恢复需要代谢性和非代谢性疲劳因子的逆 转。已知参与人肌肉疲劳的因子，例如乳酸盐、氨、氢离子等，提供了疲劳/恢 复过程不完整和不令人满意的解释，很可能还有其他未知的因子参与(Baker 等，J.Appl.Physiol.74：2294-2300，1993；Bazzarre等，J Am.Coll.Nutr.11：505-511， 1992；Dohm等，Fed.Proc.44：348-352，1985；Edwards In：Biochemistry of Exercise， Proceedings of the Fifth International Symposium on the Biochemistry of Exercise (Kutrgen，Vogel，Poormans，编)，1983；MacDougall等，Acta Physiol.Scand.146： 403-404，1992；Walser等，Kidney Int.32：123-128，1987)。许多研究也分析 了营养添加剂和中药添加剂提高肌肉性能的作用。

除了耐力练习中的肌肉性能外，自由基和氧化应激指数在病理生理学状态 受到影响。大量数据现已表明，氧化应激导致病理生理学状态中肌肉消耗或萎 缩(综述见Clarkson，P.M.Antioxidants and physical performance.Crit.Rev.Food Sci.Nutr.35：31-41；1995；Powers，S.K.；Lennon，S.L.Analysis of cellular responses to free radicals：Focus on exercise and skeletal muscle.Proc.Nutr.Soc.58：1025-1033； 1999)。例如，对于肌肉耐力和功能都被补偿的肌肉障碍，已经涉及一氧化氮 (NO)的作用。在肌营养不良中，尤其是由于组成营养障碍基因-糖蛋白复合 体(DGC)的蛋白质缺乏的那些，与合成NO的酶，一氧化氮合成酶(NOS) 有关。与DGC缺陷相关的营养不良的最近研究表明，细胞损伤的一个机理是与 细胞内NOS改变和NO正常保护作用的破坏相关的功能性局部缺血。这种保护 作用是交感性血管收缩中收缩诱导增加中局部缺血的预防。Rando(Microsc Res Tech 55(4)：223-35，2001)已经证实，氧化损伤先于病理学改变，并且DGC 缺陷的肌肉细胞具有对氧化挑战增加的敏感性。由于自由基的过度脂质过氧化 也已被证明是例如McArdle′s病的肌病中的因子(Russo等，Med Hypotheses.39 (2)：147-51，1992)。而且，线粒体功能障碍与年龄相关的肌肉萎缩(骨骼 肌减少症)相关是众所周知的，虽然研究不充分，但自由基损伤已被证实是作 用因子(综述见Navarro，A.：Lopez-Cepero，J.M.；Sanchez del Pino， M.L.Front.Biosci.6：D26-44；2001)。其他症状包括急性骨骼肌减少症，例如肌 萎缩和/或与烧伤相关的恶病质、卧床休息、肢体制动、或重大胸、腹和/或骨科 手术。预期本发明的方法也可有效治疗肌肉相关的病理学病况。

在某些实施方案中，本发明提供新的包含sirtuin调节剂的饮食组合物、其 制备方法和使用该组合物改善运动性能的方法。相应地，为参与包括需要耐力 的运动和需要重复肌肉用力的劳动的广泛性定义的运动的那些人提供具有改善 身体耐力和/或抑制身体疲劳作用的治疗组合物、食品和饮料。这种饮食组合物 可以附加包含电解质、咖啡因、维生素、碳水化合物等。

其他应用

增加sirtuin蛋白水平和/或活性的sirtuin调节化合物可以用于治疗或预防病 毒感染(例如流感、疱疹或乳头瘤病毒感染)或作为抗真菌剂。在某些实施方 案中，增加sirtuin蛋白水平和/或活性的sirtuin调节化合物可以作为与其他治疗 病毒疾病的治疗药物组合药物治疗的部分给药，其他治疗病毒疾病的治疗药物 包括，例如阿昔洛韦、更昔洛韦和叠氮胸苷。在另一个实施方案中，增加sirtuin 蛋白水平和/或活性的sirtuin调节化合物可以作为与其他抗真菌药物组合药物治 疗的部分给药，抗真菌药物包括，例如，局部抗真菌剂例如环吡酮、克霉唑、 益康唑、咪康唑、利霉菌素、奥昔康唑、特康唑、和托萘酯、或全身性抗真菌 剂例如氟康唑(大扶康)、伊曲康唑(斯皮仁诺)、酮康唑(里素劳)、和咪 康唑(硝酸咪康唑I.V.).

如本文描述的可以治疗的对象包括真核生物，例如哺乳动物，例如，人、 羊、牛、马、猪、狗、猫、非人类的灵长类动物、小鼠、和大鼠。可以治疗的 细胞包括真核细胞，例如，来自于上述对象的，或植物细胞、酵母细胞和原核 细胞，例如，细菌细胞。例如，调节化合物可以给予家畜来改善它们耐受更长 时间农业条件的能力。

增加sirtuin蛋白水平和/或活性的Sirtuin调节化合物也可以用于植物中增加 寿命、应激耐受和对细胞凋亡的耐受。在一个实施方案中，化合物用于植物， 例如，在一个周期的基础上，或用于真菌。在另一个实施方案中，将植物基因 修饰来产生化合物。在另一个实施方案中，在采摘和运输前使用化合物处理植 物和水果以提高其在运输中对损伤的耐受。植物种子也可以与本文描述的化合 物接触，例如，用于保存它们。

在其他实施方案中，增加sirtuin蛋白水平和/或活性的Sirtuin调节化合物可 以用于调节酵母细胞的寿命。期望延长酵母细胞寿命的情况包括任何使用酵母 的过程，例如，制造啤酒、酸奶、和焙烤制品，例如，面包。具有延长寿命的 酵母的使用导致可以使用更少的酵母或使酵母在长时期内具有活性。用于重组 生产蛋白质的酵母或其他哺乳动物细胞也可以如本文描述的进行处理。

增加sirtuin蛋白水平和/或活性的Sirtuin调节化合物也可以用于昆虫中增加 寿命、应激耐受和对细胞凋亡的耐受。在这个实施方案中，化合物可以用于有 用昆虫，例如，蜜蜂和其他涉及植物传粉的昆虫。在一个具体的实施方案中， 化合物可以用于涉及蜂蜜生产中的蜜蜂。通常，本文描述的方法可以应用于任 何可具有商业重要性的生物体，例如，真核生物。例如，它们可以用于鱼(水 产业)和鸟(例如，鸡和家禽)。

更高剂量的增加sirtuin蛋白水平和/或活性的Sirtuin调节化合物也可以用作 干预沉默基因的调节和发育期细胞凋亡调节的杀虫剂。在这个实施方案中，化 合物可以用于植物，并使用本领域已知的方法确保化合物对昆虫幼虫是生物有 效的，而对植物无效。

至少考虑到繁殖和寿命间的联系(Longo和Finch，Science，2002)，增加 sirtuin蛋白水平和/或活性的Sirtuin调节化合物可以用于影响有机体例如昆虫、 动物和微生物的繁殖。

4.测定

本文预期的其他方法包括鉴定调节sirtuin的化合物或药物的筛选方法。药 物可以是核酸，例如适体。测定可以在基于细胞或无细胞形式中进行。例如， 测定可以包括在sirtuin可以被已知调节sirtuin的药物调节的条件下使sirtuin与 测试药物培养(或接触)，和监测或测定在测试药物存在相对于测试药物不存 在时sirtuin的调节水平。sirtuin的调节水平可以通过测定其脱乙酰化底物的能 力来测定。示例性的底物是可以从BIOMOL(Plymouth Meeting，PA)获得的 乙酰化肽。优选的底物包括p53肽，例如包含乙酰化K382的那些。特别优选的 底物是Fluor de Lys-SIRT1(BIOMOL)，即，乙酰化肽Arg-His-Lys-Lys。其他底 物是来源于人组蛋白H3和H4或乙酰化氨基酸的肽。底物可以是荧光的。Sirtuin 可以是SIRT1、Sir2、SIRT3或其一部分。例如，重组SIRT1可以从BIOMOL 获得。反应可以进行约30分钟并停止，例如，使用烟酰胺停止。HDAC荧光活 性测定/药物发现试剂盒(AK-500，BIOMOL Research Laboratories)可以用于测 定乙酰化水平。相似的测定描述于Bitterman等，(2002)J.Biol.Chem.277：45099。 测定中sirtuin调节水平可以与在一种或多种(单独或同时)本文描述的可以作 为阳性或阴性对照的化合物存在下的sirtuin调节水平相比较。测定中所用的 sirtuin可以是全长的sirtuin蛋白或其部分。由于本文已经表明活化化合物似乎 与SIRT1的N端相互作用，测定中所用的蛋白质包括sirtuin的N端部分，例如， SIRT1的约1-176或1-255氨基酸；Sir2的约1-174或1-252氨基酸。

在一个实施方案中，筛选试验包括(i)在测试药物不存在时适合sirtuin脱 乙酰化底物的条件下使sirtuin与测试药物和乙酰化底物接触；和(ii)测定底物 乙酰化水平，其中底物乙酰化水平在测试药物存在时相对于测试药物不存在时 更低表明测试药物刺激由sirtuin的脱乙酰化，而底物乙酰化水平在测试药物存 在时相对于测试药物不存在时更高表明测试药物抑制sirtuin的脱乙酰化。

鉴定体内调节例如刺激或抑制sirtuin的药物的方法可包括(i)在测试药物 不存在时适合sirtuin脱乙酰化底物的条件下使细胞接触测试药物和在I类和II 类HDACs存在时能够进入细胞的底物；和(ii)测定底物乙酰化水平，其中底 物乙酰化水平在测试药物存在时相对于测试药物不存在时更低表明测试药物刺 激由sirtuin的脱乙酰化，而底物乙酰化水平在测试药物存在时相对于测试药物 不存在时更高表明测试药物抑制sirtuin的脱乙酰化。优选的底物是乙酰化肽， 还优选其是荧光的，如本文进一步描述的。该方法可以进一步包括溶解细胞来 测定底物乙酰化水平。可以向细胞中添加浓度范围为约1μM-约10mM，优选约 10μM-1mM，甚至更优选约100μM-1mM，例如，约200μM的底物。优选的底 物是乙酰化赖氨酸，例如，ε-乙酰赖氨酸(Fluor de Lys，FdL)或Fluor de Lys-SIRT1。优选的I类和II类HDACs抑制剂是曲古抑菌素A(TSA)，其可 以在约0.01-100μM，优选约0.1-10μM，例如1μM的浓度下使用。使用测试化 合物培养细胞和底物可以进行约10分钟到5小时，优选约1-3小时。由于TSA 抑制所有的I类和II类HDACs，并且某些底物，例如，Fluor de Lys，是SIRT2 差的底物，甚至是SIRT3-7更差的底物，这种测定可以用于鉴定SIRT1的体内 调节剂。

5.药物组合物

本文描述的sirtuin调节化合物可以以常规的方式使用一种或多种生理上可 接受的载体或赋形剂来配制。例如，sirtuin调节化合物和其生理上可接受的盐 和溶剂化物可以配制用于通过例如下述方式给药：注射(例如，SubQ、IM、IP)、 吸入或吹入(通过嘴或鼻)或口、颊、舌下、经皮、鼻、非肠道或直肠给药。 在一个实施方案中，sirtuin化合物可以在目标细胞存在的位点，即，特定的组 织、器官或流体(例如，血、脑脊液等)定位给药。

Sirtuin调节化合物可以以许多种给药模式配制，包括全身和局部或定位给 药。技术和制剂通常可见Remington’s Pharmaceutical Sciences，Meade Publishing Co.，Easton，PA。对于非肠道给药，优选注射，包括肌内、静脉内、腹膜内和 皮下。对于注射，化合物可以配制于液体溶液中，优选生理学上可配伍的缓冲 剂，例如Hank’s溶液或Ringer’s溶液。另外，化合物可以以固体形式配制并在 使用前即刻复溶或混悬。也包括冻干形式。

对于口服给药，药物组合物可以采用例如，片剂、锭剂或胶囊剂的形式， 通过常规方法与药学上可接受的赋形剂例如粘合剂(例如，预胶化玉米淀粉、聚 乙烯吡咯烷酮或羟丙基甲基纤维素)；填充剂(例如，乳糖、微晶纤维素或磷酸氢 钙)；润滑剂(例如硬脂酸镁、滑石粉或二氧化硅)；崩解剂(例如，马铃薯淀粉或 淀粉羟乙酸钠)；或湿润剂(例如十二烷基硫酸钠)制备。片剂可以用本领域熟知 的方法包衣。口服给药的液体制剂可以采用例如，溶液、糖浆或混悬液的形式， 或它们可以作为在使用前用水或其它适宜的媒介物溶解的干燥产品。这种液体 制剂可以通过常规的方法与药学上可接受的添加剂例如悬浮剂(例如山梨醇糖 浆、纤维素衍生物或氢化食用脂肪)；乳化剂(例如卵磷脂或阿拉伯胶)；非水媒 介物(例如ationd油、油酯、乙醇或分馏植物油)；和防腐剂(例如对-羟基苯甲 酸甲酯或丙酯或山梨酸)来制备。如果合适，制剂还可含缓冲盐、调味剂、着色 剂和甜味剂。可适当地配制提供控释活性化合物的口服制剂。

对于吸入给药(例如肺递送)，sirtuin调节化合物可以气溶胶喷雾剂的形式， 使用适宜的推进剂，例如二氯二氟甲烷、三氯氟甲烷、二氯四氟乙烷、二氧化 碳或其它合适的气体从压力包装或喷雾器中方便地递送。在压力气溶胶的情形 中，可通过提供递送计量的量的阀确定剂量单位。可配制含所述化合物和适宜 的粉末基质如乳糖或淀粉的粉末混合物的胶囊和例如用于吸入器或吹入器的例 如明胶的药筒。

Sirtuin调节化合物可以配制成通过注射，例如大量注射(bolus injection) 或连续输注的非肠道给药的注射制剂。可用附加的防腐剂将注射制剂配制在例 如安瓿或多剂量容器中制备成单位剂型。组合物可采用油或水媒介物的混悬液、 溶液或乳液的此类形式，并可含配方剂，例如悬浮剂、稳定剂和/或分散剂。 供选择地，活性成分可以是使用前用适宜的媒介物，例如无菌无热原水溶解的 粉末形式。

Sirtuin调节化合物也可配制成直肠组合物，例如含常用栓剂基质如可可脂 或其他甘油酯的栓剂或滞留型灌肠剂。

除前述制剂外，sirtuin调节化合物也可以配制成贮库(depot)制剂。可通过(例 如皮下或肌内)植入或通过肌内注射给予这种长效制剂。因此，例如，可用适宜 的高分子或疏水材料(例如在可接受的油中的乳液)或离子交换树脂，或微溶衍生 物，例如微溶盐配制sirtuin调节化合物。控释制剂也包括贴剂。

在某些实施方案中，本文描述的化合物可以配制用于递送至中枢神经系统 (CNS)(综述见Begley，Pharmacology&Therapeutics 104：29-45(2004))。 药物递送至CNS的常规方法包括：神经外科策略(例如，脑内注射或脑室内输 注)；试图开拓一种BBB内源性转运途径的药物的分子操作(例如，包含对内 皮细胞表面分子亲和性的转运肽的嵌合体融合蛋白的生成与自身不能穿过BBB 的药物组合)；设计增加药物脂溶性的药理学策略(例如，水溶性药物与脂质 或胆固醇载体的结合)；和通过高渗破裂的BBB完整性的短暂破裂(通过向颈 动脉输注甘露醇溶液或例如血管紧缩素肽的生物学活性药物的使用)。

获得缓释动力学的一种可能性是将活性化合物包埋或胶囊包封于纳米颗粒 中。纳米颗粒可以作为粉末、添加赋形剂的粉末混合物或混悬液给药。纳米颗 粒的胶体混悬液可以通过小直径的插管而容易地给药。

纳米颗粒是直径约为5nm到约1000nm的粒子。下文使用的术语“纳米颗 粒”是指活性化合物分散于聚合物基质中形成的粒子，也被称为“纳米球”， 也是指由含有由聚合物膜包裹的活性化合物的核组成的纳米颗粒，也被称为“纳 米囊”。在某些实施方案中，纳米颗粒优选具有约50nm到500nm，特别是约 100nm到200nm的直径。

纳米颗粒可以通过分散单体的原位聚合或使用预制的聚合物制备。由于原 位制备的聚合物通常不能生物降解和/或包含毒理学严重的副产品，优选由预制 聚合物制备的纳米颗粒。预制聚合物制备的纳米颗粒可以通过不同技术，例如， 通过乳液蒸发、溶剂置换、盐析、机械研磨、微量沉淀和通过乳化扩散来制备。

通过上文描述的方法，纳米颗粒可以使用不同类型的聚合物制成。为用于 本发明的方法中，优选由生物相容性聚合物制备的纳米颗粒。术语“生物相容 性”是指在引入生物学环境后材料对生物学环境没有严重作用。从生物相容性 聚合物中特别优选的是也可生物降解的聚合物。术语“可生物降解”是指在引 入生物学环境后材料被酶或化学降解为可随后消除的较小分子。实例是来自羟 基羧酸的聚酯例如聚(乳酸)(PLA)、聚(乙醇酸)(PGA)、聚己内酯(PCL)、 乳酸和乙醇酸的共聚物(PLGA)、乳酸和己内酯的共聚物、聚ε-己内酯、聚羟 基丁酸和聚原酸酯、聚氨酯、聚酐、聚缩醛、聚二氢吡喃(polydihydropyrans)、 聚氰基丙烯酸酯、天然聚合物例如藻酸盐和其他包括葡聚糖和纤维素的多糖、 胶原蛋白和白蛋白。

适宜的表面改性剂可优选选自已知有机和无机药物赋形剂。这种赋形剂包 括各种聚合物、低分子量低聚物、天然产物和表面活性剂。优选的表面改性剂 包括非离子和离子型表面活性剂。表面改性剂的代表性实例包括明胶、酪蛋白、 卵磷脂(磷脂)、阿拉伯胶、胆固醇、西黄蓍胶、硬脂酸、氯苄烷铵、硬脂酸钙、 甘油单硬脂酸酯、十八醇十六醇混合物、西土马哥(cetomacrogol)、乳化蜡、 失山梨糖醇酯、聚氧乙烯烷基醚，例如，聚乙二醇醚(macrogol ethers)例如聚 乙二醇1000单鲸蜡基醚(cetomacrogol 1000)、聚氧乙烯蓖麻油衍生物、聚氧 乙烯失水山梨糖醇脂肪酸酯、例如，商业可获得的TweensTM、聚乙二醇、聚 氧乙烯硬脂酸酯、胶态二氧化硅、磷酸盐、十二烷基硫酸钠、羧甲基纤维素钙、 羧甲基纤维素钠、甲基纤维素钠、羟乙基纤维素、羟丙基纤维素、羟丙基甲基 纤维素邻苯二甲酸酯、非晶纤维素、硅酸镁铝、三乙醇胺、聚乙烯醇和聚乙烯 吡咯烷酮(PVP)。大多数这些表面改性剂是已知的药物赋形剂并详细描述于 American Pharmaceutical Association和The Pharmaceutical Society of Great Britain， the Pharmaceutical Press，1986共同出版的Handbook of Pharmaceutical Excipients 中。

制备纳米颗粒的进一步描述可以见例如，美国专利6,264,922，其内容引入 本文作为参考。

脂质体是易于注射的进一步的药物递送体系。相应地，在本发明的方法中， 活性化合物也可以脂质体递送体系的形式给药。脂质体是本领域技术人员熟知 的。脂质体可以由许多种磷脂，例如胆固醇、磷酯酰胆碱的硬脂酰胺来制成。 本发明方法可用的脂质体包括所有类型的脂质体，包括但不限于小单层囊泡、 大单层囊泡和多层囊泡。

脂质体用于许多治疗目的，特别地，用于运输治疗药物到目标细胞。有利 地，脂质体-药物制剂提供改善药物递送性质的可能性，其包括，例如，控制药 物释放。脂质体常常需要长的循环时间来到达靶区域、细胞或位点。特别地， 靶区域、细胞或位点不位于给药部分附近时这是必要的。例如，脂质体全身性 给药时，用亲水性物质包衣脂质体是需要的，例如，如聚乙二醇(PEG)的亲 水聚合物链包衣延长脂质体血液循环时间。这种表面改性脂质体通常称为“长 循环”或“立体稳定”脂质体。

对脂质体的一种表面改性是附着分子量通常为约1000道尔顿(Da)到约 5000Da的聚乙二醇链，并且约5摩尔百分率(％)的脂质组成脂质体(参见， 例如，Stealth Liposomes，CRC Press，Lasic，D.和Martin，F.编，Boca Raton， Fla.，(1995))，及其中引用的参考文献。与易于快速从血中消除并在肝和脾 中蓄积的非表面改性脂质体相比，这种脂质体显示的药物动力学具有在肝和脾 通过单核吞噬细胞体系(MPS)摄取脂质体后非剂量依赖性减少的特点，并显 著延长血液循环时间。

在某些实施方案中，隔离复合体增加复合体循环半衰期或隔离来增加核酸 对例如核酸酶降解的降解的耐受。

本文使用的术语“隔离”，和相关的例如“隔离的”是指“隔离基团”在 体外或体内降低本文描述的复合体与血清补体或存在于血清中的其他物质的非 特异相互作用的能力。隔离基团可以通过一种或多种机理降低复合体与这些物 质的相互作用或结合，包括，例如，非特异性空间或非特异性电子相互作用。 这种相互作用的实例包括非特异性静电相互作用、电荷相互作用、范德华相互 作用、空间位阻等。对于作为隔离基团起作用的基团，没有查明其可能减少血 清补体或其他物质相互作用、缔合或结合的机理。可以通过测定复合体是否结 合血清物质或结合到何种程度来确定一个基团是否可以作为隔离基团。

应该注意，“隔离基团”可以是多功能性的。例如，一个隔离基团也可以 起到例如靶向因子的作用。隔离基团也可以是指就其隔离复合体的机理是多功 能性的。不想受已提出的机理或理论的限制，这种多功能性隔离基团的实例是 pH值敏感的胞内膜破坏性合成聚合物，例如PPAA或PEAA。某些聚(烷基丙 烯酸)已被证实破坏细胞内膜而保留外层细胞表面膜完整(Stayton等，(2000) J.Controll.Release 65：203-220；Murthy等，(1999)J.Controll.Release 61：137-143； WO 99/34831)，从而增加细胞生物利用度和起到靶向因子的作用。但是，PPAA 降低其参与的血清补体与复合体的结合，因此起到隔离基团的作用。

制备例如白藜芦醇或其衍生物的sirtuin调节剂的制剂，尤其是溶液的另一 种方式是通过使用环糊精。环糊精是指α-、β-、或γ-环糊精。环糊精详细描 述于Pitha等的美国专利4,727,064中，其引入本文作为参考。环糊精是葡萄糖 的环低聚体；这些化合物与任何分子可进入环糊精分子亲脂性空腔的化合物形 成包合络合物。

本发明组合物的环糊精可以是α-、β-、或γ-环糊精。α-环糊精包括六个 吡喃葡萄糖亚基；β-环糊精包括七个吡喃葡萄糖亚基；γ-环糊精包括八个吡喃 葡萄糖亚基。分子被认为在α-、β-、或γ-环糊精中分别形成具有4.7-5.3埃、 6.0-6.5埃和7.5-8.3埃的核开口的截锥。本发明的组合物可以包含两种或多种α -、β-、或γ-环糊精的混合物。但是，本发明的组合物通常只包含α-、β-、或 γ-环糊精中的一种。

本发明组合物中的大多数优选的环糊精是无定形环糊精化合物。无定形环 糊精是指环糊精的非晶体混合物，其中混合物是由α-、β-、或γ-环糊精制备 的。一般而言，无定形环糊精是通过需要环糊精物质的非选择性烷基化制备的。 用于该目的的合适烷化剂包括但不限于环氧丙烷、缩水甘油、iodoacetarnide、 氯乙酸盐和2-二乙基氨基乙基氯化物。进行反应得到含有多种成分的混合物， 从而防止环糊精结晶。各种烷化环糊精可以被制备，并取决于环糊精起始物和 使用的烷化剂而当然不同。在无定形环糊精中适合本发明组合物的是β-环糊精 的羟丙基、羟乙基、葡萄糖基、麦芽糖基和麦芽三糖基衍生物、羧酰氨甲基-β -环糊精、羧甲基-β-环糊精、羟丙基-β-环糊精和二乙氨基-β-环糊精。

在环糊精存在下溶解的白藜芦醇的一个实例提供于Marier等，J.Pharmacol. Exp.Therap.302：369-373(2002)中，其内容引入本文作为参考，其中使用含 有20％羟丙基-β-环糊精的0.9％的盐水制备6mg/mL的白藜芦醇溶液。

如上文提到的，本发明的物质的组合物包含优选取代的无定形环糊精和一 种或多种sirtuin调节剂的水性制剂。Sirtuin调节剂和环糊精的相对量因每种 sirtuin调节剂的相对量和环糊精对化合物的作用而不同。一般而言，sirtuin调节 剂化合物的重量与环糊精化合物重量的比例在1∶1和1∶100的范围内。选自sirtuin 调节剂的化合物与环糊精在1∶5到1∶50范围，更优选1∶10到1∶20范围的重量与 重量比被认为增加sirtuin调节剂循环利用度是最有效的。

重要的是，如果非肠道给予包含sirtuin调节剂和环糊精的水溶液，特别是 通过静脉途径，则环糊精是基本上不含致热污染物的。不同形式的环糊精，例 如无定形环糊精，可以从许多包括Sigma-Aldrich，Inc.(St.Louis，Mo.，USA)的销售 商处购买。制备羟丙基-β-环糊精的方法公开于Pitha等的美国专利4,727,064 中，其引入本文作为参考。

环糊精增溶化合物的应用的其他描述可见US 2005/0026849，其内容引入本 文作为参考。

快速崩解或溶解剂型对药学活性物质的快速吸收，特别是颊和舌下吸收是 有用的。快速熔解剂型对吞咽诸如锭剂和片剂的普通固体剂型困难的病人如年 老和小儿病人是有益的。另外，快速熔解剂型避免了与例如咀嚼剂型相关的缺 点，其中活性物质在病人口中时间长短在确定掩味剂的量和病人可能不接受活 性物质的沙砾感的程度中起到重要作用。

为了克服这种问题，制造商已经开发了许多快速熔解固体剂型口服制剂。 他们可以从包括Cima Labs，Fuisz Technologies Ltd.，Prographarm，R.P.Scherer， Yamanouchi-Shaklee，和McNeil-PPC，Inc的制造商处获得。所有这些制造商销售 不同类型的快速溶解固体口服剂型。参见Cima Labs的专利和出版物，例如美 国专利5,607,697、5,503,846、5,223,264、5,401,513、5,219,574和5,178,878、 WO 98/46215、WO 98/14179；Fuisz Technologies专利，现在是BioVail的部分， 例如美国专利5,871,781、5,869,098、5,866,163、5,851,553、5,622,719、5,567,439 和5,587,172；Prographarm的美国专利5,464,632；R.P.Scherer的专利例如美国 专利4,642,903，5,188,825、5,631,023和5,827,541；Yamanouchi-Shaklee专利例 如美国专利5,576,014和5,446,464；Janssen专利例如美国专利5,807,576、 5,635,210、5,595,761、5,587,180和5,776,491；Eurand America Inc.的美国专利 5,639,475和5,709,886；L.A.B.Pharmaceutical Research的美国专利5,807,578和 5,807,577；Schering Corporation的专利例如美国5,112,616和5,073,374； Laboratoire L.LaFon的美国专利4,616,047；Takeda Chemicals Inc.Ltd.的美国专利 5,501,861；和Elan的美国专利6,316,029。

在一个快速熔解片制剂的实例中，通过喷雾干燥或预压制过程制备的快速 熔解片的颗粒与赋形剂混合并使用常规的片剂制造机器压制成片。颗粒可以与 包括低密度、高塑性糖、低塑性糖、多元醇组合的许多种载体组合，然后直接 压制成表现改善的溶解和崩解特性的片剂。

本发明片剂的硬度通常为约2到约6Strong-Cobb单位(scu)。在此硬度范 围的片剂在咀嚼时快速崩解或溶解。另外，片剂在水中快速崩解。平均来说， 通常1.1到1.5克的片剂不搅拌时在1-3分钟崩解。这种快速崩解利于活性物质 的释放。

用于制备片剂的颗粒可以是，例如，低密度碱土金属盐或碳水化合物的混 合物。例如，碱土金属盐的混合物包括碳酸钙和氢氧化镁的组合。相似地，快 速熔解片剂可以根据本发明的方法制备，本发明方法结合使用：A)喷雾干燥的 附加轻质碳酸钙/麦芽糊精，B)氢氧化镁和C)包括速溶山梨糖醇，木糖醇和 甘露糖醇的共晶多元醇组合。将这些材料混合制得非常容易溶解并促进速活性 成分快速崩解的低密度片剂。另外，预压制和喷雾干燥的颗粒可以结合于相同 的片剂中。

对于快速熔解片剂制剂，用于本发明的sirtuin调节剂可以是例如固体、微 粒、颗粒、晶体、油或溶液形式。用于本发明的sirtuin调节剂可以是喷雾干燥 产品或已经预压制成降低药物味道的较硬颗粒形式的吸附物。用于本发明的药 物活性成分可以与在咀嚼时防止活性成分从片剂中容易提取出的载体喷雾干 燥。

除了直接加入到本发明片剂中，在掺入到制剂中之前，药物自身可以通过 预压制方法来获得增加的密度而进行加工。

用于本发明的预压制方法可以用于递送溶解性差的药学材料来改善这种药 学材料在常规剂型中的释放。这允许使用较低剂量水平来递送相当生物利用水 平的药物，并因而降低目前市售药物和新化学实体的毒性水平。溶解性差的药 学材料可以以纳米大小的纳米颗粒的形式使用。

除了由低密度碱土金属盐和/或水溶性碳水化合物制备的活性成分和颗粒 之外，快速熔解片剂可以使用常规的载体或赋形剂和早已确定的药学技术来配 制。常规载体或赋形剂包括，但不限于，稀释剂、结合剂、粘合剂(例如，纤 维素衍生物和丙烯酸衍生物)、润滑剂(例如，硬脂酸镁或钙、植物油、聚乙二 醇、滑石粉、十二烷基硫酸钠、聚氧乙烯单硬脂酸酯)、崩解剂、着色剂、调味 剂、防腐剂、甜味剂和例如缓冲剂和吸附剂的各种材料。

快速熔解片剂制备的另外描述可以见例如美国专利5,939,091，其内容引入 本文作为参考。

药物组合物(包括化妆品制剂)可以包含约0.00001-100％重量例如 0.001-10％或0.1-5％重量的本文描述的一种或多种sirtuin调节化合物。

在一个实施方案中，将本文中所述sirtuin调节化合物掺入含通常适合局部 给药的局部载体和含本领域已知的任何这种物质的局部制剂。可选择局部载体 以提供需要形式的组合物，例如软膏剂、洗剂、霜剂、微乳剂、凝胶剂、油、 溶液等，且可含天然存在或合成来源的物质。优选所选择的载体不对局部制剂 的活性药物或其它成分产生不利影响。用于本文中的适宜的局部载体的实例包 括水、醇和其它无毒有机溶剂、甘油、矿物油、聚硅氧烷、凡士林、羊毛脂、 脂肪酸、植物油、对羟基苯甲酸酯、蜡等。

制剂可以是无色无味软膏剂、洗剂、霜剂、微乳剂和凝胶剂。

sirtuin化合物可以掺入软膏中，它通常是一般以矿脂或其它矿脂衍生物为 基质的半固体制剂。本领域技术人员会意识到待用的具体软膏基质，是能提供 最佳药物递送和优选能提供其它需要的特性和例如软化性等的基质。与其它载 体或媒介物一样，软膏基质应为惰性、稳定、非刺激性和非致敏的。如在前文 部分引用的Remington′s中阐述的那样，软膏基质可分为四类：油性基质；可乳 化基质；乳化基质和水溶性基质。油性软膏基质包括例如植物油、从动物中得 到的脂肪和从矿脂中得到的半固体烃。又称为吸收的软膏基质的可乳化软膏基 质几乎不含或不含水，包括例如硫酸羟基硬脂精、无水羊毛脂和亲水性矿脂。 乳化软膏基质是油包水(W/O)乳液或水包油(O/W)乳液，包括例如，鲸蜡醇、甘 油单硬脂酸酯、羊毛脂和硬脂酸。示例性的水溶性软膏基质由各种分子量的聚 乙二醇(PEGs)制备；进一步的信息可再参考如上的Remington′s。

situin调节化合物可以掺入洗剂中，洗剂通常是应用于皮肤表面无磨擦力的 制剂，是其中包括活性药物的固体粒子存在于水或醇基质中的典型液体或半液 体制剂。洗剂通常是固体的混悬液，可含有水包油型液体油性乳液。洗剂是优 选的治疗大身体面积的制剂，因为易于涂敷更多的流体组合物。通常必须细分 散洗剂中的不溶性物质。洗剂通常包含为产生更好分散体的悬浮剂和定位及保 持活性药物与皮肤接触的化合物，例如甲基纤维素、羧甲基纤维素钠等。与本 发明方法联合使用的示例性洗剂制剂包含丙二醇和亲水性矿脂的混合物，例如 可从Beiersdorf，Inc.(Norwalk，Conn)获得的商标为AquaphorRTM的那些。

Sirtuin调节化合物可以掺入霜剂中，霜剂通常是水包油或油包水的粘性液 体或半固体乳液。霜剂基质可用水洗涤，并且含油相、乳化剂和水相。油相通 常由矿脂和脂肪醇如鲸蜡醇或硬脂醇组成；尽管不是必需的，但水相体积通常 超过油相，并通常含保湿剂。霜剂中的乳化剂如同上Remington′s中阐述的那样， 通常是非离子型、阴离子型、阳离子型或两性离子表面活性剂。

Sirtuin调节化合物可以掺入微乳剂中，微乳剂通常是两种不混溶液体如油 和水的热力学稳定的、各向同性澄清分散体，其是通过表面活性剂分子界面膜 稳定的(Encyclopedia of Plmrmaceutical)Technology(New York：Marcel Dekker， 1992)第9卷)。对于微乳剂的制备，表面活性剂(乳化剂)、辅助表面活性剂(辅助 乳化剂)、油相和水相是必需的。适宜的表面活性剂包括可用于制备乳液的任何 表面活性剂，例如通常用于制备霜剂的乳化剂。辅助表面活性剂(或“辅助乳化 剂”)通常选自聚甘油衍生物、甘油衍生物和脂肪醇。尽管不是必需的，优选的 乳化剂/辅助乳化剂组合通常选自：甘油单硬脂酸酯和聚氧乙烯硬脂酸酯；聚 乙二醇和棕榈基硬脂酸乙二醇酯(ethylene glycol palmitostearate)；以及甘油三辛 酸酯和甘油三癸酸酯和油酰基聚乙二醇甘油酯(macrogolglyceride)。水相不仅包 含水而且通常包含缓冲剂、葡萄糖、丙二醇、聚乙二醇，优选低分子量聚乙二 醇(例如PEG 300和PEG 400)，和/或甘油等，而油相通常包含例如脂肪酸酯、 改性植物油、硅油、甘油一、二和三酯的混合物、PEG的一和二酯(例如油酰基 聚乙二醇甘油酯)等。

Sirtuin调节化合物可以掺入凝胶制剂中，其通常是由小无机粒子组成的混 悬液(两相体系)或基本上均匀分布在整个载体液体中的大有机分子(单相凝 胶)组成的半固体体系。可通过例如使活性药物、载体液体和适宜的胶凝剂， 例如黄芪胶(2-5％)、藻酸钠(2-10％)、明胶(2-15％)、甲基纤维素(3-5％)、羧甲 基纤维素钠(2-5％)、卡波姆(0.3-5％)或聚乙烯醇(10-20％)混合在一起，混合直至 产生特征性半固体产物来制备单相凝胶。其它适宜的胶凝剂包括甲基羟基纤维 素、聚氧乙烯-聚氧丙烯、羟乙基纤维素和明胶。尽管凝胶剂一般使用水性载体 液体，但醇和油也可用作载体液体。

本领域技术人员已知的各种添加剂可以包含于制剂如局部制剂中。添加剂 的实例包括但不限于助溶剂、皮肤渗透促进剂、遮光剂、防腐剂(例如，抗氧 化剂)、胶凝剂、缓冲剂、表面活性剂(特别是非离子和两性表面活性剂)、乳 化剂、软化剂、增稠剂、稳定剂、湿润剂、着色剂、芳香剂等。包含助溶剂和/ 或皮肤渗透促进剂与乳化剂、软化剂和防腐剂是特别优选的。最佳局部制剂包 含大约：2重量％-60重量％，优选2重量％-50重量％的助溶剂和/或皮肤渗透促 进剂；2重量％-50重量％，优选2重量％-20重量％的乳化剂；2重量％-20重量 ％软化剂；和0.01-0.2重量％的防腐剂，和组成制剂剩余部分的活性药物和载体 (例如，水)。

皮肤渗透促进剂用于使治疗水平的活性药物通过合理大小面积的完整皮 肤。适宜的促进剂是本领域熟知的，包括例如：低级链烷醇，例如甲醇、乙醇 和2-丙醇；烷基甲基亚砜，例如二甲亚砜(DMSO)、癸甲基亚砜(C10MSO) 和十四烷基甲基亚砜；吡咯烷酮，例如2-吡咯烷酮、N-甲基-2-吡咯烷酮和N-(- 羟乙基)吡咯烷酮；尿素；N，N-二乙基-间-甲苯酰胺；C2-C6链烷二醇；其它溶剂， 例如二甲基甲酰胺(DMF)、N，N-二甲基乙酰胺(DMA)和四氢糠醇；和1- 取代氮杂环庚-2-酮，特别是1-正-十二烷基环氮杂环庚-2-酮(月桂氮酮；以 AzoneRTM商标可以从Whitby Research Incorporated，Richmond，Va得到)。

增溶剂的实例包括，但不限于以下：亲水性醚，例如二乙二醇单乙醚(乙氧 基二甘醇，作为TranscutolRTM商业可获得)和二乙二醇单乙醚油酸酯(作为 SoftcutolRTM商业可获得)；聚乙烯蓖麻油衍生物，例如聚氧35蓖麻油、聚氧40 氢化篦麻油等；聚乙二醇，特别是低分子量聚乙二醇，例如PEG300和PEG 400 和聚乙二醇衍生物，例如PEG一8辛酸/癸酸甘油酯(作为LabrasolRTM商业可获 得)；烷基甲基亚砜，例如DMSO；吡咯烷酮，例如2-吡咯烷酮和N-甲基-2-吡 咯烷酮；和DMA。多种增溶剂还可用作吸收促进剂。单一增溶剂可掺入制剂， 或增溶剂的混合物可掺入其中。

适宜的乳化剂和助乳化剂包括但不限于有关微乳制剂阐述的那些乳化剂和 助乳化剂。软化剂包括例如丙二醇、甘油、肉豆蔻酸异丙酯、聚丙二醇-2(PPG-2) 十四烷基醚丙酸酯等。

其他活性药物也可以包含在制剂中，例如其他抗炎药、镇痛药、抗微生物 药、抗真菌药、抗生素、维生素、抗氧化剂、和防晒制剂中常用的防晒药物， 包括但不限于邻氨基苯甲酸类、二苯甲酮(特别是二苯甲酮-3)、樟脑衍生物、 肉桂酸酯(例如，甲氧基肉桂酸辛酯)、二苯酰甲烷(例如，丁基甲氧基二苯 酰甲烷)、对-氨基苯甲酸(PABA)和其衍生物，和水杨酸酯(例如，水杨酸 辛酯)。

在某些局部制剂中，活性药物以占制剂大约0.25wt.％-75wt.％的量的范围存 在，优选占制剂大约0.25wt.％-30wt.％的量的范围，更优选占制剂大约 0.5wt.％-15wt.％的量的范围，最优选占制剂大约1.0wt.％-10wt.％的量的范围。

局部皮肤治疗组合物可以包装于适合的容器来适应其粘度和消费者预期的 使用。例如，洗剂或霜剂可以包装于瓶或滚珠涂药器或推进剂驱动的气雾剂装 置或装有适于手指操作的泵的容器。当组合物是霜剂时，它只需储存于不变形 的瓶或挤压容器中，例如管或带盖的瓶中。组合物也可以包含于如美国专利 5,063,507描述的那些胶囊中。相应地，也提供含有本文定义的化妆品上可接受 的组合物的密闭容器。

在一个可供选择的实施方案中，提供用于口服或非肠道给药的药物制剂， 在这种情况下制剂可以包含如上所述的含有调节化合物的微乳液，但可以包含 可选择的特别是适于口服或非肠道药物给药的药学上可接受的载体、媒介物、 添加剂等。供选择地，含有调节化合物的微乳液可以基本如上述口服或非肠道 给药，无需调整。

磷脂复合物，例如白藜芦醇-磷脂复合物，和其制备描述于美国专利申请公 开2004/116386中。使用多元醇/聚合物微胶囊稳定活性成分的方法，和其制备 描述于US20040108608中。在水性溶液中使用两亲性嵌段共聚物溶解亲脂化合 物的方法描述于WO04/035013中。

眼部病况可以通过，例如，全身、局部、眼内注射sirtuin调节化合物，或 通过插入释放sirtuin调节化合物的持续释放装置来治疗或预防。增加或减少 sirtuin蛋白水平和/或活性的sirtuin调节化合物可以通过药学上可接受眼用载体 递送，这样保持化合物与眼表面接触足够长的时间来使化合物渗透角膜和眼内 部区域，例如前房、后房、玻璃体、房水、玻璃体、角膜、虹膜/睫状肌、晶状 体、脉络膜/视网膜和巩膜。药学上可接受的眼用载体可以是，例如，软膏、植 物油或胶囊包封材料。供选择地，本发明化合物可以直接注射入玻璃体和房水。 在进一步的选择方案中，化合物可以全身性给予，例如通过静脉输注或注射， 来治疗眼睛。

本文描述的sirtuin调节化合物可根据本领域方法储存于无氧环境中。例如， 白藜芦醇或其类似物可以制备于口服给药的气密胶囊中，例如Pfizer，Inc生产的 Capsugel。

根据给予对象移植物的方法，可以给予例如先体外后体内采用sirtuin调节 化合物处理的细胞，其可伴随给予例如免疫抑制剂药物，例如环孢菌素A。对 于药物制剂的一般性原则，读者可参考Cell Therapy：Stem Cell Transplantation， Gene Therapy，and Cellular Immunotherapy，G.Morstyn和W.Sheridan编， Cambridge University Press，1996；和Hematopoietic Stem Cell Therapy，E.D.Ball， J.Lister和P.Law，Churchill Livingstone，2000。

sirtuin调节化合物的毒性和治疗效果可以通过细胞培养或试验动物中的标 准药学操作来测定。LD50是50％的群体致死的剂量。ED50是50％的群体治疗有 效的剂量。毒性和治疗效果的剂量比(LD50/ED50)是治疗指数。表现大的治疗 指数的sirtuin调节化合物是优选的。虽然可以使用表现毒副作用的sirtuin调节 化合物，应小心设计将化合物靶向于受侵袭组织部位的给药体系来最小化对未 感染的细胞的潜在损伤，从而降低副作用。

从细胞培养测定和动物研究得到的数据可以用于确定在人体使用的一系列 剂量。这种化合物的剂量可以位于包括几乎无毒或无毒的ED50的一系列循环 浓度内。剂量可在该范围内变化，这取决于使用的剂型和所用的给药途径。对 于任何化合物，治疗有效剂量可以通过细胞培养测定来初始估计。剂量可以用 动物模型确定来获得在细胞培养中测定的包括IC50(例如，测试化合物取得症 状半数最大抑制的浓度)的循环血浆浓度范围。这种信息可以用于更准确地确 定人体的有用剂量。血浆中的浓度可以通过，例如，高效液相色谱测定。

6.试剂盒

本文还提供试剂盒，例如用于治疗目的的试剂盒或用于调节细胞寿命或调 节细胞凋亡的试剂盒。试剂盒可以包含例如以预测定剂量的一种或多种sirtuin 调节化合物。试剂盒可以任选地包含使细胞与化合物接触的装置和使用说明。 装置包括注射器、支架和其他将sirtuin调节化合物引入对象体内(例如，对象 的血管)或将其应用于对象皮肤的装置。

本发明预期的另一类型的试剂盒是鉴定sirtuin调节化合物的试剂盒。这种 试剂盒包括在分离的容器中的(1)sirtuin或含有sirtuin的材料和(2)本发明 的sirtuin调节化合物。这种试剂盒可以用于，例如，进行竞争型测定来测试其 他化合物(通常由使用者提供)的sirtuin调节活性。在某些实施方案中，这些 试剂盒进一步包含测定sirtuin活性的试剂(例如，具有适当指示剂的肽，例如 实施例中公开的那些)。

在另一个实施方案中，本发明提供物质的组合物，包含在分离的剂型中， 但相互关联的本发明sirtuin调节剂和另一种治疗药物[在组合治疗和组合物中所 用的相同的药物]。本文使用的术语“相互关联”是指分离的剂型包装在一起或 以其他的方式相互连接，使得容易地看出，分离的剂型预期作为相同疗法的部 分出售和给药。药物和sirtuin调节剂优选一起包装在泡罩包装(blister pack)或 其他多室包装中，或可以被使用者分离的(例如，通过撕裂两个容器间的刻划 线)连接的、分别密封的容器中(例如金属箔袋等)。

在另一个实施方案中，本发明提供试剂盒，包含在分离的容器中：a)本发 明的sirtuin调节剂；和b)另一种例如说明书其他部分描述的那些治疗药物。

除另有说明外，本方法的实施会使用在本领域技术内的细胞生物学、细胞 培养、分子生物学、转基因生物学、微生物学、重组DNA和免疫学的常规技术。 这种技术在文献中被充分地解释。参见，例如，Molecular Cloning A Laboratory Manual，第2版，Sambrook，Fritsch和Maniatis编(Cold Spring Harbor Laboratory Press：1989)；DNA Cloning，第I和II卷(D.N.Glover编，1985)； Oligonucleotide Synthesis(M.J.Gait编，1984)；Mullis等，美国专利：4,683,195； Nucleic Acid Hybridization(B.D.Hames和S.J.Higgins编，1984)；Transcription And Translation(B.D.Hames和S.J.Higgins编，1984)；Culture Of Animal Cells (R.I.Freshney，Alan R.Liss，Inc.，1987)；Immobilized Cells And Enzymes(IRL Press，1986)；B.Perbal，A Practical Guide To Molecular Cloning(1984)；the treatise， Methods In Enzymology(Academic Press，Inc.，N.Y.)；Gene Transfer Vectors For Mammalian Cells(J.H.Miller和M.P.Calos编，1987，Cold Spring Harbor Laboratory)；Methods In Enzymology，154和155卷(Wu等编)，Immunochemical Methods In Cell And Molecular Biology(Mayer和Walker编，Academic Press， London，1987)；Handbook Of Experimental Immunology，I-IV卷(D.M.Weir和 C.C.Blackwell编，1986)；Manipulating the Mouse Embryo，(Cold Spring Harbor Laboratory Press，Cold Spring Harbor，N.Y.，1986)。

实施例

现已一般性地描述了本发明，通过参考下述实施例使本发明更易于理解， 所述实施例仅用于说明本发明的某些方面和实施方案，不以任何方式限制本发 明。

实施例1 Sirtuin调节剂的合成和表征

总路线：

路线1：

路线2：

路线3：

路线4：

试验部分：

实验部分所用缩写：

HATU＝O-(7-氮杂苯并三唑-1-基)-N，N，N’，N’-四甲基脲六氟磷酸盐

NMM＝4-甲基吗啉

DIEA＝N，N-二异丙基乙胺

DMF＝N，N-二甲基甲酰胺

CH2Cl2＝二氯甲烷

EtOAc＝乙酸乙酯

MeOH＝甲醇

Na2SO4＝硫酸钠

PPA＝聚磷酸

Et3N＝三乙胺

rt＝室温

3-(噻唑并[5，4-c]吡啶-2-基)苯胺的制备：

二异丙基氨基甲酰二硫代羧酸4-氨基吡啶-3-基酯(4-aminopyridin-3-yl diisopropylcarbamodithioate)根据Smith et al，Sulfur Lett.1994 vol 17，p.197和E. Ma，Molecules 2003，vol 8，p.678-686中所述的步骤制备。

将220mg二异丙基氨基甲酰二硫代羧酸4-氨基吡啶-3-基酯(0.81mmol)和 三乙胺(0.175mL，1.5当量)一起溶解于6mL二氯甲烷中，冷却至10℃(冰浴)。 将3-硝基苯甲酰氯(150mg，1当量，0.81mmol)溶解于3mL二氯甲烷中，然 后加至冷却的二异丙基氨基甲酰二硫代羧酸4-氨基吡啶-3-基酯溶液中。混合物 升温至室温，搅拌45分钟。反应混合物用5mL二氯甲烷稀释，盐水洗涤。将 有机层干燥(Na2SO4)，浓缩得到280mg中间体酰胺化合物(粗收率83％)。

将中间体酰胺(280mg)混悬于5mL 4N aq HCl中，在回流下搅拌30分钟。 反应混合物冷却至室温，用3N NaOH中和，用二氯甲烷萃取。将有机层干燥 (Na2SO4)，减压浓缩得到200mg化合物(3-硝基苯基)噻唑并[5，4-c]吡啶(粗收 率95％)。

将310mg 2-(3-硝基苯基)噻唑并[5，4-c]吡啶(1.2mmol)与30mLMeOH和 6mL水一起混合。加入氢硫化钠水合物(6当量，7.24mmol，400mg)，将反应 混合物在回流下搅拌3小时。反应混和物冷却至室温，浓缩。水层用二氯甲烷 萃取。有机层合并后干燥(Na2SO4)，浓缩得到230mg化合物3-(噻唑并[5，4-c] 吡啶-2-基)苯胺(粗收率84％)(MS，M++H＝228)。

化合物115的制备：

以典型方式，将40mg 3-(噻唑并[5，4-c]吡啶-2-基)苯胺(0.176mmol)和1 当量3，4，5-三甲氧基苯甲酰氯一起混悬于1mL吡啶中。反应混合物然后用 Biotage微波反应器于160度加热10分钟。然后将其冷却至室温，减压浓缩。 所得残余物使用9∶1的CH2Cl2∶MeOH混合物，通过色谱纯化(MS，M++H＝ 422)。

化合物113和114的制备：

以适当的酰氯为原料，采用制备化合物115的相同步骤。

化合物99的制备：

以典型方式，将3-(噻唑并[5，4-c]吡啶-2-基)苯胺(25mg，0.11mmol)和18mg 异氰酸3，4-(亚甲二氧基)苯基酯混悬于1mL吡啶中。反应混合物然后用Biotage 微波反应器于140度加热10分钟。然后将其冷却至室温，浓缩。所得残余物使 用9∶1的CH2Cl2∶MeOH混合物，通过色谱纯化(MS，M++H＝391)。

3-氨基-5-(噻唑并[5，4-c]吡啶-2-基)苯甲酸甲酯的制备：

将5-硝基-间苯二酸单甲酯(1.25g，5.58mmol)混悬于25mL CH2Cl2中，加 入草酰氯(0.49mL，5.58mmol)。加入3滴DMF后，反应混合物在室温下搅拌 直至所有气体生成结束并且所有固体均溶解。然后将该新鲜制备的酰氯溶液于 0℃滴加入二异丙基氨基甲酰二硫代羧酸4-氨基吡啶-3-基酯(1.5g，5.58mmol) 和三乙胺(0.77mL，5.58mmol)的50mLCH2Cl2溶液中。所得反应混合物升温 至室温，搅拌1小时。然后用25mL盐水终止反应，分成两层。将有机层干燥 (Na2SO4)，浓缩。将所得残余物悬浮于25mL 2N HCl中，在回流下搅拌30分 钟。然后将其冷却至室温，过滤收集固体，干燥得1.0g 3-硝基-5-(噻唑并[5，4-c] 吡啶-2-基)苯甲酸甲酯。将该物质然后与20mL甲醇、3mL水以及1g氢硫化钠 水合物混合，在回流下搅拌2小时。将所得反应混合物冷却，浓缩。水层用CH2Cl2 萃取。合并有机层，干燥(Na2SO4)，浓缩得150mg 3-氨基-5-(噻唑并[5，4-c]吡 啶-2-基)苯甲酸甲酯(MS，M++H＝286)。

化合物133的制备：

将3-氨基-5-(噻唑并[5，4-c]吡啶-2-基)苯甲酸甲酯(150mg，0.526mmol)与 3，4，5-三甲氧基苯甲酰氯(121mg，0.526mmol)于1mL吡啶中混合。将反应混 合物用Biotage微波反应器于160度加热10分钟。然后将其冷却至室温，浓缩。 将所得残余物使用9∶1的CH2Cl2∶MeOH混合物，通过色谱纯化，得到90mg 3-(噻 唑并[5，4-c]吡啶-2-基)-5-(3，4，5-三甲氧基苯甲酰氨基)苯甲酸甲酯(收率36％) (MS，M++H＝480)。

化合物134的制备：

将3-(噻唑并[5，4-c]吡啶-2-基)-5-(3，4，5-三甲氧基苯甲酰氨基)苯甲酸甲酯 (80mg，0.167mmol)溶解于5mL THF和含有30mg氢氧化钠的2mL水中。将 反应混合物在室温下搅拌1小时。然后将其用6N HCl酸化至pH4，浓缩。过滤 收集固体，干燥得60mg 3-(噻唑并[5，4-c]吡啶-2-基)-5-(3，4，5-三甲氧基苯甲酰氨 基)苯甲酸(收率78％)(MS，M++H＝466)。

化合物135的制备：

将3-(噻唑并[5，4-c]吡啶-2-基)-5-(3，4，5-三甲氧基苯甲酰氨基)苯甲酸(50mg， 0.108mmol)与1当量NMM一起混悬于2mL无水THF中，冷却至0℃。加入 氯甲酸异丁酯(1当量)，将反应混合物搅拌45分钟。然后加入NaBH4(1当量) 的0.5mL水溶液。将反应混合物搅拌30分钟，然后升温至室温，浓缩。水层用 CH2Cl2萃取。合并有机层，干燥(Na2SO4)，浓缩得粗产品。将其用9∶1的CH2Cl2∶ MeOH混合物，通过色谱纯化(MS，M++H＝452)。

3-(噁唑并[5，4-b]吡啶-2-基)苯胺的制备：

将2-氯代吡啶-3-胺(3.20g，0.025mol)混悬于15mL吡啶中，于冰浴中缓 慢加至3-硝基苯甲酰氯(4.64g，0.026mol)的15mL吡啶混悬液中。将反应混 合物缓慢加热至室温，搅拌过夜。次日，反应混合物以冰浴冷却，缓慢加入30mL 冰醋酸。所得混合物用200mL EtOAc稀释，用水洗涤(3×20mL)。然后将有机 层干燥(Na2SO4)，浓缩。所得残余物与10mL PPA混合，在160度搅拌6小时。 然后将反应混合物小心倾入150mL水中。用固体NaOH调pH至约5，过滤收 集固体，干燥。将该物质与50mL MeOH混合，过滤。浓缩滤液得到2.1g 2-(3- 硝基苯基)噁唑并[5，4-b]吡啶(收率35％)(MS，M++H＝242)。

将2-(3-硝基苯基)噁唑并[5，4-b]吡啶(600mg，2.49mmol)和837mg氢硫化 钠水合物(14.9mmol)一起与25mL MeOH和4mL水混合。反应混合物在回流 下搅拌3小时。然后将其冷却至室温，浓缩。水层用CH2Cl2萃取。合并有机层， 干燥(Na2SO4)，浓缩得到520mg 3-(噁唑并[5，4-b]吡啶-2-基)苯胺(定量粗收率) (MS，M++H＝212)。

化合物112的制备：

将3-(噁唑并[5，4-b]吡啶-2-基)苯胺与3，4-二甲氧基苯甲酰氯在如前所述的微 波反应条件下反应。粗产品使用9∶1的CH2Cl2∶MeOH混合物，通过色谱纯化 (MS，M++H＝376)。

化合物74和111的制备：

分别使用3，4-二甲氧基苯磺酰氯和3-二甲氨基苯甲酰氯盐酸盐，按照制备 化合物112的步骤制备。最终产物使用9∶1的CH2Cl2∶MeOH混合物，通过色 谱纯化。

3-硝基-5-(噁唑并[4，5-b]吡啶-2-基)苯甲酸和3-硝基-5-(噁唑并[4，5-b]吡啶-2-基)苯 甲酸甲酯的制备：

将2-氨基-3-羟基吡啶(1.00g，9.16mmol)与2.06g 5-硝基间苯二酸单甲酯 (9.16mmol)、5.2g HATU(13.7mmol)和3.2mLDIEA(18.3mmol)一起溶解于 20mL DMF中。反应混合物在室温下搅拌18小时。然后将其用200mL EtOAc 稀释，用水洗涤(3×25mL)。将有机层干燥(Na2SO4)，浓缩。将所得残余物与 10mL PPA混合，在160度下搅拌6小时。然后将反应混合物小心倾入200mL 水中，用固体NaOH调pH至5。通过过滤收集固体，干燥得到作为甲酯和酸的 1∶1混合物的产物。将混合物通过悬浮于150mL CH2Cl2进行分离，然后过滤。 滤液为甲酯(MS，M++H＝300)，固体为期望的酸，即3-硝基-5-(噁唑并[4，5-b] 吡啶-2-基)苯甲酸(MS，M++H＝286)。

3-氨基-N-(2-(二甲氨基)乙基)-5-(噁唑并[4，5-b]吡啶-2-基)苯甲酰胺的制备：

将3-硝基-5-(噁唑并[4，5-b]吡啶-2-基)苯甲酸(250mg，0.877mmol)与1当 量N，N-二甲基乙二胺、500mg HATU(1.5当量)和0.3mL DIEA(2当量)一 起溶解于5mL DMF中。反应混合物在室温下搅拌18小时。然后将其用50mL EtOAc稀释，用水洗涤。将有机层干燥(Na2SO4)，浓缩得到硝基酰胺中间体。 将其与200mg氢硫化钠水合物(4当量)一起溶解于50mL MeOH和5mL水中。 反应混合物在回流下搅拌1小时。然后将其浓缩至干，与50mL 1∶1CH2Cl2/MeOH 混合，过滤。将滤液浓缩得到基本上定量收率的3-氨基-N-(2-(二甲氨基)乙 基)-5-(噁唑并[4，5-b]吡啶-2-基)苯甲酰胺(MS，M++H＝326)。

化合物153的制备：

将3-氨基-N-(2-(二甲氨基)乙基)-5-(噁唑并[4，5-b]吡啶-2-基)苯甲酰胺与3，4- 二甲氧基苯甲酰氯在如前所述的相同微波条件下反应。将粗产物使用9∶1的 CH2Cl2∶MeOH混合物，通过色谱纯化(MS，M++H＝490)。

化合物154和155的制备：

使用适当的酰氯，采用制备化合物153所用的相同步骤。

4-(3-氨基-5-(噁唑并[4，5-b]吡啶-2-基)苯甲酰基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯的制备：

将3-硝基-5-(噁唑并[4，5-b]吡啶-2-基)苯甲酸(250mg，0.877mmol)与1当 量Boc-哌嗪(163mg)、500mg HATU(1.5当量)和0.3mL DIEA(2当量)一 起溶解于5mL DMF中。反应混合物在室温下搅拌18小时。然后将其用50mL EtOAc稀释，用水洗涤。将有机层干燥(Na2SO4)，浓缩得到硝基酰胺中间体。 将其与200mg氢硫化钠水合物(4当量)一起溶解于50mL MeOH和5mL水中。 反应混合物在回流下搅拌1小时。将反应混合物浓缩，水层用CH2Cl2萃取。合 并有机层，干燥(Na2SO4)，浓缩得到300mg 4-(3-氨基-5-(噁唑并[4，5-b]吡啶-2- 基)苯甲酰基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯。(MS，M++H＝424)。

化合物107的制备：

将4-(3-氨基-5-(噁唑并[4，5-b]吡啶-2-基)苯甲酰基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯 (100mg，0.236mmol)与47mg 3，4-二甲氧基苯甲酰氯(1当量)一起溶解于1mL 吡啶中。反应混合物在Biotage微波反应器中加热10分钟。然后将其冷却至室 温，浓缩。将反应产物使用9∶1的CH2Cl2∶MeOH混合物，通过色谱纯化，得 到120mg BOC保护的二酰胺衍生物。将其用2mL 25％TFA的CH2Cl2溶液处理， 室温放置1小时。然后将其浓缩，用乙醚研制得到3，4-二甲氧基-N-(3-(噁唑并 [4，5-b]吡啶-2-基)-5-(哌嗪-1-甲酰基)苯基)苯甲酰胺的TFA盐(MS，M++H＝488)。

化合物138和139的制备：

使用适当的酰氯，采用制备化合物107所用的相同步骤。

化合物136的制备：

将3-硝基-5-(噁唑并[4，5-b]吡啶-2-基)苯甲酸甲酯(2.70g)和3g氢硫化钠水 合物(6当量)与100mL MeOH和20mL水混合。反应混合物在回流下搅拌1 小时。然后将其冷却至室温，浓缩。水层用CH2Cl2萃取。合并有机层，干燥 (Na2SO4)，浓缩得到600mg中间体胺。该中间体胺的一部分(50mg)与1当 量3，4-二甲氧基苯甲酰氯在如前所述的相同微波反应条件下反应。将粗产物使 用9∶1的CH2Cl2∶MeOH混合物，通过色谱纯化(MS，M++H＝434)。

化合物137的制备：

将3-(3，4-二甲氧基苯甲酰氨基)-5-(噁唑并[4，5-b]吡啶-2-基)苯甲酸甲酯 (20mg)溶解于2mL THF和含有2当量NaOH的1mL水中。反应混合物在室 温下搅拌1分钟。然后将其用6N HCl酸化至pH5，浓缩。过滤收集所得的固体， 干燥得到酸(MS，M++H＝420)。

化合物79、80和81的制备：

将3-(2-甲基噻唑-4-基)苯胺(Aldrich)在如前所述的相同微波反应条件下， 使用适当的酰氯进行反应。最终产物使用9∶1的CH2Cl2∶MeOH混合物，通过 色谱纯化。

2-氨基-3-羟基-6-甲基吡啶的制备：

将7.00g 3-羟基-6-甲基-2-硝基吡啶(Aldrich，0.045mol)与15g氢硫化钠(6 当量，0.27mol)一起溶解于250mL MeOH和20mL H2O中。反应混合物在回流 下搅拌5小时。将反应混合物冷却至室温，用300mL无水乙醇稀释，浓缩至干。 将所得残余物溶解于300mL CH2Cl2和10mL MeOH中。将混合物超声处理10 分钟，置于室温3小时。通过过滤除去此时沉淀出的所得盐。将滤液浓缩得到 粗的胺。将其通过短硅胶柱(plug)，以95％ CH2Cl2、4％MeOH和1％Et3N洗 脱，进行纯化。获得总共5.0g期望的胺(收率89％)。

5-甲基-2-(3-硝基-苯基)-噁唑并[4，5-b]吡啶的制备：

将1.2g 2-氨基-3-羟基-6-甲基吡啶(9.68mmol)与1.60g 3-硝基苯甲酸(1 当量)、4.4g HATU(Novabiochem，1.2当量，11.6mmol)和2.5mL DIEA(1.5 当量，14.5mmol)一起溶解于20mL DMF中。反应混合物在室温下搅拌18小时。 然后将其用250mL EtOAc稀释，用水洗涤(4×15mL)。将有机层干燥(Na2SO4)， 浓缩得到粗产品。色谱纯化(Isco，梯度洗脱，戊烷至80％EtOAc/戊烷)得到 1.10g期望的酰胺中间体(收率42％)。

将该酰胺中间体(1.10g，4.00mmol)与7mL PPA混合，于150℃搅拌5小 时。将反应混合物冷却至约80℃，用200mL水稀释。将该混合物于冰浴中冷却， 用固体NaOH缓慢调pH至5。过滤收集所得固体，干燥得到600mg期望的产 物，即5-甲基-2-(3-硝基-苯基)-噁唑并[4，5-b]吡啶(2步总收率24％)。LC/MS 显示纯度＞95％。

5-溴甲基-2-(3-硝基-苯基)-噁唑并[4，5-b]吡啶的制备：

以典型方式，将400mg 5-甲基-2-(3-硝基-苯基)-噁唑并[4，5-b]吡啶 (1.57mmol)与280mg(1.57mmol)NBS和20mg苯甲酰过氧化物一起悬浮于 50mL CCl4中。反应混合物在回流下搅拌4小时。LC/MS显示约50％转化为期 望的溴化物。再回流2小时后，没有再观察到变化。再加入1当量NBS，并且 再回流4小时。LC/MS显示转化完全。将反应混合物浓缩，并将所得粗产物通 过色谱纯化(Isco，梯度洗脱，CH2Cl2至9∶1 CH2Cl2/MeOH)得到基本上定量收 率的5-溴甲基-2-(3-硝基-苯基)-噁唑并[4，5-b]吡啶。

4-[2-(3-硝基-苯基)-噁唑并[4，5-b]吡啶-5-基甲基]-哌嗪-1-甲酸叔丁酯的制备：

将5-溴甲基-2-(3-硝基-苯基)-噁唑并[4，5-b]吡啶(250mg，0.75mmol)与 Et3N(0.200mL，1.5mmol)和140mg Boc-哌嗪一起溶解于5mL CH3CN中。反应 混合物在室温下搅拌18小时。然后将其浓缩，所得残余物与25mL CH2Cl2混合， 用盐水洗涤。将有机层干燥(Na2SO4)，浓缩得到基本上定量收率的4-[2-(3-硝 基-苯基)-噁唑并[4，5-b]吡啶-5-基甲基]-哌嗪-1-甲酸叔丁酯。

4-[2-(3-氨基-苯基)-噁唑并[4，5-b]吡啶-5-基甲基]-哌嗪-1-甲酸叔丁酯的制备：

将4-[2-(3-硝基-苯基)-噁唑并[4，5-b]吡啶-5-基甲基]-哌嗪-1-甲酸叔丁酯 (330mg，0.75mmol)与210mg氢硫化钠水合物(3.75mmol)一起溶解于6mL MeOH和2mL水中。反应混合物在回流下搅拌4小时。基于LC/MS，反应似乎 完全。将反应混合物冷却至室温，浓缩。水层用CH2Cl2萃取。合并有机层，干 燥(Na2SO4)，浓缩得到基本上定量收率的4-[2-(3-氨基-苯基)-噁唑并[4，5-b]吡啶 -5-基甲基]-哌嗪-1-甲酸叔丁酯。

化合物166的制备：

将4-[2-(3-氨基-苯基)-噁唑并[4，5-b]吡啶-5-基甲基]-哌嗪-1-甲酸叔丁酯 (83mg，0.2mmol)与1当量3-二甲氨基苯甲酰氯盐酸盐(44mg，0.2mmol) 一起溶解于1mL吡啶中。反应混合物用Biotage微波反应器(160℃)加热10 分钟。然后将其冷却至室温，浓缩。将所得残余物通过色谱纯化(Isco，梯度洗 脱，CH2Cl2至95％ CH2Cl2、4％MeOH和1％EtN3)得到25mg 4-{2-[3-(3-二甲氨 基-苯甲酰氨基)-苯基]-噁唑并[4，5-b]吡啶-5-基甲基}-哌嗪-1-甲酸叔丁酯(收率 23％)。

将4-{2-[3-(3-二甲氨基-苯甲酰氨基)-苯基]-噁唑并[4，5-b]吡啶-5-基甲基}-哌 嗪-1-甲酸叔丁酯(25mg，0.045mmol)溶解于1mL 25％TFA的CH2Cl2溶液中， 置于室温1小时。然后将其浓缩，并将所得残余物用Et2O研制得到基本上定量 收率的3-二甲氨基-N-[3-(5-哌嗪-1-基甲基-噁唑并[4，5-b]吡啶-2-基)-苯基]-苯甲 酰胺的TFA盐。

化合物514的制备：

除了使用2-喹喔啉基氯(2-quinoxaloyl chloride)作为酰氯，按照与制备化 合物166详述的基本相同的步骤制备。

3-硝基-5-(噁唑并[4，5-b]吡啶-2-基)苯甲酸和3-硝基-5-(噁唑并[4，5-b]吡啶-2-基)苯 甲酸甲酯的制备：

将2-氨基-3-羟基吡啶(1.00g，9.16mmol)与2.06g 5-硝基间苯二酸单甲酯 (9.16mmol)、5.2g HATU(13.7mmol)和3.2mLDIEA(18.3mmol)一起溶解于 20mL DMF中。反应混合物在室温下搅拌18小时。然后将其用200mL EtOAc 稀释，用水洗涤(3×25mL)。将有机层干燥(Na2SO4)，浓缩。将所得残余物与 10mL PPA混合，在160度搅拌6小时。然后将反应混合物小心倾入200mL水 中，用固体NaOH调pH至5。过滤收集固体，干燥得到作为甲酯和酸的1∶1混 合物的产物。将该混合物通过悬浮于150mL CH2Cl2中进行分离，然后过滤。滤 液为甲酯(MS，M++H＝300)，固体为期望的酸，即3-硝基-5-(噁唑并[4，5-b] 吡啶-2-基)苯甲酸(MS，M++H＝286)。

3-氨基-N-(2-(二甲氨基)乙基)-5-(噁唑并[4，5-b]吡啶-2-基)苯甲酰胺的制备：

将3-硝基-5-(噁唑并[4，5-b]吡啶-2-基)苯甲酸(250mg，0.877mmol)与1当 量N，N-二甲基乙二胺、500mg HATU(1.5当量)和0.3mL DIEA(2当量)一 起溶解于5mL DMF中。反应混合物在室温下搅拌18小时。然后将其用50mL EtOAc稀释，用水洗涤。将有机层干燥(Na2SO4)，浓缩得到硝基酰胺中间体。 将其与200mg氢硫化钠水合物(4当量)一起溶解于50mL MeOH和5mL水中。 反应混合物在回流下搅拌1小时。然后将其浓缩至干，与50mL 1∶1 CH2Cl2/MeOH 混合，过滤。将滤液浓缩得到基本上定量收率的3-氨基-N-(2-(二甲氨基)乙 基)-5-(噁唑并[4，5-b]吡啶-2-基)苯甲酰胺(MS，M++H＝326)。

4-3-氨基-5-(噁唑并[4，5-b]吡啶-2-基)苯甲酰基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯的制备：

将3-硝基-5-(噁唑并[4，5-b]吡啶-2-基)苯甲酸(250mg，0.877mmol)与1当 量Boc-哌嗪(163mg)、500mg HATU(1.5当量)和0.3mL DIEA(2当量)一 起溶解于5mL DMF中。反应混合物在室温下搅拌18小时。然后将其用50mL EtOAc稀释，用水洗涤。将有机层干燥(Na2SO4)，浓缩得到硝基酰胺中间体。 将其与200mg氢硫化钠水合物(4当量)一起溶解于50mL MeOH和5mL水中。 反应混合物在回流下搅拌1小时。将反应混合物浓缩，水层用CH2Cl2萃取。合 并有机层，干燥(Na2SO4)，浓缩得到300mg 4-(3-氨基-5-(噁唑并[4，5-b]吡啶-2- 基)苯甲酰基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯。(MS，M++H＝424)。

化合物164的制备：

将4-(3-氨基-5-(噁唑并[4，5-b]吡啶-2-基)苯甲酰基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯 (100mg，0.236mmol)与47mg 3，4-二甲氧基苯甲酰氯(1当量)一起溶解于1mL 吡啶中。反应混合物在Biotage微波反应器中加热10分钟。然后将其冷却至室 温，浓缩。将所得残余物用9∶1的CH2Cl2∶MeOH混合物，通过色谱纯化，得 到120mg BOC保护的二酰胺衍生物。将其用2mL 25％TFA的CH2Cl2溶液处理， 然后置于室温1小时。然后将其浓缩，用乙醚研磨得到3，4-二甲氧基-N-(3-(噁唑 并[4，5-b]吡啶-2-基)-5-(哌嗪-1-甲酰基)苯基)苯甲酰胺的TFA盐(MS，M++H＝ 488)。

(3-硝基-5-噁唑并[4，5-b]吡啶-2-基-苯基)-甲醇的制备：

以典型方式，将3-硝基-5-(噁唑并[4，5-b]吡啶-2-基)苯甲酸(770mg， 2.70mmol)与NMM(0.3mL，2.70mmol)一起悬浮于50mL无水THF中，用 冰浴冷却。加入氯甲酸异丁酯(0.35mL，2.70mmol)，反应混合物于0℃搅拌1 小时。然后于0℃加入NaBH4(102mg，2.70mmol)的6mL水溶液，反应混合 物于该相同温度下搅拌45分钟。然后将其浓缩，将所得残余物用10mL水稀释。 水层用CH2Cl2萃取。将有机层干燥(Na2SO4)，浓缩得到500mg(3-硝基-5-噁唑 并[4，5-b]吡啶-2-基-苯基)-甲醇(收率68％，LC/MS检测纯度＞95％)。 4-(3-氨基-5-(噁唑并[4，5-b]吡啶-2-基-苯基)-哌嗪-1-甲酸叔丁酯的制备：

以典型方式，将250mg 3-硝基-5-(噁唑并[4，5-b]吡啶-2-基-苯基)-甲醇 (0.923mmol)与1当量Et3N(130μL)一起溶解于25mL CH2Cl2中。加入甲磺 酰氯(1当量，70μL)，将反应混合物加热至室温，搅拌15分钟。然后将其用 盐水骤冷，用CH2Cl2萃取。合并有机层，干燥(Na2SO4)，浓缩得到甲磺酸酯 (mesylate)中间体。将该物质与130μL Et3N和172mg Boc-哌嗪(0.923mmol) 一起同4mL CH3CN混合，在室温下搅拌1天。将反应混合物浓缩，所得残余物 通过CH2Cl2和水分离。将有机层干燥(Na2SO4)，浓缩得到基本上定量收率的 4-(3-硝基-5-噁唑并[4，5-b]吡啶-2-基-苄基)-哌嗪-1-甲酸叔丁酯。将该物质与 200mg氢硫化钠水合物一起同6mL MeOH以及1mL水混合。所得反应混合物 在回流下搅拌1小时。然后将其冷却至室温，浓缩。将所得残余物用2mL水稀 释，用CH2Cl2萃取。合并有机层，干燥(Na2SO4)，浓缩得到280mg 4-(3-氨基 -5-噁唑并[4，5-b]吡啶-2-基-苄基)-哌嗪-1-甲酸叔丁酯。

化合物159的制备：

将4-(3-氨基-5-噁唑并[4，5-b]吡啶-2-基-苄基)-哌嗪-1-甲酸叔丁酯(0.2mmol) 与1当量(40mg)3，4-二甲氧基苯甲酰氯同1mL吡啶混合。反应混合物于160℃ 在Biotage微波反应器中反应10分钟。然后将其冷却至室温，浓缩。将所得粗 产物通过色谱纯化(Isco，梯度洗脱，CH2Cl2至95％CH2Cl2、4％MeOH和 1％EtN3)。然后将纯化的产物用2mL 25％TFA的CH2Cl2溶液处理2小时。然后 将其浓缩，所得残余物用Et2O研磨，得到期望产物的TFA盐(MS，M++H＝474)。 化合物160和化合物161的制备：

使用适当的酰氯，采用制备化合物159所用的相同步骤制备。 化合物3-二甲氨基甲基-5-噁唑并[4，5-b]吡啶-2-基-苯胺的制备：

以典型方式，将250mg(3-硝基-5-噁唑并[4，5-b]吡啶-2-基-苯基)-甲醇 (0.923mmol)与1当量Et3N(130μL)一起溶解于25mL CH2Cl2中。加入甲磺 酰氯(1当量，70μL)，将反应混合物加热至室温，搅拌15分钟。然后将其用 盐水骤冷，用CH2Cl2萃取。合并有机层，干燥(Na2SO4)，浓缩得到甲磺酸酯 中间体。将该物质与2mL 2N-二甲胺的THF溶液一起溶解于5mL CH3CN中。 反应混合物于室温下搅拌2小时。然后将其浓缩，将所得残余物通过CH2Cl2和 水分离。分离有机层，干燥(Na2SO4)，浓缩得到粗硝基衍生物。将该物质与 200mg氢硫化钠水合物一起同6mL MeOH和1mL水混合，在回流下搅拌1小 时。将反应混合物冷却至室温，用100mL无水EtOH稀释，浓缩至干。将所得 残余物与10mL 9∶1 CH2Cl2/MeOH混合，过滤。将滤液浓缩得到220mg 3-二甲 氨基甲基-5-噁唑并[4，5-b]吡啶-2-基-苯胺。

化合物156的制备：

将3-二甲氨基甲基-5-噁唑并[4，5-b]吡啶-2-基-苯胺(0.2mmol)与40mg 3，4- 二甲氧基苯甲酰氯(0.2mmol)一起同1mL吡啶混合。反应混合物于160℃在 Biotage微波反应器中反应10分钟。然后将其冷却至室温，浓缩。将所得残余 物通过色谱纯化(Isco，梯度洗脱，CH2Cl2至95％CH2Cl2、4％MeOH和1％Et3N) 得到期望的产物(MS，M++H＝433)。

化合物157和化合物158的制备：

使用适当的酰氯，采用制备化合物156所用的相同步骤制备。

(3-硝基-5-噻唑并[5，4-c]吡啶-2-基-苯基)-甲醇的制备：

将3-硝基-5-噻唑并[5，4-c]吡啶-2-基-苯甲酸(880mg，2.92mmol)和NMM (0.32mL，2.92mmol)一起悬浮于50mL无水THF中。将反应混合物用冰浴冷 却，加入氯甲酸异丁酯(0.38mL，2.92mmol)。反应混合物于0℃搅拌40分钟。 然后加入NaBH4(110mg，2.70mmol)的5mL水溶液。反应混合物于0℃搅拌 30分钟，然后升温至室温。将其浓缩，然后用CH2Cl2萃取。合并有机层，干燥 (Na2SO4)，浓缩得到粗产物。通过色谱纯化(Isco，梯度洗脱，CH2Cl2至9∶1 CH2Cl2/MeOH)得到150mg(3-硝基-5-噻唑并[5，4-c]吡啶-2-基-苯基)-甲醇。 3-二甲氨基甲基-5-噻唑并[5，4-c]吡啶-2-基-苯胺的制备：

将(3-硝基-5-噻唑并[5，4-c]吡啶-2-基-苯基)-甲醇(120mg，0.418mmol)与在 冰浴中冷却的Et3N(87μL，1.5当量)一起混悬于20mL CH2Cl2中。加入甲磺 酰氯(32μL，0.418mmol)，将反应混合物缓慢升温至室温。反应混合物用CH2Cl2 和盐水分离。分离有机层，干燥(Na2SO4)，浓缩得到粗甲磺酸酯中间体。将该 物质与2mL 2N-二甲胺的THF溶液一起溶解于2mL CH3CN中。将所得反应混 合物于室温下搅拌2小时。然后将其浓缩。将所得残余物与6mL MeOH和2mL 含有200mg氢硫化钠水合物的水混合。将反应混合物在回流下搅拌3小时。然 后将其冷却至室温，用100mL无水EtOH稀释，浓缩至干。将所得残余物与10mL 9∶1 CH2Cl2/MeOH混合，过滤。将滤液浓缩得到基本上定量收率的3-二甲氨基 甲基-5-噻唑并[5，4-c]吡啶-2-基-苯胺。

化合物174的制备：

将3-二甲氨基甲基-5-噻唑并[5，4-c]吡啶-2-基-苯胺(0.2mmol)与47mg 3，4，5- 三甲氧基苯甲酰氯(0.2mmol)一起同1mL吡啶混合。反应混合物于160℃在 Biotage微波反应器中反应10分钟。然后将其冷却至室温，浓缩。将所得残余 物通过色谱纯化(Isco，梯度洗脱，CH2Cl2至95％CH2Cl2、4％MeOH和1％Et3N) 得到30mg期望的产物(MS，M++H＝479)。

3-(噁唑并[4，5-b]吡-2-基)苯甲酸的制备：

将2-氨基-3-羟基吡啶(1g，9.16mmol)与间苯二甲酸单甲酯(9.16mmol)、 5.2g HATU(1.5当量)和3.2mL DIEA一起溶解于25mL DMF中。反应混合物 于室温下搅拌18小时。然后将其用150mL乙酸乙酯稀释，用水洗涤(5×20mL)。 将有机层干燥(Na2SO4)，浓缩得到3.2g中间体酰胺。将该物质与10mL PPA混 合，于160度搅拌4小时。然后将其冷却至室温，小心倾入150mL水中。用固 体NaOH调pH至5。过滤收集所得沉淀，干燥得到380mg期望的酸，即3-(噁 唑并[4，5-b]吡啶-2-基)苯甲酸。

化合物102的制备：

为了形成酰胺，将3-(噁唑并[4，5-b]吡啶-2-基)苯甲酸(30mg，0.125mmol) 与3，4，5-三甲氧基苯胺(23mg，1当量)和71mg HATU(1.5当量)一起溶解于 2mL DMF中。加入45微升DIEA(2当量)后，将反应混合物于室温下搅拌18 小时。然后将其用乙酸乙酯稀释，用水洗涤，浓缩。将所得产物使用9∶1 CH2Cl2∶ MeOH混合物，通过色谱纯化，得到3-(噁唑并[4，5-b]吡啶-2-基)N-(3，4，5-三甲氧 基苯基)苯甲酰胺。(MS，M++H＝406)。

化合物100、化合物101和化合物103的制备：

使用适当的胺，采用制备化合物102所用的相同步骤制备。

5-噁唑并[4，5-b]吡啶-2-基-吡啶-3-基胺的制备：

以典型方法，将790mg 2-氨基-3-羟基吡啶(7.24mmol)和1.00g 5-氨基烟 酸(7.24mmol)与10mL PPA混合，于200℃搅拌6小时。将反应混合物冷却至 约100℃，小心倾入100mL水中。用固体NaOH调pH至6，过滤收集固体。 高真空干燥后总共得180mg 5-噁唑并[4，5-b]吡啶-2-基-吡啶-3-基胺。

化合物73的制备：

将5-噁唑并[4，5-b]吡啶-2-基-吡啶-3-基胺(25mg，0.118mmol)与24mg 2，4- 二甲氧基苯甲酰氯(0.118mmol)一起同1mL吡啶混合。反应混合物于160℃ 在Biotage微波反应器中反应10分钟。然后将其冷却至室温，浓缩。将所得粗 产物通过色谱纯化(Isco，梯度洗脱，CH2Cl2至9∶1CH2Cl2/MeOH)得到11mg 产物(MS，M++H＝377)。

化合物66、67和68的制备：

使用适当的酰氯，采用与制备化合物73所述基本上相同的步骤制备。

2-咪唑并[2，1-b]噻唑-6-基-苯胺的制备：

以典型方法，将123mg 2-氨基噻唑(1.23mmol)和2-溴-2’-硝基苯乙酮 (300mg，1.23mmol)与15mL甲乙酮混合，在回流下搅拌18小时。然后将其 冷却至室温，过滤。浓缩滤液。将所得固体与20mL EtOH混合，加入5滴浓 HBr。反应混合物在回流下搅拌6小时。此时一切物质均溶解，LC/MS检测显 示生成期望的硝基中间体(MS，M++H＝246)。将反应混合物浓缩，与20mL稀 NaHCO3水溶液混合。过滤收集所得固体，干燥得到300mg硝基中间体。将该 物质与6当量氢硫化钠水合物一起同15mL MeOH和3mL水混合。反应混合物 在回流下搅拌8小时。然后将其冷却至室温，浓缩。水层用CH2Cl2萃取。合并 有机层，干燥(Na2SO4)，浓缩得到260mg 2-咪唑并[2，1-b]噻唑-6-基-苯胺。

化合物203的制备：

将2-咪唑并[2，1-b]噻唑-6-基-苯胺(64mg，0.30mmol)与60mg 3，4-二甲氧 基苯甲酰氯(0.30mmol)一起同1mL吡啶混合。反应混合物于160℃在Biotage 微波反应器中反应10分钟。将反应混合物冷却至室温，浓缩。将所得残余物通 过色谱纯化(Isco，梯度洗脱，CH2Cl2至9∶1CH2Cl2/MeOH)得到期望的产物(MS， M++H＝380)。

化合物204的制备：

使用适当的酰氯，采用制备化合物203所用的相同步骤制备。

化合物707、739和740的制备：

除了在合成步骤开始时使用2-氨基-4-甲基噻唑，在最后的酰胺形成步骤中 使用适当的酰氯外，采用制备化合物203所用的相同步骤制备。

6-(2-硝基-苯基)-2-咪唑并[2，1-b]噻唑-3-甲酸乙酯的制备：

以典型方法，将2.1g 2-氨基噻唑-4-甲酸乙酯(Combi-Blocks，0.0123mol) 与2-溴-2’-硝基苯乙酮(3.0g，0.0123mol)一起同25mL甲乙酮混合。将反应混 合物在回流下搅拌18小时。然后将其冷却至室温，过滤除去一些固体。将滤液 浓缩得到3.10g 6-(2-硝基-苯基)-2-咪唑并[2，1-b]噻唑-3-甲酸乙酯(MS，M++H＝ 318)。

[6-(2-硝基-苯基)-咪唑并[2，1-b]噻唑-3-基]-甲醇的制备：

将6-(2-硝基-苯基)-2-咪唑并[2，1-b]噻唑-3-甲酸乙酯(14.50g，0.0458mol) 与100mL THF和含有7.3g NaOH(4当量)的100mL水混合。反应混合物在室 温下搅拌18小时。然后将其浓缩。将水层用CH2Cl2洗涤一次，然后用6N HCl 酸化。过滤收集固体，干燥得到7.4g酸中间体。将该物质(7.4g，0.0256mol) 与NMM(2.8mL，0.0256mol)一起同200mL无水THF混合，冷却至0℃。加 入氯甲酸异丁酯(3.35mL，0.0256mol)，反应混合物在冰浴中搅拌3小时。加 入NaBH4(0.97g，0.0256mol)的30mL水溶液。反应混合物于0℃搅拌45分 钟。然后将其升温至室温，浓缩。水层用CH2Cl2萃取。合并有机层，干燥 (Na2SO4)，浓缩得到粗产物。通过色谱纯化(Isco，使用戊烷/EtOAc混合物) 得到5.20g[6-(2-硝基-苯基)-咪唑并[2，1-b]噻唑-3-基]-甲醇(收率74％)。

4-[6-(2-氨基-苯基)-咪唑并[2，1-b]噻唑-3-基甲基]-哌嗪-1-甲酸叔丁酯的制备：

将[6-(2-硝基-苯基)-咪唑并[2，1-b]噻唑-3-基]-甲醇(1.0g，3.64mol)与1当量 Et3N(0.51mL)一起溶解于100mL CH2Cl2中。加入甲磺酰氯(1当量，0.28mL)， 将反应混合物加热至室温，搅拌15分钟。然后将其用盐水骤冷，用CH2Cl2萃 取。合并有机层，干燥(Na2SO4)，浓缩得到甲磺酸酯中间体。将该物质与0.51mL Et3N和680mg Boc-哌嗪(3.64mmol)一起同4mL CH3CN混合，在室温下搅拌 1天。将反应混合物浓缩，所得残余物通过CH2Cl2和水分离。将有机层干燥 (Na2SO4)，浓缩得到基本上定量收率的产物。将该物质与200mg氢硫化钠水 合物一起同6mL MeOH和1mL水混合。将所得反应混合物在回流下搅拌24小 时。然后将其冷却至室温，浓缩。将所得残余物用2mL水稀释，用CH2Cl2萃 取。合并有机层，干燥(Na2SO4)，浓缩得到0.90g 4-[6-(2-氨基-苯基)-咪唑并[2，1-b] 噻唑-3-基甲基]-哌嗪-1-甲酸叔丁酯。

化合物207的制备：

将4-[6-(2-氨基-苯基)-咪唑并[2，1-b]噻唑-3-基甲基]-哌嗪-1-甲酸叔丁酯 (0.3mmol)与1当量(60mg)3，4-二甲氧基苯甲酰氯一起同1mL吡啶混合。 反应混合物于160℃在Biotage微波反应器中反应10分钟。然后将其冷却至室 温，浓缩。将所得粗产物通过色谱纯化(Isco，梯度洗脱，CH2Cl2至95％ CH2Cl2、 4％MeOH和1％Et3N)。然后将纯化的产物用2mL 25％TFA的CH2Cl2溶液处理 2小时。然后将其浓缩，所得残余物用Et2O研磨得到期望的产物的TFA盐(MS， M++H＝478)。

化合物208、326、327、328、329、330、337、338、440、441、442、443、444、 445、446、447、448、510、511、512、543、544、708、709、710、733、735、 736、737、738、743和744的制备：

使用适当的酰氯或磺酰氯，采用制备化合物207所用的相同步骤制备。化 合物623、624、625、644、645、692、695、697和698是使用适当的酰氯，根 据制备化合物207所用的步骤制备的。酰氯是商业上可获得的或按下述方法由 羧酸制备：将羧酸(1.0mmol)、亚硫酰氯(2.0mmol)和催化量的N，N-二甲基 甲酰胺(DMF)(2滴)在甲苯(2mL)中回流1小时。将反应物冷却至室温， 真空浓缩得到期望的酰氯。

2-(3-二甲氨基甲基-咪唑并[2，1-b]噻唑-6-基)-苯胺的制备：

将[6-(2-硝基-苯基)-咪唑并[2，1-b]噻唑-3-基]-甲醇(435mg，1.58mmol)与1 当量Et3N(0.330mL)一起溶解于25mL CH2Cl2中。加入甲磺酰氯(1当量， 0.12mL)，将反应混合物升温至室温，搅拌15分钟。然后将其用盐水骤冷，用 CH2Cl2萃取。合并有机层，干燥(Na2SO4)，浓缩得到甲磺酸酯中间体。将该物 质与4mL 2N-二甲胺的THF溶液一起同4mL THF混合，在室温下搅拌3小时。 将反应混合物浓缩，所得残余物通过CH2Cl2和水分离。将有机层干燥(Na2SO4)， 浓缩得到基本上定量收率的产物。将该物质与200mg氢硫化钠水合物一起同 6mL MeOH和1mL水混合。所得反应混合物在回流下搅拌6小时。然后将其冷 却至室温，用100mL无水EtOH稀释，浓缩。将所得残余物与20mL 9∶1 CH2Cl2/MeOH混合，过滤。将滤液浓缩得到2-(3-二甲氨基甲基-咪唑并[2，1-b] 噻唑-6-基)-苯胺。

化合物205的制备：

将2-(3-二甲氨基甲基-咪唑并[2，1-b]噻唑-6-基)-苯胺(0.3mmol)与1当量 (60mg)3，4-二甲氧基苯甲酰氯一起同1mL吡啶混合。反应混合物于160℃在 Biotage微波反应器中反应10分钟。然后将其冷却至室温，浓缩。将所得粗产 物通过色谱纯化(Isco，梯度洗脱，CH2Cl2至95％CH2Cl2、4％MeOH和1％Et3N) 得到期望的产物，为淡黄色固体(MS，M++H＝437。

化合物206的制备：

使用适当的酰氯，采用制备化合物205所用的相同步骤制备。

2-(3-吗啉-4-基-咪唑并[2，1-b]噻唑-6-基)-苯胺的制备：

将[6-(2-硝基-苯基)-咪唑并[2，1-b]噻唑-3-基]-甲醇(435mg，1.58mmol)与1当 量Et3N(0.330mL)一起溶解于25mL CH2Cl2中。加入甲磺酰氯(1当量，0.12mL)， 将反应混合物加热至室温，搅拌15分钟。然后将用盐水骤冷，用CH2Cl2萃取。 合并有机层，干燥(Na2SO4)，浓缩得到甲磺酸酯中间体。将该物质与0.33mL Et3N 和0.14mL吗啉一起同6mL CH3CN混合。反应混合物在室温下搅拌18小时。 次日，将其浓缩，所得残余物通过CH2Cl2和水分离。将有机层干燥(Na2SO4)， 浓缩得到基本上定量收率的产物。将该物质与200mg氢硫化钠水合物一起同 6mL MeOH和1mL水混合。将所得反应混合物在回流下搅拌6小时。然后将其 冷却至室温，用100mL无水EtOH稀释，浓缩。将所得残余物与20mL 9∶1 CH2Cl2/MeOH混合，过滤。将滤液浓缩得到2-(3-吗啉-4-基-咪唑并[2，1-b]噻唑-6- 基)-苯胺。

化合物209的制备：

将2-(3-吗啉-4-基-咪唑并[2，1-b]噻唑-6-基)-苯胺(0.3mmol)与1当量(60mg) 3，4-二甲氧基苯甲酰氯一起同1mL吡啶混合。反应混合物于160℃在Biotage微 波反应器中反应10分钟。然后将其冷却至室温，浓缩。将所得粗产物通过色谱 纯化(Isco，梯度洗脱，CH2Cl2至95％CH2Cl2、4％MeOH和1％Et3N)得到期 望的产物，为淡黄色固体(MS，M++H＝479)。

化合物210的制备：

使用适当的酰氯，采用制备化合物209所用的相同步骤制备。

6-(2-硝基-苯基)-咪唑并[2，1-b]噻唑-2-甲酸乙酯的制备：

以典型方法，将1.0g 2-氨基噻唑-5-甲酸乙酯(Astatech，5.81mmol)与1.42g 2-溴-2’-硝基苯乙酮一起同50mL丙酮酮混合，在回流下搅拌18小时。然后将其 过滤。将滤液浓缩得到中间体酰胺(MS，M++H＝336)。将该物质与6滴浓HBr 一起同20mL EtOH混合，在回流下搅拌4小时。将反应混合物冷却至室温，浓 缩。将所得残余物用稀NaHCO3水溶液稀释。过滤收集固体，干燥得到6-(2-硝 基-苯基)-咪唑并[2，1-b]噻唑-2-甲酸乙酯(MS，M++H＝318)。

[6-(2-硝基-苯基)-咪唑并[2，1-b]噻唑-2-基]-甲醇的制备：

将6-(2-硝基-苯基)-2-咪唑并[2，1-b]噻唑-2-甲酸乙酯(660mg，2.08mmol) 溶解于12mL THF中，加入NaOH(4当量)的10mL水溶液。反应混合物在 50℃搅拌12小时。然后将其冷却至室温，浓缩。将水层用6N HCl酸化至pH5。 过滤收集固体，干燥得到基本上定量收率的酸。将该物质(2.08mmol)与NMM (0.23mL，2.08mmol)一起同20mL无水THF混合，于冰浴中冷却。加入氯甲 酸异丁酯(0.27mL，2.08mmol)，将反应混合物于0℃搅拌30分钟。加入NaBH4 (80mg，2.08mmol)的5mL水溶液。反应混合物于0℃搅拌30分钟，然后浓 缩。水层用CH2Cl2萃取。合并有机层，干燥(Na2SO4)，浓缩。通过色谱纯化 (Isco，使用CH2Cl2和MeOH的混合物梯度洗脱)得到190mg[6-(2-硝基-苯基)- 咪唑并[2，1-b]噻唑-2-基]-甲醇。

2-(2-二甲氨基甲基-咪唑并[2，1-b]噻唑-6-基)-苯胺的制备：

除了使用[6-(2-硝基-苯基)-咪唑并[2，1-b]噻唑-2-基]-甲醇作为起始原料外， 采用在制备2-(3-二甲氨基甲基-咪唑并[2，1-b]噻唑-6-基)-苯胺的过程中所用的基 本上相同的步骤制备。

化合物178的制备：

将2-(2-二甲氨基甲基-咪唑并[2，1-b]噻唑-6-基)-苯胺(0.3mmol)与1当量 (60mg)3，4-二甲氧基苯甲酰氯一起同1mL吡啶混合。反应混合物于160℃在 Biotage微波反应器中反应10分钟。然后将其冷却至室温，浓缩。将所得残余 物通过色谱纯化(Isco，梯度洗脱，CH2Cl2至95％CH2Cl2、4％MeOH和1％Et3N) 得到期望的产物，为淡黄色固体(MS，M++H＝437)。

化合物179的制备：

使用适当的酰氯，采用制备化合物178所用的相同步骤制备。

4-[6-(2-氨基-苯基)-咪唑并[2，1-b]噻唑-2-基甲基]-哌嗪-1-甲酸叔丁酯的制备：

除了使用[6-(2-硝基-苯基)-咪唑并[2，1-b]噻唑-2-基]-甲醇作为起始原料外， 采用与制备4-[6-(2-氨基-苯基)-咪唑并[2，1-b]噻唑-3-基甲基]-哌嗪-1-甲酸叔丁酯 的过程中所用步骤基本上相同的步骤制备。

化合物270的制备：

将4-[6-(2-氨基-苯基)-咪唑并[2，1-b]噻唑-2-基甲基]-哌嗪-1-甲酸叔丁酯 (0.2mmol)与1当量(40mg)3，4-二甲氧基苯甲酰氯一起同1mL吡啶混合。 反应混合物于160℃在Biotage微波反应器中反应10分钟。然后将其冷却至室 温，浓缩。将所得粗产物通过色谱纯化(Isco，梯度洗脱，CH2Cl2至95％CH2Cl2、 4％MeOH和1％Et3N)。将纯化的产物用2mL 25％TFA的CH2Cl2溶液处理2小 时。然后将其浓缩，所得残余物用Et2O研磨得到期望的产物的TFA盐(MS， M++H＝478)。

化合物271和化合物513的制备：

使用适当的酰氯，采用制备化合物270所用的相同步骤制备。

3-(2-硝基-苯基)-咪唑并[2，1-b]噻唑-6-甲酸乙酯的制备：

按如下方法制备4-(2-硝基-苯基)-噻唑-2-基胺：将2-溴-2′-硝基苯乙酮(1.75g， 7.2mmol)与硫脲(1.09g，14.4mmol)一起同50mL无水EtOH混合，在回流下 搅拌2小时。将反应混合物冷却至室温，减压浓缩。所得残余物用20mL 1N NaOH 水溶液碱化，用CH2Cl2萃取。合并有机层，干燥(Na2SO4)，浓缩得到基本上 定量收率的4-(2-硝基-苯基)-噻唑-2-基胺。

将4-(2-硝基-苯基)-噻唑-2-基胺(1.60g，7.2mmol)与0.90mL溴丙酮酸乙 酯(7.2mmol)一起同50mL甲乙酮混合，在回流下搅拌24小时。再加入当量 的溴丙酮酸乙酯(0.90mL，7.2mmol)，反应混合物再在回流下搅拌8小时。将 反应混合物冷却至室温，减压浓缩。所得残余物通过色谱纯化(Isco，梯度洗脱， CH2Cl2至95％CH2Cl2、5％MeOH)得到1.2g 3-(2-硝基-苯基)-咪唑并[2，1-b]噻唑 -6-甲酸乙酯(收率52％)。

[3-(2-硝基-苯基)-咪唑并[2，1-b]噻唑-6-基]-甲醇的制备：

将3-(2-硝基-苯基)-咪唑并[2，1-b]噻唑-6-甲酸乙酯(1.2g，3.78mmol)与50mL THF和50mL含有600mg NaOH(4当量)的水混合。反应混合物50℃搅拌8 小时。然后将其冷却至室温，减压浓缩。水层用6N HCl酸化至pH6。过滤收集 所得固体，干燥得到465mg中间体酸。将该中间体酸(465mg，1.61mmol)与 NMM(0.18mL，1.61mmol)一起同50mL无水THF混合。反应混合物于冰浴 中冷却，加入氯甲酸异丁酯(0.21mL，1.61mmol)。置于0℃30分钟后，加入 NaBH4(240mg)的2mL水溶液。将所得反应混合物于0℃搅拌30分钟，然后 浓缩。水层用CH2Cl2萃取。合并有机层，干燥(Na2SO4)，浓缩得到粗醇。通 过色谱纯化(Isco，梯度洗脱，CH2Cl2至95％CH2Cl2、5％MeOH)得到200mg [3-(2-硝基-苯基)-咪唑并[2，1-b]噻唑-6-基]-甲醇(收率45％)。

4-[3-(2-硝基-苯基)-咪唑并[2，1-b]噻唑-6-基甲基]-哌嗪-1-甲酸叔丁酯的制备：

将[3-(2-硝基-苯基)-咪唑并[2，1-b]噻唑-6-基]-甲醇(200mg，0.727mmol)与 Et3N(0.10mL，0.727mmol)一起同50mLCH2Cl2混合，在冰浴中冷却。加入甲 磺酰氯(56μL，0.727mmol)，将反应混合物升温至室温，搅拌30分钟。将反应 混合物用盐水骤冷，用CH2Cl2萃取。合并有机层，干燥(Na2SO4)，浓缩得到 基本上定量收率的甲磺酸酯中间体。将该物质与三乙胺(0.10mL，0.727mmol) 和Boc-哌嗪一起溶解于10mL乙腈中。将该反应混合物在室温下搅拌18小时。 然后将其浓缩。所得残余物通过水和CH2Cl2分离。分离有机层，干燥(Na2SO4)， 浓缩得到基本上定量收率的4-[3-(2-硝基-苯基)-咪唑并[2，1-b]噻唑-6-基甲基]-哌 嗪-1-甲酸叔丁酯。

4-[3-(2-氨基-苯基)-咪唑并[2，1-b]噻唑-6-基甲基]-哌嗪-1-甲酸叔丁酯的制备：

将4-[3-(2-硝基-苯基)-咪唑并[2，1-b]噻唑-6-基甲基]-哌嗪-1-甲酸叔丁酯 (320mg，0.73mmol)与20mL MeOH以及含有氢硫化钠水合物(244mg，6当 量)的5mL水混合。反应混合物在回流下搅拌4小时。然后将其冷却至室温， 浓缩。水层用CH2Cl2萃取。合并有机层，干燥(Na2SO4)，浓缩得到280mg 4-[3-(2- 氨基-苯基)-咪唑并[2，1-b]噻唑-6-基甲基]-哌嗪-1-甲酸叔丁酯(收率92％)。

化合物560的制备：

将4-[3-(2-氨基-苯基)-咪唑并[2，1-b]噻唑-6-基甲基]-哌嗪-1-甲酸叔丁酯 (45mg，0.1mmol)与1当量(40mg)2-喹喔啉基氯一起同1mL吡啶混合。反 应混合物于160℃在Biotage微波反应器中反应10分钟。然后将其冷却至室温， 浓缩。所得粗产物通过色谱纯化(Isco，梯度洗脱，CH2Cl2至95％CH2Cl2、 4％MeOH和1％Et3N)。然后将纯化的产物用2mL 25％TFA的CH2Cl2溶液处理 2小时。然后将其浓缩，所得残余物用Et2O研磨得到期望的产物的TFA盐(MS， M++H＝470)。

化合物559的制备：

使用适当的酰氯，采用制备化合物560所用的相同步骤制备。

6-(2-氯-吡啶-3-基)-咪唑并[2，1-b]噻唑-3-甲酸乙酯和6-(2-溴-吡啶-3-基)-咪唑并 [2，1-b]噻唑-3-甲酸乙酯的1∶1混合物的制备：

根据WO2005/061476中所述的步骤制备2-溴-1-(2-氯-吡啶-3-基)-乙酮和2- 溴-1-(2-溴-吡啶-3-基)-乙酮的1∶1混合物。将该混合物(5.6g，约0.0240mol)与 2-氨基-噻唑-4-甲酸乙酯(4.6g)一起同150mL甲乙酮混合，在回流下搅拌18 小时。将反应混合物浓缩。所得残余物与150mL CH2Cl2混合，过滤。过滤的固 体为未反应的2-氨基-噻唑-4-甲酸乙酯。将滤液浓缩得到基本上纯的6-(2-氯-吡 啶-3-基)-咪唑并[2，1-b]噻唑-3-甲酸乙酯和6-(2-溴-吡啶-3-基)-咪唑并[2，1-b]噻唑 -3-甲酸乙酯的1∶1混合物(总共3.0g)。

6-(2-氯-吡啶-3-基)-3-吗啉-4-基甲基-咪唑并[2，1-b]噻唑和6-(2-溴-吡啶-3-基)-3-吗 啉-4-基甲基-咪唑并[2，1-b]噻唑的1∶1混合物的制备：

将6-(2-氯-吡啶-3-基)-咪唑并[2，1-b]噻唑-3-甲酸乙酯和6-(2-溴-吡啶-3-基)- 咪唑并[2，1-b]噻唑-3-甲酸乙酯的1∶1混合物(3.0g)与含有3g NaOH的25mL水 一起同100mLTHF混合。反应混合物于50℃搅拌3小时。然后将其冷却至室温， 浓缩。水层用6NHCl酸化至pH5，将所得混合物过滤。收集固体得到2.14g中 间体酸。

将该1∶1的酸混合物(2.14g)与NMM(0.85mL)一起同250mL无水THF 混合，在冰浴中冷却。加入氯甲酸异丁酯(1.0mL)，将反应混合物升温至室温， 搅拌3小时。将反应混合物于冰浴中冷却，加入NaBH4(0.29g)的20mL水溶 液。将反应混合物搅拌30分钟，然后升温至室温。将其浓缩，随后用CH2Cl2萃 取。合并有机层，干燥(Na2SO4)，浓缩得到1.5g中间体醇。

将该1∶1的中间体醇混合物(1.5g)与Et3N(0.80mL)一起溶解于100mL CH2Cl2中，在冰浴中冷却。加入甲磺酰氯(0.44mL)，将反应混合物升温至室 温。将反应混合物用盐水骤冷，分成两层。将有机层干燥(Na2SO4)，浓缩得到 中间体甲磺酸酯。将该物质与0.8mL Et3N和0.5mL吗啉一起立即与30mL CH3CN混合。反应混合物于50℃搅拌3小时。减压浓缩反应混合物，所得残余 物通过CH2Cl2和水分离。分离有机层，干燥(Na2SO4)，浓缩得到粗产物。通 过色谱纯化(Isco，梯度洗脱，CH2Cl2至95％CH2Cl2、4％MeOH和1％Et3N) 得到720mg 6-(2-氯-吡啶-3-基)-3-吗啉-4-基甲基-咪唑并[2，1-b]噻唑和6-(2-溴-吡 啶-3-基)-3-吗啉-4-基甲基-咪唑并[2，1-b]噻唑的1∶1混合物。

(4-甲氧基-苄基)-[3-(3-吗啉-4-基甲基-咪唑并[2，1-b]噻唑-6-基)-吡啶-2-基]-胺的制 备：

将6-(2-氯-吡啶-3-基)-3-吗啉-4-基甲基-咪唑并[2，1-b]噻唑和6-(2-溴-吡啶-3- 基)-3-吗啉-4-基甲基-咪唑并[2，1-b]噻唑的1∶1混合物(600mg)与0.47mL 4-甲氧 基苄基胺一起同15mL甲苯混合，在回流下搅拌5天。将反应混合物冷却至室 温，通过CH2Cl2和盐水分离。分离有机层，干燥(Na2SO4)并浓缩得到粗产物。 通过色谱纯化(Isco，梯度洗脱，CH2Cl2至95％CH2Cl2、4％MeOH和1％Et3N) 得到200mg(4-甲氧基-苄基)-[3-(3-吗啉-4-基甲基-咪唑并[2，1-b]噻唑-6-基)-吡啶 -2-基]-胺。

3-(3-吗啉-4-基甲基-咪唑并[2，1-b]噻唑-6-基)-吡啶-2-基胺的制备：

将(4-甲氧基-苄基)-[3-(3-吗啉-4-基甲基-咪唑并[2，1-b]噻唑-6-基)-吡啶-2-基]- 胺(100mg，0.23mmol)与三乙基硅烷(0.11mL，2当量)一起与2mL CH2Cl2 混合。加入三氟醋酸(1mL)，反应混合物在室温下搅拌18小时。次日，将反 应混合物浓缩。将所得残余物用Et2O研磨得到基本上定量收率的3-(3-吗啉-4- 基甲基-咪唑并[2，1-b]噻唑-6-基)-吡啶-2-基胺的TFA盐。

化合物621的制备：

将3-(3-吗啉-4-基甲基-咪唑并[2，1-b]噻唑-6-基)-吡啶-2-基胺的TFA盐 (0.1mmol)与0.1mmol 2-喹喔啉基氯一起同1mL吡啶混合。反应混合物于160℃ 在微波反应器中反应10分钟。然后将其冷却至室温，浓缩得到粗产物。使用已 经用0.1％TFA缓冲的含水CH3CN混合物，通过制备HPLC纯化，得到18mg 期望产物的TFA盐(MS，M++H＝472)。

N-(4-羟基吡啶-3-基)-3硝基苯甲酰胺的制备：

将4-羟基-3-硝基吡啶(40g)和10％Pd/C(4g)在EtOH(700mL)和二氯 甲烷(50mL)中的混悬液在H2(1atm)下于室温搅拌4天。TLC显示反应完 全。将反应混合物通过Celite垫过滤，将滤液真空浓缩得到3-氨基-4-羟基吡啶 的红色泡沫粗品(32g，收率100％，MS确认)，将其直接用于下一步骤。

于10℃向3-氨基-4-羟基吡啶(2.376g，21.6mmol)的吡啶(36.0mL)溶液 中滴加3-硝基苯甲酰氯(3.339g，18.0mmol)的吡啶(54.0mL)溶液，将所得 混合物搅拌过夜。加入Na2CO3(1.145g，10.8mmol)，将混合物搅拌1小时。 过滤收集固体，用10％HOAc(30mL×3)和水(30mL×3)洗涤，真空干燥得 到N-(4-羟基吡啶-3-基)-3硝基苯甲酰胺的黄色固体(3.70g，收率66％)。1H-NMR (400 MHz，DMSO-dB6B)δ：6.34(1H，d，J＝7.2Hz)，7.74(1H，d，J＝8.0Hz)，7.84 (1H，t，J＝8.0Hz)，8.34(1H，d，J＝7.2Hz)，8.44(1H，t，J＝8.0Hz)，8.66(1H，s)，8.73 (1H，s)，9.66(1H，s)，11.65(1H，br s)；MS(ESI)：对于C12H9N3O4的计算值(m/z)： 259，实测值：260[M+1]+。

2-(3-硝基苯基)噁唑并[4，5-c]吡啶的制备：

将N-(4-羟基吡啶-3-基)-3-硝基苯甲酰胺(1.554g，6mmol)的聚磷酸(12.0mL) 溶液于150℃搅拌6小时。将反应混合物倾入蒸馏水中，加入氢氧化钠至pH＝5。 过滤收集沉淀，水洗至中性，真空烘箱(50℃)干燥得到2-(3-硝基苯基)噁唑并 [4，5-c]吡啶的黄色固体(1.389g，收率96％)。MS(ESI)：对于C12H7NO3的计 算值(m/z)：241，实测值：242[M+1]+。

3-(噁唑并[4，5-c]吡啶-2-基)苯胺的制备：

将2-(3-硝基苯基)噁唑并[4，5-c]吡啶(1.50g，6.2mmol)、铁粉(1.867g， 31.8mmol)和NH4Cl(2.86g，53.5mmol)在CH3OH/H2O(4∶1，311.2mL)中的 混悬液回流6小时。将混合物过滤，并将滤液真空蒸发。残余物用硅胶色谱纯 化(以石油醚∶EtOAc∶Et3N＝160∶40∶1洗脱)得到3-(噁唑并[4，5-c]吡啶-2-基)苯胺 的白色固体(1.107g，收率85％)。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ：5.54(2H，s)， 6.82(1H，d，J＝8.0Hz)，7.24(1H，t，J＝8.0Hz)，7.35(1H，d，J＝8.0Hz)，7.44(1H，s)， 7.86(1H，d，J＝5.6Hz)，8.56(1H，d，J＝5.6Hz)，9.07(1H，s)；MS(ESI)：对于 C12H9N3O的计算值(m/z)：211，实测值：212[M+1]+。

制备化合物296、297、298、311、343、344、345、346、347和348的一般步 骤：

酰氯也可商业上获得或通过由相应的羧酸按以下方法制备：将1.0g羧酸在 10mL亚硫酰氯和0.1mL DMF中回流2小时。将反应混合物冷却至室温，减压 浓缩得到期望的酰氯。将3-(噁唑并[4，5-c]吡啶-2-基)苯胺(各0.2mmol)和适当 的酰氯(各0.24mmol)在吡啶(2mL)中的混合物于室温下搅拌过夜。将反应 混合物用H2O(各5mL)稀释。过滤收集沉淀，用MeOH(5mL)研磨，干燥 得到库化合物，将其通过HPLC&MS分析。将该库化合物进一步通过硅胶垫 用CH2Cl2/EtOAc或石油醚/EtOAc洗脱纯化。

2-(3-硝基苯基)噻唑并[4，5-c]吡啶的制备：

将N-(4-羟基吡啶-3-基)-3-硝基苯甲酰胺(1.33g，5.2mmol)和P2S5(2.40g， 10.4mmol)在吡啶(6.0mL)和对-二甲苯(24mL)中的混合物于140℃搅拌18 小时。趁热在真空下除去溶剂，残余物由EtOH重结晶纯化得到2-(3-硝基苯基) 噻唑并[4，5-c]吡啶的黄色固体(1.08g，收率81％)。MS(ESI)：对于C12H7N3O2S 的计算值(m/z)：257，实测值：258[M+1]+。

3-(噻唑并[4，5-c]吡啶-2-基)苯胺的制备：

将2-(3-硝基苯基)噻唑并[4，5-c]吡啶(1.53g，5.9mmol)、NH4Cl(2.76g， 51.6mmol)、铁粉(1.80g，32.2mmol)、H2O(30mL)和甲醇(120mL)的混合 物在N2下加热至回流，保持5.5小时。将混合物过滤，并将滤液用H2O(400mL) 稀释。过滤收集沉淀，真空干燥得到3-(噻唑并[4，5-c]吡啶-2-基)苯胺的棕色固体 (841mg，63％)。1HNMR(400MHz，DMSO-d6)δ：9.28(1H，s)；8.52(1H，s)； 8.21(1H，s)；7.23-7.38(3H，d)，6.79(1H，s)，5.51(2H，s)；MS(ESI)：对于C12H9N3S 的计算值(m/z)：227，实测值：228[M+H]P。

制备化合物272、273、400、401、402和403的一般步骤：

使用3-(噻唑并[4，5-c]吡啶-2-基)苯胺作为起始原料和适当的酰氯，采用与上 述制备化合物343所用步骤基本相同的步骤制备。

N-(4-羟基吡啶-3-基)-4-硝基苯甲酰胺的制备：

于0℃向3-氨基-4-羟基吡啶(3.4g，30.9mmol)的吡啶(51.0mL)溶液中 滴加对-硝基苯甲酰氯(4.8g，25.7mmol)的吡啶(77.0ml)溶液，搅拌过夜。 加入Na2CO3(1.7g)的水(65mL)溶液，将所得混合物搅拌1小时。反应混合 物用10％AcOH中和。过滤收集沉淀，用10％AcOH洗涤，真空干燥(50℃)得 到N-(4-羟基吡啶-3-基)-4-硝基苯甲酰胺的淡绿色固体(4.1g，收率62％)。1HNMR (400MHz，DMSO-d6)δ：11.64(1H，br s)，9.57(1H，s)，9.07(1H，s)，8.75(1H，d，J＝ 4.4Hz)，8.36(1H，d，J＝8.8Hz)，8.20(1H，d，J＝8.8Hz)，7.74(1H，d，J＝4.4Hz)， 6.33(1H，s)；MS(ESI)：对于C12H9N3O的计算值(m/z)：211，实测值：212[M+1]+。

2-(4-硝基苯基)噁唑并[4，5-c]吡啶的制备：

将N-(4-羟基吡啶-3-基)-4-硝基苯甲酰胺(2.59g，10.0mmol)和聚磷酸(20mL) 的溶液于140℃搅拌6小时。将反应混合物倾入蒸馏水(200mL)中，加入氢氧 化钠至pH＝5。过滤收集沉淀，水洗至中性，真空干燥得到2-(4-硝基苯基)噁唑 并[4，5-c]吡啶的黄色固体(2.261g，收率94％)。MS(ESI)：对于C12H7NO3的计 算值(m/z)：241，实测值：242[M+1]+。

4-(噁唑并[4，5-c]吡啶-2-基)苯胺的制备：

将2-(4-硝基苯基)噁唑并[4，5-c]吡啶(2.261g，9.3mmol)、铁粉(2.814g， 48.0mmol)和NH4Cl(4.314g，80.1mmol)在CH3OH/H2O(4∶1，469mL)中回 流6小时。将混合物过滤，并将滤液真空蒸发。残余物用硅胶色谱以石油醚∶乙 酸乙酯∶Et3N＝160∶40∶1洗脱纯化得到4-(噁唑并[4，5-c]吡啶-2-基)苯胺的黄色固 体(1.215g，收率62％)。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ：6.11(2H，s)，6.69(2H， d，J＝8.4Hz)，7.75(1H，d，J＝5.6Hz)，7.87(2H，d，J＝8.4Hz)，8.46(1H，d，J＝5.6 Hz)，8.94(1H，s)；MS(ESI)：对于C12H9N3O的计算值(m/z)：211，实测值：212 [M+1]+。

制备化合物339、340、341、342、449、410、411和412的一般步骤：

化合物339、340、341、342、449、410、411和412是使用4-(噁唑并[4，5-c] 吡啶-2-基)苯胺为起始原料和适当的酰氯，采用如前所述制备化合物343基本上 相同的步骤制备的。

2-(4-硝基苯基)噻唑并[4，5-c]吡啶的制备：

将N-(4-羟基吡啶-3-基)-4-硝基苯甲酰胺(5.18g，0.02mol)和P2S5(8.90g， 0.04mol)在吡啶(25mL)和对-二甲苯(100mL)中的混合物于140℃搅拌18 小时。趁热在真空下除去溶剂，残余物由EtOH重结晶纯化得到2-(4-硝基苯基) 噻唑并[4，5-c]吡啶的黄色固体(3.00g，收率59％)。MS(ESI)：对于C12H7N3O2S 的计算值(m/z)：257，实测值：258[M+1]+。

4-(噻唑并[4，5-c]吡啶-2-基)苯胺的制备：

将2-(4-硝基苯基)噻唑并[4，5-c]吡啶(2.57g，0.01mol)、铁粉(2.8g，0.05mmol) 和NH4Cl(4.32g，0.08mol)在CH3OH/H2O(4∶1，200mL)中回流6小时。将混 合物过滤，并将滤液真空蒸发。残余物用水(30mL)洗涤得到4-(噻唑并[4，5-c] 吡啶-2-基)苯胺的白色固体(1.37g，收率60％)。

制备化合物322、323、324、325、409和450的一般步骤：

使用4-(噁唑并[4，5-c]吡啶-2-基)苯胺作为起始原料和适当的酰氯，通过如前 所述制备化合物343基本上相同的步骤制备化合物322、323、324、325、409 和450。

N-(4-羟基吡啶-3-基)-5-硝基噻吩-2-甲酰胺的制备：

将5-硝基噻吩-2-甲酸(5.000g，28.9mmol)在SOCl2(40mL)中的混合物 回流2小时。真空蒸发过量的SOCl2，滴加3-氨基-4-羟基吡啶(2.65g，24.1mmol) 的吡啶(150mL)溶液。反应混合物于10℃搅拌过夜。加入Na2CO3(1.533g， 14.5mmol)的水溶液(100mL)，将所得混合物再搅拌小时。过滤收集沉淀，用 10％Na2CO3(120mL)洗涤，真空干燥得到N-(4-羟基吡啶-3-基)-5-硝基噻吩-2- 甲酰胺的黄色粉末(5.87g，收率92％)。

2-(5-硝基噻吩-2-基)噁唑并[4，5-c]吡啶的制备：

将N-(4-羟基吡啶-3-基)-5-硝基噻吩-2-甲酰胺(2.385g，9.0mmol)的聚磷酸 (18mL)溶液于140℃搅拌6小时。将反应混合物倾入蒸馏水中，加入氢氧化 钠至pH＝5。过滤收集沉淀，水洗至中性，干燥得到2-(5-硝基噻吩-2-基)噁唑并 [4，5-c]吡啶的黄色固体(1.775g，收率80％)。MS(ESI)：对于C10H5N3O3S的 计算值(m/z)：247，实测值：248[M+1]+。

5-(噁唑并[4，5-c]吡啶-2-基)噻吩-2-胺的制备：

将2-(5-硝基噻吩-2-基)噁唑并[4，5-c]吡啶(1.775g，7.2mmol)、铁粉(2.108g， 36.0mmol)和NH4Cl(3.081g，57.6mmol)在CH3OH/H2O(4∶1，360mL)中回流 6小时。将混合物过滤，并将滤液真空蒸发。残余物用硅胶色谱以石油醚∶乙酸 乙酯∶Et3N＝160∶40∶1洗脱纯化得到5-(噁唑并[4，5-c]吡啶-2-基)噻吩-2-胺的黄色 固体(1.1g，收率70％)。1HNMR(400MHz，DMSO-d6)δ：8.83(1H，s)，8.41(1H， d，J＝4.8Hz)，7.67(1H，d，J＝4.8Hz)，7.57(1H，d，J＝4.4Hz)，6.91(2H，s)，6.03 (1H，d，J＝4.4Hz)；MS(ESI)：对于C10H7N3OS的计算值(m/z)：217，实测值：218 [M+1]+。

化合物422、423、424、425、426、427和428的制备：

使用5-(噁唑并[4，5-c]吡啶-2-基)噻吩-2-胺作为起始原料和适当的酰氯，通过 如前所述制备化合物343基本上相同的步骤制备化合物422、423、424、425、 426、427和428。

2-(5-硝基噻吩-2-基)噻唑并[4，5-c]吡啶的制备：

将化合物17(1.97g，7.43mmol)和P2S5(3.30g，15mmol)在吡啶(30mL) 和对-二甲苯(120mL)中的混合物于140℃搅拌18小时。趁热在真空下除去溶 剂，残余物由EtOH重结晶纯化得到化合物21的黄色固体(700mg，收率35％， Lot#：MC0052-050-21)。MS(ESI)：对于C10H5N3O2S2的计算值(m/z)：263，实 测值：264.1[M+1]+。

5-(噻唑[4，5-c]吡啶-2-基)噻吩-2-胺的制备：

将化合物21(700mg，2.66mmol)、铁粉(745mg，13.30mmol)和NH4Cl(1.36g， 22mmol)在CH3OH/H2O(4∶1，150mL)中回流6小时。将混合物过滤，并将 滤液真空蒸发。将残余物用水(30mL)洗涤，干燥得到化合物22的黄色固体 (306mg，收率50％)。

化合物515、516、517、518、519和520的制备：

使用5-(噁唑并[4，5-c]吡啶-2-基)噻吩-2-胺作为起始原料和适当的酰氯，通过 如前所述制备化合物343基本上相同的步骤制备化合物515、516、517、518、 519和520。

N-(3-羟基吡啶-4-基)-3-甲基苯甲酰胺的制备：

根据Journal ofOrganic Chemistry(1995)，p.5721中所述的步骤，制备3-氨基 -4-羟基吡啶。于10℃向3-氨基-4-羟基吡啶(2.481g，21.6mmol)的吡啶(40mL) 溶液中滴加3-硝基苯甲酰氯(3.10g，16.7mmol)的吡啶(50mL)溶液，将所 得混合物搅拌过夜。加入Na2CO3(1.0g)，将混合物再搅拌1小时。过滤收集沉 淀，用10％醋酸(30mL×3)和水(30mL×3)洗涤，真空干燥得到N-(3-羟基吡 啶-4-基)-3-甲基苯甲酰胺的黄色固体(1.057g，收率43％)。

2-(3-硝基苯基)噁唑并[5，4-c]吡啶的制备：

将N-(3-羟基吡啶-4-基)-3-甲基苯甲酰胺(1.30g，5mmol)的聚磷酸(7.5mL) 溶液于150℃搅拌6小时。将反应混合物倾入蒸馏水中，加入氢氧化钠至pH＝5。 过滤收集沉淀，水洗至中性，真空烘箱(50℃)干燥得到2-(3-硝基苯基)噁唑并 [5，4-c]吡啶的黄色固体(1.120g，收率93％)。

3-(噁唑并[5，4-c]吡啶-2-基)苯胺的制备：

将2-(3-硝基苯基)噁唑并[5，4-c]吡啶(1.20g，5mmol)、铁粉(1.40g，25mmol) 和NH4Cl(2.14g，40mmol)在CH3OH/H2O(4∶1，60mL)中的混悬液回流6小 时。将反应混合物过滤，并将滤液真空蒸发。将残余物倾入水中。过滤收集沉 淀，用水(20mL×3)洗涤得到3-(噁唑并[5，4-c]吡啶-2-基)苯胺的白色固体(0.330g， 收率31％)。

化合物429、430、431、451、452、453和454的制备：

使用3-(噁唑并[5，4-c]吡啶-2-基)苯胺作为起始原料和适当的酰氯，通过如前 所述制备化合物343基本上相同的步骤制备化合物429、430、431、451、452、 453和454。

N-(3-羟基吡啶-4-基)-4-硝基苯甲酰胺的制备：

于10℃向4-氨基-3-羟基吡啶(2.5g，22.7mmol)的吡啶(88mL)溶液中滴 加对-硝基苯甲酰氯(4.8g，25.7mmol)的吡啶(50mL)溶液，在室温下搅拌 过夜。向反应混合物中加入Na2CO3(1.1g，10.4mmol)的水(10mL)溶液，搅 拌1小时。加入10％AcOH中和溶液。过滤收集沉淀，用10％AcOH洗涤，干 燥得到N-(3-羟基吡啶-4-基)-4-硝基苯甲酰胺的黄色粉末(2.27g，收率52％)。 MS(ESI)：对于C12H9N3O4的计算值(m/z)：259，实测值：260[M+H]+。

2-(4-硝基苯基)噁唑并[5，4-c]吡啶的制备：

将N-(3-羟基吡啶-4-基)-4-硝基苯甲酰胺(260mg，1mmol)和聚磷酸(1.5mL) 的混合物于150℃搅拌6小时。将反应混合物倾入水中，加入氢氧化钠至pH＝5。 过滤收集沉淀，水洗至中性，干燥得到2-(4-硝基苯基)噁唑并[5，4-c]吡啶的棕色 固体(177mg，收率73％)。1HNMR(400MHz，DMSO-d6)δ：9.21(1H，s)，8.62(1H， d，J＝4.8Hz)，8.51(4H，d，J＝18，8.8Hz)，7.95(1H，d，J＝5.2Hz)。

4-(噁唑并[5，4-c]吡啶-2-基)苯胺的制备：

将2-(4-硝基苯基)噁唑并[5，4-c]吡啶(610mg，2.5mmol)、NH4Cl(1.2g， 22.4mmol)、铁粉(0.76g，13.6mmol)、H2O(13mL)和甲醇(51mL)的混合 物在N2下加热至回流，保持6小时。将混合物真空浓缩，用硅胶色谱纯化(以 EA/PE＝3∶1洗脱)得到4-(噁唑并[5，4-c]吡啶-2-基)苯胺的淡棕色粉末(340mg， 收率64％)。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ：8.95(1H，s)；8.46(1H，d，J＝5.2)；7.92 (2H，d，J＝8.8)；7.69(1H，d，J＝5.6)，6.71(2H，d，J＝8.8)，6.19(2H，s)；MS(ESI)：对于 C12H9N3O的计算值(m/z)：211，实测值：212[M+H]+。

化合物408和419的制备：

使用4-(噁唑并[5，4-c]吡啶-2-基)苯胺作为起始原料和适当的酰氯，通过如前 所述制备化合物343基本上相同的步骤制备化合物408和419。

N-(3-羟基吡啶-4-基)-5-硝基噻吩-2-甲酰胺的制备：

将5-硝基噻吩-2-甲酸(5.0g，28.9mmol)和SOCl2(40mL)的溶液回流2 小时。真空除去溶剂，然后加入4-氨基-3-羟基吡啶(2.65g，24.1mmol)的吡啶 (150mL)溶液。反应混合物于10℃搅拌过夜。加入Na2CO3(1.53g，14.5mmol) 的水(100mL)溶液，搅拌1小时，然后加入AcOH调pH＝7。过滤收集沉淀， 用10％AcOH(30mL×2)洗涤，干燥得到N-(3-羟基吡啶-4-基)-5-硝基噻吩-2- 甲酰胺的黄色粉末(5.0g，收率78％)。

2-(5-硝基噻吩-2-基)噁唑并[5，4-c]吡啶的制备：

向搅拌的N-(3-羟基吡啶-4-基)-5-硝基噻吩-2-甲酰胺(1.1g，4.1mmol)的吡 啶(5mL)溶液中加入P2O5(1.2g，8.3mmol)和对-二甲苯(21mL)。于160℃ 回流过夜后，将反应混合物在真空下浓缩，残余物由硅胶色谱以5％乙酸乙酯的 CH2Cl2溶液洗脱得到2-(5-硝基噻吩-2-基)噁唑并[5，4-c]吡啶的棕色固体(174mg， 收率17％)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ：8.97(1H，s)；8.59(1H，d，J＝5.6)；7.94 (1H，d，J＝4.4)；7.86(1H，d，J＝4.4)，7.69(1H，d，J＝5.6，0.8)。

5-(噁唑并[5，4-c]吡啶-2-基)噻吩-2-胺的制备：

将2-(5-硝基噻吩-2-基)噁唑并[5，4-c]吡啶(170mg，0.69mmol)、 NH4Cl(199mg，3.73mmol)、铁粉(328mg，5.87mmol)、H2O(10mL)和甲醇 (40mL)的混合物在N2下加热至回流，保持6小时。将混合物真空浓缩，然 后加入100mL水，置于4℃过夜。过滤收集固体，干燥得到5-(噁唑并[5，4-c]吡 啶-2-基)噻吩-2-胺的棕色固体(52mg，35％)。1HNMR(400MHz，DMSO-d6)δ：8.84 (1H，s)；8.40(1H，d，J＝5.2)；7.64(1H，d，J＝4)；7.57(1H，d，J＝5.2)，7.06(2H，s)，1.09 (1H，d，J＝4.4)。

化合物561、562和563的制备：

使用5-(噁唑并[5，4-c]吡啶-2-基)噻吩-2-胺作为起始原料和适当的酰氯，通过 如前所述制备化合物343基本上相同的步骤制备化合物561、562和563。

2-(噁唑并[4，5-c]吡啶-2-基)苯胺的制备：

将3-氨基-4-羟基吡啶(2.225g，20.0mmol)和2-氨基苯甲酸(2.740g， 20.0mmol)在聚磷酸(40mL)中于140℃搅拌6小时。将反应混合物倾入蒸馏 水中，加入氢氧化钠至pH＝8。过滤收集沉淀，粗产物用硅胶色谱以石油醚∶乙 酸乙酯∶Et3N(160∶40∶1)洗脱纯化得到2-(噁唑并[4，5-c]吡啶-2-基)苯胺(1.659g， 收率39％)。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ：6.68(1H，t，J＝7.6Hz)，6.93(1H，d，J ＝8.0Hz)，7.17(2H，s)，7.30(1H，t，J＝7.6Hz)，7.83(1H，d，J＝5.6Hz)，7.90(1H，d， J＝8.0Hz)，8.55(1H，d，J＝5.6Hz)，9.05(1H，s)；MS(ESI)：对于C12H9N3O的计算 值(m/z)：211，实测值：212[M+1]+。

化合物404、405、406、407、420和421的制备：

使用2-(噁唑并[4，5-c]吡啶-2-基)苯胺作为起始原料和适当的酰氯，通过如前 所述制备化合物343相同的步骤制备化合物404、405、406、407、420和421。

2-(2-硝基苯基)噻唑并[4，5-c]吡啶的制备：

使用4-羟基-3-氨基吡啶和2-硝基苯甲酰氯，采用如前所述类似的步骤制备 N-(4-羟基-吡啶-3-基)-2-硝基-苯甲酰胺。将-(4-羟基-吡啶-3-基)-2-硝基-苯甲酰胺 (2.6g，0.01mol)和P2S5(4.44g，0.02mol)在吡啶(12.5mL)和对-二甲苯(50mL) 中的混合物于140℃搅拌18小时。真空除去溶剂，残余物通过重结晶纯化得到 2-(2-硝基苯基)噻唑并[4，5-c]吡啶的黄色固体(1.43g，收率55％)。

2-噻唑并[4，5-c]吡啶-2-基-苯胺的制备：

将2-(2-硝基苯基)噻唑并[4，5-c]吡啶(1.170g，4.6mmol)、Fe粉(1.26g， 22.8mmol)和NH4Cl(1.97g，36.8mol)在CH3OH∶H2O(4∶1，80mL)中的混悬 液回流6小时。将混合物过滤，真空蒸发滤液。将残余物倾入水中。过滤收集 沉淀，用水(20mL×3)洗涤，得到2-噻唑并[4，5-c]吡啶-2-基-苯胺的黄色固体 (0.760g，收率73％)。

化合物317、318、319、320、321和349的制备：

使用2-(2-硝基苯基)噻唑并[4，5-c]吡啶作为起始原料和适当的酰氯，通过如 前所述制备化合物343的基本上相同的步骤制备化合物317、318、319、320、 321和349。

2-(噁唑并[5，4-c]吡啶-2-基)苯胺的制备：

将在聚磷酸(40mL)中的3-羟基-4-氨基吡啶(2.220g，20.0mmol)和2- 氨基苯甲酸(2.740g，20.0mmol)于140℃搅拌6小时。将反应混合物倾入蒸馏 水中，加入氢氧化钠至pH＝8。过滤收集沉淀，进一步用硅胶色谱以石油醚∶乙 酸乙酯∶Et3N(160∶40∶1)洗脱纯化，得到2-(噁唑并[5，4-c]吡啶-2-基)苯胺的黄色 固体(1.332g，收率31％)。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ：6.70(1H，t，J＝6.8Hz)， 6.94(1H，d，J＝8.4Hz)，7.20(2H，s)，7.33(1H，t，J＝6.8Hz)，7.80(1H，d，J＝5.6Hz)， 7.95(1H，d，J＝8.4Hz)，8.53(1H，d，J＝5.6Hz)，9.05(1H，s)；MS(ESI)：对于 C12H9N3O的计算值(m/z)：211，实测值：212[M+1]+。

化合物455、456、457、458和459的制备：

使用2-(噁唑并[5，4-c]吡啶-2-基)苯胺作为起始原料和适当的酰氯，通过如前 所述制备化合物343的基本上相同的步骤制备化合物455、456、457、458和459。

N-(2-氯-5-甲基吡啶-3-基)-2-硝基苯甲酰胺的制备：

于0℃向5-氨基-6-氯-3-甲基吡啶(9.54g，66.9mmol)的吡啶(200mL)溶 液中滴加2-硝基苯甲酰氯(13.65g，73.6mmol)。反应混合物在室温下搅拌18 小时。然后将深色混合物用水(1500mL)稀释，加入饱和碳酸氢钠溶液至pH＝8。 过滤收集固体，用水(30mL×3)冲洗，在烘箱中干燥得到N-(2-氯-5-甲基吡啶 -3-基)-2-硝基苯甲酰胺的淡白色固体(17.70g，收率91％)。

6-甲基-2-(2硝基苯基)噻唑并[5，4-b]吡啶的制备：

将N-(2-氯-5-甲基吡啶-3-基)-2-硝基苯甲酰胺(5.0g，17.1mmol)和P2S5(7.6g， 34.2mmol)在吡啶(50mL)和对-二甲苯(200mL)中的混合物于140℃搅拌20 小时。将热溶液转移至另一烧瓶中，真空除去溶剂。残余物由EtOH重结晶纯 化得到6-甲基-2-(2硝基苯基)噻唑并[5，4-b]吡啶的黄色固体(3.5g，收率75％)。

6-(溴甲基)-2-(2-硝基苯基)噻唑并[5，4-b]吡啶的制备：

将6-甲基-2-(2硝基苯基)噻唑并[5，4-b]吡啶(2.9g，10.7mmol)、N-溴代琥珀 酰亚胺(NBS，1.91g，10.7mmol)、CCl4(200mL)和过氧化苯甲酰(0.021g) 在氩气下加入三颈瓶(500mL)中。将所得黄色混合物回流2小时。再加入NBS (1.91g)和过氧化苯甲酰(0.021g)。两小时后，再加入NBS(0.95g)和过氧 化苯甲酰(0.021g)，将混合物继续回流3小时。然后将混合物冷却至室温。将 溶液转移至另一烧瓶中，真空浓缩得到6-(溴甲基)-2-(2-硝基苯基)噻唑并[5，4-b] 吡啶粗品(4.0g)，将其直接用于下一步骤。

4-((2-(2-硝基苯基)噻唑并[5，4-b]吡啶-6-基)甲基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯的制备：

将6-(溴甲基)-2-(2-硝基苯基)噻唑并[5，4-b]吡啶粗品(4.0g)、BOC-哌嗪 (1.99g，10.7mmol)、Et3N(1.5mL，10.7mmol)和乙腈(100mL)的溶液于50℃ 搅拌4小时，然后于室温下搅拌60小时。TLC检测反应完全。将混合物真空浓 缩，用硅胶色谱纯化(石油醚∶乙酸乙酯∶Et3N＝100∶10∶1)得到4-((2-(2-硝基苯基) 噻唑并[5，4-b]吡啶-6-基)甲基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯的黄色固体(3.6g，两步收率74 ％)。

4-((2-(2-氨基苯基)噻唑并[5，4-b]吡啶-6-基)甲基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯的制备：

将4-((2-(2-硝基苯基)噻唑并[5，4-b]吡啶-6-基)甲基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯 (2.13g，4.7mmol)、NH4Cl(2.00g，37mmol)、铁粉(1.31g，23.5mmol)、H2O (40mL)和甲醇(160mL)的混合物在N2下回流3小时。将反应混合物过滤， 滤液在真空下浓缩，用硅胶色谱纯化(石油醚∶乙酸乙酯∶Et3N＝800∶200∶1)得到 4-((2-(2-氨基苯基)噻唑并[5，4-b]吡啶-6-基)甲基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯的黄色固体 (1.63g，收率81％)。

制备化合物588、589、590、591、592、593、594、622、646、681、682、683、 684、685、686、687、688、689、701、702、722、723、724、725、730、731 和732的一般步骤：

将氨基骨架(4-((2-(2-氨基苯基)噻唑并[5，4-b]吡啶-6-基)甲基)哌嗪-1-甲酸叔 丁酯，各0.141mmol)和适当酰氯(0.17mmol)在吡啶(2mL)中的混合物于 室温摇动过夜。然后将反应混合物用饱和NaHCO3(各5mL)稀释。过滤收集 沉淀，用MeOH(5mL)研磨，干燥得到Boc保护的库化合物，将其以HPLC& MS分析。对于那些纯度低于95％的Boc保护的库化合物，将这些化合物进一 步通过硅胶垫以石油醚/EtOAc洗脱进行纯化。

将Boc保护的化合物溶解于25％TFA/CH2Cl2溶液(1或2mL)中，在室温 下摇动，用TLC或LC/MS检测。然后将混合物于真空下浓缩，用CH2Cl2 (1.0mL×2)于真空下共蒸发，得到期望产物的TFA盐，将其通过1H NMR、 HPLC和MS分析。

化合物690、726、727、728和729的制备：

除了使用3-氨基-2-羟基-6-甲基吡啶作为起始原料外，通过与制备化合物 646所述步骤基本上相同的步骤制备化合物690、726、727、728和729。 制备化合物240、608、241、221、280、222、223、225、244、245、246、247、 226、303、238、227、304、228、305、306、307、308、309、310、248、249 和396的一般步骤：

使用3-噻唑并[5，4-c]吡啶-2-基-苯胺作为起始原料和适当的酰氯，通过与如 下所述制备化合物241基本上相同的步骤制备化合物240、608、241、221、280、 222、223、225、244、245、246、247、226、303、238、227、304、228、305、 306、307、308、309、310、248、249和396。

向3-噻唑并[5，4-c]吡啶-2-基苯胺在1.5mL DMF中的混合物中加入在吡啶 (0.25mL)中的5-苯基呋喃-2-碳酰氯(62mg，MW＝206.63，0.3mmol)中。反 应于40℃保持72小时，用TLC检测。在反应结束时加入5mL H2O，将所得混 悬液过滤收集固体，然后将其用水洗涤，干燥。粗产物进一步用制备TLC(丙酮 /石油醚＝1/2)纯化，并用丙酮洗涤，得到白色粉末(43mg，36.1％)。产物经1H NMR确认。1H NMR(DMSO-d6，500MHz)，δ10.50(1H，s)，9.45(1H，s)，8.70(1H， brs)，8.68(1H，d，J＝5.5Hz)，8.13(1H，d，J＝7.8Hz)，8.08(1H，d，J＝5.5Hz)，8.02 (2H，d，J＝7.6Hz)，7.93(1H，d，J＝7.7Hz)，7.63(1H，t，J＝7.9Hz)，7.55(3H，m)， 7.43(1H，t，J＝7.3Hz)，7.23(1H，d，J＝3.4Hz)。EIMS m/z(％)：397.2(M+)。 制备化合物466、398、229、230、282、250、231、399、251、283、232、252、 284、285、287、234、235、236、237、239、289、288、290、655和280的一 般步骤：

使用3-噻唑并[5，4-c]吡啶-2-基-苯胺作为起始原料和适当的磺酰氯，通过如 下所述制备化合物398基本上相同的步骤制备化合物466、398、229、230、282、 250、231、399、251、283、232、252、284、285、287、234、235、236、237、 239、289、288、290、655和280。

将2mL吡啶中的3-噻唑并[5，4-c]吡啶-2-基苯胺(68mg，0.3mmol)在搅拌 下加入丹磺酰氯(81mg，0.3mmol)。反应物于约40℃保持24小时。在真空下 蒸发吡啶，加入水。将所得混悬液过滤，用THF洗涤，得到黄色固体产物(29mg， 21.0％)。1H NMR(DMSO-d6，500MHz)δ9.38(1H，s)，8.64(1H，d，J＝2.8Hz)， 8.45(1H，d，J＝8.5Hz)，8.38(1H，d，J＝8.6Hz)，8.30(1H，d，J＝7.1Hz)，8.03(1H，d，J ＝5.4Hz)，7.87(1H，s)，7.71(1H，d，J＝7.6Hz)，7.64(2H，m)，7.40(1H，t，J＝7.9Hz)， 7.31(1H，d，J＝8.1Hz)，7.26(1H，d，J＝7.6Hz)，2.77(6H，s)。EIMS m/z：460.01(M+， 31)。

制备化合物599、600、498、610、601、611、485、484、481、612、475、473、 472、613和491的一般步骤：

使用3-噻唑并[5，4-c]吡啶-2-基-苯胺作为起始原料和适当的异硫氰酸酯，通 过如下所述制备化合物599基本上相同的步骤制备化合物599、600、498、610、 601、611、485、484、481、612、475、473、472、613和491。

向1mL吡啶中的3-噻唑并[5，4-c]吡啶-2-基苯胺混合物中加入异硫氰酸2，4- 二甲氧基苯基酯(59mg，0.3mmol)。反应物于60℃保持24小时，同时搅拌，用 TLC监测反应。一旦反应完成，就向粗混合物加入5mL H2O，将所得混悬液过 滤收集固体，然后用水洗涤，用制备TLC(丙酮/石油醚＝1/2)纯化。将分离的固体 进一步用丙酮洗涤，风干得到期望的产物38mg(30.3％)。产物经1H NMR确认。 1H NMR(DMSO-d6，500MHz)δ9.40(1H，s)，8.65(1H，d，J＝5.4Hz)，8.55(1H，s)， 8.05(1H，d，J＝5.2Hz)，7.90(1H，d，J＝7.4Hz)，7.77(1H，d，J＝7.7Hz)，7.55(1H，t，J ＝7.8Hz)，7.47(1H，d，J＝6.6Hz)，6.63(1H，s)，6.54(1H，d，J＝7.8Hz)，3.82(3H，s)， 3.77(3H，s)。MS：422.26(M+)。

制备化合物604、605和607的一般步骤：

使用3-噻唑并[5，4-c]吡啶-2-基-苯胺作为起始原料和适当的氯甲酸酯，通过 如下所述制备化合物604基本上相同的步骤制备化合物604、605和607。

向2.5mL吡啶中的3-噻唑并[5，4-c]吡啶-2-基苯胺(68mg，0.3mmol)混合物 中加入N-甲基-N-苯基氨基甲酰氯(50.7mg，0.3mmol)。反应物于室温保持48 小时。然后向混合物中加入水(5mL)，将所得混悬液过滤。收集的固体进一步 用制备TLC(石油醚/丙酮＝2/1)纯化。产物经1H NMR确认。1H NMR(500MHz，丙 酮-d6)δ9.34(1H，s)，8.66(1H，d，J＝5.3Hz)，8.43(1H，s)，7.97(1H，d，J＝5.4Hz)， 7.79(2H，d，J＝7.9Hz)，7.74(1H，d，J＝8.1Hz)，7.50(2H，t，J＝8.1Hz)，7.44(2H，d， J＝8.0Hz)，7.37(1H，d，J＝7.2Hz)，3.36(3H，s)。

制备化合物387、609、390、391、462、392、393、436、461、460、596、465 和463的一般步骤：

使用2-噻唑并[5，4-c]吡啶-2-基-苯胺作为起始原料和适当的酰氯，通过如下 所述制备化合物385基本上相同的步骤制备化合物387、609、390、391、462、 392、393、436、461、460、596、465和463。

向1.5mL DMF中的2-噻唑并[5，4-c]吡啶-2-基苯胺混合物中加入在吡啶 (0.25mL)中的5-苯基呋喃-2-碳酰氯(62mg，0.3mmol)。反应物于40℃保持 24小时，同时搅拌，用TLC检测。一旦反应完成，就向粗混合物中加入5mL H2O， 并将所得混悬液过滤收集固体产物，将其随后用水洗涤，干燥。粗产物进一步 通过制备TLC(丙酮/石油醚＝1/2)纯化，得到38mg产物(36.80％)。产物经1H NMR确认：1H NMR(500MHz，DMSO-d6)δ8.44(1H，s)，7.74(4H，d，J＝7.5Hz)， 7.41(4H，t，J＝7.7Hz)，7.29(1H，t，J＝7.4Hz)，6.87(2H，d，J＝3.0Hz)，6.75(2H，d， J＝2.6Hz)。EIMS m/z：397.2(M+)。

化合物162和163的制备：

向微波管形瓶中加入2-噻唑并[5，4-c]吡啶-2-基苯胺(40mg，0.2mmol)、3，4，5- 三甲氧基苯甲酰氯(40.6mg，0.2mmol)和1mL吡啶。将混合物在160℃下进行 微波辐射10分钟。冷却后立即向溶液中加入MeOH，致使沉淀形成。过滤固体， 用MeOH洗涤，干燥得到期望的酰胺产物(对于C21H17N3O3S的计算值：391.45， [M+H]+实测值：392.1)。

制备化合物467、394和469的一般步骤：

使用2-噻唑并[5，4-c]吡啶-2-基-苯胺作为起始原料和适当的磺酰氯，通过如 下所述制备化合物467基本上相同的步骤制备化合物467、394和469。

向2-噻唑并[5，4-c]吡啶-2-基苯胺(71mg，0.3mmol)在1mL THF中的混合物 中于室温边搅拌边加入2mL吡啶中的SM2(68mg，0.3mmol)。反应物于60℃油 浴中保持2天，用TLC监测至起始原料消失。随后加入5mL水，将所得混悬液过 滤，收集粗产物，将其通过丙酮洗涤，得到细的黄色粉末13mg(10.2％)。

1H NMR(500MHz，DMSO-d6)δ9.43(1H，s)，8.70(1H，d，J＝5.5Hz)，8.12 (1H，d，J＝5.4Hz)，8.04(1H，d，J＝7.6Hz)，7.58(1H，t，J＝7.5Hz)，7.45(1H，d，J＝ 8.1Hz)，7.38(1H，t，J＝7.1Hz)，7.17(1H，d，J＝8.3Hz)，7.00(1H，s)，6.90(1H，d，J＝ 8.4Hz)，3.71(3H，s)，3.46(3H，s)。EIMS m/z：427.17(M+，10)。

制备化合物614、615和616的一般步骤：

使用2-噻唑并[5，4-c]吡啶-2-基-苯胺作为起始原料和适当的异硫氰酸酯，通 过如下所述制备化合物614基本上相同的步骤制备化合物614、615和616。

向2-噻唑并[5，4-c]吡啶-2-基苯胺(68mg，0.3mmol)、异硫氰酸4-(1H-吡唑-1- 基)苯基酯(60mg，0.3mmol)和催化量DMAP的混合物中加入8mL乙醇。反应 物于50℃保持48小时。将混悬液过滤，用丙酮彻底洗涤，得到10mg产物(7％)。 1H NMR(500MHz，DMSO-D6)δ9.43(1H，s)，8.58(1H，d，J＝5.5Hz)，8.47(1H，m)， 8.21(1H，d，J＝7.9Hz)，8.19(1H，d，J＝7.4Hz)，7.85(2H，d，J＝8.9Hz)，7.80(1H，d，J ＝8.9Hz)，7.75(1H，d，J＝6.7Hz)，7.68(2H，m)，7.61(1H，m)，7.46(1H，m)，6.55(1H， m)。

制备化合物597的一般步骤：

使用2-噻唑并[5，4-c]吡啶-2-基-苯胺作为起始原料和适当的氯甲酸酯，通过如 下所述制备化合物597基本上相同的步骤制备化合物597。

向2.5mL吡啶中的2-噻唑并[5，4-c]吡啶-2-基苯胺(68mg，0.3mmol)中加入 氯甲酸4-甲氧基苯基酯(56mg，0.3mmol)，将混合物于室温下搅拌24小时。加 入水(5mL)，将所得混合物过滤。将收集的粗产物用水洗涤，干燥得到11mg (12％)。1H NMR(500MHz，丙酮-d6)δ9.27(1H，s)，8.73(1H，d，J＝5.5Hz)，8.62 (1H，d，J＝8.4Hz)，8.02(1H，d，J＝5.5Hz)，7.98(1H，d，J＝7.8Hz)，7.58(1H，m)， 7.23(3H，m)，6.97(2H，d，J＝8.9Hz)，3.87(3H，s)。

3-(5-二甲氨基甲基-噁唑并[4，5-b]吡啶-2-基)-苯胺的制备：

将5-溴甲基-2-(3-硝基-苯基)-噁唑并[4，5-b]吡啶(250mg，0.75mmol)与3mL 2M二甲胺的THF溶液一起溶解于5mL CH3CN中。反应混合物在室温下搅拌 18小时。然后将其浓缩，将所得残余物与25mLCH2Cl2混合，用盐水洗涤。将 有机层干燥(Na2SO4)，浓缩得到基本上定量收率的硝基中间体。将其与200mg 硫化氢钠水合物一起同6mL MeOH和2mL水混合。反应混合物在回流下搅拌1 小时。然后将其冷却至室温，浓缩至干。将所得残余物与100mL 9∶1 CH2Cl2/MeOH混合物混合，过滤。将滤液浓缩得到120mg 3-(5-二甲氨基甲基- 噁唑并[4，5-b]吡啶-2-基)-苯胺(MS，M++H＝269)。

化合物165的制备：

使3-(5-二甲氨基甲基-噁唑并[4，5-b]吡啶-2-基)-苯胺(54mg，0.2mmol)与 在1mL吡啶中的3-二甲氨基苯甲酰氯使用如前所述相同的微波条件反应。将反 应混合物冷却至室温，浓缩。使用用1％三乙胺缓冲的9∶1CH2Cl2/MeOH混合 物，通过色谱纯化得到7mg期望的产物(MS，M++H＝416)。

3-(5-甲基-噁唑并[4，5-b]吡啶-2-基)-苯胺的制备：

将5-甲基-2-(3-硝基-苯基)噁唑并[4，5-b]吡啶(50mg，0.196mmol)与2mL 水和66mg氢硫化钠水合物一起同6mL MeOH混合。反应混合物在回流下搅拌 2小时。然后将其浓缩，用CH2Cl2萃取。合并有机层，干燥(Na2SO4)，浓缩 得到20mg 3-(5-甲基-噁唑并[4，5-b]吡啶-2-基)-苯胺。

化合物167的制备：

使3-(5-甲基-噁唑并[4，5-b]吡啶-2-基)-苯胺(20mg，0.0889mol)与在1mL 吡啶中的3-二甲氨基苯甲酰氯按照如前所述相同的微波条件反应。将反应混合 物冷却至室温，浓缩。使用用1％三乙胺缓冲的9∶1 CH2Cl2/MeOH混合物，通 过色谱纯化得到7mg期望的产物(MS，M++H＝373)。

5-(2-硝基-苯基)-噻唑-2-基胺的制备：

以典型方法，将2-氨基-5-溴噻唑单氢溴酸盐(Aldrich，5.00g，0.0192mol) 与40mL甲苯、40mL乙醇和20mL水混合。加入2-硝基苯基硼酸(3.2g，0.0192g) 和2.35g[1，1′-双(二苯基膦基)二茂铁]二氯-钯(II)与CH2Cl2的复合物(1∶1)以 及6.10g无水碳酸钠。反应混合物于90℃搅拌18小时。然后将其冷却至室温，浓 缩。将所得残余物与500mL EtOAc混合，用水(3×50mL)洗涤。过滤有机层， 除去黑色沉淀。将滤液用稀1N HCl萃取。将合并的水层浓缩至近干。将所得残 余物通过制备HPLC，使用已经用0.1％TFA缓冲的乙腈水溶液混合物纯化，得到 108mg 5-(2-硝基-苯基)-噻唑-2-基胺(MS，M++H＝222)。

2-(2-硝基-苯基)-咪唑并[2，1-b]噻唑-6-甲酸乙酯的制备：

将5-(2-硝基-苯基)-噻唑-2-基胺(100mg，0.452mmol)与10mL甲乙酮和1.5 当量溴丙酮酸乙酯混合。反应混合物在回流下搅拌5小时。将反应混合物冷却至 室温，浓缩。粗产物用色谱纯化(Isco，梯度洗脱，CH2Cl2至9∶1 CH2Cl2/MeOH)， 得到60mg 2-(2-硝基-苯基)-咪唑并[2，1-b]噻唑-6-甲酸乙酯(MS，M++H＝318)。

2-(2-氨基-苯基)-咪唑并[2，1-b]噻唑-6-甲酸甲酯的制备：

将2-(2-硝基-苯基)-咪唑并[2，1-b]噻唑-6-甲酸乙酯(60mg，0.189mmol)与在 1mL水中的氢硫化钠水合物(32mg，0.567mmol)一起同3mL MeOH混合。反应 混合物在回流下搅拌1小时，用LC/MS监测。此时硝基基团完全被还原，乙酯基 团转化为相应的甲酯衍生物。将反应混合物冷却至室温，浓缩。水层用CH2Cl2萃 取。合并有机层，干燥(Na2SO4)，浓缩得到基本上定量收率的2-(2-氨基-苯基)- 咪唑并[2，1-b]噻唑-6-甲酸甲酯(MS，M++H＝274)。

化合物703的制备：

将2-(2-氨基-苯基)-咪唑并[2，1-b]噻唑-6-甲酸甲酯(27mg，0.095mmol)与 22mg 3，4，5-三甲氧基苯甲酰氯一起同1mL吡啶混合。反应混合物于160℃在微波 反应器中反应10分钟。然后将其冷却至室温，浓缩。所得粗产物通过制备HPLC， 使用已经用0.1％TFA缓冲的含水乙腈混合物纯化，得到108mg 2-[2-(3，4，5-三甲氧 基苯甲酰氨基)-苯基]-咪唑并[2，1-b]噻唑-6-甲酸甲酯(MS，M++H＝468)。

化合物704的制备：

将2-[2-(3，4，5-三甲氧基苯甲酰氨基)-苯基]-咪唑并[2，1-b]噻唑-6-甲酸甲酯 (6mg)与1mL THF混合。加入氢氧化钠(10mg)的1mL水溶液。反应混合物 在室温下搅拌4小时，然后浓缩。所得粗产物通过制备HPLC，使用已经用0.1％ TFA缓冲的含水乙腈混合物纯化，得到108mg 2-[2-(3，4，5-三甲氧基苯甲酰氨基)- 苯基]-咪唑并[2，1-b]噻唑-6-甲酸(MS，M++H＝454)。

化合物108的制备：

将4-(3-氨基-5-(噁唑并[4，5-b]吡啶-2-基)苯甲酰基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯 (25mg)用1mL含有25％TFA的CH2Cl2溶液于室温下处理30分钟。然后将其浓 缩，加入Et2O沉淀出产物。真空干燥后，得到期望产物的TFA盐(MS，M++H＝ 324)。

2-(甲硫基)噁唑并[4，5-b]吡啶的制备：

根据Chu-Moyer和Berger(J.Org.Chem.1995，60，5721-5725)的步骤经少数 改进后制备2-(甲硫基)噁唑并[4，5-b]吡啶。向2-氨基-3-羟基吡啶(2.8g，25mmol) 在EtOH(62mL，0.4M)中的混悬液中加入黄原酸乙酯钾(8.0g，50mmol，2当 量)。将反应混合物加热至回流(78℃)，搅拌18小时。将反应混合物浓缩至干， 并将所得残余物产物溶解于水(70mL)中。用冰醋酸酸化至pH5后即有大量固体 析出。过滤混悬液，用水洗涤(3x)，于高真空管中干燥过夜，得到2-硫代噁唑 并[4，5-b]吡啶的棕色固体(3.3g，21.6mmol，86％)。

向0℃冷却的2-硫代噁唑并[4，5-b]吡啶(3.3g，21.6mmol)的DMF(54mL， 0.4M)溶液中加入K2CO3(3.0g，21.6mmol)和碘甲烷(1.6mL，25.9mmol)。 于0℃搅拌2.5小时后，将反应混合物用水(60mL)稀释，用Et2O(3×100mL) 萃取。合并有机层，用水和盐水洗涤，干燥(MgSO4)，过滤，浓缩。用二氧化 硅(0％至10％MeOH/CH2Cl2)纯化，得到2-(甲硫基)噁唑并[4，5-b]吡啶的褐色固 体(2.5g，14.7mmol，68％)。MS，M++H＝167。

Boc保护的1-噁唑并[4，5-b]吡啶-2-基-哌啶-3-基胺的制备：

根据Chu-Moyer和Berger(J.Org.Chem.1995，60，5721-5725)的步骤经少数 改进后制备1-噁唑并[4，5-b]吡啶-2-基-哌啶-3-基胺。向2-(甲硫基)噁唑并[4，5-b]吡 啶(1.9g，11.4mmol)的甲苯(1.1M)溶液中加入3-Boc-哌啶(2.3g，11.4mmol)。 将反应混合物加热至85℃维持5.5小时，冷却，然后浓缩。将残余物溶解于CH2Cl2 中，过滤，浓缩。用二氧化硅纯化(0％至10％MeOH/CH2Cl2)得到期望产物的 白色固体(2.6g，8.3mmol，73％)。MS，M++H＝319。

间-吡啶基6-(1H-苯并[d]咪唑-2-基)吡啶-2-胺的制备：

将6-氨基吡啶-2-甲酸(1.12g，8.2mmol)与1，2-二氨基苯(1.77mg，16.4mmol) 的混悬液于8mL PPA中，在180度加热2小时。将反应混合物倾入250mL冰水中， 在剧烈搅拌下用2N NaOH(已冷却)中和。过滤所得沉淀，收集灰白色固体， 将其用20mL热水洗涤，干燥，使用9∶1的CH2Cl2∶MeOH混合物，通过色谱纯 化(MS，M++H＝211)。

化合物57的制备：

将间-吡啶基6-(1H-苯并[d]咪唑-2-基)吡啶-2-胺(25mg，0.118mmol)与24mg 2，3，4-三甲氧基苯甲酰氯(0.118mmol)一起同1mL吡啶混合。反应混合物于160℃ 在Biotage微波反应器中反应10分钟。然后将其冷却至室温，浓缩。所得粗产物 通过色谱纯化(Isco，梯度洗脱，CH2Cl2至9∶1CH2Cl2/MeOH)，得到11mg产品 (MS，M++H＝407.1)。

化合物58、59、60、64、69、211和70的制备：

使用适当的芳香族酰氯，与制备化合物57类似地制备这些化合物。反应混 合物于室温搅拌过夜或于160度在Biotage微波反应器中反应10分钟。然后将其冷 却至室温，减压浓缩。所得残余粗产物用乙腈重结晶纯化或通过色谱纯化(Isco， 梯度洗脱，CH2Cl2至9∶1CH2Cl2/MeOH)。

化合物71的制备：

在2mL管形瓶中，将在1mL吡啶中的6-(噁唑并[4，5-b]吡啶-2-基)吡啶-2-胺 (11mg，0.05mmol)加入5-异氰酸根合苯并[d][1，3]间二氧杂环戊烯(9mg， 0.05mmol)。将反应物加热至160℃(MW)，维持10分钟。取等分试样，用MeOH 稀释。真空下除去吡啶。将粗产物悬浮于5mL乙腈中，磁力搅拌半小时，过滤 收集产物，将其随后于真空下干燥(MS，M++H＝376.1)。

化合物72、87和147的制备：

使用适当的芳香族异氰酸酯或异硫氰酸酯，与制备化合物71类似地制备这 些化合物。反应混合物于室温搅拌过夜或于160℃在Biotage微波反应器中反应10 分钟。然后将其冷却至室温，减压浓缩。所得残余粗产物用乙腈重结晶纯化或 通过色谱纯化(Isco，梯度洗脱，CH2Cl2至9∶1 CH2Cl2/MeOH)。

2-(1，4-二氮杂环庚烷-1-基)苯并[d]噁唑的制备：

于室温下在40mL管形瓶中，向高哌嗪(2g，20mmol)的乙腈溶液中加入2- 氯苯并[d]噁唑(760mg，5mmol)。反应混合物逐渐变为混悬液。再放置半小时， 过滤除去固体，将收集的滤液直接用色谱纯化(Isco，梯度洗脱，CH2Cl2至9∶1 CH2Cl2/MeOH)。分离得到420mg期望的产物(MS，M++H＝218.1)。

化合物85的制备：

化合物85获得自如前所述制备-2-(1，4-二氮杂环庚烷-1-基)苯并[d]噁唑的副产 物。获得24mg产物(MS，M++H＝335.1)。

化合物88的制备：

在2mL管形瓶中，向1mL吡啶中的2-(1，4-二氮杂环庚烷-1-基)苯并[d]噁唑 (43mg，0.2mmol)中加入2，4-二甲氧基苯甲酰氯(40mg，mw＝230.6，0.2mmol)。 将反应物加热至160℃(MW)维持10分钟。然后将其冷至室温，浓缩。所得粗 产物通过色谱纯化(Isc0，梯度洗脱，CH2Cl2至9∶1 CH2Cl2/MeOH)，得到60mg 产物(MS，M++H＝382.1)。

化合物89、90和91的制备：

使用适当的芳香族酰氯和异氰酸酯，与制备化合物88类似地制备这些化合 物。反应混合物于室温搅拌过夜或于160℃在Biotage微波反应器中反应10分钟。 然后将其冷却至室温，减压浓缩。所得残余粗产物用乙腈重结晶纯化或用色谱 纯化(Isco，梯度洗脱，CH2Cl2至9∶1 CH2Cl2/MeOH)。

化合物92的制备：

在2mL管形瓶中，向2mL CH3CN中的2-氯苯并[d]噁唑(51mg，0.33mmol) 中加入3-(2-甲基噻唑-4-基)苯胺(95mg，0.5mmol，1.5当量)。将反应物加热至 160℃(MW)维持10分钟。然后将其冷却至室温，浓缩。所得粗产物用色谱纯 化(Isco，梯度洗脱，CH2Cl2至9∶1 CH2Cl2/MeOH)，得到71mg产物(MS，M++H ＝308.1)。

化合物93、94、95、104和105的制备：

与制备化合物92类似，使用3-(2-甲基噻唑-4-基)苯胺或6-(噁唑并[4，5-b]吡啶 -2-基)吡啶-2-胺或6-(噁唑并[4，5-b]吡啶-2-基)吡啶-2-胺与2-氯苯并[d]噁唑或2-氯 苯并[d]噻唑反应制备这些化合物。反应混合物于160℃在Biotage微波反应器中反 应10分钟。然后将其冷却至室温，减压浓缩。所得残余粗产物用乙腈重结晶纯 化或用色谱纯化(Isco，梯度洗脱，CH2Cl2至9∶1 CH2Cl2/MeOH)。

化合物142的制备：

以典型方法，向3，4-二甲氧基苯甲酰氯(100mg，mw＝200，0.5mmol)中加 入在5mL吡啶中的2-(1H-苯并[d]咪唑-2-基)苯胺(105mg，0.5mmol)。反应物于 室温下保持过夜，同时搅拌。然后除去吡啶，向粗混合物中加入5mL MeOH。 所得混悬液搅拌半小时后即过滤收集灰白色固体，然后将其用MeOH洗，减压 干燥。TLC/HPLC/LC-质谱显示，该产品的纯度大于95％(MS，M++H＝374.1)。

3-(1H-苯并[d]咪唑-2-基)吡啶-2-胺的制备：

将2-氨基吡啶-3-甲酸2-氨基烟酸(1.12g，8.2mmol)与1，2-二氨基苯(1.77mg， 16.4mmol)的混悬液于8mL PPA中，在180度下加热2小时。将反应混合物倾入 250mL冰水中，在剧烈搅拌下用2N冰冷的NaOH中和。过滤所得沉淀，用20mL 热水洗涤，得到1.1克纯的相应3-(1H-苯并[d]咪唑-2-基)吡啶-2-胺(MS，M++H＝ 211.1)。

6-(1H-苯并[d]咪唑-2-基)吡啶-2-胺的制备：

将6-氨基吡啶-2-甲酸(112mg)或2-氨基吡啶-4-甲酸(112mg，0.82mmol) 或5-氨基吡啶-3-甲酸(112mg，0.82mmol)与1，2-二氨基苯(177mg，1.64mmol) 的混悬液于4mL PPA中加热(180度)2小时。将反应混合物各自倾入50mL冰水 中，在剧烈搅拌下用2NNaOH(已冷却)中和。过滤所得沉淀，用20mL热水洗 涤，得到105mg期望的产物6-(1H-苯并[d]咪唑-2-基)吡啶-2-胺(MS，M++H＝ 211.1)。

3-(1H-苯并[d]咪唑-2-基)吡啶-4-胺的制备：

将4-氨基吡啶-3-甲酸4-氨基烟酸(1.12g，8.2mmol)与1，2-二氨基苯(1.77mg， 16.4mmol)的混悬液于8mL PPA中，在180度下加热2小时。将反应混合物倾入 250mL冰水中，在剧烈搅拌下用2N冰冷的NaOH中和。过滤所得沉淀，用20mL 热水洗涤，得到1.35克纯的相应3-(1H-苯并[d]咪唑-2-基)吡啶-2-胺(MS，M++H＝ 211.1)。

2-(1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-2-基)苯胺的制备：

将在5mL无水THF中的2-(1H-苯并[d]咪唑-2-基)苯胺(525mg，2.5mmol)冷 却至-78度，然后用注射器加入1mL n-Bu-Li(2.5mmol，2.5N，于己烷中)。反应 物于-78度搅拌20分钟，加入MeI(360mg，2.6mmol)。反应物逐渐升温至室温， 于室温再维持一小时。粗反应物用25mL醚稀释，所得混悬液过滤除去固体。从 收集的滤液中除去溶剂后分离粗产物，得到纯度大于95％的510mg 2-(1-甲基 -1H-苯并[d]咪唑-2-基)苯胺(MS，M++H＝224.1)。

化合物141、143、144、145、146、168、169、175、176、177、257、258、259、 260、261、276、313、314、315、507、508、556和293的制备：

与化合物142的制备方法类似，用适当的取代双环芳香族苯胺与相应的芳香 族酰氯、磺酰氯、氯甲酸酯和异氰酸酯反应制备这些化合物。反应混合物于室 温下搅拌过夜或于160℃在Biotage微波反应器中反应10分钟。然后将其冷却至室 温，减压浓缩。所得残余粗产物用乙腈重结晶纯化或通过色谱，使用9∶1 CH2Cl2∶ MeOH纯化。

化合物503的制备：

向CH2Cl2(20mL)中的3-甲氧基-4-(吗啉代甲基)苯甲酸(502mg，2mmol) 中加入(COCl)2(2mL，23mmol)，然后滴入一小滴DMF。所得混合物在室温下 搅拌3小时。真空蒸发得黄色固体。然后将该固体溶解于5mL DMF中。随后加 入5mL吡啶中的2-(1H-苯并[d]咪唑-2-基)苯胺(420mg，2mmol)，反应混合物于 室温下保持过夜，同时搅拌。将反应物浓缩得粗产品，将其进一步用Shimadzu 反相制备HPLC纯化，得到期望的产物(103mg)，其纯度大于98％(MS，M++H ＝443.1)。

化合物587的制备：

将在甲苯(5mL)中的苯甲酸3-甲氧基-4-((吡咯烷-1-基)甲基)酯(249mg， 1mmol)和2-(1H-苯并[d]咪唑-2-基)苯胺(209mg，1mmol)冷至0℃，然后加入 AlMe3(2mL，2M，于甲苯中，4当量)。所得混合物逐步升温至室温，搅拌过夜。 然后将反应物冷却至0℃，小心用5mL MeOH骤冷。升温至室温后，混合物用饱 和NaHCO3和AcOEt分离。分离成两层前过滤混合物。然后将滤液的两相分离。 收集有机层，用Na2SO4干燥，过滤，减压浓缩。产物用Combiflash以胺RediSep 柱(68-2203-100，Teledyne Isco)(0-2％MeOH的DCM溶液)纯化。合并收集的馏 分，浓缩得25mg产品(MS，M++H＝427.1)。

化合物557和558的制备：

这些化合物的制备方法类似于化合物587。产物用Combiflash以胺RediSep柱 纯化。

3-(氯甲基)-6-(2-硝基苯基)咪唑并[2，1-b]噻唑的制备：

将(3-硝基-5-噻唑并[5，4-c]吡啶-2-基-苯基)-甲醇(1.375g，5mmol)混悬于 25mL CH2Cl2中，用冰浴冷却。滴加亚硫酰氯(3.6mL，10当量)，反应混合物缓 慢加热至室温。搅拌过夜后，向反应混合物中加入100mL醚，过滤所得混悬液， 收集1.55g期望的产物(MS，M++H＝293.1)。

化合物626的制备：

将3-(氯甲基)-6-(2-硝基苯基)咪唑并[2，1-b]噻唑(292mg，1mmol)、4-苄基哌 嗪-2-酮(380mg，2mmol)和NaH(88mg，2.2当量)混悬于4mL无水DMF中。 将反应物在100℃下加热过夜。冷却至室温后，将反应混合物用水和AcOEt分离。 收集有机层，干燥，蒸发得粗产品，进一步用反相HPLC纯化得211mg期望的产 物4-苄基-1-((6-(2-硝基苯基)咪唑并[2，1-b]噻唑-3-基)甲基)哌嗪-2-酮(MS，M++H ＝448.1)。

化合物627的制备：

向5mL MeOH中的200mg 1-((6-(2-硝基苯基)咪唑并[2，1-b]噻唑-3-基)甲 基)-4-苄基哌嗪-2-酮混悬液中加入250mg氢硫化钠水合物。反应混合物在135℃ (MW)下加热30分钟。冷却至室温后，混合物用50mL水稀释，用CH2Cl2萃取。 合并有机层，干燥(Na2SO4)，浓缩得粗产品，可以将其进一步用反相HPLC纯 化得135mg目标产物1-((6-(2-氨基苯基)咪唑并[2，1-b]噻唑-3-基)甲基)-4-苄基哌 嗪-2-酮(MS，M++H＝418.1)。

化合物628的制备：

将1-((6-(2-氨基苯基)咪唑并[2，1-b]噻唑-3-基)甲基)-4-苄基哌嗪-2-酮(44mg， 0.1mmol)和2-喹喔啉基氯(21mg，1.1当量)在2.5mL吡啶中的混合物在160℃ (MW)下加热20分钟。冷却至室温后，除去吡啶，将粗反应物溶于甲醇，用 反相HPLC纯化得22mg期望的产物(MS，M++H＝574.1)。

617、618、647、648、676、677、678、679、699、741、742和711的制备：

这化合物以类似于化合物628的制备方法制备。产品用反相HPLC纯化。

化合物42的制备：

向50mL烧瓶中加入2-氨基-3-羟基吡啶(1.0g，9.1mmol)，3-氨基苯甲酸 (1.24g，9.1mmol)和12mL聚磷酸。将混合物加热至200℃。4小时后，稍微冷 却反应物，然后用冰水骤冷。将混合物用饱和Na2CO3中和至pH7.5。产品用EtOAc 萃取，合并有机提取物，用盐水洗涤，经MgSO4干燥。蒸发溶剂得到期望的产 物氨基苯基-噁唑并吡啶。(对于C12H9N3O的计算值：211.2，[M+H]+实测值： 212)

向6mL DMF中的苯胺(0.375g，1.8mmol)溶液中加入3-二甲氨基苯甲酸 (0.29g，1.8mmol)、HATU(1.0g，2.7mmol)、HOAt(0.36g，2.7mmol)和二 异丙基乙胺(0.69g，5.3mmol)。反应混合物于70℃搅拌过夜。用CH2Cl2稀释后， 有机层用饱和NaHCO3和盐水洗涤，经MgSO4干燥。粗物质用二氧化硅色谱(0-10 ％MeOH/CH2Cl2)纯化得到期望的产物。(对于C21H18N4O2的计算值：358， [M+H]+实测值：359)

化合物19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、 34、35、36、37、38、39、40、41、43、44、45、46、47、48、49、50、51、 52、53、54、55、56、109和110的制备方法类似于化合物42。

化合物65的制备：

在微波管形瓶中加入4-噁唑并[4，5-b]吡啶-2-基胺(50mg，0.2mmol)、4-甲 氧基苯磺酰氯(49mg，0.2mmol)和1mL吡啶。混合物于160℃置于微波辐射中 12分钟。然后蒸发吡啶，将所得棕色固体用甲醇/二氯甲烷研磨。过滤固体，用 甲醇/二氯甲烷洗涤，干燥得到期望产物的灰白色粉末。(对于C18H14N4O4S的 计算值：382.40，[M+H]+实测值：383.0)。

化合物61、63、75、76、96、97、98和106采用类似于化合物65的制备方法 制备。

化合物77的制备：

向50mL圆底烧瓶中加入2-氨基苯酚(0.24g，2.2mmol)、2-氨基吡啶-4-甲酸 (0.30g，2.2mmol)和2mL聚磷酸。混合物加热至200℃搅拌4小时。然后将反应 物用冰骤冷，用饱和Na2CO3水溶液碱化至pH7.5。将所得沉淀过滤，水洗，干燥 得到期望产物的棕色固体。(对于C12H9N3O的计算值：211.23，[M+H]+实测值： 212.1)。

在微波管形瓶中加入4-苯并噁唑-2-基-吡啶-2-基胺(0.050g，0.2mmol)、3，4- 二甲氧基苯甲酰氯(0.047g，0.2mmol)和1mL吡啶。混合物于160℃置于微波辐 射中12分钟。冷却后向混合物中加入甲醇，形成沉淀。将固体过滤，用甲醇洗 涤，干燥得到期望产物的红色固体。(对于C21H17N3O4的计算值：375.39， [M+H]+实测值：376.1)

化合物78以类似于化合物77的制备方法制备。

1-苯并[1，3]间二氧杂环戊烯-5-基-3-(4-苯并噁唑-2-基-吡啶-2-基)-脲，化合物86的 制备：

在微波管形瓶中加入4-苯并噁唑-2-基-吡啶-2-基胺(0.05g，0.2mmol)、异氰 酸3，4-(亚甲二氧基)苯基酯(0.04g，0.2mmol)和1mlL吡啶。混合物于160℃置于 微波辐射中15分钟。冷却后形成沉淀。将固体过滤，然后用热甲醇研磨。将未 溶解的物质过滤，过滤母液中形成的沉淀，干燥得到期望产物的白色固体(对 于C20H14N4O4的计算值：374.36，[M+H]+实测值：375.1)。

2-[1-(4-氟-苯基)-5-甲基-1H-咪唑-4-基]-噁唑并[4，5-b]吡啶，化合物62的制备：

向25mL圆底烧瓶中加入1-(4-氟苯基)-5-(三氟甲基)吡唑甲酸 (0.15g，0.5mmol)、2-氨基-3-羟基吡啶(0.060g，0.5mmol)和1mL聚磷酸。将 混合物加热至200℃，搅拌4小时。然后将反应物用冰骤冷，用饱和Na2CO3水溶 液碱化至pH7.5。

将所得沉淀过滤，用甲醇洗涤。粗产物用二氧化硅制备TLC板，以5％甲醇 /二氯甲烷洗脱纯化。分离期望的产物，干燥得到白色粉末(对于C16H8F4N4O 的计算值：348.26，[M+H]+实测值：349.0)。

3，4，5-三甲氧基-N-甲基N-(2-噁唑并[4，5-b]吡啶-2-基-苯基)-苯甲酰胺，化合物292 的制备：

向3mL DMF中的3，4，5-三甲氧基-N-(2-噁唑并[4，5-b]吡啶-2-基-苯基)-苯甲酰 胺(0.03g，0.1mmol)混悬液中加入氢化钠(在矿物油中的60％分散物，0.006g， 0.2mmol)。混合物于室温下搅拌30分钟，变成均一。然后向其中滴加入碘甲烷 (0.040g，0.3mmol，0.02mL)。于室温再过一小时后，反应物用水骤冷，然后 用饱和NH4Cl和EtOAc分离。将有机层用盐水洗涤，经MgSO4干燥。粗产品用二 氧化硅色谱纯化，0-5％甲醇/二氯甲烷。分离期望的产物，为黄色固体(对于 C23H21N3O5的计算值：419.44，[M+H]+实测值：420.1)

化合物148的制备：

将对-硝基苯甲酸(4.6g，27.5mmol)和2，3二氨基吡啶(3.0g，27.5mmol) 于室温和机械搅拌下加入聚磷酸(27.5mL)中。反应混合物于175℃搅拌2小时， 冷却至室温，用水骤冷，用NaHCO3碱化。水层置于室温过夜使沉淀析出。过滤 所得沉淀，用水、EtOAc和Et2O洗涤，真空干燥得到期望产物的棕色固体。(对 于C12H8N4O2的计算值：240.22，[M+H]+实测值：241)。

在氩气氛下于0℃向已用己烷预洗涤的氢化钠(550mg，13.7mmol)中加入 二甲基甲酰胺(30mL)。于0℃向该混悬液中分批加入2-(4-硝基苯基)-3H-咪唑并 [4，5-b]吡啶(3.0g，12.43mmol)，反应混合物于室温搅拌1小时40分钟。然后加 入2-(氯甲氧基)乙基三甲氧基硅烷(2.4mL，13.7mmol)，反应混合物于室温搅拌 2.5小时，用水骤冷。水层用EtOAc萃取，合并有机层，Na2SO4干燥，过滤，真 空浓缩。粗产品用SiO2柱色谱以己烷/EtOAc(50∶50)至(20∶80)纯化得一馏分， 为纯异构体，和第二馏分，其由85∶15的两种位置异构体(regioisomer)的混合 物组成。(对于C18H22N4O3Si的计算值：370.48，[M+H]+实测值：371)。

于室温向SEM保护的咪唑并吡啶(1.60g，4.30mmol)在MeOH(8mL)、EtOAc (12mL)和甲氧基乙醇(2mL)中的混合物中加入钯(0)炭(10％w/w，160mg， 0.15mmol)。反应混合物置于H2气氛中(真空/氩气三次，真空/H2三次)，室温搅 拌至转化完全(4小时)。反应混合物用Celite过滤，滤液于真空浓缩得到苯胺的 棕色固体。(对于C18H24N4OSi的计算值：340.49，[M+H]+实测值：341)。

向1.5mL DMF中的咪唑并吡啶苯胺(150mg，0.44mmol)溶液中加入2，3，4- 三甲氧基苯甲酸(93mg，0.44mmol)、HATU(250mg，0.7mmol)、HOAt(90mg， 0.7mmol)和二异丙基乙胺(171mg，0.23mL，1.3mmol)。反应混合物于80℃搅 拌过夜。用EtOAc稀释后，有机层用水洗，Na2SO4干燥，过滤，真空浓缩。然 后将所得化合物溶解于EtOH(1mL)和5 N HCl(1mL)水溶液中。反应混合物 于70℃搅拌2.5小时，冷却至室温，用2N NaOH水溶液和饱和NaNCO3水溶液中 和。将混合物部分用真空浓缩，所得沉淀过滤，用水和Et2O洗，真空干燥得到 期望的产物。

化合物149、150、151、180、181、182、183、184和185以类似于化合物148 的方法制备。

化合物190的制备：

将4-乙炔基苯胺15(1.61g，13.79mmol)于室温加入3-溴-2-吡啶酮33(2.0g， 11.49mmol)、PdCl2(PPh3)2(403mg，0.574mmol)和CuI(109mg，0.572mmol) 的除气三乙胺(60mL)溶液中。反应混合物除气5分钟，于100℃搅拌6小时， 真空浓缩。黑色残余物与CH2Cl2/MeOH混合，过滤，真空浓缩。粗产品用SiO2 柱色谱以CH2Cl2/MeOH(100∶0)至(99∶1)纯化，得到期望的产物。(对于 C13H10N2O的计算值：210.23，[M+H]+实测值：211)

向N-(4-氟[2，3-b]吡啶-2-基-苯基-2，3-二甲氧基苯甲酰胺(30mg，0.143mmol) 和三乙胺(0.02mL，0.143mmol)的CH2Cl2(1mL)溶液中加入2，4-二甲氧基苯 甲酰氯(44mg，0.219mmol)。反应混合物于室温搅拌过夜。用水稀释后，水层 用CH2Cl2萃取，合并有机层，NaSO4干燥，过滤，真空浓缩。粗产品用SiO2柱色 谱以己烷/EtOAc(80∶20至50∶50)纯化，得到期望的产物(对于C22H18N2O4的 计算值：374.39，[M+H]+实测值：375)。

化合物186、187、188、189、191、192和193以类似于化合物190的方法制 备。

化合物200的制备：

采用SulfurLetters 1995，18(2)，79-95中描述的步骤，经六步由2-氨基-吡啶制 备2-(3-硝基苯基)-噻唑并[4，5-b]吡啶。于室温将钯(0)炭(10％w/w，40mg， 0.038mmol)加入2-(3-硝基苯基)-噻唑并[4，5-b]吡啶(403mg，1.57mmol)、甲苯 (2.5mL)、AcOH(2.5mL)和甲氧基乙醇(2.5mL)的混合物中。将反应混合 物置于H2气氛中(真空/氩气三次，真空/H2三次)，于50℃搅拌3小时，于60℃搅 拌1.5小时。由于反应未完全，再加入钯炭(40mg，0038mmol)，反应混合物于 60℃搅拌20小时。将反应混合物冷却至室温，用Celite过滤，滤液于真空浓缩。 粗产品用SiO2柱色谱以EtOAc/己烷(80∶20)纯化，得到期望的产物苯胺，为棕 色固体。(对于C12H9N3S的计算值：227.27，[M+H]+ 实测值：228.2)。

向噻唑并[4，5-b]吡啶-2-基-苯胺(40mg，0.176mmol)和三乙胺(0.02mL， 0.143mmol)的CH2Cl2(1mL)溶液中加入3-二甲基氨基苯甲酰氯(47mg， 0.213mmol)。反应混合物于室温搅拌过夜。用水稀释后，水层用CH2Cl2萃取， 合并有机层，NaSO4干燥，过滤，真空浓缩。粗产品用制备HPLC纯化，得到期 望的产物。(对于C21H18N4OS3的计算值：74.46，[M+H]+ 实测值：375)。

化合物152、194、195、196、197、198、199、201和202以类似于化合物200 的制备方法制备。

化合物286的制备：

向5-甲基-2-硝基苯甲酸(2.0g，11.0mmol)的100mL CH2Cl2溶液中加入草 酰氯(7.0g，4.8mL、55.2mmol)和3滴DMF。将混合物室温搅拌40分钟，真空 除去溶剂。所得残余物置于高真空，然后溶于10mL CH2Cl2。将该溶液加入2-氨 基-3-羟基吡啶(1.21g，11.0mmol)和二异丙基乙胺(2.1g，2.9mL，16.6mmol) 的100mL CH2Cl2溶液中。反应物于室温搅拌至反应完全，然后用CH2Cl2和盐水 分离。有机层用盐水洗涤，MgSO4干燥。粗产品用二氧化硅色谱纯化，EtOAc/ 己烷，(20∶80至90∶10)得到期望的酰胺产物。(对于C13H11N3O4的计算值： 273.25，[M+H]+实测值：274.1)。

将1mL EtOH中的钯炭(10％w/w，0.12g)淤浆加入吡啶酰胺(1.2g，4.4mmol) 的50mL MeOH溶液中。反应物置于H2气氛中，室温搅拌过夜。混合物用氮气清 洗，然后用Celite过滤。真空除去挥发物得到期望的胺(对于C13H13N3O2的计 算值：243.27，[M+H]+实测值：244)。

将2-氨基-N-(3-羟基吡啶-2-基)-5-甲基苯甲酰胺(0.2g，0.8mmol)与1mL PPA 混合，混合物于150℃搅拌2小时。反应物用冰骤冷，用饱和Na2CO3碱化。过滤 所得黄色固体，水洗，干燥得到期望的苯胺。(对于C13H11N3O的计算值：225.25， [M+H]+实测值：226.1)。

在微波管形瓶中加入4-甲基-2-噁唑并[4，5-b]吡啶-2-基-苯胺(40mg， 0.2mmol)、3，4-二甲氧基苯甲酰氯(35mg，0.2mmol)和1mL吡啶。混合物于160℃ 置于微波辐射中10分钟。过滤所得沉淀，用MeOH洗涤，干燥得到期望的酰胺， 为白色固体。(对于C22H19N304的计算值：389.41，[M+H]+实测值：390.1)。 化合物295的制备：

向4-(溴甲基)-3-甲氧基苯甲酸甲酯(10.0g，38.6mmol)的200mL CH2Cl2溶 液中加入吗啉(3.36g，38.6mmol)和二异丙基乙胺(5.98g，8.1mL，46.3mmol)。 溶液于室温搅拌过夜，然后将反应物用CH2Cl2和水分离。有机提取物用盐水洗 涤，MgSO4干燥。蒸发溶剂得到期望产物的粘性固体。(对于C14H19NO4的计 算值：265.31，[M+H]+实测值：266.1)。

将4-(吗啉代甲基)-3-甲氧基苯甲酸甲酯(10.4g，39.1mmol)溶解于150mL THF中，向其中加入LiOH(4.68g，195.4mmol)于75mL水中的混悬液。混合物 室温搅拌过夜，然后真空除去溶剂。将所得固体混悬于CH2Cl2(200mL)和MeOH (50mL)中。然后将混合物通过Celite过滤，从母液中蒸发溶剂得到期望的酸 产物。(对于C13H17NO4的计算值：251.28，[M+H]+实测值：252.1)

将苯甲酸(0.1g，0.4mmol)混悬于CH2Cl2(5mL)中，向其中加入草酰氯 (0.25g，2.0mmol、0.17mL)和2滴DMF。置于室温1小时后，真空除去溶剂， 将所得残余物置于高真空30分钟。然后将其与吡啶(2mL)混合，加入装有3- 噁唑并[4，5-b]吡啶-2-基-苯胺(0.084g，0.4mmol)的微波管型瓶。反应混合物置 于微波辐射中于160℃维持10分钟。然后除去溶剂，粗物质用二氧化硅色谱(5-10 ％MeOH/CH2Cl2)和制备TLC(5％MeOH/CH2Cl2)纯化，得到期望的酰胺产物。 (对于C25H24N4O4∶444.5的计算值，[M+H]+ 实测值：445.1)。

化合物706、571、572、585、629、630、631、632、636、637、638、642 和643以类似于化合物295的制备方法制备。

化合物468的制备：

将3，5-二甲基苯甲酸(0.3g，2mmol)和亚硫酰氯(8mL)在氮气氛下混合， 加热至回流，保持3小时。过量的亚硫酰氯在真空下完全蒸发。然后向其中加入 4-噁唑并[4，5-b]吡啶-2-基吡啶-2-基胺(0.318g，1.5mmol)、无水吡啶(8mL) 和催化量的DMAP，将混合物加热至回流于110℃维持6小时。向其中加入水 (20mL)，将化合物萃取至CH2Cl2(2×25mL)中。有机层用无水Na2SO4干燥， 过滤，浓缩。粗化合物用二氧化硅(60-120目)，以EtOAc∶己烷(1∶5)洗脱纯 化，获得纯酰胺(对于C20H16N4O2的计算值：344.38，[M+H]+实测值：3445.1)。

化合物367、369、375、376、470、482、483、566、567、576、578、579、 580和639以类似于化合物468的制备方法制备。

化合物565的制备：

于10-15℃向4-噁唑并[4，5-b]吡啶-2-基吡啶-2-基胺(0.192g，0.91mmol)的 无水吡啶(10mL)溶液中加入TMSCl(1mL，0.75mmol)，反应混合物于室温 搅拌4小时。

在另外的圆底烧瓶中，在氮气氛下将三氟甲氧基苯甲酸(0.250g，1.21mmol) 和亚硫酰氯(6mL)混合，加热至回流，保持3小时。在真空下蒸发过量的亚硫 酰氯。于室温下向该反应混合物加入上述制得的硅烷化胺，混合物加热至回流， 保持6小时。加入水(20mL)，化合物用二氯甲烷(2×25mL)萃取。有机层用 无水Na2SO4干燥，过滤，浓缩。化合物粗品用二氧化硅(60-120目)以EtOAc： 己烷洗脱纯化，获得纯的酰胺。(对于C19H11F3N4O3的计算值：400.32，[M+H]+ 实测值：400.8)。

化合物577、581、640、641和668的制备方法类似于化合物565。

化合物705的制备：

将4-噁唑并[4，5-b]吡啶-2-基吡啶-2-基胺(0.20g，0.9mmol)、无水吡啶(1mL) 和4-氯苯磺酰氯(0.9g，0.9mmol)在封闭管中混合，在220℃下加热2小时。 反应完成后(用TLC监测)，将反应混合物冷却至室温，加入水(20mL)，将 化合物萃取至二氯甲烷(2×30mL)中，干燥有机层(Na2SO4)，过滤，浓缩。 化合物粗品用二氧化硅柱色谱纯化，获得纯的磺酰胺(对于C17H11ClN4O3S 的计算值：386.82，[M+H]+实测值：387.0)。

化合物370、371、372、373、374、471、474、476、477、478、479和653 的制备方法类似于化合物705。

化合物379的制备：

向搅拌的2-噁唑并[4，5-b]吡啶-2-基-苯胺(0.2g，0.94mmol)的2mL无水吡 啶溶液中加入3，5-二甲磺酰氯(0.193g，0.94mmol)和催化量的DMAP。混合 物于140℃搅拌3小时。(反应进程以TLC监测)。反应混合物用水(20mL)稀 释，用乙酸乙酯(2×25mL)萃取。合并有机层，用Na2SO4干燥，真空浓缩。 化合物粗品用二氧化硅柱色谱纯化，获得相应的磺酰胺(对于C20H17N3O3S 的计算值：379.44，[M+H]+实测值：380.0)。

化合物377、378、380、381、382、383、384、486、487、488、489、490、 492、493和494的制备方法类似于化合物379。

化合物495的制备：

于室温向搅拌的2-噁唑并[4，5-b]吡啶-2-基-苯胺(0.15g，0.70mmol)的1.5mL 吡啶溶液中加入氯甲酸4-氯苯基酯(0.16g，0.84mmol)，然后加入催化量的 DMAP。反应物在氮气氛下搅拌2小时。(反应进程以TLC监测)。反应混合物 用水(10mL)稀释，用乙酸乙酯(2×25mL)萃取，合并有机层，用无水Na2SO4 干燥，过滤，真空浓缩。化合物粗品用柱色谱纯化，获得相应的氨基甲酸酯。(对 于C19H12N3O3Cl的计算值：365.7，[M+H]+ 实测值：366.0)。

化合物496、497、499、500、501、502、568和582的制备方法类似于化合 物495。

化合物584的制备：

将三光气(0.72g，2.4mmol)溶解于无水二氯甲烷中并于-78℃加入吡啶(1 当量)。混合物搅拌10分钟。经十分钟向该反应混合物中加入在2mL DCM中 的3，5-二甲基苯酚(0.5g，4mmol)，于室温搅拌2小时。在另一圆底烧瓶中， 将2-噁唑并[4，5-b]吡啶-2-基-苯胺(0.2g，0.9mmol)溶解于吡啶(20mL)中， 再于室温经5分钟向其中滴加上述制备的氯甲酸苯基酯。加入催化量的DMAP， 反应物搅拌过夜。在起始原料完全消失后(以TLC监测)，将反应混合物用水 (10mL)稀释，用乙酸乙酯(2×25mL)萃取。合并有机层，用无水Na2SO4干 燥，过滤，真空浓缩。化合物粗品用二氧化硅柱色谱纯化，获得纯化合物。(对 于C21H17N3O3的计算值：359.38，[M+H]+实测值：360.0)。

化合物569、570、583、655、656、657、669、670和671的制备方法类似 于化合物584。

化合物672的制备：

向搅拌的4-三氟甲氧基苯酚(0.1g，0.56mmol)的无水DMF(0.5mL)溶液 中加入N，N-碳酰二咪唑(0.09g，0.56mmol)。反应物于室温在氮气氛下搅拌30 分钟。将反应混合物用水(10mL)稀释，萃取至乙酸乙酯中，用无水Na2SO4 干燥，过滤，真空蒸发。将该化合物粗品溶解于吡啶(0.5mL)中，将其加入预 先搅拌的2-噁唑并[4，5-b]吡啶-2-基-苯胺(0.075g，0.35mmol)的吡啶(0.5mL) 溶液中，然后加入催化量的DMAP。混合物于室温搅拌2小时。反应完成后(用 TLC监测)，反应混合物用水(10mL)稀释，用乙酸乙酯萃取，无水Na2SO4 干燥，过滤，真空浓缩。化合物粗品用柱色谱纯化得到纯化合物。(对于 C20H12F3N3O4的计算值：415.33，[M+H]+实测值：415.1)。

化合物666的制备：

于室温在氮气氛下向4-噁唑并[4，5-b]吡啶-2-基吡啶-2-基胺(0.24g， 0.96mmol)的吡啶(2mL)溶液中滴加氯化三甲基硅烷(0.6mL，4.33mmol)， 将混合物搅拌6小时。向其中加入异硫氰酸4-二甲基氨基苯基酯(0.251g， 1.41mol)和催化量的二甲氨基吡啶。反应物回流12小时(反应进程用TLC监 测)。反应混合物用水(50mL)稀释，化合物用DCM(2×50mL)萃取。将合 并的有机层干燥(Na2SO4)，真空蒸发。化合物粗品用二氧化硅色谱纯化，得到 相应的硫脲。(对于C20H18N6OS的计算值：390.47，[M+H]+实测值：391.0)。

化合物573、574、575、658、659、660、661、662、663、664、665、667、 673、674和675的制备方法类似于化合物666。

化合物634的制备：

向搅拌的硫脲(0.040g，1.05mmol)的DMF∶H2O(4mL，2∶2)溶液中加入 NH3溶液(30％，3mL)。混合物于室温搅拌30分钟。向其中加入NaIO4溶液 (0.033g，于2mL水中)，将反应混合物在80℃下加热12小时。然后于室温加 入10％NaOH溶液(1mL)。将所得的沉淀过滤，用水(2×10mL)、己烷(2×10mL) 洗涤，干燥获得所需的纯胍(对于C18H13ClN6O的计算值：364.8，[M+H]+实 测值：364.9)。

化合物633和635的制备方法类似于化合物634。

化合物506的制备：

按照与制备4-甲基吗啉-3-甲氧基苯甲酸甲酯相同的方法制备4-甲基吡咯烷 -3-甲氧基苯甲酸甲酯。

向1mL甲苯中的3-噁唑并[4，5-b]吡啶-2-基苯胺(0.10g，0.5mmol)的混悬 液中加入三甲基铝(2.0M，于甲苯中，0.2mL，0.5mmol)。该混合物于室温搅 拌1.5小时。然后向其中加入4-甲基吡咯烷-3-甲氧基苯甲酸甲酯(0.12g， 0.5mmol)在1mL甲苯中的淤浆。反应物在回流下搅拌17小时。冷却后，混合 物用CH2Cl2和盐水分离。水层用CH2Cl2萃取，合并有机提取物，用盐水洗涤， 经MgSO4干燥。粗产品用二氧化硅色谱纯化，0至10％MeOH/CH2Cl2洗脱，得 到期望的酰胺(对于C25H24N4O3的计算值：428.50，[M+H]+实测值：429.1)。

化合物525的制备：

将3.27g(30mmol)2，3-二氨基吡啶、4.53g(30mmol；1.0当量)2-硝基苯 甲醛和1.92g(60mmol；2.0当量)硫磺充分混合在一起，加热至120℃。混合 物变为黑色液体，再搅拌3小时。冷却至室温后，将固体残余物溶解于热乙醇 (400mL)中，过滤。浓缩滤液，残余物用快速层析纯化(梯度洗脱，己烷/乙 酸乙酯1∶1至0∶100)得到吡啶并咪唑产物。(对于C12H8N4O2的计算值：240.2， [M+H]+实测值：242)。

在100mL二颈瓶中，在氮气下将604mg(13.8mmol；1.1当量)氢化钠(55％， 于石蜡中)用无水己烷(2×5mL)洗涤，悬浮于无水DMF(30mL)中。于0℃ 分批加入3.02g(12.6mmol)咪唑22，导致气体放出，并形成深红棕色溶液。 混合物于0℃搅拌30分钟，于室温搅拌30分钟，冷却至0℃，滴加2.45ml (13.8mmol，1.1当量)2-(氯甲氧基)乙基三甲基硅烷。室温搅拌5.5小时后， 将该橘棕色混悬液加入饱和Na2CO3水溶液(150mL)、水(300mL)、乙酸乙酯 (200mL)和盐水(50mL)的混合物中。水层用乙酸乙酯(4×100mL)萃取， 合并有机层，用盐水和水的混合物(1∶3；2×100mL)以及盐水(50mL)洗涤， 干燥(NaSO4)，浓缩。残余物用快速层析纯化(梯度洗脱，己烷/乙酸乙酯1∶2 至0∶100)，得到产物的三种异构体：1.90g(5.13mmol，41％)、1.31g(3.55mmol； 28％)和895mg(2.41mmol；19％)。(对于C18H22N4O3Si的计算值：370.1， [M+H]+实测值：371.2)。

在10％钯炭(190mg)存在下，于环境压力和温度下将2-(2-硝基苯基)咪唑 并吡啶1.87g(5.05mmol)溶解于乙酸乙酯(27ml)和甲醇(18mL)中，保持 4小时。用快速层析(己烷/乙酸乙酯1∶1)纯化粗产品得到期望的苯胺，为黄绿 色油状物。(对于C18H224N4OSi的计算值：340.1，[M+H]+ 实测值：341.2)。

将2-[3-(2-三甲基甲硅烷基-乙氧基甲基)-3H-咪唑并[4，5-b]吡啶-2-基]苯胺 (85.1mg；0.25mmol)与在无水CH2Cl2(2mL)中的3，4-二甲氧基苯甲酰氯 (60.2mg；1.2当量)和38μL(1.1当量)NEt3反应，然后通过快速层析(己烷 /乙酸乙酯2∶1)，得到期望的酰胺，为无色、高度粘稠的树脂状物，其在加入乙 醇时固化。(对于C27H32N4O4Si的计算值：504.2，[M+H]+ 实测值：505)。

化合物521、522、523、524、526、527、528、529、530、531、532、533、 534、535、536、537、538、539和540的制备方法类似于化合物525。

化合物253的制备：

按典型方法，将在4mL吡啶中的2-(2-氨基苯基)吲哚(104mg，0.5mmol) 与2，4-二甲氧基苯甲酰氯(100mg，0.5mmol)搅拌。反应物在室温下搅拌过夜。 通过LC-MS确认反应完成，加入15mL水。将所得混悬液搅拌并超声处理至获 得白色沉淀。过滤收集白色固体，水洗，风干。产品用硅胶快速层析纯化，以 CH2Cl2作为洗脱剂(0至10％甲醇梯度)。TLC/HPLC/LC-Mass显示其为纯净产 品(MS，M++H＝373.1)。

使用适当的酰氯，采用类似于化合物253的制备方法制备化合物254、255 和256。

化合物262的制备：

按典型方法，将3mL吡啶中的4-(1H-苯并咪唑-2-基)-苯胺(83mg，0.4mmol) 加入2，4-二甲氧基苯甲酰氯(80mg，0.4mmol)。反应物于室温搅拌过夜。用 LC-MS确认反应完成，加入15mL水。所得混悬液搅拌5小时后过滤收集灰白 色固体，将其用水洗，减压干燥。产品用硅胶快速层析纯化，以CH2Cl2作为洗 脱剂(0至10％甲醇梯度)。TLC/HPLC/LC-Mass显示，其为纯净产品(MS，M+ +H＝374.1)。

使用适当的酰氯，采用类似于化合物262的制备方法制备化合物263、264 和294，用乙腈重结晶纯化或用正相色谱以9∶1的CH2Cl2∶MeOH混合物作为 洗脱剂纯化。

化合物332的制备：

按典型方法制备化合物332，在管形瓶中将2-吡啶-3-基-苯胺 (400umol，68mg)溶于2mL吡啶。在搅拌下加入3，4-二甲氧基苯甲酰氯 (400umol，80mg)。溶液于室温搅拌过夜。然后加入20mL H2O，所得白色乳 液在间歇性超声下搅拌过夜直至澄清溶液中生成白色沉淀。过滤固体，风干。 用硅胶以CH2Cl2纯化(甲醇梯度0至10％)，浓缩至干，获得产物的白色固体。 (MS，M++H＝335.1)。

使用适当的酰氯，采用类似于化合物332的制备方法制备化合物331和333。 在化合物331和333的情况下，通过萃取至CH2Cl2中分离粗产品。

化合物334的制备：

按典型方法制备化合物332，在管形瓶中将2-吡啶-3-基-苯胺 (400umol，70mg)溶于2mL吡啶。在搅拌下加入2，4-二甲氧基苯甲酰氯 (400umol，80mg)。溶液于室温搅拌过夜。然后加入20mL H2O，所得白色乳 液在间歇性超声下搅拌过夜直至澄清溶液中生成白色沉淀。过滤固体，风干。 用硅胶以CH2Cl2纯化(甲醇梯度0至10％)，浓缩至干，获得产物的白色固体。 (MS，M++H＝340.1)。

使用适当的酰氯，采用类似于化合物332的制备方法制备化合物335和336。 在化合物335的情况下，通过萃取至CH2Cl2中分离粗产品。

化合物413的制备：

按典型方法制备化合物413，在管形瓶中将2-吡啶-3-基-苯胺(300umol， 66mg)溶于2mL吡啶。在搅拌下加入2，4-二甲氧基苯甲酰氯(300umol，60mg)。 溶液于室温搅拌过夜，浓缩至干，用戊烷(2×5mL)处理(chase)获得橙色固 体粗产品。粗产品用硅胶色谱纯化(0％至70％在戊烷中的乙酸乙酯)，获得期 望的产物(77mg)。(MS，M++H＝385.1)。

使用适当的酰氯，采用类似于化合物413的制备方法制备化合物414、415 和416。

2-(2-硝基-苯基)-咪唑并[1，2-a]吡啶的制备：

将2-溴-2’-硝基苯乙酮(7.65g，31.3mmol)和2-氨基吡啶(2.95g，31.3mmol) 溶于丙酮(50mL)，加热至回流。10分钟后，除了剧烈沸腾外，有浅黄色/白色 沉淀生成。继续回流3小时，冷却至室温。通过蒸发将体积减少1/2，过滤收集 固体中间体，用丙酮(20mL)洗涤，风干(7.26g中间体)。将中间体(7.20g) 溶于MeOH(100mL)，加入HBr(4滴，催化剂)，加热至回流。用TLC监测 反应(10％MeOH的CH2Cl2溶液)。70分钟后，将反应混合物冷却至室温，用 1M NaOH调节至pH＝12，浓缩除去甲醇。过滤收集黄色产品，水洗，风干。 获得5.54g(74％)2-(2-硝基-苯基)-咪唑并[1，2-a]吡啶，为黄色晶体固体(MS，M+ +H＝240.1)。

2-咪唑并[1，2-a]吡啶-2-基苯胺的制备：

用两种还原法制备2-咪唑并[1，2-a]吡啶-2-基苯胺。

1)催化氢化。将2-(2-硝基-苯基)-咪唑并[1，2-a]吡啶(250mg，1.04mmol) 溶于THF(15mL)中。向烧瓶中加入20mg 10％钯炭，通氮气后，在H2气球 (1atm)O/W条件下搅拌。用HPLC或TLC监测反应(5％MeOH的CH2Cl2 溶液)。反应混合物用Celite床过滤除去催化剂，用THF(2×10mL)洗涤床， 合并有机层，浓缩至干得琥珀色油。通过小心旋转蒸发50％乙醇水溶液，过滤 收集获得白色固体产物(MS，M++H＝210.1)。

2)硫化物还原。在圆底烧瓶中加入2-(2-硝基-苯基)-咪唑并[1，2-a]吡啶 (250mg，1.04mmol)、氢硫化钠(351mg，6.24mmol)、甲醇(6mL)和水(2mL)。 反应混合物回流过夜。TLC显示反应完全(5％MeOH的CH2Cl2溶液)。将混合 物冷却至室温，浓缩至干，向白色/黄色盐中加入水(1mL)、CH2Cl2(10mL) 和MeOH(1mL)。分层，将水层用CH2Cl2(2×10mL)反萃取。合并有机层， 经NaSO4干燥，浓缩至干获得产物，为褐色固体(MS，M++H＝210.1)。

化合物265的制备：

按照典型方法制备化合物265，在管型瓶中将2-咪唑并[1，2-a]吡啶-2-基-苯胺 (400umol，84mg)溶于3mL吡啶中。在搅拌下加入2，4-二甲氧基苯甲酰氯 (400umol，80mg)。将溶液在室温下搅拌过夜。然后加入15mL H2O，所得白 色乳液在间歇性超声下搅拌5小时直至澄清溶液中出现白色沉淀。过滤固体， 风干。用硅胶以CH2Cl2(甲醇梯度0至10％)洗脱纯化，浓缩至干，用戊烷研 磨得到产品，为灰白色固体(MS，M++H＝374.1)。

使用适当的酰氯，采用类似于化合物265的制备方法制备化合物266、267 和268。

2-(2-硝基-苯基)-咪唑并[1，2-a]吡啶-3-甲醛的制备：

在干燥的烧瓶中加入DMF(2.7g，37mmol)，冷却至0℃，经5分钟缓慢加 入POCl3。溶液于0℃搅拌10分钟，再经1小时升温至室温。向再冷却至0℃ 的深红色溶液中加入2-(2-硝基-苯基)-咪唑并[1，2-a]吡啶(1.0g，4.18mmol)的 DMF(8mL)溶液。将反应物搅拌5.5小时；LC-MS显示有些产品生成。再加 入Vilsmeier复合物(由2.7g DMF和1.47g POCl3制备)，反应物搅拌过夜，然 后加热至50℃维持3小时至反应完成。将反应物冷却至室温，倾倒在冰上，用 1N NaOH调pH＝7。将产物萃取入CH2Cl2(3×50mL)中，用盐水洗涤，经Na2SO4 干燥，浓缩得到产品，为白色固体(1.03g，收率92％)。(MS，M++H＝268.0)。

化合物316的制备：

向冷却至0℃的2-(2-硝基-苯基)-咪唑并[1，2-a]吡啶(700mg，2.62mmol)的 甲醇(30mL)混悬液中加入NaBH4(99mg，2.62mmol)的甲醇(2mL)溶液。 于0℃搅拌15分钟后，将溶液升温至室温，搅拌1.5小时。用4N HCl调pH至 6，浓缩溶液除去甲醇。过滤收集黄色固体，水洗，充分干燥得到产品，为黄色 固体(539mg，收率76％)。(MS，M++H＝270.1)。

3-氯甲基-2-(2-硝基-苯基)-咪唑并[1，2-a]吡啶的制备：

向[2-(2-硝基-苯基)-咪唑并[1，2-a]吡啶-3-基]-甲醇(500mg，1.86mmol)的 CH2Cl2(25mL)混悬液中滴加亚硫酰氯(662mg，3当量)。反应物于室温搅拌 3.5小时，浓缩至干，加入CH2Cl2，减压干燥得到定量收率的产品，为白色固体。 (MS，M++H＝270.1，与水稀释剂反应。

2-(3-二甲氨基甲基)-咪唑并[1，2-a]吡啶-2-基)-苯胺得制备：

向冷却至0℃的3-氯甲基-2-(2-硝基-苯基)-咪唑并[1，2-a]吡啶(324mg， 1.0mmol)的CH2Cl2(20mL)混悬液中滴加三乙胺(303mg，3当量)，然后经 5小时分两次加入2M二甲胺的THF溶液(8mmol，4mL)。将反应混合物浓缩 至干，溶于CH2Cl2(20mL)，用水、盐水洗涤，经Na2SO4干燥，浓缩，用色谱 法以9∶1的CH2Cl2/MeOH混合物纯化。浓缩馏分，溶于THF(15mL)，在H2 气球条件下与10％Pd/C(10mg)搅拌过夜。将反应混合物通过Celite过滤，浓 缩得到产品，为黄色固体(164mg)。(MS，M++H＝267.1)。

化合物350的制备：

按典型方法制备化合物350，将在2ml吡啶中的2-(3-二甲氨基甲基)-咪唑并 [1，2-a]吡啶-2-基)-苯胺(200umol，53mg)与3，4-二甲氧基苯甲酰氯(200umol， 40mg)于室温搅拌过夜。将反应混合物通过加入10mL H2O骤冷，浓缩，通过 色谱法以90∶9∶1的CH2Cl2/甲醇/三乙胺混合物纯化。用戊烷研磨得产品，为褐 色固体。可利用另外的硅胶柱色谱(100％EtOAc)和/或制备TLC(5％MeOH 的CH2Cl2溶液w/7M NH3)获得更高的纯度。(MS，M++H＝431.1)。

使用适当的酰氯，采用类似于化合物350的制备方法制备化合物351。

4-[2-(2-氨基-苯基)-咪唑并[1，2-a]吡啶-3-基甲基)-哌嗪-1-甲酸叔丁酯的制备：

向冷却至0℃的3-氯甲基-2-(2-硝基-苯基)-咪唑并[1，2-a]吡啶(298mg， 0.92mmol)的CH2Cl2(15mL)混悬液中滴加三乙胺(297mg，3当量)，然后 经24小时分两次加入1-Boc-哌嗪(1.3当量，221mg)。将反应混合物浓缩至干， 用色谱法以9∶1的CH2Cl2/MeOH混合物纯化。浓缩馏分，溶于乙醇(20mL)， 在H2气氛下与10％Pd/C(10mg)搅拌48小时。将反应混合物通过Celite过滤， 浓缩，在高真空下干燥，获得250mg期望的产物。(MS，M++H＝408.2)

化合物359的制备：

按典型方法制备化合物359，将在2mL吡啶中的4-[2-(2-氨基-苯基)-咪唑并 [1，2-a]吡啶-3-基甲基]-哌嗪-1-甲酸叔丁酯(150umol，61mg)和2，4-二甲氧基苯 甲酰氯(150umol，30mg)于室温搅拌3小时。反应物用1mL H2O骤冷，浓缩， 通过硅胶色谱纯化(0至5％MeOH的CH2Cl2溶液)。浓缩馏分，用TFA/CH2Cl2 处理5小时，浓缩至干，用CH2Cl2处理(chase)(2×10mL)，抽高真空，用1∶1 戊烷/乙醚研磨，获得二TFA盐的白色固体，(46mg)。(MS，M++H＝472.1)

使用适当的酰氯，采用类似于化合物359的制备方法制备化合物362和364。 2-(2-硝基-苯基)-咪唑并[1，2-a]嘧啶的制备：

将2-溴-2’-硝基苯乙酮(5g，20.4mmol)和2-氨基吡啶(1.94g，20.4mmol) 溶于丙酮(50mL)，加热至回流。60分钟后有浅白色沉淀生成。继续回流5.5 小时，冷却至室温。通过蒸发将体积减少1/2，过滤收集固体中间体，用丙酮 (20mL)洗涤，风干(2.84g中间体)。通过浓缩合并的母液收集第二份产物， 将残余物在新鲜丙酮(20mL)中回流1.5小时。经过冷却，通过蒸发将体积减 少1/2，收集3.11g固体。将合并的固体中间体(5.95g)溶于MeOH(70mL)， 加入5滴浓HBr，回流2小时。冷却后，将体积减少1/2，加入水(40mL)，用 1N NaOH调溶液至碱性(pH＝10)。旋转蒸发除去产品结晶产生的甲醇。过滤 产品，水洗，风干得到5.03g期望的产物(MS，M++H＝241.0)。

2-咪唑并[1，2-a]嘧啶-2-基-苯胺得制备：

将2-(2-硝基-苯基)-咪唑并[1，2-a]嘧啶(2g，8.33mmol)和NaHS(2.8g，6 当量)于25％含水甲醇(40mL)水溶液中回流过夜。将反应混合物冷却至室温， 浓缩至干。加入甲醇(10mL)和水(30mL)，用CH2Cl2(3×100mL)萃取产品。 合并有机层，浓缩至干，用10％MeOH∶CH2Cl2处理，于45℃高真空条件下干燥， 获得产品，为橙色固体(1.34g，收率76％)。(MS，M++H＝211.1)

化合物437的制备：

按典型方法制备化合物437，将在2mL吡啶中的2-咪唑并[1，2-a]嘧啶-2-基- 苯胺(200umol，42mg)和2，4-二甲氧基苯甲酰氯(200umol，40mg)于室温搅 拌过夜。次日早晨，将反应混合物浓缩至干，用CH2Cl2和戊烷处理。用硅胶以 30％至70％EtOAc的戊烷溶液梯度洗脱进行纯化。(MS，M++H＝375.1)

使用适当的酰氯，采用类似于化合物437的方法制备化合物438、439、504 和505。

2-(5，6，7，8-四氢-咪唑并[1，2-a]吡啶-2-基)-苯胺的制备：

在干燥的烧瓶中加入2-(2-硝基-苯基)-咪唑并[1，2-a]吡啶(239mg，1mmol)， 10％Pd/C(15mg)、乙醇(25mL)、水(1.5mL)和4M HCl(0.5mL)。充氮气， 在1atm氢气条件下和另外的Pd/C催化剂(15mg)和4N HCl(4.5mL)加料下 搅拌5天直至反应完成。将反应混合物通过Celite过滤，用饱和NaHCO3溶液 中和至pH＝6。将溶液旋转蒸发除去乙醇，水层用CH2Cl2(2×5mL)萃取，将 合并的有机层经Na2SO4干燥，浓缩获得定量收率的产品，为油状物(205mg)。 (MS，M++H＝214.1)

化合物545的制备：

在管形瓶中加入2-(5，6，7，8-四氢-咪唑并[1，2-a]吡啶-2-基)-苯胺(200umol， 42mg)和三乙胺(3.5当量，100ul)的无水CH2Cl2(3ml)溶液，然后在搅拌 下加入3，4-二甲氧基苯甲酰氯(200umol，40mg)。将反应物于室温搅拌过夜， 浓缩至干，用硅胶以0％至100％EtOAc的戊烷溶液梯度洗脱纯化，在用戊烷研 磨后获得白色固体产物。(MS，M++H＝378.1)

使用适当的酰氯，采用类似于化合物545的制备方法制备化合物546、547 和548。

化合物541的制备：

在管形瓶中将3-甲氧基-4-吗啉-4-基甲基-苯甲酸(125mg，500umol)溶于 无水CH2Cl2(5ml)，加入草酰氯(0.5mL，11当量)和1滴DMF。搅拌3小时 后将反应物浓缩至干，获得酰氯。向该酰氯中加入2-咪唑并[1，2-a]吡啶-2-基-苯 胺(500mmol，104mg)的无水吡啶(5mL)溶液。搅拌2小时后将反应混合物 浓缩至干，混悬于EtOAc，用50％饱和NaHCO3溶液洗涤。将水层用EtOAc 反萃取，合并有机层，经Na2SO4干燥，浓缩，获得黄色固体粗品。柱色谱层析 (40g二氧化硅，0％至5％MeOH的CH2Cl2溶液梯度)，浓缩，用甲醇研磨得 白色固体产品(57mg)。(MS，M++H＝443.1)

使用2-咪唑并[1，2-a]嘧啶-2-基-苯胺，采用类似于化合物541的制备方法制 备化合物542。

2-(3-吡咯烷-1-基甲基-咪唑并[2，1-b]噻唑-6-基)-苯胺的制备：

将在CH2Cl2(5ml)中的[6-(2-硝基-苯基)-咪唑并[2，1-b]噻唑-3-基]-甲醇 (110mg，0.4mmol)和三乙胺(56ul，1当量)冷却至0℃。滴加甲磺酰氯(31ul， 1当量)，于0℃搅拌10分钟，升温至室温，搅拌15分钟。将反应物通过加入 盐水骤冷，用CH2Cl2萃取甲磺酸酯，经Na2SO4干燥，浓缩。将残余物溶于乙 腈(3mL)中，加入三乙胺(31ul，1当量)，然后加入吡咯烷(66ul，2当量)。 将反应混合物搅拌2小时，浓缩，用戊烷处理。柱色谱层析，用CH2Cl2(0至4 ％MeOH梯度)洗脱得6-(2-硝基-苯基)-3-吡咯烷-1-基甲基-咪唑并[2，1-b]噻唑。 将该物质溶于甲醇(16ml)，加入氢硫化钠(112mg，5当量)的水(4ml)溶液。 反应混合物再加入NaHS(2×112mg)，回流2天。将反应物浓缩除去甲醇，水 溶液用CH2Cl2(3×40ml)萃取。有机层用Na2SO4干燥，浓缩得产品为黄色膜， 109mg。(MS，M++H＝299.1)

化合物620的制备：

将2-(3-吡咯烷-1-基甲基-咪唑并[2，1-b]噻唑-6-基)-苯胺(200umol)的2ml 吡啶溶液与3，4，5-三甲氧基苯甲酰氯(200umol，46mg)搅拌。将溶液搅拌3小 时，浓缩至干，用甲醇处理，通过制备-HPLC纯化。将馏分冻干得36mg产品， 为THA盐。(MS，M++H＝493.1)

使用适当的酰氯，采用类似于化合物620的制备方法制备化合物619。

6-(2-硝基-苯基)-咪唑并[2，1-b]噻唑-3-甲酸乙酯的制备：

按典型方法，将乙基(2-氨基-噻唑-4-基)-乙酸甲酯(1.0g，5.8mmol)与2-溴 -2’-硝基苯乙酮(1.42g，5.8mmol)一起同30mL甲乙酮混合。将反应混合物回 流1小时，于90℃搅拌过夜。然后将其冷却至室温，浓缩得红色油状物。将其 溶于甲醇以促使产品沉淀，加水得乳液。旋转蒸发除去甲醇，将乳状水溶液置 于分液漏斗中。用Na2CO3调pH至9，混合物用CH2Cl2(3×50ml)萃取。合并 有机层，经Na2SO4干燥，浓缩得红色油状物，硅胶色谱纯化(CH2Cl2加0至5 ％MeOH梯度洗脱)。获得产物为红色固体(0.59g，收率32％)。(MS， M++H＝318.0)

[6-(2-硝基-苯基)-咪唑并[2，1-b]噻唑-3-基]-乙酸的制备：

将在2∶1 THF/水中的6-(2-硝基-苯基)-咪唑并[2，1-b]噻唑-3-甲酸乙酯(466mg， 1.47mmol)与4当量NaOH(234mg)混合。将反应混合物加热至50℃维持3 小时。反应混合物浓缩至干，将残余物溶于水(20mL)，用CH2Cl2洗涤，水层 用4N HCl调pH＝3。过滤收集固体，水洗，风干得产物酸为棕色固体(442mg， 收率99％)(MS，M++H＝304.0)

化合物649的制备：

在管形瓶中，将[6-(2-硝基-苯基)-咪唑并[2，1-b]噻唑-3-基]-乙酸(30mg， 100umol)、N-甲基哌嗪(10mg，1.0当量)、N，N-二异丙基乙基胺(52uL，3.0 当量)溶于CH2Cl2。在反应混合物中依次加入HOAT(16mg，1.2当量)和EDCI (29mg，1.5当量)。反应物搅拌过夜。加入50％饱和NaHCO3(2ml)并用CH2Cl2 (3×3ml)萃取后，将有机层用Na2SO4干燥，浓缩。用戊烷研磨得产品酰胺为 棕色固体。

将上步制得的酰胺溶于甲醇(4ml)和NaHS(34mg，6当量)，在150℃下 用微波加热30分钟。向反应物混合物中加入MgSO4，过滤后浓缩，用CH2Cl2 (2x)处理，获得期望的苯胺，为红色膜状物。

将上步制得的苯胺溶于吡啶(2ml)中，加入2-喹喔啉基氯(38mg，2.0当 量)固体。搅拌过夜后，将反应物浓缩至于，用制备-HPLC纯化得标题化合物， 为橙色固体(32.2mg，三步收率44％)。(MS，M++H＝512.2)

化合物650的制备：

向管形瓶中加入4-[6-(2-氨基-苯基)-咪唑并[2，1-b]噻唑-3-基甲基]-哌嗪-1-甲 酸叔丁酯(82mg，0.2mmol)、三乙胺(56ul，2当量)和无水CH2Cl2(3ml)。 加入2-喹喔啉基氯(40mg，1.0当量)固体。将反应混合物搅拌18小时，浓缩， 用CH2Cl2处理。用硅胶以CH2Cl2(95∶4∶1的CH2Cl2∶MeOH∶Et3N梯度)洗脱纯 化得化合物650的黄色固体。(MS，M++H＝570.2)

化合物651的制备：

将化合物650(105mg，0.185mmol)用30％在CH2Cl2(4ml)中的TFA处 理2小时，用CH2Cl2(3x)和乙醚(3x)处理，获得化合物441的粗品。将该 物质的一半(92umol)与Et3N(70ul)一起溶于CH2Cl2(5ml)中，冷却至0℃。 加入醋酐(10ul，1当量)，将反应混合物经1小时升温至室温。将反应物通过 加入甲醇和水骤冷，浓缩至干。用反相制备HPLC纯化，冻干得化合物651的 TFA盐。(MS，M++H＝512.2)

2-[6-(2-硝基-苯基)-咪唑并[2，1-b]噻唑-3-基]-乙醇的制备：

将[6-(2-硝基-苯基)-咪唑并[2，1-b]噻唑-3-基]-乙酸(300mg，1.0mmol)混悬 于THF(20ml)中，与NMM(110ul，1当量)在室温下搅拌1小时。将反应 混合物冷却至0℃，加入氯甲酸异丁酯(131ul，1当量)，反应混合物于0℃搅 拌2小时，此时混合酸酐形成完全。于0℃滴加NaBH4(38mg)在水(5ml)中 的混合物，升温至室温，搅拌1小时。反应物在1当量条件下不能完全反应， 因此再加入3当量NaBH4。1小时后反应未完全，因此将反应混合物浓缩至干， 加入新鲜的THF，然后加入NaBH4(1当量)，搅拌过夜。LC-MS显示反应完 全，将混合物浓缩至干，加入CH2Cl2(50ml)和水(20ml)。待分层，水层用 CH2Cl2(3×50ml)萃取，合并有机层，用Na2SO4干燥，浓缩至干。产物用硅胶 纯化(具有15％至100％EtOAc梯度的戊烷)，浓缩，由CH3CN∶H2O冻干(160mg， 收率55％)。(MS，M++H＝290.0)

4-{2-[6-(2-硝基-苯基)-咪唑并[2，1-b]噻唑-3-基]-乙基}-哌嗪-1-甲酸叔丁酯的制 备：

将2-[6-(2-硝基-苯基)-咪唑并[2，1-b]噻唑-3-基]-乙醇(40mg，0.14mmol)溶 于无水CH2Cl2，冷却至0℃。依次加入三乙胺(19ul，1当量)和甲磺酰氯(11ul， 1当量)。将反应混合物升温至室温，搅拌30分钟。LC-MS显示反应未完全， 再加入三乙胺(19ul，1当量)和甲磺酰氯(11ul，1当量)。将反应混合物通过 加入2ml盐水骤冷，用CH2Cl2(2×2ml)萃取，经Na2SO4干燥，浓缩得甲磺酸 酯，为黄色膜状物。

将甲磺酸酯溶于无水乙腈(2ml)和三乙胺(38ul，2当量)，与N-Boc-哌嗪 (26mg，2当量)搅拌过夜，反应混合物仍然仅是甲磺酸酯。反应混合物中加 入碘化钠(41mg)，搅拌6天，用反相制备HPLC纯化。将馏分用NaHCO3(饱 和)碱化，浓缩除去CH3CN，水层用CH2Cl2萃取。有机层干燥浓缩得产品为 黄色膜状物。(MS，M++H＝458.2)

化合物680的制备：

在微波试管中加入4-{2-[6-(2-硝基-苯基)-咪唑并[2，1-b]噻唑-3-基]-乙基}-哌 嗪-1-甲酸叔丁酯(24mg，0.05mmol)、NaHS(30mg，10当量)和5ml甲醇。 将反应混合物在150℃下微波加热30分钟。反应进行但不完全。再加入30mg NaHS，在160℃下微波加热反应混合物30分钟。再次加入15mg NaHS，在160℃ 下微波加热反应混合物20分钟。过滤除去固体，溶液用MgSO4干燥，浓缩得 胺中间体。将该胺(0.05mmol)与吡啶(3ml)和2-喹喔啉基氯(20mg，2当量) 混合，在160℃下微波加热10分钟。反应部分完成，因此再加入两当量2-喹喔 啉基氯(20mg)后，将反应物在160℃下微波加热20分钟。反应混合物浓缩至 干，用硅胶色谱纯化(CH2Cl2洗脱，0至5％MeOH梯度)。将残余物用25％TFA/ CH2Cl2处理3小时，浓缩，用反相制备HPLC纯化。(MS，M++H＝484.2)。

3-氯甲基-6-(2-硝基-苯基)-咪唑并[2，1-b]噻唑的制备：

向搅拌的[6-(2-硝基-苯基)-咪唑并[2，1-b]噻唑-3-基]-甲醇(1.0g，3.63mmol) 的无水二氯甲烷(15ml)溶液中缓慢加入亚硫酰氯(2ml，7.5当量)。溶液变为 均一，然后有黄色沉淀生成。5分钟后，加入催化量的DMF(1滴)，将混合物 搅拌1小时，浓缩至干，依次用CH2Cl2(2x)、乙醚(1x)处理，减压干燥。获 得1.53g黄色固体，推测为定量收率。(MS，M++H＝294.0)

化合物700的制备：

重排：将在2ml1-甲基-哌嗪中的3-氯甲基-6-(2-硝基-苯基)-咪唑并[2，1-b]噻 唑(126mg，0.300mmol)在110℃下微波加热30分钟。将反应混合物浓缩至干， 用甲醇处理得粗3-(4-甲基-哌嗪-1-基甲基)-6-(2-硝基-苯基)-咪唑并[2，1-b]噻唑。

硝基还原：将上述残余物溶于乙醇(20ml)，在搅拌下加入10％钯炭。抽气 再冲入氮气(3x)，H2气球(1atm)条件下搅拌18小时。反应混合物用Celite 过滤，浓缩至干，用CH2Cl2和戊烷处理获得胺，为红色油状物。

酰胺的形成：将上步制得的胺溶于吡啶(3ml)，将其加入装有2-喹喔啉基 氯(64mg，1.1当量)的微波试管中，在160℃下微波加热30分钟。反应仅完 成50％，因此再加入另一份2-喹喔啉基氯，继续在160℃加热30分钟。将反应 混合物浓缩至干，用反相制备HPLC纯化。(MS，M++H＝512.2)

使用适当的胺，采用类似于化合物700的制备方法制备化合物714、715、 716和717。(Boc保护基团在纯化前通过用25％TFA的CH2Cl2溶液处理除去。) 化合物718的制备：

将6-(2-硝基-苯基)-咪唑并[2，1-b]噻唑-3-甲酸乙酯(0.342g，1mmol)溶于3∶1 的乙醇∶THF(80ml)。向反应混合物中加入10％Pd/C(30mg)，反应混合物在 H2气球(1atm)条件下搅拌7天，并定时加入催化剂。反应混合物用Celite过 滤，浓缩至干，用戊烷处理得苯胺，为橙色固体，289mg。

上步制备的部分苯胺(56mg，200umol)溶于吡啶(4ml)，与2-喹喔啉基 氯(46mg，1.2当量)于室温搅拌过夜。反应混合物用乙醇骤冷，浓缩至干， 用CH2Cl2/戊烷处理。将残余物溶于CH2Cl2，用50％饱和NaHCO3水溶液洗涤， 经Na2SO4干燥。产品用硅胶纯化(具有0至5％甲醇梯度的CH2Cl2)。(MS，M+ +H＝444.1)

使用[6-(2-硝基-苯基)-咪唑并[2，1-b]噻唑-3-基]-乙酸甲酯作为起始原料，采 用与化合物718相同的方法制备化合物720。

化合物719的制备：

将6-{2-[(喹喔啉-2-羰基)-氨基]-苯基}-咪唑并[2，1-b]噻唑-3-甲酸乙酯溶于 1∶10 THF∶甲醇(33ml)，与1M NaOH水溶液(4ml)搅拌过夜。用LC-MS监测 反应完成。将反应混合物浓缩除去有机物，加入水(20ml)。将碱性(pH＝13) 水层用CH2Cl2(2×20ml)洗涤。水层用4M HCl酸化(pH＝2)，用CH2Cl2(3×20ml) 萃取。合并有机层，经Na2SO4干燥，过滤，浓缩，用戊烷研磨得期望的产物， 为橙色固体。(MS，M++H＝416.0)

使用类似的甲酯作为起始原料，采用与化合物719相同的制备方法制备化 合物721。

化合物745的制备：

重排：将3-氯甲基-6-(2-硝基-苯基)-咪唑并[2，1-b]噻唑(0.200mmol)、咪唑 (68mg，5当量)和于乙腈(3ml)中的三乙胺(140ul)在110℃微波加热30 分钟。将反应混合物浓缩至干。

硝基还原：将上步的残余物溶于甲醇(6ml)，加入NaHS(67mg，6当量) 在水(1ml)中的混合物，反应物于60℃搅拌过夜。次日早晨，加入另一份NaHS (67mg，6当量)，将反应物加热至85℃维持3小时。将反应物冷却，浓缩至 干，用CH2Cl2和水稀释，用CH2Cl2(2×40ml)萃取。合并有机层，干燥(Na2SO4)， 浓缩。

酰胺的形成：将上步制得的胺溶于吡啶(3ml)，和2-喹喔啉基氯(46mg， 1.2当量)于室温搅拌3小时。将反应混合物浓缩至干，用反相制备HPLC纯化。 和HCl冷冻干燥得HCl盐。(MS，M++H＝452.1)

实施例2：Sirtuin调节剂的鉴定

使用基于荧光偏振或质谱的测定法来鉴定SIRT1调节剂的活性。相同的测 定法可用于鉴定任何sirtuin蛋白的调节剂。荧光偏振测定法使用基于已知的 sirtuin脱乙酰作用靶-p53片段的两种不同肽中的一种。化合物1-18用含有具 有如下14个氨基酸残基的肽1的底物进行检测：GQSTSSHSK(Ac)NleSTEG (SEQ ID NO：1)，其中K(Ac)为乙酰化赖氨酸残基，Nle为正亮氨酸。将该肽用 荧光基团MR121(激发635nm/发射680nm)在C-端标记，用生物素在N-端标 记。肽底物的序列是基于多种修饰后的p53。特别是，与乙酰化赖氨酸不同，所 有的精氨酸和亮氨酸残基均被丝氨酸取代，使得肽在不存在脱乙酰作用的情况 下不易于被胰蛋白酶裂解。另外，由于蛋氨酸在合成和纯化过程中易于氧化， 因此将天然存在于该序列中的蛋氨酸残基用正亮氨酸替代。化合物19-56用含 有具有如下20个氨基酸残基的肽2的底物进行检测：EE-K(生物 素)-GQSTSSHSK(Ac)NleSTEG-K(MR121)-EE-NH2(SEQ ID NO：2)，其中K(生 物素)为生物素化赖氨酸残基，K(Ac)为乙酰化赖氨酸残基，Nle为正亮氨酸， K(MR121)为用MR121荧光基团修饰的赖氨酸残基。将该肽用荧光基团MR121 (激发635nm/发射680nm)在C-端标记，用生物素在N-端标记。肽底物的序 列是基于多种修饰后的p53。特别是，与乙酰化赖氨酸残基不同，所有的精氨酸 和亮氨酸残基均被丝氨酸取代，使得肽在不存在脱乙酰作用的情况下不易于被 胰蛋白酶裂解。另外，由于蛋氨酸在合成和纯化过程中易于氧化，因此将天然 存在于该序列中的蛋氨酸残基用正亮氨酸取代。作为测定过程中可选择的底物， 如下肽3同样被用于检测化合物19至56：Ac-EE-K(生物 素)-GQSTSSHSK(Ac)NleSTEG-K(5TMR)-EE-NH2(SEQ ID NO：3)，其中K(Ac) 为乙酰化赖氨酸残基，Nle为正亮氨酸。将该肽用荧光基团5TMR(激发540nm/ 发射580nm)在C-端标记。肽底物的序列也是基于多种修饰后的p53。另外， 由于蛋氨酸在合成和纯化过程中易于氧化，因此将天然存在于该序列中的蛋氨 酸残基用正亮氨酸取代。

肽底物在NAD+存在下接触sirtuin蛋白，使底物脱乙酰化，致使其对胰蛋白 酶引起的裂解敏感。然后加入胰蛋白酶，进行反应至完成(即脱乙酰化底物被 裂解)，释放出MR121或5TMR片段。然后在反应物中加入链霉抗生物素蛋白， 它可结合未裂解底物(如任何残留的乙酰化底物)和裂解肽底物的非荧光部分 (如含生物素片段)。观察到的对于结合至链霉抗生物素蛋白的全长肽底物的荧 光偏振信号强于观察到的对于释放的MR121或5TMR C-端片段的荧光偏振信 号。由此得到的荧光偏振与脱乙酰化水平成反比(如信号与surtuin蛋白活性成 反比)。由具有适当的激发和发射滤波器的微量培养板荧光偏振读数计 (Molecular Devices Spectramax MD)读取结果。

使用肽1的荧光偏振测定法操作过程如下：将0.5μM肽底物和150μM βNAD+与0.1μg/ml SIRT1在反应缓冲液中(25mM三羟甲基氨基甲烷-醋酸盐 (Tris-acetate)pH8，137mM Na-Ac，2.7mM K-Ac，1mM Mg-Ac，0.05％吐温-20， 0.1％普朗尼克F127(Pluronic F127)，10mM CaCl2，5mM DTT，0.025％BSA， 0.15mM烟酰胺)于37℃孵化60分钟。将测试化合物1-18溶于DMSO中，以 0.7μM至100μM中的11种浓度加入反应物中。

使用肽2的荧光偏振测定法可按如下操作：将0.5μM肽底物和120μM βNAD+与3nM SIRT1在反应缓冲液中(25mM三羟甲基氨基甲烷-醋酸盐 (Tris-acetate)pH8，137mM Na-Ac，2.7mM K-Ac，1mM Mg-Ac，0.05％吐温-20， 0.1％普朗尼克F127(Pluronic F127)，10mM CaCl2，5mM DTT，0.025％BSA) 于25℃孵化20分钟。将测试化合物19-56溶于DMSO中，以300μM至0.15μM 中的10种浓度稀释3倍后加入反应物中。

用SIRT1孵化后，向反应物中加入烟酰胺至最终浓度为3mM，以停止脱乙 酰化反应，并加入0.5μg/mL胰蛋白酶以裂解脱乙酰化底物。反应物在1μM链 霉抗生物素蛋白存在下于37℃孵化30分钟。荧光偏振在激发(650nm)和发射 (680nm)波长检测。然后测定不同浓度测试化合物存在条件下的sirtuin蛋白 活性水平，可与不存在测试化合物条件下的sirtuin蛋白活性水平进行比较，和/ 或与在如下所述阴性对照(如抑制水平)和阳性对照(如活化水平)中的sirtuin 蛋白活性水平进行比较。

对于荧光偏振测定法，抑制sirtuin活性的对照试验是通过在反应初始时加入 1μL 500mM烟酰胺作为阴性对照(如容许检测最大的sirtuin抑制)而进行的。 活化sirtuin活性的对照试验是通过用3nM sirtuin蛋白和代替化合物的1μL DMSO以达到底物脱乙酰化作用的基线(如检测校正的sirtuin活性)而进行的。

基于质谱的测定法使用如下20个氨基酸残基的肽：Ac-EE-K(生物 素)-GQSTSSHSK(Ac)NleSTEG-K(5TMR)-EE-NH2(SEQ ID NO：3)，其中K(Ac) 为乙酰化赖氨酸残基，Nle为正亮氨酸。将该肽用荧光基团5TMR(激发540nm/ 发射580nm)在C-端标记。肽底物的序列基于多种修饰后的p53。另外，由于 蛋氨酸在合成和纯化过程中易于氧化，因此将天然存在于该序列中的蛋氨酸残 基用正亮氨酸取代。

质谱测定法按如下操作：将0.5μM肽底物和120μM βNAD+与10nM SIRT1 在反应缓冲液中(50mM三羟甲基氨基甲烷-醋酸盐(Tris-acetate)pH8，137mM NaCl，2.7mM KCl，1mM MgCl2，5mM DTT，0.05％BSA)于25℃孵化25分 钟。测试化合物可按如前所述加入反应物中。将SirT1基因克隆入含T7-启动子 的载体中，转化入BL21(DE3)中。与SIRT1孵化25分钟后，加入10μL 10％甲 酸以停止反应。将反应物密封，并冷冻用于之后的质谱分析。检测底物肽的质 量以精确测定与脱乙酰化肽(产品)相比较的乙酰化程度(如起始原料)。

对于基于质谱的测定法，抑制sirtuin活性的对照试验是通过在反应初始时加 入1μL 500mM烟酰胺作为阴性对照(如容许检测最大的sirtuin抑制)而进行 的。活化sirtuin活性的对照试验是通过用10nM sirtuin蛋白和代替化合物的1μL DMSO检测底物在测定线性范围中给定时间点的脱乙酰作用的量而进行的。该 时间点和测试化合物所用的时间点相同，在线性范围中，终点表示速率的变化。

对于上述各个测定，SIRT1蛋白按如下方式表达和纯化。将SirT1基因克隆 入含T7-启动子的载体中，转化入BL21(DE3)中。通过与作为N-端His-tag融合 蛋白的1mM IPTG于18℃孵育过夜，在30000x g下采集，将蛋白表达。细胞用 溶胞缓冲液(50mM Tris-HCl，2mM三[2-羧乙基]膦(TCEP)，10μM ZnCl2，200mM NaCl)中的溶菌酶溶解，进一步超声处理10分钟使溶解完全。蛋白用Ni-NTA 柱(Amersham)纯化，将含纯蛋白的馏分混合，浓缩，用筛分柱(Sephadex S200 26/60球形)处理。收集含可溶蛋白的峰，用离子交换柱(MonoQ)处理。梯度 洗脱(200mM-500mM NaCl)得纯蛋白。将该蛋白浓缩，用透析缓冲液(20mM Tris-HCl，2mM TCEP)透析过夜。等分蛋白，于-80℃冷冻至进一步使用。

活化SIRT1的Sirtuin调节化合物用如上所述的测定法鉴定，如下表4所示。 抑制SIRT1的Sirtuin调节化合物用如上所述的测定法鉴定，如下表5所示。在 荧光偏振测定法(FP)或质谱测定法(MS)中活化化合物的ED50值用A′(ED50 ＝＜5μM)，A(ED50＝5-50μM)，B(ED50＝51-100μM)，C(ED50＝101-150μM) 和D(ED50＝＞150μM)表示。NT表示化合物未用所述测定方法检测。NA表 示化合物在所述测定方法中无活性。倍增活化作用(fold activation)，如用MS 所测定，由A(倍增活化＞250％)，B(倍增活化＜250％)或C(无倍增活化) 表示。白藜芦醇活化SIRT1的ED50是16μM，在MS测定中白藜芦醇对SIRT1 的倍增活化作用约为200％。相似地，抑制化合物的IC50值由A(IC50＝＜50μM)， B(IC50＝51-100μM)，C(IC50＝101-150μM)和D(IC50＝＞150μM)表示。

表4.Sirt1活化剂

表5.Sirt1抑制剂

实施例3：使用SIRT3鉴定Sirtuin调节剂

用荧光偏振测定法鉴定SIRT3调节剂活性。可用同样的测定方法鉴定任何 sirtuin蛋白调节剂。该测定法利用基于已知的sirtuin脱乙酰靶-组蛋白H4片段 的肽底物。该底物含有具有如下14个氨基酸残基的肽：生物素 -GASSHSK(Ac)VLK(MR121)(SEQ ID NO：4)，其中K(Ac)为乙酰化赖氨酸残基。 将该肽用荧光基团MR121(激发635nm/发射680nm)在C-端标记，用生物素 在N-端标记。

肽底物在NAD+存在下接触sirtuin蛋白，使底物脱乙酰化，致使其对胰蛋白 酶引起的裂解敏感。然后加入胰蛋白酶，进行反应至完成(如脱乙酰化底物被 裂解)，释放出MR121片段。然后在反应物中加入链霉抗生物素蛋白，它可结 合未裂解底物(即任何残留的乙酰化底物)和裂解肽底物的非荧光部分(即含 生物素片段)。观察到的对于结合至链霉抗生物素蛋白的全长肽底物的荧光偏振 信号强于观察到的对于释放的MR121 C-端片段的荧光偏振信号。因此所得到的 荧光偏振与脱乙酰化水平成反比(如信号与surtuin蛋白活性成反比)。由具有适 当的激发和发射滤波器的微量培养板荧光偏振读数计(Molecular Devices Spectramax MD)读取结果。

荧光偏振测定法可按如下操作：将0.5μM肽底物和50μM βNAD+与2nM SIRT3在反应缓冲液(25mM三羟甲基氨基甲烷-醋酸盐(Tris-acetate)pH8， 137mM Na-Ac，2.7mM K-Ac，1mM Mg-Ac，0.1％普朗尼克F127(Pluronic F127)，10mM CaCl2，1mM TCEP，0.025％BSA)中，于37℃孵化60分钟。将 测试化合物溶于DMSO中，以0.7μM至100μM中的11种浓度加入反应物中。 测定中使用的SIRT3蛋白对应于具有N-端His-tag的人SIRT3氨基酸残基 102-399。该蛋白在E.coli中过度表达，用标准技术在镍螯合柱上纯化。用SIRT3 孵化60分钟后，向反应物中加入烟酰胺至最终浓度为3mM，以停止脱乙酰化 作用，并加入0.5μg/mL胰蛋白酶以裂解脱乙酰化底物。反应物在1mM链霉抗 生物素蛋白存在条件下于37℃孵化30分钟。荧光偏振在激发(650nm)和发射 (680nm)波长下检测。然后测定不同浓度测试化合物存在条件下的sirtuin蛋 白活性水平，可与不存在测试化合物条件下的sirtuin蛋白活性水平进行比较， 和/或与在如下所述阴性对照(如抑制水平)和阳性对照(如活化水平)中的sirtuin 蛋白活性水平进行比较。

抑制sirtuin活性的对照试验是通过在反应初始时加入30mM烟酰胺(如容 许检测最大的sirtuin抑制)而进行的。活化sirtuin活性的对照试验是通过用 0.5μg/mL sirtuin蛋白以达到底物脱乙酰化作用的基线(如检测校正的sirtuin活 性)而进行的。

活化SIRT3的Sirtuin调节化合物用如上所述的测定方法进行鉴定，如下表 6所示。抑制SIRT3的Sirtuin调节化合物用如上所述的测定方法进行鉴定，如 下表7所示。活化化合物的ED50值用A(ED50＝＜50μM)，B(ED50＝51-100μM)， C(ED50＝101-150μM)和D(ED50＝＞150μM)表示。白藜芦醇活化SIRT3的 ED50＞300μM。相似地，抑制化合物的IC50值由A(IC50＝＜50μM)，B(IC50 ＝51-100μM)，C(IC50＝101-150μM)和D(IC50＝＞150μM)表示。

表6

表7

实施例4：基于细胞的Sirtuin活性测定

脂肪调动测定(Fat mobilization assay)。将3T3L1细胞以2mL 30000细胞/ml 通过24孔板接种于Dulbecco改良Eagle培养基(Dulbecco’s Modified Eagle Medium，DMEM)/10％新生小牛血清中。然后将各个孔通过加入100nM罗格列 酮使其分化。未分化对照组细胞在测定过程中维持于新鲜的DMEM/10％新生小 牛血清中。在第48小时(2天)，通过加入DMEM/10％胎牛血清/0.5mM 3-异丁 基-1-甲基黄嘌呤(IBMX)/1μM地塞米松引起脂肪形成。在第96小时(4天)， 通过除去介质，向每个孔中加入2ml DMEM/10％胎牛血清以及10μg/ml胰岛素 或100nM罗格列酮进一步促使脂肪形成。在第144小时(6天)和第192小时 (8天)，所有的孔均替换为DMEM/10％胎牛血清。

在第240小时(从最初的细胞接种开始第10天)，向各个孔中重复三次加入 浓度范围内的测试化合物，并加入100nM罗格列酮。三个孔的未分化细胞依然 置于DMEM/10％新生牛血清中，三个孔的分化对照细胞则置于新鲜DMEM/10 ％新生小牛血清和100nM罗格列酮中。作为脂肪调动的阳性对照，使用浓度范 围为100μM至0.4μM、稀释三倍的白藜芦醇(SIRT1活化剂)。

在第312小时(13天)，移除介质，细胞用PBS洗涤两次。包括没有细胞 的空白对照组的每个孔中加入0.5mL油红O溶液(由Adipogenesis Assay Kit， Cat.#ECM950，Chemicon Intemational，Temecula，CA提供)。板于室温孵化15分 钟，然后除去油红O染色溶液，各个孔用1mL洗液(Adipogenesis Assay Kit) 洗3次。除去最后一次洗液后直接观察、扫描或拍摄染色板。萃取染料 (Adipogenesis Assay Kit)，用酶标仪(plate reader)于520nm定量分析。定量 直观结果如图16所示。

第一脊神经节(Primary dorsal root ganglion，DGR)细胞保护测定。测试化 合物通过所述的轴突保护测定方法进行检测(Araki et al.(2004) Science 305(5686)：1010-3)。简而言之，将来自E12.5胚胎的小鼠DGR外植体在1nM神 经生长因子存在条件下培养。通过向培养基介质中加入5-氟尿嘧啶将非神经元 细胞从培养基中移除。测试化合物于轴突切断前12至24小时加入。在第10-20 天于体外(DIV)用18-穿刺针移除神经元胞体来切除神经突。

实施例5：基于ATP细胞的测定法

该实施例描述了SIRT1活化剂-白藜芦醇在NCI-H358细胞中对细胞ATP 水平的影响。细胞ATP水平是细胞代谢速率和扩展地，线粒体功能的间接量度。 由于SIRT1的活化与体内增加的线粒体生物学发生有关，该研究的目的在于通 过细胞ATP水平作为指标测定白藜芦醇是否增加了线粒体功能。ATP测试与细 胞活力测试相结合，因此细胞ATP水平可校正活细胞水平。细胞ATP水平用 ATPLite 1 Step Kit(PerkinElmer)测量，细胞活力用细胞渗透染料，AlamarBlueTM 测量。

细胞ATP测定为多重测定，需要测定给定细胞样本的ATP水平和活力。该 测试在96孔测定板中进行，数据以测定板中每孔的[ATP]/活力形式表示。

ATPLite 1StepTM Kit为用于检测ATP的单步发光细胞基测定法。该试剂盒包 括冻干的底物混合物，由D-荧光素和荧光虫(Photinus pyrali)酶荧光素酶组成。 另外，该试剂盒中含有基于洗涤剂的重组缓冲液，其引起细胞膜破裂。测试混 合物中的荧光素酶根据下述的示意反应催化游离细胞ATP和D-荧光素之间的反 应，产生生物荧光。产生的光量与细胞ATP浓度成正比。

AlamarBlueTM测定法为使用可溶的非毒性细胞渗透染料的单步测定法，细胞 渗透染料加入细胞生长培养基中。该染料在活细胞中进行电子还原，但不在死 细胞中进行电子还原。还原染料产物产生荧光信号，可通过荧光板分析仪检测 (激发545nm和发射575nm)。在给定孔中产生的荧光量与活细胞的数目成正 比。通过该测定获取活力信号，用以校正ATPLite 1StepTM测定结果中的ATP信 号。

制备细胞ATP测定法中的测试底物：将白藜芦醇称重，置于棕色管形瓶中。 将该物质溶于100％媒介物(DMSO)中，使最终浓度为10mM(原液)，将原 液如SOP 7.10所述用100％DMSO系列稀释。在化合物板中白藜芦醇的最终浓 度为0.008、0.023、0.069、0.206、0.617、1.852、5.556、16.667、50和150μM。

白藜芦醇在NCI-H358细胞中对细胞ATP水平的影响通过所述细胞ATP测 定法测定。实验设计汇总于图1。在该测定法中，将NCI-H358细胞(获得自 American Tissue Culture Collection，ATCC)接种于96孔微板(104细胞/孔)。 NCI-H358生长培养基由RPMI 1640培养基加入10％FBS、100mg/mL链霉素和 100单位/mL青霉素组成。三个重复细胞微板用15μL 10个浓度的白藜芦醇 (0.008、0.023、0.069、0.206、0.617、1.852、5.556、16.667、50和150μM) 或15μL媒介物(DMSO，最终浓度为0.5％，每板重复12次)处理。于细胞生 长条件下将化合物处理48小时后，将板从孵化器中移出，每孔加入15μL AlamarBlueTM染料。细胞微板与染料在生长条件下孵化2小时，随后用板分析 仪测定荧光。除去含有AlamarBlueTM的介质，每孔用100μL PBS洗板。除去洗 液，每孔中加入200μL 1xATPLite 1Step试剂。然后用板分析仪测定发光。用发 光扫描测定的每孔ATP信号通过由荧光扫描仪测定的相应细胞活力值校正，从 而得到每个活细胞单位的平均ATP水平(ATP/vCell)。然后将各个处理的 ATP/vCell归一化至其各自细胞微板的平均媒介物ATP/vCell，从而得到标准化 的ATP/vCell(标准ATP/vCell)。最后，将各个单独处理的标准ATP/vCell通过 板重复数平均，从而得到平均标准ATP/vCell。增加细胞ATP水平的白藜芦醇剂 量具有大于1.0的标准ATP/vCell。用S形剂量-反应曲线模型通过最佳拟合曲线 分析测定使标准ATP/vCell最大增加50％的白藜芦醇浓度(EC50 ATP)。

测量用10种浓度的白藜芦醇或仅用媒介物处理的细胞的ATP水平。各个 ATP水平归一化至相应处理孔的细胞活力，从而得到ATP/vCell值。随后将各个 ATP/vCell值归一化至其各自细胞微板的平均媒介物ATP/vCell值。

数据为标准ATP/vCell(任意单位)。图2为标绘的10种浓度白藜芦醇与其 相应的标准ATP/vCell值的最佳拟合、S形剂量-反应曲线。这些值为三块板重 复的平均值。白藜芦醇以剂量依赖方式增加NCI-H358细胞中的细胞ATP水平。 细胞ATP水平的最大增加为3倍，出现于用50μM白藜芦醇处理的情况。通过 测定，白藜芦醇的EC50ATP为29μM。

实施例6：以ATP细胞基试验筛选测试化合物

大量化合物通过实施例5所述测试方法筛选其对ATP水平的影响。结果如 表8所示。增加细胞内ATP水平的化合物的ED50值表示为A(ED50＝＜50μM)、 B(ED50＝51-100μM)、C(ED50＝101-150μM)、和D(ED50＝＞150μM)。NA表 示化合物未用所述方法测定。同样地，降低细胞内ATP水平的化合物的IC50值 表示为A(IC50＝＜50μM)、B(IC50＝51-100μM)、C(IC50＝101-150μM)、和D (IC50＝＞150μM)。

表8

等同物

本发明提供了sirtuin活化化合物和其使用方法等等。已对本发明的具体实施 例进行了讨论，上述说明书是举例说明性的，而非限制性的。对本领域技术人 员而言，在阅读了本说明书之后，本发明的许多变化是显然的。本发明的全部 范围应当参照权利要求及其等同物的全部范围，和说明书及其所述的变化来确 定。

相关申请

本申请要求下述美国临时申请的优先权：2005年8月4日提交的60/705612、 2005年12月2日提交的60/741783、2006年3月3日提交的60/779370和2006 年4月14日提交的60/792276，在此将其全部内容引入作为参考。

引入作为参考

本文述及的所有出版物和专利，包括下述条目在此通过将其全部引入本文作 为参考，正如每个出版物或专利均明确和分别地指明引入作为参考那样。如果 有所矛盾，以本申请，包括本文的任何定义为准。

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此外，引入作为参考的是：PCT公开WO 2005/002672；2005/002555；和 2004/016726。