欧洲鹅耳枥的组培快繁方法
专利汇可以提供欧洲鹅耳枥的组培快繁方法专利检索，专利查询，专利分析的服务。并且本 发明 涉及一种欧洲鹅 耳 枥的组培快繁方法，其特征是包括如下工艺：选取生长饱满的茎尖，表面消毒后接种在诱导培养基上；培养4周统计诱导率。剪取1.5~2.0cm茎段接种于增殖培养基上，60天统计增殖倍数。剪取生长健壮、长3~4cm的单苗接种于生根培养基上诱导生根。培养50天统计生根率、平均根数和平均根长。当根长到3~5cm时进行炼苗移栽，30天后，调查其移栽成活率。本发明的优点：能够诱导欧洲鹅耳枥试管苗快速增殖产生大量不定芽，成活率高达85%，为欧洲鹅耳枥的工厂化育苗提供了一条有效的途径。，下面是欧洲鹅耳枥的组培快繁方法专利的具体信息内容。
1.一种欧洲鹅耳枥的组培快繁方法，其特征是该方法包括如下工艺步骤：
1）选择生长饱满的茎尖，表面消毒后接种在含0.5~10.0mg/L 6-苄基氨基嘌呤的WPM基本培养基上进行不定芽诱导培养，培养基中还包含6.5g/L琼脂粉和30.0g/L蔗糖；
2）待不定芽长出后，剪取1.5~ 2.0cm茎尖，在附加0.1~2.0mg/L 的6-苄基氨基嘌呤，
0.1~2.0mg/L的激动素，0~0.5mg/L 的吲哚丁酸植物激素的MS基本培养基上进行增殖培养；
3）剪取生长健壮、长3~4cm的单苗进行生根培养，WPM基本培养基大量元素减少1/2，其他元素保持不变，简称1/2WPM基本培养基；附加0~1.0 mg/L吲哚丁酸，0~1.0mg/的萘乙酸；培养温度为25±2℃，pH 5.8~6.0，光照12h/天，光照强度为2000 lx；
4）当单苗根长到3~5cm时，将生根试管苗的瓶口封口膜打开，在培养室散射光下进行开口炼苗，使试管苗逐渐与外界接触，在1周内将周围环境湿度保持在70%~80%，逐步提高小苗适应外界环境的能力；5天后取出试管苗洗净根部的培养物质，移栽到育苗基质中生长，基质由珍珠岩、泥炭土、园土的重量比为2:2:1组成，充分混合后用多菌灵消毒。
2.根据权利要求1所述的欧洲鹅耳枥的组织培养方法，其特征是：步骤1）中的WPM基本培养基主要包含以下成分：NH4NO3 400mg/L、Ca(NO3)2·4H2O 556mg/L、CaCl2·2H2O 96mg/L、MgSO4·7H2O 370mg/L、KH2PO4 170mg/L、K2SO4 990mg/L、H3BO3 6.2mg/L、MnSO4·H2O 17.7mg/L、ZnSO4·7H2O 8.6mg/L、NaMoO4·2H2O 0.25mg/L、CuSO4·5H2O 0.25mg/L、FeSO4·7H2O
27.8mg/L、Na2-EDTA 37.3mg/L、肌醇100mg/L、甘氨酸2mg/L、烟酸0.5mg/L、盐酸硫胺素
1.0mg/L、盐酸吡哆醇0.5mg/L；步骤2）中的MS基本培养基中还包含6.0g/L琼脂粉和
30.0g/L的蔗糖；主要包含以下成分：NH4NO3 1650mg/L、KNO3 1900mg/L、MgSO4·7H2O 370mg/L、KH2PO4 170mg/L、CaCl2·2H2O 440 mg/L、KI 0.83mg/L、H3BO3 6.2mg/L、MnSO4·4H2O 22.3 mg/L、ZnSO4·7H2O 8.6mg/L、NaMoO4·2H2O 0.25mg/L、CuSO4·5H2O 0.025mg/L、CoCl2·6H2O
0.025mg/L、FeSO4·7H2O 27.8mg/L、Na2-EDTA 37.25mg/L、肌醇 100mg/L、甘氨酸2mg/L、烟酸0.5mg/L、盐酸吡哆醇0.5mg/L、盐酸硫胺素0.1 mg/L。
3.根据权利要求1所述的欧洲鹅耳枥的组织培养方法，其特征是：步骤3）中的1/2WPM基本培养基，主要包含以下成分：NH4NO3 200mg/L、Ca(NO3)2·4H2O 278mg/L、CaCl2·2H2O
48mg/L、MgSO4·7H2O 185mg/L、KH2PO4 85mg/L、K2SO4 495mg/L、H3BO3 6.2mg/L、MnSO4·H2O
17.7mg/L、ZnSO4·7H2O 8.6mg/L、NaMoO4·2H2O 0.25mg/L、CuSO4·5H2O 0.25mg/L、FeSO4·7H2O
27.8mg/L、Na2-EDTA 37.3mg/L、肌醇100mg/L、甘氨酸2mg/L、烟酸0.5mg/L、烟酸硫胺素
1.0mg/L、盐酸吡哆醇0.5mg/L；附加0~1.0 mg/L吲哚丁酸，0~1.0mg/的萘乙酸；还包含
6.5g/L琼脂粉和15.0g/L的蔗糖，PH 5.8~6.0，光照12h/d，光照强度为2000 lx；培养至60天时统计其增殖倍数、平均株高、生根率、平均根数和平均根长；当根长到3~5cm时，将生根试管苗的瓶口封口膜打开，在培养室散射光下进行开口炼苗，使试管苗逐渐与外界接触，在
1周内将周围环境湿度保持在70%~80%，逐步提高小苗适应外界环境的能力；5天后取出试管苗洗净根部的培养物质，移栽到育苗基质中生长，基质由珍珠岩、泥炭土、园土2:2:1组成，充分混合后用多菌灵消毒。
欧洲鹅耳枥的组培快繁方法
技术领域
背景技术
发明内容
2）待不定芽长出后，剪取1.5~ 2.0cm茎尖在附加0.1~2.0mg/L 的6-苄基氨基嘌呤，
0.1~2.0mg/L的激动素，0~0.5mg/L 的吲哚丁酸植物激素MS基本培养基上进行增殖培养；
3）剪取生长健壮、长3~4cm的单苗进行生根培养，基本培养基大量元素减少1/2，其他元素保持不变，简称1/2基本培养基；附加0~1.0 mg/L吲哚丁酸，0~1.0mg/的萘乙酸；培养温度为25±2℃，pH 5.8~6.0，光照12h/天，光照强度为2000 lx；
4）当单苗根长到3~5cm时，将生根试管苗的瓶口封口膜打开，在培养室散射光下进行开口炼苗，使试管苗逐渐与外界接触，在1周内将周围环境湿度保持在70%~80%，逐步提高小苗适应外界环境的能力；5天后取出试管苗洗净根部的培养物质，移栽到育苗基质中生长，基质由珍珠岩、泥炭土、园土的重量比为2:2:1组成，充分混合后用多菌灵消毒。
具体实施方式
（benzylaminopurine，简称BA）进行诱导培养，基本培养基是WPM（Woody Plant Medium，简称WPM），主要包含以下成分：NH4NO3 400mg/L、Ca(NO3)2·4H2O 556mg/L、CaCl2·2H2O 96mg/L、MgSO4·7H2O 370mg/L、KH2PO4 170mg/L、K2SO4 990mg/L、H3BO3 6.2mg/L、MnSO4·H2O 17.7mg/L、ZnSO4·7H2O 8.6mg/L、NaMoO4·2H2O 0.25mg/L、CuSO4·5H2O 0.25mg/L、FeSO4·7H2O 27.8mg/L、Na2-EDTA 37.3mg/L、肌醇100mg/L、甘氨酸2mg/L、烟酸0.5mg/L、烟酸硫胺素1.0mg/L、盐酸吡哆醇0.5mg/L；基本培养基还包含6.5g/L的琼脂粉和30.0g/L蔗糖。
0.25mg/L、CuSO4·5H2O 0.25mg/L、FeSO4·7H2O 27.8mg/L、Na2-EDTA 37.3mg/L、肌醇100mg/L、甘氨酸2mg/L、烟酸0.5mg/L、烟酸硫胺素1.0mg/L、盐酸吡哆醇0.5mg/L；附加0~1.0 mg/L吲哚丁酸（indole butyric acid，简称IBA），0~1.0mg/的萘乙酸（naphthylene acetic acid，简称NAA）；还包含6.5g/L琼脂粉和15.0g/L的蔗糖，pH 5.8~6.0，光照12h/d，光照强度为2000 lx。培养至60天时统计其增殖倍数、平均株高、生根率、平均根数和平均根长。
当根长到3~5cm时，将生根试管苗的瓶口封口膜打开，在培养室散射光下进行开口炼苗，使试管苗逐渐与外界接触，在1周内将周围环境湿度保持在70%~80%，逐步提高小苗适应外界环境的能力。5d后取出试管苗洗净根部的培养物质，移栽到育苗基质中生长，基质由珍珠岩、泥炭土、园土2:2:1组成，充分混合后用多菌灵消毒。
2.0cm茎段进行增殖，基本培养基是MS；附加的植物激素为0.1mg/L的BA、0.5mg/L的KT和
0.01mg/L的IBA；还包含6.0g/L的琼脂粉和30.0g/L的蔗糖。60天统计增殖倍数。剪取生长健壮、长3~4cm的单苗进行生根培养，基本培养基为1/2WPM；附加的植物激素为0.01mg/L的NAA、0.5mg/L的IBA；还包含6.5g/L的琼脂粉和15.0g/L的蔗糖，PH 5.8~6.0，光照12h/d，光照强度为2000 lx。60天后统计增殖倍数、平均株高、生根率、平均根数和平均根长。结果表明每个外植体平均分化2.86个不定芽，平均芽长达3.25cm；生根率达56.8%，平均根数达2.95，平均根长达4.48cm。将生根试管苗的瓶口封口膜打开，在培养室散射光下进行开口炼苗，使试管苗逐渐与外界接触，在1周内将周围环境湿度保持在70%~80%，逐步提高小苗适应外界环境的能力。5d后取出试管苗洗净根部的培养物质，移栽到育苗基质中生长，基质由珍珠岩、泥炭土、园土2:2:1组成，充分混合后用多菌灵消毒，成活率达70%。
2.0cm茎段进行增殖，基本培养基是MS；附加的植物激素为1.0mg/L的BA、2.0mg/L的KT和
0.01mg/L的IBA；还包含6.0g/L的琼脂粉和30.0g/L的蔗糖。60天统计增殖倍数。剪取生长健壮、长3~4cm的单苗进行生根培养，基本培养基为1/2WPM；附加的植物激素为0.5mg/L的NAA、0.5mg/L的IBA；还包含6.5g/L的琼脂粉和15.0g/L的蔗糖，PH 5.8~6.0，光照12h/d，光照强度为2000 lx。60天后统计增殖倍数、平均株高、生根率、平均根数和平均根长。结果表明每个外植体平均分化2.54个不定芽，平均芽长达3.89cm；生根率达65.8%，平均根数达2.35，平均根长达3.08cm。将生根试管苗的瓶口封口膜打开，在培养室散射光下进行开口炼苗，使试管苗逐渐与外界接触，在1周内将周围环境湿度保持在70%~80%，逐步提高小苗适应外界环境的能力。5d后取出试管苗洗净根部的培养物质，移栽到育苗基质中生长，基质由珍珠岩、泥炭土、园土2:2:1组成，充分混合后用多菌灵消毒，成活率达65%。
2.0cm茎段进行增殖，基本培养基是MS；附加的植物激素为1.0 mg/L的BA、0.5mg/L的KT和
0.5mg/L的IBA；还包含6.0g/L的琼脂粉和30.0g/L的蔗糖。60天统计增殖倍数。剪取生长健壮、长3~4cm的单苗进行生根培养，基本培养基为1/2WPM；附加的植物激素为0.01mg/L的NAA；还包含6.5g/L的琼脂粉和15.0g/L的蔗糖，PH 5.8~6.0，光照12h/d，光照强度为
2000 lx。60天后统计增殖倍数、平均株高、生根率、平均根数和平均根长。结果表明每个外植体平均分化4.06个不定芽，平均芽长达3.87cm；生根率达76.8%，平均根数达3.65，平均根长达3.76cm。将生根试管苗的瓶口封口膜打开，在培养室散射光下进行开口炼苗，使试管苗逐渐与外界接触，在1周内将周围环境湿度保持在70%~80%，逐步提高小苗适应外界环境
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