【発明の詳細な説明】

【０００１】

【産業上の利用分野】本発明は、１段階反応で活性化部分トロンボプラスチン時間（activated partial thromb
oplastin time:ＡＰＴＴ）を測定するための方法及び試薬に関する。 本発明によるこの方法及び試薬は、血液凝固系の他のパラメーターの測定と一緒に行われるＡＰＴ
Ｔの測定に特に適している。

【０００２】

【従来の技術】活性化部分トロンボプラスチン時間（Ａ
ＰＴＴ）の測定は、凝固分析において最も頻繁に行われる測定の１つである。 それは、主として、第VIII因子の減少の欠如の如き患者の血漿中の因子欠乏の検出及びヘパリン治療をモニターするのに役立つ。 この分析は普通は次のように行われる：患者の血漿のサンプルを活性化剤と混合する。 インキュベーション段階の間に第XII 因子を活性化する。 その後、塩化カルシウムで反応を開始する。 サンプルが凝固するまでの時間を測定する。 この方法を行うための試薬はかなり以前から知られており、例えば、バクスター (Baxter) 社、オルソ(Ortho) 社及びダイアメッド (DiaMed) 社によって市販されている。 通常、カオリン、シリケート又はエラグ酸が活性化剤として用いられる。 実際の測定は、分析管の手動倒置及び血栓形成の目視観察によって行われる。
しかしながら、凝固時間は、アメルング (Amelung)社、
バクスター (Baxter) 社、レイバー(Labor) 社及びベーリング(Behring) 社により販売されているような光学的又は機械的測定装置を用いても測定することができる。

【０００３】しかしながら、上記の従来法は幾つかの重要な欠点を有している： １． 活性化段階は、全ての患者について一定であると仮定されなければならないので、測定において患者固有の特徴を考慮に入れることができない。 しかしながら、内因性凝固系及び患者の出血及びトロンボゲン形成傾向に重要であるフィブリン溶解の活性化は、この活性化段階の間に始まるのである。 かくして、インキュベーション時間があまりに短過ぎると活性化が不完全になるので、
正常な血漿でも凝固時間が長くなる。 インキュベーション時間があまりに長過ぎても、活性化したフィブリン溶解系が、凝固を長引かせるフィブリノーゲンからの分解産物を放出するのでその値はやはり増加する。 ２． 従来法の２番目の欠点は、分析を２段階で行わなければならないことである。 これは、誤差が生じるおそれを増大させて、この測定法を標準化するのをより難しくする。 ３． 更に、現行のＡＰＴＴ測定法は概して標準化するのが難しいという事実が、現行法の重要な欠点である。 測定結果は通常は秒単位であるが、活性化剤が正確に規定されたいつでも同じ表面を有する化学物質ではないので、試薬を製造する際にバラツキを避けることができない。 加えて、凝固プロセスに必要なリン脂質を化学的に純粋な形で得るのが難しく、それらの活性を一定に維持するのが難しい。 従って、各バッチ間での測定結果のバラツキを避けることができない。 しかしながら、結果のバラツキは、あまりに大き過ぎなければ、当然のこととして許容されている。 ４．４番目の欠点は、古典的なＡＰＴＴ測定法は自動化能に乏しいことである。 トロンボプラスチン時間（Ｐ
Ｔ）及びフィブリノーゲンの如き他の重要な凝固試験は、１種の試験試薬を用いて行うことができる速い反応プロセスであり、比較的長い予備インキュベーション時間を有する２段階試験は、例えば、凝固系の複数のパラメーターを平行して測定する場合に、この分析プロセスにあまり適合せず、一定時間内に処理する分析量を実質的に低下させる。 ５． 更に、血漿を用いて反応を開始させることは、試験操作、計算及びアナライザー機能をかなり簡略化するであろうから望ましいことである。

【０００４】

【発明が解決しようとする課題】従って、本発明の技術的課題は、当該技術の現状の欠点を可能な限り回避すること、即ち、特に、活性化段階をＡＰＴＴ反応に含ませること、結果を標準化すること、ピペッティング操作の回数を減少させること及びサンプル液、特に血漿により反応を開始させることを可能にすることである。

【０００５】

【課題を解決するための手段】この課題は、活性化部分トロンボプラスチン時間（ＡＰＴＴ）の測定に必要な物質を予め混合した形で含有する試薬をサンプル液と接触させることによりＡＰＴＴの測定が開始されることを特徴とする、１段階反応でＡＰＴＴを測定する方法により解決された。 本発明による方法では、試薬を測定容器内に入れてからサンプル液を添加することによって反応を開始してもよい。 一方、最初にサンプル液を添加してから予め混合した試薬を添加することによって反応を開始することも可能である。 この測定は、先行技術の方法で必要な活性化段階を要さずに、試薬とサンプル液の直接接触によって開始されることが重要である。 本発明の方法によるＡＰＴＴの測定は、好ましくは、サンプル液として所望により希釈した血液又は血漿を用いることによって、特に好ましくは血漿を用いることによって行われる。

【０００６】ＡＰＴＴ測定用試薬は、ＡＰＴＴ測定に必要な物質を予め混合した形で含有する。 この必要な物質は、通常は活性化剤成分、二価カチオン及びリン脂質である。 カオリン、シリケート及び／又はエラグ酸が活性化剤として好ましく用いられる。 活性化剤の濃度は、例えば、試薬１Ｌ当たり２５〜２５０ｍｇ／Ｌ、特に好ましくは１００ｍｇ／Ｌのグラスウール活性化エラグ酸である。 試薬中に含有されるリン脂質は、動物及び／又は植物組織抽出物から得ることができ、及び／又は人工的に製造することもできる。 ウサギの脳からのクロロホルム抽出物が適するリン脂質の例である。 好ましくは、試薬１Ｌ当たり0.２〜1.０ｇ、特に好ましくは0.４〜0.６
ｇのウサギの脳の抽出物を用いる。 試薬中に存在する二価カチオンは、好ましくは、該試薬に例えば塩化カルシウムを添加することによって供給されるカルシウムイオンである。 分析溶液中でのカルシウムイオンの濃度は、
好ましくは５〜１５ミリモル／Ｌ、特に好ましくは7.５
〜１2.５ミリモル／Ｌである。 加えて、試薬が１又は２
以上のアミノ酸で安定化されるのが好ましい。 この安定化により、高温（例えば、３７℃）であっても試薬の保存寿命がかなり増す。 Ｄ−アラニン、Ｌ−アラニン、β
−アラニン、グリシン及びバリンを含む群から選ばれるアミノ酸が、安定化のために好ましく用いられる。 更に、該アミノ酸は、試薬の総重量の0.５〜１０％の総濃度で存在するのが好ましい。

【０００７】驚いたことに、全ての従来の試験方法に反して、１段階試験操作でＡＰＴＴを測定することが可能であることが分かった。 かくして、活性化剤とリン脂質を二価カチオン（例えば、塩化カルシウム）と混合して、この混合物を所望によりアミノ酸（例えば、アラニン）で安定化する。 ＡＰＴＴを測定するのに必要な全ての物質を含有する予め混合した試薬はこうして得られる。 今や、サンプル液、例えば、血漿をこの試薬と直接接触させることによって、反応を開始させることが可能である。 驚いたことに、従来、絶対に必要であると考えられていた活性化段階は、本発明による方法においては省略できるのである。

【０００８】本発明による方法の好ましい態様においては、試薬は既に容器、特にキュベット内に詰められている。 試薬は、例えば、溶液として又は凍結乾燥物として、液体であっても固体であってもよい。 容器は、好ましくは、例えば、ポリプロピレンの如き不浸透性の透明材料でできたものである。 更に、容器は、試薬を分配した後に気密性かつ水密性であるのが好ましい。 これを達成するためには、例えば、アルミニウムホイルシールからなる密閉手段が用いられる。 このようにすれば、ＡＰ
ＴＴの測定をかなり簡略化することが可能となり、また容器にＡＰＴＴ試薬を工業包装するか又は予め充填することによって、凝固系の他のパラメーターを測定するための分析系にそれを統合することも可能となる。

【０００９】この目的のために、幾つかの容器を１枚のカードの中に、即ち、普通のホルダー内に統合するのが更に好ましい。 試薬及び／又はバッチに固有のデータは、このホルダー上及び／又はそれらの容器上に蓄積することができる。 かかる蓄積は、例えば、バーコードラベルの形であってもよい。 こうして、結果の標準化を有意に促進し、従ってそれらの判定を有意に促進する試薬についてのバッチ固有の補正係数を用いることができる。 更に、実験室で試薬成分をピペッティングしなくてもよい。 これは、特に、測定容器が工業包装されるか又は予め充填される場合、例えば、測定容器がポリプロピレンの如き不浸透性材料で構成されかつホイル又はキャップで密閉されている場合に、試験の最適化を意味し、
また分析プロセスを制御しかつ結果を評価するためのコンピュータープログラムを大幅に簡素化できるようにする。

【００１０】ＡＰＴＴを測定するための上記の１段階試験の本発明は、例えば、トロンボプラスチン時間、フィブリノーゲン、トロンビン時間及びレプチラーゼ時間を測定するための試薬を１つの組合せ試薬として、例えば、幾つかの容器からなるカードに更に統合することにより、患者のプロフィールを簡単なやり方で作成することも可能にする。 凝固因子（例えば、第VIII、IX、Ｘ、
XI、XII 因子）、プロテインＣ及びプロテインＳの如き更なる凝固試験に適合させることも可能である。 試験を行うには、患者の血漿を用いて反応を開始させることが必要なだけである。 正常値、検量線等の如き試験に固有の全ての情報はバーコード上に蓄積することができるので、新鮮な正常血漿プール（ＦＮＰ）、大きな誤差源を供給する必要も、ユーザーの実験室で検量線を作成する必要ももはやない。 分析を自動的に行う場合、試薬をピペッティングする必要もないので、このための複雑な理論計算も不必要である。 コード化された試薬とコード化された患者サンプルとを組み合わせれば間違いが排除されるので、信頼できる最適結果が得られる。

【００１１】かくして、本発明の更なる目的は、ＡＰＴ
Ｔを測定する方法と、ＡＰＴＴ測定と平行して行うことのできる他の測定方法を組み合わせることである。 この例は、例えば、トロンボプラスチン時間（ＰＴ）、フィブリノーゲン濃度、トロンビン時間（ＴＴ）、レプチラーゼ時間（ＲＴ）、凝固因子、プロテインＣ及びプロテインＳの如き凝固系の他のパラメーターである。 本発明は、活性化部分トロンボプラスチン時間（ＡＰＴＴ）の測定に必要な全ての物質を予め混合した形で含有する、
１段階反応でＡＰＴＴを測定するための試薬にも関する。 かかる試薬は、通常、上で詳細に記したように、リン脂質、活性化剤及び二価カチオンを含有する。 該試薬は、好ましくは、上で詳細に記したように１又は２以上のアミノ酸によって安定化される。 本発明による試薬は、それがＡＰＴＴ測定に必要な全ての物質を予め混合した形で含有するのに反して、ＡＰＴＴ測定用の公知の試薬の場合には、少なくとも１種の必須成分、通常は二価イオンが欠如している点で先行技術の試薬と相違している。

【００１２】試薬は、好ましくは、液体又は固体（例えば、粉末又は凍結乾燥物）の形で容器内に詰められ又は予め充填されており、１枚のカードの中に統合された幾つかの容器を含むことができ、そして試薬及び／又はバッチに固有のデータを容器及び／又はそれらのホルダー上に蓄積することができる。 例えば、図４に示すような５つのＡＰＴＴ試験用測定キュベットを有するカードがこのために用いられ、例えば、試薬の満了日、ロット番号、新鮮な正常血漿プールの値、他の測定単位への換算及び補正係数の如きデータをカード上に及び／又は測定キュベット自体の上に蓄積することができる。 図５に示すように、かかるカードを患者プロフィールのために設計することが更に可能であり、異なる分析（例えば、Ａ
ＰＴＴ、ＰＴ、フィブリノーゲン、ＴＴ及びＲＴ）を平行して行うのに用いることができる。 かくして、本発明は、ＡＰＴＴの測定のための本発明による試薬を含有する幾つかの容器及び、所望により、凝固系の他のパラメーターの測定のための更なる容器を含む組合せ試薬も提供する。

【００１３】図面に基づき、本発明のいくつかの側面を更に説明する。 図１ａは、正常血漿を用いる先行技術の測定方法についての凝固の時間的経過を示し（反応は従来通りに３分間予備インキュベーションをした後に塩化カルシウムで開始される）、図１ｂは、本発明による測定方法についての凝固の時間的経過を示し（反応は正常血漿で開始される）、図２ａは、第VIII因子欠乏血漿を用いる先行技術の測定方法についての凝固の時間的経過を示し（反応は３分間予備インキュベーションをした後に塩化カルシウムで開始される）、図２ｂは、本発明による測定方法についての凝固の時間的経過を示し（反応は第VIII因子欠乏血漿で開始される）、図３は、異なる血漿サンプルでの両方法の相関関係を示し、図４は、５
つの測定キュベットが統合されたカードの前面及び背面を示す。 試薬の満了日、ロット番号、新鮮な正常血漿プールの値、他の測定単位への換算及び補正係数を背面上にバーコードで記録することができる。 図５は、例えば、５つの測定キュベットが同じように統合されたカードの前面及び背面を示す。 この場合、カードは患者プロフィールのために設計され、種々の分析を同時に行うのに用いることができる。 背面上のバーコードは図４におけるように全てのデータを含んでいる。 次の実施例により、本発明をより詳細に説明する。

【００１４】

【実施例】 実施例１ ５０ｍＬ ＡＰＴＴ試薬（ダイアセリン (DiaCelin) 、
ダイアメッド (DiaMed) 社）を５０ｍＬの0.０２モル／
Ｌ塩化カルシウムと混合した。 この混合液0.２ｍＬをレイバー社のキュベット内にピペッティングした。 0.１ｍ
Ｌ血漿で反応を開始させた。 凝固の時間的経過を光学的にモニターして、レイバー社製のアナライザー（コアスクリーナー (Coascreener)）で記録した。 正常血漿、異常血漿（平均及び高い）、ヘパリン血漿（0.１５ｕ／ｍ
Ｌ及び0.３ｕ／ｍＬ）、因子欠乏血漿サンプル（第VII
I、IX、Ｘ、XI、XII 因子，含量約１％）を血漿サンプルとして用いた。 これに平行して、ダイアメッド社からの試薬を用いて、その説明書に従い、従来法で血漿サンプルを分析した。 その結果を表１に纏めた。 図１及び図２は２つの典型的な凝固曲線（正常血漿及び第VIII因子欠乏血漿）を示し、図３は該両方法の相関関係を示し、
図４は複数の測定を同時に行うのに適するカードを示す。

【００１５】

【表１】 表 １凝固時間（秒） 先行技術の方法 本発明による方法 ─────────────────────────────────── 正常血漿１（ＮＰ） ２7.５ ８5.４ 異常血漿１（ＡＰ１） ５9.３ １４1.３ 異常血漿２（ＡＰ２） ９7.７ １８4.２ ヘパリン血漿１（ＨＰ１） ４6.３ １０4.２ ヘパリン血漿２（ＨＰ２） ８0.５ １３2.５ 因子欠乏血漿VIII ６8.０ １２8.７ 因子欠乏血漿IX ９4.２ １５8.９ 因子欠乏血漿Ｘ １０3.５ １４5.０ 因子欠乏血漿XI ８6.１ １４5.４ 因子欠乏血漿XII １５0.９ １５1.９

【００１６】 実施例２安定性を向上させるために各場合に示した量のアミノ酸を添加して、実施例１の実験を繰り返した。 種々の濃度における安定性の程度は、試薬を３７℃で貯蔵することによるストレス試験において、正常血漿で測定した。 その結果を表２に纏めた。 これによると、試薬はＤ−アラニン、Ｌ−アラニン、β−アラニン及びグリシンによって非常に良好に安定化された。

【００１７】

【表２】 表 ２ ─────────────────────────────────── 表 ２ａ 凝固時間（秒） ─────────────────────────── Ｄ−アラニン 開始時 ３日間３７℃ １週間３７℃ ２週間３７℃ ─────────────────────────────────── ０％ ８０ １１６ １２９ １４０ 0.６２５％ ７５ ９６ １０２ １１７ 1.２５％ ７３ ８８ ９０ ９９ 2.５％ ７２ ８１ ８２ ８５ 5.０％ ７３ ７５ ７４ ７４ ───────────────────────────────────

【００１８】 ─────────────────────────────────── 表 ２ｂ 凝固時間（秒） ─────────────────────────── Ｌ−アラニン 開始時 ３日間３７℃ １週間３７℃ ２週間３７℃ ─────────────────────────────────── ０％ ８０ １０７ １３５ １４５ 0.６２５％ ７５ ９１ １０３ １１９ 1.２５％ ７４ ８６ ９２ １０２ 2.５％ ７５ ８０ ８３ ８６ 5.０％ ７７ ７９ ８０ ８０ ───────────────────────────────────

【００１９】 ─────────────────────────────────── 表 ２ｃ 凝固時間（秒） ─────────────────────────── β−アラニン 開始時 ３日間３７℃ １週間３７℃ ２週間３７℃ ─────────────────────────────────── ０％ ８１ １０８ １３０ １４４ 0.６２５％ ７６ ９６ １０７ １１８ 1.２５％ ７４ ８８ ９３ １００ 2.５％ ７５ ７４ ８２ ８３ 5.０％ ７７ ７９ ７９ ７８ ───────────────────────────────────

【００２０】 ─────────────────────────────────── 表 ２ｄ 凝固時間（秒） ─────────────────────────── グリシン 開始時 ３日間３７℃ １週間３７℃ ２週間３７℃ ─────────────────────────────────── ０％ ８１ １１０ １３６ １３６ 0.６２５％ ７６ ９２ ９８ １０３ 1.２５％ ７５ ８４ ９０ ９２ 2.５％ ７５ ７９ ８２ ８０ 5.０％ ８３ ８５ ８７ ８７ ───────────────────────────────────

【００２１】 ─────────────────────────────────── 表 ２ｅ 凝固時間（秒） ─────────────────────────── バリン 開始時 ３日間３７℃ １週間３７℃ ２週間３７℃ ─────────────────────────────────── ０％ ８６ １１１ １３０ １４５ 0.６２５％ ８０ ９８ １０６ １２６ 1.２５％ ７９ ９１ ９５ １０５ 2.５％ ７８ ８８ ９２ ９６ 5.０％ ８２ ９１ ９４ ９５ ───────────────────────────────────

【００２２】 ─────────────────────────────────── 表 ２ｆ 凝固時間（秒） ─────────────────────────── リシン 開始時 ３日間３７℃ １週間３７℃ ２週間３７℃ ─────────────────────────────────── ０％ ７８ １０８ １３１ １４０ 0.６２５％ ８０ ９１ １０４ １２８ 1.２５％ ９３ １０６ １２０ １１８ 2.５％ １６０ ２０２ − − 5.０％ ＞２５０ − − − ───────────────────────────────────

【００２３】 ─────────────────────────────────── 表 ２ｇ 凝固時間（秒） ─────────────────────────── メチオニン 開始時 ３日間３７℃ １週間３７℃ ２週間３７℃ ─────────────────────────────────── ０％ ８１ １０８ １２５ １４０ 0.６２５％ ７５ ９４ ９９ １１９ 1.２５％ ７６ ９０ ９５ １１０ 2.５％ ８１ ９５ ９６ １１０ 5.０％ １０５ １２２ − − ───────────────────────────────────

【００２４】 ─────────────────────────────────── 表 ２ｈ 凝固時間（秒） ─────────────────────────── グルタミン酸 開始時 ３日間３７℃ １週間３７℃ ２週間３７℃ ─────────────────────────────────── ０％ ８２ １１０ １３１ １４２ 0.６２５％ ７４ ９３ １０２ １２０ 1.２５％ ７２ ８６ ９１ １０２ 2.５％ ７８ ８７ ９２ １０３ 5.０％ １２２ １６０ １６８ １８０ ───────────────────────────────────

【００２５】 ─────────────────────────────────── 表 ２ｉ 凝固時間（秒） Ｎ−アセチル ─────────────────────────── システイン 開始時 ３日間３７℃ １週間３７℃ ２週間３７℃ ─────────────────────────────────── ０％ ８３ １１７ １３７ １４２ 0.６２５％ １２２ １６６ １７６ ＞２５０ 1.２５％ ２２８ ＞２５０ − − 2.５％ ＞２５０ − − − 5.０％ ＞２５０ − − − ───────────────────────────────────

【００２６】 ─────────────────────────────────── 表 ２ｊ 凝固時間（秒） アスパラ ─────────────────────────── ギン酸 開始時 ３日間３７℃ １週間３７℃ ２週間３７℃ ─────────────────────────────────── ０％ ８１ １０９ １３５ １３６ 0.６２５％ ７４ ８８ １０２ １０９ 1.２５％ ７３ ８３ ９０ ９２ 2.５％ ７７ ８２ ８９ ８８ 5.０％ １１０ １１８ １４０ １３０ ───────────────────────────────────

【００２７】 ─────────────────────────────────── 表 ２ｋ 凝固時間（秒） ─────────────────────────── アルギニン 開始時 ３日間３７℃ １週間３７℃ ２週間３７℃ ─────────────────────────────────── ０％ ８３ １１７ １３２ １４０ 0.６２５％ ８３ ８５ １２５ １４１ 1.２５％ １０３ １６５ １６０ １６５ 2.５％ ２１４ ＞２５０ − − 5.０％ ＞２５０ − − − ───────────────────────────────────

【００２８】 実施例３実施例１の実験を繰り返した。 しかしながら、トロンボプラスチン時間（ＰＴ）、フィブリノーゲン（Ｆｉ
ｂ）、トロンビン時間（ＴＴ）及びレプチラーゼ時間（ＲＴ）も同時に測定した。 ダイアメッド社からの試薬を用いた。 試薬は次のように用いた。 ａ）トロンボプラスチン時間（ＰＴ）測定用ダイアプラ
スチン (DiaPlastin) 0.２ｍＬのこの試薬を１番目のキュベット内にピペッティングした。 反応は0.１ｍＬ血漿で開始させた。 ｂ）活性化部分トロンボプラスチン時間（ＡＰＴＴ）測
定用ダイアセリン実施例１で調製した0.２ｍＬの試薬を２番目のキュベット内にピペッティングした。 反応は0.１ｍＬ血漿で開始させた。 ｃ）フィブリノーゲン濃度測定用フィブリノーゲン試薬トロンビン試薬をオウレン(Owren) 緩衝液と１＋１で混合し、その0.２ｍＬを３番目のキュベット内にピペッティングした。 反応は0.０２ｍＬ血漿で開始させた。 ｄ）トロンビン時間（ＴＴ）測定用ダイアトロンビン
(DiaThrombin)この凍結乾燥体を３１ｍＬ蒸留水中に溶解させた。 その
0.２ｍＬを４番目のキュベット内にピペッティングした。 反応は0.２ｍＬ血漿で開始させた。 ｅ）レプチラーゼ時間（ＲＴ）測定用ダイアレプチン
(DiaReptin) 0.１ｍＬのこの試薬を３ｍＬ蒸留水で希釈した。 この希釈液0.２ｍＬを５番目のキュベット内にピペッティングした。 反応は0.２ｍＬ血漿で開始させた。 実施例３の結果を表３に纏めた。 これら結果から、それぞれの方法が十分に匹敵することがわかる。 図５は、これら測定を患者の血漿で同時に行うことができるカードを示している。

【００２９】

【表３】 表 ３ ──────────────────────────────────── 凝固時間（秒） ＰＴ ＡＰＴＴ Ｆｉｂ ＴＴ ＲＴ 旧法／新法 旧法／新法 旧法／新法 旧法／新法 旧法／新法 ──────────────────────────────────── 正常 12.0／11.7 28.3／89.0 11.5／11.5 18.5／19.5 20.8／20.1 血漿１ 異常 18.9／18.4 61.0／148.0 21.2／20.3 15.2／15.5 26.9／27.1 血漿１ 異常 27.5／26.5 97.0／188.0 22.0／20.7 15.9／15.9 33.3／32.7 血漿２ ヘパリン 13.0／13.4 43.0／110.0 13.4／13.1 >250／>250 21.3／20.7 血漿１ ヘパリン 13.9／13.7 82.0／137.0 13.5／12.6 >250／>250 19.8／21.3 血漿２ ───────────────────────────────────

【００３０】 実施例４実施例３の実験を繰り返した。 しかしながら、試薬をポリプロピレン製キュベット内に前もって分配してアルミニウムホイルで密閉した。 その結果を表４に纏めた。 試薬を予め分配して密閉しても結果に変化がないことが明らかになった。

【００３１】

【表４】 表 ４ ──────────────────────────────────── 凝固時間（秒） ＰＴ ＡＰＴＴ Ｆｉｂ ＴＴ ＲＴ 密閉／普通 密閉／普通 密閉／普通 密閉／普通 密閉／普通 ──────────────────────────────────── 正常 11.8／11.8 86.8／88.4 10.8／10.8 21.0／21.0 19.8／19.9 血漿１ 異常 18.5／17.9 145.0／147.0 19.3／19.0 17.3／17.1 26.4／26.3 血漿１ 異常 26.2／26.7 188.0／188.0 17.8／18.1 17.1／17.4 30.6／32.3 血漿２ ヘパリン 13.5／13.1 108.0／109.0 11.4／11.8 >250／>250 19.9／21.1 血漿１ ヘパリン 13.3／13.2 137.0／138.0 12.9／12.2 >250／>250 20.7／20.0 血漿２ ───────────────────────────────────

【図面の簡単な説明】

【図１】ａは、正常血漿を用いる先行技術の測定方法についての凝固の時間的経過を示し、ｂは、本発明による測定方法についての凝固の時間的経過を示す。 縦軸は光学密度を表し横軸は経過時間を表す。

【図２】ａは、第VIII因子欠如血漿を用いる先行技術の測定方法についての凝固の時間的経過を示し、ｂは、本発明による測定方法についての凝固の時間的経過を示す。 縦軸は光学密度を表し横軸は経過時間を表す。

【図３】異なる血漿サンプルでの両方法の相関関係を示す。 縦軸は旧法の凝固時間を表し横軸は新法の凝固時間を表す。

【図４】５つの測定キュベットが統合された同時測定用カードの前面及び背面を示す。

【図５】５つの測定キュベットが統合された患者プロフィール用のカードの前面及び背面を示す。