一种藻酸盐组成的微胶囊中合成胞外蛋白质的方法
专利汇可以提供一种藻酸盐组成的微胶囊中合成胞外蛋白质的方法专利检索，专利查询，专利分析的服务。并且本 发明 公开了一种藻酸盐组成的微胶囊中合成胞外 蛋白质 的方法，采取以下步骤：在微 流体 装置中分别注入外层 水 相、油相和内层水相；调节内层水相的渗透压，在微管道的 节点 处形成水包油包水液滴；在 载玻片 上将其与交联溶液 接触 ；用大肠杆菌 试剂 盒 中的酶和底物在合成胞外蛋白质；通过离心收集半渗透微胶囊。通过以上制备方法，由聚乙烯亚胺涂覆的藻酸盐组成的半透聚离子络合物膜可使合成蛋白质的底物顺利扩散到微胶囊中，底物和副产物通过膜持续交换可使蛋白质持续合成；尽管由于微胶囊的体积小使得合成的蛋白质产物很少，但小分子副产物可透过半渗透膜分泌出去，蛋白质仍保留在微胶囊中。，下面是一种藻酸盐组成的微胶囊中合成胞外蛋白质的方法专利的具体信息内容。
1.一种藻酸盐组成的微胶囊中合成胞外蛋白质的方法，其特征在于采取以下步骤：
A)在微流体装置中分别注入外层水相、油相和内层水相，流速分别为
0.01-0.05,0.1-0.3和4-5mol/L；所述外层水相是含1.0wt%十二烷基甜菜碱的超纯水，所述内层水相是含1.0wt%海藻酸钠的超纯水、0.6wt%的氯化钠和0.1wt%的荧光素葡聚糖的混合液；
B)调节内层水相的渗透压至200-500，在微管道的节点处形成水包油包水液滴；
C)在载玻片上将步骤B)得到的水包油包水乳化液与包含0.05-0.5mol/L氯化钙和
0.05-0.5wt%聚乙烯亚胺的交联溶液接触，通过交联反应形成带聚离子复合膜的海藻酸钙小珠；
D)用大肠杆菌试剂盒中的酶和底物合成胞外蛋白质，以试剂盒中的绿色荧光蛋白的DNA编码为模板，DNA浓度为0.07-2ng/μL；
E)将模板DNA、转录酶和翻译酶及底物加入步骤A)中的内层水相，依次进行上述步骤A、B、C，得到半渗透微胶囊；
F)通过离心收集步骤E)得到的半渗透微胶囊，将含有底物的水相加入微胶囊悬浮液中，将微胶囊悬浮液置于培养皿中，在20-50℃下培养2-10小时使蛋白质合成，然后在
5-10℃下培养12-24小时使蛋白质充分形成。
一种藻酸盐组成的微胶囊中合成胞外蛋白质的方法
技术领域
背景技术
发明内容
0.01-0.05,0.1-0.3和4-5mol/L；所述外层水相是含1.0wt%十二烷基甜菜碱的超纯水，所述内层水相是含1.0wt%海藻酸钠的超纯水、0.6wt%的氯化钠和0.1wt%的荧光素葡聚糖的混合液；
B)调节内层水相的渗透压至200-500，在微管道的节点处形成水包油包水液滴；
C)在载玻片上将步骤B)得到的水包油包水乳化液与包含0.05-0.5mol/L氯化钙和
0.05-0.5wt%聚乙烯亚胺的交联溶液接触，通过交联反应形成带聚离子复合膜的海藻酸钙小珠；
D)用大肠杆菌试剂盒中的酶和底物合成胞外蛋白质，以试剂盒中的绿色荧光蛋白的DNA编码为模板，DNA浓度为0.07-2ng/μL；
E)将模板DNA、转录酶和翻译酶及底物加入步骤A)中的内层水相，依次进行上述步骤A、B、C，得到半渗透微胶囊；
F)通过离心收集步骤E)得到的半渗透微胶囊，将含有底物的水相加入微胶囊悬浮液中，将微胶囊悬浮液置于培养皿中，在20-50℃下培养2-10小时使蛋白质合成，然后在
5-10℃下培养12-24小时使蛋白质充分形成。
具体实施方式
4mol/L；所述外层水相是含1.0wt%十二烷基甜菜碱的超纯水，所述内层水相是含1.0wt%海藻酸钠的超纯水、0.6wt%的氯化钠和0.1wt%的荧光素葡聚糖的混合液；
B)调节内层水相的渗透压至200，在微管道的节点处形成水包油包水液滴；
C)在载玻片上将步骤B)得到的水包油包水乳化液与包含0.05mol/L氯化钙和
0.05wt%聚乙烯亚胺的交联溶液接触，通过交联反应形成带聚离子复合膜的海藻酸钙小珠；
D)用大肠杆菌试剂盒中的酶和底物合成胞外蛋白质，以试剂盒中的绿色荧光蛋白的DNA编码为模板，DNA浓度为0.07ng/μL；
E)将模板DNA、转录酶和翻译酶及底物加入步骤A)中的内层水相，依次进行上述步骤A、B、C，得到半渗透微胶囊；
F)通过离心收集步骤E)得到的半渗透微胶囊，将含有底物的水相加入微胶囊悬浮液中，将微胶囊悬浮液置于培养皿中，在20℃下培养10小时使蛋白质合成，然后在5℃下培养
24小时使蛋白质充分形成。
4.5mol/L；所述外层水相是含1.0wt%十二烷基甜菜碱的超纯水，所述内层水相是含1.0wt%海藻酸钠的超纯水、0.6wt%的氯化钠和0.1wt%的荧光素葡聚糖的混合液；
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