首页 / 专利库 / 植物油脂 / 植物油 / 鳄梨油 / 应激相关多肽及其用途

应激相关多肽及其用途

阅读:40发布:2021-04-08

专利汇可以提供应激相关多肽及其用途专利检索,专利查询,专利分析的服务。并且本 发明 公开了参与或与 植物 中的应激反应( 生物 和非生物应激)相关的 蛋白质 和编码这些蛋白质的核酸。本发明还公开了这些蛋白质的用途。,下面是应激相关多肽及其用途专利的具体信息内容。

1.一种编码应激相关多肽的分离的核酸分子,其中所述多肽在 酵母双杂交分析法中与一种选自如下一组的蛋白质片段结合: OsGF14-c(SEQ IDNO:113),OsDAD1(SEQ ID NO:128), Os006819-2510(SEQ ID NO:20),OsCRTC(SEQ ID NO:134), OsSGT1(SEQ ID NO:144),OsERP(SEQ ID NO:146),OsCHIB1(SEQ ID NO:152),OsCS(SEQ ID NO:156),OsPP2A-2(SEQ ID NO:164)和 OsCAA90866(SEQ ID NO:170)。
2.权利要求1的分离的核酸分子,其中所述分离的核酸分子来 源于稻(Oryza sativa)。
3.权利要求1的分离的核酸分子,其中所述分离的核酸分子包 含选自由SEQ ID NO:1-111中的奇数编号所组成的组的一种核酸序 列。
4.权利要求3的分离的核酸分子,其中所述分离的核酸分子包 含SEQ ID NO:1-15中的一个奇数编号所示的核酸序列,所述蛋白质 包含SEQ ID NO:114所示的基酸序列。
5.权利要求3的分离的核酸分子,其中所述分离的核酸分子包 含SEQ ID NO:7和17之一的核酸序列,所述蛋白质包含SEQ ID NO: 128所示的氨基酸序列。
6.权利要求3的分离的核酸分子,其中所述分离的核酸分子包 含SEQ ID NO:21-25中的一个奇数编号所示的核酸序列,所述蛋白 质包含SEQ ID NO:20所示的氨基酸序列。
7.权利要求3的分离的核酸分子,其中所述分离的核酸分子包 含SEQ ID NO:27所示的核酸序列,所述蛋白质包含SEQ ID NO:134 所示的氨基酸序列。
8.权利要求3的分离的核酸分子,其中所述分离的核酸分子包 含SEQ ID NO:29所示的核酸序列,所述蛋白质包含SEQ ID NO:138 所示的氨基酸序列。
9.权利要求3的分离的核酸分子,其中所述分离的核酸分子包 含SEQ ID NO:31-43中的一个奇数编号所示的核酸序列,所述蛋白 质包含SEQ ID NO:144所示的氨基酸序列。
10.权利要求3的分离的核酸分子,其中所述分离的核酸分子包 含SEQ ID NO:45-67中的一个奇数编号所示的核酸序列,所述蛋白 质包含SEQ ID NO:146所示的氨基酸序列。
11.权利要求3的分离的核酸分子,其中所述分离的核酸分子包 含SEQ ID NO:69所示的核酸序列,所述蛋白质包含SEQ ID NO:36 所示的氨基酸序列。
12.权利要求3的分离的核酸分子,其中所述分离的核酸分子包 含SEQ ID NO:71-77中的一个奇数编号所示的核酸序列,所述蛋白 质包含SEQ ID NO:152所示的氨基酸序列。
13.权利要求3的分离的核酸分子,其中所述分离的核酸分子包 含SEQ ID NO:79-95中的一个奇数编号所示的核酸序列,所述蛋白 质包含SEQ ID NO:156所示的氨基酸序列。
14.权利要求3的分离的核酸分子,其中所述分离的核酸分子包 含SEQ ID NO:97-105中的一个奇数编号所示的核酸序列,所述蛋白 质包含如SEQ ID NO:164所示的氨基酸序列。
15.权利要求3的分离的核酸分子,其中所述分离的核酸分子包 含SEQ ID NO:97和107-111中的一个奇数编号所示的核酸序列,所 述蛋白质包含SEQ ID NO:170所示的氨基酸序列。
16.一种编码应激相关多肽的分离的核酸分子,其中所述核酸分 子选自如下一组:
(a)编码包含SEQ ID NO:2-112中的一个偶数编号所示的氨基 酸序列的多肽的核酸分子;
(b)包含SEQ ID NO:1-111中的一个奇数编号所示的核酸序 列的核酸分子;
(c)具有与(a)或(b)的核酸分子的核酸序列至少90%相同 性的核酸序列的核酸分子;
(d)与(a)或(b)在选自如下一组的杂交条件下杂交的核酸分子, 所述组由以下所组成:
(i)在50℃于7%十二烷基硫酸钠(SDS)、0.5M NaPO4、 1mM乙二胺四乙酸(EDTA)中杂交,以及在50℃ 2X于标准柠檬酸盐 (SSC)、0.1%SDS中终洗涤;
(ii)在50℃于7%SDS、0.5M NaPO4、1mM EDTA中杂 交,以及在50℃于1X SSC、0.1%SDS中终洗涤;
(iii)在50℃于7%SDS、0.5M NaPO4、1mM EDTA中杂 交,以及在50℃于0.5X SSC、0.1%SDS中终洗涤;
(iv)在50℃于7%十二烷基硫酸钠(SDS)、0.5M NaPO4、 1mM EDTA中杂交,以及在50℃于0.1X SSC,0.1%SDS中终洗涤; 和
(v)在50℃于7%十二烷基硫酸钠(SDS)、0.5M NaPO4、 1mM EDTA中杂交,以及在65℃于0.1X SSC、0.1%SDS中终洗涤;
(e)包含与(a)完全互补的核酸序列的核酸分子;以及
(f)包含(a)的完全反向互补的核酸序列的核酸分子。
17.一种由权利要求16的分离的核酸分子编码的分离的应激相 关多肽,或其功能性片段、结构域或特征。
18.一种制备权利要求17的多肽的方法,该方法包括如下步骤:
(a)在合适的生长条件下培养包含表达盒的细胞,所述表达盒 包含权利要求16的核酸分子;以及
(b)从所述细胞中分离多肽。
19.一种包含权利要求1的分离的核酸分子的转基因植物细胞。
20.权利要求19的转基因植物,其中所述植物选自由以下所组 成的组:玉米(Zea mays)、芸苔属(Brassica sp.)、苜蓿(Medicago sativa)、水稻(Oryza sativa ssp.)、黑麦(Secale cereale)、高粱(Sorghum bicolor、Soeghum vulgare)、珍珠粟(Pennisetum glaucum)、粟米(Panicum miliaceum)、谷子(Setaria italica)、穇子(Eleusine coracana)、向日 葵(Helianthus annuus)、红花(Carthamus tinctorius)、小麦(Triticum aestivum)、大豆(Glycine max)、烟草(Nicotiana tabacum)、铃薯 (Solanum tuberosum)、花生(Arachis hypogaea)、花,甘薯(Ipomoea batatus)、木薯(Manihot esculenta)、咖啡(Cofea spp.)、椰子(Cocos nucifera)、凤梨(Ananas comosus)、柑桔树(Citrus spp.)、可可 (Theobroma cacao)、茶(Camellia sinensis)、香蕉(Musa spp.),鳄梨 (Persea ultilane)、无花果(Ficus casica)、番石榴(Psidium guajava)、芒 果(Mangifera indica)、橄榄(Olea europaea)、番木瓜(Carica papaya)、 腰果(Anacardium occidentale)、澳洲坚果(Macadamia integrifolia)、杏 仁(Prunus amygdalus)、甜菜(Beta vulgaris)、甘蔗(Saccharum spp.)、 燕麦、浮萍(Lemna)、大麦、蔬菜、观赏植物及针叶树。
21.权利要求20的转基因植物,其中所述植物是水稻(Oryza sativa ssp.)。
22.权利要求20的转基因植物,其中所述浮萍选自由浮萍属、 紫萍属、芜萍属和Wofiella属所组成的组。
23.权利要求20的转基因植物,其中所述蔬菜选自由番茄、莴 苣、瓜尔豆、豆、胡芦巴、大豆、四季豆、豇豆、绿豆、利马豆、 蚕豆、小扁豆、鹰嘴豆、青豆、利马豆、豌豆及香瓜属成员所组成的 组。
24.权利要求20的转基因植物,其中所述所述观赏植物选自由 凤仙花属、秋海棠属、天竺葵属、蓳菜属、仙客来属、马鞭草属、长 春花属、万寿菊属、报春花属、非洲紫罗兰属、藿香蓟属、苋属、金 鱼草属、耧斗菜属、瓜叶菊属、三叶草属、秋英属、豇豆属、大丽花 属、曼陀罗属、翠雀属、扶郎花属、唐菖蒲属、大岩桐属、朱顶红属、 松叶菊属、Salpiglossos、百日草属、杜鹃花属、八仙花属、木槿属、 蔷薇属、郁金香属、水仙属、矮牵属、石竹属、大戟属和菊属植物 组成的组。
25.权利要求20的转基因植物,其中所述针叶树选自由火炬松、 湿地松、美国黄松、黑松、辐射松、道格拉斯冷杉、西部杉、特 卡杉、红杉、枞、香脂冷杉、西部红柏及阿拉斯加黄柏。
26.权利要求19的转基因植物,其中所述转基因植物选自金合 欢属、小茴香、朝鲜蓟、芝麻菜、黑莓、canola、芫荽、克莱氏小 柑橘、宽叶莴苣、桉树、茴香、葡萄柚、哈蜜瓜、豆薯、猕猴桃、柠 檬、酸橙、蘑菇、坚果、黄秋葵、柑桔、欧芹、柿子、车前草、石榴、 白杨、辐射松、菊苣、南方松、枫香、柑橘树、黑小麦、藤本植物、 山药、苹果、梨、温柏、樱桃、杏、甜瓜、大麻、荞麦、葡萄、树莓、 藜、蓝莓、油桃、桃、李子、草莓、西瓜、茄子、胡椒、花椰菜、芸 苔、椰菜、甘蓝、ultilan sprouts、洋葱、胡萝卜、韭菜、甜菜、蚕豆、 芹菜、萝卜、南瓜、菊苣、葫芦、大蒜、四季豆、菠菜、南瓜(squash)、 芜箐、ultilane及绿皮西葫芦(zucchini)。
27.一种分离的应激相关多肽,其中所述多肽在酵母双杂交分析 法中结合选自如下一组的蛋白片段,所述组由OsGF14-c(SEQ ID NO: 113),OsDAD1(SEQ ID NO:128),Os006819-2510(SEQ ID NO:20), OsCRTC(SEQ ID NO:134),OsSGT1(SEQ ID NO:144),OsERP(SEQ ID NO:146),OsCHIB1(SEQ ID NO:152),OsCS(SEQ ID NO:156), OsPP2A-2(SEQ ID NO:164)和OsCAA90866(SEQ ID NO:170)所组 成。
28.权利要求17的分离的应激相关多肽,其中所述分离的应激 相关多肽选自由以下所组成的组:
(a)包含SEQ ID NO:2-112中的偶数编号的氨基酸序列的多肽; 以及
(b)包含与(a)的多肽有至少80%相似性的氨基酸序列的多 肽,其相似性是使用具有默认GAP分析参数的GAP GCG Wisconsin Package SEQWEB_应用软件确定的。
29.权利要求28的分离的应激相关多肽,其中所述多肽包含SEQ ID NO:2-112中的一个偶数编号所示的氨基酸序列。
30.一种包含编码权利要求1的应激相关多肽的核酸分子的表达 盒。
31.权利要求30的表达盒,其中所述编码应激相关多肽的核酸 分子包含一个选自SEQ ID NO:1-111中的一个奇数编号所示的核酸 序列。
32.权利要求30的表达盒,其中所述表达盒还包含一个可操纵 地连接到所述核酸分子的调控元件。
33.权利要求32的表达盒,其中所述调控元件包含一个启动子。
34.权利要求33的表达盒,其中所述启动子是一种植物启动子。
35.权利要求33的表达盒,其中所述启动子是一种组成型启动 子。
36.权利要求33的表达盒,其中所述启动子是一种组织特异性 或细胞类型特异性启动子。
37.权利要求36的表达盒,其中所述组织特异性或细胞类型特 异性启动子指导所述表达盒在选自表皮、根部、维管组织、分生组织、 形成层、皮层、木髓、叶、花、种子及其组合的部位中表达。
38.一种包含权利要求30的表达盒的转基因植物细胞。
39.权利要求38的转基因植物细胞,其中所述分离的核酸分子 包含SEQ ID NO:1-111中的一个奇数编号所示的核酸序列。
40.一种包含权利要求30的表达盒的转基因植物。
41.权利要求40的转基因植物的转基因种子或后代。
42.一种调节植物细胞应激反应的方法,该方法包括将包含编码 应激相关多肽的分离的核酸分子的表达盒导入所述植物细胞,其中所 述多肽在酵母双杂交分析法中结合到选自如下一组的蛋白片段: OsGF14-c(SEQ ID NO:113),OsDAD1(SEQ ID NO:128), Os006819-2510(SEQ ID NO:20),OsCRTC(SEQ ID NO:134), OsSGT1(SEQ ID NO:144),OsERP(SEQ ID NO:146),OsCHIB1(SEQ ID NO:152),OsCS(SEQ ID NO:156),OsPP2A-2(SEQ ID NO:164)和 OsCAA90866(SEQ ID NO:170)。
43.权利要求42的方法,其中所述多肽在细胞中的表达导致所 述细胞增殖的速度或程度增强。
44.权利要求42的方法,其中所述多肽在细胞中的表达导致所 述细胞增殖的速度和程度降低。
45.权利要求42的方法,其中所述分离的核酸分子包含选自SEQ ID NO:1-173中的一个奇数编号所示的核酸序列。
46.权利要求45的方法,其中所述分离的核酸分子包含选自SEQ ID NO:1-111中的一个奇数编号所示的核酸序列。

说明书全文

相关申请的交叉参考

本申请以2002年12月26日提交的美国临时申请序列号60/463, 564为基础,并要求其优先权,该申请在此通过引用将其全文并入本 发明

技术领域

本发明所公开的主题一般地涉及转基因植物。更具体地,本发明 所公开的主题涉及应激相关多肽、编码该多肽的核酸分子及其用途。
缩略表
ABA-脱落酸
AOS-活性物质
FPD-功能蛋白域
HR-过敏反应
HSPs-高分值片段
LR-局部抵抗
PP2A-2A型丝酸/苏氨酸蛋白磷酸
SA-杨酸
SAR-系统获得性抵抗
氨基酸缩写和相应的mRNA密码子
          3字母      1字母
氨基酸                         mRNA密码子
          代码       代码
丙氨酸    Ala        A         GCA GCC GCG GCU
精氨酸                         AGA AGG CGA CGC CGG
                               CGU
天冬酰胺  Asn        N         AAC AAU
天冬氨酸  Asp        D         GAC GAU
半胱氨酸  Cys        C         UGC UGU
谷氨酸    Glu        E         GAA GAG
谷氨酰胺  Gln        Q         CAA CAG
甘氨酸    Gly        G         GGA GGC GGG GGU
组氨酸    His        H         CAC CAU
异亮氨酸  Ile        I         AUA AUC AUU
亮氨酸                         UUA UUG CUA CUC CUG
          Leu        L
                               CUU
赖氨酸    Lys        K         AAA AAG
甲硫氨酸  Met        M         AUG
脯氨酸    Pro        P         CCA CCC CCG CCU
苯丙氨酸  Phe        F         UUC UUU
丝氨酸                         ACG AGU UCA UCC UCG
          Ser        S
                               UCU
苏氨酸    Thr        T         ACA ACC ACG ACU
色氨酸    Trp        W         UGG
酪氨酸    Tyr        Y         UAC UAU
缬氨酸    Val        V         GUA GUC GUG GUU

背景技术

由于一些主要的人类主食,单子叶植物如水稻、谷物和小麦,已 经成为抗病、抗害虫和抗各种环境应激的遗传工程目标。植物-病原 体间相互作用及协同参与对环境应激反应的蛋白复杂网络的知识在 农业上有重要的应用,提供了控制疾病的新方法。对参与应激反应的 蛋白之间相互作用的调节能用于开发对抗病原体的遗传工程化植物。 为农业产量的提高,抗害虫农作物的生产可以作为一种对环境破坏性 杀虫剂的替代。
例如,调节先天性免疫的信号通路的详细认识有助于开发持久的 作物保护策略。对疾病的抗性发生在几个水平上,包括局部和非特异 性的系统反应。植物的过敏反应(HR)是对病原生物产生局部抵 抗的机制,其特征在于在感染部位快速和局部化的组织萎缩和细胞死 亡,导致侵入的病原体的固定。该过程由病原体诱导子(elicitor)触 发并由攻击之后迅速发生(Lamb和Dixon,1997)的氧化爆发(oxidative burst)所组织。活性氧物质(AOS)的聚积是植物对生物和非生物应 激反应的过程中的一个中心主题。AOS在过敏反应开始时产生并可 能对感染初始阶段杀死宿主组织中发挥了作用。AOS也作为信号分 子,该信号分子诱导PR基因表达并诱导参与导致PR基因诱导的信 号级联的其它信号分子的产生。防御基因的触发能扩展到非感染组织 和整个植物,导致局部抵抗(LR)和系统获得性抵抗(SAR,如Martinez 等,2000所述)。作为SAR的结果,提供了该植物的其它部分对相 同和不相关病原体的长效保护。
来自氧化爆发的过氧化氢不仅通过启动细胞壁结构蛋白的交联, 而且通过触发在遭攻击细胞中的细胞死亡在局部化过敏反应中扮演 了重要的色,它还作为一个扩散信号在编码如谷胱甘肽S-转移酶和 谷胱甘肽过氧化物酶(Levine等,1994)这样的细胞保护剂的基因的邻 近细胞中诱导水杨酸(SA)的生成。SA被认为在LR和SAR中通过SA 自由基的产生作为信号分子,SA自由基可能是SA与过氧化氢酶和 过氧化物酶相互作用的副产品,如Martinez等,2000所报道。这些 作者指出在经受HR的细胞中,花对细菌病原体的识别在SA产生 之前触发了氧化爆发,并且过氧化氢对于SA局部和系统的聚集是必 需的,因此该识别是作为LR和SAR的初始信号。Chen等,1993年 已经阐述过过氧化氢酶参与植物中SA介导的SAR诱导,显示过氧 化氢酶与SA的结合导致过氧化氢酶活性的抑制,且随后的过氧化氢 的聚集诱导了与SAR有关的防御相关基因的表达。
细胞壁通过从病原体表面称为诱导子的分子接受信息,并通过将 这一信息传送给植物细胞质膜,从而在对细菌和真菌病原体的防御中 也能扮演重要的角色,导致引起抗性的基因活化过程。由诱导子诱导 的并与过敏反应相关的一类生物化学反应是真菌或细菌感染后在植 物中产生的植物抗毒素、抗微生物化合物的合成和聚集 (Hammerschmidt,1999所述)。其它反应可涉及激活其它信号分子 的蛋白酶的表达以及允许所述植物对病原体攻击引起的物理损伤有 形态学改变反应的酶的表达。
应激反应不与其它细胞过程独立发生,但能和植物生长和发育的 其它方面例如对细胞周期和衰老的控制密切关联。已知一些蛋白在细 胞生长和发育的一般途径中和对具体应激的反应中均起作用。例如 2A型丝氨酸/苏氨酸蛋白磷酸酶(PP2A)是信号转导的重要调控子, 它们通过其它蛋白的去磷酸化作用影响信号转导(Janssens和Goris, 2001)。在植物和其它生物中有多种PP2A同种型,并且它们在不同 组织中和在发育的不同阶段看起来是差异表达的(Arino等,1993)。 Harris等引证了大量描述除调节亚单位外PP2A亚单位与多种细胞蛋 白相关的报告,表明PP2A作为与蛋白合成、细胞周期和细胞凋亡相 关的多种信号通路的调控子发挥作用(Harris等,1999)。PP2A酶被 暗示是参与多种植物生长和发育过程的介导物。
另外,PP2A酶在病原体入侵中起作用。在动物体内,多种病毒 蛋白靶定特异性PP2A酶以解除对宿主中选择的细胞通路的调节并促 进病毒后代的产生(Sontag,2001;Garcia等,2000)。PP2A酶和许多 细胞蛋白和病毒蛋白相互作用,且这些蛋白-蛋白间的相互作用对于 PP2A信号的调节是关键的(Sontag,同上)。例如,与PP2A(例如PP2A) 相互作用的蛋白可靶定PP2A到不同的亚细胞区室或影响PP2A酶的 活性。
为调节植物对生物和非生物应激的反应,需要对信号通路及蛋白 -蛋白间的相互作用的网络有更全面的理解。此外,为促进更耐受生 物和非生物应激的植物工程化,必需确定参与这些网络的其它因子。
发明概述
本概述列出了几个本发明所公开主题的实施方式,在很多情况下 列出了这些实施例的变异和替换。本概述仅仅是众多不同实施方式的 例证。提到的所给实施方式的一个或多个有代表性的特征也同样是例 证性的。这样的一个实施方式典型地可以在有或没有所提及的特征的 情况下存在;同样地,无论是否在本概述中列出,那些特征也可应用 于本发明的其它实施方式。为了避免过多的重复,本概述没有列出或 建议这些特征的所有可能组合。
本发明所公开的主题提供了参与控制和调控植物成熟和发育, 包括增殖、衰老、疾病抵抗、包括应激抵抗在内的应激反应和分化的 蛋白和编码这些蛋白的核酸。本发明所公开的主题提供了包含至少一 种如本文所述蛋白的组合物以及使用本文所公开的蛋白来影响植物 的成熟、发育和对应激的反应的方法。
本发明提供了一种编码应激相关多肽的分离的核酸分子,其中在 酵母双杂交分析中,所述多肽与选自由以下所组成的组的蛋白的片段 结合:OsGF14-c(SEQ IDNO:113),OsDAD1(SEQ ID NO:128), Os006819-2510(SEQ ID NO:20),OsCRTC(SEQ ID NO:134), OsSGT1(SEQ ID NO:144),OsERP(SEQ ID NO:146),OsCHIB1(SEQ ID NO:152),OsCS(SEQ ID NO:156),OsPP2A-2(SEQ ID NO:164) 和OsCAA90866(SEQ ID NO:170)。在一个实施方式中,该分离的核 酸分子衍生自水稻(Oryza sativa)。在另一个实施例中,该分离的核 酸分子包含选自由SEQ ID NO:1-111中的奇数编号所组成的组的核 酸序列。
本发明还提供了在应激相关蛋白和本文所公开的分离的核酸分 子所编码的多肽之间相互作用的说明。在一个实施方式中,该分离的 核酸分子包含SEQ ID NO:1-15中的一个奇数编号的核酸序列,该蛋 白包含SEQ ID NO:114所示的氨基酸序列。在另一个实施方式中, 该分离的核酸分子包含SEQ ID NO:7和17中的一个核酸序列,该蛋 白包含SEQ ID NO:128所示的氨基酸序列。在另一个实施方式中, 该分离的核酸分子包含SEQ ID NO:21-25中的其中一个奇数编号的 核酸序列,该蛋白包含SEQ ID NO:20所示的氨基酸序列。在另一个 实施方式中,该分离的核酸分子包含SEQ ID NO:27所示的核酸序 列,该蛋白包含SEQ ID NO:134所示的氨基酸序列。在一个实施方 式中,该分离的核酸分子包含SEQ ID NO:29所示的核酸序列,该蛋 白包含SEQ ID NO:138所示的氨基酸序列。在另一个实施方式中, 该分离的核酸分子包含SEQ ID NO:31-43中的其中一个奇数编号的 核酸序列,该蛋白包含SEQ ID NO:144所示的氨基酸序列。在另一 个实施方式中,该分离的核酸分子包含SEQ ID NO:45-67中的一个 奇数编号所示的核酸序列,该蛋白包含SEQ ID NO:146所示的氨基 酸序列。在另一个实施方式中,该分离的核酸分子包含SEQ ID NO:69 所示的核酸序列,该蛋白包含SEQ ID NO:36所示的氨基酸序列。在 另一个实施方式中,该分离的核酸分子包含SEQ ID NO:71-77中的 一个奇数编号所示的核酸序列,该蛋白包含SEQ ID NO:152所示的 氨基酸序列。在另一个实施方式中,该分离的核酸分子包含SEQ ID NO:79-95中的一个奇数编号所示的核酸序列,该蛋白包含SEQ ID NO:156所示的氨基酸序列。在另一个实施方式中,该分离的核酸分 子包含SEQ ID NO:97-105中的一个奇数编号所示的核酸序列,该蛋 白包含SEQ ID NO:164所示的氨基酸序列。在另一个实施方式中, 该分离的核酸分子包含SEQ ID NO:97和107-111中的一个奇数编号 所示的核酸序列,该蛋白包含SEQ ID NO:170所示的氨基酸序列。
本发明还提供了一种编码应激相关多肽的分离的核酸分子,其 中该核酸分子选自由以下所组成的组:
(a)编码包含SEQ ID NO:2-112中的一个偶数编号所示的氨基 酸序列的多肽的核酸分子;
(b)包含SEQ ID NO:1-111中的一个奇数编号所示的核酸序 列的核酸分子;
(c)与(a)或(b)的核酸分子的核酸序列具有至少90%相同 性的核酸序列的核酸分子;
(d)在选自由以下所组成的组的杂交条件下,与(a)或(b)杂交的 核酸分子,所述的组为:
(i)于50℃的7%十二烷基硫酸钠(SDS)、0.5M NaPO4、 1mM乙二胺四乙酸(EDTA),以及50℃的于2X标准柠檬酸盐(SSC)、 0.1% SDS中的终洗涤液;
(ii)于50℃的7% SDS、0.5M NaPO4、1mM EDTA,以 及50℃的于1X SSC、0.1% SDS中的终洗涤液;
(iii)于50℃的7% SDS、0.5M NaPO4、1mM EDTA,以 及50℃的于0.5X SSC、0.1% SDS中的终洗涤液;
(iv)于50℃的7%十二烷基硫酸钠(SDS)、0.5M NaPO4、 1mM EDTA,以及50℃的于0.1X SSC,0.1% SDS中的终洗涤液;和
(v)于50℃的7%十二烷基硫酸钠(SDS)、0.5M NaPO4、 1mM EDTA,以及65℃的于0.1X SSC、0.1% SDS中的终洗涤液;
(e)包含与(a)完全互补的核酸序列的核酸分子;以及
(f)包含(a)的完全反向互补的核酸序列的核酸分子。
本发明还提供了一种由本发明公开的分离的核酸分子编码的分 离的应激相关多肽,或其功能片段、结构域或特征。
本发明还提供了一种制备本文公开的多肽的方法,该方法包括 以下步骤:(a)在合适的生长条件下培养包含表达盒的细胞,所述表达 盒包含本文所公开的核酸分子;和(b)从所述细胞中分离所述多肽。
本发明还提供了包含本文所公开的分离的核酸分子的转基因植 物细胞。在一个实施方式中,所述植物选自由以下所组成的组:玉米 (Zea mays)、芸苔,紫花苜蓿(Medicago sativa L.),水稻(Oryza sativa ssp.),黑麦(Secale cereale)、高梁(Sorghum bicolor,Sorghum vulgare)、 珍珠粟(Pennisetum glaucum)、稷(Panicum miliaceum)、谷子(Setaria italica)、穇子(Eleusine coracana)、向日葵(Helianthus annuus)、 红花(Carthamus tinctorius)、小麦(Triticum aestivum)、大豆(Glycine max)、烟草(Nicotiana tabacum)、铃薯(Solanum tuberosum)、 花生(Arachis hypogaea)、棉花、甘薯(Ipomoea batatus)、木薯(Manihot esculenta)、咖啡(Cofea spp.)、椰子(Cocos nucifera)、凤梨(Ananas comosus)、柑桔树(Citrus spp.)、可可树(Theobroma cacao)、茶 树(Camellia sinensis)、芭蕉(Musa spp.)、鳄梨(Persea ultilane)、 无花果(Ficus casica)、番石榴(Psidium guajava)、芒果(Mangifera indica)、橄榄树(Olea europaea)、番木瓜树(Carica papaya)、腰 果树(Anacardium occidentale)、澳大利亚坚果(Macadamia integrifolia)、杏树(Prunus amygdalus)、甜菜(Beta vulgaris)、甘 蔗(Saccharum spp.)、燕麦、浮萍(Lemna)、大麦、蔬菜、观赏植 物以及针叶树。在另一个实施例中,所述植物是水稻(Oryza sativa ssp.)。在一个实施例中,浮萍选自由以下所组成的组:浮萍属、紫萍 属、芜萍属和wofiella属。在一个实施例中,所述蔬菜选自由以下所 组成的组:番茄、莴苣、瓜尔豆、角豆、胡芦巴、大豆、菜用豆类、 豇豆、绿豆、利马豆、蚕豆、小扁豆、鹰嘴豆、四季豆、利马豆、豌 豆以及香瓜属成员。在一个实施方式中,所述观赏植物选自由以下所 组成的组:凤仙花属植物、秋海棠属植物、天竺葵属植物、堇菜属植 物、仙客来属植物、马鞭草属植物、长春花属植物、万寿菊属植物、 报春花属植物、非洲紫罗兰属植物、藿香蓟属植物、苋属植物、金鱼 草属植物(Antihirrhinum、耧斗菜属植物、瓜叶菊属植物、三叶草属 植物、秋英属(Cosmo)、豇豆属植物、大丽花属植物、曼陀罗属植物、 翠雀属植物、扶郎花属植物、唐菖蒲属植物、大岩桐属植物、朱顶红 属植物、松叶菊属植物、Salpiglossos以及百日草属植物、杜鹃花属 植物、八仙花属植物、木槿属植物、蔷薇属植物、郁金香属植物、水 仙属植物、矮牵属植物、石竹属、大戟属植物和茼蒿属植物。在一 个实施方式中,所述针叶树选自由以下所组成的组:火炬松、湿地松、 美国黄松、美国黑松、辐射松(Monterey pine)、道格拉斯冷杉 (Douglas-fir)、西部杉(Western hemlock)、特卡杉(Sitka spruce)、红杉、枞、香脂冷杉(balsam fir)、西部红柏(Western red cedar)和阿拉斯加黄色柏。在另一个实施方式中,所述转基因植 物是选自由以下所构成的组:金合欢属、小茴香、朝鲜蓟、芝麻菜、 黑莓、油菜、芫荽、克莱小柑橘(clementines)、宽叶莴苣、桉树、 茴香、柚子树、哈蜜瓜、豆薯、奇异果(kiwifruit)、柠檬、莱姆(lime)、 蘑菇、坚果、秋葵、橙、欧芹、柿树、车前草、石榴、白杨、辐射松、 菊苣、南方松(Southern Pine)、枫香、柑橘树、黑小麦、藤本植物、 山药、苹果、梨树、温柏、樱桃树、杏树、甜瓜、大麻、荞麦、葡萄 树、树莓、藜属植物、蓝莓、油桃树、桃树、李树、草莓、西瓜、茄 子、胡椒、菜花、芸苔、花椰菜、卷心菜、ultilan sprouts、洋葱、胡 萝卜、韭葱、甜菜、蚕豆、芹菜、萝卜、南瓜、菊苣、葫芦、大蒜、 四季豆、菠菜、西葫芦、芜菁、ultilane和绿皮西葫芦(zucchini)。
本发明还提供了一种分离的应激相关多肽,其中该多肽在酵母 双杂交分析中结合到选自由以下所构成的组的蛋白的片段: OsGF14-c(SEQ IDNO:113),OsDAD1(SEQ ID NO:128), Os006819-2510(SEQ ID NO:20),OsCRTC(SEQ ID NO:134), OsSGT1(SEQ ID NO:144),OsERP(SEQ ID NO:146),OsCHIB1 (SEQ ID NO:152),OsCS(SEQ ID NO:156),OsPP2A-2(SEQ ID NO: 164)和OsCAA90866(SEQ ID NO:170)。在一个实施方式中,该分离 的应激相关多肽选自由以下所构成的组:(a)包含SEQ ID NO:2-112 中的偶数编号的一段氨基酸序列的多肽;(b)包含与(a)的多肽至少80 %相似的氨基酸序列的多肽,通过使用具有默认的GAP分析参数的 GCG Wisconsin Package SEQWEB_ GAP应用程序确定相似性。在另 一个实施方式中,该多肽包含SEQ ID NO:2-112中的一个偶数编号 的氨基酸序列。
本发明还提供包含编码本文公开的应激相关多肽的核酸分子的 表达盒。在一个实施方式中,该编码应激相关多肽的核酸分子包含选 自SEQ ID NO:1-111中的一个奇数编号的核酸序列。在一个实施方 式中,该表达盒进一步包含了可操纵地连接于该核酸分子的调控元 件。在一个实施方式中,该调控元件包含一个启动子。在一个实施方 式中,该启动子是植物启动子。在另一个实施方式中,该启动子是组 成型启动子。在另一个实施方式中,该启动子是组织特异性或细胞类 类型特异性启动子。在一个实施方式中,该组织特异性或细胞类型特 异性启动子指导该表达盒在选自表皮、根部、维管组织、分生组织、 形成层、皮层、木髓、叶、花、种子及其组合的位置中表达。
本发明还提供了一种包含所公开的表达盒的转基因植物细胞。在 一个实施方式中,该表达盒包含了含有SEQ ID NO:1-111中的一个 奇数序列的核酸序列的分离的核酸分子。
本发明还提供了包含所公开的表达盒的转基因植物,以及本文所 公开的转基因植物的转基因种子和后代。
本发明还提供了一种调节植物细胞应激反应的方法,该方法包括 将包含编码应激相关多肽的分离的核酸分子的表达盒导入该植物细 胞,其中该多肽在酵母双杂交分析中结合到选自由以下所构成的组的 蛋白的片段:OsGF14-c(SEQ IDNO:113),OsDAD1(SEQ ID NO: 128),Os006819-2510(SEQ ID NO:20),OsCRTC(SEQ ID NO:134), OsSGT1(SEQ ID NO:144),OsERP(SEQ ID NO:146),OsCHIB1 (SEQ ID NO:152),OsCS(SEQ ID NO:156),OsPP2A-2(SEQ ID NO: 164)和OsCAA90866(SEQ ID NO:170)。在所公开方法的一个实施例 中,该多肽在细胞中的表达导致该细胞增殖的速度或程度增强。在另 一个实施方式中,该多肽在细胞中的表达导致所述细胞增殖的速度或 程度减低。
在另一个关于本发明的瞬时方法的实施方式中,该分离的核酸分 子包含选自SEQ ID NO:1-173中的一个奇数序列的核酸序列。在另 一个实施方式中,该分离的核酸分子包含选自SEQ ID NO:1-111中 的一个奇数序列的核酸序列。
因此,本发明的一个目的是提供能用于增强农业上重要植物的方 法和组合物。这一目的通过本发明能全部或部分实现。
本发明的一个目的已如上所述,通过研读以下本发明的说明书和 非限制性实施例,本发明的其它目的和优点对于本领域技术人员将是 明显的。
附图说明
图1是本发明多种非限制性的应激相关蛋白相互作用的示意图。 箭头指示DNA结合结构域融合蛋白(粗线方框或椭圆)和活化结构 域融合蛋白相互作用的方向。虚线方框表示以前发表的相互作用。椭 圆而非方框表示了与DNA结合结构域融合的蛋白不与其它蛋白相互 作用。环形箭头是指自身相互作用。虚线表示蛋白之间的氨基酸相似 性。本图中列出的蛋白可作如下分类:生物应激(20251);非生物应 激(12464,19902,22844,22874,23059和23426)和叶绿体(19842, 22832,22840,22844,22858,22874,23059,23061,23426和30846)。
图2是本发明多种非限制性的应激相关蛋白相互作用的示意图。 箭头指示DNA结合结构域融合蛋白(粗线方框或椭圆)和活化结构 域融合蛋白相互作用的方向。虚线方框表示以前发表的相互作用。椭 圆而非方框表示了与DNA结合结构域融合的蛋白不与其它蛋白相互 作用。环形箭头是指自身相互作用。虚线表示蛋白之间的氨基酸相似 性。本图中列出的蛋白可作如下分类:发育(谷氨酰氨肽酶);生 物应激(19651,20899和22823);非生物应激(20775,29077,29098, 29086和29113)。
图3是本发明多种非限制性的应激相关蛋白相互作用的示意图。 箭头指示DNA结合结构域融合蛋白(粗线方框或椭圆)和活化结构 域融合蛋白相互作用的方向。虚线方框表示以前发表的相互作用。椭 圆而非方框表示了与DNA结合结构域融合的蛋白不与其它蛋白相互 作用。环形箭头是指自身相互作用。虚线表示蛋白之间的氨基酸相似 性。本图中列出的蛋白可作如下分类:生物应激(ORF020300-2233.2, 23268,011994-D16和OsPP2-A)和非生物应激(23225,OsCAA90866 和3209-OS208938)。
序列表简述
SEQ ID NO:1-174代表用于下文所公开的双杂交分析法的水稻 (Oryza sativa)多肽的核酸和氨基酸序列。对于这些序列,奇数编号 的序列是核酸序列,偶数编号的序列是紧位于其前的核酸序列所推导 出的氨基酸序列。例如SEQ ID NO:2是如SEQ ID NO:1所示的核酸 序列所推导的氨基酸序列,SEQ ID NO:4是如SEQ ID NO:3所示的 核酸序列所推导的氨基酸序列,SEQ ID NO:6是如SEQ ID NO:5所 示的核酸序列所推导的氨基酸序列等等。对SEQ ID NO各序列的进 一步描述显示在下表中:   SEQ ID   NO.   PN数   描述   1,2   22858   新蛋白22858,片段,与拟南介   (Arabidopsis)GTP环化水解酶II相似   (BAB09512.1;e=0)   3,4   22874   新蛋白22874,片段,与推定的拟南介   (Arabidopsis)磷脂酰肌醇4磷酸5激酶   相似(NP_187603.1;4e-18)   5,6   22866   新蛋白PN22866,片段,与拟南介(A.   Thaliana)液泡ATP酶C亚单位相似(V-ATP   酶C亚单位;液泡质子C亚单位;   Q9SDS7;e-152)   7,8   23022   新蛋白PN23022,片段,与大麦(H.   Vulgare)质膜H+-ATP酶相似   (CAC50884;e=0.0)   9,10   23061   假定蛋白OsContig3864,与大麦(H.   vulgare)光合系统I反应中心亚单位II相   似,叶绿素前体   (P36213;6e-87)   11,12   29982   新蛋白PN29982   13,14   30846   新蛋白PN30846   15,16   30974   新蛋白PN30974   17,18   23053   新蛋白23053,片段,与推定的拟南介   (Arabidopsis)Na+依赖的无机磷酸协同转运   蛋白相似(NP_181341.1;e-105)   19,20   20462   假定蛋白006819-2510,与来自萱草属   (Hemerocallis)杂交品种的衰老相关蛋白   5相似   (AAC34855.1;e-97)   21,22   23226   新蛋白PN23226,胼胝质合酶   23,24   23485   新蛋白PN23485,与大麦(Hordeum   vulgare)粪卟啉原III氧化酶叶相似,叶绿   体前体(Q42840;e-169)   25,26   29037   新蛋白PN29037   27,28   29950   新蛋白PN29950   29,30   20551   假定蛋白003118-3674,与番茄   (Lycopersicon esculentum)调蛋白相似   31,32   24060   类L-天冬氨酸样蛋白   33,34   23914   RNA结合结构域蛋白   35,36   23221   富脯氨酸蛋白   37,38   24061   类植物生长素诱导蛋白   39,40   23949   类HSP70   41,42   28982   类Archain delta COP   43,44   29042   类原纤蛋白   45,46   29984   新蛋白PN29950   47,48   30844   新蛋白PN30844   49,50   30868   NAD(P)结合结构域蛋白   51,52   24292   类γ衔接蛋白   53,54   29983   新蛋白PN29983   55,56   30845   类果胶(甲)脂酶   57,58   31085   类受体样蛋白激酶   59,60   20674   类丙酸正磷酸二激酶   61,62   30870   类Isp-4   63,64   29997   类黄嘌呤脱氢酶   65,66   30843   类遍在蛋白特异性蛋白酶   67,68   30857   新蛋白PN30857   69,70   20115   环状锌指蛋白   71,72   22823   新蛋白PN22823,与ABC转运蛋白相似   (T02187,AB043999.1,NP_171753;e=0)   73,74   22154   新蛋白PN22154,与拟南介(A.thaliana)   谷氨酰氨肽酶相似(AL035525;e=0)   75,76   29041   新蛋白PN29041,片段,与推定的拟南介(A.   thaliana)ATP酶相似(AAG52137;e-17)   77,78   22020   新蛋白PN22020,片段,与推定的拟南介(A.   thaliana)蛋白相似(NP_197783;3e-34)   79,80   22825   新蛋白PN22825,片段   81,82   29076   新蛋白PN29076,片段   83,84   29077   新蛋白PN29077,片段,与拟南介(A.   thaliana)类DNA损伤诱导蛋白DDI1相   似(BAB02792;5e-94)   85,86   29084   新蛋白PN29084,片段,与大豆(Glycine   max)钙依赖蛋白激酶相似(A43713,2e-79)   87,88   29115   新蛋白PN29115,片段,与拟南介(A.   thaliana)6,7-二甲基-8-Ribityllumazine合   酶前体相似(AAK93590,6e-37)   89,90   29116   新蛋白PN29116,片段   91,92   29117   新蛋白PN29117   93,94   29118   新蛋白PN29118,片段   95,96   29119   新蛋白PN29119,片段   97,98   21639   假定蛋白ORF020300-2233.2,推定的   PP2A调控亚单位,与OsCAA90866相似   (AAD39930;5e-92;CAA90866;5e-53)   99,100   23268   新蛋白23268,与磷酸核糖氨基苯甲酸转   移酶相似,叶绿体前体,片段   (AAB02913.1;5e-95)   101,102   26645   新蛋白PN26645,推定的蛋白二硫化物异   构酶相关蛋白前体   (BAB09470.1;e-28)   103,104   24162   新蛋白PN24162,类孔蛋白,电压依赖性   阴离子通道蛋白   (NP_201551;3e-86)   105,106   20618   假定蛋白011994-D16,与玉米(Z.mays)   DnaJ蛋白相似(T01643;e=0)   107,108   23045   新蛋白PN23045   109,110   23225   新蛋白PN23225,与小麦(Tritticum   aestivum)起始因子(iso)4f p82亚单位相似   (AAA74724;e=0)   111,112   29883   新蛋白PN29883,片段   113,114   12464   水稻(O.Sativa)14-3-3蛋白同系物GF14-c   (U65957)   115,116   22844   水稻3-磷酸莽草酸1-羧乙烯基转移酶(又   称EPSP合酶;AB052962;BAB61062.1)   117,118   22832   水稻果糖-二磷酸缩酶,叶绿体前体   (Q40677)   119,120   23426   水稻叶绿体核酮糖二磷酸羧化酶,大链   (D00207;P12089)   121,122   19842   水稻核酮糖二磷酸羧化酶/加氧酶活化酶,   大同种型A1(AB034698,BAA97583)   123,124   23059   OsContig4331,推定的水稻光合系统II的   33kDa放氧蛋白   (BAB64069)   125,126   22840   水稻光合系统II的10kDa多肽   (U86018;T04177)   127,128   20251   水稻抗编程性细胞死亡1防御子   (D89727;BAA24104)   129,130   19902   β-苹果青霉素EXPB2   (U95968;AAB61710)   131,132   24059   水稻组蛋白去乙酰基转移酶HD1   (AF332875;AAK01712.1)   133,134   20544   水稻钙网蛋白前体   (AB021259;BAA88900)   135,136   22883   水稻低温诱导蛋白5(AB011368;   BAA24979.1)   137,138   23878   推定的水稻肌球蛋白   (AC090120;AAL31066.1)   139,140   20554   水稻DEHYDRIN RAB 16B(P22911)   141,142   19701   可溶性淀粉合酶(AF165890;AAD49850)   143,144   20285   OsSGT1(gi|6581058)   145,146   20696   诱导子反应蛋白(gi|11358958)   147,148   24063   RAS GTP酶(gi|730510)   149,150   20621   Shaggy激酶(gi|13677093)   151,152   19651   水稻壳多糖酶,III类(AF296279;   AAG02504)   153,154   20899   水稻过氧化氢酶A同工酶(D29966;   BAA06232)   155,156   19707   水稻纤维素合酶催化亚基,类RSW1   (AF030052;AAC39333)   157,158   29086   水稻salT基因产物(AF001395;   AAB53810.1)   159,160   29098   水稻Aquaporin(AF062393)   161,162   29113   水稻DNAJ同源物(BAB70509.1)   163,164   20254   水稻丝氨酸/苏氨酸蛋白磷酸酶PP2A-2,   催化亚基   (AF134552,AAD22116)   165,166   23266   推定的水稻富脯氨酸蛋白AAK63900   (AC084884)   167,168   24775   水稻谷蛋白CAA33838(X15833)   169,170   20311   水稻寒害诱导蛋白CAA90866   (Z54153,CAA90866)   171,172   20215   推定的水稻14-3-3蛋白(AAK38492)   173,174   23186   推定的水稻吡咯烷酮羧基肽酶   (AAG46136)
发明详述
下面将参比所附的实施例更加全面地描述本发明,在实施例中显 示了本发明代表性的实施方式。不过,本发明可以以不同的形式体现 而不应该被解释为限于本文所述的实施方式。更确切地说,提供这些 实施方式是为了彻底和完全地公开本发明,并将本发明的范围完全告 知本领域技术人员。
特此本文所引用的所有专利(包括已公开的专利申请)和出版物 (包括GENBANK_序列参比)在此处通过引用将其全部内容并入本 发明参比,相当于每篇专利和出版物都被特别地声明以引用参比的方 式并入。这些专利和出版物与本发明之间的任何不一致,应以有利于 本发明来解决。
I.概论
功能基因组学的目标是确定控制生物表型表达的基因,功能基因 组学运用了多种方法学包括,但不限于生物信息学、基因表达研究学、 基因和基因产物相互作用学、遗传学、生物化学和分子遗传学。例如, 生物信息学能通过在异源生物中确定在氨基酸或核苷水平有高度相 似性(同源性)的基因来确定已知基因的功能。在mRNA或多肽水 平的基因表达研究学通过将基因的表达与环境反应、发育过程或遗传 (突变)或分子遗传(基因过表达或表达不足)干扰相结合能确定所 述基因的功能。基因在mRNA水平的表达既可以单独(例如通过 Northern分析)也可以和其它基因一同(例如通过微阵列分析)被确 定,而基因在多肽水平的表达既可以单独(例如通过天然或变性多肽 凝胶或免疫印迹分析)也可以和其它基因一同(例如通过蛋白质组分 析)被确定。多肽/多肽以及多肽/DNA的相互作用学的知识能通过确 定在同一生物过程中共同作用的多肽和核酸序列而确定功能。遗传学 通过证明基因中DNA损伤(突变)对生物有可定量的影响来确定基 因的功能,这些影响包括但不限于生物的发育;激素生物合成和反应; 生长和生长习性(植物结构);mRNA表达图谱;多肽表达图谱;抗 病能;对非生物应激的耐受(例如干旱条件);获得养分的能力; 光合效率;改变的初级和次级代谢;以及多种植物器官的成分。生物 化学通过单独或与其它多肽联合来阐明由某基因编码的多肽,典型地 是在异源生物中表达时,具有某种酶活性而确定所述基因的功能。分 子遗传学能通过在天然植物中或异源生物中过表达或降低基因该基 因,并观察在如上遗传学的功能确定中所述的可定量的影响来确定所 述基因的功能。在功能基因组学中,这些方法中的任何一个或全部(经 常是协同)被用于确定具有大量生物表型中的任一个表型的基因的功 能。
本领域技术人员公认这些不同的方法学皆能提供数据作为具体 基因的功能的证据,并且随着用于功能确定的数据的数量增加这一证 据更有力:在一个单一方法学的实施方式中,在另一两种方法学的实 施方式中,以及在另一两种以上方法学的实施方式中。另外,本领域 技术人员知道不同的方法学对于提供确定基因功能的证据的力度可 以是不同的。典型地,但不总是,认为生物化学、遗传学或分子遗传 学证据的数据比生物信息学或基因表达证据的数据是更有说服力的。 最后,本领域技术人员公认,对于不同的基因,确定这些不同基因的 功能,从单一方法学获得的单一数据在每个不同数据所提供的证据的 强度方面可以是不同的。
作物性状功能基因组学的目的是确定感兴趣的作物性状基因,例 如农作物中能够赋予有用的农业性状的基因。这些农业性状包括,但 不限于在数量上或者在质量上提高的产量;增加的养分获得和代谢效 率的;增强的或改变的用于食品、饲料、纤维或加工的植物组织的营 养成分;增强的农业或工业加工效用;增强的植物疾病抵抗性;增强 的对不利环境条件(非生物应激)的耐受,不利环境条件包括但不限 于干旱、过度寒冷、过热或过高的土壤盐度或过量的酸度或度; 以及植物结构或发育(包括发育计时的变化)的改变包括发育时机的 改变。通过转基因或非转基因方法确定的这些性状基因的应用能大大 地改善农作物以利于农业的发展。
就人类和动物的消费而言,谷类是行星上最重要的农作物。在 水稻、玉米、小麦、大麦、黑麦、燕麦和其它农业上重要的单子叶植 物中观察到了基因组同线性(在大的染色体片段中基因次序保守), 这使根据单个谷类基因的序列不同谷类品种的直系同源基因的作图 和分离更容易。在谷粒中水稻具有最小的(约420Mb)基因组,近 来已经成为公共和私人基因组和EST测序工作的主要焦点。参见 Goff等,2002。
II.定义
除非另有定义,本文所用的所有技术和科学术语的意思与本领域 普通技术人员通常理解的意思相同。为使本说明书清楚,某些定义如 下文所述。
依照长期存在的专利法惯例,术语“一种”当用于本申请包括用 于权利要求书中时,意思是“一个或多个”。
本文所用术语“约”,当指质量、重量、时间、体积、浓度或百 分比的值或量时,意思是包含与说明的量相比有±20%或±10%的变 异,在另一个实施例中有±5%的变异,在另一个实施例中有±1%的变 异,以及在另一个实施例中有±0.1%的变异,因为这些变异是适于实 施本发明的。除非另有说明,说明书和权利要求书所用的表示成分的 数量、反应条件等的所有数应被理解成在所有情况下被术语“约”所 修饰的数。因此,除非有相反的说明,本说明书和所附的权利要求书 所述的数字参数是取决于本发明希望获得的期望特性而变化的近似 值。
本文所用术语“氨基酸”和“氨基酸残基”可替换使用,且是指 自然存在的20种氨基酸及其类似物、衍生物和同源物中的任一种; 有不同侧链的氨基酸类似物;以及前述任何一个的所有立体异构体立 体异构体。因此术语“氨基酸”意指包括所有自然的或合成的分子, 既包括氨基官能度又包括酸性官能度并能包括在自然存在的氨基酸 的聚合物中。
氨基酸通过多肽在其肽键处化学消化(水解)而形成。本文所述 的氨基酸残基在一个实施方式中是“L”同分异构形式。但是,“D” 同分异构形式的残基可以取代任何L-氨基酸残基,只要该多肽保留 了所想要的功能特性。NH2是指存在于多肽的氨基末端的游离的氨基 基团。COOH是指存在在多肽的羧基末端的游离的羧基基团。为与氨 基酸残基的标准多肽命名的缩写一致,这由上文中的表格显示。
注意到本文结构式所表示的所有氨基酸残基序列在常规的氨基 末端到羧基末端的方向上有一个从左到右的取向。另外,短语“氨基 酸”和“氨基酸残基”被广泛地定义为包括修饰的和罕见的氨基酸。
此外,注意到氨基酸残基序列开始和结尾的破折号表示键合其 它一个或多个氨基酸残基序列的肽键或者键合氨基末端基团如NH2或乙酰基或如COOH的羧基末端基团的共价键。
本文所用术语“与......相关”和“可操纵地连接”是指物理或 功能上相关的两个核苷酸序列。例如,如果一个启动子或调控DNA 序列与编码RNA或多肽的DNA序列被可操纵地连接或定位使得该 调控子DNA序列将影响该编码或结构DNA序列的表达水平,则说 这两个序列相关。
本文所用术语“嵌合体”是指包含来源于不同多肽或相对彼此 间处于非天然存在的位置的结构域或其它特征的多肽。
本文所用术语“嵌合构建体”是指重组核酸分子,其中启动子 或调控核酸序列被可操纵地连接于其上或与一编码mRNA或表达成 蛋白的核酸序列相关,使得该调控核酸序列能调节该相关核酸序列的 转录或表达。该嵌合构建体的所述调控核酸序列通常不被可操纵性地 连接于自然情况下发现的相关核酸序列。
本文所用术语“辅因子”指一种在酶催化反应中所需的自然反 应物,如有机分子或金属离子。例如,辅因子可以是NAD(P),核黄 素(包括FAD和FMN),叶酸、钼辅助因子、硫胺、生物素、硫辛 酸、泛酸和辅酶A、S-腺苷甲硫氨酸、磷酸吡哆醛、泛醌和甲基醌 类。在一个实施方式中,辅因子可以被再生和再利用。
本文所用术语“编码序列”和“可读框”(ORF)可以替换使用, 它们是指转录成如mRNA,rRNA,tRNA,snRNA,有义RNA或反 义RNA这样的RNA的核酸序列。在一个实施方式中,然后将该RNA 在体内或体外翻译以产生多肽。
本文所用术语“互补的”是指包含反向平行核苷酸序列的两条 核苷酸序列,所述反向平行核苷酸序列因反向平行核苷酸序列中的互 补碱基残基间形成氢键而能彼此配对。如本领域所知,两条互补链的 核酸序列当从5’到3’方向观察,它们都是彼此反向互补的。
还如本领域所知,在一组给定的条件下相互杂交的两条序列没 有必要必需是100%完全互补。本文所用术语“完全互补”和“100% 互补”是指Watson-Crick碱基配对中互补区为100%的序列,即在互 补区没有错配存在。但是,对于克隆到克隆载体中的重组分子(例如 cDNAs)常发生在这些分子中的某些在5’或3’端可能有由于克隆所 导致的非互补的突出端。在这种情况下,应理解100%或完全互补区 不包括任何加入该重组分子中的(典型地是在末端),只是作为克隆 的结果或促进克隆的序列。这些序列是,例如,多接头序列和有限制 性内切酶识别位点的接头等。
本文所用术语“结构域”和“特征”,当用于指多肽或氨基酸 序列时,是指有具有特定体生物功能的氨基酸序列的子序列 (subsequence)。具有特定生物功能的结构域和特征包括但不限于配 体结合、核酸结合、催化活性、底物结合和多肽-多肽相互作用结构 域。同样地,当在文中用于指核酸序列时,“结构域”或“特征”是 编码多肽的结构域或特征的核酸序列的子序列。
本文所用术语“酶活性”是指酶催化底物转化为产物的能力。 酶的底物可包括酶的自然底物也可包括自然底物的类似物,该类似物 也能被酶转化成产物或产物的类似物。酶活性例如可以通过测定一定 时间后反应中产物的量或测定一定时间后反应混合物中剩余的底物 量来测量。酶活性也能通过测定一定时间后反应混合物中剩余的未用 的反应辅因子的量或通过测定一定时间后反应混合物中消耗的辅因 子的量来测量。酶活性还能通过测定一定时间后反应混合物中剩余的 自由能供体或富含能量分子(例如ATP、磷酸烯醇丙酮酸、乙酰磷酸 或磷酸肌酸)的量或测定一定时间后反应混合物中消耗的自由能供体 或富含能量分子(例如ADP、丙酮酸、乙酸和肌酸)的量来测量。
本文所用,术语“表达盒”是指在合适的宿主细胞中能指导特 定核苷酸序列表达的核酸分子,它包括一个被可操纵地连接于感兴趣 核苷序列上的启动子,所述感兴趣核苷序列被可操纵地连接于终止信 号。所述表达盒还典型地包括该核苷序列正确翻译所需的序列。编码 区通常编码感兴趣的多肽,不过也能在正义或反义方向上编码感兴趣 的功能RNA,例如反义RNA或非翻译RNA。包含感兴趣核苷序列 的表达盒可以是嵌合的,意即至少它的一个组分相对于它的其它组分 中的至少一个是异源的。表达盒也可以是自然存在的但已经获得了对 异源表达有用的重组体形式的表达盒。然而,典型地,表达盒相对于 宿主是异源的,即表达盒的特定DNA序列在宿主细胞中不是自然存 在的而是通过转化将其导入宿主细胞或宿主细胞的祖细胞中。当宿主 细胞暴露于某些特定的外界刺激时,表达盒中核苷酸序列的表达可以 可以处于启动转录的组成型启动子或诱导型启动子的控制下。对多细 胞生物如植物来说,该启动子还可以是对特定组织、器官或发育阶段 具有特异性的。
本文所用术语“片段”指包含另一个序列亚型的序列。当用于核 酸或氨基酸序列的上下文中,术语“片段”和“子序列”可以替换使 用。核酸序列片段可以是比在另一核酸序列中发现的要小的许多核苷 酸,因此所述核酸序列片段包括但不限于外显子或内含子序列、启动 子、增强子、复制起点、5’或3’非翻译区、编码区和多肽结合结构域。 可以理解片段或子序列也可以包含小于完整核酸序列的序列,例如外 显子或内含子、启动子、增强子等的一部分。同样地,氨基酸序列的 片段或子序列可以是许多小于自然存在的多肽中发现的残基的序列, 因此其包括但不限于结构域、特征和重复等。也同样地,可以理解氨 基酸序列的片段或子序列无需包括结构域、特征和重复等的完整氨基 酸序列。片段也可以是功能片段,其中所述片段保留感兴趣核酸序列 或氨基酸序列的特定生物学功能。例如,转录因子的功能片段可包括 但不限于DNA结合结构域、反式激活结构域或两者。同样地,受体 酪氨酸激酶的功能片段包括但不限于配体结合结构域、激酶结构域、 ATP结合结构域以及它们的组合。
本文所用术语“基因”指编码RNA的核酸,例如包括但不限于 编码多肽的结构基因的核酸序列。靶基因可以是来源于细胞、内源基 因、转基因或外源基因如病原体基因,该病原体例如是感染细胞后存 在感染细胞中的病毒。包含靶基因的细胞可来源于或存在于任何生物 中,例如植物、动物、原虫、病毒、细菌或真菌。术语“基因”也泛 指与生物学功能相关的任一DNA片段。同样地,术语“基因”包括 但不限于编码序列、启动子区域、转录调控序列、作为调控蛋白的特 异性识别序列的非表达DNA片段,有助于基因表达的非表达DNA 片段,设计成具有所希望的参数的DNA片段或它们的组合。可以通 过多种方法获得基因,包括从生物样本克隆、基于已知或预测的序列 信息合成,以及从一个或多个存在的序列重组衍生。
如本领域所理解的那样,基因包含一条编码链和一条非编码链。 本文所用术语“编码链”和“正义链”可替换使用,并指与翻译基因 产物的mRNA有相同核苷序列的核酸序列。还如本领域所理解的那 样,当编码链和/或正义链用于指一个DNA分子时,该编码/正义链 在相应的mRNA中包括胸苷残基而不是尿苷残基。另外,当用于指 DNA分子时,编码/正义链还可包括在mRNA中未发现的附加元件, 这些附加单元包括但不限于启动子、增强子和内含子。同样地,术语 “模板链”和“反义链”可以替换使用,指和所述编码/正义链互补 的核酸序列。
本文所用术语“互补性”和“互补的”是指通过传统的 Watson-Crick或其它非传统类型的相互作用能与另一个核酸序列形 成一个或多个氢键的核酸。对于本发明的核酸分子,核酸分子与其互 补序列结合的自由能足以允许该核酸发挥相关功能,在一个实施方式 中是指RNAi活性。例如,siRNA构建体的正义和反义链之间的互补 性程度与siRNA反义链和靶核酸序列之间的互补性程度可以是相同 的或不同的。siRNA双链体的反义链中与靶序列少于100%的互补性 包括点突变,当这些变化位于反义siRNA的3′端和中间时,这种互 补性不太被容许,而在反义siRNA链的5’端附近的突变可以显示小 程度的RNAi活性(Elbashir等,2001c)。核酸分子的结合自由能的测 定是本领域所公知的,参见例如Freier等,1986;Turner等,1987。
本文所术语“百分比互补性”指在可与另一个核酸序列形成氢键 (例如Watson-Crick碱基配对)的核酸分子中的连续残基的百分比 (例如在10个中有5,6,7,8,9,10个,即为50%,60%,70%, 80%,90%和100%互补的)。术语“100%互补的”,“完全互补的” 和“完美互补的”(perfectly complementary)是指核酸序列的全部连 续残基都能与另一个核酸序列中同样数目的连续残基以氢键结合。
术语“基因表达”通常指一种细胞过程,通过该过程一种生物学 活性多肽从DNA序列产生并在细胞中显示出其生物活性。同样地, 基因表达包括转录和翻译过程,还包括能影响基因或基因产物的生物 学活性的转录后和翻译后过程。这些过程包括但不限于RNA的合成、 加工和转运,以及多肽的合成和转运,以及多肽翻译后的修饰。另外, 在细胞内影响蛋白-蛋白间相互作用的过程也能影响本文所定义的 基因表达。
术语“异源”、“重组”和“外源”,当用于本文指核酸序列(如 DNA序列)或基因时,是指来源于特定的宿主细胞的外源序列,或 如果来源于相同的来源,是指从其原始形态修饰的序列。因此,在宿 主细胞中的异源基因包括对特定宿主细胞是异源的,但已经通过例如 使用DNA重排(DNA shuffling)或其它重组技术(例如将基因克隆 到载体中)而被修饰的基因。该术语还包括自然存在的DNA序列的 非自然存在的多个拷贝。因此,这些术语指与所述细胞外源或异源的 DNA片段,或与所述细胞是同源的但在位置上或形态上这一元件通 常在所述宿主细胞中没有发现的片段。同样地,当用于多肽或氨基酸 序列的上下文中,外源多肽或氨基酸序列是来源于不同于该特定具体 宿主细胞来源的多肽或氨基酸序列,或如果来源于相同来源,是指从 其原始形态被修饰过的序列。因此,外源DNA片段可被表达以产生 外源多肽。
“同源”核酸(或氨基酸)序列是指与其被导入的宿主细胞自然 相关的核酸(或氨基酸)序列。
本文所用术语“宿主细胞”和“重组宿主细胞”可替换使用, 是指本发明组合物(例如表达载体)能被导入的细胞(例如植物细胞)。 而且,这些术语不但是指表达构建体最初导入的特定植物细胞还指这 样的细胞的子代或潜在的子代。因为由于突变或环境影响,某些修饰 可以发生在子代中,这样的子代可能实际上和亲本细胞不相同,但仍 包括在本文所用术语的范围内。
术语“与......特异性杂交”是指当某一具体的核苷酸序列存在 于复合混合物(如总细胞)DNA或RNA中时,一分子仅在严紧的条 件下与该具体核苷酸序列结合、形成双链体(duplexing)或杂交。术 语“基本上结合”是指在探针核酸和靶核酸之间的互补杂交并包含可 以通过降低杂交介质的严紧性而获得对靶核酸序列所希望的检测来 调节的微小错配。
本文所用术语“抑制剂”是指一种能钝化或降低多肽如受体、 信号转导多肽、结构基因产物或转运多肽的生物学活性如生物合成和 催化活性的化学物质。术语“除草剂”(或“除草化合物”)在本文 用来定义施用于任何发育阶段的植物的抑制剂,从而该除草剂抑制该 植物的生长或杀死该植物。
“分离的”核酸分子或蛋白或其生物学活性部分,当通过重组技 术制备时,其基本上不含有其它细胞物质或培养介质,或当由化学合 成时,其基本上不含化学制品前体或其它化学制品。因此,术语“分 离的核酸”是指基因组、cDNA或合成发生的多核苷酸或它们的一些 组合,其(1)与在自然情况下发现该分离的核酸的细胞不相关,或 (2)被可操纵地连接到一在自然情况下不被连接的多核苷酸上。同 样地,术语“分离的多肽”是指一种多肽,在某些实施方式中,是从 重组DNA或RNA制备的或合成发生的多肽或它们的一些组合,其 (1)与在自然情况下通常发现与之相关的蛋白不相关,(2)从其通 常存在的细胞中分离出来,(3)从同一细胞来源分离而不含有来源 于同一细胞的其它蛋白,(4)被来自不同种的细胞表达,或(5)在 自然情况下不存在。
在某些实施方式中,“分离的”核酸不含在所述核酸来源的生 物基因组DNA中自然存在于该核酸的侧翼(即位于该核酸5’和3’ 端的序列)的序列(例如蛋白编码序列或调控序列)。例如在多个实 施方式中,该分离的核酸分子可以包含在核酸来源的细胞的基因组 DNA中自然存在于该核酸的侧翼的,小于约5kb、4kb、3kb、2kb、 1kb、0.5kb或0.1kb的核苷序列。基本上不含有细胞物质的蛋白包括 具有少于30%、20%、10%或5%(按干重计)的污染蛋白的蛋白或 多肽制剂。当本发明的蛋白或其生物学活性部分是重组产生的时候, 培养介质表示少于约30%、20%、10%或5%(按干重计)的化学制 品前体或感兴趣的化学制品的非蛋白。因此,术语“分离的”,当用 于分离的DNA分子或分离多肽的上下文中,是指经人工操作离开其 天然环境存在的DNA分子或多肽,因此不是自然产物。分离DNA 分子或多肽可以纯化的形式存在或可存在于非自然环境中,例如存在 于转基因宿主细胞中。
术语“分离的”,当用于“分离的细胞”的上下文中时,是指 已从其自然环境除去的细胞,该自然环境例如作为器官、组织或生物 体的一部分。
本文所用术语“成熟多肽”指将转运肽、信号肽和/或前肽部分 被去除了的多肽。
本文所用术语“核心启动子”是指能支持任何转录的启动子最 小片段,如TATA元件。典型地,核心启动子在缺少上游或下游活 化的情况下启动子活性大大降低。在合适的转录因子存在情况下,核 心启动子可发挥作用允许转录。
本文所用术语“修饰的酶活性”是指与植物中自然存在的酶活 性(即在没有人工对这些活性进行直接或间接操作的情况下,自然存 在的酶活性)不同的酶活性。在一个实施方式中,通过非自然存在的 酶来显示修饰的酶活性,所述非自然存在的酶对抑制该同源物的自然 存在酶活性的抑制剂耐受。
本文所用术语“调节(modulate)”指生化实体,例如野生型 或突变的核酸分子的任何或全部化学和生物活性或特性的增加、降低 或其它改变。同样地,术语“调节”可以指基因的表达水平或编码一 个或多个蛋白或蛋白亚单位的RNA分子或等效RNA分子水平的改 变,或一个或多个蛋白或蛋白亚单位活性的上调或下调,以致表达、 水平或活性大于或小于调节子缺乏的情况下观察到的表达、水平或活 性。例如,术语“调节”可以意指“抑制”或“阻抑”,但“调节” 一词的使用不限于这一定义。
本文所用术语“抑制”、“阻抑”、“下调”及其语法上的变 体可以互相替换使用,并指基因表达或编码一个或多个基因产物的 RNA水平被降低到本发明的核酸分子不存在的情况下观察到的表达 或水平以下的行为。在一个实施方式中,使用核酸分子(例如dsRNA、 反义RNA或siRNA)的抑制导致靶RNA稳定状态水平的降低。在 另一个实施方式中,使用核酸分子(例如dsRNA、反义RNA或siRNA) 的抑制导致靶基因表达水平低于在不能介导RNAi反应的失活或弱化 分子存在的情况下所观察到的水平。在另一个实施方式中,使用本发 明的核酸分子(例如dsRNA、反义RNA或siRNA)对基因表达的抑 制在所述核酸分子存在的情况下比该核酸分子不存在的情况下要大。 在再另一个实施方式中,基因表达的抑制和由该基因(例如由dsRNA、 反义RNA或siRNA介导的RNAi)编码的mRNA降解率的增强相关。
本文所用术语“调节(modulation)”是指一个反应的上调(即 活化或刺激)和下调(即抑制或阻抑)。因此,该术语“调节”当用 于指功能性特性或生物学活性或过程(例如酶活性或受体结合)时, 是指上调(例如活化或刺激)、下调(例如抑制或阻抑)或改变这些 特性、活性和过程的能力。在某些实例中,这些调节可因发生的具体 事件如信号转导途径的活化而定,和/或仅在具体细胞类型中是显示 的。
术语“调节子(modulator)”是指具有调节能力的多肽、核酸、 大分子、复合体、分子、小分子、化合物或物种等(自然存在或非自 然存在的),或从如细菌、植物、真菌或动物细胞或组织这样的生物 材料制得的提取物。通过试验中的包含物能够评价调节子做为功能性 特性、生物学活性或过程或它们组合(例如激动剂、局部拮抗剂、局 部激动剂、反向激动剂、拮抗剂、抗微生物剂、微生物感染或增殖的 抑制剂等)的抑制剂或激活剂(直接地或间接地)的潜在活性。在这 些试验中,许多调节子可以被同时筛选。调节子的活性可以是已知的、 未知的或部分已知的。
调节子可以是选择性的或非选择性的。本发明所用术语“选择性 的”当用于调节子(例如抑制剂)的上下文中时,是指在所述调节子 与一个分子(例如一个感兴趣基因)相对于其与另一个相似但不相同 分子(例如与该感兴趣基因相同基因家族的成员)相互作用方面可测 量的或其它生物学上相关的差异。
应该理解不需要所述相互作用的差异程度是完全相反的。换言 之,术语“选择性调节子”不仅仅包括仅仅与感兴趣基因的mRNA 转录物结合而不与相关基因家族成员的mRNA转录物结合的那些分 子。该术语还用来包括其特征在于与感兴趣基因和相关家族成员的转 录物的相互作用有稍小程度差异的调节子。例如,选择性调节子包括 可发现允许调节子与感兴趣基因的转录物的结合相对于调节子与相 关基因的转录物的结合方面有生物学相关差异的情况(例如序列相同 性的程度)的调节子。
当确定了选择性调节子时,该调节子将以不同于(例如更强地) 其结合到另一分子(例如感兴趣基因的相关的基因的mRNA转录物) 上的方式结合到一个分子(例如感兴趣基因的mRNA转录物)。在 本文中,调节子被假定为显示了对该分子的“选择性结合”或“优先 结合”,且结合得更强。
本文所用术语“突变”包含其传统含义,指在核酸或多肽序列 中因遗传、自然存在或引入产生的变化,并用作本领域普通技术人员 通常知晓的意思。
本文所用术语“天然的”是指在非转化的植物细胞基因组中自 然存在的基因。同样地,当用于多肽的上下文中,“天然多肽”是被 非转化的植物细胞基因组的天然基因所编码的多肽。
本文所用术语“自然存在”是指自然发现的与通过操作人工产生 的物质不同的物质。例如,在实验室中还没有通过进行人工修饰或分 离的自然状态下的生物(包括病毒)中存在的多肽或核苷酸序列,则 是自然存在的。同样,如果多肽或核苷酸序列被重组分子编码或存在 在重组分子中则认为是“非自然存在”,即便该氨基酸或核酸序列与 自然发现的氨基酸或核酸序列相同。
本文所用术语“核酸”和“核酸分子”指任一脱氧核糖核酸 (DNA)、核糖核酸(RNA)、寡核苷酸、通过聚合酶链式反应(PCR) 产生的片段和通过连接、剪切、核酸内切酶作用和核酸外切酶作用中 任一项产生的片段。核酸可由自然存在的核苷单体(如脱氧核糖核酸 和核糖核酸)或自然存在的核苷的类似物的单体(如自然存在的核苷 酸的α-对应体形式)或两种单体的组合组成。修饰的核苷酸在糖部分 和/或嘧啶或嘌呤碱基部分可有修饰。糖修饰包括,例如,用卤素、 烷基、胺和叠氮基替换一个或多个羟基,或可以用做醚或酯的糖。而 且完整的糖部分可以用空间和电子上相似的结构如氮杂糖和环糖 类似物替换。
在碱基部分修饰的例子包括烷基化嘌呤和嘧啶、酰化嘌呤或嘧啶 或其它众所周知的杂环取代物。通过磷酸二酯键或这些键的类似物可 将核酸单体连接起来。磷酸二酯键的类似物包括硫代磷酸酯、二硫代 磷酸酯、phosphoroselenoate、phosphorodiselenoate、 phosphoroanilothioate、phosphoranilidate和氨基磷酸酯等等。术语“核 酸”还包括所谓的“肽核酸”,其包含附着于聚酰胺骨架的自然存在 的或经修饰的核酸碱基。核酸可以是单链的或双链的。
术语“可操纵地连接”,当描述两个核酸区域的关系时,是指一 种并列,其中所述区处在一种允许它们以它们想要的方式发挥作用的 联系中。例如,“可操纵地连接”到编码序列上的控制序列通过这样 一种方式而与编码序列连接:即在与所述控制序列相容的条件下例如 当合适的分子(例如诱导物和聚合酶)与所述控制或调控序列结合时 获得的所述编码序列的表达。因此在一个实施方式中,术语“可操纵 地连接”指通过所述启动子控制和调控编码序列转录的方式而连接所 述编码序列的启动子。可操纵地将启动子和编码序列连接的技术是本 领域所公知的,相对于感兴趣的编码序列的准确定向和定位尤其是依 赖于启动子的特异性。
因此术语“可操纵地连接”可指通过启动子区域控制和调控核 苷序列转录的方式而与核苷序列连接的启动子区域。同样地,核苷序 列被假定为处于其可操纵地连接的启动子的“转录控制”下。可操纵 地将启动子区域和核苷序列连接的技术是本领域已知的。术语“可操 纵地连接的”还可指以转录终止序列控制核苷序列转录的终止的方式 与该核酸序列连接的转录终止序列或其它核酸。另外,术语“可操纵 地连接”,当可操纵地连接一开放的读码框架时,可指其以正调节或 负调节的方式调节该可读框表达的增强子、沉默子或其它核酸调控序 列。
本文所用术语“百分比相同的”在两个核酸或多肽序列的上下 文中,当比较和比对以寻找最大对应时,是指分别具有以下核苷酸和 氨基酸相同性的两个或多个序列或子序列:在一个实施方式中60%, 在另一个实施方式中70%,在另一个实施方式中80%,在另一个实 施方式中90%,在另一个实施方式中95%,以及再另一个实施方式 中至少99%,者是通过使用下面的序列比较算法或目测检查法测得 的。在一个实施方式中,超过在至少约50个残基长度的区域存在所 述序列相同性百分比,在另一个实施方式中在至少约100个残基长度 的区域存在所述序列相同性百分比,以及在另一个实施方式中在至少 约150个残基区域存在所述序列相同性百分比。在另一个实施方式 中,在该序列的全长存在所述序列相同性百分比。
为了进行序列比较,典型地用做参照序列用检验序列进行比较。 当使用序列比较算法时,将检验和参照序列输入计算机中,如果必要 指定子序列的相配序列(coordinates)并指定序列算法程序参数。然 后基于指定的程序参数,用序列比较算法计算相对于参照序列检验序 列的百分比序列相同性。
可以通过下述算法进行用于比较的序列最佳排列,例如通过在 Smith和Waterman,1981中公开的局部同源算法,在Needleman和 Wunsch,1970中公开的同源比对算法,在Pearson和Lipman,1988 中公开的相似性方法的研究,这些算法的计算机化的实施(GAP, BESTFIT,FASTA和TFASTA in the GCG Wisconsin Package,从 Accelrys公司获得,San Diego,California,美国)或通过目测检查。通 常参见Ausubel等,1988。
适合确定百分比序列相同性和序列相似性的算法的一个实例是 在Altschul等,1990中描述的BLAST算法。进行BLAST分析的软 件通过美国国立生物技术信息中心(NCBI) (http://www.ncbi.nlm.nih.gov/)可公开获得。所述算法首先涉及当与数 据库序列中相同长度的核苷酸序列进行比对时,在所查询的序列中识 别出匹配或满足于某正计分域值T(positive valued threshold score T) 的步长W的短核苷酸词汇来确定高计分序列对(HSPs)。T称作邻里 词计分域(neighborhood word score threshold)。通常参见Altschul 等,1990。这些最初的邻里词取样(word hits)作为“种子”用于引 发搜索发现含有它们的更长的HSPs。然后该邻里词取样在两个方向 上沿着每个序列延伸到累积的比对计分可增加为止。对于核苷酸序 列,通过使用参数M(对一对匹配残基的奖励计分,始终>0)和N (对错配残基的罚分,始终<0)计算累积计分。对于氨基酸序列,使 用计分矩阵计算累计得分。当累积计分从其最大达到值减少了未知数 x,或由于一个或多个负计分残基比对的累积计分为零或以下,或到 达了的任一序列的末端时,则停止每个方向上核苷酸词汇的延伸。 BLAST算法参数W、T和X决定比对的灵敏性和速度。BLAST程序 (用于核苷酸序列)使用了作为缺省值的词汇步长(W)11,期望值(E) 10,中止值(cutoff)100,M=5,N=4,并进行两链的比较。对于氨 基酸序列,BLASTP程序使用了缺省值wordlength(W)3,期望值(E) 10以及BLOSUM62计分矩阵。参见Henikoff和Henikoff,1992。
除了计算序列相同性百分比,BLAST算法还进行在两条序列间 相似性的统计学分析(参见例如Karlin和Altschul,1993)。BLAST算 法提供的相似性的度量是最小总和概率(P(N)),其指示了在两个核苷 酸或氨基酸序列间匹配偶然发生的概率。例如,如果检验核酸序列和 参比核酸序列相比最小总和概率在一个实施方式中是小于约0.1,在 另一个实施方式中小于约0.01,以及在再另一个实施方式中小于约 0.001,则认为检验核酸序列和参照序列相似。
术语“与......基本杂交”指在探针核酸分子和靶核酸分子之间的 互补杂交,并包含可以通过降低杂交和/或洗脱介质的严紧性而使得 实现所希望的杂交的微小错配(例如多肽现象)。
“严紧杂交条件”和“严紧杂交洗脱条件”在核酸杂交实验如 Southern和Northern印迹分析中是依赖于序列和环境的。更长的序列 在更高的温度时特异地杂交。对核酸杂交的详尽指导在Tijssen,1993 中可见。通常,对限定离子强度和pH的特定序列所选择的高严紧性 杂交和洗脱条件比特定序列的热熔点(Tm)低约5℃。典型地,在 “高严紧条件”下,探针将与其靶子序列特异性地杂交,但不与其它 序列特异地杂交。同样地,对限定离子强度和pH的特定序列选择的 介质严紧性杂交和洗脱条件比该特定序列的Tm低约5℃以上。对于 高严紧条件,代表性的介质严紧条件包括杂交和洗脱,除了杂交和洗 脱温度在一个实施方式中比限定离子强度和pH的特定序列的Tm低 8℃,在另一个实施方式中低10℃,在另一个实施方式中低12℃, 以及在再另一个实施方式中低15℃外,洗脱。
Tm是靶序列的50%和一完全匹配的探针杂交的温度(在限定的 离子强度和pH下)。选择非常严紧的条件等于具体探针的Tm。对具 有大于100个互补残基的互补核酸的Southern或Northern印迹分析, 高严紧杂交条件的实施例是在42℃有1mg肝素的50%甲酰胺中过 夜杂交。高严紧洗脱条件的实施例是在65℃,于0.1x标准柠檬酸盐 (SSC),0.1%(w/v)SDS中洗脱15分钟。另一个高严紧洗脱条件的实 施例是在65℃,于0.2x SSC缓冲液中洗脱15分钟(参见Sambrook 和Russell,2001 for a description of SSC buffer and other stringency conditions)。高严紧性洗脱前经常有较低严紧性洗脱以去除背景探针 信号。对于大于约100个核苷的双链体的中等严紧性洗脱条件的实施 例是于45℃在1X SSC中洗脱15分钟。对于大于约100个核苷的双 链体的中等严紧洗脱条件的另一个实施例是于40℃在4-6X SSC中洗 脱15分钟。对于短探针(例如约10到50个核苷),严紧条件典型 地包括pH 7.0-8.3时的小于约1M Na+离子的盐浓度,典型地约0.01 到1M Na+离子浓度(或其它盐),温度典型地是至少约30℃。严紧 条件通过添加去稳定剂,如甲酰胺,也可以实现。一般地,在具体杂 交检测测定中信噪比比对无关探针观察到的高2倍(或更高)表明特 异性杂交的检测。
下面是可用于克隆基本上与本发明的参比核苷酸序列相似的同 源核苷酸序列的杂交和洗脱条件的实施例:在一个实施例中探针核苷 酸序列与靶核苷酸序列在50℃,于7%十二烷基硫酸钠(NaDS),0.5M NaPO4,1mm乙二胺四乙酸(EDTA)中杂交,之后在50℃,于2X SSC, 0.1% NaDS中洗脱;在另一个实施例中,探针和靶序列在50℃,于 7% NaDS,0.5M NaPO4,1mm EDTA中杂交,之后在50℃,于1X SSC,0.1% NaDS中洗脱;在另一个实施例中,探针和靶序列在50℃, 于7% NaDS,0.5MNaPO4,1mm EDTA中杂交,之后在50℃,于0.5X SSC,0.1% NaDS中洗脱;在另一个实施例中,探针和靶序列在50℃, 于7% NaDS,0.5MNaPO4,1mm EDTA中杂交,之后在50℃,于0.1X SSC,0.1% NaDS中洗脱;在另一个实施例中,探针和靶序列在50℃, 于7% NaDS,0.5M NaPO4,1mm EDTA中杂交,之后在65℃,于0.1X SSC,0.1% NaDS中洗脱。在一个实施方式中,杂交条件包含在42℃ 在滚筒试管中至少杂交12小时。
术语“表型”指细胞或生物的完整的物理、生化和生理构成, 例如具有任一性状或任一组性状。同样地,表型由在细胞或生物体内 基因的表达导致,并涉及潜在可观察的或可测量的性状。
本文所用术语“多肽”、“蛋白”和“肽”在本文可替换使用, 是指20种蛋白质氨基酸或氨基酸类似物的聚合物,不论其大小和功 能。尽管“蛋白”经常被用于指相对较大的多肽,而“肽”经常被用 于指小的多肽,不过在现有技术中这些术语的用法是重叠和变化的。 除非另有说明,本文所用的术语“多肽”是指肽、多肽和蛋白。如本 文所用,术语“蛋白”、“多肽”、和“肽”在本文中被可替换地用于 指基因产物。术语“多肽”包括具有所有功能的蛋白,包括酶。因此 代表性的多肽包括基因产物、自然存在的蛋白、同系物、直系同源物、 旁向性同源基因、片段和前述的其它等价物、变异体和类似物。
术语“多肽片段”或“片段”,当用于指参比多肽时,是指和该 参比多肽本身相比其中氨基酸残基缺失的多肽,但是保留的氨基酸序 列的位置通常和该参比多肽的相应位置相同。这些缺失可以发生在参 比多肽的氨基末端或羧基末端,或同时在上述两端。片段典型地是至 少5,6,8或10个氨基酸长,至少14个氨基酸长,至少20,30,40或 50个氨基酸长,至少75个氨基酸长,或至少100,150,200,300,500 个或更多个氨基酸长。片段可保留所述参比多肽的一种或多种生物学 活性。在某些实施方式中,一个片段可以包含一个结构域或特征,并 在该结构域或特征的一侧或两侧任选包含其它氨基酸,该其它氨基酸 的数目可是从5,10,15,20,30,40,50至100个或更多个残基。另外, 片段可以包括一特定区域的亚片段,该亚片段保留其来源区域的功 能。在另一个实施方式中,片段可以有免疫原性的特性。
本文所用术语“前多肽”指通常靶定到细胞器,如叶绿体,并还 包含转运肽的多肽。
本文所用术语“引物”指包含在一个实施方式中两个或多个脱氧 核糖核苷酸或核糖核苷酸的序列如实施方式,在另一个实施方式中多 于三个,在另一个实施方式中多于八个,以及在再另一个实施方式中 包含外显子或内含子区域的至少约20个核苷酸。在一个实施方式中 这些寡核苷酸长度在10和30个碱基之间。
术语“启动子”或“启动子区域”皆指在基因中位于编码序列的 5’端并行使指导该编码序列转录的功能的核苷序列。所述启动子区域 包含转录起始位点,并可另外包括一种或多种转录调控元件。在一个 实施方式中本发明的一种方法使用了RNA聚合酶III启动子。
“核心启动子”是具有使基本水平转录发生所需要的最少元件 的核苷酸序列。因此核心启动子不是完全启动子而是能在实验系统中 指导报道基因构建体基本水平转录的启动子的子序列。核心启动子包 括但不限于CMV核心启动子,HSV-tk核心启动子,猴病毒40(SV40) 核心启动子、人b-肌动蛋白核心启动子、人EF2核心启动子、腺病 毒E1B核心启动子和热休克蛋白(hsp)70核心启动子。核心启动子经 常被一种或多种转录调控元件扩大以影响可操纵连接的基因的转录。 例如,可将细胞类型特异性或组织特异性转录调控元件加到核心启动 子上,以产生以细胞型特异性或组织特异性方式指导可操纵连接的核 苷序列转录的重组启动子。
不同启动子与转录调控元件由不同的组合。基因是否在细胞中 表达依赖于组成该基因启动子的具体转录调控元件和细胞核中存在 的不同转录因子的组合。因此,根据它们在体内或体外的功能性活性, 通常将启动子分类为“组成型”、“组织特异性”、“细胞类型特异性” 或“诱导型”。例如,组成型启动子是一种在多种细胞类型中能指导 基因转录的启动子。代表性的组成型启动子包括下列编码某些组成型 或管家(″housekeeping″)功能的基因的启动子:次黄嘌呤磷酸核糖 基转移酶(HPRT)、二氢叶酸还原酶(DHFR;Scharfmann等,1991)、 腺嘌呤核苷脱氨酶、磷酸甘油酸激酶(PGK)、丙酮酸激酶、磷酸甘油 酸变位酶,β-肌动蛋白启动子(参见例如Williams等,1993)以及 其它本领域技术人员已知的组成型启动子。另一方面,“组织特异性” 或”细胞类型特异性”启动子在某些组织和细胞类型中指导转录,但在 其它组织和细胞类型中是灭活的。代表性的组织特异性启动子包括下 文中更详细描述的那些启动子,以及本领域技术人员已知的其它组织 特异性和细胞型特异性启动子。
当用于启动子的上下文中,本文所用术语“连接的”指启动子元 件物理上的邻近,以致它们一起发挥作用指导可操纵连接的核苷酸序 列的转录。
本文所用术语“转录调控序列”或“转录调控元件”皆指在启 动子区域内能对调控转录因子反应的核苷序列。反应可包括转录产物 的减少或增加,这通过转录因子与包含转录调控元件的DNA分子的 结合来介导。在一个实施方式中,转录调控序列是转录终止序列,在 本文或者被称作转录终止信号。
术语“转录因子”通常是指通过与转录调控元件和转录细胞成 分,包括RNA聚合酶、转录相关因子(TAFs)、染色质重构蛋白和 影响基因转录的任何其它相关蛋白的相互作用而调节基因表达的蛋 白。
如本文所用,“显著性”或“显著的”涉及在两个或多个个体间 非随机相关概率的统计学分析。为确定联系是否是显著的或有显著 性,进行数据的统计学处理以计算概率,表示为“p-值”。低于使用 者定义的临界点的那些p-值被认为是显著的。在一个实施例中,P- 值小于或等于0.05,在另一个实施例中小于0.01,在另一个实施例中 小于0.005,在另一个实施例中小于0.001,它们被认为是显著的。
术语“纯化的”指存在的占优势的目的物质(即以摩尔计,其 比组合物中任何其它个体物质更丰富)。“纯化部分”是指其中目的物 质包含存在的所有物质的至少约50%的组合物。测定溶液或分散体 中物质的纯度,物质溶解或分散于其中的溶剂或基质通常不包括在这 些测定中;而是仅仅考虑被溶解或分散的物质(包括感兴趣的物质)。 通常,纯化的组合物将具有包含大于组合物中所存在的所有物质的约 80%的一种物质,大于存在的所有物质的约85%、90%、95%、99 %或更多的物质。可以将目的物质纯化到基本同质性(通过常规检测 方法在组合物中不能检测出污染物质),其中所述组合物基本上由单 一物质组成。本领域技术人员根据本文的教导使用标准技术可以纯化 本发明多肽。通过本领域技术人员已知的多种方法可以测定多肽的纯 度,包括例如氨基末端氨基酸序列分析、凝胶电泳和质谱分析。
“参照序列”是用做序列比较基础的确定序列。参照序列可以是 一较大序列的亚型,例如全长核苷或氨基酸序列的片段,或可包含全 长序列。通常,当用于指核苷序列时,参照序列是至少200、300或 400个核苷长,经常是至少600个核苷长,和经常是至少800个核苷 酸长。因为两个蛋白每个都可(1)包含两个蛋白间相似的序列(即 所述全蛋白序列的一部分),以及(2)还可包含两个蛋白间有差异的 序列,所以两个(或多个)蛋白间的序列比较典型地是通过“比较窗” (如上文所定义)来比较这两个蛋白的序列以确定和比较序列相似的 局部区域来进行的。
术语“调控序列”(regulatory sequence)是用于通篇说明书的一 个通用术语,是指影响被可操纵地连接的编码和非编码序列的表达所 必需的或希望的多核苷酸序列,如起始信号、增强子、调控子、启动 子和终止序列。代表性的调控序列如Goeddel,1990中所描述,包括 例如猿病毒40(SV40)早期和晚期启动子,腺病毒或巨细胞病毒直接 早期启动子、lac系统、trp系统、TAC系统或TRC系统、由T7RNA 聚合酶指导表达的T7启动子、噬菌体λ的主要操纵子和启动子区域、 fd包膜蛋白的控制区域、3-磷酸甘油酸激酶或其它糖酵解酶启动子、 酸性磷酸酶启动子如Pho5、酵母的α交配因子启动子、杆状病毒系 统的多角体启动子,和已知的控制原核或真核细胞或它们的病毒的基 因表达的其它序列以及它们的多种组合。这些控制序列的特性和用途 可以不同,这取决于宿主生物体。在原核生物中,这些调控序列一般 包括启动子、核糖体结合位点和转录终止序列。术语“调控序列”意 指至少包括其存在可影响表达的成分,并还可包括那些存在是有益的 附加组分例如前导序列和融合配偶体序列。
在某些实施方式中,多核苷酸序列的转录是在想要表达的细胞类 型中控制所述多核苷酸表达的启动子序列的控制下。也可以理解该多 核苷酸可以处于与控制自然存在形式多核苷酸的表达的那些序列相 同或不同的调控序列的控制下。
术语“报道基因”是指包含编码能利用其存在或活性容易地检测 的蛋白的核苷序列的核酸,包括但不限于荧光素酶、荧光蛋白(如绿 色荧光蛋白)、氯霉素乙酰转移酶、β-半乳糖苷酶、分泌型胎盘碱性 磷酸酶、β-内酰胺酶、人生长激素和其它分泌型酶报道基因。通常, 报道基因编码一个不被宿主细胞产生的多肽,其通过细胞分析如细胞 的直接荧光测定、放射性同位素和分光光度分析而可检测,典型地为 了信号分析不需要杀死细胞。在某些实例中,报道基因编码宿主细胞 的荧光测定特性发生变化的酶,这通过定性、定量或半定量功能或转 录活化是可检测的。代表性的酶包括酯酶、β-内酰胺酶、磷酸酶、过 氧化物酶、蛋白酶(组织纤溶酶原激活物或尿激酶)以及其它通过本 领域技术人员已知的或将来开发的合适的产色或荧光底物可检测其 功能的酶。
本文所用术语”测序”指使用常规的手动或自动化实验室技术测 定DNA或蛋白靶样品的核酸或氨基酸的有序线性序列。
本文所用术语“基本纯的”是指多核苷酸或多肽基本上不含与其 在自然状态下相关的序列和分子,以及在分离操作中所用的那些分 子。术语“基本不含”是指所述样品不含在自然情况下与其相关的物 质或化合物的量在一个实施方式中是至少为50%,在另一个实施方 式中是至少为70%,在另一个实施方式中为80%以及在再另一个实 施方式中是90%。
本文所用术语“靶细胞”指希望在其中插入核酸序列或多肽的细 胞,或是影响在未经修饰的细胞中从已知是标准情况所发生的修饰的 细胞。引入靶细胞的核酸序列的长度可是可变的。另外,核酸序列作 为质粒或其它载体的成分或作为裸序列可进入靶细胞。
本文所用术语“转录”指与RNA聚合酶与作为存在于基因编码 序列中的作为结构信息RNA指导表达的基因相互作用有关的细胞过 程。所述过程包括但不限于如下步骤:(a)转录起始;(b)转录物延 伸;(C)转录物拼接;(d)转录物加帽(e)转录物终止;(f)转录 物聚腺苷酸化;(g)转录物的核输出;(h)转录物编辑;和(i)稳定转 录物。
本文所用术语“转录因子”是指一细胞质或核蛋白,所述蛋白结 合到基因上,或结合到基因的RNA转录物上,或结合到基因或RNA 转录物的另一蛋白上或依次结合到基因或RNA转录物上的另一蛋白 上,从而调节所述基因的表达。这些调节可另外通过其它机制实现; “基因的转录因子”的本质属于在某方式下改变所述基因的转录水平 的因子。
术语“转染”是指将表达载体这样的核酸引入受体细胞,在某些 实例中其涉及核酸介导的基因转移。术语“转化”指作为外源核酸的 细胞摄取结果的细胞基因型改变的过程。例如,转化细胞可表达本发 明多肽的重组体形式,或从该转移基因可发生反义表达以致所述基因 自然存在形式的表达被破坏了。
术语“载体”是指能转运其连接的另一个核酸的核酸。符合本发 明可使用的一种载体是附加体,即具有染色体外复制能力的核酸。其 它载体包括那些具有自主复制和表达其所连接的核酸的能力的载体。 能指导其可操纵地连接的基因的表达能力的载体在本文被称做“表达 载体”。通常,在重组DNA技术中利用的表达载体通常为质粒形式。 在本发明说明书中,“质粒”和“载体”可以替换使用,因为质粒是 载体最常使用的形式。但是,本发明意欲包括发挥等效功能和之后为 本领域所知的表达载体的其它形式。
本文所用术语“表达载体”是指能在合适宿主细胞中指导特定 核苷酸序列表达的DNA序列,包含可操纵地连接到可操纵地连接于 转录终止序列的感兴趣核苷酸序列上的启动子。典型地,其还包含所 述核苷酸序列正确翻译所需的序列。包含感兴趣核苷酸序列的构建体 可以是嵌合的。该构建体还可以是自然存在的但已经获得了对异源表 达有用的重组体形式的构建体。感兴趣的核苷酸序列包括用于实现所 述核苷酸序列正确表达的任何额外序列,这样的感兴趣的核苷酸序列 也可以称作“表达盒”。
本文所用术语“异源基因”、“异源DNA序列”、“异源核苷酸 序列”、“异源核酸分子”或“异源DNA片段”皆指来自与目的宿主 细胞无关的来源的序列,或如果来自相同的来源是从它的最初形式修 饰的序列。因此在宿主细胞中,异源基因包括对特定宿主细胞是内源 的但是已经例如通过诱突或通过与天然转录调控序列分离而被修饰 的基因。这些术语还包括自然存在的核苷序列的非自然存在的多拷 贝。因此这些术语指与所述细胞无关或异源的DNA片段,或与所述 细胞同源但是处于宿主细胞核酸中通常未发现该元件的位置。
当两个核酸的序列在一个子代核酸中组合,则这两个核酸是“重 组的”。当所述两个核酸都是重组底物则两个序列是“直接”重组的。 当所述序列通过使用中间体如交换寡核苷酸而被重组则两个序列是 “间接重组的”。对于间接重组,顶多不过一个序列是真正的重组底 物,而且在一些情况下两个序列都不是重组底物。
本文所用术语“调控元件”是指与控制核苷序列表达有关的核苷 序列。调控元件可包含被可操纵地连接到感兴趣核苷序列上的启动子 和终止信号。调控序列也包括增强子和沉默子。典型地,它们还包括 所述核苷序列正确翻译所需的序列。
本文所用术语“显著的增加”是指在活性(例如酶活性)上大于 测量技术的系统误差限度的增加。在一个实施方式中比基线活性(例 如在抑制剂存在的情况下野生型酶的活性)增加约2倍或更大,在另 一个实施方式中增加约5倍或更大,以及在另一个实施方式中增加约 10倍或更大。
本文所用术语“显著少于”和“显著减少的”指大于测量技术的 系统误差限度的减少的结果(例如酶促反应的产物量),在一个实施 方式中相对于基线活性(例如在抑制剂不存在的情况下,野生型酶的 活性)减少约2倍或更大,在另一个实施方式中减少约5倍或更大, 以及在另一个实施方式中减少约10倍或更大。
本文所用术语“特异性结合”和“免疫交叉反应”是两个分子基 本上是相似的指示。两个核酸序列或多肽基本上是相似的指示是第一 个核酸编码的多肽与第二个核酸编码的多肽具有免疫交叉反应性或 特异性结合第二个核酸编码的多肽。因此例如当两个多肽仅仅因保守 替换而不同时,典型地其中一个多肽基本上和第二个多肽相似。
术语“特异性地(或选择性地)与抗体结合”或“与......特异性 地(或选择性地)免疫反应”,当指多肽或肽时,是指在异源多肽群 体和其它生物制剂存在的情况下鉴定所述多肽是否存在的结合反应。 因此,在指定的免疫测定条件下,该特定的抗体与一具体多肽结合而 不与样品中存在的其它多肽以显著量结合。在这样条件下与抗体特异 结合可需要选择对特定多肽具有专一性的抗体。例如可以选择对具有 本发明任一核酸序列编码的氨基酸序列的多肽引起的抗体来获得与 所述多肽的特异性免疫反应,但不与除了多态变体外的其它多肽发生 特异免疫反应的抗体。多种免疫测定方法可用于选择与特定多肽发生 特异性免疫反应的抗体。例如固相ELISA免疫测定法、Western印迹 法,或免疫组织化学法都被常规地用于选择与多肽发生特异性免疫反 应的单克隆抗体。参见Harlow和Lane,1988,对用于测定特异性免 疫反应的免疫测定方法和条件的描述。典型地特异性或选择性反应是 背景信号或噪音的至少2倍以及更典型地是背景值的10到100倍。
本文所用术语“子序列”分别指包含较长核酸或氨基酸(例如多 肽)序列的一部分的核酸或氨基酸序列。
本文所用术语“底物”指在酶自然执行其功能的生物化学途径中 酶自然识别并将其转化成产物的分子;或是也能在与自然存在的反应 相似的酶促反应中被酶识别并被酶转化成产物的分子的经修饰形式。
本文所用术语“合适的生长条件”是指适合于某一希望结果的生 长条件,例如重组多肽的生产或核酸分子的表达。
本文所用术语“转化”是指将异源DNA引入植物细胞、植物组 织或植物的过程。转化的植物细胞、植物组织或植物被理解为不仅包 括转化过程的最终产物,还包括它们的转基因后代。
本文所用术语“转化的”、“转基因的”和“重组的”宿主是指异 源核酸分子引入的宿主生物如细菌或植物。核酸分子可以被稳定地整 合到宿主的基因组中,或核酸分子还可做为染色体外分子存在。这一 染色体外分子可以自主复制。转化的细胞、组织或植物被理解为不仅 包括转化过程的最终产物,还包括它们的转基因后代。“非转化的”、 “非转基因的”或“非重组的”宿主指不含有异源核酸分子的野生型 生物,例如细菌或植物。
本文所用术语“存活力”是指植物的适合度参数。测定植物发育 的纯合性能,指示哪些多肽是植物生长所必不可少的。
III 核酸与多肽
一方面,本发明提供了一种编码应激相关多肽的分离的核酸分 子,其中该多肽结合到选自由以下所构成的组的一个蛋白的片段上: OsGF14-c(SEQ IDNO:113),OsDAD1(SEQ ID NO:128), Os006819-2510(SEQ ID NO:20),OsCRTC(SEQ ID NO:134), OsSGT1(SEQ ID NO:144),OsERP(SEQ ID NO:146),OsCHIB1(SEQ ID NO:152),OsCS(SEQ ID NO:156),OsPP2A-2(SEQ ID NO:164) 和OsCAA90866(SEQ ID NO:170)。在某些实施方式中,该分离的核 酸分子衍生自水稻(即Oryza sativa)。
本文所用表述“应激相关多肽“是指与应激,尤其是植物应激相 关的蛋白或多肽(请注意这两个术语在全文都可以替换使用)。这样 的多肽可以与应激反应的增长相关,相反地,这样的多肽可以与应激 反应的取消或抑制相关。此外,该多肽能与应激反应相关。例如,当 细胞被暴露于生物或非生物刺激的时候。本发明的“应激相关多肽” 通过在细胞中这样的多肽对表达水平的降低或提高来调节细胞对应 激的应答。
本文所用术语“结合”意指与一种规定的靶分子互作的应激相关 多肽。在一些实施方式中,这样的互作允许一种生物学读出(例如在 酵母双杂交系统中呈阳性)。在一些实施方式中,这样的互作是可测 的(例如至少10-5M KD)。
本申请所公开的是编码植物蛋白的水稻(O.sativa)来源的 cDNAs,这些植物蛋白在酵母双杂交系统中与OsGF14-c(SEQ IDNO: 113),OsDAD1(SEQ ID NO:128),Os006819-2510(SEQ ID NO:20), OsCRTC(SEQ ID NO:134),OsSGT1(SEQ ID NO:144),OsERP (SEQ ID NO:146),OsCHIB1(SEQ ID NO:152),OsCS(SEQ ID NO: 156),OsPP2A-2(SEQ ID NO:164)和OsCAA90866(SEQ ID NO:170) 互作。
在某些实施方式中,本发明提供了一种分离的核酸分子,其包 含与编码本发明的应激相关多肽的核酸分子的核苷酸序列基本相似 的核苷酸序列。
在广义上,术语“基本相似的”,如本申请所用与核酸序列相关, 是指相应于参照序列(即编码本发明的应激相关蛋白的核酸分子的核 苷酸序列)的核苷酸序列,其中该相应的序列编码一种具有与参照核 苷酸序列所编码的多肽基本上相同的结构的多肽。在一些实施方式 中,该基本上相似的核苷酸序列编码由参照核苷酸序列所编码的多肽 (即,尽管核苷酸序列是不相同的,但是该编码的蛋白具有相同的氨 基酸序列)。在一些实施方式中,“基本相似的”指与含有编码本发 明的其中一种应激相关蛋白(例如,以下实施例中所描述的蛋白)的 参照序列相比,具有至少50%的序列相同性,或至少60%、70%、80% 或85%,或至少90%或95%,或者至少96%、97%或99%的序列相 同性的核苷酸序列。
“基本相似的”还指与编码BIOPATH蛋白和/或功能性蛋白结构 域(FPD)的核苷酸序列的区域具有至少50%的相同性,或者至少 80%的相同性,或者至少95%的相同性,或者至少99%的相同性的核 苷酸序列,其中用本申请所描述的GAP分析进行核苷酸序列比对。 术语“基本相似的”特意包括了其中的序列被修饰至能在特定细胞中 最优化表达的核苷酸序列。
包括与参照核苷酸序列“基本相似的”核苷酸序列的多核苷酸杂 交到包括参照序列的多核苷酸上,该参照序列在一个实施方式中存在 于50℃的7%十二烷基硫酸钠(SDS)、0.5M NaPO4、1mM乙二胺四 乙酸(EDTA)中,并在50℃,于2X标准标准柠檬酸盐(SSC)、0.1% SDS中洗脱;在另一实施方式中存在于50℃的7%十二烷基硫酸钠 (SDS)、0.5M NaPO4、1mM EDTA中,并于50℃在1X SSC、0.1% SDS 中洗脱;在另一个实施方式中存在于50℃的7%十二烷基硫酸钠 (SDS)、0.5M NaPO4、1mM EDTA中,并于50℃在0.5X SSC、0.1% SDS中洗脱,或存在于50℃的7%十二烷基硫酸钠(SDS)、0.5M NaPO4、1mM EDTA,并于50℃在0.1X SSC、0.1% SDS中洗脱;或 在另外一个实施方式中存在于50℃的7%十二烷基硫酸钠(SDS)、 0.5M NaPO4、1mM EDTA,并于65℃在0.1X SSC、0.1% SDS中洗 脱。
术语“基本相似的”,当用做指蛋白或多肽时,指一种相应于参 比蛋白(即,本发明所公开的应激相关蛋白)的蛋白或多肽,其中, 该蛋白与参比蛋白具有基本相同的结构和功能,其中仅在氨基酸序列 中发生不在本质上影响多肽功能的改变。当用于蛋白或氨基酸序列 时,基本相似的蛋白或氨基酸序列与参比蛋白或氨基酸序列的相同性 百分比为至少30%,或者至少40%、50%、60%、70%、80%、85% 或90%,或者至少95%,或者至少99%,每一个落在至少30%至至 少99%的范围内的数都是本发明所公开的主题的一部分,使用缺省值 GAP分析参数和GAP的GCG Wisconsin Package SEQWEB_应用, 基于Needleman & Wunsch,1970的算法进行序列比对。
在一个实施方式中,多肽涉及如非生物应激耐受、疾病抵抗、提 高产量或营养品质或成分这样的功能。在一个实施方式中,该多肽涉 及干旱抵抗。
在一个实施方式中,分离的多肽包含SEQ ID NO:2-112中的偶 数编号所示的氨基酸序列,且变异体具有保守性氨基酸的修饰。术语 “保守修饰的变异体”指能被具有简并密码子取代的核酸序列编码的 多肽,其中至少至少一个或多个(或全部)密码子的一个位置被用混 合碱基和/或脱氧次黄苷残基所取代(Batzer等,1991;Ohtsuka等, 1985;Rossolini等,1994)。此外,本领域技术人员将意识到对核酸、 蛋白、多肽或者改变、添加或缺失被编码序列中的单个氨基酸或小比 率的氨基酸的多肽序列的个别取代、缺失或添加是“保守修饰”。这 样的修饰导致了氨基酸被化学相似性的氨基酸所取代。保守修饰的变 异体提供了与位经修饰的多肽相似的生物学活性。功能性相似的氨基 酸的保守取代表是本领域所公知的。参见Creighton,1984。
术语“保守修饰的变异体“也指具有与本发明所公开的多肽序列 相似的氨基酸残基序列的肽,其中一个或多个残基已被功能上相似的 残基保守取代。保守取代的例子包括一个非极性(疏水性)残基,如 异亮氨酸、缬氨酸、亮氨酸或甲硫氨酸取代另一个非极性残基;极性 (亲水性)残基可以相互取代,例如精氨酸和赖氨酸间,谷氨酰胺和 天冬酰胺间,甘氨酸和丝氨酸间;例如赖氨酸、精氨酸或组氨酸这样 的碱性残基的相互取代;或例如天冬氨酸和谷氨酸间的相互取代。
例如那些可被用于修饰本申请所描述的多肽的氨基酸取代,通常 是基于氨基酸侧链取代的相对相似性,例如,它们的疏水性、亲水性、 电荷、大小等。对氨基酸侧链取代的大小、形状和类型的分析揭示精 氨酸赖氨酸和组氨酸都是带正电荷的残基,丙氨酸、甘氨酸和丝氨酸 的大小都相似,苯丙氨酸、色氨酸和酪氨酸都具有大致相同的形状。 因此,基于这些因素,精氨酸、赖氨酸和组氨酸;丙氨酸、甘氨酸和 丝氨酸;及苯丙氨酸、色氨酸和酪氨酸在本申请中被定义位生物学功 能等价物。其它的生物学功能等价物的变化是本领域技术人员所了解 的。
在生物学功能等价氨基酸取代中,氨基酸的亲水指数可以被考 虑。每一个氨基酸都基于其疏水性和载荷特性被指定了一个亲水指 数,它们是:异亮氨酸(+4.5)、缬氨酸(+4.2)、亮氨酸(+3.8)、 苯丙氨酸(+2.8)、半胱氨酸(+2.5)、甲硫氨酸(+1.9)、丙氨酸(+1.8)、 甘氨酸(-0.4)、苏氨酸(-0.7)、丝氨酸(-0.8)、色氨酸(-0.9)、酪 氨酸(-1.3)、脯氨酸(-1.6)、组氨酸(-3.2)、谷氨酸(-3.5)、谷氨 酰胺(-3.5)、天冬氨酸(-3.5)、天冬酰胺(-3.5)、赖,赖氨酸(-3.9) 和精氨酸(-4.5)。
亲水性氨基酸指数在赋予蛋白质活性生物学功能方面的重要性 通常能够被本领域所理解(Kyte & Doolittle,1982,在此处通过引用 并入本发明中)。已知某些氨基酸可以被其它具有相似的亲水指数或 计分的氨基酸所取代,且仍然保留了相似生物学活性。在基于亲水指 数发生改变时,氨基酸的取代涉及亲水指数在一个实施例中为原始值 的±2范围内,在一个实施例中为原始值的±1范围内,在一个实施例 中为原始值的±0.5范围内的氨基酸。
本领域中也应理解相似氨基酸的取代可以在亲水性的基础上有 效地进行。U.S 4,554,101通过引用并入本发明中,其中指出由其邻近 的氨基酸的亲水性调节的蛋白质的最大局部平均亲水性与其免疫原 性和抗原性相关,即与蛋白的生物学特性相关。应理解氨基酸可以被 具有相似亲水性值的另一氨基酸所取代,且仍然得到了生物学上等价 的蛋白。
如US 4,554,101中所详述的那样,以下亲水性值被指定给氨基酸 残基:精氨酸(+3.0)、赖氨酸(+3.0)、天冬氨酸(+3.0±1)、谷氨 酸(+3.0±1)、丝氨酸(+0.3)、天冬酰胺(+0.2)、谷氨酰胺(+0.2)、 甘氨酸(0)、苏氨酸(-0.4)、脯氨酸(-0.5±1)、丙氨酸(-0.5)、组 氨酸(-0.5)、半胱氨酸(-1.0)、甲硫氨酸(-1.3)、缬氨酸(-1.5)、 亮氨酸(-1.8)、异亮氨酸(-1.8)、酪氨酸(-2.3)、苯丙氨酸(-2.5)、 色氨酸(-3.4)。
在基于相似的亲水性值进行变化时,氨基酸取代包括其亲水性值 在一个实施方式中是在原始值±2的范围内,在另一个具体实施方式 中是在原始值±1的范围内,在另一个具体实施方式中是在原始值±5 的范围内。
由于讨论的焦点已集中在由于氨基酸变化所引起的功能性等价 多肽上,将意识到这些变换能可以受到编码DNA的改变的影响,还 考虑到遗传密码子是有简并性的,两个或者多个密码子编码子编码相 同的氨基酸。
在一个实施方式中,多肽在植物的特定部位或组织被表达。在一 个实施方式中,该特定部位或组织包括但不限于表皮、维管组织、分 生组织、形成层、皮层或木髓。在另一个实施方式中,该特定部位或 组织是叶或鞘、根、花和发育中的胚珠或种子。在另一个实施方式中, 该特定部位或组织可以是,例如,表皮、根、维管组织、分生组织、 形成层、皮层、木髓、叶或花。在又一个实施方式中,该部位或组织 是种子。
本发明所公开的多肽及其片段或其变异体可以包括本发明所公 开的多肽的任何数目的连续氨基酸残基,其中残基数目选自从10到 本发明所公开的全长多肽的残基数的整数所组成的组。在一个实施方 式中,多肽的一部分或者片段是功能性多肽。本发明所公开的主题 包括具有特异性活性的活性多肽,该特异性活性至少是天然的(非合 成的)内源多肽的活性的在一个实施方式中20%,在另一个实施方式 中30%,在另一个实施方式中40%,在另一个实施方式中50%,在 另一个实施方式中60%,在另一个实施方式中70%,在另一个实施 方式中80%,在另一个实施方式中90%,在又一个实施方式中95%。 此外,底物特异性(kcat/Km)与天然的(非合成的)内源多肽基本 相似。典型地,Km在一个实施方式中至少为天然的内源多肽的30%, 在另一个实施方式中至少为天然的内源多肽的40%,在另一个实施 方式中至少为天然的内源多肽的50%;在另一个实施方式中至少为 天然的内源多肽的60%,在另一个实施方式中至少为天然的内源多肽 的70%,在另一个实施方式中至少为天然的内源多肽的80%,以及 在另一个实施方式中至少为天然的内源多肽的90%。对活性和底物特 异性的分析测量和定量测量的方法是本领域技术人员所公知的。
当本发明所公开的多肽被用做免疫原时可以引起对其特异性反 应的抗体的产生。因此,本发明所公开的多肽可以被用做免疫原以构 建对本发明所公开多肽具有免疫活性的抗体,为这一目的,包括但不 限于免疫测定法或多肽纯化技术。用于测定结合情况的免疫测定法为 本领域技术人员所公知,其包括但不限于酶联免疫吸附测定 (ELISAs)和竞争性免疫测定法。
IV.酵母双杂交系统
酵母双杂交系统是一个众所周知的系统,它是基于发现了真核生 物转录激活子是模化的(参见,例如,Gyuris et al.,1993;Bartel & Fields,1997;Feys et al.,2001)。酵母双杂交系统使用:1)指导“诱 饵”(一种通过被融合到DNA结合结构域而被导入酵母DNA的已 知蛋白)的合成的质粒;2)一个或多个具有诱饵蛋白的上游结合位 点的报道基因(“reporters”);和3)指导融合到活性区域和其它 有用部分(“活性标记蛋白”或“捕获蛋白”)的蛋白的合成质粒。
在所有下述的实施例中,一种自动化的、高生产率酵母双杂交分 析技术(由Myriad Genetics Inc.,Salt Lake City,Utah,美国 所提供) 被用于寻找与诱饵蛋白互作的蛋白。简而言之,靶蛋白(例如OsE2F1) 在酵母中作为酵母Ga14p多肽的DNA结合结构域的融合部分而被 表达。编码靶蛋白或该蛋白的片段的DNA通过PCR从cDNA扩增 而来或由有用的克隆制备到。所得到的DNA片段通过连接或重组被 克隆入DNA结合结构域载体(例如pGBT9、pGBT.C、pAS2-1), 这样产生了Ga14p和靶蛋白序列之间的框内融合。所得的结构,靶 基因结构,通过转化被导入单倍体酵母菌株中。
然后使用一种筛选方法来寻找针对大于5百万个cDNA克隆的混 合肽基序的两个活性结构域文库单个诱饵蛋白。该文库衍生自RNA 分离自生长在正常条件下的水稻植物的叶、茎和根的RNA,以及来 自暴露给不同应激(输入性状文库,input trait library)的植物,来自 不同的种子阶段、胼胝体以及早期和晚期的复总状花序(输出性状文 库,output trait library)。为了进行筛选,活性结构域融合物(即克 隆入活性结构域载体的O.sativa cDNA)通过转化被导入相反杂交型 的单倍体酵母菌株中。携带有活性结构域结构的酵母菌株包含一个或 多个Ga14p-反应性报道基因,其表达可以被监控。一些酵母报道菌 株的非限制性例子包括Y190、PJ69和CBY14a。
将携带靶基因结构的酵母与携带有活性结构域文库的酵母结合 起来。这两个酵母菌株交配形成双倍体酵母并被置于培养基上,该介 质是被选择用于一个或多个Ga14p-反应性报道基因的表达。因此, 两种杂交蛋白(即靶“诱饵”蛋白和活性结构域“捕获”蛋白)都在 酵母报道菌株中被表达,在该菌株中测试蛋白间的互作导致了报道基 因TRP1和LEU2的转录,允许在缺少色氨酸和亮氨酸的选择性培养 基上生长。对孵育后产生的克隆进行选择以进行进一步表征。活性结 构域质粒从每一个在双杂交筛选获得的克隆分离到。在这一结构中插 入的序列通过序列分析(例如Sanger’s双脱氧核苷链末端终止法;参 见Ausubel et al.,1988,包括至2002年的更新)获得。因此,获自这 些筛选的阳性克隆的特性通过针对私有的和公共的(例如 GENBANK_)核酸和蛋白质数据库的序列分析进行测定。
活性结构域融合部分与靶蛋白的互作通过对互作的特异性的测 试来进行确认。该活性结构域结构被共转化入酵母报道菌株中,该菌 株具有原始靶蛋白结构或者多种其它DNA结构结构域结构。在靶蛋 白存在但没有其它测试蛋白存在的条件下的报道基因的表达说明这 种互作是真实存在的。
为了进一步表征编码互作蛋白的基因,将诱饵蛋白与捕获蛋白的 核酸序列与存在于Torrey Mesa Research Institute(TMRI)’s私有 GENECHIP_水稻基因组阵列(Affymetrix,Santa Clara,California, 美国;参见Zhu等,2001)的核酸序列进行比较。水稻基因组阵列包 含25-mer寡核苷酸探针以及与构成水稻基因组图谱的约42000个连 续核苷酸中发现的21000个核苷酸的预测开放阅读框的3’末端相对 应的序列(参见Goff等,2002)。16种不同探针被用于测量每一核 酸的表达水平。探针序列可以在以下网址获得 http://tmri.org/gene_exp_web/。计算出来的表达值通过将观测到的表 达水平减去与每一探针相关的噪音背景来进行测定。实验包括从包括 种子、根、茎、叶和茎、复总状花序和花粉的不同植物组织来评估差 别基因表达。也在植物中进行了基因表达的测量,这些植物被暴露于 外界寒冷环境(即14℃)、浸透压(补充了260mM甘露醇的生长培 养基)、干旱(补充了25%聚乙二醇8000的培养基)、盐(补充了 150mM NaCl的培养基)、脱落酸(ABA)-诱导应激(补充了50μM ABA的培养基;参见Chen等,2002)、真菌病原体Magnaporthe grisea 感染,和用植物激素(jasmonic acid(JA;100μM)、赤霉素(GA3; 50μM)和脱落酸)、除草剂苄基嘌呤(BAP;10μM)、2,4-二氯苯 氧乙酸(2,4-D;2mg/l)及BL2(10μM)的处理。
许多本发明所公开的应激相关蛋白都能相互作用。
V.控制和调节核酸分子的表达
A.总则
本发明的一方面提供了用于调节(即提高或降低)本发明所公 开的核酸分子和/或多肽在植物中的表达水平的方法和组合物。尤其, 本发明所公开的核酸分子和多肽在某些组织中,和/或以某种量,被 组成型表达、暂时性表达或空间表达(例如在发育阶段),这在非重 组工程化植物中是不典型的。因此,本发明提供了在这样的典型的应 用,例如改变上述所鉴定的特定特征中的用途。
本发明所公开的分离的核酸分子对于在例如细菌、酵母、昆虫、 哺乳动物或植物细胞这样的重组工程化细胞中表达本发明所公开的 多肽是有用的。表达细胞可以在非自然条件下(例如在数量、成分、 部位和/或时间上)产生多肽,因为它们已经被进行了相应的遗传改 变。本领域技术人员熟知可用于编码本发明所公开的多肽的核酸的表 达的众多表达系统。
另一方面,本发明特别描述了由本文所公开的核酸分子编码的应 激相关多肽。在某些实施方式中,该应激相关多肽是分离的。
本发明还进一步提供了一种用于修饰(即提高或降低)本发明所 公开的多肽在植物中或在其一部分中的浓度和成分。修饰可以通过提 高或降低在植物中的浓度和/或成分(即本发明所公开的多肽的比率) 达到修饰的目的。该方法包括将含有如上述的本发明所公开的核酸分 子的表达盒导入植物细胞中以获得转化的植物细胞或组织,和培养该 转化的植物细胞或组织。该核酸分子可以处于组成型或诱导型启动子 的调节下。该方法还可以包括对某序列的核酸分子在植物中的表达进 行诱导或抑制一段时间,该时间足以对在植物中或在植物部分中的浓 度和/或成分进行修饰。
具有被修饰了的本发明所公开的核酸分子的表达的植物或植物 部分可以被分析并用本领域技术人员已知的方法进行选择,这些方法 包括但不限于Southern印迹分析、DNA测序或用特异于该核酸分子 的引物进行PCR分析和检测由此所产生的PCR产物。
通常,浓度或成分与原始控制植物(native control plant)、植物 部分或缺乏表达盒的细胞相比被提高或降低了至少在一个实施方式 中为5%,在另一个实施方式中为10%,在另一个实施方式中为20%, 在另一个实施方式中为30%,在另一个实施方式中为40%,在另一 个实施方式中为50%,在另一个实施方式中为60%,在另一个实施 方式中为70%,在另一个实施方式中为80%,及在另一个实施方式 中为90%。
B.核酸分子表达的调节
本发明所公开的组合物包括植物核酸分子和由含开放阅读框的 核酸分子所编码的多肽或部分长度多肽的氨基酸序列。这些序列可以 被应用于通过降低或消除该植物基因的表达或通过过表达特定基因 产物,来改变相应于该开放阅读框的特定基因的表达。本发明所公开 的该方法的具体实施方式包括用本发明所公开的包括可操纵地连接 于启动子的开放阅读框的核酸分子稳定地转化植物,该启动子能在植 物细胞中启动该开放阅读框(正义或反义)的表达。就“部分”或“片 段”而言,因为其涉及包含编码具有全长多肽的活性的部分长度多肽 的开放阅读框或片段的核酸分子,这意味着是这样的一段序列,在一 个实施方式中具有至少80个核苷酸,在另一个实施方式中具有至少 150个核苷酸,和在另一个实施方式中具有至少400个核苷酸。如果 不用于表达,“部分”或“片段”意指在有代表性的实施方式中具有 相应于本发明所公开的核酸分子的核苷酸序列的至少9或12或15或 至少20个连续核苷酸(例如,探针和引物或者其它寡核苷酸)。因此, 为了表达特定的基产物,该方法包括将包含可操纵地连接于开放阅读 框的启动子的表达盒导入植物、植物细胞或植物组织中,以生产转化 的分化植物、转化细胞或转化组织。转化细胞或组织能再生以提供转 化的分化植物。转化的分化植物或其细胞能以改变在植物或其细胞中 基因产物的量的量表达该开放阅读框,该产物被该开放阅读框所编 码。本发明还提供一种由此处公开的方法制备的转化植物及其后代和 种子。
本发明进一步包括一个核苷酸序列,其与在严格条件下与本发明 的核酸分子以及从这个核酸分子中转录的RNA分子杂交的一个序列 (后文称作“测试”序列)互补。当杂交在严格条件下进行时,测试 核酸分子或本发明的核酸分子可以在一个支持物上呈递:例如在膜上 或在DNA芯片上。因此,变性的测试核酸分子或本发明所公开的核 酸分子首先与支持物结合,并且杂交在特定的时间和温度进行,在一 个实施方式中,在55℃和70℃之间,在含有0.1% SDS的2×SSC 中进行杂交,随后在同样温度但用SSC浓度降低的缓冲液中漂洗支 持物。根据所需要的严格程度,这种浓度降低的缓冲液典型的是含有 0.1% SDS的1×SSC,含有0.1% SDS的0.5×SSC,或者含有0.1% SDS 的0.1×SSC。
在另一个实施方式中,本发明提供了一种转化的植物宿主细胞, 或者一种通过培育获得的宿主细胞,其能过表达,低表达或剔除多肽 编码基因和/或其基因产物。植物细胞用至少一种这样的表达载体转 化,其中该植物宿主细胞可用于再生植物组织或完整植物或其种子, 其中导入序列的表达效应,包括过表达和低表达,可以在体外或in planta测定。
另一方面,本发明还特别提供了一种分离的应激相关多肽,其中 该多肽与选自如下一组的蛋白质的片段相结合:OsGF14-c(SEQ ID NO:113),OsDAD1(SEQ ID NO:128),Os006819-2510(SEQ ID NO: 20),OsCRTC(SEQ ID NO:134),OsSGT1(SEQ ID NO:144),OsERP (SEQ ID NO:146),OsCHIB1(SEQ ID NO:152),OsCS(SEQ ID NO: 156),OsPP2A-2(SEQ ID NO:164)和OsCAA90866(SEQ ID NO:170)。 在一些实施方式中,本发明的公开了一种分离的多肽,其包含或由与 本发明所公开的分离的应激相关多肽的氨基酸序列基本相似的氨基 酸序列组成。
由于本发明所公开的蛋白质在应激中起作用,在某些实施方式 中,导入本发明所公开的核酸分子的细胞与未导入该核酸分子的细胞 相比具有不同的应激反应。
另一方面,本发明特别提供了一种调节植物细胞的应激反应的方 法,该方法包括将编码应激相关多肽的分离的核酸分子导入植物细胞 中,其中所述多肽与选自如下一组的蛋白质片段相结合:OsGF14-c (SEQ IDNO:113),OsDAD1(SEQ ID NO:128),Os006819-2510(SEQ ID NO:20),OsCRTC(SEQ ID NO:134),OsSGT 1(SEQ ID NO:144), OsERP(SEQ ID NO:146),OsCHIB1(SEQ ID NO:152),OsCS(SEQ ID NO:156),OsPP2A-2(SEQ ID NO:164)和OsCAA90866(SEQ ID NO:170),其中多肽由该细胞表达。
另一方面,本发明特别提供了一种调节植物细胞的应激反应的方 法,该方法包括将编码应激相关多肽的分离的核酸分子导入植物细胞 中,其中该多肽与选自如下一组的蛋白质片段相结合:OsGF14-c(SEQ IDNO:113),OsDAD1(SEQ ID NO:128),Os006819-2510(SEQ ID NO: 20),OsCRTC(SEQ ID NO:134),OsSGT1(SEQ ID NO:144),OsERP (SEQ ID NO:146),OsCHIB1(SEQ ID NO:152),OsCS(SEQ ID NO: 156),OsPP2A-2(SEQ ID NO:164)和OsCAA90866(SEQ ID NO:170), 其中由该核酸分子编码的多肽在细胞中的表达降低。
如本发明所讨论的那样,本文所描述的应激相关蛋白能影响处于 应激条件下(例如当植物暴露于生物或非生物刺激时)的细胞。因此, 通过改变植物细胞中本发明所公开的应激相关蛋白的量,可以调节植 物细胞对应激的反应。
在一些情况中,本发明所公开的应激相关蛋白在细胞中表达的增 加将导致细胞提高其应激反应(在某些情况下,提高增殖速度)。在 其它情况中,本发明所公开的的应激相关蛋白在细胞中表达的增加导 致细胞降低其应激反应(在某些情况下,降低增殖速度)。同样地, 本发明所公开的应激相关蛋白在细胞中表达的降低可以提高或降低 细胞的应激反应(在某些情况下,提高或降低了细胞的增殖速度)。 相关的是如果本发明所公开的应激相关蛋白的表达水平增加或降低, 则细胞的应激反应改变。
本发明所公开的应激相关蛋白在细胞中的表达水平的提高是相 对简单的问题。例如,蛋白质的过表达可以根据标准方法如上述那些 方法,通过用编码蛋白质的核酸分子转化细胞而实现。
本发明所公开的应激相关蛋白在细胞中表达水平降低同样通过 使用标准方法即可简单地实现。例如,可以给予细胞与编码蛋白质的 核酸分子的有义链(即mRNA链)互补的反义RNA或DNA寡核苷 酸,以降低该蛋白质在细胞中的表达(参见,例如Agrawal,1993; US 5,929,226)。
调节本发明所公开的核酸分子的表达可以通过例如以下方式之 一而实现:
1.“有义”抑制
本发明所公开的核苷酸序列表达的改变,在一个实施方式中表达 降低是通过“有义”抑制而获得(参见例如Jorgensen等,1996所述)。 在这种情况中,本发明所公开的核苷序列的全部或一部分包含在一 DNA分子中。该DNA分子可以与在包含靶基因的细胞实施方式中起 作用的启动子可操纵地连接,该细胞在一个实施例中是植物细胞,并 导入该细胞中,其中该核苷序列是可表达的。该核苷序列以“有义方 向”插入DNA分子中,意味着该核苷序列的编码链可以被转录。在 一个实施方式中,核苷酸序列是完全可翻译的并且该核苷酸序列或其 一部分中所包含的所有遗传信息均翻译为多肽。在另一个实施方式 中,核苷酸序列是部分可翻译的并且翻译成一个短肽。在一个实施方 式中,这可以通过在核苷酸序列中插入至少一个未成熟的终止密码子 而实现,这个密码子使得翻译停止。在另一个实施方式中,核苷酸序 列被转录但无翻译产物产生。这通常通过除去由该核苷酸序列编码的 多肽的起始密码子,即ATG,而实现。在此外的另一个实施方式中, 包含核苷酸序列或其一部分的DNA分子被稳定整合入植物细胞的基 因组中。在另一个实施方式中,包含该核苷酸序列或其一部分的DNA 分子包含在一个染色体外复制的分子中。
在含有上述DNA分子之一的转基因植物中,可以降低相应于所 述DNA分子中包含的核苷序列的核苷序列的表达。DNA分子中的核 苷序列与表达被降低的核苷序列相比,在一个实施方式中至少70%相 同,在另一个实施方式中至少80%相同,在另一个实施方式中至少 90%相同,在另一个实施方式中至少95%相同,以及在又一个实施方 式中至少99%相同。
2.“反义”抑制
在另一个实施方式中,本发明所公开的核苷酸序列表达的改变, 例如表达降低,是通过“反义”抑制获得的。本发明所公开的核苷酸 序列的全部或一部分包含在一个DNA分子中。该DNA分子可以与 在植物细胞中起作用的启动子可操纵地连接,并导入植物细胞中,其 中该核苷酸序列是可表达的。将核苷酸序列以“反义方向”插入该 DNA分子中,意味着核苷酸序列的反向互补链(有时也称为非编码 链)可被转录。在一个实施方式方式中,包含核苷序列或其一部分的 DNA分子被稳定地整合入植物细胞的基因组中。在另一个实施方式 中,包含核苷序列或其一部分的DNA分子包含在染色体外复制的分 子中。描述了这种方法的一些出版物被加以引用以进一步例证(Green et al.,1986;van der Krol et al.,1991;Powell et al.,1989;Ecker & Davis, 1986)。
在含有上述DNA分子之一的转基因植物中,可以降低相应于该 DNA分子中包含的核苷序列的核苷序列的表达。该DNA分子中的核 苷序列与表达被降低的核苷序列相比,在一个实施方式中至少70% 相同,在另一个实施方式中至少80%相同,在另一个实施方式中至少 90%相同,在另一个实施方式中至少95%相同,以及在又一个实施方 式中至少99%相同。
3.同源重组
在另一个实施方式中,相应于本发明所公开的核苷酸序列的至少 一个基因组拷贝在植物基因组中通过例如Paszkowski et al.,1988中 进一步所述的同源重组技术被修饰。该技术利用同源序列彼此识别及 在各自的核酸分子之间交换核苷酸序列的能力,本领域称之为同源重 组。同源重组可发生在细胞中核苷酸序列的染色体拷贝及通过转化导 入细胞中的核苷酸序列的引入拷贝之间。因此在核苷序列的染色体拷 贝中精确导入特异的修饰。在一个实施方式中,本发明所公开的核苷 酸序列的调节元件被修饰。这种调节元件通过使用本发明所公开的核 苷酸序列或其一部分作为探针筛选基因组文库而容易地获得。现有的 调节元件由不同的调节元件置换,因此改变核苷酸序列的表达,或者 调节元件被突变或缺失,因此消除了该核苷序列的表达。在另一个实 施方式中,核苷序列通过缺失一部分核苷序列或全部核苷酸序列,或 者通过突变而被修饰。本发明还提供了突变多肽在植物细胞中的表 达。已经揭示了破坏内源植物基因的这种技术的新进展(Kempin et al.,1997和Miao & Lam,1995)。
在一个实施方式中,核苷酸序列的染色体拷贝中的突变通过用嵌 合的寡核苷酸转化细胞而导入,所述嵌合的寡核苷酸由在末端具有两 个发夹帽的双链体构象中的RNA和DNA残基的一个连续片段组成。 所述寡核苷酸的另一个特点是,例如,在RNA残基存在2’-O-甲基化。 RNA/DNA序列被设计成与本发明公开的核苷序列的染色体拷贝的 序列对比,并含有希望的核苷改变。例如,这个技术在US5,501,967 和Zhu et al.,1999中进一步例证。
4.核酶
在另一个实施方式中,编码本发明公开的多肽的RNA由特异于 这种RNA的催化性RNA或核酶裂解。核酶在转基因植物中表达并导 致植物细胞中编码本发明多肽的RNA的量降低,从而导致细胞中累 积的多肽量降低。这种方法见US4,987,071进一步例证。
5.显性-阴性突变体
在另一个实施方式中,由本发明所公开的核苷酸序列编码的多 肽的活性被改变。这通过多肽的显性阴性突变体在转基因植物中的 表达从而导致内源多肽的活性丧失而实现。
6.适体(Aptamers)
在另一个实施方式中,本发明所公开的多肽的活性通过在转基因 植物中表达与多肽特异性结合的核酸配体(所谓的适体)而抑制。适 体可以通过SELEX(Systematic Evolution of Ligands by Exponential Enrichment)方法获得。在SELEX方法中,将具有随机化序列的区域 的单链核酸的候选混合物与多肽接触,并从候选混合物的剩余部分中 分离出与靶的亲和性增加的那些核酸。扩增分离的核酸以产生配体富 集的混合物。在反复几次后,获得了与多肽具有最佳亲和性的核酸, 并用于在转基因植物中表达。这种方法US 5,270,163中进一步例证。
7.锌指多肽
与本发明所公开的核苷酸序列或其调节区域结合的锌指多肽也 可以用于改变核苷酸序列的表达。在另一个实施方式中,该核苷酸序 列的转录被降低或增加。锌指多肽如在Beerli et al.,1998,或WO 95/19431,WO 98/54311,或WO 96/06166中所揭示,这些文献均通 过引用将其全文并入本发明。
8.dsRNA
本发明所公开的核苷酸序列的表达的改变也可以通过双链 RNA(dsRNA)干扰(RNAi)而获得,例如WO 99/32619,WO 99/53050 或WO 99/61631所述,这些文献均通过引用将其全文并入本发明。 在一个实施方式中,本发明公开的核苷酸序列的表达的改变,在一个 实施方式中其表达降低,是通过dsRNA干扰而获得的。本发明公开 的的核苷酸序列的全部,或在一个实施方式中是一部分,均可包含在 一个DNA分子中。该DNA分子的大小在一个实施方式中是100- 1000个核苷酸或更多;最佳大小通过经验确定。将相同的DNA分子 的两个拷贝连接,由一个间隔DNA分子分隔,由此第一个和第二个 拷贝方向相反。在一个实施方式中,DNA分子的第一个拷贝是反向 互补体(也称作非编码链),第二个拷贝是编码链;在另一个实施方式 中,第一个拷贝是编码链,第二个拷贝是反向互补体。间隔DNA分 子的大小在一个实施方式中是长度为200-10,000个核苷酸,在另一 个实施方式中是400-5000个核苷酸,在又一个实施方式中是600- 1500个核苷酸。所述间隔在一个实施方式中是一种随机的DNA片段, 在另一个实施方式中是一种随机的DNA片段且与dsRNA干扰的靶 生物体不同源,在又一个实施方式中是由靶生物体有效剪接的一个功 能性内含子。由间隔分隔的DNA分子的两个拷贝与在植物细胞中起 作用的启动子可操纵地连接,并导入植物细胞中,其中核苷酸序列是 可表达的。在一个实施方式中,包含该核苷酸序列或其一部分的DNA 分子被稳定地整合入植物细胞的基因组中。在另一个实施方式中,包 含该核苷酸序列或其一部分的DNA分子包含在一个染色体外复制的 分子中。引用描述了这种方法的一些出版物以进一步例证(Waterhouse et al.,1998;Chuang & Meyerowitz,2000;Smith et al.,2000)。
在另一个非限制性实施例中,RNA干扰(RNAi)或转录后基因沉 默(PTGS)可用于降低本发明公开的应激相关蛋白在细胞中的表达水 平。如本文所用术语“RNA干扰”和“转录后基因沉默”可互换使 用,是指通过小的干扰RNA(siRNA;主要参见Fire et al.,1998)介导 的基因表达的序列特异性调节的过程,导致无效或亚效等位基因 (hypomorphic)表型。因此,本文描述的是编码本发明的应激相关 蛋白的核苷酸序列,因此易于设计RNAi。事实上,编码RNAi分子 的构建体已经揭示,其连续合成一种RNAi分子,导致延长对靶基因 表达的抑制(Brummelkamp et al.,2002)。
在含有上述DNA分子之一的转基因植物中,相应于DNA分子 中包含的核苷酸序列的核苷酸序列的表达在一个实施方式中被降低。 DNA分子中的核苷酸序列与表达被降低的核苷酸序列相比,在一个 实施方式中至少70%相同,在另一个实施方式中至少80%相同,在 另一个实施方式中至少90%相同,在另一个实施方式中至少95%相 同,及在又一个实施方式中至少99%相同。
9.DNA分子的插入(插入诱变)
在一个实施方式中,将DNA分子插入本发明公开的核苷酸序列 的染色体拷贝中或者插入其调节区域中。在一个实施方式中,这种 DNA分子包含能在植物细胞中转座的转座元件,例如Ac/Ds, Em/Spm,突变子。或者,DNA分子包含农杆菌属T-DNA的T-DNA 边界。DNA分子还可包含一个重组酶或整合酶识别位点,可用于从 植物细胞染色体中除去部分DNA分子。本发明还涵盖了使用T-DNA, 转座子,寡核苷酸的插入诱变的方法或者本领域技术人员已知的其它 方法。使用T-DNA和转座子进行插入诱变的方法见Winkler & Feldmann,1989及Martienssen,1998所述,在此通过引用将其全文 并入本发明。
10.缺失诱变
在另一个实施方式中,本发明所公开的核酸分子的突变是在细胞 或植物中通过缺失一部分核苷酸序列或调节序列而在序列的基因组 拷贝中产生的。缺失诱变的方法为本领域技术人员所已知。参见例如 Miao & Lam,1995。
在另一个实施方式中,缺失是随机在一大群植物中通过化学诱变 或放射而产生,在本发明的基因中有缺失的植物通过正向或反求遗传 学(reverse genetics)分离。已知用快速中子或γ射线辐射导致植物 缺失突变(Silverstone et al.,1998;Bruggemann et al.,1996;Redei & Koncz,1992)。本发明公开的基因中的缺失突变可以在反求遗传学策 略中使用PCR用混合的基因组DNAs,如在线虫(C.elegans)中所 示,加以恢复(Liu et al.,1999)。正向遗传学(forward genetics)策略 包括携带感兴趣性状的品系的诱变,随后筛选M2子代中该性状的存 在与否。期望这些突变体是破坏本发明的基因的突变体。这可以通过 Southern印迹或使用针对本发明所公开的的基因所设计的具有来自 这些突变体的基因组DNA的引物进行的PCR进行评估。
11.植物细胞中的过表达
在另一个实施方式中,编码多肽的本发明公开的核苷酸序列被过 表达。过表达本发明的核酸分子的核酸分子和表达盒的实例如上述。 本发明还涵盖了本领域技术人员已知的过表达核酸分子的方法。
在一个实施方式中,本发明所公开的的核苷酸序列的表达在植物 的每个细胞中均是改变的。这可以通过例如同源重组或通过插入到染 色体中而获得。这还可以通过例如在能在植物的每个细胞中表达有义 或反义RNA,锌指多肽,或核酶的启动子的控制下,表达有义或反 义RNA,锌指多肽或核酶而获得。组成型,诱导型,组织特异性或 细胞类型特异性,或发育调节的表达也在本发明的范围内,并导致本 发明的核苷酸序列在植物细胞中的表达组成型,诱导型,组织特异性, 或发育调节性地改变。表达有义或反义RNA,锌指多肽或核酶的构 建体,或者用于过表达本发明的核苷酸序列的构建体,可以根据本发 明的教导,如本文所述教导,制备并转化入植物细胞中。
C.植物表达载体的构建
本发明进一步包括一种重组载体,其包含本发明的表达盒。本发 明还包括包含本发明表达盒的植物细胞以及包含这些植物细胞的植 物。在一个实施方式中,植物是双子叶植物。在另一个实施方式中, 植物是裸子植物。在另一个实施方式中,植物是单子叶植物。在一个 实施方式中,单子叶植物是谷类。在一个实施方式中,谷类是例如玉 米,小麦,大麦,燕麦,裸麦,黍,高粱,黑小麦,黑麦(secale), 单粒小麦,斯佩特小麦(spelt),二粒小麦,埃塞俄比亚画眉草(teff), 买罗高粱(milo),亚麻,gramma grass,摩擦禾(Tripsacum)或墨西 哥类蜀黍。在另一个实施方式中,谷物是高粱。
在一个实施方式中,表达盒在整个植物中表达。在另一个实施方 式中,表达盒在植物的特定部位或组织中表达。在一个实施方式中, 所述部位或组织包括但不限于表皮、根、维管组织、分生组织、形成 层、皮层、木髓、叶、花,及其组合。在另一个实施方式中,所述部 位或组织是种子。
在一个实施方式中,表达盒参与的功能包括但不限于疾病抗性、 产量、生物或非生物刺激抗性、营养性质、碳代谢、光合作用、信号 转导、细胞生长、繁殖、疾病处理(例如病原体抗性)、基因调节及分 化。在一个实施方式中,所述多肽参与如生物或非生物刺激耐受性, 提高的产量或增殖,疾病抗性,或营养成分的功能中。
例如本发明的核酸分子在适于表达的条件下可以导入宿主细胞 中,由此宿主细胞转录并翻译该核酸分子以产生应激相关多肽。“在 适于表达的条件下”是指核酸分子定位于细胞中,并由此在该细胞中 表达。例如,核酸分子在细胞中可位于活性的启动子的下游,由此该 启动子将启动启动由该核酸分子编码的多肽在细胞中表达。任何调节 序列(例如启动子,增强子,诱导型启动子)均可与核酸分子连接; 或者,核酸分子可包括其自身的调节序列,并由此在细胞中表达(即 转录和/或翻译)。
在本发明的核酸分子在表达条件下导入细胞中,该核酸分子可以 包括在表达盒中。因此,本发明进一步提供了包含表达盒的一种宿主 细胞,该表达盒包含编码本发明的应激相关多肽的核酸分子。这种表 达盒除了包括编码本发明的应激相关多肽的核酸分子之外,还可以包 括至少一个调节序列(例如启动子和/或增强子)。
同样,计划在转基因植物中表达的编码序列可以在表达盒中首先 装配,所述表达盒与在植物中可表达的合适启动子可操作地连接。所 述表达盒还可包含转基因表达需要的或选择的任何其它的序列。这种 序列包括但不限于转录终止子,增强表达的外来序列如内含子,vital 序列,及预期将基因产物定向于特异细胞器和细胞区室的序列。这些 表达盒然后可被容易地转移至下述的植物转化载体中。以下是关于典 型的表达盒的不同成分的描述。
1.启动子
表达盒中使用的启动子的选择可以确定转基因在转基因植物中 的空间和时间表达模式。选择的启动子可以在特异的细胞类型(如叶 表皮细胞,叶肉细胞,根皮层细胞)或特异的组织或器官(例如根,叶, 或花)中表达转基因,并且这种选择可以反映基因产物积聚的希望部 位。或者,选择的启动子在多种诱导条件下可启动启动基因的表达。 启动子在其强度上有所不同,即其促进转录的能力。根据利用的宿主 细胞系统,可以使用众多合适启动子的任一个,包括基因的天然启动 子。如下是可用于表达盒中的启动子的非限制性实施例。
在一个非限制性实例中,可以应用在新生植物的所有组织中指导 基因表达的植物启动子片段。这种启动子在此是指“组成型”启动子, 并且在大多数环境条件及发育或细胞分化状态下是有活性的。组成型 启动子例如包括花椰菜花叶病毒(CaMV)35S转录起始区域,衍生自 根瘤土壤杆菌(Agrobacterium tumefaciens)的T-DNA的1′-或2′-启 动子,及本领域技术人员已知的来自多种植物基因的其它转录起始区 域。这种基因包括,例如AP2基因,来自拟南芥的ACT11(Huang et al., 1996),来自拟南芥的Cat3(GENBANK_登录号U43147;Zhong et al.,1996),编码来自甘蓝型油菜(Brassica napus)的硬脂酰-酰基载 体蛋白去饱和酶的基因(GENBANK_登录号X74782;Solocombe et al.,1994),来自玉米的GPc1(BENBANK_登录号X15596;Martinez et al.,1989),及来自玉米的Gpc2(GENBANK_登录号U45855; Manjunath et al.,1997)。
或者,植物启动子可以指导本发明所公开的的核酸分子在特定组 织中的表达,或者可以另外在更精确的环境或发育条件下指导表达。 可影响诱导型启动子转录的环境条件例如包括缺氧情况,温度提高, 或者存在光。这种启动子在本文是指“诱导型”,“细胞类型特异性” 或“组织特异性”启动子。本领域技术人员意识到组织特异性启动子 可启动以启动可操纵地连接的序列在除了靶组织之外的组织中表达。 因此,如本文所用组织特异性启动子是启动在靶组织中优先表达的启 动子,但也可导致在其它组织中有一些表达。
在发育控制下的启动子例如包括起始仅在(优先在)某些组织如 果实,种子或花中转录的启动子。指导核酸在胚珠,花,或种子中表 达的启动子在本发明中特别有用。如本文所用种子特异性或优先的启 动子是指导在种子组织中特异性或优先表达的启动子。这种启动子可 以是,例如胚珠特异性,胚特异性,胚乳特异性,珠被特异性,种皮 特异性启动子,或其一些组合。例如包括来自胚珠特异性BEL1基因 的启动子,如Reiser et al.,1995所述(GENBANK_登录号U39944)。 种子特异性启动子的非限制性实例衍生自如下基因:来自玉米的 MAC1(Sheridan et al.,1996),来自玉米的Cat3(GENBANK_登录号 L05934;Abler et al.,1993),编码来自玉米的油质蛋白18kD的基因 (GENBANK_登录号J05212;Lee et al.,1994),来自拟南芥的 vivparous-1(GENBANK_登录号U93215),编码来自拟南芥的油质蛋 白的基因(GENBANK_登录号Z17657),来自拟南芥的Atmycl(Urao et al.,1996),来自拟南芥的2s种子贮存蛋白基因家族(Conceicao et al.,1994),编码来自甘蓝型油菜的油质蛋白20kD的基因 (GENBANK_登录号M63985),来自甘蓝型油菜的napA (GENBANK_登录号J02798;Josefsson et al.,1987),来自甘蓝型油 菜的napin基因家族(Sjodahl et al.,1995),编码来自甘蓝型油菜的2S 贮存蛋白的基因(Dasgupta et al.,1993),编码来自大豆的油质蛋白A 的基因(GENBANK_登录号U09118)和油质蛋白B的基因 (GENBANK_登录号U09119),及编码来自大豆低分子量硫富集蛋 白的基因(Choi et al.,1995)。
或者,可以鉴别提供具有希望的表达特性的启动子或者具有表达 增强活性的启动子的特定序列,这些序列或相似序列通过克隆或通过 突变导入序列中。可以进一步预期这些序列可被诱变以增强转基因在 特定物种中表达。
另外,预期可以应用来自一个以上的启动子的启动子组合元件。 例如,US 5,491,288公开了将花椰菜花叶病毒(CaMV)启动子与组蛋 白启动子组合。因此,来自本文所公开的启动子的元件可以与来自其 它启动子的元件组合。
a.组成型表达:遍在蛋白启动子
遍在蛋白是已知在许多类型细胞中积聚的基因产物,并且其启动 子已经从一些物种中克隆以用于转基因植物中(例如,向日葵-Binet et al.,1991;玉米-Christensen et al.,1989;及拟南芥-Callis et al.,1990; Norris et al.,1993)。玉米遍在蛋白启动子已经在转基因单子叶植物系 统中揭示,而且针对单子叶植物转化构建的其序列和载体在专利出版 物EP0342926(授予 Lubrizol)中揭示,该文献在此通过引用并入本发 明。Taylor et al.,1993描述了包含玉米遍在蛋白启动子和第一个内含 子的一种载体(pAHC25),及其当通过微粒轰击导入时在许多单子叶 植物的细胞悬浮液中具有高度活性。拟南芥遍在蛋白启动子适用于本 发明所公开的核苷酸序列。遍在蛋白启动子适于在转基因植物(单子 叶植物和双子叶植物)中的基因表达。合适的载体是pAHC25或者 本文所揭示的任何转化载体的衍生物,通过导入合适的遍在蛋白启动 子和/或内含子序列而修饰。
b.组成型表达:CaMV 35S启动子
质粒pCGN1761的构建已公布的专利申请EP0392225中揭示(实 施例23),该文献在此处通过引用并入本发明。pCGN1761含有“双” CaMV 35S启动子及在启动子和终止子之间有一个独特EcoRI位点的 tml转录终止子,并具有一个pUC类型主链。构建pCGN1761的衍生 物,其具有除了现有的EcoRI位点之外还包括NotI和XhoI位点的一 个修饰的多接头。这个衍生物称为pCGN1761ENX。pCGN1761ENX 用于在其多接头内克隆cDNA序列或编码序列(包括微生物ORF序 列),以在转基因植物中在35S启动子的控制下表达。这种构建的完 整35S启动子-编码序列-tml终止子盒可以切割以转移至下述的转化 载体,在启动子5’端通过HindIII,SphI,SalI和XbaI位点切割,在 终止子3’端通过XbaI,BamHI和BglI切割。另外,双35S启动子片 段可以通过在5’端用HindIII,SphI,SalI,XbaI或Pstl及在3’端用 任何多接头限制位点(EcoRI,NotI或XhoI)切割以用另一个启动子置 换。如果需要,在克隆位点周围的修饰可以通过导入可增强翻译的序 列而产生。当需要过表达时这是特别有用的。例如,pCGN1761ENX 可以通过最佳化翻译起始位点而修饰,如US 5,639,949的实施例37 所述,该文献在此通过引用并入本发明。
c.组成型表达:肌动蛋白启动子
已知肌动蛋白的一些同种型在大多数类型的细胞中表达,因此肌 动蛋白启动子可用作组成型启动子。特别地,已经克隆和表征了来自 水稻ActI基因的启动子(McElroy et al.,1990)。发现启动子的一个 1300个碱基(kb)的片段含有在水稻原生质体中表达所需的所有调节 元件。另外,已经构建了基于ActI启动子的众多表达载体以特异性 用于单子叶植物中(McElroy et al.,1991)。这些掺入了ActI-内含子1, AdhI 5’侧翼序列(来自玉米醇脱氢酶基因)及AdhI-内含子1和来自 CaMV 35S启动子的序列。示出最高表达的载体是35S与ActI内含 子或ActI 5’侧翼序列与ActI内含子的融合体。(β-葡糖醛酸酶(GUS) 报道基因的)起始ATG周围的序列的最佳化也增强表达。McElroy et al.,1991公开的启动子表达盒可以易于针对基因表达进行修饰,并 特别适用于单子叶植物宿主中。例如,将含有启动子的片段从 McElroy构建体中除去,并用于代替pCGN1761ENX中的双35S启动 子,然后用于插入特异的基因序列。由此构建的融合基因然后可移至 合适的转化载体中。在一个单独的报道中,还发现具有其第一个内含 子的水稻ActI启动子在培养的大麦细胞中指导高表达(Chibbar et al., 1993)。
d.诱导型表达:PR-1启动子
pCGN1761ENX中的双35S启动子可以用选择的任何启动子置 换,导致合适的高表达水平。例如US 5,614,395中所公开的化学调节 启动子之一,如烟草PR-1a启动子,可置换所述双35S启动子。或者, 可以使用Lebel et al.,1998所公开的拟南芥PR-1启动子。选择的启 动子可以通过限制酶从其来源中切离,或者可使用携带合适的末端限 制位点的引物通过PCR扩增。如果进行PCR扩增,在靶载体中扩增 的启动子克隆后可对启动子再测序以检测扩增错误。化学/病原体可 调节的烟草PR-1a启动子从质粒pCIB1004中切离(对于其构建,参见 EP0332104中实施例21所述,该专利在此处通过引用并入本发明中), 并移至质粒pCGN1761ENX(Uknes et al.,1992)。pCIB1004用NcoI 切割,并将所得线性化片段的3’突出端通过用T4DNA聚合酶处理而 平端化。然后将该片段用HindIII切割,并将所得含有PR-1a启动子 的片段经凝胶纯化并克隆入已经除去双35S启动子的pCGN1761ENX 中。这是通过用XhoI切割并用T4聚合酶平端化,随后用HindIII切 割,并分离pCIB1004启动子片段克隆入其中的较大的含有载体-终止 子的片段而实现。这样产生了具有PR-1a启动子和tml终止子及具有 独特EcoRI和NotI位点的间插多接头的pCGN1761ENX衍生物。选 择的编码序列可以被插入到这个载体中,随后融合产物(即启动子-基 因-终止子)可以移至任何选择的转化载体,包括本文揭示的那些载 体。可以应用多种化学调节子诱导选择的编码序列在根据本发明转化 的植物中表达,所述调节子包括苯并噻二唑(benzothiadiazole),异 烟酸,及US 5,523,311和US 5,614,395中揭示的水杨酸化合物。
e.诱导型表达:乙醇诱导型启动子
可由某些醇或酮如乙醇诱导的启动子也可以用于赋予本发明的 编码序列诱导型表达。这种启动子是例如来自构巢曲霉(Aspergillus nidulans)的alcA基因(Caddick et al.,1998)。在构巢曲霉中,alcA 基因编码醇脱氢酶I,其表达由AlcR转录因子在存在化学诱导剂的 情况下调节。就本发明的目的而言,包含与最小35S启动子融合的 alcA基因启动子序列的质粒palcA:CAT中的CAT编码序列(Caddick et al.,1998)由本发明所公开的编码序列置换以形成具有在alcA基因 启动子控制下的编码序列的表达盒。这是使用本领域已知的方法进行 的。
f.诱导型表达:糖皮质激素诱导型启动子
本发明还提供了使用基于类固醇激素的系统对本发明的核酸序 列表达的诱导。例如,使用糖皮质激素介导的诱导系统(Aoyama & Chua,1997),通过应用糖皮质激素诱导基因表达,例如合成的糖皮 质激素如地塞米松(dexamethasone),浓度范围在一个实施方式实施 方式中是从0.1mM至1mM,在另一个实施方式实施方式中是从10 mM至100mM。就本发明的目的而言,将荧光素酶基因序列Aoyama & Chua用本发明的核酸序列置换以形成具有在与35S最小启动子融 合的GAL4上游活化序列的6个拷贝的控制下的本发明核酸序列的表 达盒。这是使用本领域已知的方法进行的。反式作用因子包含与疱疹 病毒多肽VP16的反式激活结构域(Triezenberg et al.,1988)融合的 GAL4DNA-结合结构域(Keegan et al.,1986),疱疹病毒多肽VP16的 反式激活结构域与大鼠糖皮质激素受体的激素结合结构域(Picard et al.,1988)融合。融合多肽的表达由本领域已知的或本发明所公开的 启动子控制。本发明还提供了包含表达盒的植物,所述表达盒包含与 6x GAL4/最小启动子融合的本发明的核酸序列。因此,获得了融合多 肽的组织或器官特异性,这导致该核酸序列的诱导型组织或器官特异 性被表达。
g.根部特异性表达
基因表达的另一种模式是根部表达。合适的根部启动子是玉米金 属硫蛋白样(MTL)基因的启动子,如de Framond,1991及US 5,466,785 所述,它们在在此均通过应用并入本发明中。将这个MTL启动子移 至合适的载体如pCGN1761ENX以插入选择的基因,随后将完整的 启动子-基因-终止子表达盒转移至感兴趣的转化载体中。
h.创伤诱导型启动子
创伤诱导型启动子也可适用于基因表达。已经公开了许多这样的 启动子(例如Xu et al.,1993;Logemann et al.,1989;Rohrmeier & Lehle,1993;Firek et al.,1993;Warner et al.,1993所述),所有启 动子均适用于本发明。Logemann等公开了双子叶植物马铃薯wunI 基因的5’上游序列。Xu等示出来自双子叶植物马铃薯(pin2)的创伤可 诱导的启动子在单子叶植物水稻中是具有活性的。另外,Rohrmeier & Lehle描述了玉米WipI cDNA的克隆,其是创伤诱导的并且使用标准 技术可用于分离关联启动子。同样地,Firek等及Warner已经公开了 来自单子叶植物芦笋(Asparagus officinalis)的一种创伤诱导型基因, 其在局部创伤部位和病原体侵入部位表达。使用本领域熟知的克隆技 术,这些启动子可移至合适的载体,与本发明的基因融合,并用于在 植物创伤部位表达这些基因。
i.木髓优选表达
在此通过引用并入本发明的PCT国际公布WO93/07278描述了 玉米trpA基因的分离,该基因优先在木髓细胞中表达。呈递了从转 录起始处扩展直至-1726个碱基对(bp)的基因序列和启动子。使用标 准分子生物学技术,这一启动子或其一部分可以移至一个载体如 pCGN1761,在此其可置换35S启动子并用于启动启动外源基因以木 髓优选的方式表达。事实上,含有木髓优选的启动子或其一部分的片 段可移至任何载体并加以修饰以用于转基因植物。
j.叶特异性表达
编码磷酸烯醇羧化酶(PEPC)的玉米基因已经由Hudspeth & Grula,1989所公开。使用标准分子生物学技术,这个基因的启动子 可用于启动启动任何基因以叶特异性方式在转基因植物中表达。
k.花粉特异性表达
WO 93/07278描述了在花粉细胞中表达的玉米钙依赖蛋白激酶 (CDPK)基因的分离。该基因序列和启动子从转录起始位置扩展至 1400bp。使用标准分子生物学技术,该启动子或其一部分可转移至 如pCGN1761的载体,在此其可置换35S启动子并用于启动启动本 发明的核酸序列以花粉特异性方式表达。
2.转录终止子
有多种5’和3’转录调节序列可用于本发明。转录终止子负责转 录的终止及正确的mRNA聚腺苷酸化。3′非翻译调节DNA序列在一 个实施方式实施方式中包括约50-约1,000个核苷酸碱基对,及在另 一个实施方式实施方式中包括约100-约1,000个核苷酸碱基对,并 含有植物转录和翻译终止序列。合适的转录终止子及已知在植物中起 作用的那些终止子包括CaMV 35S终止子,tml终止子,胭脂氨酸合 酶终止子,豌豆rbcS E9终止子,来自根瘤土壤杆菌的章鱼氨酸合 酶基因的T7转录物的终止子,及来自马铃薯或番茄的蛋白酶抑制剂 I或II基因的3’末端,尽管也可以使用本领域技术人员已知的其它3’ 元件。或者,可以使用γcoixin,油质蛋白3,或来自Coix属的其它 终止子。
非限制性3’元件包括来自根瘤土壤杆菌的胭脂氨酸合酶基因的 那些元件(Bevan et al.,1983),来自根瘤土壤杆菌的章鱼氨酸合酶基 因的T7转录物的终止子,及来自马铃薯或番茄的蛋白酶抑制剂I或 II基因的3’末端。
由于在转录起始位点和编码序列起始处之间的DNA序列(即非 翻译前导序列,也称作5’非翻译区)可影响基因表达,因此也可以应 用一个特殊的前导序列。非限制性前导序列期望包括被预测指导为可 操纵地连接的基因最佳表达的序列,即包括可增加或保持mRNA稳 定性并防止不适当的翻译起始的共有前导序列。根据本发明的揭示本 领域技术人员已知这种序列的选择。衍生自在植物中高度表达的基因 的序列在本发明中是有用的。
因此,有多种转录终止子可用于表达盒中。它们负责转录的终止 和正确的mRNA聚腺苷酸化。适当的转录终止子是已知在植物起作 用的那些终止子,包括CaMV 35S终止子,tml终止子,胭脂氨酸合 酶终止子,及豌豆rbcS E9终止子。这些可被用于单子叶植物和双子 叶植物中。另外,可以使用基因的天然转录终止子。
3.增强或调节表达的其它序列
已经发现许多序列能增强基因从转录单位内表达,这些序列可与 本发明的基因联合以增加其在转基因植物中的表达。
已经发现在转基因植物中增强基因表达的其它序列包括内含子 序列(例如来自Adh1,bronze1,actin1,actin 2(PCT国际公开号WO 00/760067),或者蔗糖合酶内含子),及病毒前导序列(例如来自烟草 花叶病毒(TMV),玉米褪绿斑驳病毒(MCMV),或苜蓿花叶病毒 (AMV))。例如,已知许多衍生自病毒的非翻译前导序列增强可操纵 地连接的核酸的表达。特别地,来自烟草花叶病毒(TMV),玉米褪绿 斑驳病毒(MCMV),和苜蓿花叶病毒(AMV)的前导序列显示出有效增 强表达(例如Gallie et al.,1987;Skuzeski et al.,1990所述)。本领域 已知的其它前导序列包括但不限于细小核糖核酸病毒前导序列,例如 脑心肌炎病毒(EMCV)前导序列(脑心肌炎5’非编码区;Elroy-Stein et al.,1989);马铃薯Y病毒前导序列(例如烟草蚀刻病毒(TEV)前导 序列和玉米矮缩花叶病毒(MDMV)前导序列);人免疫球蛋白重链结 合蛋白(BiP)前导序列(Macejak et al.,1991);来自AMV的包被蛋白 mRNA的非翻译前导序列(AMV RNA 4;Jobling et al.,1987);TMV 前导序列(Gallie et al.,1989);和玉米褪绿斑驳病毒前导序列(Lommel et al.,1991)。也见于Della-Cioppa et al.,1987所述。在需要之处可 进一步包括调节元件如Adh内含子1(Callis et al.,1987),蔗糖合酶 内含子(Vasil et al.,1989)或TMVω元件(Gallie et al.,1989)。增强子 的非限制性实例包括来自CaMV 35S启动子的元件,章鱼氨酸合酶 基因(Ellis et al.,1987),水稻肌动蛋白I基因,玉米醇脱氢酶基因 (Callis et al.,1987),玉米shrunken I基因(Vasil et al.,1989),TMVω 元件(Gallie et al.,1989)及来自非植物真核生物的启动子(例如酵母; Ma et al.,1988)。
还已知衍生自病毒的许多非翻译前导序列增强表达,这些在双子 叶植物细胞中特别有效。特别地,来自烟草花叶病毒(TMV;“W-序 列”),玉米褪绿斑驳病毒(MCMV),及苜蓿花叶病毒(AMV)的前导 序列已经显示出在增强表达方面是有效的(参见例如Gallie et al., 1987;Skuzeski et al.,1990所述)。本领域已知的其它前导序列包括 但不限于细小核糖核酸病毒前导序列,例如EMCV(脑心肌炎病毒) 前导序列(5′非编码区;参见Elroy-Stein et al.,1989);马铃薯Y病毒 前导序列,例如来自烟草蚀刻病毒(TEV;参见Allison et al.,1986); 玉米矮缩花叶病毒(MDMV;参见Kong & Steinbiss 1998所述);人免 疫球蛋白重链结合多肽(BiP)前导序列(Macejak & Sarnow,1991);来 自苜蓿花叶病毒包被多肽mRNA的非翻译非前导序列(AMV;RNA 4; 参见Jobling & Gehrke,1987);烟草花叶病毒(TMV)前导序列(Gallie et al.,1989);及玉米褪绿斑驳病毒(MCMV)前导序列(Lommel et al., 1991)。也参见Della-Cioppa et al.,1987。
除了在本发明的靶表达盒的5’调节区域中掺入一或多个前述元 件之外,也可掺入其它元件。这种元件包括但不限于最小启动子。最 小启动子是指基本的启动子元件在没有上游或下游激活的情况中是 失活的或者接近失活的。当没有反式激活子存在或当增强子或应答元 件结合位点不存在时,这种启动子在植物中具有低背景活性。特别用 于植物中靶基因的一个最小启动子是Bz1最小启动子,其得自玉米的 bronze1基因。Bz1核心启动子通过在位于第-53至-58位的NheI位点 切割得自“myc”突变体Bz1-荧光素酶构建体pBz1LucR98(Roth et al., 1991)。衍生的Bz1核心启动子片段因此从第-53位扩展至+227,并包 括5’非翻译区中的Bz1内含子-1。通过使用合成的TATA元件产生的 一个最小启动子对本发明也是有用的。TATA元件使得RNA聚合酶 因子识别所述启动子,并赋予在无激活的情况中基本水平的基因表达 (通常参见Mukumoto et al.,1993;Green,2000)。
4.细胞内基因产物的靶定
已知在植物中存在多种靶定基因产物的机制,并且控制这些机制 功能的序列已经在一定程度上被表征。例如,基因产物靶定于叶绿体 是由在多种多肽的氨基末端发现的信号序列控制的,该信号序列在叶 绿体输入过程中被裂解以产生成熟多肽(参见,例如Comai et al., 1988)。这些信号序列可以与异源基因产物融合以影响异源产物输入 叶绿体(Van den Broeck et al.,1985)。编码合适的信号序列的DNA 可以分离自编码如下多肽的cDNA的5’末端:核酮糖-1,5-二磷酸羧化 酶/加氧酶(RUBISCO)多肽,叶绿素a/b结合(CAB)多肽,5-烯醇-丙 酮酸shikimate-3-磷酸(EPSP)合酶,GS2多肽及已知定位于叶绿体的 许多其它多肽。也见于US 5,639,949的实施例37中标题为“叶绿体 靶定表达”的部分,该文献在此处通过引用并入本发明。
其它基因产物可定位于其它细胞器如线粒体和过氧化物酶体 (例如Unger et al.,1989)。编码这些产物的cDNA也可以加以操纵以 实现异源基因产物靶定于这些细胞器官。这种序列例如是核编码的 ATP酶及线粒体特异性天冬氨酸氨基转移酶同种型。靶定细胞多肽已 经由Rogers et al.,1985公开。
另外,序列已经被鉴定其控制基因产物靶定于其它细胞区室。氨 基末端序列负责靶定于内质网(ER),质外体,及糊粉细胞胞外分泌 (Koehler & Ho,1990)。另外,氨基末端序列与羧基末端序列联合负 责基因产物的液泡靶定(Shinshi et al.,1990)。
通过将上述适当的靶序列与感兴趣的转基因序列融合,可以将转 基因产物定向于任何细胞器或细胞区室。例如叶绿体靶定,将来自 RUBISCO基因,CAB基因,EPSP合酶基因或GS2基因的叶绿体信 号序列在框内与转基因的氨基末端ATG融合。选择的信号序列可包 括已知的切割位点,构建的融合体在切割所需的切割位点之后可考虑 任何氨基酸。在一些情况中,这种需要可以通过在切割位点和转基因 ATG之间加入少量氨基酸,或者置换转基因序列内的一些氨基酸而 完成。通过体外转录的构建体的体外翻译,随后通过体外叶绿体吸收, 可以测试就叶绿体输入而构建的融合体的叶绿体吸收效力,使用 Bartlett et al.,1982和Wasmann et al.,1986所公开的技术进行。这些 构建技术为本领域所熟知并同样可用于线粒体和过氧化物酶体。
上述细胞靶定机制不仅可与关联启动子联合应用,也可以与异源 启动子联合应用以实现在启动子的转录调节下特异性细胞靶定目标, 所述启动子具有与靶信号衍生自其中的启动子不同的表达模式。
D.植物转化载体的构建
1.导言
植物转化领域的技术人员已知用于植物转化的众多转化载体,本 发明的基因可与这种载体联合应用。载体的选择依赖于选择的转化技 术和转化的靶物种。就某些靶物种而言,可以应用不同的抗生素或除 草剂选择标记。转化中常规使用的选择标记包括nptII基因,其赋予 卡那霉素和相关抗生素抗性(Messing & Vieira,1982;Bevan et al., 1983);bar基因,其赋予除草剂膦丝菌素抗性(White et al.,1990; Spencer et al.,1990);hph基因,其赋予抗生素潮霉素抗性(Blochinger & Diggelmann,1984);dhfr基因,其赋予氨甲喋呤抗性(Bourouis & Jarry,1983);EPSP合酶基因,其赋予草甘膦(glyphosate)抗性(US 4,940,935和5,188,642);及甘露糖-6-磷酸异构酶基因,其提供代谢甘 露糖的能力(US 5,767,378和US 5,994,629)。
本发明的组合物包括植物核酸分子,及由包含开放阅读框的核酸 分子编码的多肽或部分长度的多肽的氨基酸序列。这些序列可用于改 变相应于开放阅读框的特定基因的表达,通过降低或消除植物基因的 表达或者通过过表达特定的基因产物进行。本发明这个实施方式的方 法包括用本发明的核酸分子稳定地转化植物,本发明的核酸分子包括 与能启动开放阅读框(有义或反义)在植物细胞中表达的启动子可操 纵地连接的开放阅读框。就包含编码具有全长多肽活性的部分长度多 肽的开放阅读框或其片段的核酸分子而言的“部分”或“片段”是指 一个序列,其在一个实施方式中有至少80个核苷酸,在另一个实施 方式中有至少150个核苷酸,及在又一个实施方式中有至少400个 核苷酸。如果不用于表达,“部分”或“片段”是指在代表性的实施 方式中具有相应于本发明的核酸分子的核苷酸序列的至少9,或12, 或15,或至少20个连续核苷酸(例如探针和引物或其它寡核苷酸)。 因此,为表达某一特定的基因产物,所述方法包括在植物,植物细胞 或植物组织中导入包含与开放阅读框可操纵地连接的启动子的一个 表达盒,以产生一种转化的分化植物,转化的细胞,或转化的组织。 转化的细胞或组织可以再生以提供一种转化的分化植物。转化的分化 植物或其细胞可以以改变植物或其细胞中基因产物的量的量表达开 放阅读框,该产物由所述开放阅读框编码。本发明还提供了通过本发 明所公开的方法制备的一种转化的植物以及其子代和种子。
本发明进一步包括在严格条件下与本发明的核酸分子杂交的一 个序列(后文称作测试序列)互补的一个核苷酸序列,以及从所述核 酸分子中转录的RNA分子。当在严格条件下杂交时,可以将测试序 列或本发明核酸分子呈递于支持物上,例如膜或DNA芯片上。因此, 变性的测试序列或本发明的核酸分子首先与支持物结合,并在特定的 时间和温度进行杂交,在一个实施方式中在55℃-70℃,在含有 0.1% SDS的2×SSC中杂交,随后在相同温度但用SSC浓度降低的 缓冲液漂洗支持物。根据所需的严格程度,这种浓度降低的缓冲液典 型地是含有0.1% SDS的1×SSC,含有0.1% SDS的0.5×SSC,或者 含有0.1% SDS的0.1×SSC。
在另一个实施方式中,本发明提供了一种转化的或者通过繁殖获 得的植物宿主细胞,其能过表达,低表达或剔除了多肽编码基因和/ 或其基因产物。用至少一种这样的表达载体转化植物细胞,其中植物 宿主细胞可用于再生植物组织或完整的植物或其种子,其中导入的序 列的表达,包括过表达和低表达的作用可以在体外或in planta测定。
另一方面,本发明具体提供了一种分离的应激相关多肽,其中该 多肽与选自如下一组的蛋白质片段结合:OsGF14-c(SEQ IDNO:113), OsDAD1(SEQ ID NO:128),Os006819-2510(SEQ ID NO:20), OsCRTC(SEQ ID NO:134),OsSGT1(SEQ ID NO:144),OsERP (SEQ ID NO:146),OsCHIB1(SEQ ID NO:152),OsCS(SEQ ID NO: 156),OsPP2A-2(SEQ ID NO:164)和OsCAA90866(SEQ ID NO:170)。 在一些实施方式中,本发明提供了一种分离的多肽,其包含或由与本 发明的分离的应激相关多肽的氨基酸序列基本相似的氨基酸序列组 成。
由于本发明的蛋白质在应激反应中起作用,在某些实施方式中, 导入本发明所公开的的核酸分子的细胞与未导入本发明的核酸分子 的细胞相比具有不同的细胞应激反应。
另一方面,本发明提供了一种调节植物应激反应的方法,包括在 植物细胞中导入编码应激相关多肽的分离的核酸分子,其中所述多肽 与选自如下一组的蛋白质片段相结合:OsGF14-c(SEQ IDNO:113), OsDAD1(SEQ ID NO:128),Os006819-2510(SEQ ID NO:20), OsCRTC(SEQ ID NO:134),OsSGT1(SEQ ID NO:144),OsERP (SEQ ID NO:146),OsCHIB 1(SEQ ID NO:152),OsCS(SEQ ID NO: 156),OsPP2A-2(SEQ ID NO:164)和OsCAA90866(SEQ ID NO:170), 其中多肽由细胞表达。
另一方面,本发明提供了一种调节植物细胞应激反应的方法,包 括在植物细胞中导入编码应激相关多肽的分离的核酸分子,其中所述 多肽结合选自如下一组的蛋白质片段:OsGF14-c(SEQ IDNO:113), OsDAD1(SEQ ID NO:128),Os006819-2510(SEQ ID NO:20), OsCRTC(SEQ ID NO:134),OsSGT1(SEQ ID NO:144),OsERP (SEQ ID NO:146),OsCHIB 1(SEQ ID NO:152),OsCS(SEQ ID NO: 156),OsPP2A-2(SEQ ID NO:164)和OsCAA90866(SEQ ID NO:170), 其中由该核酸分子编码的多肽在细胞中的表达降低。
如本发明所讨论的这样,本文所述的应激相关蛋白影响应激反应 (例如当植物被暴露于生物或非生物刺激时)。因此,通过改变植物细 胞中本发明所公开的应激相关蛋白的量,可以调节植物细胞的应激反 应。
在一些情况中,本发明所公开的应激相关蛋白在细胞中表达增加 将导致细胞增加其应激反应(在一些情况中,提高其增殖速度)。在 其它情况中,本发明的应激相关蛋白在细胞中表达的增加导致细胞降 低其应激反应(在一些情况中,降低其增殖速度)。同样地,本发明 所公开的应激相关蛋白在细胞中表达的降低可增加或降低细胞应激 反应(在一些情况中,增加或降低细胞增殖速度)。相关的是如果本 发明所公开的应激相关蛋白的表达水平增加或降低,则细胞的应激反 应发生改变。
增加本发明的应激相关蛋白在细胞中的表达水平是一个相对简 单的问题。例如,蛋白质的过表达可以使用如上述那些方法的标准方 法,通过用编码蛋白质的核酸分子转化细胞而实现。
一旦本发明的核酸序列已经克隆入表达系统中,则其被转化入植 物细胞中。本发明的受体和靶表达盒可以许多本领域公认的方式导入 植物细胞中。植物再生的方法也为本领域所熟知。例如,利用Ti质 粒载体输送外源DNA,以及直接DNA吸收,脂质体,电穿孔,微注 射和微粒轰击。另外,土壤杆菌(Agrobacterium)属的细菌可用于转 化植物细胞。下文描述了转化双子叶植物和单子叶植物的代表性技 术,以及代表性的质粒转化技术。
植物的转化可以用一个DNA分子或多个DNA分子(即共转化) 进行,这两种技术均适用于本发明的表达盒。有许多转化载体用于植 物转化,本发明的表达盒可与任何这种载体联合应用。载体的选择依 赖于转化技术和进行转化的物种。
许多技术可利用并已知将核酸分子及包含该核酸分子的表达盒 导入植物宿主细胞中的技术。这些技术包括但不限于用根瘤土壤杆菌 或发根土壤杆菌(A.rhizogenes)作为转化剂用DNA转化,脂质体,PEG 沉淀,电穿孔,DNA注射,直接DNA吸收,微粒轰击,粒子加速, 等等(参见例如EP 0 295 959和EP 0 138 341所述;也见于下文所述)。 然而,除了植物细胞之外的细胞可以用本发明的表达盒转化。关于植 物表达载体和报道基因,及土壤杆菌和土壤杆菌介导的基因转移的一 般描述可见于Gruber et al.,1993所述,所述文献在此处通过引用将 其全文并入本发明中。
含有基因组或合成片段的表达载体可以导入原生质体或导入完 整的组织或分离的细胞中。在一些实施方式中,表达载体被导入完整 组织中。“植物组织”包括分化的和未分化的组织或完整植物,包括 但不限于根,茎,芽,叶,花粉,种子,肿瘤组织,及多种形式的细 胞和培养物如单细胞,原生质体,胚及胼胝体。植物组织可以在植物 或器官,组织或细胞培养物中。培养植物组织的一般方法由例如Maki et al.,1993和Phillips et al.1988提供。在一些实施方式中,表达载 体被导入玉米或其它植物组织中,使用直接基因转移方法如微粒介导 的输送,DNA注射,电穿孔等方法进行。在一些实施方式中,表达 载体被导入植物组织中,使用biolistic设备经微粒介导的输送方法进 行(参见例如Tomes et al.,1995)。本发明的载体不仅可用于表达结构 基因,也可以用于外显子-饵(trap)克隆或启动子-饵程序中以检测 在多种组织中不同的基因表达(Lindsey et al.,1993;Auch & Reth, 1990)。
在一些实施方式中,应用土壤杆菌属的Ti和Ri质粒的二元类型 载体。Ti衍生的载体可用于转化许多高等植物,包括单子叶植物和双 子叶植物,包括但不限于大豆,棉花,油菜,烟草,和水稻(Pacciotti et al.,1985:Byme et al.,1987;Sukhapinda et al.,1987;Lorz et al., 1985;Potrykus,1985;Park et al.,1985:Hiei et al.,1994)。T-DNA 转化植物细胞的应用已经广泛研究并详细描述(EP 0 120 516; Hoekema,1985;Knauf et al.,1983;及An et al.,1985,每个文献 在此处通过应用将其全文并入本发明中)。为导入植物中,可以将本 发明的核酸分子插入二元载体中,如实施例所述。
本领域技术人员可利用其它转化方法,如外源DNA构建体的直 接吸收(参见EP 0 295 959),电穿孔(Fromm et al.,1986),或者用所 述核酸构建体包被的金属粒子高速度弹道轰击植物细胞(Kline et al., 1987;US 4,945,050)。一旦转化,则可以使用本领域技术人员熟知的 技术再生细胞。特别相关的是最近描述的将外源基因转化入商业重要 的农作物中的方法,所述农作物如油菜种子(De Block et al.,1989), 向日葵(Everett et al.,1987),大豆(McCabe et al.,1988;Hinchee et al., 1988;Chee et al.,1989;Christou et al.,1989;EP 0 301 749),水稻 (Hiei et al.,1994),和玉米(Gordon Kamm et al.,1990;Fromm et al., 1990)。
当然,方法的选择依赖于靶定转化的植物类型,即单子叶植物或 双子叶植物。转化植物细胞的合适方法包括但不限于微注射 (Crossway et al.,1986),电穿孔(Riggs et al.,1986),土壤杆菌介导的 转化(Hinchee et al.,1988),直接基因转移(Paszkowski et al.,1984), 及使用得自Agracetus,Inc.(Madison,Wisconsin,United States of America)和BioRad(Hercules,California,United States of America)的 设备进行弹道粒子加速。参见例如US 4,945,050;McCabe et al.,1988; Weissinger et al.,1988;Sanford et al.,1987(洋葱);Christou et al., 1988(大豆);McCabe et al.,1988(大豆);Datta et al.,1990(水稻); Klein et al.,1988(玉米);Fromm et al.,1990(玉米);Gordon-Kamm et al.,1990(玉米);Svab et al.,1990(烟草叶绿体);Koziel et al.,1993 (玉米);Shimamoto et al.,1989(水稻);Christou et al.,1991(水稻); 欧洲专利申请EP 0 332 581(果园草(orchardgrass)及其它早熟禾亚 科(Pooideae));Vasil et al.,1993(小麦);Weeks et al.,1993(小麦)。 在一个实施方式中,应用针对玉米的原生质体转化方法(参见EP 0 292 435;US5,350,689)。
2.适于土壤杆菌转化的载体
含有包含本发明的表达盒的载体的根瘤土壤杆菌细胞在产生转 化植物的方法中有用,其中所述载体包含Ti质粒。将植物细胞如上 述用根瘤土壤杆菌感染以产生转化的植物细胞,然后从转化的植物细 胞中再生植物。本领域技术人员已知许多用于进行本发明的土壤杆菌 载体系统。
可利用使用根瘤土壤杆菌进行转化的许多载体。这些载体典型地 携带至少一个T-DNA边界序列并包括载体如pBIN19(Bevan,1984)。 下文描述了适于土壤杆菌转化的两种典型的载体的构建。
a.pCIB200和pCIB2001
二元载体pCIB200和pCIB2001用于构建重组载体以与土壤杆菌 使用,并如以下方式构建。pTJS75kan是通过用NarI消化pTJS75 (Schmidhauser & Helinski,1985)使得四环素抗性基因切离,随后插入 来自携带NPTII序列的pUC4K的AccI片段(Messing & Vieira,1982: Bevan et al.,1983:McBride & Summerfelt,1990)而产生。将XhoI接 头与PCIB7的EcoRV片段连接,PCIB7含有左侧和右侧T-DNA边界, 一个植物可选择的nos/nptII嵌合基因及pUC多接头(Rothstein et al., 1987),并将XhoI消化的片段克隆入SalI消化的pTJS75kan中以产生 pCIB200(见EP 0 332 104,实施例19)。pCIB200含有如下独特的多 接头限制位点:EcoRI,SstI,KpnI,BglII,XbaI,和SalI。pCIB2001 是pCIB200的衍生物,通过在多接头插入额外的限制位点而产生。 pCIB2001的多接头中的独特的限制位点是EcoRI,SstI,KpnI,BglII, XbaI,SalI,MluI,BclI,AvrII,ApaI,HpaI和StuI。pCIB2001,除 了含有这些独特的限制位点之外,还具有植物和细菌卡那霉素选择, 进行土壤杆菌介导的转化的左侧和右侧T-DNA边界,RK2衍生的trfA 在大肠杆菌(E.coli)及其它宿主之间活动化的功能,及也来自RK2 的OriT和OriV功能。pCIB2001多接头适于克隆含有其自身调节信 号的植物表达盒。
b.pCIB10及其潮霉素选择衍生物
二元载体pCIB10含有以在植物中进行选择的编码卡那霉素抗性 的基因,T-DNA右侧和左侧边界序列,及掺入的来自广泛宿主范围 的pRK252质粒的序列使得其在大肠杆菌和土壤杆菌中均复制。其构 建由Rothstein et al.,1987所公开。可以构建pCIB10的多种衍生物, 其掺入Gritz & Davies,1983揭示的潮霉素B磷酸转移酶基因。这些 衍生物使得可以仅基于潮霉素(pCIB743),或潮霉素和卡那霉素 (pCIB715,pCIB717)而选择转基因植物细胞。
3.活于非土壤杆菌转化的载体
不使用根瘤土壤杆菌进行转化不需要选择的转化载体中的 T-DNA序列,并因此除了上述含有T-DNA序列的载体之外还可利用 缺乏这些序列的载体。不依赖于土壤杆菌的转化技术包括通过粒子轰 击,原生质体吸收(例如聚乙二醇(PEG)和电穿孔),及微注射进行转 化。载体的选择主要依赖于转化的物种。下文公开了适于非土壤杆菌 转化的典型载体的构建。
a.pCIB3064
pCIB3064是适于直接基因转移技术组合除草剂BASTA_(草铵 磷(glufosinate ammonium)或膦丝菌素)选择的pUC衍生载体。质粒 pCIB246包含可操纵地与大肠杆菌β-葡糖醛酸酶(GUS)基因和 CaMV 35S转录终止子融合的CaMV 35S启动子,见PCT国际出版 物WO 93/07278所揭示。这个载体的35S启动子含有起始位点的两 个ATG序列5’。这些位点是使用标准PCR技术突变的,由此除去 ATG并产生限制位点SspI和PvuII。这些新的限制位点距离独特的 SalI位点96和37bp,距离实际的起始位点101和42bp。pCIB246 的所得衍生物称为pCIB3025。然后将GUS基因通过用SalI和SacI 消化从pCIB3025中切离,进行末端平端化并再连接以产生质粒 pCIB3060。质粒pJIT82得自John Innes Centre,Norwich,England, 将含有来自绿色产色链球菌(Streptomyces viridochromogenes)的bar 基因的400bp SmaI片段切离并插入pCIB3060的HpaI位点中 (Thompson et al.,1987)。这样产生pCIB3064,其包含位于CaMV 35S 启动子控制下的bar基因及进行除草剂选择的终止子,氨苄青霉素抗 性基因(以在大肠杆菌中选择)和具有独特位点SphI,PstI,HindIII 和BamHI的一个多接头。这个载体适于克隆含有其自身调节信号的 植物表达盒。
b.pSOG19和pSOG35
pSOG35是一种转化载体,其利用大肠杆菌二氢叶酸还原酶 (DHFR)基因作为可选择标记以赋予氨甲喋呤抗性。使用PCR扩增35S 启动子(-800bp),来自玉米Adh1基因的内含子6(-550bp),及来自 pSOG10的18bp的GUS非翻译前导序列。编码大肠杆菌二氢叶酸还 原酶II型基因的250-bp片段也通过PCR扩增,并将这两个PCR片 段用来自pB 1221(BD Biosciences Clontech,Palo Alto,California, United States of America)的SacI-PstI片段装配,pB1221含有pUC19 载体主链和胭脂氨酸合酶终止子。这些片段的装配产生pSOG19,其 含有与内含子6序列融合的35S启动子,GUS前导序列,DHFR基 因,及胭脂氨酸合酶终止子。pSOG19中GUS前导序列用来自玉米 褪绿斑驳病毒(MCMV)的前导序列置换产生载体pSOG35。pSOG19 和pSOG35携带氨苄青霉素抗性pUC基因并具有用于克隆外源物的 HindIII,SphI,PstI和EcoRI位点。
4.用于转化方法的可选择标记
通常但非必需采取使用可选择的标记进行直接基因转移或土壤 杆菌介导的转移的方法,所述可选择的标记可提供抗生素抗性(卡那 霉素,潮霉素,或氨甲喋呤)或除草剂抗性(例如膦丝菌素)。然而, 进行植物转化的可选择标记的选择对本发明不是关键的。
就某些植物物种而言,可利用不同的抗生素或除草剂选择标记。 转化中常规使用的选择标记包括nptII基因,其赋予卡那霉素及相关 抗生素抗性(Messing & Vierra,1982;Bevan et al.,1983),bar基因, 其赋予除草剂膦丝菌素抗性(White et al.,1990,Spencer et al.,1990), hph基因,其赋予抗生素潮霉素抗性(Blochinger & Diggelmann,1984), 及dhfr基因,其赋予氨甲喋呤抗性(Bourouis & Jarry,1983)。
也可以使用导致阳性选择的选择标记,如磷酸甘露糖异构酶 (PMI)基因(见PCT国际公开号WO 93/05163)。可用于阳性选择的其 它基因在PCT国际公开号WO 94/20627中描述,并编码木异构酶 (xyloisomerase)和磷酸甘露糖异构酶,如甘露糖-6-磷酸异构酶和甘 露糖-1-磷酸异构酶;磷酸甘露糖变位酶;甘露糖差向异构酶,如将 碳水化合物转化为甘露糖或者将甘露糖转化为碳水化合物如葡萄糖 或半乳糖的酶;磷酸酶,如甘露糖或木糖磷酸酶,甘露糖-6-磷酸酶 和甘露糖-1-磷酸酶,及参与将甘露糖或其衍生物或前体转运至细胞 中的通透酶。一种制剂典型地用于降低化合物对细胞的毒性,而且典 型是葡萄糖衍生物,如甲基-3-O-葡萄糖或根皮苷。鉴别转化的细胞 而不破坏或杀死群体中的未转化的细胞及非共同导入抗生素或除草 剂抗性基因的细胞。如PCT国际公开号WO 93/05163所述,除了消 除了需要抗生素或除草剂抗性基因之外,还已经示出阳性选择方法通 常远比传统的阴性选择方法更有效。
如上所述,用于直接基因转移技术组合除草剂BASTA_(或膦丝 菌素)选择的一个载体是pCIB3064。这个载体基于质粒pCIB246,其 包含与大肠杆菌β-葡糖醛酸酶(GUS)基因可操纵地连接的CaMV 35S启动子和CaMV 35S转录终止子,见PCT国际公开号WO 93/07278所述。用于赋予膦丝菌素抗性的一个基因是来自绿色产色链 球菌的基因(Thompson et al.,1987)。这个载体适于克隆含有其自身调 节信号的植物表达盒。
如上所述,一个额外的转化载体是pSOG35,其利用大肠杆菌二 氢叶酸还原酶(DHFR)基因作为赋予氨甲喋呤抗性的一个可选择的 标记。使用聚合酶链反应(PCR)扩增35S启动子(大约800碱基对 (bp)),来自玉米Adh1的内含子6(大约550bp),及来自pSOG10的 18bp的GUS非翻译前导序列。将编码大肠杆菌二氢叶酸还原酶II 型基因的250bp片段也通过PCR扩增,并将这两个PCR片段用来自 pBI221(BD Biosciences-Clontech,Palo Alto,California,United States of America)的SacI-PstI片段装配,其包含pUC19载体主链和胭脂氨 酸合酶终止子。这些片段的装配产生pSOG19,其含有与内含子6序 列融合的35S启动子,GUS前导序列,DHFR基因及胭脂氨酸合酶 终止子。pSOG19中的GUS前导序列用来自玉米褪绿斑驳病毒 (MCMV)的前导序列置换产生载体pSOG35。pSOG19和pSOG35携 带氨苄青霉素抗性的pUC衍生的基因,并具有用于克隆外源序列的 HindIII,SphI,PstI和EcoRI位点。
二元主链载体pNOV2117含有两侧为右侧和左侧边界序列的 T-DNA部分,并包括POSITECHTM(Syngenta Corp.,Wilmington, Delaware,United States of America)植物可选择的标记及“候选基因” 基因表达盒。POSITECHTM植物可选择标记赋予甘露糖抗性,在此情 况中由启动PMI(磷酸甘露糖异构酶)基因表达的玉米遍在蛋白启动 子后接花椰菜花叶病毒转录终止子组成。
5.适于叶绿体转化的载体
为在植物质体中表达本发明的核苷酸序列,使用质体转化载体 pPH143(PCT国际公开号WO 97/32011,实施例36)。将核苷酸序列 插入pPH143中,从而置换原卟啉原氧化酶(Protox)编码序列。然后这 个载体用于质体转化并选择壮观霉素抗性转化体。或者,将核苷酸序 列插入pPH143中以便其置换aadH基因。在这种情况中,选择对 PROTOX抑制剂抗性的转化体。
6.质体的转化
在另一个实施方式中,本发明的核苷酸序列直接转化入质体基因 组中。质体转化技术见US 5,451,513;US 5,545,817;和US 5,545,818; 及PCT国际公开号WO 95/16783;及McBride et al.,1994所述。叶 绿体转化的基本技术包括将在可选择标记两侧的克隆的质体DNA区 域与感兴趣的基因一起导入合适的靶组织中,例如使用biolistics或 原生质体转化方法进行(例如氯化钙或PEG介导的转化)。称为靶序列 的1000-1500个碱基(kb)的侧翼区域促进与质体基因组直向同源重 组,由此使得原质体系的特异区域置换或修饰。最初,利用叶绿体 16S rRNA和赋予壮观霉素和/或链霉素抗性的rps12基因中的点突变 作为转化的可选择标记(Svab et al.,1990;Staub et al.,1992)。这样 产生频率为大约1%靶叶片轰击的稳定同质转化体。这些标记之间克 隆位点的存在使得可以产生质体靶定载体以导入外源基因(Staub et al.,1993)。转化频率的实际增加通过将隐性rRNA或r-蛋白抗生素抗 性基因用显性可选择标记,编码壮观霉素-解毒酶氨基糖苷-3N-腺苷 酰转移酶的细菌aadA置换而获得(Staub et al.,1993)。用于质体转化 的其它可选择的标记为本领域所已知并涵盖在本发明范围内。典型 地,在转化后需要大约15-20个细胞分裂周期以达到同质状态。
质体表达,其中基因是通过直向同源重组插入每个植物细胞中存 在的圆形质体基因组的全部几千个拷贝中,利用核表达的基因的巨大 拷贝数的优势使得表达水平可易于超过总可溶的植物蛋白的10%。在 一个实施方式中,本发明的核苷酸序列插入质体靶定载体中并转化入 希望的植物宿主的质体基因组中。获得与含有本发明的核苷酸序列的 质体基因组同质的植物,并且在一个实施方式中该植物能高度表达所 述核苷酸序列。
质体转化的一个实例如下。将烟草c.v.‘Xanthi nc’的种子在T琼 脂培养基上以1”圆形排列在每个平板上萌生至7个,并在接种后12 -14天用来自质粒pPH143和pPH145(Svab & Maliga,1993)的DNA 包被的1μm钨粒子(M10,Biorad,Hercules,California,United States of America)进行轰击。轰击的秧苗在T培养基上孵育2天,之后切离 叶片并置于含有500μg/ml壮观霉素二盐酸化物(Sigma,St.Louis, Missouri,United States of America)的RMOP培养基(Svab et al.,1990) 平板上在亮光(350-500μmol photons/m2/s)下远轴放置。将在轰击后3 -8周呈现为在变白的叶片下的抗性芽被亚克隆到相同的选择性培养 基上,使得形成胼胝体,并将二级芽分离及亚克隆。独立的亚克隆中 转化的质体基因组拷贝的完全分离(同质性)通过Southern印迹这样 的的标准技术(Sambrook & Russell,2001)评估。BamHI/EcoRI消化的 总细胞DNA(Mettler,1987)在1% Tris-酸-EDTA(TBE)琼脂糖凝胶 上分离,移至尼龙膜上(Amersham Biosciences,Piscataway,New Jersey,United States of America)并用32P标记的相应于来自含有一部 分rps7/12质体靶定序列的pC8的0.7kb BamHI/HindIII DNA片段的 随机引物DNA序列进行探测。将同质芽在含有壮观霉素的MS/IBA 培养基(McBride et al.,1994)上无菌生根并移至温室中。
7.双子叶植物的转化
双子叶植物的转化技术为本领域所熟知并包括基于土壤杆菌的 技术及不需要土壤杆菌的技术。不需要土壤杆菌的技术包括外源遗传 物质由原生质体或细胞的直接吸收。这可以通过PEG或电穿孔介导 的吸收,粒子轰击介导的输送或微注射而实现。这些技术的实例见 Paszkowski et al.,1984;Potrykus et al.,1985;Reich et al.,1986和 Klein et al.,1987所公开。在每种情况中,均使用本领域已知的标准 技术将转化的细胞再生为完整植物。
土壤杆菌介导的转化由于其高效的转化及其针对许多不同物种 的广泛效力而是转化双子叶植物的一种有效技术。土壤杆菌转化典型 包括将携带感兴趣的外源DNA的二元载体(例如pCIB200或 pCIB2001)移至一个适当的土壤杆菌菌株中,这可根据宿主土壤杆菌 菌株一起停留的Ti质粒或染色体上携带的vir基因的补体而定(例如 针对pCIB200和pCIB2001的菌株CIB542(Uknes et al.,1993))。重 组二元载体移至土壤杆菌是通过三亲杂交(triparental mating)程序实 现的,使用携带重组二元载体的大肠杆菌,携带质粒如pRK2013并 能将重组的二元载体移至靶土壤杆菌菌株的辅助大肠杆菌菌株进行。 或者,重组二元载体可以通过DNA转化移至土壤杆菌(H_fgen & Willmitzer,1988)。
通过重组土壤杆菌转化靶植物物种通常包括将土壤杆菌与来自 植物的外植体根据本领域熟知的方案共培养。将转化的组织在携带存 在于二元质粒T-DNA边界的抗生素或除草剂抗性标记的可选择的培 养基上再生。
用基因转化植物细胞的另一种方案包括向植物组织和细胞推进 无活性的或生物学活性的粒子。这种技术见均授予Sanford等的美国 专利US4,945,050;US 5,036,006;和US 5,100,792所揭示。通常,这 个程序包括在有效渗透细胞外表面并掺入其内部的条件下,向细胞推 进无活性或生物学活性的粒子。当利用无活性的粒子时,载体可通过 用含有希望基因的载体包被粒子而导入细胞中。或者,靶细胞可由载 体环绕以便载体通过粒子的激发而载入细胞中。也可将生物活性粒子 (例如均含有被导入的DNA的干酵母细胞,干细菌,或噬菌体)推进 植物细胞组织中。
8.单子叶植物的转化
大多数单子叶植物的转化现在也已经常规进行。转化技术例如包 括使用PEG或电穿孔将基因直接移至原生质体中,及通过粒子轰击 入胼胝体中。转化可以用单一DNA物种或多个DNA物种(即共转化) 进行,这两种技术均适用于本发明。共转化可具有避免完整载体构建 及产生具有感兴趣的基因未连的基因座和可选择标记的转基因植 物的优势,使得在随后的世代中可以除去可选择的标记,这被认为是 希望如此的。然而,使用共转化的缺点是单独的DNA物种被整合入 基因组中的频率低于100%(Schocher et al.,1986)。
专利申请EP 0 292 435,EP 0 392 225,及WO 93/07278描述了 从玉米原种近交系的中制备胼胝体和原生质体的技术,使用PEG或 电穿孔转化原生质体及从转化的原生质体中再生玉米植物的技术。 Gordon-Kamm et al.,1990和Fromm et al.,1990已经公布了使用粒 子轰击转化A188衍生的玉米品系的技术。另外,WO 93/07278和 Koziel et al.,1993描述了通过粒子轰击转化玉米原种近交系的技术。 这个技术利用从授粉后14-15天的玉米穗中切离的长度为1.5-2.5 mm的未未成熟玉米胚及使用PDS-1000He Biolistic粒子输送设备 (DuPont Biotechnology,Wilmington,Delaware,United States of America)进行轰击。
水稻的转化也可以利用原生质体或粒子轰击通过直接基因转移 技术进行。原生质体介导的转化已经针对水稻的Japonica类型和 Indica类型而揭示(Zhang et al.,1988;Shimamoto et al.,1989;Datta et al.,1990)。这两种类型也可以使用粒子轰击而常规转化(Christou et al.,1991)。另外,WO 93/21335描述了通过电穿孔转化水稻的技术。 Casas et al.,1993公开了通过微粒轰击产生转基因高粱植物。
专利申请EP 0 332 581描述了早熟禾亚科原生质体的产生,转化 和再生的技术。这些技术可以转化果园草(Dactylis)和小麦。另外, Vasil et al.,1992也公开了使用粒子轰击进入C型长期可再生的胼胝 体细胞中进行小麦转化,Vasil et al.,1993和Weeks et al.,1993也揭 示了使用粒子轰击未成熟胚和未成熟胚衍生的胼胝体进行转化。
然而,小麦转化的代表性技术包括通过粒子轰击未成熟胚而转化 小麦,并包括在基因输送之前的高蔗糖或高麦芽糖步骤。在轰击之前, 将胚(长度0.75-1mm)铺板于具有3%蔗糖(Murashige & Skoog,1962) 和3mg/l 2,4-二氯苯氧基乙酸(2,4-D)的MS培养基上以诱导体细胞 胚,这可以在黑暗处进行。在选择轰击当天,将胚从诱导培养基中取 出并置于渗透剂(即具有希望浓度典型为15%的蔗糖或麦芽糖的诱 导培养基)上。使得胚质壁分离2-3小时,然后轰击。尽管不是关键 地,但典型地每个靶平板有20个胚。将合适的携带基因的质粒(如 pCIB3064或pSG35)使用标准程序在微米大小的金粒上沉淀。将每个 平板的胚用DuPont BIOLISTICS_氦设备发射,使用大约1000磅/平 方英寸的爆发压(psi),标准的80目屏(80mesh screen)。在轰击后, 将胚回置于黑暗处以回收大约24小时(仍在渗透剂上)。24小时后, 将胚从渗透剂中取出并回置于诱导培养基上,在此放置大约1个月之 后再生。大约1个月后,将具有发育中的胚形成胼胝体的胚外植体移 至再生培养基(MS+1mg/L NAA,5mg/L GA),所述培养基另外含有 适当的选择剂(在pCIB3064情况中为10mg/l BASTA_,在pSOG35 情况中为2mg/l氨甲喋呤)。大约1个月后,将发育的芽移至较大的 称为“GA7s”的无菌容器中,容器中含有一半强度的MS,2%蔗糖 及相同浓度的选择剂。
也已经公开了使用土壤杆菌进行单子叶植物的转化。参见WO 94/00977和US5,591,616,这两个文献在此处通过引用被并入本发明 中。也见于Negrotto et al.,2000,在此处通过引用并如本发明中。Zhao et al.,2000特别公开了用土壤杆菌转化高粱。也见于US 6,369,298。
水稻(Oryza sativa)可用于再生转基因植物。可以使用多种水稻 栽培品种(Hiei et al.,1994;Dong et al.,1996;Hiei et al.,1997)。同 样,以下揭示的多种培养基组分可以在数量上改变或取代。起始胚胎 发生应答和/或从成熟胚中建立培养物,通过在MS-CIM培养基(MS 基础盐,4.3g/L;维生素B5(200×),5ml/L;蔗糖,30g/L;脯氨酸, 500mg/L;谷氨酰胺,500mg/L;酪蛋白水解物,300mg/L;2,4-D(1 mg/ml),2ml/L;用1N KOH将pH调节为5.8;植物凝胶(Phytagel), 3g/L)上培养而进行。将培养应答起始阶段的成熟胚或建立的培养系 接种并与含有希望的载体构建体的根瘤土壤杆菌菌株LBA4404(土 壤杆菌)共同培养。将土壤杆菌从甘油原种中在固体YPC培养基(加上 100mg/L壮观霉素及任何其它适当的抗生素)上在28℃培养大约2 天。将土壤杆菌再悬浮于液体MS-CIM培养基中。将土壤杆菌培养 物稀释至OD600为0.2-0.3并加入乙酰丁香酮(acetosyringone)至终 浓度为200μM。加入乙酰丁香酮之后将该溶液与水稻培养物混和以 诱导土壤杆菌将DNA移至植物细胞。为进行接种,将植物培养物浸 于细菌悬浮液中。除去液体细菌悬浮液并将接种的培养物置于共培养 培养基上,在22℃孵育2天。然后将培养物移至具有替卡西林 (ticarcillin,400mg/L)的MS-CIM培养基以抑制土壤杆菌的生长。 对利用PMI可选择的标记基因的构建体(Reed et al.,2001),7天后将 培养物移至含有甘露糖作为糖源的选择培养基(MS加上2%甘露糖, 300mg/L替卡西林),在黑暗中培养3-4周。然后将抗性集落移至再 生诱导培养基(无2,4-D,0.5mg/L IAA,1mg/L玉米素,200mg/L TIMENTIN_,2%甘露糖,和3%山梨糖醇的MS)并在黑暗中生长 14天。然后将增殖的集落移至另一个再生诱导培养基,并移至光生 长室中。将再生的芽移至具有GA7-1培养基(无激素和2%山梨糖醇 的MS)的GA7容器中2周,然后当其足够大并具有足够的根时移至 温室中。将植物移植在温室的土壤中(T0世代)生长至成熟,收获T1 种子。
E.转化细胞的生长和筛选
然后将转基因植物细胞置于合适的选择性培养基中以选择转基 因细胞,然后生长至胼胝体。在生根培养基中生长,以从胼胝体中生 长芽并从芽中产生幼苗。将不同构建体正常地与一个标记连接以在植 物细胞中选择。方便地,标记可以是杀生物剂(例如抗生素包括但不 限于卡那霉素,G418,博来霉素,潮霉素,氯霉素,除草剂等等)抗 性。设计所用特殊标记以使得可以选择转化的细胞(与缺失已经导入 的DNA的细胞相比)。包括本发明的转录盒的DNA构建体的成分是 从与宿主天然(内源)或异源(外源)的序列中制备的。如本文所用 术语“异源”和“外源”序列是指在导入所述构建体的野生型宿主中 未发现的序列,或者已经分离自宿主并掺入一个表达载体中的序列。 在一个实施方式中异源构建体含有与转录起始区域衍生自其中的基 因不是天然的至少一个区域。
为证实转化细胞和植物中存在转基因,可以进行多种分析。这种 分析包括,例如本领域技术人员所熟知的“分子生物学”分析,如 Southern和Northern印迹,原位杂交及基于核酸的扩增方法如PCR或 RT-PCR;“生物化学”分析,例如通过免疫学方法(酶联免疫吸附测 定(ELISA)和Western印迹)或通过酶功能检测蛋白质产物的存在; 植物部分分析,如种子分析;及分析整个再生植物的表型,例如疾病 抗性或抗虫性。
DNA可分离自细胞系或任何植物部分以通过本领域技术人员熟 知的技术确定预先选择的核酸片段的存在。注意完整的序列不总是存 在,大概是由于细胞中序列的重排或缺失所致。
通过本发明的方法导入的核酸片段的存在可以通过聚合酶链反 应(PCR)确定。使用这种技术,扩增核酸的不连续片段并通过凝胶电 泳检测。这种类型的分析使得可以确定预选的核酸片段是否存在于稳 定的转化体中。预期使用PCR技术可以克隆与导入的预选DNA片段 邻近的宿主基因组DNA的片段。
DNA整合入宿主基因组中及转化体的独立相同性的阳性证据可 以使用Southern杂交技术确定。使用这种技术,可以鉴别导入宿主基 因组中及宿主DNA序列两侧的特异DNA序列。因此,给定的转化 体的Southern杂交模式作为转化体的鉴别特性。另外,可以通过 Southern杂交以表明导入的预选DNA片段在高分子量的DNA中的 存在:例如为证实导入的预选DNA片段已经整合入宿主基因组中。 Southern杂交提供了也可以使用PCR获得的某些信息,例如预选 DNA片段的存在,但也可以表明外源核酸分子整合入基因组中并可 以鉴定每个转化体。
预期使用斑点(dot)或狭线(slot)印迹杂交技术(对Southern 杂交技术加以修改的技术),可以获得衍生自PCR的相同信息(例如 存在预选的DNA片段)。
PCR和Southern杂交技术均可用于论证预选的DNA片段传递至 子代。在大多数情况中,给定转化体的特征性Southern杂交模式在子 代中将分离为一或多个孟德尔基因(Spencer et al.,1990;Laursen et al., 1994),表明基因的稳定遗传。胼胝体和亲代转化体(R0)的非嵌合性质 可以通过种系传递及相同的Southern印迹杂交模式和转化DNA在胼 胝体,R0植物和R1子代中的强度而提示。
而某些DNA分子技术可以使用分离自植物任何部分的DNA进 行,特异的RNA仅在特殊的细胞或组织类型中表达,因此必需从这 些组织中制备RNA以进行分析。PCR技术也可用于检测和量化从导 入的预选DNA分子中产生的RNA。在这个PCR应用中,首先必需 使用酶如反转录酶将RNA反转录为互补DNA(cDNA),然后通过应 用常规的PCR技术以扩增所得cDNA。
在一些情况中,PCR技术不能表明RNA产物的完整性。关于 RNA产物性质的进一步信息可通过Northern印迹获得。这个技术表 明RNA物种的存在并额外给出了关于RNA完整性的信息。RNA物 种的存在与否也可以使用本领域已知的斑点或狭线印迹Northern杂 交技术而确定。这些技术是Northern印迹的修改技术,典型地表明 仅存在或不存在RNA物种。
因此,Southern印迹和PCR可用于检测感兴趣的DNA分子的存 在。表达可以通过特异性鉴别导入的预选DNA片段的蛋白质产物或 者评测由其表达而导致的表型改变而评价。
特异蛋白质的产生和鉴别的分析可以利用蛋白质的物理-化学, 结构,功能或其它性质。独特的物理-化学或结构性质使得可以通过 电泳程序如通过天然或变性凝胶电泳或者等电聚焦,或者通过层析技 术如离子交换或凝胶排阻层析分离并鉴别蛋白质。各个蛋白质的独特 结构提供了使用本领域公认的技术如ELISA,利用特异的抗体检测各 个蛋白质存在的机会。可利用组合方案以增加额外的信息,如Western 印迹,其中抗体用于定位已经通过电泳技术分离并移至固体支持物的 各个基因产物。可利用另外的技术证实感兴趣的产物的相同性,如通 过氨基酸测序随后纯化而评价。尽管这些技术是最常用的,但也可以 使用本领域技术人员已知的其它方法。
也可以使用分析程序通过蛋白质功能,尤其是酶催化包括特异性 底物和产物的特异性化学反应的能力鉴别蛋白质的表达。这些反应可 以随后通过物理或化学程序提供并量化底物的丧失或反应产物的产 生。实例是与所分析的酶同样变化,并且是本领域针对许多不同的酶 所已知的。
基因产物的表达也可以通过评价其表达的表型结果而确定。这些 分析可采取多种形式,包括但非限于分析化学组合物,形态学或植物 的生理学性质的改变。形态学改变可包括更高或更粗的茎干。植物或 植物的一部分应答所加处理中的改变典型地在称为生物测定的严格 控制条件下评价。
同样,蛋白质表达水平可以通过任何标准方法测定。例如,与本 发明的应激相关蛋白特异性结合的抗体(单克隆或多克隆抗体)可以 通过标准方法产生(参见例如Ausubel et al.,1988,包括直至2002年 的补充材料所述产生抗体的方法;Harlow & Lane,1988)。使用这种 应激相关蛋白的特异性抗体,蛋白质水平可以通过任何免疫学方法测 定,所述方法包括但不限于Western印迹,免疫沉淀,和ELISA。
测定蛋白质水平的另一种非限制性的方法是通过测定mRNA水 平而进行。例如,总mRNA可分离自导入本发明的核酸分子(或者这 种核酸分子的反义形式)的细胞或未处理的细胞。使用导入被处理的 细胞的核酸分子作为探针进行的Northern印迹分析可表明与未处理 的细胞相比,处理的细胞是否在不同水平(在mRNA水平和多肽水 平)表达该核酸分子。
应激反应的改变(在未受攻击的细胞和植物,或者在用例如暴露 于盐或病原体感染而受到攻击的细胞和植物中)可通过标准方法计数 细胞而容易地进行测定。例如,细胞可使用血细胞计数器或显微镜人 工计数。胼胝体生长和植物生长可通过重量和/或高度测定。各个细 胞生长可通过任何标准的应激反应测定而确定(例如3H掺入法)。
本发明进一步包括通过调节一种以上的本发明所述应激相关蛋 白的表达来操纵应激反应。例如,第一种应激相关蛋白的表达水平增 加加上第二种应激相关蛋白表达水平的降低可导致细胞(或包括该细 胞的植物)的应激反应与单独的第一种应激相关蛋白表达水平的增加 或第二种应激相关蛋白表达水平的降低相比发生更大改变。本发明已 经提供了许多应激相关蛋白及其彼此的相互关系。操纵本发明所公开 的一种或多种应激相关蛋白的表达使得经遗传工程化的植物(即转基 因植物)的发育在刺激(例如生物或非生物刺激)下具有更优的应激 反应。
VI.植物,培育及种子产生
A.植物
宿主细胞是任何类型的细胞,包括但不限于细菌细胞,酵母细胞, 植物细胞,昆虫细胞,哺乳动物细胞。许多这种细胞是可商购的,例 如来自美国弗吉尼亚州马纳萨斯的美国典型培养物保藏中心 (American Type Culture Collection,Manassas,Virginia,United States of America)。
在某些实施方式中,细胞是植物细胞,其可以再生以形成转基因 植物。因此,本发明提供了一种转化的(转基因)植物细胞,in planta 或ex planta,包括转化的质体或其它细胞器(例如核,线粒体或叶绿 体)。如本文所用,“转基因植物”是具有一或多种植物细胞的植物, 所述植物细胞含有一个外源核酸分子(例如编码本发明所公开的应激 相关多肽的核酸分子)。因此,转基因植物可包含这样的一个核酸分 子,该分子包含一个外源核酸序列(即衍生自不同植物物种的核酸序 列)。或者或另外,转基因植物可包含这样的一个核酸分子,该分子 包含来自相同植物物种的核酸序列,其中该核酸序列已经从该植物物 种分离出来。在后面的实施例中,核酸序列可以与野生型序列相同或 不同,并可以任选地包括与在天然发生的植物中发现的那些序列相同 或不同的调节序列。
本发明可用于转化任何植物物种的细胞,包括但不限于来自玉米 (Zea mays),芸苔属(例如甘蓝型油菜(B.napus),芜菁(B.rapa), 芥菜(B.iuncea)),特别是用作种子油(seed oil)来源的那些芸苔 物种,苜蓿(Medicago sativa),水稻(Oryza sativa),黑麦(Secale cereale),高粱(两色蜀黍、蜀黍),黍米(例如珍珠粟(Pennisetum glaucum)),粟米(Panicum miliaceum),谷子(Setaria italica),穇子 (Eleusine coracana)),向日葵(Helianthus annuus),红花(Carthamus tinctorius),小麦(Triticum aestivum),大豆(glycine max),烟草(Nicotiana tabacum),马铃薯(Solanum tuberosum),花生(Arachis hypogaea),棉 花(Gossypium barbadense)))))))))))))))))))))))))))))))))))))))))))))),陆地 棉(Gossypium hirsutum)),甘薯(Ipomoea batatus),木薯(Manihot esculenta),咖啡(Cofea spp.),椰子(Cocos nucifera),凤梨(Ananas comosus),柑桔树(柑桔属(Citrus spp.)),可可(Theobroma cacao), 茶(Camellia sinensis),香蕉(Musa spp.)),鳄梨(Persea ultilane),无花 果(Ficus casica),番石榴(Psidium guajava),芒果(Mangifera indica), 橄榄(Olea europaea),番木瓜(Carica papaya),腰果(Anacardium occidentale),澳洲坚果(Macadamia integrifolia),杏仁(Prunus amygdalus),甜菜(Beta vulgaris),甘蔗(Saccharum spp.),燕麦,浮萍 (Lemna),大麦,蔬菜,观赏植物,及针叶树。
浮萍(Lemna,参见PCT国际公开号WO 00/07210)包括浮萍科 (Lemnaceae)的成员。已知有4个属34个物种的浮萍,如下所述: 浮萍属(L.aequinoctialis,L.disperma,L.ecuadoriensis,L.gibba, 日本青萍(L.japonica),矮山麦冬(L.minor),镰形青萍(L.miniscula), L.obscura,稀脉萍(L.perpusilla),L.tenera,品字萍(L.trisulca), L.turionifera,L.valdiviana);紫萍属(S.intermedia,S.polyrrhiza,S. punctata);芜萍属(Wa.Angusta,Wa.Arrhiza,Wa.Australina,Wa. Borealis,Wa.Brasiliensis,Wa.Columbiana,Wa.Elongata,Wa.Globosa, Wa.Microscopica,Wa.Neglecta)及Wofiella属(W1.ultila,W1. ultilanen,W1.gladiata,W1.ultila,W1.lingulata,W1.repunda,W1. rotunda,和W1.neotropica)。浮萍科的任何其它的属或物种如果存在, 则也包含在本发明范围内。在一个实施方式中,Lemna gibba用于本 发明中,在其它实施方式中,应用矮山麦冬和镰形青萍。浮萍物种可 使用Landolt,1986所述分类方案加以分类。
本发明范围内的蔬菜包括番茄(Lycopersicon esculentum),莴苣 (例如Lactuca sativa),青豆(Phaseolus vulgaris),利马豆(Phaseolus limensis),豌豆(香豌豆属(Lathyrus spp.)),及香瓜属的成员如黄瓜 (C.sativus),香瓜(C.cantalupensis),及甜瓜(C.melo)。观赏植物包 括杜鹃花(杜鹃属(Rhododendron spp.)),八仙花属(Macrophylla hydrangea),芙蓉属(Hibiscus rosasanensis),玫瑰(蔷薇属(Rosa spp.)),郁金香(郁金香属(Tulipa spp.)),水仙(水仙属(Narcissus spp.)),矮牵牛花(Petunia hybrida),康乃馨(Dianthus caryophyllus), 一品红(Euphorbia pulcherrima),和菊花。可用于实现本发明的针叶树 包括例如松树,如火炬松(Pinus taeda),沼泽松(Pinus elliotii),美 国黄松(Pinus ponderosa),黑松(Pinus contorta),和辐射松(Pinus radiata),道格拉斯冷杉(Pseudotsuga menziesii);西部铁杉(Tsuga ultilane);锡特卡云杉(Picea glauca);红杉(Sequoia sempervirens); 真冷杉(ture fir)如银枞(Abies amabilis)和香脂冷杉(Abies balsamea);及松,如西部红柏(Thuja plicata)和阿拉斯加黄柏 (Chamaecyparis nootkatensis)。
可用于本发明中的豆科植物包括豆类和豌豆。代表性的豆包括瓜 尔豆,角豆,胡芦巴,大豆,四季豆,豇豆,绿豆,利马豆,蚕豆, 小扁豆,鹰嘴豆等等。豆包括但不限于落花生(例如花生),蚕豆(Vicia) (例如小寇花(crown vetch),毛苕子(hairy vetch),赤豆(adzuki bean), 绿豆,和鹰嘴豆),羽扇豆(Lupinus)(例如羽扇豆(lupine),三叶草 (trifolium)),菜豆(Phaseolus)(例如菜豆和利马豆),豌豆(Pisum) (例如field bean),草木犀属(Melilotus)(例如三叶草(clover)),苜 蓿(Medicago)(例如苜蓿),荷花(Lotus)(例如车轴草(trefoil)), 小扁豆属(lens)(例如小扁豆(lentil)),及假木蓝(false indigo)。 用于本发明方法中的非限制性草料和草坪草(turfgrass)包括苜蓿, 果园草,高羊茅(tall fescue),多年生黑麦草(perennial ryegrass), 匍匐性本特草(creeping bent grass),和小糠草。
本发明范围内的其它植物包括金合欢,茴香,朝鲜蓟,芝麻菜, 黑莓,canola,芫荽,克莱门氏小柑橘,菊苣,桉树,茴香,葡萄, 蜜汁,豆薯,猕猴桃,柠檬,酸橙,蘑菇,坚果,黄秋葵,柑桔,欧 芹,柿子,车前草,石榴,白杨,辐射松,菊苣,南方松,枫香,橘 子,黑小麦,葡萄,山药,苹果,梨,温柏,樱桃,杏,甜瓜,大麻, 荞麦,葡萄,悬钩子,藜,蓝莓,油桃,桃,李子,草莓,西瓜,茄 子,胡椒,花椰菜,芸苔,例如椰菜,甘蓝,ultilan sprouts,洋葱, 胡萝卜,韭菜,甜菜,蚕豆,芹菜,萝卜,南瓜,菊苣,葫芦,大蒜, 四季豆,菠菜,南瓜,芜箐,ultilane,及夏南瓜。
本发明范围内的观赏植物包括凤仙花属,秋海棠属,天竺葵属, 堇菜属,仙客来属,马鞭草属,长春花属,万寿菊属,报春花属,非 洲紫罗兰属,藿香蓟属,苋属,金鱼草属,耧斗菜属,瓜叶菊属,三 叶草,秋英属,豇豆属,大丽花属,曼陀罗属,飞燕草,大丁草,剑 兰,大岩桐,孤挺花,松叶菊属,Salpiglossos和百日草属植物。
在某些实施方式中,本发明的转基因植物是农作物,特别是谷类 植物。这种农作物和谷类包括但非限于玉米,苜蓿,向日葵,水稻, 芸苔,canola,大豆,大麦,大豆,甜菜,棉花,红花,花生,高粱, 小麦,黍及烟草。
本发明还提供了包含所述成分的植物。在一个实施方式中,植物 的特征在于植物的表型或可测定的特性加以修饰,这种修饰可归因于 表达盒所致。在一个实施方式中,修饰包括例如营养增加,营养吸收 效力增加,内源化合物的产量或者异源化合物的产量增加。在另一个 实施方式中,修饰包括对除草剂,非生物刺激或病原体抗性增加或降 低。在另一个实施方式中,修饰包括对光,水,氮或微量元素的需求 增加或减少。在另一个实施方式中,修饰包括富集必需氨基酸作为植 物多肽级分的一部分。在另一个实施方式中,多肽级分可以是例如全 部种子多肽,可溶多肽,不可溶多肽,可水提取的多肽,及脂质相关 的多肽。在另一个实施方式中,修饰包括基因的过表达,低表达,反 义调节,有义抑制,诱导型表达,诱导型抑制,或者诱导型调节。
B.培育
通过用本发明的核酸序列转化获得的植物可以是任何植物物种, 包括单子叶植物和双子叶植物;然而,本发明方法中使用的植物在一 个实施方式中选自上述农业重要的靶农作物。本发明基因的表达组合 对产量和质量重要的其它特性可以通过培育掺入植物品系中。培育方 法和技术为本领域所已知。参见例如Welsh,1981;Wood,1983; Mayo,1987;Singh,1986;Wricke & Weber,1986。
工程化进入上述转基因种子和植物中的遗传特性通过有性生殖 或营养生长而传代,并因此可在子代植物中保持和繁殖。通常,保持 和繁殖利用已知的农业学方法以符合特殊的目的,如耕种,播种,或 收获。也可以应用专业处理如水培或温室技术。由于生长中的农作物 易受昆虫或感染的攻击和伤害以及杂草的竞争,因此要采取措施以控 制杂草,植物疾病,昆虫,线虫,及其它不利条件以改良产量。这些 包括机械措施如土壤耕耘或除去杂草和感染的植物,以及应用农用化 学制品如除草剂,杀真菌剂,杀配子剂,生长调节物,催熟剂和杀虫 剂。
根据本发明的转基因植物和种子的有利遗传特性的应用可进一 步在植物培育中产生,其针对具有改良性状的植物的发育,所述改良 性状如耐受虫害、除草剂或者生物或非生物刺激,改良的营养价值, 增加的产量或增殖,或者改良的结构使得倒伏或脱粒损失减少。多种 培育步骤的特征在于熟知的人工干涉如选择杂交品系,指导亲代品系 的授粉,或者选择适当的子代植物。
根据希望的性质可采取不同的培育措施。相关的技术为本领域所 熟知,包括但不限于杂交,近交,回交培育,多线培育,变种混和, 种间杂交,非整倍体技术等等。杂交技术也可包括通过机械、化学或 生物化学方式不育化植物以产生雄性或雌性不育植物。雄性不育植物 用不同品系的花粉交叉授粉保证了雄性不育但雌性能育植物的基因 组一律获得两个亲代品系的性质。因此,本发明的转基因种子和植物 可用于培育改良的植物品系,例如提高常规方法的效力如除草剂或杀 虫剂处理的效力,或者由于其修饰的遗传性质而可以免除所述方法。 或者可以获得具有改良的刺激耐受性的新农作物,由于其最佳化的遗 传“装备”而产生与不能耐受相对不利发育条件(例如干旱)的产物 相比品质更好的收获产物。
另外,本发明还提供了一种转基因植物,这种植物的种子,及这 种植物的子代植物包括杂交系和近交系。在代表性的实施方式中,转 基因植物是转基因的玉米,大豆,大麦,苜蓿,向日葵,canola,大 豆,棉花,花生,高粱,烟草,甜菜,水稻,小麦,裸麦,草坪草, 黍,甘蔗,番茄,或马铃薯。
本发明的转化的(转基因)植物包括一种植物,其基因组通过一 个外源核酸分子而扩展,或者其中一个基因被破坏,例如导致由该基 因编码的产物的功能丧失,降低或改变,这种植物与相应的野生型植 物相比也可以具有增加的产量和/或产生品质更好的产物。本发明的 核酸分子因此用于靶基因破坏,以及用作标记和探针。
本发明还提供了一种植物培育方法,例如制备杂交的可育的转基 因植物。所述方法包括将包含本发明的特殊核酸分子的一种可育转基 因植物自身杂交或者与第二种植物(例如没有所述特殊的核酸分子的 植物)杂交,以制备包含所述特殊核酸分子的杂交可育的转基因植物 的种子。然后将种子种植以获得杂交可育的转基因植物。该植物可以 是单子叶植物或双子叶植物。在一个特定的实施方式中,该植物是一 种谷类植物。
杂交可育的转基因植物可具有通过雌亲或通过雄亲遗传的特殊 核酸分子。第二种植物可以是一种近交植物。杂交可育的转基因植物 可以是杂交体。本发明还包括任何这些杂交可育的转基因植物的种 子。
C.种子产生
本发明的一些实施方式还提供了包含表达盒的植物的种子和分 离的产物,所述表达盒包含如文中所述那样与本发明的分离的核酸可 操纵地连接的一个启动子序列。在一些实施方式中,该分离的核酸分 子选自由以下所组成的组:
a.编码包含SEQ ID NO:2-112中的一个偶数编号的氨基酸 序列的多肽的核酸分子;
b.包含SEQ ID NO:1-111中的一个奇数编号的核酸序列的 核酸分子;
c.具有与(a)或(b)的核酸分子的核酸序列有至少90%相同性 的核酸序列的核酸分子;
d.在选自如下一组的杂交条件下与(a)或(b)杂交的核酸分子:
i.在50℃在7%十二烷基硫酸钠(SDS),0.5M NaPO4, 1mM乙二胺四乙酸(EDTA)中杂交,最后在50℃ 在2X标准柠檬酸盐水(SSC),0.1% SDS中洗涤;
ii.在50℃在7% SDS,0.5M NaPO4,1mM EDTA中杂 交,最后在50℃在1×SSC,0.1% SDS中洗涤;
iii.在50℃在7% SDS,0.5M NaPO4,1mM EDTA中杂 交,最后在50℃在0.5×SSC,0.1% SDS中洗涤;
iv.在50℃在7%十二烷基硫酸钠(SDS),0.5M NaPO4, 1mM EDTA中杂交,最后在50℃在0.1×SSC,0.1% SDS中洗涤;
v.在50℃在7%十二烷基硫酸钠(SDS),0.5M NaPO4, 1mM EDTA在杂交,最后在65℃在0.1×SSC,0.1% SDS中洗涤;
e.包含与(a)完全互补的核酸序列的核酸分子;
f.包含与(a)完全反向互补的核酸序列的核酸分子。
在一个实施方式中,该分离的产物包含酶,营养多肽,结构多肽, 氨基酸,脂质,脂肪酸,多糖,糖,醇,生物碱,类胡萝卜素,propanoid, 类固醇,色素,维生素,或植物激素。
本发明的实施方式还涉及通过表达含有选自如下一组的核苷酸 序列的分离的核酸而产生的分离产物:
(a)一个核苷酸序列,其在45℃在1M NaCl杂交条件下,后 接在50℃在0.1M NaCl中最后洗涤步骤下与SEQ ID NO:1 -185中的奇数编号所示的核苷酸序列或其片段、结构域 或其特征部分杂交;
(b)编码一种多肽的一个核苷酸序列,所述多肽是SEQ ID NO:2-186中的偶数编号所示的多肽的直向同源物或其片 段、结构域、或特征部分;
(c)与(a)或(b)互补(例如完全互补)的核苷酸序列;及
(d)与本发明所公开的(a)或(b)反向互补(例如完全反向互补)的 核苷酸序列。
在一个实施方式中,产物是在植物中产生的。在另一个实施方式 中,产物是在细胞培养物中产生的。在另一个实施方式中,产物是在 无细胞系统中产生的。在一个实施方式中,产物包含酶,营养多肽, 结构多肽,氨基酸,脂质,脂肪酸,多糖,糖,醇,生物碱,类胡萝 卜素,propanoid,类固醇,色素,维生素,或植物激素。在另一个实 施方式中,产物是包含SEQ ID NO:2-112中的偶数编号所示的氨基 酸序列的多肽或其直向同源物。在一个实施方式中,多肽包含酶。
在种子生产中,种子的萌发性质和同质性是基本的产物特性。由 于难以保持一种农作物没有其它农作物和杂草种子、控制种子产生病 变及产生良好萌发的种子,已经由种子生产者揭示了相当广泛和充分 说明的种子生产实践方法,所述种子生产者是纯种子的生长,检验和 营销领域中富有经验者。因此,农场主购买符合特定品质标准的经鉴 定的种子而不使用从其自己的农作物收获的种子是常识性的。用作种 子的繁殖材料通常用包含除草剂,杀昆虫剂,杀真菌剂,杀菌剂,杀 线虫剂,杀软体动物剂,或其混合物的保护剂包膜处理。通常使用的 保护剂包膜包含化合物如环己烯亚胺(captan),萎锈灵(carboxin), 秋兰姆(thiram)(二硫四甲秋兰姆;TMTD_;得自R.T.Vanderbilt Company,Inc.,Norwalk,Connecticut,United States of America), methalaxyl(APRON XL_;得自Syngenta Corp.,Wilmington, Delaware,United States of America),和甲基嘧啶磷(pirimiphos-- methyl)(ACTELLIC_;得自Agriliance,LLC,St.Paul,Minnesota, United States of America)。如果需要,这些化合物另外与载体,表面 活性剂和/或通常用于配制领域中的促进应用的佐剂一起配制,以提 供抗细菌、真菌或动物有害物所致伤害的保护作用。保护剂包膜可以 通过将繁殖材料用液体制剂浸渍或者通过用一种组合的湿或干制剂 包被而应用。也可以使用其它的应用方法如在萌芽或结果阶段直接处 理。
本发明通过参考如下详述的实施例将得以进一步描述。提供这些 实施例的目的只是例证本发明,除非特别指出并非对本发明的限制。
                            实施例
包括如下实施例以例证本发明的实施方式。根据本发明的所公开 的内容及本领域一般技术水平,本领域技术人员将意识到如下实施例 只是举例说明,在不偏离本发明范围的前提下可对本发明加以各种改 变,修饰和变化。
                            实施例I
本实施例描述了在叶绿体类囊体膜和其他细胞膜上相互作用的 水稻蛋白的确定及表征。具体地,在本实施例中所描述的是新表征的 与水稻14-3-3蛋白同系物GF14-c(OsGF14-c)及抗凋亡性死亡1防 御子(OsDAD1)相互作用的水稻蛋白。
14-3-3蛋白(在Muslin和Xing,2000中所述)通过与它们的配偶 体蛋白结合而与细胞信号、细胞周期和凋亡的多种调控子相互作用。 这些蛋白高潜力的特异性蛋白-蛋白相互作用使得这些蛋白适于双杂 交分析法。已知14-3-3蛋白在细胞核中参与蛋白复合体的形成,而 这通常是在胞质中发现。使用酵母双杂交分析法的研究还将GF14同 种型定位于叶绿体基质和类囊体膜基质侧(Sehnke等,2000)。但是, 目前尚未直接确定GF14-c的亚细胞定位。涉及OsGF14-c的蛋白间 相互作用的研究可以使得确定OsGF14-c蛋白在细胞中的定位。
OsDAD1由水稻高度保守的DAD基因同系物编码,在动物和植 物中DAD基因是内源性程序性细胞死亡或凋亡的抑制子(Apte等, 1995;Gallois等,1997)。已经显示在花瓣衰老(程序性细胞死亡的一 个例子)过程中DAD植物同系物的表达下调,并且由与多种应激反 应和发育过程相关的植物激素乙烯(Orzaez和Granell,1997)引起,这 些支持了DAD的这一作用。虽然已用拟南芥(Arabidopsis)和豌豆 DAD同系物进行了这些研究,但是关于水稻DAD1在文献中尚未见 描述。以下所提供的相互作用研究的目的是进一步表征这一蛋白。
利用自动化、高通量的酵母双杂交分析技术(如上文所述)搜索 与诱饵蛋白OsGF14-c和OsDAD1相互作用的水稻蛋白。通过BLAST 分析将该搜索中所用的编码蛋白片段的序列与数据库的数据比较以 确定所述全长基因的序列。所发现的蛋白看起来定位于叶绿体的类囊 体、液泡膜和胞质膜。这些结果说明OsGF14-c是水稻的膜成分。类 囊体上与OsGF14-c相互作用的蛋白形成一种新的参与光合过程的叶 绿体蛋白复合物。这一相互作用的研究也确定了水稻OsDAD1是一 种膜蛋白,这与先前表征的来源于其他植物种的DAD同系物一致。 对于在水稻叶绿体的类囊体或其它细胞膜上相互作用的蛋白的作用 的说明可以允许开发特异靶定以干扰类囊体或内膜系统的结构功能 的除草剂。
本实施例提供了与水稻14-3-3蛋白同系物GF14-c以及抗凋亡性 死亡1防御子相互作用的新表征的水稻蛋白。利用自动化、高通量的 酵母双杂交分析技术(由Myriad Genetics公司提供,Salt Lake City, UT)寻找与诱饵蛋白OsGF14-c和OsDAD1相互作用的水稻蛋白。所 述14-3-3蛋白(在Muslin和Xing,2000中所述)通过与它们的配偶体 蛋白结合从而与细胞信号、细胞周期和凋亡的多种调节子相互作用。 这些蛋白高潜能的特异性蛋白-蛋白相互作用使得这些蛋白适于双杂 交分析法。已知14-3-3蛋白在细胞核中参与蛋白复合体的形成,而 这通常是在胞质中发现。使用酵母双杂交分析法的研究还将GF14同 种型定位于叶绿体基质和类囊体膜基质侧(Sehnke等,2000)。但是, 目前尚未直接确定GF14-c的亚细胞定位。与OsGF14-c有关的蛋白 相互作用的研究使可以确定OsGF14-c蛋白在细胞内的定位。
OsDAD1由水稻高度保守的DAD基因同系物编码,在动物和植 物中DAD基因是内源性程序性细胞死亡或凋亡的抑制子(Apte等, 1995;Gallois等,1997)。已经显示在花瓣衰老(程序性细胞死亡的一 个例子)过程中DAD植物同系物的表达下调并且该下调由与多种应 激反应和发育过程相关的植物激素乙烯(Orzaez和Granell,1997)引 起,这些支持了DAD的这一作用。虽然已经使用拟南芥(Arabidopsis) 和豌豆DAD同系物进行了这些研究,但是关于水稻DAD1尚未见描 述。本实施例所提供的相互作用研究的目的是表征这一蛋白。
结论:
研究发现GF14-c与下述物质相互作用:参与莽草酸途径的EPSP 合成酶(OsBAB61062);叶绿体中参与卡尔文循环反应的两种酶,即 水稻叶绿体醛缩酶(OsBAA02730)和叶绿体酶RUBISCO(OsRBCL); RUBISCO活化酶前体(OsRCAA1);以及两个水稻光合系统蛋白,即 推定的33kDa的光合系统II放氧蛋白(OsPN23059)和光合系统II 10 kDa多肽(OsAAB46718)。另外8种GF14-c相互作用的蛋白是新的水 稻蛋白:一种与大麦(Hordeum vulgare)光合系统I反应中心亚单位II 相似的光合系统蛋白(OsPN23061),叶绿体前体;一种与参与维生素 B2(莽草酸途径的辅因子)生物合成的拟南芥GTP环化水解酶II相 似的蛋白(OsPN22858);一种与参与植物水应激反应相关的信号事件 的拟南芥4磷脂酰肌醇-5磷酸激酶(PI4P5K)相似的蛋白 (OsPN22874);两种H+-ATP酶,分别与拟南芥液泡ATP合酶C亚 单位(OsPN22866)和大麦胞质膜H+-ATP酶(OsPN23022)相似;一种 推定的发动蛋白(dynamine)同系物(OsPN30846),可能与其他植物 的发动蛋白家族成员一样定位于叶绿体;以及其他两种未知功能蛋白 (OsPN29982和OsPN30974)。
研究发现OsDAD1与三种膜蛋白相互作用:定位于邻近于细胞 壁的胞质膜上的水稻β扩张蛋白(OsEXPB2);一种新的推定的磷酸盐 协同转运蛋白(OsPN23053);以及H+-ATP酶样蛋白OsPN23022,该 蛋白也与GF14-c相互作用。
表1和表2分别列出了与OsGF14-c蛋白(14-3-3蛋白同系物 GF14-c)和OsDAD1蛋白相互作用的蛋白,之后列出了每一个蛋白 的详细信息并讨论了这些相互作用的意义。图1提供了所述相互作用 的图表。SEQ ID NO:1-18和114-130提供了本实施例蛋白的核苷和 氨基酸序列。
已确定的9种蛋白是先前未表征过的水稻蛋白。基于它们推测的 生物学功能以及捕获蛋白蛋白能够与诱饵蛋白OsGF14-c和OsDAD1 特异地相互作用的能力,推测OsGF14-c是一种膜成分。基于下面描 述的结果,推测OsGF14-c定位于水稻叶绿体的类囊体及其它细胞膜。 在类囊体中相互作用的蛋白是新蛋白复合体的一部分并参与叶绿体 中发生的光合过程。对水稻类囊体中相互作用蛋白的作用的了解可以 用于开发特异性地靶定以干扰类囊体膜的结构和功能的除草剂。本研 究所发现的相互作用还确定了OsDAD1可能是水稻的一种膜成分, 这一观察结果与对其它动植物的DAD同系物的先前报道是一致的。
                       表1
确定的与OsGF14-c(14-3-3蛋白同系物GF14-c)相互作用蛋白
下表给出了用作诱饵和发现作捕获蛋白的蛋白克隆的名称。蛋白 名称项下的括号中显示了本实施例蛋白(或相关蛋白)的核酸/蛋白 序列的登录号。所述诱饵蛋白和捕获蛋白蛋白的相配序列(Coord)分 别是搜索用的诱饵蛋白片段或相互作用的捕获蛋白蛋白克隆所编码 的氨基酸。来源是每个捕获蛋白克隆重获的文库。   基因名称   蛋白名称   (GENBANK_登录号)   诱饵   相配序   列   捕获蛋   白相配   序列   (来源)                                   诱饵蛋白   OsGF14-c   PN12464   (SEQ ID NO:   114)   水稻(O.sativa)14-3-3蛋白同   系物GF14-c(U65957)   1-257#                                 相互作用蛋白   OsBAB61062   PN22844   (SEQ ID NO:   116)   水稻(O.sativa)3-磷酸莽草酸1-   羧乙烯基转移酶(又称EPSP合   酶)(AB052962;BAB61062.1)   1-150   463-511   (输入性   状)   OsPN22858   (SEQ ID NO:   2)   新蛋白22858,片段,与拟南芥   GTP环化水解酶II相似   (BAB09512.1;e=0)   1-150   27-154   (输入性   状)   OsPN22874   (SEQ ID NO::   4)   新蛋白22874,片段,与拟南芥4   磷脂酰肌醇-5磷酸激酶相似   (NP_187603.1;4e-18)   1-150   1-88   (输入性   状)   OsBAA02730   PN22832   (Contig4280.fas   ta.Contig1)   (SEQ ID NO::   118)   水稻(O.sativa)二磷酸果糖醛   缩酶,叶绿体前体   (Q40677)   1-150   206-269   (输入性   状)   OsRBCL   PN23426   (SEQ ID NO::   120)   水稻(O.sativa)叶绿体二磷酸核   酮糖羧化酶,大链(D00207;   P12089)   1-150   287-462   (输入性   状)   OsRCAA1   PN19842   (SEQ ID NO::   122)   水稻(O.sativa)叶绿体二磷酸核   酮糖羧化酶/加氧酶活化酶,Large   同种型A1(AB034698,   BAA97583)   1-150   68-210   (输入性   状)   OsPN22866   (Contig388.fast   a.Contig2)   (SEQ ID NO::   6)   新蛋白PN22866,片段,与拟南   芥液泡ATP合酶C亚单位(V-ATP   酶C亚单位)(液泡质子泵C亚单   位)相似(Q9SDS7;e-152)   1-150   95-305   (输入性   状)   OsPN23022$   (SEQ ID   NO::8)   新蛋白PN23022,片段,与大麦胞   质膜H+-ATP酶相似(CAC50884;   e=0.0)   1-150   149-285   (输入性   状)   OsPN23061   (Contig3864.fas   ta.Contig1)   (SEQ ID NO::   10)   假定蛋白OsContig3864,与大麦   (Hordeum vulgare)光合系统I反应   中心亚单位II相似,叶绿体前体   (P36213;6e-87)   1-150   94-203   (输入性   状)   OsPN23059   (Contig4331.fas   ta.Contig1   (SEQ ID NO:   132)   OsContig4331,水稻(O.sativa)   推定的光合系统II的33kDa放氧   蛋白(BAB64069)   1-150   193-333   90-169   (输入性   状)   OsAAB46718   PN22840   (FL_R01_003_   H20.g.1a.Sp6a   TMRI)   (SEQ ID NO:   126)   水稻(O.sativa)光合系统II 10   kDa多肽(U86018;T04177)   1-150   82-126   (输入性   状)   OsPN29982   (SEQ ID NO::   12)   新蛋白PN29982   1-150   201-300   (输入性   状)   OsPN30846   (SEQ ID NO::   14)   新蛋白PN30846   1-150   1-266   (输入性   状)   OsPN30974   (SEQ ID NO:   16)   新蛋白PN30974   1-150   38-178   (输入性   状)
注:GF14-c与玉米转录因子Viviparous-1(ZmVP1)及与Em结 合蛋白(EmBp)的相互作用在文献中也有报道(Schultz等,1998)。
#自身活化克隆,即在双杂交系统中缺少捕获蛋白蛋白时其能活 化报道基因,因此在本研究中未使用。
$捕获蛋白蛋白克隆OsPN23022也可以与用作诱饵的抗凋亡性 死亡1防御子(OsDAD1)相互作用。所述诱饵蛋白OsDAD1可以与β 扩张蛋白EXPB2(OsEXPB2)及与同推定的拟南芥Na+依赖的无机磷 酸盐协同转运蛋白(OsPN23053)相似的新蛋白23053,片段相互作用。 这些相互作用显示在下表2中。
                                 表2
         确定的与OsDAD1(抗凋亡性死亡1防御子)相互作用蛋白   基因名称  蛋白名称  (GENBANK_登录号)   诱饵相   配序列   捕获蛋   白相配   序列   (来源)                                   诱饵蛋白   OsDAD1   PN20251   (SEQ ID NO::   128)  水稻(O.sativa)抗凋亡性死  亡1防御子(D89727;  BAA24104)                                 相互作用蛋白   OsPN23022   (SEQ ID NO:   8)  新蛋白PN23022,片段,  与大麦胞质膜H+-ATP酶相似  (CAC50884;e=0.0)   30-115   37-371   (输入性   状)   OsPN23053   (SEQ ID NO:   18)  新蛋白23053,片段,与推定的  拟南芥Na+依赖无机磷酸盐协  同转运蛋白相似  (NP_181341.1;e-105)   30-115   2x 1-180   (输入性   状)   OsEXPB2   PN19902   (SEQ ID NO:   130)   β扩张蛋白EXPB2   (U95968;AAB61710)   1-115         30-115   80-207   (输入性   状)     183-261   2x   80-218   (输入性   状)
使用Os GF14-c作为诱饵的双杂交系统
GF14-c(GENBANK_登录号#U65957)是一256个氨基酸的蛋 白,已报道其可以与位点特异性DNA结合蛋白(即碱性亮氨酸拉链 因子EmBP1)及组织特异性调控因子(即viviparous-1;VP-1;Schultz 等,1998)相互作用。它可以与EmBP1和VP-1形成复合体以介导基 因表达。在几乎所有真核生物和组织中都发现了14-3-3蛋白,并通 常在任一已知的生物中都由多个蛋白同种型组成(De Lille等, 2001)。它们认为充当分子骨架或侣伴蛋白并调节与之相互作用的蛋 白的胞质或胞核定位,它们通过调节这些蛋白的核输入/输出而相互 作用(Zilliacus等,2001;Muslin和Xing,2000所述)。14-3-3蛋白与 多种与细胞信号通路、细胞周期和细胞凋亡有关的功能各异的调节蛋 白结合。在植物中,14-3-3蛋白控制的酶包括淀粉合酶、葡萄糖合酶、 F1 ATP合酶,抗坏血酸过氧化物酶(ascordate peroxidase)以及affeate 氧甲基转移酶,胞质膜H+-ATP酶,氮同化和碳同化途径的光和底物 调节的代谢酶,和涉及转录调控的酶如G-box复合体和核心转录因子 TBP,TFIIB及EmBP。然而,是否这些途径中的每一个都需要特异性 14-3-3同种型尚未全面地描述过(De Lille等,同上)。早先发现 14-3-3蛋白在胞核(Bihn等,1997;Imhof和Wolffe,1999;Zilliacus 等,同上)、胞质和线粒体(De Lille等,同上)中参与形成蛋白复合体。 植物14-3-3蛋白也被定位于叶绿体基质和类囊体膜的基质侧(Sehnke 等,同上)。但是GF14-c的亚细胞定位尚未被直接地评价过因此它的 细胞内定位仍然需要准确确定。
通过对GF14-c氨基酸序列的分析确定在第107到110位氨基酸 上含有一个cAMP和GMP依赖的磷酸化位点,6个蛋白激酶C磷酸 化位点(第10-12,29-31,56-61,29到31,59-61以及74-76位氨基 酸),3个酪蛋白激酶II磷酸化位点(第110-113,120-123,以及177-180 位氨基酸),1个N-豆蔻酰化位点(第9-14位氨基酸)以及2个酰胺 化位点(第77-80和105-108位氨基酸)。本研究中所用诱饵片段编 码GF14-c的第1到150位氨基酸。BLAST分析将GF14-c核苷酸序 列与TMRI’s GENECHIP_水稻基因组阵列序列数据库比较确定了探 针(probeset)OS009195_at(e-48期望值)是最接近的配对序列。基因 表达实验表明这一基因在几种不同组织类型中没有特异性表达而且 不能被各种应激、除草剂和施用的激素特异性地诱导。
发现编码GF14-c的第1到150位氨基酸的诱饵蛋白与水稻(O. sativa)3-磷酸莽草酸1-羧乙烯基转移酶(又称EPSP合酶) (OsBAB61062)相互作用。OsBAB61062是一个511个氨基酸的蛋白 质,其包含一个EPSP合酶特征位点1(162到176位氨基酸)、一个 EPSP合酶特征位点2(423到441位氨基酸)的,而且其N-末端富 含丙氨酸。OsBAB61062氨基酸序列的BLAST分析确定该蛋白是水 稻3-磷酸莽草酸1-羧乙烯基转移酶(通常也称作EPSP合酶) (GENBANK_登录号BAB61062.1,83.9%相同性,e=0.0)。这一511 个氨基酸的酶被定位于叶绿体,在此催化芳香族氨基酸合成过程中的 必需步骤,该过程又称莽草酸途径。由于EPSP合酶对于藻类、高等 植物、细菌和真菌是必需的而在哺乳动物体内不存在,所以该酶是除 草剂和抗菌剂的一个有用靶点。
BLAST分析将EPSP合酶的核苷酸序列与TMRI’s GENECHIP_ 水稻基因组阵列序列数据库比较确定探针OS020639.1at(e-156期望 值)是最接近的配对序列。基因表达实验表明该基因可以被涉及与植 物应激反应相关的信号转导的植物激素茉莉酸以及引起水稻瘟病的 真菌稻瘟病菌(M.grisea)诱导表达。在干旱条件下该基因受到抑制。
发现编码GF14-c的第1到150位氨基酸的诱饵蛋白与同拟南芥 GTP环化水解酶II(OsPN22858)相似的片段,蛋白22858相互作用。 捕获蛋白克隆OsPN22858是一460个氨基酸的蛋白片段,在182到 198位的氨基酸形成跨膜区段,24与25位氨基酸之间有一可能的切 割位点,但是不存在N-末端信号肽。OsPN22858的BLAST分析确定 了其氨基酸序列与拟南芥GTP环化水解酶II及3,4-二羟基-2-丁酮-4- 磷酸合酶的氨基酸序列最匹配(GENBANK_登录号BAB09512.1, 74.4%相同性,e=0)。GTP环化水解酶II催化维生素B2生物合成的 第一步反应(Ritz等,2001)。
BLAST分析将新蛋白22858的核苷酸序列与TMRI’s GENECHIP_水稻基因组阵列序列数据库比较确定了OS015318_s_at (5e-10期望值)是最接近的配对序列。对于这个探针该期望值太低不能 作为GTP环化水解酶II基因表达的可靠指示。
发现编码GF14-c的第1到150位氨基酸的诱饵蛋白与蛋白22874 相互作用,蛋白22874是与拟南芥4磷脂酰肌醇-5磷酸激酶 (OsPN22874)相似的片段。BLAST分析确定OsPN22874的89个氨基 酸序列与拟南芥4磷脂酰肌醇-5磷酸激酶(PI4P5K)最匹配 (GENBANK_登录号NP_187603.1,65.5%相同性,4e-18)。PI4P5K是 在许多物种的多种信号事件包括植物内质网的应激反应(Shank等, 2001)中起着明确作用的一种酶。动物和酵母PI4P5K磷酸化4磷脂酰 肌醇磷酸盐生成作为两个第二信使,1,4,5-三磷酸肌醇和二酰基甘油 的前体及作为与信号转导和细胞骨架结构有关的许多细胞蛋白的调 节物(在Mikami等,1998中所述)的磷脂酰肌醇-4,5-二磷酸。Mikami 等确定了编码拟南芥PI4P5K蛋白的全长cDNA克隆,干旱、盐和脱 落酸处理所述植物可以诱导该蛋白的mRNA表达,这表明该蛋白参 与水应激信号转导(Mikami等,同上)。Elge等报道拟南芥PI4P5K主 要在叶、花和根的维管组织,即侧生分生组织的细胞又称原形成层 (Elge等,2001)中表达。
还发现编码GF14-c的第1到150位氨基酸的诱饵蛋白也与叶绿 体前体,水稻果糖二磷酸醛缩酶(OsBAA02730)相互作用。 OsBAA02730(GENBANK_登录号Q40677)是一388个氨基酸的蛋 白,通过氨基酸序列分析确定该蛋白包括果糖二磷酸醛缩酶I型活性 部位(从44到388位氨基酸)(8.5e-228)。OsBAA02730氨基酸序列的 BLAST分析表明该蛋白是水稻水稻果糖二磷酸醛缩酶,叶绿体前体 (GENBANK_登录号No.Q40677)。编码叶绿体二磷酸果糖酶的基因 与编码该酶胞浆形式的基因一同分离出来(Tsutsumi等,1994)。在基 因组中叶绿体二磷酸果糖酶在单基因座上被编码,而胞浆形式分布于 基因组的3个基因座上。在高等植物中二磷酸果糖酶有两种同种型即 胞浆型和叶绿体型。在植物中胞浆型高度保守,看起来是通过Ca2+介导的蛋白激酶/磷酸酶途径调节被调节(Nakamura等,1996)。该酶被 认为在果实成熟过程中发挥作用(Schwab等,2001)。该叶绿体酶参与 叶绿体的两个主要糖磷酸盐的代谢途径:C3光合碳反应循环(卡尔 文循环)和淀粉生物合成途径反应。在这两种情况中,二磷酸果糖酶 催化3-磷酸二羟基丙酮和3-磷酸甘油醛形成1,6-二磷酸果糖。这些主 题已在Michelis等,2000中综述,Michelis等在燕麦叶绿体中还确定 了果糖二磷酸醛缩酶的一个44kDa的热诱导同种型,证实了其定位 于类囊体膜并提出该酶不是嵌入叶绿体膜而是趋向于附着于叶绿体 膜。在其它植物物种中也发现了类似的热诱导类囊体相关二磷酸果糖 酶同系物。
BLAST分析将果糖二磷酸醛缩酶的核苷酸序列与TMRI’s GENECHIP_水稻基因组阵列序列数据库比较确定探针 OS006916.1_at(e-156期望值)是最接近的配对序列。我们的基因表达 实验表明茉莉酸和干旱下调该基因的表达。
另外,发现编码GF14-c的第1到150位氨基酸的诱饵蛋白也与 水稻二磷酸核酮糖羧化酶大链前体(RUBISCO大亚单位;OsRBCL) 相互作用。通过BLAST分析OsRBCL的氨基酸序列确定该蛋白是水 稻叶绿体二磷酸核酮糖羧化酶,大链前体(RuBP羧化酶/加氧酶,也 简称RUBISCO;GENBANK_登录号No.P12089)。RUBISCO是一 存在于高等植物叶绿体中的477个氨基酸的蛋白,在氨基酸196-204 位有活性部位。叶绿体的RuBP羧化酶/加氧酶是结合于类囊体膜的 CO2固定的多酶复合体的组分(Suss等,1993),参与光合作用过程中 在叶绿体基质中发生的卡尔文循环反应。卡尔文循环中的起始和终末 化合物是5碳糖-1,5二磷酸核酮糖(RuBP)。如其名字所示,RuBP 羧化酶/加氧酶催化与RuBP有关的两类型反应。在高二氧化碳低氧 浓度的环境中,RUBISCO的羧化酶活性占优势催化卡尔文循环的起 始反应,RuBP羧化,这形成了3-磷酸甘油酸(PGA)。但是在低二氧 化碳高氧的环境中,氧与二氧化碳竞争作为RUBISCO的底物,该酶 的加氧酶活性也发挥作用,这导致氧与RuBP缩合形成3-磷酸甘油酸 酯和磷酸乙醇。RUBISCO是世界上含量最丰富的酶占叶中可溶性蛋 白总量的40%(这些主题在Raven等,1999中已讨论)。
BLAST分析将RUBISCO的核苷酸序列与TMRI’s GENECHIP_ 水稻基因组阵列序列数据库比较确定探针OS000296_s_at(e=0期望 值)是最接近的配对序列。基因表达实验表明BAP、2,4-D、BL2、 茉莉酸、赤霉素和脱落酸下调该基因的表达。在渗透性应激条件下该 基因上调。
发现编码GF14-c的第1到150位氨基酸的诱饵蛋白也水稻二磷 酸核酮糖羧化酶/加氧酶活化酶,大同种型A1(OsRCAA1)相互作用。 通过BLAST分析OsRCAA1的氨基酸序列确定了该466个氨基酸的 蛋白是水稻RUBISCO活化酶大同种型前体(GENBANK_登录号 BAA97583)。它包含两个活性位点(第31-38位氨基酸和156-163 位氨基酸)。RUBISCO活化酶是一种促进ATP依赖性的,从磷酸化 糖从RUBISCO活性位点移去的AAA+蛋白(与多种细胞活性相关的 ATP酶)。这种作用使RUBISCO的活性位点释放以通过CO2和金属 结合引起的自发氨甲酰化,其是RUBISCO活性的先决条件。(在 Salvucci等,2001;Salvucci和Ogren,1996中所述)。
发现编码GF14-c的第1到150位氨基酸的诱饵蛋白与蛋白 PN22866相互作用,蛋白PN22866是与拟南芥液泡ATP合酶C亚单 位(V-ATP酶C亚单位;液泡质子泵C亚单位)(OsPN22866)相似的片 段。OsPN22866是一408个氨基酸的蛋白片段。通过BLAST分析确 定其氨基酸序列与拟南芥液泡ATP合酶C亚单位(V-ATP酶C亚单位) (液泡质子泵C亚单位)(Q9SDS7,72.7%相同性,e-152)最匹配。H+ 转位ATP酶(H+-ATP酶,V-ATP酶)是一种作为真核生物的必需质子 泵发挥作用的多亚单位酶。人V-ATP酶的催化位点由3个A亚单位 和3个B亚单位的六聚体组成,该六聚体结合并水解ATP并被附属 亚单位C、D和E调节(van Hille等,1993)。
ATP酶是必须的细胞换能器,将跨膜离子电化学电位差转化为 ATP水解的化学能。植物ATP酶存在于叶绿体、线粒体和液泡中。 在液泡中ATP酶调节液泡的内容物和容积,这是依赖位于液泡形成 体(液泡膜)中的转运蛋白和通道的协调活动。V-ATP酶利用细胞溶 质ATP磷酸基团断裂所释放的能量将质子泵入液泡内腔,从而产生 推动离子和代谢物转运的H+电化学梯度。因此作为“管家”和应激 反应酶的V-ATP酶是重要的。已显示V-ATP酶的表达依赖于代谢状 态被高度地调节。V-ATP酶由位于两个主要结构域,膜周结构域(V1) 和膜内结构域(Vo)的几种多肽亚单位组成。C亚单位是一种包含4个 跨膜结构域的高度疏水蛋白。虽然认为C亚单位直接参与H+转运并 可能和V1的稳定有关,但是它的功能仍然是未知的。植物V-ATP酶 的结构、功能和调节在Ratajczak,2000中综述。
还发现编码GF14-c的第1到150位氨基酸的诱饵蛋白与蛋白 PN23022相互作用,蛋白PN23022是于大麦胞质膜H+-ATP酶 (OsPN23022)相似的片段。蛋白PN23022是一534个氨基酸的片段, 根据对氨基酸序列分析预测该蛋白包括7个跨膜结构域(170-186, 202-218,226-242,266-282,308-324,337-353,和373-389位氨基酸)。 OsPN23022氨基酸序列的BLAST分析确定该蛋白类似于大麦细胞质 膜H+-ATP酶(GENBANK_登录号CAC50884;88.2%相同性,期望 值e=0),该酶可以将质子转运进入细胞内的细胞器或者通过真核细胞 的细胞质膜。BLAST分析将新蛋白PN23022的核苷酸序列与TMRI’s GENECHIP_水稻基因组阵列序列数据库比较确定了探针 OS000972_f_at(e-11期望值)是最接近的配对序列。对于这个探针该期 望值太低不能作为该ATP酶基因表达的可靠指示。还发现OsPN23022 与抗凋亡性死亡1防御子(OsDAD1;见表22)相互作用。
发现编码GF14-c的第1到150位氨基酸的诱饵蛋白与蛋白 OsContig3864相互作用,蛋白OsContig3864与大麦(H.vulgare)光合 系统I反应中心亚单位II,叶绿体前体(OsPN23061)相似。 OsContig3864的氨基酸序列分析预测该蛋白是在21到22位氨基酸之 间可能有一切割位点的203个氨基酸的蛋白,但是似乎不存在N-末 端信号肽。通过BLAST分析确定OsContig3864克隆有一与大麦(H. vulgare)光合系统I反应中心亚单位II,叶绿体前体(光合系统I 20 kDa亚单位;PSI-D;GENBANK_登录号P36213,80%相同性,3e-86) 的氨基酸最匹配的氨基酸序列。光合系统(光合系统I和II)是嵌入 光合类囊体膜中的多亚单位蛋白复合体。在植物和蓝绿藻类中,它们 顺序作用并催化有氧光合作用的第一步,即光诱导的电荷分离过程, 由此将太阳能转化成二氧化碳和碳水化合物。光合系统I通过电子传 递链催化光诱导的,从膜的内腔侧(类囊体内侧)的质体蓝素/细胞 色素C6向间质侧的铁氧还蛋白/黄素氧还蛋白的电子转移(在Fromme 等,2001中所述)。
BLAST分析将OsContig3864的核苷酸序列与TMRI’s GENECHIP_水稻基因组阵列序列数据库比较确定探针OS000721_at (e=0期望值)是最接近的配对序列。基因表达实验表明该基因在几 种不同的植物组织类型中没有特异性表达,而且不能被各种应激、除 草剂和施用的激素特异性地诱导。
发现编码GF14-c的第1到150位氨基酸的诱饵蛋白与蛋白 OsContig4331相互作用,蛋白OsContig4331是推定的水稻光合系统 II 33kDa放氧蛋白(OsPN23059)。从输入性状文库中获得的两个捕获 蛋白克隆分别编码OsContig4331的193-333位氨基酸及90-169位 氨基酸。这些克隆是非重叠的,表明OsContig4331中存在多个GF14-c 结合位点。OsContig4331蛋白序列分析预测其编码了一个333个氨基 酸的蛋白。该分析还表明OsContig4331在37和38位氨基酸之间有 一个可能的切割位点,尽管没有明显的N-末端信号肽。OsContig 4331 氨基酸序列的BLAST分析确定了该蛋白是水稻推定的33kDa光合系 统II放氧蛋白(GENBANK_登录号BAB64069,90.6%相同性,e-169)。 光合系统II利用光氧化作用将水转化为分子氧,从而释放电子进入 光合的电子传递链。
BLAST分析将OsContig4331,光合系统I反应中心亚单位II前 体,的核苷酸序列与TMRI’s GENECHIP_水稻基因组阵列序列数据 库比较确定探针OS000372_at(e=0期望值)是最接近的配对序列。我 们的基因表达实验表明所述基因在冷应激中被下调。
还发现编码GF14-c的第1到150位氨基酸的诱饵蛋白与水稻光 合系统II 10kDa多肽(OSAAB46718)相互作用,蛋白OSAAB46718是 一含有一预测的跨膜结构域(102-118位氨基酸)的126个氨基酸的 蛋白片段。与Genpept数据库进行比对的BLAST分析揭示 OsAAB46718是水稻光合系统II 10kDa多肽(GENBANK_登录号 T04177,91.2%相同性,2e-61)。
还发现编码GF14-c的第1到150位氨基酸的诱饵蛋白与蛋白 PN29982(OsPN29982)相互作用。通过BLAST分析确定了蛋白 OsPN29982的300个氨基酸序列与一个从拟南芥推定的未知功能蛋 白(GENBANK_登录号NP_196688.1,47%相同性,3e-054)的氨基 酸序列最匹配。第二个最匹配的蛋白是CHICK LIM/homobox蛋白 Lhx1(homobox蛋白LIM-1)(GENBANK_登录号P53411,28%相同 性,e=0.002)。基于所述homobox结构域,推测这种相互作用可能类 似于14-3-3蛋白与转录因子如VP1的相互作用。
还发现编码GF14-c的第1到150位氨基酸的诱饵蛋白与蛋白 PN30846(OsPN30846)相互作用。蛋白OsPN30846的BLAST分析确 定了所述蛋白的266个氨基酸序列与豆科植物黄芪(Astragalus sinicus)的发动蛋白同系物(GENBANK_登录号AAF19398.1,70.6% 相同性,2e-99)的氨基酸序列最匹配。自从在大鼠脑中发现GTP-结合发 动蛋白以来,已经在许多有机体和组织中分离出发动蛋白样蛋白并显 示它们与多种看起来不相关的生理过程有关。植物细胞中发现了许多 发动蛋白样蛋白的不同同种型,基于氨基酸序列的相似性这些植物同 系物可以分成几个亚家族,如G68/ADL1,ADL2和ADL3(在Kim等, 2001中所述)。这些植物发动蛋白样蛋白中仅有一些的生理角色被确 定了。已显示拟南芥发动蛋白样蛋白ADL1定位于叶绿体的类囊体 膜,并且参与它的生物发生(Park等,1998)。另一拟南芥发动蛋白样 蛋白ADL2被靶定于质体,其大肠杆菌(E.coli)中表达的重组体形 式可以通过存在于ADL2中的pleckstrin同系物(pleckstrin homology) (PH)结构域特异性地与磷脂酰肌醇4-磷酸结合(Kim等,同上)。基于 ADL2与这些发动蛋白以及其它相关蛋白的生物化学特性的相似性, ADL2可能参与在叶绿体被膜的小泡形成。
还发现编码GF14-c的第1到150位氨基酸的诱饵蛋白与蛋白 PN30974(OsPN30974)相互作用。新蛋白OsPN30974的BLAST分析 确定了它的476个氨基酸序列与拟南芥的未知功能的假定蛋白 (GENBANK_登录号NP_173623.1,49%相同性,e-137)的氨基酸序列 最匹配。接下的13个期望值<e-15的最佳采样(hits)都是公用域注册 的拟南芥或水稻的未知功能蛋白。
使用OsDAD1作为诱饵的双杂交系统
第二个用来确定相互作用蛋白的诱饵蛋白就是水稻水稻抗凋亡 性死亡1防御子(OsDAD1)。OsDAD1(GENBANK_登录号 BAA24104)是一包含3个预测的跨膜结构域(第33到49,59到75, 和94到110位氨基酸)的114个氨基酸的蛋白。DAD1是生长发育 过程中清除无用细胞的程序性细胞死亡或凋亡过程的抑制子。DAD 是动物和植物中都存在的高度保守的蛋白。这些有机体中该基因的功 能障碍或下调与程序性细胞死亡连锁(Lindholm等,2000)。DAD1是 定位于内质网膜的寡糖基转移酶的重要亚单位(Lindholm等,同上)。 开花期结束后衰老花瓣的DAD1表达明显降低并且DAD1表达也会 被植物激素乙烯下调(Orzaez和Granell,1997)。乙烯参与多种应激反 应以及包括花瓣衰老(Shibuya等,2000)、细胞延长、根部表皮的细胞 命运图式发育和果实催熟的发育过程(Ecker,1995)。
在本实施例中,编码OsDAD1的第1-115和30-115位氨基酸的 两个克隆用作诱饵蛋白。
发现OsDAD1与同推定的拟南芥Na+依赖无机磷酸盐协同转运 蛋白(OsPN23053)相似的蛋白片段23053相互作用。OsPN23053是一 个蛋白片段,但是它可得的379个氨基酸序列包含5个预测的跨膜域 (第100到116,118到134,226到242,259到275,和324到 340位氨基酸)和一个可切割的信号肽(1到46位氨基酸)。BLAST 分析确定OsPN23053氨基酸序列与推定的拟南芥Na+依赖的无机磷 酸盐协同转运蛋白的氨基酸序列最匹配(GENBANK_登录号 NP_181341.1,55.4%相同性,e-105)。哺乳动物的Na+依赖的无机磷酸盐 协同转运蛋白作为泡的谷氨酸转运体存在于神经突触泡和内分泌突 触样微泡中并负责哺乳动物中枢神经系统主要的兴奋性神经递质谷 氨酸的储存(CNS;Takamori等,2000)。Na+依赖的无机磷酸盐协同转 运蛋白至少有两个同种型(Takamori等,同上;Aihara等,2000),分别 表达在胰脏和脑(Hayashi等,2001;Fujiyama等,2001)。OsPN23053 是在水稻中发现的第一个Na+依赖的无机磷酸盐协同转运蛋白家族 成员。植物在蛋白合成和谷氨酸介导信号传导的重要生物过程中利用 谷氨酸(Lacombe等,2001)。氮循环过程中由谷酰胺生成谷氨酸并且 植物氮同化途径受光信号的调节提示谷氨酸的生成和光信号的转导 之间的联系。
发现OsDAD1与β膨胀素EXPB2(OsEXPB2)相互作用。 OsEXPB2氨基酸序列的BLAST分析表明该蛋白是水稻β膨胀素 (GENBANK_登录号AAB61710,99.6%相同性,e-156)。植物膨胀素促 进细胞壁的扩展。Shcherban等从黄瓜中分离了两个带有指导蛋白分 泌到细胞壁信号肽的膨胀素编码cDNA克隆(Shcherban等,1995)。 这些文献的作者从随机收集的无名cDNA标本中至少确定了4种水 稻、6种拟南芥的膨胀素cDNAs(表达顺序标记)。他们认为膨胀素的 长短和序列高度保守提示该多基因家族在单子叶植物和双子叶植物 进化趋异之前已经形成。他们的分析显示虽然膨胀素的一连串高度保 守的色氨酸能够介导膨胀素与纤维素或者其他葡聚糖的结合,但是膨 胀素与可以解释膨胀素在细胞壁扩展中作用的已知功能结构域没有 相似之处。
摘要
叶绿体的类囊体膜包含与光合作用有关的光合色素、作用中心及 电子传递链。OsGF14-c定位于此是同它与本实施例光合系统蛋白的 相互作用一致。光合系统(光合系统I和II)是嵌入在类囊体膜的大 的多亚单位蛋白复合体。作为蛋白-色素复合体大群体一部分的光合 作用中心催化光合作用相关的光诱导电荷分离。两个光合系统都利用 来自于太阳光的光子的能量,经由电子传递链实现电子跨类囊体膜的 易位。电子传递过程伴随着跨类囊体膜质子浓度差的积累。由此产生 的膜电化学电位推动了在随后的黑暗反应中CO2还原生成碳水化合 物所需的ATP的合成。发现OsGF14-c与同光合系统I反应中心亚单 位II叶绿体前体相似的OsContig3864、水稻推定的光合系统II 33 kDa放氧蛋白OsContig4331和水稻光合系统II 10kDa多肽相互作 用。Sehnke等2000年报告的使用酵母双杂交技术确定的植物14-3-3 蛋白与另一个光合系统I亚单位蛋白拟南芥光合系统I N-亚单位At pPSI-N相互作用的结果支持了所述相互作用的正确性。OsGF14-c与 OsPN23061(OsContig3864)、OsPN23059(OsContig4331)和 OsAAB46718(光合系统II 10kDa多肽)的相互作用提示OsGF14-c 在类囊体膜内或膜上蛋白之间的偶联中发挥作用。
倘若OsGF14-c与叶绿体光合系统的组分相互作用,那么本研究 中发现的与OsGF14-c相互作用的其他蛋白也可能被定位于叶绿体或 者可能作为相互作用的复合体共定位于类囊体膜。例如,OsGF14-c 与定位于叶绿体参与莽草酸途径启动芳香族氨基酸合成的EPSP合 成酶(OsBAB61062)相互作用。有趣的是,莽草酸途径的该酶需要黄 素作为辅因子(Bornemann等,Biochemistry 35(30):9907-9916,1996), 而OsGF14-c也与同拟南芥GTP环化水解酶II相似的新蛋白片段 OsPN22858相互作用。GTP环化水解酶II参与莽草酸途径酶辅因子 维生素B2的生物合成。这些蛋白与OsGF14-c的相互作用可以使莽 草酸途径的关键蛋白紧密结合在类囊体表面或类囊体内。OsGF14-c 与类囊体膜上参与叶绿体糖磷酸盐代谢途径的叶绿体醛缩酶 (OsBAA02730)、卡尔文循环的酶RUBISCO(OsRBCL)和RUBISCO 活化酶大亚型前体(OsRCAA1)的相互作用进一步支持OsGF14-c及 其他相互作用蛋白在类囊体膜的定位。该报告还确定了燕麦叶绿体类 囊体膜的果糖二磷酸醛缩酶同种型(Michelis等,同上)。
另外,确定的新的与OsGF14-c相互作用的蛋白是推定的发动蛋 白同系物(OsPN30846)。植物的发动蛋白样蛋白定位于类囊体和叶绿 体外膜(Park等,1998;Kim等,2001)。因此,水稻的发动蛋白同系 物可能是存在于叶绿体的一种膜蛋白。所述推断以及确定的其他与 OsGF14-c相互作用的蛋白位于叶绿体类囊体的事实证明14-3-3蛋白 是作为类囊体和叶绿体外膜的组分发挥作用。拟南芥发动蛋白样蛋白 重组体ADL2亚家族能够与磷脂酰肌醇4磷酸特异结合进一步支持了 这一假说。文献(Kim等综述,同上所述)报告的发动蛋白与磷酸肌醇 的相互作用同发动蛋白样蛋白OsPN30846和4磷脂酰肌醇-5磷酸激 酶OsPN22874(水稻PI4P5K)都位于类囊体伴随出现并都与 OsGF14-c相互作用的情况一致。我们推测上述的相互作用蛋白是类 囊体膜参与光合作用的蛋白复合体的一部分。
发现OsGF14-c除了与叶绿体类囊体的组分相互作用,还与分别 同胞质膜H+-ATP酶和液泡ATP酶C亚单位相似的蛋白OsPN23022 和OsPN22866相互作用,提示OsGF14-c也存在于胞质膜和液泡膜。 OsGF 14-c与ATP酶的相互作用代表14-3-3对植物膨压的调节。文献 报告的14-3-3通过调节胞质膜H+ATP酶的至少一种变型完成所述功 能确证了该假说(在DeLille等,2001中所述)。液泡ATP酶与 OsGF14-c的相互作用即可以发生在液泡膜,也可以发生在内质网膜、 高尔基体、有被小泡和液泡前体。
根据与被水应激诱导并在叶子表达的拟南芥PI4P5K的功能相同 性可以确定OsGF14-c与新蛋白OsPN22874(水稻PI4P5K)相互作用的 生物学意义。倘若OsGF14-c可以与类囊体和液泡膜组分相互作用, 那么水稻PI4P5K可以定位于叶绿体,但是也可与液泡ATP酶一起存 在于液泡中。另外,水稻PI4P5K能够指导与非生物胁迫情况下叶绿 体保护和液泡大小调节有关的激酶信号事件相关分子的合成。
另外两种确定的OsGF14-c的相互作用蛋白OsPN29982和 OsPN30974是未知功能蛋白。虽然如此,但是由于14-3-3蛋白是侣 伴蛋白,这些相互作用代表了捕获蛋白蛋白获得合适的蛋白折叠或者 OsGF14-c负责OsPN29982和OsPN30974正确的亚细胞定位的过程。 由于其他的OsGF14-c相互作用蛋白看起来是膜相关蛋白, OsPN29982和OsPN30974也可能是膜蛋白并存在于类囊体或其他 细胞膜结构。
总而言之,与OsGF14-c相互作用的一些水稻蛋白看起来定位于 类囊体膜并在此参与发生在叶绿体的光合作用过程。这些相互作用与 早先报道的14-3-3定位于叶绿体基质和类囊体膜基质侧(Sehnke等, 2000)的情况一致。其他相互作用蛋白与胞质膜或液泡膜相关。因此, OsGF14-c可能是水稻膜组分。由于14-3-3蛋白参与多种信号途径并 被认为是蛋白跨膜装配、伸展和运输必需的伴侣分子,所以OsGF14-c 作为粘附分子或稳定蛋白调节类囊体或其他膜结构的与之相互作用 的蛋白。OsGF14-c是一种膜组分的确定是一个新的发现并是水稻 GF14-c蛋白的第一个功能性表征。具体地,本实施例确定的在叶绿 体类囊体膜的相互作用代表了一个新的水稻蛋白复合体。
本研究中确定了OsDAD1的3个相互作用蛋白。其中之一是也 可与OsGF14-c相互作用的推定的胞质膜H+-ATP酶(OsPN23022)。有 证据表明OsDAD1和H+-ATP酶都是膜内在蛋白(Lindholm等, 2000;Ratajczak等,2000)。H+-ATP酶转运质子进入特定细胞内的细 胞器或者通过胞质膜,该酶的活性导致真核细胞细胞内环境的酸化。 已经显示溶酶体的酸性内环境是某些条件下细胞凋亡所必需的 (Kagedal等,2001;Bursch,2001)。因此这两个酶的活性是调节程序性 细胞死亡必需的,它们之间的相互作用代表了该事件的一个调控步 骤。而且,14-3-3蛋白涉及包括凋亡在内的许多细胞事件的调节(van Hemert等,2001)。OsPN23022与GF14-c和OsDAD1的相互作用可 能代表了该调控的一些步骤。
确定的另一个与OsDAD1相互作用的蛋白是一个新的水稻Na+ 依赖的无机磷酸盐协同转运蛋白。基于水稻无机磷酸盐协同转运蛋白 与位于神经和内分泌腺的囊泡并参与谷氨酸储存的哺乳动物同系物 的功能相同性,我们推测该蛋白也是一个膜蛋白(Takamori等,2000)。 植物谷氨酸可能同动物的一样参与凋亡的调节(Bezzi等,2001)并通 过水稻磷酸盐协同转运蛋白OsPN23053和OsDAD1的联结完成调 节。
最后,发现OsDAD1与水稻β膨胀素相互作用。膨胀素定位于邻 近细胞壁一侧的细胞膜并介导细胞壁的扩展。由于调节细胞死亡的基 因是防御反应的一部分,这种相互作用与细胞壁响应细胞死亡时的结 构改变有关。
本研究报道的蛋白相互作用代表了水稻中DAD1蛋白同系物的第 一个新表征。特别是,OsDAD1及其相互作用蛋白看起来是膜蛋白 以及其中之一OsPN23022也能与OsGF14-c相互作用的事实进一步支 持了OsGF14-c是膜组分的观点。
                         实施例II
水稻衰老相关蛋白(Os006819-2510)的氨基酸序列与在花瓣衰老 时表达增加的6个cDNA序列之一编码的萱草衰老相关蛋白5(DSA5) 有61.4%的同一性。该基因的转录在花瓣中占优势,在花瓣而不是叶 子衰老时表达增加并且可以以使花瓣过早衰老的浓度的脱落酸(ABA) 诱导表达。花瓣衰老是生长发育中清除有害细胞的内源性程序性细胞 死亡或称凋亡的一个例子。具有调节细胞生死功能的基因对于发育过 程是重要的。由于水稻衰老相关蛋白Os006819-2510与植物生长发育 之间潜在的关联,所以被选为进行相互作用研究的诱饵蛋白。
利用自动化、高通量的酵母双杂交分析技术(如上文所述)(由 Myriad Genetics公司提供,Salt Lake City,UT)鉴定与水稻衰老相关 蛋白Os006819-2510相互作用的蛋白。
结论:
发现水稻衰老相关蛋白Os006819-2510可以与8种水稻蛋白相互 作用。其中5种相互作用蛋白是已知的,即水稻参与调节核组蛋白乙 酰化的组蛋白脱乙酰基酶HD1(OsAAK01712)、也与参与淀粉生物合 成的可溶性淀粉合酶(OsSSS)和另一种新的未知功能蛋白 (OsPN29950)相互作用的钙结合蛋白钙网织蛋白前体(OsCRTC)、低温 诱导蛋白5(OsLIP5)、可被水应激诱导的脱水素RAB 16B和可以与 细胞周期调节蛋白网络的推定钙调蛋白激酶相互作用的推定的水稻 肌动蛋白的发动蛋白肌球蛋白(OsPN23878)(见实施例I和II)。另外 3种相互作用蛋白是新蛋白,包括参与葡聚糖胼胝质生物合成的推定 的细胞胼胝质合酶(OsPN23226)、与大麦叶绿素生物合成途径的粪卟 啉原III氧化酶叶绿体前体相似的蛋白(OsPN23485)和与拟南芥γ羟 基丁酸脱氢酶相似的蛋白。
表3-5列出了本实施例的相互作用蛋白,之后列出了每一个蛋白 的详细信息并讨论了这些相互作用的意义。SEQ ID NO:19-30和 131-138提供了本实施例蛋白的核酸和氨基酸序列。
注意到几种确定的捕获蛋白蛋白同诱饵蛋白Os006819-2510一样 是膜相关分子(OsCRTC,OsPN23226,OsLIP5)。一些看起来与水稻细 胞周期过程有关(OsPN23878,Os003118-3674,OsCRTC,OsSSS, OsPN23226,OsAAK01712),而另一些则与植物的应激反应有关 (OsRAB16B,OsLIP5,OsCRTC)。一些已确定的蛋白是先前未表征过 的水稻蛋白。基于捕获蛋白蛋白的推测的生物学功能以及与诱饵蛋白 Os006819-2510特异性地相互作用的能力,推测Os006819-2510可能 参与细胞周期/有丝分裂过程和植物对应激的抵抗,并且事实上代表 了水稻中的这些生物过程之间的联系。
参与水稻细胞周期调节的蛋白可以作为基因操作或修饰基因水 平和活性的化合物的靶点并籍此调整植物细胞周期。编码这些蛋白的 基因的确定允许了改变植物生长发育使之符合农艺学要求的农作物 遗传操作和化合物应用。同样,因为参与植物对应激抵抗的基因可以 用来促进农作物的生长并提高产率,所以有重要的商业用途。
                            表3
确定的Os006819-2510(与萱草衰老相关蛋白5相似的假定蛋白
                  006819-2510)相互作用蛋白
下表给出了用作诱饵和被发现用作捕获蛋白的蛋白克隆名称。蛋 白名称项下的括号中显示了本实施例蛋白(或相关蛋白)的核酸/蛋 白序列登录号。所述诱饵蛋白和捕获蛋白蛋白的相配序列(Coord)分 别是搜索用的诱饵蛋白片段或被相互作用的捕获蛋白蛋白克隆编码 的氨基酸。来源是获得每个捕获蛋白克隆的文库。   基因名称  蛋白名称  (GENBANK_登录号)   诱饵   Coord   捕获蛋白   Coord(来   源)                        诱饵蛋白   Os006819-251   0   PN20462   (SEQ ID NO:   20)   假定蛋白006819-2510,与杂交栽   培萱草(Hemerocallis)的衰老   相关蛋白5相似(AAC34855.1;e-97)                                 相互作用蛋白   OsAAK01712   PN24059   (SEQ ID NO:   132)   水稻(O.sativa)组蛋白脱乙酰基   酶HD1   (AF332875;AAK01712.1)   1-150   90-221   (输出性   状)   OsCRTC*   PN20544   (SEQ ID NO:   134)   水稻(O.sativa)钙网织蛋白前体   (AB021259;BAA88900)   1-273   283-301   (输出性   状)   OsLIP5   PN22883   (SEQ ID NO:   136)   水稻(O.sativa)低温诱导蛋白5   (AB011368;BAA24979.1)   1-150   29-60   (输入性   状)   OsPN23878#   (SEQ ID NO:   138)   水稻(O.sativa)推定的肌球蛋白   (AC090120;AAL31066.1)   1-150   685-888   (输出性   状)   OsRAB16B   PN20554   (SEQ ID NO:   140)   水稻(O.sativa)脱水素RAB 16B   (P22911)   1-273   147-164   (输出性   状)   OsPN23226   (SEQ ID NO:   22)  新蛋白PN23226,胼胝质合酶   1-273   345-432   (输出性   状)   OsPN23485   (SEQ ID NO:   24)  新蛋白PN23485,与大麦  (Hordeum vulgare)粪卟啉原III  氧化酶叶绿体前体相似(Q42840;  e-169)   1-273   90-243   (输出性   状)   OsPN29037   (SEQ ID NO:   26)  新蛋白PN29037   1-150   73-165   (输入性   状)
*其它的与OsCRTC相互作用的蛋白列于表4
#其它的与OsPN23878相互作用的蛋白列于表5
                            表4   基因名称  蛋白名称  (GENBANK_登录号)   诱饵   Coord   捕获蛋白   Coord(来   源)                              诱饵蛋白   OsCRTC   PN20544   (SEQ ID NO:   134)  钙网织蛋白前体(AB021259;  BAA88900)                            相互作用蛋白   OsPN29950   (SEQ ID NO:   28)  新蛋白PN29950   1-150   7-103   2x 138-343   50-343   (输出性状) OsSSS PN19701 (SEQ ID NO: 142)   可溶性淀粉合酶   (AF165890;AAD49850)  250-425   68-270   (输入性状)   97-263   (输出性状)
                               表5   基因名称   蛋白名称   (GENBANK_登录号)   诱饵   Coord   捕获蛋白   Coord(来   源)                                  捕获蛋白   OsPN23878   (SEQ ID NO:   138)   水稻(Oryza sativa)推定的肌   球蛋白   (AC090120;AAL31066.1)                                  诱饵蛋白   Os003118-367   4   PN20551   (SEQ ID NO:   30)   假定蛋白003118-3674,与番   茄钙调蛋白相似   75-149   824-935   (输出性   状)
通过氨基酸序列分析推测Os006819-2510是含有一个可切割信 号肽(第1到27位氨基酸)和3个跨膜结构域(第48到64,82到98, 和233到249位氨基酸)的276个氨基酸的蛋白质。该分析还推测它 有2个内质网保留基序、1个N末端(AFRL)及另一个C末端(KGGY) 和1个从第57位氨基酸(Prosite)开始的原核细胞膜脂蛋白脂质的附着 位点。该位点从功能来说是一个蛋白加工区段。Pfam的分析也确定 了这一典型地是在与进化相关包含跨膜结构域的一群真核细胞表面 抗原中发现的,又被称为四次跨膜超家族结构域的跨膜超家族结构 域。
与Genpept数据库进行比对的BLAST分析揭示Os006819-2510 与来自杂交栽培萱草的衰老相关蛋白5相似(萱草;GENBANK_登 录号AAC34855.1;61.4%相同性;e-97)。与该结果相一致,Myriad’s 私人数据库中同萱草衰老相关蛋白5(Os005991-3479)相似的假定蛋 白005991-3479的氨基酸序列与Os006819-2510最匹配(63%相同性)。 在确定导致开花24小时后花瓣衰老和细胞死亡的遗传程序的组分的 努力中,分离了在花瓣衰老时水平升高的6个cDNA序列(命名为 DSA3,4,5,6,12和15)之一编码衰老相关蛋白5的cDNA序列 (Panavas等,1999)。但是,在公共数据库中未发现基因仍未确定的 DSA5基因产物的相同性序列。已确定新生和衰老的叶子中DSA mRNA的水平没有差异,比在花瓣中所检测到的最大表达水平低4%, DSA基因(除DSA12外)在萱草根以低水平表达,并被使花瓣过早衰 老的脱落酸诱导(除外DSA4)。
编码Os006819-2510的第1-273和1-150位氨基酸的两个诱饵蛋 白片段用于酵母双杂交筛选。
发现编码Os006819-2510的第1到150位氨基酸的诱饵蛋白片段 与水稻(O.sativa)组蛋白脱乙酰基酶HD1(OsAAK01712)相互作用。 OsAAK01712的氨基酸序列的BLAST分析表明捕获蛋白蛋白是水稻 组蛋白脱乙酰基酶HD1(GENBANK_登录号AAK01712.1,100%相同 性,e=0.0)。已经从植物、真菌和动物中分离到组蛋白脱乙酰基酶 (HD)(reviewed by Lechner等,1996)。组蛋白脱乙酰基酶和组蛋白 乙酰基转移酶的酶活性维持了核组蛋白乙酰化的可逆性酶学平衡。核 组蛋白是真核细胞中高度保守的一群细胞核蛋白,代表了组装染色体 DNA的DNA-蛋白复合体染色质的主要组分。由于核组蛋白能够进 行如乙酰化、磷酸化、糖基化、ADP核糖化和泛蛋白化这样的可逆 的翻译后修饰,因此它们除了在染色质结构形成中的角色还参与基因 调节。组蛋白脱乙酰基酶种酶的形式存在,并且所述多样性反映了核 组蛋白乙酰化调节的复杂性。基于酶在发育过程中的表达、分子量、 生化特性以及可被不同的化合物抑制的特点,在发芽的玉米胚中确定 和表征了4种核HDs(HD1-A,HD1-BI,HD1-BII,和HD2)。基于上述 数据,Lechner等提出HD酶参与建立和维持组蛋白-蛋白质相互作 用并且乙酰化作用能够调节带有阴离子结构域的蛋白与染色质特定 区域的结合。
发现Os006819-2510与水稻(O.sativa)钙网织蛋白前体(OsCRTC) 相互作用。氨基酸序列的BLAST分析确定捕获蛋白克隆OsCRTC是 水稻钙网织蛋白前体(GENBANK_登录号BAA88900/SwissProt #Q9SLY8,100%相同性,e=0.0)。通过氨基酸序列分析推测OsCRTC 是包含1个可切割的信号肽(第1-29位氨基酸)、1个钙网织蛋白 家族重复基序(第218-230位氨基酸)和1个内质网前导序列(第 421-424位氨基酸)的一424个氨基酸的蛋白(见Munro和Pelham, 1987;Pelham,1990)。钙网织蛋白前体如其名称所示,该序列分析确 定了一个钙网织蛋白家族标记(第31-343位氨基酸,1.3e-166;见 Michalak等,1992;Bergeron等,1994;Watanabe等,1994)。该分析还 预测了一个跨膜结构域(第7-29位氨基酸)和一个卷曲螺旋(第 360-389位氨基酸)。Li和Komatsu首次确定了编码水稻钙网织蛋白 OsCRTC的cDNA,并发现该基因参与水稻培养悬浮细胞的再生。他 们报道水稻钙网织蛋白是高度保守的,并与其它植物钙网织蛋白有较 高的相同性(70-93%),而与哺乳动物钙网织蛋白仅有50-53%的相同 性。认为钙网织蛋白(CRT)是一个被认为涉及真核细胞包括Ca2+信号 传导、细胞内Ca2+储存、跨膜储存性Ca2+离子流、内质网Ca2+-ATP 酶功能的调节、促使蛋白折叠的侣伴蛋白活性、控制细胞粘附、基因 表达和凋亡的多种功能的内质网钙结合蛋白(由Michalak等,1998 和Persson等综述)。如Persson等报道所显示,植物的CRT被定位 于内质网、高尔基体、胞间连丝和胞质膜(Borisjuk等,1998;Hassan 等,1995;Baluska等,2001),并显示出影响细胞钙离子稳态。本研究 显示转基因烟草和拟南芥植物中的钙网织蛋白的表达的诱导增加了 内质网的ATP依赖性Ca2+蓄积,并且这种CRT介导的内质网Ca2+池 的改变调节了内质网衍生的Ca2+信号。这些结果证明CRT作为内质 网Ca2+储存的调节子扮演了关键角色,并且内质网是植物细胞中,除 液泡以外的另一个重要的Ca2+储存库。基于该蛋白在于最大CRT表 达时退化的粉囊中及的定位,提出钙网织蛋白的拟南芥同系物参与花 粉囊的成熟和开裂(Nelson等,1997)。此外,哺乳动物CRTC的烟草 同系物参与应激依赖和ATP依赖方式的蛋白-蛋白相互作用 (Denecke等,1995)。该观点支持了使用酵母双杂交技术鉴定与 OsCRTC相互作用的蛋白。
OsCRTC也被用作诱饵蛋白并发现与水稻可溶性淀粉合酶 (OsSSS;见表24)和新蛋白PN29950(OsPN29950)相互作用。OsSSS 是参与植物淀粉生物合成的3种酶之一的可溶性淀粉合酶(SSS)的水 稻同系物。淀粉是世界主要农作物产品的主要成分,也是可用于工业 生产的由植物合成的最重要的产品之一。它包括两种葡萄糖聚合物: 多分支的支链淀粉和相对无支链的直链淀粉。淀粉合酶参与支链淀粉 的合成。该酶利用ADPGlc作为糖基供体,将糖基通过(1→4)键连接 在葡聚糖链的非还原端,从而延长了淀粉直链(由Cao等,2000; Kossman和Lloyd,2000综述)。根据淀粉合酶的氨基酸序列、分子 量和抗原性的相似性,分成不同的同种型。各种植物器官中具有的可 溶性淀粉合酶同种型差异较大,不同的同种型相对的淀粉合酶的活性 也不同(Smith等,1997 cited in Cao等,同上)。OsPN29950是一通过 BLAST分析发现与来自拟南芥的推定蛋白相似的未知功能蛋白 (GENBANK_登录号NP_199037.1,32%相同性,2e-29)。
Os006819-2510可以与低温诱导蛋白5(OsLIP5)相互作用。OsLIP5 是具有1个可切割的信号肽(第1-27位氨基酸)和3个推定的跨膜 区域(第48-64,82-98,和233-249位氨基酸)的276个氨基酸的 蛋白质。氨基酸序列的BLAST分析确定该捕获蛋白克隆是水稻低温 诱导蛋白5(LIP5,GENBANK_登录号BAA24979.1,100%相同性, 8e-052)。水稻LIP5是被直接提交到公共数据库而在文献中未见描述。 在酵母中,LIP5参与硫辛酸的代谢(Sulo和Martin,1993)。BLAST 分析显示水稻LIP5样蛋白OsLIP5也与由短期水应激诱导的9个 cDNA之一所编码并认为与产生寒冷敏感性水稻品种的获得性抗冷 性的水稻蛋白WSI724(GENBANK_登录号T07613,98%相同性, 3e-051)相似(Takahashi等,1994)。在水应激时发生差异表达的cDNA 编码的蛋白中,WSI724的表达相对稳定。BLAST分析将OsLIP5核 苷酸序列与TMRI’s GENECHIP_水稻基因组阵列序列数据库比较确 定了探针(probeset)OS000070_r_at(e=4e-75)是最接近的配对序列。 基因表达实验说明该基因可被除草剂BL2下调。
Os006819-2510也被发现与水稻推定肌球蛋白(OsPN23878)相互 作用。OsPN23878的氨基酸序列的BLAST分析表明该捕获蛋白是水 稻推定的肌球蛋白(GENBANK_登录号AAL31066.1,99%相同性, e=0.0)。OsPN23878也与肌球蛋白VIII,玉米ZMM3(片段)相似 (GENBANK_登录号A59311,89%相同性,e=0.0)。肌球蛋白已在实 施例I中讨论。基于目前关于植物肌球蛋白的认识,肌球蛋白VIII 捕获蛋白OsPN23878可以是参与胞质分裂的细胞骨架组分。
该捕获蛋白OsPN23878也与同番茄钙调蛋白(Os003118-3674; 见表25)相似的假定蛋白003118-3674相互作用。Os003118-3674是含 有2个EF手钙结合结构域(第22-34和93-105位氨基酸)的148 个氨基酸的蛋白质。与Os003118-3674含有EF手钙结合结构域的观 察相一致,Genpept数据库的BLAST分析揭示该蛋白与拟南芥推定 的钙调蛋白(GENBANK_登录号NP_1764705,e-57)有72%的相同性, 尽管在该搜索中的最高命中是推定的拟南芥丝氨酸/苏氨酸激酶 (GENBANK_登录号NP_172695.1,76%相同性,7e-60)。因此,值得 思考的是该钙调蛋白样蛋白具有激酶活性的可能性。
BLAST分析将OsPN23878核苷酸序列与TMRI’s GENECHIP_ 水稻基因组阵列序列数据库进行比较,确定了探针(probeset) OS002190_I_at(e-165)是最接近的配对序列。我们的基因表达实验表明 在一系列给定的条件下该基因未被特异性诱导。
另外,发现Os006819-2510与OsRAB16B(OsRAB16B)相互作用, OsRAB16B是一虽然看起来没有可切割的信号肽,但在第51-52位 氨基酸之间有一可能的切割位点的164个氨基酸的蛋白质。氨基酸序 列的分析(2.6e-81)推测该蛋白是被水应激诱导表达的一组植物蛋白脱 水素的成员(见Close等,1989;Robertson和Ch和ler,1992;Dure 等,1989)。脱水素包括碱性的、富含甘氨酸的RAB(脱落酸应答性)蛋 白。与之相一致,该分析表明OsRAB16B是一个碱性的、富含甘氨 酸的蛋白。与公共数据库进行比对的BLAST分析揭示OsRAB16B是 水稻脱水素RAB 16B(GENBANK_登录号P22911,100%相同性, 4e-95)。Yamaguchi-Shinozaki等1990年分离的编码该蛋白的cDNA序 列是水稻组织中差异表达的4个水稻RAB基因之一。与OsRAB16B 是一种水稻RAB蛋白的观点相一致,与Myriad’s私有数据库进行比 对的BLAST分析揭示OsRAB16B与OsRAB25有57%的相同性。 虽然没有OsRAB16B表达的数据,但是水稻RAB16B启动子含有2 个脱落酸诱导作用必需的脱落酸(ABA)反应性元件(Ono等,1996)。 在其它的水稻RAB蛋白中,RAB16A基因与盐分胁迫有关(Saijo等, 2001),并且在不同的植物组织和植物器官中RAB16A启动子的活性 也被脱落酸和渗透性应激诱导(Ono等,同上)。NaCl和/或脱落酸处 理诱导了水稻胚胎、叶、根和胼胝体衍生的悬浮细胞的另一个RAB 蛋白,RAB21(Mundy和Chua,1988)。根据上述结果,捕获蛋白 OsRAB16B有可能在应激反应中发挥作用。
Os006819-2510被发现与蛋白PN23226(OsPN23226)相互作用。
与公共数据库进行比对的BLAST分析揭示OsPN23226与推定的 葡聚糖合酶(GENBANK_登录号NP_563743.1,78%相同性,e=0.0) 和来自拟南芥的胼胝质合酶1催化亚单位(GENBANK_登录号 NP_563743.1,78%相同性,e=0.0)相似。高等植物的胼胝质合酶(CalS) 是一个参与胼胝质合成的多亚单位的膜相关酶(在Hong等,2001 中所述)。与植物细胞壁的主要成分纤维素不同,胼胝质是带有1,6- 分支的线性1,3-β-葡聚糖。植物胼胝质在形成中的细胞板和其他许多 部位合成,并在纤维素合成之前在细胞板沉积。创伤、病原体感染和 生理性应激可以诱导胼胝质合成。胼胝质合酶的活性在植物发育过程 中被高度调节,并能被各种生物因素和非生物因素影响。与纤维素合 酶类似的CalS是一个大的跨膜蛋白。它的结构包括在CalS同种型中 相对保守的位于胞质一侧的一个大亲水环、在胞质一侧的的一个保守 性较低的长N末端片段和一个短的C末端片段。中央环被认为作为 受体容纳其它CalS催化活性所必需的蛋白(见下文),并且N末端区 段包含与调节1,3-β-葡聚糖合酶活性的蛋白相互作用的子域。
Hong等确定了编码拟南芥胼胝质合酶催化亚单位的cDNA并证 明高等植物编码产生了多个CalS酶同种型而拟南芥CalS1是一个细 胞板特异的同种型。另外,这些作者使用酵母双杂交技术并通过体外 实验显示CalS1与另外两个细胞板特异的蛋白phragmoplastin和尿核 苷二磷酸葡萄糖转移酶相互作用,提示它可以与这些及其他蛋白形成 促进细胞板胼胝质沉积的大复合体。此外,胞质膜CalS具有严格的 Ca2+依赖性,Ca2+在细胞板形成中扮演关键角色并且还能活化细胞板 特异的CalS1。捕获蛋白蛋白OsPN23226可能是与拟南芥CalS1催化 亚单位功能相似的水稻胼胝质合酶同系物。
除了在细胞板胼胝质还在许多专门组织合成并对机械性和生理 性应激作出反应。认为在高等植物的不同部位以及响应不同的生理和 发育信号的胼胝质合成需要多种CalS同工酶(Hong等,如上所述)。
也发现Os006819-2510与同大麦粪卟啉原III氧化酶叶绿体前体 (OsPN23485)相似的蛋白PN23485相互作用。氨基酸序列的BLAST 分析确定OsPN23485与大麦粪卟啉原III氧化酶叶绿体前体相似(粪 生素氧化酶)(GENBANK_登录号Q42840,89.3%相同性,e-169)。粪 卟啉原III氧化酶(CPO)催化哺乳动物血红素和光合生物叶绿素生物 合成共用的从5氨基乙酰丙酸脂到原卟啉IX途径的一步反应。植物 CPO N末端序列有质体转运肽的特征。CPO专一定位于质体基质并 且在体外实验中转录翻译的CPO被转运入豌豆质体的基质并被基质 肽链内切酶切短(reviewed by Ishikawa等,2001)。从大豆、烟草和大 麦中获得了编码植物CPO的cDNA序列(Kruse等,1995)。他们发现 植物粪生素氧化酶mRNA在不同组织有不同程度的表达并在发育细 胞中表达量最大而在完全分化细胞表达量明显减少,提示不同器官对 四吡咯的需要不同。基于以上结果,这些作者提出参与四吡咯(卟啉) 合成的酶受发育状况而不受光的调节,通过对这些酶的调节保证了反 应中间产物的稳定流量并有助于避免卟啉堆积引起的光力学损伤。抑 制叶绿素合成途径导致了诸如发现于白绿植物和lin2损伤表型的植 物损伤。Ishikawa等发现拟南芥突变体中粪卟啉原III氧化酶缺乏导 致形成损伤。此外,观察到在伴有CPO活性下降的转基因烟草中有 光敏感性四吡咯中间物堆积并表现抗氧化反应和坏死性的叶损伤,基 于此作者提出CPO抑制形成的损伤可以诱导一系列模拟病原体侵袭 后HR的抵抗反应。这些损伤与人类的卟啉病相似。如果粪卟啉(原) 堆积,那么它可以作为光敏剂通过HR和特定损伤模拟突变体的细胞 死亡和损伤形成中有关键作用的活性氧化物的产生而导致损伤形成。 他们提示lin2突变体中粪卟啉堆积触发的氧化爆发导致了细胞死亡。
发现Os006819-2510与蛋白PN29037(OsPN29037)相互作用。氨 基酸序列的BLAST分析确定捕获蛋白蛋白OsPN29037与拟南芥γ- 羟基丁酸脱氢酶相似(GENBANK_登录号AAK94781.1,80.7%,相同 性,e-127)。该酶可以氧化γ-羟基丁酸。作为动物脑中一种含量较少的 直接或间接参与氧衍生自由基清除的代谢产物,γ-羟基丁酸与褪黑 激素相似(Cash,1996)。
概述
因而,衰老相关蛋白Os006819-2510与许多可能参与细胞周期过 程几种蛋白相互作用。在公共数据库中可以检索到的推定的水稻肌球 蛋白OsPN23878是其中之一。肌球蛋白是一种在多种细胞活动中作 为分子马达以ATP依赖的方式与肌动蛋白丝相互作用的细胞骨架蛋 白。根据该捕获蛋白蛋白与肌球蛋白VIII的相似性和文献中报道的 肌球蛋白VIII参与细胞板成熟和胞质分裂时肌动蛋白细胞支架的形 成,我们推测肌球蛋白OsPN23878是水稻胞质分裂时参与细胞活动 的细胞骨架组分。肌球蛋白OsPN23878和衰老相关蛋白的关联可能 是涉及细胞周期依赖性事件中细胞骨架形成和衰老的一个步骤。编码 OsPN23878的基因在圆锥花序的特异性表达(根据我们的基因表达实 验)与该蛋白和Os006819-2510的相互作用以及根据后者萱草同系物 的编码基因推测的(Panavas等,1999)其在花的衰老中发挥作用的情 况一致。衰老相关蛋白定位于内质网提示了OsPN23878参与的一些 事件可能与胞间连丝的功能有关。
值得注意的是肌球蛋白OsPN23878也与一种新的钙调蛋白激酶 样蛋白Os003118-3674相互作用(见表25)并且后者还可以与发现与 水稻细胞周期蛋白OsCYCOS2相互作用的肌球蛋白的重链 (OsAAK98715)相互作用,推测Os003118-3674可能参与有丝分裂过 程中细胞支架的形成。肌球蛋白与钙结合钙调蛋白样蛋白的相互作用 与已发表的关于肌球蛋白的功能受钙调节的证据一致(Yokota等, 1999,在Reddy,2001中所述)。Os003118-3674具有激酶活性的可能性 使这种相互作用可以传导细胞周期信号相关事件更具可能。因此,钙 调蛋白样蛋白Os003118-3674是衰老相关蛋白及本实施例中其相互作 用配偶体与细胞周期网络之间的联系。
另一个可能参与细胞周期调节的相互作用蛋白是水稻组蛋白脱乙 酰基酶OsAAK01712。该酶包含1个跨膜结构域,并参与核组蛋白乙 酰化。同其它真核生物一样,细胞染色质主要蛋白组分,植物组蛋白 的乙酰化/脱乙酰化与细胞周期中的复制有关(Jasencakova等,2001)。 因此,Os006819-2510-OsAAK01712相互作用可能参与涉及染色质形 成的有丝分裂活动。
所发现的与衰老相关蛋白相互作用的另一新的相互作用蛋白是 与叶绿素生物合成途径中粪卟啉原III氧化酶叶绿体前体相似的 OsPN23485。CPO功能丧失导致拟南芥lin2突变体损伤形成(Ishikawa 等,2001)的观察将编码CPO的基因与细胞死亡途径的调节相联系。 而且,植物CPO受发育调控和光的调节(Ishikawa等综述,同上)。 基于这些报道,水稻CPO(OsPN23485)与衰老相关蛋白的相互作用在 水稻中以发育依赖性方式参与调节程序性细胞死亡。
根据氨基酸序列分析被推定是跨膜蛋白的衰老相关蛋白 Os006819-2510可以与同其它植物钙调蛋白一样也可能是一个内质网 跨膜蛋白的水稻钙调蛋白OsCRTC相互作用。Os006819-2510存在两 个内质网保留基序,OsCRTC有一个内质网前导序列,这表明这两个 蛋白都定位于内质网中。该观点与植物Os006819-2510和OsCRTC 之间相互作用的可能性相一致。Os006819-2510参与内质网中 OsCRTC调控。这种相互作用与Nelson等1997年基于拟南芥花粉囊 败育时花药中CRT表达最高的现象推测的植物CRT在花粉囊成熟和 开裂中发挥作用一致。此外,Denecke等1995年报道在核被膜、内 质网、有丝分裂细胞中发现了与纺锤体形成和成膜体有关的其它植物 CRT同系物。假设衰老相关蛋白与参与有丝分裂的蛋白相互作用,那 么本实施例的水稻CRT可能在有丝分裂中具有作用。但是,Nelson 等指出植物CRT可能有包括发育过程中在蛋白合成率较高的发育胚 乳和通过内质网大量转运分泌性蛋白的分泌期蜜腺发挥侣伴蛋白的 作用调节CRT定位的其他作用。OsCRTC也与水稻可溶性淀粉合酶 同系物OsSSS相互作用。已经从植物胚乳细胞分离到了可溶性淀粉 合酶(Cao等,2000)。这些数据表明本实施例中的水稻CRT同系物可 能与可溶性淀粉合酶OsSSS相互作用并在蛋白合成时作为侣伴蛋白 促进正确的蛋白折叠的一些组织中也可以发现本实施例水稻CRT同 系物。
确定的与水稻衰老相关蛋白Os006819-2510相互作用的推定胼胝 质合酶催化亚单位(OsPN23226)是参与葡聚糖合成的另一跨膜酶,进 一步证明Os006819-2510是一个膜相关蛋白。细胞膜蛋白参与包括细 胞壁高分子合成和装配的细胞壁的多种相互作用( Biochemistry和 Molecular Biology of Plants,Buchanan,Gruissem和Jones(eds.),John Wiley和Sons,New York,NY 2002,p.13)。可能与其拟南芥同系物的 功能一样,捕获蛋白蛋白OsPN23226是催化底物UDP-葡萄糖合成沉 积于细胞壁的胼胝质的一种细胞膜酶。衰老相关蛋白与水稻推定的胼 胝质合酶OsPN23226及钙网织蛋白OsCRTC的相互作用和OsCRTC 与可溶性淀粉合酶OsSSS的相互作用都涉及膜相关蛋白。然而尚无 证据证明这些相互作用同时发生,它们与在细胞周期/发育的不同阶 段或对不同生理和发育信号作出反应时内膜系统不同区隔之间的储 存、分配、靶定膜蛋白及其它分子的运输量有关( Biochemistry和 Molecular Biology of Plants,Buchanan,Gruissem和Jones(eds.),John Wiley和Sons,New York,NY 2002,p.14)。此外,本实施例确定的相 互作用将衰老相关诱饵蛋白与植物正常生长中一个极其重要的葡聚 糖合成过程相联系。例如,有功能的胼胝质合酶1催化亚单位(CalS1) 复合体的形成对细胞壁的结构是重要的。有人提出对CalS1复合物的 各种组分及CalS相关蛋白的功能性表征可以作为研究细胞板形成中 酶活性的调节并阐明植物胼胝质的合成和堆积的工具(Hong等,Plant Cell 13(4):755-768,2001)。确定的衰老相关蛋白与新推定的胼胝质合 酶催化亚单位(OsPN23226)的相互作用提供了对水稻该过程的新洞 察。
其它确定的与衰老相关蛋白相互作用的蛋白将该蛋白与植物应 激反应相联系。已知OsRAB16B可以被水应激和植物激素脱落酸诱 导的RAB家族成员。多种植物物种的种子发育过程中脱落酸水平的 升高刺激种子产生储存蛋白并防止过早出芽;脱落酸也可被水应激诱 导并调节气孔蒸腾(Raven,Eivert和Eichhorn,p.684)。根据 OsRAB16B与其他RAB蛋白质功能上的相同性和OsRAB16B启动子 中存在ABA反应元件,我们推测OsRAB16B在非生物胁迫反应中有 作用,并且其功能能被Ca2+调节。另一个与应激相关的相互作用蛋白 是参与硫辛酸代谢的酵母低温诱导蛋白5(OsLIP5),其在酵母中涉及 硫辛酸代谢。动物的硫辛酸有助于减轻系统性应激的影响(Kelly,1999) 并有效保护动物细胞免遭由俄国黄星矢车菊中分离的倍半萜内酯瑞 品内酯的细胞毒作用(Robles等,1997)。水稻LIP5样蛋白与同水稻 抗寒力有关并被水应激诱导的基因编码的WSI724的高度相同性 (98%)提示捕获蛋白OsLIP5具有相似的作用。基因表达实验表明编码 OsLIP5的基因被除草剂BL2下调。该发现表明OsLIP5在非生物应 激中发挥作用。虽然Os006819-2510与捕获蛋白OsRAB16B及 OsLIP5相互作用的特定功能尚不清楚,但是这些相互作用可能参与 花的衰老、对水和寒冷应激反应的生物过程。
另外,前面提到的水稻钙网织蛋白OsCRTC在应激反应中也有作 用。该假设的根据是Denecke等1995研究发现烟草CRT蛋白功能性 同系物以应激依赖性方式参与蛋白-蛋白相互作用。
总之,确定的与水稻衰老相关蛋白Os006819-2510相互作用蛋白 是几种膜相关蛋白,这支持了水稻Os006819-2510是膜相关蛋白的观 点。在这些被鉴定的蛋白中,包括参与细胞周期/有丝分裂过程和在 植物应激反应中发挥功能的蛋白。其中一些是新表征的水稻蛋白。确 定的水稻衰老相关蛋白与参与细胞周期/有丝分裂和抵抗应激的蛋白 的相互作用表明该诱饵蛋白功能的重叠。事实上,Os006819-2510将 水稻应激耐受力和细胞分裂过程相关。
                        实施例III
OsSGT1是包含1个三十四肽重复结构域、2个可变区、出现于 后生生物的CHORD和SGT1蛋白的CS基序和SGS基序的367个氨 基酸的蛋白质。Sgt1是酵母细胞周期信号所必需的。在酵母中,SGT1 通过与SKP1相互作用与着丝粒复合体和SCF-型E3泛素连接酶发生 联系。COP9信号传导体与SCF E3泛素连接酶相互作用。SGT1通过 与SCF复合体相互作用发挥其在SIC1和CLN1降解中的基本活性。 因此,SGT1一个可能的作用是通过特定的SCF复合体靶定蛋白或能 参与蛋白活性的修饰,或具有经由泛素化活化和降解靶蛋白的双重功 能SGT1复合体,使其被26S蛋白酶体降解,。拟南芥有两个SGT1 同系物。温度敏感sgt1酵母突变体AtSGT1a和AtSGT1b能在非允许 性温度时补充G1和G2阻断。但是,SGT1b与RPP5调节植物霜霉 病抗病力必需的RAR1相互作用。在这种情况下,SGT1途径降解的 靶可能是疾病抵抗相关的靶蛋白。大麦编码一个也能与涉及大麦对霜 霉病抵抗的RAR1相互作用的SGT1同系物(Austin等,2002; Azevedo等,2002)。BLAST分析将OsSGT1的核苷酸序列与TMRI’s GENECHIP_水稻基因组阵列序列数据库比较确定了探针 OS016424.1(98%)是最接近的配对序列。基因表达实验表明该基因被 稻瘟病感染上调。
水稻SGT1蛋白与两种拟南芥SGT1同系物有74%和75%的序 列相同性,并与酿酒酵母SGT1有45%的相同性。在酵母中,SGT1 是细胞周期G1/S-阶段和G2/M-阶段转化所需要的。在拟南芥中, SGT1b与Rar1相互作用并介导抗病性。因此,在植物中,SGT1可 能控制疾病抵抗和发展中的基本过程。基于与疾病抵抗和发展的潜在 关联水稻OsSGT1蛋白被选为相互作用研究的诱饵蛋白。如上所述, 编码OsSGT1第200-368位氨基酸的诱饵片段用于酵母双杂交筛选。
结论
OsSGT1被发现与10种水稻蛋白相互作用。3种相互作用蛋白先 前已描述,即OsSGT1、Ras GTP合酶(gi|730510)和诱导物反应性蛋 白(gi|11358958)。剩余的7种相互作用蛋白是带有可识别蛋白结构域 的新蛋白,或者与其它蛋白相似的蛋白。它们是L天冬酶样蛋白、 RNA结合域蛋白、生长素诱导样蛋白、archainδCOP样蛋白、原纤 维蛋白样蛋白、HSP70样蛋白和富含脯氨酸蛋白。诱导物反应性蛋白 也被用作诱饵蛋白,并且与12种或带有可识别蛋白结构域,或与已 知蛋白类似或通过序列相似性无法确认的新蛋白相互作用。它们是 NAD(P)结合域蛋白、γ衔接蛋白样蛋白、果胶脂酶样蛋白、受体样 激酶、蛋白激酶样蛋白、丙酮酸盐正磷酸盐双激酶样蛋白、Isp-4样 蛋白、黄嘌呤脱氢酶样蛋白、泛素特异蛋白酶样蛋白和4种未知蛋白。
表6-8列出了本实施例的相互作用蛋白,之后列出了每一个蛋白 的详细信息并讨论了这些相互作用的重要性。SEQ ID NO:31-70和 143-150提供了本实施例蛋白的核酸和氨基酸序列。基于SGT1的生 物学功能,相互作用蛋白也可能参与细胞周期/有丝分裂过程和/或植 物对应激的抵抗。同样,与诱导物反应性蛋白相互作用的蛋白也能参 与植物对应激的抵抗。参与水稻细胞周期调节的蛋白可以作为遗传操 作或修饰其水平及活性化合物的靶,并籍此调整植物细胞周期。这些 蛋白编码基因的确定允许改变植物生长发育使之符合农艺学要求的 农作物遗传操作和化合物应用。同样,涉及植物对应激抵抗的基因可 以用来促进农作物的生长并提高产量,所以有重要的商业用途。
                      表6
确定的Os006819-2510(与萱草衰老相关蛋白5类似的假定蛋白
            006819-2510)相互作用蛋白
下表给出了用作诱饵蛋白和发现作捕获蛋白的蛋白克隆名称。蛋 白名称项下的括号中显示了本实施例蛋白(或相关蛋白)的核酸/蛋 白序列登录号。所述诱饵蛋白和捕获蛋白蛋白的相配序列(Coord)分 别是搜索用的诱饵蛋白片段或相互作用的捕获蛋白克隆编码的氨基 酸。来源是获得每个捕获蛋白克隆的文库。   基因名称   蛋白名称   (GENBANK_登录号)   诱饵   Coord  捕获蛋白  Coord(来源)                              诱饵蛋白   PN20285   (SEQ ID NO:   144)   OsSGT1(gi|6581058)                            相互作用蛋白   PN24060   (SEQ ID NO:   32)   L-天冬酶样蛋白类似物   200-368  176-315  (输出性状)   PN20696*   (OsERP)   (SEQ ID NO:   146)   诱导物敏感蛋白   (gi|11358958)   200-368   54-144   (输入性状)   PN23914   (SEQ ID NO:   34)   RNA结合结构域蛋白   200-368   1-263×3   (输出性状)   PN23221#   (SEQ ID NO:   36)   富含脯氨酸蛋白   200-368   182-366×2   (输出性状)   207-344   (输入性状)   134-254   (输出性状)   PN20285   (SEQ ID NO:   144)   OsSGT1(gi|6581058)   200-368   9-227   (输出性状)   PN24061   (SEQ ID NO:   38)   生长素诱导蛋白样蛋白   200-368   34-236   (输出性状)   PN24063   (SEQ ID NO:   148)   RAS GTP酶(gi|730510)   200-368   63-202   (输出性状)   PN23949   (SEQ ID NO:   40)   HSP70类似物   200-368   244-418   (outpu trait)   PN28982   (SEQ ID NO:   42)   ArchainδCOP-类似物   PN29042   (SEQ ID NO:   44)   原纤维蛋白样蛋白
*确定的其它与诱导物反应性蛋白相互作用的蛋白列于表7
#确定的其它与PN23221相互作用的蛋白列于表8
                         表7   基因名称   蛋白名称   (GENBANK_登   录号)  诱饵Coord  捕获蛋白Coord  (来源)                            诱饵蛋白   PN20696   (OsERP)   (SEQ ID NO:   146)   诱导物敏感蛋白   (gi|11358958)                          相互作用蛋白   PN29984   (SEQ ID NO:   46)   新蛋白PN29984   50-145   1-38   5-41   (输入性状)   PN30844   (SEQ ID NO:   48)   新蛋白PN30844   50-145   1-64   (输入性状)   PN30868   (SEQ ID NO:   50)   NAD(P)结合域   50-145   167-336   (输入性状)   PN24292   (SEQ ID NO:   52)   γ衔接蛋白样蛋   白   23-120   737-918   (输出性状)   PN29983   (SEQ ID NO:   54)   新蛋白PN29983   50-145   1-131   (输入性状)   PN30845   (SEQ ID NO:   56)   果胶脂酶样蛋白   50-145   1-64   (输入性状)   PN31085   (SEQ ID NO:   58)   受体样蛋白激酶样   蛋白   23-120   378-553   (输出性状)   PN20674   (SEQ ID NO:   60)   丙酮酸盐正磷酸盐   双激酶样蛋白   50-145   64-263   71-298   (输入性状)   PN30870   (SEQ ID NO:   62)   Isp-4样蛋白   50-145   1-446   (输入性状)   PN29997   (SEQ ID NO:   64)   黄嘌呤脱氢酶样蛋   白   23-120   737/918   (输出性状)   PN30843   (SEQ ID NO:   66)   泛素特异蛋白酶样   蛋白   50-145   164-221   (输入性状)   PN30857   (SEQ ID NO:   68)  新蛋白PN30857   50-145   1-148   (输入性状)
                          表8   基因名称   蛋白名称   (GENBANK_登录   号)  诱饵Coord  捕获蛋白Coord  (来源)                           捕获蛋白   PN23221   (SEQ ID NO:   36)   富含脯氨酸蛋白                           诱饵蛋白   PN20621   (SEQ ID NO:   150)   Shaggy激酶   (gi|13677093)  120-435  175-311  (输出性状)   PN20115   (SEQ ID NO:   70)   环形锌指蛋白   5-140   84-302   191-324   (输出性状)
使用OsSGT1作为诱饵蛋白的双杂交系统
发现编码OsSGT1的第200-368位氨基酸的诱饵片段与L天冬酶 样蛋白PN24060相互作用。氨基酸序列的BLAST分析确定捕获蛋白 蛋白PN24060与拟南芥L天冬酶(gi|18394135)有36.5%的相同性。L- 天冬氨酸脱氨酶(天冬酶)利用碳负离子机制产生延胡索酸和胺离子 催化L-天冬氨酸可逆性脱氨基化。对该酶催化活性的了解已有近100 年,但是最近的许多研究揭示了这一充分表征的酶的一些有趣的出乎 意料的新特点。在某些条件下可见的非线性动力学显示出是由单独的 一个调节位点所导致的。底物天冬氨酸也可作为活化物与所需的二价 金属离子结合于此位点。因此,PN24060可能催化重要的与疾病抵抗 和细胞周期相关的蛋白修饰反应。
也发现编码OsSGT1的第200-368位氨基酸的诱饵蛋白片段与诱 导物反应性蛋白PN20696相互作用。氨基酸序列的BLAST分析确定 捕获蛋白克隆PN20696是水稻诱导物反应性蛋白(gi|11358958; OsERP)。根据GENBANK_的数据显示OsERP是一在稻瘟病真菌诱 导物存在时被水稻培养细胞表达的的144个氨基酸的蛋白质。因此, OsERP在水稻的疾病反应中具有作用。
OsERP也被用作诱饵蛋白并发现与其它12个蛋白相互作用(见表 7)。这些捕获蛋白蛋白在本实施例中下文描述。
通过BLAST分析确定了一个OsERP的拟南芥同系物。At1g63220 的氨基酸序列与OsERP有75%的相同性。为了了解OsERP的拟南芥 同系物是否在抵抗疾病中发挥作用,由随机插入物种子库(ar和om insertion见d library)中确定了在At1g63220(line SAIL_320_D02)基 因中有T-DNA插入的拟南芥。对插入周围区域的DNA进行的序列 分析显示T-DNA定位于At1g63220的第5外显子中。进行植物回交, 并通过PCR确定带有T-DNA插入的纯合子。以假单胞杆状细菌叶斑 病致病型ES4326攻击纯合子突变型与野生型植物,计数接种3天后 假单孢菌的蓄积(Glazebrook等,1996)。这些实验在至少6种植物中 重复两次。结果以每cm2叶片的克隆形成数log值的平均值和标准差 表示。接种3天后,突变体累计菌落数是野生型的10倍以上(wt=3.94 log cfu/leaf disk std.0.57,at1g63220=5.34 std.0.63)。因此, At1g63220参与拟南芥对疾病的抵抗。At1g63220突变体可能抑制了 依赖SGT1相互作用的防御反应。
另外,编码OsSGT1的第200-368位氨基酸的诱饵蛋白片段与 RNA结合域蛋白PN23914相互作用。PN23914是一164个氨基酸的 蛋白。氨基酸序列的BLAST分析显示捕获蛋白与虹鳟鱼 tFZR1(gi|2982698)有35.9%的相同性。TFZR1是含有FTZ-F1盒的孤 细胞核受体家族成员。锌指结构域和FTZ-F1盒的氨基酸序列与斑马 鱼FTZ-F1的分别有92.8%和100%的相同性。另一方面,tFZR1与斑 马鱼FTZ-F1之间的全序列相同性较低(33.0%)。该结果说明tFZR1 是fushitarazu因子1(FTZ-F1)亚家族的一个新成员。PN23914可能通 过锌指结构区发挥作用。
另外,编码OsSGT1第200-368位氨基酸的诱饵片段与水稻脯氨 酸富含蛋白PN23221相互作用。氨基酸序列的BLAST分析显示 PN23221与水稻脯氨酸富含蛋白(gi|18478606)有40.3%的相同性。富 含脯氨酸蛋白可以介导蛋白之间的相互作用(Zhao等,2001)。值得注 意的是,富含脯氨酸蛋白PN23221也可与shaggy激酶PN20621和环 形锌指蛋白样蛋白PN20115(见表28)相互作用。因此,富含脯氨酸蛋 白PN23221能够将这些蛋白与OsSGT1联系在一起。
发现编码OsSGT1的第200-368位氨基酸的诱饵片段与OsSGT1 相互作用。换言之,OsSGT1与其本身相互作用。虽然钓取OsSGT1 的诱饵蛋白包含第200-368位氨基酸,但是捕获蛋白包含第9-227位 氨基酸。虽然OsSGT1能够通过聚集实现自身调节,但是这些诱饵和 捕获蛋白片段反应了OsSGT1蛋白单体自发的蛋白折叠。
另外发现编码OsSGT1的第200-368位氨基酸的诱饵片段与生长 素诱导蛋白样蛋白PN24061相互作用。与公共数据库进行比对的 BLAST分析揭示PN24061与推定的水稻IAA1蛋白(gi|17154533) 有63.5%的相同性。吲哚乙酸是一种属于生长素类的植物生长激素。 IAA与包括顶端优势、向性、梢伸长、形成层细胞分裂诱导和根发生 的许多生理学过程相关。因此,IAA诱导的基因可能编码产生对发育 改变作出反应的蛋白。这种关联通过与SGT1的相互作用与细胞分裂 调节相联系。
也发现编码OsSGT1的第200-368位氨基酸的诱饵片段与Ras GTP酶PN24063相互作用。氨基酸序列的BLAST分析确定PN24063 是维持GTP酶活性的ras相关GTP结合蛋白(gi|730510)。该蛋白有特 征性存在于ras及ras相关小GTP结合蛋白基因并参与GTP结合和水 解的4个保守区域。另外,靠近羧基末端有2个膜锚定必需的相连半 胱氨酸残基。大肠杆菌合成的该蛋白具有GTP合酶的活性(i.e., hydrolysis of GTP to GDP;Kidou等,1993)。Ras GTP合酶可能参与发 育信号过程。在花发育早期表达的番茄ORFX控制雌蕊叶细胞的数 量并包含一段与人癌基因c-H-ras p21结构(fw2.2:一个控制番茄果实 大小的数量性遗传位点)相似的序列(Frary等,2000)。GTP合酶ρ家 族也参与细胞形态的控制并介导来自细胞膜受体的信号(Winge等, 1997)。
通过BLAST分析确定了PN24063的一个拟南芥同系物。 At1g02130氨基酸序列与PN24063有90%的相似性。为了了解 PN24063的拟南芥同系物是否在抗病性中发挥作用,由随机插入物种 子库(ar和om insertion见d library)中确定了在At1g02130(line SAIL_680_D03)基因中有T-DNA插入的拟南芥。对插入周围区域的 DNA进行序列分析,显示T-DNA定位于At1g02130的启动子。植物 回交并通过PCR确定带有T-DNA插入物的纯合子。以假单胞杆状细 菌叶斑病致病型ES4326攻击纯合子突变体与野生型植物,计数接种 3天后假单孢菌的蓄积(Glazebrook等同上),这些实验在至少6种 植物中重复两次。结果以每cm2叶片的克隆形成数的log值的平均值 和标准差表示。接种3天后,突变体累计菌落数是野生型的10倍以 上(wt=3.93 log cfu/leaf disk std.0.57,at1g02130=5.22 std.0.9)。因此, At1g02130参与拟南芥对疾病的抵抗。At1g02130突变体可能抑制了 依赖SGT1相互作用的防御反应。
发现编码OsSGT1的第200-368位氨基酸的诱饵蛋白片段与 ArchainδCOP样蛋白PN28982相互作用。氨基酸序列的BLAST 分析显示捕获蛋白蛋白PN28982与水稻ArchainδCOP有92%的相 同性(gi|2506139)。能与膜可逆结合的细胞质外壳蛋白在分泌途径的膜 转运中有重要作用。研究较清楚的一个例子是被GTP结合蛋白Arf1 募集到膜的七聚体蛋白复合体COPI或外壳蛋白家族。装配入电子致 密外壳并有利于膜出芽时在内质网和高尔基体之间转运。活化的Arf1 将外壳蛋白带到膜上。但是,Arf1和外壳蛋白与膜结合后的停留时 间不同:在Arf1-GTP已经被水解解离之后,外壳蛋白仍然保留在膜 上。即使没有小泡出芽,外壳蛋白和Arf1与膜的快速结合与解离也 随机发生。外壳蛋白和Arf1的持续活性形成了与含有COPI的转运 中间物形成相关的动态平衡膜区域。Arf1/外壳蛋白的这种作用为其 他细胞外壳蛋白行为的研究提供了一种模型(Presley等,2002)。δ- COP可能与OsSGT1和Ras GTP酶相互作用并以此协调专一性切割 蛋白的膜转运。
通过BLAST分析确定了一个PN28982的拟南芥同系物。 At5g05010的氨基酸序列与PN28982有77%的相同性。为了了解 PN28982的拟南芥同系物是否在抗病性中发挥作用,由随机插入物种 子库中确定了在At5g05010(line SAIL_84_C10)基因中有T-DNA插入 的拟南芥。对插入周围区域的DNA进行序列分析,显示T-DNA定 位于At5g05010的启动子中。植物回交并通过PCR确定带有T-DNA 插入的纯合子。以假单胞杆状细菌叶斑病致病型ES4326攻击纯合子 突变型与野生型植物,计数接种3天后假单孢菌的蓄积(Glazebrook 等同上),此实验在至少6种植物中重复两次。结果以每cm2叶片的 克隆形成数log值的平均值和标准差表示。接种3天后,突变型累计 菌落数是野生型的10倍以上(wt=3.93 log cfu/leaf disk std.0.57, at5g05010=5.24 std.0.52)。因此,At5g05010参与拟南芥对疾病的 抵抗。At5g05010突变体可能抑制了依赖SGT1相互作用的防御反应。
编码OsSGT1的第200-368位氨基酸的诱饵蛋白片段与原纤维蛋 白样蛋白PN29042相互作用。氨基酸序列的BLAST分析显示捕获蛋 白OsPN29037与原纤维蛋白马铃薯同系物CDSP34叶绿体前体 (gi|7489242)有75%的相同性(gi|2506139)。又称为原纤维蛋白/ CDSP34蛋白的质体脂结合蛋白在遭受非生物应激胁迫的成熟胡椒果 实的丝状色质体和茄科植物叶子的叶绿体中积聚。在对水应激反应的 多种双子叶和单子叶植物中原纤维蛋白/CDSP34蛋白水平大量增加 (Langenkamper等,2001)。在水应激的野生型番茄植物和ABA缺陷 型flacca突变体的CDSP 34相关转录数量增加的程度相似,但是仅在 野生型中有蛋白的积聚,提示ABA参与CDSP 34合成的转录后调节。 在受强光照的马铃薯中可以观察到CDSP 34转录物和蛋白丰度的增 加。CDSP 34蛋白在维持渗透应激和氧化应激时间质薄层类囊体的稳 定中具有一种结构性作用(Gillet等,1998)。
BLAST分析将PN29042的核苷酸序列与TMRI’s GENECHIP_水 稻基因组阵列序列数据库比较确定探针OS011738(100%)是最接近的 配对序列。基因表达实验表明该基因表达被ABA处理上调。
通过BLAST分析确定了PN29042的拟南芥同系物。At4g22240 的氨基酸序列与PN29042有79%的相同性。为了了解PN29042的拟 南芥同系物是否在抗病性中发挥作用,由随机插入物种子库中确定了 在At4g22240(line SAIL_691_B11)基因中有T-DNA插入的拟南芥。 对插入周围区域的DNA进行序列分析,显示T-DNA定位于 At4g22240的第1外显子。进行植物回交,并通过PCR确定带有 T-DNA插入物的纯合子。以假单胞杆状细菌叶斑病致病型ES4326攻 击纯合子突变型与野生型植物,计数接种3天后假单孢菌的蓄积 (Glazebrook等同上),这些实验在至少6种植物中重复两次。结果 以每cm2叶片的克隆形成数log值的平均值和标准差表示。接种3天 后,突变型累计菌落数是野生型的10倍以上(wt=3.93log cfu/leafdisk std.0.57,at4g22240=5.21 std.0.43)。因此,At4g22240参与拟南芥 对疾病的抵抗。At4g22240突变体可能抑制了依赖SGT1相互作用的 防御反应。
另外,发现编码OsSGT1的第200-368位氨基酸的诱饵片段与 HSP70样蛋白PN23949相互作用。氨基酸序列的BLAST分析显示捕 获蛋白OsPN3949与黄瓜叶绿体的热休克蛋白70(gi|7441856)有71% 相同性。热休克蛋白(在Bierkens等,2000中所述)是作为细胞内侣伴 蛋白促进蛋白折叠/伸展和装配/分离的应激蛋白。它们在对热和化学 物质等许多刺激作出反应的植物细胞中选择性表达。因此,作为调节 蛋白的HSP蛋白是保护性应激反应的成分。BLAST分析将PN23949 的核苷酸序列与TMRI’s GENECHIP_水稻基因组阵列序列数据库比 较确定探针OS015016(97%)是最接近的配对序列。基因表达实验表 明该基因表达被除草剂和JA下调。
使用OsERP(PN20696)作为诱饵蛋白的双杂交系统
其次,其中一个蛋白,即诱导物反应性蛋白PN20696(gi|11358958; OsERP)被发现与OsSGT1相互作用,并被用作诱饵蛋白。如表27 所示,发现水稻诱导物敏感蛋白PN20696(gi|11358958;OsERP)与受体 样蛋白激酶样蛋白PN31085相互作用。氨基酸序列的BLAST分析表 明捕获蛋白蛋白OsPN31085与水稻受体样蛋白激酶样蛋白 (gi|7434420)有48%的相同性。该受体蛋白激酶包括一大组蛋白,且 其中大部分都含有一胞质蛋白激酶催化结构域、一个跨膜区和/或带 有可以与其它大分子相互作用的富含亮氨酸重复单位的细胞外区域。 细胞间通讯可能是由在植物形态发生中具有重要作用的受体激酶介 导。
OsERP也被发现与丙酮酸正磷酸盐双激酶PN20674相互作用。 氨基酸序列的BLAST分析表明捕获蛋白PN20674与水稻丙酮酸正磷 酸盐双激酶(gi|743444)有97%的相同性。丙酮酸正磷酸盐双激酶 (PPDK)在四碳光合作用中的功能已知,但是在三碳植物中的功能尚 不明确。脱落酸、PEG和淹水可以显著诱导一种大约97kDa通过微 序列分析确定为PPDK的蛋白在水稻根(三碳)表达。水稻PPDK是 ABA诱导在根中表达的蛋白。蛋白印迹分析显示的水稻幼苗根部 PPDK在渐进性干旱、寒冷、高盐和甘露醇处理后的诱导表达代表了 一种水应激反应。PPDK在淹水水稻幼苗的根及鞘和暴露在无氧N2 环境下黄化水稻幼苗的诱导表达代表了一种低氧应激反应。没有任何 应激处理可以诱导PPDK在绿色水稻幼苗叶片的堆积。淹水幼苗的根 有Ppdk转录产物的堆积并伴有乙醛还原酶1的诱导表达。低氧应激 触发了根部和水稻黄化幼苗PPDK活性的增加并伴有磷酸烯醇丙酮 酸羧化酶和苹果酸脱氢酶活性的增加。这些结果表明细胞质PPDK参 与耐缺氧物种,水稻中的水份亏缺和低氧应激的代谢反应(Moons等, 1998)。
另外发现OsERP与γ衔接蛋白PN24292相互作用。氨基酸序列 的BLAST分析表明捕获蛋白蛋白PN24292与拟南芥γ衔接蛋白 (gi|5091510)有97%的相同性。真核生物小泡运输需要通过特异蛋白 复合体进行膜识别。异四倍体衔接蛋白复合体1、2和3(AP1/2/3)由 两大、一小和一中等大小的衔接蛋白亚单位构成。AP1/2/3的大亚单 位是同系物并且七聚体外壳蛋白I(COPI)复合体的两个亚单位也属于 该基因家族。另外,异四聚体的所有的小亚单位与中等亚单位的氨基 末端具有相同性并保留有两个与COPI复合体相对应的亚单位。 AP1/2/3与七聚体COPI的子结构(异四倍体,F-COPI子复形)有共 同的祖先复合体(称前F-COPI)。由于所有的大的和所有的小的/中 等亚单位分别具有相同性序列,所以推测该复合体的祖先是一个具有 一大一小两个亚单位的异源二聚体(Schledzewski等,1999)。archain δCOP和与γ衔接蛋白的诱饵蛋白ERP相互作用的OsSGT1相互作 用。
OsERP也被发现与黄嘌呤脱氢酶PN29997相互作用。氨基酸序 列的BLAST分析表明捕获蛋白PN29997与拟南芥黄嘌呤脱氢酶 (gi|15236216)有66%的相同性。黄嘌呤脱氢酶是负责黄嘌呤降解的 酶。黄嘌呤降解反应参与嘌呤的分解代谢和应激反应。BLAST分析 将PN29997的核苷酸序列与TMRI’s GENECHIP_水稻基因组阵列序 列数据库比较确定探针OS013724(100%)是最接近的配对序列。基因 表达实验表明该基因在种子中表达。
OsERP也被发现与泛素特异蛋白酶PN30843相互作用。氨基酸 序列的BLAST分析表明捕获蛋白PN30843与拟南芥泛素特异蛋白酶 (gi|11993486)有40%的相同性。泛素/26S蛋白酶体途径是真核生物选 择性降解细胞质和细胞核蛋白的主要途径。在本途径中,泛素链与短 寿蛋白结合,信号识别,通过26S蛋白酶体降解被标记蛋白。在靶蛋 白降解中或者降解后,附着的多泛素链被泛素特异蛋白酶(UBPs)释放 并随后被分解,使游离泛素单体再生重复利用。拟南芥泛素蛋白酶 T-DNA的插入突变产生胚胎发育停顿在球形期的纯合子胚胎致死表 型。停止发育种子多泛素链水平的明显增高表明泛素的再循环存在障 碍。因此,在植物发育早期,泛素/26S蛋白酶体途径尤其是AtUBP14 起了重要作用(Doelling等,Plant J.27(5):393-405,2001)。SGT1也与 泛素/26S蛋白酶体途径的组分相互作用并且能与泛素特异蛋白酶相 互作用的ERP也与OsSGT相互作用。该蛋白酶在抗病和发育方面都 具有功能。
OsERP也被发现与果胶脂酶PN30845相互作用。氨基酸序列的 BLAST分析表明捕获蛋白PN30845与水稻果胶脂酶(gi|15528783)有 71%的相同性。果胶脂酶催化细胞壁多聚半乳糖醛酸酶的酯化。在双 子叶植物中,这些遍在细胞壁酶参与包括细胞黏附和茎部伸长在内的 重要发育过程。BLAST分析将PN30845的核苷酸序列与TMRI’s GENECHIP_水稻基因组阵列序列数据库比较确定探针OS007057 (99%)是最接近的配对序列。基因表达实验表明JA处理、高盐生长环 境和除草剂处理可以上调该基因。
OsERP还被发现与许多蛋白相互作用,即PN30870、PN29984、 PN30844、PN29983、PN30868和PN30857。PN30870、PN29984、 PN30844、PN29983、PN30868和PN30857的氨基酸序列的BLAST 分析显示这些捕获蛋白与其他任何已表征蛋白无充分的相同性。但 是,基于与水稻诱导物反应性蛋白PN20696的关联,这些蛋白可能 在疾病抵抗和细胞周期中具有功能。
BLAST分析将PN30857的核苷酸序列与TMRI’s GENECHIP_水 稻基因组阵列序列数据库比较确定探针OS008661.1(99%)是最接近的 配对序列。基因表达实验表明稻瘟病感染使该基因上调。
通过BLAST分析确定了PN29983的拟南芥同系物。At2g36950 的氨基酸序列与PN29983有52%的相同性。为了了解PN29983的拟 南芥同系物是否在抗病性中有作用,由随机插入物种子库(ar和om insertion见d library)中确定了在At2g36950(line SAIL_779_E11)基 因中有T-DNA插入的拟南芥。对插入物周围区域的DNA进行序列 分析,显示T-DNA定位于At2g36950的第1外显子中。进行植物回 交,并通过PCR确定带有T-DNA插入的纯合子。以假单胞杆状细菌 叶斑病致病型ES4326攻击纯合子突变型与野生型植物,计数接种3 天后假单孢菌的蓄积(Glazebrook等同上),这些实验在至少6种植 物中重复两次。结果以每cm2叶片的克隆形成数log值的平均值和标 准差表示。接种3天后,突变型累计菌落数是野生型的10倍以上(wt =3.94 log cfu/leaf disk std.0.57,at2g36950=5.95 std.0.72)。因此, At2g36950参与拟南芥对疾病的抵抗。At2g36950突变体可能抑制了 依赖于EPR/SGT1相互作用的防御反应。
值得注意的是,下列这几种诱饵蛋白OsSGT、环形锌指蛋白 PN20115和shaggy激酶PN20621都能识别捕获蛋白,即富含脯氨酸 蛋白PN23221。本实施例中前文已经描述了OsSGT和PN23221。
氨基酸序列的BLAST分析显示诱饵蛋白环形锌指蛋白PN20115 与拟南芥环形锌指蛋白At1g63170有65%的相同性。作为蛋白-蛋白 相互作用界面的环形域是一个保守的锌指基序。它能与其他蛋白相互 作用控制发育或应激耐受过程。BLAST分析将PN20115的核苷酸序 列与TMRI’s GENECHIP_水稻基因组阵列序列数据库比较确定探针 OS015830(90%)是最接近的配对序列。基因表达实验表明干旱时该基 因上调。
氨基酸序列的BLAST分析表明诱饵蛋白Shaggy激酶PN20621 是水稻Shaggy激酶(gi|131677093)。GSK3/SHAGGY是涉及真核细胞 多种信号途径的高度保守的丝氨酸/苏氨酸激酶。已经确定了许多种 植物GSK3/SHAGGY样激酶。拟南芥的油菜素类固醇非敏感型突变 体2(BIN2)基因编码了一个GSK3/SHAGGY样激酶。该激酶编码基因 的获得功能性突变或过表达抑制油菜素类固醇(BR)信号传导,导致植 物产生与BR缺陷和BR响应相似的突变。相反,通过共抑制降低BIN2 的表达部分复苏了弱BR信号突变体。因此,BIN2作为负调节子控 制植物中的类固醇信号传导(Li和Nam,Science 295(5558): 1299-1301,2002)。
概述
作为一种主要产品的水稻已经成为提高产率和抵抗疾病、病虫害和 各种环境应激的基因操作的对象。推测本实施例确定的蛋白可能参与 细胞周期过程和/或应激反应。有关涉及细胞周期过程和应激反应的 水稻蛋白和相互作用分子的认识有重要的农业应用。调节这些相互作 用可以用于影响植物的生长发育,从而增加农作物产率和对环境应激 的耐受。
植物的疾病反应经常模拟正常的发育过程。例如,植物对真菌赤 霉素和壳梭孢毒素的反应分别类似于对自身生成的赤霉素和生长素 的反应(Hedden和Kamiya,Annual Rev.Plant Physiol.Plant Mol.Biol. 48:431,1977;Baunsgaard等,Plant J.13:661,1998)。非生物胁迫反应 有一些与某些植物发育阶段相同的特征。遭受失水应激的叶子细胞表 达的基因与发育或种子干燥过程中胚胎细胞所表达的某些基因相同 (Medina等,Plant Physiol.125:1655,2001)。由于基因表达的系统性调 节推动了发育过程和应激反应(Chen等,Plant Cell 14:559,2002),有 可能存在一组广泛重叠序列基因群并且编码参与这些反应的相同性 蛋白。本实施例描述了重叠序列基因组。
本实施例描述的结果有助于预测水稻或其他植物的基因功能。例 如,水稻有一个通过与抗性基因和泛素化蛋白降解途径相互作用参与 病原体防御的大麦SGT1和拟南芥SGT1b蛋白的同系物(OsSGT1; gb|AAF18438)。OsSGT1可被稻瘟病感染诱导并可能参与病原体防御。 OsSGT1与许多未明确的或已知的包括可以被稻瘟病真菌诱导物 (gb|AF090698)诱导转录的蛋白相互作用。该诱导物敏感蛋白(OsERP) 与其他未明确蛋白和将OsERP与SGT1介导的蛋白降解途径相联系 的泛素蛋白酶相关蛋白相互作用。这些水稻蛋白与其它植物同系物被 怀疑与疾病抵抗有关。
OsERP(PN20696)、Ras GTP酶(PN24063)、ArchainγCOP-样 蛋白(28982)、原纤维蛋白样蛋白(PN29042)和与OsERP(PN29983) 相互作用的一个未明确蛋白的拟南芥蛋白同系物已被确认。以假单胞 细菌攻击拟南芥的相同性基因插入突变体。接种3天后,突变型累计 菌落数是野生型的10倍以上。因此,这些拟南芥同系物参与拟南芥 的疾病抵抗。这些突变体可能抑制依赖与SGT1相互作用的防御反应。 基于相同性和相互作用谱,拟南芥基因的水稻同系物也能利用SGT1 作为一个因子参与疾病抵抗和其它过程。这些结果表明可以应用组合 数据资料来预测可以利用突变体显型被验证的基因功能。
                       实施例IV
本实施例描述了在细胞壁相互作用并参与生物胁迫反应的水稻 蛋白的确定及特征。如前所述,应用一种自动化、高通量的酵母双杂 交分析技术搜索与水稻壳质酶III及纤维素合成酶催化亚单位相互作 用的蛋白。通过BLAST分析将该搜索中所用蛋白片段的编码序列与 专利数据库和公共数据库的数据比对以确定所述全长基因的序列。这 些发现的蛋白看起来定位或靶定于细胞膜并参与植物病原体诱导的 防御反应。参与病原体防御途径和生化反应的水稻蛋白的确定和表征 能允许产生抗病性增强或降低的经遗传修饰的农作物。
壳质酶是一种降解昆虫、线虫、真菌和细菌等植物病原体的结构 组分甲壳素的二糖酶。由于细菌的细胞壁是壳质酶III的特异底物, 因此这些酶涉及包括防御具有甲壳质的病原体等多种生物学功能 (Brunner等,Plant J.14(2):225-34,1998)。基于壳质酶与TMRI’s植物 健康计划的关联,选择壳质酶作为研究这些相互作用的诱饵蛋白。这 些蛋白高潜能的特异性酶-底物相互作用使得它们适于双杂交分析 法。在植物中编码与抗病反应有关的蛋白质的水稻基因的鉴定能够允 许对农作物进行遗传操作以获得抗病性增加或减弱的植物,所以对于 农业有重要意义。
本实施例所用的第二个诱饵蛋白叫做纤维素合酶催化亚单位,是 涉及高等植物细胞壁重要组分纤维素合成的膜结合酶复合体的一部 分,该酶的产物对于植物的形态发生和其他许多生物学过程是重要的 (在Perrin R.M.,Curr.Biol.11(6):R213-R216,2001中所述)。
本实施例提供了与水稻壳质酶III(OsCHIB1)和水稻纤维素合酶催 化亚单位RSW1样蛋白(OsCS)相互作用的新表征的水稻蛋白。自动 化、高通量的酵母双杂交分析技术(由Myriad Genetics Inc.提供,Salt Lake City,UT)被用于搜索与壳质酶和纤维素合酶诱饵蛋白相互作用 的蛋白。
结论:
壳质酶III与水稻由环境应激反应诱导产生的分子的植物解毒机 制相关的抗氧化酶过氧化氢酶A相互作用。第二个相互作用蛋白是 参与纤维素生物合成的酶纤维素合酶催化亚单位,也是应用于本实施 例的第二个诱饵蛋白。该搜索也确定了4个与壳质酶相互作用的新的 水稻蛋白:与具有重要的清除防御反应中组织毒素作用的植物ABC 运转器相似的蛋白、与蛋白水解活性同植物对病原体反应中信号分子 活性相关的拟南芥谷氨酰氨基肽酶相似的肽酶、与拟南芥推定ATP 酶相似的蛋白和一种与拟南芥推定蛋白相似的未知蛋白。
发现诱饵克隆纤维素合酶催化亚单位与其自身及12种蛋白相互 作用。其中包括3种已知水稻蛋白:已知作为热休克蛋白调节蛋白参 与植物保护性应激反应的一种分子DNAJ同系物和可被盐和应激诱 导的salT基因产物和水通道蛋白这两种跨膜泵蛋白。其他9种相互 作用蛋白是新蛋白:在植物核酸损伤防御机制中有推定角色的DNA 损伤诱导蛋白、可能通过调节热休克蛋白参与植物应激反应的推定 BAG蛋白、与拟南芥核黄素前体6,7-二甲基-8-核糖-2,4-二氧四氢喋 啶合酶前体类似并可能参与氧化应激中核黄素生物合成的蛋白、与大 豆钙依赖蛋白激酶类似的蛋白、可能作为拟南芥细胞壁损伤后分子信 号或转录调节蛋白的推定锌指蛋白和4种未知功能的蛋白质。
下面的表9和表10分别列出了可以本实践例的相互作用蛋白, 之后列出了每一个蛋白的详细信息并讨论了这些相互作用的意义。图 2提供了所述相互作用的简图。SEQ ID NO:71-96和151-162提供了 本实施例蛋白的核酸和氨基酸序列。
本实施例确定的一些蛋白代表了先前未表征过的水稻蛋白。这些 蛋白看起来参与植物的病原体防御机制。基于它们推测的生物学功能 以及能与诱饵蛋白壳质酶及纤维素合酶相互作用的能力,它们被定位 或靶定到细胞壁并在此参与涉及局部或系统性病原体防御的生化反 应和基因诱导。
                          表9
         确定的与OsCHIB1(壳质酶III)的相互作用蛋白
下表给出了用作诱饵和发现作捕获的蛋白克隆名称。蛋白名称项 下的括号中显示了本实施例蛋白(或相关蛋白)的核酸/蛋白序列登 录号。所述诱饵蛋白和捕获蛋白的相配序列(Coord)分别是搜索用的 诱饵蛋白片段或相互作用的捕获蛋白克隆编码的氨基酸。来源是获得 每个捕获克隆的文库。   基因名称   蛋白名称   (GENBANK_登录号)   诱饵   Coord  捕获蛋白  Coord(来源)                              诱饵蛋白   OsCHIB1   PN19651   (SEQ ID NO:   152)   水稻(O.sativa)壳质酶   III   (AF296279;AAG02504)                            相互作用蛋白   OsCATA   PN20899   (SEQ ID NO:   154)   水稻(O.sativa)过氧   化氢酶同工酶A   (D29966;BAA06232)   10-200   332-433   (输入性状)   OsCS*   PN19707   (SEQ ID NO:   156)   水稻(O.sativa)纤维   素合酶催化亚单位,   RSW1-样蛋白   (AF030052;AAC39333)   10-200   411-489   (输入性状)   OsPN22823   (SEQ ID NO:72)   新蛋白PN22823,与   ABC运转器相似   (T02187,AB043999.1,   NP_171753;e=0)   10-200   25-106   (输入性状)   OsPN22154   (SEQ ID NO:74)   新蛋白PN22154,与拟南   芥谷氨酰氨基肽酶相似   (AL035525;e=0)   10-200   390-562   (输入性状)   OsPN29041   (SEQ ID NO:76)   新蛋白PN29041,片段,   与拟南芥推定ATP酶相   似   (AAG52137;e-17)   10-200   2×5-108   (输入性状)   OsPN22020   (FL_R01_P005_C09   .g.la.Sp6a)   (SEQ ID NO:78)   新蛋白PN22020,片段,   与拟南芥推定蛋白相似   (NP_197783;3e-34)   10-200   3×76-170   128-170   (输入性状)
纤维素合酶催化亚单位也被用作诱饵蛋白;与它相互作用的蛋白列于 表10。
                           表10
确定的OsCS(纤维素合酶催化亚单位,RSW1样蛋白)相互作用蛋白   基因名称   蛋白名称   (GENBANK_登录号)   诱饵   Coord  捕获蛋白  Coord(来源)                                诱饵蛋白   OsCS   PN19707   (SEQ ID   NO:156)   水稻(O.sativa)纤维素合酶催   化亚单位,RSW1样蛋白   (AF030052;AAC39333)                               相互作用蛋白   OsCS   PN19707   (SEQ ID   NO:156)   水稻(O.sativa)纤维素合酶催   化亚单位,RSW1样蛋白   (AF030052;AAC39333)   316-583  316-582  (输入性状)   OsAAB5381   0   PN29086   (SEQ ID   NO:158)   水稻(O.sativa)salT基因产   物   (AF001395;AAB53810.1)   316-583  6-145  (输出性状)   OsPIP2A   PN29098   (SEQ ID   NO:160)   水稻(O.sativa)水通道   (AF062393)   316-583  123-290  (输出性状)   OsPN22825   (SEQ ID   NO:80)   新蛋白PN22825,片段   316-583  5-129  (输入性状)   OsPN29076   (SEQ ID   NO:82)   新蛋白PN29076,片段   316-583   1-187   43-388   122-304   (输出性状)   OsPN29077   (SEQ ID   NO:84)   新蛋白PN29077,片段,与拟南   芥DNA损伤诱导蛋白相似,   DDI1样蛋白   (BAB02792;5e-94)   316-583   4×1-242   (输出性状)   OsPN29084   (SEQ ID   NO:86)   新蛋白PN29084,片段,与大豆   (Glycine max)钙依赖蛋白激酶   相似   (A43713,2e-79)   316-583   3×1-253   (输出性状)   OsPN29113   (SEQ ID   NO:162)   水稻(O.sativa)DNAJ同系   物   (BAB70509.1)   316-583   1-92   (输出性状)   OsPN29115   (SEQ ID   NO:88)   新蛋白PN29115,片段,与拟南   芥6,7-二甲基-8-核糖-2,4-二氧   四氢喋啶合酶前体相似   (AAK93590,6e-37)   316-583   1-188   (输出性状)   OsPN29116   (SEQ ID   NO:90)   新蛋白PN29116,片段   316-583   1-169   (输出性状)   OsPN29117   (FL_R01_P0   78_N11.fasta   .contig1)*   (SEQ ID   NO:92)  新蛋白PN29117   316-583   -7-151   (输出性状)   OsPN29118   (SEQ ID   NO:94)  新蛋白PN29118,片段   316-583   1-136   (输出性状)   OsPN29119   (FL_R01_P0   84_P01.g.la.   Sp6a)   (SEQ ID   NO:96)  新蛋白PN29119,片段   316-583   -53 to 155   (输出性状)
*OsPN29117也与热休克蛋白hsp70(OsHSP70,PN20775)相互作用: 输出性状文库OsPN29117的三个捕获蛋白克隆(一个编码第11-160 位氨基酸,两个编码第29-160位氨基酸)与OsHSP70的一个诱饵克 隆(第138-360位氨基酸)相互作用。
使用OsCHIB1(壳质酶III)作为诱饵蛋白的双杂交系统
水稻壳质酶III(GENBANK_登录号AF296279)是一286个氨基 酸的蛋白。壳质酶是一种降解甲壳质的二糖酶。甲壳质是昆虫、线虫、 真菌和细菌的结构组分。壳质酶是高等植物病原体感染反应诱导的多 种疾病相关蛋白(PR)之一(在Stintzi等,Biochimie.75(8):687-706, 1993中所述)。虽然壳质酶执行多种生物学功能,但是细菌细胞壁是 壳质酶III的特异性底物提示这些酶的主要角色是防御蛋白(Brunner 等,同上)。该酶通过降解真菌和细菌的细胞壁直接攻击病原体。
本搜索使用的诱饵片段是编码OsCHIB1(壳质酶III)的第10-200 位氨基酸。该蛋白区域包含酶的活性位点(第127-135位氨基酸)。 在TMRI’s GENECHIP_水稻基因组阵列序列数据库中没有基因与 OsCHIB1编码基因相匹配。
发现OsCHIB1(壳质酶III)与OsCATA(PN20899;水稻过氧化氢 酶A同工酶(D29966;BAA06232))相互作用。过氧化氢酶 A(GENBANK_登录号D29966)是由Higo和Higo确定(Plant Mol. Biol.30(3):505-521,1996)的玉米Cat-3基因(玉米(Zea mays); GENBANK_登录号L05934)同系物的水稻CatA基因产物。根据植 物过氧化氢酶基因由共同祖先基因进化产生的差异分为3群,水稻 CatA和玉米Cat-3基因都属于3群之一的单子叶植物特有群(Guan和 Sc和alios,J.Mol.Evol.42(5):570-579,1996)。水稻过氧化氢酶A包 含491个氨基酸并有H65和N138位的2个催化位点以及Y348位的 1个血红素结合位点。血红素是过氧化氢酶活性的辅因子。Higo和 Higo已经显示CatA基因在发育早期种子和幼苗中有高水平表达并且 被除草剂百草枯诱导,而脱落酸(ABA)、创伤、水杨酸和过氧化氢 不能或者只能轻微诱导该基因表达。
过氧化氢酶是可以在几乎所有需氧生物中发现的应激诱导酶。它 们是植物细胞抗活性氧自由基(AOS)的酶解毒机制的一部分。AOS在 环境应激反应中被诱导并作为信号分子通过诱导PR基因和其他的信 号分子(如水杨酸,SA)活化多种防御反应并增加应激耐受力(Lamb和 Dixon,Ann.Rev.Plant Biol.48(1):251,1997)。但是,AOS也能损伤 蛋白、膜脂质、DNA和植物的其他细胞组分。这两种分歧作用的平 衡依赖于一组氧化清道夫对AOS细胞水平的紧密控制。在这些抗氧 化分子中,过氧化氢酶通过将氧化爆发中产生的AOS前体过氧化氢 转化为分子氧和水,保护植物细胞免遭毒性损害(在Dat等,Redox Rep.6(1):37-42,2001中所述)。
发现OsCHIB1(壳质酶III)与水稻(O.Sativa)纤维素合酶催化 亚单位RSW1-样蛋白(OsCS;PN19707)相互作用。在输入性状文库检 索到的我们搜索所发现的捕获蛋白克隆编码水稻纤维素合酶催化亚 单位第411-489位氨基酸。该583个氨基酸的蛋白区域是跨膜区域C 末端并通过氨基酸序列分析预测位于细胞质一侧的胞质膜。
纤维素合酶是包括多种同工酶的膜结合酶复合体。纤维素合酶催 化亚单位(GENBANK_登录号AF030052)参与高等植物细胞壁必需 组分多糖类纤维素的合成。纤维素传递决定植物生长和细胞形态的机 械性能并对植物生物学有多方面的影响。大部分植物通过活化纤维素 合酶在胞质膜合成纤维素。该酶作为玫瑰花环结构的一部分通过增加 糖核苷酸前体延长新生纤维素链,然后装配成以相同的方向排列于胞 质膜表面的微纤维。这个过程似乎依赖玫瑰花环结构的精确组织和定 向(Perrin,R.M.,Curr.Biol.11(6):R213-6,2001)。引起纤维素分解的拟 南芥rsw1基因突变导致根形态发生的改变(Baskin等,Aust.J.Plant Physiol.19(4):427-437,1992),表明植物正常的纤维素合成对于发育 和形态是关键的。Arioli等显示(Science 279(5351):717-720,1998) 拟南芥rsw1基因编码纤维素合酶的催化亚单位。但是,现在的基因 和生化证据都支持由组织特异性表达或不同条件下差异表达的多个 成员组成的一个基因家族编码高等植物纤维素合酶催化亚单位的观 点。以上由Perrin,R.M.综述。这些作者指出植物中存在多个编码纤 维素合酶催化亚单位的基因提示在同样的细胞中功能性多亚单位复 合体如二聚体的形成需要多种纤维素合酶同种型。另外,在特点尚未 确定的玫瑰花环结构中发现许多其他多肽。目的是确定与合酶相互作 用蛋白的相互作用研究有助于阐明纤维素合酶玫瑰花环装置的结构 以及解决纤维素生物合成中仍然存在的一些问题。在TMRI’s GENECHIP_水稻基因组阵列序列数据库中没有与OsCS编码基因匹 配的基因。
纤维素合酶催化亚单位也用作诱饵蛋白。本实施例中它的相互作 用蛋白列于表30并在下文讨论。
发现OsCHIB1(壳质酶III)与同ABC运转器(OsPN22823)类似 的蛋白PN22823相互作用。PN22823是一包含10个跨膜域(第45-61, 154-170,174-190,253-269,295-311,671-687,715-731,794-810, 818-834和933-949位氨基酸)和2个ATP/GTP结合位点基序A(P 环)(第383-390和1031-1038位氨基酸)的1239个氨基酸的蛋白。 与Genpept数据库进行比对的BLAST分析揭示PN22823与日本黄连 (Coptis japonica)CjMDR1(GENBANK_登录号AB043999.1;e=0.0) 有55%的氨基酸序列相同性。CjMDR1是在较其他器官有较高的生 物碱堆积的根茎表达的多药耐药基因(Yazaki等,J.Exp.Bot.52(357): 877-9,2001)。其他与PN22823高度类似的是拟南芥推定的ABC运转 器(GENBANK_登录号T02187;e=0)和推定的P糖蛋白 (GENBANK_登录号NP_171753;e=0)。所述蛋白包含ATP结合盒 (ABC)并属于包括P蛋白(P-gp)和多药耐药相关蛋白2(MRP2)在内的 一个家族(Fardel等,Toxicology 167(1):37-46,2001所述)。ABC蛋白 是转运多种化合物包括磷脂、离子、肽类、类固醇、多糖、氨基酸、 有机阴离子、药物和其他外来物质通过生物膜的跨膜蛋白。
哺乳动物ABC运转器参与外源物的胆汁清除并且这些毒素上调 它的表达。从拟南芥中确定了许多ABC运转器家族成员(129种,根 据Sanchez-Fern和ez等,J.Biol.Chem.276(32):30231-30244,2001) 提示这些植物蛋白有重要角色。与这一观点一致,发现ABC运转器 是水稻梗型(Oryza sativa cv.Drew)对茉莉酸、苯并噻二嗪和/或稻瘟 病感染反应时早期直接上调基因之一(Xiong等,Mol.Plant Microbe Interact.14(5):685-692,2001)。这提示同哺乳动物一样,ABC运转器 在植物防御毒素中有重要角色。目前表征的大部分植物ABC运转器 定位于液泡膜并认为参与细胞毒素的胞内隔离(在Leslie等, Toxicology 167(1):3-23,2001中所述)。而且,如抗真菌药二萜香紫苏 醇处理的烟草(Nicotiana plumbaginifolia)培养细胞的ABC运转器上 调的研究所示(Jasinski等,Plant Cell 13(5):1095-107,2001),植物 ABC运转器看起来在多药耐药中发挥了与哺乳动物的ABC运转器相 似的作用。从拟南芥分离的MRP同系物(AtMRPs)与植物对除草剂的 耐药有关(Rea等,Annu.Rev.Plant Physiol.Plant Mol.Biol.49: 727-760,1998)。也有证据表明同在哺乳动物中一样,ABC运转器作 为激素的传递体。具体地,一种拟南芥ABC运转器的突变体AtMRP5 可能由于丧失了生长素结合物运输体的功能而导致根生长减慢和侧 根形成增加(Gaedeke等,EMBO J.20(8):1875-1887,2001)。
BLAST分析将新蛋白PN22823的核苷酸序列与TMRI’s GENECHIP_水稻基因组阵列序列数据库比较确定探针 OS_ORF012127_at(e-145期望值)是最接近的配对序列。基因表达实验 说明该基因被真菌病原体稻瘟病菌诱导表达。
发现OsCHIB1(壳质酶III)与同拟南芥谷氨酰氨基肽酶 (OsPN22154)类似的蛋白PN22154相互作用。OsPN22154是与小鼠 氨基肽酶(GENBANK_登录号U35646)的拟南芥同系物 (GENBANK_登录号AL035525)有65%相同性的一173个氨基酸的 蛋白片段。应用拟南芥氨基肽酶样蛋白的cDNA序列和水稻基因组序 列(作为模板)合成了一个编码与拟南芥氨基肽酶样蛋白有54.7%相 同性的874个氨基酸的水稻蛋白的DNA序列。对这一水稻新蛋白的 区域分析的确发现了1个肽酶M1域(第17-402位氨基酸)和1个 锌结合域(第311-320位氨基酸)提示该蛋白是金属氨基肽酶。尚不 清楚该蛋白是由拟南芥氨基肽酶样蛋白的直系相同性基因还是由相 同性基因编码。BLAST分析将新蛋白PN22154的核苷酸序列与 TMRI’s GENECHIP_水稻基因组阵列序列数据库比较确定探针 OS_004263_at(4e-83期望值)是最接近的配对序列。基因表达实验表 明该基因在圆锥花序表达。
发现OsCHIB1(壳质酶III)与蛋白PN29041(OsPN29041)相互作 用。BLAST分析表明该蛋白与拟南芥推定的ATP酶(GENBANK_登 录号AAG52137;e-17)相似。ATP酶定位于邻近细胞壁一侧的胞质膜。 TMRI’s GENECHIP_水稻基因组阵列序列数据库中未检索到匹配基 因,因此没有基因表达数据可以用来预测它在应激和感染中的作用。 该蛋白可能对于病原体感染没有作用。但是,它是本实施例通过酵母 双杂交相互作用确定的我们提示存在于细胞壁界面的壳质酶多蛋白 复合体的组分。一种假设是该ATP样蛋白存在于胞质膜并参与细胞 壁的合成。进一步的相互作用数据有助于阐明它参与壳质酶多蛋白复 合体的生物学意义。
发现OsCHIB1(壳质酶III)与蛋白PN22020(OsPN22020)相互作 用。蛋白PN22020是与拟南芥的推定蛋白(GENBANK_登录号 NP_197783;3e-34)有55%相同性的一175个氨基酸的蛋白片段。氨基 酸序列分析确定了一个也发现于蛋白激酶C同工酶的C2域(第5-90 位氨基酸,e=0.037),提示PN22020能参与同蛋白激酶C调节的信号 途径相似的信号途径。它与甲壳质的相互作用可能代表了发生在对病 原体和毒素反应过程中的信号事件。但是,该结构域也可在其他激酶 和非激酶蛋白中发现(Ponting和Parker,Protein Sci.5(1):162-166, 1996)。新蛋白PN22020全长氨基酸序列的确定就可能决定所述含C2 域蛋白所属类别。
BLAST分析将新蛋白PN22020的核苷酸序列与TMRI’s GENECHIP_水稻基因组阵列序列数据库比较确定探针 OS008182_r_at(e-102期望值)是最接近的配对序列。基因表达实验说 明该基因在叶、茎、根、种子、圆锥花序和花粉中组成性表达。
使用OsCS作为诱饵蛋白的双杂交系统
使用的第二个诱饵蛋白是水稻(O.sativa)纤维素合酶催化亚单位 RSW1样蛋白(OsCS;PN19707;GENBANK_登录号AF030052)。 由于该蛋白可以与诱饵蛋白水稻(O.sativa)壳质酶III(OsCHIB1; PN19651)相互作用,所以在本实施例前文已有描述。本搜索使用的诱 饵片段编码OsCS第316-583位氨基酸。
发现OsCS与水稻(O.sativa)纤维素合酶催化亚单位RSW1样 蛋白(OsCS)相互作用。换句话,发现OsCS与其自身相互作用。在 输入性状文库检索到捕获蛋白蛋白并且其编码与诱饵克隆几乎完全 相同的氨基酸(捕获蛋白克隆编码第316-582位氨基酸)。这种自身 相互作用支持了曾经提出的纤维素合酶作为二聚体起作用的观点(见 Perrin,R.M.,Curr.Biol.11(6):R213-R216,2001))。
也发现OsCS与水稻(O.sativa)salT基因产物(OsAAB53810)相 互作用。氨基酸序列的BLAST分析表明145个氨基酸的蛋白 OsAAB53810是水稻salT基因产物(AAB53810.1;100%相同性;3e-80)。 该蛋白由Claes等报道(Plant Cell 2(1):19-27,1990)的从遭受盐分胁迫 的水稻根部分离的cDNA克隆salT编码。这些作者显示在对盐分胁 迫和干旱作出反应的成熟植物及幼苗的鞘和根salT mRNA特异性表 达。Garcia等(Planta 207(2):172-80,1998)报道的基因表达数据表 明植物每一部位salT的表达依赖细胞代谢活动以及是否在对应激作 出反应。这些作者也发现salT基因被赤霉酸和脱落酸诱导并提示这 些生长调节物质的诱导作用通过独立的或可能拮抗的途径完成。 OsAAB53810氨基酸序列分析推测了jacalin样植物凝集素结构域(第 14-145位氨基酸,2.3e-32)。Jacalin以一种高度特异的方式与碳水化合 物相互作用(Sankaranarayanan等,Nat.Struct.Biol.3(7):596-603, 1996)。
也发现OsCS与水通道(OsPIP2a)相互作用。氨基酸序列分析确定 水通道(GENBANK_登录号AF062393)是一包含6个跨膜域(第 48-64,83-99,131-147,175-191,207-223,和254-270位氨基酸)和一 个主要内在蛋白(MIP)家族标记(第34-271位氨基酸)的290个氨基 酸的蛋白。输出性状文库检索的捕获蛋白克隆编码包含4个靠近C 末端的推定跨膜域和部分MIP家族标记的OsPIP2a第123-290位氨基 酸。认为水通道是一个胞质膜内在蛋白(Malz和Sauter,Plant Mol. Biol.40(6):985-995,1999)。这种蛋白促进小分子的移动并经常作为水 的通道。这是OsPIP2a也称为水通道的原因。Malz和Sauter确定了 OsPIP2a和OsPIP1a并报道这两个蛋白有许多证明它们归属于不同亚 家族的标志性基序和相同性。他们报道水稻OsPIP2a和OsPIP1a显示 相似而不是完全相同的表达模式,它们在幼苗的表达水平都高于成体 并且在初生根的表达受光照调节。另外,他们的研究表明虽然OsPIP 的表达与生长无关联,但是赤霉酸也调节可以被淹水诱导快速生长的 深水水稻节间OsPIP的转录表达。拟南芥对不同的激动剂和环境发生 反应时表达的PIP蛋白不同,例如,Pih等报道的盐分胁迫诱导液泡 内在蛋白(SITIP)表达(Mol.Cells 9(1):84-90,1999)。这些作者提示 PIP蛋白负责高渗透性应激如高盐条件下植物的渗透调节。
也发现OsCS与蛋白PN22825(OsPN22825)相互作用。OsPN22825 是一完整序列未知的229个氨基酸蛋白片段。与公共数据库和 Myriad’s专利数据库进行比对的BLAST分析揭示OsPN22825与拟南 芥的两个未知蛋白相似(GENBANK_登录号NP_188565,67%相同 性,3e-82;和GENBANK_登录号AB025624,37%相同性,3e-82)。 TMRI’s GENECHIP_水稻基因组阵列序列数据库中未检索到匹配基 因,因此没有基因表达数据可以用来预测它在应激和感染中的作用。
也发现OsCS与蛋白PN29076(OsPN29076)相互作用。OsPN29076 是一完整序列未知的389个氨基酸的蛋白片段。已获得的氨基酸序列 的分析确定了1个细胞色素c家族血红素结合位点(第142-147位氨 基酸)。BLAST分析揭示没有蛋白与OsPN29076具有高度相同性, 最佳命中是一个拟南芥未知功能蛋白(GENBANK_登录号AAF24616, 34%相同性,3e-46)。在输出性状文库检索到编码OsPN29076第1-187、 42-389和121-304位氨基酸的3个捕获蛋白克隆。这些克隆有一跨 过OsPN29076第121-187位氨基酸并包含细胞色素c家族血红素结 合位点的重叠区。TMRI’s GENECHIP_水稻基因组阵列序列数据库中 未检索到OsPN29076的匹配基因,因此没有基因表达数据可以用来 预测它在应激和感染中的作用。缺乏OsPN29076相关信息难以确定 其功能。OsPN29076完整氨基酸序列的确定有助于阐明该蛋白的功能 以及OsCS-OsPN29076相互作用的生物学意义。
也发现OsCS与同拟南芥DNA损伤诱导蛋白DDI1样蛋白 (OsPN29077)相似的PN29077相互作用。OsPN29077是一完整序列未 知的243个氨基酸的蛋白片段。BLAST分析表明OsPN29077与拟南 芥DNA损伤诱导蛋白DDI1样蛋白(GENBANK_登录号BAB02792; 5e-94)有73%的相同性。认为DDI1是酵母细胞周期检验点蛋白并且被 许多DNA损伤因素诱导表达。这种蛋白将细胞阻断于某一阶段并调 节对DNA损伤的转录反应(Zhu和Xiao,Nucleic Acids Res.26(23): 5402-5408,1998)。报道的DDI1与泛素相互作用(Bertolaet等,Nat. Struct.Biol.8(5):417-422,2001)的观察支持了酵母双杂交在这种蛋白 研究中的应用。
BLAST分析将新蛋白OsPN29077的核苷酸序列与TMRI’s GENECHIP_水稻基因组阵列序列数据库比较确定探针 OS016688.1_at(e-83期望值)是最接近的配对序列。基因表达实验表明 这一基因在几种不同组织类型中没有特异性表达而且不能被各种应 激、除草剂和施用的激素诱导。
也发现OsCS与同大豆(G.max)钙依赖蛋白激酶(OsPN29084)相 似的蛋白PN29084相互作用。OsPN29084是一完整序列未知的284 个氨基酸的蛋白片段。已获得的氨基酸序列分析确定了4个EF-手钙 结合域(第110-122,146-158,182-194和216-228位氨基酸)。与这 些结构域的存在相一致,BLAST分析显示OsPN29084与包括大豆钙 依赖性蛋白激酶在内的许多钙依赖性蛋白激酶(GENBANK_登录 号A43713,81% identity,2e-79)有高度相同性。所述大豆蛋白也包括4 个EF手钙结合域并且其活化需要钙而不是钙调节蛋白或磷脂(Harper 等,Science 252(5008):951-954,1991)。钙通过兴奋这种钙依赖性蛋白 激酶充当第二信使。
BLAST分析将OsPN29084的核苷酸序列与TMRI’s GENECHIP_水稻基因组阵列序列数据库比较确定探针 OS004083.1_at(e-83期望值)是最接近的配对序列。基因表达实验表明 这一基因在几种不同组织类型中没有特异性表达而且不能被各种应 激、除草剂和施用的激素诱导。
也发现OsCS与水稻(O.sativa)DNAJ同系物(OsPN29113)相互 作用。OsPN29113是一包含1个ATP/GTP结合位点基序(P环,第 43-50位氨基酸)的92个氨基酸的蛋白。已获得氨基酸序列的BLAST 分析表明OsPN29113是水稻DNAJ同系物(GENBANK_登录号 BAB70509.1;100%相同性;5e-39)。真核细胞DnaJ样蛋白通过与不同 的Hsp70和DnaJ样蛋白对的直接相互作用调节热休克蛋白Hsp70的 侣伴蛋白(蛋白折叠)功能(Cyr等,Trends Biochem.Sci.19(4): 176-181,1994)。热休克蛋白(在Bierkens,J.G.,Toxicology 153(1-3): 61-72,2000中所述)是作为细胞内侣伴蛋白促进蛋白折叠/伸展和装配 /分解的应激蛋白。在植物细胞应对包括热和许多化学性物质在内的 多种刺激时选择性表达。作为热休克蛋白的调节蛋白,DnaJ样蛋白 是植物保护性应激反应的一部分。
BLAST分析将OsPN29113核苷酸序列与TMRI’s GENECHIP_ 水稻基因组阵列序列数据库比较确定了探针(probeset)OS002926_at (e-124期望值)是最接近的配对序列。基因表达实验表明这一基因在几 种不同组织类型中没有特异性表达而且不能被各种应激、除草剂和施 用的激素诱导。
也发现OsCS与同拟南芥6,7-二甲基-8-核糖-2,4-二氧四氢喋啶合 酶前体(OsPN29115)相似的蛋白PN29115相互作用。OsPN29115是一 完整序列未知的188个氨基酸的蛋白片段。氨基酸序列分析确定已获 得的序列包含1个ATP/GTP结合位点基序A(P环,第94-101位氨 基酸)和1个6,7-二甲基-8-核糖-2,4-二氧四氢喋啶合酶家族标记(第 42-186位氨基酸)。后一结构域的存在与表明OsPN29115同拟南芥推 定的6,7-二甲基-8-核糖-2,4-二氧四氢喋啶合酶前体(GENBANK_登 录号AAK93590,6e-37)有50%相同性的BLAST分析结果一致。辅因 子核黄素由前体6,7-二甲基-8-核糖-2,4-二氧四氢喋啶合成(Nielsen 等,J.Biol.Chem.261(8):3661-3669,1986)。黄素类参与许多生物学过 程。(reviewed by Massey,V.,Biochem.Soc.Trans.28(4):283-296,2000) 例如,它们参与电子传递反应并通过产生过氧化物籍此促进氧化应 激,但是同时黄素类参与氧衍生自由基反应产物过氧化氢的还原。黄 素类也参与土壤解毒并与植物光诱导的DNA修复有关。黄素蛋白的 化学多样性是通过与相结合蛋白的特异性相互作用控制的。
BLAST分析将OsPN29115核苷酸序列与TMRI’s GENECHIP_ 水稻基因组阵列序列数据库比较确定了探针(probeset)OS015577_at (e-41期望值)是最接近的配对序列。基因表达实验表明这一基因在几 种不同组织类型中没有特异性表达而且不能被各种应激、除草剂和施 用的激素诱导。
也发现OsCS与蛋白PN29116(OsPN29116)相互作用。OsPN29116 是一完整序列未知的170个氨基酸的蛋白片段。已获得氨基酸序列分 析确定了1个据报道参与蛋白-蛋白相互作用的WD40域(第82-118 位氨基酸)(Ajuh等,J.Biol.Chem.276(45):42370-42381,2001)。 BLAS分析确定OsPN29116与两个拟南芥未知蛋白有相同性 (GENBANK_登录号T45879,67%相同性,e-64,和GENBANK_登录 号NP_181253,69%相同性,e-58)。缺乏OsPN29116相关信息难以确定 其功能。OsPN29116完整氨基酸序列的确定有助于阐明该蛋白的功能 以及OsCS-OsPN29116相互作用的生物学意义。
BLAST分析将OsPN29116核苷酸序列与TMRI’s GENECHIP_水 稻基因组阵列序列数据库比较确定了探针(probeset)OS016500_r_at (e-12期望值)是最接近的配对序列。对于这个探针该期望值太低不能 作为OsPN29116基因表达的可靠指示。
也发现OsCS与蛋白PN29117(OsPN29117)相互作用。OsPN29117 是一包含1个泛素结构域(第12-84位氨基酸)的237个氨基酸的蛋 白。氨基酸序列分析表明该蛋白包含1个已知可以与Hsp70/Hsc70分 子侣伴蛋白结合并调节其功能的BAG结构域(第106-187位氨基酸, 2.1e-11)(Briknarova等,Nat.Struct.Biol.8(4):349-352,2001)。共侣伴 蛋白BAG家族机能上调节细胞应激反应、凋亡、增殖、细胞迁移和 激素作用中重要的信号转导蛋白和转录因子(Briknarova等,同上; Antoku等,Biochem.Biophys.Res.Commun.286(5):1003-1010, 2001)。BLAST分析表明OsPN29117与拟南芥未知功能蛋白 (GENBANK_登录号AAC14405,44%相同性,4e-52)具有相同性。与 OsPN29117是BAG家族成员之一的观点一致,也发现OsPN29117 与hsp70(OsHSP70)相互作用(见表30下的*标注)。热休克蛋白(上 文讨论)是具有ATP依赖细胞内侣伴蛋白功能并在对热和化学物质 等许多刺激作出反应的植物细胞中选择性表达的应激蛋白。作为热休 克蛋白的调节蛋白,BAG蛋白OsPN29117是植物的保护性应激反 应的一部分。
搜索获得的捕获蛋白克隆编码包含泛素结构域的OsPN29117第 1-151位氨基酸区段。注意,该捕获蛋白蛋白包含5’非翻译区的一小 段(-7到0),因此在表2中它的相配序列表示为第-7到151位氨基酸。 BLAST分析将OsPN29117核苷酸序列与TMRI’s GENECHIP_水稻 基因组阵列序列数据库比较确定了探针(probeset)OS017803_at(e-73 期望值)是最接近的配对序列。基因表达实验表明这一基因在几种不 同组织类型中没有特异性表达而且不能被各种应激、除草剂和施用的 激素诱导。
也发现OsCS与蛋白PN29118(OsPN29118)相互作用。OsPN29118 是一完整序列未知的136个氨基酸的蛋白片段。BLAST分析揭示 OsPN29118与公共数据库和Myriad’s专利数据库的蛋白仅有很弱的 相同性,最佳命中是拟南芥推定的锌指蛋白SHI样蛋白(GENBANK_ 登录号NP_201436,42%相同性,5e-15)。接下来相同性最高的蛋白是 一种拟南芥假定蛋白(GENBANK_登录号T04595,38%相同性, 9e-15)。OsPN29118完整氨基酸序列的确定有助于阐明该蛋白的功能 以及OsCS-OsPN29118相互作用的生物学意义。
BLAST分析将OsPN29118核苷酸序列与TMRI’s GENECHIP_ 水稻基因组阵列序列数据库比较确定了探针(probeset)OS004996.1_at (e-38期望值)是最接近的配对序列。基因表达实验表明这一基因在几 种不同组织类型中没有特异性表达而且不能被各种应激、除草剂和施 用的激素诱导。
也发现OsCS与蛋白PN29119(OsPN29119)相互作用。OsPN29119 是一完整序列未知的327个氨基酸的蛋白片段。BLAST分析表明 OsPN29119与拟南芥未知功能蛋白T17H3.9(GENBANK_登录号 AAD45997,7e-54)有38%的相同性。OsPN29119完整氨基酸序列的发 现有助于阐明该蛋白的功能以及OsCS-OsPN29119相互作用的生物 学意义。从输出性状文库检索到一个编码OsPN29119第1-155位氨 基酸的捕获蛋白克隆。该捕获蛋白蛋白包含5’非翻译区的一小段(-7 到0),因此在表2中它的相配序列表示为第-53到155位氨基酸。 BLAST分析将OsPN29119核苷酸序列与TMRI’s GENECHIP_水稻 基因组阵列序列数据库比较确定了探针(probeset)OS014829.1_at (e-131期望值)是最接近的配对序列。基因表达实验表明这一基因在几 种不同组织类型中没有特异性表达而且不能被各种应激、除草剂和施 用的激素诱导。
摘要
与OsCHIB1(壳质酶III)相互作用的蛋白
被设计用来搜索与壳质酶诱饵蛋白相互作用蛋白的酵母双杂交分 析分离了看起来与植物防御病原体反应有关的蛋白。植物对疾病的抵 抗发生在包括局部和非特异性系统性反应在内的多个水平。植物的过 敏反应(HR)是具有感染局部迅速组织萎缩及细胞死亡的特点并导 致侵入病原体固定的对病原微生物的局部抵抗机制。该过程被病原诱 导物启动并通过病原体攻击后迅速发生的氧化暴发协调反应(Lamb 和Dixon,Ann.Rev.Plant Biol.48(1):251,1997)。活性氧自由基(AOS) 堆积是植物生物胁迫和非生物胁迫的中心主题。AOS在HR启动时产 生并可能是感染初期杀伤宿主组织的手段。AOS也作为诱导PR基因 表达的信号分子或者是PR基因诱导信号级联反应中的其他信号分子 的产物。防御基因的触发可以扩展到非感染组织以及整个植物并导致 局部抗性(LR)和系统获得抗性(SAR)(在Martinez等,Plant Physiol. 122(3):757-766,2000中所述)。作为结果,SAR可以为植物其他部位 提供对同一或无关病原体的长效保护。
氧化爆发产生的过氧化氢不仅促进了细胞壁结构蛋白的交联,而 且通过启动受攻击细胞的死亡并作为诱导临近细胞编码保护剂如谷 胱甘肽S-转移酶和谷胱甘肽过氧化物酶基因或者作为产生水杨酸(SA) 的可扩散信号在局部HR中具有重要作用。Martinez等报告认为水杨 酸(SA)通过产生可能是SA与过氧化氢酶或过氧化物酶相互作用副 产物的水杨酸根成为LR或SAR的信号分子(如上所述)。这些作者 显示棉花对细菌性病原体的识别在遭受HR的细胞产生SA之前触发 了氧化爆发并且过氧化氢是局部和系统SA蓄积所必需的,因此氧化 爆发是LR和SAR的启动信号。Chen等已经显示过氧化氢酶与SA 的结合抑制了过氧化氢酶活性并且由此产生的过氧化氢蓄积诱导了 SAR有关的防御相关基因表达,并证明过氧化氢酶参与诱导植物SA 介导的SAR(Science 262(5141):1883-1886,1993)。
本研究发现壳质酶与过氧化氢酶A相互作用。倘若已确定壳质酶 是一种防御蛋白,那么这种相互作用与病原体攻击时存在受应激诱导 的过氧化氢酶的现象一致,提示这两种酶可能都定位于细胞壁并在此 参与PR基因的诱导。真菌过氧化氢酶可以保护定居于表达HR宿主 的杀生性真菌免遭AOS侵害(Mayer等,Phytochemistry 58(1):33-41, 2001)的观察使作为抵抗微生物的防御反应一部分的壳质酶-过氧化 氢酶相互作用的意义获得了进一步的支持。显示这类有机体分泌的其 他酶之中有过氧化氢酶以清除或灭活宿主产生的AOS。
另外,细胞壁通过从病原体表面的诱导物分子获得信息并将信息 传递到植物胞质膜导致诱导防御的基因活化过程并参与防御细菌和 真菌病原体。诱导物诱导的与过敏反应有关的一种生化反应是植物受 到真菌或细菌感染后产生的抗菌复合物植保菌素的合成和蓄积(在 Hammerschmidt,R.,Ann.Rev.Phytopathol.37:285-306,1999中所述)。 发现ABC运转器是与壳质酶相互作用的蛋白之一。已知ABC运转器 将细胞毒素、代谢产物和其他分子与植物组织隔离。因此发现ABC 运转器与定位于细胞壁并参与毒素运输的壳质酶相互作用。虽然植物 防御反应中植保菌素的功能尚不十分明确(Hammerschmidt,R.,同 上),但是ABC运转器可能参与植物病原体诱导的防御反应过程中从 植物细胞清除毒素的推测是令人兴奋的。而且,基因表达实验说明真 菌病原体稻瘟病菌(M.grisea)能诱导ABC运转器编码基因的表达。 这些结果与该蛋白在病原性真菌和细菌诱导的水稻防御反应中的推 定功能一致。
也发现壳质酶与同拟南芥谷氨酰氨基肽酶类似的新蛋白PN22154 相互作用。虽然该捕获蛋白的特有功能未知,但是已知所述蛋白水解 活性是植物针对病原体的防御机制的普通组分。这些机制包括壳质酶 和蛋白酶。肽酶活性与信号调节有关。例如,羧肽酶通过水解肽类激 素的焦谷氨基从而活化这些信号分子。羧肽酶通过蛋白水解调节拟南 芥油菜素类固醇非敏感型突变体1(BRI1)信号(Li等,Proc.Natl.Acad. Sci.USA 98(10):5916-5921,2001)。基于新蛋白PN22154与壳质酶相 互作用的能力和后者在PR防御中的已知功能,推测壳质酶可以与新 蛋白PN22154相互作用形成针对侵入者的具有壳多糖分解活性和蛋 白水解活性的复合体的组分,水稻谷氨酰氨基肽酶样蛋白能参与植物 防御反应相关细胞壁信号分子的活化。
发现的第四个与壳质酶相互作用的蛋白是纤维素合酶催化亚单 位。该酶是位于胞质膜并在此参与细胞壁形成的复合物,它的调节作 用能允许植物对病原体攻击导致的机体损伤产生形态学改变。这种相 互作用对于维持防御反应中细胞壁组分的新陈代谢平衡具有重要意 义。壳质酶可能定位于细胞壁并在病原体攻击后立即与纤维素合酶相 互作用,或者也可能靶定到该位点在PR基因诱导后与合酶相互作用。
除了新蛋白PN22020和PN29041,发现与壳质酶相互作用的水稻 蛋白看起来都定位于或者被募集到细胞壁并在此参与植物对病原体 攻击的防御反应。ABC运转器和谷氨酰氨基肽酶样蛋白,这两种与 壳质酶相互作用的蛋白是新表征的水稻蛋白。
就整体而言,所有这些蛋白都能够在植物细胞的细胞壁界面作为 一个多组分复合体相互作用并都能参与AOS水平控制、PR基因诱导 和细胞壁合成及完整性维持以此保护植物免遭侵入性病原体的损伤。
与纤维素合酶催化亚单位(OsCS)相互作用的蛋白
涉及OsCS的相互作用扩展了使用壳质酶诱饵蛋白确定的应激反应 蛋白网络。OsCS与许多看起来参与植物病原体诱导应激反应的细胞 壁蛋白相互作用。已发表的证据将其中一些蛋白与植物对各种应激的 反应相联系。水通道(OsPIP2a)和盐分胁迫诱导蛋白(OsAAB53810), 这两种蛋白分子虽然在抗病性中没有直接的作用,但是可以作为细胞 壁蛋白复合体的跨膜泵调节膨压或转运溶质。此外,在可以与催化碳 水化合物链合成的酶相互作用的背景下,OsAAB53810中iacalin样植 物凝集素结构域的存在具有特殊的意义。如果iacalin有与碳水化合 物结合的特性(Sankaranarayanan等,Nat.Struct.Biol.3(7):596-603, 1996),那么OsAAB53810能够特异性的与OsCS合成的新生纤维素 链结合并因此在细胞壁新陈代谢相关OsCS依赖性事件中发挥有效的 作用。OsAAB53810可以被盐和应激诱导的事实支持了该蛋白在此类 生理事件中的角色。
另一相互作用蛋白水稻DNAJ同系物OsPN29113可能通过调节 各种应激诱导的热休克蛋白的侣伴蛋白功能参与植物的保护性应激 反应。DNAJ蛋白与纤维素合酶的相互作用可能参与植物对病原体或 遭受HR的细胞产生的化学物质的反应并且所述反应与应激反应中细 胞壁的损伤有关。
在与OsCS相互作用的新蛋白中,OsPN29077与拟南芥DNA损 伤诱导蛋白DDI1样蛋白相似。基于DNA损伤反应时酵母DDI1的 表达及序列的相同性,我们推测OsPN29077执行与DDI1相同的功 能并且OsCS-OsPN29077相互作用与植物抵抗DNA损伤的防御机制 相关。同样,我们将BAG样蛋白OsPN29117归于在植物保护性应 激反应中作为热休克蛋白调节子的推定角色。同此角色一致, OsPN29117也与通过我们的基因表达实验表明的是组成性表达并被 茉莉酸下调的植物防御反应途径组分hsp70相互作用(见附件1的图 表)。因为OsPN29077和OsPN29117都与纤维素合酶催化亚单位相 互作用,后者与病原体诱导的防御蛋白壳质酶相互作用,所以这些相 互作用蛋白是在细胞壁参与病原体攻击防御反应的同一复合体的一 部分。
新蛋白OsPN29115与拟南芥核黄素前体6,7-二甲基-8-核糖-2,4- 二氧四氢喋啶合酶前体的蛋白相似。已有报道的核黄素功能中涉及作 为氧化应激结果的氧化还原反应(Massey,V.,Biochem.Soc.Trans. 28(4):283-96,2000)。基于所述证据以及与已确定相互作用蛋白的序 列相同性,OsCS-OsPN29115的相互作用将植物对应激和病原体所产 毒素的反应与需要OsCS活性的结构改变相联系。
与OsCS相互作用的其他新蛋白包括与大豆钙依赖蛋白激酶相似 的蛋白(OsPN29084)和与拟南芥推定的锌指蛋白相似的蛋白 (OsPN29118)。这些相互作用蛋白与蛋白激酶和锌指蛋白的相同性提 示它们分别作为信号分子和转录的调节蛋白发挥作用。它们与OsCS 的相互作用代表了细胞壁被病原体损伤破裂后发生的信号和转录事 件并且捕获蛋白蛋白可以从细胞壁转移到细胞其他部位介导所述事 件。OsCS-OsPN29084相互作用可能代表了生理性反应产生的细胞外 信号转导的一个步骤,而OsCS-OsPN29118相互作用与细胞外信号反 应的转录调节有关。这种信号能以病原体攻击的植物损伤的形式出 现。
基于发现的与OsCS相互作用的其他蛋白(OsPN22825、 OsPN29076、OsPN29116和OsPN29119)与纤维素合酶及壳质酶的相 关,这些捕获蛋白也是病原体抵抗、维持细胞壁完整或保持蛋白复合 体完整的重要因子。
因此,本实施例的结果显示与纤维素合酶催化亚单位相互作用的 蛋白也是位于细胞壁表面的壳质酶多蛋白复合体的一部分。
                         实施例V
Janssens和Goris认为丝氨酸/苏氨酸蛋白质磷酸酶2A型(PP2A) 是通过使其他蛋白脱磷酸影响信号传导的重要调节蛋白(Janssens 和Goris,Biochem J.353(Pt 3):417-439,2001)。丝氨酸/苏氨酸蛋白质 磷酸酶家族蛋白质磷酸酶2A(PP2A)的成员包含一个活性受到精细调 控的高度保守的催化亚单位(Janssens和Goris,同上)。在植物和其 他有机体中有多个PP2A的同种型并且看起来在不同组织和发育不同 阶段有差异表达(Arino等,Plant Mol.Biol.21(3):475-485,1993)。 Harris等评价了许多描述PP2A亚单位与除调节亚单位之外的许多细 胞蛋白有关的报告,提示PP2A是与蛋白合成、细胞周期及凋亡相关 的许多信号途径的调节子(Harris等,Plant Physiol.121(2):609-617, 1999)。PP2A酶作为调节蛋白与植物生长和发育的许多过程相关。
另外,PP2A酶在病原体入侵中有作用。在哺乳动物,许多病毒 蛋白特异靶定PP2A酶以解除宿主某些细胞途径的管制并促进病毒的 繁育(Sontag,E.,Cell Signal 13(1):7-16,2001;Garcia等,Microbes Infect.2(4):401-407,2000)。PP2A酶与许多细胞和病毒蛋白相互作用 并且这种蛋白-蛋白相互作用对于PP2A信号调控是关键的(Sontag, 同上)。比如,与PP2A相互作用的蛋白(例如,PP2A)将PP2A靶 定到不同的亚细胞区隔,或者影响PP2A的酶活性。此外,植物PP2A 酶在对病毒感染的反应中具有作用(Dunigan和Madlener,Virology 207(2):460-466,1995)。事实上,丝氨酸/苏氨酸蛋白质磷酸酶在烟草 花斑病毒介导的程序性细胞死亡中必需的(Dunigan和Madlener,同 上)。
OsPP2A-2(GENBANK_登录号AF134552)是包含丝氨酸/苏氨酸 蛋白质磷酸酶标志(第112-117位氨基酸)的蛋白磷酸酶家族的一308 个氨基酸亚单位。
如前所述,使用酵母双杂交方法详细分析PP2A介导的信号事件。 本搜索使用并发现有相互作用蛋白的诱饵片段编码OsPP2A-2第 1-308位和150-308位氨基酸。
本实施例所用的第二个诱饵OsCAA90866是由一个仅知道可以 被寒冷诱导的水稻完整cDNA序列编码的蛋白。基于OsCAA90866 与非生物胁迫的关联性,选择它作为相互作用研究的诱饵蛋白。涉及 OsCAA90866的相互作用的考察将提供对这种了解甚少的蛋白功能 的洞察。植物对环境应力作出反应并由此产生选择优势的相关水稻基 因的确定有利于培养对非生物胁迫具有抗性的农作物并提高产率。
结论
发现OsPP2A-2与可能是转录调节子的水稻推定的富含脯氨酸蛋白 和种子储存蛋白谷蛋白相互作用。本搜索还确定了5个与OsPP2A-2 相互作用的新蛋白:也与水稻的冷诱导蛋白CAA90866(本实施例的 第二个诱饵蛋白)相似的推定的PP2A调节亚单位蛋白;可能参与植 物病原体感染反应的与邻氨基苯甲酸磷酸核糖转移酶相似的一种酶; 在蛋白折叠中有推定作用的二硫化物异构酶;一种电压依赖离子通道 蛋白;在病原体诱导的防御反应中具有推定作用的DnaJ样蛋白。
发现本实施例中的第二个诱饵蛋白冷诱导蛋白CAA90866与其自 身及6个蛋白相互作用。其中之一是发现与本实施例描述的诱饵蛋白 OsPP2A-2相互作用的同样的推定PP2A调节亚单位蛋白(与诱饵蛋 白自身相似)。该相互作用将本实施例确定的两个蛋白网络相联系(即 将生物胁迫及非生物胁迫相关蛋白与磷酸酶相联系)。本搜索确定的 其他相互作用蛋白包括可被各种非生物胁迫诱导的14-3-3样蛋白; 具有推定的活化植物冷应激反应相关信号肽功能的吡咯烷酮羧基肽 酶样蛋白;一种包含磷酸肌醇基团可能参与低温耐受力相关信号事件 调节的新蛋白;一种新的在应激条件相关RNA延迟途径具有推定功 能的小麦启动因子(iso)4fp82亚单位的水稻同系物;与植物2-脱氢-3- 脱氧二氧磷基八醛缩酶相似的一种新蛋白。
表11和表12分别列出了本实施例的相互作用蛋白,之后列出了 每一个蛋白的详细信息并讨论了这些相互作用的意义。图3提供了所 述相互作用的简图。SEQ ID NO:97-112和163-174提供了本实施例 蛋白的核酸和氨基酸序列。
一些已确定蛋白是先前未表征的水稻蛋白。基于它们推测的生物 学功能以及与诱饵蛋白OsPP2A-2或OsCAA90866特异性相互作用的 能力,推测与OsPP2A-2相互作用的蛋白代表了生物胁迫相关的水稻 防御反应网络而与OsCAA90866相互作用的蛋白代表了非生物胁迫 相关的水稻防御反应网络。重要的是,已确定的相互作用提示磷酸酶 在水稻的生物胁迫和非生物胁迫应激反应的调节中都扮演了一个角 色。
                          表11
确定的OsPP2A-2(丝氨酸/苏氨酸蛋白磷酸酶PP2A-2)相互作用蛋白
下表给出了用作诱饵和发现作捕获的蛋白克隆名称。蛋白名称项 下的括号中显示了本实施例蛋白(或相关蛋白)的核酸/蛋白序列登 录号。所述诱饵蛋白和捕获蛋白的相配序列(Coord)分别是搜索用的 诱饵蛋白片段或相互作用的捕获蛋白蛋白克隆编码的氨基酸。来源是 获得每个捕获克隆的文库。   基因名称  蛋白名称  (GENBANK_登录号)   诱饵   Coord   捕获蛋   白   Coord   (来源)                       诱饵蛋白   OsPP2A-2   PN20254   (AF134552-OS002763)   (SEQ ID NO:164)   水稻(O.sativa)丝氨   酸/苏氨酸蛋白磷酸酶   PP2A-2,催化亚单位   (AF134552,AAD22116)                                       相互作用蛋白   OsAAK63900   PN23266   (SEQ ID NO:166)   水稻(O.sativa)推定   的富含脯氨酸蛋白   AAK63900(AC084884)   1-308   122-224   (输入性   状)   OsORF020300-2233.2   PN21639   (2233(2)-OS-ORF02030   0novel   (SEQ ID NO:98)   假定蛋白   ORF020300-2233.2,推定   的PP2A调节亚单位,   与OsCAA90866相似   (AAD39930;5e-92)   (CAA90866;5e-53)   1-308   93-387   118-388   (输入性   状)   OsPN23268   PN23268 novel   (SEQ ID NO:100)   新蛋白23268,类似于邻   氨基苯甲酸磷酸核糖转   移酶,叶绿体前体,片段   (AAB02913.1;5e-95)   1-308   2×   12-200   (输入性   状)   OsCAA33838   PN24775   (SEQ ID NO:168)   水稻(O.sativa)谷蛋   白CAA33838   (X15833)   150-308   5-155   (输出性   状)   OsPN26645   (Contig3412.fasta.Conti   g1)(novel)   (SEQ ID NO:102)   新蛋白PN26645,推定   蛋白二硫化物异构酶相   关蛋白前体   (BAB09470.1;e-28)   1-308   24-164   (输入性   状)   OsPN24162   (Contig3453.fasta.Conti   g1)(novel)   (SEQ ID NO:104)   新蛋白PN24162,孔蛋   白样,电压依赖离子通道   蛋白(NP_201551;3e-86)  150-308   28-164   (输出性   状)   Os011994-D16   PN20618   (FL_R01_P028_D16OS   011994)(novel)   (SEQ ID NO:106)   假定蛋白011994-D16,   与玉米DnaJ蛋白相似   (T01643;e=0)  150-308   99-368   (输出性   状)
                            表12
          确定的与OsCAA90866(水稻冷诱导蛋白CAA90866)
                         相互作用蛋白
下表给出了用作诱饵和发现作捕获的蛋白克隆名称。蛋白名称项 下的括号中显示了本实施例蛋白(或相关蛋白)的核酸/蛋白序列登 录号。所述诱饵蛋白和捕获蛋白的相配序列(Coord)分别是搜索用的 诱饵蛋白片段或相互作用的捕获蛋白克隆编码的氨基酸。来源是获得 每个捕获蛋白克隆的文库。   基因名称   蛋白名称   (GENBANK_登录   号)   诱饵   Coord  捕获蛋白  Coord(来源)                                  诱饵蛋白   OsCAA90866   PN20311   (984756_OS015052)   (SEQ ID NO:170)   水稻(O.sativa)冷   诱导蛋白CAA90866   (Z54153,CAA90866)                                相互作用蛋白   OsCAA90866   PN20311   (SEQ ID NO:170)   水稻(O.sativa)冷   诱导蛋白CAA90866   (Z54153,CAA90866)   100-250   1-126   (输出性状)   Os008938-3209   PN20215   (3209-OS208938)   (SEQ ID NO:172)   水稻(O.sativa)推   定的14-3-3蛋白   (AAK38492)   100-250   4×53-259   (输入性状)   OsAAG46136   PN23186   (SEQ ID NO:174)   水稻(O.sativa)推   定的吡咯烷酮羧基肽   酶   (AAG46136)   100-250   2×92-222   (输入性状)   OsORF020300-223   PN21639   (SEQ ID NO:98)   假定蛋白   ORF020300-2233.2,   推定的PP2A调节亚   单位,与   OsCAA90866相似   (AAD39930;5e-92)   (CAA90866,5e-53)   100-250   3×1-206   3×1-190   (输出性状)   OsPN23045   (SEQ ID NO:108)   新蛋白PN23045   100-250   2×240-287   (输入性状)   OsPN23225   (SEQ ID NO:110)   新蛋白PN23225,   与小麦(Tritticum   aestivum)启动因子   (iso)4f p82亚单位相   似(AAA74724;e=0)   100-250   639-792   (输入性状)   OsPN29883   (SEQ ID NO:112)  新蛋白PN29883,  片段  100-250   58-175   (输出性状)
使用OsPP2A作为诱饵蛋白的双杂交系统
发现编码水稻(O.sativa)丝氨酸/苏氨酸蛋白质磷酸酶PP2A-2 催化亚单位第1-308位氨基酸(OsPP2A-2)的诱饵片段与水稻(O. sativa)(水稻)推定的可能是转录调节子的富含脯氨酸蛋白相互作用。 所述诱饵片段(即OsPP2A-2的第1-308位氨基酸)包含OsPP2A-2的丝 氨酸/苏氨酸蛋白质磷酸酶标志。从输入性状文库中检索到的捕获蛋 白克隆编码OsAAK63900第122-224位氨基酸。令人有些惊讶的是, 该捕获蛋白未编码OsAAK63900的HLH域。
水稻(O.sativa)推定的富含脯氨酸蛋白AAK63900(OsAAK63900) (GENBANK_登录号AC084884)是一包含一推定的跨膜域(第7-23 位氨基酸)的224个氨基酸的蛋白。它也包含与细菌的一群DNA结 合转录调节蛋白共有的gntR家族标记(第10-34位氨基酸)(见Buck 和Guest,Biochem.J.260:737-747,1989;Haydon和Guest,FEMS Microbiol.Lett.79:291-296,1991;和Reizer等,Mol.Microbiol.5: 1081-1089,1991.)。该标志包含一个通常存在于转录因子的螺旋环 螺旋(HLH)蛋白二聚化域(第5-20位氨基酸)(见Murre等,Cell 56: 777-783,1989;Garrel和Campuzano,BioEssays 13:493-498,1991, Kato和Dang,FASEB J.6:3065-3072,1992;Krause等,Cell 63: 907-919,1990;和Riechmann等,Nucl.Acids Res.22:749-755, 1994)。但是没有发现DNA结合基序。
OsAAK63900的氨基酸序列分析发现一个包含参与二硫键的6个 保守半胱氨酸的Ole eI家族标记(第30-162位氨基酸)。该标志是可 在一群能被分泌并由大约145个氨基酸组成的(较OsAAK63900短) 未知功能植物花粉蛋白中发现的保守区段。发现的第一个Ole eI蛋 白家族蛋白是油橄榄树(Olea europaea)花粉中的一种结构蛋白也是 一种主要变应原的Ole e I(IUIS命名)(Villalba等,Eur.J.Biochem. 216(3):863-869,1993)。
也发现编码OsPP2A-2第1-308位氨基酸的诱饵片段(包含 OsPP2A-2的丝氨酸/苏氨酸蛋白质磷酸酶标志)与一个新的含有一推 定PP2A调节亚单位并与OsCAA90866相似的418个氨基酸的水稻(O. sativa)OsORF020300-2233.2相互作用。从输入性状文库检索到编码 ORF020300-233第93-387和118-388位氨基酸的两个捕获蛋白克隆表 明OsORF020300-223通过第118-387位氨基酸之间的区域与 OsPP2A-2相互作用。虽然OsORF020300-223没有N末端信号肽,但 是包含第50-51位氨基酸之间的一可能的切割位点。 OsORF020300-223与拟南芥PP2A调节亚单位相似(GENBANK_登 录号AAD39930.1;44.5%氨基酸序列相同性;5e-91期望值)。 OsORF020300-223也与同水稻耐冻性相关并且与OsORF020300-223 相互作用的水稻冷诱导蛋白CAA90866相似(GENBANK_登录号 CAA90866,68%序列相同性性;9e-48期望值)。CAA90866也用作诱 饵蛋白以及使用它确定的相互作用在本实施例的下文中讨论。
BLAST分析将OsORF020300-223的核苷酸序列与TMRI’s GENECHIP_水稻基因组阵列序列数据库 (http://tmri.org/gene_exp_web/)比较确定探针OS015607_at(e-135期望 值)是最接近的配对序列。基因表达实验表明该基因被真菌病原体稻 瘟病菌诱导。
也发现编码OsPP2A-2第1-308位氨基酸的诱饵片段(包含 OsPP2A-2的丝氨酸/苏氨酸蛋白质磷酸酶标志)与可能参与植物对病 原体感染的防御反应并同邻氨基苯甲酸磷酸核糖转移酶相似的新蛋 白(23268)相互作用。命名为OsPN23268的新蛋白与邻氨基苯甲酸 磷酸核糖转移酶叶绿体前体相似。从输入性状文库检索到编码新蛋白 OsPN23268第12-200位氨基酸的两个捕获蛋白克隆。
OsPN23268是一虽然看起来不含有N-末端肽序列但是包含第 43-44位氨基酸之间的一可能切割位点的320个氨基酸的新蛋白。 Os23268蛋白序列分析发现了两个最初从大肠杆菌胸苷磷酸化酶确 定的结构域(Walter等,J.Biol.Chem.265(23):14016-22,1990):糖基 转移酶家族的螺旋束域(第1-61位氨基酸),糖基转移酶家族的a/b 域(第66-303位氨基酸)。后者包含一个通过伸展调节推定的磷酸盐 结合位点的β折叠片(Walter等,J.Biol.Chem.265(23):14016-14022, 1990)。从输入性状文库检索到编码OsPN23268的两个捕获蛋白克隆 并发现它们与包含编码新蛋白OsPN23268第12-200位氨基酸序列的 OsPP2A-2相互作用。OsPN23268的序列包含糖基转移酶家族的螺旋 束域和部分a/b域。
糖基转移酶家族包括胸苷磷酸化酶和邻氨基苯甲酸磷酸核糖基 转移酶。在哺乳动物细胞,邻氨基苯甲酸磷酸核糖基转移酶与血管原 性因子血小板衍生的内皮细胞生长因子相同(Morita等,Curr.Pharm. Biotechnol.2(3):257-267,2001;Browns和Bicknell,Biochem.J. 334(Pt 1):1-8,1998)并通过将化学治疗药卡培他滨转化为活性形式而 控制疗效(Ack1和和Peters,Drug Resist.Updat.2(4):205-214,1999)。 如名称所示,新蛋白23268与参与也存在于细菌中的色氨酸生物合成 途径的拟南芥邻氨基苯甲酸磷酸核糖基转移酶相似(GENBANK_ 登录号AAB02913.1;56.6%相同性;5e-95)(Edwards等,J.Mol.Biol. 203(2):523-524,1988)。在拟南芥,该色氨酸生物合成酶首先以高分 子量前体的形式合成,然后进入叶绿体转化为成熟型(Zhao和Last,J. Biol.Chem.270(11):6081-6087,1995)。拟南芥邻氨基苯甲酸磷酸核糖 基转移酶也与从苋色藜(有广谱抗病毒活性的植物)确定的烟草花叶 病毒和烟草脆裂病毒感染植物的过敏反应诱导的基因之一DESCA11 (GENBANK_登录号BI534445;e-17)相似(Cooper,B.,Plant J.26(3): 339-349,2001)。
BLAST分析将OsPN23268的核苷酸序列与TMRI’s GENECHIP_ 水稻基因组阵列序列数据库比较确定探针OS015603_s_at(3e-41期 望值)是最接近的配对序列。我们的基因表达实验表明该基因被真菌 病原体稻瘟病菌诱导。
也发现包含OsPP2A-2第150-308位氨基酸的诱饵片段与种子储 存蛋白谷蛋白CAA33838(OsCAA33838)相互作用。谷蛋白CAA33838 是水稻种子主要的储存蛋白。Wen等(Nucleic Acids Res.17(22):9490, 1989)确定了它的cDNA序列并且开花后5-7天该蛋白在水稻的胚乳 中蓄积(Udaka等,J.Nutr.Sci.Vitaminol.(Tokyo)46(2):84-90,2000)。 从输出性状文库检索到编码OsCAA33838第5-155位氨基酸的一个捕 获蛋白克隆。氨基酸序列分析确定OsCAA33838(GENBANK_登录 号X15833)是一包含一个可切割信号肽(第1-24位氨基酸)的499 个氨基酸的蛋白。该分析确定了一个11S植物种子储存蛋白区域(第 1-469位氨基酸;1e-243)。11S植物种子储存蛋白可能是具有六聚体结 构的糖基化蛋白。它们由通过二硫键连接的两条肽链组成并且由于存 在两个β-折叠桶是cupin超家族成员。所述分析也发现了这一结构 域,但是将其定位于一狭小区域(第302-324位氨基酸)。另外,确 定了一个也可是在cumin超家族成员中发现7S种子储存蛋白C-末端 区域(第319-478位氨基酸,602e-04)。确定的N-糖基化位点与 OsCAA33838是一个糖基化蛋白的证据相一致(第491-494位氨基 酸)。
BLAST分析将OsCAA33838的核苷酸序列与TMRI’s GENECHIP_水稻基因组阵列序列数据库比较确定探针OS000688.1 at(e=0期望值)是最接近的配对序列。基因表达实验表明该基因在几 种不同的植物组织类型中没有特异性表达,而且不能被各种应激、除 草剂和施用的激素诱导。
也发现OsPP2A-2的诱饵片段与新蛋白推定的二硫化物异构酶相 关蛋白前体PN26645相互作用(也称为OsPN26645)。本搜索使用的 诱饵片段编码包含OsPP2A-2的丝氨酸/苏氨酸蛋白质磷酸酶标志的 OsPP2A-2第1-308位氨基酸。从输入性状文库检索到编码OsPN26645 第24-164位氨基酸的一个捕获蛋白克隆。氨基酸序列分析确定 OsPN26645是一包含一个可切割信号肽(第1-17位氨基酸)和一个 预测跨膜域(第210-226位氨基酸)的311个氨基酸的蛋白。与Genpept 数据库进行比对的BLAST分析揭示OsPN26645的氨基酸序列与同大 鼠推定二硫化物异构酶相关蛋白前体(GENBANK_登录号: gi5668777,46%相同性,1e-63)相似的拟南芥蛋白(GENBANK_登录 号BAB09470.1;32.8%相同性;e-28)相似。如名称所示,二硫化物异构 酶催化二硫键的形成。因此,该酶对于正常的蛋白折叠是重要的。哺 乳动物内质网内腔的二硫化物异构酶催化分泌蛋白和细胞表面蛋白 形成二硫键而微粒体该酶缺陷将不能引导二硫键的共翻译(Bulledi 和Freedman,Nature 335(6191):649-651,1988)。虽然植物中该酶的活 性尚未表征,但可能发挥相似的功能。
BLAST分析将OsPN26645的核苷酸序列与TMRI’s GENECHIP_ 水稻基因组阵列序列数据库比较确定探针OS002485.1_at(e-105期望 值)是最接近的配对序列。基因表达实验表明该基因在几种不同的植 物组织类型中没有特异性表达,而且不能被各种应激、除草剂和施用 的激素诱导。
也发现OsPP2A-2的诱饵片段与新蛋白孔蛋白样的电压依赖离子 通道蛋白PN24162(OsPN24162)相互作用。本搜索使用的诱饵片段编 码OsPP2A-2的第150-308位氨基酸。从输出性状文库检索到编码 OsPN24162第28-164位氨基酸的一个捕获蛋白克隆。氨基酸序列的 BLAST分析表明OsPN24162与拟南芥孔蛋白样蛋白(GENBANK_ 登录号NP_201551;53%相同性;3e-86)最匹配。OsPN24162也与属于 水稻基因组较小的一个多基因家族的cDNA序列编码的274个氨基酸 的水稻线粒体电压依赖阴离子通道蛋白(GENBANK_登录号 Y18104;44%相同性;2e-61)相似(Roosens等,Biochim.Biophys.Acta 1463(2):470-476,2000)。该基因的表达受小植株成熟和器官的功能性 调节,而对渗透性应激不敏感(Roosens等,同上)。根据在革兰阴性 菌外膜上形成孔道的蛋白类推,线粒体电压依赖离子通道蛋白也称为 线粒体孔蛋白。
BLAST分析将OsPN24162的核苷酸序列与TMRI’s GENECHIP_ 水稻基因组阵列序列数据库比较确定探针OS007036.1_at(e-65期望 值)是最接近的配对序列。基因表达实验表明该基因在几种不同的植 物组织类型中没有特异性表达,而且不能被各种应激、除草剂和施用 的激素诱导。
也发现OsPP2A-2的诱饵片段与在病原体诱导的防御反应中具有推定 功能的DnaJ蛋白相互作用。本搜索使用的诱饵片段编码OsPP2A-2 的第150-308位氨基酸。从输出性状文库检索到编码Os011994-D16 第99-368位氨基酸的一个捕获蛋白克隆。所述新蛋白被命名为 011994-D16,又因为从水稻中确定,所以也称为Os011994-D16。
氨基酸序列的BLAST分析确定Os011994-D16与玉米(Zea mays) DnaJ蛋白同系物ZMDJ1(GENBANK_登录号T01643;84%相同性; e=0)相似。真核细胞的DnaJ样蛋白通过与不同的Hsp70和DnaJ样蛋 白对的直接相互作用调节热休克蛋白Hsp70的侣伴蛋白功能(Cyr等, Trends Biochem.Sci.19(4):176-181,1994)。热休克蛋白(在Bierkens, J.G.,Toxicology 153(1-3):61-72,2000中所述)是作为细胞内侣伴蛋白 促进蛋白折叠和装配并在对热和化学物质等许多刺激作出反应的植 物细胞中选择性表达的应激蛋白。作为热休克蛋白的调节蛋白,DnaJ 样蛋白因此参与植物保护性应激反应。
BLAST分析将Os011994-D16的核苷酸序列与TMRI’s GENECHIP_水稻基因组阵列序列数据库比较确定探针 OS009139.1_at(e=0期望值)是最接近的配对序列。基因表达实验表 明该基因可以被植物激素茉莉酸诱导表达。
使用水稻冷诱导蛋白CAA90866(OsCAA90866)作为诱饵蛋白的 双杂交系统
诱饵蛋白即水稻(O.sativa)冷诱导蛋白CAA90866(OsCAA90866) 是由水稻耐冻性相关的全长cDNA序列编码的一379个氨基酸的蛋 白。BLAST分析表明OsCAA90866与拟南芥PP2A的类似于可以与 诱饵蛋白PP2A-2相互作用的OsORF020300-223(见实施例III)的同 一调节亚单位(GENBANK_登录号AAD39930;35%相同性;e-57期 望值)相似。BLAST分析将冷诱导蛋白的核苷酸序列与TMRI’s GENECHIP_水稻基因组阵列序列数据库比较确定探针OS015052at (4e-78期望值)是最接近的配对序列。基因表达实验表明所述基因被冷 应激诱导表达。
如表32描述,发现编码水稻(O.sativa)冷诱导蛋白CAA90866 (OsCAA90866)的第100-250位氨基酸的诱饵克隆与从输出性状文库 检索到的编码同一蛋白第1-126位氨基酸的捕获蛋白克隆相互作用。
另外,也发现编码水稻(O.sativa)冷诱导蛋白CAA90866 (OsCAA90866)的第100-250位氨基酸的诱饵克隆与Os008938-3209 相互作用。由输入性状文库检索到编码Os008938-3209的第53-259 位氨基酸的4个捕获蛋白克隆。Os008938-3209是包含一个14-3-3蛋 白标志1(第48-60位氨基酸)和一个14-3-3蛋白标志2(第220-260 位氨基酸)的一260个氨基酸的蛋白,提示Os008938-3209是14-3-3 家族成员。Os008938-3209氨基酸序列的BLAST分析表明该蛋白与 水稻推定的14-3-3蛋白(GENBANK_登录号AAK38492,8e-145)有 100%的相同性。14-3-3蛋白与细胞信号、细胞周期调节和凋亡的调 节子相互作用。认为它们作为细胞支架或侣伴蛋白并通过调节与之相 互作用的蛋白的核输入/核输出调节这些蛋白的细胞质及细胞核定位 (Zilliacus等,Mol.Endocrinol.15(4):501-511,2001;reviewed by Muslin等,Cell Signal 12(11-12):703-709,2000)。既然14-3-3参与细 胞核(Imhof和Wolffe,Biochemistry 38(40):13085-13093,1999; Zilliacus等,同上)、细胞质(De Lille等,Plant Physiol.126(1):35-38, 2001)、线粒体(De Lille等,同上)和叶绿体(Sehnke等,Plant Physiol. 122(1):235-242,2000)蛋白复合体的形成,那么确定Os008938-3209 的细胞内定位需要更多的信息。所述捕获蛋白的细胞定位将有助于解 释它与冷诱导蛋白CAA90866相互作用的意义。
BLAST分析将Os008938-3209蛋白的核苷酸序列与TMRI’s GENECHIP_水稻基因组阵列序列数据库比较确定OS008938_s_at (e-61期望值)是最接近的配对序列。基因表达实验表明该基因被水杨 酸、ABA、BAP、BL2、和2,4D以及冷应激和干旱条件下诱导表达。
另外,发现编码水稻(O.sativa)冷诱导蛋白CAA90866 (OsCAA90866)的第100-250位氨基酸的诱饵克隆与水稻(O.sativa) 吡咯烷酮羧基肽酶OsAAG46136相互作用。从输入性状文库检索到 编码OsAAG46136的第92-222位氨基酸的2个捕获蛋白克隆。这些 克隆包括OsAAG46136的焦谷氨酰(基)肽酶I基序。
OsAAG46136是一包含一个焦谷氨酰肽酶I基序(第11-221位氨 基酸)的222个氨基酸的蛋白。该基序存在于肽类激素(包括促甲状 腺激素释放激素和促黄体激素释放激素)N末端区域并提供所述蛋白 对蛋白酶的抵抗(Odagaki等,Structure Fold Des.7(4):399-411,1999)。 BLAST分析显示OsAAG46136与水稻吡咯烷酮羧基肽酶 (GENBANK_登录号AAG46136;4e-126)有100%的氨基酸序列相同 性性。OsAAG46136也与拟南芥的两个未见文献描述的未知蛋白 (GENBANK_登录号NP_176063,8e-080和AAK25976.1,e-076)相似。 OsAAG46136与吡咯烷酮羧基肽酶的相似性提示了这一未充分确定 的水稻蛋白的功能。吡咯烷酮羧基肽酶(Pcps)催化蛋白N末端焦谷氨 基脱落。所述过程存在于许多物种(reviewed by Awade等,Proteins 20(1):34-51,1994)并是细菌鉴别的有用工具(许多文献描述了该蛋白 细菌同系物)。萤光假单胞菌Pcps的活性位点已表征并且该位点的性 质(Cys-144和His-166是活性必需的)提示它代表了巯基氨基肽酶的 一个新类别(Le Saux等,J.Bacteriol.178(11):3308-3313,1996)。该蛋 白家族的肽酶是加工处理和活化重要活性肽包括与阿耳茨海默氏病 有重要关联的淀粉样蛋白前体(APP)所必需的(Lefterov等,FASEB J. 14(12):1837-1847,2000)。此外,该酶催化糖肽抗癌药博来霉素脱氨 基失活(Schwartz等,Proc.Natl.Acad.Sci.USA 96(8):4680-4685, 1999)。
BLAST分析将OsAAG46136的核苷酸序列与TMRI’s GENECHIP_水稻基因组阵列序列数据库比较确定OS013894_s_at (e-8期望值)是最接近的配对序列。对于这个探针该期望值太低不能作 为OsAAG46136基因表达的可靠指示。
也发现编码水稻(O.sativa)冷诱导蛋白CAA90866(OsCAA90866) 第100-250位氨基酸的诱饵克隆与包含一个推定的PP2A调节亚单位 并与OsCAA90866相似(见实践例III)的ORF020300-2233.2 (OsORF020300-223)相互作用。从输出性状文库检索到编码 OsORF020300-223第1-206位氨基酸的3个捕获蛋白克隆和第1-190 位氨基酸的3个捕获蛋白克隆。
另外,发现编码水稻(O.sativa)冷诱导蛋白CAA90866 (OsCAA90866)的第100-250位氨基酸的诱饵克隆与蛋白PN23045 (OsPN23045)相互作用。从输入性状文库检索到编码OsPN23045第 240-287位氨基酸的2个捕获蛋白克隆。
OsPN23045是一包含一个肌醇P结构域(第233-272位氨基酸) 的287个氨基酸的蛋白。所述结构域从参与信号转导的牛磷酸肌醇1 磷酸酶确定(见York等,Biochemistry 33(45):13164-13171,1994)。 Mikami等显示水应激和脱落酸(ABA)可以诱导拟南芥4磷脂酰肌 醇5磷酸激酶(AtPIP5K11),提示了磷酸肌醇信号级联放大与植物的 水应激反应之间的联系(Mikami等,Plant J.15(4):563-568,1998)。 Xiong等报告拟南芥编码磷酸肌醇1磷酸酶的基因突变体FRY1是植 物ABA和应激信号的负调节蛋白(Xiong等,Genes Dev.15(15): 1971-1984,2001),提供了磷酸肌醇介导植物ABA和应激信号转导的 证据。
BLAST分析将OsPN23045的核苷酸序列与TMRI’s GENECHIP_ 水稻基因组阵列序列数据库比较确定OS006742.1at(e=0期望值) 是最接近的配对序列。基因表达实验表明该基因在植物的叶和茎中特 异表达。
也发现编码水稻(O.sativa)冷诱导蛋白CAA90866(OsCAA90866) 第100-250位氨基酸的诱饵克隆与同小麦(Tritticum aestivum)启动 因子(iso)4fp82亚单位(p82)相似的(GENBANK_登录号AAA74724; 69.6%氨基酸序列相同性;e=0)一792个氨基酸的新蛋白PN23225 相互作用。从输入性状文库检索到编码OsPN23225第639-792位氨 基酸的1个捕获蛋白克隆。该小麦蛋白包含ATP结合、金属结合和 磷酸化的可能基序(Allen等,J.Biol.Chem.267(32):23232-23236, 1992)。OsPN23225包含一个根据真核起始因子中间区域命名的 MIF4G区域(第207-434位氨基酸)和一个也存在于真核起始因子 (eIF)的MA3区域(第627-739位氨基酸)(Ponting,C.P.,Trends Biochem.Sci.25(9):423-426,2000)。在参与mRNA延迟途径的分子 中发现所述区域。虽然诱饵冷诱导蛋白CAA90866的功能尚不确定, 但是它看起来是一个核蛋白并且它与eIF样蛋白OsPN23225的相互 作用支持了CAA90866参与水稻转录机制的观点。捕获蛋白 OsPN23225的表征可能代表了一种新的水稻eIF的发现。
BLAST分析将新蛋白OsPN23225的核苷酸序列与TMRI’s GENECHIP_水稻基因组阵列序列数据库比较确定OS003249_at(e-17 期望值)是最接近的配对序列。对于这个探针该期望值太低不能作为 OsPN23225基因表达的可靠指示。
也发现编码水稻(O.sativa)冷诱导蛋白CAA90866(OsCAA90866) 第100-250位氨基酸的诱饵克隆与同拟南芥推定的2-脱氢-3-脱氧二 氧磷基八醛缩酶(GENBANK_登录号NP_178068;3e-142期望值)和 豌豆(Pisum sativum)2-脱氢-3-脱氧二氧磷基八醛缩酶(Kdo8P合酶) (GENBANK_登录号O50044;3e-142期望值)相似的一340个氨基酸的 片段OsPN29883相互作用。从输出性状文库检索到编码OsPN29883 第58-175位氨基酸的1个捕获蛋白克隆。与肠杆菌Kdo8P合酶有高 度的结构和功能类似性的豌豆Kdo8P合酶催化植物细胞壁脂多糖组 分Kdo-8-P的生物合成(Brabetz等,Planta 212(1):136-143,2000)。
概述
确定的诱饵蛋白OsPP2A-2的相互作用蛋白(即,与OsPP2A-2 结合的蛋白)组成了据推测与植物对病原体的防御反应有关的网络。 在确定的与OsPP2A-2相互作用的5个新蛋白中,Os23268与拟南芥 催化色氨酸生物合成的邻氨基苯甲酸磷酸核糖转移酶相似。该酶是同 参与抗病毒感染的DESCA11基因相似的基因编码(Cooper,B.,Plant J. 26(3):339-49,2001)。虽然色氨酸在疾病抵抗中的角色未知,但是色 氨酸可以用于植物激素和信号分子3吲哚乙酸的生物合成。因此,色 氨酸在植物基因表达的调节中有作用。此外,Os23268的糖基转移酶 功能与疾病抵抗信号途径或植保菌素细胞分布相关。植保菌素是由植 物感染或应激导致蓄积并且蓄积的快慢与植物对真菌和细菌的抗病 性有关的一种低分子量抗菌复合物。总而言之,这些数据提示邻氨基 苯甲酸磷酸核糖转移酶在植物应对病原体感染的反应中具有作用。此 外,基因表达实验证实该基因被真菌病原体稻瘟病菌诱导表达。因此, 相信邻氨基苯甲酸磷酸核糖转移酶样新蛋白Os23268参与介导水稻 生物胁迫反应的信号和调控途径。
与DnaJ蛋白相似的新蛋白Os011994-D16是另一个可能参与病原 体诱导的防御反应的OsPP2A-2相互作用蛋白。已知DnaJ样蛋白是 热休克蛋白的调节蛋白,因此是植物保护性应激反应的一部分。基因 表达实验支持了这种观点,显示编码本实施例DnaJ样蛋白的基因表 达被植物病原体诱导特异性防御反应信号网络的组分茉莉酸抑制。 (在Nurnberger和Scheel,Trends Plant Sci.6(8):372-379,2001中所 述)。
OsPP2A-2也被发现与同拟南芥PP2A调节亚单位和水稻冷诱导 蛋白CAA90866(OsCAA90866)(本实践例使用的第二个诱饵蛋白) 相似的新蛋白OsORF020300-2233.2相互作用。OsORF020300-223与 PP2A调节亚单位的相似性确证了它与PP2A-2催化亚单位的相互作 用,该相互作用与PP2A酶的亚单位组成相一致(Awotunde等, Biochim Biophys Acta 1480(1-2):65-76,2000)。 OsORF020300-223-OsPP2A-2的相互作用提示OsORF020300-223参 与涉及OsPP2A-2酶活性的信号事件并且OsORF020300-223与水稻 冷诱导蛋白OsCAA90866的相似性说明耐冻性影响所述信号事件其 中之一。
OsPP2A-2也被发现与水稻推定的富含脯氨酸蛋白OsAAK63900 相互作用。虽然它不含已知的DNA结合基序,但是已表明 OsAAK63900可以作为转录调节子发挥作用。它具有与转录因子共有 的尽管仅仅介导蛋白二聚体化反应的HLH域。它还有一个与细菌 DNA结合转录调节子共有的尽管功能未知的gntR家族标记。尽管缺 乏有关Ole eI功能的数据难以评论所述可能性,但是Ole eI的存在 提示OsPP2-2能够使OsAAK69300脱磷酸由此调节它作为花粉蛋白 的功能。也有植物(Vazquez-Tello等,Mol.Gen.Genet.257(2):157-166, 1998)和哺乳动物(Wadzinski等,Mol.Cell Biol.13(5):2822-2834, 1993)细胞PP2A蛋白调节转录因子的DNA结合活性的证据。因此, OsPP2A-2-OsAAK63900的相互作用最可能发生在细胞核并参与水稻 转录事件的调节。
发现与OsPP2A-2相互作用的其他蛋白包括在蛋白折叠中具有推 定功能的二硫化物异构酶(新蛋白OsPN26645),电压依赖离子通道 蛋白(新蛋白OsPN24162)和种子储存蛋白谷蛋白(OsCAA33838)。 这些相互作用的生物学意义尚不清楚。谷蛋白的氨基酸序列分析确定 了许多蛋白激酶C和酪蛋白激酶II磷酸化位点。谷蛋白的磷酸化状 态可能决定它的功能和稳定性并且与OsPP2A-2的相互作用可能发生 在谷蛋白脱磷酸过程中。或者,这种相互作用导致OsPP2A-2的定位 并因此影响OsPP2A-2依赖性脱磷酸作用的下游事件。倘若在植物种 子储存蛋白的两条肽链间存在二硫键,那么令人感兴趣的是, OsPP2A-2也与推定蛋白二硫化物异构酶(OsPN26645)相互作用。 OsPP2A-2与其他酶的相互作用可能产生一种共翻译修饰复合体。其 他的酵母双杂交数据也阐明了这些相互作用的目的。但是,倘若PP2A 其他蛋白的关联涉及生物胁迫反应,那么上述关联也可能涉及生物胁 迫反应。
发现寒冷诱导蛋白CAA90866与其本身以及其他6个蛋白相互作 用。据推测这些蛋白是与水稻冷应激反应有关的蛋白网络的组分。确 证编码冷诱导蛋白的基因被寒冷诱导表达的基因表达实验支持了该 假设。推定的14-3-3蛋白Os008938-3209是相互作用蛋白之一。诱饵 蛋白OsCAA90866与耐冻性的关系提示它与Os008938-3209的相互 作用与植物的耐寒性有关。基因表达实验显示该蛋白可以被各种应激 因素诱导。它的激活作用可能允许它与许多应激蛋白相互作用。倘若 14-3-3蛋白的功能是作为分子侣伴,那么Os008938-3209就能作为相 互作用的粘着分子维持细胞膜蛋白复合体的稳定性或者能协调与应 激有关的基因转录因子的相互作用。Os008938-3209的亚细胞定位能 进一步阐明它与OsCAA90866相互作用的意义。
另一个与OsCAA90866相互作用的蛋白是吡咯烷酮羧基肽酶样 蛋白(OsAAG46136)。OsAAG46136推定的吡咯烷酮羧基肽酶的功能 提示它参与底物蛋白的加工和/或活化并且这些蛋白对于植物的抗冻 反应具有重要作用。肽酶的活性与信号调节有关。例如,羧肽酶水解 掉肽类激素的焦谷氨基,从而活化这类信号分子。羧肽酶通过蛋白水 解过程调节拟南芥油菜素类固醇非敏感型突变体1(BRI1)信号(Li等, Proc.Natl.Acad.Sci.USA 98(10):5916-5921,2001)。根据它与冷诱导 蛋白相互作用的能力和后者在耐冻性中的功能,推测羧肽酶样蛋白 OsAAG46136可能在植物冷应激反应相关的信号分子/肽类激素的活 化中发挥作用。
OsCAA90866与具有推定的磷酸肌醇功能的蛋白OsPN23045和 小麦起始因子(iso)4f p82亚单位水稻同系物OsPN23225的相互作用 提供了对诱饵蛋白功能的进一步洞察。已知植物磷酸肌醇介导ABA 和应激信号转导(Mikami等,Plant J.15(4):563-568,1998;Xiong等, Genes Dev.15(15):1971-1984,2001)。推定的肌醇磷酸酶OsPN23045 蛋白以相似的方式发挥作用并且它与冷诱导蛋白的相互作用与耐寒 性相关信号事件的调节有关。捕获蛋白OsPN23225可能代表一种新 的水稻eIF。eIF蛋白在RNA转录后加工途径中具有作用(Ponting C.P., Trends Biochem.Sci.25(9):423-426,2000)并且应激是与许多RNA转 录有关的典型事件。基于这些信息和CAA90866与耐冻性的关系,推 测OsCA90866-PN23225的相互作用调控冷应激相关的转录事件。
最后,OsCAA90866与与诱饵蛋白OsPP2A-2相互作用的推定的 同一PP2A调节亚单位蛋白OsORF020300-223相互作用并与之相似。 所述相互作用提供了本实践例的两个网络之间的联系并提示 OsPP2A-2既参与生物胁迫也参与非生物胁迫反应途径(见附件1简 图)。基于观察到的相互作用和这种相互作用涉及的蛋白的序列相似 性,看起来OsPP2A-2对生物胁迫和非生物胁迫反应途径都具有调 节作用。因此,虽然这两种途径是独立的,但是猜测它们通过蛋白磷 酸酶相联系并且这些酶可能通过使这两种途径中的蛋白脱磷酸从而 介导植物应激反应。在这种背景下,观察到的OsCAA90866的自身 相互作用可能参与多组分磷酸酶复合体的形成。此外,OsCA90866 与醛缩酶样蛋白OsPN29883的相互作用提示该醛缩酶通过脱磷酸活 化/失活并且该新蛋白参与基于冷诱导蛋白其他相互作用和基因表达 模式的应激反应。
此外,拟南芥蛋白磷酸酶2A调节A亚单位(PP2A-A) (OsORF020300-223)已被提示参与拟南芥中生长素转运的调节 (Garbers等,EMBO J.15(9):2115-2124,1996)。植物激素生长素调控 过程,例如细胞延长、根毛发育和根的分支。由于OsORF020300-223 也与寒冷诱导蛋白CAA90866相似,并与之相互作用,因此 OsORF020300-223也可能参与植物激素的转运。
参考文献
下面所列出的参比文献以及说明书中所引用的全部参考文献都 通过引用并入本发明,以便它们补充、解释、提供背景技术或者教导 本文所用的方法学、技术和/或组合物。
Aasland et al.(1995)Trends Biochem.Sci.20:56-59.
Abdel-Ghany et al.(2000)DNA Cell Biol.19:567-578.
Abler et al.(1993)Plant Mol.Biol.22:1031-1038.
Ach & Gruissem(1997)Proc.Natl.Acad.Sci.USA 91:5863-5867.
Ackland & Peters,(1999)Drug Resist.Update 2:205-214.
Agrawal S(ed.)(1993) Methods in Molecular Biology,volume 20,
Humana Press,Totowa,New Jersey,United States of America.
Agueli et al.(2001)Biochem.J.360:413-419.
Aihara et al.(2000)J.Neurochem.74:2622-2625.
Ajuh et al.(2001)J.Biol.Chem.276:42370-42381.
Allen et al.(1992)J.Biol.Chem.267:23232-23236.
Allison et al.(1986)Virology 154:9-20.
Altschul et al.(1990)J.Mol.Biol.215:403.
Altschul et al.(1997)Nucl.Acids Res.25:3389.
An et al.(1985)EMBO J.4:277.
Antoku et al.(2001)Biochem.Biophys.Res.Commun.286:1003-1010.
Aoyama & Chua(1997)Plant J 11:605-612.
Apte et al.(1995)FEBS Lett.363:304-306.
Arino et al.(1993)Plant Mol.Biol.21:475-485.
Arioli et al.(1998)Science 279:717-720.
Auch & Reth(1990)Nucl.Acids Res.18:6743.
Austin et al.(2002)Science 295:2077-2080.
Ausubel et al.(1988) Current Protocols in Molecular Biology,John Wiley & Sons,New York,New York,United States of America.
Awade et al.(1994)Proteins 20:34-51.
Awotunde et al.(2000)Biochim Biophys Acta 1480:65-76.
Azevedo et al.(2002)Science 295:2073-2076.
Aznar & Lacal(2001)Prog.Nucleic Acid Res.Mol.Biol.67:193-234.
Baluska et al.(2001)Plant Physiol.126:39-46.
Bartel & Fields(eds.),(1997) The Yeast Two-Hybrid System,Oxford Press.
Bartlett et al.(1982)in  Methods in Chloroplast Molecular Biology, (Edelman et al.,eds.)Elsevier Biomedical Press,New York,New
York,United States of America,pp.1081-1091.
Baskin et al.(1992)Aust.J.Plant Physiol.19:427-437.
Batzer et al.(1991)Nucleic Acid Res.19:5081.
Baunsgaard et al.(1998)Plant J.13:661.
Beerli et al.(1998)Proc Natl Acad Sci USA 95:14628-14633.
Bergeron et al.(1994)Trends Biochem.Sci.19:124-128.
Bertolaet et al.(2001)Nat.Struct.Biol.8:417-422.
Bevan(1984)Nucl.Acids Res.12:8711.
Bevan et al.(1983)Nature 304:184-187.
Bezzi et al.(2001)Nat.Neurosci.4:702-710.
Biedenkapp et al.(1988)Nature 335:835-837.
Bierkens et al.(2000)Toxicology 153:61-72.
Bihn et al.(1997)Plant J.12:1439-1445.
Binet et al.(1991)Plant Mol Biol 17:395-407.
Bischoff et al.(1994)Proc.Natl.Acad.Sci.USA 91:2587-2591.
Bisikirska et al.(1997)Z.Naturforsch 52:180-186.
Blochinger & Diggelmann(1984)Mol Cell Biol 4:2929-2931.
Bolhuis et al.(1998)J.Biol.Chem.273:21217-21224.
Borisjuk et al.(1998)Planta 206:504-14.
Bornemann et al.(1996)Biochemistry 35:9907-9916.
Bourouis & Jarry(1983)EMBO J 2:1099-1104.
Brabetz et al.(2000)Planta 212:136-143.
Bradwell et al.(1994)Genes Dev.8:1664-1677.
Braun(2001)Plant Physiol.125:1611-1619.
Briknarova et al.(2001)Nat.Struct.Biol.8:349-352.
Browns & Bicknell(1998)Biochem.J.334:1-8.
Bruggemann et al.(1996)Plant J 10:755-760.
Brummelkamp et al.(2002)Science 296:550-3.
Brunner et al.(1998)Plant J.14:225-34.
Buchanan et al.(eds.),(2002) Biochemistryand Molecular Biology of Plants,John Wiley & Sons,New York,New York,United States of America.
Buck & Guest(1989)Biochem.J.260:737-747.
Bulledi & Freedman(1988)Nature 335:649-651.
Burglin et al.(1997)Nucl.Acids Res.25:4173-4180.
Bursch(2001)Cell Death Differ.8:569-81.
Busch et al.(1990)Trends Genet.6:36-40.
Byrne et al.(1987)Plant Cell Tissue Org Culture 8:3.
Caddick et al.,(1998)Nat Biotechnol 16:177-180.
Callebaut & Momon(1997)FEBS Lett.400:25-30.
Callis et al.(1987)Genes Dev.1:1183.
Callis et al.,(1990)J Biol Chem 265:12486-12493.
Cao et al.(2000)Arch Biochem Biophys.373:135-46.
Casas et al.,(1993)Proe Natl Acad Sci USA 90:11212-6.
Cash(1996)Med Hypotheses 47:455-459.
Chan et al.(1998)Biochim.Biophys.Acta 1442:1-19.
Chee et al.(1989)Plant Physiol.91:1212.
Chen et al.(1993)Science 262:1883-1886.
Chen et al.(2002)Plant Cell 14:559-574.
Chibbar et al.,(1993)Plant Cell Rep 12:506-509.
Choi et al.(1995)Mol Gen,Genet.246:266.
Christensen et al.,(1989)Plant Mol Biol 12:619-632.
Christou et al.(1988)Plant Physiol.87:671.
Christou et al.(1989)Proc.Natl.Acad.Sci.USA 86:7500.
Christou et al.,(1991)Bio/Technology 9:957-962.
Chuang & Meyerowitz,(2000)Proc Natl Acad Sci USA 97:4985-90.
Chung et al.(1994)Plant Mol.Biol.26:657-665.
Claes et al.(1990)Plsnt Cell 2:19-27.
Close et al.(1989)Plant Mol.Biol.13:95-108.
Comai et al.,(1988)J Biol Chem 263:15104-15109.
Conceicao et al.(1994)Plant 5:493.
Corpet et al.(1988)Nucl.Acids Res.16:10881.
Creighton,(1984) Proteins,WH Freeman & Co.,New York,New York, United States of America.
Crossway et al.(1986)Bio/Techniques 4:320.
Cruz et al.(1998)P.R.Health Sci.J.17:323-326.
Cyr et al.(1994)Trends Biochem.Sci.19:176-181.
Dasgupta et al.(1993)Gene 133:301.
Dasso(2000)Cell 104:321-324.
Dat et al.(2001)Redox Rep.6:37-42.
Datta et al.(1990)Bio/Technology 8:736.
Davies et al.(1996)EMBO J.15:4330-4343.
De Block et al.(1989)Plant Physiol.91:694.
de Framond,(1991)FEBS Lett 290:103-6.
Della-Cioppa et al.(1987)Plant Physiol.84:965.
De Lille et al.(2001)Plant Physiol.126:35-38.
Denecke et al.(1995)Plant Cell 7:391-406.
Doelling et al.(2001)Plant J.27:393-405.
Dong et al.,(1996)Mol Breeding 2:267-276.
Doonan et al.(1997)Curr.Opin.Cell.Biol.9:824-830.
Dunigan & Madlener(1995)Virology 207:460-466.
Dure et al.(1989)Plant Mol.Biol.12:475-486.
Dwyer et al.(1996)Biochim Biophys Acta 1289:231-237.
Ecker(1995)Science 268:667-675.
Ecker & Davis,(1986)Proc Natl Acad Sci USA 83:5372-5376.
Edwards et al.(1988)J.Mol.Biol.203:523-524.
Elbashir et al.,(2001)EMBO J 20:6877-88.
Elge et al.(2001)Plant J.26:561-571.
Ellenberger(1994)Curr.Opin.Struct.Biol.4:12-21.
Ellis et al.(1987)EMBO J.,6:3203.
Elroy-Stein et al.(1989)Proc.Natl.Acad.Sci.USA.86:6126.
EP 0 120 516
EP 0 138 341
EP 0 292 435
EP 0 295 959
EP 0 301 749
EP 0 332 104
EP 0 332 581
EP 0 342 926
EP 0 392 225
EP 1 116 793
Everett et al.(1987)Bio/Technology 5:1201.
Fardel et al.(2001)Toxicology 167:37-46.
Feys et al.(2001)EMBO J.20:5400-5411.
Fire et al.(1998)Nature 391:806-811.
Firek et al.,(1993)Plant Mol Biol 22:129-142.
Frary et al.(2000)Science 289:85-88.
Freier et al.,(1986)Proc Natl Acad Sci USA 83:9373-9377.
Fromental-Ramain et al.(1996)Development 122:461-472.
Fromm et al.(1986)Nature 319:791.
Fromm et al.(1990)Bio/Technology 8:833.
Fromme et al.(2001)Biochim.Biophys Acta 1507:5-31.
Fujiyama et al.(2001)J.Comp.Neurol.435:379-387.
Gaedeke et al.(2001)EMBO J.20:1875-1887.
Gallie et al.(1987)Nucl.Acids Res.15:3257.
Gallie et al.(1989)Plant Cell 1:301.
Gallois et al.(1997)Plsnt J.11:1325-1331.
Garbers et al.(1996)EMBO J.15:2115-2124.
Garcia et al.(1998)Planta 207:172-80.
Garcia et al.(2000)Microbes Infect.2:401-407.
Garrel & Campuzano(1991)BioEssays 13:493-498.
Gehring(1992)Trends Biochem.Sci.17:277-280.
Gehring & Hiromi(1986)Ann.Rev.Genet.20:147-173.
Gillet et al.(1998)Plant J.16:257-262.
Glazebrook et al.(1996)Genetics 143:973-982.
Godwin et al.(1998)Proc.Natl.Acad.Sci.USA 95:13042-13047.
Goeddel,(1990) Methods in Enzymology,Volume 185,Academic Press, San Diego,California,United States of America.
Goff(2001)Plant J.26:339-349.
Goff et al.(2002)Science 296:92-100.
Gocal et al.(2001)Plant Physiol.125:1788-1801.
Gordon Kamm et al.(1990)Plant Cell 2:603.
Greco et al.(1997)Mol.Gen.Genet.253:615-623.
Green,(2000)Trends Biochem Sci 25:59-63.
Green et al.,(1986)Ann Rev Biochem 55:569-597.
Gritz et al.(1983)Gene 25:179.
Grotewold et al.(1991)Proc.Natl.Acad.Sci.USA 88:4587-4591.
Groves,et al.(1999)Curr.Opin.Struct.Biol.9:383-389.
Gruber et al.(1993)Vectors for Plant Transformation,in  Methods in Plant Molecular Biology,Glich et al.eds,pp.89-119,CRC Press.
Guan & Scandalios(1996)J.Mol.Evol.42:570-579.
Guo et al.(2000)EMBO J.19:6891-6899.
Gyuris et al.(1993)Cell 1993,75:791-803.
Hake et al.(1995)Philos Trans.R Soc.Lond.B Biol.Sci.350:45-51.
Hammerschmidt(1999)Ann.Rev.Phytopathol.37:285-306.
Hannig et al.(1995)Bioessays 17:915-919.
Haraven et al.(1996)Cell 84:735-44.
Harlow & Lane,(1988) Antibodies:A Laboratory Manual,Cold Spring Harbor Laboratory Press,Cold Spring Harbor,New York,United States of America.
Harper et al.(1991)Science 252:951-954.
Harris et al.(1999)Plant Physiol.121:609-617.
Hartwig(1995)Protein Profile 2:703-800.
Hassan et al.(1995)Biochem.Biophys.Res.Commun.211:54-49.
Hatzfeld(1999)Int.Rev.Cytol.186:179-224.
Hayashi et al.(2001)J.Biol.Chem.276:43400-43406.
Haydon & Guest(1991)FEMS Microbiol.Lett.79:291-296.
Hedden & Kamiya(1977)Annual Rev.Plant Physiol.Plant Mol.Biol.48: 431.
Henikoff & Henikoff(1989)Proc.Natl.Acad.Sci.USA,89:10915.
Hiei et al.(1994)Plant J.6:271.
Hiei et al.,(1997)Plant Mol Biol 35:205-18.
Higgins et al.(1988)Gene 73:237.
Higgins et al.(1989)CABIOS 5:151.
Higo & Higo(1996)Plant Mol.Biol.30:505-521.
Hinchee et al.(1988)Bio/Technology 6:915.
Hoekema(1985)in  The Binary Plant Vector System,Offset-drukkerij Kanters B.V.
Holk et al.(1996)Plant Mol.Biol.31:1153-1161.
Hong et al.(2001)Plant Cell 13:755-768.
Huang et al.(1992)CABIOS 8:155.
Huang et al.(1996)Plant Mol.Biol.33:125.
Huber et al.(1997)Cell 90:871-882.
Hudspeth & Grula,(1989)Plant Molec Biol 12:579-589.
Hurst(1995)Protein Prof.2:105-168.
Imhof & Wolffe(1999)Biochemistry 38:13085-13093.
Ishikawa et al.(2001)Plant J.27:89-99.
Janssens & Goris(2001)Biochem J.353:417-439.
Jasencakova et al.(2001)Chromosoma 110:83-92.
Jasinski et al.(2001)Plant Cell 13:1095-107.
Jia et al.(2000)Plant Sci.155:115-122.
Jin & Martin(1999)Plant Mol.Biol.4:577-585.
Jobling & Gehrke(1987)Nature 325:622.
John et al.(2001)Protoplasma 216:119-142.
Johnson et al.(1997)J.Biol.Chem.272:7106-7113.
Jorgensen et al.,(1996)Plant Mol Biol 31:957-973.
Josefsson et al.(1987)J.Biol.Chem.262:12196.
Kagedal et al.(2001)Biochem J.359:335-343.
Kaitna et al.(2000)Curr.Biol.10:1172-1181.
Kang et al.(1995)Plant Mol.Biol.29:1-10.
Kang et al.(1997)Mol.Cells 7:45-51.
Kao et al.(2000)Biochem.Biophys.Res.Commun.267:201-207.
Karlin & Altschul(1990)Proc.Natl.Acad.Sci.USA 87:2264.
Karlin & Altschul(1993)Proc.Natl.Acad.Sci.USA 90:5873.
Kato & Dang(1992)FASEB J.6:3065-3072.
Kawalleck et al.(1992)Proc.Natl.Acad.Sci.USA 89:4713-7.
Keegan et al.,(1986)Science 231:699-704.
Kehres et al.(1998)Microb.Comp.Genomics 3:151-169.
Kelly(1999)Altern.Med.Rev.4:249-265.
Kempin et al.,(1997)Nature 389:802-803.
Kerstetter et al.(1997)Development 124:3045-3054.
Kidou et al.(1993)FEBS Lett.332:282-286.
Kim et al.(2001)Plant Physiol.127:1243-1255.
Kitade et al.(1999)Nucl.Acids Symp.Ser.42:25-26.
Klein et al.(1988)Bio/Technology 6:559.
Kline et al.(1987)Nature 327:70.
Knauf et al.(1983)Analysis of Host Range Expression by Agrobacterium, in  Molecular Genetics of the Bacteria-Plant Interaction,Puhler, (ed.),Springer-Verlag.
Kobe et al.(1994)Trends Biochem.Sci.19:415-421.
Kong & Steinbiss(1998)Arch Vil 143:1791-1799.
Koonin(1993)J.Mol.Biol.229:1165-1174.
Korfhage et al.(1994)Plant Cell 6:695-708.
Kossman & Lloyd(2000)Crit.Rev.Biochem.Mol.Biol.35:141-196.
Kostyal et al.(1998)Clin.Exp.Immunol.112:355-362.
Kosugi & Ohashi(2002)Plant Physiol.128:833-843.
Koziel et al.(1993)Biotechnology 11:194.
Krause et al.(1990)Cell 63:907-919.
Kruse et al.(1995)Planta 196:796-803.
Kyozuka et al.(2000)Plant Cell Physiol.41:710-718.
Kyte & Doolittle,(1982)J Mol Biol 157:105-132.
Lacombe et al.(2001)Science 292:1486-1487.
Lamb & Dixon(1997)Ann.Rev.Plant Biol.48:251.
Landolt(1986) Biosystematic Investigation on the Family of Duckweeds: The family of Lemnaceae-A Monograph Study,Geobatanischen Institut ETH,Stiftung Rubel,Zurich.
Landschulz et al.(1988)Science 240:1759-1764.
Langenkamper et al.(2001)J.Exp.Bot.52:1545-1554.
Laursen et al.(1994)Plant Mol.Biol.24:51.
Lebel et al.,(1998)Plant J 16:223-233.
Lechner et al.(1996)Biochim Biophys Acta 1296:181-188.
Lee et al.(1994)Plant Mol.Biol.26:1981.
Lefterov et al.(2000)FASEB J.14:1837-1847.
Lenny et al.(1997)Mol.Biol.Rep.24:157-168.
Le Saux et al.(1996)J.Bacteriol.178:3308-3313.
Leslie et al.(2001)Toxicology 167:3-23.
Levine et al.,(1994)Cell 79:583-593.
Li & Komatsu(2000)Eur.J.Biochem.267:737-745.
Li & Nam(2002)Science 295:1299-1301.
Li et al.(2001)Proc.Natl.Acad.Sci.USA 98:5916-5921.
Lim et al.(1999)Plant Physiol.120:1193-1204.
Lim et al.(2000)Plant Mol.Biol.44:513-527.
Lincoln et al.(1994)Plant Cell 6:1859-1876.
Lindholm et al.(2000)Mech.Dev.93:169-173.
Lindsey et al.(1993)Transgen.Res.2:3347.
Liu et al.(1992)Antiviral Res.19:247-265.
Liu et al.,(1999)Genome Res 9:859-867.
Logemann et al.,(1989)Plant Cell 1:151-158.
Lommel et al.(1991)Virology 181:382.
Lopez-Dee et al.(1999)Dev.Genet.25:237-244.
Lorz et al.(1985)Mol.Gen.Genet.199:178.
Ma et al.(1988)Nature 334:631.
Macejak & Sarnow,(1991)Nature 353:90-94.
Magyar et al.(2000)FEBS Lett.486:79-87.
Maki et al.(1993) Methods in Plant Molecular Biology,Glich et al.eds, pp.67-88,CRC Press.
Malz & Sauter(1999)Plant Mol.Biol.40:985-995.
Manjunath et al.(1997)Plant Mol.Biol.33:97.
Mann & Affolter(1998)Curr.Opin.Genet.Dev.8:423-429.
Mannervick(1999)Bioessays 21:267-270.
Martinez et al.(1989)J.Mol.Biol.208:551.
Martinez et al.(2000)Plant Physiol.122:757-766.
Massey(2000)Biochem.Soc.Trans.28:283-296.
Mayer et al.(2001)Phytochemistry 58:33-41.
Mayo,(1987) The Theory of Plant Breeding,Second Edition,Clarendon Press,New York,New York,United States of America.
McBride et al.(1994)Proc.Natl.Acad.Sci.USA 91:7301.
McBride et al.(1990)Plant Mol.Biol.14:266.
McCabe et al.(1988)Bio/Technology 6:923.
McElroy et al.,(1990)Plant Cell 2:163-71.
McEwen,et al.(2001)Mol.Biol.Cell.12:2776-89.
McLeod(1986)Bioessays 6:208-212.
Medina et al.(2001)Plant Physiol.125:1655.
Merkle et al.(1994)Plant J.6:555-565.
Messing & Vierra(1982)Gene 19:259.
Miao & Lam,(1995)Plant J 7:359-365.
Michalak et al.(1992)Biochem.J.285:681-692.
Michalak et al.(1998)Biochem.Cell.Biol.76:779-785.
Michelis et al.(2000)Plant Mol.Biol.44:487-498.
Mikami et al.(1998)Plant J.15:563-568.
Moon et al.(1999)Plant Physiol.120:1193-1204.
Moons et al.(1998)Plant J.15:89-98.
Morita et al.(2001)Curr.Pharm.Biotechnol.2:257-267.
Muehlbauer et al,(1999)Plant Physiol.119:651-62.
Mukumoto et al.,(1993)Plant Mol Biol 23:995-1003.
Muller et al.(1995)Nature 374:727-730.
Mundy & Chua(1988)EMBO J.7:2279-2286.
Munro & Pelham(1987)Cell 48:899-907.
Munster et al.(2001)Gene 262:1-130.
Murre et al.(1989)Cell 56:777-783.
Muslin & Xing(2000)Cell Signal 12:703-709.
Myers & Miller(1988)CABIOS 4:11.
Nagamara-Inoue et al.(2001)Int.Rev.Immunol.20:83-105.
Nakamura et al.(1996)Plant Mol.Biol.30:381-385.
Needleman & Wunsch(1970)J.Mol.Biol.48:443.
Negrotto et al.,(2000)Plant Cell Reports 19:798-803.
Nelson et al.(1997)Plant Physiol.114:29-37.
Nepveu(2001)Gene 270:1-15.
Ng & Yanofsky(2001)Nat.Rev.Genet.2:186-195.
Nielsen et al.(1986)J.Biol.Chem.261:3661-3669.
Norris et al.,(1993)Plant Mol Biol 21:895-906.
Nurnberger & Scheel(2001)Trends Plant Sci.6:372-379.
O’Connell et al.(2001)J.Biol.Chem.276:43065-43073.
Odagaki et al.(1999)Structure Fold Des.7:399-411.
Ohtsuka et al.,(1985)J.Biol.Chem.260:2605-2608.
Oliveira et al.(2001)Braz.J.Med.Biol.Res.34:567-575.
Ono et al.(1996)Plant Physiol.112:483-491.
Ono et al.(2001)Proc.Natl.Acad.Sci.USA 98:759-764.
Oppenheimer et al.(1991)Cell 67:483-493.
Orzaez & Granell(1997)FEBS Lett.404:275-278.
O′Shea et al.(1989)Science 243:538-542.
Pacciotti et al.(1985)Bio/Technology 3:241.
Panavas et al.(1999)Plant Mol.Biol.40:237-248.
Park et al.(1985)J.Plant Biol.,38:365.
Park et al.(1998)EMBO J.17:859-867.
Pascual et al.(2000)J.Mol.Biol.304:723-729.
Paszkowski et al.(1984)EMBO J.3:2717.
PCT International Publication No.WO 93/05163
PCT International Publication No.WO 93/07278
PCT International Publication WO 93/21335
PCT International Publication WO 94/00977
PCT International Publication No.WO 94/20627
PCT International Publication No.WO 95/16783
PCT International Publication WO 95/19431
PCT International Publication WO 96/06166
PCT International Publication WO 98/54311
PCT International Publication WO 99/32619
PCT International Publication WO 99/53050
PCT International Publ ication WO 99/61631
PCT International Publication No.WO 00/07210
PCT International Publication No.WO 00/760067
PCT International Publication No.WO 01/07618
Pearson & Lipman(1988)Proc.Natl.Acad.Sci.USA 85:2444.
Pearson et al.(1994)Meth.Mol.Biol.24:307.
Peifer et al.(1990)Cell 63:1167-76.
Peifer et al.(1994)Cell 76:789-791.
Pelham(1990)Trends Biochem.Sci.15:483-486.
Perrin(2001)Curr.Biol.11:R213-R216.
Persson et al.(2001)Plant Physiol.126:1092-1104.
Phillips et al.(1988)in  Corn and Corn Improvement,3rd ed,Sprague et al. eds.,Amer.Soc of Agronomy.
Picard et al.,(1988)Cell 54:1073-1080.
Pih et al.(1999)Mol.Cells 9:84-90.
Ponting(2000)Trends Biochem.Sci.25:423-426.
Ponting & Parker(1996)Protein Sci.5:162-166.
Postma-Haarsma et al.(2002)Plant Mol Biol 48:423-41.
Potrykus(1985)Trends Biotech.7:269.
Potuschak & Doerner(2001)Curr.Opin.Plant Biol.4:501-506.
Powell et al.,(1989)Proc.Natl.Acad.Sci.USA 86:6949-6952.
Presley et al.(2002)Nature 417:187-193.
Purugganan et al.(1995)Genetics 140:345-356.
Ratajczak(2000)Biochim Biophys Acta 1465:17-36.
Raven et al.(1999) Biology of Plants,Freeman/Worth.
Rea et al.(1998)Annu.Rev.Plant Physiol.Plant Mol.Biol.49:727-760.
Reddy(2001)Int.Rev.Cytol.204:97-178.
Redei & Koncz,(1992)in  Methods in Arabidopsis Research(Koncz C, Chua N-H & Schell J,eds.)World Scientific Press,River Edge,
New Jersey,United States of America,pp.16-82.
Reed et al.,(2001)In Vitro Cell Dev Biol-Plant 37:127-132.
Reichelt et al.(1999)Plant J.19:555-567.
Reiser et al.(1995)Cell 83:735.
Reizer et al.(1991)Mol.Microbiol.5:1081-1089.
Riechmann et al.(1994)Nucl.Acids Res.22:749-755.
Riechmann & Meyerowitz(1997)Biol.Chem.378:1079-1101.
Riggs et al.(1986)Proc.Natl.Acad.Sci.USA 83:5602.
Ritz et al.(2001)J.Biol.Chem.276:22273-22277.
Robertson & Chandler(1992)Plant Mol.Biol.19:1031-1044.
Robins et al.(1998)J.Med.Chem.41:3857-3864.
Robles et al.(1997)J.Neurosci.Res.47:90-97.
Rogers et al.,(1985)Proc.Natl.Acad.Sci.USA 82:6512-6516.
Rogers et al.(2001)J.Biol.Chem.276:30914-30922.
Rohrmeier & Lehle,(1993)Plant Mol Biol 22:783-792.
Roosens et al.(2000)Biochim.Biophys.Acta 1463:470-476.
Rossolini et al.,(1994)Mol Cell Probes 8:91-98.
Roth et al.,(1991)Plant Cell 3:317-325.
Rothstein et al.(1987)Gene 53:153.
Ruberti et al.(1991)EMBO J.10:1787-1791.
Sabelli et al.(1999)Mol.Gen.Genet.261:820-830.
Saijo et al.(2001)Plant Cell Physiol.42:1228-1233.
Salvucci & Ogren(1996)Phosynthesis Res.47:(1)1-11.
Salvucci et al.(2001)Plant Physiol.127:1053-1064.
Sanchez-Fernandez et al.(2001)J.Biol.Chem.276:30231-30244.
Sanderfoot et al.(1999)Plant Physiol.121:929-938.
Sanford et al.(1987)Particulate Sci.Tech.5:27.
Sankaranarayanan et al.(1996)Nat.Struct.Biol.3:596-603.
Saraste et al.(1990)Trends Biochem.Sci.15:430-434.
Sato et al,(1997)J.Biol.Chem.272:24530-5.
Sauter et al.(1995)Plant J.7:623-632.
Savidge et al.(1995)Plant Cell 7:721-33.
Sazer & Dasso(2000)J.Cell Sci.113:1111-1118.
Scharfmann et al.,(1991)Proc Natl Acad Sci USA 88:4626-4630.
Schledzewski et al.(1999)J.Mol.Evol.48:770-778.
Schmidhauser & Helinski(1985)J.Bacteriol.164:446.
Schneeberger et al.(1998)Development 125:2857-2865.
Schocher et al.,(1986)Bio/Technology 4:1093-1096.
Schofield(1987)Trends Neurosci.10:3-6.
Schultz et al.(1998)Plant Cell 10:837-47.
Schwab et al.(2001)Phytochemistry 56:407-415.
Schwartz et al.(1999)Proc.Natl.Acad.Sci.USA 96:4680-4685.
Sehnke et al.(2000)Plant Physiol.122:235-242.
Sganga et al.(1992)Proc.Natl.Acad.Sci.USA 89:6328-6332.
Shalev et al.(2001)J.Biol.Chem.276:34948-34957.
Shank et al.(2001)Plant Physiol.126:267-277.
Shcherban et al.(1995)Proc.Natl.Acad.Sci.USA 92:9245-9249.
Sheridan et al.(1996)Genetics 142:1009.
Shibuya et al.(2000)J.Exp.Bot.51:2067-2073.
Shimamoto et al.(1989)Nature 338:274.
Shinshi et al.,(1990)Plant Mol Biol 14:357-368.
Silverstone et al.,(1998)Plant Cell 10:155-169.
Singh,(1986) Breeding for Resistance to Diseases and Insect Pests, Springer-Verlag,New York,New York,United States of America.
Singh et al.(1998)J.Plant.Physiol.153:316-323.
Sinha et al.(1993)Genes Dev.7:787-795.
Sjodahl et al.(1995)Planta 197:264.
Skuzeski et al.(1990)Plant Mol.Biol.,15:65.
Smilie(1979)Trends Biochem.Sci.4:151-155.
Smith et al.,(2000)Nature 407:319-320.
Smith & Waterman(1981)Adv.Appl.Math.2:482.
Smith et al.(1997)Ann.Rev.Plant Biol.48:67.
Solocombe et al.(1994)Plant Physiol.104:1167.
Sontag(2001)Cell Signal 13:7-16.
Spencer et al.(1990)Theor.Appl.Genet.79:625.
Staub et al.(1992)Plant Cell 4:39.
Staub et al.(1993)EMBO J.12:601.
Stintzi et al.(1993)Biochimie.75:687-706.
Sukhapinda et al.(1987)Plant Mol.Biol.8:209.
Sulo & Martin(1993)J.Biol.Chem.268:17634-17639.
Sung et al.(2001)Mol.Cells 11:352-359.
Suss et al.(1993)Proc.Natl.Acad.Sci.USA 90:5514-5518.
Svab et al.(1990)Proc.Natl.Acad.Sci.USA 87:8526.
Takahashi et al.(1994)Plant Mol.Biol.26:339-352.
Takamori et al.(2000)Nature 407:189-194.
Tanaka et al.(1997)Plant Mol.Biol.35:981-986.
Tapon & Hall(1997)Curr.Opin.Cell.Biol.9:86-92.
Taylor et al.,(1993)Plant Cell Rep 12:491-495.
Theissen et al.(2000)Plant Mol.Biol.42:115-149.
Thompson et al.(1987)EMBO J.6:2519.
Tomes et al.(1995) Plant Cell,Tissue and Organ Culture:Fundamental Methods,Springer-Verlag.
Triezenberg et al.,(1988)Genes Dev 2:718-729.
Trimarchi & Lees(2002)Nat.Rev.Mol.Cell.Biol.3:11-20.
Tsutsumi et al.(1994)Gene 141:215-220.
Turner et al.,(1987)Cold.Spring Harb Symp Quant Biol LII:123-133.
Udaka et al.(2000)J.Nutr.Sci.Vitaminol.(Tokyo)46:84-90.
Uknes et al.,(1992)Plant Cell 4:645-656.
Umeda et al.(1999)Mol.Gen.Genet.262:230-238.
Unger et al.,(1989)Plant Mol Biol 13:411-418.
Urao et al.(1996)Plant Mol.Biol.32:571.
U.S.Patent Application No.20010049831
U.S.Patent No.4,554,101
U.S.Patent No.4,940,935
U.S.Patent No.4,945,050
U.S.Patent No.4,987,071
U.S.Patent No.5,036,006
U.S.Patent No.5,100,792
U.S.Patent No.5,188,642
U.S.Patent No.5,270,163
U.S.Patent No.5,350,689
U.S.Patent No.5,451,513
U.S.Patent No.5,466,785
U.S.Patent No.5,491,288
U.S.Patent No.5,501,967
U.S.Patent No.5,523,311
U.S.Patent No.5,545,817
U.S.Patent No.5,545,818
U.S.Patent No.5,591,616
U.S.Patent No.5,614,395
U.S.Patent No.5,639,949
U.S.Patent No.5,767,378
U.S.Patent No.5,929,226
U.S.Patent No.5,990,386
U.S.Patent No.5,994,629
U.S.Patent No.6,087,175
U.S.Patent No.6,369,298
Van Breusegem et al.(1994)Planta 193:57-66.
Van den Broeck et al.,(1985)Nature 313:358-363.
van der Krol et al.,(1991)In  Antisense nucleic acids and proteins(Joseph M & van der Krol A,eds.)Marcel Dekker Inc,New York,New York,United States of America,pp.125-141.
van Hemert et al.(2001)Bioessays 23:936-946.
van Hille et al.(1993)Biochem Biophys Res.Commun.197:15-21.
Vasil et al.(1989)Mol.Microbiol.3:371.
Vasil et al.,(1992)Bio/Technology 10:667-674.
Vasil et al.(1993)Biotechnology 11:1553.
Vazquez-Tello et al.(1998)Mol.Gen.Genet.257:157-166.
Villalba et al.(1993)Eur.J.Biochem.216:863-869.
Vollbrecht et al.(1991)Nature 350:241-243.
Vos et al.(2000)Plant Cell 12:979-990.
Wadzinski et al.(1993)Mol.Cell Biol.13:2822-2834.
Walter et al.(1990)J.Biol.Chem.265:14016-22.
Warner et al.,(1993)Plant J 3:191-201.
Wasmann et al.,(1986)Mol Gen Genet 205:446-453.
Watanabe et al.(1994)J.Biol.Chem.269:7744-7749.
Waterhouse et al.,(1998)Proc Natl Acad Sci USA 95:13959-13964.
Weeks et al.(1993)Plant Phyiol.102:1077.
Weissinger et al.(1988)Ann.Rev.Genet.22:421.
Welsh,(1981) Fundamentals of Plant Genetics and Breeding,John Wiley & Sons,New York,New York,United States of America.
Wen et al.(1989)Nul.Acids Res.17:9490.
White et al.(1990)Nucl.Acids Res.18:1062.
Williams et al.,(1993)J Clin Invest 92:503-508.
Williams-Carrier et al.(1997)Development 124:3737-3745.
Winge et al.(1997)Plant Mol.Biol.35:483-495.
Wolf & Borchardt(1991)J.Med.Chem.34:1521-1530.
Wood,(1983) Crop Breeding,American Society of Agronomy,Madison, Wisconsin,United States of America.
Wricke & Weber,(1986) Quantitative Genetics and Selection Plant Breeding,Walter de Gruyter and Co.,Berlin,Germany.
Wu et al.(1995)Mol.Cell.Biol.15:2536-2546.
Xia et al.(1996)Plant J.10:761-769.
Xiong et al.(2001a)Genes Dev.15:1971-1984.
Xiong et al.(2001b)Mol.Plant Microbe Interact.14:685-692.
Xu et al.,(1993)Plant Mol Biol 22:573-588.
Yamaguchi-Shinozaki et al.(1990)Plant Mol.Biol.14:29-39.
Yao et al.(2001)Proc.Natl.Acad.Sci.USA 98:1306-1311.
Yazaki et al.(2001)J.Exp.Bot.52:877-9.
Yokota et al.(1999a)Plant Physiol.119:231-240.
Yokota et al.(1999b)Plant Physiol.121:525-534.
York et al.(1994)Biochemistry 33:13164-13171.
Yucel(2000)J.Cell.Biol.150:1-11.
Zhang et al.(1998)EMBo J.17:6404-6411.
Zhao & Last,(1995)J.Biol.Chem.270:6081-6087.
Zhao et al.,(2000)Plant Mol Biol 44:789-98.
Zhao et al.(2001)EMBO J.20:2315-2325.
Zhong et al.(1996)Mol.Gen.Genet.251:196.
Zhu & Xiao(1998)Nucl.Acids Res.26:5402-5408.
Zhu et al.,(1999)Proc Natl Acad Sci USA 96:8768-8773.
Zhu et al.(2001)Plant Physiol.Biochem.39:221-242.
Zilliacus et al.(2001)Mol.Endocrinol.15:501-511.
Zollman,et al.(1994)Proc.Natl.Acad.Sci.USA 91:10717-21.
仅仅通过使用常规实验,本领域技术人员将意识到或能够确定与 本文具体描述的具体实施方式的许多等价形式。这些等价形式应该包 括在下面的权利要求的范围内。
                           序列表
<110>先正达合作有限公司
<120>应激相关多肽及其用途
<130>1392-10-20 PCT
<150>US 60/436,564
<151>2002-12-26
<160>174
<170>PatentIn version 3.2
<210>1
<211>1383
<212>DNA
<213>Oryza sativa
<220>
<221>CDS
<222>(1)..(1383)
<400>1
gct tcc ttt cgg act gtt ggt gct aaa atc act cag gaa act ggt gat    48
Ala Ser Phe Arg Thr Val Gly Ala Lys Ile Thr Gln Glu Thr Gly Asp
1               5                   10                  15
ttc ttt gtt agc gat gca gag ggt gac cca gac aaa cca act gat ggt    96
Phe Phe Val Ser Asp Ala Glu Gly Asp Pro Asp Lys Pro Thr Asp Gly
            20                  25                  30
ttt tcc tct att gat gag gct ata ggc gca ttg cat gaa gga aag ttt    144
Phe Ser Ser Ile Asp Glu Ala Ile Gly Ala Leu His Glu Gly Lys Phe
        35                  40                  45
gtt att gct gta gat gat gaa agc ggt gat aat gaa ggg gat ctt gtc    192
Val Ile Ala Val Asp Asp Glu Ser Gly Asp Asn Glu Gly Asp Leu Val
    50                  55                  60
atg gca gct acg ctg gca gac cca gaa tct att gca ttc atg atc agg    240
Met Ala Ala Thr Leu Ala Asp Pro Glu Ser Ile Ala Phe Met Ile Arg
65                  70                  75                  80
aat ggt tct ggg atc atc tca gtg ggc atg aag gaa gag gac tta aca    288
Asn Gly Ser Gly Ile Ile Ser Val Gly Met Lys Glu Glu Asp Leu Thr
                85                  90                  95
aga ttg atg att cct atg atg tct cca att gca gaa att gag gat att    336
Arg Leu Met Ile Pro Met Met Ser Pro Ile Ala Glu Ile Glu Asp Ile
            100                 105                 110
tca gct gct gct tcc aca gta aca gtg gat gcc aga gtg ggc ata tca    384
Ser Ala Ala Ala Ser Thr Val Thr Val Asp Ala Arg Val Gly Ile Ser
        115                 120                 125
acc ggc gtc tcg gct gca gat agg gca aaa acg att ttt act cta gcc    432
Thr Gly Val Ser Ala Ala Asp Arg Ala Lys Thr Ile Phe Thr Leu Ala
    130                 135                 140
tcc cct gat tct aag cca act gac ctc aga aga cca ggc cat ata ttc    480
Ser Pro Asp Ser Lys Pro Thr Asp Leu Arg Arg Pro Gly His Ile Phe
145                 150                 155                 160
cct cta aaa tac cga aac ggt ggt gtg cta aaa aga gct gga cat act    528
Pro Leu Lys Tyr Arg Asn Gly Gly Val Leu Lys Arg Ala Gly His Thr
                165                 170                 175
gag gca tcc gtc gat ctt gtc gcg ttg gct ggc ttg cgc cct gtg tct    576
Glu Ala Ser Val Asp Leu Val Ala Leu Ala Gly Leu Arg Pro Val Ser
            180                 185                 190
gtc ctg tca acc gtc atc aac cca gtg gat ggt tca atg gca gga atg    624
Val Leu Ser Thr Val Ile Asn Pro Val Asp Gly Ser Met Ala Gly Met
        195                 200                 205
cca gtg ctg aaa cag atg gct ttg gag cat gat atc cca att gtt tca    672
Pro Val Leu Lys Gln Met Ala Leu Glu His Asp Ile Pro Ile Val Ser
    210                 215                 220
atc gct gat ctc atc cgg tat aga agg aag agg gag aag ctg gtg gaa    720
Ile Ala Asp Leu Ile Arg Tyr Arg Arg Lys Arg Glu Lys Leu Val Glu
225                 230                 235                 240
ctg att gct gta tct cgt ttg ccg acg aaa tgg ggc ctt ttc cga gct    768
Leu Ile Ala Val Ser Arg Leu Pro Thr Lys Trp Gly Leu Phe Arg Ala
                245                 250                 255
tac tgc tac caa tcc aag ctt gat gga acc gag cac att gct gtt gca    816
Tyr Cys Tyr Gln Ser Lys Leu Asp Gly Thr Glu His Ile Ala Val Ala
            260                 265                 270
aag ggc gac atc ggc gac ggc gag gac gtc ttg gtg agg gtc cat tcc    864
Lys Gly Asp Ile Gly Asp Gly Glu Asp Val Leu Val Arg Val His Ser
        275                 280                 285
gag tgc ctg acc ggc gac atc ctc ggc tcc gcc cgc tgc gac tgc ggc    912
Glu Cys Leu Thr Gly Asp Ile Leu Gly Ser Ala Arg Cys Asp Cys Gly
    290                 295                 300
aac cag ctg gac ctg gcg atg cag ctc atc gac aag gcc ggc cgc ggc    960
Asn Gln Leu Asp Leu Ala Met Gln Leu Ile Asp Lys Ala Gly Arg Gly
305                 310                 315                 320
gtc ctc gtc tac ctc cgc ggc cac gag ggc cgc ggc atc ggc ctc ggc    1008
Val Leu Val Tyr Leu Arg Gly His Glu Gly Arg Gly Ile Gly Leu Gly
                325                 330                 335
cag aag ctc cgc gcc tac aac ctc cag gac gac ggc cac gac acc gtc    1056
Gln Lys Leu Arg Ala Tyr Asn Leu Gln Asp Asp Gly His Asp Thr Val
            340                 345                 350
cag gcc aac gtc gag ctc ggc ctc gcc gtc gac tcc cgc gag tac ggc    1104
Gln Ala Asn Val Glu Leu Gly Leu Ala Val Asp Ser Arg Glu Tyr Gly
        355                 360                 365
atc ggc gcc cag att ctg cgg gac atg ggg gtg cgc acg atg cgg ctg    1152
Ile Gly Ala Gln Ile Leu Arg Asp Met Gly Val Arg Thr Met Arg Leu
    370                 375                 380
atg acg aac aac ccg gca aag ttc gtc ggg ctc aag ggc tac ggg ctc    1200
Met Thr Asn Asn Pro Ala Lys Phe Val Gly Leu Lys Gly Tyr Gly Leu
385                 390                 395                 400
gcc gtc gtc ggc agg gtt ccg gtg atc tcc ccc atc acc aag gag aac    1248
Ala Val Val Gly Arg Val Pro Val Ile Ser Pro Ile Thr Lys Glu Asn
                405                 410                 415
cag agg tac ctc gag acg aag cgc acc aag atg ggc cat gtc tac ggc    1296
Gln Arg Tyr Leu Glu Thr Lys Arg Thr Lys Met Gly His Val Tyr Gly
            420                 425                 430
tcc gac ctc ccc ggc aac gtc ccg gag gaa ttc ctc aac ccg gac gac    1344
Ser Asp Leu Pro Gly Asn Val Pro Glu Glu Phe Leu Asn Pro Asp Asp
        435                 440                 445
atc gcc gga gac caa gac gaa gac gac acc cac aac tga                1383
Ile Ala Gly Asp Gln Asp Glu Asp Asp Thr His Asn
    450                 455                 460
<210>2
<211>460
<212>PRT
<213>Oryza sativa
<400>2
Ala Ser Phe Arg Thr Val Gly Ala Lys Ile Thr Gln Glu Thr Gly Asp
1               5                   10                  15
Phe Phe Val Ser Asp Ala Glu Gly Asp Pro Asp Lys Pro Thr Asp Gly
            20                  25                  30
Phe Ser Ser Ile Asp Glu Ala Ile Gly Ala Leu His Glu Gly Lys Phe
        35                  40                  45
Val Ile Ala Val Asp Asp Glu Ser Gly Asp Asn Glu Gly Asp Leu Val
    50                  55                  60
Met Ala Ala Thr Leu Ala Asp Pro Glu Ser Ile Ala Phe Met Ile Arg
65                  70                  75                  80
Asn Gly Ser Gly Ile Ile Ser Val Gly Met Lys Glu Glu Asp Leu Thr
                85                  90                  95
Arg Leu Met Ile Pro Met Met Ser Pro Ile Ala Glu Ile Glu Asp Ile
            100                 105                 110
Ser Ala Ala Ala Ser Thr Val Thr Val Asp Ala Arg Val Gly Ile Ser
        115                 120                 125
Thr Gly Val Ser Ala Ala Asp Arg Ala Lys Thr Ile Phe Thr Leu Ala
    130                 135                 140
Ser Pro Asp Ser Lys Pro Thr Asp Leu Arg Arg Pro Gly His Ile Phe
145                 150                 155                 160
Pro Leu Lys Tyr Arg Asn Gly Gly Val Leu Lys Arg Ala Gly His Thr
                165                 170                 175
Glu Ala Ser Val Asp Leu Val Ala Leu Ala Gly Leu Arg Pro Val Ser
            180                 185                 190
Val Leu Ser Thr Val Ile Asn Pro Val Asp Gly Ser Met Ala Gly Met
        195                 200                 205
Pro Val Leu Lys Gln Met Ala Leu Glu His Asp Ile Pro Ile Val Ser
    210                 215                 220
Ile Ala Asp Leu Ile Arg Tyr Arg Arg Lys Arg Glu Lys Leu Val Glu
225                 230                 235                 240
Leu Ile Ala Val Ser Arg Leu Pro Thr Lys Trp Gly Leu Phe Arg Ala
                245                 250                 255
Tyr Cys Tyr Gln Ser Lys Leu Asp Gly Thr Glu His Ile Ala Val Ala
            260                 265                 270
Lys Gly Asp Ile Gly Asp Gly Glu Asp Val Leu Val Arg Val His Ser
        275                 280                 285
Glu Cys Leu Thr Gly Asp Ile Leu Gly Ser Ala Arg Cys Asp Cys Gly
    290                 295                 300
Asn Gln Leu Asp Leu Ala Met Gln Leu Ile Asp Lys Ala Gly Arg Gly
305                 310                 315                 320
Val Leu Val Tyr Leu Arg Gly His Glu Gly Arg Gly Ile Gly Leu Gly
                325                 330                 335
Gln Lys Leu Arg Ala Tyr Asn Leu Gln Asp Asp Gly His Asp Thr Val
            340                 345                 350
Gln Ala Asn Val Glu Leu Gly Leu Ala Val Asp Ser Arg Glu Tyr Gly
        355                 360                 365
Ile Gly Ala Gln Ile Leu Arg Asp Met Gly Val Arg Thr Met Arg Leu
    370                 375                 380
Met Thr Asn Asn Pro Ala Lys Phe Val Gly Leu Lys Gly Tyr Gly Leu
385                 390                 395                 400
Ala Val Val Gly Arg Val Pro Val Ile Ser Pro Ile Thr Lys Glu Asn
                405                 410                 415
Gln Arg Tyr Leu Glu Thr Lys Arg Thr Lys Met Gly His Val Tyr Gly
            420                 425                 430
Ser Asp Leu Pro Gly Asn Val Pro Glu Glu Phe Leu Asn Pro Asp Asp
        435                 440                 445
Ile Ala Gly Asp Gln Asp Glu Asp Asp Thr His Asn
    450                 455                 460
<210>3
<211>267
<212>DNA
<213>Oryza sativa
<220>
<221>CDS
<222>(1)..(267)
<400>3
gga aca aac cct ggc ttc aga gtt gga gag atc agg ctc tcc aac agg    48
Gly Thr Asn Pro Gly Phe Arg Val Gly Glu Ile Arg Leu Ser Asn Arg
1               5                   10                  15
gat att tat ttc ggc aca tta ttg ggg aac aca cca gag ggt tca ggg    96
Asp Ile Tyr Phe Gly Thr Leu Leu Gly Asn Thr Pro Glu Gly Ser Gly
            20                  25                  30
agg tat gtc tgg tca gat ggt tgc act tac gat ggt gag tgg agg aga    144
Arg Tyr Val Trp Ser Asp Gly Cys Thr Tyr Asp Gly Glu Trp Arg Arg
        35                  40                  45
ggg atg agg cat ggg caa gga aag aca atg tgg cca tct gga gcc acc    192
Gly Met Arg His Gly Gln Gly Lys Thr Met Trp Pro Ser Gly Ala Thr
    50                  55                  60
tac gag ggt gag tac tct ggt ggc tac att tat ggt gaa ggc aca tat    240
Tyr Glu Gly Glu Tyr Ser Gly Gly Tyr Ile Tyr Gly Glu Gly Thr Tyr
65                  70                  75                  80
acc ggg tct gac aac atc gtc tac aag                                267
Thr Gly Ser Asp Asn Ile Val Tyr Lys
                85
<210>4
<211>89
<212>PRT
<213>Oryza sativa
<400>4
Gly Thr Asn Pro Gly Phe Arg Val Gly Glu Ile Arg Leu Ser Asn Arg
1               5                   10                  15
Asp Ile Tyr Phe Gly Thr Leu Leu Gly Asn Thr Pro Glu Gly Ser Gly
            20                  25                  30
Arg Tyr Val Trp Ser Asp Gly Cys Thr Tyr Asp Gly Glu Trp Arg Arg
        35                  40                  45
Gly Met Arg His Gly Gln Gly Lys Thr Met Trp Pro Ser Gly Ala Thr
    50                  55                  60
Tyr Glu Gly Glu Tyr Ser Gly Gly Tyr Ile Tyr Gly Glu Gly Thr Tyr
65                  70                  75                  80
Thr Gly Ser Asp Asn Ile Val Tyr Lys
                85
<210>5
<211>1227
<212>DNA
<213>Oryza sativa
<220>
<221>CDS
<222>(1)..(1227)
<400>5
cca cgc gtc cgg aga agc ggc cgc ttt ttt ttt ttg ttt tcc cct ccg    48
Pro Arg Val Arg Arg Ser Gly Arg Phe Phe Phe Leu Phe Ser Pro Pro
1               5                   10                  15
act ccg act ccg atc gat ctc cac ccc gaa tcc ctc ctc ctc acc gcc    96
Thr Pro Thr Pro Ile Asp Leu His Pro Glu Ser Leu Leu Leu Thr Ala
            20                  25                  30
ggc gag ctt ccg gct gcg gcg gag atg gcc aca cgt tat tgg atc gtg    144
Gly Glu Leu Pro Ala Ala Ala Glu Met Ala Thr Arg Tyr Trp Ile Val
        35                  40                  45
tct ctt ccc gtg cag act cct ggc tcc acc gcc aat tct ctc tgg gcg    192
Ser Leu Pro Val Gln Thr Pro Gly Ser Thr Ala Asn Ser Leu Trp Ala
    50                  55                  60
cgc ctc cag gac tcc atc tcg cgc cac tcc ttc gac acg ccg ctc tac    240
Arg Leu Gln Asp Ser Ile Ser Arg His Ser Phe Asp Thr Pro Leu Tyr
65                  70                  75                  80
cgg ttt aac gtc ccc gat ctc cgc gtc ggc acg ctc gac tcc ctc ctc    288
Arg Phe Asn Val Pro Asp Leu Arg Val Gly Thr Leu Asp Ser Leu Leu
                85                  90                  95
gcc ctc agc gac gat ctc gtc aag tcc aac gtc ttc atc gag ggg gtc    336
Ala Leu Ser Asp Asp Leu Val Lys Ser Asn Val Phe Ile Glu Gly Val
            100                 105                 110
tcg cac aag atc cgg agg cag atc gag gag cta gag cgc gcc ggg ggt    384
Ser His Lys Ile Arg Arg Gln Ile Glu Glu Leu Glu Arg Ala Gly Gly
        115                 120                 125
gtc gag agt ggg gct ctc acc gtt gac ggc gtc ccc gtc gac acc tac    432
Val Glu Ser Gly Ala Leu Thr Val Asp Gly Val Pro Val Asp Thr Tyr
    130                 135                 140
ctc acc agg ttt gtg tgg gat gag ggc aaa tac cca acg atg tca ccg    480
Leu Thr Arg Phe Val Trp Asp Glu Gly Lys Tyr Pro Thr Met Ser Pro
145                 150                 155                 160
ctc aag gag att gcc ggc agc atc caa tca cag gtc tcc aag att gaa    528
Leu Lys Glu Ile Ala Gly Ser Ile Gln Ser Gln Val Ser Lys Ile Glu
                165                 170                 175
gat gac atg aag gtt cga gga gcg gaa tac aat aat gta agg agc cag    576
Asp Asp Met Lys Val Arg Gly Ala Glu Tyr Asn Asn Val Arg Ser Gln
            180                 185                 190
ctt aat gcg atc aac aga aag caa acc gga agc tta gca gtt cgt gat    624
Leu Asn Ala Ile Asn Arg Lys Gln Thr Gly Ser Leu Ala Val Arg Asp
        195                 200                 205
ctt tcc aat ctg gta aaa cca gag gat atg gtc aca tca gaa cat cta    672
Leu Ser Asn Leu Val Lys Pro Glu Asp Met Val Thr Ser Glu His Leu
    210                 215                 220
gtg aca ctc ctt gca gtt gtt cct cag tac tct caa aag gat tgg ttg    720
Val Thr Leu Leu Ala Val Val Pro Gln Tyr Ser Gln Lys Asp Trp Leu
225                 230                 235                 240
tca agc tat gag tcc ctt gac aca ttt gtg gta ccg aga tcg tct aaa    768
Ser Ser Tyr Glu Ser Leu Asp Thr Phe Val Val Pro Arg Ser Ser Lys
                245                 250                 255
aaa ctt tat gag gac aat gag tat gct ctc tac acg gta aca ttg ttt    816
Lys Leu Tyr Glu Asp Asn Glu Tyr Ala Leu Tyr Thr Val Thr Leu Phe
            260                 265                 270
gct aag gtt gtt gac aac ttt aag gtc cgt gca cgt gaa aaa ggt ttc    864
Ala Lys Val Val Asp Asn Phe Lys Val Arg Ala Arg Glu Lys Gly Phe
        275                 280                 285
cag gtt cgc gat ttt gag tat agt tct gaa gca cag gaa agt agg aag    912
Gln Val Arg Asp Phe Glu Tyr Ser Ser Glu Ala Gln Glu Ser Arg Lys
    290                 295                 300
gaa gag ctg gaa aag cta atg caa gac cag gaa gca atg agg gca tca    960
Glu Glu Leu Glu Lys Leu Met Gln Asp Gln Glu Ala Met Arg Ala Ser
305                 310                 315                 320
ctt ctg caa tgg tgc tat gcc agc tac agt gag gta ttc agt tcc tgg    1008
Leu Leu Gln Trp Cys Tyr Ala Ser Tyr Ser Glu Val Phe Ser Ser Trp
                325                 330                 335
atg cac ttc tgt ctg gtg cgt gtc ttt gta gag agc att ctt aga tat    1056
Met His Phe Cys Leu Val Arg Val Phe Val Glu Ser Ile Leu Arg Tyr
            340                 345                 350
ggt ctt ccc cca tca ttc ctg tct gct gtt cta gca cct tct caa aag    1104
Gly Leu Pro Pro Ser Phe Leu Ser Ala Val Leu Ala Pro Ser Gln Lys
        355                 360                 365
ggt gaa aag aaa gta agg agc atc ctg agg aac tct gtg ggc aat gtc    1152
Gly Glu Lys Lys Val Arg Ser Ile Leu Arg Asn Ser Val Gly Asn Val
    370                 375                 380
cat agt att tat tgg aaa tct gaa gac gat gtt ggt gta gct ggt ctg    1200
His Ser Ile Tyr Trp Lys Ser Glu Asp Asp Val Gly Val Ala Gly Leu
385                 390                 395                 400
gga ggc aag gca gtg ttt ttg gag taa                                1227
Gly Gly Lys Ala Val Phe Leu Glu
                405
<210>6
<211>408
<212>PRT
<213>Oryza sativa
<400>6
Pro Arg Val Arg Arg Ser Gly Arg Phe Phe Phe Leu Phe Ser Pro Pro
1               5                   10                  15
Thr Pro Thr Pro Ile Asp Leu His Pro Glu Ser Leu Leu Leu Thr Ala
            20                  25                  30
Gly Glu Leu Pro Ala Ala Ala Glu Met Ala Thr Arg Tyr Trp Ile Val
        35                  40                  45
Ser Leu Pro Val Gln Thr Pro Gly Ser Thr Ala Asn Ser Leu Trp Ala
    50                  55                  60
Arg Leu Gln Asp Ser Ile Ser Arg His Ser Phe Asp Thr Pro Leu Tyr
65                  70                  75                  80
Arg Phe Asn Val Pro Asp Leu Arg Val Gly Thr Leu Asp Ser Leu Leu
                85                  90                  95
Ala Leu Ser Asp Asp Leu Val Lys Ser Asn Val Phe Ile Glu Gly Val
            100                 105                 110
Ser His Lys Ile Arg Arg Gln Ile Glu Glu Leu Glu Arg Ala Gly Gly
        115                 120                 125
Val Glu Ser Gly Ala Leu Thr Val Asp Gly Val Pro Val Asp Thr Tyr
    130                 135                 140
Leu Thr Arg Phe Val Trp Asp Glu Gly Lys Tyr Pro Thr Met Ser Pro
145                 150                 155                 160
Leu Lys Glu Ile Ala Gly Ser Ile Gln Ser Gln Val Ser Lys Ile Glu
                165                 170                 175
Asp Asp Met Lys Val Arg Gly Ala Glu Tyr Asn Asn Val Arg Ser Gln
            180                 185                 190
Leu Asn Ala Ile Asn Arg Lys Gln Thr Gly Ser Leu Ala Val Arg Asp
        195                 200                 205
Leu Ser Asn Leu Val Lys Pro Glu Asp Met Val Thr Ser Glu His Leu
    210                 215                 220
Val Thr Leu Leu Ala Val Val Pro Gln Tyr Ser Gln Lys Asp Trp Leu
225                 230                 235                 240
Ser Ser Tyr Glu Ser Leu Asp Thr Phe Val Val Pro Arg Ser Ser Lys
                245                 250                 255
Lys Leu Tyr Glu Asp Asn Glu Tyr Ala Leu Tyr Thr Val Thr Leu Phe
            260                 265                 270
Ala Lys Val Val Asp Asn Phe Lys Val Arg Ala Arg Glu Lys Gly Phe
        275                 280                 285
Gln Val Arg Asp Phe Glu Tyr Ser Ser Glu Ala Gln Glu Ser Arg Lys
    290                 295                 300
Glu Glu Leu Glu Lys Leu Met Gln Asp Gln Glu Ala Met Arg Ala Ser
305                 310                 315                 320
Leu Leu Gln Trp Cys Tyr Ala Ser Tyr Ser Glu Val Phe Ser Ser Trp
                325                 330                 335
Met His Phe Cys Leu Val Arg Val Phe Val Glu Ser Ile Leu Arg Tyr
            340                 345                 350
Gly Leu Pro Pro Ser Phe Leu Ser Ala Val Leu Ala Pro Ser Gln Lys
        355                 360                 365
Gly Glu Lys Lys Val Arg Ser Ile Leu Arg Asn Ser Val Gly Asn Val
    370                 375                 380
His Ser Ile Tyr Trp Lys Ser Glu Asp Asp Val Gly Val Ala Gly Leu
385                 390                 395                 400
Gly Gly Lys Ala Val Phe Leu Glu
                405
<210>7
<211>1512
<212>DNA
<213>Oryza sativa
<220>
<221>CDS
<222>(1)..(1512)
<400>7
aag tat gct gag cgt ggg ctt cgt tct ctt gct gtt gca aga cag gaa    48
Lys Tyr Ala Glu Arg Gly Leu Arg Ser Leu Ala Val Ala Arg Gln Glu
1               5                   10                  15
gta cct gag aag tcg aag gag tct gct ggt gga cca tgg caa ttc gtt    96
Val Pro Glu Lys Ser Lys Glu Ser Ala Gly Gly Pro Trp Gln Phe Val
            20                  25                  30
ggt ctg ctg ccc ctg ttt gat ccc ccg agg cac gac agt gct gaa act    144
Gly Leu Leu Pro Leu Phe Asp Pro Pro Arg His Asp Ser Ala Glu Thr
        35                  40                  45
atc cgg aag gct ctc cat ctt ggt gtt aat gtt aag atg atc act ggt    192
Ile Arg Lys Ala Leu His Leu Gly Val Asn Val Lys Met Ile Thr Gly
    50                  55                  60
gac cag ctt gct att ggt aag gag act ggt agg agg ctt gga atg ggt    240
Asp Gln Leu Ala Ile Gly Lys Glu Thr Gly Arg Arg Leu Gly Met Gly
65                  70                  75                  80
aca aac atg tat cct tca tcc gca ttg ctc gga caa aac aag gac gct    288
Thr Asn Met Tyr Pro Ser Ser Ala Leu Leu Gly Gln Asn Lys Asp Ala
                85                  90                  95
tca ctt gag gca ctt ccc gtg gat gag ctc att gag aag gct gat ggt    336
Ser Leu Glu Ala Leu Pro Val Asp Glu Leu Ile Glu Lys Ala Asp Gly
            100                 105                 110
ttt gcc gga gtc ttc cct gag cac aaa tat gag atc gtg aag agg ttg    384
Phe Ala Gly Val Phe Pro Glu His Lys Tyr Glu Ile Val Lys Arg Leu
        115                 120                 125
caa gag aag aag cac atc gtc ggt atg acc gga gat ggt gtc aat gat    432
Gln Glu Lys Lys His Ile Val Gly Met Thr Gly Asp Gly Val Asn Asp
    130                 135                 140
gcc cct gct ctt aag aag gcc gac att ggt att gct gtt gct gat gca    480
Ala Pro Ala Leu Lys Lys Ala Asp Ile Gly Ile Ala Val Ala Asp Ala
145                 150                 155                 160
ata gat gct gca aga agt gct tcc gac att gtg ctc act gag cca ggt    528
Ile Asp Ala Ala Arg Ser Ala Ser Asp Ile Val Leu Thr Glu Pro Gly
                165                 170                 175
ctt agt gtc att atc agc gct gtc ctc act agc aga tgc atc ttc cag    576
Leu Ser Val Ile Ile Ser Ala Val Leu Thr Ser Arg Cys Ile Phe Gln
            180                 185                 190
agg atg aag aac tat acc att tat gca gtt tcc atc acc atc cgt ata    624
Arg Met Lys Asn Tyr Thr Ile Tyr Ala Val Ser Ile Thr Ile Arg Ile
        195                 200                 205
gtg ctt gga ttt ttg ctt att gct ctg atc tgg aaa tac gac ttc tca    672
Val Leu Gly Phe Leu Leu Ile Ala Leu Ile Trp Lys Tyr Asp Phe Ser
    210                 215                 220
ccc ttc atg gtc ctt atc att gcc atc ctg aat gac ggt act atc atg    720
Pro Phe Met Val Leu Ile Ile Ala Ile Leu Asn Asp Gly Thr Ile Met
225                 230                 235                 240
acg atc tcg aag gac aga gtt aag cct tct ccc ttg cca gac agc tgg    768
Thr Ile Ser Lys Asp Arg Val Lys Pro Ser Pro Leu Pro Asp Ser Trp
                245                 250                 255
aag ctg aag gaa atc ttc gct acc ggt att gtg ctt gga agc tac ctt    816
Lys Leu Lys Glu Ile Phe Ala Thr Gly Ile Val Leu Gly Ser Tyr Leu
            260                 265                 270
gct ctg atg acc gtt att ttc ttc tgg gcc atg cac aag aca gac ttt    864
Ala Leu Met Thr Val Ile Phe Phe Trp Ala Met His Lys Thr Asp Phe
        275                 280                 285
ttc acg gac aaa ttc ggt gtc aga tca atc agg aac agt gaa cat gag    912
Phe Thr Asp Lys Phe Gly Val Arg Ser Ile Arg Asn Ser Glu His Glu
    290                 295                 300
atg atg tct gca ctg tac ctc caa gtc agt att gtg agt cag gcc ctc    960
Met Met Ser Ala Leu Tyr Leu Gln Val Ser Ile Val Ser Gln Ala Leu
305                 310                 315                 320
atc ttc gtc acc cgt tct cgc agc tgg tcc ttc atc gaa cgc cct ggt    1008
Ile Phe Val Thr Arg Ser Arg Ser Trp Ser Phe Ile Glu Arg Pro Gly
                325                 330                 335
ctt ctc ttg gtc act gca ttc atg ctt gca caa ctg gtt gcg aca ttc    1056
Leu Leu Leu Val Thr Ala Phe Met Leu Ala Gln Leu Val Ala Thr Phe
            340                 345                 350
ctc gct gtc tat gcc aac tgg ggc ttt gcc agg atc aag ggc att ggc    1104
Leu Ala Val Tyr Ala Asn Trp Gly Phe Ala Arg Ile Lys Gly Ile Gly
        355                 360                 365
tgg ggc tgg gct ggc gtt atc tgg ctt tac agc att gtg ttc tac ttc    1152
Trp Gly Trp Ala Gly Val Ile Trp Leu Tyr Ser Ile Val Phe Tyr Phe
    370                 375                 380
cct ctt gac atc ttc aag ttc ttc atc cgc ttt gtg ctg agt gga agg    1200
Pro Leu Asp Ile Phe Lys Phe Phe Ile Arg Phe Val Leu Ser Gly Arg
385                 390                 395                 400
gcc tgg gac aac ctc ctt gag aac aag att gca ttc acc acc aag aag    1248
Ala Trp Asp Asn Leu Leu Glu Asn Lys Ile Ala Phe Thr Thr Lys Lys
                405                 410                 415
gat tac ggt agg gag gag agg gag gca caa tgg gcc acc gca caa aga    1296
Asp Tyr Gly Arg Glu Glu Arg Glu Ala Gln Trp Ala Thr Ala Gln Arg
            420                 425                 430
aca ctt cac ggc ctt cag cca ccg gag gtc gcc tcc aac acg ctc ttc    1344
Thr Leu His Gly Leu Gln Pro Pro Glu Val Ala Ser Asn Thr Leu Phe
        435                 440                 445
aac gac aag agc agc tac cgc gag ctc tct gag atc gct gag caa gcc    1392
Asn Asp Lys Ser Ser Tyr Arg Glu Leu Ser Glu Ile Ala Glu Gln Ala
    450                 455                 460
aag aga cga gct gag atc gcg agg ctg aga gag ctg aac act ctc aag    1440
Lys Arg Arg Ala Glu Ile Ala Arg Leu Arg Glu Leu Asn Thr Leu Lys
465                 470                 475                 480
ggc cac gtc gaa tcg gtg gtg aag ctg aag ggg ctg gac atc gac acg    1488
Gly His Val Glu Ser Val Val Lys Leu Lys Gly Leu Asp Ile Asp Thr
                485                 490                 495
atc cag cag aac tac aca gtg tga                                    1512
Ile Gln Gln Asn Tyr Thr Val
            500
<210>8
<211>503
<212>PRT
<213>Oryza sativa
<400>8
Lys Tyr Ala Glu Arg Gly Leu Arg Ser Leu Ala Val Ala Arg Gln Glu
1               5                   10                  15
Val Pro Glu Lys Ser Lys Glu Ser Ala Gly Gly Pro Trp Gln Phe Val
            20                  25                  30
Gly Leu Leu Pro Leu Phe Asp Pro Pro Arg His Asp Ser Ala Glu Thr
        35                  40                  45
Ile Arg Lys Ala Leu His Leu Gly Val Asn Val Lys Met Ile Thr Gly
    50                  55                  60
Asp Gln Leu Ala Ile Gly Lys Glu Thr Gly Arg Arg Leu Gly Met Gly
65                  70                  75                  80
Thr Asn Met Tyr Pro Ser Ser Ala Leu Leu Gly Gln Asn Lys Asp Ala
                85                  90                  95
Ser Leu Glu Ala Leu Pro Val Asp Glu Leu Ile Glu Lys Ala Asp Gly
            100                 105                 110
Phe Ala Gly Val Phe Pro Glu His Lys Tyr Glu Ile Val Lys Arg Leu
        115                 120                 125
Gln Glu Lys Lys His Ile Val Gly Met Thr Gly Asp Gly Val Asn Asp
    130                 135                 140
Ala Pro Ala Leu Lys Lys Ala Asp Ile Gly Ile Ala Val Ala Asp Ala
145                 150                 155                 160
Ile Asp Ala Ala Arg Ser Ala Ser Asp Ile Val Leu Thr Glu Pro Gly
                165                 170                 175
Leu Ser Val Ile Ile Ser Ala Val Leu Thr Ser Arg Cys Ile Phe Gln
            180                 185                 190
Arg Met Lys Asn Tyr Thr Ile Tyr Ala Val Ser Ile Thr Ile Arg Ile
        195                 200                 205
Val Leu Gly Phe Leu Leu Ile Ala Leu Ile Trp Lys Tyr Asp Phe Ser
    210                 215                 220
Pro Phe Met Val Leu Ile Ile Ala Ile Leu Asn Asp Gly Thr Ile Met
225                 230                 235                 240
Thr Ile Ser Lys Asp Arg Val Lys Pro Ser Pro Leu Pro Asp Ser Trp
                245                 250                 255
Lys Leu Lys Glu Ile Phe Ala Thr Gly Ile Val Leu Gly Ser Tyr Leu
            260                 265                 270
Ala Leu Met Thr Val Ile Phe Phe Trp Ala Met His Lys Thr Asp Phe
        275                 280                 285
Phe Thr Asp Lys Phe Gly Val Arg Ser Ile Arg Asn Ser Glu His Glu
    290                 295                 300
Met Met Ser Ala Leu Tyr Leu Gln Val Ser Ile Val Ser Gln Ala Leu
305                 310                 315                 320
Ile Phe Val Thr Arg Ser Arg Ser Trp Ser Phe Ile Glu Arg Pro Gly
                325                 330                 335
Leu Leu Leu Val Thr Ala Phe Met Leu Ala Gln Leu Val Ala Thr Phe
            340                 345                 350
Leu Ala Val Tyr Ala Asn Trp Gly Phe Ala Arg Ile Lys Gly Ile Gly
        355                 360                 365
Trp Gly Trp Ala Gly Val Ile Trp Leu Tyr Ser Ile Val Phe Tyr Phe
    370                 375                 380
Pro Leu Asp Ile Phe Lys Phe Phe Ile Arg Phe Val Leu Ser Gly Arg
385                 390                 395                 400
Ala Trp Asp Asn Leu Leu Glu Asn Lys Ile Ala Phe Thr Thr Lys Lys
                405                 410                 415
Asp Tyr Gly Arg Glu Glu Arg Glu Ala Gln Trp Ala Thr Ala Gln Arg
            420                 425                 430
Thr Leu His Gly Leu Gln Pro Pro Glu Val Ala Ser Asn Thr Leu Phe
        435                 440                 445
Asn Asp Lys Ser Ser Tyr Arg Glu Leu Ser Glu Ile Ala Glu Gln Ala
    450                 455                 460
Lys Arg Arg Ala Glu Ile Ala Arg Leu Arg Glu Leu Asn Thr Leu Lys
465                 470                 475                 480
Gly His Val Glu Ser Val Val Lys Leu Lys Gly Leu Asp Ile Asp Thr
                485                 490                 495
Ile Gln Gln Asn Tyr Thr Val
            500
<210>9
<211>612
<212>DNA
<213>Oryza sativa
<220>
<221>CDS
<222>(1)..(612)
<400>9
atg gcc atg gcc acg caa gcc tcc gcc gcc aag tgc cac ctc ctc gcc    48
Met Ala Met Ala Thr Gln Ala Ser Ala Ala Lys Cys His Leu Leu Ala
1               5                   10                  15
gcc tgg gca ccg gcg aag ccg cgc tca tcc acc ctc tcc atg ccc acc    96
Ala Trp Ala Pro Ala Lys Pro Arg Ser Ser Thr Leu Ser Met Pro Thr
            20                  25                  30
tcg agg gca ccc acc tcc ctc aga gcg gcg gcg gag gat cag ccc gcc    144
Ser Arg Ala Pro Thr Ser Leu Arg Ala Ala Ala Glu Asp Gln Pro Ala
        35                  40                  45
gcg gcg gcg acg gag gag aag aag cca gcc ccc gcg ggg ttc gtg ccg    192
Ala Ala Ala Thr Glu Glu Lys Lys Pro Ala Pro Ala Gly Phe Val Pro
    50                  55                  60
ccg cag ctg gac ccc aac acg ccg tcc ccg atc ttc ggc ggg agc acg    240
Pro Gln Leu Asp Pro Asn Thr Pro Ser Pro Ile Phe Gly Gly Ser Thr
65                  70                  75                  80
ggg gga ctc ctc cgg aag gcg cag gtg gag gag ttc tac gtc atc aca    288
Gly Gly Leu Leu Arg Lys Ala Gln Val Glu Glu Phe Tyr Val Ile Thr
                85                  90                  95
tgg acg tcg ccc aag gag cag gtg ttc gag atg ccc acg ggc ggc gcc    336
Trp Thr Ser Pro Lys Glu Gln Val Phe Glu Met Pro Thr Gly Gly Ala
            100                 105                 110
gcc atc atg cgc gag ggc ccc aac ctg ctg aag ctg gcc agg aag gag    384
Ala Ile Met Arg Glu Gly Pro Asn Leu Leu Lys Leu Ala Arg Lys Glu
        115                 120                 125
cag tgc ctg gcc ctg ggc acc agg ctc cgc tcc aag tac aag atc aac    432
Gln Cys Leu Ala Leu Gly Thr Arg Leu Arg Ser Lys Tyr Lys Ile Asn
    130                 135                 140
tac cag ttc tac cgc gtc ttc ccc aat ggc gag gtg cag tac ctc cac    480
Tyr Gln Phe Tyr Arg Val Phe Pro Asn Gly Glu Val Gln Tyr Leu His
145                 150                 155                 160
ccc aag gac ggc gtc tac ccg gag aag gtc aac gcc ggc agg cag ggc    528
Pro Lys Asp Gly Val Tyr Pro Glu Lys Val Asn Ala Gly Arg Gln Gly
                165                 170                 175
gtc ggc cag aac ttc cgc agc atc ggc aag aac gtc agc ccc atc gag    576
Val Gly Gln Asn Phe Arg Ser Ile Gly Lys Asn Val Ser Pro Ile Glu
            180                 185                 190
gtc aag ttc acc ggc aag aac gtc ttc gac atc tag                    612
Val Lys Phe Thr Gly Lys Asn Val Phe Asp Ile
        195                 200
<210>10
<211>203
<212>PRT
<213>Oryza sativa
<400>10
Met Ala Met Ala Thr Gln Ala Ser Ala Ala Lys Cys His Leu Leu Ala
1               5                   10                  15
Ala Trp Ala Pro Ala Lys Pro Arg Ser Ser Thr Leu Ser Met Pro Thr
            20                  25                  30
Ser Arg Ala Pro Thr Ser Leu Arg Ala Ala Ala Glu Asp Gln Pro Ala
        35                  40                  45
Ala Ala Ala Thr Glu Glu Lys Lys Pro Ala Pro Ala Gly Phe Val Pro
    50                  55                  60
Pro Gln Leu Asp Pro Asn Thr Pro Ser Pro Ile Phe Gly Gly Ser Thr
65                  70                  75                  80
Gly Gly Leu Leu Arg Lys Ala Gln Val Glu Glu Phe Tyr Val Ile Thr
                85                  90                  95
Trp Thr Ser Pro Lys Glu Gln Val Phe Glu Met Pro Thr Gly Gly Ala
            100                 105                 110
Ala Ile Met Arg Glu Gly Pro Asn Leu Leu Lys Leu Ala Arg Lys Glu
        115                 120                 125
Gln Cys Leu Ala Leu Gly Thr Arg Leu Arg Ser Lys Tyr Lys Ile Asn
    130                 135                 140
Tyr Gln Phe Tyr Arg Val Phe Pro Asn Gly Glu Val Gln Tyr Leu His
145                 150                 155                 160
Pro Lys Asp Gly Val Tyr Pro Glu Lys Val Asn Ala Gly Arg Gln Gly
                165                 170                 175
Val Gly Gln Asn Phe Arg Ser Ile Gly Lys Asn Val Ser Pro Ile Glu
            180                 185                 190
Val Lys Phe Thr Gly Lys Asn Val Phe Asp Ile
        195                 200
<210>11
<211>901
<212>DNA
<213>Oryza sativa
<220>
<221>CDS
<222>(1)..(900)
<400>11
gcg cca ggg gcg cga gtg ttc ctg gca cgg ccg ctc ctc cgc cgc tcg    48
Ala Pro Gly Ala Arg Val Phe Leu Ala Arg Pro Leu Leu Arg Arg Ser
1               5                   10                  15
ccg cgg ggc gtc gcc tgc gcc ctt cgc cgg agg ccc tcc aag tac aag    96
Pro Arg Gly Val Ala Cys Ala Leu Arg Arg Arg Pro Ser Lys Tyr Lys
            20                  25                  30
aat aaa atc cag aat gag gag gtt gta gta gag gat gat att ggc ggt    144
Asn Lys Ile Gln Asn Glu Glu Val Val Val Glu Asp Asp Ile Gly Gly
        35                  40                  45
ggt ggt gaa gac gat gac gac gcg ctg gaa gca ctt ttt aag cag ttg    192
Gly Gly Glu Asp Asp Asp Asp Ala Leu Glu Ala Leu Phe Lys Gln Leu
    50                  55                  60
gaa gaa gat ctc aag aat gat gat ttg tct gtt gag gat gat gac gat    240
Glu Glu Asp Leu Lys Asn Asp Asp Leu Ser Val Glu Asp Asp Asp Asp
65                  70                  75                  80
gga att tca gaa gaa gat atg gca aga ttt gag cag gag ttg gca gag    288
Gly Ile Ser Glu Glu Asp Met Ala Arg Phe Glu Gln Glu Leu Ala Glu
                85                  90                  95
gca atc ggg gat att gct gat gct gat gaa tct gga gag ggt tcg tca    336
Ala Ile Gly Asp Ile Ala Asp Ala Asp Glu Ser Gly Glu Gly Ser Ser
            100                 105                 110
tta ggc tct gag gct tat ggg aat gat gaa aaa acg gat gaa atc aaa    384
Leu Gly Ser Glu Ala Tyr Gly Asn Asp Glu Lys Thr Asp Glu Ile Lys
        115                 120                 125
cgg cca gag ctg aaa aac tgg caa ctt aag agg ctg gct cgt gct ctc    432
Arg Pro Glu Leu Lys Asn Trp Gln Leu Lys Arg Leu Ala Arg Ala Leu
    130                 135                 140
aaa ata ggt cgc cgt aaa act agt ata aag aat ctt gca ggg gaa cta    480
Lys Ile Gly Arg Arg Lys Thr Ser Ile Lys Asn Leu Ala Gly Glu Leu
145                 150                 155                 160
ggc ctg gat agg act ttg gtc att gaa ttg ctc cga aat cca cct cca    528
Gly Leu Asp Arg Thr Leu Val Ile Glu Leu Leu Arg Asn Pro Pro Pro
                165                 170                 175
aaa ctt cta ttc atg tct gat tct ttg cct gat gaa gac cct tct aaa    576
Lys Leu Leu Phe Met Ser Asp Ser Leu Pro Asp Glu Asp Pro Ser Lys
            180                 185                 190
cct gaa atc aag gaa ata gag ccc tct cca gta gtt gat aac gct gat    624
Pro Glu Ile Lys Glu Ile Glu Pro Ser Pro Val Val Asp Asn Ala Asp
        195                 200                 205
gtc act gaa acc aag cca cag acg gaa ctt cct gtt cat gtc atg tgc    672
Val Thr Glu Thr Lys Pro Gln Thr Glu Leu Pro Val His Val Met Cys
    210                 215                 220
gca gaa tgg tct tca cag aaa aga tta aaa aag gtg caa ctg gag aca    720
Ala Glu Trp Ser Ser Gln Lys Arg Leu Lys Lys Val Gln Leu Glu Thr
225                 230                 235                 240
tta gaa aga gtc tac tcc cga acc aaa cgc cct aca aat aca atg atc    768
Leu Glu Arg Val Tyr Ser Arg Thr Lys Arg Pro Thr Asn Thr Met Ile
                245                 250                 255
agc agc ata gtt caa gtg aca agc ctt cca cgg aag acc att gtt aag    816
Ser Ser Ile Val Gln Val Thr Ser Leu Pro Arg Lys Thr Ile Val Lys
            260                 265                 270
tgg ttt gag gat aga agg gaa cag gat ggg gta cct gac cat cga gtt    864
Trp Phe Glu Asp Arg Arg Glu Gln Asp Gly Val Pro Asp His Arg Val
        275                 280                 285
gca ttc aag aga tcc cta tct gag acc ata gct agt t                  901
Ala Phe Lys Arg Ser Leu Ser Glu Thr Ile Ala Ser
    290                 295                 300
<210>12
<211>300
<212>PRT
<213>Oryza sativa
<400>12
Ala Pro Gly Ala Arg Val Phe Leu Ala Arg Pro Leu Leu Arg Arg Ser
1               5                   10                  15
Pro Arg Gly Val Ala Cys Ala Leu Arg Arg Arg Pro Ser Lys Tyr Lys
            20                  25                  30
Asn Lys Ile Gln Asn Glu Glu Val Val Val Glu Asp Asp Ile Gly Gly
        35                  40                  45
Gly Gly Glu Asp Asp Asp Asp Ala Leu Glu Ala Leu phe Lys Gln Leu
    50                  55                  60
Glu Glu Asp Leu Lys Asn Asp Asp Leu Ser Val Glu Asp Asp Asp Asp
65                  70                  75                  80
Gly Ile Ser Glu Glu Asp Met Ala Arg Phe Glu Gln Glu Leu Ala Glu
                85                  90                  95
Ala Ile Gly Asp Ile Ala Asp Ala Asp Glu Ser Gly Glu Gly Ser Ser
            100                 105                 110
Leu Gly Ser Glu Ala Tyr Gly Asn Asp Glu Lys Thr Asp Glu Ile Lys
        115                 120                 125
Arg Pro Glu Leu Lys Asn Trp Gln Leu Lys Arg Leu Ala Arg Ala Leu
    130                 135                 140
Lys Ile Gly Arg Arg Lys Thr Ser Ile Lys Asn Leu Ala Gly Glu Leu
145                 150                 155                 160
Gly Leu Asp Arg Thr Leu Val Ile Glu Leu Leu Arg Asn Pro Pro Pro
                165                 170                 175
Lys Leu Leu Phe Met Ser Asp Ser Leu Pro Asp Glu Asp Pro Ser Lys
            180                 185                 190
Pro Glu Ile Lys Glu Ile Glu Pro Ser Pro Val Val Asp Asn Ala Asp
        195                 200                 205
Val Thr Glu Thr Lys Pro Gln Thr Glu Leu Pro Val His Val Met Cys
    210                 215                 220
Ala Glu Trp Ser Ser Gln Lys Arg Leu Lys Lys Val Gln Leu Glu Thr
225                 230                 235                 240
Leu Glu Arg Val Tyr Ser Arg Thr Lys Arg Pro Thr Asn Thr Met Ile
                245                 250                 255
Ser Ser Ile Val Gln Val Thr Ser Leu Pro Arg Lys Thr Ile Val Lys
            260                 265                 270
Trp Phe Glu Asp Arg Arg Glu Gln Asp Gly Val Pro Asp His Arg Val
        275                 280                 285
Ala Phe Lys Arg Ser Leu Ser Glu Thr Ile Ala Ser
    290                 295                 300
<210>13
<211>799
<212>DNA
<213>Oryza sativa
<220>
<221>CDS
<222>(1)..(798)
<400>13
gcc cca cgc cgc ccc tcc acc ttc ctc aac gcc gtc gcg ctc ggc aac    48
Ala Pro Arg Arg Pro Ser Thr Phe Leu Asn Ala Val Ala Leu Gly Asn
1               5                   10                  15
gtc ggg gcg ggc aag tcg gcc gtg ctg aac agc ctc atc ggc cac ccc    96
Val Gly Ala Gly Lys Ser Ala Val Leu Asn Ser Leu Ile Gly His pro
            20                  25                  30
gtg ctg ccg acg ggg gag aac ggg gcg acg agg gcg cca att gtg gtg    144
Val Leu Pro Thr Gly Glu Asn Gly Ala Thr Arg Ala Pro Ile Val Val
        35                  40                  45
gac ctg cag agg gac ccg ggc ctc agc agc aag tcc atc gtg ctg caa    192
Asp Leu Gln Arg Asp Pro Gly Leu Ser Ser Lys Ser Ile Val Leu Gln
    50                  55                  60
atc gac agc aag tcg cag cgg gtg tcc gca agt tcg ctg cgg cat tcg    240
Ile Asp Ser Lys Ser Gln Arg Val Ser Ala Ser Ser Leu Arg His Ser
65                  70                  75                  80
ctg cag gac agg ctc agc aag ggg gcg tcc agc gga tcc agt agg ggc    288
Leu Gln Asp Arg Leu Ser Lys Gly Ala Ser Ser Gly Ser Ser Arg Gly
                85                  90                  95
cgt gta gag ggg atc aat ctc aag ctg cgg acg agt aca gct ccc cca    336
Arg Val Glu Gly Ile Asn Leu Lys Leu Arg Thr Ser Thr Ala Pro Pro
            100                 105                 110
cta aag ctg gtt gat tta cct ggg ata gac cag cga gct gtt gac gat    384
Leu Lys Leu Val Asp Leu Pro Gly Ile Asp Gln Arg Ala Val Asp Asp
        115                 120                 125
cca atg att aat gaa tat gct ggg cac aat gat gca ata ctg cta gtt    432
Pro Met Ile Asn Glu Tyr Ala Gly His Asn Asp Ala Ile Leu Leu Val
    130                 135                 140
gtg ata cct gca atg caa gca gct gat gtt gcg tca tct cga gct ctt    480
Val Ile Pro Ala Met Gln Ala Ala Asp Val Ala Ser Ser Arg Ala Leu
145                 150                 155                 160
agg ctg gcc aag gat att gat gca gat ggc acc aga act gta ggt gtg    528
Arg Leu Ala Lys Asp Ile Asp Ala Asp Gly Thr Arg Thr Val Gly Val
                165                 170                 175
ata agt aaa gtt gat caa gca gaa gga gat gca aaa act ata gct tgt    576
Ile Ser Lys Val Asp Gln Ala Glu Gly Asp Ala Lys Thr Ile Ala Cys
            180                 185                 190
gtt cag gcc ctt ctg ttg aat aag ggc cca aaa aac ctt cca gat atc    624
Val Gln Ala Leu Leu Leu Asn Lys Gly Pro Lys Asn Leu Pro Asp Ile
        195                 200                 205
gag tgg gtt gct ctg ata gga caa tca gtt gca att gcg tca gct caa    672
Glu Trp Val Ala Leu Ile Gly Gln Ser Val Ala Ile Ala Ser Ala Gln
    210                 215                 220
gca gca ggt tct gaa aac tca cta gaa aca gca tgg aat gct gaa gct    720
Ala Ala Gly Ser Glu Asn Ser Leu Glu Thr Ala Trp Asn Ala Glu Ala
225                 230                 235                 240
gaa acc ctc aga tcc atc tta act gga gct cca aaa agt aaa cta ggt    768
Glu Thr Leu Arg Ser Ile Leu Thr Gly Ala Pro Lys Ser Lys Leu Gly
                245                 250                 255
aga ata gct ctg gtt gac acc att gct aag c                          799
Arg Ile Ala Leu Val Asp Thr Ile Ala Lys
            260                 265
<210>14
<211>266
<212>PRT
<213>Oryza sativa
<400>14
Ala Pro Arg Arg Pro Ser Thr Phe Leu Asn Ala Val Ala Leu Gly Asn
1               5                   10                  15
Val Gly Ala Gly Lys Ser Ala Val Leu Asn Ser Leu Ile Gly His Pro
            20                  25                  30
Val Leu Pro Thr Gly Glu Asn Gly Ala Thr Arg Ala Pro Ile Val Val
        35                  40                  45
Asp Leu Gln Arg Asp Pro Gly Leu Ser Ser Lys Ser Ile Val Leu Gln
    50                  55                  60
Ile Asp Ser Lys Ser Gln Arg Val Ser Ala Ser Ser Leu Arg His Ser
65                  70                  75                  80
Leu Gln Asp Arg Leu Ser Lys Gly Ala Ser Ser Gly Ser Ser Arg Gly
                85                  90                  95
Arg Val Glu Gly Ile Asn Leu Lys Leu Arg Thr Ser Thr Ala Pro Pro
            100                 105                 110
Leu Lys Leu Val Asp Leu Pro Gly Ile Asp Gln Arg Ala Val Asp Asp
        115                 120                 125
Pro Met Ile Asn Glu Tyr Ala Gly His Asn Asp Ala Ile Leu Leu Val
    130                 135                 140
Val Ile Pro Ala Met Gln Ala Ala Asp Val Ala Ser Ser Arg Ala Leu
145                 150                 155                 160
Arg Leu Ala Lys Asp Ile Asp Ala Asp Gly Thr Arg Thr Val Gly Val
                165                 170                 175
Ile Ser Lys Val Asp Gln Ala Glu Gly Asp Ala Lys Thr Ile Ala Cys
            180                 185                 190
Val Gln Ala Leu Leu Leu Asn Lys Gly Pro Lys Asn Leu Pro Asp Ile
        195                 200                 205
Glu Trp Val Ala Leu Ile Gly Gln Ser Val Ala Ile Ala Ser Ala Gln
    210                 215                 220
Ala Ala Gly Ser Glu Asn Ser Leu Glu Thr Ala Trp Asn Ala Glu Ala
225                 230                 235                 240
Glu Thr Leu Arg Ser Ile Leu Thr Gly Ala Pro Lys Ser Lys Leu Gly
                245                 250                 255
Arg Ile Ala Leu Val Asp Thr Ile Ala Lys
            260                 265
<210>15
<211>1429
<212>DNA
<213>Oryza sativa
<220>
<221>CDS
<222>(1)..(1428)
<400>15
atg ggg gcc ctt ttg agc tcc ccc aac agc aag aac cag cca tgg gag    48
Met Gly Ala Leu Leu Ser Ser Pro Asn Ser Lys Asn Gln Pro Trp Glu
1               5                   10                  15
cat ggt gaa gct tca aag gca gat tcc tcc aag aag ctg cgg atg tcg    96
His Gly Glu Ala Ser Lys Ala Asp Ser Ser Lys Lys Leu Arg Met Ser
            20                  25                  30
gcg ccg cct ctg tcc ggt ggc tac gac cac ccc ggg ctg atc ccg ggg    144
Ala Pro Pro Leu Ser Gly Gly Tyr Asp His Pro Gly Leu Ile Pro Gly
        35                  40                  45
ctc ccg gat gag atc tcg ctg cag atc ctc gca agg atg ccc cgg atg    192
Leu Pro Asp Glu Ile Ser Leu Gln Ile Leu Ala Arg Met Pro Arg Met
    50                  55                  60
ggt tat ctg aat gca aag atg gtt tcg agg agc tgg aag gct gcg atc    240
Gly Tyr Leu Asn Ala Lys Met Val Ser Arg Ser Trp Lys Ala Ala Ile
65                  70                  75                  80
act ggc gtg gag ctg tac cgg gtg agg aag gag ctg ggt gtg agt gag    288
Thr Gly Val GLu Leu Tyr Arg Val Arg Lys Glu Leu Gly Val Ser Glu
                85                  90                  95
gaa tgg ctg tac atg ctt acc aag tca gat gat ggg aag cta gtg tgg    336
Glu Trp Leu Tyr Met Leu Thr Lys Ser Asp Asp Gly Lys Leu Val Trp
            100                 105                 110
aat gca ttc gat ccg gtt tgt ggc caa tgg cag agg ctg cca ctg atg    384
Asn Ala Phe Asp Pro Val Cys Gly Gln Trp Gln Arg Leu Pro Leu Met
        115                 120                 125
ccg ggg atc agc cat gga gga gaa tgc aag agg ggc atc cct ggg ttg    432
Pro Gly Ile Ser His Gly Gly Glu Cys Lys Arg Gly Ile Pro Gly Leu
    130                 135                 140
tgg tta ggg gat ttg ttg agc gcc ggc atc agg gtc tct gat gtt att    480
Trp Leu Gly Asp Leu Leu Ser Ala Gly Ile Arg Val Ser Asp Val Ile
145                 150                 155                 160
aga ggc tgg ctt ggc caa agg gat tca ttg gat agg ctt ccg ttc tgc    528
Arg Gly Trp Leu Gly Gln Arg Asp Ser Leu Asp Arg Leu Pro Phe Cys
                165                 170                 175
ggt tgt gca att ggg aca gtc aac ggg tgc atc tat gtt tta ggt gga    576
Gly Cys Ala Ile Gly Thr Val Asn Gly Cys Ile Tyr Val Leu Gly Gly
            180                 185                 190
ttc tct aga ggc tcg gcg atg aaa tgt gta tgg agg tat gat cct ttt    624
Phe Ser Arg Gly Ser Ala Met Lys Cys Val Trp Arg Tyr Asp Pro Phe
        195                 200                 205
gtc aat gcg tgg cag gag gtt agc tcg atg agc acc ggg cgc gca ttc    672
Val Asn Ala Trp Gln Glu Val Ser Ser Met Ser Thr Gly Arg Ala Phe
    210                 215                 220
tgc aag gct agc ctg ctg aac aac aag ctg tat gtt gtt ggt ggt gtc    720
Cys Lys Ala Ser Leu Leu Asn Asn Lys Leu Tyr Val Val Gly Gly Val
225                 230                 235                 240
agc aaa ggc aag aac ggg tta gct ccg ctc caa tcc gcc gag gtg ttt    768
Ser Lys Gly Lys Asn Gly Leu Ala Pro Leu Gln Ser Ala Glu Val Phe
                245                 250                 255
gac cca agg aca gga att tgg gtg gga ggg gcc ctg aca ctc tcc gtc    816
Asp Pro Arg Thr Gly Ile Trp Val Gly Gly Ala Leu Thr Leu Ser Val
            260                 265                 270
tcg aaa ggg cca agc tct acc agc tgc ctc ttg gtt gag ctg gtg aag    864
Ser Lys Gly Pro Ser Ser Thr Ser Cys Leu Leu Val Glu Leu Val Lys
        275                 280                 285
ccc att gcg aca gga atg acc tct ttg gga ggc aag ctt tat gtt ctt    912
Pro Ile Ala Thr Gly Met Thr Ser Leu Gly Gly Lys Leu Tyr Val Leu
    290                 295                 300
caa agt ctg tat tcc ggg cca ttc ttt gtt gat gtt ggt ggg gag atc    960
Gln Ser Leu Tyr Ser Gly Pro Phe Phe Val Asp Val Gly Gly Glu Ile
305                 310                 315                 320
ttt gat ccg gag aca aat tca tgg gcg gaa atg cct gta gga atg ggc    1008
Phe Asp Pro Glu Thr Asn Ser Trp Ala Glu Met Pro Val Gly Met Gly
                325                 330                 335
gag ggc tgg cca gcg agg cag gct ggt acg aag tta agt gct gtc ata    1056
Glu Gly Trp Pro Ala Arg Gln Ala Gly Thr Lys Leu Ser Ala Val Ile
            340                 345                 350
gat ggg gac ttg tat gct ttg gag cca tca act tct ttt gat aga ggt    1104
Asp Gly Asp Leu Tyr Ala Leu Glu Pro Ser Thr Ser Phe Asp Arg Gly
        355                 360                 365
aag atc aag att tat gat cct cag gag gat gct tgg aag gtt gcc att    1152
Lys Ile Lys Ile Tyr Asp Pro Gln Glu Asp Ala Trp Lys Val Ala Ile
    370                 375                 380
ggc cag gta cca gtg ggt gac ttt gca gag tcg gaa tgt cca tac tta    1200
Gly Gln Val Pro Val Gly Asp Phe Ala Glu Ser Glu Cys Pro Tyr Leu
385                 390                 395                 400
ctt gca gga ttt ctt ggc aag ctc aat ttg atc atc aaa gat gta gat    1248
Leu Ala Gly Phe Leu Gly Lys Leu Asn Leu Ile Ile Lys Asp Val Asp
                405                 410                 415
agc aag atc aat ata atg caa acc gat gtt ctg aag cct gtg gag ttg    1296
Ser Lys Ile Asn Ile Met Gln Thr Asp Val Leu Lys Pro Val Glu Leu
            420                 425                 430
tca gcc cct gga aat ggt cca aca tgc caa aat caa caa ctt ttt tca    1344
Ser Ala Pro Gly Asn Gly Pro Thr Cys Gln Asn Gln Gln Leu Phe Ser
        435                 440                 445
gaa cag gaa act aat ttg tgg aaa gtc atc gtg tcg aaa aat ctt gca    1392
Glu Gln Glu Thr Asn Leu Trp Lys Val Ile Val Ser Lys Asn Leu Ala
    450                 455                 460
gcc gct gaa tta gtc agt tgt cag gtg ctc aac ata t                  1429
Ala Ala Glu Leu Val Ser Cys Gln Val Leu Asn Ile
465                 470                 475
<210>16
<211>476
<212>PRT
<213>Oryza sativa
<400>16
Met Gly Ala Leu Leu Ser Ser Pro Asn Ser Lys Asn Gln Pro Trp Glu
1               5                   10                  15
His Gly Glu Ala Ser Lys Ala Asp Ser Ser Lys Lys Leu Arg Met Ser
            20                  25                  30
Ala Pro Pro Leu Ser Gly Gly Tyr Asp His Pro Gly Leu Ile Pro Gly
        35                  40                  45
Leu Pro Asp Glu Ile Ser Leu Gln Ile Leu Ala Arg Met Pro Arg Met
    50                  55                  60
Gly Tyr Leu Asn Ala Lys Met Val Ser Arg Ser Trp Lys Ala Ala Ile
65                  70                  75                  80
Thr Gly Val Glu Leu Tyr Arg Val Arg Lys Glu Leu Gly Val Ser Glu
                85                  90                  95
Glu Trp Leu Tyr Met Leu Thr Lys Ser Asp Asp Gly Lys Leu Val Trp
            100                 105                 110
Asn Ala Phe Asp Pro Val Cys Gly Gln Trp Gln Arg Leu Pro Leu Met
        115                 120                 125
Pro Gly Ile Ser His Gly Gly Glu Cys Lys Arg Gly Ile Pro Gly Leu
    130                 135                 140
Trp Leu Gly Asp Leu Leu Ser Ala Gly Ile Arg Val Ser Asp Val Ile
145                 150                 155                 160
Arg Gly Trp Leu Gly Gln Arg Asp Ser Leu Asp Arg Leu Pro Phe Cys
                165                 170                 175
Gly Cys Ala Ile Gly Thr Val Asn Gly Cys Ile Tyr Val Leu Gly Gly
            180                 185                 190
Phe Ser Arg Gly Ser Ala Met Lys Cys Val Trp Arg Tyr Asp Pro Phe
        195                 200                 205
Val Asn Ala Trp Gln Glu Val Ser Ser Met Ser Thr Gly Arg Ala Phe
    210                 215                 220
Cys Lys Ala Ser Leu Leu Asn Asn Lys Leu Tyr Val Val Gly Gly Val
225                 230                 235                 240
Ser Lys Gly Lys Asn Gly Leu Ala Pro Leu Gln Ser Ala Glu Val Phe
                245                 250                 255
Asp Pro Arg Thr Gly Ile Trp Val Gly Gly Ala Leu Thr Leu Ser Val
            260                 265                 270
Ser Lys Gly Pro Ser Ser Thr Ser Cys Leu Leu Val Glu Leu Val Lys
        275                 280                 285
Pro Ile Ala Thr Gly Met Thr Ser Leu Gly Gly Lys Leu Tyr Val Leu
    290                 295                 300
Gln Ser Leu Tyr Ser Gly Pro Phe Phe Val Asp Val Gly Gly Glu Ile
305                 310                 315                 320
Phe Asp Pro Glu Thr Asn Ser Trp Ala Glu Met Pro Val Gly Met Gly
                325                 330                 335
Glu Gly Trp Pro Ala Arg Gln Ala Gly Thr Lys Leu Ser Ala Val Ile
            340                 345                 350
Asp Gly Asp Leu Tyr Ala Leu Glu Pro Ser Thr Ser Phe Asp Arg Gly
        355                 360                 365
Lys Ile Lys Ile Tyr Asp Pro Gln Glu Asp Ala Trp Lys Val Ala Ile
    370                 375                 380
Gly Gln Val Pro Val Gly Asp Phe Ala Glu Ser Glu Cys Pro Tyr Leu
385                 390                 395                 400
Leu Ala Gly Phe Leu Gly Lys Leu Asn Leu Ile Ile Lys Asp Val Asp
                405                 410                 415
Ser Lys Ile Asn Ile Met Gln Thr Asp Val Leu Lys Pro Val Glu Leu
            420                 425                 430
Ser Ala Pro Gly Asn Gly Pro Thr Cys Gln Asn Gln Gln Leu Phe Ser
        435                 440                 445
Glu Gln Glu Thr Asn Leu Trp Lys Val Ile Val Ser Lys Asn Leu Ala
    450                 455                 460
Ala Ala Glu Leu Val Ser Cys Gln Val Leu Asn Ile
465                 470                 475
<210>17
<211>1140
<212>DNA
<213>Oryza sativa
<220>
<221>CDS
<222>(1)..(1140)
<400>17
tca tcc ttc ctt tgg ggt tat ctg gtg tca cca ata att ggt gga gca    48
Ser Ser Phe Leu Trp Gly Tyr Leu Val Ser Pro Ile Ile Gly Gly Ala
1               5                   10                  15
ctg gtc gac tac tat ggc gga aag cga gtt atg gct tat ggc gtg gct    96
Leu Val Asp Tyr Tyr Gly Gly Lys Arg Val Met Ala Tyr Gly Val Ala
            20                  25                  30
cta tgg tcc ttg gct aca ttc ctc tcc cct tgg gca gct gct cgc tct    144
Leu Trp Ser Leu Ala Thr Phe Leu Ser Pro Trp Ala Ala Ala Arg Ser
        35                  40                  45
ctc tgg ttg ttc ctc tca act aga gtt ctg ctg ggt atg gca gaa ggg    192
Leu Trp Leu Phe Leu Ser Thr Arg Val Leu Leu Gly Met Ala Glu Gly
    50                  55                  60
gtg gca ctc cca agt atg aac aac atg gtg ttg agg tgg ttt cct cgc    240
Val Ala Leu Pro Ser Met Asn Asn Met Val Leu Arg Trp Phe Pro Arg
65                  70                  75                  80
aca gag cga tca agt gct gtc ggg att gca atg gct ggt ttt cag ctt    288
Thr Glu Arg Ser Ser Ala Val Gly Ile Ala Met Ala Gly Phe Gln Leu
                85                  90                  95
ggc aat acc att ggt tta ctt ctt tcc cct atc atc atg tca cga gct    336
Gly Asn Thr Ile Gly Leu Leu Leu Ser Pro Ile Ile Met Ser Arg Ala
            100                 105                 110
gga att ttt gga cca ttt gtg ata ttt gga tta ttt gga ttt cta tgg    384
Gly Ile Phe Gly Pro Phe Val Ile Phe Gly Leu Phe Gly Phe Leu Trp
        115                 120                 125
gtg ttg gtg tgg ata tct gct ata tca ggg act cca ggt gaa aat gca    432
Val Leu Val Trp Ile Ser Ala Ile Ser Gly Thr Pro Gly Glu Asn Ala
    130                 135                 140
caa ata tca gca cat gaa cta gat tat ata acc agg ggt cag aaa ttg    480
Gln Ile Ser Ala His Glu Leu Asp Tyr Ile Thr Arg Gly Gln Lys Leu
145                 150                 155                 160
gta aaa act caa tct gga ggt gaa aga tta cga aag gtc cct cct ttc    528
Val Lys Thr Gln Ser Gly Gly Glu Arg Leu Arg Lys Val Pro Pro Phe
                165                 170                 175
agc aag cta ctc tct aaa tgg cca aca tgg gct tta att tct gca aat    576
Ser Lys Leu Leu Ser Lys Trp Pro Thr Trp Ala Leu Ile Ser Ala Asn
            180                 185                 190
gct atg cat agt tgg ggt tat ttt gtc att ctt tca tgg atg cca gtg    624
Ala Met His Ser Trp Gly Tyr Phe Val Ile Leu Ser Trp Met Pro Val
        195                 200                 205
tat ttc aaa aca ata tat cat gtt aat ctg aga gaa gct gca tgg ttt    672
Tyr Phe Lys Thr Ile Tyr His Val Asn Leu Arg Glu Ala Ala Trp Phe
    210                 215                 220
agt gca ctc ccc tgg gtc atg atg gca gtt tta ggc tat gtt gct ggt    720
Ser Ala Leu Pro Trp Val Met Met Ala Val Leu Gly Tyr Val Ala Gly
225                 230                 235                 240
gtt gta tca gac agg ctt atc caa aat ggt aca agc atc act ttg act    768
Val Val Ser Asp Arg Leu Ile Gln Asn Gly Thr Ser Ile Thr Leu Thr
                245                 250                 255
cgg aag ata atg cag aca att ggc ttt gtg ggt cct ggt gtg gct ctt    816
Arg Lys Ile Met Gln Thr Ile Gly Phe Val Gly Pro Gly Val Ala Leu
            260                 265                 270
ctt gga cta aat gca gca aag agt cca gtc atc gct tct gct tgg ctt    864
Leu Gly Leu Asn Ala Ala Lys Ser Pro Val Ile Ala Ser Ala Trp Leu
        275                 280                 285
act atc gct gta ggt ttg aag tcc ttt ggt cac tca ggt ttt cta gta    912
Thr Ile Ala Val Gly Leu Lys Ser Phe Gly His Ser Gly Phe Leu Val
    290                 295                 300
aat ctt cag gag att gct cca caa tat gct gga gtg cta cat gga atg    960
Asn Leu Gln Glu Ile Ala Pro Gln Tyr Ala Gly Val Leu His Gly Met
305                 310                 315                 320
tca aat aca gct gga aca ttt gct gcc att tta gga act gtt gga gca    1008
Ser Asn Thr Ala Gly Thr Phe Ala Ala Ile Leu Gly Thr Val Gly Ala
                325                 330                 335
ggt ttc ttt gtc gat cgg atg ggt tct ttc cgt gga ttt tta ata tta    1056
Gly Phe Phe Val Asp Arg Met Gly Ser Phe Arg Gly Phe Leu Ile Leu
            340                 345                 350
aca tct ctt cta tac ttc agt agc aca ctg ttc tgg gat ata ttt gct    1104
Thr Ser Leu Leu Tyr Phe Ser Ser Thr Leu Phe Trp Asp Ile Phe Ala
        355                 360                 365
act gga gag cgt gtt gat ttt gat ggc act ggc tag                    1140
Thr Gly Glu Arg Val Asp Phe Asp Gly Thr Gly
    370                 375
<210>18
<211>379
<212>PRT
<213>Oryza sativa
<400>18
Ser Ser Phe Leu Trp Gly Tyr Leu Val Ser Pro Ile Ile Gly Gly Ala
1               5                   10                  15
Leu Val Asp Tyr Tyr Gly Gly Lys Arg Val Met Ala Tyr Gly Val Ala
            20                  25                  30
Leu Trp Ser Leu Ala Thr Phe Leu Ser Pro Trp Ala Ala Ala Arg Ser
        35                  40                  45
Leu Trp Leu Phe Leu Ser Thr Arg Val Leu Leu Gly Met Ala Glu Gly
    50                  55                  60
Val Ala Leu Pro Ser Met Asn Asn Met Val Leu Arg Trp Phe Pro Arg
65                  70                  75                  80
Thr Glu Arg Ser Ser Ala Val Gly Ile Ala Met Ala Gly Phe Gln Leu
                85                  90                  95
Gly Asn Thr Ile Gly Leu Leu Leu Ser Pro Ile Ile Met Ser Arg Ala
            100                 105                 110
Gly Ile Phe Gly Pro Phe Val Ile Phe Gly Leu Phe Gly Phe Leu Trp
        115                 120                 125
Val Leu Val Trp Ile Ser Ala Ile Ser Gly Thr Pro Gly Glu Asn Ala
    130                 135                 140
Gln Ile Ser Ala His Glu Leu Asp Tyr Ile Thr Arg Gly Gln Lys Leu
145                 150                 155                 160
Val Lys Thr Gln Ser Gly Gly Glu Arg Leu Arg Lys Val Pro Pro Phe
                165                 170                 175
Ser Lys Leu Leu Ser Lys Trp Pro Thr Trp Ala Leu Ile Ser Ala Asn
            180                 185                 190
Ala Met His Ser Trp Gly Tyr Phe Val Ile Leu Ser Trp Met Pro Val
        195                 200                 205
Tyr Phe Lys Thr Ile Tyr His Val Asn Leu Arg Glu Ala Ala Trp Phe
    210                 215                 220
Ser Ala Leu Pro Trp Val Met Met Ala Val Leu Gly Tyr Val Ala Gly
225                 230                 235                 240
Val Val Ser Asp Arg Leu Ile Gln Asn Gly Thr Ser Ile Thr Leu Thr
                245                 250                 255
Arg Lys Ile Met Gln Thr Ile Gly Phe Val Gly Pro Gly Val Ala Leu
            260                 265                 270
Leu Gly Leu Asn Ala Ala Lys Ser Pro Val Ile Ala Ser Ala Trp Leu
        275                 280                 285
Thr Ile Ala Val Gly Leu Lys Ser Phe Gly His Ser Gly Phe Leu Val
    290                 295                 300
Asn Leu Gln Glu Ile Ala Pro Gln Tyr Ala Gly Val Leu His Gly Met
305                 310                 315                 320
Ser Asn Thr Ala Gly Thr Phe Ala Ala Ile Leu Gly Thr Val Gly Ala
                325                 330                 335
Gly Phe Phe Val Asp Arg Met Gly Ser Phe Arg Gly Phe Leu Ile Leu
            340                 345                 350
Thr Ser Leu Leu Tyr Phe Ser Ser Thr Leu Phe Trp Asp Ile Phe Ala
        355                 360                 365
Thr Gly Glu Arg Val Asp Phe Asp Gly Thr Gly
    370                 375
<210>19
<211>831
<212>DNA
<213>Oryza sativa
<220>
<221>CDS
<222>(1)..(831)
<400>19
atg gcg ttc cgg ctg agc aac agc ctg ctc ggg atc ctg aac gcg gtg    48
Met Ala Phe Arg Leu Ser Asn Ser Leu Leu Gly Ile Leu Asn Ala Val
1               5                   10                  15
acg ttc ctc ctg tcg gtg ccc gtg ctg ggc ggc ggc atc tgg ctg gcg    96
Thr Phe Leu Leu Ser Val Pro Val Leu Gly Gly Gly Ile Trp Leu Ala
            20                  25                  30
acg cgc gcc gac ggc acg gag tgc gag cgc tac ttc tcg gcg ccg gtg    144
Thr Arg Ala Asp Gly Thr Glu Cys Glu Arg Tyr Phe Ser Ala Pro Val
        35                  40                  45
atc gcg ttc ggg gtg ttc ctc ctc ctc gtc tcc ctc gcg ggc ctc gtc    192
Ile Ala Phe Gly Val Phe Leu Leu Leu Val Ser Leu Ala Gly Leu Val
    50                  55                  60
ggc gcc tgc tgc cgc gtc aac tgc ctc ctc tgg ttc tac ctc gtc gcc    240
Gly Ala Cys Cys Arg Val Asn Cys Leu Leu Trp Phe Tyr Leu Val Ala
65                  70                  75                  80
atg ttc gtc ctc atc gtc gtc ctc ttc tgc ttc acc gtc ttc gcc ttc    288
Met Phe Val Leu Ile Val Val Leu Phe Cys Phe Thr Val Phe Ala Phe
                85                  90                  95
gtc gtc acc aac aag ggc gcc ggc gag gcc gtc tcc ggc aga ggg tac    336
Val Val Thr Asn Lys Gly Ala Gly Glu Ala Val Ser Gly Arg Gly Tyr
            100                 105                 110
aag gag tac agg ctc ggc gac tac tcc aac tgg ctg cag aag cgg atg    384
Lys Glu Tyr Arg Leu Gly Asp Tyr Ser Asn Trp Leu Gln Lys Arg Met
        115                 120                 125
gag aac agc aag aac tgg aac agg atc agg agc tgc ctc cag gac tcc    432
Glu Asn Ser Lys Asn Trp Asn Arg Ile Arg Ser Cys Leu Gln Asp Ser
    130                 135                 140
aag gtc tgc aag aaa ctg cag gac aag aac tgg gat cgg acc cag ttc    480
Lys Val Cys Lys Lys Leu Gln Asp Lys Asn Trp Asp Arg Thr Gln Phe
145                 150                 155                 160
ttc aaa gcc gac ctc tcc ccg ctc gag tcc gga tgc tgc aag cca ccc    528
Phe Lys Ala Asp Leu Ser Pro Leu Glu Ser Gly Cys Cys Lys Pro Pro
                165                 170                 175
agc agc tgc aac ttc ctc tac gtc agc ggc acg aac tgg acg aag gtg    576
Ser Ser Cys Asn Phe Leu Tyr Val Ser Gly Thr Asn Trp Thr Lys Val
            180                 185                 190
ccc acc aac tcg tcg gac ccg gac tgc aac acg tgg gtc gac gac ggc    624
Pro Thr Asn Ser Ser Asp Pro Asp Cys Asn Thr Trp Val Asp Asp Gly
        195                 200                 205
acg cag ctg tgc tac aac tgc cag tcg tgc aag gcc ggc gcg gtg gcg    672
Thr Gln Leu Cys Tyr Asn Cys Gln Ser Cys Lys Ala Gly Ala Val Ala
    210                 215                 220
acc ctg aag cgg gac tgg aag cgc gtc gcc gtc gtc tgc atc gtc ttc    720
Thr Leu Lys Arg Asp Trp Lys Arg Val Ala Val Val Cys Ile Val Phe
225                 230                 235                 240
ctc gtc ttc atc gtc atc gtc tac tcc ctc ggc tgc tgc gcg ttc agg    768
Leu Val Phe Ile Val Ile Val Tyr Ser Leu Gly Cys Cys Ala Phe Arg
                245                 250                 255
aac aac cgg agg gac aac cgc ggc gcc tat cgc ggt gcc gcg tgg aag    816
Asn Asn Arg Arg Asp Asn Arg Gly Ala Tyr Arg Gly Ala Ala Trp Lys
            260                 265                 270
ggc gga tac gcc tga                                                831
Gly Gly Tyr Ala
        275
<210>20
<211>276
<212>PRT
<213>Oryza sativa
<400>20
Met Ala Phe Arg Leu Ser Asn Ser Leu Leu Gly Ile Leu Asn Ala Val
1               5                   10                  15
Thr Phe Leu Leu Ser Val Pro Val Leu Gly Gly Gly Ile Trp Leu Ala
            20                  25                  30
Thr Arg Ala Asp Gly Thr Glu Cys Glu Arg Tyr Phe Ser Ala Pro Val
        35                  40                  45
Ile Ala Phe Gly Val Phe Leu Leu Leu Val Ser Leu Ala Gly Leu Val
    50                  55                  60
Gly Ala Cys Cys Arg Val Asn Cys Leu Leu Trp Phe Tyr Leu Val Ala
65                  70                  75                  80
Met Phe Val Leu Ile Val Val Leu Phe Cys Phe Thr Val Phe Ala Phe
                85                  90                  95
Val Val Thr Asn Lys Gly Ala Gly Glu Ala Val Ser Gly Arg Gly Tyr
            100                 105                 110
Lys Glu Tyr Arg Leu Gly Asp Tyr Ser Asn Trp Leu Gln Lys Arg Met
        115                 120                 125
Glu Asn Ser Lys Asn Trp Asn Arg Ile Arg Ser Cys Leu Gln Asp Ser
    130                 135                 140
Lys Val Cys Lys Lys Leu Gln Asp Lys Asn Trp Asp Arg Thr Gln Phe
145                 150                 155                 160
Phe Lys Ala Asp Leu Ser Pro Leu Glu Ser Gly Cys Cys Lys Pro Pro
                165                 170                 175
Ser Ser Cys Asn Phe Leu Tyr Val Ser Gly Thr Asn Trp Thr Lys Val
            180                 185                 190
Pro Thr Asn Ser Ser Asp Pro Asp Cys Asn Thr Trp Val Asp Asp Gly
        195                 200                 205
Thr Gln Leu Cys Tyr Asn Cys Gln Ser Cys Lys Ala Gly Ala Val Ala
    210                 215                 220
Thr Leu Lys Arg Asp Trp Lys Arg Val Ala Val Val Cys Ile Val Phe
225                 230                 235                 240
Leu Val Phe Ile Val Ile Val Tyr Ser Leu Gly Cys Cys Ala Phe Arg
                245                 250                 255
Asn Asn Arg Arg Asp Asn Arg Gly Ala Tyr Arg Gly Ala Ala Trp Lys
            260                 265                 270
Gly Gly Tyr Ala
        275
<210>21
<211>2727
<212>DNA
<213>Oryza sativa
<220>
<221>CDS
<222>(1)..(2727)
<400>21
ata aaa aga ctt cac ctt ctg ctc aca gtg aag gaa tct gct atg gat    48
Ile Lys Arg Leu His Leu Leu Leu Thr Val Lys Glu Ser Ala Met Asp
1               5                   10                  15
gtt cct aca aac ctg gat gct aga agg cgg ata tca ttc ttt gct aat    96
Val Pro Thr Asn Leu Asp Ala Arg Arg Arg Ile Ser Phe Phe Ala Asn
            20                  25                  30
tct ctt ttc atg gac atg cca agt gct cca aaa gtc cgg cac atg ttg    144
Ser Leu Phe Met Asp Met Pro Ser Ala Pro Lys Val Arg His Met Leu
        35                  40                  45
ccc ttc tct gtc ttg act cct tac tac aaa gaa gat gtc ctt ttc tct    192
Pro Phe Ser Val Leu Thr Pro Tyr Tyr Lys Glu Asp Val Leu Phe Ser
    50                  55                  60
tcc caa gca tta gaa gac cag aat gaa gat ggg gtt tct att ctt ttt    240
Ser Gln Ala Leu Glu Asp Gln Asn Glu Asp Gly Val Ser Ile Leu Phe
65                  70                  75                  80
tac ttg caa aaa atc tat cca gat gaa tgg aaa cat ttc ctt caa agg    288
Tyr Leu Gln Lys Ile Tyr Pro Asp Glu Trp Lys His Phe Leu Gln Arg
                85                  90                  95
gtg gat tgc aat act gaa gag gaa ctc cgt gag aca gag cag ttg gaa    336
Val Asp Cys Asn Thr Glu Glu Glu Leu Arg Glu Thr Glu Gln Leu Glu
            100                 105                 110
gat gag ctt cgc ctt tgg gca tca tac agg ggc caa act ttg acg aga    384
Asp Glu Leu Arg Leu Trp Ala Ser Tyr Arg Gly Gln Thr Leu Thr Arg
        115                 120                 125
act gtc aga ggg atg atg tac tac aga caa gct ttg gtg ctt cag gct    432
Thr Val Arg Gly Met Met Tyr Tyr Arg Gln Ala Leu Val Leu Gln Ala
    130                 135                 140
ttt ctt gat atg gct aga gat gaa gat ctt agg gaa ggc ttc aga gca    480
Phe Leu Asp Met Ala Arg Asp Glu Asp Leu Arg Glu Gly Phe Arg Ala
145                 150                 155                 160
gct gac ctc tta aat gat gaa tca cca tta ctg act caa tgc aaa gct    528
Ala Asp Leu Leu Asn Asp Glu Ser Pro Leu Leu Thr Gln Cys Lys Ala
                165                 170                 175
ata gct gac atg aag ttt aca tac gtt gta tca tgc caa caa tac ggt    576
Ile Ala Asp Met Lys Phe Thr Tyr Val Val Ser Cys Gln Gln Tyr Gly
            180                 185                 190
atc cag aaa cgt tct ggt gat cac cgt gca caa gat att ctt aga ctg    624
Ile Gln Lys Arg Ser Gly Asp His Arg Ala Gln Asp Ile Leu Arg Leu
        195                 200                 205
atg aca act tat cca tca ctt cgg gtt gcc tat att gat gaa gtt gaa    672
Met Thr Thr Tyr Pro Ser Leu Arg Val Ala Tyr Ile Asp Glu Val Glu
    210                 215                 220
gag cca agc aaa gac agg aac aag aag ata gaa aag gtt tac tac tca    720
Glu Pro Ser Lys Asp Arg Asn Lys Lys Ile Glu Lys Val Tyr Tyr Ser
225                 230                 235                 240
gcg ttg gtg aag gca gct gta acc aag cct gac gat cct ggt cag aaa    768
Ala Leu Val Lys Ala Ala Val Thr Lys Pro Asp Asp Pro Gly Gln Lys
                245                 250                 255
ctt gat cag gac ata tac aga ata aag cta cca ggt aat gca atg cta    816
Leu Asp Gln Asp Ile Tyr Arg Ile Lys Leu Pro Gly Asn Ala Met Leu
            260                 265                 270
ggt gaa gga aag cca gaa aat cag aac cat gcg ata ata ttt act cga    864
Gly Glu Gly Lys Pro Glu Asn Gln Asn His Ala Ile Ile Phe Thr Arg
        275                 280                 285
ggt gaa ggc ctt caa act ata gac atg aat cag gaa cat tac atg gag    912
Gly Glu Gly Leu Gln Thr Ile Asp Met Asn Gln Glu His Tyr Met Glu
    290                 295                 300
gag act ttg aaa atg aga aat ctg ctg caa gag ttt ctg aag aaa cat    960
Glu Thr Leu Lys Met Arg Asn Leu Leu Gln Glu Phe Leu Lys Lys His
305                 310                 315                 320
gat ggt gtg agg tat cca tca ata ctt ggt gtg aga gag cac ata ttc    1008
Asp Gly Val Arg Tyr Pro Ser Ile Leu Gly Val Arg Glu His Ile Phe
                325                 330                 335
act ggc agt gtt tct tct ctt gcg tgg ttc atg tca aat caa gag aca    1056
Thr Gly Ser Val Ser Ser Leu Ala Trp Phe Met Ser Asn Gln Glu Thr
            340                 345                 350
agt ttt gtc act att gga caa cgg gta ctt gcc aat cct ttg aga gtt    1104
Ser Phe Val Thr Ile Gly Gln Arg Val Leu Ala Asn Pro Leu Arg Val
        355                 360                 365
cga ttt cat tat gga cat cct gat att ttt gat cga ctt ttc cac ctc    1152
Arg Phe His Tyr Gly His Pro Asp Ile Phe Asp Arg Leu Phe His Leu
    370                 375                 380
acg agg ggt ggt gta agc aaa gca tcc aag att atc aat ctt agt gag    1200
Thr Arg Gly Gly Val Ser Lys Ala Ser Lys Ile Ile Asn Leu Ser Glu
385                 390                 395                 400
gac ata ttt gct gga ttc aac tca aca ctg cgt gaa gga aat gtt acg    1248
Asp Ile Phe Ala Gly Phe Asn Ser Thr Leu Arg Glu Gly Asn Val Thr
                405                 410                 415
cat cat gaa tac atg caa gtt ggc aag ggg aga gat gtg ggt ctc aat    1296
His His Glu Tyr Met Gln Val Gly Lys Gly Arg Asp Val Gly Leu Asn
            420                 425                 430
caa atc tca cta ttt gag gca aaa ata gct aat ggt aat gga gag cag    1344
Gln Ile Ser Leu Phe Glu Ala Lys Ile Ala Asn Gly Asn Gly Glu Gln
        435                 440                 445
aca ctg agc cgt gac gtc tac cga ctt gga cat cgt ttt gat ttc ttc    1392
Thr Leu Ser Arg Asp Val Tyr Arg Leu Gly His Arg Phe Asp Phe Phe
    450                 455                 460
aga atg ttg tcc tgc tac tac acc act att ggt ttt tac ttc agc act    1440
Arg Met Leu Ser Cys Tyr Tyr Thr Thr Ile Gly Phe Tyr Phe Ser Thr
465                 470                 475                 480
atg atg aca gtg tgg aca gtg tat gta ttc ctc tat gga cgt ctc tat    1488
Met Met Thr Val Trp Thr Val Tyr Val Phe Leu Tyr Gly Arg Leu Tyr
                485                 490                 495
ctt gtc ctc agt ggt ctt gat gaa gcc ttg gct act gga aaa agg ttt    1536
Leu Val Leu Ser Gly Leu Asp Glu Ala Leu Ala Thr Gly Lys Arg Phe
            500                 505                 510
ata cac aat gaa cct ctc cag gtt gct ctt gct tca cag tct ttt gtg    1584
Ile His Asn Glu Pro Leu Gln Val Ala Leu Ala Ser Gln Ser Phe Val
        515                 520                 525
cag ctt ggg ttt ttg atg gcg ttg cct atg atg atg gaa att ggt ctg    1632
Gln Leu Gly Phe Leu Met Ala Leu Pro Met Met Met Glu Ile Gly Leu
    530                 535                 540
gag aga gga ttt aga acc gca ttg agc gac ttt gta ctg atg cag ctg    1680
Glu Arg Gly Phe Arg Thr Ala Leu Ser Asp Phe Val Leu Met Gln Leu
545                 550                 555                 560
cag tta gca tct gtt ttc ttt aca ttc tct ctc ggg acc aaa act cac    1728
Gln Leu Ala Ser Val Phe Phe Thr Phe Ser Leu Gly Thr Lys Thr His
                565                 570                 575
tac tat gga aca acg ctg ctc cat gga gga gcc gag tat aga gct act    1776
Tyr Tyr Gly Thr Thr Leu Leu His Gly Gly Ala Glu Tyr Arg Ala Thr
            580                 585                 590
ggg cgt gga ttt gtg gtg ttc cat gcc aaa ttt gcg gag aac tat cga    1824
Gly Arg Gly Phe Val Val Phe His Ala Lys Phe Ala Glu Asn Tyr Arg
        595                 600                 605
cta tac tca cgc agc cat ttt gtc aag ggt att gag ttg ctg att ttg    1872
Leu Tyr Ser Arg Ser His Phe Val Lys Gly Ile Glu Leu Leu Ile Leu
    610                 615                 620
cta att gtg tat gaa atc ttt ggg caa tca tat cga gga gct atc gcg    1920
Leu Ile Val Tyr Glu Ile Phe Gly Gln Ser Tyr Arg Gly Ala Ile Ala
625                 630                 635                 640
tac atc ttc att aca ttt tcg atg tgg ttt atg gtt gta acc tgg ctc    1968
Tyr Ile Phe Ile Thr Phe Ser Met Trp Phe Met Val Val Thr Trp Leu
                645                 650                 655
ttt gca cca ttc cta ttt aat cct tct ggg ttc gag tgg cag aag att    2016
Phe Ala Pro Phe Leu Phe Asn Pro Ser Gly Phe Glu Trp Gln Lys Ile
            660                 665                 670
gtg gat gat tgg act gat tgg aat aag tgg atc agc aac cgt ggt ggt    2064
Val Asp Asp Trp Thr Asp Trp Asn Lys Trp Ile Ser Asn Arg Gly Gly
        675                 680                 685
att ggt gta cca ccg gag aaa agt tgg gag tca tgg tgg gag aaa gag    2112
Ile Gly Val Pro Pro Glu Lys Ser Trp Glu Ser Trp Trp Glu Lys Glu
    690                 695                 700
cag gag cct ata aaa tat tct ggg aag cgt gga att gtt ctc gaa ata    2160
Gln Glu Pro Ile Lys Tyr Ser Gly Lys Arg Gly Ile Val Leu Glu Ile
705                 710                 715                 720
gtg ctt gca ttg cgc ttc ttt atc tac caa tat ggt ctt gtt tat cac    2208
Val Leu Ala Leu Arg Phe Phe Ile Tyr Gln Tyr Gly Leu Val Tyr His
                725                 730                 735
ttg aac ata acc aaa cac aca aag agt gtc ctg gtc tat tgc ctg tca    2256
Leu Asn Ile Thr Lys His Thr Lys Ser Val Leu Val Tyr Cys Leu Ser
            740                 745                 750
tgg gtt gtc atc ttt gta att ctg ctt gtg atg aag acc gtg tca gtt    2304
Trp Val Val Ile Phe Val Ile Leu Leu Val Met Lys Thr Val Ser Val
        755                 760                 765
ggg agg cgg aaa ttc agc gcg gac ttc caa ctt gtg ttc cgg ttg att    2352
Gly Arg Arg Lys Phe Ser Ala Asp Phe Gln Leu Val Phe Arg Leu Ile
    770                 775                 780
aag ggg ttg ata ttt ata aca ttt atc tcc atc att ata atc ttg ata    2400
Lys Gly Leu Ile Phe Ile Thr Phe Ile Ser Ile Ile Ile Ile Leu Ile
785                 790                 795                 800
gca atc cct cat atg aca gtc cag gac atc ttt gtt tgc att ctt gcc    2448
Ala Ile Pro His Met Thr Val Gln Asp Ile Phe Val Cys Ile Leu Ala
                805                 810                 815
ttc atg cca act ggc tgg ggt ctg ctg ttg gtt gcg caa gct atc aag    2496
Phe Met Pro Thr Gly Trp Gly Leu Leu Leu Val Ala Gln Ala Ile Lys
            820                 825                 830
cca gta att gtg cgc atc ggg ttg tgg gga tcg atc aag gcg ctt gcg    2544
Pro Val Ile Val Arg Ile Gly Leu Trp Gly Ser Ile Lys Ala Leu Ala
        835                 840                 845
agg gga tat gag atc atc atg ggg ctc ctg ctc ttc acc ccg atc gcg    2592
Arg Gly Tyr Glu Ile Ile Met Gly Leu Leu Leu Phe Thr Pro Ile Ala
    850                 855                 860
ttc ctc gct tgg ttc ccg ttt gta tcc gag ttc cag acc aga atg ctc    2640
Phe Leu Ala Trp Phe Pro Phe Val Ser Glu Phe Gln Thr Arg Met Leu
865                 870                 875                 880
ttc aac cag gcc ttc agc aga ggt ctg cag atc tcg cga atc ctt ggc    2688
Phe Asn Gln Ala Phe Ser Arg Gly Leu Gln Ile Ser Arg Ile Leu Gly
                885                 890                 895
ggc cac aag aaa gac cga gct aca cgg aac aag gag tag                2727
Gly His Lys Lys Asp Arg Ala Thr Arg Asn Lys Glu
        900                 905
<210>22
<211>908
<212>PRT
<213>Oryza sativa
<400>22
Ile Lys Arg Leu His Leu Leu Leu Thr Val Lys Glu Ser Ala Met Asp
1               5                   10                  15
Val Pro Thr Asn Leu Asp Ala Arg Arg Arg Ile Ser Phe Phe Ala Asn
            20                  25                  30
Ser Leu Phe Met Asp Met Pro Ser Ala Pro Lys Val Arg His Met Leu
        35                  40                  45
Pro Phe Ser Val Leu Thr Pro Tyr Tyr Lys Glu Asp Val Leu Phe Ser
    50                  55                  60
Ser Gln Ala Leu Glu Asp Gln Asn Glu Asp Gly Val Ser Ile Leu Phe
65                  70                  75                  80
Tyr Leu Gln Lys Ile Tyr Pro Asp Glu Trp Lys His Phe Leu Gln Arg
                85                  90                  95
Val Asp Cys Asn Thr Glu Glu Glu Leu Arg Glu Thr Glu Gln Leu Glu
            100                 105                 110
Asp Glu Leu Arg Leu Trp Ala Ser Tyr Arg Gly Gln Thr Leu Thr Arg
        115                 120                 125
Thr Val Arg Gly Met Met Tyr Tyr Arg Gln Ala Leu Val Leu Gln Ala
    130                 135                 140
Phe Leu Asp Met Ala Arg Asp Glu Asp Leu Arg Glu Gly Phe Arg Ala
145                 150                 155                 160
Ala Asp Leu Leu Asn Asp Glu Ser Pro Leu Leu Thr Gln Cys Lys Ala
                165                 170                 175
Ile Ala Asp Met Lys Phe Thr Tyr Val Val Ser Cys Gln Gln Tyr Gly
            180                 185                 190
Ile Gln Lys Arg Ser Gly Asp His Arg Ala Gln Asp Ile Leu Arg Leu
        195                 200                 205
Met Thr Thr Tyr Pro Ser Leu Arg Val Ala Tyr Ile Asp Glu Val Glu
    210                 215                 220
Glu Pro Ser Lys Asp Arg Asn Lys Lys Ile Glu Lys Val Tyr Tyr Ser
225                 230                 235                 240
Ala Leu Val Lys Ala Ala Val Thr Lys Pro Asp Asp Pro Gly Gln Lys
                245                 250                 255
Leu Asp Gln Asp Ile Tyr Arg Ile Lys Leu Pro Gly Asn Ala Met Leu
            260                 265                 270
Gly Glu Gly Lys Pro Glu Asn Gln Asn His Ala Ile Ile Phe Thr Arg
        275                 280                 285
Gly Glu Gly Leu Gln Thr Ile Asp Met Asn Gln Glu His Tyr Met Glu
    290                 295                 300
Glu Thr Leu Lys Met Arg Asn Leu Leu Gln Glu Phe Leu Lys Lys His
305                 310                 315                 320
Asp Gly Val Arg Tyr Pro Ser Ile Leu Gly Val Arg Glu His Ile Phe
                325                 330                 335
Thr Gly Ser Val Ser Ser Leu Ala Trp Phe Met Ser Asn Gln Glu Thr
            340                 345                 350
Ser Phe Val Thr Ile Gly Gln Arg Val Leu Ala Asn Pro Leu Arg Val
        355                 360                 365
Arg Phe His Tyr Gly His Pro Asp Ile Phe Asp Arg Leu Phe His Leu
    370                 375                 380
Thr Arg Gly Gly Val Ser Lys Ala Ser Lys Ile Ile Asn Leu Ser Glu
385                 390                 395                 400
Asp Ile Phe Ala Gly Phe Asn Ser Thr Leu Arg Glu Gly Asn Val Thr
                405                 410                 415
His His Glu Tyr Met Gln Val Gly Lys Gly Arg Asp Val Gly Leu Asn
            420                 425                 430
Gln Ile Ser Leu Phe Glu Ala Lys Ile Ala Asn Gly Asn Gly Glu Gln
        435                 440                 445
Thr Leu Ser Arg Asp Val Tyr Arg Leu Gly His Arg Phe Asp Phe Phe
    450                 455                 460
Arg Met Leu Ser Cys Tyr Tyr Thr Thr Ile Gly Phe Tyr Phe Ser Thr
465                 470                 475                 480
Met Met Thr Val Trp Thr Val Tyr Val Phe Leu Tyr Gly Arg Leu Tyr
                485                 490                 495
Leu Val Leu Ser Gly Leu Asp Glu Ala Leu Ala Thr Gly Lys Arg Phe
            500                 505                 510
Ile His Asn Glu Pro Leu Gln Val Ala Leu Ala Ser Gln Ser Phe Val
        515                 520                 525
Gln Leu Gly Phe Leu Met Ala Leu Pro Met Met Met Glu Ile Gly Leu
    530                 535                 540
Glu Arg Gly Phe Arg Thr Ala Leu Ser Asp Phe Val Leu Met Gln Leu
545                 550                 555                 560
Gln Leu Ala Ser Val Phe Phe Thr Phe Ser Leu Gly Thr Lys Thr His
                565                 570                 575
Tyr Tyr Gly Thr Thr Leu Leu His Gly Gly Ala Glu Tyr Arg Ala Thr
            580                 585                 590
Gly Arg Gly Phe Val Val Phe His Ala Lys Phe Ala Glu Asn Tyr Arg
        595                 600                 605
Leu Tyr Ser Arg Ser His Phe Val Lys Gly Ile Glu Leu Leu Ile Leu
    610                 615                 620
Leu Ile Val Tyr Glu Ile Phe Gly Gln Ser Tyr Arg Gly Ala Ile Ala
625                 630                 635                 640
Tyr Ile Phe Ile Thr Phe Ser Met Trp Phe Met Val Val Thr Trp Leu
                645                 650                 655
Phe Ala Pro Phe Leu Phe Asn Pro Ser Gly Phe Glu Trp Gln Lys Ile
            660                 665                 670
Val Asp Asp Trp Thr Asp Trp Asn Lys Trp Ile Ser Asn Arg Gly Gly
        675                 680                 685
Ile Gly Val Pro Pro Glu Lys Ser Trp Glu Ser Trp Trp Glu Lys Glu
    690                 695                 700
Gln Glu Pro Ile Lys Tyr Ser Gly Lys Arg Gly Ile Val Leu Glu Ile
705                 710                 715                 720
Val Leu Ala Leu Arg Phe Phe Ile Tyr Gln Tyr Gly Leu Val Tyr His
                725                 730                 735
Leu Asn Ile Thr Lys His Thr Lys Ser Val Leu Val Tyr Cys Leu Ser
            740                 745                 750
Trp Val Val Ile Phe Val Ile Leu Leu Val Met Lys Thr Val Ser Val
        755                 760                 765
Gly Arg Arg Lys Phe Ser Ala Asp Phe Gln Leu Val Phe Arg Leu Ile
    770                 775                 780
Lys Gly Leu Ile Phe Ile Thr Phe Ile Ser Ile Ile Ile Ile Leu Ile
785                 790                 795                 800
Ala Ile Pro His Met Thr Val Gln Asp Ile Phe Val Cys Ile Leu Ala
                805                 810                 815
Phe Met Pro Thr Gly Trp Gly Leu Leu Leu Val Ala Gln Ala Ile Lys
            820                 825                 830
Pro Val Ile Val Arg Ile Gly Leu Trp Gly Ser Ile Lys Ala Leu Ala
        835                 840                 845
Arg Gly Tyr Glu Ile Ile Met Gly Leu Leu Leu Phe Thr Pro Ile Ala
    850                 855                 860
Phe Leu Ala Trp Phe Pro Phe Val Ser Glu Phe Gln Thr Arg Met Leu
865                 870                 875                 880
Phe Asn Gln Ala Phe Ser Arg Gly Leu Gln Ile Ser Arg Ile Leu Gly
                885                 890                 895
Gly His Lys Lys Asp Arg Ala Thr Arg Asn Lys Glu
            900                 905
<210>23
<211>975
<212>DNA
<213>Oryza sativa
<220>
<221>CDS
<222>(1)..(975)
<400>23
cac gcg tcc ggg tcc ggg tcg gtg cgg gag cgg ttc gag gcc atg atc    48
His Ala Ser Gly Ser Gly Ser Val Arg Glu Arg Phe Glu Ala Met Ile
1               5                   10                  15
cgc cgc gtg cag ggg gag gtg tgc gcg gcg ctg gag gag gcc gac ggg    96
Arg Arg Val Gln Gly Glu Val Cys Ala Ala Leu Glu Glu Ala Asp Gly
            20                  25                  30
agc ggc gcc cgg ttc gtg gag gac gtg tgg tcg cgc ccc ggc ggc ggc    144
Ser Gly Ala Arg Phe Val Glu Asp Val Trp Ser Arg Pro Gly Gly Gly
        35                  40                  45
ggg ggc atc agc cgg gtg ctc cag gac ggc cgc gtg ttc gag aag gcc    192
Gly Gly Ile Ser Arg Val Leu Gln Asp Gly Arg Val Phe Glu Lys Ala
    50                  55                  60
ggg gtc aac gtc tcc gtc gtg tac ggc gtc atg ccc ccc gac gcg tac    240
Gly Val Asn Val Ser Val Val Tyr Gly Val Met Pro Pro Asp Ala Tyr
65                  70                  75                  80
cgc gcc gcc aag ggg gag gcc ggc aag aac ggc gcg gcg gca gat ggc    288
Arg Ala Ala Lys Gly Glu Ala Gly Lys Asn Gly Ala Ala Ala Asp Gly
                85                  90                  95
ccc aag gct ggg ccc gtg ccc ttc ttt gcc gct ggc att agc tcg gtt    336
Pro Lys Ala Gly Pro Val Pro Phe Phe Ala Ala Gly Ile Ser Ser Val
            100                 105                 110
ctt cac ccc aag aac cca ttt gct cca aca ttg cat ttt aac tac cgc    384
Leu His Pro Lys Asn Pro Phe Ala Pro Thr Leu His Phe Asn Tyr Arg
        115                 120                 125
tat ttt gag aca gat gca ccg aaa gat gct cct ggt gca cca agg caa    432
Tyr Phe Glu Thr Asp Ala Pro Lys Asp Ala Pro Gly Ala Pro Arg Gln
    130                 135                 140
tgg tgg ttt gga ggt ggt act gat ttg act cct tca tat atc att gaa    480
Trp Trp Phe Gly Gly Gly Thr Asp Leu Thr Pro Ser Tyr Ile Ile Glu
145                 150                 155                 160
gag gat gtg aag cat ttt cat tct gtt caa aaa caa gcg tgt gat aag    528
Glu Asp Val Lys His Phe His Ser Val Gln Lys Gln Ala Cys Asp Lys
                165                 170                 175
ttt gac cca agt ttt tac ccg aga ttc aaa aaa tgg tgt gat gat tat    576
Phe Asp Pro Ser Phe Tyr Pro Arg Phe Lys Lys Trp Cys Asp Asp Tyr
            180                 185                 190
ttc tat att aag cac cgt aat gag cgt cgg ggg ctt ggt gga ata ttt    624
Phe Tyr Ile Lys His Arg Asn Glu Arg Arg Gly Leu Gly Gly Ile Phe
        195                 200                 205
ttt gat gat ctt aat gac tat gat caa gaa atg ctt ctc aac ttt gct    672
Phe Asp Asp Leu Asn Asp Tyr Asp Gln Glu Met Leu Leu Asn Phe Ala
    210                 215                 220
aca gaa tgt gcg gat tct gtt gtt cct gca tac ata cca atc att gaa    720
Thr Glu Cys Ala Asp Ser Val Val Pro Ala Tyr Ile Pro Ile Ile Glu
225                 230                 235                 240
cgc cgg aag gac act cca ttt act gag gaa cac aag gca tgg caa caa    768
Arg Arg Lys Asp Thr Pro Phe Thr Glu Glu His Lys Ala Trp Gln Gln
                245                 250                 255
ctg agg aga ggt cgc tat gtg gag ttc aac ctt gta tat gat cgc ggt    816
Leu Arg Arg Gly Arg Tyr Val Glu Phe Asn Leu Val Tyr Asp Arg Gly
            260                 265                 270
acc aca ttt ggc ctc aag act ggg ggg agg att gag agt att ctg gtt    864
Thr Thr Phe Gly Leu Lys Thr Gly Gly Arg Ile Glu Ser Ile Leu Val
        275                 280                 285
tct ctt cca ctg act gca cga tgg cag tat tat cat aca cct gaa gag    912
Ser Leu Pro Leu Thr Ala Arg Trp Gln Tyr Tyr His Thr Pro Glu Glu
    290                 295                 300
gga act gaa gaa cgg aaa ctt ctt gac gcg tgc ata aac cca aag gaa    960
Gly Thr Glu Glu Arg Lys Leu Leu Asp Ala Cys Ile Asn Pro Lys Glu
305                 310                 315                 320
tgg ctc gat ctc tga                                                975
Trp Leu Asp Leu
<210>24
<211>324
<212>PRT
<213>Orvza sativa
<400>24
His Ala Ser Gly Ser Gly Ser Val Arg Glu Arg Phe Glu Ala Met Ile
1               5                   10                  15
Arg Arg Val Gln Gly Glu Val Cys Ala Ala Leu Glu Glu Ala Asp Gly
            20                  25                  30
Ser Gly Ala Arg Phe Val Glu Asp Val Trp Ser Arg Pro Gly Gly Gly
        35                  40                  45
Gly Gly Ile Ser Arg Val Leu Gln Asp Gly Arg Val Phe Glu Lys Ala
    50                  55                  60
Gly Val Asn Val Ser Val Val Tyr Gly Val Met Pro Pro Asp Ala Tyr
65                  70                  75                  80
Arg Ala Ala Lys Gly Glu Ala Gly Lys Asn Gly Ala Ala Ala Asp Gly
                85                  90                  95
Pro Lys Ala Gly Pro Val Pro Phe Phe Ala Ala Gly Ile Ser Ser Val
            100                 105                 110
Leu His Pro Lys Asn Pro Phe Ala Pro Thr Leu His Phe Asn Tyr Arg
        115                 120                 125
Tyr Phe Glu Thr Asp Ala Pro Lys Asp Ala Pro Gly Ala Pro Arg Gln
    130                 135                 140
Trp Trp Phe Gly Gly Gly Thr Asp Leu Thr Pro Ser Tyr Ile Ile Glu
145                 150                 155                 160
Glu Asp Val Lys His Phe His Ser Val Gln Lys Gln Ala Cys Asp Lys
                165                 170                 175
Phe Asp Pro Ser Phe Tyr Pro Arg Phe Lys Lys Trp Cys Asp Asp Tyr
            180                 185                 190
Phe Tyr Ile Lys His Arg Asn Glu Arg Arg Gly Leu Gly Gly Ile Phe
        195                 200                 205
Phe Asp Asp Leu Asn Asp Tyr Asp Gln Glu Met Leu Leu Asn Phe Ala
    210                 215                 220
Thr Glu Cys Ala Asp Ser Val Val Pro Ala Tyr Ile Pro Ile Ile Glu
225                 230                 235                 240
Arg Arg Lys Asp Thr Pro Phe Thr Glu Glu His Lys Ala Trp Gln Gln
                245                 250                 255
Leu Arg Arg Gly Arg Tyr Val Glu Phe Asn Leu Val Tyr Asp Arg Gly
            260                 265                 270
Thr Thr Phe Gly Leu Lys Thr Gly Gly Arg Ile Glu Ser Ile Leu Val
        275                 280                 285
Ser Leu Pro Leu Thr Ala Arg Trp Gln Tyr Tyr His Thr Pro Glu Glu
    290                 295                 300
Gly Thr Glu Glu Arg Lys Leu Leu Asp Ala Cys Ile Asn Pro Lys Glu
305                 310                 315                 320
Trp Leu Asp Leu
<210>25
<211>882
<212>DNA
<213>Oryza sativa
<220>
<221>CDS
<222>(1)..(882)
<400>25
atg gag gtg ggg ttc ctg ggg ctg ggc atc atg ggg aag gca atg gcg    48
Met Glu Val Gly Phe Leu Gly Leu Gly Ile Met Gly Lys Ala Met Ala
1               5                   10                  15
gcc aac ctc ctc cgc cac ggc ttc cgc gtc acc gtc tgg aac cgg act    96
Ala Asn Leu Leu Arg His Gly Phe Arg Val Thr Val Trp Asn Arg Thr
            20                  25                  30
ctc tcc aag tgc cag gag ctc gtc gcg ctg ggc gcc gcc gtg ggg gag    144
Leu Ser Lys Cys Gln Glu Leu Val Ala Leu Gly Ala Ala Val Gly Glu
        35                  40                  45
acg ccg gcg gcc gtc gtc gcc aag tgc aga tac acc atc gcc atg ctc    192
Thr Pro Ala Ala Val Val Ala Lys Cys Arg Tyr Thr Ile Ala Met Leu
    50                  55                  60
tcc gac ccc agc gcc gcg cta tct gtt gta ttc gac aag gac ggc gtg    240
Ser Asp Pro Ser Ala Ala Leu Ser Val Val Phe Asp Lys Asp Gly Val
65                  70                  75                  80
ctc gag cag att ggg gaa ggg aag ggt tat gtg gac atg tcc act gtt    288
Leu Glu Gln Ile Gly Glu Gly Lys Gly Tyr Val Asp Met Ser Thr Val
                85                  90                  95
gat gcc gcc act tct tgc aag ata agc gag gct ata aaa caa aaa ggt    336
Asp Ala Ala Thr Ser Cys Lys Ile Ser Glu Ala Ile Lys Gln Lys Gly
            100                 105                 110
ggg gct ttt gtt gaa gct cca gtt tca gga agc aaa aag cca gct gaa    384
Gly Ala Phe Val Glu Ala Pro Val Ser Gly Ser Lys Lys Pro Ala Glu
        115                 120                 125
gat ggc caa ttg gtc att ctt gct gca ggg gac aag gta ttg tat gat    432
Asp Gly Gln Leu Val Ile Leu Ala Ala Gly Asp Lys Val Leu Tyr Asp
    130                 135                 140
gat atg gtc cct gca ttt gat gta ctt ggg aaa aag tcg ttc ttt ttg    480
Asp Met Val Pro Ala Phe Asp Val Leu Gly Lys Lys Ser Phe Phe Leu
145                 150                 155                 160
gga gag att gga aat gga gca aag atg aaa ctg gtg gtc aac atg atc    528
Gly Glu Ile Gly Asn Gly Ala Lys Met Lys Leu Val Val Asn Met Ile
                165                 170                 175
atg gga agt atg atg aat gct ttg tct gag gga ctc tct ctg gct gat    576
Met Gly Ser Met Met Asn Ala Leu Ser Glu Gly Leu Ser Leu Ala Asp
            180                 185                 190
aac agt ggt ttg agc ccc cag aca ctt ctt gat gtc ctg gac ctt ggc    624
Asn Ser Gly Leu Ser Pro Gln Thr Leu Leu Asp Val Leu Asp Leu Gly
        195                 200                 205
gcc atc gcg aat cca atg ttc aag ctg aaa ggg ccc tcg atg ctg caa    672
Ala Ile Ala Asn Pro Met Phe Lys Leu Lys Gly Pro Ser Met Leu Gln
    210                 215                 220
ggc agc tac aac cct gca ttt ccc ctg aaa cac cag cag aag gat atg    720
Gly Ser Tyr Asn Pro Ala Phe Pro Leu Lys His Gln Gln Lys Asp Met
225                 230                 235                 240
agg ttg gca ctt gcc cta gga gac gag aac gct gtc tcc atg cca gtg    768
Arg Leu Ala Leu Ala Leu Gly Asp Glu Asn Ala Val Ser Met Pro Val
                245                 250                 255
gca gct gct tcc aac gag gcg ttc aag aaa gca aga agc ttg gga cta    816
Ala Ala Ala Ser Asn Glu Ala Phe Lys Lys Ala Arg Ser Leu Gly Leu
            260                 265                 270
ggg gac ctg gat ttc tca gcg gtt tac gag gta ctg aag ggc gca ggt    864
Gly Asp Leu Asp Phe Ser Ala Val Tyr Glu Val Leu Lys Gly Ala Gly
        275                 280                 285
ggc tca ggc aag gcg tga                                            882
Gly Ser Gly Lys Ala
    290
<210>26
<211>293
<212>PRT
<213>Oryza sativa
<400>26
Met Glu Val Gly Phe Leu Gly Leu Gly Ile Met Gly Lys Ala Met Ala
1               5                   10                  15
Ala Asn Leu Leu Arg His Gly Phe Arg Val Thr Val Trp Asn Arg Thr
            20                  25                  30
Leu Ser Lys Cys Gln Glu Leu Val Ala Leu Gly Ala Ala Val Gly Glu
        35                  40                  45
Thr Pro Ala Ala Val Val Ala Lys Cys Arg Tyr Thr Ile Ala Met Leu
    50                  55                  60
Ser Asp Pro Ser Ala Ala Leu Ser Val Val Phe Asp Lys Asp Gly Val
65                  70                  75                  80
Leu Glu Gln Ile Gly Glu Gly Lys Gly Tyr Val Asp Met Ser Thr Val
                85                  90                  95
Asp Ala Ala Thr Ser Cys Lys Ile Ser Glu Ala Ile Lys Gln Lys Gly
            100                 105                 110
Gly Ala Phe Val Glu Ala Pro Val Ser Gly Ser Lys Lys Pro Ala Glu
        115                 120                 125
Asp Gly Gln Leu Val Ile Leu Ala Ala Gly Asp Lys Val Leu Tyr Asp
    130                 135                 140
Asp Met Val Pro Ala Phe Asp Val Leu Gly Lys Lys Ser Phe Phe Leu
145                 150                 155                 160
Gly Glu Ile Gly Asn Gly Ala Lys Met Lys Leu Val Val Asn Met Ile
                165                 170                 175
Met Gly Ser Met Met Asn Ala Leu Ser Glu Gly Leu Ser Leu Ala Asp
            180                 185                 190
Asn Ser Gly Leu Ser Pro Gln Thr Leu Leu Asp Val Leu Asp Leu Gly
        195                 200                 205
Ala Ile Ala Asn Pro Met Phe Lys Leu Lys Gly Pro Ser Met Leu Gln
    210                 215                 220
Gly Ser Tyr Asn Pro Ala Phe Pro Leu Lys His Gln Gln Lys Asp Met
225                 230                 235                 240
Arg Leu Ala Leu Ala Leu Gly Asp Glu Asn Ala Val Ser Met Pro Val
                245                 250                 255
Ala Ala Ala Ser Asn Glu Ala Phe Lys Lys Ala Arg Ser Leu Gly Leu
            260                 265                 270
Gly Asp Leu Asp Phe Ser Ala Val Tyr Glu Val Leu Lys Gly Ala Gly
        275                 280                 285
Gly Ser Gly Lys Ala
    290
<210>27
<211>1032
<212>DNA
<213>Oryza sativa
<220>
<221>CDS
<222>(1)..(1032)
<400>27
gct tct gag gaa tca aca aca gcc aac tta gtg ggg cag atc aca acc    48
Ala Ser Glu Glu Ser Thr Thr Ala Asn Leu Val Gly Gln Ile Thr Thr
1               5                   10                  15
acc tgt aca gat gat att tct gtg aac aga tca gca gaa aat tct tca    96
Thr Cys Thr Asp Asp Ile Ser Val Asn Arg Ser Ala Glu Asn Ser Ser
            20                  25                  30
cag aag aac att cca ttg gat gga gta tct gca cag tcc att aag cca    144
Gln Lys Asn Ile Pro Leu Asp Gly Val Ser Ala Gln Ser Ile Lys Pro
        35                  40                  45
tct gca agt agt agg tct gaa cca gta ggt ctt ggt gga ggt ttg cag    192
Ser Ala Ser Ser Arg Ser Glu Pro Val Gly Leu Gly Gly Gly Leu Gln
    50                  55                  60
cct aag agg cgg agc aga aca gca aag cca cct ggg agt agc agt gat    240
Pro Lys Arg Arg Ser Arg Thr Ala Lys Pro Pro Gly Ser Ser Ser Asp
65                  70                  75                  80
act ggc gaa gtc gtc aat tcc tct cgc atc agc aat agc caa aat gct    288
Thr Gly Glu Val Val Asn Ser Ser Arg Ile Ser Asn Ser Gln Asn Ala
                85                  90                  95
gtt tca atg ggc cag cag gtt ctg caa gcc ctt gct tct caa aat act    336
Val Ser Met Gly Gln Gln Val Leu Gln Ala Leu Ala Ser Gln Asn Thr
            100                 105                 110
aat gta aac aga agc cat gtt acg gat tct cca ctt cca tcc act act    384
Asn Val Asn Arg Ser His Val Thr Asp Ser Pro Leu Pro Ser Thr Thr
        115                 120                 125
tct cag ttt tct ggt gga atg cct ccg aga aga cag ggt ggt gaa gga    432
Ser Gln Phe Ser Gly Gly Met Pro Pro Arg Arg Gln Gly Gly Glu Gly
    130                 135                 140
caa gtt gat ttt ggc agt atg ata tcc agt gtg cta aac aac cca gct    480
Gln Val Asp Phe Gly Ser Met Ile Ser Ser Val Leu Asn Asn Pro Ala
145                 150                 155                 160
ttt ggc aat ctg ttg tcc aat gta gca gag caa aca ggc atg ggt tcc    528
Phe Gly Asn Leu Leu Ser Asn Val Ala Glu Gln Thr Gly Met Gly Ser
                165                 170                 175
gca ggt gat ttg aga aac atg gtg gaa gag tgt gca cag agc cct gca    576
Ala Gly Asp Leu Arg Asn Met Val Glu Glu Cys Ala Gln Ser Pro Ala
            180                 185                 190
ata atg gat act atg agt aat tta gtc caa aat gtg gat ggg tca gga    624
Ile Met Asp Thr Met Ser Asn Leu Val Gln Asn Val Asp Gly Ser Gly
        195                 200                 205
aga ggt caa ggt ggc att gac ttg tct aga atg atg cag caa atg atg    672
Arg Gly Gln Gly Gly Ile Asp Leu Ser Arg Met Met Gln Gln Met Met
        210                 215                 220
cct gtt gta tcc caa gtt ctt ggt gga gct ggg gct cgt cct gct ggt    720
Pro Val Val Ser Gln Val Leu Gly Gly Ala Gly Ala Arg Pro Ala Gly
225                 230                 235                 240
aca aat agt gga caa tcc aga ttg cag cct cgg cgc agt gac atg aga    768
Thr Asn Ser Gly Gln Ser Arg Leu Gln Pro Arg Arg Ser Asp Met Arg
                245                 250                 255
gtg gat gat gct tca gat tat gga aat tct cag att gat cta cac caa    816
Val Asp Asp Ala Ser Asp Tyr Gly Asn Ser Gln Ile Asp Leu His Gln
            260                 265                 270
gct cgt gaa cac att gag caa cat gac tcc ccc agg gat atc ttc ggt    864
Ala Arg Glu His Ile Glu Gln His Asp Ser Pro Arg Asp Ile Phe Gly
        275                 280                 285
gcg gtc ctc gaa act gct gca cag gct tat ggt gaa gat gag agt att    912
Ala Val Leu Glu Thr Ala Ala Gln Ala Tyr Gly Glu Asp Glu Ser Ile
    290                 295                 300
gag gac atg ctt gaa gag ctt gtc agt gac cca gaa ctt aca gat gac    960
Glu Asp Met Leu Glu Glu Leu Val Ser Asp Pro Glu Leu Thr Asp Asp
305                 310                 315                 320
tac ctg aaa ctt ctg ctc caa caa gtt cgc cag agg ata cag tcg gca    1008
Tyr Leu Lys Leu Leu Leu Gln Gln Val Arg Gln Arg Ile Gln Ser Ala
                325                 330                 335
tct caa tcc ggg aac cag tct tga                                    1032
Ser Gln Ser Gly Asn Gln Ser
            340
<210>28
<211>343
<212>PRT
<213>Oryza sativa
<400>28
Ala Ser Glu Glu Ser Thr Thr Ala Asn Leu Val Gly Gln Ile Thr Thr
1               5                   10                  15
Thr Cys Thr Asp Asp Ile Ser Val Asn Arg Ser Ala Glu Asn Ser Ser
            20                 25                 30
Gln Lys Asn Ile Pro Leu Asp Gly Val Ser Ala Gln Ser Ile Lys Pro
        35                  40                  45
Ser Ala Ser Ser Arg Ser Glu Pro Val Gly Leu Gly Gly Gly Leu Gln
    50                  55                  60
Pro Lys Arg Arg Ser Arg Thr Ala Lys Pro Pro Gly Ser Ser Ser Asp
65                  70                  75                  80
Thr Gly Glu Val Val Asn Ser Ser Arg Ile Ser Asn Ser Gln Asn Ala
                85                  90                  95
Val Ser Met Gly Gln Gln Val Leu Gln Ala Leu Ala Ser Gln Asn Thr
            100                 105                 110
Asn Val Asn Arg Ser His Val Thr Asp Ser Pro Leu Pro Ser Thr Thr
        115                 120                 125
Ser Gln Phe Ser Gly Gly Met Pro Pro Arg Arg Gln Gly Gly Glu Gly
    130                 135                 140
Gln Val Asp Phe Gly Ser Met Ile Ser Ser Val Leu Asn Asn Pro Ala
145                 150                 155                 160
Phe Gly Asn Leu Leu Ser Asn Val Ala Glu Gln Thr Gly Met Gly Ser
                165                 170                 175
Ala Gly Asp Leu Arg Asn Met Val Glu Glu Cys Ala Gln Ser Pro Ala
            180                 185                 190
Ile Met Asp Thr Met Ser Asn Leu Val Gln Asn Val Asp Gly Ser Gly
        195                 200                 205
Arg Gly Gln Gly Gly Ile Asp Leu Ser Arg Met Met Gln Gln Met Met
    210                 215                 220
Pro Val Val Ser Gln Val Leu Gly Gly Ala Gly Ala Arg Pro Ala Gly
225                 230                 235                 240
Thr Asn Ser Gly Gln Ser Arg Leu Gln Pro Arg Arg Ser Asp Met Arg
                245                 250                 255
Val Asp Asp Ala Ser Asp Tyr Gly Asn Ser Gln Ile Asp Leu His Gln
            260                 265                 270
Ala Arg Glu His Ile Glu Gln His Asp Ser Pro Arg Asp Ile Phe Gly
        275                 280                 285
Ala Val Leu Glu Thr Ala Ala Gln Ala Tyr Gly Glu Asp Glu Ser Ile
    290                 295                 300
Glu Asp Met Leu Glu Glu Leu Val Ser Asp Pro Glu Leu Thr Asp Asp
305                 310                 315                 320
Tyr Leu Lys Leu Leu Leu Gln Gln Val Arg Gln Arg Ile Gln Ser Ala
                325                 330                 335
Ser Gln Ser Gly Asn Gln Ser
            340
<210>29
<211>447
<212>DNA
<213>Oryza sativa
<220>
<221>CDS
<222>(1)..(447)
<400>29
atg ggg ggg aag gag ctg agc gag gag cag gtg gcg tcg atg cgg gag    48
Met Gly Gly Lys Glu Leu Ser Glu Glu Gln Val Ala Ser Met Arg Glu
1               5                   10                  15
gcg ttc tcc ctc ttc gac acc gac ggc gac ggc cgg atc gcg ccg tcg    96
Ala Phe Ser Leu Phe Asp Thr Asp Gly Asp Gly Arg Ile Ala Pro Ser
            20                  25                  30
gag ctc ggc gtc ctg atg cgc tcc ctc ggc ggg aac ccc acc cag gcg    144
Glu Leu Gly Val Leu Met Arg Ser Leu Gly Gly Asn Pro Thr Gln Ala
        35                  40                  45
cag ctc cgc gac atc gcc gcg cag gag aag ctc acc gcg ccc ttc gac    192
Gln Leu Arg Asp Ile Ala Ala Gln Glu Lys Leu Thr Ala Pro Phe Asp
    50                  55                  60
ttc ccg cgc ttc ctc gac cte atg cgc gcc cac ctc cgc ccc gag ccc    240
Phe Pro Arg Phe Leu Asp Leu Met Arg Ala His Leu Arg Pro Glu Pro
65                  70                  75                  80
ttc gac cgc ccg ctc cgc gac gcc ttc cgc gtc ctc gac aag gac gcc    288
Phe Asp Arg Pro Leu Arg Asp Ala Phe Arg Val Leu Asp Lys Asp Ala
                85                  90                  95
tcc ggc acc gtc tcc gtc gcc gat ctc cgc cac gtc ctc acc tcc atc    336
Ser Gly Thr Val Ser Val Ala Asp Leu Arg His Val Leu Thr Ser Ile
            100                 105                 110
ggc gag aag ctc gag ccc cac gag ttc gac gag tgg atc cgc gag gtc    384
Gly Glu Lys Leu Glu Pro His Glu Phe Asp Glu Trp Ile Arg Glu Val
        115                 120                 125
gac gtc gcc ccc gac ggc acc atc cgc tac gac gac ttc atc cgc cgc    432
Asp Val Ala Pro Asp Gly Thr Ile Arg Tyr Asp Asp Phe Ile Arg Arg
    130                 135                 140
atc gtc gcc aaa taa                                                447
Ile Val Ala Lys
145
<210>30
<211>148
<212>PRT
<213>Oryza sativa
<400>30
Met Gly Gly Lys Glu Leu Ser Glu Glu Gln Val Ala Ser Met Arg Glu
1               5                   10                  15
Ala Phe Ser Leu Phe Asp Thr Asp Gly Asp Gly Arg Ile Ala Pro Ser
            20                  25                  30
Glu Leu Gly Val Leu Met Arg Ser Leu Gly Gly Asn Pro Thr Gln Ala
        35                  40                  45
Gln Leu Arg Asp Ile Ala Ala Gln Glu Lys Leu Thr Ala Pro Phe Asp
    50                  55                  60
Phe Pro Arg Phe Leu Asp Leu Met Arg Ala His Leu Arg Pro Glu Pro
65                  70                  75                  80
Phe Asp Arg Pro Leu Arg Asp Ala Phe Arg Val Leu Asp Lys Asp Ala
                85                  90                  95
Ser Gly Thr Val Ser Val Ala Asp Leu Arg His Val Leu Thr Ser Ile
            100                 105                 110
Gly Glu Lys Leu Glu Pro His Glu Phe Asp Glu Trp Ile Arg Glu Val
        115                 120                 125
Asp Val Ala Pro Asp Gly Thr Ile Arg Tyr Asp Asp Phe Ile Arg Arg
    130                 135                 140
Ile Val Ala Lys
145
<210>31
<211>1692
<212>DNA
<213>Oryza sativa
<220>
<221>CDS
<222>(1)..(1692)
<400>31
atg gcc tcc gcc gcc gtc atc ccg tcg tcc gcg ccc ggc gcc gcc gcc    48
Met Ala Ser Ala Ala Val Ile Pro Ser Ser Ala Pro Gly Ala Ala Ala
1               5                   10                  15
gca ggt gcg gcc gcg gtt arr agc gct ggg tgg gtg gtg gac gag cgg    96
Ala Gly Ala Ala Ala Val Xaa Ser Ala Gly Trp Val Val Asp Glu Arg
            20                  25                  30
gac ggc ttc att tca tgg ctg cgc gga aag ttc gcg gcg gcc aac gcc    144
Asp Gly Phe Ile Ser Trp Leu Arg Gly Lys Phe Ala Ala Ala Asn Ala
        35                  40                  45
atc atc gac ctg ctg ctg ctc cam cty cgs tcc gtc ggc gag ccc ggg    192
Ile Ile Asp Leu Leu Leu Leu Xaa Xaa Arg Ser Val Gly Glu Pro Gly
    50                  55                  60
gag ttc gag cac gtc gcc gcc gcg gtg cag cag cgg cgc cac cac tgg    240
Glu Phe Glu His Val Ala Ala Ala Val Gln Gln Arg Arg His His Trp
65                  70                  75                  80
gcg ccc gtg atc cac atg cag cag ttc ttc ccc gtc ggc gac gtc gcg    288
Ala Pro Val Ile His Met Gln Gln Phe Phe Pro Val Gly Asp Val Ala
                85                  90                  95
tac gcg ctc cag cag gcc ggg tkg cgc cgc cgc gcg ccg ccg cac cac    336
Tyr A1a Leu Gln Gln Ala Gly Xaa Arg Arg Arg Ala Pro Pro His His
            100                 105                 110
cag cag cag ggc ccc ggc gcc tcg ccg tcc ccg ccg ccc cyt ccc ccg    384
Gln Gln Gln Gly Pro Gly Ala Ser Pro Ser Pro Pro Pro Xaa Pro Pro
        115                 120                 125
cgc ggc cgc ccc tcg ttc tcg gcg tcc cac tcg cac cat cgc cac ggt    432
Arg Gly Arg Pro Ser Phe Ser Ala Ser His Ser His His Arg His Gly
    130                 135                 140
ggt cac cat cat cgc tcc gat tcg gtg cgc ggc ggc ggc act ggt gcg    480
Gly His His His Arg Ser Asp Ser Val Arg Gly Gly Gly Thr Gly Ala
145                 150                 155                 160
acg gct gga tcc gat aaa gat gga cgt gaa gtt cat aac aag gaa gag    528
Thr Ala Gly Ser Asp Lys Asp Gly Arg Glu Val His Asn Lys Glu Glu
                165                 170                 175
aaa gga atg aag gaa gca gag aat gtg gtt gaa gct aaa agc tca cag    576
Lys Gly Met Lys Glu Ala Glu Asn Val Val Glu Ala Lys Ser Ser Gln
            180                 185                 190
ttg gag tct ctt gtt tct cat gaa ggt gaa aaa act cct agg ccg caa    624
Leu Glu Ser Leu Val Ser His Glu Gly Glu Lys Thr Pro Arg Pro Gln
        195                 200                 205
gct gtt gct gaa gga agc agt aaa gtg gtt cca act cct gtg gag tat    672
Ala Val Ala Glu Gly Ser Ser Lys Val Val Pro Thr Pro Val Glu Tyr
    210                 215                 220
acg gtc aat gac att att gat ggc aag acg gtt aat gct gtt gaa ggg    720
Thr Val Asn Asp Ile Ile Asp Gly Lys Thr Val Asn Ala Val Glu Gly
225                 230                 235                 240
ctt aag gtt tat gaa ggg ttg gta aat gag aat gag aaa aac aag att    768
Leu Lys Val Tyr Glu Gly Leu Val Asn Glu Asn Glu Lys Asn Lys Ile
                245                 250                 255
ctc tct tta ctt aat gaa aca aaa gct tct ttt cgt cga gga ggg ctt    816
Leu Ser Leu Leu Asn Glu Thr Lys Ala Ser Phe Arg Arg Gly Gly Leu
            260                 265                 270
gaa gct ggg cag act gta ata att gga aaa aga cca atg aag ggt cat    864
Glu Ala Gly Gln Thr Val Ile Ile Gly Lys Arg Pro Met Lys Gly His
        275                 280                 285
ggg agg gaa att att cag ctg ggc att cct atc gtt gaa ggc cct cct    912
Gly Arg Glu Ile Ile Gln Leu Gly Ile Pro Ile Val Glu Gly Pro Pro
    290                 295                 300
gaa gat gac tat cca aga gag aca aaa gtg gag gct gtt cct gga ttg    960
Glu Asp Asp Tyr Pro Arg Glu Thr Lys Val Glu Ala Val Pro Gly Leu
305                 310                 315                 320
ctg cat gat ctg ttt gac cgc ttg tgt cag aag gaa att ata cca aca    1008
Leu His Asp Leu Phe Asp Arg Leu Cys Gln Lys Glu Ile Ile Pro Thr
                325                 330                 335
aaa cca gat tat tgt gtt att gat tac tac aat gag ggg gat tat tct    1056
Lys Pro Asp Tyr Cys Val Ile Asp Tyr Tyr Asn Glu Gly Asp Tyr Ser
            340                 345                 350
cac cct cac caa tcc cct cct tgg tat ggt aga ccc ttt tgt aca ttc    1104
His Pro His Gln Ser Pro Pro Trp Tyr Gly Arg Pro Phe Cys Thr Phe
        355                 360                 365
tgc ctg aca gat tgt gac atg gtg ttc ggc cga gtt att tca gga gaa    1152
Cys Leu Thr Asp Cys Asp Met Val Phe Gly Arg Val Ile Ser Gly Glu
    370                 375                 380
cga ggt gat cat aga ggt cct ctg aag ctc ctt ctc tcg aca ggg tct    1200
Arg Gly Asp His Arg Gly Pro Leu Lys Leu Leu Leu Ser Thr Gly Ser
385                 390                 395                 400
ctt ctg gtg ttg cat ggg aag agt gct gat gtt gct aag cga gct att    1248
Leu Leu Val Leu His Gly Lys Ser Ala Asp Val Ala Lys Arg Ala Ile
                405                 410                 415
cct gct gca tgt aag cag cgg atc cta cta agc ttc ggg aag tct tta    1296
Pro Ala Ala Cys Lys Gln Arg Ile Leu Leu Ser Phe Gly Lys Ser Leu
            420                 425                 430
tcg aga aaa caa gta cca tct gaa agt gtt tca cgg ttt act acc ccg    1344
Ser Arg Lys Gln Val Pro Ser Glu Ser Val Ser Arg Phe Thr Thr Pro
        435                 440                 445
ttg aca cca cct cct atg ccc tgg ggt cct cca agg ccg gct aac atg    1392
Leu Thr Pro Pro Pro Met Pro Trp Gly Pro Pro Arg Pro Ala Asn Met
    450                 455                 460
gcg cgt cat tct tca agc cct aaa cac ttt gga tat gcc cca aac agt    1440
Ala Arg His Ser Ser Ser Pro Lys His Phe Gly Tyr Ala Pro Asn Ser
465                 470                 475                 480
ggc gta ctt cca gcg ccg gcc att gga gcg cat cac att cct cca tca    1488
Gly Val Leu Pro Ala Pro Ala Ile Gly Ala His His Ile Pro Pro Ser
                485                 490                 495
gat gga atg cag cca ctc ttt gta gca cct gct cca gtt gct gct gca    1536
Asp Gly Met Gln Pro Leu Phe Val Ala Pro Ala Pro Val Ala Ala Ala
            500                 505                 510
gcc atg cct ttc cca tca cct gtt cct ttg cca aac tta acc aac agc    1584
Ala Met Pro Phe Pro Ser Pro Val Pro Leu Pro Asn Leu Thr Asn Ser
        515                 520                 525
ttg gat ggc aga agc tgc tcc aag gtc tgc tcc aca acg act ccc agt    1632
Leu Asp Gly Arg Ser Cys Ser Lys Val Cys Ser Thr Thr Thr Pro Ser
    530                 535                 540
tcc tgg cac ggg ggt ctt cct tcc tcc tgg atc ggg tca cgc act gcc    1680
Ser Trp His Gly Gly Leu Pro Ser Ser Trp Ile Gly Ser Arg Thr Ala
545                 550                 555                 560
tca tca gat gat                                                    1692
Ser Ser Asp Asp
<210>32
<211>564
<212>PRT
<213>Oryza sativa
<220>
<221>misc_feature
<222>(23)..(23)
<223>The  ′Xaa′at location 23 stands for Arg,or Lys.
<220>
<221>misc_feature
<222>(56)..(56)
<223>The  ′Xaa′at  location  56 stands for Gln,or His.
<220>
<221>misc_feature
<222>(57)..(57)
<223>The  ′Xaa′at  location 57 stands for Leu.
<220>
<221>misc feature
<222>(104)..(104)
<223>The ′Xaa′at location 104 stands for Trp,or Leu.
<220>
<221>misc feature
<222>(126)..(126)
<223>The ′Xaa′at location 126 stands for Pro,or Leu.
<400>32
Met Ala Ser Ala Ala Val Ile Pro Ser Ser Ala Pro Gly Ala Ala Ala
1               5                   10                  15
Ala Gly Ala Ala Ala Val Xaa Ser Ala Gly Trp Val Val Asp Glu Arg
            20                  25                  30
Asp Gly Phe Ile Ser Trp Leu Arg Gly Lys Phe Ala Ala Ala Asn Ala
        35                  40                  45
Ile Ile Asp Leu Leu Leu Leu Xaa Xaa Arg Ser Val Gly Glu Pro Gly
    50                  55                  60
Glu Phe Glu His Val Ala Ala Ala Val Gln Gln Arg Arg His His Trp
65                  70                  75                  80
Ala Pro Val Ile His Met Gln Gln Phe Phe Pro Val Gly Asp Val Ala
                85                  90                  95
Tyr Ala Leu Gln Gln Ala Gly Xaa Arg Arg Arg Ala Pro Pro His His
            100                 105                 110
Gln Gln Gln Gly Pro Gly Ala Ser Pro Ser Pro Pro Pro Xaa Pro Pro
        115                 120                 125
Arg Gly Arg Pro Ser Phe Ser Ala Ser His Ser His His Arg His Gly
    130                 135                 140
Gly His His His Arg Ser Asp Ser Val Arg Gly Gly Gly Thr Gly Ala
145                 150                 155                 160
Thr Ala Gly Ser Asp Lys Asp Gly Arg Glu Val His Asn Lys Glu Glu
                165                 170                 175
Lys Gly Met Lys Glu Ala Glu Asn Val Val Glu Ala Lys Ser Ser Gln
            180                 185                 190
Leu Glu Ser Leu Val Ser His Glu Gly Glu Lys Thr Pro Arg Pro Gln
        195                 200                 205
Ala Val Ala Glu Gly Ser Ser Lys Val Val Pro Thr Pro Val Glu Tyr
    210                 215                 220
Thr Val Asn Asp Ile Ile Asp Gly Lys Thr Val Asn Ala Val Glu Gly
225                 230                 235                 240
Leu Lys Val Tyr Glu Gly Leu Val Asn Glu Asn Glu Lys Asn Lys Ile
                245                 250                 255
Leu Ser Leu Leu Asn Glu Thr Lys Ala Ser Phe Arg Arg Gly Gly Leu
            260                 265                 270
Glu Ala Gly Gln Thr Val Ile Ile Gly Lys Arg Pro Met Lys Gly His
        275                 280                 285
Gly Arg Glu Ile Ile Gln Leu Gly Ile Pro Ile Val Glu Gly Pro Pro
    290                 295                 300
Glu Asp Asp Tyr Pro Arg Glu Thr Lys Val Glu Ala Val Pro Gly Leu
305                 310                 315                 320
Leu His Asp Leu Phe Asp Arg Leu Cys Gln Lys Glu Ile Ile Pro Thr
                325                 330                 335
Lys Pro Asp Tyr Cys Val Ile Asp Tyr Tyr Asn Glu Gly Asp Tyr Ser
            340                 345                 350
His Pro His Gln Ser Pro Pro Trp Tyr Gly Arg Pro Phe Cys Thr Phe
        355                 360                 365
Cys Leu Thr Asp Cys Asp Met Val Phe Gly Arg Val Ile Ser Gly Glu
    370                 375                 380
Arg Gly Asp His Arg Gly Pro Leu Lys Leu Leu Leu Ser Thr Gly Ser
385                 390                 395                 400
Leu Leu Val Leu His Gly Lys Ser Ala Asp Val Ala Lys Arg Ala Ile
                405                 410                 415
Pro Ala Ala Cys Lys Gln Arg Ile Leu Leu Ser Phe Gly Lys Ser Leu
            420                 425                 430
Ser Arg Lys Gln Val Pro Ser Glu Ser Val Ser Arg Phe Thr Thr Pro
        435                 440                 445
Leu Thr Pro Pro Pro Met Pro Trp Gly Pro Pro Arg Pro Ala Asn Met
    450                 455                 460
Ala Arg His Ser Ser Ser Pro Lys His Phe Gly Tyr Ala Pro Asn Ser
465                 470                 475                 480
Gly Val Leu Pro Ala Pro Ala Ile Gly Ala His His Ile Pro Pro Ser
                485                 490                 495
Asp Gly Met Gln Pro Leu Phe Val Ala Pro Ala Pro Val Ala Ala Ala
            500                 505                 510
Ala Met Pro Phe Pro Ser Pro Val Pro Leu Pro Asn Leu Thr Asn Ser
        515                 520                 525
Leu Asp Gly Arg Ser Cys Ser Lys Val Cys Ser Thr Thr Thr Pro Ser
    530                 535                 540
Ser Trp His Gly Gly Leu Pro Ser Ser Trp Ile Gly Ser Arg Thr Ala
545                 550                 555                 560
Ser Ser Asp Asp
<210>33
<211>858
<212>DNA
<213>Oryza sativa
<220>
<221>CDS
<222>(1)..(858)
<400>33
atg gag ggc ggc ggc gag gtg ggc tgg tac gtg ctc ggc ccg aac cag    48
Met Glu Gly Gly Gly Glu Val Gly Trp Tyr Val Leu Gly Pro Asn Gln
1               5                   10                  15
gag cac gtc ggc ccc tac gcg ctc tcc gag ctg cga gaa cat ttt gct    96
Glu His Val Gly Pro Tyr Ala Leu Ser Glu Leu Arg Glu His Phe Ala
            20                  25                  30
aat ggg tac atc agt gag agc tca atg ctc tgg gca gaa ggg agg agt    144
Asn Gly Tyr Ile Ser Glu Ser Ser Met Leu Trp Ala Glu Gly Arg Ser
        35                  40                  45
gaa tgg atg cca ttg tcg tcg att cct gac cta ctt gcg gtg gtc aca    192
Glu Trp Met Pro Leu Ser Ser Ile Pro Asp Leu Leu Ala Val Val Thr
    50                  55                  60
aaa aag gat caa cct gat gaa gga att gaa gat gat ttc gat aaa ttt    240
Lys Lys Asp Gln Pro Asp Glu Gly Ile Glu Asp Asp Phe Asp Lys Phe
65                  70                  75                  80
caa aag gag gtt ata gaa gct gag gca gag gtg gaa gcc tcg aca gac    288
Gln Lys Glu Val Ile Glu Ala Glu Ala Glu Val Glu Ala Ser Thr Asp
                85                  90                  95
aag gct gca gat aac gac ata aac caa gaa cat ggg gcc gat gat cct    336
Lys Ala Ala Asp Asn Asp Ile Asn Gln Glu His Gly Ala Asp Asp Pro
            100                 105                 110
gat gac cgg cca gca acc cca cca gat ggc gag gac gaa ttt act gat    384
Asp Asp Arg Pro Ala Thr Pro Pro Asp Gly Glu Asp Glu Phe Thr Asp
        115                 120                 125
gat gat ggt act gtt tac aag tgg gat cgt gtc ctg agg gca tgg gtt    432
Asp Asp Gly Thr Val Tyr Lys Trp Asp Arg Val Leu Arg Ala Trp Val
    130                 135                 140
cct caa gat gac cta gaa ggc aaa aat gac aac tat gaa gtt gaa gac    480
Pro Gln Asp Asp Leu Glu Gly Lys Asn Asp Asn Tyr Glu Val Glu Asp
145                 150                 155                 160
atg act ttt gca cat gag gaa gaa gtt ttc caa gca cca gat att gct    528
Met Thr Phe Ala His Glu Glu Glu Val Phe Gln Ala Pro Asp Ile Ala
                165                 170                 175
ggt tca acc aca tta gaa gaa aac aat gtt tct gcg gaa att gaa atc    576
Gly Ser Thr Thr Leu Glu Glu Asn Asn Val Ser Ala Glu Ile Glu Ile
            180                 185                 190
aaa gaa cca cca aag gta gaa aag aga gca cat aag aag cgg aag tct    624
Lys Glu Pro Pro Lys Val Glu Lys Arg Ala His Lys Lys Arg Lys Ser
        195                 200                 205
tct gaa aag cca gcc gat aaa aag gaa gct tac aaa cct cca gat agt    672
Ser Glu Lys Pro Ala Asp Lys Lys Glu Ala Tyr Lys Pro Pro Asp Ser
    210                 215                 220
tgg gtt gat ctc aaa gtt aac aca cat gtc tac gtt act ggt ttg cct    720
Trp Val Asp Leu Lys Val Asn Thr His Val Tyr Val Thr Gly Leu Pro
225                 230                 235                 240
gat gat gtc aca gct gag gag att gtg gag gta ttt tcc aaa tgt gga    768
Asp Asp Val Thr Ala Glu Glu Ile Val Glu Val Phe Ser Lys Cys Gly
                245                 250                 255
att ata aag gag gac cca gag aca aga aaa ccc cga gta aaa atc tat    816
Ile Ile Lys Glu Asp Pro Glu Thr Arg Lys Pro Arg Val Lys Ile Tyr
            260                 265                 270
act gac aga gaa aca ggc aga aag aaa ggt gat gcg cta gtg            858
Thr Asp Arg Glu Thr Gly Arg Lys Lys Gly Asp Ala Leu Val
        275                 280                 285
<210>34
<211>286
<212>PRT
<213>Oryza sativa
<400>34
Met Glu Gly Gly Gly Glu Val Gly Trp Tyr Val Leu Gly Pro Asn Gln
1               5                   10                  15
Glu His Val Gly Pro Tyr Ala Leu Ser Glu Leu Arg Glu His Phe Ala
            20                  25                  30
Asn Gly Tyr Ile Ser Glu Ser Ser Met Leu Trp Ala Glu Gly Arg Ser
        35                  40                  45
Glu Trp Met Pro Leu Ser Ser Ile Pro Asp Leu Leu Ala Val Val Thr
    50                  55                  60
Lys Lys Asp Gln Pro Asp Glu Gly Ile Glu Asp Asp Phe Asp Lys Phe
65                  70                  75                  80
Gln Lys Glu Val Ile Glu Ala Glu Ala Glu Val Glu Ala Ser Thr Asp
                85                  90                  95
Lys Ala Ala Asp Asn Asp Ile Asn Gln Glu His Gly Ala Asp Asp Pro
            100                 105                 110
Asp Asp Arg Pro Ala Thr Pro Pro Asp Gly Glu Asp Glu Phe Thr Asp
        115                 120                 125
Asp Asp Gly Thr Val Tyr Lys Trp Asp Arg Val Leu Arg Ala Trp Val
    130                 135                 140
Pro Gln Asp Asp Leu Glu Gly Lys Asn Asp Asn Tyr Glu Val Glu Asp
145                 150                 155                 160
Met Thr Phe Ala His Glu Glu Glu Val Phe Gln Ala Pro Asp Ile Ala
                165                 170                 175
Gly Ser Thr Thr Leu Glu Glu Asn Asn Val Ser Ala Glu Ile Glu Ile
            180                 185                 190
Lys Glu Pro Pro Lys Val Glu Lys Arg Ala His Lys Lys Arg Lys Ser
        195                 200                 205
Ser Glu Lys Pro Ala Asp Lys Lys Glu Ala Tyr Lys Pro Pro Asp Ser
    210                 215                 220
Trp Val Asp Leu Lys Val Asn Thr His Val Tyr Val Thr Gly Leu Pro
225                 230                 235                 240
Asp Asp Val Thr Ala Glu Glu Ile Val Glu Val Phe Ser Lys Cys Gly
                245                 250                 255
Ile Ile Lys Glu Asp Pro Glu Thr Arg Lys Pro Arg Val Lys Ile Tyr
            260                 265                 270
Thr Asp Arg Glu Thr Gly Arg Lys Lys Gly Asp Ala Leu Val
        275                 280                 285
<210>35
<211>1251
<212>DNA
<213>Oryza sativa
<220>
<221>CDS
<222>(1)..(1251)
<400>35
atg gcg agg cgc tct cct tgc ctc gcc gtc gcc atg ctc ctg ctt ggg    48
Met Ala Arg Arg Ser Pro Cys Leu Ala Val Ala Met Leu Leu Leu Gly
1               5                   10                  15
gcg ttg gcg gtg gcg agc gcc ttc att gat gaa gcg gcg gct gct ggc    96
Ala Leu Ala Val Ala Ser Ala Phe Ile Asp Glu Ala Ala Ala Ala Gly
            20                  25                  30
cgg ggg ctc ggc cat ggc gcc cgc ttc atg agc aag cag ggt cgt gtg    144
Arg Gly Leu Gly His Gly Ala Arg Phe Met Ser Lys Gln Gly Arg Val
        35                  40                  45
aca tac gag aag ctg ccg gag ccg gag ccg aag cca aag cca aag cct    192
Thr Tyr Glu Lys Leu Pro Glu Pro Glu Pro Lys Pro Lys Pro Lys Pro
    50                  55                  60
cat cct aaa ccc acg cca aaa cct gag ccc aag cca gag ccg gag cca    240
His Pro Lys Pro Thr Pro Lys Pro Glu Pro Lys Pro Glu Pro Glu Pro
65                  70                  75                  80
aaa cca gta cct gag cct gag cct aaa ccg gaa cca aag cca gaa cca    288
Lys Pro Val Pro Glu Pro Glu Pro Lys Pro Glu Pro Lys Pro Glu Pro
                85                  90                  95
aaa cct gag cct aag cct gaa cct aaa cca tac cca gag cca aaa ccg    336
Lys Pro Glu Pro Lys Pro Glu Pro Lys Pro Tyr Pro Glu Pro Lys Pro
            100                 105                 110
gag ccg aag cca gag cca aaa cct gag ccg gag cct aaa cct gag cct    384
Glu Pro Lys Pro Glu Pro Lys Pro Glu Pro Glu Pro Lys Pro Glu Pro
        115                 120                 125
aag cca gaa cca aaa cca gaa cca aag ccg tac cca gag ccg aag cca    432
Lys Pro Glu Pro Lys Pro Glu Pro Lys Pro Tyr Pro Glu Pro Lys Pro
    130                 135                 140
gag cca aaa ccg gaa ccg aag ccg gaa cca aaa ccg gag ccc aaa cca    480
Glu Pro Lys Pro Glu Pro Lys Pro Glu Pro Lys Pro Glu Pro Lys Pro
145                 150                 155                 160
aag cca gag ccc aaa cca cac cca gaa cca aag cct gat ccg aaa cct    528
Lys Pro Glu Pro Lys Pro His Pro Glu Pro Lys Pro Asp Pro Lys Pro
                165                 170                 175
gag cct aag cca cac cca gag cct gag cct aag cct gaa cct aag cct    576
Glu Pro Lys Pro His Pro Glu Pro Glu Pro Lys Pro Glu Pro Lys Pro
            180                 185                 190
gag ccc aag cca cac cct gag cct gaa cca aag cct gag cct aag cct    624
Glu Pro Lys Pro His Pro Glu Pro Glu Pro Lys Pro Glu Pro Lys Pro
        195                 200                 205
gag cca aag cca gaa cca aag ccg gag cca aaa cct gaa cca aaa cca    672
Glu Pro Lys Pro Glu Pro Lys Pro Glu Pro Lys Pro Glu Pro Lys Pro
    210                 215                 220
aag cca aag cca gag cca aag cca aag cct gag ccc aag cca tac cct    720
Lys Pro Lys Pro Glu Pro Lys Pro Lys Pro Glu Pro Lys Pro Tyr Pro
225                 230                 235                 240
gag cct aag cct aag cct gaa cca aag cct gag cct aag cct gag cca    768
Glu Pro Lys Pro Lys Pro Glu Pro Lys Pro Glu Pro Lys Pro Glu Pro
                245                 250                 255
aag cca gaa cca aag ccg gag cca aaa cct gaa cca aaa cca gag cca    816
Lys Pro Glu Pro Lys Pro Glu Pro Lys Pro Glu Pro Lys Pro Glu Pro
            260                 265                 270
aag cca gag cca aag cca aag cct gag ccc aag cca cac cct aag cct    864
Lys Pro Glu Pro Lys Pro Lys Pro Glu Pro Lys Pro His Pro Lys Pro
        275                 280                 285
gag cct aag cct gag ccc aag cca gaa cca aag cca gag cca aaa cct    912
Glu Pro Lys Pro Glu Pro Lys Pro Glu Pro Lys Pro Glu Pro Lys Pro
    290                 295                 300
gaa cca aaa cca gag cca aaa cca gag cct gaa ccg aag cct gag cca    960
Glu Pro Lys Pro Glu Pro Lys Pro Glu Pro Glu Pro Lys Pro Glu Pro
305                 310                 315                 320
aag cct gaa cca aaa cca gag ccc aaa cca tat cca gag cct aaa ccg    1008
Lys Pro Glu Pro Lys Pro Glu Pro Lys Pro Tyr Pro Glu Pro Lys Pro
                325                 330                 335
gat ccc aaa cca gaa ccc aaa cca cac cca gaa cca aag cca gag ccc    1056
Asp Pro Lys Pro Glu Pro Lys Pro His Pro Glu Pro Lys Pro Glu Pro
            340                 345                 350
aag cca cag ccg gag cca aaa cca gag ccg aag cct gaa cct aaa cca    1104
Lys Pro Gln Pro Glu Pro Lys Pro Glu Pro Lys Pro Glu Pro Lys Pro
        355                 360                 365
gag cct aag ccc gaa cca aaa ccg gag cct aaa cca tac cca gag cca    1152
Glu Pro Lys Pro Glu Pro Lys Pro Glu Pro Lys Pro Tyr Pro Glu Pro
    370                 375                 380
aag cct gaa ccg aaa cct aag cct aag cct gag cca aaa cct gaa gca    1200
Lys Pro Glu Pro Lys Pro Lys Pro Lys Pro Glu Pro Lys Pro Glu Ala
385                 390                 395                 400
cct ccg aag aag cac aag ccg ccg cac ata ccg cca gcg acc gac cag    1248
Pro Pro Lys Lys His Lys Pro Pro His Ile Pro Pro Ala Thr Asp Gln
                405                 410                 415
tga                                                            1251
<210>36
<211>416
<212>PRT
<213>Oryza sativa
<400>36
Met Ala Arg Arg Ser Pro Cys Leu Ala Val Ala Met Leu Leu Leu Gly
1               5                   10                  15
Ala Leu Ala Val Ala Ser Ala Phe Ile Asp Glu Ala Ala Ala Ala Gly
            20                  25                  30
Arg Gly Leu Gly His Gly Ala Arg Phe Met Ser Lys Gln Gly Arg Val
        35                  40                  45
Thr Tyr Glu Lys Leu Pro Glu Pro Glu Pro Lys Pro Lys Pro Lys Pro
    50                  55                  60
His Pro Lys Pro Thr Pro Lys Pro Glu Pro Lys Pro Glu Pro Glu Pro
65                  70                  75                  80
Lys Pro Val Pro Glu Pro Glu Pro Lys Pro Glu Pro Lys Pro Glu Pro
                85                  90                  95
Lys Pro Glu Pro Lys Pro Glu Pro Lys Pro Tyr Pro Glu Pro Lys Pro
            100                 105                 110
Glu Pro Lys Pro Glu Pro Lys Pro Glu Pro Glu Pro Lys Pro Glu Pro
        115                 120                 125
Lys Pro Glu Pro Lys Pro Glu Pro Lys Pro Tyr Pro Glu Pro Lys Pro
    130                 135                 140
Glu Pro Lys Pro Glu Pro Lys Pro Glu Pro Lys Pro Glu Pro Lys Pro
145                 150                 155                 160
Lys Pro Glu Pro Lys Pro His Pro Glu Pro Lys Pro Asp Pro Lys Pro
                165                 170                 175
Glu Pro Lys Pro His Pro Glu Pro Glu Pro Lys Pro Glu Pro Lys Pro
            180                 185                 190
Glu Pro Lys Pro His Pro Glu Pro Glu Pro Lys Pro Glu Pro Lys Pro
        195                 200                 205
Glu Pro Lys Pro Glu Pro Lys Pro Glu Pro Lys Pro Glu Pro Lys Pro
    210                 215                 220
Lys Pro Lys Pro Glu Pro Lys Pro Lys Pro Glu Pro Lys Pro Tyr Pro
225                 230                 235                 240
Glu Pro Lys Pro Lys Pro Glu Pro Lys Pro Glu Pro Lys Pro Glu Pro
                245                 250                 255
Lys Pro Glu Pro Lys Pro Glu Pro Lys Pro Glu Pro Lys Pro Glu Pro
            260                 265                 270
Lys Pro Glu Pro Lys Pro Lys Pro Glu Pro Lys Pro His Pro Lys Pro
        275                 280                 285
Glu Pro Lys Pro Glu Pro Lys Pro Glu Pro Lys Pro Glu Pro Lys Pro
    290                 295                 300
Glu Pro Lys Pro Glu Pro Lys Pro Glu Pro Glu Pro Lys Pro Glu Pro
305                 310                 315                 320
Lys Pro Glu Pro Lys Pro Glu Pro Lys Pro Tyr Pro Glu Pro Lys Pro
                325                 330                 335
Asp Pro Lys Pro Glu Pro Lys Pro His Pro Glu Pro Lys Pro Glu Pro
            340                 345                 350
Lys Pro Gln Pro Glu Pro Lys Pro Glu Pro Lys Pro Glu Pro Lys Pro
        355                 360                 365
Glu Pro Lys Pro Glu Pro Lys Pro Glu Pro Lys Pro Tyr Pro Glu Pro
    370                 375                 380
Lys Pro Glu Pro Lys Pro Lys Pro Lys Pro Glu Pro Lys Pro Glu Ala
385                 390                 395                 400
Pro Pro Lys Lys His Lys Pro Pro His Ile Pro Pro Ala Thr Asp Gln
                405                 410                 415
<210>37
<211>711
<212>DNA
<213>Oryza sativa
<220>
<221>CDS
<222>(1)..(711)
<400>37
atg gcc ggc gcc gac gtg gac gtc ggg acg gag ctc cgg ctg ggg ctg    48
Met Ala Gly Ala Asp Val Asp Val Gly Thr Glu Leu Arg Leu Gly Leu
1               5                   10                  15
ccc gga ggt ggc ggc ggc gcc gcc gag gcg gcg gcc aag gcc gcg aag    96
Pro Gly Gly Gly Gly Gly Ala Ala Glu Ala Ala Ala Lys Ala Ala Lys
            20                  25                  30
agg ggc ttc gag gag acc att gac ctg aag ctg aag ctg ccc acc gcc    144
Arg Gly Phe Glu Glu Thr Ile Asp Leu Lys Leu Lys Leu Pro Thr Ala
        35                  40                  45
ggc atg gag gag gcc gcc gcc ggc aag gcg gag gcg ccg gcc gcc gag    192
Gly Met Glu Glu Ala Ala Ala Gly Lys Ala Glu Ala Pro Ala Ala Glu
    50                  55                  60
aag gcc aag agg ccg gcg gag gcc gcc gcc gcc gac gcc gag aag cca    240
Lys Ala Lys Arg Pro Ala Glu Ala Ala Ala Ala Asp Ala Glu Lys Pro
65                  70                  75                  80
cct gct ccc aag gcg cag gca gtg ggt tgg cca cca gtt cgg tcg ttc    288
Pro Ala Pro Lys Ala Gln Ala Val Gly Trp Pro Pro Val Arg Ser Phe
                85                  90                  95
cgc agg aat atc atg acc gtc cag tca gtg aag agc aag aag gaa gag    336
Arg Arg Asn Ile Met Thr Val Gln Ser Val Lys Ser Lys Lys Glu Glu
            100                 105                 110
gaa gct gac aag cag cag cag cag ccc gct gcc aat gcc agc ggc agc    384
Glu Ala Asp Lys Gln Gln Gln Gln Pro Ala Ala Asn Ala Ser Gly Ser
        115                 120                 125
aac agc tct gcc ttc gtg aag gtc agc atg gac ggg gca ccc tac ctg    432
Asn Ser Ser Ala Phe Val Lys Val Ser Met Asp Gly Ala Pro Tyr Leu
    130                 135                 140
cgc aag gtg gac ctg aag atg tac aac agc tac aag gac ctc tcc ctt    480
Arg Lys Val Asp Leu Lys Met Tyr Asn Ser Tyr Lys Asp Leu Ser Leu
145                 150                 155                 160
gct ctg cag aag atg ttc ggc acc ttc acc gca act ggg aac aat atg    528
Ala Leu Gln Lys Met Phe Gly Thr Phe Thr Ala Thr Gly Asn Asn Met
                165                 170                 175
aat gag gtg aat ggc tct gat gct gtt aca act tat gaa gac aag gat    576
Asn Glu Val Asn Gly Ser Asp Ala Val Thr Thr Tyr Glu Asp Lys Asp
            180                 185                 190
ggt gac tgg atg ctt gtt gga gat gtc ccg tgg cag atg ttt gtc gag    624
Gly Asp Trp Met Leu Val Gly Asp Val Pro Trp Gln Met Phe Val Glu
        195                 200                 205
tca tgc aaa cgc ttg agg atc atg aag ggt tcc gaa gcc att ggt ctt    672
Ser Cys Lys Arg Leu Arg Ile Met Lys Gly Ser Glu Ala Ile Gly Leu
    210                 215                 220
gca cca aga gca aag gac aag tac aag aac aag agc tga                711
Ala Pro Arg Ala Lys Asp Lys Tyr Lys Asn Lys Ser
225                 230                 235
<210>38
<211>236
<212>PRT
<213>Oryza sativa
<400>38
Met Ala Gly Ala Asp Val Asp Val Gly Thr Glu Leu Arg Leu Gly Leu
1               5                   10                  15
Pro Gly Gly Gly Gly Gly Ala Ala Glu Ala Ala Ala Lys Ala Ala Lys
            20                  25                  30
Arg Gly Phe Glu Glu Thr Ile Asp Leu Lys Leu Lys Leu Pro Thr Ala
        35                  40                  45
Gly Met Glu Glu Ala Ala Ala Gly Lys Ala Glu Ala Pro Ala Ala Glu
    50                  55                  60
Lys Ala Lys Arg Pro Ala Glu Ala Ala Ala Ala Asp Ala Glu Lys Pro
65                  70                  75                  80
Pro Ala Pro Lys Ala Gln Ala Val Gly Trp Pro Pro Val Arg Ser Phe
                85                  90                  95
Arg Arg Asn Ile Met Thr Val Gln Ser Val Lys Ser Lys Lys Glu Glu
            100                 105                 110
Glu Ala Asp Lys Gln Gln Gln Gln Pro Ala Ala Asn Ala Ser Gly Ser
        115                 120                 125
Asn Ser Ser Ala Phe Val Lys Val Ser Met Asp Gly Ala Pro Tyr Leu
    130                 135                 140
Arg Lys Val Asp Leu Lys Met Tyr Asn Ser Tyr Lys Asp Leu Ser Leu
145                 150                 155                 160
Ala Leu Gln Lys Met Phe Gly Thr Phe Thr Ala Thr Gly Asn Asn Met
                165                 170                 175
Asn Glu Val Asn Gly Ser Asp Ala Val Thr Thr Tyr Glu Asp Lys Asp
            180                 185                 190
Gly Asp Trp Met Leu Val Gly Asp Val Pro Trp Gln Met Phe Val Glu
        195                 200                 205
Ser Cys Lys Arg Leu Arg Ile Met Lys Gly Ser Glu Ala Ile Gly Leu
    210                 215                 220
Ala Pro Arg Ala Lys Asp Lys Tyr Lys Asn Lys Ser
225                 230                 235
<210>39
<211>1257
<212>DNA
<213>Oryza sativa
<220>
<221>CDS
<222>(1)..(1257)
<400>39
acg cgt ccg gac ttc gat aag aaa gtt gtg gat tgg ctt gct agc aac    48
Thr Arg Pro Asp Phe Asp Lys Lys Val Val Asp Trp Leu Ala Ser Asn
1               5                   10                  15
ttt aag aaa gat gaa ggc att gat ctt ctg aaa gac aaa caa gcc ctg    96
Phe Lys Lys Asp Glu Gly Ile Asp Leu Leu Lys Asp Lys Gln Ala Leu
            20                  25                  30
cag cga ctc act gag gca gca gag aaa gcg aag atg gaa ctg tct acg    144
Gln Arg Leu Thr Glu Ala Ala Glu Lys Ala Lys Met Glu Leu Ser Thr
        35                  40                  45
ctg tct cag aca aac att agc ttg cct ttc ata act gct act gct gat    192
Leu Ser Gln Thr Asn Ile Ser Leu Pro Phe Ile Thr Ala Thr Ala Asp
    50                  55                  60
ggg cct aaa cac atc gag aca act ctc tcc aga gcc aaa ttt gag gag    240
Gly Pro Lys His Ile Glu Thr Thr Leu Ser Arg Ala Lys Phe Glu Glu
65                  70                  75                  80
cta tgt tcg gac ctc att gat agg ctt aaa act cct gtc act aat gcc    288
Leu Cys Ser Asp Leu Ile Asp Arg Leu Lys Thr Pro Val Thr Asn Ala
                85                  90                  95
ttg aga gat gcc aaa ctg tct gtt gat aac ctg gac gaa gtg att ctt    336
Leu Arg Asp Ala Lys Leu Ser Val Asp Asn Leu Asp Glu Val Ile Leu
            100                 105                 110
gtt ggt gga tcc act cgt atc cct tcc gtg caa gag ctt gtg aag aag    384
Val Gly Gly Ser Thr Arg Ile Pro Ser Val Gln Glu Leu Val Lys Lys
        115                 120                 125
atc act ggc aag gat ccc aat gtc aca gtc aac cct gat gag gtt gtt    432
Ile Thr Gly Lys Asp Pro Asn Val Thr Val Asn Pro Asp Glu Val Val
    130                 135                 140
tct ctt ggg gca gct gta cag ggt gga gtt ttg gcc gga gat gtg aaa    480
Ser Leu Gly Ala Ala Val Gln Gly Gly Val Leu Ala Gly Asp Val Lys
145                 150                 155                 160
gat gtc gtt ctt ctt gat gtt act cca ttg tct ctt ggt ctg gag acg    528
Asp Val Val Leu Leu Asp Val Thr Pro Leu Ser Leu Gly Leu Glu Thr
                165                 170                 175
ttg ggt gga gtg atg acc aag att att ccc aga aac aca aca ctg ccc    576
Leu Gly Gly Val Met Thr Lys Ile Ile Pro Arg Asn Thr Thr Leu Pro
            180                 185                 190
acc tca aaa tca gag gta ttc tcc aca gct gca gat gga cag aca agt    624
Thr Ser Lys Ser Glu Val Phe Ser Thr Ala Ala Asp Gly Gln Thr Ser
        195                 200                 205
gtt gag ata aat gtt ctt cag gga gag aga gag ttt gtc cgg gac aac    672
Val Glu Ile Asn Val Leu Gln Gly Glu Arg Glu Phe Val Arg Asp Asn
    210                 215                 220
aag tct ctt gga agc ttc cgc ttg gat gga atc ccc tcc ctg cac cac    720
Lys Ser Leu Gly Ser Phe Arg Leu Asp Gly Ile Pro Ser Leu His His
225                 230                 235                 240
gtg gtg ttc cac aaa ttg aag tca agt ttg ata ttg atg cca atg gta    768
Val Val Phe His Lys Leu Lys Ser Ser Leu Ile Leu Met Pro Met Val
                245                 250                 255
tct ctt ctg ttg ctg cta ttg ata agg gta ctg gga aga aac agg ata    816
Ser Leu Leu Leu Leu Leu Leu Ile Arg Val Leu Gly Arg Asn Arg Ile
            260                 265                 270
tcc cca tca ccg gcg ctt agt aca ctg cca aag gat gag gtt gag aga    864
Ser Pro Ser Pro Ala Leu Ser Thr Leu Pro Lys Asp Glu Val Glu Arg
        275                 280                 285
atg gtg gaa gag gct gac aag ttt gct cag gag gac aaa gag aaa aga    912
Met Val Glu Glu Ala Asp Lys Phe Ala Gln Glu Asp Lys Glu Lys Arg
    290                 295                 300
gat gcc att gat acc aaa aac cag gca gac tct gtg gtc tac cag act    960
Asp Ala Ile Asp Thr Lys Asn Gln Ala Asp Ser Val Val Tyr Gln Thr
305                 310                 315                 320
gag aag caa ctg aag gag cta ggt gac aag gta cct gca cct gtg aaa    1008
Glu Lys Gln Leu Lys Glu Leu Gly Asp Lys Val Pro Ala Pro Val Lys
                325                 330                 335
gag aag gtg gat gca aag ctc aac gag ctc aaa gag gcc att gcg ggt    1056
Glu Lys Val Asp Ala Lys Leu Asn Glu Leu Lys Glu Ala Ile Ala Gly
            340                 345                 350
gga tca aca cag agc atg aag gat gcc atg gct gct tta aac gag gaa    1104
Gly Ser Thr Gln Ser Met Lys Asp Ala Met Ala Ala Leu Asn Glu Glu
        355                 360                 365
gtt atg cag atc ggc cag gcc atg tac aac cag cag cct aat gct ggt    1152
Val Met Gln Ile Gly Gln Ala Met Tyr Asn Gln Gln Pro Asn Ala Gly
    370                 375                 380
gct gct gga cct act cct ggt gcc gat gct gga ccg aca agc tca ggc    1200
Ala Ala Gly Pro Thr Pro Gly Ala Asp Ala Gly Pro Thr Ser Ser Gly
385                 390                 395                 400
ggt aag gga ccg aat gat gga gat gtt att gat gcg gat ttc act gac    1248
Gly Lys Gly Pro Asn Asp Gly Asp Val Ile Asp Ala Asp Phe Thr Asp
                405                 410                 415
agc aat tga                                                        1257
Ser Asn
<210>40
<211>418
<212>PRT
<213>Oryza sativa
<400>40
Thr Arg Pro Asp Phe Asp Lys Lys Val Val Asp Trp Leu Ala Ser Asn
1               5                   10                  15
Phe Lys Lys Asp Glu Gly Ile Asp Leu Leu Lys Asp Lys Gln Ala Leu
            20                  25                  30
Gln Arg Leu Thr Glu Ala Ala Glu Lys Ala Lys Met Glu Leu Ser Thr
        35                  40                  45
Leu Ser Gln Thr Asn Ile Ser Leu Pro Phe Ile Thr Ala Thr Ala Asp
    50                  55                  60
Gly Pro Lys His Ile Glu Thr Thr Leu Ser Arg Ala Lys Phe Glu Glu
65                  70                  75                  80
Leu Cys Ser Asp Leu Ile Asp Arg Leu Lys Thr Pro Val Thr Asn Ala
                85                  90                  95
Leu Arg Asp Ala Lys Leu Ser Val Asp Asn Leu Asp Glu Val Ile Leu
            100                 105                 110
Val Gly Gly Ser Thr Arg Ile Pro Ser Val Gln Glu Leu Val Lys Lys
        115                 120                 125
Ile Thr Gly Lys Asp Pro Asn Val Thr Val Asn Pro Asp Glu Val Val
    130                 135                 140
Ser Leu Gly Ala Ala Val Gln Gly Gly Val Leu Ala Gly Asp Val Lys
145                 150                 155                 160
Asp Val Val Leu Leu Asp Val Thr Pro Leu Ser Leu Gly Leu Glu Thr
                165                 170                 175
Leu Gly Gly Val Met Thr Lys Ile Ile Pro Arg Asn Thr Thr Leu Pro
            180                 185                 190
Thr Ser Lys Ser Glu Val Phe Ser Thr Ala Ala Asp Gly Gln Thr Ser
        195                 200                 205
Val Glu Ile Asn Val Leu Gln Gly Glu Arg Glu Phe Val Arg Asp Asn
    210                 215                 220
Lys Ser Leu Gly Ser Phe Arg Leu Asp Gly Ile Pro Ser Leu His His
225                 230                 235                 240
Val Val Phe His Lys Leu Lys Ser Ser Leu Ile Leu Met Pro Met Val
                245                 250                 255
Ser Leu Leu Leu Leu Leu Leu Ile Arg Val Leu Gly Arg Asn Arg Ile
            260                 265                 270
Ser Pro Ser Pro Ala Leu Ser Thr Leu Pro Lys Asp Glu Val Glu Arg
        275                 280                 285
Met Val Glu Glu Ala Asp Lys Phe Ala Gln Glu Asp Lys Glu Lys Arg
    290                 295                 300
Asp Ala Ile Asp Thr Lys Asn Gln Ala Asp Ser Val Val Tyr Gln Thr
305                 310                 315                 320
Glu Lys Gln Leu Lys Glu Leu Gly Asp Lys Val Pro Ala Pro Val Lys
                325                 330                 335
Glu Lys Val Asp Ala Lys Leu Asn Glu Leu Lys Glu Ala Ile Ala Gly
            340                 345                 350
Gly Ser Thr Gln Ser Met Lys Asp Ala Met Ala Ala Leu Asn Glu Glu
        355                 360                 365
Val Met Gln Ile Gly Gln Ala Met Tyr Asn Gln Gln Pro Asn Ala Gly
    370                 375                 380
Ala Ala Gly Pro Thr Pro Gly Ala Asp Ala Gly Pro Thr Ser Ser Gly
385                 390                 395                 400
Gly Lys Gly Pro Asn Asp Gly Asp Val Ile Asp Ala Asp Phe Thr Asp
                405                 410                 415
Ser Asn
<210>41
<211>1557
<212>DNA
<213>Oryza sativa
<220>
<221>CDS
<222>(1)..(1557)
<400>41
atg gtg gtt ctt gca gct tct att ata tcg aag tct gga aaa gct ctt    48
Met Val Val Leu Ala Ala Ser Ile Ile Ser Lys Ser Gly Lys Ala Leu
1               5                   10                  15
gtt tcg aga caa ttt gtt gac atg tcc cgg ata agg atc gat ggg ctg    96
Val Ser Arg Gln Phe Val Asp Met Ser Arg Ile Arg Ile Asp Gly Leu
            20                  25                  30
ctt gca gca ttt ccg aag ctg gtc gga agt gga aag caa cat act tat    144
Leu Ala Ala Phe Pro Lys Leu Val Gly Ser Gly Lys Gln His Thr Tyr
        35                  40                  45
gtt gag act gaa aat gtt cgt tat gtc tat caa cca att gaa gca ctg    192
Val Glu Thr Glu Asn Val Arg Tyr Val Tyr Gln Pro Ile Glu Ala Leu
    50                  55                  60
tat ttg ctt ctc atc aca aat aag caa agt aac att ctt gaa gat ctg    240
Tyr Leu Leu Leu Ile Thr Asn Lys Gln Ser Asn Ile Leu Glu Asp Leu
65                  70                  75                  80
gat act tta agg cta ctc tcc aag ctt ata cct gaa tat gct ccc tct    288
Asp Thr Leu Arg Leu Leu Ser Lys Leu Ile Pro Glu Tyr Ala Pro Ser
                85                  90                  95
ttg gat gaa gag ggt gtc tgt aag gca gca ttc gag ctt ctg ttt gcc    336
Leu Asp Glu Glu Gly Val Cys Lys Ala Ala Phe Glu Leu Leu Phe Ala
            100                 105                 110
ttt att gaa gcc att tct ctt gga aac aaa gag aac gta act gtt gca    384
Phe Ile Glu Ala Ile Ser Leu Gly Asn Lys Glu Asn Val Thr Val Ala
        115                 120                 125
caa gtt aaa caa tac tgt gaa atg gag agc cat gaa gaa aag ctg cac    432
Gln Val Lys Gln Tyr Cys Glu Met Glu Ser His Glu Glu Lys Leu His
    130                 135                 140
aag ctg gtt atg caa agc aaa ata aat gaa act aag gat gtc atg agg    480
Lys Leu Val Met Gln Ser Lys Ile Asn Glu Thr Lys Asp Val Met Arg
145                 150                 155                 160
agg aaa gtc act gag att gag aaa agc aag act gat aga ggg aag cct    528
Arg Lys Val Thr Glu Ile Glu Lys Ser Lys Thr Asp Arg Gly Lys Pro
                165                 170                 175
gac aag gga gga ttt gga tcc ttg aga act cca aac agc ttc agt gac    576
Asp Lys Gly Gly Phe Gly Ser Leu Arg Thr Pro Asn Ser Phe Ser Asp
            180                 185                 190
atg ggc att aga ggt ggt ggt cca ggg ggc gat cct ata ttt ggt gat    624
Met Gly Ile Arg Gly Gly Gly Pro Gly Gly Asp Pro Ile Phe Gly Asp
        195                 200                 205
atg gac tcg ttc acc cac aag gcc aaa ggc cgc cca tct gct cct gct    672
Met Asp Ser Phe Thr His Lys Ala Lys Gly Arg Pro Ser Ala Pro Ala
    210                 215                 220
cct gca tct gct tct act aaa gtt cct ggt ggt atg aaa tta agc aaa    720
Pro Ala Ser Ala Ser Thr Lys Val Pro Gly Gly Met Lys Leu Ser Lys
225                 230                 235                 240
gca cag aag aca aac cag ttc ctt gag tct ttg aaa gct gaa gga gaa    768
Ala Gln Lys Thr Asn Gln Phe Leu Glu Ser Leu Lys Ala Glu Gly Glu
                245                 250                 255
gtc att ttg gag gac act caa cca agt gca act caa tca agg tca tca    816
Val Ile Leu Glu Asp Thr Gln Pro Ser Ala Thr Gln Ser Arg Ser Ser
            260                 265                 270
tat atc cca cca agc gat cct atc aca gtg aca att gaa gag aag ctc    864
Tyr Ile Pro Pro Ser Asp Pro Ile Thr Val Thr Ile Glu Glu Lys Leu
        275                 280                 285
aat gtc act gtt aaa agg gat ggg gga gtt agc aat ttt gat att caa    912
Asn Val Thr Val Lys Arg Asp Gly Gly Val Ser Asn Phe Asp Ile Gln
    290                 295                 300
gga acc ctg gct ctc caa att ctg aat gac act gat ggt ttt att cag    960
Gly Thr Leu Ala Leu Gln Ile Leu Asn Asp Thr Asp Gly Phe Ile Gln
305                 310                 315                 320
tta cag att gag aac caa gat gta cct ggc ctt aac ttc aag aca cac    1008
Leu Gln Ile Glu Asn Gln Asp Val Pro Gly Leu Asn Phe Lys Thr His
                325                 330                 335
ccc aat atc aac aaa gag tta ttc aac agt caa caa att gtg ggg gca    1056
Pro Asn Ile Asn Lys Glu Leu Phe Asn Ser Gln Gln Ile Val Gly Ala
            340                 345                 350
aaa gat cca aac agg cct ttc ccc agt ggt caa aat gaa aca ccg ttg    1104
Lys Asp Pro Asn Arg Pro Phe Pro Ser Gly Gln Asn Glu Thr Pro Leu
        355                 360                 365
gtg aaa tgg aga atc cag gag ttg aat gag tca tct ctt cca ttg gca    1152
Val Lys Trp Arg Ile Gln Glu Leu Asn Glu Ser Ser Leu Pro Leu Ala
    370                 375                 380
gtg aac tgt tgg cct tcg gtg tcc gga aat gaa acc tat gtg aac att    1200
Val Asn Cys Trp Pro Ser Val Ser Gly Asn Glu Thr Tyr Val Asn Ile
385                 390                 395                 400
gaa tat gaa gct tca gag atg ttt gat ttg cac aat gtt gtc atc tct    1248
Glu Tyr Glu Ala Ser Glu Met Phe Asp Leu His Asn Val Val Ile Ser
                405                 410                 415
atc cct ctc ccc gca ctt agg gag gct cca ggt gtt agg cag ata gac    1296
Ile Pro Leu Pro Ala Leu Arg Glu Ala Pro Gly Val Arg Gln Ile Asp
            420                 425                 430
gga gaa tgg agg tat gac tca aga aat tca gtg ttg gag tgg tcc att    1344
Gly Glu Trp Arg Tyr Asp Ser Arg Asn Ser Val Leu Glu Trp Ser Ile
        435                 440                 445
att ctt gtt gat caa tca aac cgc agt ggt tct ttg gag ttc act gtc    1392
Ile Leu Val Asp Gln Ser Asn Arg Ser Gly Ser Leu Glu Phe Thr Val
    450                 455                 460
cct gca gct gat cca tca aca ttc ttc ccg ata tct gtt ggg ttt tct    1440
Pro Ala Ala Asp Pro Ser Thr Phe Phe Pro Ile Ser Val Gly Phe Ser
465                 470                 475                 480
gca tca aat aca ttt agt gat ttg aag gtg acc gcc atc cgt ccg ctg    1488
Ala Ser Asn Thr Phe Ser Asp Leu Lys Val Thr Ala Ile Arg Pro Leu
                485                 490                 495
agg gaa ggt agc cca cca aag ttt tct cag agg aat cga ttg gtt act    1536
Arg Glu Gly Ser Pro Pro Lys Phe Ser Gln Arg Asn Arg Leu Val Thr
            500                 505                 510
tat aac tac caa gtg gtt tga                                        1557
Tyr Asn Tyr Gln Val Val
        515
<210>42
<211>518
<212>PRT
<213>Orvza sativa
<400>42
Met Val Val Leu Ala Ala Ser Ile Ile Ser Lys Ser Gly Lys Ala Leu
1               5                   10                  15
Val Ser Arg Gln Phe Val Asp Met Ser Arg Ile Arg Ile Asp Gly Leu
            20                  25                  30
Leu Ala Ala Phe Pro Lys Leu Val Gly Ser Gly Lys Gln His Thr Tyr
        35                  40                  45
Val Glu Thr Glu Asn Val Arg Tyr Val Tyr Gln Pro Ile Glu Ala Leu
    50                  55                  60
Tyr Leu Leu Leu Ile Thr Asn Lys Gln Ser Asn Ile Leu Glu Asp Leu
65                  70                  75                  80
Asp Thr Leu Arg Leu Leu Ser Lys Leu Ile Pro Glu Tyr Ala Pro Ser
                85                  90                  95
Leu Asp Glu Glu Gly Val Cys Lys Ala Ala Phe Glu Leu Leu Phe Ala
            100                 105                 110
Phe Ile Glu Ala Ile Ser Leu Gly Asn Lys Glu Asn Val Thr Val Ala
        115                 120                 125
Gln Val Lys Gln Tyr Cys Glu Met Glu Ser His Glu Glu Lys Leu His
    130                 135                 140
Lys Leu Val Met Gln Ser Lys Ile Asn Glu Thr Lys Asp Val Met Arg
145                 150                 155                 160
Arg Lys Val Thr Glu Ile Glu Lys Ser Lys Thr Asp Arg Gly Lys Pro
                165                 170                 175
Asp Lys Gly Gly Phe Gly Ser Leu Arg Thr Pro Asn Ser Phe Ser Asp
            180                 185                 190
Met Gly Ile Arg Gly Gly Gly Pro Gly Gly Asp Pro Ile Phe Gly Asp
        195                 200                 205
Met Asp Ser Phe Thr His Lys Ala Lys Gly Arg Pro Ser Ala Pro Ala
    210                 215                 220
Pro Ala Ser Ala Ser Thr Lys Val Pro Gly Gly Met Lys Leu Ser Lys
225                 230                 235                 240
Ala Gln Lys Thr Asn Gln Phe Leu Glu Ser Leu Lys Ala Glu Gly Glu
                245                 250                 255
Val Ile Leu Glu Asp Thr Gln Pro Ser Ala Thr Gln Ser Arg Ser Ser
            260                 265                 270
Tyr Ile Pro Pro Ser Asp Pro Ile Thr Val Thr Ile Glu Glu Lys Leu
        275                 280                 285
Asn Val Thr Val Lys Arg Asp Gly Gly Val Ser Asn Phe Asp Ile Gln
    290                 295                 300
Gly Thr Leu Ala Leu Gln Ile Leu Asn Asp Thr Asp Gly Phe Ile Gln
305                 310                 315                 320
Leu Gln Ile Glu Asn Gln Asp Val Pro Gly Leu Asn Phe Lys Thr His
                325                 330                 335
Pro Asn Ile Asn Lys Glu Leu Phe Asn Ser Gln Gln Ile Val Gly Ala
            340                 345                 350
Lys Asp Pro Asn Arg Pro Phe Pro Ser Gly Gln Asn Glu Thr Pro Leu
        355                 360                 365
Val Lys Trp Arg Ile Gln Glu Leu Asn Glu Ser Ser Leu Pro Leu Ala
    370                 375                 380
Val Asn Cys Trp Pro Ser Val Ser Gly Asn Glu Thr Tyr Val Asn Ile
385                 390                 395                 400
Glu Tyr Glu Ala Ser Glu Met Phe Asp Leu His Asn Val Val Ile Ser
                405                 410                 415
Ile Pro Leu Pro Ala Leu Arg Glu Ala Pro Gly Val Arg Gln Ile Asp
            420                 425                 430
Gly Glu Trp Arg Tyr Asp Ser Arg Asn Ser Val Leu Glu Trp Ser Ile
        435                 440                 445
Ile Leu Val Asp Gln Ser Asn Arg Ser Gly Ser Leu Glu Phe Thr Val
    450                 455                 460
Pro Ala Ala Asp Pro Ser Thr Phe Phe Pro Ile Ser Val Gly Phe Ser
465                 470                 475                 480
Ala Ser Asn Thr Phe Ser Asp Leu Lys Val Thr Ala Ile Arg Pro Leu
                485                 490                 495
Arg Glu Gly Ser Pro Pro Lys Phe Ser Gln Arg Asn Arg Leu Val Thr
            500                 505                 510
Tyr Asn Tyr Gln Val Val
        515
<210>43
<211>960
<212>DNA
<213>Oryza sativa
<220>
<221>CDS
<222>(1)..(960)
<400>43
atg gcg ggg tcg tcg tcc ctc agc acg ctc tcc ctc tgc acg cag tcg    48
Met Ala Gly Ser Ser Ser Leu Ser Thr Leu Ser Leu Cys Thr Gln Ser
1                   5               10                  15
cca tca ccg tca ccg gtg gcg tcc ggc cgc ctc gtg gca ccg gct gtc    96
Pro Ser Pro Ser Pro Val Ala Ser Gly Arg Leu Val Ala Pro Ala Val
            20                  25                  30
ctc ggt ttc gcc ggg gcc ccg cgg ttc ccg acg ctg cgg gcc gcg cca    144
Leu Gly Phe Ala Gly Ala Pro Arg Phe Pro Thr Leu Arg Ala Ala Pro
        35                  40                  45
cgg cgg ctg acg gcg cgg gcg gtg gcc ggg gac gcc gag gac gag tkg    192
Arg Arg Leu Thr Ala Arg Ala Val Ala Gly Asp Ala Glu Asp Glu Xaa
    50                  55                  60
ggg aag gag ccg gcg gcg gac cag ggc ggt gcc gcc gcg gcg gtg gcc    240
Gly Lys Glu Pro Ala Ala Asp Gln Gly Gly Ala Ala Ala Ala Val Ala
65                  70                  75                  80
gag gcg ccc gcg gat gtg ccg gtg acg agc gag gtc gcg gag ctc aag    288
Glu Ala Pro Ala Asp Val Pro Val Thr Ser Glu Val Ala Glu Leu Lys
                85                  90                  95
gcg aag ctg aag gag gcg ctg tac ggt acg gag cgc ggc ctg cgc gcg    336
Ala Lys Leu Lys Glu Ala Leu Tyr Gly Thr Glu Arg Gly Leu Arg Ala
            100                 105                 110
tcc agc gag acg cgc gcg gag gtg gtc gag ctc atc acg cag ctc gag    384
Ser Ser Glu Thr Arg Ala Glu Val Val Glu Leu Ile Thr Gln Leu Glu
        115                 120                 125
gcc cgc aac ccc acg ccg gcg ccc acc gag gcg ctc acc ctc ctc aac    432
Ala Arg Asn Pro Thr Pro Ala Pro Thr Glu Ala Leu Thr Leu Leu Asn
    130                 135                 140
ggc aag tgg atc ctc gcg tac acc tca ttt tca cag cta ttc cca cta    480
Gly Lys Trp Ile Leu Ala Tyr Thr Ser Phe Ser Gln Leu Phe Pro Leu
145                 150                 155                 160
ttg ggg tct ggt agt ttg cct cag ctt gtc aag gtg gaa gaa ata tca    528
Leu Gly Ser Gly Ser Leu Pro Gln Leu Val Lys Val Glu Glu Ile Ser
                165                 170                 175
caa act att gat tct gag aac ttc acg gtt cag aat tgc atc aag ttt    576
Gln Thr Ile Asp Ser Glu Asn Phe Thr Val Gln Asn Cys Ile Lys Phe
            180                 185                 190
tca gga cct tta gca aca act tca gtg tct acc aat gcc aaa ttt gaa    624
Ser Gly Pro Leu Ala Thr Thr Ser Val Ser Thr Asn Ala Lys Phe Glu
        195                 200                 205
gtt cga agt ccc aaa cgt gta cag atc aaa ttt gat gaa ggc att atc    672
Val Arg Ser Pro Lys Arg Val Gln Ile Lys Phe Asp Glu Gly Ile Ile
    210                 215                 220
ggc act cca caa ttg act gat tct att gta cta cct gag aag ttt gag    720
Gly Thr Pro Gln Leu Thr Asp Ser Ile Val Leu Pro Glu Lys Phe Glu
225                 230                 235                 240
tta ttt ggg cag aat att gac ctg acc cca ttg aag ggc ata ttt tca    768
Leu Phe Gly Gln Asn Ile Asp Leu Thr Pro Leu Lys Gly Ile Phe Ser
                245                 250                 255
tca att gaa aat gca gca tcc tca gtt gct aga acc atc tct ggt caa    816
Ser Ile Glu Asn Ala Ala Ser Ser Val Ala Arg Thr Ile Ser Gly Gln
            260                 265                 270
cct cca cta aag ata cca att agg act gac aat gct gag tct tgg ttg    864
Pro Pro Leu Lys Ile Pro Ile Arg Thr Asp Asn Ala Glu Ser Trp Leu
        275                 280                 285
ctc aca acc tac ctt gat gat gag ctt aga atc tcc aga ggt gat ggc    912
Leu Thr Thr Tyr Leu Asp Asp Glu Leu Arg Ile Ser Arg Gly Asp Gly
    290                 295                 300
agc agc atc ttt gta ctg ttt aag gaa gga agc acc ctc cta tat taa    960
Ser Ser Ile Phe Val Leu Phe Lys Glu Gly Ser Thr Leu Leu Tyr
305                 310                 315
<210>44
<211>319
<212>PRT
<213>Oryza sativa
<220>
<221>misc_feature
<222>(64)..(64)
<223>The ′Xaa′at location 64 stands for Trp,or Leu.
<400>44
Met Ala Gly Ser Ser Ser Leu Ser Thr Leu Ser Leu Cys Thr Gln Ser
1               5                   10                  15
Pro Ser Pro Ser Pro Val Ala Ser Gly Arg Leu Val Ala Pro Ala Val
            20                  25                  30
Leu Gly Phe Ala Gly Ala Pro Arg Phe Pro Thr Leu Arg Ala Ala Pro
        35                  40                  45
Arg Arg Leu Thr Ala Arg Ala Val Ala Gly Asp Ala Glu Asp Glu Xaa
    50                  55                  60
Gly Lys Glu Pro Ala Ala Asp Gln Gly Gly Ala Ala Ala Ala Val Ala
65                  70                  75                  80
Glu Ala Pro Ala Asp Val Pro Val Thr Ser Glu Val Ala Glu Leu Lys
                85                  90                  95
Ala Lys Leu Lys Glu Ala Leu Tyr Gly Thr Glu Arg Gly Leu Arg Ala
            100                 105                 110
Ser Ser Glu Thr Arg Ala Glu Val Val Glu Leu Ile Thr Gln Leu Glu
        115                 120                 125
Ala Arg Asn Pro Thr Pro Ala Pro Thr Glu Ala Leu Thr Leu Leu Asn
    130                 135                 140
Gly Lys Trp Ile Leu Ala Tyr Thr Ser Phe Ser Gln Leu Phe Pro Leu
145                 150                 155                 160
Leu Gly Ser Gly Ser Leu Pro Gln Leu Val Lys Val Glu Glu Ile Ser
                165                 170                 175
Gln Thr Ile Asp Ser Glu Asn Phe Thr Val Gln Asn Cys Ile Lys Phe
            180                 185                 190
Ser Gly Pro Leu Ala Thr Thr Ser Val Ser Thr Asn Ala Lys Phe Glu
        195                 200                 205
Val Arg Ser Pro Lys Arg Val Gln Ile Lys Phe Asp Glu Gly Ile Ile
    210                 215                 220
Gly Thr Pro Gln Leu Thr Asp Ser Ile Val Leu Pro Glu Lys Phe Glu
225                 230                 235                 240
Leu Phe Gly Gln Asn Ile Asp Leu Thr Pro Leu Lys Gly Ile Phe Ser
                245                 250                 255
Ser Ile Glu Asn Ala Ala Ser Ser Val Ala Arg Thr Ile Ser Gly Gln
            260                 265                 270
Pro Pro Leu Lys Ile Pro Ile Arg Thr Asp Asn Ala Glu Ser Trp Leu
        275                 280                 285
Leu Thr Thr Tyr Leu Asp Asp Glu Leu Arg Ile Ser Arg Gly Asp Gly
    290                 295                 300
Ser Ser Ile Phe Val Leu Phe Lys Glu Gly Ser Thr Leu Leu Tyr
305                 310                 315
<210>45
<211>126
<212>DNA
<213>Oryza sativa
<220>
<221>CDS
<222>(1)..(126)
<400>45
gcg ccg tca agc tca tct gga acc aca tca agg cca acg gcc tcc aga    48
Ala Pro Ser Ser Ser Ser Gly Thr Thr Ser Arg Pro Thr Ala Ser Arg
1               5                   10                  15
acc cag caa aca aaa ggg aga tta act gtg acg ata agc tta aaa gct    96
Thr Gln Gln Thr Lys Gly Arg Leu Thr Val Thr Ile Ser Leu Lys Ala
            20                  25                  30
tat tcg ccg gga agg aca agg tcg gga tga                            126
Tyr Ser Pro Gly Arg Thr Arg Ser Gly
        35                  40
<210>46
<211>41
<212>PRT
<213>Oryza sativa
<400>46
Ala Pro Ser Ser Ser Ser Gly Thr Thr Ser Arg Pro Thr Ala Ser Arg
1               5                   10                  15
Thr Gln Gln Thr Lys Gly Arg Leu Thr Val Thr Ile Ser Leu Lys Ala
            20                  25                  30
Tyr Ser Pro Gly Arg Thr Arg Ser Gly
        35                  40
<210>47
<211>692
<212>DNA
<213>Oryza sativa
<220>
<221>CDS
<222>(1)..(690)
<400>47
gtc gcc gtg cgc aag aag gag acg cgc gac ggc gcc atg cag acc atg    48
Val Ala Val Arg Lys Lys Glu Thr Arg Asp Gly Ala Met Gln Thr Met
1               5                   10                  15
ccg tcg cgc gtg cag cag ggc gcc gcc gac ttc gag gag acg ctc ttc    96
Pro Ser Arg Val Gln Gln Gly Ala Ala Asp Phe Glu Glu Thr Leu Phe
            20                  25                  30
gtg cgc tgc cac ctc tac tgc agc ggc ggc gcc ggc acc ggc aag ccg    144
Val Arg Cys His Leu Tyr Cys Ser Gly Gly Ala Gly Thr Gly Lys Pro
        35                  40                  45
ctc agg ttc gag ccc cgg ccg ttc ctc ctg tcg gcg gtg gcc gtg gaa    192
Leu Arg Phe Glu Pro Arg Pro Phe Leu Leu Ser Ala Val Ala Val Glu
    50                  55                  60
gcc ccc gag ctc gac ttt ggc cgg agc gcc gtc gac ctg agc ctc ctc    240
Ala Pro Glu Leu Asp Phe Gly Arg Ser Ala Val Asp Leu Ser Leu Leu
65                  70                  75                  80
gtg aag gag tcc acg gac aag agc cag caa ggg gag cgt gtc cgg caa    288
Val Lys Glu Ser Thr Asp Lys Ser Gln Gln Gly Glu Arg Val Arg Gln
                85                  90                  95
tgg gac atg gcg ttg ccg ctc gcc ggg aag gcg aag ggc ggc gag ctc    336
Trp Asp Met Ala Leu Pro Leu Ala Gly Lys Ala Lys Gly Gly Glu Leu
            100                 105                 110
gtc gtc aaa ctg tcg ttc cag atc atg gac gac ggc ggc gtc ggg ctg    384
Val Val Lys Leu Ser Phe Gln Ile Met Asp Asp Gly Gly Val Gly Leu
        115                 120                 125
ttc aac cag acc gga gca gca acc aag att aac tcg tcg tcg tcg tct    432
Phe Asn Gln Thr Gly Ala Ala Thr Lys Ile Asn Ser Ser Ser Ser Ser
    130                 135                 140
tct tcc ttg ttt gca cgg aag cag agc aag cta tcc ttc agc atc acg    480
Ser Ser Leu Phe Ala Arg Lys Gln Ser Lys Leu Ser Phe Ser Ile Thr
145                 150                 155                 160
agc ccg aag gtg tcg cgg tcg gag ccg aag ctg acg ccg aca aag ggc    528
Ser Pro Lys Val Ser Arg Ser Glu Pro Lys Leu Thr Pro Thr Lys Gly
                165                 170                 175
tcg ccg tcg ccg gac ttg cga ggc att gac gac ttc aag ctc gac gag    576
Ser Pro Ser Pro Asp Leu Arg Gly Ile Asp Asp Phe Lys Leu Asp Glu
            180                 185                 190
ccc agt ttg cca tcg ctg gca gag gcc aag caa gag cag aag gag cca    624
Pro Ser Leu Pro Ser Leu Ala Glu Ala Lys Gln Glu Gln Lys Glu Pro
        195                 200                 205
gag ccg ccg gag ccg gag gag aag gtc gat gac tcg gag ttc ccg gag    672
Glu Pro Pro Glu Pro Glu Glu Lys Val Asp Asp Ser Glu Phe Pro Glu
    210                 215                 220
ttc gac gta gtg gac aaa gg                                         692
Phe Asp Val Val Asp Lys
225                 230
<210>48
<211>230
<212>PRT
<213>Oryza sativa
<400>48
Val Ala Val Arg Lys Lys Glu Thr Arg Asp Gly Ala Met Gln Thr Met
1               5                   10                  15
Pro Ser Arg Val Gln Gln Gly Ala Ala Asp Phe Glu Glu Thr Leu Phe
            20                  25                  30
Val Arg Cys His Leu Tyr Cys Ser Gly Gly Ala Gly Thr Gly Lys Pro
        35                  40                  45
Leu Arg Phe Glu Pro Arg Pro Phe Leu Leu Ser Ala Val Ala Val Glu
    50                  55                  60
Ala Pro Glu Leu Asp Phe Gly Arg Ser Ala Val Asp Leu Ser Leu Leu
65                  70                  75                  80
Val Lys Glu Ser Thr Asp Lys Ser Gln Gln Gly Glu Arg Val Arg Gln
                85                  90                  95
Trp Asp Met Ala Leu Pro Leu Ala Gly Lys Ala Lys Gly Gly Glu Leu
            100                 105                 110
Val Val Lys Leu Ser Phe Gln Ile Met Asp Asp Gly Gly Val Gly Leu
        115                 120                 125
Phe Asn Gln Thr Gly Ala Ala Thr Lys Ile Asn Ser Ser Ser Ser Ser
    130                 135                 140
Ser Ser Leu Phe Ala Arg Lys Gln Ser Lys Leu Ser Phe Ser Ile Thr
145                 150                 155                 160
Ser Pro Lys Val Ser Arg Ser Glu Pro Lys Leu Thr Pro Thr Lys Gly
                165                 170                 175
Ser Pro Ser Pro Asp Leu Arg Gly Ile Asp Asp Phe Lys Leu Asp Glu
            180                 185                 190
Pro Ser Leu Pro Ser Leu Ala Glu Ala Lys Gln Glu Gln Lys Glu Pro
        195                 200                 205
Glu Pro Pro Glu Pro Glu Glu Lys Val Asp Asp Ser Glu Phe Pro Glu
    210                 215                 220
Phe Asp Val Val Asp Lys
225                 230
<210>49
<211>1503
<212>DNA
<213>Oryza sativa
<220>
<221>CDS
<222>(1)..(1503)
<400>49
ctg gac gag gtg atg gcg gtg agc ccc gtg ggg cta ggg cgg cgg tcg    48
Leu Asp Glu Val Met Ala Val Ser Pro Val Gly Leu Gly Arg Arg Ser
1               5                   10                  15
cgg cag ata ttc gac gag gtg tgg cgc aag ttc tcg cgg ctg ggg cag    96
Arg Gln Ile Phe Asp Glu Val Trp Arg Lys Phe Ser Arg Leu Gly Gln
            20                  25                  30
atg tcg agc gcg tcg tcg acg gcg ctg gcg gag gag gag cag gcc gtg    144
Met Ser Ser Ala Ser Ser Thr Ala Leu Ala Glu Glu Glu Gln Ala Val
        35                  40                  45
ctc atc cgc ggc gga ccc atg tgc gag ttc acc gtc ccc ggc gcg cag    192
Leu Ile Arg Gly Gly Pro Met Cys Glu Phe Thr Val Pro Gly Ala Gln
    50                  55                  60
gac acc acc gtc ctc gtc gtc ggc gcc acc agc cgc atc ggc cgc atc    240
Asp Thr Thr Val Leu Val Val Gly Ala Thr Ser Arg Ile Gly Arg Ile
65                  70                  75                  80
gtc gtc cgc aag ctc atg ctc cgc ggg tac aat gtc aag gct tta gtt    288
Val Val Arg Lys Leu Met Leu Arg Gly Tyr Asn Val Lys Ala Leu Val
                85                  90                  95
aga agg aat gat gct gaa gtg ata gat atg ctc cca agg tcg gtg gat    336
Arg Arg Asn Asp Ala Glu Val Ile Asp Met Leu Pro Arg Ser Val Asp
            100                 105                 110
att gtt gtc ggt gat gtt ggt gat cct tca act gtc aaa tcg gct gta    384
Ile Val Val Gly Asp Val Gly Asp Pro Ser Thr Val Lys Ser Ala Val
        115                 120                 125
tca ggt tgc agc aag ata atc tat tgc gca act gca cgc tca act att    432
Ser Gly Cys Ser Lys Ile Ile Tyr Cys Ala Thr Ala Arg Ser Thr Ile
    130                 135                 140
act gga gac cta aat agg gtt gat aat caa gga gta agg aat gtt agt    480
Thr Gly Asp Leu Asn Arg Val Asp Asn Gln Gly Val Arg Asn Val Ser
145                 150                 155                 160
aag gct ttc cag gat tac tac aat gaa ttg gct cag ctt agg gct ggt    528
Lys Ala Phe Gln Asp Tyr Tyr Asn Glu Leu Ala Gln Leu Arg Ala Gly
                165                 170                 175
aaa agc agc aag agc aaa ctc ctg ata gca aaa ttt aaa tct ccc aag    576
Lys Ser Ser Lys Ser Lys Leu Leu Ile Ala Lys Phe Lys Ser Pro Lys
            180                 185                 190
tct ctg aat ggt tgg gag gtg gac cag gga tct tat ttt cca aac aca    624
Ser Leu Asn Gly Trp Glu Val Asp Gln Gly Ser Tyr Phe Pro Asn Thr
        195                 200                 205
ttt gct tct agg ttt gat gaa ggt atc gat gca tca ttt gac ttt tca    672
Phe Ala Ser Arg Phe Asp Glu Gly Ile Asp Ala Ser Phe Asp Phe Ser
    210                 215                 220
gag gct ggt caa gct gtt ttc tca gga ttt gtt ttc aca aga ggt gga    720
Glu Ala Gly Gln Ala Val Phe Ser Gly Phe Val Phe Thr Arg Gly Gly
225                 230                 235                 240
tat gtt gag ata tca aaa agg cta tct ctt cct ttg gga tct act cta    768
Tyr Val Glu Ile Ser Lys Arg Leu Ser Leu Pro Leu Gly Ser Thr Leu
                245                 250                 255
gac agg tat gat ggc tta ctt ttt tcg gtg gga gga aat gga aga tca    816
Asp Arg Tyr Asp Gly Leu Leu Phe Ser Val Gly Gly Asn Gly Arg Ser
            260                 265                 270
tat gtt gtt att ctt gag act ggt ccg ctg gct gac acc tcc cag agc    864
Tyr Val Val Ile Leu Glu Thr Gly Pro Leu Ala Asp Thr Ser Gln Ser
        275                 280                 285
aag aag tac ttt gct cgg atg act aca aaa gta gga ttt tgt agg gtg    912
Lys Lys Tyr Phe Ala Arg Met Thr Thr Lys Val Gly Phe Cys Arg Val
    290                 295                 300
agg gta cca ttt tca gct ttt cgg cca gta aac cct caa gat cct ccc    960
Arg Val Pro Phe Ser Ala Phe Arg Pro Val Asn Pro Gln Asp Pro Pro
305                 310                 315                 320
cta gac cct ttt ctt gtg cat aca cta aca att agg ttt gaa ccc aaa    1008
Leu Asp Pro Phe Leu Val His Thr Leu Thr Ile Arg Phe Glu Pro Lys
                325                 330                 335
aga cag aga cct ggt gat gga tct caa agt gct act gac ccc aga aat    1056
Arg Gln Arg Pro Gly Asp Gly Ser Gln Ser Ala Thr Asp Pro Arg Asn
            340                 345                 350
ttt gag ctt ata ttg gaa tac atc aaa gct ttg cct act ggt caa gaa    1104
Phe Glu Leu Ile Leu Glu Tyr Ile Lys Ala Leu Pro Thr Gly Gln Glu
        355                 360                 365
aca gac ttc att ctg gtc tca tgc tca ggt tct ggg att gaa cct aac    1152
Thr Asp Phe Ile Leu Val Ser Cys Ser Gly Ser Gly Ile Glu Pro Asn
    370                 375                 380
aga aga gaa caa gtc ctc aaa gca aaa aag gct gga gag gat gca ttg    1200
Arg Arg Glu Gln Val Leu Lys Ala Lys Lys Ala Gly Glu Asp Ala Leu
385                 390                 395                 400
aga agg tca ggc ctt gga tac aca ata gta cgc cct ggt cca ctg cag    1248
Arg Arg Ser Gly Leu Gly Tyr Thr Ile Val Arg Pro Gly Pro Leu Gln
                405                 410                 415
gaa gaa cct ggt ggt cag cgt gca ttg atc ttt gat caa ggg aac aga    1296
Glu Glu Pro Gly Gly Gln Arg Ala Leu Ile Phe Asp Gln Gly Asn Arg
            420                 425                 430
atc tcg cag ggt atc agt tgc gcc gat gta gca gat att tgt gtc aaa    1344
Ile Ser Gln Gly Ile Ser Cys Ala Asp Val Ala Asp Ile Cys Val Lys
        435                 440                 445
gca ttg cat gat tcc act gct agg aac aaa agt ttt gat gta tgc tac    1392
Ala Leu His Asp Ser Thr Ala Arg Asn Lys Ser Phe Asp Val Cys Tyr
    450                 455                 460
gag tat gta gct aag caa ggg aat gag cta tat gaa ctt gtg gcc cat    1440
Glu Tyr Val Ala Lys Gln Gly Asn Glu Leu Tyr Glu Leu Val Ala His
465                 470                 475                 480
tta cca gat aaa gct aac aac tat ctt aca ccg gca tta tct gtt cta    1488
Leu Pro Asp Lys Ala Asn Asn Tyr Leu Thr Pro Ala Leu Ser Val Leu
                485                 490                 495
gag aag aac acc tga                                                1503
Glu Lys Asn Thr
            500
<210>50
<211>500
<212>PRT
<213>Oryza sativa
<400>50
Leu Asp Glu Val Met Ala Val Ser Pro Val Gly Leu Gly Arg Arg Ser
1               5                   10                  15
Arg Gln Ile Phe Asp Glu Val Trp Arg Lys Phe Ser Arg Leu Gly Gln
            20                  25                  30
Met Ser Ser Ala Ser Ser Thr Ala Leu Ala Glu Glu Glu Gln Ala Val
        35                  40                  45
Leu Ile Arg Gly Gly Pro Met Cys Glu Phe Thr Val Pro Gly Ala Gln
    50                  55                  60
Asp Thr Thr Val Leu Val Val Gly Ala Thr Ser Arg Ile Gly Arg Ile
65                  70                  75                  80
Val Val Arg Lys Leu Met Leu Arg Gly Tyr Asn Val Lys Ala Leu Val
                85                  90                  95
Arg Arg Asn Asp Ala Glu Val Ile Asp Met Leu Pro Arg Ser Val Asp
            100                 105                 110
Ile Val Val Gly Asp Val Gly Asp Pro Ser Thr Val Lys Ser Ala Val
        115                 120                 125
Ser Gly Cys Ser Lys Ile Ile Tyr Cys Ala Thr Ala Arg Ser Thr Ile
    130                 135                 140
Thr Gly Asp Leu Asn Arg Val Asp Asn Gln Gly Val Arg Asn Val Ser
145                 150                 155                 160
Lys Ala Phe Gln Asp Tyr Tyr Asn Glu Leu Ala Gln Leu Arg Ala Gly
                165                 170                 175
Lys Ser Ser Lys Ser Lys Leu Leu Ile Ala Lys Phe Lys Ser Pro Lys
            180                 185                 190
Ser Leu Asn Gly Trp Glu Val Asp Gln Gly Ser Tyr Phe Pro Asn Thr
        195                 200                 205
Phe Ala Ser Arg Phe Asp Glu Gly Ile Asp Ala Ser Phe Asp Phe Ser
    210                 215                 220
Glu Ala Gly Gln Ala Val Phe Ser Gly Phe Val Phe Thr Arg Gly Gly
225                 230                 235                 240
Tyr Val Glu Ile Ser Lys Arg Leu Ser Leu Pro Leu Gly Ser Thr Leu
                245                 250                 255
Asp Arg Tyr Asp Gly Leu Leu Phe Ser Val Gly Gly Asn Gly Arg Ser
            260                 265                 270
Tyr Val Val Ile Leu Glu Thr Gly Pro Leu Ala Asp Thr Ser Gln Ser
        275                 280                 285
Lys Lys Tyr Phe Ala Arg Met Thr Thr Lys Val Gly Phe Cys Arg Val
    290                 295                 300
Arg Val Pro Phe Ser Ala Phe Arg Pro Val Asn Pro Gln Asp Pro Pro
305                 310                 315                 320
Leu Asp Pro Phe Leu Val His Thr Leu Thr Ile Arg Phe Glu Pro Lys
                325                 330                 335
Arg Gln Arg Pro Gly Asp Gly Ser Gln Ser Ala Thr Asp Pro Arg Asn
            340                 345                 350
Phe Glu Leu Ile Leu Glu Tyr Ile Lys Ala Leu Pro Thr Gly Gln Glu
        355                 360                 365
Thr Asp Phe Ile Leu Val Ser Cys Ser Gly Ser Gly Ile Glu Pro Asn
    370                 375                 380
Arg Arg Glu Gln Val Leu Lys Ala Lys Lys Ala Gly Glu Asp Ala Leu
385                 390                 395                 400
Arg Arg Ser Gly Leu Gly Tyr Thr Ile Val Arg Pro Gly Pro Leu Gln
                405                 410                 415
Glu Glu Pro Gly Gly Gln Arg Ala Leu Ile Phe Asp Gln Gly Asn Arg
            420                 425                 430
Ile Ser Gln Gly Ile Ser Cys Ala Asp Val Ala Asp Ile Cys Val Lys
        435                 440                 445
Ala Leu His Asp Ser Thr Ala Arg Asn Lys Ser Phe Asp Val Cys Tyr
    450                 455                 460
Glu Tyr Val Ala Lys Gln Gly Asn Glu Leu Tyr Glu Leu Val Ala His
465                 470                 475                 480
Leu Pro Asp Lys Ala Asn Asn Tyr Leu Thr Pro Ala Leu Ser Val Leu
                485                 490                 495
Glu Lys Asn Thr
            500
<210>51
<211>2688
<212>DNA
<213>Oryza sativa
<220>
<221>CDS
<222>(1)..(2688)
<400>51
atg ata cgg gcg ata cgc gcg tgc aag acg gcg gcg gag gag cgg gcg    48
Met Ile Arg Ala Ile Arg Ala Cys Lys Thr Ala Ala Glu Glu Arg Ala
1               5                   10                  15
gtg gtg cgg cgg gag tgc gcg gcg ata cgg gcg gcc atc agc gag ggg    96
Val Val Arg Arg Glu Cys Ala Ala Ile Arg Ala Ala Ile Ser Glu Gly
            20                  25                  30
gac cag gac tac cgc cac cgg aac atg gcc aag ctc atg ttc atc cac    144
Asp Gln Asp Tyr Arg His Arg Asn Met Ala Lys Leu Met Phe Ile His
        35                  40                  45
atg ctc ggg tac ccc acc cac ttc ggc cag atg gag tgc ctc aag ctc    192
Met Leu Gly Tyr Pro Thr His Phe Gly Gln Met Glu Cys Leu Lys Leu
    50                  55                  60
atc gcc gcc gcg ggc ttc ccc gag aag cgc atc ggg tac ctc ggc ctc    240
Ile Ala Ala Ala Gly Phe Pro Glu Lys Arg Ile Gly Tyr Leu Gly Leu
65                  70                  75                  80
atg ctg ctg ctc gac gag cgg cag gag aat gct atg ttc tgc ttt gag    288
Met Leu Leu Leu Asp Glu Arg Gln Glu Asn Ala Met Phe Cys Phe Glu
                85                  90                  95
cat ttg gta gta ctt aac gcg gac aga gat ctt aac cac tcg aac cag    336
His Leu Val Val Leu Asn Ala Asp Arg Asp Leu Asn His Ser Asn Gln
            100                 105                 110
ttc att gtg ggg ctt gca ctc tgt gct ctt ggc aac att tgc tcc gct    384
Phe Ile Val Gly Leu Ala Leu Cys Ala Leu Gly Asn Ile Cys Ser Ala
        115                 120                 125
gaa atg gcg cgt gat ctg tca cct gag gtg gag agg cta ttg caa agt    432
Glu Met Ala Arg Asp Leu Ser Pro Glu Val Glu Arg Leu Leu Gln Ser
    130                 135                 140
agg gaa cca aat acc aag aag aag gct gcc tta tgc tct ata agg atc    480
Arg Glu Pro Asn Thr Lys Lys Lys Ala Ala Leu Cys Ser Ile Arg Ile
145                 150                 155                 160
gta cgg aag gtt cca gat ttg gca gag aac ttc atg ggc tct gct gtt    528
Val Arg Lys Val Pro Asp Leu Ala Glu Asn Phe Met Gly Ser Ala Val
                165                 170                 175
tca cta ctg aag gaa aaa cat cac ggg gtt ctc ata tct gct gtt cag    576
Ser Leu Leu Lys Glu Lys His His Gly Val Leu Ile Ser Ala Val Gln
            180                 185                 190
ctc tgc gca gaa ctt tgt aaa gca agc aaa gag gca ttg gag tac ctg    624
Leu Cys Ala Glu Leu Cys Lys Ala Ser Lys Glu Ala Leu Glu Tyr Leu
        195                 200                 205
agg aag aac tgc ctt gat ggt ttg gtc aga ata ctg aga gat gtg tcc    672
Arg Lys Asn Cys Leu Asp Gly Leu Val Arg Ile Leu Arg Asp Val Ser
    210                 215                 220
aat agt tca tat gct cct gaa tat gac att gct gga att acg gat ccg    720
Asn Ser Ser Tyr Ala Pro Glu Tyr Asp Ile Ala Gly Ile Thr Asp Pro
225                 230                 235                 240
ttc ttg cat atc aga gtg ctt aag ctc atg cga att ttg ggt caa gga    768
Phe Leu His Ile Arg Val Leu Lys Leu Met Arg Ile Leu Gly Gln Gly
                245                 250                 255
gat gca gat tgc agt gag ttt gtg aat gat att ctt gct cag ctg tgc    816
Asp Ala Asp Cys Ser Glu Phe Val Asn Asp Ile Leu Ala Gln Leu Cys
            260                 265                 270
tct gta tct tat atc gaa tta ttt gca ttg cat ttc cag gtt gca aca    864
Ser Val Ser Tyr Ile Glu Leu Phe Ala Leu His Phe Gln Val Ala Thr
        275                 280                 285
aaa act gag tca aat aag aac gca gga aat gct att tta tat gaa tgt    912
Lys Thr Glu Ser Asn Lys Asn Ala Gly Asn Ala Ile Leu Tyr Glu Cys
    290                 295                 300
gtt gag act ata atg ggc atc gaa gct act agt ggt tta cgt gtg ctg    960
Val Glu Thr Ile Met Gly Ile Glu Ala Thr Ser Gly Leu Arg Val Leu
305                 310                 315                 320
gca atc aat atc ttg ggt aga ttt ctg tcc aac cgt gat aat aac atc    1008
Ala Ile Asn Ile Leu Gly Arg Phe Leu Ser Asn Arg Asp Asn Asn Ile
                325                 330                 335
aga tat gtt gct ctg aac atg ctt atg aag gcc atg gag gta gac acg    1056
Arg Tyr Val Ala Leu Asn Met Leu Met Lys Ala Met Glu Val Asp Thr
            340                 345                 350
caa gca gtg cag agg cat aga gca aca ata tta gag tgt gtc aag gat    1104
Gln Ala Val Gln Arg His Arg Ala Thr Ile Leu Glu Cys Val Lys Asp
       355                  360                  365
gct gat gta tct att cgc aaa agg gcc ctt gaa ctt gtt tac ctt ctt    1152
Ala Asp Val Ser Ile Arg Lys Arg Ala Leu Glu Leu Val Tyr Leu Leu
    370                 375                 380
gtc aac gat gca aat gca aaa tct ttg acc aag gag ctt gtt gat tac    1200
Val Asn Asp Ala Asn Ala Lys Ser Leu Thr Lys Glu Leu Val Asp Tyr
385                 390                 395                 400
ctg gaa gta agt gat cag gac ttc aag gac gac ctc aca gca aag ata    1248
Leu Glu Val Ser Asp Gln Asp Phe Lys Asp Asp Leu Thr Ala Lys Ile
                405                 410                 415
tgc tca att gtt gaa aag ttt tcc caa gat aaa ctt tgg tac tta gac    1296
Cys Ser Ile Val Glu Lys Phe Ser Gln Asp Lys Leu Trp Tyr Leu Asp
            420                 425                 430
cag atg ttc aag gtt tta tct ctg gct gga aat tat gtg aag gac gat    1344
Gln Met Phe Lys Val Leu Ser Leu Ala Gly Asn Tyr Val  Lys Asp Asp
        435                 440                 445
gta tgg cat gct cta ata gtc tta ata agc aat gca tct gaa ctc caa    1392
Val Trp His Ala Leu Ile Val Leu Ile Ser Asn Ala Ser Glu Leu Gln
    450                 455                 460
gga tac tca gtg aga tca tta tac aag gca ttg cta gct tgc ggt gaa    1440
Gly Tyr Ser Val Arg Ser Leu Tyr Lys Ala Leu Leu Ala Cys Gly Glu
465                 470                 475                 480
cag gaa agt ttg gtt agg gta gct gta tgg tgc att ggt gag tat ggt    1488
Gln Glu Ser Leu Val Arg Val Ala Val Trp Cys Ile Gly Glu Tyr Gly
                485                 490                 495
gaa atg ctg gtg aac aat gtt ggt atg ctg gac ata gag gaa cca atc    1536
Glu Met Leu Val Asn Asn Val Gly Met Leu Asp Ile Glu Glu Pro Ile
            500                 505                 510
acg gta aca gaa tct gat gcc gtg gat gct gta gag gtc tct ctt aaa    1584
Thr Val Thr Glu Ser Asp Ala Val Asp Ala Val Glu Val Ser Leu Lys
        515                 520                 525
cga tac tct gca gac gtg aca act cgg gct atg tgt cta gta tct ctc    1632
Arg Tyr Ser Ala Asp Val Thr Thr Arg Ala Met Cys Leu Val Ser Leu
    530                 535                 540
ttg aag ctc tct tcc cga ttc cca ccg act tca gaa tca tct ttg ctt    1680
Leu Lys Leu Ser Ser Arg Phe Pro Pro Thr Ser Glu Ser Ser Leu Leu
545                 550                 555                 560
gag cgg atg cct gtg ata gat gaa gct agt tac ttg gct aag aga gct    1728
Glu Arg Met Pro Val Ile Asp Glu Ala Ser Tyr Leu Ala Lys Arg Ala
                565                 570                 575
gct tcc aca caa gca act att tca tca gat aaa tta gct gct gca gca    1776
Ala Ser Thr Gln Ala Thr Ile Ser Ser Asp Lys Leu Ala Ala Ala Ala
            580                 585                 590
act cct gga agc tcg ctt aag ctt cca aat ggt gta gca aag cca cca    1824
Thr Pro Gly Ser Ser Leu Lys Leu Pro Asn Gly Val Ala Lys Pro Pro
        595                 600                 605
ccg gct cct cta gct gat ttg ctt gat tta agt tct gac gat gct cct    1872
Pro Ala Pro Leu Ala Asp Leu Leu Asp Leu Ser Ser Asp Asp Ala Pro
    610                 615                 620
gcg act act tcc gcc cct act aca gca cct aat gat ttc cta cag gat    1920
Ala Thr Thr Ser Ala Pro Thr Thr Ala Pro Asn Asp Phe Leu Gln Asp
625                 630                 635                 640
ctt ttg ggc ata ggc ttg act gat aca tct aca gca ggt ttt gat ctt    1968
Leu Leu Gly Ile Gly Leu Thr Asp Thr Ser Thr Ala Gly Phe Asp Leu
                645                 650                 655
act ttt ttg ttc att cag tac ata ttt ggt ttg aca agt gaa gca agt    2016
Thr Phe Leu Phe Ile Gln Tyr Ile Phe Gly Leu Thr Ser Glu Ala Ser
            660                 665                 670
gat gct cat att ctc aca ttt gat act cat tta tgt gga gct cca tca    2064
Asp Ala His Ile Leu Thr Phe Asp Thr His Leu Cys Gly Ala Pro Ser
        675                 680                 685
gca agc aca gat att ctg atg gat ctt cta tca att ggt tct tct cca    2112
Ala Ser Thr Asp Ile Leu Met Asp Leu Leu Ser Ile Gly Ser Ser Pro
    690                 695                 700
gta caa aat ggc cca cca aca gta tca aac ttt agc ctt cct ggt caa    2160
Val Gln Asn Gly Pro Pro Thr Val Ser Asn Phe Ser Leu Pro Gly Gln
705                 710                 715                 720
gat gag aat aca gct tac ccg cca atc aca gct ttc cag agt gca gct    2208
Asp Glu Asn Thr Ala Tyr Pro Pro Ile Thr Ala Phe Gln Ser Ala Ala
                725                 730                 735
ttg aag atc act ttc aat ttt aag aag cag tct gga aaa cct cag gag    2256
Leu Lys Ile Thr Phe Asn Phe Lys Lys Gln Ser Gly Lys Pro Gln Glu
            740                 745                 750
act aca att cat gct agc ttt aca aat ttg aca tct aat aca ttc acg    2304
Thr Thr Ile His Ala Ser Phe Thr Asn Leu Thr Ser Asn Thr Phe Thr
        755                 760                 765
gat ttc atc ttt cag gca gct gta cca aag ttt atc cag ttg cgt ttg    2352
Asp Phe Ile Phe Gln Ala Ala Val Pro Lys Phe Ile Gln Leu Arg Leu
    770                 775                 780
gac ccc gct agc agc aac acg ctt cct gcc agt gga aat gat tct gtt    2400
Asp Pro Ala Ser Ser Asn Thr Leu Pro Ala Ser Gly Asn Asp Ser Val
785                 790                 795                 800
aca caa agc ctc agt gtc aca aat aac caa cat gga cag aaa ccc ctt    2448
Thr Gln Ser Leu Ser Val Thr Asn Asn Gln His Gly Gln Lys Pro Leu
                805                 810                 815
gcg atg cgt atc cgg ata act tac aaa gtg aac gac aaa ctc atc atg    2496
Ala Met Arg Ile Arg Ile Thr Tyr Lys Val Asn Asp Lys Leu Ile Met
            820                 825                 830
aat cgg agg aga tgc tcg aca aaa tat gac ctg gta aag cac tcg agt    2544
Asn Arg Arg Arg Cys Ser Thr Lys Tyr Asp Leu Val Lys His Ser Ser
        835                 840                 845
ctc ctg gcc atc gag gcg ata aac cct ccc ttg tac cga agt gaa cga    2592
Leu Leu Ala Ile Glu Ala Ile Asn Pro Pro Leu Tyr Arg Ser Glu Arg
    850                 855                 860
gca cta gtg cac gag tac tta gcc tgt gtc tat cgc ttt cgg ccg ttt    2640
Ala Leu Val His Glu Tyr Leu Ala Cys Val Tyr Arg Phe Arg Pro Phe
865                 870                 875                 880
cga aac gct ccc gtc caa gca ata aga cga gac gtg gct gag ata taa    2688
Arg Asn Ala Pro Val Gln Ala Ile Arg Arg Asp Val Ala Glu Ile
                885                 890                 895
<210>52
<211>895
<212>PRT
<213>Oryza sativa
<400>52
Met Ile Arg Ala Ile Arg Ala Cys Lys Thr Ala Ala Glu Glu Arg Ala
1               5                   10                  15
Val Val Arg Arg Glu Cys Ala Ala Ile Arg Ala Ala Ile Ser Glu Gly
            20                  25                  30
Asp Gln Asp Tyr Arg His Arg Asn Met Ala Lys Leu Met Phe Ile His
        35                  40                  45
Met Leu Gly Tyr Pro Thr His Phe Gly Gln Met Glu Cys Leu Lys Leu
    50                  55                  60
Ile Ala Ala Ala Gly Phe Pro Glu Lys Arg Ile Gly Tyr Leu Gly Leu
65                  70                  75                  80
Met Leu Leu Leu Asp Glu Arg Gln Glu Asn Ala Met Phe Cys Phe Glu
                85                  90                  95
His Leu Val Val Leu Asn Ala Asp Arg Asp Leu Asn His Ser Asn Gln
            100                 105                 110
Phe Ile Val Gly Leu Ala Leu Cys Ala Leu Gly Asn Ile Cys Ser Ala
        115                 120                 125
Glu Met Ala Arg Asp Leu Ser Pro Glu Val Glu Arg Leu Leu Gln Ser
    130                 135                 140
Arg Glu Pro Asn Thr Lys Lys Lys Ala Ala Leu Cys Ser Ile Arg Ile
145                 150                 155                 160
Val Arg Lys Val Pro Asp Leu Ala Glu Asn Phe Met Gly Ser Ala Val
                165                 170                 175
Ser Leu Leu Lys Glu Lys His His Gly Val Leu Ile Ser Ala Val Gln
            180                 185                 190
Leu Cys Ala Glu Leu Cys Lys Ala Ser Lys Glu Ala Leu Glu Tyr Leu
        195                 200                 205
Arg Lys Asn Cys Leu Asp Gly Leu Val Arg Ile Leu Arg Asp Val Ser
    210                 215                 220
Asn Ser Ser Tyr Ala Pro Glu Tyr Asp Ile Ala Gly Ile Thr Asp Pro
225                 230                 235                 240
Phe Leu His Ile Arg Val Leu Lys Leu Met Arg Ile Leu Gly Gln Gly
                245                 250                 255
Asp Ala Asp Cys Ser Glu Phe Val Asn Asp Ile Leu Ala Gln Leu Cys
            260                 265                 270
Ser Val Ser Tyr Ile Glu Leu Phe Ala Leu His Phe Gln Val Ala Thr
        275                 280                 285
Lys Thr Glu Ser Asn Lys Asn Ala Gly Asn Ala Ile Leu Tyr Glu Cys
    290                 295                 300
Val Glu Thr Ile Met Gly Ile Glu Ala Thr Ser Gly Leu Arg Val Leu
305                 310                 315                 320
Ala Ile Asn Ile Leu Gly Arg Phe Leu Ser Asn Arg Asp Asn Asn Ile
                325                 330                 335
Arg Tyr Val Ala Leu Asn Met Leu Met Lys Ala Met Glu Val Asp Thr
            340                 345                 350
Gln Ala Val Gln Arg His Arg Ala Thr Ile Leu Glu Cys Val Lys Asp
        355                 360                 365
Ala Asp Val Ser Ile Arg Lys Arg Ala Leu Glu Leu Val Tyr Leu Leu
    370                 375                 380
Val Asn Asp Ala Asn Ala Lys Ser Leu Thr Lys Glu Leu Val Asp Tyr
385                 390                 395                 400
Leu Glu Val Ser Asp Gln Asp Phe Lys Asp Asp Leu Thr Ala Lys Ile
                405                 410                 415
Cys Ser Ile Val Glu Lys Phe Ser Gln Asp Lys Leu Trp Tyr Leu Asp
            420                 425                 430
Gln Met Phe Lys Val Leu Ser Leu Ala Gly Asn Tyr Val Lys Asp Asp
        435                 440                 445
Val Trp His Ala Leu Ile Val Leu Ile Ser Asn Ala Ser Glu Leu Gln
    450                 455                 460
Gly Tyr Ser Val Arg Ser Leu Tyr Lys Ala Leu Leu Ala Cys Gly Glu
465                 470                 475                 480
Gln Glu Ser Leu Val Arg Val Ala Val Trp Cys Ile Gly Glu Tyr Gly
                485                 490                 495
Glu Met Leu Val Asn Asn Val Gly Met Leu Asp Ile Glu Glu Pro Ile
            500                 505                 510
Thr Val Thr Glu Ser Asp Ala Val Asp Ala Val Glu Val Ser Leu Lys
        515                 520                 525
Arg Tyr Ser Ala Asp Val Thr Thr Arg Ala Met Cys Leu Val Ser Leu
    530                 535                 540
Leu Lys Leu Ser Ser Arg Phe Pro Pro Thr Ser Glu Ser Ser Leu Leu
545                 550                 555                 560
Glu Arg Met Pro Val Ile Asp Glu Ala Ser Tyr Leu Ala Lys Arg Ala
                565                 570                 575
Ala Ser Thr Gln Ala Thr Ile Ser Ser Asp Lys Leu Ala Ala Ala Ala
            580                 585                 590
Thr Pro Gly Ser Ser Leu Lys Leu Pro Asn Gly Val Ala Lys Pro Pro
        595                 600                 605
Pro Ala Pro Leu Ala Asp Leu Leu Asp Leu Ser Ser Asp Asp Ala Pro
    610                 615                 620
Ala Thr Thr Ser Ala Pro Thr Thr Ala Pro Asn Asp Phe Leu Gln Asp
625                 630                 635                 640
Leu Leu Gly Ile Gly Leu Thr Asp Thr Ser Thr Ala Gly Phe Asp Leu
                645                 650                 655
Thr Phe Leu Phe Ile Gln Tyr Ile Phe Gly Leu Thr Ser Glu Ala Ser
            660                 665                 670
Asp Ala His Ile Leu Thr Phe Asp Thr His Leu Cys Gly Ala Pro Ser
        675                 680                 685
Ala Ser Thr Asp Ile Leu Met Asp Leu Leu Ser Ile Gly Ser Ser Pro
    690                 695                 700
Val Gln Asn Gly Pro Pro Thr Val Ser Asn Phe Ser Leu Pro Gly Gln
705                 710                 715                 720
Asp Glu Asn Thr Ala Tyr Pro Pro Ile Thr Ala Phe Gln Ser Ala Ala
                725                 730                 735
Leu Lys Ile Thr Phe Asn Phe Lys Lys Gln Ser Gly Lys Pro Gln Glu
            740                 745                 750
Thr Thr Ile His Ala Ser Phe Thr Asn Leu Thr Ser Asn Thr Phe Thr
        755                 760                 765
Asp Phe Ile Phe Gln Ala Ala Val Pro Lys Phe Ile Gln Leu Arg Leu
    770                 775                 780
Asp Pro Ala Ser Ser Asn Thr Leu Pro Ala Ser Gly Asn Asp Ser Val
785                 790                 795                 800
Thr Gln Ser Leu Ser Val Thr Asn Asn Gln His Gly Gln Lys Pro Leu
                805                 810                 815
Ala Met Arg Ile Arg Ile Thr Tyr Lys Val Asn Asp Lys Leu Ile Met
            820                 825                 830
Asn Arg Arg Arg Cys Ser Thr Lys Tyr Asp Leu Val Lys His Ser Ser
        835                 840                 845
Leu Leu Ala Ile Glu Ala Ile Asn Pro Pro Leu Tyr Arg Ser Glu Arg
    850                 855                 860
Ala Leu Val His Glu Tyr Leu Ala Cys Val Tyr Arg Phe Arg Pro Phe
865                 870                 875                 880
Arg Asn Ala Pro Val Gln Ala Ile Arg Arg Asp Val Ala Glu Ile
                885                 890                 895
<210>53
<211>394
<212>DNA
<213>Oryza sativa
<220>
<221>CDS
<222>(1)..(393)
<400>53
ggt gtg gag acg gtt gtg acg gac acg gcg ggg aac aag gtg gtg gtc    48
Gly Val Glu Thr Val Val Thr Asp Thr Ala Gly Asn Lys Val Val Val
1               5                   10                  15
acc ggc gcg gcg gac gcg gcg gag ctg aag gag cgc atc gag gcg cgg    96
Thr Gly Ala Ala Asp Ala Ala Glu Leu Lys Glu ArgIle Glu Ala Arg
            20                  25                 30
acc aag aag gcc gtg cag atc gtc tcc gcc ggc gcc ggc ccg ccg ccc    144
Thr Lys Lys Ala Val Gln Ile Val Ser Ala Gly Ala Gly Pro Pro Pro
        35                  40                  45
aag aag gat aag gag gag aag aag gac aag gac aag aag ggc ggc ggc    192
Lys Lys Asp Lys Glu Glu Lys Lys Asp Lys Asp Lys Lys Gly Gly Gly
    50                  55                  60
gac gac aag aag gcc gag aag gag aag ggc ggc ggc ggc ggc gat aag    240
Asp Asp Lys Lys Ala Glu Lys Glu Lys Gly Gly Gly Gly Gly Asp Lys
65                  70                  75                  80
aag gcg gag aag gag aag ggc ggc ggc gac aag ccc aag gag gag aag    288
Lys Ala Glu Lys Glu Lys Gly Gly Gly Asp Lys Pro Lys Glu Glu Lys
                85                  90                  95
aaa gcc aag gag ccc aaa gag gag acg gtg acg ctc aag atc cgc ctc    336
Lys Ala Lys Glu Pro Lys Glu Glu Thr Val Thr Leu Lys Ile Arg Leu
            100                 105                 110
cac tgc gag gga tgc atc gac cgc atc aag cgc cgc atc tgc aag atc    384
His Cys Glu Gly Cys Ile Asp Arg Ile Lys Arg Arg Ile Cys Lys Ile
        115                 120                 125
aaa ggg ggc a                                                      394
Lys Gly Gly
    130
<210>54
<211>131
<212>PRT
<213>Oryza sativa
<400>54
Gly Val Glu Thr Val Val Thr Asp Thr Ala Gly Asn Lys Val Val Val
1               5                   10                  15
Thr Gly Ala Ala Asp Ala Ala Glu Leu Lys Glu Arg Ile Glu Ala Arg
            20                  25                  30
Thr Lys Lys Ala Val Gln Ile Val Ser Ala Gly Ala Gly Pro Pro Pro
        35                  40                  45
Lys Lys Asp Lys Glu Glu Lys Lys Asp Lys Asp Lys Lys Gly Gly Gly
    50                  55                  60
Asp Asp Lys Lys Ala Glu Lys Glu Lys Gly Gly Gly Gly Gly Asp Lys
65                  70                  75                  80
Lys Ala Glu Lys Glu Lys Gly Gly Gly Asp Lys Pro Lys Glu Glu Lys
                85                  90                  95
Lys Ala Lys Glu Pro Lys Glu Glu Thr Val Thr Leu Lys Ile Arg Leu
            100                 105                 110
His Cys Glu Gly Cys Ile Asp Arg Ile Lys Arg Arg Ile Cys Lys Ile
        115                 120                 125
Lys Gly Gly
    130
<210>55
<211>194
<212>DNA
<213>Oryza sativa
<220>
<221>CDS
<222>(1)..(192)
<400>55
ggc gac cag ggg agg acg tac ctg ttc agg gtg tcc aat gtc ggg gtg    48
Gly Asp Gln Gly Arg Thr Tyr Leu Phe Arg Val Ser Asn Val Gly Val
1               5                   10                  15
aag acg tcc gtc aat gtc agg atc cag ggg cac tcg ctg agg ttg gtg    96
Lys Thr Ser Val Asn Val Arg Ile Gln Gly His Ser Leu Arg Leu Val
            20                  25                  30
gag gtg gag ggg acg cac ccg gtg cag aac gtg tac gac tcg ctc gac    144
Glu Val Glu Gly Thr His Pro Val Gln Asn Val Tyr Asp Ser Leu Asp
        35                  40                  45
gtc cat gtc ggc cag tcg gtg gcg ttc ctc gtc acg ctc gac aag gcg    192
Val His Val Gly Gln Ser Val Ala Phe Leu Val Thr Leu Asp Lys Ala
    50                  55                  60
gc                                                                 194
<210>56
<211>64
<212>PRT
<213>Oryza sativa
<400>56
Gly Asp Gln Gly Arg Thr Tyr Leu Phe Arg Val Ser Asn Val Gly Val
1               5                   10                 15
Lys Thr Ser Val Asn Val Arg Ile Gln Gly His Ser Leu Arg Leu Val
            20                  25                  30
Glu Val Glu Gly Thr His Pro Val Gln Asn Val Tyr Asp Ser Leu Asp
        35                  40                  45
Val His Val Gly Gln Ser Val Ala Phe Leu Val Thr Leu Asp Lys Ala
    50                  55                  60
<210>57
<211>2815
<212>DNA
<213>Oryza sativa
<220>
<221>CDS
<222>(1)..(2814)
<400>57
atg gcc gcc ctc ttc ctc ctc ctc ctc ctc cac gta tca gac gcc gcc    48
Met Ala Ala Leu Phe Leu Leu Leu Leu Leu His Val Ser Asp Ala Ala
1               5                   10                  15
atc aac ccg ggc gac ctg tcc gtg ctc cac gac ctg cgc cgc tcg ctg    96
Ile Asn Pro Gly Asp Leu Ser Val Leu His Asp Leu Arg Arg Ser Leu
            20                  25                  30
acc aam gcc gaa gcc gtc ctc ggc tgg ggc gac ccc aac gcc gcc gac    144
Thr Xaa Ala Glu Ala Val Leu Gly Trp Gly Asp Pro Asn Ala Ala Asp
        35                  40                  45
ccg tgc gcc gca tgg ccg cac atc tcc tgc gac cgc gcc ggc cgc gtc    192
Pro Cys Ala Ala Trp Pro His Ile Ser Cys Asp Arg Ala Gly Arg Val
    50                  55                  60
aac aac atc gac ctc aag aac gcc ggc ctc gcc ggg acg ctc ccc ttc    240
Asn Asn Ile Asp Leu Lys Asn Ala Gly Leu Ala Gly Thr Leu Pro Phe
65                  70                  75                  80
acc ttt gcc gcg ctc gac gcg ctc cag gac ctc agc ctc cag aac cac    288
Thr Phe Ala Ala Leu Asp Ala Leu Gln Asp Leu Ser Leu Gln Asn His
                85                  90                  95
aac ctc tcc ggc gac ctc ccg tcc ttc cgc ggc atg gcc tcc ctc cgc    336
Asn Leu Ser Gly Asp Leu Pro Ser Phe Arg Gly Met Ala Ser Leu Arg
            100                 105                 110
cac gcc ttc ctc aac aac aac tcc ttc cgc tcc atc ccc gcc gac ttc    384
His Ala Phe Leu Asn Asn Asn Ser Phe Arg Ser Ile Pro Ala Asp Phe
        115                 120                 125
ttc agc ggc ctc acc tcc ctc ctc gtc atc tcc ctc gac cag aac ccg    432
Phe Ser Gly Leu Thr Ser Leu Leu Val Ile Ser Leu Asp Gln Asn Pro
    130                 135                 140
ctc aac gtc tcc tcc ggg ggg tgg acg atc ccc gcc gac gtc gcc gcc    480
Leu Asn Val Ser Ser Gly Gly Trp Thr Ile Pro Ala Asp Val Ala Ala
145                 150                 155                 160
gcg cag cag ctg cag agc ctc agc ctc aac gga tgc aac ctc acc ggc    528
Ala Gln Gln Leu Gln Ser Leu Ser Leu Asn Gly Cys Asn Leu Thr Gly
                165                 170                 175
gcc atc ccg gac ttc ctc ggc gcc atg aac agc ctc cag gag ctc aag    576
Ala Ile Pro Asp Phe Leu Gly Ala Met Asn Ser Leu Gln Glu Leu Lys
            180                 185                 190
ctc gcc tac aac gcc ctc tcc gga ccc atc ccc tcc acc ttc aac gcc    624
Leu Ala Tyr Asn Ala Leu Ser Gly Pro Ile Pro Ser Thr Phe Asn Ala
        195                 200                 205
tcc ggg ttg cag acg ctc tgg ctc aac aac cag cac ggc gtc ccc aag    672
Ser Gly Leu Gln Thr Leu Trp Leu Asn Asr Gln His Gly Val Pro Lys
    210                 215                 220
ctc tcc ggc acg ctc gac ctc atc gcc acc atg ccc aac ctc gaa cag    720
Leu Ser Gly Thr Leu Asp Leu Ile Ala Thr Met Pro Asn Leu Glu Gln
225                 230                 235                 240
gca tgg ctc cac ggc aac gac ttc tcc ggc ccc atc ccg gac tcc atc    768
Ala Trp Leu His Gly Asn Asp Phe Ser Gly Pro Ile Pro Asp Ser Ile
                245                 250                 255
gcc gac tgc aag cgc ctc tcc gac ctc tgc ctc aac agc aac cag ctc    816
Ala Asp Cys Lys Arg Leu Ser Asp Leu Cys Leu Asn Ser Asn Gln Leu
            260                 265                 270
gtc ggc ctc gtc cca ccg gcg ctc gag tcc atg gcc ggc ctc aag tcc    864
Val Gly Leu Val Pro Pro Ala Leu Glu Ser Met Ala Gly Leu Lys Ser
        275                 280                 285
gtt cag ctc gac aac aac aat ctc ttg ggc ccc gtc ccg gcg atc aag    912
Val Gln Leu Asp Asn Asn Asn Leu Leu Gly Pro Val Pro Ala Ile Lys
    290                 295                 300
gcg ccc aag tac acc tac tca cag aac ggg ttc tgc gcc gac aag ccg    960
Ala Pro Lys Tyr Thr Tyr Ser Gln Asn Gly Phe Cys Ala Asp Lys Pro
305                 310                 315                 320
ggg gtc gcc tgc tcg cct cag gtg atg gca ttg ctt cac ttc ctc gcc    1008
Gly Val Ala Cys Ser Pro Gln Val Met Ala Leu Leu His Phe Leu Ala
                325                 330                 335
gag gtc gat tac ccc aag agg ctg gta gct agt tgg tcc ggg aac aat    1056
Glu Val Asp Tyr Pro Lys Arg Leu Val Ala Ser Trp Ser Gly Asn Asn
            340                 345                 350
tcc tgc gtg gat tgg ctg gga att agc tgc gtt gca ggg aat gtg acg    1104
Ser Cys Val Asp Trp Leu Gly Ile Ser Cys Val Ala Gly Asn Val Thr
        355                 360                 365
atg ctc aat ttg ccg gag tat gga ctc aat ggc aca atc agc gac agt    1152
Met Leu Asn Leu Pro Glu Tyr Gly Leu Asn Gly Thr Ile Ser Asp Ser
    370                 375                 380
ctt ggg aat ctg agt gaa ctc tcg gac atc aac ctc atc gga aat aac    1200
Leu Gly Asn Leu Ser Glu Leu Ser Asp Ile Asn Leu Ile Gly Asn Asn
385                 390                 395                 400
ctt act ggg cat gtg ccg gat agc ctc aca agc ctc agg ttg ctg cag    1248
Leu Thr Gly His Val Pro Asp Ser Leu Thr Ser Leu Arg Leu Leu Gln
                405                 410                 415
aag ctg gac ctg tcc ggg aac gac ctg acc ggg ccg ctg ccc acc ttc    1296
Lys Leu Asp Leu Ser Gly Asn Asp Leu Thr Gly Pro Leu Pro Thr Phe
            420                 425                 430
agc ccg agt gtg aag gtg aat gtg acc ggc aat ctc aac ttc aat ggg    1344
Ser Pro Ser Val Lys Val Asn Val Thr Gly Asn Leu Asn Phe Asn Gly
        435                 440                 445
acg gca cca gga tca gcg cca tcc aag gat act cct ggg tct tcg tcg    1392
Thr Ala Pro Gly Ser Ala Pro Ser Lys Asp Thr Pro Gly Ser Ser Ser
    450                 455                 460
tcc agg gcg cca acc ttg cct ggc cag ggc gtc ctt ccg gaa aat aag    1440
Ser Arg Ala Pro Thr Leu Pro Gly Gln Gly Val Leu Pro Glu Asn Lys
465                 470                 475                 480
aag aaa aga tca gct gtt gtg ttg gcc acc acc atc ccg gtt gca gtc    1488
Lys Lys Arg Ser Ala Val Val Leu Ala Thr Thr Ile Pro Val Ala Val
                485                 490                 495
agt gtg gtg gct ctg gct tca gtg tgt gcc gtg ctc atc ttc cgt aag    1536
Ser Val Val Ala Leu Ala Ser Val Cys Ala Val Leu Ile Phe Arg Lys
            500                 505                 510
aaa agg gga tca gtt cca cca aat gca gct tcc gtc gtc gtc cac ccc    1584
Lys Arg Gly Ser Val Pro Pro Asn Ala Ala Ser Val Val Val His Pro
        515                 520                 525
cgc gag aat tct gac cca gac aac ttg gtc aag att gtc atg gtg aac    1632
Arg Glu Asn Ser Asp Pro Asp Asn Leu Val Lys Ile Val Met Val Asn
    530                 535                 540
aat gat ggc aac agt agt tcg acc caa ggc aat aca ctt agc ggg agc    1680
Asn Asp Gly Asn Ser Ser Ser Thr Gln Gly Asn Thr Leu Ser Gly Ser
545                 550                 555                 560
agc agc cgc gct agt gat gtt cac atg atc gat acg ggc aat ttc gtg    1728
Ser Ser Arg Ala Ser Asp Val His Met Ile Asp Thr Gly Asn Phe Val
                565                 570                 575
att gct gtg cag gtc ctc cgt ggc gca acc aag aac ttt acc cag gac    1776
Ile Ala Val Gln Val Leu Arg Gly Ala Thr Lys Asn Phe Thr Gln Asp
            580                 585                 590
aat gtg ctt ggc cgt ggg ggc ttt ggt gtc gtc tac aag ggt gag ctg    1824
Asn Val Leu Gly Arg Gly Gly Phe Gly Val Val Tyr Lys Gly Glu Leu
        595                 600                 605
cat gac ggc acg atg att gct gtg aag agg atg gag gct gca gtg atc    1872
His Asp Gly Thr Met Ile Ala Val Lys Arg Met Glu Ala Ala Val Ile
    610                 615                 620
agc aac aag gcc ttg gat gag ttc caa gcc gag att acc att cta acc    1920
Ser Asn Lys Ala Leu Asp Glu Phe Gln Ala Glu Ile Thr Ile Leu Thr
625                 630                 635                 640
aag gta cgg cac cgc aac ctg gtc tcg ata ctg ggt tac tca att gaa    1968
Lys Val Arg His Arg Asn Leu Val Ser Ile Leu Gly Tyr Ser Ile Glu
                645                 650                 655
ggg aat gag agg ctg ctg gtc tat gag tac atg tcc aac ggg gct ttg    2016
Gly Asn Glu Arg Leu Leu Val Tyr Glu Tyr Met Ser Asn Gly Ala Leu
            660                 665                 670
agc aag cat ctg ttc cag tgg aag cag ttt gaa tta gaa ccc ctc tca    2064
Ser Lys His Leu Phe Gln Trp Lys Gln Phe Glu Leu Glu Pro Leu Ser
        675                 680                 685
tgg aag aag agg ctc aat att gca  ctg gat gtt gct cgt ggg atg gaa    2112
Trp Lys Lys Arg Leu Asn Ile Ala Leu Asp Val Ala Arg Gly Met Glu
    690                 695                 700
tat ctg cac aac ctg gca cat cag tgc tac atc cat agg gat ctc aag    2160
Tyr Leu His Asn Leu Ala His Gln Cys Tyr Ile His Arg Asp Leu Lys
705                 710                 715                 720
tca gca aac att ctc ctc ggc gac gat ttc cga gca aag gta tca gac    2208
Ser Ala Asn Ile Leu Leu Gly Asp Asp Phe Arg Ala Lys Val Ser Asp
                725                 730                 735
ttt ggg cta gtt aaa cat gca cca gat gga aac ttc tct gtg gca acc    2256
Phe Gly Leu Val Lys His Ala Pro Asp Gly Asn Phe Ser Val Ala Thr
            740                 745                 750
aga ctc gct gga act ttt ggg tac ttg gct cct gaa tat gct gtg act    2304
Arg Leu Ala Gly Thr Phe Gly Tyr Leu Ala Pro Glu Tyr Ala Val Thr
        755                 760                 765
ggg aaa atc acg aca aaa gca gat gtc ttc agc ttt ggg gta gtg ctg    2352
Gly Lys Ile Thr Thr Lys Ala Asp Val Phe Ser Phe Gly Val Val Leu
    770                 775                 780
atg gag ctg ata act gga atg act gcc att gat gag agc cgt ctg gag    2400
Met Glu Leu Ile Thr Gly Met Thr Ala Ile Asp Glu Ser Arg Leu Glu
785                 790                 795                 800
gag gaa acc cgt tat ctg gcc tca tgg ttc tgt cag ata agg aag gat    2448
Glu Glu Thr Arg Tyr Leu Ala Ser Trp Phe Cys Gln Ile Arg Lys Asp
                805                 810                 815
gaa gat agg ctc aga gca gcc att gat cct act ctg gat caa tct gat    2496
Glu Asp Arg Leu Arg Ala Ala Ile Asp Pro Thr Leu Asp Gln Ser Asp
            820                 825                 830
gag act ttt gag agc atc tcc gtg atc gca gag ctt gct ggc cac tgc    2544
Glu Thr Phe Glu Ser Ile Ser Val Ile Ala Glu Leu Ala Gly His Cys
        835                 840                 845
aca tcc cgg gaa ccc acc cag cga ccg gac atg ggc cac gcc gtg aac    2592
Thr Ser Arg Glu Pro Thr Gln Arg Pro Asp Met Gly His Ala Val Asn
    850                 855                 860
gtg ctc gtc ccg atg gta gag aaa tgg aag cct gtg aac gac gag acc    2640
Val Leu Val Pro Met Val Glu Lys Trp Lys Pro Val Asn Asp Glu Thr
865                 870                 875                 880
gag gac tac atg ggc att gat ctg cac cag ccg ttg ctc cag atg gtg    2688
Glu Asp Tyr Met Gly Ile Asp Leu His Gln Pro Leu Leu Gln Met Val
                885                 890                 895
aag ggc tgg cag gac gca gag gcc agc atg aca gat gga agc atc ctg    2736
Lys Gly Trp Gln Asp Ala Glu Ala Ser Met Thr Asp Gly Ser Ile Leu
            900                 905                 910
agc ctt gag gac agc aag ggc agc atc cca gct cgg cct gcc ggg ttt    2784
Ser Leu Glu Asp Ser Lys Gly Ser Ile Pro Ala Arg Pro Ala Gly Phe
        915                 920                 925
gca gaa tcg ttc acc tcg gct gat ggc cgg t                          2815
Ala Glu Ser Phe Thr Ser Ala Asp Gly Arg
    930                 935
<210>58
<211>938
<212>PRT
<213>Oryza sativa
<220>
<221>misc_feature
<222>(34)..(34)
<223>The′Xaa′at location 34 stands for Lys,or Asn.
<400>58
Met Ala Ala Leu Phe Leu Leu Leu Leu Leu His Val Ser Asp Ala Ala
1               5                   10                  15
Ile Asn Pro Gly Asp Leu Ser Val Leu His Asp Leu Arg Arg Ser Leu
            20                  25                  30
Thr Xaa Ala Glu Ala Val Leu Gly Trp Gly Asp Pro Asn Ala Ala Asp
        35                  40                  45
Pro Cys Ala Ala Trp Pro His Ile Ser Cys Asp Arg Ala Gly Arg Val
    50                  55                  60
Asn Asn Ile Asp Leu Lys Asn Ala Gly Leu Ala Gly Thr Leu Pro Phe
65                  70                  75                  80
Thr Phe Ala Ala Leu Asp Ala Leu Gln Asp Leu Ser Leu Gln Asn His
                85                  90                  95
Asn Leu Ser Gly Asp Leu Pro Ser Phe Arg Gly Met Ala Ser Leu Arg
            100                 105                 110
His Ala Phe Leu Asn Asn Asn Ser Phe Arg Ser Ile Pro Ala Asp Phe
        115                 120                 125
Phe Ser Gly Leu Thr Ser Leu Leu Val Ile Ser Leu Asp Gln Asn Pro
    130                 135                 140
Leu Asn Val Ser Ser Gly Gly Trp Thr Ile Pro Ala Asp Val Ala Ala
145                 150                 155                 160
Ala Gln Gln Leu Gln Ser Leu Ser Leu Asn Gly Cys Asn Leu Thr Gly
                165                 170                 175
Ala Ile Pro Asp Phe Leu Gly Ala Met Asn Ser Leu Gln Glu Leu Lys
             180                 185                 190
Leu Ala Tyr Asn Ala Leu Ser Gly Pro Ile Pro Ser Thr Phe Asn Ala
        195                 200                 205
Ser Gly Leu Gln Thr Leu Trp Leu Asn Asn Gln His Gly Val Pro Lys
    210                 215                 220
Leu Ser Gly Thr Leu Asp Leu Ile Ala Thr Met Pro Asn Leu Glu Gln
225                 230                 235                 240
Ala Trp Leu His Gly Asn Asp Phe Ser Gly Pro Ile Pro Asp Ser Ile
                245                 250                 255
Ala Asp Cys Lys Arg Leu Ser Asp Leu Cys Leu Asn Ser Asn Gln Leu
            260                 265                 270
Val Gly Leu Val Pro Pro Ala Leu Glu Ser Met Ala Gly Leu Lys Ser
        275                 280                 285
Val Gln Leu Asp Asn Asn Asn Leu Leu Gly Pro Val Pro Ala Ile Lys
    290                 295                 300
Ala Pro Lys Tyr Thr Tyr Ser Gln Asn Gly Phe Cys Ala Asp Lys Pro
305                 310                 315                 320
Gly Val Ala Cys Ser Pro Gln Val Met Ala Leu Leu His Phe Leu Ala
                325                 330                 335
Glu Val Asp Tyr Pro Lys Arg Leu Val Ala Ser Trp Ser Gly Asn Asn
            340                 345                 350
Ser Cys Val Asp Trp Leu Gly Ile Ser Cys Val Ala Gly Asn Val Thr
        355                 360                 365
Met Leu Asn Leu Pro Glu Tyr Gly Leu Asn Gly Thr Ile Ser Asp Ser
    370                 375                 380
Leu Gly Asn Leu Ser Glu Leu Ser Asp Ile Asn Leu Ile Gly Asn Asn
385                 390                 395                 400
Leu Thr Gly His Val Pro Asp Ser Leu Thr Ser Leu Arg Leu Leu Gln
                405                 410                 415
Lys Leu Asp Leu Ser Gly Asn Asp Leu Thr Gly Pro Leu Pro Thr Phe
            420                 425                 430
Ser Pro Ser Val Lys Val Asn Val Thr Gly Asn Leu Asn Phe Asn Gly
        435                 440                 445
Thr Ala Pro Gly Ser Ala Pro Ser Lys Asp Thr Pro Gly Ser Ser Ser
    450                 455                 460
Ser Arg Ala Pro Thr Leu Pro Gly Gln Gly Val Leu Pro Glu Asn Lys
465                 470                 475                 480
Lys Lys Arg Ser Ala Val Val Leu Ala Thr Thr Ile Pro Val Ala Val
                485                 490                 495
Ser Val Val Ala Leu Ala Ser Val Cys Ala Val Leu Ile Phe Arg Lys
            500                 505                 510
Lys Arg Gly Ser Val Pro Pro Asn Ala Ala Ser Val Val Val His Pro
        515                 520                 525
Arg Glu Asn Ser Asp Pro Asp Asn Leu Val Lys Ile Val Met Val Asn
    530                 535                 540
Asn Asp Gly Asn Ser Ser Ser Thr Gln Gly Asn Thr Leu Ser Gly Ser
545                 550                 555                 560
Ser Ser Arg Ala Ser Asp Val His Met Ile Asp Thr Gly Asn Phe Val
                565                 570                 575
Ile Ala Val Gln Val Leu Arg Gly Ala Thr Lys Asn Phe Thr Gln Asp
            580                 585                 590
Asn Val Leu Gly Arg Gly Gly Phe Gly Val Val Tyr Lys Gly Glu Leu
        595                 600                 605
His Asp Gly Thr Met Ile Ala Val Lys Arg Met Glu Ala Ala Val Ile
    610                 615                 620
Ser Asn Lys Ala Leu Asp Glu Phe Gln Ala Glu Ile Thr Ile Leu Thr
625                 630                 635                 640
Lys Val Arg His Arg Asn Leu Val Ser Ile Leu Gly Tyr Ser Ile Glu
                645                 650                 655
Gly Asn Glu Arg Leu Leu Val Tyr Glu Tyr Met Ser Asn Gly Ala Leu
            660                 665                 670
Ser Lys His Leu Phe Gln Trp Lys Gln Phe Glu Leu Glu Pro Leu Ser
        675                 680                 685
Trp Lys Lys Arg Leu Asn Ile Ala Leu Asp Val Ala Arg Gly Met Glu
    690                 695                 700
Tyr Leu His Asn Leu Ala His Gln Cys Tyr Ile His Arg Asp Leu Lys
705                 710                 715                 720
Ser Ala AsnIle Leu Leu Gly Asp Asp Phe Arg Ala Lys Val Ser Asp
               725                 730                 735
Phe Gly Leu Val Lys His Ala Pro Asp Gly Asn Phe Ser Val Ala Thr
            740                 745                 750
Arg Leu Ala Gly Thr Phe Gly Tyr Leu Ala Pro Glu Tyr Ala Val Thr
        755                 760                 765
Gly Lys Ile Thr Thr Lys Ala Asp Val Phe Ser Phe Gly Val Val Leu
    770                 775                 780
Met Glu Leu Ile Thr Gly Met Thr Ala Ile Asp Glu Ser Arg Leu Glu
785                 790                 795                 800
Glu Glu Thr Arg Tyr Leu Ala Ser Trp Phe Cys Gln Ile Arg Lys Asp
                805                 810                 815
Glu Asp Arg Leu Arg Ala Ala Ile Asp Pro Thr Leu Asp Gln Ser Asp
            820                 825                 830
Glu Thr Phe Glu Ser Ile Ser Val Ile Ala Glu Leu Ala Gly His Cys
        835                 840                 845
Thr Ser Arg Glu Pro Thr Gln Arg Pro Asp Met Gly His Ala Val Asn
    850                 855                 860
Val Leu Val Pro Met Val Glu Lys Trp Lys Pro Val Asn Asp Glu Thr
865                 870                 875                 880
Glu Asp Tyr Met Gly Ile Asp Leu His Gln Pro Leu Leu Gln Met Val
                885                 890                 895
Lys Gly Trp Gln Asp Ala Glu Ala Ser Met Thr Asp Gly Ser Ile Leu
            900                 905                 910
Ser Leu Glu Asp Ser Lys Gly Ser Ile Pro Ala Arg Pro Ala Gly Phe
        915                 920                 925
Ala Glu Ser Phe Thr Ser Ala Asp Gly Arg
    930                 935
<210>59
<211>2844
<212>DNA
<213>Oryza sativa
<220>
<221>CDS
<222>(1)..(2844)
<400>59
atg ccg tcg gtt tcg agg gcc gtg tgc gtg cag agg gcg agc ggg aat    48
Met Pro Ser Val Ser Arg Ala Val Cys Val Gln Arg Ala Ser Gly Asn
1               5                   10                  15
aac ggc agg agg tgc aga gat ggg gcg gcc gcc gcc ggc cgc cga tcc    96
Asn Gly Arg Arg Cys Arg Asp Gly Ala Ala Ala Ala Gly Arg Arg Ser
            20                  25                  30
gtc gtg gcg cag aga gcg cgg cac ggc aag ccg gag gtc gcc atc cgc    144
Val Val Ala Gln Arg Ala Arg His Gly Lys Pro Glu Val Ala Ile Arg
        35                  40                  45
tcg ggg tcc ggc ggc tcg gcg cgg ggc ggg cat tgc tcg cct ctc agg    192
Ser Gly Ser Gly Gly Ser Ala Arg Gly Gly His Cys Ser Pro Leu Arg
    50                  55                  60
gca gtg gcg gcg ccg atc ccg act acc aaa aag agg gtg ttc cac ttc    240
Ala Val Ala Ala Pro Ile Pro Thr Thr Lys Lys Arg Val Phe His Phe
65                  70                  75                  80
ggc aag ggc aag agc gag ggc aac aag gcc atg aag gac ctg ctg gga    288
Gly Lys Gly Lys Ser Glu Gly Asn Lys Ala Met Lys Asp Leu Leu Gly
                85                  90                  95
ggg aag ggg gcg aac ttg gcg gag atg gcg agc atc ggg ctg tcg gtg    336
Gly Lys Gly Ala Asn Leu Ala Glu Met Ala Ser Ile Gly Leu Ser Val
            100                 105                 110
ccg ccg ggg ttc acg gtg tcg acg gag gcg tgc cag cag tac cag gcg    384
Pro Pro Gly Phe Thr Val Ser Thr Glu Ala Cys Gln Gln Tyr Gln Ala
        115                 120                 125
gcg ggg aag acg ctg ccg gcg ggg ctg tgg gag gag atc gtc gag ggg    432
Ala Gly Lys Thr Leu Pro Ala Gly Leu Trp Glu Glu Ile Val Glu Gly
    130                 135                 140
ctc cag tgg gtg gag gag tac atg gcg gcg cgc ctc ggc gac ccc gcc    480
Leu Gln Trp Val Glu Glu Tyr Met Ala Ala Arg Leu Gly Asp Pro Ala
145                 150                 155                 160
cgc cct ctc ctc ctc tcc gtc cgc tcc ggc gcc gcc gtg tcg atg ccg    528
Arg Pro Leu Leu Leu Ser Val Arg Ser Gly Ala Ala Val Ser Met Pro
                165                 170                 175
ggg atg atg gac acg gtg ctg aac ctg ggg ctg aac gac gag gtg gcg    576
Gly Met Met Asp Thr Val Leu Asn Leu Gly Leu Asn Asp Glu Val Ala
            180                 185                 190
gcg gga ctg gcg gcc aag agc ggc gac cgc ttc gcg tac gac tcc tac    624
Ala Gly Leu Ala Ala Lys Ser Gly Asp Arg Phe Ala Tyr Asp Ser Tyr
        195                 200                 205
cgc cgt ttc ctc gac atg ttc ggc aac gtg gtc atg gac att cct cat    672
Arg Arg Phe Leu Asp Met Phe Gly Asn Val Val Met Asp Ile Pro His
    210                 215                 220
gca ctg ttc gag gag aag ctc gaa gcc atg aaa gca gtc aag ggg ctg    720
Ala Leu Phe Glu Glu Lys Leu Glu Ala Met Lys Ala Val Lys Gly Leu
225                 230                 235                 240
cac aac gac act gac ctg act gcc act gac ctc aaa gaa cta gtg gca    768
His Asn Asp Thr Asp Leu Thr Ala Thr Asp Leu Lys Glu Leu Val Ala
                245                 250                 255
cag tac aag gat gtc tat gtt gaa gct aag gga gag cca ttc ccc tct    816
Gln Tyr Lys Asp Val Tyr Val Glu Ala Lys Gly Glu Pro Phe Pro Ser
            260                 265                 270
gat ccc aag aag caa ctg cag ctg gcc gtg ttg gcc gtg ttc aac tca    864
Asp Pro Lys Lys Gln Leu Gln Leu Ala Val Leu Ala Val Phe Asn Ser
        275                 280                 285
tgg gat agc cca aga gca atc aag tac aga agc ata aac aag atc act    912
Trp Asp Ser Pro Arg Ala Ile Lys Tyr Arg Ser Ile Asn Lys Ile Thr
    290                 295                 300
ggg ctg aag ggc act gct gta aac gtg cag acc atg gtg ttt gga aac    960
Gly Leu Lys Gly Thr Ala Val Asn Val Gln Thr Met Val Phe Gly Asn
305                 310                 315                 320
atg ggg aac acc tct ggc acg ggt gtg ctc ttc act agg aac cca agc    1008
Met Gly Asn Thr Ser Gly Thr Gly Val Leu Phe Thr Arg Asn Pro Ser
                325                 330                 335
act gga gag aag aag ctt tac ggc gaa ttc ctt gtg aat gct cag ggt    1056
Thr Gly Glu Lys Lys Leu Tyr Gly Glu Phe Leu Val Asn Ala Gln Gly
            340                 345                 350
gaa gat gtg gtt gct gga atc aga act cca gag gat ctt gat gct atg    1104
Glu Asp Val Val Ala Gly Ile Arg Thr Pro Glu Asp Leu Asp Ala Met
        355                 360                 365
agg gac cac atg ccg gag cct tat gaa gag ctc gtt gag aac tgc aaa    1152
Arg Asp His Met Pro Glu Pro Tyr Glu Glu Leu Val Glu Asn Cys Lys
    370                 375                 380
att ttg gag agt cac tat aaa gaa atg atg gat att gaa ttt act gtt    1200
Ile Leu Glu Ser His Tyr Lys Glu Met Met Asp Ile Glu Phe Thr Val
385                 390                 395                 400
cag gaa aat agg ctt tgg atg ctt cag tgc aga aca gga aag cgc aca    1248
Gln Glu Asn Arg Leu Trp Met Leu Gln Cys Arg Thr Gly Lys Arg Thr
                405                 410                 415
gga aaa ggt gct gta aag att gct cta gac atg gtt aac gag ggc ctt    1296
Gly Lys Gly Ala Val Lys Ile Ala Leu Asp Met Val Asn Glu Gly Leu
            420                 425                 430
gtt gag cgc cgc aca gca ctt aag atg gta gaa cca ggt cac ctg gat    1344
Val Glu Arg Arg Thr Ala Leu Lys Met Val Glu Pro Gly His Leu Asp
        435                 440                 445
cag ctt ctt cat cct cag ttt gag aac cca tca ggg tat aaa gac aaa    1392
Gln Leu Leu His Pro Gln Phe Glu Asn Pro Ser Gly Tyr Lys Asp Lys
    450                 455                 460
gtt att gcc acg ggc tta cct gca tca cct ggg gct gct gtg ggc caa    1440
Val Ile Ala Thr Gly Leu Pro Ala Ser Pro Gly Ala Ala Val Gly Gln
465                 470                 475                 480
att gta ttc act gcc gag gat gct gaa gca tgg cat gcc caa ggg aaa    1488
Ile Val Phe Thr Ala Glu Asp Ala Glu Ala Trp His Ala Gln Gly Lys
                485                 490                 495
gat gtt att ctg gtg agg aca gag acc agc cca gag gat gtt ggt ggc    1536
Asp Val Ile Leu Val Arg Thr Glu Thr Ser Pro Glu Asp Val Gly Gly
            500                 505                 510
atg cat gca gct gtt gga att ctt aca gca aga ggt ggt atg acc tct    1584
Met His Ala Ala Val Gly Ile Leu Thr Ala Arg Gly Gly Met Thr Ser
        515                 520                 525
cac gct gct gtt gtt gcg cgc gga tgg ggc aaa tgt tgt gtg tca gga    1632
His Ala Ala Val Val Ala Arg Gly Trp Gly Lys Cys Cys Val Ser Gly
    530                 535                 540
tgc tca agc gtc cgt gta aat gat gcg tcc aag att gta gtg att gaa    1680
Cys Ser Ser Val Arg Val Asn Asp Ala Ser Lys Ile Val Val Ile Glu
545                 550                 555                 560
gac aag gcg ctg cat gaa ggt gag tgg cta tcg ttg aat gga tca act    1728
Asp Lys Ala Leu His Glu Gly Glu Trp Leu Ser Leu Asn Gly Ser Thr
                565                 570                 575
ggt gaa gtg atc att ggc aag cag cca ctc tgc cca cca gcc ctt agt    1776
Gly Glu Val Ile Ile Gly Lys Gln Pro Leu Cys Pro Pro Ala Leu Ser
            580                 585                 590
ggt gat ttg gaa act ttc atg tct tgg gtg gat gaa gtt agg aaa ctc    1824
Gly Asp Leu Glu Thr Phe Met Ser Trp Val Asp Glu Val Arg Lys Leu
        595                 600                 605
aag gtt atg gca aat gct gat acc ccc gag gat gca aca aca gcc aga    1872
Lys Val Met Ala Asn Ala Asp Thr Pro Glu Asp Ala Thr Thr Ala Arg
    610                 615                 620
cag aat ggg gca gaa gga att ggg cta tgc cgg act gaa cat atg ttc    1920
Gln Asn Gly Ala Glu Gly Ile Gly Leu Cys Arg Thr Glu His Met Phe
625                 630                 635                 640
ttc gct tca gac gag agg att aag gct gtc agg cag atg att atg gct    1968
Phe Ala Ser Asp Glu Arg Ile Lys Ala Val Arg Gln Met Ile Met Ala
                645                 650                 655
tca agt ctt gaa ctg agg cag aaa gca  cta gat cgc ctt ttg cct tat   2016
Ser Ser Leu Glu Leu Arg Gln Lys Ala Leu Asp Arg Leu Leu Pro  Tyr
            660                 665                 670
cag agg tct gac ttt gaa ggc atc ttc cgt gca atg gat ggg ctt ccg    2064
Gln Arg Ser Asp Phe Glu Gly Ile Phe Arg Ala Met Asp Gly Leu Pro
        675                 680                 685
gta act att aga ctc ttg gat cct cca ctt cat gag ttc ctt cca gaa    2112
Val Thr Ile Arg Leu Leu Asp Pro Pro Leu His Glu Phe Leu Pro  Glu
    690                 695                 700
ggc cat gtt gag gat atg gtg cgt gag cta tgc tct gaa act gga gca    2160
Gly His Val Glu Asp Met Val Arg Glu Leu Cys Ser Glu Thr Gly Ala
705                 710                 715                 720
gct cag gat gat gtc ctt gca aga gta gaa aaa ctt tcc gaa gta aat    2208
Ala Gln Asp Asp Val Leu Ala Arg Val Glu Lys Leu Ser Glu Val Asn
                725                 730                 735
cca atg ctt ggt ttc cgt ggg tgc agg ctt ggt ata tca tac cct gaa    2256
Pro Met Leu Gly Phe Arg Gly Cys Arg Leu Gly Ile Ser Tyr Pro Glu
            740                 745                 750
ttg act gaa atg caa gcc cgt gcc atc ttt gaa gct gct ata acc atg    2304
Leu Thr Glu Met Gln Ala Arg Ala Ile Phe Glu Ala Ala Ile Thr Met
        755                 760                 765
acc aac cag ggt att caa gtc ttt ccg gag ata atg gtt ccc ctt gtt    2352
Thr Asn Gln Gly Ile Gln Val Phe Pro Glu Ile Met Val Pro Leu Val
    770                 775                 780
gga act cct cag gaa ttg ggg cat caa gtg gat gtt atc cgt caa att    2400
Gly Thr Pro Gln Glu Leu Gly His Gln Val Asp Val Ile Arg Gln Ile
785                 790                 795                 800
gcc aac aag gtg ttc aca gac atg gga aaa act att ggc tac aaa gtt    2448
Ala Asn Lys Val Phe Thr Asp Met Gly Lys Thr Ile Gly Tyr Lys Val
                805                 810                 815
gga act atg att gaa att ccc agg gca gct tta gtg gct gat gag ata    2496
Gly Thr Met Ile Glu Ile Pro Arg Ala Ala Leu Val Ala Asp Glu Ile
            820                 825                 830
gca gag cag gct gag ttc ttc tcc ttt gga aca aac gac cta aca cag    2544
Ala Glu Gln Ala Glu Phe Phe Ser Phe Gly Thr Asn Asp Leu Thr Gln
        835                 840                 845
atg aca ttt ggt tac agt agg gat gat gtg ggg aag ttc ctt ccc atc    2592
Met Thr Phe Gly Tyr Ser Arg Asp Asp Val Gly Lys Phe Leu Pro Ile
    850                 855                 860
tat ctg tct cag ggt atc ctc cag cat gac ccc ttt gag gtg ctt gat    2640
Tyr Leu Ser Gln Gly Ile Leu Gln His Asp Pro Phe Glu Val Leu Asp
865                 870                 875                 880
cag agg gga gtt ggg gag ctg gtt aag ctg gct aca gag aga ggc cgc    2688
Gln Arg Gly Val Gly Glu Leu Val Lys Leu Ala Thr Glu Arg Gly Arg
                885                 890                 895
aaa gct agg cct aac ttg aag gtg ggc atc tgt ggt gaa cat ggt gga    2736
Lys Ala Arg Pro Asn Leu Lys Val Gly Ile Cys Gly Glu His Gly Gly
            900                 905                 910
gag cct ctg tca gtc gct ttc ttt gcg aag gct ggg ctg gac tat gtt    2784
Glu Pro Leu Ser Val Ala Phe Phe Ala Lys Ala Gly Leu Asp Tyr Val
        915                 920                 925
tct tgt tcg cct ttc agg gtc cca att gct agg cta gct gca gct cag    2832
Ser Cys Ser Pro Phe Arg Val Pro Ile Ala Arg Leu Ala Ala Ala Gln
    930                 935                 940
gtg ctc ctc tga                                                    2844
Val Leu Leu
 945
<210>60
<211>947
<212>PRT
<213>Oryza sativa
<400>60
Met Pro Ser Val Ser Arg Ala Val Cys Val Gln Arg Ala Ser Gly Asn
1               5                   10                  15
Asn Gly Arg Arg Cys Arg Asp Gly Ala Ala Ala Ala Gly Arg Arg Ser
            20                  25                  30
Val Val Ala Gln Arg Ala Arg His Gly Lys Pro Glu Val Ala Ile Arg
        35                  40                  45
Ser Gly Ser Gly Gly Ser Ala Arg Gly Gly His Cys Ser Pro Leu Arg
    50                  55                  60
Ala Val Ala Ala Pro Ile Pro Thr Thr Lys Lys Arg Val Phe His Phe
65                  70                  75                  80
Gly Lys Gly Lys Ser Glu Gly Asn Lys Ala Met Lys Asp Leu Leu Gly
                85                  90                  95
Gly Lys Gly Ala Asn Leu Ala Glu Met Ala Ser Ile Gly Leu Ser Val
            100                 105                 110
Pro Pro Gly Phe Thr Val Ser Thr Glu Ala Cys Gln Gln Tyr Gln Ala
        115                 120                 125
Ala Gly Lys Thr Leu Pro Ala Gly Leu Trp Glu Glu Ile Val Glu Gly
    130                 135                 140
Leu Gln Trp Val Glu Glu Tyr Met Ala Ala Arg Leu Gly Asp Pro Ala
145                 150                 155                 160
Arg Pro Leu Leu Leu Ser Val Arg Ser Gly Ala Ala Val Ser Met Pro
                165                 170                 175
Gly Met Met Asp Thr Val Leu Asn Leu Gly Leu Asn Asp Glu Val Ala
            180                 185                 190
Ala Gly Leu Ala Ala Lys Ser Gly Asp Arg Phe Ala Tyr Asp Ser Tyr
        195                 200                 205
Arg Arg Phe Leu Asp Met Phe Gly Asn Val Val Met Asp Ile Pro His
    210                 215                 220
Ala Leu Phe Glu Glu Lys Leu Glu Ala Met Lys Ala Val Lys Gly Leu
225                 230                 235                 240
His Asn Asp Thr Asp Leu Thr Ala Thr Asp Leu Lys Glu Leu Val Ala
                245                 250                 255
Gln Tyr Lys Asp Val Tyr Val Glu Ala Lys Gly Glu Pro Phe Pro Ser
            260                 265                 270
Asp Pro Lys Lys Gln Leu Gln Leu Ala Val Leu Ala Val Phe Asn Ser
        275                 280                 285
Trp Asp Ser Pro Arg Ala Ile Lys Tyr Arg Ser Ile Asn Lys Ile Thr
    290                 295                 300
Gly Leu Lys Gly Thr Ala Val Asn Val Gln Thr Met Val Phe Gly Asn
305                 310                 315                 320
Met Gly Asn Thr Ser Gly Thr Gly Val Leu Phe Thr Arg Asn Pro Ser
                325                 330                 335
Thr Gly Glu Lys Lys Leu Tyr Gly Glu Phe Leu Val Asn Ala Gln Gly
            340                 345                 350
Glu Asp Val Val Ala Gly Ile Arg Thr Pro Glu Asp Leu Asp Ala Met
        355                 360                 365
Arg Asp His Met Pro Glu Pro Tyr Glu Glu Leu Val Glu Asn Cys Lys
    370                 375                 380
Ile Leu Glu Ser His Tyr Lys Glu Met Met Asp Ile Glu Phe Thr Val
385                 390                 395                 400
Gln Glu Asn Arg Leu Trp Met Leu Gln Cys Arg Thr Gly Lys Arg Thr
                405                 410                 415
Gly Lys Gly Ala Val Lys Ile Ala Leu Asp Met Val Asn Glu Gly Leu
            420                 425                 430
Val Glu Arg Arg Thr Ala Leu Lys Met Val Glu Pro Gly His Leu Asp
        435                 440                 445
Gln Leu Leu His Pro Gln Phe Glu Asn Pro Ser Gly Tyr Lys Asp Lys
    450                 455                 460
Val Ile Ala Thr Gly Leu Pro Ala Ser Pro Gly Ala Ala Val Gly Gln
465                 470                 475                 480
Ile Val Phe Thr Ala Glu Asp Ala Glu Ala Trp His Ala Gln Gly Lys
                485                 490                 495
Asp Val Ile Leu Val Arg Thr Glu Thr Ser Pro Glu Asp Val Gly Gly
            500                 505                 510
Met His Ala Ala Val Gly Ile Leu Thr Ala Arg Gly Gly Met Thr Ser
        515                 520                 525
His Ala Ala Val Val Ala Arg Gly Trp Gly Lys Cys Cys Val Ser Gly
    530                 535                 540
Cys Ser Ser Val Arg Val Asn Asp Ala Ser Lys Ile Val Val Ile Glu
545                 550                 555                 560
Asp Lys Ala Leu His Glu Gly Glu Trp Leu Ser Leu Asn Gly Ser Thr
                565                 570                 575
Gly Glu Val Ile Ile Gly Lys Gln Pro Leu Cys Pro Pro Ala Leu Ser
            580                 585                 590
Gly Asp Leu Glu Thr Phe Met Ser Trp Val Asp Glu Val Arg Lys Leu
        595                 600                 605
Lys Val Met Ala Asn Ala Asp Thr Pro Glu Asp Ala Thr Thr Ala Arg
    610                 615                 620
Gln Asn Gly Ala Glu Gly Ile Gly Leu Cys Arg Thr Glu His Met Phe
625                 630                 635                 640
Phe Ala Ser Asp Glu Arg Ile Lys Ala Val Arg Gln Met Ile Met Ala
                645                 650                 655
Ser Ser Leu Glu Leu Arg Gln Lys Ala Leu Asp Arg Leu Leu Pro Tyr
            660                 665                 670
Gln Arg Ser Asp Phe Glu Gly Ile Phe Arg Ala Met Asp Gly Leu Pro
        675                 680                 685
Val Thr Ile Arg Leu Leu Asp Pro Pro Leu His Glu Phe Leu Pro Glu
    690                 695                 700
Gly His Val Glu Asp Met Val Arg Glu Leu Cys Ser Glu Thr Gly Ala
705                 710                 715                 720
Ala Gln Asp Asp Val Leu Ala Arg Val Glu Lys Leu Ser Glu Val Asn
                725                 730                 735
Pro Met Leu Gly Phe Arg Gly Cys Arg Leu Gly Ile Ser Tyr Pro Glu
            740                 745                 750
Leu Thr Glu Met Gln Ala Arg Ala Ile Phe Glu Ala Ala Ile Thr Met
        755                 760                 765
Thr Asn Gln Gly Ile Gln Val Phe Pro Glu Ile Met Val Pro Leu Val
    770                 775                 780
Gly Thr Pro Gln Glu Leu Gly His Gln Val Asp Val Ile Arg Gln Ile
785                 790                 795                 800
Ala Asn Lys Val Phe Thr Asp Met Gly Lys Thr Ile Gly Tyr Lys Val
                805                 810                 815
Gly Thr Met Ile Glu Ile Pro Arg Ala Ala Leu Val Ala Asp Glu Ile
            820                 825                 830
Ala Glu Gln Ala Glu Phe Phe Ser Phe Gly Thr Asn Asp Leu Thr Gln
        835                 840                 845
Met Thr Phe Gly Tyr Ser Arg Asp Asp Val Gly Lys Phe Leu Pro Ile
    850                 855                 860
Tyr Leu Ser Gln Gly Ile Leu Gln His Asp Pro Phe Glu Val Leu Asp
865                 870                 875                 880
Gln Arg Gly Val Gly Glu Leu Val Lys Leu Ala Thr Glu Arg Gly Arg
                885                 890                 895
Lys Ala Arg Pro Asn Leu Lys Val Gly Ile Cys Gly Glu His Gly Gly
            900                 905                 910
Glu Pro Leu Ser Val Ala Phe Phe Ala Lys Ala Gly Leu Asp Tyr Val
        915                 920                 925
Ser Cys Ser Pro Phe Arg Val Pro Ile Ala Arg Leu Ala Ala Ala Gln
    930                 935                 940
Val Leu Leu
945
<210>61
<211>1339
<212>DNA
<213>Oryza sativa
<220>
<221>CDS
<222>(1)..(1338)
<400>61
ggc gaa gaa gat gag cac ccc cat gaa ggc cgt gcc ggc gtc gag cgc    48
Gly Glu Glu Asp Glu His Pro His Glu Gly Arg Ala Gly Val Glu Arg
1               5                   10                  15
cgc cga cag cac gta gtt gta ctt ctg cca cca ccc ctt gcg gta ctt    96
Arg Arg Gln His Val Val Val Leu Leu Pro Pro Pro Leu Ala Val Leu
            20                  25                  30
gaa cac gaa gta gtt gaa gat ggt gcc cgt gac gag cca gct cgc gat    144
Glu His Glu Val Val Glu Asp Gly Ala Arg Asp Glu ProAla Arg Asp
        35                  40                  45
gtt ggt cgg cgt cgc cgg cgg cat ccc ggc gaa ccc gta gga gat gac    192
Val Gly Arg Arg Arg Arg Arg His Pro Gly Glu Pro Val Gly Asp Asp
    50                  55                  60
ggg gac gtt gat gag cgc gat cca ctt ctt ctc cgg gaa cgc cct gct    240
Gly Asp Val Asp Glu Arg Asp Pro Leu Leu Leu Arg Glu Arg Pro Ala
65                  70                  75                  80
gag cag cca cac cgg cac ggg cag cac ggc gcc ggc gag gaa cag cca    288
Glu Gln Pro His Arg His Gly Gln His Gly Ala Gly Glu Glu Gln Pro
                85                  90                  95
cac cag gtt gcg gta cag gcc gtg gcg gcc gaa cag ccg ggc ggg gcc    336
His Gln Val Ala Val Gln Ala Val Ala Ala Glu Gln Pro Gly Gly Ala
            100                 105                 110
gat gag ccc cca gat cac cga cgc gtc gaa cgt gac ccg gta ctt ggg    384
Asp Glu Pro Pro Asp His Arg Arg Val Glu Arg Asp Pro Val Leu Gly
        115                 120                 125
gca cgt cca cgg gct gtc cgg gtg cag cgc ctc cac gtc gca gat gtt    432
Ala Arg Pro Arg Ala Val Arg Val Gln Arg Leu His Val Ala Asp Val
    130                 135                 140
gtc gat gct gcc cag cat cca cca cgc cac cgc cag gtt cac cac gcc    480
Val Asp Ala Ala Gln His Pro Pro Arg His Arg Gln Val His His Ala
145                 150                 155                 160
ggc gac cac cgt gcc cac cag ctg cgc cgt gta cat gca ccg cgg cgg    528
Gly Asp His Arg Ala His Gln Leu Arg Arg Val His Ala Pro Arg Arg
                165                 170                 175
gat ctt cat gta gtg ccc cag ctt gag gtc cgc gag gaa cga cag cgc    576
Asp Leu His Val Val Pro Gln Leu Glu Val Arg Glu Glu Arg Gln Arg
            180                 185                 190
gtg cac cgt gct gat cct ccc gta gat ctt gaa cag cag gtt cgc gat    624
Val His Arg Ala Asp Pro Pro Val Asp Leu Glu Gln Gln Val Arg Asp
        195                 200                 205
cgg ctt ccc cgg cag cgc gta ccc gat cat gaa ctg cgc gat gat gtc    672
Arg Leu Pro Arg Gln Arg Val Pro Asp His Glu Leu Arg Asp Asp Val
    210                 215                 220
gta ccc cgg ttg ctg gtt ggt ggt ggc ctg gat gac gcc gat ggg gag    720
Val Pro Arg Leu Leu Val Gly Gly Gly Leu Asp Asp Ala Asp Gly Glu
225                 230                 235                 240
ggt gac gac gaa ggc gag ggc gaa ggc gaa gag cat ccc cca cca cgg    768
Gly Asp Asp Glu Gly Glu Gly Glu Gly Glu Glu His Pro Pro Pro Arg
                245                 250                 255
cag ctg cac ctc ctc cct gta cac gaa cga cat gac cag cga cac ggc    816
Gln Leu His Leu Leu Pro Val His Glu Arg His Asp Gln Arg His Gly
            260                 265                 270
gac gct gcc gac gag cag cac gag gaa cca cca ctg cgg cac ctg ctt    864
Asp Ala Ala Asp Glu Gln His Glu Glu Pro Pro Leu Arg His Leu Leu
        275                 280                 285
gta ccg ccg cat cag ctt cgc gtg cac gtc cat ctt cgc cgc cgc gga    912
Val Pro Pro His Gln Leu Arg Val His Val His Leu Arg Arg Arg Gly
    290                 295                 300
gct cat cgc cga cct gct ctg cct cca gat gtc ccc gcc gtg gaa cag    960
Ala His Arg Arg Pro Ala Leu Pro Pro Asp Val Pro Ala Val Glu Gln
305                 310                 315                 320
cgc cac gtg cac gat cgt cgc cgt gaa cct cag gaa ccc gga ccc gat    1008
Arg His Val His Asp Arg Arg Arg Glu Pro Gln Glu Pro Gly Pro Asp
                325                 330                 335
gga gat ggc gaa cag cgg gct cag gta cag ctt ccc gta gct ctc gta    1056
Gly Asp Gly Glu Gln Arg Ala Gln Val Gln Leu Pro Val Ala Leu Val
            340                 345                 350
cgc cgc cac gtt gag gtc gaa ctc cct cgt gag cac ctt ggt ggt gtc    1104
Arg Arg His Val Glu Val Glu Leu Pro Arg Glu His Leu Gly Gly Val
        355                 360                 365
gta ctt ctg ccc gga cgc cgt gaa cag ctg gtt gga gaa gat tgg gaa    1152
Val Leu Leu Pro Gly Arg Arg Glu Gln Leu Val Gly Glu Asp Trp Glu
    370                 375                 380
ctt cct cgc gtc gaa cgt gtc gaa ctt cca gta gca gag cgg cac gat    1200
Leu Pro Arg Val Glu Arg Val Glu Leu Pro Val Ala Glu Arg His Asp
385                 390                 395                 400
gag gta gat gaa cat gac gaa gcc cgc ggc ggt gtt ggc gat gga cga    1248
Glu Val Asp Glu His Asp Glu Ala Arg Gly Gly Val Gly Asp Gly Arg
                405                 410                 415
cca cgg cgc cac cag cgg gct ccc gtg gta cgc cga gat gcc ggc cca    1296
Pro Arg Arg His Gln Arg Ala Pro Val Val Arg Arg Asp Ala Gly Pro
            420                 425                 430
gtc cag tgt gaa ggc gcc gac gcc gag gcc gtg gta gcc gga g          1339
Val Gln Cys Glu Gly Ala Asp Ala Glu Ala Val Val Ala Gly
        435                 440                 445
<210>62
<211>446
<212>PRT
<213>Oryza sativa
<400>62
Gly Glu Glu Asp Glu His Pro His Glu Gly Arg Ala Gly Val Glu Arg
1               5                   10                  15
Arg Arg Gln His Val Val Val Leu Leu Pro Pro Pro Leu Ala Val Leu
            20                  25                  30
Glu His Glu Val Val Glu Asp Gly Ala Arg Asp Glu Pro Ala Arg Asp
        35                  40                  45
Val Gly Arg Arg Arg Arg Arg His Pro Gly Glu Pro Val Gly Asp Asp
    50                  55                  60
Gly Asp Val Asp Glu Arg Asp Pro Leu Leu Leu Arg Glu Arg Pro Ala
65                  70                  75                  80
Glu Gln Pro His Arg His Gly Gln His Gly Ala Gly Glu Glu Gln Pro
                85                  90                  95
His Gln Val Ala Val Gln Ala Val Ala Ala Glu Gln Pro Gly Gly Ala
            100                 105                 110
Asp Glu Pro Pro Asp His Arg Arg Val Glu Arg Asp Pro Val Leu Gly
        115                 120                 125
Ala Arg Pro Arg Ala Val Arg Val Gln Arg Leu His Val Ala Asp Val
    130                 135                 140
Val Asp Ala Ala Gln His Pro Pro Arg His Arg Gln Val His His Ala
145                 150                 155                 160
Gly Asp His Arg Ala His Gln Leu Arg Arg Val His Ala Pro Arg Arg
                165                 170                 175
Asp Leu His Val Val Pro Gln Leu Glu Val Arg Glu Glu Arg Gln Arg
            180                 185                 190
Val His Arg Ala Asp Pro Pro Val Asp Leu Glu Gln Gln Val Arg Asp
        195                 200                 205
Arg Leu Pro Arg Gln Arg Val Pro Asp His Glu Leu Arg Asp Asp Val
    210                 215                 220
Val Pro Arg Leu Leu Val Gly Gly Gly Leu Asp Asp Ala Asp Gly Glu
225                 230                 235                 240
Gly Asp Asp Glu Gly Glu Gly Glu Gly Glu Glu His Pro Pro Pro Arg
                245                 250                 255
Gln Leu His Leu Leu Pro Val His Glu Arg His Asp Gln Arg His Gly
            260                 265                 270
Asp Ala Ala Asp Glu Gln His Glu Glu Pro Pro Leu Arg His Leu Leu
        275                 280                 285
Val Pro Pro His Gln Leu Arg Val His Val His Leu Arg Arg Arg Gly
    290                 295                 300
Ala His Arg Arg Pro Ala Leu Pro Pro Asp Val Pro Ala Val Glu Gln
305                 310                 315                 320
Arg His Val His Asp Arg Arg Arg Glu Pro Gln Glu Pro Gly Pro Asp
                325                 330                 335
Gly Asp Gly Glu Gln Arg Ala Gln Val Gln Leu Pro Val Ala Leu Val
            340                 345                 350
Arg Arg His Val Glu Val Glu Leu Pro Arg Glu His Leu Gly Gly Val
        355                 360                 365
Val Leu Leu Pro Gly Arg Arg Glu Gln Leu Val Gly Glu Asp Trp Glu
    370                 375                 380
Leu Pro Arg Val Glu Arg Val Glu Leu Pro Val Ala Glu Arg His Asp
385                 390                 395                 400
Glu Val Asp Glu His Asp Glu Ala Arg Gly Gly Val Gly Asp Gly Arg
                405                 410                 415
Pro Arg Arg His Gln Arg Ala Pro Val Val Arg Arg Asp Ala Gly Pro
            420                 425                 430
Val Gln Cys Glu Gly Ala Asp Ala Glu Ala Val Val Ala Gly
        435                 440                 445
<210>63
<211>4131
<212>DNA
<213>Oryza sativa
<220>
<221>CDS
<222>(1)..(4131)
<400>63
atg ggg tcg ctc acc agg gcg gag gag gag gag acg gcg gcg gcc gag    48
Met Gly Ser Leu Thr Arg Ala Glu Glu Glu Glu Thr Ala Ala Ala  Glu
1                5                  10                  15
gag tgg tcg ggc gag gcg gtc gtc tac gtc aac ggc gtc cgc cgc gtg    96
Glu Trp Ser Gly Glu Ala Val Val Tyr Val Asn Gly Val Arg Arg Val
            20                  25                  30
ctc ccc gac ggc ctc gct cac ctc acc ctg ctc caa tac ctc aga gac    144
Leu Pro Asp Gly Leu Ala His Leu Thr Leu Leu Gln Tyr Leu Arg Asp
        35                  40                  45
att ggt ctt cct gga aca aag ctt gga tgt ggt gaa ggt ggc tgt gga    192
Ile Gly Leu Pro Gly Thr Lys Leu Gly Cys Gly Glu Gly Gly Cys Gly
    50                  55                  60
gcc tgc act gtg atg gtc tca tgc tat gat caa act aca aag aag aca    240
Ala Cys Thr Val Met Val Ser Cys Tyr Asp Gln Thr Thr Lys Lys Thr
65                  70                  75                  80
cag cat ttt gca atc aac gca tgc ttg gct ccg ctt tat tct gtg gaa    288
Gln His Phe Ala Ile Asn Ala Cys Leu Ala Pro Leu Tyr Ser Val Glu
                85                  90                  95
gga atg cac ata atc aca gta gag gga att ggg aat cgt cag cga ggt    336
Gly Met His Ile Ile Thr Val Glu Gly Ile Gly Asn Arg Gln Arg Gly
            100                 105                 110
ttg cac cca atc cag gaa cgt tta gcc atg gcc cac ggt tca caa tgt    384
Leu His Pro Ile Gln Glu Arg Leu Ala Met Ala His Gly Ser Gln Cys
        115                 120                 125
gga ttt tgc acc cct ggt ttt gtg atg tcg atg tat gca ttg ctg aga    432
Gly Phe Cys Thr Pro Gly Phe Val Met Ser Met Tyr Ala Leu Leu Arg
    130                 135                 140
tca agt gaa cag cct cct act gaa gag cag att gaa gat agc ctt gca    480
Ser Ser Glu Gln Pro Pro Thr Glu Glu Gln Ile Glu Asp Ser Leu Ala
145                 150                 155                 160
gga aat tta tgt cgc tgt act ggc tac aga cca ata ata gac gcc ttc    528
Gly Asn Leu Cys Arg Cys Thr Gly Tyr Arg Pro Ile Ile Asp Ala Phe
                165                 170                 175
cgt gtt ttc tcg aaa aga gat gat ctt ttg tac aac aat tca tct ctg    576
Arg Val Phe Ser Lys Arg Asp Asp Leu Leu Tyr Asn Asn Ser Ser Leu
            180                 185                 190
aaa aat gca gat ggc cga cct atc tgc cct tca aca gga aaa cca tgt    624
Lys Asn Ala Asp Gly Arg Pro Ile Cys Pro Ser Thr Gly Lys Pro Cys
        195                 200                 205
tcc tgc gga gat cag aaa gac atc aat ggt agt gaa tct tca tta ttg    672
Ser Cys Gly Asp Gln Lys Asp Ile Asn Gly Ser Glu Ser Ser Leu Leu
    210                 215                 220
aca cct acg aaa agc tac tca cct tgt tca tac aat gag att gat gga    720
Thr Pro Thr Lys Ser Tyr Ser Pro Cys Ser Tyr Asn Glu Ile Asp Gly
225                 230                 235                 240
aat gcg tac agt gag aaa gaa ctc att ttc ccc cca gaa ctt cag ttg    768
Asn Ala Tyr Ser Glu Lys Glu Leu Ile Phe Pro Pro Glu Leu Gln Leu
                245                 250                 255
aga aaa gtt acg tca ctt aaa ttg aat ggg ttt aat ggg att cgg tgg    816
Arg Lys Val Thr Ser Leu Lys Leu Asn Gly Phe Asn Gly Ile Arg Trp
            260                 265                 270
tat aga cct ctt aaa cta aag caa gta ttg cat ttg aaa gca tgc tac    864
Tyr Arg Pro Leu Lys Leu Lys Gln Val Leu His Leu Lys Ala Cys Tyr
        275                 280                 285
cca aat gca aaa cta atc att ggt aac tct gaa gta gga gtt gaa aca    912
Pro Asn Ala Lys Leu Ile Ile Gly Asn Ser Glu Val Gly Val Glu Thr
    290                 295                 300
aag ttc aag aat gcc cag tat aag gtc ttg atc tca gtt act cat gtt    960
Lys Phe Lys Asn Ala Gln Tyr Lys Val Leu Ile Ser Val Thr His Val
305                 310                 315                 320
cca gag ctt cat acc ctt aaa gtg aaa gag gat ggt ata cat att ggt    1008
Pro Glu Leu His Thr Leu Lys Val Lys Glu Asp Gly Ile His Ile Gly
                325                 330                 335
tct tct gta aga ctt gca cag ctc caa aat ttc ctc aga aag gtt att    1056
Ser Ser Val Arg Leu Ala Gln Leu Gln Asn Phe Leu Arg Lys Val Ile
            340                 345                 350
tta gag cgt gat tca cat gaa att tca tcc tgt gag gca ata ctg cgg    1104
Leu Glu Arg Asp Ser His Glu Ile Ser Ser Cys Glu Ala Ile Leu Arg
        355                 360                 365
caa tta aaa tgg ttt gct ggg aca caa atc agg aat gtt gct tct gtt    1152
Gln Leu Lys Trp Phe Ala Gly Thr Gln Ile Arg Asn Val Ala Ser Val
    370                 375                 380
gga ggt aac att tgt act gct agt cca ata tca gat cta aat cca ctt    1200
Gly Gly Asn Ile Cys Thr Ala Ser Pro Ile Ser Asp Leu Asn Pro Leu
385                 390                 395                 400
tgg atg gct aca ggt gca acg ttt gag ata att gat gtg aac aat aat    1248
Trp Met Ala Thr Gly Ala Thr Phe Glu Ile Ile Asp Val Asn Asn Asn
                405                 410                 415
att agg acc att cct gca aaa gat ttt ttt ctg ggt tat cgt aaa gtt    1296
Ile Arg Thr Ile Pro Ala Lys Asp Phe Phe Leu Gly Tyr Arg Lys Val
            420                 425                 430
gac tta aaa cct gat gag ata ttg ctc tct gtt ata ctg cca tgg aca    1344
Asp Leu Lys Pro Asp Glu Ile Leu Leu Ser Val Ile Leu Pro Trp Thr
        435                 440                 445
agg cca ttt gaa ttt gtc aaa gaa ttc aag cag gca cat aga agg gag    1392
Arg Pro Phe Glu Phe Val Lys Glu Phe Lys Gln Ala His Arg Arg Glu
    450                 455                 460
gat gac att gcg ttg gtg aat gct gga atg cgt gtc tat ata aga aaa    1440
Asp Asp Ile Ala Leu Val Asn Ala Gly Met Arg Val Tyr Ile Arg Lys
465                 470                 475                 480
gtt gaa ggt gat tgg ata att tcg gat gtt tca att atc tat gga ggg    1488
Val Glu Gly Asp Trp Ile Ile Ser Asp Val Ser Ile Ile Tyr Gly Gly
                485                 490                 495
gta gct gca gtt tca cac cgt gct tca aaa act gaa acc ttt ctc act    1536
Val Ala Ala Val Ser His Arg Ala Ser Lys Thr Glu Thr Phe Leu Thr
            500                 505                 510
gga aaa aaa tgg gac tat gga ttg ttg gat aag act ttt gat ctg ttg    1584
Gly Lys Lys Trp Asp Tyr Gly Leu Leu Asp Lys Thr Phe Asp Leu Leu
        515                 520                 525
aaa gaa gac gta gtt ctg gct gaa aat gca cct ggt gga atg gtt gaa    1632
Lys Glu Asp Val Val Leu Ala Glu Asn Ala Pro Gly Gly Met Val Glu
    530                 535                 540
ttt cgc agt tca ctt act ttg agt ttc ttt ttc aaa ttt ttc ctt cat    1680
Phe Arg Ser Ser Leu Thr Leu Ser Phe Phe Phe Lys Phe Phe Leu His
545                 550                 555                 560
gtt act cat gaa atg aat ata aaa gga ttt tgg aag gat gga tta cat    1728
Val Thr His Glu Met Asn Ile Lys Gly Phe Trp Lys Asp Gly Leu His
                565                 570                 575
gca acc aat ctt tca gcc ata cag tct ttc act aga cct gtc ggt gtt    1776
Ala Thr Asn Leu Ser Ala Ile Gln Ser Phe Thr Arg Pro Val Gly Val
            580                 585                 590
gga act caa tgt tat gaa ttg gtt aga caa gga act gca gtt ggc caa    1824
Gly Thr Gln Cys Tyr Glu Leu Val Arg Gln Gly Thr Ala Val Gly Gln
        595                 600                 605
cct gtg gtt cac aca tca gct atg ctt cag gtt act ggt gaa gcg gaa    1872
Pro Val Val His Thr Ser Ala Met Leu Gln Val Thr Gly Glu Ala Glu
    610                 615                 620
tat act gat gac aca ccg aca ccc ccc aat acc ttg cat gct gct ctg    1920
Tyr Thr Asp Asp Thr Pro Thr Pro Pro Asn Thr Leu His Ala Ala Leu
625                 630                 635                 640
gtg ctg agt acg aaa gct cac gca cgc ata tta tct att gat gct tca    1968
Val Leu Ser Thr Lys Ala His Ala Arg Ile Leu Ser Ile Asp Ala Ser
                645                 650                 655
ctt gcc aaa tct tcc cct ggg ttt gcg ggt ctc ttc ctt tca aaa gac    2016
Leu Ala Lys Ser Ser Pro Gly Phe Ala Gly Leu Phe Leu Ser Lys Asp
            660                 665                 670
gtg cct ggc gct aac cat act ggg cct gtt atc cat gac gag gag gtt    2064
Val Pro Gly Ala Asn His Thr Gly Pro Val Ile His Asp Glu Glu Val
        675                 680                 685
ttt gca tct gat gtt gtt aca tgt gtt ggc cag att gtt gga ctt gtt    2112
Phe Ala Ser Asp Val Val Thr Cys Val Gly Gln Ile Val Gly Leu Val
    690                 695                 700
gtg gca gat acc cgt gat aat gca aaa gct gct gca aat aaa gtc aat    2160
Val Ala Asp Thr Arg Asp Asn Ala Lys Ala Ala Ala Asn Lys Val Asn
705                 710                 715                 720
att gag tat tct gaa ctt cca gca att tta tcc ata gag gaa gct gtg    2208
Ile Glu Tyr Ser Glu Leu Pro Ala Ile Leu Ser Ile Glu Glu Ala Val
                725                 730                 735
aaa gct ggt agc ttt cat cca aat agc aag aga tgc cta gta aaa ggt    2256
Lys Ala Gly Ser Phe His Pro Asn Ser Lys Arg Cys Leu Val Lys Gly
            740                 745                 750
aat gtt gaa caa tgt ttt ctg tcg ggt gca tgc gat aga att ata gaa    2304
Asn Val Glu Gln Cys Phe Leu Ser Gly Ala Cys Asp Arg Ile Ile Glu
        755                 760                 765
gga aaa gta caa gtt gga ggt caa gag cac ttc tac atg gag cct cag    2352
Gly Lys Val Gln Val Gly Gly Gln Glu His Phe Tyr Met Glu Pro Gln
    770                 775                 780
agc act ctt gta tgg cca gtt gat tct gga aat gaa att cat atg att    2400
Ser Thr Leu Val Trp Pro Val Asp Ser Gly Asn Glu Ile His Met Ile
785                 790                 795                 800
tca tct acc cag gct ccc cag aag cac caa aag tat gtt gct aat gtt    2448
Ser Ser Thr Gln Ala Pro Gln Lys His Gln Lys Tyr Val Ala Asn Val
                805                 810                 815
ctt ggt ctt cca caa tca aga gtt gtt tgc aag act aag cgt att ggt    2496
Leu Gly Leu Pro Gln Ser Arg Val Val Cys Lys Thr Lys Arg Ile Gly
            820                 825                 830
ggt gga ttt ggt gga aaa gaa acc aga tca gca ata ttt gct gca gca    2544
Gly Gly Phe Gly Gly Lys Glu Thr Arg Ser Ala Ile Phe Ala Ala Ala
        835                 840                 845
gca tct gta gct gct tat tgt tta agg cag cct gta aag ctt gtt ttg    2592
Ala Ser Val Ala Ala Tyr Cys Leu Arg Gln Pro Val Lys Leu Val Leu
    850                 855                 860
gac agg gat att gac atg atg aca act gga cag agg cac agt ttc cta    2640
Asp Arg Asp Ile Asp Met Met Thr Thr Gly Gln Arg His Ser Phe Leu
865                 870                 875                 880
ggg aag tac aag gtg gga ttt acc gat gat ggg aag ata ttg gcc tta    2688
Gly Lys Tyr Lys Val Gly Phe Thr Asp Asp Gly Lys Ile Leu Ala Leu
                885                 890                 895
gac ctt gat gtt tat aac aat ggt ggt cat tca cat gat ttg tcc ctt    2736
Asp Leu Asp Val Tyr Asn Asn Gly Gly His Ser His Asp Leu Ser Leu
            900                 905                 910
cca gtc ctg gag cgt gct atg ttt cat tca gac aat gtc tat gat ata    2784
Pro Val Leu Glu Arg Ala Met Phe His Ser Asp Asn Val Tyr Asp Ile
        915                 920                 925
cca aat gtc aga gtc aat ggg caa gta tgt ttc aca aat ttc cca agc    2832
Pro Asn Val Arg Val Asn Gly Gln Val Cys Phe Thr Asn Phe Pro Ser
    930                 935                 940
aat act gct ttc aga ggt ttt ggt ggt cca caa gct atg ctg att gca    2880
Asn Thr Ala Phe Arg Gly Phe Gly Gly Pro Gln Ala Met Leu Ile Ala
945                 950                 955                 960
gag aat tgg att cag cac atg gct aca gaa ctc aag cga agt cct gag    2928
Glu Asn Trp Ile Gln His Met Ala Thr Glu Leu Lys Arg Ser Pro Glu
                965                 970                 975
gag ata aaa gaa ctt aat ttt caa agt gag gga tct gtg ctt cat tat    2976
Glu Ile Lys Glu Leu Asn Phe Gln Ser Glu Gly Ser Val Leu His Tyr
            980                 985                 990
ggc cag ttg ctt caa aat tgt aca  ata cat tca gta tgg  gat gaa cta  3024
Gly Gln Leu Leu Gln Asn Cys Thr  Ile His Ser Val Trp  Asp Glu Leu
        995                 1000                 1005
aag gtt  tct tgt aat ttt atg  gaa gct cgc aaa gct  gta att gat     3069
Lys Val  Ser Cys Asn Phe Met  Glu Ala Arg Lys Ala  Val Ile Asp
    1010                 1015                 1020
ttt aac  aat aat aac cgt tgg  aga aag cgt ggc att  gct atg gtt     3114
Phe Asn  Asn Asn Asn Arg Trp  Arg Lys Arg Gly Ile  Ala Met Val
    1025                 1030                 1035
ccc acc  aag ttt ggg ata tcc  ttc act aca aaa ttc  atg aat cag     3159
Pro Thr  Lys Phe Gly Ile Ser  Phe Thr Thr Lys Phe  Met Asn Gln
    1040                 1045                 1050
gtt ctg  agg atg aac aat tgc  agg ctg tgc tta gtg  caa gtt tac     3204
Val Leu  Arg Met Asn Asn Cys  Arg Leu Cys Leu Val  Gln Val Tyr
    1055                 1060                 1065
act gat  gga act gtc ctt gta  acg cat ggt ggg gtt  gaa atg ggg     3249
Thr Asp  Gly Thr Val Leu Val  Thr His Gly Gly Val  Glu Met Gly
    1070                 1075                 1080
cag ggt  tta cac aca aag gta  gcc caa gtt gcg gct  tca tca ttc     3294
Gln Gly  Leu His Thr Lys Val  Ala Gln Val Ala Ala  Ser Ser Phe
    1085                 1090                 1095
aat atc  cct ctt agc tct ata  ttt atc tca gaa aca  agc act gat     3339
Asn Ile  Pro Leu Ser Ser Ile  Phe Ile Ser Glu Thr  Ser Thr Asp
    1100                 1105                 1110
aag gta  cca aat gca aca cca  aca gca gcc tct gct  agt tca gat     3384
Lys Val  Pro Asn Ala Thr Pro  Thr Ala Ala Ser Ala  Ser Ser Asp
    1115                 1120                 1125
tta tat  ggt gct gca gtt ttg  gat gct tgt cag caa  att atg gct     3429
Leu Tyr  Gly Ala Ala Val Leu  Asp Ala Cys Gln Gln  Ile Met Ala
    1130                 1135                 1140
cgg atg  gaa cct gtt gct tca  aga gga aac cac aag  tcc ttt gct     3474
Arg Met  Glu Pro Val Ala Ser  Arg Gly Asn His Lys  Ser Phe Ala
    1145                 1150                 1155
gag ttg  gtt cta gca tgc tac  ctg gaa agg ata gat  ctc tct gct     3519
Glu Leu  Val Leu Ala Cys Tyr  Leu Glu Arg Ile Asp  Leu Ser Ala
    1160                 1165                 1170
cat gga  ttt tat atc act cct  gat gtt ggg ttt gac  tgg gtg tct     3564
His Gly  Phe Tyr Ile Thr Pro  Asp Val Gly Phe Asp  Trp Val Ser
    1175                 1180                 1185
ggc aag  gga act cca ttc tac  tat ttc aca tac gga  gca gca ttt     3609
Gly Lys  Gly Thr Pro Phe Tyr  Tyr Phe Thr Tyr Gly  Ala Ala Phe
    1190                 1195                 1200
gca gaa  gtt gaa att gat acc  cta act ggg gat ttc  cac aca agg     3654
Ala Glu  Val Glu Ile Asp Thr  Leu Thr Gly Asp Phe  His Thr Arg
    1205                 1210                 1215
aca gta  gat att gtt atg gat  ctt ggc tgt tca att  aat ccg gct     3699
Thr Val  Asp Ile Val Met Asp  Leu Gly Cys Ser Ile  Asn Pro Ala
    1220                 1225                 1230
att gat  att ggc cag att gaa  gga ggt ttt atc caa  gga tta ggt     3744
Ile Asp  Ile Gly Gln Ile Glu  Gly Gly Phe Ile Gln  Gly Leu Gly
    1235                 1240                 1245
tgg gcg  gcc ctg gaa gaa cta  aaa tgg ggg gat gat  aac cac aag     3789
Trp Ala  Ala Leu Glu Glu Leu  Lys Trp Gly Asp Asp  Asn His Lys
    1250                 1255                 1260
tgg att  cga cct gga cat ctt  ttc act tgt ggg cct  ggc tct tac     3834
Trp Ile  Arg Pro Gly His Leu  Phe Thr Cys Gly Pro  Gly Ser Tyr
    1265                 1270                 1275
aaa ata  ccc tct gta aat gat  ata cct cta aac ttc  aag gtc tca     3879
Lys Ile  Pro Ser Val Asn Asp  Ile Pro Leu Asn Phe  Lys Val Ser
    1280                 1285                 1290
ctt ttg  aag ggc gtt ttg aat  cca aag gtc att cac  tca tcc aag     3924
Leu Leu  Lys Gly Val Leu Asn  Pro Lys Val Ile His  Ser Ser Lys
    1295                 1300                 1305
gct gta  gga gag cca ccg ttt  ttc ctc ggt tca gcc  gtc ttg ttt     3969
Ala Val  Gly Glu Pro Pro Phe  Phe Leu Gly Ser Ala  Val Leu Phe
    1310                 1315                 1320
gcc ata  aag gat gcg ata tct  gcc gca aga gct gag  gag ggt cac     4014
Ala Ile  Lys Asp Ala Ile Ser  Ala Ala Arg Ala Glu  Glu Gly His
    1325                 1330                 1335
ttc gac  tgg ttc cca ctc gac  agc cca gca aca ccg  gaa aga ata     4059
Phe Asp  Trp Phe Pro Leu Asp  Ser Pro Ala Thr Pro  Glu Arg Ile
    1340                 1345                 1350
aga atg  gca tgc gtg gat tcc  atc aca aag aaa ttt  gct agc gta     4104
Arg Met  Ala Cys Val Asp Ser  Ile Thr Lys Lys Phe  Ala Ser Val
    1355                 1360                 1365
tat tac  cgt ccc aag ctt agt  gta tag                              4131
Tyr Tyr  Arg Pro Lys Leu Ser  Val
    1370                 1375
<210>64
<211>1376
<212>PRT
<213>Oryza sativa
<400>64
Met Gly Ser Leu Thr Arg Ala Glu Glu Glu Glu Thr Ala Ala Ala Glu
1               5                   10                  15
Glu Trp Ser Gly Glu Ala Val Val Tyr Val Asn Gly Val Arg Arg Val
            20                  25                  30
Leu Pro Asp Gly Leu Ala His Leu Thr Leu Leu Gln Tyr Leu Arg Asp
        35                  40                  45
Ile Gly Leu Pro Gly Thr Lys Leu Gly Cys Gly Glu Gly Gly Cys Gly
    50                  55                  60
Ala Cys Thr Val Met Val Ser Cys Tyr Asp Gln Thr Thr Lys Lys Thr
65                  70                  75                  80
Gln His Phe Ala Ile Asn Ala Cys Leu Ala Pro Leu Tyr Ser Val Glu
                85                  90                  95
Gly Met His Ile Ile Thr Val Glu Gly Ile Gly Asn Arg Gln Arg Gly
            100                 105                 110
Leu His Pro Ile Gln Glu Arg Leu Ala Met Ala His Gly Ser Gln Cys
        115                 120                 125
Gly Phe Cys Thr Pro Gly Phe Val Met Ser Met Tyr Ala Leu Leu Arg
    130                 135                 140
Ser Ser Glu Gln Pro Pro Thr Glu Glu Gln Ile Glu Asp Ser Leu Ala
145                 150                 155                 160
Gly Asn Leu Cys Arg Cys Thr Gly Tyr Arg Pro Ile Ile Asp Ala Phe
                165                 170                 175
Arg Val Phe Ser Lys Arg Asp Asp Leu Leu Tyr Asn Asn Ser Ser Leu
            180                 185                 190
Lys Asn Ala Asp Gly Arg Pro Ile Cys Pro Ser Thr Gly Lys Pro Cys
        195                 200                 205
Ser Cys Gly Asp Gln Lys Asp Ile Asn Gly Ser Glu Ser Ser Leu Leu
    210                 215                 220
Thr Pro Thr Lys Ser Tyr Ser Pro Cys Ser Tyr Asn Glu Ile Asp Gly
225                 230                 235                 240
Asn Ala Tyr Ser Glu Lys Glu Leu Ile Phe Pro Pro Glu Leu Gln Leu
                245                 250                 255
Arg Lys Val Thr Ser Leu Lys Leu Asn Gly Phe Asn Gly Ile Arg Trp
            260                 265                 270
Tyr Arg Pro Leu Lys Leu Lys Gln Val Leu His Leu Lys Ala Cys Tyr
        275                 280                 285
Pro Asn Ala Lys Leu Ile Ile Gly Asn Ser Glu Val Gly Val Glu Thr
    290                 295                 300
Lys Phe Lys Asn Ala Gln Tyr Lys Val Leu Ile Ser Val Thr His Val
305                 310                 315                 320
Pro Glu Leu His Thr Leu Lys Val Lys Glu Asp Gly Ile His Ile Gly
                325                 330                 335
Ser Ser Val Arg Leu Ala Gln Leu Gln Asn Phe Leu Arg Lys Val Ile
            340                 345                 350
Leu Glu Arg Asp Ser His Glu Ile Ser Ser Cys Glu Ala Ile Leu Arg
        355                 360                 365
Gln Leu Lys Trp Phe Ala Gly Thr Gln Ile Arg Asn Val Ala Ser Val
    370                 375                 380
Gly Gly Asn Ile Cys Thr Ala Ser Pro Ile Ser Asp Leu Asn Pro Leu
385                 390                 395                 400
Trp Met Ala Thr Gly Ala Thr Phe Glu Ile Ile Asp Val Asn Asn Asn
                405                 410                 415
Ile Arg Thr Ile Pro Ala Lys Asp Phe Phe Leu Gly Tyr Arg Lys Val
            420                 425                 430
Asp Leu Lys Pro Asp Glu Ile Leu Leu Ser Val Ile Leu Pro Trp Thr
        435                 440                 445
Arg Pro Phe Glu Phe Val Lys Glu Phe Lys Gln Ala His Arg Arg Glu
    450                 455                 460
Asp Asp Ile Ala Leu Val Asn Ala Gly Met Arg Val Tyr Ile Arg Lys
465                 470                 475                 480
Val Glu Gly Asp Trp Ile Ile Ser Asp Val Ser Ile Ile Tyr Gly Gly
                485                 490                 495
Val Ala Ala Val Ser His Arg Ala Ser Lys Thr Glu Thr Phe Leu Thr
            500                 505                 510
Gly Lys Lys Trp Asp Tyr Gly Leu Leu Asp Lys Thr Phe Asp Leu Leu
        515                 520                 525
Lys Glu Asp Val Val Leu Ala Glu Asn Ala Pro Gly Gly Met Val Glu
    530                 535                 540
Phe Arg Ser Ser Leu Thr Leu Ser Phe Phe Phe Lys Phe Phe Leu His
545                 550                 555                 560
Val Thr His Glu Met Asn Ile Lys Gly Phe Trp Lys Asp Gly Leu His
                565                 570                 575
Ala Thr Asn Leu Ser Ala Ile Gln Ser Phe Thr Arg Pro Val Gly Val
            580                 585                 590
Gly Thr Gln Cys Tyr Glu Leu Val Arg Gln Gly Thr Ala Val Gly Gln
        595                 600                 605
Pro Val Val His Thr Ser Ala Met Leu Gln Val Thr Gly Glu Ala Glu
    610                 615                 620
Tyr Thr Asp Asp Thr Pro Thr Pro Pro Asn Thr Leu His Ala Ala Leu
625                 630                 635                 640
Val Leu Ser Thr Lys Ala His Ala Arg Ile Leu Ser Ile Asp Ala Ser
                645                 650                 655
Leu Ala Lys Ser Ser Pro Gly Phe Ala Gly Leu Phe Leu Ser Lys Asp
            660                 665                 670
Val Pro Gly Ala Asn His Thr Gly Pro Val Ile His Asp Glu Glu Val
        675                 680                 685
Phe Ala Ser Asp Val Val Thr Cys Val Gly Gln Ile Val Gly Leu Val
    690                 695                 700
Val Ala Asp Thr Arg Asp Asn Ala Lys Ala Ala Ala Asn Lys Val Asn
705                 710                 715                 720
Ile Glu Tyr Ser Glu Leu Pro Ala Ile Leu Ser Ile Glu Glu Ala Val
                725                 730                 735
Lys Ala Gly Ser Phe His Pro Asn Ser Lys Arg Cys Leu Val Lys Gly
            740                 745                 750
Asn Val Glu Gln Cys Phe Leu Ser Gly Ala Cys Asp Arg Ile Ile Glu
        755                 760                 765
Gly Lys Val Gln Val Gly Gly Gln Glu His Phe Tyr Met Glu Pro Gln
    770                 775                 780
Ser Thr Leu Val Trp Pro Val Asp Ser Gly Asn Glu Ile His Met Ile
785                 790                 795                 800
Ser Ser Thr Gln Ala Pro Gln Lys His Gln Lys Tyr Val Ala Asn Val
                805                 810                 815
Leu Gly Leu Pro Gln Ser Arg Val Val Cys Lys Thr Lys Arg Ile Gly
            820                 825                 830
Gly Gly Phe Gly Gly Lys Glu Thr Arg Ser Ala Ile Phe Ala Ala Ala
        835                 840                 845
Ala Ser Val Ala Ala Tyr Cys Leu Arg Gln Pro Val Lys Leu Val Leu
    850                 855                 860
Asp Arg Asp Ile Asp Met Met Thr Thr Gly Gln Arg His Ser Phe Leu
865                 870                 875                 880
Gly Lys Tyr Lys Val Gly Phe Thr Asp Asp Gly Lys Ile Leu Ala Leu
                885                 890                 895
Asp Leu Asp Val Tyr Asn Asn Gly Gly His Ser His Asp Leu Ser Leu
            900                 905                 910
Pro Val Leu Glu Arg Ala Met Phe His Ser Asp Asn Val Tyr Asp Ile
        915                 920                 925
Pro Asn Val Arg Val Asn Gly Gln Val Cys Phe Thr Asn Phe Pro Ser
    930                 935                 940
Asn Thr Ala Phe Arg Gly Phe Gly Gly Pro Gln Ala Met Leu Ile Ala
945                 950                 955                 960
Glu Asn Trp Ile Gln His Met Ala Thr Glu Leu Lys Arg Ser Pro Glu
                965                 970                 975
Glu Ile Lys Glu Leu Asn Phe Gln Ser Glu Gly Ser Val Leu His Tyr
            980                 985                 990
Gly Gln Leu Leu Gln Asn Cys Thr  Ile His Ser Val Trp  Asp Glu Leu
        995                 1000                 1005
Lys Val  Ser Cys Asn Phe Met  Glu Ala Arg Lys Ala  Val Ile Asp
    1010                 1015                 1020
Phe Asn  Asn Asn Asn Arg Trp  Arg Lys Arg Gly Ile  Ala Met Val
    1025                 1030                 1035
Pro Thr  Lys Phe Gly Ile Ser  Phe Thr Thr Lys Phe  Met Asn Gln
    1040                 1045                 1050
Val Leu  Arg Met Asn Asn Cys  Arg Leu Cys Leu Val  Gln Val Tyr
    1055                 1060                 1065
Thr Asp  Gly Thr Val Leu Val  Thr His Gly Gly Val  Glu Met Gly
    1070                 1075                 1080
Gln Gly  Leu His Thr Lys Val  Ala Gln Val Ala Ala  Ser Ser Phe
    1085                 1090                 1095
Asn Ile  Pro Leu Ser Ser Ile  Phe Ile Ser Glu Thr  Ser Thr Asp
    1100                 1105                 1110
Lys Val  Pro Asn Ala Thr Pro  Thr Ala Ala Ser Ala  Ser Ser Asp
    1115                 1120                 1125
Leu Tyr  Gly Ala Ala Val Leu  Asp Ala Cys Gln Gln  Ile Met Ala
    1130                 1135                 1140
Arg Met  Glu Pro Val Ala Ser  Arg Gly Asn His Lys  Ser Phe Ala
    1145                 1150                 1155
Glu Leu  Val Leu Ala Cys Tyr  Leu Glu Arg Ile Asp  Leu Ser Ala
    1160                 1165                 1170
His Gly  Phe Tyr Ile Thr Pro  Asp Val Gly Phe Asp  Trp Val Ser
    1175                 1180                 1185
Gly Lys  Gly Thr Pro Phe Tyr  Tyr Phe Thr Tyr Gly  Ala Ala Phe
    1190                 1195                 1200
Ala Glu  Val Glu Ile Asp Thr  Leu Thr Gly Asp Phe  His Thr Arg
    1205                 1210                 1215
Thr Val  Asp Ile Val Met Asp  Leu Gly Cys Ser Ile  Asn Pro Ala
    1220                 1225                 1230
Ile Asp  Ile Gly Gln Ile Glu  Gly Gly Phe Ile Gln  Gly Leu Gly
    1235                 1240                 1245
Trp Ala  Ala Leu Glu Glu Leu  Lys Trp Gly Asp Asp  Asn His Lys
    1250                 1255                 1260
Trp Ile  Arg Pro Gly His Leu  Phe Thr Cys Gly Pro  Gly Ser Tyr
    1265                 1270                 127S
Lys Ile  Pro Ser Val Asn Asp  Ile Pro Leu Asn Phe  Lys Val Ser
    1280                 1285                 1290
Leu Leu  Lys Gly Val Leu Asn  Pro Lys Val Ile His  Ser Ser Lys
    1295                 1300                 1305
Ala Val  Gly Glu Pro Pro Phe  Phe Leu Gly Ser Ala  Val Leu Phe
    1310                 1315                 1320
Ala Ile  Lys Asp Ala Ile Ser  Ala Ala Arg Ala Glu  Glu Gly His
    1325                 1330                 1335
Phe Asp  Trp Phe Pro Leu Asp  Ser Pro Ala Thr Pro  Glu Arg Ile
    1340                 1345                 1350
Arg Met  Ala Cys Val Asp Ser  Ile Thr Lys Lys Phe  Ala Ser Val
    1355                 1360                 1365
Tyr Tyr  Arg Pro Lys Leu Ser  Val
    1370                 1375
<210>65
<211>2529
<212>DNA
<213>Oryza sativa
<220>
<221>CDS
<222>(1)..(2529)
<400>65
ggt gct ggc ctg caa aat ctt ggg aac act tgc tac ctg aac tcg gtg    48
Gly Ala Gly Leu Gln Asn Leu Gly Asn Thr Cys Tyr Leu Asn Ser Val
1                5                  10                  15
ctg caa tgc ttg acg tac aca gaa cca ttt gcg gcc tat ttg cag agc    96
Leu Gln Cys Leu Thr Tyr Thr Glu Pro Phe Ala Ala Tyr Leu Gln Ser
            20                  25                  30
ggg aag cac aag tct tca tgt cgt act gct gga ttt tgt gca cta tgt    144
Gly Lys His Lys Ser Ser Cys Arg Thr Ala Gly Phe Cys Ala Leu Cys
        35                  40                  45
gct ctt caa aac cat gtt aag act gct cta cag tca act gga aaa ata    192
Ala Leu Gln Asn His Val Lys Thr Ala Leu Gln Ser Thr Gly Lys Ile
    50                  55                  60
gtg acg cca tca cag att gtc aag aac ttg cgc tgc atc tcc cgt agt    240
Val Thr Pro Ser Gln Ile Val Lys Asn Leu Arg Cys Ile Ser Arg Ser
65                  70                  75                  80
ttc cgc aat tca agg cag gag gat gca cat gag tta atg gtt aat tta    288
Phe Arg Asn Ser Arg Gln Glu Asp Ala His Glu Leu Met Val Asn Leu
                85                  90                  95
ctt gaa tcc atg cat aaa tgt tgt cta cct tct gga gta cca agt gag    336
Leu Glu Ser Met His Lys Cys Cys Leu Pro Ser Gly Val Pro Ser Glu
            100                 105                 110
tct cct agt gca tat gag aag agc tta gtt cac aaa ata ttt ggt ggc    384
Ser Pro Ser Ala Tyr Glu Lys Ser Leu Val His Lys Ile Phe Gly Gly
        115                 120                 125
cgc cta aga agt cag gtg aaa tgc aca cag tgc tca cat tgc tcc aac    432
Arg Leu Arg Ser Gln Val Lys Cys Thr Gln Cys Ser His Cys Ser Asn
    130                 135                 140
aaa ttt gat cct ttc ttg gat ctc agc ctt gat att ggt aag gcc acg    480
Lys Phe Asp Pro Phe Leu Asp Leu Ser Leu Asp Ile Gly Lys Ala Thr
145                 150                 155                 160
tct ctg gtg agg gca ctt caa aat ttc act gcg gaa gag ctc tta gat    528
Ser Leu Val Arg Ala Leu Gln Asn Phe Thr Ala Glu Glu Leu Leu Asp
                165                 170                 175
ggg gga gaa aag caa tat cag tgc caa cgc tgc agg aaa aag gtt gta    576
Gly Gly Glu Lys Gln Tyr Gln Cys Gln Arg Cys Arg Lys Lys Val Val
            180                 185                 190
gca aag aaa aag ttt aca att gat aag gcg cca tat gtt ctg aca att    624
Ala Lys Lys Lys Phe Thr Ile Asp Lys Ala Pro Tyr Val Leu Thr Ile
        195                 200                 205
cat ctg aag cgc ttt agc cct ttc aac cec cgt gaa aag att gac aaa    672
His Leu Lys Arg Phe Ser Pro Phe Asn Pro Arg Glu Lys Ile Asp Lys
    210                 215                 220
aaa gtt gat ttt cag cca atg cta gac ttg aag cca ttt att agc gac    720
Lys Val Asp Phe Gln Pro Met Leu Asp Leu Lys Pro Phe Ile Ser Asp
225                 230                 235                 240
tct aaa gtg agt aat ttg aaa tac agc ctt tat ggt gtt ttg gtt cat    768
Ser Lys Val Ser Asn Leu Lys Tyr Ser Leu Tyr Gly Val Leu Val His
                245                 250                 255
gct ggt tgg aac act cag tca ggc cat tat tat tgc ttc gtt cga act    816
Ala Gly Trp Asn Thr Gln Ser Gly His Tyr Tyr Cys Phe Val Arg Thr
            260                 265                 270
tcc agt gga atg tgg cac aac ctt gat gat aac cag gta cgc caa gtc    864
Ser Ser Gly Met Trp His Asn Leu Asp Asp Asn Gln Val Arg Gln Val
        275                 280                 285
cgt gag gca gat gta ttg aga cag aaa gca tat atg tta ttt tat gta    912
Arg Glu Ala Asp Val Leu Arg Gln Lys Ala Tyr Met Leu Phe Tyr Val
    290                 295                 300
cgt gac aga gtt ggg aat ccg act cca cgc aag gat aat atc act gct    960
Arg Asp Arg Val Gly Asn Pro Thr Pro Arg Lys Asp Asn Ile Thr Ala
305                 310                 315                 320
aat atg cca gcc agg aga aca ata cct gaa aag atc tca ggt ctg agt    1008
Asn Met Pro Ala Arg Arg Thr Ile Pro Glu Lys Ile Ser Gly Leu Ser
                325                 330                 335
gat atg atc cag agc ggc gta att gaa gca aaa ttg aac ggt tcc tcg    1056
Asp Met Ile Gln Ser Gly Val Ile Glu Ala Lys Leu Asn Gly Ser Ser
            340                 345                 350
tct cct tat ggc gat aag agg ttg cac ggc ata agc aat ggg aac tca    1104
Ser Pro Tyr Gly Asp Lys Arg Leu His Gly Ile Ser Asn Gly Asn Ser
        355                 360                 365
atc aag act tca aga gag cat tat ttg aag aaa gat ggc aaa act gaa    1152
Ile Lys Thr Ser Arg Glu His Tyr Leu Lys Lys Asp Gly Lys Thr Glu
    370                 375                 380
gct cct aaa gcc tct gaa aac aat ggc ctg gct tcc aca cag aaa gct    1200
Ala Pro Lys Ala Ser Glu Asn Asn Gly Leu Ala Ser Thr Gln Lys Ala
385                 390                 395                 400
tct gca cct caa att gat ggt gct acc tta tct gct caa tct aag caa    1248
Ser Ala Pro Gln Ile Asp Gly Ala Thr Leu Ser Ala Gln Ser Lys Gln
                405                 410                 415
att act tca act ggt cac aga gag gta tct tca tca gat cga tct gca    1296
Ile Thr Ser Thr Gly His Arg Glu Val Ser Ser Ser Asp Arg Ser Ala
            420                 425                 430
tct ctt aca cat gtg att gtg aac caa gca gtg gcc atg gtt ccg tcg    1344
Ser Leu Thr His Val Ile Val Asn Gln Ala Val Ala Met Val Pro Ser
        435                 440                 445
cag gaa ttg caa cca aag gtt gat ggc tta acc gat acc tct tcc ctg    1392
Gln Glu Leu Gln Pro Lys Val Asp Gly Leu Thr Asp Thr Ser Ser Leu
    450                 455                 460
ggc aat ggc aat gcg ata ttg tct gag cga aat aaa caa aca tcc cag    1440
Gly Asn Gly Asn Ala Ile Leu Ser Glu Arg Asn Lys Gln Thr Ser Gln
465                 470                 475                 480
cat caa aat cca ttt tct atg cca gct tcc cat gga aag gac aca ggg    1488
His Gln Asn Pro Phe Ser Met Pro Ala Ser His Gly Lys Asp Thr Gly
                485                 490                 495
gca ggg ctt gct gca caa act ttc cca act aag gat gct att gtt tca    1536
Ala Gly Leu Ala Ala Gln Thr Phe Pro Thr Lys Asp Ala Ile Val Ser
            500                 505                 510
aat ggt gtt gta cct agt agc agg gat cca att tcc agt gag aag gtg    1584
Asn Gly Val Val Pro Ser Ser Arg Asp Pro Ile Ser Ser Glu Lys Val
        515                 520                 525
tgt ggc ttg caa aaa tcc atc aag caa gat gac aaa acg gtg aaa gaa    1632
Cys Gly Leu Gln Lys Ser Ile Lys Gln Asp Asp Lys Thr Val Lys Glu
    530                 535                 540
ctt cct ata agt gag aac aat ata gta tca gga ctt gaa cga gtc aac    1680
Leu Pro Ile Ser Glu Asn Asn Ile Val Ser Gly Leu Glu Arg Val Asn
545                 550                 555                 560
gcc aga aaa cag act agc tct gaa gtt tcc atg aag gta gct gca gct    1728
Ala Arg Lys Gln Thr Ser Ser Glu Val Ser Met Lys Val Ala Ala Ala
                565                 570                 575
gat tcg tgc aat agc aac aca cct aaa agg gtg gat ttg aag tca aag    1776
Asp Ser Cys Asn Ser Asn Thr Pro Lys Arg Val Asp Leu Lys Ser Lys
            580                 585                 590
aaa ctt gtg aga tat cca gtc atg aac atg tgg ctt ggg ccc aga caa    1824
Lys Leu Val Arg Tyr Pro Val Met Asn Met Trp Leu Gly Pro Arg Gln
        595                 600                 605
gtt atg cta ggt tca cta aag gta caa aag aaa aag aaa tgc aat aga    1872
Val Met Leu Gly Ser Leu Lys Val Gln Lys Lys Lys Lys Cys Asn Arg
    610                 615                 620
act aga aga cgg tct gta gtt tgt gag gac atg gcc aat gcc act tgt    1920
Thr Arg Arg Arg Ser Val Val Cys Glu Asp Met Ala Asn Ala Thr Cys
625                 630                 635                 640
tca ggt aac aac aca agc gag cag cag gca tca aca tca aca aca acg    1968
Ser Gly Asn Asn Thr Ser Glu Gln Gln Ala Ser Thr Ser Thr Thr Thr
                645                 650                 655
tcg tct gaa act gtg caa tgt act ccc aga ggg cgg aaa cgt gcc tat    2016
Ser Ser Glu Thr Val Gln Cys Thr Pro Arg Gly Arg Lys Arg Ala Tyr
            660                 665                 670
gat agt gac agt cct aaa aat aat aac cag aag caa aac aag caa gac    2064
Asp Ser Asp Ser Pro Lys Asn Asn Asn Gln Lys Gln Asn Lys Gln Asp
        675                 680                 685
gtt att gga gcc gat act ggt agt ggt gaa ctt aac atg gat aag aga    2112
Val Ile Gly Ala Asp Thr Gly Ser Gly Glu Leu Asn Met Asp Lys Arg
    690                 695                 700
aat gtt att agt gaa acc gct gct agt gct gag ctt ccg aag ctg ggt    2160
Asn Val Ile Ser Glu Thr Ala Ala Ser Ala Glu Leu Pro Lys Leu Gly
705                 710                 715                 720
cca ggc tct tct gca aat cag gaa cat tca agg aac aat gtt cat gca    2208
Pro Gly Ser Ser Ala Asn Gln Glu His Ser Arg Asn Asn Val His Ala
                725                 730                 735
aaa ttg gga gtt ccc cgg cat ttt act gtt ctg aca agg gac ttg gct    2256
Lys Leu Gly Val Pro Arg His Phe Thr Val Leu Thr Arg Asp Leu Ala
            740                 745                 750
gaa gtt act gtt cca tgc tgg gat gat gtt gct gtg tca aat gct gag    2304
Glu Val Thr Val Pro Cys Trp Asp Asp Val Ala Val Ser Asn Ala Glu
        755                 760                 765
gca aga gag tca aaa cat tca gaa agc aag agc att gga tat gtg tta    2352
Ala Arg Glu Ser Lys His Ser Glu Ser Lys Ser Ile Gly Tyr Val Leu
    770                 775                 780
gat gaa tgg gac gag gag tat gac cgt gga aag acc aag aaa atc aga    2400
Asp Glu Trp Asp Glu Glu Tyr Asp Arg Gly Lys Thr Lys Lys Ile Arg
785                 790                 795                 800
aat tca aag gaa gac tac ggt gga cca aac ccc ttc cag gag gag gcc    2448
Asn Ser Lys Glu Asp Tyr Gly Gly Pro Asn Pro Phe Gln Glu Glu Ala
                805                 810                 815
aac tac atc tca cag aga aac atg aaa cag agg acc tat caa ccc aaa    2496
Asn Tyr Ile Ser Gln Arg Asn Met Lys Gln Arg Thr Tyr Gln Pro Lys
            820                 825                 830
tcc tgg aag aaa cat gcc cat gtt aga aga tga                        2529
Ser Trp Lys Lys His Ala His Val Arg Arg
        835                 840
<210>66
<211>842
<212>PRT
<213>Oryza sativa
<400>66
Gly Ala Gly Leu Gln Asn Leu Gly Asn Thr Cys Tyr Leu Asn Ser Val
1                5                  10                  15
Leu Gln Cys Leu Thr Tyr Thr Glu Pro Phe Ala Ala Tyr Leu Gln Ser
            20                  25                   30
Gly Lys His Lys Ser Ser Cys Arg Thr Ala Gly Phe Cys Ala Leu Cys
        35                  40                  45
Ala Leu Gln Asn His Val Lys Thr Ala Leu Gln Ser Thr Gly Lys Ile
    50                  55                  60
Val Thr Pro Ser Gln Ile Val Lys Asn Leu Arg Cys Ile Ser Arg Ser
65                  70                  75                  80
Phe Arg Asn Ser Arg Gln Glu Asp Ala His Glu Leu Met Val Asn Leu
                85                  90                  95
Leu Glu Ser Met His Lys Cys Cys Leu Pro Ser Gly Val Pro Ser Glu
            100                 105                 110
Ser Pro Ser Ala Tyr Glu Lys Ser Leu Val His Lys Ile Phe Gly Gly
        115                 120                 125
Arg Leu Arg Ser Gln Val Lys Cys Thr Gln Cys Ser His Cys Ser Asn
    130                 135                 140
Lys Phe Asp Pro Phe Leu Asp Leu Ser Leu Asp Ile Gly Lys Ala Thr
145                 150                 155                 160
Ser Leu Val Arg Ala Leu Gln Asn Phe Thr Ala Glu Glu Leu Leu Asp
               165                 170                 175
Gly Gly Glu Lys Gln Tyr Gln Cys Gln Arg Cys Arg Lys Lys Val Val
            180                 185                 190
Ala Lys Lys Lys Phe Thr Ile Asp Lys Ala Pro Tyr Val Leu Thr Ile
        195                 200                 205
His Leu Lys Arg Phe Ser Pro Phe Asn Pro Arg Glu Lys Ile Asp Lys
    210                 215                 220
Lys Val Asp Phe Gln Pro Met Leu Asp Leu Lys Pro Phe Ile Ser Asp
225                 230                 235                 240
Ser Lys Val Ser Asn Leu Lys Tyr Ser Leu Tyr Gly Val Leu Val His
                245                 250                 255
Ala Gly Trp Asn Thr Gln Ser Gly His Tyr Tyr Cys Phe Val Arg Thr
            260                 265                 270
Ser Ser Gly Met Trp His Asn Leu Asp Asp Asn Gln Val Arg Gln Val
        275                 280                 285
Arg Glu Ala Asp Val Leu Arg Gln Lys Ala Tyr Met Leu Phe Tyr Val
    290                 295                 300
Arg Asp Arg Val Gly Asn Pro Thr Pro Arg Lys Asp Asn Ile Thr Ala
305                 310                 315                 320
Asn Met Pro Ala Arg Arg Thr Ile Pro Glu Lys Ile Ser Gly Leu Ser
                325                 330                 335
Asp Met Ile Gln Ser Gly Val Ile Glu Ala Lys Leu Asn Gly Ser Ser
            340                 345                 350
Ser Pro Tyr Gly Asp Lys Arg Leu His Gly Ile Ser Asn Gly Asn Ser
        355                 360                 365
Ile Lys Thr Ser Arg Glu His Tyr Leu Lys Lys Asp Gly Lys Thr Glu
    370                 375                 380
Ala Pro Lys Ala Ser Glu Asn Asn Gly Leu Ala Ser Thr Gln Lys Ala
385                 390                 395                 400
Ser Ala Pro Gln Ile Asp Gly Ala Thr Leu Ser Ala Gln Ser Lys Gln
                405                 410                 415
Ile Thr Ser Thr Gly His Arg Glu Val Ser Ser Ser Asp Arg Ser Ala
            420                 425                 430
Ser Leu Thr His Val Ile Val Asn Gln Ala Val Ala Met Val Pro Ser
        435                 440                 445
Gln Glu Leu Gln Pro Lys Val Asp Gly Leu Thr Asp Thr Ser Ser Leu
    450                 455                 460
Gly Asn Gly Asn Ala Ile Leu Ser Glu Arg Asn Lys Gln Thr Ser Gln
465                 470                 475                 480
His Gln Asn Pro Phe Ser Met Pro Ala Ser His Gly Lys Asp Thr Gly
                485                 490                 495
Ala Gly Leu Ala Ala Gln Thr Phe Pro Thr Lys Asp Ala Ile Val Ser
            500                 505                 510
Asn Gly Val Val Pro Ser Ser Arg Asp Pro Ile Ser Ser Glu Lys Val
        515                 520                 525
Cys Gly Leu Gln Lys Ser Ile Lys Gln Asp Asp Lys Thr Val Lys Glu
    530                 535                 540
Leu Pro Ile Ser Glu Asn Asn Ile Val Ser Gly Leu Glu Arg Val Asn
545                 550                 555                 560
Ala Arg Lys Gln Thr Ser Ser Glu Val Ser Met Lys Val Ala Ala Ala
                565                 570                 575
Asp Ser Cys Asn Ser Asn Thr Pro Lys Arg Val Asp Leu Lys Ser Lys
            580                 585                 590
Lys Leu Val Arg Tyr Pro Val Met Asn Met Trp Leu Gly Pro Arg Gln
        595                  600                 605
Val Met Leu Gly Ser Leu Lys Val Gln Lys Lys Lys Lys Cys Asn Arg
    610                 615                 620
Thr Arg Arg Arg Ser Val Val Cys Glu Asp Met Ala Asn Ala Thr Cys
625                 630                 635                 640
Ser Gly Asn Asn Thr Ser Glu Gln Gln Ala Ser Thr Ser Thr Thr Thr
                645                 650                 655
Ser Ser Glu Thr Val Gln Cys Thr Pro Arg Gly Arg Lys Arg Ala Tyr
            660                 665                 670
Asp Ser Asp Ser Pro Lys Asn Asn Asn Gln Lys Gln Asn Lys Gln Asp
        675                 680                 685
Val Ile Gly Ala Asp Thr Gly Ser Gly Glu Leu Asn Met Asp Lys Arg
    690                 695                 700
Asn Val Ile Ser Glu Thr Ala Ala Ser Ala Glu Leu Pro Lys Leu Gly
705                 710                 715                 720
Pro Gly Ser Ser Ala Asn Gln Glu His Ser Arg Asn Asn Val His Ala
               725                 730                 735
Lys Leu Gly Val Pro Arg His Phe Thr Val Leu Thr Arg Asp Leu Ala
            740                 745                 750
Glu Val Thr Val Pro Cys Trp Asp Asp Val Ala Val Ser Asn Ala Glu
        755                 760                 765
Ala Arg Glu Ser Lys His Ser Glu Ser Lys Ser Ile Gly Tyr Val Leu
    770                 775                 780
Asp Glu Trp Asp Glu Glu Tyr Asp Arg Gly Lys Thr Lys Lys Ile Arg
785                 790                 795                 800
Asn Ser Lys Glu Asp Tyr Gly Gly Pro Asn Pro Phe Gln Glu Glu Ala
                805                 810                 815
Asn Tyr Ile Ser Gln Arg Asn Met Lys Gln Arg Thr Tyr Gln Pro Lys
           820                 825                 830
Ser Trp Lys Lys His Ala His Val Arg Arg
       835                 840
<210>67
<211>492
<212>DNA
<213>Oryza sativa
<220>
<221>CDS
<222>(1)..(492)
<400>67
cag gac acc cgt cct ctg caa gcc caa cgt cga cgc cat gga gga ggc    48
Gln Asp Thr Arg Pro Leu Gln Ala Gln Arg Arg Arg His Gly Gly Gly
1               5                   10                  15
cct cag gat cgc caa cgt gaa ccc tca caa ggc gat ttt ctt cga cga    96
Pro Gln Asp Arg Gln Arg Glu Pro Ser Gln Gly Asp Phe Leu Arg Arg
            20                  25                  30
cag cgt gag gaa cat cca ggc ggg gaa gag gat cgg gct cca cac ggt    144
Gln Arg Glu Glu His Pro Gly Gly Glu Glu Asp Arg Ala Pro His Gly
        35                  40                  45
gct ggt ggg cac gcc gca gcg ggt gaa ggg cgc gga cca cgc gct gga    192
Ala Gly Gly His Ala Ala Ala Gly Glu Gly Arg Gly Pro Arg Ala Gly
    50                  55                  60
gag cat cca caa cat cag gga ggc gct gcc gga gct gtg gga gga ggc    240
Glu His Pro Gln His Gln Gly Gly Ala Ala Gly Ala Val Gly Gly Gly
65                  70                  75                  80
cga gaa ggc gga gga cgt gct cat cta ctc cga ccg cgt cgc cat cga    288
Arg Glu Gly Gly Gly Arg Ala His Leu Leu Arg Pro Arg Arg His Arg
                85                  90                  95
gac atc ggt gac cgc gta ggc cac acc tac tgt ctc tcc cga ctc cgg    336
Asp Ile Gly Asp Arg Val Gly His Thr Tyr Cys Leu Ser Arg Leu Arg
            100                 105                 110
cga atc gct cag aac gag caa cca tcc atc cat cca tgt cca tcc ctg    384
Arg Ile Ala Gln Asn Glu Gln Pro Ser Ile His Pro Cys Pro Ser Leu
        115                 120                 125
gcc ggg cag gtg atc atc agg tgg gaa ttc aga att ggc cgg gac aac    432
Ala Gly Gln Val Ile Ile Arg Trp Glu Phe Arg Ile Gly Arg Asp Asn
    130                 135                 140
aat acg ttc caa gaa aaa aag agg agg gtg ttc cgt gga agt tca gga    480
Asn Thr Phe Gln Glu Lys Lys Arg Arg Val Phe Arg Gly Ser Ser Gly
145                 150                 155                 160
ttc aga atg taa                                                    492
Phe Arg Met
<210>68
<211>163
<212>PRT
<213>Oryza sativa
<400>68
Gln Asp Thr Arg Pro Leu Gln Ala Gln Arg Arg Arg His Gly Gly Gly
1               5                   10                  15
Pro Gln Asp Arg Gln Arg Glu Pro Ser Gln Gly Asp Phe Leu Arg Arg
            20                  25                  30
Gln Arg Glu Glu His Pro Gly Gly Glu Glu Asp Arg Ala Pro His Gly
        35                  40                  45
Ala Gly Gly His Ala Ala Ala Gly Glu Gly Arg Gly Pro Arg Ala Gly
    50                  55                  60
Glu His Pro Gln His Gln Gly Gly Ala Ala Gly Ala Val Gly Gly Gly
65                  70                  75                  80
Arg Glu Gly Gly Gly Arg Ala His Leu Leu Arg Pro Arg Arg His Arg
                85                  90                  95
Asp Ile Gly Asp Arg Val Gly His Thr Tyr Cys Leu Ser Arg Leu Arg
            100                 105                 110
Arg Ile Ala Gln Asn Glu Gln Pro Ser Ile His Pro Cys Pro Ser Leu
        115                 120                 125
Ala Gly Gln Val Ile Ile Arg Trp Glu Phe Arg Ile Gly Arg Asp Asn
    130                 135                 140
Asn Thr Phe Gln Glu Lys Lys Arg Arg Val Phe Arg Gly Ser Ser Gly
145                 150                 155                 160
Phe Arg Met
<210>69
<211>753
<212>DNA
<213>Oryza sativa
<220>
<221>CDS
<222>(1)..(753)
<400>69
atg gtc tgc gtc gcc atc gag tac cgg atg cgc cgg ggg cag cgt gac    48
Met Val Cys Val Ala Ile Glu Tyr Arg Met Arg Arg Gly Gln Arg Asp
1               5                   10                  15 
agg gcc ccg gcg tcc gcc gac gag gaa agg gga agt gac ggg tcg tct    96
Arg Ala Pro Ala Ser Ala Asp Glu Glu Arg Gly Ser Asp Gly Ser Ser
            20                  25                  30
tca tct agc gat gat gat gtc acg gag gac gat cgc cgt ggt agc tgc    144
Ser Ser Ser Asp Asp Asp Val Thr Glu Asp Asp Arg Arg Gly Ser Cys
        35                  40                  45
acc gat tgc gtc agt att gca aag cac ctg gag tca gct aat aca atg    192
Thr Asp Cys Val Ser Ile Ala Lys His Leu Glu Ser Ala Asn Thr Met
    50                  55                  60
ttc tcc ttc ata tgg tgg ata att gga ttt tat tgg ata tct gct ggg    240
Phe Ser Phe Ile Trp Trp Ile Ile Gly Phe Tyr Trp Ile Ser Ala Gly
65                  70                  75                  80
ggt gag gat gtt atc cgt gat gca cct cag ctt tac tgg ctt tgc ata    288
Gly Glu Asp Val Ile Arg Asp Ala Pro Gln Leu Tyr Trp Leu Cys Ile
                85                  90                  95
gtc ttt ctg gca ttt gac gtg ttc ttt gtt gta ttc tgt gtt gct ctg    336
Val Phe Leu Ala Phe Asp Val Phe Phe Val Val Phe Cys Val Ala Leu
            100                 105                 110
gct tgc atc att ggt att gct gta tgt tgc tgc cta cct tgc att ata    384
Ala Cys Ile Ile Gly Ile Ala Val Cys Cys Cys Leu Pro Cys Ile Ile
        115                 120                 125
gct att ctc tat gcg gtt tct gat cag gaa gga gcg tca gaa gat gat    432
Ala Ile Leu Tyr Ala Val Ser Asp Gln Glu Gly Ala Ser Glu Asp Asp
    130                 135                 140
att cgc caa att cca aga tac aaa ttt cgg aga aca gat gaa cct gaa    480
Ile Arg Gln Ile Pro Arg Tyr Lys Phe Arg Arg Thr Asp Glu Pro Glu
145                 150                 155                 160
aaa caa act gct gat gag aca gga cct ttt ggt gga ata atg aca gag    528
Lys Gln Thr Ala Asp Glu Thr Gly Pro Phe Gly Gly Ile Met Thr Glu
                165                 170                 175
tgt ggc acc aat caa cct att gag aaa gta ctc gca cct gaa gat gcg    576
Cys Gly Thr Asn Gln Pro Ile Glu Lys Val Leu Ala Pro Glu Asp Ala
            180                 185                 190
gag tgt tgc att tgc ctt tcg gca tat gat gat ggt gca gag ctg cgt    624
Glu Cys Cys Ile Cys Leu Ser Ala Tyr Asp Asp Gly Ala Glu Leu Arg
        195                 200                 205
gaa ctt cct tgt ggg cac cat ttc cac tgt gcc tgc att gat aaa tgg    672
Glu Leu Pro Cys Gly His His Phe His Cys Ala Cys Ile Asp Lys Trp
    210                 215                 220
ctg cat atc aac gca aca tgc ccc ctg tgc aag ttc aat atc cgg aaa    720
Leu His Ile Asn Ala Thr Cys Pro Leu Cys Lys Phe Asn Ile Arg Lys
225                 230                 235                 240
agt ggc agt agc agt gga agt gaa gaa gta tga                        753
Ser Gly Ser Ser Ser Gly Ser Glu Glu Val
                245                 250
<210>70
<211>250
<212>PRT
<213>Oryza sativa
<400>70
Met Val Cys Val Ala Ile Glu Tyr Arg Met Arg Arg Gly Gln Arg Asp
1               5                   10                  15
Arg Ala Pro Ala Ser Ala Asp Glu Glu Arg Gly Ser Asp Gly Ser Ser
            20                  25                  30
Ser Ser Ser Asp Asp Asp Val Thr Glu Asp Asp Arg Arg Gly Ser Cys
        35                  40                  45
Thr Asp Cys Val Ser Ile Ala Lys His Leu Glu Ser Ala Asn Thr Met
    50                  55                  60
Phe Ser Phe Ile Trp Trp Ile Ile Gly Phe Tyr Trp Ile Ser Ala Gly
65                  70                  75                  80
Gly Glu Asp Val Ile Arg Asp Ala Pro Gln Leu Tyr Trp Leu Cys Ile
                85                  90                  95
Val Phe Leu Ala Phe Asp Val Phe Phe Val Val Phe Cys Val Ala Leu
            100                 105                 110
Ala Cys Ile Ile Gly Ile Ala Val Cys Cys Cys Leu Pro Cys Ile Ile
        115                 120                 125
Ala Ile Leu Tyr Ala Val Ser Asp Gln Glu Gly Ala Ser Glu Asp Asp
    130                 135                 140
Ile Arg Gln Ile Pro Arg Tyr Lys Phe Arg Arg Thr Asp Glu Pro Glu
145                 150                 155                 160
Lys Gln Thr Ala Asp Glu Thr Gly Pro Phe Gly Gly Ile Met Thr Glu
                165                 170                 175
Cys Gly Thr Asn Gln Pro Ile Glu Lys Val Leu Ala Pro Glu Asp Ala
            180                 185                 190
Glu Cys Cys Ile Cys Leu Ser Ala Tyr Asp Asp Gly Ala Glu Leu Arg
        195                 200                 205
Glu Leu Pro Cys Gly His His Phe His Cys Ala Cys Ile Asp Lys Trp
    210                 215                 220
Leu His Ile Asn Ala Thr Cys Pro Leu Cys Lys Phe Asn Ile Arg Lys
225                 230                 235                 240
Ser Gly Ser Ser Ser Gly Ser Glu Glu Val
                245                 250
<210>71
<211>3720
<212>DNA
<213>Oryza sativa
<220>
<221>CDS
<222>(1)..(3720)
<400>71
atg gac gag tca ggc aga gga aca ggt gat gat cat ggc cgg gag acg    48
Met Asp Glu Ser Gly Arg Gly Thr Gly Asp Asp His Gly Arg Glu Thr
1               5                   10                  15
aag gat gct gcg gcg gcg gcg tcg tcg tcg tcg ggg aag aag gtg ccg    96
Lys Asp Ala Ala Ala Ala Ala Ser Ser Ser Ser Gly Lys Lys Val Pro
            20                  25                  30
ctg ttc agc ttg ttc cgg tac gcc gac cgc ctc gac gtg ctg ctg atg    144
Leu Phe Ser Leu Phe Arg Tyr Ala Asp Arg Leu Asp Val Leu Leu Met
        35                  40                  45
gtt gtc ggc acg gtg ggc gcg ctc ggc aac ggc atc tcg cag ccc ctc    192
Val Val Gly Thr Val Gly Ala Leu Gly Asn Gly Ile Ser Gln Pro Leu
    50                  55                  60
atg acg gtc ctc ttc ggc aac gtc atc aac tcc ttc ggc gcg aac acc    240
Met Thr Val Leu Phe Gly Asn Val Ile Asn Ser Phe Gly Ala Asn Thr
65                  70                  75                  80
agc ggc agc gtc ctc cgc agc gtg acc aag gtg aag gta tca tgc tgg    288
Ser Gly Ser Val Leu Arg Ser Val Thr Lys Val Lys Val Ser Cys Trp
                85                  90                  95
act atg gca gga gaa agg cag tct gcc cgc atc cgt tct tta tac ctg    336
Thr Met Ala Gly Glu Arg Gln Ser Ala Arg Ile Arg Ser Leu Tyr Leu
            100                 105                 110
aaa gcc gtt ctg agg cag gat att aca ttc ttc gac aca gag atg aca    384
Lys Ala Val Leu Arg Gln Asp Ile Thr Phe Phe Asp Thr Glu Met Thr
        115                 120                 125
act ggt gaa gca gtt tct aga atg tct agt gat acc ctc cta att caa    432
Thr Gly Glu Ala Val Ser Arg Met Ser Ser Asp Thr Leu Leu Ile Gln
    130                 135                 140
ggt gct ctt ggt gag aag gga ggg aag ctt gta gaa ctg tta tca agc    480
Gly Ala Leu Gly Glu Lys Gly Gly Lys Leu Val Glu Leu Leu Ser Ser
145                 150                 155                 160
ttc atc ggt ggc ttt atc ata gca ttc act aga gga tgg ctt ctc act    528
Phe Ile Gly Gly Phe Ile Ile Ala Phe Thr Arg Gly Trp Leu Leu Thr
                165                 170                 175
ctt gtc atg cta aca tcg cta ccg tta att gct att gcc agt gca gtt    576
Leu Val Met Leu Thr Ser Leu Pro Leu Ile Ala Ile Ala Ser Ala Val
            180                 185                 190
tct gca cag gcc cta act aga gtt tct agc aag aga caa aca tca tat    624
Ser Ala Gln Ala Leu Thr Arg Val Ser Ser Lys Arg Gln Thr Ser Tyr
        195                 200                 205
agt gat gct ggg gac aca gtt gaa cag acc att gga tct ata aga aca    672
Ser Asp Ala Gly Asp Thr Val Glu Gln Thr Ile Gly Ser Ile Arg Thr
    210                 215                 220
gtt gtg tcc ttc aat ggt gag aag aaa gcg ata gca atg tac cgt aat    720
Val Val Ser Phe Asn Gly Glu Lys Lys Ala Ile Ala Met Tyr Arg Asn
225                 230                 235                 240
ttt ata aag aag tca tac aag gct act att gag gaa ggc att atc act    768
Phe Ile Lys Lys Ser Tyr Lys Ala Thr Ile Glu Glu Gly Ile Ile Thr
                245                 250                 255
ggt ttt ggc atg ggc tct gtc atg tgc gtc gta ttt ggc agc tat gga    816
Gly Phe Gly Met Gly Ser Val Met Cys Val Val Phe Gly Ser Tyr Gly
            260                 265                 270
tta gcc ttc tgg tat ggt gga aag cta atc att gag aaa ggt tac aca    864
Leu Ala Phe Trp Tyr Gly Gly Lys Leu Ile Ile Glu Lys Gly Tyr Thr
        275                 280                 285
gga gga aaa atc atg act atc ttg ttt gcc gtg ttg acc ggc aat gca    912
Gly Gly Lys Ile Met Thr Ile Leu Phe Ala Val Leu Thr Gly Asn Ala
    290                 295                 300
aca cct gca gtt gct gca gtt gtg gaa ggt caa tct gca gca tac aat    960
Thr Pro Ala Val Ala Ala Val Val Glu Gly Gln Ser Ala Ala Tyr Asn
305                 310                 315                 320
ttg ttc aaa aca att gag agg aaa cca gag ata gat tcc gat gat aac    1008
Leu Phe Lys Thr Ile Glu Arg Lys Pro Glu Ile Asp Ser Asp Asp Asn
                325                 330                 335
aat ggc atg gtt tta gaa gat atg aat ggc gat att gag cta aag gat    1056
Asn Gly Met Val Leu Glu Asp Met Asn Gly Asp Ile Glu Leu Lys Asp
            340                 345                 350
gtg tac ttt cgt tac cct gca aga cca gag cag ttg ata ttg gat gga    1104
Val Tyr Phe Arg Tyr Pro Ala Arg Pro Glu Gln Leu Ile Leu Asp Gly
        355                 360                 365
ttg tcg tta caa gta gcg agt gga aca aca atg gct ata gtc gga gag    1152
Leu Ser Leu Gln Val Ala Ser Gly Thr Thr Met Ala Ile Val Gly Glu
    370                 375                 380
agt gga agc gga aag tca act gtt atc agc cta gtc gaa aga ttc tac    1200
Ser Gly Ser Gly Lys Ser Thr Val Ile Ser Leu Val Glu Arg Phe Tyr
385                 390                 395                 400
gat cca cag tct ggc gaa gtt tta ata gat gga att agc atc aag aaa    1248
Asp Pro Gln Ser Gly Glu Val Leu Ile Asp Gly Ile Ser Ile Lys Lys
                405                 410                 415
ctg aga ctt gat tgg ata aga ggg aag atc ggt ctt gtt agc caa gag    1296
Leu Arg Leu Asp Trp Ile Arg Gly Lys Ile Gly Leu Val Ser Gln Glu
            420                 425                 430
cct ctg ctt ttt atg gcc tcc att aaa gat aac ata ata tat ggt aaa    1344
Pro Leu Leu Phe Met Ala Ser Ile Lys Asp Asn Ile Ile Tyr Gly Lys
        435                 440                 445
aaa gat gca acg ctt gaa gag atc aag aga gca gcg gag ctt gca aat    1392
Lys Asp Ala Thr Leu Glu Glu Ile Lys Arg Ala Ala Glu Leu Ala Asn
    450                 455                 460
gca gct aac ttc att gac aag tta cca aat ggt tat gat act tta gtt    1440
Ala Ala Asn Phe Ile Asp Lys Leu Pro Asn Gly Tyr Asp Thr Leu Val
465                 470                 475                 480
ggc cag cgc ggt act cag ctc tct gga gga caa aaa cag aga att gca    1488
Gly Gln Arg Gly Thr Gln Leu Ser Gly Gly Gln Lys Gln Arg Ile Ala
                485                 490                 495
att gca aga gcc atc ctc aaa gat cca aaa atc ctt ttg ctc gat gaa    1536
Ile Ala Arg Ala Ile Leu Lys Asp Pro Lys Ile Leu Leu Leu Asp Glu
            500                 505                 510
gca aca agt gca ctt gat gtg gag tct gag agg ata gtt cag gag gca    1584
Ala Thr Ser Ala Leu Asp Val Glu Ser Glu Arg Ile Val Gln Glu Ala
        515                 520                 525
cta aat aga atg atg gta gaa aga acc aca ctc gtt gtc gct cat cgt    1632
Leu Asn Arg Met Met Val Glu Arg Thr Thr Leu Val Val Ala His Arg
    530                 535                 540
ttg agc act gtg agg aat gtt gat tgc atc aca gtc gtc cgc aaa gga    1680
Leu Ser Thr Val Arg Asn Val Asp Cys Ile Thr Val Val Arg Lys Gly
545                 550                 555                 560
aaa ata gtt gaa caa ggt cct cat gat gca ctg gtg aag gat ccc gat    1728
Lys Ile Val Glu Gln Gly Pro His Asp Ala Leu Val Lys Asp Pro Asp
                565                 570                 575
gga gct tac tcc cag cta att agg cta caa gag act cat cgt gat gaa    1776
Gly Ala Tyr Ser Gln Leu Ile Arg Leu Gln Glu Thr His Arg Asp Glu
            580                 585                 590
agg cat aaa cta cca gat tcc aga tca aaa agt act agt ttg tca ttc    1824
Arg His Lys Leu Pro Asp Ser Arg Ser Lys Ser Thr Ser Leu Ser Phe
        595                 600                 605
aga cga tca aga act aaa gat ttt ctc agc aag agc aac agg tat tcc    1872
Arg Arg Ser Arg Thr Lys Asp Phe Leu Ser Lys Ser Asn Arg Tyr Ser
    610                 615                 620
ttc aag agc ccc tta gga ttg cct gtt gat ata cat gag gat gga atg    1920
Phe Lys Ser Pro Leu Gly Leu Pro Val Asp Ile His Glu Asp Gly Met
625                 630                 635                 640
aca agc gaa caa caa aag gtt gac cac tct gac agt aag gcc att aaa    1968
Thr Ser Glu Gln Gln Lys Val Asp His Ser Asp Ser Lys Ala Ile Lys
                645                 650                 655
aaa aca cca ttt gga cgg ctt ttt aat ctt aat aag cca gaa gtg cca    2016
Lys Thr Pro Phe Gly Arg Leu Phe Asn Leu ASn Lys Pro Glu Val Pro
            660                 665                 670
gtt ctt ttg tta ggt tct ata gca gca tca gtg cat gga gtc att ttg    2064
Val Leu Leu Leu Gly Ser Ile Ala Ala Ser Val His Gly Val Ile Leu
        675                 680                 685
cca cta tac ggt ata ata atg cca ggt gtt cta aaa tca ttc tat gaa    2112
Pro Leu Tyr Gly Ile Ile Met Pro Gly Val Leu Lys Ser Phe Tyr Glu
    690                 695                 700
ccg cca gat cag ctg cga aaa gat tct aga ttt tgg gca ttg atg tct    2160
Pro Pro Asp Gln Leu Arg Lys Asp Ser Arg Phe Trp Ala Leu Met Ser
705                 710                 715                 720
gtt gtt ctg ggg gtt gct tgt ttg att tca atc cca gca gaa tat ttt    2208
Val Val Leu Gly Val Ala Cys Leu Ile Ser Ile Pro Ala Glu Tyr Phe
                725                 730                 735
ttg ttt gga att gct ggg gga aag ctt ata cag cgt gtc cgt aca ctg    2256
Leu Phe Gly Ile Ala Gly Gly Lys Leu Ile Gln Arg Val Arg Thr Leu
            740                 745                 750
tca ttt caa aga att atg cac caa gag gtt gct tgg ttt gat aag ccc    2304
Ser Phe Gln Arg Ile Met His Gln Glu Val Ala Trp Phe Asp Lys Pro
        755                 760                 765
tcc aat tcc agt ggg gca ctt ggt aca agg ctc tca gtc gat gcg ttg    2352
Ser Asn Ser Ser Gly Ala Leu Gly Thr Arg Leu Ser Val Asp Ala Leu
    770                 775                 780
aat gtc cgc cgt tta gta gga gat aac ctg gcc ctt ata gtc cag gct    2400
Asn Val Arg Arg Leu Val Gly Asp Asn Leu Ala Leu Ile Val Gln Ala
785                 790                 795                 800
gta gct aca cta atc act ggc ttt gcc ata gct ttt gcg gca gat tgg    2448
Val Ala Thr Leu Ile Thr Gly Phe Ala Ile Ala Phe Ala Ala Asp Trp
               805                 810                 815
agg ctt gca ctg atc atc act tgt gta att cct tta gtg ggt gca cag    2496
Arg Leu Ala Leu Ile Ile Thr Cys Val Ile Pro Leu Val Gly Ala Gln
            820                 825                 830
ggc tat gct caa gtt aag ttc ttg aag ggg ttc agt gaa gaa tct aag    2544
Gly Tyr Ala Gln Val Lys Phe Leu Lys Gly Phe Ser Glu Glu Ser Lys
        835                 840                 845
gag atg tat gag gat gca aac caa gtt gcg gct gac gct gta ggc agc    2592
Glu Met Tyr Glu Asp Ala Asn Gln Val Ala Ala Asp Ala Val Gly Ser
    850                 855                 860
atc aga act gta gca tct ttc tgt tca gag aaa aga gtg gtg gca ata    2640
Ile Arg Thr Val Ala Ser Phe Cys Ser Glu Lys Arg Val Val Ala Ile
865                 870                 875                 880
tac aac aag aaa tgt gaa gct tta aga aaa cag gga att cga agc gga    2688
Tyr Asn Lys Lys Cys Glu Ala Leu Arg Lys Gln Gly Ile Arg Ser Gly
                885                 890                 895
atc gtt gga ggg att ggc tta agt ttc tca aac ttg atg tta tat ctg    2736
Ile Val Gly Gly Ile Gly Leu Ser Phe Ser Asn Leu Met Leu Tyr Leu
            900                 905                 910
act tac ggt ctt tgc ttc tat gtt ggt gca aag ttc gta agt cag gga    2784
Thr Tyr Gly Leu Cys Phe Tyr Val Gly Ala Lys Phe Val Ser Gln Gly
        915                 920                 925
aaa act act ttt tca gat gtt ttc aaa gtt ttc ttt gct tta gtt ttg    2832
Lys Thr Thr Phe Ser Asp Val Phe Lys Val Phe Phe Ala Leu Val Leu
    930                 935                 940
gca gcc gtt ggt gtt tcg cag tca agt gca ttg tcw act aat gca aca    2880
Ala Ala Val Gly Val Ser Gln Ser Ser Ala Leu Xaa Thr Asn Ala Thr
945                 950                 955                 960
arg gca agg gat tct gcc att tcc att ttt agt att atc gat cgg aag    2928
Xaa Ala Arg Asp Ser Ala Ile Ser Ile Phe Ser Ile Ile Asp Arg Lys
                965                 970                 975
tct agg att gat tca agt agc gac gag gga gcg ata atg gaa aac gtc    2976
Ser Arg Ile Asp Ser Ser Ser Asp Glu Gly Ala Ile Met Glu Asn Val
            980                 985                 990
act ggc agc att gat ttc aat aat  gtc agt ttc aag tac  cca tca cgc  3024
Thr Gly Ser Ile Asp Phe Asn Asn  Val Ser Phe Lys Tyr  Pro Ser Arg
        995                 1000                 1005
cct gat  gtt caa ata ttc agt  gac ttt acc ttg cac  att cct tcc     3069
Pro Asp  Val Gln Ile Phe Ser  Asp Phe Thr Leu His  Ile Pro Ser
    1010                 1015                 1020
caa aag  acc ata gca ctt gtt  gga gaa agc ggt agt  ggg aag tcc     3114
Gln Lys  Thr Ile Ala Leu Val  Gly Glu Ser Gly Ser  Gly Lys Ser
    1025                 1030                 1035
acg ata  att gct tta tta gag  cgt ttc tat gat cct  gat tct ggt     3159
Thr Ile  Ile Ala Leu Leu Glu  Arg Phe Tyr Asp Pro  Asp Ser Gly
    1040                 1045                 1050
aat atc  tca cta gat gga gtt  gaa att aga agc tta  aaa gtc agc     3204
Asn Ile  Ser Leu Asp Gly Val  Glu Ile Arg Ser Leu  Lys Val Ser
    1055                 1060                 1065
tgg ttg  agg gat cag atg ggg  ctt gta ggc cag gag  cca gtg ctt     3249
Trp Leu  Arg Asp Gln Met Gly  Leu Val Gly Gln Glu  Pro Val Leu
    1070                 1075                 1080
ttc aac  gam aca atc cgt gcc  aac ata aca tac ggg  aaa cac agt     3294
Phe Asn  Xaa Thr Ile Arg Ala  Asn Ile Thr Tyr Gly  Lys His Ser
    1085                 1090                 1095
gag gta  aca gag gaa gag atc  act gct gtg gcc aag  gca gca aac     3339
Glu Val  Thr Glu Glu Glu Ile  Thr Ala Val Ala Lys  Ala Ala Asn
    1100                 1105                 1110
gcc cat  gag ttc gta tca agc  ctg cca caa gga tac  gac aca gtg     3384
Ala His  Glu Phe Val Ser Ser  Leu Pro Gln Gly Tyr  Asp Thr Val
    1115                 1120                 1125
gta ggt  gag aaa ggg gtg caa  cta tct ggt ggg caa  aaa cag agg     3429
Val Gly  Glu Lys Gly Val Gln  Leu Ser Gly Gly Gln  Lys Gln Arg
    1130                 1135                 1140
gta gca  att gca agg gcc atc  cta aag gac cct aag  ata ctg cta     3474
Val Ala  Ile Ala Arg Ala Ile  Leu Lys Asp Pro Lys  Ile Leu Leu
    1145                 1150                 1155
ctt gat  gag gca acc agt gct  cta gat gca gaa tca  gaa cgt gtt     3519
Leu Asp  Glu Ala Thr Ser Ala  Leu Asp Ala Glu Ser  Glu Arg Val
    1160                 1165                 1170
gtt caa  gat gca ttg gat cga  gtc atg gtc aac agg  act acc att     3564
Val Gln  Asp Ala Leu Asp Arg  Val Met Val Asn Arg  Thr Thr Ile
    1175                 1180                 1185
gta gtg  gca cac cgc ctc tcc  aca atc aaa ggg gct  gat atg att     3609
Val Val  Ala His Arg Leu Ser  Thr Ile Lys Gly Ala  Asp Met Ile
    1190                 1195                 1200
gca gtc  ctc aag gaa gga aaa  att gca gaa aaa gga  aag cat gaa     3654
Ala Val  Leu Lys Glu Gly Lys  Ile Ala Glu Lys Gly  Lys His Glu
    1205                 1210                 1215
gca cta  ttg cgg atc aag gat  ggt gca tat gct tca  ctt gta caa     3699
Ala Leu  Leu Arg Ile Lys Asp  Gly Ala Tyr Ala Ser  Leu Val Gln
    1220                 1225                 1230
ctc cgc  tct aat tcc gag taa                                       3720
Leu Arg  Ser Asn Ser Glu
    1235
<210>72
<211>1239
<212>PRT
<213>Oryza sativa
<220>
<221>misc_feature
<222>(956)..(956)
<223>The ′Xaa′at location 956 stands for Ser.
<220>
<221>misc_feature
<222>(961)..(961)
<223>The ′Xaa′at location 961 stands for Arg,or Lys.
<220>
<221>misc_feature
<222>(1086)..(1086)
<223>The ′Xaa′at location 1086 stands for Glu,or Asp.
<400>72
Met Asp Glu Ser Gly Arg Gly Thr Gly Asp Asp His Gly Arg Glu Thr
1               5                   10                  15
Lys Asp Ala Ala Ala Ala Ala Ser Ser Ser Ser Gly Lys Lys Val Pro
            20                  25                  30
Leu Phe Ser Leu Phe Arg Tyr Ala Asp Arg Leu Asp Val Leu Leu Met
        35                  40                  45
Val Val Gly Thr Val Gly Ala Leu Gly Asn Gly Ile Ser Gln Pro Leu
    50                  55                  60
Met Thr Val Leu Phe Gly Asn Val Ile Asn Ser Phe Gly Ala Asn Thr
65                  70                  75                  80
Ser Gly Ser Val Leu Arg Ser Val Thr Lys Val Lys Val Ser Cys Trp
                85                  90                  95
Thr Met Ala Gly Glu Arg Gln Ser Ala Arg Ile Arg Ser Leu Tyr Leu
            100                 105                 110
Lys Ala Val Leu Arg Gln Asp Ile Thr Phe Phe Asp Thr Glu Met Thr
        115                 120                 125
Thr Gly Glu Ala Val Ser Arg Met Ser Ser Asp Thr Leu Leu Ile Gln
    130                 135                 140
Gly Ala Leu Gly Glu Lys Gly Gly Lys Leu Val Glu Leu Leu Ser Ser
145                 150                 155                 160
Phe Ile Gly Gly Phe Ile Ile Ala Phe Thr Arg Gly Trp Leu Leu Thr
                165                 170                 175
Leu Val Met Leu Thr Ser Leu Pro Leu Ile Ala Ile Ala Ser Ala Val
            180                 185                 190
Ser Ala Gln Ala Leu Thr Arg Val Ser Ser Lys Arg Gln Thr Ser Tyr
        195                 200                 205
Ser Asp Ala Gly Asp Thr Val Glu Gln Thr Ile Gly Ser Ile Arg Thr
    210                 215                 220
Val Val Ser Phe Asn Gly Glu Lys Lys Ala Ile Ala Met Tyr Arg Asn
225                 230                 235                 240
Phe Ile Lys Lys Ser Tyr Lys Ala Thr Ile Glu Glu Gly Ile Ile Thr
                245                 250                 255
Gly Phe Gly Met Gly Ser Val Met Cys Val Val Phe Gly Ser Tyr Gly
            260                 265                 270
Leu Ala Phe Trp Tyr Gly Gly Lys Leu Ile Ile Glu Lys Gly Tyr Thr
        275                 280                 285
Gly Gly Lys Ile Met Thr Ile Leu Phe Ala Val Leu Thr Gly Asn Ala
    290                 295                 300
Thr Pro Ala Val Ala Ala Val Val Glu Gly Gln Ser Ala Ala Tyr Asn
305                 310                 315                 320
Leu Phe Lys Thr Ile Glu Arg Lys Pro Glu Ile Asp Ser Asp Asp Asn
                325                 330                 335
Asn Gly Met Val Leu Glu Asp Met Asn Gly Asp Ile Glu Leu Lys Asp
            340                 345                 350
Val Tyr Phe Arg Tyr Pro Ala Arg Pro Glu Gln Leu Ile Leu Asp Gly
        355                 360                 365
Leu Ser Leu Gln Val Ala Ser Gly Thr Thr Met Ala Ile Val Gly Glu
    370                 375                 380
Ser Gly Ser Gly Lys Ser Thr Val Ile Ser Leu Val Glu Arg Phe Tyr
385                 390                 395                 400
Asp Pro Gln Ser Gly Glu Val Leu Ile Asp Gly Ile Ser Ile Lys Lys
                405                 410                 415
Leu Arg Leu Asp Trp Ile Arg Gly Lys Ile Gly Leu Val Ser Gln Glu
            420                 425                 430
Pro Leu Leu Phe Met Ala Ser Ile Lys Asp Asn Ile Ile Tyr Gly Lys
        435                 440                 445
Lys Asp Ala Thr Leu Glu Glu Ile Lys Arg Ala Ala Glu Leu Ala Asn
    450                 455                 460
Ala Ala Asn Phe Ile Asp Lys Leu Pro Asn Gly Tyr Asp Thr Leu Val
465                 470                 475                 480
Gly Gln Arg Gly Thr Gln Leu Ser Gly Gly Gln Lys Gln Arg Ile Ala
                485                 490                 495
Ile Ala Arg Ala Ile Leu Lys Asp Pro Lys Ile Leu Leu Leu Asp Glu
            500                 505                 510
Ala Thr Ser Ala Leu Asp Val Glu Ser Glu Arg Ile Val Gln Glu Ala
        515                 520                 525
Leu Asn Arg Met Met Val Glu Arg Thr Thr Leu Val Val Ala His Arg
    530                 535                 540
Leu Ser Thr Val Arg Asn Val Asp Cys Ile Thr Val Val Arg Lys Gly
545                 550                 555                 560
Lys Ile Val Glu Gln Gly Pro His Asp Ala Leu Val Lys Asp Pro Asp
                565                 570                 575
Gly Ala Tyr Ser Gln LeuIle Arg Leu Gln Glu Thr His Arg Asp Glu
            580                 585                 590
Arg His Lys Leu Pro Asp Ser Arg Ser Lys Ser Thr Ser Leu Ser Phe
        595                 600                 605
Arg Arg Ser Arg Thr Lys Asp Phe Leu Ser Lys Ser Asn Arg Tyr Ser
    610                 615                 620
Phe Lys Ser Pro Leu Gly Leu Pro Val Asp Ile His Glu Asp Gly Met
 625                 630                 635                640
Thr Ser Glu Gln Gln Lys Val Asp His Ser Asp Ser Lys Ala Ile Lys
                645                 650                 655
Lys Thr Pro Phe Gly Arg Leu Phe Asn Leu Asn Lys Pro Glu Val Pro
            660                 665                 670
Val Leu Leu Leu Gly Ser Ile Ala Ala Ser Val His Gly Val Ile Leu
        675                 680                 685
Pro Leu Tyr Gly Ile Ile Met Pro Gly Val Leu Lys Ser Phe Tyr Glu
    690                 695                 700
Pro Pro Asp Gln Leu Arg Lys Asp Ser Arg Phe Trp Ala Leu Met Ser
705                 710                 715                 720
Val Val Leu Gly Val Ala Cys Leu Ile Ser Ile Pro Ala Glu Tyr Phe
                725                 730                 735
Leu Phe Gly Ile Ala Gly Gly Lys Leu Ile Gln Arg Val Arg Thr Leu
            740                 745                 750
Ser Phe Gln Arg Ile Met His Gln Glu Val Ala Trp Phe Asp Lys Pro
        755                 760                 765
Ser Asn Ser Ser Gly Ala Leu Gly Thr Arg Leu Ser Val Asp Ala Leu
    770                 775                 780
Asn Val Arg Arg Leu Val Gly Asp Asn Leu Ala Leu Ile Val Gln Ala
785                 790                 795                 800
Val Ala Thr Leu Ile Thr Gly Phe Ala Ile Ala Phe Ala Ala Asp Trp
                805                 810                 815
Arg Leu Ala Leu Ile Ile Thr Cys Val Ile Pro Leu Val Gly Ala Gln
            820                 825                 830
Gly Tyr Ala Gln Val Lys Phe Leu Lys Gly Phe Ser Glu Glu Ser Lys
        835                 840                 845
Glu Met Tyr Glu Asp Ala Asn Gln Val Ala Ala Asp Ala Val Gly Ser
    850                 855                 860
Ile Arg Thr Val Ala Ser Phe Cys Ser Glu Lys Arg Val Val Ala Ile
865                 870                 875                 880
Tyr Asn Lys Lys Cys Glu Ala Leu Arg Lys Gln Gly Ile Arg Ser Gly
                885                 890                 895
Ile Val Gly Gly Ile Gly Leu Ser Phe Ser Asn Leu Met Leu Tyr Leu
            900                 905                 910
Thr Tyr Gly Leu Cys Phe Tyr Val Gly Ala Lys Phe Val Ser Gln Gly
        915                 920                 925
Lys Thr Thr Phe Ser Asp Val Phe Lys Val Phe Phe Ala Leu Val Leu
    930                 935                 940
Ala Ala Val Gly Val Ser Gln Ser Ser Ala Leu Xaa Thr Asn Ala Thr
945                 950                 955                 960
Xaa Ala Arg Asp Ser Ala Ile Ser Ile Phe Ser Ile Ile Asp Arg Lys
                965                 970                 975
Ser Arg Ile Asp Ser Ser Ser Asp Glu Gly Ala Ile Met Glu Asn Val
            980                 985                 990
Thr Gly Ser Ile Asp Phe Asn Asn  Val Ser Phe Lys Tyr  Pro Ser Arg
        995                 1000                 1005
Pro Asp  Val Gln Ile Phe Ser  Asp Phe Thr Leu His  Ile Pro Ser
    1010                 1015                 1020
Gln Lys  Thr Ile Ala Leu Val  Gly Glu Ser Gly Ser  Gly Lys Ser
    1025                 1030                 1035
Thr Ile  Ile Ala Leu Leu Glu  Arg Phe Tyr Asp Pro  Asp Ser Gly
    1040                 1045                 1050
Asn Ile  Ser Leu Asp Gly Val  Glu Ile Arg Ser Leu  Lys Val Ser
    1055                 1060                 1065
Trp Leu  Arg Asp Gln Met Gly  Leu Val Gly Gln Glu  Pro Val Leu
    1070                 1075                 1080
Phe Asn  Xaa Thr Ile Arg Ala  Asn Ile Thr Tyr Gly  Lys His Ser
    1085                 1090                 1095
Glu Val  Thr Glu Glu Glu Ile  Thr Ala Val Ala Lys  Ala Ala Asn
    1100                 1105                 1110
Ala His  Glu Phe Val Ser Ser  Leu Pro Gln Gly Tyr  Asp Thr Val
    1115                 1120                 1125
Val Gly  Glu Lys Gly Val Gln  Leu Ser Gly Gly Gln  Lys Gln Arg
    1130                 1135                 1140
Val Ala  Ile Ala Arg Ala Ile  Leu Lys Asp Pro Lys  Ile Leu Leu
    1145                 1150                 1155
Leu Asp  Glu Ala Thr Ser Ala  Leu Asp Ala Glu Ser  Glu Arg Val
    1160                 1165                 1170
Val Gln  Asp Ala Leu Asp Arg  Val Met Val Asn Arg  Thr Thr Ile
    1175                 1180                 1185
Val Val  Ala His Arg Leu Ser  Thr Ile Lys Gly Ala  Asp Met Ile
    1190                 1195                 1200
Ala Val  Leu Lys Glu Gly Lys  Ile Ala Glu Lys Gly  Lys His Glu
    1205                 1210                 1215
Ala Leu  Leu Arg Ile Lys Asp  Gly Ala Tyr Ala Ser  Leu Val Gln
    1220                 1225                 1230
Leu Arg  Ser Asn Ser Glu
    1235
<210>73
<211>2625
<212>DNA
<213>Oryza sativa
<220>
<221>CDS
<222>(1)..(2625)
<400>73
atg gcg gcg gcg gag cag agc gcg gag cag ttc agg ggc cag gcg agg    48
Met Ala Ala Ala Glu Gln Ser Ala Glu Gln Phe Arg Gly Gln Ala Arg
1               5                   10                  15
ctc ccg ggg ttc gcg gcg cec cgg cgg tac gac ctg cgg ctc gtc ccc    96
Leu Pro Gly Phe Ala Ala Pro Arg Arg Tyr Asp Leu Arg Leu Val Pro
            20                  25                  30
gac ctc gac ggg tgc gcc ttc acg gga tct gtg gac gtc tcc gtc gac    144
Asp Leu Asp Gly Cys Ala Phe Thr Gly Ser Val Asp Val Ser Val Asp
        35                  40                  45
gtc acg gcg ccc acc agg ttc ctc gtg ctc aac gcc gcc gag ctc gag    192
Val Thr Ala Pro Thr Arg Phe Leu Val Leu Asn Ala Ala Glu Leu Glu
    50                  55                  60
gtc tcc ccc ggg ggc gtc cag ttc aag ccc cat ggc gcc gag cag gag    240
Val Ser Pro Gly Gly Val Gln Phe Lys Pro His Gly Ala Glu Gln Glu
65                  70                  75                  80
ctg cac cca gcg gag gtt acc aat gtg cca gag gat gag atc ctg att    288
Leu His Pro Ala Glu Val Thr Asn Val Pro Glu Asp Glu Ile Leu Ile
                85                  90                  95
atc cgc ttc aat gag gtt ctt cct gta ggg gag gga act tta gta att    336
Ile Arg Phe Asn Glu Val Leu Pro Val Gly Glu Gly Thr Leu Val Ile
            100                 105                 110
gca ttc aag gga act ctg aac gac aag atg cat ggc ttc tac aga agt    384
Ala Phe Lys Gly Thr Leu Asn Asp Lys Met His Gly Phe Tyr Arg Ser
        115                 120                 125
gtg tat gaa ctc aat ggg gag aag aag aac atg gcg gta acc cag ttt    432
Val Tyr Glu Leu Asn Gly Glu Lys Lys Asn Met Ala Val Thr Gln Phe
    130                 135                 140
gaa cct gct gac gca agg cgt tgt ttt cct tgt tgg gat gag ccc tct    480
Glu Pro Ala Asp Ala Arg Arg Cys Phe Pro Cys Trp Asp Glu Pro Ser
145                 150                 155                 160
ttt aag gct ata ttc aaa att act cta gaa gtt ccg tct gag acc gtt    528
Phe Lys Ala Ile Phe Lys Ile Thr Leu Glu Val Pro Ser Glu Thr Val
                165                 170                 175
gca ttg tca aac atg cca gtg gtt gaa gag aag gtc aat ggc ctt atc    576
Ala Leu Ser Asn Met Pro Val Val Glu Glu Lys Val Asn Gly Leu Ile
            180                 185                 190
aaa gct gtc tat ttt caa gaa aca cca ata atg tca aca tac cta gtg    624
Iys Ala Val Tyr Phe Gln Glu Thr Pro Ile Met Ser Thr Tyr Leu Val
        195                 200                 205
gct gtt att gtt ggc atg ttc gac tat gtg gaa gct ttc acc act gat    672
Ala Val Ile Val Gly Met Phe Asp Tyr Val Glu Ala Phe Thr Thr Asp
    210                 215                 220
ggc act agg gtt cgt gtt tac act caa gtt ggc aag agt gcc cag gga    720
Gly Thr Arg Val Arg Val Tyr Thr Gln Val Gly Lys Ser Ala Gln Gly
225                 230                 235                 240
aag ttt gca cta gag gtt gct gtg aag aca ctg gtc ctc ttc aag gag    768
Lys Phe Ala Leu Glu Val Ala Val Lys Thr Leu Val Leu Phe Lys Glu
                245                 250                 255
tat ttt gct gtg cca tac cca ctc cca aaa atg gac atg att gcc att    816
Tyr Phe Ala Val Pro Tyr Pro Leu Pro Lys Met Asp Met Ile Ala Ile
            260                 265                 270
cct gat ttt gcc tct gga gca atg gag aac tat ggc ttg gtt aca tat    864
Pro Asp Phe Ala Ser Gly Ala Met Glu Asn Tyr Gly Leu Val Thr Tyr
        275                 280                 285
cgt gaa aca gct ttg tta ttt gat gag aaa cac tct gca gct gcg aat    912
Arg Glu Thr Ala Leu Leu Phe Asp Glu Lys His Ser Ala Ala Ala Asn
    290                 295                 300
aag caa agg gtt gca gtt gtg gta gcc cat gaa tta gct cac cag tgg    960
Lys Gln Arg Val Ala Val Val Val Ala His Glu Leu Ala His Gln Trp
305                 310                 315                 320
ttt gga aat ctt gtg acg atg gag tgg tgg aca cac cta tgg ctt aac    1008
Phe Gly Asn Leu Val Thr Met Glu Trp Trp Thr His Leu Trp Leu Asn
                325                 330                 335
gag ggt ttt gcg aca tgg gtc tcc tac tta gct gca gac aat ttc ttt    1056
Glu Gly Phe Ala Thr Trp Val Ser Tyr Leu Ala Ala Asp Asn Phe Phe
            340                 345                 350
cct gaa tgg aat gtt tgg acc caa ttt ctt gag gaa tct aca aca ggt    1104
Pro Glu Trp Asn Val Trp Thr Gln Phe Leu Glu Glu Ser Thr Thr Gly
        355                 360                 365
ttc aag tta gat gcc ctt gca ggg tca cat cca att gag gtc gac gta    1152
Phe Lys Leu Asp Ala Leu Ala Gly Ser His Pro Ile Glu Val Asp Val
    370                 375                 380
aat cac gtt gat gaa ata gat gaa ata ttt gat gct ata agc tac agg    1200
Asn His Val Asp Glu Ile Asp Glu Ile Phe Asp Ala Ile Ser Tyr Arg
385                 390                 395                 400
aaa gga gct gct gtt att cgg atg ctg caa agc tat ctt ggg gct gaa    1248
Lys Gly Ala Ala Val Ile Arg Met Leu Gln Ser Tyr Leu Gly Ala Glu
                405                 410                 415
act ttt cag aaa tct ctg gcc gca tac atc gaa aag ttc gca tat tca    1296
Thr Phe Gln Lys Ser Leu Ala Ala Tyr Ile Glu Lys Phe Ala Tyr Ser
            420                 425                 430
aat gcc aag act gag gac ttg tgg gct gcc ctt gaa gag ggg tct ggt    1344
Asn Ala Lys Thr Glu Asp Leu Trp Ala Ala Leu Glu Glu Gly Ser Gly
        435                 440                 445
gaa cca gtg aaa aca tta atg cat tca tgg aca aag cag caa ggg tac    1392
Glu Pro Val Lys Thr Leu Met His Ser Trp Thr Lys Gln Gln Gly Tyr
    450                 455                 460
cct gtt gtt aat gtg aag ctc aag gat gga aag cta gag atg gag cag    1440
Pro Val Val Asn Val Lys Leu Lys Asp Gly Lys Leu Glu Met Glu Gln
465                 470                 475                 480
aca cag ttc cta tca agc ggg gct gaa gga gtt ggg caa tgg gtg gtt    1488
Thr Gln Phe Leu Ser Ser Gly Ala Glu Gly Val Gly Gln Trp Val Val
                485                 490                 495
ccc atc aca ctg tgt tgc tgt tcg tac tca cgt caa gag aag ttc ctt    1536
Pro Ile Thr Leu Cys Cys Cys Ser Tyr Ser Arg Gln Glu Lys Phe Leu
            500                 505                 510
ttt aat gga aag caa gag gat ttt aat ttg tca ggg ctt gta gaa tgt    1584
Phe Asn Gly Lys Gln Glu Asp Phe Asn Leu Ser Gly Leu Val Glu Cys
        515                 520                 525
caa aag aaa gaa gac ttc tgg att aaa ctt aat gtc aat cag act ggc    1632
Gln Lys Lys Glu Asp Phe Trp Ile Lys Leu Asn Val Asn Gln Thr Gly
    530                 535                 540
ttc tat aga gtg agc tat gat gag gaa ctt gca tct cga ctt aga tat    1680
Phe Tyr Arg Val Ser Tyr Asp Glu Glu Leu Ala Ser Arg Leu Arg Tyr
545                 550                 555                 560
gca att gaa gcc aac aaa ctg agt gca gca gac aga tat ggt gta ctt    1728
Ala Ile Glu Ala Asn Lys Leu Ser Ala Ala Asp Arg Tyr Gly Val Leu
                565                 570                 575
gat gac aca tat gcc ctc tgt atg gct ggc aaa cag aag cta gtc tcc    1776
Asp Asp Thr Tyr Ala Leu Cys Met Ala Gly Lys Gln Lys Leu Val Ser
            580                 585                 590
tta ttg cat ttg att gct gcg tac aag gat gaa acc gag tat act gtg    1824
Leu Leu His Leu Ile Ala Ala Tyr Lys Asp Glu Thr Glu Tyr Thr Val
        595                 600                 605
ctc gcc aca agt ctg agc att gtc gag atg gtg gct gtt gct gct cct    1872
Leu Ala Thr Ser Leu Ser Ile Val Glu Met Val Ala Val Ala Ala Pro
    610                 615                 620
gag ggg ttg ggc aag ctg aaa aag ttc ctg att gac ttt ctt gag cca    1920
Glu Gly Leu Gly Lys Leu Lys Lys Phe Leu Ile Asp Phe Leu Glu Pro
 625                 630                 635                 640
ttt gca cag aga att ggt tgg gat gct aaa agc ggt gag ggt cac ttg    1968
Phe Ala Gln Arg Ile Gly Trp Asp Ala Lys Ser Gly Glu Gly His Leu
                645                 650                 655
gat gca tta ttg aga ggt aca ctt tta act gct ctg gca gaa ctt ggc    2016
Asp Ala Leu Leu Arg Gly Thr Leu Leu Thr Ala Leu Ala Glu Leu Gly
            660                 665                 670
cat gaa gct aca ata aat gaa gct gta cgc cga ttt aac atc ttt gtg    2064
His Glu Ala Thr Ile Asn Glu Ala Val Arg Arg Phe Asn Ile Phe Val
        675                 680                 685
gaa gat aga gaa aca cca cta ctc cct cca gat gtt cga aag gcg gca    2112
Glu Asp Arg Glu Thr Pro Leu Leu Pro Pro Asp Val Arg Lys Ala Ala
    690                 695                 700
tat gtt gct ttg atg cag aca gtg aac aaa tca aac aga gcc ggc tat    2160
Tyr Val Ala Leu Met Gln Thr Val Asn Lys Ser Asn Arg Ala Gly Tyr
705                 710                 715                 720
gaa tca cta ttg aag atc tat aaa gaa act gat ctg agc cag gaa aaa    2208
Glu Ser Leu Leu Lys Ile Tyr Lys Glu Thr Asp Leu Ser Gln Glu Lys
                725                 730                 735
gtc aga att tta ggt tct cta gca tct tgc cct gat cct gat gtt gtt    2256
Val Arg Ile Leu Gly Ser Leu Ala Ser Cys Pro Asp Pro Asp Val Val
            740                 745                 750
cgt gat aca ctg gac ttc atg ctg tca cct gag gtg agg aat cag gac    2304
Arg Asp Thr Leu Asp Phe Met Leu Ser Pro Glu Val Arg Asn Gln Asp
        755                 760                 765
tct ata ttt ttg ctt aga gga gtc ggt gca gcg gga cat gag gtg gca    2352
Ser Ile Phe Leu Leu Arg Gly Val Gly Ala Ala Gly His Glu Val Ala
    770                 775                 780
tgg aca tgg ttg aag gaa aag tgg gac tac att tca gac acc ttc tct    2400
Trp Thr Trp Leu Lys Glu Lys Trp Asp Tyr Ile Ser Asp Thr Phe Ser
785                 790                 795                 800
gga act ctt ctc acc tat ttc gtt tcc acc acc gtc tca ccg ctg cgc    2448
Gly Thr Leu Leu Thr Tyr Phe Val Ser Thr Thr Val Ser Pro Leu Arg
                805                 810                 815
acc gat gaa atg ggc gac gac gcg gag gag ttc ttc aag agc agg acg    2496
Thr Asp Glu Met Gly Asp Asp Ala Glu Glu Phe Phe Lys Ser Arg Thr
            820                 825                 830
aag gcc aac atc gcg agg acg gtg aag cag agc atc gag aga gtg agg    2544
Lys Ala Asn Ile Ala Arg Thr Val Lys Gln Ser Ile Glu Arg Val Arg
        835                 840                 845
atc aat gcc aaa tgg gtg gag agc acc agg gcc gag gct aac ctg ggc    2592
Ile Asn Ala Lys Trp Val Glu Ser Thr Arg Ala Glu Ala Asn Leu Gly
    850                 855                 860
aat gtc ctc aag gaa att tct cac gac cac tga                        2625
Asn Val Leu Lys Glu Ile Ser His Asp His
865                 870
<210>74
<211>874
<212>PRT
<213>Oryza sativa
<400>74
Met Ala Ala Ala Glu Gln Ser Ala Glu Gln Phe Arg Gly Gln Ala Arg
1               5                   10                  15
Leu Pro Gly Phe Ala Ala Pro Arg Arg Tyr Asp Leu Arg Leu Val Pro
            20                  25                  30
Asp Leu Asp Gly Cys Ala Phe Thr Gly Ser Val Asp Val Ser Val Asp
        35                  40                  45
Val Thr Ala Pro Thr Arg Phe Leu Val Leu Asn Ala Ala Glu Leu Glu
    50                  55                  60
Val Ser Pro Gly Gly Val Gln Phe Lys Pro His Gly Ala Glu Gln Glu
65                  70                  75                  80
Leu His Pro Ala Glu Val Thr Asn Val Pro Glu Asp Glu Ile Leu Ile
                85                  90                  95
Ile Arg Phe Asn Glu Val Leu Pro Val Gly Glu Gly Thr Leu Val Ile
            100                 105                 110
Ala Phe Lys Gly Thr Leu Asn Asp Lys Met His Gly Phe Tyr Arg Ser
        115                 120                 125
Val Tyr Glu Leu Asn Gly Glu Lys Lys Asn Met Ala Val Thr Gln Phe
    130                 135                 140
Glu Pro Ala Asp Ala Arg Arg Cys Phe Pro Cys Trp Asp Glu Pro Ser
145                 150                 155                 160
Phe Lys Ala Ile Phe Lys Ile Thr Leu Glu Val Pro Ser Glu Thr Val
                165                 170                 175
Ala Leu Ser Asn Met Pro Val Val Glu Glu Lys Val Asn Gly Leu Ile
            180                 185                 190
Lys Ala Val Tyr Phe Gln Glu Thr Pro Ile Met Ser Thr Tyr Leu Val
        195                 200                 205
Ala Val Ile Val Gly Met Phe Asp Tyr Val Glu Ala Phe Thr Thr Asp
    210                 215                 220
Gly Thr Arg Val Arg Val Tyr Thr Gln Val Gly Lys Ser Ala Gln Gly
225                 230                 235                 240
Lys Phe Ala Leu Glu Val Ala Val Lys Thr Leu Val Leu Phe Lys Glu
                245                 250                 255
Tyr Phe Ala Val Pro Tyr Pro Leu Pro Lys Met Asp Met Ile Ala Ile
            260                 265                 270
Pro Asp Phe Ala Ser Gly Ala Met Glu Asn Tyr Gly Leu Val Thr Tyr
        275                 280                 285
Arg Glu Thr Ala Leu Leu Phe Asp Glu Lys His Ser Ala Ala Ala Asn
    290                 295                 300
Lys Gln Arg Val Ala Val Val Val Ala His Glu Leu Ala His Gln Trp
305                 310                 315                 320
Phe Gly Asn Leu Val Thr Met Glu Trp Trp Thr His Leu Trp Leu Asn
                325                 330                 335
Glu Gly Phe Ala Thr Trp Val Ser Tyr Leu Ala Ala Asp Asn Phe Phe
            340                 345                 350
Pro Glu Trp Asn Val Trp Thr Gln Phe Leu Glu Glu Ser Thr Thr Gly
        355                 360                 365
Phe Lys Leu Asp Ala Leu Ala Gly Ser His Pro Ile Glu Val Asp Val
    370                 375                 380
Asn His Val Asp Glu Ile Asp Glu Ile Phe Asp Ala Ile Ser Tyr Arg
385                 390                 395                 400
Lys Gly Ala Ala Val Ile Arg Met Leu Gln Ser Tyr Leu Gly Ala Glu
                405                 410                 415
Thr Phe Gln Lys Ser Leu Ala Ala Tyr Ile Glu Lys Phe Ala Tyr Ser
            420                 425                 430
Asn Ala Lys Thr Glu Asp Leu Trp Ala Ala Leu Glu Glu Gly Ser Gly
        435                 440                 445
Glu Pro Val Lys Thr Leu Met His Ser Trp Thr Lys Gln Gln Gly Tyr
    450                 455                 460
Pro Val Val Asn Val Lys Leu Lys Asp Gly Lys Leu Glu Met Glu Gln
465                 470                 475                 480
Thr Gln Phe Leu Ser Ser Gly Ala Glu Gly Val Gly Gln Trp Val Val
                485                 490                 495
Pro Ile Thr Leu Cys Cys Cys Ser Tyr Ser Arg Gln Glu Lys Phe Leu
            500                 505                 510
Phe Asn Gly Lys Gln Glu Asp Phe Asn Leu Ser Gly Leu Val Glu Cys
        515                 520                 525
Gln Lys Lys Glu Asp Phe Trp Ile Lys Leu Asn Val Asn Gln Thr Gly
    530                 535                 540
Phe Tyr Arg Val Ser Tyr Asp Glu Glu Leu Ala Ser Arg Leu Arg Tyr
545                 550                 555                 560
Ala Ile Glu Ala Asn Lys Leu Ser Ala Ala Asp Arg Tyr Gly Val Leu
                565                 570                 575
Asp Asp Thr Tyr Ala Leu Cys Met Ala Gly Lys Gln Lys Leu Val Ser
            580                 585                 590
Leu Leu His Leu Ile Ala Ala Tyr Lys Asp Glu Thr Glu Tyr Thr Val
        595                 600                 605
Leu Ala Thr Ser Leu Ser Ile Val Glu Met Val Ala Val Ala Ala  Pro
    610                 615                 620
Glu Gly Leu Gly Lys Leu Lys Lys Phe Leu Ile Asp Phe Leu Glu Pro
625                 630                 635                 640
Phe Ala Gln Arg Ile Gly Trp Asp Ala Lys Ser Gly Glu Gly His Leu
                645                 650                 655
Asp Ala Leu Leu Arg Gly Thr Leu Leu Thr Ala Leu Ala Glu Leu Gly
            660                 665                 670
His Glu Ala Thr Ile Asn Glu Ala Val Arg Arg Phe Asn Ile Phe Val
        675                 680                 685
Glu Asp Arg Glu Thr Pro Leu Leu Pro Pro Asp Val Arg Lys Ala Ala
    690                 695                 700
Tyr Val Ala Leu Met Gln Thr Val Asn Lys Ser Asn Arg Ala Gly Tyr
705                 710                 715                 720
Glu Ser Leu Leu Lys Ile Tyr Lys Glu Thr Asp Leu Ser Gln Glu Lys
                725                 730                 735
Val Arg Ile Leu Gly Ser Leu Ala Ser Cys Pro Asp Pro Asp Val Val
            740                 745                 750
Arg Asp Thr Leu Asp Phe Met Leu Ser Pro Glu Val Arg Asn Gln Asp
        755                 760                 765
Ser Ile Phe Leu Leu Arg Gly Val Gly Ala Ala Gly His Glu Val Ala
    770                 775                 780
Trp Thr Trp Leu Lys Glu Lys Trp Asp Tyr Ile Ser Asp Thr Phe Ser
785                 790                 795                 800
Gly Thr Leu Leu Thr Tyr Phe Val Ser Thr Thr Val Ser Pro Leu Arg
                805                 810                 815
Thr Asp Glu Met Gly Asp Asp Ala Glu Glu Phe Phe Lys Ser Arg Thr
            820                 825                 830
Lys Ala Asn Ile Ala Arg Thr Val Lys Gln Ser Ile Glu Arg Val Arg
        835                 840                 845
Ile Asn Ala Lys Trp Val Glu Ser Thr Arg Ala Glu Ala Asn Leu Gly
    850                 855                 860
Asn Val Leu Lys Glu Ile Ser His Asp His
865                 870
<210>75
<211>378
<212>DNA
<213>Oryza sativa
<220>
<221>CDS
<222>(1)..(378)
<400>75
aca aac tcc ctg gtg caa atc aga agg gca ctt cgt gcc ctt gtt gat         48
Thr Asn Ser Leu Val Gln Ile Arg Arg Ala Leu Arg Ala Leu Val Asp
1               5                   10                  15
gat cac acg gat ggg ttg atg gat ttt gaa gat act gaa gtg aga tct         96
Asp His Thr Asp Gly Leu Met Asp Phe Glu Asp Thr Glu Val Arg Ser
            20                  25                  30
tcg gag gaa act gat gct ttg gag gaa gct aga ttg gca atc gag caa        144
Ser Glu Glu Thr Asp Ala Leu Glu Glu Ala Arg Leu Ala Ile Glu Gln
        35                  40                  45
gta gtg atc cca aaa ggt gaa agc gtg cag cta ctg ccc aga cca cca        192
Val Val Ile Pro Lys Gly Glu Ser Val Gln Leu Leu Pro Arg Pro Pro
    50                  55                  60
agc atc atc gct tcc cag gtg gat cta gtc gaa agt ttc aag ctc aag        240
Ser Ile Ile Ala Ser Gln Val Asp Leu Val Glu Ser Phe Lys Leu Lys
65                  70                  75                  80
tgg gaa tct ata ggc cag gag cca aac gca tgc ctc aga att ctt ccg        288
Trp Glu Ser Ile Gly Gln Glu Pro Asn Ala Cys Leu Arg Ile Leu Pro
                85                  90                  95
caa ttc gta ggc gtg gaa gaa ggc ggc aag tct gtc aag caa gaa gct        336
Gln Phe Val Gly Val Glu Glu Gly Gly Lys Ser Val Lys Gln Glu Ala
            100                 105                 110
gca act gag ctc aca gat tca gac aat tca gat gac atg gac                378
Ala Thr Glu Leu Thr Asp Ser Asp Asn Ser Asp Asp Met Asp
        115                 120                 125
<210>76
<211>126
<212>PRT
<213>Oryza sativa
<400>76
Thr Asn Ser Leu Val Gln Ile Arg Arg Ala Leu Arg Ala Leu Val Asp
1               5                   10                  15
Asp His Thr Asp Gly Leu Met Asp Phe Glu Asp Thr Glu Val Arg Ser
            20                  25                  30
Ser Glu Glu Thr Asp Ala Leu Glu Glu Ala Arg Leu Ala Ile Glu Gln
        35                  40                  45
Val Val Ile Pro Lys Gly Glu Ser Val Gln Leu Leu Pro Arg Pro Pro
    50                  55                  60
Ser Ile Ile Ala Ser Gln Val Asp Leu Val Glu Ser Phe Lys Leu Lys
65                  70                  75                  80
Trp Glu Ser Ile Gly Gln Glu Pro Asn Ala Cys Leu Arg Ile Leu Pro
                85                  90                  95
Gln Phe Val Gly Val Glu Glu Gly Gly Lys Ser Val Lys Gln Glu Ala
            100                 105                 110
Ala Thr Glu Leu Thr Asp Ser Asp Asn Ser Asp Asp Met Asp
        115                 120                 125
<210>77
<211>528
<212>DNA
<213>Oryza satiVa
<220>
<221>CDS
<222>(1)..(528)
<400>77
cca cgc gtc cgg acg gtg gcc tcg gcg cgc gac ctc aag aac gtc aac         48
Pro Arg Val Arg Thr Val Ala Ser Ala Arg Asp Leu Lys Asn Val Asn
1               5                   10                  15
tgg cgc aac ggc gac ctc aag ccc tac gcc gtc gtg tgg atc gac gac         96
Trp Arg Asn Gly Asp Leu Lys Pro Tyr Ala Val Val Trp Ile Asp Asp
            20                  25                  30
ggc gcc aag tgc tcc acc cgc gtc gac ctc gac aac gcc gac aac ccc        144
Gly Ala Lys Cys Ser Thr Arg Val Asp Leu Asp Asn Ala Asp Asn Pro
        35                  40                  45
acc tgg gat gac aag ctc acc gtc cct ctc ccg ccc tcc acc cgc ctc        192
Thr Trp Asp Asp Lys Leu Thr Val Pro Leu Pro Pro Ser Thr Arg Leu
    50                  55                  60
gac gac gcc gtc ctc tac ctc gac gtc gtc cac gcc aac gcc acc gac        240
Asp Asp Ala Val Leu Tyr Leu Asp Val Val His Ala Asn Ala Thr Asp
65                  70                  75                  80
ggc gtc aag ccc ctc gtc ggc tcc gcg cgc ctc ccg ctc cgc gac gtc        288
Gly Val Lys Pro Leu Val Gly Ser Ala Arg Leu Pro Leu Arg Asp Val
                85                  90                  95
ctc gcc gac acc ggc ata ggc gcc cga gcc tcc cgc tcc ctc cgc ctc        336
Leu Ala Asp Thr Gly Ile Gly Ala Arg Ala Ser Arg Ser Leu Arg Leu
            100                 105                 110
aag cgc ccc tcc ggc cgc ccc cat gga cgc ctc gaa gtc cgc gtc gcc        384
Lys Arg Pro Ser Gly Arg Pro His Gly Arg Leu Glu Val Arg Val Ala
        115                 120                 125
gtc cgc gag ccc aag cgc tac tac gac ccc tcg ccg gcg tac cct gct        432
Val Arg Glu Pro Lys Arg Tyr Tyr Asp Pro Ser Pro Ala Tyr Pro Ala
    130                 135                 140
ccc tac cac cag cag acg aac cgt gac ccc tac gcc tac ggt aac act        480
Pro Tyr His Gln Gln Thr Asn Arg Asp Pro Tyr Ala Tyr Gly Asn Thr
145                 150                 155                 160
aca act ggt ggc tat ggc tat gcc tat ggc ggt acc cct ttc cta taa        528
Thr Thr Gly Gly Tyr Gly Tyr Ala Tyr Gly Gly Thr Pro Phe Leu
                165                 170                 175
<210>78
<211>175
<212>PRT
<213>Oryza sativa
<400>78
Pro Arg Val Arg Thr Val Ala Ser Ala Arg Asp Leu Lys Asn Val Asn
1               5                   10                  15
Trp Arg Asn Gly Asp Leu Lys Pro Tyr Ala Val Val Trp Ile Asp Asp
            20                  25                  30
Gly Ala Lys Cys Ser Thr Arg Val Asp Leu Asp Asn Ala Asp Asn Pro
        35                  40                  45
Thr Trp Asp Asp Lys Leu Thr Val Pro Leu Pro Pro Ser Thr Arg Leu
    50                  55                  60
Asp Asp Ala Val Leu Tyr Leu Asp Val Val His Ala Asn Ala Thr Asp
65                  70                  75                  80
Gly Val Lys Pro Leu Val Gly Ser Ala Arg Leu Pro Leu Arg Asp Val
                85                  90                  95
Leu Ala Asp Thr Gly Ile Gly Ala Arg Ala Ser Arg Ser Leu Arg Leu
            100                 105                 110
Lys Arg Pro Ser Gly Arg Pro His Gly Arg Leu Glu Val Arg Val Ala
        115                 120                 125
Val Arg Glu Pro Lys Arg Tyr Tyr Asp Pro Ser Pro Ala Tyr Pro Ala
    130                 135                 140
Pro Tyr His Gln Gln Thr Asn Arg Asp Pro Tyr Ala Tyr Gly Asn Thr
145                 150                 155                 160
Thr Thr Gly Gly Tyr Gly Tyr Ala Tyr Gly Gly Thr Pro Phe Leu
                165                 170                 175
<210>79
<211>687
<212>DNA
<213>Oryza sativa
<220>
<221>CDS
<222>(1)..(687)
<400>79
atg gcg gag gcg gag gcg ggg agg aag gag aag aag gag gtg gtg cgg         48
Met Ala Glu Ala Glu Ala Gly Arg Lys Glu Lys Lys Glu Val Val Arg
1               5                   10                  15
ctg gag cgc gaa tcg gtg atc ccc atc atg aag ccc aag ctc atc atg         96
Leu Glu Arg Glu Ser Val Ile Pro Ile Met Lys Pro Lys Leu Ile Met
            20                  25                  30
aag ctc gcc tac ctc atc gaa caa caa tct gac aga gaa gaa ttc ttg        144
Lys Leu Ala Tyr Leu Ile Glu Gln Gln Ser Asp Arg Glu Glu Phe Leu
        35                  40                  45
aag ctc tgc aag agg att gag tac acc att agg gcc tgg tat cat ctc        192
Lys Leu Cys Lys Arg Ile Glu Tyr Thr Ile Arg Ala Trp Tyr His Leu
    50                  55                  60
cag ttt gat gat atg atg gaa cta ttt gct ctt ttt gac cct gtt cat        240
Gln Phe Asp Asp Met Met Glu Leu Phe Ala Leu Phe Asp Pro Val His
65                  70                  75                  80
ggt gcc caa aaa ctg caa cag cag aat ttc tcg act gag gaa gtc gat        288
Gly Ala Gln Lys Leu Gln Gln Gln Asn Phe Ser Thr Glu Glu Val Asp
                85                  90                  95
aca ctc gag cag aac ttc ctg acc tat ttc ttt cag gtg atg caa aaa        336
Thr Leu Glu Gln Asn Phe Leu Thr Tyr Phe Phe Gln Val Met Gln Lys
            100                 105                 110
agc aat ttc aac ata tta tca gat gat gag gtt gag ctt gct cat tct        384
Ser Asn Phe Asn Ile Leu Ser Asp Asp Glu Val Glu Leu Ala His Ser
        115                 120                 125
gga caa tat ctg ctg aat ctt ccc atc aaa gtt gat gaa gca aag tta        432
Gly Gln Tyr Leu Leu Asn Leu Pro Ile Lys Val Asp Glu Ala Lys Leu
    130                 135                 140
gat aac aaa ctt ttg tca aag tat ttt aaa gag cac cat cac gac aac        480
Asp Asn Lys Leu Leu Ser Lys Tyr Phe Lys Glu His His His Asp Asn
145                 150                 155                 160
cta ccg gag ttc tca gat aag tat gtc ata ttc cgg agg ggc att gga        528
Leu Pro Glu Phe Ser Asp Lys Tyr Val Ile Phe Arg Arg Gly Ile Gly
                165                 170                 175
ctg gat cgc act agc aac ttt ttc ttt atg gag aaa gtg gac atg atc        576
Leu Asp Arg Thr Ser Asn Phe Phe Phe Met Glu Lys Val Asp Met Ile
            180                 185                 190
ata gct cgt gcg tgg cga tgg ttc ttg gag aaa aca aga ctg caa aag        624
Ile Ala Arg Ala Trp Arg Trp Phe Leu Glu Lys Thr Arg Leu Gln Lys
        195                 200                 205
ctc ttc tca aga aag aaa agt gtt agg cca aag aca gat tcc aag aag        672
Leu Phe Ser Arg Lys Lys Ser Val Arg Pro Lys Thr Asp Ser Lys Lys
    210                 215                 220
aat gat gat cta gtt                                                    687
Asn Asp Asp Leu Val
225
<210>80
<211>229
<212>PRT
<213>Oryza sativa
<400>80
Met Ala Glu Ala Glu Ala Gly Arg Lys Glu Lys Lys Glu Val Val Arg
1               5                   10                  15
Leu Glu Arg Glu Ser Val Ile Pro Ile Met Lys Pro Lys Leu Ile Met
            20                  25                  30
Lys Leu Ala Tyr Leu Ile Glu Gln Gln Ser Asp Arg Glu Glu Phe Leu
        35                  40                  45
Lys Leu Cys Lys Arg Ile Glu Tyr Thr Ile Arg Ala Trp Tyr His Leu
    50                  55                  60
Gln Phe Asp Asp Met Met Glu Leu Phe Ala Leu Phe Asp Pro Val His
65                  70                  75                  80
Gly Ala Gln Lys Leu Gln Gln Gln Asn Phe Ser Thr Glu Glu Val Asp
                85                  90                  95
Thr Leu Glu Gln Asn Phe Leu Thr Tyr Phe Phe Gln Val Met Gln Lys
            100                 105                 110
Ser Asn Phe Asn Ile Leu Ser Asp Asp Glu Val Glu Leu Ala His Ser
        115                 120                 125
Gly Gln Tyr Leu Leu Asn Leu Pro Ile Lys Val Asp Glu Ala Lys Leu
    130                 135                 140
Asp Asn Lys Leu Leu Ser Lys Tyr Phe Lys Glu His His His Asp Asn
145                 150                 155                 160
Leu Pro Glu Phe Ser Asp Lys Tyr Val Ile Phe Arg Arg Gly Ile Gly
                165                 170                 175
Leu Asp Arg Thr Ser Asn Phe Phe Phe Met Glu Lys Val Asp Met Ile
            180                 185                 190
Ile Ala Arg Ala Trp Arg Trp Phe Leu Glu Lys Thr Arg Leu Gln Lys
        195                 200                 205
Leu Phe Ser Arg Lys Lys Ser Val Arg Pro Lys Thr Asp Ser Lys Lys
    210                 215                 220
Asn Asp Asp Leu Val
225
<210>81
<211>1167
<212>DNA
<213>Oryza sativa
<220>
<221>CDS
<222>(1)..(1167)
<400>81
gag aga gat atc agt atg gtt aac agt tat ccc cca tct gct ttt gat        48
Glu Arg Asp Ile Ser Met Val Asn Ser Tyr Pro Pro Ser Ala Phe Asp
1               5                   10                  15
tgc aaa ggt tgg aat tca gca tct att ttc att tat gaa tct gat gag         96
Cys Lys Gly Trp Asn Ser Ala Ser Ile Phe Ile Tyr Glu Ser Asp Glu
            20                  25                  30
gaa atc cag tgc ctt ctt gac tgg tta aga gac tat gac cca agg gag        144
Glu Ile Gln Cys Leu Leu Asp Trp Leu Arg Asp Tyr Asp Pro Arg Glu
        35                  40                  45
aag gaa ctg aaa gac tct atc ttg cag tgg caa aga cat ttc tgt cat        192
Lys Glu Leu Lys Asp Ser Ile Leu Gln Trp Gln Arg His Phe Cys His
    50                  55                  60
caa agc agt tct cct ctc gtt gat cct cca att tct ggt cca aag ggt        240
Gln Ser Ser Ser Pro Leu Val Asp Pro Pro Ile Ser Gly Pro Lys Gly
65                  70                  75                  80
gaa cag ctt atg gag ctt cca aat acc aag gct gca gta att ttg gaa        288
Glu Gln Leu Met Glu Leu Pro Asn Thr Lys Ala Ala Val Ile Leu Glu
                85                  90                  95
caa aag tat ggt ctg caa ttg gac cag gac aca agt gat cta ccg aaa        336
Gln Lys Tyr Gly Leu Gln Leu Asp Gln Asp Thr Ser Asp Leu Pro Lys
            100                 105                 110
aag cga gga aag aag ata aag tta agt tct gaa gat aga aca tat cgc        384
Lys Arg Gly Lys Lys Ile Lys Leu Ser Ser Glu Asp Arg Thr Tyr Arg
        115                 120                 125
tgc gac tgt ttg gaa cct gta tgg cct tct cga tac cat tgt tta aca        432
Cys Asp Cys Leu Glu Pro Val Trp Pro Ser Arg Tyr His Cys Leu Thr
    130                 135                 140
tgt cat gag act tat ctc ata tct aca gag ttt gag ggg cat aat gat        480
Cys His Glu Thr Tyr Leu Ile Ser Thr Glu Phe Glu Gly His Asn Asp
145                 150                 155                 160
gga aaa tgc agt aaa atc cac cag tct cct gat gaa agc aga gaa aat        528
Gly Lys Cys Ser Lys Ile His Gln Ser Pro Asp Glu Ser Arg Glu Asn
                165                 170                 175
gat gag cca aaa gtg aag gtt acc aaa tct gat acg aag gaa aaa gat        576
Asp Glu Pro Lys Val Lys Val Thr Lys Ser Asp Thr Lys Glu Lys Asp
            180                 185                 190
tcc ctt gaa tgt agc tct gtc att gaa ccg tcc agt gac aga aaa ttg        624
Ser Leu Glu Cys Ser Ser Val Ile Glu Pro Ser Ser Asp Arg Lys Leu
        195                 200                 205
atg caa tgc cca tat gac ttt gaa gaa att tgc aga aag ttc gtc aca        672
Met Gln Cys Pro Tyr Asp Phe Glu Glu Ile Cys Arg Lys Phe Val Thr
    210                 215                 220
aat gat tcg aac aag gag aca gta aag cag att gga ctt aat ggg tcc        720
Asn Asp Ser Asn Lys Glu Thr Val Lys Gln Ile Gly Leu Asn Gly Ser
225                 230                 235                 240
aat gga gtt cca tca ttt gtg cct tca cct gca ttt ttt ctt gaa cct        768
Asn Gly Val Pro Ser Phe Val Pro Ser Pro Ala Phe Phe Leu Glu Pro
                245                 250                 255
gca att gta caa agt caa aac mga aaa gat gat gaa ctc aag gat tgg        816
Ala Ile Val Gln Ser Gln Asn Xaa Lys Asp Asp Glu Leu Lys Asp Trp
            260                 265                 270
acc tcc tct tta gag gaa tgc aat gca atg tct gct caa aag cta gtt        864
Thr Ser Ser Leu Glu Glu Cys Asn Ala Met Ser Ala Gln Lys Leu Val
        275                 280                 285
caa gag gtt tcc aaa tct ggt caa agt tgt cct ggc aat gtg ggt gat        912
Gln Glu Val Ser Lys Ser Gly Gln Ser Cys Pro Gly Asn Val Gly Asp
    290                 295                 300
gag aag gtg caa aaa tct aaa aag ccc acc cct gat aat act tct ggt        960
Glu Lys Val Gln Lys Ser Lys Lys Pro Thr Pro Asp Asn Thr Ser Gly
305                 310                 315                 320
gag gaa gca cat tct aca aca ggc aag cca aca cga ttg cta gct gtt       1008
Glu Glu Ala His Ser Thr Thr Gly Lys Pro Thr Arg Leu Leu Ala Val
                325                 330                 335
aat ggg ggg ttg gtt cca gag tca tcc ttg agg cct ctt ata gga cga       1056
Asn Gly Gly Leu Val Pro Glu Ser Ser Leu Arg Pro Leu Ile Gly Arg
            340                 345                 350
aac tct cac ata ctt aag cag caa aag ata aac ttg ctt gac atc gaa       1104
Asn Ser His Ile Leu Lys Gln Gln Lys Ile Asn Leu Leu Asp Ile Glu
        355                 360                 365
gca gcc ttg cct gag gag gca ctg aga gcc tca aag tgt cag caa ata       1152
Ala Ala Leu Pro Glu Glu Ala Leu Arg Ala Ser Lys Cys Gln Gln Ile
    370                 375                 380
aga agg cgt tca tgg                                                   1167
Arg Arg Arg Ser Trp
385
<210>82
<211>389
<212>PRT
<213>Oryza sativa
<220>
<221>misc_feature
<222>(264)..(264)
<223>The ′Xaa′at location 264 stands for Arg.
<400>82
Glu Arg Asp Ile Ser Met Val Asn Ser Tyr Pro Pro Ser Ala Phe Asp
1               5                   10                  15
Cys Lys Gly Trp Asn Ser Ala Ser Ile Phe Ile Tyr Glu Ser Asp Glu
            20                  25                  30
Glu Ile Gln Cys Leu Leu Asp Trp Leu Arg Asp Tyr Asp Pro Arg Glu
        35                  40                  45
Lys Glu Leu Lys Asp Ser Ile Leu Gln Trp Gln Arg His Phe Cys His
    50                  55                  60
Gln Ser Ser Ser Pro Leu Val Asp Pro Pro Ile Ser Gly Pro Lys Gly
65                  70                  75                  80
Glu Gln Leu Met Glu Leu Pro Asn Thr Lys Ala Ala Val Ile Leu Glu
                85                  90                  95
Gln Lys Tyr Gly Leu Gln Leu Asp Gln Asp Thr Ser Asp Leu Pro Lys
            100                 105                 110
Lys Arg Gly Lys Lys Ile Lys Leu Ser Ser Glu Asp Arg Thr Tyr Arg
        115                 120                 125
Cys Asp Cys Leu Glu Pro Val Trp Pro Ser Arg Tyr His Cys Leu Thr
    130                 135                 140
Cys His Glu Thr Tyr Leu Ile Ser Thr Glu Phe Glu Gly His Asn Asp
145                 150                 155                 160
Gly Lys Cys Ser Lys Ile His Gln Ser Pro Asp Glu Ser Arg Glu Asn
                165                 170                 175
Asp Glu Pro Lys Val Lys Val Thr Lys Ser Asp Thr Lys Glu Lys Asp
            180                 185                 190
Ser Leu Glu Cys Ser Ser Val Ile Glu Pro Ser Ser Asp Arg Lys Leu
        195                 200                 205
Met Gln Cys Pro Tyr Asp Phe Glu Glu Ile Cys Arg Lys Phe Val Thr
    210                 215                 220
Asn Asp Ser Asn Lys Glu Thr Val Lys Gln Ile Gly Leu Asn Gly Ser
225                 230                 235                 240
Asn Gly Val Pro Ser Phe Val Pro Ser Pro Ala Phe Phe Leu Glu Pro
                245                 250                 255
Ala Ile Val Gln Ser Gln Asn Xaa Lys Asp Asp Glu Leu Lys Asp Trp
            260                 265                 270
Thr Ser Ser Leu Glu Glu Cys Asn Ala Met Ser Ala Gln Lys Leu Val
        275                 280                 285
Gln Glu Val Ser Lys Ser Gly Gln Ser Cys Pro Gly Asn Val Gly Asp
    290                 295                 300
Glu Lys Val Gln Lys Ser Lys Lys Pro Thr Pro Asp Asn Thr Ser Gly
305                 310                 315                 320
Glu Glu Ala His Ser Thr Thr Gly Lys Pro Thr Arg Leu Leu Ala Val
                325                 330                 335
Asn Gly Gly Leu Val Pro Glu Ser Ser Leu Arg Pro Leu Ile Gly Arg
            340                 345                 350
Asn Ser His Ile Leu Lys Gln Gln Lys Ile Asn Leu Leu Asp Ile Glu
        355                 360                 365
Ala Ala Leu Pro Glu Glu Ala Leu Arg Ala Ser Lys Cys Gln Gln Ile
    370                 375                 380
Arg Arg Arg Ser Trp
385
<210>83
<211>728
<212>DNA
<213>Oryza sativa
<220>
<221>CDS
<222>(1)..(726)
<400>83
gtt gaa gct cag aag aaa att gaa gct gca att cgg cag aaa ggt att         48
Val Glu Ala Gln Lys Lys Ile Glu Ala Ala Ile Arg Gln Lys Gly Ile
1               5                   10                  15
gat gaa aac tgg gag gct gcc ttg gag cac aac cct gaa gca ttt gct         96
Asp Glu Asn Trp Glu Ala Ala Leu Glu His Asn Pro Glu Ala Phe Ala
            20                  25                  30
cga gtg gtt atg ctg tat gtg gac atg gaa gtc aat ggt gta cct ttg        144
Arg Val Val Met Leu Tyr Val Asp Met Glu Val Asn Gly Val Pro Leu
        35                  40                  45
aag gcc ttt gtt gac agt gga gca caa tca act atc ata tca aaa agc        192
Lys Ala Phe Val Asp Ser Gly Ala Gln Ser Thr Ile Ile Ser Lys Ser
    50                  55                  60
tgt gcc gaa cgt tgc ggg ttg ctt agg ctg ctt gat cag cga tat aga        240
Cys Ala Glu Arg Cys Gly Leu Leu Arg Leu Leu Asp Gln Arg Tyr Arg
65                  70                  75                  80
ggt gtt gct att ggc gtt ggt caa tca gag att ctt ggt aga ata cat        288
Gly Val Ala Ile Gly Val Gly Gln Ser Glu Ile Leu Gly Arg Ile His
                85                  90                  95
gta gcc cca ata aag att ggc cat gtc ttc tat cct tgt tca ttc aca        336
Val Ala Pro Ile Lys Ile Gly His Val Phe Tyr Pro Cys Ser Phe Thr
            100                 105                 110
gta ttg gat gct ccc aat atg gaa ttt ctt ttt ggg ctt gat atg ctg        384
Val Leu Asp Ala Pro Asn Met Glu Phe Leu Phe Gly Leu Asp Met Leu
        115                 120                 125
cgg aaa cat cag tgc ata att gac tta aaa gac aat gtt ctt aga gta        432
Arg Lys His Gln Cys Ile Ile Asp Leu Lys Asp Asn Val Leu Arg Val
    130                 135                 140
gga ggt ggt gag gtt tca gtg ccc ttc tta caa gag aaa gac atc cct        480
Gly Gly Gly Glu Val Ser Val Pro Phe Leu Gln Glu Lys Asp Ile Pro
145                 150                 155                 160
tca cat ata cgt gat gaa gag aaa cta tcg aag cta gca tct ctc agc        528
Ser His Ile Arg Asp Glu Glu Lys Leu Ser Lys Leu Ala Ser Leu Ser
                165                 170                 175
caa gga gct gct gga gaa tcg tca acg gca cgg gag aag act cct gat        576
Gln Gly Ala Ala Gly Glu Ser Ser Thr Ala Arg Glu Lys Thr Pro Asp
            180                 185                 190
gcg cca cca cga gct cct act aca ggt gct cca gct gtg aat cct ccg        624
Ala Pro Pro Arg Ala Pro Thr Thr Gly Ala Pro Ala Val Asn Pro Pro
        195                 200                 205
caa cca cag gga gga gga gat ttc gaa gca aaa gtc acg aaa ctg gtg        672
Gln Pro Gln Gly Gly Gly Asp Phe Glu Ala Lys Val Thr Lys Leu Val
    210                 215                 220
gaa ctt gga ttc gac cgg gca tcc gta atc caa gct ctc aag ttg ttc        720
Glu Leu Gly Phe Asp Arg Ala Ser Val Ile Gln Ala Leu Lys Leu Phe
225                 230                 235                 240
aac ggg aa                                                             728
Asn Gly
<210>84
<211>242
<212>PRT
<213>Oryza sativa
<400>84
Val Glu Ala Gln Lys Lys Ile Glu Ala Ala Ile Arg Gln Lys Gly Ile
1               5                   10                  15
Asp Glu Asn Trp Glu Ala Ala Leu Glu His Asn Pro Glu Ala Phe Ala
            20                  25                  30
Arg Val Val Met Leu Tyr Val Asp Met Glu Val Asn Gly Val Pro Leu
        35                  40                  45
Lys Ala Phe Val Asp Ser Gly Ala Gln Ser Thr Ile Ile Ser Lys Ser
    50                  55                  60
Cys Ala Glu Arg Cys Gly Leu Leu Arg Leu Leu Asp Gln Arg Tyr Arg
65                  70                  75                  80
Gly Val Ala Ile Gly Val Gly Gln Ser Glu Ile Leu Gly Arg Ile His
                85                  90                  95
Val Ala Pro Ile Lys Ile Gly His Val Phe Tyr Pro Cys Ser Phe Thr
            100                 105                 110
Val Leu Asp Ala Pro Asn Met Glu Phe Leu Phe Gly Leu Asp Met Leu
        115                 120                 125
Arg Lys His Gln Cys Ile Ile Asp Leu Lys Asp Asn Val Leu Arg Val
    130                 135                 140
Gly Gly Gly Glu Val Ser Val Pro Phe Leu Gln Glu Lys Asp Ile Pro
145                 150                 155                 160
Ser His Ile Arg Asp Glu Glu Lys Leu Ser Lys Leu Ala Ser Leu Ser
                165                 170                 175
Gln Gly Ala Ala Gly Glu Ser Ser Thr Ala Arg Glu Lys Thr Pro Asp
            180                 185                 190
Ala Pro Pro Arg Ala Pro Thr Thr Gly Ala Pro Ala Val Asn Pro Pro
        195                 200                 205
Gln Pro Gln Gly Gly Gly Asp Phe Glu Ala Lys Val Thr Lys Leu Val
    210                 215                 220
Glu Leu Gly Phe Asp Arg Ala Ser Val Ile Gln Ala Leu Lys Leu Phe
225                 230                 235                 240
Asn Gly
<210>85
<211>760
<212>DNA
<213>Oryza sativa
<220>
<221>CDS
<222>(1)..(759)
<400>85
gaa tct gga atc ttc agg caa att ctt aga ggc aaa ctt gat ttg gaa         48
Glu Ser Gly Ile Phe Arg Gln Ile Leu Arg Gly Lys Leu Asp Leu Glu
1               5                   10                  15
tct gat ccg tgg cct agt ata tct gat agt gct aaa gat cta gtc cgt         96
Ser Asp Pro Trp Pro Ser Ile Ser Asp Ser Ala Lys Asp Leu Val Arg
            20                  25                  30
aat atg ctt atc cgt gat cct aca aag aga ttt act gct cac gag gtt        144
Asn Met Leu Ile Arg Asp Pro Thr Lys Arg Phe Thr Ala His Glu Val
        35                  40                  45
ctc tgt cat cca tgg att gtt gat gat gct gtg gca cct gat aag cct        192
Leu Cys His Pro Trp Ile Val Asp Asp Ala Val Ala Pro Asp Lys Pro
    50                  55                  60
att gat tct gct gtt ttg tca agg ctg aaa cac ttt tct gca atg aac        240
Ile Asp Ser Ala Val Leu Ser Arg Leu Lys His Phe Ser Ala Met Asn
65                  70                  75                  80
aag ctc aag aag atg gct ttg agg gtt att gct gaa agc cta tct gaa        288
Lys Leu Lys Lys Met Ala Leu Arg Val Ile Ala Glu Ser Leu Ser Glu
                85                  90                  95
gaa gag atc gga ggt ttg aag gaa ttg ttt aaa atg atc gat act gac        336
Glu Glu Ile Gly Gly Leu Lys Glu Leu Phe Lys Met Ile Asp Thr Asp
            100                 105                 110
aat agt ggg acg ata act tat gat gaa ctg aag aat ggc ctg aaa agg        384
Asn Ser Gly Thr Ile Thr Tyr Asp Glu Leu Lys Asn Gly Leu Lys Arg
        115                 120                 125
gtg ggc tca gat cta atg gaa cca gaa atc cag gct tta atg gat gcc        432
Val Gly Ser Asp Leu Met Glu Pro Glu Ile Gln Ala Leu Met Asp Ala
    130                 135                 140
gct gat att gac aac agt gga acc atc gac tat ggt gaa ttc tta gca        480
Ala Asp Ile Asp Asn Ser Gly Thr Ile Asp Tyr Gly Glu Phe Leu Ala
145                 150                 155                 160
gct act ttg cac atg aat aaa ctg gag agg gag gaa aac ttg gtg tca        528
Ala Thr Leu His Met Asn Lys Leu Glu Arg Glu Glu Asn Leu Val Ser
                165                 170                 175
gca ttc acg ttc ttt gat aag gat gga agt ggc ttc ata acc att gat        576
Ala Phe Thr Phe Phe Asp Lys Asp Gly Ser Gly Phe Ile Thr Ile Asp
            180                 185                 190
gag ctc tcg caa gcc tgc gaa cag ttt ggc ctt tct gat gtt cat ctt        624
Glu Leu Ser Gln Ala Cys Glu Gln Phe Gly Leu Ser Asp Val His Leu
        195                 200                 205
gag gat atg atc aaa gat gtg gat caa aat aat gat gga caa att gat        672
Glu Asp Met Ile Lys Asp Val Asp Gln Asn Asn Asp Gly Gln Ile Asp
    210                 215                 220
tac agc gag ttt gcc gcg atg atg aga aag ggc aat gct ggt gga gcc        720
Tyr Ser Glu Phe Ala Ala Met Met Arg Lys Gly Asn Ala Gly Gly Ala
225                 230                 235                 240
aat gct ggt gga gtc act tct act ggt gga aca gga agg a                  760
Asn Ala Gly Gly Val Thr Ser Thr Gly Gly Thr Gly Arg
                245                 250
<210>86
<211>253
<212>PRT
<213>Oryza sativa
<400>86
Glu Ser Gly Ile Phe Arg Gln Ile Leu Arg Gly Lys Leu Asp Leu Glu
1               5                   10                  15
Ser Asp Pro Trp Pro Ser Ile Ser Asp Ser Ala Lys Asp Leu Val Arg
            20                  25                  30
Asn Met Leu Ile Arg Asp Pro Thr Lys Arg Phe Thr Ala His Glu Val
        35                  40                  45
Leu Cys His Pro Trp Ile Val Asp Asp Ala Val Ala Pro Asp Lys Pro
    50                  55                  60
Ile Asp Ser Ala Val Leu Ser Arg Leu Lys His Phe Ser Ala Met Asn
65                  70                  75                  80
Lys Leu Lys Lys Met Ala Leu Arg Val Ile Ala Glu Ser Leu Ser Glu
                85                  90                  95
Glu Glu Ile Gly Gly Leu Lys Glu Leu Phe Lys Met Ile Asp Thr Asp
            100                 105                 110
Asn Ser Gly Thr Ile Thr Tyr Asp Glu Leu Lys Asn Gly Leu Lys Arg
        115                 120                 125
Val Gly Ser Asp Leu Met Glu Pro Glu Ile Gln Ala Leu Met Asp Ala
    130                 135                 140
Ala Asp Ile Asp Asn Ser Gly Thr Ile Asp Tyr Gly Glu Phe Leu Ala
145                 150                 155                 160
Ala Thr Leu His Met Asn Lys Leu Glu Arg Glu Glu Asn Leu Val Ser
                165                 170                 175
Ala Phe Thr Phe Phe Asp Lys Asp Gly Ser Gly Phe Ile Thr Ile Asp
            180                 185                 190
Glu Leu Ser Gln Ala Cys Glu Gln Phe Gly Leu Ser Asp Val His Leu
        195                 200                 205
Glu Asp Met Ile Lys Asp Val Asp Gln Asn Asn Asp Gly Gln Ile Asp
    210                 215                 220
Tyr Ser Glu Phe Ala Ala Met Met Arg Lys Gly Asn Ala Gly Gly Ala
225                 230                 235                 240
Asn Ala Gly Gly Val Thr Ser Thr Gly Gly Thr Gly Arg
                245                 250
<210>87
<211>567
<212>DNA
<213>Oryza sativa
<220>
<221>CDS
<222>(1)..(567)
<400>87
gtc tcc ttc cct tac tcc cca cgg ccg gcc gcg ttg gct gca ggc gct        48
Val Ser Phe Pro Tyr Ser Pro Arg Pro Ala Ala Leu Ala Ala Gly Ala
1               5                   10                  15
cgg gcc tcg cgg gtt agc ccc gtc gtg gtc gcc gcc ggc ggc ggg cac        96
Arg Ala Ser Arg Val Ser Pro Val Val Val Ala Ala Gly Gly Gly His
            20                  25                  30
cag cgg ctt atg ggg tcg ttg act aac acc cag ggg ctc agg ttt gga        144
Gln Arg Leu Met Gly Ser Leu Thr Asn Thr Gln Gly Leu Arg Phe Gly
        35                  40                  45
gtg gtt gtg gca cgg ttc aat gag att gtc acc aac ttg cta ctg cag        192
Val Val Val Ala Arg Phe Asn Glu Ile Val Thr Asn Leu Leu Leu Gln
    50                  55                  60
gga gct ctt gag aca ttt gag aga tat tcc gtc aaa aaa gaa aat ata        240
Gly Ala Leu Glu Thr Phe Glu Arg Tyr Ser Val Lys Lys Glu Asn Ile
65                  70                  75                  80
aca gtt cta agt gtt cct ggc agt ttt gaa att cct gtt gcg gca caa        288
Thr Val Leu Ser Val Pro Gly Ser Phe Glu Ile Pro Val Ala Ala Gln
                85                  90                  95
aag ctt ggg aag tct gga aag ttt gat gcc aat ttt gtg cat tgg cgc        336
Lys Leu Gly Lys Ser Gly Lys Phe Asp Ala Asn Phe Val His Trp Arg
            100                 105                 110
tgt gca ttc aga ggt gac aca acc cac tac ggt gct gtt gca aac tct        384
Cys Ala Phe Arg Gly Asp Thr Thr His Tyr Gly Ala Val Ala Asn Ser
        115                 120                 125
gct gct tca ggt gta ctg tct gct gga ttg tct gct gag atc cca tgc        432
Ala Ala Ser Gly Val Leu Ser Ala Gly Leu Ser Ala Glu Ile Pro Cys
    130                 135                 140
ata ttt ggt gtt ctg aca tgt gat gac atg gac cag gct cta aat cgt        480
Ile Phe Gly Val Leu Thr Cys Asp Asp Met Asp Gln Ala Leu Asn Arg
145                 150                 155                 160
gct ggt ggt aag gct gga aac aag gga gct gaa gcc gct cta act gca        528
Ala Gly Gly Lys Ala Gly Asn Lys Gly Ala Glu Ala Ala Leu Thr Ala
                165                 170                 175
atc gag atg gcc tcg ctg ttc cag cat cac ctg gcc tga                    567
Ile Glu Met Ala Ser Leu Phe Gln His His Leu Ala
            180                 185
<210>88
<211>188
<212>PRT
<213>Oryza sativa
<400>88
Val Ser Phe Pro Tyr Ser Pro Arg Pro Ala Ala Leu Ala Ala Gly Ala
1               5                   10                  15
Arg Ala Ser Arg Val Ser Pro Val Val Val Ala Ala Gly Gly Gly His
            20                  25                  30
Gln Arg Leu Met Gly Ser Leu Thr Asn Thr Gln Gly Leu Arg Phe Gly
        35                  40                  45
Val Val Val Ala Arg Phe Asn Glu Ile Val Thr Asn Leu Leu Leu Gln
    50                  55                  60
Gly Ala Leu Glu Thr Phe Glu Arg Tyr Ser Val Lys Lys Glu Asn Ile
65                  70                  75                  80
Thr Val Leu Ser Val Pro Gly Ser Phe Glu Ile Pro Val Ala Ala Gln
                85                  90                  95
Lys Leu Gly Lys Ser Gly Lys Phe Asp Ala Asn Phe Val His Trp Arg
            100                 105                 110
Cys Ala Phe Arg Gly Asp Thr Thr His Tyr Gly Ala Val Ala Asn Ser
        115                 120                 125
Ala Ala Ser Gly Val Leu Ser Ala Gly Leu Ser Ala Glu Ile Pro Cys
    130                 135                 140
Ile Phe Gly Val Leu Thr Cys Asp Asp Met Asp Gln Ala Leu Asn Arg
145                 150                 155                 160
Ala Gly Gly Lys Ala Gly Asn Lys Gly Ala Glu Ala Ala Leu Thr Ala
                165                 170                 175
Ile Glu Met Ala Ser Leu Phe Gln His His Leu Ala
            180                 185
<210>89
<211>509
<212>DNA
<213>Oryza sativa
<220>
<221>CDS
<222>(1)..(507)
<400>89
gga agg aag cct gtt gcg gcc caa cat tac aac aag ggt gat aaa gat         48
Gly Arg Lys Pro Val Ala Ala Gln His Tyr Asn Lys Gly Asp Lys Asp
1               5                   10                  15
gga aca agc act ggc agc cga tgc act tct gtt gca tgg gta ccg gag         96
Gly Thr Ser Thr Gly Ser Arg Cys Thr Ser Val Ala Trp Val Pro Glu
            20                  25                  30
cgt gaa gga atc ttt gtt gtt agc cat tct gat gga aat ctg tat gtg        144
Arg Glu Gly Ile Phe Val Val Ser His Ser Asp Gly Asn Leu Tyr Val
        35                  40                  45
tac gat aaa tgc aaa gat gga aac act gag tgt aca ttc cca gct ata        192
Tyr Asp Lys Cys Lys Asp Gly Asn Thr Glu Cys Thr Phe Pro Ala Ile
    50                  55                  60
aag gat ccg gct cag tta atg att tca cat gca aag tcc agc aag agc        240
Lys Asp Pro Ala Gln Leu Met Ile Ser His Ala Lys Ser Ser Lys Ser
65                  70                  75                  80
aac cca att gct aga tgg cat gtt tgc caa ggt tca atc aac gcc atc        288
Asn Pro Ile Ala Arg Trp His Val Cys Gln Gly Ser Ile Asn Ala Ile
                85                  90                  95
tcc ttt tca cca gat gga gca tat tta gca act gtt ggg cga gat ggt        336
Ser Phe Ser Pro Asp Gly Ala Tyr Leu Ala Thr Val Gly Arg Asp Gly
            100                 105                 110
tat ttg aga gtg ttt gac ttt tcg aag gag caa cta ata ttt ggt ggg        384
Tyr Leu Arg Val Phe Asp Phe Ser Lys Glu Gln Leu Ile Phe Gly Gly
        115                 120                 125
aaa agt tat tat ggt gca cta ttg tgt tgc aca tgg agc tcg gat ggc        432
Lys Ser Tyr Tyr Gly Ala Leu Leu Cys Cys Thr Trp Ser Ser Asp Gly
    130                 135                 140
aaa tat ctg ttg act ggt ggt gaa gat gat ctt gtg cag gta tgg agc        480
Lys Tyr Leu Leu Thr Gly Gly Glu Asp Asp Leu Val Gln Val Trp Ser
145                 150                 155                 160
atg gat gac aga aag ata gtc gcg tgg gg                                 509
Met Asp Asp Arg Lys Ile Val Ala Trp
                165
<210>90
<211>169
<212>PRT
<213>Oryza sativa
<400>90
Gly Arg Lys Pro Val Ala Ala Gln His Tyr Asn Lys Gly Asp Lys Asp
1               5                   10                  15
Gly Thr Ser Thr Gly Ser Arg Cys Thr Ser Val Ala Trp Val Pro Glu
            20                  25                  30
Arg Glu Gly Ile Phe Val Val Ser His Ser Asp Gly Asn Leu Tyr Val
        35                  40                  45
Tyr Asp Lys Cys Lys Asp Gly Asn Thr Glu Cys Thr Phe Pro Ala Ile
    50                  55                  60
Lys Asp Pro Ala Gln Leu Met Ile Ser His Ala Lys Ser Ser Lys Ser
65                  70                  75                  80
Asn Pro Ile Ala Arg Trp His Val Cys Gln Gly Ser Ile Asn Ala Ile
                85                  90                  95
Ser Phe Ser Pro Asp Gly Ala Tyr Leu Ala Thr Val Gly Arg Asp Gly
            100                 105                 110
Tyr Leu Arg Val Phe Asp Phe Ser Lys Glu Gln Leu Ile Phe Gly Gly
        115                 120                 125
Lys Ser Tyr Tyr Gly Ala Leu Leu Cys Cys Thr Trp Ser Ser Asp Gly
    130                 135                 140
Lys Tyr Leu Leu Thr Gly Gly Glu Asp Asp Leu Val Gln Val Trp Ser
145                 150                 155                 160
Met Asp Asp Arg Lys Ile Val Ala Trp
                165
<210>91
<211>714
<212>DNA
<213>Oryza sativa
<220>
<221>CDS
<222>(1)..(714)
<400>91
atg ctg gtg cag cgc agg gac ggc gac acg ggt ccg gcc gtc agg ctc         48
Met Leu Val Gln Arg Arg Asp Gly Asp Thr Gly Pro Ala Val Arg Leu
1               5                   10                  15
agg gtc tcc cac ggc gcc tcc ttc cgc gac gtc gcc gtg ccg gcg cac         96
Arg Val Ser His Gly Ala Ser Phe Arg Asp Val Ala Val Pro Ala His
            20                  25                  30
tcc acc ttc ggt gaa ttg aag ggg gtc ctt acc cag gca act ggc gta        144
Ser Thr Phe Gly Glu Leu Lys Gly Val Leu Thr Gln Ala Thr Gly Val
        35                  40                  45
gag cct gaa agg cag agg ctc ttc ttc cgt ggg aag gag aag agt gac        192
Glu Pro Glu Arg Gln Arg Leu Phe Phe Arg Gly Lys Glu Lys Ser Asp
    50                  55                  60
aat gag ttc ctg cat aca gct ggg gtc aag gat gga gca aaa ctt ctt        240
Asn Glu Phe Leu His Thr Ala Gly Val Lys Asp Gly Ala Lys Leu Leu
65                  70                  75                  80
cta ctt gag aag cct gcc cct gcc aat gta gag cag agg gcc gag cca        288
Leu Leu Glu Lys Pro Ala Pro Ala Asn Val Glu Gln Arg Ala Glu Pro
                85                  90                  95
gta att atg gat gag agc atg atg aag gct tgt gag gct gtt ggc cgt        336
Val Ile Met Asp Glu Ser Met Met Lys Ala Cys Glu Ala Val Gly Arg
            100                 105                 110
gta aga gct gaa gtt gac aga ctc tct gcc aag gta tgt gat ttg gag        384
Val Arg Ala Glu Val Asp Arg Leu Ser Ala Lys Val Cys Asp Leu Glu
        115                 120                 125
aag agt gtg ttt gca ggg aga aag att gag gat aaa gat ttt gtt gtc        432
Lys Ser Val Phe Ala Gly Arg Lys Ile Glu Asp Lys Asp Phe Val Val
    130                 135                 140
ttg acg gag ctt ctt atg atg gag ctg ctg aaa ctt gat ggc ata gag        480
Leu Thr Glu Leu Leu Met Met Glu Leu Leu Lys Leu Asp Gly Ile Glu
145                 150                 155                 160
gca gag gga gaa gca agg gca caa agg aag gct gag gta cgc cgt gtc        528
Ala Glu Gly Glu Ala Arg Ala Gln Arg Lys Ala Glu Val Arg Arg Val
                165                 170                 175
caa ggt ctt gtg gag acg ttg gat aag ctg aag gca aga aat gcc aat        576
Gln Gly Leu Val Glu Thr Leu Asp Lys Leu Lys Ala Arg Asn Ala Asn
            180                 185                 190
ccc ttc agc gat caa aac aaa tct gtt tca gtg aca acg cag tgg gag        624
Pro Phe Ser Asp Gln Asn Lys Ser Val Ser Val Thr Thr Gln Trp Glu
        195                 200                 205
acg ttc gac aat ggc atg ggc agc ttg aat gca ccc cca cca cgg gtt        672
Thr Phe Asp Asn Gly Met Gly Ser Leu Asn Ala Pro Pro Pro Arg Val
    210                 215                 220
tct tcc aca caa ata aac acc gac tgg gag caa ttc gac tag                714
Ser Ser Thr Gln Ile Asn Thr Asp Trp Glu Gln Phe Asp
225                 230                 235
<210>92
<211>237
<212>PRT
<213>Oryza sativa
<400>92
Met Leu Val Gln Arg Arg Asp Gly Asp Thr Gly Pro Ala Val Arg Leu
1               5                   10                  15
Arg Val Ser His Gly Ala Ser Phe Arg Asp Val Ala Val Pro Ala His
            20                  25                  30
Ser Thr Phe Gly Glu Leu Lys Gly Val Leu Thr Gln Ala Thr Gly Val
        35                  40                  45
Glu Pro Glu Arg Gln Arg Leu Phe Phe Arg Gly Lys Glu Lys Ser Asp
    50                  55                  60
Asn Glu Phe Leu His Thr Ala Gly Val Lys Asp Gly Ala Lys Leu Leu
65                  70                  75                  80
Leu Leu Glu Lys Pro Ala Pro Ala Asn Val Glu Gln Arg Ala Glu Pro
                85                  90                  95
Val Ile Met Asp Glu Ser Met Met Lys Ala Cys Glu Ala Val Gly Arg
            100                 105                 110
Val Arg Ala Glu Val Asp Arg Leu Ser Ala Lys Val Cys Asp Leu Glu
        115                 120                 125
Lys Ser Val Phe Ala Gly Arg Lys Ile Glu Asp Lys Asp Phe Val Val
    130                 135                 140
Leu Thr Glu Leu Leu Met Met Glu Leu Leu Lys Leu Asp Gly Ile Glu
145                 150                 155                 160
Ala Glu Gly Glu Ala Arg Ala Gln Arg Lys Ala Glu Val Arg Arg Val
                165                 170                 175
Gln Gly Leu Val Glu Thr Leu Asp Lys Leu Lys Ala Arg Asn Ala Asn
            180                 185                 190
Pro Phe Ser Asp Gln Asn Lys Ser Val Ser Val Thr Thr Gln Trp Glu
        195                 200                 205
Thr Phe Asp Asn Gly Met Gly Ser Leu Asn Ala Pro Pro Pro Arg Val
    210                 215                 220
Ser Ser Thr Gln Ile Asn Thr Asp Trp Glu Gln Phe Asp
225                 230                 235
<210>93
<211>411
<212>DNA
<213>Oryza sativa
<220>
<221>CDS
<222>(1)..(411)
<400>93
acc tcc tca gga gat cag cag atg gtg acg gtg gcg gag agg ttc ccg         48
Thr Ser Ser Gly Asp Gln Gln Met Val Thr Val Ala Glu Arg Phe Pro
1               5                   10                  15
cgg gag gtg agc tcg gag gcg gtg ttc cgg tgc gtg cgg ctg ggg ccg         96
Arg Glu Val Ser Ser Glu Ala Val Phe Arg Cys Val Arg Leu Gly Pro
            20                  25                  30
gtc gac cag gcc gag gcg gag gtc gcg tac cag acg gcc gtc agc atc        144
Val Asp Gln Ala Glu Ala Glu Val Ala Tyr Gln Thr Ala Val Ser Ile
        35                  40                  45
ggc ggc cac gtg ttc aag ggc atc ctg cac gac gtc ggc ccc gaa gcc        192
Gly Gly His Val Phe Lys Gly Ile Leu His Asp Val Gly Pro Glu Ala
    50                  55                  60
ctg gcg gtc gcc ggc ggc ggc ggc gcc agc gag tac cac ttc cgc ctc        240
Leu Ala Val Ala Gly Gly Gly Gly Ala Ser Glu Tyr His Phe Arg Leu
65                  70                  75                  80
acc ggc gac ggg tcc tcg ccg agc acc gcc gcg gcc ggc gag gca ggc        288
Thr Gly Asp Gly Ser Ser Pro Ser Thr Ala Ala Ala Gly Glu Ala Gly
                85                  90                  95
tcc ggc ggc ggc ggc aac atc atc gtg tca tcg gct gtg gtg atg gac        336
Ser Gly Gly Gly Gly Asn Ile Ile Val Ser Ser Ala Val Val Met Asp
            100                 105                 110
ccg tac ccg acg ccc ggg ccc tac ggc gcg ttc ccc gcc ggc acg cca        384
Pro Tyr Pro Thr Pro Gly Pro Tyr Gly Ala Phe Pro Ala Gly Thr Pro
        115                 120                 125
ttc ttc cac ggc cac ccg cgg ccg tga                                    411
Phe Phe His Gly His Pro Arg Pro
    130                 135
<210>94
<211>136
<212>PRT
<213>Oryza sativa
<400>94
Thr Ser Ser Gly Asp Gln Gln Met Val Thr Val Ala Glu Arg Phe Pro
1               5                   10                  15
Arg Glu Val Ser Ser Glu Ala Val Phe Arg Cys Val Arg Leu Gly Pro
            20                  25                  30
Val Asp Gln Ala Glu Ala Glu Val Ala Tyr Gln Thr Ala Val Ser Ile
        35                  40                  45
Gly Gly His Val Phe Lys Gly Ile Leu His Asp Val Gly Pro Glu Ala
    50                  55                  60
Leu Ala Val Ala Gly Gly Gly Gly Ala Ser Glu Tyr His Phe Arg Leu
65                  70                  75                  80
Thr Gly Asp Gly Ser Ser Pro Ser Thr Ala Ala Ala Gly Glu Ala Gly
                85                  90                  95
Ser Gly Gly Gly Gly Asn Ile Ile Val Ser Ser Ala Val Val Met Asp
            100                 105                 110
Pro Tyr Pro Thr Pro Gly Pro Tyr Gly Ala Phe Pro Ala Gly Thr Pro
        115                 120                 125
Phe Phe His Gly His Pro Arg Pro
    130                 135
<210>95
<211>982
<212>DNA
<213>Oryza sativa
<220>
<221>CDS
<222>(1)..(981)
<400>95
atg gag ttc gag gcg gac ggc gcc cgg tgg ccg gag ccg cga ggc gac         48
Met Glu Phe Glu Ala Asp Gly Ala Arg Trp Pro Glu Pro Arg Gly Asp
1               5                   10                  15
gct gcc ggg gcg ccg ccg ctg gag cgt ggc gat gcg cct tcc cct cgc         96
Ala Ala Gly Ala Pro Pro Leu Glu Arg Gly Asp Ala Pro Ser Pro Arg
            20                  25                  30
ttc gat tcg tct cgt gcc cta aga ttg ctg aga gag ctt ggc tca aat        144
Phe Asp Ser Ser Arg Ala Leu Arg Leu Leu Arg Glu Leu Gly Ser Asn
        35                  40                  45
gta aca gaa gat ttg gtt gtg ctg atg cca aat ttg cta tca ttt ctg        192
Val Thr Glu Asp Leu Val Val Leu Met Pro Asn Leu Leu Ser Phe Leu
    50                  55                  60
aaa cat gat gat cct gtg gtt gtt aat caa tcc ata gct agt ggg aca        240
Lys His Asp Asp Pro Val Val Val Asn Gln Ser Ile Ala Ser Gly Thr
65                  70                  75                  80
aat tta ttt gct gct gta ttg gaa gag atg aca ctt cag att aat aag        288
Asn Leu Phe Ala Ala Val Leu Glu Glu Met Thr Leu Gln Ile Asn Lys
                85                  90                  95
tgt gga agg gtt gat gct tgg ctt gaa gag atg tgg gct tgg acg aag        336
Cys Gly Arg Val Asp Ala Trp Leu Glu Glu Met Trp Ala Trp Thr Lys
            100                 105                 110
cag ttt aaa gat gca gtc cat aat ctg atc cat gag tct gtc cca gtt        384
Gln Phe Lys Asp Ala Val His Asn Leu Ile His Glu Ser Val Pro Val
        115                 120                 125
gct act aaa ctg ttt gct gta aag ttc att gaa aca tgg atc ctg tgt        432
Ala Thr Lys Leu Phe Ala Val Lys Phe Ile Glu Thr Trp Ile Leu Cys
    130                 135                 140
ttc gca cct caa tcc aaa agt gac cgg atg cag cca act gaa gga agg        480
Phe Ala Pro Gln Ser Lys Ser Asp Arg Met Gln Pro Thr Glu Gly Arg
145                 150                 155                 160
aac agg agg ttg ttt gat agt tca aga tta tct caa ttc cat ccc agc        528
Asn Arg Arg Leu Phe Asp Ser Ser Arg Leu Ser Gln Phe His Pro Ser
                165                 170                 175
ctt aac cct gct gtt ctc gaa gct gat gca aac agg gct ctc atc ctc        576
Leu Asn Pro Ala Val Leu Glu Ala Asp Ala Asn Arg Ala Leu Ile Leu
            180                 185                 190
ctt gtg gat ata ctg cag tca gct tgt gct cat caa gga tcc ttc cta        624
Leu Val Asp Ile Leu Gln Ser Ala Cys Ala His Gln Gly Ser Phe Leu
        195                 200                 205
gtt ggc acc att aat tct ctt gca gct att gca aag aat aga cct gtt        672
Val Gly Thr Ile Asn Ser Leu Ala Ala Ile Ala Lys Asn Arg Pro Val
    210                 215                 220
tac tac gaa cgc ata ctg cca gtg cta ctt ggt ttt gac cct agt ttg        720
Tyr Tyr Glu Arg Ile Leu Pro Val Leu Leu Gly Phe Asp Pro Ser Leu
225                 230                 235                 240
gag gtt gca aaa gga gct cat cct gca agt ctg cgg tat tcc ctg aaa        768
Glu Val Ala Lys Gly Ala His Pro Ala Ser Leu Arg Tyr Ser Leu Lys
                245                 250                 255
aca gct ttt tta ggg ttt cta agg agt cct tgc cag gca atg att gag        816
Thr Ala Phe Leu Gly Phe Leu Arg Ser Pro Cys Gln Ala Met Ile Glu
            260                 265                 270
tcc aag gat act ctg gta agg cag ctt cgt gtt ctg agc cct ggt gaa        864
Ser Lys Asp Thr Leu Val Arg Gln Leu Arg Val Leu Ser Pro Gly Glu
        275                 280                 285
gca aca gaa cag att att agg caa gta gag aag atg act aga aat att        912
Ala Thr Glu Gln Ile Ile Arg Gln Val Glu Lys Met Thr Arg Asn Ile
    290                 295                 300
gag cgc gct tct cgt gct agc aag gat gaa cct tca acg ttg gat atg        960
Glu Arg Ala Ser Arg Ala Ser Lys Asp Glu Pro Ser Thr Leu Asp Met
305                 310                 315                 320
cct tac gga gat gtt agt cgg a                                          982
Pro Tyr Gly Asp Val Ser Arg
                325
<210>96
<211>327
<212>PRT
<213>Oryza sativa
<400>96
Met Glu Phe Glu Ala Asp Gly Ala Arg Trp Pro Glu Pro Arg Gly Asp
1               5                   10                  15
Ala Ala Gly Ala Pro Pro Leu Glu Arg Gly Asp Ala Pro Ser Pro Arg
            20                  25                  30
Phe Asp Ser Ser Arg Ala Leu Arg Leu Leu Arg Glu Leu Gly Ser Asn
        35                  40                  45
Val Thr Glu Asp Leu Val Val Leu Met Pro Asn Leu Leu Ser Phe Leu
    50                  55                  60
Lys His Asp Asp Pro Val Val Val Asn Gln Ser Ile Ala Ser Gly Thr
65                  70                  75                  80
Asn Leu Phe Ala Ala Val Leu Glu Glu Met Thr Leu Gln Ile Asn Lys
                85                  90                  95
Cys Gly Arg Val Asp Ala Trp Leu Glu Glu Met Trp Ala Trp Thr Lys
            100                 105                 110
Gln Phe Lys Asp Ala Val His Asn Leu Ile His Glu Ser Val Pro Val
        115                 120                 125
Ala Thr Lys Leu Phe Ala Val Lys Phe Ile Glu Thr Trp Ile Leu Cys
    130                 135                 140
Phe Ala Pro Gln Ser Lys Ser Asp Arg Met Gln Pro Thr Glu Gly Arg
145                 150                 155                 160
Asn Arg Arg Leu Phe Asp Ser Ser Arg Leu Ser Gln Phe His Pro Ser
                165                 170                 175
Leu Asn Pro Ala Val Leu Glu Ala Asp Ala Asn Arg Ala Leu Ile Leu
            180                 185                 190
Leu Val Asp Ile Leu Gln Ser Ala Cys Ala His Gln Gly Ser Phe Leu
        195                 200                 205
Val Gly Thr Ile Asn Ser Leu Ala Ala Ile Ala Lys Asn Arg Pro Val
    210                 215                 220
Tyr Tyr Glu Arg Ile Leu Pro Val Leu Leu Gly Phe Asp Pro Ser Leu
225                 230                 235                 240
Glu Val Ala Lys Gly Ala His Pro Ala Ser Leu Arg Tyr Ser Leu Lys
                245                 250                 255
Thr Ala Phe Leu Gly Phe Leu Arg Ser Pro Cys Gln Ala Met Ile Glu
            260                 265                 270
Ser Lys Asp Thr Leu Val Arg Gln Leu Arg Val Leu Ser Pro Gly Glu
        275                 280                 285
Ala Thr Glu Gln Ile Ile Arg Gln Val Glu Lys Met Thr Arg Asn Ile
    290                 295                 300
Glu Arg Ala Ser Arg Ala Ser Lys Asp Glu Pro Ser Thr Leu Asp Met
305                 310                 315                 320
Pro Tyr Gly Asp Val Ser Arg
                325
<210>97
<211>1257
<212>DNA
<213>Oryza sativa
<220>
<221>CDS
<222>(1)..(1257)
<400>97
atg gtc gag gtg gag gaa gtc agc aac aag atg cag gcg cag atg cgc        48
Met Val Glu Val Glu Glu Val Ser Asn Lys Met Gln Ala Gln Met Arg
1               5                   10                  15
ctc cac ccc gcg gcg gcg gcg gag gag gag gac gcc gac ctc ccg ctc         96
Leu His Pro Ala Ala Ala Ala Glu Glu Glu Asp Ala Asp Leu Pro Leu
            20                  25                  30
cct gcc ctc ttc gac aag gcg tcc cac ctc cac tcc ctc gcc tcc agc        144
Pro Ala Leu Phe Asp Lys Ala Ser His Leu His Ser Leu Ala Ser Ser
        35                  40                  45
tcc tcc ctc gat cag gaa ggg atc cgc aag ggg gtc gac ctg ctg cgg        192
Ser Ser Leu Asp Gln Glu Gly Ile Arg Lys Gly Val Asp Leu Leu Arg
    50                  55                  60
cgg tgc gac gag atg gtc agt aag ctc ggc ctc ttc tcc tcc aac gag        240
Arg Cys Asp Glu Met Val Ser Lys Leu Gly Leu Phe Ser Ser Asn Glu
65                  70                  75                  80
acc aag gat gac gtc tcc act gcc aac ctc aaa tac cta ctc gtg ccg        288
Thr Lys Asp Asp Val Ser Thr Ala Asn Leu Lys Tyr Leu Leu Val Pro
                85                  90                  95
tac tac ctt ggg gaa atg act gaa agg gta gcg cag gaa gat cgg atc        336
Tyr Tyr Leu Gly Glu Met Thr Glu Arg Val Ala Gln Glu Asp Arg Ile
            100                 105                 110
cca gtc ctt aag gcg tcg cag gat cat ttg aag gaa ttc att tct atc        384
Pro Val Leu Lys Ala Ser Gln Asp His Leu Lys Glu Phe Ile Ser Ile
        115                 120                 125
tgt gaa gca ctg gag ctt ata tca gag gat gag ctt gaa ttg tct agg        432
Cys Glu Ala Leu Glu Leu Ile Ser Glu Asp Glu Leu Glu Leu Ser Arg
    130                 135                 140
cag aag caa cct gat acc atg gca aat cga aga gca cag aag gct gca        480
Gln Lys Gln Pro Asp Thr Met Ala Asn Arg Arg Ala Gln Lys Ala Ala
145                 150                 155                 160
cgg ttc aag cgc caa aag gct gca gaa aca aag ctc cta gaa atc aag        528
Arg Phe Lys Arg Gln Lys Ala Ala Glu Thr Lys Leu Leu Glu Ile Lys
                165                 170                 175
gag agg aaa gaa agg cgt agg cgg tca ttg aga gca gct gct tta tca        576
Glu Arg Lys Glu Arg Arg Arg Arg Ser Leu Arg Ala Ala Ala Leu Ser
            180                 185                 190
gct cct att gaa gct ggg gag gaa gat gct ttt gag gat gat gga gag        624
Ala Pro Ile Glu Ala Gly Glu Glu Asp Ala Phe Glu Asp Asp Gly Glu
        195                 200                 205
gaa gaa aga gag gca tgg tta gct act atc tca ttg gct cta tgc aag        672
Glu Glu Arg Glu Ala Trp Leu Ala Thr Ile Ser Leu Ala Leu Cys Lys
    210                 215                 220
gct ttt gac ctt ctt gac atg tta aag aag gaa gaa gaa atg ctt ctg        720
Ala Phe Asp Leu Leu Asp Met Leu Lys Lys Glu Glu Glu Met Leu Leu
225                 230                 235                 240
gca gta aaa gaa agg caa gcg aag gat ggt aat gca ttt gct cgt gaa        768
Ala Val Lys Glu Arg Gln Ala Lys Asp Gly Asn Ala Phe Ala Arg Glu
                245                 250                 255
atg ctt gat gaa cgt aca aaa aag gct gaa gca tgg cac cat aat gct        816
Met Leu Asp Glu Arg Thr Lys Lys Ala Glu Ala Trp His His Asn Ala
            260                 265                 270
gcc aac cgt gca cca tat tcc aag cca gct gat cca atc act tgt gca        864
Ala Asn Arg Ala Pro Tyr Ser Lys Pro Ala Asp Pro Ile Thr Cys Ala
        275                 280                 285
aca ttt gct caa gat gtc att gaa ggt aga gca agt gtt tca caa gca        912
Thr Phe Ala Gln Asp Val Ile Glu Gly Arg Ala Ser Val Ser Gln Ala
    290                 295                 300
cat gag cac aaa cac cag ccg ctg ata ttt ggc cct gca agt ctt gtt        960
His Glu His Lys His Gln Pro Leu Ile Phe Gly Pro Ala Ser Leu Val
305                 310                 315                 320
ggt gga gga cta acc agt gaa aga gag aga atg gca gca caa gtt ttt       1008
Gly Gly Gly Leu Thr Ser Glu Arg Glu Arg Met Ala Ala Gln Val Phe
                325                 330                 335
cag cca agt tac agg ttg cca acg atg agc ata gaa gaa gct ggc tta       1056
Gln Pro Ser Tyr Arg Leu Pro Thr Met Ser Ile Glu Glu Ala Gly Leu
            340                 345                 350
cgt gag atg aaa atg atg gag aaa tgg caa gaa aga act gct aag atg       1104
Arg Glu Met Lys Met Met Glu Lys Trp Gln Glu Arg Thr Ala Lys Met
        355                 360                 365
att caa gaa tca aac tcc gca tgg cac aag gat ggc agt cgg tca gcc       1152
Ile Gln Glu Ser Asn Ser Ala Trp His Lys Asp Gly Ser Arg Ser Ala
    370                 375                 380
caa gag gat gag gac gct gaa gag gag aaa gca aga gca tgg gat gac       1200
Gln Glu Asp Glu Asp Ala Glu Glu Glu Lys Ala Arg Ala Trp Asp Asp
385                 390                 395                 400
tgg aag gac gat aac cct cgt ggt gca ggc aac aag aag ctc act ccc       1248
Trp Lys Asp Asp Asn Pro Arg Gly Ala Gly Asn Lys Lys Leu Thr Pro
                405                 410                 415
tgt ggc tag                                                           1257
Cys Gly
<210>98
<211>418
<212>PRT
<213>Oryza sativa
<400>98
Met Val Glu Val Glu Glu Val Ser Asn Lys Met Gln Ala Gln Met Arg
1               5                   10                  15
Leu His Pro Ala Ala Ala Ala Glu Glu Glu Asp Ala Asp Leu Pro Leu
            20                  25                  30
Pro Ala Leu Phe Asp Lys Ala Ser His Leu His Ser Leu Ala Ser Ser
        35                  40                  45
Ser Ser Leu Asp Gln Glu Gly Ile Arg Lys Gly Val Asp Leu Leu Arg
    50                  55                  60
Arg Cys Asp Glu Met Val Ser Lys Leu Gly Leu Phe Ser Ser Asn Glu
65                  70                  75                  80
Thr Lys Asp Asp Val Ser Thr Ala Asn Leu Lys Tyr Leu Leu Val Pro
                85                  90                  95
Tyr Tyr Leu Gly Glu Met Thr Glu Arg Val Ala Gln Glu Asp Arg Ile
            100                 105                 110
Pro Val Leu Lys Ala Ser Gln Asp His Leu Lys Glu Phe Ile Ser Ile
        115                 120                 125
Cys Glu Ala Leu Glu Leu Ile Ser Glu Asp Glu Leu Glu Leu Ser Arg
    130                 135                 140
Gln Lys Gln Pro Asp Thr Met Ala Asn Arg Arg Ala Gln Lys Ala Ala
145                 150                 155                 160
Arg Phe Lys Arg Gln Lys Ala Ala Glu Thr Lys Leu Leu Glu Ile Lys
                165                 170                 175
Glu Arg Lys Glu Arg Arg Arg Arg Ser Leu Arg Ala Ala Ala Leu Ser
            180                 185                 190
Ala Pro Ile Glu Ala Gly Glu Glu Asp Ala Phe Glu Asp Asp Gly Glu
        195                 200                 205
Glu Glu Arg Glu Ala Trp Leu Ala Thr Ile Ser Leu Ala Leu Cys Lys
    210                 215                 220
Ala Phe Asp Leu Leu Asp Met Leu Lys Lys Glu Glu Glu Met Leu Leu
225                 230                 235                 240
Ala Val Lys Glu Arg Gln Ala Lys Asp Gly Asn Ala Phe Ala Arg Glu
                245                 250                 255
Met Leu Asp Glu Arg Thr Lys Lys Ala Glu Ala Trp His His Asn Ala
            260                 265                 270
Ala Asn Arg Ala Pro Tyr Ser Lys Pro Ala Asp Pro Ile Thr Cys Ala
        275                 280                 285
Thr Phe Ala Gln Asp Val Ile Glu Gly Arg Ala Ser Val Ser Gln Ala
    290                 295                 300
His Glu His Lys His Gln Pro Leu Ile Phe Gly Pro Ala Ser Leu Val
305                 310                 315                 320
Gly Gly Gly Leu Thr Ser Glu Arg Glu Arg Met Ala Ala Gln Val Phe
                325                 330                 335
Gln Pro Ser Tyr Arg Leu Pro Thr Met Ser Ile Glu Glu Ala Gly Leu
            340                 345                 350
Arg Glu Met Lys Met Met Glu Lys Trp Gln Glu Arg Thr Ala Lys Met
        355                 360                 365
Ile Gln Glu Ser Asn Ser Ala Trp His Lys Asp Gly Ser Arg Ser Ala
    370                 375                 380
Gln Glu Asp Glu Asp Ala Glu Glu Glu Lys Ala Arg Ala Trp Asp Asp
385                 390                 395                 400
Trp Lys Asp Asp Asn Pro Arg Gly Ala Gly Asn Lys Lys Leu Thr Pro
                405                 410                 415
Cys Gly
<210>99
<211>963
<212>DNA
<213>Oryza sativa
<220>
<221>CDS
<222>(1)..(963)
<400>99
gtg ctg gag acg ctg atc ggc ggt gac cac ttc tcg gag gag gag gcg        48
Val Leu Glu Thr Leu Ile Gly Gly Asp His Phe Ser Glu Glu Glu Ala
1               5                   10                  15
gag gcg acg ctg cgg ctg ctg ctg gag gag gag aac gag gcg cgc atc         96
Glu Ala Thr Leu Arg Leu Leu Leu Glu Glu Glu Asn Glu Ala Arg Ile
            20                  25                  30
gcc gcc ttc ctc gtg ctc ctc agg gcc aag ggc gag acc tac gaa gag        144
Ala Ala Phe Leu Val Leu Leu Arg Ala Lys Gly Glu Thr Tyr Glu Glu
        35                  40                  45
atc gtg ggg ttg gcg aag gcg atg ata ggc tgc tgc gtc cgg gtc gac        192
Ile Val Gly Leu Ala Lys Ala Met Ile Gly Cys Cys Val Arg Val Asp
    50                  55                  60
ggg ctc gat gac gcc gtc gac att gtc ggc acc ggc ggg gac ggc gcg        240
Gly Leu Asp Asp Ala Val Asp Ile Val Gly Thr Gly Gly Asp Gly Ala
65                  70                  75                  80
gac acc gtc aac atc tcc acc ggc tcc acc atc ctc gcc gcc gcg gcg        288
Asp Thr Val Asn Ile Ser Thr Gly Ser Thr Ile Leu Ala Ala Ala Ala
                85                  90                  95
ggt gcc aaa gtc gcc aag caa ggg agc aga gct agc tcg tcg gcc tgc        336
Gly Ala Lys Val Ala Lys Gln Gly Ser Arg Ala Ser Ser Ser Ala Cys
            100                 105                 110
ggc agc gcc gat ggt att aaa cga tgt gtc aat gag gtg ggt gtt gga        384
Gly Ser Ala Asp Gly Ile Lys Arg Cys Val Asn Glu Val Gly Val Gly
        115                 120                 125
ttc atg atg tct gca aac tat cat cca gca atg aaa atc gtg aaa cct        432
Phe Met Met Ser Ala Asn Tyr His Pro Ala Met Lys Ile Val Lys Pro
    130                 135                 140
gtg agg aag aag ctg aaa ata aag aca gtt ttc aat atc ctt ggt cct        480
Val Arg Lys Lys Leu Lys Ile Lys Thr Val Phe Asn Ile Leu Gly Pro
145                 150                 155                 160
ctc tta aat cca gca agg gtg cct tat gct gtt att ggt gtt tac cac        528
Leu Leu Asn Pro Ala Arg Val Pro Tyr Ala Val Ile Gly Val Tyr His
                165                 170                 175
gag aac ata gtt acc aag atg gct aag gca gct cag aaa ttt gga atg        576
Glu Asn Ile Val Thr Lys Met Ala Lys Ala Ala Gln Lys Phe Gly Met
            180                 185                 190
aag aga gca ttg gtt gtc cat tcg aag ggt ttg gat gaa ata agc cca        624
Lys Arg Ala Leu Val Val His Ser Lys Gly Leu Asp Glu Ile Ser Pro
        195                 200                 205
ctt ggg cct gga tat atc ctt gat gtc aca cca aga aag att gaa aaa        672
Leu Gly Pro Gly Tyr Ile Leu Asp Val Thr Pro Arg Lys Ile Glu Lys
    210                 215                 220
atg ctc ttc gat cca ttg gat ttt ggt ata ccc cgc tgc acg ctg gaa        720
Met Leu Phe Asp Pro Leu Asp Phe Gly Ile Pro Arg Cys Thr Leu Glu
225                 230                 235                 240
gat cta aaa gga ggt gat cca gcg ttc aac gca aaa gtt ctc cag gat        768
Asp Leu Lys Gly Gly Asp Pro Ala Phe Asn Ala Lys Val Leu Gln Asp
                245                 250                 255
gtt ctt gct ggt caa aga ggt tca att gct gat gct ctc gtg ctg aat        816
Val Leu Ala Gly Gln Arg Gly Ser Ile Ala Asp Ala Leu Val Leu Asn
            260                 265                 270
gct gca gca tct ctt ctt gtc agt ggt aaa gta aat act ttg cat gat        864
Ala Ala Ala Ser Leu Leu Val Ser Gly Lys Val Asn Thr Leu His Asp
        275                 280                 285
ggt gta gcg tta gca cag gaa aca caa cgc tcc ggg gag gcc atc aac        912
Gly Val Ala Leu Ala Gln Glu Thr Gln Arg Ser Gly Glu Ala Ile Asn
    290                 295                 300
aca ctt gaa tcc tgg ata aag att tcc aat gta agt act tct gat aat        960
Thr Leu Glu Ser Trp Ile Lys Ile Ser Asn Val Ser Thr Ser Asp Asn
305                 310                 315                 320
taa                                                                    963
<210>100
<211>320
<212>PRT
<213>Oryza sativa
<400>100
Val Leu Glu Thr Leu Ile Gly Gly Asp His Phe Ser Glu Glu Glu Ala
1               5                   10                  15
Glu Ala Thr Leu Arg Leu Leu Leu Glu Glu Glu Asn Glu Ala Arg Ile
            20                  25                  30
Ala Ala Phe Leu Val Leu Leu Arg Ala Lys Gly Glu Thr Tyr Glu Glu
        35                  40                  45
Ile Val Gly Leu Ala Lys Ala Met Ile Gly Cys Cys Val Arg Val Asp
    50                  55                  60
Gly Leu Asp Asp Ala Val Asp Ile Val Gly Thr Gly Gly Asp Gly Ala
65                  70                  75                  80
Asp Thr Val Asn Ile Ser Thr Gly Ser Thr Ile Leu Ala Ala Ala Ala
                85                  90                  95
Gly Ala Lys Val Ala Lys Gln Gly Ser Arg Ala Ser Ser Ser Ala Cys
            100                 105                 110
Gly Ser Ala Asp Gly Ile Lys Arg Cys Val Asn Glu Val Gly Val Gly
        115                 120                 125
Phe Met Met Ser Ala Asn Tyr His Pro Ala Met Lys Ile Val Lys Pro
    130                 135                 140
Val Arg Lys Lys Leu Lys Ile Lys Thr Val Phe Asn Ile Leu Gly Pro
145                 150                 155                 160
Leu Leu Asn Pro Ala Arg Val Pro Tyr Ala Val Ile Gly Val Tyr His
                165                 170                 175
Glu Asn Ile Val Thr Lys Met Ala Lys Ala Ala Gln Lys Phe Gly Met
            180                 185                 190
Lys Arg Ala Leu Val Val His Ser Lys Gly Leu Asp Glu Ile Ser Pro
        195                 200                 205
Leu Gly Pro Gly Tyr Ile Leu Asp Val Thr Pro Arg Lys Ile Glu Lys
    210                 215                 220
Met Leu Phe Asp Pro Leu Asp Phe Gly Ile Pro Arg Cys Thr Leu Glu
225                 230                 235                 240
Asp Leu Lys Gly Gly Asp Pro Ala Phe Asn Ala Lys Val Leu Gln Asp
                245                 250                 255
Val Leu Ala Gly Gln Arg Gly Ser Ile Ala Asp Ala Leu Val Leu Asn
            260                 265                 270
Ala Ala Ala Ser Leu Leu Val Ser Gly Lys Val Asn Thr Leu His Asp
        275                 280                 285
Gly Val Ala Leu Ala Gln Glu Thr Gln Arg Ser Gly Glu Ala Ile Asn
    290                 295                 300
Thr Leu Glu Ser Trp Ile Lys Ile Ser Asn Val Ser Thr Ser Asp Asn
305                 310                 315                 320
<210>101
<211>936
<212>DNA
<213>Oryza sativa
<220>
<221>CDS
<222>(1)..(936)
<400>101
atg gcg acg cgg ctg ctg tgt tgg acg gcg ctc ctc ctc ccc atc atc         48
Met Ala Thr Arg Leu Leu Cys Trp Thr Ala Leu Leu Leu Pro Ile Ile
1               5                   10                  15
gcc gcc acc gcc gcc gcc tcg ccg ctt ccc gag gcg tgc ccg gtg cct         96
Ala Ala Thr Ala Ala Ala Ser Pro Leu Pro Glu Ala Cys Pro Val Pro
            20                  25                  30
act gcg gcg gag gaa atc ctt ggg cct ggc ggc aca tgc acg acg ctg        144
Thr Ala Ala Glu Glu Ile Leu Gly Pro Gly Gly Thr Cys Thr Thr Leu
        35                  40                  45
gat cgc cgc ggc gac cct gtc ggc gtc atc gag ggg gat gag gta aca        192
Asp Arg Arg Gly Asp Pro Val Gly Val Ile Glu Gly Asp Glu Val Thr
    50                  55                  60
ttg gcg aag gcc att act ctt ctt cac atg aac aaa gat gat tac att        240
Leu Ala Lys Ala Ile Thr Leu Leu His Met Asn Lys Asp Asp Tyr Ile
65                  70                  75                  80
gct gta ctc ttc tat gct tcc tgg tgc cca ttc tca caa gaa tgc aag        288
Ala Val Leu Phe Tyr Ala Ser Trp Cys Pro Phe Ser Gln Glu Cys Lys
                85                  90                  95
cca aat ttt gag ata tta gca tct ttg ttc cca tct att cgg cat ttt        336
Pro Asn Phe Glu Ile Leu Ala Ser Leu Phe Pro Ser Ile Arg His Phe
            100                 105                 110
gcg ttt gaa gaa tcc tca atc agg cca agt ata ata tca aga tat ggg        384
Ala Phe Glu Glu Ser Ser Ile Arg Pro Ser Ile Ile Ser Arg Tyr Gly
        115                 120                 125
att cat ggt ttt cca aca cta ttt ctc ttg aat tca act atg cga gtg        432
Ile His Gly Phe Pro Thr Leu Phe Leu Leu Asn Ser Thr Met Arg Val
    130                 135                 140
cgg tat cat gga cca cgg act gtt aag tcc ctg gct gct ttc tac cgt        480
Arg Tyr His Gly Pro Arg Thr Val Lys Ser Leu Ala Ala Phe Tyr Arg
145                 150                 155                 160
gat gtt tca ggt ttc gat gtt tca atg acg tca gag gcc gtg cta cat        528
Asp Val Ser Gly Phe Asp Val Ser Met Thr Ser Glu Ala Val Leu His
                165                 170                 175
tca gta gat ggt att gag ctt aag aag gat gct gaa cag gaa aat tgt        576
Ser Val Asp Gly Ile Glu Leu Lys Lys Asp Ala Glu Gln Glu Asn Cys
            180                 185                 190
cca ttc tgg tgg gca cgc tca ccg gag aaa ata ctt cag cag gat act        624
Pro Phe Trp Trp Ala Arg Ser Pro Glu Lys Ile Leu Gln Gln Asp Thr
        195                 200                 205
tat cta gca ctg gca act gca ttt gta atc ttg agg tta ctg tat ctt        672
Tyr Leu Ala Leu Ala Thr Ala Phe Val Ile Leu Arg Leu Leu Tyr Leu
    210                 215                 220
ctc ttt cca aag ata ggt tcc ttc gcc aaa cgg gcg tgg agg agg cat        720
Leu Phe Pro Lys Ile Gly Ser Phe Ala Lys Arg Ala Trp Arg Arg His
225                 230                 235                 240
act ctt ttt cca aac ttg gtg ggt gtg cat gaa tat ttc ttc acc tac        768
Thr Leu Phe Pro Asn Leu Val Gly Val His Glu Tyr Phe Phe Thr Tyr
                245                 250                 255
ctt gaa caa gca aga cac aaa ttc ttt agg tta tac cct tcg aag cga        816
Leu Glu Gln Ala Arg His Lys Phe Phe Arg Leu Tyr Pro Ser Lys Arg
            260                 265                 270
ggg aat tta cag gaa ggg gcc agg aat gcc act gct tgg gct tcc aag        864
Gly Asn Leu Gln Glu Gly Ala Arg Asn Ala Thr Ala Trp Ala Ser Lys
        275                 280                 285
tca tta gca tcc gtc tca atc gga gaa cca agc act att gga agg aca        912
Ser Leu Ala Ser Val Ser Ile Gly Glu Pro Ser Thr Ile Gly Arg Thr
    290                 295                 300
aac tct aca aat gag cta aga taa                                        936
Asn Ser Thr Asn Glu Leu Arg
305                 310
<210>102
<211>311
<212>PRT
<213>Oryza sativa
<400>102
Met Ala Thr Arg Leu Leu Cys Trp Thr Ala Leu Leu Leu Pro Ile Ile
1               5                   10                  15
Ala Ala Thr Ala Ala Ala Ser Pro Leu Pro Glu Ala Cys Pro Val Pro
            20                  25                  30
Thr Ala Ala Glu Glu Ile Leu Gly Pro Gly Gly Thr Cys Thr Thr Leu
        35                  40                  45
Asp Arg Arg Gly Asp Pro Val Gly Val Ile Glu Gly Asp Glu Val Thr
    50                  55                  60
Leu Ala Lys Ala Ile Thr Leu Leu His Met Asn Lys Asp Asp Tyr Ile
65                  70                  75                  80
Ala Val Leu Phe Tyr Ala Ser Trp Cys Pro Phe Ser Gln Glu Cys Lys
                85                  90                  95
Pro Asn Phe Glu Ile Leu Ala Ser Leu Phe Pro Ser Ile Arg His Phe
            100                 105                 110
Ala Phe Glu Glu Ser Ser Ile Arg Pro Ser Ile Ile Ser Arg Tyr Gly
        115                 120                 125
Ile His Gly Phe Pro Thr Leu Phe Leu Leu Asn Ser Thr Met Arg Val
    130                 135                 140
Arg Tyr His Gly Pro Arg Thr Val Lys Ser Leu Ala Ala Phe Tyr Arg
145                 150                 155                 160
Asp Val Ser Gly Phe Asp Val Ser Met Thr Ser Glu Ala Val Leu His
                165                 170                 175
Ser Val Asp Gly Ile Glu Leu Lys Lys Asp Ala Glu Gln Glu Asn Cys
            180                 185                 190
Pro Phe Trp Trp Ala Arg Ser Pro Glu Lys Ile Leu Gln Gln Asp Thr
        195                 200                 205
Tyr Leu Ala Leu Ala Thr Ala Phe Val Ile Leu Arg Leu Leu Tyr Leu
    210                 215                 220
Leu Phe Pro Lys Ile Gly Ser Phe Ala Lys Arg Ala Trp Arg Arg His
225                 230                 235                 240
Thr Leu Phe Pro Asn Leu Val Gly Val His Glu Tyr Phe Phe Thr Tyr
                245                 250                 255
Leu Glu Gln Ala Arg His Lys Phe Phe Arg Leu Tyr Pro Ser Lys Arg
            260                 265                 270
Gly Asn Leu Gln Glu Gly Ala Arg Asn Ala Thr Ala Trp Ala Ser Lys
        275                 280                 285
Ser Leu Ala Ser Val Ser Ile Gly Glu Pro Ser Thr Ile Gly Arg Thr
    290                 295                 300
Asn Ser Thr Asn Glu Leu Arg
305                 310
<210>103
<211>834
<212>DNA
<213>Oryza sativa
<22o>
<221>CDS
<222>(1)..(834)
<400>103
atg gcc atg aag gga ccc ggc ctc ttc tcc gac att ggc aag agg gcc         48
Met Ala Met Lys Gly Pro Gly Leu Phe Ser Asp Ile Gly Lys Arg Ala
1               5                   10                  15
aag gat ctg ctc acc aag gac tac acc tat gac cag aag ctg acc gtc         96
Lys Asp Leu Leu Thr Lys Asp Tyr Thr Tyr Asp Gln Lys Leu Thr Val
            20                  25                  30
tcc acc gtc agc tcc tcc gga gtg ggc ctc act tcc aca gct gtg aag        144
Ser Thr Val Ser Ser Ser Gly Val Gly Leu Thr Ser Thr Ala Val Lys
        35                  40                  45
aaa ggg ggg ctt tat act ctt gat gtc agc tca gtt tac aag tac aag        192
Lys Gly Gly Leu Tyr Thr Leu Asp Val Ser Ser Val Tyr Lys Tyr Lys
    50                  55                  60
agt act ctc gtc gat gtc aaa gtg gac aca gaa tct aat atc tct act        240
Ser Thr Leu Val Asp Val Lys Val Asp Thr Glu Ser Asn Ile Ser Thr
65                  70                  75                  80
act ttg act gtg ttt gat gtc ctt cca tcc aca aag ctt gtg aca agt        288
Thr Leu Thr Val Phe Asp Val Leu Pro Ser Thr Lys Leu Val Thr Ser
                85                  90                  95
gtc aag ctg cct gac tac aat tct gga aag gtg gag atg caa tac ttc        336
Val Lys Leu Pro Asp Tyr Asn Ser Gly Lys Val Glu Met Gln Tyr Phe
            100                 105                 110
cat gag aat gca agt ttt gcc act gct gtt ggc atg aag cca tct cct        384
His Glu Asn Ala Ser Phe Ala Thr Ala Val Gly Met Lys Pro Ser Pro
        115                 120                 125
gtg gtt gaa ttt tct gga aca gct ggt gct caa gga ctt gcc ttt ggt        432
Val Val Glu Phe Ser Gly Thr Ala Gly Ala Gln Gly Leu Ala Phe Gly
    130                 135                 140
gca gaa gct ggg ttt gac act gct aca gga aaa ttt acc aag tac agt        480
Ala Glu Ala Gly Phe Asp Thr Ala Thr Gly Lys Phe Thr Lys Tyr Ser
145                 150                 155                 160
gct gcg ata ggt gta acc aag cca gat tat cat gct gca atc gtt ctg        528
Ala Ala Ile Gly Val Thr Lys Pro Asp Tyr His Ala Ala Ile Val Leu
                165                 170                 175
gcg gac aaa ggt gac acc gtt aaa gtg tca ggt gta tat cac ctt gat        576
Ala Asp Lys Gly Asp Thr Val Lys Val Ser Gly Val Tyr His Leu Asp
            180                 185                 190
gat aag cag aaa tcc tct gtt gtt gct gaa tta acc cgc agg ctc tca        624
Asp Lys Gln Lys Ser Ser Val Val Ala Glu Leu Thr Arg Arg Leu Ser
        195                 200                 205
aca aat gag aac act ctc act gtt ggt ggc ctg tac aag gtt gac ccc        672
Thr Asn Glu Asn Thr Leu Thr Val Gly Gly Leu Tyr Lys Val Asp Pro
    210                 215                 220
gag aca gct gtg aag gca agg ctc aac aac act gga aag ctt gct gct        720
Glu Thr Ala Val Lys Ala Arg Leu Asn Asn Thr Gly Lys Leu Ala Ala
225                 230                 235                 240
ctt ctc cag cat gag gtt aaa ccc aag tcg gtt ttg aca atc tct ggt        768
Leu Leu Gln His Glu Val Lys Pro Lys Ser Val Leu Thr Ile Ser Gly
                245                 250                 255
gaa ttc gac acc aag gcc ttg gac aga ccc ccc aag ttt ggt cta gcg        816
Glu Phe Asp Thr Lys Ala Leu Asp Arg Pro Pro Lys Phe Gly Leu Ala
            260                 265                 270
ctt gca ctc agg ccc tga                                                834
Leu Ala Leu Arg Pro
        275
<210>104
<211>277
<212>PRT
<213>Oryza sativa
<400>104
Met Ala Met Lys Gly Pro Gly Leu Phe Ser Asp Ile Gly Lys Arg Ala
1               5                   10                  15
Lys Asp Leu Leu Thr Lys Asp Tyr Thr Tyr Asp Gln Lys Leu Thr Val
            20                  25                  30
Ser Thr Val Ser Ser Ser Gly Val Gly Leu Thr Ser Thr Ala Val Lys
        35                  40                  45
Lys Gly Gly Leu Tyr Thr Leu Asp Val Ser Ser Val Tyr Lys Tyr Lys
    50                  55                  60
Ser Thr Leu Val Asp Val Lys Val Asp Thr Glu Ser Asn Ile Ser Thr
65                  70                  75                  80
Thr Leu Thr Val Phe Asp Val Leu Pro Ser Thr Lys Leu Val Thr Ser
                85                  90                  95
Val Lys Leu Pro Asp Tyr Asn Ser Gly Lys Val Glu Met Gln Tyr Phe
            100                 105                 110
His Glu Asn Ala Ser Phe Ala Thr Ala Val Gly Met Lys Pro Ser Pro
        115                 120                 125
Val Val Glu Phe Ser Gly Thr Ala Gly Ala Gln Gly Leu Ala Phe Gly
    130                 135                 140
Ala Glu Ala Gly Phe Asp Thr Ala Thr Gly Lys Phe Thr Lys Tyr Ser
145                 150                 155                 160
Ala Ala Ile Gly Val Thr Lys Pro Asp Tyr His Ala Ala Ile Val Leu
                165                 170                 175
Ala Asp Lys Gly Asp Thr Val Lys Val Ser Gly Val Tyr His Leu Asp
            180                 185                 190
Asp Lys Gln Lys Ser Ser Val Val Ala Glu Leu Thr Arg Arg Leu Ser
        195                 200                 205
Thr Asn Glu Asn Thr Leu Thr Val Gly Gly Leu Tyr Lys Val Asp Pro
    210                 215                 220
Glu Thr Ala Val Lys Ala Arg Leu Asn Asn Thr Gly Lys Leu Ala Ala
225                 230                 235                 240
Leu Leu Gln His Glu Val Lys Pro Lys Ser Val Leu Thr Ile Ser Gly
                245                 250                 255
Glu Phe Asp Thr Lys Ala Leu Asp Arg Pro Pro Lys Phe Gly Leu Ala
            260                 265                 270
Leu Ala Leu Arg Pro
        275
<210>105
<211>1254
<212>DNA
<213>Oryza sativa
<220>
<221>CDS
<222>(1)..(1254)
<400>105
atg ttc ggg cgc gcg ccg aag aag agc gac aac acc aag tac tac gag         48
Met Phe Gly Arg Ala Pro Lys Lys Ser Asp Asn Thr Lys Tyr Tyr Glu
1               5                   10                  15
atc ctg ggg gtc ccc aag acc gcc tcc cag gac gac ctc aag aag gcg         96
Ile Leu Gly Val Pro Lys Thr Ala Ser Gln Asp Asp Leu Lys Lys Ala
            20                  25                  30
tac cgc aag gcc gcc atc aag aac cac ccc gac aag ggc ggc gac ccc        144
Tyr Arg Lys Ala Ala Ile Lys Asn His Pro Asp Lys Gly Gly Asp Pro
        35                  40                  45
gag aag ttc aag gag ctt gca caa gct tat gag gta ttg agt gac ccg        192
Glu Lys Phe Lys Glu Leu Ala Gln Ala Tyr Glu Val Leu Ser Asp Pro
    50                  55                  60
gag aaa cgt gaa atc tat gac caa tat ggt gaa gat gcc ctc aag gaa        240
Glu Lys Arg Glu Ile Tyr Asp Gln Tyr Gly Glu Asp Ala Leu Lys Glu
65                  70                  75                  80
gga atg ggt gga ggc gga tcc cat gtt gat cca ttt gac atc ttt tca        288
Gly Met Gly Gly Gly Gly Ser His Val Asp Pro Phe Asp Ile Phe Ser
                85                  90                  95
tca ttc ttt gga cct tct ttt ggt ggt ggt ggc agc agc agg ggc aga        336
Ser Phe Phe Gly Pro Ser Phe Gly Gly Gly Gly Ser Ser Arg Gly Arg
            100                 105                 110
agg caa agg agg gga gag gat gtg atc cat ccg ctt aag gtt tct cta        384
Arg Gln Arg Arg Gly Glu Asp Val Ile His Pro Leu Lys Val Ser Leu
        115                 120                 125
gaa gat ctt tac aat ggt act tca aag aag ctc tct ctt tcc cgc aat        432
Glu Asp Leu Tyr Asn Gly Thr Ser Lys Lys Leu Ser Leu Ser Arg Asn
    130                 135                 140
gtc ctc tgc gcc aag tgc aag ggc aag ggt tcc aag tct ggt gct tcc        480
Val Leu Cys Ala Lys Cys Lys Gly Lys Gly Ser Lys Ser Gly Ala Ser
145                 150                 155                 160
atg agg tgc cca ggt tgc cag ggg tct ggc atg aaa atc acc atc cgc        528
Met Arg Cys Pro Gly Cys Gln Gly Ser Gly Met Lys Ile Thr Ile Arg
                165                 170                 175
cag ctg ggg cct tcc atg ata cag cag atg cag cag cct tgc aat gag        576
Gln Leu Gly Pro Ser Met Ile Gln Gln Met Gln Gln Pro Cys Asn Glu
            180                 185                 190
tgt aag ggg act gga gag agc att aat gag aag gat cgc tgc cca ggc        624
Cys Lys Gly Thr Gly Glu Ser Ile Asn Glu Lys Asp Arg Cys Pro Gly
        195                 200                 205
tgc aag ggc gag aag gtt att cag gag aag aag gtt ctg gag gtt cac        672
Cys Lys Gly Glu Lys Val Ile Gln Glu Lys Lys Val Leu Glu Val His
    210                 215                 220
gtt gag aag ggg atg caa cac aat cag aag atc act ttc cct ggt gaa        720
Val Glu Lys Gly Met Gln His Asn Gln Lys Ile Thr Phe Pro Gly Glu
225                 230                 235                 240
gct gat gag gcg cct gat acc gtt acg gga gac att gta ttc gtc ctc        768
Ala Asp Glu Ala Pro Asp Thr Val Thr Gly Asp Ile Val Phe Val Leu
                245                 250                 255
cag cag aag gac cac tcc aag ttc aaa agg aag ggc gat gat ctc ttt        816
Gln Gln Lys Asp His Ser Lys Phe Lys Arg Lys Gly Asp Asp Leu Phe
            260                 265                 270
tat gag cac acc tta tct ctg act gaa gca ctt tgt ggt ttc caa ttt        864
Tyr Glu His Thr Leu Ser Leu Thr Glu Ala Leu Cys Gly Phe Gln Phe
        275                 280                 285
gtc ctg aca cat ctg gac aac aga cag ctg ctc att aag tca aac ccc        912
Val Leu Thr His Leu Asp Asn Arg Gln Leu Leu Ile Lys Ser Asn Pro
    290                 295                 300
ggt gaa gtt gtt aag cct gac caa ttc aag gca ata aac gat gag gga        960
Gly Glu Val Val Lys Pro Asp Gln Phe Lys Ala Ile Asn Asp Glu Gly
305                 310                 315                 320
atg cca atg tac cag agg cct ttc atg aag ggg aag ctc tac att cat       1008
Met Pro Met Tyr Gln Arg Pro Phe Met Lys Gly Lys Leu Tyr Ile His
                325                 330                 335
ttc acg gtg gag ttc cct gat tcc ctg gcg cct gaa caa tgc aag gct       1056
Phe Thr Val Glu Phe Pro Asp Ser Leu Ala Pro Glu Gln Cys Lys Ala
            340                 345                 350
ctc gag gct gtg ctt cca ccg aag cct gca tcc cag ctg aca gaa atg       1104
Leu Glu Ala Val Leu Pro Pro Lys Pro Ala Ser Gln Leu Thr Glu Met
        355                 360                 365
gag ata gat gaa tgc gag gag acc acg atg cac gat gtc aac aac att       1152
Glu Ile Asp Glu Cys Glu Glu Thr Thr Met His Asp Val Asn Asn Ile
    370                 375                 380
gag gaa gag atg cgc agg aaa gcc caa gct gct cag gag gcg tat gat       1200
Glu Glu Glu Met Arg Arg Lys Ala Gln Ala Ala Gln Glu Ala Tyr Asp
385                 390                 395                 400
gag gac gat gag atg cct gga ggt gcc cag aga gtt cag tgc gcg caa       1248
Glu Asp Asp Glu Met Pro Gly Gly Ala Gln Arg Val Gln Cys Ala Gln
                405                 410                 415
cag taa                                                               1254
Gln
<210>106
<211>417
<212>PRT
<213>Oryza sativa
<400>106
Met Phe Gly Arg Ala Pro Lys Lys Ser Asp Asn Thr Lys Tyr Tyr Glu
1               5                   10                  15
Ile Leu Gly Val Pro Lys Thr Ala Ser Gln Asp Asp Leu Lys Lys Ala
            20                  25                  30
Tyr Arg Lys Ala Ala Ile Lys Asn His Pro Asp Lys Gly Gly Asp Pro
        35                  40                  45
Glu Lys Phe Lys Glu Leu Ala Gln Ala Tyr Glu Val Leu Ser Asp Pro
    50                  55                  60
Glu Lys Arg Glu Ile Tyr Asp Gln Tyr Gly Glu Asp Ala Leu Lys Glu
65                  70                  75                  80
Gly Met Gly Gly Gly Gly Ser His Val Asp Pro Phe Asp Ile Phe Ser
                85                  90                  95
Ser Phe Phe Gly Pro Ser Phe Gly Gly Gly Gly Ser Ser Arg Gly Arg
            100                 105                 110
Arg Gln Arg Arg Gly Glu Asp Val Ile His Pro Leu Lys Val Ser Leu
        115                 120                 125
Glu Asp Leu Tyr Asn Gly Thr Ser Lys Lys Leu Ser Leu Ser Arg Asn
    130                 135                 140
Val Leu Cys Ala Lys Cys Lys Gly Lys Gly Ser Lys Ser Gly Ala Ser
145                 150                 155                 160
Met Arg Cys Pro Gly Cys Gln Gly Ser Gly Met Lys Ile Thr Ile Arg
                165                 170                 175
Gln Leu Gly Pro Ser Met Ile Gln Gln Met Gln Gln Pro Cys Asn Glu
            180                 185                 190
Cys Lys Gly Thr Gly Glu Ser Ile Asn Glu Lys Asp Arg Cys Pro Gly
        195                 200                 205
Cys Lys Gly Glu Lys Val Ile Gln Glu Lys Lys Val Leu Glu Val His
    210                 215                 220
Val Glu Lys Gly Met Gln His Asn Gln Lys Ile Thr Phe Pro Gly Glu
225                 230                 235                 240
Ala Asp Glu Ala Pro Asp Thr Val Thr Gly Asp Ile Val Phe Val Leu
                245                 250                 255
Gln Gln Lys Asp His Ser Lys Phe Lys Arg Lys Gly Asp Asp Leu Phe
            260                 265                 270
Tyr Glu His Thr Leu Ser Leu Thr Glu Ala Leu Cys Gly Phe Gln Phe
        275                 280                 285
Val Leu Thr His Leu Asp Asn Arg Gln Leu Leu Ile Lys Ser Asn Pro
    290                 295                 300
Gly Glu Val Val Lys Pro Asp Gln Phe Lys Ala Ile Asn Asp Glu Gly
305                 310                 315                 320
Met Pro Met Tyr Gln Arg Pro Phe Met Lys Gly Lys Leu Tyr Ile His
                325                 330                 335
Phe Thr Val Glu Phe Pro Asp Ser Leu Ala Pro Glu Gln Cys Lys Ala
            340                 345                 350
Leu Glu Ala Val Leu Pro Pro Lys Pro Ala Ser Gln Leu Thr Glu Met
        355                 360                 365
Glu Ile Asp Glu Cys Glu Glu Thr Thr Met His Asp Val Asn Asn Ile
    370                 375                 380
Glu Glu Glu Met Arg Arg Lys Ala Gln Ala Ala Gln Glu Ala Tyr Asp
385                 390                 395                 400
Glu Asp Asp Glu Met Pro Gly Gly Ala Gln Arg Val Gln Cys Ala Gln
                405                 410                 415
Gln
<210>107
<211>864
<212>DNA
<213>Oryza sativa
<220>
<221>CDS
<222>(1)..(864)
<400>107
atg gcg gcc ata tct tcg ctt ccc ttc gcg gca ctg cgc cgg gcc gcc         48
Met Ala Ala Ile Ser Ser Leu Pro Phe Ala Ala Leu Arg Arg Ala Ala
1               5                   10                  15
gac tgc agg ccg tcg acg gcg gcg gcg gcg gcg ggg gcg ggg gcg ggg         96
Asp Cys Arg Pro Ser Thr Ala Ala Ala Ala Ala Gly Ala Gly Ala Gly
            20                  25                  30
gcc gtc gtg ctc agc gtg agg ccc cgg cgg ggg tcg cgc tcg gtg gtg        144
Ala Val Val Leu Ser Val Arg Pro Arg Arg Gly Ser Arg Ser Val Val
        35                  40                  45
cgc tgc gtc gcc acg gcg ggc gat gtt cca ccc act gtc gca gaa aca        192
Arg Cys Val Ala Thr Ala Gly Asp Val Pro Pro Thr Val Ala Glu Thr
    50                  55                  60
aag atg aat ttt ctc aag tca tac aag cgt cct atc cta agc att tac        240
Lys Met Asn Phe Leu Lys Ser Tyr Lys Arg Pro Ile Leu Ser Ile Tyr
65                  70                  75                  80
agt aca gtt cta caa gaa ctt ttg gta cag caa cat ctg atg aga tac        288
Ser Thr Val Leu Gln Glu Leu Leu Val Gln Gln His Leu Met Arg Tyr
                85                  90                  95
aaa aca aca tat caa tat gat gcg gtg ttt gct ctt ggt ttt gtg acc        336
Lys Thr Thr Tyr Gln Tyr Asp Ala Val Phe Ala Leu Gly Phe Val Thr
            100                 105                 110
gtc tat gac caa ctc atg gaa ggg tac cct agc aat gag gat agg gat        384
Val Tyr Asp Gln Leu Met Glu Gly Tyr Pro Ser Asn Glu Asp Arg Asp
        115                 120                 125
gca atc ttc aaa gca tat ata aca gcg tta aac gaa gac cct gag caa        432
Ala Ile Phe Lys Ala Tyr Ile Thr Ala Leu Asn Glu Asp Pro Glu Gln
    130                 135                 140
tac aga gct gac gca caa aag atg gaa gag tgg gct cgt tcc cag aat        480
Tyr Arg Ala Asp Ala Gln Lys Met Glu Glu Trp Ala Arg Ser Gln Asn
145                 150                 155                 160
ggt aat tct tta gtt gag ttt tca tcc aaa gat gga gaa ata gag gcc        528
Gly Asn Ser Leu Val Glu Phe Ser Ser Lys Asp Gly Glu Ile Glu Ala
                165                 170                 175
att ctg aaa gat att tca gaa agg gcc cag ggt aag gga agc ttc agc        576
Ile Leu Lys Asp Ile Ser Glu Arg Ala Gln Gly Lys Gly Ser Phe Ser
            180                 185                 190
tac agc cgg ttc ttt gca gtt ggc ttg ttc cgt ttg ctt gag ctt gca        624
Tyr Ser Arg Phe Phe Ala Val Gly Leu Phe Arg Leu Leu Glu Leu Ala
        195                 200                 205
aat gca aca gag cca acc ata cta gac aag ctt tgc gct gct cta aac        672
Asn Ala Thr Glu Pro Thr Ile Leu Asp Lys Leu Cys Ala Ala Leu Asn
    210                 215                 220
atc aac aaa aga agt gtc gac agg gat ctc gat gtt tac cgg aac ata        720
Ile Asn Lys Arg Ser Val Asp Arg Asp Leu Asp Val Tyr Arg Asn Ile
225                 230                 235                 240
ctc tcc aaa ttg gtc cag gct aag gaa ctt ctc aag gaa tac gtg gaa        768
Leu Ser Lys Leu Val Gln Ala Lys Glu Leu Leu Lys Glu Tyr Val Glu
                245                 250                 255
agg gaa aag aag aag aga gag gaa aga tca gag acc cca aaa tcg aat        816
Arg Glu Lys Lys Lys Arg Glu Glu Arg Ser Glu Thr Pro Lys Ser Asn
            260                 265                 270
gaa gct gtt acg aaa ttt gac ggg agt ctc aat tcc atg agg cat taa        864
Glu Ala Val Thr Lys Phe Asp Gly Ser Leu Asn Ser Met Arg His
        275                 280                 285
<210>108
<211>287
<212>PRT
<213>Oryza sativa
<400>108
Met Ala Ala Ile Ser Ser Leu Pro Phe Ala Ala Leu Arg Arg Ala Ala
1               5                   10                  15
Asp Cys Arg Pro Ser Thr Ala Ala Ala Ala Ala Gly Ala Gly Ala Gly
            20                  25                  30
Ala Val Val Leu Ser Val Arg Pro Arg Arg Gly Ser Arg Ser Val Val
        35                  40                  45
Arg Cys Val Ala Thr Ala Gly Asp Val Pro Pro Thr Val Ala Glu Thr
    50                  55                  60
Lys Met Asn Phe Leu Lys Ser Tyr Lys Arg Pro Ile Leu Ser Ile Tyr
65                  70                  75                  80
Ser Thr Val Leu Gln Glu Leu Leu Val Gln Gln His Leu Met Arg Tyr
                85                  90                  95
Lys Thr Thr Tyr Gln Tyr Asp Ala Val Phe Ala Leu Gly Phe Val Thr
            100                 105                 110
Val Tyr Asp Gln Leu Met Glu Gly Tyr Pro Ser Asn Glu Asp Arg Asp
        115                 120                 125
Ala Ile Phe Lys Ala Tyr Ile Thr Ala Leu Asn Glu Asp Pro Glu Gln
    130                 135                 140
Tyr Arg Ala Asp Ala Gln Lys Met Glu Glu Trp Ala Arg Ser Gln Asn
145                 150                 155                 160
Gly Asn Ser Leu Val Glu Phe Ser Ser Lys Asp Gly Glu Ile Glu Ala
                165                 170                 175
Ile Leu Lys Asp Ile Ser Glu Arg Ala Gln Gly Lys Gly Ser Phe Ser
            180                 185                 190
Tyr Ser Arg Phe Phe Ala Val Gly Leu Phe Arg Leu Leu Glu Leu Ala
        195                 200                 205
Asn Ala Thr Glu Pro Thr Ile Leu Asp Lys Leu Cys Ala Ala Leu Asn
    210                 215                 220
Ile Asn Lys Arg Ser Val Asp Arg Asp Leu Asp Val Tyr Arg Asn Ile
225                 230                 235                 240
Leu Ser Lys Leu Val Gln Ala Lys Glu Leu Leu Lys Glu Tyr Val Glu
                245                 250                 255
Arg Glu Lys Lys Lys Arg Glu Glu Arg Ser Glu Thr Pro Lys Ser Asn
            260                 265                 270
Glu Ala Val Thr Lys Phe Asp Gly Ser Leu Asn Ser Met Arg His
        275                 280                 285
<210>109
<211>2379
<212>DNA
<213>Oryza sativa
<220>
<221>CDS
<222>(1)..(2379)
<400>109
atg gag aag gat cac cag ccc gtc atc agc ttg cgc ccc ggc ggc ggc         48
Met Glu Lys Asp His Gln Pro Val Ile Ser Leu Arg Pro Gly Gly Gly
1               5                   10                  15
ggc ggc ggc ccc cgc ccc ggc cgc ctc ttc tcc ccc gcc ttc gcc gcc         96
Gly Gly Gly Pro Arg Pro Gly Arg Leu Phe Ser Pro Ala Phe Ala Ala
            20                  25                  30
gcc gcc tcc ggc tcc ggc gac ttg ctc cgc tcc cac gtc ggc ggc gca        144
Ala Ala Ser Gly Ser Gly Asp Leu Leu Arg Ser His Val Gly Gly Ala
        35                  40                  45
tcc aag att ggt gat cca aat ttt gag gtg cgc gag cgt gtt cgc tat        192
Ser Lys Ile Gly Asp Pro Asn Phe Glu Val Arg Glu Arg Val Arg Tyr
    50                  55                  60
aca aga gat caa ctt ctc gag ctg cgt gag atc gtt gac ata cct gag        240
Thr Arg Asp Gln Leu Leu Glu Leu Arg Glu Ile Val Asp Ile Pro Glu
65                  70                  75                  80
gcc atc tta att aag caa gag att gat ata gag ctt cat ggt gaa gat        288
Ala Ile Leu Ile Lys Gln Glu Ile Asp Ile Glu Leu His Gly Glu Asp
                85                  90                  95
cag att tgg ggt cgc cct gag tca gat gtg caa gtg cag aca caa acc        336
Gln Ile Trp Gly Arg Pro Glu Ser Asp Val Gln Val Gln Thr Gln Thr
            100                 105                 110
cag gcg caa ccg cac aat cgg tat ggt gag aca gat aac cgt gac tgg        384
Gln Ala Gln Pro His Asn Arg Tyr Gly Glu Thr Asp Asn Arg Asp Trp
        115                 120                 125
cgt gca cgc acg gtt caa cct ccg gca gct aat gaa gag aag tcc tgg        432
Arg Ala Arg Thr Val Gln Pro Pro Ala Ala Asn Glu Glu Lys Ser Trp
    130                 135                 140
gac aac att cgt gaa gct aaa gca gca cat gct tca agt ggt cgg caa        480
Asp Asn Ile Arg Glu Ala Lys Ala Ala His Ala Ser Ser Gly Arg Gln
145                 150                 155                 160
caa gag caa gtt aac agg cag gat caa tta aac cac cag ttt gct tca        528
Gln Glu Gln Val Asn Arg Gln Asp Gln Leu Asn His Gln Phe Ala Ser
                165                 170                 175
aaa gct cag gtt ggc ccg act cct gct ctt atc aag gct gag gta cct        576
Lys Ala Gln Val Gly Pro Thr Pro Ala Leu Ile Lys Ala Glu Val Pro
            180                 185                 190
tgg tca gct aga aga ggc aat ctc tca gag aaa gat aga gtc ctg aaa        624
Trp Ser Ala Arg Arg Gly Asn Leu Ser Glu Lys Asp Arg Val Leu Lys
        195                 200                 205
aca gtg aaa ggt ata cta aac aaa ctg aca ccg gag aaa ttt gat cta        672
Thr Val Lys Gly Ile Leu Asn Lys Leu Thr Pro Glu Lys Phe Asp Leu
    210                 215                 220
ctc aag ggc caa cta atg gaa tct gga att acc act gct gat att cta        720
Leu Lys Gly Gln Leu Met Glu Ser Gly Ile Thr Thr Ala Asp Ile Leu
225                 230                 235                 240
aag gat gtt att tct ctc ata ttt gag aag gct gtt ttt gag ccc acc        768
Lys Asp Val Ile Ser Leu Ile Phe Glu Lys Ala Val Phe Glu Pro Thr
                245                 250                 255
ttc tgt ccg atg tat gct cas ctt tgt tcc gat ctc aat gag aag cta        816
Phe Cys Pro Met Tyr Ala Gln Leu Cys Ser Asp Leu Asn Glu Lys Leu
            260                 265                 270
cca tca ttc cct tcg gaa gaa cca ggt ggc aaa gag att acg ttc aag        864
Pro Ser Phe Pro Ser Glu Glu Pro Gly Gly Lys Glu Ile Thr Phe Lys
        275                 280                 285
cgc gtg ctg ttg aac aat tgt cag gaa gca ttt gaa ggc gct gag agc        912
Arg Val Leu Leu Asn Asn Cys Gln Glu Ala Phe Glu Gly Ala Glu Ser
    290                 295                 300
cta agg gct gaa ata gca aaa ttg act ggc cct gac caa gag atg gag        960
Leu Arg Ala Glu Ile Ala Lys Leu Thr Gly Pro Asp Gln Glu Met Glu
305                 310                 315                 320
aga agg gac aaa gaa agg att gtc aaa cta aga aca ctt gga aat atc       1008
Arg Arg Asp Lys Glu Arg Ile Val Lys Leu Arg Thr Leu Gly Asn Ile
                325                 330                 335
cgt cta att ggt gag cta ctt aag caa aag atg gta cct gaa aag ata       1056
Arg Leu Ile Gly Glu Leu Leu Lys Gln Lys Met Val Pro Glu Lys Ile
            340                 345                 350
gtt cat cac att gtt cag gaa ctc ttg ggg tct gga cct gat aaa aag       1104
Val His His Ile Val Gln Glu Leu Leu Gly Ser Gly Pro Asp Lys Lys
        355                 360                 365
gct tgc cct gaa gag gaa aac gtt gag gct att tgt cag ttc ttc aat       1152
Ala Cys Pro Glu Glu Glu Asn Val Glu Ala Ile Cys Gln Phe Phe Asn
    370                 375                 380
aca att ggt aaa cag ctt gac gag aac cca aaa tct cgt cga att aat       1200
Thr Ile Gly Lys Gln Leu Asp Glu Asn Pro Lys Ser Arg Arg Ile Asn
385                 390                 395                 400
gat acc tac ttc att cag atg aag gag tta aca aca aac ctt cag ttg       1248
Asp Thr Tyr Phe Ile Gln Met Lys Glu Leu Thr Thr Asn Leu Gln Leu
                405                 410                 415
gca cca cgt ctg agg ttt atg gtt cgt gat gtg gtt gat ctt cgt tca       1296
Ala Pro Arg Leu Arg Phe Met Val Arg Asp Val Val Asp Leu Arg Ser
            420                 425                 430
aac aat tgg gtg cct cga cgt gaa gag att aag gcc aag aca atc agt       1344
Asn Asn Trp Val Pro Arg Arg Glu Glu Ile Lys Ala Lys Thr Ile Ser
        435                 440                 445
gaa att cat gat gag gct ata aag aca ctt gga cta cgg cca ggg gca       1392
Glu Ile His Asp Glu Ala Ile Lys Thr Leu Gly Leu Arg Pro Gly Ala
    450                 455                 460
aca gga ctc acg agg aat ggc cgt aat gca cca ggt ggt cct ctt tcc       1440
Thr Gly Leu Thr Arg Asn Gly Arg Asn Ala Pro Gly Gly Pro Leu Ser
465                 470                 475                 480
cct ggt gga ttc cca atg aat cga cca gga aca gga ggg atg atg cct       1488
Pro Gly Gly Phe Pro Met Asn Arg Pro Gly Thr Gly Gly Met Met Pro
                485                 490                 495
ggg atg cct gga aca cct ggt atg cct gga tca aga aag atg cct gga        1536
Gly Met Pro Gly Thr Pro Gly Met Pro Gly Ser Arg Lys Met Pro Gly
            500                 505                 510
atg cct ggg tta gat aat gat aac tgg gaa gtt cca cgt tct aaa tca        1584
Met Pro Gly Leu Asp Asn Asp Asn Trp Glu Val Pro Arg Ser Lys Ser
        515                 520                 525
atg cca aga ggc gac tct ctt cgt aac cag ggt ccg ttg ctt aat aag        1632
Met Pro Arg Gly Asp Ser Leu Arg Asn Gln Gly Pro Leu Leu Asn Lys
    530                 535                 540
cca tca tct att aac aag cca tca tct att aac tcc agg ctt ctt cct        1680
Pro Ser Ser Ile Asn Lys Pro Ser Ser Ile Asn Ser Arg Leu Leu Pro
545                 550                 555                 560
cat gga agt gga gca cta att ggt aag agt gct ctt ttg ggc agt ggt        1728
His Gly Ser Gly Ala Leu Ile Gly Lys Ser Ala Leu Leu Gly Ser Gly
                565                 570                 575
ggt cca cca tct cgc cct tcc agc ctt atg gct agt ccc act cat aca        1776
Gly Pro Pro Ser Arg Pro Ser Ser Leu Met Ala Ser Pro Thr His Thr
            580                 585                 590
cca gct caa act gca cca tca cca aaa cct gta agt gca gct cca gct        1824
Pro Ala Gln Thr Ala Pro Ser Pro Lys Pro Val Ser Ala Ala Pro Ala
        595                 600                 605
gtt gtg cct gtc aca gac aaa gca gcc ggt tct tcc cat gag atg cca        1872
Val Val Pro Val Thr Asp Lys Ala Ala Gly Ser Ser His Glu Met Pro
    610                 615                 620
gct gca gtt cag aag aag acg gta tcc ctt ctt gaa gag tat ttt ggc        1920
Ala Ala Val Gln Lys Lys Thr Val Ser Leu Leu Glu Glu Tyr Phe Gly
625                 630                 635                 640
ata cgt att ctg gat gaa gca caa caa tgt atc gag gag ctt cag tgt        1968
Ile Arg Ile Leu Asp Glu Ala Gln Gln Cys Ile Glu Glu Leu Gln Cys
                645                 650                 655
cct gag tac tac tct gag att gtg aaa gaa gct atc aat ctt gct ctg        2016
Pro Glu Tyr Tyr Ser Glu Ile Val Lys Glu Ala Ile Asn Leu Ala Leu
            660                 665                 670
gat aag ggt ccc aac ttc att gat ccc ctt gtt agg ctg ctg gag cat        2064
Asp Lys Gly Pro Asn Phe Ile Asp Pro Leu Val Arg Leu Leu Glu His
        675                 680                 685
ctg cac acc aag aaa att ttc aag act gag gac ctg aaa act gga tgc        2112
Leu His Thr Lys Lys Ile Phe Lys Thr Glu Asp Leu Lys Thr Gly Cys
    690                 695                 700
tta ctg tat gca gcc ctg ctg gaa gat att ggt att gac ctt cct cta        2160
Leu Leu Tyr Ala Ala Leu Leu Glu Asp Ile Gly Ile Asp Leu Pro Leu
705                 710                 715                 720
gct cca gcc ttg ttt ggt gaa gtt gtt gca cga ctg agt ttg tcg tgt        2208
Ala Pro Ala Leu Phe Gly Glu Val Val Ala Arg Leu Ser Leu Ser Cys
                725                 730                 735
agc ttg agc ttt gaa gtt gtt gag gag att cta aaa gca gtg gag gat        2256
Ser Leu Ser Phe Glu Val Val Glu Glu Ile Leu Lys Ala Val Glu Asp
            740                 745                 750
aca tac ttc cgc aaa gga att ttt gat gct gtc atg aaa acc atg ggt        2304
Thr Tyr Phe Arg Lys Gly Ile Phe Asp Ala Val Met Lys Thr Met Gly
        755                 760                 765
gga aac tct tca ggt cag gct atc ttg agc tcg cat gct gtg gta atc        2352
Gly Asn Ser Ser Gly Gln Ala Ile Leu Ser Ser His Ala Val Val Ile
    770                 775                 780
gac gcc tgc aac aaa ctt ctg aaa taa                                    2379
Asp Ala Cys Asn Lys Leu Leu Lys
785                 790
<210>110
<211>792
<212>PRT
<213>Oryza sativa
<400>110
Met Glu Lys Asp His Gln Pro Val Ile Ser Leu Arg Pro Gly Gly Gly
1               5                   10                  15
Gly Gly Gly Pro Arg Pro Gly Arg Leu Phe Ser Pro Ala Phe Ala Ala
            20                  25                  30
Ala Ala Ser Gly Ser Gly Asp Leu Leu Arg Ser His Val Gly Gly Ala
        35                  40                  45
Ser Lys Ile Gly Asp Pro Asn Phe Glu Val Arg Glu Arg Val Arg Tyr
    50                  55                  60
Thr Arg Asp Gln Leu Leu Glu Leu Arg Glu Ile Val Asp Ile Pro Glu
65                  70                  75                  80
Ala Ile Leu Ile Lys Gln Glu Ile Asp Ile Glu Leu His Gly Glu Asp
                85                  90                  95
Gln Ile Trp Gly Arg Pro Glu Ser Asp Val Gln Val Gln Thr Gln Thr
            100                 105                 110
Gln Ala Gln Pro His Asn Arg Tyr Gly Glu Thr Asp Asn Arg Asp Trp
        115                 120                 125
Arg Ala Arg Thr Val Gln Pro Pro Ala Ala Asn Glu Glu Lys Ser Trp
    130                 135                 140
Asp Asn Ile Arg Glu Ala Lys Ala Ala His Ala Ser Ser Gly Arg Gln
145                 150                 155                 160
Gln Glu Gln Val Asn Arg Gln Asp Gln Leu Asn His Gln Phe Ala Ser
                165                 170                 175
Lys Ala Gln Val Gly Pro Thr Pro Ala Leu Ile Lys Ala Glu Val Pro
            180                 185                 190
Trp Ser Ala Arg Arg Gly Asn Leu Ser Glu Lys Asp Arg Val Leu Lys
        195                 200                 205
Thr Val Lys Gly Ile Leu Asn Lys Leu Thr Pro Glu Lys Phe Asp Leu
    210                 215                 220
Leu Lys Gly Gln Leu Met Glu Ser Gly Ile Thr Thr Ala Asp Ile Leu
225                 230                 235                 240
Lys Asp Val Ile Ser Leu Ile Phe Glu Lys Ala Val Phe Glu Pro Thr
                245                 250                 255
Phe Cys Pro Met Tyr Ala Gln Leu Cys Ser Asp Leu Asn Glu Lys Leu
            260                 265                 270
Pro Ser Phe Pro Ser Glu Glu Pro Gly Gly Lys Glu Ile Thr Phe Lys
        275                 280                 285
Arg Val Leu Leu Asn Asn Cys Gln Glu Ala Phe Glu Gly Ala Glu Ser
    290                 295                 300
Leu Arg Ala Glu Ile Ala Lys Leu Thr Gly Pro Asp Gln Glu Met Glu
305                 310                 315                 320
Arg Arg Asp Lys Glu Arg Ile Val Lys Leu Arg Thr Leu Gly Asn Ile
                325                 330                 335
Arg Leu Ile Gly Glu Leu Leu Lys Gln Lys Met Val Pro Glu Lys Ile
            340                 345                 350
Val His His Ile Val Gln Glu Leu Leu Gly Ser Gly Pro Asp Lys Lys
        355                 360                 365
Ala Cys Pro Glu Glu Glu Asn Val Glu Ala Ile Cys Gln Phe Phe Asn
    370                 375                 380
Thr Ile Gly Lys Gln Leu Asp Glu Asn Pro Lys Ser Arg Arg Ile Asn
385                 390                 395                 400
Asp Thr Tyr Phe Ile Gln Met Lys Glu Leu Thr Thr Asn Leu Gln Leu
                405                 410                 415
Ala Pro Arg Leu Arg Phe Met Val Arg Asp Val Val Asp Leu Arg Ser
            420                 425                 430
Asn Asn Trp Val Pro Arg Arg Glu Glu Ile Lys Ala Lys Thr Ile Ser
        435                 440                 445
Glu Ile His Asp Glu Ala Ile Lys Thr Leu Gly Leu Arg Pro Gly Ala
    450                 455                 460
Thr Gly Leu Thr Arg Asn Gly Arg Asn Ala Pro Gly Gly Pro Leu Ser
465                 470                 475                 480
Pro Gly Gly Phe Pro Met Asn Arg Pro Gly Thr Gly Gly Met Met Pro
                485                 490                 495
Gly Met Pro Gly Thr Pro Gly Met Pro Gly Ser Arg Lys Met Pro Gly
            500                 505                 510
Met Pro Gly Leu Asp Asn Asp Asn Trp Glu Val Pro Arg Ser Lys Ser
        515                 520                 525
Met Pro Arg Gly Asp Ser Leu Arg Asn Gln Gly Pro Leu Leu Asn Lys
    530                 535                 540
Pro Ser Ser Ile Asn Lys Pro Ser Ser Ile Asn Ser Arg Leu Leu Pro
545                 550                 555                 560
His Gly Ser Gly Ala Leu Ile Gly Lys Ser Ala Leu Leu Gly Ser Gly
                565                 570                 575
Gly Pro Pro Ser Arg Pro Ser Ser Leu Met Ala Ser Pro Thr His Thr
            580                 585                 590
Pro Ala Gln Thr Ala Pro Ser Pro Lys Pro Val Ser Ala Ala Pro Ala
        595                 600                 605
Val Val Pro Val Thr Asp Lys Ala Ala Gly Ser Ser His Glu Met Pro
    610                 615                 620
Ala Ala Val Gln Lys Lys Thr Val Ser Leu Leu Glu Glu Tyr Phe Gly
625                 630                 635                 640
Ile Arg Ile Leu Asp Glu Ala Gln Gln Cys Ile Glu Glu Leu Gln Cys
                645                 650                 655
Pro Glu Tyr Tyr Ser Glu Ile Val Lys Glu Ala Ile Asn Leu Ala Leu
            660                 665                 670
Asp Lys Gly Pro Asn Phe Ile Asp Pro Leu Val Arg Leu Leu Glu His
        675                 680                 685
Leu His Thr Lys Lys Ile Phe Lys Thr Glu Asp Leu Lys Thr Gly Cys
    690                 695                 700
Leu Leu Tyr Ala Ala Leu Leu Glu Asp Ile Gly Ile Asp Leu Pro Leu
705                 710                 715                 720
Ala Pro Ala Leu Phe Gly Glu Val Val Ala Arg Leu Ser Leu Ser Cys
                725                 730                 735
Ser Leu Ser Phe Glu Val Val Glu Glu Ile Leu Lys Ala Val Glu Asp
            740                 745                 750
Thr Tyr Phe Arg Lys Gly Ile Phe Asp Ala Val Met Lys Thr Met Gly
        755                 760                 765
Gly Asn Ser Ser Gly Gln Ala Ile Leu Ser Ser His Ala Val Val Ile
    770                 775                 780
Asp Ala Cys Asn Lys Leu Leu Lys
785                 790
<210>111
<211>1021
<212>DNA
<213>Oryza sativa
<220>
<221>CDS
<222>(1)..(1020)
<400>111
cca cgc gtc cgc tgt cgc ctc tgc tcc tcc tcc tcc tgc tcc atc tcc         48
Pro Arg Val Arg Cys Arg Leu Cys Ser Ser Ser Ser Cys Ser Ile Ser
1               5                   10                  15
tcc tcc ata tcc cac tcg cca atc tcg att ccc tcc tcc gct cta cct         96
Ser Ser Ile Ser His Ser Pro Ile Ser Ile Pro Ser Ser Ala Leu Pro
            20                  25                  30
cgc cgg agt tca ccc tgt gtg gga ctg gga gcg gcg gcg gcg tcg gag        144
Arg Arg Ser Ser Pro Cys Val Gly Leu Gly Ala Ala Ala Ala Ser Glu
        35                  40                  45
gca atg gac gct tcg tcg gtg gcg ctc tac ggc cag ctc aag gct gct        192
Ala Met Asp Ala Ser Ser Val Ala Leu Tyr Gly Gln Leu Lys Ala Ala
    50                  55                  60
caa cca ttc ttc ttg tta gct ggg cct aat gtg att gaa tca gag gag        240
Gln Pro Phe Phe Leu Leu Ala Gly Pro Asn Val Ile Glu Ser Glu Glu
65                  70                  75                  80
cat gtc ctg aag atg gca aaa cac atc aaa ggc atc aca acc aag ctt        288
His Val Leu Lys Met Ala Lys His Ile Lys Gly Ile Thr Thr Lys Leu
                85                  90                  95
ggt ctg cca ctt gtg ttc aag tcc agc ttt gat aaa gca aat cgt aca        336
Gly Leu Pro Leu Val Phe Lys Ser Ser Phe Asp Lys Ala Asn Arg Thr
            100                 105                 110
tca tca aaa tcc ttc cgt ggt cct ggt ctg gag gaa ggc ctg aag ata        384
Ser Ser Lys Ser Phe Arg Gly Pro Gly Leu Glu Glu Gly Leu Lys Ile
        115                 120                 125
ctt gaa aaa gtg aaa gca aca tat gac att cca gtg gtc act gat gtg        432
Leu Glu Lys Val Lys Ala Thr Tyr Asp Ile Pro Val Val Thr Asp Val
    130                 135                 140
cat gaa agc cac cag tgt gaa gcc gcc gga aga gtg gcc gac atc ata        480
His Glu Ser His Gln Cys Glu Ala Ala Gly Arg Val Ala Asp Ile Ile
145                 150                 155                 160
caa att cca gct ttc ttc tgt cgc cag act gat ctt cta gtg gct gct        528
Gln Ile Pro Ala Phe Phe Cys Arg Gln Thr Asp Leu Leu Val Ala Ala
                165                 170                 175
gcc aag act gga aaa att atc aac atc aag aaa gga caa ttc tgt gct        576
Ala Lys Thr Gly Lys Ile Ile Asn Ile Lys Lys Gly Gln Phe Cys Ala
            180                 185                 190
cct tct gtt atg gcc aac tct gca gag aaa atc aga ctt gct gga aat        624
Pro Ser Val Met Ala Asn Ser Ala Glu Lys Ile Arg Leu Ala Gly Asn
        195                 200                 205
caa aat gtt atg gtc tgt gag cgt ggc acc atg ttt ggc tac aat gat        672
Gln Asn Val Met Val Cys Glu Arg Gly Thr Met Phe Gly Tyr Asn Asp
    210                 215                 220
cta att gtt gat cca agg aat ttt gag tgg ctg aga gaa gct aat tgt        720
Leu Ile Val Asp Pro Arg Asn Phe Glu Trp Leu Arg Glu Ala Asn Cys
225                 230                 235                 240
cca gtt gta gct gat gta acg cat gct cta caa cag cct gct gga aaa        768
Pro Val Val Ala Asp Val Thr His Ala Leu Gln Gln Pro Ala Gly Lys
                245                 250                 255
aag ctt gat ggt gga ggt gtt gca agt ggg ggc tta cga gaa cta ata        816
Lys Leu Asp Gly Gly Gly Val Ala Ser Gly Gly Leu Arg Glu Leu Ile
            260                 265                 270
cca tgc atc gca agg act tct gtt gct gtc gga gtt gat ggt att ttc        864
Pro Cys Ile Ala Arg Thr Ser Val Ala Val Gly Val Asp Gly Ile Phe
        275                 280                 285
atg gag gta cat gat gat ccc ttg aac gca cct tgt gat ggc cca act        912
Met Glu Val His Asp Asp Pro Leu Asn Ala Pro Cys Asp Gly Pro Thr
    290                 295                 300
caa tgg cca ctg cgc aat ttg gag gag cta tta gag gag ctg att gca        960
Gln Trp Pro Leu Arg Asn Leu Glu Glu Leu Leu Glu Glu Leu Ile Ala
305                 310                 315                 320
att gct cga gtc acc aag gga aag aag cca ctc aag atc gat ctc acc       1008
Ile Ala Arg Val Thr Lys Gly Lys Lys Pro Leu Lys Ile Asp Leu Thr
                325                 330                 335
ccc ttc aaa gaa t                                                     1021
Pro Phe Lys Glu
            340
<210>112
<211>340
<212>PRT
<213>Oryza sativa
<400>112
Pro Arg Val Arg Cys Arg Leu Cys Ser Ser Ser Ser Cys Ser Ile Ser
1               5                   10                  15
Ser Ser Ile Ser His Ser Pro Ile Ser Ile Pro Ser Ser Ala Leu Pro
            20                  25                  30
Arg Arg Ser Ser Pro Cys Val Gly Leu Gly Ala Ala Ala Ala Ser Glu
        35                  40                  45
Ala Met Asp Ala Ser Ser Val Ala Leu Tyr Gly Gln Leu Lys Ala Ala
    50                  55                  60
Gln Pro Phe Phe Leu Leu Ala Gly Pro Asn Val Ile Glu Ser Glu Glu
65                  70                  75                  80
His Val Leu Lys Met Ala Lys His Ile Lys Gly Ile Thr Thr Lys Leu
                85                  90                  95
Gly Leu Pro Leu Val Phe Lys Ser Ser Phe Asp Lys Ala Asn Arg Thr
            100                 105                 110
Ser Ser Lys Ser Phe Arg Gly Pro Gly Leu Glu Glu Gly Leu Lys Ile
        115                 120                 125
Leu Glu Lys Val Lys Ala Thr Tyr Asp Ile Pro Val Val Thr Asp Val
    130                 135                 140
His Glu Ser His Gln Cys Glu Ala Ala Gly Arg Val Ala Asp Ile Ile
145                 150                 155                 160
Gln Ile Pro Ala Phe Phe Cys Arg Gln Thr Asp Leu Leu Val Ala Ala
                165                 170                 175
Ala Lys Thr Gly Lys Ile Ile Asn Ile Lys Lys Gly Gln Phe Cys Ala
            180                 185                 190
Pro Ser Val Met Ala Asn Ser Ala Glu Lys Ile Arg Leu Ala Gly Asn
        195                 200                 205
Gln Asn Val Met Val Cys Glu Arg Gly Thr Met Phe Gly Tyr Asn Asp
    210                 215                 220
Leu Ile Val Asp Pro Arg Asn Phe Glu Trp Leu Arg Glu Ala Asn Cys
225                 230                 235                 240
Pro Val Val Ala Asp Val Thr His Ala Leu Gln Gln Pro Ala Gly Lys
                245                 250                 255
Lys Leu Asp Gly Gly Gly Val Ala Ser Gly Gly Leu Arg Glu Leu Ile
            260                 265                 270
Pro Cys Ile Ala Arg Thr Ser Val Ala Val Gly Val Asp Gly Ile Phe
        275                 280                 285
Met Glu Val His Asp Asp Pro Leu Asn Ala Pro Cys Asp Gly Pro Thr
    290                 295                 300
Gln Trp Pro Leu Arg Asn Leu Glu Glu Leu Leu Glu Glu Leu Ile Ala
305                 310                 315                 320
Ile Ala Arg Val Thr Lys Gly Lys Lys Pro Leu Lys Ile Asp Leu Thr
                325                 330                 335
Pro Phe Lys Glu
            340
<210>113
<211>771
<212>DNA
<213>Oryza sativa
<220>
<221>CDS
<222>(1)..(771)
<400>113
atg tct cgg gag gag aat gtc tac atg gcc aag ctg gcc gag cag gct         48
Met Ser Arg Glu Glu Asn Val Tyr Met Ala Lys Leu Ala Glu Gln Ala
1               5                   10                  15
gaa agg tat gag gag atg gtt gag tac atg gag aag gtt gca aag act         96
Glu Arg Tyr Glu Glu Met Val Glu Tyr Met Glu Lys Val Ala Lys Thr
            20                  25                  30
gta gat gtg gaa gag ctc act gtt gag gag cgc aac ctc ttg tct gtt        144
Val Asp Val Glu Glu Leu Thr Val Glu Glu Arg Asn Leu Leu Ser Val
        35                  40                  45
gct tac aag aat gtg att ggt gcc cgc cgt gcc tcc tgg cgt att gtc        192
Ala Tyr Lys Asn Val Ile Gly Ala Arg Arg Ala Ser Trp Arg Ile Val
    50                  55                  60
tca tcc att gaa cag aag gag gag ggt cgt ggc aat gag gaa cat gtt        240
Ser Ser Ile Glu Gln Lys Glu Glu Gly Arg Gly Asn Glu Glu His Val
65                  70                  75                  80
act ctg atc aag gag tac cgt ggc aag att gaa gct gag ctg agc aag        288
Thr Leu Ile Lys Glu Tyr Arg Gly Lys Ile Glu Ala Glu Leu Ser Lys
                85                  90                  95
att tgc gat ggt atc ctg aag ttg ctt gac tca cac ctt gtg ccc tca        336
Ile Cys Asp Gly Ile Leu Lys Leu Leu Asp Ser His Leu Val Pro Ser
            100                 105                 110
tct act gct gca gaa tct aag gtg ttt tac ctc aag atg aag ggt gat        384
Ser Thr Ala Ala Glu Ser Lys Val Phe Tyr Leu Lys Met Lys Gly Asp
        115                 120                 125
tac cac agg tac ctt gcg gaa ttt aag act ggt gcc gag aga aag gaa        432
Tyr His Arg Tyr Leu Ala Glu Phe Lys Thr Gly Ala Glu Arg Lys Glu
    130                 135                 140
gct gct gag agc aca atg gtg gct tac aag gct gct cag gat att gct        480
Ala Ala Glu Ser Thr Met Val Ala Tyr Lys Ala Ala Gln Asp Ile Ala
145                 150                 155                 160
ctg gcg gat ctt gct ccc acc cat ccc ata agg ctt gga ctg gca ctt        528
Leu Ala Asp Leu Ala Pro Thr His Pro Ile Arg Leu Gly Leu Ala Leu
                165                 170                 175
aac ttc tct gtg ttc tac tac gag att cta aac tct ccs gac aag gct        576
Asn Phe Ser Val Phe Tyr Tyr Glu Ile Leu Asn Ser Pro Asp Lys Ala
            180                 185                 190
tgc aac ctt gct aag cag gcg ttt gac gaa gcc atc tcc gag ttg gat        624
Cys Asn Leu Ala Lys Gln Ala Phe Asp Glu Ala Ile Ser Glu Leu Asp
        195                 200                 205
acc ctc ggg gag gag tct tac aag gac agc act ttg atc atg cag ctc        672
Thr Leu Gly Glu Glu Ser Tyr Lys Asp Ser Thr Leu Ile Met Gln Leu
    210                 215                 220
ctg agg gac aac ttg acc ctc tgg acc tct gac ctc acg gag gac ggt        720
Leu Arg Asp Asn Leu Thr Leu Trp Thr Ser Asp Leu Thr Glu Asp Gly
225                 230                 235                 240
ggt gat gag gtg aaa gaa gcc tcc aag ggc gac gcc tgc gag ggc cag        768
Gly Asp Glu Val Lys Glu Ala Ser Lys Gly Asp Ala Cys Glu Gly Gln
                245                 250                 255
taa                                                                    771
<210>114
<211>256
<212>PRT
<213>Oryza sativa
<400>114
Met Ser Arg Glu Glu Asn Val Tyr Met Ala Lys Leu Ala Glu Gln Ala
1               5                   10                  15
Glu Arg Tyr Glu Glu Met Val Glu Tyr Met Glu Lys Val Ala Lys Thr
            20                  25                  30
Val Asp Val Glu Glu Leu Thr Val Glu Glu Arg Asn Leu Leu Ser Val
        35                  40                  45
Ala Tyr Lys Asn Val Ile Gly Ala Arg Arg Ala Ser Trp Arg Ile Val
    50                  55                  60
Ser Ser Ile Glu Gln Lys Glu Glu Gly Arg Gly Asn Glu Glu His Val
65                  70                  75                  80
Thr Leu Ile Lys Glu Tyr Arg Gly Lys Ile Glu Ala Glu Leu Ser Lys
                85                  90                  95
Ile Cys Asp Gly Ile Leu Lys Leu Leu Asp Ser His Leu Val Pro Ser
            100                 105                 110
Ser Thr Ala Ala Glu Ser Lys Val Phe Tyr Leu Lys Met Lys Gly Asp
        115                 120                 125
Tyr His Arg Tyr Leu Ala Glu Phe Lys Thr Gly Ala Glu Arg Lys Glu
    130                 135                 140
Ala Ala Glu Ser Thr Met Val Ala Tyr Lys Ala Ala Gln Asp Ile Ala
145                 150                 155                 160
Leu Ala Asp Leu Ala Pro Thr His Pro Ile Arg Leu Gly Leu Ala Leu
                165                 170                 175
Asn Phe Ser Val Phe Tyr Tyr Glu Ile Leu Asn Ser Pro Asp Lys Ala
            180                 185                 190
Cys Asn Leu Ala Lys Gln Ala Phe Asp Glu Ala Ile Ser Glu Leu Asp
        195                 200                 205
Thr Leu Gly Glu Glu Ser Tyr Lys Asp Ser Thr Leu Ile Met Gln Leu
    210                 215                 220
Leu Arg Asp Asn Leu Thr Leu Trp Thr Ser Asp Leu Thr Glu Asp Gly
225                 230                 235                 240
Gly Asp Glu Val Lys Glu Ala Ser Lys Gly Asp Ala Cys Glu Gly Gln
                245                 250                 255
<210>115
<211>1536
<212>DNA
<213>Oryza sativa
<220>
<221>CDS
<222>(1)..(1536)
<400>115
atg gcg tcc aac gcc gcg gct gcg gcg gcg gtg tcc ctg gac cag gcc         48
Met Ala Ser Asn Ala Ala Ala Ala Ala Ala Val Ser Leu Asp Gln Ala
1               5                   10                  15
gtg gcg gcg tcg gcg gcg ttc tcg tcg cgg aag cag ctg cgg ctg ccc         96
Val Ala Ala Ser Ala Ala Phe Ser Ser Arg Lys Gln Leu Arg Leu Pro
            20                  25                  30
gcc gcg gcg cgc ggg ggg atg cgg gtg cgg gtg cgg gcg cgg ggg cgg        144
Ala Ala Ala Arg Gly Gly Met Arg Val Arg Val Arg Ala Arg Gly Arg
        35                  40                  45
cgg gag gcg gtg gtg gtg gcg tcc gcg tcg tcg tcg tcg gtg gca gcg        192
Arg Glu Ala Val Val Val Ala Ser Ala Ser Ser Ser Ser Val Ala Ala
    50                  55                  60
ccg gcg gcg aag gcg gag gag atc gtg ctc cag ccc atc agg gag atc        240
Pro Ala Ala Lys Ala Glu Glu Ile Val Leu Gln Pro Ile Arg Glu Ile
65                  70                  75                  80
tcc ggg gcg gtt cag ctg cca ggg tcc aag tcg ctc tcc aac agg atc        288
Ser Gly Ala Val Gln Leu Pro Gly Ser Lys Ser Leu Ser Asn Arg Ile
                85                  90                  95
ctc ctc ctc tcc gcc ctc tcc gag ggc aca aca gtg gtg gac aac ttg        336
Leu Leu Leu Ser Ala Leu Ser Glu Gly Thr Thr Val Val Asp Asn Leu
            100                 105                 110
ctg aac agt gag gat gtt cac tac atg ctt gag gcc ctg aaa gcc ctc        384
Leu Asn Ser Glu Asp Val His Tyr Met Leu Glu Ala Leu Lys Ala Leu
        115                 120                 125
ggg ctc tct gtg gaa gca gat aaa gtt gca aaa aga gct gta gtc gtt        432
Gly Leu Ser Val Glu Ala Asp Lys Val Ala Lys Arg Ala Val Val Val
    130                 135                 140
ggc tgt ggt ggc aag ttt cct gtt gag aag gat gcg aaa gag gaa gtg        480
Gly Cys Gly Gly Lys Phe Pro Val Glu Lys Asp Ala Lys Glu Glu Val
145                 150                 155                 160
caa ctc ttc ttg ggg aac gct gga act gca atg cga cca ttg aca gca        528
Gln Leu Phe Leu Gly Asn Ala Gly Thr Ala Met Arg Pro Leu Thr Ala
                165                 170                 175
gcc gtg act gct gct ggt gga aat gca act tat gtg ctt gat gga gtg        576
Ala Val Thr Ala Ala Gly Gly Asn Ala Thr Tyr Val Leu Asp Gly Val
            180                 185                 190
cca cga atg agg gag aga ccg att ggt gac ttg gtt gtc ggg ttg aaa        624
Pro Arg Met Arg Glu Arg Pro Ile Gly Asp Leu Val Val Gly Leu Lys
        195                 200                 205
caa ctt ggt gcg gat gtc gac tgt ttc ctt ggc act gaa tgc cca cct        672
Gln Leu Gly Ala Asp Val Asp Cys Phe Leu Gly Thr Glu Cys Pro Pro
    210                 215                 220
gtt cgt gtc aag gga att gga gga ctt cct ggt ggc aag gtt aag ctc        720
Val Arg Val Lys Gly Ile Gly Gly Leu Pro Gly Gly Lys Val Lys Leu
225                 230                 235                 240
tct ggt tcc atc agc agt cag tac ttg agt gcc ttg ctg atg gct gct        768
Ser Gly Ser Ile Ser Ser Gln Tyr Leu Ser Ala Leu Leu Met Ala Ala
                245                 250                 255
cct ttg gcc ctt ggg gat gtg gag atc gaa atc att gac aaa cta atc        816
Pro Leu Ala Leu Gly Asp Val Glu Ile Glu Ile Ile Asp Lys Leu Ile
            260                 265                 270
tcc att cct tac gtt gaa atg aca ttg aga ttg atg gag cgt ttt ggt        864
Ser Ile Pro Tyr Val Glu Met Thr Leu Arg Leu Met Glu Arg Phe Gly
        275                 280                 285
gtg aag gca gag cat tct gat agt tgg gac aga ttc tat att aag gga        912
Val Lys Ala Glu His Ser Asp Ser Trp Asp Arg Phe Tyr Ile Lys Gly
    290                 295                 300
ggg cag aag tac aaa tct cct gga aat gcc tat gtt gaa ggt gat gcc        960
Gly Gln Lys Tyr Lys Ser Pro Gly Asn Ala Tyr Val Glu Gly Asp Ala
305                 310                 315                 320
tca agc gcg agc tat ttc ttg gct ggt gct gca atc act gga ggc act       1008
Ser Ser Ala Ser Tyr Phe Leu Ala Gly Ala Ala Ile Thr Gly Gly Thr
                325                 330                 335
gtg aca gtt caa ggt tgt ggt acg acc agt ttg cag ggt gat gtc aaa       1056
Val Thr Val Gln Gly Cys Gly Thr Thr Ser Leu Gln Gly Asp Val Lys
            340                 345                 350
ttt gct gag gta ctt gag atg atg gga gca aag gtt aca tgg act gac       1104
Phe Ala Glu Val Leu Glu Met Met Gly Ala Lys Val Thr Trp Thr Asp
        355                 360                 365
acc agt gta acc gta act ggt cca cca cgt gag cct tat ggg aag aaa       1152
Thr Ser Val Thr Val Thr Gly Pro Pro Arg Glu Pro Tyr Gly Lys Lys
    370                 375                 380
cac ctg aaa gct gtt gat gtc aac atg aac aaa atg cct gat gtt gcc       1200
His Leu Lys Ala Val Asp Val Asn Met Asn Lys Met Pro Asp Val Ala
385                 390                 395                 400
atg acc ctt gcc gtt gtt gca ctc ttc gct gat ggt cca act gct atc       1248
Met Thr Leu Ala Val Val Ala Leu Phe Ala Asp Gly Pro Thr Ala Ile
                405                 410                 415
aga gat gtg gct tcc tgg aga gta aag gaa acc gaa agg atg gtt gca       1296
Arg Asp Val Ala Ser Trp Arg Val Lys Glu Thr Glu Arg Met Val Ala
            420                 425                 430
att cgg acc gag cta aca aag ctg gga gca tcg gtt gaa gaa ggt cct       1344
Ile Arg Thr Glu Leu Thr Lys Leu Gly Ala Ser Val Glu Glu Gly Pro
        435                 440                 445
gac tac tgc atc atc acc cca ccg gag aag ctg aac atc acg gca atc       1392
Asp Tyr Cys Ile Ile Thr Pro Pro Glu Lys Leu Asn Ile Thr Ala Ile
    450                 455                 460
gac acc tac gat gat cac agg atg gcc atg gcc ttc tcc ctc gct gcc        1440
Asp Thr Tyr Asp Asp His Arg Met Ala Met Ala Phe Ser Leu Ala Ala
465                 470                 475                 480
tgc gcc gac gtg ccc gtg acg atc agg gac cct ggt tgc acc cgc aag        1488
Cys Ala Asp Val Pro Val Thr Ile Arg Asp Pro Gly Cys Thr Arg Lys
                485                 490                 495
acc ttc ccc aac tac ttc gac gtt cta agc act ttc gtc agg aac tga        1536
Thr Phe Pro Asn Tyr Phe Asp Val Leu Ser Thr Phe Val Arg Asn
            500                 505                 510
<210>116
<211>511
<212>PRT
<213>Oryza sativa
<400>116
Met Ala Ser Asn Ala Ala Ala Ala Ala Ala Val Ser Leu Asp Gln Ala
1               5                   10                  15
Val Ala Ala Ser Ala Ala Phe Ser Ser Arg Lys Gln Leu Arg Leu Pro
            20                  25                  30
Ala Ala Ala Arg Gly Gly Met Arg Val Arg Val Arg Ala Arg Gly Arg
        35                  40                  45
Arg Glu Ala Val Val Val Ala Ser Ala Ser Ser Ser Ser Val Ala Ala
    50                  55                  60
Pro Ala Ala Lys Ala Glu Glu Ile Val Leu Gln Pro Ile Arg Glu Ile
65                  70                  75                  80
Ser Gly Ala Val Gln Leu Pro Gly Ser Lys Ser Leu Ser Asn Arg Ile
                85                  90                  95
Leu Leu Leu Ser Ala Leu Ser Glu Gly Thr Thr Val Val Asp Asn Leu
            100                 105                 110
Leu Asn Ser Glu Asp Val His Tyr Met Leu Glu Ala Leu Lys Ala Leu
        115                 120                 125
Gly Leu Ser Val Glu Ala Asp Lys Val Ala Lys Arg Ala Val Val Val
    130                 135                 140
Gly Cys Gly Gly Lys Phe Pro Val Glu Lys Asp Ala Lys Glu Glu Val
145                 150                 155                 160
Gln Leu Phe Leu Gly Asn Ala Gly Thr Ala Met Arg Pro Leu Thr Ala
                165                 170                 175
Ala Val Thr Ala Ala Gly Gly Asn Ala Thr Tyr Val Leu Asp Gly Val
            180                 185                 190
Pro Arg Met Arg Glu Arg Pro Ile Gly Asp Leu Val Val Gly Leu Lys
        195                 200                 205
Gln Leu Gly Ala Asp Val Asp Cys Phe Leu Gly Thr Glu Cys Pro Pro
    210                 215                 220
Val Arg Val Lys Gly Ile Gly Gly Leu Pro Gly Gly Lys Val Lys Leu
225                 230                 235                 240
Ser Gly Ser Ile Ser Ser Gln Tyr Leu Ser Ala Leu Leu Met Ala Ala
                245                 250                 255
Pro Leu Ala Leu Gly Asp Val Glu Ile Glu Ile Ile Asp Lys Leu Ile
            260                 265                 270
Ser Ile Pro Tyr Val Glu Met Thr Leu Arg Leu Met Glu Arg Phe Gly
        275                 280                 285
Val Lys Ala Glu His Ser Asp Ser Trp Asp Arg Phe Tyr Ile Lys Gly
    290                 295                 300
Gly Gln Lys Tyr Lys Ser Pro Gly Asn Ala Tyr Val Glu Gly Asp Ala
305                 310                 315                 320
Ser Ser Ala Ser Tyr Phe Leu Ala Gly Ala Ala Ile Thr Gly Gly Thr
                325                 330                 335
Val Thr Val Gln Gly Cys Gly Thr Thr Ser Leu Gln Gly Asp Val Lys
            340                 345                 350
Phe Ala Glu Val Leu Glu Met Met Gly Ala Lys Val Thr Trp Thr Asp
        355                 360                 365
Thr Ser Val Thr Val Thr Gly Pro Pro Arg Glu Pro Tyr Gly Lys Lys
    370                 375                 380
His Leu Lys Ala Val Asp Val Asn Met Asn Lys Met Pro Asp Val Ala
385                 390                 395                 400
Met Thr Leu Ala Val Val Ala Leu Phe Ala Asp Gly Pro Thr Ala Ile
                405                 410                 415
Arg Asp Val Ala Ser Trp Arg Val Lys Glu Thr Glu Arg Met Val Ala
            420                 425                 430
Ile Arg Thr Glu Leu Thr Lys Leu Gly Ala Ser Val Glu Glu Gly Pro
        435                 440                 445
Asp Tyr Cys Ile Ile Thr Pro Pro Glu Lys Leu Asn Ile Thr Ala Ile
    450                 455                 460
Asp Thr Tyr Asp Asp His Arg Met Ala Met Ala Phe Ser Leu Ala Ala
465                 470                 475                 480
Cys Ala Asp Val Pro Val Thr Ile Arg Asp Pro Gly Cys Thr Arg Lys
                485                 490                 495
Thr Phe Pro Asn Tyr Phe Asp Val Leu Ser Thr Phe Val Arg Asn
            500                 505                 510
<210>117
<211>1167
<212>DNA
<213>Oryza sativa
<220>
<221>CDS
<222>(1)..(1167)
<400>117
atg gcg tct gct act ctc ctc aag tca tct ttc ctt ccc aag aag tct         48
Met Ala Ser Ala Thr Leu Leu Lys Ser Ser Phe Leu Pro Lys Lys Ser
1               5                   10                  15
gaa tgg ggt gcc acc cgc cag gct gcc gcc ccc aag ccg gtg act gtc         96
Glu Trp Gly Ala Thr Arg Gln Ala Ala Ala Pro Lys Pro Val Thr Val
            20                  25                  30
tcc atg gtt gtc cgc gct ggt gcc tac gac gat gag ctt gtc aag acc        144
Ser Met Val Val Arg Ala Gly Ala Tyr Asp Asp Glu Leu Val Lys Thr
        35                  40                  45
gcg aaa acc att gca tca cca gga agg ggt atc ctt gcc atg gat gag        192
Ala Lys Thr Ile Ala Ser Pro Gly Arg Gly Ile Leu Ala Met Asp Glu
    50                  55                  60
tcg aac gcg acc tgc ggt aag agg ctt gcg tca att ggc ctt gag aac        240
Ser Asn Ala Thr Cys Gly Lys Arg Leu Ala Ser Ile Gly Leu Glu Asn
65                  70                  75                  80
acc gag gcc aac cgc cag gct tac cgg acc ctc ctt gtc acc gca ccg        288
Thr Glu Ala Asn Arg Gln Ala Tyr Arg Thr Leu Leu Val Thr Ala Pro
                85                  90                  95
ggc ttg gga cag tac atc tcc ggt gct atc ctc ttc gag gag act ctg        336
Gly Leu Gly Gln Tyr Ile Ser Gly Ala Ile Leu Phe Glu Glu Thr Leu
            100                 105                 110
tac cag tca act gta gat ggc aag aag att gtc gac atc ctc act gag        384
Tyr Gln Ser Thr Val Asp Gly Lys Lys Ile Val Asp Ile Leu Thr Glu
        115                 120                 125
cag aaa atc gtt cca ggt atc aag gtc gac aag ggt ctt gtg ccc ctt        432
Gln Lys Ile Val Pro Gly Ile Lys Val Asp Lys Gly Leu Val Pro Leu
    130                 135                 140
gct ggc tcc aac aac gag tca tgg tgc caa ggt cgc gac ggc ctt gcc        480
Ala Gly Ser Asn Asn Glu Ser Trp Cys Gln Gly Arg Asp Gly Leu Ala
145                 150                 155                 160
tcg cgc gag gcg gca tac tac cag cag ggc gct cgc ttc gcc aag tgg        528
Ser Arg Glu Ala Ala Tyr Tyr Gln Gln Gly Ala Arg Phe Ala Lys Trp
                165                 170                 175
cgc act gtt gtc agc atc ccc aac ggc cca tct gaa ctc gcc gtg aag        576
Arg Thr Val Val Ser Ile Pro Asn Gly Pro Ser Glu Leu Ala Val Lys
            180                 185                 190
gag gct gcc tgg ggc ctt gcc cgc tac gcc gcc att tct cag gac aac        624
Glu Ala Ala Trp Gly Leu Ala Arg Tyr Ala Ala Ile Ser Gln Asp Asn
        195                 200                 205
ggg ctg gtg ccg att gtc gag cct gag atc ctc ctc gac ggt gag cat        672
Gly Leu Val Pro Ile Val Glu Pro Glu Ile Leu Leu Asp Gly Glu His
    210                 215                 220
ggc atc gac agg acc ttc gag gtg gcg cag aag gtg tgg gcg gag acc        720
Gly Ile Asp Arg Thr Phe Glu Val Ala Gln Lys Val Trp Ala Glu Thr
225                 230                 235                 240
ttc ttc tac atg gcc gag aac aat gtg atg ttc gag ggc atc ctc ctc        768
Phe Phe Tyr Met Ala Glu Asn Asn Val Met Phe Glu Gly Ile Leu Leu
                245                 250                 255
aag cca agc atg gtg aca ccc ggt gcc gag tgc aag gac agg gcc acc        816
Lys Pro Ser Met Val Thr Pro Gly Ala Glu Cys Lys Asp Arg Ala Thr
            260                 265                 270
cct gag caa gta tct gac tac acc ctc aag ctc ctc cac aga agg atc        864
Pro Glu Gln Val Ser Asp Tyr Thr Leu Lys Leu Leu His Arg Arg Ile
        275                 280                 285
ccc cct gcc gtc ccc gcg atc atg ttc ttg tcg ggt ggg cag tcg gag        912
Pro Pro Ala Val Pro Ala Ile Met Phe Leu Ser Gly Gly Gln Ser Glu
    290                 295                 300
gtg gag gcg acg cag aac ctg aac gcg atg aac cag ggg ccc aac ccg        960
Val Glu Ala Thr Gln Asn Leu Asn Ala Met Asn Gln Gly Pro Asn Pro
305                 310                 315                 320
tgg cac gtg tcg ttc tcg tac gcg agg gcg ctg cag aac acg tgc ctc       1008
Trp His Val Ser Phe Ser Tyr Ala Arg Ala Leu Gln Asn Thr Cys Leu
                325                 330                 335
aag acg tgg ggc ggg cag ccg gag aac gtg aag gcg gcg cag gac cgc       1056
Lys Thr Trp Gly Gly Gln Pro Glu Asn Val Lys Ala Ala Gln Asp Arg
            340                 345                 350
ctg ctc ctc cgc gcc aag gcc aac tcg ctg gcg cag ctc ggc aag tac       1104
Leu Leu Leu Arg Ala Lys Ala Asn Ser Leu Ala Gln Leu Gly Lys Tyr
        355                 360                 365
acc agc gac ggc gag gcc gcc gag gcc aag gag ggc atg ttc gtc aag       1152
Thr Ser Asp Gly Glu Ala Ala Glu Ala Lys Glu Gly Met Phe Val Lys
    370                 375                 380
aac tac gtc tac taa                                                   1167
Asn Tyr Val Tyr
385
<210>118
<211>388
<212>PRT
<213>Oryza sativa
<400>118
Met Ala Ser Ala Thr Leu Leu Lys Ser Ser Phe Leu Pro Lys Lys Ser
1               5                   10                  15
Glu Trp Gly Ala Thr Arg Gln Ala Ala Ala Pro Lys Pro Val Thr Val
            20                  25                  30
Ser Met Val Val Arg Ala Gly Ala Tyr Asp Asp Glu Leu Val Lys Thr
        35                  40                  45
Ala Lys Thr Ile Ala Ser Pro Gly Arg Gly Ile Leu Ala Met Asp Glu
    50                  55                  60
Ser Asn Ala Thr Cys Gly Lys Arg Leu Ala Ser Ile Gly Leu Glu Asn
65                  70                  75                  80
Thr Glu Ala Asn Arg Gln Ala Tyr Arg Thr Leu Leu Val Thr Ala Pro
                85                  90                  95
Gly Leu Gly Gln Tyr Ile Ser Gly Ala Ile Leu Phe Glu Glu Thr Leu
            100                 105                 110
Tyr Gln Ser Thr Val Asp Gly Lys Lys Ile Val Asp Ile Leu Thr Glu
        115                 120                 125
Gln Lys Ile Val Pro Gly Ile Lys Val Asp Lys Gly Leu Val Pro Leu
    130                 135                 140
Ala Gly Ser Asn Asn Glu Ser Trp Cys Gln Gly Arg Asp Gly Leu Ala
145                 150                 155                 160
Ser Arg Glu Ala Ala Tyr Tyr Gln Gln Gly Ala Arg Phe Ala Lys Trp
                165                 170                 175
Arg Thr Val Val Ser Ile Pro Asn Gly Pro Ser Glu Leu Ala Val Lys
            180                 185                 190
Glu Ala Ala Trp Gly Leu Ala Arg Tyr Ala Ala Ile Ser Gln Asp Asn
        195                 200                 205
Gly Leu Val Pro Ile Val Glu Pro Glu Ile Leu Leu Asp Gly Glu His
    210                 215                 220
Gly Ile Asp Arg Thr Phe Glu Val Ala Gln Lys Val Trp Ala Glu Thr
225                 230                 235                 240
Phe Phe Tyr Met Ala Glu Asn Asn Val Met Phe Glu Gly Ile Leu Leu
                245                 250                 255
Lys Pro Ser Met Val Thr Pro Gly Ala Glu Cys Lys Asp Arg Ala Thr
            260                 265                 270
Pro Glu Gln Val Ser Asp Tyr Thr Leu Lys Leu Leu His Arg Arg Ile
        275                 280                 285
Pro Pro Ala Val Pro Ala Ile Met Phe Leu Ser Gly Gly Gln Ser Glu
    290                 295                 300
Val Glu Ala Thr Gln Asn Leu Asn Ala Met Asn Gln Gly Pro Asn Pro
305                 310                 315                 320
Trp His Val Ser Phe Ser Tyr Ala Arg Ala Leu Gln Asn Thr Cys Leu
                325                 330                 335
Lys Thr Trp Gly Gly Gln Pro Glu Asn Val Lys Ala Ala Gln Asp Arg
            340                 345                 350
Leu Leu Leu Arg Ala Lys Ala Asn Ser Leu Ala Gln Leu Gly Lys Tyr
        355                 360                 365
Thr Ser Asp Gly Glu Ala Ala Glu Ala Lys Glu Gly Met Phe Val Lys
    370                 375                 380
Asn Tyr Val Tyr
385
<210>119
<211>1434
<212>DNA
<213>Oryza sativa
<220>
<221>CDS
<222>(1)..(1434)
<400>119
atg tca cca caa aca gaa act aaa gca agt gtt gga ttt aaa gct ggt         48
Met Ser Pro Gln Thr Glu Thr Lys Ala Ser Val Gly Phe Lys Ala Gly
1               5                   10                  15
gtt aag gat tat aaa ttg act tac tac acc ccg gag tac gaa acc aag         96
Val Lys Asp Tyr Lys Leu Thr Tyr Tyr Thr Pro Glu Tyr Glu Thr Lys
            20                  25                  30
gac act gat atc ttg gca gca ttc cga gta act cct cag ccg ggg gtt        144
Asp Thr Asp Ile Leu Ala Ala Phe Arg Val Thr Pro Gln Pro Gly Val
        35                  40                  45
ccg ccc gaa gaa gca ggg gct gca gta gct gcc gaa tct tct act ggt        192
Pro Pro Glu Glu Ala Gly Ala Ala Val Ala Ala Glu Ser Ser Thr Gly
    50                  55                  60
aca tgg aca act gtt tgg act gat gga ctt acc agt ctt gat cgt tac        240
Thr Trp Thr Thr Val Trp Thr Asp Gly Leu Thr Ser Leu Asp Arg Tyr
65                  70                  75                  80
aaa ggc cga tgc tat cac atc gag ccc gtt gtt ggg gag gat aat caa        288
Lys Gly Arg Cys Tyr His Ile Glu Pro Val Val Gly Glu Asp Asn Gln
                85                  90                  95
tat atc gct tat gta gct tat cca tta gac cta ttt gaa gag ggt tct        336
Tyr Ile Ala Tyr Val Ala Tyr Pro Leu Asp Leu Phe Glu Glu Gly Ser
            100                 105                 110
gtt act aac atg ttt act tcc att gtg ggt aac gta ttt ggt ttc aaa        384
Val Thr Asn Met Phe Thr Ser Ile Val Gly Asn Val Phe Gly Phe Lys
        115                 120                 125
gcc cta cgc gct cta cgt ctg gag gat ctg cga att ccc cct act tat        432
Ala Leu Arg Ala Leu Arg Leu Glu Asp Leu Arg Ile Pro Pro Thr Tyr
    130                 135                 140
tca aaa act ttc caa ggt ccg cct cat ggt atc caa gtt gaa agg gat        480
Ser Lys Thr Phe Gln Gly Pro Pro His Gly Ile Gln Val Glu Arg Asp
145                 150                 155                 160
aag ttg aac aaa tac ggt cgt cct tta ttg gga tgt act att aaa cca        528
Lys Leu Asn Lys Tyr Gly Arg Pro Leu Leu Gly Cys Thr Ile Lys Pro
                165                 170                 175
aaa ttg gga tta tct gca aaa aat tat ggt aga gca tgt tat gag tgt        576
Lys Leu Gly Leu Ser Ala Lys Asn Tyr Gly Arg Ala Cys Tyr Glu Cys
            180                 185                 190
cta cgc ggt gga ctt gat ttt acc aaa gat gat gaa aac gta aac tca        624
Leu Arg Gly Gly Leu Asp Phe Thr Lys Asp Asp Glu Asn Val Asn Ser
        195                 200                 205
caa cca ttt atg cgt tgg agg gac cgt ttt gtc ttt tgt gcc gaa gct        672
Gln Pro Phe Met Arg Trp Arg Asp Arg Phe Val Phe Cys Ala Glu Ala
    210                 215                 220
att tat aaa tca cag gcc gaa acc ggt gaa att aag ggg cat tac ttg        720
Ile Tyr Lys Ser Gln Ala Glu Thr Gly Glu Ile Lys Gly His Tyr Leu
225                 230                 235                 240
aat gcg act gca ggt aca tgc gaa gaa atg att aaa aga gct gta ttt        768
Asn Ala Thr Ala Gly Thr Cys Glu Glu Met Ile Lys Arg Ala Val Phe
                245                 250                 255
gcg agg gaa tta ggg gtt cct att gta atg cat gac tac tta acc ggg        816
Ala Arg Glu Leu Gly Val Pro Ile Val Met His Asp Tyr Leu Thr Gly
            260                 265                 270
ggg ttc acc gca aat act agt ttg gct cat tat tgc cgc gac aac ggc        864
Gly Phe Thr Ala Asn Thr Ser Leu Ala His Tyr Cys Arg Asp Asn Gly
        275                 280                 285
cta ctt ctt cac att cac cga gca atg cat gca gtt att gat aga cag        912
Leu Leu Leu His Ile His Arg Ala Met His Ala Val Ile Asp Arg Gln
    290                 295                 300
aaa aat cat ggt atg cat ttc cgt gta tta gct aaa gca ttg cgt atg        960
Lys Asn His Gly Met His Phe Arg Val Leu Ala Lys Ala Leu Arg Met
305                 310                 315                 320
tct ggg gga gat cat atc cac gct ggt aca gta gta ggt aag tta gaa       1008
Ser Gly Gly Asp His Ile His Ala Gly Thr Val Val Gly Lys Leu Glu
                325                 330                 335
ggg gaa cgc gaa atg act tta ggt ttt gtt gat tta ttg cgc gat gat       1056
Gly Glu Arg Glu Met Thr Leu Gly Phe Val Asp Leu Leu Arg Asp Asp
            340                 345                 350
ttt att gaa aaa gat cgt gct cgc ggt atc ttt ttc act cag gac tgg        1104
Phe Ile Glu Lys Asp Arg Ala Arg Gly Ile Phe Phe Thr Gln Asp Trp
        355                 360                 365
gta tcc atg cca ggt gtt ata ccg gtg gct tca ggg ggt att cat gtt        1152
Val Ser Met Pro Gly Val Ile Pro Val Ala Ser Gly Gly Ile His Val
    370                 375                 380
tgg cat atg cca gct ctg acc gaa atc ttt gga gat gat tct gta ttg        1200
Trp His Met Pro Ala Leu Thr Glu Ile Phe Gly Asp Asp Ser Val Leu
385                 390                 395                 400
caa ttt ggt gga gga act tta gga cat cct tgg ggt aat gca cct ggt        1248
Gln Phe Gly Gly Gly Thr Leu Gly His Pro Trp Gly Asn Ala Pro Gly
                405                 410                 415
gca gca gct aat cgg gtg gct tta gaa gcc tgt gta caa gct cgt aac        1296
Ala Ala Ala Asn Arg Val Ala Leu Glu Ala Cys Val Gln Ala Arg Asn
            420                 425                 430
gaa ggg cgc gat ctt gct cgt gaa ggt aat gaa att atc cga tca gct        1344
Glu Gly Arg Asp Leu Ala Arg Glu Gly Asn Glu Ile Ile Arg Ser Ala
        435                 440                 445
tgc aaa tgg agt cct gaa cta gcc gca gct tgt gaa ata tgg aaa gcg        1392
Cys Lys Trp Ser Pro Glu Leu Ala Ala Ala Cys Glu Ile Trp Lys Ala
    450                 455                 460
atc aaa ttc gag ttc gag ccg gta gat aaa cta gat agc tag                1434
Ile Lys Phe Glu Phe Glu Pro Val Asp Lys Leu Asp Ser
465                 470                 475
<210>120
<211>477
<212>PRT
<213>Oryza sativa
<400>120
Met Ser Pro Gln Thr Glu Thr Lys Ala Ser Val Gly Phe Lys Ala Gly
1               5                   10                  15
Val Lys Asp Tyr Lys Leu Thr Tyr Tyr Thr Pro Glu Tyr Glu Thr Lys
            20                  25                  30
Asp Thr Asp Ile Leu Ala Ala Phe Arg Val Thr Pro Gln Pro Gly Val
        35                  40                  45
Pro Pro Glu Glu Ala Gly Ala Ala Val Ala Ala Glu Ser Ser Thr Gly
    50                  55                  60
Thr Trp Thr Thr Val Trp Thr Asp Gly Leu Thr Ser Leu Asp Arg Tyr
65                  70                  75                  80
Lys Gly Arg Cys Tyr His Ile Glu Pro Val Val Gly Glu Asp Asn Gln
                85                  90                  95
Tyr Ile Ala Tyr Val Ala Tyr Pro Leu Asp Leu Phe Glu Glu Gly Ser
            100                 105                 110
Val Thr Asn Met Phe Thr Ser Ile Val Gly Asn Val Phe Gly Phe Lys
        115                 120                 125
Ala Leu Arg Ala Leu Arg Leu Glu Asp Leu Arg Ile Pro Pro Thr Tyr
    130                 135                 140
Ser Lys Thr Phe Gln Gly Pro Pro His Gly Ile Gln Val Glu Arg Asp
145                 150                 155                 160
Lys Leu Asn Lys Tyr Gly Arg Pro Leu Leu Gly Cys Thr Ile Lys Pro
                165                 170                 175
Lys Leu Gly Leu Ser Ala Lys Asn Tyr Gly Arg Ala Cys Tyr Glu Cys
            180                 185                 190
Leu Arg Gly Gly Leu Asp Phe Thr Lys Asp Asp Glu Asn Val Asn Ser
        195                 200                 205
Gln Pro Phe Met Arg Trp Arg Asp Arg Phe Val Phe Cys Ala Glu Ala
    210                 215                 220
Ile Tyr Lys Ser Gln Ala Glu Thr Gly Glu Ile Lys Gly His Tyr Leu
225                 230                 235                 240
Asn Ala Thr Ala Gly Thr Cys Glu Glu Met Ile Lys Arg Ala Val Phe
                245                 250                 255
Ala Arg Glu Leu Gly Val Pro Ile Val Met His Asp Tyr Leu Thr Gly
            260                 265                 270
Gly Phe Thr Ala Asn Thr Ser Leu Ala His Tyr Cys Arg Asp Asn Gly
        275                 280                 285
Leu Leu Leu His Ile His Arg Ala Met His Ala Val Ile Asp Arg Gln
    290                 295                 300
Lys Asn His Gly Met His Phe Arg Val Leu Ala Lys Ala Leu Arg Met
305                 310                 315                 320
Ser Gly Gly Asp His Ile His Ala Gly Thr Val Val Gly Lys Leu Glu
                325                 330                 335
Gly Glu Arg Glu Met Thr Leu Gly Phe Val Asp Leu Leu Arg Asp Asp
            340                 345                 350
Phe Ile Glu Lys Asp Arg Ala Arg Gly Ile Phe Phe Thr Gln Asp Trp
        355                 360                 365
Val Ser Met Pro Gly Val Ile Pro Val Ala Ser Gly Gly Ile His Val
    370                 375                 380
Trp His Met Pro Ala Leu Thr Glu Ile Phe Gly Asp Asp Ser Val Leu
385                 390                 395                 400
Gln Phe Gly Gly Gly Thr Leu Gly His Pro Trp Gly Asn Ala Pro Gly
                405                 410                 415
Ala Ala Ala Asn Arg Val Ala Leu Glu Ala Cys Val Gln Ala Arg Asn
            420                 425                 430
Glu Gly Arg Asp Leu Ala Arg Glu Gly Asn Glu Ile Ile Arg Ser Ala
        435                 440                 445
Cys Lys Trp Ser Pro Glu Leu Ala Ala Ala Cys Glu Ile Trp Lys Ala
    450                 455                 460
Ile Lys Phe Glu Phe Glu Pro Val Asp Lys Leu Asp Ser
465                 470                 475
<210>121
<211>1401
<212>DNA
<213>Oryza sativa
<220>
<221>CDS
<222>(1)..(1401)
<400>121
atg gct gct gcc ttc tcc tcc acc gtt gga gct ccg gcg tcc act ccg         48
Met Ala Ala Ala Phe Ser Ser Thr Val Gly Ala Pro Ala Ser Thr Pro
1               5                   10                  15
acc aac ttc ctg ggg aag aag ctg aag aag cag gtg aca tcg gcg gtg         96
Thr Asn Phe Leu Gly Lys Lys Leu Lys Lys Gln Val Thr Ser Ala Val
            20                  25                  30
aac tac cat ggc aag agc tcc aac atc aac agg ttc aag gtg atg gcc        144
Asn Tyr His Gly Lys Ser Ser Asn Ile Asn Arg Phe Lys Val Met Ala
        35                  40                  45
aag gag ctg gac gag ggc aag cag acc gac cag gac agg tgg aag ggt        192
Lys Glu Leu Asp Glu Gly Lys Gln Thr Asp Gln Asp Arg Trp Lys Gly
    50                  55                  60
ctc gcc tac gac atc tcc gat gac cag cag gac atc acc agg ggg aag        240
Leu Ala Tyr Asp Ile Ser Asp Asp Gln Gln Asp Ile Thr Arg Gly Lys
65                  70                  75                  80
ggt ttc gtc gac tcc ctt ttc cag gct ccc acg ggt gat ggc acc cac        288
Gly Phe Val Asp Ser Leu Phe Gln Ala Pro Thr Gly Asp Gly Thr His
                85                  90                  95
gag gcc gtc ctc agc tcc tac gag tac ctc agc cag ggt ctc aga acg        336
Glu Ala Val Leu Ser Ser Tyr Glu Tyr Leu Ser Gln Gly Leu Arg Thr
            100                 105                 110
tac gac ttc gac aac acc atg gga ggc ttc tac atc gcc cct gct ttc        384
Tyr Asp Phe Asp Asn Thr Met Gly Gly Phe Tyr Ile Ala Pro Ala Phe
        115                 120                 125
atg gac aag ctc gtc gtc cac atc tcc aag aac ttc atg acc ctc ccc        432
Met Asp Lys Leu Val Val His Ile Ser Lys Asn Phe Met Thr Leu Pro
    130                 135                 140
aac atc aag gtc cca ctc atc ctg ggt atc tgg gga ggc aag ggt cag        480
Asn Ile Lys Val Pro Leu Ile Leu Gly Ile Trp Gly Gly Lys Gly Gln
145                 150                 155                 160
gga aaa tcc ttc cag tgt gag ctc gtc ttc gcc aag atg ggg atc aac        528
Gly Lys Ser Phe Gln Cys Glu Leu Val Phe Ala Lys Met Gly Ile Asn
                165                 170                 175
ccc atc atg atg agc gcc gga gag ctg gag agc ggc aac gcc gga gag        576
Pro Ile Met Met Ser Ala Gly Glu Leu Glu Ser Gly Asn Ala Gly Glu
            180                 185                 190
ccg gcg aag ctg atc agg cag cgg tac cgt gag gcg gca gac atc atc        624
Pro Ala Lys Leu Ile Arg Gln Arg Tyr Arg Glu Ala Ala Asp Ile Ile
        195                 200                 205
aag aag ggg aag atg tgc tgc ctc ttc atc aac gat ctg gac gcg ggt        672
Lys Lys Gly Lys Met Cys Cys Leu Phe Ile Asn Asp Leu Asp Ala Gly
    210                 215                 220
gca ggt cgc atg gga ggc acc acc cag tac acg gtg aac aac cag atg        720
Ala Gly Arg Met Gly Gly Thr Thr Gln Tyr Thr Val Asn Asn Gln Met
225                 230                 235                 240
gtg aac gcc acc ctg atg aac atc gcc gac aac cca acc aac gtg cag        768
Val Asn Ala Thr Leu Met Asn Ile Ala Asp Asn Pro Thr Asn Val Gln
                245                 250                 255
ctc ccc ggg atg tac aac aag gag gac aac ccc cgt gtc ccc atc atc        816
Leu Pro Gly Met Tyr Asn Lys Glu Asp Asn Pro Arg Val Pro Ile Ile
            260                 265                 270
gtc acc ggc aac gac ttc tcc acg ctg tac gcg ccg ctc atc cgt gac        864
Val Thr Gly Asn Asp Phe Ser Thr Leu Tyr Ala Pro Leu Ile Arg Asp
        275                 280                 285
ggg cgt atg gag aag ttc tac tgg gct ccc acc cgc gac gac cgt gtc        912
Gly Arg Met Glu Lys Phe Tyr Trp Ala Pro Thr Arg Asp Asp Arg Val
    290                 295                 300
ggc gtc tgc aag ggt atc ttc cgc acc gac aac gtc ccc gac gag gac        960
Gly Val Cys Lys Gly Ile Phe Arg Thr Asp Asn Val Pro Asp Glu Asp
305                 310                 315                 320
atc gtc aag atc gtc gac agc ttc cca ggc caa tcc atc gat ttc ttc       1008
Ile Val Lys Ile Val Asp Ser Phe Pro Gly Gln Ser Ile Asp Phe Phe
                325                 330                 335
ggc gct ctt cgt gcc cgt gtt tac gac gac gag gtg cgc aag tgg gtg       1056
Gly Ala Leu Arg Ala Arg Val Tyr Asp Asp Glu Val Arg Lys Trp Val
            340                 345                 350
tcg gac acg ggt gtg gag aac att ggc aag agg ctg gtg aac tcg agg       1104
Ser Asp Thr Gly Val Glu Asn Ile Gly Lys Arg Leu Val Asn Ser Arg
        355                 360                 365
gag ggc cca ccg gag ttc gag cag ccc aag atg acg atc gaa aag ctc       1152
Glu Gly Pro Pro Glu Phe Glu Gln Pro Lys Met Thr Ile Glu Lys Leu
    370                 375                 380
atg gag tac gga tac atg ctt gtg aag gag cag gag aac gtc aag cgt       1200
Met Glu Tyr Gly Tyr Met Leu Val Lys Glu Gln Glu Asn Val Lys Arg
385                 390                 395                 400
gtg cag ctg gct gag cag tac ttg agc gag gct gct ctt ggt gac gct       1248
Val Gln Leu Ala Glu Gln Tyr Leu Ser Glu Ala Ala Leu Gly Asp Ala
                405                 410                 415
aac tcc gac gcc atg aag act ggt tcc ttc tac ggg caa gga gca cag       1296
Asn Ser Asp Ala Met Lys Thr Gly Ser Phe Tyr Gly Gln Gly Ala Gln
            420                 425                 430
caa gca ggt aac ctg cct gtg ccg gaa ggt tgc acc gac cct gtt gcc       1344
Gln Ala Gly Asn Leu Pro Val Pro Glu Gly Cys Thr Asp Pro Val Ala
        435                 440                 445
aag aac ttc gac cca acg gcg agg agc gac gac ggc agc tgc ctt tac       1392
Lys Asn Phe Asp Pro Thr Ala Arg Ser Asp Asp Gly Ser Cys Leu Tyr
    450                 455                 460
acc ttt taa                                                           1401
Thr Phe
465
<210>122
<211>466
<212>PRT
<213>Oryza sativa
<400>122
Met Ala Ala Ala Phe Ser Ser Thr Val Gly Ala Pro Ala Ser Thr Pro
1               5                   10                  15
Thr Asn Phe Leu Gly Lys Lys Leu Lys Lys Gln Val Thr Ser Ala Val
            20                  25                  30
Asn Tyr His Gly Lys Ser Ser Asn Ile Asn Arg Phe Lys Val Met Ala
        35                  40                  45
Lys Glu Leu Asp Glu Gly Lys Gln Thr Asp Gln Asp Arg Trp Lys Gly
    50                  55                  60
Leu Ala Tyr Asp Ile Ser Asp Asp Gln Gln Asp Ile Thr Arg Gly Lys
65                  70                  75                  80
Gly Phe Val Asp Ser Leu Phe Gln Ala Pro Thr Gly Asp Gly Thr His
                85                  90                  95
Glu Ala Val Leu Ser Ser Tyr Glu Tyr Leu Ser Gln Gly Leu Arg Thr
            100                 105                 110
Tyr Asp Phe Asp Asn Thr Met Gly Gly Phe Tyr Ile Ala Pro Ala Phe
        115                 120                 125
Met Asp Lys Leu Val Val His Ile Ser Lys Asn Phe Met Thr Leu Pro
    130                 135                 140
Asn Ile Lys Val Pro Leu Ile Leu Gly Ile Trp Gly Gly Lys Gly Gln
145                 150                 155                 160
Gly Lys Ser Phe Gln Cys Glu Leu Val Phe Ala Lys Met Gly Ile Asn
                165                 170                 175
Pro Ile Met Met Ser Ala Gly Glu Leu Glu Ser Gly Asn Ala Gly Glu
            180                 185                 190
Pro Ala Lys Leu Ile Arg Gln Arg Tyr Arg Glu Ala Ala Asp Ile Ile
        195                 200                 205
Lys Lys Gly Lys Met Cys Cys Leu Phe Ile Asn Asp Leu Asp Ala Gly
    210                 215                 220
Ala Gly Arg Met Gly Gly Thr Thr Gln Tyr Thr Val Asn Asn Gln Met
225                 230                 235                 240
Val Asn Ala Thr Leu Met Asn Ile Ala Asp Asn Pro Thr Asn Val Gln
                245                 250                 255
Leu Pro Gly Met Tyr Asn Lys Glu Asp Asn Pro Arg Val Pro Ile Ile
            260                 265                 270
Val Thr Gly Asn Asp Phe Ser Thr Leu Tyr Ala Pro Leu Ile Arg Asp
        275                 280                 285
Gly Arg Met Glu Lys Phe Tyr Trp Ala Pro Thr Arg Asp Asp Arg Val
    290                 295                 300
Gly Val Cys Lys Gly Ile Phe Arg Thr Asp Asn Val Pro Asp Glu Asp
305                 310                 315                 320
Ile Val Lys Ile Val Asp Ser Phe Pro Gly Gln Ser Ile Asp Phe Phe
                325                 330                 335
Gly Ala Leu Arg Ala Arg Val Tyr Asp Asp Glu Val Arg Lys Trp Val
            340                 345                 350
Ser Asp Thr Gly Val Glu Asn Ile Gly Lys Arg Leu Val Asn Ser Arg
        355                 360                 365
Glu Gly Pro Pro Glu Phe Glu Gln Pro Lys Met Thr Ile Glu Lys Leu
    370                 375                 380
Met Glu Tyr Gly Tyr Met Leu Val Lys Glu Gln Glu Asn Val Lys Arg
385                 390                 395                 400
Val Gln Leu Ala Glu Gln Tyr Leu Ser Glu Ala Ala Leu Gly Asp Ala
                405                 410                 415
Asn Ser Asp Ala Met Lys Thr Gly Ser Phe Tyr Gly Gln Gly Ala Gln
            420                 425                 430
Gln Ala Gly Asn Leu Pro Val Pro Glu Gly Cys Thr Asp Pro Val Ala
        435                 440                 445
Lys Asn Phe Asp Pro Thr Ala Arg Ser Asp Asp Gly Ser Cys Leu Tyr
    450                 455                 460
Thr Phe
465
<210>123
<211>1002
<212>DNA
<213>Oryza sativa
<220>
<221>CDS
<222>(1)..(1002)
<400>123
atg gca gca tcg cte caa gcc gcg gcc acc ctg atg cag ccg gcc aag         48
Met Ala Ala Ser Leu Gln Ala Ala Ala Thr Leu Met Gln Pro Ala Lys
1               5                   10                  15
ctc ggc ggc cgg gcc tcc tcc gcc gcg ctg cca tcg cgc ccg tct tcg         96
Leu Gly Gly Arg Ala Ser Ser Ala Ala Leu Pro Ser Arg Pro Ser Ser
            20                  25                  30
cac gtc gcc agg gcg ttc ggc gtc gac acc ggt gcc gcc ggc agg atc        144
His Val Ala Arg Ala Phe Gly Val Asp Thr Gly Ala Ala Gly Arg Ile
        35                  40                  45
acg tgc tcc ctg cag tcc gac atc cgg gag gtc gcc aac aag tgc gcc        192
Thr Cys Ser Leu Gln Ser Asp Ile Arg Glu Val Ala Asn Lys Cys Ala
    50                  55                  60
gat gcc gcc aag ctc gcc ggc ttc gcc ctc gcc acc tca gct ctg ctc        240
Asp Ala Ala Lys Leu Ala Gly Phe Ala Leu Ala Thr Ser Ala Leu Leu
65                  70                  75                  80
gtc tcg ggc gcc agc gcg gag ggc gtg ccg agg agg ctt acc ttc gac        288
Val Ser Gly Ala Ser Ala Glu Gly Val Pro Arg Arg Leu Thr Phe Asp
                85                  90                  95
gag att cag agt aag acg tac atg gag gtg aag gga acc ggc acg gcg        336
Glu Ile Gln Ser Lys Thr Tyr Met Glu Val Lys Gly Thr Gly Thr Ala
            100                 105                 110
aac cag tgc ccg acg gtg gag ggc ggc gtc gac tcc ttc gcc ttc aag        384
Asn Gln Cys Pro Thr Val Glu Gly Gly Val Asp Ser Phe Ala Phe Lys
        115                 120                 125
gcc ggc aag tac aac atg aag aag ttc tgc ctg gag ccg acg tcc ttc        432
Ala Gly Lys Tyr Asn Met Lys Lys Phe Cys Leu Glu Pro Thr Ser Phe
    130                 135                 140
acc gtt aag gcg gag ggc gtg gcc aag aac gcg cca ccc gag ttc cag        480
Thr Val Lys Ala Glu Gly Val Ala Lys Asn Ala Pro Pro Glu Phe Gln
145                 150                 155                 160
aag acc aag ctc atg acc cgc ctg acc tac acc ctc gac gag atc gag        528
Lys Thr Lys Leu Met Thr Arg Leu Thr Tyr Thr Leu Asp Glu Ile Glu
                165                 170                 175
ggc ccg ctc gag gtc agc tcc gac gga acc atc aag ttc gag gag aag        576
Gly Pro Leu Glu Val Ser Ser Asp Gly Thr Ile Lys Phe Glu Glu Lys
            180                 185                 190
gac gga atc gac tac gcc gcc gtc acc gtg cag ctg ccg gga ggc gag        624
Asp Gly Ile Asp Tyr Ala Ala Val Thr Val Gln Leu Pro Gly Gly Glu
        195                 200                 205
cgc gtg ccg ttc ctc ttc acc atc aag aat ctg gtc gcc acc ggc aag        672
Arg Val Pro Phe Leu Phe Thr Ile Lys Asn Leu Val Ala Thr Gly Lys
    210                 215                 220
ccg gag agc ttc ggc ggg ccc ttc ctc gtg ccc agc tac cgt ggt tcg        720
Pro Glu Ser Phe Gly Gly Pro Phe Leu Val Pro Ser Tyr Arg Gly Ser
225                 230                 235                 240
tcc ttc ctc gac cca aag ggc cgc ggt ggc tct acc ggc tac gac aac        768
Ser Phe Leu Asp Pro Lys Gly Arg Gly Gly Ser Thr Gly Tyr Asp Asn
                245                 250                 255
gct gtg gcg ctc ccc gcc gga ggc aga gga gac gag gag gag ctc gct        816
Ala Val Ala Leu Pro Ala Gly Gly Arg Gly Asp Glu Glu Glu Leu Ala
            260                 265                 270
aag gag aac gtc aag aac gcc tcg tcg tcg acg ggc aac atc acg ttg        864
Lys Glu Asn Val Lys Asn Ala Ser Ser Ser Thr Gly Asn Ile Thr Leu
        275                 280                 285
agc gtc acc aag agc aag cca gag acc ggc gag gtg att ggc gtc ttc        912
Ser Val Thr Lys Ser Lys Pro Glu Thr Gly Glu Val Ile Gly Val Phe
    290                 295                 300
gag agc gtg cag ccg tcg gac aca gac ctc ggc gcc aag gtg ccc aag        960
Glu Ser Val Gln Pro Ser Asp Thr Asp Leu Gly Ala Lys Val Pro Lys
305                 310                 315                 320
gat gtc aag atc caa ggg gtg tgg tac gcg cag ctc gag tag               1002
Asp Val Lys Ile Gln Gly Val Trp Tyr Ala Gln Leu Glu
                325                 330
<210>124
<211>333
<212>PRT
<213>Oryza sativa
<400>124
Met Ala Ala Ser Leu Gln Ala Ala Ala Thr Leu Met Gln Pro Ala Lys
1               5                   10                  15
Leu Gly Gly Arg Ala Ser Ser Ala Ala Leu Pro Ser Arg Pro Ser Ser
            20                  25                  30
His Val Ala Arg Ala Phe Gly Val Asp Thr Gly Ala Ala Gly Arg Ile
        35                  40                  45
Thr Cys Ser Leu Gln Ser Asp Ile Arg Glu Val Ala Asn Lys Cys Ala
    50                  55                  60
Asp Ala Ala Lys Leu Ala Gly Phe Ala Leu Ala Thr Ser Ala Leu Leu
65                  70                  75                  80
Val Ser Gly Ala Ser Ala Glu Gly Val Pro Arg Arg Leu Thr Phe Asp
                85                  90                  95
Glu Ile Gln Ser Lys Thr Tyr Met Glu Val Lys Gly Thr Gly Thr Ala
            100                 105                 110
Asn Gln Cys Pro Thr Val Glu Gly Gly Val Asp Ser Phe Ala Phe Lys
        115                 120                 125
Ala Gly Lys Tyr Asn Met Lys Lys Phe Cys Leu Glu Pro Thr Ser Phe
    130                 135                 140
Thr Val Lys Ala Glu Gly Val Ala Lys Asn Ala Pro Pro Glu Phe Gln
145                 150                 155                 160
Lys Thr Lys Leu Met Thr Arg Leu Thr Tyr Thr Leu Asp Glu Ile Glu
                165                 170                 175
Gly Pro Leu Glu Val Ser Ser Asp Gly Thr Ile Lys Phe Glu Glu Lys
            180                 185                 190
Asp Gly Ile Asp Tyr Ala Ala Val Thr Val Gln Leu Pro Gly Gly Glu
        195                 200                 205
Arg Val Pro Phe Leu Phe Thr Ile Lys Asn Leu Val Ala Thr Gly Lys
    210                 215                 220
Prc Glu Ser Phe Gly Gly Pro Phe Leu Val Pro Ser Tyr Arg Gly Ser
225                 230                 235                 240
Ser Phe Leu Asp Pro Lys Gly Arg Gly Gly Ser Thr Gly Tyr Asp Asn
                245                 250                 255
Ala Val Ala Leu Pro Ala Gly Gly Arg Gly Asp Glu Glu Glu Leu Ala
            260                 265                 270
Lys Glu Asn Val Lys Asn Ala Ser Ser Ser Thr Gly Asn Ile Thr Leu
        275                 280                 285
Ser Val Thr Lys Ser Lys Pro Glu Thr Gly Glu Val Ile Gly Val Phe
    290                 295                 300
Glu Ser Val Gln Pro Ser Asp Thr Asp Leu Gly Ala Lys Val Pro Lys
305                 310                 315                 320
Asp Val Lys Ile Gln Gly Val Trp Tyr Ala Gln Leu Glu
                325                 330
<210>125
<211>381
<212>DNA
<213>Oryza sativa
<220>
<221>CDS
<222>(1)..(381)
<400>125
atg atc acc tcg ccg ctg gtg gcg ccg gcc cgg gcc aag ggc ctt ccg         48
Met Ile Thr Ser Pro Leu Val Ala Pro Ala Arg Ala Lys Gly Leu Pro
1               5                   10                  15
tcc atc tcc cgc cgg gga tcc tcc ttc gcc atc gtc tgc agc ggt ggg         96
Ser Ile Ser Arg Arg Gly Ser Ser Phe Ala Ile Val Cys Ser Gly Gly
            20                  25                  30
aag aag atc aag acc gac aag ccc tac ggg att gga ggt ggc atg tca        144
Lys Lys Ile Lys Thr Asp Lys Pro Tyr Gly Ile Gly Gly Gly Met Ser
        35                  40                  45
gtc gat att gat gca tct ggc agg aaa agc acg ggg aag ggt gtg tac        192
Val Asp Ile Asp Ala Ser Gly Arg Lys Ser Thr Gly Lys Gly Val Tyr
    50                  55                  60
caa ttc gtt gac aag tac ggc gca aac gtc gac ggc tac agc cca atc        240
Gln Phe Val Asp Lys Tyr Gly Ala Asn Val Asp Gly Tyr Ser Pro Ile
65                  70                  75                  80
tac tcg ccg gag gaa tgg tct ccc acc ggt gac acc tac gtt ggt gga        288
Tyr Ser Pro Glu Glu Trp Ser Pro Thr Gly Asp Thr Tyr Val Gly Gly
                85                  90                  95
acc acc ggg ctt ctg atc tgg gcc gtg acc ctc gcc ggg ctc ctc ggc        336
Thr Thr Gly Leu Leu Ile Trp Ala Val Thr Leu Ala Gly Leu Leu Gly
            100                 105                 110
ggc ggc gcc ctc ctc gtc tac aac acc agc gcc ctc gcc ggc taa            381
Gly Gly Ala Leu Leu Val Tyr Asn Thr Ser Ala Leu Ala Gly
        115                 120                 125
<210>126
<211>126
<212>PRT
<213>Oryza sativa
<400>126
Met Ile Thr Ser Pro Leu Val Ala Pro Ala Arg Ala Lys Gly Leu Pro
1               5                   10                  15
Ser Ile Ser Arg Arg Gly Ser Ser Phe Ala Ile Val Cys Ser Gly Gly
            20                  25                  30
Lys Lys Ile Lys Thr Asp Lys Pro Tyr Gly Ile Gly Gly Gly Met Ser
        35                  40                  45
Val Asp Ile Asp Ala Ser Gly Arg Lys Ser Thr Gly Lys Gly Val Tyr
    50                  55                  60
Gln Phe Val Asp Lys Tyr Gly Ala Asn Val Asp Gly Tyr Ser Pro Ile
65                  70                  75                  80
Tyr Ser Pro Glu Glu Trp Ser Pro Thr Gly Asp Thr Tyr Val Gly Gly
                85                  90                  95
Thr Thr Gly Leu Leu Ile Trp Ala Val Thr Leu Ala Gly Leu Leu Gly
            100                 105                 110
Gly Gly Ala Leu Leu Val Tyr Asn Thr Ser Ala Leu Ala Gly
        115                 120                 125
<210>127
<211>345
<212>DNA
<213>Oryza sativa
<220>
<221>CDS
<222>(1)..(345)
<400>127
atg ccg agg gcc acg agc gat gcg aag ctt cta att cag tcc ctg ggc         48
Met Pro Arg Ala Thr Ser Asp Ala Lys Leu Leu Ile Gln Ser Leu Gly
1               5                   10                  15
aag gct tat gct gcc aca cca aca aat ctc aag atc att gac ctc tat         96
Lys Ala Tyr Ala Ala Thr Pro Thr Asn Leu Lys Ile Ile Asp Leu Tyr
            20                  25                  30
gtg gtc ttt gca gtc gcc act gcc ctt att cag gtt gtt tac atg gga        144
Val Val Phe Ala Val Ala Thr Ala Leu Ile Gln Val Val Tyr Met Gly
        35                  40                  45
ata gtg ggg tca ttt cct ttc aac tct ttc ctt tct ggc gtc ctc tca        192
Ile Val Gly Ser Phe Pro Phe Asn Ser Phe Leu Ser Gly Val Leu Ser
    50                  55                  60
tgc ata gga act gca gtc ctc gct gtt tgc ctt cgt att caa gtt aac        240
Cys Ile Gly Thr Ala Val Leu Ala Val Cys Leu Arg Ile Gln Val Asn
65                  70                  75                  80
aaa gat aac aag gaa ttc aag gat ctt cct cct gaa agg gcg ttt gca        288
Lys Asp Asn Lys Glu Phe Lys Asp Leu Pro Pro Glu Arg Ala Phe Ala
                85                  90                  95
gat ttc gtt ctg tgc aat ctg gtg ctc cac ttg gtg atc atg aac ttc        336
Asp Phe Val Leu Cys Asn Leu Val Leu His Leu Val Ile Met Asn Phe
            100                 105                 110
ctt ggt tga                                                            345
Leu Gly
<210>128
<211>114
<212>PRT
<213>Oryza sativa
<400>128
Met Pro Arg Ala Thr Ser Asp Ala Lys Leu Leu Ile Gln Ser Leu Gly
1               5                   10                  15
Lys Ala Tyr Ala Ala Thr Pro Thr Asn Leu Lys Ile Ile Asp Leu Tyr
            20                  25                  30
Val Val Phe Ala Val Ala Thr Ala Leu Ile Gln Val Val Tyr Met Gly
        35                  40                  45
Ile Val Gly Ser Phe Pro Phe Asn Ser Phe Leu Ser Gly Val Leu Ser
    50                  55                  60
Cys Ile Gly Thr Ala Val Leu Ala Val Cys Leu Arg Ile Gln Val Asn
65                  70                  75                  80
Lys Asp Asn Lys Glu Phe Lys Asp Leu Pro Pro Glu Arg Ala Phe Ala
                85                  90                  95
Asp Phe Val Leu Cys Asn Leu Val Leu His Leu Val Ile Met Asn Phe
            100                 105                 110
Leu Gly
<210>129
<211>786
<212>DNA
<213>Oryza sativa
<220>
<221>CDS
<222>(1)..(786)
<400>129
atg gct ggg gcc tct gcc aag gtc gtc gcg atg ctg ctc tcc gtg ctc         48
Met Ala Gly Ala Ser Ala Lys Val Val Ala Met Leu Leu Ser Val Leu
1               5                   10                  15
gcc acg tac ggc ttc gcc gcc ggc gtc gtc tac acc aac gac tgg ctc         96
Ala Thr Tyr Gly Phe Ala Ala Gly Val Val Tyr Thr Asn Asp Trp Leu
            20                  25                  30
ccg gcc aag gcc acc tgg tac ggc cag ccc aac ggc gcc gga ccc gac        144
Pro Ala Lys Ala Thr Trp Tyr Gly Gln Pro Asn Gly Ala Gly Pro Asp
        35                  40                  45
gac aac ggc ggt gcg tgc ggg ttc aag aac acc aac cag tac ccg ttc        192
Asp Asn Gly Gly Ala Cys Gly Phe Lys Asn Thr Asn Gln Tyr Pro Phe
    50                  55                  60
atg tcc atg acc tcc tgc ggc aac gag cct ctg ttc cag gac ggc aag        240
Met Ser Met Thr Ser Cys Gly Asn Glu Pro Leu Phe Gln Asp Gly Lys
65                  70                  75                  80
ggc tgt ggc gcc tgc tac cag ata cgg tgc acc aac aac ccg tcg tgc        288
Gly Cys Gly Ala Cys Tyr Gln Ile Arg Cys Thr Asn Asn Pro Ser Cys
                85                  90                  95
tcc ggg cag ccc agg acg gtg atc atc acg gac atg aac tac tac ccc        336
Ser Gly Gln Pro Arg Thr Val Ile Ile Thr Asp Met Asn Tyr Tyr Pro
            100                 105                 110
gtg gcc agg tac cac ttc gac ctg agc ggc acg gcg ttc ggc gcc atg        384
Val Ala Arg Tyr His Phe Asp Leu Ser Gly Thr Ala Phe Gly Ala Met
        115                 120                 125
gcg agg ccg ggg ctg aac gac cag ctc cgc cac gcc ggc atc atc gac        432
Ala Arg Pro Gly Leu Asn Asp Gln Leu Arg His Ala Gly Ile Ile Asp
    130                 135                 140
atc cag ttc agg cgc gtc ccg tgc tac cac cgc ggc ctc tac gtg aac        480
Ile Gln Phe Arg Arg Val Pro Cys Tyr His Arg Gly Leu Tyr Val Asn
145                 150                 155                 160
ttc cac gtc gag gcc ggg tcc aac ccg gtg tac ctc gcc gtg ctg gtg        528
Phe His Val Glu Ala Gly Ser Asn Pro Val Tyr Leu Ala Val Leu Val
                165                 170                 175
gag ttc gcc aac aag gac ggc acg gtg gtg cag ctc gac gtc atg gag        576
Glu Phe Ala Asn Lys Asp Gly Thr Val Val Gln Leu Asp Val Met Glu
            180                 185                 190
tcg ctc ccc agc ggc aag ccg acg cgg gtc tgg acg ccc atg cgc cgc        624
Ser Leu Pro Ser Gly Lys Pro Thr Arg Val Trp Thr Pro Met Arg Arg
        195                 200                 205
tcc tgg gga tcc atc tgg cgc ctc gac gcc aac cac cgc ctc cag ggc        672
Ser Trp Gly Ser Ile Trp Arg Leu Asp Ala Asn His Arg Leu Gln Gly
    210                 215                 220
ccc ttm tcc ctc cgc atg gtc agc gag tcc ggc cag acc gtc atc gcc        720
Pro Xaa Ser Leu Arg Met Val Ser Glu Ser Gly Gln Thr Val Ile Ala
225                 230                 235                 240
cac cag gtc atc ccg gcc aac tgg agg gcc aac acc aac tac ggc tcc        768
His Gln Val Ile Pro Ala Asn Trp Arg Ala Asn Thr Asn Tyr Gly Ser
                245                 250                 255
aaa gtc cag ttc cgt tga                                                786
Lys Val Gln Phe Arg
            260
<210>130
<211>261
<212>PRT
<213>Oryza sativa
<220>
<221>misc_feature
<222>(226)..(226)
<223>The ′Xaa′at location 226 stands for Leu,or Phe.
<400>130
Met Ala Gly Ala Ser Ala Lys Val Val Ala Met Leu Leu Ser Val Leu
1               5                   10                  15
Ala Thr Tyr Gly Phe Ala Ala Gly Val Val Tyr Thr Asn Asp Trp Leu
            20                  25                  30
Pro Ala Lys Ala Thr Trp Tyr Gly Gln Pro Asn Gly Ala Gly Pro Asp
        35                  40                  45
Asp Asn Gly Gly Ala Cys Gly Phe Lys Asn Thr Asn Gln Tyr Pro Phe
    50                  55                  60
Met Ser Met Thr Ser Cys Gly Asn Glu Pro Leu Phe Gln Asp Gly Lys
65                  70                  75                  80
Gly Cys Gly Ala Cys Tyr Gln Ile Arg Cys Thr Asn Asn Pro Ser Cys
                85                  90                  95
Ser Gly Gln Pro Arg Thr Val Ile Ile Thr Asp Met Asn Tyr Tyr Pro
            100                 105                 110
Val Ala Arg Tyr His Phe Asp Leu Ser Gly Thr Ala Phe Gly Ala Met
        115                 120                 125
Ala Arg Pro Gly Leu Asn Asp Gln Leu Arg His Ala Gly Ile Ile Asp
    130                 135                 140
Ile Gln Phe Arg Arg Val Pro Cys Tyr His Arg Gly Leu Tyr Val Asn
145                 150                 155                 160
Phe His Val Glu Ala Gly Ser Asn Pro Val Tyr Leu Ala Val Leu Val
                165                 170                 175
Glu Phe Ala Asn Lys Asp Gly Thr Val Val Gln Leu Asp Val Met Glu
            180                 185                 190
Ser Leu Pro Ser Gly Lys Pro Thr Arg Val Trp Thr Pro Met Arg Arg
        195                 200                 205
Ser Trp Gly Ser Ile Trp Arg Leu Asp Ala Asn His Arg Leu Gln Gly
    210                 215                 220
Pro Xaa Ser Leu Arg Met Val Ser Glu Ser Gly Gln Thr Val Ile Ala
225                 230                 235                 240
His Gln Val Ile Pro Ala Asn Trp Arg Ala Asn Thr Asn Tyr Gly Ser
                245                 250                 255
Lys Val Gln Phe Arg
            260
<210>131
<211>1482
<212>DNA
<213>Oryza sativa
<220>
<221>CDS
<222>(1)..(1482)
<400>131
atg gac gcc tcc gcc gga ggc ggg ggg aac tcg ctg ccg acg gcg ggg         48
Met Asp Ala Ser Ala Gly Gly Gly Gly Asn Ser Leu Pro Thr Ala Gly
1               5                   10                  15
gcc gac ggg gcc aag cgg cgg gtg tgc cac ttc tac gac gcg gag gtg         96
Ala Asp Gly Ala Lys Arg Arg Val Cys His Phe Tyr Asp Ala Glu Val
            20                  25                  30
ggg aac tac tac tgc ggg cag ggg cac ccg atg aag ccc cac cgc atc        144
Gly Asn Tyr Tyr Cys Gly Gln Gly His Pro Met Lys Pro His Arg Ile
        35                  40                  45
cgg atg acc cac gcg ctg ctc gcc cac tac ggc ctc ctc gac cag atg        192
Arg Met Thr His Ala Leu Leu Ala His Tyr Gly Leu Leu Asp Gln Met
    50                  55                  60
cag gtg ctc aag ccc cac ccg gcg cgc gac cgc gac ctc tgc cgc ttc        240
Gln Val Leu Lys Pro His Pro Ala Arg Asp Arg Asp Leu Cys Arg Phe
65                  70                  75                  80
cac gcc gac gac tac gtc gcc ttc ctc cgc tcc gtc acg ccg gag acc        288
His Ala Asp Asp Tyr Val Ala Phe Leu Arg Ser Val Thr Pro Glu Thr
                85                  90                  95
cag cag gac cag atc cgg gcg ctc aag cgc ttc aac gtc ggc gag gac        336
Gln Gln Asp Gln Ile Arg Ala Leu Lys Arg Phe Asn Val Gly Glu Asp
            100                 105                 110
tgc ccc gtc ttc gac ggc ctc tac agc ttc tgc cag acc tac gcc ggg        384
Cys Pro Val Phe Asp Gly Leu Tyr Ser Phe Cys Gln Thr Tyr Ala Gly
        115                 120                 125
gga tcc gtc ggc ggc gcc gtc aag ctc aac cac ggc cac gac atc gcc        432
Gly Ser Val Gly Gly Ala Val Lys Leu Asn His Gly His Asp Ile Ala
    130                 135                 140
atc aac tgg gcc ggc ggc ctc cac cac gcc aag aag tgc gag gcc tcc        480
Ile Asn Trp Ala Gly Gly Leu His His Ala Lys Lys Cys Glu Ala Ser
145                 150                 155                 160
ggc ttc tgc tac gtc aac gac atc gtc ctc gcc atc ctc gag ctc ctc        528
Gly Phe Cys Tyr Val Asn Asp Ile Val Leu Ala Ile Leu Glu Leu Leu
                165                 170                 175
aaa tac cac cag cgt gtt ctc tat gtg gac atc gat atc cac cat ggg        576
Lys Tyr His Gln Arg Val Leu Tyr Val Asp Ile Asp Ile His His Gly
            180                 185                 190
gat ggt gtg gag gag gcg ttt tac acg acg gac agg gtg atg acg gtc        624
Asp Gly Val Glu Glu Ala Phe Tyr Thr Thr Asp Arg Val Met Thr Val
        195                 200                 205
tcg ttc cac aag ttt ggg gat tat ttc ccg gga aca ggg gat atc cgt        672
Ser Phe His Lys Phe Gly Asp Tyr Phe Pro Gly Thr Gly Asp Ile Arg
    210                 215                 220
gac att ggg tat tca gag ggg aag tat tac tgc ctg aat gtc ccg ctg        720
Asp Ile Gly Tyr Ser Glu Gly Lys Tyr Tyr Cys Leu Asn Val Pro Leu
225                 230                 235                 240
gat gat ggg att gat gat gac agc tac cag tcc atc ttc aag ccg atc        768
Asp Asp Gly Ile Asp Asp Asp Ser Tyr Gln Ser Ile Phe Lys Pro Ile
                245                 250                 255
atc agc aaa gtc atg gag atg tat cgt cct ggt gca gtc gtg ctt cag        816
Ile Ser Lys Val Met Glu Met Tyr Arg Pro Gly Ala Val Val Leu Gln
            260                 265                 270
tgc ggc gct gat tcg ttg tcc ggc gat agg ttg ggc tgt ttc aat ctc        864
Cys Gly Ala Asp Ser Leu Ser Gly Asp Arg Leu Gly Cys Phe Asn Leu
        275                 280                 285
tca ggg aaa ggt cat gca gaa tgt gta aag ttc atg agg tct ttc aat        912
Ser Gly Lys Gly His Ala Glu Cys Val Lys Phe Met Arg Ser Phe Asn
    290                 295                 300
gtt ccg ttg ctt ctt ctt ggt ggt ggt gga tat gcc ata aga aat gtt        960
Val Pro Leu Leu Leu Leu Gly Gly Gly Gly Tyr Ala Ile Arg Asn Val
305                 310                 315                 320
gca cgc tgt tgg tgc tat gag aca gga gtt gca ctt ggt cat gag ctc       1008
Ala Arg Cys Trp Cys Tyr Glu Thr Gly Val Ala Leu Gly His Glu Leu
                325                 330                 335
acc gac aag atg cct cca aat gag tat ttt gag tat ttt ggt cca gaa       1056
Thr Asp Lys Met Pro Pro Asn Glu Tyr Phe Glu Tyr Phe Gly Pro Glu
            340                 345                 350
tac agt ctt ttc gtt gca gca agt aac atg gag aac aga aat acc aac       1104
Tyr Ser Leu Phe Val Ala Ala Ser Asn Met Glu Asn Arg Asn Thr Asn
        355                 360                 365
aag caa ttg gag gaa ata aaa tgc aac att ctg gac aat ctt tca aaa       1152
Lys Gln Leu Glu Glu Ile Lys Cys Asn Ile Leu Asp Asn Leu Ser Lys
    370                 375                 380
ctt caa cat gct cct agt gtc caa ttt gaa gag cga att cct gaa aca       1200
Leu Gln His Ala Pro Ser Val Gln Phe Glu Glu Arg Ile Pro Glu Thr
385                 390                 395                 400
aag tta cct gag cca gat gaa gat caa gag gat cca gat gaa agg cac        1248
Lys Leu Pro Glu Pro Asp Glu Asp Gln Glu Asp Pro Asp Glu Arg His
                405                 410                 415
gac cct gac tct gat atg gta ttg gat gat cac aaa cct atg gga cac        1296
Asp Pro Asp Ser Asp Met Val Leu Asp Asp His Lys Pro Met Gly His
            420                 425                 430
tca gca aga agc ctt att cgc aac atc gaa gtt aag aga gaa atc act        1344
Ser Ala Arg Ser Leu Ile Arg Asn Ile Glu Val Lys Arg Glu Ile Thr
        435                 440                 445
gaa tca gag gcc aaa gat cag cat ggt aag aga ttg aca act gaa cat        1392
Glu Ser Glu Ala Lys Asp Gln His Gly Lys Arg Leu Thr Thr Glu His
    450                 455                 460
aaa gga cca gaa ccg atg gca gac gat cct ggt tcc tcc aag caa gct        1440
Lys Gly Pro Glu Pro Met Ala Asp Asp Pro Gly Ser Ser Lys Gln Ala
465                 470                 475                 480
cct gta agt cgt cgt ctt ctc tat cca tct gca aat cca tag                1482
Pro Val Ser Arg Arg Leu Leu Tyr Pro Ser Ala Asn Pro
                485                 490
<210>132
<211>493
<212>PRT
<213>Oryza sativa
<400>132
Met Asp Ala Ser Ala Gly Gly Gly Gly Asn Ser Leu Pro Thr Ala Gly
1               5                   10                  15
Ala Asp Gly Ala Lys Arg Arg Val Cys His Phe Tyr Asp Ala Glu Val
            20                  25                  30
Gly Asn Tyr Tyr Cys Gly Gln Gly His Pro Met Lys Pro His Arg Ile
        35                  40                  45
Arg Met Thr His Ala Leu Leu Ala His Tyr Gly Leu Leu Asp Gln Met
    50                  55                  60
Gln Val Leu Lys Pro His Pro Ala Arg Asp Arg Asp Leu Cys Arg Phe
65                  70                  75                  80
His Ala Asp Asp Tyr Val Ala Phe Leu Arg Ser Val Thr Pro Glu Thr
                85                  90                  95
Gln Gln Asp Gln Ile Arg Ala Leu Lys Arg Phe Asn Val Gly Glu Asp
            100                 105                 110
Cys Pro Val Phe Asp Gly Leu Tyr Ser Phe Cys Gln Thr Tyr Ala Gly
        115                 120                 125
Gly Ser Val Gly Gly Ala Val Lys Leu Asn His Gly His Asp Ile Ala
    130                 135                 140
Ile Asn Trp Ala Gly Gly Leu His His Ala Lys Lys Cys Glu Ala Ser
145                 150                 155                 160
Gly Phe Cys Tyr Val Asn Asp Ile Val Leu Ala Ile Leu Glu Leu Leu
                165                 170                 175
Lys Tyr His Gln Arg Val Leu Tyr Val Asp Ile Asp Ile His His Gly
            180                 185                 190
Asp Gly Val Glu Glu Ala Phe Tyr Thr Thr Asp Arg Val Met Thr Val
        195                 200                 205
Ser Phe His Lys Phe Gly Asp Tyr Phe Pro Gly Thr Gly Asp Ile Arg
    210                 215                 220
Asp Ile Gly Tyr Ser Glu Gly Lys Tyr Tyr Cys Leu Asn Val Pro Leu
225                 230                 235                 240
Asp Asp Gly Ile Asp Asp Asp Ser Tyr Gln Ser Ile Phe Lys Pro Ile
                245                 250                 255
Ile Ser Lys Val Met Glu Met Tyr Arg Pro Gly Ala Val Val Leu Gln
            260                 265                 270
Cys Gly Ala Asp Ser Leu Ser Gly Asp Arg Leu Gly Cys Phe Asn Leu
        275                 280                 285
Ser Gly Lys Gly His Ala Glu Cys Val Lys Phe Met Arg Ser Phe Asn
    290                 295                 300
Val Pro Leu Leu Leu Leu Gly Gly Gly Gly Tyr Ala Ile Arg Asn Val
305                 310                 315                 320
Ala Arg Cys Trp Cys Tyr Glu Thr Gly Val Ala Leu Gly His Glu Leu
                325                 330                 335
Thr Asp Lys Met Pro Pro Asn Glu Tyr Phe Glu Tyr Phe Gly Pro Glu
            340                 345                 350
Tyr Ser Leu Phe Val Ala Ala Ser Asn Met Glu Asn Arg Asn Thr Asn
        355                 360                 365
Lys Gln Leu Glu Glu Ile Lys Cys Asn Ile Leu Asp Asn Leu Ser Lys
    370                 375                 380
Leu Gln His Ala Pro Ser Val Gln Phe Glu Glu Arg Ile Pro Glu Thr
385                 390                 395                 400
Lys Leu Pro Glu Pro Asp Glu Asp Gln Glu Asp Pro Asp Glu Arg His
                405                 410                 415
Asp Pro Asp Ser Asp Met Val Leu Asp Asp His Lys Pro Met Gly His
            420                 425                 430
Ser Ala Arg Ser Leu Ile Arg Asn Ile Glu Val Lys Arg Glu Ile Thr
        435                 440                 445
Glu Ser Glu Ala Lys Asp Gln His Gly Lys Arg Leu Thr Thr Glu His
    450                 455                 460
Lys Gly Pro Glu Pro Met Ala Asp Asp Pro Gly Ser Ser Lys Gln Ala
465                 470                 475                 480
Pro Val Ser Arg Arg Leu Leu Tyr Pro Ser Ala Asn Pro
                485                 490
<210>133
<211>1275
<212>DNA
<213>Oryza sativa
<220>
<221>CDS
<222>(1)..(1275)
<400>133
atg gcg atc cgc gcg agg tcc tcc tcc tac gcc gcc gcg gcg gtc gcg         48
Met Ala Ile Arg Ala Arg Ser Ser Ser Tyr Ala Ala Ala Ala Val Ala
1               5                   10                  15
ctg gcg ctc gcg ctg gcg tcc gtc gcc gct gtc gcc ggc gag gtc ttc         96
Leu Ala Leu Ala Leu Ala Ser Val Ala Ala Val Ala Gly Glu Val Phe
            20                  25                  30
ttc cag gag aag ttc gaa gat gga tgg gaa agt cgg tgg gtc aag tca        144
Phe Gln Glu Lys Phe Glu Asp Gly Trp Glu Ser Arg Trp Val Lys Ser
        35                  40                  45
gaa tgg aag aag gat gag aac atg gct ggt gaa tgg aac cac aca tct        192
Glu Trp Lys Lys Asp Glu Asn Met Ala Gly Glu Trp Asn His Thr Ser
    50                  55                  60
ggg aag tgg aat gga gat cct gag gac aaa ggt atc caa acc tct gag        240
Gly Lys Trp Asn Gly Asp Pro Glu Asp Lys Gly Ile Gln Thr Ser Glu
65                  70                  75                  80
gac tac agg ttc tac gct att tca gcg gag tac cca gaa ttc agc aac        288
Asp Tyr Arg Phe Tyr Ala Ile Ser Ala Glu Tyr Pro Glu Phe Ser Asn
                85                  90                  95
aag gat aaa acc ctg gtg ctg cag ttc tct gta aag cat gag caa aag        336
Lys Asp Lys Thr Leu Val Leu Gln Phe Ser Val Lys His Glu Gln Lys
            100                 105                 110
ctt gac tgt ggt ggt gga tat gtc aag ttg ctt ggt ggt gat gtt gac        384
Leu Asp Cys Gly Gly Gly Tyr Val Lys Leu Leu Gly Gly Asp Val Asp
        115                 120                 125
cag aag aaa ttt ggt ggg gac aca ccg tac agc att atg ttt gga cca        432
Gln Lys Lys Phe Gly Gly Asp Thr Pro Tyr Ser Ile Met Phe Gly Pro
    130                 135                 140
gac atc tgt ggg tac agc acc aag aag gtc cat act atc ttt act aag        480
Asp Ile Cys Gly Tyr Ser Thr Lys Lys Val His Thr Ile Phe Thr Lys
145                 150                 155                 160
aat gac aag aac cat ttg atc aag aag gat gtc ccc tgc gag act gat        528
Asn Asp Lys Asn His Leu Ile Lys Lys Asp Val Pro Cys Glu Thr Asp
                165                 170                 175
cag ctg tcc cat gtg tac act ttg atc atc cat cct gat gct aca tac        576
Gln Leu Ser His Val Tyr Thr Leu Ile Ile His Pro Asp Ala Thr Tyr
            180                 185                 190
agc ata ctt att gac aat gtt gag aag caa tct ggc agc atc tac gag        624
Ser Ile Leu Ile Asp Asn Val Glu Lys Gln Ser Gly Ser Ile Tyr Glu
        195                 200                 205
cac tgg gat att ctg cct ccg aag caa atc aag gac cca gaa gct aag        672
His Trp Asp Ile Leu Pro Pro Lys Gln Ile Lys Asp Pro Glu Ala Lys
    210                 215                 220
aag cca gag gac tgg gat gac aag gag tac att cct gac cct gag gac        720
Lys Pro Glu Asp Trp Asp Asp Lys Glu Tyr Ile Pro Asp Pro Glu Asp
225                 230                 235                 240
aag aag cct gag gga tac gat gat att ccc aag gaa atc cct gac cct        768
Lys Lys Pro Glu Gly Tyr Asp Asp Ile Pro Lys Glu Ile Pro Asp Pro
                245                 250                 255
gat gct aag aag cct gag gct ggg gct gat gag gaa gat ggt gag tgg        816
Asp Ala Lys Lys Pro Glu Ala Gly Ala Asp Glu Glu Asp Gly Glu Trp
            260                 265                 270
act gca cca acc atc cgt aac cct gag tac aag gga cca tgg aag caa        864
Thr Ala Pro Thr Ile Arg Asn Pro Glu Tyr Lys Gly Pro Trp Lys Gln
        275                 280                 285
aag aaa atc aag aac cct aac tac cag ggc aaa tgg aag ccg ccg atg        912
Lys Lys Ile Lys Asn Pro Asn Tyr Gln Gly Lys Trp Lys Pro Pro Met
    290                 295                 300
atc gcc acc cca gac ttc caa gat gat cct tac atc tac gcc ttt gac        960
Ile Ala Thr Pro Asp Phe Gln Asp Asp Pro Tyr Ile Tyr Ala Phe Asp
305                 310                 315                 320
agc ctg aag tcc att gga att gag ttg tgg cag gtc aaa tca ggg act       1008
Ser Leu Lys Ser Ile Gly Ile Glu Leu Trp Gln Val Lys Ser Gly Thr
                325                 330                 335
ctg ttt gac aac att ctg att act gac gat gct gct ttg gcc aag aca       1056
Leu Phe Asp Asn Ile Leu Ile Thr Asp Asp Ala Ala Leu Ala Lys Thr
            340                 345                 350
ttc gca gag gag aca tgg gcc aag cac aag gat gct gag aag gct gct       1104
Phe Ala Glu Glu Thr Trp Ala Lys His Lys Asp Ala Glu Lys Ala Ala
        355                 360                 365
ttt gac gag gca gag aaa aag aag gaa gag gag gaa gct gcc aag gcc       1152
Phe Asp Glu Ala Glu Lys Lys Lys Glu Glu Glu Glu Ala Ala Lys Ala
    370                 375                 380
ggt gag gac gat gat gat ttg gat gac gag gat gct gag gat gag gac       1200
Gly Glu Asp Asp Asp Asp Leu Asp Asp Glu Asp Ala Glu Asp Glu Asp
385                 390                 395                 400
aag gcc gat gag aag gct gac tct gat gca gag gat ggc aag gat tct       1248
Lys Ala Asp Glu Lys Ala Asp Ser Asp Ala Glu Asp Gly Lys Asp Ser
                405                 410                 415
gat gat gag aag cat gat gag ctc taa                                   1275
Asp Asp Glu Lys His Asp Glu Leu
            420
<210>134
<211>424
<212>PRT
<213>Oryza sativa
<400>134
Met Ala Ile Arg Ala Arg Ser Ser Ser Tyr Ala Ala Ala Ala Val Ala
1               5                   10                  15
Leu Ala Leu Ala Leu Ala Ser Val Ala Ala Val Ala Gly Glu Val Phe
            20                  25                  30
Phe Gln Glu Lys Phe Glu Asp Gly Trp Glu Ser Arg Trp Val Lys Ser
        35                  40                  45
Glu Trp Lys Lys Asp Glu Asn Met Ala Gly Glu Trp Asn His Thr Ser
    50                  55                  60
Gly Lys Trp Asn Gly Asp Pro Glu Asp Lys Gly Ile Gln Thr Ser Glu
65                  70                  75                  80
Asp Tyr Arg Phe Tyr Ala Ile Ser Ala Glu Tyr Pro Glu Phe Ser Asn
                85                  90                  95
Lys Asp Lys Thr Leu Val Leu Gln Phe Ser Val Lys His Glu Gln Lys
            100                 105                 110
Leu Asp Cys Gly Gly Gly Tyr Val Lys Leu Leu Gly Gly Asp Val Asp
        115                 120                 125
Gln Lys Lys Phe Gly Gly Asp Thr Pro Tyr Ser Ile Met Phe Gly Pro
    130                 135                 140
Asp Ile Cys Gly Tyr Ser Thr Lys Lys Val His Thr Ile Phe Thr Lys
145                 150                 155                 160
Asn Asp Lys Asn His Leu Ile Lys Lys Asp Val Pro Cys Glu Thr Asp
                165                 170                 175
Gln Leu Ser His Val Tyr Thr Leu Ile Ile His Pro Asp Ala Thr Tyr
            180                 185                 190
Ser Ile Leu Ile Asp Asn Val Glu Lys Gln Ser Gly Ser Ile Tyr Glu
        195                 200                 205
His Trp Asp Ile Leu Pro Pro Lys Gln Ile Lys Asp Pro Glu Ala Lys
    210                 215                 220
Lys Pro Glu Asp Trp Asp Asp Lys Glu Tyr Ile Pro Asp Pro Glu Asp
225                 230                 235                 240
Lys Lys Pro Glu Gly Tyr Asp Asp Ile Pro Lys Glu Ile Pro Asp Pro
                245                 250                 255
Asp Ala Lys Lys Pro Glu Ala Gly Ala Asp Glu Glu Asp Gly Glu Trp
            260                 265                 270
Thr Ala Pro Thr Ile Arg Asn Pro Glu Tyr Lys Gly Pro Trp Lys Gln
        275                 280                 285
Lys Lys Ile Lys Asn Pro Asn Tyr Gln Gly Lys Trp Lys Pro Pro Met
    290                 295                 300
Ile Ala Thr Pro Asp Phe Gln Asp Asp Pro Tyr Ile Tyr Ala Phe Asp
305                 310                 315                 320
Ser Leu Lys Ser Ile Gly Ile Glu Leu Trp Gln Val Lys Ser Gly Thr
                325                 330                 335
Leu Phe Asp Asn Ile Leu Ile Thr Asp Asp Ala Ala Leu Ala Lys Thr
            340                 345                 350
Phe Ala Glu Glu Thr Trp Ala Lys His Lys Asp Ala Glu Lys Ala Ala
        355                 360                 365
Phe Asp Glu Ala Glu Lys Lys Lys Glu Glu Glu Glu Ala Ala Lys Ala
    370                 375                 380
Gly Glu Asp Asp Asp Asp Leu Asp Asp Glu Asp Ala Glu Asp Glu Asp
385                 390                 395                 400
Lys Ala Asp Glu Lys Ala Asp Ser Asp Ala Glu Asp Gly Lys Asp Ser
                405                 410                 415
Asp Asp Glu Lys His Asp Glu Leu
            420
<210>135
<211>279
<212>DNA
<213>Oryza sativa
<220>
<221>CDS
<222>(1)..(279)
<400>135
atg gcc ggc atc atc cac aag atc gag gag aag ctc cac atg ggc gga        48
Met Ala Gly Ile Ile His Lys Ile Glu Glu Lys Leu His Met Gly Gly
1               5                   10                  15
ggc gag cac aag aag gaa gac gag cac aag aag gag ggg gag cac cac         96
Gly Glu His Lys Lys Glu Asp Glu His Lys Lys Glu Gly Glu His His
            20                  25                  30
aag aag gac ggg gag cac aag gaa ggc gtg gtg gag aag atc aag gac        144
Lys Lys Asp Gly Glu His Lys Glu Gly Val Val Glu Lys Ile Lys Asp
        35                  40                  45
aag atc acc ggc gac cac ggc gac ggc ggc gag cac aag gag aag aag        192
Lys Ile Thr Gly Asp His Gly Asp Gly Gly Glu His Lys Glu Lys Lys
    50                  55                  60
gac aag aag aag aag aag gag aag aag cac ggc gag gag ggc tac cac        240
Asp Lys Lys Lys Lys Lys Glu Lys Lys His Gly Glu Glu Gly Tyr His
65                  70                  75                  80
cac gac ggc cac agc agc agc agc agc gac agc gac tga                    279
His Asp Gly His Ser Ser Ser Ser Ser Asp Ser Asp
                85                  90
<210>136
<211>92
<212>PRT
<213>Oryza sativa
<400>136
Met Ala Gly Ile Ile His Lys Ile Glu Glu Lys Leu His Met Gly Gly
1               5                   10                  15
Gly Glu His Lys Lys Glu Asp Glu His Lys Lys Glu Gly Glu His His
            20                  25                  30
Lys Lys Asp Gly Glu His Lys Glu Gly Val Val Glu Lys Ile Lys Asp
        35                  40                  45
Lys Ile Thr Gly Asp His Gly Asp Gly Gly Glu His Lys Glu Lys Lys
    50                  55                  60
Asp Lys Lys Lys Lys Lys Glu Lys Lys His Gly Glu Glu Gly Tyr His
65                  70                  75                  80
His Asp Gly His Ser Ser Ser Ser Ser Asp Ser Asp
                85                  90
<210>137
<211>3321
<212>DNA
<213>Oryza sativa
<220>
<221>CDS
<222>(1)..(3321)
<400>137
gar arg ggt gga ggt kac gcg gag gtg gat tcg gcg gct gct gct act         48
Glu Xaa Gly Gly Gly Xaa Ala Glu Val Asp Ser Ala Ala Ala Ala Thr
1               5                   10                  15
ggt gct cgg gcc acg gcg gcg acg aca cca cgg agg cag tct ccg gcg         96
Gly Ala Arg Ala Thr Ala Ala Thr Thr Pro Arg Arg Gln Ser Pro Ala
            20                  25                  30
gga gct ggg agc ccc tcg cag cgc gac gcg cgg tgg ggt gac acg agc        144
Gly Ala Gly Ser Pro Ser Gln Arg Asp Ala Arg Trp Gly Asp Thr Ser
        35                  40                  45
tcc tac ggt gct aga aag aag cac agg gtt ttt tgc cag ctt cca aat        192
Ser Tyr Gly Ala Arg Lys Lys His Arg Val Phe Cys Gln Leu Pro Asn
    50                  55                  60
agt gat tgg gcc tta tgc act gta att aca acc tcc ggt gac gat tcc        240
Ser Asp Trp Ala Leu Cys Thr Val Ile Thr Thr Ser Gly Asp Asp Ser
65                  70                  75                  80
gta cta aag ctt cct gaa gga aaa gta ctg agg ttg aaa aca gag agc        288
Val Leu Lys Leu Pro Glu Gly Lys Val Leu Arg Leu Lys Thr Glu Ser
                85                  90                  95
ctt gaa gct gca aat cct gaa att ctt gac ggg gtg gat gat ctt atg        336
Leu Glu Ala Ala Asn Pro Glu Ile Leu Asp Gly Val Asp Asp Leu Met
            100                 105                 110
cag cta agt tat cta agt gag cca tcc gtt ctg tac aat ttg cag tac        384
Gln Leu Ser Tyr Leu Ser Glu Pro Ser Val Leu Tyr Asn Leu Gln Tyr
        115                 120                 125
aga tac tct caa gac ttg ata tat act aaa gca ggt cca gtt ttg gtg        432
Arg Tyr Ser Gln Asp Leu Ile Tyr Thr Lys Ala Gly Pro Val Leu Val
    130                 135                 140
gcg gtc aat cct ttt aag aaa gtt cct cta tat ggt aat gag tac att        480
Ala Val Asn Pro Phe Lys Lys Val Pro Leu Tyr Gly Asn Glu Tyr Ile
145                 150                 155                 160
gat gca tat aga aat aaa aca aag gat agc cca cac gtt tat gca ata        528
Asp Ala Tyr Arg Asn Lys Thr Lys Asp Ser Pro His Val Tyr Ala Ile
                165                 170                 175
gca gat tca gcc ctc cgt gaa atg aaa aga gat gaa gtt aac cag tct        576
Ala Asp Ser Ala Leu Arg Glu Met Lys Arg Asp Glu Val Asn Gln Ser
            180                 185                 190
atc atc ata agt ggt gag agt gga gca gga aag aca gaa act gca aag        624
Ile Ile Ile Ser Gly Glu Ser Gly Ala Gly Lys Thr Glu Thr Ala Lys
        195                 200                 205
att gct atg cag tat ttg gct tct ctt gga ggt ggg ggt ggc ata gaa        672
Ile Ala Met Gln Tyr Leu Ala Ser Leu Gly Gly Gly Gly Gly Ile Glu
    210                 215                 220
tat gag atc cta caa acc aac cca ata ctc gag gct ttt ggc aac gca        720
Tyr Glu Ile Leu Gln Thr Asn Pro Ile Leu Glu Ala Phe Gly Asn Ala
225                 230                 235                 240
aag aca cta aga aat gac aac tca agt cgc ttt gga aag ctc att gaa        768
Lys Thr Leu Arg Asn Asp Asn Ser Ser Arg Phe Gly Lys Leu Ile Glu
                245                 250                 255
att cat ttt agt aca act gga agg att tgt ggt gcc atg att caa aca        816
Ile His Phe Ser Thr Thr Gly Arg Ile Cys Gly Ala Met Ile Gln Thr
            260                 265                 270
ttt cta ctt gag aag tca agg gtt gta caa tgt gca gtt ggc gag cgc        864
Phe Leu Leu Glu Lys Ser Arg Val Val Gln Cys Ala Val Gly Glu Arg
        275                 280                 285
tcc tac cat att ttt tat caa cta tgt gcc ggt gct cct gcg tcc ctc        912
Ser Tyr His Ile Phe Tyr Gln Leu Cys Ala Gly Ala Pro Ala Ser Leu
    290                 295                 300
aga gat aag ttg aat atg aag aaa gcg gat gaa tac aaa tat ttg aag        960
Arg Asp Lys Leu Asn Met Lys Lys Ala Asp Glu Tyr Lys Tyr Leu Lys
305                 310                 315                 320
cag agt tgc tgc tat tca att gcc ggt gtg gat gat gct caa atg ttc       1008
Gln Ser Cys Cys Tyr Ser Ile Ala Gly Val Asp Asp Ala Gln Met Phe
                325                 330                 335
cgt act gta acg gaa gct atg aac atc gtt cat atc agc aaa gag gac       1056
Arg Thr Val Thr Glu Ala Met Asn Ile Val His Ile Ser Lys Glu Asp
            340                 345                 350
caa gat aat gtt ttc acg atg gtt tct gca att cta tgg cta gga gat       1104
Gln Asp Asn Val Phe Thr Met Val Ser Ala Ile Leu Trp Leu Gly Asp
        355                 360                 365
gtc tct ttc acg gtc att gac aac gaa aac cat gtt gag att gtt gta       1152
Val Ser Phe Thr Val Ile Asp Asn Glu Asn His Val Glu Ile Val Val
    370                 375                 380
gat gaa gcg gca gaa acg gtc gca aga ctt ctt ggc tgc agt att gaa       1200
Asp Glu Ala Ala Glu Thr Val Ala Arg Leu Leu Gly Cys Ser Ile Glu
385                 390                 395                 400
gat ctc aat tta gct ttg tcg aag agg cac atg aaa gtt aat aat gaa       1248
Asp Leu Asn Leu Ala Leu Ser Lys Arg His Met Lys Val Asn Asn Glu
                405                 410                 415
aat att gta cag aaa ctc acc ctt tca cag gca atc gac aca aga gat       1296
Asn Ile Val Gln Lys Leu Thr Leu Ser Gln Ala Ile Asp Thr Arg Asp
            420                 425                 430
gcg ttg gcc aag tca ctc tat gcc agt ttg ttt gag tgg ctt gtt gaa       1344
Ala Leu Ala Lys Ser Leu Tyr Ala Ser Leu Phe Glu Trp Leu Val Glu
        435                 440                 445
caa att aac aag tct ctt tca gtt ggc aag cgt cga act ggg aga tca        1392
Gln Ile Asn Lys Ser Leu Ser Val Gly Lys Arg Arg Thr Gly Arg Ser
    450                 455                 460
atc agc att ctt gat atc tat ggc ttt gaa tca ttc gat agg aac agt        1440
Ile Ser Ile Leu Asp Ile Tyr Gly Phe Glu Ser Phe Asp Arg Asn Ser
465                 470                 475                 480
ttt gaa cag ttc tgt att aac tat gct aat gaa agg ctc caa caa cat        1488
Phe Glu Gln Phe Cys Ile Asn Tyr Ala Asn Glu Arg Leu Gln Gln His
                485                 490                 495
ttc aat cgc cat ttg ttt aag ctt gaa caa gag gaa tac gtt gaa gat        1536
Phe Asn Arg His Leu Phe Lys Leu Glu Gln Glu Glu Tyr Val Glu Asp
            500                 505                 510
ggc att gac tgg gca aag gtt gag ttt gag gac aat cag aac tgt ttg        1584
Gly Ile Asp Trp Ala Lys Val Glu Phe Glu Asp Asn Gln Asn Cys Leu
        515                 520                 525
aat ctc ttt gag aaa aag cca ctg ggg ttg ttg tct ctg cta gat gaa        1632
Asn Leu Phe Glu Lys Lys Pro Leu Gly Leu Leu Ser Leu Leu Asp Glu
    530                 535                 540
gaa tct acc ttc ccc aat gcc aca gat ctt act ttt gcg aac aag ctt        1680
Glu Ser Thr Phe Pro Asn Ala Thr Asp Leu Thr Phe Ala Asn Lys Leu
545                 550                 555                 560
aag caa cat ctg aac aat aat tct tgc ttc cga gga gaa aga ggc aag        1728
Lys Gln His Leu Asn Asn Asn Ser Cys Phe Arg Gly Glu Arg Gly Lys
                565                 570                 575
gct ttt gca gtc cgt cac tat gca gga gag gtg gct tat gac acg tca        1776
Ala Phe Ala Val Arg His Tyr Ala Gly Glu Val Ala Tyr Asp Thr Ser
            580                 585                 590
ggt ttt cta gag aag aat aga gat tta ttg cac atg gac tca att cag        1824
Gly Phe Leu Glu Lys Asn Arg Asp Leu Leu His Met Asp Ser Ile Gln
        595                 600                 605
ttc ctt gcc aaa tgc aaa tcc tca cta cca caa atg ttt gca tcc aaa        1872
Phe Leu Ala Lys Cys Lys Ser Ser Leu Pro Gln Met Phe Ala Ser Lys
    610                 615                 620
atg ctt tct caa tct gat aat ccg tta cct gtt cca tat aga aat agt        1920
Met Leu Ser Gln Ser Asp Asn Pro Leu Pro Val Pro Tyr Arg Asn Ser
625                 630                 635                 640
gct gct gac tca cag aag tta agt gtt gcg atg aag ttt aag gga caa        1968
Ala Ala Asp Ser Gln Lys Leu Ser Val Ala Met Lys Phe Lys Gly Gln
                645                 650                 655
ttg ttc caa ctt atg caa aga ctc gaa agt aca aca cca cac ttt ata        2016
Leu Phe Gln Leu Met Gln Arg Leu Glu Ser Thr Thr Pro His Phe Ile
            660                 665                 670
cgt tgt att aag cca aac aat ttg caa ctc cct gca att tat gaa caa        2064
Arg Cys Ile Lys Pro Asn Asn Leu Gln Leu Pro Ala Ile Tyr Glu Gln
        675                 680                 685
gga ctt gtg ctt caa caa ctc aaa tgt tgt ggg gtt ctt gag gtt gtc        2112
Gly Leu Val Leu Gln Gln Leu Lys Cys Cys Gly Val Leu Glu Val Val
    690                 695                 700
cga att tca aga tct gga tat cca aca aga atg act cat cag aaa ttt        2160
Arg Ile Ser Arg Ser Gly Tyr Pro Thr Arg Met Thr His Gln Lys Phe
705                 710                 715                 720
gct cga cgg tat ggc ttt ctt ctt ctt gag gat gtc gca tct caa gac        2208
Ala Arg Arg Tyr Gly Phe Leu Leu Leu Glu Asp Val Ala Ser Gln Asp
                725                 730                 735
cca ctt agt gtt tcg gtt gca att ctt cac cag ttt aac att ttg cct        2256
Pro Leu Ser Val Ser Val Ala Ile Leu His Gln Phe Asn Ile Leu Pro
            740                 745                 750
gag atg tat caa gtt ggg tac aca aaa ttg ttc ttt cga act ggc cag        2304
Glu Met Tyr Gln Val Gly Tyr Thr Lys Leu Phe Phe Arg Thr Gly Gln
        755                 760                 765
att ggc aaa ctt gaa gac act cgg aac cgt act ctg cat ggt att tta        2352
Ile Gly Lys Leu Glu Asp Thr Arg Asn Arg Thr Leu His Gly Ile Leu
    770                 775                 780
agg gtt caa agc tgt ttc aga ggg cat caa gcc cgt cgc cat gca agg        2400
Arg Val Gln Ser Cys Phe Arg Gly His Gln Ala Arg Arg His Ala Arg
785                 790                 795                 800
gaa cga ata aga gga gtt ttg gct ctt caa tca ttt att cga ggt gag        2448
Glu Arg Ile Arg Gly Val Leu Ala Leu Gln Ser Phe Ile Arg Gly Glu
                805                 810                 815
aat gca aga aaa atg tat tcg tct ctg gca agg aaa cac agg gca gcc        2496
Asn Ala Arg Lys Met Tyr Ser Ser Leu Ala Arg Lys His Arg Ala Ala
            820                 825                 830
att att tta cag aga aat cta aaa tgc tgg ctt gca aga aga tat ttc        2544
Ile Ile Leu Gln Arg Asn Leu Lys Cys Trp Leu Ala Arg Arg Tyr Phe
        835                 840                 845
gtt aac ata cgg aag gct tca gta gta ata caa tct ggc att cgt ggt        2592
Val Asn Ile Arg Lys Ala Ser Val Val Ile Gln Ser Gly Ile Arg Gly
    850                 855                 860
tgt ctt gtt cga aga tgt gct ggc aat gtt gat cta ttg aat gtg cta        2640
Cys Leu Val Arg Arg Cys Ala Gly Asn Val Asp Leu Leu Asn Val Leu
865                 870                 875                 880
aga gaa ttc gaa tca aag aag gag gca gag ggt gac caa att ttg att        2688
Arg Glu Phe Glu Ser Lys Lys Glu Ala Glu Gly Asp Gln Ile Leu Ile
                885                 890                 895
aag gca tca ttc ctg gct gag cta caa agg cga ata tta aag gcc gag        2736
Lys Ala Ser Phe Leu Ala Glu Leu Gln Arg Arg Ile Leu Lys Ala Glu
            900                 905                 910
gcg aca gtc cga gaa aag gat gaa gag aac gag atg ctt cag cag cga        2784
Ala Thr Val Arg Glu Lys Asp Glu Glu Asn Glu Met Leu Gln Gln Arg
        915                 920                 925
ctt cag caa tat gaa aac cga tgg tca gaa tac gag cag aaa atg aaa        2832
Leu Gln Gln Tyr Glu Asn Arg Trp Ser Glu Tyr Glu Gln Lys Met Lys
    930                 935                 940
gcg atg gag gaa atg tgg cag aag caa atg cgg tca tta caa tca agc        2880
Ala Met Glu Glu Met Trp Gln Lys Gln Met Arg Ser Leu Gln Ser Ser
945                 950                 955                 960
cta tcc gta gca aag aag agc ctt gct ctt gat gag acg cct agg atg        2928
Leu Ser Val Ala Lys Lys Ser Leu Ala Leu Asp Glu Thr Pro Arg Met
                965                 970                 975
tcc gac tca tcg gtc gac cag agc tgg gag agc aat ggg gtt cac att        2976
Ser Asp Ser Ser Val Asp Gln Ser Trp Glu Ser Asn Gly Val His Ile
            980                 985                 990
ggc agc gcg tcg cag ctg gtt cca cgc acc gtt gga cgg gag atg aat        3024
Gly Ser Ala Ser Gln Leu Val Pro Arg Thr Val Gly Arg Glu Met Asn
        995                 1000                1005
gcc agc atc agc gtc atc agc cgc ttg gcc gaa gag ttc gag cag            3069
Ala Ser Ile Ser Val Ile Ser Arg Leu Ala Glu Glu Phe Glu Gln
    1010                1015                1020
cgc agc cag gtc ttc gct gat gat gcc aag ttc ttg gtt gag gtc            3114
Arg Ser Gln Val Phe Ala Asp Asp Ala Lys Phe Leu Val Glu Val
    1025                1030                1035
aag tcc gga cag gcc gat gcc agc ctg aac cct gac atg gag ctc            3159
Lys Ser Gly Gln Ala Asp Ala Ser Leu Asn Pro Asp Met Glu Leu
    1040                1045                1050
cgc agg ctg aag cag aac ttc gac tca tgg aag aag gac ttc ggc            3204
Arg Arg Leu Lys Gln Asn Phe Asp Ser Trp Lys Lys Asp Phe Gly
    1055                1060                1065
tcg cgc ata agg gag acg aag gtg atc ctc aac aag ctg ggg agc            3249
Ser Arg Ile Arg Glu Thr Lys Val Ile Leu Asn Lys Leu Gly Ser
    1070                1075                1080
ggc aac gaa tcg tcg ccc aac tcg gtg aag cga aaa tgg tgg ggg            3294
Gly Asn Glu Ser Ser Pro Asn Ser Val Lys Arg Lys Trp Trp Gly
    1085                1090                1095
agg ctg aac aca tcc aag ttt tca tga                                    3321
Arg Leu Asn Thr Ser Lys Phe Ser
    1100                1105
<210>138
<211>1106
<212>PRT
<213>Oryza sativa
<220>
<221>misc_feature
<222>(2)..(2)
<223>The ′Xaa′at location 2 stands for Arg,or Lys.
<220>
<221>misc_feature
<222>(6)..(6)
<223>The ′Xaa′at location 6 stands for Asp,or Tyr.
<400>138
Glu Xaa Gly Gly Gly Xaa Ala Glu Val Asp Ser Ala Ala Ala Ala Thr
1               5                   10                  15
Gly Ala Arg Ala Thr Ala Ala Thr Thr Pro Arg Arg Gln Ser Pro Ala
            20                  25                  30
Gly Ala Gly Ser Pro Ser Gln Arg Asp Ala Arg Trp Gly Asp Thr Ser
        35                  40                  45
Ser Tyr Gly Ala Arg Lys Lys His Arg Val Phe Cys Gln Leu Pro Asn
    50                  55                  60
Ser Asp Trp Ala Leu Cys Thr Val Ile Thr Thr Ser Gly Asp Asp Ser
65                  70                  75                  80
Val Leu Lys Leu Pro Glu Gly Lys Val Leu Arg Leu Lys Thr Glu Ser
                85                  90                  95
Leu Glu Ala Ala Asn Pro Glu Ile Leu Asp Gly Val Asp Asp Leu Met
            100                 105                 110
Gln Leu Ser Tyr Leu Ser Glu Pro Ser Val Leu Tyr Asn Leu Gln Tyr
        115                 120                 125
Arg Tyr Ser Gln Asp Leu Ile Tyr Thr Lys Ala Gly Pro Val Leu Val
    130                 135                 140
Ala Val Asn Pro Phe Lys Lys Val Pro Leu Tyr Gly Asn Glu Tyr Ile
145                 150                 155                 160
Asp Ala Tyr Arg Asn Lys Thr Lys Asp Ser Pro His Val Tyr Ala Ile
                165                 170                 175
Ala Asp Ser Ala Leu Arg Glu Met Lys Arg Asp Glu Val Asn Gln Ser
            180                 185                 190
Ile Ile Ile Ser Gly Glu Ser Gly Ala Gly Lys Thr Glu Thr Ala Lys
        195                 200                 205
Ile Ala Met Gln Tyr Leu Ala Ser Leu Gly Gly Gly Gly Gly Ile Glu
    210                 215                 220
Tyr Glu Ile Leu Gln Thr Asn Pro Ile Leu Glu Ala Phe Gly Asn Ala
225                 230                 235                 240
Lys Thr Leu Arg Asn Asp Asn Ser Ser Arg Phe Gly Lys Leu Ile Glu
                245                 250                 255
Ile His Phe Ser Thr Thr Gly Arg Ile Cys Gly Ala Met Ile Gln Thr
            260                 265                 270
Phe Leu Leu Glu Lys Ser Arg Val Val Gln Cys Ala Val Gly Glu Arg
        275                 280                 285
Ser Tyr His Ile Phe Tyr Gln Leu Cys Ala Gly Ala Pro Ala Ser Leu
    290                 295                 300
Arg Asp Lys Leu Asn Met Lys Lys Ala Asp Glu Tyr Lys Tyr Leu Lys
305                 310                 315                 320
Gln Ser Cys Cys Tyr Ser Ile Ala Gly Val Asp Asp Ala Gln Met Phe
                325                 330                 335
Arg Thr Val Thr Glu Ala Met Asn Ile Val His Ile Ser Lys Glu Asp
            340                 345                 350
Gln Asp Asn Val Phe Thr Met Val Ser Ala Ile Leu Trp Leu Gly Asp
        355                 360                 365
Val Ser Phe Thr Val Ile Asp Asn Glu Asn His Val Glu Ile Val Val
    370                 375                 380
Asp Glu Ala Ala Glu Thr Val Ala Arg Leu Leu Gly Cys Ser Ile Glu
385                 390                 395                 400
Asp Leu Asn Leu Ala Leu Ser Lys Arg His Met Lys Val Asn Asn Glu
                405                 410                 415
Asn Ile Val Gln Lys Leu Thr Leu Ser Gln Ala Ile Asp Thr Arg Asp
            420                 425                 430
Ala Leu Ala Lys Ser Leu Tyr Ala Ser Leu Phe Glu Trp Leu Val Glu
        435                 440                 445
Gln Ile Asn Lys Ser Leu Ser Val Gly Lys Arg Arg Thr Gly Arg Ser
    450                 455                 460
Ile Ser Ile Leu Asp Ile Tyr Gly Phe Glu Ser Phe Asp Arg Asn Ser
465                 470                 475                 480
Phe Glu Gln Phe Cys Ile Asn Tyr Ala Asn Glu Arg Leu Gln Gln His
                485                 490                 495
Phe Asn Arg His Leu Phe Lys Leu Glu Gln Glu Glu Tyr Val Glu Asp
            500                 505                 510
Gly Ile Asp Trp Ala Lys Val Glu Phe Glu Asp Asn Gln Asn Cys Leu
        515                 520                 525
Asn Leu Phe Glu Lys Lys Pro Leu Gly Leu Leu Ser Leu Leu Asp Glu
    530                 535                 540
Glu Ser Thr Phe Pro Asn Ala Thr Asp Leu Thr Phe Ala Asn Lys Leu
545                 550                 555                 560
Lys Gln His Leu Asn Asn Asn Ser Cys Phe Arg Gly Glu Arg Gly Lys
                565                 570                 575
Ala Phe Ala Val Arg His Tyr Ala Gly Glu Val Ala Tyr Asp Thr Ser
            580                 585                 590
Gly Phe Leu Glu Lys Asn Arg Asp Leu Leu His Met Asp Ser Ile Gln
        595                 600                 605
Phe Leu Ala Lys Cys Lys Ser Ser Leu Pro Gln Met Phe Ala Ser Lys
    610                 615                 620
Met Leu Ser Gln Ser Asp Asn Pro Leu Pro Val Pro Tyr Arg Asn Ser
625                 630                 635                 640
Ala Ala Asp Ser Gln Lys Leu Ser Val Ala Met Lys Phe Lys Gly Gln
                645                 650                 655
Leu Phe Gln Leu Met Gln Arg Leu Glu Ser Thr Thr Pro His Phe Ile
            660                 665                 670
Arg Cys Ile Lys Pro Asn Asn Leu Gln Leu Pro Ala Ile Tyr Glu Gln
        675                 680                 685
Gly Leu Val Leu Gln Gln Leu Lys Cys Cys Gly Val Leu Glu Val Val
    690                 695                 700
Arg Ile Ser Arg Ser Gly Tyr Pro Thr Arg Met Thr His Gln Lys Phe
705                 710                 715                 720
Ala Arg Arg Tyr Gly Phe Leu Leu Leu Glu Asp Val Ala Ser Gln Asp
                725                 730                 735
Pro Leu Ser Val Ser Val Ala Ile Leu His Gln Phe Asn Ile Leu Pro
            740                 745                 750
Glu Met Tyr Gln Val Gly Tyr Thr Lys Leu Phe Phe Arg Thr Gly Gln
        755                 760                 765
Ile Gly Lys Leu Glu Asp Thr Arg Asn Arg Thr Leu His Gly Ile Leu
    770                 775                 780
Arg Val Gln Ser Cys Phe Arg Gly His Gln Ala Arg Arg His Ala Arg
785                 790                 795                 800
Glu Arg Ile Arg Gly Val Leu Ala Leu Gln Ser Phe Ile Arg Gly Glu
                805                 810                 815
Asn Ala Arg Lys Met Tyr Ser Ser Leu Ala Arg Lys His Arg Ala Ala
            820                 825                 830
Ile Ile Leu Gln Arg Asn Leu Lys Cys Trp Leu Ala Arg Arg Tyr Phe
        835                 840                 845
Val Asn Ile Arg Lys Ala Ser Val Val Ile Gln Ser Gly Ile Arg Gly
    850                 855                 860
Cys Leu Val Arg Arg Cys Ala Gly Asn Val Asp Leu Leu Asn Val Leu
865                 870                 875                 880
Arg Glu Phe Glu Ser Lys Lys Glu Ala Glu Gly Asp Gln Ile Leu Ile
                885                 890                 895
Lys Ala Ser Phe Leu Ala Glu Leu Gln Arg Arg Ile Leu Lys Ala Glu
            900                 905                 910
Ala Thr Val Arg Glu Lys Asp Glu Glu Asn Glu Met Leu Gln Gln Arg
        915                 920                 925
Leu Gln Gln Tyr Glu Asn Arg Trp Ser Glu Tyr Glu Gln Lys Met Lys
    930                 935                 940
Ala Met Glu Glu Met Trp Gln Lys Gln Met Arg Ser Leu Gln Ser Ser
945                 950                 955                 960
Leu Ser Val Ala Lys Lys Ser Leu Ala Leu Asp Glu Thr Pro Arg Met
                965                 970                 975
Ser Asp Ser Ser Val Asp Gln Ser Trp Glu Ser Asn Gly Val His Ile
            980                 985                 990
Gly Ser Ala Ser Gln Leu Val Pro Arg Thr Val Gly Arg Glu Met Asn
        995                 1000                1005
Ala Ser Ile Ser Val Ile Ser Arg Leu Ala Glu Glu Phe Glu Gln
    1010                1015                1020
Arg Ser Gln Val Phe Ala Asp Asp Ala Lys Phe Leu Val Glu Val
    1025                1030                1035
Lys Ser Gly Gln Ala Asp Ala Ser Leu Asn Pro Asp Met Glu Leu
    1040                1045                1050
Arg Arg Leu Lys Gln Asn Phe Asp Ser Trp Lys Lys Asp Phe Gly
    1055                1060                1065
Ser Arg Ile Arg Glu Thr Lys Val Ile Leu Asn Lys Leu Gly Ser
    1070                1075                1080
Gly Asn Glu Ser Ser Pro Asn Ser Val Lys Arg Lys Trp Trp Gly
    1085                1090                1095
Arg Leu Asn Thr Ser Lys Phe Ser
    1100                1105
<210>139
<211>495
<212>DNA
<213>Oryza sativa
<220>
<221>CDS
<222>(1)..(495)
<400>139
atg gag aac tac cag ggg cag cac ggc tac ggc gcc gac cgc gtc gac         48
Met Glu Asn Tyr Gln Gly Gln His Gly Tyr Gly Ala Asp Arg Val Asp
1               5                   10                  15
gtg tac ggc aac ccg gtc ggc gcc ggc cag tac ggc ggc ggc gcc acc         96
Val Tyr Gly Asn Pro Val Gly Ala Gly Gln Tyr Gly Gly Gly Ala Thr
            20                  25                  30
gcg ccc ggc gga ggc cac gga gcg atg ggg atg gga ggt cat gcc ggc        144
Ala Pro Gly Gly Gly His Gly Ala Met Gly Met Gly Gly His Ala Gly
        35                  40                  45
gcc ggc gcc ggc ggc cag ttc cag ccg gcg agg gag gac cgc aag acc        192
Ala Gly Ala Gly Gly Gln Phe Gln Pro Ala Arg Glu Asp Arg Lys Thr
    50                  55                  60
ggc ggc atc ctc cac cgc tcc ggc agc tca agc tcc agc tcg tcg tct        240
Gly Gly Ile Leu His Arg Ser Gly Ser Ser Ser Ser Ser Ser Ser Ser
65                  70                  75                  80
gag gac gac ggg atg gga ggg agg agg aag aag ggg atc aag gag aag        288
Glu Asp Asp Gly Met Gly Gly Arg Arg Lys Lys Gly Ile Lys Glu Lys
                85                  90                  95
atc aag gag aag ctg ccc ggc ggc aac aag ggc aac aac cag cag cag        336
Ile Lys Glu Lys Leu Pro Gly Gly Asn Lys Gly Asn Asn Gln Gln Gln
            100                 105                 110
cag cag atg atg ggg aac act ggc ggc gcg tac ggg cag cag ggc cac        384
Gln Gln Met Met Gly Asn Thr Gly Gly Ala Tyr Gly Gln Gln Gly His
        115                 120                 125
gcc ggg atg acc ggc gcc ggc acc ggc gtg cac ggt gcg gag tac ggc        432
Ala Gly Met Thr Gly Ala Gly Thr Gly Val His Gly Ala Glu Tyr Gly
    130                 135                 140
aac gcc ggc gag aag aag gga ttc atg gac aag atc aag gag aag ctg        480
Asn Ala Gly Glu Lys Lys Gly Phe Met Asp Lys Ile Lys Glu Lys Leu
145                 150                 155                 l60
ccc ggc cag cac taa                                                    495
Pro Gly Gln His
<210>140
<211>164
<212>PRT
<213>Oryza sativa
<400>140
Met Glu Asn Tyr Gln Gly Gln His Gly Tyr Gly Ala Asp Arg Val Asp
1               5                   10                  15
Val Tyr Gly Asn Pro Val Gly Ala Gly Gln Tyr Gly Gly Gly Ala Thr
            20                  25                  30
Ala Pro Gly Gly Gly His Gly Ala Met Gly Met Gly Gly His Ala Gly
        35                  40                  45
Ala Gly Ala Gly Gly Gln Phe Gln Pro Ala Arg Glu Asp Arg Lys Thr
    50                  55                  60
Gly Gly Ile Leu His Arg Ser Gly Ser Ser Ser Ser Ser Ser Ser Ser
65                  70                  75                  80
Glu Asp Asp Gly Met Gly Gly Arg Arg Lys Lys Gly Ile Lys Glu Lys
                85                  90                  95
Ile Lys Glu Lys Leu Pro Gly Gly Asn Lys Gly Asn Asn Gln Gln Gln
            100                 105                 110
Gln Gln Met Met Gly Asn Thr Gly Gly Ala Tyr Gly Gln Gln Gly His
        115                 120                 125
Ala Gly Met Thr Gly Ala Gly Thr Gly Val His Gly Ala Glu Tyr Gly
    130                 135                 140
Asn Ala Gly Glu Lys Lys Gly Phe Met Asp Lys Ile Lys Glu Lys Leu
145                 150                 155                 160
Pro Gly Gln His
<210>141
<211>1881
<212>DNA
<213>Oryza sativa
<220>
<221>CDS
<222>(1)..(1881)
<400>141
atg gcg acg gcg gcg ggg atg ggg atc ggg gcg gcg tgc ctg gtg gcg         48
Met Ala Thr Ala Ala Gly Met Gly Ile Gly Ala Ala Cys Leu Val Ala
1               5                   10                  15
ccg cag gtg agg ccg ggg agg agg ttg cgg ctc cag cgg gtg cgg agg         96
Pro Gln Val Arg Pro Gly Arg Arg Leu Arg Leu Gln Arg Val Arg Arg
            20                  25                  30
cgg tgc gtg gcg gag ctg agc agg gac ggt ggg tcg gcg cag cgc ccg        144
Arg Cys Val Ala Glu Leu Ser Arg Asp Gly Gly Ser Ala Gln Arg Pro
        35                  40                  45
ctg gca ccg gcg ccg ctg gtg aag cag ccg gtc ctg ccg acc ttc ctc        192
Leu Ala Pro Ala Pro Leu Val Lys Gln Pro Val Leu Pro Thr Phe Leu
    50                  55                  60
gtg ccg acg tcg acg cca ccc gcg ccc acg cag tcg ccg gcg ccg gcg        240
Val Pro Thr Ser Thr Pro Pro Ala Pro Thr Gln Ser Pro Ala Pro Ala
65                  70                  75                  80
ccg acc ccg ccg ccg ttg ccg gac tcc ggc gtg ggg gag atc gag ccc        288
Pro Thr Pro Pro Pro Leu Pro Asp Ser Gly Val Gly Glu Ile Glu Pro
                85                  90                  95
gat cta gaa ggt ctc aca gaa gat tcc atc gac aaa aca att ttt gtg        336
Asp Leu Glu Gly Leu Thr Glu Asp Ser Ile Asp Lys Thr Ile Phe Val
            100                 105                 110
gct agt gag cag gag tct gag atc atg gat gtg aag gag caa gct caa        384
Ala Ser Glu Gln Glu Ser Glu Ile Met Asp Val Lys Glu Gln Ala Gln
        115                 120                 125
gct aaa gta aca cgc agc gtt gtc ttt gta acc ggt gaa gct tct cct        432
Ala Lys Val Thr Arg Ser Val Val Phe Val Thr Gly Glu Ala Ser Pro
    130                 135                 140
tat gca aag tca ggt gga cta gga gat gtt tgt ggt tca ctg cca att        480
Tyr Ala Lys Ser Gly Gly Leu Gly Asp Val Cys Gly Ser Leu Pro Ile
145                 150                 155                 160
gct ctt gct ctt cgt ggt cat cgt gtg atg gtt gta atg ccg aga tac        528
Ala Leu Ala Leu Arg Gly His Arg Val Met Val Val Met Pro Arg Tyr
                165                 170                 175
atg aac ggg gcc ttg aac aaa aat ttt gca aac gca ttt tac act gag        576
Met Asn Gly Ala Leu Asn Lys Asn Phe Ala Asn Ala Phe Tyr Thr Glu
            180                 185                 190
aag cac att aag att cca tgc ttt ggc gga gaa cat gaa gtt act ttt        624
Lys His Ile Lys Ile Pro Cys Phe Gly Gly Glu His Glu Val Thr Phe
        195                 200                 205
ttt cac gag tat agg gat tct gtt gat tgg gtg ttt gtt gat cat ccc        672
Phe His Glu Tyr Arg Asp Ser Val Asp Trp Val Phe Val Asp His Pro
    210                 215                 220
tca tat cat aga cct gga aat ttg tat gga gat aat ttt ggt gct ttt        720
Ser Tyr His Arg Pro Gly Asn Leu Tyr Gly Asp Asn Phe Gly Ala Phe
225                 230                 235                 240
ggc gat aat cag ttc aga tac aca ctc ctg tgc tat gcg gcg tgt gaa        768
Gly Asp Asn Gln Phe Arg Tyr Thr Leu Leu Cys Tyr Ala Ala Cys Glu
                245                 250                 255
gcc cca tta att ctt gaa ctg gga gga tat atc tat gga cag aaa tgc        816
Ala Pro Leu Ile Leu Glu Leu Gly Gly Tyr Ile Tyr Gly Gln Lys Cys
            260                 265                 270
atg ttt gtt gtg aat gat tgg cat gcc agt ctt gtg cca gtc ctt ctt        864
Met Phe Val Val Asn Asp Trp His Ala Ser Leu Val Pro Val Leu Leu
        275                 280                 285
gct gca aaa tat aga cca tat ggt gtt tac agg gat gcc cgc agt gtt        912
Ala Ala Lys Tyr Arg Pro Tyr Gly Val Tyr Arg Asp Ala Arg Ser Val
    290                 295                 300
ctt gtc ata cat aat cta gca cat cag ggt gtg gag cct gcc agt aca        960
Leu Val Ile His Asn Leu Ala His Gln Gly Val Glu Pro Ala Ser Thr
305                 310                 315                 320
tat cct gac ctg gga ttg cca cct gaa tgg tat gga gca tta gaa tgg       1008
Tyr Pro Asp Leu Gly Leu Pro Pro Glu Trp Tyr Gly Ala Leu Glu Trp
                325                 330                 335
gtg ttt cca gag tgg gca agg cgg cat gcc ctt gac aag ggt gag gca       1056
Val Phe Pro Glu Trp Ala Arg Arg His Ala Leu Asp Lys Gly Glu Ala
            340                 345                 350
gtc aat ttt tta aaa ggc gca gtt gtg aca gca gat cga att gtg act       1104
Val Asn Phe Leu Lys Gly Ala Val Val Thr Ala Asp Arg Ile Val Thr
        355                 360                 365
gtc agc cag ggg tat tca tgg gag gtc aca act gct gaa ggt ggg caa       1152
Val Ser Gln Gly Tyr Ser Trp Glu Val Thr Thr Ala Glu Gly Gly Gln
    370                 375                 380
ggc ctc aat gag ctc tta agc tcc cgg aag agt gta ttg aat gga att       1200
Gly Leu Asn Glu Leu Leu Ser Ser Arg Lys Ser Val Leu Asn Gly Ile
385                 390                 395                 400
gta aat gga att gac att aat gat tgg aac cca tcc aca gac aag ttt       1248
Val Asn Gly Ile Asp Ile Asn Asp Trp Asn Pro Ser Thr Asp Lys Phe
                405                 410                 415
ctc cct tat cat tat tct gtt gat gac ctg tcc gga aag gcc aag tgt       1296
Leu Pro Tyr His Tyr Ser Val Asp Asp Leu Ser Gly Lys Ala Lys Cys
            420                 425                 430
aaa gct gaa ttg cag aag gag ctg ggt tta cct ata agg ccc gat gtg       1344
Lys Ala Glu Leu Gln Lys Glu Leu Gly Leu Pro Ile Arg Pro Asp Val
        435                 440                 445
cct ctg att ggc ttt att gga aga ttg gac tat caa aaa ggc att gat        1392
Pro Leu Ile Gly Phe Ile Gly Arg Leu Asp Tyr Gln Lys Gly Ile Asp
    450                 455                 460
cta att aaa ctt gcc att cca gat ctc atg cgg gac aat att caa ttc        1440
Leu Ile Lys Leu Ala Ile Pro Asp Leu Met Arg Asp Asn Ile Gln Phe
465                 470                 475                 480
gtc atg ctt gga tct ggt gac cca ggt ttt gaa gga tgg atg aga tcc        1488
Val Met Leu Gly Ser Gly Asp Pro Gly Phe Glu Gly Trp Met Arg Ser
                485                 490                 495
aca gaa tca ggg tac agg gat aaa ttt cgt gga tgg gtt gga ttt agt        1536
Thr Glu Ser Gly Tyr Arg Asp Lys Phe Arg Gly Trp Val Gly Phe Ser
            500                 505                 510
gtt cca gtt tcc cac cga ata act gca ggt tgc gat ata ttg ttg atg        1584
Val Pro Val Ser His Arg Ile Thr Ala Gly Cys Asp Ile Leu Leu Met
        515                 520                 525
cca tcc aga ttc gaa cct tgt ggc ctc aat cag cta tat gct atg caa        1632
Pro Ser Arg Phe Glu Pro Cys Gly Leu Asn Gln Leu Tyr Ala Met Gln
    530                 535                 540
tat ggt aca gtg cct gtt gtt cat gga act gga ggc ctc aga gat aca        1680
Tyr Gly Thr Val Pro Val Val His Gly Thr Gly Gly Leu Arg Asp Thr
545                 550                 555                 560
gtg gag aat ttt aac ccg ttt gct gag aaa gga gag cag ggt aca ggg        1728
Val Glu Asn Phe Asn Pro Phe Ala Glu Lys Gly Glu Gln Gly Thr Gly
                565                 570                 575
tgg gca ttc tcg cca cta acc att gaa aaa aat gct gtg ggc att gcg        1776
Trp Ala Phe Ser Pro Leu Thr Ile Glu Lys Asn Ala Val Gly Ile Ala
            580                 585                 590
gat ggc aat ttc gac ata cag gga aca caa gtc ctc ttg gga ggg tct        1824
Asp Gly Asn Phe Asp Ile Gln Gly Thr Gln Val Leu Leu Gly Gly Ser
        595                 600                 605
aat gaa gcg agg cat gtc aag cga ctt tac atg gga cca tgc cgc ctc        1872
Asn Glu Ala Arg His Val Lys Arg Leu Tyr Met Gly Pro Cys Arg Leu
    610                 615                 620
aca gta tga                                                            1881
Thr Val
625
<210>142
<211>626
<212>PRT
<213>Oryza sativa
<400>142
Met Ala Thr Ala Ala Gly Met Gly Ile Gly Ala Ala Cys Leu Val Ala
1               5                   10                  15
Pro Gln Val Arg Pro Gly Arg Arg Leu Arg Leu Gln Arg Val Arg Arg
            20                  25                  30
Arg Cys Val Ala Glu Leu Ser Arg Asp Gly Gly Ser Ala Gln Arg Pro
        35                  40                  45
Leu Ala Pro Ala Pro Leu Val Lys Gln Pro Val Leu Pro Thr Phe Leu
    50                  55                  60
Val Pro Thr Ser Thr Pro Pro Ala Pro Thr Gln Ser Pro Ala Pro Ala
65                  70                  75                  80
Pro Thr Pro Pro Pro Leu Pro Asp Ser Gly Val Gly Glu Ile Glu Pro
                85                  90                  95
Asp Leu Glu Gly Leu Thr Glu Asp Ser Ile Asp Lys Thr Ile Phe Val
            100                 105                 110
Ala Ser Glu Gln Glu Ser Glu Ile Met Asp Val Lys Glu Gln Ala Gln
        115                 120                 125
Ala Lys Val Thr Arg Ser Val Val Phe Val Thr Gly Glu Ala Ser Pro
    130                 135                 140
Tyr Ala Lys Ser Gly Gly Leu Gly Asp Val Cys Gly Ser Leu Pro Ile
145                 150                 155                 160
Ala Leu Ala Leu Arg Gly His Arg Val Met Val Val Met Pro Arg Tyr
                165                 170                 175
Met Asn Gly Ala Leu Asn Lys Asn Phe Ala Asn Ala Phe Tyr Thr Glu
            180                 185                 190
Lys His Ile Lys Ile Pro Cys Phe Gly Gly Glu His Glu Val Thr Phe
        195                 200                 205
Phe His Glu Tyr Arg Asp Ser Val Asp Trp Val Phe Val Asp His Pro
    210                 215                 220
Ser Tyr His Arg Pro Gly Asn Leu Tyr Gly Asp Asn Phe Gly Ala Phe
225                 230                 235                 240
Gly Asp Asn Gln Phe Arg Tyr Thr Leu Leu Cys Tyr Ala Ala Cys Glu
                245                 250                 255
Ala Pro Leu Ile Leu Glu Leu Gly Gly Tyr Ile Tyr Gly Gln Lys Cys
            260                 265                 270
Met Phe Val Val Asn Asp Trp His Ala Ser Leu Val Pro Val Leu Leu
        275                 280                 285
Ala Ala Lys Tyr Arg Pro Tyr Gly Val Tyr Arg Asp Ala Arg Ser Val
    290                 295                 300
Leu Val Ile His Asn Leu Ala His Gln Gly Val Glu Pro Ala Ser Thr
305                 310                 315                 320
Tyr Pro Asp Leu Gly Leu Pro Pro Glu Trp Tyr Gly Ala Leu Glu Trp
                325                 330                 335
Val Phe Pro Glu Trp Ala Arg Arg His Ala Leu Asp Lys Gly Glu Ala
            340                 345                 350
Val Asn Phe Leu Lys Gly Ala Val Val Thr Ala Asp Arg Ile Val Thr
        355                 360                 365
Val Ser Gln Gly Tyr Ser Trp Glu Val Thr Thr Ala Glu Gly Gly Gln
    370                 375                 380
Gly Leu Asn Glu Leu Leu Ser Ser Arg Lys Ser Val Leu Asn Gly Ile
385                 390                 395                 400
Val Asn Gly Ile Asp Ile Asn Asp Trp Asn Pro Ser Thr Asp Lys Phe
                405                 410                 415
Leu Pro Tyr His Tyr Ser Val Asp Asp Leu Ser Gly Lys Ala Lys Cys
            420                 425                 430
Lys Ala Glu Leu Gln Lys Glu Leu Gly Leu Pro Ile Arg Pro Asp Val
        435                 440                 445
Pro Leu Ile Gly Phe Ile Gly Arg Leu Asp Tyr Gln Lys Gly Ile Asp
    450                 455                 460
Leu Ile Lys Leu Ala Ile Pro Asp Leu Met Arg Asp Asn Ile Gln Phe
465                 470                 475                 480
Val Met Leu Gly Ser Gly Asp Pro Gly Phe Glu Gly Trp Met Arg Ser
                485                 490                 495
Thr Glu Ser Gly Tyr Arg Asp Lys Phe Arg Gly Trp Val Gly Phe Ser
            500                 505                 510
Val Pro Val Ser His Arg Ile Thr Ala Gly Cys Asp Ile Leu Leu Met
        515                 520                 525
Pro Ser Arg Phe Glu Pro Cys Gly Leu Asn Gln Leu Tyr Ala Met Gln
    530                 535                 540
Tyr Gly Thr Val Pro Val Val His Gly Thr Gly Gly Leu Arg Asp Thr
545                 550                 555                 560
Val Glu Asn Phe Asn Pro Phe Ala Glu Lys Gly Glu Gln Gly Thr Gly
                565                 570                 575
Trp Ala Phe Ser Pro Leu Thr Ile Glu Lys Asn Ala Val Gly Ile Ala
            580                 585                 590
Asp Gly Asn Phe Asp Ile Gln Gly Thr Gln Val Leu Leu Gly Gly Ser
        595                 600                 605
Asn Glu Ala Arg His Val Lys Arg Leu Tyr Met Gly Pro Cys Arg Leu
    610                 615                 620
Thr Val
625
<210>143
<211>1104
<212>DNA
<213>Oryza sativa
<220>
<221>CDS
<222>(1)..(1104)
<400>143
atg gca acc gcc gcc gcg tcg gat ctg gag agc aag gcc aag gcg gcc        48
Met Ala Thr Ala Ala Ala Ser Asp Leu Glu Ser Lys Ala Lys Ala Ala
1               5                   10                  15
ttc gtc gac gac gac ttc gag ctc gcc gcc gag ctc tac acg cag gca         96
Phe Val Asp Asp Asp Phe Glu Leu Ala Ala Glu Leu Tyr Thr Gln Ala
            20                  25                  30
atc gag gcc agc ccc gcc acc gcc gag ctc tac gcc gac cgc gcc cag        144
Ile Glu Ala Ser Pro Ala Thr Ala Glu Leu Tyr Ala Asp Arg Ala Gln
        35                  40                  45
gcc cat atc aag cta ggc aac tac act gag gct gta gct gat gct aac        192
Ala His Ile Lys Leu Gly Asn Tyr Thr Glu Ala Val Ala Asp Ala Asn
    50                  55                  60
aag gcc att gaa ctt gac cca tca atg cac aag gct tat ctt cgt aaa        240
Lys Ala Ile Glu Leu Asp Pro Ser Met His Lys Ala Tyr Leu Arg Lys
65                  70                  75                  80
ggc gct gca tgt ata cga ctg gag gag tat caa act gca aaa gca gct        288
Gly Ala Ala Cys Ile Arg Leu Glu Glu Tyr Gln Thr Ala Lys Ala Ala
                85                  90                  95
ctt gaa ttg ggt tac tcg ttc gca tct ggt gac tca agg ttt act cgc        336
Leu Glu Leu Gly Tyr Ser Phe Ala Ser Gly Asp Ser Arg Phe Thr Arg
            100                 105                 110
cta atg aag gag tgt gat gag cgc att gct gag gag ctt act gaa gtc        384
Leu Met Lys Glu Cys Asp Glu Arg Ile Ala Glu Glu Leu Thr Glu Val
        115                 120                 125
cct gtt aag aag gct gaa gat gga gca gct gcc ccc tct gtt gct tct        432
Pro Val Lys Lys Ala Glu Asp Gly Ala Ala Ala Pro Ser Val Ala Ser
    130                 135                 140
ttt gtt gag gaa aag gat gat gct gca aac atg gat aat aca cca cca        480
Phe Val Glu Glu Lys Asp Asp Ala Ala Asn Met Asp Asn Thr Pro Pro
145                 150                 155                 160
atg gta gaa gtg aag cca aaa tac agg cac gac ttc tac aac agt gct        528
Met Val Glu Val Lys Pro Lys Tyr Arg His Asp Phe Tyr Asn Ser Ala
                165                 170                 175
aca gaa gtt gta ttg aca att ttt gca aag ggt gtt cct gct gag aat        576
Thr Glu Val Val Leu Thr Ile Phe Ala Lys Gly Val Pro Ala Glu Asn
            180                 185                 190
gtt gtt gtt gat ttt ggt gaa caa atg tta agt gtg tcg att gaa gtc        624
Val Val Val Asp Phe Gly Glu Gln Met Leu Ser Val Ser Ile Glu Val
        195                 200                 205
cct gga gag gag ccg tac cat ttt cag cct cgt ctg ttt tct aag atc        672
Pro Gly Glu Glu Pro Tyr His Phe Gln Pro Arg Leu Phe Ser Lys Ile
    210                 215                 220
atc cct gag aaa agc aga tac caa gtg cta tcc acg aag gtt gaa ata        720
Ile Pro Glu Lys Ser Arg Tyr Gln Val Leu Ser Thr Lys Val Glu Ile
225                 230                 235                 240
aga ctg gct aaa gct gaa cag att aca tgg acc tca ctt gat tat gat        768
Arg Leu Ala Lys Ala Glu Gln Ile Thr Trp Thr Ser Leu Asp Tyr Asp
                245                 250                 255
aaa aaa cca aag gct gtt cca caa aag ata atc cct cca gct gaa tcg        816
Lys Lys Pro Lys Ala Val Pro Gln Lys Ile Ile Pro Pro Ala Glu Ser
            260                 265                 270
gcc cag agg cca tca tat cct tcc tca aaa tcc aag aaa gac tgg gat        864
Ala Gln Arg Pro Ser Tyr Pro Ser Ser Lys Ser Lys Lys Asp Trp Asp
        275                 280                 285
aaa ctg gaa gct gaa gtt aaa aag gag gag aag gag gag aag ctt gaa        912
Lys Leu Glu Ala Glu Val Lys Lys Glu Glu Lys Glu Glu Lys Leu Glu
    290                 295                 300
ggc gat gct gca ttg aac aaa ttt ttc cgt gac atc tac agt gat gct        960
Gly Asp Ala Ala Leu Asn Lys Phe Phe Arg Asp Ile Tyr Ser Asp Ala
305                 310                 315                 320
gat gaa gac atg cga cga gca atg atg aaa tct ttt gtt gaa tct aac       1008
Asp Glu Asp Met Arg Arg Ala Met Met Lys Ser Phe Val Glu Ser Asn
                325                 330                 335
ggt act gtt ctg tcg acc aat tgg aaa gat gtt ggc tcg aag aag gta       1056
Gly Thr Val Leu Ser Thr Asn Trp Lys Asp Val Gly Ser Lys Lys Val
            340                 345                 350
gag gga agc cca cct gat ggg atg gag ctt aag aaa tgg gag tac taa       1104
Glu Gly Ser Pro Pro Asp Gly Met Glu Leu Lys Lys Trp Glu Tyr
        355                 360                 365
<210>144
<211>367
<212>PRT
<213>Oryza sativa
<400>144
Met Ala Thr Ala Ala Ala Ser Asp Leu Glu Ser Lys Ala Lys Ala Ala
1               5                   10                  15
Phe Val Asp Asp Asp Phe Glu Leu Ala Ala Glu Leu Tyr Thr Gln Ala
            20                  25                  30
Ile Glu Ala Ser Pro Ala Thr Ala Glu Leu Tyr Ala Asp Arg Ala Gln
        35                  40                  45
Ala His Ile Lys Leu Gly Asn Tyr Thr Glu Ala Val Ala Asp Ala Asn
    50                  55                  60
Lys Ala Ile Glu Leu Asp Pro Ser Met His Lys Ala Tyr Leu Arg Lys
65                  70                  75                  80
Gly Ala Ala Cys Ile Arg Leu Glu Glu Tyr Gln Thr Ala Lys Ala Ala
                85                  90                  95
Leu Glu Leu Gly Tyr Ser Phe Ala Ser Gly Asp Ser Arg Phe Thr Arg
            100                 105                 110
Leu Met Lys Glu Cys Asp Glu Arg Ile Ala Glu Glu Leu Thr Glu Val
        115                 120                 125
Pro Val Lys Lys Ala Glu Asp Gly Ala Ala Ala Pro Ser Val Ala Ser
    130                 135                 140
Phe Val Glu Glu Lys Asp Asp Ala Ala Asn Met Asp Asn Thr Pro Pro
145                 150                 155                 160
Met Val Glu Val Lys Pro Lys Tyr Arg His Asp Phe Tyr Asn Ser Ala
                165                 170                 175
Thr Glu Val Val Leu Thr Ile Phe Ala Lys Gly Val Pro Ala Glu Asn
            180                 185                 190
Val Val Val Asp Phe Gly Glu Gln Met Leu Ser Val Ser Ile Glu Val
        195                 200                 205
Pro Gly Glu Glu Pro Tyr His Phe Gln Pro Arg Leu Phe Ser Lys Ile
    210                 215                 220
Ile Pro Glu Lys Ser Arg Tyr Gln Val Leu Ser Thr Lys Val Glu Ile
225                 230                 235                 240
Arg Leu Ala Lys Ala Glu Gln Ile Thr Trp Thr Ser Leu Asp Tyr Asp
                245                 250                 255
Lys Lys Pro Lys Ala Val Pro Gln Lys Ile Ile Pro Pro Ala Glu Ser
            260                 265                 270
Ala Gln Arg Pro Ser Tyr Pro Ser Ser Lys Ser Lys Lys Asp Trp Asp
        275                 280                 285
Lys Leu Glu Ala Glu Val Lys Lys Glu Glu Lys Glu Glu Lys Leu Glu
    290                 295                 300
Gly Asp Ala Ala Leu Asn Lys Phe Phe Arg Asp Ile Tyr Ser Asp Ala
305                 310                 315                 320
Asp Glu Asp Met Arg Arg Ala Met Met Lys Ser Phe Val Glu Ser Asn
                325                 330                 335
Gly Thr Val Leu Ser Thr Asn Trp Lys Asp Val Gly Ser Lys Lys Val
            340                 345                 350
Glu Gly Ser Pro Pro Asp Gly Met Glu Leu Lys Lys Trp Glu Tyr
        355                 360                 365
<210>145
<211>435
<212>DNA
<213>Oryza sativa
<220>
<221>CDS
<222>(1)..(435)
<400>145
atg gtg cag ggg acg ctc gag gtg ctg ctc gtc gga gcc aag ggc ctc         48
Met Val Gln Gly Thr Leu Glu Val Leu Leu Val Gly Ala Lys Gly Leu
1               5                   10                  15
gag aac acc gac tac ctg tgc aac atg gac ccg tac gcg gtt ctc aaa         96
Glu Asn Thr Asp Tyr Leu Cys Asn Met Asp Pro Tyr Ala Val Leu Lys
            20                  25                  30
tgc cgc tcg cag gag cag aag agc agc gtt gcg tca ggt aaa gga tct        144
Cys Arg Ser Gln Glu Gln Lys Ser Ser Val Ala Ser Gly Lys Gly Ser
        35                  40                  45
gac cct gaa tgg aac gaa acc ttt atg ttc agc gtc act cac aac gct        192
Asp Pro Glu Trp Asn Glu Thr Phe Met Phe Ser Val Thr His Asn Ala
    50                  55                  60
aca gag ctc atc atc aag ttg atg gac agt gac agt ggc acg gat gat        240
Thr Glu Leu Ile Ile Lys Leu Met Asp Ser Asp Ser Gly Thr Asp Asp
65                  70                  75                  80
gat ttt gtt gga gaa gca acg att tct ttg gaa gca atc tat aca gaa        288
Asp Phe Val Gly Glu Ala Thr Ile Ser Leu Glu Ala Ile Tyr Thr Glu
                85                  90                  95
gga agc ata ccc cca act gtt tat aat gtt gtg aaa gaa gaa gaa tac        336
Gly Ser Ile Pro Pro Thr Val Tyr Asn Val Val Lys Glu Glu Glu Tyr
            100                 105                 110
cgt gga gaa atc aaa gtg ggc ctg acg ttc act cca gag gat gat cgc        384
Arg Gly Glu Ile Lys Val Gly Leu Thr Phe Thr Pro Glu Asp Asp Arg
        115                 120                 125
gat cgg ggt tta tct gag gaa gac att ggt gga tgg aag cag tca tct        432
Asp Arg Gly Leu Ser Glu Glu Asp Ile Gly Gly Trp Lys Gln Ser Ser
    130                 135                 140
tga                                                                    435
<210>146
<211>144
<212>PRT
<213>Oryza sativa
<400>146
Met Val Gln Gly Thr Leu Glu Val Leu Leu Val Gly Ala Lys Gly Leu
1               5                   10                  15
Glu Asn Thr Asp Tyr Leu Cys Asn Met Asp Pro Tyr Ala Val Leu Lys
            20                  25                  30
Cys Arg Ser Gln Glu Gln Lys Ser Ser Val Ala Ser Gly Lys Gly Ser
        35                  40                  45
Asp Pro Glu Trp Asn Glu Thr Phe Met Phe Ser Val Thr His Asn Ala
    50                  55                  60
Thr Glu Leu Ile Ile Lys Leu Met Asp Ser Asp Ser Gly Thr Asp Asp
65                  70                  75                  80
Asp Phe Val Gly Glu Ala Thr Ile Ser Leu Glu Ala Ile Tyr Thr Glu
                85                  90                  95
Gly Ser Ile Pro Pro Thr Val Tyr Asn Val Val Lys Glu Glu Glu Tyr
            100                 105                 110
Arg Gly Glu Ile Lys Val Gly Leu Thr Phe Thr Pro Glu Asp Asp Arg
        115                 120                 125
Asp Arg Gly Leu Ser Glu Glu Asp Ile Gly Gly Trp Lys Gln Ser Ser
    130                 135                 140
<210>147
<211>609
<212>DNA
<213>Oryza sativa
<220>
<221>CDS
<222>(1)..(609)
<400>147
atg aat ccc gag tat gac tac ctc ttc aag ctt ctg ctc atc gga gac         48
Met Asn Pro Glu Tyr Asp Tyr Leu Phe Lys Leu Leu Leu Ile Gly Asp
1               5                   10                  15
tcg ggc gtc ggg aag tct tgc ctg ctt ctg agg ttt gcg gac gat tca         96
Ser Gly Val Gly Lys Ser Cys Leu Leu Leu Arg Phe Ala Asp Asp Ser
            20                  25                  30
tat ctg gag agc tat atc agt acc atc ggc gtt gat ttt aaa atc cgc        144
Tyr Leu Glu Ser Tyr Ile Ser Thr Ile Gly Val Asp Phe Lys Ile Arg
        35                  40                  45
act gtt gag caa gat ggg aag aca ata aag ctg caa att tgg gat act        192
Thr Val Glu Gln Asp Gly Lys Thr Ile Lys Leu Gln Ile Trp Asp Thr
    50                  55                  60
gct ggc caa gag cga ttt agg acc att aca agc agc tac tac cgt ggt        240
Ala Gly Gln Glu Arg Phe Arg Thr Ile Thr Ser Ser Tyr Tyr Arg Gly
65                  70                  75                  80
gcc cac ggg atc att gtt gtt tat gat gtg act gat cag gag agc ttc        288
Ala His Gly Ile Ile Val Val Tyr Asp Val Thr Asp Gln Glu Ser Phe
                85                  90                  95
aac aat gtc aag cag tgg ctg aat gaa att gat agg tat gct agt gaa        336
Asn Asn Val Lys Gln Trp Leu Asn Glu Ile Asp Arg Tyr Ala Ser Glu
            100                 105                 110
aat gtg aac aag ctc ttg gtg ggg aac aag tgt gat cta gct gag aac        384
Asn Val Asn Lys Leu Leu Val Gly Asn Lys Cys Asp Leu Ala Glu Asn
        115                 120                 125
aga gtg gtt tct tat gag gct ggc aag gcc ctt gct gat gag att gga        432
Arg Val Val Ser Tyr Glu Ala Gly Lys Ala Leu Ala Asp Glu Ile Gly
    130                 135                 140
ata cca ttc ctg gag acc agt gcg aag gat gca aca aat gtg gag aag        480
Ile Pro Phe Leu Glu Thr Ser Ala Lys Asp Ala Thr Asn Val Glu Lys
145                 150                 155                 160
gca ttc atg acc atg gca gga gag ata aag aac agg atg gca agc caa        528
Ala Phe Met Thr Met Ala Gly Glu Ile Lys Asn Arg Met Ala Ser Gln
                165                 170                 175
ggc cgt aca aat gca agc aag cct gca acc gtg caa atg ccg agg caa        576
Gly Arg Thr Asn Ala Ser Lys Pro Ala Thr Val Gln Met Pro Arg Gln
            180                 185                 190
cct gtt gcc cag caa agc agc tgc tgc tct tga                            609
Pro Val Ala Gln Gln Ser Ser Cys Cys Ser
        195                 200
<210>148
<211>202
<212>PRT
<213>Oryza sativa
<400>148
Met Asn Pro Glu Tyr Asp Tyr Leu Phe Lys Leu Leu Leu Ile Gly Asp
1               5                   10                  15
Ser Gly Val Gly Lys Ser Cys Leu Leu Leu Arg Phe Ala Asp Asp Ser
            20                  25                  30
Tyr Leu Glu Ser Tyr Ile Ser Thr Ile Gly Val Asp Phe Lys Ile Arg
        35                  40                  45
Thr Val Glu Gln Asp Gly Lys Thr Ile Lys Leu Gln Ile Trp Asp Thr
    50                  55                  60
Ala Gly Gln Glu Arg Phe Arg Thr Ile Thr Ser Ser Tyr Tyr Arg Gly
65                  70                  75                  80
Ala His Gly Ile Ile Val Val Tyr Asp Val Thr Asp Gln Glu Ser Phe
                85                  90                  95
Asn Asn Val Lys Gln Trp Leu Asn Glu Ile Asp Arg Tyr Ala Ser Glu
            100                 105                 110
Asn Val Asn Lys Leu Leu Val Gly Asn Lys Cys Asp Leu Ala Glu Asn
        115                 120                 125
Arg Val Val Ser Tyr Glu Ala Gly Lys Ala Leu Ala Asp Glu Ile Gly
    130                 135                 140
Ile Pro Phe Leu Glu Thr Ser Ala Lys Asp Ala Thr Asn Val Glu Lys
145                 150                 155                 160
Ala Phe Met Thr Met Ala Gly Glu Ile Lys Asn Arg Met Ala Ser Gln
                165                 170                 175
Gly Arg Thr Asn Ala Ser Lys Pro Ala Thr Val Gln Met Pro Arg Gln
            180                 185                 190
Pro Val Ala Gln Gln Ser Ser Cys Cys Ser
        195                 200
<210>149
<211>1410
<212>DNA
<213>Oryza sativa
<220>
<221>CDS
<222>(1)..(1410)
<400>149
atg cat atg atg cgg cgg ctc aag agc atc gcc tcc ggc cgc tcg tcc         48
Met His Met Met Arg Arg Leu Lys Ser Ile Ala Ser Gly Arg Ser Ser
1               5                   10                  15
gtc tcc gat ccg ggt ggt gat tct ggc acc aaa aga cca aaa ttc gat         96
Val Ser Asp Pro Gly Gly Asp Ser Gly Thr Lys Arg Pro Lys Phe Asp
            20                  25                  30
cag gat gga gca gga gat ata gtc att gag cca cat cta act gat gac        144
Gln Asp Gly Ala Gly Asp Ile Val Ile Glu Pro His Leu Thr Asp Asp
        35                  40                  45
aaa cct atg cgc gta gac caa gaa tca tct tca tct cat aga gat gct        192
Lys Pro Met Arg Val Asp Gln Glu Ser Ser Ser Ser His Arg Asp Ala
    50                  55                  60
gag gca agc aca tct act agt aag aat cct ggt aga act gaa gaa gca        240
Glu Ala Ser Thr Ser Thr Ser Lys Asn Pro Gly Arg Thr Glu Glu Ala
65                  70                  75                  80
ggt gcg gat att ctt cca aaa gaa atg aat gag atg aca ata agt gat        288
Gly Ala Asp Ile Leu Pro Lys Glu Met Asn Glu Met Thr Ile Ser Asp
                85                  90                  95
gat aaa gtt gat ggc cat aat gat aag gaa tct gaa ggt gtt att gtt        336
Asp Lys Val Asp Gly His Asn Asp Lys Glu Ser Glu Gly Val Ile Val
            100                 105                 110
aat gca aat gga aca gaa aca ggt cag att att gtg aca tca att gga        384
Asn Ala Asn Gly Thr Glu Thr Gly Gln Ile Ile Val Thr Ser Ile Gly
        115                 120                 125
ggt caa aat ggg aag cca aag cag aag gta tca tac atg gca gaa cgt        432
Gly Gln Asn Gly Lys Pro Lys Gln Lys Val Ser Tyr Met Ala Glu Arg
    130                 135                 140
gta gtt ggt act ggt tca ttt ggt gta gtt ttt cag gcc aag tgc ttg        480
Val Val Gly Thr Gly Ser Phe Gly Val Val Phe Gln Ala Lys Cys Leu
145                 150                 155                 160
gaa act gga gag act gtt gcc att aag aag gtt ctg caa gat aaa aga        528
Glu Thr Gly Glu Thr Val Ala Ile Lys Lys Val Leu Gln Asp Lys Arg
                165                 170                 175
tat aag aac aga gag ctc caa aca atg caa ctg ctt gac cat cct aat        576
Tyr Lys Asn Arg Glu Leu Gln Thr Met Gln Leu Leu Asp His Pro Asn
            180                 185                 190
gtg gtc cag cta aag cat cac ttc ttt tcg acg act gag agg ggt gaa        624
Val Val Gln Leu Lys His His Phe Phe Ser Thr Thr Glu Arg Gly Glu
        195                 200                 205
gtt tac ctc aac ctt gta ctt gaa tat gtc tca gag aca gtt tat cgt        672
Val Tyr Leu Asn Leu Val Leu Glu Tyr Val Ser Glu Thr Val Tyr Arg
    210                 215                 220
gtt gct aaa tac tac aat cgg atg aac cag cgt gtg ccc ata ttg cat        720
Val Ala Lys Tyr Tyr Asn Arg Met Asn Gln Arg Val Pro Ile Leu His
225                 230                 235                 240
gtt aag ctg tat gca tat cag atg tgc cgt gcc ctt gca tat atc cat        768
Val Lys Leu Tyr Ala Tyr Gln Met Cys Arg Ala Leu Ala Tyr Ile His
                245                 250                 255
cgt gtt gtt ggt gtc tgc cat cga gat att aaa cct caa aat cta ctg        816
Arg Val Val Gly Val Cys His Arg Asp Ile Lys Pro Gln Asn Leu Leu
            260                 265                 270
gtc aat cct cat aca cat caa ctg aag ctt tgt gat ttt gga agt gct        864
Val Asn Pro His Thr His Gln Leu Lys Leu Cys Asp Phe Gly Ser Ala
        275                 280                 285
aag aaa ttg gtt cct ggt gaa cct aac ata tca tac att tgc tcg cgg        912
Lys Lys Leu Val Pro Gly Glu Pro Asn Ile Ser Tyr Ile Cys Ser Arg
    290                 295                 300
tat tat agg gct cct gaa cta ata ttt gga gct aca gag tat acc aca        960
Tyr Tyr Arg Ala Pro Glu Leu Ile Phe Gly Ala Thr Glu Tyr Thr Thr
305                 310                 315                 320
gca att gat atc tgg tct gtt ggt tgt gta cta gct gag ctt ctg att       1008
Ala Ile Asp Ile Trp Ser Val Gly Cys Val Leu Ala Glu Leu Leu Ile
                325                 330                 335
ggt cag cct ctg ttc cct gga gaa agt ggt gtt gat caa ctg gtg gaa       1056
Gly Gln Pro Leu Phe Pro Gly Glu Ser Gly Val Asp Gln Leu Val Glu
            340                 345                 350
ata ata aag att ttg ggt aca cca act aga gaa gaa atc agg tgc atg       1104
Ile Ile Lys Ile Leu Gly Thr Pro Thr Arg Glu Glu Ile Arg Cys Met
        355                 360                 365
aat cca aac tat tct gaa ttc aaa ttc cct cag ata aaa gct cat cca       1152
Asn Pro Asn Tyr Ser Glu Phe Lys Phe Pro Gln Ile Lys Ala His Pro
    370                 375                 380
tgg cac aag ctt ttt ggt aag cgc atg cca cct gaa gct gtt gat ctt       1200
Trp His Lys Leu Phe Gly Lys Arg Met Pro Pro Glu Ala Val Asp Leu
385                 390                 395                 400
gtg tca agg ttg ctg cag tac tcg cca aat ttg cgt tgc aca gct gtt       1248
Val Ser Arg Leu Leu Gln Tyr Ser Pro Asn Leu Arg Cys Thr Ala Val
                405                 410                 415
gat gct tgt gct cat cca ttc ttt gat gaa ctg cgg gat ccc aag acc       1296
Asp Ala Cys Ala His Pro Phe Phe Asp Glu Leu Arg Asp Pro Lys Thr
            420                 425                 430
tgc ttg tca aat gga cga tca tta cca ccc ttg ttc gac ttc tca gct        1344
Cys Leu Ser Asn Gly Arg Ser Leu Pro Pro Leu Phe Asp Phe Ser Ala
        435                 440                 445
gct gaa ttg gaa ggc ctt cct gtt gag cta gtc cac cga atc att cct        1392
Ala Glu Leu Glu Gly Leu Pro Val Glu Leu Val His Arg Ile Ile Pro
    450                 455                 460
gaa cat atg agg aag tga                                                1410
Glu His Met Arg Lys
465
<210>150
<211>469
<212>PRT
<213>Oryza sativa
<400>150
Met His Met Met Arg Arg Leu Lys Ser Ile Ala Ser Gly Arg Ser Ser
1               5                   10                  15
Val Ser Asp Pro Gly Gly Asp Ser Gly Thr Lys Arg Pro Lys Phe Asp
            20                  25                  30
Gln Asp Gly Ala Gly Asp Ile Val Ile Glu Pro His Leu Thr Asp Asp
        35                  40                  45
Lys Pro Met Arg Val Asp Gln Glu Ser Ser Ser Ser His Arg Asp Ala
    50                  55                  60
Glu Ala Ser Thr Ser Thr Ser Lys Asn Pro Gly Arg Thr Glu Glu Ala
65                  70                  75                  80
Gly Ala Asp Ile Leu Pro Lys Glu Met Asn Glu Met Thr Ile Ser Asp
                85                  90                  95
Asp Lys Val Asp Gly His Asn Asp Lys Glu Ser Glu Gly Val Ile Val
            100                 105                 110
Asn Ala Asn Gly Thr Glu Thr Gly Gln Ile Ile Val Thr Ser Ile Gly
        115                 120                 125
Gly Gln Asn Gly Lys Pro Lys Gln Lys Val Ser Tyr Met Ala Glu Arg
    130                 135                 140
Val Val Gly Thr Gly Ser Phe Gly Val Val Phe Gln Ala Lys Cys Leu
145                 150                 155                 160
Glu Thr Gly Glu Thr Val Ala Ile Lys Lys Val Leu Gln Asp Lys Arg
                165                 170                 175
Tyr Lys Asn Arg Glu Leu Gln Thr Met Gln Leu Leu Asp His Pro Asn
            180                 185                 190
Val Val Gln Leu Lys His His Phe Phe Ser Thr Thr Glu Arg Gly Glu
        195                 200                 205
Val Tyr Leu Asn Leu Val Leu Glu Tyr Val Ser Glu Thr Val Tyr Arg
    210                 215                 220
Val Ala Lys Tyr Tyr Asn Arg Met Asn Gln Arg Val Pro Ile Leu His
225                 230                 235                 240
Val Lys Leu Tyr Ala Tyr Gln Met Cys Arg Ala Leu Ala Tyr Ile His
                245                 250                 255
Arg Val Val Gly Val Cys His Arg Asp Ile Lys Pro Gln Asn Leu Leu
            260                 265                 270
Val Asn Pro His Thr His Gln Leu Lys Leu Cys Asp Phe Gly Ser Ala
        275                 280                 285
Lys Lys Leu Val Pro Gly Glu Pro Asn Ile Ser Tyr Ile Cys Ser Arg
    290                 295                 300
Tyr Tyr Arg Ala Pro Glu Leu Ile Phe Gly Ala Thr Glu Tyr Thr Thr
305                 310                 315                 320
Ala Ile Asp Ile Trp Ser Val Gly Cys Val Leu Ala Glu Leu Leu Ile
                325                 330                 335
Gly Gln Pro Leu Phe Pro Gly Glu Ser Gly Val Asp Gln Leu Val Glu
            340                 345                 350
Ile Ile Lys Ile Leu Gly Thr Pro Thr Arg Glu Glu Ile Arg Cys Met
        355                 360                 365
Asn Pro Asn Tyr Ser Glu Phe Lys Phe Pro Gln Ile Lys Ala His Pro
    370                 375                 380
Trp His Lys Leu Phe Gly Lys Arg Met Pro Pro Glu Ala Val Asp Leu
385                 390                 395                 400
Val Ser Arg Leu Leu Gln Tyr Ser Pro Asn Leu Arg Cys Thr Ala Val
                405                 410                 415
Asp Ala Cys Ala His Pro Phe Phe Asp Glu Leu Arg Asp Pro Lys Thr
            420                 425                 430
Cys Leu Ser Asn Gly Arg Ser Leu Pro Pro Leu Phe Asp Phe Ser Ala
        435                 440                 445
Ala Glu Leu Glu Gly Leu Pro Val Glu Leu Val His Arg Ile Ile Pro
    450                 455                 460
Glu His Met Arg Lys
465
<210>151
<211>861
<212>DNA
<213>Oryza sativa
<220>
<221>CDS
<222>(1)..(861)
<400>151
atg gtg aac ggc tac ttg ttc cgg gag tac atc ggc gcg cag ttc acc         48
Met Val Asn Gly Tyr Leu Phe Arg Glu Tyr Ile Gly Ala Gln Phe Thr
1               5                   10                  15
ggc gtg cgc ttc tcc gac gtg ccc gtc aac ccg ggc ctc agc ttc cac         96
Gly Val Arg Phe Ser Asp Val Pro Val Asn Pro Gly Leu Ser Phe His
            20                  25                  30
ttc atc ctc gcc ttc gcc atc gac tac ttc atg gcg acg cag tcc tcc        144
Phe Ile Leu Ala Phe Ala Ile Asp Tyr Phe Met Ala Thr Gln Ser Ser
        35                  40                  45
aag ccg gcg cca gcc aac ggc gtg ttc gcc ccg tac tgg gac acg gcc        192
Lys Pro Ala Pro Ala Asn Gly Val Phe Ala Pro Tyr Trp Asp Thr Ala
    50                  55                  60
aac ctg tcc ccg gcc gcc gtc gcc gcg gcc aag gcg gcg cac ccc aac        240
Asn Leu Ser Pro Ala Ala Val Ala Ala Ala Lys Ala Ala His Pro Asn
65                  70                  75                  80
ctc agc gtc atc ctc gcc ctc ggc ggc gac acc gtc cag aac acc ggc        288
Leu Ser Val Ile Leu Ala Leu Gly Gly Asp Thr Val Gln Asn Thr Gly
                85                  90                  95
gtc aac gcc acg ttc gcg ccg acg tcg tcc gtc gac gcg tgg gtg cgc        336
Val Asn Ala Thr Phe Ala Pro Thr Ser Ser Val Asp Ala Trp Val Arg
            100                 105                 110
aac gcc gcc gac tcc gtc tcc ggc ctc atc gac gcc tac ggc ctc gac        384
Asn Ala Ala Asp Ser Val Ser Gly Leu Ile Asp Ala Tyr Gly Leu Asp
        115                 120                 125
ggc gtc gac gtc gac tac gag cac ttc gcc gcc ggc gtg gac acg ttc        432
Gly Val Asp Val Asp Tyr Glu His Phe Ala Ala Gly Val Asp Thr Phe
    130                 135                 140
gtg gag tgc atc ggt cgc ctc ctc acc gag ctc aag gcg cgg cac ccg        480
Val Glu Cys Ile Gly Arg Leu Leu Thr Glu Leu Lys Ala Arg His Pro
145                 150                 155                 160
aac atc gcc acc tcc atc gcg ccg ttc gag cac ccc gtg gtg cag cgc        528
Asn Ile Ala Thr Ser Ile Ala Pro Phe Glu His Pro Val Val Gln Arg
                165                 170                 175
tac tac cag ccg ctg tgg cgg cgc tac gcc ggc gtg atc gac tac gtc        576
Tyr Tyr Gln Pro Leu Trp Arg Arg Tyr Ala Gly Val Ile Asp Tyr Val
            180                 185                 190
aac ttc cag ttc tac ggc tac ggc gcc aac acc gac gtg gcg acg tac        624
Asn Phe Gln Phe Tyr Gly Tyr Gly Ala Asn Thr Asp Val Ala Thr Tyr
        195                 200                 205
gtg atg ttc tac gac gag cag gcg gcg aac tac ccc ggc agc aag ctg        672
Val Met Phe Tyr Asp Glu Gln Ala Ala Asn Tyr Pro Gly Ser Lys Leu
    210                 215                 220
ctc gcc agc ttc aag acc ggg aac gtc acc ggg ctg ctc tcg ccg gag        720
Leu Ala Ser Phe Lys Thr Gly Asn Val Thr Gly Leu Leu Ser Pro Glu
225                 230                 235                 240
cag ggg atc gcc ggc gcg aag gag ttg cag cgg cag ggg aag ctg ccg        768
Gln Gly Ile Ala Gly Ala Lys Glu Leu Gln Arg Gln Gly Lys Leu Pro
                245                 250                 255
ggg ttg ttc atc tgg tca gcg gat agc tcc atg gtc agc agc tac aag        816
Gly Leu Phe Ile Trp Ser Ala Asp Ser Ser Met Val Ser Ser Tyr Lys
            260                 265                 270
ttt gag tac gag acc aag gct cag gag atc gtc gcc aac cac tga            861
Phe Glu Tyr Glu Thr Lys Ala Gln Glu Ile Val Ala Asn His
        275                 280                 285
<210>152
<211>286
<212>PRT
<213>Oryza sativa
<400>152
Met Val Asn Gly Tyr Leu Phe Arg Glu Tyr Ile Gly Ala Gln Phe Thr
1               5                   10                  15
Gly Val Arg Phe Ser Asp Val Pro Val Asn Pro Gly Leu Ser Phe His
            20                  25                  30
Phe Ile Leu Ala Phe Ala Ile Asp Tyr Phe Met Ala Thr Gln Ser Ser
        35                  40                  45
Lys Pro Ala Pro Ala Asn Gly Val Phe Ala Pro Tyr Trp Asp Thr Ala
    50                  55                  60
Asn Leu Ser Pro Ala Ala Val Ala Ala Ala Lys Ala Ala His Pro Asn
65                  70                  75                  80
Leu Ser Val Ile Leu Ala Leu Gly Gly Asp Thr Val Gln Asn Thr Gly
                85                  90                  95
Val Asn Ala Thr Phe Ala Pro Thr Ser Ser Val Asp Ala Trp Val Arg
            100                 105                 110
Asn Ala Ala Asp Ser Val Ser Gly Leu Ile Asp Ala Tyr Gly Leu Asp
        115                 120                 125
Gly Val Asp Val Asp Tyr Glu His Phe Ala Ala Gly Val Asp Thr Phe
    130                 135                 140
Val Glu Cys Ile Gly Arg Leu Leu Thr Glu Leu Lys Ala Arg His Pro
145                 150                 155                 160
Asn Ile Ala Thr Ser Ile Ala Pro Phe Glu His Pro Val Val Gln Arg
                165                 170                 175
Tyr Tyr Gln Pro Leu Trp Arg Arg Tyr Ala Gly Val Ile Asp Tyr Val
            180                 185                 190
Asn Phe Gln Phe Tyr Gly Tyr Gly Ala Asn Thr Asp Val Ala Thr Tyr
        195                 200                 205
Val Met Phe Tyr Asp Glu Gln Ala Ala Asn Tyr Pro Gly Ser Lys Leu
    210                 215                 220
Leu Ala Ser Phe Lys Thr Gly Asn Val Thr Gly Leu Leu Ser Pro Glu
225                 230                 235                 240
Gln Gly Ile Ala Gly Ala Lys Glu Leu Gln Arg Gln Gly Lys Leu Pro
                245                 250                 255
Gly Leu Phe Ile Trp Ser Ala Asp Ser Ser Met Val Ser Ser Tyr Lys
            260                 265                 270
Phe Glu Tyr Glu Thr Lys Ala Gln Glu Ile Val Ala Asn His
        275                 280                 285
<210>153
<211>1476
<212>DNA
<213>Oryza sativa
<220>
<221>CDS
<222>(1)..(1476)
<400>153
atg gat cct tgc aag ttc cgg ccg tcg agc tcg ttc gac acg aag acg         48
Met Asp Pro Cys Lys Phe Arg Pro Ser Ser Ser Phe Asp Thr Lys Thr
1               5                   10                  15
acg acg acg aac gcg gga gct ccg gtg tgg aac gac aac gag gcg ctg         96
Thr Thr Thr Asn Ala Gly Ala Pro Val Trp Asn Asp Asn Glu Ala Leu
            20                  25                  30
aca gtg ggg ccc agg ggg ccg atc ctc ctc gag gac tac cac ctg atc        144
Thr Val Gly Pro Arg Gly Pro Ile Leu Leu Glu Asp Tyr His Leu Ile
        35                  40                  45
gag aag gtg gcg cac ttc gcc cgg gag cgc atc ccg gag cgc gtg gtc        192
Glu Lys Val Ala His Phe Ala Arg Glu Arg Ile Pro Glu Arg Val Val
    50                  55                  60
cac gcc cgc ggc gcc tcc gcc aag ggc ttc ttc gag tgc acc cac gac        240
His Ala Arg Gly Ala Ser Ala Lys Gly Phe Phe Glu Cys Thr His Asp
65                  70                  75                  80
gtc acc gac atc acc tgc gcc gac ttc ctc cgg tcc ccg ggc gcc cag        288
Val Thr Asp Ile Thr Cys Ala Asp Phe Leu Arg Ser Pro Gly Ala Gln
                85                  90                  95
acc ccc gtc atc gtc cgc ttc tcc acc gtc atc cac gag cgc ggc agc        336
Thr Pro Val Ile Val Arg Phe Ser Thr Val Ile His Glu Arg Gly Ser
            100                 105                 110
ccg gag acg atc cgc gac ccg cgc ggg ttc gcc gtc aag ttc tac acc        384
Pro Glu Thr Ile Arg Asp Pro Arg Gly Phe Ala Val Lys Phe Tyr Thr
        115                 120                 125
cgc gag ggc aac tgg gac ctc ctc ggc aac aac ttc ccc gtc ttc ttc        432
Arg Glu Gly Asn Trp Asp Leu Leu Gly Asn Asn Phe Pro Val Phe Phe
    130                 135                 140
atc cgc gac ggc atc aag ttc ccc gac gtc atc cac gcc ttc aag ccc        480
Ile Arg Asp Gly Ile Lys Phe Pro Asp Val Ile His Ala Phe Lys Pro
145                 150                 155                 160
aac ccg cgc tcc cat gtc cag gag tac tgg agg gtc ttc gac ttc ttg        528
Asn Pro Arg Ser His Val Gln Glu Tyr Trp Arg Val Phe Asp Phe Leu
                165                 170                 175
tcc cac cac ccc gag agc ctc cac acc ttc ttc ttc ctc ttc gac gac        576
Ser His His Pro Glu Ser Leu His Thr Phe Phe Phe Leu Phe Asp Asp
            180                 185                 190
gtc ggc atc ccc acc gat tac cgc cac atg gac ggc ttc ggc gtc aac        624
Val Gly Ile Pro Thr Asp Tyr Arg His Met Asp Gly Phe Gly Val Asn
        195                 200                 205
acc tac acc ttc gtc acc cgc gac gcc aag gcc agg tac gtc aag ttc        672
Thr Tyr Thr Phe Val Thr Arg Asp Ala Lys Ala Arg Tyr Val Lys Phe
    210                 215                 220
cac tgg aag ccc acc tgc ggc gtc agc tgc ttg atg gac gac gag gcc        720
His Trp Lys Pro Thr Cys Gly Val Ser Cys Leu Met Asp Asp Glu Ala
225                 230                 235                 240
acg ctc gtc ggc ggc aag aac cac agc cac gcc acc cag gac ctc tac        768
Thr Leu Val Gly Gly Lys Asn His Ser His Ala Thr Gln Asp Leu Tyr
                245                 250                 255
gac tcc atc gcc gcc ggc aac ttc ccc gag tgg aag ctg ttc gtc cag        816
Asp Ser Ile Ala Ala Gly Asn Phe Pro Glu Trp Lys Leu Phe Val Gln
            260                 265                 270
gtg atc gac ccg gag gag gag gag agg ttc gac ttc gac ccg ctg gat        864
Val Ile Asp Pro Glu Glu Glu Glu Arg Phe Asp Phe Asp Pro Leu Asp
        275                 280                 285
gac acc aag aca tgg ccg gag gac gag gtg ccg ctc cgg ccc gtg ggg        912
Asp Thr Lys Thr Trp Pro Glu Asp Glu Val Pro Leu Arg Pro Val Gly
    290                 295                 300
cgc ctc gtt ctc aac cgc aac gtc gac aac ttc ttc aac gag aac gag        960
Arg Leu Val Leu Asn Arg Asn Val Asp Asn Phe Phe Asn Glu Asn Glu
305                 310                 315                 320
cag ctg gcg ttc ggg ccg ggg ctg gtg gtg ccg ggg atc tac tac tcc       1008
Gln Leu Ala Phe Gly Pro Gly Leu Val Val Pro Gly Ile Tyr Tyr Ser
                325                 330                 335
gac gac aag atg ctg cag tgc agg gtg ttc gcg tac gcc gac acg cag       1056
Asp Asp Lys Met Leu Gln Cys Arg Val Phe Ala Tyr Ala Asp Thr Gln
            340                 345                 350
cgc tac agg ctg ggg cca aac tac ctg atg ctg ccg gtg aac gcg ccc       1104
Arg Tyr Arg Leu Gly Pro Asn Tyr Leu Met Leu Pro Val Asn Ala Pro
        355                 360                 365
aag tgc gcc cac cac aac aac cac tac gac ggc gcc atg aac ttc atg        1152
Lys Cys Ala His His Asn Asn His Tyr Asp Gly Ala Met Asn Phe Met
    370                 375                 380
cac cgg gac gag gag gtg gac tac tac cca tcg cgc cac gcg ccg ctc        1200
His Arg Asp Glu Glu Val Asp Tyr Tyr Pro Ser Arg His Ala Pro Leu
385                 390                 395                 400
cgc cac gcg ccg ccg acg ccc atc acg ccg cgc ccc gtg gtg ggg agg        1248
Arg His Ala Pro Pro Thr Pro Ile Thr Pro Arg Pro Val Val Gly Arg
                405                 410                 415
agg cag aag gcg acg ata cac aag cag aac gac ttc aag cag ccc ggg        1296
Arg Gln Lys Ala Thr Ile His Lys Gln Asn Asp Phe Lys Gln Pro Gly
            420                 425                 430
gag agg tac agg tcg tgg gcg ccg gat aga cag gag agg ttc atc ccc        1344
Glu Arg Tyr Arg Ser Trp Ala Pro Asp Arg Gln Glu Arg Phe Ile Pro
        435                 440                 445
ctt cgc cgg cga gtc gcg cac ccc aag gtc tcc cct gag ctc cgc gcc        1392
Leu Arg Arg Arg Val Ala His Pro Lys Val Ser Pro Glu Leu Arg Ala
    450                 455                 460
atc tgg gtc aac tac ctc tcc cag tgt gat gag tcg ttg ggg gtg aag        1440
Ile Trp Val Asn Tyr Leu Ser Gln Cys Asp Glu Ser Leu Gly Val Lys
465                 470                 475                 480
att gcg aat agg ctc aac gtg aag cca agc atg tga                        1476
Ile Ala Asn Arg Leu Asn Val Lys Pro Ser Met
                485                 490
<210>154
<211>491
<212>PRT
<213>Oryza sativa
<400>154
Met Asp Pro Cys Lys Phe Arg Pro Ser Ser Ser Phe Asp Thr Lys Thr
1               5                   10                  15
Thr Thr Thr Asn Ala Gly Ala Pro Val Trp Asn Asp Asn Glu Ala Leu
            20                  25                  30
Thr Val Gly Pro Arg Gly Pro Ile Leu Leu Glu Asp Tyr His Leu Ile
        35                  40                  45
Glu Lys Val Ala His Phe Ala Arg Glu Arg Ile Pro Glu Arg Val Val
    50                  55                  60
His Ala Arg Gly Ala Ser Ala Lys Gly Phe Phe Glu Cys Thr His Asp
65                  70                  75                  80
Val Thr Asp Ile Thr Cys Ala Asp Phe Leu Arg Ser Pro Gly Ala Gln
                85                  90                  95
Thr Pro Val Ile Val Arg Phe Ser Thr Val Ile His Glu Arg Gly Ser
            100                 105                 110
Pro Glu Thr Ile Arg Asp Pro Arg Gly Phe Ala Val Lys Phe Tyr Thr
        115                 120                 125
Arg Glu Gly Asn Trp Asp Leu Leu Gly Asn Asn Phe Pro Val Phe Phe
    130                 135                 140
Ile Arg Asp Gly Ile Lys Phe Pro Asp Val Ile His Ala Phe Lys Pro
145                 150                 155                 160
Asn Pro Arg Ser His Val Gln Glu Tyr Trp Arg Val Phe Asp Phe Leu
                165                 170                 175
Ser His His Pro Glu Ser Leu His Thr Phe Phe Phe Leu Phe Asp Asp
            180                 185                 190
Val Gly Ile Pro Thr Asp Tyr Arg His Met Asp Gly Phe Gly Val Asn
        195                 200                 205
Thr Tyr Thr Phe Val Thr Arg Asp Ala Lys Ala Arg Tyr Val Lys Phe
    210                 215                 220
His Trp Lys Pro Thr Cys Gly Val Ser Cys Leu Met Asp Asp Glu Ala
225                 230                 235                 240
Thr Leu Val Gly Gly Lys Asn His Ser His Ala Thr Gln Asp Leu Tyr
                245                 250                 255
Asp Ser Ile Ala Ala Gly Asn Phe Pro Glu Trp Lys Leu Phe Val Gln
            260                 265                 270
Val Ile Asp Pro Glu Glu Glu Glu Arg Phe Asp Phe Asp Pro Leu Asp
        275                 280                 285
Asp Thr Lys Thr Trp Pro Glu Asp Glu Val Pro Leu Arg Pro Val Gly
    290                 295                 300
Arg Leu Val Leu Asn Arg Asn Val Asp Asn Phe Phe Asn Glu Asn Glu
305                 310                 315                 320
Gln Leu Ala Phe Gly Pro Gly Leu Val Val Pro Gly Ile Tyr Tyr Ser
                325                 330                 335
Asp Asp Lys Met Leu Gln Cys Arg Val Phe Ala Tyr Ala Asp Thr Gln
            340                 345                 350
Arg Tyr Arg Leu Gly Pro Asn Tyr Leu Met Leu Pro Val Asn Ala Pro
        355                 360                 365
Lys Cys Ala His His Asn Asn His Tyr Asp Gly Ala Met Asn Phe Met
    370                 375                 380
His Arg Asp Glu Glu Val Asp Tyr Tyr Pro Ser Arg His Ala Pro Leu
385                 390                 395                 400
Arg His Ala Pro Pro Thr Pro Ile Thr Pro Arg Pro Val Val Gly Arg
                405                 410                 415
Arg Gln Lys Ala Thr Ile His Lys Gln Asn Asp Phe Lys Gln Pro Gly
            420                 425                 430
Glu Arg Tyr Arg Ser Trp Ala Pro Asp Arg Gln Glu Arg Phe Ile Pro
        435                 440                 445
Leu Arg Arg Arg Val Ala His Pro Lys Val Ser Pro Glu Leu Arg Ala
    450                 455                 460
Ile Trp Val Asn Tyr Leu Ser Gln Cys Asp Glu Ser Leu Gly Val Lys
465                 470                 475                 480
Ile Ala Asn Arg Leu Asn Val Lys Pro Ser Met
                485                 490
<210>155
<211>1749
<212>DNA
<213>Oryza sativa
<220>
<221>CDS
<222>(1)..(1749)
<400>155
atg gcg gcg aac gcg ggg atg gtg gcg gga tcc cgc aac cgg aac gag         48
Met Ala Ala Asn Ala Gly Met Val Ala Gly Ser Arg Asn Arg Asn Glu
1               5                   10                  15
ttc gtc atg atc cgc ccc gac ggc gac gcg cca ccg ccg gct aag cca         96
Phe Val Met Ile Arg Pro Asp Gly Asp Ala Pro Pro Pro Ala Lys Pro
            20                  25                  30
ggg aag agt gtg aat ggt cag gtc tgc cag att tgt ggc gac act gtt        144
Gly Lys Ser Val Asn Gly Gln Val Cys Gln Ile Cys Gly Asp Thr Val
        35                  40                  45
ggc gtc tcg gcc acc ggc gac gtc ttt gtt gcc tgc aat gag tgc gcc        192
Gly Val Ser Ala Thr Gly Asp Val Phe Val Ala Cys Asn Glu Cys Ala
    50                  55                  60
ttc ccg gtc tgc cgc cct tgc tac gag tac gag cgc aag gaa ggg aac        240
Phe Pro Val Cys Arg Pro Cys Tyr Glu Tyr Glu Arg Lys Glu Gly Asn
65                  70                  75                  80
cag tgc tgc ccc cag tgc aag act aga tac aag agg cac aaa ggt agc        288
Gln Cys Cys Pro Gln Cys Lys Thr Arg Tyr Lys Arg His Lys Gly Ser
                85                  90                  95
cct aga gtt cag ggc gat gag gag gag gaa gat gtt gat gac ctg gac        336
Pro Arg Val Gln Gly Asp Glu Glu Glu Glu Asp Val Asp Asp Leu Asp
            100                 105                 110
aat gaa ttc aat tat aag cat ggc aat ggc aaa ggt cca gag tgg cag        384
Asn Glu Phe Asn Tyr Lys His Gly Asn Gly Lys Gly Pro Glu Trp Gln
        115                 120                 125
ata cag aga cag ggg gaa gat gtt gac ctg tct tca tct tct cgc cac        432
Ile Gln Arg Gln Gly Glu Asp Val Asp Leu Ser Ser Ser Ser Arg His
    130                 135                 140
gaa caa cat cgg att ccc cgt ctg aca agt ggg caa cag atc tca gga        480
Glu Gln His Arg Ile Pro Arg Leu Thr Ser Gly Gln Gln Ile Ser Gly
145                 150                 155                 160
gag atc cct gat gct tcc ccc gat cgc cat tct atc cgc agc gga aca        528
Glu Ile Pro Asp Ala Ser Pro Asp Arg His Ser Ile Arg Ser Gly Thr
                165                 170                 175
tca agc tat gtt gat cca agt gtt cca gtt cct gtg agg att gtg gac        576
Ser Ser Tyr Val Asp Pro Ser Val Pro Val Pro Val Arg Ile Val Asp
            180                 185                 190
ccc tcc aag gac ttg aat tcc tat ggg att aac agt gtt gac tgg caa        624
Pro Ser Lys Asp Leu Asn Ser Tyr Gly Ile Asn Ser Val Asp Trp Gln
        195                 200                 205
gaa aga gtt gcc agc tgg agg aac aag cag gac aaa aat atg atg cag        672
Glu Arg Val Ala Ser Trp Arg Asn Lys Gln Asp Lys Asn Met Met Gln
    210                 215                 220
gta gct aat aaa tat cca gag gca aga ggg gga gac atg gaa ggg act        720
Val Ala Asn Lys Tyr Pro Glu Ala Arg Gly Gly Asp Met Glu Gly Thr
225                 230                 235                 240
ggt tca aat ggt gaa gat atc caa atg gtt gat gat gca cgt cta cct        768
Gly Ser Asn Gly Glu Asp Ile Gln Met Val Asp Asp Ala Arg Leu Pro
                245                 250                 255
ctg agc cgc ata gtg cct atc cct tca aac cag ctc aac ctt tac cgg        816
Leu Ser Arg Ile Val Pro Ile Pro Ser Asn Gln Leu Asn Leu Tyr Arg
            260                 265                 270
att gtt atc att ctc cgt ctt atc atc ctg atg ttc ttc ttc caa tat        864
Ile Val Ile Ile Leu Arg Leu Ile Ile Leu Met Phe Phe Phe Gln Tyr
        275                 280                 285
cgt gtc act cat cca gtg cgg gat gct tat gga ttg tgg cta gta tct        912
Arg Val Thr His Pro Val Arg Asp Ala Tyr Gly Leu Trp Leu Val Ser
    290                 295                 300
gtt atc tgt gaa att tgg ttt gcc tta tcc tgg ctc cta gat caa ttc        960
Val Ile Cys Glu Ile Trp Phe Ala Leu Ser Trp Leu Leu Asp Gln Phe
305                 310                 315                 320
cca aag tgg tac ccg ata aac cgt gaa aca tac ctt gac agg ctt gca       1008
Pro Lys Trp Tyr Pro Ile Asn Arg Glu Thr Tyr Leu Asp Arg Leu Ala
                325                 330                 335
ttg aga tat gat agg gag gga gag cca tca cag ctt gct ccc att gat       1056
Leu Arg Tyr Asp Arg Glu Gly Glu Pro Ser Gln Leu Ala Pro Ile Asp
            340                 345                 350
gtc ttt gtc agt acg gtg gat cca cta aag gaa cct cct ctg atc aca       1104
Val Phe Val Ser Thr Val Asp Pro Leu Lys Glu Pro Pro Leu Ile Thr
        355                 360                 365
gca aac act gtt ttg tcc att ctg gct gtg gat tac cct gtt gac aaa       1152
Ala Asn Thr Val Leu Ser Ile Leu Ala Val Asp Tyr Pro Val Asp Lys
    370                 375                 380
gtg tca tgc tat gtt tct gac gat ggt tca gct atg tta act ttt gag       1200
Val Ser Cys Tyr Val Ser Asp Asp Gly Ser Ala Met Leu Thr Phe Glu
385                 390                 395                 400
gct ctg tca gaa act gca gaa ttt gct agg aag tgg gtt ccg ttt tgc       1248
Ala Leu Ser Glu Thr Ala Glu Phe Ala Arg Lys Trp Val Pro Phe Cys
                405                 410                 415
aag aag cac aat att gaa cca cga gct cca gag ttt tac ttt gct caa       1296
Lys Lys His Asn Ile Glu Pro Arg Ala Pro Glu Phe Tyr Phe Ala Gln
            420                 425                 430
aaa ata gat tac ctg aag gac aaa atc caa cct tcc ttt gtt aaa gaa       1344
Lys Ile Asp Tyr Leu Lys Asp Lys Ile Gln Pro Ser Phe Val Lys Glu
        435                 440                 445
agg cgg gca atg aag aga gag tat gaa gaa ttc aag gta cgg atc aat        1392
Arg Arg Ala Met Lys Arg Glu Tyr Glu Glu Phe Lys Val Arg Ile Asn
    450                 455                 460
gct ctt gtt gcg aag gca caa aaa gta cct gaa gag ggg tgg acc atg        1440
Ala Leu Val Ala Lys Ala Gln Lys Val Pro Glu Glu Gly Trp Thr Met
465                 470                 475                 480
gct gat ggc act gct tgg cct ggg aat aac cca agg gat cac cct ggc        1488
Ala Asp Gly Thr Ala Trp Pro Gly Asn Asn Pro Arg Asp His Pro Gly
                485                 490                 495
atg att cag gtg ttc ttg ggg cac agt ggt ggg ctt gac act gat ggt        1536
Met Ile Gln Val Phe Leu Gly His Ser Gly Gly Leu Asp Thr Asp Gly
            500                 505                 510
aac gag ttg cca cgg ctt gtc tac gtc tct cgt gaa aag agg cca gga        1584
Asn Glu Leu Pro Arg Leu Val Tyr Val Ser Arg Glu Lys Arg Pro Gly
        515                 520                 525
ttc cag cat cac aag aag gct ggt gca atg aat gca ttg att cgt gta        1632
Phe Gln His His Lys Lys Ala Gly Ala Met Asn Ala Leu Ile Arg Val
    530                 535                 540
tct gct gtg ctg aca aat ggt gcc tat ctt ctc aat gtg gat tgt gat        1680
Ser Ala Val Leu Thr Asn Gly Ala Tyr Leu Leu Asn Val Asp Cys Asp
545                 550                 555                 560
cat tac ttc aac aat agc aaa gct ctt aga gaa gca atg tgc ttc atg        1728
His Tyr Phe Asn Asn Ser Lys Ala Leu Arg Glu Ala Met Cys Phe Met
                565                 570                 575
atg gat ccc gca cta gga aga                                            1749
Met Asp Pro Ala Leu Gly Arg
            580
<210>156
<211>583
<212>PRT
<213>Oryza sativa
<400>156
Met Ala Ala Asn Ala Gly Met Val Ala Gly Ser Arg Asn Arg Asn Glu
1               5                   10                  15
Phe Val Met Ile Arg Pro Asp Gly Asp Ala Pro Pro Pro Ala Lys Pro
            20                  25                  30
Gly Lys Ser Val Asn Gly Gln Val Cys Gln Ile Cys Gly Asp Thr Val
        35                  40                  45
Gly Val Ser Ala Thr Gly Asp Val Phe Val Ala Cys Asn Glu Cys Ala
    50                  55                  60
Phe Pro Val Cys Arg Pro Cys Tyr Glu Tyr Glu Arg Lys Glu Gly Asn
65                  70                  75                  80
Gln Cys Cys Pro Gln Cys Lys Thr Arg Tyr Lys Arg His Lys Gly Ser
                85                  90                  95
Pro Arg Val Gln Gly Asp Glu Glu Glu Glu Asp Val Asp Asp Leu Asp
            100                 105                 110
Asn Glu Phe Asn Tyr Lys His Gly Asn Gly Lys Gly Pro Glu Trp Gln
        115                 120                 125
Ile Gln Arg Gln Gly Glu Asp Val Asp Leu Ser Ser Ser Ser Arg His
    130                 135                 140
Glu Gln His Arg Ile Pro Arg Leu Thr Ser Gly Gln Gln Ile Ser Gly
145                 150                 155                 160
Glu Ile Pro Asp Ala Ser Pro Asp Arg His Ser Ile Arg Ser Gly Thr
                165                 170                 175
Ser Ser Tyr Val Asp Pro Ser Val Pro Val Pro Val Arg Ile Val Asp
            180                 185                 190
Pro Ser Lys Asp Leu Asn Ser Tyr Gly Ile Asn Ser Val Asp Trp Gln
        195                 200                 205
Glu Arg Val Ala Ser Trp Arg Asn Lys Gln Asp Lys Asn Met Met Gln
    210                 215                 220
Val Ala Asn Lys Tyr Pro Glu Ala Arg Gly Gly Asp Met Glu Gly Thr
225                 230                 235                 240
Gly Ser Asn Gly Glu Asp Ile Gln Met Val Asp Asp Ala Arg Leu Pro
                245                 250                 255
Leu Ser Arg Ile Val Pro Ile Pro Ser Asn Gln Leu Asn Leu Tyr Arg
            260                 265                 270
Ile Val Ile Ile Leu Arg Leu Ile Ile Leu Met Phe Phe Phe Gln Tyr
        275                 280                 285
Arg Val Thr His Pro Val Arg Asp Ala Tyr Gly Leu Trp Leu Val Ser
    290                 295                 300
Val Ile Cys Glu Ile Trp Phe Ala Leu Ser Trp Leu Leu Asp Gln Phe
305                 310                 315                 320
Pro Lys Trp Tyr Pro Ile Asn Arg Glu Thr Tyr Leu Asp Arg Leu Ala
                325                 330                 335
Leu Arg Tyr Asp Arg Glu Gly Glu Pro Ser Gln Leu Ala Pro Ile Asp
            340                 345                 350
Val Phe Val Ser Thr Val Asp Pro Leu Lys Glu Pro Pro Leu Ile Thr
        355                 360                 365
Ala Asn Thr Val Leu Ser Ile Leu Ala Val Asp Tyr Pro Val Asp Lys
    370                 375                 380
Val Ser Cys Tyr Val Ser Asp Asp Gly Ser Ala Met Leu Thr Phe Glu
385                 390                 395                 400
Ala Leu Ser Glu Thr Ala Glu Phe Ala Arg Lys Trp Val Pro Phe Cys
                405                 410                 415
Lys Lys His Asn Ile Glu Pro Arg Ala Pro Glu Phe Tyr Phe Ala Gln
            420                 425                 430
Lys Ile Asp Tyr Leu Lys Asp Lys Ile Gln Pro Ser Phe Val Lys Glu
        435                 440                 445
Arg Arg Ala Met Lys Arg Glu Tyr Glu Glu Phe Lys Val Arg Ile Asn
    450                 455                 460
Ala Leu Val Ala Lys Ala Gln Lys Val Pro Glu Glu Gly Trp Thr Met
465                 470                 475                 480
Ala Asp Gly Thr Ala Trp Pro Gly Asn Asn Pro Arg Asp His Pro Gly
                485                 490                 495
Met Ile Gln Val Phe Leu Gly His Ser Gly Gly Leu Asp Thr Asp Gly
            500                 505                 510
Asn Glu Leu Pro Arg Leu Val Tyr Val Ser Arg Glu Lys Arg Pro Gly
        515                 520                 525
Phe Gln His His Lys Lys Ala Gly Ala Met Asn Ala Leu Ile Arg Val
    530                 535                 540
Ser Ala Val Leu Thr Asn Gly Ala Tyr Leu Leu Asn Val Asp Cys Asp
545                 550                 555                 560
His Tyr Phe Asn Asn Ser Lys Ala Leu Arg Glu Ala Met Cys Phe Met
                565                 570                 575
Met Asp Pro Ala Leu Gly Arg
            580
<210>157
<211>438
<212>DNA
<213>Oryza sativa
<220>
<221>CDS
<222>(1)..(438)
<400>157
atg acg ctg gtg aag att ggt ccg tgg ggc gga aat gga ggg tca gct         48
Met Thr Leu Val Lys Ile Gly Pro Trp Gly Gly Asn Gly Gly Ser Ala
1               5                   10                  15
cag gac atc agt gtg cca ccc aag aag ctg tta ggc gtg aca atc tac         96
Gln Asp Ile Ser Val Pro Pro Lys Lys Leu Leu Gly Val Thr Ile Tyr
            20                  25                  30
agc tca gat gca atc aga tcc att gcc ttc aac tac atc ggt gtg gat        144
Ser Ser Asp Ala Ile Arg Ser Ile Ala Phe Asn Tyr Ile Gly Val Asp
        35                  40                  45
gga cag gaa tat gcc att ggt cca tgg ggt ggg ggc gaa agc acc tct        192
Gly Gln Glu Tyr Ala Ile Gly Pro Trp Gly Gly Gly Glu Ser Thr Ser
    50                  55                  60
aca gag att aaa ctg ggc tcc tct gag cag atc aag gag att tct gga        240
Thr Glu Ile Lys Leu Gly Ser Ser Glu Gln Ile Lys Glu Ile Ser Gly
65                  70                  75                  80
acc cat ggc cca gtc tat gat ctg gct gac att gtc acc tat ctt aag        288
Thr His Gly Pro Val Tyr Asp Leu Ala Asp Ile Val Thr Tyr Leu Lys
                85                  90                  95
att gtg aca agt gct aat aat aca tac gag gct gga gtc cca aat gga        336
Ile Val Thr Ser Ala Asn Asn Thr Tyr Glu Ala Gly Val Pro Asn Gly
            100                 105                 110
aag gaa ttc agc att cca ctg caa gac tct ggc cat gtc gtt gga ttc        384
Lys Glu Phe Ser Ile Pro Leu Gln Asp Ser Gly His Val Val Gly Phe
        115                 120                 125
ttt gga agg tct gga acg ctt atc gac gca att ggc atc tac gtc cac        432
Phe Gly Arg Ser Gly Thr Leu Ile Asp Ala Ile Gly Ile Tyr Val His
    130                 135                 140
cct tga                                                                438
Pro
145
<210>158
<211>145
<212>PRT
<213>Oryza sativa
<400>158
Met Thr Leu Val Lys Ile Gly Pro Trp Gly Gly Asn Gly Gly Ser Ala
1               5                   10                  15
Gln Asp Ile Ser Val Pro Pro Lys Lys Leu Leu Gly Val Thr Ile Tyr
            20                  25                  30
Ser Ser Asp Ala Ile Arg Ser Ile Ala Phe Asn Tyr Ile Gly Val Asp
        35                  40                  45
Gly Gln Glu Tyr Ala Ile Gly Pro Trp Gly Gly Gly Glu Ser Thr Ser
    50                  55                  60
Thr Glu Ile Lys Leu Gly Ser Ser Glu Gln Ile Lys Glu Ile Ser Gly
65                  70                  75                  80
Thr His Gly Pro Val Tyr Asp Leu Ala Asp Ile Val Thr Tyr Leu Lys
                85                  90                  95
Ile Val Thr Ser Ala Asn Asn Thr Tyr Glu Ala Gly Val Pro Asn Gly
            100                 105                 110
Lys Glu Phe Ser Ile Pro Leu Gln Asp Ser Gly His Val Val Gly Phe
        115                 120                 125
Phe Gly Arg Ser Gly Thr Leu Ile Asp Ala Ile Gly Ile Tyr Val His
    130                 135                 140
Pro
145
<210>159
<211>873
<212>DNA
<213>Oryza sativa
<220>
<221>CDS
<222>(1)..(873)
<400>159
atg ggg aag gac gag gtg atg gag agc ggc ggc gcc gcc ggc gaa ttc         48
Met Gly Lys Asp Glu Val Met Glu Ser Gly Gly Ala Ala Gly Glu Phe
1               5                   10                  15
gcg gcc aag gac tac acg gac ccg ccg ccg gcg ccg ctg atc gac gcg         96
Ala Ala Lys Asp Tyr Thr Asp Pro Pro Pro Ala Pro Leu Ile Asp Ala
            20                  25                  30
gcg gag ctg ggg tcg tgg tcg ctg tac cgc gcc gtc atc gcc gag ttc        144
Ala Glu Leu Gly Ser Trp Ser Leu Tyr Arg Ala Val Ile Ala Glu Phe
        35                  40                  45
atc gcc acg ctg ctg ttc ctg tac atc acc gtg gcc acg gtg atc ggg        192
Ile Ala Thr Leu Leu Phe Leu Tyr Ile Thr Val Ala Thr Val Ile Gly
    50                  55                  60
tac aag cac cag acg gac gcg tcg gcc tcc ggc gcc gac gcg gcg tgc        240
Tyr Lys His Gln Thr Asp Ala Ser Ala Ser Gly Ala Asp Ala Ala Cys
65                  70                  75                  80
ggc ggc gtg ggc gtg ctc ggc atc tcg tgg gcg ttc ggc ggc atg atc        288
Gly Gly Val Gly Val Leu Gly Ile Ser Trp Ala Phe Gly Gly Met Ile
                85                  90                  95
ttc atc ctg gtc tac tgc acc gcc ggc atc tcc ggc ggg cac atc aac        336
Phe Ile Leu Val Tyr Cys Thr Ala Gly Ile Ser Gly Gly His Ile Asn
            100                 105                 110
ccg gcg gtg acg ttc ggg ctc ttc ctg gcg cgc aag gtg tcc ctg gtc        384
Pro Ala Val Thr Phe Gly Leu Phe Leu Ala Arg Lys Val Ser Leu Val
        115                 120                 125
cgc gcc atc ctc tac atc gtg gcg cag tgc ctc ggc gcc atc tgc ggc        432
Arg Ala Ile Leu Tyr Ile Val Ala Gln Cys Leu Gly Ala Ile Cys Gly
    130                 135                 140
gtc ggg ctc gtc aat gcg ttc cca aac gcc tac ttc aac agg tac ggg        480
Val Gly Leu Val Asn Ala Phe Pro Asn Ala Tyr Phe Asn Arg Tyr Gly
145                 150                 155                 160
ggc ggc gcc aac acc ctc gcc gcc ggc tac tcc aag ggc acc ggc ctc        528
Gly Gly Ala Asn Thr Leu Ala Ala Gly Tyr Ser Lys Gly Thr Gly Leu
                165                 170                 175
gcc gcc gag atc atc ggc acc ttc gtg ctc gtc tac acc gtc ttc tcc        576
Ala Ala Glu Ile Ile Gly Thr Phe Val Leu Val Tyr Thr Val Phe Ser
            180                 185                 190
gcc acc gac ccc aag cgc aac gcc cgc gac tca cat gtc ccg gtc ttg        624
Ala Thr Asp Pro Lys Arg Asn Ala Arg Asp Ser His Val Pro Val Leu
        195                 200                 205
gcg ccg ctg cca atc ggc ttc gcc gtg ttc atg gtc cac ctg gcg acg        672
Ala Pro Leu Pro Ile Gly Phe Ala Val Phe Met Val His Leu Ala Thr
    210                 215                 220
atc ccg atc acc ggc acc ggc atc aac ccg gcc agg agc atc gga gcg        720
Ile Pro Ile Thr Gly Thr Gly Ile Asn Pro Ala Arg Ser Ile Gly Ala
225                 230                 235                 240
gcc gtc atc ttc aac aac gag aag gcg tgg cac aac cat tgg atc ttc        768
Ala Val Ile Phe Asn Asn Glu Lys Ala Trp His Asn His Trp Ile Phe
                245                 250                 255
tgg gtc ggc ccg ttc gtc ggc gcc gcc atc gcg gcg ttc tac cac cag        816
Trp Val Gly Pro Phe Val Gly Ala Ala Ile Ala Ala Phe Tyr His Gln
            260                 265                 270
tac atc ctc cgg gcc ggc gcc atc aag gcc ctc ggc tcc ttc agg agc        864
Tyr Ile Leu Arg Ala Gly Ala Ile Lys Ala Leu Gly Ser Phe Arg Ser
        275                 280                 285
aac gcg tga                                                            873
Asn Ala
    290
<210>160
<211>290
<212>PRT
<213>Oryza sativa
<400>160
Met Gly Lys Asp Glu Val Met Glu Ser Gly Gly Ala Ala Gly Glu Phe
1               5                   10                  15
Ala Ala Lys Asp Tyr Thr Asp Pro Pro Pro Ala Pro Leu Ile Asp Ala
            20                  25                  30
Ala Glu Leu Gly Ser Trp Ser Leu Tyr Arg Ala Val Ile Ala Glu Phe
        35                  40                  45
Ile Ala Thr Leu Leu Phe Leu Tyr Ile Thr Val Ala Thr Val Ile Gly
    50                  55                  60
Tyr Lys His Gln Thr Asp Ala Ser Ala Ser Gly Ala Asp Ala Ala Cys
65                  70                  75                  80
Gly Gly Val Gly Val Leu Gly Ile Ser Trp Ala Phe Gly Gly Met Ile
                85                  90                  95
Phe Ile Leu Val Tyr Cys Thr Ala Gly Ile Ser Gly Gly His Ile Asn
            100                 105                 110
Pro Ala Val Thr Phe Gly Leu Phe Leu Ala Arg Lys Val Ser Leu Val
        115                 120                 125
Arg Ala Ile Leu Tyr Ile Val Ala Gln Cys Leu Gly Ala Ile Cys Gly
    130                 135                 140
Val Gly Leu Val Asn Ala Phe Pro Asn Ala Tyr Phe Asn Arg Tyr Gly
145                 150                 155                 160
Gly Gly Ala Asn Thr Leu Ala Ala Gly Tyr Ser Lys Gly Thr Gly Leu
                165                 170                 175
Ala Ala Glu Ile Ile Gly Thr Phe Val Leu Val Tyr Thr Val Phe Ser
            180                 185                 190
Ala Thr Asp Pro Lys Arg Asn Ala Arg Asp Ser His Val Pro Val Leu
        195                 200                 205
Ala Pro Leu Pro Ile Gly Phe Ala Val Phe Met Val His Leu Ala Thr
    210                 215                 220
Ile Pro Ile Thr Gly Thr Gly Ile Asn Pro Ala Arg Ser Ile Gly Ala
225                 230                 235                 240
Ala Val Ile Phe Asn Asn Glu Lys Ala Trp His Asn His Trp Ile Phe
                245                 250                 255
Trp Val Gly Pro Phe Val Gly Ala Ala Ile Ala Ala Phe Tyr His Gln
            260                 265                 270
Tyr Ile Leu Arg Ala Gly Ala Ile Lys Ala Leu Gly Ser Phe Arg Ser
        275                 280                 285
Asn Ala
290
<210>161
<211>279
<212>DNA
<213>Oryza sativa
<220>
<221>CDS
<222>(1)..(279)
<400>161
tgc aaa gtt tca tat att gac gca att ctt ggg aca acc gtc aag gtt         48
Cys Lys Val Ser Tyr Ile Asp Ala Ile Leu Gly Thr Thr Val Lys Val
1               5                   10                  15
ccc act gtt gat ggg atg gtt gac cta aag atc ccc tcc ggt acc cag         96
Pro Thr Val Asp Gly Met Val Asp Leu Lys Ile Pro Ser Gly Thr Gln
            20                  25                  30
cca ggc aca acg tta gtg atg tcc aag aaa ggt gtc cca ctc ctc ggg        144
Pro Gly Thr Thr Leu Val Met Ser Lys Lys Gly Val Pro Leu Leu Gly
        35                  40                  45
aag tca aat gct cgt gga gac cag cta gtg cgt gta cag gtc gag att        192
Lys Ser Asn Ala Arg Gly Asp Gln Leu Val Arg Val Gln Val Glu Ile
    50                  55                  60
cca aag cgt ctg agc agc gac gag agg aag ctg att gaa gaa ctt gca        240
Pro Lys Arg Leu Ser Ser Asp Glu Arg Lys Leu Ile Glu Glu Leu Ala
65                  70                  75                  80
aac cta aac aag gct caa aca gca aac agc agg aga taa                    279
Asn Leu Asn Lys Ala Gln Thr Ala Asn Ser Arg Arg
                85                  90
<210>162
<211>92
<212>PRT
<213>Oryza sativa
<400>162
Cys Lys Val Ser Tyr Ile Asp Ala Ile Leu Gly Thr Thr Val Lys Val
1               5                   10                  15
Pro Thr Val Asp Gly Met Val Asp Leu Lys Ile Pro Ser Gly Thr Gln
            20                  25                  30
Pro Gly Thr Thr Leu Val Met Ser Lys Lys Gly Val Pro Leu Leu Gly
        35                  40                  45
Lys Ser Asn Ala Arg Gly Asp Gln Leu Val Arg Val Gln Val Glu Ile
    50                  55                  60
Pro Lys Arg Leu Ser Ser Asp Glu Arg Lys Leu Ile Glu Glu Leu Ala
65                  70                  75                  80
Asn Leu Asn Lys Ala Gln Thr Ala Asn Ser Arg Arg
                85                  90
<210>163
<211>924
<212>DNA
<213>Oryza sativa
<220>
<221>CDS
<222>(1)..(924)
<400>163
atg agc agc ccc cat ggc ggc ctc gac gac cag atc gag cgc ctc atg         48
Met Ser Ser Pro His Gly Gly Leu Asp Asp Gln Ile Glu Arg Leu Met
1               5                   10                  15
cag tgc aag ccc ctc ccc gag ccc gag gtc aga gca ctt tgc gag aag         96
Gln Cys Lys Pro Leu Pro Glu Pro Glu Val Arg Ala Leu Cys Glu Lys
            20                  25                  30
gca aaa gag ata ttg atg gag gag agc aac gtt caa cct gta aag agt        144
Ala Lys Glu Ile Leu Met Glu Glu Ser Asn Val Gln Pro Val Lys Ser
        35                  40                  45
cct gtt aca ata tgt ggt gat att cat ggg cag ttt cat gac ctt gca        192
Pro Val Thr Ile Cys Gly Asp Ile His Gly Gln Phe His Asp Leu Ala
    50                  55                  60
gaa ctg ttc cga atc ggt gga aag tgc cca gat aca aac tac ttg ttt        240
Glu Leu Phe Arg Ile Gly Gly Lys Cys Pro Asp Thr Asn Tyr Leu Phe
65                  70                  75                  80
atg gga gat tac gtg gat cgt ggt tat tat tct gtt gaa act gtc acg        288
Met Gly Asp Tyr Val Asp Arg Gly Tyr Tyr Ser Val Glu Thr Val Thr
                85                  90                  95
ctt ttg gtg gct tta aag gtt cgt tat cct cag cga att act att ctc        336
Leu Leu Val Ala Leu Lys Val Arg Tyr Pro Gln Arg Ile Thr Ile Leu
            100                 105                 110
aga gga aac cac gaa agt cga cag atc act caa gtt tat gga ttc tat        384
Arg Gly Asn His Glu Ser Arg Gln Ile Thr Gln Val Tyr Gly Phe Tyr
        115                 120                 125
gac gag tgc tta agg aag tac ggg aat gca aat gtg tgg aaa act ttt        432
Asp Glu Cys Leu Arg Lys Tyr Gly Asn Ala Asn Val Trp Lys Thr Phe
    130                 135                 140
aca gat ctc ttc gat tac ttc ccc ttg aca gca ttg gtt gag tca gaa        480
Thr Asp Leu Phe Asp Tyr Phe Pro Leu Thr Ala Leu Val Glu Ser Glu
145                 150                 155                 160
ata ttt tgc ctg cat ggt gga tta tcg cca tcc att gag aca ctt gat        528
Ile Phe Cys Leu His Gly Gly Leu Ser Pro Ser Ile Glu Thr Leu Asp
                165                 170                 175
aac ata cgt aac ttc gat cgt gtc caa gaa gtt ccc cat gaa ggg ccc        576
Asn Ile Arg Asn Phe Asp Arg Val Gln Glu Val Pro His Glu Gly Pro
            180                 185                 190
atg tgt gat ctt ctg tgg tct gat cca gac gat cga tgt ggt tgg ggt        624
Met Cys Asp Leu Leu Trp Ser Asp Pro Asp Asp Arg Cys Gly Trp Gly
        195                 200                 205
att tct cct cga ggt gct gga tac acc ttc ggg cag gat ata tca gag        672
Ile Ser Pro Arg Gly Ala Gly Tyr Thr Phe Gly Gln Asp Ile Ser Glu
    210                 215                 220
cag ttc aac cat acc aat aat tta aga ctt att gct aga gct cac cag        720
Gln Phe Asn His Thr Asn Asn Leu Arg Leu Ile Ala Arg Ala His Gln
225                 230                 235                 240
ttg gtc atg gag gga ttc aat tgg gct cat gag caa aaa gtt gtt acc        768
Leu Val Met Glu Gly Phe Asn Trp Ala His Glu Gln Lys Val Val Thr
                245                 250                 255
ata ttt agt gca cct aat tat tgc tat cgc tgt ggg aac atg gca tca        816
Ile Phe Ser Ala Pro Asn Tyr Cys Tyr Arg Cys Gly Asn Met Ala Ser
            260                 265                 270
atc ttg gaa gtt gat gat tgc agg gag cat aca ttc atc cag ttt gag        864
Ile Leu Glu Val Asp Asp Cys Arg Glu His Thr Phe Ile Gln Phe Glu
        275                 280                 285
cca gcc cca aga agg gga gag cca gat gta act cgt aga aca cct gac        912
Pro Ala Pro Arg Arg Gly Glu Pro Asp Val Thr Arg Arg Thr Pro Asp
    290                 295                 300
tat ttc ctg tga                                                        924
Tyr Phe Leu
305
<210>164
<211>307
<212>PRT
<213>Oryza sativa
<400>164
Met Ser Ser Pro His Gly Gly Leu Asp Asp Gln Ile Glu Arg Leu Met
1               5                   10                  15
Gln Cys Lys Pro Leu Pro Glu Pro Glu Val Arg Ala Leu Cys Glu Lys
            20                  25                  30
Ala Lys Glu Ile Leu Met Glu Glu Ser Asn Val Gln Pro Val Lys Ser
        35                  40                  45
Pro Val Thr Ile Cys Gly Asp Ile His Gly Gln Phe His Asp Leu Ala
    50                  55                  60
Glu Leu Phe Arg Ile Gly Gly Lys Cys Pro Asp Thr Asn Tyr Leu Phe
65                  70                  75                  80
Met Gly Asp Tyr Val Asp Arg Gly Tyr Tyr Ser Val Glu Thr Val Thr
                85                  90                  95
Leu Leu Val Ala Leu Lys Val Arg Tyr Pro Gln Arg Ile Thr Ile Leu
            100                 105                 110
Arg Gly Asn His Glu Ser Arg Gln Ile Thr Gln Val Tyr Gly Phe Tyr
        115                 120                 125
Asp Glu Cys Leu Arg Lys Tyr Gly Asn Ala Asn Val Trp Lys Thr Phe
    130                 135                 140
Thr Asp Leu Phe Asp Tyr Phe Pro Leu Thr Ala Leu Val Glu Ser Glu
145                 150                 155                 160
Ile Phe Cys Leu His Gly Gly Leu Ser Pro Ser Ile Glu Thr Leu Asp
                165                 170                 175
Asn Ile Arg Asn Phe Asp Arg Val Gln Glu Val Pro His Glu Gly Pro
            180                 185                 190
Met Cys Asp Leu Leu Trp Ser Asp Pro Asp Asp Arg Cys Gly Trp Gly
        195                 200                 205
Ile Ser Pro Arg Gly Ala Gly Tyr Thr Phe Gly Gln Asp Ile Ser Glu
    210                 215                 220
Gln Phe Asn His Thr Asn Asn Leu Arg Leu Ile Ala Arg Ala His Gln
225                 230                 235                 240
Leu Val Met Glu Gly Phe Asn Trp Ala His Glu Gln Lys Val Val Thr
                245                 250                 255
Ile Phe Ser Ala Pro Asn Tyr Cys Tyr Arg Cys Gly Asn Met Ala Ser
            260                 265                 270
Ile Leu Glu Val Asp Asp Cys Arg Glu His Thr Phe Ile Gln Phe Glu
        275                 280                 285
Pro Ala Pro Arg Arg Gly Glu Pro Asp Val Thr Arg Arg Thr Pro Asp
    290                 295                 300
Tyr Phe Leu
305
<210>165
<211>675
<212>DNA
<213>Oryza sativa
<220>
<221>CDS
<222>(1)..(675)
<400>165
atg gca ggt gct cct cga gga cta gtt ctc ctc ggc gtt tgt gcc gtc         48
Met Ala Gly Ala Pro Arg Gly Leu Val Leu Leu Gly Val Cys Ala Val
1               5                   10                  15
ttg atg gcg gtc gcc gtc ggc gga gag gcg gcg tcg gtg gtc gtc ggc         96
Leu Met Ala Val Ala Val Gly Gly Glu Ala Ala Ser Val Val Val Gly
            20                  25                  30
acg gcc aag tgc gcc gac tgc acc cgg aag aac atg aaa gct gag gat        144
Thr Ala Lys Cys Ala Asp Cys Thr Arg Lys Asn Met Lys Ala Glu Asp
        35                  40                  45
gct ttc aag aac ctc cag gtg gcg att aag tgc aag aac ggc aac ggc        192
Ala Phe Lys Asn Leu Gln Val Ala Ile Lys Cys Lys Asn Gly Asn Gly
    50                  55                  60
gag tac gag agc aag gcc act gga aag ctc gac ggc acc ggt gcc ttc        240
Glu Tyr Glu Ser Lys Ala Thr Gly Lys Leu Asp Gly Thr Gly Ala Phe
65                  70                  75                  80
agc gtc ccc ctt gac gcc gac ctc cac agc tcc gac tgc atc gct cag        288
Ser Val Pro Leu Asp Ala Asp Leu His Ser Ser Asp Cys Ile Ala Gln
                85                  90                  95
ctc cac agc gcc acc aac gag cca tgc ccc ggc cag gag cca tcc aag        336
Leu His Ser Ala Thr Asn Glu Pro Cys Pro Gly Gln Glu Pro Ser Lys
            100                 105                 110
atc gtg cca atg tcg gag ggc acc ttt gct gcc gtc gcc ggc aag acc        384
Ile Val Pro Met Ser Glu Gly Thr Phe Ala Ala Val Ala Gly Lys Thr
        115                 120                 125
cac tac cga tcg gcg ttg tgc gcg tcc gtg acc atc tgc ggc cca atc        432
His Tyr Arg Ser Ala Leu Cys Ala Ser Val Thr Ile Cys Gly Pro Ile
    130                 135                 140
aag aag aag atc ata gac cac ttc cac aag aag ccg gtg cca ccc aag        480
Lys Lys Lys Ile Ile Asp His Phe His Lys Lys Pro Val Pro Pro Lys
145                 150                 155                 160
ccg gag cca aag ccg gag cca ccc aag ccc aag cct gag ccg gag cac        528
Pro Glu Pro Lys Pro Glu Pro Pro Lys Pro Lys Pro Glu Pro Glu His
                165                 170                 175
cca ttc ctc gac cac atc cac aag aag gag aag cac ttc ttc gac cac        576
Pro Phe Leu Asp His Ile His Lys Lys Glu Lys His Phe Phe Asp His
            180                 185                 190
ttc cac aag aag ccc gtg cca ccc aag cct gag cct aag ccc gag ccc        624
Phe His Lys Lys Pro Val Pro Pro Lys Pro Glu Pro Lys Pro Glu Pro
        195                 200                 205
aag ccg cag cct gcg cca gag tac cac aac cct agc cct ccg gcg aat        672
Lys Pro Gln Pro Ala Pro Glu Tyr His Asn Pro Ser Pro Pro Ala Asn
    210                 215                 220
taa                                                                    675
<210>166
<211>224
<212>PRT
<213>Oryza sativa
<400>166
Met Ala Gly Ala Pro Arg Gly Leu Val Leu Leu Gly Val Cys Ala Val
1               5                   10                  15
Leu Met Ala Val Ala Val Gly Gly Glu Ala Ala Ser Val Val Val Gly
            20                  25                  30
Thr Ala Lys Cys Ala Asp Cys Thr Arg Lys Asn Met Lys Ala Glu Asp
        35                  40                  45
Ala Phe Lys Asn Leu Gln Val Ala Ile Lys Cys Lys Asn Gly Asn Gly
    50                  55                  60
Glu Tyr Glu Ser Lys Ala Thr Gly Lys Leu Asp Gly Thr Gly Ala Phe
65                  70                  75                  80
Ser Val Pro Leu Asp Ala Asp Leu His Ser Ser Asp Cys Ile Ala Gln
                85                  90                  95
Leu His Ser Ala Thr Asn Glu Pro Cys Pro Gly Gln Glu Pro Ser Lys
            100                 105                 110
Ile Val Pro Met Ser Glu Gly Thr Phe Ala Ala Val Ala Gly Lys Thr
        115                 120                 125
His Tyr Arg Ser Ala Leu Cys Ala Ser Val Thr Ile Cys Gly Pro Ile
    130                 135                 140
Lys Lys Lys Ile Ile Asp His Phe His Lys Lys Pro Val Pro Pro Lys
145                 150                 155                 160
Pro Glu Pro Lys Pro Glu Pro Pro Lys Pro Lys Pro Glu Pro Glu His
                165                 170                 175
Pro Phe Leu Asp His Ile His Lys Lys Glu Lys His Phe Phe Asp His
            180                 185                 190
Phe His Lys Lys Pro Val Pro Pro Lys Pro Glu Pro Lys Pro Glu Pro
        195                 200                 205
Lys Pro Gln Pro Ala Pro Glu Tyr His Asn Pro Ser Pro Pro Ala Asn
    210                 215                 220
<210>167
<211>1500
<212>DNA
<213>Oryza sativa
<220>
<221>CDS
<222>(1)..(1500)
<400>167
atg gcg agt tcc gtt ttc tct cgg ttt tct ata tac ttt tgt gtt ctt         48
Met Ala Ser Ser Val Phe Ser Arg Phe Ser Ile Tyr Phe Cys Val Leu
1               5                   10                  15
cta tta tgc cat ggt tct atg gcc cag cta ttt aat ccc agc aca aac         96
Leu Leu Cys His Gly Ser Met Ala Gln Leu Phe Asn Pro Ser Thr Asn
            20                  25                  30
cca tgg cat agt cct cgg caa gga agt ttt agg gag tgt aga ttt gat        144
Pro Trp His Ser Pro Arg Gln Gly Ser Phe Arg Glu Cys Arg Phe Asp
        35                  40                  45
aga cta caa gca ttt gaa cca ctt cgg aaa gtg agg tca gaa gct ggg        192
Arg Leu Gln Ala Phe Glu Pro Leu Arg Lys Val Arg Ser Glu Ala Gly
    50                  55                  60
gtg act gag tac ttc gat gag aag aat gaa tta ttc cag tgc acg ggt        240
Val Thr Glu Tyr Phe Asp Glu Lys Asn Glu Leu Phe Gln Cys Thr Gly
65                  70                  75                  80
act ttt gtg atc cga cgt gtc att cag cct caa ggc ctt ttg gta cct        288
Thr Phe Val Ile Arg Arg Val Ile Gln Pro Gln Gly Leu Leu Val Pro
                85                  90                  95
cga tac aca aat att cct ggc gtg gtc tac atc atc caa ggg aga ggt        336
Arg Tyr Thr Asn Ile Pro Gly Val Val Tyr Ile Ile Gln Gly Arg Gly
            100                 105                 110
tct atg ggt tta acc ttc ccc ggt tgc cct gcg act tac cag caa caa        384
Ser Met Gly Leu Thr Phe Pro Gly Cys Pro Ala Thr Tyr Gln Gln Gln
        115                 120                 125
ttc caa caa ttt tca tct caa ggc caa agt cag agc caa aag ttt aga        432
Phe Gln Gln Phe Ser Ser Gln Gly Gln Ser Gln Ser Gln Lys Phe Arg
    130                 135                 140
gat gag cac caa aag att cat caa ttt agg caa gga gac att gtt gca        480
Asp Glu His Gln Lys Ile His Gln Phe Arg Gln Gly Asp Ile Val Ala
145                 150                 155                 160
ctc cca gct ggt gtt gca cat tgg ttc tac aat gat ggt gat gca cct        528
Leu Pro Ala Gly Val Ala His Trp Phe Tyr Asn Asp Gly Asp Ala Pro
                165                 170                 175
att gtt gcc gta tat gtt tat gac gta aac aac aac gcc aat cag ctt        576
Ile Val Ala Val Tyr Val Tyr Asp Val Asn Asn Asn Ala Asn Gln Leu
            180                 185                 190
gaa cct agg caa aag gag ttc cta tta gcc ggc aac aac aat cgg gct        624
Glu Pro Arg Gln Lys Glu Phe Leu Leu Ala Gly Asn Asn Asn Arg Ala
        195                 200                 205
caa caa caa caa gta tat ggt agc tca att gag caa cac tct ggg caa        672
Gln Gln Gln Gln Val Tyr Gly Ser Ser Ile Glu Gln His Ser Gly Gln
    210                 215                 220
aac ata ttc agc gga ttt ggt gtt gag atg cta agt gag gct tta ggc        720
Asn Ile Phe Ser Gly Phe Gly Val Glu Met Leu Ser Glu Ala Leu Gly
225                 230                 235                 240
atc aac gca gta gca gca aag agg cta cag agc caa aat gat caa aga        768
Ile Asn Ala Val Ala Ala Lys Arg Leu Gln Ser Gln Asn Asp Gln Arg
                245                 250                 255
gga gag atc ata cat gtg aag aat ggc ctt caa ttg ttg aaa ccg act        816
Gly Glu Ile Ile His Val Lys Asn Gly Leu Gln Leu Leu Lys Pro Thr
            260                 265                 270
ttg aca caa cag caa gaa caa gca caa gca caa gat caa tat caa caa        864
Leu Thr Gln Gln Gln Glu Gln Ala Gln Ala Gln Asp Gln Tyr Gln Gln
        275                 280                 285
gtt caa tac agt gaa cga cag caa aca tct tct cga tgg aac gga ttg        912
Val Gln Tyr Ser Glu Arg Gln Gln Thr Ser Ser Arg Trp Asn Gly Leu
    290                 295                 300
gag gag aac ttt tgc acg atc aag gtg aga gta aac att gaa aat cct        960
Glu Glu Asn Phe Cys Thr Ile Lys Val Arg Val Asn Ile Glu Asn Pro
305                 310                 315                 320
agt cgt gct gat tca tac aac cca cgt gcc gga agg ata aca agt gtc       1008
Ser Arg Ala Asp Ser Tyr Asn Pro Arg Ala Gly Arg Ile Thr Ser Val
                325                 330                 335
aat agt cag aag ttc ccc atc ctt aac ctc atc caa atg agc gct acc       1056
Asn Ser Gln Lys Phe Pro Ile Leu Asn Leu Ile Gln Met Ser Ala Thr
            340                 345                 350
aga gta aac cta tac cag aat gct att ctc tcg ccg ttc tgg aac gtc       1104
Arg Val Asn Leu Tyr Gln Asn Ala Ile Leu Ser Pro Phe Trp Asn Val
        355                 360                 365
aat gct cat agt ttg gtc tat atg att caa ggg cga tct cga gtt caa       1152
Asn Ala His Ser Leu Val Tyr Met Ile Gln Gly Arg Ser Arg Val Gln
    370                 375                 380
gtc gtt agt aac ttt gga aag act gtg ttt gat ggt gtc ctt cgc cca       1200
Val Val Ser Asn Phe Gly Lys Thr Val Phe Asp Gly Val Leu Arg Pro
385                 390                 395                 400
gca caa tta ttg atc att ccg caa cat tat gct gtc ttg aag aaa gca       1248
Ala Gln Leu Leu Ile Ile Pro Gln His Tyr Ala Val Leu Lys Lys Ala
                405                 410                 415
gag cgt gaa gga tgc caa tat atc gca atc aag aca aac gct aac gcc       1296
Glu Arg Glu Gly Cys Gln Tyr Ile Ala Ile Lys Thr Asn Ala Asn Ala
            420                 425                 430
ttc gtc agc cac ctt gca ggg aaa aac tca gta ttc cgt gcc ttg cca       1344
Phe Val Ser His Leu Ala Gly Lys Asn Ser Val Phe Arg Ala Leu Pro
        435                 440                 445
gtt gat gta gtc gct aat gcg tat cgc atc tca agg gag caa gcc cga       1392
Val Asp Val Val Ala Asn Ala Tyr Arg Ile Ser Arg Glu Gln Ala Arg
    450                 455                 460
agc ctc aag aac aac agg gga gaa gag cac ggt gcc ttc act cct aga       1440
Ser Leu Lys Asn Asn Arg Gly Glu Glu His Gly Ala Phe Thr Pro Arg
465                 470                 475                 480
ttt caa caa caa tac tac cca gga tta tcg aat gag tcc gaa agc gag       1488
Phe Gln Gln Gln Tyr Tyr Pro Gly Leu Ser Asn Glu Ser Glu Ser Glu
                485                 490                 495
acc tca gag taa                                                       1500
Thr Ser Glu
<210>168
<211>499
<212>PRT
<213>Oryza sativa
<400>168
Met Ala Ser Ser Val Phe Ser Arg Phe Ser Ile Tyr Phe Cys Val Leu
1               5                   10                  15
Leu Leu Cys His Gly Ser Met Ala Gln Leu Phe Asn Pro Ser Thr Asn
            20                  25                  30
Pro Trp His Ser Pro Arg Gln Gly Ser Phe Arg Glu Cys Arg Phe Asp
        35                  40                  45
Arg Leu Gln Ala Phe Glu Pro Leu Arg Lys Val Arg Ser Glu Ala Gly
    50                  55                  60
Val Thr Glu Tyr Phe Asp Glu Lys Asn Glu Leu Phe Gln Cys Thr Gly
65                  70                  75                  80
Thr Phe Val Ile Arg Arg Val Ile Gln Pro Gln Gly Leu Leu Val Pro
                85                  90                  95
Arg Tyr Thr Asn Ile Pro Gly Val Val Tyr Ile Ile Gln Gly Arg Gly
            100                 105                 110
Ser Met Gly Leu Thr Phe Pro Gly Cys Pro Ala Thr Tyr Gln Gln Gln
        115                 120                 125
Phe Gln Gln Phe Ser Ser Gln Gly Gln Ser Gln Ser Gln Lys Phe Arg
    130                 135                 140
Asp Glu His Gln Lys Ile His Gln Phe Arg Gln Gly Asp Ile Val Ala
145                 150                 155                 160
Leu Pro Ala Gly Val Ala His Trp Phe Tyr Asn Asp Gly Asp Ala Pro
                165                 170                 175
Ile Val Ala Val Tyr Val Tyr Asp Val Asn Asn Asn Ala Asn Gln Leu
            180                 185                 190
Glu Pro Arg Gln Lys Glu Phe Leu Leu Ala Gly Asn Asn Asn Arg Ala
        195                 200                 205
Gln Gln Gln Gln Val Tyr Gly Ser Ser Ile Glu Gln His Ser Gly Gln
    210                 215                 220
Asn Ile Phe Ser Gly Phe Gly Val Glu Met Leu Ser Glu Ala Leu Gly
225                 230                 235                 240
Ile Asn Ala Val Ala Ala Lys Arg Leu Gln Ser Gln Asn Asp Gln Arg
                245                 250                 255
Gly Glu Ile Ile His Val Lys Asn Gly Leu Gln Leu Leu Lys Pro Thr
            260                 265                 270
Leu Thr Gln Gln Gln Glu Gln Ala Gln Ala Gln Asp Gln Tyr Gln Gln
        275                 280                 285
Val Gln Tyr Ser Glu Arg Gln Gln Thr Ser Ser Arg Trp Asn Gly Leu
    290                 295                 300
Glu Glu Asn Phe Cys Thr Ile Lys Val Arg Val Asn Ile Glu Asn Pro
305                 310                 315                 320
Ser Arg Ala Asp Ser Tyr Asn Pro Arg Ala Gly Arg Ile Thr Ser Val
                325                 330                 335
Asn Ser Gln Lys Phe Pro Ile Leu Asn Leu Ile Gln Met Ser Ala Thr
            340                 345                 350
Arg Val Asn Leu Tyr Gln Asn Ala Ile Leu Ser Pro Phe Trp Asn Val
        355                 360                 365
Asn Ala His Ser Leu Val Tyr Met Ile Gln Gly Arg Ser Arg Val Gln
    370                 375                 380
Val Val Ser Asn Phe Gly Lys Thr Val Phe Asp Gly Val Leu Arg Pro
385                 390                 395                 400
Ala Gln Leu Leu Ile Ile Pro Gln His Tyr Ala Val Leu Lys Lys Ala
                405                 410                 415
Glu Arg Glu Gly Cys Gln Tyr Ile Ala Ile Lys Thr Asn Ala Asn Ala
            420                 425                 430
Phe Val Ser His Leu Ala Gly Lys Asn Ser Val Phe Arg Ala Leu Pro
        435                 440                 445
Val Asp Val Val Ala Asn Ala Tyr Arg Ile Ser Arg Glu Gln Ala Arg
    450                 455                 460
Ser Leu Lys Asn Asn Arg Gly Glu Glu His Gly Ala Phe Thr Pro Arg
465                 470                 475                 480
Phe Gln Gln Gln Tyr Tyr Pro Gly Leu Ser Asn Glu Ser Glu Ser Glu
                485                 490                 495
Thr Ser Glu
<210>169
<211>1140
<212>DNA
<213>Oryza sativa
<220>
<221>CDS
<222>(1)..(1140)
<400>169
atg gtc gag gtg gag gaa gtc agc aac aag atg cag gtg cag atg cgc         48
Met Val Glu Val Glu Glu Val Ser Asn Lys Met Gln Val Gln Met Arg
1               5                   10                  15
ctc cac ccc gcc gcg gcg gcg gag gag gag gac gcc gac ctc ccg ctc         96
Leu His Pro Ala Ala Ala Ala Glu Glu Glu Asp Ala Asp Leu Pro Leu
            20                  25                  30
ccc gcc ctc ttc gac aag gcg tcc cac ctc cac tcc ctc gcc tcc agc        144
Pro Ala Leu Phe Asp Lys Ala Ser His Leu His Ser Leu Ala Ser Ser
        35                  40                  45
tcc tcc ctc gac cag gaa ggg atc cgc aag ggg gtc gac ctg ctg cgg        192
Ser Ser Leu Asp Gln Glu Gly Ile Arg Lys Gly Val Asp Leu Leu Arg
    50                  55                  60
cgg tgc gac gag atg gtc agt aag gtc ggc ctc ttc tcc tcc aac gag        240
Arg Cys Asp Glu Met Val Ser Lys Val Gly Leu Phe Ser Ser Asn Glu
65                  70                  75                  80
acc aag gat gac atc tcc acc gcc aac ctc aaa tac cta ctc gta ccg        288
Thr Lys Asp Asp Ile Ser Thr Ala Asn Leu Lys Tyr Leu Leu Val Pro
                85                  90                  95
tac tac ctt ggg gaa atg act gaa agg gta gcg cag gaa gat cgg atc        336
Tyr Tyr Leu Gly Glu Met Thr Glu Arg Val Ala Gln Glu Asp Arg Ile
            100                 105                 110
cca gtc ctt aag gcg tcg cag gat cat ttg aag gaa ttc att tct atc        384
Pro Val Leu Lys Ala Ser Gln Asp His Leu Lys Glu Phe Ile Ser Ile
        115                 120                 125
tgt gaa gca ctg gag ctt ata tca gag gat gag ctt gaa ata tct agg        432
Cys Glu Ala Leu Glu Leu Ile Ser Glu Asp Glu Leu Glu Ile Ser Arg
    130                 135                 140
cag aag aac ctg ata cca tgg caa atc gaa gag cac aga agg ttg cac        480
Gln Lys Asn Leu Ile Pro Trp Gln Ile Glu Glu His Arg Arg Leu His
145                 150                 155                 160
ggt tca agc gcc aaa agg ctg cag aaa caa agc tct aga atc aag gag        528
Gly Ser Ser Ala Lys Arg Leu Gln Lys Gln Ser Ser Arg Ile Lys Glu
                165                 170                 175
agg aaa gaa agg cgt agg cgt cat gag agc agc tgc tta tca gct cct        576
Arg Lys Glu Arg Arg Arg Arg His Glu Ser Ser Cys Leu Ser Ala Pro
            180                 185                 190
att gag ctg gga gga gat ctt ttg agg atg atg gag aag gaa aga gaa        624
Ile Glu Leu Gly Gly Asp Leu Leu Arg Met Met Glu Lys Glu Arg Glu
        195                 200                 205
ggc atg gtt agc tac tat ctc att ggc tct atc gaa ggc ttt gac ctt        672
Gly Met Val Ser Tyr Tyr Leu Ile Gly Ser Ile Glu Gly Phe Asp Leu
    210                 215                 220
ctt gac atg tta aag aag gaa gaa gaa atc gtt ccg gca gta aaa gaa        720
Leu Asp Met Leu Lys Lys Glu Glu Glu Ile Val Pro Ala Val Lys Glu
225                 230                 235                 240
gga aag cga agg atg gta atg cat ttg ctc gtg aaa tgc ttg atg aac        768
Gly Lys Arg Arg Met Val Met His Leu Leu Val Lys Cys Leu Met Asn
                245                 250                 255
gta caa aaa ggg ctg aag cat ggc acc ata atg ctg cca acc gtg cac        816
Val Gln Lys Gly Leu Lys His Gly Thr Ile Met Leu Pro Thr Val His
            260                 265                 270
cat act cca aac cag ctg atc caa tca ctt gtg caa cta acc agt gaa        864
His Thr Pro Asn Gln Leu Ile Gln Ser Leu Val Gln Leu Thr Ser Glu
        275                 280                 285
aga gag aga atg gca gca caa gtt ttt cag cca agt tat agg ttg cca        912
Arg Glu Arg Met Ala Ala Gln Val Phe Gln Pro Ser Tyr Arg Leu Pro
    290                 295                 300
acg atg agc ata gaa gaa gct ggc tta cgt gag atg aaa atg atg gag        960
Thr Met Ser Ile Glu Glu Ala Gly Leu Arg Glu Met Lys Met Met Glu
305                 310                 315                 320
aaa tgg caa gaa aga act gcc aag atg att caa gaa tca aac tcc gca       1008
Lys Trp Gln Glu Arg Thr Ala Lys Met Ile Gln Glu Ser Asn Ser Ala
                325                 330                 335
tgg cac aag gat ggc agt cgg tca gcc caa gag gac gag gac gcc gaa       1056
Trp His Lys Asp Gly Ser Arg Ser Ala Gln Glu Asp Glu Asp Ala Glu
            340                 345                 350
gag gag aaa gcg aga gga tgg gat gac tgg aag gac gat aac cct cgt       1104
Glu Glu Lys Ala Arg Gly Trp Asp Asp Trp Lys Asp Asp Asn Pro Arg
        355                 360                 365
ggt gca ggc aac aag aag ctc act ccc tgt ggc taa                        1140
Gly Ala Gly Asn Lys Lys Leu Thr Pro Cys Gly
    370                 375
<210>170
<211>379
<212>PRT
<213>Oryza sativa
<400>170
Met Val Glu Val Glu Glu Val Ser Asn Lys Met Gln Val Gln Met Arg
1               5                   10                  15
Leu His Pro Ala Ala Ala Ala Glu Glu Glu Asp Ala Asp Leu Pro Leu
            20                  25                  30
Pro Ala Leu Phe Asp Lys Ala Ser His Leu His Ser Leu Ala Ser Ser
        35                  40                  45
Ser Ser Leu Asp Gln Glu Gly Ile Arg Lys Gly Val Asp Leu Leu Arg
    50                  55                  60
Arg Cys Asp Glu Met Val Ser Lys Val Gly Leu Phe Ser Ser Asn Glu
65                  70                  75                  80
Thr Lys Asp Asp Ile Ser Thr Ala Asn Leu Lys Tyr Leu Leu Val Pro
                85                  90                  95
Tyr Tyr Leu Gly Glu Met Thr Glu Arg Val Ala Gln Glu Asp Arg Ile
            100                 105                 110
Pro Val Leu Lys Ala Ser Gln Asp His Leu Lys Glu Phe Ile Ser Ile
        115                 120                 125
Cys Glu Ala Leu Glu Leu Ile Ser Glu Asp Glu Leu Glu Ile Ser Arg
    130                 135                 140
Gln Lys Asn Leu Ile Pro Trp Gln Ile Glu Glu His Arg Arg Leu His
145                 150                 155                 160
Gly Ser Ser Ala Lys Arg Leu Gln Lys Gln Ser Ser Arg Ile Lys Glu
                165                 170                 175
Arg Lys Glu Arg Arg Arg Arg His Glu Ser Ser Cys Leu Ser Ala Pro
            180                 185                 190
Ile Glu Leu Gly Gly Asp Leu Leu Arg Met Met Glu Lys Glu Arg Glu
        195                 200                 205
Gly Met Val Ser Tyr Tyr Leu Ile Gly Ser Ile Glu Gly Phe Asp Leu
    210                 215                 220
Leu Asp Met Leu Lys Lys Glu Glu Glu Ile Val Pro Ala Val Lys Glu
225                 230                 235                 240
Gly Lys Arg Arg Met Val Met His Leu Leu Val Lys Cys Leu Met Asn
                245                 250                 255
Val Gln Lys Gly Leu Lys His Gly Thr Ile Met Leu Pro Thr Val His
            260                 265                 270
His Thr Pro Asn Gln Leu Ile Gln Ser Leu Val Gln Leu Thr Ser Glu
        275                 280                 285
Arg Glu Arg Met Ala Ala Gln Val Phe Gln Pro Ser Tyr Arg Leu Pro
    290                 295                 300
Thr Met Ser Ile Glu Glu Ala Gly Leu Arg Glu Met Lys Met Met Glu
305                 310                 315                 320
Lys Trp Gln Glu Arg Thr Ala Lys Met Ile Gln Glu Ser Asn Ser Ala
                325                 330                 335
Trp His Lys Asp Gly Ser Arg Ser Ala Gln Glu Asp Glu Asp Ala Glu
            340                 345                 350
Glu Glu Lys Ala Arg Gly Trp Asp Asp Trp Lys Asp Asp Asn Pro Arg
        355                 360                 365
Gly Ala Gly Asn Lys Lys Leu Thr Pro Cys Gly
    370                 375
<210>171
<211>783
<212>DNA
<213>Oryza sativa
<220>
<221>CDS
<222>(1)..(783)
<400>171
atg tcg cct gct gag gca tcg cgt gag gag aat gtg tac atg gca aag         48
Met Ser Pro Ala Glu Ala Ser Arg Glu Glu Asn Val Tyr Met Ala Lys
1               5                   10                  15
ctt gcc gag cag gct gag cgt tac gag gaa atg gtc gaa ttc atg gag         96
Leu Ala Glu Gln Ala Glu Arg Tyr Glu Glu Met Val Glu Phe Met Glu
            20                  25                  30
aag gtg gca aag acc act gat gtt ggt gag ctc acc gtt gag gag cgg        144
Lys Val Ala Lys Thr Thr Asp Val Gly Glu Leu Thr Val Glu Glu Arg
        35                  40                  45
aac ctg ctt tct gtg gct tac aag aac gtg att ggt gct cgg agg gca        192
Asn Leu Leu Ser Val Ala Tyr Lys Asn Val Ile Gly Ala Arg Arg Ala
    50                  55                  60
tcg tgg agg atc atc tct tct att gag cag aag gag gag agc cgt ggg        240
Ser Trp Arg Ile Ile Ser Ser Ile Glu Gln Lys Glu Glu Ser Arg Gly
65                  70                  75                  80
aat gag gca tat gtt gca tca att aag gag tac cgt agc agg att gaa        288
Asn Glu Ala Tyr Val Ala Ser Ile Lys Glu Tyr Arg Ser Arg Ile Glu
                85                  90                  95
act gag ctc agc aag atc tgt gat ggt atc ctt aag ctt ctg gat tcc        336
Thr Glu Leu Ser Lys Ile Cys Asp Gly Ile Leu Lys Leu Leu Asp Ser
            100                 105                 110
cac ctt gtc cca tct gcc act gct gca gag tcc aag gtg ttc tac ctg        384
His Leu Val Pro Ser Ala Thr Ala Ala Glu Ser Lys Val Phe Tyr Leu
        115                 120                 125
aaa atg aag ggt gac tac cac agg tac ctt gct gag ttt aag tca gga        432
Lys Met Lys Gly Asp Tyr His Arg Tyr Leu Ala Glu Phe Lys Ser Gly
    130                 135                 140
gct gag agg aag gaa gca gct gag aac act ctt gtg gca tac aag tct        480
Ala Glu Arg Lys Glu Ala Ala Glu Asn Thr Leu Val Ala Tyr Lys Ser
145                 150                 155                 160
gcc cag gat att gca ctc gct gac ctg cct aca act cac ccg ata agg        528
Ala Gln Asp Ile Ala Leu Ala Asp Leu Pro Thr Thr His Pro Ile Arg
                165                 170                 175
ctt gga ctt gca ctg aac ttc tca gtg ttc tac tat gag ata ctg aac        576
Leu Gly Leu Ala Leu Asn Phe Ser Val Phe Tyr Tyr Glu Ile Leu Asn
            180                 185                 190
tca cca gac cgt gct tgc aac ctt gca aag cag gcg ttc gac gat gct        624
Ser Pro Asp Arg Ala Cys Asn Leu Ala Lys Gln Ala Phe Asp Asp Ala
        195                 200                 205
att gct gaa ctg gac act ctt ggc gag gag tct tac aag gac agc acc        672
Ile Ala Glu Leu Asp Thr Leu Gly Glu Glu Ser Tyr Lys Asp Ser Thr
    210                 215                 220
ttg atc atg caa ctt ctt cgt gac aat ctg act ctc tgg acc tct gac        720
Leu Ile Met Gln Leu Leu Arg Asp Asn Leu Thr Leu Trp Thr Ser Asp
225                 230                 235                 240
aat gcg gag gat ggt ggt gac gag atc aag gaa gca gcg aag cct gaa        768
Asn Ala Glu Asp Gly Gly Asp Glu Ile Lys Glu Ala Ala Lys Pro Glu
                245                 250                 255
gga gag ggc cac taa                                                    783
Gly Glu Gly His
            260
<210>172
<211>260
<212>PRT
<213>Oryza sativa
<400>172
Met Ser Pro Ala Glu Ala Ser Arg Glu Glu Asn Val Tyr Met Ala Lys
1               5                   10                  15
Leu Ala Glu Gln Ala Glu Arg Tyr Glu Glu Met Val Glu Phe Met Glu
            20                  25                  30
Lys Val Ala Lys Thr Thr Asp Val Gly Glu Leu Thr Val Glu Glu Arg
        35                  40                  45
Asn Leu Leu Ser Val Ala Tyr Lys Asn Val Ile Gly Ala Arg Arg Ala
    50                  55                  60
Ser Trp Arg Ile Ile Ser Ser Ile Glu Gln Lys Glu Glu Ser Arg Gly
65                  70                  75                  80
Asn Glu Ala Tyr Val Ala Ser Ile Lys Glu Tyr Arg Ser Arg Ile Glu
                85                  90                  95
Thr Glu Leu Ser Lys Ile Cys Asp Gly Ile Leu Lys Leu Leu Asp Ser
            100                 105                 110
His Leu Val Pro Ser Ala Thr Ala Ala Glu Ser Lys Val Phe Tyr Leu
        115                 120                 125
Lys Met Lys Gly Asp Tyr His Arg Tyr Leu Ala Glu Phe Lys Ser Gly
    130                 135                 140
Ala Glu Arg Lys Glu Ala Ala Glu Asn Thr Leu Val Ala Tyr Lys Ser
145                 150                 155                 160
Ala Gln Asp Ile Ala Leu Ala Asp Leu Pro Thr Thr His Pro Ile Arg
                165                 170                 175
Leu Gly Leu Ala Leu Asn Phe Ser Val Phe Tyr Tyr Glu Ile Leu Asn
            180                 185                 190
Ser Pro Asp Arg Ala Cys Asn Leu Ala Lys Gln Ala Phe Asp Asp Ala
        195                 200                 205
Ile Ala Glu Leu Asp Thr Leu Gly Glu Glu Ser Tyr Lys Asp Ser Thr
    210                 215                 220
Leu Ile Met Gln Leu Leu Arg Asp Asn Leu Thr Leu Trp Thr Ser Asp
225                 230                 235                 240
Asn Ala Glu Asp Gly Gly Asp Glu Ile Lys Glu Ala Ala Lys Pro Glu
                245                 250                 255
Gly Glu Gly His
            260
<210>173
<211>669
<212>DNA
<213>Oryza sativa
<220>
<221>CDS
<222>(1)..(669)
<400>173
atg ggt tct gaa gga cct tct ggt gtt acc gtt cac gtt act gga ttc         48
Met Gly Ser Glu Gly Pro Ser Gly Val Thr Val His Val Thr Gly Phe
1               5                   10                  15
aag aag ttc cat gga gtc gct gag aat ccg acg gag aag att gtg cgc         96
Lys Lys Phe His Gly Val Ala Glu Asn Pro Thr Glu Lys Ile Val Arg
            20                  25                  30
aat ctt gag tca ttt atg gaa aag aga ggg ttg cct aaa ggt tta aca        144
Asn Leu Glu Ser Phe Met Glu Lys Arg Gly Leu Pro Lys Gly Leu Thr
        35                  40                  45
ctt gga agt tgc act gtt ctt gag act gct ggg cag ggt ggg ctt ggt        192
Leu Gly Ser Cys Thr Val Leu Glu Thr Ala Gly Gln Gly Gly Leu Gly
    50                  55                  60
ccg ttg tat gaa gtg ttt gaa tca gcc atc gta gac aaa gag tat ggg        240
Pro Leu Tyr Glu Val Phe Glu Ser Ala Ile Val Asp Lys Glu Tyr Gly
65                  70                  75                  80
ttg aat gat cag ggg caa gtg att ctg ctc cat ttt gga gtc aac agt        288
Leu Asn Asp Gln Gly Gln Val Ile Leu Leu His Phe Gly Val Asn Ser
                85                  90                  95
ggc aca aca agg ttt gcc ctt gag aat caa gct att aat gaa gct acc        336
Gly Thr Thr Arg Phe Ala Leu Glu Asn Gln Ala Ile Asn Glu Ala Thr
            100                 105                 110
ttc cgt tgc cct gat gag ctg gga tgg aaa cca cag agg gcc cct att        384
Phe Arg Cys Pro Asp Glu Leu Gly Trp Lys Pro Gln Arg Ala Pro Ile
        115                 120                 125
gtg tca tct gat gga agc atc tca aat tta aga aag acc act gtg cct        432
Val Ser Ser Asp Gly Ser Ile Ser Asn Leu Arg Lys Thr Thr Val Pro
    130                 135                 140
gtg aat gaa gtg aac aag tcc cta caa cag atg ggc ttc gat gtg gcg        480
Val Asn Glu Val Asn Lys Ser Leu Gln Gln Met Gly Phe Asp Val Ala
145                 150                 155                 160
cct tcg gat gac gct ggt cga ttc gta tgc aac tat gtc tat tac caa        528
Pro Ser Asp Asp Ala Gly Arg Phe Val Cys Asn Tyr Val Tyr Tyr Gln
                165                 170                 175
tct ctt agg ttc gca gaa cag cgc ggt atc aag tct ttg ttc gtc cat        576
Ser Leu Arg Phe Ala Glu Gln Arg Gly Ile Lys Ser Leu Phe Val His
            180                 185                 190
ttc ccc ctc ttc acg acg att agt gag gaa gtt cag atg aac ttc gtc        624
Phe Pro Leu Phe Thr Thr Ile Ser Glu Glu Val Gln Met Asn Phe Val
        195                 200                 205
gca acc ctc ctc gaa gtt ctt gct tcc cag aac tat gca cag taa            669
Ala Thr Leu Leu Glu Val Leu Ala Ser Gln Asn Tyr Ala Gln
    210                 215                 220
<210>174
<211>222
<212>PRT
<213>Oryza sativa
<400>174
Met Gly Ser Glu Gly Pro Ser Gly Val Thr Val His Val Thr Gly Phe
1               5                   10                  15
Lys Lys Phe His Gly Val Ala Glu Asn Pro Thr Glu Lys Ile Val Arg
            20                  25                  30
Asn Leu Glu Ser Phe Met Glu Lys Arg Gly Leu Pro Lys Gly Leu Thr
        35                  40                  45
Leu Gly Ser Cys Thr Val Leu Glu Thr Ala Gly Gln Gly Gly Leu Gly
    50                  55                  60
Pro Leu Tyr Glu Val Phe Glu Ser Ala Ile Val Asp Lys Glu Tyr Gly
65                  70                  75                  80
Leu Asn Asp Gln Gly Gln Val Ile Leu Leu His Phe Gly Val Asn Ser
                85                  90                  95
Gly Thr Thr Arg Phe Ala Leu Glu Asn Gln Ala Ile Asn Glu Ala Thr
            100                 105                 110
Phe Arg Cys Pro Asp Glu Leu Gly Trp Lys Pro Gln Arg Ala Pro Ile
        115                 120                 125
Val Ser Ser Asp Gly Ser Ile Ser Asn Leu Arg Lys Thr Thr Val Pro
    130                 135                 140
Val Asn Glu Val Asn Lys Ser Leu Gln Gln Met Gly Phe Asp Val Ala
145                 150                 155                 160
Pro Ser Asp Asp Ala Gly Arg Phe Val Cys Asn Tyr Val Tyr Tyr Gln
                165                 170                 175
Ser Leu Arg Phe Ala Glu Gln Arg Gly Ile Lys Ser Leu Phe Val His
            180                 185                 190
Phe Pro Leu Phe Thr Thr Ile Ser Glu Glu Val Gln Met Asn Phe Val
        195                 200                 205
Ala Thr Leu Leu Glu Val Leu Ala Ser Gln Asn Tyr Ala Gln
    210                 215                 220
高效检索全球专利

专利汇是专利免费检索,专利查询,专利分析-国家发明专利查询检索分析平台,是提供专利分析,专利查询,专利检索等数据服务功能的知识产权数据服务商。

我们的产品包含105个国家的1.26亿组数据,免费查、免费专利分析。

申请试用

分析报告

专利汇分析报告产品可以对行业情报数据进行梳理分析,涉及维度包括行业专利基本状况分析、地域分析、技术分析、发明人分析、申请人分析、专利权人分析、失效分析、核心专利分析、法律分析、研发重点分析、企业专利处境分析、技术处境分析、专利寿命分析、企业定位分析、引证分析等超过60个分析角度,系统通过AI智能系统对图表进行解读,只需1分钟,一键生成行业专利分析报告。

申请试用

QQ群二维码
意见反馈