技术领域
[0001] 本
发明涉及
生物制药技术领域,特别是涉及一种原代细胞制备机。
背景技术
[0002] 原代细胞在生物制品生产中有着广泛的应用。原代细胞的制备是某些生物制品生产的
基础,尽管组织不同、需求量不同、条件不同,使得原代细胞的制备方法差异较大,但原代细胞制备的基本流程相同,即无菌采集组织,洗液将组织内的血液洗去,胰酶将组织消化分散成疏松的结构,细胞间连接不再紧密,加入血清中和胰酶,在外
力作用下分散出单个细胞,过滤将单个细胞和仍处于结团状态的细胞分离,过滤得到的单个细胞即为目标细胞。
[0003] 目前的原代细胞制备装置结构复杂,也就导致价格昂贵,难于广泛推广,使得中小生物制药企业不得不选用原始的原代细胞制备工艺,进而阻碍生物制药的发展。
发明内容
[0004] 本发明
实施例提供一种原代细胞制备机,用以解决或部分解决现有原代细胞制备装置结构复杂、价格昂贵的问题。
[0005] 本发明实施例提供一种原代细胞制备机,包括:第一容器、第二容器、过滤网以及搅碎组件;
[0006] 所述第一容器和所述第二容器相连通,所述搅碎组件安装于所述第一容器内,所述过滤网安装于所述第二容器内;
[0007] 所述搅碎组件包括第一旋
转轴和套设于所述第一
旋转轴上的第二旋转轴,所述第一旋转轴的外
侧壁设有第一刀片组,所述第二旋转轴的外侧壁设有第二刀片组;驱动所述第一旋转轴使得所述第一旋转轴与所述第二旋转轴同轴异向转动,以实现所述第一刀片组与所述第二刀片组相反方向转动。
[0008] 在上述方案的基础上,所述第一刀片组包括上下错位环绕设置的若干第一刀片;所述第二刀片组包括上下错位环绕设置的若干第二刀片。
[0009] 在上述方案的基础上,所述第一刀片的刀刃和所述第二刀片的刀刃的形状均为弧形。
[0010] 在上述方案的基础上,所述第一刀片的刀刃和所述第二刀片的刀刃的朝向相反设置。
[0011] 在上述方案的基础上,所述第一容器的侧壁上设置有热
水加入口和热水排出口。
[0012] 在上述方案的基础上,所述第一容器上设置有可分离的第一盖体,所述第一盖体上设有用于所述第二旋转轴穿过的第一通孔。
[0013] 在上述方案的基础上,所述第一容器设置于所述第二容器的上方;所述第一容器的底部设置有液体通道,以使所述第一容器内的
混合液输送至所述第二容器内。
[0014] 在上述方案的基础上,所述液体通道上设置
阀门。
[0015] 在上述方案的基础上,所述第二容器上设置有可分离的第二盖体,所述第二盖体上设有用于所述液体通道穿过的第二通孔。
[0016] 在上述方案的基础上,所述第一容器和所述第二容器均由透明材料制备。
[0017] 本发明实施例提供的一种原代细胞制备机,无菌取动物某一特定组织或禽胚胎组织,洗去表层血液,将所有组织加入到第一容器内;驱动第一旋转轴开始沿一定的方向转动,此时第一刀片组与第二刀片组相反方向转动,当组织
块大小为1cm3左右时停止转动,加入适量胰酶和37℃的水;驱动第一旋转轴继续沿一定的方向转动,使胰酶和组织充分混匀;在37℃的水作用下消化5~15min,加入含5%~10%的培养基终止消化,之后继续加入培养基至第一容器的容量的80%,混悬培养基和细胞;使第一容器内的细胞液流过第二容器的过滤网进行过滤,收集细胞液直至全部细胞液过滤完毕,调整细胞至合适浓度并分装,之后移入
温度为37℃的培养室继续培养。本发明实施例提供的原代细胞制备机可用于
哺乳动物组织和禽类组织原代细胞的制备,简单易操作,制备细胞快速且量大,非常适合于病毒的批量繁殖。
附图说明
[0018] 为了更清楚地说明本发明实施例或
现有技术中的技术方案,下面将对实施例或现有技术描述中所需要使用的附图作一简单地介绍,显而易见地,下面描述中的附图是本发明的一些实施例,对于本领域普通技术人员来讲,在不付出创造性劳动的前提下,还可以根据这些附图获得其他的附图。
[0019] 图1为本发明实施例的原代细胞制备机的结构示意图;
[0020] 图2为本发明实施例的搅碎组件的结构示意图。
[0021] 附图标记:
[0022] 1、第一容器;2、第二容器;3、搅碎组件;31、第一旋转轴;311、第一刀片组;32、第二旋转轴;321、第二刀片组;4、
框架;5、过滤网。
具体实施方式
[0023] 为使本发明实施例的目的、技术方案和优点更加清楚,下面将结合本发明实施例中的附图,对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述,显然,所描述的实施例是本发明一部分实施例,而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例,本领域普通技术人员在没有作出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例,都属于本发明保护的范围。
[0024] 在本发明的描述中,需要说明的是,除非另有明确的规定和限定,术语“安装”、“相连”、“连接”应做广义理解,例如,可以是固定连接,也可以是可拆卸连接,或一体地连接;可以是机械连接,也可以是电连接;可以是直接相连,也可以通过中间媒介间接相连,可以是两个元件内部的连通。对于本领域的普通技术人员而言,可以具体情况理解上述术语在本发明中的具体含义。
[0025] 图1为本发明实施例的原代细胞制备机的结构示意图,如图1所示,本发明实施例提供的原代细胞制备机,包括:第一容器1、第二容器2、过滤网5以及搅碎组件3;
[0026] 为了可全程观看原代细胞的制备以及细胞的消化程度,第一容器1和第二容器2均由透明材料制备,第一容器1和第二容器2均可以用耐高压且强韧的玻璃制备;
[0027] 第一容器1和第二容器2相连通,搅碎组件3安装于第一容器1内,过滤网5安装于第二容器2内,过滤网5可以通过网状
支架固定在第二容器2的内部;
[0028] 如图2所示,搅碎组件包括第一旋转轴31和套设于第一旋转轴31上的第二旋转轴32,第一旋转轴31的外侧壁设有第一刀片组311,第二旋转轴32的外侧壁设有第二刀片组
321;驱动第一旋转轴31使得第一旋转轴31与第二旋转轴32同轴异向转动,以实现第一刀片组311与第二刀片组321相反方向转动。
[0029] 第一刀片组311与第二刀片组321相反方向转动,使得在使用过程中,能够剪切组织,使得组织受到来自两个方向的力,使得组织保持相对
位置的固定,同时受到两边刀片带来的切割力,使得单纯的切割变为剪切,从而使得切割效率更高,切割效果更好。
[0030] 在本发明实施例中,无菌取动物某一特定组织或禽胚胎组织,洗去表层血液,将所有组织加入到第一容器内;驱动第一旋转轴31开始沿一定的方向转动,此时第一刀片组311与第二刀片组321相反方向转动,当组织块大小为1cm3左右时停止转动,加入适量胰酶和37℃的水;驱动第一旋转轴31继续沿一定的方向转动,使胰酶和组织充分混匀;在37℃的水作用下消化5~15min,加入含5%~10%的培养基终止消化,之后继续加入培养基至第一容器1的容量的80%,混悬培养基和细胞;使第一容器1内的细胞液流过第二容器2的过滤网进行过滤,收集细胞液直至全部细胞液过滤完毕,调整细胞至合适浓度并分装,之后移入温度为
37℃的培养室继续培养。本发明实施例提供的原代细胞制备机可用于哺乳动物组织和禽类组织原代细胞的制备,简单易操作,制备细胞快速且量大,非常适合于病毒的批量繁殖,根据生产需要,原代细胞制备机可制作成1L、2L、3L、5L、10L等规格。
[0031] 在上述实施例的基础上,第一刀片组311包括上下错位环绕设置的若干第一刀片;第二刀片组321包括上下错位环绕设置的若干第二刀片。
[0032] 在本发明实施例中,若干第一刀片沿着第一旋转轴31的长度方向依次设置,且相邻的两个第一刀片不在同一条直线上,即上下两个第一刀平的投影不重合;若干第二刀片沿着第二旋转轴32的长度方向依次设置,且相邻的两个第二刀片不在同一条直线上,即上下两个第二刀平的投影不重合。
[0033] 在上述实施例的基础上,第一刀片的刀刃和第二刀片的刀刃的形状均为弧形。
[0034] 在本发明实施例中,第一刀片的刀刃沿着顺
时针方向延伸布置,第二刀片的刀刃沿着逆时针方向延伸布置。
[0035] 在上述实施例的基础上,第一刀片的刀刃和第二刀片的刀刃的朝向相反设置。
[0036] 在本发明实施例中,为了提高剪切效果,第一刀片的刀刃朝向第一旋转轴31设置,第二刀片的刀刃背离第二旋转轴32设置。
[0037] 需要说明的是,第一旋转轴31贯穿第二旋转轴32向上伸出;第二旋转轴32上端固定连接有内
齿轮、以及与内齿轮相
啮合的第一
外齿轮,第一外齿轮的轴芯固定连接于第二旋转轴32上端面,第一外齿轮能以轴芯中心进行旋转;第一旋转轴31上固定连接有与第一外齿轮相啮合的第二外齿轮;内齿轮、第一外齿轮、第二外齿轮共同组成一组
行星齿轮组,通过
电机驱动第一旋转轴31的顶端沿着一定的方向旋转。
[0038] 在上述实施例的基础上,第一容器1的侧壁上设置有热水加入口和热水排出口。
[0039] 在本发明实施例中,热水加入口位于第一容器1的上端,热水排出口位于第一容器1的下端,热水排出口处设置有阀门。
[0040] 在上述实施例的基础上,第一容器上设置有可分离的第一盖体,第一盖体上设有用于第二旋转轴32穿过的第一通孔。
[0041] 在本发明实施例中,当组织或液体加完后将第一盖体盖上,以防组织或液体溅出。
[0042] 在上述实施例的基础上,第一容器1设置于第二容器2的上方;第一容器1的底部设置有液体通道,以使第一容器1内的混合液输送至第二容器2内。
[0043] 需要说明的是,液体通道上设置阀门。把第一容器1设置于第二容器2的上方,当混悬培养基和细胞完成时无需外接动力即可让混合液由第一容器1输送至第二容器2。
[0044] 在上述实施例的基础上,第二容器2上设置有可分离的第二盖体,第二盖体上设有用于液体通道穿过的第二通孔。
[0045] 在本发明实施例中,第二盖体可以通过卡接的方式安装在第二容器2上。第一容器1和第二容器2可以均为敞口的容器。
[0046] 需要说明的是,第一容器1和第二容器2均安装在框架4的内部,以便进行整体的高压灭菌。
[0047] 在本发明实施例中,无菌取动物某一特定组织或禽胚胎组织,洗去表层血液,将所有组织通过第一容器的敞口加入到第一容器内;通过电机驱动第一旋转轴31开始沿一定的方向转动,转速为50~100rpm,此时第一刀片组311与第二刀片组321相反方向转动,当组织3
块大小为1cm 左右时停止转动,通过第一容器的敞口加入适量胰酶和通
过热水加入口加入
37℃的水,加入热水的目的是提高胰酶的活性促进组织消化;通过电机驱动第一旋转轴31继续沿一定的方向转动,转速调为50rpm,使胰酶和组织充分混匀;在37℃的水作用下消化5~15min,加入含5%~10%的培养基终止消化,之后继续加入培养基至第一容器1的容量的
80%,混悬培养基和细胞;打开位于液体通道上的阀门,使第一容器1内的细胞液流过第二容器2的过滤网进行过滤,通过第二容器2底部的细胞液出口收集细胞液直至全部细胞液过滤完毕,调整细胞至合适浓度并分装,之后移入温度为37℃的培养室继续培养。
[0048] 以上所述仅为本发明的较佳实施例而已,并不用以限制本发明,凡在本发明的精神和原则之内,所作的任何
修改、等同替换、改进等,均应包含在本发明的保护范围之内。