一种耐盐促生菌wp-3及其应用
阅读：74发布：2020-05-08
专利汇可以提供一种耐盐促生菌wp-3及其应用专利检索，专利查询，专利分析的服务。并且本 发明 属于农业 微 生物 技术领域，公开了一种耐盐促生菌wp-3及其应用，所述耐盐促生菌wp-3分类命名为葡萄球菌属，基因序列为SEQ ID NO：1；于2018年5月14日保藏于中国典型培养物保存中心，保藏号为CCTCC NO：M2018273；所述耐盐促生菌wp-3的形态特征为：菌落小，淡黄色，不透明，表面光滑，边缘光滑，圆形。本发明所述耐盐促生菌wp-3具有较高的 碱 耐受性、 耐盐性 、对 温度 具有较好的适应性；能够溶有机磷和无机磷、增加 土壤 可溶磷含量、合成生长素IAA、促进作物生长、促进作物 种子 萌发。，下面是一种耐盐促生菌wp-3及其应用专利的具体信息内容。
1.一种耐盐促生菌wp-3，其特征在于，所述耐盐促生菌wp-3，2018年5月14日保藏于中国典型培养物保存中心，保藏号为CCTCC NO：M2018273，保藏单位地址湖北省武汉市武昌区八一路299号。
2.如权利要求1所述的耐盐促生菌wp-3，其特征在于，所述耐盐促生菌wp-3 DNA基因序列为SEQ ID NO：1。
3.一种如权利要求1所述耐盐促生菌wp-3的分离方法，其特征在于，所述耐盐促生菌wp-3的分离方法包括以下步骤：
步骤一，从新疆第八师146团盐碱地采集土壤，装入干净的采样袋，做好标记，于4℃冰箱中保存备用；
步骤二，将采集到的土样称取10g置于90m L灭菌水的250m L三角瓶中，于摇床震荡
150r/min 20min后，用1ml移液器从上清液中吸取1ml加入盛有9ml无菌水的试管中充分混匀；
步骤三，用移液器从试管中吸取1ml加入另一盛有9ml无菌水的试管中，混合均匀，依此类推制成10-1，10-2，10-3，10-4，10-5，10-6不同稀释度的溶液；
步骤四，从步骤三所得不同浓度的溶液中各吸取0.1ml，分别在含10％氯化钠的LB培养基平板上涂布均匀，倒置在30℃恒温箱中培养2-3d；
步骤五，挑取单菌落接于LB斜面上，待长出菌苔后在4℃冰箱保存。
4.如权利要求3所述耐盐促生菌wp-3的分离方法，其特征在于，所述LB培养基由酵母提取物5g，胰化蛋白胨10g，氯化钠10g，蒸馏水1000mL，固体加琼脂15g组成；并于121℃灭菌20分钟制得。
5.一种如权利要求1所述耐盐促生菌wp-3的鉴定方法，其特征在于，所述耐盐促生菌wp-3的鉴定方法包括：
对分离纯化后得到的菌株wp-3进行划线于LB培养基进行菌落形态分析；
将分离纯化得到的菌株wp-3通过16S rRNA测序分析。
6.一种如权利要求1所述耐盐促生菌wp-3在重度盐碱地中的应用。
7.一种如权利要求1所述耐盐促生菌wp-3在增加土壤可溶磷含量中的应用。
8.一种如权利要求1所述耐盐促生菌wp-3在合成生长素IAA中的应用。
9.一种如权利要求1所述耐盐促生菌wp-3在促进作物生长中的应用。
10.一种如权利要求1所述耐盐促生菌wp-3在促进作物种子萌发中的应用。
一种耐盐促生菌wp-3及其应用
技术领域
背景技术
[0002] 目前，最接近的现有技术：我国土地资源丰富，面积辽阔，但是盐碱地及耕地盐渍化所占的比例较重。其中有些土壤由于盐碱过重构成特殊的环境导致作物难以生长。这些特殊的环境孕育着适应此环境的盐碱微生物，尤其是特殊的环境中植被覆盖下的微生物资源更加丰富，具备了多样化的基因、结构和机能。例如有些菌株除了具有耐盐碱能力之外并具有固氮、溶磷能力(无机磷、有机磷)、分泌植物激素的能力。许多研究证明这些具有多种功能的菌株能够促进作物的生长。
[0003] 目前。我国缺乏耐盐促生微生物，尤其是耐高盐度促生微生物。因此，从盐碱地挖掘高耐盐与促生微生物，并利用挖掘的高耐盐促生微生物改良重度盐碱土壤与促进作物生长，成为当前研究的热点。
[0004] 综上所述，现有技术存在的问题是：现有技术对耐盐促生微生物的研究较少，缺乏耐盐促生微生物，尤其是缺乏有效的高耐盐促生微生物。本发明耐盐促生菌wp-3，可以在高盐度土壤中生存，且具有较好的促生特性，促进作物生长。
[0005] 解决上述技术问题的难度：从盐碱地挖掘既可以耐高盐，又可以促进作物生长。
[0006] 解决上述技术问题的意义：盐碱地挖掘高耐盐与促生微生物，并利用挖掘的高耐盐促生微生物能够改良重度盐碱土壤，促进作物生长，为促进作物在逆境中生长提供菌种资源。
发明内容
[0007] 针对现有技术存在的问题，本发明提供了一种耐盐促生菌wp-3及其应用。
[0008] 本发明是这样实现的，一种耐盐促生菌wp-3，所述耐盐促生菌wp-3分类命名为葡萄球菌属(Marinococcus sp.)，基因序列为SEQ ID NO：1；于2018年5月14日保藏于中国典型培养物保存中心，保藏号为CCTCC NO：M2018273，保藏单位地址湖北省武汉市武昌区八一路299号。
[0009] 本发明的另一目的在于提供一种耐盐促生菌wp-3的分离方法包括以下步骤：
[0011] 步骤二，将采集到的土样称取10g置于90m L灭菌水的250m L三角瓶中，于摇床震荡150r/min 20min后，用1ml移液器从上清液中吸取1ml加入盛有9ml无菌水的试管中充分混匀。
[0012] 步骤三，用移液器从此试管中吸取1ml加入另一盛有9ml无菌水的试管中，混合均-1 -2 -3 -4 -5 -6匀，依此类推制成10 ，10 ，10 ，10 ，10 ，10 不同稀释度的溶液。
[0013] 步骤四，从步骤三所得不同浓度的溶液中各吸取0.1ml，分别在含10％氯化钠的LB培养基平板上涂布均匀，倒置在30℃恒温箱中培养2-3d。
[0014] 步骤五，挑取单菌落接于LB斜面上，待长出菌苔后在4℃冰箱保存。
[0016] 本发明的另一目的在于提供一种耐盐促生菌wp-3的鉴定方法为：对分离纯化后得到的菌株wp-3进行划线于LB培养基进行菌落形态观察，所述耐盐促生菌wp-3的形态特征为：菌落小，淡黄色，不透明，表面光滑，边缘光滑，圆形；将分离纯化得到的菌株wp-3通过16S rRNA序列分析，该菌株为Marinococcus sp.。
[0018] 本发明的另一目的在于提供一种所述耐盐促生菌wp-3在增加土壤可溶磷含量中的应用，所述耐盐促生菌wp-3能够溶有机磷和无机磷。
[0019] 进一步，所述菌株wp-3溶磷能力定量测定方法为：
[0020] (1)将2ug·m L-1的磷标准液梯度稀释至含磷量为0.00、0.04、0.08、0.24、0.40、0.80、1.20ug·m L-1制作标准曲线。
[0021] (2)在室温下加入钼锑抗显色剂，显色20min，测定其吸光值并制作标准曲线。
[0022] (3)将保存的溶磷菌株挑取少许沉淀接种于LB液体培养基中，在30℃温度下150r·min-1振荡培养24h，使菌液吸光值OD600＝1，吸取1mL菌液于液体PKO培养基。
[0023] (4)解磷菌株挑取少许沉淀接于LB液体培养基中，在30℃温度下150r·min-1振荡培养过夜，使菌液吸光值OD600＝1。
[0024] (5)吸取1m L菌液于液体蒙金娜培养基，30℃温度下120r·min-1振荡培养箱培养48h。
[0025] (6)取5m L菌液离心上清定容至25m L后加入显色剂，每组3个平行，通过钼锑抗比色法测定菌株的溶磷与解磷能力。
[0026] 进一步，所述蒙金娜有机培养基(1L)由葡萄糖10.0g，(NH4)2SO4 0.5 g，MgSO4·7H2O 0.3g，NaCl 0.3g，KCl 0.3g，FeSO4·7H2O 0.03g，MnSO4·H2O 0.03g，卵磷脂0.2g，CaCO3 1.0 g，酵母粉0.5g，琼脂20.0g；蒸馏水1000ml组成；液体培养基不加琼脂，置于121℃灭菌20分钟。
[0027] 所述PKO无机培养基(1L)由葡萄糖10.0g，MgSO4·7H2O 0.3g，(NH4)2SO4 0.5 g，NaCl 0.3g，Ca3(PO4)22.0g，KCl 0.3g，MnSO4·H2O 0.03g，FeSO4·7H2O 0.036g，琼脂20g，蒸馏水1000ml组成；液体培养基不加琼脂，置于121℃灭菌20分钟。
[0028] 本发明的另一目的在于提供一种所述耐盐促生菌wp-3在合成生长素IAA中的应用，所述耐盐促生菌wp-3可利用色氨酸合成生长素IAA。
[0029] 进一步，所述菌株wp-3分泌IAA能力的测定方法为：
[0030] (Ⅰ)IAA标准曲线配置
[0031] 精确称取32.8mg的IAA于100m L容量瓶中，用甲醇定容(该溶液含IAA328mg/L；再用甲醇依次稀释1倍，连续进行4次，配成5份浓度依次相差1倍的标准溶液，比色时也是等量的标准溶液加等量的比色液。
[0032] (Ⅱ)将菌株wp-3按1％接种量接种于含有L-色氨酸(100mg/L)的LB液体培养基，在30℃，150r/min摇床培养48h。
[0033] (Ⅲ)将菌悬液以10000r/min离心10min，取上清液，加入等体积Salkowski比色液(50mL 35％HClO4+1m L 0.5mol/L FeCl3))，避光静置30min，测定其OD530值。
[0034] (Ⅳ)对照标准曲线计算单位体积培养液中IAA的含量。
[0035] 本发明的另一目的在于提供一种所述耐盐促生菌wp-3在促进作物生长中的应用，所述耐盐促生菌wp-3可促进高盐度胁迫的小麦生长。
[0036] 进一步，所述耐盐促生菌wp-3促进高盐度胁迫的小麦生长的测定方法为：
[0038] 2)小麦种子先用自来水冲洗干净，用75％酒精消毒30s，再用0.1％升汞消毒7min，用无菌水冲洗5～6遍。
[0039] 3)将种子浸泡在无菌水中2h，再将小麦种子浸泡在各处理溶液中8h，取大小一致饱满的种子，然后均匀排列在铺有灭菌滤纸直径12cm的消毒发芽盒中。
[0040] 4)待小麦种子露白后，立即播种到装有等量经灭菌的营养土(营养土3：蛭石1)的花盆(上直径15cm，下直径10cm，高13cm)中，播种深度1cm左右，播种带上1次性手套均匀播种；及时等量浇水，50d后进行生长指标的测定。
[0041] 本发明的另一目的在于提供一种所述耐盐促生菌wp-3在促进作物种子萌发中的应用，所述耐盐促生菌wp-3可促进盐胁迫小麦种子的萌发。
[0042] 进一步，所述耐盐促生菌wp-3促进盐胁迫小麦种子萌发的测定方法为：
[0043] ①设置2个处理(T1：150mM NaCl溶液；T2：150mM NaCl溶液+菌株菌悬液)。每个处理设置3个重复，每个重复发芽盒内放置48粒小麦种子。
[0044] ②小麦种子先用自来水冲洗干净，用75％酒精消毒30s，再用0.1％升汞消毒7min，用无菌水冲洗5～6遍。
[0045] ③先将种子浸泡在无菌水中2h，再将小麦种子浸泡在各处理溶液中8h，取大小一致饱满的种子，均匀排列在铺有灭菌滤纸直径12cm的消毒发芽盒中；48h后计算每24h小麦发芽率。
[0046] 综上所述，本发明的优点及积极效果为：该菌株可以有效地促进植物营养吸收、调节植物生长以及提高植物在逆境条件下抗逆能力。
[0047] 本发明提供的一种耐盐促生菌wp-3及应用，所述耐盐促生菌wp-3具有较高的碱耐受性、耐盐性、对温度具有较好的适应性；能够溶有机磷和无机磷、增加土壤可溶磷含量、合成生长素IAA、促进作物生长、促进作物种子萌发。附图说明
[0049] 图2是本发明实施例提供的高耐盐促生菌(Marinococcus sp.)菌落形态示意图。
[0050] 图3是本发明实施例提供的菌株wp-3容磷能力示意图。
[0051] 图4是本发明实施例提供的菌株wp-3IAA定量测定标准曲线示意图。
[0052] 图5是本发明实施例提供的小麦接种菌株wp-3促生效果示意图。
[0053] 图6是本发明实施例提供的小麦接种菌株wp-3对根长、幼苗鲜重、地上和地下部分鲜重影响示意图。
[0054] 图7是本发明实施例提供的盐胁迫下小麦接种菌株wp-3促生效果示意图。
[0055] 图8是本发明实施例提供的盐胁迫小麦接种菌株wp-3对根长、幼苗鲜重、地上和地下部分鲜重影响示意图。
[0056] 图9是本发明实施例提供的盐胁迫小麦种子接种菌株wp-3对发芽率影响示意图。
具体实施方式
[0057] 为了使本发明的目的、技术方案及优点更加清楚明白，以下结合实施例，对本发明进行进一步详细说明。应当理解，此处所描述的具体实施例仅仅用以解释本发明，并不用于限定本发明。
[0058] 现有技术对耐盐促生微生物的研究较少，缺乏耐盐促生微生物，尤其是缺乏有效的高耐盐促生微生物。
[0059] 针对现有技术存在的问题，本发明提供了一种耐盐促生菌wp-3及其应用，下面结合附图对本发明作详细的描述。
[0060] 本发明实施例提供的一种耐盐促生菌wp-3分类命名为葡萄球菌属(Marinococcus sp.)，基因序列为SEQ ID NO：1；于2018年5月14日保藏于中国典型培养物保存中心，保藏号为CCTCC NO：M2018273，保藏单位地址湖北省武汉市武昌区八一路299号。
[0061] 如图2所示，本发明实施例提供的耐盐促生菌wp-3的形态特征为：菌落小，淡黄色，不透明，表面光滑，边缘光滑，圆形。
[0062] 本发明实施例提供的一种所述耐盐促生菌wp-3在重度盐碱地的应用，所述耐盐促生菌wp-3具有较高的碱耐受性、耐盐性、对温度具有较好的适应性。
[0063] 本发明实施例提供的一种所述耐盐促生菌wp-3在增加土壤可溶磷含量中的应用，所述耐盐促生菌wp-3能够溶有机磷和无机磷。
[0064] 本发明实施例提供的一种所述耐盐促生菌wp-3在合成生长素IAA中的应用，所述耐盐促生菌wp-3可利用色氨酸合成生长素IAA。
[0065] 本发明实施例提供的一种所述耐盐促生菌wp-3在促进作物生长中的应用，所述耐盐促生菌wp-3可促进高盐度胁迫的小麦生长。
[0066] 本发明实施例提供的一种所述耐盐促生菌wp-3在促进作物种子萌发中的应用，所述耐盐促生菌wp-3可促进盐胁迫小麦种子的萌发。
[0067] 下面结合实施例对本发明作进一步描述。
[0068] 实施例1：高耐盐促生菌wp-3(Marinococcus sp.)的分离与鉴定
[0069] 1.1高耐盐促生菌wp-3(Marinococcus sp.)的分离(如图1所示)
[0070] 从新疆第八师146团盐碱地采集土壤，装入干净的采样袋，做好标记，于4℃冰箱中保存备用。将采集到的土样称取10g置于90m L灭菌水的250m L三角瓶中，于摇床震荡150r/min 20min后，用1ml移液器从上清液中吸取1ml加入盛有9ml无菌水的试管中充分混匀，然后用移液器从此试管中吸取1ml加入另一盛有9ml无菌水的试管中，混合均匀，依此类推制-1 -2 -3 -4 -5 -6成10 ，10 ，10 ，10 ，10 ，10 不同稀释度的溶液后，各吸取0.1ml分别在含10％氯化钠的LB培养基平板上涂布均匀，倒置在30℃恒温箱中培养2-3d，挑取单菌落接于LB斜面上，待长出菌苔后在4℃冰箱保存。
[0071] LB培养基：酵母提取物5g，胰化蛋白胨10g，氯化钠10g，蒸馏水1000mL，固体加琼脂15g，121℃灭菌20分钟。
[0072] 1.2菌株wp-3的鉴定
[0073] 对上述分离纯化得到的菌株wp-3进行划线于LB培养基进行菌落形态观察，如图1所示。其特征为菌落小，淡黄色，不透明，表面光滑，边缘光滑，圆形。
[0074] 将分离纯化得到的菌株wp-3通过16S rRNA序列分析，该菌株为Marinococcus sp.。
[0075] 实施例2：菌株wp-3生长特性研究
[0076] 2.1不同pH对菌株wp-3生长影响
[0077] 将菌株wp-3菌悬液以1.0％接种量接种于不同pH值(6，7，8，9，10，11)LB培养基，在30℃，150r/min振荡培养24h，以不接种的LB培养基为对照，采用722分光光度计检测光密度值(D600 nm)，结果见表1，最适生长pH为9。
[0078] 表1不同pH对菌株wp-3生长影响
[0079]
[0080] 2.2不同温度对菌株wp-3生长影响
[0081] 将菌株wp-3菌悬液以1.0％接种量接种于pH值9LB培养基，在不同温度(24℃、27℃、30℃、33℃、36℃)，150r/min振荡培养24h，以不接种的LB培养基为对照，采用722分光光度计检测光密度值(D600 nm)，结果见表2，最适生长温度为30℃。
[0082] 表2不同温度对菌株wp-3生长影响
[0083]
[0084] 2.3不同盐度对菌株wp-3生长影响
[0085] 将菌株wp-3菌悬液以1.0％接种量接种于pH值9，并含不同氯化钠浓度(4-17％)的LB培养基，在30℃，150r/min振荡培养24h，以不接种的LB培养基为对照，采用722分光光度计检测光密度值(D600 nm)，结果见表3，该菌株最大耐盐浓度为17％。
[0086] 表3不同盐度对菌株wp-3生长影响
[0087]
[0088] 实施例3：菌株wp-3溶磷能力定量测定
[0089] 3.1将2ug·m L-1的磷标准液梯度稀释至含磷量为0.00、0.04、0.08、0.24、0.40、-10.80、1.20ug·m L 制作标准曲线。在室温下加入钼锑抗显色剂，显色20min，测定其吸光值并制作标准曲线。将保存的溶磷菌株挑取少许沉淀接种于LB液体培养基中，在30℃温度下
150r·min-1振荡培养24h，使菌液吸光值OD600＝1，吸取1mL菌液于液体PKO培养基；解磷菌株挑取少许沉淀接于LB液体培养基中，在30℃温度下150r·min-1振荡培养过夜，使菌液吸光值OD600＝1，吸取1m L菌液于液体蒙金娜培养基，30℃温度下120r·min-1振荡培养箱培养48h。取5m L菌液离心上清定容至25m L后加入显色剂，每组3个平行，通过钼锑抗比色法测定菌株的溶磷与解磷能力。
150r·min-1振荡培养24h，使菌液吸光值OD600＝1，吸取1mL菌液于液体PKO培养基；解磷菌株挑取少许沉淀接于LB液体培养基中，在30℃温度下150r·min-1振荡培养过夜，使菌液吸光值OD600＝1，吸取1m L菌液于液体蒙金娜培养基，30℃温度下120r·min-1振荡培养箱培养48h。取5m L菌液离心上清定容至25m L后加入显色剂，每组3个平行，通过钼锑抗比色法测定菌株的溶磷与解磷能力。
[0090] 测得菌株wp-3能够溶有机磷，转化量为0.22mg/L 2d；溶无机磷，转化量为1.84mg/L 2d，如图3所示。
[0091] 蒙金娜有机培养基(1L)：葡萄糖10.0g，(NH4)2SO4 0.5 g，MgSO4·7H2O 0.3g，NaCl 0.3g，KCl 0.3g，FeSO4·7H2O 0.03g，MnSO4·H2O 0.03g，卵磷脂0.2g，CaCO3 1.0 g，酵母粉
0.5g，琼脂20.0g；蒸馏水1000ml；液体培养基不加琼脂，121℃灭菌20分钟。
0.5g，琼脂20.0g；蒸馏水1000ml；液体培养基不加琼脂，121℃灭菌20分钟。
[0092] PKO无机培养基(1L)：葡萄糖10.0g，MgSO4·7H2O 0.3g，(NH4)2SO4 0.5g，NaCl 0.3g，Ca3(PO4)22.0g，KCl 0.3g，MnSO4·H2O 0.03g，FeSO4·7H2O 0.036g，琼脂20g，蒸馏水
1000ml；液体培养基不加琼脂，121℃灭菌20分钟。
1000ml；液体培养基不加琼脂，121℃灭菌20分钟。
[0093] 实施例4：菌株wp-3产IAA定量测定
[0094] 4.1IAA标准曲线配置
[0095] 精确称取32.8mg的IAA于100m L容量瓶中，用甲醇定容(该溶液含IAA328mg/L。再用甲醇依次稀释1倍，连续进行4次，配成5份浓度依次相差1倍的标准溶液，比色时也是等量的标准溶液加等量的比色液，标准曲线如图4所示。
[0096] 4.2菌株wp-3分泌IAA能力测定
[0097] 将菌株wp-3按1％接种量接种于含有L-色氨酸(100mg/L)的LB液体培养基，在30℃，150r/min摇床培养48h后，将菌悬液以10000r/min离心10min，取上清液，加入等体积Salkowski比色液(50mL 35％HClO4+1m L 0.5mol/L FeCl3))，避光静置30min，测定其OD530值。对照标准曲线计算单位体积培养液中IAA的含量。测定菌株wp-3产IAA含量为21.16mg/L。
[0098] 实施例5：菌株wp-3对非盐胁迫小麦的促生盆栽实验
[0099] 5.1小麦盆栽实验
[0100] 设置2个处理(T1：无菌水；T2：无菌水+菌株菌悬液)。每个处理设置3个重复，每个重复花盆内放置3粒小麦种子。小麦种子先用自来水冲洗干净，用75％酒精消毒30s，再用0.1％升汞消毒7min，用无菌水冲洗5～6遍，先将种子浸泡在无菌水中2h，取大小一致饱满的种子，再将小麦种子浸泡在各处理溶液中8h，然后均匀排列在铺有灭菌滤纸的消毒发芽盒(直径12cm)中。待小麦种子露白后，立即播种到装有等量经灭菌的营养土(营养土3：蛭石
1)的花盆(上直径15cm，下直径10cm，高13cm)中，播种深度1cm左右，播种带上1次性手套均匀播种。及时等量浇水，50d后进行生长指标的测定。促生效果图如图5所示。
1)的花盆(上直径15cm，下直径10cm，高13cm)中，播种深度1cm左右，播种带上1次性手套均匀播种。及时等量浇水，50d后进行生长指标的测定。促生效果图如图5所示。
[0101] 5.2小麦生长指标测定
[0102] 小麦生长50d，将植株取出，清洗根部，测定小麦根长，幼苗鲜重、地上部分鲜重、地下部分鲜重，菌株wp-3对小麦根长，幼苗鲜重、地上部分鲜重、地下部分鲜重有促进作用，分别提高25.5％、13.79％、184.2％、19.0％，结果如图6所示。
[0103] 实施例6：菌株wp-3对盐胁迫小麦的促生盆栽实验
[0104] 6.1小麦盆栽实验
[0105] 设置2个处理(T1：150mM NaCl溶液；T2：150mM NaCl溶液+菌株菌悬液)。每个处理设置3个重复，每个重复花盆内放置3粒小麦种子。小麦种子先用自来水冲洗干净，用75％酒精消毒30s，再用0.1％升汞消毒7min，用无菌水冲洗5～6遍，先将种子浸泡在无菌水中2h，再将小麦种子浸泡在各处理溶液中8h，取大小一致饱满的种子，然后均匀排列在铺有灭菌滤纸的消毒发芽盒(直径12cm)中。待小麦种子露白后，立即播种到装有等量经灭菌的营养土(营养土3：蛭石1)的花盆(上直径15cm，下直径10cm，高13cm)中，播种深度1cm左右，播种带上1次性手套均匀播种。及时等量浇水，50d后进行生长指标的测定，促生效果图如图7所示。
[0106] 6.2小麦生长生理指标测定
[0107] 小麦生长50d，将植株取出，清洗根部，测定小麦根长，幼苗鲜重、地上部分鲜重、地下部分鲜重，菌株wp-3对小麦根长，幼苗鲜重、地上部分鲜重有促进作用，分别提高12.8％、25.8％、11.9％，结果如图8所示。
[0108] 实施例7：盐胁迫下小麦接种菌株wp-3发芽实验
[0109] 设置2个处理(T1：150mM NaCl溶液；T2：150mM NaCl溶液+菌株菌悬液)。每个处理设置3个重复，每个重复发芽盒内放置48粒小麦种子。小麦种子先用自来水冲洗干净，用75％酒精消毒30s，再用0.1％升汞消毒7min，用无菌水冲洗5～6遍，先将种子浸泡在无菌水中2h，再将小麦种子浸泡在各处理溶液中8h，取大小一致饱满的种子，然后均匀排列在铺有灭菌滤纸的消毒发芽盒(直径12cm)中。48h后计算每24h小麦发芽率，小麦发芽率在48h到
168h均高于对照，如图9所示。
168h均高于对照，如图9所示。
[0110] 证明部分(具体实施例/实验/仿真/药理学分析/能够证明本发明创造性的正面实验数据、证据材料、鉴定报告、商业数据、研发证据、商业合作证据等)
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