一种具有降低餐后血糖作用的含有石斛叶的组合物及其制备
方法
技术领域
[0001] 本
发明属于食品领域，涉及一种保健食品，具体来说是
一种具有降低餐后血糖作用的含有石斛叶的组合物及其制备方法。
背景技术
[0002] 随着老龄化社会的临近，慢性疫病成为主要疫病。餐后高血糖是大
血管疾病的独立危险因素。餐后高血糖与
视网膜病变
风险增加，颈动脉内膜中层厚度增加、心肌血容量和心肌血流下降、癌症风险增高及老年人认知功能受损相关，还可引起
氧化应激、
炎症和内皮功能障碍。流行病学研究结果表明：降低餐后血糖可有效地降低心源性猝死的发生。
[0003] 有多种控制血糖的方式：低糖饮食有益于控制餐后血糖；某些药物对控制餐后血糖较佳；饮食干预，体
力活动和体重控制仍是糖尿病控制的基石。调控餐后血糖的药物包括糖苷酶
抑制剂、促胰岛素分泌剂、胰岛素及其胰岛素类似物、胰高血糖素样肽等等。药物
治疗价格较高，而且长期服用具有一定的毒
副作用(如低血糖、体重增加和胃肠道反应等)，作为终生控制餐后血糖的方法有一定的弊端。
[0004] 当代社会，心脑血管疫病已经成为中老年的主要慢性疫病。目前国内市场上安全有效的调节餐后血糖的保健品较少，因此基于天然食物的降低餐后血糖的保健产品开发，具有重要的意义。
发明内容
[0005] 针对
现有技术中的上述技术问题，本发明提供了一种具有降低餐后血糖作用的含有石斛叶的组合物及其制备方法，所述的这种具有降低餐后血糖作用的含有石斛叶的组合物及其制备方法要解决现有技术中的食物降低餐后血糖的效果不佳的技术问题。
[0006] 本发明提供了一种具有降低餐后血糖作用的含有石斛叶的组合物，由下列重量份数的原料制备而成：
[0007]
[0008]
[0009] 进一步的，组合物的剂型可以是粉剂、颗粒剂、丸剂、片剂、酊剂或
水剂。
[0010] 进一步的，所述的糖酸类口感调节物质由
甜味剂和酸味剂组成，甜味剂和酸味剂的
质量比为50-800：1，所述的甜味剂为山梨醇或者蛋白糖中的任意一种或两种的组合；所述的酸味剂为
柠檬酸、苹果酸中的任意一种或两种的组合。
[0011] 本发明还提供了上述的一种具有降低餐后血糖作用的含有石斛叶的组合物的制备方法，包括如下步骤：
[0012] 1)一个制备石斛叶
水解液和冻干粉的步骤，将新鲜石斛叶分选、清洗和控干水分后，按照质量比1:1加水打浆，采用
纤维素酶和果胶酶依次水解石斛叶并制备其匀浆，
纤维素酶的酶解条件为：料液比为1g：60-100ml，加酶量为料液总质量的1.0-1.5％，酶解
温度为40-60℃，酶解时间为2-8h，酶解pH为5.0-9.0；果胶酶的酶解条件为：料液比为1g：60-
100ml；加酶量为料液总质量的0.3-0.8％、酶解温度为40-60℃、酶解时间为1-3h；酶解pH为
3.0-7.0；水解后煮沸5～15min；冷却后置于-80℃
冰箱冷冻24h，再进行
冷冻干燥处理，设定冷阱温度-60℃，
真空度1MPa，干燥时间48h；冻干后的固体用
粉碎机粉碎，过60目筛后收集备用；
[0013] 2)一个制备猴头菇水解液和冻干粉的步骤；将干燥猴头菇清洗后，粉碎，过100目分级筛，
筛下物加水和纤维素酶进行水解处理，酶水解处理条件是：料水比1g：40-80ml，加酶量为料水总质量的0.6-1.5％，酶解时间为3-9h，酶解温度为30-50℃，溶液pH为6.0-8.0，水解后煮沸5～15min；冷却后置于-80℃冰箱冷冻24h，再进行冷冻干燥处理，设定冷阱温度-60℃，真空度1MPa，干燥时间48h；冻干后的固体用粉碎机粉碎，过60目筛后收集备用；
[0014] 3)一个莲子芯的冻干粉的制备步骤：莲子芯经过分选、清洗，置于-80℃冰箱冷冻24h，再进行冷冻干燥处理；设定冷阱温度-60℃，真空度1MPa，干燥时间48h；冻干后的固体用粉碎机粉碎，过60目筛后收集备用。
[0015] 4)一个山楂的冻干粉的制备步骤：山楂经分选、清洗、去核、切分后，置于-80℃冰箱冷冻24h，再进行冷冻干燥处理，设定冷阱温度-60℃，真空度1MPa，干燥时间48h；冻干后的固体用粉碎机粉碎，过60目筛后收集备用；
[0016] 5)一个组合物产品的制备步骤：将石斛叶水解液的冻干粉、猴头菇水解液的冻干粉、莲子芯冻干粉、山楂冻干粉和糖酸类口感调节物按照质量份数混合，搅拌均匀，制成各种剂型的具有降低餐后血糖作用的含有石斛叶的组合物，所述的剂型包括粉剂、颗粒剂、丸剂、酊剂或水剂。
[0017] 本发明的目的是开发一种调节餐后血糖的组合物，该组合物中的组分来源于食物，具有抑制餐后血糖快速上升的功效，对人体没有有害作用，且感官性状易于被人接受。
[0018] 为了实现上述目的，本发明通过药理学技术，
生物技术和
食品加工技术开发出一种调节餐后血糖的来源于食物的组合物。
[0019] 本发明还提供了上述组合物的制备方法，包括石斛叶的纤维素酶和果胶酶水解和冷冻干燥方法；猴头菇的纤维素酶和果胶酶水解液和冷冻干燥方法；莲子芯和山楂冻干粉的制备方法及最终组合物产品的制备步骤，本发明产品是将上述各物料按照比例混合，制备成组合物。
[0020]
铁皮石斛(Dendrobiumofficinale Kimura et Migo)主要有增强免疫、抗疲劳、抗氧化、降血糖、降血压等药理作用。石斛叶是铁皮石斛
植物的叶子。石斛叶子往往作为食品和药品加工的废弃物而丢弃。研究表明：铁皮石斛茎与叶中各含有较高的不同有效成分，总多糖主要集中于茎，总生物
碱和总黄
酮主要集中于叶。茎和叶均可作为食药用资源加以充分利用。在抗氧化活性实验中，清除DPPH自由基的结果显示，叶部多糖明显优于茎部多糖，表明其具有较高的抗氧化应用价值。但石斛叶子的降血糖作用还未见报道。
[0021] 猴头菇(Hericium ernaceus)是一种
真菌，猴头菇多糖是猴头菇的主要活性成分。现代医学和药理学的很多研究证明猴头菇多糖具有提高免疫力、抗
肿瘤、抗衰老、降血脂等多种生理功能。猴头菇中的多糖和寡糖具有降血糖作用。猴头菇中的萜类和酚类对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、枯草芽孢杆菌均具有一定的抑菌效果。
[0022] 莲子心(Nelumbinis plumula)是睡莲科植物莲的成熟
种子中的干燥幼叶及胚根，具有清心安神、止咳化痰、
止血抗炎等功效。莲子心中的化学成分主要为生物碱类，此外还有黄酮类、多糖类和挥发油等成分，具有降血脂、抗氧化、抗炎等多种药理作用。莲子芯水提物对大肠埃希氏菌、链球菌、金黄色葡萄球菌、鼠伤寒沙
门氏菌、巴氏杆菌等均有不同程度的抑菌作用。因此通过添加莲子芯的抑菌活性，可以防止产品中
微生物增殖，起到
防腐剂的作用。因此，莲子芯不仅能够提供营养物质，还可以起到抗
氧化剂和防腐剂的作用，延长保质期，避免了外源性添加剂的使用。
[0023] 山楂(Crataegus pinnatifida)是蔷薇科山楂属植物的果实。山楂中含有丰富的黄酮类、萜类和维生素类物质，具有降血压、抗凝血、抗氧化和保护内皮细胞的作用。
[0024] 本
专利将石斛叶、猴头菇、莲子芯和山楂进行配合，结合药理学实验技术、生物加工技术和食品加工手段对其进行产品配方优化，产品加工和功能验证，开拓石斛叶利用新领域，提高石斛的利用率，对血糖代谢紊乱等特殊人群的科学合理膳食具有重要的意义。
[0025] 石斛叶、猴头菇、莲子芯和山楂等原料，传统加工方式是水提或醇提，对提取物再进行进一步加工。由于多糖和三萜类、黄酮类物质的
水溶性有很大的差异，水提或醇提均会导致其他非可溶性成分的大量损失。因此，本专利中采用纤维素酶水解，一方面提高了多糖的生物利用度，另一方面纤维素水解后可以将三萜类物质释放出来，最后收集水解后的全部液体。由于不单独提取某一类物质，避免了提取过程中其他功能成分的损失。最大限度地保留了多糖和三萜类、黄酮类物质的含量。
[0026] 本发明中涉及石斛叶的铁皮石斛(Dendrobiumofficinale Kimura et Migo)的绿色
叶片。本发明中涉及的石斛叶水解液是石斛叶经过纤维素酶和果胶酶水解并过滤后的液态产物，其溶液中含有石斛叶中的各种多糖物质及矿物元素、
蛋白质等营养物质，同时可溶性糖类(单糖、寡糖、糊精等低聚糖和可溶性多糖)含量比未水解叶片明显增加，主要源于石斛叶中纤维素和果胶物质的降解。本发明中涉及的纤维素酶是催化降解纤维素生成
葡萄糖和低聚合度纤维的一组酶的总称，包括葡聚糖内切酶、葡聚糖外切酶和纤维
二糖酶3个主要组分(SIGMA
试剂，C1184，来源于Aspergillus niger)。本发明中涉及的果胶酶是混合物，CAS:9032-75-1，Sigma公司产品，果胶酶3个主要组分是果胶甲酯酶(EC 3.1.1.11)，聚半乳糖
醛酸酶(EC3.2.1.15)，果胶裂解酶(EC 4.2.2.10)，可使果胶水解为
蔗糖和半乳糖醛酸。石斛叶清洗后粉碎，称量并配成溶液进行酶水解处理。
[0027] 本发明采用的猴头菇(Hericium ernaceus)是一种真菌干燥后的子实体。本发明的猴头菇水解液是猴头菇经过纤维素酶水解并过滤后的液态产物，其溶液含有猴头菇中的多糖、黄酮类物质、矿物质等营养成分，但可溶性糖类(单糖、寡糖、低聚糖和可溶性多糖)含量比原未水解猴头菇明显增加，主要源于果实中的纤维素酶降解。本发明中涉及的纤维素酶是催化降解纤维素生成葡萄糖和低聚合度纤维的一组酶的总称，包括葡聚糖内切酶、葡聚糖外切酶和纤维二糖酶3个主要组分(SIGMA试剂，C1184，来源于Aspergillus niger)。称取定量猴头菇
浆液后，配成溶液，进行纤维素酶解。
[0028] 本发明采用的莲子心(Nelumbinis plumula)是睡莲科植物莲的成熟种子中的干燥幼叶及胚根。莲子芯经过分选、清洗，置于-80℃冰箱冷冻24h，再进行冷冻干燥处理。设定冷阱温度-60℃，真空度1MPa，干燥时间48h。；冻干后的固体用粉碎机粉碎，过60目筛。
[0029] 本发明采用的山楂(Crataegus pinnatifida)是蔷薇科山楂属植物的果实。山楂经分选、清洗、去核、切分后，置于-80℃冰箱冷冻24h，再进行冷冻干燥处理。设定冷阱温度-60℃，真空度1MPa，干燥时间48h。；冻干后的固体用粉碎机粉碎，过60目筛。
[0030] 本发明目的是通过石斛叶、猴头菇、莲子芯和山楂进行配伍，以药理学结果作为配方优化的检测指标，开发出一种降低餐后血糖的产品，达到营养和功能性互补，并提高消化和吸收率，并且固体形式作为原始产品，方便储运或在其他食品中的添加。
[0031] 本发明采用了石斛叶、猴头菇的纤维素酶和果胶酶水解物的冻干粉的组合，营养和功能互补，一方面增强了营养性和功能性，，增强了降血糖的保健功能，提高了产品中多糖类和纤维素类物质的消化率和吸收率；同时提高了终产品中游离态多糖，三萜类物质、黄酮类物质和其他功能性物质含量，增强了功能性成分，莲子芯和山楂中的黄酮类物质具有抑菌抗氧化作用，可在不外加防腐剂和抗氧化剂的情况下延长最终产品的保质期。降低了产品中抗氧化剂和防腐剂的使用量。
[0032] 本发明的方法制备的组合物酸甜适口，无苦味，
颜色微黄白色，可直接食用，或者用液体(水或
乙醇)稀释成饮料食用，也可以作为配料添加到其他食品中。
[0033] 本发明和已有技术相比，其技术进步是显著的。本发明采用了纤维素酶和果胶酶水解，一方面提高了石斛叶和猴头菇中不溶性多糖的生物利用度；另一方面，纤维素或果胶水解后可将石斛叶和猴头菇中的三萜类物质、黄酮类物质和酚类物质等释放出来，不仅具有功能互补的功效，还具有协同抗氧化和抗衰老效果。本发明技术简单，无残留，无污染，不受空间和时间的限制，对加工空间设施和人没有不良影响。
附图说明
[0034] 图1显示了石斛叶水解液冻干粉对动物餐后血糖的影响。
具体实施方式
[0036] 本发明提供了一种具有降低餐后血糖作用的含有石斛叶的组合物，由下列重量份数的原料制备而成：
[0037]
[0038] 进一步的，其剂型可以是粉剂、颗粒剂、丸剂、片剂、酊剂或水剂。
[0039] 进一步的，所述的糖酸类口感调节物质由甜味剂和酸味剂组成，甜味剂和酸味剂的质量比为50-800：1，所述的甜味剂为山梨醇、蛋白糖中的任意一种或两种的组合；所述的酸味剂为柠檬酸或者、苹果酸中的任意一种或两种的组合。
[0040] 本发明还提供了上述的一种具有降低餐后血糖作用的含有石斛叶的组合物的制备方法，包括如下步骤：
[0041] 1)一个制备石斛叶水解液和冻干粉的步骤，将新鲜石斛叶分选、清洗和控干水分后，按照质量比1:1加水打浆，采用纤维素酶和果胶酶依次水解石斛叶并制备其匀浆，纤维素酶的酶解条件为：料液比为1g：60-100ml，加酶量为料液总质量的1.0-1.5％，酶解温度为40-60℃，酶解时间为2-8h，酶解pH为5.0-9.0；果胶酶的酶解条件为：料液比为1g：60-
100ml；加酶量为料液总质量的0.3-0.8％、酶解温度为40-60℃、酶解时间为1-3h；酶解pH为
3.0-7.0；水解后煮沸5～15min；冷却后置于-80℃冰箱冷冻24h，再进行冷冻干燥处理，设定冷阱温度-60℃，真空度1MPa，干燥时间48h；冻干后的固体用粉碎机粉碎，过60目筛后收集备用；
[0042] 2)一个制备猴头菇水解液和冻干粉的步骤；将干燥猴头菇清洗后，粉碎，过100目分级筛，筛下物加水和纤维素酶进行水解处理，酶水解处理条件是：料水比1g：40-80ml，加酶量为料水总质量的0.6-1.5％，酶解时间为3-9h，酶解温度为30-50℃，溶液pH为6.0-8.0，水解后煮沸5～15min；冷却后置于-80℃冰箱冷冻24h，再进行冷冻干燥处理，设定冷阱温度-60℃，真空度1MPa，干燥时间48h；冻干后的固体用粉碎机粉碎，过60目筛后收集备用；
[0043] 3)一个莲子芯的冻干粉的制备步骤：莲子芯经过分选、清洗，置于-80℃冰箱冷冻24h，再进行冷冻干燥处理；设定冷阱温度-60℃，真空度1MPa，干燥时间48h；冻干后的固体用粉碎机粉碎，过60目筛后收集备用。
[0044] 4)一个山楂的冻干粉的制备步骤：山楂经分选、清洗、去核、切分后，置于-80℃冰箱冷冻24h，再进行冷冻干燥处理，设定冷阱温度-60℃，真空度1MPa，干燥时间48h；冻干后的固体用粉碎机粉碎，过60目筛后收集备用；
[0045] 5)一个组合物产品的制备步骤：将石斛叶水解液的冻干粉、猴头菇水解液的冻干粉、莲子芯冻干粉、山楂冻干粉和糖酸类口感调节物按照质量份数混合，搅拌均匀，制成各种剂型产品，包括粉剂、颗粒剂、丸剂、酊剂或水剂。
[0046] 实施例2:
[0047] 1,石斛叶预处理及纤维素酶酶解工艺流程
[0048] 石斛叶分选→切分→称重→加水→打浆→酶水解→过滤→检测
[0049] 工艺描述：
[0050] (1)挑选原料：取新鲜石斛叶无虫蛀破损部分。
[0051] (2)分成小
块：新鲜石斛叶用小刀分割成小块，放入
搅拌机中方便粉碎。
[0052] (3)称重：将鲜石斛叶放到
指定容器中，用
电子天平进行称重。
[0053] (4)加水：与鲜石斛叶以1g：10ml的料水比，进行调配。
[0054] (5)粉碎：将新鲜石斛叶放入搅拌机中，快速搅打，每搅打10秒钟停一次，进行3-4次搅打。
[0055] (6)酶水解：分别进行酶解温度、酶解pH、加酶量、酶解时间五组因素进行实验。
[0056] (7)可溶性固形物分析:利用阿贝折光仪进行可溶性固形物分析
[0057] 料液比的实验结果如表1所示。
[0058] 石斛叶纤维素酶水解过程中料液比的单因素实验，按照酶解温度为50℃，酶解时间为1h，酶解pH为7.0，加酶量为料液总质量的1％，取1g：80ml、1g：100ml、1g：120ml、1g：140ml四组料液比，分别进行四组实验，最后用手持糖度计比较可溶性固形物含量，实验结果表1所示。
[0059] 由表1结果可知酶解料液比对石斛叶液中可溶性固形物含量的影响，随着料液比的升高可溶性固形物变化率是呈现下降的趋势，因此在料液比为1g:80ml时，可溶性固形物最高。因此石斛叶最佳纤维素酶酶解料液比1g:80ml。
[0060] 表1料液比对石斛叶纤维素酶水解效果的影响
[0061]
[0062] 实施例3:
[0063] 3,动物餐后血糖测定及石斛叶的降血糖效果
[0064] 3.1血糖测定方法：
[0065] (1)经口
摄食含定量材料的胶囊，后每隔15分钟利用
采血笔通过雄兔
耳端进行采血；
[0066] (2)将血糖
试纸插入配套
血糖仪，等待数秒，血糖仪启动完成；
[0067] (3)将血样轻触血糖试纸进血端口，血滴自动被吸入；
[0068] (4)确认采血量足够；
[0069] (5)等待8秒，屏幕显示血糖检测结果。
[0070] 3.2食物对餐后血糖影响的测定程序：
[0071] (1)经口摄食含定量白砂糖胶囊，后每隔15分钟通过雄兔耳端采血测定一次血糖，共测定5次，作为对照；
[0072] (2)经口摄食含定量材料的胶囊，后每隔15分钟通过雄兔耳端采血测定一次血糖，共测定5次。与对照组比较。
[0073] 实验结果如图1所示。结果表明大耳白兔(雄)在摄食定量蔗糖和石斛叶后，血糖在前30min内变化幅度不大。待30min后血糖开始下降，甚至低于空腹血糖。图中结果表明石斛叶水解液冻干粉降血糖作用持续时间长，血糖下降幅度大，食用后动物餐后血糖甚至低于空腹血糖，所以石斛叶降血糖效果非常显著，在餐后血糖调节控制过程中具有较好的效果。
