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一种城市河流除臭的新方法

阅读:60发布:2020-08-21

专利汇可以提供一种城市河流除臭的新方法专利检索,专利查询,专利分析的服务。并且本 发明 涉及一种城市河流除臭的新方法,所述方法包括如下步骤:⑴取出部分城市河流发臭 水 体 ,分别从工业 废水 和生活污水发臭水体中筛选分离菌株;⑵验证所分离菌株是否有臭味产生;⑶通过调节不同pH、添加不同 防腐剂 及两者结合的手段抑制产臭菌株生长,降低 氨 氮含量,控制臭味产生。本发明方法通过调节pH值、添加防腐剂及两者结合的综合手段抑制产臭菌株生长,降低氨氮含量,从而消除臭味的产生。本发明操作过程简单,安全性高,不会对操作人员造成影响,大量使用也不会对环境造成影响,不会造成二次污染,更加环保,使用方便而且生产成本更低,具有较好的经济价值和生态价值。,下面是一种城市河流除臭的新方法专利的具体信息内容。

1.一种城市河流除臭的新方法,其特征在于:所述方法包括如下步骤:
⑴取出部分城市河流发臭体,其中城市河流包括排入的工业废水和生活污水,分别取出部分工业废水发臭水体和生活污水发臭水体,分别从工业废水和生活污水发臭水体中筛选分离菌株;
⑵验证所分离菌株是否有臭味产生,水体发臭包括含硫、氮有机物分解溢出的硫化氢气所致;而氨氮是指水中以游离氨和铵离子形式存在的氮,因此只要降低水体中氨氮含量,降低游离氨、氨气浓度,就能控制臭味产生;
⑶通过调节不同pH、添加不同防腐剂及两者结合的手段抑制产臭菌株生长,降低氨氮含量,控制臭味产生。
2.根据权利要求1所述的城市河流除臭新方法,其特征在于:具体步骤如下:
⑴筛选分离菌株:对菌株的筛选和分离通过在固体平板上培养来实现;
选取YPD和LB固体培养基进行菌株的筛选和分离,将工业废水发臭水体和生活污水发臭水体分别稀释10-1和10-2两个梯度,以不稀释为对照,取200ul样液分别均匀涂布到两种培养基上,之后分别在30℃和37℃下培养48h;
将得到的不同菌株分别在对应的培养基上传代培养,得到单菌落后,在相应液体培养基中培养后,用甘油冻藏于-80℃箱,待用;
⑵产硫化氢验证:将分离得到的菌株接种到相应的液体培养基中,按相应条件培养24~48h制备菌悬液;无菌条件下,分别接种于产H2S验证斜面培养基上,为确保结果的准确性,用无菌水作为对照,无菌条件下将无菌水接种于产H2S验证斜面培养基上,恒温培养,观察菌株是否产生硫化氢气体;
⑶产氨气验证:将分离得到的菌株接种到相应的液体培养基中,按相应条件培养24~
48h制备菌悬液,无菌条件下,分别取1×106个/ml菌转接入相应液体培养基中,其中液体培养基置于50ml三瓶中,在三角瓶的封瓶膜中放入湿润的红色石蕊试纸,相应转速培养24~48h,用无菌水作为对照组,观察红色石蕊试纸是否变蓝,如果变蓝,则证明分离所得菌株产生氨气;
⑷抑制菌株生长,控制臭味产生:
降低水体中氨氮含量,降低游离氨、氨气浓度:无菌条件下,将分离得到的菌株在相应的液体培养基中进行培养24~48h,制备菌悬液,取1×106个/ml菌分别转接入pH不同、添加不同防腐剂的液体培养基中,150r/min,37℃恒温培养至稳定期,之后测定其吸光度值和氨氮含量,观察红色石蕊试纸变色情况,得到抑制产臭菌株生长,降低氨氮含量,控制臭味产生的不同pH、添加不同防腐剂及两者结合的手段,即能够对城市河流进行除臭。
3.根据权利要求2所述的城市河流除臭新方法,其特征在于:所述步骤⑷中不同pH为为
3、4、5、6、7、8;所述不同防腐剂及其添加终质量浓度分别为0.25%苯甲酸钠,0.05%脱氢乙酸钠,3%乳酸钠。
4.根据权利要求3所述的城市河流除臭新方法,其特征在于:所述步骤⑷中不同pH、添加不同防腐剂及两者结合的手段为:
当调节发臭水体的pH≦4时,添加3种防腐剂中的一种或两种以上;当调节发臭水体的pH=5时,添加终质量浓度为0.25%的苯甲酸钠;
或者,当调节发臭水体的pH≦3时,添加3种防腐剂中的一种或两种以上;当调节发臭水体的pH≦4时,添加终质量浓度为0.25%的苯甲酸钠和/或终质量浓度为0.05%的脱氢乙酸钠;当调节发臭水体的pH≦5时,添加终质量浓度为0.25%的苯甲酸钠。
5.根据权利要求2所述的城市河流除臭新方法,其特征在于:所述步骤⑵中H2S验证斜面培养基的制备方法如下:每100ml中加入酚红0.0025g,硫酸0.02g,胰蛋白胨1g,酵母提取物0.5g,氯化钠1g,琼脂1.2g。
6.根据权利要求2所述的城市河流除臭新方法,其特征在于:所述步骤⑷中pH不同的液体培养基的制备方法如下:分别调节液体培养基pH为3、4、5、6、7、8,并将其置于高压灭菌锅中于115℃灭菌20min。
7.根据权利要求5所述的城市河流除臭新方法,其特征在于:所述添加不同防腐剂的液体培养基的制备方法如下:
①0.25%苯甲酸钠液体培养基溶液:在无菌的条件下,先称取苯甲酸钠0.25g,并将其溶于100ml已灭菌的液体培养基中,摇匀,之后用无菌滤膜器进行过滤和除菌,置于4℃冰箱保存备用;
②0.05%脱氢乙酸钠液体培养基溶液:在无菌条件下,先称取脱氢乙酸钠0.05g,再将其溶于100ml已灭菌的液体培养基中,摇匀,之后用无菌滤膜器进行过滤并除菌,置于4℃冰箱保存备用;
③3%乳酸钠液体培养基溶液:无菌条件下,用移液枪吸取3ml质量浓度为60%的乳酸钠溶液,并将其加入100ml已灭菌的液体培养基中,摇匀,之后用无菌滤膜器进行过滤和除菌,置于4℃的冰箱中来保存备用。
8.根据权利要求2所述的城市河流除臭新方法,其特征在于:所述步骤⑷中取1×106个/ml菌分别转接入pH不同、添加不同防腐剂的液体培养基中的pH不同、添加不同防腐剂的的液体培养基为:6种不同pH值分别与3种不同防腐剂组合,制备得到的液体培养基。
9.根据权利要求2所述的城市河流除臭新方法,其特征在于:所述步骤⑴中从工业废水发臭水体中筛选分离得到5株菌,从生活污水发自水体中分离得到4株菌;所述步骤⑵中分离所得菌株均无硫化氢气体产生;所述步骤⑶中分离所得菌株的红色石蕊试纸均变蓝,则证明有氨气产生。
10.根据权利要求2至9任一项所述的城市河流除臭新方法,其特征在于:所述步骤⑵中分离所得菌株均无硫化氢气体产生,说明所述方法所取城市河流水样中无产硫化氢气体的菌株;所述步骤⑶中分离所得菌株均有氨气产生,说明所述方法所取城市河流水样中有产氨气的菌株,说明城市河流发臭水体中均含有产生氨气的菌株。

说明书全文

一种城市河流除臭的新方法

技术领域

[0001] 本发明属于生物技术领域和体除臭技术领域,尤其是一种城市河流除臭的新方法。

背景技术

[0002] 为了去除城市河流臭味,对发臭水体的治理主要包括物理法、化学法、生物法和河道曝气法等。物理方法主要包括截污、调水、清淤等水利工程;化学方法如化学试剂除藻,加入盐促进磷的沉淀;生物方法主要有人工湿地处理、水生植物恢复、生物修复等。
[0003] 以上工艺都有投资成本高,处理效果见效慢,处理效果受季节性影响较大的缺点。
[0004] 通过检索,尚未发现与本发明专利申请相关的专利公开文献。

发明内容

[0005] 本发明目的在于克服现有技术的不足之处,提供一种城市河流除臭的新方法,该方法操作过程简单,安全性高,不会对操作人员造成影响,大量使用也不会对环境造成影响,不会造成二次污染,更加环保,使用方便而且生产成本更低,具有较好的经济价值和生态价值。
[0006] 本发明解决其技术问题所采用的技术方案是:
[0007] 一种城市河流除臭的新方法,所述方法包括如下步骤:
[0008] ⑴取出部分城市河流发臭水体,其中城市河流包括排入的工业废水和生活污水,分别取出部分工业废水发臭水体和生活污水发臭水体,分别从工业废水和生活污水发臭水体中筛选分离菌株;
[0009] ⑵验证所分离菌株是否有臭味产生,水体发臭包括含硫、氮有机物分解溢出的硫化氢气所致;而氨氮是指水中以游离氨和铵离子形式存在的氮,因此只要降低水体中氨氮含量,降低游离氨、氨气浓度,就能控制臭味产生;
[0010] ⑶通过调节不同pH、添加不同防腐剂及两者结合的手段抑制产臭菌株生长,降低氨氮含量,控制臭味产生。
[0011] 而且,具体步骤如下:
[0012] ⑴筛选分离菌株:对菌株的筛选和分离通过在固体平板上培养来实现;
[0013] 选取YPD和LB固体培养基进行菌株的筛选和分离,将工业废水发臭水体和生活污水发臭水体分别稀释10-1和10-2两个梯度,以不稀释为对照,取200ul样液分别均匀涂布到两种培养基上,之后分别在30℃和37℃下培养48h;
[0014] 将得到的不同菌株分别在对应的培养基上传代培养,得到单菌落后,在相应液体培养基中培养后,用甘油冻藏于-80℃箱,待用;
[0015] ⑵产硫化氢验证:将分离得到的菌株接种到相应的液体培养基中,按相应条件培养24~48 h制备菌悬液;无菌条件下,分别接种于产H2S验证斜面培养基上,为确保结果的准确性,用无菌水作为对照,无菌条件下将无菌水接种于产H2S验证斜面培养基上,恒温培养,观察菌株是否产生硫化氢气体;
[0016] ⑶产氨气验证:将分离得到的菌株接种到相应的液体培养基中,按相应条件培养24~48h 制备菌悬液,无菌条件下,分别取1×106个/ml菌转接入相应液体培养基中,其中液体培养基置于50ml三瓶中,在三角瓶的封瓶膜中放入湿润的红色石蕊试纸,相应转速培养24~48h,用无菌水作为对照组,观察红色石蕊试纸是否变蓝,如果变蓝,则证明分离所得菌株产生氨气;
[0017] ⑷抑制菌株生长,控制臭味产生:
[0018] 降低水体中氨氮含量,降低游离氨、氨气浓度:无菌条件下,将分离得到的菌株在相应的液体培养基中进行培养24~48h,制备菌悬液,取1×106个/ml菌分别转接入pH不同、添加不同防腐剂的液体培养基中,150r/min,37℃恒温培养至稳定期,之后测定其吸光度值和氨氮含量,观察红色石蕊试纸变色情况,得到抑制产臭菌株生长,降低氨氮含量,控制臭味产生的不同pH、添加不同防腐剂及两者结合的手段,即能够对城市河流进行除臭。
[0019] 而且,所述步骤⑷中不同pH为为3、4、5、6、7、8;所述不同防腐剂及其添加终质量浓度分别为0.25%苯甲酸钠,0.05%脱氢乙酸钠,3%乳酸钠。
[0020] 而且,所述步骤⑷中不同pH、添加不同防腐剂及两者结合的手段为:
[0021] 当调节发臭水体的pH≦4时,添加3种防腐剂中的一种或两种以上;当调节发臭水体的 pH=5时,添加终质量浓度为0.25%的苯甲酸钠;
[0022] 或者,当调节发臭水体的pH≦3时,添加3种防腐剂中的一种或两种以上;当调节发臭水体的pH≦4时,添加终质量浓度为0.25%的苯甲酸钠和/或终质量浓度为0.05%的脱氢乙酸钠;当调节发臭水体的pH≦5时,添加终质量浓度为0.25%的苯甲酸钠。
[0023] 而且,所述步骤⑵中H2S验证斜面培养基的制备方法如下:每100ml中加入酚红0.0025g,硫酸亚铁0.02g,胰蛋白胨1g,酵母提取物0.5g,氯化钠1g,琼脂1.2g。
[0024] 而且,所述步骤⑷中pH不同的液体培养基的制备方法如下:分别调节液体培养基pH为 3、4、5、6、7、8,并将其置于高压灭菌锅中于115℃灭菌20min。
[0025] 而且,所述添加不同防腐剂的液体培养基的制备方法如下:
[0026] ①0.25%苯甲酸钠液体培养基溶液:在无菌的条件下,先称取苯甲酸钠0.25g,并将其溶于100ml已灭菌的液体培养基中,摇匀,之后用无菌滤膜器进行过滤和除菌,置于4℃冰箱保存备用;
[0027] ②0.05%脱氢乙酸钠液体培养基溶液:在无菌条件下,先称取脱氢乙酸钠0.05g,再将其溶于100ml已灭菌的液体培养基中,摇匀,之后用无菌滤膜器进行过滤并除菌,置于4℃冰箱保存备用;
[0028] ③3%乳酸钠液体培养基溶液:无菌条件下,用移液枪吸取3ml质量浓度为60%的乳酸钠溶液,并将其加入100ml已灭菌的液体培养基中,摇匀,之后用无菌滤膜器进行过滤和除菌,置于4℃的冰箱中来保存备用。
[0029] 而且,所述步骤⑷中取1×106个/ml菌分别转接入pH不同、添加不同防腐剂的液体培养基中的pH不同、添加不同防腐剂的的液体培养基为:6种不同pH值分别与3种不同防腐剂组合,制备得到的液体培养基。
[0030] 而且,所述步骤⑴中从工业废水发臭水体中筛选分离得到5株菌,从生活污水发自水体中分离得到4株菌;所述步骤⑵中分离所得菌株均无硫化氢气体产生;所述步骤⑶中分离所得菌株的红色石蕊试纸均变蓝,则证明有氨气产生。
[0031] 而且,所述步骤⑵中分离所得菌株均无硫化氢气体产生,说明所述方法所取城市河流水样中无产硫化氢气体的菌株;所述步骤⑶中分离所得菌株均有氨气产生,说明所述方法所取城市河流水样中有产氨气的菌株,说明城市河流发臭水体中均含有产生氨气的菌株。
[0032] 本发明取得的优点和积极效果为:
[0033] 本发明通过筛选城市河流中产臭菌株,从根本上解决城市河流恶臭问题,解决现有的城市河流发臭水体对城市居民及城市环境的危害,该方法通过调节pH值、添加防腐剂及两者结合的综合手段抑制产臭菌株生长,降低氨氮含量,从而消除臭味的产生。本发明操作过程简单,安全性高,不会对操作人员造成影响,大量使用也不会对环境造成影响,不会造成二次污染,更加环保,使用方便而且生产成本更低,具有较好的经济价值和生态价值。

具体实施方式

[0034] 下面详细叙述本发明的实施例,需要说明的是,本实施例是叙述性的,不是限定性的,不能以此限定本发明的保护范围。
[0035] 本发明中所使用的原料,如无特殊说明,均为常规的市售产品;本发明中所使用的方法,如无特殊说明,均为本领域的常规方法。
[0036] 实施例1
[0037] 一种城市河流除臭的新方法,所述方法包括如下步骤:
[0038] ⑴取出部分城市河流发臭水体,其中城市河流包括排入的工业废水和生活污水,分别取出部分工业废水发臭水体和生活污水发臭水体,分别从工业废水和生活污水发臭水体中筛选分离菌株;
[0039] ⑵验证所分离菌株是否有臭味产生,水体发臭包括含硫、氮有机物分解溢出的硫化氢、氨气所致;而氨氮是指水中以游离氨(NH3)和铵离子(NH4+)形式存在的氮,因此只要降低水体中氨氮含量,降低游离氨、氨气浓度,就能控制臭味产生;
[0040] ⑶通过调节不同pH、添加不同防腐剂及两者结合的手段抑制产臭菌株生长,降低氨氮含量,控制臭味产生。
[0041] 具体地,步骤步骤如下:
[0042] ⑴筛选分离菌株:对菌株的筛选和分离主要通过在固体平板上培养来实现。选取YPD 和LB固体培养基进行菌株的筛选和分离,将工业废水和生活污水分别稀释10-1和10-2两个梯度,以不稀释为对照,取200ul样液分别均匀涂布到两种培养基上,之后分别在30℃和37℃下培养48h。将得到的不同菌株分别在对应的培养基上传代培养,得到单菌落后,在相应液体培养基中培养后,用甘油冻藏于-80℃冰箱,待用。结果显示,从工业废水中筛选分离得到 5株菌,从生活污水中分离得到4株菌。
[0043] ⑵产硫化氢验证:将分离得到的菌株接种到相应的液体培养基中,按相应条件培养24~48 h制备菌悬液;无菌条件下,分别接种于产H2S验证斜面培养基上,为确保结果的准确性,用无菌水作为对照,无菌条件下将无菌水接种于产H2S验证斜面培养基上,恒温培养。分离所得菌株均无硫化氢气体产生。
[0044] ⑶产氨气验证:将分离得到的菌株接种到相应的液体培养基中,按相应条件培养24~48h 制备菌悬液,无菌条件下,分别取1×106个/ml菌转接入相应液体培养基中,其中液体培养基置于50ml三角瓶中,在三角瓶的封瓶膜中放入湿润的红色石蕊试纸,相应转速培养24~48h,用无菌水作为对照组,观察实验结果为分离所得菌株红色石蕊试纸均变蓝,有氨气产生。
[0045] ⑷抑制菌株生长,降低氨氮含量,控制臭味产生:无菌条件下,将分离得到的菌株分别在LB液体培养基中培养24~48h,制备菌悬液,在各菌株生长到对数期时分别取1×106个/ml 菌体转接入pH为3,4,5,6,7,8的LB液体培养基中,设定转速为150r/min,37℃恒温培养至稳定期,之后测定其吸光度值和氨氮含量,观察红色石蕊试纸变色情况,得到抑制产臭菌株生长,降低氨氮含量,控制臭味产生的不同pH、添加不同防腐剂及两者结合的手段,即能够对城市河流进行除臭。
[0046] 具体的参数条件及实验结果见表1、表2和表3。
[0047] 实施例2
[0048] 一种城市河流除臭的新方法,所述方法包括如下步骤:
[0049] ⑴取出部分城市河流发臭水体,其中城市河流包括排入的工业废水和生活污水,分别取出部分工业废水发臭水体和生活污水发臭水体,分别从工业废水和生活污水发臭水体中筛选分离菌株;
[0050] ⑵验证所分离菌株是否有臭味产生,水体发臭包括含硫、氮有机物分解溢出的硫化氢、氨气所致;而氨氮是指水中以游离氨(NH3)和铵离子(NH4+)形式存在的氮,因此只要降低水体中氨氮含量,降低游离氨、氨气浓度,就能控制臭味产生;
[0051] ⑶通过调节不同pH、添加不同防腐剂及两者结合的手段抑制产臭菌株生长,降低氨氮含量,控制臭味产生。
[0052] 具体地,步骤步骤如下:
[0053] ⑴筛选分离菌株:对菌株的筛选和分离主要通过在固体平板上培养来实现。选取YPD 和LB固体培养基进行菌株的筛选和分离,将工业废水和生活污水分别稀释10-1和10-2两个梯度,以不稀释为对照,取200ul样液分别均匀涂布到两种培养基上,之后分别在30℃和37℃下培养48h。将得到的不同菌株分别在对应的培养基上传代培养,得到单菌落后,在相应液体培养基中培养后,用甘油冻藏于-80℃冰箱,待用。结果显示,从工业废水中筛选分离得到 5株菌,从生活污水中分离得到4株菌。
[0054] ⑵产硫化氢验证:将分离得到的菌株接种到相应的液体培养基中,按相应条件培养24~48 h制备菌悬液;无菌条件下,分别接种于产H2S验证斜面培养基上,为确保结果的准确性,用无菌水作为对照,无菌条件下将无菌水接种于产H2S验证斜面培养基上,恒温培养。分离所得菌株均无硫化氢气体产生。
[0055] ⑶产氨气验证:将分离得到的菌株接种到相应的液体培养基中,按相应条件培养24~48h 制备菌悬液,无菌条件下,分别取1×106个/ml菌转接入相应液体培养基中,其中液体培养基置于50ml三角瓶中,在三角瓶的封瓶膜中放入湿润的红色石蕊试纸,相应转速培养24~48h,用无菌水作为对照组,观察实验结果为分离所得菌株红色石蕊试纸均变蓝,有氨气产生。
[0056] ⑷抑制菌株生长,降低氨氮含量,控制臭味产生:无菌条件下,将分离得到的菌株分别在LB液体培养基中培养24~48h,制备菌悬液,在各菌株生长到对数期时分别取1×106个/ml 菌体转接入已制备好的未添加防腐剂、添加0.25%苯甲酸钠、0.05%脱氢乙酸钠和3%乳酸钠的LB液体培养基中。转速为150r/min,37℃恒温培养至稳定期,之后测定其吸光度值和氨氮含量,观察红色石蕊试纸变色情况,得到抑制产臭菌株生长,降低氨氮含量,控制臭味产生的不同pH、添加不同防腐剂及两者结合的手段,即能够对城市河流进行除臭。
[0057] 具体的参数条件及实验结果见表1、表2和表3。
[0058] 实施例3
[0059] 一种城市河流除臭的新方法,所述方法包括如下步骤:
[0060] ⑴取出部分城市河流发臭水体,其中城市河流包括排入的工业废水和生活污水,分别取出部分工业废水发臭水体和生活污水发臭水体,分别从工业废水和生活污水发臭水体中筛选分离菌株;
[0061] ⑵验证所分离菌株是否有臭味产生,水体发臭包括含硫、氮有机物分解溢出的硫4
化氢、氨气所致;而氨氮是指水中以游离氨(NH3)和铵离子(NH+)形式存在的氮,因此只要降低水体中氨氮含量,降低游离氨、氨气浓度,就能控制臭味产生;
[0062] ⑶通过调节不同pH、添加不同防腐剂及两者结合的手段抑制产臭菌株生长,降低氨氮含量,控制臭味产生。
[0063] 具体地,步骤步骤如下:
[0064] ⑴筛选分离菌株:对菌株的筛选和分离主要通过在固体平板上培养来实现。选取YPD 和LB固体培养基进行菌株的筛选和分离,将工业废水和生活污水分别稀释10-1和10-2两个梯度,以不稀释为对照,取200ul样液分别均匀涂布到两种培养基上,之后分别在30℃和37℃下培养48h。将得到的不同菌株分别在对应的培养基上传代培养,得到单菌落后,在相应液体培养基中培养后,用甘油冻藏于-80℃冰箱,待用。结果显示,从工业废水中筛选分离得到 5株菌,从生活污水中分离得到4株菌。
[0065] ⑵产硫化氢验证:将分离得到的菌株接种到相应的液体培养基中,按相应条件培养24~48 h制备菌悬液;无菌条件下,分别接种于产H2S验证斜面培养基上,为确保结果的准确性,用无菌水作为对照,无菌条件下将无菌水接种于产H2S验证斜面培养基上,恒温培养。分离所得菌株均无硫化氢气体产生。
[0066] ⑶产氨气验证:将分离得到的菌株接种到相应的液体培养基中,按相应条件培养24~48h 制备菌悬液,无菌条件下,分别取1×106个/ml菌转接入相应液体培养基中,其中液体培养基置于50ml三角瓶中,在三角瓶的封瓶膜中放入湿润的红色石蕊试纸,相应转速培养24~48h,用无菌水作为对照组,观察实验结果为分离所得菌株红色石蕊试纸均变蓝,有氨气产生。
[0067] ⑷抑制菌株生长,降低氨氮含量,控制臭味产生:无菌条件下,将分离得到的菌株6
分别在LB液体培养基中培养24~48h,制备菌悬液,在各菌株生长到对数期时分别取1×10个/ml 菌体转接入已制备好的pH为3且分别添加0.25%苯甲酸钠,0.05%脱氢乙酸钠和3%乳酸钠; pH为4且分别添加0.25%苯甲酸钠,0.05%脱氢乙酸钠和3%乳酸钠;pH为5且分别添加0.25%苯甲酸钠,0.05%脱氢乙酸钠和3%乳酸钠;pH为6且分别添加0.25%苯甲酸钠,
0.05%脱氢乙酸钠和3%乳酸钠;pH为7且分别添加0.25%苯甲酸钠,0.05%脱氢乙酸钠和
3%乳酸钠; pH为8且分别添加0.25%苯甲酸钠,0.05%脱氢乙酸钠和3%乳酸钠的LB液体培养基中。转速为150r/min,37℃恒温培养至稳定期,之后测定其吸光度值和氨氮含量,观察红色石蕊试纸变色情况,得到抑制产臭菌株生长,降低氨氮含量,控制臭味产生的不同pH、添加不同防腐剂及两者结合的手段,即能够对城市河流进行除臭。
[0068] 具体的参数条件及实验结果见表1、表2和表3。
[0069] 测定本发明方法各实施例吸光度值,氨氮含量,观察红色石蕊试纸变色情况结果如下:
[0070] 表1本发明方法各实施例吸光度值表
[0071]
[0072]
[0073] 从表1中可以看出,pH≦4时添加3种防腐剂都能抑制城市河流菌株生长,pH=5时,添加0.25%苯甲酸钠能抑制城市河流菌株生长。
[0074] 表2本发明方法各实施例氨氮含量表(mg/L)
[0075]
[0076]
[0077] 从表2中可以看出,pH≦4时添加3种防腐剂都能有效降低城市河流氨氮含量,pH=5时,添加0.25%苯甲酸钠能有效降低城市河流氨氮含量。
[0078] 表3本发明方法各实施例红色石蕊变色情况表
[0079]
[0080]
[0081] 注:“+”表示红色石蕊试纸变蓝,“—”表示结果红色石蕊试纸无变色。
[0082] 从表2中可以看出,pH≦3时添加3种防腐剂红色石蕊试纸均不变色,pH≦4时,添加0.25%苯甲酸钠和0.05%脱氢乙酸钠的红色石蕊试纸不变色,pH≦5时添加0.25%苯甲酸钠的红色石蕊试纸不变色。无氨气溢出,能有效消除城市河流臭味。
[0083] 实施例4
[0084] 一种城市河流除臭的新方法,所述方法包括如下步骤:
[0085] ⑴取出部分城市河流发臭水体,其中城市河流包括排入的工业废水和生活污水,分别取出部分工业废水发臭水体和生活污水发臭水体,分别从工业废水和生活污水发臭水体中筛选分离菌株;
[0086] ⑵验证所分离菌株是否有臭味产生,水体发臭包括含硫、氮有机物分解溢出的硫化氢、氨气所致;而氨氮是指水中以游离氨和铵离子形式存在的氮,因此只要降低水体中氨氮含量,降低游离氨、氨气浓度,就能控制臭味产生;
[0087] ⑶通过调节不同pH、添加不同防腐剂及两者结合的手段抑制产臭菌株生长,降低氨氮含量,控制臭味产生。
[0088] 较优地,具体步骤如下:
[0089] ⑴筛选分离菌株:对菌株的筛选和分离通过在固体平板上培养来实现;
[0090] 选取YPD和LB固体培养基进行菌株的筛选和分离,将工业废水发臭水体和生活污水发臭水体分别稀释10-1和10-2两个梯度,以不稀释为对照,取200ul样液分别均匀涂布到两种培养基上,之后分别在30℃和37℃下培养48h;
[0091] 将得到的不同菌株分别在对应的培养基上传代培养,得到单菌落后,在相应液体培养基中培养后,用甘油冻藏于-80℃冰箱,待用;
[0092] ⑵产硫化氢验证:将分离得到的菌株接种到相应的液体培养基中,按相应条件培养24~48 h制备菌悬液;无菌条件下,分别接种于产H2S验证斜面培养基上,为确保结果的准确性,用无菌水作为对照,无菌条件下将无菌水接种于产H2S验证斜面培养基上,恒温培养,观察菌株是否产生硫化氢气体;
[0093] ⑶产氨气验证:将分离得到的菌株接种到相应的液体培养基中,按相应条件培养24~48h 制备菌悬液,无菌条件下,分别取1×106个/ml菌转接入相应液体培养基中,其中液体培养基置于50ml三角瓶中,在三角瓶的封瓶膜中放入湿润的红色石蕊试纸,相应转速培养24~48h,用无菌水作为对照组,观察红色石蕊试纸是否变蓝,如果变蓝,则证明分离所得菌株产生氨气;
[0094] ⑷抑制菌株生长,控制臭味产生:
[0095] 降低水体中氨氮含量,降低游离氨、氨气浓度:无菌条件下,将分离得到的菌株在相应的液体培养基中进行培养24~48h,制备菌悬液,取1×106个/ml菌分别转接入pH不同、添加不同防腐剂的液体培养基中,150r/min,37℃恒温培养至稳定期,之后测定其吸光度值和氨氮含量,观察红色石蕊试纸变色情况,得到抑制产臭菌株生长,降低氨氮含量,控制臭味产生的不同pH、添加不同防腐剂及两者结合的手段,即能够对城市河流进行除臭。
[0096] 较优地,所述步骤⑷中不同pH为为3、4、5、6、7、8;所述不同防腐剂及其添加终质量浓度分别为0.25%苯甲酸钠,0.05%脱氢乙酸钠,3%乳酸钠。
[0097] 较优地,所述步骤⑷中不同pH、添加不同防腐剂及两者结合的手段为:
[0098] 当调节发臭水体的pH≦4时,添加3种防腐剂中的一种或两种以上;当调节发臭水体的 pH=5时,添加终质量浓度为0.25%的苯甲酸钠;
[0099] 较优地,当调节发臭水体的pH≦3时,添加3种防腐剂中的一种或两种以上;当调节发臭水体的pH≦4时,添加终质量浓度为0.25%的苯甲酸钠和/或终质量浓度为0.05%的脱氢乙酸钠;当调节发臭水体的pH≦5时,添加终质量浓度为0.25%的苯甲酸钠。
[0100] 较优地,所述步骤⑵中H2S验证斜面培养基的制备方法如下:每100ml中加入酚红 0.0025g,硫酸亚铁0.02g,胰蛋白胨1g,酵母提取物0.5g,氯化钠1g,琼脂1.2g。
[0101] 较优地,所述步骤⑷中pH不同的液体培养基的制备方法如下:可以使用安全性高,低成本的酸或分别调节液体培养基pH为3、4、5、6、7、8,并将其置于高压灭菌锅中于115℃灭菌20min。
[0102] 较优地,所述添加不同防腐剂的液体培养基的制备方法如下:
[0103] ①0.25%苯甲酸钠液体培养基溶液:在无菌的条件下,先称取苯甲酸钠0.25g,并将其溶于100ml已灭菌的液体培养基中,摇匀,之后用无菌滤膜器进行过滤和除菌,置于4℃冰箱保存备用;
[0104] ②0.05%脱氢乙酸钠液体培养基溶液:在无菌条件下,先称取脱氢乙酸钠0.05g,再将其溶于100ml已灭菌的液体培养基中,摇匀,之后用无菌滤膜器进行过滤并除菌,置于4℃冰箱保存备用;
[0105] ③3%乳酸钠液体培养基溶液:无菌条件下,用移液枪吸取3ml质量浓度为60%的乳酸钠溶液,并将其加入100ml已灭菌的液体培养基中,摇匀,之后用无菌滤膜器进行过滤和除菌,置于4℃的冰箱中来保存备用。
[0106] 较优地,所述步骤⑷中取1×106个/ml菌分别转接入pH不同、添加不同防腐剂的液体培养基中的pH不同、添加不同防腐剂的的液体培养基为:6种不同pH值分别与3种不同防腐剂组合,制备得到的液体培养基。
[0107] 较优地,所述步骤⑴中从工业废水发臭水体中筛选分离得到5株菌,从生活污水发自水体中分离得到4株菌;所述步骤⑵中分离所得菌株均无硫化氢气体产生;所述步骤⑶中分离所得菌株的红色石蕊试纸均变蓝,则证明有氨气产生。
[0108] 较优地,所述步骤⑵中分离所得菌株均无硫化氢气体产生,说明所述方法所取城市河流水样中无产硫化氢气体的菌株;所述步骤⑶中分离所得菌株均有氨气产生,说明所述方法所取城市河流水样中有产氨气的菌株,说明城市河流发臭水体中均含有产生氨气的菌株。
[0109] 综合看来,本发明方法能抑制城市河流菌株生长,降低氨氮含量,控制氨气产生,有效消除城市河流臭味。且本发明方法成本低,操作方法简单,不会对环境造成危害,安全环保。
[0110] 表4本发明方法中使用的各防腐剂的价格成本表
[0111]种类 单价(g/元)
苯甲酸钠 0.32
脱氢乙酸钠 0.98
60%乳酸钠 0.3
[0112] 。
[0113] 尽管为说明目的公开了本发明的实施例,但是本领域的技术人员可以理解:在不脱离本发明及所附权利要求的精神和范围内,各种替换、变化和修改都是可能的,因此,本发明的范围不局限于实施例和所公开的内容。
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