一种犬C反应蛋白快速定量分析检测卡及其制备方法
专利汇可以提供一种犬C反应蛋白快速定量分析检测卡及其制备方法专利检索，专利查询，专利分析的服务。并且本 发明 公开了一种犬C反应蛋白快速定量分析检测卡及其制备方法，所述犬C反应蛋白快速定量分析检测卡包括PVC 底板 、样品垫、结合垫、 硝酸 纤维 素膜和吸 水 滤纸 ，所述结合垫上预包被 荧光 微球标记的抗-CRP单克隆 抗体 Ab1，所述硝酸纤维膜上设有一条包被羊抗-鼠IgG单克隆抗体的质控C线和一条包被抗-CRP单克隆抗体Ab2的检测T线。当进行检测时，样本中的CRP将被荧 光标 记抗体Ab1捕获形成复合物，由于层析作用复合物沿膜向前移动，被检测线处的抗体Ab2截留，形成“荧光标记Ab1-CRP-Ab2”复合物，该复合物在紫外 光激发 下能激发产生615nm的红光，激发光饱和时，激发产生的荧光强度与 试纸 条上富集的反应复合物数量成正比，即可计算出检样中 抗原 的含量。，下面是一种犬C反应蛋白快速定量分析检测卡及其制备方法专利的具体信息内容。
1.一种犬C反应蛋白快速定量分析检测卡及其制备方法，其特征在于：所述犬C反应蛋白快速定量分析检测卡包括PVC底板(1)、样品垫(2)、结合垫(3)、硝酸纤维素膜(4)和吸水滤纸(5)，所述样品垫(2)、结合垫(3)、硝酸纤维素膜(4)和吸水滤纸(5)设置在PVC底板(1)上并依次衔接，所述结合垫(3)上预包被荧光微球标记的抗-CRP单克隆抗体Ab1，所述硝酸纤维膜(4)上设有一条包被羊抗-鼠IgG单克隆抗体的质控C线(6)和一条包被抗-CRP单克隆抗体Ab2的检测T线(7)。
2.根据权利要求1所述的一种犬C反应蛋白快速定量分析检测卡及其制备方法，其特征在于，所述样品垫(2)的制备方法包括如下步骤：
(1)配置样品垫处理液：含1％牛血清蛋白、2％聚乙二醇4000和0.5％Triton X-100的甘氨酸缓冲液；
(2)将样品垫处理液以0.5μl/cm2的量比喷涂在样品垫(2)上。
3.根据权利要求1所述的一种犬C反应蛋白快速定量分析检测卡及其制备方法，其特征在于，所述结合垫(3)的制备方法包括如下步骤：
将用荧光微球标记的-CRP单克隆抗体Ab1按3.5μl/cm2的量比喷涂在结合垫(3)上。
4.根据权利要求1所述的一种犬C反应蛋白快速定量分析检测卡及其制备方法，其特征在于，所述硝酸纤维素膜(4)的制备方法包括如下步骤：
(1)用含3％蔗糖的pH＝7.4的0.01M的磷酸盐缓冲液将羊抗-鼠IgG单克隆抗体稀释至
1mg/mL，即为质控C线工作液；
(2)用含3％蔗糖的pH＝7.4的0.01M的磷酸盐缓冲液将抗-CRP单克隆抗体Ab2稀释至
1mg/mL，即为检测T线工作液；
(3)取PVC底板(1)，粘贴硝酸纤维膜(4)；
(4)在硝酸纤维膜上划质控C线(6)和检测T线(7)，划线浓度均为1μl/cm；
(5)将完成划线的粘贴硝酸纤维膜(4)的PVC底板(1)置于干燥箱中35～40摄氏度干燥处理。
5.根据权利要求1所述的一种犬C反应蛋白快速定量分析检测卡及其制备方法，其特征在于，所述荧光微球标记的抗-CRP单克隆抗体Ab1的制备方法包括如下步骤：
(1)将1mL标记缓冲液0.1M MES缓冲液和1mg荧光微球加入到离心管中，涡旋均匀；
(2)在上述离心管中加入20～50μL标记活化剂A和20～50μL标记活化剂B，在旋转培养器上活化30min；
(3)将活化后的荧光微球离心处理30min，保留沉淀，加入500μL淬灭剂，90W功率超声处理，每个超声周期中超声2s，间歇5s，完成1～3个超声周期；
(4)在淬灭后的荧光微球中加入20～200μg抗-CRP单克隆抗体Ab1，涡旋均匀，在旋转培养器上活化30min；
(5)加入2mL标记封闭液，超声2s，间歇5s，重复3次，在旋转培养器上活化30min；
(6)离心处理30min，保留沉淀，加入2mL标记荧光球稀释液，90W功率超声处理，每个超声周期中超声2s，间歇5s，完成3～5个超声周期。
6.根据权利要求5所述的一种犬C反应蛋白快速定量分析检测卡及其制备方法，其特征在于，所述荧光微球为含有稀土铕元素的荧光错配物的聚苯乙烯微球，所述荧光微球的密度为1.05g/cm3，所述荧光微球的的直径为300nm，所述荧光微球的功能基团为羧基。
7.根据权利要求5所述的一种犬C反应蛋白快速定量分析检测卡及其制备方法，其特征在于，所述标记活化剂A为含50mg/mL NHS的MES缓冲液，所述标记活化剂B为含50mg/mL EDC的MES缓冲液。
8.根据权利要求5所述的一种犬C反应蛋白快速定量分析检测卡及其制备方法，其特征在于，所述标记封闭液为含3％牛血清蛋白的0.04M pH＝8.0的乙醇胺溶液，所述标记荧光微球稀释液为含1％牛血清蛋白、0.5％牛丙种球蛋白、3％蔗糖的甘氨酸缓冲液，所述淬灭剂为含0.25％甲醇的MES缓冲液。
一种犬C反应蛋白快速定量分析检测卡及其制备方法
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具体实施方式
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