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淀粉芽孢杆菌RTI472组合物和用于利于植物生长和治疗植物疾病的方法

阅读:508发布:2024-01-11

专利汇可以提供淀粉芽孢杆菌RTI472组合物和用于利于植物生长和治疗植物疾病的方法专利检索,专利查询,专利分析的服务。并且本 发明 涉及包括具有抗 植物 病原体 活性的解 淀粉 芽孢杆菌的新菌株的组合物和方法。当该组合物施用于植物叶子、花、果实、皮、根、 种子 、愈伤组织、嫁接苗、插条、 土壤 或生长培养基周围、和伴随着 播种 和种植愈伤组织、嫁接苗、插条的土壤或生长培养基时,对利于植物生长和/或赋予对抗病原体感染的保护有用。含有解淀粉芽孢杆菌RTI472菌株的组合物可单独施用或与以下成分组合施用:其他 微 生物 、生物或化学杀昆虫剂、杀 真菌 剂、 杀 线虫 剂 、杀细菌剂、 除草剂 、 植物提取 物、 植物生长调节剂 或 肥料 。在一个实例中,解淀粉芽孢杆菌RTI472菌株可与其他微生物或化学杀昆虫剂、杀真菌剂、 杀线虫剂 、杀细菌剂、除草剂、 植物提取物 、和植物生长调节剂一起作为病虫害综合治理方案的一部分被递送至植物。,下面是淀粉芽孢杆菌RTI472组合物和用于利于植物生长和治疗植物疾病的方法专利的具体信息内容。

1.一种组合物,其包括以ATCC第PTA-121166号保藏的解淀粉芽孢杆菌RTI472、或具有所有其识别特征的突变体的生物纯培养物,用于施用于植物以利于植物生长和/或保护易受影响的植物不受病原性感染。
2.如权利要求1所述的组合物,其中,所述利于植物生长和/或保护呈现为改善的幼苗、改善的根发育、改善的植物生长、改善的植物健康、提高的产率、改善的外观、改善的植物病原体抗性、或降低的病原体感染、或它们的组合。
3.如权利要求1所述的组合物,其中,所述组合物的形式为液体、粉尘、干燥的可润湿粉末、可传播颗粒、或干燥的可润湿颗粒。
4.如权利要求1所述的组合物,其中,所述组合物的形式为液体,并且解淀粉芽孢杆菌RTI472的浓度为约1.0×108CFU/ml~约1.0×1012CFU/ml。
5.如权利要求1所述的组合物,其中所述组合物可以是粉尘、干燥的可润湿粉末、可传播颗粒、或干燥的可润湿颗粒的形式,并且解淀粉芽孢杆菌RTI472的浓度为约1.0×
108CFU/g~约1.0×1012CFU/g。
6.如权利要求1所述的组合物,其中所述组合物的形式为油分散体,并且解淀粉芽孢杆菌RTI472的浓度为约1.0×108CFU/ml~约1.0×1012CFU/ml。
7.如权利要求1所述的组合物,其中,所述解淀粉芽孢杆菌RTI472是孢子或营养细胞的形式。
8.如权利要求1所述的组合物,所述组合物还包含微生物、生物或化学杀昆虫剂、杀真菌剂、线虫剂、杀细菌剂、除草剂植物提取物、植物生长调节剂肥料中的一种或它们的组合,这些成分以适于促进植物生长和/或保护易受影响的植物不受病原性感染的量存在。
9.如权利要求1所述的组合物,所述组合物还包含载体、表面活性剂、分散剂或酵母提取物中的一种或它们的组合。
10.如权利要求1所述的组合物,其中,所述组合物的形式为种植基质。
11.如权利要求10所述的组合物,其中,所述种植基质的形式为盆栽土。
12.一种用组合物包覆的植物种子,其中,所述组合物包括:
以适合利于植物生长和/或保护易受影响的植物不受病原性感染的量存在的以ATCC第PTA-121166号保藏的解淀粉芽孢杆菌RTI472、或具有所有其识别特征的突变体的生物纯培养物的孢子。
13.如权利要求12所述的植物种子,其中,所述利于植物生长和/或保护呈现为改善的幼苗活力、改善的根发育、改善的植物生长、改善的植物健康、提高的产率、改善的外观、改善的植物病原体抗性、或降低的病原体感染、或它们的组合。
14.如权利要求12所述的植物种子,其中所述组合物包含约1.0×102CFU/种子~约1.0
9
×10CFU/种子的量的解淀粉芽孢杆菌孢子。
15.如权利要求12所述的植物种子,其中,所述种子包括单子叶植物、双子叶植物、谷类、玉米、甜玉米、爆米花玉米、种子玉米、青贮玉米、田地玉米、稻、小麦、大麦高粱、芸苔属蔬菜、花椰菜、卷心菜、菜花、球芽甘蓝、羽衣甘蓝、无头甘蓝、芥菜、球茎甘蓝、鳞茎类蔬菜、洋葱、大蒜、葱、果蔬、胡椒、番茄、茄子、草原樱桃、树番茄、秋葵、葡萄、草药/香料、葫芦科蔬菜、黄瓜、哈密瓜、甜瓜、香瓜、西葫芦、西瓜、南瓜、茄子、叶用蔬菜、莴苣、芹菜、菠菜、欧芹、菊苣、豆类/蔬菜(多汁的和干燥的豆和豌豆)、豆、青豆、豆荚、荚豆、大豆、干豆、鹰嘴豆、利豆、豌豆、三豆、裂荚豌豆、扁豆、油籽作物、坎诺拉油菜、蓖麻、花、亚麻、花生、油菜籽、红花、芝麻、向日葵、大豆、根/茎和球茎蔬菜、胡萝卜、马铃薯、甜马铃薯、甜菜、姜、辣根、萝卜、人参、芜箐、甘蔗、甜菜、草、或草皮草的种子。
16.如权利要求14所述的植物种子,所述植物还包括干豆、玉米、小麦、大豆、油菜、水稻、黄瓜、胡椒、番茄、西葫芦、棉花、草和草皮草的种子。
17.如权利要求12所述的植物种子,其中,所述组合物还包含微生物、生物或化学杀昆虫剂、杀真菌剂、杀线虫剂、杀细菌剂、或植物生长调节剂或肥料中的一种或它们的组合,这些成分以适于促进植物生长和/或保护易受影响的植物不受病原性感染的量存在。
18.一种用于利于植物生长和/或保护易受影响的植物不受病原性感染的组合物,所述组合物包括:
适合利于植物生长和/或保护易受影响的植物不受病原性感染的量的以ATCC第PTA-
121166号保藏的解淀粉芽孢杆菌RTI472、或具有所有其识别特征的突变体的生物纯培养物;和
适于促进植物生长和/或保护易受影响的植物不受病原性感染的量的微生物、生物或化学杀昆虫剂、杀真菌剂、杀线虫剂、杀细菌剂、除草剂、植物提取物、植物生长调节剂或肥料中的一种或它们的组合。
19.如权利要求18所述的组合物,其中,所述利于植物生长和/或保护呈现为改善的幼苗活力、改善的根发育、改善的植物生长、改善的植物健康、提高的产率、改善的外观、改善的植物病原体抗性、或降低的病原体感染、或它们的组合。
20.如权利要求18所述的组合物,其中,所述组合物的形式为液体,并且解淀粉芽孢杆菌RTI472的浓度为约1.0×108CFU/ml~约1.0×1012CFU/ml。
21.如权利要求18所述的组合物,其中所述组合物可以是粉尘、干燥的可润湿粉末、可传播颗粒、或干燥的可润湿颗粒的形式,并且解淀粉芽孢杆菌RTI472的浓度为约1.0×
108CFU/g~约1.0×1012CFU/g。
22.如权利要求18所述的组合物,其中所述组合物的形式为油分散体,并且解淀粉芽孢杆菌RTI472的浓度为约1.0×108CFU/ml~约1.0×1012CFU/ml。
23.如权利要求18所述的组合物,其中,所述解淀粉芽孢杆菌RTI472是孢子或营养细胞的形式。
24.如权利要求18所述的组合物,其中,所述植物包括:单子叶植物、双子叶植物、谷类、玉米、甜玉米、爆米花玉米、种子玉米、青贮玉米、田地玉米、水稻、小麦、大麦、高粱、芦笋、浆果、蓝莓、黑莓、树莓、罗甘莓、黑果木、蔓越莓、醋栗、接骨木、红醋栗、蔓越橘、灌木浆果、芸苔属蔬菜、花椰菜、卷心菜、菜花、球芽甘蓝、羽衣甘蓝、无头甘蓝、芥菜、球茎甘蓝、葫芦科蔬菜、黄瓜、哈密瓜、甜瓜、香瓜、西葫芦(Squash)、西瓜、南瓜、茄子、鳞茎类蔬菜、洋葱、大蒜、葱、柑橘、橙、葡萄柚、柠檬、桔子、橘柚、柚子、果蔬、胡椒、番茄、草原樱桃、树番茄、秋葵、葡萄、草药/香料、叶用蔬菜、莴苣、芹菜、菠菜、欧芹、菊苣、豆类/蔬菜(多汁的和干燥的豆和豌豆)、豆、青豆、豆荚、荚豆、大豆、干豆、鹰嘴豆、利马豆、豌豆、三角豆、裂荚豌豆、扁豆、油籽作物、坎诺拉油菜、蓖麻、椰子、棉花、亚麻、油棕、橄榄、花生、油菜籽、红花、芝麻、向日葵、大豆、仁果类水果、苹果、山楂、梨、榅桲、夏花山楂、根/块茎和球茎蔬菜、胡萝卜、马铃薯、甜马铃薯、木薯、甜菜、姜、辣根、萝卜、人参、芜箐、核果类水果、杏、樱桃、油桃、桃、李子、梅子、草莓、木本坚果、杏仁、开心果、山核桃、胡桃、榛子、栗子、腰果、山毛榉坚果、灰胡桃、夏威夷果、奇异果、香蕉、(蓝色)龙舌兰、草、草皮草、观赏植物、一品红、硬插枝、栗子、橡树、枫树、甘蔗、或甜菜。
25.一种利于植物生长和/或保护易受影响的植物不受病原性感染的方法,所述方法包括将包括以ATCC第PTA-121166号保藏的解淀粉芽孢杆菌RTI472、或具有所有其识别特征的突变体的生物纯培养物的组合物以适于利于植物生长和/或保护易受影响的植物不受病原性感染的量递送至:植物的叶子、植物的皮、植物的果实、植物的花、植物的种子、植物的根、植物的插条、植物的嫁接苗、植物的愈伤组织;植物周围的土壤或生长培养基;在将植物种子播种在土壤或生长培养基中之前的土壤或生长培养基;或在将植物、植物的插枝、植物嫁接苗、或植物愈伤组织种植在土壤或生长培养基中之前的土壤或生长培养基。
26.如权利要求25所述的方法,其中,所述组合物被递送到植物的叶子。
27.如权利要求25所述的方法,其中,所述利于植物生长和/或保护呈现为改善的幼苗活力、改善的根发育、改善的植物生长、改善的植物健康、提高的产率、改善的外观、改善的植物病原体抗性、或降低的病原体感染、或它们的组合。
28.如权利要求25所述的方法,其中解淀粉芽孢杆菌RTI472以约1.0×1010CFU/ha~约
14
1.0×10 CFU/ha的比例递送。
29.如权利要求25所述的方法,其中,所述解淀粉芽孢杆菌RTI472是孢子或营养细胞的形式。
30.如权利要求25所述的方法,其中,所述组合物的形式为液体、粉尘、干燥的可润湿粉末、可传播颗粒、干燥的可润湿颗粒或油分散体。
31.如权利要求25所述的方法,其中,所述组合物还包含微生物、生物或化学杀昆虫剂、杀真菌剂、杀线虫剂、杀细菌剂、除草剂、植物提取物、植物生长调节剂或肥料中的一种或它们的组合,这些成分以适于促进植物生长和/或保护易受影响的植物不受病原性感染的量存在。
32.如权利要求25所述的方法,其中,所述组合物还包含载体、表面活性剂、分散剂或酵母提取物中的一种或它们的组合。
33.如权利要求25所述的方法,其中,所述植物包括:单子叶植物、双子叶植物、谷类、玉米、甜玉米、爆米花玉米、种子玉米、青贮玉米、田地玉米、水稻、小麦、大麦、高粱、芦笋、浆果、蓝莓、黑莓、树莓、罗甘莓、黑果木、蔓越莓、醋栗、接骨木、红醋栗、蔓越橘、灌木浆果、芸苔属蔬菜、花椰菜、卷心菜、菜花、球芽甘蓝、羽衣甘蓝、无头甘蓝、芥菜、球茎甘蓝、葫芦科蔬菜、黄瓜、哈密瓜、甜瓜、香瓜、西葫芦、西瓜、南瓜、茄子、鳞茎类蔬菜、洋葱、大蒜、葱、柑橘、橙、葡萄柚、柠檬、桔子、橘柚、柚子、果蔬、胡椒、番茄、草原樱桃、树番茄、秋葵、葡萄、草药/香料、叶用蔬菜、莴苣、芹菜、菠菜、欧芹、菊苣、豆类/蔬菜(多汁的和干燥的豆和豌豆)、豆、青豆、豆荚、荚豆、大豆、干豆、鹰嘴豆、利马豆、豌豆、三角豆、裂荚豌豆、扁豆、油籽作物、坎诺拉油菜、蓖麻、椰子、棉花、亚麻、油棕、橄榄、花生、油菜籽、红花、芝麻、向日葵、大豆、仁果类水果、苹果、山楂、梨、榅桲、夏花山楂、根/块茎和球茎蔬菜、胡萝卜、马铃薯、甜马铃薯、木薯、甜菜、姜、辣根、萝卜、人参、芜箐、核果类水果、杏、樱桃、油桃、桃、李子、梅子、草莓、木本坚果、杏仁、开心果、山核桃、胡桃、榛子、栗子、腰果、山毛榉坚果、灰胡桃、夏威夷果、奇异果、香蕉、(蓝色)龙舌兰、草、草皮草、观赏植物、一品红、绣球花、硬插枝、栗子、橡树、枫树、甘蔗、或甜菜。
34.如权利要求33所述的方法,其中,所述植物包括大豆、豆类、豆荚、小麦、棉花、玉米、胡椒、番茄、马铃薯、木薯、葡萄、草莓、香蕉、花生、西葫芦、南瓜、茄子、或黄瓜。
35.如权利要求25所述的方法,其中,所述病原体感染由以下引起:植物真菌病原体、植物细菌病原体,锈菌、葡萄孢属(Botrytis spp.)、灰葡萄孢(Botrytis cinerea)、葱鳞葡萄孢菌(Botrytis squamosa),欧文氏菌属(Erwinia spp.)、胡萝卜软腐欧文氏菌(Erwinia carotovora)、解淀粉欧文氏菌(Erwinia amylovora),狄克氏菌属(Dickeya spp.),达旦提狄克氏菌(Dickeya dadantii),茄狄克氏菌(Dickeya solani),农杆菌属(Agrobacterium spp.),根癌土壤杆菌(Agrobacterium tumefaciens),黄单胞菌属(Xanthomonas spp.),地毯草黄单胞杆菌(Xanthomonas axonopodis),野油菜黄单胞菌胡萝卜致病变种
(Xanthomonas campestris pv.carotae),桃李黄单胞菌(Xanthomonas pruni),藤黄单胞菌(Xanthomonas arboricola),水稻黄单胞菌水稻致病变种(Xanthomonas oryzae pv.oryzae),木杆菌属(Xylella spp.),苛养木杆菌(Xylella fastidiosa),暂定菌属(Candidatus spp.),韧皮部杆菌(Candidatus liberibacter),镰孢属(Fusarium spp.),禾谷镰孢菌(Fusarium graminearum),尖镰孢(Fusarium oxysporum),尖镰孢古巴专化型(Fusarium oxysporum f.sp.Cubense),尖镰孢番茄专化型(Fusarium oxysporum f.sp.Lycopersici),北美大豆猝死综合症病菌(Fusarium virguliforme),核盘菌属(Sclerotinia spp.),核盘菌(Sclerotinia sclerotiorum),小核盘菌(Sclerotinia minor),斑核盘菌(Sclerotinia homeocarpa),尾孢菌属(Cercospora/Cercosporidium spp.),钩丝壳属(Uncinula spp.),葡萄钓丝壳(Uncinula necator)(白粉菌(Powdery Mildew)),叉丝单囊壳属(Podosphaera spp.)(白粉菌(Powdery Mildew)),白叉丝单囊壳(Podosphaera leucotricha),秘密叉丝单囊壳(Podosphaera clandestine),拟茎点霉属(Phomopsis spp.),霜霉病拟茎点霉菌(Phomopsis viticola),链格孢菌属(Alternaria spp.),极链格孢菌(Alternaria tenuissima),孔洞链隔孢菌(Alternaria porri),链格孢(Alternaria alternate),茄链格孢(Alternaria solani),细极链格孢(Alternaria tenuis),假单胞菌属(Pseudomonas spp.),丁香假单胞菌番茄致病变种(Pseudomonas syringae pv.Tomato),疫霉属(Phytophthora spp.),致病疫霉(Phytophthora 
infestans),寄生疫霉(Phytophthora parasitica),大豆疫霉菌(Phytophthora sojae),辣椒疫霉菌(Phytophthora capsici),肉桂疫霉菌(Phytophthora cinnamon),草莓疫霉菌(Phytophthora fragariae),疫霉属(Phytophthora spp.),栎树疫霉菌(Phytophthora ramorum),棕榈疫霉菌(Phytophthora palmivara),烟草疫霉菌(Phytophthora 
nicotianae),层锈菌属(Phakopsora spp.),豆薯层锈菌(Phakopsora pachyrhizi),山马蝗层锈菌(Phakopsora meibomiae),曲霉(Aspergillus spp.),黄曲霉(Aspergillus flavus),黑曲霉(Aspergillus niger),单孢锈菌属(Uromyces spp.),疣顶单孢锈菌(Uromyces appendiculatus),枝孢属(Cladosporium spp.),多主枝孢(Cladosporium herbarum),根霉属(Rhizopus spp.),隐根根霉(Rhizopus arrhizus),青霉属
(Penicillium spp.),丝核菌属(Rhizoctonia spp.),立枯丝核菌(Rhizoctonia solani),玉蜀黍丝核菌(Rhizoctonia zeae),稻枯斑丝核菌(Rhizoctonia oryzae),博爱丝核菌(Rhizoctonia caritae),小麦纹枯病菌(Rhizoctonia cerealis),番红花枯病菌(Rhizoctoniacrocorum),草莓花枯病菌(Rhizoctonia fragariae),多枝丝核菌
(Rhizoctonia ramicola),灌木枯病菌(Rhizoctonia rubi),豆类丝核菌(Rhizoctonia leguminicola),豆类壳球孢(Macrophomina phaseolina),稻瘟病菌(Magnaorthe oryzae),球腔菌属(Mycosphaerella spp.),灰霉菌(Mycosphaerella graminocola),香蕉黑条叶斑菌(Mycosphaerella fijiensis(黑色叶斑病)),苹果球腔菌(Mycosphaerella pomi),柑橘球腔菌(Mycosphaerella citri),稻瘟菌属(Magnaporthe spp.),稻瘟菌(Magnaporthe grisea),褐腐病菌属(Monilinia spp.),桃褐腐病菌(Monilinia fruticola),Monilinia vacciniicorymbosi,核果链核盘菌(Monilinia laxa),刺盘孢属(Colletotrichum spp.),炭疽病菌(Colletotrichum gloeosporiodes),尖孢炭疽菌(Colletotrichum acutatum),白炭疽病菌(Colletotrichum Candidum),间座壳属(Diaporthe spp.),柑桔间座壳(Diaporthe citri),棒孢菌属(Corynespora spp.),山扁豆生棒孢(Corynespora Cassiicola),胶锈菌属(Gymnosporangium spp.),胶锈菌(Gymnosporangium juniperi-virginianae),点病菌属(Schizothyrium spp.),苹果煤点病菌(Schizothyrium pomi),粘壳孢菌属(Gloeodes spp.),仁果粘壳孢菌(Gloeodes pomigena),葡萄座腔菌属(Botryosphaeria spp.),杨树溃疡病菌(Botryosphaeria dothidea),明孢盘菌属(Neofabraea spp.),穿孔病菌属(Wilsonomyces spp.),穿孔病菌(Wilsonomyces carpophilus),单丝壳属(Sphaerotheca spp.),白斑病菌(Sphaerotheca macularis),蔷薇单丝壳菌(Sphaerotheca pannosa),白粉菌属(Erysiphe spp.),壳多孢属(Stagonospora spp.),颖枯壳多孢(Stagonospora nodorum),腐霉菌(Pythium spp.),终极腐霉(Pythium ultimum),瓜果腐霉(Pythium aphanidermatum),不规则腐霉(Pythium irregularum),胡萝卜腐霉(Pythium ulosum),鲁特里亚腐霉(Pythium lutriarium),猝倒病腐霉(Pythium sylvatium),黑星菌属(Venturia spp),苹果黑星菌(Venturia inaequalis),轮枝孢属(Verticillium spp.),黑粉菌属(Ustilago spp.),裸黑粉菌(Ustilago nuda),玉米黑粉菌(Ustilago maydis),甘蔗黑粉菌(Ustilago scitaminea),麦角菌属(Claviceps spp.),麦角菌(Claviceps puprrea),腥黑粉菌属(Tilletia spp.),小麦腥黑粉菌(Tilletia tritici),亚腥黑粉菌(Tilletia laevis),刚毛腥黑粉菌(Tilletia horrid),小麦矮化腥黑粉菌(Tilletia controversa),茎点霉菌属(Phoma spp.),大豆茎点霉菌(Phoma glycinicola),棉花茎点霉菌(Phoma exigua),芸苔茎点霉菌(Phoma lingam),禾旋孢腔菌(Cocliobolus sativus),燕麦全蚀病菌(Gaeumanomyces gaminis),毛盘孢属(Colleototricum spp.),喙孢属(Rhychosporium spp.),黑麦喙孢(Rhychosporium secalis),蠕孢菌属(Biopolaris spp.),长蠕孢菌属(Helminthosporium spp.),黑麦长蠕孢菌(Helminthosporium secalis),玉米长蠕孢菌(Helminthosporium maydis),马铃薯长蠕孢菌(Helminthosporium solai)或小麦褐斑长蠕孢菌
(Helminthosporium tritici-repentis)或其组合。
36.如权利要求35所述的方法,其中所述病原体感染有以下的一种或组合引起:
大豆豆锈病真菌(豆薯层锈菌、山马蝗层锈菌)和包括大豆的植物;灰葡萄孢(灰葡萄孢病)和包括葡萄的植物;灰葡萄孢(灰葡萄孢病)和包括草莓的植物;曲霉(例如茄链格孢)和包括番茄的植物;曲霉(例如茄链格孢)和包括马铃薯的植物;豆锈病(疣顶单胞锈菌)和包括菜豆的植物;扩散叉丝壳(大豆白粉病)和包括大豆的植物;香蕉黑条叶斑菌(黑色叶斑病)或尖镰孢古巴专化型(巴拿马病)和包括香蕉的植物;黄单胞菌属或水稻黄单胞菌水稻致病变种和包括水稻的植物;地毯草黄单胞杆菌和包括木薯的植物;野油菜黄单胞菌和包括番茄的植物;灰葡萄孢(胡椒灰葡萄孢病)和包括胡椒的植物;白粉病和包括葫芦的植物;
核盘菌(白霉)和包括豆荚的植物;核盘菌(白霉)和包括马铃薯的植物;银斑核盘菌(草皮币斑病)和包括坪草的植物;南方白霉病和包括花生的植物;叶斑枯病(尾孢菌)和包括花生的植物;禾谷镰孢菌(小麦赤霉病)和包括小麦的植物;禾生球腔菌(小麦壳针孢斑)和包括小麦的植物;颖枯壳多孢(颖状斑和壳针孢叶枯病)和包括小麦的植物;解淀粉欧文氏菌和包括苹果、梨和其他梨果的植物;苹果黑星菌和包括苹果、梨和其他梨果的植物;或立枯丝核菌和包括小麦、水稻、坪草、大豆、玉米、豆类和蔬菜作物的植物。
37.一种用于利于植物生长和/或保护易受影响的植物不受病原性感染的方法,所述方法包括:
在合适的生长培养基中种植植物的种子或使植物的营养插条/组织再生,其中用含有以ATCC第PTA-121166号保藏的解淀粉芽孢杆菌RTI472、或具有所有其识别特征的突变体的生物纯培养物的组合物包覆种子或接种营养插条/组织,其中,赋予利于源自种子或营养插条/组织的植物的生长和/或保护易不受病原性感染。
38.如权利要求37所述的方法,其中,所述利于植物生长呈现为改善的幼苗活力、改善的根发育、改善的植物生长、改善的植物健康、提高的产率、改善的外观、改善的植物病原体抗性、或降低的病原体感染、或它们的组合。
39.如权利要求37所述的方法,其中,解淀粉芽孢杆菌RTI472以孢子的形式,以约1.0×
102CFU/种子~约1.0×109CFU/种子的范围的量存在。
40.如权利要求37所述的方法,其中,所述植物包括:单子叶植物、双子叶植物、谷类、玉米、甜玉米、爆米花玉米、种子玉米、青贮玉米、田地玉米、水稻、小麦、大麦、高粱、芦笋、浆果、蓝莓、黑莓、树莓、罗甘莓、黑果木、蔓越莓、醋栗、接骨木、红醋栗、蔓越橘、灌木浆果、芸苔属蔬菜、花椰菜、卷心菜、菜花、球芽甘蓝、羽衣甘蓝、无头甘蓝、芥菜、球茎甘蓝、葫芦科蔬菜、黄瓜、哈密瓜、甜瓜、香瓜、西葫芦、西瓜、南瓜、茄子、鳞茎类蔬菜、洋葱、大蒜、葱、柑橘、橙、葡萄柚、柠檬、桔子、橘柚、柚子、果蔬、胡椒、番茄、草原樱桃、树番茄、秋葵、葡萄、草药/香料、叶用蔬菜、莴苣、芹菜、菠菜、欧芹、菊苣、豆类/蔬菜(多汁的和干燥的豆和豌豆)、豆、青豆、豆荚、荚豆、大豆、干豆、鹰嘴豆、利马豆、豌豆、三角豆、裂荚豌豆、扁豆、油籽作物、坎诺拉油菜、蓖麻、椰子、棉花、亚麻、油棕、橄榄、花生、油菜籽、红花、芝麻、向日葵、大豆、仁果类水果、苹果、山楂、梨、榅桲、夏花山楂、根/块茎和球茎蔬菜、胡萝卜、马铃薯、甜马铃薯、木薯、甜菜、姜、辣根、萝卜、人参、芜箐、核果类水果、杏、樱桃、油桃、桃、李子、梅子、草莓、木本坚果、杏仁、开心果、山核桃、胡桃、榛子、栗子、腰果、山毛榉坚果、灰胡桃、夏威夷果、奇异果、香蕉、(蓝色)龙舌兰、草、草皮草、观赏植物、一品红、绣球花、硬插枝、栗子、橡树、枫树、甘蔗、或甜菜。
41.如权利要求39所述的方法,其中,所述植物包括大豆、豆类、豆荚、小麦、棉花、玉米、胡椒、番茄、马铃薯、木薯、葡萄、草莓、香蕉、花生、西葫芦、南瓜、茄子、或黄瓜。
42.如权利要求37所述的方法,其中,所述病原体感染由以下引起:植物真菌病原体、植物细菌病原体,锈菌、葡萄孢属(Botrytis spp.)、灰葡萄孢(Botrytis cinerea)、葱鳞葡萄孢菌(Botrytis squamosa),欧文氏菌属(Erwinia spp.)、胡萝卜软腐欧文氏菌(Erwinia carotovora)、解淀粉欧文氏菌(Erwinia amylovora),狄克氏菌属(Dickeya spp.),达旦提狄克氏菌(Dickeya dadantii),茄狄克氏菌(Dickeya solani),农杆菌属(Agrobacterium spp.),根癌土壤杆菌(Agrobacterium tumefaciens),黄单胞菌属(Xanthomonas spp.),地毯草黄单胞杆菌(Xanthomonas axonopodis),野油菜黄单胞菌胡萝卜致病变种
(Xanthomonas campestris pv.carotae),桃李黄单胞菌(Xanthomonas pruni),藤黄单胞菌(Xanthomonas arboricola),水稻黄单胞菌水稻致病变种(Xanthomonas oryzae pv.oryzae),木杆菌属(Xylella spp.),苛养木杆菌(Xylella fastidiosa),暂定菌属(Candidatus spp.),韧皮部杆菌(Candidatus liberibacter),镰孢属(Fusarium spp.),禾谷镰孢菌(Fusarium graminearum),尖镰孢(Fusarium oxysporum),尖镰孢古巴专化型(Fusarium oxysporum f.sp.Cubense),尖镰孢番茄专化型(Fusarium oxysporum f.sp.Lycopersici),北美大豆猝死综合症病菌(Fusarium virguliforme),核盘菌属(Sclerotinia spp.),核盘菌(Sclerotinia sclerotiorum),小核盘菌(Sclerotinia minor),银斑核盘菌(Sclerotinia homeocarpa),尾孢菌属(Cercospora/Cercosporidium spp.),钩丝壳属(Uncinula spp.),葡萄钓丝壳(Uncinula necator)(白粉菌(Powdery Mildew)),叉丝单囊壳属(Podosphaera spp.)(白粉菌(Powdery Mildew)),白叉丝单囊壳(Podosphaera leucotricha),秘密叉丝单囊壳(Podosphaera clandestine),拟茎点霉属(Phomopsis spp.),霜霉病拟茎点霉菌(Phomopsis viticola),链格孢菌属(Alternaria spp.),极链格孢菌(Alternaria tenuissima),孔洞链隔孢菌(Alternaria porri),链格孢(Alternaria alternate),茄链格孢(Alternaria solani),细极链格孢(Alternaria tenuis),假单胞菌属(Pseudomonas spp.),丁香假单胞菌番茄致病变种(Pseudomonas syringae pv.Tomato),疫霉属(Phytophthora spp.),致病疫霉(Phytophthora 
infestans),寄生疫霉(Phytophthora parasitica),大豆疫霉菌(Phytophthora sojae),辣椒疫霉菌(Phytophthora capsici),肉桂疫霉菌(Phytophthora cinnamon),草莓疫霉菌(Phytophthora fragariae),疫霉属(Phytophthora spp.),栎树疫霉菌(Phytophthora ramorum),棕榈疫霉菌(Phytophthora palmivara),烟草疫霉菌(Phytophthora 
nicotianae),层锈菌属(Phakopsora spp.),豆薯层锈菌(Phakopsora pachyrhizi),山马蝗层锈菌(Phakopsora meibomiae),曲霉(Aspergillus spp.),黄曲霉(Aspergillus flavus),黑曲霉(Aspergillus niger),单孢锈菌属(Uromyces spp.),疣顶单孢锈菌(Uromyces appendiculatus),枝孢属(Cladosporium spp.),多主枝孢(Cladosporium herbarum),根霉属(Rhizopus spp.),隐根根霉(Rhizopus arrhizus),青霉属
(Penicillium spp.),丝核菌属(Rhizoctonia spp.),立枯丝核菌(Rhizoctonia solani),玉蜀黍丝核菌(Rhizoctonia zeae),稻枯斑丝核菌(Rhizoctonia oryzae),博爱丝核菌(Rhizoctonia caritae),小麦纹枯病菌(Rhizoctonia cerealis),番红花枯病菌(Rhizoctonia crocorum),草莓花枯病菌(Rhizoctonia fragariae),多枝丝核菌(Rhizoctonia ramicola),灌木枯病菌(Rhizoctonia rubi),豆类丝核菌(Rhizoctonia leguminicola),豆类壳球孢(Macrophomina phaseolina),稻瘟病菌(Magnaorthe oryzae),球腔菌属(Mycosphaerella spp.),灰霉菌(Mycosphaerella graminocola),香蕉黑条叶斑菌(Mycosphaerella fijiensis(黑色叶斑病)),苹果球腔菌(Mycosphaerella pomi),柑橘球腔菌(Mycosphaerella citri),稻瘟菌属(Magnaporthe spp.),稻瘟菌(Magnaporthe grisea),褐腐病菌属(Monilinia spp.),桃褐腐病菌(Monilinia fruticola),Monilinia vacciniicorymbosi,核果链核盘菌(Monilinia laxa),刺盘孢属(Colletotrichum spp.),炭疽病菌(Colletotrichum gloeosporiodes),尖孢炭疽菌(Colletotrichum acutatum),白炭疽病菌(Colletotrichum Candidum),间座壳属(Diaporthe spp.),柑桔间座壳(Diaporthe citri),棒孢菌属(Corynespora spp.),山扁豆生棒孢(Corynespora Cassiicola),胶锈菌属(Gymnosporangium spp.),胶锈菌(Gymnosporangium juniperi-virginianae),煤点病菌属(Schizothyrium spp.),苹果煤点病菌(Schizothyrium pomi),粘壳孢菌属(Gloeodes spp.),仁果粘壳孢菌(Gloeodes pomigena),葡萄座腔菌属(Botryosphaeria spp.),杨树溃疡病菌(Botryosphaeria dothidea),明孢盘菌属(Neofabraea spp.),穿孔病菌属(Wilsonomyces spp.),穿孔病菌(Wilsonomyces carpophilus),单丝壳属(Sphaerotheca spp.),白斑病菌(Sphaerotheca macularis),蔷薇单丝壳菌(Sphaerotheca pannosa),白粉菌属(Erysiphe spp.),壳多孢属(Stagonospora spp.),颖枯壳多孢(Stagonospora nodorum),腐霉菌(Pythium spp.),终极腐霉(Pythium ultimum),瓜果腐霉(Pythium aphanidermatum),不规则腐霉(Pythium irregularum),胡萝卜腐霉(Pythium ulosum),鲁特里亚腐霉(Pythium lutriarium),猝倒病腐霉(Pythium sylvatium),黑星菌属(Venturia spp),苹果黑星菌(Venturia inaequalis),轮枝孢属(Verticillium spp.),黑粉菌属(Ustilago spp.),裸黑粉菌(Ustilago nuda),玉米黑粉菌(Ustilago maydis),甘蔗黑粉菌(Ustilago scitaminea),麦角菌属(Claviceps spp.),麦角菌(Claviceps puprrea),腥黑粉菌属(Tilletia spp.),小麦腥黑粉菌(Tilletia tritici),亚腥黑粉菌(Tilletia laevis),刚毛腥黑粉菌(Tilletia horrid),小麦矮化腥黑粉菌(Tilletia controversa),茎点霉菌属(Phoma spp.),大豆茎点霉菌(Phoma glycinicola),棉花茎点霉菌(Phoma exigua),芸苔茎点霉菌(Phoma lingam),禾旋孢腔菌(Cocliobolus sativus),燕麦全蚀病菌(Gaeumanomyces gaminis),毛盘孢属(Colleototricum spp.),喙孢属(Rhychosporium spp.),黑麦喙孢(Rhychosporium secalis),蠕孢菌属(Biopolaris spp.),长蠕孢菌属(Helminthosporium spp.),黑麦长蠕孢菌(Helminthosporium secalis),玉米长蠕孢菌(Helminthosporium maydis),马铃薯长蠕孢菌(Helminthosporium solai)或小麦褐斑长蠕孢菌
(Helminthosporium tritici-repentis)或其组合。
43.如权利要求37所述的方法,其中,所述组合物还包含微生物、生物或化学杀昆虫剂、杀真菌剂、杀线虫剂、杀细菌剂、或植物生长调节剂或肥料中的一种或它们的组合,这些成分以适于促进植物生长和/或保护易受影响的植物不受病原性感染的量存在。
44.一种用于利于植物生长和/或保护易受影响的植物不受病原性感染的方法,所述方法包括:
递送以下的组合:
包括适于利于植物生长和/或保护易受影响的植物不受病原性感染的量的以ATCC第PTA-121166号保藏的解淀粉芽孢杆菌RTI472、或具有所有其识别特征的突变体的生物纯培养物的第一组合物;和
包含适于有利植物生长和/或保护易受影响的植物不受病原性感染的量的微生物、生物或化学杀昆虫剂、杀真菌剂、杀线虫剂、杀细菌剂、除草剂、植物提取物、植物生长调节剂或肥料中的一种或它们的组合的第二组合物,
至:植物的叶、植物的皮、植物的果实、植物的花、植物的种子、植物的根、植物的插条、植物的嫁接苗、植物的愈伤组织;植物周围的土壤或生长培养基;在将植物种子播种在土壤或生长培养基中之前的土壤或生长培养基;或在将植物、植物的插枝、植物嫁接苗、或植物愈伤组织种植在土壤或生长培养基中之前的土壤或生长培养基。
45.如权利要求44所述的方法,其中,所述组合被递送到植物的叶子。
46.如权利要求44所述的方法,其中,所述第一组合物包含载体、表面活性剂、分散剂或酵母提取物中的一种或它们的组合。
47.如权利要求44所述的方法,其中,所述利于植物生长和/或保护呈现为改善的幼苗活力、改善的根发育、改善的植物生长、改善的植物健康、提高的植物重量、提高的产率、改善的外观、改善的植物病原体抗性、或降低的病原体感染、或它们的组合。
48.如权利要求44所述的方法,其中所述利于植物生长和/或保护的合适的量是约1.0×1010CFU/ha~约1.0×1014CFU/ha的解淀粉芽孢杆菌RTI472。
49.如权利要求44所述的方法,其中,所述解淀粉芽孢杆菌RTI472是孢子或营养细胞的形式。
50.如权利要求44所述的方法,其中,所述植物包括:单子叶植物、双子叶植物、谷类、玉米、甜玉米、爆米花玉米、种子玉米、青贮玉米、田地玉米、水稻、小麦、大麦、高粱、芦笋、浆果、蓝莓、黑莓、树莓、罗甘莓、黑果木、蔓越莓、醋栗、接骨木、红醋栗、蔓越橘、灌木浆果、芸苔属蔬菜、花椰菜、卷心菜、菜花、球芽甘蓝、羽衣甘蓝、无头甘蓝、芥菜、球茎甘蓝、葫芦科蔬菜、黄瓜、哈密瓜、甜瓜、香瓜、西葫芦、西瓜、南瓜、茄子、鳞茎类蔬菜、洋葱、大蒜、葱、柑橘、橙、葡萄柚、柠檬、桔子、橘柚、柚子、果蔬、胡椒、番茄、草原樱桃、树番茄、秋葵、葡萄、草药/香料、叶用蔬菜、莴苣、芹菜、菠菜、欧芹、菊苣、豆类/蔬菜(多汁的和干燥的豆和豌豆)、豆、青豆、豆荚、荚豆、大豆、干豆、鹰嘴豆、利马豆、豌豆、三角豆、裂荚豌豆、扁豆、油籽作物、坎诺拉油菜、蓖麻、椰子、棉花、亚麻、油棕、橄榄、花生、油菜籽、红花、芝麻、向日葵、大豆、仁果类水果、苹果、山楂、梨、榅桲、夏花山楂、根/块茎和球茎蔬菜、胡萝卜、马铃薯、甜马铃薯、木薯、甜菜、姜、辣根、萝卜、人参、芜箐、核果类水果、杏、樱桃、油桃、桃、李子、梅子、草莓、木本坚果、杏仁、开心果、山核桃、胡桃、榛子、栗子、腰果、山毛榉坚果、灰胡桃、夏威夷果、奇异果、香蕉、(蓝色)龙舌兰、草、草皮草、观赏植物、一品红、绣球花、硬插枝、栗子、橡树、枫树、甘蔗、或甜菜。
51.如权利要求50所述的方法,其中,所述植物包括大豆、豆类、豆荚、小麦、棉花、玉米、胡椒、番茄、马铃薯、木薯、葡萄、草莓、香蕉、花生、西葫芦、南瓜、茄子、或黄瓜。
52.如权利要求50所述的方法,其中,所述病原体感染由以下引起:植物真菌病原体、植物细菌病原体,锈菌、葡萄孢属(Botrytis spp.)、灰葡萄孢(Botrytis cinerea)、葱鳞葡萄孢菌(Botrytis squamosa),欧文氏菌属(Erwinia spp.)、胡萝卜软腐欧文氏菌(Erwinia carotovora)、解淀粉欧文氏菌(Erwinia amylovora),狄克氏菌属(Dickeya spp.),达旦提狄克氏菌(Dickeya dadantii),茄狄克氏菌(Dickeya solani),农杆菌属(Agrobacterium spp.),根癌土壤杆菌(Agrobacterium tumefaciens),黄单胞菌属(Xanthomonas spp.),地毯草黄单胞杆菌(Xanthomonas axonopodis),野油菜黄单胞菌胡萝卜致病变种
(Xanthomonas campestris pv.carotae),桃李黄单胞菌(Xanthomonas pruni),藤黄单胞菌(Xanthomonas arboricola),水稻黄单胞菌水稻致病变种(Xanthomonas oryzae pv.oryzae),木杆菌属(Xylella spp.),苛养木杆菌(Xylella fastidiosa),暂定菌属(Candidatus spp.),韧皮部杆菌(Candidatus liberibacter),镰孢属(Fusarium spp.),禾谷镰孢菌(Fusarium graminearum),尖镰孢(Fusarium oxysporum),尖镰孢古巴专化型(Fusarium oxysporum f.sp.Cubense),尖镰孢番茄专化型(Fusarium oxysporum f.sp.Lycopersici),北美大豆猝死综合症病菌(Fusarium virguliforme)、核盘菌属(Sclerotinia spp.),核盘菌(Sclerotinia sclerotiorum),小核盘菌(Sclerotinia minor),银斑核盘菌(Sclerotinia homeocarpa),尾孢菌属(Cercospora/Cercosporidium spp.),钩丝壳属(Uncinula spp.),葡萄钓丝壳(Uncinula necator)(白粉菌(Powdery Mildew)),叉丝单囊壳属(Podosphaera spp.)(白粉菌(Powdery Mildew)),白叉丝单囊壳(Podosphaera leucotricha),秘密叉丝单囊壳(Podosphaera clandestine),拟茎点霉属(Phomopsis spp.),霜霉病拟茎点霉菌(Phomopsis viticola),链格孢菌属(Alternaria spp.),极链格孢菌(Alternaria tenuissima),孔洞链隔孢菌(Alternaria porri),链格孢(Alternaria alternate),茄链格孢(Alternaria solani),细极链格孢(Alternaria tenuis),假单胞菌属(Pseudomonas spp.),丁香假单胞菌番茄致病变种(Pseudomonas syringae pv.Tomato),疫霉属(Phytophthora spp.),致病疫霉(Phytophthora 
infestans),寄生疫霉(Phytophthora parasitica),大豆疫霉菌(Phytophthora sojae),辣椒疫霉菌(Phytophthora capsici),肉桂疫霉菌(Phytophthora cinnamon),草莓疫霉菌(Phytophthora fragariae),疫霉属(Phytophthora spp.),栎树疫霉菌(Phytophthora ramorum),棕榈疫霉菌(Phytophthora palmivara),烟草疫霉菌(Phytophthora 
nicotianae),层锈菌属(Phakopsora spp.),豆薯层锈菌(Phakopsora pachyrhizi),山马蝗层锈菌(Phakopsora meibomiae),曲霉(Aspergillus spp.),黄曲霉(Aspergillus flavus),黑曲霉(Aspergillus niger),单孢锈菌属(Uromyces spp.),疣顶单孢锈菌(Uromyces appendiculatus),枝孢属(Cladosporium spp.),多主枝孢(Cladosporium herbarum),根霉属(Rhizopus spp.),隐根根霉(Rhizopus arrhizus),青霉属
(Penicillium spp.),丝核菌属(Rhizoctonia spp.),立枯丝核菌(Rhizoctonia solani),玉蜀黍丝核菌(Rhizoctonia zeae),稻枯斑丝核菌(Rhizoctonia oryzae),博爱丝核菌(Rhizoctonia caritae),小麦纹枯病菌(Rhizoctonia cerealis),番红花枯病菌(Rhizoctonia crocorum),草莓花枯病菌(Rhizoctonia fragariae),多枝丝核菌(Rhizoctonia ramicola),灌木枯病菌(Rhizoctonia rubi),豆类丝核菌(Rhizoctonia leguminicola),豆类壳球孢(Macrophomina phaseolina),稻瘟病菌(Magnaorthe oryzae),球腔菌属(Mycosphaerella spp.),灰霉菌(Mycosphaerella graminocola),香蕉黑条叶斑菌(Mycosphaerella fijiensis(黑色叶斑病)),苹果球腔菌(Mycosphaerella pomi),柑橘球腔菌(Mycosphaerella citri),稻瘟菌属(Magnaporthe spp.),稻瘟菌(Magnaporthe grisea),褐腐病菌属(Monilinia spp.),桃褐腐病菌(Monilinia fruticola),Monilinia vacciniicorymbosi,核果链核盘菌(Monilinia laxa),刺盘孢属(Colletotrichum spp.),炭疽病菌(Colletotrichum gloeosporiodes),尖孢炭疽菌(Colletotrichum acutatum),白炭疽病菌(Colletotrichum Candidum),间座壳属(Diaporthe spp.),柑桔间座壳(Diaporthe citri),棒孢菌属(Corynespora spp.),山扁豆生棒孢(Corynespora Cassiicola),胶锈菌属(Gymnosporangium spp.),胶锈菌(Gymnosporangium juniperi-virginianae),煤点病菌属(Schizothyrium spp.),苹果煤点病菌(Schizothyrium pomi),粘壳孢菌属(Gloeodes spp.),仁果粘壳孢菌(Gloeodes pomigena),葡萄座腔菌属(Botryosphaeria spp.),杨树溃疡病菌(Botryosphaeria dothidea),明孢盘菌属(Neofabraea spp.),穿孔病菌属(Wilsonomyces spp.),穿孔病菌(Wilsonomyces carpophilus),单丝壳属(Sphaerotheca spp.),白斑病菌(Sphaerotheca macularis),蔷薇单丝壳菌(Sphaerotheca pannosa),白粉菌属(Erysiphe spp.),壳多孢属(Stagonospora spp.),颖枯壳多孢(Stagonospora nodorum),腐霉菌(Pythium spp.),终极腐霉(Pythium ultimum),瓜果腐霉(Pythium aphanidermatum),不规则腐霉(Pythium irregularum),胡萝卜腐霉(Pythium ulosum),鲁特里亚腐霉(Pythium lutriarium),猝倒病腐霉(Pythium sylvatium),黑星菌属(Venturia spp),苹果黑星菌(Venturia inaequalis),轮枝孢属(Verticillium spp.),黑粉菌属(Ustilago spp.),裸黑粉菌(Ustilago nuda),玉米黑粉菌(Ustilago maydis),甘蔗黑粉菌(Ustilago scitaminea),麦角菌属(Claviceps spp.),麦角菌(Claviceps puprrea),腥黑粉菌属(Tilletia spp.),小麦腥黑粉菌(Tilletia tritici),亚腥黑粉菌(Tilletia laevis),刚毛腥黑粉菌(Tilletia horrid),小麦矮化腥黑粉菌(Tilletia controversa),茎点霉菌属(Phoma spp.),大豆茎点霉菌(Phoma glycinicola),棉花茎点霉菌(Phoma exigua),芸苔茎点霉菌(Phoma lingam),禾旋孢腔菌(Cocliobolus sativus),燕麦全蚀病菌(Gaeumanomyces gaminis),毛盘孢属(Colleototricum spp.),喙孢属(Rhychosporium spp.),黑麦喙孢(Rhychosporium secalis),蠕孢菌属(Biopolaris spp.),长蠕孢菌属(Helminthosporium spp.),黑麦长蠕孢菌(Helminthosporium secalis),玉米长蠕孢菌(Helminthosporium maydis),马铃薯长蠕孢菌(Helminthosporium solai)或小麦褐斑长蠕孢菌
(Helminthosporium tritici-repentis)或其组合。
53.如权利要求52所述的方法,其中所述病原体感染有以下的一种或组合引起:
大豆豆锈病真菌(豆薯层锈菌山马蝗层锈菌)和包括大豆的植物;灰葡萄孢(灰葡萄孢病)和包括葡萄的植物;灰葡萄孢(灰葡萄孢病)和包括草莓的植物;曲霉(例如茄链格孢)和包括番茄的植物;曲霉(例如茄链格孢)和包括马铃薯的植物;豆锈病(疣顶单胞锈菌)和包括菜豆的植物;扩散叉丝壳(大豆白粉病)和包括大豆的植物;香蕉黑条叶斑菌(黑色叶斑病)或尖镰孢古巴专化型(巴拿马病)和包括香蕉的植物;黄单胞菌属或水稻黄单胞菌水稻致病变种和包括水稻的植物;地毯草黄单胞杆菌和包括木薯的植物;野油菜黄单胞菌和包括番茄的植物;灰葡萄孢(胡椒灰葡萄孢病)和包括胡椒的植物;白粉病和包括葫芦的植物;
核盘菌(白霉)和包括豆荚的植物;核盘菌(白霉)和包括马铃薯的植物;银斑核盘菌(草皮币斑病)和包括坪草的植物;南方白霉病和包括花生的植物;叶斑枯病(尾孢菌)和包括花生的植物;禾谷镰孢菌(小麦赤霉病)和包括小麦的植物;禾生球腔菌(小麦壳针孢斑)和包括小麦的植物;颖枯壳多孢(颖状斑和壳针孢叶枯病)和包括小麦的植物;解淀粉欧文氏菌和包括苹果、梨和其他梨果的植物;苹果黑星菌和包括苹果、梨和其他梨果的植物;或立枯丝核菌和包括小麦、水稻、坪草、大豆、玉米、豆类和蔬菜作物的植物。
54.一种用于利于植物生长和/或保护易受影响的植物不受病原性感染的方法,所述方法包括:
递送一种组合物,其包含:
适合利于植物生长和/或保护不受病原性感染的量的以ATCC第PTA-121166号保藏的解淀粉芽孢杆菌RTI472、或具有所有其识别特征的突变体的生物纯培养物;和
适于促进植物生长和/或保护植物不受病原性感染的量的微生物、生物或化学杀昆虫剂、杀真菌剂、杀线虫剂、杀细菌剂、除草剂、植物提取物、植物生长调节剂或肥料中的一种或它们的组合,
至:植物的叶、植物的皮、植物的果实、植物的花、植物的种子、植物的根、植物的插条、植物的嫁接苗、植物的愈伤组织;植物周围的土壤或生长培养基;在将植物种子播种在土壤或生长培养基中之前的土壤或生长培养基;或在将植物、植物的插枝、植物嫁接苗、或植物愈伤组织种植在土壤或生长培养基中之前的土壤或生长培养基。
55.如权利要求54所述的方法,其中,所述组合物被递送到植物的叶子。
56.如权利要求54所述的方法,其中,所述利于植物生长和/或护易不受病原性感染呈现为改善的幼苗活力、改善的根发育、改善的植物生长、改善的植物健康、提高的植物重量、提高的产率、改善的外观、改善的植物病原体抗性、或降低的病原体感染、或它们的组合。
57.如权利要求54所述的方法,其中,所述解淀粉芽孢杆菌RTI472是孢子或营养细胞的形式。
58.如权利要求54所述的方法,其中,所述植物包括:单子叶植物、双子叶植物、谷类、玉米、甜玉米、爆米花玉米、种子玉米、青贮玉米、田地玉米、水稻、小麦、大麦、高粱、芦笋、浆果、蓝莓、黑莓、树莓、罗甘莓、黑果木、蔓越莓、醋栗、接骨木、红醋栗、蔓越橘、灌木浆果、芸苔属蔬菜、花椰菜、卷心菜、菜花、球芽甘蓝、羽衣甘蓝、无头甘蓝、芥菜、球茎甘蓝、葫芦科蔬菜、黄瓜、哈密瓜、甜瓜、香瓜、西葫芦、西瓜、南瓜、茄子、鳞茎类蔬菜、洋葱、大蒜、葱、柑橘、橙、葡萄柚、柠檬、桔子、橘柚、柚子、果蔬、胡椒、番茄、草原樱桃、树番茄、秋葵、葡萄、草药/香料、叶用蔬菜、莴苣、芹菜、菠菜、欧芹、菊苣、豆类/蔬菜(多汁的和干燥的豆和豌豆)、豆、青豆、豆荚、荚豆、大豆、干豆、鹰嘴豆、利马豆、豌豆、三角豆、裂荚豌豆、扁豆、油籽作物、坎诺拉油菜、蓖麻、椰子、棉花、亚麻、油棕、橄榄、花生、油菜籽、红花、芝麻、向日葵、大豆、仁果类水果、苹果、山楂、梨、榅桲、夏花山楂、根/块茎和球茎蔬菜、胡萝卜、马铃薯、甜马铃薯、木薯、甜菜、姜、辣根、萝卜、人参、芜箐、核果类水果、杏、樱桃、油桃、桃、李子、梅子、草莓、木本坚果、杏仁、开心果、山核桃、胡桃、榛子、栗子、腰果、山毛榉坚果、灰胡桃、夏威夷果、奇异果、香蕉、(蓝色)龙舌兰、草、草皮草、观赏植物、一品红、绣球花、硬插枝、栗子、橡树、枫树、甘蔗、或甜菜。
59.如权利要求54所述的方法,其中,所述植物包括大豆、豆类、豆荚、小麦、棉花、玉米、胡椒、番茄、马铃薯、木薯、葡萄、草莓、香蕉、花生、西葫芦、南瓜、茄子、或黄瓜。
60.如权利要求54所述的方法,其中,所述病原体感染由以下引起:植物真菌病原体、植物细菌病原体,锈菌、葡萄孢属(Botrytis spp.)、灰葡萄孢(Botrytis cinerea)、葱鳞葡萄孢菌(Botrytis squamosa),欧文氏菌属(Erwinia spp.)、胡萝卜软腐欧文氏菌(Erwinia carotovora)、解淀粉欧文氏菌(Erwinia amylovora),狄克氏菌属(Dickeya spp.),达旦提狄克氏菌(Dickeya dadantii),茄狄克氏菌(Dickeya solani),农杆菌属(Agrobacterium spp.),根癌土壤杆菌(Agrobacterium tumefaciens),黄单胞菌属(Xanthomonas spp.),地毯草黄单胞杆菌(Xanthomonas axonopodis),野油菜黄单胞菌胡萝卜致病变种
(Xanthomonas campestris pv.carotae),桃李黄单胞菌(Xanthomonas pruni),藤黄单胞菌(Xanthomonas arboricola),水稻黄单胞菌水稻致病变种(Xanthomonas oryzae pv.oryzae),木杆菌属(Xylella spp.),苛养木杆菌(Xylella fastidiosa),暂定菌属(Candidatus spp.),韧皮部杆菌(Candidatus liberibacter),镰孢属(Fusarium spp.),禾谷镰孢菌(Fusarium graminearum),尖镰孢(Fusarium oxysporum),尖镰孢古巴专化型(Fusarium oxysporum f.sp.Cubense),尖镰孢番茄专化型(Fusarium oxysporum f.sp.Lycopersici),北美大豆猝死综合症病菌(Fusarium virguliforme)、核盘菌属(Sclerotinia spp.),核盘菌(Sclerotinia sclerotiorum),小核盘菌(Sclerotinia minor),银斑核盘菌(Sclerotinia homeocarpa),尾孢菌属(Cercospora/Cercosporidium spp.),钩丝壳属(Uncinula spp.),葡萄钓丝壳(Uncinula necator)(白粉菌(Powdery Mildew)),叉丝单囊壳属(Podosphaera spp.)(白粉菌(Powdery Mildew)),白叉丝单囊壳(Podosphaera leucotricha),秘密叉丝单囊壳(Podosphaera clandestine),拟茎点霉属(Phomopsis spp.),霜霉病拟茎点霉菌(Phomopsis viticola),链格孢菌属(Alternaria spp.),极链格孢菌(Alternaria tenuissima),孔洞链隔孢菌(Alternaria porri),链格孢(Alternaria alternate),茄链格孢(Alternaria solani),细极链格孢(Alternaria tenuis),假单胞菌属(Pseudomonas spp.),丁香假单胞菌番茄致病变种(Pseudomonas syringae pv.Tomato),疫霉属(Phytophthora spp.),致病疫霉(Phytophthora 
infestans),寄生疫霉(Phytophthora parasitica),大豆疫霉菌(Phytophthora sojae),辣椒疫霉菌(Phytophthora capsici),肉桂疫霉菌(Phytophthora cinnamon),草莓疫霉菌(Phytophthora fragariae),疫霉属(Phytophthora spp.),栎树疫霉菌(Phytophthora ramorum),棕榈疫霉菌(Phytophthora palmivara),烟草疫霉菌(Phytophthora 
nicotianae),层锈菌属(Phakopsora spp.),豆薯层锈菌(Phakopsora pachyrhizi),山马蝗层锈菌(Phakopsora meibomiae),曲霉(Aspergillus spp.),黄曲霉(Aspergillus flavus),黑曲霉(Aspergillus niger),单孢锈菌属(Uromyces spp.),疣顶单孢锈菌(Uromyces appendiculatus),枝孢属(Cladosporium spp.),多主枝孢(Cladosporium herbarum),根霉属(Rhizopus spp.),隐根根霉(Rhizopus arrhizus),青霉属
(Penicillium spp.),丝核菌属(Rhizoctonia spp.),立枯丝核菌(Rhizoctonia solani),玉蜀黍丝核菌(Rhizoctonia zeae),稻枯斑丝核菌(Rhizoctonia oryzae),博爱丝核菌(Rhizoctonia caritae),小麦纹枯病菌(Rhizoctonia cerealis),番红花枯病菌(Rhizoctonia crocorum),草莓花枯病菌(Rhizoctonia fragariae),多枝丝核菌(Rhizoctonia ramicola),灌木枯病菌(Rhizoctonia rubi),豆类丝核菌(Rhizoctonia leguminicola),豆类壳球孢(Macrophomina phaseolina),稻瘟病菌(Magnaorthe oryzae),球腔菌属(Mycosphaerella spp.),灰霉菌(Mycosphaerella graminocola),香蕉黑条叶斑菌(Mycosphaerella fijiensis(黑色叶斑病)),苹果球腔菌(Mycosphaerella pomi),柑橘球腔菌(Mycosphaerella citri),稻瘟菌属(Magnaporthe spp.),稻瘟菌(Magnaporthe grisea),褐腐病菌属(Monilinia spp.),桃褐腐病菌(Monilinia fruticola),Monilinia vacciniicorymbosi,核果链核盘菌(Monilinia laxa),刺盘孢属(Colletotrichum spp.),炭疽病菌(Colletotrichum gloeosporiodes),尖孢炭疽菌(Colletotrichum acutatum),白炭疽病菌(Colletotrichum Candidum),间座壳属(Diaporthe spp.),柑桔间座壳(Diaporthe citri),棒孢菌属(Corynespora spp.),山扁豆生棒孢(Corynespora Cassiicola),胶锈菌属(Gymnosporangium spp.),胶锈菌(Gymnosporangium juniperi-virginianae),煤点病菌属(Schizothyrium spp.),苹果煤点病菌(Schizothyrium pomi),粘壳孢菌属(Gloeodes spp.),仁果粘壳孢菌(Gloeodes pomigena),葡萄座腔菌属(Botryosphaeria spp.),杨树溃疡病菌(Botryosphaeria dothidea),明孢盘菌属(Neofabraea spp.),穿孔病菌属(Wilsonomyces spp.),穿孔病菌(Wilsonomyces carpophilus),单丝壳属(Sphaerotheca spp.),白斑病菌(Sphaerotheca macularis),蔷薇单丝壳菌(Sphaerotheca pannosa),白粉菌属(Erysiphe spp.),壳多孢属(Stagonospora spp.),颖枯壳多孢(Stagonospora nodorum),腐霉菌(Pythium spp.),终极腐霉(Pythium ultimum),瓜果腐霉(Pythium aphanidermatum),不规则腐霉(Pythium irregularum),胡萝卜腐霉(Pythium ulosum),鲁特里亚腐霉(Pythium lutriarium),猝倒病腐霉(Pythium sylvatium),黑星菌属(Venturia spp),苹果黑星菌(Venturia inaequalis),轮枝孢属(Verticillium spp.),黑粉菌属(Ustilago spp.),裸黑粉菌(Ustilago nuda),玉米黑粉菌(Ustilago maydis),甘蔗黑粉菌(Ustilago scitaminea),麦角菌属(Claviceps spp.),麦角菌(Claviceps puprrea),腥黑粉菌属(Tilletia spp.),小麦腥黑粉菌(Tilletia tritici),亚腥黑粉菌(Tilletia laevis),刚毛腥黑粉菌(Tilletia horrid),小麦矮化腥黑粉菌(Tilletia controversa),茎点霉菌属(Phoma spp.),大豆茎点霉菌(Phoma glycinicola),棉花茎点霉菌(Phoma exigua),芸苔茎点霉菌(Phoma lingam),禾旋孢腔菌(Cocliobolus sativus),燕麦全蚀病菌(Gaeumanomyces gaminis),毛盘孢属(Colleototricum spp.),喙孢属(Rhychosporium spp.),黑麦喙孢(Rhychosporium secalis),蠕孢菌属(Biopolaris spp.),长蠕孢菌属(Helminthosporium spp.),黑麦长蠕孢菌(Helminthosporium secalis),玉米长蠕孢菌(Helminthosporium maydis),马铃薯长蠕孢菌(Helminthosporium solai)或小麦褐斑长蠕孢菌
(Helminthosporium tritici-repentis)或其组合。
61.如权利要求60所述的方法,其中所述病原体感染有以下的一种或组合引起:
大豆豆锈病真菌(豆薯层锈菌山马蝗层锈菌)和包括大豆的植物;灰葡萄孢(灰葡萄孢病)和包括葡萄的植物;灰葡萄孢(灰葡萄孢病)和包括草莓的植物;曲霉(例如茄链格孢)和包括番茄的植物;曲霉(例如茄链格孢)和包括马铃薯的植物;豆锈病(疣顶单胞锈菌)和包括菜豆的植物;扩散叉丝壳(大豆白粉病)和包括大豆的植物;香蕉黑条叶斑菌(黑色叶斑病)或尖镰孢古巴专化型(巴拿马病)和包括香蕉的植物;黄单胞菌属或水稻黄单胞菌水稻致病变种和包括水稻的植物;地毯草黄单胞杆菌和包括木薯的植物;野油菜黄单胞菌和包括番茄的植物;灰葡萄孢(胡椒灰葡萄孢病)和包括胡椒的植物;白粉病和包括葫芦的植物;
核盘菌(白霉)和包括豆荚的植物;核盘菌(白霉)和包括马铃薯的植物;银斑核盘菌(草皮币斑病)和包括坪草的植物;南方白霉病和包括花生的植物;叶斑枯病(尾孢菌)和包括花生的植物;禾谷镰孢菌(小麦赤霉病)和包括小麦的植物;禾生球腔菌(小麦壳针孢斑)和包括小麦的植物;颖枯壳多孢(颖状斑和壳针孢叶枯病)和包括小麦的植物;解淀粉欧文氏菌和包括苹果、梨和其他梨果的植物;苹果黑星菌和包括苹果、梨和其他梨果的植物;或立枯丝核菌和包括小麦、水稻、坪草、大豆、玉米、豆类和蔬菜作物的植物。
62.如权利要求54所述的方法,其中所述利于植物生长和/或保护易不受病原性感染的合适的量是约1.0×1010CFU/ha~约1.0×1014CFU/ha的解淀粉芽孢杆菌RTI472。
63.一种组合物,其以适于保护易受影响的植物不受病原性感染的量包括分离的芬枯草菌素MA化合物、分离的芬枯草菌素MB化合物、分离的芬枯草菌素MC化合物、分离的脱羟基芬枯草菌素MA化合物、分离的脱羟基芬枯草菌素MB化合物、分离的芬枯草菌素H化合物、分离的芬枯草菌素I化合物、以及分离的脱羟基芬枯草菌素I化合物的至少一种,所述化合物具有式:
其中R为OH,n为8~20的范围,FA为线性、异构体、或反异构体,且:芬枯草菌素MA中X1为Ala,X2为Thr,且X3为Met;芬枯草菌素MB中X1为Val,X2为Thr,且芬枯草菌素MC中X3为Met;X1为Aba,X2为Thr,且X3为Met;芬枯草菌素H中X1为Val,X2为Thr,且X3为Hcy;且芬枯草菌素I中X1为Ile,X2为Thr,且X3为Ile;且
其中R为H,n为8~20的范围,FA为线性、异构体、或反异构体,且:脱羟基芬枯草菌素MA中X1为Ala,X2为Thr,且X3为Met;脱羟基芬枯草菌素MB中X1为Val,X2为Thr,且X3为Met;且脱羟基芬枯草菌素I中X1为Ile,X2为Thr,且X3为Ile。
64.如权利要求63所述的组合物,所述组合物还包含微生物、生物或化学杀昆虫剂、杀真菌剂、杀线虫剂、杀细菌剂、除草剂、植物提取物、植物生长调节剂或肥料中的一种或它们的组合,这些成分以适于促进植物生长和/或保护易受影响的植物不受病原性感染的量存在。
65.如权利要求64所述的组合物,其中,所述杀真菌剂选自下组:氟吡菌酰胺加戊唑醇、百菌清、甲基硫菌灵、丙硫菌唑、和氢
66.如权利要求63所述的组合物,其中,所述组合物的形式为液体、粉尘、可传播颗粒、或干燥的可润湿颗粒。
67.一种组合物,其以适于保护易受影响的植物不受病原性感染的量包括具有
3341.6Da的分子量的分离的Ericin S化合物和具有2985.4Da的分子量的分离的Ericin A化合物中的一种或两者。
68.如权利要求67所述的组合物,所述组合物还包含微生物、生物或化学杀昆虫剂、杀真菌剂、杀线虫剂、杀细菌剂、除草剂、植物提取物、植物生长调节剂或肥料中的一种或它们的组合,这些成分以适于促进植物生长和/或保护易受影响的植物不受病原性感染的量存在。
69.如权利要求68所述的组合物,其中杀真菌剂为以下的一个或多个:苯威吡氟
(benzovindiflupyr)、抗霜霉剂(anitiperonosporic)、辛唑嘧菌胺(ametoctradin)、吲唑磺菌胺(amisulbrom)、包括氢氧化铜、氯氧化铜、硫酸铜和过硫酸铜的铜盐、啶酰菌胺(boscalid)、噻呋酰胺(thiflumazide)、氟酰胺(flutianil)、呋霜灵(furalaxyl)、噻菌灵(thiabendazole)、麦锈灵(benodanil)、灭锈胺(mepronil)、异丙噻菌胺(isofetamid)、甲呋酰胺(fenfuram)、必杀芬(bixafen)、氟唑菌酰胺(fluxapyroxad)、戊苯吡菌胺(penflufen)、环丙吡菌胺(sedaxane)、丁香菌酯(coumoxystrobin)、烯肟菌酯
(enoxastrobin)、氟菌螨酯(flufenoxystrobin)、唑菌酯(Pyraoxystrobin)、唑胺菌酯(pyrametostrobin)、三环吡菌威(triclopyricarb)、烯肟菌胺(fenaminstrobin)、苯氧菌胺(metominostrobin)、嘧啶肟草醚(pyribencarb)、消螨多(meptyldinocap)、三苯基乙酸(fentin acetate)、三苯基氯化锡(fentin chloride)、三苯基氢氧化锡(fentin hydroxide)、土霉素(oxytetracycline)、乙菌利(chlozolinate)、地茂散(chloroneb)、四氧硝基苯(tecnazene)、土菌灵(etridiazole)、依杜卡(iodocarb)、硫菌威(prothiocarb)、合成枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis syn.)、包括菌株QST713、FZB24、MBI600和D747的解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)、互叶白千层(Melaleuca alternifolia)提取物、白花羽扇豆(Lupinus albus doce)提取物、BLAD多肽、啶菌噁唑(pyrisoxazole)、恶咪唑(oxpoconazole)、乙环唑(etaconazole)、胺苯吡菌(fenpyrazamine)、替芳(naftifine)、特比萘芬(terbinafine)、井冈霉素(validamycin)、丁吡吗啉(pyrimorph)、霜霉灭(valifenalate)、四氯苯酞(fthalide)、噻菌灵(probenazole)、异噻菌胺(isotianil)、昆布多糖(laminarin)、大虎杖(Reynoutria sachalinensis)的提取物、磷酸磷酸盐、叶枯酞(teclofthalam)、唑菌嗪(triazoxide)、甲氧苯啶菌(pyriofenone)、有机油、酸氢、百菌清(chlorothalonil)、唑呋草(fluoroimide);唑类,包括:联苯三唑醇、糠菌唑、环丙唑醇、苯醚甲环唑、烯唑醇、恩康唑、氟环唑、氟喹唑、腈苯唑、氟唑、粉唑醇、己唑醇、亚胺唑、种菌唑、叶菌、腈菌唑、戊菌唑、丙环唑、丙硫菌唑、硅氟唑、三唑酮、三唑醇、戊唑醇、四氟醚唑、灭菌唑、咪鲜胺、稻瘟酯、抑霉唑、氟菌唑、氰霜唑、苯菌灵、多菌灵、硫杂-地巴唑(thia-bendazole)、麦穗宁、噻唑菌胺、土菌灵和恶霉灵、氮康唑、烯唑醇-M、恶咪唑、多效唑、烯效唑、1-(4-氯-苯基)-2-([1,2,4]三唑-1-基)-环庚醇和抑霉唑硫酸盐;甲氧基丙烯酸酯(strobilurins)类,包括:嘧菌酯、醚菌胺、烯肟菌酯、氟嘧菌酯、醚菌酯、苯氧菌胺(methominostrobin)、肟醚菌胺、啶氧菌酯、双唑草腈、肟菌酯、烯肟菌酯、(2-氯-5-[1-(3-甲基苄氧基亚基)乙基]苯基)氨基甲酸甲酯、(2-氯-5-[1-(6-甲基吡啶-2-基甲氧基亚氨基)乙基]苯基)氨基甲酸甲酯和2-(邻-(2,5-二甲基苯氧基亚甲基)-苯基)-3-甲氧基丙烯酸甲酯、2-(2-(6-(3-氯-2-甲基-苯氧基)-5-氟-嘧啶-4-基氧基-苯基)-2-甲氧基亚氨基-N-甲基-乙酰胺和3-甲氧基-2-(2-(N-(4-甲氧基-苯基)-环丙烷羧酰亚胺基-硫甲基)-苯基)-丙烯酸甲酯;羧酰胺,包括:萎锈灵、苯霜灵、苯霜灵-M、环酰菌胺、氟酰胺、呋吡菌胺、灭锈胺、甲霜灵、高效甲霜灵、呋酰胺、恶霜灵、氧化萎锈灵、吡噻菌胺、吡唑萘菌胺、噻呋酰胺、噻酰菌胺、3,4-二氯-N-(2-氰基苯基)异噻唑-5-羧酰胺、烯酰吗啉、氟吗啉、氟酰菌胺、氟吡菌胺(微苯甲酰胺(picobenzamid))、苯酰菌胺、环丙酰菌胺、双氯氰菌胺、双炔酰菌胺、N-(2-(4-[3-(4-氯苯基)丙-2-炔基氧基]-3-甲氧基苯基)乙基)-2-甲磺酰基-氨基-3-甲基丁酰胺、N-(2-(4-[3-(4-氯-苯基)丙-2-炔基氧基]-3-甲氧基-苯基)氧基)-2-乙烷磺酰氨基-
3-甲基丁酰胺、3-(4-氯苯基)-3-(2-异丙氧基羰基-氨基-3-甲基-丁酰基氨基)丙酸甲酯、N-(4'-溴联苯基-2-基)-4-二氟甲基-甲基噻唑-δ-羧酰胺、N-(4'-三氟甲基-联苯基-2-基)-4-二氟甲基-2-甲基噻唑-5-羧酰胺、N-(4'-氯-3'-氟联苯基-2-基)-4-二氟甲基-2-甲基-噻唑-5-羧酰胺、N-(3,4'-二氯-4-氟联苯基-2-基)-3-二氟-甲基-1-甲基-吡唑-4-羧酰胺、N-(3',4'-二氯-5-氟联苯基-2-基)-3-三氟甲基-1-甲基吡唑-4-羧酰胺、N-(2-氰基-苯基)-3,4-二氯异噻唑-5-羧酰胺、2-氨基-4-甲基-噻唑-5-羧酰胺、2-氯-N-(1,1,3-三甲基-茚满-4-基)-烟酰胺、N-(2-(1,3-二甲基丁基)-苯基)-1,3-二甲基-5-氟-1H-吡唑-4-羧酰胺、N-(4'-氯-3',5-二氟-联苯基-2-基)-3-二氟甲基-1-甲基-IH-吡唑-4-羧酰胺、N-(4'-氯-3',5-二氟-联苯基-2-基)-3-三氟甲基-1-甲基-1H-吡唑-4-羧酰胺、N-(3',4'-二氯-5-氟-联苯基-2-基)-3-三氟甲基-1-甲基-1H-吡唑-4-羧酰胺、N-(3',5-二氟-4'-甲基-联苯基-2-基)-3-二氟甲基-1-甲基-1H-吡唑-4-羧酰胺、N-(3',5-二氟-4'-甲基-联苯基-2-基)-3-三氟甲基-1-甲基-1H-吡唑-4-羧酰胺、N-(顺式-2-二环丙基-2-基-苯基)-3-二氟甲基-1-甲基-1H-吡唑-4-羧酰胺、N-(反式-2-二环丙基-2-基-苯基)-3-二氟-甲基-1-甲基-
1H-吡唑-4-羧酰胺、氟吡菌酰胺、N-(3-乙基-3,5-5-三甲基-环己基)-3-甲酰基氨基-2-羟基-苯甲酰胺、噻菌灵、硅噻菌胺、N-(6-甲氧基-吡啶-3-基)环丙烷羧酰胺、2-碘-N-苯基-苯甲酰胺、N-(2-二环-丙基-2-基-苯基)-3-二氟甲基-1-甲基吡唑-4-基羧酰胺、N-(3',4',
5'-三氟联苯基-2-基)-1,3-二甲基吡唑-4-基羧酰胺、N-(3',4',5'-三氟联苯基-2-基)-1,
3-二甲基-5-氟吡唑-4-基-羧酰胺、N-(3',4',5'-三氟联苯基-2-基)-5-氯-1,3-二甲基-吡唑-4-基羧酰胺、N-(3',4',5'-三氟联苯基-2-基)-3-氟甲基-1-甲基吡唑-4-基羧酰胺、N-(3',4',5'-三氟联苯基-2-基)-3-(氯氟甲基)-1-甲基吡唑-4-基羧酰胺、N-(3',4',5'-三氟联苯基-2-基)-3-二氟甲基-1-甲基吡唑-4-基羧酰胺、N-(3',4',5'-三氟联苯基-2-基)-
3-二氟甲基-5-氟-1-甲基吡唑-4-基羧酰胺、N-(3',4',5'-三氟联苯基-2-基)-5-氯-3-二氟甲基-1-甲基吡唑-4-基羧酰胺、N-(3',4',5'-三氟联苯基-2-基)-3-(氯二氟甲基)-1-甲基吡唑-4-基羧酰胺、N-(3',4',5'-三氟联苯基-2-基)-1-甲基-3-三氟甲基吡唑-4-基羧酰胺、N-(3',4',5'-三氟联苯基-2-基)-5-氟-1-甲基-3-三氟甲基吡唑-4-基羧酰胺、N-(3',
4',5'-三氟联苯基-2-基)-5-氯-1-甲基-3-三氟甲基吡唑-4-基羧酰胺、N-(2',4',5'-三氟联苯基-2-基)-1,3-二甲基吡唑-4-基羧酰胺、N-(2',4',5'-三氟联苯基-2-基)-1,3-二甲基-5-氟吡唑-4-基羧酰胺、N-(2',4',5'-三氟联苯基-2-基)-5-氯-1,3-二甲基吡唑-4-基羧酰胺、N-(2',4',5'-三氟联苯基-2-基)-3-氟甲基-1-甲基吡唑-4-基羧酰胺、N-(2',4',
5'-三氟联苯基-2-基)-3-(氯氟甲基)-1-甲基吡唑-4-基羧酰胺、N-(2',4',5'-三氟联苯基-2-基)-3-二氟甲基-1-甲基吡唑-4-基羧酰胺、N-(2',4',5'-三氟联苯基-2-基)-3-二氟甲基-5-氟-1-甲基吡唑-4-基羧酰胺、N-(2',4',5'-三氟联苯基-2-基)-5-氯-3-二氟甲基-
1-甲基吡唑-4-基羧酰胺、N-(2',4',5'-三氟联苯基-2-基)-3-(氯二氟甲基)-1-甲基吡唑-
4-基羧酰胺、N-(2',4',5'-三氟联苯基-2-基)-1-甲基-3-三氟甲基吡唑-4-基羧酰胺、N-(2',4',5'-三氟联苯基-2-基)-5-氟-1-甲基-3-三氟甲基吡唑-4-基羧酰胺、N-(2',4',5'-三氟联苯基-2-基)-5-氯-1-甲基-3-三氟甲基吡唑-4-基羧酰胺、N-(3',4'-二氯-3-氟联苯基-2-基)-1-甲基-3-三氟甲基-1H-吡唑-4-羧酰胺、N-(3',4'-二氯-3-氟联苯基-2-基)-1-甲基-3-二氟甲基-1H-吡唑-4-羧酰胺、N-(3',4'-二氟-3-氟联苯基-2-基)-1-甲基-3-三氟甲基-1H-吡唑-4-羧酰胺、N-(3',4'-二氟-3-氟联苯基-2-基)-1-甲基-S-二氟甲基-1H-吡唑-4-羧酰胺、N-(3'-氯-4'-氟-3-氟联苯基-2-基)-1-甲基-3-二氟甲基-1H-吡唑-4-羧酰胺、N-(3',4'-二氯-4-氟联苯基-2-基)-1-甲基-3-三氟甲基-1H-吡唑-4-羧酰胺、N-(3',
4'-二氟-4-氟联苯基-2-基)-1-甲基-S-三氟甲基-IH-吡唑-4-羧酰胺、N-(3',4'-二氯-4-氟联苯基-2-基)-1-甲基-3-二氟甲基-1H-吡唑-4-羧酰胺、N-(3',4'-二氟-4-氟联苯基-2-基)-1-甲基-3-二氟甲基-1H-吡唑-4-羧酰胺、N-(3'-氯-4'-氟-4-氟联苯基-2-基)-1-甲基-S-二氟甲基-IH-吡唑-羧酰胺、N-(3',4'-二氯-5-氟联苯基-2-基)-1-甲基-3-三氟甲基-1H-吡唑-4-羧酰胺、N-(3',4'-二氟-5-氟联苯基-2-基)-1-甲基-3-三氟甲基-1H-吡唑-
4-羧酰胺、N-(3',4'-二氯-5-氟联苯基-2-基)-1-甲基-S-二氟甲基-IH-吡唑-羧酰胺、N-(3',4'-二氟-5-氟联苯基-2-基)-1-甲基-3-二氟甲基-1H-吡唑-4-羧酰胺、N-(3',4'-二氯-5-氟联苯基-2-基)-1,3-二甲基-1H-吡唑-4-羧酰胺、N-(3'-氯-4'-氟-5-氟联苯基-2-基)-1-甲基-3-二氟甲基-1H-吡唑-4-羧酰胺、N-(4'-氟-4-氟联苯基-2-基)-1-甲基-3-三氟甲基-1H-吡唑-4-羧酰胺、N-(4'-氟-5-氟联苯基-2-基)-1-甲基-3-三氟甲基-1H-吡唑-
4-羧酰胺、N-(4'-氯-5-氟联苯基-2-基)-1-甲基-3-三氟甲基-1H-吡唑-4-羧酰胺、N-(4'-甲基-5-氟联苯基-2-基)-1-甲基-3-三氟甲基-1H-吡唑-4-羧酰胺、N-(4'-氟-5-氟联苯基-
2-基)-1,3-二甲基-1H-吡唑-4-羧酰胺、N-(4'-氯-5-氟联苯基-2-基)-1,3-di甲基-1H-吡唑-4-羧酰胺、N-(4'-甲基-5-氟联苯基-2-基)-1,3-二甲基-1H-吡唑-4-羧酰胺、N-(4'-氟-
6-氟联苯基-2-基)-1-甲基-3-三氟甲基-1H-吡唑-4-羧酰胺、N-(4'-氯-6-氟联苯基-2-基)-1-甲基-3-三氟甲基-1H-吡唑-4-羧酰胺、N-[2-(1,1,2,3,3,3-六氟丙氧基)-苯基]-3-二氟甲基-1-甲基-1H-吡唑-4-羧酰胺、N-[4'-(三氟甲基硫)-联苯基-2-基]-3-二氟甲基-
1-甲基-1H-吡唑-4-羧酰胺、和N-[4'-(三氟甲基硫-联苯基-2-基]-1-甲基-3-三氟甲基-1-甲基-1H-吡唑-4-羧酰胺;杂环化合物,包括:氟啶胺、啶斑肟、乙嘧酚磺酸酯、嘧菌环胺、氯苯嘧啶醇、嘧菌腙、嘧菌胺、氟苯嘧啶醇、嘧霉胺、嗪胺灵、拌种咯、咯菌腈、阿尔迪莫、十二环吗啉、丁苯吗啉、十三吗啉、苯锈啶、异菌脲、腐霉利、乙烯菌核利、噁唑酮菌、咪唑菌酮、辛噻酮、烯丙苯噻唑、5-氯-7-(4-甲基-哌啶-1–基)-6-(2,4,6-三氟苯基)-[1,2,4]三唑并[1,5-a]嘧啶、敌菌灵、哒菌酮、咯喹酮、丙氧喹啉、三环唑、2-丁氧基-6-碘-3-丙基色原-4-酮、阿拉酸式苯-S-甲基、敌菌丹、克菌丹、棉隆、灭菌丹、氰菌胺、苯氧喹啉、N,N-二甲基-3-(3-溴-
6-氟-2-甲基吲哚-1-磺酰基)-[1,2,4]三唑-1-磺酰胺、5-乙基-6-辛基-[1,2,4]三唑并[1,
5-a]嘧啶-2,7-二胺、2,3,5,6-四氯-4-甲磺酰基-吡啶、3,4,5-三氯-吡啶-2,6-二-腈、N-(1-(5-溴-3-氯-吡啶-2-基)-乙基)-2,4-二氯-烟酰按、N-((5-溴-3-氯吡啶-2-基)-甲基)-
2,4-二氯-烟酰按、二氟林、氯定、乙酸十二环吗啉、氟菌胺、灰瘟素、喹菌酮、咪菌威、野燕枯、苯敌快-甲基硫酸盐、恶喹酸和病花灵;氨基甲酸酯类,选自:代森锰锌、代森锰、威百亩、甲硫威(methasulphocarb)、代森联、福美、丙森锌、福美双、代森锌、福美锌、乙霉威、异丙菌威、苯噻菌胺、霜霉威、霜霉威盐酸盐、4-氟苯基N-(1-(1-(4-氰基苯基)-乙磺酰基)丁-2-基)氨基甲酸酯、3-(4-氯-苯基)-3-(2-异丙氧基羰基氨基-3-甲基-丁酰基氨基)丙酸甲酯;
以及其他杀真菌剂,包括胍、多果定、多果定游离、双胍辛胺、双胍盐、抗生素;春雷霉素、土霉素及其盐、链霉素、多抗霉素、井冈霉素A、硝基苯基衍生物;乐杀螨、消螨普、消螨通、含硫杂环基化合物;二噻农、稻瘟灵、有机金属化合物;三苯锡盐、有机磷化合物;敌瘟磷、异稻瘟净、三乙膦酸、三乙膦酸、磷酸和其盐、吡菌磷、甲基立枯磷、有机氯化合物;苯氟磺胺、磺菌胺、六氯苯、四氯苯酞、戊菌隆、五氯硝基苯、硫菌灵、甲基硫菌灵、对甲抑菌灵,其他:环氟菌胺、霜脲氰、甲菌定、乙嘧酚、呋霜灵、苯菌酮和螺环菌胺、双胍辛胺乙酸盐、双胍辛胺三乙酸盐(iminoctadine-triacetate)、双胍辛胺三烷苯磺酸盐、春雷霉素盐酸盐水合物、双氯酚、五氯苯酚及其盐、N-(4-氯-2-硝基-苯基)-N-乙基-4-甲基-苯磺酰胺、氯硝胺、酞菌酯、四氧硝基苯(tecnazen)、联苯、溴硝丙二醇、二苯胺、米多霉素、喹啉铜、调环酸、N-(环丙基甲氧基亚氨基-(6-二氟甲氧基-2,3-二氟-苯基)-甲基)-2-苯基乙酰胺、N'-(4-(4-氯-
3-三氟甲基-苯氧基)-2,5-二甲基-苯基)-N-乙基-N-甲基甲脒、N'-(4-(4-氟-3-三氟甲基-苯氧基)-2,5-二甲基-苯基)-N-乙基-N-甲基甲脒、N'-(2-甲基-5-三氟甲基-4-(3-三甲基硅烷基-丙氧基)-苯基)-N-乙基-N-甲基甲脒和N'-(5-二氟甲基-2-甲基4-(3-三甲基硅烷基-丙氧基)-苯基)-N-乙基-N-甲基甲脒。
70.如权利要求67所述的组合物,其中,所述杀真菌剂选自下组:氟吡菌酰胺加戊唑醇、百菌清、甲基硫菌灵、丙硫菌唑、和氢氧化铜。
71.如权利要求67所述的组合物,其中,所述组合物的形式为液体、粉尘、可传播颗粒、或干燥的可润湿颗粒。
72.一种以ATCC第PTA-121166号保藏的解淀粉芽孢杆菌RTI472的生物纯培养物的提取物,所述提取物包括分离的芬枯草菌素MA化合物、分离的芬枯草菌素MB化合物、分离的芬枯草菌素MC化合物、分离的脱羟基芬枯草菌素MA化合物、分离的脱羟基芬枯草菌素MB化合物、分离的芬枯草菌素H化合物、分离的芬枯草菌素I化合物、和分离的脱羟基芬枯草菌素I化合物的至少一种。
73.一种解淀粉芽孢杆菌的生物纯培养物的提取物,所述提取物包括具有3341.6Da的分子量的分离的Ericin S化合物或具有2985.4Da的分子量的分离的Ericin A化合物的至少一种。
74.一种保护或处理植物或果实以避免病原体感染的方法,其包括对植物或果实、或者对根或植物的根周围的土壤施用有效量的权利要求63-73中所述的任一种组合物或提取物。
75.如权利要求74所述的方法,其中,所述植物包括:单子叶植物、双子叶植物、谷类、玉米、甜玉米、爆米花玉米、种子玉米、青贮玉米、田地玉米、水稻、小麦、大麦、高粱、芦笋、浆果、蓝莓、黑莓、树莓、罗甘莓、黑果木、蔓越莓、醋栗、接骨木、红醋栗、蔓越橘、灌木浆果、芸苔属蔬菜、花椰菜、卷心菜、菜花、球芽甘蓝、羽衣甘蓝、无头甘蓝、芥菜、球茎甘蓝、葫芦科蔬菜、黄瓜、哈密瓜、甜瓜、香瓜、西葫芦、西瓜、南瓜、茄子、鳞茎类蔬菜、洋葱、大蒜、葱、柑橘、橙、葡萄柚、柠檬、桔子、橘柚、柚子、果蔬、胡椒、番茄、草原樱桃、树番茄、秋葵、葡萄、草药/香料、叶用蔬菜、莴苣、芹菜、菠菜、欧芹、菊苣、豆类/蔬菜(多汁的和干燥的豆和豌豆)、豆、青豆、豆荚、荚豆、大豆、干豆、鹰嘴豆、利马豆、豌豆、三角豆、裂荚豌豆、扁豆、油籽作物、坎诺拉油菜、蓖麻、椰子、棉花、亚麻、油棕、橄榄、花生、油菜籽、红花、芝麻、向日葵、大豆、仁果类水果、苹果、山楂、梨、榅桲、夏花山楂、根/块茎和球茎蔬菜、胡萝卜、马铃薯、甜马铃薯、木薯、甜菜、姜、辣根、萝卜、人参、芜箐、核果类水果、杏、樱桃、油桃、桃、李子、梅子、草莓、木本坚果、杏仁、开心果、山核桃、胡桃、榛子、栗子、腰果、山毛榉坚果、灰胡桃、夏威夷果、奇异果、香蕉、(蓝色)龙舌兰、草、草皮草、观赏植物、一品红、绣球花、硬插枝、栗子、橡树、枫树、甘蔗、或甜菜。
76.如权利要求74所述的方法,其中,所述病原体感染由以下引起:植物真菌病原体、植物细菌病原体,锈菌、葡萄孢属(Botrytis spp.)、灰葡萄孢(Botrytis cinerea)、葱鳞葡萄孢菌(Botrytis squamosa),欧文氏菌属(Erwinia spp.)、胡萝卜软腐欧文氏菌(Erwinia carotovora)、解淀粉欧文氏菌(Erwinia amylovora),狄克氏菌属(Dickeya spp.),达旦提狄克氏菌(Dickeya dadantii),茄狄克氏菌(Dickeya solani),农杆菌属(Agrobacterium spp.),根癌土壤杆菌(Agrobacterium tumefaciens),黄单胞菌属(Xanthomonas spp.),地毯草黄单胞杆菌(Xanthomonas axonopodis),野油菜黄单胞菌胡萝卜致病变种
(Xanthomonas campestris pv.carotae),桃李黄单胞菌(Xanthomonas pruni),藤黄单胞菌(Xanthomonas arboricola),水稻黄单胞菌水稻致病变种(Xanthomonas oryzae pv.oryzae),木杆菌属(Xylella spp.),苛养木杆菌(Xylella fastidiosa),暂定菌属(Candidatus spp.),韧皮部杆菌(Candidatus liberibacter),镰孢属(Fusarium spp.),禾谷镰孢菌(Fusarium graminearum),尖镰孢(Fusarium oxysporum),尖镰孢古巴专化型(Fusarium oxysporum f.sp.Cubense),尖镰孢番茄专化型(Fusarium oxysporum f.sp.Lycopersici),北美大豆猝死综合症病菌(Fusarium virguliforme),核盘菌属(Sclerotinia spp.),核盘菌(Sclerotinia sclerotiorum),小核盘菌(Sclerotinia minor),银斑核盘菌(Sclerotinia homeocarpa),尾孢菌属(Cercospora/Cercosporidium spp.),钩丝壳属(Uncinula spp.),葡萄钓丝壳(Uncinula necator)(白粉菌(Powdery Mildew)),叉丝单囊壳属(Podosphaera spp.)(白粉菌(Powdery Mildew)),白叉丝单囊壳(Podosphaera leucotricha),秘密叉丝单囊壳(Podosphaera clandestine),拟茎点霉属(Phomopsis spp.),霜霉病拟茎点霉菌(Phomopsis viticola),链格孢菌属(Alternaria spp.),极链格孢菌(Alternaria tenuissima),孔洞链隔孢菌(Alternaria porri),链格孢(Alternaria alternate),茄链格孢(Alternaria solani),细极链格孢(Alternaria tenuis),假单胞菌属(Pseudomonas spp.),丁香假单胞菌番茄致病变种(Pseudomonas syringae pv.Tomato),疫霉属(Phytophthora spp.),致病疫霉(Phytophthora 
infestans),寄生疫霉(Phytophthora parasitica),大豆疫霉菌(Phytophthora sojae),辣椒疫霉菌(Phytophthora capsici),肉桂疫霉菌(Phytophthora cinnamon),草莓疫霉菌(Phytophthora fragariae),疫霉属(Phytophthora spp.),栎树疫霉菌(Phytophthora ramorum),棕榈疫霉菌(Phytophthora palmivara),烟草疫霉菌(Phytophthora 
nicotianae),层锈菌属(Phakopsora spp.),豆薯层锈菌(Phakopsora pachyrhizi),山马蝗层锈菌(Phakopsora meibomiae),曲霉(Aspergillus spp.),黄曲霉(Aspergillus flavus),黑曲霉(Aspergillus niger),单孢锈菌属(Uromyces spp.),疣顶单孢锈菌(Uromyces appendiculatus),枝孢属(Cladosporium spp.),多主枝孢(Cladosporium herbarum),根霉属(Rhizopus spp.),隐根根霉(Rhizopus arrhizus),青霉属
(Penicillium spp.),丝核菌属(Rhizoctonia spp.),立枯丝核菌(Rhizoctonia solani),玉蜀黍丝核菌(Rhizoctonia zeae),稻枯斑丝核菌(Rhizoctonia oryzae),博爱丝核菌(Rhizoctonia caritae),小麦纹枯病菌(Rhizoctonia cerealis),番红花枯病菌(Rhizoctonia crocorum),草莓花枯病菌(Rhizoctonia fragariae),多枝丝核菌(Rhizoctonia ramicola),灌木枯病菌(Rhizoctonia rubi),豆类丝核菌(Rhizoctonia leguminicola),豆类壳球孢(Macrophomina phaseolina),稻瘟病菌(Magnaorthe oryzae),球腔菌属(Mycosphaerella spp.),灰霉菌(Mycosphaerella graminocola),香蕉黑条叶斑菌(Mycosphaerella fijiensis(黑色叶斑病)),苹果球腔菌(Mycosphaerella pomi),柑橘球腔菌(Mycosphaerella citri),稻瘟菌属(Magnaporthe spp.),稻瘟菌(Magnaporthe grisea),褐腐病菌属(Monilinia spp.),桃褐腐病菌(Monilinia fruticola),Monilinia vacciniicorymbosi,核果链核盘菌(Monilinia laxa),刺盘孢属(Colletotrichum spp.),炭疽病菌(Colletotrichum gloeosporiodes),尖孢炭疽菌(Colletotrichum acutatum),白炭疽病菌(Colletotrichum Candidum),间座壳属(Diaporthe spp.),柑桔间座壳(Diaporthe citri),棒孢菌属(Corynespora spp.),山扁豆生棒孢(Corynespora Cassiicola),胶锈菌属(Gymnosporangium spp.),胶锈菌(Gymnosporangium juniperi-virginianae),煤点病菌属(Schizothyrium spp.),苹果煤点病菌(Schizothyrium pomi),粘壳孢菌属(Gloeodes spp.),仁果粘壳孢菌(Gloeodes pomigena),葡萄座腔菌属(Botryosphaeria spp.),杨树溃疡病菌(Botryosphaeria dothidea),明孢盘菌属(Neofabraea spp.),穿孔病菌属(Wilsonomyces spp.),穿孔病菌(Wilsonomyces carpophilus),单丝壳属(Sphaerotheca spp.),白斑病菌(Sphaerotheca macularis),蔷薇单丝壳菌(Sphaerotheca pannosa),白粉菌属(Erysiphe spp.),壳多孢属(Stagonospora spp.),颖枯壳多孢(Stagonospora nodorum),腐霉菌(Pythium spp.),终极腐霉(Pythium ultimum),瓜果腐霉(Pythium aphanidermatum),不规则腐霉(Pythium irregularum),胡萝卜腐霉(Pythium ulosum),鲁特里亚腐霉(Pythium lutriarium),猝倒病腐霉(Pythium sylvatium),黑星菌属(Venturia spp),苹果黑星菌(Venturia inaequalis),轮枝孢属(Verticillium spp.),黑粉菌属(Ustilago spp.),裸黑粉菌(Ustilago nuda),玉米黑粉菌(Ustilago maydis),甘蔗黑粉菌(Ustilago scitaminea),麦角菌属(Claviceps spp.),麦角菌(Claviceps puprrea),腥黑粉菌属(Tilletia spp.),小麦腥黑粉菌(Tilletia tritici),亚腥黑粉菌(Tilletia laevis),刚毛腥黑粉菌(Tilletia horrid),小麦矮化腥黑粉菌(Tilletia controversa),茎点霉菌属(Phoma spp.),大豆茎点霉菌(Phoma glycinicola),棉花茎点霉菌(Phoma exigua),芸苔茎点霉菌(Phoma lingam),禾旋孢腔菌(Cocliobolus sativus),燕麦全蚀病菌(Gaeumanomyces gaminis),毛盘孢属(Colleototricum spp.),喙孢属(Rhychosporium spp.),黑麦喙孢(Rhychosporium secalis),蠕孢菌属(Biopolaris spp.),长蠕孢菌属(Helminthosporium spp.),黑麦长蠕孢菌(Helminthosporium secalis),玉米长蠕孢菌(Helminthosporium maydis),马铃薯长蠕孢菌(Helminthosporium solai)或小麦褐斑长蠕孢菌
(Helminthosporium tritici-repentis)或其组合。
77.一种以通过赋予保护易受影响的植物不受或降低病原性感染的方式利于植物生长、同时最小化对治疗抵抗的累积的方法,所述方法包括:
以单独施用和以改变的时间间隔的方式递送第一组合物和第二组合物至易受影响的植物,其中第一和第二组合物都以适于赋予保护植物不受或降低病原性感染的量递送以赋予保护植物不受或降低病原性感染,
其中所述第一组合物包括以ATCC第PTA-121166号保藏的解淀粉芽孢杆菌RTI472、或具有所有其识别特征的突变体的生物纯培养物,且
其中所述第二组合物包括一个或多个具有抗真菌或抗细菌性能的化学活性试剂,且其中,第一和第二组合物以改变的时间间隔的方式递送至植物的叶子、植物的皮、植物的果实、植物的花、植物的种子、植物的根、植物的插条、植物的嫁接苗、植物的愈伤组织或植物周围的土壤或生长培养基的一种或组合,
其中,赋予保护不受和/或降低病原性感染所需的化学活性试剂的总量减少且对治疗抵抗的累积被最小化。
78.如权利要求77所述的方法,其中,所述植物包括:单子叶植物、双子叶植物、谷类、玉米、甜玉米、爆米花玉米、种子玉米、青贮玉米、田地玉米、水稻、小麦、大麦、高粱、芦笋、浆果、蓝莓、黑莓、树莓、罗甘莓、黑果木、蔓越莓、醋栗、接骨木、红醋栗、蔓越橘、灌木浆果、芸苔属蔬菜、花椰菜、卷心菜、菜花、球芽甘蓝、羽衣甘蓝、无头甘蓝、芥菜、球茎甘蓝、南瓜、茄子、葫芦科蔬菜、黄瓜、哈密瓜、甜瓜、香瓜、西葫芦、西瓜、鳞茎类蔬菜、洋葱、大蒜、葱、柑橘、橙、葡萄柚、柠檬、桔子、橘柚、柚子、果蔬、胡椒、番茄、草原樱桃、树番茄、秋葵、葡萄、草药/香料、叶用蔬菜、莴苣、芹菜、菠菜、欧芹、菊苣、豆类/蔬菜(多汁的和干燥的豆和豌豆)、豆、青豆、豆荚、荚豆、大豆、干豆、鹰嘴豆、利马豆、豌豆、三角豆、裂荚豌豆、扁豆、油籽作物、坎诺拉油菜、蓖麻、椰子、棉花、亚麻、油棕、橄榄、花生、油菜籽、红花、芝麻、向日葵、大豆、仁果类水果、苹果、山楂、梨、榅桲、夏花山楂、根/块茎和球茎蔬菜、胡萝卜、马铃薯、甜马铃薯、木薯、甜菜、姜、辣根、萝卜、人参、芜箐、核果类水果、杏、樱桃、油桃、桃、李子、梅子、草莓、木本坚果、杏仁、开心果、山核桃、胡桃、榛子、栗子、腰果、山毛榉坚果、灰胡桃、夏威夷果、奇异果、香蕉、(蓝色)龙舌兰、草、草皮草、观赏植物、一品红、绣球花、硬插枝、栗子、橡树、枫树、甘蔗、或甜菜。
79.如权利要求77所述的方法,其中,所述病原体感染由以下引起:植物真菌病原体、植物细菌病原体,锈菌、葡萄孢属(Botrytis spp.)、灰葡萄孢(Botrytis cinerea)、葱鳞葡萄孢菌(Botrytis squamosa),欧文氏菌属(Erwinia spp.)、胡萝卜软腐欧文氏菌(Erwinia carotovora)、解淀粉欧文氏菌(Erwinia amylovora),狄克氏菌属(Dickeya spp.),达旦提狄克氏菌(Dickeya dadantii),茄狄克氏菌(Dickeya solani),农杆菌属(Agrobacterium spp.),根癌土壤杆菌(Agrobacterium tumefaciens),黄单胞菌属(Xanthomonas spp.),地毯草黄单胞杆菌(Xanthomonas axonopodis),野油菜黄单胞菌胡萝卜致病变种
(Xanthomonas campestris pv.carotae),桃李黄单胞菌(Xanthomonas pruni),藤黄单胞菌(Xanthomonas arboricola),水稻黄单胞菌水稻致病变种(Xanthomonas oryzae pv.oryzae),木杆菌属(Xylella spp.),苛养木杆菌(Xylella fastidiosa),暂定菌属(Candidatus spp.),韧皮部杆菌(Candidatus liberibacter),镰孢属(Fusarium spp.),禾谷镰孢菌(Fusarium graminearum),尖镰孢(Fusarium oxysporum),尖镰孢古巴专化型(Fusarium oxysporum f.sp.Cubense),尖镰孢番茄专化型(Fusarium oxysporum f.sp.Lycopersici),北美大豆猝死综合症病菌(Fusarium virguliforme),核盘菌属(Sclerotinia spp.),核盘菌(Sclerotinia sclerotiorum),小核盘菌(Sclerotinia minor),银斑核盘菌(Sclerotinia homeocarpa),尾孢菌属(Cercospora/Cercosporidium spp.),钩丝壳属(Uncinula spp.),葡萄钓丝壳(Uncinula necator)(白粉菌(Powdery Mildew)),叉丝单囊壳属(Podosphaera spp.)(白粉菌(Powdery Mildew)),白叉丝单囊壳(Podosphaera leucotricha),秘密叉丝单囊壳(Podosphaera clandestine),拟茎点霉属(Phomopsis spp.),霜霉病拟茎点霉菌(Phomopsis viticola),链格孢菌属(Alternaria spp.),极链格孢菌(Alternaria tenuissima),孔洞链隔孢菌(Alternaria porri),链格孢(Alternaria alternate),茄链格孢(Alternaria solani),细极链格孢(Alternaria tenuis),假单胞菌属(Pseudomonas spp.),丁香假单胞菌番茄致病变种(Pseudomonas syringae pv.Tomato),疫霉属(Phytophthora spp.),致病疫霉(Phytophthora 
infestans),寄生疫霉(Phytophthora parasitica),大豆疫霉菌(Phytophthora sojae),辣椒疫霉菌(Phytophthora capsici),肉桂疫霉菌(Phytophthora cinnamon),草莓疫霉菌(Phytophthora fragariae),疫霉属(Phytophthora spp.),栎树疫霉菌(Phytophthora ramorum),棕榈疫霉菌(Phytophthora palmivara),烟草疫霉菌(Phytophthora 
nicotianae),层锈菌属(Phakopsora spp.),豆薯层锈菌(Phakopsora pachyrhizi),山马蝗层锈菌(Phakopsora meibomiae),曲霉(Aspergillus spp.),黄曲霉(Aspergillus flavus),黑曲霉(Aspergillus niger),单孢锈菌属(Uromyces spp.),疣顶单孢锈菌(Uromyces appendiculatus),枝孢属(Cladosporium spp.),多主枝孢(Cladosporium herbarum),根霉属(Rhizopus spp.),隐根根霉(Rhizopus arrhizus),青霉属
(Penicillium spp.),丝核菌属(Rhizoctonia spp.),立枯丝核菌(Rhizoctonia solani),玉蜀黍丝核菌(Rhizoctonia zeae),稻枯斑丝核菌(Rhizoctonia oryzae),博爱丝核菌(Rhizoctonia caritae),小麦纹枯病菌(Rhizoctonia cerealis),番红花枯病菌(Rhizoctonia crocorum),草莓花枯病菌(Rhizoctonia fragariae),多枝丝核菌(Rhizoctonia ramicola),灌木枯病菌(Rhizoctonia rubi),豆类丝核菌(Rhizoctonia leguminicola),豆类壳球孢(Macrophomina phaseolina),稻瘟病菌(Magnaorthe oryzae),球腔菌属(Mycosphaerella spp.),灰霉菌(Mycosphaerella graminocola),香蕉黑条叶斑菌(Mycosphaerella fijiensis(黑色叶斑病)),苹果球腔菌(Mycosphaerella pomi),柑橘球腔菌(Mycosphaerella citri),稻瘟菌属(Magnaporthe spp.),稻瘟菌(Magnaporthe grisea),褐腐病菌属(Monilinia spp.),桃褐腐病菌(Monilinia fruticola),Monilinia vacciniicorymbosi,核果链核盘菌(Monilinia laxa),刺盘孢属(Colletotrichum spp.),炭疽病菌(Colletotrichum gloeosporiodes),尖孢炭疽菌(Colletotrichum acutatum),白炭疽病菌(Colletotrichum Candidum),间座壳属(Diaporthe spp.),柑桔间座壳(Diaporthe citri),棒孢菌属(Corynespora spp.),山扁豆生棒孢(Corynespora Cassiicola),胶锈菌属(Gymnosporangium spp.),胶锈菌(Gymnosporangium juniperi-virginianae),煤点病菌属(Schizothyrium spp.),苹果煤点病菌(Schizothyrium pomi),粘壳孢菌属(Gloeodes spp.),仁果粘壳孢菌(Gloeodes pomigena),葡萄座腔菌属(Botryosphaeria spp.),杨树溃疡病菌(Botryosphaeria dothidea),明孢盘菌属(Neofabraea spp.),穿孔病菌属(Wilsonomyces spp.),穿孔病菌(Wilsonomyces carpophilus),单丝壳属(Sphaerotheca spp.),白斑病菌(Sphaerotheca macularis),蔷薇单丝壳菌(Sphaerotheca pannosa),白粉菌属(Erysiphe spp.),壳多孢属(Stagonospora spp.),颖枯壳多孢(Stagonospora nodorum),腐霉菌(Pythium spp.),终极腐霉(Pythium ultimum),瓜果腐霉(Pythium aphanidermatum),不规则腐霉(Pythium irregularum),胡萝卜腐霉(Pythium ulosum),鲁特里亚腐霉(Pythium lutriarium),猝倒病腐霉(Pythium sylvatium),黑星菌属(Venturia spp),苹果黑星菌(Venturia inaequalis),轮枝孢属(Verticillium spp.),黑粉菌属(Ustilago spp.),裸黑粉菌(Ustilago nuda),玉米黑粉菌(Ustilago maydis),甘蔗黑粉菌(Ustilago scitaminea),麦角菌属(Claviceps spp.),麦角菌(Claviceps puprrea),腥黑粉菌属(Tilletia spp.),小麦腥黑粉菌(Tilletia tritici),亚腥黑粉菌(Tilletia laevis),刚毛腥黑粉菌(Tilletia horrid),小麦矮化腥黑粉菌(Tilletia controversa),茎点霉菌属(Phoma spp.),大豆茎点霉菌(Phoma glycinicola),棉花茎点霉菌(Phoma exigua),芸苔茎点霉菌(Phoma lingam),禾旋孢腔菌(Cocliobolus sativus),燕麦全蚀病菌(Gaeumanomyces gaminis),毛盘孢属(Colleototricum spp.),喙孢属(Rhychosporium spp.),黑麦喙孢(Rhychosporium secalis),蠕孢菌属(Biopolaris spp.),长蠕孢菌属(Helminthosporium spp.),黑麦长蠕孢菌(Helminthosporium secalis),玉米长蠕孢菌(Helminthosporium maydis),马铃薯长蠕孢菌(Helminthosporium solai)或小麦褐斑长蠕孢菌
(Helminthosporium tritici-repentis)或其组合。
80.如权利要求77所述的方法,其中改变的时间间隔为隔开5~7天。
81.如权利要求77所述的方法,其中,第一和第二组合物递送至植物的叶子、植物的果实、或植物的花。
82.如权利要求77所述的方法,其中所述适于赋予保护植物不受或降低病原性感染的量是约1.0×1010CFU/ha~约1.0×1014CFU/ha的解淀粉芽孢杆菌RTI472。
83.如权利要求77所述的方法,其中,所述化学活性试剂包括甲氧基丙烯酸酯、三唑、粉唑醇、戊唑醇、丙硫菌唑、氟环唑、氟吡菌酰胺、百菌清、甲基硫菌灵、氢氧化铜杀真菌剂、EDBC基杀真菌剂、代森锰锌、琥珀酸脱氢酶(SDHI)杀真菌剂、联苯吡菌胺、异菌脲、烯酰吗啉或霜霉灭(valifenalate)的一种或组合。
84.如权利要求83所述的方法,其中,所述化学活性试剂包括氟吡菌酰胺加戊唑醇,以及代替百菌清杀真菌剂的递送的含有RTI472第一组合物的递送。
85.如权利要求83所述的方法,其中所述植物包括葫芦,且所述病原体感染由白粉病引起。
86.如权利要求83所述的方法,其中,所述化学活性试剂包括甲基硫菌灵杀真菌剂,以及代替丙硫菌唑杀真菌剂的递送的含有RTI472第一组合物的递送。
87.如权利要求83所述的方法,其中,所述化学活性试剂包括氢氧化铜杀真菌剂,以及代替百菌清杀真菌剂的递送的含有RTI472第一组合物的递送。
88.如权利要求83所述的方法,其中,所述第一组合物还包含载体、表面活性剂、分散剂或酵母提取物中的一种或它们的组合。
89.一种有益于植物生长的组合物,所述组合物包括:
以ATCC第PTA-121166号保藏的解淀粉芽孢杆菌RTI472、或具有所有其识别特征的突变体的生物纯培养物;以及联苯菊酯杀昆虫剂。
90.如权利要求89所述的组合物,其中,所述组合物在可用作液体肥料的制剂中。
91.如权利要求89所述的组合物,其中,所述组合物还包含水合硅酸铝镁以及至少一种分散剂。
92.如权利要求89所述的组合物,其中,所述联苯菊酯杀昆虫剂的浓度范围为0.1g/ml至0.2g/ml。
93.如权利要求89所述的组合物,其中,所述联苯菊酯杀昆虫剂的浓度为约0.1715g/ml。
94.一种有益于植物生长的组合物,所述组合物包括:一种有利于植物生长的组合物,所述组合物包括:以ATCC第PTA-121166号保藏的解淀粉芽孢杆菌RTI472、或具有所有其识别特征的突变体的生物纯培养物;以及包括来自白羽扇豆的提取物、BLAD多肽、或BLAD多肽的片段的一种或组合的杀真菌剂。
95.如权利要求94所述的组合物,其中,所述组合物包含约20%的BLAD多肽或BLAD多肽的片段。
96.一种产品,其包含:
第一组分,其包括以ATCC第PTA-121166号保藏的解淀粉芽孢杆菌RTI472、或具有所有其识别特征的突变体的生物纯培养物;
第二组分,其包括微生物、生物或化学杀昆虫剂、杀真菌剂、杀线虫剂、杀细菌剂、除草剂、植物提取物、植物生长调节剂或肥料的一种或组合,其中所述第一和第二组分分开包装,且每个组分为适于利于植物生长和/或保护易受影响的植物不受病原性感染的量;和使用说明,用于将所述第一组合物与第二组合物的组合以适于促进植物生长的量递送至:植物的叶、植物的皮、植物的果实、植物的花、植物的种子、植物的根、植物的插条、植物的嫁接苗、植物的愈伤组织;植物周围的土壤或生长培养基;在将植物种子播种在土壤或生长培养基中之前的土壤或生长培养基;或在将植物、植物的插枝、植物嫁接苗、或植物愈伤组织种植在土壤或生长培养基中之前的土壤或生长培养基。
97.如权利要求96所述的产品,其中,所述杀昆虫剂是氟吡菌酰胺、戊唑醇、百菌清、甲基硫菌灵、丙硫菌唑、咯菌腈、甲霜灵、环丙吡菌胺、吡唑羧酰胺和氢氧化铜的一种或多种的组合。
98.如权利要求96所述的产品,其中,所述第一组合物还包含载体、表面活性剂、分散剂或酵母提取物中的一种或它们的组合。
99.如权利要求96所述的产品,其中,所述第一和第二组合物各自的形式为液体、粉尘、可传播颗粒(spreadable granule)、干燥的可润湿粉末或干燥的可润湿颗粒。
100.如权利要求96所述的产品,其中,所述第一组合物的形式为液体,并且解淀粉芽孢杆菌RTI472的浓度为约1.0×108CFU/ml~约1.0×1012CFU/ml。
101.如权利要求96所述的产品,其中所述第一组合物可以是粉尘、干燥的可润湿粉末、可传播颗粒、或干燥的可润湿颗粒的形式,并且解淀粉芽孢杆菌RTI472的浓度为约1.0×
108CFU/g~约1.0×1012CFU/g。
102.如权利要求96所述的产品,其中所述第一组合物的形式为油分散体,并且解淀粉芽孢杆菌RTI472的浓度为约1.0×108CFU/ml~约1.0×1012CFU/ml。
103.一种组合物,其包含:
一种或多种具有有利于植物生长和/或植物健康的性能的微生物的生物纯培养物;以及酵母提取物,用于施用至植物以利于植物生长和/或保护易受影响的植物不受病原性感染。
104.如权利要求103所述的组合物,所述组合物还包含载体、表面活性剂或分散剂中的一种或它们的组合。
105.如权利要求103所述的组合物,其还包括微生物、生物或化学杀昆虫剂、杀真菌剂、杀线虫剂、杀细菌剂、除草剂、植物提取物、植物生长调节剂或肥料的一种或组合。
106.如权利要求103所述的组合物,其中,所述微生物包括真菌类。
107.如权利要求103所述的组合物,其中,所述微生物包括细菌类。
108.如权利要求103所述的组合物,其中,所述微生物包括枯草芽孢杆属微生物。
109.如权利要求103所述的组合物,其中,所述微生物包括解淀粉芽孢杆菌。

说明书全文

淀粉芽孢杆菌RTI472组合物和用于利于植物生长和治疗

疾病的方法

[0001] 相关申请交叉参考
[0002] 本申请要求2014年12月29日提交的美国临时专利申请第62/097,207号的权益,其公开通过引用全文纳入本文。

技术领域

[0003] 本发明公开的主题涉及用于施用于植物叶子、植物果实和花、植物种子和根、以及植物周围的土壤以利于植物生长以及治疗植物疾病的包括解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)RTI472的分离株的组合物。

背景技术

[0004] 已知在土壤中存在许多对植物生长和健康有有益效果的生物,其与植物一起生活,尤其在根部区域(植物生长促进根瘤菌(Plant Growth Promoting Rhizobacteria)“PGPR”),或作为内生菌寄居在植物内。它们的有益的植物生长促进性质包括氮固定、螯合、磷酸盐的溶解、非有益微生物的抑制、抗虫、诱导系统抗性(ISR)、系统获得性抗性(SAR)、土壤中的植物材料的分解以提高有用的土壤有机物,以及刺激植物生长、发育并响应干旱等环境应激的植物激素(如吲哚乙酸(IAA)、乙偶姻和2,3-丁二醇等)的合成。此外,这些微生物可通过分解前体分子1-基环丙烷-1-羧酸酯(ACC)来干扰植物的乙烯应激反应,从而刺激植物生长并减缓果实成熟。这些有益的微生物可改善土壤的品质、植物的生长、产率、和作物的品质。多种微生物表现出这样的对控制植物疾病有用的生物学活性。与合成的肥料杀虫剂相比,这样的生物杀虫剂(活生物体和这些活生物体天然产生的化合物)更安全和更生物可降解。
[0005] 真菌植物病原体,包括但不限于葡萄孢属(Botrytis spp.)(例如灰葡萄孢(Botrytis cinerea))、镰孢属(Fusarium spp.)(例如尖镰孢(F.oxysporum)和禾谷镰孢菌(F.graminearum))、丝核菌属(Rhizoctonia spp.)(例如立枯丝核菌(R.solani))、稻瘟菌属(Magnaporthe spp.)、球腔菌属(Mycosphaerella spp.)、柄锈菌属(Puccinia spp.)(例如隐匿柄锈菌(P.recondita))、疫霉属(Phytopthora spp.)和层锈菌属(Phakopsora spp.)(例如豆薯层锈菌(P.pachyrhizi))是一类植物有害生物,可在农业和园艺行业中导致严重的经济损失。化学试剂可被用于控制真菌植物病原体,但化学试剂的使用具有一些的缺点,包括高成本、缺乏功效、出现真菌的抗性菌株、以及不希望的环境影响。另外,这些化学处理有不加区别的倾向,并可能在该处理所针对的植物病原体以外,对有益的细菌、真菌、和节肢动物产生不良影响。第二种植物有害生物是细菌病原体,包括但不限于欧文氏菌属(Erwinia spp.)(如菊欧文氏菌(Erwinia chrysanthemi))、泛菌属(Pantoea spp.)(如柠檬泛菌(P.citrea))、黄单胞菌属(Xanthomonas)(例如野油菜黄单胞菌(Xanthomonas campestris))、假单胞菌属(Pseudomonas spp.)(如丁香假单胞菌(P.syringae))和青枯菌属(Ralstonia spp.)(如茄科青枯菌(R.soleacearum)),可在农业和园艺行业中导致严重的经济损失。与病原真菌类似,使用化学试剂处理这些细菌病原体具有一些缺点。病毒和类病毒生物体包括第三种植物致病剂,其难以控制,但细菌微生物可通过诱导系统抗性(ISR)向植物提供抗性。因此,需要可被用作生物肥料和/或生物杀虫剂以控制病原真菌、病毒、和细菌的微生物,且在改善农业的可持续性中需求旺盛。最后一种植物病原体包括植物病原线虫和昆虫,其导致植物的严重损害和损失。
[0006] 已报道了一些作为生物防治株的芽孢杆菌属(species Bacillus)的成员,并且部分被用于商业产品(Joseph W.Kloepper等,2004,Phytopathology Vol.94,No.11,1259-1266)。例如,目前在商业生物防治产品中使用的菌株包括:短小芽孢杆菌(Bacillus pumilus)株QST2808,作为活性成分用于SONATA和BALLAD-PLUS,BAYER CROP SCIENCE生产;
短小芽孢杆菌株GB34,作为活性成分用于YIELDSHIELD,BAYER CROP SCIENCE生产;枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)株QST713,作为SERENADE的活性成分使用,BAYER CROP SCIENCE生产;枯草芽孢杆菌株GBO3,作为活性成分用于KODIAK和SYSTEM3,HELENA CHEMICAL COMPANY生产。各种苏金芽孢杆菌(Bacillus thuringiensis)和坚强芽孢杆菌(Bacillus firmus)的菌株被用作抗线虫和媒介昆虫的生物防治剂,这些菌株作为许多市售生物防治产品的基础,包括BAYER CROP SCIENCE生产的NORTICA和PONCHO-VOTIVO。另外,目前在商业的生物刺激素产品中使用的芽孢杆菌菌株包括:解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)菌株FZB42作为活性成分用于ABiTEP GmbH生产的RHIZOVITAL 42,以及作为全细胞(包括其发酵提取物)被包括在生物刺激剂产品(如JHBiotech Inc生产的FULZYME)中各种其他枯草芽孢杆菌。
[0007] 本发明公开的主题提供微生物组合物及其利于植物生长和疾病预防和控制的方法。

发明内容

[0008] 在一个实施方式中,提供一种组合物,其包括以ATCC第PTA-121166号保藏的解淀粉芽孢杆菌RTI472、或具有所有其识别特征的突变体的生物纯培养物,用于施用于植物以利于植物生长和/或保护易受影响的植物不受病原性感染。
[0009] 在一个实施方式中,提供一种用组合物包覆的植物种子,所述组合物包括以适合利于植物生长和/或保护易受影响的植物不受病原性感染的量存在的以ATCC第PTA-121166号保藏的解淀粉芽孢杆菌RTI472、或具有所有其识别特征的突变体的生物纯培养物的孢子。
[0010] 在一个实施方式中,提供一种组合物以利于植物生长和/或保护易受影响的植物不受病原性感染,所述组合物包括:适于利于植物生长和/或保护易受影响的植物不受病原性感染的量的以ATCC第PTA-121166号保藏的解淀粉芽孢杆菌RTI472、或具有所有其识别特征的突变体的生物纯培养物;以及适于利于植物生长和/或保护易受影响的植物不受病原性感染的量的微生物、生物或化学杀昆虫剂、杀真菌剂、杀线虫剂、杀细菌剂、除草剂植物提取物、植物生长调节剂、或肥料的一种或组合。
[0011] 在一个实施方式中,提供一种利于植物生长和/或保护易受影响的植物不受病原性感染的方法,所述方法包括将包括以ATCC第PTA-121166号保藏的解淀粉芽孢杆菌RTI472、或具有所有其识别特征的突变体的生物纯培养物的组合物以适于利于植物生长和/或保护易受影响的植物不受病原性感染的量递送至:植物的叶子、植物的皮、植物的果实、植物的花、植物的种子、植物的根、植物的插条、植物的嫁接苗、植物的愈伤组织;植物周围的土壤或生长培养基;在将植物种子播种在土壤或生长培养基中之前的土壤或生长培养基;或在将植物、植物的插枝、植物嫁接苗、或植物愈伤组织种植在土壤或生长培养基中之前的土壤或生长培养基。
[0012] 在一个实施方式中,提供一种利于植物生长和/或保护易受影响的植物不受病原性感染的方法,所述方法包括将一种组合物递送至:至植物的叶子、植物的皮、植物的果实、植物的花、植物的种子、植物的根、植物的插条、植物的嫁接苗、植物的愈伤组织;植物周围的土壤或生长培养基;在将植物种子播种在土壤或生长培养基中之前的土壤或生长培养基;或在将植物、植物的插枝、植物嫁接苗、或植物愈伤组织种植在土壤或生长培养基中之前的土壤或生长培养基;所述组合物包括适于利于植物生长和/或保护不受病原性感染的量的以ATCC第PTA-121166号保藏的解淀粉芽孢杆菌RTI472、或具有所有其识别特征的突变体的生物纯培养物;以及适于利于植物生长和/或保护不受病原性感染的量的微生物、生物或化学杀昆虫剂、杀真菌剂、杀线虫剂、杀细菌剂、除草剂、植物提取物、植物生长调节剂、或肥料的一种或组合。
[0013] 在一个实施方式中,提供一种利于植物生长和/或保护易受影响的植物不受病原性感染的方法,所述方法包括将第一组合物和第二组合物的组合递送至:植物的叶子、植物的皮、植物的果实、植物的花、植物的种子、植物的根、植物的插条、植物的嫁接苗、植物的愈伤组织;植物周围的土壤或生长培养基;在将植物种子播种在土壤或生长培养基中之前的土壤或生长培养基;或在将植物、植物的插枝、植物嫁接苗、或植物愈伤组织种植在土壤或生长培养基中之前的土壤或生长培养基;所述第一组合物包括适于利于植物生长和/或保护易受影响的植物不受病原性感染的量的以ATCC第PTA-121166号保藏的解淀粉芽孢杆菌RTI472、或具有所有其识别特征的突变体的生物纯培养物;且第二组合物包括适于利于植物生长和/或保护易受影响的植物不受病原性感染的量的微生物、生物或化学杀昆虫剂、杀真菌剂、杀线虫剂、杀细菌剂、除草剂、植物提取物、植物生长调节剂或肥料的一种或组合。
[0014] 在一个实施方式中,提供一种利于植物生长和/或保护易受影响的植物不受病原性感染的方法,所述方法包括:
[0015] 在合适的生长培养基中种植植物的种子或使植物的营养插条/组织再生,其中用含有以ATCC第PTA-121166号保藏的解淀粉芽孢杆菌RTI472、或具有所有其识别特征的突变体的生物纯培养物的组合物包覆种子或接种营养插条/组织,其中,赋予利于源自种子或营养插条/组织的植物的生长和/或保护其不受病原性感染。
[0016] 在一个实施方式中,提供一种通过赋予保护易受影响的植物不受或降低病原性感染的方式利于植物生长,同时最小化对治疗抵抗的累积的方法,所述方法包括以单独施用和改变的时间间隔的方式将第一组合物和第二组合物递送至易受影响的植物,其中第一和第二组合物都以适于赋予保护植物不受或降低病原性感染的量递送,其中第一组合物包括以ATCC第PTA-121166号保藏的解淀粉芽孢杆菌RTI472、或具有所有其识别特征的突变体的生物纯培养物,且其中第二组合物包括具有抗真菌或抗细菌性能的化学活性试剂的一种或多种,且其中第一和第二组合物以改变的时间间隔的方式递送至植物的叶子、植物的皮、植物的果实、植物的花、植物的种子、植物的根、植物的插条、植物的嫁接苗、植物的愈伤组织或植物周围的土壤或生长培养基的一种或组合,其中赋予保护不受和/或降低病原性感染所需的化学活性试剂的总量减少且对治疗抵抗的累积被最小化。
[0017] 在本发明的一种实施方式中,提供一种组合物,所述组合物以适于赋予植物生长益处或保护易受影响的植物不受病原性感染的量包括分离的芬枯草菌素MA化合物、分离的芬枯草菌素MB化合物、分离的芬枯草菌素MC化合物、分离的脱羟基芬枯草菌素MA化合物、分离的脱羟基芬枯草菌素MB化合物、分离的芬枯草菌素H化合物、分离的芬枯草菌素I化合物、以及分离的脱羟基芬枯草菌素I化合物的至少一种,所述芬枯草菌素和脱羟基芬枯草菌素化合物具有式:
[0018]
[0019] 其中R为OH,n为8~20的范围,FA为线性、异构体、或反异构体且:芬枯草菌素MA中X1为Ala,X2为Thr,且X3为Met;芬枯草菌素MB中X1为Val,X2为Thr,且X3为Met;芬枯草菌素MC中X1为Aba,X2为Thr,且X3为Met;芬枯草菌素H中X1为Val,X2为Thr,且X3为Hcy;且芬枯草菌素I中X1为Ile,X2为Thr,且X3为Ile;或其中R为H,n为8~20的范围,FA为线性、异构体、或反异构体,且:脱羟基芬枯草菌素MA中X1为Ala,X2为Thr,且X3为Met;脱羟基芬枯草菌素MB中X1为Val,X2为Thr,且X3为Met;且脱羟基芬枯草菌素I中X1为Ile,X2为Thr,且X3为Ile。
[0020] 在一个实施方式中,提供一种组合物以适于保护易受影响的植物不受病原性感染的量包括具有3341.6Da的分子量的分离的Ericin(埃利新)S化合物和具有2985.4Da的分子量的分离的Ericin A化合物中的一种或两者。
[0021] 在一个实施方式中,提供一种以ATCC第PTA-121166号保藏的解淀粉芽孢杆菌RTI472的生物纯培养物的提取物,所述提取物包括芬枯草菌素-MA、-MB、-MC、-H、和-I化合物以及脱羟基芬枯草菌素-MA、-MB、和-I化合物以及表XVII列出的额外的类芬枯草菌素和类脱羟基芬枯草菌素化合物的一种或组合。
[0022] 在一个实施方式中,提供一种解淀粉芽孢杆菌的生物纯培养物的提取物,所述提取物包括具有3341.6Da的分子量的分离的Ericin S化合物或具有2985.4Da的分子量的分离的Ericin A化合物的至少一种。
[0023] 在一个实施方式中提供一种用于促进植物生长的组合物,该组合物包含:以ATCC第PTA-121166号保藏的解淀粉芽孢杆菌RTI472、或具有所有其识别特征的突变体的生物纯培养物;以及联苯菊酯杀昆虫剂。
[0024] 在一个实施方式中提供一种用于促进植物生长的组合物,该组合物包含:以ATCC第PTA-121166号保藏的解淀粉芽孢杆菌RTI472、或具有所有其识别特征的突变体的生物纯培养物;以及包括来自白羽扇豆(Lupinus albus)的提取物、BLAD多肽、或BLAD多肽的片段的一种或组合的杀真菌剂。
[0025] 在一个实施方式中提供一种产品,该产品包含:包括以ATCC第PTA-121166号保藏的解淀粉芽孢杆菌RTI472、或具有所有其识别特征的突变体的生物纯培养物的第一组分;包括微生物、生物或化学杀昆虫剂、杀真菌剂、杀线虫剂、杀细菌剂、除草剂、植物提取物、植物生长调节剂或肥料的一种或组合的第二组分,其中第一和第二组分分开包装,且每个组分为适于利于植物生长和/或保护易受影响的植物不受病原性感染的量;以及任选的使用说明,用于以适于有利于植物生长的量递送第一和第二组合物的组合至:植物的叶子、植物的皮、植物的果实、植物的花、植物的种子、植物的根、植物的插条、植物的嫁接苗、植物的愈伤组织;植物周围的土壤或生长培养基;在将植物种子播种在土壤或生长培养基中之前的土壤或生长培养基;或在将植物、植物的插枝、植物嫁接苗、或植物愈伤组织种植在土壤或生长培养基中之前的土壤或生长培养基。
[0026] 在一个实施方式中提供一种组合物,该产品包含:一种或多种具有有利于植物生长和/或植物健康的性能的微生物的生物纯培养物;以及酵母提取物,用于施用至植物以利于植物生长和/或保护易受影响的植物不受病原性感染。附图说明
[0027] 以上概括地描述了本发明公开的主题,将结合以下附图进行描述。
[0028] 图1示出了将根据本发明一个或多个实施方式的包含解淀粉芽孢杆菌菌株RTI472(顶部)中发现的羊毛硫氨酸抗生素(lantibiotic)生物合成操纵子及其周围的基因组织,与两种解淀粉芽孢杆菌参照菌株的相应区域,解淀粉芽孢杆菌FZB42(中部)和解淀粉芽孢杆菌TrigoCor1448(底部)进行对比的示意图,与RTI472的序列相同性百分数显示在每个箭头下面。进一步分析发现,生产MW=3341.6Da的Ericin S分子和MW=2985.4Da的Ericin A分子的羊毛硫肽(lantipeptide)合成操纵子对于解淀粉芽孢杆菌菌株而言是独特的。
[0029] 图2A是解淀粉芽孢杆菌RTI472菌株和未公开的称为“FB005”的解淀粉芽孢杆菌菌株的代谢物概况的图表,显示出RTI472菌株生产Ericin S分子(MW=3341.6Da)和Ericin A分子(MW=2985.4Da),而FB005菌株中没有探测到Ericin A或Ericin S。图2B是RTI472菌株鉴定的羊毛硫肽生物合成簇和和7个参照解淀粉芽孢杆菌基因组的比较表,显示出7个参照解淀粉芽孢杆菌基因组的区域中的同线性(synteny)缺失。该羊毛硫肽生物合成簇在RTI472菌株中被鉴定为Ericin S生物合成簇,同时7个参照菌株中没有一个具有功能性Ericin S生物合成簇。图2C是RTI472菌株和7个参照解淀粉芽孢杆菌基因组中的羊毛硫肽生物合成簇鉴定的比较的表,显示出7个参照解淀粉芽孢杆菌基因组的区域中的同线性(synteny)丧失。该羊毛硫肽生物合成簇在RTI472菌株中被鉴定为Ericin S生物合成簇,而7个参照菌株中没有一个具有功能性Ericin S生物合成簇。这些附图显示出根据本发明的一个或多个实施方式的代谢物概况,以及在RTI472菌株中被鉴定为Ericin S生物合成簇而在其他参照解淀粉芽孢杆菌菌株中没有出现的羊毛硫肽生物合成簇之间的对比。
[0030] 图3是柱状图,显示根据本发明的一个或多个实施方式在进行以下各处理后,感染豆锈病(疣顶单胞锈菌(Uromyces appendiculatus))10天后后y轴上的疾病控制%(平均):废发酵肉汤(SFB)(使用条件1×108cfu/ml)中的RTI472孢子,TACTIC(对全部制剂以
0.1875%施用,并用作空白对照),戊唑醇(以50g活性成分/ha施用),百菌清(使用条件500g活性成分/ha),SERENADE OPTIMUM(使用条件1×108cfu/ml),以及SERENADE OPTIMUM(使用条件4x108cfu/ml)。未处理的对照组结果是23%疾病。带有相同字母的值表示没有显著差异(p=0.10)。
[0031] 图4是柱状图,显示根据本发明的一个或多个实施方式在用以下各方式处理后,被放置在被扩散叉丝壳(Microsphaera diffusa)感染的大豆植株附近9天后的y轴上的疾病控制%(平均):废发酵肉汤(SFB)(使用条件1×108cfu/ml)中的RTI472孢子,SERENADE OPTIMUM(使用条件1×108cfu/ml),以及HORIZON(戊唑醇使用条件a 50g活性成分/ha)。另外,每个处理都作为佐剂包括TACTIC(使用条件0.1875%)。未处理的对照组结果是70%疾病严重程度。带有相同字母的值表示没有显著差异(p=0.10)。
[0032] 图5是柱状图,显示进行以下各处理后,感染胡椒灰葡萄孢病(灰葡萄孢(Botrytis cinerea))7天后y轴上的疾病控制%(平均):废发酵肉汤(SFB)(使用条件1×108cfu/ml)中的RTI472孢子,TACTIC(对全部制剂以0.1875%施用,并用作空白对照),戊唑醇(以50g活性成分/ha施用),百菌清(使用条件500g活性成分/ha),SERENADE OPTIMUM(使用条件1×108cfu/ml),以及SERENADE OPTIMUM(使用条件4x108cfu/ml)。根据本发明的一个或多个实施方式,未处理的对照组结果是6%疾病。带有相同字母的值表示没有显著差异(p=0.10)。
[0033] 图6是柱状图,显示根据本发明的一个或多个实施方式进行以下各处理后,感染胡椒灰葡萄孢病(灰葡萄孢(Botrytis cinerea))3天后的y轴上的疾病控制%(平均):废发酵肉汤(SFB)中的RTI472孢子(使用条件2.5×106、1×107、2.5×107、1×108、和2.5×108cfu/ml)以及SERENADE OPTIMUM(使用条件2.5×106、1×107、2.5×107、1×108、和2.5×108cfu/ml),与TACTIC(对全部制剂以0.1875%施用,并用作空白对照)、SERENADEOPTIMUM(使用条件4x108)、戊唑醇(以50g活性成分/ha施用)进行对比。未处理的对照组结果是30%疾病。带有相同字母的值表示没有显著差异(p=0.10)。
[0034] 图7是柱状图,显示根据本发明的一个或多个实施方式进行以下各处理后,感染增加量的胡椒灰葡萄孢病(灰葡萄孢(Botrytis cinerea))4天后的y轴上的疾病控制%(平均):废发酵肉汤(SFB)中的RTI472孢子(使用条件1.0x108cfu/ml)以及SERENADE OPTIMUM(使用条件1×108和4x108cfu/ml),与TACTIC(对全部制剂以0.1875%施用,并用作空白对照)、戊唑醇(HORIZON;以50g活性成分/ha施用)进行对比。随着增加量的灰葡萄孢(conidia/ml)感染,未处理的对照组的疾病百分数分别为50k=15%,100k=30%,500k=65%,1M=65%,以及2M=65%。带有相同字母的值表示没有显著差异(p=0.10)。
[0035] 图8A是根据本发明的一个或多个实施方式在用SERENADE OPTIMUM(使用条件1×108cfu/ml)处理后,用50k分生孢子/ml的胡椒灰葡萄孢病(灰葡萄孢)感染胡椒植物4天后的图像。图8B是根据本发明的一个或多个实施方式在用SERENADE OPTIMUM(使用条件1×
108cfu/ml)处理后,用50k分生孢子/ml的废发酵肉汤(SFB)中的RTI472孢子感染胡椒植物4天后的图像。图8C是根据本发明的一个或多个实施方式在用TACTIC(对全部制剂以
0.1875%施用,并用作空白对照)处理后,用50k分生孢子/ml的胡椒灰葡萄孢病(灰葡萄孢)感染胡椒植物4天后的图像。图8D是根据本发明的一个或多个实施方式在用感染的对照处理后,用50k分生孢子/ml的胡椒灰葡萄孢病(灰葡萄孢)感染胡椒植物4天后的图像。
[0036] 图9A是根据本发明的一个或多个实施方式在用SERENADE OPTIMUM(使用条件1×108cfu/ml)处理后,用100k分生孢子/ml的胡椒灰葡萄孢病(灰葡萄孢)感染胡椒植物4天后的图像。图9B是根据本发明的一个或多个实施方式在用废发酵肉汤(SFB)中的RTI472孢子(使用条件1×108cfu/ml)处理后,用100k分生孢子/ml的胡椒灰葡萄孢病(灰葡萄孢)感染4天后的图像。图9C是根据本发明的一个或多个实施方式在用TACTIC(对全部制剂以
0.1875%施用,并用作空白对照)处理后,用100k分生孢子/ml的胡椒灰葡萄孢病(灰葡萄孢)感染胡椒植物4天后的图像。图9D是根据本发明的一个或多个实施方式在用感染的对照处理后,用100k分生孢子/ml的胡椒灰葡萄孢病(灰葡萄孢)感染胡椒植物4天后的图像。
[0037] 图10A是根据本发明的一个或多个实施方式在用SERENADE OPTIMUM(使用条件1×108cfu/ml)处理后,用500k分生孢子/ml的胡椒灰葡萄孢病(灰葡萄孢)感染胡椒植物4天后的图像。图10B是根据本发明的一个或多个实施方式在用废发酵肉汤(SFB)中的RTI472孢子(使用条件1×108cfu/ml)处理后,用500k分生孢子/ml的胡椒灰葡萄孢病(灰葡萄孢)感染胡椒植物4天后的图像。图10C是根据本发明的一个或多个实施方式在用TACTIC(对全部制剂以0.1875%施用,并用作空白对照)处理后,用500k分生孢子/ml的胡椒灰葡萄孢病(灰葡萄孢)感染胡椒植物4天后的图像。图10D是根据本发明的一个或多个实施方式在用感染的对照处理后,用500k分生孢子/ml的胡椒灰葡萄孢病(灰葡萄孢)感染胡椒植物4天后的图像。
[0038] 图11A是根据本发明的一个或多个实施方式在用SERENADE OPTIMUM(使用条件1×108cfu/ml)处理后,用1M分生孢子/ml的胡椒灰葡萄孢病(灰葡萄孢)感染胡椒植物4天后的图像。图11B是根据本发明的一个或多个实施方式用废发酵肉汤(SFB)中的RTI472孢子(使用条件1×108cfu/ml)处理后,用1M分生孢子/ml的胡椒灰葡萄孢病(灰葡萄孢)感染胡椒植物4天后的图像。图11C是根据本发明的一个或多个实施方式在用TACTIC(对全部制剂以
0.1875%施用,并用作空白对照)处理后,用1M分生孢子/ml的胡椒灰葡萄孢病(灰葡萄孢)感染胡椒植物4天后的图像。图11D是根据本发明的一个或多个实施方式在用感染的对照处理后,用1M分生孢子/ml的胡椒灰葡萄孢病(灰葡萄孢)感染胡椒植物4天后的图像。
[0039] 图12A是根据本发明的一个或多个实施方式在用SERENADE OPTIMUM(使用条件1×108cfu/ml)处理后,用2M分生孢子/ml的胡椒灰葡萄孢病(灰葡萄孢)感染胡椒植物4天后的图像。图12B是根据本发明的一个或多个实施方式用废发酵肉汤(SFB)中的RTI472孢子(使用条件1×108cfu/ml)处理后,用2M分生孢子/ml的胡椒灰葡萄孢病(灰葡萄孢)感染胡椒植物4天后的图像。图12C是根据本发明的一个或多个实施方式在用TACTIC(对全部制剂以
0.1875%施用,并用作空白对照)处理后,用2M分生孢子/ml的胡椒灰葡萄孢病(灰葡萄孢)感染胡椒植物4天后的图像。图12D是根据本发明的一个或多个实施方式在用感染的对照处理后,用2M分生孢子/ml的胡椒灰葡萄孢病(灰葡萄孢)感染胡椒植物4天后的图像。
[0040] 图13显示根据本发明的一个或多个实施方式,四个独立的草莓田间试验中未处理的对照(“UT”)中被灰葡萄孢病原体感染的果实的百分比的图,以确定RTI472菌株对该病原体的拮抗。
[0041] 图14是表示早先报道的包括解淀粉芽孢杆菌的微生物所生产的两种芬枯草菌素型和脱羟基芬枯草菌素型环状脂肽,以及根据本发明的一种或多种实施方式用解淀粉芽孢杆菌RTI472分离株所生产的新鉴定的(用粗体显示)芬枯草菌素和脱羟基芬枯草菌素型分子的示意图。
[0042] 图15是显示根据本发明的一个或多个实施方式酸沉淀后从RTI472废发酵肉汤(SFB)中回收的脂肽的百分数的图。术语“472-AP-沉淀”和“472-AP-上清液”分别指离心的SFB酸沉淀后获得的重悬的沉淀和上清液。百分数基于每个来自RTI472废发酵肉汤(472-SFB)的脂肽的累积离子丰度进行计算和比较。
[0043] 图16A显示点样在含有RTI472废发酵肉汤(472-SFB)的869琼脂平板上的灰葡萄孢。图16B显示点样在含有酸沉淀加离心(472-AP-沉淀)后获得的重悬的沉淀物质的869琼脂平板上的灰葡萄孢。图16C显示点样在含有RTI472废发酵肉汤(472-SFB)的869琼脂平板上的禾谷镰孢菌(Fusarium graminearum)。图16D显示点样在酸沉淀加离心(472-AP-沉淀)后获得的重悬的沉淀物质的869琼脂平板上的禾谷镰孢菌。图16A-16D是根据本发明的一个或多个实施方式的平板试验图像,其显示了解淀粉芽孢杆菌RTI472的废发酵肉汤(SFB)酸沉淀物中分离的代谢物对灰葡萄孢和禾谷镰孢菌的控制。对于阳性对照,在真菌旁边的每个板的左侧点样10μl的RTI472的细胞培养物。
[0044] 详述
[0045] 本申请以及权利要求书中使用的术语“一个”、“一种”、“所述”是指“一个或多个”。因此,例如,提及“植株”包括多个植株,除非上下文中明确指出了相反含义。
[0046] 在本说明书和权利要求书中的术语“包括”、“包含”和“含有”以非排他性方式使用,除非上下文中有相反要求。类似地,术语“包括”及其语法上的变体不是为了起限制作用,因此,对列表中的项目的引述并不排除可以替换到或者添加到所列项目中的其他类似项目。
[0047] 出于本说明书和权利要求的目的,术语约摂与一个或多个数字或数值范围共同使用时,应理解为所有这些数字,包括该范围内的所有数字以及延伸所示数值的上下边界的修改。通过端点引用数字范围包括该范围内包含的所有数字,例如,所有的整数,以及该范围内的所有分数(例如1-5包括1、2、3、4、5及其分数,例如1.5、2.25、3.75、4.1等)以及该范围内的任意范围。
[0048] 出于本说明书和权利要求的目的,当与RTI472菌株或另一个解淀粉芽孢杆菌菌株所产生的具有抗微生物活性的化合物关联使用时,术语“代谢物”和“化合物”可互换使用。
[0049] 本文所用的短语“细菌菌株的生物纯培养物”是指以下的一种或其组合:细菌菌株的生物纯发酵培养物的孢子、细菌菌株的生物纯发酵培养物的营养细胞、细菌菌株的生物纯发酵培养物的一种或多种产品、细菌菌株的生物纯发酵培养物的培养物固体、细菌菌株的生物纯发酵培养物的培养物上清液、细菌菌株的生物纯发酵培养物的提取物、以及细菌菌株的生物纯发酵培养物的一种或多种代谢物。
[0050] 在本发明的某些实施方式中,提供组合物和方法,其包括解淀粉芽孢杆菌的新鉴定的菌株的生物纯培养物,用于施用至植物以利于植物生长和/或保护易受影响的植物不受病原性感染。在本发明的组合物和方法中,所述利于植物生长呈现为改善的幼苗、改善的根发育、改善的植物生长、改善的植物健康、提高的产率、改善的外观、改善的植物病原体抗性、或降低的病原体感染、或它们的组合。
[0051] 鉴定为属于解淀粉芽孢杆菌的植物相关细菌分离自北卡罗来纳生长的西洋参的根,并测试植物病原体拮抗性能。更具体地,通过高度保守的16S rRNA和rpoB基因序列分析,分离的细菌菌株被鉴定为解淀粉芽孢杆菌的新菌株(见实施例1)。新细菌分离株(称为“解淀粉芽孢杆菌RTI472”)的16S RNA序列被确定为与三种已知的其他解淀粉芽孢杆菌株、解淀粉芽孢杆菌菌株NS6(KF177175)、解淀粉芽孢杆菌菌株FZB42(NR_075005)和枯草芽孢杆菌菌株DSM 10(NR_027552)的16S rRNA基因序列相同。另外,测定到RTI472的rpoB序列与已知的解淀粉芽孢杆菌AS43.3菌株具有最高平的序列相似度(即,>99%序列相同性);但是,在DNA水平上有10个核苷酸差异,表明RTI472是一种新的解淀粉芽孢杆菌RTI472菌株。解淀粉芽孢杆菌RTI472的菌株按照国际承认用于专利程序的微生物保存布达佩斯条约的规定,于2014年4月17日保藏于美国弗吉尼亚州玛纳萨斯的美国典型培养物保藏中心(ATCC),专利保藏编号为PTA-121166。
[0052] 解淀粉芽孢杆菌RTI472菌株的基因组序列分析揭示该菌株具有与羊毛硫氨酸抗生素生物合成相关的基因,而其他与解淀粉芽孢杆菌RTI472紧密相关的菌株中缺少该基因的同系物(见实施例2)。这在图1中进行说明,其示出了解淀粉芽孢杆菌RTI472中发现的独特的羊毛硫氨酸抗生素生物合成簇的基因组织以及RTI472下方示出的两种已知的解淀粉芽孢杆菌参照菌株FZB42(中间)和TrigoCor1448(底部)的相应区域的示意图。由图1可以看出,FZB42和TrigoCor1448菌株缺少该簇中存在的许多基因,并且多种基因呈现低水平的序列相同度。RTI472菌株中的该羊毛硫肽生物合成簇被鉴定为Ericin S生物合成簇。RTI472菌株的代谢物概况使用HPLC/MS/MS进行分析,显示出新鉴定的RTI472菌株生产MW=3341.6Da的Ericin S分子和MW=2985.4Da的Ericin A分子。图2A显示解淀粉芽孢杆菌RTI472菌株和未公开的称为“FB005”的解淀粉芽孢杆菌菌株的代谢物概况的图。概况显示RTI472菌株生产Ericin A和Ericin S肽,同时没有在FB005菌株中检测到Ericin A或Ericin S。针对说明书和权利要求的目的,术语“Ericin S”、“Ericin S分子”、“Ericin S化合物”、和“Ericin S肽”在这里可互换使用。类似地,针对说明书和权利要求的目的,术语“Ericin A”、“Ericin A分子”、“Ericin A化合物”、和“Ericin A肽”在这里可互换使用。
[0053] 另外,进一步与大量额外的解淀粉芽孢杆菌参照菌株的比较基因组学分析也类似地显示出这些菌株也缺少羊毛硫氨酸抗生素生物合成簇。图2B-2C是RTI472菌株中鉴定的羊毛硫肽生物合成簇与7个参照解淀粉芽孢杆菌基因组比较的表,显示出7个参照解淀粉芽孢杆菌基因组的区域中的同线性(synteny)缺失。该数据表明新鉴定的RTI472具有独特的羊毛硫氨酸抗生素生物合成通路。该羊毛硫肽生物合成簇在RTI472菌株中被鉴定为Ericin S生物合成簇,而7个参照菌株中没有一个具有功能性Ericin S生物合成簇。因此,新鉴定的RTI472菌株具备羊毛硫肽合成通路,其生产MW=3341.6Da的Ericin S分子和MW=2985.4Da的Ericin A分子,其对于解淀粉芽孢杆菌菌株而言是独特的。
[0054] 另外,进行实验以确定解淀粉芽孢杆菌RTI472菌株在各种条件下的体外和在各植物内的生长促进和拮抗活性。实验结果示于图3-16以及实施例3-16。实验显示与商业获得的含有作为活性成分的枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)菌株QST713的SERENADE(拜作物科学公司)相比,解淀粉芽孢杆菌RTI472的利于植物生长和赋予保护或控制植物病原体感染的能力。除了标准单独施用,解淀粉芽孢杆菌RTI472菌株用于预防/处理植物病原体感染的程序,其中以交替的时间间隔与一个或多个商业获得的化学杀真菌剂/杀细菌剂一起对植物施用。在一些情况下,解淀粉芽孢杆菌RTI472菌株的施用与化学杀真菌剂/杀细菌剂一样单独进行。在一些情况下RTI472菌株可用于代替程序中的化学活性物质之一。当用作玉米种子处理时,RTI472菌株还在提高产率和减少疾病中有效。实验结果提供一个新的RTI472菌株增强FRACTURE(CONSUMO EM VERDE(CEV),BIOTECNOLOGIA DAS PLANTAS S.A.,葡萄牙)的拮抗性能的益处的实例,FRACTURE是一种作为活性成分含有BLAD多肽的植物提取物。还描述了RTI472菌株所生产的新的抗微生物代谢物的鉴定。
[0055] 在本发明的一个实施方式中,提供一种组合物,其包括以ATCC第PTA-121166号保藏的解淀粉芽孢杆菌RTI472、或具有所有其识别特征的突变体的生物纯培养物,用于施用于植物以利于植物生长和/或保护易受影响的植物不受病原性感染。
[0056] 在另一个实施方式中,提供一种利于植物生长和/或保护易受影响的植物不受病原性感染的方法,所述方法包括将包括以ATCC第PTA-121166号保藏的解淀粉芽孢杆菌RTI472、或具有所有其识别特征的突变体的生物纯培养物的组合物以适于利于植物生长和/或保护易受影响的植物不受病原性感染的量递送至:植物的叶子、植物的皮、植物的果实、植物的花、植物的种子、植物的根、植物的插条、植物的嫁接苗、植物的愈伤组织;植物周围的土壤或生长培养基;在将植物种子播种在土壤或生长培养基中之前的土壤或生长培养基;或在将植物、植物的插枝、植物嫁接苗、或植物愈伤组织种植在土壤或生长培养基中之前的土壤或生长培养基。
[0057] 已知有益的植物相关细菌,包括根际和内生细菌,向宿主植物提供包括对抗病害和害虫以及耐受包括寒冷、盐度和干旱压力的环境应激的许多益处。例如由于发育得更好的根系,接种了植物生长促进细菌的植物获得更多的水和来自土壤的营养,植物生长得更健康且对生物和非生物胁迫较不敏感。这样本发明的微生物组合物可单独施用或或与目前的作物管理输入物例如化学肥料、除草剂和杀虫剂结合使用,以最大限度地提高作物生产力。植物生长促进效果转化为更快的植物生长和提高的地上生物量,是可用于提高早期活力的性质。改善早期活力的一个益处是植物更有竞争力,并且胜过杂草,其通过尽可能减少劳动力和除草剂的应用直接降低了杂草管理的成本。植物生长促进效果还转化为改善根发育,包括更深和更广的根,更多的细根参与水和营养的摄取。该性质允许更好地利用农业的资源,并减少用于灌溉需要和/或肥料施用的水。根发育和根架构的改变影响了植物与其他土壤携带的微生物的相互作用,包括帮助植物摄取营养(包括氮固定和磷酸盐的溶解)的有益的真菌和细菌。这些有益的微生物还与植物病原体竞争以提高整体植物健康和降低化学杀真菌剂和杀虫剂的需要。
[0058] 实施例3描述了平板试验中解淀粉芽孢杆菌RTI472对几种主要植物病原体的拮抗性能,并且实施例4描述了菌株的表型性状如植物激素的产生、乙偶姻和吲哚乙酸(IAA)、和营养循环。另外,在温室和田间试验对多种作物进行研究以确定解淀粉芽孢杆菌RTI472菌株预防和/或改善被常见植物病原体植物的自然或人工感染的效果的能力。结果在实施例5-14和图3-14中描述。
[0059] 实施例5描述了解淀粉芽孢杆菌RTI472菌株改善植物病原体豆锈病(疣顶单胞锈菌)和植物病原体胡椒灰葡萄孢病(灰葡萄孢)效果的能力。另外,在第一组实验中,解淀粉芽孢杆菌RTI472菌株的不同的制剂,以及另一种新鉴定的解淀粉芽孢杆菌菌株RTI301,通过叶片施用RTI472菌株,测试了对疣顶单胞锈菌和灰葡萄孢的控制。实验设计设置为在用病原体感染九天后,对以下进行疾病控制百分数的评价:单独用水稀释的废发酵肉汤中的RTI472孢子(“RTI472+1%SFB”),用水加酵母提取物稀释的废发酵肉汤中的RTI472孢子(“RTI472+1%SFB+酵母提取物”),单独用水稀释100倍的废发酵肉汤中的RTI301孢子(“RTI301+1%SFB”),用水加酵母提取物稀释100倍的废发酵肉汤中的RTI301孢子(“RTI301+1%SFB+酵母提取物”),BRAVO WEATHER STIK(500g活性成分/ha百菌清),HORIZON(50g活性成分/ha戊唑醇),以及孢子浓度与RTI472和RTI301菌株相同的SERENADE OPTIMUM。未处理的对照组(仅水)结果是28%疾病。豆锈病和胡椒灰葡萄孢病实验的结果类似。豆锈病实验的结果示于表III并表明与施用没有添加酵母提取物的菌株相比,酵母提取物的添加在疾病控制中造成了约40%的提高。RTI472+1%SFB+酵母提取物和RTI301+1%SFB+酵母提取物展示的疾病控制量与观察到的当以相同比例施用SERENADEOPTIMUM(即,1×108cfu/ml)时类似,虽然RTI472和RTI301制剂中的SFB的量相对较低为1%,并且SFB可预期含有具有抗真菌活性的分泌化合物。实施例6描述了另一个类似的实验,通过RTI472菌株的豆锈病疾病控制,结果示于表IV和图3。结果显示了与以相同比例施用SERENADE OPTIMUM的处理相比,在用RTI472孢子处理豆类植物叶子后豆锈病(疣顶单胞锈菌)得到相当的控制。
[0060] 实施例6和表V和图4中的结果显示与以相同比例施用SERENADE OPTIMUM的处理相比,用RTI472孢子处理大豆叶子后改善的大豆白粉病(扩散叉丝壳)控制。
[0061] 实施例7描述了类似的实验,显示了RTI472菌株控制灰葡萄孢导致的胡椒灰葡萄孢病的能力。结果示于表VI和图5,并且显示了与在同等的细菌孢子浓度下用SERENADE OPTIMUM处理叶子相比,在用RTI472孢子处理胡椒植物叶子后改善的病原体控制。
[0062] 实施例7描述了额外的实验,显示了与SERENADE OPTIMUM相比,通过RTI472的胡椒灰葡萄孢病(灰葡萄孢)的改善的控制。结果示于表VII和图6,并且显示了与在同等细菌孢子浓度下用SERENADE OPTIMUM处理叶子相比,在用提高浓度的RTI472孢子处理胡椒植物叶子后改善的病原体控制。
[0063] 实施例7、表VIII、和图7-12中描述的进一步结果显示了与在相同的细菌孢子浓度下用SERENADE OPTIMUM产品处理相比,用用RTI472孢子处理,然后用渐增的更高剂量的病原体接种植物(50k,100k,500k,1M和2M分生孢子/ml)后对病原体胡椒灰葡萄孢病(灰葡萄孢)的控制。图8-12是用提高的胡椒灰葡萄孢病50k,100k,500k,1M和2M分生孢子/ml剂量分别感染4天后、和用RTI472或SERENADE OPTIMUM孢子处理植物叶子后的胡椒植物图像。在3种最低的病原体接种率中,观察到RTI472菌株和SERENADE OPTIMUM的相似的疾病控制百分数。但是,在2种最高的病原体接种率1M和2M中,观察到与SERENADE OPTIMUM相比,用RTI472菌株处理的植株在统计学上的改善。
[0064] 在田间试验对多种作物进行研究以确定解淀粉芽孢杆菌RTI472菌株预防和/或改善被常见植物病原体植物的自然或人工感染的效果的能力。结果在实施例8-11中描述。在实验中,RTI472以与SERENADE OPTIMUM相同的比例被施用在作物的叶子上。RTI472孢子作为标准的单独生物杀真菌剂或与商业获得的化学杀真菌剂/杀细菌剂联合被施用在植物上。取决于作物,施用进行1~6次,施用之间为5~7天的间隔。第一次施用的时机取决于特定作物,并且在种植时、作物出苗后的数周、开花时、疾病出现、或在预期出现疾病之前的范围内。
[0065] 实施例8和表IX-XI中的结果显示当以相同比例,作为标准的单独生物杀真菌剂或作为施用包括化学杀真菌剂/杀细菌剂的商业产品的处理程序施用时,与SERENADE OPTIMUM相比,RTI472对葫芦中白粉病的可比较的或改善的控制。作为标准的单独生物杀真菌剂,RTI472显示出与使用工业标准氟吡菌酰胺加戊唑醇杀真菌剂的程序类似的表现。
[0066] 实施例9和表XII-XIV中的结果显示当以相同比例,作为标准的单独生物杀真菌剂或作为施用包括化学杀真菌剂/杀细菌剂的商业产品的处理程序施用,与SERENADE OPTIMUM相比,RTI472对豆荚(snap bean)中的白霉病的可比较的或改善的控制。作为标准的单独生物杀真菌剂,RTI472显示出与使用工业标准氟吡菌酰胺加戊唑醇杀真菌剂的程序类似的表现。
[0067] 实施例9和表XII中的结果显示当以相同比例,作为标准的单独生物杀真菌剂或作为施用包括化学杀真菌剂/杀细菌剂的商业产品的处理程序施用,与SERENADE OPTIMUM相比,RTI472对豆荚中的白霉病的可比较的或改善的控制。豆荚中白霉病的最佳控制在使用解淀粉芽孢杆菌RTI472和甲基硫菌灵杀真菌剂的组合的程序中被观察到,比甲基硫菌灵与丙硫菌唑杀真菌剂联合使用的化学程序更优。
[0068] 实施例9和表XIII-XIV中的结果显示作为标准的单独生物杀真菌剂以相同比例施用,与SERENADE OPTIMUM相比,RTI472对花生中叶斑枯病和南方白霉病的改善的控制和产量上的显著提高(表XIII中的适度压力和表XIV中的重压)。
[0069] 实施例10和表XV中的结果显示作为标准的单独生物杀真菌剂以相同比例施用,与SERENADE OPTIMUM相比,RTI472对小麦赤霉病和大豆豆锈病的改善的控制。实施例10和表XV中的结果显示作为标准的单独生物杀真菌剂施用时,与对照植物相比,RTI472对番茄中的茄链格孢(Alternaria solani)改善的控制。
[0070] 实施例11和表XVI中的结果显示当以相同比例,作为标准的单独生物杀真菌剂或作为施用包括化学杀真菌剂/杀细菌剂的商业产品的处理程序施用,与SERENADE OPTIMUM相比,RTI472对番茄中的细菌性斑点番茄病(黄单胞菌(Xanthomonas))的改善的控制。番茄中的细菌性斑点番茄病(黄单胞菌)的最佳控制在解淀粉芽孢杆菌RTI472作为标准单独或用氢的程序中观察到,并且优于基于使用百菌清联合氢氧化铜的方案。
[0071] 实施例12描述在化学活性试剂的典型组合(MAXIM+甲霜灵+PONCHO250)以外,用解淀粉芽孢杆菌RTI472菌株的孢子包覆玉米种子的有益效果,以改善产量,并与控制丝核菌和禾谷镰孢菌感染一样控制自然发生的植物疾病。在第一个实验中,未处理的种子和各个处理的玉米种子在威斯康星州的三个独立的田间试验中种植,并分析了从种植到出苗的时长、植株挺立度(plant stand)、植株活力、以及以蒲式耳/英亩计的颗粒产量。包括有解淀粉芽孢杆菌RTI472的种子处理与仅用化学对照处理的种子相比,从种植到出苗的时长、植株挺立度或植株活力并没有统计上的显著效果,但确实带来了6蒲式耳/英亩的颗粒增加(从231增加至237蒲式耳/英亩),表明颗粒产量有2.6%的增加。在相关实验中,分别用病原体丝核菌和禾谷镰孢菌攻击实验中的玉米植物时,与用化学对照单独处理的种子相比,用解淀粉芽孢杆菌RTI472处理的种子在丝核菌和天然存在的疾病的疾病严重程度在统计学上显着降低。
[0072] 实施例13描述草莓田间试验中进行的研究,以确定解淀粉芽孢杆菌RTI472菌株预防和/或改善植物病原体棕灰霉病(灰葡萄孢)影响的能力。RTI472菌株与称为“农民程序(FARMER’s program)”的化学活性试剂组合的施用和SERENADE MAX的施用进行比较,其中SERENADE MAX具有的枯草芽孢杆菌菌株QST713的浓度比RTI472菌株高10倍。表XVIII中的结果显示在三种处理(解淀粉芽孢杆菌RTI472、SERENADE MAX、和农民程序)中,草莓中的棕灰霉病的胜过未处理的对照的改善的控制,并且用RTI472处理的产量略高。图13示出了每个草莓试验中随时间发展未处理的对照(“UT”)中感染灰葡萄孢病原体的果实。
[0073] 实施例14描述了矮生西葫芦田间试验研究以确定解淀粉芽孢杆菌RTI472菌株作为标准单独或作为与产品FRACTURE中的活性剂的混合物以预防和/或改善二孢白粉菌(Golovinomyces cichoracearum(ERYSCI))导致的白粉病的影响的能力。实验结果示于表XIX。FRACTURE提供了疾病严重程度的约15%降低,同时SERENADE OPTIMUM和RTI472带来了疾病严重程度的约30%降低。疾病严重程度的最显著的降低在BRAVO WEATHER STIK(45%)和LUNA EXPERIENCE(94%)中被观察到。当将RTI472和FRACTURE一起施用,观察到疾病控制的累积效果,得到疾病严重程度的47%的降低。这与BRAVO WEATHER STIK(45%)下疾病严重程度的降低相当,并且证明了在控制葫芦中的白粉病的程序中,解淀粉芽孢杆菌RTI472和FRACTURE的组合作为百菌清杀真菌剂的替代品的有用性。
[0074] 实施例15描述了对解淀粉芽孢杆菌RTI472菌株产生的环状脂肽-芬枯草菌素和脱羟基芬枯草菌素的考察,并且令人惊讶地鉴定出了这些分子的几种之前未报道的种类。经测定,解淀粉芽孢杆菌RTI472产生之前报道的芬枯草菌素A、B和C化合物以及脱羟基芬枯草菌素A、B和C化合物。令人惊讶的是,除了这些已知的化合物,确定RTI472菌株还生产了之前没有被鉴定过的这些化合物的衍生物,其中环状肽链8位上的L-异亮氨酸(在图14中称为X3)被L-甲硫氨酸替代。新的芬枯草菌素和脱羟基芬枯草菌素种类在此被称为MA、MB和MC,是指A、B和C类的图14中的X3的L-异亮氨酸被L-甲硫氨酸替代的衍生物。新鉴定的分子用粗体示于图14和表XX。如表XX所记载的,脱羟基芬枯草菌素MC化合物没有在RTI472菌株的培养物中被观察到。进一步确定RTI472菌株产生另外一类之前尚未鉴定的芬枯草菌素。在该类中,芬枯草菌素B的L-异亮氨酸(图14中的X3位)被L-同型半胱氨酸(Hcy)替代。该之前未鉴定的芬枯草菌素代谢物在此称为芬枯草菌素H并用粗体示于图14和表XX。进一步确定RTI472菌株产生另外一类未鉴定的芬枯草菌素和脱羟基芬枯草菌素代谢物。在该类中,环形肽骨架结构的位点4处的氨基酸(图14中的位点X1)被L-异亮氨酸替代。这些之前未鉴定的代谢物在此称为芬枯草菌素I和脱羟基芬枯草菌素I并示于图14和表XX。
[0075] 实施例16描述了从解淀粉芽孢杆菌菌株RTI472废发酵肉汤中拮抗性脂肽的分离,并进行体外平板试验,显示分离的脂肽保留其对两种常见植物病原体的活性。培养RTI472并通过LCMS分析培养基上清液的酸沉淀,以比较伊枯草菌素、表面活性肽、和芬枯草菌素的相对丰度。图15是显示在酸沉淀后从RTI472废发酵肉汤中回收的脂肽的百分数的图。结果显示脂肽总量的83%通过酸沉淀被回收。接下来,进行板生物测定,其中通过LCMS分析相同的样品,对灰葡萄孢和禾谷镰孢菌进行分析。结果示于图16A-16D,并且显示于灰葡萄孢和禾谷镰孢菌,酸沉淀样品具有与起始废发酵肉汤类似的拮抗活性水平。
[0076] 在一个实施方式中,提供一种组合物,其包括以ATCC第PTA-121166号保藏的解淀粉芽孢杆菌RTI472、或具有所有其识别特征的突变体的生物纯培养物,用于施用于植物以利于植物生长和/或保护易受影响的植物不受病原性感染。所述利于植物生长和/或保护呈现为改善的幼苗活力、改善的根发育、改善的植物生长、改善的植物健康、提高的产率、改善的外观、改善的植物病原体抗性、或降低的病原体感染、或它们的组合。
[0077] 本发明的组合物和方法对大范围的植物有益,包括但不限于:单子叶植物、双子叶植物、谷类、玉米、甜玉米、爆米花玉米、种子玉米、青贮玉米、田地玉米、水稻、小麦、大麦高粱、芦笋、浆果、蓝莓、黑莓、树莓、罗甘莓、黑果木、蔓越莓、醋栗、接骨木、红醋栗、蔓越橘、灌木浆果、芸苔属蔬菜、花椰菜、卷心菜、菜花、球芽甘蓝、羽衣甘蓝、无头甘蓝、芥菜、球茎甘蓝、葫芦科蔬菜、黄瓜、哈密瓜、甜瓜、香瓜、西葫芦、西瓜、南瓜、茄子、鳞茎类蔬菜、洋葱、大蒜、葱、柑橘、橙、葡萄柚、柠檬、桔子、橘柚、柚子、果蔬、胡椒、番茄、草原樱桃、树番茄、秋葵、葡萄、草药/香料、叶用蔬菜、莴苣、芹菜、菠菜、欧芹、菊苣、豆类/蔬菜(多汁的和干燥的豆和豌豆)、豆、青豆、豆荚、荚豆、大豆、干豆、鹰嘴豆、利豆、豌豆、三豆、裂荚豌豆、扁豆、油籽作物、坎诺拉油菜、蓖麻、椰子、花、亚麻、油棕、橄榄、花生、油菜籽、红花、芝麻、向日葵、大豆、仁果类水果、苹果、山楂、梨、榅桲、夏花山楂、根/茎和球茎蔬菜、胡萝卜、马铃薯、甜马铃薯、木薯、甜菜、姜、辣根、萝卜、人参、芜箐、核果类水果、杏、樱桃、油桃、桃、李子、梅子、草莓、木本坚果、杏仁、开心果、山核桃、胡桃、榛子、栗子、腰果、山毛榉坚果、灰胡桃、夏威夷果、奇异果、香蕉、(蓝色)龙舌兰、草、草皮草、观赏植物、一品红、硬插枝、栗子、橡树、枫树、甘蔗、或甜菜。
[0078] 在一个或多个实施方式中,植物可包括大豆、豆类、豆荚、小麦、棉花、玉米、胡椒、番茄、马铃薯、木薯、葡萄、草莓、香蕉、花生、西葫芦、南瓜、茄子、和黄瓜。
[0079] 在本发明的组合物和方法中,病原体感染可以由多种植物病原体引起,例如包括但不限于:植物病原体,例如包括植物真菌病原体、植物细菌病原体,锈菌、葡萄孢属(Botrytis spp.)、灰葡萄孢(Botrytis cinerea)、葱鳞葡萄孢菌(Botrytis squamosa),欧文氏菌属(Erwinia spp.)、胡萝卜软腐欧文氏菌(Erwinia carotovora)、解淀粉欧文氏菌(Erwinia amylovora),狄克氏菌属(Dickeya spp.),达旦提狄克氏菌(Dickeya dadantii),茄狄克氏菌(Dickeya solani),农杆菌属(Agrobacterium spp.),根癌土壤杆菌(Agrobacterium tumefaciens),黄单胞菌属(Xanthomonas spp.),地毯草黄单胞杆菌(Xanthomonas axonopodis),野油菜黄单胞菌胡萝卜致病变种(Xanthomonas campestris pv.carotae),桃李黄单胞菌(Xanthomonas pruni),藤黄单胞菌(Xanthomonas 
arboricola),水稻黄单胞菌水稻致病变种(Xanthomonas oryzae pv.oryzae),木杆菌属(Xylella spp.),苛养木杆菌(Xylella fastidiosa),暂定菌属(Candidatus spp.),韧皮部杆菌(Candidatus liberibacter),镰孢属(Fusarium spp.),禾谷镰孢菌(Fusarium graminearum),尖镰孢(Fusarium oxysporum),尖镰孢古巴专化型(Fusarium oxysporum f.sp.Cubense),尖镰孢番茄专化型(Fusarium oxysporum f.sp.Lycopersici),北美大豆猝死综合症病菌(Fusarium virguliforme)、核盘菌属(Sclerotinia spp.),核盘菌(Sclerotinia sclerotiorum),小核盘菌(Sclerotinia minor),斑核盘菌(Sclerotinia homeocarpa),尾孢菌属(Cercospora/Cercosporidium spp.),钩丝壳属(Uncinula spp.),葡萄钓丝壳(Uncinula necator)(白粉菌(PowderyMildew)),叉丝单囊壳属(Podosphaera spp.)(白粉菌(Powdery Mildew)),白叉丝单囊壳(Podosphaera leucotricha),秘密叉丝单囊壳(Podosphaera clandestine),拟茎点霉属(Phomopsis spp.),霜霉病拟茎点霉菌(Phomopsis viticola),链格孢菌属(Alternaria spp.),极链格孢菌(Alternaria tenuissima),孔洞链隔孢菌(Alternaria porri),链格孢(Alternaria alternate),茄链格孢(Alternaria solani),细极链格孢(Alternaria tenuis),假单胞菌属(Pseudomonas spp.),丁香假单胞菌番茄致病变种(Pseudomonas syringae pv.Tomato),疫霉属(Phytophthora spp.),致病疫霉(Phytophthora infestans),寄生疫霉(Phytophthora parasitica),大豆疫霉菌(Phytophthora sojae),辣椒疫霉菌(Phytophthora capsici),肉桂疫霉菌(Phytophthora cinnamon),草莓疫霉菌(Phytophthora fragariae),疫霉属(Phytophthora spp.),栎树疫霉菌(Phytophthora ramorum),棕榈疫霉菌(Phytophthora palmivara),烟草疫霉菌(Phytophthora nicotianae),层锈菌属(Phakopsora spp.),豆薯层锈菌(Phakopsora pachyrhizi),山马蝗层锈菌(Phakopsora meibomiae),曲霉(Aspergillus spp.),黄曲霉(Aspergillus flavus),黑曲霉(Aspergillus niger),单孢锈菌属(Uromyces  spp.),疣顶单孢锈菌(Uromyces appendiculatus),枝孢属
(Cladosporium spp.),多主枝孢(Cladosporium herbarum),根霉属(Rhizopus spp.),隐根根霉(Rhizopus arrhizus),青霉属(Penicillium spp.),丝核菌属(Rhizoctonia spp.),立枯丝核菌(Rhizoctonia solani),玉蜀黍丝核菌(Rhizoctonia zeae),稻枯斑丝核菌(Rhizoctonia oryzae),博爱丝核菌(Rhizoctonia caritae),小麦纹枯病菌(Rhizoctonia cerealis),番红花枯病菌(Rhizoctonia crocorum),草莓花枯病菌(Rhizoctonia fragariae),多枝丝核菌(Rhizoctonia ramicola),灌木枯病菌
(Rhizoctonia rubi),豆类丝核菌(Rhizoctonia leguminicola),豆类壳球孢
(Macrophomina phaseolina),稻瘟病菌(Magnaorthe oryzae),球腔菌属(Mycosphaerella spp.),灰霉菌(Mycosphaerella graminocola),香蕉黑条叶斑菌(Mycosphaerella fijiensis(黑色叶斑病)),苹果球腔菌(Mycosphaerella pomi),柑橘球腔菌
(Mycosphaerella citri),稻瘟菌属(Magnaporthe spp.),稻瘟菌(Magnaporthe grisea),褐腐病菌属(Monilinia spp.),桃褐腐病菌(Monilinia fruticola),Monilinia vacciniicorymbosi,核果链核盘菌(Monilinia laxa),刺盘孢属(Colletotrichum spp.),炭疽病菌(Colletotrichum gloeosporiodes),尖孢炭疽菌(Colletotrichum acutatum),白炭疽病菌(Colletotrichum Candidum),间座壳属(Diaporthe spp.),柑桔间座壳(Diaporthe citri),棒孢菌属(Corynespora spp.),山扁豆生棒孢(Corynespora Cassiicola),胶锈菌属(Gymnosporangium spp.),胶锈菌(Gymnosporangium juniperi-virginianae),点病菌属(Schizothyrium spp.),苹果煤点病菌(Schizothyrium pomi),粘壳孢菌属(Gloeodes spp.),仁果粘壳孢菌(Gloeodes pomigena),葡萄座腔菌属(Botryosphaeria spp.),杨树溃疡病菌(Botryosphaeria dothidea),明孢盘菌属(Neofabraea spp.),穿孔病菌属(Wilsonomyces spp.),穿孔病菌(Wilsonomyces carpophilus),单丝壳属(Sphaerotheca spp.),白斑病菌(Sphaerotheca macularis),蔷薇单丝壳菌(Sphaerotheca  pannosa),白粉菌属(Erysiphe spp.),壳多孢属
(Stagonospora spp.),颖枯壳多孢(Stagonospora nodorum),腐霉菌(Pythium spp.),终极腐霉(Pythium ultimum),瓜果腐霉(Pythium aphanidermatum),不规则腐霉(Pythium irregularum),胡萝卜腐霉(Pythium ulosum),鲁特里亚腐霉(Pythium lutriarium),猝倒病腐霉(Pythium sylvatium),黑星菌属(Venturia spp),苹果黑星菌(Venturia inaequalis),轮枝孢属(Verticillium spp.),黑粉菌属(Ustilago spp.),裸黑粉菌(Ustilago nuda),玉米黑粉菌(Ustilago maydis),甘蔗黑粉菌(Ustilago scitaminea),麦角菌属(Claviceps spp.),麦角菌(Claviceps puprrea),腥黑粉菌属(Tilletia spp.),小麦腥黑粉菌(Tilletia tritici),亚腥黑粉菌(Tilletia laevis),刚毛腥黑粉菌(Tilletia horrid),小麦矮化腥黑粉菌(Tilletia controversa),茎点霉菌属(Phoma spp.),大豆茎点霉菌(Phoma glycinicola),棉花茎点霉菌(Phoma exigua),芸苔茎点霉菌(Phoma lingam),禾旋孢腔菌(Cocliobolus sativus),燕麦全蚀病菌(Gaeumanomyces gaminis),毛盘孢属(Colleototricum spp.),喙孢属(Rhychosporium spp.),黑麦喙孢(Rhychosporium secalis),蠕孢菌属(Biopolaris spp.),长蠕孢菌属(Helminthosporium spp.),黑麦长蠕孢菌(Helminthosporium secalis),玉米长蠕孢菌(Helminthosporium maydis),马铃薯长蠕孢菌(Helminthosporium solai)和小麦褐斑长蠕孢菌
(Helminthosporium tritici-repentis),或它们的组合。
[0080] 在一些实施方式中,病原体感染可由以下的一种或组合引起:大豆豆锈病真菌(豆薯层锈菌、山马蝗层锈菌)和包括大豆的植物;灰葡萄孢(灰葡萄孢病)和包括葡萄的植物;灰葡萄孢(灰葡萄孢病)和包括草莓的植物;曲霉(例如茄链格孢)和包括番茄的植物;曲霉(例如茄链格孢)和包括马铃薯的植物;豆锈病(疣顶单胞锈菌)和包括菜豆的植物;扩散叉丝壳(大豆白粉病)和包括大豆的植物;香蕉黑条叶斑菌(黑色叶斑病)或尖镰孢古巴专化型(巴拿马病)和包括香蕉的植物;黄单胞菌属或水稻黄单胞菌水稻致病变种和包括水稻的植物;地毯草黄单胞杆菌和包括木薯的植物;野油菜黄单胞菌和包括番茄的植物;灰葡萄孢(胡椒灰葡萄孢病)和包括胡椒的植物;白粉病和包括葫芦的植物;核盘菌(白霉)和包括豆荚的植物;核盘菌(白霉)和包括马铃薯的植物;银斑核盘菌(草皮币斑病)和包括坪草的植物;南方白霉病和包括花生的植物;叶斑枯病(尾孢菌)和包括花生的植物;禾谷镰孢菌(小麦赤霉病)和包括小麦的植物;禾生球腔菌(小麦壳针孢斑)和包括小麦的植物;颖枯壳多孢(颖状斑和壳针孢叶枯病)和包括小麦的植物;解淀粉欧文氏菌和包括苹果、梨和其他梨果的植物;苹果黑星菌和包括苹果、梨和其他梨果的植物;或立枯丝核菌和包括小麦、水稻、坪草、大豆、玉米、豆类和蔬菜作物的植物。
[0081] 所述含有RTI472菌株的组合物的形式可以是液体、油分散体、粉尘、干燥的可润湿粉末、可传播颗粒、或干燥的可润湿颗粒。当以适于利于植物生长和/或保护易受影响的植物不受病原性感染的量将组合物施用于植物的叶子、植物的皮、植物的果实、植物的花、植物的种子、植物的根、植物的插条、植物的嫁接苗、植物的愈伤组织;植物周围的土壤或生长培养基;在将植物种子播种在土壤或生长培养基中之前的土壤或生长培养基;或在将植物、植物的插枝、植物嫁接苗、或植物愈伤组织种植在土壤或生长培养基中之前的土壤或生长培养基时,有利于植物生长。所述组合物还可包含微生物、生物或化学杀昆虫剂、杀真菌剂、杀线虫剂、杀细菌剂、除草剂、植物提取物、植物生长调节剂或肥料中的一种或它们的组合,这些成分以适于有利植物生长和/或保护易受影响的植物不受病原性感染的量存在。所述组合物还可包含载体、表面活性剂、分散剂或酵母提取物中的一种或它们的组合。为了本说明书和权利要求的目的,术语“表面活性剂”和“佐剂”可互换使用。酵母提取物能够以约0.01%至0.2%w/w的有益植物生长的比例递送。
[0082] 所述组合物可以是种植基质的形式。所述种植基质可以是盆栽土的形式。
[0083] 在一个实施方式中提供一种组合物,该组合物包含:一种或多种具有有利于植物生长和/或植物健康的性能的微生物的生物纯培养物;以及酵母提取物,用于施用至植物以利于植物生长和/或保护易受影响的植物不受病原性感染。所述微生物可以包含真菌类。所述微生物可以包含细菌类。所述微生物可包括枯草芽孢杆属微生物。所述微生物可包括解淀粉芽孢杆菌。所述组合物还可包含载体、表面活性剂、分散剂中的一种或它们的组合。所述组合物还可包括微生物、生物或化学杀昆虫剂、杀真菌剂、杀线虫剂、杀细菌剂、除草剂、植物提取物、植物生长调节剂或肥料的一种或组合。
[0084] 在一个实施方式中,提供一种组合物以利于植物生长和/或保护易受影响的植物不受病原性感染,所述组合物包括:适于利于植物生长和/或保护易受影响的植物不受病原性感染的量的以ATCC第PTA-121166号保藏的解淀粉芽孢杆菌RTI472、或具有所有其识别特征的突变体的生物纯培养物;以及适于利于植物生长和/或保护易受影响的植物不受病原性感染的量的微生物、生物或化学杀昆虫剂、杀真菌剂、杀线虫剂、杀细菌剂、除草剂、植物提取物、植物生长调节剂、或肥料的一种或组合。在该实施方式中,所述解淀粉芽孢杆菌的生物纯培养物RTI472和微生物、生物或化学杀昆虫剂、杀真菌剂、杀线虫剂、杀细菌剂、除草剂、植物提取物、植物生长调节剂或肥料的一种或组合一起配制。
[0085] 在一个实施方式中,所述杀真菌剂可包括白羽扇豆的提取物。在一个实施方式中,所述杀真菌剂可包括BLAD多肽。所述BLAD多肽可以是来自甜羽扇豆(白羽扇豆)的天然产生的种子储藏蛋白,其通过引起真菌细胞壁损伤和扰乱内细胞膜来对易受影响的真菌病原体起作用。所述组合物可包括约20%的BLAD多肽。
[0086] 在包括解淀粉芽孢杆菌RTI472的组合物中,所述组合物的形式可为液体,并且解淀粉芽孢杆菌RTI472能够以约1.0×108CFU/ml至约1.0×1012CFU/ml的浓度存在。所述组合物可以是粉尘、干燥的可润湿粉末、可传播颗粒、或干燥的可润湿颗粒的形式,并且解淀粉芽孢杆菌RTI472的量可以是约1.0×108CFU/g至约1.0×1012CFU/g。所述组合物可以是油分散体的形式,并且解淀粉芽孢杆菌RTI472的浓度可以是约1.0×108CFU/ml至约1.0×1012CFU/ml。解淀粉芽孢杆菌RTI472可以是孢子或营养细胞的形式。
[0087] 在一个实施方式中,提供一种利于植物生长和/或保护易受影响的植物不受病原性感染的方法,所述方法包括将包括以ATCC第PTA-121166号保藏的解淀粉芽孢杆菌RTI472、或具有所有其识别特征的突变体的生物纯培养物的组合物以适于利于植物生长和/或保护易受影响的植物不受病原性感染的量递送至:植物的叶子、植物的皮、植物的果实、植物的花、植物的种子、植物的根、植物的插条、植物的嫁接苗、植物的愈伤组织;植物周围的土壤或生长培养基;在将植物种子播种在土壤或生长培养基中之前的土壤或生长培养基;或在将植物、植物的插枝、植物嫁接苗、或植物愈伤组织种植在土壤或生长培养基中之前的土壤或生长培养基。所述组合物可递送至植物的叶子。
[0088] 在方法中,所述包括解淀粉芽孢杆菌RTI472的组合物还可包含载体、表面活性剂、分散剂或酵母提取物中的一种或它们的组合。酵母提取物能够以约0.01%至0.2%w/w的有益植物生长的比例递送。
[0089] 在本发明的另一个实施方式中,提供一种方法以利于植物生长和/或保护易受影响的植物不受病原性感染,所述方法包括:将适于利于植物生长和/或保护易受影响的植物不受病原性感染的量的以ATCC第PTA-121166号保藏的解淀粉芽孢杆菌RTI472、或具有所有其识别特征的突变体的生物纯培养物;以及适于利于植物生长和/或保护不受病原性感染的量的微生物、生物或化学杀昆虫剂、杀真菌剂、杀线虫剂、杀细菌剂、除草剂、植物提取物、植物生长调节剂、或肥料的一种或组合递送至:植物的叶、植物的皮、植物的果实、植物的花、植物的种子、植物的根、植物的插条、植物的嫁接苗、植物的愈伤组织;植物周围的土壤或生长培养基;在将植物种子播种在土壤或生长培养基中之前的土壤或生长培养基;或在将植物、植物的插枝、植物嫁接苗、或植物愈伤组织种植在土壤或生长培养基中之前的土壤或生长培养基。
[0090] 在一个实施方式中,提供一种方法以利于植物生长和/或保护易受影响的植物不受病原性感染,所述方法包括:将以适于利于植物生长和/或保护易受影响的植物的量包括适于利于植物生长和/或保护易受影响的植物不受病原性感染的量的以ATCC第PTA-121166号保藏的解淀粉芽孢杆菌RTI472、或具有所有其识别特征的突变体的生物纯培养物的第一组合物,以及包括利于植物生长和/或保护易受影响的植物不受病原性感染的量的微生物、生物或化学杀昆虫剂、杀真菌剂、杀线虫剂、杀细菌剂、除草剂、植物提取物、植物生长调节剂、或肥料的一种或组合的第二组合物的组合递送至:植物的叶、植物的皮、植物的果实、植物的花、植物的种子、植物的根、植物的插条、植物的嫁接苗、植物的愈伤组织;植物周围的土壤或生长培养基;在将植物种子播种在土壤或生长培养基中之前的土壤或生长培养基;或在将植物、植物的插枝、植物嫁接苗、或植物愈伤组织种植在土壤或生长培养基中之前的土壤或生长培养基。在一个实施方式中,所述第一和第二组合物可递送至植物的叶子。所述第一组合物还可包含载体、表面活性剂、分散剂或酵母提取物中的一种或它们的组合。酵母提取物能够以约0.01%至0.2%w/w的有益植物生长的比例递送。
[0091] 所述第二组合物的杀真菌剂可包括来自白羽扇豆的提取物。所述第二组合物的杀真菌剂可包括BLAD多肽。所述BLAD多肽可以是来自甜羽扇豆(白羽扇豆)的天然产生的种子储藏蛋白,其通过引起真菌细胞壁损伤和扰乱内细胞膜来对易受影响的真菌病原体起作用。所述第二组合物的杀真菌剂可包括约20%BLAD多肽。
[0092] 在本发明的将RTI472与微生物、生物或化学杀昆虫剂、杀真菌剂、杀线虫剂、杀细菌剂、除草剂、植物提取物、植物生长调节剂或肥料一起递送的组合物和方法中,植物的生长益处和/或赋予的保护呈现为改善的幼苗活力、改善的根发育、改善的植物生长、改善的植物健康、提高的产率、改善的外观、改善的植物病原体抗性、降低的病原体感染或它们的组合。
[0093] 在一个实施方式中,所述方法还可包括将液体肥料施用至:所述方法可进一步包括将液体肥料施用至:植物周围的土壤或生长培养基;在将植物种子播种在土壤或生长培养基中之前的土壤或生长培养基;或在将植物、植物的插枝、植物嫁接苗、或植物愈伤组织种植在土壤或生长培养基中之前的土壤或生长培养基。
[0094] 将RTI472与微生物、生物或化学杀昆虫剂、杀真菌剂、杀线虫剂、杀细菌剂、除草剂、植物提取物、植物生长调节剂或肥料一起递送的方法中,所述组合物的形式可以是液体、油分散体、粉尘、干燥的可润湿粉末可传播颗粒、或干燥的可润湿颗粒。解淀粉芽孢杆菌RTI472可以是孢子或营养细胞的形式。解淀粉芽孢杆菌RTI472能够以利于植物生长的约1.0×1010cfu/ha~约1.0×1014cfu/ha比例递送。酵母提取物能够以约0.01%至0.2%w/w的有益植物生长的比例递送。
[0095] 在本发明的将RTI472与微生物、生物或化学杀昆虫剂、杀真菌剂、杀线虫剂、杀细菌剂、除草剂、植物提取物、植物生长调节剂或肥料一起递送的组合物和方法中,所述杀昆虫剂可包括联苯菊酯。在一个或多个实施方式中,所述杀线虫剂可包括硫线磷。在一个或多个实施方式中,所述杀昆虫剂可包括联苯菊酯,并且所述组合物可配制为液体。在一个或多个实施方式中,所述杀昆虫剂可包括联苯菊酯和噻虫胺。在一个或多个实施方式中,所述杀昆虫剂可包括联苯菊酯和噻虫胺,并且所述组合物可配制为液体。在一个或多个实施方式中,所述杀昆虫剂可包括联苯菊酯或ζ-氯氰菊酯。在一个或多个实施方式中,所述组合物配制为液体,且所述杀昆虫剂可包括联苯菊酯或ζ-氯氰菊酯。
[0096] 所述杀昆虫剂可以是联苯菊酯,所述组合物制剂还包含水合镁以及选自下组的至少一种分散剂:蔗糖酯、木质素磺酸盐、烷基聚糖苷、磺酸甲缩合物和磷酸酯。所述联苯菊酯杀昆虫剂可以以0.1g/ml~0.2g/ml的浓度存在。所述联苯菊酯杀昆虫剂可以以约0.1715g/ml的浓度存在。所述联苯菊酯杀昆虫剂的施用率范围为约每公顷0.1克活性物质(克活性物质/公顷)至1000克活性物质/公顷(ai/ha),更优选为约1-100克活性物质/公顷。
[0097] 在一个实施方式中,联苯菊酯组合物可包括:联苯菊酯;水合硅酸铝镁;和选自蔗糖酯、木质素磺酸酯、烷基聚糖苷、萘磺酸甲醛缩合物和磷酸酯中的至少一种分散剂。
[0098] 以所述组合物中所有组分的总重量为基准计,所述联苯菊酯存在的浓度优选为1.0-35重量%,更优选为15-25重量%。所述联苯菊酯杀昆虫剂组合物可以以适合作为具有肥料的液体混合物的方式配制。所述联苯菊酯杀昆虫剂可以以0.1g/ml至0.2g/ml的浓度存在于液体制剂中。所述联苯菊酯杀昆虫剂可以以约0.1715g/ml的浓度存在于液体制剂中。
术语“可以以适合作为具有肥料的液体混合物的方式配制”和“在可用作液体肥料的制剂中”在本说明书和权利要求中可互换使用,并意在表示所述制剂能够溶解、分散或乳化,使得与肥料混合而在液体制剂中被递送至植物。
[0099] 以所述组合物中所有组分的总重量为基准计,分散剂或分散体存在的总浓度可为约0.02-20重量%。
[0100] 在一些实施方式中,所述水合硅酸铝镁可选自蒙脱石和绿坡缕石。
[0101] 在一些实施方式中,所述磷酸酯可选自壬基苯酚磷酸酯和十三烷基醇乙氧基化的磷酸盐。
[0102] 其它实施方式可还包含防冻剂、消泡剂和杀微生物剂中的至少一种。
[0103] 在一个实施方式中提供一种用于促进植物生长的组合物,该组合物包含:以ATCC第PTA-121166号保藏的解淀粉芽孢杆菌RTI472、或具有所有其识别特征的突变体的生物纯培养物;以及杀昆虫剂。所述杀昆虫剂可以是以下中的一种或它们的组合:拟除虫菊酯(pyrethroids)、联苯菊酯、七氟菊酯、ζ-氯氰菊酯、有机磷酸酯、四氯乙磷、毒死蜱(chlorpyrifos)、丁基嘧啶磷(tebupirimphos)、氟氯氰菊酯、苯基吡唑类(fiproles)、氟虫腈(fipronil)、烟(nicotinoids)或噻虫胺(clothianidin)。所述杀昆虫剂可包括联苯菊酯。所述杀昆虫剂可包括联苯菊酯,并且所述组合物可在可用作液体肥料的制剂中。所述组合物可还包含水合硅酸铝镁以及至少一种分散剂。所述联苯菊酯杀昆虫剂可以以0.1g/ml~0.2g/ml的浓度存在。所述联苯菊酯杀昆虫剂可以以约0.1715g/ml的浓度存在。
[0104] 另外,在一个或多个实施方式中,本发明的组合物和方法的合适的杀昆虫剂、除草剂、杀真菌剂和杀线虫剂可包括以下:
[0105] 杀昆虫剂:A0)各种杀昆虫剂,包括:agrigata、磷化铝(al-phosphide)、钝绥螨属(amblyseius)、蚜小蜂属(aphelinus)、烟蚜茧蜂属(aphidius)、食蚜瘿蚊(aphidoletes)、青蒿素(artimisinin)、苜蓿银纹夜蛾核多面体病病毒(autographa californica NPV)、三唑(azocyclotin)、枯草芽孢杆菌(Bacillus-subtilis)、苏云金芽孢杆菌扎瓦亚种(bacillus-thur.-aizawai)、苏云金芽孢杆菌库斯塔克亚种(bacillus-thur.-kurstaki)、苏云金芽孢杆菌(Bacillus  thuringiensis)、百僵菌(beauveria)、球孢白僵菌(beauveria-bassiana)、高效氟氯氰菊酯(betacyfluthrin)、生物制品(biological)、杀虫双(bisultap)、溴氟菊酯(brofluthrinate)、乙基溴硫磷(bromophos-e)、溴螨酯(bromopropylate)、Bt-玉米-GM(Bt-Corn-GM)、Bt-大豆-GM(Bt-Soya-GM)、辣椒素(capsaicin)、杀螟丹(cartap)、南蛇藤提取物(celastrus-extract)、氯虫酰胺
(chlorantraniliprole)、灭幼脲(chlorbenzuron)、氯氧磷(chlorethoxyfos)、氯弗虫脲(chlorfluazuron)、毒死蜱-乙基(chlorpyrifos-e)、蛇床素(cnidiadin)、晶石(cryolite)、杀螟腈(cyanophos)、氰虫酰胺(cyantraniliprole)、氯氟氰菊酯
(cyhalothrin)、三环锡(cyhexatin)、氯氰菊酯(cypermethrin)、离额茧蜂(dacnusa)、DCIP、二氯丙烯(dichloropropene)、三氯杀螨醇(dicofol)、潜蝇姬小蜂属(diglyphus)、潜蝇姬小蜂属+离额茧蜂属(diglyphus+dacnusa)、混灭威(dimethacarb)、二甲基二硫醚(dithioether)、乙酸十二烷酯、甲氨基阿维菌素(emamectin)、恩蚜小蜂属(encarsia)、EPN、浆角蚜小蜂属(eretmocerus)、二溴乙烯、桉叶脑(eucalyptol)、脂肪酸、脂肪酸/盐、喹螨醚(fenazaquin)、仲丁威(BPMC)、唑螨酯(fenpyroximate)、氟氰戊菊酯
(flubrocythrinate)、氟螨嗪(flufenzine)、伐虫脒(formetanate)、安果磷(formothion)、呋线威(furathiocarb)、γ-氯氟氰菊酯(gamma-cyhalothrin)、大蒜汁(garlic-juice)、颗粒体病毒、瓢虫(harmonia)、棉铃实夜蛾核多面体病毒(Heliothis armigera NPV)、非活性细菌(inactive bacterium)、吲哚-3-基丁酸(indol-3-ylbutyric acid)、碘代甲烷、铁、水胺硫磷(isocarbofos)、异柳磷(isofenphos)、异柳磷-甲基(isofenphos-m)、异丙威(isoprocarb)、叶蚜磷(isothioate)、高岭土、林丹(lindane)、浏阳霉素(liuyangmycin)、苦参碱(matrine)、地胺磷(mephosfolan)、聚乙醛、金龟子绿僵菌(Metarhizium anisopliae)、甲胺磷(methamidophos)、速灭威(metolcarb)(MTMC)、矿物油、灭蚁灵(mirex)、m-异硫氰酸酯(m-isothiocyanate)、杀虫单(monosultap)、疣孢漆斑菌(Myrothecium verrucaria)、二溴磷(naled)、华釉小蜂属(Neochrysocharis formosa)、尼古丁、烟碱、油、油酸、氧乐果(omethoate)、小花蝽属(orius)、氧化苦参碱(oxymatrine)、拟青霉菌(paecilomyces)、石蜡油、对硫磷-乙基(parathion-e)、巴斯德氏菌属(pasteuria)、石油类油(petroleum-oil)、信息素(pheromones)、磷酸、无色杆菌属(photorhabdus)、辛硫磷(phoxim)、植绥螨属(phytoseiulus)、嘧啶磷-乙基(pirimiphos-e)、植物油、抗溴氰菊酯小菜蛾(Plutella xylostella)GV、多面体病毒、多酚提取物、油酸钾、丙溴磷
(profenofos)、补骨内酯(prosuler)、丙硫磷(prothiofos)、吡唑硫磷(pyraclofos)、除虫菊酯(pyrethrins)、哒嗪硫磷(pyridaphenthion)、嘧螨醚(pyrimidifen)、吡丙醚(pyriproxifen)、基亚伊提取物(quillay-extract)、灭螨猛(quinomethionate)、菜油(rape-oil)、鱼藤(rotenone)、皂苷(saponin)、saponozit、钠化合物、硅氟酸钠、淀粉、斯氏线虫属(steinernema)、葡萄球菌链霉菌属(streptomyces)、氟虫胺(sulfluramid)、硫、丁基嘧啶磷(tebupirimfos)、七氟菊酯(tefluthrin)、双硫磷(temephos)、得脱蟎(tetradifon)、久效威(thiofanox)、甲基乙拌磷(thiometon)、基因转殖(transgenics)(例如Cry3Bb1)、唑蚜威(triazamate)、木霉属(trichoderma)、赤眼蜂属(trichogramma)、杀铃脲(triflumuron)、轮枝孢病(verticillium)、藜芦碱(vertrine)、异构杀昆虫剂(例如κ-联苯菊酯、κ-七氟菊酯)、dichoromezotiaz、溴虫氟苯双酰胺(broflanilide)、pyraziflumid;
A1)氨基甲酸酯类,包括:涕灭威、棉铃威、丙硫克百威、甲萘威、克百威、丁硫克百威、甲硫威、灭多威、杀线威、抗蚜威、残杀威和硫双威;A2)有机磷酸酯类,包括:乙酰甲胺磷、益棉磷、保棉磷、毒虫畏、毒死蜱、毒死蜱-甲基、甲基内吸磷、二嗪农、敌敌畏/DDVP、百治磷、乐果、乙拌磷、乙硫磷、杀螟硫磷、倍硫磷、恶唑磷、马拉硫磷、甲胺磷、杀扑磷、速灭磷、久效磷、氧乐果(oxymethoate)、亚砜磷、对硫磷、对硫磷-甲基、稻丰散、甲拌磷、伏杀硫磷、亚胺硫磷、磷胺、嘧啶磷-甲基、喹硫磷、特丁硫磷、杀虫畏、三唑磷和敌百虫;A3)环戊二烯有机氯化合物类,例如硫丹;A4)苯基吡唑(fiproles)类,包括:乙虫清(ethiprole)、氟虫腈、匹弗普罗(pyrafluprole)和哌普罗(pyriprole);A5)新烟碱类,包括啶虫脒、噻虫胺
(clothianidin)、呋虫胺、吡虫啉、烯啶虫胺、噻虫啉以及噻虫嗪;A6)多杀菌素类(spinosyns),例如斯哌特姆(Spinetoram)和多杀菌素(Spinosad);A7)菌素(mectins)类的氯通道活化剂,包括阿巴菌素、甲氨基阿维菌素-苯甲酸盐、双氢除虫菌素、勒皮菌素和弥拜菌素;A8)保幼激素模拟物(juvenile hormone mimics),例如氢化保幼素(hydroprene)、丙诺保幼素(kinoprene)、美赐平(methoprene)、苯氧威和吡丙醚;A9)选择性同翅类取食阻滞剂,例如吡蚜酮、氟啶虫酰胺和氟虫吡喹;A10)螨生长抑制剂,例如四螨嗪、噻螨酮(hexythiazox)和乙螨唑;A11)线粒体ATP合成酶的抑制剂,例如丁醚脲、苯丁锡
(fenbutatin oxide)和克螨特;氧化磷酸化的解偶联剂,例如虫螨腈;A12)烟碱乙酰胆碱受体通道阻断剂,例如杀虫磺、杀螟丹盐酸盐、杀虫环和杀虫双;A13)来自苯甲酰脲类的0型几丁质生物合成抑制剂,包括双三氟虫脲(bistrifluron)、二氟脲、氟虫脲、氟铃脲、虱螨脲、氟酰脲和氟苯脲;A14)1型几丁质生物合成抑制剂,例如噻嗪酮(buprofezin);A15)蜕皮干扰剂,例如灭蝇胺(cyromazine);A16)蜕皮激素受体激动剂,例如甲氧虫酰肼、虫酰肼、氯虫酰肼和环虫酰肼(chromafenozide);A17)章鱼胺受体激动剂,例如双甲脒;A18)线粒体复合物电子转移抑制剂,哒螨灵、吡螨胺、唑虫酰胺、嘧虫胺、腈吡螨酯(cyenopyrafen)、丁氟螨酯(cyflumetofen)、伏蚁腙(hydramethylnon);灭螨醌或嘧螨酯(fluacrypyrim);A19)电压依赖性钠通道阻断剂,例如茚虫威和氰氟虫腙(metaflumizone);A20)脂合成抑制剂,例如季酮螨酯(spirodiclofen)、螺甲螨酯(spiromesifen)和螺四胺酸酯(spirotetramat);
A21)来自二酰胺类的雷诺定受体调节剂,包括:氟虫双酰胺、邻苯二甲酰胺化合物(R)-3-氯-N1-{2-甲基-4-[1,2,2,2-四氟-1-(三氟甲基)乙基]苯基}-N2-(1-甲基-2-甲基磺酰基乙基)邻苯二甲酰胺和(S)-3-氯-N1-{2-甲基-4-[1,2,2,2-四氟-1-(三氟甲基)乙基]苯基}-N2-(1-甲基-2-甲基磺酰基乙基)邻苯二甲酰胺、氯虫酰胺(chlorantraniliprole)和氰虫酰胺(cyantraniliprole);A22)作用模式未知或不确定的化合物,例如印苦楝子素、酰胺弗特(amidoflumet)、联苯肼酯(Bifenazate)、联氟砜(fluensulfone)、胡椒基丁醚、啶虫丙醚、杀弗乐(Sulfoxaflor);或A23)来自拟除虫菊酯类的钠通道调节剂,包括氟酯菊酯、丙烯菊酯、联苯菊酯、氟氯氰菊酯、λ-氯氟氰菊酯、氯氰菊酯、α-氯氰菊酯、β-氯氰菊酯、ζ-氯氰菊酯、溴氰菊酯、顺式氰戊菊酯、醚菊酯、甲氰菊酯、氰戊菊酯、氟氰戊菊酯、τ-氟胺氰菊酯、氯菊酯、氟硅菊酯和四溴菊酯。
[0106] 杀真菌剂:B0)苯威吡氟(benzovindiflupyr)、抗霜霉剂(anitiperonosporic)、辛唑嘧菌胺(ametoctradin)、吲唑磺菌胺(amisulbrom)、铜盐(例如氢氧化铜、氯氧化铜、硫酸铜、过硫酸铜)、啶酰菌胺(boscalid)、噻呋酰胺(thiflumazide)、氟酰胺(flutianil)、呋霜灵(furalaxyl)、噻菌灵(thiabendazole)、麦锈灵(benodanil)、灭锈胺(mepronil)、异丙噻菌胺(isofetamid)、甲呋酰胺(fenfuram)、必杀芬(bixafen)、氟唑菌酰胺(fluxapyroxad)、戊苯吡菌胺(penflufen)、环丙吡菌胺(sedaxane)、丁香菌酯(coumoxystrobin)、烯肟菌酯(enoxastrobin)、氟菌螨酯(flufenoxystrobin)、唑菌酯(Pyraoxystrobin)、唑胺菌酯(pyrametostrobin)、三环吡菌威(triclopyricarb)、烯肟菌胺(fenaminstrobin)、苯氧菌胺(metominostrobin)、嘧啶肟草醚(pyribencarb)、消螨多(meptyldinocap)、三苯基乙酸锡(fentin acetate)、三苯基氯化锡(fentin chloride)、三苯基氢氧化锡(fentin hydroxide)、土霉素(oxytetracycline)、乙菌利(chlozolinate)、地茂散(chloroneb)、四氧硝基苯(tecnazene)、土菌灵(etridiazole)、依杜卡(iodocarb)、硫菌威(prothiocarb)、合成枯草芽孢杆菌(Bacillus  subtilis syn.)、解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)(例如菌株QST 713、FZB24、MBI600、D747)、互叶白千层(Melaleuca alternifolia)提取物、白花羽扇豆(Lupinus albus doce)提取物、BLAD多肽、啶菌噁唑(pyrisoxazole)、恶咪唑(oxpoconazole)、乙环唑(etaconazole)、胺苯吡菌酮
(fenpyrazamine)、萘替芳(naftifine)、特比萘芬(terbinafine)、井冈霉素
(validamycin)、丁吡吗啉(pyrimorph)、霜霉灭(valifenalate)、四氯苯酞(fthalide)、噻菌灵(probenazole)、异噻菌胺(isotianil)、昆布多糖(laminarin)、大虎杖(Reynoutria sachalinensis)的提取物、磷酸和磷酸盐、叶枯酞(teclofthalam)、唑菌嗪(triazoxide)、甲氧苯啶菌(pyriofenone)、有机油、酸氢钾、百菌清(chlorothalonil)、唑呋草(fluoroimide);B1)唑类,包括:联苯三唑醇、糠菌唑、环丙唑醇、苯醚甲环唑、烯唑醇、恩康唑、氟环唑、氟喹唑、腈苯唑、氟硅唑、粉唑醇、己唑醇、亚胺唑、种菌唑、叶菌、腈菌唑、戊菌唑、丙环唑、丙硫菌唑、硅氟唑、三唑酮、三唑醇、戊唑醇、四氟醚唑、灭菌唑、咪鲜胺、稻瘟酯、抑霉唑、氟菌唑、氰霜唑、苯菌灵、多菌灵、硫杂-地巴唑(thia-bendazole)、麦穗宁、噻唑菌胺、土菌灵和恶霉灵、氮康唑、烯唑醇-M、恶咪唑、多效唑、烯效唑、1-(4-氯-苯基)-2-([1,2,
4]三唑-1-基)-环庚醇和抑霉唑硫酸盐;B2)甲氧基丙烯酸酯(strobilurins)类,包括:嘧菌酯、醚菌胺、烯肟菌酯、氟嘧菌酯、醚菌酯、苯氧菌胺(methominostrobin)、肟醚菌胺、啶氧菌酯、双唑草腈、肟菌酯、烯肟菌酯、(2-氯-5-[1-(3-甲基苄氧基亚氨基)乙基]苯基)氨基甲酸甲酯、(2-氯-5-[1-(6-甲基吡啶-2-基甲氧基亚氨基)乙基]苯基)氨基甲酸甲酯和2-(邻-(2,5-二甲基苯氧基亚甲基)-苯基)-3-甲氧基丙烯酸甲酯、2-(2-(6-(3-氯-2-甲基-苯氧基)-5-氟-嘧啶-4-基氧基-苯基)-2-甲氧基亚氨基-N-甲基-乙酰胺和3-甲氧基-2-(2-(N-(4-甲氧基-苯基)-环丙烷羧酰亚胺基-硫甲基)-苯基)-丙烯酸甲酯;B3)羧酰胺,包括:萎锈灵、苯霜灵、苯霜灵-M、环酰菌胺、氟酰胺、呋吡菌胺、灭锈胺、甲霜灵、高效甲霜灵、呋酰胺、恶霜灵、氧化萎锈灵、吡噻菌胺、吡唑萘菌胺、噻呋酰胺、噻酰菌胺、3,4-二氯-N-(2-氰基苯基)异噻唑-5-羧酰胺、烯酰吗啉、氟吗啉、氟酰菌胺、氟吡菌胺(微苯甲酰胺
(picobenzamid))、苯酰菌胺、环丙酰菌胺、双氯氰菌胺、双炔酰菌胺、N-(2-(4-[3-(4-氯苯基)丙-2-炔基氧基]-3-甲氧基苯基)乙基)-2-甲磺酰基-氨基-3-甲基丁酰胺、N-(2-(4-[3-(4-氯-苯基)丙-2-炔基氧基]-3-甲氧基-苯基)氧基)-2-乙烷磺酰氨基-3-甲基丁酰胺、3-(4-氯苯基)-3-(2-异丙氧基羰基-氨基-3-甲基-丁酰基氨基)丙酸甲酯、N-(4'-溴联苯基-
2-基)-4-二氟甲基-甲基噻唑-δ-羧酰胺、N-(4'-三氟甲基-联苯基-2-基)-4-二氟甲基-2-甲基噻唑-5-羧酰胺、N-(4'-氯-3'-氟联苯基-2-基)-4-二氟甲基-2-甲基-噻唑-5-羧酰胺、N-(3,4'-二氯-4-氟联苯基-2-基)-3-二氟-甲基-1-甲基-吡唑-4-羧酰胺、N-(3',4'-二氯-
5-氟联苯基-2-基)-3-三氟甲基-1-甲基吡唑-4-羧酰胺、N-(2-氰基-苯基)-3,4-二氯异噻唑-5-羧酰胺、2-氨基-4-甲基-噻唑-5-羧酰胺、2-氯-N-(1,1,3-三甲基-茚满-4-基)-烟酰胺、N-(2-(1,3-二甲基丁基)-苯基)-1,3-二甲基-5-氟-1H-吡唑-4-羧酰胺、N-(4'-氯-3',
5-二氟-联苯基-2-基)-3-二氟甲基-1-甲基-IH-吡唑-4-羧酰胺、N-(4'-氯-3',5-二氟-联苯基-2-基)-3-三氟甲基-1-甲基-1H-吡唑-4-羧酰胺、N-(3',4'-二氯-5-氟-联苯基-2-基)-3-三氟甲基-1-甲基-1H-吡唑-4-羧酰胺、N-(3',5-二氟-4'-甲基-联苯基-2-基)-3-二氟甲基-1-甲基-1H-吡唑-4-羧酰胺、N-(3',5-二氟-4'-甲基-联苯基-2-基)-3-三氟甲基-
1-甲基-1H-吡唑-4-羧酰胺、N-(顺式-2-二环丙基-2-基-苯基)-3-二氟甲基-1-甲基-1H-吡唑-4-羧酰胺、N-(反式-2-二环丙基-2-基-苯基)-3-二氟-甲基-1-甲基-1H-吡唑-4-羧酰胺、氟吡菌酰胺、N-(3-乙基-3,5-5-三甲基-环己基)-3-甲酰基氨基-2-羟基-苯甲酰胺、噻菌灵、硅噻菌胺、N-(6-甲氧基-吡啶-3-基)环丙烷羧酰胺、2-碘-N-苯基-苯甲酰胺、N-(2-二环-丙基-2-基-苯基)-3-二氟甲基-1-甲基吡唑-4-基羧酰胺、N-(3',4',5'-三氟联苯基-2-基)-1,3-二甲基吡唑-4-基羧酰胺、N-(3',4',5'-三氟联苯基-2-基)-1,3-二甲基-5-氟吡唑-4-基-羧酰胺、N-(3',4',5'-三氟联苯基-2-基)-5-氯-1,3-二甲基-吡唑-4-基羧酰胺、N-(3',4',5'-三氟联苯基-2-基)-3-氟甲基-1-甲基吡唑-4-基羧酰胺、N-(3',4',5'-三氟联苯基-2-基)-3-(氯氟甲基)-1-甲基吡唑-4-基羧酰胺、N-(3',4',5'-三氟联苯基-2-基)-
3-二氟甲基-1-甲基吡唑-4-基羧酰胺、N-(3',4',5'-三氟联苯基-2-基)-3-二氟甲基-5-氟-1-甲基吡唑-4-基羧酰胺、N-(3',4',5'-三氟联苯基-2-基)-5-氯-3-二氟甲基-1-甲基吡唑-4-基羧酰胺、N-(3',4',5'-三氟联苯基-2-基)-3-(氯二氟甲基)-1-甲基吡唑-4-基羧酰胺、N-(3',4',5'-三氟联苯基-2-基)-1-甲基-3-三氟甲基吡唑-4-基羧酰胺、N-(3',4',
5'-三氟联苯基-2-基)-5-氟-1-甲基-3-三氟甲基吡唑-4-基羧酰胺、N-(3',4',5'-三氟联苯基-2-基)-5-氯-1-甲基-3-三氟甲基吡唑-4-基羧酰胺、N-(2',4',5'-三氟联苯基-2-基)-1,3-二甲基吡唑-4-基羧酰胺、N-(2',4',5'-三氟联苯基-2-基)-1,3-二甲基-5-氟吡唑-4-基羧酰胺、N-(2',4',5'-三氟联苯基-2-基)-5-氯-1,3-二甲基吡唑-4-基羧酰胺、N-(2',4',5'-三氟联苯基-2-基)-3-氟甲基-1-甲基吡唑-4-基羧酰胺、N-(2',4',5'-三氟联苯基-2-基)-3-(氯氟甲基)-1-甲基吡唑-4-基羧酰胺、N-(2',4',5'-三氟联苯基-2-基)-3-二氟甲基-1-甲基吡唑-4-基羧酰胺、N-(2',4',5'-三氟联苯基-2-基)-3-二氟甲基-5-氟-
1-甲基吡唑-4-基羧酰胺、N-(2',4',5'-三氟联苯基-2-基)-5-氯-3-二氟甲基-1-甲基吡唑-4-基羧酰胺、N-(2',4',5'-三氟联苯基-2-基)-3-(氯二氟甲基)-1-甲基吡唑-4-基羧酰胺、N-(2',4',5'-三氟联苯基-2-基)-1-甲基-3-三氟甲基吡唑-4-基羧酰胺、N-(2',4',5'-三氟联苯基-2-基)-5-氟-1-甲基-3-三氟甲基吡唑-4-基羧酰胺、N-(2',4',5'-三氟联苯基-2-基)-5-氯-1-甲基-3-三氟甲基吡唑-4-基羧酰胺、N-(3',4'-二氯-3-氟联苯基-2-基)-1-甲基-3-三氟甲基-1H-吡唑-4-羧酰胺、N-(3',4'-二氯-3-氟联苯基-2-基)-1-甲基-
3-二氟甲基-1H-吡唑-4-羧酰胺、N-(3',4'-二氟-3-氟联苯基-2-基)-1-甲基-3-三氟甲基-
1H-吡唑-4-羧酰胺、N-(3',4'-二氟-3-氟联苯基-2-基)-1-甲基-S-二氟甲基-1H-吡唑-4-羧酰胺、N-(3'-氯-4'-氟-3-氟联苯基-2-基)-1-甲基-3-二氟甲基-1H-吡唑-4-羧酰胺、N-(3',4'-二氯-4-氟联苯基-2-基)-1-甲基-3-三氟甲基-1H-吡唑-4-羧酰胺、N-(3',4'-二氟-4-氟联苯基-2-基)-1-甲基-S-三氟甲基-IH-吡唑-4-羧酰胺、N-(3',4'-二氯-4-氟联苯基-2-基)-1-甲基-3-二氟甲基-1H-吡唑-4-羧酰胺、N-(3',4'-二氟-4-氟联苯基-2-基)-1-甲基-3-二氟甲基-1H-吡唑-4-羧酰胺、N-(3'-氯-4'-氟-4-氟联苯基-2-基)-1-甲基-S-二氟甲基-IH-吡唑-羧酰胺、N-(3',4'-二氯-5-氟联苯基-2-基)-1-甲基-3-三氟甲基-1H-吡唑-4-羧酰胺、N-(3',4'-二氟-5-氟联苯基-2-基)-1-甲基-3-三氟甲基-1H-吡唑-4-羧酰胺、N-(3',4'-二氯-5-氟联苯基-2-基)-1-甲基-S-二氟甲基-IH-吡唑-羧酰胺、N-(3',4'-二氟-5-氟联苯基-2-基)-1-甲基-3-二氟甲基-1H-吡唑-4-羧酰胺、N-(3',4'-二氯-5-氟联苯基-2-基)-1,3-二甲基-1H-吡唑-4-羧酰胺、N-(3'-氯-4'-氟-5-氟联苯基-2-基)-1-甲基-3-二氟甲基-1H-吡唑-4-羧酰胺、N-(4'-氟-4-氟联苯基-2-基)-1-甲基-3-三氟甲基-
1H-吡唑-4-羧酰胺、N-(4'-氟-5-氟联苯基-2-基)-1-甲基-3-三氟甲基-1H-吡唑-4-羧酰胺、N-(4'-氯-5-氟联苯基-2-基)-1-甲基-3-三氟甲基-1H-吡唑-4-羧酰胺、N-(4'-甲基-5-氟联苯基-2-基)-1-甲基-3-三氟甲基-1H-吡唑-4-羧酰胺、N-(4'-氟-5-氟联苯基-2-基)-
1,3-二甲基-1H-吡唑-4-羧酰胺、N-(4'-氯-5-氟联苯基-2-基)-1,3-di甲基-1H-吡唑-4-羧酰胺、N-(4'-甲基-5-氟联苯基-2-基)-1,3-二甲基-1H-吡唑-4-羧酰胺、N-(4'-氟-6-氟联苯基-2-基)-1-甲基-3-三氟甲基-1H-吡唑-4-羧酰胺、N-(4'-氯-6-氟联苯基-2-基)-1-甲基-3-三氟甲基-1H-吡唑-4-羧酰胺、N-[2-(1,1,2,3,3,3-六氟丙氧基)-苯基]-3-二氟甲基-1-甲基-1H-吡唑-4-羧酰胺、N-[4'-(三氟甲基硫)-联苯基-2-基]-3-二氟甲基-1-甲基-
1H-吡唑-4-羧酰胺、和N-[4'-(三氟甲基硫-联苯基-2-基]-1-甲基-3-三氟甲基-1-甲基-
1H-吡唑-4-羧酰胺;B4)杂环化合物,包括:氟啶胺、啶斑肟、乙嘧酚磺酸酯、嘧菌环胺、氯苯嘧啶醇、嘧菌腙、嘧菌胺、氟苯嘧啶醇、嘧霉胺、嗪胺灵、拌种咯、咯菌腈、阿尔迪莫、十二环吗啉、丁苯吗啉、十三吗啉、苯锈啶、异菌脲、腐霉利、乙烯菌核利、噁唑酮菌、咪唑菌酮、辛噻酮、烯丙苯噻唑、5-氯-7-(4-甲基-哌啶-1–基)-6-(2,4,6-三氟苯基)-[1,2,4]三唑并[1,5-a]嘧啶、敌菌灵、哒菌酮、咯喹酮、丙氧喹啉、三环唑、2-丁氧基-6-碘-3-丙基色原-4-酮、阿拉酸式苯-S-甲基、敌菌丹、克菌丹、棉隆、灭菌丹、氰菌胺、苯氧喹啉、N,N-二甲基-3-(3-溴-
6-氟-2-甲基吲哚-1-磺酰基)-[1,2,4]三唑-1-磺酰胺、5-乙基-6-辛基-[1,2,4]三唑并[1,
5-a]嘧啶-2,7-二胺、2,3,5,6-四氯-4-甲磺酰基-吡啶、3,4,5-三氯-吡啶-2,6-二-腈、N-(1-(5-溴-3-氯-吡啶-2-基)-乙基)-2,4-二氯-烟酰按、N-((5-溴-3-氯吡啶-2-基)-甲基)-
2,4-二氯-烟酰按、二氟林、氯定、乙酸十二环吗啉、氟菌胺、灰瘟素、喹菌酮、咪菌威、野燕枯、苯敌快-甲基硫酸盐、恶喹酸和病花灵;B5)氨基甲酸酯类,选自:代森锰锌、代森锰、威百亩、甲硫威(methasulphocarb)、代森联、福美铁、丙森锌、福美双、代森锌、福美锌、乙霉威、异丙菌威、苯噻菌胺、霜霉威、霜霉威盐酸盐、4-氟苯基N-(1-(1-(4-氰基苯基)-乙磺酰基)丁-2-基)氨基甲酸酯、3-(4-氯-苯基)-3-(2-异丙氧基羰基氨基-3-甲基-丁酰基氨基)丙酸甲酯;
[0107] 或B6)其它杀真菌剂,包括:胍、多果定、多果定游离碱、双胍辛胺、双胍盐、抗生素:春雷霉素、土霉素及其盐、链霉素、多抗霉素、井冈霉素A、硝基苯基衍生物:乐杀螨、消螨普、消螨通、含硫杂环基化合物:二噻农、稻瘟灵、有机金属化合物:三苯锡盐、有机磷化合物:敌瘟磷、异稻瘟净、三乙膦酸、三乙膦酸铝、磷酸和其盐、吡菌磷、甲基立枯磷、有机氯化合物:
苯氟磺胺、磺菌胺、六氯苯、四氯苯酞、戊菌隆、五氯硝基苯、硫菌灵、甲基硫菌灵、对甲抑菌灵,其它:环氟菌胺、霜脲氰、甲菌定、乙嘧酚、呋霜灵、苯菌酮和螺环菌胺、双胍辛胺乙酸盐、双胍辛胺三乙酸盐(iminoctadine-triacetate)、双胍辛胺三烷苯磺酸盐、春雷霉素盐酸盐水合物、双氯酚、五氯苯酚及其盐、N-(4-氯-2-硝基-苯基)-N-乙基-4-甲基-苯磺酰胺、氯硝胺、酞菌酯、四氧硝基苯(tecnazen)、联苯、溴硝丙二醇、二苯胺、米多霉素、喹啉铜、调环酸、N-(环丙基甲氧基亚氨基-(6-二氟甲氧基-2,3-二氟-苯基)-甲基)-2-苯基乙酰胺、N'-(4-(4-氯-3-三氟甲基-苯氧基)-2,5-二甲基-苯基)-N-乙基-N-甲基甲脒、N'-(4-(4-氟-3-三氟甲基-苯氧基)-2,5-二甲基-苯基)-N-乙基-N-甲基甲脒、N'-(2-甲基-5-三氟甲基-4-(3-三甲基硅烷基-丙氧基)-苯基)-N-乙基-N-甲基甲脒和N'-(5-二氟甲基-2-甲基4-(3-三甲基硅烷基-丙氧基)-苯基)-N-乙基-N-甲基甲脒。
[0108] 除草剂:C1)乙酰-CoA羧基酶抑制剂(ACC),例如环己酮肟醚,如禾草灭(alloxydim)、烯草酮(clethodim)、克劳普草酮(cloproxydim)、噻草酮(cycloxydim)、烯禾定(sethoxydim)、肟草酮(tralkoxydim)、丁苯草酮(butroxydim)、环苯草酮(clefoxydim)或吡喃草酮(tepraloxydim);苯氧基苯氧基丙酸酯,如炔草酯(clodinafop-propargyl)、氰氟草酯(cyhalofop-butyl)、禾草灵(diclofop-methyl)、恶唑禾草灵(fenoxaprop-ethyl)、精恶唑禾草灵(fenoxaprop-P-ethyl)、噻唑禾草灵(fenthiapropethyl)、吡氟禾草灵(fluazifop-butyl)、精吡氟禾草灵(fluazifop-P-butyl)、吡氟氯禾灵-乙氧基乙基(haloxyfop-ethoxyethyl)、氟吡甲禾灵(haloxyfop-methyl)、高效氟吡甲禾灵
(haloxyfop-P-methyl)、异恶草醚(isoxapyrifop)、喔草酯(propaquizafop)、喹禾灵(quizalofop-ethyl)、精喹禾灵(quizalofop-P-ethyl)或喹禾灵(quizalofop-tefuryl);
或芳基氨基丙酸,如草氟安(flamprop-methyl)或麦草氟异丙酯(flamprop-isopropyl);
C2)乙酰乳酸合酶抑制剂(ALS),例如咪唑啉酮(imidazolinones),如咪唑烟酸(imazapyr)、灭草喹(imazaquin)、咪草酸-甲基(imazamethabenz-methyl)(imazame)、甲氧咪草烟(imazamox)、甲基咪草烟(imazapic)或咪唑乙烟酸(imazethapyr);嘧啶醚,如嘧硫酸(pyrithiobac-acid)、嘧硫草醚钠(pyrithiobac-sodium)、双草醚钠(bispyribac-sodium)。KIH-6127或嘧苯恶(pyribenzoxym);磺酰胺(sulfonamides)、例如双氟磺草胺(florasulam)、唑嘧磺草胺(flumetsulam)或磺草唑胺(metosulam);或磺酰脲
(sulfonylureas)、例如酰嘧磺隆(amidosulfuron)、四唑嘧磺隆(azimsulfuron)、苄嘧磺隆-甲基(bensulfuron-methyl)、氯嘧磺隆-乙基(chlorimuron-ethyl)、氯磺隆
(chlorsulfuron)、醚磺隆(cinosulfuron)、环丙嘧磺隆(cyclosulfamuron)、胺苯磺隆(ethametsulfuron-methyl)、乙氧嘧磺隆(ethoxysulfuron)、啶嘧磺隆(flazasulfuron)、氯吡嘧磺隆-甲基(halosulfuron-methyl)、唑吡嘧磺隆(imazosulfuron)、甲磺隆-甲基(metsulfuron-methyl)、烟嘧磺隆(nicosulfuron)、氟嘧磺隆-甲基(primisulfuron-methyl)、氟磺隆(prosulfuron)、吡嘧磺隆-乙基(pyrazosulfuron-ethyl)、砜嘧磺隆(rimsulfuron)、甲嘧磺隆-甲基(sulfometuron-methyl)、噻吩磺隆(thifensulfuron-methyl)、醚苯磺隆(triasulfuron)、苯甲磺隆(tribenuron-methyl)、氟胺磺隆-甲基(triflusulfuron-methyl)、三氟甲磺隆(tritosulfuron)、将磺酰磺隆(sulfosulfuron)、比甲酰胺磺隆(foramsulfuron)or碘磺隆(iodosulfuron);C3)酰胺,例如草毒死
(allidochlor)(CDAA)、新燕灵(benzoylprop-ethyl)、溴丁酰草胺(bromobutide)、氯硫酰草胺(chlorthiamid)、草乃敌(diphenamid)、乙氧苯草胺(etobenzanid)(benzchlomet)、噻唑草酰胺(fluthiamide)、杀木磷(fosamin)或杀草利(monalide);C4)植物生长素除草剂,例如吡啶甲酸,例如二氯吡啶酸(clopyralid)或毒莠定(picloram);或者2,4-D或草除灵(benazolin);C5)植物生长素转移抑制剂,例如抑草生(naptalam)或氟吡草腙
(diflufenzopyr);C6)类胡萝卜素生物合成抑制剂,例如吡草酮(benzofenap)、异恶草酮(clomazone)(dimethazone)、吡氟草胺(diflufenican)、氟咯草酮(fluorochloridone)、氟啶酮、吡唑特(pyrazolynate)、苄草唑(pyrazoxyfen)、异恶唑草酮(isoxaflutole)、氯草酮(isoxachlortole)、甲基磺草酮(mesotrione)、磺草酮(sulcotrione)(chlormesulone)、环己二酮(ketospiradox)、呋草酮、达草灭(norflurazon)或杀草强(amitrole);C7)EPSPS(5-烯醇丙酮莽草酸-3-磷酸合酶),例如草甘膦或硫复松(sulfosate);C8)谷氨酰胺合成酶抑制剂,例如双丙氨膦(bilanafos(bialaphos))或草丁膦铵;C9)脂质生物合成抑制剂,例如有酰替苯胺,例如莎稗磷或苯噻草胺;乙酰氯苯胺类,例如二甲噻草胺、S-二甲噻草胺、乙草胺(acetochlor)、甲草胺(alachlor)、去草胺、丁烯草胺、乙酰甲草胺(Diethatyl-ethyl)、二甲草胺、吡草胺、甲氧毒草安、S-甲氧毒草安、丙草胺(pretilachlor)、扑草胺、广草胺、特丁草胺、甲氧噻草胺或二甲苯草胺(xylachlor);硫脲,例如苏达灭除草剂、草灭特、燕麦敌、哌草丹、EPTC、禾草畏、草达灭、克草猛、苄草丹、禾草丹(benthiocarb)、野麦威或灭草猛;或者呋草黄(benfuresate)或氟草磺胺(perfluidone);C10)有丝分裂抑制剂,例如有氨基甲酸酯,例如黄草灵、雷克拉(carbetamid)、氯苯胺灵、坪草丹、炔敌稗(pronamid)(propyzamid)、苯胺灵或仲草丹;二硝基苯胺,例如贝尼芬(Benefin)、仲丁灵、敌乐胺(dinitramin)、乙丁烯氟灵(ethalfluralin)、氟消草(fluchloralin)、黄草消(oryzalin)、二甲戊灵(pendimethalin)、氨氟乐灵(prodiamine)或氟乐灵(trifluralin);吡啶,例如氟硫草定(dithiopyr)或噻唑烟酸(thiazopyr);或者丁胺磷、敌草索-二甲酯(DCPA)或马来酰肼;C11)原卟啉IX原氧化酶抑制剂,例如有二苯基醚(diphenyl ethers),例如氟草醚(acifluorfen)、氟锁草醚-钠(acifluorfen-sodium)、苯草醚、甲羧除草醚(bifenox)、全灭草(chlomitrofen)(CNP)、氯氟草醚(ethoxyfen)、消草醚(fluorodifen)、乙羧氟草醚(fluoroglycofen-ethyl)、氟磺胺草醚(fomesafen)、氟呋草醚(furyloxyfen)、乳氟禾草灵(lactofen)、除草醚(nitrofen)、三氟甲草醚(nitrofluorfen)或乙氧氟草醚
(oxyfluorfen);噁二唑,例如恶草酮(oxadiargyl)或丙炔恶草酮(oxadiazon);环酰亚胺,例如唑啶草酮(azafenidin)、氟丙嘧草酯(butafenacil)、唑酮草酯(carfentrazone)、乙基唑酮草酯、吲哚酮草酯(cinidon-ethyl)、氟烯草酸(flumiclorac-pentyl)、丙炔氟草胺(flumioxazine)、炔草胺(flumipropyn)、丙嘧草酯(flupropacil)、氟噻乙草酯-甲基(fluthiacet-methyl)、甲磺草胺或噻二唑草胺(thidiazimin);或者吡唑,例如ET-751、JV 
485吡氯草胺(nipyraclofen);C12)光合作用抑制剂,例如有敌稗(propanil)、哒草特(pyridate)或哒草醇(pyridafol);苯并硫杂二嗪农,例如噻草平;二硝基酚,例如杀草全(bromofenoxim)、地乐酚(dinoseb)、地乐酚-乙酸酯、乐消(dinoterb)或DNOC;双亚吡啶基(dipyridylenes),例如牧草快(cyperquat)-氯化物、苯敌快-甲基硫酸盐、敌草快(diquat)或百草枯-二氯化物;脲,例如氯溴隆、绿麦隆、枯莠隆、恶唑隆、敌草隆、磺噻隆(ethidimuron)、非草隆、伏草隆、异丙隆、异恶隆(isouron)、利谷隆、噻唑隆
(methabenzthiazuron)、灭草定(methazole)、吡喃隆、甲氧隆、绿谷隆、草不隆、环草隆或丁噻隆(tebuthiuron);苯酚,例如溴苯腈或碘苯腈(ioxynil);氯草敏(chloridazon);三嗪,例如莠灭净(ametryn)、莠去津、草净津、desmein、dimethamethryn、环嗪酮(hexazinone)、扑灭通(prometon)、扑草净(prometryn)、扑灭津、西玛津、西草净(simetryn)、甲氧去草净(terbumeton)、去草净(terbutryn)、特丁津或草达津;三嗪酮、例如苯嗪草酮(metamitron)或赛克津(metribuzin);尿嘧啶,例如除草定(bromacil)、环草定(lenacil)或特草定(terbacil);或双氨基甲酸酯,例如双苯胺灵或苯敌草;C13)增效剂,例如有环氧乙烷,例如灭草环;C14)CIS细胞壁合成抑制剂,例如异恶草胺(isoxaben)或敌草腈(dichlobenil);
C15)多种其他除草剂,例如有二氯丙酸(dichloropropionic acids),例如茅草枯(dalapon);二氢苯并呋喃,例如乙氧呋草黄(ethofumesate);苯乙酸,例如伐草克(fenac);
或者叠氮净(aziprotryne)、燕麦灵(barban)、地散磷、噻草隆(benzthiazuron)、氟草黄、丁环草磷、丁硫咪唑酮、播土隆、苯酮唑(cafenstrole)、氯草灵、燕麦酯-甲基(chlorfenprop-methyl)、枯草隆、环庚草醚、苄草隆(cumyluron)、环莠隆(cycluron)、环草津(cyprazine)、三环塞草胺、苄草隆(dibenzyluron)、杀草净(dipropetryn)、杀草隆(dymron)、艾格林津(eglinazine)-乙基、草藻灭(endothall)、乙嗪草酮(ethiozin)、氟酮磺隆(flucabazone)、氟苯草灭(fluorbentranil)、氟胺草唑(flupoxam)、草特灵、异乐灵(isopropalin)、卡灵草(karbutilate)、抑长灵、灭草隆、敌草胺、萘丙胺(naproanilide)、磺乐灵(nitralin)、恶嗪草酮(oxaciclomefone)、棉胺宁、哌草磷、普赛津(procyazine)、环丙氟灵(profluralin)、稗草畏、密草通(secbumeton)、草克死(CDEC)、芽根灵(terbucarb)、吡嘧磺隆
(triaziflam)、triazofenamid或三甲隆;或它们的环境可兼容盐。
[0109] 杀线虫剂或生物杀线虫剂(bionematicides):苯菌灵、二氧威、涕灭砜威、环线威(tirpate)、二胺磷(diamidafos)、苯线磷、硫线磷、除线磷(diclofenthion)、灭线磷、丰索磷、噻唑膦(fostiazate)、速杀硫磷(heterophos)、氯氨磷(isamidofos)、氯唑磷(isazofos)、磷虫威、硫磷嗪、新烟磷(imicyafos)、甲基灭蚜磷、乙酰虫腈(acetoprole)、苯鲁噻唑(benclothiaz)、氯化苦、棉隆、联氟砜(fluensulfone)、1,3-二氯丙烯(telone)、二甲基二硫醚、威百亩(metam sodium)、威百亩钾(metam potassium),安百亩(metam)盐(所有的MITC产生物),溴甲烷(methyl bromide)、生物土壤修复剂(例如芥末籽、芥末籽提取物)、土壤蒸汽熏蒸、异硫氰酸烯丙酯(allyl isothiocyanate)(AITC)、硫酸二甲酯(dimethyl sulfate)、糠醛(furfual)(醛)。
[0110] 本发明的合适的植物生长调节剂包括以下:植物生长调节剂:D1)抗生长素(antiauxins),例如氯贝酸、2,3,5-三-碘苯甲酸;D2)生长素,例如4-CPA、2,4-D、2,4-DB、2,4-DEP、滴丙酸、2,4,5-涕丙酸、IAA、IBA、萘乙酰胺、[α]-萘乙酸、1-萘酚、萘氧乙酸、环烷酸钾、环烷酸钠、2,4,5-T;D3)细胞激动素,例如2iP、苄基腺嘌呤、4-羟基苯乙基醇、激动素、玉米素;D4)落叶剂,例如氰氨化钙、噻节因、草藻灭、乙烯利、脱叶亚磷(merphos)、甲氧隆、五氯苯酚、噻苯隆、脱叶磷(tribufos);D5)乙烯抑制剂,例如四烯雌酮、1-甲基环丙烯;D6)乙烯释放剂,例如ACC、乙烯硅、乙烯利、乙二肟;D7)杀配子剂(gametocides),例如杀雄嗪、马来酰肼(maleic hydrazide);D8)赤霉素,例如赤霉素、赤霉酸;D9)生长抑制剂,例如脱落酸、嘧啶醇、仲丁灵、西维因、三丁氯苄膦、氯苯胺灵、调呋酸、氟节胺、增糖胺、杀木磷、增甘膦、异嘧醇(isopyrimol)、茉莉酸、马来酰肼、助壮素(mepiquat)、哌壮素、茉莉酮、苯胺灵、调节胺(tiaojiean)、2,3,5-三-碘苯甲酸;D10)形态素,例如整形素、整形醇、二氯芴丁酯、芴丁酯;D11)生长阻滞剂,例如矮壮素、亚拉生长素、调嘧醇、抑长灵、多效唑、四环唑、烯效唑;D12)生长刺激剂,例如芸苔素内酯、乙基芸苔素内酯(brassinolide-ethyl)、DCPTA、氯吡脲、恶霉灵、补骨内酯(prosuler)、三十烷醇(triacontanol);D13)未分类的植物生长调节剂,例如菊乙胺酯(bachmedesh)、氟草黄、丁环草磷、香芹酮、氯化胆碱、苯氰丁酰胺(ciobutide)、苯哒嗪钾、氨腈、环丙酰胺酸、环己酰亚胺、环丙磺酰胺、爱增美(epocholeone)、吲唑酯、乙烯、呋苯硫脲(fuphenthiourea)、乙二醇缩糖醛(furalane)、增产肟、氯乙亚磺酸(holosulf)、抗倒胺、karetazan、砷酸铅、磺菌威、调环酸、比达农、杀雄啉、抑芽唑、抗倒酯(trinexapac)。
[0111] 所述肥料可以是液体肥料。术语液体肥料摂是指流体或液体形式的肥料,其含有各种比例的氮、磷和钾(例如但不限于10%的氮、34%的磷和0%的钾)以及微量养料,所述微量养料通常称作起始肥料,其具有高含磷量并且促进快速且茁壮的根生长。
[0112] 本发明的化学制剂可以是任意合适的常规形式,例如,乳液浓缩剂(EC)、悬浮液浓缩剂(SC)、混悬-乳液(suspo-emulsion)(SE)、胶囊悬浮液(CS)、水分散颗粒(WG)、可乳化颗粒(EG)、油包水乳液(EO)、水包油乳液(EW)、微乳(ME)、油分散体(OD)、油溶性可流动制剂(OF)、油溶性液体(OL)、可溶性浓缩剂(SL)、超低容量悬浮剂(SU)、超低容量液体(UL)、可分散的浓缩剂(DC)、可润湿粉末(WP)或任何技术上可行的制剂,与农业上可接受的辅料组合。
[0113] 在本发明的另一个实施方式中,提供一种用组合物包覆的植物种子,所述组合物包括以适合利于植物生长和/或保护易受影响的植物不受病原性感染的量存在的以ATCC第PTA-121166号保藏的解淀粉芽孢杆菌RTI472、或具有所有其识别特征的突变体的生物纯培养物的孢子。所述利于植物生长和/或保护呈现为改善的幼苗活力、改善的根发育、改善的植物生长、改善的植物健康、提高的产率、改善的外观、改善的植物病原体抗性、降低的病原体感染、或它们的组合。
[0114] 所述包覆在植物种子上的组合物可在约1.0×102CFU/种子~约1.0×109CFU/种子的量的范围内包括解淀粉芽孢杆菌孢子。
[0115] 所述植物种子可包括但不限于:单子叶植物、双子叶植物、谷类、玉米、甜玉米、爆米花玉米、种子玉米、青贮玉米、田地玉米、水稻、小麦、大麦、高粱、芸苔属蔬菜、花椰菜、卷心菜、菜花、球芽甘蓝、羽衣甘蓝、无头甘蓝、芥菜、球茎甘蓝、鳞茎类蔬菜、洋葱、大蒜、葱、果蔬、胡椒、番茄、茄子、草原樱桃、树番茄、秋葵、葡萄、草药/香料、葫芦科蔬菜、黄瓜、哈密瓜、甜瓜、香瓜、西葫芦、西瓜、南瓜、茄子、叶用蔬菜、莴苣、芹菜、菠菜、欧芹、菊苣、豆类/蔬菜(多汁的和干燥的豆和豌豆)、豆、青豆、豆荚、荚豆、大豆、干豆、鹰嘴豆、利马豆、豌豆、三角豆、裂荚豌豆、扁豆、油籽作物、坎诺拉油菜、蓖麻、棉花、亚麻、花生、油菜籽、红花、芝麻、向日葵、大豆、根/块茎和球茎蔬菜、胡萝卜、马铃薯、甜马铃薯、甜菜、姜、辣根、萝卜、人参、芜箐、甘蔗、甜菜、草、或草皮草的种子。
[0116] 在一个或多个实施方式中,所述植物种子还包括干豆、玉米、小麦、大豆、油菜、水稻、黄瓜、胡椒、番茄、西葫芦、棉花、草和草皮草的种子。
[0117] 通过包覆的植物种子处理的病原体感染可由以下的一种或多种植物病原体引起,包括但不限于:植物真菌病原体、植物细菌病原体、锈菌、葡萄孢属(Botrytis spp.)、灰葡萄孢(Botrytis cinerea)、葱鳞葡萄孢菌(Botrytis squamosa),欧文氏菌属(Erwinia spp.)、胡萝卜软腐欧文氏菌(Erwinia  carotovora)、解淀粉欧文氏菌(Erwinia amylovora)、镰孢属(Fusarium spp.)、黄色镰孢属(Fusarium colmorum)、禾谷镰孢菌(Fusarium graminearum)、尖镰孢(Fusarium oxysporum)、尖镰孢古巴专化型(Fusarium oxysporum  f.sp.Cubense)、尖镰孢番茄专化型(Fusarium  oxysporum f.sp.Lycopersici),北美大豆猝死综合症病菌(Fusarium virguliforme)、黄单胞菌属(Xanthomonas spp.)、地毯草黄单胞杆菌(Xanthomonas axonopodis)、野油菜黄单胞菌胡萝卜致病变种(Xanthomonas campestris pv.carotae)、桃李黄单胞菌(Xanthomonas pruni)、藤黄单胞菌(Xanthomonas arboricola),水稻黄单胞菌水稻致病变种
(Xanthomonas oryzae pv.oryzae)、假单胞菌属(Pseudomonas spp.)、丁香假单胞菌番茄致病变种(Pseudomonas syringae pv.Tomato)、疫霉属(Phytophthora spp.),致病疫霉(Phytophthora infestans),寄生疫霉(Phytophthora parasitica),大豆疫霉菌(Phytophthora sojae),辣椒疫霉菌(Phytophthora capsici),肉桂疫霉菌(Phytophthora cinnamon),草莓疫霉菌(Phytophthora fragariae),疫霉属(Phytophthora spp.),栎树疫霉菌(Phytophthora ramorum),棕榈疫霉菌(Phytophthora palmivara),烟草疫霉菌(Phytophthora nicotianae),丝核菌属(Rhizoctonia spp.),立枯丝核菌(Rhizoctonia solani),玉蜀黍丝核菌(Rhizoctonia zeae),稻枯斑丝核菌(Rhizoctonia oryzae),博爱丝核菌(Rhizoctonia caritae),小麦纹枯病菌(Rhizoctonia cerealis),番红花枯病菌(Rhizoctonia crocorum),草莓花枯病菌(Rhizoctonia fragariae),多枝丝核菌(Rhizoctonia ramicola),灌木枯病菌(Rhizoctonia rubi),豆类丝核菌(Rhizoctonia leguminicola),豆类壳球孢(Macrophomina phaseolina),稻瘟病菌(Magnaorthe oryzae),腐霉菌(Pythium spp)、终极腐霉(Pythium ultimum)、瓜果腐霉(Pythium aphanidermatum)、不规则腐霉(Pythium irregularum)、胡萝卜腐霉(Pythium ulosum)、鲁特里亚腐霉(Pythium lutriarium)、猝倒病腐霉(Pythium sylvatium)、黑粉霉属(Ustilago spp.)、裸黑粉菌(Ustilago nuda),玉米黑粉菌(Ustilago maydis),甘蔗黑粉菌(Ustilago scitaminea),麦角菌属(Claviceps spp.),麦角菌(Claviceps puprrea),腥黑粉菌属(Tilletia spp.),小麦腥黑粉菌(Tilletia tritici),亚腥黑粉菌(Tilletia laevis),刚毛腥黑粉菌(Tilletia horrid),小麦矮化腥黑粉菌(Tilletia controversa),茎点霉菌属(Phoma spp.),大豆茎点霉菌(Phoma glycinicola),棉花茎点霉菌(Phoma exigua),芸苔茎点霉菌(Phoma lingam),禾旋孢腔菌(Cocliobolus sativus),燕麦全蚀病菌(Gaeumanomyces gaminis)或毛盘孢属(Colleototricum spp.)或其组合。
[0118] 包覆在所述植物种子上的组合物还可包含微生物、生物或化学杀昆虫剂、杀真菌剂、杀线虫剂、杀细菌剂或植物生长调节剂中的一种或它们的组合,这些成分以适于有利植物生长和/或保护易受影响的植物不受病原性感染的量存在。所述杀昆虫剂可包括联苯菊酯。所述杀线虫剂可包括硫线磷。所述杀虫剂可包括联苯菊酯和噻虫胺。
[0119] 在本发明的另一实施方式中,提供一种利于植物生长和/或保护易受影响的植物不受病原性感染的方法,该方法包括:在合适的生长培养基中种植植物的种子或再生滋养/愈伤组织,其中,用包括以ATCC第PTA-121166号保藏的解淀粉芽孢杆菌RTI472、或具有所有其识别特征的突变体的生物纯培养物的组合物包覆种子或接种滋养/愈伤组织,使植物从种子或滋养/愈伤组织的生长受益和/或保护易不受病原性感染。所述利于植物生长和/或保护呈现为改善的幼苗活力、改善的根发育、改善的植物生长、改善的植物健康、提高的产率、改善的外观、改善的植物病原体抗性、降低的病原体感染、或它们的组合。
[0120] 在一个实施方式中,所述方法还可包括将液体肥料施用至:植物周围的土壤或生长培养基;在将植物种子播种在土壤或生长培养基中之前的土壤或生长培养基;或在将植物、植物的插枝、植物嫁接苗、或植物愈伤组织种植在土壤或生长培养基中之前的土壤或生长培养基。
[0121] 在一个实施方式中,提供一种方法以通过赋予保护易受影响的植物不受或降低病原性感染的方式利于植物生长,同时最小化对治疗抵抗的累积。所述方法包括以单独施用和以改变的时间间隔的方式递送第一组合物第二组合物至易受影响的植物,其中第一和第二组合物都以适于赋予保护植物不受或降低病原性感染的量递送以赋予保护植物不受或降低病原性感染。所述第一组合物包括以ATCC第PTA-121166号保藏的解淀粉芽孢杆菌RTI472、或具有所有其识别特征的突变体的生物纯培养物。所述第二组合物包括一种或多种具有抗真菌或抗细菌性能的化学活性试剂。在所述方法中,第一和第二组合物以改变的时间间隔的方式递送至植物的叶子、植物的皮、植物的果实、植物的花、植物的种子、植物的根、植物的插条、植物的嫁接苗、植物的愈伤组织或植物周围的土壤或生长培养基的一种或组合。在所述方法中,赋予保护不受和/或降低病原性感染所需的化学活性试剂的总量减少且对治疗抵抗的累积被最小化。所述利于植物生长和/或保护呈现为改善的幼苗活力、改善的根发育、改善的植物生长、改善的植物健康、提高的产率、改善的外观、改善的植物病原体抗性、降低的病原体感染、或它们的组合。
[0122] 所述第一组合物还可包含载体、表面活性剂、分散剂或酵母提取物中的一种或它们的组合。酵母提取物能够以约0.01%至0.2%w/w的有益植物生长的比例递送。
[0123] 在以通过赋予保护易受影响的植物不受或降低病原性感染的方式利于植物生长、同时最小化对治疗抵抗的累积的方法中,所述改变的时间间隔范围可以是1天~10天和5天到7天。第一次施用的时机可取决于特定作物,并且在种植时、作物出苗后的数周、开花时、疾病出现、或在预期出现疾病之前的范围内。第一和第二组合物可分别递送至植物的叶子、植物的果实、或植物的花。适合赋予保护植物不受或降低病原性感染的递送的量可以是约1.0×1010cfu/ha~约1.0×1014cfu/ha解淀粉芽孢杆菌RTI472和约0.01%~0.2%w/w酵母提取物。
[0124] 以单独施用和以改变的时间间隔的方式向易受影响的植物递送的一种或多种化学活性试剂例如可包括但不限于甲氧基丙烯酸酯、三唑、粉唑醇、戊唑醇、丙硫菌唑、氟环唑、氟吡菌酰胺、百菌清、甲基硫菌灵、氢氧化铜杀真菌剂、EDBC基杀真菌剂、代森锰锌、琥珀酸脱氢酶(SDHI)杀真菌剂、联苯吡菌胺、异菌脲、烯酰吗啉或霜霉灭(valifenalate)的一种或组合。
[0125] 以单独施用和以改变的时间间隔的方式向易受影响的植物递送的一个或多个化学活性试剂可包括氟吡菌酰胺加戊唑醇,且包含RTI472的第一组合物的递送可以替代百菌清杀真菌剂的递送。所述植物可以是葫芦且所述病原体感染可由白粉病引起。
[0126] 以单独施用和以改变的时间间隔的方式向易受影响的植物递送的一个或多个化学活性试剂可包括甲基硫菌灵杀真菌剂,且包含RTI472的第一组合物的递送可以替代丙硫菌唑杀真菌剂的递送。
[0127] 以单独施用和以改变的时间间隔的方式向易受影响的植物递送的一个或多个化学活性试剂可包括氢氧化铜杀真菌剂,且包含RTI472的第一组合物的递送可以替代百菌清杀真菌剂的递送。
[0128] 在一个实施方式中,提供一种产品,其包括以ATCC第PTA-121166号保藏的解淀粉芽孢杆菌RTI472、或具有所有其识别特征的突变体的生物纯培养物的第一组分;包括微生物、生物或化学杀昆虫剂、杀真菌剂、杀线虫剂、杀细菌剂、除草剂、植物提取物、植物生长调节剂或肥料的一种或组合的第二组分,其中第一和第二组分分开包装,且每个组分为适于利于植物生长和/或保护易受影响的植物不受病原性感染的量;以及使用说明,用于以适于有利于植物生长的量递送第一和第二组合物的组合至:植物的叶子、植物的皮、植物的果实、植物的花、植物的种子、植物的根、植物的插条、植物的嫁接苗、植物的愈伤组织;植物周围的土壤或生长培养基;在将植物种子播种在土壤或生长培养基中之前的土壤或生长培养基;或在将植物、植物的插枝、植物嫁接苗、或植物愈伤组织种植在土壤或生长培养基中之前的土壤或生长培养基。
[0129] 在所述产品中,所述杀昆虫剂可以是以下中的一种或它们的组合:拟除虫菊酯、联苯菊酯、七氟菊酯、ζ-氯氰菊酯、有机磷酸酯、四氯乙磷、毒死蜱、丁基嘧啶磷、氟氯氰菊酯、苯基吡唑类、氟虫腈、烟碱或噻虫胺。
[0130] 在所述产品中,第一组合物还可包含载体、表面活性剂、分散剂或酵母提取物中的一种或它们的组合。
[0131] 在所述产品中,第一和第二组合物各自的形式可以是液体、粉尘、可传播颗粒(spreadable granule)、干燥的可润湿粉末或干燥的可润湿颗粒。在一个实施方式中,第一组合物的形式为液体,并且解淀粉芽孢杆菌RTI472的浓度为约1.0×108CFU/ml~约1.0×1012CFU/ml。在一个实施方式中,第一组合物是粉尘、干燥的可润湿粉末、可传播颗粒、或干燥的可润湿颗粒的形式,并且解淀粉芽孢杆菌RTI472的量可以是约1.0×108CFU/g至约1.0×1012CFU/g。在一个实施方式中,第一组合物是油分散体的形式,并且解淀粉芽孢杆菌RTI472的浓度可以是约1.0×108CFU/ml至约1.0×1012CFU/ml。
[0132] 在本发明的一种实施方式中,提供一种组合物,所述组合物以适于保护易受影响的植物不受病原性感染的量包括分离的芬枯草菌素MA化合物、分离的芬枯草菌素MB化合物、分离的芬枯草菌素MC化合物、分离的脱羟基芬枯草菌素MA化合物、分离的脱羟基芬枯草菌素MB化合物、分离的芬枯草菌素H化合物、分离的芬枯草菌素I化合物、以及分离的脱羟基芬枯草菌素I化合物的至少一种,所述化合物具有式:
[0133]
[0134] 其中R为OH,n为8~20的范围,FA为线性、异构体、或反异构体,且:芬枯草菌素MA中X1为Ala,X2为Thr,且X3为Met;芬枯草菌素MB中X1为Val,X2为Thr,且芬枯草菌素MC中X3为Met;X1为Aba,X2为Thr,且X3为Met;芬枯草菌素H中X1为Val,X2为Thr,且X3为Hcy;且芬枯草菌素Il中X1为Ile,X2为Thr,且X3为Ile;且
[0135] 其中R为H,n为8~20的范围,FA为线性、异构体、或反异构体,且:脱羟基芬枯草菌素MA中X1为Ala,X2为Thr,且X3为Met;脱羟基芬枯草菌素MB中X1为Val,X2为Thr,且X3为Met;且脱羟基芬枯草菌素I中X1为Ile,X2为Thr,且X3为Ile。
[0136] 在另一个实施方式中,所述组合物还以适合利于植物生长和/或保护易受影响的植物不受病原性感染的量包括表XVI列出的额外的分离的类芬枯草菌素和类脱羟基芬枯草菌素中的一种或组合。
[0137] 所述利于植物生长和/或保护呈现为改善的幼苗活力、改善的根发育、改善的植物生长、改善的植物健康、提高的产率、改善的外观、改善的植物病原体抗性、降低的病原体感染、或它们的组合。
[0138] 芬枯草菌素-MA、-MB、-MC、-H、和-I化合物,和脱羟基芬枯草菌素-MA、-MB、和-I化合物,和额外的类芬枯草菌素和类脱羟基芬枯草菌素化合物的一种或组合可通过如下方式分离:首先,在本领域公知的合适的条件、例如包括但不限于在实施例中描述的条件下,培养RTI472解淀粉芽孢杆菌菌株、或另一种生产芬枯草菌素-MA、-MB、-MC、-H、和-I和脱羟基芬枯草菌素-MA、-MB、和-I化合物的解淀粉芽孢杆菌菌株,在869或M2培养基中培养菌株3~6天。存在于解淀粉芽孢杆菌培养物上清液中的类芬枯草菌素和类脱羟基芬枯草菌素环状脂肽可进一步使用本领域公知的方法分离。例如,解淀粉芽孢杆菌培养物上清液可如实施例16所述被酸化至pH2或用CaCl2(《Worldwide research efforts in the fighting against microbial pathogens:from basic  research to technological 
developments.》A.Mendez-Vilas(编辑)中的Ajesh,K等,2013,“Purification and characterization of antifungal lipopeptide from a soil isolated strain of Bacillus cereus.”227-231页)或NH4SO4(Kim,SH等,2000,Biotechnol Appl Biochem.31(Pt 3):249-253)处理的同时与如包括但不限于直接液体分配、膜超滤泡沫分级(Baker,SC等,2010,Adv Exp Med Biol.672:281-288)的多种相分离方式的有机萃取步骤(Kim,PI等,2004,J Appl Microbiol.97(5):942-949)组合。
[0139] 在一个实施方式中,列于表XVII的芬枯草菌素-MA、-MB、-MC、-H、和-I化合物,和脱羟基芬枯草菌素-MA、-MB、和-I化合物,和额外的类芬枯草菌素和类脱羟基芬枯草菌素化合物中的一种或组合可从产生这些化合物的解淀粉芽孢杆菌菌株的生物纯培养物中分离。
[0140] 在一个实施方式中,列于表XVII的芬枯草菌素-MA、-MB、-MC、-H、和-I化合物,和脱羟基芬枯草菌素-MA、-MB、和-I化合物,和额外的类芬枯草菌素和类脱羟基芬枯草菌素化合物中的一种或组合可从以ATCC第PTA-121166号保藏的解淀粉芽孢杆菌RTI472的生物纯培养物中分离。
[0141] 在一个实施方式中,提供一种解淀粉芽孢杆菌菌株的生物纯培养物的提取物,所述提取物包括芬枯草菌素-MA、-MB、-MC、-H、和-I化合物以及脱羟基芬枯草菌素-MA、-MB、和-I化合物以及表XVII列出的额外的类芬枯草菌素和类脱羟基芬枯草菌素化合物的一种或组合。
[0142] 在一个实施方式中,提供一种以ATCC第PTA-121166号保藏的解淀粉芽孢杆菌RTI472的生物纯培养物的提取物,所述提取物包括芬枯草菌素-MA、-MB、-MC、-H、和-I化合物以及脱羟基芬枯草菌素-MA、-MB、和-I化合物以及表XVII列出的额外的类芬枯草菌素和类脱羟基芬枯草菌素化合物的一种或组合。
[0143] 在一个实施方式中,列于表XVII的具有3341.6Da的分子量的分离的Ericin S化合物和具有2985.4Da的分子量的分离的Ericin A化合物,以及额外的类芬枯草菌素和类脱羟基芬枯草菌素化合物的一种或组合可从可生产这些化合物的解淀粉芽孢杆菌菌株的生物纯培养物中分离。
[0144] 在一个实施方式中,列于表XVII的具有3341.6Da的分子量的分离的Ericin S化合物和具有2985.4Da的分子量的分离的Ericin A化合物,以及额外的类芬枯草菌素和类脱羟基芬枯草菌素化合物的一种或组合可从以ATCC第PTA-121166号保藏的解淀粉芽孢杆菌RTI472的生物纯培养物中分离。
[0145] 在一个实施方式中,提供一种解淀粉芽孢杆菌的生物纯培养物的提取物,所述提取物包括具有3341.6Da的分子量的分离的Ericin S化合物或具有2985.4Da的分子量的分离的Ericin A化合物的至少一种。
[0146] 在一个实施方式中,提供一种以ATCC第PTA-121166号保藏的解淀粉芽孢杆菌RTI472的生物纯培养物的提取物,所述提取物包括具有3341.6Da的分子量的分离的Ericin S化合物或具有2985.4Da的分子量的分离的Ericin A化合物的至少一种。
[0147] 在一个实施方式中,提供一种组合物以适于保护易受影响的植物不受病原性感染的量包括具有3341.6Da的分子量的分离的Ericin S化合物和具有2985.4Da的分子量的分离的Ericin A化合物中的一种或两者。包括分离的Ericin S化合物和分离的Ericin A化合物的组合物可进一步包括芬枯草菌素-MA、-MB、-MC、-H、和-I化合物和脱羟基芬枯草菌素-MA、-MB、和-I化合物的至少一种,任选地包括额外的分离的类芬枯草菌素和类脱羟基芬枯草菌素化合物的一种或组合。
[0148] 包括Ericin S和Ericin A化合物,和芬枯草菌素-MA、-MB、-MC、-H、和-I化合物和脱羟基芬枯草菌素-MA、-MB、和-I化合物的至少一种,和任选的额外的分离的类芬枯草菌素和类脱羟基芬枯草菌素化合物的一种或组合的所述组合物可进一步包括微生物、生物或化学杀虫剂、杀真菌剂、杀线虫剂、杀细菌剂、除草剂、植物提取物、植物生长调节剂、或肥料的一种或组合,以适合利于植物生长和/或保护易受影响的植物不受病原性感染的量存在。
[0149] 所述杀真菌剂可包括来自白羽扇豆的提取物。所述杀真菌剂可包括BLAD多肽。所述BLAD多肽可以是来自甜羽扇豆(白羽扇豆)的天然产生的种子储藏蛋白,其通过引起真菌细胞壁损伤和扰乱内细胞膜来对易受影响的真菌病原体起作用。所述杀真菌剂可包括约20%的BLAD多肽。
[0150] 包括Ericin S和Ericin A化合物,和芬枯草菌素-MA、-MB、-MC、-H、和-I化合物和脱羟基芬枯草菌素-MA、-MB、和-I化合物的至少一种的所述组合物可以是液体、油分散体、粉尘、可传播颗粒、或干的可湿性颗粒的形式。
[0151] 在一个实施方式中,提供一种有利于植物生长和/或保护不受植物病原体感染的方法包括:向植物或果实、或向根或植物的根周围的土壤施用有效量的包括分离的Ericin S和Ericin A化合物和芬枯草菌素-MA、-MB、-MC、-H、和-I化合物和脱羟基芬枯草菌素-MA、-MB、和-I化合物,和额外的分离的类芬枯草菌素和类脱羟基芬枯草菌素化合物的一种或组合的提取物或组合物,以利于植物生长和/或保护不受植物病原体感染。所述利于植物生长和/或保护呈现为改善的幼苗活力、改善的根发育、改善的植物生长、改善的植物健康、提高的产率、改善的外观、改善的植物病原体抗性、降低的病原体感染、或它们的组合。
[0152] 在施用有效量的包括分离的Ericin S和Ericin A化合物和芬枯草菌素-MA、-MB、-MC、-H、和-I化合物和脱羟基芬枯草菌素-MA、-MB、和-I化合物,和额外的分离的芬枯草菌素或类脱羟基芬枯草菌素化合物的一种或组合的提取物或组合物的方法中,所述植物例如包括:单子叶植物、双子叶植物、谷类、玉米、甜玉米、爆米花玉米、种子玉米、青贮玉米、田地玉米、水稻、小麦、大麦、高粱、芦笋、浆果、蓝莓、黑莓、树莓、罗甘莓、黑果木、蔓越莓、醋栗、接骨木、红醋栗、蔓越橘、灌木浆果、芸苔属蔬菜、花椰菜、卷心菜、菜花、球芽甘蓝、羽衣甘蓝、无头甘蓝、芥菜、球茎甘蓝、葫芦科蔬菜、黄瓜、哈密瓜、甜瓜、香瓜、西葫芦、西瓜、南瓜、茄子、鳞茎类蔬菜、洋葱、大蒜、葱、柑橘、橙、葡萄柚、柠檬、桔子、橘柚、柚子、果蔬、胡椒、番茄、草原樱桃、树番茄、秋葵、葡萄、草药/香料、叶用蔬菜、莴苣、芹菜、菠菜、欧芹、菊苣、豆类/蔬菜(多汁的和干燥的豆和豌豆)、豆、青豆、豆荚、荚豆、大豆、干豆、鹰嘴豆、利马豆、豌豆、三角豆、裂荚豌豆、扁豆、油籽作物、坎诺拉油菜、蓖麻、椰子、棉花、亚麻、油棕、橄榄、花生、油菜籽、红花、芝麻、向日葵、大豆、仁果类水果、苹果、山楂、梨、榅桲、夏花山楂、根/块茎和球茎蔬菜、胡萝卜、马铃薯、甜马铃薯、木薯、甜菜、姜、辣根、萝卜、人参、芜箐、核果类水果、杏、樱桃、油桃、桃、李子、梅子、草莓、木本坚果、杏仁、开心果、山核桃、胡桃、榛子、栗子、腰果、山毛榉坚果、灰胡桃、夏威夷果、奇异果、香蕉、(蓝色)龙舌兰、草、草皮草、观赏植物、一品红、硬插枝、栗子、橡树、枫树、甘蔗、或甜菜。
[0153] 在施用有效量的包括分离的Ericin S和Ericin A化合物和芬枯草菌素-MA、-MB、-MC、-H、和-I化合物和脱羟基芬枯草菌素-MA、-MB、和-I化合物,和额外的分离的芬枯草菌素或类脱羟基芬枯草菌素化合物的一种或组合的提取物或组合物的方法中,所述病原体感染可由以下导致:植物病原体,例如包括植物真菌病原体、植物细菌病原体,锈菌如葡萄孢属(Botrytis spp.)、灰葡萄孢(Botrytis cinerea)、葱鳞葡萄孢菌(Botrytis squamosa),欧文氏菌属(Erwinia spp.)、胡萝卜软腐欧文氏菌(Erwinia carotovora)、解淀粉欧文氏菌(Erwinia amylovora),狄克氏菌属(Dickeya spp.),达旦提狄克氏菌(Dickeya dadantii),茄狄克氏菌(Dickeya solani),农杆菌属(Agrobacterium spp.),根癌土壤杆菌(Agrobacterium tumefaciens),黄单胞菌属(Xanthomonas spp.),地毯草黄单胞杆菌(Xanthomonas axonopodis),野油菜黄单胞菌胡萝卜致病变种(Xanthomonas campestris pv.carotae),桃李黄单胞菌(Xanthomonas pruni),藤黄单胞菌(Xanthomonas 
arboricola),水稻黄单胞菌水稻致病变种(Xanthomonas oryzae pv.oryzae),木杆菌属(Xylella spp.),苛养木杆菌(Xylella fastidiosa),暂定菌属(Candidatus spp.),韧皮部杆菌(Candidatus liberibacter),镰孢属(Fusarium spp.),禾谷镰孢菌(Fusarium graminearum),尖镰孢(Fusarium oxysporum),尖镰孢古巴专化型(Fusarium oxysporum f.sp.Cubense),尖镰孢番茄专化型(Fusarium oxysporum f.sp.Lycopersici),北美大豆猝死综合症病菌(Fusarium virguliforme),核盘菌属(Sclerotinia spp.),核盘菌(Sclerotinia sclerotiorum),小核盘菌(Sclerotinia minor),银斑核盘菌(Sclerotinia homeocarpa),尾孢菌属(Cercospora/Cercosporidium spp.),钩丝壳属(Uncinula spp.),葡萄钓丝壳(Uncinula necator)(白粉菌(Powdery Mildew)),叉丝单囊壳属(Podosphaera spp.)(白粉菌(Powdery Mildew)),白叉丝单囊壳(Podosphaera leucotricha),秘密叉丝单囊壳(Podosphaera clandestine),拟茎点霉属(Phomopsis spp.),霜霉病拟茎点霉菌(Phomopsis viticola),链格孢菌属(Alternaria spp.),极链格孢菌(Alternaria tenuissima),孔洞链隔孢菌(Alternaria porri),链格孢(Alternaria alternate),茄链格孢(Alternaria solani),细极链格孢(Alternaria tenuis),假单胞菌属(Pseudomonas spp.),丁香假单胞菌番茄致病变种(Pseudomonas syringae pv.Tomato),疫霉属(Phytophthora spp.),致病疫霉(Phytophthora infestans),寄生疫霉(Phytophthora parasitica),大豆疫霉菌(Phytophthora sojae),辣椒疫霉菌(Phytophthora capsici),肉桂疫霉菌(Phytophthora cinnamon),草莓疫霉菌(Phytophthora fragariae),疫霉属(Phytophthora spp.),栎树疫霉菌(Phytophthora ramorum),棕榈疫霉菌(Phytophthora palmivara),烟草疫霉菌(Phytophthora nicotianae),层锈菌属(Phakopsora spp.),豆薯层锈菌(Phakopsora pachyrhizi),山马蝗层锈菌(Phakopsora meibomiae),曲霉(Aspergillus spp.),黄曲霉(Aspergillus flavus),黑曲霉(Aspergillus niger),单孢锈菌属(Uromyces  spp.),疣顶单孢锈菌(Uromyces appendiculatus),枝孢属
(Cladosporium spp.),多主枝孢(Cladosporium herbarum),根霉属(Rhizopus spp.),隐根根霉(Rhizopus arrhizus),青霉属(Penicillium spp.),丝核菌属(Rhizoctonia spp.),立枯丝核菌(Rhizoctonia solani),玉蜀黍丝核菌(Rhizoctonia zeae),稻枯斑丝核菌(Rhizoctonia oryzae),博爱丝核菌(Rhizoctonia caritae),小麦纹枯病菌(Rhizoctonia cerealis),番红花枯病菌(Rhizoctonia crocorum),草莓花枯病菌(Rhizoctonia fragariae),多枝丝核菌(Rhizoctonia ramicola),灌木枯病菌
(Rhizoctonia rubi),豆类丝核菌(Rhizoctonia leguminicola),豆类壳球孢
(Macrophomina phaseolina),稻瘟病菌(Magnaorthe oryzae),球腔菌属(Mycosphaerella spp.),灰霉菌(Mycosphaerella graminocola),香蕉黑条叶斑菌(Mycosphaerella fijiensis(黑色叶斑病)),苹果球腔菌(Mycosphaerella pomi),柑橘球腔菌
(Mycosphaerella citri),稻瘟菌属(Magnaporthe spp.),稻瘟菌(Magnaporthe grisea),褐腐病菌属(Monilinia spp.),桃褐腐病菌(Monilinia fruticola),Monilinia vacciniicorymbosi,核果链核盘菌(Monilinia laxa),刺盘孢属(Colletotrichum spp.),炭疽病菌(Colletotrichum gloeosporiodes),尖孢炭疽菌(Colletotrichum acutatum),白炭疽病菌(Colletotrichum Candidum),间座壳属(Diaporthe spp.),柑桔间座壳(Diaporthe citri),棒孢菌属(Corynespora spp.),山扁豆生棒孢(Corynespora Cassiicola),胶锈菌属(Gymnosporangium spp.),胶锈菌(Gymnosporangium juniperi-virginianae),煤点病菌属(Schizothyrium spp.),苹果煤点病菌(Schizothyrium pomi),粘壳孢菌属(Gloeodes spp.),仁果粘壳孢菌(Gloeodes pomigena),葡萄座腔菌属(Botryosphaeria spp.),杨树溃疡病菌(Botryosphaeria dothidea),明孢盘菌属(Neofabraea spp.),穿孔病菌属(Wilsonomyces spp.),穿孔病菌(Wilsonomyces carpophilus),单丝壳属(Sphaerotheca spp.),白斑病菌(Sphaerotheca macularis),蔷薇单丝壳菌(Sphaerotheca  pannosa),白粉菌属(Erysiphe spp.),壳多孢属
(Stagonospora spp.),颖枯壳多孢(Stagonospora nodorum),腐霉菌(Pythium spp.),终极腐霉(Pythium ultimum),瓜果腐霉(Pythium aphanidermatum),不规则腐霉(Pythium irregularum),胡萝卜腐霉(Pythium ulosum),鲁特里亚腐霉(Pythium lutriarium),猝倒病腐霉(Pythium sylvatium),黑星菌属(Venturia spp),苹果黑星菌(Venturia inaequal is),轮枝孢属(Verticillium spp.),黑粉菌属(Ustilago spp.),裸黑粉菌(Ustilago nuda),玉米黑粉菌(Ustilago maydis),甘蔗黑粉菌(Ustilago scitaminea),麦角菌属(Claviceps spp.),麦角菌(Claviceps puprrea),腥黑粉菌属(Tilletia spp.),小麦腥黑粉菌(Tilletia tritici),亚腥黑粉菌(Tilletia laevis),刚毛腥黑粉菌(Tilletia horrid),小麦矮化腥黑粉菌(Tilletia controversa),茎点霉菌属(Phoma spp.),大豆茎点霉菌(Phoma glycinicola),棉花茎点霉菌(Phoma exigua),芸苔茎点霉菌(Phoma lingam),禾旋孢腔菌(Cocliobolus sativus),燕麦全蚀病菌(Gaeumanomyces gaminis),毛盘孢属(Colleototricum spp.),喙孢属(Rhychosporium  spp.),黑麦喙孢
(Rhychosporium secalis),蠕孢菌属(Biopolaris spp.),长蠕孢菌属(Helminthosporium spp.),黑麦长蠕孢菌(Helminthosporium secalis),玉米长蠕孢菌(Helminthosporium maydis),马铃薯长蠕孢菌(Helminthosporium solai),和小麦褐斑长蠕孢菌
(Helminthosporium tritici-repentis)或它们的组合。
实施例
[0154] 包括以下实施例以向本领域技术人员提供指导,用于实践本公开的代表性实施方式。根据本发明以及本领域的一般技能水平,本领域技术人员能够理解以下实施例仅用于示例,并且可采用多种改变、修改以及变化,而不偏离本公开的范围。
[0155] 实施例1
[0156] 通过序列分析对作为解淀粉芽孢杆菌的细菌分离株的鉴定
[0157] 与植物相关的指定为RTI474的细菌菌株分离自生长于北卡罗来纳的西洋参的根。对RTI472菌株的16S rRNA以及rpoB基因进行测序,然后使用BLAST与NCBI和RDP数据库中的其他已知的细菌菌株进行比较。测定到RTI472的16S RNA部分序列(SEQ ID NO:1)与解淀粉芽孢杆菌菌株NS6(KF177175)、解淀粉芽孢杆菌菌株FZB42(NR_075005)和枯草芽孢杆菌枯草亚种(Bacillus subtilis subsp.subtilis)菌株DSM 10(NR_027552)的16S rRNA基因序列相同。另外,测定到RTI472的rpoB序列与已知的解淀粉芽孢杆菌AS43.3菌株具有最高水平的序列相似度(即,>99%序列相同性);但是,在DNA水平上有10个核苷酸差异,表明RTI472是一种新的解淀粉芽孢杆菌菌株。RTI472菌株鉴定为解淀粉芽孢杆菌。rpoB基因序列在DNA水平上的差异表明RTI472是解淀粉芽孢杆菌的新菌株。解淀粉芽孢杆菌RTI472的菌株按照国际承认用于专利程序的微生物保存布达佩斯条约的规定,于2014年4月17日保藏于美国弗吉尼亚州玛纳萨斯的美国典型培养物保藏中心(ATCC),专利保藏编号为PTA-
121166。
[0158] 实施例2
[0159] 与解淀粉芽孢杆菌RTI472菌株中的羊毛硫氨酸抗生素生物合成相关的独特基因[0160] 解淀粉芽孢杆菌RTI472菌株的基因组的进一步的序列分析揭示该菌株具有与羊毛硫氨酸抗生素生物合成相关的独特基因,而其他紧密相关的解淀粉芽孢杆菌菌株中缺少该基因的同系物。通过使用RAST、antiSMASH和BAGEL生物信息学平台的计算分析,在解淀粉芽孢杆菌RTI472中鉴定了羊毛硫肽生物合成簇。RAST基因组标注鉴定了一个基因区域,其蛋白质序列被推定为与羊毛硫肽生物合成相关。这通过antiSMASH数据确定,该数据鉴定了与具有羊毛硫肽生物合成簇的相同的基因组区域。图1显示了与2个紧密相关的解淀粉芽孢杆菌菌株相比,在解淀粉芽孢杆菌RTI472中发现的羊毛硫氨酸抗生素生物合成簇的基因组组织示意图。在图1中,顶部的箭头表示RTI472菌株的蛋白质编码区域并指出了相对的转录方向。作为对比,两种紧密相关的解淀粉芽孢杆菌参照菌株FZB42(中部)和TrigoCor1448(底部)的相应区域在RTI472菌株下方示出。RTI472菌株的基因编码的蛋白质的氨基酸相同度与两个参照菌株进行比较,均通过代表性箭头的阴影度以及箭头中的相同度百分比表示。由图1可以看出,FZB42和TrigoCor1448菌株缺少该簇中存在的许多基因,并且多种基因呈现低水平的序列相同度。
[0161] RAST数据的初始检查导致了属于I类羊毛硫肽合成通路的RTI472菌株基因的鉴定,除了前肽以外其似乎是完整的(基因簇的“A”基因)。对RTI472菌株的RAST数据的进一步的检查显示了两个基因(一个推定的生物合成基因和一个推定的免疫基因)之间的不具有相关的假设基因的区域(约400bp)。随后使用antiSMASH来鉴定该区域中的推定的核心肽序列。为了确认该结果,使用BAGEL程序分析该区域的核苷酸序列,其被预测为核心肽为Ericin S前肽。虽然基于生物信息学分析解淀粉芽孢杆菌RTI472表现为缺乏Ericin A的前肽,随后的HPLC/MS/MS数据显示在RTI472菌株的培养物上清液中存在Ericin A(2985.4Da的MW)和Ericin S(3341.6Da的MW)。解淀粉芽孢杆菌RTI472菌株和未公开的称为“FB005”的解淀粉芽孢杆菌菌株的代谢物概况比较的图示于图2A。图2A的图显示RTI472菌株生产Ericin A和Ericin S肽,而没有在FB005菌株中检测到Ericin A或Ericin S。
[0162] RTI472和可获得的解淀粉芽孢杆菌基因组之间的基因组-基因组比较随后显示没有一个参照基因组具有功能性的Ericin S生物合成簇。然而许多基因组与该基因簇的抗性部分具有低同源性。图2B-2C是显示RTI472菌株中鉴定的羊毛硫肽生物合成簇和7个参照解淀粉芽孢杆菌基因组之间的比较的表。该表显示7个参照解淀粉芽孢杆菌基因组的区域中的同线性的缺失。7个参照菌株中没有一个具有功能性的Ericin S生物合成簇。另外,基于对文献的研究,得出枯草芽孢杆菌A1/3是之前报道的具有用于生产Ericin S的生物合成簇的唯一其他菌株(参考Stein等,2002,J.Bacteriol.Vol.184,No.6,1703)。因此,新鉴定的RTI472菌株具备羊毛硫肽合成通路,其生产MW=3341.6Da的Ericin S分子和MW=2985.4Da的Ericin A分子,其对于解淀粉芽孢杆菌菌株而言是独特的。
[0163] 实施例3
[0164] 解淀粉芽孢杆菌RTI472分离株的抗微生物性质
[0165] 所述分离株相对于主要植物病原体的拮抗能力在平板试验中进行测定。以4cm的距离在869琼脂板上并排生长所述细菌分离株和病原真菌,实施了用于评价相对于植物真菌病原体的拮抗作用的平板试验。在室温下对平板进行培养,并在两周内定期检查生长性质,例如生长抑制、小生境占有(niche occupation)或没有影响。在筛选针对细菌病原体的拮抗性质的情况下,病原体首先作为菌苔铺展在869琼脂平板上。随后,在板上点样20μl等份的RTI472培养物。将平板在室温下温育并在两周内定期检查对施用了RTI472的位置周围的菌苔的中的抑制区域。拮抗作用活性的总结示于以下表I。
[0166] 表I.解淀粉芽孢杆菌RTI472分离株针对主要植物病原体的拮抗性质
[0167]
[0168]
[0169] +++活性非常强,++活性强,+有活性,+-活性弱,-没有观察到活性
[0170] 实施例4
[0171] 解淀粉芽孢杆菌RTI472分离株的表型性状
[0172] 除拮抗性质外,还测定了解淀粉芽孢杆菌RTI472菌株的各种表型性状,数据如下表II所示。根据表II下方文字描述的步骤实施了评价。
[0173] 表II.表型试验:植物激素的产生、乙偶姻和吲哚乙酸(IAA)、以及解淀粉芽孢杆菌RTI472分离株的营养循环
[0174]特性评价 RTI472
酸产物(甲基红) -
乙偶姻产物(MR-VP) +++
几丁质酶活性 -
吲哚-3-乙酸产物 -
蛋白酶活性 ++
磷酸盐的溶解 +
[0175] +++非常强,++强,+若干,+-弱,-没有观察到
[0176] 酸及乙偶姻测试。将富集869培养基中20μl的起始培养物转移至1ml甲基红-伏普(Voges Proskauer)培养基(西格玛奥德里奇(Sigma Aldrich)39484)。在30℃和200rpm的条件下将培养物培养2天。转移0.5ml的培养物并添加50μl的0.2g/l的甲基红。红色表示酸产生。剩余的0.5ml培养物与0.3ml的5%α-萘酚(西格玛奥德里奇N1000)混合,然后混合0.1ml的40%KOH。30分钟的培养后,对试样进行解读。红色的显色表明乙偶姻的产生。对于酸和乙偶姻试验,用未接种培养基用作为阴性对照(Sokol等,1979,Journal of Clinical Microbiology.9:538-540)。
[0177] 吲哚-3-乙酸。将富集869培养基中20μl的起始培养物转移至1ml的1/10869培养基,该培养基中补充有0.5g/l的色氨酸(西格玛奥德里奇T0254)。在30℃和200RPM的条件下在暗处将培养物培养4-5天。对试样进行离心并将0.1ml的上清液与0.2ml的索尔科斯基试剂(Salkowski’s Reagent)(35%高氯酸,10mM FeCl3)混合。在暗处培养30分钟后,将产生粉红色的试样记为阳性(positive),用于IAA合成。将IAA的稀释液(西格玛奥德里奇I5148)用作阳性对照;未接种的培养基用作阴性对照(Taghavi等,2009,应用环境微生物学75:748-757(Applied and Environmental Microbiology 75:748-757))。
[0178] 磷酸盐溶解测试。将细菌置于Pikovskaya(PVK)琼脂培养基上,该培养基每升包含10g葡萄糖、5g磷酸钙、0.2g氯化钾、0.5g硫酸铵、0.2g氯化钠、0.1g七水合硫酸镁、0.5g酵母提取物、2mg硫酸锰、2mg硫酸铁和15g琼脂,pH为7,经过高压灭菌。洁净区域表示磷酸盐溶解细菌(Sharma等,2011,微生物学和生物技术研究期刊1:90-95(Journal of Microbiology and Biotechnology Research 1:90-95))。
[0179] 几丁质酶活性。将10%湿重的胶体几丁质添加至改良PVK琼脂培养基(每升包含10g葡萄糖、0.2g氯化钾、0.5g硫酸铵、0.2g氯化钠、0.1g七水合硫酸镁、0.5g酵母提取物、
2mg硫酸锰、2mg硫酸铁和15g琼脂,pH为7,经过高压灭菌)。将细菌接种在这些几丁质板上;
洁净区域表明几丁质酶活性(N.K.S.Murthy和Bleakley.,2012.“用于筛选几丁质酶生产微生物的胶体壳多糖的简化方法(Simplified Method of Preparing Colloidal Chitin Used for Screening of Chitinase Producing Microorganisms)”.微生物学网络杂志(The Internet Journal of Microbiology).10(2))。
[0180] 蛋白酶活性。将细菌接种在补充有10%奶的869琼脂培养基上。洁净区域表示分解蛋白质的能力,表明了蛋白酶活性(Sokol等,1979,临床微生物学期刊(Journal of Clinical Microbiology)9:538-540)。
[0181] 实施例5
[0182] 解淀粉芽孢杆菌RTI472的疣顶单胞锈菌和灰葡萄孢拮抗作用
[0183] 研究在温室中的菜豆植株中进行,以确定解淀粉芽孢杆菌RTI472菌株预防和/或改善植物病原体豆锈病(疣顶单胞锈菌)和植物病原体灰葡萄孢的效果的能力。
[0184] 在第一组实验中,测试不同的解淀粉芽孢杆菌RTI472菌株制剂的叶面施用对植物病原体疣顶单胞锈菌和灰葡萄孢的控制。RTI472,还测试了单独的和新鉴定的解淀粉芽孢杆菌菌株,RTI301。实验设计和配制如下:
[0185] 配方:
[0186] 废发酵肉汤(SFB)中的解淀粉芽孢杆菌RTI472孢子,在水中稀释约100倍,并以1×108cfu/ml的比例对叶子施用。
[0187] 废发酵肉汤(SFB)中的解淀粉芽孢杆菌RTI472孢子,在加有酵母提取物的水中稀释约100倍,并以1×108cfu/ml和约0.2%的酵母提取物的比例对叶子施用。
[0188] 废发酵肉汤(SFB)中的解淀粉芽孢杆菌RTI301孢子,在水中稀释约100倍,并以1×8
10cfu/ml的比例对叶子施用。
[0189] 废发酵肉汤(SFB)中的解淀粉芽孢杆菌RTI301孢子,在加有酵母提取物的水中稀释约100倍,并以1×108cfu/ml和约0.2%的酵母提取物的比例对叶子施用。
[0190] SERENADE OPTIMUM(拜耳作物科学公司)产品在枯草芽孢杆菌菌株QST713孢子比8
例为1×10cfu/ml的条件下施用。
[0191] HORIZON(HORIZON AG-PRODUCTS)产品在50g活性成分/ha(戊唑醇)的比例下施用。
[0192] BRAVO WEATHER STIK(SYNGENTA作物保护公司)产品在500g活性成分/ha(百菌清)的比例下施用。
[0193] TACTIC(洛夫兰产品公司(LOVELAND PRODUCTS,INC))产品以0.1875%v/v浓度包括在上述所有列出的制剂中。
[0194] 处理施用方法:
[0195] 使用具有单顶置喷嘴的轨道喷雾器(TeeJet SS8001E Flat Fan)在压力=276kPa(40psi)下用以上列出的多种处理接种21天龄菜豆植物(有两片三小叶)。喷嘴高度为豆类植物叶以上36cm(14”)。施用量为200L/ha且实验重复次数为六次。处理植物接种一次,对照植物不经任何处理。
[0196] 感染率:
[0197] 在处理施用一天后,用豆锈病(疣顶单胞锈菌)感染测试植物,接种率为200k分生孢子/ml。
[0198] 感染豆锈病(疣顶单胞锈菌)后九天,评估以下各项疾病控制的百分数:单独用水稀释的废发酵肉汤中的RTI472孢子(“RTI472+1%SFB”),用水加酵母提取物稀释的废发酵肉汤中的RTI472孢子(“RTI472+1%SFB+酵母提取物”),单独用水稀释100倍的废发酵肉汤中的RTI301孢子(“RTI301+1%SFB”),用水加酵母提取物稀释100倍的废发酵肉汤中的RTI301孢子(“RTI301+1%SFB+酵母提取物”),BRAVO WEATHER STIK(500g活性成分/ha百菌清),HORIZON(50g活性成分/ha戊唑醇),以及根据以上描述的施用率的SERENADE OPTIMUM。未处理的对照组(仅水)结果是28%疾病。
[0199] 实验结果列于下表III。结果显示,与施用没有添加酵母提取物的菌株相比,每个RTI472和RTI301菌株的酵母提取物的添加导致了疾病控制中约40%的提高。RTI472+1%SFB+酵母提取物和RTI301+1%SFB+酵母提取物展示的疾病控制量与观察到的当以相同比例施用SERENADE OPTIMUM(即,1×108cfu/ml)时类似,虽然RTI472和RTI301制剂中的SFB的量相对较低为1%,并且SFB可预期含有具有抗真菌活性的分泌化合物。
[0200] 使用上述列出的相同配方和实验设计,对胡椒植物进行实验以测定RTI472和RTI301呈现的由病原体灰葡萄孢导致的胡椒灰葡萄孢病的疾病控制量中,获得了类似的结果(数据未显示)。
[0201] 表III.与SERENADE OPTIMUM和化学活性剂相比,当和或不和酵母提取物配制时,解淀粉芽孢杆菌RTI472和RTI301控制豆锈病(疣顶单胞锈菌)的结果。
[0202]
[0203] 以下实验描述了通过RTI472对植物病原体疣顶单胞锈菌导致的豆锈病的疾病控制。实验设计和配制如下:
[0204] 配方:
[0205] 废发酵肉汤(SFB)中的解淀粉芽孢杆菌RTI472孢子,在加有酵母提取物的水中稀释约100倍,并以1×108cfu/ml和约0.2%的酵母提取物的比例对叶子施用。
[0206] SERENADE OPTIMUM(拜耳作物科学公司)产品在孢子比例为1×108cfu/ml和4×8
10cfu/ml的条件下施用。
[0207] HORIZON(HORIZON AG-PRODUCTS)在50g活性成分/ha(戊唑醇)的比例下施用。
[0208] 百菌清在500g活性成分/ha的比例下使用。
[0209] 还作为空白对照包括TACTIC(洛夫兰产品公司),在对所有制剂的0.1875%v/v浓度下施用。
[0210] 处理施用方法:
[0211] 使用具有单顶置喷嘴的轨道喷雾器(TeeJet SS8001E Flat Fan)在压力=276kPa(40psi)下用多种处理接种21天龄菜豆植物(有两片三叶)。喷嘴高度为大豆植物叶以上36cm(14”)。施用量为200L/ha且实验重复次数为六次。处理植物接种一次,对照植物不经任何处理。
[0212] 感染率:
[0213] 在处理施用一天后,用豆锈病(疣顶单胞锈菌)感染测试植物,接种率为200k分生孢子/ml。
[0214] 感染豆锈病(疣顶单胞锈菌)后十天,评估以下各项疾病控制的百分数:废发酵肉汤(SFB)中的RTI472孢子(使用条件1×108cfu/ml),戊唑醇(以50g活性成分/ha施用),百菌清(使用条件500g活性成分/ha),SERENADE OPTIMUM(使用条件1×108cfu/ml),和SERENADE OPTIMUM(使用条件4x108cfu/ml)。还包括作为对照的TACTIC(使用条件0.1875%),其应用于所有制剂。未处理的对照组结果是23%疾病(数据未显示)。实验结果示于以下的表IV和图3,表明当以相同比例施用时,与SERENADE OPTIMUM相比,豆锈病(疣顶单胞锈菌)的控制为类似的水平。
[0215] 表IV.与SERENADE OPTIMUM和化学活性试剂相比,解淀粉芽孢杆菌RTI472对豆锈病(疣顶单胞锈菌)的控制的结果。
[0216]处理 疾病控制百分数
8
RTI472+SFB 1×10cfu/ml 92a
0.1875%TACTIC 44b
戊唑醇 100a
百菌清 100a
SERENADE OPTIMUM 1×108cfu/ml 95a
SERENADE OPTIMUM 4×108cfu/ml 97a
未处理对照植物的疾病百分数-23%  
[0217] 实施例6
[0218] 解淀粉芽孢杆菌RTI472在大豆白粉病(扩散叉丝壳(Microsphaera diffusa))中的拮抗作用
[0219] 在温室中的大豆上进行研究,以确定解淀粉芽孢杆菌RTI472菌株预防和/或改善自然侵染大豆白粉病(扩散叉丝壳)的效果的能力。
[0220] 配方:
[0221] 废发酵肉汤(SFB)中的解淀粉芽孢杆菌RTI472孢子,在加有酵母提取物的水中稀释约100倍,并以1×108cfu/ml和约0.2%的酵母提取物的比例对叶子施用。
[0222] SERENADE OPTIMUM(拜耳作物科学公司)孢子在1×108cfu/ml的比例下施用。
[0223] HORIZON(HORIZON AG-PRODUCTS)在50g活性成分/ha(戊唑醇)的比例下施用。
[0224] TACTIC(洛夫兰产品公司)以对所有制剂0.1875%v/v的浓度施用。
[0225] 处理施用方法:
[0226] 使用具有单顶置喷嘴的轨道喷雾器(TeeJet SS8001E Flat Fan)在压力=276kPa(40psi)下用多种处理接种21天龄大豆植物(有两片三叶)。喷嘴高度为大豆植物叶以上36cm(14”)。施用量为200L/ha且实验重复次数为6次。接受处理的植物接种一次,对照植物不经任何处理。
[0227] 感染率:
[0228] 实施处理后立即将测试植物放置在之前用扩散叉丝壳感染的大豆层(flats of soybeans)之间。
[0229] 放置在感染扩散叉丝壳的层之间后九天,评估以下各项疾病控制的百分数:废发酵肉汤(SFB)中的RTI472孢子(使用条件1×108cfu/ml),SERENADE OPTIMUM(使用条件1×108cfu/ml),和HORIZON(戊唑醇以50g活性成分/ha施用)。未处理的对照组结果是70%疾病(数据未显示)。实验结果示于以下的表V和图4,表明当以相同比例施用时,与SERENADE OPTIMUM相比,大豆白粉病(扩散叉丝壳)的优越的控制。
[0230] 表V.与SERENADE OPTIMUM相比,解淀粉芽孢杆菌RTI472的大豆白粉病(扩散叉丝壳)控制的结果。
[0231]
[0232]
[0233] 图4中的图显示了用以下各处理,接种后第九天的y轴上的疾病控制(平均)%:废发酵肉汤(SFB)中的RTI472孢子(使用条件1×108cfu/ml),SERENADE OPTIMUM(使用条件1×108cfu/ml),和HORIZON(戊唑醇以50g活性成分/ha施用)。检查对照组结果是70%疾病(数据未显示)。
[0234] 实施例7
[0235] 解淀粉芽孢杆菌RTI472在胡椒灰葡萄孢病(灰葡萄孢)中的拮抗作用
[0236] 在温室中的胡椒上进行研究,以确定解淀粉芽孢杆菌RTI472菌株预防和/或改善植物病原体胡椒灰葡萄孢病(灰葡萄孢)的效果的能力。
[0237] 配方:
[0238] 废发酵肉汤(SFB)中的解淀粉芽孢杆菌RTI472孢子,在加有酵母提取物的水中稀释约100倍,并以1×108cfu/ml和约0.2%的酵母提取物的比例对叶子施用。
[0239] SERENADE OPTIMUM(拜耳作物科学公司)孢子在比例为1×108cfu/ml和4×108cfu/ml的条件下施用。
[0240] HORIZON(HORIZON AG-PRODUCTS)在50g活性成分/ha(戊唑醇)的比例下施用。
[0241] 百菌清在500g活性成分/ha的比例下使用。
[0242] 还作为空白对照包括TACTIC(洛夫兰产品公司),以对所有制剂0.1875%v/v的浓度施用。
[0243] 处理施用方法:
[0244] 使用具有单顶置喷嘴的轨道喷雾器(TeeJet SS8001E Flat Fan)在压力=276kPa(40psi)下用多种处理接种28天龄胡椒植物。喷嘴高度为胡椒植物叶以上36cm(14”)。施用量为200L/ha且实验重复次数为六次。处理植物接种一次,对照植物不经任何处理。
[0245] 感染率:
[0246] 在实施处理一天后,在1M分生孢子/ml感染比例下用灰葡萄孢感染测试植物。
[0247] 感染胡椒灰葡萄孢病(灰葡萄孢)后七天,评估以下各项疾病控制的百分数:废发酵肉汤(SFB)中的RTI472孢子(使用条件1×108cfu/ml),TACTIC(使用条件0.1875%),戊唑醇(以50g活性成分/ha施用),百菌清(使用条件500g活性成分/ha),SERENADE OPTIMUM(使用条件1×108cfu/ml),和SERENADE OPTIMUM(使用条件4x108cfu/ml)。未处理的对照组结果是6%疾病(数据未显示)。实验结果示于以下的表VI和图5,表明当以相同比例施用时,与SERENADE OPTIMUM相比,胡椒灰葡萄孢病(灰葡萄孢)的优越的控制。
[0248] 表VI.与SERENADE OPTIMUM和化学活性试剂相比,解淀粉芽孢杆菌RTI472对胡椒灰葡萄孢病(灰葡萄孢)的控制的结果。
[0249]处理 疾病控制百分数
RTI472+SFB 1×108cfu/ml 88ab
0.1875%TACTIC 0c
戊唑醇 99a
百菌清 99a
SERENADE OPTIMUM 1×10^8cfu/ml 77b
SERENADE OPTIMUM 4×10^8cfu/ml 88ab
未处理对照植物的疾病百分数-6%  
[0250] 在另一个试验中,在温室中的胡椒上进行研究,以确定解淀粉芽孢杆菌RTI472菌株预防和/或改善植物病原体胡椒灰葡萄孢病(灰葡萄孢)的效果的最佳剂量。
[0251] 配方:
[0252] 加有酵母提取物的废发酵肉汤(SFB)中的解淀粉芽孢杆菌RTI472孢子,并在2.5×106cfu/ml~2.5×108cfu/ml的范围内和0.01%~0.2%的酵母提取物的比例对叶子施用。
[0253] SERENADE OPTIMUM(拜耳作物科学公司)孢子在2.5×106cfu/ml~4×108cfu/ml的范围内施用。
[0254] HORIZON(HORIZON AG-PRODUCTS)在50g活性成分/ha(戊唑醇)的比例下施用。
[0255] 还作为空白对照包括TACTIC(洛夫兰产品公司),以对所有制剂0.1875%v/v的浓度施用。
[0256] 处理施用方法:
[0257] 使用具有单顶置喷嘴的轨道喷雾器(TeeJet SS8001E Flat Fan)在压力=276kPa(40psi)下用多种处理接种28天龄胡椒植物。喷嘴高度为胡椒植物叶以上36cm(14”)。施用量为200L/ha且实验重复次数为六次。处理植物接种一次,对照植物不经任何处理。
[0258] 感染率:
[0259] 在实施处理一天后,在1M分生孢子/ml接种比例下用灰葡萄孢感染测试植物。
[0260] 感染胡椒灰葡萄孢病(灰葡萄孢)后三天,评估以下各项疾病控制的百分数:废发酵肉汤(SFB)中的RTI472孢子(以2.5×106、1×107、2.5×107、1×108、和2.5×108cfu/ml施用)以及SERENADE OPTIMUM(以2.5×106、1×107、2.5×107、1×108、和2.5×108cfu/ml施用),与TACTIC(对全部制剂以0.1875%施用,并用作空白对照)、SERENADE OPTIMUM(以8
4x10施用)、戊唑醇(以50g活性成分/ha施用)。未处理的对照组结果是70%疾病(数据未显示)。实验结果列于下表VII和图6。
[0261] 表VII.与SERENADE OPTIMUM和化学活性试剂相比,解淀粉芽孢杆菌RTI472剂量反应试验对胡椒灰葡萄孢病(灰葡萄孢)的控制的结果。
[0262]
[0263] 在另一个试验中,在温室中的胡椒上进行研究,以确定在不同的病原体接种率下解淀粉芽孢杆菌RTI472菌株预防和/或改善植物病原体胡椒灰葡萄孢病(灰葡萄孢)的效果的能力。
[0264] 配方:
[0265] 废发酵肉汤(SFB)中的解淀粉芽孢杆菌RTI472孢子,在加有酵母提取物的水中稀释约100倍,并以1×108cfu/ml和约0.2%的酵母提取物的比例对叶子施用。
[0266] SERENADE OPTIMUM(拜耳作物科学公司)孢子在1×108cfu/ml~4×108cfu/ml的施用率下使用。
[0267] HORIZON(HORIZON AG-PRODUCTS)在50g活性成分/ha(戊唑醇)的比例下施用。
[0268] 还作为空白对照包括TACTIC(洛夫兰产品公司),以对所有制剂0.1875%v/v的浓度施用。
[0269] 处理施用方法:
[0270] 使用具有单顶置喷嘴的轨道喷雾器(TeeJet SS8001E Flat Fan)在压力=276kPa(40psi)下用多种处理接种28天龄胡椒植物。喷嘴高度为胡椒植物叶以上36cm(14”)。施用量为200L/ha且实验重复次数为六次。处理植物接种一次,对照植物不经任何处理。
[0271] 感染率:
[0272] 在实施处理一天后,在接种比例50k~2M分生孢子/ml的范围内用灰葡萄孢感染测试植物。
[0273] 感染胡椒灰葡萄孢病(灰葡萄孢)后四天,评估以下各项疾病控制的百分数:废发酵肉汤(SFB)中的RTI472孢子(以2.5×106cfu/ml施用)以及SERENADE OPTIMUM(以1×108、和4×108cfu/ml施用),与TACTIC(对全部制剂以0.1875%施用,并用作空白对照)、戊唑醇(HORIZON;以50g活性成分/ha施用)。未处理的对照组中的疾病百分数(数据未显示)为50k=15%,100k=30%,500k=65%,1M=65%,and 2M=65%。实验结果列于下表VIII和图7。另外,图8A-8D示出灰葡萄孢接种率50k的植物,图9A-9D示出灰葡萄孢接种率100k的植物,图10A-10D示出灰葡萄孢接种率500k的植物,图11A-11D示出灰葡萄孢接种率1M的植物,且图12A-12D示出灰葡萄孢接种率2M的植物。在3种最低的病原体接种率中,观察到RTI472菌株和SERENADE OPTIMUM的相似的疾病控制百分数。但是,在2种最高的病原体接种率1M和2M中,观察到与SERENADE OPTIMUM相比,用RTI472菌株处理的植株在统计学上的改善。
[0274] 表VIII与SERENADE OPTIMUM和化学活性试剂相比,解淀粉芽孢杆菌RTI472控制以不同植物病原体浓度接种后胡椒灰葡萄孢病(灰葡萄孢)的能力。
[0275]
[0276]
[0277] 实施例8
[0278] 解淀粉芽孢杆菌RTI472在对葫芦中的白粉病的拮抗作用
[0279] 在佛罗里达田间试验中的葫芦上进行研究,以确定解淀粉芽孢杆菌RTI472菌株预防和/或改善植物病原体葫芦疾病白粉病的效果的能力。
[0280] 总体上,采用下表IX所示的比例的每个产品进行6次施用。在RTI472的情况下,施用率以g/ha计,且施用率对应于基于1400g/ha施用率的SERENADE OPTIMUM所推荐的相同的菌落形成单位/ha。
[0281] 除非另有规定,所有施用进行6次,施用之间间隔5~7天。第一次施用的时机取决于特定作物,并且在种植时、作物出苗后的数周、开花时、疾病出现、或在预期临出现疾病之前的范围内。在将生物和化学活性成分的施用进行组合的程序4、5和6的情况下,第一、第三和第五施用(A、C和E)采用生物品、同时第二、第四和第六施用(B、D和F)采用化学品。
[0282] 配方:
[0283] SERENADE OPTIMUM(拜耳作物科学公司)在1400g/ha、对应于1.8x10+13cfu/ha的比例下施用。
[0284] 解淀粉芽孢杆菌RTI472孢子在添加有酵母提取物的废发酵肉汤(SFB)中,且施用率对应于基于1400g/ha施用率的Serenade Optimum所推荐的相同的菌落形成单位/ha,和酵母提取物在约0.01%~0.2%的范围内。
[0285] TACTIC(洛夫兰产品公司)在0.1875%v/v浓度下施用。
[0286] LUNA EXPERIENCE(拜耳作物科学公司)在500g活性成分/ha(氟吡菌酰胺加戊唑醇杀真菌剂)的比例下施用。
[0287] BRAVO WEATHER STIK(SYNGENTA作物保护公司)在2240g活性成分/ha(百菌清)的比例下施用。
[0288] 试验设计如下:未处理对照组,RTI472+TACTIC,SERENADE OPTIMUM+TACTIC,RTI472+LUNA EXPERIENCE+TACTIC,SERENADE OPTIMUM+LUNA EXPERIENCE+TACTIC,和BRAVO WEATHER STIK+LUNA EXPERIENCE+TACTIC。
[0289] 处理施用方法:
[0290] 按照如上所述的时间进行了六次施用。施用喷雾设置为递送30加仑每英亩。使用具有扁平扇喷嘴(8004型)的CO2背包式喷雾器以4mph的地面速度喷洒各个地块,并且每个喷嘴间隔开18英寸。运送化学品的载体是在2升瓶子中混合的水。
[0291] 疾病评分:对每个处理的5株植物的叶子评价疾病严重程度的平均百分比。评估了每个处理的四个地块作物对白粉病的作物反应和疾病控制。试验在每个施用之后、临下一次施用之前进行评估。白粉病来自自然侵染。黄瓜的实验结果示于下表IX,并显示了与当作为标准的单独生物杀真菌剂或作为处理程序的一部分,以相同比例施用SERENADE OPTIMUM相比在黄瓜中相似的白粉病控制。
[0292] 表IX与Serenade Optimum和其他化学活性试剂相比,解淀粉芽孢杆菌RTI472对黄瓜中的白粉病的控制的结果。
[0293]
[0294] 类似的实验使用相同的方式和施用率在商业生产温室田间试验中在冬南瓜和黄瓜中进行,以确定RTI472菌株预防和/或改善植物病原体白粉病的效果的能力。对于黄瓜和冬南瓜,第一处理施用发生在作物出苗约3周后。冬南瓜和黄瓜的数据分别示于在表X和XI。疾病严重程度,表现为“疾病压力曲线下面积”(AUDPC),被定义为在上叶表面发生白粉病的严重程度(叶面积受影响)的函数。
[0295] 与Serenade Optimum相比,作为标准的单独生物杀真菌剂,RTI472提供对冬南瓜的白粉病的更好的控制。白粉病的冬南瓜的最佳控制在三特程序中观察到,其中解淀粉芽孢杆菌RTI472和LUNA EXPERIENCE(BAYER作物科学公司)的组合与基于BRAVO WEATHER STIK(SYNGENTA)和LUNA EXPERIENCE组合使用的工业标准程序相等。因此,解淀粉芽孢杆菌RTI472在控制葫芦中的白粉病的程序中可作为百菌清杀真菌剂的替代品。这在黄瓜中控制白粉病的试验中得到进一步确认,其中解淀粉芽孢杆菌RTI472作为标准的单独显示出与使用工业标准LUNA EXPERIENCE的程序相似的表现(见表XI)。
[0296] 表X.与SERENADE OPTIMUM和其他化学活性试剂相比,解淀粉芽孢杆菌RTI472对冬南瓜中的白粉病的控制的结果。
[0297]
[0298]
[0299] *施用率以g/ha计
[0300] +表示施用的时间(有字母/日期)
[0301] 表XI与Serenade Optimum和其他化学活性试剂相比,解淀粉芽孢杆菌RTI472对黄瓜中的白粉病的控制的结果。
[0302]
[0303]
[0304] *施用率以g/ha计
[0305] +表示施用的时间(有字母/日期)
[0306] 实施例9
[0307] 解淀粉芽孢杆菌RTI472在豆荚和花生的白霉和叶斑枯病中的拮抗作用
[0308] 在田间试验对豆荚和花生进行研究以确定解淀粉芽孢杆菌RTI472菌株预防和/或改善植物病原体豆荚核盘菌引起的棉状腐病(白霉)和花生中的叶斑枯病的效果的能力。
[0309] 总体上,除非另有说明,采用下表XII所示的比例对每个产品以5~7天间隔的方式进行6次施用。第一次施用的时机取决于特定作物,并且在种植时、作物出苗后的数周、开花时、疾病出现、或在预期临出现疾病之前的范围内。在RTI472的情况下(*施用率以g/ha计),且施用率对应于基于1400g/ha施用率的Serenade Optimum所推荐的相同的菌落形成单位/ha。在将生物和化学活性成分的施用进行组合的程序4、5和6的情况下,第一、第三和第五施用(A、C和E)采用生物品、同时第二、第四和第六施用(B、D和F)采用化学品。
[0310] 配方:
[0311] SERENADE OPTIMUM(拜耳作物科学公司)在1400g/ha、对应于1.8x10+13cfu/ha的比例下施用。
[0312] 解淀粉芽孢杆菌RTI472孢子在添加有酵母提取物的废发酵肉汤(SFB)中,且施用率对应于基于1400g/ha施用率的Serenade Optimum所推荐的相同的菌落形成单位/ha,和酵母提取物在约0.01%~0.2%的范围内。
[0313] TACTIC(洛夫兰产品公司)在0.1875%v/v浓度下施用。
[0314] TOPSIN M 70W(CEREXAGRI,INC.)在1570g活性成分/ha(甲基硫菌灵杀真菌剂)的比例下施用。
[0315] PROLINE(BAYER作物SCIENCE)在200g活性成分/ha(丙硫菌唑杀真菌剂)的比例下施用。
[0316] 试验设计如下:未处理的对照组,RTI472+TACTIC,SERENADE OPTIMUM+TACTIC,RTI472+TOPSIN M 70W+TACTIC,SERENADE OPTIMUM+TOPSIN M 70W+TACTIC,和PROLINE+TOPSIN M 70W+TACTIC。
[0317] 处理施用方法:除非另有规定,所有施用进行6次,施用之间间隔5~7天。施用喷雾设置为递送30加仑每英亩。使用具有扁平风扇喷嘴(8004型)的CO2背包式喷雾器以4mph的地面速度喷洒各个地块,并且每个喷嘴间隔开18英寸。运送化学品的载体是在2升瓶子中混合的水。
[0318] 疾病评分:
[0319] 豆荚中的白霉实验:茎评价–评价每个地块十个茎。疾病严重程度是通过视觉估计受到疾病影响的每个茎的量来确定的。冠层–在植物上评估叶、发育和成熟果实。在每个地块将6个2英尺的每个区段作为子样本进行评估,并且通过估计显示白霉症状的冠层的百分数来确定严重程度。整个冠层进行了评估。
[0320] 实验结果列于下表XII。与SERENADE OPTIMUM相比,作为标准的单独生物杀真菌剂,RTI472提供对豆荚上白霉病的更好的控制。豆荚中白霉病的最佳控制在使用解淀粉芽孢杆菌RTI472和TOPSIN(甲基硫菌灵杀真菌剂)的组合的程序中被观察到,其比基于与TOPSIN一起使用PROLINE(丙硫菌唑杀真菌剂)的化学程序更优。因此,解淀粉芽孢杆菌RTI472可作为丙硫菌唑杀真菌剂替代品用于程序中,用于干豆、坎诺拉油菜、玉米、花生、大豆和甜菜中发现的尾孢褐斑病(Cercospora leaf spot)、壳针孢褐斑病(Septoria brown spot)、菌核病和丝核菌这样的疾病的控制。
[0321] 表XII与SERENADE OPTIMUM和其他化学活性试剂相比,解淀粉芽孢杆菌RTI472对豆荚中的白霉的控制的结果。
[0322]
[0323]
[0324] *施用率以g/ha计
[0325] +表示施用的时间(有字母/日期)
[0326] 在田间试验中对乔治亚州的花生进行类似的研究,以确定解淀粉芽孢杆菌RTI472菌株预防和/或改善花生中尾孢菌(Cercospora/Cercosporidium)导致的植物病原体南方白霉病和叶斑枯病的自然发生的效果。对RTI472和SERENADE OPTIMUM使用如上所述的相同的施用率和相同的方式,其中每次菌株的单独施用都进行6次,施用之间间隔5~7天。在豆荚的白霉实验中对茎进行评价。冠层—将每个地块中的6个2英尺的每个区段作为子样本进行评估,并且通过估计整个冠层中显示症状的叶子的百分数来确定严重程度。疾病严重程度以每1米行命中的数目评级为1-10的白霉和叶斑枯病指数。所有的花生被收获、计数、称重并以可出售或疾病来分类以确定每英亩产量。
[0327] 以下分别在表XIII和XIV中示出中度疾病压力和重度疾病压力和实验结果。RTI472比SERENADEOPTIMUM和未处理的对照组更好地控制了花生叶斑病。在两个实验中观察到这些结果,其中有一个中度压力,一个是重度压力。RTI472比SERENADEOPTIMUM和未处理的对照组更好地抑制了花生南方白霉病。在两个实验中观察到这些结果,其中有一个中度压力,一个是重度压力。在包括六次施用的喷雾程序中没有观察到RTI472的负面作物反应。在同时存在两种疾病的田野中的花生产量显示,与SERENADE OPTIMUM和未处理对照组相比,用RTI472处理结果得到更高的产量反应。
[0328] 表XIII与SERENADE OPTIMUM相比,解淀粉芽孢杆菌RTI472控制花生中的叶斑枯病和南方白霉病(中度压力)的结果
[0329]
[0330] 表XIV.与SERENADE OPTIMUM相比,解淀粉芽孢杆菌RTI472控制花生中的叶斑枯病和南方白霉病(重度压力)的结果
[0331]
[0332]
[0333] 实施例10
[0334] 解淀粉芽孢杆菌RTI472对小麦赤霉病、大豆锈病、和茄链格孢的拮抗作用[0335] 在田间试验中对乔治亚州的小麦、大豆和番茄进行类似的研究,以确定解淀粉芽孢杆菌RTI472菌株预防和/或改善植物病原体小麦赤霉病、大豆锈病、和茄链格孢的效果的能力。
[0336] 对每个RTI472和SERENADE OPTIMUM进行了施用,SERENADE OPTIMUM的施用率采用1400g/ha,且RTI472的施用率对应于基于1400g/ha施用率的Serenade Optimum所推荐的相同的菌落形成单位/ha。除非另有规定,以间隔5~7天向作物施用处理。施用的次数和第一次施用的时机取决于特定作物,并且在种植时、作物出苗后的数周、开花时、疾病出现、或在预期临出现疾病之前的范围内。施用喷雾设置为递送20加仑每英亩(189l/ha)。使用具有双扁平风扇喷嘴(8003型)的CO2背包式喷雾器以3mph的地面速度喷洒各个地块,并且每个喷嘴间隔开18英寸。运送化学品的载体是在2升瓶子中混合的水。
[0337] 对于小麦赤霉病,单次处理施用在作物开花时进行。处理后三天,用赤霉病病原体玉米赤霉(也称为禾谷镰孢菌)对植物进行人工感染。疾病严重程度通过确定受赤霉病(小穗漂白)影响的小麦头部的百分数来测定。百分数疾病控制基于将疾病的未处理的对照组植物视作100%。数据示于以下表XV。
[0338] 对于大豆锈病,进行6次处理施用。初次施用在生长的R1期进行递送。该实验具有自然侵染。疾病严重程度通过如白霉实验那样评价茎来测定。冠层—每个地块的6个2英尺的区段作为子样本进行评估,并且通过估计整个冠层中显示锈病症状的叶子的百分数来确定严重程度。百分数疾病控制基于将疾病的未处理的对照组植物视作100%。数据示于以下表XV。
[0339] 对于番茄,进行2次处理施用。疾病严重程度通过观察冠层和估计被影响的叶子的百分数来测定。百分数疾病控制基于将疾病的未处理的对照组植物视作100%。数据示于以下表XV。
[0340] 表XV.与SERENADE OPTIMUM相比,解淀粉芽孢杆菌RTI472对小麦赤霉病、大豆豆锈病和番茄中的链格孢属的疾病控制。
[0341]
[0342] 通过未处理的对照的百分数来衡量,RTI472控制小麦赤霉病比SERENADE更好。小麦赤霉病实验在未处理对照组中为85%的重度严重程度/压力。通过未处理的对照的百分数来衡量,RTI472控制大豆锈病比SERENADE更好。大豆锈病实验在未处理对照组中为44%的中度严重程度/压力。在整个处理施用程序中,RTI472没有观察到负面作物反应,其中包括小麦中的一次施用,番茄的两次施用和大豆的六次施用。
[0343] 实施例11
[0344] 解淀粉芽孢杆菌RTI472对乔治亚州的田间试验中的番茄细菌性斑点番茄病(黄单胞菌)的拮抗作用
[0345] 在田间试验中的番茄上进行研究,以确定解淀粉芽孢杆菌RTI472菌株预防和/或改善植物植物病原体细菌性斑点番茄病(黄单胞菌)的效果的能力。
[0346] 以施用之间间隔5~7天的方式一共对作物进行4次施用。在将生物和化学活性成分的施用进行组合的程序4和5的情况下,第一、和第三施用采用生物品、同时第二、和第四施用采用化学品。
[0347] 配方:
[0348] SERENADE OPTIMUM在1400g/ha、对应于1.8x10+13cfu/ha的比例下施用。
[0349] 解淀粉芽孢杆菌RTI472孢子在添加有酵母提取物的废发酵肉汤(SFB)中,且施用率对应于基于1400g/ha施用率的Serenade Optimum所推荐的相同的菌落形成单位/ha,和酵母提取物在约0.01%~0.2%的范围内。
[0350] TACTIC(洛夫兰产品公司)在0.1875%v/v浓度下施用。
[0351] KOCIDE 3000(DUPONT USA)在1850g活性成分/ha(氢氧化铜杀真菌剂)的比例下施用。
[0352] BRAVO WEATHER STIK(SYNGENTA作物保护公司)在2240g活性成分/ha(百菌清)的比例下施用。
[0353] 试验设计如下:未处理对照组,RTI472+TACTIC,SERENADE OPTIMUM+TACTIC,RTI472+KOCIDE 3000+TACTIC,SERENADE OPTIMUM+KOCIDE 3000+TACTIC,和BRAVO WEATHER STIK+KOCIDE 3000+TACTIC.
[0354] 处理施用方法:
[0355] 在每个施用之间间隔5到7天的方式将四个单独的处理施用递送到作物。施用喷雾设置为递送40加仑每英亩。使用具有锥形喷嘴的CO2背包式喷雾器以3mph的地面速度喷洒各个地块,并且每个喷嘴间隔开12英寸。运送化学品的载体是在2.5升瓶子中混合的水。
[0356] 疾病严重程度通过评价冠层来测定。平均疾病严重程度百分数用每次处理的植物中间来评价。百分数疾病控制基于将疾病的未处理的对照组植物视作100%。数据示于以下表XVI。处理包括:未处理对照组,RTI472+TACTIC,SERENADE OPTIMUM+TACTIC,RTI472++KOCIDE 3000+TACTIC,SERENADE OPTIMUM+KOCIDE 3000 TACTIC,和BRAVO WEATHER STIK+KOCIDE 3000+TACTIC。番茄中的细菌性斑点番茄病(黄单胞菌)的最佳控制在解淀粉芽孢杆菌RTI472作为标准单独或与KOCIDE的程序中观察到,并且优于基于使用BRAVO WEATHER STIK(百菌清;SYNGENTA)联合KOCIDE 3000的方案。
[0357] 表XVI.与SERENADE OPTIMUM和化学活性试剂相比,解淀粉芽孢杆菌RTI472对番茄中的细菌性斑点番茄病(黄单胞菌)的控制的结果。
[0358]
[0359] 实施例12
[0360] 用解淀粉芽孢杆菌RTI472涂覆玉米种子的效果
[0361] 实施试验以测定使用解淀粉芽孢杆菌RTI472菌株的孢子以及典型的化学对照涂覆玉米种子而产生的效果。用威斯康星州的三个田间试验的平均值测定了对从种植到出苗的时长、植株挺立度(plant stand)、植株活力、以及颗粒产量的效果。试验按以下进行。
[0362] 配方:
[0363] 解淀粉芽孢杆菌RTI472孢子在水中的浓缩物(1.0×10+10cfu/ml)以1.0×10+5cfu/种子的量施用。
[0364] MAXIM(先正达作物保护公司(SYNGENTA CROP PROTECTION,INC))以0.0064mg AI/颗(kernel)的量施用至种子(咯菌腈)。
[0365] 甲霜灵以0.005mg AI/颗的量施用至种子。
[0366] PONCHO 250(BAYER作物科学)以0.25mg AI/颗(噻虫胺)的量施用至种子。
[0367] 处理施用方法:
[0368] 将玉米种子与含有解淀粉芽孢杆菌RTI472孢子以及化学对照MAXIM+甲霜灵+PONCHO 250的溶液混合来进行种子处理,使得每颗种子平均为1×105cfu和如上所述的标签标明浓度的化学活性成分。使用未处理的种子以及仅用化学对照处理的种子作为对照来进行试验。未处理的种子和各个处理的玉米种子在威斯康星州的三个独立的田间试验中种植,并分析了从种植到出苗的时长、植株挺立度(plant stand)、植株活力、以及以蒲式耳/英亩计的颗粒产量。使用来自三处田间试验的数据的平均值,化学对照的添加相比于未处理的种子在从种植到出苗的时间、植株挺立度、植株活力和颗粒产量均具有统计上的显著增加。包括有解淀粉芽孢杆菌RTI472的种子处理与仅用化学对照处理的种子相比,从种植到出苗的时长、植株挺立度或植株活力并没有统计上的显著效果,但确实带来了6蒲式耳/英亩的颗粒增加(从231增加至237蒲式耳/英亩),表明颗粒产量有2.6%的增加。
[0369] 如上所述进行了相关的试验,区别在于玉米植株分别经受病原体丝核菌以及禾谷镰孢菌的考验。疾病严重度通过目视调查来评价,程度为1-5。用解淀粉芽孢杆菌RTI472的种子处理与仅用化学对照处理的种子相比,对丝核菌和自然发生的疾病的疾病严重程度在统计学显著降低。
[0370] 实施例13
[0371] 解淀粉芽孢杆菌RTI472对意大利和西班牙的田间试验的草莓中的棕灰霉病(灰葡萄孢)的拮抗作用
[0372] 描述草莓田间试验中进行的研究,以确定解淀粉芽孢杆菌RTI472菌株预防和/或改善植物病原体棕灰霉病(灰葡萄孢)影响的能力。
[0373] 以施用之间间隔7天的方式一共对作物进行4次施用。
[0374] 配方:
[0375] SERENADE MAX在4000g/ha、对应于2.0×10+14cfu/ha的枯草芽孢杆菌菌株QST713的比例下施用。
[0376] 添加了酵母提取物的废发酵肉汤(SFB)中的解淀粉芽孢杆菌RTI472孢子且施用率+13为2.0×10 cfu/ha,酵母提取物在约0.01%~0.2%的范围内。另外以每100升雾溶液0.15升的比例添加SILWET L77(海伦娜化学(HELENA CHEMICAL)),非离子有机硅表面活性剂。
[0377] 前两次对作物的施用为以0.8kg/ha的比例的SWITCH(嘧菌环胺375g/kg加甲霜灵250g/kg;SYNGENTA作物保护公司),然后两次SIGNUM的施用为1.8kg/ha的比例(啶酰菌胺
267g/kg加唑菌胺酯67g/kg;拜耳作物科学公司)。这在此称为“农民程序”。
[0378] 试验设计如下:未处理的对照(UTC),农民程序,RTI472+SILWET L77,和SERENADE MAX。
[0379] 处理施用方法:
[0380] 进行四次独立的田间试验,每次重复4次,将试验结果相结合并作为平均结果。在每个施用之间间隔7天的方式将四个单独的处理施用递送到作物。在开始处理前三天,对包括未处理对照组的所有地块用SWITCH处理以抑制初期疾病发展。在施用中,根据作物密度,施用喷雾器设定为递送53~107加仑每英亩。使用具有锥形喷嘴的CO2背包式喷雾器以0.56mph(0.25m/s或0.9km/h)的地面速度喷洒各个地块,并且每个喷嘴间隔开2英寸(5.5cm)。
[0381] 所有的草莓被收获、计数、称重并以可出售或疾病来分类以确定产量。疾病发生率(被棕灰霉病影响的果实%)通过评价在6个不同的日期收获的每个处理的果实来测定,并表现为“疾病压力曲线下面积”(AUDPC)。与未处理的对照相比的疾病发生率和产量提高%示于下表XVIII。作为时间的函数,UTC中的疾病发生率示于下图13,并且显示试验期间的疾病压力达到最高的疾病压力约20%至45%的果实侵害。
[0382] 下表XVIII中的结果显示在三种处理(解淀粉芽孢杆菌RTI472、SERENADE MAX、和农民程序)中,草莓中的棕灰霉病(灰葡萄孢)的胜过未处理的对照的改善的控制,并且用RTI472处理的产量略高。
[0383] 表XVIII和SERENADE MAX和基于农民程序的化学活性试剂相比,解淀粉芽孢杆菌RTI472控制草莓上的棕灰霉病(灰葡萄孢霉)的结果。结果是四次独立田间试验的平均值。
[0384]
[0385] 实施例14
[0386] 解淀粉芽孢杆菌RTI472在对矮生西葫芦(summer squash)中的白粉病的拮抗作用[0387] 对矮生西葫芦进行田间试验研究以确定解淀粉芽孢杆菌RTI472菌株作为标准单独或作为与FRACTURE的混合物以预防和/或改善二孢白粉菌(ERYSCI)导致的矮生西葫芦中的白粉病的影响的能力。FRACTURE(CONSUMO EM VERDE(CEV),BIOTECNOLOGIA DAS PLANTAS S.A.,葡萄牙)是一种基于植物提取物的制剂,作为活性成分含有20%BLAD多肽。所述BLAD多肽是来自甜羽扇豆(白羽扇豆)的天然产生的种子储藏蛋白,其通过引起真菌细胞壁损伤和扰乱内细胞膜来对易受影响的真菌病原体起作用。
[0388] 总体上,除非另有说明,采用下表XIX所示的比例对每个产品以5~7天间隔的方式进行6次施用。第一次施用的时机是临预测的疾病出现之前。在RTI472的情况下(**施用率1.8×10+13cfu/ha),施用率对应于基于1400g/ha施用率的SERENADE OPTIMUM所推荐的相同的菌落形成单位/ha。
[0389] 配方:
[0390] SERENADE OPTIMUM(拜耳作物科学公司)在1400g/ha、对应于1.8x10+13cfu/ha的比例下施用。
[0391] FRACTURE(CONSUMO EM VERDE(CEV),BIOTECNOLOGIA DAS PLANTAS S.A.,葡萄牙)在672g活性成分/ha(BLAD)的比例下施用。
[0392] 解淀粉芽孢杆菌RTI472孢子加添加有酵母提取物0.15%,蔗糖0.2%,MgSO40.02%,和CaCl20.002%的废发酵肉汤(SFB),且施用率对应于基于1400g/ha施用率的Serenade Optimum所推荐的相同的菌落形成单位/ha。
[0393] BRAVO WEATHER STIK(SYNGENTA作物保护公司)产品在1680g活性成分/ha(百菌清)的比例下施用。
[0394] LUNA EXPERIENCE(拜耳作物科学公司)在500g活性成分/ha(氟吡菌酰胺加戊唑醇杀真菌剂)的比例下施用。
[0395] TACTIC(洛夫兰产品公司)在0.1875%v/v浓度下施用。
[0396] 试验设计如下:未处理对照组,FRACTURE,SERENADE OPTIMUM+TACTIC,BRAVO WEATHER STIK+TACTIC,LUNA EXPERIENCE+TACTIC,RTI472+TACTIC,RTI472+FRACTURE+TACTIC.
[0397] 处理施用方法:除非另有规定,所有施用进行6次,施用之间间隔5~7天。施用喷雾设置为递送30加仑每英亩。使用具有扁平风扇喷嘴(8004型)的CO2背包式喷雾器以4mph的地面速度喷洒各个地块,并且每个喷嘴间隔开18英寸。运送化学品的载体是在2升瓶子中混合的水。对于RTI472加FRACTURE的施用,对两种产品进行罐混并以与个别产品相同的浓度施用。
[0398] 疾病评分:矮生西葫芦中的白粉病用对顶部叶片的水平评价。疾病严重程度,表现为“疾病压力曲线下面积”(AUDPC),被定义为在上叶表面发生白粉病的严重程度(叶面积受影响)的函数。未处理植物确认有100%疾病发生率和62.8%疾病严重程度。
[0399] 实验结果列于下表XIX。FRACTURE提供了疾病严重程度的约15%降低,同时SERENADE OPTIMUM和RTI472带来了疾病严重程度的约30%降低。疾病严重程度的最显著的降低在BRAVO WEATHER STIK(45%)和LUNA EXPERIENCE(94%)中被观察到。有意思的是,当将RTI472和FRACTURE一起施用,观察到疾病控制的累积效果,得到疾病严重程度的47%的降低。这与BRAVO WEATHER STIK的疾病严重程度的降低(45%)相当。因此,基于解淀粉芽孢杆菌RTI472和FRACTURE的产品组合在控制葫芦中的白粉病的程序中可作为百菌清杀真菌剂的替代品。
[0400] 表XIX.与SERENADE OPTIMUM,FRACTURE和其他化学活性试剂相比,解淀粉芽孢杆菌RTI472对矮生西葫芦中的二孢白粉菌(ERYSCI)引起的白粉病的控制的结果。
[0401]
[0402] *施用率以g活性成分/ha计
[0403] **施用率以cfu/ha计
[0404] +表示施用的时间(有字母/日期)
[0405] N.A.不可施用
[0406] 实施例15
[0407] 解淀粉芽孢杆菌RTI472分离株的新代谢物的鉴定
[0408] 之前报道了五类芬枯草菌素型代谢物和脱羟基芬枯草菌素型代谢物是由包括解淀粉芽孢杆菌的微生物种类生产的(例如参见Li,Xing-Yu,等,2013,J.Microbiol.Biotechnol.23(3),313–321;Pecci Y,等2010,《质谱(Mass Spectrom.)》,45(7):772-77.)。这些代谢物、环状脂肽是还含有脂肪酸基团的环状肽分子。芬枯草菌素和脱羟基芬枯草菌素型代谢物的五个类型记作A、B、C、D和S。这些代谢物的骨架结构和五类中的每一类的特异性氨基酸序列示于图13。
[0409] 解淀粉芽孢杆菌RTI472生产的芬枯草菌素和脱羟基芬枯草菌素型代谢物使用UHPLC-TOF MS进行分析。将30℃下在869培养基中生长3和6天的RTI472菌株生产的芬枯草菌素型代谢物的分子量与芬枯草菌素和脱羟基芬枯草菌素型代谢物预期的理论分子量相比较。另外,为了确定RTI472菌株生产的多种芬枯草菌素型代谢物的氨基酸组成,对先前通过UHPLC-TOF MS鉴定的每种芬枯草菌素型代谢物进行使用LC-MS-MS的肽测序。藉此,测得所述解淀粉芽孢杆菌RTI472产生了芬枯草菌素A、B、C、D和S以及脱羟基芬枯草菌素A、B、C、D和S。令人惊讶的是,除了这些已知的化合物,测得RTI472菌株还产生了几类之前未鉴定的这些化合物的衍生物。
[0410] 例如,确定解淀粉芽孢杆菌RTI472菌株生产了芬枯草菌素类化合物和脱羟基芬枯草菌素类化合物,其中环状肽链8位上的L-异亮氨酸(在图14中称为X3)被L-甲硫氨酸替代。新的芬枯草菌素和脱羟基芬枯草菌素种类在此被称为MA、MB和MC,是指A、B和C类的图14中的X3的L-异亮氨酸被L-甲硫氨酸替代的衍生物。新鉴定的分子用粗体示于图14和下表XX。
如表XX所记载的,脱羟基芬枯草菌素MC化合物没有在RTI472菌株的培养中被观察到。
[0411] 进一步确定解淀粉芽孢杆菌RTI472菌株产生另外一类未鉴定芬枯草菌素(推定为脱羟基芬枯草菌素)代谢物。在该类中,芬枯草菌素B的L-异亮氨酸(图13中的X3位)被L-同型半胱氨酸(Hcy)替代。该推定的未鉴定的代谢物在此称为芬枯草菌素H。
[0412] 进一步确定RTI472菌株产生另外一类未鉴定的芬枯草菌素和脱羟基芬枯草菌素代谢物。在该类中,环形肽骨架结构的位点4处的氨基酸(图14中的位点X1)被L-异亮氨酸替代。这些之前未鉴定的代谢物在此称为芬枯草菌素I和脱羟基芬枯草菌素I并用粗体示于图14和表XX。
[0413] 之前报道的芬枯草菌素和脱羟基芬枯草菌素型脂肽和新鉴定的代谢物的氨基酸序列的汇总在以下的表XX中提供。
[0414] 表XX解淀粉芽孢杆菌RTI472中的芬枯草菌素型脂肽的UHPLC-TOF MS鉴定的汇总。
[0415]
[0416]
[0417] 实施例16
[0418] 分离的RTI472的脂肽代谢物的抗微生物活性
[0419] 将来自解淀粉芽孢杆菌菌株RTI472的拮抗性脂肽从RTI 472废发酵肉汤中分离并显示出保留其活性。
[0420] 在本实验中,根据以下文献中描述的步骤,将解淀粉芽孢杆菌培养上清液酸化至pH2:Smyth,TJP等,2010,“Isolation and Analysis of Lipopeptides and High Molecular Weight Biosurfactants.”《和脂质微生物手册(Handbook of Hydrocarbon and Lipid Microbiology)》中,K.N.Timmis(编辑).3687-3704页。通过UHPLC-TOF MS分析脂肽的回收,并测试了其对于灰葡萄孢和禾谷镰孢菌的拮抗活性。
[0421] 将RTI472在M2生孢培养基中在30℃下培养6天,将废发酵肉汤(472-SFB)以18,514g离心20分钟以除去孢子。随后通过加入浓HCl将上清液酸化至pH2.0,并在4℃下过夜沉淀。随后将样品以18,514g离心20分钟,得到固体粗脂肽。将沉淀物冻干过夜,溶解在原始体积的M2培养基中,并通过LCMS分析。大量的伊枯草菌素(C14,C15,C16)、表面活性肽(C12,C13,C14,C15,C16,C17)、和芬枯草菌素(A,B,C,D,S)被提取、整合、和总结,以比较来自每个样品的脂肽的相对丰度。图15是显示在酸沉淀后从RTI472废发酵肉汤(SFB)中回收的脂肽的百分数的图。术语“472-AP-沉淀”和“472-AP-上清液”分别指离心的SFB酸沉淀后获得的重悬的沉淀和上清液。图15中的图中的结果显示脂肽总量的83%通过酸沉淀被回收。伊枯草菌素65%被沉淀,同时26%的伊枯草菌素,没有通过酸沉淀方法回收。使用酸沉淀100%回收了表面活性肽和芬枯草菌素。为了确认LCMS结果与拮抗活性的相关性,通过LCMS分析对相同的样品进行生物测定。对于生物测定,将20μl的灰葡萄孢或禾谷镰刀菌接种物点样在平板中间,其中分别用10μl、20μl和40μl等分试样中的472-AP-沉淀。检测抗真菌活性,并在30℃孵育5天或7天后分别对灰葡萄孢和禾谷镰孢菌进行成像。结果示于图16A-16D的板试验的图中。图16A和16B是在869琼脂平板上点样的灰葡萄孢的图像,其具有A)RTI472发酵肉汤(472-SFB);和B)在酸沉淀和离心(472-AP-沉淀)后获得的重悬浮沉淀物质。图16C和
16D是在869琼脂平板上点样的禾谷镰孢菌的图像,其具有C)RTI472发酵肉汤(472-SFB);和D)在酸沉淀和离心后获得的重悬浮沉淀物质(472-AP-沉淀)。对于阳性对照,在真菌旁边的每个板的左侧点样10μl的RTI472的细胞培养物。结果显示酸沉淀样品(472-AP-沉淀)对灰葡萄孢和禾谷镰孢菌均具有与起始废发酵肉汤类似的拮抗活性水平。生物测定结果与图15中的LCMS数据良好相关。
[0422] 参考文献
[0423] 本说明书中述及的所有出版物、专利申请、专利和其他参考文献都通过引用全文纳入本文。
[0424] 虽然通过阐述和举例的方式详细描述了上述主题以清晰理解,但本发明技术人员应理解可在附加的权利要求书范围内实施某些改变和修改。
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