本发明涉及通式(I)所示新型法呢基转移酶抑制剂、其可能的盐 类、其制备方法和含有它们的药物组合物。

对法呢基转移酶的抑制作用以及因此而产生的对蛋白质Ras的法呢 基化反应的抑制作用会阻止突变蛋白质将正常细胞转变为癌细胞。

基因Ras的C-末端序列包含图案“CAAX”或“Cys-Aaa1- Aaa2-Xaa”，其中Aaa代表脂族氨基酸，Xaa代表任何一种氨基酸。

众所周知，具有CAAX序列的四肽能够抑制蛋白质Ras的法呢基 化。例如，PCT WO91/16340与EP0461869描述了法呢基转移酶的肽抑 制剂Cys-Aaa1-Aaa2-Xaa，它们特别地是以在约10-6或10-7M浓度下 呈现其抑制活性的肽Cys-Val-Len-Ser，Cys-Val-Ile-Met与Cys-Val-Met 为代表的。

业已发现，作为本发明的主题，通式(I)所示的肽在约10-8或 10-9的浓度下表现出抑制活性(IC50)。 在通式(I)中， R1代表通式Y-S-A1-所示基团，其中Y代表氢原子，或氨基酸的 其余部分或脂肪酸的残基或烷基或烷氧羰基或其中R4代表C1-4烷基、 视需要而定被苯基或下列通式所示基团取代的基团R4-S- 式中A1、X1、R1′、R2、R2′与R如下定义，A1代表直链或支链 C1-4亚烷基，在基团＞C(X1)(Y1)的α位可视需要而定被下列基 团取代：氨基，直链或支链C1-6烷基氨基，其中每一烷基部分均为C1-6 烷基的直链或支链二烷基氨基，直链或支链C1-6链烷酰氨基或其中 烷基部分为直链或支链C1-6烷基的烷氧羰基氨基， X1和Y1分别代表氢原子或者二者连同与其结合的碳原子共同形成基团 ＞C＝O， R1′代表氢原子或甲基， R2代表可视具体情况而定被羟基、C1-4烷氧基、巯基、C1-4烷硫基、 C1-4烷基亚磺酰基或C1-4烷基磺酰基取代的C1-6直链或支链烷基、 链烯基或炔基，当R2代表被羟基取代的烷基时，R2可以与α位羧基形 成内酯， R2′代表氢原子或甲基， R代表氢原子或可被下列基团取代的C1-6烷基：C1-4烷氧基、C1-4 烷基硫、C1-4烷基亚磺酰、C1-4烷基磺酰、苯基、苯氧基、苯硫基、 苯基亚磺酰、苯磺酰、C1-4烷基氨基、其中每一个烷基均含1-4个碳 原子的二烷基氨基，或者可被一个或多个选自氢原子和烷基、烷氧基、 烷硫基或链烷酰基的原子或基团取代的苯基， 条件是基团 处于萘核的5或6位。

更具体地， R1代表式Y-S-A1-所示基团，其中Y代表氢原子或赖氨酸或含多 达20个碳原子的脂肪酸的其余部分，A1代表可被氨基或C1-4烷基氨基 取代的亚乙基或亚丙基， X1和Y1各自代表氢原子或者连同与其相结合的碳原子共同形成基团＞ C＝O， R1′代表氢原子或甲基， R2代表可被羟基、甲氧基、巯基、甲硫基、甲基亚磺酰基或甲基磺酰基 取代的C1-4烷基， R2′代表氢原子或甲基， R代表氢原子或可被烷氧基取代的C1-4烷基，或苯基。

进一步更具体地， R1代表式Y-S-A1-所示基团，其中Y代表氢原子，A1代表 可被氨基取代的亚乙基或亚丙基， X1和Y1分别代表氢原子或连同与其结合的碳原子共同形成基团＞ C＝O， R1′代表氢原子， R2代表可被羟基、甲氧基、巯基或甲硫基取代的甲基、乙基、丙 基或丁基， R2′代表氢原子， R2代表氢原子或C1-4烷基。

作为尤其令人感兴趣的通式I所示化合物，其中R1代表2- 巯基乙基或1-氨基-2-巯基乙基，X1和Y1分别代表氢原子或 连同与其结合的碳原子共同形成基团＞C＝O，R1′代表氢原子， R2代表正丁基或2-甲硫基乙基，R2′代表氢原子，R代表氢原 子或甲基。

本发明还涉及通式(I)的产物的立体异构形式。由 R1C(X1)(Y1)(NR1′)和R3CH(NR3′)CO-OH表示的 其余氨基酸优选具有天然氨基酸的构型。

本发明还涉及通式(I)的产物的有机或无机盐。

本发明的新型产物可以通过采用由更具体地于肽化学中使用 的方法派生的已知方法来制备以便嵌接分子链。

一般地，在通式(I)所示的产物中，X1与Y1连同与其结合 的碳原子共同形成基团＞C＝O，该产物由与通式(III)所示氨 基酸缩合的5-硝基或6-硝基萘-1-羧酸得到： 式中R2与R2′如上所述，R′代表可被苯基取代的C1-4烷基， 优选为叔丁基， 上述制备过程在诸如羟基苯并三唑和二环己基碳化二亚胺或N′ -(3-二甲氨基丙基)-N-乙基碳化二亚胺的盐酸盐之类缩合 剂以及诸如三乙胺之类碱存在下在诸如二甲基甲酰胺之类有机溶 剂中进行以便得到通式IV所示产物 式中R2、R2′与R′如上定义， 该产物优选借助氯化亚锡或通过氢气在催化剂如钯存在下被还原 为通式(V)所示产物 式中R2、R2′与R′如上所述， 通式(VI)所示化合物与其缩合 式中R1如上所定义，X1与Y1连同与其结合的碳原子共同形成基 团＞C＝O，条件是R1上的氨基与巯基官能团可以由诸如适用于巯 基官能团的三苯甲基或适用于氨基官能团的叔丁氧羰基之类适宜 的保护基得到保护， 该过程优选在卤代甲酸烷基酯(氯代甲酸异丁酯)和有机碱(N- 甲基吗啉)存在下于惰性有机溶剂(四氢呋喃)中进行以便得到通 式(VII)所示产物： 式中R1、R1′、X1、Y1、R2、R2′和R′如上定义，其中保 护基借助三氟乙酸在乙二硫醇或三乙基硅烷存在下被氢原子取 代，这些保护基为三苯甲基、叔丁氧羰基或叔丁基，以便得到其中 X1与Y1连同与其结合的碳原子共同形成基团＞C＝O的产物(I)。

一般情况下，其中X1与Y1分别代表氢原子的化合物(I)可 以通过其中R1如上限定的通式(VIII)所示醛R1-CHO与化合 物(V)在还原剂如氰基硼氢化钠、硼氢化钠、三乙酸基硼氢化钠 或氢存在下，在催化剂存在下相互作用来获得，条件是R1具有的 氨基与巯基官能团可以由诸如适用于巯基的三苯甲基或适用于氨 基的叔丁氧羰基之类适宜保护基得到保护。一般地，该反应在有机 溶剂例如醇如甲醇中进行，该溶剂可视具体情况而定与另一种有机 溶剂例如醚如四氢呋喃结合使用。特别有利的是在无水介质中进行 操作。

一旦完成胺与醛的缩合过程，便可以通过应用常规技术用氢原 子替代保护基。因此，可以借助三氟乙酸在乙二硫醇或三乙基硅烷 存在下用氢原子代替Boc或三苯甲基或叔丁基保护基。

当通式(I)中的R2与α位的羧基官能团形成内酯时，在碱 性介质中对相应的化合物进行处理可以得到其中R2为被羟基取代 的烷基的化合物(I)。一般地，一旦pH高于7便发生内酯的开 环反应。特别有利的是在无机碱(碳酸钠、氢氧化钾)的存在下于 稀酒精介质如水-甲醇混合物中进行。

其中R代表氢原子的化合物(I)可以通过其中R代表可被 取代的烷基或苯基的化合物(I)发生皂化反应而获得。

其中R代表可被取代的烷基或苯基的上述化合物(I)可以通 过其中R代表氢原子的化合物(I)在不触及分子中其余部分的酯 化反应的通常条件下进行酯化反应来获得。

可以按照T.NAKAYAMA等人在Chem.Pharm.Bull.32，3968 (1984)中描述的方法制备5-硝基或6-硝基萘-1-羧酸。

可以按照欧洲专利申请EP 0618221所述方法制备S-三苯甲 基-N-叔丁氧羰基半胱氨酸醛。

可以按照诸如色谱分离之类的常规方法提纯化合物(I)。

下列实施例描述本发明化合物的制备方法。

实施例1

按照T.NAKAYAMA等人的Chem.Pharm.Bull.32，3968(1984) 所述方法制备5-硝基萘-1-羧酸。

在由2.17g 5-硝基萘-1-羧酸与30cm3二氯甲烷和13cm3 二甲基甲酰胺形成的溶液中，加入2g(L)-蛋氨酸甲酯盐酸盐、 1.35g 1-羟基-苯并三唑、1.4cm3三乙胺和2.06g二环己基碳化 二亚胺。在约20℃下将反应混合物搅拌20小时，随后用烧结玻璃 过滤，用5cm3二甲基甲酰胺洗涤2次，随后减压浓缩至于。将所 得到的残余物溶于100cm3二氯甲烷之中，先用10％(P/V)碳酸 氢钠水溶液、随后用10％乙酸水溶液、最后用饱和氯化钠水溶液 洗涤。用MgSO4干燥有机相，过滤，减压浓缩至干。得到3.4g棕 色固体，在硅胶上进行色谱提纯〔洗脱剂：二氯甲烷-乙酸乙酯 (95/5体积/体积)〕。因此得到2.6g N-〔(5-硝基萘基)- 1-羰基〕-L-蛋氨酸甲酯固体，其特征如下所示： -质子核磁共振谱                                (300 MHz；(CD3)2SO d6；δ

  ppm)：2，00～2，25(mt，2H：CH2)；2，11(s，3H：SCH3)；2，65(mt，2H：

SCH2)；3，77(s，3H：OCH3)；4，70(mt，1H：CHN)；7，82和7，89(2t，J＝8，5 Hz，

2H：3位H和7位H)；7，85(d，J＝8，5 Hz，1H：2位H)；8，36(d，J＝8，5 Hz，1H：

4位H)；8，43(d，J＝8，5 Hz，1H：8位H)；8，57(d，J＝8，5 Hz，1H：6位H)；9，17

(d，J＝7，5 Hz，1H：CONH).

向由N-〔(5-硝基萘基)-1-羰基〕-L-蛋氨酸甲 酯1.09g与23m3乙酸乙酯和6cm3乙醇组成的溶液中加入3.39g氯 化亚锡(II)二水合物。在约70℃将反应混合物搅拌30分钟，将 其倾入冰中，通过加入5％(P/V)碳酸氢钠水溶液将pH值调至 约7-8。在配有C盐的烧结玻璃上过滤所得到的混合物。通过倾 析分离有机相，用50cm3乙酸乙酯萃取水相3次。合并有机相，用 MgSO4干燥，过滤并减压浓缩至干。因此得到油状N-〔(5- 氨基萘基)-1-羰基〕-L-蛋氨酸甲酯0.9g，其特征在于：

-质子核磁共振谱

                                                      (200 MHz，(CD3)2SO d6

                                加入数滴CD3COOD d4，δppm)：1，95～2，25(mt，

2H：CH2)；2，09(s，3H：SCH3)；2，62(mt，2H：SCH2)；3，71(s，3H：OCH3)；4，63

(mt，1H：CHCOO)；6，71(d，J＝8，5 Hz，1H：6位)；7，15～7，60(mt，4H：

芳族H)；8，18(d，J＝8，5 Hz，1H：Hen 8)；8，84(d残基，J＝7，5 Hz，1H：

CONH).

向由1.25g N-叔丁氧羰基氨基-S-三苯甲基-L-半胱氨 酸与0.3cm3 N-甲基吗啉和25cm3四氢呋喃组成的约-15℃溶液 中加入0.3Scm3氯甲酸异丁酯，随后加入由0.9gN-〔(5-氨基 萘基)-1-羰基〕-L-蛋氨酸甲酯与20cm3四氢呋喃形成的溶 液。在约20℃将反应混合物搅拌2天，随后过滤并减压浓缩至干。 将所得到的残余物溶于50cm3乙酸乙酯，先用蒸馏水、随后用 0.5NNaHCO3水溶液、10％(p/v)柠檬酸水溶液、最后用蒸馏 水洗涤。用MgSO4干燥有机相，过滤并在减压下浓缩至干。因此， 得到2g黄色烤蛋白状物质，在氧化硅上通过色谱提纯〔洗提剂： CH2Cl2-乙酸乙酯(90-10，体积)〕得到1.5g固状N-〔5 -(2(R)-叔丁氧羰基氨基-3-三苯甲硫基丙酰氨基)-萘基- 1-羰基〕-L-蛋氨酸甲酯，其特征在于： -质子核磁共振谱：

                  (300 MHz，(CD3)2SOd6，δ ppm)：1，43(s，9H：C(CH3)3)；2，00～2，25(mt，4H：CH2和CH2SAr)；2，08 (s，3H：SCH3)；2，60(mt，2H：SCH2)；3，74(s，3H：OCH3)；4，32(mt，1H：NCH)； 4，64(mt，1H：CHCOO)；7，20～7，80(mt，20H：芳族H和CONH)； 8，00～8，15(mt，2H：8位H和6位H)；9，02(d，J＝8 Hz，1H：CONH)；10，08(s， 1H：ArNH).

向由0.45g N-〔5-(2(R)-叔丁氧羰基氨基-3-三苯甲 硫基丙酰氨基)萘基-1-羰基〕-L-蛋氨酸甲酯与1cm3水和 10cm3四氢呋喃组成的溶液中于约5℃加入0.061g二水合氧化锂。 在约20℃将溶液搅拌4小时，随后减压浓缩。得到0.47g烤蛋白状 N-〔5-(2(R)-叔丁氧羰基氨基-3-三苯甲硫基丙酰氨基) 萘基-1-羰基〕-L-蛋氨酸。

向由0.44g N-〔5-(2(R)-叔丁氧羰基氨基-3-三苯甲 硫基丙酰氨基)萘基-1-羰基〕-L-蛋氨酸与2cm3水和2cm3 乙二硫醇组成的混合物于约5℃加入2cm3三氟乙酸。在约20℃搅 拌2小时，随后滴加20cm3三氟乙酸。将该反应混合物搅拌2小时。 过滤并减压浓缩。用30cm3乙醚研磨所得到的残余物2次，随后减 压干燥。因此得到0.23g白色固状N-〔5-(2(R)-氨基-3- 巯基丙酰氨基)萘基-1-羰基〕-L-蛋氨酸的三氟乙酸盐，其 特征在于：

-质子核磁共振谱

                                           (200 MHz，(CD3)2SO d6，δ

ppm)：1，90～2，25(mt，2H：CH2)；2，10(s，3H：SCH3)；2，65(mt，2H：

SCH2)；3，15(d，J＝7 Hz，2H：SCH2)；4，28(mt，1H：NCH)；4，61(mt，1H：

CHCOO)；7，45～7，80(mt，4H：芳香H)；8，10～8，30(mt，2H：8位上的

H和6位上的H)；8，90(d，J＝8 Hz，1H：CONH)；10，20(mf，1H：ArNHCO)  

      元素分析：C19H23N3O4S2，1，5CF3CO2H：

          计算值(％)：C＝45，78；H＝4，33；N＝7，45；S＝11，37

          实测值(％)：C＝45，92；H＝4，05；N＝7，54；S＝11，66.

实施例2

按照实施例1中制备N-〔5-(2(R)-氨基-3-巯基丙 酰氨基)萘基-1-羰基〕-L-蛋氨酸的三氟乙酸盐的方法进行 操作，不同的是以N-〔5-(2(R)-叔丁氧羰基氨基-3-三苯 甲硫基丙酰氨基)萘基-1-羰基〕-L-蛋氨酸甲酯0.52g为原 料，得到0.17g N-〔5-(2(R)-氨基-3-巯基丙酰氨基)萘 基-1-羰基〕-L-蛋氨酸甲酯的三氟乙酸盐，其特征如下：

-质子的核磁共振谱：                             (300 MHz，(CD3)2SO d6，δ

ppm)：2，08(mt，2H：CH2)；2，10(s，3H：SCH3)；2，64(mt，2H：CH2S)；3，21

(d，J＝6 Hz，2H：SCH2)；3，78(s，3H：COOCH3)；4，39(t，J＝6 Hz，1H：CHN)；

4，69(mt，1H：CHCOO)；7，60～7，80(mt，4H：H2-H3-H6和H7)；8，13(d，

J＝8，5 Hz，1H：H8)；8，25(dd，J＝7，5和2，5 Hz，1H：H4)；8，00～8，60(mf，

2H：NH2)；9，05(d，J＝7.5 Hz，1H：ArCONH)；10，60(mf，1H：ArNHCO).

        元素分析：C20H25N3O4S2，1，33CF3CO2H：

        计算值(％)：   C＝46，33；H＝4，52；N＝7，15；S＝10，91

        实测值(％)：   C＝46，2；H＝4，5；N＝7，3；S＝11，4

实施例3

向由0.55g N〔(5-氨基萘基)-1-羰基〕-L-蛋氨酸 甲酯和30cm3甲醇组成的溶液中加入0.74g按照欧洲专利申请EP 0618 221制备的S-三苯甲基-N-叔丁氧羰基半胱氨酸醛 (Cysteinal)、0.1cm3浓乙酸和分子筛(3A)。在约20℃搅拌 20小时，随后加入0.32g氰基硼氢化钠。在约20℃搅拌24小时， 在配有C盐的烧结玻璃上过滤。用甲醇洗涤烧结玻璃。滤液经减压 浓缩后形成的糊状物在硅胶上被色谱提纯〔洗提剂：二氯甲烷-乙 酸乙酯(90-10，体积)〕。因此得到黄色固状N-〔5-(2(R) -叔丁氧羰基氨基-3-三苯甲硫基丙氨基)萘基-1-羰基〕- L-蛋氨酸甲酯0.3g，其特征在于：

-质子核磁共振谱

                                           (300 MHz，(CD3)2SO d6，δ

ppm)：1，42(s，9H：C(CH3)3)；2，08(mt，2H：CH2)；2，10(s，3H：SCH3)；

2，25～2，55(mt，2H：CH2S)；2，65(mt，2H：CH2S)；3，00～3，25(mt，2H：

NCH2)；3，75(s，3H：COOCH3)；3，82(mt，1H：NCH)；4，76(mt，1H：CHCOO)；

6，15(mf，1H：ArNH)；6，52(d宽峰，J＝7，5 Hz，1H：芳族H处于胺的

邻位)；7，02(d，J＝8 Hz，1H：OCONH)；7，10～7，60(mt，19H：

芳族H)；8，02(d宽峰J＝8 Hz，1H：芳族H处于酰胺的邻位)；8，92

(d，J＝7，5 Hz，1H：CONH).

向由0.3g N-〔5-(2(R)-叔丁氧羰基氨基-3-三苯甲 硫基丙氨基)萘基-1-羰基〕-L-蛋氨酸甲酯与1cm3水和10cm3 四氢呋喃组成的溶液中于约5℃加入0.04g二水合氧化锂.在约20 ℃将溶液搅拌20小时，随后减压浓缩。得到0.3g烤蛋白状N-〔5 -(2(R)-叔丁氧羰基氨基-3-三苯甲硫基丙氨基)萘基-1- 羰基〕-L-蛋氨酸。

向由0.3g N-〔5-(2(R)-叔丁氧羰基氨基-3-三苯甲 硫基丙氨基)萘基-1-羰基〕-L-蛋氨酸与1.5cm3水和1.5cm3 乙二硫醇组成的混合物于约5℃加入1.5cm3三氟乙酸。于约20℃ 搅拌2小时，随后滴加15cm3三氟乙酸。将该反应混合物搅拌3小 时并减压浓缩。用25cm3乙醚研磨所得到的残余物3次，随后减压 干燥。因此得到0.14g黄色糊状N-〔5-(2(R)-氨基-3-巯 基丙氨基)萘基-1-羰基〕-L-蛋氨酸的三氟乙酸盐，其特征 在于：

-质子核磁共振谱                    (200 MHz，(CD3)2SOd6

            加入几滴      CD3COOD d4，δ ppm)：1，95～2，20(mt，

2H：CH2)；2，10(s，3H：SCH3)；2，50～2，70(mt，2H：CH2S)；2，88(mt，2H：

CH2)；3，30～3，70(mt，3H：NCH2和NCH)；4，59(mt， (mf：残余ArNH)；6，71(d宽峰J＝8 Hz，1H：芳族H处于胺的 邻位)；7，30～7，60(mt，4H：芳族H)；8，26(d宽峰，J＝8，5 Hz，1H： 芳族H处于酰胺的邻位)；8，70(d，J＝9 Hz，1H：(残基CONH)。

元素分析：C19H25N3O3S2，1，25CF3CO2H

    计算值(％)：C＝46，94；H＝4，81；N＝7，64；S＝11，66

    实测值(％)：C＝46，69；H＝4，32；N＝7，46；S＝11，90.

实施例4

按照实施例1中制备N-〔5-(2(R)-氨基-3-巯基丙 氨基)萘基-1-羰基〕-L-蛋氨酸的三氟乙酸盐的方法进行操 作，不同的是以N-〔5-(2(R)-叔丁氧羰基氨基-3-三苯甲 硫基丙氨基)萘基-1-羰基〕-L-蛋氨酸甲酯0.33g为原料， 得到0.05g N-〔5-(2(R)-氨基-3-巯基丙氨基)萘基-1 -羰基〕-L-蛋氨酸甲酯的三氟乙酸盐，其特征如下：

-质子的核磁共振谱：                            (300 MHz，(CD3)2SO d6，δ

  ppm)：2，10(mt，2H：CH2)；2，12(s，3H：SCH3)；2，63(mt，2H：CH2S)；2，92    (mt，2H：CH2S)；3，30～3，70(mt：NCH2CHN)；3，76(s，3H：COOCH3)；4，79    (mt，1H：CHCOO)；6，40(mf，1H：ArNH)；6，72(d，J＝8 Hz，1H：H6)；7，40(t，

J＝8 Hz，1H：H7)；7，52(d，J＝8 Hz，1H：H8)；7，40～7，60(mt，2H：H2 et H

3)；8，13(mf，3H：NH3+CF3COO-)；8，30(d宽峰，J＝8 Hz，1H：H4)；8，92(d，J＝

7，5 Hz，1H：ArCONH).

元素分析：C20H27N3O3S2，1，2CF3CO2H：

计算值(％)：   C＝48，18；H＝5，09；N＝7，52；S＝11，48

实测值(％)：   C＝48，0；H＝5，1；N＝7，7；S＝11，9

实施例5

按照实施例1中制备N-〔(5-硝基萘基)-1-羰基〕- L-蛋氨酸甲酯的方法进行操作，不同的是以1.1g 5-硝基萘-1 -羧酸与L-己氨酸甲酯为原料，得到N-〔(5-硝基萘基)- 1-羰基〕-L-己氨酸甲酯1.3g。

按照实施例1中制备N-〔(5-硝基萘基)-1-羰基〕- L-蛋氨酸甲酯的方法进行操作，不同的是以1.3gN-〔(5-硝 基萘基)-1-羰基〕-L-己氨酸甲酯为原料，得到N-〔(5 -硝基萘基)-1-羰基〕-L-己氨酸甲酯1.2g。

按照实施例3中制备N-〔5-(2(R)-叔丁氧羰基氨基-3 -三苯甲硫基丙氨基)萘基-1-羰基〕-L-蛋氨酸甲酯的方法 进行操作，不同的是以1.4g N-〔(5-氨基萘基)-1-羰基〕 -L-己氨酸甲酯为原料，得到0.67g N-〔5-(2(R)-叔丁氧 羰基氨基-3-三苯甲硫基丙氨基)萘基-1-羰基〕-L-己氨 酸甲酯，其特征如下：

-质子核磁共振谱：                               (200 MHz，(CD3)2SO d6，δ

ppm)：0，91(t，J＝7，5 Hz，3H：CH3)；1，25～1，60(mt，4H：CH2)；1，43(s，

9H：C(CH3)3)；1，80(mt，2H：CH2)；2，20～2，70(mt，2H：CH2S)；3，00～

3，50(mt，2H：NCH2)；3，75(s，3H：COOCH3)；3，82(mt，1H：NCH)；4，50(mt，

1H：CHCOO)；6，10(mf，1H：ArNH)；6，52(d宽峰，J＝7，5 Hz，1H：芳族H处

于胺的邻位)；6，97(d，J＝8，5 Hz，1H：OCONH)；7，00～7，60(mt，19H：

芳族H)；8，05(d宽峰，J＝8 Hz，1H：芳族H处于酰胺的邻位)；

8，80(d，J＝7 Hz，1H：CONH).

            质谱 (DIC)：M/Z＝746(MH+)

按照实施例3中制备N-〔5-(2(R)-叔丁氧羰基氨基-3 -三苯甲硫基丙氨基)萘基-1-羰基〕-L-蛋氨酸的方法进行 操作，不同的是以0.65g N-〔5-(2(R)-叔丁氧羰基氨基-3 -三苯甲硫基丙氨基)萘基-1-羰基〕-L-己氨酸甲酯为原料， 得到0.6gN-〔5-(2(R)-叔丁氧羰基氨基-3-三苯甲硫基 丙氨基)萘基-1-羰基〕-L-己氨酸。

按照实施例3中制备N-〔5-(2(R)-氨基-3-巯基丙 氨基)萘基-1-羰基〕-L-蛋氨酸三氟乙酸盐的方法进行操作， 不同的是以0.6g N-〔(5-(2(R)-叔丁氧羰基氨基-3-三 苯甲硫基丙氨基)萘基-1-羰基〕-L-己氨酸为原料，得到 0.06g N-〔5-(2(R)-氨基-3-巯基丙氨基)萘基-1-羰 基〕-L-己氨酸三氟乙酸盐，其特征如下：

-质子核磁共振谱：                                   (250 MHz，(CD3)2SOd6，δ

ppm)：0，93(t，J＝7，5 Hz，3H：CH3)；1，40(mt，4H：CH2)；1，81(mt，2H：CH2)；

2，91(mt，2H：CH2S)；3，30～3，70(mt，3H：CHN和NCH2)；4，44(mt，1H：

CHCOO)；6，40(mf，1H：ArNH)；6，71(d宽峰，J＝7，5 Hz，1H：芳族H处于胺

的邻位)；7，30～7，60(mt，4H：芳族H)；8，10(mf，2H，：NH2)；

8，30(d宽峰，J＝8 Hz，1H：芳族H处于酰胺的邻位)；8，73(d，J＝7，5 Hz，

1H：CONH)

元素分析：C20H27N3O3S，CF3CO2H

   计算值(％)：C＝52，48；H＝5，60；N＝8，34；S＝6，37

   实测值(％)  C＝51，19；H＝5，46；N＝7，93；S＝6，18

质谱(LSIMS)：M/Z＝390(MH+).

实施例6

按照实施例1中制备N-〔(5-硝基萘基)-1-羰基〕- L-蛋氨酸甲酯的方法进行操作，不同的是以4.7g L-蛋氨酸乙酯 为原料，得到7.35g N-〔(5-硝基萘基)-1-羰基〕-L- 蛋氨酸乙酯，其特征如下：

-质子核磁共振谱：                              (300 MHz，(CD3)2SO d6，δ

ppm)：1，28(t，J＝7，5 Hz，3H：乙基的CH3)；2，08(mt，2H：CH2)；2，11(s，

3H：SCH3)；2，65(mt，2H：CH2S)；4，22(mt，2H：乙基的COOCH2)；4，66(mt，

1H：CHCOO)；7，80 8，00(mt，3H：H2-H3和H7)；8，36(d，J＝7，5 Hz，1H：

H4)；8，46和8，56(2d，J＝8 Hz，1H：H6和H8)；9，17(d，J＝7，5 Hz，1H：

ArCONH).

按照实施例1中制备N-〔(5-氨基萘基)-1-羰基〕- L-蛋氨酸甲酯的方法进行操作，不同的是以1.38g N-〔(5- 硝基萘基)-1-羰基〕-L-蛋氨酸乙酯为原料，得到1.02g N -〔(5-氨基萘基)-1-羰基〕-L-蛋氨酸乙酯，无须进一 步提纯便可用于后续步骤。

按照实施例3中制备N-〔5-(2(R)-叔丁氧羰基氨基-3 -三苯甲硫基丙氨基)-萘基-1-羰基〕-L-蛋氨酸甲酯的方 法进行操作，不同的是以1g N-〔(5-氨基萘基)-1-羰基〕 -L-蛋氨酸乙酯为原料，得到0.94g N-〔5-(2(R)-叔丁氧 羰基氨基-3-三苯甲硫基丙氨基)萘基-1-羰基〕-L-蛋氨 酸乙酯，无须进行其它提纯便可用于后续步骤。

按照实施例3中制备N-〔5-(2(R)-氨基-3-巯基丙 氨基)-萘基-1-羰基〕-L-蛋氨酸的三氟乙酸盐的方法进行 操作，不同的是以0.4g N-〔5-(2-(R)-叔丁氧羰基氨基-3 -三苯甲硫基丙氨基)萘基-1-羰基〕-L-蛋氨酸乙酯为原料， 得到0.033g粉状N-〔5-(2(R)-氨基-3-巯基丙氨基)萘 基-1-羰基〕-L-蛋氨基乙酯，其特征如下所示：

-质子核磁共振谱：                             (400 MHz，(CD3)2SO d6，δ

ppm)：1，30(t，J＝7，5 Hz，3H：乙基的CH3)；2，10(mt，2H：CH2)；2，11(s，

3H：SCH3)；2，65(mt，2H：CH2S)；2，90(AB拆分，J＝14和5 Hz，2H：

CH2S)；3，30～3，70(mt：NCH2CHN)；4，21(mt，2H：乙基的COOCH2)；

4，65(mt，1H：CHCOO)；6，38(mt，1H：ArNH)；6，72(d，J＝8 Hz，1H：H6)；7，40

(t，J＝8 Hz，1H：H7)；7，52(d，J＝8 Hz，1H：H8)；7，40～7，60(mt，2H：H2和

H3)；8，30(d宽峰J＝8 Hz，1H：H4)；8，90(d，J＝7，5 Hz，1H：ArCONH).

-ana  元素分析：C21H29N3O3S2，CF3CO2H：

      计算值(％)：    C＝50，26；H＝5，5；N＝7，65；S＝11，67

      实测值(％)：    C＝49，9；H＝5，8；N＝7，7；S＝11，7

实施例7

向由5.36g N-叔丁氧羰基-L-蛋氨酸与100cm3乙醚组成 的溶液中加入2.68g 5-茚满醇(indanol)，随后加入0.24g4- 二甲氨基哌啶和4.96g1，3-二环己基碳化二亚胺。在约20℃搅拌该 反应混合物直至酯化反应进行完全为止。随后用烧结玻璃进行过 滤，用100cm3水洗涤3次、再用100cm3 5％(V/V)乙酸水溶液 洗涤，随后用100cm3水洗，最后用100cm310％(P/V)NaHCO3水溶液洗涤2次。用MgSO4干燥有机相，过滤并进行减压浓缩至 干。得到4.03g无须进行其它提纯便可以用于后续步骤的N-叔丁 氧羰基-L-蛋氨酸5-茚满醇酯。

向由0.96g N-叔丁氧羰基-L-蛋氨酸5-茚满醇酯在 25cm3CH2Cl2中形成的溶液中加入5cm3三氟乙酸，在约20℃搅拌 3小时，脱除溶剂并在二异丙醚中结晶后，得到0.5g无须其它提纯 便可用于后续步骤的L-蛋氨酸的5-茚满醇酯。

按照实施例1中制备N-〔(5-硝基萘基)-1-羰基〕- L-蛋氨酸甲酯的方法进行操作，不同的是以0.5g L-蛋氨酸5-茚 满醇酯为原料，得到0.28g N-〔(5-硝基萘基)-1-羰基〕 -L-蛋氨酸5-茚满醇酯，其特征在于：   -质子核磁共振谱：                            (250 MHz，(CD3)2SO d6，δ

ppm)：2，10(mt，2H：茚满基的CH2)；2，14(s，3H：SCH3)；2，24(mt，2H：

CH2)；2，73(mt，2H：CH2S)；2，87和2，90(2t，J＝7，5 Hz，2H ：茚满基的

ArCH2)；4，88(mt，1H：CHCOO)；6，95(dd，J＝9 et 2 Hz，1H：茚满基

的H6)；7，06(d，J＝2 Hz，1H：茚满基的H4)；7，30(d，J＝9 Hz，1H：茚满基

的H7)；7，76(t，J＝8 Hz，1H：H7)；7，85～8，00(mt，2H：H2和H3)；8，35

和8，60(2d，J＝8 Hz，1H ：H6和H8)；8，43(dd，J＝7，5和3 Hz，1H：H4)；

9，36(d，J＝7，5 Hz，1H：ArCONH).

按照实施例1中制备N-〔(5-硝基萘基)-1-羰基〕- L-蛋氨酸甲酯的方法进行操作，不同的是以4.64g N-〔(5- 硝基萘基)-1-羰基〕-L-蛋氨酸5-茚满醇酯为原料，得到 3.40g N-〔(5-硝基萘基)-1-羰基〕-L-蛋氨酸5-茚 满醇酯，其特征在于：

-质子核磁共振谱：                        (200 MHz，(CD3)2SO d6，δ

ppm)：2，07(mt，2H：茚满基的CH2)；2，14(s，3H：SCH3)；2，10～2，30

(mt，2H：CH2)；2，72(mt，2H：CH2S)；2，88和2，94(2t，J＝7 Hz，2H

茚满基的ArCH2)；4，82(mt，1H：CHCOO)；5，81(s宽峰，2H：NH2)；6，72(d

宽峰，J＝7，5 Hz，1H：H6)；6，94(dd，J＝8和2 Hz，1H：茚满基的H6)；7，05

(d，J＝2 Hz，1H：茚满基的H4)；7，22(t，J＝7，5 Hz，1H：H7)；7，30(d，J＝8

Hz，1H：茚满基的H7)；7，35～7，55(mt，3H：H2-H3和H8)；8，20(d

宽峰，J＝8 Hz，1H：H4)；9，08(d，J＝7，5 Hz，1H：ArCONH).

按照实施例3中制备N〔5-(2-(R)-叔丁氧羰基氨基-3 -三苯甲硫基丙氨基)萘基-1-羰基〕-L-蛋氨酸甲酯的方法 进行操作，不同的是以0.22g N-〔(5-氨基萘基)-1-羰基〕 -L-蛋氨酸5-茚满醇酯为原料，得到0.38g N-〔5-  (2- (R)-叔丁氧羰基氨基-3-三苯甲硫基丙氨基)萘基-1-羰基〕 -L-蛋氨酸5-茚满醇酯，其特征在于：

-质子核磁共振谱：                                    (250 MHz，(CD3)2SOd6

       滴加几滴                          CD3COOD d4，δ ppm)：1，38(s，9H：

OC(CH3)3)；2，07(mt，2H：茚满基的CH2le)；2，12(s，3H：SCH3)；2，25(mt，2H：

CH2)；2，55～2，80(mt，4H：CH2S)；2，86和2，90(2t，J＝7，5 Hz，2H：

茚满是的ArCH2)；3，00～3，30(mt，2H：NCH2)；3，81(mt，1H：CHN)；4，82

(mt，1H：CHCOO)；6，52(d宽峰，J＝8 Hz，1H：H6)；6，92(dd，J＝8和2 Hz，1H：

茚满基的H6)；7，02(d，J＝2 Hz，1H：茚满基的H4)；7，10～7，60(mt，

20H：茚满基的H7-SC(C6H5)3-H2-H3-H7et H8)；8，03(d宽峰，J＝8，5

Hz，1H：H4)，

按照实施例3中制备N-〔5-(2(R)-氨基-2-巯基丙 氨基)-萘基-1-羰基〕-L-蛋氨酸的三氟乙酸盐的方法进行 操作，不同的是以0.38g N-〔5-(2(R)-叔丁氧羰基氨基-3 -三苯甲硫基丙氨基)萘基-1-羰基〕-L-蛋氨酸5-茚满醇 酯为原料，得到0.064g N-〔5-(2(R)-氨基-3-巯基丙氨 基)苯基-1-羰基〕-L-蛋氨酸5-茚满醇酯的三氟乙酸盐， 其特征如下所示：

-质子核磁共振谱：                       (300 MHz，(CD3)2SO d6，δ

ppm)：2，06(mt，2H茚满基的CH2)；2，12(s，3H：SCH3)；2，22(mt，2H：

CH2)；2，70(mt，2H：CH2S)；2，75～2，85(mt，6H：茚满基的ArCH2

和CH2S)；3，00～3，60(mt：NCH2CHN)；4，82(mt，1H：CHCOO)；6，36(mt，

1H：ArNH)；6，68(d宽峰，J＝8 Hz，1H：H6)：692(dd，J＝8和2 Hz，1H：茚满基

的H6 le)；7，02(d，J＝2 Hz，1H：茚满基的H4)；7，26(d，J＝8 Hz，1H：茚满基

的H7 le)；7，32(t，J＝8 Hz，1H：H7)；7，45～7，65(mt，3H：H2-H 3et H8)；

8，26(d宽峰，J＝8，5 Hz，1H：H4)；9，10(d，J＝7，5 Hz，1H：ArCONH).

             元素分析：C28H33N3O3S2，CF3CO2H：

           计算值(％)：    C＝56，5；H＝5，37；N＝6，59；S＝10，06

           实测值(％)：    C＝56，2；H＝5，6；N＝6，6；S＝10，1

实施例8

向由0.3g N-〔5-(2-(R)-叔丁氧羰基氨基-3-三苯 甲硫基丙氨基)萘基-1-羰基〕-L-蛋氨酸于5cm3二乙醚中 形成的溶液中加入0.048g苄醇，随后加入0.054g 4-二甲氨基哌 啶和0.1g1，3-二环己基碳化二亚胺。在约20℃搅拌该反应介 质直到酯化反应进行完全为止，随后用烧结玻璃过滤，用100cm3 水洗三次后，用100cm35％(V/V)乙酸水溶液洗涤，随后用100cm3 水洗，最后用NaHCO310％(P/V)水溶液100cm3洗涤2次。用 MgSO4干燥有机相，过滤后减压浓缩至干。得到0.21g无需进一步 提纯便可用于下列步骤的N-〔5-(2(R)-叔丁氧羰基氨基-3 -三苯甲硫基丙氨基)萘基-1-羰基〕-L-蛋氨酸苄酯。

按照实施例3中制备N-〔5-(2-(R)-氨基-3-巯基 丙氨基)萘基-1-羰基〕-L-蛋氨酸的三氟乙酸盐的方法进行 操作，不同的是以0.21g N-〔5-(2(R)-叔丁氧羰基氨基-3 -三苯甲硫基丙氨基)萘基-1-羰基〕-L-蛋氨酸苄酯为原料， 得到0.021粉状N-〔5-(2(R)-氨基-3-巯基丙氨基)萘基 -1-羰基〕-L-蛋氨酸苄酯三氟乙酸盐，其特征在于：

-质子核磁共振谱：                       (200 MHz，(CD3)2SOd6

       滴加数滴     CD3COOD d4，δ ppm)：2，10(mt，2H：CH2)；

2，10(s，3H：SCH3)；2，50～3，00(mt，4H：CH2S)；3，10～3，90(mt，3H：

NCH2CHN)；4，73(mt，1H：CHCOO)；5，23(AB明显，J＝13，5 Hz，2H：

COOCH2Ar)；6，32(mt残基：ArNH)；6，70(d，J＝7，5 Hz，1H：H6)；de 7，20～

7，60(mt，9H：芳族H-H2-H3-H7和H8)；8，27(d宽峰，J＝7，5 Hz，

1H：H4)；8，98(d残基，J＝7，5 Hz：ArCONH).

        元素分析：C26H31N3O3S2，1，25 CF3CO2H：

      计算值(％)：     C＝53，47；H＝5，08；N＝6，56；S＝10，02

      实测值(％)：     C＝53，3；H＝4，9；N＝6，7；S＝10，2

实施例9

按照实施例8中制备N-〔5-(2(R)-叔丁氧羰基氨基-3 -三苯甲硫基丙氨基)萘基-1-羰基〕-L-蛋氨酸苄酸的方法 进行操作，不同的是以0.053g 2-(2-甲氧乙氧基)乙醇为原料， 得到0.43g产物，在硅胶上经色谱提纯〔洗提液：环己烷-乙酸乙 酯(70-30，体积)〕得到0.31g N-〔5-(2(R)-叔丁氧羰 基氨基-3-三苯甲硫基丙氨基)萘基-1-羰基〕-L-蛋氨酸 -2-(2-甲氧乙氧基)乙酯，其特征在于：

-质子核磁共振谱：                                         (200 MHz，CDCl3，δ

ppm)：1，45(s，9H：OC(CH3)3)；2，12(mt，2H：CH2)；2，12(s，3H：SCH3)；2，54和

2，64(2 mts，2H ：CH2S)；3，05～3，30(mt，2H：NCH2)；3，36(s，3H：

COOCH3)；3，40～4，05(mt，7H：OCH2和CHN)；4，37(mt，2H：COOCH2)；

4，68(d，J＝8 Hz，1H：NHCOO)；5，05(mt，1H：CHCOO)；6，52(d宽峰，J＝7，5

Hz，1H：H6)；6，68(d，J＝8 Hz，1H：ArCONH)；7，10～7，90(mt，21H：

SC(C6H5)3-H2-H3-H4-H7-H8和ArNH).

按照实施例3中制备N-〔5-(2(R)-氨基-3-巯基丙 氨基)萘基-1-羰基〕-L-蛋氨酸的三氟乙酸盐的方法进行操 作，不同的是以0.21g N-〔5-(2(R)-叔丁氧羰基氨基-3- 三苯甲硫基丙氨基)萘基-1-羰基〕-L-蛋氨酸2-(2-甲 氧基乙氧基)乙酯为原料，得到0.051g N-〔5-(2(R)-氨基 -3-巯基丙氨基)萘基-1-羰基〕-L-蛋氨酸2-(2-甲 氧乙氧基)乙酯的三氟乙酸盐，其特征如下所示：

-质子核磁共振谱：                             (200 MHz，(CD3)2SOd6，δ

ppm)：2，10(mt，2H：CH2)；2，12(s，3H：SCH3)；2，64(t，J＝7，5 Hz，2H：

CH2S)；2，90(AB明显，2H：CH2S)；3，25(s，3H：OCH3)；3，30～3，80(mt，

9H：OCH2和NCH2CHN)；4，28(mt，2H：COOCH2)；4，67(mt，1H：CHCOO)；

6，32(mf，1H：ArNH)；6，72(d宽峰，J＝8 Hz，1H：H6)；7，37(t，J＝8 Hz，1H：H

7)；7，40～7，65(mt，3H：H2-H3和H8)；8，09(mf，3H：NH3+CF3COO-)；

8，28(d宽峰，J＝8 Hz，1H：H4)；8，87(d，J＝7，5 Hz，1H：ArCONH).

         元素分析：C24H35N3O5S2，1，25 CF3CO2H：

       计算值(％)：     C＝48，8；H＝5，60；N＝6，44；S＝9，83

       实测值(％)：     C＝48，8；H＝5，7；N＝6，6；S＝10，0

实施例10

按照实施例7制备N-叔丁氧羰基-L-蛋氨酸5-茚满醇 酯的方法进行操作，不同的是以3.73g 2-(苯基磺酰基)乙醇为 原料，得到7.9gN-叔丁氧羰基-L-蛋氨酸2-(苯基磺酰基) 乙酯，无需进一步提纯便可用于后续步骤。

按照实施例7制备L-蛋氨酸5-茚满醇酯的方法进行操作， 不同的是以4.17g N-叔丁氧羰基-L-蛋氨酸2-(苯基磺酰基) 乙酯为原料，得到3.54gL-蛋氨酸2-(苯基磺酰基)乙酯，无 需进-步提纯便可用于后续步骤。

按照实施例1中制备N-〔(5-硝基萘基)-1-羰基〕- L-蛋氨酸甲酯的方法进行操作，不同的是以2.75gL-蛋氨酸2 -(苯基磺酰基)乙酯为原料，得到2.06gN-〔(5-硝基萘基) -1-羰基〕-L-蛋氨酸-2-(苯基磺酰基)乙酯，其特征在 于： -质子核磁共振谱                                       (300 MHz，(CD3)2SO d6，δ

ppm)：1，92(mt，2H：CH2)；2，06(s，3H：SCH3)；2，55(mt，2H：CH2S)；3，81(t，

J＝6 Hz，2H：CH2SO2)；4，35～4，55(mt，2H：COOCH2)；4，48(mt，1H：

CHCOO)；7，68(t，J＝7，5 Hz，2H：芳族H位于磺酰基间位)；de 7，75

7，95(mt，4H：H2-H3-H7芳族H位于磺酰基对位)；7，96(d，J＝7，5

Hz，2H：芳族H位于磺酰基邻位)；8，34(dd，J＝7，5和1，5 Hz，1H：H

4)；8，40和8，53(2d宽峰，J＝8 Hz，1H：H6和H8)；9，09(d，J＝7，5 Hz，

1H：ArCONH).

按照实施例1中制备N-〔(5-硝基萘基)-1-羰基〕- L-蛋氨酸甲酯的方法进行操作，不同的是以2.06g N-〔(5- 硝基萘基)-1-羰基〕-L-蛋氨酸2-(苯基磺酰基)乙酯为 原料，得到3.40gN-〔(5-硝基萘基)-1-羰基〕-L-蛋 氨酸-2-(苯基磺酰基)乙酯，无须进一步提纯便可用于后续步 骤。

按照实施例3中制备N-〔5-(2(R)-叔丁氧羰基氨基-3 -三苯甲硫基丙氨基)萘基-1-羰基〕-L-蛋氨基甲酯的方法 进行操作，不同的是以0.972g N-〔(5-氨基萘基)-1-羰基〕 -L-蛋氨酸2-(苯磺酰)乙酯为原料，得到0.21g N-〔5- (2(R)-叔丁氧羰基氨基-3-三苯甲硫基丙氨基)萘基-1-羰 基〕-L-蛋氨酸2-(苯磺酰)乙酯，无需进一步提纯便可以被 用于后续步骤。

按照实施例3中制备N-〔5-(2(R)-氨基-3-巯基丙 氨基)萘基〕-1-羰基〕-L-蛋氨酸三氟乙酸盐的方法进行操 作，不同的是以 0.21g N-〔5-(2(R)-叔丁氧羰基氨基-3- 三苯甲硫基丙氨基)萘基-1-羰基〕-L-蛋氨酸2-(苯磺酰) 乙酯为原料，得到0.013g N-〔5-(2-(R)-氨基-3-巯基 丙氨基)萘基〕-1-羰基〕-L-蛋氨酸2-(苯磺酰)乙酯的 三氟乙酸盐，其特征如下： -质子核磁共振谱：                           (400 MHz，(CD3)2SOd6

    滴入几滴     CD3COOD d4，δen ppm)：1，90(mt，2H：CH2)； 2，05(s，3H：SCH3)；2，54(mt：CH2S)；2，88(mt，2H：CH2S)；3，40～3，65(mt， 3H：NCH2CHN)；3，76(AB明显2H：CH2SO2)；4，38和4，45(AB明显，1H ：COOCH2)；4，46(mt，1H：CHCOO)；6，70(d.J＝7，5 Hz，1H：H6)；7，36 (t，J＝7，5 Hz，1H：H7)；7，45～7，60(mt，3H：H2-H3和H8)；7，68(t，J＝7，5 Hz，2H：芳族H位于磺酰基间位)；7，78(t，J＝7，5 Hz，1H： 芳族H位于磺酰基对位)；7，96(d，J＝7，5 Hz，2H：芳族H位于磺酰 基邻位)；8，26(d宽峰，J＝8 Hz，1H：H4)；8，76(d残基，J＝7，5 Hz： ArCONH).

      质谱  (DIC)：M/Z＝576(MH+). 实施例11

向由4.7g 5-硝基-1-萘酸于50cm3甲醇中形成的悬浮液中 加1cm3 97％硫酸，随后将其回流12小时。将溶液重新冷却至约 20℃，干燥所形成的沉积物，用5cm3冰冷却甲醇洗涤2次，随后 干燥直至其重量恒定为止。得到4.56g熔点为105℃的5-硝基- 1-萘甲酸甲酯。

向由4.45g 5-硝基-1-萘甲酸甲酯于150cm3乙酸乙酯和 35cm3乙醇的混合物中形成的溶液中加入21.5g氯化亚锡(II)的 二水合物，在约70℃加热30分钟。随后冷却至约20℃，将反应 混合物倾入200cm3冰中，通过添加5％(P/V)NaHCO3溶液将 pH逐渐地调至7-8。用配有C盐的烧结玻璃过滤所得到的混合 物，通过倾析分离有机相并且用150cm3乙酸乙酯萃取水相2次。 合并有机相，用MgSO4干燥，过滤并且减压浓缩至于。得到4.5g 油状5-氨基-1-萘甲酸甲酯，无需进一步提纯便可用于后续步 骤。

向4.5g 5-氨基-1-萘酸甲酯于30cm3甲醇中形成的溶液中 加入14.75g S-三苯甲基-N-叔丁氧羰基半胱氨酸醛、0.14cm3 浓乙酸、分子筛(3A)和4.15g氰基硼氢化钠。在约20℃将反应 混合物搅拌2天。用配有C盐的烧结玻璃过滤。用甲醇洗涤烧结玻 璃。减压浓缩滤出物，将其溶于150cm3乙酸乙酯并依次用100cm310 ％(p/v)NaHCO3水溶液、100cm310％(p/v)柠檬酸水溶液、 100cm3蒸馏水、100cm3 10％(p/v)NaHCO3水溶液和 100cm3NaCl饱和水溶液洗涤。用MgSO4干燥有机相，过滤并减压 浓缩至干。用硅胶色谱提纯产物〔洗提剂：环己烷-乙酸乙酯(85 -15，体积)〕。得到3.5g米色烤蛋白状5-(2(R)-叔丁氧羰 基氨基-3-三苯甲硫基丙氨基)-1-萘酸甲酯，无需进一步提 纯便可用于后续步骤。

向由1.5g 5-(2(R)-叔丁氧羰基氨基-3-三苯甲硫基丙 氨基)-1-萘酸甲酯于25cm3二甲基甲酰胺中形成的溶液中边搅 拌边加入3.6cm3碘代甲烷和7g固体NaHCO3。在约20℃搅拌反 应混合物20小时，随后将其倾入200cm3冰中。用150cm3乙酸乙 酯萃取水相3次。合并有机相，用MgSO4干燥，过滤并且减压浓 缩至干。借助硅胶色谱提纯所得到的红油状物质〔洗脱剂：环己烷 -乙酸乙酯(90-10，体积)〕。得到0.56g 5-(2(R)-叔丁 氧羰基氨基-3-三苯甲硫基丙基-N-甲氨基)-1-萘甲酸甲 酯，其特征如下：

-质子核磁共振谱：                            (400 MHz，(CD3)2SO d6，δ

ppm)：1，42(s，9H：OC(CH3)3)；2，28(mt，2H：SCH2)；2，62(s，3H：NCH3)；

2，85和3，04(2 dd，J＝13和7 Hz和J＝13和6.5 Hz，1H：

NCH2)；3，82(mt，1H：CHN)；3，96(s，3H：COOCH3)；6，83(d，J＝9 Hz，1H：

NHCOO)；7，15(d，J＝8 Hz，1H：H6)；7，20～7，40(mt，15H：SC(C6H5)3)；

7，47和7，52(2t，J＝8 Hz，1H：H3和H7)；8，10～8，15和8，36(

mt和 d，J＝8 Hz，2H和1H：H2-H4和H8).

向由0.56g 5-(2(R)-叔丁氧羰基氨基-3-三苯甲硫基丙 基-N-甲氨基)-1-萘酸甲酯于25cm3蒸馏水和55cm3乙醇中 形成的溶液中加入0.2g氢氧化钾。回流加热2小时后，减压浓缩。 将残余物溶于蒸馏水中，随后用10％(p/v)柠檬酸水溶液将其 pH值调至3。用50cm3乙酸乙酯萃取水相3次。合并有机相，用 NaCl饱和水溶液洗涤，用MgSO4干燥，过滤并减压浓缩至干。得 到0.55g 5-(2(R)-叔丁氧羰基氨基-3-三苯甲硫基丙基-N -甲氨基)-1-萘酸，该黄色油状物无须进一步提纯便可用于后 续步骤。

按照实施例1中制备N-〔(5-硝基萘基)-1-羰基〕- -蛋氨酸甲酯的方法进行操作，不同的是以0.55g 5-(2(R)-叔 丁氧羰基氨基-3-三苯甲硫基丙基-N-甲氨基)-1-萘酸为 原料，得到1.2g橙色油，硅胶色谱提纯后〔洗提剂：环己烷-乙 酸乙酯(80-20，体积)〕，得到0.55g N-〔5-(2(R)-叔 丁氧羰基氨基-3-三苯甲硫基丙基-N-甲氨基)-萘基-1- 羰基〕-L-蛋氨酸甲酯，其特征如下：

-质子核磁共振谱：                                    (300 MHz，(CD3)2SO，δ

ppm)：1，41(s，9H：OC(CH3)3)；2，06(mt，2H：CH2)；2，10(s，3H：SCH3)；2，38

(mt，2H：SCH2)；2，60(mt，2H：CH2S)；2，60(s，3H：NCH3)；2，85和3，04(2 mts，

1H：NCH2)；3，75(s，3H：COOCH3)；3，82(mt，1H：CHN)；4，69(mt，1H：

CHCOO)；6，85(d，J＝9 Hz，1H：NHCOO)；7，10(d，J＝8 Hz，1H：H6)；7，20～

7，45和7，42(2 mts，16H和1H：SC(C6H5)3- H3和H7)；7，55(d，

J＝8 Hz，1H：H2)；7，85和7，92(2d，J＝8 Hz，1H：H4和H8)；8，91(d，

J＝7.5 Hz，1H：ArCONH).

按照实施例3中制备N-〔5-(2(R)-叔丁氧羰基氨基-3 -三苯甲硫基丙基氨基)萘基-1-羰基〕-L-蛋氨酸的方法进 行操作，不同的是以0.3g N-〔5-(2(R)-叔丁氧羰基氨基-3 -三苯甲硫基丙基-N-甲氨基)萘基-1-羰基〕-L-蛋氨酸 甲酯为原料，得到0.3g N-〔5-(2(R)-叔丁氧羰基氨基-3 -三苯甲硫基丙基-N-甲氨基)-萘基-1-羰基)-L-蛋氨 酸，无需进一步提纯便用于后续步骤。

按照实施例3中制备N-〔5-(2-(R)-氨基-3-巯基 丙氨基)萘基-1-羰基〕-L-蛋氨酸的三氟乙酸盐的方法进行 操作，不同的是以0.25g N-〔5-(2(R)-叔丁氧羰基氨基-3 -三苯甲硫基丙基-N-甲氨基)萘基-1-羰基〕-L-蛋氨酸 为原料，得到0.045g粉状N-〔5-(2(R)-氨基-3-巯基丙 基-N-甲氨基)萘基-1-羰基〕-L-蛋氨酸的三氟乙酸盐， 其特征在于：

-质子核磁共振谱                          (400 MHz，(CD3)2SO d6，δ

ppm)：1，95～2，15(mt，2H：CH2)；2，10(s，3H：SCH3)；2，63(mt，2H：

SCH2)；2，78(s，3H：NCH3)；2，84(mt，2H：CH2S)；3，28和3，40(2 dd，

            J＝11和8 Hz和J＝11和6 Hz，1H：NCH2)；3，57(mt，1H：

CHN)；4，60(mt，1H：CHCOO)；7，35(d，J＝7，5 Hz，1H：H6)；7，53(t，J＝8 Hz；

1H：H7)；7，55～7，70(mt，2H：H2和H3)；7，95(mf，2H：NH2)；7，99(d，J＝

8 Hz，1H：H8)；8，55(dd，J＝8和2 Hz，1H：H4)；8，83(d，J＝7.5 Hz，1H：

ArCONH).

      元素分析：C20H27N3O3S2，1，25CF3CO2H：

    计算值(％)：    C＝47，9；H＝5，05；N＝7，45；S＝11，37

    实测值(％)：    C＝47，7；H＝5，3；N＝7，4  S＝11，4

实施例12

按照实施例3中制备N-〔5-(2-(R)-氨基-3-巯基 丙氨基)萘基-1-羰基〕-L-蛋氨酸的三氟乙酸盐的方法进行 操作，不同的是以0.25g N-〔5-(2(R)-叔丁氧羰基氨基-3 -三苯甲硫基丙基-N-甲氨基)萘基-1-羰基〕-L-蛋氨酸 甲酯为原料，得到0.049g粉状N-〔5-(2(R)-氨基-3-巯 基丙基-N-甲氨基)萘基-1-羰基〕-L-蛋氨酸甲酯的三氟 乙酸盐，其特征在于：

-质子核磁共振谱                            (250 MHz，(CD3)2SO d6

          加入几滴      CD3COOD d4，δppm)：2，06(mt，2H：CH2)；

2，10(s，3H：SCH3)；2，63(mt，2H：SCH2)；2，80(s，3H：NCH3)；2，84(mt，2H：

CH2S)；3，30和3，42(2 dd，J＝13，5和9 Hz和J＝13，5和5，5 Hz，1H：

NCH2)；3，59(mt，1H：CHN)；3，75(s，3H：COOCH3)；4，70(mt，1H：CHCOO)；

7，35(d，J＝7，5 Hz，1H：H6)；7，50～7，70(mt，3H：H2-H3和H7)；7，97(d，

J＝8，5 Hz，1H：H8)；8，53(dd，J＝7，5和2 Hz，1H：H4)；8，93(d，J＝7.5 Hz，1H：

ArCONH).

       元素分析    ：C21H29N3O3S2，1，25CF3CO2H：

         计算值(％)：     C＝48，82；H＝5，27；N＝7，27；S＝11，09

         实测值(％)：     C＝48，3；H＝5，1；N＝7，0；S＝11，2

实施例13

向由3.75g S-三苯甲基-L-半胱氨酸于15cm3水中形成的 悬浮液中边搅拌边加入1.5cm3 33％(P/P)碳酸钠和1.5cm3硫酸 二甲酯。边搅拌边将反应混合物加热至90℃，直至形成透明溶液 为止，随后回流加热2小时，冷却后，过滤所形成的沉淀，先用水 洗，后用乙醚洗涤。得到1.95g熔点为114℃的N-甲基-S-三 苯甲基-L-半胱氨酸。

向由1.95g N-甲基-S-三苯甲基-L-半胱氨酸于20cm3 二氯甲烷中形成的溶液中加入0.68cm3三乙胺和1.06g二碳酸二叔 丁酯。在约20℃将反应混合物搅拌20小时，随后用10％(p/v) 柠檬酸水溶液洗涤，随后用蒸馏水洗涤。用MgSO4干燥有机相， 过滤并减压浓缩。用硅胶色谱提纯所得到的米色固体〔洗脱剂：乙 酸乙酯〕。得到0.4g N-甲基-N-叔丁氧羰基-S-三苯甲基 -L-半胱氨酸，其特征在于：

-质子核磁共振谱：       (250 MHz，(CD3)2SOd6

           加入几滴CD3COOD d4，温度为393K，δ   ppm)：1，40(s，9H：OC(CH3)3)；2，55～2，82(mt，2H：SCH2)；2，68(s，3H：   NCH3)；4，16(dd，J＝10和5，5 Hz，1H：CHN)；7，20～7，45(mt，15H：

芳族H).

向由1.57g N，O二甲羟基胺于10cm3CH2Cl2中形成的悬浮 液中于0℃左右加入1.96cm3N-甲基哌啶。将该溶液加入由7.8g N -甲基-N-叔丁氧羰基-S-三苯甲基-L-半胱氨酸、 1.96cm3 N-甲基哌啶、2.08cm3氯甲酸异丁酯和20cm3 CH2Cl2于约-8℃形成的反应混合物中。在约20℃将反应混合物搅拌2 小时，用10％(p/v)柠檬酸水溶液洗涤，随后用2％(p/v) NaOH水溶液、最后用饱和NaCl溶液洗涤。用MgSO4干燥有机相， 过滤并减压浓缩。所得的红色稠油用硅胶色谱提纯〔洗提液：二氯 甲烷-乙酸乙酯(95-5，体积)〕。得到4.2g红油状N-(N -甲基-2(R)-叔丁氧羰基氨基-3-三苯甲硫基丙酰)-N，O -二甲羟基胺，其特征在于：

-质子核磁共振谱：    ：(200 MHz，(CD3)2SOd6

         加入几滴CD3COOD d4，温度为373K，δ ppm)：1，41(s，9H：OC(CH3)3)；2，35～2，75(mt，2H：SCH2)；2，62(s，3H： NCH3)；3，06(s，3H：NCH3)；3，60(s，3H：NOCH3)；4，89(dd，J＝9，5和6Hz，1H： CHN)；7，20～7，45(mt，15H：芳族H).

向由0.386g氢化锂铝于35cm3乙醚中形成的约-45℃悬浮液 中加入4.2g处于15cm3乙醚中的N-(N-甲基-2(R)-叔丁氧 羰基氨基-3-三苯甲硫基丙酰基)-N，O-二甲羟胺。边搅 拌边将温度升至0℃。冷却至约-35℃后，加入由1.77g NaHCO3与6.5cm3水组成的溶液。用10cm3盐酸标准溶液洗涤有机相3次、 用10cm3NaHCO3饱和溶液洗涤2次，最后用10cm3NaCl饱和溶液 洗涤。用MgSO4干燥有机相，过滤并进行减压浓缩。得到2.2g无 需进-步提纯便可以用于后续步骤的N-甲基-N-叔丁氧羰基 -S-三苯甲基半胱氨酸醛。

按照实施例3中制备N-〔5-(2(R)-叔丁氧羰基氨基-3 -三苯甲硫基丙氨基)萘基-1-羰基〕-L-蛋氨酸甲酯的方法 进行操作，不同的是以2.9g N-甲基-N-叔丁氧羰基-S-三 苯甲基半胱氨酸醛为原料，得到0.55g N-{5-〔(N-甲基- 2(R)-叔丁氧羰基氨基)-3-三苯甲硫基丙氨基〕-萘基-1- 羰基}-L-蛋氨酸甲酯，无需进一步提纯便可用于后续步骤。

按照实施例3中制备N-〔5-(2(R)-叔丁氧羰基氨基-3 -三苯甲硫基丙氨基)萘基-1-羰基〕-L-蛋氨酸的方法进行 操作，不同的是以035g N-{5-〔(N-甲基-2(R)-叔丁氧羰 基氨基)-3-三苯甲硫丙氨基〕-萘基-1-羰基}-L-蛋氨 酸甲酯为原料，得到0.33g N-{5-〔(N-甲基-2(R)-叔丁 氧羰基氨基)-3-三苯甲硫基丙氨基〕-萘基-1-羰基}-L -蛋氨酸，无需进一步提纯便可用于后续步骤。

按照实施例3中制备N-〔5-(2-(R)-氨基-3-巯基 丙氨基)萘基-1-羰基〕-L-蛋氨酸的三氟乙酸盐的方法进行 操作，不同的是以0.33g N-{5-〔(N-甲基-2(R)-叔丁氧羰 基氨基)-3-三苯甲硫基丙氨基〕萘基-1-羰基}-L-蛋氨 酸为原料，得到0.05g N-〔5-(2(R)-甲氨基-3-巯基丙氨 基)萘基-1-羰基〕-L-蛋氨酸的三氟乙酸盐，其特征在于：

-质子核磁共振谱                  (300 MHz，(CD3)2SO d6

       加入几滴CD3COOD d4，δppm)：2，08(mt，2H：CH2)；

2，08(s，3H：SCH3)；2，64(mt，2H：CH2S)；2，68(s，3H：NCH3)；2，92(mt，2H：

CH2S)；3，30～3，65(mt，3H：NCH2CHN)；4，58(mt，1H：CHCOO)；6，73(d，

J＝8 Hz，1H：H6)；7，35(t，J＝8 Hz，1H：H7)；7，45～7，65(mt，3H：H2-H3

和H8)；8，24(d宽峰，J＝8，5 Hz，1H：H4)；8，71(d 残基，J＝7，5 Hz：

ArCONH).

           元素分析：C20H27N3O3S2，1，25CF3CO2H：

          计算值(％)：    C＝47，91；H＝5，05；N＝7，45；S＝11，37

          实测值(％)：    C＝47，8；H＝4，7；N＝7，5；S＝11，5

实施例14

按照实施例3中制备N-〔5-(2-(R)-氨基-3-巯基 丙氨基)萘基-1-羰基〕-L-蛋氨酸的三氟乙酸盐的方法进行 操作，不同的是以0.35g N-{5-〔(N-甲基-2(R)-叔丁氧羰 基氨基)-3-三苯甲硫基丙氨基〕萘基-1-羰基}-L-蛋氨 酸甲酯为原料，得到0.049g粉状N-〔5-(2(R)-甲氨基-3 -巯基丙氨基)萘基-1-羰基〕-L-蛋氨酸甲酯的三氟乙酸盐， 其特征在于：

-质子核磁共振谱                    (400 MHz，(CD3)2SOd6

        加入几滴CD3COOD d4，δppm)：2，25和2，40(2 mts，

1H：CH2)；2，69(s，3H：SCH3)；2，94(mt，2H：CH2S)；2，94(s，3H：

NCH3)；3，30～3，65(mt，5H：CH2S和NCH2CHN)；3，75(s，3H：COOCH3)；

4，72(dd，J＝9和4，5 Hz，1H：CHCOO)；6，73(d，J＝8 Hz，1H：H6)；7，39(t，J＝8

Hz，1H：H7)；7，45～7，65(mt，3H：H2-H3和H8)；8，28(d宽峰，J＝8 Hz，

1H：H4).

       元素分析：C21H29N3O3S2，2，5CF3CO2H：

       计算值(％)：   C＝43，33；H＝4，41；N＝5，83；S＝8，9

       实测值(％)：   C＝43，9；H＝4，6；N＝5，9；S＝8，7

实施例15

向由12.5g氢化钾于80cm3四氢呋喃中组成的约0℃悬浮液中 加入2.6g冠醚18-6，随后滴加由5g N-叔丁氧羰基-L-蛋氨 酸甲酯于15cm3四氢呋喃和2.5cm3碘代甲烷中形成的溶液。在约0 ℃搅拌2小时。随后加入6cm3乙酸，将反应混合物倾入200g冰中。 通过加入10％(p/v)NaOH溶液将pH值调至约9。用20cm3 乙醚将反应混合物洗涤3次。通过添加10％(v/v)盐酸溶液将水 溶液的pH值调至约3，随后用20cm3乙酸乙酯萃取3次。合并有 机相，用NaCl饱和溶液洗涤，用MgSO4干燥，过滤并且减压浓缩 至于。得到6g无需进一步提纯便可用于后续步骤的N-甲基-N -叔丁氧羰基-L-蛋氨酸甲酯。

向由4.6g N-甲基-N-叔丁氧羰基-L-蛋氨酸甲酯于 150cm3甲醇中组成的溶液中加入6.6g对甲苯磺酸一水合物，在分 子筛(3A)存在下回流24小时。将反应介质冷却至约20℃，在 烧结玻璃上过滤并且减压蒸除溶剂。将残余物溶于150cm3水中并 且用己烷-二乙醚(50-50，体积)混合物洗涤。通过添加 NaHCO3饱和溶液将水相的pH值升至10左右。用50cm3乙酸乙酯 萃取水相4次，合并有机相，用饱和NaCl溶液洗涤，用MgSO4干燥，过滤，减压浓缩至干。得到6g N-甲基-L-蛋氨酸甲酯， 其特征如下所示：

-质子核磁共振谱：                                (200 MHz，(CD3)2SO d6，d

ppm)：1，75(mt，2H：CH2)；1，95(mf，1H：NH)；2，04(s，3H：SCH3)；2，22(s，

3H：NCH3)；2，52(mt，2H：CH2S)；3，21(dd，J＝7和5 Hz，1H：NCHCOO)；3，66

(s，3H：COOCH3).

按照实施例1制备N-〔(5-硝基萘基)-1-羰基〕-L -蛋氨酸甲酯的方法进行操作，不同的是以0.68gN-甲基-L- 蛋氨酸甲酯为原料，得到1.34g N-甲基-N-〔(5-硝基萘基) -1-羰基〕-L-蛋氨酸甲酸，无需进一步提纯便可以用于后续 步骤。

按照实施例1制备N-〔(5-硝基萘基)-1-羰基〕-L -蛋氨酸甲酯的方法进行操作，不同的是以1.17gN-甲基-N- 〔(5-硝基萘基)-1-羰基〕-L-蛋氨酸甲酯为原料，得到 0.97gN-甲基-N-〔(5-硝基萘基)-1-羰基〕-L-蛋 氨酸甲酸，无需进一步提纯便可以用于后续步骤。

按照实施例3制备N-〔5-(2(R)-叔丁氧羰基氨基-3 -三苯甲硫基丙氨基)-萘基-1-羰基〕-L-蛋氨酸甲酯的方 法进行操作，不同的是以0.95g N-甲基-N-〔(5-氨基萘基) -1-羰基〕-L-蛋氨酸甲酯为原料，得到0.97g N-甲基-N -〔5-(2(R)-叔丁氧羰基氨基-3-三苯甲硫基丙氨基)萘基 -1-羰基〕-L-蛋氨酸甲酯，无需进一步提纯便可用于后续步 骤。

按照实施例3制备N-〔5-(2(R)-叔丁氧羰基氨基-3 -三苯甲硫基丙氨基)-萘基-1-羰基〕-L-蛋氨酸的方法进 行操作，不同的是以0.37g N-甲基-N-〔5-(2(R)叔丁羰基 氨基-3-三苯甲硫基丙氨基)萘基-1-羰基〕-L-蛋氨酸为 原料，得到0.36g N-甲基-N-〔5-(2(R)-叔丁氧羰基氨基 -3-三苯甲硫基丙氨基)萘基-1-羰基〕-L-蛋氨酸，无需 进一步提纯便可用于后续步骤。

按照实施例3制备N-〔5-(2(R)-氨基-3-巯基丙氨 基)-萘基-1-羰基〕-L-蛋氨酸的方法进行操作，不同的是 以0.35gN-甲基-N-〔(5-(2(R)-叔丁氧羰基氨基-3- 三苯甲硫基丙氨基)萘基-1-羰基〕-L-蛋氨酸为原料，得到 0.13g N-甲基-N-〔5-(2(R)-氨基-3-巯基丙氨基)萘 基-1-羰基〕-L-蛋氨酸，无需进一步提纯便可用于后续步骤。

其特征在于：

-质子核磁共振谱：      (400 MHz，(CD3)2SO d6

           加入几滴CD3COOD d4，温度为413K，δ

ppm)：1，90～2，40(mt，5H：CH2和SCH3)；2，40～2，90(mt，5H：CH2S和

NCH3)；3，13和3，22(2dd，J＝14和6，5 Hz，1H：CH2S)；3，56和3，76(2

mts，2H和1H：NCH2CHN)；5，10(mf展开，1H：CHCOO)；6，68(d，

J＝8 Hz，1H：H6)；7，10～7，50(mt，4H：H2-H3-H7和H8)；8，15(d宽峰，

J＝8 Hz，1H：H4).

       元素分析：C20H27N3O3S2，1，14CF3CO2H：

       计算值(％)：   C＝48，5；H＝5，14；N＝7，61；S＝11，62

       实测值(％)：   C＝48，4；H＝5，2；N＝7，6；S＝11，6

实施例16

按照实施例3中制备N-〔5-(2-(R)-氨基-3-巯基 -丙氨基)萘基-1-羰基〕-L-蛋氨酸三氟乙酸盐的方法进行 操作，不同的是以0.34g N-甲基-N-〔5-(2(R)-叔丁氧羰 基氨基-3-三苯甲硫基丙基氨基)萘基-1-羰基〕-L-蛋氨 酸甲酯为原料，得到0.045g粉状N-甲基-N-〔5-(2(R)- 氨基-3-巯基丙基氨基)-萘基-1-羰基〕-L-蛋氨酸甲酯， 其特征在于：

-质子核磁共振谱：          (400 MHz，CD3)2SOd6

           加入几滴CD3COOD d4，温度为413°K，δ

ppm)：1，90～2，30(mt，5H：CH2和SCH3)；2，40～2，90(mt，5H：CH2S和

NCH3)；3，13和3，22(2 dd，J＝14和6，5 Hz，1H：CH2S)；3，45～3，80

(mt，3H：NCH2CHN)；3，70(s，3H：COOCH3)；5，10(mf展开，1H：CHCOO)；

6，68(d，J＝8 Hz，1H：H6)；7，10～7，50(mt，4H：H2-H3-H7和H8)；8，15

(d宽峰，J＝8 Hz，1H：H4).

        元素分析：C21H29N3O3S2，1，14CF3CO2H：

        计算值(％)：   C＝49，42；H＝5，37；N＝7，43；S＝11，33

        实测值(％)：   C＝49，4H＝5，0；N＝7，5；S＝11，5

实施例17

按照T.NAKAYAMA等人在Chem.Pharm.Bull.32，3968(1984) 中所述方法制备6-硝基萘-1-羧酸。

向9.84g 6-硝基萘-1-羧酸与3-硝基萘-1-羧酸的混 合物于200cm3氯仿和60cm3二甲基甲酰胺中形成的溶液中加入 9.9gL-蛋氨酸甲酯的盐酸盐、6.8g 1-羟基苯并三唑、5cm3三乙 胺和10.3g二环己基碳化二亚胺。在约20℃将反应混合物搅拌2 天。用烧结玻璃过滤，用50cm3氯仿洗涤。用200cm3NaHCO3水 溶液10％(p/v)洗涤有机溶液2次、随后用10％(p/v)柠檬 酸水溶液、用蒸馏水、再用NaCl饱和水溶液洗涤。用MgSO4干燥 有机相，过滤，减压浓缩至干。得到13.3g油状物，在硅胶上进行 色谱提纯，洗提剂为环己烷-乙酸乙酯(1∶1，体积)混合物。 得到0.64g N-〔(6-硝基萘基)-1-羰基〕-L-蛋氨酸甲 酯固体和3.7gN〔(6-硝基萘基)-1-羰基〕-L-蛋氨酸甲 酯和N-〔(3-硝基萘基)-1-羰基〕-L-蛋氨酸甲酯的混 合物。

N〔(6-硝基萘基)-1-羰基〕-L-蛋氨酸甲酯的特征 如下所示：

-质子核磁共振谱：                           (300 MHz；(CD3)2SO d6；δ

ppm)：de 2，10(mt，2H：CH2)；2，12(s，3H：SCH3)；2，65(mt，2H：CH2S)；

3，77(s，3H：COOCH3)；4，70(mt，1H：CHCOO)；7，82(t，J＝7，5 Hz，1H：H

3)；7，95和8，45(2d，J＝7，5 Hz，1H：H2和4)；8，36(dd，J＝9和2 Hz，

1H：H7)；8，48(d宽峰，J＝9 Hz，1H：H8) ；9，12(d，J＝2 Hz，1H：H5)；

9，18(d，J＝7，5 Hz，1H：CONH).

向0.64g N-〔(6-硝基萘基)-1-羰基〕-L-蛋氨酸 甲酯于40cm3乙醇中的溶液中加入2g氯化亚锡(II)的二水合物。 在约70℃将反应混合物搅拌30分钟，随后冷却至约20℃。加入 40cm3乙酸乙酯。将反应混合物倾入冰中，随后将pH值通过添加5 ％(p/v)NaHCO3水溶液调至约7-8。用配有C盐的烧结玻璃 过滤所得到的混合物。倾析分离有机相，用150cm3乙酸乙酯萃取 水相3次。合并有机相，用MgSO4干燥，过滤并在减压下浓缩至 干。得到0.66g油状物，用硅胶进行色谱提纯，洗提剂：环己烷- 乙酸乙酯(1∶1体积)。得到0.38g油状N-〔(6-氨基萘基) -1-羰基〕-L-蛋氨酸甲醋，其特征在于：

-质子核磁共振谱：                               (200 MHz，(CD3)2SO d6，δ

ppm)：2，06(mt，2H：CH2)；2，09(s，3H：SCH3)；2，60(mt，2H：CH2S)；3，80

(s，3H：COOCH3)；4，63(mt，1H：CHCOO)；5，48(s，2H：Ar-NH2)；6，86(dd，J＝9

和2 Hz，1H：H7)；7，19～7，62(2d，J＝8 Hz，1H：H2和4)；7，32

(t，J＝8 Hz，1H：H3)；7，90(d宽峰)，J＝9 Hz，1H：H8)；8，82(d，J＝7，5

Hz，1H：CONH).

向0.66g N-〔(6-氨基萘基)-1-羰基〕-L-蛋氨酸 甲酯于20cm3 CH2Cl2中的溶液中加入1.02g S-三苯甲基-N- 叔丁氧羰基半胱氨酸、0.297g1-羟基苯并三唑和0.42g 1-(3- 二乙氨基丙基)-3-乙基碳化二亚胺盐酸盐，在约20℃搅拌反 应混合物24小时。用15cm3蒸馏水洗涤3次。用MgSO4干燥有机 相。过滤并减压浓缩至干。得到的烤蛋白状物用硅胶进行色谱提纯 〔洗提剂：CH2Cl2-乙酸乙酯(8∶2体积)〕。得到0.6gN- 〔(6-(2(R)-叔丁氧羰基氨基-3-三苯甲硫基丙酰氨基)- 萘基-1-羰基〕-L-蛋氨酸甲酯白色固体，其特征如下：

-质子核磁共振谱：                                (400 MHz，CDCl3，

温度为333°K，δppm)：1，45(s，9H：OC(CH3)3)；2，14(s，3H：SCH3)；

2，16et 2，35(2 mts，1H：CH2)；2，55(t，J＝7，5 Hz，2H：CH2S)；2，73et

2，83(2dd，J＝13和5，5 Hz和J＝13和7，5 Hz，1H：CH2S)；

3，83(s，3H：COOCH3)；3，99(mt，1H：CHN)；4，84(d，J＝7，5 Hz，1H：NHCOO)；

5，03(mt，1H：CHCOO)；6，64(d，J＝8 Hz，1H：ArCONH)；7，05～7，50(mt，

16H：SC(C6H5)3和H3)；7，38(dd，J＝9和1，5 Hz，1H：H7)；7，59(d，J＝7，5 Hz，

1H：H2)；7，85(d宽峰，J＝7，5 Hz，1H：H4)；8，22(mf，1H：ArNHCO)；8，27(d，

J＝1，5 Hz，1H：H5)；8，33(d，J＝9 Hz，1H：H8).

向0.3g N-〔6-(2(R)-叔丁氧羰基氨基-3-三苯甲硫 基丙酰氨基)萘基-1-羰基〕-L-蛋氨酸甲酯于0.75cm3蒸馏 水和7.5cm3四氢呋喃中形成的溶液中加入0.057g水合含氧化锂。 在约20℃将溶液搅拌20小时，随后减压浓缩。得到0.29g烤蛋白 状N-〔6-(2(R)-叔丁氧羰基氨基-3-三苯甲硫基丙酰氨 基)萘基-1-羰基〕-L-蛋氨酸无须进一步提纯该产物便可用 于后续步骤。

向0.29gN-〔6-(2(R)-叔丁氧羰基氨基-3-三苯甲硫 基丙酰氨基)萘基-1-羰基〕-L-蛋氨酸于2.6cm3二氯甲烷 中形成的溶液中于约20℃加入0.1cm3三乙基甲硅烷，随后加入 2.6cm3三氟乙酸。在约20℃将反应混合物搅拌2小时，随后减压 浓缩。用25cm3己烷研磨残余物3次、用25cm3戊烷研磨3次、用 25cm3乙醚研磨3次，随后减压干燥。用高性能液体色谱提纯残余 物(相C18)，用乙腈-水混合物(含0.1％三氟乙酸)洗提。得 到0.02g粉状N-〔6-(2(R)-氨基-3-巯基丙酰氨基)-萘 基-1-羰基〕-L-蛋氨酸的三氟乙酸盐，其特征如下：

-质子核磁共振谱：                               (300 MHz，(CD3)2SO d6，δ

ppm)：2，08(mt，2H：CH2)；2，11(s，3H：SCH3)；2，63(mt，2H：CH2S)；3，11

(mt，2H：CH2S)；4，22(mt，1H：CHN)；4，61(mt，1H：CHCOO)；7，58(mt，2H：H

2和H3)；7，68 dd，J＝9和2，5 Hz，1H：H7)；8，01(dd，J＝7，5和2，5 Hz，1H：H

4)；8，28(d，J＝9 Hz，1H：H8)；8，38(d，J＝2，5 Hz，1H：H5)；8，43(mf，3H：

NH3+CF3COO-)；8，88(d，J＝7，5 Hz，1H：ArCONH)；10，82(s，1H：ArNHCO).

        元素分析：C19H23N3O4S2，1CF3CO2H：

           计算值(％)：C＝47，1；H＝4，52；N＝7，85；S＝11，9

           实测值(％)：C＝47，1；H＝4，3；N＝7，6；S＝10，7.

实施例18

按照实施例17中制备N-〔6-(2(R)-氨基-3-巯基丙 酰氨基)-萘基-1-羰基〕-L-蛋氨酸三氟乙酸盐的制备方法 进行操作，不同的是以0.25g N-〔6-(2(R)-叔丁氧羰基氨基 -3-三苯甲硫基丙酰氨基)萘基-1-羰基〕-L-蛋氨酸甲酯 为原料，得到0.035g N-〔6-(2(R)-氨基-3-巯基丙酰氨 基)萘基-1-羰基〕-L-蛋氨酸甲酯的三氟乙酸盐，其特征在 于：

-质子核磁共振谱：                             (400 MHz，(CD3)2SO d6，δ

ppm)：2，08(mt，2H：CH2)；2，10(s，3H：SCH3)；2，64(mt，2H：CH2S)；3，11

(d，J＝6 Hz，2H：CH2S)；3，74(s，3H：COOCH3)；4，19(t，J＝6 Hz，1H：CHN)；

4，67(mt，1H：CHCOO)；7，50～7，60(mt，2H：H2和H3)；7，68(dd，J＝9和1，5

Hz，1H：H7)；8，00(d宽峰，J＝8和2 Hz，1H：H4)；8，23(d，J＝9 Hz，1H：H8)；

8，36(d，J＝1，5 Hz，1H：H5)；8，43(mf，2H：NH2)；8，98(d，J＝8 Hz，1H：

ArCONH)；10，78(s，1H：ArNHCO).

          元素分析：C20H25N3O4S2，1CF3CO2H：

             计算值(％)：C＝48，08；H＝4，77；N＝7，65；S＝11，6

             实测值(％)：C＝48，3；H＝4，6；N＝7，5；S＝11，2.

实施例19

向0.34g N-〔(6-氨基萘基)-1-羰基〕-L-蛋氨酸 甲酯于20cm3甲醇中形成的溶液中加入1.34g按照EP0618221 A2 所述方法制备的S-三苯甲基-N-叔丁氧羰基半胱氨酸醛、 0.17cm3乙酸、分子筛(3A)和0.19g氰基硼氢化钠。在约20℃ 将该反应混合物搅拌3天，用配有C盐的烧结玻璃过滤。用甲醇洗 涤烧结玻璃。减压浓缩滤出液，将其重新溶解于100cm3乙酸乙酯 中并依次用100cm3NaHCO3水溶液10％(p/v)、80cm3 10％ (p/v)柠檬酸水溶液、100cm3蒸馏水、100cm3 10％(p/v) NaHCO3水溶液和100cm3NaCl饱和水溶液洗涤。MgSO4干燥有 机相，过滤并减压浓缩至干。得到的烤蛋白状物用硅胶进行色谱提 纯〔洗提剂：环己烷-乙酸乙酯(1∶3，体积)〕。得到0.48g 黄色固状N-〔6-(2(R)-叔丁氧羰基氨基-3-三苯甲硫基丙 氨基)萘基-1-羰基〕-L-蛋氨酸甲酯，其特征在于：

-质子核磁其振谱：

                                                (300 MHz，(CD3)2SO d6，δ

ppm)：1，40(s，9H：(CH3)3)；2，10(mt，2H：CH2)；2，12(s，3H：SCH3)；2，20

～2，55和2，63(2 mts，2H：CH2S)；3，06(mt，2H：NCH2)；3，74(mt，1H：

CHN)；3，74(s，3H：COOCH3)；4，67(mt，1H：CHCOO)；5，92(t宽峰，J＝5，5 Hz，

1H：ArNH)；6，75(s宽峰，1H：H5)；6，89和7，63(2d，J＝7，5 Hz，1H：H

2和H4)；6，95(dd，J＝9和1，5 Hz，1H：H7)；7，20～7，45(mt，16H：H

3和芳族H)；7，93(d宽峰：J＝9 Hz，1H：H8)；8，85(d，J＝7，5 Hz，1H：

CONH).

向0.48g N-〔6-(2(R)-叔丁氧羰基氨基-3-三苯甲硫 基丙氨基)萘基-1-羰基〕-L-蛋氨酸甲酯于2.6cm3蒸馏水 和7.2cm3四氢呋喃中形成的溶液中加入0.05g水合氧化锂。于约 20℃搅拌20小时，减压浓缩。将残余物溶于蒸馏水中并且通过添 加10％(p/v)柠檬酸水溶液将pH值调至3。用50cm3乙酸乙酯 萃取水相3次。合并有机相，用NaCl饱和水溶液洗涤，用MgSO4干燥，过滤和减压浓缩至干。得到0.43g烤蛋白状N-〔6-(2(R) -叔丁氧羰基氨基-3-三苯甲硫基丙氨基)萘基-1-羰基〕- L-蛋氨酸。无须进-步提纯便可用于后续步骤。

向0.42g N-〔6-(2(R)-叔丁氧羰基氨基-3-三苯甲硫 基丙氨基)-萘基-1-羰基〕-L-蛋氨酸与1.0cm3乙二硫醇 的混合物中于约20℃加入20cm3三氟乙酸。在约20℃搅拌2小时， 减压浓缩。用25cm3乙醚研磨残余物3次，减压干燥。用高性能液 相色谱(相C18)提纯残余物，用含0.1％三氟乙酸的乙腈-水混 合物洗提。得到0.14g粉状N-〔6-(2(R)-氨基-3-巯基 丙氨基)萘基-1-羰基〕-L-蛋氨酸三氟乙酸盐，其特征在于：

-质子核磁共振谱：                           (300 MHz，(CD3)2SOd6，δ

ppm)：2，05(mt，2H：CH2)；2，10(s，3H：SCH3)；2，62和2，88(2 mts，2H

chacun：CH2S)；3，30～3，70(mt，3H：CHN和NCH2)；4，58(mt，1H：

CHCOO)；6，20(mf，1H：ArNH)；6.92(s宽峰，1H：H5)；7，05(dd，J＝9和1，5

Hz，1H：H7)；7，28和7，70(2d，J＝7，5 Hz，1H：H2和H4)；7，40

(t，J＝7，5 Hz，1H：H3)；8，08(d宽峰，J＝9 Hz，1H：H8)；8，09(mf，3H：

NH3+)；8，70(d，)＝7，5 Hz，1H：CONH)

       元素分析：C19H25N3O3S2，1，4CF3CO2H：

             计算值(％)：C＝46，16；H＝4，69；N＝7，41；S＝11，31

             实测值(％)：C＝46，13；H＝4，59；N＝7，45；S＝11，25.

实施例20

按照实施例19中制备N-〔6-(2(R)-氨基-3-巯基 丙氨基)-萘基-1-羰基〕-L-蛋氨酸三氟乙酸盐的制备方法 进行操作，所不同的是以0.6g N-〔6-(2(R)-叔丁氧羰基氨 基-3-三苯甲硫基丙氨基)萘基-1-羰基〕-L-蛋氨酸甲酯 为原料，得到0.15g N-〔6-(2(R)-氨基-3-巯基丙氨基) 萘基-1-羰基〕-L-蛋氨酸甲酯的三氟乙酸盐，其特征在于：

-质子核磁共振谱：               (300 MHz，(CD3)2SOd6

      加入几滴CD3COODd4，δppm)：2，05(mt，2H：CH2)；

2，05(s，3H：SCH3)；2，56和2，83(2 mrs，2H：CH2S)；3，35～3，60(mt，

3H：CHN和NCH2)；3，68(s，3H：COOCH3)；4，54(mt，1H：CHCOO)；6.90(d，

J＝1，5 Hz，1H：H5)；7，03(dd，J＝9和1，5 Hz，1H：H7)；7，28和7，67(2d，

J＝7，5 Hz，1H：H2和H4)；7，34(t，J＝7，5 Hz，1H：H3)；8，00(d

宽峰，J＝9 Hz，1H：H8).

        元素分析：C20H27N3O3S2，1，2 CF3CO2H

          计算值(％)：C＝48，19；H＝5，09；N＝7，52；S＝11，48

          实测值(％)：C＝48，05；H＝4，98；N＝7，75；S＝11，80.

实施例21

向由0.57g间氯过苯甲酸于6cm3CH2Cl2中形成的约0℃溶液 中在10分钟内滴加0.5g溶于4cm3CH2Cl2中的N-〔(6-硝基 萘基)-1-羰基〕-L-蛋氨酸甲酯。在约20℃将反应混合物 搅拌20小时，冷却至约0℃。加入5cm3NaOH标准溶液。倾析后， 用10cm3CH2Cl2萃取水相2次。合并有机相，用NaCl饱和水溶液 洗涤，用MgSO4干燥，过滤，减压浓缩至干。得到0.6g 2(S) -(6-硝基-1-萘甲酰氨基)-4-甲磺酰基丁酸甲酯，无需 进一步提纯便可用于后续步骤。    

向0.42g溶于30cm3乙酸乙酯和20cm3乙醇的2(S)-(6 -硝基-1-萘甲酰氨基)-4-甲磺酰基丁酸甲酯的溶液中加入 0.04g10％钯/碳，在约20℃将该溶液置于1.5大气压的氢压力下， 历时3小时。用配有C盐的烧结玻璃过滤反应混合物并且减压浓缩 至干，得到0.6g 2(S)-(6-氨基-1-萘甲酰氨基)-4- 甲磺酰基丁酸甲酯，其特征如下：

-质子核磁共振谱：             (300 MHz，(CD3)2SO d6

    加入数滴CD3COOD d4，δppm)：2，10～2，40(mt，2H：CH2)；3，00

(s，3H：SO2CH3)；3，15～3，40(mt，2H：CH2SO2)；3，75(s，3H：COOCH3)；

4，67(mt，1H：CHCOO)；6.89(d，J＝2 Hz，1H：H5)；7，01(dd，J＝9和2 Hz，1H：

H7)；7，25(d宽峰)，J＝7，5 Hz，1H：H2)；7，32(t，J＝7，5 Hz，1H：H3)；7，63(d

宽峰，J＝7，5 Hz，1H：H4)；7，95(d，J＝9 Hz，1H：H8)；8，85(d残基，J＝7，5

Hz：ArCONH). 

按照实施例19中制备N-〔6-(2-(R)-叔丁氧羰基氨基 -3-三苯甲硫丙氨基)萘基-1-羰基〕-L-蛋氨酸甲酯的方 法进行操作，所不同的是以0.4g 2(S)-(6-氨基-1-萘甲 酰氨基〕-4-甲磺酰基丁酸甲酯为原料，得到0.55g 2(S)- 〔6-(2(R)-叔丁氧羰基氨基-3-三苯甲硫基丙氨基)-1- 萘甲酰氨基(-4-甲磺酰基丁酸甲酯，其特征在于：

-质子核磁共振谱：                              (CD3)2SO d6，δppm)：

1，40(s，9H：OC(CH3)3)；2，20～2，45(mt，2H：CH2)；2，50～2，65(mt：

CH2S)；3，03(s，3H：SO2CH3)；2，95～3，40(mt，4H：NCH2和CH2SO2)；

3，70 3，85(mt，1H：CHN)；3，77(s，3H：COOCH3)；4，68(mt，1H：CHCOO)；

5，92(t宽峰，J＝5 Hz，1H：ArNH)；6.75(s宽峰，1H：H5)；6，90(d，J＝8 Hz，1H：

NHCOO)；6，94(d宽峰.J＝9 Hz，1H：H7)；7，25～7，45(mt，17H：SC(C6H5)3

-H2和H3)；7，65(d宽峰，J＝7，5 Hz，1H：H4)；7，95(d，J＝9 Hz，1H：H8)；

8，94(d，J＝7，5 Hz，1H：ArCONH).

按照实施例19中制备N-〔6-(2-(R)-叔丁氧羰基氨基 -3-三苯甲硫丙氨基)萘基-1-羰基〕-L-蛋氨酸的方法进 行操作，所不同的是以0.36g 2(S)-〔6-(2(R)-叔丁氧羰 基氨基-3-三苯甲硫基丙氨基)-1-萘甲酰氨基〕-4-甲磺 酰基丁酸甲酯为原料，得到0.35g 2(S)-〔6-(2(R)-叔丁 氧羰基氨基-3-三苯甲硫基丙氨基)-1-萘甲酰氨基〕-4- 甲磺酰基丁酸，无需进一步提纯便可用于后续步骤。

按照实施例19中制备N-〔6-(2-(R)-氨基-3-巯基 丙氨基)萘基-1-羰基〕-L-蛋氨酸三氟乙酸盐的方法进行操 作，所不同的是以0.35g 2(S)-〔6-(2(R)-叔丁氧羰基氨 基-3-三苯甲硫基丙氨基)-1-萘甲酰氨基〕-4-甲磺酰基 丁酸为原料，得到0.132g 2(S)-〔6-(2(R)-氨基-3-巯 基丙氨基)-1-萘甲酰氨基〕-4-甲磺酰基丁酸三氟乙酸盐， 其特征在于：

-质子核磁共振谱：                                 (CD3)2SOd6，δppm)：

2，10～2，45(mt，2H：CH2)；2，90(mt，2H：CH2S)；3，04(s，3H：SO2CH3)；

3，15～3，70(mt：CH2SO2和NCH2CHN)；4，60(mt，1H：CHCOO)；6，24(mf，1H：

ArNH)；6.94(d，J＝2 Hz，1H：H5)；7，08(dd，J＝9和2 Hz，1H：H7)；7，35(d

宽峰，J＝7，5 Hz，1H：H2)；7，42(t，J＝7，5 Hz，1H：H3)；7，72(d宽峰，J＝7，5 Hz，

1H：H4)；8，05(d，J＝9 Hz，1H：H8)；8，08(mf，3H：NH3+CF3COO-)；8，83(d，

J＝7，5 Hz，1H：ArCONH).

          元素分析：C19H25N3O5S2，1，6CF3CO2H：

        计算值(％)：    C＝42，87；H＝4，31；N＝6，76；S＝10，31

        实测值(％)：    C＝42，4；H＝4，2；N＝6，9；S＝10，4

实施例22

按照实施例19中制备N-〔6-(2-(R)-氨基-3-巯基 丙氨基)萘基-1-羰基〕-L-蛋氨酸三氟乙酸盐的方法进行操 作，所不同的是以0.16g 2(S)-〔6-(2(R)-叔丁氧羰基氨 基-3-三苯甲硫基丙氨基)-1-萘甲酰氨基〕-4-甲磺酰基 丁酸甲酯为原料，得到0.035g 2(S)-〔6-(2(R)-氨基-3 -巯基丙氨基)-1-萘甲酰氨基〕-4-甲磺酰基丁酸甲酯三氟 乙酸盐，其特征在于：

-质子核磁共振谱：                      (300 MHz，(CD3)2SO d6，δppm)：

2，25～2，40(mt，2H：CH2)；2，91(mt，2H：CH2S)；3，04(s，3H：SO2CH3)；

3，20～3，65(mt：CH2SO2和NCH2CHN)；3，77(s，3H：COOCH3)；4，67(mt，1H：

CHCOO)；6，24(mf，1H：ArNH)；6.94(d，J＝2 Hz，1H：H5)；7，08(dd，J＝9和2

Hz，1H：H7)；7，35(d宽峰，J＝7，5 Hz，1H：H2)；7，42(t，J＝7，5 Hz，1H：H3)；

7，65(d宽峰J＝7，5 Hz，1H：H4)；8，05(d，J＝9 Hz，1H：H8)；8，08(mf，3H：

NH3+CF3COO-)；8，95(d，J＝7，5 Hz，1H：ArCONH)

       元素分析：C20H27N3O5S2，1，25CF3CO2H：

      计算值(％)：    C＝45，34；H＝4，78；N＝7，05；S＝10，76

      实测值(％)：C＝44，4；H＝4，4；N＝7，0；S＝10，7

实施例23

按照实施例17中制备N-〔6-(2-(R)-叔丁氧羰基氨基 -3-三苯甲硫丙酰氨基)萘基-1-羰基〕-L-蛋氨酸甲酯的 方法进行操作，所不同的是以0.66g N-〔(6-氨基萘基)-1 -羰基〕-L-蛋氨酸甲酯和0.48gN，N’-二叔丁氧羰基胱氨酸 为原料，得到0.7g二-{N-〔6-(2(R)-叔丁氧羰基氨基-3 -硫烷基丙酰氨基)萘基-1-羰基〕-L-蛋氨酸二甲酯，无须 进一步提纯便可用于后续步骤。

按照实施例17中制备N-〔6-(2(R)-氨基-3-巯基丙 酰氨基)萘基-1-羰基〕-L-蛋氨酸三氟乙酸盐的方法进行操 作，所不同的是以0.3g二-{N-〔6-(2(R)-叔丁氧羰基氨基 -3-硫烷基丙酰氨基)萘基-1-羰基〕-L-蛋氨酸}二甲酯 为原料，得到0.06g二-{N-〔 6-(2(R)-氨基-3-硫烷基 丙酰氨基)萘基-1-羰基〕-L-蛋氨酸}二甲酯三氟乙酸盐， 其特征在于：

-质子核磁共振谱：                        (400 MHz，(CD3)2SO d6，δ

ppm)：2，00～2，15(mt，2H：CH2)；2，08(s，3H：SCH3)；2，62(mt，2H：

CH2S)；3，22和3，44(dd和mt，J＝14 et 8 Hz，1H：CH2S)；

3，72(s，3H：COOCH3)；4，32(mt，1H：CHN)；4，67(mt，1H：CHCOO)；7，50～

7，60(mt，2H：H2和H3)；7，68(dd，J＝9和2 Hz，1H：H7)；7，97(d宽峰，J＝8，5

Hz，1H：H4)；8，24(d，J＝9 Hz，1H：H8)；8，35(d，J＝2 Hz，1H：H5)；8，53(mf，

2H：NH3+CF3COO-)；8，98(d，J＝8 Hz，1H：ArCONH)；10，92(s，1H：ArNHCO)

       元素分析：C40H48N6O8S4，2 CF3CO2H，二水合物：

     计算值(％)：     C＝46，6；H＝4，75；N＝7，4；S＝11，3

     实测值(％)：     C＝46，6；H＝4，5；N＝7，1；S＝11，0

可以在下列试验中证明蛋白质Ras的法呢基转移酶和法呢基 化作用的抑制活性。

法呢基转移酶的活性是通过被转移的(3H)法呢基的数量由 蛋白质P21H-Ras上的(3H)焦磷酸法呢酯〔(3H)FPP〕 来确定。最终体积为60μl的标准反应混合物的组成如下：三羟 甲基氨基甲烷-HCl 50mM，MgCl2 5mM，二硫苏糖醇5mM， 辛基-β-D-吡喃葡糖苷0.2％，P21H-ras 200皮摩尔，， (3H)FPP(61000dpm/皮摩尔)4.5皮摩尔。

通过添加约5ng由THP1细胞培养物提纯得到的人体法呢基 转移酶来引发反应。在有96个1cm3孔的微量滴定平皿(Titer Plate，Beckman)上于37℃培养20分钟后，通过添加0.4cm30.1 ％处于甲醇之中的0℃SDS来终止反应。随后加入30％处于甲醇 之中的三氯乙酸(TCA)。将平皿放置于冰中1小时。用过滤装 置(Combi Cell Harvester，Spatron)在玻璃纤维膜(Filtermat Pharmacia)上回收沉淀物并用6％处于蒸馏水中的三氯乙酸进 行清洗。用微波炉干燥这些膜，随后用通过在热空气中熔融形成的 闪烁体(MeltilexPharmacia)进行浸渍，最后在β-Plate (LKB)计数器中计数(cpm)。每一试验重复3次。

活性单元被定义为在20分钟内在P21H-Ras上有1皮摩尔 (3H)FPP被转移。

通过将在有或无抑制剂存在的条件下进行的试验经过空白扣 除之后进行对比得到抑制百分比，IC50为由9种不同浓度采用 Enzfitter或Grafit软件得到的抑制效果测量值。

可以下列方式确定细胞活性：

细胞系为THAC系(被活性Ha-Ras转染的细胞CCL39， K.Sennuen等人，EMBOJ.，7(1)161-168(1988))。这 些细胞在含DMEM介质、5％胎牛血清，1％ G418的直径为 6cm的培替培养皿中被接种。

培养24小时之后，改变培养介质(采用或不采用血清)，将 所研究的化合物在有或无DTT存在条件下以二甲基甲酰胺 (DMF)溶液的形式加入其中(DMF的最终浓度为0.5％， 0.1mMDTT)。于37℃培养24小时后，在1cm3裂解缓冲液(三 羟甲基氨基甲烷HCl20mM，三硝基甲苯X1141％，MgCl25mM，DTT7mM，NaCl150mM，pH＝7.4)中裂解细胞。在10 分钟内以4000转/分的转速通过离心分离澄清裂解物。用三硝基甲 苯(Triton)X114进行萃取能够将法尼基化蛋白Ras与非法尼基 化蛋白Ras相互分离〔 C.BORDIER，J.Biol.Chem.256(4)，1604 -1607(1981)〕。憎水性更强的法尼基化蛋白Ras存在于去污 剂相中，而非法尼基化蛋白Ras存在于水相中。在用于在14％聚 丙烯酰胺凝胶上进行电泳和沉积的变性缓冲剂中通过于95℃加热 将样品变性。当着色剂到达凝胶下部时，凝胶的蛋白质在PVDF隔 膜上被转移。借助蛋白质印迹法提取蛋白质Ras：用特异性的抗 Ras(pan-Ras Ab3，OncogeneScience)单克隆抗体随后用125I 标记蛋白质A培养膜。经过自动射线照相术，识别分割谱带并用γ 计数器计数。与法尼基化Ras和非法尼基化Ras对应的谱带的放射 活性可以确定蛋白质Ras的法尼基化作用的抑制活性。

结果如表1所示。

表1 化合物    抑制活性IC50   对细胞(THAC)的抑制作用(％) 实施例1    48 实施例3    5，6 实施例5    69 实施例8    100 实施例9    70 实施例10    21 实施例19    1，8       31～50μM 实施例20    80         50～10μM 实施例21    4mM

新型化合物I呈无毒性和药物可接受的盐的形式。这些无毒盐 包括与无机酸(盐酸、硫酸、氢溴酸、磷酸、硝酸)或与有机酸(乙 酸、三氟乙酸、丙酸、琥珀酸、马来酸、羟基马来酸、苯甲酸、富 马酸、甲磺酸或草酸)或与无机碱(氢氧化钾、氢氧化锂、碳酸钠、 石灰)或有机碱(叔胺如三乙胺、哌啶、苄胺)根据化合物I中R1 和R2的性质形成的盐。

本发明还涉及含有至少一种与一种或多种惰性或生理活性且 药物可接受稀释剂或助剂缔合的化合物I的药物组合物。

这些组合物可以口服、非肠胃或直肠方式给药。

口服组合物包括片剂、丸剂、粉剂或粒剂。其中本发明活性化 合物与一种或多种惰性稀释剂如蔗糖、乳糖或淀粉混合。其中还可 以含有除了稀释剂以外的其它物质如润滑剂例如硬脂酸镁。

作为口服液体组合物，可以选用药物可接受的乳液、溶液、悬 液液、糖浆、含有惰性稀释剂如水或石蜡油的酏剂。其中还可以含 有除了稀释剂以外的其它物质例如润湿剂、甜味剂或芳香剂。

用于非肠胃给药的本发明组合物可以是含水或非水无菌溶 液、悬浮液或乳液。作为溶剂或赋形剂，可以采用丙二醇、聚乙二 醇、植物油、尤其是橄榄油或可注射有机酯如油酸乙酯。其中还可 以含有助剂，尤其是润湿剂、乳化剂和分散剂、可以采用多种方法 例如借助细菌过滤器向组合物中加入杀菌剂或通过加热来进行灭 菌步骤。这些组合物还可被制成在使用时能够被溶于无菌水中或其 他可注射无菌介质中的无菌固体组合物。

适用于直肠给药的组合物为除了活性化合物以外还含有赋形 剂如可可油的栓剂。

本发明组合物特别适用于治疗人体不同器官的癌症。

人体治疗剂量取决于所期望的疗效、疗程和治疗客体的自身因 素。

一般地，人体腹膜内给药剂量包括在0.1-20mg/kg/天。

下列实施例描述本发明组合物。

实施例

将实施例1得到的化合物200mg溶于100cm3生理盐水之中。 将所形成的溶液以无菌方式分配于10cm3安瓿瓶中。

以一次性注射或灌注的方式施用这些安瓿给药。