专利汇可以提供一种高频诱导黄山苦茶组培苗生根的方法专利检索,专利查询,专利分析的服务。并且本 发明 提供一种高频诱导黄山苦茶组培苗生根的方法,该方法包括初代培养、增殖培养和生根培养三个培养步骤,直接对再生的黄山苦茶组培苗进行不定根诱导,通过一系列培养基与培养工艺的组合,省去了壮苗环节,简化了快繁体系,明显缩短了组织培养的周期。本发明方法将未经壮苗的不定芽组培苗直接接种到生根诱导培养基中,不需经过传统方法中的壮苗培养期,节约20-30天的培养时间,较大程度缩短了不定根诱导的时间。本发明高频诱导黄山苦茶组培苗生根,组培苗接种到不定根诱导培养基后,15天有60%的组培苗可观察到不定根产生,23天后生根率达到72%,30天后生根率达到93%,不定根诱导率明显高于传统方法。,下面是一种高频诱导黄山苦茶组培苗生根的方法专利的具体信息内容。
1.一种高频诱导黄山苦茶组培苗生根的方法,包括初代培养、增殖培养、生根培养,其特征在于:所述初代培养的培养基包括KT和NAA,其中KT的浓度为0.5mg/L~1.0mg/L,NAA的浓度为1.0mg/L~2.0mg/L;所述增殖培养的培养基包括6-BA和NAA,其中6-BA的浓度为
0.5mg/L~2.0mg/L,NAA的浓度为0.1mg/L~0.2mg/L;所述生根培养的培养基包括IBA和IAA,其中IBA的浓度为1.0mg/L~2.0mg/L,IAA的浓度为1.0mg/L~2.0mg/L。
2.如权利要求1所述的方法,其特征在于:所述初代培养的培养基中KT的浓度为0.5mg/L,NAA的浓度为2.0mg/L。
3.如权利要求1或2所述的方法,其特征在于:所述增殖培养的培养基中6-BA的浓度为
2.0mg/L,NAA的浓度为0.1mg/L。
4.如权利要求1或2所述的方法,其特征在于:所述生根培养中IBA的浓度为1.0mg/L,IAA的浓度为2.0mg/L。
5.如权利要求2所述的方法,其特征在于:所述初代培养为春季、秋季取黄山苦茶当年生幼嫩新梢,先用洗衣粉水洗去表面灰尘污渍,再流水冲洗1小时;在无菌操作条件下,先用
75%酒精消毒约30s,无菌水漂洗3次,再用0.1%HgCl2+0.1%吐温-20消毒4min,无菌水漂洗5次,最后用无菌吸水纸将材料表面的水,外植体接种在MS+0.5mg/LKT+2.0mg/LNAA+卡那胶5.8g/L+蔗糖30g/L的培养基上,培养30天。
6.如权利要求3所述的方法,其特征在于:所述增殖培养为待腋芽萌发并伸长至2cm左右时,将其剪下,进行增殖培养,增殖培养的培养基基为:MS+0.2mg/LNAA+2.0mg/L6-BA+卡那胶5.8g/L+蔗糖30g/L,培养30天。
7.如权利要求4所述的方法,其特征在于:所述生根培养为待组培苗长至3厘米左右,选取生长健壮的组培苗,在无菌操作条件下,用浓度为500mg/L的吲哚丁酸溶液浸泡组培苗的基部10min,后转入生根培养基中,生根培养基为1/2MS+1.0mg/LIBA+2.0mg/LIAA+1g/L活性炭+卡那胶5.8g/L+蔗糖20g/L,培养30天。
8.如权利要求1所述的方法,其特征在于,包括如下步骤:
(1)初代培养:将带有黄山苦茶腋芽幼嫩茎段,先用洗衣粉水洗去表面灰尘污渍,再流水冲洗1小时,在无菌操作条件下,先用75%酒精消毒约30s,无菌水漂洗3次,再用0.1%HgCl2+0.1%吐温-20消毒4min,无菌水漂洗5次,最后用无菌吸水纸将材料表面的水,将外植体接种在MS+0.5mg/LKT+2.0mg/LNAA+卡那胶5.8g/L+蔗糖30g/L的培养基上,光照18h/d,黑暗6h/d,23摄氏度,培养30天;
(2)增殖培养:待腋芽萌发并伸长至2cm左右时,将其剪下,进行增殖培养,增殖培养的培养基基为:MS+0.2mg/LNAA+2.0mg/L6-BA+卡那胶5.8g/L+蔗糖30g/L,光照18h/d,黑暗6h/d,23摄氏度,培养30天;
(3)生根培养:待组培苗长至3厘米左右,选取生长健壮的组培苗,在无菌操作条件下,用浓度为500mg/L的吲哚丁酸溶液浸泡组培苗的基部10min,后转入诱导生根培养基中,生根培养基为1/2MS+1.0mg/LIBA+2.0mg/LIAA+1g/L活性炭+卡那胶5.8g/L+蔗糖20g/L,光照
18h/d,黑暗6h/d,23摄氏度,培养30天。
9.如权利要求8所述的方法,其特征在于:所述生根培养的光照为红光。
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