心达康制剂是从植物沙棘(Hippophae L.)中提取的有效部位沙棘总黄酮与辅料制备而成。沙棘总黄酮用于治疗心脑血管疾病已得到了世界公认，现代药理学研究和临床应用表明：沙棘总黄酮具有扩张冠状动脉，增加心脑组织供血量，降低心脏负荷，抑制血小板聚集，改善微循环，防止血栓形成及动脉粥样硬化的发生，抑制脂质过氧化反应，延缓衰老等作用。其中的“心达康片”和“心达康胶囊”分别刊登在中国部颁标准中药成方制剂第十四册和新药转正标准33册上，并已在临床上应用多年，在治疗心脑血管疾病方面取得了较满意的治疗效果。但经研究发现，现有心达康制剂存在着质量控制方法不合理的缺点，如现在市场上的心达康片，包括糖衣片和薄膜衣片，由于其制法、处方实际上一样，只是包衣不同，而却实行两个标准(一个是WS3-B-2666-97，一个是WS3一B一2666-2002)，浪费了标准资源；另外在2005年版中国药典附录XVG对照品、对照药材、对照提取物中已没有收载现标准中的仍在使用的标准品异鼠李素葡萄糖苷，这给产品的质量控制带来一定的难度；现有心达康制剂存在质量控制标准简单，产品质量不易控制的缺点，体现在：因醋柳黄酮是一类黄酮物质的总称，而对其的鉴别和含量控制均以单一的异鼠李素来进行衡量，故不能有效控制该制剂的质量，从而影响其临床疗效。

本发明的目的，是提供一种心达康制剂的鉴别方法。本发明针对原有心达康制剂质量控制标准简单，产品质量不易控制的缺点，对本制剂的质量控制方法进行了研究，拟订了制剂中槲皮素、异鼠李素的薄层色谱鉴别，提高了心达康制剂的质量控制标准，该质量标准中的控制方法可有效地控制心达康制剂的质量，从而保证了该制剂的临床疗效。
本发明所述的心达康制剂是由沙棘总黄酮(醋柳黄酮)与辅料制备而成。其制法为沙棘经提取得醋柳黄酮，取醋柳黄酮50g(含总黄酮以异鼠李素计5g)，粉碎成细粉，加入适量辅料按照常规方法制成包括片剂(包括含片、分散片、咀嚼片)、胶囊剂、软胶囊剂、滴丸剂在内的不同制剂。
本心达康制剂的鉴别方法，所述制剂包括片剂、胶囊剂、软胶囊剂、滴丸剂，所述鉴别包括以槲皮素对照品、异鼠李素对照品为对照鉴别制剂中黄酮苷元的薄层色谱鉴别。槲皮素、异鼠李素的鉴别方法是分别以槲皮素对照品和异鼠李素对照品为对照，以甲苯∶乙酸乙酯∶甲酸＝2～10∶1～8∶0.1～1.5的溶液为展开剂的薄层色谱法。
所述鉴别方法包括以下：
取本制剂或其内容物，研细，加乙醇使溶解，滤过，滤液作为供试品溶液；另取槲皮素和异鼠李素对照品，加乙醇制成混合溶液，作为对照品溶液；照中国药典薄层色谱法试验，吸取上述供试品溶液、对照品溶液，分别点于同一硅胶G薄层板上，以甲苯∶乙酸乙酯∶甲酸＝2～10∶1～8∶0.1～1.5为展开剂，展开，取出，晾干，喷以1～5％三氯化铝乙醇溶液，置紫外光灯下检视；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。
更具体的鉴别方法包括以下：
取本制剂或其内容物，研细，取细粉2～20mg，加无水乙醇2～20ml，超声处理1～15分钟，滤过，滤液作为供试品溶液；另取槲皮素和异鼠李素对照品，加无水乙醇制成每1ml各含1mg～10mg的混合溶液，作为对照品溶液；照中国药典一部附录VIB薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各1～20ul，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以甲苯∶乙酸乙酯∶甲酸＝2～10∶1～8∶0.1～1.5为展开剂，展开，取出，晾干，喷以1～5％的三氯化铝乙醇溶液，置365nm紫外光灯下检视；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。
本心达康制剂的含量测定，包括制剂中总黄酮测定。
本心达康制剂的含量测定，还包括对制剂中槲皮素、异鼠李素、山柰素总量的测定，该测定方法是以异鼠李素、槲皮素、山柰素对照品为对照，以甲醇∶0.4％磷酸＝30～60∶30～60为流动相的高效液相色谱法。
经研究申请人发现，采用以下质量控制方法将更容易控制这种制剂的质量，更有利于保证制剂的临床疗效：
性状：
对于片剂：内容物为棕黄色至棕色，味微苦；
对于胶囊剂：内容物为浅黄褐色至灰褐色的颗粒及粉末；气微，味微苦；
对于软胶囊剂：内容物为含有少量悬浮固体浸膏的黄色油状液体；气微，味微苦；
对于滴丸剂：本品为棕色的滴丸；气微，味微苦；
鉴别：
取本制剂1片或1粒，研细，加乙醇5ml或10ml，超声处理5分钟，制成1mg/ml的溶液，滤过，滤液作为供试品溶液；另取槲皮素和异鼠李素对照品，加乙醇制成每1ml各含1mg的混合溶液，作为对照品溶液；照中国药典一部附录VIB薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各1～2ul，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以甲苯∶乙酸乙酯∶甲酸＝5∶4∶0.5为展开剂，展开，取出，晾干，喷以1～3％三氯化铝乙醇溶液，置365nm紫外光灯下检视；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。
检查：
应符合中国药典一部附录中片剂、胶囊剂、软胶囊剂或滴丸剂项下各有关规定。
含量测定
(1)总黄酮
对照品溶液的制备：精密称取采用P2O5干燥12小时以上的异鼠李素对照品，加无水乙醇制成每1ml含异鼠李素20ug的溶液，即得；
标准曲线的制备：精密量取对照品溶液1、2、3、4、5、6ml，分别置10ml量瓶中，加1～3％三氯化铝无水乙醇溶液1.0ml，用无水乙醇稀释至刻度，摇匀，放置10分钟，以相应的试剂为空白，照紫外-可见分光光度法(中国药典一部附录VA)，在430nm的波长处测定吸光度，以吸光度为纵坐标，浓度为横坐标，绘制标准曲线；
测定法：本制剂取片剂20片、取10～20粒胶囊剂、滴丸剂内容物，精密称定，研细混匀，取约0.1g，精密称定，置具塞锥形瓶中，加无水乙醇适量，于80℃水浴中加热回流15分钟，放冷，移置100ml量瓶中，用无水乙醇稀释至刻度，摇匀，滤过，弃去初滤液，精密量取续滤液10ml，置25ml量瓶中，用无水乙醇稀释至刻度，摇匀，精密量取3ml，置10ml量瓶中，加1～％三氯化铝无水乙醇溶液1.0ml，用无水乙醇稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液；另取未加显色剂的同样量供试品溶液作空白，照上述标准曲线制备项下的方法，自“放置10分钟”起，照紫外-可见分光光度法(中国药典一部附录VA)，在430nm的波长处测定吸光度，从标准曲线中读出供试品中异鼠李素的重量(ug)，计算，即得；
本制剂含总黄酮(以异鼠李素计)为5mg时，含醋柳黄酮以异鼠李素(C16H12O7)计，片剂每片应为标示量的90.0～110.0％、胶囊剂和软胶囊剂每粒应为标示量的90.0～110.0％、滴丸剂每丸应为标示量的90.0～110.0％。
本制剂含总黄酮(以异鼠李素计)为10mg时，含醋柳黄酮以异鼠李素(C16H12O7)计，片剂每片应为标示量的90.0～110.0％、胶囊剂和软胶囊剂每粒应为标示量的90.0～110.0％、滴丸剂每丸应为标示量的90.0～110.0％、
(2)槲皮素、异鼠李素、山柰素采用高效液相色谱法测定：色谱柱为C18柱；以甲醇∶0.4％磷酸＝50∶50为流动相；检测波长为370nm；理论塔板数按异鼠李素峰计算应不低于3000；精密称取以P2O5为干燥剂减压干燥12小时以上异鼠李素、山柰素、120℃干燥4小时的槲皮素对照品适量，加甲醇制成每1ml分别含异鼠李素20ug、山柰素2ug、槲皮素25ug的混合溶液，即得对照品溶液；本制剂取片剂20片除去包衣、取10粒胶囊剂、滴丸剂内容物，精密称定，研细混匀，取相当于总黄酮10mg，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇25ml，称定重量，超声处理(功率135W，频率59kHz)30分钟，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，弃去初滤液，精密量取续滤液5ml，置具塞锥形瓶中，加甲醇15ml，盐酸(1→2)5ml，置水浴中加热回流30分钟，迅速冷却，转移至50ml量瓶中，用甲醇稀释至刻度，摇匀，用0.45um微孔滤膜滤过，取续滤液，即得供试品溶液；分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10ul，注入液相色谱仪，测定，即得；
本制剂含总黄酮(以异鼠李素计)为5mg时，各剂型含槲皮素(C15H10O7)、异鼠李素(C16H12O7)、山柰素(C15H10O6)的总量：片剂每片应不少于标示量的80％、胶囊剂和软胶囊剂每粒每粒应不少于标示量的80％、滴丸剂每丸应不少于标示量的80％。
本制剂含总黄酮(以异鼠李素计)为10mg时，各剂型含槲皮素(C15H10O7)、异鼠李素(C16H12O7)、山柰素(C15H10O6)的总量：片剂每片应不少于标示量的80％、胶囊剂和软胶囊剂每粒每粒应不少于标示量的80％、滴丸剂每丸应不少于标示量的80％。
本质量控制方法是对现有心达康制剂产品的质量控制方法进行的改进，其改进方法包括：将现有心达康片糖衣片和薄膜衣片两种产品标准合并；对合并产品标准性状进行调整；对原鉴别项的总黄酮的化学反应显色鉴别删除代之以醋柳黄酮中槲皮素、异鼠李素的专属性鉴别；含量测定项中对照品异鼠李素按药典新要求采用P2O5干燥法；增加用高效液相色谱法测定槲皮素、异鼠李素、山柰素总含量。
由于本发明与现有技术相比，增加了槲皮素、异鼠李素的薄层色谱鉴别和采用高效液相色谱法测定制剂中槲皮素、异鼠李素、山柰素的总含量，所采用的方法专属于性强、精密度高，重现性好，回收率高，提高了原心达康制剂的质量控制标准，从而保证了该制剂的质量和临床疗效。
为了确保本发明的质量控制方法科学、合理、可行，本申请人对方法中的鉴别和含量测定方法进行了研究，具体试验资料如下：
【鉴别】经试验，采用槲皮素和异鼠李素作对照鉴别心达康制剂，其阴性无干扰，斑点清晰。点样量采用10ul，斑点有点拖尾，调整点样量为1～2ul。
采用不同生产厂家的硅胶G薄层板，以上述薄层色谱条件展开，均可得到满意的分离结果。
【检查】应符合中国药典片剂(中国药典一部附录ID)、胶囊剂、软胶囊剂(中国药典一部附录IL)或滴丸剂(中国药典一部附录IK)项下有关规定。
【含量测定】总黄酮同原标准方法，仅对异鼠李素对照品的干燥方式进行了研究，结果见表1。
表1

(心达康片样品批号：060301，规格：5mg/片)
以上结果表明：采用两种方式干燥异鼠李素对照品后，测总黄酮的含量无明显差异，故异鼠李素对照品改为采用P2O5干燥12h以上，以更符合药典对对照品干燥条件的要求。
槲皮素、异鼠李素、山柰素新增加的采用高效液相色谱法测定心达康片中的槲皮素、异鼠李素、山柰素总量的含量测定方法。方法参照中国药典一部沙棘项下收载的高效液相色谱法测定异鼠李素的方法，对心达康制剂中槲皮素、异鼠李素、山柰素进行含量测定。
1.最大吸收波长选择
取槲皮素、异鼠李素、山柰素对照品，分别用甲醇制成对照品溶液，于200-600nm波长范围内扫描，槲皮素在371nm处有最大吸收波长，异鼠李素在369.5nm处有最大吸收波长，山柰素在366.5nm处有最大吸收波长。参照中国药典2005年版一部沙棘项下异鼠李素的检测波长，故将槲皮素、异鼠李素、山奈素检测波长选择为370nm。
2.流动相的选择
中国药典2005年版一部沙棘项下异鼠李素的含量测定项下流动相为甲醇∶0.4％磷酸＝58∶42，银杏叶片中槲皮素、异鼠李素、山柰素的含量测定项下流动相为甲醇∶0.4％磷酸＝50∶50，本品为单味药制剂，故参照中国药典，确定流动相最佳为甲醇∶0.4％磷酸＝50∶50。
3.色谱条件及系统适用性试验
流动相：甲醇∶0.4％磷酸＝50∶50
色谱柱：迪马公司DiamonsilC18(5um 250×4.6mm)
流速：1ml/s，柱温35℃；
此条件下样品中槲皮素、异鼠李素、山柰素能与其它组分达到基线分离，与相邻的色谱峰分离度符合要求。理论塔板数按异鼠李素峰计算应不低于3000。
4.供试品溶液的制备方法研究
心达康制剂的主要成分为沙棘总黄酮，是由异鼠李素-3-芸香糖苷、异鼠李素-3-鼠李糖苷、槲皮素-3-葡萄糖苷、山柰素-3-葡萄糖苷等多种黄酮苷类化合物组成，所述成份较难直接测定，而其苷元主要为槲皮素、异鼠李素、山柰素，故采用加酸水解使黄酮苷转化成黄酮苷元后进行含量测定。
由于槲皮素、异鼠李素、山柰素均能溶解于甲醇，参照心达康胶囊质量标准中供试品溶液的制备方法，以甲醇25ml为提取溶剂进行提取。取本品20片，除去包衣，精密称定，研细，取适量(相当于总黄酮10mg)，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇25ml，称定重量，超声处理(功率135W，频率59kHz)，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，弃去初滤液，精密量取续滤液5ml，置具塞锥形瓶中，加甲醇15ml，盐酸，置水浴中加热回流，迅速冷却，转移至50ml量瓶中，用甲醇稀释至刻度，摇匀，用微孔滤膜(0.45um)滤过，取续滤液，即得。采用上述色谱条件，进行测定。
4.1提取时间研究20(30或40)分钟。
4.2加酸量的研究加盐酸(1→2)3(5或7)ml。
4.3水解时间的考察水浴中加热回流20(30或40)分钟。
实验结果见表2。
表2

结果：通过试验比较，确定供试液制备方法为：取本品20片，除去包衣，精密称定，研细，取适量(相当于总黄酮10mg)，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇25ml，称定重量，超声处理(功率135W，频率59kHz)30分钟，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，弃去初滤液，精密量取续滤液5ml，置具塞锥形瓶中，加甲醇15ml，盐酸(1→2)5ml，置水浴中加热回流30分钟，迅速冷却，转移至50ml量瓶中，用甲醇稀释至刻度，摇匀，用微孔滤膜(0.45um)滤过，取续滤液，即得。
5.专属性试验
用缺醋柳黄酮的心达康片阴性样品，按供试品处理方法处理后，进行测定，结果在槲皮素、异鼠李素、山柰素峰的位置上无干扰。
6.标准曲线的制备
精密称取槲皮素对照品20.69mg，置50ml量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，作为对照品贮备液。精密称取山柰素对照品3.23mg，置10ml量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，作为对照品贮备液。精密称取异鼠李素对照品8.46mg，置25ml量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，作为对照品贮备液。分别精密量取槲皮素对照品贮备液10ml、山柰素对照品贮备液1ml、异鼠李素对照品贮备液10ml于同一50ml量瓶中，用甲醇稀释至刻度，摇匀，作为混合对照品溶液。再分别精密量取混合对照品溶液1、2、4、6、8、10ml于10ml量瓶中，用甲醇稀释至刻度，摇匀，吸取10ul进样。以进样量为横坐标，峰面积为纵坐标绘制标准曲线。计算回归方程。
槲皮素回归方程：A＝4636757.285C-18655.16986(r2＝0.999989135)
山柰素回归方程：A＝4025498.961C-4063.736986(r2＝0.999377663)
异鼠李素回归方程：A＝4551361C-22470.2(r2＝0.999995)
结果表明：在上述色谱条件下，槲皮素在0.08276-0.8276ug之间，样品进样量与峰面积线性关系良好，山柰素在0.00646-0.0646ug之间，样品进样量与峰面积线性关系良好，异鼠李素在0.06768-0.6768ug之间，样品进样量与峰面积线性关系良好。
7.精密度试验
7.1仪器精密度精密吸取槲皮素、山柰素、异鼠李素混合对照品溶液各10ul，在上述色谱条件下重复进样5次。结果见表3。
表3  仪器精密度试验
  进样次数   槲皮素   山奈素   异鼠李素   1   1486544   118686   767727   2   1451610   113661   746763   3   1483973   120058   768565   4   1483038   119708   762612   5   1485164   120285   766082   RSD(％)   1.0   2.3   1.2
7.2重复性试验
平行取同批心达康片样品6份，按“含量测定”项下供试液制备方法试验，采用上述色谱条件，测定槲皮素、山柰素、异鼠李素含量。结果见表4。
表4  重复性试验结果
  试验次数   1   2   3   4   5   6   RSD(％)   槲皮素、山奈素、异  鼠李素总含量(mg/片)   4.82   4.83   4.82   4.82   4.80   4.82   1.1
以上结果表明：槲皮素，山奈素，异鼠李素含量具有较好的重现性
8、准确度(加样回收率试验)
精密量取槲皮素对照品溶液(浓度0.9348mg/ml)3ml、山柰酚对照品溶液(浓度0.2196mg/ml)1ml、异鼠李素对照品溶液(浓度0.54mg/ml)3ml，共6份，分别置6个具塞锥形瓶中，水浴上蒸干溶剂，备用。取已知含槲皮素19.07mg/g、山柰素1.40mg/g、异鼠李素11.60mg/g的样品，精密称定，置上述具塞锥形瓶中，按拟定测定槲皮素、山柰素、异鼠李素总量方法进行加样回收实验，结果见表5、表6、表7。
表5  槲皮素加样回收率试验结果

表6  山柰素加样回收率试验结果

表7  异鼠李素加样回收率试验结果

以上结果试验表明：该方法具有较好的回收率，准确度好。
9、耐用性实验
9.1稳定性试验取供试品溶液于制备后0、1、3、6、12、24小时后测定含量，其结果见表8。
表8  稳定性试验结果
  放置时间   0   1   3   6   12   24   RSD(％)   槲皮素   1547874   1540112   1543021   1532368   1485664   1566521   1.8   山柰素   124117   122975   125646   125481   119476   126826   2.1   异鼠李素   801384   797535   800284   793973   765418   816134   2.1
以上结果表明：供试品在24小时内稳定性较好。
9.2流动相比例变化的试验
取样品，按上述确定的供试品溶液的制备方法制备供试品溶液，流动相分别为：①甲醇-0.4％磷酸(45∶55))；②甲醇-0.4％磷酸(50∶50)；③甲醇-0.4％磷酸(55∶45)。在其他色谱条件不变，只改变流动相的情况下，对测定结果进行考察。按上述色谱条件下进样测定，测定结果见表9。
表9  流动相比例变化的考察

根据以上测定结果，RSD为1.3％，流动相比例的较小变化对测定结果无影响。
9.3不同品牌色谱柱的考察
取同批样品，按上述确定的供试品溶液的制备方法制备供试品溶液，色谱柱分别为：(1)Kromasil.200×4.6mmID，5um；(2)Dickma 250×4.mmID 5um；(3)phenomemex 150×4.6ID 5um。在流动相及其他色谱条件不变，只改变所使用的色谱柱，对测定结果进行考察。按上述色谱条件下进样测定，测定结果见表10。
表10  不同品牌色谱柱的考察

根据以上测定结果，RSD为1.09％，不同品牌的色谱柱对测定结果无明显影响。
根据以上的试验结果可知，该方法的耐用性较好。
10、样品含量测定
按拟定的心达康制剂槲皮素、山奈素、异鼠李素含量测定方法，对原长期留样的心达康片和市售产品进行了含量测定，结果见表11、表12、表13。
表11  五批心达康片(规格：5mg)含量测定结果
  批号   槲皮素(mg)   山柰酚(mg)   异鼠李素(mg)   总量(mg/片)   占标示量(％)   060103   2.88   0.20   1.67   4.75   95.0   060202   2.78   0.20   1.62   4.60   92.0   060203   2.91   0.20   1.71   4.83   96.6   060301   2.96   0.21   1.73   4.90   98.0   060402   2.96   0.21   1.73   4.90   98.0
表12  三批心达康片(规格：10mg)含量测定结果
  批号   槲皮素(mg)   山柰酚(mg)   异鼠李素(mg)   总量(mg/片)   占标示量(％)   060101   6.14   0.25   3.27   9.66   96.6   060201   5.76   0.34   3.27   9.37   93.7   060401   5.47   0.37   3.22   9.06   90.6
表13  三批心达康片(规格：5mg)含量测定结果
  生产厂家   批号   槲皮素  (mg)   山柰酚  (mg)   异鼠李素  (mg)   总量  (mg/片)   占标示  量(％)   上海天赐福生物工  程有限公司   051102   1.12   0.37   2.59   4.08   81.6   四川川大华西药业  股份有限公司   050401   0.99   0.30   2.92   4.21   84.2   四川雅达药业股份  有限公司   050610   1.01   0.22   3.02   4.25   85
从以上结果可以看出，采用高效液相色谱法测定心达康片中槲皮素、山柰素、异鼠李素总含量相当于其总黄酮标示量的81.6％～98.0％。考虑到本标准只是对已有产品进行含量测定，因此暂以测得的最低数据为其限度标准。即采用高效液相色谱法测定心达康片中槲皮素、山柰素、异鼠李素总量，应不低于标示量的80.0％。

以下通过实施例进一步说明本发明，但并不作为对本发明的限制，本发明的质量控制方法也可以用于以下其它心达康剂型药品的质量控制。
实施例一：所述片剂质量控制方法包括
性状：本品为糖衣片或薄膜衣片，除去包衣后显棕黄色至棕色，味微苦。
鉴别：取本品1片，除去包衣，研细，加乙醇每5ml(5mg)或10ml(10mg)，超声处理5分钟，滤过，滤液作为供试品溶液；另取槲皮素和异鼠李素对照品，加乙醇制成每1ml各含1mg的混合溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法(中国药典一部附录VIB)试验，吸取上述两种溶液各1～2ul，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以甲苯∶乙酸乙酯∶甲酸＝5∶4∶0.5为展开剂，展开，取出，晾干，喷以1％三氯化铝乙醇溶液，置365nm紫外光灯下检视；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。
检查：应符合片剂项下有关的各规定(中国药典一部附录ID)。
含量测定
(1)总黄酮
对照品溶液的制备：精密称取异鼠李素对照品，加无水乙醇制成每1ml含异鼠李素20ug的溶液，即得。
标准曲线的制备：精密量取对照品溶液1、2、3、4、5、6ml，分别置10ml量瓶中，加1％三氯化铝无水乙醇溶液1.0ml，用无水乙醇稀释至刻度，摇匀，放置10分钟，以相应的试剂为空白，照紫外-可见分光光度法(中国药典2005年版一部附录VA)，在430nm的波长处测定吸光度，以吸光度为纵坐标，浓度为横坐标，绘制标准曲线。
测定法：取本片剂20片，除去包衣，精密称定，研细，取0.1g，精密称定，置具塞锥形瓶中，加无水乙醇适量，于80℃水浴中加热回流15分钟，放冷，移置100ml量瓶中，用无水乙醇稀释至刻度，摇匀，滤过，弃去初滤液，精密量取续滤液10ml，置25ml量瓶中，用无水乙醇稀释至刻度，摇匀，精密量取3ml，置10ml量瓶中，加1％三氯化铝无水乙醇溶液1.0ml，用无水乙醇稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液；另取未加显色剂的同样量供试品溶液作空白，照标准曲线制备项下的方法，自“放置10分钟”起，依法测定吸光度，从标准曲线中读出供试品中异鼠李素的重量(ug)，计算，即得。
本片剂每片含醋柳黄酮以异鼠李素(C16H12O7)计，应为标示量的90.0％～110.0％。
本片剂每片含总黄酮(以异鼠李素计)①5mg、②10mg。
(2)槲皮素、异鼠李素、山柰素照高效液相色谱法(中国药典2005年版一部附录VID)测定：
色谱柱为C18柱，流速为1ml/s，柱温为35℃，以甲醇∶0.4％磷酸＝50∶50为流动相；检测波长为370nm；理论塔板数按异鼠李素峰计算应不低于3000。
对照品溶液的制备：精密称取以P2O5为干燥剂减压干燥12小时以上异鼠李素、山柰素、120℃干燥4小时的槲皮素对照品适量，加甲醇制成每1ml分别含异鼠李素20ug、山柰素2ug、槲皮素25ug的混合溶液，即得。
供试品溶液的制备：取本品20片，除去包衣，精密称定，研细，取适量(相当于总黄酮10mg)，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇25ml，称定重量，超声处理(功率135W，频率59kHz)30分钟，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，弃去初滤液，精密量取续滤液5ml，置具塞锥形瓶中，加甲醇15ml，盐酸(1→2)5ml，置水浴中加热回流30分钟，迅速冷却，转移至50ml量瓶中，用甲醇稀释至刻度，摇匀，用微孔滤膜(0.45um)滤过，取续滤液，即得。
测定法：分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10ul，注入液相色谱仪，测定，即得。
本片剂每片含槲皮素(C15H10O7)、异鼠李素(C16H12O7)、山柰素(C15H10O6)的总量不少于总黄酮标示量的80.0％；
【功能与主治】补益心气，化瘀通脉，消痰运脾。用于心气虚弱，心脉瘀阻，痰湿困脾所致心慌、心悸、心痛，气短胸闷，血脉不畅，咳累等症。
【用法与用量】口服，一次10mg，一日3次，三个月为一疗程。
【规格】每片含总黄酮(以异鼠李素计)①5mg②10mg    
【贮臧】密封，置干燥处。
实施例二：所述胶囊剂质量控制方法包括
性状：内容物为浅黄褐色至灰褐色的颗粒及粉末；气微，味微苦。
鉴别：取本胶囊剂内容物5mg或10mg，加乙醇5ml或10ml，超声处理5分钟，制成1mg/ml的溶液，滤过，滤液作为供试品溶液；另取槲皮素和异鼠李素对照品，加乙醇制成每1ml各含1mg的混合溶液，作为对照品溶液；照中国药典2005年版一部附录VIB薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各1～2ul，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以甲苯∶乙酸乙酯∶甲酸＝5∶4∶0.5为展开剂，展开，取出，晾干，喷以3％三氯化铝乙醇溶液，置365nm紫外光灯下检视；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。
检查：应符合胶囊剂项下有关规定(中国药典2005年版一部附录IL)。。
含量测定
(1)总黄酮
对照品溶液的制备：精密称取异鼠李素对照品，加无水乙醇制成每1ml含异鼠李素20ug的溶液，即得；
标准曲线的制备：精密量取对照品溶液1、2、3、4、5、6ml，分别置10ml量瓶中，加3％三氯化铝无水乙醇溶液1.0ml，用无水乙醇稀释至刻度，摇匀，放置10分钟，以相应的试剂为空白，照紫外-可见分光光度法(中国药典2005年版一部附录VA)，在430nm的波长处测定吸光度，以吸光度为纵坐标，浓度为横坐标，绘制标准曲线。
测定法：取本胶囊剂10～20粒内容物，精密称定，研细，混匀，取0.1g，精密称定，置具塞锥形瓶中，加无水乙醇适量，于80℃水浴中加热回流15分钟，放冷，移置100ml量瓶中，用无水乙醇稀释至刻度，摇匀，滤过，弃去初滤液，精密量取续滤液10ml，置25ml量瓶中，用无水乙醇稀释至刻度，摇匀，精密量取3ml，置10ml量瓶中，加3％三氯化铝无水乙醇溶液1.0ml，用无水乙醇稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液；另取未加显色剂的同样量供试品溶液作空白，照标准曲线制备项下的方法，自“放置10分钟”起，依法测定吸光度，从标准曲线中读出供试品中异鼠李素的重量(ug)，计算，即得；
本胶囊剂含醋柳黄酮以异鼠李素(C16H12O7)计，应为标示量的90.0％～110.0％。
本胶囊剂每粒含黄酮(以异鼠李素计)①5mg、②10mg。
(2)槲皮素、异鼠李素、山柰素照高效液相色谱法(中国药典2005年版一部附录VID)测定。
色谱柱为C18柱，流速为1ml/s，柱温为35℃，以甲醇∶0.4％磷酸＝50∶50为流动相；检测波长为370nm。理论塔板数按异鼠李素峰计算应不低于3000。
对照品溶液的制备：精密称取以P2O5为干燥剂减压干燥12小时以上异鼠李素、山柰素、120℃干燥4小时的槲皮素对照品适量，加甲醇制成每1ml分别含异鼠李素20ug、山柰素2ug、槲皮素25ug的混合溶液，即得；
供试品溶液的制备：取总黄酮含量测定项下内容物适量(相当于总黄酮10mg)，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇25ml，称定重量，超声处理(功率135W，频率59kHz)30分钟，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，弃去初滤液，精密量取续滤液5ml，置具塞锥形瓶中，加甲醇15ml，盐酸(1→2)5ml，置水浴中加热回流30分钟，迅速冷却，转移至50ml量瓶中，用甲醇稀释至刻度，摇匀，用微孔滤膜(0.45um)滤过，取续滤液，即得。
测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10ul，注入液相色谱仪，测定，即得。
本胶囊剂每粒含槲皮素(C15H10O7)、异鼠李素(C16H12O7)、山柰素(C15H10O6)的总量不少于总黄酮标示量的80.0％。
实施例三：本软胶囊剂质量控制方法包括
性状：内容物为含有少量悬浮固体浸膏的黄色油状液体；气微，味微苦。
鉴别：取本胶囊剂内容物5mg或10mg，加乙醇5ml或10ml，超声处理5分钟，制成1mg/ml的溶液，滤过，滤液作为供试品溶液；另取槲皮素和异鼠李素对照品，加乙醇制成每1ml各含1mg的混合溶液，作为对照品溶液；照中国药典2005年版一部附录VIB薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各1～2ul，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以甲苯∶乙酸乙酯∶甲酸＝5∶4∶0.5为展开剂，展开，取出，晾干，喷以3％三氯化铝乙醇溶液，置365nm紫外光灯下检视；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。
检查：应符合胶囊剂项下有关规定(中国药典2005年版一部附录IL)。
含量测定
(1)总黄酮
对照品溶液的制备：精密称取异鼠李素对照品，加无水乙醇制成每1ml含异鼠李素20ug的溶液，即得；
标准曲线的制备：精密量取对照品溶液1、2、3、4、5、6ml，分别置10ml量瓶中，加3％三氯化铝无水乙醇溶液1.0ml，用无水乙醇稀释至刻度，摇匀，放置10分钟，以相应的试剂为空白，照紫外-可见分光光度法(中国药典2005年版一部附录VA)，在430nm的波长处测定吸光度，以吸光度为纵坐标，浓度为横坐标，绘制标准曲线。
测定法：取本制剂10～20粒内容物，精密称定，混匀，取0.1g，精密称定，置具塞锥形瓶中，加无水乙醇适量，于80℃水浴中加热回流15分钟，放冷，移置100ml量瓶中，用无水乙醇稀释至刻度，摇匀，滤过，弃去初滤液，精密量取续滤液10ml，置25ml量瓶中，用无水乙醇稀释至刻度，摇匀，精密量取3ml，置10ml量瓶中，加3％三氯化铝无水乙醇溶液1.0ml，用无水乙醇稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液；另取未加显色剂的同样量供试品溶液作空白，照标准曲线制备项下的方法，自“放置10分钟”起，依法测定吸光度，从标准曲线中读出供试品中异鼠李素的重量(ug)，计算，即得；
本软胶囊剂含醋柳黄酮以异鼠李素(C16H12O7)计，应为标示量的90.0％～110.0％。
本软胶囊剂每粒含黄酮(以异鼠李素计)①5mg、②10mg。
(2)槲皮素、异鼠李素、山柰素照高效液相色谱法(中国药典2005年版一部附录VID)测定。
色谱柱为C18柱，流速为1ml/s，柱温为35℃，以甲醇∶0.4％磷酸＝50∶50为流动相；检测波长为370nm；理论塔板数按异鼠李素峰计算应不低于3000。
对照品溶液的制备：精密称取以P2O5为干燥剂减压干燥12小时以上异鼠李素、山柰素、120℃干燥4小时的槲皮素对照品适量，加甲醇制成每1ml分别含异鼠李素20ug、山柰素2ug、槲皮素25ug的混合溶液，即得；
供试品溶液的制备：取总黄酮测定项下内容物适量(相当于总黄酮10mg)，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇25ml，称定重量，超声处理(功率135W，频率59kHz)30分钟，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，弃去初滤液，精密量取续滤液5ml，置具塞锥形瓶中，加甲醇15ml，盐酸(1→2)5ml，置水浴中加热回流30分钟，迅速冷却，转移至50ml量瓶中，用甲醇稀释至刻度，摇匀，用微孔滤膜(0.45um)滤过，取续滤液，即得。
测定法：分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10ul，注入液相色谱仪，测定，即得。
本软胶囊剂每粒含槲皮素(C15H10O7)、异鼠李素(C16H12O7)、山柰素(C15H10O6)的总量不少于总黄酮标示量的80.0％。
实施例四：本滴丸剂质量控制方法包括
性状：内容物为浅黄褐色至灰褐色的颗粒及粉末；气微，味微苦。
鉴别：取本滴丸剂内容物5mg或10mg，加乙醇5ml或10ml，超声处理5分钟，制成1mg/ml的溶液，滤过，滤液作为供试品溶液；另取槲皮素和异鼠李素对照品，加乙醇制成每1ml各含1mg的混合溶液，作为对照品溶液；照中国药典2005年版一部附录VIB薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各1～2ul，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以甲苯∶乙酸乙酯∶甲酸＝5∶4∶0.5为展开剂，展开，取出，晾干，喷以1％三氯化铝乙醇溶液，置365nm紫外光灯下检视；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。
检查：应符合滴丸剂项下有关规定(中国药典2005年版一部附录IK)。
含量测定
(1)总黄酮
对照品溶液的制备：精密称取异鼠李素对照品，加无水乙醇制成每1ml含异鼠李素20ug的溶液，即得；
标准曲线的制备：精密量取对照品溶液1、2、3、4、5、6ml，分别置10ml量瓶中，加1％三氯化铝无水乙醇溶液1.0ml，用无水乙醇稀释至刻度，摇匀，放置10分钟，以相应的试剂为空白，照紫外-可见分光光度法(中国药典2005年版一部附录VA)，在430nm的波长处测定吸光度，以吸光度为纵坐标，浓度为横坐标，绘制标准曲线。
测定法：本制剂10～20粒内容物，精密称定，混匀，取0.1g，精密称定，置具塞锥形瓶中，加无水乙醇适量，于80℃水浴中加热回流15分钟，放冷，移置100ml量瓶中，用无水乙醇稀释至刻度，摇匀，滤过，弃去初滤液，精密量取续滤液10ml，置25ml量瓶中，用无水乙醇稀释至刻度，摇匀，精密量取3ml，置10ml量瓶中，加1％三氯化铝无水乙醇溶液1.0ml，用无水乙醇稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液；另取未加显色剂的同样量供试品溶液作空白，照标准曲线制备项下的方法，自“放置10分钟”起，依法测定吸光度，从标准曲线中读出供试品中异鼠李素的重量(ug)，计算，即得；
本滴丸剂含醋柳黄酮以异鼠李素(C16H12O7)计，应为标示量的90.0％～110.0％。
本滴丸每丸含黄酮(以异鼠李素计)①5mg、②10mg。
(2)槲皮素、异鼠李素、山柰素照高效液相色谱法(中国药典一部附录VID)测定。
色谱柱为C18柱，流速为1ml/s，柱温为35℃，以甲醇∶0.4％磷酸＝50∶50为流动相；检测波长为370nm。理论塔板数按异鼠李素峰计算应不低于3000。
对照品溶液的制备：精密称取以P2O5为干燥剂减压干燥12小时以上异鼠李素、山柰素、120℃干燥4小时的槲皮素对照品适量，加甲醇制成每1ml分别含异鼠李素20ug、山柰素2ug、槲皮素25ug的混合溶液，即得；
供试品溶液的制备：取总黄酮测定项下的内容物适量(相当于总黄酮10mg)，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇25ml，称定重量，超声处理(功率135W，频率59kHz)30分钟，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，弃去初滤液，精密量取续滤液5ml，置具塞锥形瓶中，加甲醇15ml，盐酸(1→2)5ml，置水浴中加热回流30分钟，迅速冷却，转移至50ml量瓶中，用甲醇稀释至刻度，摇匀，用微孔滤膜(0.45um)滤过，取续滤液，即得。
测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10ul，注入液相色谱仪，测定，即得。本滴丸剂每丸含槲皮素(C15H10O7)、异鼠李素(C16H12O7)、山柰素(C15H10O6)的总量不少于总黄酮标示量的80.0％。
本分案申请的原案申请号为200610022691.0，申请日为2006年12月29日，发明名称为《心达康制剂的质量控制方法》。