CCR2的4-氮杂环丁烷基-1-杂芳基-环己醇拮抗剂
阅读：585发布：2021-02-02
专利汇可以提供CCR2的4-氮杂环丁烷基-1-杂芳基-环己醇拮抗剂专利检索，专利查询，专利分析的服务。并且本 发明 包括式(I)的化合物，其中：R1、R2、R3和R4如 说明书 中所定义。本发明还包括包含式(I)化合物的药物组合物以及通过施用式(I)化合物来 预防 、 治疗 或改善CCR2介导的综合征、障碍或 疾病 (例如II型糖尿病、 肥胖症 或哮喘)的方法。，下面是CCR2的4-氮杂环丁烷基-1-杂芳基-环己醇拮抗剂专利的具体信息内容。
1.一种式(I)化合物，
其中：
R1是
吡啶基、
吡啶-N-氧化物、1H-吡啶-2-酮基、吲哚基、吡嗪基、3-H-噻唑-2-酮基、嘧啶基、苯并 唑基、 唑基、噻唑基、异噻唑基、吡唑基、咪唑基、噻吩基、呋喃基、[1，2，4] 二唑基或[1，3，
4]噻二唑基；其中所述吡啶基、吡啶-N-氧化物、嘧啶基、吡唑基、咪唑基、噻吩基或噻唑基任选地被一个选自以下的取代基取代：OC(1-4)烷基、OC(3-6)环烷基、OCH2CF3、OCH2Ph、F、CN、CH2CN、C(1-4)烷基、CH2CF3、N(C(1-4)烷基)2、C(1-4)烷基OH、Si(CH3)3、-C≡CH、SCH3、S(O)CH3、SO2CH3、吡咯烷基、OH、NH2、NHCN、CO2H、CONH2、NHCO2C(1-4)烷基、N(SO2CH3)2、NHSO2CH3、NHC(O)CF3、NHC(1-4)烷基、NHCO2H、NHCO2C(1-4)烷基、NHCOC(1-4)烷基、NHCONH2、NHCONHC(1-4)烷基和Br；
或者所述吡啶基可被一个OCH3基团和一个CH3取代；或者其中所述嘧啶基任选地被一个N(C(1-4)烷基)2基团或一个或两个OCH3基团取代；或者其中所述噻唑基任选地在两个相邻碳原子上被取代以形成稠合的二环体系苯并噻唑-2-基，或者其中所述苯并噻唑-2-基任选地被Br或OCH3取代；或者其中所述1H-吡啶-2-酮基任选地被一个选自以下的取代基取代：CH2CN、C(1-4)烷基、CH2CF3和CH2CH2OH，或者所述1H-吡啶-2-酮基可任选地被最多2个甲基基团取代；或者其中所述[1，2，4] 二唑基任选地在任何碳原子上被CCl3或吡咯烷基取代，或者作为选择所述[1，2，4] 二唑基的所述碳原子上的两个氢原子可被氧代基团替换；
2
R 是C(1-4)烷基、NH2，NO2、NHCH2CH2OH、N(C(1-4)烷基)2、N(SO2CH3)2、CN、F、Cl、Br、CF3、C(3-6)环烷基、杂环基、OCF3、OCF2H、CF2H或OC(1-4)烷基；
3 2 3
R 是H、F、Cl、CF3或OC(1-4)烷基；或者，R 和R 可与它们所连接的苯基结合在一起以形成苯并[1，3]二氧杂环戊烯基、2，3-二氢-苯并呋喃基或2，3-二氢-苯并[1，4]二氧杂环己烯基；
4
R 是H、OC(1-4)烷基或F；
及其溶剂化物、水合物、互变异构体、前药和可药用的盐。
2.根据权利要求1所述的化合物，其中：
1
R 是
吡啶 基、
吡啶-N-氧化物、1H-吡啶-2-酮基、吲哚基、吡嗪基、3-H-噻唑-2-酮基、嘧啶基、甲基取代的咪唑基、任选地被Br取代的甲基取代的吡唑基、任选地被Br取代的噻吩基、苯并唑基、 唑基、噻唑基、异噻唑基、[1，2，4] 二唑基或[1，3，4]噻二唑基；其中所述吡啶基、吡啶-N-氧化物或噻唑基任选地被一个选自以下的取代基取代：OC(1-4)烷基、OC(3-6)环烷基、OCH2CF3、OCH2Ph、F、CN、CH2CN、C(1-4)烷基、CH2CF3、N(C(1-4)烷基)2、C(1-4)烷基OH、Si(CH3)3、-C≡CH、SCH3、S(O)CH3、SO2CH3、吡咯烷基、OH、NH2、NHCN、CO2H、CONH2、NHCO2C(1-4)烷基、N(SO2CH3)2、NHSO2CH3、NHC(O)CH3、NHC(O)CF3、NHC(1-4)烷基和Br；或者所述吡啶基可被一个OCH3基团和一个CH3取代；其中所述嘧啶基任选地被一个N(C(1-4)烷基)2基团或一个或两个OCH3基团取代；其中所述噻唑基任选地在两个相邻碳原子上被取代以形成稠合的二环体系苯并噻唑-2-基，其中所述苯并噻唑-2-基任选地被Br或OCH3取代；其中所述1H-吡啶-2-酮基任选地被一个选自以下的取代基取代：CH2CN、C(1-4)烷基、CH2CF3和CH2CH2OH，或者所述1H-吡啶-2-酮基可任选地被最多2个甲基基团取代；其中所述[1，2，4] 二唑基任选地在任何碳原子上被CCl3或吡咯烷基取代，或者作为选择所述[1，2，4] 二唑基的所述碳原子上的两个氢原子可被氧代基团替换；
2
R 是C(1-4)烷基、NH2、NO2、NHCH2CH2OH、N(C(1-4)烷基)2、N(SO2CH3)2、CN、F、Cl、Br、CF3、吡咯烷基、OCF3、OCF2H、CF2H或OC(1-4)烷基；
3 2 3
R 是H、F、Cl、CF3或OC(1-4)烷基；或者，R 和R 可与它们所连接的苯基结合在一起以形成苯并[1，3]二氧杂环戊烯基基团；
4
R 是H、OCH3或F；
及其溶剂化物、水合物、互变异构体、前药和可药用的盐。
3.根据权利要求2所述的化合物，其中：
1
R 是吡啶基、吡啶-N-氧化物、嘧啶基、甲基取代的咪唑基、任选地被Br取代的甲基取代的吡唑基、任选地被Br取代的噻吩基、苯并 唑基、 唑基、噻唑基、异噻唑基或[1，3，4]噻二唑基；其中所述吡啶基、吡啶-N-氧化物或噻唑基任选地被一个选自以下的取代基取代：OC(1-4)烷基、OC(3-6)环烷基、OCH2CF3、OCH2Ph、F、CN、C(1-4)烷基、N(C(1-4)烷基)2、C(1-4)烷基OH、Si(CH3)3、-C≡CH、SCH3、S(O)CH3、SO2CH3、吡咯烷基、OH、NH2、NHCN和Br；或者所述吡啶基可被一个OCH3基团和一个CH3取代；其中所述嘧啶基任选地被一个N(C(1-4)烷基)2基团或一个或两个OCH3基团取代；其中所述噻唑基任选地在两个相邻碳原子上被取代以形成稠合的二环体系苯并噻唑-2-基，其中所述苯并噻唑-2-基任选地被Br或OCH3取代；
2
R 是NH2、NO2、NHCH2CH2OH、N(CH3)2、N(SO2CH3)2、CN、F、Cl、Br、CF3、吡咯烷基或OCH3；
3 2 3
R 是H、F、Cl、CF3或OCH3；或者，R 和R 可与它们所连接的苯基结合在一起以形成苯并[1，3]二氧杂环戊烯基基团；
4
R 为H或F；
及其溶剂化物、水合物、互变异构体、前药和可药用的盐。
4.根据权利要求3所述的化合物，其中：
1
R 是吡啶基、吡啶-N-氧化物、嘧啶基、甲基取代的咪唑基、任选地被Br取代的甲基取代的吡唑基、任选地被Br取代的噻吩基、苯并 唑基、 唑基、噻唑基、异噻唑基或[1，3，4]噻二唑基；其中所述吡啶基或吡啶-N-氧化物任选地被一个选自以下的取代基取代：OC(1-4)烷基、OC(3-6)环烷基、OCH2CF3、OCH2Ph、F、CN、C(1-4)烷基、N(C(1-4)烷基)2和Br；或者所述吡啶基可被一个OCH3基团和一个CH3取代；其中所述嘧啶基任选地被一个N(C(1-4)烷基)2基团或一个或两个OCH3基团取代；其中所述噻唑基任选地被C(1-4)烷基、CH2OH、Si(CH3)3、-C≡CH、SCH3、S(O)CH3、SO2CH3、OH、NH2、N(C(1-4)烷基)2、吡咯烷基、OC(1-4)烷基、NHCN取代，或者所述噻唑基可在两个相邻碳原子上被取代以形成稠合的二环体系苯并噻唑-2-基，其中所述苯并噻唑-2-基任选地被Br取代；
及其溶剂化物、水合物、互变异构体、前药和可药用的盐。
5.根据权利要求4所述的化合物，其中：
1
R 是吡啶基、甲氧基取代吡啶-N-氧化物、嘧啶基、甲基取代的咪唑基、任选地被Br取代的甲基取代的吡唑基、任选地被Br取代的噻吩基、苯并 唑基、 唑基、噻唑基、异噻唑基或[1，3，4]噻二唑基；其中所述吡啶基任选地被一个选自以下的取代基取代：OCH3、OCH2CH3、OCH(CH3)2、OC(CH3)3、环丁氧基、OCH2CF3、OCH2Ph、F、CN、CH3、N(CH3)2和Br；或者所述吡啶基可被一个OCH3基团和一个CH3取代；其中所述嘧啶基任选地被一个N(CH3)2基团或一个或两个OCH3基团取代；其中所述噻唑基任选地被CH2OH、Si(CH3)3、CH3、CH2CH3、CH(CH3)2、-C≡CH、SCH3、S(O)CH3、SO2CH3、OH、NH2、N(CH3)2、吡咯烷基、OCH3、OCH(CH3)2、NHCN取代，或者所述噻唑基可在两个相邻碳原子上被取代以形成稠合的二环体系苯并噻唑-2-基，其中所述苯并噻唑-2-基任选地被Br取代；
2
R 是CF3、F、Cl、CN或OCH3，
3 2 3
R 是H、F、Cl或CF3，或者，R 和R 可与它们所连接的苯基结合在一起以形成苯并[1，
3]二氧杂环戊烯基基团；
4
R 为H或F；
及其溶剂化物、水合物、互变异构体、前药和可药用的盐。
6.根据权利要求1所述的化合物，其选自由以下化合物组成的组：
及其溶剂化物、水合物、互变异构体、前药和可药用的盐。
7.根据权利要求6所述的化合物，其选自由以下化合物组成的组：
及其溶剂化物、水合物、互变异构体、前药和可药用的盐。
8.一种以下化学式的化合物
及其溶剂化物、水合物、互变异构体、前药和可药用的盐。
9.一种式(Ia)的化合物，
其中：
1
R 是
吡啶基、吡
啶-N-氧化物、1H-吡啶-2-酮基、吲哚基、吡嗪基、3-H-噻唑-2-酮基、嘧啶基、苯并 唑基、 唑基、噻唑基、异噻唑基、吡唑基、咪唑基、噻吩基、呋喃基、[1，2，4] 二唑基或[1，3，
4]噻二唑基；其中所述吡啶基、吡啶-N-氧化物、嘧啶基、吡唑基、咪唑基、噻吩基或噻唑基任选地被一个选自以下的取代基取代：OC(1-4)烷基、OC(3-6)环烷基、OCH2CF3、OCH2Ph、F、CN、CH2CN、C(1-4)烷基、CH2CF3、N(C(1-4)烷基)2、C(1-4)烷基OH、Si(CH3)3、-C≡CH、SCH3、S(O)CH3、SO2CH3、吡咯烷基、OH、NH2、NHCN、CO2H、CONH2、NHCO2C(1-4)烷基、N(SO2CH3)2、NHSO2CH3、NHC(O)CF3、NHC(1-4)烷基、NHCO2H、NHCO2C(1-4)烷基、NHCOC(1-4)烷基、NHCONH2、NHCONHC(1-4)烷基和Br；
或者所述吡啶基可被一个OCH3基团和一个CH3取代；或者其中所述嘧啶基任选地被一个N(C(1-4)烷基)2基团或一个或两个OCH3基团取代；或者其中所述噻唑基任选地在两个相邻碳原子上被取代以形成稠合的二环体系苯并噻唑-2-基，或者其中所述苯并噻唑-2-基任选地被Br或OCH3取代；或者其中所述1H-吡啶-2-酮基任选地被一个选自以下的取代基取代：CH2CN、C(1-4)烷基、CH2CF3和CH2CH2OH，或者所述1H-吡啶-2-酮基可任选地被最多2个甲基基团取代；或者其中所述[1，2，4] 二唑基任选地在任何碳原子上被CCl3或吡咯烷基取代，或者作为选择所述[1，2，4] 二唑基的所述碳原子上的两个氢原子可被氧代基团替换；
2
R 是C(1-4)烷基、NH2，NO2、NHCH2CH2OH、N(C(1-4)烷基)2、N(SO2CH3)2、CN、F、Cl、Br、CF3、C(3-6)环烷基、杂环基、OCF3、OCF2H、CF2H或OC(1-4)烷基；
3 2 3
R 是H、F、Cl、CF3或OC(1-4)烷基；或者，R 和R 可与它们所连接的苯基结合在一起以形成苯并[1，3]二氧杂环戊烯基、2，3-二氢-苯并呋喃基或2，3-二氢-苯并[1，4]二氧杂环己烯基基团；
4
R 是H、OC(1-4)烷基或F；
及其溶剂化物、水合物、互变异构体、前药和可药用的盐。
10.根据权利要求9所述的化合物，其中：
1
R 是
吡啶基、
吡啶-N-氧化物、1H-吡啶-2-酮基、吲哚基、吡嗪基、3-H-噻唑-2-酮基、嘧啶基、甲基取代的咪唑基、任选地被Br取代的甲基取代的吡唑基、任选地被Br取代的噻吩基、苯并唑基、 唑基、噻唑基、异噻唑基、[1，2，4] 二唑基或[1，3，4]噻二唑基；其中所述吡啶基、吡啶-N-氧化物或噻唑基任选地被一个选自以下的取代基取代：OC(1-4)烷基、OC(3-6)环烷基、OCH2CF3、OCH2Ph、F、CN、CH2CN、C(1-4)烷基、CH2CF3、N(C(1-4)烷基)2、C(1-4)烷基OH、Si(CH3)3、-C≡CH、SCH3、S(O)CH3、SO2CH3、吡咯烷基、OH、NH2、NHCN、CO2H、CONH2、NHCO2C(1-4)烷基、N(SO2CH3)2、NHSO2CH3、NHC(O)CH3、NHC(O)CF3、NHC(1-4)烷基和Br；或者所述吡啶基可被一个OCH3基团和一个CH3取代；其中所述嘧啶基任选地被一个N(C(1-4)烷基)2基团或一个或两个OCH3基团取代；其中所述噻唑基任选地在两个相邻碳原子上被取代以形成稠合的二环体系苯并噻唑-2-基，其中所述苯并噻唑-2-基任选地被Br或OCH3取代；其中所述1H-吡啶-2-酮基任选地被一个选自以下的取代基取代：CH2CN、C(1-4)烷基、CH2CF3和CH2CH2OH，或者所述1H-吡啶-2-酮基可任选地被最多2个甲基基团取代；其中所述[1，2，4] 二唑基任选地在任何碳原子上被CCl3或吡咯烷基取代，或者作为选择所述[1，2，4] 二唑基的所述碳原子上的两个氢原子可被氧代基团替换；
2
R 是C(1-4)烷基、NH2、NO2、NHCH2CH2OH、N(C(1-4)烷基)2、N(SO2CH3)2、CN、F、Cl、Br、CF3、吡咯烷基、OCF3、OCF2H、CF2H或OC(1-4)烷基；
3 2 3
R 是H、F、Cl、CF3或OC(1-4)烷基；或者，R 和R 可与它们所连接的苯基结合在一起以形成苯并[1，3]二氧杂环戊烯基基团；
4
R 是H、OCH3或F；
及其溶剂化物、水合物、互变异构体、前药和可药用的盐。
11.根据权利要求10所述的化合物，其中：
1
R 是吡啶基、吡啶-N-氧化物、嘧啶基、甲基取代的咪唑基、任选地被Br取代的甲基取代的吡唑基、任选地被Br取代的噻吩基、苯并 唑基、 唑基、噻唑基、异噻唑基或[1，3，4]噻二唑基；其中所述吡啶基、吡啶-N-氧化物或噻唑基任选地被一个选自以下的取代基取代：OC(1-4)烷基、OC(3-6)环烷基、OCH2CF3、OCH2Ph、F、CN、C(1-4)烷基、N(C(1-4)烷基)2、C(1-4)烷基OH、Si(CH3)3、-C≡CH、SCH3、S(O)CH3、SO2CH3、吡咯烷基、OH、NH2、NHCN和Br；或者所述吡啶基可被一个OCH3基团和一个CH3取代；其中所述嘧啶基任选地被一个N(C(1-4)烷基)2基团或一个或两个OCH3基团取代；其中所述噻唑基任选地在两个相邻碳原子上被取代以形成稠合的二环体系苯并噻唑-2-基，其中所述苯并噻唑-2-基任选地被Br或OCH3取代；
2
R 是NH2、NO2、NHCH2CH2OH、N(CH3)2、N(SO2CH3)2、CN、F、Cl、Br、CF3、吡咯烷基或OCH3；
3 2 3
R 是H、F、Cl、CF3或OCH3；或者，R 和R 可与它们所连接的苯基结合在一起以形成苯并[1，3]二氧杂环戊烯基基团；
4
R 是H或F；
及其溶剂化物、水合物、互变异构体、前药和可药用的盐。
12.根据权利要求11所述的化合物，其中：
1
R 是吡啶基、吡啶-N-氧化物、嘧啶基、甲基取代的咪唑基、任选地被Br取代的甲基取代的吡唑基、任选地被Br取代的噻吩基、苯并 唑基、 唑基、噻唑基、异噻唑基或[1，3，4]噻二唑基；其中所述吡啶基或吡啶-N-氧化物任选地被一个选自以下的取代基取代：OC(1-4)烷基、OC(3-6)环烷基、OCH2CF3、OCH2Ph、F、CN、C(1-4)烷基、N(C(1-4)烷基)2和Br；或者所述吡啶基可被一个OCH3基团和一个CH3取代；其中所述嘧啶基任选地被一个N(C(1-4)烷基)2基团或一个或两个OCH3基团取代；其中所述噻唑基任选地被C(1-4)烷基、CH2OH、Si(CH3)3、-C≡CH、SCH3、S(O)CH3、SO2CH3、OH、NH2、N(C(1-4)烷基)2、吡咯烷基、OC(1-4)烷基、NHCN取代，或者所述噻唑基可在两个相邻碳原子上被取代以形成稠合的二环体系苯并噻唑-2-基，其中所述苯并噻唑-2-基任选地被Br取代；
及其溶剂化物、水合物、互变异构体、前药和可药用的盐。
13.根据权利要求12所述的化合物，其中：
1
R 是吡啶基、甲氧基取代的吡啶-N-氧化物、嘧啶基、甲基取代的咪唑基、任选地被Br取代的甲基取代的吡唑基、任选地被Br取代的噻吩基、苯并 唑基、 唑基、噻唑基、异噻唑基或[1，3，4]噻二唑基；其中所述吡啶基任选地被一个选自以下的取代基取代：OCH3、OCH2CH3、OCH(CH3)2、OC(CH3)3、环丁氧基、OCH2CF3、OCH2Ph、F、CN、CH3、N(CH3)2和Br；或者所述吡啶基可被一个OCH3基团和一个CH3取代；其中所述嘧啶基任选地被一个N(CH3)2基团或一个或两个OCH3基团取代；其中所述噻唑基任选地被CH2OH、Si(CH3)3、CH3、CH2CH3、CH(CH3)2、-C≡CH、SCH3、S(O)CH3、SO2CH3、OH、NH2、N(CH3)2、吡咯烷基、OCH3、OCH(CH3)2、NHCN取代，或者所述噻唑基可在两个相邻碳原子上被取代以形成稠合的二环体系苯并噻唑-2-基，其中所述苯并噻唑-2-基任选地被Br取代；
2
R 是CF3、F、Cl、CN或OCH3，
3 2 3
R 是H、F、Cl或CF3，或者，R 和R 可与它们所连接的苯基结合在一起以形成苯并[1，
3]二氧杂环戊烯基基团；
4
R 是H或F；
及其溶剂化物、水合物、互变异构体、前药和可药用的盐。
14.根据权利要求9所述的化合物，其选自由以下化合物组成的组：
及其溶剂化物、水合物、互变异构体、前药和可药用的盐。
15.一种以下化学式的化合物
及其溶剂化物、水合物、互变异构体、前药和可药用的盐。
16.根据权利要求15所述的化合物，其具有下式
17.根据权利要求16所述的结晶化合物，其具有以下的XRPD°2θ峰：
位置[°2θ]
7.0
7.4
9.3
11.0
12.6
14.3
14.4
14.8
15.3
17.1
17.4
18.3
18.7
19.2
19.7
21.3
21.8
22.2
22.9
23.5
23.9
24.5
24.7
25.3
26.3
28.2
28.8
29.5
。
18.一种药物组合物，所述药物组合物包含根据权利要求1所述的化合物以及可药用
载体。
19.一种药物组合物，所述药物组合物通过将根据权利要求1所述的化合物与可药用
载体混合制成。
20.一种制备药物组合物的方法，所述方法包括将根据权利要求1所述的化合物与可
药用载体混合。
21.一种药物组合物，所述药物组合物包含根据权利要求9所述的化合物以及可药用
载体。
22.一种药物组合物，所述药物组合物通过将根据权利要求9所述的化合物与可药用
载体混合制成。
23.一种制备药物组合物的方法，所述方法包括将根据权利要求9所述的化合物与可
药用载体混合。
24.一种用于预防、治疗或改善CCR2介导的综合征、障碍或疾病的方法，所述方法包括向有需要的受试者给予治疗上有效量的根据权利要求1所述的化合物。
25.一种预防、治疗或改善综合征、障碍或疾病的方法，其中所述综合征、障碍或疾病选自：慢性阻塞性肺病(COPD)、眼科疾病、葡萄膜炎、动脉粥样硬化症、类风湿性关节炎、牛皮癣、牛皮癣性关节炎、特应性皮炎、多发性硬化症、克罗恩氏病、溃疡性结肠炎、肾炎、器官同种异体移植物排斥、纤维化肺、肾功能不全、I型糖尿病、II型糖尿病、糖尿病并发症、糖尿病性肾病变、糖尿病性视网膜病、糖尿病性视网膜炎、糖尿病性微血管病、体重过重、肥胖症、肥胖症相关胰岛素抵抗、代谢综合征、肺结核、肉样瘤病、侵入性葡萄球菌病、白内障手术后的炎症、过敏性鼻炎、过敏性结膜炎、慢性荨麻疹、哮喘、过敏性哮喘、牙周病、牙周炎、齿龈炎、齿龈疾病、舒张性心肌疾病、心脏梗塞、心肌炎、慢性心力衰竭、血管狭窄、再狭窄、再灌注障碍、腹主动脉瘤、肾小球肾炎、实体瘤和癌症、慢性淋巴细胞性白血病、慢性粒细胞性白血病、多发性骨髓瘤、恶性骨髓瘤、何杰金氏病、膀胱癌、乳腺癌、子宫颈癌、结肠癌、肺癌、前列腺癌或胃癌以及慢性神经炎性疾病，包括但不限于阿尔茨海默氏病、缺血性中风、脊髓损伤、神经挫伤和外伤性脑损伤，所述方法包括向有需要的受试者给予有效量的根据权利要求1所述的化合物。
26.一种预防、治疗或改善综合征、障碍或疾病的方法，其中所述综合征、障碍或疾病选自：I型糖尿病、II型糖尿病、糖尿病并发症、糖尿病性肾病变、糖尿病性视网膜病、糖尿病性视网膜炎、糖尿病性微血管病变、肥胖症、肥胖症相关胰岛素抵抗、代谢综合征、哮喘和过敏性哮喘，所述方法包括向有需要的受试者给予治疗上有效量的根据权利要求1所述的化合物。
27.一种治疗疾病的方法，所述疾病选自：II型糖尿病、肥胖症和哮喘，所述方法包括向有需要的受试者给予治疗上有效量的根据权利要求1所述的化合物。
CCR2的4-氮杂环丁烷基-1-杂芳基-环己醇拮抗剂
[0002] 本专利申请要求享有2008年12月10日和2009年4月7日提交的美国临时申请No.61/121,272和No.61/167,295的优先权，所述临时申请各自的内容以其全文引用的方式并入本文。
技术领域
[0003] 本发明涉及取代的二哌啶化合物、其药物组合物和使用方法，所述取代的二哌啶化合物为趋化性细胞因子受体2(CCR2)的拮抗剂。更具体地讲，CCR2拮抗剂是可用于预防、治疗或改善CCR2介导的综合征、障碍或疾病的取代的哌啶基丙烯酰胺化合物。
背景技术
[0004] CCR2是GPCR受体家族的成员(已知均为趋化因子受体)，由单核细胞和记忆型T淋巴细胞表达。CCR2信号级联涉及磷脂酶(PLCβ2)、蛋白激酶(PKC)和脂质激酶(PI-3激酶)的激活。
[0006] 单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)是CC趋化因子亚家族(其中CC表示具有相邻的第一个和第二个半胱氨酸的亚家族)的成员，能与细胞表面趋化因子受体2(CCR2)结合。
MCP-1是强效的趋化因子，其在结合至CCR2后可介导单核细胞和淋巴细胞向炎症部位的迁移(即趋化性)。MCP-1也由心肌细胞、血管内皮细胞、成纤维细胞、软骨细胞、平滑肌细胞、肾小球膜细胞、肺泡细胞、T-淋巴细胞、巨噬细胞等表达。
MCP-1是强效的趋化因子，其在结合至CCR2后可介导单核细胞和淋巴细胞向炎症部位的迁移(即趋化性)。MCP-1也由心肌细胞、血管内皮细胞、成纤维细胞、软骨细胞、平滑肌细胞、肾小球膜细胞、肺泡细胞、T-淋巴细胞、巨噬细胞等表达。
[0007] 在单核细胞进入炎性组织并分化成巨噬细胞后，单核细胞分化提供数种促炎性调节剂的第二来源，所述调节剂包括肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素-1(IL-1)、IL-8(CXC趋化因子亚家族的成员，其中CXC表示在第一个和第二个半胱氨酸之间有一个氨基酸残基)、IL-12、花生四烯酸代谢物(例如PGE2和LTB4)、氧衍生的自由基、基质金属蛋白酶和补体成分。
[0008] 慢性炎性疾病的动物模型研究已表明通过拮抗剂抑制MCP-1和CCR2之间的结合能抑制炎症应答。MCP-1和CCR2之间的相互作用已被指涉及(见Rollins B J，Monocyte chemoattractant protein 1：a potential regulator of monocyte recruitment in inflammatory disease(单核细胞化学引诱物蛋白质1：炎性疾病中单核细胞募集的潜在调节因子)，Mol.Med.Today，1996，2：198；和Dawson J等人，Targeting monocyte chemoattractant protein-1 signaling in disease(疾病中靶向单核细胞化学引诱物蛋白质-1信号转导)Expert Opin Ther.Targets，2003Feb.7(1)：35-48)炎性疾病病理例如牛皮癣、葡萄膜炎、动脉粥样硬化、类风湿性关节炎(RA)、多发性硬化症、克罗恩氏病、肾炎、器官同种异体移植物排斥、纤维化肺、肾功能不全、II型糖尿病和糖尿病并发症、糖尿病性肾病变、糖尿病性视网膜病、糖尿病性视网膜炎、糖尿病性微血管病、肺结核、肉样瘤病、侵入性葡萄球菌病、白内障手术后的炎症、过敏性鼻炎、过敏性结膜炎、慢性荨麻疹、慢性阻塞性肺疾病(COPD)、过敏性哮喘、牙周病、牙周炎、龈炎、齿龈疾病、舒张性心肌疾病、心脏梗塞、心肌炎、慢性心力衰竭、血管狭窄、再狭窄、再灌注障碍、肾小球肾炎、实体瘤和癌症、慢性淋巴细胞性白血病、慢性粒细胞性白血病、多发性骨髓瘤、恶性骨髓瘤、何杰金氏病以及膀胱癌、乳腺癌、子宫颈癌、结肠癌、肺癌、前列腺癌和胃癌。单核细胞迁移被MCP-1拮抗剂(MCP-1的抗体或可溶性失活片段)抑制，所述拮抗剂已被证实可抑制关节炎、哮喘和葡萄膜炎的发展。MCP-1和CCR2敲除(KO)小鼠均表明单核细胞向炎性病变处的浸润显著减少。此外，这种KO小鼠可抵抗实验性变应性脑脊髓炎(EAE，一种人MS模型)、蟑螂过敏原诱导的哮喘、动脉粥样硬化症和葡萄膜炎的发展。类风湿性关节炎和克罗恩氏病患者在用TNF-α拮抗剂(例如单克隆抗体和可溶性受体)以与MCP-1表达及浸润性巨噬细胞数目的减少相关的剂量水平进行治疗过程中得到了改善。
[0009] MCP-1已被指涉及季节性过敏性鼻炎和慢性过敏性鼻炎的发病机理中，其已被发现于大多数尘螨过敏患者的鼻粘膜中。还已发现MCP-1可体外诱发组胺从嗜碱粒细胞的释放。在过敏病症期间，过敏原和组胺均已显示会引发(即上调)MCP-1和其他趋化因子在过敏性鼻炎患者的鼻粘膜中的表达，表明这些患者中存在正反馈回路。
[0010] 仍然需要小分子CCR2拮抗剂来预防、治疗或改善由MCP-1诱导的单核细胞和淋巴细胞向炎性部位的迁移所导致的CCR2介导的炎性综合征、障碍或疾病。
[0013] 图2是以°2θ表示的化合物40a(游离碱一水合物)的研磨样品的X射线粉末衍射图案。
具体实施方式
[0014] 本发明包括式I的化合物。
[0015]
[0016] 其中：
[0017] R 1 是吡啶
基、吡啶-N-氧化物、1H-吡啶-2-酮基、吲哚基、吡嗪基、3-H-噻唑-2-酮基、嘧啶基、苯并唑基、 唑基、噻唑基、异噻唑基、吡唑基、咪唑基、噻吩基、呋喃基、[1，2，4] 二唑基或[1，
3，4]噻二唑基；其中所述吡啶基、吡啶-N-氧化物、嘧啶基、吡唑基、咪唑基、噻吩基或噻唑基任选地被一个选自以下的取代基取代：OC(1-4)烷基、OC(3-6)环烷基、OCH2CF3、OCH2Ph、F、CN、CH2CN、C(1-4)烷基、CH2CF3、N(C(1-4)烷基)2、C(1-4)烷基OH、Si(CH3)3、-C≡CH、SCH3、S(O)CH3、SO2CH3、吡咯烷基、OH、NH2、NHCN、CO2H、CONH2、NHCO2C(1-4)烷基、N(SO2CH3)2、NHSO2CH3、NHC(O)CF3、NHC(1-4)烷基、NHCO2H、NHCO2C(1-4)烷基、NHCOC(1-4)烷基、NHCONH2、NHCONHC(1-4)烷基和Br；
或者所述吡啶基可被一个OCH3基团和一个CH3取代；或者其中所述嘧啶基任选地被一个N(C(1-4)烷基)2基团或一个或两个OCH3基团取代；或者其中所述噻唑基任选地在两个相邻碳原子上被取代以形成稠合的二环体系苯并噻唑-2-基，或者其中所述苯并噻唑-2-基任选地被Br或OCH3取代；或者其中所述1H-吡啶-2-酮基任选地被一个选自以下的取代基取代：CH2CN、C(1-4)烷基、CH2CF3和CH2CH2OH，或所述1H-吡啶-2-酮基任选地被最多2个甲基基团取代；或者其中所述[1，2，4] 二唑基任选地在任何碳原子上被CCl3或吡咯烷基取代，或者所述[1，2，4] 二唑基的所述碳原子上的两个氢原子可被氧代基团替换；
基、吡啶-N-氧化物、1H-吡啶-2-酮基、吲哚基、吡嗪基、3-H-噻唑-2-酮基、嘧啶基、苯并唑基、 唑基、噻唑基、异噻唑基、吡唑基、咪唑基、噻吩基、呋喃基、[1，2，4] 二唑基或[1，
3，4]噻二唑基；其中所述吡啶基、吡啶-N-氧化物、嘧啶基、吡唑基、咪唑基、噻吩基或噻唑基任选地被一个选自以下的取代基取代：OC(1-4)烷基、OC(3-6)环烷基、OCH2CF3、OCH2Ph、F、CN、CH2CN、C(1-4)烷基、CH2CF3、N(C(1-4)烷基)2、C(1-4)烷基OH、Si(CH3)3、-C≡CH、SCH3、S(O)CH3、SO2CH3、吡咯烷基、OH、NH2、NHCN、CO2H、CONH2、NHCO2C(1-4)烷基、N(SO2CH3)2、NHSO2CH3、NHC(O)CF3、NHC(1-4)烷基、NHCO2H、NHCO2C(1-4)烷基、NHCOC(1-4)烷基、NHCONH2、NHCONHC(1-4)烷基和Br；
或者所述吡啶基可被一个OCH3基团和一个CH3取代；或者其中所述嘧啶基任选地被一个N(C(1-4)烷基)2基团或一个或两个OCH3基团取代；或者其中所述噻唑基任选地在两个相邻碳原子上被取代以形成稠合的二环体系苯并噻唑-2-基，或者其中所述苯并噻唑-2-基任选地被Br或OCH3取代；或者其中所述1H-吡啶-2-酮基任选地被一个选自以下的取代基取代：CH2CN、C(1-4)烷基、CH2CF3和CH2CH2OH，或所述1H-吡啶-2-酮基任选地被最多2个甲基基团取代；或者其中所述[1，2，4] 二唑基任选地在任何碳原子上被CCl3或吡咯烷基取代，或者所述[1，2，4] 二唑基的所述碳原子上的两个氢原子可被氧代基团替换；
[0018] R2是C(1-4)烷基、NH2，NO2、NHCH2CH2OH、N(C(1-4)烷基)2、N(SO2CH3)2、CN、F、Cl、Br、CF3、C(3-6)环烷基、杂环基、OCF3、OCF2H、CF2H或OC(1-4)烷基；
[0019] R3是H、F、Cl、CF3或OC(1-4)烷基；或者，R2和R3可与它们所连接的苯基合在一起形成苯并[1，3]二氧杂环戊烯基(dioxolyl)、2，3-二氢-苯并呋喃基或2，3-二氢-苯并[1，4]二氧杂环己烯基(dioxinyl)基团；
[0020] R4是H、OC(1-4)烷基或F；
[0021] 及其溶剂化物、水合物、互变异构体、前药和可药用的盐。
[0022] 本发明的一个实施例包括式(Ia)的化合物。
[0023]
[0024] 其中R1、R2、R3和R4如上式(I)所定义。
[0025] 本发明的另一个实施例包括式(I)和/或式(Ia)的化合物，其中：1
[0026] R 是吡啶、吡啶-N-氧化物、1H-吡啶-2-酮基、吲哚基、吡嗪基、3-H-噻唑-2-酮基、嘧啶基、甲基取代的咪唑基、任选被Br取代的甲基取代的吡唑基、任选被Br取代的噻吩基、苯并唑基、 唑基、噻唑基、异噻唑基、[1，2，4] 二唑基或[1，3，4]噻二唑基；其中所述吡啶基、吡啶-N-氧化物或噻唑基任选地被一个选自以下的取代基取代：OC(1-4)烷基、OC(3-6)环烷基、OCH2CF3、OCH2Ph、F、CN、CH2CN、C(1-4)烷基、CH2CF3、N(C(1-4)烷基)2、C(1-4)烷基OH、Si(CH3)3、-C≡CH、SCH3、S(O)CH3、SO2CH3、吡咯烷基、OH、NH2、NHCN、CO2H、CONH2、NHCO2C(1-4)烷基、N(SO2CH3)2、NHSO2CH3、NHC(O)CH3、NHC(O)CF3、NHC(1-4)烷基和Br；或者所述吡啶基可被一个OCH3基团和一个CH3取代；其中所述嘧啶基任选地被一个N(C(1-4)烷基)2基团或一个或两个OCH3基团取代；其中所述噻唑基任选地在两个相邻碳原子上被取代以形成稠合的二环体系苯并噻唑-2-基，其中所述苯并噻唑-2-基任选地被Br或OCH3取代；其中所述1H-吡啶-2-酮基任选地被一个选自以下的取代基取代：CH2CN、C(1-4)烷基、CH2CF3和CH2CH2OH，或所述1H-吡啶-2-酮基任选地被最多2个甲基基团取代；其中所述[1，2，4] 二唑基任选地在任何碳原子上被CCl3或吡咯烷基取代，或者所述碳原子上的两个氢原子可被氧代基团替换；
[0027] R2是C(1-4)烷基、NH2、NO2、NHCH2CH2OH、N(C(1-4)烷基)2、N(SO2CH3)2、CN、F、Cl、Br、CF3、吡咯烷基、OCF3、OCF2H、CF2H或OC(1-4)烷基；
[0028] R3是H、F、Cl、CF3或OC(1-4)烷基；或者，R2和R3可与它们所连接的苯基合在一起形成苯并[1，3]二氧杂环戊烯基基团；
[0029] R4是H、OCH3或F；
[0030] 及其溶剂化物、水合物、互变异构体、前药和可药用的盐。
[0031] 本发明的另一个实施例包括式(I)和/或式(Ia)的化合物，其中：
[0032] R1是吡啶基、吡啶-N-氧化物、嘧啶基、甲基取代的咪唑基、任选地被Br取代的甲基取代的吡唑基、任选地被Br取代的噻吩基、苯并 唑基、 唑基、噻唑基、异噻唑基或[1，3，4]噻二唑基；其中所述吡啶基、吡啶-N-氧化物或噻唑基任选地被一个选自以下的取代基取代：OC(1-4)烷基、OC(3-6)环烷基、OCH2CF3、OCH2Ph、F、CN、C(1-4)烷基、N(C(1-4)烷基)2、C(1-4)烷基OH、Si(CH3)3、-C≡CH、SCH3、S(O)CH3、SO2CH3、吡咯烷基、OH、NH2、NHCN和Br；或者所述吡啶基可被一个OCH3基团和一个CH3取代；其中所述嘧啶基任选地被一个N(C(1-4)烷基)2基团或一个或两个OCH3基团取代；其中所述噻唑基任选地在两个相邻碳原子上被取代以形成稠合的二环体系苯并噻唑-2-基，其中所述苯并噻唑-2-基任选地被Br或OCH3取代；
[0033] R2是NH2、NO2、NHCH2CH2OH、N(CH3)2、N(SO2CH3)2、CN、F、Cl、Br、CF3、吡咯烷基或OCH3；
[0034] R3是H、F、Cl、CF3或OCH3；或者，R2和R3可与它们所连接的苯基结合在一起以形成苯并[1，3]二氧杂环戊烯基基团；
[0035] R4为H或F；
[0036] 及其溶剂化物、水合物、互变异构体、前药和可药用的盐。
[0037] 本发明的另一个实施例包括式(I)和/或式(Ia)的化合物，其中：
[0038] R1是吡啶基、吡啶-N-氧化物、嘧啶基、甲基取代的咪唑基、任选地被Br取代的甲基取代的吡唑基、任选地被Br取代的噻吩基、苯并 唑基、 唑基、噻唑基、异噻唑基或[1，3，4]噻二唑基；其中所述吡啶基或吡啶-N-氧化物任选地被一个选自以下的取代基取代：OC(1-4)烷基、OC(3-6)环烷基、OCH2CF3、OCH2Ph、F、CN、C(1-4)烷基、N(C(1-4)烷基)2和Br；或者所述吡啶基可被一个OCH3基团和一个CH3取代；其中所述嘧啶基任选地被一个N(C(1-4)烷基)2基团或一个或两个OCH3基团取代；其中所述噻唑基任选地被C(1-4)烷基、CH2OH、Si(CH3)3、-C≡CH、SCH3、S(O)CH3、SO2CH3、OH、NH2、N(C(1-4)烷基)2、吡咯烷基、OC(1-4)烷基、NHCN取代，或者所述噻唑基可在两个相邻碳原子上被取代以形成稠合的二环体系苯并噻唑-2-基，其中所述苯并噻唑-2-基任选地被Br取代；
[0039] R2是NH2、NO2、NHCH2CH2OH、N(CH3)2、N(SO2CH3)2、CN、F、Cl、Br、CF3、吡咯烷基或OCH3；
[0040] R3是H、F、Cl、CF3或OCH3；或者，R2和R3可与它们所连接的苯基结合在一起以形成苯并[1，3]二氧杂环戊烯基基团；
[0041] R4为H或F；
[0042] 及其溶剂化物、水合物、互变异构体、前药和可药用的盐。
[0043] 本发明的另一个实施例包括式(I)和/或式(Ia)的化合物，其中：
[0044] R1是吡啶基、甲氧基取代吡啶-N-氧化物、嘧啶基、甲基取代的咪唑基、任选地被Br取代的甲基取代的吡唑基、任选地被Br取代的噻吩基、苯并 唑基、 唑基、噻唑基、异噻唑基或[1，3，4]噻二唑基；其中所述吡啶基任选地被一个选自以下的取代基取代：OCH3、OCH2CH3、OCH(CH3)2、OC(CH3)3、环丁氧基、OCH2CF3、OCH2Ph、F、CN、CH3、N(CH3)2和Br；或者所述吡啶基可被一个OCH3基团和一个CH3取代；其中所述嘧啶基任选地被一个N(CH3)2基团或一个或两个OCH3基团取代；其中所述噻唑基任选地被CH2OH、Si(CH3)3、CH3、CH2CH3、CH(CH3)2、-C≡CH、SCH3、S(O)CH3、SO2CH3、OH、NH2、N(CH3)2、吡咯烷基、OCH3、OCH(CH3)2、NHCN取代，或者所述噻唑基可在两个相邻碳原子上被取代以形成稠合的二环体系苯并噻唑-2-基，其中所述苯并噻唑-2-基任选地被Br取代；
[0045] R2是CF3、F、Cl、CN、OCH3，
[0046] R3是H、F、Cl、CF3，或者，R2和R3可与它们所连接的苯基结合在一起以形成苯并[1，3]二氧杂环戊烯基基团；
[0047] R4是H、F；
[0048] 及其溶剂化物、水合物、互变异构体、前药和可药用的盐。
[0049] 本发明的另一个实施例是选自以下的化合物：
[0050]
[0051]
[0052]
[0053]
[0054]
[0055]
[0056]
[0057]
[0058]
[0059]
[0060]
[0061]
[0062]
[0063]
[0064]
[0065] 及其溶剂化物、水合物、互变异构体、前药和可药用的盐。
[0066] 本发明的另一个实施例是选自以下的化合物：
[0067]
[0068]
[0069]
[0070]
[0071]
[0072] 及其溶剂化物、水合物、互变异构体、前药和可药用的盐。
[0073] 本发明的另一个实施例是一种化合物，其为
[0074]
[0075] 及其溶剂化物、水合物、互变异构体、前药和可药用的盐。
[0076] 本发明的另一个实施例是选自以下的化合物：
[0077]
[0078]
[0079]
[0080]
[0081]
[0082]
[0083]
[0084]
[0085]
[0086]
[0087]
[0088]
[0089]
[0090]
[0091]
[0092] 及其溶剂化物、水合物、互变异构体、前药和可药用的盐。
[0093] 本发明的另一个实施例是化合物：
[0094]
[0095] 及其溶剂化物、水合物、互变异构体、前药和可药用的盐。
[0096] 另一个实施例是下式的化合物
[0097]
[0098] 本发明的另一个实施例是下式的结晶化合物
[0099]
[0100] 其具有以下XRPD °2Θ峰：
[0101]位置[°2θ]
7.0
7.4
9.3
11.0
12.6
14.3
14.4
14.8
15.3
17.1
17.4
18.3
18.7
19.2
19.7
21.3
21.8
22.2
22.9
23.5
23.9
24.5
24.7
25.3
26.3
28.2
28.8
29.5
7.0
7.4
9.3
11.0
12.6
14.3
14.4
14.8
15.3
17.1
17.4
18.3
18.7
19.2
19.7
21.3
21.8
22.2
22.9
23.5
23.9
24.5
24.7
25.3
26.3
28.2
28.8
29.5
[0102]
[0103] 本发明的另一个实施例是包括式(I)或(Ia)的化合物以及可药用载体的药物组合物。
[0105] 本发明还提供预防、治疗或改善CCR2介导的综合征、障碍或疾病的方法，所述方法包括向有需要的受试者给予治疗上有效量的式(I)或(Ia)化合物或其形式、组合物或药物。CCR2介导的疾病的例子包括(但不限于)慢性阻塞性肺病(COPD)、眼科疾病、葡萄膜炎、动脉粥样硬化症、类风湿性关节炎、牛皮癣、牛皮癣性关节炎、特应性皮炎、多发性硬化症、克罗恩氏病、溃疡性结肠炎、肾炎、器官同种异体移植物排斥、纤维化肺、肾功能不全、I型糖尿病、II型糖尿病、糖尿病并发症、糖尿病性肾病变、糖尿病性视网膜病、糖尿病性视网膜炎、糖尿病性微血管病、体重过重、肥胖症、肥胖症相关胰岛素抵抗、代谢综合征、肺结核、肉样瘤病、侵入性葡萄球菌病、白内障手术后的炎症、过敏性鼻炎、过敏性结膜炎、慢性荨麻疹、哮喘、过敏性哮喘、牙周病、牙周炎、齿龈炎、齿龈疾病、舒张性心肌疾病、心脏梗塞、心肌炎、慢性心力衰竭、血管狭窄、再狭窄、再灌注障碍、腹主动脉瘤、肾小球肾炎、实体瘤和癌症、慢性淋巴细胞性白血病、慢性粒细胞性白血病、多发性骨髓瘤、恶性骨髓瘤、何杰金氏病、膀胱癌、乳腺癌、子宫颈癌、结肠癌、肺癌、前列腺癌或胃癌以及慢性神经炎性疾病(包括但不限于，阿尔茨海默氏病、缺血性中风、脊髓损伤、神经挫伤和外伤性脑损伤)。在本发明的一个实施例中，CCR2介导的综合征、障碍或疾病是炎性综合征、障碍或疾病。
[0106] 本发明还提供预防、治疗或改善CCR2介导的炎性综合征、障碍或疾病的方法，其中所述综合征、障碍或疾病与升高的MCP-1表达或MCP-1过度表达相关，或者为伴随与升高的MCP-1表达或MCP-1过度表达相关的综合征、障碍或疾病的炎性病症，所述方法包括向有需要的受试者给予治疗上有效量的式(I)或(Ia)的化合物或其形式、组合物或药物。
[0107] 本发明还提供一种预防、治疗或改善综合征、障碍或疾病的方法，其中所述综合征、障碍或疾病选自以下：慢性阻塞性肺病(COPD)、眼科疾病、葡萄膜炎、动脉粥样硬化症、类风湿性关节炎、牛皮癣、牛皮癣性关节炎、特应性皮炎、多发性硬化症、克罗恩氏病、溃疡性结肠炎、肾炎、器官同种异体移植物排斥、纤维化肺、肾功能不全、I型糖尿病、II型糖尿病、糖尿病并发症、糖尿病性肾病变、糖尿病性视网膜病、糖尿病性视网膜炎、糖尿病性微血管病、体重过重、肥胖症、肥胖症相关胰岛素抵抗、代谢综合征、肺结核、肉样瘤病、侵入性葡萄球菌病、白内障手术后的炎症、过敏性鼻炎、过敏性结膜炎、慢性荨麻疹、哮喘、过敏性哮喘、牙周病、牙周炎、齿龈炎、齿龈疾病、舒张性心肌疾病、心脏梗塞、心肌炎、慢性心力衰竭、血管狭窄、再狭窄、再灌注障碍、腹主动脉瘤、肾小球肾炎、实体瘤和癌症、慢性淋巴细胞性白血病、慢性粒细胞性白血病、多发性骨髓瘤、恶性骨髓瘤、何杰金氏病、膀胱癌、乳腺癌、子宫颈癌、结肠癌、肺癌、前列腺癌或胃癌以及慢性神经炎性疾病(包括但不限于，阿尔茨海默氏病、缺血性中风、脊髓损伤、神经挫伤和外伤性脑损伤)，所述方法包括向有需要的受试者给予治疗上有效量的式(I)或(Ia)的化合物或其形式、组合物或药物。
[0108] 另一个实施例是一种预防、治疗或改善综合征、障碍或疾病的方法，其中所述综合征、障碍或疾病选自以下：I型糖尿病、II型糖尿病、糖尿病并发症、糖尿病性肾病变、糖尿病性视网膜病、糖尿病性视网膜炎、糖尿病性微血管病变、肥胖症、肥胖症相关胰岛素抵抗、代谢综合征、哮喘和过敏性哮喘，所述方法包括向有需要的受试者给予治疗上有效量的式(I)或(Ia)的化合物或其形式、组合物或药物。
[0109] 另一个实施例是一种治疗疾病的方法，所述疾病选自以下：II型糖尿病、肥胖症和哮喘，所述方法包括向有需要的受试者给予治疗上有效量的式(I)或(Ia)的化合物或其形式、组合物或药物。
[0110] 在一个实施例中，本发明提供一种治疗或改善综合征、障碍或疾病的方法，其中所述综合征、障碍或疾病选自以下：眼科疾病、类风湿性关节炎、牛皮癣、牛皮癣性关节炎、特应性皮炎、慢性阻塞性肺疾病、过敏性鼻炎、哮喘、过敏性哮喘和牙周病，所述方法包括向有需要的受试者给予治疗上有效量的式(I)或(Ia)的化合物或其形式、组合物或药物。
[0112] 在另一个实施例中，本发明涉及一种由实例1至实例72中的任一实例的方法所制得的产物。
[0114] 在另一个实施例中，本发明涉及一种权利要求1所述的化合物，其为实例40的极性较低的异构体。
[0115] 在另一个实施例中，本发明涉及hCCR2敲入小鼠用于鉴定供在哮喘治疗中使用的CCR2拮抗剂的用途。
[0116] 在另一个实施例中，本发明涉及hCCR2敲入小鼠用于鉴定供在肥胖症治疗中使用的CCR2拮抗剂的用途。
[0117] 在另一个实施例中，本发明涉及hCCR2敲入小鼠用于鉴定在选自实例78、实例79和实例80的实例中所述的CCR2拮抗剂的用途。
[0118] 本发明还提供一种用于制备如本文所述的式(I)化合物的方法，所述方法包括在存在还原剂的情况下使式(V)
[0119] 的化合物与式(VI) 的化合物反应以提供式(I)的化合物。本发明还包括由这个方法制造的产物。
[0120] 一个实施例是一种用于制备本文所述的式(I)化合物的方法，所述方法包括在存在还原剂的情况下使式(VI) 的化合物与 反应以提供式(I)的化合物。另一个实施例是由这个方法制得的产物。
[0121] 定义
[0122] 除非另外指明，否则术语“烷基”指最多12个碳原子(优选最多6个碳原子)的直链和支链基团，包括但不限于甲基、乙基、丙基、异丙基、丁基、异丁基、仲丁基、叔丁基、戊基、异戊基、己基、异己基、庚基、辛基、2，2，4-三甲基戊基、壬基、癸基、十一烷基以及十二烷基。
[0123] 术语“C(a-b)”(其中a和b为表示指定数目的碳原子的整数)是指烷基、烯基、炔基、烷氧基或环烷基，或者指基团中的烷基部分，其中烷基作为前缀词根出现，含有a至b(包括a和b)个碳原子。例如，C(1-4)表示含有1、2、3或4个碳原子的基团。
[0124] 术语“环烷基”是指通过将一个氢原子从单环碳原子移除而衍生的饱和或部分不饱和单环或二环烃环基团。典型的环烷基包括环丙基、环丁基、环戊基、环戊烯基、环己基、环己烯基、环庚基和环辛基。另外实例包括C(3-8)环烷基、C(5-8)环烷基、C(3-12)环烷基、C(3-20)环烷基、十氢萘基和2，3，4，5，6，7-六氢-1H-茚基。
[0125] 术语“氧代(oxo)”是指官能团
[0126] 术语“杂环基”是指从单个碳或氮环原子脱去一个氢原子衍生的饱和或部分不饱和的单环基团。所述环包含3、4、5或6个环碳原子加上1、2或3个杂原子。合适的杂原子包括氮、氧和硫。典型的杂环基包括(但不限于)2H-吡咯、2-吡咯啉基、3-吡咯啉基、吡咯烷基、1，3-二氧戊环基、2-咪唑啉基(也称为4，5-二氢-1H-咪唑基)、咪唑烷基、2-吡唑啉基、吡唑烷基、四唑基、哌啶基、1，4-二 烷基、吗啉基、1，4-二噻烷基、硫代吗啉基、哌嗪基、氮杂环庚烷基、六氢-1，4-二氮杂卓基等。
[0127] 术语“杂芳族”或“杂芳基”指5至7元单环或8至10元双环芳环体系，其包含一个至四个选自N、O或S的杂原子，其中氮原子和硫原子可以任何允许的氧化态存在。例子包括(但不限于)苯并咪唑基、苯并噻唑基、苯并噻吩基、苯并 唑基、呋喃基、咪唑基、异噻唑基、异 唑基、 唑基、吡嗪基、吡唑基、吡啶基、嘧啶基、吡咯基、喹啉基、噻唑基和噻吩基。
[0128] 术语“杂原子”指氮原子、氧原子或硫原子，其中氮原子和硫原子可以任何允许的氧化态存在。
[0129] 对于在医学中使用而言，本发明化合物的盐类是指非毒性的“可药用的盐”。FDA批准的可药用盐形式(Ref.International J.Pharm.1986，33，201-217；J.Pharm.Sci.，1977，Jan，66(1)，p1)包括可药用酸式/阴离子盐或碱式/阳离子盐。
[0130] 在本说明书通篇中，化合物被描述为通常通过硅胶柱来分离，尽管还可以使用制备型薄层色谱法或者高压或低压液相色谱法。公认的是，当通过硅胶型分离介质洗脱化合物时，极性最小的化合物在极性较大的化合物之前洗脱。因此，术语“极性较小的异构体”是指会首先从硅胶型分离介质洗脱的异构体。
[0131] 通过X射线晶体学方法，“极性较小的异构体”被确定为“顺式”异构体，这是指环己基环体系上芳基或杂芳基环和氮杂环丁烷环之间的“顺式”关系。相应地，“极性较大的异构体”是指“反式”异构体。
[0132] 缩写
[0133] 在本专利申请说明书以及整个专利申请中，可能使用到如下缩写。
[0134]
[0135]
[0136] 可药用的酸性/阴离子盐包括(但不限于)乙酸盐、苯磺酸盐、苯甲酸盐、碳酸氢盐、酒石酸氢盐、溴化物、依地酸钙、樟脑磺酸盐、碳酸盐、氯化物、柠檬酸盐、二盐酸盐、依地酸盐、乙二磺酸盐、依托酸盐、乙磺酸酯、延胡索酸盐、葡庚糖酸盐、葡糖酸盐、谷氨酸盐、对羟乙酰氨基苯胂酸盐、己基间苯二酚盐、海巴明、氢溴酸盐、盐酸盐、羟萘酸盐、碘化物、羟乙基磺酸盐、乳酸盐、乳糖酸盐、苹果酸盐、马来酸盐、扁桃酸盐、甲磺酸盐、甲基溴化物、甲基硝酸盐、甲基硫酸盐、粘酸盐、萘磺酸盐、硝酸盐、双羟萘酸盐、泛酸盐、磷酸盐/二磷酸盐、聚半乳糖醛酸盐、水杨酸盐、硬脂酸盐、次乙酸盐、琥珀酸盐、硫酸盐、鞣酸盐、酒石酸盐、茶氯酸盐、甲苯磺酸盐以及三乙碘化物。有机酸或无机酸还包括但不限于氢碘酸、过氯酸、硫酸、磷酸、丙酸、乙醇酸、甲磺酸、羟基乙磺酸、草酸、2-萘磺酸、对甲苯磺酸、环己烷氨基磺酸、糖精酸或三氟乙酸。
[0137] 可药用的碱性/阳离子盐包括(不限于)铝、2-氨基-2-羟甲基-丙-1，3-二醇(也称为三(羟甲基)氨基甲烷、三羟甲基氨基甲烷(tromethane)或“TRIS”)、氨、苄星、叔-丁胺、钙、葡萄糖酸钙、氢氧化钙、氯普鲁卡因、胆碱、胆碱碳酸氢盐、氯化胆碱、环己胺、二乙醇胺、乙二胺、锂、LiOMe、L-赖氨酸、镁、葡甲胺、NH3、NH4OH、N-甲基-D-葡糖胺、哌啶、钾、叔丁醇钾、氢氧化钾(水溶液)、普鲁卡因、奎宁、钠、碳酸钠、2-乙基己酸钠(SEH)、氢氧化钠、三乙醇胺或锌。
[0138] 使用方法
[0139] 本发明涉及用于预防、治疗或改善CCR2介导的综合征、障碍或疾病的方法，所述方法包括向有需要的受试者给予有效量的式(I)的化合物或其形式、组合物或药物。
[0140] 可用到式(I)化合物的CCR2介导的综合症、障碍或疾病的例子包括慢性阻塞性肺病(COPD)、眼科疾病、葡萄膜炎、动脉粥样硬化症、类风湿性关节炎、牛皮癣、牛皮癣性关节炎、特应性皮炎、多发性硬化症、克罗恩氏病、溃疡性结肠炎、肾炎、器官同种异体移植物排斥、纤维化肺、肾功能不全、I型糖尿病、II型糖尿病、糖尿病并发症、糖尿病性肾病变、糖尿病性视网膜病、糖尿病性视网膜炎、糖尿病性微血管病、体重过重、肥胖症、肥胖症相关胰岛素抵抗、代谢综合征、肺结核、慢性阻塞性肺疾病、肉样瘤病、侵入性葡萄球菌病、白内障手术后的炎症、过敏性鼻炎、过敏性结膜炎、慢性荨麻疹、哮喘、过敏性哮喘、牙周病、牙周炎、齿龈炎、齿龈疾病、舒张性心肌疾病、心脏梗塞、心肌炎、慢性心力衰竭、血管狭窄、再狭窄、再灌注障碍、腹主动脉瘤、多发性硬化症、肾小球肾炎、实体瘤和癌症、慢性淋巴细胞性白血病、慢性粒细胞性白血病、多发性骨髓瘤、恶性骨髓瘤、何杰金氏病、膀胱癌、乳腺癌、子宫颈癌、结肠癌、肺癌、前列腺癌或胃癌以及慢性神经炎性疾病(包括但不限于，阿尔茨海默氏病、缺血性中风、脊髓损伤、神经挫伤和外伤性脑损伤)。
[0141] 就本发明方法而言，术语“施用”意指通过使用式(I)化合物或其形式、组合物或药物来治疗性地或预防性地预防、治疗或改善本文所述的综合征、障碍或疾病的方法。这种方法包括在治疗期间在不同时间施用有效量的所述化合物、化合物形式、组合物或药物，或者以组合形式同时施用。本发明的方法应理解为涵盖所有已知的治疗性处理方案。
[0142] 术语“受试者”是指患者，其可以是已作为治疗、观察或实验的对象的动物，通常是哺乳动物(通常是人)。在本发明的一个方面，受试者有发展与升高的MCP-1表达或MCP-1过度表达有关的综合征、障碍或疾病的风险(或易于发生所述发展)，或者为具有伴随与升高的MCP-1表达或MCP-1过度表达有关的综合征、障碍或疾病的炎性病症的患者。
[0143] 术语“治疗上的有效量”意指在组织系统、动物或人中引起生物学反应或药物反应的活性化合物或药剂的量，而所述生物学反应或药物反应正是研究人员、兽医、医生或其他临床医师所寻求的，包括预防、治疗或改善所治疗的综合征、障碍或疾病的症状。
[0144] 术语“葡萄膜炎”通常指任何涉及眼的炎性疾病。葡萄膜炎可以基于眼中存在炎症的部位而划分为以下临床上不同的亚型(百分比对应于已知符合这些类型的患者)：前部(51％)、中部(13％)、后部(20％)或全葡萄膜炎(16％)，并且根据病程，划分为急性(16％)、复发性(26％)或慢性(58％)。患有前葡萄膜炎的那些患者(·19％)尽管进行积极治疗，但最终也会发展成不能恢复的视力损伤，如单侧盲(9％)、双侧盲(2％)或者单侧或双侧视力受损(8％)。葡萄膜炎的大部分病例是特发性的，但已知的原因包括感染(如，弓形体病、巨细胞病毒等)或发展为全身炎性和/或自体免疫疾病(如，少年RA、HLA-B27相关的脊椎关节病变、肉状瘤病等)的组分。(HLA-B27：人白细胞抗原B*27-是由6号染色体上主要组织相容性复合体(MHC)中B基因座编码的I类表面抗原，其将微生物抗原呈递给T细胞。HLA-B27与某一组被称为血清反应阴性脊椎关节病变的自身免疫疾病密切相关。
[0145] 本发明化合物当用作CCR2抑制剂时，可以以在约0.5mg至约10g、优选约0.5mg至约5g的剂量范围内的有效剂量每日一次或一日多次施用。给药剂量将受诸如给药途径，受体的健康状况、体重和年龄，治疗频率以及同期治疗和不相干治疗的存在等因素影响。
[0146] 对于本领域的技术人员还将显而易见的是，本发明的化合物或其药物组合物的治疗有效剂量将根据所需效果而变化。因此，本领域技术人员可容易地确定待施用的最佳剂量，并且最佳剂量将随所使用的具体化合物、施用方式、制剂强度和疾病状况的进展而变化。另外，与受治的特定受试者相关的因素，包括受试者年龄、体重、饮食和施用时间，将导致需要将剂量调整至适当的治疗水平。因而上述剂量是一般情况的示例。当然，可存在个例，即较高或较低剂量范围是有益的，这也处于本发明的范围内。
[0147] 可以将式(I)和/或(Ia)的化合物配制成包含任何已知的可药用载体的药物组合物。示例性载体包括但不限于任何合适的溶剂、分散介质、包衣、抗菌剂和抗真菌剂以及等渗剂。同样可作为制剂组分的示例性赋形剂包括填充剂、粘合剂、崩解剂以及润滑剂。
[0148] 式(I)和/或(Ia)的化合物的可药用盐包括由无机或有机酸或碱形成的常规无毒盐或季铵盐。此类酸加成盐的例子包括乙酸盐、己二酸盐、苯甲酸盐、苯磺酸盐、柠檬酸盐、樟脑酸盐、十二烷基硫酸盐、盐酸盐、氢溴酸盐、乳酸盐、马来酸盐、甲磺酸盐、硝酸盐、草酸盐、新戊酸盐、丙酸盐、琥珀酸盐、硫酸盐以及酒石酸盐。碱盐包括铵盐、碱金属盐诸如钠盐和钾盐、碱土金属盐例如钙盐和镁盐、有机碱盐例如二环己胺盐以及氨基酸例如精氨酸的盐。也可以将碱性含氮基团用例如烷基卤进行季铵化。
[0149] 本发明的药物组合物可以通过任何能实现其预期目的的方式施用。例子包括通过肠胃外、皮下、静脉内、肌内、腹膜内、透皮、口腔或眼等途径施用。作为另外一种选择或同时地，可通过口服途径施用。适用于肠胃外施用的制剂包括水溶性形式的活性化合物(例如，水溶性盐)的水溶液、酸性溶液、碱性溶液、右旋糖水溶液、等渗碳水化合物溶液以及环糊精包合配合物。
[0150] 本发明还包括制备药物组合物的方法，该方法包括将可药用载体与本发明的任何化合物混合。另外，本发明包括通过将可药用载体与本发明的任何化合物混合而制备的药物组合物。本文所用的术语“组合物”旨在涵盖包含规定量的规定成分的产品，以及任何通过规定量的规定成分的组合而直接或间接得到的产品。
[0151] 多晶型物和溶剂化物
[0152] 此外，本发明的化合物可具有一种或多种多晶型或无定形结晶形式，这些多晶型或无定形结晶形式旨在包括在本发明的范围内。另外，化合物可例如与水形成溶剂化物(即水合物)或与普通有机溶剂形成溶剂化物。本文所用的术语“溶剂化物”意指本发明的化合物与一个或多个溶剂分子的物理缔合。这个物理缔合涉及不同程度的离子键键合和共价键键合，包括氢键键合。在某些情况下，当(例如)一个或多个溶剂分子掺入在结晶固体的晶格中时，溶剂化物将能够分离出来。术语“溶剂化物”旨在既涵盖溶液相溶剂化物又涵盖可分离的溶剂化物。合适的溶剂化物的非限制性例子包括乙醇化物、甲醇化物等。
[0153] 本发明旨在将本发明化合物的多晶型物和溶剂化物包括在其范围内。因此，在本发明的治疗方法中，术语“施用”将涵盖用本发明的化合物或其多晶型物或溶剂化物治疗、改善或预防本文所述的综合征、障碍或疾病的手段，其虽然没有被具体公开，但这明显包括在本发明的范围之内。
[0154] 在另一个实施例中，本发明涉及如式(I)或式(Ia)的实例中描述的用作药物特别是用作治疗CCR2介导的综合征障碍或疾病的药物的化合物。
[0155] 在另一个实施例中，本发明涉及如式(I)或式(Ia)的实例中描述的化合物用于制备供治疗与升高的或不适当的CCR2活性相关的疾病的药物的用途。
[0156] 本发明将本发明化合物的前药包括在其范围内。通常，此类前药将为所述化合物的官能化衍生物，其在体内容易地转化为所需的化合物。因此，在本发明的治疗方法中，术语“施用”应涵盖用具体公开的化合物或者用可能不具体公开、但在施用给患者后在体内转化为该指定的化合物的化合物来治疗多种所描述的疾病。选择和制备合适的前药衍生物的常规方法在(例如)以下文献中有描述：“Design of Prodrugs(前药设计)”，Ed.H.Bundgaard，Elsevier，1985。
[0157] 如果根据本发明的化合物具有至少一个手性中心，则它们可相应地作为对映体存在。如果化合物具有两个或更多个手性中心，则它们可另外还作为非对映体存在。应当理解，所有的这类异构体及其混合物都涵盖在本发明的范围内。
[0158] 如果用于制备根据本发明的化合物的方法产生立体异构体的混合物，则这些异构体可以通过常规技术如制备型色谱来分离。化合物可制备为外消旋形式，或者可通过对映体特异性合成或通过拆分来制备单独的对映体。可例如通过标准的技术将化合物拆分成它们的组分对映体，如通过与光学活性酸(如(-)-二对甲苯酰-D-酒石酸和/或(+)-二对甲苯酰-L-酒石酸)形成盐来形成非对映体对，然后进行分步结晶和游离碱的再生，从而进行拆分。也可通过形成非对映体酯或酰胺，然后进行色谱分离并移除手性助剂，从而拆分化合物。或者，可用手性HPLC柱拆分化合物。
[0159] 在任何用于制备本发明化合物的方法中，可能必需和/或期望保护任何有关分子上的敏感基团或活性基团。这可通过常规保护基来实现，如在以下文献中描述的那些保护基：Protective Groups in Organic Chemistry，J.F.W.McOmie(编辑)，Plenum Press，1973；和 T.W.Greene&P.G.M.Wuts，Protective Groups in Organic Synthesis，John Wiley&Sons，1991。保护基团可在方便的后续阶段使用本领域已知的方法除去。
[0160] 一般反应方案
[0161] 本发明的代表性化合物可根据下文所述的一般合成方法合成。式(I)的化合物可通过本领域技术人员已知的方法制备。下面的反应方案仅意在代表本发明的实例，而绝无意于限制本发明。
[0162] 式(I)的化合物可按照方案1中所概述的方法制备。
[0163] 方案1
[0164]
[0165] 方案1示出了可得到式(I)的化合物的合成路线。使市售的氮杂环丁烷(II)在约0℃至约25℃范围的温度下，在有机溶剂(例如，THF、二氯甲烷或1，2-二氯乙烷)中，在存在偶合试剂(例如，EDCI/HOBt、PyBrop或DCC)的情况下，与酸(III)(其中(III)根据Ingersoll，A.W等人，Organic Syntheses 1932，XII，40-2所述的程序，但用市售的取代苯甲酰氯进行制备)反应，以产生相应的酰胺(IV)。
[0166] 将酰胺(IV)在约0℃至约25℃范围的温度下，在有机溶剂(例如，二乙醚、THF、二氯甲烷或二氧杂环己烷)中，用酸(例如，1N HCl、1N H2SO4或三氟乙酸)进行处理以产生胺(V)。
[0167] 使胺(V)在0℃至约25℃范围的温度下，在有机溶剂(例如，二氯甲烷、1，2-二氯乙烷或THF)中，在具有或不具有分子筛条件下在有机碱(例如，三乙胺、二乙基丙胺或N-甲基吗啉)中，在存在还原剂(例如NaBH4、NaBH(CN)3或NaBH(OAc)3)的情况下，与适当取代的酮(VI)反应以产生相应的氮杂环丁烷(I)。
[0168] 或者，式(I)的化合物可根据方案2中概述的方法制备。
[0169] 方案2
[0170]
[0171] 将市售的氮杂环丁烷(VII)在0℃至约25℃范围的温度下，在有机溶剂(例如，二氯甲烷、1，2-二氯乙烷或THF)中，在具有或不具有分子筛条件下在有机碱(例如，三乙胺、二乙基丙胺或N-甲基吗啉)中，在存在还原剂(例如NaBH4、NaBH(CN)3或NaBH(OAc)3)的情况下，与适当取代的酮(VI)反应以产生相应的氮杂环丁烷(VIII)。
[0172] 将氮杂环丁烷(VIII)在约0℃至约25℃范围的温度下，在有机溶剂(例如，二乙醚、THF、二氧杂环己烷或二氯甲烷)中，用1N HCl、1N H2SO4或三氟乙酸进行处理以产生相应的胺(IX)。
[0173] 使胺(IX)在约0℃至约25℃范围的温度下，在有机溶剂(例如，THF、二氯甲烷或1，2-二氯乙烷)中，在存在偶合试剂(例如，EDCI/HOBt、PyBrop或DCC)的情况下，与酸(X)反应以产生相应的氮杂环丁烷(XI)。
[0174] 将氮杂环丁烷(XI)在约0℃至约25℃范围的温度下，在有机溶剂(例如，乙醚、THF或二氧杂环己烷)中，用1N HCl或H2SO4或三氟乙酸进行处理以产生相应的胺(XII)。
[0175] 使胺(XII)与酸(XIII)反应。当Ra为OH时，反应在约0℃至约25℃范围的温度下，在有机溶剂(例如，THF、二氯甲烷或1，2-二氯乙烷)中，在存在偶合试剂(例如，EDCI/aHOBt、PyBrop或DCC)的情况下进行。当R 为Cl时，反应在约0℃至约25℃范围的温度下，在有机溶剂(例如，THF、二氯甲烷或1，2-二氯乙烷)中，在存在有机碱(例如，三乙胺、二乙基丙胺或N-甲基吗啉)的情况下进行，以产生相应的氮杂环丁烷(I)。
[0176] 式(I)的化合物可从酮(VI)衍生。(VI)的制备在方案3中概述。
[0177] 方案3
[0178]
[0179] 使市售的芳基卤或芳基烷烃R1X(其中R1如在式(I)中定义)在约-78℃至约0℃范围的温度下，在有机溶剂(例如，醚、THF或二氧杂环己烷)中，在存在有机金属试剂(例如，n-BuLi、i-PrMgBr或i-PrMgCl)的情况下，与市售的酮(XIV)反应，以产生相应的缩酮(XV)。
[0180] 将缩酮(XV)在约0℃至约25℃范围的温度下，在有机溶剂(例如，丙酮、乙腈或THF)中，用酸(例如，1N HCl或1N H2SO4)进行处理，以产生相应的酮(VI)。
[0181] 实例
[0182] 本发明的代表性化合物可根据下文所述的一般合成方法合成。式(I)的化合物可通过本领域技术人员已知的方法制备。下面的实例仅意在代表本发明的实例，而绝无意于限制本发明。
[0183] 实例1：N-({1-[4-羟基-4-(6-甲氧基-吡啶-3-基)-环己基]-氮杂环丁烷-3-基氨基甲酰基}-甲基)-3-三氟甲基-苯甲酰胺
[0184] 步骤A：8-(6-甲氧基-吡啶-3-基)-1，4-二氧杂-螺[4.5]癸烷-8-醇
[0185]
[0186] 在-78℃下，将5-溴-2-甲氧基-吡啶(Aldrich，5.0g，26.6mmol)于THF或醚(30mL)中的溶液用在10分钟内缓慢滴加的n-BuLi(己烷中2.5M，12mL，30mmol)处理。将反应在-78℃下再搅拌20分钟。将1，4-二氧杂-螺[4.5]癸烷-8-酮(Aldrich，4.37g，28mmol)于THF(10mL)中的溶液缓慢滴入反应。在加入后，将反应在-78℃下再搅拌2小时。
反应随后用水猝灭，并升温至室温。真空除去溶剂，残余物在乙酸乙酯和水之间分配。有机层用盐水洗涤，在无水Na2SO4上干燥、过滤并浓缩以得到黄色固体，其随后使用己烷和乙酸乙酯(从10％乙酸乙酯至100％乙酸乙酯)通过CombiFlash 系统(Teledyne Isco，Inc，Lincoln，NE)上的硅胶柱进行纯化，得到标题化合物，为黄色固体。
1
反应随后用水猝灭，并升温至室温。真空除去溶剂，残余物在乙酸乙酯和水之间分配。有机层用盐水洗涤，在无水Na2SO4上干燥、过滤并浓缩以得到黄色固体，其随后使用己烷和乙酸乙酯(从10％乙酸乙酯至100％乙酸乙酯)通过CombiFlash 系统(Teledyne Isco，Inc，Lincoln，NE)上的硅胶柱进行纯化，得到标题化合物，为黄色固体。
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[0187] H NMR(400MHz，CDCl3)δ8.28(s，1H)，7.75(d，J＝7.5Hz，1H)，6.72(d，J＝7.5Hz，1H)，3.95(m，4H)，2.35(s，br，1H)，2.10(m，1H)，1.85(m，2H)，1.65(m，2H)。
[0188] 步骤B：4-羟基-4-(6-甲氧基-吡啶-3-基)-环己酮
[0189]
[0190] 将前一步骤所制备的8-(6-甲氧基-吡啶-3-基)-1，4-二氧杂-螺[4.5]癸烷-8-酮(4.00g，15.7mmol)在室温下用1N HCl(～16mL)于丙酮(20mL)中的溶液处理4小时。反应用饱和的NaHCO3溶液中和，并移除溶剂。残余物在乙酸乙酯和水之间分配。有机层用盐水洗涤，在无水Na2SO4上干燥、过滤并浓缩以得到黄色固体，其随后使用己烷和乙酸乙酯(从10％乙酸乙酯至100％乙酸乙酯)通过CombiFlash 系统上的硅胶柱进行纯化，得到标题化合物，为浅黄色固体。
[0191] 1H NMR(400MHz，CDCl3.)δ8.30(s，1H)，7.75(d，J ＝ 7.0Hz，1H)，6.75(d，J ＝6.5Hz，1H)，3.90(s，4H)，2.91(m，2H)，2.35(d，J＝6.8Hz，2H)，2.22(m，4H)。
[0192] 步骤C：3-[2-(3-三氟甲基-苯甲酰氨基)-乙酰氨基]-氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯
[0193]
[0194] 将3-氨基-氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯(AstaTech，1.2g，6.97mmol)和(3-三氟甲基-苯甲酰氨基)-乙酸(Bionet Building Blocks，1.57g，6.36mmol)在室温下用EDCI(Aldrich，1.57g，6.36mmol)、HOBT(Aldrich，1.22g，6.36mmol)于DCM(10mL)中的溶液处理4小时。将反应溶液在DCM和水之间分配。有机层用盐水洗涤，在无水Na2SO4上干燥、过滤并浓缩以得到黄色油，并使用己烷和乙酸乙酯(从10％乙酸乙酯至100％乙酸乙酯)通过CombiFlash 系统上的硅胶柱进行纯化，得到标题化合物，为白色固体。1
[0195] H NMR(400MHz，CDCl3)δ8.10(s，1H)，8.02(d，J＝6.6Hz，1H)，7.80(d，J＝6.8Hz，1H)，7.56(t，J＝6.5Hz，1H)，4.61(m，1H)，4.25(t，J＝7.2Hz，2H)，4.18(d，J＝5.5Hz，2H)，
3.82(t，J＝7.5Hz，2H)，1.41(s，9H)。
3.82(t，J＝7.5Hz，2H)，1.41(s，9H)。
[0196] 步骤D：N-(氮杂环丁烷-3-基氨基甲酰基甲基)-3-三氟甲基-苯甲酰胺游离碱、HCl和TFA盐
[0197]
[0198] 将前一步骤所制备的3-[2-(3-三氟甲基-苯甲酰氨基)-乙酰氨基]-氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯(7.5g，18.7mmol)在室温下溶解于4N HCl于二氧杂环己烷(5mL)和MeOH(20mL)中的溶液中。再搅拌反应4小时。移除溶剂，将残余物干燥，得到标题化合物，为HCl盐(黄色泡沫)。
[0199] 将3-[2-(3-三氟甲基-苯甲酰氨基)-乙酰氨基]-氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯(2.10g，5.24mmol)在室温下溶于1∶1TFA和DCM混合溶液(10mL)中。再搅拌反应2小
时。移除溶剂，将残余物干燥，得到标题化合物，为含有额外TFA的TFA盐(无色油)。
时。移除溶剂，将残余物干燥，得到标题化合物，为含有额外TFA的TFA盐(无色油)。
[0200] 通过用固体Na2CO3在MeOH中过夜处理该盐而获得游离碱。过滤固体，将残余物干燥，得到标题化合物供进行分析表征。HCl或TFA盐通常用于进一步反应。
[0201] 1H NMR(400MHz，CDCl3)δ8.10(s，1H)，8.05(d，J＝6.0Hz，1H)，7.78(d，J＝6.2Hz，1H)，7.55(m，2H)，4.78(m，1H)，4.15(d，J＝3.2Hz，2H)，3.95(t，J＝7.0Hz，2H)，3.52(t，J＝7.0Hz，2H)。
[0202] 步骤E：N-({1-[4-羟基-4-(6-甲氧基-吡啶-3-基)-环己基]-氮杂环丁烷-3-基氨基甲酰基}-甲基)-3-三氟甲基-苯甲酰胺
[0203]
[0204] 在室温下，将本实例的步骤B中制备的4-羟基-4-(6-甲氧基-吡啶-3-基)-环己酮(300mg，1.36mmol)和本实例的步骤D中制备的N-(氮杂环丁烷-3-基氨基甲酰基甲基)-3-三氟甲基-苯甲酰胺HCl盐(460mg，1.36mmol)于DCM(5mL)中的溶液用TEA(1mL，7.12mmol)处理10分钟，接着用NaBH(OAc)3(860mg，4.07mmol)再处理4小时。用饱和的碳酸氢钠猝灭反应。分离有机层，将含水层用氯仿和IPA“混合物”(～3∶1，v/v)萃取3次。将合并的有机层在无水Na2SO4上干燥，过滤并浓缩以得到粗产物，其随后使用乙酸乙酯和7N NH3MeOH溶液作为洗脱液(从纯乙酸乙酯至在乙酸乙酯中含5％7N NH3MeOH溶液)，通过CombiFlash 系统进行纯化，得到两种标题化合物，为白色固体：一种极性较小的异构体和一种极性较大的异构体。
[0205] 1a：得自硅胶柱的极性较小的异构体，
[0206] 1H NMR(400MHz，CDCl3)δ8.28(s，1H)，8.11(s，1H)，8.05(d，J ＝ 5.8Hz，1H)，7.78(d，J＝ 6.5Hz，1H)，7.70(d，J ＝ 6.5Hz，1H)，7.57(t，J＝ 6.8Hz，1H)，6.70(d，J ＝
6.5Hz，1H)，4.51(m，1H)，4.20(d，J ＝ 3.2Hz，2H)，3.88(s，3H)，3.65(t，J ＝ 6.0Hz，2H)，
2.92(t，J＝5.8Hz，2H)，2.20(m，2H)，1.85(m，2H)，1.56(m，2H)，1.45(m，2H)。
6.5Hz，1H)，4.51(m，1H)，4.20(d，J ＝ 3.2Hz，2H)，3.88(s，3H)，3.65(t，J ＝ 6.0Hz，2H)，
2.92(t，J＝5.8Hz，2H)，2.20(m，2H)，1.85(m，2H)，1.56(m，2H)，1.45(m，2H)。
[0207] 1b：得自硅胶柱的极性较大的异构体，
[0208] 1H NMR(400MHz，CDCl3)δ8.25(s，1H)，8.10(s，1H)，8.05(d，J ＝ 6.5Hz，1H)，7.80(d，J＝ 6.4Hz，1H)，7.71(d，J ＝ 6.5Hz，1H)，7.62(d，J ＝ 6.5Hz，1H)，7.60(t，J ＝
6.8Hz，1H)，7.37(d，J ＝ 6.2Hz，1H)，6.70(d，J ＝ 6.8Hz，1H)，4.55(m，1H)，4.20(d，J ＝
3.5hz，2H)，3.65(t，J＝6.5Hz，2H)，3.08(t，J＝6.5Hz，2H)，1.85～1.50(m，8H)。
6.8Hz，1H)，7.37(d，J ＝ 6.2Hz，1H)，6.70(d，J ＝ 6.8Hz，1H)，4.55(m，1H)，4.20(d，J ＝
3.5hz，2H)，3.65(t，J＝6.5Hz，2H)，3.08(t，J＝6.5Hz，2H)，1.85～1.50(m，8H)。
[0209] 实例2：N-({1-[4-羟基-4-(6-甲氧基-1-氧基-吡啶-3-基)-环己基]-氮杂环丁烷-3-基氨基甲酰基}-甲基)-3-三氟甲基-苯甲酰胺
[0210]
[0211] 将N-({1-[4-羟基-4-(6-甲氧基-吡啶-3-基)-环己基]-氮杂环丁烷-3-基氨基甲酰基}-甲基)-3-三氟甲基-苯甲酰胺(极性较小的异构体，1a，150mg，0.30mmol)于DCM(5mL)中的溶液在0℃下用mCPBA(Aldrich，62mg，0.36mmol)处理2小时。将反应在DCM和稀释的NaHSO3溶液之间分配。含水层用氯仿和IPA“混合物”(～3∶1，v/v)萃取三次。将合并的有机层在无水Na2SO4上干燥，过滤并浓缩以得到粗产物，将其从IPA重结晶，得到标题化合物，为白色固体。
1
1
[0212] H NMR(400MHz，CDCl3)δ8.25(s，1H)，8.15(s，1H)，8.05(d，J ＝ 6.8Hz，1H)，7.90(d，J＝ 7.0Hz，1H)，7.70(d，J ＝ 6.5Hz，1H)，7.40(t，J＝ 6.5Hz，1H)，7.20(d，J ＝
6.4Hz，1H)，6.75(d，J ＝ 6.4Hz，1H)，4.75(m，1H)，4.55(m，1H)，4.20(m，1H)，3.80(t，J ＝
7.0Hz，2H)，2.55(t，J＝6.5Hz，2H)，1.95～1.75(m，8H)。ESI-MS(m/z)：C25H29F3N4O5计算值：
522；实测值：523(M+H)。
6.4Hz，1H)，6.75(d，J ＝ 6.4Hz，1H)，4.75(m，1H)，4.55(m，1H)，4.20(m，1H)，3.80(t，J ＝
7.0Hz，2H)，2.55(t，J＝6.5Hz，2H)，1.95～1.75(m，8H)。ESI-MS(m/z)：C25H29F3N4O5计算值：
522；实测值：523(M+H)。
[0213] 实例3：N-({1-[4-羟基-4-(5-甲氧基-吡啶-2-基)-环己基]-氮杂环丁烷-3-基氨基甲酰基}-甲基)-3-三氟甲基-苯甲酰胺
[0214] 步骤A：8-(5-甲氧基-吡啶-2-基)-1，4-二氧杂-螺[4.5]癸烷-8-醇
[0215]
[0216] 使用实例1的步骤A中所述的程序，在醚中由2-溴-5-甲氧基-吡啶(Aldrich)和1，4-二氧杂-螺[4.5]癸烷-8-酮制得本标题化合物，为白色固体。
[0217] 1H NMR(400MHz，CDCl3)δ8.33(s，1H)，8.11(s，1H)，7.40(s，1H)，4.01(s，4H)，3.87(s，3H)，2.18(m，4H)，1.85(m，2H)，1.70(m，2H)。
[0218] 步骤B：4-羟基-4-(5-甲氧基-吡啶-2-基)-环己酮
[0219]
[0220] 使用实例1的步骤B中所述的程序，由前一步骤所制备的8-(5-甲氧基-吡啶-2-基)-1，4-二氧杂-螺[4.5]癸烷-8-醇制得本标题化合物，为白色固体。
[0221] 1H NMR(400MHz，CDCl3)δ8.28(s，1H)，8.12(s，1H)，7.419s，1H)，3.90(s，3H)，3.0(m，2H)，2.38(d，J＝6.8Hz，2H)，2.25(m，4H)。
[0222] 步骤C：N-({1-[4-羟基-4-(5-甲氧基-吡啶-2-基)-环己基]-氮杂环丁烷-3-基氨基甲酰基}-甲基)-3-三氟甲基-苯甲酰胺
[0223]
[0224] 使用实例1的步骤E中所述的程序，由前一步骤所制备的4-羟基-4-(5-甲氧基-吡啶-2-基)-环己酮和N-(氮杂环丁烷-3-基氨基甲酰基甲基)-3-三氟甲基-苯甲
酰胺的还原性胺化制得本标题化合物，为白色固体。
酰胺的还原性胺化制得本标题化合物，为白色固体。
[0225] 3a：得自硅胶柱的极性较小的异构体。
[0226] 1H NMR(400MHz，CDCl3)δ8.25(s，1H)，8.14(s，1H)，8.10(s，1H)，8.02(d，J ＝6.5Hz，1H)，7.72(d，J ＝ 7.1Hz，1H)，7.52(t，J ＝ 6.8Hz，1H)，7.40(s，1H)，4.50(m，1H)，
4.18(d，J＝3.0Hz，2H)，3.55(t，J＝6.0Hz，2H)，2.85(t，J＝6.0Hz，2H)，2.31(s，br，1H)，
2.15(t，J＝9.0Hz，2H)，1.85(m，2H)，1.45(m，4H)。
4.18(d，J＝3.0Hz，2H)，3.55(t，J＝6.0Hz，2H)，2.85(t，J＝6.0Hz，2H)，2.31(s，br，1H)，
2.15(t，J＝9.0Hz，2H)，1.85(m，2H)，1.45(m，4H)。
[0227] 3b：得自硅胶柱的极性较大的异构体
[0228] 1H NMR(400MHz，CDCl3)δ8.31(s，1H)，8.23(d，J＝6.8Hz，2H)，8.05(d，J＝6.7Hz，1H)，7.78(m，2H)，7.55(m，2H)，7.44(s，1H)，4.55(m，1H)，4.15(d，J＝3.0Hz，2H)，3.65(t，J＝7.0Hz，2H0，3.10(d，J＝5.8Hz，2H)，2.15(s，br，1H)，1.95～1.55(m，8H)。
[0229] 实例4：N-({1-[4-羟基-4-(6-甲氧基-吡啶-2-基)-环己基]-氮杂环丁烷-3-基氨基甲酰基}-甲基)-3-三氟甲基-苯甲酰胺
[0230] 步骤A：8-(6-甲氧基-吡啶-2-基)-1，4-二氧杂-螺[4.5]癸烷-8-醇
[0231]
[0232] 使用实例1的步骤A中所述的程序，在醚中由2-溴-6-甲氧基-吡啶(Aldrich)制得本标题化合物，为白色固体。
[0233] 1H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.60(t，J＝7.2Hz，1H)，6.98(d，J＝6.5Hz，1H)，6.62(d，J＝6.8Hz，1H)，4.00(s，3H)，3.95(m，4H)，2.05(m，4H)，1.90(m，2H)，1.75(m，2H)。
[0234] 步骤B：4-羟基-4-(6-甲氧基-吡啶-2-基)-环己酮
[0235]
[0236] 使用实例1的步骤B中所述的程序，由前一步骤所制备的8-(6-甲氧基-吡啶-2-基)-1，4-二氧杂-螺[4.5]癸烷-8-醇制得本标题化合物，为白色固体。
[0237] 1H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.67(t，J＝6.8Hz，1H)，6.989d，J＝7.0Hz，1H)，6.69(d，J＝6.8Hz，1H)，3.95(s，3H)，2.95(m，2H)，2.35(m，2H)，2.20(m，4H)。
[0238] 步骤C：N-({1-[4-羟基-4-(6-甲氧基-吡啶-2-基)-环己基]-氮杂环丁烷-3-基氨基甲酰基}-甲基)-3-三氟甲基-苯甲酰胺
[0239]
[0240] 使用实例1的步骤E中所述的程序，由前一步骤所制备的4-羟基-4-(6-甲氧基-吡啶-2-基)-环己酮和N-(氮杂环丁烷-3-基氨基甲酰基甲基)-3-三氟甲基-苯甲
酰胺的还原性胺化制得本标题化合物，为白色固体。
酰胺的还原性胺化制得本标题化合物，为白色固体。
[0241] 4a：得自硅胶柱的极性较小的异构体。
[0242] 1H NMR(400MHz，CDCl3)δ8.15(s，1H)，8.029d，J＝5.0Hz，1H)，7.75(d，J＝6.0Hz，1H)，7.55(m，1H)，7.41(m，1H)，7.02(d，J ＝ 6.6Hz，1H)，6.62(d，J ＝ 6.8Hz，1H)，4.54(m，
1H)，4.18(d，J＝3.5Hz，2H)，3.62(t，J＝6.8Hz，2H)，2.95(t，J＝6.5Hz，2H)，2.10(m，2H)，
1.90(m，2H)，1.52(m，2H)，1.45(M，2H)。
1H)，4.18(d，J＝3.5Hz，2H)，3.62(t，J＝6.8Hz，2H)，2.95(t，J＝6.5Hz，2H)，2.10(m，2H)，
1.90(m，2H)，1.52(m，2H)，1.45(M，2H)。
[0243] 4b：得自硅胶柱的极性较大的异构体
[0244] 1H NMR(400MHz，CDCl3)δ8.15(s，1H)，8.08(d，J＝5.0Hz，1H)，7.85(t，J＝4.5Hz，1H)，7.80(d，J＝6.5Hz，1H)，7.60(m，2H)，6.90(d，J＝6.6Hz，1H)，6.62(d，J＝6.8Hz，1H)，
4.52(m，1H)，4.20(d，J ＝ 5.8Hz，2H)，3.65(t，J ＝ 6.4Hz，1H)，3.05(t，J ＝ 6.6Hz，2H)，
1.85～1.48(m，8H)。
4.52(m，1H)，4.20(d，J ＝ 5.8Hz，2H)，3.65(t，J ＝ 6.4Hz，1H)，3.05(t，J ＝ 6.6Hz，2H)，
1.85～1.48(m，8H)。
[0245] 实例5：N-({1-[4-(6-乙氧基-吡啶-3-基)-4-羟基-环己基]-氮杂环丁烷-3-基氨基甲酰基}-甲基)-3-三氟甲基-苯甲酰胺
[0246] 步骤A：8-(6-乙氧基-吡啶-3-基)-1，4-二氧杂-螺[4.5]癸烷-8-醇
[0247]
[0248] 使用实例1的步骤A中所述的程序，在醚中由5-溴-乙氧基-吡啶(Aldrich)和1，4-二氧杂-螺[4.5]癸烷-8-酮制得本标题化合物，为白色固体。
[0249] 1H NMR(400MHz，CDCl3)δ8.25(s，1H)，7.70(d，J＝7.0Hz，1H)，6.75(d，J＝7.0Hz，1H)，4.32(q，J＝7.1Hz，2H)，4.02(m，4H)，2.10(m，4H)，1.85(d，J＝7.5Hz，2H)，1.70(d，J＝7.7Hz，2H)，1.48(t，J＝7.3Hz，3H)。
[0250] 步骤B：4-(6-乙氧基-吡啶-3-基)-4-羟基-环己酮
[0251]
[0252] 使用实例1的步骤B中所述的程序，由前一步骤中制备的8-(6-乙氧基-吡啶-3-基)-1，4-二氧杂-螺[4.5]癸烷-8-醇制得本标题化合物，为白色固体。
[0253] ESI-MS(m/z)：C13H17NO3计算值：235；实测值：236(M+H)。
[0254] 步骤C：N-({1-[4-(6-乙氧基-吡啶-3-基)-4-羟基-环己基]-氮杂环丁烷-3-基氨基甲酰基}-甲基)-3-三氟甲基-苯甲酰胺
[0255]
[0256] 使用实例1的步骤E中所述的程序，由前一步骤所制备的4-(6-乙氧基-吡啶-3-基)-4-羟基-环己酮和N-(氮杂环丁烷-3-基氨基甲酰基甲基)-3-三氟甲基-苯
甲酰胺的还原性胺化制得本标题化合物，为白色固体。
甲酰胺的还原性胺化制得本标题化合物，为白色固体。
[0257] 5a：得自硅胶柱的极性较小的异构体，
[0258] 1H NMR(400MHz，CDCl3)δ8.29(s，1H)，8.15(s，1H)，8.08(m，2H)，7.80(m，2H)，7.62(m，2H)，6.75(d，J ＝6.5Hz，1H)，4.53(m，1H)，4.35(q，J ＝ 7.8Hz，2H)，4.22(d，J ＝
6.1Hz，2H)，3.75(t，J ＝ 6.5Hz，2H)，2.95(t，J ＝ 6.5Hz，2H)，2.40(m，2H)，2.26(m，2H)，
1.92(m，2H)，1.65(m，2H)，1.48(t，J＝7.5Hz，3H)。
6.1Hz，2H)，3.75(t，J ＝ 6.5Hz，2H)，2.95(t，J ＝ 6.5Hz，2H)，2.40(m，2H)，2.26(m，2H)，
1.92(m，2H)，1.65(m，2H)，1.48(t，J＝7.5Hz，3H)。
[0259] 5b：得自硅胶柱的极性较小的异构体
[0260] 1H NMR(400MHz，CDCl3)δ8.25(s，1H)，8.159s，1H)，8.04(d，J ＝ 6.2Hz，1H)，7.85(t，J＝ 5.5Hz，1H)，7.72(d，J ＝ 6.7Hz，1H)，7.70(t，J＝ 6.4Hz，1H)，6.68(d，J ＝
7.0Hz，1H)，6.10(s，br，1H)，5.72(s，br，1H)，4.51(m，1H)，4.30(q，J＝7.8Hz，2H)，4.18(d，J＝3.5Hz，2H)，3.62(t，J＝6.9Hz，2H)，3.10(t，J＝6.5Hz，2H)，1.85(m，2H)，1.70(m，4H)，
1.55(m，2H)，1.38(t，J＝8.0Hz，3H)。
7.0Hz，1H)，6.10(s，br，1H)，5.72(s，br，1H)，4.51(m，1H)，4.30(q，J＝7.8Hz，2H)，4.18(d，J＝3.5Hz，2H)，3.62(t，J＝6.9Hz，2H)，3.10(t，J＝6.5Hz，2H)，1.85(m，2H)，1.70(m，4H)，
1.55(m，2H)，1.38(t，J＝8.0Hz，3H)。
[0261] 实例6：N-({1-[4-(6-氟-吡啶-3-基)-4-羟基-环己基]-氮杂环丁烷-3-基氨基甲酰基}-甲基)-3-三氟甲基-苯甲酰胺
[0262] 步骤A：8-(6-氟-吡啶-3-基)-1，4-二氧杂-螺[4.5]癸烷-8-醇
[0263]
[0264] 使用实例1的步骤A中所述的程序，在醚中由5-溴-2-氟-吡啶(Aldrich)和1，4-二氧杂-螺[4.5]癸烷-8-酮制得本标题化合物，为白色固体。
1
1
[0265] H NMR(400MHz，CDCl3)δ8.35(s，1H)，7.98(dd，J＝9.0，6.5Hz，1H)，6.90(d，J＝6.5Hz，1H)，4.01(m，4H)，2.10(m，4H)，1.85(d，J＝7.8Hz，2H)，.70(d，J＝7.8Hz，2H)。
[0266] 步骤B：4-(6-氟-吡啶-3-基)-4-羟基-环己酮
[0267]
[0268] 使用实例1的步骤B中所述的程序，由前一步骤所制备的8-(6-氟-吡啶-3-基)-1，4-二氧杂-螺[4.5]癸烷-8-醇制得本标题化合物，为白色固体。
[0269] 1H NMR(400MHz，CDCl3)δ8.40(s，1H)，8.00(dd，J＝8.2，6.5Hz，1H)，6.98(d，J＝6.5Hz，1H)，2.95(m，2H)，2.50(m，2H)，2.32(m 4H)。
[0270] 步骤C：N-({1-[4-(6-氟-吡啶-3-基)-4-羟基-环己基]-氮杂环丁烷-3-基氨基甲酰基}-甲基)-3-三氟甲基-苯甲酰胺
[0271]
[0272] 使用实例1的步骤E中所述的程序，由前一步骤所制备的4-(6-氟-吡啶-3-基)-4-羟基-环己酮和N-(氮杂环丁烷-3-基氨基甲酰基甲基)-3-三氟甲基-苯
甲酰胺的还原性胺化制得本标题化合物，为白色固体。
甲酰胺的还原性胺化制得本标题化合物，为白色固体。
[0273] 6a：得自硅胶柱的极性较小的异构体1
[0274] H NMR(400MHz，CDCl3)δ8.35(s，1H)，8.15(s，1H)，8.05(d，J ＝ 6.4Hz，1H)，7.96(t，J ＝ 6.8Hz，1H)，7.74(d，J ＝ 6.5Hz，1H)，7.55(t，J ＝ 7.2Hz，1H)，7.50(m，1H)，
6.90(d，J ＝ 6.7Hz，1H)，4.53(m，1H)，4.15(d，J ＝ 3.5Hz，2H)，3.60(t，J ＝ 6.7Hz，2H)，
2.88(t，J＝6.8Hz，2H)，2.20(m，2H)，1.85(m，2H)，1.65(m，4H)。
6.90(d，J ＝ 6.7Hz，1H)，4.53(m，1H)，4.15(d，J ＝ 3.5Hz，2H)，3.60(t，J ＝ 6.7Hz，2H)，
2.88(t，J＝6.8Hz，2H)，2.20(m，2H)，1.85(m，2H)，1.65(m，4H)。
[0275] 6b：得自硅胶柱的极性较大的异构体，
[0276] 8.32(s，1H)，8.10(d，J ＝ 6.0Hz，1H)，8.01(d，J ＝ 6.2Hz，1H)，7.95(m，1H)，7.72(d，J ＝ 6.2Hz，1H)，7.50(t，J ＝ 6.5Hz，1H)，6.85(d，J ＝ 6.6Hz，1H)，4.50(m，1H)，
4.15(s，br，2H)，3.70(t，J＝6.5Hz，2H)，3.10(t，J＝5.5Hz，2H)，1.90～1.50(m，8H)。
4.15(s，br，2H)，3.70(t，J＝6.5Hz，2H)，3.10(t，J＝5.5Hz，2H)，1.90～1.50(m，8H)。
[0277] 实例7：N-({1-[4-(6-苄氧基-吡啶-3-基)-4-羟基-环己基]-氮杂环丁烷-3-基氨基甲酰基}-甲基)-3-三氟甲基-苯甲酰胺
[0278] 步骤A：8-(6-苄氧基-吡啶-3-基)-1，4-二氧杂-螺[4.5]癸烷-8-醇
[0279]
[0280] 使用实例1步骤A中所述的程序，在醚中由5-溴-2-苄氧基-吡啶(Alfa Aesar)和1，4-二氧杂-螺[4.5]癸烷-8-酮制得本标题化合物，为白色固体。
[0281] 1H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.55(d，J ＝ 7.0Hz，1H)，7.40(m，5H)，7.33(m，1H)，6.42(d，J＝6.8Hz，1H)，5.10(s，2H)，4.05(m，4H)，2.05(m，4H)，1.80(m，2H)，1.55(m，2H)。
[0282] 步骤B：4-(6-苄氧基-吡啶-3-基)-4-羟基-环己酮
[0283]
[0284] 使用实例1的步骤B中所述的程序，由前一步骤所制备的8-(6-苄氧基-吡啶-3-基)-1，4-二氧杂-螺[4.5]癸烷-8-醇制得本标题化合物，为白色固体。
[0285] 1H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.45(d，J ＝ 6.5Hz，1H)，7.30(m，5H)，7.33(m，1H)，6.52(d，J＝6.6Hz，1H)，5.10(s，2H)，2.90(m，2H)，2.30(m，2H)，2.05(m，4H)。
[0286] 步骤C：N-({1-[4-(6-苄氧基-吡啶-3-基)-4-羟基-环己基]-氮杂环丁烷-3-基氨基甲酰基}-甲基)-3-三氟甲基-苯甲酰胺
[0287]
[0288] 使用实例1的步骤E中所述的程序，由前一步骤所制备的4-(6-苄氧基-吡啶-3-基)-4-羟基-环己酮和N-(氮杂环丁烷-3-基氨基甲酰基甲基)-3-三氟甲基-苯
甲酰胺的还原性胺化制得本标题化合物，为白色固体。
甲酰胺的还原性胺化制得本标题化合物，为白色固体。
[0289] 7a：得自硅胶柱的极性较小的异构体，
[0290] 1H NMR(400MHz，CDCl3)δ8.15(s，1H)，8.01(d，J＝6.1Hz，1H)，7.80(d，J＝6.5Hz，1H)，7.62(t，J ＝ 6.8Hz，1H)，7.35(m，5H)，6.55(d，J ＝ 7.0Hz，1H)，5.15(s，2H)，4.52(m，
1H)，4.15(d，J＝4.0Hz，2H)，3.60(t，J＝7.0Hz，2H)，2.90(t，J＝6.8Hz，2H)，2.30(s，br，
1H)，2.05(m，1H)，1.75(m，4H)，1.45(m，2H)。
1H)，4.15(d，J＝4.0Hz，2H)，3.60(t，J＝7.0Hz，2H)，2.90(t，J＝6.8Hz，2H)，2.30(s，br，
1H)，2.05(m，1H)，1.75(m，4H)，1.45(m，2H)。
[0291] 7b：得自硅胶柱的极性较大的的异构体
[0292] 1H NMR(400MHz，CDCl3)δ8.15(s，1H)，8.00(d，J＝6.5Hz，1H)，7.78(d，J＝6.6Hz，1H)，7.60(t，J＝6.6Hz，1H)，7.35(m，1H)，6.60(d，J＝6.8Hz，1H)，4.50(m，1H)，4.20(d，J＝4.0Hz，2H)，3.65(t，J＝7.0Hz，2H)，3.10(t，J＝7.0Hz，2H)，2.30(s，1H)，2.02(m，2H)，
1.90～1.65(6H)。
1.90～1.65(6H)。
[0293] 实例8：N-({1-[4-羟基-4-(6-异丙氧基-吡啶-3-基)-环己基]-氮杂环丁烷-3-基氨基甲酰基}-甲基)-3-三氟甲基-苯甲酰胺
[0294]
[0295] 在0℃下将NaH(95％，51mg，2mmol)缓慢加到IPA(4mL)中，直到气泡消失。向此溶液加入N-({1-[4-(6-氟-吡啶-3-基)-4-羟基-环己基]-氮杂环丁烷-3-基氨基甲酰基}-甲基)-3-三氟甲基-苯甲酰胺(6a，200mg，0.40mmol)于DMF(1mL)中的溶液。在加入后，在80℃下再加热反应2小时。将反应溶液用MeOH猝灭，并在DCM和水之间分配。分离有机层，含水层用氯仿和IPA“混合物”(～3∶1，v/v)萃取3次。将合并的有机层在无水Na2SO4上干燥，过滤并浓缩以得到粗产物，其随后使用乙酸乙酯和7N NH3 MeOH溶液作为洗脱液(从纯乙酸乙酯至在乙酸乙酯中含5％7N NH3 MeOH溶液)通过CombiFlash 系统进行纯化，得到标题化合物，为白色固体。
1
1
[0296] H NMR(400MHz，CDCl3)δ8.25(s，1H)，8.15(s，1H)，8.05(d，J ＝ 6.8Hz，1H)，7.75(d，J＝ 6.8Hz，1H)，7.70(d，J ＝ 6.8Hz，1H)，7.52(t，J＝ 6.5Hz，1H)，6.68(d，J ＝
6.0Hz，1H)，5.20(m，1H)，4.62(m，1H)，4.15(d，J ＝ 4.0Hz，2H)，3.60(t，J ＝ 7.0Hz，2H)，
3.05(s.，br，2H)，2.30(s，1H)，2.20(m，2H)，2.05(m，2H)，1.65(m，2H)，1.52(m，2H)，1.31(d，J＝6.0Hz，6H)。
6.0Hz，1H)，5.20(m，1H)，4.62(m，1H)，4.15(d，J ＝ 4.0Hz，2H)，3.60(t，J ＝ 7.0Hz，2H)，
3.05(s.，br，2H)，2.30(s，1H)，2.20(m，2H)，2.05(m，2H)，1.65(m，2H)，1.52(m，2H)，1.31(d，J＝6.0Hz，6H)。
[0297] 实例9：N-({1-[4-(6-叔丁氧基-吡啶-3-基)-4-羟基-环己基]-氮杂环丁烷-3-基氨基甲酰基}-甲基)-3-三氟甲基-苯甲酰胺
[0298]
[0299] 使用实例8所述的程序，由N-({1-[4-(6-氟-吡啶-3-基)-4-羟基-环己基]-氮杂环丁烷-3-基氨基甲酰基}-甲基)-3-三氟甲基-苯甲酰胺6a和t-BuOK制得本标题化合物，为白色固体。
[0300] 1H NMR(400MHz，CDCl3)δ8.25(s，1H)，8.10(s，1H)，8.00(d，J ＝ 6.5Hz，1H)，7.80(d，J ＝ 6.5Hz，1H)，7.61(d，J ＝ 6.6Hz，1H)，7.52(t，J ＝ 5.5Hz，1H)，7.35(m，1H)，
6.88(m，1H)，6.60(d，J ＝6.8Hz，1H)，4.52(m，1H)，4.15(d，J ＝ 4.0Hz，2H)，3.65(t，J ＝
7.0Hz，2H)，2.95(t，J ＝ 7.0Hz，2H)，2.30(s，1H)，2.21(m，1H)，1.80(m，6H)，1.52(s，9H)，
1.35(m，2H)。
6.88(m，1H)，6.60(d，J ＝6.8Hz，1H)，4.52(m，1H)，4.15(d，J ＝ 4.0Hz，2H)，3.65(t，J ＝
7.0Hz，2H)，2.95(t，J ＝ 7.0Hz，2H)，2.30(s，1H)，2.21(m，1H)，1.80(m，6H)，1.52(s，9H)，
1.35(m，2H)。
[0301] 实例10：N-[(1-{4-羟基-4-[6-(2，2，2-三氟-乙氧基)-吡啶-3-基]-环己基}-氮杂环丁烷-3-基氨基甲酰基)-甲基]-3-三氟甲基-苯甲酰胺
[0302]
[0303] 使用实例8所述的程序，由N-({1-[4-(6-氟-吡啶-3-基)-4-羟基-环己基]-氮杂环丁烷-3-基氨基甲酰基}-甲基)-3-三氟甲基-苯甲酰胺6a和CF3CH2OH(Sigma)制得本标题化合物，为白色固体。
[0304] 1H NMR(400MHz，CDCl3)δ8.28(s，1H)，8.15(s，1H)，8.05(d，J ＝ 6.4Hz，1H)，7.78(d，J ＝ 6.6Hz，1H)，7.70(t，J ＝ 6.6Hz，1H)，7.65(m，1H)，7.55(t，J ＝ 5.8Hz，2H)，
6.70(d，J ＝ 6.8Hz，1H)，4.75(q，J ＝ 8.5Hz，2H)，4.55(m，1H)，4.15(d，J ＝ 4.0Hz，2H)，
3.62(t，J ＝ 6.0Hz，2H)，2.95(t，J ＝ 7.0Hz，2H)，2.30(s，1H)，1.85(m，4H)，1.55(m，2H)，
1.45(m，2H)。
6.70(d，J ＝ 6.8Hz，1H)，4.75(q，J ＝ 8.5Hz，2H)，4.55(m，1H)，4.15(d，J ＝ 4.0Hz，2H)，
3.62(t，J ＝ 6.0Hz，2H)，2.95(t，J ＝ 7.0Hz，2H)，2.30(s，1H)，1.85(m，4H)，1.55(m，2H)，
1.45(m，2H)。
[0305] 实例11：N-({1-[4-(6-环丁氧基-吡啶-3-基)-4-羟基-环己基]-氮杂环丁烷-3-基氨基甲酰基}-甲基)-3-三氟甲基-苯甲酰胺
[0306]
[0307] 使用实例8所述的程序，由N-({1-[4-(6-氟-吡啶-3-基)-4-羟基-环己基]-氮杂环丁烷-3-基氨基甲酰基}-甲基)-3-三氟甲基-苯甲酰胺6a和环丁醇(Aldrich)制得本标题化合物，为白色固体。
1
1
[0308] H NMR(400MHz，CDCl3)δ8.25(s，1H)，8.10(s，1H)，8.01(d，J ＝ 6.5Hz，1H)，7.75(d，J ＝ 6.6Hz，1H)，7.70(d，J ＝ 6.8Hz，1H)，7.55(t，J ＝ 6.6Hz，1H)，7.25(m，1H)，
6.65(d，J ＝6.0Hz，1H)，5.10(m，1H)，4.50(m，1H)，4.10(d，J ＝ 4.0Hz，2H)，3.60(t，J ＝
7.0Hz，2H)，2.90(t，J ＝ 7.0Hz，2H)，2.40(m，1H)，2.37(m，4H)，2.15(m，2H)，2.10(m，2H)，
1.83(m，2H)，1.80～1.45(4H)。
6.65(d，J ＝6.0Hz，1H)，5.10(m，1H)，4.50(m，1H)，4.10(d，J ＝ 4.0Hz，2H)，3.60(t，J ＝
7.0Hz，2H)，2.90(t，J ＝ 7.0Hz，2H)，2.40(m，1H)，2.37(m，4H)，2.15(m，2H)，2.10(m，2H)，
1.83(m，2H)，1.80～1.45(4H)。
[0309] 实例12：N-({1-[4-(6-氰基-吡啶-3-基)-4-羟基-环己基]-氮杂环丁烷-3-基氨基甲酰基}-甲基)-3-三氟甲基-苯甲酰胺
[0310]
[0311] 将N-({1-[4-(6-氟-吡啶-3-基)-4-羟基-环己基]-氮杂环丁烷-3-基氨基甲酰基}-甲基)-3-三氟甲基-苯甲酰胺6a(70mg，0.14mmol)、KCN(Aldrich，46mg，0,70mmol)和18-冠醚-6(Aldrich，190mg，0.70mmol)于DMF(1mL)中的溶液在密封管中加热到150℃维持过夜。将反应溶液用CombiFlash 系统加载在硅胶柱上，使用乙酸乙酯和7NNH3 MeOH溶液作为洗脱液(从纯乙酸乙酯至在乙酸乙酯中含5％7NNH3 MeOH溶液)，得到标题化合物，为白色固体。
[0312] 1H NMR(400MHz，CDCl3)δ8.35(s，1H)，8.15(s，1H)，8.01(d，J ＝ 6.0Hz，1H)，7.80(d，J＝6.5Hz，1H)，7.61(t，J＝6.8Hz，1H)，7.35(s，br，1H)，7.88(d，J＝6.2Hz，1H)，
4.52(m，1H)，4.18(d，J ＝ 3.0Hz，2H)，3.62(t，J ＝ 7.0Hz，2H)，2.90(t，J ＝ 6.8Hz，2H)，
2.32(s，1H)，2.20(m，2H)，1.80(4H)，1.55(m，2H)。
4.52(m，1H)，4.18(d，J ＝ 3.0Hz，2H)，3.62(t，J ＝ 7.0Hz，2H)，2.90(t，J ＝ 6.8Hz，2H)，
2.32(s，1H)，2.20(m，2H)，1.80(4H)，1.55(m，2H)。
[0313] 实例13：N-({1-[4-羟基-4-(6-甲基-吡啶-3-基)-环己基]-氮杂环丁烷-3-基氨基甲酰基}-甲基)-3-三氟甲基-苯甲酰胺
[0314] 步骤A：8-(6-甲基-吡啶-3-基)-1，4-二氧杂-螺[4.5]癸烷-8-醇
[0315]
[0316] 使用实例1的步骤A中所述的程序，在醚中由5-溴-2-甲基-吡啶(AcrosOrganics)和1，4-二氧杂-螺[4.5]癸烷-8-酮制得本标题化合物，为白色固体。
[0317] 1H NMR(400MHz，CDCl3)δ8.45(s，1H)，7.75(d，J＝7.2Hz，1H)，7.10(d，J＝7.0Hz，1H)，4.02(s，4H)，2.45(s，3H)，2.10(m，4H)，1.90(d，J ＝ 9.0Hz，2H)，1.72(d，J ＝ 8.5Hz，
2H)。
2H)。
[0318] 步骤B：4-羟基-4-(6-甲基-吡啶-3-基)-环己酮
[0319]
[0320] 使用实例1的步骤B中所述的程序，由前一步骤所制备的8-(6-甲基-吡啶-3-基)-1，4-二-氧杂-螺[4.5]癸烷-8-醇制得本标题化合物，为白色固体。
1
1
[0321] H NMR(400MHz，CDCl3)δ8.65(s，1H)，7.81(d，J＝6.5Hz，1H)，7.209d，J＝6.5Hz，1H)，3.10(m，2H)，2.61(s，3H)，2.42(m，2H)，2.28(m，4H)。
[0322] 步骤C：N-({1-[4-羟基-4-(6-甲基-吡啶-3-基)-环己基]-氮杂环丁烷-3-基氨基甲酰基}-甲基)-3-三氟甲基-苯甲酰胺
[0323]
[0324] 使用实例1的步骤E中所述的程序，由前一步骤所制备的4-羟基-4-(6-甲基-吡啶-3-基)-环己酮和N-(氮杂环丁烷-3-基氨基甲酰基甲基)-3-三氟甲基-苯甲酰胺的还原性胺化制得本标题化合物，为白色固体。
[0325] 13a：得自硅胶柱的极性较小的异构体，
[0326] 1H NMR(400MHz，CDCl3)δ8.61(s，1H)，8.15(s，1H)，8.02(d，J ＝ 7.0Hz，1H)，7.70(m，2H)，7.68(m，1H)，7.55(d，J ＝ 6.5Hz，1H)，7.70(s，1H)，7.10(d，J ＝ 6.8Hz，1H)，
4.52(m，1H)，4.10(d，J ＝ 6.0Hz，2H)，3.62(t，J ＝ 7.5Hz，2H)，2.98(t，J ＝ 7.8Hz，2H)，
2.50(s，3H)，2.25(m，2H)，1.85(m，2H)，1.55(m，4H)。
4.52(m，1H)，4.10(d，J ＝ 6.0Hz，2H)，3.62(t，J ＝ 7.5Hz，2H)，2.98(t，J ＝ 7.8Hz，2H)，
2.50(s，3H)，2.25(m，2H)，1.85(m，2H)，1.55(m，4H)。
[0327] 13b：得自硅胶柱的极性较大的异构体
[0328] 1H NMR(400MHz，CDCl3)δ8.60(s，1H)，8.18(s，1H)，8.10(d，J ＝ 6.5Hz，1H)，7.80(d，J ＝ 6.8Hz，1H)，7.76(d，J ＝ 6.5Hz，1H)，7.60(t，J ＝ 7.2Hz，1H)，7.45(m，1H)，
7.12(d，J＝6.8Hz，1H)，4.62(m，1H)，4.17(d，J＝5.8Hz，2H)，3.38(br，s，2H)，2.75(m，4H)，
1.85(m，2H)，1.70(m，2H)。
7.12(d，J＝6.8Hz，1H)，4.62(m，1H)，4.17(d，J＝5.8Hz，2H)，3.38(br，s，2H)，2.75(m，4H)，
1.85(m，2H)，1.70(m，2H)。
[0329] 实例14：N-({1-[4-羟基-4-(6-甲氧基-5-甲基-吡啶-3-基)-环己基]-氮杂环丁烷-3-基氨基甲酰基}-甲基)-3-三氟甲基-苯甲酰胺
[0330] 步骤A：8-(6-甲氧基-5-甲基-吡啶-3-基)-1，4-二氧杂-螺[4.5]癸烷-8-醇[0331]
[0332] 使用实例1的步骤A中所述的程序，在醚中由5-溴-2-甲氧基-3-甲基-吡啶(Alfa Aesar)和1，4-二氧杂-螺[4.5]癸烷-8-酮制得本标题化合物，为白色固体。
[0333] 1H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.50(s，1H)，3.98(m，4H)，3.92(s，3H)，2.20(s，3H)，2.10(m，4H)，1.85(m，2H)，1.78(m，2H)。
[0334] 步骤B：4-羟基-4-(6-甲氧基-5-甲基-吡啶-3-基)-环己酮
[0335]
[0336] 使用实例1的步骤B中所述的程序，由前一步骤所制备的8-(6-甲氧基-5-甲基-吡啶-3-基)-1，4-二氧杂-螺[4.5]癸烷-8-醇制得本标题化合物，为白色固体。
1
1
[0337] H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.50(s，1H)，3.90(s，3H)，2.25(s，3H)，2.70(m，2H)，2.35(m，2H)，2.20(m，4H)。
[0338] 步骤C：N-({1-[4-羟基-4-(6-甲氧基-5-甲基-吡啶-3-基)-环己基]-氮杂环丁烷-3-基氨基甲酰基}-甲基)-3-三氟甲基-苯甲酰胺
[0339]
[0340] 使用实例1的步骤E中所述的程序，由前一步骤所制备的4-羟基-4-(6-甲氧基-5-甲基-吡啶-3-基)-环己酮和N-(氮杂环丁烷-3-基氨基甲酰基甲基)-3-三氟甲
基-苯甲酰胺的还原性胺化制得本标题化合物，为白色固体。
基-苯甲酰胺的还原性胺化制得本标题化合物，为白色固体。
[0341] 14a：得自硅胶柱的极性较小的异构体，1
[0342] H NMR(400MHz，CDCl3)δ8.10(s，1H)，8.02(d，J＝6.5Hz，1H)，7.80(d，J＝6.6Hz，1H)，7.55(t，J＝6.6Hz，1H)，7.60(s，1H)，6.72(d，J＝6.4Hz，1H)，4.50(m，1H)，4.18(d，J＝4.3Hz，2H)，3.60(t，J＝6.8Hz，2H)，2.90(t，J＝6.5Hz，2H)，2.20(m，2H)，1.85(m，2H)，
1.62(m，2H)，1.43(m，2H)。
1.62(m，2H)，1.43(m，2H)。
[0343] 14b：得自硅胶柱的极性较大的异构体
[0344] 1H NMR(400MHz，CDCl3)δ8.15(s，1H)，8.05(d，J＝6.6Hz，1H)，7.78(d，J＝6.5Hz，1H)，7.58(t，J＝6.7Hz，1H)，7.55(s，1H)，6.95(d，J＝6.6Hz，1H)，4.55(m，1H)，4.20(d，J＝
3.5Hz，2H)，3.66(t，J＝7.5Hz，2H)，3.10(t，J＝7.5Hz，2H)，1.90～1.68(m，6H)，1.60(m，
2H)。
3.5Hz，2H)，3.66(t，J＝7.5Hz，2H)，3.10(t，J＝7.5Hz，2H)，1.90～1.68(m，6H)，1.60(m，
2H)。
[0345] 实例15：N-{[1-(4-羟基-4-吡啶-3-基-环己基)-氮杂环丁烷-3-基氨基甲酰基]-甲基}-3-三氟甲基-苯甲酰胺
[0346] 步骤A：8-吡啶-3-基-1，4-二氧杂-螺[4.5]癸烷-8-醇
[0347]
[0348] 使用实例1的步骤A中所述的程序，在醚中由3-溴吡啶(Aldrich)制得本标题化合物，为黄色固体。
[0349] 1H NMR(CHLOROFORM-d)δ：8.67(d，J ＝ 1.8Hz，1H)，8.30(d，J ＝ 4.8Hz，1H)，7.86(d，J ＝ 9.6Hz，1H)，7.22(dd，J ＝ 8.1，4.8Hz，1H)，3.97(s，4H)，2.00-2.22(m，4H)，
1.77-1.88(m，2H)，1.67(d，J＝10.4Hz，2H)。
1.77-1.88(m，2H)，1.67(d，J＝10.4Hz，2H)。
[0350] 步骤B：4-羟基-4-吡啶-3-基-环己酮
[0351]
[0352] 使用实例1的步骤B中所述的程序，使用由前一步骤所制备的癸烷-8-醇，由前一步骤所制备的8-吡啶-3-基-1，4-二氧杂-螺[4.5]癸烷-8-醇制得本标题化合物。1
[0353] H NMR(MeOH)δ：8.98(s，1H)，8.80(d，J＝6.1Hz，2H)，8.12(t，J＝6.9Hz，1H)，1.96-2.12(m，2H)，1.82-1.96(m，2H)，1.80(br.s.，2H)，1.60-1.76(m，2H)。
[0354] 步骤C：N-{[1-(4-羟基-4-吡啶-3-基-环己基)-氮杂环丁烷-3-基氨基甲酰基]-甲基}-3-三氟甲基-苯甲酰胺
[0355]
[0356] 使用实例1的步骤E中所述的程序，由前一步骤所制备的4-羟基-4-吡啶-3-基-环己酮和N-(氮杂环丁烷-3-基氨基甲酰基甲基)-3-三氟甲基-苯甲酰胺的
还原性胺化制得本标题化合物，为黄色固体。
还原性胺化制得本标题化合物，为黄色固体。
[0357] 1H NMR(CHLOROFORM-d)δ：8.65-8.94(m，1H)，8.33-8.58(m，1H)，8.12(s，1H)，8.01(d，J ＝ 6.3Hz，1H)，7.70-7.91(m，2H)，7.58(t，J ＝ 7.7Hz，1H)，7.25(br.s.，1H)，
4.54(t，J＝6.1Hz，2H)，4.16(br s，1H)，3.51-3.72(m，2H)，3.00-3.14(m，2H)，2.92(t，J＝
6.6Hz，1H)，2.06-2.32(m，2H)，1.79-1.98(m，2H)，1.51(br.s.，2H)，1.25(s，2H)。
4.54(t，J＝6.1Hz，2H)，4.16(br s，1H)，3.51-3.72(m，2H)，3.00-3.14(m，2H)，2.92(t，J＝
6.6Hz，1H)，2.06-2.32(m，2H)，1.79-1.98(m，2H)，1.51(br.s.，2H)，1.25(s，2H)。
[0358] 实例16：N-({1-[4-羟基-4-(6-甲氧基-吡啶-3-基)-环己基]-氮杂环丁烷-3-基氨基甲酰基}-甲基)-4-三氟甲基-苯甲酰胺
[0359] 步骤A：{1-[4-羟基-4-(6-甲氧基-吡啶-3-基)-环己基]-氮杂环丁烷-3-基}-氨基甲酸叔丁酯
[0360]
[0361] 使用实例1的步骤E中所述的程序，由4-羟基-4-(6-甲氧基-吡啶-3-基)-环己酮(如实例1的步骤B所述)和氮杂环丁烷-3-基氨基甲酸叔丁酯(BetaPharm)的还原
性胺化制得本标题化合物，为白色固体。
性胺化制得本标题化合物，为白色固体。
[0362] 得自硅胶柱的极性较小的异构体
[0363] 1H NMR(400MHz，CDCl3)δ8.28(s，1H)，7.72(d，J＝6.4Hz，1H)，6.75(d，J＝6.4Hz，1H)，4.95(s，br，1H)，4.25(m，1H)，3.90(s，3H)，3.55(t，J ＝ 6.1Hz，2H)，2.75(s，br，3H)，
2.20(m，2H)，1.82(m，2H)，1.65(m，2H)，1.42(s，9H)，1.35(m，2H)。
2.20(m，2H)，1.82(m，2H)，1.65(m，2H)，1.42(s，9H)，1.35(m，2H)。
[0364] 得自硅胶柱的极性较大的异构体
[0365] 1H NMR(400MHz，CDCl3)δ8.25(s，1H)，7.70(d，J＝ 6.5Hz，1H)，4.90(s，br，1H)，4.30(s，br，1H)，3.92 9s，3H)，3.65(t，J ＝ 3.5Hz，2H)，2.89(s，br，2H)，2.05(m，1H)，
2.90～2.69(m，6H)，1.55(m，2H)，1.45(s，9H)。
2.90～2.69(m，6H)，1.55(m，2H)，1.45(s，9H)。
[0366] 步骤B：4-(3-氨基-氮杂环丁烷-1-基)-1-(6-甲氧基-吡啶-3-基)-环己醇TFA盐
[0367]
[0368] {在室温下，将1-[4-羟基-4-(6-甲氧基-吡啶-3-基)-环己基]-氮杂环丁烷-3-基}-氨基甲酸叔丁酯(得自步骤A的极性较小的异构体，5.50g，14.6mmol)于
DCM(10mL)和TFA(10mL)中的溶液搅拌2小时。移除溶剂并在真空下干燥，得到标题化合物，为无色油。
DCM(10mL)和TFA(10mL)中的溶液搅拌2小时。移除溶剂并在真空下干燥，得到标题化合物，为无色油。
[0369] ESI-MS(m/z)：C15H23N3O2计算值：277；实测值：278(M+H)。
[0370] 步骤C：({1-[4-羟基-4-(6-甲氧基-吡啶-3-基)-环己基]-氮杂环丁烷-3-基氨基甲酰基}-甲基)-氨基甲酸叔丁酯
[0371]
[0372] 4-(3-氨基-氮杂环丁烷-1-基)-1-(6-甲氧基-吡啶-3-基)-环己醇TFA盐(～4.2g，15.1mmol)、叔丁氧羰基氨基-乙酸(Sigma，2.70g，15.1mmol)和TEA(4.20mL，
30mmol)在室温下溶于DCM(30mL)中。混合物随后用EDCI(Aldrich，3.05g，16mmol)和HOBT(Aldrich，2.16g，16mmol)进行处理。并且在室温下再搅拌反应6小时。将反应溶液在DCM和水之间分配。将有机层用盐水洗涤，在无水Na2SO4上干燥，过滤并浓缩以得到粗产物，其随后通过CombiFlash 系统DCM和MeOH MeOH作为洗脱液(从纯DCM至DCM中含10％
MeOH)进行纯化，得到标题化合物，为白色固体。
30mmol)在室温下溶于DCM(30mL)中。混合物随后用EDCI(Aldrich，3.05g，16mmol)和HOBT(Aldrich，2.16g，16mmol)进行处理。并且在室温下再搅拌反应6小时。将反应溶液在DCM和水之间分配。将有机层用盐水洗涤，在无水Na2SO4上干燥，过滤并浓缩以得到粗产物，其随后通过CombiFlash 系统DCM和MeOH MeOH作为洗脱液(从纯DCM至DCM中含10％
MeOH)进行纯化，得到标题化合物，为白色固体。
[0373] 1H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.68(d，J＝6.5Hz，1H)，7.55(t，J＝6.8Hz，1H)，6.64(d，J＝6.5Hz，1H)，5.21(s，br，1H)，4.50(m，1H)，4.00(t，J＝3.2Hz，2H)，3.60(t，J＝6.5Hz，2H)，2.95(t，J ＝ 6.5Hz，2H)，2.60(s，br，1H)，2.33(m，1H)，1.92(m，2H)，1.72(m，2H)，
1.58(m，2H)，1.50(m，2H)，1.47(s，9H)
1.58(m，2H)，1.50(m，2H)，1.47(s，9H)
[0374] 步骤D：2-氨基-N-{1-[4-羟基-4-(6-甲氧基-吡啶-3-基)-环己基]-氮杂环丁烷-3-基}-乙酰胺TFA盐
[0375]
[0376] 使用本实例的步骤B中所述的程序，由({1-[4-羟基-4-(6-甲氧基-吡啶-3-基)-环己基]-氮杂环丁烷-3-基氨基甲酰基}-甲基)-氨基甲酸叔丁酯通过N-Boc基团的去保护制得本标题化合物。
[0377] ESI-MS(m/z)：C17H26N4O3计算值：334；实测值：335(M+H)。
[0378] 步骤E：N-({1-[4-羟基-4-(6-甲氧基-吡啶-3-基)-环己基]-氮杂环丁烷-3-基氨基甲酰基}-甲基)-4-三氟甲基-苯甲酰胺
[0379]
[0380] 使用本实例的步骤C中所述的程序，由前一步骤所制备的2-氨基-N-{1-[4-羟基-4-(6-甲氧基-吡啶-3-基)-环己基]-氮杂环丁烷-3-基}-乙酰胺和4-三氟苯甲酸(Aldrich)通过EDCI偶合制得本标题化合物。
1
1
[0381] H NMR(400MHz，CDCl3)δ8.30(s，1H)，7.95(d，J＝7.0Hz，2H)，7.72(d，J＝6.8Hz，3H)，7.10(m，1H)，6.75(d，J ＝ 6.4Hz，1H)，6.40(m，1H)，4.51(m，1H)，4.15(d，J ＝ 3.0Hz，
2H)，3.95(s，3H)，3.62(t，J ＝ 6.8Hz，2H)，2.90(t，J ＝ 6.6Hz，2H)，2.35(m，1H)，2.20(m，
1H)，1.80(m，2H)，1.65(m，4H)，1.52(m，2H)。
2H)，3.95(s，3H)，3.62(t，J ＝ 6.8Hz，2H)，2.90(t，J ＝ 6.6Hz，2H)，2.35(m，1H)，2.20(m，
1H)，1.80(m，2H)，1.65(m，4H)，1.52(m，2H)。
[0382] 实例17：3，4，5-三氟-N-({1-[4-羟基-4-(6-甲氧基-吡啶-3-基)-环己基]-氮杂环丁烷-3-基氨基甲酰基}-甲基)-苯甲酰胺
[0383]
[0384] 使用实例16的步骤C中所述的程序，由实例16的步骤D所制备的2-氨基-N-{1-[4-羟基-4-(6-甲氧基-吡啶-3-基)-环己基]-氮杂环丁烷-3-基}-乙酰胺
和3，4，5-三氟苯甲酸通过EDCI偶合制得本标题化合物。
和3，4，5-三氟苯甲酸通过EDCI偶合制得本标题化合物。
[0385] 1H NMR(MeOH)δ：8.26(d，J ＝ 2.5Hz，1H)，7.82(dd，J ＝ 8.7，2.7Hz，1H)，7.54-7.69(m，2H)，6.76(d，J ＝ 8.8Hz，1H)，4.45(m，1H)，4.12(q，J ＝ 7.2Hz，2H)，
4.01-4.10(m，2H)，3.91(s，3H)，3.64(t，J ＝ 7.8Hz，2H)，3.27-3.38(m，4H)，2.91-3.02(m，
2H)，2.36(t，J＝3.4Hz，2H)。
4.01-4.10(m，2H)，3.91(s，3H)，3.64(t，J ＝ 7.8Hz，2H)，3.27-3.38(m，4H)，2.91-3.02(m，
2H)，2.36(t，J＝3.4Hz，2H)。
[0386] 实例18：3，4-二氯-N-({1-[4-羟基-4-(6-甲氧基-吡啶-3-基)-环己基]-氮杂环丁烷-3-基氨基甲酰基}-甲基)-苯甲酰胺
[0387]
[0388] 将在DCM(4mL)中含有实例16的步骤D所制备的2-氨基-N-{1-[4-羟基-4-(6-甲氧基-吡啶-3-基)-环己基]-氮杂环丁烷-3-基}-乙酰胺(60mg，0.13mmol)、3，4-二氯苯甲酰氯(Aldrich，27mg，0.13mmol)和Et3N(76uL，0.54mmol)的溶液在室温下搅拌1小时，接着用饱和NaHCO3和DCM进行水后处理(aqueous workup)。将有机层干燥(Na2SO4)并真空浓缩，接着通过柱层析纯化(5％NH3MeOH溶液与EtOAc混合)，得到标题化合物，为白色固体。
[0389] 1H NMR(MeOH)δ：8.26(d，J ＝ 2.8Hz，1H)，7.99(d，J ＝ 2.3Hz，1H)，7.77(dd，J＝ 8.7，2.7Hz，1H)，7.70(dd，J ＝ 8.5，2.1Hz，1H)，7.53(d，J ＝ 8.3Hz，1H)，6.73(d，J ＝9.3Hz，1H)，4.46(t，J ＝ 6.4Hz，2H)，4.00(br.s.，1H)，3.91(s，3H)，3.59(t，J ＝ 7.5Hz，
2H)，2.94(t，J ＝ 6.1Hz，2H)，2.33(br.s.，1H)，2.12-2.24(m，2H)，1.74-1.90(m，2H)，
1.55-1.65(m，2H)，1.33-1.43(m，2H)。
2H)，2.94(t，J ＝ 6.1Hz，2H)，2.33(br.s.，1H)，2.12-2.24(m，2H)，1.74-1.90(m，2H)，
1.55-1.65(m，2H)，1.33-1.43(m，2H)。
[0390] 实例19：3，5-二氟-N-({1-[4-羟基-4-(6-甲氧基-吡啶-3-基)-环己基]-氮杂环丁烷-3-基氨基甲酰基}-甲基)-苯甲酰胺
[0391]
[0392] 使用实例18中所述的程序，由实例16的步骤D所制备的2-氨基-N-{1-[4-羟基-4-(6-甲氧基-吡啶-3-基)-环己基]-氮杂环丁烷-3-基}-乙酰胺和3，5--二氟苯
甲酰氯的偶合制得本标题化合物，为黄色固体。
甲酰氯的偶合制得本标题化合物，为黄色固体。
[0393] 1H NMR(CHLOROFORM-d)δ：8.30(d，J ＝ 2.5Hz，1H)，7.73(dd，J ＝ 8.7，2.7Hz，1H)，7.37(dd，J ＝ 7.7，2.1Hz，2H)，6.89-7.06(m，1H)，6.72(d，J ＝ 8.6Hz，1H)，
4.41-4.60(m，1H)，4.10-4.14(m，2H)，3.92(s，3H)，3.62(t，J ＝ 7.1Hz，2H)，2.34(br.s.，
1H)，2.12-2.25(m，2H)，1.77-1.90(m，2H)，1.67(d，J＝8.8Hz，2H)，1.49-1.61(m，4H)。
4.41-4.60(m，1H)，4.10-4.14(m，2H)，3.92(s，3H)，3.62(t，J ＝ 7.1Hz，2H)，2.34(br.s.，
1H)，2.12-2.25(m，2H)，1.77-1.90(m，2H)，1.67(d，J＝8.8Hz，2H)，1.49-1.61(m，4H)。
[0394] 实例20：苯并[1，3]二氧杂环戊烯-5-甲酸({1-[4-羟基-4-(6-甲氧基-吡啶-3-基)-环己基]-氮杂环丁烷-3-基氨基甲酰基}-甲基)-酰胺
[0395]
[0396] 使用实例18中所述的程序，由实例16的步骤D所制备的2-氨基-N-{1-[4-羟基-4-(6-甲氧基-吡啶-3-基)-环己基]-氮杂环丁烷-3-基}-乙酰胺和胡椒基氯
(piperonoyl chloride)(Aldrich)的偶合制得本标题化合物，为黄色固体。
(piperonoyl chloride)(Aldrich)的偶合制得本标题化合物，为黄色固体。
[0397] 1H NMR(CHLOROFORM-d)δ：8.30(d，J ＝ 2.5Hz，1H)，7.72(dd，J ＝ 8.8，2.5Hz，1H)，7.29-7.43(m，1H)，6.91-7.11(m，1H)，6.83(d，J ＝ 8.1Hz，1H)，6.71(d，J ＝ 8.6Hz，
1H)，5.96-6.09(m，2H)，4.39-4.58(m，1H)，4.12(d，J ＝ 5.1Hz，2H)，3.91(s，3H)，3.62(t，J ＝ 6.8Hz，2H)，2.88(br.s.，2H)，2.55(br s.，1H)，2.32(br.s.，2H)，2.10-2.25(m，4H)，
1.73-1.91(m，2H).
1H)，5.96-6.09(m，2H)，4.39-4.58(m，1H)，4.12(d，J ＝ 5.1Hz，2H)，3.91(s，3H)，3.62(t，J ＝ 6.8Hz，2H)，2.88(br.s.，2H)，2.55(br s.，1H)，2.32(br.s.，2H)，2.10-2.25(m，4H)，
1.73-1.91(m，2H).
[0398] 实例21：3-氰基-N-({1-[4-羟基-4-(6-甲氧基-吡啶-3-基)-环己基]-氮杂环丁烷-3-基氨基甲酰基}-甲基)-苯甲酰胺
[0399]
[0400] 使用实例16的步骤C中所述的程序，由实例16的步骤D所制备的2-氨基-N-{1-[4-羟基-4-(6-甲氧基-吡啶-3-基)-环己基]-氮杂环丁烷-3-基}-乙酰胺
和3-氰基苯甲酸通过EDCI偶合制得本标题化合物，为黄色固体。
和3-氰基苯甲酸通过EDCI偶合制得本标题化合物，为黄色固体。
[0401] 1H NMR(CHLOROFORM-d)δ：8.28(d，J ＝ 2.3Hz，1H)，8.16(t，J ＝ 1.5Hz，1H)，8.07(d，J＝ 7.8Hz，1H)，7.79(d，J ＝6.6Hz，1H)，7.56(t，J ＝ 7.8Hz，1H)，7.12(d，J＝
7.6Hz，1H)，6.70(d，J ＝ 8.6Hz，1H)，4.43-4.60(m，1H)，4.14(d，J ＝ 5.6Hz，2H)，3.59(t，J ＝ 7.3Hz，2H)，3.30(br s.，3H)，2.88(t，J ＝ 6.8Hz，2H)，2.29(t，J ＝ 3.4Hz，1H)，
2.10-2.21(m，2H)，1.76-1.90(m，2H)，1.54(d，J＝12.4Hz，2H)，1.39(d，J＝13.1Hz，2H)。
7.6Hz，1H)，6.70(d，J ＝ 8.6Hz，1H)，4.43-4.60(m，1H)，4.14(d，J ＝ 5.6Hz，2H)，3.59(t，J ＝ 7.3Hz，2H)，3.30(br s.，3H)，2.88(t，J ＝ 6.8Hz，2H)，2.29(t，J ＝ 3.4Hz，1H)，
2.10-2.21(m，2H)，1.76-1.90(m，2H)，1.54(d，J＝12.4Hz，2H)，1.39(d，J＝13.1Hz，2H)。
[0402] 实例22：N-({1-[4-羟基-4-(6-甲氧基-吡啶-3-基)-环己基]-氮杂环丁烷-3-基氨基甲酰基}-甲基)-3-甲基-苯甲酰胺
[0403]
[0404] 使用实例16的步骤C中所述的程序，由实例16的步骤D所制备的2-氨基-N-{1-[4-羟基-4-(6-甲氧基-吡啶-3-基)-环己基]-氮杂环丁烷-3-基}-乙酰胺
和3-甲基苯甲酸通过EDCI偶合制得本标题化合物，为黄色固体。
和3-甲基苯甲酸通过EDCI偶合制得本标题化合物，为黄色固体。
[0405] 1H NMR(CHLOROFORM-d)δ：8.29(d，J＝2.0Hz，1H)，7.71(dd，J＝8.7，2.7Hz，1H)，7.29-7.42(m，2H)，7.03-7.12(m，2H)，6.70(d，J ＝ 9.3Hz，1H)，4.41-4.59(m，1H)，4.14(d，J ＝ 5.1Hz，2H)，3.91(s，3H)，3.52-3.63(m，2H)，2.86(t，J ＝ 7.1Hz，2H)，2.83(s，3H)，
2.51(br s.，1H)，2.27(t，J＝3.4Hz，2H)，2.12-2.21(m，4H)，1.85(br.s.，2H)。
2.51(br s.，1H)，2.27(t，J＝3.4Hz，2H)，2.12-2.21(m，4H)，1.85(br.s.，2H)。
[0406] 实例23：N-({1-[4-羟基-4-(6-甲氧基-吡啶-3-基)-环己基]-氮杂环丁烷-3-基氨基甲酰基}-甲基)-3-甲氧基-苯甲酰胺
[0407]
[0408] 使用实例16的步骤C中所述的程序，由实例16的步骤D所制备的2-氨基-N-{1-[4-羟基-4-(6-甲氧基-吡啶-3-基)-环己基]-氮杂环丁烷-3-基}-乙酰胺
和3-甲氧基苯甲酸(Aldrich)通过EDCI偶合制得本标题化合物，为黄色固体。
和3-甲氧基苯甲酸(Aldrich)通过EDCI偶合制得本标题化合物，为黄色固体。
[0409] 1H NMR(CHLOROFORM-d)δ：8.29(s，1H)，7.71(dd，J ＝ 8.7，2.7Hz，1H)，7.32-7.43(m，2H)，7.02-7.11(m，2H)，6.63-6.76(m，1H)，4.43-4.58(m，1H)，4.14(d，J ＝
5.1Hz，2H)，3.91(s，3H)，3.83(s，3H)，3.59(t，J＝7.3Hz，2H)，3.45-3.40(m，2H)，2.86(t，J＝7.1Hz，2H)，2.51(br s.，1H)，1.85(br.s.，4H)，1.53(d，J＝13.6Hz，2H)。
5.1Hz，2H)，3.91(s，3H)，3.83(s，3H)，3.59(t，J＝7.3Hz，2H)，3.45-3.40(m，2H)，2.86(t，J＝7.1Hz，2H)，2.51(br s.，1H)，1.85(br.s.，4H)，1.53(d，J＝13.6Hz，2H)。
[0410] 实例24：3-氯-N-({1-[4-羟基-4-(6-甲氧基-吡啶-3-基)-环己基]-氮杂环丁烷-3-基氨基甲酰基}-甲基)-苯甲酰胺
[0411]
[0412] 使用实例16的步骤C中所述的程序，由实例16的步骤D所制备的2-氨基-N-{1-[4-羟基-4-(6-甲氧基-吡啶-3-基)-环己基]-氮杂环丁烷-3-基}-乙酰胺
和间氯苯甲酸(Aldrich)通过EDCI偶合制得本标题化合物，为黄色固体。
和间氯苯甲酸(Aldrich)通过EDCI偶合制得本标题化合物，为黄色固体。
[0413] 1H NMR(CHLOROFORM-d)δ：8.29(s，1H)，7.85(s，1H)，7.71(d，J ＝ 9.6Hz，1H)，7.49(d，J ＝ 7.3Hz，1H)，7.44(t，J ＝ 4.8Hz，1H)，7.31-7.40(m，1H)，6.70(d，J＝ 8.8Hz，1H)，4.49(s，1H)，4.14(d，J ＝ 11.9Hz，2H)，3.92(br.s.，3H)，3.55-3.64(m，
2H)，3.02-2.95(m，2H)，2.86(t，J ＝ 6.9Hz，2H)，2.52(br s.，1H)，2.28(br.s.，2H)，
1.87-1.99(m，2H)，1.74-1.86(m，2H)。
2H)，3.02-2.95(m，2H)，2.86(t，J ＝ 6.9Hz，2H)，2.52(br s.，1H)，2.28(br.s.，2H)，
1.87-1.99(m，2H)，1.74-1.86(m，2H)。
[0414] 实例25：N-({1-[4-(5-溴-吡啶-2-基)-4-羟基-环己基]-氮杂环丁烷-3-基氨基甲酰基}-甲基)-3-三氟甲基-苯甲酰胺
[0415] 步骤A：8-(5-溴-吡啶-2-基)-1，4-二氧杂-螺[4.5]癸烷-8-醇
[0416]
[0417] 使用实例1的步骤A中所述的程序，在醚中由2，5-二溴-吡啶(Aldrich)和1，4-二氧杂-螺[4.5]癸烷-8-酮制得本标题化合物，为白色固体。
1
1
[0418] H NMR(CHLOROFORM-d)δ：7.52-7.60(m，1H)，7.35-7.42(m，2H)，4.01(s，4H)，1.98-2.26(m，4H)，1.74(t，J＝12.8Hz，4H)。
[0419] 步骤B：4-(5-溴-吡啶-2-基)-4-羟基-环己酮
[0420]
[0421] 使用实例1的步骤B中所述的程序，由前一步骤所制备的8-(5-溴-吡啶-2-基)-1，4-二氧杂-螺[4.5]癸烷-8-醇制得本标题化合物，为白色固体。
[0422] 1H NMR(CHLOROFORM-d)δ：7.53(t，J ＝ 7.7Hz，1H)，7.37(d，J ＝ 7.8Hz，1H)，7.23-7.30(m，1H)，2.90(td，J ＝ 14.1，6.3Hz，2H)，2.27-2.41(m，2H)，2.12-2.25(m，2H)，
1.98-2.09(m，2H)。
1.98-2.09(m，2H)。
[0423] 步骤C：N-({1-[4-(5-溴-吡啶-2-基)-4-羟基-环己基]-氮杂环丁烷-3-基氨基甲酰基}-甲基)-3-三氟甲基-苯甲酰胺
[0424]
[0425] 使用实例1的步骤E中所述的程序，由前一步骤所制备的4-(5-溴-吡啶-2-基)-4-羟基-环己酮和N-(氮杂环丁烷-3-基氨基甲酰基甲基)-3-三氟甲基-苯
甲酰胺的还原性胺化制得本标题化合物，为白色固体。
甲酰胺的还原性胺化制得本标题化合物，为白色固体。
[0426] 25a：得自硅胶柱的极性较小的异构体，
[0427] 1H NMR(CHLOROFORM-d)δ：8.06(s，1H)，7.96(d，J ＝ 7.8Hz，1H)，7.71(d，J ＝7.8Hz，1H)，7.47(d，J ＝ 7.8Hz，2H)，7.37(d，J ＝ 7.6Hz，1H)，7.30(d，J ＝ 7.8Hz，1H)，
4.12(d，J＝5.1Hz，1H)，3.55(t，J＝7.2Hz，2H)，3.45(t，J＝7.0Hz，2H)，2.86(br.s.，2H)，
2.29(br.s.，1H)，2.05(td，J＝12.9，3.8Hz，2H)，1.74-1.88(m，2H)，1.43(d，J＝16.9Hz，
2H)，1.35(d，J＝12.4Hz，2H)。
4.12(d，J＝5.1Hz，1H)，3.55(t，J＝7.2Hz，2H)，3.45(t，J＝7.0Hz，2H)，2.86(br.s.，2H)，
2.29(br.s.，1H)，2.05(td，J＝12.9，3.8Hz，2H)，1.74-1.88(m，2H)，1.43(d，J＝16.9Hz，
2H)，1.35(d，J＝12.4Hz，2H)。
[0428] 25b：得自硅胶柱的极性较大的异构体
[0429] 1H NMR(CHLOROFORM-d)δ：8.06(s，1H)，7.97(d，J ＝ 7.8Hz，1H)，7.72(d，J ＝ 7.8Hz，1H)，7.44-7.57(m，2H)，7.37(t，J ＝ 4.5Hz，1H)，7.09(d，J ＝ 7.8Hz，1H)，4.42-4.56(m，1H)，4.12(d，J ＝ 4.8Hz，2H)，3.58(t，J ＝ 7.6Hz，2H)，2.96-3.05(m，2H)，
2.51(br s.，1H)，2.01-2.12(m，2H)，1.73(br.s.，2H)，1.58-1.70(m，2H)，1.44-1.57(m，
2H)。
2.51(br s.，1H)，2.01-2.12(m，2H)，1.73(br.s.，2H)，1.58-1.70(m，2H)，1.44-1.57(m，
2H)。
[0430] 实例26：N-({1-[4-(6-二甲基氨基-吡啶-3-基)-4-羟基-环己基]-氮杂环丁烷-3-基氨基甲酰基}-甲基)-3-三氟甲基-苯甲酰胺
[0431] 步骤A：8-(6-二甲基氨基-吡啶-3-基)-1，4-二氧杂-螺[4.5]癸烷-8-醇
[0432]
[0433] 使用实例1步骤A中所述的程序，在醚中由5-溴-2-二甲基氨基吡啶(Indofine)和1，4-二氧杂-螺[4.5]癸烷-8-酮制得本标题化合物，为白色固体。
[0434] 1H NMR(CHLOROFORM-d)δ：8.27(d，J＝2.8Hz，1H)，7.59(dd，J＝9.0，2.7Hz，1H)，6.49(d，J ＝ 8.8Hz，1H)，3.86-4.03(m，4H)，3.07(s，6H)，2.07(dd，J ＝ 8.7，2.7Hz，4H)，
1.77-1.93(m，2H)，1.60-1.73(m，2H)。
1.77-1.93(m，2H)，1.60-1.73(m，2H)。
[0435] 步骤B：4-(6-二甲基氨基-吡啶-3-基)-4-羟基-环己酮
[0436]
[0437] 使用实例1的步骤B中所述的程序，由前一步骤所制备的8-(6-二甲基氨基-吡啶-3-基)-1，4-二氧杂-螺[4.5]癸烷-8-醇制得本标题化合物，为白色固体。
[0438] 1H NMR(CHLOROFORM-d)δ：8.19(d，J＝2.8Hz，1H)，7.48-7.60(m，1H)，6.45(d，J＝8.3Hz，1H)，3.02(s，6H)，2.71-2.87(m，2H)，2.55(t，J＝6.9Hz，2H)，2.25(d，J＝13.6Hz，
2H)，2.08-2.17(m，2H)。
2H)，2.08-2.17(m，2H)。
[0439] 步骤C：N-({1-[4-(6-二甲基氨基-吡啶-3-基)-4-羟基-环己基]-氮杂环丁烷-3-基氨基甲酰基}-甲基)-3-三氟甲基-苯甲酰胺
[0440]
[0441] 使用实例1的步骤E中所述的程序，由前一步骤所制备的4-(6-二甲基氨基-吡啶-3-基)-4-羟基-环己酮和N-(氮杂环丁烷-3-基氨基甲酰基甲基)-3-三氟甲基-苯甲酰胺的还原性胺化制得本标题化合物，为白色固体。
[0442] 1H NMR(CHLOROFORM-d)δ：8.25(d，J ＝ 2.3Hz，1H)，8.07(s，1H)，7.97(d，J ＝7.8Hz，1H)，7.70(d，J ＝ 8.6Hz，1H)，7.59(dd，J ＝ 8.8，2.5Hz，1H)，7.46-7.54(m，2H)，
4.46-4.57(m，1H)，4.09(d，J ＝ 5.1Hz，2H)，3.61-3.71(m，2H)，3.21(br.s.，6H)，2.44(br s.，1H)，2.11-2.23(m，2H)，1.75-1.86(m，2H)，1.65(d，J＝6.3Hz，4H)，1.52(d，J＝14.9Hz，
2H)。
4.46-4.57(m，1H)，4.09(d，J ＝ 5.1Hz，2H)，3.61-3.71(m，2H)，3.21(br.s.，6H)，2.44(br s.，1H)，2.11-2.23(m，2H)，1.75-1.86(m，2H)，1.65(d，J＝6.3Hz，4H)，1.52(d，J＝14.9Hz，
2H)。
[0443] 实例27：N-{[1-(4-羟基-4-嘧啶-5-基-环己基)-氮杂环丁烷-3-基氨基甲酰基]-甲基}-3-三氟甲基-苯甲酰胺
[0444] 步骤A：8-嘧啶-5-基-1，4-二氧杂-螺[4.5]癸烷-8-醇
[0445]
[0446] 使用实例1的步骤A中所述的程序，在醚中由5-溴-嘧啶(Aldrich)制得本标题化合物，为白色固体。1
[0447] H NMR(400MHz，CDCl3)δ9.40(s，1H)，8.90(s，2H)，1.95(m，2H)，1.75(m，4H)，1.50(m，2H)。
[0448] 步骤B：4-羟基-4-嘧啶-5-基-环己酮
[0449]
[0450] 使用实例1的步骤B中所述的程序，由前一步骤所制备的8-嘧啶-5-基-1，4-二氧杂-螺[4.5]癸烷-8-醇制得本标题化合物，为白色固体。1
[0451] H NMR(400MHz，CDCl3)δ9.20(s，1H)，8.90(s，2H)，2.60(m，2H)，2.20(m，4H)，2.15(m，2H)。
[0452] 步骤C：N-{[1-(4-羟基-4-嘧啶-5-基-环己基)-氮杂环丁烷-3-基氨基甲酰基]-甲基}-3-三氟甲基-苯甲酰胺
[0453]
[0454] 使用实例1的步骤E中所述的程序，由前一步骤所制备的4-羟基-4-嘧啶-5-基-环己酮和N-(氮杂环丁烷-3-基氨基甲酰基甲基)-3-三氟甲基-苯甲酰胺的
还原性胺化制得本标题化合物，为白色固体。
还原性胺化制得本标题化合物，为白色固体。
[0455] 27a：得自硅胶柱的极性较小的异构体，
[0456] 1H NMR(400MHz，CDCl3)δ9.10(s，1H)，8.90(s，2H)，8.15(s，1H)，8.00(d，J ＝7.0Hz，1H)，7.75(d，J ＝ 6.6Hz，1H)，7.62(t，J ＝ 6.6Hz，1H)，4.52(m，1H)，4.15(d，J ＝
3.4Hz，2H)，3.60(t，J＝6.2Hz，2H)，2.96(t，J＝6.5Hz，2H)，2.40(s，br，1H)，2.19(m 2H)，
1.85(m，2H)，1.55(m，4H)。
3.4Hz，2H)，3.60(t，J＝6.2Hz，2H)，2.96(t，J＝6.5Hz，2H)，2.40(s，br，1H)，2.19(m 2H)，
1.85(m，2H)，1.55(m，4H)。
[0457] 27b：得自硅胶柱的极性较大的异构体
[0458] 1H NMR(400MHz，CDCl3)δ9.11(s，1H)，8.88(s，2H)，8.16(s，1H)，8.05(d，J ＝6.1Hz，1H)，7.82(d，J ＝ 6.2Hz，1H)，7.75(m，1H)，7.60(m，1H)，4.58(m，1H)，4.20(d，J ＝
3.2Hz，2H)，3.65(t，J＝6.0Hz，2H)，3.12(t，J＝6.0Hz，2H)，2.20(m，2H)，1.90～1.69(m，
4H)，1.55(m，2H)。
3.2Hz，2H)，3.65(t，J＝6.0Hz，2H)，3.12(t，J＝6.0Hz，2H)，2.20(m，2H)，1.90～1.69(m，
4H)，1.55(m，2H)。
[0459] 实例28：N-({1-[4-羟基-4-(2-甲氧基-嘧啶-5-基)-环己基]-氮杂环丁烷-3-基氨基甲酰基}-甲基)-3-三氟甲基-苯甲酰胺
[0460] 步骤A：8-(2-甲氧基-嘧啶-5-基)-1，4-二氧杂-螺[4.5]癸烷-8-醇
[0461]
[0462] 使用实例1的步骤A中所述的程序，在醚中由5-溴-2-甲氧基-嘧啶(Aldrich)和1，4-二氧杂-螺[4.5]癸烷-8-酮制得本标题化合物，为白色固体。
[0463] 1H NMR(400MHz，CDCl3)δ8.51(s，2H)，4.05(s，4H)，3.75(s，3H)，2.01(m，2H)，1.83(m 2H)，1.70(m，2H)，1.52(m，2H)。
[0464] 步骤B：4-羟基-4-(2-甲氧基-嘧啶-5-基)-环己酮
[0465]
[0466] 使用实例1的步骤B中所述的程序，由前一步骤所制备的8-(2-甲氧基-嘧啶-5-基)-1，4-二氧杂-螺[4.5]癸烷-8-醇制得本标题化合物，为白色固体。
1
1
[0467] H NMR(400MHz，CDCl3)δ8.70(s，2H)，3.75(s，3H)，2.85(m，2H)，2.34(m，2H)，2.20(m，2H)，1.95(m，2H)。
[0468] 步骤C：N-({1-[4-羟基-4-(2-甲氧基-嘧啶-5-基)-环己基]-氮杂环丁烷-3-基氨基甲酰基}-甲基)-3-三氟甲基-苯甲酰胺
[0469]
[0470] 使用实例1的步骤E中所述的程序，由前一步骤所制备的4-羟基-4-(2-甲氧基-嘧啶-5-基)-环己酮和N-(氮杂环丁烷-3-基氨基甲酰基甲基)-3-三氟甲基-苯甲
酰胺的还原性胺化制得本标题化合物，为白色固体。
酰胺的还原性胺化制得本标题化合物，为白色固体。
[0471] 28a：得自硅胶柱的极性较小的异构体，
[0472] 1H NMR(400MHz，CDCl3)δ8.70(s，2H)，8.10(s，1H)，8.05(d，J ＝ 6.5Hz，1H)，7.80(d，J ＝ 6.6Hz，1H)，7.73(t，J ＝ 6.5Hz，1H)，4.60(m，1H)，4.15(d，J ＝ 3.0Hz，2H)，
3.70(t，J＝5.6Hz，2H)，3.06(t，J＝3.5Hz，2H)，2.20(m，2H)，1.70～1.45(m，6H)。
3.70(t，J＝5.6Hz，2H)，3.06(t，J＝3.5Hz，2H)，2.20(m，2H)，1.70～1.45(m，6H)。
[0473] 28b：得自硅胶柱的极性较小的异构体
[0474] 1H NMR(400MHz，CDCl3)δ8.60(s，2H)，8.15(s，1H)，8.02(d，J ＝ 6.6Hz，1H)，7.80(d，J ＝6.8Hz，1H)，7.60(t，J ＝ 6.5Hz，1H)，7.45(m，1H)，4.55(m，1H)，4.15(d，J ＝
3.6Hz，2H)，3.60(t，J ＝ 6.0Hz，2H)，3.10(t，J ＝ 6.0Hz，2H)，1.96(m，2H)，1.75(m，4H)，
1.64(m，2H)。
3.6Hz，2H)，3.60(t，J ＝ 6.0Hz，2H)，3.10(t，J ＝ 6.0Hz，2H)，1.96(m，2H)，1.75(m，4H)，
1.64(m，2H)。
[0475] 实例29：N-({1-[4-(2，4-二甲氧基-嘧啶-5-基)-4-羟基-环己基]-氮杂环丁烷-5-基氨基甲酰基}-甲基)-3-三氟甲基-苯甲酰胺
[0476] 步骤A：8-(2，4-二甲氧基-嘧啶-5-基)-1，4-二氧杂-螺[4.5]癸烷-8-醇
[0477]
[0478] 使用实例1的步骤A中所述的程序，在醚中由5-溴-2，4-二甲氧基-嘧啶(Aldrich)和1，4-二氧杂-螺[4.5]癸烷-8-酮制得本标题化合物，为白色固体。
[0479] 1H NMR(400MHz，CDCl3)δ8.21(s，1H)，4.10(s，3H)，4.00(s，3H)，3.98(m，4H)，2.11(m，2H)，2.02(m，4H)，1.76(m，2H)。
[0480] 步骤B：4-(2，4-二甲氧基-嘧啶-5-基)-4-羟基-环己酮
[0481]
[0482] 使用实例1的步骤B中所述的程序，由前一步骤所制备的8-(2，4-二甲氧基-嘧啶-5-基)-1，4-二氧杂-螺[4.5]癸烷-8-醇制得本标题化合物，为白色固体。
[0483] ESI-MS(m/z)：C12H16N2O4计算值：252；实测值：253(M+H)。
[0484] 步骤C：N-({1-[4-(2，4-二甲氧基-嘧啶-5-基)-4-羟基-环己基]-氮杂环丁烷-3-基氨基甲酰基}-甲基)-3-三氟甲基-苯甲酰胺
[0485]
[0486] 使用实例1的步骤E中所述的程序，由前一步骤所制备的4-(2，4-二甲氧-嘧啶-5-基)-4-羟基-环己酮和N-(氮杂环丁烷-3-基氨基甲酰基甲基)-3-三氟甲基-苯甲酰胺的还原性胺化制得本标题化合物，为白色固体。
[0487] 29a：得自硅胶柱的极性较小的异构体，
[0488] 1H NMR(400MHz，d4-MeOH)δ8.28(s，1H)，8.21(s，1H)，8.16(d，J ＝ 6.2Hz，1H)，7.85(d，J ＝ 7.0Hz，1H)，7.70(t，J ＝ 6.5Hz，1H)，4.46(m，1H)，4.08(s，2H)，4.01(s，3H)，
3.69(t，J＝7.0Hz，2H)，3.32(s，3H)，3.02(t，J＝7.2Hz，2H)，2.5(m，2H)，2.31(s，br，1H)，
1.90(m，2H)，1.55(m，2H)，1.35(m，2H)。
3.69(t，J＝7.0Hz，2H)，3.32(s，3H)，3.02(t，J＝7.2Hz，2H)，2.5(m，2H)，2.31(s，br，1H)，
1.90(m，2H)，1.55(m，2H)，1.35(m，2H)。
[0489] 29b：得自硅胶柱的极性较大的异构体
[0490] 1H NMR(400MHz，d4-MeOH)δ8.38(s，1H)，8.30(s，1H)，8.21(d，J ＝ 6.5Hz，1H)，7.95(d，J ＝ 6.0Hz，1H)，7.78(t，J ＝ 6.5Hz，1H)，4.75(m，1H)，4.45(t，J ＝ 6.8Hz，2H)，
4.32(t，J ＝ 6.8Hz，2H)，4.12(s，2H)，4.01(s，3H)，3.50(s，3H)，2.35(m，1H)，2.31(m，2H)，
1.95(m，2H)，1.85(m，4H)。
4.32(t，J ＝ 6.8Hz，2H)，4.12(s，2H)，4.01(s，3H)，3.50(s，3H)，2.35(m，1H)，2.31(m，2H)，
1.95(m，2H)，1.85(m，4H)。
[0491] 实例30：N-({1-[4-羟基-4-(1-甲基-1H-咪唑-2-基)-环己基]-氮杂环丁烷-3-基氨基甲酰基}-甲基)-3-三氟甲基-苯甲酰胺
[0492] 步骤A：8-(1-甲基-1H-咪唑-2-基)-1，4-二氧杂-螺[4.5]癸烷-8-醇
[0493]
[0494] 使用实例1步骤A中所述的程序，在THF中由2-溴-1-甲基-1H-咪唑(Aldrich)和1，4-二氧杂-螺[4.5]癸烷-8-酮制得本标题化合物，为白色固体。
[0495] 1H NMR(400MHz，CDCl3)δ6.78(d，J ＝ 3.0Hz，2H)，3.95(m，4H)，3.90(s，3H)，2.30(m，2H)，2.11(m，2H)，2.0(d，J＝8.5Hz，2H)，1.72(d，J＝8.8Hz，2H)。
[0496] 步骤B：4-羟基-4-(1-甲基-1H-咪唑-2-基)-环己酮
[0497]
[0498] 使用实例1的步骤B中所述的程序，由前一步骤所制备的8-(1-甲基-1H-咪唑-2-基)-1，4-二氧杂-螺[4.5]癸烷-8-醇制得本标题化合物，为白色固体。
[0499] 1H NMR(400MHz，CDCl3)δ6.80(s，2H)，3.85(s，3H)，2.78(m，2H)，2.40(m，4H)，2.25(m，2H)。
[0500] 步骤C：N-({1-[4-羟基-4-(1-甲基-1H-咪唑-2-基)-环己基]-氮杂环丁烷-3-基氨基甲酰基}-甲基)-3-三氟甲基-苯甲酰胺
[0501]
[0502] 使用实例1的步骤E中所述的程序，由前一步骤所制备的4-羟基-4-(1-甲基-1H-咪唑-2-基)-环己酮和N-(氮杂环丁烷-3-基氨基甲酰基甲基)-3-三氟甲基-苯
甲酰胺的还原性胺化制得本标题化合物，为白色固体。
甲酰胺的还原性胺化制得本标题化合物，为白色固体。
[0503] 30a：得自硅胶柱的极性较小的异构体，
[0504] 1H NMR(400MHz，d4-MeOH)δ8.15(s，1H)，8.06(d，J ＝ 6.5Hz，1H)，7.80(d，J ＝6.4Hz，1H)，7.65(t，J ＝ 6.5Hz，1H)，6.93(d，J ＝ 4.5Hz，1H)，6.75(d，J ＝ 4.0Hz，1H)，
4.34(m，1H)，3.98(s，2H)，3.79(s，3H)，3.65(t，J ＝ 6.0Hz，2H)，3.04(t，J ＝ 6.0Hz，2H)，
2.35(m，1H)，2.30(m，2H)，1.85(m，2H)，1.65(m，2H)，1.30(m，2H)。
4.34(m，1H)，3.98(s，2H)，3.79(s，3H)，3.65(t，J ＝ 6.0Hz，2H)，3.04(t，J ＝ 6.0Hz，2H)，
2.35(m，1H)，2.30(m，2H)，1.85(m，2H)，1.65(m，2H)，1.30(m，2H)。
[0505] 30b：得自硅胶柱的极性较大的异构体
[0506] 1H NMR(400MHz，d4-MeOH)δ8.14(s，1H)，8.06(d，J ＝ 6.0Hz，1H)，7.78(d，J ＝6.2Hz，1H)，7.58(t，J ＝ 6.5Hz，1H)，6.88(s，1H)，6.72(s，1H)，4.41(m，1H)，3.98(s，2H)，
3.90(t，J ＝ 6.0Hz，2H)，3.80(s，3H)，3.12(s，3H)，3.36(t，J ＝ 6.0Hz，2H)，2.55(m，1H)，
2.16(m，2H)，1.85(m，2H)，1.35(m，2H)，1.70(m，2H)，1.55(m，2H)。
3.90(t，J ＝ 6.0Hz，2H)，3.80(s，3H)，3.12(s，3H)，3.36(t，J ＝ 6.0Hz，2H)，2.55(m，1H)，
2.16(m，2H)，1.85(m，2H)，1.35(m，2H)，1.70(m，2H)，1.55(m，2H)。
[0507] 实例31：N-({1-[4-(4-溴-1-甲基-1H-吡唑-3-基)-4-羟基-环己基]-氮杂环丁烷-3-基氨基甲酰基}-甲基)-3-三氟甲基-苯甲酰胺
[0508] 步骤A：4-溴-1-甲基-1H-吡唑
[0509]
[0510] 在0℃下，将4-溴-1H-吡唑(Aldrich，5.0g，34mmol)于DMF(10mL)中的溶液用NaH(95％，940mg，37.4mmol)处理，接着用MeI(2.28mL，34mmol)处理。将反应在2小时内升温至室温，用MeOH猝灭。将溶液在乙酸乙酯和水之间分配。将有机层用盐水洗涤，在无水Na2SO4上干燥、过滤并浓缩以得到黄色固体，其随后使用己烷和乙酸乙酯(从10％乙酸乙酯至100％乙酸乙酯)通过CombiFlash 系统上的硅胶柱进行纯化，得到标题化合物，为黄色固体。1
[0511] H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.45(s，1H)，7.38(s，1H)，3.90(s，3H)。
[0512] 步骤B：8-(4-溴-1-甲基-1H-吡唑-3-基)-1，4-二氧杂-螺[4.5]癸烷-8-醇
[0513]
[0514] 使用实例1步骤A中所述的程序，在THF中由前一步骤所制备的4-溴-1-甲基-1H-吡唑和1，4-二氧杂-螺[4.5]癸烷-8-酮制得本标题化合物，为白色固体。
1
1
[0515] H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.30(s，1H)，4.10(s，4H)，3.98(s，3H)，2.52(t，J ＝7.5Hz，2H)，2.10(t，J＝7.2Hz，2H)，2.00(d，J＝7.1Hz，2H)，1.70(d，J＝6.8Hz，2H)。
[0516] 步骤C：4-(4-溴-1-甲基-1H-吡唑-3-基)-4-羟基-环己酮
[0517]
[0518] 使用实例1的步骤B中所述的程序，由前一步骤所制备的8-(4-溴-1-甲基-1H-吡唑-3-基)-1，4-二氧杂-螺[4.5]癸烷-8-醇制得本标题化合物，为白色固体。
1
1
[0519] H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.30(s，1H)，4.05(s，3H)，3.02(s，1H)，2.92(t，J ＝8.0Hz，2H)，2.65(t，J＝8.0Hz，2H)，2.23(m，4H)。
[0520] 步骤D：N-({1-[4-(4-溴-1-甲基-1H-吡唑-3-基)-4-羟基-环己基]-氮杂环丁烷-3-基氨基甲酰基}-甲基)-3-三氟甲基-苯甲酰胺
[0521]
[0522] 使用实例1的步骤E中所述的程序，由前一步骤所制备的4-(4-溴-1-甲基-1H-咪唑-3-基)-4-羟基-环己酮和N-(氮杂环丁烷-3-基氨基甲酰基甲基)-3-三
氟甲基-苯甲酰胺的还原性胺化制得本标题化合物，为白色固体。
氟甲基-苯甲酰胺的还原性胺化制得本标题化合物，为白色固体。
[0523] 31a：得自硅胶柱的极性较小的异构体，
[0524] 1H NMR(400MHz，d4-MeOH)δ8.25(s，1H)，8.16(d，J ＝ 6.5Hz，1H)，7.90(d，J ＝6.4Hz，1H)，7.68(t，J ＝ 6.5Hz，1H)，7.32(s，1H)，4.42(m，1H)，4.11(s，3H)，4.05(s，2H)，
3.68(t，J ＝ 6.0Hz，2H)，3.05(t，J ＝ 6.0Hz，2H)，2.55(m，2H)，2.40(m，1H)，1.96(m，2H)，
1.70(m，2H)，1.55(m，2H)。
3.68(t，J ＝ 6.0Hz，2H)，3.05(t，J ＝ 6.0Hz，2H)，2.55(m，2H)，2.40(m，1H)，1.96(m，2H)，
1.70(m，2H)，1.55(m，2H)。
[0525] 31b：得自硅胶柱的极性较大的异构体
[0526] 1H NMR(400MHz，d4-MeOH)δ8.24(s，1H)，8.20(d，J ＝ 6.6Hz，1H)，7.88(d，J ＝6.4Hz，1H)，7.70(t，J ＝ 6.8Hz，1H)，7.35(s，1H)，4.50(m，1H)，4.15(s，3H)，4.06(s，2H)，
3.75(t，J ＝ 6.8Hz，2H)，3.12(t，J ＝ 6.8Hz，2H)，2.35(m，3H)，1.95(m，2H)，1.75(m，2H)，
1.60(m，2H)。
3.75(t，J ＝ 6.8Hz，2H)，3.12(t，J ＝ 6.8Hz，2H)，2.35(m，3H)，1.95(m，2H)，1.75(m，2H)，
1.60(m，2H)。
[0527] 实例32：N-({1-[4-羟基-4-(1-甲基-1H-吡唑-3-基)-环己基]-氮杂环丁烷-3-基氨基甲酰基}-甲基)-3-三氟甲基-苯甲酰胺
[0528]
[0529] 使N-({1-[4-(4-溴-1-甲基-1H-吡唑-3-基)-4-羟基-环己基]-氮杂环丁烷-3-基氨基甲酰基}-甲基)-3-三氟甲基-苯甲酰胺31a(100mg，0.18mmol)于
MeOH(25mL)中的溶液在全氢模式下(流速1mL/分钟)穿过H-Cube 连续流动氢化反应器(ThalesNano，匈牙利布达佩斯)中的10％披钯碳筒(10％Pd on C cartridge)。浓缩所得的溶液，得到标题化合物，为黄色固体。
MeOH(25mL)中的溶液在全氢模式下(流速1mL/分钟)穿过H-Cube 连续流动氢化反应器(ThalesNano，匈牙利布达佩斯)中的10％披钯碳筒(10％Pd on C cartridge)。浓缩所得的溶液，得到标题化合物，为黄色固体。
[0530] 1H NMR(400MHz，d4-MeOH)δ8.21(s，1H)，8.20(d，J ＝ 6.5Hz，1H)，7.90(d，J ＝6.5Hz，1H)，7.72(t，J ＝ 6.5Hz，1H)，7.32(s，1H)，6.28(s，1H)，4.51(m，1H)，4.15(s，2H)，
4.08(s，3H)，3.95(t，J ＝ 6.0Hz，2H)，3.52(t，J ＝ 6.0Hz，2H)，2.85(m，1H)，2.26(m，2H)，
2.02(m，2H)，1.82(m，2H)，1.45(m，2H)。
4.08(s，3H)，3.95(t，J ＝ 6.0Hz，2H)，3.52(t，J ＝ 6.0Hz，2H)，2.85(m，1H)，2.26(m，2H)，
2.02(m，2H)，1.82(m，2H)，1.45(m，2H)。
[0531] 实例33：N-{[1-(4-羟基-4-噻唑-2-基-环己基)-氮杂环丁烷-3-基氨基甲酰基]-甲基}-3-三氟甲基-苯甲酰胺
[0532] 步骤A；8-噻唑-2-基-1，4-二氧杂-螺[4.5]癸烷-8-醇
[0533]
[0534] 在-78℃下将n-BuLi(己烷中2.5M，26mL，65mmol)的溶液在10分钟内缓慢滴入噻唑(Aldrich，5.0g，59mmol)于THF(50mL)中的溶液。在-78℃下再搅拌反应20分钟。将1，4-二氧杂-螺[4.5]癸烷-8-酮(9.36g，60mmol)于THF(20mL)中的溶液缓慢滴入反应。
在加入后，在-78℃下再搅拌反应2小时。随后用水溶液猝灭反应，并升温至室温。真空移除溶剂，将残余物在乙酸乙酯和水之间分配。将有机层用盐水洗涤，在无水Na2SO4上干燥、过滤并浓缩以得到黄色固体，其随后使用己烷和乙酸乙酯(从10％乙酸乙酯至100％乙酸乙酯)通过CombiFlash 系统上的硅胶柱进行纯化，得到标题化合物，为白色固体。
在加入后，在-78℃下再搅拌反应2小时。随后用水溶液猝灭反应，并升温至室温。真空移除溶剂，将残余物在乙酸乙酯和水之间分配。将有机层用盐水洗涤，在无水Na2SO4上干燥、过滤并浓缩以得到黄色固体，其随后使用己烷和乙酸乙酯(从10％乙酸乙酯至100％乙酸乙酯)通过CombiFlash 系统上的硅胶柱进行纯化，得到标题化合物，为白色固体。
[0535] 1H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.70(s，1H)，7.28(s，1H)，4.01(m，4H)，3.30(s，1H)，2.35(m，2H)，2.23(m，2H)，2.05(m，2H)，1.85(m，2H)。
[0536] 步骤B：4-羟基-4-噻唑-2-基-环己酮
[0537]
[0538] 使用实例1的步骤B中所述的程序，由前一步骤中制备的8-噻唑-2-基-1，4-二氧杂-螺[4.5]癸烷-8-醇制得本标题化合物，为白色固体。
[0539] 1H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.71(s，1H)，7.32(s，1H)，2.93(m，2H)，2.40(m，4H)，2.31(m，2H)。
[0540] 步骤C：N-{[1-(4-羟基-4-噻唑-2-基-环己基)-氮杂环丁烷-3-基氨基甲酰基]-甲基}-3-三氟甲基-苯甲酰胺
[0541]
[0542] 使用实例1的步骤E中所述的程序，由前一步骤所制备的4-羟基-4-噻唑-2-基-环己酮和N-(氮杂环丁烷-3-基氨基甲酰基甲基)-3-三氟甲基-苯甲酰胺的
还原性胺化制得本标题化合物，为白色固体。
还原性胺化制得本标题化合物，为白色固体。
[0543] 33a：得自硅胶柱的极性较小的异构体，
[0544] 1H NMR(400MHz，CDCl3)δ8.15(s，1H)，8.02(d，J＝6.0Hz，1H)，7.75(d，J＝6.5Hz，1H)，7.70(m，1H)，7.65(s，1H)，7.55(t，J＝6.8Hz，1H)，7.43(d，J＝6.0Hz，1H)，7.22(d，J＝6.2Hz，1H)，4.48(m，1H)，4.18(d，J＝6.7Hz，2H)，3.51(t，J＝7.0Hz，2H)，2.98(t，J＝
7.0Hz，2H)，2.30(m，2H)，1.81(m，2H)，1.68(m，2H)，1.48(m，2H)。
7.0Hz，2H)，2.30(m，2H)，1.81(m，2H)，1.68(m，2H)，1.48(m，2H)。
[0545] 33b：得自硅胶柱的极性较大的异构体
[0546] 1H NMR(400MHz，CDCl3)δ8.10(s，1H)，8.02(d，J＝7.0Hz，1H)，7.75(d，J＝7.0Hz，1H)，7.70(s，1H)，7.55(t，J ＝ 6.5Hz，1H)，7.32(d，4.5Hz，1H)，7.01(d，J ＝ 4.0Hz，1H)，
4.55(m，1H)，4.15(d，J ＝ 7.8Hz，2H)，3.659t，J ＝ 7.5Hz，2H)，3.08(t，J ＝ 7.5Hz，2H)，
2.05(m，2H)，1.80(m，4H)，1.70(m，2H)。
4.55(m，1H)，4.15(d，J ＝ 7.8Hz，2H)，3.659t，J ＝ 7.5Hz，2H)，3.08(t，J ＝ 7.5Hz，2H)，
2.05(m，2H)，1.80(m，4H)，1.70(m，2H)。
[0547] 实例34：N-({1-[4-羟基-4-(5-甲基-噻唑-2-基)-环己基]-氮杂环丁烷-3-基氨基甲酰基}-甲基)-3-三氟甲基-苯甲酰胺
[0548] 步骤A：8-(5-甲基-噻唑-2-基)-1，4-二氧杂-螺[4.5]癸烷-8-醇
[0549]
[0550] 使用实例33的步骤A中所述的程序，由5-甲基-噻唑制得本标题化合物，为白色固体。
[0551] 1H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.32(s，1H)，4.01(m，4H)，2.45(s，3H)，2.20(t，J ＝6.2Hz，2H)，2.02(t，J＝6.5Hz，2H)，1.98(d，J＝6.2Hz，2H)，1.70(d，J＝6.2Hz，2H)。
[0552] 步骤B：4-羟基-4-(5-甲基-噻唑-2-基)-环己酮
[0553]
[0554] 使用实例1的步骤B中所述的程序，由前一步骤所制备的8-(5-甲基-噻唑-2-基)-1，4-二氧杂-螺[4.5]癸烷-8-醇的去保护制得本标题化合物，为白色固体。
[0555] 1H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.30(s，1H)，2.90(m，2H)，2.52(s，3H)，2.45(m，4H)，2.33(m，2H)。
[0556] 步骤C：N-({1-[4-羟基-4-(5-甲基-噻唑-2-基)-环己基]-氮杂环丁烷-3-基氨基甲酰基}-甲基)-3-三氟甲基-苯甲酰胺
[0557]
[0558] 使用实例1的步骤E中所述的程序，由前一步骤所制备的4-羟基-4-(5-甲基-噻唑-2-基)-环己酮和N-(氮杂环丁烷-3-基氨基甲酰基甲基)-3-三氟甲基-苯甲酰胺的还原性胺化制得本标题化合物，为白色固体。
[0559] 34a：得自硅胶柱的极性较小的异构体
[0560] 1H NMR(400MHz，d4-MeOH)δ8.21(s，1H)，8.15(d，J ＝ 6.5Hz，1H)，7.82(d，J ＝6.0Hz，1H)，7.65(t，J ＝ 7.2Hz，1H)，4.40(m，1H)，3.55(t，J ＝ 7.5Hz，2H)，3.30(s，3H)，
2.98(t，J＝7.2Hz，2H)，2.30(m，2H)，1.80(m，2H)，1.65(m，2H)，1.42(m，2H)。
2.98(t，J＝7.2Hz，2H)，2.30(m，2H)，1.80(m，2H)，1.65(m，2H)，1.42(m，2H)。
[0561] 34b：得自硅胶柱的极性较大的异构体
[0562] 1H NMR(400MHz，CDCl3)δ8.15(s，1H)，8.06(d，J＝6.0Hz，1H)，7.78(d，J＝6.4Hz，1H)，7.62(t，J＝6.5Hz，1H)，7.32(s，1H)，4.62(m，1H)，4.18(d，J＝4.5Hz，2H)，3.89(t，J＝6.8Hz，2H)，3.50(s，br，2H)，2.52(s，br，1H)，2.10～1.89(m，3H)，1.82～1.63(m，3H)。
[0563] 实例35：N-({1-[4-羟基-4-(5-羟甲基-噻唑-2-基)-环己基]-氮杂环丁烷-3-基氨基甲酰基}-甲基)-3-三氟甲基-苯甲酰胺
[0564] 步骤A：5-(叔丁基-二甲基-硅烷基氧基甲基)-噻唑
[0565]
[0566] 在-78℃下，将5-氧甲基-噻唑(3B Scientific，5g，43mmol)和咪唑(3.50g，52mmol)于DMF(10mL)中的溶液用TBSCl(6.48g，43mmol)处理30分钟。用MeOH猝灭反应，并升温至室温。将溶液在醚和水之间分配。将有机层用盐水洗涤，在无水Na2SO4上干燥、过滤并浓缩以得到黄色固体，并使用己烷和乙酸乙酯(从5％乙酸乙酯至30％乙酸乙酯)通过CombiFlash 系统上的硅胶柱进行纯化，得到标题化合物，为白色固体。
[0567] ESI-MS(m/z)：C10H19NOSSi计算值：229；实测值：230(M+H)。
[0568] 步骤B：8-(5-羟甲基-噻唑-2-基)-1，4-二氧杂-螺[4.5]癸烷-8-醇
[0569]
[0570] 使用实例33的步骤A中所述的程序，由5-(叔丁基-二甲基-硅烷基氧基甲基)-噻唑出发，然后经TBAF后处理，制得本标题化合物，为白色固体。
[0571] ESI-MS(m/z)：C12H17NO4S计算值：271；实测值：272(M+H)。
[0572] 步骤C：4-羟基-4-(5-羟甲基-噻唑-2-基)-环己酮
[0573]
[0574] 使用实例1的步骤B中所述的程序，由前一步骤所制备的8-(5-羟甲基-噻唑-2-基)-1，4-二氧杂-螺[4.5]癸烷-8-醇的去保护制得本标题化合物，为白色固体。
[0575] 1H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.60(s，1H)，4.85(s，2H)，2.22(m，4H)，2.05(m，4H)。
[0576] 步骤D：N-({1-[4-羟基-4-(5-羟甲基-噻唑-2-基)-环己基]-氮杂环丁烷-3-基氨基甲酰基}-甲基)-3-三氟甲基-苯甲酰胺
[0577]
[0578] 使用实例1的步骤E中所述的程序，由前一步骤所制备的4-羟基-4-(5-羟甲基-噻唑-2-基)-环己酮和N-(氮杂环丁烷-3-基氨基甲酰基甲基)-3-三氟甲基-苯甲
酰胺的还原性胺化制得本标题化合物，为白色固体。
酰胺的还原性胺化制得本标题化合物，为白色固体。
[0579] 35a：得自硅胶柱的极性较小的异构体，1
[0580] H NMR(400MHz，d4-MeOH)δ8.25(s，1H)，8.18(d，J ＝ 6.5Hz，1H)，7.90(d，J ＝6.5Hz，1H)，7.72(d，J ＝ 6.6Hz，1H)，7.55(s，1H)，4.77(s，2H)，4.62(m，1H)，4.20(t，J ＝
6.5Hz，2H)，4.08(d，J ＝ 3.5Hz，2H)，3.85(m，J ＝ 6.1Hz，2H)，2.35(m，1H)，2.01(m，2H)，
1.85(m，2H)，1.64(m，2H)。
6.5Hz，2H)，4.08(d，J ＝ 3.5Hz，2H)，3.85(m，J ＝ 6.1Hz，2H)，2.35(m，1H)，2.01(m，2H)，
1.85(m，2H)，1.64(m，2H)。
[0581] 35b：得自硅胶柱的极性较大的异构体
[0582] 1H NMR(400MHz，CDCl3)δ8.10(s，1H)，8.05(d，J ＝ 6.5Hz，1H)，7.90(m，1H)，7.78(d，J ＝ 6.6Hz，1H)，7.63(t，J ＝ 6.6Hz，1H)，7.55(s，1H)，4.82(s，2H)，4.68(m，1H)，
4.18(d，J ＝ 3.5Hz，2H)，3.75(m，J ＝ 6.5Hz，2H)，3.20(m，J ＝ 6.1Hz，2H)，2.35(m，1H)，
1.85(m，4H)，1.65(m，2H)，1.24(m，2H)。
4.18(d，J ＝ 3.5Hz，2H)，3.75(m，J ＝ 6.5Hz，2H)，3.20(m，J ＝ 6.1Hz，2H)，2.35(m，1H)，
1.85(m，4H)，1.65(m，2H)，1.24(m，2H)。
[0583] 实例36：N-({1-[4-(6-溴-苯并噻唑-2-基)-4-羟基-环己基]-氮杂环丁烷-3-基氨基甲酰基}-甲基)-3-三氟甲基-苯甲酰胺
[0584] 步骤A：8-(6-溴-苯并噻唑-2-基)-1，4-二氧杂-螺[4.5]癸烷-8-醇
[0585]
[0586] 使用实例33的步骤A中所述的程序，由6-溴-苯并噻唑(Aldrich)制得本标题化合物，为白色固体。
[0587] 1H NMR(400MHz，CDCl3)δ8.05(s，1H)，7.82(d，J＝6.1Hz，1H)，7.55(d，J＝6.1Hz，1H)，4.05(s，4H)，2.32(m，2H)，2.10(m，4H)，1.81(m，2H)。
[0588] 步骤B：4-(6-溴-苯并噻唑-2-基)-4-羟基-环己酮
[0589]
[0590] 使用实例1的步骤B中所述的程序，由前一步骤所制备的8-(6-溴-苯并噻唑-2-基)-1，4-二氧杂-螺[4.5]癸烷-8-醇的去保护制得本标题化合物，为白色固体。
[0591] 1H NMR(400MHz，CDCl3)δ8.02(s，1H)，7.80(d，J＝6.5Hz，1H)，7.58(d，J＝6.5Hz，1H)，2.91(m，2H)，2.55(m，4H)，2.32(m，2H)。
[0592] 步骤C：N-({1-[4-(6-溴-苯并噻唑-2-基)-4-羟基-环己基]-氮杂环丁烷-3-基氨基甲酰基}-甲基)-3-三氟甲基-苯甲酰胺
[0593]
[0594] 使用实例1的步骤E中所述的程序，由前一步骤所制备的4-(6-溴-苯并噻唑-2-基)-4-羟基-环己酮和N-(氮杂环丁烷-3-基氨基甲酰基甲基)-3-三氟甲基-苯
甲酰胺的还原性胺化制得本标题化合物，为白色固体。
甲酰胺的还原性胺化制得本标题化合物，为白色固体。
[0595] 36a：得自硅胶柱的极性较小的异构体，
[0596] 1H NMR(400MHz，CDCl3)δ8.12(s，1H)，8.02，8.00(s，1H)，7.80(d，J＝6.5Hz，1H)，7.77(d，J ＝ 6.2Hz，1H)，7.61(m，1H)，7.57(m，2H)，4.55(m，1H)，4.20(s，2H)，3.60(t，J ＝
6.5Hz，2H)，3.10(t，J＝6.4Hz，2H)，2.38(m，3H)，1.85(m，2H)，1.74(m，2H)，1.60(m，2H)。
6.5Hz，2H)，3.10(t，J＝6.4Hz，2H)，2.38(m，3H)，1.85(m，2H)，1.74(m，2H)，1.60(m，2H)。
[0597] 36b：得自硅胶柱的极性较大的异构体
[0598] 1H NMR(400MHz，CDCl3)δ8.10(s，1H)，8.02(m，2H)，7.80(m，2H)，7.65(d，J ＝6.5Hz，1H)，7.60(m，1H)，7.45(m，1H)，4.58(m，1H)，4.20(s，2H)，3.65(t，J ＝ 6.5Hz，2H)，
3.02(t，J＝6.6Hz，2H)，2.23(m，1H)，2.10(m，4H)，1.80(m，2H)，1.65(m，2H)。
3.02(t，J＝6.6Hz，2H)，2.23(m，1H)，2.10(m，4H)，1.80(m，2H)，1.65(m，2H)。
[0599] 实例37：N-{[1-(4-苯并噻唑-2-基-4-羟基-环己基)-氮杂环丁烷-3-基氨基甲酰基]-甲基}-3-三氟甲基-苯甲酰胺
[0600]
[0601] 使用实例32中所述的程序，由N-({1-[4-(6-溴-苯并噻唑-2-基)-4-羟基-环己基]-氮杂环丁烷-3-基氨基甲酰基}-甲基)-3-三氟甲基-苯甲酰胺(极性较小的异构体，36a)制得本标题化合物，为白色固体。
[0602] 1H NMR(400MHz，CDCl3)δ8.15(s，1H)，8.05(d，J＝6.6Hz，1H)，7.93(d，J＝6.4Hz，1H)，7.89(d，J＝6.0Hz，1H)，7.80(d，J＝6.7Hz，1H)，7.55(t，J＝6.2Hz，1H)，7.48(t，J＝6.4Hz，1H)，7.37(t，J＝6.1Hz，1H)，4.50(m，1H)，4.19(d，J＝3.2Hz，2H)，3.64(t，J＝
6.8Hz，2H)，3.10(s，1H)，3.02(t，J ＝ 6.7Hz，2H)，2.40(m，1H)，2.25(m，2H)，1.85(m，2H)，
1.72(m，2H)，1.60(m，2H)。
6.8Hz，2H)，3.10(s，1H)，3.02(t，J ＝ 6.7Hz，2H)，2.40(m，1H)，2.25(m，2H)，1.85(m，2H)，
1.72(m，2H)，1.60(m，2H)。
[0603] 实例38：N-({1-[4-羟基-4-(4-甲基-噻唑-2-基)-环己基]-氮杂环丁烷-3-基氨基甲酰基}-甲基)-3-三氟甲基-苯甲酰胺
[0604] 步骤A：8-(4-甲基-噻唑-2-基)-1，4-二氧杂-螺[4.5]癸烷-8-醇
[0605]
[0606] 使用实例33步骤A中所述的程序，由4-甲基-噻唑(Aldrich)和1，4-二氧杂-螺[4.5]癸烷-8-酮制得本标题化合物，为白色固体。
[0607] 1H NMR(400MHz，CDCl3)δ6.80(s，1H)，3.98(m，4H)，2.41(s，3H)，2.22(m，J ＝6.2Hz，2H)，2.08(m，J＝6.2Hz，2H)，1.95(d，J＝6.0Hz，2H)，1.72(d，J＝6.2Hz，2H)。
[0608] 步骤B：4-羟基-4-(4-甲基-噻唑-2-基)-环己酮
[0609]
[0610] 使用实例1的步骤B中所述的程序，由前一步骤所制备的8-(4-甲基-噻唑-2-基)-1，4-二氧杂-螺[4.5]癸烷-8-醇的去保护制得本标题化合物，为白色固体。
[0611] 1H NMR(400MHz，CDCl3)δ6.85(s，1H)，2.85(m，2H)，2.45(s，3H)，2.40(m，4H)，2.28(m，4H)。
[0612] 步骤C：N-({1-[4-羟基-4-(4-甲基-噻唑-2-基)-环己基]-氮杂环丁烷-3-基氨基甲酰基}-甲基)-3-三氟甲基-苯甲酰胺
[0613]
[0614] 使用实例1的步骤E中所述的程序，由前一步骤所制备的4-羟基-4-(4-甲基-噻唑-2-基)-环己酮和N-(氮杂环丁烷-3-基氨基甲酰基甲基)-3-三氟甲基-苯甲酰胺的还原性胺化制得本标题化合物，为白色固体。
[0615] 38a：得自硅胶柱的极性较小的异构体，
[0616] 1H NMR(400MHz，d4-MeOH)δ8.15(s，1H)，8.08(d，J ＝ 6.2Hz，1H)，7.81(d，J ＝7.0Hz，1H)，7.63(t，J ＝ 6.5Hz，1H)，6.92(s，1H)，4.38(m，1H)，4.00(s，2H)，3.55(t，J ＝
7.0Hz，2H)，2.92(t，J ＝ 7.2Hz，2H)，2.35(s，3H)，2.25(m，2H)，1.72(m，2H)，1.58(m，2H)，
1.43(m，2H)。
7.0Hz，2H)，2.92(t，J ＝ 7.2Hz，2H)，2.35(s，3H)，2.25(m，2H)，1.72(m，2H)，1.58(m，2H)，
1.43(m，2H)。
[0617] 38b：得自硅胶柱的极性较大的异构体，
[0618] 1H NMR(400MHz，d4-MeOH)δ8.18(s，1H)，8.10(d，J ＝ 6.0Hz，1H)，7.82(d，J ＝6.5Hz，1H)，7.62(t，J ＝ 6.8Hz，1H)，6.90(s，1H)，4.45(m，1H)，4.02(s，2H)，3.70(t，J ＝
7.0Hz，2H)，3.15(t，J ＝ 7.2Hz，2H)，2.32(m，3H)，2.30(m，1H)，1.98(m，2H)，1.85(m，2H)，
1.70(m，2H)，1.48(m，2H)。
7.0Hz，2H)，3.15(t，J ＝ 7.2Hz，2H)，2.32(m，3H)，2.30(m，1H)，1.98(m，2H)，1.85(m，2H)，
1.70(m，2H)，1.48(m，2H)。
[0619] 实例39：N-({1-[4-羟基-4-(2-三甲基硅烷基-噻唑-5-基)-环己基]-氮杂环丁烷-3-基氨基甲酰基}-甲基)-3-三氟甲基-苯甲酰胺
[0620] 步骤A：8-(2-三甲基硅烷基-噻唑-5-基)-1，4-二氧杂-螺[4.5]癸烷-8-醇
[0621]
[0622] 使用实例33步骤A中所述的程序，由2-三甲基硅烷基-噻唑(Fluka)和1，4-二氧杂-螺[4.5]癸烷-8-酮制得本标题化合物，为白色固体。
[0623] ESI-MS(m/z)：C14H23NO3SSi计算值：313；实测值：314(M+H)。
[0624] 步骤B：4-羟基-4-(2-三甲基硅烷基-噻唑-5-基)-环己酮
[0625]
[0626] 使用实例1的步骤B中所述的程序，由前一步骤所制备的8-(2-三甲基硅烷基-噻唑-5-基)-1，4-二氧杂-螺[4.5]癸烷-8-醇的去保护制得本标题化合物，为白色固体。
[0627] 1H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.68(s，1H)，3.98(m，4H)，2.20(m，2H)，2.04(m，2H)，1.95(m，2H)，1.75(m，2H)，0.29(s，9H)。
[0628] 步骤C：N-({1-[4-羟基-4-(2-三甲基硅烷基-噻唑-5-基)-环己基]-氮杂环丁烷-3-基氨基甲酰基}-甲基)-3-三氟甲基-苯甲酰胺
[0629]
[0630] 使用实例1的步骤E中所述的程序，由前一步骤所制备的4-羟基-4-(2-三甲基硅烷基-噻唑-5-基)-环己酮和N-(氮杂环丁烷-3-基氨基甲酰基甲基)-3-三氟甲基-苯甲酰胺的还原性胺化制得本标题化合物，为白色固体。
[0631] 39a：得自硅胶柱的极性较小的异构体，
[0632] 1H NMR(400MHz，CDCl3)δ8.11(s，1H)，8.02(d，J＝6.6Hz，1H)，7.78(d，J＝6.6Hz，1H)，7.70(s，1H)，7.60(t，J ＝ 6.9Hz，1H)，7.25(br，s，1H)，6.50(s，br，1H)，4.50(m，1H)，
4.15(d，J ＝ 4.5Hz，2H)，3.55(t，J ＝ 7.0Hz，2H)，2.95(t，J ＝ 7.1Hz，2H)，2.28(m，2H)，
1.85～1.64(m，4H)，1.50(m，2H)。
4.15(d，J ＝ 4.5Hz，2H)，3.55(t，J ＝ 7.0Hz，2H)，2.95(t，J ＝ 7.1Hz，2H)，2.28(m，2H)，
1.85～1.64(m，4H)，1.50(m，2H)。
[0633] 39b：得自硅胶柱的极性较大的异构体，
[0634] 1H NMR(400MHz，CDCl3)δ8.10(s，1H)，8.02(d，J＝6.6Hz，1H)，7.80(d，J＝6.6Hz，1H)，7.68(s，1H)，7.58(t，J ＝ 6.8Hz，1H)，7.24(s，br，1H)，6.72(s，br，1H)，4.55(m，1H)，
4.18(d，J＝4.5Hz，2H)，3.65(t，J＝7.0Hz，2H)，3.00(t，J＝7.0Hz，2H)，2.20(s，br，1H)，
1,98(m，2H)，1.75(m，2H)，1.66(m，2H)，1.45(m，2H)，0.32(s，9H)。
4.18(d，J＝4.5Hz，2H)，3.65(t，J＝7.0Hz，2H)，3.00(t，J＝7.0Hz，2H)，2.20(s，br，1H)，
1,98(m，2H)，1.75(m，2H)，1.66(m，2H)，1.45(m，2H)，0.32(s，9H)。
[0635] 实例40：N-{[1-(4-羟基-4-噻唑-5-基-环己基)-氮杂环丁烷-3-基氨基甲酰基]-甲基}-3-三氟甲基-苯甲酰胺
[0636] 步骤A：8-噻唑-5-基-1，4-二氧杂-螺[4.5]癸烷-8-醇
[0637]
[0638] 在-78℃下，将2-三甲基硅烷基-噻唑(Fluka，5.0g，31.8mmol)于THF(20mL)中的溶液用在10分钟内缓慢滴加的n-BuLi(己烷中2.5M，15.3mL，38.2mmol)处理。-78℃下再搅拌反应20分钟。将1，4-二氧杂-螺[4.5]癸烷-8-酮(Aldrich，6.0g，38mmol)于THF(15mL)中的溶液缓慢滴入反应。在加入后，在-78℃下再搅拌反应2小时。随后用水猝灭反应，并升温至室温。真空移除溶剂，将残余物在乙酸乙酯和水之间分配。将有机层用盐水洗涤，在无水Na2SO4上干燥、过滤并浓缩以得到黄色固体。在室温下向此固体于THF(20mL)中的溶液加入TBAF(THF中1.0N，30mL)。搅拌反应1小时。移除溶剂，将残余物在乙酸乙酯和水之间分配。将有机层用盐水洗涤，在无水Na2SO4上干燥、过滤并浓缩，然后使用己烷和乙酸乙酯(从10％乙酸乙酯至100％乙酸乙酯)通过CombiFlash 系统上的硅胶柱进行纯化，得到标题化合物，为白色固体。
[0639] 1H NMR(400MHz，CDCl3)δ8.65(s，1H)，7.72(s，1H)，4.01(m，4H)，2.20(m，2H)，2.08(m，4H)，1.69(m，2H)。
[0640] 步骤B：4-羟基-4-噻唑-5-基-环己酮
[0641]
[0642] 将前一步骤中制备的8-噻唑-5-基-1，4-二氧杂-螺[4.5]癸烷-8-酮(4.35g，18.0mmol)在室温下用1N HCl(～10mL)于丙酮(20mL)中的溶液处理4小时。将反应用饱和的NaHCO3溶液中和，并移除溶剂。将残余物在乙酸乙酯和水之间分配。将有机层用盐水洗涤，在无水Na2SO4上干燥、过滤并浓缩以得到黄色固体，其随后使用己烷和乙酸乙酯(从
10％乙酸乙酯至100％乙酸乙酯)通过CombiFlash 系统上的硅胶柱进行纯化，得到标题化合物，为浅黄色固体。
10％乙酸乙酯至100％乙酸乙酯)通过CombiFlash 系统上的硅胶柱进行纯化，得到标题化合物，为浅黄色固体。
[0643] 1H NMR(400MHz，CDCl3)δ8.70(s，1H)，7.73(s，1H)，2.96(m，2H)，2.35(m，4H)，2.23(m，2H)。
[0644] 步骤C：N-{[1-(4-羟基-4-噻唑-5-基-环己基)-氮杂环丁烷-3-基氨基甲酰基]-甲基}-3-三氟甲基-苯甲酰胺
[0645]
[0646] 在室温下，将前一步骤所制备的4-羟基-4-噻唑-5-基-环己酮(2.0g，10.1mmol)和实例1的步骤D所制备的N-(氮杂环丁烷-3-基氨基甲酰基甲基)-3-三氟甲基-苯甲酰胺HCl盐(5.1g，15.0mmol)于DCM(20mL)中的溶液用TEA(2.8mL，20mmol)处理10分钟，接着用NaBH(OAc)3(5.28g，25mmol)再处理4小时。用饱和的碳酸氢钠猝灭反应。分离有机层，含水层用氯仿和IPA“混合物”(～3∶1，v/v)萃取3次。将合并的有机层在无水Na2SO4上干燥，过滤并浓缩以得到粗产物，其随后使用乙酸乙酯和7N NH3 MeOH溶液作为洗脱液(从纯乙酸乙酯至在乙酸乙酯中含5％7N NH3 MeOH溶液)通过CombiFlash 系统进行纯化，得到两种标题化合物，为白色固体：一种极性较小的异构体和一种极性较大的异构体。
[0647] 40a：得自硅胶柱的极性较小的异构体，
[0648] 1H NMR(400MHz，d4-MeOH)δ8.90(s，1H)，8.25(s，1H)，8.20(d，J ＝ 6.3Hz，1H)，7.88(d，J ＝ 6.5Hz，1H)，7.85(s，1H)，7.69(t，J ＝ 6.5Hz，1H)，4.45(m，1H)，4.05(s，2H)，
3.68(t，J＝7.0Hz，2H)，3.02(t，J＝7.0Hz，2H)，2.35(s，br，1H)，2.25(m，2H)，1.90(m，2H)，
1.82(m，2H)，1.38(m，2H)。
3.68(t，J＝7.0Hz，2H)，3.02(t，J＝7.0Hz，2H)，2.35(s，br，1H)，2.25(m，2H)，1.90(m，2H)，
1.82(m，2H)，1.38(m，2H)。
[0649] 此化合物的立体化学由X射线晶体学确定为“顺式”。如所定义，“顺式”是噻唑环和氮杂环丁烷环之间的关系。
[0650] 40b：得自硅胶柱的极性较大的异构体，
[0651] 1H NMR(400MHz，d4-MeOH)δ8.88(s，1H)，8.20(s，1H)，8.16(d，J ＝ 6.5Hz，1H)，7.87(d，J ＝ 6.5Hz，1H)，7.74(s，1H)，7.70(t，J ＝ 6.5Hz，1H)，4.46(m，1H)，4.05(s，2H)，
4.68(t，J ＝ 7.0Hz，2H)，3.70(t，J ＝ 7.2Hz，2H)，3.07(t，J ＝ 7.0Hz，2H)，2.20(m，1H)，
2.05(m，2H)，1.85(t，J＝7.8Hz，2H)，1.74(m，2H)，1.65(m，2H)。
4.68(t，J ＝ 7.0Hz，2H)，3.70(t，J ＝ 7.2Hz，2H)，3.07(t，J ＝ 7.0Hz，2H)，2.20(m，1H)，
2.05(m，2H)，1.85(t，J＝7.8Hz，2H)，1.74(m，2H)，1.65(m，2H)。
[0652] 步骤D：N-{[1-(4-羟基-4-噻唑-5-基-环己基)-氮杂环丁烷-3-基氨基甲酰基]-甲基}-3-三氟甲基-苯甲酰胺半琥珀酸酯
[0653]
[0654] 将前一步骤所制备的40a(1.50g，3.14mmol)和琥珀酸(185mg，1.57mmol)溶于丙酮(8mL)和甲醇(1mL)中直到固体消失。向此溶液加入醚(100mL)。随后通过过滤收集白色沉淀。用冷的醚洗涤固体几次。随后真空干燥固体，得到标题化合物，为白色固体。
[0655] LC-MS：LC，99％纯度；ESI-MS(m/z)：C22H25F3N4O3S计算值：482；实测值：483(M+H)。
[0656] 实例41：N-({1-[4-羟基-4-(2-甲基-噻唑-5-基)-环己基]-氮杂环丁烷-3-基氨基甲酰基}-甲基)-3-三氟甲基-苯甲酰胺
[0657] 步骤A：8-(2-甲基-噻唑-5-基)-1，4-二氧杂-螺[4.5]癸烷-8-醇
[0658]
[0659] 使用实例33步骤A中所述的程序，由2-甲基-噻唑(Aldrich)和1，4-二氧杂-螺[4.5]癸烷-8-酮制得本标题化合物，为白色固体。
[0660] 1H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.30(s，1H)，3.98(m，4H)，2.42(s，3H)，2.20(t，J ＝6.5Hz，2H)，2.10(t，J＝6.5Hz，2H)，2.00(d，J＝6.0Hz，2H)，1.72(d，J＝6.1Hz，2H)。
[0661] 步骤B：4-羟基-4-(-甲基-噻唑-5-基)-环己酮
[0662]
[0663] 使用实例1的步骤B中所述的程序，由前一步骤所制备的8-(2-甲基-噻唑-5-基)-1，4-二氧杂-螺[4.5]癸烷-8-醇的去保护制得本标题化合物，为白色固体。
[0664] ESI-MS(m/z)：C10H13NO2S计算值：211；实测值：212(M+H)。
[0665] 步骤C：N-({1-[4-羟基-4-(2-甲基-噻唑-5-基)-环己基]-氮杂环丁烷-3-基氨基甲酰基}-甲基)-3-三氟甲基-苯甲酰胺
[0666]
[0667] 使用实例1的步骤E中所述的程序，由前一步骤所制备的4-羟基-4-(-甲基-噻唑-5-基)-环己酮和N-(氮杂环丁烷-3-基氨基甲酰基甲基)-3-三氟甲基-苯甲酰胺的还原性胺化制得本标题化合物，为白色固体。
[0668] 41a：得自硅胶柱的极性较小的异构体，1
[0669] H NMR(400MHz，d4-MeOH)δ8.25(s，1H)，8.18(d，J ＝ 6.3Hz，1H)，7.85(d，J ＝6.5Hz，1H)，7.69(t，J ＝ 6.5Hz，1H)，7.49(s，1H)，4.42(m，1H)，4.05(s，2H)，3.75(t，J ＝
6.0Hz，2H)，3.02(t，J ＝ 6.0Hz，2H)，2.68(s，3H)，2.32(s，br，1H)，2.25(m，2H)，1.90(m，
2H)，1.82(m，2H)，1.32(m，2H)。
6.0Hz，2H)，3.02(t，J ＝ 6.0Hz，2H)，2.68(s，3H)，2.32(s，br，1H)，2.25(m，2H)，1.90(m，
2H)，1.82(m，2H)，1.32(m，2H)。
[0670] 41b：得自硅胶柱的极性较大的异构体，1
[0671] H NMR(400MHz，d4-MeOH)δ8.18(s，1H)，8.06(d，J ＝ 6.5Hz，1H)，7.79(d，J ＝6.5Hz，1H)，7.62(t，J ＝ 6.6Hz，1H)，7.32(s，1H)，4.55(m，1H)，4.35(t，J ＝ 6.0Hz，2H)，
4.20(m，2H)，4.00(s，2H)，2.95(m，1H)，2.52(s，3H)，2.02(m，2H)，2.25(m，2H)，1.90(m，2H)，
1.82(m，2H)，1.75(m，2H)，1.65(m，2H)。
4.20(m，2H)，4.00(s，2H)，2.95(m，1H)，2.52(s，3H)，2.02(m，2H)，2.25(m，2H)，1.90(m，2H)，
1.82(m，2H)，1.75(m，2H)，1.65(m，2H)。
[0672] 实例42：N-({1-[4-(2-乙基-噻唑-5-基)-4-羟基-环己基]-氮杂环丁烷-3-基氨基甲酰基}-甲基)-3-三氟甲基-苯甲酰胺
[0673] 步骤A：8-(2-乙基-噻唑-5-基)-1，4-二氧杂-螺[4.5]癸烷-8-醇
[0674]
[0675] 使用实例33的步骤A中所述的程序，由2-乙基-噻唑(Aldrich)和1，4-二氧杂-螺[4.5]癸烷-8-酮制得本标题化合物，为白色固体。
1
1
[0676] H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.40(s，1H)，3.98(m，4H)，2.95(q，J ＝ 6.8Hz，2H)，2.10(m，4H)，2.05(m，2H)，1.68(d，J＝6.0Hz，2H)，1.35(t，J＝6.8Hz，3H)。
[0677] 步骤B：4-羟基-4-(2-乙基-噻唑-5-基)-环己酮
[0678]
[0679] 使用实例1的步骤B中所述的程序，由前一步骤所制备的8-(2-乙基-噻唑-5-基)-1，4-二氧杂-螺[4.5]癸烷-8-醇的去保护制得本标题化合物，为白色固体。
1
1
[0680] H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.48(s，1H)，3.10(m，2H)，2.85(q，J ＝ 6.0Hz，2H)，2.35(m，4H)，2.28(m，2H)，1.40(t，J＝6.0Hz，3H)。
[0681] 步骤C：N-({1-[4-(2-乙基-噻唑-5-基)-4-羟基-环己基]-氮杂环丁烷-3-基氨基甲酰基}-甲基)-3-三氟甲基-苯甲酰胺
[0682]
[0683] 使用实例1的步骤E中所述的程序，由前一步骤所制备的4-羟基-4-(2-乙基-噻唑-5-基)-环己酮和N-(氮杂环丁烷-3-基氨基甲酰基甲基)-3-三氟甲基-苯甲酰胺的还原性胺化制得本标题化合物，为白色固体。
[0684] 42a：得自硅胶柱的极性较小的异构体，1
[0685] H NMR(400MHz，d4-MeOH)δ8.16(s，1H)，8.08(d，J ＝ 6.5Hz，1H)，7.80(d，J ＝6.6Hz，1H)，7.64(t，J ＝ 6.4Hz，1H)，7.49(s，1H)，4.38(m，1H)，3.98(s，2H)，3.58(d，J ＝
6.0Hz，2H)，2.95(m，4H)，2.30(m，1H)，2.15(m，2H)，1.80(m，2H)，1.65(m，2H)，1.32(t，J ＝
7.5Hz，3H)，1.28(m，2H)。
6.0Hz，2H)，2.95(m，4H)，2.30(m，1H)，2.15(m，2H)，1.80(m，2H)，1.65(m，2H)，1.32(t，J ＝
7.5Hz，3H)，1.28(m，2H)。
[0686] 42b：得自硅胶柱的极性较大的异构体
[0687] 1H NMR(400MHz，d4-MeOH)δ8.15(s，1H)，8.10(d，J ＝ 6.8Hz，1H)，7.82(d，J ＝6.4Hz，1H)，7.65(t，J ＝ 6.5Hz，1H)，7.38(s，1H)，4.45(m，1H)，4.02(s，2H)，3.74(t，J ＝
6.0Hz，2H)，3.15(t，J ＝ 7.0Hz，2H)，2.92(q，J ＝ 7.2Hz，2H)，2.30(m，1H)，2.06(m，2H)，
1.79(m，2H)，1.65(m，2H)，1.52(m，2H)。
6.0Hz，2H)，3.15(t，J ＝ 7.0Hz，2H)，2.92(q，J ＝ 7.2Hz，2H)，2.30(m，1H)，2.06(m，2H)，
1.79(m，2H)，1.65(m，2H)，1.52(m，2H)。
[0688] 实例43：N-({1-[4-羟基-4-(2-异丙基-噻唑-5-基)-环己基]-氮杂环丁烷-3-基氨基甲酰基}-甲基)-3-三氟甲基-苯甲酰胺
[0689] 步骤A：2-异丙基-噻唑
[0690]
[0691] 向5-异丙基-噻唑(TCI，5g，40mmol)于MeOH(20mL)中的溶液加入5％Pd/C(Aldrich，～2.0g)，然后在室温下装载在具有40psi H2的Parr氢化摇动器上2小时。通过Celite垫层过滤掉催化剂。将所得的溶液浓缩，并与乙酸乙酯一起快速通过硅胶柱，得到标题化合物，为无色油。
[0692] ESI-MS(m/z)：C6H9NS计算值：127；实测值：128(M+H)。
[0693] 步骤B：8-(2-异丙基-噻唑-5-基)-1，4-二氧杂-螺[4.5]癸烷-8-醇
[0694]
[0695] 使用实例33的步骤A中所述的程序，由2-异丙基-噻唑和1，4-二氧杂-螺[4.5]癸烷-8-酮制得本标题化合物，为白色固体。
[0696] ESI-MS(m/z)：C14H21NO3S计算值：283；实测值：284(M+H)。
[0697] 步骤C：4-羟基-4-(2-异丙基-噻唑-5-基)-环己酮
[0698]
[0699] 使用实例1的步骤B中所述的程序，由前一步骤所制备的8-(2-异丙基-噻唑-5-基)-1，4-二氧杂-螺[4.5]癸烷-8-醇的去保护制得本标题化合物，为白色固体。
[0700] 1H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.47(s，1H)，3.25(m，1H)，2.85(m，2H)，2.40(m，4H)，2.28(m，2H)，1.38(d，J＝7.5Hz，6H)。
[0701] 步骤D：N-({1-[4-羟基-4-(2-异丙基-噻唑-5-基)-环己基]-氮杂环丁烷-3-基氨基甲酰基}-甲基)-3-三氟甲基-苯甲酰胺
[0702]
[0703] 使用实例1的步骤E中所述的程序，由前一步骤所制备的4-羟基-4-(2-异丙基-噻唑-5-基)-环己酮和N-(氮杂环丁烷-3-基氨基甲酰基甲基)-3-三氟甲基-苯甲
酰胺的还原性胺化制得本标题化合物，为白色固体。
酰胺的还原性胺化制得本标题化合物，为白色固体。
[0704] 43a：得自硅胶柱的极性较小的异构体，
[0705] 1H NMR(400MHz，d4-MeOH)δ8.25(s，1H)，8.12(d，J ＝ 6.5Hz，1H)，7.85(d，J ＝6.6Hz，1H)，7.70(t，J ＝ 6.4Hz，1H)，7.50(s，1H)，4.42(m，1H)，4.05(s，2H)，3.65(d，J ＝
6.0Hz，2H)，3.30(m，1H)，3.01(t，J ＝ 6.0Hz，2H)，2.30(m，2H)，2.25(m，2H)，1.85(m，2H)，
1.70(m，2H)，1.35(d，J＝7.5Hz，6H)。
6.0Hz，2H)，3.30(m，1H)，3.01(t，J ＝ 6.0Hz，2H)，2.30(m，2H)，2.25(m，2H)，1.85(m，2H)，
1.70(m，2H)，1.35(d，J＝7.5Hz，6H)。
[0706] 43b：得自硅胶柱的极性较大的异构体，
[0707] 1H NMR(400MHz，d4-MeOH)δ8.25(s，1H)，8.15(d，J ＝ 6.5Hz，1H)，7.90(d，J ＝6.4Hz，1H)，7.75(t，J ＝ 6.5Hz，1H)，7.48(s，1H)，4.55(m，1H)，4.12(t，J ＝ 6.0Hz，2H)，
4.05(s，2H)，3.72(t，J＝6.0Hz，2H)，2.85(m，1H)，2.06(m，2H)，1.85(m，4H)，1.65(m，2H)。
4.05(s，2H)，3.72(t，J＝6.0Hz，2H)，2.85(m，1H)，2.06(m，2H)，1.85(m，4H)，1.65(m，2H)。
[0708] 实例44：N-({1-[4-(2-乙炔基-噻唑-5-基)-4-羟基-环己基]-氮杂环丁烷-3-基氨基甲酰基}-甲基)-3-三氟甲基-苯甲酰胺
[0709] 步骤A：2-三甲基硅烷基乙炔基-噻唑
[0710]
[0711] 将2-溴噻唑(Aldrich，5.0g，30.5mmol)、乙炔基-三甲基-硅烷(Aldrich，3.0g，30.5mmol)、PdCl2(PPh3)2(Aldrich，500mg，0.71mmol)和CuI(Aldrich，400mg，1.52mmol)于THF(20mL)中的溶液在室温下用TEA(5mL)处理20分钟。在60下加热反应4小时。通过
celite垫层过滤掉固体，浓缩滤液以得到黄色固体，其随后使用己烷和乙酸乙酯(从10％乙酸乙酯至100％乙酸乙酯)通过CombiFlash 系统上的硅胶柱进行纯化，得到标题化合物，为黄色油。
celite垫层过滤掉固体，浓缩滤液以得到黄色固体，其随后使用己烷和乙酸乙酯(从10％乙酸乙酯至100％乙酸乙酯)通过CombiFlash 系统上的硅胶柱进行纯化，得到标题化合物，为黄色油。
[0712] 1H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.80(s，1H)，7.31(s，1H)，0.28(s，9H).
[0713] 步骤B：8-(2-三甲基硅烷基乙炔基-噻唑-5-基)-1，4-二氧杂-螺[4.5]癸烷-8-醇
[0714]
[0715] 使用实例33的步骤A中所述的程序，由前一步骤所制备的2-三甲基硅烷基乙炔基-噻唑和1，4-二氧杂-螺[4.5]癸烷-8-酮制得本标题化合物，为白色固体。
[0716] ESI-MS(m/z)：C16H23NO3SSi计算值：337；实测值：338(M+H)。
[0717] 步骤C：4-羟基-4-(2-三甲基硅烷基乙炔基-噻唑-5-基)-环己酮
[0718]
[0719] 使用实例1的步骤B中所述的程序，由前一步骤所制备的8-(2-三甲基硅烷基乙炔基-噻唑-5-基)-1，4-二氧杂-螺[4.5]癸烷-8-醇的去保护制得本标题化合物，为白色固体。
[0720] ESI-MS(m/z)：C14H19NO2SSi计算值：293；实测值：294(M+H)。
[0721] 步骤D：N-({1-[4-(2-乙炔基-噻唑-5-基)-4-羟基-环己基]-氮杂环丁烷-3-基氨基甲酰基}-甲基)-3-三氟甲基-苯甲酰胺
[0722]
[0723] 使用实例1的步骤E中所述的程序，由前一步骤所制备的4-羟基-4-(2-三甲基硅烷基乙炔基-噻唑-5-基)-环己酮和N-(氮杂环丁烷-3-基氨基甲酰基甲基)-3-三氟甲基-苯甲酰胺的还原性胺化制得本标题化合物，为白色固体。
[0724] 44a：得自硅胶柱的极性较小的异构体，
[0725] 1H NMR(400MHz，d4-MeOH)δ8.11(s，1H)，8.05(d，J ＝ 6.5Hz，1H)，7.78(d，J ＝6.6Hz，1H)，7.55(t，J ＝ 6.4Hz，1H)，7.50(s，1H)，4.32(m，1H)，3.98(s，2H)，3.65(d，J ＝
6.0Hz，2H)，2.90(t，J ＝ 6.0Hz，2H)，2.85(s，1H)，2.20(m，1H)，2.02(m，2H)，1.85(m，2H)，
1.50(m，2H)，1.25(m，2H)。
6.0Hz，2H)，2.90(t，J ＝ 6.0Hz，2H)，2.85(s，1H)，2.20(m，1H)，2.02(m，2H)，1.85(m，2H)，
1.50(m，2H)，1.25(m，2H)。
[0726] 44b：得自硅胶柱的极性较大的异构体
[0727] 1H NMR(400MHz，d4-MeOH)δ8.22(s，1H)，8.15(d，J ＝ 6.5Hz，1H)，7.90(d，J ＝6.4Hz，1H)，7.75(t，J ＝ 6.5Hz，1H)，7.70(s，1H)，4.45(m，1H)，4.05(s，2H)，3.72(t，J ＝
6.0Hz，2H)，3.05(t，J ＝ 6.0Hz，2H)，3.00(s，1H)，2.25(m，1H)，2.16(m，2H)，1.85(m，2H)，
1.65(m，2H)，152(m，2H)。
6.0Hz，2H)，3.05(t，J ＝ 6.0Hz，2H)，3.00(s，1H)，2.25(m，1H)，2.16(m，2H)，1.85(m，2H)，
1.65(m，2H)，152(m，2H)。
[0728] 实例45：N-({1-[4-羟基-4-(2-甲基硫烷基-噻唑-5-基)-环己基]-氮杂环丁烷-3-基氨基甲酰基}-甲基)-3-三氟甲基-苯甲酰胺
[0729] 步骤A：8-(2-甲基硫烷基-噻唑-5-基)-1，4-二氧杂-螺[4.5]癸烷-8-醇
[0730]
[0731] 使用实例33的步骤A中所述的程序，由2-甲基硫烷基-噻唑(Aldrich)和1，4-二氧杂-螺[4.5]癸烷-8-酮制得本标题化合物，为白色固体。
1
1
[0732] H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.40(s，1H)，3.98(m，4H)，2.62(s，3H)，2.15～ 2.02(m，6H)，1.65(m，2H)。
[0733] 步骤B：8-(2-甲基硫烷基-噻唑-5-基)-1，4-二氧杂-螺[4.5]癸烷-8-醇
[0734]
[0735] 使用实例1的步骤B中所述的程序，由前一步骤所制备的8-(2-甲基硫烷基-噻唑-5-基)-1，4-二氧杂-螺[4.5]癸烷-8-醇的去保护制得本标题化合物，为白色固体。
[0736] ESI-MS(m/z)：C10H13NO2S2计算值：243；实测值：244(M+H)。
[0737] 步骤C：N-({1-[4-羟基-4-(2-甲基硫烷基-噻唑-5-基)-环己基]-氮杂环丁烷-3-基氨基甲酰基}-甲基)-3-三氟甲基-苯甲酰胺
[0738]
[0739] 使用实例1的步骤E中所述的程序，由前一步骤所制备的8-(2-甲基硫烷基-噻唑-5-基)-1，4-二氧杂-螺[4.5]癸烷-8-醇和N-(氮杂环丁烷-3-基氨基甲酰基甲基)-3-三氟甲基-苯甲酰胺的还原性胺化制得本标题化合物，为白色固体。
[0740] 45a：得自硅胶柱的极性较小的异构体，1
[0741] H NMR(400MHz，d4-MeOH)δ8.10(s，1H)，8.05(d，J ＝ 6.5Hz，1H)，7.76(d，J ＝6.6Hz，1H)，7.60(t，J ＝ 6.6Hz，1H)，7.23(s，1H)，4.35(m，1H)，3.98(d，J ＝ 3.5Hz，2H)，
3.55(t，J ＝ 6.5Hz，2H)，3.02(t，J ＝ 6.1Hz，2H)，2.90(m，1H)，2.70(s，3H)，2.02(m，2H)，
1.75(m，2H)，1.48(m，2H)，1.28(m，2H)。
3.55(t，J ＝ 6.5Hz，2H)，3.02(t，J ＝ 6.1Hz，2H)，2.90(m，1H)，2.70(s，3H)，2.02(m，2H)，
1.75(m，2H)，1.48(m，2H)，1.28(m，2H)。
[0742] 45b：得自硅胶柱的极性较大的异构体1
[0743] H NMR(400MHz，CDCl3)δ8.15(s，1H)，8.02(d，J＝6.8Hz，1H)，7.80(d，J＝6.5Hz，1H)，7.62(t，J＝6.6Hz，1H)，7.40(s，1H)，4.52(m，1H)，4.18(d，J＝5.0Hz，2H)，3.65(t，J＝6.0Hz，2H)，3.11(d，J＝6.5Hz，2H)，2.85(m，1H)，2.80(s，3H)，2.10(m，2H)，1.75(m，2H)，
1.62(m，2H)，1.42(m，2H)。
1.62(m，2H)，1.42(m，2H)。
[0744] 实例46：N-({1-[4-羟基-4-(2-甲亚磺酰基-噻唑-5-基)-环己基]-氮杂环丁烷-3-基氨基甲酰基}-甲基)-3-三氟甲基-苯甲酰胺
[0745]
[0746] 将N-({1-[4-羟基-4-(2-甲基硫烷基-噻唑-5-基)-环己基]-氮杂环丁烷-3-基氨基甲酰基}-甲基)-3-三氟甲基-苯甲酰胺(极性较小的异构体，45a，
100mg，0.19mmol)于MeOH(1mL)和水(1mL)中的溶液在室温下用OXONE(Aldrich，230mg，
0.38mmol)处理6小时。将反应混合物在DCM和饱和NaHCO3之间分配。分离有机层，将含水层用氯仿和IPA“混合物”(～3∶1，v/v)萃取3次。将合并的有机层在无水Na2SO4上干燥，过滤并浓缩以得到粗产物，其随后使用乙酸乙酯和7N NH3MeOH溶液作为洗脱液(从纯乙酸乙酯至在乙酸乙酯中含5％7N NH3MeOH溶液)通过CombiFlash 系统进行纯化，得到标题化合物，为白色固体。
1
100mg，0.19mmol)于MeOH(1mL)和水(1mL)中的溶液在室温下用OXONE(Aldrich，230mg，
0.38mmol)处理6小时。将反应混合物在DCM和饱和NaHCO3之间分配。分离有机层，将含水层用氯仿和IPA“混合物”(～3∶1，v/v)萃取3次。将合并的有机层在无水Na2SO4上干燥，过滤并浓缩以得到粗产物，其随后使用乙酸乙酯和7N NH3MeOH溶液作为洗脱液(从纯乙酸乙酯至在乙酸乙酯中含5％7N NH3MeOH溶液)通过CombiFlash 系统进行纯化，得到标题化合物，为白色固体。
1
[0747] H NMR(400MHz，d4-MeOH)δ8.22(s，1H)，8.18(d，J ＝ 6.5Hz，1H)，7.90(s，1H)，7.85(d，J ＝6.6Hz，1H)，7.70(t，J ＝ 6.4Hz，1H)，4.45(m，1H)，4.05(s，2H)，3.75(d，J ＝
6.0Hz，2H)，3.10(t，J ＝ 6.0Hz，2H)，3.04(s，3H)，2.42(m，1H)，2.25(m，2H)，1.95(m，2H)，
1.80(m，2H)，1.42(m，2H).
6.0Hz，2H)，3.10(t，J ＝ 6.0Hz，2H)，3.04(s，3H)，2.42(m，1H)，2.25(m，2H)，1.95(m，2H)，
1.80(m，2H)，1.42(m，2H).
[0748] 实例47：N-({1-[4-羟基-4-(2-甲磺酰基-噻唑-5-基)-环己基]-氮杂环丁烷-3-基氨基甲酰基}-甲基)-3-三氟甲基-苯甲酰胺
[0749] 步骤A：4-羟基-4-(2-甲磺酰基-噻唑-5-基)-环己酮
[0750]
[0751] 使用实例46中所述的程序，由实例45的步骤B中制备的8-(2-甲基硫烷基-噻唑-5-基)-1，4-二氧杂-螺[4.5]癸烷-8-醇的OXONE氧化制得本标题化合物，为白色固体。
[0752] 1H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.85(s，1H)，3.33(s，3H)，2.95(m，2H)，2.42(m，4H)，2.30(m，2H)。
[0753] 步骤B：N-({1-[4-羟基-4-(2-甲磺酰基-噻唑-5-基)-环己基]-氮杂环丁烷-3-基氨基甲酰基}-甲基)-3-三氟甲基-苯甲酰胺
[0754]
[0755] 使用实例1的步骤E中所述的程序，由前一步骤所制备的4-羟基-4-(2-甲磺酰基-噻唑-5-基)-环己酮和N-(氮杂环丁烷-3-基氨基甲酰基甲基)-3-三氟甲基-苯甲酰胺的还原性胺化制得本标题化合物，为白色固体。
[0756] 47a：得自硅胶柱的极性较小的异构体，
[0757] 1H NMR(400MHz，CDCl3)δ8.10(s，1H)，8.05(d，J ＝ 6.5Hz，1H)，7.85(s，1H)，7.78(d，J＝ 6.6Hz，1H)，7.63(t，J ＝ 6.6Hz，1H)，7.45(t，J＝ 3.0Hz，1H)，7.01(d，J ＝
5.6Hz，1H)，4.65(m，1H)，4.15(d，J ＝ 3.5Hz，2H)，3.60(t，J ＝ 6.5Hz，2H)，3.35(s，3H)，
2.98(t，J＝6.1Hz，2H)，2.35(m，1H)，2.22(m，2H)，1.87(m，2H)，1.79(m，2H)，1.46(m，2H)。
5.6Hz，1H)，4.65(m，1H)，4.15(d，J ＝ 3.5Hz，2H)，3.60(t，J ＝ 6.5Hz，2H)，3.35(s，3H)，
2.98(t，J＝6.1Hz，2H)，2.35(m，1H)，2.22(m，2H)，1.87(m，2H)，1.79(m，2H)，1.46(m，2H)。
[0758] 47b：得自硅胶柱的极性较大的异构体
[0759] 1H NMR(400MHz，d4-MeOH)δ8.15(s，1H)，8.06(d，J ＝ 6.8Hz，1H)，7.80(d，J ＝6.5Hz，1H)，7.55(t，J ＝ 6.6Hz，1H)，7.50(s，1H)，4.45(m，1H)，3.98(s，2H)，3.75(t，J ＝
6.0Hz，2H)，3.21(d，J ＝ 6.5Hz，2H)，2.85(m，1H)，2.65(m，1H)，2.10(m，2H)，2.00(m，2H)，
1.75(m，2H)，1.42(m，2H)。
6.0Hz，2H)，3.21(d，J ＝ 6.5Hz，2H)，2.85(m，1H)，2.65(m，1H)，2.10(m，2H)，2.00(m，2H)，
1.75(m，2H)，1.42(m，2H)。
[0760] 实例48：N-({1-[4-羟基-4-(2-羟基-噻唑-5-基)-环己基]-氮杂环丁烷-3-基氨基甲酰基}-甲基)-3-三氟甲基-苯甲酰胺
[0761]
[0762] 将N-({1-[4-羟基-4-(2-甲磺酰基-噻唑-5-基)-环己基]-氮杂环丁烷-3-基氨基甲酰基}-甲基)-3-三氟甲基-苯甲酰胺(极性较小的异构体，47a，100mg，0.18mmol)和LiOH水合物(Aldrich，15mg，0.36mmol)于水(1mL)和THF(1mL)中溶液在密封管中加热到60℃维持2小时。粗溶液通过使用乙酸乙酯和7N NH3 MeOH溶液作为洗脱液(从纯乙酸乙酯至在乙酸乙酯中含5％7NNH3 MeOH溶液)的CombiFlash 系统直接纯化，得到标题化合物，为白色固体。
[0763] 1H NMR(400MHz，d4-MeOH)δ8.11(s，1H)，8.05(d，J ＝ 6.5Hz，1H)，7.80(d，J ＝6.6Hz，1H)，7.62(t，J ＝ 6.6Hz，1H)，6.60(s，1H)，4.45(m，1H)，4.05(t，J ＝ 5.5Hz，2H)，
3.95(s，2H)，3.65(m，2H)，2.98(m，1H)，2.35(m，2H)，2.22(m，1H)，1.97(m，2H)，1.59(m，2H)，
1.50(m，1H)，1.25(m，1H)。
3.95(s，2H)，3.65(m，2H)，2.98(m，1H)，2.35(m，2H)，2.22(m，1H)，1.97(m，2H)，1.59(m，2H)，
1.50(m，1H)，1.25(m，1H)。
[0764] 实例49：N-({1-[4-(2-氨基-噻唑-5-基)-4-羟基-环己基]-氮杂环丁烷-3-基氨基甲酰基}-甲基)-3-三氟甲基-苯甲酰胺
[0765] 步骤A：[5-(8-羟基-1，4-二氧杂-螺[4.5]癸-8-基)-噻唑-2-基]-氨基甲酸叔丁酯
[0766]
[0767] 使用实例33的步骤A中所述的程序，由噻唑-2-基-氨基甲酸叔丁酯(根据Das，B.等人Tetrahedron Lett.2006，47，7551-7556制备)和1，4-二氧杂-螺[4.5]癸烷-8-酮制得本标题化合物，为白色固体。
[0768] ESI-MS(m/z)：C16H24N2O5S计算值：356；实测值：357(M+H)。
[0769] 步骤B：[5-(1-羟基-4-氧-环己基)-噻唑-2-基]-氨基甲酸叔丁酯
[0770]
[0771] 使用实例1的步骤B中所述的程序，由前一步骤所制备的[5-(8-羟基-1，4-二氧杂-螺[4.5]癸-8-基)-噻唑-2-基]-氨基甲酸叔丁酯的去保护制得本标题化合物，为白色固体。
[0772] ESI-MS(m/z)：C14H20N2O4S计算值：312；实测值：312(M+H)。
[0773] 步骤C：[5-(1-羟基-4-{3-[2-(3-三氟甲基-苯甲酰氨基)-乙酰氨基]-氮杂环丁烷-1-基}-环己基)-噻唑-2-基]-氨基甲酸叔丁酯
[0774]
[0775] 使用实例1的步骤E中所述的程序，由前一步骤所制备的[5-(1-羟基-4-氧代-环己基)-噻唑-2-基]-氨基甲酸叔丁酯和N-(氮杂环丁烷-3-基氨基甲酰基甲
基)-3-三氟甲基-苯甲酰胺的还原性胺化制得本标题化合物，为白色固体。
基)-3-三氟甲基-苯甲酰胺的还原性胺化制得本标题化合物，为白色固体。
[0776] 1H NMR(400MHz，CDCl3)δ8.11(s，1H)，8.08(d，J＝6.5Hz，1H)，7.78(d，J＝6.6Hz，1H)，7.60(t，J ＝ 6.6Hz，1H)，7.08(s，1H)，4.45(m，1H)，4.05(s，2H)，3.98(m，2H)，3.65(t，J ＝ 5.6Hz，2H)，2.90(m，1H)，2.35(m，2H)，1.97(m，2H)，1.60(m，2H)，1.38(s，9H)，1.30(m，
2H)。
2H)。
[0777] 步骤D：N-({1-[4-(2-氨基-噻唑-5-基)-4-羟基-环己基]-氮杂环丁烷-3-基氨基甲酰基}-甲基)-3-三氟甲基-苯甲酰胺
[0778]
[0779] 使用实例16的步骤B中所述的程序，由前一步骤所制备的[5-(1-羟基-4-{3-[2-(3-三氟甲基-苯甲酰氨基)-乙酰氨基]-氮杂环丁烷-1-基}-环己基)-噻
唑-2-基]-氨基甲酸叔丁酯的TFA去保护制得本标题化合物，为无色油。
唑-2-基]-氨基甲酸叔丁酯的TFA去保护制得本标题化合物，为无色油。
[0780] ESI-MS(m/z)：C22H26F3N5O3S计算值：497；实测值：498(M+H)。
[0781] 实例50：N-({1-[4-(2-二甲基氨基-噻唑-5-基)-4-羟基-环己基]-氮杂环丁烷-3-基氨基甲酰基}-甲基)-3-三氟甲基-苯甲酰胺
[0782]
[0783] 将N-({1-[4-羟基-4-(2-甲磺酰基-噻唑-5-基)-环己基]-氮杂环丁烷-3-基氨基甲酰基}-甲基)-3-三氟甲基-苯甲酰胺(极性较小的异构体，47a，100mg，0.18mmol)和二甲胺(Aldrich，在水中40％，2mL)于DMF(1mL)中的溶液在密封管中加热到120℃过夜。粗溶液通过使用乙酸乙酯和7N NH3 MeOH溶液作为洗脱液(从纯乙酸乙酯至在乙酸乙酯中含5％7N NH3 MeOH溶液)的CombiFlash 系统直接纯化，得到标题化合物，为白色固体。
[0784] 1H NMR(400MHz，d4-MeOH)δ8.25(s，1H)，8.18(d，J ＝ 6.5Hz，1H)，7.88(d，J ＝6.4Hz，1H)，7.75(t，J ＝ 6.5Hz，1H)，7.05(s，1H)，4.51(m，1H)，4.25(s，2H)，4.10(s，2H)，
3.72(t，J ＝ 6.5Hz，2H)，3.15(s，6H)，3.05(m，2H)，2.38(m，1H)，2.20(m，2H)，1.95(m，2H)，
1.55(m，2H)，1.32(m，2H)。
3.72(t，J ＝ 6.5Hz，2H)，3.15(s，6H)，3.05(m，2H)，2.38(m，1H)，2.20(m，2H)，1.95(m，2H)，
1.55(m，2H)，1.32(m，2H)。
[0785] 实例51：N-({1-[4-羟基-4-(2-吡咯烷-1-基-噻唑-5-基)-环己基]-氮杂环丁烷-3-基氨基甲酰基}-甲基)-3-三氟甲基-苯甲酰胺
[0786]
[0787] 使用实例50所述的程序，由N-({1-[4-羟基-4-(2-甲磺酰基-噻唑-5-基)-环己基]-氮杂环丁烷-3-基氨基甲酰基}-甲基)-3-三氟甲基-苯甲酰胺(极性较小的异构体，47a)和吡咯烷(Aldrich)制得本标题化合物，为白色固体。
[0788] 1H NMR(400MHz，d4-MeOH)δ8.15(s，1H)，8.08(d，J ＝ 4.5Hz，1H)，7.78(d，J ＝6.6Hz，1H)，7.62(t，J ＝ 6.6Hz，1H)，6.90(d，J ＝ 5.2Hz，1H)，4.30(m，1H)，3.98(s，2H)，
3.65(m，2H)，3.25(m，4H)，3.10(m，2H)，2.85(m，1H)，2.20(m，2H)，2.01(m，4H)，2.22(m，1H)，
1.97(m，2H)，1.75(m，2H)，1.35(m，1H)，1.18(m，1H)。
3.65(m，2H)，3.25(m，4H)，3.10(m，2H)，2.85(m，1H)，2.20(m，2H)，2.01(m，4H)，2.22(m，1H)，
1.97(m，2H)，1.75(m，2H)，1.35(m，1H)，1.18(m，1H)。
[0789] 实例52：N-({1-[4-羟基-4-(2-甲氧基-噻唑-5-基)-环己基]-氮杂环丁烷-3-基氨基甲酰基}-甲基）-3-三氟甲基-苯甲酰胺
[0790]
[0791] 将N-({1-[4-羟基-4-(2-甲磺酰基-噻唑-5-基)-环己基]-氮杂环丁烷-3-基氨基甲酰基}-甲基)-3-三氟甲基-苯甲酰胺(极性较小的异构体，47a，100mg，0.18mmol)的溶液在80℃下用NaOMe(Aldrich，MeOH中0.5M，1mL)于DMF(1mL)中的溶液处理4小时。
粗溶液通过使用乙酸乙酯和7N NH3 MeOH溶液作为洗脱液(从纯乙酸乙酯至在乙酸乙酯中含5％7NNH3 MeOH溶液)的CombiFlash 系统直接纯化，得到标题化合物，为白色固体。
粗溶液通过使用乙酸乙酯和7N NH3 MeOH溶液作为洗脱液(从纯乙酸乙酯至在乙酸乙酯中含5％7NNH3 MeOH溶液)的CombiFlash 系统直接纯化，得到标题化合物，为白色固体。
[0792] 1H NMR(400MHz，d4-MeOH)δ8.10(s，1H)，8.05(d，J ＝ 6.5Hz，1H)，7.72(d，J ＝6.6Hz，1H)，7.60(t，J ＝ 6.6Hz，1H)，6.92(s，1H)，4.35(m，1H)，3.92(d，J ＝ 3.5Hz，2H)，
3.90(s，3H)，3.45(t，J ＝ 6.5Hz，2H)，2.85(t，J ＝ 6.1Hz，2H)，2.30(m，1H)，2.12(m，2H)，
1.77(m，2H)，1.60(m，2H)，1.28(m，2H)。
3.90(s，3H)，3.45(t，J ＝ 6.5Hz，2H)，2.85(t，J ＝ 6.1Hz，2H)，2.30(m，1H)，2.12(m，2H)，
1.77(m，2H)，1.60(m，2H)，1.28(m，2H)。
[0793] 实例53：N-({1-[4-羟基-4-(2-异丙氧基-噻唑-5-基）-环己基]-氮杂环丁烷-3-基氨基甲酰基}-甲基）-3-三氟甲基-苯甲酰胺
[0794]
[0795] 使用实例52所述的程序，由N-({1-[4-羟基-4-(2-甲磺酰基-噻唑-5-基)-环己基]-氮杂环丁烷-3-基氨基甲酰基}-甲基)-3-三氟甲基-苯甲酰胺(极性较小的异构体，47a)和i-PrONa(由IPA和95％NaH原位制备)制得本标题化合物，为白色固体。
1
1
[0796] H NMR(400MHz，CDCl3)δ8.12(s，1H)，8.03(d，J＝6.5Hz，1H)，7.81(d，J＝6.5Hz，1H)，7.58(d，J ＝ 6.6Hz，1H)，7.35(m，1H)，7.25(d，J ＝ 4.0Hz，1H)，5.12(m，1H)，4.55(m，
1H)，4.15(d，J＝3.5Hz，2H)，3.60(t，J＝6.5Hz，2H)，3.02(m，J＝6.1Hz，2H)，2.25(m，1H)，
2.15(m，2H)，2.00(m，2H)，1.85(m，4H)，1.41(d，J＝7.2Hz，6H)，1.35(m，2H)。
1H)，4.15(d，J＝3.5Hz，2H)，3.60(t，J＝6.5Hz，2H)，3.02(m，J＝6.1Hz，2H)，2.25(m，1H)，
2.15(m，2H)，2.00(m，2H)，1.85(m，4H)，1.41(d，J＝7.2Hz，6H)，1.35(m，2H)。
[0797] 实例54：N-({1-[4-(2-叔丁氧基-噻唑-5-基)-4-羟基-环己基]-氮杂环丁烷-3-基氨基甲酰基}-甲基)-3-三氟甲基-苯甲酰胺
[0798]
[0799] 使用实例52所述的程序，由N-({1-[4-羟基-4-(2-甲磺酰基-噻唑-5-基)-环己基]-氮杂环丁烷-3-基氨基甲酰基}-甲基)-3-三氟甲基-苯甲酰胺(极性较小的异构体，47a)和t-BuOK(Aldrich，THF中1.0N)制得本标题化合物，为白色固体。
[0800] ESI-MS(m/z)：C26H33F3N4O4S计算值：554；实测值：555(M+H)。
[0801] 实例55：N-({1-[4-(2-氰基氨基-噻唑-5-基)-4-羟基-环己基]-氮杂环丁烷-3-基氨基甲酰基}-甲基)-3-三氟甲基-苯甲酰胺
[0802]
[0803] 将氰化物(cyamide)(Aldrich，23mg，0.54mmol)于DMF(1mL)中的溶液在0℃下用NaH(95％，14mg，0.54mmol)处理。将反应在10分钟内升温至室温。向此溶液加入N-({1-[4-羟基-4-(2-甲磺酰基-噻唑-5-基)-环己基]-氮杂环丁烷-3-基氨基甲酰基}-甲基)-3-三氟甲基-苯甲酰胺(极性较小的异构体，47a，100mg，0.18mmol)，并在
120℃下加热反应4小时。粗溶液通过使用乙酸乙酯和7N NH3MeOH溶液作为洗脱液(从纯乙酸乙酯至在乙酸乙酯中含5％7N NH3 MeOH溶液)的CombiFlash 系统直接纯化，得到标题化合物，为白色固体。
120℃下加热反应4小时。粗溶液通过使用乙酸乙酯和7N NH3MeOH溶液作为洗脱液(从纯乙酸乙酯至在乙酸乙酯中含5％7N NH3 MeOH溶液)的CombiFlash 系统直接纯化，得到标题化合物，为白色固体。
[0804] ESI-MS(m/z)：C23H25F3N6O3S计算值：522；实测值：523(M+H)。
[0805] 实例56：N-({1-[4-(2-二甲基氨基甲基-噻唑-5-基)-4-羟基-环己基]-氮杂环丁烷-3-基氨基甲酰基}-甲基)-3-三氟甲基-苯甲酰胺
[0806] 步骤A：二甲基-噻唑-2基甲胺
[0807]
[0808] 将噻唑-2-甲醛(Aldrich，2.0g，17.7mmol)于DCM(20mL)中的溶液用二甲胺(Aldrich，水中40％，3mL)和分子筛(～1.0g)处理，接着用NaBH(OAc)3(4.2g，20mmol)处理。在室温下搅拌反应过夜。真空移除溶剂，将残余物在乙酸乙酯和水之间分配。将有机层用盐水洗涤，在无水Na2SO4上干燥、过滤并浓缩以得到黄色固体，其随后使用己烷和乙酸乙酯(从10％乙酸乙酯至100％乙酸乙酯)通过CombiFlash 系统上的硅胶柱进行纯化，得到标题化合物，为黄色固体。1
[0809] H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.72(s，1H)，7.32(s，1H)，3.95(s，2H)，2.42(s，6H)。
[0810] 步骤B：8-(2-二甲基氨基甲基-噻唑-5-基)-1，4-二氧杂-螺[4.5]癸烷-8-醇[0811]
[0812] 使用实例33的步骤A中所述的程序，在醚中由前一步骤所制备的二甲基-噻唑-2-基甲胺和1，4-二氧杂-螺[4.5]癸烷-8-酮制得本标题化合物，为白色固体。
[0813] ESI-MS(m/z)：C14H22N2O3S计算值：298；实测值：299(M+H)。
[0814] 步骤C：4-(2-二甲基氨基甲基-噻唑-5-基)-4-羟基-环己酮
[0815]
[0816] 使用实例1的步骤B中所述的程序，由前一步骤所制备的8-(2-二甲基氨基甲基-噻唑-5-基)-1，4-二氧杂-螺[4.5]癸烷-8-醇的去保护制得本标题化合物，为白色固体。
[0817] ESI-MS(m/z)：C12H18N2O2S计算值：254；实测值：255(M+H)。
[0818] 步骤D：N-({1-[4-(2-二甲基氨基甲基-噻唑-5-基)-4-羟基-环己基]-氮杂环丁烷-3-基氨基甲酰基}-甲基)-3-三氟甲基-苯甲酰胺
[0819]
[0820] 使用实例1的步骤E中所述的程序，由前一步骤所制备的4-(2-二甲基氨基甲基-噻唑-5-基)-4-羟基-环己酮和N-(氮杂环丁烷-3-基氨基甲酰基甲基)-3-三氟甲基-苯甲酰胺的还原性胺化制得本标题化合物，为白色固体。
[0821] 1H NMR(400MHz，CDCl3)δ8.15(s，1H)，8.05(d，J＝6.6Hz，1H)，7.78(d，J＝6.4Hz，1H)，7.72(t，J＝4.0Hz，1H)，7.55(t，J＝6.2Hz，1H)，7.47(s，1H)，7.28(d，J＝6.4Hz，1H)，
4.50(m，1H)，4.19(d，J ＝ 3.2Hz，2H)，3.72(s，2H)，3.64(t，J ＝ 6.8Hz，2H)，3.55(s，1H)，
2.90(t，J＝6.7Hz，2H)，2.35(s，6H)，2.25(m，2H)，1.85(m，4H)，1.40(m，2H)。
4.50(m，1H)，4.19(d，J ＝ 3.2Hz，2H)，3.72(s，2H)，3.64(t，J ＝ 6.8Hz，2H)，3.55(s，1H)，
2.90(t，J＝6.7Hz，2H)，2.35(s，6H)，2.25(m，2H)，1.85(m，4H)，1.40(m，2H)。
[0822] 实例57：N-{[1-(4-羟基-4-异噻唑-5-基-环己基)-氮杂环丁烷-3-基氨基甲酰基]-甲基}-3-三氟甲基-苯甲酰胺
[0823] 步骤A：8-异噻唑-5-基-1，4-二氧杂-螺[4.5]癸烷-8-醇
[0824]
[0825] 使用实例33的步骤A中所述的程序，由异噻唑(Focus Synthesis)和1，4-二氧杂-螺[4.5]癸烷-8-酮制得本标题化合物，为白色固体。1
[0826] H NMR(400MHz，CDCl3)δ8.35(s，1H)，7.12(s，1H)，4.05(s，4H)，2.40(m，2H)，2.05(m，2H)，1.78(m，2H)，1.56(m，2H)。
[0827] 步骤B：4-羟基-4-异噻唑-5-基-环己酮
[0828]
[0829] 使用实例1的步骤B中所述的程序，由前一步骤中制备的8-异噻唑-5-基-1，4-二氧杂-螺[4.5]癸烷-8-醇的去保护制得本标题化合物，为白色固体。
[0830] 1H NMR(400MHz，CDCl3)δ8.35(s，1H)，7.10(s，1H)，2.90(m，2H)，2.71(s，3H)，2.45(m，4H)，2.30(m，2H)。
[0831] 步骤C：N-{[1-(4-羟基-4-异噻唑-5-基-环己基)-氮杂环丁烷-3-基氨基甲酰基]-甲基}-3-三氟甲基-苯甲酰胺
[0832]
[0833] 使用实例1的步骤E中所述的程序，由前一步骤所制备的4-羟基-4-异噻唑-5-基-环己酮和N-(氮杂环丁烷-3-基氨基甲酰基甲基)-3-三氟甲基-苯甲酰胺的
还原性胺化制得本标题化合物，为白色固体。
还原性胺化制得本标题化合物，为白色固体。
[0834] 57a：得自硅胶柱的极性较小的异构体，制备成半琥珀酸酯，
[0835] 1H NMR(400MHz，d4-MeOH)δ8.38(s，1H)，8.25(s，1H)，8.18(d，J ＝ 6.5Hz，1H)，7.90(d，J ＝ 6.6Hz，1H)，7.72(t，J ＝ 6.6Hz，1H)，7.28(s，1H)，4.55(m，1H)，4.10(s，2H)，
4.05(t，J ＝ 7.5Hz，2H)，3.55(t，J ＝ 7.5Hz，2H)，2.90(m，1H)，2.55(s，2H)，2.22(m，2H)，
1.97(m，2H)，1.79(m，2H)，1.58(m，2H)。
4.05(t，J ＝ 7.5Hz，2H)，3.55(t，J ＝ 7.5Hz，2H)，2.90(m，1H)，2.55(s，2H)，2.22(m，2H)，
1.97(m，2H)，1.79(m，2H)，1.58(m，2H)。
[0836] 57b：得自硅胶柱的极性较大的异构体，
[0837] 1H NMR(400MHz，d4-MeOH)δ8.11(s，1H)，8.05(d，J ＝ 6.5Hz，1H)，7.80(d，J ＝6.6Hz，1H)，7.62(t，J ＝ 6.6Hz，1H)，7.15(s，1H)，4.45(m，1H)，3.95(s，2H)，3.65(t，J ＝
7.0Hz，2H)，3.01(t，J ＝ 6.5Hz，2H)，2.95(m，1H)，2.01(m，2H)，1.97(m，2H)，1.68(m，2H)，
1.40(m，2H)。
7.0Hz，2H)，3.01(t，J ＝ 6.5Hz，2H)，2.95(m，1H)，2.01(m，2H)，1.97(m，2H)，1.68(m，2H)，
1.40(m，2H)。
[0838] 实例58：N-({1-[4-羟基-4-(3-甲基-异噻唑-5-基)-环己基]-氮杂环丁烷-3-基氨基甲酰基}-甲基)-3-三氟甲基-苯甲酰胺
[0839] 步骤A：8-(3-甲基-异噻唑-5-基)-1，4-二氧杂-螺[4.5]癸烷-8-醇
[0840]
[0841] 使用实例33的步骤A中所述的程序，在醚中由3-甲基-异噻唑(FocusSynthesis)和1，4-二-氧杂-螺[4.5]癸烷-8-酮制得本标题化合物，为白色固体。
[0842] ESI-MS(m/z)：C12H17NO3S计算值：255；实测值：256(M+H)。
[0843] 步骤B：4-羟基-4-(3-甲基-异噻唑-5-基)-环己酮
[0844]
[0845] 使用实例1的步骤B中所述的程序，由前一步骤所制备的8-(3-甲基-异噻唑-5-基)-1，4-二氧杂-螺[4.5]癸烷-8-醇的去保护制得本标题化合物，为白色固体。
[0846] 1H NMR(400MHz，CDCl3)δ6.88(s，1H)，2.90(m，2H)，2.43(s，3H)，2.33(m，4H)，2.20(m，2H)。
[0847] 步骤C：N-({1-[4-羟基-4-(3-甲基-异噻唑-5-基)-环己基]-氮杂环丁烷-3-基氨基甲酰基}-甲基)-3-三氟甲基-苯甲酰胺
[0848]
[0849] 使用实例1的步骤E中所述的程序，由前一步骤所制备的4-羟基-4-(3-甲基-异噻唑-5-基)-环己酮和N-(氮杂环丁烷-3-基氨基甲酰基甲基)-3-三氟甲基-苯甲酰胺的还原性胺化制得本标题化合物，为白色固体。
[0850] 58a：得自硅胶柱的极性较小的异构体，1
[0851] H NMR(400MHz，CDCl3)δ8.14(s，1H)，8.02(d，J ＝ 6.5Hz，1H)，7.71(m，2H)，7.50(t，J ＝6.5Hz，1H)，6.92(s，1H)，4.50(m，1H)，4.15(d，J ＝ 4.2Hz，2H)，3.65(t，J ＝
7.0Hz，2H)，3.10(d，J ＝ 6.5Hz，2H)，2.42(s，3H)，2.35(m，1H)，2.20(m，1H)，2.11(m 2H)，
1.85(m，2H)，1.70(m，2H)，1.42(m，2H)。
7.0Hz，2H)，3.10(d，J ＝ 6.5Hz，2H)，2.42(s，3H)，2.35(m，1H)，2.20(m，1H)，2.11(m 2H)，
1.85(m，2H)，1.70(m，2H)，1.42(m，2H)。
[0852] 58b：得自硅胶柱的极性较大的异构体1
[0853] H NMR(400MHz，CDCl3)δ8.15(s，1H)，8.01(d，J ＝ 6.7Hz，1H)，7.81(s，1H)，7.65(m，1H)，7.50(t，J ＝ 6.5Hz，1H)，6.82(s，1H)，4.55(m，1H)，4.18(d，J ＝ 4.0Hz，2H)，
3.65(t，J ＝ 7.0Hz，2H)，3.20(d，J ＝ 6.5Hz，2H)，2.45(s，3H)，2.25(m，1H)，2.05(m，1H)，
1.80(m，2H)，1.65(m，2H)，1.45(m，2H)。
3.65(t，J ＝ 7.0Hz，2H)，3.20(d，J ＝ 6.5Hz，2H)，2.45(s，3H)，2.25(m，1H)，2.05(m，1H)，
1.80(m，2H)，1.65(m，2H)，1.45(m，2H)。
[0854] 实例59：N-{[1-(4-羟基-4-[1，3，4]噻二唑-2-基-环己基)-氮杂环丁烷-3-基氨基甲酰基]-甲基}-3-三氟甲基-苯甲酰胺
[0855] 步骤A：8-[1，3，4]噻二唑-2-基-1，4-二氧杂-螺[4.5]癸烷-8-醇
[0856]
[0857] 使用实例33的步骤A中所述的程序，由[1，3，4]噻二唑(3BScientific)和1，4-二氧杂-螺[4.5]癸烷-8-酮制得本标题化合物，为白色固体。
[0858] ESI-MS(m/z)：C10H14N2O3S计算值：242；实测值：243(M+H)。
[0859] 步骤B：4-羟基-4-[1，3，4]噻二唑-2-基-环己酮
[0860]
[0861] 使用实例1的步骤B中所述的程序，由前一步骤所制备的8-[1，3，4]噻二唑-2-基-1，4-二氧杂-螺[4.5]癸烷-8-醇的去保护制得本标题化合物，为白色固体。
[0862] 1H NMR(400MHz，CDCl3)δ9.15(s，1H)，2.70(m，2H)，2.52(m，2H)，2.35(m，4H)。
[0863] 步骤C：N-{[1-(4-羟基-4-[1，3，4]噻二唑-2-基-环己基)-氮杂环丁烷-3-基氨基甲酰基]-甲基}-3-三氟甲基-苯甲酰胺
[0864]
[0865] 使用实例1的步骤E中所述的程序，由前一步骤所制备的4-羟基-4-[1，3，4]噻二唑-2-基-环己酮和N-(氮杂环丁烷-3-基氨基甲酰基甲基)-3-三氟甲基-苯甲酰胺的还原性胺化制得本标题化合物，为白色固体。
[0866] 1H NMR(400MHz，CDCl3)δ9.10(s，1H)，8.10(s，1H)，7.71(d，J ＝ 5.8Hz，1H)，7.30(d，J ＝ 6.5Hz，1H)，7.25(t，J ＝ 5.6Hz，1H)，7.18(s，1H)，6.65(m，1H)，4.50(m，1H)，
4.18(d，J ＝ 4.2Hz，2H)，3.60(t，J ＝ 7.0Hz，2H)，3.10(d，J ＝ 6.5Hz，2H)，2.45(m，1H)，
2.35(m，1H)，2.20(m，2H)，1.95(m，4H)，1.60(m，2H)。
4.18(d，J ＝ 4.2Hz，2H)，3.60(t，J ＝ 7.0Hz，2H)，3.10(d，J ＝ 6.5Hz，2H)，2.45(m，1H)，
2.35(m，1H)，2.20(m，2H)，1.95(m，4H)，1.60(m，2H)。
[0867] 实例60：N-({1-[4-(4-溴-噻吩-2-基)-4-羟基-环己基]-氮杂环丁烷-3-基氨基甲酰基}-甲基)-3-三氟甲基-苯甲酰胺
[0868] 步骤A：8-(4-溴-噻吩-2-基)-1，4-二氧杂-螺[4.5]癸烷-8-醇
[0869]
[0870] 使用实例33的步骤A中所述的程序，由2-溴噻吩(Aldrich)和1，4-二氧杂-螺[4.5]癸烷-8-酮制得本标题化合物，为白色固体。
[0871] 1H NMR(MeOH)δ ：6.99(s，1H)，6.88-6.97(m，1H)，3.94-4.00(m，4H)，2.07-2.23(m，2H)，1.94-2.07(m，4H)，1.58-1.71(m，2H)。
[0872] 步骤B：4-(4-溴-噻吩-2-基)-4-羟基-环己酮
[0873]
[0874] 使用实例1的步骤B中所述的程序，由前一步骤所制备的8-(4-溴-噻吩-2-基)-1，4-二氧杂-螺[4.5]癸烷-8-醇的去保护制得本标题化合物，为白色固体。
[0875] 1H NMR(MeOH)δ：7.12-7.16(m，1H)，6.97(d，J ＝ 3.0Hz，1H)，2.87-2.98(m，2H)，2.77-2.85(m，2H)，2.11-2.24(m，4H)。
[0876] 步骤C：N-({1-[4-(4-溴-噻吩-2-基)-4-羟基-环己基]-氮杂环丁烷-3-基氨基甲酰基}-甲基)-3-三氟甲基-苯甲酰胺
[0877]
[0878] 使用实例1的步骤E中所述的程序，由前一步骤所制备的4-(4-溴-噻吩-2-基)-4-羟基-环己酮和N-(氮杂环丁烷-3-基氨基甲酰基甲基)-3-三氟甲基-苯
甲酰胺的还原性胺化制得本标题化合物，为白色固体。
甲酰胺的还原性胺化制得本标题化合物，为白色固体。
[0879] 1H NMR(MeOH)δ：8.12(s，1H)，8.04(d，J＝7.8Hz，1H)，7.76(d，J＝7.8Hz，1H)，7.59(t，J＝ 7.8Hz，1H)，7.15(d，J ＝5.3Hz，1H)，6.82(d，J ＝ 5.3Hz，1H)，4.34(t，J ＝
6.8Hz，1H)，3.50-3.58(m，4H)，2.82(t，J ＝ 7.5Hz，2H)，2.46-2.60(m，2H)，2.22(t，J ＝
3.4Hz，1H)，1.66-1.80(m，2H)，1.49(d，J＝13.6Hz，2H)，1.36(dd，J＝13.9，4.5Hz，2H)。
6.8Hz，1H)，3.50-3.58(m，4H)，2.82(t，J ＝ 7.5Hz，2H)，2.46-2.60(m，2H)，2.22(t，J ＝
3.4Hz，1H)，1.66-1.80(m，2H)，1.49(d，J＝13.6Hz，2H)，1.36(dd，J＝13.9，4.5Hz，2H)。
[0880] 实例61：N-{[1-(4-羟基-4-噻吩-2-基-环己基)-氮杂环丁烷-3-基氨基甲酰基]-甲基}-3-三氟甲基-苯甲酰胺
[0881]
[0882] 使用实例32所述的程序，由N-({1-[4-(4-溴-噻吩-2-基)-4-羟基-环己基]-氮杂环丁烷-3-基氨基甲酰基}-甲基)-3-三氟甲基-苯甲酰胺的还原脱溴制得本
标题化合物，为白色固体。
标题化合物，为白色固体。
[0883] 1H NMR(MeOH)δ：8.12(s，1H)，8.06(d，J＝7.8Hz，1H)，7.77(d，J＝7.8Hz，1H)，7.60(t，J ＝ 7.8Hz，1H)，7.22(d，J ＝ 5.1Hz，1H)，6.96-7.07(m，1H)，6.82-6.90(m，1H)，
4.43-4.57(m，1H)，4.14(t，J ＝ 8.3Hz，2H)，3.96(br s，2H)，3.21(d，J ＝ 1.8Hz，2H)，
3.14(br.s.，1H)，2.17-2.32(m，2H)，1.89-2.00(m，2H)，1.74(t，J＝13.4Hz，2H)，1.38(d，J＝9.3Hz，2H)。
4.43-4.57(m，1H)，4.14(t，J ＝ 8.3Hz，2H)，3.96(br s，2H)，3.21(d，J ＝ 1.8Hz，2H)，
3.14(br.s.，1H)，2.17-2.32(m，2H)，1.89-2.00(m，2H)，1.74(t，J＝13.4Hz，2H)，1.38(d，J＝9.3Hz，2H)。
[0884] 基甲酰基]-甲基}-3-三氟甲基-苯甲酰胺
[0885]
[0886]
[0888] 将 硼 烷 -THF(Aldrich，1.0M，30.4mL，30.4mmol) 和 唑 (Aldrich，2.0mL，30.41mmol)于THF(20mL)中的溶液在-78℃下预搅拌1小时，然后加入n-丁基锂(2.5M，
12.1mL，30.4mmol)，接着加入1，4-环己二酮单乙二醇缩酮(5.2g，33.45mmol)。将反应维持在-78℃下4小时后，向反应加入1N HCl并将其在室温下过夜搅拌，接着用NaHCO3和EtOAc进行水后处理。将有机层干燥(Na2SO4)并真空浓缩，并使用柱层析(0-100％EtOAc/己烷(含NH3MeOH溶液))纯化。
12.1mL，30.4mmol)，接着加入1，4-环己二酮单乙二醇缩酮(5.2g，33.45mmol)。将反应维持在-78℃下4小时后，向反应加入1N HCl并将其在室温下过夜搅拌，接着用NaHCO3和EtOAc进行水后处理。将有机层干燥(Na2SO4)并真空浓缩，并使用柱层析(0-100％EtOAc/己烷(含NH3MeOH溶液))纯化。
[0889] 1H NMR(CHLOROFORM-d)δ：7.66(s，1H)，7.09(s，1H)，2.76-2.98(m，2H)，2.19-2.48(m，4H)，1.86-2.15(m，2H)。
[0890] 步骤B：N-{[1-(4-羟基-4- 唑-2-基-环己基)-氮杂环丁烷-3-基氨基甲酰基]-甲基}-3-三氟甲基-苯甲酰胺
[0891]
[0892] 使用实例1的步骤E中所述的程序，由前一步骤所制备的4-羟基-4-唑-2-基-环己酮和N-(氮杂环丁烷-3-基氨基甲酰基甲基)-3-三氟甲基-苯甲酰胺的
还原性胺化制得本标题化合物，为白色固体。
还原性胺化制得本标题化合物，为白色固体。
[0893] 1H NMR(MeOH)δ：8.20-8.32(m，1H)，8.10-8.20(m，1H)，7.87(s，1H)，7.90(s，1H)，7.71(t，J＝8.6Hz，1H)，7.07-7.22(m，1H)，4.43(t，J＝6.9Hz，1H)，3.71(d，J＝5.3Hz，
2H)，3.54-3.65(m，2H)，3.01(t，J ＝ 7.7Hz，2H)，2.76-2.96(m，1H)，2.52(d，J ＝ 13.4Hz，
2H)，2.21-2.33(m，2H)，2.07-2.18(m，2H)，1.76-1.92(m，2H)。
2H)，3.54-3.65(m，2H)，3.01(t，J ＝ 7.7Hz，2H)，2.76-2.96(m，1H)，2.52(d，J ＝ 13.4Hz，
2H)，2.21-2.33(m，2H)，2.07-2.18(m，2H)，1.76-1.92(m，2H)。
[0894] 基氨基甲酰基]-甲基}-3-三氟甲基-苯甲酰胺
[0895]
[0896]
[0897] 使用实例61所述的程序，由苯并 唑(Aldrich)制得本标题化合物。
[0898] 基氨基甲酰基]-甲基}-3-三氟甲基-苯甲酰胺
[0899]
[0900] 使用实例1的步骤E中所述的程序，由前一步骤所制备的4-苯并 唑-2-基-4-羟基-环己酮和N-(氮杂环丁烷-3-基氨基甲酰基甲基)-3-三氟甲基-苯甲酰胺的还原性胺化制得本标题化合物，为白色固体。
1
1
[0901] H NMR(MeOH)δ：8.23(s，1H)，8.15(d，J ＝ 7.8Hz，1H)，7.88(d，J ＝ 8.6Hz，1H)，7.65-7.76(m，2H)，7.58-7.65(m，1H)，7.33-7.48(m，2H)，4.42(quin，J ＝ 7.0Hz，1H)，
3.54-3.69(m，2H)，3.02(t，J ＝ 7.6Hz，2H)，2.62(d，J ＝ 13.4Hz，2H)，2.25-2.36(m，1H)，
1.88(d，J＝13.6Hz，2H)，1.72-1.84(m，4H)，1.16-1.35(m，2H)。
3.54-3.69(m，2H)，3.02(t，J ＝ 7.6Hz，2H)，2.62(d，J ＝ 13.4Hz，2H)，2.25-2.36(m，1H)，
1.88(d，J＝13.6Hz，2H)，1.72-1.84(m，4H)，1.16-1.35(m，2H)。
[0902] 实例64：3-氟-N-({1-[4-羟基-4-(6-甲基-吡啶-3-基)-环己基]-氮杂环丁烷-3-基氨基甲酰基}-甲基)-5-三氟甲基-苯甲酰胺
[0903] 步骤A：3-[2-(3-三氟甲基-5-氟-苯甲酰氨基)-乙酰氨基]-氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯
[0904]
[0905] 使用实例1的步骤C中所述的程序，由3-氨基-氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯(AstaTech)和(5-氟-3-三氟甲基-苯甲酰氨基)-乙酸(由类似于Ingersoll，A.W.等
人，Organic Syntheses 1932，XII，40-2的方法制备)之间的EDCI偶合制得本标题化合物，为白色固体。
人，Organic Syntheses 1932，XII，40-2的方法制备)之间的EDCI偶合制得本标题化合物，为白色固体。
[0906] 1H NMR(400MHz，CDCl3)δ8.05(s，1H)，7.89(d，J＝7.5Hz，1H)，7.41(d，J＝7.2Hz，1H)，4.55(m，1H)，4.28(t，J＝7.2Hz，2H)，4.15(d，J＝3.0Hz，2H)，3.80(t，J＝4.5Hz，2H)，
1.45(s，9H)。
1.45(s，9H)。
[0907] 步骤B：N-(氮杂环丁烷-3-基氨基甲酰基甲基)-3-三氟甲基-5-氟-苯甲酰胺TFA盐
[0908]
[0909] 使用实例1的步骤D中所述的程序，由前一步骤所制备的3-[2-(5-氟-3-三氟甲基-苯甲酰氨基)-乙酰氨基]-氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯的TFA去保护制得本标题化合物，为无色油。
[0910] ESI-MS(m/z)：C13H13F4N3O2计算值：319；实测值：320(M+H)。
[0911] 步骤C：3-氟-N-({1-[4-羟基-4-(6-甲基-吡啶-3-基)-环己基]-氮杂环丁烷-3-基氨基甲酰基}-甲基)-5-三氟甲基-苯甲酰胺
[0912]
[0913] 使用实例1的步骤E中所述的程序，由实例13的步骤B中制备的4-羟基-4-(6-甲基-吡啶-3-基)-环己酮和N-(氮杂环丁烷-3-基氨基甲酰基甲基)-3-三氟甲基-5-氟-苯甲酰胺的还原性胺化制得本标题化合物，为白色固体。
[0914] 64a：得自硅胶柱的极性较小的异构体，
[0915] 1H NMR(400MHz，CDCl3)δ8.60(s，1H)，7.95(s，1H)，7.74(m，2H)，7.65(d，J ＝6.6Hz，1H)，7.10(d，J ＝ 6.4Hz，1H)，7.00(m，1H)，4.55(m，1H)，4.15(d，J ＝ 5.5Hz，2H)，
3.60(d，J ＝ 6.8Hz，2H)，2.99(t，J ＝ 6.8Hz，2H)，2.55(s，3H)，2.35(m，1H)，2.20(m，2H)，
1.90(m，2H)，1.40(m，4H)。
3.60(d，J ＝ 6.8Hz，2H)，2.99(t，J ＝ 6.8Hz，2H)，2.55(s，3H)，2.35(m，1H)，2.20(m，2H)，
1.90(m，2H)，1.40(m，4H)。
[0916] 64b：得自硅胶柱的极性较大的异构体
[0917] 1H NMR(400MHz，CDCl3)δ8.58(s，1H)，8.00(s，br，2H)，7.75(s，1H)，7.65(m，1H)，7.04(d，J＝ 4.5Hz，1H)，6.98(m，1H)，4.62(m，1H)，4.18(d，J ＝ 4.5Hz，2H)，3.65(d，J ＝
6.6Hz，2H)，3.05(t，J＝6.6Hz，2H)，2.48(s，3H)，2.38(m，1H)，1.92(m，4H)，1.65(m，4H)。
6.6Hz，2H)，3.05(t，J＝6.6Hz，2H)，2.48(s，3H)，2.38(m，1H)，1.92(m，4H)，1.65(m，4H)。
[0918] 实例65：3-氟-N-{[1-(4-羟基-4-噻唑-5-基-环己基)-氮杂环丁烷-3-基氨基甲酰基]-甲基}-5-三氟甲基-苯甲酰胺
[0919]
[0920] 使用实例1的步骤E中所述的程序，由实例40的步骤B中制备的4-羟基-4-噻唑-5-基-环己酮和N-(氮杂环丁烷-3-基氨基甲酰基甲基)-3-三氟甲基-5-氟-苯甲
酰胺的还原性胺化制得本标题化合物，为白色固体。
酰胺的还原性胺化制得本标题化合物，为白色固体。
[0921] 1H NMR(400MHz，CDCl3)δ8.72(s，1H)，7.85(s，1H)，7.80(s，1H)，7.78(d，J ＝6.5Hz，1H)，7.45(d，J ＝ 7.5Hz，1H)，7.01(s，1H)，4.50(m，1H)，4.10(s，2H)，3.65(m，J ＝
6.5Hz，2H)，3.00(m，J＝6.1Hz，2H)，2.35(m，1H)，2.20(m，2H)，1.90(m，4H)，1.44(m，2H)。
6.5Hz，2H)，3.00(m，J＝6.1Hz，2H)，2.35(m，1H)，2.20(m，2H)，1.90(m，4H)，1.44(m，2H)。
[0922] 实例66：N-({1-[4-羟基-4-(6-甲基-吡啶-3-基)-环己基]-氮杂环丁烷-3-基氨基甲酰基}-甲基)-3，5-双-三氟甲基-苯甲酰胺
[0923] 步骤A：3-[2-(3，5-双-三氟甲基-苯甲酰氨基)-乙酰氨基]-氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯
[0924]
[0925] 使用实例1的步骤C中所述的程序，由3-氨基-氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯和(3，5-双三氟甲基-苯甲酰氨基)-乙酸(由类似于Ingersoll，AW.等人，Organic Syntheses
1932，XII，40-2的方法制备)之间的EDCI偶合制得本标题化合物，为白色固体。
1932，XII，40-2的方法制备)之间的EDCI偶合制得本标题化合物，为白色固体。
[0926] ESI-MS(m/z)：C19H21F6N3O4计算值：469；实测值：470(M+H)。
[0927] 步骤B：N-(氮杂环丁烷-3-基氨基甲酰基甲基)-3，5-双-三氟甲基-苯甲酰氨TFA盐
[0928]
[0929] 使用实例1的步骤D中所述的程序，由前一步骤所制备的3-[2-(3，5-双-三氟甲基-苯甲酰氨基)-乙酰氨基]-氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯的TFA去保护制得本标题化合物，为无色油。
[0930] 1H NMR(400MHz，CDCl3)δ8.28(s，2H)，8.05(s，1H)，4.63(m，1H)，4.40(m，2H)，2.15(m，2H)，3.88(m，2H)。
[0931] 步骤D：N-({1-[4-羟基-4-(6-甲基-吡啶-3-基)-环己基]-氮杂环丁烷-3-基氨基甲酰基}-甲基)-3，5-双三氟甲基-苯甲酰胺
[0932]
[0933] 使用实例1的步骤E中所述的程序，由实例13的步骤B制备的4-羟基-4-(6-甲基-吡啶-3-基)-环己酮和N-(氮杂环丁烷-3-基氨基甲酰基甲基)-3，5-双-三氟甲基-苯甲酰胺的还原性胺化制得本标题化合物，为白色固体。
[0934] 66a：得自硅胶柱的极性较小的异构体，
[0935] 1H NMR(400MHz，CDCl3)δ8.60(s，1H)，8.28(s，2H)，8.00(s，1H)，7.82(m，1H)，7.70(d，J ＝6.6Hz，1H)，7.11(d，J ＝ 6.4Hz，1H)，7.02(m，1H)，4.55(m，1H)，4.15(d，J ＝
5.5Hz，2H)，3.61(d，J ＝ 6.8Hz，2H)，2.95(t，J ＝ 6.8Hz，2H)，2.51(s，3H)，2.30(m，1H)，
2.25(m，2H)，1.85(m，2H)，1.45(m，4H)。
5.5Hz，2H)，3.61(d，J ＝ 6.8Hz，2H)，2.95(t，J ＝ 6.8Hz，2H)，2.51(s，3H)，2.30(m，1H)，
2.25(m，2H)，1.85(m，2H)，1.45(m，4H)。
[0936] 66b：得自硅胶柱的极性较大的异构体
[0937] 1H NMR(400MHz，CDCl3)δ8.58(s，1H)，8.32(s，br，2H)，8.00(s，1H)，7.95(m，1H)，7.88(m 1H)，7.70(d，J＝6.5Hz，1H)，7.11(d，J ＝6.6Hz，1H)，4.62(m，1H)，4.18(d，J ＝
5.5Hz，2H)，3.75(d，J ＝ 6.6Hz，2H)，3.35(t，J ＝ 6.6Hz，2H)，2.48(s，3H)，2.38(m，1H)，
1.92(m，4H)，1.65(m，2H)。
5.5Hz，2H)，3.75(d，J ＝ 6.6Hz，2H)，3.35(t，J ＝ 6.6Hz，2H)，2.48(s，3H)，2.38(m，1H)，
1.92(m，4H)，1.65(m，2H)。
[0938] 实例67：N-{[1-(4-羟基-4-噻唑-2-基-环己基)-氮杂环丁烷-3-基氨基甲酰基]-甲基}-3，5-双-三氟甲基-苯甲酰胺
[0939]
[0940] 使用实例1的步骤E中所述的程序，由实例40的步骤B中制备的4-羟基-4-噻唑-2-基-环己酮和N-(氮杂环丁烷-3-基氨基甲酰基甲基)-3，5-双-三氟甲基-苯甲
酰胺的还原性胺化制得本标题化合物，为白色固体。
酰胺的还原性胺化制得本标题化合物，为白色固体。
[0941] 67a：得自硅胶柱的极性较小的异构体，
[0942] 1H NMR(400MHz，CDCl3)δ8.28(s，1H)，8.00(s，1H)，7.70(d，J ＝ 6.6Hz，1H)，7.31(d，J ＝ 6.4Hz，1H)，4.52(m，1H)，4.25(d，J ＝ 5.0Hz，2H)，3.55(d，J ＝ 6.0Hz，2H)，
3.10(t，J＝6.0Hz，2H)，2.90(m，1H)，2.35(m，2H)，1.85(m，2H)，1.70(m，2H)，1.55(m，2H)。
3.10(t，J＝6.0Hz，2H)，2.90(m，1H)，2.35(m，2H)，1.85(m，2H)，1.70(m，2H)，1.55(m，2H)。
[0943] 67b：得自硅胶柱的极性较大的异构体
[0944] 1H NMR(400MHz，CDCl3)δ8.32(s，br，2H)，8.00(s，1H)，7.88(m1H)，7.70(s，1H)，7.41(d，J ＝ 6.6Hz，1H)，4.58(m，1H)，4.15(d，J ＝ 5.5Hz，2H)，3.65(d，J ＝ 6.6Hz，2H)，
3.20(t，J＝6.6Hz，2H)，2.30(m，1H)，2.05(m，4H)，1.82(m，2H)，1.65(m，2H)。
3.20(t，J＝6.6Hz，2H)，2.30(m，1H)，2.05(m，4H)，1.82(m，2H)，1.65(m，2H)。
[0945] 实例68：N-{[1-(4-羟基-4-噻唑-2-基-环己基)-氮杂环丁烷-3-基氨基甲酰基]-甲基}-2，5-双-三氟甲基-苯甲酰胺
[0946] 步骤A：3-[2-(2，5-双-三氟甲基-苯甲酰氨基)-乙酰氨基]-氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯
[0947]
[0948] 使用实例1的步骤C中所述的程序，由3-氨基-氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯和(2，5-双三氟甲基-苯甲酰氨基)-乙酸(由类似于Ingersoll，A.W.等人，Organic Syntheses
1932，XII，40-2的方法制备)之间的EDCI偶合制得本标题化合物，为白色固体。
1932，XII，40-2的方法制备)之间的EDCI偶合制得本标题化合物，为白色固体。
[0949] ESI-MS(m/z)：C19H21F6N3O4计算值：469；实测值：470(M+H)。
[0950] 步骤B：N-(氮杂环丁烷-3-基氨基甲酰基甲基)-2，5-双-三氟甲基-苯甲酰氨TFA盐
[0951]
[0952] 使用实例1的步骤D中所述的程序，由3-[2-(2，5-双-三氟甲基-苯甲酰氨基)-乙酰氨基]-氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯的TFA去保护制得本标题化合物，为无色油。
[0953] 1H NMR(400MHz，d4-MeOH)δ8.25(s，1H)，8.18(d，J ＝ 7.0Hz，1H)，7.95(d，J ＝7.5Hz，1H)，4.63(m，1H)，4.40(dt，J ＝ 7.5，5.0Hz，2H)，4.30(dt，J ＝ 7.5，4.5Hz，2H)，
4.10(s，2H)。
4.10(s，2H)。
[0954] 步骤C：N-{[1-(4-羟基-4-噻唑-2-基-环己基)-氮杂环丁烷-3-基氨基甲酰基]-甲基}-2，5-双-三氟甲基-苯甲酰胺
[0955]
[0956] 使用实例1的步骤E中所述的程序，由实例40的步骤B中制备的4-羟基-4-噻唑-2-基-环己酮和N-(氮杂环丁烷-3-基氨基甲酰基甲基)-2，5-双-三氟甲基-苯甲
酰胺的还原性胺化制得本标题化合物，为白色固体。
酰胺的还原性胺化制得本标题化合物，为白色固体。
[0957] 1H NMR(400MHz，d4-MeOH)δ8.20(s，1H)，7.75(d，J ＝ 6.6Hz，1H)，7.63(d，J ＝6.5Hz，1H)，7.44(d，J ＝ 8.2Hz，1H)，7.359d，J ＝ 6.5Hz，1H)，4.55(m，1H)，4.10(s，2H)，
3.91(d，J ＝ 6.8Hz，2H)，3.20(t，J ＝ 6.8Hz，2H)，2.45(m，1H)，2.30(m，1H)，2.05(m，4H)，
1.85(m，2H)，1.45(m，2H)。
3.91(d，J ＝ 6.8Hz，2H)，3.20(t，J ＝ 6.8Hz，2H)，2.45(m，1H)，2.30(m，1H)，2.05(m，4H)，
1.85(m，2H)，1.45(m，2H)。
[0958] 实例69：N-({1-[4-羟基-4-(6-甲基-吡啶-3-基)-环己基]-氮杂环丁烷-3-基氨基甲酰基}-甲基)-2，5-双-三氟甲基-苯甲酰胺
[0959]
[0960] 使用实例1的步骤E中所述的程序，由实例13的步骤B中制备的4-羟基-4-(6-甲基-吡啶-3-基)-环己酮和N-(氮杂环丁烷-3-基氨基甲酰基甲基)-2，5-双-三氟甲基-苯甲酰胺的还原性胺化制得本标题化合物，为白色固体。
[0961] 69a：得自硅胶柱的极性较小的异构体，
[0962] 1H NMR(400MHz，CDCl3)δ8.58(s，1H)，7.82(m，2H)，7.75(d，J ＝ 6.6Hz，1H)，7.44(m，1H)，7.11(d，J ＝6.4Hz，1H)，4.52(m，1H)，4.15(d，J ＝ 5.5Hz，2H)，3.61(d，J ＝
6.8Hz，2H)，2.95(t，J ＝ 6.8Hz，2H)，2.45(s，3H)，2.30(m，1H)，2.25(m，2H)，1.85(m，2H)，
1.45(m，4H)。
6.8Hz，2H)，2.95(t，J ＝ 6.8Hz，2H)，2.45(s，3H)，2.30(m，1H)，2.25(m，2H)，1.85(m，2H)，
1.45(m，4H)。
[0963] 69b：得自硅胶柱的极性较大的异构体
[0964] 1H NMR(400MHz，CDCl3)δ8.60(s，1H)，7.85(m，2H)，7.78(d，J ＝ 6.5Hz，1H)，7.65(d，J ＝ 6.5Hz，1H)，7.11(d，J ＝ 6.6Hz，1H)，4.62(m，1H)，4.18(d，J ＝ 5.5Hz，2H)，
3.65(d，J ＝ 6.6Hz，2H)，3.15(t，J ＝ 6.6Hz，2H)，2.48(s，3H)，2.18(m，1H)，1.92(m，4H)，
1.65(m，2H)。
3.65(d，J ＝ 6.6Hz，2H)，3.15(t，J ＝ 6.6Hz，2H)，2.48(s，3H)，2.18(m，1H)，1.92(m，4H)，
1.65(m，2H)。
[0965] 实例70：2-氯-N-({1-[4-羟基-4-(6-甲基-吡啶-3-基)-环己基]-氮杂环丁烷-3-基氨基甲酰基}-甲基)-5-三氟甲基-苯甲酰胺
[0966] 步骤A：3-[2-(2-氯-5-三氟甲基-苯甲酰氨基)-乙酰氨基]-氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯
[0967]
[0968] 使用实例1的步骤C中所述的程序，由3-氨基-氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁基酯和(2-氯-5-三氟甲基-苯甲酰氨基)-乙酸(由类似于Ingersoll，A W.等人，Organic Syntheses 1932，XII，40-2的方法制备)之间的EDCI偶合制得本标题化合物，为白色固体。
[0969] ESI-MS(m/z)：C18H21ClF3N3O4计算值：435；实测值：436(M+H)。
[0970] 步骤B：N-(氮杂环丁烷-3-基氨基甲酰基甲基)-2-氯-5-三氟甲基-苯甲酰胺TFA盐
[0971]
[0972] 使用实例1的步骤D中所述的程序，由3-[2-(2-氯-5-三氟甲基-苯甲酰氨基)-乙酰氨基]-氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯的TFA去保护制得本标题化合物，为无色油。
[0973] 1H NMR(400MHz，d4-MeOH)δ8.00(s，1H)，7.82(d，J ＝ 6.0Hz，1H)，7.74(d，J ＝6.5Hz，1H)，4.70(m，1H)，4.45(dt，J ＝ 7.0，4.5Hz，2H)，4.28(dt，J ＝ 7.0，4.5Hz，2H)，
4.12(s，2H)。
4.12(s，2H)。
[0974] 步骤C：2-氯-N-({1-[4-羟基-4-(6-甲基-吡啶-3-基)-环乙基]-氮杂环丁烷-3-基氨基甲酰基}-甲基)-5-三氟甲基-苯甲醚胺
[0975]
[0976] 使用实例1的步骤E中所述的程序，由实例13的步骤B中制备的4-羟基-4-(6-甲基-吡啶-3-基)-环己酮和N-(氮杂环丁烷-3-基氨基甲酰基甲基)-2-氯-5-三氟甲基-苯甲酰胺的还原性胺化制得本标题化合物，为白色固体。
[0977] 70a：得自硅胶柱的极性较小的异构体，1
[0978] H NMR(400MHz，CDCl3)δ8.60(s，1H)，7.90(s，1H)，7.75(d，J ＝ 6.6Hz，1H)，7.61(d，J＝6.4Hz，2H)，7.52(d，J＝6.0Hz，1H)，7.35(d，J＝6.0Hz，1H)，7.2(d，J＝6.2Hz，
1H)，5.70(d，br，2H)，4.55(m，1H)，4.15(d，J＝5.5Hz，2H)，3.60(d，J＝6.8Hz，2H)，2.95(t，J＝6.8Hz，2H)，2.51(s，3H)，2.30(m，1H)，2.25(m，2H)，1.85(m，2H)，1.45(m，4H)。
1H)，5.70(d，br，2H)，4.55(m，1H)，4.15(d，J＝5.5Hz，2H)，3.60(d，J＝6.8Hz，2H)，2.95(t，J＝6.8Hz，2H)，2.51(s，3H)，2.30(m，1H)，2.25(m，2H)，1.85(m，2H)，1.45(m，4H)。
[0979] 70b：得自硅胶柱的极性较大的异构体1
[0980] H NMR(400MHz，CDCl3)δ8.58(s，1H)，7.92(s，1H)，7.70(d，J ＝ 6.2Hz，1H)，7.65(d，J ＝ 6.0Hz，1H)，7.55(d，J ＝ 6.5Hz，1H)，7.42(m，1H)，7.40(d，J ＝ 6.5Hz，1H)，
7.11(d，J ＝ 6.6Hz，1H)，4.65(m，1H)，4.18(d，J ＝ 5.5Hz，2H)，3.65(d，J ＝ 6.6Hz，2H)，
3.15(t，J＝6.6Hz，2H)，2.50(s，3H)，2.38(m，1H)，2.20(m，2H)，1.92(m，4H)，1.65(m，2H)。
7.11(d，J ＝ 6.6Hz，1H)，4.65(m，1H)，4.18(d，J ＝ 5.5Hz，2H)，3.65(d，J ＝ 6.6Hz，2H)，
3.15(t，J＝6.6Hz，2H)，2.50(s，3H)，2.38(m，1H)，2.20(m，2H)，1.92(m，4H)，1.65(m，2H)。
[0981] 实例71：N-[2-([1-[反式-4-羟基-4-(1，3-噻唑-5-基)环己基]-3-氮杂环丁烷基]氨基)-2-氧代乙基]-3-(三氟甲基)苯甲酰胺，40a(半琥珀酸酯和游离碱一水合物)
[0982] 步骤A：2-(3-(三氟甲基)苯甲酰胺)乙酸，3
[0983]
[0984] 向装配有热电偶控制器、机械搅拌器、加热罩、冷凝器和氮气出/入口转接器的12L 4颈圆底烧瓶装入甘氨酸(1，Alfa Aesar)(318g；4.19mol)、乙腈(1.2L)和氢氧化钠溶液(5.31L；10.62mol)，将混合物搅拌冷却到4℃。在2小时内滴加3-(三氟甲基)苯甲酰氯(2，Alfa Aesar)(885.0g；4.12mol)(640mL)于乙腈(0.75L)中的溶液(总共1.39L)，同时内部温度维持在4-6℃，将略微桔色-浅粉红色的溶液在4℃下再搅拌30分钟。在
0-6℃下用37％浓HCl溶液(30分钟内加入400mL)将反应酸化至pH＝3，并在0℃下搅拌
1小时(直到得到略微浅黄色的悬浮液)。过滤收集固体，用冷的(0℃)去离子(“D.I”)H2O(300mL×2)洗涤，在抽气下干燥2小时，然后在低真空(house vacuum)(120mmHg)下的
60℃干燥烘箱中放置20小时，以得到纯3，为灰白色固体。滤液用EtOAc(1L×2)萃取，将合并的有机相用盐水(300mL)洗涤，并在66℃下在低真空下然后在高真空(20mmHg)下浓缩，得到粗产物，为灰白色蜡质固体，将其用甲苯(1L)研磨和超声处理并在10℃下搅拌1小时。
过滤收集所得固体，用己烷(50mL×2)洗涤，在低真空下的50℃真空烘箱中干燥，得到另外
1
的纯标题化合物3，为灰白色固体。3的结构通过其 H-NMR来确认。
0-6℃下用37％浓HCl溶液(30分钟内加入400mL)将反应酸化至pH＝3，并在0℃下搅拌
1小时(直到得到略微浅黄色的悬浮液)。过滤收集固体，用冷的(0℃)去离子(“D.I”)H2O(300mL×2)洗涤，在抽气下干燥2小时，然后在低真空(house vacuum)(120mmHg)下的
60℃干燥烘箱中放置20小时，以得到纯3，为灰白色固体。滤液用EtOAc(1L×2)萃取，将合并的有机相用盐水(300mL)洗涤，并在66℃下在低真空下然后在高真空(20mmHg)下浓缩，得到粗产物，为灰白色蜡质固体，将其用甲苯(1L)研磨和超声处理并在10℃下搅拌1小时。
过滤收集所得固体，用己烷(50mL×2)洗涤，在低真空下的50℃真空烘箱中干燥，得到另外
1
的纯标题化合物3，为灰白色固体。3的结构通过其 H-NMR来确认。
[0985] 步骤B：3-[2-(3-三氟甲基-苯甲酰胺)-乙酰氨基]-氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯5
[0986]
[0987] 向装配有热电偶控制器、机械搅拌器、加热罩、冷凝器和氮气入口转接器的22L 4颈圆底烧瓶装入前一步骤所制备的酸3(600g；2.40mol)、二氯甲烷(8.8L)、TEA(440mL；3.13mol)、N-Boc-3-(氨基)氮杂环丁烷(4，CNH Technologies，Inc.)(448g；2.55mol)和HOBT(37.7g；0.28mol，AK Scientific)，并将混合物在20℃下搅拌5分钟，一次加入EDCI(506g；2.64mol；1.1当量，AK Scientific)。将混合物在20℃下再搅拌6小时。加入更多的EDCI(120.0g，0.626mol；0.26当量)，并且在20℃下搅拌反应20小时。在第21小时再加入EDCI(33.3g；0.174mol；0.05当量)，并在20℃下再搅拌反应4小时。反应用饱和的NaHCO3(4L×2)(含水pH＝9)和盐水(3L×2)洗涤，并将分离的有机相在60℃下在低真空(120mmHg)然后在高度真空(20mmHg)下浓缩，得到粗5，为浅黄色浓稠浆料。
[0988] 向装配有热电偶控制器、机械搅拌器、加热罩、冷凝器和氮气入口转接器的22L 4颈圆底烧瓶装入粗5于EtOAc(3.1L)中的温热溶液(60℃)，并将混合物搅拌加热到73℃，同时将温热(60℃)的庚烷(10.0L)分五份(2L×5)在30分钟内加入。将所得的略微白色混浊溶液在73℃下搅拌10分钟。移除加热罩，将混合物在3小时内逐渐冷却到20℃，并在水浴中进一步冷却到10℃，并搅拌1小时。过滤收集固体，用己烷(300mL×2)洗涤，在抽气下干燥，然后在低真空下的50℃干燥烘箱中放置20小时，得到标题化合物5，为灰白色结晶1
固体。5的结构通过 H-NMR来确认。
固体。5的结构通过 H-NMR来确认。
[0989] 步骤C：N-(氮杂环丁烷-3-基氨基甲酰基甲基)-3-三氟甲基-苯甲酰胺硫酸盐6
[0990]
[0991] 向装配有热电偶、机械搅拌器、冷凝器和氮气入口转接器的12L4颈圆底烧瓶装入前一步骤所制备的Boc保护的中间体5(434g；1.08mol)和甲醇(3.5L)，所得溶液在氮气下在20℃下搅拌。在3分钟内滴加9M H2SO4(140mL；1.26mol)的溶液，然后将混合物温热到60℃，并搅拌6小时。将反应冷却到40℃，一次加入NaHCO3(420g；5.00mol)，并在12-16℃下搅拌1小时。过滤移除白色固体，用MeOH(200mL×3)洗涤，然后经HPLC检查后弃去。滤液(总共约4.0L)在50℃下在高真空(20mmHg)下浓缩，并用MeOH(1L)洗涤(chase)一次，得到粗标题化合物6，为灰白色泡沫固体，其在N2下在黑暗中保持在0℃下，无需另外纯化
1
即用于进一步的反应。化合物6的结构通过 H-NMR来确认。
1
即用于进一步的反应。化合物6的结构通过 H-NMR来确认。
[0992] 步骤D：8-噻唑-5-基-1，4-二氧杂-螺[4.5]癸-8-醇，9
[0993]
[0994] 向装配有热电偶、机械搅拌器、压力平衡滴液漏斗、隔膜和氮气出/入口转接器的12L 4颈圆底烧瓶装入THF(0.5L)并冷却到-50℃。将丁基锂(800.mL，1.60mol.环己烷中2.0M)在适度氮气压力下经由套管加入。在45分钟内滴加2-(叔丁基二甲基甲硅烷基)噻唑)(255.3g，1.25mol，Synthonix)于THF(1.51L)中的溶液，同时内部温度维持在-51℃至-48℃。将所得的澄清黄色-浅绿色溶液在-50℃至-53℃下搅拌30分钟，然后冷却到-73℃。在50分钟内滴加1，4-环己二酮单乙二醇缩酮(200.0g；1.25摩尔，AK Scientific)于THF(1.5L)中的溶液，并将混合物在-76℃下搅拌2小时。通过HPLC和
LC-MS来监测反应的进程。用饱和的NaHCO3(1.0L)猝灭反应，然后用去离子H2O(2.0L)和EtOAc(3.5L)在快速搅拌下稀释。用水浴替换干冰浴，将混合物搅拌20分钟。在相分离后，水相用EtOAc(3L)萃取，合并的有机相用盐水(800mL)洗涤，然后在68℃下在高真空(20mmHg)下浓缩，得到粗中间物12，为略微浅棕色的浓稠油。
LC-MS来监测反应的进程。用饱和的NaHCO3(1.0L)猝灭反应，然后用去离子H2O(2.0L)和EtOAc(3.5L)在快速搅拌下稀释。用水浴替换干冰浴，将混合物搅拌20分钟。在相分离后，水相用EtOAc(3L)萃取，合并的有机相用盐水(800mL)洗涤，然后在68℃下在高真空(20mmHg)下浓缩，得到粗中间物12，为略微浅棕色的浓稠油。
[0995] 向2L 3颈圆底烧瓶装入上述粗12(472.7g)于THF(2L)中的溶液，一次加入1.0N HCl(165mL，0.165mol)，并将混合物在28-24℃下搅拌2小时。通过HPLC和LC-MS来监测反应的进程。将反应冷却到0℃，通过加入1N NaOH(220mL)将混合物的pH调节到9-10，然后溶剂在60℃下在高真空(20mmHg)下浓缩。将所得的物质溶于EtOAc(4L)，并用饱和NaHCO3(800mL)洗涤。在相分离后，将固体NaCl加到水相，该水相再次用EtOAc(2L)萃取。合并有机相，在68℃下在高真空(20mmHg)下浓缩，得到粗产物9，为灰白色蜡质固体。将粗产物9(352.4g)悬浮在己烷(1.5L)中，然后在20℃下搅拌并超声处理20分钟；过滤收集所得的白色固体，用己烷(300mL×2)洗涤，风干，然后在60℃的干燥烘箱中放置20小时，
1
得到纯的9，为白色结晶固体，其不经进一步纯化即用于下一步骤。化合物9的结构通过 H NMR来确认。
1
得到纯的9，为白色结晶固体，其不经进一步纯化即用于下一步骤。化合物9的结构通过 H NMR来确认。
[0996] 步骤E：4-羟基-4-噻唑-5-基-环己酮，10
[0997]
[0998] 向装配有热电偶、机械搅拌器、冷凝器和氮气出/入口转接器的5L 4颈圆底烧瓶装入前一步骤所制备的缩酮9(316.3g，1.30mol)和DMF(238.0mL)，同时进行搅拌。在2分钟内加入2N HCl(1.13L，2.26mol)的溶液；将混合物在26℃下搅拌5分钟，加热到60℃，并搅拌3小时。通过HPLC和LC-MS监测反应的进程。在冰水浴中将反应冷却到0℃，通过滴加4N NaOH溶液同时进行快速搅动，将水液(pH＝2～3)调节为碱性(pH＝10～11)。将所得碱性浆料0℃下搅拌1小时；过滤收集固体，用冷水(100mL)洗涤，在抽气下干燥1小时，然后在50℃下在低真空(120mmHg)下的真空干燥烘箱中放置48小时，得到标题化合物10，为米黄色结晶固体。
[0999] 滤液用固体NaCl饱和，并用EtOAc(1L×4)萃取。将合并的萃取物用盐水(500mL)洗涤，并在68℃下在高真空(20mmHg)下浓缩1小时，回收到不纯产物10，为黄色蜡质固体。将此不纯产物10悬浮在66℃的EtOAc/己烷(100/200，mL/mL)中，同时进行超声处理，然后在20℃下搅拌1小时。过滤收集亮浅黄色固体，用己烷洗涤(50mL×2)，风干，然后在50℃下在低真空(120mmHg)下的干燥烘箱中放置20小时，得到额外数量的较纯的标题化合物，
1
为浅黄色固体。化合物10的结构通过 H NMR来确认。
1
为浅黄色固体。化合物10的结构通过 H NMR来确认。
[1000] 步骤F：N-[2-([1-[反式-4-羟基-4-(1，3-噻唑-5-基)环己基]-3-氮杂环丁烷基]氨基)-2-氧代乙基]-3-(三氟甲基)苯甲酰胺，40a
[1001]
[1002] 向装配有热电偶、机械搅拌器、冷凝器和氮气出/入口转接器的22L 4颈圆底烧瓶装入如本实例的步骤C中制备的6H2SO4盐(291.04g，0.870mol)、MeCN(4.82L)和前一步骤所制备的酮10(170.0g，0.845mol)。将略微浅黄色的悬浮液在16℃下搅拌10分钟，然后用在5分钟内加入的NaBH(OAc)3(231.76g，1.04mol，Alfa Asear)处理，并将混合物在28-20℃下搅拌2小时。通过HPLC和LC-MS监测反应的进程。将饱和NaHCO3溶液(2.5L)加到反应混合物，接着加入EtOAc(2.5L)，并将所得的混合物快速搅拌10分钟。在相分离后，用EtOAc(2.0L)萃取水相(pH＝8～9)，将合并的有机相用盐水(2.0L)洗涤，并在66℃下在高真空(20mmHg)下浓缩，得到40a和40b的混合物，为白色泡沫固体。
[1003] 上述粗产物40a/40b混合物通过使用Redi Sep 正相柱(9×1.5Kg)的CombiFlash Companion XL制备型HPLC系统进行分离，用7NNH3MeOH溶液/EtOAc(从0％/100％至6.5％/93.5％，流速＝300mL/分钟，并在UVmax＝230nm下监测)洗脱，得到纯产物40a
1
游离碱，为白色泡沫固体。化合物40a的结构通过 HNMR确认。
1
游离碱，为白色泡沫固体。化合物40a的结构通过 HNMR确认。
[1004] 步骤G：N-[2-([1-[反式-4-羟基-4-(1，3-噻唑-5-基)环己基]-3-氮杂环丁烷基]氨基)-2-氧代乙基]-3-(三氟甲基)苯甲酰胺半琥珀酸酯
[1005]
[1006] 向装配有热电偶、机械搅拌器、加料漏斗、冷凝器和氮气入口转接器的4颈5L圆底烧瓶装入前一步骤所制备的40a游离碱(420.5g，0.872mol)、琥珀酸(52.48g；0.444mol)和EtOAc(1.682L)。将溶液在氮气下边搅拌边温热到63℃，并且边搅拌边加入EtOH(0.421L)，直到琥珀酸完全溶解变成澄清溶液。将溶液逐渐冷却到20℃并搅拌2小时；
进一步冷却到5℃，并再搅拌一小时。过滤收集固体，然后在65℃的真空烘箱中放置72小时，得到标题化合物，为白色结晶固体。40a的半琥珀酸盐的结构通过1H NMR确认。
进一步冷却到5℃，并再搅拌一小时。过滤收集固体，然后在65℃的真空烘箱中放置72小时，得到标题化合物，为白色结晶固体。40a的半琥珀酸盐的结构通过1H NMR确认。
[1007] 步骤H：从半琥珀酸酯结晶出40a(游离碱一水合物)：
[1008] N-[2-([1-[反式-4-羟基-4-(1，3-噻唑-5-基)环己基]-3-氮杂环丁烷基]氨基)-2-氧代乙基]-3-(三氟甲基)苯甲酰胺一水合物40a
[1009]
[1010] 向装配有磁力搅拌棒、磁力搅拌盘和125mL加料漏斗的125mL锥形瓶装入前一步骤所制备的40a半琥珀酸盐(2.53g，0.872mol)和12mL的水。在4小时的过程中边搅拌边加入0.2N NaOH(58mL)到所得溶液。将所得悬浮液搅拌过夜。过滤收集固体，并在环境实验室条件下干燥，得到标题化合物，为白色结晶固体。
[1011] 步骤I：从游离碱结晶出40a(游离碱一水合物)
[1012] N-[2-([1-[反式-4-羟基-4-(1，3-噻唑-5-基)环己基]-3-氮杂环丁烷基]氨基)-2-氧代乙基]-3-(三氟甲基)苯甲酰胺一水合物40a
[1013] 向放置在加热磁力搅拌盘上的装配有磁力搅拌棒的10mL小瓶装入10mg的如先前在本实例步骤F中分离的40a游离碱和0.1mL的甲基乙基酮。将所得的悬浮液加热至回流，直到化合物溶解(数分钟)。移除搅拌棒，并让溶液冷却至环境温度。在一天后，从溶液沉淀出结晶物质。通过吸移管移除上清液，将晶体在环境实验室条件下风干1天，得到标题化合物，为白色结晶固体。
[1014] 实例72：N-[2-([1-[反式-4-羟基-4-(1，3-噻唑-5-基)环己基]-3-氮杂环丁烷基]氨基)-2-氧代乙基]-3-(三氟甲基)苯甲酰胺一水合物(40a游离碱一水合物)
[1015] 步骤A：N-[2-([1-[4-羟基-4-(1，3-噻唑-5-基)环己基]-3-氮杂环丁烷基]氨基)-2-氧代乙基]-3-(三氟甲基)苯甲酰胺
[1016]
[1017] 将N-[2-(3-氮杂环丁烷基氨基)-2-氧代乙基]-3-(三氟甲基)苯甲酰胺(3.44kg，2-MeTHF中4.8w/w％，0.548mol)于2-甲基四氢呋喃(2-MeTHF，3.3kg)中的溶液加到惰性化的反应器。加入4-羟基-4-(1，3-噻唑-5-基)环己酮(108.1g，0.537mol)。
加入Pt/C 5％润湿(213.8g)。将反应器用N2清洗三次，然后用H2清洗三次，并在25℃和1巴H2下剧烈搅拌12小时。滤出催化剂，将母液冷却到15℃。加入1N HCl(866mL)到母液。
加入水(510mL)，将混合物在25℃下搅拌30分钟。让各层在30分钟内分离，移除有机层。
将607mL的乙酸异丙酯(iPrOAc)加到水层并搅拌10分钟。让各层分离，移除有机层。将iPrOAc(607mL)加到水层并搅拌10分钟；让各层分离，移除有机层。将790mL的iPrOAc加到水层。然后，加入NaOH 50％(75.10g)。将混合物加热到55℃，在55℃下搅拌30分钟，在2小时内冷却到25℃，并在25℃下搅拌3小时。将沉淀过滤，用152mL iPrOAc洗涤，然后用152mL水洗涤三次。将沉淀在真空和N2气氛下在40℃下干燥20小时，得到标题化合物。
加入Pt/C 5％润湿(213.8g)。将反应器用N2清洗三次，然后用H2清洗三次，并在25℃和1巴H2下剧烈搅拌12小时。滤出催化剂，将母液冷却到15℃。加入1N HCl(866mL)到母液。
加入水(510mL)，将混合物在25℃下搅拌30分钟。让各层在30分钟内分离，移除有机层。
将607mL的乙酸异丙酯(iPrOAc)加到水层并搅拌10分钟。让各层分离，移除有机层。将iPrOAc(607mL)加到水层并搅拌10分钟；让各层分离，移除有机层。将790mL的iPrOAc加到水层。然后，加入NaOH 50％(75.10g)。将混合物加热到55℃，在55℃下搅拌30分钟，在2小时内冷却到25℃，并在25℃下搅拌3小时。将沉淀过滤，用152mL iPrOAc洗涤，然后用152mL水洗涤三次。将沉淀在真空和N2气氛下在40℃下干燥20小时，得到标题化合物。
[1018] 步骤B：N-[2-([1-[反式-4-羟基-4-(1，3-噻唑-5-基)环己基]-3-氮杂环丁烷基]氨基)-2-氧代乙基]-3-(三氟甲基)苯甲酰胺一水合物
[1019]
[1020] 如下制备溶液1：将3000mL甲基异丁酮(MIK)和8.17ml水加到4颈烧瓶并搅拌30分钟。将前一步骤所制备的N-[2-([1-[反式-4-羟基-4-(1，3-噻唑-5-基)环己基]-3-氮杂环丁烷基]氨基)-2-氧代乙基]-3-(三氟甲基)苯甲酰胺(394g)和1500mL的溶液1加到4颈烧瓶，并加热到80℃。滤出不溶物质，用80mL的溶液1洗涤，并将滤液加到反应混合物。将溶液1在大气压力下蒸馏至790mL，将此790mL的溶液1加到反应混合物。将反应混合物边搅拌边冷却到0℃。从反应混合物结晶出沉淀。将沉淀过滤，用MIK(2×130mL)洗涤，并在真空和N2气氛下在40℃下干燥20小时，得到粗的标题化合物，为白色固体。
[1021] 重结晶。将MIK(37.6mL)和水(4mL)加到反应器，在25℃下搅拌30分钟。让各层在30分钟内分离，移除水层。加入粗的N-[2-([1-[反式-4-羟基-4-(1，3-噻唑-5-基)环己基]-3-氮杂环丁烷基]氨基)-2-氧代乙基]-3-(三氟甲基)甲酰胺水合物(10g)，将反应加热至回流并搅拌10分钟。将反应混合物以0.5℃/分钟的速率冷却到94℃，并搅拌10分钟。将反应混合物按线性冷却曲线在11小时内冷却到0℃，并在0℃下搅拌2小时以得到沉淀。将沉淀过滤，用4mL的MIK洗涤两次，并在真空和N2气氛下在30℃下干燥20小时，得到标题化合物N-[2-([1-[反式-4-羟基-4-(1，3-噻唑-5-基)环己基]-3-氮杂环丁烷基]氨基)-2-氧代乙基]-3-(三氟甲基)苯甲酰胺水合物，为白色固体。
[1022] 实例73：N-[2-([1-[反式-4-羟基-4-(1，3-噻唑-5-基)环己基]-3-氮杂环丁烷基]氨基)-2-氧代乙基]-3-(三氟甲基)苯甲酰胺一水合物(40a游离碱一水合物)的粉末X射线衍射数据
[1023] 为了使优选的取向的可能影响减至最低，将40a(游离碱一水合物)的样品用玛瑙研钵和研杵适度研磨以减小粒度。对未处理的和研磨的40a(游离碱一水合物)均进行分析。比较衍射图案以证实晶形未因研磨而发生变化。
[1024] 使用Philips X’Pert Pro MPD衍射仪(PANalytical B.V.，Almelo，荷兰)进行分析。将每份样品荷载回(backloaded)16mm样品夹持器中并进行分析。使用X-Celerator检测器(PANalytical B.V.，Almelo，荷兰)，以0.0165°2θ的步长和10.16秒的每步时间从3至35°2θ扫描各个样品。有效扫描速度为0.2067°/s。采用45kV和40mA的仪器电压和电流设置。
[1025] 未处理样品和研磨样品的衍射图案的比较结果示于图1。数据显示未处理样品出现明显优选的取向，这由在大约7.4、14.8和22.3°2θ处的强峰证明。这种优选的取向因研磨而明显减少。研磨样品的衍射图案的单独显示示于图2。相对强度＞5％的40a(游离碱一水合物)研磨样品衍射峰的相应d-间距以及°2θ值列表于表1。
[1026] 表1.JNJ-41443532-ZAF批次32641161的衍射峰的d-间距和°2θ值
[1027]
[1028]
[1029] 实例74：体外生物学数据
[1030] 将本发明的化合物进行多种代表性的生物学测试。
[1031] 这些测试的结果旨在以非限制性的方式说明本发明。
[1032] THP-1细胞中的MCP-1受体结合测定
[1033] 人单核细胞系THP-1细胞从美国典型培养物保藏中心(American Type Culture Collection，Manassas，Va.，USA)获得。使THP-1细胞在补充有10％胎牛血清的RPMI-1640(RPMI：Roswell Park Memorial Institute Medium-细胞培养生长培养基)中
6
在加湿的5％CO2气氛中在37℃下生长。将细胞密度维持在0.5×10 个细胞/mL。
6
在加湿的5％CO2气氛中在37℃下生长。将细胞密度维持在0.5×10 个细胞/mL。
[1034] 在存在不同浓度的未标记MCP-1(R&D Systems，Minneapolis，Minn.)或测试化合125
物的情况下，将THP-1细胞与0.5nM I标记的MCP-1(Perkin-Elmer Lfe Sciences，Inc.Boston，Mass.)在96孔板中在30℃下温育2小时。随后将细胞收获至滤板上，干燥，并将20μL的Microscint 20加到每孔。将平板在TopCount NXT，微板闪烁&发光计数器(Perkin-Elmer Life Sciences，Inc.Boston，Mass.)中计数。从所有的值减去空白值(仅有缓冲液)，并将药物处理的值与介质处理的值进行比较。1μM冷MCP-1用于非特异性结合。
物的情况下，将THP-1细胞与0.5nM I标记的MCP-1(Perkin-Elmer Lfe Sciences，Inc.Boston，Mass.)在96孔板中在30℃下温育2小时。随后将细胞收获至滤板上，干燥，并将20μL的Microscint 20加到每孔。将平板在TopCount NXT，微板闪烁&发光计数器(Perkin-Elmer Life Sciences，Inc.Boston，Mass.)中计数。从所有的值减去空白值(仅有缓冲液)，并将药物处理的值与介质处理的值进行比较。1μM冷MCP-1用于非特异性结合。
[1035] 表2列出了针对本发明的测试化合物获得的抑制MCP-1与CCR2结合的IC50值。如果对于某种特定化合物未获得IC50值，则百分比抑制值是在25μM的测试浓度下得出。
[1036] 表2：MCP-1结合IC50的抑制
[1037]实例 CCR2结合(nM)
1a 44
2 290
3a 210
4a 71
5a 18
6a 190
7A 1,900
8 26
9 49
10 17
11 28
12 170
13a 45
14a 215
15 190
16 6,450
17 6,400
18 120
19 4,300
20 6,900
21 7,500
22 2,300
23 14,500
24 1,600
25a 3,100
26 300
27a 650
28a 1,100
29a 24,000
30a 5300
31a 440
32 2,700
33a 62
34a 51
35a 240
36a 3.8
37 110
38a 370
39a 13
40a 37
41a 200
42a 78
43a 57
44a 340
45a 41
46 660
47a 260
48 560
49 260
50 560
51 3,300
52 73
53 4.0
54 280
55 1,200
56 310
57a 36
58a 90
59 790
60 230
61 100
62 950
63 1,000
64a 37
65 70
66a 330
67a 370
68 500
69a 240
70a 590
1a 44
2 290
3a 210
4a 71
5a 18
6a 190
7A 1,900
8 26
9 49
10 17
11 28
12 170
13a 45
14a 215
15 190
16 6,450
17 6,400
18 120
19 4,300
20 6,900
21 7,500
22 2,300
23 14,500
24 1,600
25a 3,100
26 300
27a 650
28a 1,100
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33a 62
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37 110
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39a 13
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41a 200
42a 78
43a 57
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52 73
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54 280
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64a 37
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68 500
69a 240
70a 590
[1038]
[1039]
[1040] 实例75：动物。
[1041] 使用注射入C57BL/6小鼠中的靶129Sv/Evbrd胚胎干细胞克隆产生小鼠CCR2敲出/人CCR2敲入小鼠。hCCR2转录物的表达通过在来自纯合hCCR2敲入小鼠的脾脏和血液全RNA上进行的定量反转录聚合酶链式反应来进行确认。向C57BL/6遗传背景的回交继续进行到第八代。转基因小鼠在没有特异性病原体、温控的设施中饲养，维持12小时光照/12小时黑暗周期。小鼠自由饮水进食。实验程序根据动物关护的机构标准来实施，并由机构的动物关护和使用委员会批准。
[1042] 实例76：鼠科动物体内细胞迁移测定。
[1043] 动物以3、10和30mg/kg每日两次口服给予介质或CCR2拮抗剂。将动物进行麻醉和剖腹手术。将小肠的远端襻(distal loop)(5cm长)轻轻取出放到湿润消毒纱布上。将合成的人MCP-1(1mg/100mL无菌PBS)或单独PBS逐滴给予到取出的肠襻的绒毛膜上。将缝合结放置到肠系膜中以标记处理的区域的末端。二十四小时后，处死动物，并移除肠片段及相邻区域。沿肠系膜边界打开组织，钉平并移除粘膜。剩余的肌肉层在100％EtOH中稍作固定，然后使用Hanker-Yates试剂染色，以检测含有髓过氧化酶的免疫细胞。以10mpk每天两次口服给药，如果与介质处理的动物相比细胞迁移的抑制达到30％，则认为化合物是有效的。发现实例40的化合物能有效阻断细胞迁移。
[1044] 实例77：小鼠中巯基醋酸盐诱导的腹膜炎
[1045] 动物以3、10、30和100mg/kg每日两次口服给予介质或CCR2拮抗剂。在一小时后，给动物腹腔内注射无菌巯基醋酸盐(25mL/kg，ip，Sigma)以诱导腹膜炎。动物每天用介质或CCR2拮抗剂口服治疗两次。在72小时时间点后，用10mL的无菌盐水灌洗腹腔。使用显微镜进行腹腔灌洗液中的总细胞计数，并在Giemsa染色(Hema Tek 2000)后使用cytospin分析进行细胞分化。通过将CCR2拮抗剂处理小鼠的白细胞数的变化与介质处理的小鼠相比较，来计算巯基醋酸盐诱导的腹膜炎的抑制百分比。以10mpk每天两次口服给药，实例40的化合物显示对巯基醋酸盐诱导的腹膜炎具有＞50％抑制。
[1046] 实例78：MCP-1-诱导的单核细胞向小鼠气道的募集
[1047] 动物以3、10和30mg/kg每日两次口服给予介质或CCR2拮抗剂。一小时后，动物鼻内给予在无菌盐水中的4μg MCP-1。动物每天用介质或CCR2拮抗剂口服治疗两次。在48小时后，小鼠通过腹膜内注射麻醉溶液(Sleepaway-戊巴比妥钠)进行安乐死。使用1.4ml的含有3mM EDTA的冰冷PBS进行整体支气管肺泡灌洗(BAL)。使用显微镜进行BAL灌洗液中的总细胞计数，并在Giemsa染色(Hema Tek2000)后，使用cytospin分析进行细胞分化。通过将化合物处理的小鼠的总白细胞计数(包括单核细胞/巨噬细胞和淋巴细胞)的变化与介质处理的小鼠相比较来计算抑制百分比。如果抑制百分比达到30％，则认为化合物是有效的。以10mpk口服给药，实例40的化合物显示具有＞50％抑制。
[1048] 实例79：小鼠中高脂肪饮食诱导的肥胖症和胰岛素抗性
[1049] 在7周龄动物中通过进行大约60％卡路里来自脂质(D-12492；Research Diets Inc.)的高脂肪饮食10-24周来诱导肥胖症。在7周龄之前，给动物喂养标准颗粒饮食，其中5％的卡路里作为脂肪提供。将肥胖动物通过体重和脂肪量来随机化。肥胖动物以3、10和30mg/kg每日两次口服给予介质或CCR2拮抗剂。监测体重和食物摄入和空腹血糖水平。通过NMR分析器(Burker MiniSpec)来确定体质量。在禁食3小时的动物中进行胰岛素耐受性测试。在腹膜内弹丸式注射重组人胰岛素(1.5U/kg)之后，使用血糖测计仪在注射之前和在注射15、30、45、60、90和120分钟后测量血糖浓度。在过夜(17小时)禁食之后进行葡萄糖耐受性测试。在口服溶于水的葡萄糖(1g/kg)之前和口服15、30、60、90、120分钟后测量血糖浓度。通过完整的实验室动物监测系统监测能量支出分析。在用介质或CCR2拮抗剂处理40天之后，通过CO2窒息处死动物。通过将化合物处理的小鼠的体重变化与介子处理的小鼠相比较，来计算体重减少的百分比。以10mpk每天两次口服给药，实例40的化合物显示减少体重＞8％。
[1050] 实例80：过敏性哮喘的小鼠模型。
[1051] 通过在第0天和第5天腹膜内注射在100μL磷酸盐缓冲液(PBS)中吸收到1mg Imject 的10μg鸡蛋清蛋白(OVA)而使动物敏化。对照动物腹膜内接收PBS。在第12天、第16天和第20天，通过超声波雾化器吸入0.5％OVA气雾剂10分钟来攻击OVA免疫的动物。对照动物以类似方式用PBS来攻击。OVA敏化动物从第9天至第20天每天两次且在第21天每天一次(处死前2小时)以3、10、30mg/kg口服接收介质(0.5％Methocel)或CCR2拮抗剂。每天一次口服地塞米松(5mg/kg)和孟鲁斯特(1mg/kg)。在21天，在CCR2化合物最后一次给药之后2小时，使用Buxco全身体积描记术测量对气雾化乙酰甲胆碱的支气管反应性。在第21天，处死动物。收集支气管肺泡罐洗液(1mL)，并计数总细胞。在Giemsa染色(Hema Tek 2000)后使用cytospin分析来确定嗜酸性粒细胞、淋巴细胞、单核细胞和中性粒细胞的数量。通过将化合物处理的小鼠与介质处理的小鼠相比较来计算总BAL白细胞计数(和嗜酸性粒细胞计数)的抑制百分比。如果抑制达到30％，则认为化合物是有效的。以10mpk口服给药，实例40的化合物显示能有效减少细胞计数。
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