具有抗炎活性的人参二醇型三萜皂苷
阅读：1042发布：2020-05-27
专利汇可以提供具有抗炎活性的人参二醇型三萜皂苷专利检索，专利查询，专利分析的服务。并且本 发明 利用多种分离手段，包括正反相 硅 胶柱层析、大孔 吸附 树脂 柱层析、凝胶柱层析和制备高效液相色谱法等，从三七叶中分离得到了包括7个新化合物在内的人参二醇型三萜皂苷类化合物。这7个新化合物经活性测定实验表明具有抗炎活性，为今后进一步的药理活性筛选及临床研究开发出疗效确切、毒 副作用 小的抗炎药物奠定了物质 基础 。，下面是具有抗炎活性的人参二醇型三萜皂苷专利的具体信息内容。
1.下述通式(I)所示的人参二醇型三萜皂苷或其可药用的盐，
通式(I)中，
R1表示氢原子、卤素原子、C1～C6烷基、C1～C6卤代烷基、C1～C6烷氧基、C1～C6卤代烷氧基、C3～C6环烷基、羟基、氨基、C2～C6烯基、C2～C6炔基、C1～C6烷基羰基、醛基C1～C6烷基、羧基C1～C6烷基、或过氧基；
R2、R3、R4及R5各自独立地表示氢原子、C1～C6烷基、C1～C6卤代烷基、C3～C6环烷基、C2～C6烯基、C2～C6炔基、或糖基。
2.下述通式(II)所示的人参二醇型三萜皂苷或其可药用的盐，
通式(II)中，
R6、R7、R8及R9各自独立地表示氢原子、C1～C6烷基、C1～C6卤代烷基、C3～C6环烷基、C2～C6烯基、C2～C6炔基、或糖基。
3.根据权利要求1或2所述的人参二醇型三萜皂苷或其可药用的盐，其中，所述糖基包括单糖基或二糖基。
4.根据权利要求3所述的人参二醇型三萜皂苷或其可药用的盐，其中，
所述单糖基选自由阿拉伯糖基、核糖基、木糖基、来苏糖基、葡萄糖基、阿洛糖基、甘露糖基、鼠李糖基、果糖基、半乳糖基、芹糖基、葡萄糖醛酸基、半乳糖醛酸基所组成的组中的至少一者；
所述二糖基选自由乳糖基、蔗糖基和麦芽糖基所组成的组中的至少一者。
5.根据权利要求1所述的人参二醇型三萜皂苷或其可药用的盐，其中，该人参二醇型三萜皂苷为下述结构式1至结构式4所示的化合物中的任意一者：
[结构式1]
[结构式2]
[结构式3]
[结构式4]
6.根据权利要求2所述的人参二醇型三萜皂苷或其可药用的盐，其中，该人参二醇型三萜皂苷为下述结构式5至结构式7所示的化合物中的任意一者：
[结构式5]
[结构式6]
[结构式7]
7.一种三七叶提取物，包含权利要求1～6中任意一项所述的人参二醇型三萜皂苷或其可药用的盐。
8.一种药物组合物，包含治疗有效量的权利要求1～6中任意一项所述的人参二醇型三萜皂苷或其可药用的盐、以及药学可接受的赋形剂。
9.一种化妆品组合物，包含权利要求1～6中任意一项所述的人参二醇型三萜皂苷或其可药用的盐、以及至少一种生理学上可接受的赋形剂。
具有抗炎活性的人参二醇型三萜皂苷
技术领域
[0001] 本发明属于天然药物领域，具体而言，涉及一类具有抗炎活性的新型人参二醇型三萜皂苷。
背景技术
[0002] 炎症是具有血管系统的活体组织对各种损伤因子的刺激所发生的一种以防御反应为主的基本病理过程。任何能够引起组织损伤的因素都可成为炎症的原因。炎症的基本病理变化通常包括局部组织的变质、渗出和增生等。炎症反应与糖尿病、肿瘤、心脑血管疾病等多种疾病的发生发展密切相关。
[0003] 三七Panax notoginseng(Burk.)F.H.Chen为五加科人参属植物，又名田七、血参、田三七、滇三七、参三七，主产于云南文山州，在广西、广东等地亦有分布。作为传统常用名贵药材，三七不仅应用于治疗跌打损伤，民间也常用于预防血栓。
[0004] 三七的入药部位主要是其根和根茎，但是由于适宜生长环境较为局限，导致三七资源不足。为了扩大其资源的利用度，有必要对三七的除了根和根茎之外的其它部位(例如，三七叶)的化学成分及药理活性进行研究。
[0005] 另外，三七皂苷为三七的主要活性成分，具有抗炎、抗氧化、抗癌、抗焦虑和抑郁、促淋巴管及血管生成、抗纤维化以及神经保护等作用，在临床上可用于治疗心脑血管疾病、肝损伤、缺血性再灌注损伤以及糖尿病等症。迄今为止，从三七中共分离鉴定了180多种三萜皂苷类化合物，主要为达玛烷型三萜皂苷。根据其皂苷元C-6位有无羟基取代可分为两类：原人参二醇型(I型)和原人参三醇型(II型)。其中，三七根中主要含有II型皂苷；三七叶中以I型皂苷为主。由于I型和II型皂苷药理作用不同，因而也有必要对三七叶的成分进行研究。
发明内容
[0006] 本发明的目的在于通过多种提取、分离手段，从三七叶中提取、分离并鉴定具有抗炎活性的活性单体化合物。
[0008] 具体而言，本发明提供：
[0009] (1)下述通式(I)所示的人参二醇型三萜皂苷或其可药用的盐，
[0010]
[0011] R1表示氢原子、卤素原子、C1～C6烷基、C1～C6卤代烷基、C1～C6烷氧基、C1～C6卤代烷氧基、C3～C6环烷基、羟基、氨基、C2～C6烯基、C2～C6炔基、C1～C6烷基羰基、醛基C1～C6烷基、羧基C1～C6烷基、或过氧基；
[0012] R2、R3、R4及R5各自独立地表示氢原子、C1～C6烷基、C1～C6卤代烷基、C3～C6环烷基、C2～C6烯基、C2～C6炔基、或糖基。
[0013] (2)下述通式(II)所示的人参二醇型三萜皂苷或其可药用的盐，
[0014]
[0015] R6、R7、R8及R9各自独立地表示氢原子、C1～C6烷基、C1～C6卤代烷基、C3～C6环烷基、C2～C6烯基、C2～C6炔基、或糖基。
[0016] (3)(3β,12β,20S)-三羟基-25-过氧基达玛-23-烯-3-O-β-D-吡喃葡萄糖基-20-O-α-L-呋喃阿拉伯糖基(1→6)-β-D-吡喃葡萄糖苷(三七叶皂苷NL-A1)，具有结构式1所示的结构：
[0017] [结构式1]
[0018]
[0019] (4)(3β,12β,20S)-三羟基-25-过氧基达玛-23-烯-3-O-β-D-吡喃葡萄糖基-20-O-β-D-吡喃木糖基(1→6)-β-D-吡喃葡萄糖苷(三七叶皂苷NL-A2)，具有结构式2所示的结构：
[0020] [结构式2]
[0021]
[0022] (5)(3β,12β,20S,25)-四羟基达玛-23-烯-3-O-β-D-吡喃葡萄糖基-20-O-α-L-呋喃阿拉伯糖基(1→6)-β-D-吡喃葡萄糖苷(三七叶皂苷NL-B1)，具有结构式3所示的结构：
[0023] [结构式3]
[0024]
[0025] (6)(3β,12β,20S,25)-四羟基达玛-23-烯-3-O-[β-D-吡喃木糖基(1→2)-β-D-吡喃葡萄糖基(1→2)-β-D-吡喃葡萄糖基]-20-O-α-L-呋喃阿拉伯糖基(1→6)-β-D-吡喃葡萄糖苷(三七叶皂苷NL-B2)，具有结构式4所示的结构：
[0026] [结构式4]
[0027]
[0028] (7)(3β,12β,20S)-三羟基达玛-25-烯-24-酮-3-O-β-D-吡喃葡萄糖基-20-O-α-L-呋喃阿拉伯糖基(1→6)-β-D-吡喃葡萄糖苷(三七叶皂苷NL-C1)，具有结构式5所示的结构：
[0029] [结构式5]
[0030]
[0031] (8)(3β,12β,20S)-三羟基达玛-25-烯-24-酮-3-O-β-D-吡喃葡萄糖基-20-O-β-D-吡喃木糖基(1→6)-β-D-吡喃葡萄糖苷(三七叶皂苷NL-C2)，具有结构式6所示的结构：
[0032] [结构式6]
[0033]
[0034] (9)(3β,12β,20S)-三羟基达玛-25-烯-24-酮-3-O-[β-D-吡喃葡萄糖基(1→2)-β-D-吡喃葡萄糖基]-20-O-β-D-吡喃木糖基(1→6)-β-D-吡喃葡萄糖苷(三七叶皂苷NL-C3)，具有结构式7所示的结构：
[0035] [结构式7]
[0036]
[0037] 本发明还提供一种三七叶提取物，其包含上述(1)至(9)中任意一项所述的人参二醇型三萜皂苷或其可药用的盐。
[0038] 另外，本发明还提供一种药物组合物，其包含治疗有效量的上述(1)至(9)中任意一项所述的人参二醇型三萜皂苷或其可药用的盐、以及药学可接受的赋形剂。
[0039] 本发明进一步提供一种化妆品组合物，其包含上述(1)至(9)中任意一项所述的人参二醇型三萜皂苷或其可药用的盐、以及至少一种生理学上可接受的赋形剂。
[0040] 发明的效果
[0041] 本发明提供的人参二醇型三萜皂苷，特别是三七叶皂苷NL-A1(以下简称为“化合物1”)、三七叶皂苷NL-A2(以下简称为“化合物2”)、三七叶皂苷NL-B1(以下简称为“化合物3”)、三七叶皂苷NL-B2(以下简称为“化合物4”)、三七叶皂苷NL-C1(以下简称为“化合物5”)、三七叶皂苷NL-C2(以下简称为“化合物6”)、和三七叶皂苷NL-C3(以下简称为“化合物7”)这7个化合物，均能抑制脂多糖诱导的RAW264.7细胞中一氧化氮的释放，且具有浓度依赖性，提示它们具有抗炎作用，因而预期可以作为抗炎药物的候选化合物。
附图说明
附图说明
[0042] 图1A至图1G中示出了各化合物1～7在10、25和50μM浓度下对RAW 264.7细胞释放NO的抑制作用。
[0043] 符号说明
[0044] N：正常组；LPS：脂多糖(模型组)；DEX：地塞米松(阳性药对照组)
具体实施方式
[0045] 以下通过具体实施方式的描述并参照附图对本发明作进一步说明，但这并非是对本发明的限制，本领域技术人员根据本发明的基本思想，可以做出各种修改或改进，但是只要不脱离本发明的基本思想，均在本发明的范围之内。
[0047] 本发明中，“卤素原子”表示氟原子、氯原子、溴原子、碘原子。
[0049] 本发明中，“C1～C6烷基”表示碳原子数为1～6的直链或支链烷基，例如，可列举甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、仲丁基、异丁基、叔丁基、正戊基、新戊基、1-甲基丁基、2-甲基丁基、3-甲基丁基、1-乙基丙基、1,1-二甲基丙基、1,2-二甲基丙基、正己基、1-甲基戊基、2-甲基戊基、3-甲基戊基、4-甲基戊基、1-乙基丁基、2-乙基丁基、1,1-二甲基丁基、1,2-二甲基丁基、1,3-二甲基丁基、2,2-二甲基丁基、2,3-二甲基丁基、3,3-二甲基丁基、1,1,2-三甲基丙基、1,2,2-三甲基丙基、1-乙基-1-甲基丙基或1-乙基-2-甲基丙基等基。
[0050] 本发明中，“C2～C6烯基”表示碳原子数为2～6的直链或支链烯基，例如，可列举出乙烯基、1-丙烯基、2-丙烯基、1-丁烯基、2-丁烯基、3-丁烯基、2-甲基-1-丙烯基、1,3-丁二烯基、1-戊烯基、2-戊烯基、1-甲基-1-丁烯基、3-戊烯基、1-甲基-2-丁烯基、4-戊烯基、1-甲基-3-丁烯基、1,2-二甲基-2-丙烯基、2-甲基-2-丁烯基、1,2-二甲基-1-丙烯基、1,3-戊二烯基、1-己烯基、2-己烯基、1-甲基-1-戊烯基、3-己烯基、4-己烯基、5-己烯基、1-甲基-4-戊烯基、1-乙基-3-丁烯基、1-(异丁基)乙烯基、1-乙基-1-甲基-2-丙烯基、1-(异丙基)-2-丙烯基、1,3-二甲基-2-丁烯基、3-甲基-4-戊烯基、1,1,2-三甲基-2-丙烯基或1,5-己二烯基等基。
[0051] 本发明中，“C2～C6炔基”表示碳原子数为2～6的直链或支链炔基，例如，可列举出乙炔基、1-丙炔基、2-丙炔基、1-丁炔基、2-丁炔基、3-丁炔基、1-戊炔基、2-戊炔基、3-戊炔基、1-甲基-2-丁炔基、4-戊炔基、1-甲基-3-丁炔基、1-己炔基、2-己炔基、3-己炔基、1-甲基-2-戊炔基、5-己炔基、1-乙基-3-丁炔基、1-乙基-1-甲基-2-丙炔基、或1,1-二甲基-2-丁炔基等基。
[0052] 本发明中，“C1～C6卤代烷基”表示被相同或不同的1～6个卤素原子取代的碳原子数为1～6的直链或支链烷基，例如可列举出：氟甲基、二氟甲基、溴甲基、二溴甲基、碘甲基、氯二氟甲基、1-氟乙基、1,1-二氟乙基、2,2,2-三氟乙基、1,1,2,2-四氟乙基、五氟乙基、1-氟丙基、1,1-二氟丙基、3,3,3-三氟丙基、1-溴丙基、1-氟丁基、4,4-二氟丁基、4,4,4-三氟-3-甲基丁基、2,2,3,4,4,4-六氟丁基、1-氯丁基、1-溴丁基、1-碘丁基、1-氟戊基、5,5,5-三氟戊基、1-氯戊基、5,5,5-三氯戊基、1-溴戊基、1-氟己基、6,6,6-三氟己基、1-氯己基或6-碘己基等基。
[0053] 本发明中，“C1～C6烷氧基”表示烷基部分为上述定义的(C1～C6烷基)-O-基，例如，可列举出甲氧基、乙氧基、正丙氧基、异丙氧基、正丁氧基、异丁氧基、仲丁氧基、叔丁氧基、正戊氧基、1-甲基丁氧基、2-甲基丁氧基、3-甲基丁氧基、1-乙基丙氧基、1,1-二甲基丙氧基、1,2-二甲基丙氧基或正己基氧基等基。
[0054] 本发明中，“C1～C6卤代烷氧基”表示卤代烷基部分为上述定义的(C1～C6卤代烷)-O-基，例如，可列举出二氟甲氧基、二氯甲氧基、三氟甲氧基、三氯甲氧基、三溴甲氧基、2-氟乙氧基、1-氯乙氧基、1-溴乙氧基、2,2-二氟乙氧基、2,2-二氯乙氧基、2,2,2-三氟乙氧基、2,2,2-三氯乙氧基、1,1,2,2-四氟乙氧基、1-氯丙氧基、2-溴丙氧基、2-溴-1-甲基乙氧基、
3-碘丙氧基、2,3-二氯丙氧基、2,3-二溴丙氧基、3,3,3-三氟丙氧基、1-溴-3,3,3-三氟丙氧基、2,2,3,3,3-五氟丙氧基、2,2,2-三氟-1-三氟甲基乙氧基、2-氯丁氧基、4-溴丁氧基、3-溴-2-甲基丙氧基、4,4,4-三氟丁氧基、5,5,5-三氟戊氧基、或4,4,5,5,5-五氟戊氧基等基。
3-碘丙氧基、2,3-二氯丙氧基、2,3-二溴丙氧基、3,3,3-三氟丙氧基、1-溴-3,3,3-三氟丙氧基、2,2,3,3,3-五氟丙氧基、2,2,2-三氟-1-三氟甲基乙氧基、2-氯丁氧基、4-溴丁氧基、3-溴-2-甲基丙氧基、4,4,4-三氟丁氧基、5,5,5-三氟戊氧基、或4,4,5,5,5-五氟戊氧基等基。
[0055] 本发明中，“C3～C6环烷基”表示碳原子数为3～6的环烷基，例如，可列举出环丙基、环丁基、环戊基或环己基等基。
[0056] 本发明中，“C1～C6烷基羰基”表示烷基部分为上述定义的(C1～C6烷基)-C(＝O)-基，例如，可列举出甲基羰基、乙基羰基、正丙基羰基、异丙基羰基、正丁基羰基、异丁基羰基、仲丁基羰基、叔丁基羰基、正戊基羰基、2-甲基丁基羰基、2,2-二甲基丙基羰基、或正己基羰基等基。
[0057] 本发明中，“醛基C1～C6烷基”表示烷基部分为上述定义的H-C(＝O)-(C1～C6烷基)-基，例如，可列举出甲醛基、醛基甲基、醛基乙基、醛基正丙基、醛基异丙基、醛基正丁基、醛基异丁基、醛基仲丁基、醛基叔丁基、醛基正戊基、醛基2-甲基丁基、醛基2,2-二甲基丙基、或醛基正己基等基。
[0058] 本发明中，“羧基C1～C6烷基”表示烷基部分为上述定义的HO-C(＝O)-(C1～C6烷基)-基，例如，可列举出甲羧基、羧基甲基、羧基乙基、羧基正丙基、羧基异丙基、羧基正丁基、羧基异丁基、羧基仲丁基、羧基叔丁基、羧基正戊基、或羧基正己基等基。
[0059] 本发明中，糖基包括单糖基、或二糖基。
[0060] 单糖是多羟基醛或酮类化合物，以五碳糖和六碳糖最常见。五碳醛糖包括L-阿拉伯糖、D-木糖、D-来苏糖、D-核糖。六碳醛糖包括D-葡萄糖、D-甘露糖、D-阿洛糖、D-半乳糖。六碳酮糖包括D-果糖、L-山梨糖。其中，优选为D-葡萄糖、D-木糖、L-阿拉伯糖。
[0061] 另外，作为单糖分子的一个羟基被氢原子取代的单糖，常见的有6-去氧糖(甲基五碳糖)，例如包括L-鼠李糖。
[0062] 单糖分子中的伯醇羟基氧化成羧基，从而形成为糖醛酸，例如包括葡萄糖醛酸和半乳糖醛酸。
[0063] 糖链中含有支链的单糖类称为支碳链糖，例如包括D-芹糖。
[0064] 二糖又名双糖，由二分子的单糖通过糖苷键形成，例如包括乳糖、蔗糖和麦芽糖。
[0065] 本发明中，可药用的盐类指的是在通式(I)或(II)所表示的本发明化合物当中，羟基、羧基或氨基等与金属或有机碱形成的盐类、或者与无机酸或有机酸形成的盐类。作为金属，可列举出钠或钾等碱金属或者镁或钙等碱土类金属；作为有机碱，可列举出三乙胺或二异丙胺等；作为无机酸，可列举出磷酸、盐酸、氢氢溴酸、氢碘酸、硼酸或硫酸等；作为有机酸，可列举出甲酸、醋酸、乳酸、抗坏血酸、琥珀酸、富马酸、马来酸、草酸、柠檬酸、苯甲酸、水杨酸、酒石酸、甲磺酸、4-甲苯磺酸或三氟甲磺酸等。
[0066] 本发明的新型人参二醇型三萜皂苷可以从三七叶中分离得到。因此，本发明另一方面还提供一种包含上述人参二醇型三萜皂苷的三七叶提取物。具体来说，将三七叶用含水乙醇溶液回流提取，减压回收溶剂，得到浸膏。将该浸膏悬浮于水中，经大孔吸附树脂色谱柱分离，分别得到水洗脱物和95％乙醇洗脱物，其中95％乙醇洗脱物为富含上述人参二醇型三萜皂苷的三七叶提取物。
[0067] 接下来，将95％乙醇洗脱物经硅胶柱层析得到多个流份，分别对各个流份进一步采用正反硅胶柱层析、凝胶柱层析和制备HPLC等方法进行精制，从而获得上述纯的化合物1～7。
[0068] 可以采用1H-NMR、13C-NMR等一维核磁共振谱以及1H 1H COSY、HSQC、HMBC、HSQC-TOCSY、NOESY等二维核磁共振谱等波谱技术和化学反应对上述所得到的化合物1～7的结构进行鉴定确证。
[0069] 上述提取、分离、精制、以及结构鉴定过程中的具体操作对于本领域技术人员来说是公知的，可以参考相应的技术手册或教科书中记载的内容来进行。例如，参见吴继洲主编《天然药物化学》(高等教育出版社)、裴月湖主编《有机化合物波谱解析》(中国医药科技出版社)。本说明书中省略其详细的描述。
[0070] 本发明还提供一种药物组合物，包含治疗有效量的上述人参二醇型三萜皂苷以及任选的药学可接受的赋形剂。
[0071] 上述药学可接受的赋形剂可以是药物制剂领域中任何常规的赋形剂，特定赋形剂的选择将取决于用于治疗特定患者的给药方式或疾病类型和状态，用于特定给药模式的合适药物组合物的制备方法完全在药物领域技术人员的知识范围内。例如，可以作为药学可接受的赋形剂包括药学领域常规的稀释剂、载体、填充剂、粘合剂、湿润剂、崩解剂等。
[0072] 上述药物组合物可以制成片剂、粉剂、颗粒剂、胶囊、口服液、注射乳剂、注射用无菌粉针等多种形式。上述各种剂型的药物均可以按照药学领域的常规方法制备。
[0073] 本发明进一步提供一种化妆品组合物，包含上述人参二醇型三萜皂苷以及任选的至少一种生理学上可接受的赋形剂。术语“生理学上可接受的赋形剂”是指适合于局部或口服使用并且当与哺乳动物(特别是人类)的粘膜、指甲、头皮、头发、体毛和皮肤等接触时不存在任何毒性、不相容性等的风险的物质。根据本发明，生理学上可接受的赋形剂优选是美容上可接受的赋形剂。可适用的这些赋形剂是本领域技术人员熟知的，包括例如润肤剂、有机溶剂、螯合剂、渗透剂、增稠剂、填充剂、乳化剂或表面活性剂、防腐剂、着色剂、芳香剂、和其混合物。
[0075] 除了上述人参二醇型三萜皂苷以外，根据本发明的化妆品组合物还可以含有一种或多种第二活性剂，所述第二活性剂能够增强上述人参二醇型三萜皂苷的活性并且与其相容，即不易相互反应或者掩盖或限制其作用。特别地，第二活性剂可以例如选自保湿剂、湿润剂、抗氧化剂、皮肤保护剂、抗老化活性剂、防射线剂特别是防UV射线剂、及其混合物。
[0076] 实施例
[0077] 以下通过例子进一步解释或说明本发明的内容，但是这些例子不应被理解为对本发明保护范围的限制。
[0078] 需要说明的是，以下实施例中所用的各种试剂等是本领域已知的，可通过商购得到。
[0079] 实施例1
[0080] 三七叶提取物的制备
[0081] 干燥的三七叶8kg，剪碎，经10倍量50％乙醇溶液依次加热回流提取3次，时间为3小时、2小时、2小时，合并滤液，减压回收溶剂，得浸膏2.67kg。取浸膏2.1kg溶于20L水中，经D101大孔吸附树脂色谱柱分离，洗脱溶剂为水→95％乙醇，从而得到了水以及95％乙醇洗脱物，分别为760.0g和695.0g。其中，95％乙醇洗脱物作为富含人参二醇型三萜皂苷的三七叶提取物用于后续的实验。
[0082] 实施例2
[0083] 人参二醇型三萜皂苷化合物1～7的分离制备及结构鉴定
[0084] 化合物1～7分离是同时进行的，因而在一个实施例中进行描述。
[0085] 1.[化合物1～7的分离制备]
[0086] 取上述实施例1中所获得的95％乙醇洗脱物150.0g，经硅胶柱层析[洗脱溶剂：CH2Cl2→CH2Cl2/MeOH(体积比为100:3→100:7→10:1→8:1→3:1→2:1→1:1)→MeOH]，得到12个组分[其中，Fr.1(1.3g)、Fr.2(6.2g)、Fr.3(2.1g)、Fr.4(5.4g)、Fr.5(6.8g)、Fr.6(6.5g)、Fr.7(56.3g)、Fr.8(28.2g)、Fr.9(16.4g)、Fr.10(7.2g)、Fr.11(3.7g)、Fr.12(2.0g)]。
[0087] Fr.6(6.2g)经硅胶柱层析[洗脱溶剂：CH2Cl2-MeOH-水(体积比为40:3:1→30:3:1→25:3:1→15:3:1→13:3:1→12:3:1→10:3:1→8:3:1→6:3:1，下层)→MeOH]，得到13个组分[Fr.6-1(32.0mg)、Fr.6-2(28.0mg)、Fr.6-3(40.7mg)、Fr.6-4(74.5mg)、Fr.6-5(757.8mg)、Fr.6-6(528.0mg)、Fr.6-7(570.3mg)、Fr.6-8(422.7mg)、Fr.6-9(1.0g)、Fr.6-10(1.2g)、Fr.6-11(704.1mg)、Fr.6-12(140.0mg)、Fr.6-13(228.6mg)]。其中，Fr.6-10(800.0mg)经PHPLC分离纯化[洗脱溶剂为CH3CN-1％HAc(37:63，v/v)，Cosmosil 5C18-MS-II柱]，得到三七叶皂苷NL-A1(化合物1，44.9mg)和三七叶皂苷NL-C1(化合物5，12.4mg)。
[0088] Fr.7(30.0g)经MCI柱层析[洗脱溶剂为甲醇-水(65％→70％→75％→80％→100％，v/v)]，得到12个组分[Fr.7-1(80.6mg)、Fr.7-2(1.3g)、Fr.7-3(582.8mg)、Fr.7-4(447.3mg)、Fr.7-5(482.1mg)、Fr.7-6(2.4g)、Fr.7-7(4.9g)、Fr.7-8(12.1g)、Fr.7-9(2.8g)、Fr.7-10(1.1g)、Fr.7-11(169.3mg)、Fr.7-12(1.3g)]。其中，Fr.7-5(480.0mg)经PHPLC分离[CH3CN-1％HAc(30:70，v/v)，Cosmosil 5C18-MS-II柱]，得到三七叶皂苷NL-B1(化合物3，23.8mg)。Fr.7-6(800.0mg)经PHPLC分离制备[洗脱溶剂为甲醇-1％HAc(70:30，v/v)，Cosmosil 5C18-MS-II柱]，得到7个组分[Fr.7-6-1(17.1mg)，Fr.7-6-2(34.3mg)，Fr.7-6-3(141.5mg)，Fr.7-6-4(179.5mg)，Fr.7-6-5(20.7mg)，Fr.7-6-6(51.3mg)，Fr.7-6-
7(87.1mg)]。Fr.7-6-3(141.5mg)经PHPLC分离纯化[洗脱溶剂为CH3CN-1％HAc(35:65，v/v)，Cosmosil 5C18-MS-II柱]得到三七叶皂苷NL-C2(化合物6，11.9mg)。Fr.7-6-4(179.5mg)经PHPLC分离纯化[洗脱溶剂为CH3CN-1％HAc(32:68，v/v)，Cosmosil 5C18-MS-II柱]，得到三七叶皂苷NL-A2(化合物2，8.0mg)。
7(87.1mg)]。Fr.7-6-3(141.5mg)经PHPLC分离纯化[洗脱溶剂为CH3CN-1％HAc(35:65，v/v)，Cosmosil 5C18-MS-II柱]得到三七叶皂苷NL-C2(化合物6，11.9mg)。Fr.7-6-4(179.5mg)经PHPLC分离纯化[洗脱溶剂为CH3CN-1％HAc(32:68，v/v)，Cosmosil 5C18-MS-II柱]，得到三七叶皂苷NL-A2(化合物2，8.0mg)。
[0089] Fr.8(25.0g)经MCI柱层析[洗脱溶剂为甲醇-水(40％→60％→70％→80％→100％，v/v)]，得到11个组分[Fr.8-1(83.1mg)、Fr.8-2(46.0mg)、Fr.8-3(202.4mg)、Fr.8-4(98.6mg)、Fr.8-5(303.6mg)、Fr.8-6(1.7g)、Fr.8-7(611.2mg)、Fr.8-8(6.7g)、Fr.8-9(11.6g)、Fr.8-10(811mg)、Fr.8-11(838.1mg)]。其中，Fr.8-6(1.6g)经PHPLC分离制备[洗脱溶剂为甲醇-1％HAc(60:40，v/v)，Venusil PrepG C18柱]，得到13个组分[Fr.8-6-1(53.3mg)、Fr.8-6-2(13.9mg)、Fr.8-6-3(10.1mg)、Fr.8-6-4(39.0mg)、Fr.8-6-5(40.3mg)、Fr.8-6-6(135.3mg)、Fr.8-6-7(264.4mg)、Fr.8-6-8(244.2mg)、Fr.8-6-9(223.8mg)、Fr.8-
6-10(207.5mg)、Fr.8-6-11(73.6mg)、Fr.8-6-12(97.2mg)、Fr.8-6-13(146.0mg)]。Fr.8-6-
6(135.3mg)经PHPLC分离纯化[洗脱溶剂为CH3CN-1％HAc(26:74，v/v)，Cosmosil 5C18-MS-II柱]，得到三七叶皂苷NL-B2(化合物4，10.2mg)。Fr.8-6-9(223.8mg)经PHPLC分离制备[洗脱溶剂为CH3CN-1％HAc(27:73，v/v)，Cosmosil 5C18-MS-II柱]，得到6个组分[Fr.8-6-9-1(49.2mg)、Fr.8-6-9-2(2.9mg)、Fr.8-6-9-3(28.3mg)、Fr.8-6-9-4(12.0mg)、Fr.8-6-9-5(27.6mg)、Fr.8-6-9-6(37.4mg)]。Fr.8-6-9-6(37.4mg)为三七叶皂苷NL-C3(化合物7，
37.4mg)。
6-10(207.5mg)、Fr.8-6-11(73.6mg)、Fr.8-6-12(97.2mg)、Fr.8-6-13(146.0mg)]。Fr.8-6-
6(135.3mg)经PHPLC分离纯化[洗脱溶剂为CH3CN-1％HAc(26:74，v/v)，Cosmosil 5C18-MS-II柱]，得到三七叶皂苷NL-B2(化合物4，10.2mg)。Fr.8-6-9(223.8mg)经PHPLC分离制备[洗脱溶剂为CH3CN-1％HAc(27:73，v/v)，Cosmosil 5C18-MS-II柱]，得到6个组分[Fr.8-6-9-1(49.2mg)、Fr.8-6-9-2(2.9mg)、Fr.8-6-9-3(28.3mg)、Fr.8-6-9-4(12.0mg)、Fr.8-6-9-5(27.6mg)、Fr.8-6-9-6(37.4mg)]。Fr.8-6-9-6(37.4mg)为三七叶皂苷NL-C3(化合物7，
37.4mg)。
[0090] 2.[结构鉴定]
[0091] 主要利用光谱技术，包括红外、质谱、核磁共振谱(1H-NMR、13C-NMR、1H 1H COSY、HSQC、HMBC、HSQC-TOCSY、NOESY)和旋光度，鉴定上述所得到的化合物1～7的结构。
[0093] 三七叶皂苷NL-A1(化合物1)：(3β,12β,20S)-三羟基-25-过氧基达玛-23-烯-3-O-β-D-吡喃葡萄糖基-20-O-α-L-呋喃阿拉伯糖基(1→6)-β-D-吡喃葡萄糖苷
[0094] 白色粉末；
[0095] [α]D25-1.8°(conc 0.87，MeOH)；
[0096] IRνmax(KBr)cm-1：3368，2942，2877，1635，1455，1384，1075，1037，895；
[0097] 1H NMR(C5D5N，500MHz)δ：0.78、1.56(1H each，both m，H2-1)，[1.81(1H，m，overlapped)，2.21(1H，m)，H2-2]，3.36(1H，dd，J＝4.0、11.5Hz，H-3)，0.73(1H，br.d，ca.J＝12Hz，H-5)，[1.39(1H，m，overlapped)，1.51(1H，m)，H2-6]，1.22、1.49((1H each，both m，H2-7)，1.39(1H，m，overlapped，H-9)，[1.56(1H，m)，2.01(1H，m，overlapped)，H2-11]，4.02(1H，m，H-12)，2.01(1H，m，overlapped，H-13)，[0.98(1H，m)，1.61(1H，m，overlapped)，H2-15]，1.47、1.79(1H each，both m，H2-16)，2.44(1H，q like，ca.J＝11Hz，H-17)，1.02(3H，s，H3-18)，0.81(3H，s，H3-19)，1.61(3H，s，H3-21)，[2.81(1H，dd，J＝8.0、14.0Hz)，3.08(1H，dd，J＝5.5、14.0Hz)，H2-22]，6.16(1H，ddd，J＝5.5、8.0、16.0Hz，H-23)，6.11(1H，d，J＝16.0Hz，H-24)，1.61(3H，s，H3-26)，1.61(3H，s，H3-27)，1.32(3H，s，H3-28)，1.00(3H，s，H3-29)，0.90(3H，s，H3-30)，4.95(1H，d，J＝8.0Hz，H-1')，4.06(1H，m，overlapped，H-2')，
4.27(1H，dd，J＝8.0、9.0Hz，H-3')，4.22(1H，m，H-4')，4.03(1H，m，overlapped，H-5')，[4.42(1H，dd，J＝5.5、11.5Hz)，4.62(1H，dd，J＝2.0、11.5Hz)，H2-6']，5.18(1H，d，J＝
8.0Hz，H-1”)，3.97(1H，dd，J＝7.5、8.0Hz，H-2”)，4.20(1H，m，overlapped，H-3”)，4.03(1H，m，overlapped，H-4”)，4.09(1H，m，H-5”)，[4.13(1H，dd，J＝5.0、11.0Hz)，4.66(1H，br.d，ca.J＝11Hz)，H2-6”]，5.66(1H，d，J＝1.5Hz，H-1”')，4.87(1H，br.s，H-2”')，4.78(2H，m，H-
3”'and 4”')，[4.21(1H，m，overlapped)，4.31(1H，br.d，ca.J＝11Hz)，H2-5”']；13C NMR(C5D5N，125MHz)δ：39.1(C-1)，26.7(C-2)，88.8(C-3)，39.7(C-4)，56.4(C-5)，18.4(C-6)，
35.0(C-7)，40.0(C-8)，50.1(C-9)，36.9(C-10)，30.7(C-11)，70.6(C-12)，49.4(C-13)，
51.5(C-14)，30.5(C-15)，26.3(C-16)，52.0(C-17)，16.0(C-18)，16.3(C-19)，83.2(C-20)，
23.3(C-21)，39.8(C-22)，126.7(C-23)，138.0(C-24)，81.3(C-25)，25.4(C-26)，25.1(C-
27)，28.1(C-28)，16.8(C-29)，17.2(C-30)，107.1(C-1')，75.7(C-2')，78.7(C-3')，71.8(C-4')，78.4(C-5')，63.0(C-6')，98.2(C-1”)，75.1(C-2”)，78.8(C-3”)，71.9(C-4”)，76.4(C-5”)，68.3(C-6”)，110.0(C-1”')，83.3(C-2”')，78.9(C-3”')，85.9(C-4”')，62.7(C-
5”')。
4.27(1H，dd，J＝8.0、9.0Hz，H-3')，4.22(1H，m，H-4')，4.03(1H，m，overlapped，H-5')，[4.42(1H，dd，J＝5.5、11.5Hz)，4.62(1H，dd，J＝2.0、11.5Hz)，H2-6']，5.18(1H，d，J＝
8.0Hz，H-1”)，3.97(1H，dd，J＝7.5、8.0Hz，H-2”)，4.20(1H，m，overlapped，H-3”)，4.03(1H，m，overlapped，H-4”)，4.09(1H，m，H-5”)，[4.13(1H，dd，J＝5.0、11.0Hz)，4.66(1H，br.d，ca.J＝11Hz)，H2-6”]，5.66(1H，d，J＝1.5Hz，H-1”')，4.87(1H，br.s，H-2”')，4.78(2H，m，H-
3”'and 4”')，[4.21(1H，m，overlapped)，4.31(1H，br.d，ca.J＝11Hz)，H2-5”']；13C NMR(C5D5N，125MHz)δ：39.1(C-1)，26.7(C-2)，88.8(C-3)，39.7(C-4)，56.4(C-5)，18.4(C-6)，
35.0(C-7)，40.0(C-8)，50.1(C-9)，36.9(C-10)，30.7(C-11)，70.6(C-12)，49.4(C-13)，
51.5(C-14)，30.5(C-15)，26.3(C-16)，52.0(C-17)，16.0(C-18)，16.3(C-19)，83.2(C-20)，
23.3(C-21)，39.8(C-22)，126.7(C-23)，138.0(C-24)，81.3(C-25)，25.4(C-26)，25.1(C-
27)，28.1(C-28)，16.8(C-29)，17.2(C-30)，107.1(C-1')，75.7(C-2')，78.7(C-3')，71.8(C-4')，78.4(C-5')，63.0(C-6')，98.2(C-1”)，75.1(C-2”)，78.8(C-3”)，71.9(C-4”)，76.4(C-5”)，68.3(C-6”)，110.0(C-1”')，83.3(C-2”')，78.9(C-3”')，85.9(C-4”')，62.7(C-
5”')。
[0098] ESI-Q-Orbitrap MS：负离子模式：m/z 947.52405[M-H]-(calcd for C47H79O19，947.52101)，确定其分子式为C47H80O19。
[0099] 三七叶皂苷NL-A2(化合物2)：(3β,12β,20S)-三羟基-25-过氧基达玛-23-烯-3-O-β-D-吡喃葡萄糖基-20-O-β-D-吡喃木糖基(1→6)-β-D-吡喃葡萄糖苷
[0100] 白色粉末；
[0101] [α]D25+6.0°(conc 0.26，MeOH)；
[0102] IRνmax(KBr)cm-1：3418，2968，2865，1647，1455，1395，1052，1033，1014；
[0103] 1H NMR(C5D5N，500MHz)δ：[0.78(1H，m)，1.57(1H，m，overlapped)，H2-1]，1.84、2.23(1H each，both m，H2-2)，3.38(1H，dd，J＝4.5、11.5Hz，H-3)，0.74(1H，br.d，ca.J＝
12Hz，H-5)，1.39、1.54(1H each，both m，H2-6)，1.22、1.50(1H each，both m，H2-7)，1.42(1H，m，H-9)，[1.55(1H，m，overlapped)，2.02(1H，m)，H2-11]，4.08(1H，m，H-12)，2.04(1H，dd，J＝10.5、10.5Hz，H-13)，[0.99(1H，m)，1.60(1H，m，overlapped)，H2-15]，1.47、1.80(1H each，both m，H2-16)，2.49(1H，q like，ca.J＝11Hz，H-17)，1.02(3H，s，H3-18)，0.85(3H，s，H3-19)，1.62(3H，s，H3-21)，[2.85(1H，dd，J＝8.0、13.5Hz)，3.14(1H，dd，J＝5.5、13.5Hz)，H2-22]，6.21(1H，ddd，J＝5.5、8.0、16.0Hz，H-23)，6.13(1H，d，J＝16.0Hz，H-24)，1.61(3H，s，H3-26)，1.62(3H，s，H3-27)，1.33(3H，s，H3-28)，1.02(3H，s，H3-29)，0.93(3H，s，H3-30)，
4.98(1H，d，J＝7.5Hz，H-1')，4.08(1H，dd，J＝7.5、8.5Hz，H-2')，4.29(1H，dd，J＝8.5、
9.0Hz，H-3')，4.26(1H，dd，J＝9.0、9.0Hz，H-4')，4.06(1H，m，overlapped，H-5')，[4.44(1H，dd，J＝5.5、11.5Hz)，4.64(1H，br.d，ca.J＝12Hz)，H2-6']，5.20(1H，d，J＝7.5Hz，H-
1”)，3.95(1H，dd，J＝7.5、8.5Hz，H-2”)，4.21(1H，m，overlapped，H-3”)，4.13(1H，m，overlapped，H-4”)，4.13(1H，m，overlapped，H-5”)，[4.33(1H，m，overlapped)，4.76(1H，br.d，ca.J＝11Hz)，H2-6”]，5.00(1H，d，J＝7.5Hz，H-1”')，4.05(1H，dd，J＝7.5、8.0Hz，H-
2”')，4.15(1H，dd，J＝8.0、9.0Hz，H-3”')，4.22(1H，m，H-4”')，[3.74(1H，dd，J＝10.5、
10.5Hz)，4.34(1H，m，overlapped)，H2-5”']；13C NMR(C5D5N，125MHz)δ：39.1(C-1)，26.8(C-
2)，88.8(C-3)，39.7(C-4)，56.4(C-5)，18.5(C-6)，35.1(C-7)，40.1(C-8)，50.1(C-9)，37.0(C-10)，30.9(C-11)，70.4(C-12)，49.7(C-13)，51.5(C-14)，30.6(C-15)，26.4(C-16)，51.9(C-17)，16.0(C-18)，16.3(C-19)，83.2(C-20)，23.3(C-21)，39.7(C-22)，126.8(C-23)，
138.1(C-24)，81.4(C-25)，25.5(C-26)，25.1(C-27)，28.2(C-28)，16.8(C-29)，17.2(C-
30)，107.1(C-1')，75.8(C-2')，78.8(C-3')，71.9(C-4')，78.5(C-5')，63.1(C-6')，98.3(C-1”)，75.0(C-2”)，79.0(C-3”)，71.6(C-4”)，76.9(C-5”)，69.9(C-6”)，105.7(C-1”')，
74.9(C-2”')，78.1(C-3”')，71.1(C-4”')，67.1(C-5”')。
12Hz，H-5)，1.39、1.54(1H each，both m，H2-6)，1.22、1.50(1H each，both m，H2-7)，1.42(1H，m，H-9)，[1.55(1H，m，overlapped)，2.02(1H，m)，H2-11]，4.08(1H，m，H-12)，2.04(1H，dd，J＝10.5、10.5Hz，H-13)，[0.99(1H，m)，1.60(1H，m，overlapped)，H2-15]，1.47、1.80(1H each，both m，H2-16)，2.49(1H，q like，ca.J＝11Hz，H-17)，1.02(3H，s，H3-18)，0.85(3H，s，H3-19)，1.62(3H，s，H3-21)，[2.85(1H，dd，J＝8.0、13.5Hz)，3.14(1H，dd，J＝5.5、13.5Hz)，H2-22]，6.21(1H，ddd，J＝5.5、8.0、16.0Hz，H-23)，6.13(1H，d，J＝16.0Hz，H-24)，1.61(3H，s，H3-26)，1.62(3H，s，H3-27)，1.33(3H，s，H3-28)，1.02(3H，s，H3-29)，0.93(3H，s，H3-30)，
4.98(1H，d，J＝7.5Hz，H-1')，4.08(1H，dd，J＝7.5、8.5Hz，H-2')，4.29(1H，dd，J＝8.5、
9.0Hz，H-3')，4.26(1H，dd，J＝9.0、9.0Hz，H-4')，4.06(1H，m，overlapped，H-5')，[4.44(1H，dd，J＝5.5、11.5Hz)，4.64(1H，br.d，ca.J＝12Hz)，H2-6']，5.20(1H，d，J＝7.5Hz，H-
1”)，3.95(1H，dd，J＝7.5、8.5Hz，H-2”)，4.21(1H，m，overlapped，H-3”)，4.13(1H，m，overlapped，H-4”)，4.13(1H，m，overlapped，H-5”)，[4.33(1H，m，overlapped)，4.76(1H，br.d，ca.J＝11Hz)，H2-6”]，5.00(1H，d，J＝7.5Hz，H-1”')，4.05(1H，dd，J＝7.5、8.0Hz，H-
2”')，4.15(1H，dd，J＝8.0、9.0Hz，H-3”')，4.22(1H，m，H-4”')，[3.74(1H，dd，J＝10.5、
10.5Hz)，4.34(1H，m，overlapped)，H2-5”']；13C NMR(C5D5N，125MHz)δ：39.1(C-1)，26.8(C-
2)，88.8(C-3)，39.7(C-4)，56.4(C-5)，18.5(C-6)，35.1(C-7)，40.1(C-8)，50.1(C-9)，37.0(C-10)，30.9(C-11)，70.4(C-12)，49.7(C-13)，51.5(C-14)，30.6(C-15)，26.4(C-16)，51.9(C-17)，16.0(C-18)，16.3(C-19)，83.2(C-20)，23.3(C-21)，39.7(C-22)，126.8(C-23)，
138.1(C-24)，81.4(C-25)，25.5(C-26)，25.1(C-27)，28.2(C-28)，16.8(C-29)，17.2(C-
30)，107.1(C-1')，75.8(C-2')，78.8(C-3')，71.9(C-4')，78.5(C-5')，63.1(C-6')，98.3(C-1”)，75.0(C-2”)，79.0(C-3”)，71.6(C-4”)，76.9(C-5”)，69.9(C-6”)，105.7(C-1”')，
74.9(C-2”')，78.1(C-3”')，71.1(C-4”')，67.1(C-5”')。
[0104] ESI-Q-Orbitrap MS：负离子模式：m/z 947.51996[M-H]-(calcd for C47H79O19，947.52101)，确定其分子式为C47H80O19。
[0105] 三七叶皂苷NL-B1(化合物3)：(3β,12β,20S,25)-四羟基达玛-23-烯-3-O-β-D-吡喃葡萄糖基-20-O-α-L-呋喃阿拉伯糖基(1→6)-β-D-吡喃葡萄糖苷
[0106] 白色粉末；
[0107] [α]D25+2.2°(conc 1.19，MeOH)；
[0108] IRνmax(KBr)cm-1：3379，2944，2877，1649，1458，1387，1076，1035，1018；
[0109] 1H NMR(C5D5N，500MHz)δ：[0.78(1H，m)，1.55(1H，m，overlapped)，H2-1]，[1.79(1H，m，overlapped)，2.22(1H，m)，H2-2]，3.37(1H，dd，J＝4.5、12.0Hz，H-3)，0.73(1H，br.d，ca.J＝12Hz，H-5)，[1.38(1H，m，overlapped)，1.50(1H，m)，H2-6]，[1.20(1H，m)，1.48(1H，m，overlapped)，H2-7]，1.37(1H，m，overlapped，H-9)，[1.56(1H，m，overlapped)，2.04(1H，m)，H2-11]，4.04(1H，m，H-12)，2.04(1H，dd，J＝11.0、11.0Hz，H-13)，[0.96(1H，m)，1.56(1H，m，overlapped)，H2-15]，1.47、1.79(1H each，both m，overlapped，H2-16)，2.44(1H，q like，ca.J＝10Hz，H-17)，1.01(3H，s，H3-18)，0.83(3H，s，H3-19)，1.61(3H，s，H3-
21)，[2.84(1H，dd，J＝8.5、14.0Hz)，3.11(1H，dd，J＝5.5、14.0Hz)，H2-22]，6.23(1H，ddd，J＝5.5、8.5、15.5Hz，H2-23)，6.09(1H，d，J＝15.5Hz，H-24)，1.56(3H，s，H3-26)，1.57(3H，s，H3-27)，1.28(3H，s，H3-28)，1.11(3H，s，H3-29)，0.89(3H，s，H3-30)，4.96(1H，d，J＝8.0Hz，H-1')，4.06(1H，dd，J＝8.0、9.0Hz，H-2')，4.28(1H，dd，J＝9.0、9.0Hz，H-3')，4.24(1H，J＝
9.0、9.0Hz，H-4')，4.05(1H，m，overlapped，H-5')，[4.44(1H，dd，J＝5.5、11.5Hz)，4.63(1H，dd，J＝1.5、11.5Hz)，H2-6']，5.18(1H，d，J＝7.5Hz，H-1”)，3.98(1H，dd，J＝7.5、
8.5Hz，H-2”)，4.18(1H，dd，J＝8.5、8.5Hz，H-3”)，4.01(1H，dd，J＝8.5、9.0Hz，H-4”)，4.09(1H，m，H-5”)，[4.21(1H，dd，J＝3.0、11.0Hz)，4.69(1H，br.d，ca.J＝11Hz)，H2-6”]，5.65(1H，d，J＝1.5Hz，H-1”')，4.89(1H，br.s，H-2”')，4.80(1H，m，overlapped，H-3”')，4.80(1H，m，overlapped，H-4”')，[4.21(1H，dd，J＝3.5、12.0Hz)，4.32(1H，br.d，ca.J＝12Hz)，H2-5”']；13C NMR(C5D5N，125MHz)δ：39.1(C-1)，26.8(C-2)，89.0(C-3)，39.7(C-4)，56.4(C-
5)，18.4(C-6)，35.1(C-7)，40.1(C-8)，50.1(C-9)，36.9(C-10)，30.8(C-11)，70.6(C-12)，
49.5(C-13)，51.5(C-14)，30.5(C-15)，26.4(C-16)，52.1(C-17)，16.0(C-18)，16.3(C-19)，
83.3(C-20)，23.3(C-21)，39.6(C-22)，122.7(C-23)，142.2(C-24)，70.0(C-25)，30.7(C-
26)，30.6(C-27)，28.1(C-28)，16.7(C-29)，17.2(C-30)，107.0(C-1')，75.8(C-2')，78.8(C-3')，71.8(C-4')，78.4(C-5')，63.1(C-6')，98.2(C-1”)，75.2(C-2”)，78.9(C-3”)，72.0(C-4”)，76.6(C-5”)，68.4(C-6”)，110.2(C-1”')，83.5(C-2”')，78.9(C-3”')，86.0(C-
4”')，62.8(C-5”')。
21)，[2.84(1H，dd，J＝8.5、14.0Hz)，3.11(1H，dd，J＝5.5、14.0Hz)，H2-22]，6.23(1H，ddd，J＝5.5、8.5、15.5Hz，H2-23)，6.09(1H，d，J＝15.5Hz，H-24)，1.56(3H，s，H3-26)，1.57(3H，s，H3-27)，1.28(3H，s，H3-28)，1.11(3H，s，H3-29)，0.89(3H，s，H3-30)，4.96(1H，d，J＝8.0Hz，H-1')，4.06(1H，dd，J＝8.0、9.0Hz，H-2')，4.28(1H，dd，J＝9.0、9.0Hz，H-3')，4.24(1H，J＝
9.0、9.0Hz，H-4')，4.05(1H，m，overlapped，H-5')，[4.44(1H，dd，J＝5.5、11.5Hz)，4.63(1H，dd，J＝1.5、11.5Hz)，H2-6']，5.18(1H，d，J＝7.5Hz，H-1”)，3.98(1H，dd，J＝7.5、
8.5Hz，H-2”)，4.18(1H，dd，J＝8.5、8.5Hz，H-3”)，4.01(1H，dd，J＝8.5、9.0Hz，H-4”)，4.09(1H，m，H-5”)，[4.21(1H，dd，J＝3.0、11.0Hz)，4.69(1H，br.d，ca.J＝11Hz)，H2-6”]，5.65(1H，d，J＝1.5Hz，H-1”')，4.89(1H，br.s，H-2”')，4.80(1H，m，overlapped，H-3”')，4.80(1H，m，overlapped，H-4”')，[4.21(1H，dd，J＝3.5、12.0Hz)，4.32(1H，br.d，ca.J＝12Hz)，H2-5”']；13C NMR(C5D5N，125MHz)δ：39.1(C-1)，26.8(C-2)，89.0(C-3)，39.7(C-4)，56.4(C-
5)，18.4(C-6)，35.1(C-7)，40.1(C-8)，50.1(C-9)，36.9(C-10)，30.8(C-11)，70.6(C-12)，
49.5(C-13)，51.5(C-14)，30.5(C-15)，26.4(C-16)，52.1(C-17)，16.0(C-18)，16.3(C-19)，
83.3(C-20)，23.3(C-21)，39.6(C-22)，122.7(C-23)，142.2(C-24)，70.0(C-25)，30.7(C-
26)，30.6(C-27)，28.1(C-28)，16.7(C-29)，17.2(C-30)，107.0(C-1')，75.8(C-2')，78.8(C-3')，71.8(C-4')，78.4(C-5')，63.1(C-6')，98.2(C-1”)，75.2(C-2”)，78.9(C-3”)，72.0(C-4”)，76.6(C-5”)，68.4(C-6”)，110.2(C-1”')，83.5(C-2”')，78.9(C-3”')，86.0(C-
4”')，62.8(C-5”')。
[0110] ESI-Q-Orbitrap MS：负离子模式：m/z 931.52838[M-H]-(calcd for C47H79O18，931.52609)，确定其分子式为C47H80O18。
[0111] 三七叶皂苷NL-B2(化合物4)：(3β,12β,20S,25)-四羟基达玛-23-烯-3-O-[β-D-吡喃木糖基(1→2)-β-D-吡喃葡萄糖基(1→2)-β-D-吡喃葡萄糖基]-20-O-α-L-呋喃阿拉伯糖基(1→6)-β-D-吡喃葡萄糖苷
[0112] 白色粉末；
[0113] [α]D25-2.1°(conc 0.28，MeOH)；
[0114] IRνmax(KBr)cm-1：3364，2938，2877，1647，1456，1384，1073，1042，893；
[0115] 1H NMR(C5D5N，500MHz)δ：0.76、1.52(1H each，both m，H2-1)，1.81、2.18(1H each，both m，H2-2)，3.28(1H，dd，J＝4.0、11.5Hz，H-3)，0.69(1H，br.d，ca.J＝12Hz，H-5)，[1.37(1H，m，overlapped)，1.49(1H，m)，H2-6]，1.20、1.45(1H each，both m，H2-7)，1.37(1H，m，overlapped，H-9)，[1.55(1H，m，overlapped)，1.98(1H，m)，H2-11]，3.99(1H，m，overlapped，H-12)，2.04(1H，dd，J＝10.5、10.5 Hz，H-13)，[0.96(1H，m)，1.55(1H，m，overlapped)，H2-15]，1.47、1.77(1H each，both m，H2-16)，2.44(1H，q like，ca.J＝11 Hz，H-17)，1.01(3H，s，H3-18)，0.83(3H，s，H3-19)，1.60(3H，s，H3-21)，[2.82(1H，dd，J＝8.5、14.0 Hz)，3.09(1H，dd，J＝6.0、14.0 Hz)，H2-22]，6.21(1H，ddd，J＝6.0、8.5、15.5 Hz，H2-
23)，6.07(1H，d，J＝15.5 Hz，H-24)，1.55(3H，s，H3-26)，1.55(3H，s，H3-27)，1.28(3H，s，H3-
28)，1.11(3H，s，H3-29)，0.89(3H，s，H3-30)，4.92(1H，d，J＝8.0 Hz，H-1')，4.11(1H，dd，J＝
7.0、8.0 Hz，H-2')，4.35(1H，m，overlapped，H-3')，4.08(1H，dd，J＝9.0、9.0 Hz，H-4')，
3.94(1H，m，H-5')，[4.35(1H，m，overlapped)，4.57(1H，dd，J＝2.0、11.5 Hz)，H2-6']，5.50(1H，d，J＝7.5 Hz，H-1”)，4.19(1H，m，overlapped，H-2”)，4.27(1H，dd，J＝9.0、9.0 Hz，H-
3”)，4.20(1H，dd，J＝7.0、9.0 Hz，H-4”)，3.85(1H，m，H-5”)，[4.35(1H，m，overlapped)，
4.46(1H，dd，J＝3.0、11.5 Hz)，H2-6”]，5.39(1H，d，J＝6.5 Hz，H-1”')，4.10(1H，dd，J＝
6.5、9.0 Hz，H-2”')，4.12(1H，m，overlapped，H-3”')，4.13(1H，dd，J＝9.0、9.0 Hz，H-
4”')，[3.68(1H，dd，J＝11.0、11.0 Hz)，4.30(1H，m，overlapped)，H2-5”']，5.16(1H，d，J＝
7.5 Hz，H-1””)，3.95(1H，dd，J＝7.5、8.0 Hz，H-2””)，4.16(1H，dd，J＝8.0、9.5 Hz，H-
3””)，3.98(1H，dd，J＝9.0、9.5 Hz，H-4””)，4.06(1H，m，H-5””)，[4.07(1H，m，overlapped)，
4.65(1H，br.d，ca.J＝11 Hz)，H2-6””]，5.64(1H，d，J＝1.5 Hz，H-1””')，4.85(1H，dd，J＝
1.5、3.0 Hz，H-2””')，4.77(1H，m，overlapped，H-3””')，4.77(1H，m，overlapped，H-4””')，[4.19(1H，m，overlapped)，4.30(1H，m，overlapped)，H2-5””']；13C NMR(C5D5N，125 MHz)δ：
39.2(C-1)，26.8(C-2)，89.0(C-3)，39.8(C-4)，56.4(C-5)，18.5(C6)，35.1(C-7)，40.1(C-
8)，50.1(C-9)，36.9(C-10)，30.8(C-11)，70.6(C-12)，49.5(C-13)，51.5(C-14)，30.6(C-
15)，26.4(C-16)，52.1(C-17)，16.0(C-18)，16.3(C-19)，83.4(C-20)，23.3(C-21)，39.6(C-
22)，122.8(C-23)，142.3(C-24)，70.0(C-25)，30.7(C-26)，30.7(C-27)，28.1(C-28)，16.7(C-29)，17.2(C-30)，104.8(C-1')，83.0(C-2')，78.7(C-3')，71.2(C-4')，78.3(C-5')，
63.0(C-6')，103.2(C-1”)，84.6(C-2”)，78.0(C-3”)，71.9(C-4”)，77.8(C-5”)，62.9(C-
6”)，106.5(C-1”')，76.0(C-2”')，77.7(C-3”')，70.7(C-4”')，67.4(C-5”')，98.2(C-1””)，
75.2(C-2””)，78.9(C-3””)，72.0(C-4””)，76.5(C-5””)，68.4(C-6””)，110.2(C-1””')，
83.3(C-2””)，79.0(C-3””)，86.1(C-4””)，62.8(C-5””)。
23)，6.07(1H，d，J＝15.5 Hz，H-24)，1.55(3H，s，H3-26)，1.55(3H，s，H3-27)，1.28(3H，s，H3-
28)，1.11(3H，s，H3-29)，0.89(3H，s，H3-30)，4.92(1H，d，J＝8.0 Hz，H-1')，4.11(1H，dd，J＝
7.0、8.0 Hz，H-2')，4.35(1H，m，overlapped，H-3')，4.08(1H，dd，J＝9.0、9.0 Hz，H-4')，
3.94(1H，m，H-5')，[4.35(1H，m，overlapped)，4.57(1H，dd，J＝2.0、11.5 Hz)，H2-6']，5.50(1H，d，J＝7.5 Hz，H-1”)，4.19(1H，m，overlapped，H-2”)，4.27(1H，dd，J＝9.0、9.0 Hz，H-
3”)，4.20(1H，dd，J＝7.0、9.0 Hz，H-4”)，3.85(1H，m，H-5”)，[4.35(1H，m，overlapped)，
4.46(1H，dd，J＝3.0、11.5 Hz)，H2-6”]，5.39(1H，d，J＝6.5 Hz，H-1”')，4.10(1H，dd，J＝
6.5、9.0 Hz，H-2”')，4.12(1H，m，overlapped，H-3”')，4.13(1H，dd，J＝9.0、9.0 Hz，H-
4”')，[3.68(1H，dd，J＝11.0、11.0 Hz)，4.30(1H，m，overlapped)，H2-5”']，5.16(1H，d，J＝
7.5 Hz，H-1””)，3.95(1H，dd，J＝7.5、8.0 Hz，H-2””)，4.16(1H，dd，J＝8.0、9.5 Hz，H-
3””)，3.98(1H，dd，J＝9.0、9.5 Hz，H-4””)，4.06(1H，m，H-5””)，[4.07(1H，m，overlapped)，
4.65(1H，br.d，ca.J＝11 Hz)，H2-6””]，5.64(1H，d，J＝1.5 Hz，H-1””')，4.85(1H，dd，J＝
1.5、3.0 Hz，H-2””')，4.77(1H，m，overlapped，H-3””')，4.77(1H，m，overlapped，H-4””')，[4.19(1H，m，overlapped)，4.30(1H，m，overlapped)，H2-5””']；13C NMR(C5D5N，125 MHz)δ：
39.2(C-1)，26.8(C-2)，89.0(C-3)，39.8(C-4)，56.4(C-5)，18.5(C6)，35.1(C-7)，40.1(C-
8)，50.1(C-9)，36.9(C-10)，30.8(C-11)，70.6(C-12)，49.5(C-13)，51.5(C-14)，30.6(C-
15)，26.4(C-16)，52.1(C-17)，16.0(C-18)，16.3(C-19)，83.4(C-20)，23.3(C-21)，39.6(C-
22)，122.8(C-23)，142.3(C-24)，70.0(C-25)，30.7(C-26)，30.7(C-27)，28.1(C-28)，16.7(C-29)，17.2(C-30)，104.8(C-1')，83.0(C-2')，78.7(C-3')，71.2(C-4')，78.3(C-5')，
63.0(C-6')，103.2(C-1”)，84.6(C-2”)，78.0(C-3”)，71.9(C-4”)，77.8(C-5”)，62.9(C-
6”)，106.5(C-1”')，76.0(C-2”')，77.7(C-3”')，70.7(C-4”')，67.4(C-5”')，98.2(C-1””)，
75.2(C-2””)，78.9(C-3””)，72.0(C-4””)，76.5(C-5””)，68.4(C-6””)，110.2(C-1””')，
83.3(C-2””)，79.0(C-3””)，86.1(C-4””)，62.8(C-5””)。
[0116] ESI-Q-Orbitrap MS：负离子模式：m/z 1225.62134[M-H]-(calcd for C58H97O27，1225.62117)，确定其分子式为C58H98O27。
[0117] 三七叶皂苷NL-C1(化合物5)：(3β,12β,20S)-三羟基达玛-25-烯-24-酮-3-O-β-D-吡喃葡萄糖基-20-O-α-L-呋喃阿拉伯糖基(1→6)-β-D-吡喃葡萄糖苷
[0118] 白色粉末；
[0119] [α]D25-6.7°(conc 0.21，MeOH)；
[0120] UVλmax(MeOH)nm(logε)：218(3.57)；
[0121] IRνmax(KBr)cm-1：3387，2941，2877，1669，1632，1456，1384，1077，1039；
[0122] 1H NMR(C5D5N，500MHz)：δ：0.77、1.56(1H each，both m，H2-1)，[1.82(1H，m，overlapped)，2.23(1H，m)，H2-2]，3.37(1H，dd，J＝2.5、10.5Hz，H-3)，0.72(1H，br.d，ca.J＝12Hz，H-5)，1.38、1.50(1H each，both m，overlapped，H2-6)，1.19、1.47(1H each，both m，H2-7)，1.37(1H，m，overlapped，H-9)，1.51、1.97(1H each，both m，overlapped，H2-11)，4.21(1H，m，H-12)，2.04(1H，m，H-13)，0.99、1.53(1H each，both m，overlapped，H2-15)，
1.36、1.82(1H each，both m，overlapped，H2-16)，2.60(1H，q like，ca.J＝10Hz，H-17)，
0.92(3H，s，H3-18)，0.80(3H，s，H3-19)，1.58(3H，s，H3-21)，2.09、2.75(1H each，both m，H2-22)，[3.17(1H，ddd，J＝6.5、10.5、16.5Hz)，3.40(1H，ddd，J＝3.5、10.5、16.5Hz)，H2-
23]，[5.78(1H，br.s)，6.37(1H，br.s)，H2-26]，1.85(3H，s，H3-27)，1.31(3H，s，H3-28)，1.00(3H，s，H3-29)，0.98(3H，s，H3-30)，4.95(1H，d，J＝7.5Hz，H-1')，4.06(1H，dd，J＝7.5、
8.0Hz，H-2')，4.27(1H，dd，J＝8.0、9.0Hz，H-3')，4.23(1H，dd，J＝8.5、9.0Hz，H-4')，4.03(1H，m，H-5')，[4.40(1H，dd，J＝5.5、11.5Hz)，4.61(1H，dd，J＝1.5、11.5Hz)，H2-6']，5.10(1H，d，J＝8.0Hz，H-1”)，3.95(1H，dd，J＝8.0、8.5Hz，H-2”)，4.19(1H，dd，J＝8.5、9.0Hz，H-
3”)，3.97(1H，dd，J＝9.0、9.0Hz，H-4”)，4.09(1H，m，H-5”)，[4.13(1H，dd，J＝5.0、11.0Hz)，
4.70(1H，br.d，ca.J＝11Hz)，H2-6”]，5.71(1H，dd，J＝1.5Hz，H-1”')，4.88(1H，J＝1.5、
4.5Hz，H-2”')，4.82(1H，dd，J＝4.5、4.5Hz，H-3”')，4.76(1H，m，H-4”')，[4.25(1H，m，overlapped)，4.35(1H，dd，J＝3.0、12.0Hz)，H2-5”']；13C NMR(C5D5N，125MHz)δ：39.2(C-1)，
26.8(C-2)，89.0(C-3)，39.7(C-4)，56.4(C-5)，18.5(C-6)，35.1(C-7)，40.0(C-8)，50.2(C-
9)，37.0(C-10)，30.8(C-11)，70.2(C-12)，49.5(C-13)，51.5(C-14)，30.7(C-15)，26.7(C-
16)，51.9(C-17)，16.0(C-18)，16.3(C-19)，83.2(C-20)，21.9(C-21)，29.8(C-22)，32.7(C-
23)，202.6(C-24)，144.4(C-25)，125.5(C-26)，17.8(C-27)，28.2(C-28)，16.8(C-29)，17.4(C-30)，107.0(C-1')，75.8(C-2')，78.8(C-3')，71.9(C-4')，78.4(C-5')，63.1(C-6')，
98.0(C-1”)，74.9(C-2”)，79.4(C-3”)，72.0(C-4”)，76.7(C-5”)，68.8(C-6”)，110.3(C-
1”')，83.5(C-2”')，78.8(C-3”')，86.0(C-4”')，62.7(C-5”')。
1.36、1.82(1H each，both m，overlapped，H2-16)，2.60(1H，q like，ca.J＝10Hz，H-17)，
0.92(3H，s，H3-18)，0.80(3H，s，H3-19)，1.58(3H，s，H3-21)，2.09、2.75(1H each，both m，H2-22)，[3.17(1H，ddd，J＝6.5、10.5、16.5Hz)，3.40(1H，ddd，J＝3.5、10.5、16.5Hz)，H2-
23]，[5.78(1H，br.s)，6.37(1H，br.s)，H2-26]，1.85(3H，s，H3-27)，1.31(3H，s，H3-28)，1.00(3H，s，H3-29)，0.98(3H，s，H3-30)，4.95(1H，d，J＝7.5Hz，H-1')，4.06(1H，dd，J＝7.5、
8.0Hz，H-2')，4.27(1H，dd，J＝8.0、9.0Hz，H-3')，4.23(1H，dd，J＝8.5、9.0Hz，H-4')，4.03(1H，m，H-5')，[4.40(1H，dd，J＝5.5、11.5Hz)，4.61(1H，dd，J＝1.5、11.5Hz)，H2-6']，5.10(1H，d，J＝8.0Hz，H-1”)，3.95(1H，dd，J＝8.0、8.5Hz，H-2”)，4.19(1H，dd，J＝8.5、9.0Hz，H-
3”)，3.97(1H，dd，J＝9.0、9.0Hz，H-4”)，4.09(1H，m，H-5”)，[4.13(1H，dd，J＝5.0、11.0Hz)，
4.70(1H，br.d，ca.J＝11Hz)，H2-6”]，5.71(1H，dd，J＝1.5Hz，H-1”')，4.88(1H，J＝1.5、
4.5Hz，H-2”')，4.82(1H，dd，J＝4.5、4.5Hz，H-3”')，4.76(1H，m，H-4”')，[4.25(1H，m，overlapped)，4.35(1H，dd，J＝3.0、12.0Hz)，H2-5”']；13C NMR(C5D5N，125MHz)δ：39.2(C-1)，
26.8(C-2)，89.0(C-3)，39.7(C-4)，56.4(C-5)，18.5(C-6)，35.1(C-7)，40.0(C-8)，50.2(C-
9)，37.0(C-10)，30.8(C-11)，70.2(C-12)，49.5(C-13)，51.5(C-14)，30.7(C-15)，26.7(C-
16)，51.9(C-17)，16.0(C-18)，16.3(C-19)，83.2(C-20)，21.9(C-21)，29.8(C-22)，32.7(C-
23)，202.6(C-24)，144.4(C-25)，125.5(C-26)，17.8(C-27)，28.2(C-28)，16.8(C-29)，17.4(C-30)，107.0(C-1')，75.8(C-2')，78.8(C-3')，71.9(C-4')，78.4(C-5')，63.1(C-6')，
98.0(C-1”)，74.9(C-2”)，79.4(C-3”)，72.0(C-4”)，76.7(C-5”)，68.8(C-6”)，110.3(C-
1”')，83.5(C-2”')，78.8(C-3”')，86.0(C-4”')，62.7(C-5”')。
[0123] ESI-Q-Orbitrap MS：负离子模式：m/z 929.51184[M-H]-(calcd for C47H77O18，929.51044)，确定其分子式为C47H78O18。
[0124] 三七叶皂苷NL-C2(化合物6)：(3β,12β,20S)-三羟基达玛-25-烯-24-酮-3-O-β-D-吡喃葡萄糖基-20-O-β-D-吡喃木糖基(1→6)-β-D-吡喃葡萄糖苷
[0125] 白色粉末；
[0126] [α]D25+1.8°(conc 0.45，MeOH)；
[0127] UVλmax(MeOH)nm(logε)：219(3.63)；
[0128] IRνmax(KBr)cm-1：3415，2943，2877，1671，1639，1458，1386，1078，1038，894；
[0129] 1H NMR(C5D5N，500MHz)δ：0.80、1.58(1H each，both m，overlapped，H2-1)，[1.84(1H，m，overlapped)，2.24(1H，m)，H2-2]，3.38(1H，dd，J＝4.5、11.5Hz，H-3)，0.73(1H，br.d，ca.J＝12Hz，H-5)，1.39、1.51(1H each，both m，overlapped，H2-6)，1.20、1.48(1H each，both m，H2-7)，1.37(1H，m，overlapped，H-9)，[1.50(1H，m，overlapped)，1.96(1H，m)，H2-11]，4.21(1H，m，H-12)，2.03(1H，dd，J＝9.5、9.5Hz，H-13)，1.00、1.58(1H each，both m，overlapped，H2-15)，1.37、1.84(1H each，m，overlapped，H2-16)，2.60(1H，q like，ca.J＝10Hz，H-17)，0.93(3H，s，H3-18)，0.82(3H，s，H3-19)，1.58(3H，s，H3-21)，[2.11(1H，m)，2.75(1H，ddd，J＝5.0、10.5、14.5Hz)，H2-22]，[3.18(1H，ddd，J＝6.5、10.0、17.5Hz)，3.47(1H，ddd，J＝4.5、10.0、17.5Hz)，H2-23]，[5.72(1H，br.s)，6.37(1H，br.s)，H2-26]，
1.84(3H，s，H3-27)，1.31(3H，s，H3-28)，1.00(3H，s，H3-29)，0.98(3H，s，H3-30)，4.95(1H，d，J＝8.0Hz，H-1')，4.05(1H，dd，J＝8.0、8.5Hz，H-2')，4.26(1H，dd，J＝8.5、8.5Hz，H-3')，
4.22(1H，dd，J＝8.5、9.0Hz，H-4')，4.02(1H，m，overlapped，H-5')，[4.40(1H，dd，J＝5.5、
11.0Hz)，4.61(1H，dd，J＝2.0、11.5Hz)，H2-6']，5.10(1H，d，J＝7.5Hz，H-1”)，3.90(1H，dd，J＝7.5、8.0Hz，H-2”)，4.17(1H，dd，J＝8.0、8.5Hz，H-3”)，4.12(1H，dd，J＝8.5、8.5Hz，H-
4”)，4.04(1H，m，overlapped，H-5”)，[4.28(1H，dd，J＝5.5、11.5Hz)，4.76(1H，dd，J＝2.0、
11.5Hz)，H2-6”]，4.91(1H，d，J＝7.5Hz，H-1”')，4.02(1H，m，overlapped，H-2”')，4.13(1H，dd，J＝8.5、8.5Hz，H-3”')，4.25(1H，m，H-4”')，[3.69(1H，dd，J＝10.5、10.5Hz)，4.37(1H，dd，J＝5.0、10.5Hz)，H2-5”']；13C NMR(C5D5N，125MHz)δ：39.2(C-1)，26.8(C-2)，88.9(C-3)，
39.7(C-4)，56.4(C-5)，18.5(C-6)，35.1(C-7)，40.1(C-8)，50.3(C-9)，37.0(C-10)，30.8(C-11)，70.1(C-12)，49.5(C-13)，51.5(C-14)，30.7(C-15)，26.7(C-16)，52.1(C-17)，16.0(C-18)，16.3(C-19)，83.3(C-20)，21.7(C-21)，29.8(C-22)，32.8(C-23)，202.7(C-24)，
144.4(C-25)，125.5(C-26)，17.9(C-27)，28.2(C-28)，16.8(C-29)，17.4(C-30)，107.0(C-
1')，75.8(C-2')，78.8(C-3')，71.9(C-4')，78.4(C-5')，63.1(C-6')，98.0(C-1”)，74.8(C-
2”)，79.4(C-3”)，71.3(C-4”)，76.6(C-5”)，70.1(C-6”)，106.1(C-1”')，74.9(C-2”')，78.2(C-3”')，71.2(C-4”')，67.1(C-5”')。
1.84(3H，s，H3-27)，1.31(3H，s，H3-28)，1.00(3H，s，H3-29)，0.98(3H，s，H3-30)，4.95(1H，d，J＝8.0Hz，H-1')，4.05(1H，dd，J＝8.0、8.5Hz，H-2')，4.26(1H，dd，J＝8.5、8.5Hz，H-3')，
4.22(1H，dd，J＝8.5、9.0Hz，H-4')，4.02(1H，m，overlapped，H-5')，[4.40(1H，dd，J＝5.5、
11.0Hz)，4.61(1H，dd，J＝2.0、11.5Hz)，H2-6']，5.10(1H，d，J＝7.5Hz，H-1”)，3.90(1H，dd，J＝7.5、8.0Hz，H-2”)，4.17(1H，dd，J＝8.0、8.5Hz，H-3”)，4.12(1H，dd，J＝8.5、8.5Hz，H-
4”)，4.04(1H，m，overlapped，H-5”)，[4.28(1H，dd，J＝5.5、11.5Hz)，4.76(1H，dd，J＝2.0、
11.5Hz)，H2-6”]，4.91(1H，d，J＝7.5Hz，H-1”')，4.02(1H，m，overlapped，H-2”')，4.13(1H，dd，J＝8.5、8.5Hz，H-3”')，4.25(1H，m，H-4”')，[3.69(1H，dd，J＝10.5、10.5Hz)，4.37(1H，dd，J＝5.0、10.5Hz)，H2-5”']；13C NMR(C5D5N，125MHz)δ：39.2(C-1)，26.8(C-2)，88.9(C-3)，
39.7(C-4)，56.4(C-5)，18.5(C-6)，35.1(C-7)，40.1(C-8)，50.3(C-9)，37.0(C-10)，30.8(C-11)，70.1(C-12)，49.5(C-13)，51.5(C-14)，30.7(C-15)，26.7(C-16)，52.1(C-17)，16.0(C-18)，16.3(C-19)，83.3(C-20)，21.7(C-21)，29.8(C-22)，32.8(C-23)，202.7(C-24)，
144.4(C-25)，125.5(C-26)，17.9(C-27)，28.2(C-28)，16.8(C-29)，17.4(C-30)，107.0(C-
1')，75.8(C-2')，78.8(C-3')，71.9(C-4')，78.4(C-5')，63.1(C-6')，98.0(C-1”)，74.8(C-
2”)，79.4(C-3”)，71.3(C-4”)，76.6(C-5”)，70.1(C-6”)，106.1(C-1”')，74.9(C-2”')，78.2(C-3”')，71.2(C-4”')，67.1(C-5”')。
[0130] ESI-Q-Orbitrap MS：负离子模式：m/z 929.51221[M-H]-(calcd for C47H77O18，929.51044)，确定其分子式为C47H78O18。
[0131] 三七叶皂苷NL-C3(化合物7)：(3β,12β,20S)-三羟基达玛-25-烯-24-酮-3-O-[β-D-吡喃葡萄糖基(1→2)-β-D-吡喃葡萄糖基]-20-O-β-D-吡喃木糖基(1→6)-β-D-吡喃葡萄糖苷
[0132] 白色粉末；
[0133] [α]D25+1.6°(conc 0.51，MeOH)；
[0134] UVλmax(MeOH)nm(logε)：218(3.69)；
[0135] IRνmax(KBr)cm-1：3391，2942，2881，1663，1645，1632，1453，1385，1164，1077，1040，895；
[0136] 1H NMR(C5D5N，500MHz)δ：[0.73(1H，m)，1.54(1H，m，overlapped)，H2-1]，[1.83(1H，m，overlapped)，2.20(1H，m)，H2-2]，3.28(1H，dd，J＝4.0、12.0Hz，H-3)，0.66(1H，br.d，ca.J＝12Hz，H-5)，1.37、1.47(1H each，both m，overlapped，H2-6)，[1.18(1H，m)，1.46(1H，m，overlapped)，H2-7]，1.36(1H，m，overlapped，H-9)，[1.54(1H，m，overlapped)，
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2.58(1H，q like，ca.J＝11 Hz，H-17)，0.92(3H，s，H3-18)，0.81(3H，s，H3-19)，1.58(3H，s，H3-21)，[2.11(1H，m)，2.75(1H，ddd，J＝4.0、9.0、16.5 Hz)，H2-22]，[3.18(1H，ddd，J＝5.5、
9.0、16.5 Hz)，3.45(1H，ddd，J＝4.0、9.0、16.5 Hz)，H2-23]，[5.51(1H，br.s)，5.71(1H，br.s)，H2-26]，1.83(3H，s，H3-27)，1.28(3H，s，H3-28)，1.11(3H，s，H3-29)，0.97(3H，s，H3-
30)，4.92(1H，d，J＝7.5 Hz，H-1')，4.26(1H，dd，J＝7.5、8.5 Hz，H-2')，4.32(1H，m，overlapped，H-3')，4.35(1H，m，overlapped，H-4')，3.94(1H，m，H-5')，[4.35(1H，m，overlapped)，4.57(1H，dd，J＝1.5、11.5 Hz)，H2-6']，5.39(1H，d，J＝7.5 Hz，H-1”)，4.14(1H，dd，J＝7.5、8.5 Hz，H-2”)，4.26(1H，m，overlapped，H-3”)，4.14(1H，dd，J＝7.5、8.5 Hz，H-4”)，3.93(1H，m，H-5”)，4.50(2H，m，H2-6”)，5.10(1H，d，J＝8.0 Hz，H-1”')，3.90(1H，dd，J＝8.0、8.5 Hz，H-2”')，4.17(1H，dd，J＝8.5、8.5 Hz，H-3”')，4.13(1H，m，overlapped，H-4”')，4.05(1H，m，H-5”')，[4.27(1H，m，overlapped)，4.77(1H，dd，J＝1.5、11.5 Hz，H2-
6”']，4.91(1H，d，J＝7.5 Hz，H-1””)，4.02(1H，dd，J＝7.5、8.5 Hz，H-2””)，4.14(1H，m，overlapped，H-3””)，4.25(1H，dd，J＝8.0、8.5 Hz，H-4””)，[3.69(1H，dd，J＝10.5、10.5
13
Hz)，4.36(1H，m，overlapped)，H2-5””]；C NMR(C5D5N，125 MHz)δ：39.3(C-1)，26.8(C-2)，
89.0(C-3)，39.7(C-4)，56.4(C-5)，18.4(C-6)，35.1(C-7)，40.0(C-8)，50.2(C-9)，36.9(C-
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105.1(C-1')，83.5(C-2')，78.4(C-3')，71.7(C-4')，78.3(C-5')，62.9(C-6')，106.1(C-
1”)，77.2(C-2”)，78.1(C-3”)，71.7(C-4”)，78.2(C-5”)，62.7(C-6”)，98.0(C-1”')，74.8(C-2”')，79.5(C-3”')，71.4(C-4”')，76.6(C-5”')，70.2(C-6”')，106.1(C-1””)，74.9(C-
2””)，78.0(C-3””)，71.2(C-4””)，67.2(C-5””)。
1.96(1H，m)，H2-11]，4.19(1H，m，H-12)，2.03(1H，dd，J＝10.5、10.5 Hz，H-13)，[0.98(1H，m)，1.54(1H，m，overlapped)，H2-15]，1.37、1.83(1H each，both m，overlapped，H2-16)，
2.58(1H，q like，ca.J＝11 Hz，H-17)，0.92(3H，s，H3-18)，0.81(3H，s，H3-19)，1.58(3H，s，H3-21)，[2.11(1H，m)，2.75(1H，ddd，J＝4.0、9.0、16.5 Hz)，H2-22]，[3.18(1H，ddd，J＝5.5、
9.0、16.5 Hz)，3.45(1H，ddd，J＝4.0、9.0、16.5 Hz)，H2-23]，[5.51(1H，br.s)，5.71(1H，br.s)，H2-26]，1.83(3H，s，H3-27)，1.28(3H，s，H3-28)，1.11(3H，s，H3-29)，0.97(3H，s，H3-
30)，4.92(1H，d，J＝7.5 Hz，H-1')，4.26(1H，dd，J＝7.5、8.5 Hz，H-2')，4.32(1H，m，overlapped，H-3')，4.35(1H，m，overlapped，H-4')，3.94(1H，m，H-5')，[4.35(1H，m，overlapped)，4.57(1H，dd，J＝1.5、11.5 Hz)，H2-6']，5.39(1H，d，J＝7.5 Hz，H-1”)，4.14(1H，dd，J＝7.5、8.5 Hz，H-2”)，4.26(1H，m，overlapped，H-3”)，4.14(1H，dd，J＝7.5、8.5 Hz，H-4”)，3.93(1H，m，H-5”)，4.50(2H，m，H2-6”)，5.10(1H，d，J＝8.0 Hz，H-1”')，3.90(1H，dd，J＝8.0、8.5 Hz，H-2”')，4.17(1H，dd，J＝8.5、8.5 Hz，H-3”')，4.13(1H，m，overlapped，H-4”')，4.05(1H，m，H-5”')，[4.27(1H，m，overlapped)，4.77(1H，dd，J＝1.5、11.5 Hz，H2-
6”']，4.91(1H，d，J＝7.5 Hz，H-1””)，4.02(1H，dd，J＝7.5、8.5 Hz，H-2””)，4.14(1H，m，overlapped，H-3””)，4.25(1H，dd，J＝8.0、8.5 Hz，H-4””)，[3.69(1H，dd，J＝10.5、10.5
13
Hz)，4.36(1H，m，overlapped)，H2-5””]；C NMR(C5D5N，125 MHz)δ：39.3(C-1)，26.8(C-2)，
89.0(C-3)，39.7(C-4)，56.4(C-5)，18.4(C-6)，35.1(C-7)，40.0(C-8)，50.2(C-9)，36.9(C-
10)，30.9(C-11)，70.1(C-12)，49.5(C-13)，51.5(C-14)，30.7(C-15)，26.7(C-16)，52.1(C-
17)，16.0(C-18)，16.3(C-19)，83.2(C-20)，21.7(C-21)，29.8(C-22)，32.8(C-23)，202.6(C-24)，144.4(C-25)，125.5(C-26)，17.9(C-27)，28.1(C-28)，16.6(C-29)，17.4(C-30)，
105.1(C-1')，83.5(C-2')，78.4(C-3')，71.7(C-4')，78.3(C-5')，62.9(C-6')，106.1(C-
1”)，77.2(C-2”)，78.1(C-3”)，71.7(C-4”)，78.2(C-5”)，62.7(C-6”)，98.0(C-1”')，74.8(C-2”')，79.5(C-3”')，71.4(C-4”')，76.6(C-5”')，70.2(C-6”')，106.1(C-1””)，74.9(C-
2””)，78.0(C-3””)，71.2(C-4””)，67.2(C-5””)。
[0137] ESI-Q-Orbitrap MS：负离子模式：m/z 1091.56445[M-H]-(calcd for C53H87O23，1091.56327)，确定其分子式为C53H88O23。
[0138] 实施例3
[0139] 人参二醇型三萜皂苷化合物1～7的生物活性测定
[0140] 巨噬细胞作为分布于全身的免疫细胞，在免疫监视系统中扮演着核心角色。病原体进入机体后，巨噬细胞可以立即通过释放各种炎症介质而间接地发挥免疫作用。RAW 264.7细胞作为巨噬细胞的一种，因具有很强的黏附、吞噬抗原的能力，是研究微生物学、免疫学等相关学科的常用细胞株。脂多糖(Lipopolysaccharide，LPS)可刺激RAW 264.7细胞产生急性炎症反应，释放一氧化氮(Nitric oxide，NO)等多种炎症因子，这些因子可参与调控机体炎症的发生发展，其含量可间接反应炎症发生的程度。
[0141] 本发明采用LPS刺激诱导的RAW 264.7细胞模型，通过Griess试剂法检测细胞外NO的含量，测定上述化合物1～7对NO释放的抑制作用。
[0142] I.小鼠巨噬细胞RAW 264.7细胞的培养与处理
[0143] 使用含10％胎牛血清、100unit/mL青霉素和100μg/mL链霉素混合液的DMEM高糖酚红培养液，在37℃、5％CO2的恒温培养箱中培养RAW264.7细胞。待细胞融合至约90％时，按1×106cells/mL的密度接种于24孔板中，培养24小时后诱导分化。诱导期间，将诱导组的细胞培养液换成含有终浓度LPS(0.5μg/mL)、10％胎牛血清的DMEM高糖无酚红诱导液，制造RAW264.7炎症性模型。正常组使用不含LPS的DMEM高糖无酚红全培基。
[0144] II.化合物1～7对LPS刺激的RAW 264.7细胞释放NO的影响
[0145] 取对数生长期RAW 264.7巨噬细胞接种于24孔培养板中，细胞密度为1×106cells/mL，培养24小时后所有细胞更换无酚红培基培养，分别为：正常组，模型组(LPS
0.5μg/mL)，阳性药对照组(LPS0.5μg/mL+1.5μg/mL DEX)，给药组(LPS 0.5μg/mL+50μM各化合物1～7)。培养18小时后，吸取50μL培养上清于96孔细胞培养板，室温状态下，各孔加入50μL Griess Reagent I及50μL Griess Reagent II并震荡30s，酶标仪540nm检测吸光度，并用校准曲线确定实验各组NO的浓度。
0.5μg/mL)，阳性药对照组(LPS0.5μg/mL+1.5μg/mL DEX)，给药组(LPS 0.5μg/mL+50μM各化合物1～7)。培养18小时后，吸取50μL培养上清于96孔细胞培养板，室温状态下，各孔加入50μL Griess Reagent I及50μL Griess Reagent II并震荡30s，酶标仪540nm检测吸光度，并用校准曲线确定实验各组NO的浓度。
[0146] III.实验结果
[0147] 为了在安全浓度下测试化合物1～7的活性，首先进行了MTT实验，结果表明，在50μM浓度下，化合物1～7对RAW 264.7细胞的生殖不具有抑制作用，故在该浓度下对它们抑制NO产生的活性进行了筛选。结果参见下表1以及图1A～图1G。需要说明的是，在下表1和图1A～图1G中，亚硝酸盐相对浓度为相比于对照组(100％)的百分比；*表示P<0.05；**表示P<0.01；***表示P<0.001(给药组与对照组的差异)；n＝4；阳性药的终浓度为1.5μg/mL。另外，在表1中，表中数值代表平均值±标准偏差；并且化合物1～7的终浓度为50μM。
[0148] 表1.化合物1～7对RAW 264.7细胞释放NO的抑制作用
[0149]
[0150] 上表1的结果表明，在50μM浓度下，化合物1～7均具有较强的抑制NO产生的活性。另外，由图1A～图1G可以确认，其抑制作用在10、25、50μM浓度下呈剂量依赖性。
[0151] 工业实用性
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