专利汇可以提供基于基因组编辑和DNA条形码的种类特异杀虫剂专利检索,专利查询,专利分析的服务。并且本 发明 公开一种基于基因组编辑的种类特异 杀虫剂 ,通常用化学合成药物来防治寄生虫的感染。但化学合成药物特异性较差, 副作用 大且有药物残留的问题。寄生虫 疫苗 常因寄生虫表面 抗原 的突变而失效。我们根据基因编辑技术的原理设计并 鉴别 出2个可特异性地作用于刺激隐核虫DNA 条形码 序列和5.8S核糖体RNA基因的sgRNA,并经直接浸泡试验证实其可特异性地切割刺激隐核虫DNA条形码序列,杀死刺激隐核虫。这样一种基于基因组编辑和DNA条形码的种类特异杀虫剂,除可用于刺激隐核虫防治外,其原理应该也适用于其它寄生虫。,下面是基于基因组编辑和DNA条形码的种类特异杀虫剂专利的具体信息内容。
1.一种基于基因组编辑和DNA条形码的种类特异杀虫剂,其特征在于,利用特异性作用于刺激隐核虫DNA条形码序列的sgRNA,通过直接浸泡法,特异性地切割刺激隐核虫DNA条形码序列,杀死刺激隐核虫。
2.根据权利要求1所述一种基于基因组编辑和DNA条形码的种类特异杀虫剂,其特征在于,所述sgRNA包括两条,
(1)刺激隐核虫的ITS-2的sgRNA序列:atataatcatgccaacatagtgg;
(2)刺激隐核虫的5.8S核糖体RNA基因的sgRNA序列:attttcaacggtggatatcttgg。
3.根据权利要求1所述一种基于基因组编辑和DNA条形码的种类特异杀虫剂,其特征在于,具体操作方法为:
(1)以pUC57-T7-gRNA质粒为模板,设计含有靶点的引物,扩增出具靶点的sgRNA的DNA模板,以此为模板在体外进行转录,将转录产物与Cas9蛋白进行37℃温浴,使其形成REGN复合物,然后作用于DNA条形码的PCR产物,检测靶点的活性;
(2)将转录产物与Cas9mRNA混合,加入到孵化刺激隐核虫的海水中,进行体外浸泡4h。
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