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复合多肽蛋白质粉及其制备方法

阅读：966发布：2020-05-11

专利汇可以提供复合多肽蛋白质粉及其制备方法专利检索，专利查询，专利分析的服务。并且本发明公开了一种复合多肽蛋白质粉，按重量份数计，包括：大豆分离蛋白 80-90份、鱼腥藻蛋白5-10份、大豆肽粉5-10份、清蛋白多肽粉1-5份、膨化燕麦粉0.1-1份、樱桃粉0.1-1份、抗性糊精0.1-1份、三氯蔗糖 0.1-1份、瓜尔胶0.1-2份、刺槐豆胶0.1-2份、奶精0.1-2份；还提供了所述复合多肽蛋白质粉的制备方法。本发明使用大豆分离蛋白作为主要成分并添加鱼腥藻蛋白和多种肽粉，制成的复合多肽蛋白质粉在保证营养价值和保健价值的条件下降低了成本。，下面是复合多肽蛋白质粉及其制备方法专利的具体信息内容。

权利要求

1.一种复合多肽蛋白质粉，其特征在于，按重量份数计，包括：
大豆分离蛋白80-90份、鱼腥藻蛋白5-10份、大豆肽粉5-10份、清蛋白多肽粉1-5份、膨化燕麦粉0.1-1份、樱桃粉0.1-1份、抗性糊精0.1-1份、三氯蔗糖0.1-1份、瓜尔胶0.1-2份、刺槐豆胶0.1-2份、奶精0.1-2份。
2.如权利要求1所述的复合多肽蛋白质粉，其特征在于，所述鱼腥藻蛋白的制备方法为：
步骤一、取新鲜鱼腥藻，过滤、清洗杂质后研磨成粉，加入中性磷酸盐缓冲液充分溶解，在-40℃冷冻1h，快速解冻，重复冷冻解冻3次；
步骤二、向步骤一得到的混合液中加入利凡诺，搅拌均匀后静置4h，在3000r/min条件下离心10min，取上清液；
步骤三、向所述上清液中加入过量的质量浓度为60％的硫酸铵溶液，在4000r/min条件下离心15min，取沉淀物；将所述沉淀物溶解于中性磷酸盐缓冲液中，过SephadexG-25柱后，向所得溶液中再次加入过量的质量浓度为60％的硫酸铵溶液并离心处理15min，所得沉淀物即为鱼腥藻蛋白。
3.如权利要求2所述的复合多肽蛋白质粉，其特征在于，所述步骤一中快速解冻的方法为超声波辅助解冻，其功率为650W，每工作10s后间隔10s再继续工作。
4.一种如权利要求1-3任一所述的复合多肽蛋白质粉的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
步骤一、称量大豆分离蛋白、鱼腥藻蛋白、大豆肽粉、清蛋白多肽粉、抗性糊精、膨化燕麦粉、樱桃粉，混合均匀后，投入制粒机中进行制粒；
步骤二、使用快速整粒机对制粒后的物料进行整粒筛选；
步骤三、称量奶精、三氯蔗糖、瓜尔胶、刺槐豆胶分别过筛网后备用；
步骤四、将筛选后的所有物料用混合机混合，控制转速为4r/min，混合30min，得到颗粒状粉末成品。
5.如权利要求4所述的复合多肽蛋白质粉的制备方法，其特征在于，在步骤一中，所述制粒机为流化床制粒机或沸腾制粒机，所述制粒选用喷雾制粒法，其条件为：以纯净水作为粘合剂，所述混合物与所述粘合剂的质量-体积比为13.75kg/L，物料温度为55-65℃，进风口温度为120℃，风机频率为16Hz，喷液频率为6Hz，干燥程度为颗粒含水量小于3％。
6.如权利要求4所述的复合多肽蛋白质粉的制备方法，其特征在于，在所述步骤二中，整粒时选用的筛网的目数为40；在所述步骤三中，所述奶精过筛时筛网的目数为30，所述三氯蔗糖、瓜尔胶、刺槐豆胶过筛时筛网的目数为80。

说明书全文

复合多肽蛋白质粉及其制备方法

技术领域

[0001] 本发明涉及蛋白质粉领域。更具体地说，本发明涉及一种复合多肽蛋白质粉及其制备方法。

背景技术

[0002] 蛋白质是人体必须的营养素之一，在生命活动中起着生命功能执行者的作用，一般情况下，蛋白质占人体重量的16％-20％，是构成机体组织、器官的重要组成成分，由于人
体内各组织细胞的不断更新，需摄入足够的蛋白质以维持组织的更新、修复功能，并为人体
正常活动提供能量。蛋白质缺乏会导致人体代谢率下降、免疫力衰退等问题。

[0003] 蛋白质粉是一种营养性食品补充剂，通常将大豆蛋白、酪蛋白、乳清蛋白等蛋白提纯后制成富含蛋白质的粉末，为蛋白质缺失或摄入不足的人群补充必需的营养。

[0004] 螺旋藻是一种水生植物，属于蓝藻的一种，其蛋白质含量高达60％-70％，包括人体必需的8种氨基酸，且具有低脂低糖的特点。螺旋藻蛋白中的主要成分是藻胆蛋白，藻胆
蛋白是一种水溶性植物蛋白，其氨基酸种类丰富且不含胆固醇，具有一定的抗氧化能力，可
提高抑制肝肿瘤细胞的淋巴细胞的活性从而提升人体免疫力，与动物性蛋白结合可进一步
增加蛋白粉的营养价值并促进人体消化吸收。但螺旋藻适于高温碱性环境生长，对生长环
境要求较高，大量培育时存在高成本、高污染等问题。

[0005] 鱼腥藻属于淡水藻，其蛋白质含量在40％以上，同样包含全部的人体必需氨基酸。鱼腥藻蛋白中的主要成分是藻胆蛋白，且鱼腥藻生长速度快，容易人工培养繁殖，培育成本
低，可将其作为原料大量提取藻胆蛋白并应用于工业生产。

发明内容

[0006] 本发明的目的是提供一种复合多肽蛋白质粉及其制备方法，使用大豆分离蛋白作为主要成分并添加鱼腥藻蛋白和多种肽粉，制成的复合多肽蛋白质粉在保证营养价值和保
健价值的条件下降低了成本。

[0007] 为了实现根据本发明的这些目的和其它优点，提供了一种复合多肽蛋白质粉，按重量份数计，包括：

[0008] 大豆分离蛋白80-90份、鱼腥藻蛋白5-10份、大豆肽粉5-10份、清蛋白多肽粉1-5 份、膨化燕麦粉0.1-1份、樱桃粉0.1-1份、抗性糊精0.1-1份、三氯蔗糖0.1-1份、瓜尔胶0.1-
2份、刺槐豆胶0.1-2份、奶精0.1-2份。

[0009] 优选的是，所述复合多肽蛋白质粉，所述鱼腥藻蛋白的制备方法为：

[0010] 步骤一、取新鲜鱼腥藻，过滤、清洗杂质后研磨成粉，加入中性磷酸盐缓冲液充分溶解，在-40℃冷冻1h，快速解冻，重复冷冻解冻3次；

[0011] 步骤二、向步骤一得到的混合液中加入利凡诺，搅拌均匀后静置4h，在3000r/min条件下离心10min，取上清液；

[0012] 步骤三、向所述上清液中加入过量的质量浓度为60％的硫酸铵溶液，在4000r/min条件下离心15min，取沉淀物；将所述沉淀物溶解于中性磷酸盐缓冲液中，过SephadexG-25
柱后，向所得溶液中再次加入过量的质量浓度为60％的硫酸铵溶液并离心处理15min，所得
沉淀物即为鱼腥藻蛋白。

[0013] 优选的是，所述复合多肽蛋白质粉，所述步骤一中快速解冻的方法为超声波辅助解冻，其功率为650W，每工作10s后间隔10s再继续工作。

[0014] 本发明还提供了一种复合多肽蛋白质粉的制备方法，包括以下步骤：

[0015] 步骤一、称量大豆分离蛋白、鱼腥藻蛋白、大豆肽粉、清蛋白多肽粉、抗性糊精、膨化燕麦粉、樱桃粉，混合均匀后，投入制粒机中进行制粒；

[0016] 步骤二、使用快速整粒机对制粒后的物料进行整粒筛选；

[0017] 步骤三、称量奶精、三氯蔗糖、瓜尔胶、刺槐豆胶分别过筛网后备用；

[0018] 步骤四、将筛选后的所有物料用混合机混合，控制转速为4r/min，混合30min，得到颗粒状粉末成品。

[0019] 优选的是，所述复合多肽蛋白质粉的制备方法，在步骤一中，所述制粒机为流化床制粒机或沸腾制粒机，所述制粒选用喷雾制粒法，其条件为：以纯净水作为粘合剂，所述混
合物与所述粘合剂的质量-体积比为13.75kg/L，物料温度为55-65℃，进风口温度为120℃，
风机频率为16Hz，喷液频率为6Hz，干燥程度为颗粒含水量小于3％。

[0020] 优选的是，所述复合多肽蛋白质粉的制备方法，在所述步骤二中，整粒时选用的筛网的目数为40；在所述步骤三中，所述奶精过筛时筛网的目数为30，所述三氯蔗糖、瓜尔胶、
刺槐豆胶过筛时筛网的目数为80。

[0021] 本发明至少包括以下有益效果：

[0022] 1、选用可大量人工繁殖的鱼腥藻作为原料提取藻类蛋白质，降低了原料成本和原料培养时的环境成本，减小环境污染的同时提升了经济效益。

[0023] 2、以大豆分离蛋白为主要成分，添加多种小分子肽和鱼腥藻蛋白，与单一种类蛋白质制备的蛋白质粉相比，该复合多肽蛋白质粉水溶性更好，氨基酸种类、含量丰富且更加
容易被人体吸收利用。

[0024] 3、鱼腥藻蛋白与清蛋白多肽能产生协同增效作用，与其中任一单一成分相比，两者的混合物具有更强的抗氧化能力，并可有效增强淋巴细胞活性从而进一步提高免疫力。

[0025] 4、选用利凡诺从破碎的鱼腥藻细胞中提取蛋白质，节省了后续长时间的透析过程，加快了制备速度，且通过与硫酸铵提取的方法结合，有效提高了鱼腥藻蛋白的提取纯
度，相比传统的制备方法更加适合工业化生产。

[0026] 本发明的其它优点、目标和特征将部分通过下面的说明体现，部分还将通过对本发明的研究和实践而为本领域的技术人员所理解。

具体实施方式

[0027] 下面结合实施例对本发明做进一步的详细说明，以令本领域技术人员参照说明书文字能够据以实施。

[0028] 需要说明的是，下述实施方案中所述实验方法，如无特殊说明，均为常规方法，所述试剂和材料，如无特殊说明，均可从商业途径获得；在本发明的描述中，术语“横向”、“纵
向”、“上”、“下”、“前”、“后”、“左”、“右”、“竖直”、“水平”、“顶”、“底”、“内”、“外”等指示的方位或位置关系为基于实施例所示的方位或位置关系，仅是为了便于描述本发明和简化描
述，并不是指示或暗示所指的装置或元件必须具有特定的方位、以特定的方位构造和操作，
因此不能理解为对本发明的限制。

[0029] 实施例1：

[0030] 一种鱼腥藻蛋白，其由以下步骤制得：

[0031] 步骤一、取新鲜鱼腥藻，过滤、清洗杂质后研磨成粉，加入中性磷酸盐缓冲液充分溶解，在-40℃冷冻1h，使用超声波辅助快速解冻，超声波的功率为650W，每工作10s后需间
隔10s再继续工作，重复冷冻解冻3次；

[0032] 步骤二、向步骤一得到的混合液中加入利凡诺，搅拌均匀后静置4h，在3000r/min条件下离心10min，取上清液；

[0033] 步骤三、向所述上清液中加入过量的质量浓度为60％的硫酸铵溶液，在4000r/min条件下离心15min，取沉淀物；将所述沉淀物溶解于中性磷酸盐缓冲液中，过SephadexG-25
柱后，向所得溶液中再次加入过量的质量浓度为60％的硫酸铵溶液并离心处理15min，所得
沉淀物即为鱼腥藻蛋白。

[0034] 实施例2：

[0035] 一种复合多肽蛋白质粉，按重量份数计，包括：大豆分离蛋白80份、鱼腥藻蛋白5 份、大豆肽粉5份、清蛋白多肽粉1份、膨化燕麦粉0.1份、樱桃粉0.1份、抗性糊精0.1 份、三
氯蔗糖0.1份、瓜尔胶0.1份、刺槐豆胶0.1份、奶精0.1份。

[0036] 上述复合多肽蛋白质粉由以下步骤制得：

[0037] 步骤一、称量大豆分离蛋白、鱼腥藻蛋白、大豆肽粉、清蛋白多肽粉、抗性糊精、膨化燕麦粉、樱桃粉，混合均匀后，投入流化床制粒机中用喷雾制粒法进行制粒，所述喷雾制
粒法的步骤为：

[0038] 设置进风口温度为120℃，加热，当物料温度达到55-65℃时，加入质量-体积比为 13.75kg/L的纯净水作为粘合剂制粒，设置风机频率为16.00HZ，喷液频率为6.00HZ，待粘合
剂喷完，继续对物料进行沸腾干燥，控制物料水分在3％以下后停止干燥，停主风机，清灰，
停喷枪气雾，出料；

[0039] 步骤二、使用快速整粒机选用40目的筛网对制粒后的物料进行整粒筛选；

[0040] 步骤三、称量奶精过30目的筛网后备用，称量三氯蔗糖、瓜尔胶、刺槐豆胶过80目的筛网后备用；

[0041] 步骤四、将筛选后的所有物料用混合机混合，控制转速为4r/min，混合30min，得到颗粒状粉末成品。

[0042] 其中，原料来源如表1所示，所述鱼腥藻蛋白为实施例1制得的鱼腥藻蛋白，下同。

[0043] 表1

[0044]

[0045]

[0046] 实施例3：

[0047] 一种复合多肽蛋白质粉，按重量份数计，包括：大豆分离蛋白85份、鱼腥藻蛋白8 份、大豆肽粉7份、清蛋白多肽粉3份、膨化燕麦粉0.5份、樱桃粉0.5份、抗性糊精0.5 份、三
氯蔗糖0.5份、瓜尔胶1份、刺槐豆胶1份、奶精1份。

[0048] 上述复合多肽蛋白质粉的制备方法及原料来源与实施例2相同。

[0049] 实施例4：

[0050] 一种复合多肽蛋白质粉，按重量份数计，包括：大豆分离蛋白90份、鱼腥藻蛋白10 份、大豆肽粉10份、清蛋白多肽粉5份、膨化燕麦粉1份、樱桃粉1份、抗性糊精1份、三氯蔗糖1
份、瓜尔胶2份、刺槐豆胶2份、奶精2份。

[0051] 上述复合多肽蛋白质粉的制备方法及原料来源与实施例2相同。

[0052] 对比例1：

[0053] 一种复合多肽蛋白质粉，按重量份数计，包括：大豆分离蛋白85份、大豆肽粉7份、清蛋白多肽粉3份、膨化燕麦粉0.5份、樱桃粉0.5份、抗性糊精0.5份、三氯蔗糖0.5份、瓜尔
胶1份、刺槐豆胶1份、奶精1份。

[0054] 上述复合多肽蛋白质粉的制备方法及原料来源与实施例2相同。

[0055] 对比例2：

[0056] 一种复合多肽蛋白质粉，按重量份数计，包括：大豆分离蛋白85份、鱼腥藻蛋白8 份、大豆肽粉7份、膨化燕麦粉0.5份、樱桃粉0.5份、抗性糊精0.5份、三氯蔗糖0.5份、瓜尔胶
1份、刺槐豆胶1份、奶精1份。

[0057] 上述复合多肽蛋白质粉的制备方法及原料来源与实施例2相同。

[0058] 对比例3：

[0059] 一种复合多肽蛋白质粉，按重量份数计，包括：大豆分离蛋白85份、大豆肽粉7份、膨化燕麦粉0.5份、樱桃粉0.5份、抗性糊精0.5份、三氯蔗糖0.5份、瓜尔胶1份、刺槐豆胶1
份、奶精1份。

[0060] 上述复合多肽蛋白质粉的制备方法及原料来源与实施例2相同。

[0061] 对比例4：

[0062] 一种鱼腥藻蛋白，其由以下步骤制得：

[0063] 步骤一、取新鲜鱼腥藻，过滤、清洗杂质后研磨成粉，加入中性磷酸盐缓冲液充分溶解，在-40℃冷冻1h，使用超声波辅助快速解冻，超声波的功率为650W，每工作10s后需间
隔10s再继续工作，重复冷冻解冻3次；

[0064] 步骤二、向步骤一得到的混合液中加入过量的质量浓度为60％的硫酸铵溶液，在 4000r/min条件下离心15min，取沉淀物；

[0065] 步骤三、将所述沉淀物溶解于中性磷酸盐缓冲液中，过羟基磷灰石柱并用中性磷酸盐缓冲液洗脱，向所得洗脱液中再次加入过量的质量浓度为60％的硫酸铵溶液并离心处
理 15min，所得沉淀物即为鱼腥藻蛋白。

[0066] 其中，所述中性磷酸盐缓冲液的浓度为0.1mol/L。

[0067] 实验例1：鱼腥藻蛋白纯度测试

[0068] 分别取实施例1和对比例4中制得的鱼腥藻蛋白样品5mg，分别溶于10ml中性磷酸盐缓冲液中得到蛋白质溶液；分别取5mL蛋白质溶液，在紫外分光光度计上测定样品在 280
和620nm的吸光度并计算藻胆蛋白的相对纯度，实验结果见表2。

[0069] 表2

[0070]

[0071]

[0072] 根据表2可知，在样品的质量和浓度相同的条件下，实施例1中的制备方法制得的鱼腥藻蛋白的蛋白质吸光度(OD280nm)大于对比例4中的制备方法制得的鱼腥藻蛋白，即实施
例1样品的蛋白质含量大于对比例4的蛋白质含量；且实施例1的样品在620nm的吸光度与
280nm的吸光度的比值大于对比例4，即实施例1提取出的蛋白质中藻胆蛋白的比例大于对
比例4中藻胆蛋白的比例。

[0073] 综上所述，使用实施例1中的方法制备鱼腥藻蛋白，其提取的蛋白质纯度较高且藻胆蛋白的相对纯度较高。

[0074] 实验例2：氨基酸成分分析

[0075] 分别取实施例2、实施例3、实施例4中制得的复合多肽蛋白质粉样品1g，将其充分溶解于2ml蒸馏水中，选用日立L-8900氨基酸自动分析仪对样品溶液中不同种类的氨基酸
含量进行测试，对测试结果取平均值，并将必需氨基酸的含量与FAO/WHO标准的氨基酸含量
进行对比，结果见表3。

[0076] 表3

[0077]

[0078]

[0079] 根据测试数据，复合多肽蛋白质粉中含有18种常规氨基酸，且除甲硫氨酸外其余必需氨基酸的含量均超过FAO/WHO推荐的标准，所述复合多肽蛋白质粉具有较高的营养价
值。

[0080] 实验例3：免疫力实验

[0081] 选择体重在390g-410g的成年雄性大鼠作为实验对象，将其分为5个实验组，每组3 只大鼠，在相同环境的实验箱中饲养。将实施例3、对比例1、对比例2、对比例3中制得的复合
多肽蛋白质粉样品0.67g充分溶于蒸馏水后，分组经口对前4组实验对象进行灌胃，每日一
次，连续实验三日。此外，设置一空白对照组，在饲养环境相同的条件下，将上述复合多肽蛋
白质粉替换为等量的蒸馏水，对第5组实验对象进行相同实验。

[0082] 三日后分别测试每只大鼠的足跖肿胀度和淋巴细胞增殖能力，取每组平均值对比，结果如表4所示。

[0083] 表4

[0084]

[0085] 根据上述实验结果可知，用实验例3制备的复合多肽蛋白质粉喂养大鼠，其足跖肿胀度和OD差值明显高于其余对照组，对比例1和对比例2中制得的复合多肽蛋白质粉的实验
效果优于对比例3，对比例3的实验效果与空白对照组存在较大差别。

[0086] 因此，复合多肽蛋白质粉具有可增强小鼠迟发型变态反应能力和淋巴细胞转化能力的特点，对比例3中的复合多肽蛋白质粉可使大鼠具备一定的免疫能力，在复合多肽蛋白
质粉中同时加入鱼腥藻蛋白和清蛋白多肽粉后大鼠的免疫能力得到较大提升，且明显优于
单独加入鱼腥藻蛋白或清蛋白多肽粉的效果。

[0087] 实验例4：抗氧化能力

[0088] 总抗氧化能力测定：抗氧化物质能使三价铁离子还原成二价铁离子，后者可与啡啉类物质形成稳固的络合物，通过比色可测出其抗氧化能力的高低，吸光值越大总抗氧化
能力越强。分别取实施例3、对比例1、对比例2、对比例3中制得的复合多肽蛋白质粉样品
0.1g充分溶于5mL蒸馏水中，并设置一空白对照组，用等量氯化钠替代上述复合多肽蛋白质
粉样品进行实验。用紫外分光光度计测定各实验组溶液的OD差值并计算每组样品的总抗氧
化能力，测试结果如表5所示。

[0089] 计算公式：

[0090] 对丙二醛(MDA)生成的影响测定：取新鲜小鼠肝脏2g，按1:9的重量体积比取生理盐水，于冰浴中分步将肝组织剪碎，用玻璃组织匀浆器制成匀浆液，在4000r/min的转速下
离心30min，取得的上清液即为肝组织匀浆。分别取实施例3、对比例1、对比例2、对比例3中
制得的复合多肽蛋白质粉的0.1g样品，并充分溶解于5mL蒸馏水中。

[0091] 取0.2ml的肝组织匀浆和0.1ml样品溶液，在试管中混匀后在37℃下温浴1h后，测定OD差值并计算MDA的含量。此外，设置空白对照组和标准对照组，其中空白对照组用等量
氯化钠替代上述复合多肽蛋白质粉样品进行相同的实验，测定OD差值；标准对照组取0.3ml
浓度为0.1nmol/L的乳清蛋白溶液，直接测定其OD差值。对标准对照组单独设置空白对照
组，将乳清蛋白溶液替换为等量蒸馏水进行实验，测定其OD差值。

[0092] 计算公式：

[0093] 其中，蛋白质浓度为0.2ml的肝组织匀浆中的蛋白质浓度，选用考斯亮蓝法测定得出。 MDA含量的计算结果如表5所示。

[0094] 表5

[0095]

[0096]

[0097] 根据上述结果可知，实施例3中制得的复合多肽蛋白质粉的总抗氧化能力高且能有效抑制MDA的生成；未添加鱼腥藻蛋白和清蛋白多肽粉的对比例3几乎不具备抗氧化能
力；只添加鱼腥藻蛋白或清蛋白多肽粉的对比例2和对比例1具有较低的抗氧化能力，但其
明显低于实施例3中的抗氧化能力。因此，复合多肽蛋白质粉中鱼腥藻蛋白与清蛋白多肽粉
的成分结合具有突出的抗氧化效果。

[0098] 尽管本发明的实施方案已公开如上，但其并不仅仅限于说明书和实施方式中所列运用，它完全可以被适用于各种适合本发明的领域，对于熟悉本领域的人员而言，可容易地
实现另外的修改，因此在不背离权利要求及等同范围所限定的一般概念下，本发明并不限
于特定的细节和这里示出与描述的实施例。

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