本发明涉及膳食脂类，特别用于婴儿制剂的膳食脂类。本发明涉 及接近人类乳脂类的脂类组合物。

人乳脂肪基本上包含三酰甘油(TAG)，其脂肪酸结构，组成及 分布是特有的。特别是，其特征在于在三酰甘油有两个长链多聚不饱 和脂肪酸(LC-PUFA)即：主要位于三酰甘油第二位的花生四烯酸(AA， C20：4，n-6)和二十二碳六烯酸(DHA，C22：6，n-3)，其特征还 在于富含饱和(SFA)棕榈酸(P，C16：0)和P主要位于三酰甘油 2-位的事实。

用于婴儿制剂的脂肪组合物接近人乳脂肪而且这类组合物的制 备过程在专利EP-B-94／01306)和在专利申请WO94／26855(PCT／EP 94／01306)以及WO94／26854(PCT／EP94／01304)中被描述。这些组 合物包含TAG的混合物，其中位于三酰甘油的2-位的50％以上的脂肪 酸是SFA，主要是P，并且其中三酰甘油在1，3-位含中链C8-C14不饱 和脂肪酸以及饱和脂肪酸(MCFA)。

制备这些组合物的方法(该方法在EP-B-209327中有描述)在于 由一个混合物的1，3-区域特异性脂肪酶催化的酯交换，该混合物一 方面由含80％三硬脂精和20％1，3-二棕榈酰-2-油精组成，而另一方 面由含大量不饱和脂肪酸的游离脂肪酸混合物组成。在1，3区域特 异性脂肪酶的作用下，中链不饱和与／或饱和脂肪酸残基被加入到2- 棕榈酰-甘油酯的1，3-位。然后，粗混合物的游离脂肪酸通过蒸汽 蒸馏法被除去。所产生的合成TAG混合物最后与各种植物油混合。

在WO94／26855中，用1，3-区域特异性脂肪酶对上述以一定比 例与植物油混合的合成TAG混合物进行酯交换。

在WO94／26854中，在酶处理除去二甘油酯后的适当时候，通过 用1，3-区域特异性脂肪酶在富含单或双不饱和酸的油中酯交换从上 述合成TAG混合物中部分除去三饱和TAG。

该已知方法有些缺陷。

-由于大多数常用的脂肪酶对聚不饱和脂肪酸(PUFA)，特别是 对LC-PUFA，有低活性，很难用1，3-区域特异性脂肪酶将需要量的 这些脂肪酸，特别是DHA结合到TAG中。因此，为达到适合的结合度， 必须使用大大过量的脂肪酸，例如以浓缩的形式，和长的反应时间。 PUFA的浓缩物是很昂贵的。长反应时间能引起PUFA的明显氧化，PUFA 在其为游离脂肪酸形式时特别易于氧化。这种氧化降低PUFA的营养 价值并可产生有害健康的降解产物。

-而且，使用1，3-区域特异性脂肪酶产生过量的三饱和TAG和 二甘油酯。需要后续的酶处理，特别是要从粗产物中除去过量的三饱 和TAG，这使得该方法复杂而又昂贵。

-最后，所得到的脂酯混合物无论如何必须与其他脂肪混合以便 结合到人乳脂肪的组合物中。

本发明的目的是提供一种合成的TAG组合物，该组合物的组成与 结构接近人乳相关成分，所使用的掺入PUFA的合成方法不引起所述 PUFA明显的破坏性氧化。

因此，本发明涉及一种合成液体组合物，该组合物中脂肪酸的成 分与分布接近人乳脂肪，其特征在于：

-所述组合物含低于2％重量比的游离脂肪酸，

-按重量计，三酰甘油的脂肪酸含：

-35％到55％的饱和脂肪酸，其中18％到36％的棕榈酸，2到40％ 的辛酸和癸酸，最多10％月桂酸和最多10％肉豆蔻酸，

-30到45％的单不饱和脂肪酸，

-9到22％的多聚不饱和脂肪酸，其中含花生四烯酸的长链n-6 聚不饱和脂肪酸低于2％，而含二十二碳六烯酸的长链n-3不饱和脂 肪酸低于1％，并且n-6∶n-3脂肪酸之比率是5∶1到15∶1，

-棕榈酸主要在三酰甘油的2位，而花生四烯酸和二十二碳六烯 酸分布在三酰甘油的1-，2-，和3-位。

AA和DHA酸可主要在三酰甘油的2位。

由于这更主要是为成熟前婴儿食用而设计的，本发明的脂类组合 物是辛酸和癸酸优选占三酰甘油脂肪酸重量的2到10％那类。

本发明还涉及上述脂类组合物的制备方法，其以如下连续步骤为 特征：

1)含富集棕榈酸的棕榈油，富不饱和亚麻酸和α亚麻酸脂肪酸 的植物油，一种作为花生四烯酸来源的油，一种作为二十二碳六烯酸 来源的油按一定比例组成的脂类混合物被非区域专一酯交换，以获 得所需要的三酰甘油1-，2-和3-位之间脂肪酸残基随机分布的脂肪 酸组合物。

2)用1，3-区域特异性脂肪酶使步骤1)的混合物与主要含中链 脂肪酸和油酸的游离脂肪酸混合物进行酯交换，和

3)从步骤2)反应物中除去游离脂肪酸。

步骤1)的目的是增加P在TAG2位的数量并在TAG的1-，2-， 3-位掺入PUFA，特别是LC-PUFA如DHA和AA。初始混合物富含棕榈 酸，例如棕榈硬脂精以使TAG的2-位有约40％的P。非区域特异性酯 交换作用可由非区域特异性脂肪酶催化通过酶反应途径或优选由化 学催化剂催化通过化学途径完成。通过此反应，存在于TAG不同位置 上的天然脂类中的脂肪酸的非随机分布被转换成随机分布，就是说， 脂肪酸在3个位置间被均等重新分配。在此第一步，位置2的P的含 量超过约42％，十分类似于人乳中整个P的存在。若将1-和3-位的P 纳入考虑，则存在的P超过了人乳。

PUFA脂肪酸，特别是LC-PUFA以TAG的形式经历了重排反应， 它们比游离脂肪酸的混合物更稳定，并在有限的反应时间，较低温度 和惰性气体例如氮气中进行。另一方面根据已有技术，应首先制备 意欲作为脂解底物的脂肪酸混合物，这也会部分的引起它们的氧化降 解。

与同样PUFA脂肪酸组合物的单一脂类混合物相比，该反应产生 的脂类组合物有明显提高的氧化稳定性。这可能是TAG各种位置之间 PUFA脂肪酸分布的结果。

步骤2)的目的是选择性地用其他脂肪酸，特别是MCFA和油酸 (O)，而不是PUFA置换1，3位的P。为达此目的，利用动态分辨 的优点，就是说事实上大多数1，3-区域特异性脂肪酶(一般是遗传 工程修饰的或其他方式例如从Mucor miehei和Candida cylindracea中得到的)和胰脂肪酶，优先对MCFA，P和O发生反应， 并以区别方式对含4，5和6双键例如DHA和AA发生反应。在这种方 式中，过量的P被迅速交换，留下PUFA，特别是DHA在1-和3-位实 际上无任何改变。

据观察，在随后的游离脂肪酸分离之后，步骤2获得的混合物之 TAG的氧化稳定性仍保留着甚至被增强。

根据本发明，该方法的第二步之后，必须除去过剩的游离脂肪酸 和在交换过程中形成的物质，它们可能受到氧化作用。为达此目的， 可以使用任何已知方法例如常规的中和法或真空下的蒸汽蒸馏法。

此第三步优选通过进行有控制的游离脂肪酸中和法来完成，并因 此有选择精炼，水解作用最小化和皂化。有选择精练的原理是在水- 醇相进行操作，并轻微搅拌，这样在脂相和与脂相不混溶的水醇相之 间产生游离脂肪酸部分，同时逐渐加入一种碱例如浓缩的水合氢氧化 钠或氢氧化钾溶液到水醇相中，例如通过调pH计到一设置点，例如 约9．5的方法。肥皂被形成，它们在水-醇相中被生产时是增溶的， 由此在平衡和和脂相的逐步脱酸化之间产生移动。所选择的pH使酚 衍生物的中和作用达最小。所选的反应温度高于脂类的熔点并低于水 -醇混合物的沸点。在抽提出全部脂肪酸时，pH达到稳定，表示该反 应的终止。在中和作用后，用倾析法分开两相并回收脱酸化脂相，从 中除去乙醇，例如通过真空中挥发的方法，并除去残留皂，例如通过 用水-醇溶液洗或通过用吸附剂处理，特别是用无定型硅胶处理。

本发明还涉及含适当水解的蛋白质，碳水化合物，脂类和适当维 生素和微量元素的婴儿食品，其特征在于，按干物质重量计，该食品 含15到35％的脂类，其中50到100％由上述脂类组合物构成。

这类婴儿食品可制成才落入上述脂类组合物的液体或粉末形 式，例如对液态产品或干燥品来说，湿混各种成分，随后灭菌并防腐 包装，对粉末来说通过喷雾干燥或通过干燥混合。

以下实施例解释本发明。其中，成分和百分数用重量表示除非另 有说明。

实施例1

1．1)化学酯交换

一种脂类混合物(其性质及成分在下表1中给出)被用做起始物 质：

表1 油／脂肪 混合物(％) 来源 特征 鱼油 2 Nippon Suisan Kaisha 富含DHA AA的油来源 1 Gist- Brocades AA，37％(单细 胞有机体的 油) 豆油 10 市售 源于ALA 棕榈硬脂精 5 Loders Croklaan P，75％ 棕榈油 82 Morgia 源于P

含24克鱼油(24．6％DHA和6．4％EPA)的上述脂类混合物，作为 AA来源(含37％AA)的油12克，60克棕榈硬脂精(含75％的P)， 984克棕榈油和120克豆油(含LA和ALA)在0．5％甲醇钠做催化剂 存在下，于50℃被随机酯交换，在氮气下持续搅拌4小时。然后用2 升热水洗反应混合物以除去肥皂，然后在50℃，20巴真空下干燥。

为避免氧化反应，可向其加入乙二胺四乙酸钠盐(EDTA-NA3)。

1．2)1，3-区域特异性酶促酸水解

酸水解是在1，3-区域特异性脂肪酶催化下一种混合物的重排， 该混合物由前述步骤1的产物和下表2给出的脂肪酸成分的混合物组 成：

表2 脂肪酸 ％ C8∶0 10 C10∶0 15 C12∶0 10 C14∶0 1．6 C16∶0 3 C16∶1 3．2 C18∶0 1．7 C18∶1 45 C18∶2 6．3 C18∶3(α) 0．3 其他 3．9

940克前述步骤1的产物和940克市售油酸与含上述表2给出成 分的C8-12：O酸的混合物由相对于底物10％的固定化1， 3-区域特异 性脂肪酶(Lipozyme，IM 60，Novo)催化进行酯交换。通过加入6％ 水调整脂肪酶的水含量并使其在用前放置10小时。然后在40℃，氮 气下反应5小时。反应后，通过过滤除去脂肪酶并回收含TAG和游离 脂肪酸的粗混合物。

1．3)控制中和反应以除去游离脂肪酸

前述步骤的1．4公斤粗混合物和3．5升90％乙醇被引入反应器并 在40℃，一个氮气压下轻微搅拌。连续加入670克25％水合氢氧化钾 溶液到其中同时通过调pH在设定值9．5保持反应基质的pH在8．5 和9．5之间。肥皂被形成，它们在与脂相不混溶的水-醇相中形成时 被增溶，脂相与水-醇相之间的脂肪酸部分发生平衡移动向水-醇相， 并因此产生脂相的逐步脱酸化。pH稳定时表示全部的脂肪酸已被抽 提出。然后停止搅拌；较轻的水-醇相与脂相分开并回收脂相。

在三酰甘油甲基化(FAMES)后，通过所述脂肪酸甲酯的气-液层 析确定所得产物中的脂肪酸成分。

为确定脂肪酸在TAG的2位和1，3-位的分布，用胰脂肪酶(IUPAC 2．210)进行脂解。

主要脂肪酸分析及其在所得混合物中的分布的结果在下表3中 给出：  脂肪酸(fames)  脂肪酸占总    量的％   (fames)   TAG2位的  脂肪酸(％，    分析值)   TAG1,3位   的脂肪酸  (％，计算     值)  C8:0     3.07     0.06     4.56  C10:0     5.08     0.21     7.48  C12:0     4.04     0.39     5.83  C14:0     1.2     1.03     1.28  C16:0     28.13     40.86     21.88  C18:0     3.33     4.62     2.7  C18:1     37.83     34.1     39.66  C18:2     10.93     12.57     10.12  C18:3,n-3(alpha)     0.56     0.6     0.54  C20:4,n-6(AA)     0.26     0.34     0.22  C22:5,n-3(EPA)     0.18     0.2     0.17  C22:6,n-3(DHA)     0.42     0.35     0.46  其他     4.97     4.67     5.1

据观察，脂肪酸的组成及其在TAG上的分布十分类似于人乳。

而且，在80℃，空气流速150毫升／分钟诱导期间，用Omnion (R)仪USA进行加速氧化反应测试中检测的所得产物氧化稳定性 (OSI)对应于160小时的指标，就是说约比起始脂类混合物100小 时测定的值高1．5-2倍。

脂肪的固体成分由脉冲核磁共振(NMR，IUPAC 2．150 6．2．2．2) 确定如下：

在温度(℃)时显示的固体含量(％)

N-5     40．3

N-10    29．9

N-15    19

N-20    10．4

N-30    1．2

N-35    0

前述结果显示无明显数量的不需要的三不饱和TAG。

实施例2

本方法如实施例1，步骤1)中的描述进行，不同的是初始脂类 混合物成分在下表4中给出：

表4 油／脂肪 混合物(％) 来源 特征 鱼油 2 Nippon Suisan Kaisha 富含 DHA AA 的油来源 1．5 Gist-Brocades AA，37％(单细 胞有机体的油) 豆油 15 市售 源于ALA 棕榈油 81．5 Morgia 源于P

然后，酶促酯交换如实施例1，步骤2中的描述进行，不同的是 游离脂肪酸混合物的组合物在下表5中定义并且TAG／脂肪酸混合物 比率是70∶30。

表5     脂肪酸     ％     C10:0     12     C12:0     15     C14:0     6.7     C16:0     3.2     C16:1     3.5     C18:0     1.8     C18:1     48.6     C18:2     6.7     C18:3(α)     0.3     其他     2.2

主要脂肪酸及其在所得混合物中分布的分析结果在下表6中给 出：

表6     脂肪酸(fames)     脂肪酸占总量的％(fames)     C10:0     2.89     C12:0     4.04     C14:0     2.32     C16:0     28.84     C18:0     4.62     C18:1     38.65     C18:2     13.23     C18:3,n-3,(α)     0.94     C20:4,n-6(AA)     0.48     C20:5,n-3(EPA)     0.21     C22:6,n-3(DHA)     0.36     其他     3.42

据观察，脂肪酸组合物及其在TAG上的分布十分类似于人乳脂 肪。