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一种从大鲵中提取基酸的方法

阅读:761发布:2024-01-03

专利汇可以提供一种从大鲵中提取基酸的方法专利检索,专利查询,专利分析的服务。并且本 发明 涉及 生物 技术领域,特别涉及一种从大鲵中提取 氨 基酸的方法;包括以下步骤:(1)杀菌处理(2) 水 解 (3)酸解(4)中和(5)二次酸解(6)二次中和(7)萃取(8)纯化;本发明利用大鲵皮、大鲵肌肉混合作为原料提取氨基酸,充分利用大鲵资源,通过杀菌处理、水解、酸解、中和、二次酸解、二次中和、萃取、纯化的操作步骤,有效的提高了大鲵氨基酸的提取率,经测定,本发明氨基酸的提取率82%以上,纯度高达97%以上,有效的满足了目前市场对氨基酸的量以及品质的追求,提高了氨基酸的市场应用价值。,下面是一种从大鲵中提取基酸的方法专利的具体信息内容。

1.一种从大鲵中提取基酸的方法,其特征在于,包括以下步骤:
(1)杀菌处理:将大鲵原料用清洗净后,在常温下,用浓度为0.012~0.018%的盐水浸泡30~40min,将原料捞出,再在50~60℃下,用杀菌液浸泡大鲵40~50min,将原料捞出沥干,干燥得大鲵粉末;
(2)水解:加水将大鲵粉末调和成含量为40~50%的溶液,在90~110℃下搅拌30~
40min,再在50~60℃下恒温下放置80~120min,过滤得水解液和水解渣;
(3)酸解:加水将水解渣调和成含量为40~50%的溶液,用酸溶液调节水解渣溶液pH为
2.5~3.5,搅拌20~30min,离心得酸解液和酸解渣;
(4)中和:加水将酸解渣调和成含量为40~50%的溶液,用溶液调节酸解渣溶液pH为
7~8,搅拌20~30min,离心得中和液和中和渣;
(5)二次酸解:加水将中和渣调和成含量为40~50%的溶液,用酸溶液调节浆料溶液pH为3~4,搅拌20~30min,离心得二次酸解液和二次酸解渣;
(6)二次中和:加水将二次酸解渣调和成含量为40~50%的溶液,用碱溶液调节二次酸解渣溶液pH为6.5~7.5,搅拌20~30min,离心得二次中和液和二次中和渣;
(7)萃取:将水解液、酸解液、中和液、二次酸解液、二次中和液混合,浓缩,加入抗乳化剂,搅拌8~12min,再加入萃取剂,搅拌25~35min,静置1~2h,得萃取液;
(8)纯化:在萃取液中加入沉淀剂,通过离心机离心后收集沉淀,将沉淀用乙酸溶解,得到氨基酸溶液,用纯化水透析后,得到氨基酸提取液,冷冻、干燥,即得成品。
2.如权利要求1所述的从大鲵中提取氨基酸的方法,其特征在于,所述的大鲵原料,是由大鲵皮、大鲵肌肉按0.1~0.2:0.8~1.2的质量比混合。
3.如权利要求1所述的从大鲵中提取氨基酸的方法,其特征在于,所述的杀菌液,是将枇杷叶、荔枝草和猕猴桃根按等质量混合,粉碎,加入所述粉碎料质量1~2倍的水,加热熬煮30~40min,冷却至常温,加入所述粉碎料质量的5倍量的乙醇,静置120~160min,回收乙醇,过滤,将滤液浓缩至一半体积,用紫外线照射8~12min,即可。
4.如权利要求1所述的从大鲵中提取氨基酸的方法,其特征在于,所述的紫外线,波长为215~225nm。
5.如权利要求1所述的从大鲵中提取氨基酸的方法,其特征在于,所述的离心,频率
1800~2000r/min,离心时间为8~12min。
6.如权利要求1所述的从大鲵中提取氨基酸的方法,其特征在于,所述的酸溶液,是盐酸磷酸甲酸、乙酸中的一种;所述的碱溶液,是氢化钠、氢氧化中的一种。
7.如权利要求1所述的从大鲵中提取氨基酸的方法,其特征在于,所述的酸解,采用的酸溶液的浓度为0.12~0.18mol/L,所述的中和,采用的碱溶液的浓度为0.25~0.35mol/L,所述的二次酸解,采用的酸溶液的浓度为0.06~0.08mol/L,所述的二次中和,采用的碱溶液的浓度为0.12~0.18mol/L。
8.如权利要求1所述的从大鲵中提取氨基酸的方法,其特征在于,所述的抗乳化剂,是将环氧丙醇和十二烷基苯磺酸钠按1:0.08~0.12的质量比混合制得。
9.如权利要求1所述的从大鲵中提取氨基酸的方法,其特征在于,所述的萃取剂,是十二烷基磷酸或甲基三辛基氯化铵
10.如权利要求1所述的从大鲵中提取氨基酸的方法,其特征在于,所述的沉淀剂,是将苯磺酸、苯甲酸和均苯三甲酸按1:0.5~1.2:0.2~0.4的质量比混合制得。

说明书全文

一种从大鲵中提取基酸的方法

技术领域

[0001] 本发明生物技术领域,特别涉及一种从大鲵中提取氨基酸的方法。

背景技术

[0002] 大鲵,又名娃娃鱼,属两栖纲有尾目,素有软黄金之称,含有丰富的蛋白质和微量元素,以及少量的脂肪,其中8种氨基酸为人体的必需氨基酸,不但营养价值高,而且还能预防多种疾病,改善人体的免疫和细胞代谢平,同时,大鲵在食品和药用方面都具有较高的运用价值,比如:美容养颜、预防心血管疾病、延缓衰老、抗癌等作用,是一种很好的保健食品,近年来随着人们对大鲵的认识,国内外对大鲵的研究也越来越多,为了能更好的利用大鲵的营养价值和药用价值,需要将其作为食用性水产品来养殖,但是,大鲵是我国特有的珍稀野生动物,被列为国家二级保护动物不得食用、不得捕杀,因此,大鲵的人工养殖技术得到了广泛的研究,随着科学技术的发展,大鲵的人工养殖技术也越来越成熟,成功培育了大鲵子二代食用性水产品,也有相关的数据显示大鲵肌肉中的一般营养成分的比重,其中人工养殖大鲵子二代的脂肪、蛋白质和灰分的比重分别为:9.63%、94.50%和3.62%,而野生大鲵的脂肪、蛋白质和灰分的比重分别为:14.25%、79.50%和4.18%,通过国内外对大鲵肌肉营养成分的研究表明,人工养殖大鲵子二代营养价值和野生大鲵的营养价值十分接近,实现了大鲵的人工养殖,随着大鲵子二代养殖技术的不断成熟,使大鲵子二代的量不断增加。
[0003] 氨基酸在人体内通过代谢可以发挥下列一些作用:①合成组织蛋白质;②变成酸、激素抗体、肌酸等含氨物质;③转变为水化合物和脂肪;④化成二氧化碳和水及尿素,产生能量氨基酸在医药上主要用来制备复方氨基酸输液,也用作治疗药物和用于合成多肽药物。用作药物的氨基酸有一百几十种,其中包括构成蛋白质的氨基酸有20种和构成非蛋白质的氨基酸有100多种。
[0004] 由多种氨基酸组成的复方制剂在现代静脉营养输液以及“要素饮食”疗法中占有非常重要的地位,对维持危重病人的营养,抢救患者生命起积极作用,成为现代医疗中不可少的医药品种之一,因此氨基酸的提取工艺越来越受到关注;动物中富含大量氨基酸,如申请号201410380978.5《在牡蛎肉中提取氨基酸的方法》取牡蛎肉用90-100℃高温蒸汽蒸煮5~15分钟,煮熟消毒后,按鲜牡蛎肉与食盐、60-70℃热水的重量比是100:3-10:78-82的比例,将食盐和热水加入熟牡蛎肉中,在60~100℃温度研磨成浆,浆液冷却至40℃时加入鲜牡蛎肉重量1%的预扩培好的发酵菌种,搅拌均匀,在20~25℃条件下密封发酵30-50天,期间每1-2天充分搅拌1次,取发酵液过滤,得到澄清滤液装瓶,在85~95℃,20分钟条件下喷淋灭菌,得到红棕色或棕色,气味鲜香的牡蛎氨基酸液,大鲵富含氨基酸、氨基酸等物质,从大鲵中提取氨基酸目前已有相关专利研究报道,但是,从大鲵中提取氨基酸却未见相关研究报道。

发明内容

[0005] 本发明为解决上述技术问题,提供了一种从大鲵中提取氨基酸的方法。
[0006] 具体是通过以下技术方案来实现的:
[0007] 一种从大鲵中提取氨基酸的方法,包括以下步骤:
[0008] (1)杀菌处理:将大鲵原料用清水洗净后,在常温下,用浓度为0.012~0.018%的盐水浸泡30~40min,将原料捞出,再在50~60℃下,用杀菌液浸泡大鲵40~50min,将原料捞出沥干,干燥得大鲵粉末;
[0009] (2)水解:加水将大鲵粉末调和成含量为40~50%的溶液,在90~110℃下搅拌30~40min,再在50~60℃下恒温下放置80~120min,过滤得水解液和水解渣;
[0010] (3)酸解:加水将水解渣调和成含量为40~50%的溶液,用酸溶液调节水解渣溶液pH为2.5~3.5,搅拌20~30min,离心得酸解液和酸解渣;
[0011] (4)中和:加水将酸解渣调和成含量为40~50%的溶液,用溶液调节酸解渣溶液pH为7~8,搅拌20~30min,离心得中和液和中和渣;
[0012] (5)二次酸解:加水将中和渣调和成含量为40~50%的溶液,用酸溶液调节浆料溶液pH为3~4,搅拌20~30min,离心得二次酸解液和二次酸解渣;
[0013] (6)二次中和:加水将二次酸解渣调和成含量为40~50%的溶液,用碱溶液调节二次酸解渣溶液pH为6.5~7.5,搅拌20~30min,离心得二次中和液和二次中和渣;
[0014] (7)萃取:将水解液、酸解液、中和液、二次酸解液、二次中和液混合,浓缩,加入抗乳化剂,搅拌8~12min,再加入萃取剂,搅拌25~35min,静置1~2h,得萃取液;
[0015] (8)纯化:在萃取液中加入沉淀剂,通过离心机离心后收集沉淀,将沉淀用乙酸溶解,得到氨基酸溶液,用纯化水透析后,得到氨基酸提取液,冷冻、干燥,即得成品。
[0016] 所述的大鲵原料,是由大鲵皮、大鲵肌肉按0.1~0.2:0.8~1.2的质量比混合。
[0017] 所述的杀菌液,是将枇杷叶、荔枝草和猕猴桃根按等质量混合,粉碎,加入所述粉碎料质量1~2倍的水,加热熬煮30~40min,冷却至常温,加入所述粉碎料质量的5倍量的乙醇,静置120~160min,回收乙醇,过滤,将滤液浓缩至一半体积,用紫外线照射8~12min,即可。
[0018] 所述的紫外线,波长为215~225nm。
[0019] 所述的离心,频率为1800~2000r/min,离心时间为8~12min。
[0020] 所述的酸溶液,是盐酸磷酸甲酸、乙酸中的一种;所述的碱溶液,是氢氧化钠、氢氧化中的一种。
[0021] 所述的酸解,采用的酸溶液的浓度为0.12~0.18mol/L,所述的中和,采用的碱溶液的浓度为0.25~0.35mol/L,所述的二次酸解,采用的酸溶液的浓度为0.06~0.08mol/L,所述的二次中和,采用的碱溶液的浓度为0.12~0.18mol/L。
[0022] 所述的抗乳化剂,是将环氧丙醇和十二烷基苯磺酸钠按1:0.08~0.12的质量比混合制得。
[0023] 所述的萃取剂,是十二烷基磷酸或甲基三辛基氯化铵
[0024] 所述的沉淀剂,是将苯磺酸、苯甲酸和均苯三甲酸按1:0.5~1.2:0.2~0.4的质量比混合制得。
[0025] 综上所述,本发明的有益效果在于:本发明利用大鲵皮、大鲵肌肉混合作为原料提取氨基酸,充分利用大鲵资源,通过杀菌处理、水解、酸解、中和、二次酸解、二次中和、萃取、纯化的操作步骤,有效的提高了大鲵氨基酸的提取率,经测定,本发明氨基酸的提取率82%以上,纯度高达97%以上,有效的满足了目前市场对氨基酸的量以及品质的追求,提高了氨基酸的市场应用价值。
[0026] 其中,本发明首先从原料上进行优化,通过大鲵皮、肌肉的科学混合,最大限度的提高了氨基酸的收率,为氨基酸的高提取率提供保障,由于采用的原料来源于动物体,难免会有一些病原菌以及病毒残留,本发明首次将中药的杀菌机理运用到氨基酸的提取中,实践证明,杀菌效果显著,且对氨基酸活性没有影响,有效的灭杀了病原菌,保证了氨基酸的安全性;本发明通过水解、酸解、中和、二次酸解、二次中和的连续反应,使得其中的油脂、多种矿物质和其他杂质得到有效的清除,为制备的氨基酸的高纯度提供了保障,再分别通过对浓度、反应时间、反应温度进行合理的选取,最大限度的对大鲵中的氨基酸进行提取,为获得高收率的氨基酸提供基础

具体实施方式

[0027] 下面对本发明的具体实施方式作进一步详细的说明,但本发明并不局限于这些实施方式,任何在本实施例基本精神上的改进或代替,仍属于本发明权利要求所要求保护的范围。
[0028] 实施例1
[0029] 一种从大鲵中提取氨基酸的方法,包括以下步骤:
[0030] (1)杀菌处理:将大鲵原料用清水洗净后,在常温下,用浓度为0.012%的盐水浸泡30min,将原料捞出,再在50℃下,用杀菌液浸泡大鲵40min,将原料捞出沥干,干燥得大鲵粉末;所述的大鲵原料,是由大鲵皮、大鲵肌肉按0.1:0.8的质量比混合;所述的杀菌液,是将枇杷叶、荔枝草和猕猴桃根按等质量混合,粉碎,加入所述粉碎料质量1~2倍的水,加热熬煮30min,冷却至常温,加入所述粉碎料质量的5倍量的乙醇,静置120min,回收乙醇,过滤,将滤液浓缩至一半体积,用波长为215nm的紫外线照射8min,即可;
[0031] (2)水解:加水将大鲵粉末调和成含量为40%的溶液,在90℃下搅拌30min,再在50℃下恒温下放置80min,过滤得水解液和水解渣;
[0032] (3)酸解:加水将水解渣调和成含量为40%的溶液,用浓度为0.12mol/L的盐酸调节水解渣溶液pH为2.5,搅拌20min,在1800r/min的频率下,离心8min得酸解液和酸解渣;
[0033] (4)中和:加水将酸解渣调和成含量为40%的溶液,用浓度为0.25mol/L的氢氧化钠调节酸解渣溶液pH为7,搅拌20min,在1800r/min的频率下,离心8min得中和液和中和渣;
[0034] (5)二次酸解:加水将中和渣调和成含量为40%的溶液,用浓度为0.06mol/L的盐酸调节浆料溶液pH为3,搅拌20min,在1800r/min的频率下,离心8min得二次酸解液和二次酸解渣;
[0035] (6)二次中和:加水将二次酸解渣调和成含量为40%的溶液,用浓度为0.12mol的氢氧化钠调节二次酸解渣溶液pH为6.5,搅拌20min,在1800~2000r/min的频率下,离心8min得二次中和液和二次中和渣;
[0036] (7)萃取:将水解液、酸解液、中和液、二次酸解液、二次中和液混合,浓缩,加入抗乳化剂,搅拌8min,再加入十二烷基磷酸,搅拌25min,静置1h,得萃取液;所述的抗乳化剂,是将环氧丙醇和十二烷基苯磺酸钠按1:0.08的质量比混合制得;
[0037] (8)纯化:在萃取液中加入沉淀剂,通过离心机离心后收集沉淀,将沉淀用乙酸溶解,得到氨基酸溶液,用纯化水透析后,得到氨基酸提取液,冷冻、干燥,即得成品;所述的沉淀剂,是将苯磺酸、苯甲酸和均苯三甲酸按1:0.5:0.2的质量比混合制得。
[0038] 实施例2
[0039] 一种从大鲵中提取氨基酸的方法,包括以下步骤:
[0040] (1)杀菌处理:将大鲵原料用清水洗净后,在常温下,用浓度为0.018%的盐水浸泡40min,将原料捞出,再在60℃下,用杀菌液浸泡大鲵50min,将原料捞出沥干,干燥得大鲵粉末;所述的大鲵原料,是由大鲵皮、大鲵肌肉按0.2:1.2的质量比混合;所述的杀菌液,是将枇杷叶、荔枝草和猕猴桃根按等质量混合,粉碎,加入所述粉碎料质量2倍的水,加热熬煮
40min,冷却至常温,加入所述粉碎料质量的5倍量的乙醇,静置160min,回收乙醇,过滤,将滤液浓缩至一半体积,用波长为225nm的紫外线照射12min,即可;
[0041] (2)水解:加水将大鲵粉末调和成含量为50%的溶液,在110℃下搅拌40min,再在60℃下恒温下放置120min,过滤得水解液和水解渣;
[0042] (3)酸解:加水将水解渣调和成含量为50%的溶液,用浓度为0.18mol/L的磷酸调节水解渣溶液pH为3.5,搅拌30min,在2000r/min的频率下,离心12min得酸解液和酸解渣;
[0043] (4)中和:加水将酸解渣调和成含量为50%的溶液,用浓度为0.35mol/L的氢氧化钙调节酸解渣溶液pH为8,搅拌30min,在2000r/min的频率下,离心12min得中和液和中和渣;
[0044] (5)二次酸解:加水将中和渣调和成含量为50%的溶液,用浓度为0.08mol/L的磷酸调节浆料溶液pH为4,搅拌30min,在2000r/min的频率下,离心12min得二次酸解液和二次酸解渣;
[0045] (6)二次中和:加水将二次酸解渣调和成含量为50%的溶液,用浓度为0.18mol的氢氧化钙调节二次酸解渣溶液pH为7.5,搅拌30min,在2000r/min的频率下,离心12min得二次中和液和二次中和渣;
[0046] (7)萃取:将水解液、酸解液、中和液、二次酸解液、二次中和液混合,浓缩,加入抗乳化剂,搅拌12min,再加入甲基三辛基氯化铵,搅拌35min,静置2h,得萃取液;所述的抗乳化剂,是将环氧丙醇和十二烷基苯磺酸钠按1:0.12的质量比混合制得;
[0047] (8)纯化:在萃取液中加入沉淀剂,通过离心机离心后收集沉淀,将沉淀用乙酸溶解,得到氨基酸溶液,用纯化水透析后,得到氨基酸提取液,冷冻、干燥,即得成品;所述的沉淀剂,是将苯磺酸、苯甲酸和均苯三甲酸按1:1.2:0.4的质量比混合制得。
[0048] 实施例3
[0049] 一种从大鲵中提取氨基酸的方法,包括以下步骤:
[0050] (1)杀菌处理:将大鲵原料用清水洗净后,在常温下,用浓度为0.015%的盐水浸泡35min,将原料捞出,再在55℃下,用杀菌液浸泡大鲵45min,将原料捞出沥干,干燥得大鲵粉末;所述的大鲵原料,是由大鲵皮、大鲵肌肉按0.15:1的质量比混合;所述的杀菌液,是将枇杷叶、荔枝草和猕猴桃根按等质量混合,粉碎,加入所述粉碎料质量1~2倍的水,加热熬煮
35min,冷却至常温,加入所述粉碎料质量的5倍量的乙醇,静置140min,回收乙醇,过滤,将滤液浓缩至一半体积,用波长为220nm的紫外线照射10min,即可;
[0051] (2)水解:加水将大鲵粉末调和成含量为45%的溶液,在100℃下搅拌35min,再在55℃下恒温下放置100min,过滤得水解液和水解渣;
[0052] (3)酸解:加水将水解渣调和成含量为45%的溶液,用浓度为0.15mol/L的甲酸调节水解渣溶液pH为3,搅拌25min,在1900r/min的频率下,离心10min得酸解液和酸解渣;
[0053] (4)中和:加水将酸解渣调和成含量为45%的溶液,用浓度为0.30mol/L的氢氧化钠调节酸解渣溶液pH为7.5,搅拌25min,在1900r/min的频率下,离心10min得中和液和中和渣;
[0054] (5)二次酸解:加水将中和渣调和成含量为45%的溶液,用浓度为0.07mol/L的甲酸调节浆料溶液pH为3.5,搅拌20~30min,在1900r/min的频率下,离心10min得二次酸解液和二次酸解渣;
[0055] (6)二次中和:加水将二次酸解渣调和成含量为45%的溶液,用浓度为0.15mol的氢氧化钠调节二次酸解渣溶液pH为7,搅拌25min,在1900r/min的频率下,离心10min得二次中和液和二次中和渣;
[0056] (7)萃取:将水解液、酸解液、中和液、二次酸解液、二次中和液混合,浓缩,加入抗乳化剂,搅拌10min,再加入十二烷基磷酸,搅拌30min,静置1.5h,得萃取液;所述的抗乳化剂,是将环氧丙醇和十二烷基苯磺酸钠按1:0.1的质量比混合制得;
[0057] (8)纯化:在萃取液中加入沉淀剂,通过离心机离心后收集沉淀,将沉淀用乙酸溶解,得到氨基酸溶液,用纯化水透析后,得到氨基酸提取液,冷冻、干燥,即得成品;所述的沉淀剂,是将苯磺酸、苯甲酸和均苯三甲酸按1:0.8:0.3的质量比混合制得。
[0058] 实施例4
[0059] 一种从大鲵中提取氨基酸的方法,包括以下步骤:
[0060] (1)杀菌处理:将大鲵原料用清水洗净后,在常温下,用浓度为0.012%的盐水浸泡40min,将原料捞出,再在50℃下,用杀菌液浸泡大鲵50min,将原料捞出沥干,干燥得大鲵粉末;所述的大鲵原料,是由大鲵皮、大鲵肌肉按0.1:1.2的质量比混合;所述的杀菌液,是将枇杷叶、荔枝草和猕猴桃根按等质量混合,粉碎,加入所述粉碎料质量1~2倍的水,加热熬煮30min,冷却至常温,加入所述粉碎料质量的5倍量的乙醇,静置160min,回收乙醇,过滤,将滤液浓缩至一半体积,用波长为215nm的紫外线照射12min,即可;
[0061] (2)水解:加水将大鲵粉末调和成含量为40%的溶液,在110℃下搅拌30min,再在60℃下恒温下放置80min,过滤得水解液和水解渣;
[0062] (3)酸解:加水将水解渣调和成含量为50%的溶液,用浓度为0.12mol/L的乙酸调节水解渣溶液pH为3.5,搅拌20min,在2000r/min的频率下,离心8min得酸解液和酸解渣;
[0063] (4)中和:加水将酸解渣调和成含量为50%的溶液,用浓度为0.25mol/L的氢氧化钠调节酸解渣溶液pH为8,搅拌20min,在2000r/min的频率下,离心12min得中和液和中和渣;
[0064] (5)二次酸解:加水将中和渣调和成含量为50%的溶液,用浓度为0.06mol/L的乙酸调节浆料溶液pH为4,搅拌20min,在2000r/min的频率下,离心8min得二次酸解液和二次酸解渣;
[0065] (6)二次中和:加水将二次酸解渣调和成含量为50%的溶液,用浓度为0.12mol的氢氧化钠调节二次酸解渣溶液pH为7.5,搅拌20min,在2000r/min的频率下,离心8min得二次中和液和二次中和渣;
[0066] (7)萃取:将水解液、酸解液、中和液、二次酸解液、二次中和液混合,浓缩,加入抗乳化剂,搅拌8min,再加入甲基三辛基氯化铵,搅拌35min,静置2h,得萃取液;所述的抗乳化剂,是将环氧丙醇和十二烷基苯磺酸钠按1:0.08的质量比混合制得;
[0067] (8)纯化:在萃取液中加入沉淀剂,通过离心机离心后收集沉淀,将沉淀用乙酸溶解,得到氨基酸溶液,用纯化水透析后,得到氨基酸提取液,冷冻、干燥,即得成品;所述的沉淀剂,是将苯磺酸、苯甲酸和均苯三甲酸按1:0.5:0.4的质量比混合制得。
[0068] 实施例5
[0069] 一种从大鲵中提取氨基酸的方法,包括以下步骤:
[0070] (1)杀菌处理:将大鲵原料用清水洗净后,在常温下,用浓度为0.018%的盐水浸泡30min,将原料捞出,再在60℃下,用杀菌液浸泡大鲵40min,将原料捞出沥干,干燥得大鲵粉末;所述的大鲵原料,是由大鲵皮、大鲵肌肉按0.2:0.8的质量比混合;所述的杀菌液,是将枇杷叶、荔枝草和猕猴桃根按等质量混合,粉碎,加入所述粉碎料质量2倍的水,加热熬煮
40min,冷却至常温,加入所述粉碎料质量的5倍量的乙醇,静置120min,回收乙醇,过滤,将滤液浓缩至一半体积,用波长为225nm的紫外线照射8min,即可;
[0071] (2)水解:加水将大鲵粉末调和成含量为50%的溶液,在90℃下搅拌40min,再在50℃下恒温下放置120min,过滤得水解液和水解渣;
[0072] (3)酸解:加水将水解渣调和成含量为50%的溶液,用浓度为0.12mol/L的盐酸调节水解渣溶液pH为3.5,搅拌20min,在2000r/min的频率下,离心12min得酸解液和酸解渣;
[0073] (4)中和:加水将酸解渣调和成含量为40%的溶液,用浓度为0.35mol/L的氢氧化钙调节酸解渣溶液pH为7,搅拌30min,在1800r/min的频率下,离心12min得中和液和中和渣;
[0074] (5)二次酸解:加水将中和渣调和成含量为50%的溶液,用浓度为0.06mol/L的盐酸调节浆料溶液pH为4,搅拌30min,在1800r/min的频率下,离心12min得二次酸解液和二次酸解渣;
[0075] (6)二次中和:加水将二次酸解渣调和成含量为50%的溶液,用浓度为0.12mol的氢氧化钙调节二次酸解渣溶液pH为7.5,搅拌20min,在2000r/min的频率下,离心12min得二次中和液和二次中和渣;
[0076] (7)萃取:将水解液、酸解液、中和液、二次酸解液、二次中和液混合,浓缩,加入抗乳化剂,搅拌12min,再加入萃取剂,搅拌25min,静置2h,得萃取液;所述的抗乳化剂,是将环氧丙醇和十二烷基苯磺酸钠按1:0.08的质量比混合制得;所述的萃取剂,是十二烷基磷酸或甲基三辛基氯化铵
[0077] (8)纯化:在萃取液中加入沉淀剂,通过离心机离心后收集沉淀,将沉淀用乙酸溶解,得到氨基酸溶液,用纯化水透析后,得到氨基酸提取液,冷冻、干燥,即得成品;所述的沉淀剂,是将苯磺酸、苯甲酸和均苯三甲酸按1:1.2:0.2的质量比混合制得。
[0078] 对本发明实施例1~5提取的氨基酸的提取率以及纯度进行统计,结果如表1所示:
[0079] 表1
[0080]  提取率% 纯度%
实施例1 83.12 96.85
实施例2 82.58 97.33
实施例3 83.63 97.52
实施例4 83.44 96.98
实施例5 82.86 97.26
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