无毛茄子

阅读:237发布:2020-05-18

专利汇可以提供无毛茄子专利检索,专利查询,专利分析的服务。并且本 发明 涉及茄子,特别是Solanum melongena 植物 ,其包含遗传决 定子 ,当所述遗传决定子存在时,其赋予营养性植物部分上毛状体的数量减少,并且所述遗传决定子如同发现于由以下 种子 所生长的植物中,所述种子的代表性样品被以NCIMB登录号NCIMB 41756和NCIMB 42013保藏。当所述遗传决定子纯合存在时,所述毛状体的数量被强烈减少。,下面是无毛茄子专利的具体信息内容。

1.生产包含遗传决定子的茄子的方法,其中所述遗传决定子如同存在于由代表性样品以登录号NCIMB 41756和NCIMB 42013保藏的种子所生长的植物中一样,并且在存在时导致营养植物部分上每平方厘米具有少于130个毛状体的性状,所述方法包括:
a)将包含导致所述性状的所述遗传决定子的植物与另一植物进行杂交;
b)将所得到的F1自交以获得F2植物;
c)在所述F2中选择具有所述性状的植物;
d)任选地进行一轮或更多另外轮的自交或杂交,并且随后选择包含/显示所述性状的植物。
2.向包含遗传决定子的茄子引入另一期望的性状的方法,所述遗传决定子如同存在于由代表性样品被以登录号NCIMB 41756和NCIMB 42013保藏的种子所生长的植物中一样,并且在存在时导致营养植物部分上每平方厘米具有少于130个毛状体的性状,该方法包括:
a)将包含导致所述性状的所述遗传决定子的茄子与包含期望的性状的第二茄子杂交以产生F1后代;
b)选择包含所述遗传决定子和所期望的性状的F1后代,当所述遗传决定子存在时导致营养植物部分上毛状体数量减少的性状;
c)将所选择的F1后代与任一亲本杂交以产生回交后代;
d)选择包含所期望的性状和所述遗传决定子的回交后代,其中所述遗传决定子在存在时导致营养植物部分上每平方厘米具有少于130个毛状体的性状;以及
e)任选地连续重复步骤c)和d)一次或更多次以产生所选择的第四代或更高的回交后代,其包含所期望的性状和所述遗传决定子,其中所述遗传决定子在存在时导致营养植物部分上每平方厘米具有少于130个毛状体的性状。
3.生产具有遗传决定子的茄子的方法,其中所述遗传决定子如同存在于由代表性样品被以登录号NCIMB 41756和NCIMB 42013保藏在NCIMB的种子中一样,并且在存在时导致营养植物部分上每平方厘米具有少于130个毛状体的性状,所述方法通过采用二倍体化单倍体产生技术产生包含所述性状的二倍体化单倍体系来实施。
4.生产具有遗传决定子的杂交茄子的方法,其中所述遗传决定子如同存在于由代表性样品被以登录号NCIMB 41756和NCIMB 42013保藏在NCIMB的种子中一样,并且在存在时导致营养植物部分上每平方厘米具有少于130个毛状体的性状,所述方法包括将第一亲本茄子与第二亲本茄子杂交并收获所得到的杂交种子,其中所述第一亲本茄子和/或所述第二亲本茄子具有所述遗传决定子,所述遗传决定子在存在时导致营养植物部分上每平方厘米具有少于130个毛状体的性状,以及将所述杂交种子生长成具有所述遗传决定子的杂交植物。
5.生产具有遗传决定子的茄子的方法,其中所述遗传决定子如同存在于由代表性样品被以登录号NCIMB 41756和NCIMB 42013保藏在NCIMB的种子中一样,并且在存在时导致营养植物部分上每平方厘米具有少于130个毛状体的性状,所述方法通过采用在其基因组中包含所述遗传决定子的种子生长所述茄子来进行。
6.生产种子的方法,所述方法包括从具有遗传决定子的种子生长茄子,其中所述遗传决定子如同存在于由代表性样品被以登录号NCIMB 41756和NCIMB 42013保藏在NCIMB的种子中一样,并且在存在时导致营养植物部分上每平方厘米具有少于130个毛状体的性状,允许所述植物生产种子,和收获这些种子。
7.权利要求6所述的方法,其中所述种子的生产通过杂交或自交完成。
8.生产具有遗传决定子的茄子的方法,其中所述遗传决定子如同存在于由代表性样品被以登录号NCIMB 41756和NCIMB 42013保藏在NCIMB的种子中一样,并且在存在时导致营养植物部分上每平方厘米具有少于130个毛状体的性状,所述方法通过采用组织培养物来实施。
9.生产具有遗传决定子的茄子的方法,其中所述遗传决定子如同存在于由代表性样品被以登录号NCIMB 41756和NCIMB 42013保藏在NCIMB的种子中一样,并且在存在时导致营养植物部分上每平方厘米具有少于130个毛状体的性状,所述方法通过营养繁殖实施。
10.生产具有遗传决定子的茄子的方法,其中所述遗传决定子如同存在于由代表性样品被以登录号NCIMB 41756和NCIMB 42013保藏在NCIMB的种子中一样,并且在存在时导致营养植物部分上每平方厘米具有少于130个毛状体的性状,所述方法通过采用用于遗传修饰的方法将所述性状渐渗入所述茄子来实施。
11.开发具有遗传决定子的茄子的育种方法,其中所述遗传决定子如同存在于由代表性样品被以登录号NCIMB 41756和NCIMB 42013保藏在NCIMB的种子中一样,并且在存在时导致营养植物部分上每平方厘米具有少于130个毛状体的性状,所述方法包括采用包含所述性状的种质。
12.生产具有遗传决定子的茄子的方法,其中所述遗传决定子如同存在于由代表性样品被以登录号NCIMB 41756和NCIMB 42013保藏在NCIMB的种子中一样,并且在存在时导致营养植物部分上每平方厘米具有少于130个毛状体的性状,其中所述方法包括将包含赋予所述性状的所述遗传决定子的植物的后代或繁殖材料用作来源将所述性状渐渗入另一茄子。
13.由茄子果实或其部分制成的食品、或由其制成的加工食品,其中所述茄子果实收获自包含遗传决定子的茄子,所述遗传决定子如同存在于由代表性样品被以登录号NCIMB 
41756和NCIMB 42013保藏在NCIMB的种子中一样,并且在存在时导致营养植物部分上每平方厘米具有少于130个毛状体的性状。
14.包含遗传决定子的茄子作为种质在育种程序中的用途,其中所述遗传决定子如同存在于由代表性样品被以登录号NCIMB 41756和NCIMB 42013保藏在NCIMB的种子中一样,并且在存在时导致营养植物部分上每平方厘米具有少于130个毛状体的性状,所述育种程序用于开发包含导致所述性状的所述遗传决定子的茄子。
15.权利要求1-12中任一项所述的方法、权利要求13中所述的食品或者权利要求14中所述的用途,其中所述营养植物部分选自下述中:叶、茎和萼。
16.权利要求1-12中任一项所述的方法、权利要求13中所述的食品或者权利要求14中所述的用途,其中所述茄子是Solanum melongena L.种。
17.根据权利要求1-12中任一项所述的方法、权利要求13中所述的食品或者权利要求
14中所述的用途,其中所述遗传决定子在所生产的茄子中是纯合存在的。
18.权利要求16所述的方法、食品或用途,其中所述遗传决定子在所生产的茄子中是纯合存在的。
19.根据权利要求1-12中任一项所述的方法、权利要求13中所述的食品或者权利要求
14中所述的用途,其中所述茄子的成熟叶的叶片上每平方厘米具有少于120个毛状体。
20.根据权利要求19中所述的方法、食品或者用途,其中所述茄子的成熟叶的叶片上每平方厘米具有少于110个毛状体。
21.根据权利要求19中所述的方法、食品或者用途,其中所述茄子的成熟叶的叶片上每平方厘米具有少于100个毛状体。
22.根据权利要求19中所述的方法、食品或者用途,其中所述茄子的成熟叶的叶片上每平方厘米具有少于90个毛状体。
23.根据权利要求19中所述的方法、食品或者用途,其中所述茄子的成熟叶的叶片上每平方厘米具有少于80个毛状体。
24.根据权利要求19中所述的方法、食品或者用途,其中所述茄子的成熟叶的叶片上每平方厘米具有少于70个毛状体。
25.根据权利要求19中所述的方法、食品或者用途,其中所述茄子的成熟叶的叶片上每平方厘米具有少于60个毛状体。
26.根据权利要求19中所述的方法、食品或者用途,其中所述茄子的成熟叶的叶片上每平方厘米具有少于50个毛状体。
27.根据权利要求19中所述的方法、食品或者用途,其中所述茄子的成熟叶的叶片上每平方厘米具有少于40个毛状体。
28.根据权利要求19中所述的方法、食品或者用途,其中所述茄子的成熟叶的叶片上每平方厘米具有少于30个毛状体。
29.根据权利要求19中所述的方法、食品或者用途,其中所述茄子的成熟叶的叶片上每平方厘米具有少于20个毛状体。
30.根据权利要求19中所述的方法、食品或者用途,其中所述茄子的成熟叶的叶片上每平方厘米具有少于10个毛状体。
31.根据权利要求19中所述的方法、食品或者用途,其中所述茄子的成熟叶的叶片上每平方厘米具有少于5个毛状体。
32.根据权利要求19中所述的方法、食品或者用途,其中所述茄子的成熟叶的叶片上每平方厘米具有0个毛状体。

说明书全文

无毛茄子

发明领域

[0001] 本发明涉及新的茄子(茄(Solanum melongena L.)),其有助于虫害生物防治(biological pest control)的应用并导致皮肤刺激的险较低。本发明还涉及这样的植物种子和后代,以及用于获得这样的植物的繁殖材料。此外,本发明涉及由这样的植物得到的植物、种子和繁殖材料作为种质(germplasm)在育种程序中的用途。
[0002] 发明背景
[0003] 茄子(eggplant)或茄子(aubergine)(Solanum melongena L.)是茄科(nightshade family)(Solanaceae)的植物并且属于Solanum属。它与西红柿和铃薯有密切的关系。茄子结相同名称的果实,常用于烹饪。它是重要的粮食作物,在所有条件和气候下既以保护地栽培又在露地中在全世界范围内进行种植。茎往往带刺或有毛(pubescent)。
叶多毛并且有时萼显示一些小刺。茄子的所有营养部分或多或少密布星形毛状体,该毛状体给出浅灰色或略微发紫-微绿色的外观。
[0004] 茄子的各种植物部分的表面覆盖具有一个垂直臂和两到八个平臂的星形毛状体。
[0005] 毛状体(trichome)是植物上细的突起(outgrowths)或附属物。这些可以不同的结构和功能存在。例子是毛、腺毛、鳞片和乳突。植物毛状体具有各种功能,范围从抑制脱水到成为针对小型草食动物和昆虫的机械屏障。
[0006] 然而,叶毛状体确实不仅影响害虫,而且影响害虫的天敌。这可以再次影响由害虫造成的破坏的强度。理论上,毛状体对害虫和害虫的天敌的丰度和效的作用可以是中性的、负面的和正面的。捕食者和害虫的效力可能受到影响,因为毛状体的存在可以抑制移动和可能延长搜索时间。本发明的第一个目的是提供帮助害虫的天敌的茄子。
[0007] 种植像茄子、辣椒和西红柿的植物需要大量的手工劳动。处理植物包括嫁接、种植、整枝、缠绕(winding)和收获。在园艺中的工作者不仅暴露于吸入灰尘和来自植物的花粉,而且暴露于与其它植物部分和由植物分泌的各种化学化合物的皮肤接触。在一般情况下,对花粉、灰尘和植物的其他部分敏感(sensitivity)是园艺业中日益严重的问题。还发现,茄子可能引起与植物工作的人中这样的敏感反应。因此,本发明的另一个目的是提供不引起敏感反应的茄子。
[0008] 因此需要开发不具有引起人皮肤中所提到的敏感反应的能力的茄子。另外,还需要有助于虫害生物防治的应用的茄子。在导致产生本发明的实验过程中,发现具有引起毛状体数量减少的遗传决定子的茄子有利于在虫害生物防治中的应用。另外,还发现包含所述遗传决定子的茄子还引起在人皮肤中更少的敏感反应。
[0009] 本发明涉及茄子,其包含遗传决定子,与不包含所述遗传决定子的植物相比,当所述遗传决定子存在时所述遗传决定子导致营养植物部分(特别是叶、茎和萼)上毛状体数量减少的性状,并且其中所述遗传决定子与由被以登录号NCIMB 41756和NCIMB 42013保藏的种子所生长的植物的基因组中存在的遗传决定子相同或等同。
[0010] 本发明还涉及茄子(Solanum melongena L.),其包含遗传决定子,与不包含所述遗传决定子的植物相比,当所述遗传决定子存在时所述遗传决定子导致营养植物部分(特别是叶、茎和萼)上毛状体的数量减少,并且所述遗传决定子如同存在于由种子所生长的植物中,所述种子的代表性样品被以登录号NCIMB 41756和NCIMB 42013保藏。
[0011] 本发明还提供了Solanum melongena种的茄子,其与对照植物相比具有营养植物部分(特别是叶、茎和萼)上数量减少的毛状体,所述植物能够通过将NCIMB 41756或NCIMB 42013的茄子与另一茄子杂交并在所述杂交的最初或其后的后代中选择具有数量减少的毛状体的植物而获得。
[0012] 包含所述遗传决定子的茄子种子已于2010年9月22日被以登录号NCIMB 41756保藏于Aberdeen的NCIMB和于2012年7月19日被以登录号NCIMB 42013保藏于NCIMB,当所述遗传决定子存在时所述遗传决定子导致营养植物部分上毛状体的数量减少。所述保藏物并不满足一致性和稳定性的要求,因此它们不构成植物品种。
[0013] 本发明还涉及茄子,其包含遗传决定子,与不包含所述遗传决定子的茄子相比,当所述遗传决定子存在时所述遗传决定子导致除了根、果实和生殖器官之外的营养植物部分上毛状体的数量减少。“营养植物部分上毛状体的数量减少”是指至少一个、优选大多数、更优选所有营养植物部分上毛状体的数量减少。
[0014] 如本申请中所使用的定义“营养植物部分”是指所述植物的地上部分,其并不直接参与有性生殖,包括但不限于叶、茎、萼/萼片、花瓣和芽。像茄子的根、雄蕊、雌蕊和果实的植物部分一般没有任何毛状体。
[0015] 如本申请中所使用的词毛状体是指茄子上、茎、叶等上星状的和简单的细的突起或附属物。毛状体以不同的结构和功能存在。例子是毛、腺毛、鳞片和乳突。毛状体可以用作毛的同义词但是比单独的毛涵盖更多的结构。植物毛状体具有各种功能,范围从抑制脱水到作为针对小型草食动物和昆虫的机械屏障。在某些茄子中在萼、主茎和叶的主脉上偶尔发现的(thorns)棘和刺(spines)不被视为本文所定义的毛状体。毛状体的数量减少还能够被描述为毛状体的减少、低密度的毛状体、不存在毛状体、毛状体的数量少或毛状体稀少。
[0016] 优选地,所述遗传决定子是纯合存在的。当所述遗传决定子是纯合存在时,所述植物会显示毛状体数量强烈减少。与不具有所述遗传决定子的植物相比,包含所述遗传决定子的植物的营养植物部分上毛状体的数量是减少的。以杂合状态包含所述遗传决定子的植物会显示中等水平的毛状体密度。这意味着,与不具有所述决定子的植物相比,以杂合状态具有所述决定子的植物会仍然显示毛状体的数量减少,并且与以纯合状态具有所述遗传决定子的植物相比,其显示毛状体的数量增加。
[0017] 本发明还涉及茄子,其包含遗传决定子,与不包含所述遗传决定子的植物相比,当所述遗传决定子存在时所述遗传决定子导致营养植物部分上毛状体的数量减少,并且所述遗传决定子与由种子所生长的植物中存在的遗传决定子相同或等同,所述种子的代表性的样品被以登录号NCIMB 41756和NCIMB 42013保藏,其中所述植物能够通过将不具有所述遗传决定子的第一茄子与具有所述遗传决定子的第二茄子杂交而获得,或者能够通过将所述遗传决定子从所述第二茄子渐渗入所述第一茄子而获得,其中所述遗传决定子如同存在于由种子所生长的植物中,所述种子的代表性的样品被以登录号NCIMB 41756和NCIMB 42013保藏。
[0018] 本发明的茄子优选Solanum melongena植物,但是也能够是在Solanum属内所谓的茄子复合体(complex)的另一相关植物,像S.aethiopicum、S.incanum、S.macrocarpon和S.linnaeanum,本领域技术人员能够将本发明的所述遗传决定子渐渗入所述植物。本发明涉及具有如在保藏物中发现的引起毛状体数量减少的遗传决定子的这些种的植物。本领域技术人员知晓如何用这些种进行(种间)杂交,例如通过胚挽救(embryo rescue)、原生质体融合和其它相关技术的手段。优选地,本发明被用在生产可食用果实的植物种。与本发明一起使用的优选的植物种是Solanum melongena。
[0019] 如本发明所使用的渐渗是指借助于杂交和选择的一种或几种重复步骤将一定的性状或引起所述性状的一定的遗传决定子引入既不携带所述性状也不携带所述遗传决定子的植物。
[0020] 在来自不包含所述遗传鉴定因素的植物和以纯合状态包含所述遗传决定子的植物之间的杂交的后代中,通过由作为来自最初杂交和自交步骤的结果的种子种植F2植物并选择显示所期望的性状的植物,能够适当地鉴定携带导致营养植物部分上毛状体数量强烈减少的性状的所述遗传决定子的茄子。选择所述植物可以从表型上完成,或者可以通过所述遗传决定子的鉴定完成,例如借助于一种或更多种分子标记物。标记物可以相应地由本领域技术人员基于被以保藏号NCIMB41756或NCIMB 42013保藏的材料进行开发。
[0021] 遗传决定子的等效性(equivalence)可以通过等位性测试(allelism test)来确定。为了进行等位性测试,对于已知的决定子是纯合的材料(测试者(tester)植物)与对于要被测试的遗传决定子是纯合的材料进行杂交。这后一种植物被称作供体植物。要被测试的供体植物应当是或者应当被制成与要被测试的遗传决定子是纯合的。本领域技术人员知晓如何获得与要被测试的遗传决定子是纯合的植物。当在供体植物和测试者植物之间杂交的F2中没有观察到与所述遗传决定子相关的表型的分离(segregation)时,所述供体植物和所述测试者植物的遗传决定子已被证实为等效或相同。
[0022] 本发明因此涉及包含引起营养植物部分上毛状体数量减少的遗传决定子的茄子,其中携带所述遗传决定子的茄子与包含所述遗传决定子并且其代表性的种子是被以登录号NCIMB 41756和NCIMB42013保藏于NCIMB的测试者植物,或其包含所述遗传决定子的后代植物,或自其衍生的并包含所述遗传决定子的植物的杂交的第一代后代(F1)植物,显示对于所述性状1:0的分离。在所述测试者植物和本发明的所述植物二者中,所述遗传决定子以纯合形式存在。第二代和进一步的后代植物,如果通过自交获得,也显示对于所述性状1:0的分离。所述测试者植物可以是其代表性的种子是被以登录号NCIMB41756和NCIMB 42013保藏于NCIMB的植物。
[0023] 本发明涉及茄子,其包含遗传决定子,与不包含所述遗传决定子的植物相比,当所述遗传决定子存在时所述遗传决定子导致营养植物部分(特别是叶、茎和萼)上毛状体的数量减少,并且所述遗传决定子如同存在于由种子所生长的植物中,所述种子的代表性的样品被以登录号NCIMB 41756和NCIMB 42013保藏,并且其中所述茄子的成熟叶的叶片(leaf blade/lamina)具有每平方厘米小于130个毛状体,优选每平方厘米小于120个毛状体,更优选每平方厘米小于110个毛状体,甚至更优选每平方厘米小于100个毛状体,甚至更优选每平方厘米小于90个毛状体,甚至更优选每平方厘米小于80个毛状体,甚至更优选每平方厘米小于70个毛状体,甚至更优选每平方厘米小于60个毛状体,甚至更优选每平方厘米小于50个毛状体,甚至更优选每平方厘米小于40个毛状体,甚至更优选每平方厘米小于30个毛状体,甚至更优选每平方厘米小于20个毛状体,甚至更优选每平方厘米小于10个毛状体,最优选0个。
[0024] 大多数被子植物具有包括叶片(leaf blade)(也称为lamina)、叶柄(leaf stalk)(也称为petiole)和托叶的叶。茄叶由叶片和叶柄组成。叶片是叶的最大的大部分平而宽的部分,并且它与主茎通过叶柄连接。叶柄是连接叶片与植物的主茎的叶的最小部分。
[0025] 如在本申请中所定义的成熟茄叶是完全伸展的叶。对于毛状体计数,如在实施例1中所举例说明的,从植物顶部看到的第一片伸展的叶进行成熟叶的取样。通常这是被定义为幼叶的叶下第三片叶。另外,如在本申请中所定义的幼茄叶是还没有完全伸展的叶。对于毛状体计数,如在实施例1中所举例说明的,从植物顶部测量5厘米长度的第一片叶进行幼叶的取样。
[0026] 本发明还涉及茄子,其包含遗传决定子,与不包含所述遗传决定子的植物相比,当所述遗传决定子存在时所述遗传决定子导致营养植物部分上毛状体的数量减少,并且所述遗传决定子如同发现于由种子所生长的植物中,所述种子的代表性的样品被以登录号NCIMB 41756和NCIMB 42013保藏于NCIMB,并且其中所述茄子的幼叶的叶片具有每平方厘米小于400个毛状体,优选每平方厘米小于390个毛状体,更优选每平方厘米小于380个毛状体,甚至更优选每平方厘米小于370个毛状体,甚至更优选每平方厘米小于360个毛状体,甚至更优选每平方厘米小于350个毛状体,甚至更优选每平方厘米小于340个毛状体,甚至更优选每平方厘米小于330个毛状体,甚至更优选每平方厘米小于320个毛状体,甚至更优选每平方厘米小于310个毛状体,甚至更优选每平方厘米小于300个毛状体,甚至更优选每平方厘米小于290个毛状体,甚至更优选每平方厘米小于280个毛状体,甚至更优选每平方厘米小于270个毛状体,甚至更优选每平方厘米小于260个毛状体,甚至更优选每平方厘米小于250个毛状体,甚至更优选每平方厘米小于240个毛状体,甚至更优选每平方厘米小于230个毛状体,甚至更优选每平方厘米小于220个毛状体,甚至更优选每平方厘米小于210个毛状体,甚至更优选每平方厘米小于200个毛状体,甚至更优选每平方厘米小于190个毛状体,甚至更优选每平方厘米小于180个毛状体,甚至更优选每平方厘米小于170个毛状体,甚至更优选每平方厘米小于160个毛状体,甚至更优选每平方厘米小于150个毛状体,甚至更优选每平方厘米小于140个毛状体,甚至更优选每平方厘米小于130个毛状体,甚至更优选每平方厘米小于120个毛状体,甚至更优选每平方厘米小于110个毛状体,甚至更优选每平方厘米小于100个毛状体,甚至更优选每平方厘米小于90个毛状体,甚至更优选每平方厘米小于80个毛状体,甚至更优选每平方厘米小于70个毛状体,甚至更优选每平方厘米小于60个毛状体,甚至更优选每平方厘米小于50个毛状体,甚至更优选每平方厘米小于40个毛状体,甚至更优选每平方厘米小于30个毛状体,甚至更优选每平方厘米小于20个毛状体,甚至更优选每平方厘米小于10个毛状体,最优选0个。
[0027] 本发明还涉及茄子,其包含遗传决定子,与不包含所述遗传决定子的植物相比,当所述遗传决定子存在时所述遗传决定子导致营养植物部分上毛状体的数量减少,并且所述遗传决定子如同发现于由种子所生长的植物中,所述种子的代表性的样品被以登录号NCIMB 41756或NCIMB 42013保藏于NCIMB,并且其中所述茄子的主茎具有每平方厘米小于4个毛状体,优选每平方厘米小于3个毛状体,更优选每平方厘米小于2个毛状体,甚至更优选每平方厘米小于1个毛状体,甚至更优选每平方厘米小于0.5个毛状体,最优选0个。
[0028] 本发明涉及在茄子中在成熟叶中在叶片的下侧上、在叶的叶柄的上侧上;在幼叶中在叶片和叶柄二者的下侧上;和在主茎上,在1平方厘米上进行毛状体计数。所提及的计数是基于5株个体茄子植物上的平均计数,每个计数对于每个植物部分进行两次。将会偏离这些平均数的个别计数是可能的。
[0029] 本发明的一个实施方案涉及种子,其包含所述遗传决定子,与由不包含所述遗传决定子的种子所生长的植物相比,当所述遗传决定子存在时所述遗传决定子导致由所述种子所生长的植物中营养植物部分上毛状体数量减少的性状,并且其中所述遗传决定子如同发现于由种子所生长的植物中,所述种子的代表性的样品被以登录号NCIMB41756和NCIMB 42013保藏。如果所述种子以纯合状态包含所述遗传决定子,与由不包含所述决定子的种子所生长的植物相比,由该种子所生长的植物会显示毛状体的数量强烈减少。如果所述种子以杂合状态包含所述遗传决定子,与由不包含所述决定子的种子所生长的植物相比,由该种子所生长的植物会显示毛状体的数量减少,并且与由以纯合状态包含所述遗传决定子的种子所生长的植物相比,其会显示毛状体的数量增加。
[0030] 在一个实施方案中,本发明涉及茄子的后代植物,所述茄子包含所述遗传决定子,与不包含所述遗传决定子的茄子相比,当所述遗传决定子存在时所述遗传决定子导致营养植物部分上毛状体的数量减少,其中所述茄子的后代植物包含所述遗传决定子。
[0031] 本发明的另一个实施方案涉及茄子的后代植物,所述茄子包含所述遗传决定子,与不包含所述遗传决定子的茄子相比,当所述遗传决定子存在时所述遗传决定子导致营养植物部分上毛状体的数量减少,其中所述茄子的后代植物纯合地包含所述遗传决定子。
[0032] 如本申请中所使用的后代(progeny)的定义是指来自用显示所讨论的性状(在该特定的情况下所述茄子的营养(vegetable)部分上毛状体的数量减少)的本发明的植物进行杂交的第一代和所有进一步的后代(descendant)。术语“后代(progeny)”还涵盖携带本发明的性状和通过营养繁殖或增殖从本发明的其它植物或植物的后代所获得的植物。
[0033] 本发明涉及源自茄子的繁殖材料,所述茄子包含所述遗传决定子,与不包含所述遗传决定子的茄子相比,当所述遗传决定子存在时所述遗传决定子导致营养植物部分上毛状体的数量减少,其中所述繁殖材料包含所述遗传决定子。
[0034] 本发明涉及能够生长成包含所述遗传决定子的茄子的繁殖材料,与不包含所述遗传决定子的茄子相比,当所述遗传决定子存在时所述遗传决定子导致营养植物部分上毛状体的数量减少,其中所述繁殖材料包含所述遗传决定子。
[0035] 所述繁殖材料可以选自由以下组成的组:小孢子、花粉、子房、胚珠、胚、胚囊、卵细胞、插条、根、茎、细胞、原生质体、叶、子叶、下胚轴、分生细胞、根、根尖、小孢子、花药、花、种子和茎或其部分。
[0036] 本发明的另一个方面涉及所述繁殖材料的组织培养物。
[0037] 本发明还涉及用于生产包含营养植物部分上毛状体数量减少的性状的茄子的方法,其中通过采用用于遗传修饰的方法将所述性状渐渗入茄子。遗传修饰包含采用来自非可杂交的物种的基因或合成的基因的反式基因修饰或反式基因化(transgenesis)和采用编码(农业)性状、来自作物植株本身或来自性相容性供体植物的天然基因的顺式基因修饰或顺式基因化(cisgenesis)。
[0038] 在另一个实施方案中,本发明涉及由包含所述遗传决定子的茄子所收获的茄子果实、或其部分、或由果实或其部分制成的食品、或由其制成的加工食品,与不包含所述遗传决定子的茄子相比,当所述遗传决定子存在时所述遗传决定子导致营养植物部分上毛状体的数量减少,并且所述遗传决定子如同存在于由下述种子所生长的植物中一样,所述种子的代表性样品被以登录号NCIMB 41756和NCIMB 42013保藏。即使本发明的所述性状可能在所述果实部分或其加工的形式上不再可见,这样的材料仍然包含所述性状内在的遗传决定子并因此仍然是本发明的一部分。
[0039] 本发明进一步涉及茄子作为种质在育种程序中的用途,所述茄子包含遗传决定子,与不包含所述遗传决定子的茄子相比,所述遗传决定子在存在时导致营养植物部分上毛状体的数量减少,所述育种程序用于开发包含遗传决定子的茄子,与不携带所述决定子的植物相比,所述决定子导致所述植物的营养部分上毛状体数量减少。
[0040] 在一个方面,本发明涉及用于生产包含遗传决定子的茄子的方法,与不包含所述遗传决定子的植物相比,当所述遗传决定子存在时导致营养植物部分(特别是叶、茎和萼)上毛状体数量减少的性状,并且所述遗传决定子如同存在于由下述种子所生长的植物中一样,所述种子的代表性样品被以登录号NCIMB 41756和NCIMB 42013保藏,该方法包括:
[0041] a)将包含导致所述性状的遗传决定子的植物与另一植物进行杂交;
[0042] b)将所得到的F1自交以获得F2植物;
[0043] c)在所述F2中选择具有所述性状的植物;
[0044] d)任选地进行一轮或更多另外轮的自交或杂交,并且随后选择包含/显示所述性状的植物。
[0045] 在本申请上下文中的词“性状”是指植物的所述表型。术语“遗传决定子”用于指在植物基因组中引起该性状的遗传信息。当植物显示本发明的性状时,它的基因组包含引起本发明的所述性状的遗传决定子。所述植物因此具有本发明的所述遗传决定子。所述遗传决定子可以是基因、多个基因的复合体、等位基因等。
[0046] 提供本发明所述性状的亲本显然没有必要是由所保藏的种子所直接生长的植物。所述亲本还可以是来自所述种子的后代植物或来自通过其它手段被鉴定具有本发明的所述性状的种子的后代植物,并且特别具有引起所述性状的遗传决定子。
[0047] 在一个方面,本发明涉及用于生产包含遗传决定子的茄子的方法,与不包含所述遗传决定子的植物相比,当所述遗传决定子存在时导致营养植物部分上毛状体数量减少的性状,并且所述遗传决定子如同存在于由下述种子所生长的植物中一样,所述种子的代表性样品被以登录号NCIMB 41756和NCIMB 42013保藏,包括:
[0048] a)将包含导致所述性状的遗传决定子的植物与另一植物进行杂交;
[0049] b)任选地将所得到的F1与优选的亲本回交;
[0050] c)在所述F2中选择具有所述性状的植物;
[0051] d)任选地进行一轮或更多另外轮的自交或杂交,并且随后选择包含所述性状的植物。
[0052] 本发明另外提供用于向包含遗传决定子的茄子引入另一期望的性状的方法,与不包含所述遗传决定子的植物相比,所述遗传决定子在存在时导致营养植物部分上毛状体数量减少的性状,并且所述遗传决定子如同存在于由下述种子所生长的植物中一样,所述种子的代表性样品被以登录号NCIMB 41756和NCIMB 42013保藏,该方法包括:
[0053] a)将包含遗传决定子的茄子与包含期望的性状的第二茄子杂交以产生F1后代,其中与不包含所述遗传决定子的植物相比,所述遗传决定子在存在时导致营养植物部分上毛状体数量减少的性状,并且所述遗传决定子如同存在于下述种子所生长的植物中一样,所述种子的代表性样品被以登录号NCIMB 41756和NCIMB 42013保藏;
[0054] b)选择包含所述遗传决定子和所期望的性状的F1后代,当所述遗传决定子存在时导致营养植物部分上毛状体数量减少的性状;
[0055] c)将所选择的F1后代与任一亲本杂交以产生回交后代;
[0056] d)选择包含所期望的性状和所述遗传决定子的回交后代,其中所述遗传决定子在存在时导致营养植物部分上毛状体数量减少的性状;以及
[0057] e)任选地连续重复步骤c)和d)一次或更多次以产生所选择的第四代或更高的回交后代,其包含所期望的性状和所述遗传决定子,其中所述遗传决定子在存在时导致营养植物部分上毛状体数量减少的性状。本发明包括由该方法产生的茄子。
[0058] 在一个实施方案中,对于具有所述遗传决定子的植物的选择开始于杂交或者备选地回交的F2,其中所述遗传决定子在存在时导致营养植物部分上毛状体数量减少的性状。在F2中的植物的选择可以从表型上完成,以及通过采用直接或间接检测所述性状内在的遗传决定子的标记物完成。
[0059] 在一个实施方案中,对于具有所述遗传决定子的植物的选择开始于F3或者后面代中,其中所述遗传决定子在存在时导致营养植物部分上毛状体数量减少的性状。
[0060] 在一个实施方案中,包含所述遗传决定子的植物是近交系(inbred line)、杂交子(hybrid)、二倍体化单倍体(doubled haploid)或分离群体的植物。
[0061] 本发明进一步提供用于生产具有所述遗传决定子的茄子的方法,其中所述遗传决定子在存在时导致营养植物部分上毛状体数量减少的性状,该方法通过采用二倍体化单倍体产生技术产生包含所述性状的二倍体化单倍体系来实施。
[0062] 本发明还涉及能够生长成具有所述遗传决定子的植物的杂交种子(hybrid seed),其中所述遗传决定子在存在时导致营养植物部分上毛状体数量减少的性状,本发明还涉及用于生产这样的杂交种子的方法,所述方法包括将第一亲本茄子与第二亲本茄子杂交并收获所得到的杂交种子,其中所述第一亲本茄子和/或所述第二亲本茄子是本发明所要求保护的植物。
[0063] 在一个实施方案中,本发明涉及用于生产具有所述遗传决定子的杂交茄子的方法,其中所述遗传决定子在存在时导致营养植物部分上毛状体数量减少的性状,所述方法包括将第一亲本茄子与第二亲本茄子杂交并收获所得到的杂交种子,其中所述第一亲本茄子和/或所述第二亲本茄子具有所述遗传决定子,所述遗传决定子在存在时导致营养植物部分上毛状体数量减少的性状,并且将所述杂交种子生长成具有所述遗传决定子的杂交植物,其中所述遗传决定子在存在时导致营养植物部分上毛状体数量减少的性状。
[0064] 本发明还涉及用于生产具有所述遗传决定子的茄子的方法,其中所述遗传决定子在存在时导致营养植物部分上毛状体数量减少的性状,所述方法通过采用在其基因组中包含遗传决定子的种子,所述遗传决定子导致用于生长所述茄子的营养植物部分上毛状体数量减少的性状。所述种子适当地是这样的种子,其代表性样品被以登录号NCIMB 41756和NCIMB 42013保藏于NCIMB。
[0065] 本发明还涉及用于种子生产的方法,所述方法包括从种子生长茄子(所述种子的代表性样品被以登录号NCIMB 41756和NCIMB42013保藏于NCIMB),允许所述植物生产种子,和收获这些种子。所述种子的生产适当地通过杂交或自交完成。
[0066] 在一个实施方案中,本发明涉及用于通过采用组织培养物生产具有所述遗传决定子的茄子的方法,其中所述遗传决定子在存在时导致营养植物部分上毛状体数量减少的性状。
[0067] 本发明还涉及用于通过营养繁殖生产具有所述遗传决定子的茄子的方法,其中所述遗传决定子在存在时导致营养植物部分上毛状体数量减少的性状。
[0068] 在一个实施方案中,本发明涉及用于生产具有所述遗传决定子的茄子的方法,其中所述遗传决定子在存在时导致营养植物部分上毛状体数量减少的性状,所述方法通过采用用于遗传修饰的方法将所述性状渐渗入所述茄子。遗传修饰包含采用来自非可杂交物种的基因或合成基因的反式基因修饰或反式基因化和采用编码(农业)性状、来自作物植物本身或来自性相容性供体植物的天然基因的顺式基因修饰或顺式基因化。
[0069] 本发明还涉及用于开发具有所述遗传决定子的茄子的育种方法,其中所述遗传决定子在存在时导致营养植物部分上毛状体数量减少的性状,其中在所述方法中采用包含所述性状的种质。包含所述遗传决定子和成为所述种质代表的植物的代表性种子被以登录号NCIMB41756和NCIMB 42013保藏于NCIMB。
[0070] 在进一步的实施方案中,本发明涉及用于生产具有所述遗传决定子的茄子的方法,其中所述遗传决定子在存在时导致营养植物部分上毛状体数量减少的性状,其中包含赋予所述性状的遗传决定子的植物的后代或繁殖材料被用作将所述性状渐渗入另一茄子的来源。包含所述遗传决定子的所述植物的代表性种子被以登录号NCIMB 41756和NCIMB 42013保藏于NCIMB。
[0071] 本发明优选提供具有所述遗传决定子的茄子,其中所述遗传决定子在存在时导致营养植物部分上毛状体数量减少的性状,所述植物通过本文所述和/或本领域技术人员熟悉的任意方法能够获得。
[0072] 本发明涉及茄子的细胞,所述茄子包含遗传决定子,其中与不具有所述遗传决定子的茄子相比,所述遗传决定子在存在时导致营养植物部分上毛状体的数量减少,并且如同发现于由下述种子所生长的植物中,所述种子的代表性样品被以登录号NCIMB 41756和NCIMB42013保藏于NCIMB。所述茄子的细胞在它的基因组中包含所述遗传决定子。
[0073] 本发明的另一个实施方案涉及茄子的细胞,所述茄子包含遗传决定子,其中与不具有所述遗传决定子的茄子相比,所述遗传决定子在存在时导致营养植物部分上毛状体的数量减少,并且如同发现于由如下种子所生长的植物中,所述种子的代表性样品被以登录号NCIMB41756和NCIMB 42013保藏于NCIMB,所述茄子通过将茄子与由代表性样品被以登录号NCIMB 41756和NCIMB 42013保藏于NCIMB的种子所生长的茄子杂交,并且选择显示在营养植物部分上毛状体的数量减少的茄子能够获得。
[0074] 本发明还涉及种子用于向另一茄子转移所述遗传决定子的用途,所述种子的代表性样品被以登录号NCIMB 41756和NCIMB 42013之一保藏于NCIMB,其中与不包含所述遗传决定子的茄子相比,所述遗传决定子在存在于茄子中时导致茄子中营养植物部分上毛状体的数量减少。
[0075] 在另一个实施方案中,本发明还涉及茄子作为作物的用途,所述茄子包含遗传决定子,其中与不包含所述遗传决定子的茄子相比,所述遗传决定子在存在时导致营养植物部分上毛状体的数量减少,所述遗传决定子如同发现于由下述种子所生长的植物中一样,所述种子的代表性样品被以登录号NCIMB 41756和NCIMB 42013之一保藏于NCIMB。
[0076] 另外,本发明涉及茄子作为种子来源的用途,所述茄子包含遗传决定子,其中与不包含所述遗传决定子的茄子相比,所述遗传决定子在存在时导致营养植物部分上毛状体的数量减少,并且所述遗传决定子如同发现于由如下种子所生长的植物中一样,所述种子的代表性样品被以登录号NCIMB 41756和NCIMB 42013之一保藏于NCIMB。
[0077] 本发明进一步涉及茄子作为繁殖材料来源的用途,所述茄子包含遗传决定子,其中与不包含所述遗传决定子的茄子相比,所述遗传决定子在存在时所述遗传决定子导致营养植物部分上毛状体的数量减少,并且所述遗传决定子如同发现于由下述种子所生长的植物中一样,所述种子的代表性样品被以登录号NCIMB 41756和NCIMB 42013之一保藏于NCIMB。
[0078] 本发明的另一个方面涉及茄子用于消费的用途,所述茄子包含遗传决定子,其中与不包含所述遗传决定子的茄子相比,所述遗传决定子在存在时导致营养植物部分上毛状体的数量减少,并且所述遗传决定子如同发现于由如下种子所生长的植物中一样,所述种子的代表性样品被以登录号NCIMB 41756和NCIMB 42013之一保藏于NCIMB。
[0079] 另外,本发明涉及如同发现于其代表性样品被以登录号NCIMB41756和NCIMB 42013之一保藏于NCIMB的茄子种子中一样的毛状体数量减少的茄子等位基因用于将与不包含所述等位基因的茄子相比茄子中营养植物部分上毛状体数量减少的性状赋予茄子的用途。
[0080] 此外,本发明还涉及茄子作为如同发现于其代表性样品被以登录号NCIMB 41756和NCIMB 42013之一保藏于NCIMB的种子中的毛状体数量减少的茄子等位基因的受体的用途。
[0081] 本申请中在遗传决定子的上下文中所使用的术语“如同存在于……一样”是指与引起茄子的营养部分上毛状体数量减少的性状的一个或多个基因相同或相似的遗传决定子。“相同或相似或等价”是指所述基因的功能相同。实践中,这通常是指基因的DNA序列与所保藏的材料的基因组中存在的基因相同或是该基因的等位基因,即其不同不会大到引起所述性状的基因的功能不能保持完整。
[0082] 毛状体的数量减少导致无毛表型。短语“毛状体的数量减少”和词“无毛”可以互换使用。
[0083] 保藏材料
[0084] 具有赋予本发明的营养植物部分上缺乏毛状体/毛状体的数量减少的遗传决定子的Solanum melongena植物的种子于2010年9月22日被以NCIMB登录号NCIMB 41756保藏于NCIMB Ltd.(Ferguson Building,Craibstone Estate,Bucksburn,Aberdeen,AB219YA)和于2012年7月19日被以NCIMB登录号NCIMB 42013保藏于NCIMB Ltd.(Ferguson Building,Craibstone Estate,Bucksburn,Aberdeen,AB219YA)。这些保藏物的所有种子纯合地包含所述遗传决定子。与不包含所述遗传决定子的植物相比,由这些种子所生长的植物显示营养植物部分上每平方厘米的毛状体数量强烈减少。所述种子是能够生长成显示营养植物部分上毛状体数量减少的植物的种子的代表性样品。本发明并不局限于所保藏的种子,而是扩展至具有与所述保藏的种子和由其生长的植物相同或相似的导致毛状体数量减少的遗传决定子的所有种子。
[0085] 本发明现在将被阐述于下面的实施例中,这些实施例仅用于说明的目的,而不以任何方式旨在限制本发明的保护范围。在所述实施例中,参考了以下附图
[0086] 图1具有正常毛状体密度的叶的图。
[0087] 图2具有数量减少的毛状体的叶的图。
[0088] 实施例1
[0089] 无毛茄子的分析
[0090] 本发明和对照植物的茄子种子在23℃被播种于岩中(大约16小时光照/8小时黑暗)。萌发之后,幼苗被转移至岩棉(rockwool cube)并在21℃的温度下生长于温室中。七周之后,检查植物的毛状体,并对毛状体进行计数。基于一平方厘米的表面进行所有的毛状体计数。
[0091] 所有的毛状体计数针对未成熟和成熟的叶于同日进行。从植物顶部测量5厘米长度的第一片叶进行幼叶的取样。从植物顶部看到的第一片伸展的叶进行成熟叶的取样。通常这是我们定义为‘幼叶’的叶下第三片叶。对于每种基因型,取样五株植物。对于每种成熟叶,对叶片下侧进行两次计数并且对叶柄上侧进行两次计数。对于每种幼叶,也对叶片下侧进行两次计数,加上对叶柄下侧进行两次计数。此外,从植物基部数的第四片和第五片叶之间,对主茎进行两次计数。将这些计数针对每个基因型进行平均。计数的结果如表1中所示。结果显示,与从“Thelma”和“Elisa”品种得到的参考植物上的毛状体的数量相比,保藏物的植物上的毛状体的数量强烈减少。
[0092] 茄子品种“Elisa”被登记于荷兰NAK-tuinbouw研究所,作为与正常相比在主茎上具有更少的毛状体的茄子品种。这些参考植物与保藏物的植物之间的差异最明显在于成熟叶片(leaf blade/lamina)上的计数,与参考基因型Elisa和Thelma相比保藏物的植物中有每平方厘米大约十倍毛状体减少。
[0093] 表1
[0094] 植物表面每平方厘米毛状体的数量
[0095]
[0096] 实施例2
[0097] 毛状体数量减少对粉虱和它们的天敌捕食螨斯氏钝绥螨(Amblyseius swirskii)的侵染效果的评价
[0098] 在用两种不同的茄子基因型,营养植物部分上具有正常数量的毛状体的来自品种“Thelma”的对照植物和包含导致营养植物部分上数量减少的毛状体的遗传决定子的保藏物NCIMB 41756的植物(缩写为NCIMB 41756)所执行的实验中,研究了用粉虱(Bemisia tabaci)和与其天敌捕食螨(斯氏钝绥螨(Amblyseius swirskii))一起组合的粉虱的侵染效果。所述实验在温室内的12个无昆虫的网笼中进行。四种不同处理乘以三个重复进行了评价。四种处理是:有虫害生物防治的来自“Thelma”的植物,无虫害生物防治的来自“Thelma”的植物,有虫害生物防治的来自保藏物NCIMB 41756的植物,无虫害生物防治的来自保藏物NCIMB 41756的植物。
[0099] 在所有的处理中,在幼苗种植之后大约45天用粉虱成虫侵染植物。每株植物上放置10个粉虱成虫。在虫害生物防治实验单元中的植物在同一天接受捕食螨(每株植物100个捕食螨的量)。持续16周,完成观测并记录不同的变量。在每个实验单元(笼)中对10株不同植物进行观测。对于每株植物,对植物的三种不同水平(低、中、高)的三片不同叶加上一朵花进行观测。评价以下参数:捕食螨的数量,螨的幼虫/蛹的数量,粉虱的蛹的数量,粉虱被寄生蛹的数量,粉虱成虫的数量。分析数据并且最重要的结果如表2所示。
[0100] 基于这些结果,得出以下结论。在两种处理(有和无虫害生物防治)中,粉虱成虫、若虫和蛹的数量在对照品种“Thelma”植物中是最高的。总体上最低的粉虱侵染被发现于有虫害生物防治的来自保藏物NCIMZB 41756的植物中。在有虫害生物防治的两个处理中,最低数量的粉虱,包括粉虱若虫和蛹以及粉虱成虫,被发现于来自保藏物NCIMB 41756的植物中。不希望受理论束缚,这种现象的内在原因之一可能是对于具有减少数量的毛状体的植物用于捕食的搜索时间更少,并且捕食螨由于该优势比具有多毛叶的植物具有更高的繁殖。
[0101] 表2
[0102] 针对每种处理对于所有的16个连续观测(16周)累积的每株植物一天的昆虫平均数;BPC=虫害生物防治
[0103]
[0104] 实施例3
[0105] 本发明的性状向其它茄子的转移
[0106] 包含如以登录号NCIMB 41756(本文称为供体)保藏的代表性种子中所发现的在营养植物部分上毛状体数量减少的性状的遗传决定子的茄子被用于将所述营养植物部分上毛状体数量减少的性状通过杂交转移至被称为“Thelma”的栽培的茄子的亲本(母本和父本),以制得类似Thelma但具有所述营养植物部分上毛状体数量减少的性状的植物。
[0107] 获得F1种子之后,它们被播种并且由F1种子生长的植物进行自交。随后F2群体的植物进行目测筛选营养植物部分上毛状体数量减少的表型。选择表达营养植物部分上毛状体数量减少的性状的幼苗。这些所选择的植物与栽培的茄子品种Thelma的同一亲本(回交亲本)再次杂交。由此获得的BC1群体繁殖成F2BC1群体,其再次进行目测筛选营养植物部分上毛状体数量减少的表型。
[0108] 选择具有此优选的性状的F2BC1茄子并与其回交亲本再次杂交。通过进行这种反复育种过程(也称为回交),育种材料的农艺性质得到改善并且到最后优选的营养植物部分上毛状体数量减少的性状在栽培的茄子品种的亲本中被获得。
[0109] 具有优选的营养植物部分上毛状体数量减少的性状的改善的栽培的茄子品种通过将改善的母本和父本系杂交制成。
[0110] 实施例4
[0111] 在人志愿者中的皮肤刺激
[0112] 在实验中,8位健康成人志愿者,4位女性,4位男性,被暴露于新鲜收获的茄子叶。每个志愿者接受两片大(长度>20cm)茄子叶。一片叶具有正常毛状体密度并且收获自对照植物。具有数量减少的毛状体的另一片叶收获自以NCIMB号NCIMB 41756保藏的本发明的植物。由志愿者自己将叶与志愿者手臂的裸露下部轻轻摩擦。每片叶被用于志愿者的仅一个手臂,这意味着具有毛状体的叶被施加至不同于几乎没有毛状体的叶的手臂。在三个不同的阶段:在叶施加到手臂时、施加之后15分钟和施加之后30分钟,记录手臂皮肤的反应和志愿者的感觉。
[0113] 如表3所示,在多毛茄子叶施加之后大部分志愿者在被暴露于叶的皮肤上感到瘙痒感或者他们的皮肤变红(无搔抓)。在一些志愿者中,花了30分钟来发展成这些症状,而在其他人中,瘙痒立即开始。除了2个个体之外,在大多数志愿者中本发明的植物并未引起瘙痒或可见皮肤刺激。但是,这些对两种叶具有反应的个体之一在当天早些时候已经被暴露于有毛茄子。
[0114] 表3
[0115] 在暴露于有和(几乎)无毛状体的成熟茄子叶的过程中和之后人志愿者中的皮肤反应
[0116]
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