一种高品质冻糕彩色马蹄莲植株培养方法
阅读：564发布：2020-05-08
专利汇可以提供一种高品质冻糕彩色马蹄莲植株培养方法专利检索，专利查询，专利分析的服务。并且本 发明 提出了一种高品质冻糕彩色 马 蹄 莲植株培养方法，包括以下步骤：选取冻糕彩色马蹄莲品种种球—消毒灭菌—丛生芽培养—优化不定芽—优化植株，本发明通过合理的培育手段改进和 试剂 处理，大大提高了种植种球的萌芽启动率，染病率低，从芽长势优良，植株健壮，显著提高了成活率，种植品质高。，下面是一种高品质冻糕彩色马蹄莲植株培养方法专利的具体信息内容。
1.一种高品质冻糕彩色马蹄莲植株培养方法，其特征在于，包括以下步骤：
1)选取冻糕彩色马蹄莲品种种球，先用自来水冲洗掉泥土，用3g/L 50%的多菌灵可湿性粉剂浸泡24～36h，之后去除最外层的褐色表皮，再加入中性洗涤剂浸泡15min后，流水冲洗1h；
2)选取块茎上幼嫩的小芽，切成长度0.5-1cm的小块，芽底部要带有少量的块茎，并保证嫩芽的完整性，然后在超净工作台上进行表面消毒，先用0.1%的Hgcl2溶液浸泡5-9min，再用2%的NaClO溶液浸泡10min，消毒后用无菌水冲洗5次，每次5min，再将其接种于含6-BA的初代诱导培养基上培养，进行丛生芽培养；
3)将获得的丛生芽分割为0.5cm×0.5cm的小块，每块不定芽数为10个，接种于含6-BA的增殖培养基上，进行增殖培养，得优化不定芽；
4)将生长良好、长势一致的优化不定芽，切割为0.5cm×0.5cm大小，每块不定芽数为10个，接种于含6-BA的植株再生培养基上培养，进行植株培养，得优化植株。
2.根据权利要求1所述的高品质冻糕彩色马蹄莲植株培养方法，其特征在于：所述初代诱导培养基为MS+6-BA 2.0-4.0mg/L+NAA 0.2mg/L；所述增殖培养基为MS+6-BA 2.0-
4.0mg/L+蔗糖30g/L+肌醇100mg/L+酪蛋白100mg/L；所述植株再生培养基为1/2MS+6-BA
0.2-0.6mg/L+NAA 0.2mg/L+活性炭2.0g/L+蔗糖30g/L+肌醇50mg/L+酪蛋白50mg/L。
3.根据权利要求2所述的高品质冻糕彩色马蹄莲植株培养方法，其特征在于：所有培养基同时附加5.8g/L琼脂粉，pH值为5.8-6.0。
4.根据权利要求1所述的高品质冻糕彩色马蹄莲植株培养方法，其特征在于：步骤2）培养具体为先暗培养20d，然后进行光照培养，光照周期为14 h/d，光照强度2000-3000lx，培养45d统计并计算丛生芽诱导率。
5.根据权利要求1所述的高品质冻糕彩色马蹄莲植株培养方法，其特征在于：步骤3）培养具体为先 25±1℃光照培养，光照周期为14 h/d，光照强度2000-3000lx，培养30d后统计不定芽增殖面积，不定芽增殖数及大于1cm的植株数，并计算出不定芽增殖倍数及平均每增殖块大于1cm的植株数。
6.根据权利要求1所述的高品质冻糕彩色马蹄莲植株培养方法，其特征在于：步骤4）培养具体为先 25±1℃光照培养，光照周期为14 h/d，光照强度2000-3000lx，培养45d后统计不定芽增殖面积，不定芽增殖数及大于1cm的植株数，并计算出不定芽增殖倍数及平均每块大于1cm的植株数。
一种高品质冻糕彩色马蹄莲植株培养方法
技术领域
[0001] 本发明涉及马蹄莲种植技术领域，具体涉及一种高品质冻糕彩色马蹄莲植株培养方法。
背景技术
[0002] 彩色马蹄莲(学名:Zantedeschiaaethiopica)，是天南星科，马蹄莲属中除白花马蹄莲外其它种及杂交品种的统称。其肉质块茎肥大，叶基生，叶片亮绿色，全缘。肉穗花序鲜黄色，直立于佛焰中央，佛焰苞似马蹄状，有白色、黄色、粉红色、红色、紫色等，品种很多。盛花期3-4月。节处生根，根系发达粗壮。叶茎生，叶片圆形或戟形，按段尖锐有光泽，全缘，多数品种叶片有半透明斑点。彩色马蹄莲其奇特的花型和丰富的色彩，常用于制作花束、花篮、花环和瓶插，矮生和小花型品种盆栽用于摆放台阶、窗台、阳台、镜前，配植庭园，丛植于水池或堆石旁。
[0003] 彩色马蹄莲进入中国市场时间不长，但因其花形奇特，色彩艳丽，已成为我国重要的新兴切花、盆花栽培品种，具有极大的市场发展潜力。彩色马蹄莲多采用播种法和块茎分割繁殖，周期长、繁殖系数低，在生产繁殖过程中易受环境因子的制约。尤其是分生繁殖易诱发病毒病，导致种系退化、产量和品质下降，很难保持彩色马蹄莲原有的优良性状。组培离体繁殖可以大大加快种苗繁育进程，起到提纯复壮的作用，进而加快种球的繁育，是实现产业化生产的有效途径。
发明内容
[0004] 针对上述存在的问题，本发明提出了一种高品质冻糕彩色马蹄莲（即品种为冻糕的彩色马蒂莲）植株培养方法，通过合理的培育手段改进和试剂处理，大大提高了种植种球的萌芽启动率，染病率低，从芽长势优良，植株健壮，显著提高了成活率，种植品质高。
[0005] 为了实现上述的目的，本发明采用以下的技术方案：一种高品质冻糕彩色马蹄莲植株培养方法，包括以下步骤：
1）选取冻糕彩色马蹄莲品种种球，先用自来水冲洗掉泥土，用3g/L 50%的多菌灵可湿性粉剂浸泡24～36h，之后去除最外层的褐色表皮，再加入中性洗涤剂浸泡15min后，流水冲洗1h；
2）选取块茎上幼嫩的小芽，切成长度0.5-1cm的小块，芽底部要带有少量的块茎，并保证嫩芽的完整性，然后在超净工作台上进行表面消毒，先用0.1%的Hgcl2溶液浸泡5-9min，再用2%的NaClO溶液浸泡10min，消毒后用无菌水冲洗5次，每次5min，再将其接种于含6-BA的初代诱导培养基上培养，进行丛生芽培养；
3）将获得的丛生芽分割为0.5cm×0.5cm的小块，每块不定芽数为10个，接种于含6-BA的增殖培养基上，进行增殖培养，得优化不定芽；
4）将生长良好、长势一致的优化不定芽，切割为0.5cm×0.5cm大小，每块不定芽数为10个，接种于含6-BA的植株再生培养基上培养，进行植株培养，得优化植株。
1）选取冻糕彩色马蹄莲品种种球，先用自来水冲洗掉泥土，用3g/L 50%的多菌灵可湿性粉剂浸泡24～36h，之后去除最外层的褐色表皮，再加入中性洗涤剂浸泡15min后，流水冲洗1h；
2）选取块茎上幼嫩的小芽，切成长度0.5-1cm的小块，芽底部要带有少量的块茎，并保证嫩芽的完整性，然后在超净工作台上进行表面消毒，先用0.1%的Hgcl2溶液浸泡5-9min，再用2%的NaClO溶液浸泡10min，消毒后用无菌水冲洗5次，每次5min，再将其接种于含6-BA的初代诱导培养基上培养，进行丛生芽培养；
3）将获得的丛生芽分割为0.5cm×0.5cm的小块，每块不定芽数为10个，接种于含6-BA的增殖培养基上，进行增殖培养，得优化不定芽；
4）将生长良好、长势一致的优化不定芽，切割为0.5cm×0.5cm大小，每块不定芽数为10个，接种于含6-BA的植株再生培养基上培养，进行植株培养，得优化植株。
[0006] 优选的，所述初代诱导培养基为MS+6-BA 2.0-4.0mg/L+NAA 0.2 mg/L；所述增殖培养基为MS+6-BA 2.0-4.0mg/L+蔗糖30g/L+肌醇100mg/L+酪蛋白100mg/L；所述植株再生培养基为1/2MS+6-BA 0.2-0.6mg/L+NAA 0.2mg/L+活性炭2.0g/L+蔗糖30g/L+肌醇50mg/L+酪蛋白50mg/L。
[0007] 优选的，所有培养基同时附加5.8g/L琼脂粉，pH值为5.8-6.0。
[0008] 优选的，步骤2）培养具体为先暗培养20d，然后进行光照培养，光照周期为14 h/d，光照强度2000-3000lx，培养45d统计并计算丛生芽诱导率。
[0009] 优选的，步骤3）培养具体为先 25±1℃光照培养，光照周期为14 h/d，光照强度2000-3000lx，培养30d后统计不定芽增殖面积，不定芽增殖数及大于1cm的植株数，并计算出不定芽增殖倍数及平均每增殖块大于1cm的植株数。
[0010] 优选的，步骤4）培养具体为先 25±1℃光照培养，光照周期为14 h/d，光照强度2000-3000lx，培养45d后统计不定芽增殖面积，不定芽增殖数及大于1cm的植株数，并计算出不定芽增殖倍数及平均每块大于1cm的植株数。
[0011] 由于采用上述的技术方案，本发明的有益效果是：本发明高品质冻糕彩色马蹄莲植株培养方法，包括以下步骤：选取冻糕彩色马蹄莲品种种球—消毒灭菌—丛生芽培养—优化不定芽—优化植株，通过合理的培育手段改进和试剂处理，大大提高了种植种球的萌芽启动率，染病率低，从芽长势优良，植株健壮，显著提高了成活率，种植品质高。
具体实施方式
[0012] 为使本发明实施例的目的、技术方案和优点更加清楚，下面将结合本发明实施例，对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述。基于本发明的实施例，本领域普通技术人员在没有作出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。
[0013] 实施例1：1）选取冻糕彩色马蹄莲品种种球，先用自来水冲洗掉泥土，用3g/L 50%的多菌灵可湿性粉剂浸泡28h，之后去除最外层的褐色表皮，再加入中性洗涤剂浸泡15min后，流水冲洗
1h；
2）选取块茎上幼嫩的小芽，切成长度0.5-1cm的小块，芽底部要带有少量的块茎，并保证嫩芽的完整，然后在超净工作台上进行表面消毒，先用0.1%的Hgcl2溶液浸泡7min，再用
2%的NaClO溶液浸泡10min，消毒后用无菌水冲洗5次，每次5min，再将其接种于含6-BA的初代诱导培养基上培养，进行丛生芽培养；先暗培养20d，然后进行光照培养，光照周期为14 h/d，光照强度2000-3000lx，培养45d统计并计算丛生芽诱导率，监测得丛生芽诱导率为
29.3±1.2a %；
3）将获得的丛生芽分割为0.5cm×0.5cm的小块，每块不定芽数为10个，接种于含6-BA的增殖培养基上，进行增殖培养，得优化不定芽；先 25±1℃光照培养，光照周期为14 h/d，光照强度2000-3000lx，培养30d后统计不定芽增殖面积，不定芽增殖数及大于1cm的植株数，并计算出不定芽增殖倍数及平均每增殖块大于1cm的植株数，监测得增殖面积为4.1±
0.13acm2，增殖倍数为7.1±0.15a倍，>1cm的植株数为0.7±0.23b株；
4）将生长良好、长势一致的优化不定芽，切割为0.5cm×0.5cm大小，每块不定芽数为10个，接种于含6-BA的植株再生培养基上培养，进行植株培养，先 25±1℃光照培养，光照周期为14 h/d，光照强度2000-3000lx，培养45d后统计不定芽增殖面积，不定芽增殖数及大于
1cm的植株数，并计算出不定芽增殖倍数及平均每块大于1cm的植株数，监测得增殖面积为
2.9±0.15acm2，增殖倍数为5.4±0.72a倍，>1cm的植株数为5.6±0.08a株。
1h；
2）选取块茎上幼嫩的小芽，切成长度0.5-1cm的小块，芽底部要带有少量的块茎，并保证嫩芽的完整，然后在超净工作台上进行表面消毒，先用0.1%的Hgcl2溶液浸泡7min，再用
2%的NaClO溶液浸泡10min，消毒后用无菌水冲洗5次，每次5min，再将其接种于含6-BA的初代诱导培养基上培养，进行丛生芽培养；先暗培养20d，然后进行光照培养，光照周期为14 h/d，光照强度2000-3000lx，培养45d统计并计算丛生芽诱导率，监测得丛生芽诱导率为
29.3±1.2a %；
3）将获得的丛生芽分割为0.5cm×0.5cm的小块，每块不定芽数为10个，接种于含6-BA的增殖培养基上，进行增殖培养，得优化不定芽；先 25±1℃光照培养，光照周期为14 h/d，光照强度2000-3000lx，培养30d后统计不定芽增殖面积，不定芽增殖数及大于1cm的植株数，并计算出不定芽增殖倍数及平均每增殖块大于1cm的植株数，监测得增殖面积为4.1±
0.13acm2，增殖倍数为7.1±0.15a倍，>1cm的植株数为0.7±0.23b株；
4）将生长良好、长势一致的优化不定芽，切割为0.5cm×0.5cm大小，每块不定芽数为10个，接种于含6-BA的植株再生培养基上培养，进行植株培养，先 25±1℃光照培养，光照周期为14 h/d，光照强度2000-3000lx，培养45d后统计不定芽增殖面积，不定芽增殖数及大于
1cm的植株数，并计算出不定芽增殖倍数及平均每块大于1cm的植株数，监测得增殖面积为
2.9±0.15acm2，增殖倍数为5.4±0.72a倍，>1cm的植株数为5.6±0.08a株。
[0014] 其中，所述初代诱导培养基为MS+6-BA 4.0mg/L+NAA 0.2 mg/L；所述增殖培养基为MS+6-BA 2.0mg/L+蔗糖30g/L+肌醇100mg/L+酪蛋白100mg/L；所述植株再生培养基为1/2MS+6-BA 0.2mg/L+NAA 0.2mg/L+活性炭2.0g/L+蔗糖30g/L+肌醇50mg/L+酪蛋白50mg/L；
且所有培养基同时附加5.8g/L琼脂粉，pH值为5.8-6.0。
且所有培养基同时附加5.8g/L琼脂粉，pH值为5.8-6.0。
[0015] 实施例2：1）选取冻糕彩色马蹄莲品种种球，先用自来水冲洗掉泥土，用3g/L 50%的多菌灵可湿性粉剂浸泡28h，之后去除最外层的褐色表皮，再加入中性洗涤剂浸泡15min后，流水冲洗
1h；
2）选取块茎上幼嫩的小芽，切成长度0.5-1cm的小块，芽底部要带有少量的块茎，并保证嫩芽的完整性，然后在超净工作台上进行表面消毒，先用0.1%的Hgcl2溶液浸泡7min，再用2%的NaClO溶液浸泡10min，消毒后用无菌水冲洗5次，每次5min，再将其接种于含6-BA的初代诱导培养基上培养，进行丛生芽培养；先暗培养20d，然后进行光照培养，光照周期为14 h/d，光照强度2000-3000lx，培养45d统计并计算丛生芽诱导率，监测得丛生芽诱导率为
20.1±1.3b%；
3）将获得的丛生芽分割为0.5cm×0.5cm的小块，每块不定芽数为10个，接种于含6-BA的增殖培养基上，进行增殖培养，得优化不定芽；先 25±1℃光照培养，光照周期为14 h/d，光照强度2000-3000lx，培养30d后统计不定芽增殖面积，不定芽增殖数及大于1cm的植株数，并计算出不定芽增殖倍数及平均每增殖块大于1cm的植株数，监测得增殖面积为3.7±
0.02bcm2，增殖倍数为6.7±0.19b倍，>1cm的植株数为0.7±0.09b株；
4）将生长良好、长势一致的优化不定芽，切割为0.5cm×0.5cm大小，每块不定芽数为10个，接种于含6-BA的植株再生培养基上培养，进行植株培养，先 25±1℃光照培养，光照周期为14 h/d，光照强度2000-3000lx，培养45d后统计不定芽增殖面积，不定芽增殖数及大于
1cm的植株数，并计算出不定芽增殖倍数及平均每块大于1cm的植株数，监测得增殖面积为
2.7±0.12acm2，增殖倍数为4.7±0.25a倍，>1cm的植株数为4.7±0.24b株。
1h；
2）选取块茎上幼嫩的小芽，切成长度0.5-1cm的小块，芽底部要带有少量的块茎，并保证嫩芽的完整性，然后在超净工作台上进行表面消毒，先用0.1%的Hgcl2溶液浸泡7min，再用2%的NaClO溶液浸泡10min，消毒后用无菌水冲洗5次，每次5min，再将其接种于含6-BA的初代诱导培养基上培养，进行丛生芽培养；先暗培养20d，然后进行光照培养，光照周期为14 h/d，光照强度2000-3000lx，培养45d统计并计算丛生芽诱导率，监测得丛生芽诱导率为
20.1±1.3b%；
3）将获得的丛生芽分割为0.5cm×0.5cm的小块，每块不定芽数为10个，接种于含6-BA的增殖培养基上，进行增殖培养，得优化不定芽；先 25±1℃光照培养，光照周期为14 h/d，光照强度2000-3000lx，培养30d后统计不定芽增殖面积，不定芽增殖数及大于1cm的植株数，并计算出不定芽增殖倍数及平均每增殖块大于1cm的植株数，监测得增殖面积为3.7±
0.02bcm2，增殖倍数为6.7±0.19b倍，>1cm的植株数为0.7±0.09b株；
4）将生长良好、长势一致的优化不定芽，切割为0.5cm×0.5cm大小，每块不定芽数为10个，接种于含6-BA的植株再生培养基上培养，进行植株培养，先 25±1℃光照培养，光照周期为14 h/d，光照强度2000-3000lx，培养45d后统计不定芽增殖面积，不定芽增殖数及大于
1cm的植株数，并计算出不定芽增殖倍数及平均每块大于1cm的植株数，监测得增殖面积为
2.7±0.12acm2，增殖倍数为4.7±0.25a倍，>1cm的植株数为4.7±0.24b株。
[0016] 其中，所述初代诱导培养基为MS+6-BA 3.0mg/L+NAA 0.2 mg/L；所述增殖培养基为MS+6-BA 3.0mg/L+蔗糖30g/L+肌醇100mg/L+酪蛋白100mg/L；所述植株再生培养基为1/2MS+6-BA 0.4mg/L+NAA 0.2mg/L+活性炭2.0g/L+蔗糖30g/L+肌醇50mg/L+酪蛋白50mg/L；
且所有培养基同时附加5.8g/L琼脂粉，pH值为5.8-6.0。
且所有培养基同时附加5.8g/L琼脂粉，pH值为5.8-6.0。
[0017] 实施例3：1）选取冻糕彩色马蹄莲品种种球，先用自来水冲洗掉泥土，用3g/L 50%的多菌灵可湿性粉剂浸泡36h，之后去除最外层的褐色表皮，再加入中性洗涤剂浸泡15min后，流水冲洗
1h；
2）选取块茎上幼嫩的小芽，切成长度0.5-1cm的小块，芽底部要带有少量的块茎，并保证嫩芽的完整性，然后在超净工作台上进行表面消毒，先用0.1%的Hgcl2溶液浸泡5min，再用2%的NaClO溶液浸泡10min，消毒后用无菌水冲洗5次，每次5min，再将其接种于含6-BA的初代诱导培养基上培养，进行丛生芽培养；先暗培养20d，然后进行光照培养，光照周期为14 h/d，光照强度2000-3000lx，培养45d统计并计算丛生芽诱导率，监测得丛生芽诱导率为
29.1±1.2a %；
3）将获得的丛生芽分割为0.5cm×0.5cm的小块，每块不定芽数为10个，接种于含6-BA的增殖培养基上，进行增殖培养，得优化不定芽；先 25±1℃光照培养，光照周期为14 h/d，光照强度2000-3000lx，培养30d后统计不定芽增殖面积，不定芽增殖数及大于1cm的植株数，并计算出不定芽增殖倍数及平均每增殖块大于1cm的植株数，监测得增殖面积为3.8±
2
0.12acm，增殖倍数为6.9±0.17a倍，>1cm的植株数为0.7±0.31b株；
4）将生长良好、长势一致的优化不定芽，切割为0.5cm×0.5cm大小，每块不定芽数为10个，接种于含6-BA的植株再生培养基上培养，进行植株培养，先 25±1℃光照培养，光照周期为14 h/d，光照强度2000-3000lx，培养45d后统计不定芽增殖面积，不定芽增殖数及大于
1cm的植株数，并计算出不定芽增殖倍数及平均每块大于1cm的植株数，监测得增殖面积为
2.9±0.15acm2，增殖倍数为5.4±0.72a倍，>1cm的植株数为5.6±0.08a株。
1h；
2）选取块茎上幼嫩的小芽，切成长度0.5-1cm的小块，芽底部要带有少量的块茎，并保证嫩芽的完整性，然后在超净工作台上进行表面消毒，先用0.1%的Hgcl2溶液浸泡5min，再用2%的NaClO溶液浸泡10min，消毒后用无菌水冲洗5次，每次5min，再将其接种于含6-BA的初代诱导培养基上培养，进行丛生芽培养；先暗培养20d，然后进行光照培养，光照周期为14 h/d，光照强度2000-3000lx，培养45d统计并计算丛生芽诱导率，监测得丛生芽诱导率为
29.1±1.2a %；
3）将获得的丛生芽分割为0.5cm×0.5cm的小块，每块不定芽数为10个，接种于含6-BA的增殖培养基上，进行增殖培养，得优化不定芽；先 25±1℃光照培养，光照周期为14 h/d，光照强度2000-3000lx，培养30d后统计不定芽增殖面积，不定芽增殖数及大于1cm的植株数，并计算出不定芽增殖倍数及平均每增殖块大于1cm的植株数，监测得增殖面积为3.8±
2
0.12acm，增殖倍数为6.9±0.17a倍，>1cm的植株数为0.7±0.31b株；
4）将生长良好、长势一致的优化不定芽，切割为0.5cm×0.5cm大小，每块不定芽数为10个，接种于含6-BA的植株再生培养基上培养，进行植株培养，先 25±1℃光照培养，光照周期为14 h/d，光照强度2000-3000lx，培养45d后统计不定芽增殖面积，不定芽增殖数及大于
1cm的植株数，并计算出不定芽增殖倍数及平均每块大于1cm的植株数，监测得增殖面积为
2.9±0.15acm2，增殖倍数为5.4±0.72a倍，>1cm的植株数为5.6±0.08a株。
[0018] 其中，所述初代诱导培养基为MS+6-BA 4.0mg/L+NAA 0.2 mg/L；所述增殖培养基为MS+6-BA 3.0mg/L+蔗糖30g/L+肌醇100mg/L+酪蛋白100mg/L；所述植株再生培养基为1/2MS+6-BA 0.3mg/L+NAA 0.2mg/L+活性炭2.0g/L+蔗糖30g/L+肌醇50mg/L+酪蛋白50mg/L；
且所有培养基同时附加5.8g/L琼脂粉，pH值为5.8-6.0。
且所有培养基同时附加5.8g/L琼脂粉，pH值为5.8-6.0。
[0019] 实施例4：1）选取冻糕彩色马蹄莲品种种球，先用自来水冲洗掉泥土，用3g/L 50%的多菌灵可湿性粉剂浸泡36h，之后去除最外层的褐色表皮，再加入中性洗涤剂浸泡15min后，流水冲洗
1h；
2）选取块茎上幼嫩的小芽，切成长度0.5-1cm的小块，芽底部要带有少量的块茎，并保证嫩芽的完整性，然后在超净工作台上进行表面消毒，先用0.1%的Hgcl2溶液浸泡5min，再用2%的NaClO溶液浸泡10min，消毒后用无菌水冲洗5次，每次5min，再将其接种于含6-BA的初代诱导培养基上培养，进行丛生芽培养；先暗培养20d，然后进行光照培养，光照周期为14 h/d，光照强度2000-3000lx，培养45d统计并计算丛生芽诱导率，监测得丛生芽诱导率为
18.2±1.0b %；
3）将获得的丛生芽分割为0.5cm×0.5cm的小块，每块不定芽数为10个，接种于含6-BA的增殖培养基上，进行增殖培养，得优化不定芽；先 25±1℃光照培养，光照周期为14 h/d，光照强度2000-3000lx，培养30d后统计不定芽增殖面积，不定芽增殖数及大于1cm的植株数，并计算出不定芽增殖倍数及平均每增殖块大于1cm的植株数，监测得增殖面积为3.7±
0.15acm2，增殖倍数为7.0±0.12a倍，>1cm的植株数为0.7±0.16b株；
4）将生长良好、长势一致的优化不定芽，切割为0.5cm×0.5cm大小，每块不定芽数为10个，接种于含6-BA的植株再生培养基上培养，进行植株培养，先 25±1℃光照培养，光照周期为14 h/d，光照强度2000-3000lx，培养45d后统计不定芽增殖面积，不定芽增殖数及大于
1cm的植株数，并计算出不定芽增殖倍数及平均每块大于1cm的植株数，监测得增殖面积为
2
2.5±0.21acm，增殖倍数为4.5±0.46a倍，>1cm的植株数为2.7±0.13d株。
1h；
2）选取块茎上幼嫩的小芽，切成长度0.5-1cm的小块，芽底部要带有少量的块茎，并保证嫩芽的完整性，然后在超净工作台上进行表面消毒，先用0.1%的Hgcl2溶液浸泡5min，再用2%的NaClO溶液浸泡10min，消毒后用无菌水冲洗5次，每次5min，再将其接种于含6-BA的初代诱导培养基上培养，进行丛生芽培养；先暗培养20d，然后进行光照培养，光照周期为14 h/d，光照强度2000-3000lx，培养45d统计并计算丛生芽诱导率，监测得丛生芽诱导率为
18.2±1.0b %；
3）将获得的丛生芽分割为0.5cm×0.5cm的小块，每块不定芽数为10个，接种于含6-BA的增殖培养基上，进行增殖培养，得优化不定芽；先 25±1℃光照培养，光照周期为14 h/d，光照强度2000-3000lx，培养30d后统计不定芽增殖面积，不定芽增殖数及大于1cm的植株数，并计算出不定芽增殖倍数及平均每增殖块大于1cm的植株数，监测得增殖面积为3.7±
0.15acm2，增殖倍数为7.0±0.12a倍，>1cm的植株数为0.7±0.16b株；
4）将生长良好、长势一致的优化不定芽，切割为0.5cm×0.5cm大小，每块不定芽数为10个，接种于含6-BA的植株再生培养基上培养，进行植株培养，先 25±1℃光照培养，光照周期为14 h/d，光照强度2000-3000lx，培养45d后统计不定芽增殖面积，不定芽增殖数及大于
1cm的植株数，并计算出不定芽增殖倍数及平均每块大于1cm的植株数，监测得增殖面积为
2
2.5±0.21acm，增殖倍数为4.5±0.46a倍，>1cm的植株数为2.7±0.13d株。
[0020] 其中，所述初代诱导培养基为MS+6-BA 2.0mg/L+NAA 0.2 mg/L；所述增殖培养基为MS+6-BA 2.0mg/L+蔗糖30g/L+肌醇100mg/L+酪蛋白100mg/L；所述植株再生培养基为1/2MS+6-BA 0.6mg/L+NAA 0.2mg/L+活性炭2.0g/L+蔗糖30g/L+肌醇50mg/L+酪蛋白50mg/L；
且所有培养基同时附加5.8g/L琼脂粉，pH值为5.8-6.0。
且所有培养基同时附加5.8g/L琼脂粉，pH值为5.8-6.0。
[0021] 实施例5：1）选取冻糕彩色马蹄莲品种种球，先用自来水冲洗掉泥土，用3g/L 50%的多菌灵可湿性粉剂浸泡24h，之后去除最外层的褐色表皮，再加入中性洗涤剂浸泡15min后，流水冲洗
1h；
2）选取块茎上幼嫩的小芽，切成长度0.5-1cm的小块，芽底部要带有少量的块茎，并保证嫩芽的完整性，然后在超净工作台上进行表面消毒，先用0.1%的Hgcl2溶液浸泡9min，再用2%的NaClO溶液浸泡10min，消毒后用无菌水冲洗5次，每次5min，再将其接种于含6-BA的初代诱导培养基上培养，进行丛生芽培养；先暗培养20d，然后进行光照培养，光照周期为14 h/d，光照强度2000-3000lx，培养45d统计并计算丛生芽诱导率，监测得丛生芽诱导率为
20.3±1.1b%；
3）将获得的丛生芽分割为0.5cm×0.5cm的小块，每块不定芽数为10个，接种于含6-BA的增殖培养基上，进行增殖培养，得优化不定芽；先 25±1℃光照培养，光照周期为14 h/d，光照强度2000-3000lx，培养30d后统计不定芽增殖面积，不定芽增殖数及大于1cm的植株数，并计算出不定芽增殖倍数及平均每增殖块大于1cm的植株数，监测得增殖面积为3.2±
0.45bcm2，增殖倍数为6.5±0.25b倍，>1cm的植株数为0.3±0.22c株；
4）将生长良好、长势一致的优化不定芽，切割为0.5cm×0.5cm大小，每块不定芽数为10个，接种于含6-BA的植株再生培养基上培养，进行植株培养，先 25±1℃光照培养，光照周期为14 h/d，光照强度2000-3000lx，培养45d后统计不定芽增殖面积，不定芽增殖数及大于
1cm的植株数，并计算出不定芽增殖倍数及平均每块大于1cm的植株数，监测得增殖面积为
2.6±0.32acm2，增殖倍数为4.5±0.14a倍，>1cm的植株数为4.3±0.16b株。
1h；
2）选取块茎上幼嫩的小芽，切成长度0.5-1cm的小块，芽底部要带有少量的块茎，并保证嫩芽的完整性，然后在超净工作台上进行表面消毒，先用0.1%的Hgcl2溶液浸泡9min，再用2%的NaClO溶液浸泡10min，消毒后用无菌水冲洗5次，每次5min，再将其接种于含6-BA的初代诱导培养基上培养，进行丛生芽培养；先暗培养20d，然后进行光照培养，光照周期为14 h/d，光照强度2000-3000lx，培养45d统计并计算丛生芽诱导率，监测得丛生芽诱导率为
20.3±1.1b%；
3）将获得的丛生芽分割为0.5cm×0.5cm的小块，每块不定芽数为10个，接种于含6-BA的增殖培养基上，进行增殖培养，得优化不定芽；先 25±1℃光照培养，光照周期为14 h/d，光照强度2000-3000lx，培养30d后统计不定芽增殖面积，不定芽增殖数及大于1cm的植株数，并计算出不定芽增殖倍数及平均每增殖块大于1cm的植株数，监测得增殖面积为3.2±
0.45bcm2，增殖倍数为6.5±0.25b倍，>1cm的植株数为0.3±0.22c株；
4）将生长良好、长势一致的优化不定芽，切割为0.5cm×0.5cm大小，每块不定芽数为10个，接种于含6-BA的植株再生培养基上培养，进行植株培养，先 25±1℃光照培养，光照周期为14 h/d，光照强度2000-3000lx，培养45d后统计不定芽增殖面积，不定芽增殖数及大于
1cm的植株数，并计算出不定芽增殖倍数及平均每块大于1cm的植株数，监测得增殖面积为
2.6±0.32acm2，增殖倍数为4.5±0.14a倍，>1cm的植株数为4.3±0.16b株。
[0022] 其中，所述初代诱导培养基为MS+6-BA 3.0mg/L+NAA 0.2 mg/L；所述增殖培养基为MS+6-BA 4.0mg/L+蔗糖30g/L+肌醇100mg/L+酪蛋白100mg/L；所述植株再生培养基为1/2MS+6-BA 0.4mg/L+NAA 0.2mg/L+活性炭2.0g/L+蔗糖30g/L+肌醇50mg/L+酪蛋白50mg/L；
且所有培养基同时附加5.8g/L琼脂粉，pH值为5.8-6.0。
且所有培养基同时附加5.8g/L琼脂粉，pH值为5.8-6.0。
[0023] 实施例6：1）选取冻糕彩色马蹄莲品种种球，先用自来水冲洗掉泥土，用3g/L 50%的多菌灵可湿性粉剂浸泡24h，之后去除最外层的褐色表皮，再加入中性洗涤剂浸泡15min后，流水冲洗
1h；
2）选取块茎上幼嫩的小芽，切成长度0.5-1cm的小块，芽底部要带有少量的块茎，并保证嫩芽的完整性，然后在超净工作台上进行表面消毒，先用0.1%的Hgcl2溶液浸泡9min，再用2%的NaClO溶液浸泡10min，消毒后用无菌水冲洗5次，每次5min，再将其接种于含6-BA的初代诱导培养基上培养，进行丛生芽培养；先暗培养20d，然后进行光照培养，光照周期为14 h/d，光照强度2000-3000lx，培养45d统计并计算丛生芽诱导率，监测得丛生芽诱导率为
27.6±1.3a%；
3）将获得的丛生芽分割为0.5cm×0.5cm的小块，每块不定芽数为10个，接种于含6-BA的增殖培养基上，进行增殖培养，得优化不定芽；先 25±1℃光照培养，光照周期为14 h/d，光照强度2000-3000lx，培养30d后统计不定芽增殖面积，不定芽增殖数及大于1cm的植株数，并计算出不定芽增殖倍数及平均每增殖块大于1cm的植株数数，监测得增殖面积为3.5±0.22acm2，增殖倍数为6.1±0.18a倍，>1cm的植株数为0.7±0.16b株；
4）将生长良好、长势一致的优化不定芽，切割为0.5cm×0.5cm大小，每块不定芽数为10个，接种于含6-BA的植株再生培养基上培养，进行植株培养，先 25±1℃光照培养，光照周期为14 h/d，光照强度2000-3000lx，培养45d后统计不定芽增殖面积，不定芽增殖数及大于
1cm的植株数，并计算出不定芽增殖倍数及平均每块大于1cm的植株数数，监测得增殖面积为2.8±0.32acm2，增殖倍数为5.1±0.15a倍，>1cm的植株数为5.4±0.21b株。
1h；
2）选取块茎上幼嫩的小芽，切成长度0.5-1cm的小块，芽底部要带有少量的块茎，并保证嫩芽的完整性，然后在超净工作台上进行表面消毒，先用0.1%的Hgcl2溶液浸泡9min，再用2%的NaClO溶液浸泡10min，消毒后用无菌水冲洗5次，每次5min，再将其接种于含6-BA的初代诱导培养基上培养，进行丛生芽培养；先暗培养20d，然后进行光照培养，光照周期为14 h/d，光照强度2000-3000lx，培养45d统计并计算丛生芽诱导率，监测得丛生芽诱导率为
27.6±1.3a%；
3）将获得的丛生芽分割为0.5cm×0.5cm的小块，每块不定芽数为10个，接种于含6-BA的增殖培养基上，进行增殖培养，得优化不定芽；先 25±1℃光照培养，光照周期为14 h/d，光照强度2000-3000lx，培养30d后统计不定芽增殖面积，不定芽增殖数及大于1cm的植株数，并计算出不定芽增殖倍数及平均每增殖块大于1cm的植株数数，监测得增殖面积为3.5±0.22acm2，增殖倍数为6.1±0.18a倍，>1cm的植株数为0.7±0.16b株；
4）将生长良好、长势一致的优化不定芽，切割为0.5cm×0.5cm大小，每块不定芽数为10个，接种于含6-BA的植株再生培养基上培养，进行植株培养，先 25±1℃光照培养，光照周期为14 h/d，光照强度2000-3000lx，培养45d后统计不定芽增殖面积，不定芽增殖数及大于
1cm的植株数，并计算出不定芽增殖倍数及平均每块大于1cm的植株数数，监测得增殖面积为2.8±0.32acm2，增殖倍数为5.1±0.15a倍，>1cm的植株数为5.4±0.21b株。
[0024] 其中，所述初代诱导培养基为MS+6-BA 4.0mg/L+NAA 0.2 mg/L；所述增殖培养基为MS+6-BA 3.0mg/L+蔗糖30g/L+肌醇100mg/L+酪蛋白100mg/L；所述植株再生培养基为1/2MS+6-BA 0.4mg/L+NAA 0.2mg/L+活性炭2.0g/L+蔗糖30g/L+肌醇50mg/L+酪蛋白50mg/L；
且所有培养基同时附加5.8g/L琼脂粉，pH值为5.8-6.0。
且所有培养基同时附加5.8g/L琼脂粉，pH值为5.8-6.0。
[0025] 以上实施例仅用以说明本发明的技术方案，而非对其限制；尽管参照前述实施例对本发明进行了详细的说明，本领域的普通技术人员应当理解：其依然可以对前述各实施例所记载的技术方案进行修改，或者对其中部分技术特征进行等同替换；而这些修改或者替换，并不使相应技术方案的本质脱离本发明各实施例技术方案的精神和范围。
[0026] 在本说明书的描述中，参考术语“一个实施例”、“示例”、“具体示例”等的描述意指结合该实施例或示例描述的具体特征、结构、材料或者特点包含于本发明的至少一个实施例或示例中。在本说明书中，对上述术语的示意性表述不一定指的是相同的实施例或示例。而且，描述的具体特征、结构、材料或者特点可以在任何的一个或多个实施例或示例中以合适的方式结合。
[0027] 以上公开的本发明优选实施例只是用于帮助阐述本发明。优选实施例并没有详尽叙述所有的细节，也不限制该发明仅为的具体实施方式。显然，根据本说明书的内容，可作很多的修改和变化。本说明书选取并具体描述这些实施例，是为了更好地解释本发明的原理和实际应用，从而使所属技术领域技术人员能很好地理解和利用本发明。本发明仅受权利要求书及其全部范围和等效物的限制。
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