1.一种抑制信号调控蛋白α表达的树突状细胞疫苗的制备方法，其特征在于，其包括如下步骤：构建成微小RNA145-5p的基因片段，重组到载体质粒上后通过脂质体转染人未成熟树突状细胞，其负载肿瘤细胞裂解抗原，制备成树突状细胞疫苗；
所述微小RNA145-5p在树突状细胞中过表达从而抑制免疫负调控作用的信号调控蛋白α的表达，增强了树突状细胞的适应性免疫活性；
所述微小RNA145-5p的基因片段为成熟体微小RNA145，上下游各延长200个碱基，并在
5’端和3’端加入限制性酶切位点，构建成微小RNA145-5p重组片段；
其中，重组mir145-5p/pcDNA4基因构建的制备包括步骤如下：
将合成熟体微小RNA145-5p基因序列24个碱基，及其上下游各200个碱基与5’端Kpn I和3’端EcoR I的识别序列构成的基因序列通过化学合成获得，即mir145-5p；
将mir145-5p的目的DNA片段和pcDNA4载体Kpn I和EcoR I双酶切后，在T4 DNA连接酶作用下，将两者于4℃、12小时连接反应制备克隆连接液，转化大肠杆菌感受态细胞DH5a后进行阳性克隆的PCR鉴定和测序鉴定，即mir145-5p/pcDNA4；PCR产物凝胶电泳检测和测序鉴定符合mir145-p5大小和序列后，将测序正确的菌液转接于10ml含氨苄的LB液体培养基中，37℃培养过夜，用无内毒素质粒小提中量试剂盒进行质粒抽提，抽提合格的重组质粒通过核酸定量仪确定DNA浓度，用去离子水稀释到4ug/μl，然后将重组载体DNA放置-80℃超低温冰箱中长期保存。
2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述人未成熟树突状细胞，来源于人外周血、骨髓或脐带血中单核细胞，经小鼠抗人抗CD14免疫磁珠分选获得CD14阳性单核细胞，在重组人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子、和重组人干细胞生长因子和重组人白介素4诱导培养得到的未成熟树突状细胞。
3.根据权利要求1至2中任一项所述的方法，其特征在于，
与未抑制DCs中负调控SIRPα表达的成熟DCs疫苗相比，所述方法制备的DCs疫苗经荧光定量DNA聚合酶链式反应技术检测，其SIRPα基因表达显著下调40倍以上；经酶联免疫吸附测定试剂盒检测，其分泌的白介素12/p70提高20倍以上。
4.根据权利要求1至2中任一项所述的方法，其特征在于，
所述方法制备的树突状细胞疫苗，与未抑制DCs中负调控SIRPα表达的成熟DCs疫苗相比，其激活T淋巴细胞增殖倍数为10倍以上，分泌的干扰素γ提高10倍以上；在杀伤肿瘤细胞毒性实验中效靶比40∶1时杀伤肿瘤细胞达到80％以上。
5.根据权利要求1至4中任一项所述的方法，其特征在于，
采集来源于患者自体外周血，经淋巴细胞分离液分离纯化得到单个核细胞后，用1×PBS重悬并稀释到2-15×106细胞/ml，通过小鼠抗人抗CD14免疫磁珠分选获得CD14阳性单核细胞，1500rpm离心10分钟收集CD14单核细胞，并用RPMI 1640培养基重悬并稀释到1-5×
106细胞/ml，并补充5-200ng/ml GM-CSF、1-50ng/ml SCF和1-50ng/ml IL-4和1-10％自体血清或胎牛血清，每3ml加入到6孔板每孔中，于37℃、含5％CO2培养箱内培养；48小时后进行1/3换液，于37℃、含5％CO2培养箱内继续培养2天，第5天即可获得未成熟树突状细胞；
根据树突状细胞在6孔板中培养的孔数，每孔配制溶液1为250μl∶240μl RPMI 1640培养基+10μl脂质体3000转染试剂，以及溶液2为250μl∶249μl RPMI 1640+1μl 4μg重组载体DNA，将溶液1与溶液2混合，室温下置20min；与此同时，第5天培养的未成熟树突状细胞通过
1500rpm离心10分钟收集，细胞用RPMI 1640培养基冲洗细胞1遍后，用RPMI 1640培养基重悬并稀释到1×106细胞/ml，并加入到6孔板中，每孔2ml；将溶液1与溶液2的混合液逐滴加入孔中，摇动培养板，轻轻混匀，在37℃，5％的CO2中保温5～6小时；6小时后，更换RPMI 
1640培养基，在37℃，5％的CO2中继续培养48～72h检测转染水平；
培养到第7-8天的未成熟树突状细胞通过1500rpm离心10分钟收集，用RPMI 1640培养基重悬并稀释到3×106细胞/ml，并加入到6孔板中，每孔3ml；同时加入新鲜肿瘤组织来源的肿瘤细胞热休克后裂解释放的肿瘤抗原，每孔1-500ng/ml；在37℃，5％的CO2中继续培养
24h，即获得成熟树突状细胞，通过1500rpm离心10分钟收集，用0.9％生理盐水洗涤2次后
0.9％生理盐水重悬并稀释到3-20×106细胞/ml，制备树突状细胞疫苗。
6.根据权利要求5所述的方法，其特征在于，
所述PBS的pH值为7.4；所述RPMI 1640培养基含5-200ng/ml Flt3L，1-50ng/ml TNFα和
1-10％自体血清或胎牛血清。
7.根据权利要求1至6中任一项所述的方法，其特征在于，
所述方法中肿瘤细胞裂解抗原来源于新鲜肿瘤组织，肿瘤组织用1×PBS洗涤3次，使用眼科剪去除结缔组织和血管后剪碎，加入5-10ml 1×PBS，吸入15ml离心管中1000rpm离心
10min，加入3-6ml质量体积百分比为0.25％的胰酶，在37℃，5％CO2培养箱中消化30min，每隔10min漩涡振荡1次；消化后加入2-12ml RPMI 1640培养基中止消化，1200rpm离心10min后获得肿瘤细胞沉淀，加入4.5ml RPMI 1640培养基重悬；优选，所述PBS的pH值7.4，含1×双抗；优选，所述胰酶含质量体积百分比0.02％EDTA和100活性单位IU的胶原酶I；
将肿瘤细胞悬液加入蛋白酶抑制剂Cocktail 0.5ml，立即通过超声破碎仪破碎超声破碎3sec，停3sec，共3min，3次超声破碎；破碎后12000rpm离心20min，吸去上清到新的15ml离心管中，通过核酸蛋白检测仪测定蛋白浓度，用RPMI 1640培养基将裂解肿瘤抗原稀释到
10ng/μl，分装到200μl EP管中，每管50μl，放置-80℃保存备用。
8.根据权利要求6所述的方法，其特征在于，
肿瘤抗原通过热休克后裂解制备成，即将肿瘤细胞悬液放置在43℃水浴锅或金属浴中热休克0.5-4小时后制备成肿瘤抗原。
9.根据权利要求1至7中任一项所述的方法，其特征在于，所述方法中来源100ml外周血单核细胞诱导培养获得树突状细胞，培养到8天细胞数达3×107以上；其高表达共刺激分子，即CD83阳性率大于85％，CD86阳性率大于90％，CD80阳性率大于90％，4-1BBL阳性率大于80％；与未抑制DCs 中负调控SIRPα表达的成熟DCs疫苗相比，所述方法制备的DCs疫苗的SIRPα基因表达显著下调43倍，分泌的白介素12/p70提高20.24倍。
10.根据权利要求1至8中任一项所述的方法，其特征在于，所述方法制备的树突状细胞疫苗，与未抑制DCs中负调控SIRPα表达的成熟DCs疫苗相比，前者在培养到第15天T淋巴细胞增殖倍数为后者的11.24倍；分泌的干扰素γ提高13.64倍；在杀伤肿瘤细胞毒性实验中效靶比40∶1时杀伤肿瘤细胞达到80％以上。
11.一种抑制信号调控蛋白α表达的树突状细胞疫苗的制备方法，其特征在于，其包括如下步骤：
A)、重组mir145-5p/pcDNA4基因构建的制备
将含成熟体微小RNA145-5p基因序列24个碱基，及其上下游各200个碱基与5’端Kpn I和3’端EcoR I的识别序列构成的基因序列通过化学合成获得，即mir145-5p；
将mir145-5p的目的DNA片段和pcDNA4/TO载体Kpn I和EcoR I双酶切后，在T4 DNA连接酶作用下，将两者于4℃、12小时连接反应制备克隆连接液，转化大肠杆菌感受态细胞DH5a后进行阳性克隆的PCR鉴定和测序鉴定，即mir145-5p/pcDNA4；PCR产物凝胶电泳检测和测序鉴定符合mir145-p5大小和序列后，将测序正确的菌液转接于10ml含氨苄的LB液体培养基中，37℃培养过夜，用无内毒素质粒小提中量试剂盒进行质粒抽提，抽提合格的重组质粒通过核酸蛋白定量仪确定DNA浓度，用去离子水稀释到4ug/μl，然后将载体mir145-5p/pcDNA4放置-80℃超低温冰箱中长期保存；
B)、抑制信号调控蛋白α表达的树突状细胞的制备
采集外周血100ml，经淋巴细胞分离液分离纯化得到单个核细胞后，用1×PBS重悬并稀释到10×106细胞/ml，通过小鼠抗人抗CD14免疫磁珠分选获得CD14阳性单核细胞，1500rpm
6
离心10分钟收集CD14单核细胞，并用RPMI1640培养基重悬并稀释到2×10细胞/ml，并补充
100ng/ml GM-CSF、10ng/ml SCF和20ng/ml IL-4和5％自体血清或胎牛血清，每3ml加入到6孔板每孔中，于37℃、含5％CO2培养箱内培养；48小时后进行1/3换液，于37℃、含5％CO2培养箱内继续培养2天，第5天即可获得未成熟树突状细胞；
根据树突状细胞在6孔板中培养的孔数，每孔配制溶液A为250μl∶240μl RPMI 1640培养基+10μl脂质体3000转染试剂，以及溶液B为250μl∶249μl RPMI 1640+1μl 4μg mir145-
5p/pcDNA4重组载体，将溶液A与溶液B混合，室温下置20min；与此同时，第5天培养的未成熟树突状细胞通过1500rpm离心10分钟收集，细胞用RPMI 1640培养基冲洗细胞1遍后，用RPMI 
1640培养基重悬并稀释到1×106细胞/ml，并加入到6孔板中，每孔2ml；将溶液A与溶液B的混合液逐滴加入孔中，摇动培养板，轻轻混匀，在37℃，5％的CO2中保温5～6小时；6小时后，更换RPMI 1640培养基，在37℃，5％的CO2中继续培养48h检测转染水平；优选所述RPMI 
1640培养基含100ng/ml GM-CSF、10ng/ml SCF和20ng/ml IL-4和1-10％自体血清或胎牛血清；
培养到第7天的未成熟树突状细胞通过1500rpm离心10分钟收集，用RPMI 1640培养基重悬并稀释到3×106细胞/ml，并加入到6孔板中，每孔3ml；同时加入新鲜肿瘤组织来源的肿瘤细胞热休克后裂解释放的肿瘤抗原，每孔50ng/ml；在37℃，5％的CO2中继续培养24h，即获得成熟树突状细胞，通过1500rpm离心10分钟收集，用0.9％生理盐水洗涤2次后0.9％生理盐水重悬，计数树突状细胞为4.6×107，生理盐水稀释到5×106细胞/ml，制备树突状细胞疫苗；
取2×106DCs细胞使用流式抗体染色，即FITC标记的小鼠抗人CD83与PE标记的小鼠抗人CD86，FITC标记的小鼠抗人CD80与PE标记的小鼠抗人4-1BBL，然后上机检测；
优选，DC高表达共刺激分子；CD83阳性率为93.83％；CD86阳性率为99.83％；CD80阳性率为99.54％；4-1BBL阳性率为98.97％；
C)、DCs负载的肿瘤抗原制备
采集肿瘤组织，肿瘤组织用1×PBS洗涤3次，使用眼科剪去除结缔组织和血管后剪碎，加入6ml 1×PBS，吸入15ml离心管中1000rpm离心10min，加入3ml质量体积百分比为0.25％的胰酶，在37℃，5％CO2培养箱中消化30min，每隔10min漩涡振荡1次；消化后加入3ml RPMI 
1640培养基中止消化，1200rpm离心10min后获得肿瘤细胞沉淀，加入4.5ml RPMI 1640培养基重悬；所述胰酶含质量体积百分比0.02％EDTA和100活性单位IU的胶原酶I；
将肿瘤细胞悬液放置在43℃水浴锅或金属浴中热休克2小时后，肿瘤细胞悬液加入蛋白酶抑制剂Cocktail 0.5ml，立即通过超声破碎仪破碎超声破碎3sec，停3sec，共3min，3次超声破碎；破碎后12000rpm离心20min，吸去上清到新的15ml离心管中，通过核酸蛋白检测仪测定蛋白浓度，用RPMI 1640培养基将裂解肿瘤抗原稀释到10ng/μl，分装到200μl EP管中，每管50μl，放置-80℃保存备用。