一种细菌纤维素/肝素复合膜的制备及改性方法
专利汇可以提供一种细菌纤维素/肝素复合膜的制备及改性方法专利检索，专利查询，专利分析的服务。并且本 发明 涉及一种细菌 纤维 素/肝素医用 敷料 改性方法，主要步骤如下：原位培养出细菌 纤维素 （BC）/肝素（Hep）复合膜，经过提纯处理后，利用化学交联改性的方法即利用交联剂1-乙基-3-(3-二甲基 氨 基丙基)- 碳 炭化二亚胺(EDC)和N-羟基琥珀酰亚胺(NHS)，将BC与Hep的氢键结合方式变为化学键结合，且交联剂EDC/NHS在交联反应过程中只起催化作用，不参与反应过程， 水 洗可去除，无 生物 毒性。交联改性后复合膜的 力 学性能得到了提高，Hep的释放速度得到了有效的控制，能够有效加快伤口的愈合。，下面是一种细菌纤维素/肝素复合膜的制备及改性方法专利的具体信息内容。
1.一种细菌纤维素/肝素伤口敷料，其特征在于将原位制备好的细菌纤维素/肝素复合膜，通过交联剂EDC、NHS将肝素与细菌纤维素间氢键结合方式改为化学键结合，得到改性的伤口敷料。
2.一种如权利要求1所述制备细菌纤维素/肝素医用敷料材料的方法，其特征在于，包括以下步骤：
(1) 配制木醋杆菌发酵培养基，接种后25℃恒温培养10天，得到细菌纤维素/肝素复合膜，进行提纯处理，
(2) 再将BC/Hep膜浸泡在加有交联剂EDC和NHS的MES溶液中，室温下反应，制备改性复合材料。
3.根据权利要求2所述的一种制备细菌纤维素/肝素医用敷料材料的方法，其特征在于，所述步骤(1)中培养基组成为：7.0wt%葡萄糖、1.5wt%酵母浸膏、0.05wt%肝素、1.0%(v/v)无水乙醇，pH=6.8。
4.根据权利2所述的制备方法，其特征在于，所述步骤(1)中提纯方法为0.1M NaOH溶液浸泡24h，再用去离子水冲洗至BC膜表面呈中性。
5.根据权利2所述的制备方法，其特征在于，所述步骤(2)中MES溶液的摩尔浓度是
0.05mol/L，溶液的体积为100-400mL。
6.根据权利2所述的制备方法，其特征在于，所述步骤(2)中EDC和NHS的摩尔比为1:
0.6。
7.根据权利2所述的制备方法，其特征在于，所述步骤(2)中反应条件为室温下浸泡
24h。
一种细菌纤维素/肝素复合膜的制备及改性方法
技术领域
背景技术
发明内容
一种医用复合材料，包括细菌纤维素膜、肝素、交联剂EDC和NHS；
本发明提供的细菌纤维素/肝素复合材料制备方法包括如下步骤：
步骤一：配制木醋杆菌发酵培养基，培养基组成为7.0wt%葡萄糖、1.5wt%酵母浸膏、
0.05wt%肝素、1.0%(v/v)无水乙醇，pH=6.8。120℃高温灭菌20min，接种后，25℃恒温培养10天，得到细菌纤维素/肝素复合膜，
步骤二：用0.1M NaOH溶液处理细菌纤维素/肝素复合膜，再用去离子水清洗多次至纤维素表面呈中性，
步骤三：将提纯处理后的细菌纤维素/肝素复合膜浸泡在含有交联剂EDC和NHS的MES溶液中。用0.1M Na2HPO4溶液清洗2次终止反应，每1h换液。再用1.0M NaCl溶液清洗4次，每6h换液，最后用大量去离子水冲洗，冷冻干燥，得到改性的细菌纤维素/肝素医用敷料干膜；
所述步骤二的0.1M NaOH溶液处理方法为浸泡24h；
所述步骤三中加入的交联剂EDC和NHS的摩尔比为1:0.6，MES的浓度为0.05mol/L，溶液的体积为100-400mL；
与现存技术相比，本发明具有以下特点和优点：
(1) 和在培养基中加入肝素以及浸泡法制备细菌纤维素/肝素复合膜相比，本发明方法在得到复合材料后继续采用了化学交联法对复合膜改性使得肝素与BC结合的更加牢固，且肝素在BC膜中分布更加均匀，有利于医用敷料材料长期治疗伤口的效果；
下面结合具体实施例对本发明进行进一步说明，以下实施例只是描述性的，不是限定性的，但保护范围并不受此限制；
实施例1
(1) 称取7.0g葡萄糖、1.5g酵母浸膏和0.05g肝素放入烧杯中，加入100.0mL去离子水，充分搅拌溶解后，加入1.0mL无水乙醇，调节溶液pH至6.8。装入三角烧瓶中，封口后在120℃高温灭菌20min，接种后，25℃恒温培养10天，得到细菌纤维素/肝素复合膜。将复合膜放入
0.1M NaOH溶液中浸泡24h后，用大量去离子水冲洗至膜表面呈中性；
(2) 将提纯后的细菌纤维素/肝素复合膜浸泡在含有交联剂EDC和NHS摩尔的MES溶液中（EDC:NHS:Hep-COOH=0.4:0.24:1，溶液的体积是100mL），室温下反应24h。用0.1M Na2HPO4溶液清洗2次终止反应，每1h换液。再用1.0M NaCl溶液清洗4次，每6h换液，最后用大量去离子水冲洗，冷冻干燥，得到细菌纤维素/肝素干膜；
实施例2
(1) 称取7.0g葡萄糖、1.5g酵母浸膏和0.05g肝素放入烧杯中，加入100.0mL去离子水，充分搅拌溶解后，加入1.0mL无水乙醇，调节溶液pH至6.8。装入三角烧瓶中，封口后在120℃高温灭菌20min，接种后，25℃恒温培养10天，得到细菌纤维素/肝素复合膜。将复合膜放入
0.1M NaOH溶液中浸泡24h后，用大量去离子水冲洗至膜表面呈中性；
(2) 将提纯后的细菌纤维素/肝素复合膜浸泡在含有交联剂EDC和NHS摩尔的MES溶液中（EDC:NHS:Hep-COOH=0.4:0.24:1，溶液的体积是200mL），室温下反应24h。用0.1M Na2HPO4溶液清洗2次终止反应，每1h换液。再用1.0M NaCl溶液清洗4次，每6h换液，最后用大量去离子水冲洗，冷冻干燥，得到细菌纤维素/肝素干膜；
实施例3
(1) 称取7.0g葡萄糖、1.5g酵母浸膏和0.05g肝素放入烧杯中，加入100.0mL去离子水，充分搅拌溶解后，加入1.0mL无水乙醇，调节溶液pH至6.8。装入三角烧瓶中，封口后在120℃高温灭菌20min，接种后，25℃恒温培养10天，得到细菌纤维素/肝素复合膜。将复合膜放入
0.1M NaOH溶液中浸泡24h后，用大量去离子水冲洗至膜表面呈中性；
(2) 将提纯后的细菌纤维素/肝素复合膜浸泡在含有交联剂EDC和NHS摩尔的MES溶液中（EDC:NHS:Hep-COOH=0.4:0.24:1，溶液的体积是400mL），室温下反应24h。用0.1M Na2HPO4溶液清洗2次终止反应，每1h换液。再用1.0M NaCl溶液清洗4次，每6h换液，最后用大量去离子水冲洗，冷冻干燥，得到细菌纤维素/肝素干膜；
实施例4
(1) 称取7.0g葡萄糖、1.5g酵母浸膏和0.05g肝素放入烧杯中，加入100.0mL去离子水，充分搅拌溶解后，加入1.0mL无水乙醇，调节溶液pH至6.8。装入三角烧瓶中，封口后在120℃高温灭菌20min，接种后，25℃恒温培养10天，得到细菌纤维素/肝素复合膜。将复合膜放入
0.1M NaOH溶液中浸泡24h后，用大量去离子水冲洗至膜表面呈中性；
(2) 将提纯后的细菌纤维素/肝素复合膜浸泡在含有交联剂EDC和NHS摩尔的MES溶液中（EDC:NHS:Hep-COOH=0.8:0.48:1，溶液的体积是200mL），室温下反应24h。用0.1M Na2HPO4溶液清洗2次终止反应，每1h换液。再用1.0M NaCl溶液清洗4次，每6h换液，最后用大量去离子水冲洗，冷冻干燥，得到细菌纤维素/肝素干膜；
实施例5
(1) 称取7.0g葡萄糖、1.5g酵母浸膏和0.05g肝素放入烧杯中，加入100.0mL去离子水，充分搅拌溶解后，加入1.0mL无水乙醇，调节溶液pH至6.8。装入三角烧瓶中，封口后在120℃高温灭菌20min，接种后，25℃恒温培养10天，得到细菌纤维素/肝素复合膜。将复合膜放入
0.1M NaOH溶液中浸泡24h后，用大量去离子水冲洗至膜表面呈中性；
(2) 将提纯后的细菌纤维素/肝素复合膜浸泡在含有交联剂EDC和NHS摩尔的MES溶液中（EDC:NHS:Hep-COOH=1.6:0.96:1，溶液的体积是400mL），室温下反应24h。用0.1M Na2HPO4溶液清洗2次终止反应，每1h换液。再用1.0M NaCl溶液清洗4次，每6h换液，最后用大量去离子水冲洗，冷冻干燥，得到细菌纤维素/肝素干膜；
经机械性能测试，改性后的细菌纤维素/肝素复合膜具有较佳的力学性能，加入交联剂EDC与NHS后，拉伸强度最大可达106.66MPa，与纯细菌纤维素相比提高了52.65%。加入交联剂后，测试了经过24h后细菌纤维素/肝素医用敷料的膨胀率、含水率以及7天内敷料的透湿性，其测试结果如下表：
表1 不同摩尔比交联剂交联后敷料的膨胀率、含水率和透湿性
加入交联剂后，交联剂的摩尔比为0.4:0.24:1时膨胀率和透湿性最优，含水率基本没什么变化。经缓释测试后发现加入交联剂后肝素的释放速率得到了控制，浸泡在PH为7.4的PBS溶液中24后，交联剂摩尔比为1.6:0.96:1时，敷料上肝素释放率为49%，未加入交联剂的敷料肝素释放率为83%。
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